СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕБАУДИОЗИДА N С ПРИМЕНЕНИЕМ ФЕРМЕНТАТИВНОГО СПОСОБА

1. Способ получения ребаудиозида N с применением ферментативного способа, включающий: использование ребаудиозида А в качестве субстрата в присутствии донора гликозила, реакцию в условиях катализа содержащими UDP-гликозилтрансферазу (UDP) рекомбинантными клетками и/или полученной из них UDP-гликозилтрансферазой с получением ребаудиозида N.
2. Способ получения ребаудиозида N с применением ферментативного способа, включающий: использование ребаудиозида J в качестве субстрата в присутствии донора гликозила, реакцию в условиях катализа содержащими UDP-гликозилтрансферазу рекомбинантными клетками и/или полученной из них UDP-гликозилтрансферазой с получением ребаудиозида N.
3. Способ по п. 1 или 2, в котором донор гликозила включает один или два из донора на основе глюкозы и донора рамнозила, причем донор на основе глюкозы представляет собой UDP-глюкозу или систему регенерации UDP-глюкозы, состоящую из сахарозы, синтазы сахарозы и UDP, а донор рамнозила представляет собой UDP-рамнозу.
4. Способ по п. 1 или 2, в котором UDP-гликозилтрансфераза включает одну или две из UGT-A из Stevia rebaudiana и UGT-B из Oryza sativa.
5. Способ по п. 1, в котором UDP-гликозилтрансфераза включает UGT-A из Stevia rebaudiana и UGT-B из Oryza sativa; UDP-гликозилтрансферазу добавляют в реакционную систему в две стадии; при этом на первой стадии добавляют UGT-B, а на второй стадии добавляют UGT-A.
6. Способ по п. 5, в котором аминокислотная последовательность UGT-A обладает по меньшей мере 60%-й идентичностью последовательности 2, указанной в перечне последовательностей; и/или аминокислотная последовательность UGT-B обладает по меньшей мере 60%-й идентичностью последовательности 4, указанной в перечне последовательностей.
7. Способ по п. 6, в котором аминокислотная последовательность UGT-A обладает по меньшей мере 70%-й идентичностью последовательности 2, указанной в перечне последовательностей; и/или аминокислотная последовательность UGT-B обладает по меньшей мере 70%-й идентичностью последовательности 4, указанной в перечне последовательностей.
8. Способ по п. 7, в котором аминокислотная последовательность UGT-A обладает по меньшей мере 80%-й идентичностью последовательности 2, указанной в перечне последовательностей; и/или аминокислотная последовательность UGT-B обладает по меньшей мере 80%-й идентичностью последовательности 4, указанной в перечне последовательностей.
9. Способ по п. 8, в котором аминокислотная последовательность UGT-A обладает по меньшей мере 90%-й идентичностью последовательности 2, указанной в перечне последовательностей; и/или аминокислотная последовательность UGT-B обладает по меньшей мере 90%-й идентичностью последовательности 4, указанной в перечне последовательностей.
10. Способ по п. 2, в котором UDP-гликозилтрансфераза представляет собой UGT-A из Stevia rebaudiana; причем аминокислотная последовательность UGT-A обладает по меньшей мере 60%-й идентичностью последовательности 2, указанной в перечне последовательностей.
11. Способ по п. 10, в котором аминокислотная последовательность UGT-A обладает по меньшей мере 70%-й идентичностью последовательности 2, указанной в перечне последовательностей.
12. Способ по п. 11, в котором аминокислотная последовательность UGT-A обладает по меньшей мере 80%-й идентичностью последовательности 2, указанной в перечне последовательностей.
13. Способ по п. 12, в котором аминокислотная последовательность UGT-A обладает по меньшей мере 90%-й идентичностью последовательности 2, указанной в перечне последовательностей.
14. Способ по п. 1 или 2, в котором реакцию проводят в системе с водной фазой при температуре 35-45°С и величине рН от 7,5 до 8,5.
15. Способ по п. 14, в котором реакцию проводят в фосфатном буферном растворе.
16. Способ по п. 14, в котором реакционная система включает содержащую UDP-гликозилтрансферазу рекомбинантную клетку и агент для пермеабилизации клетки.
17. Способ по п. 16, в котором агент для пермеабилизации клетки представляет собой толуол; где объемная удельная концентрация толуола в реакционной системе составляет 1-3%.
18. Способ по п. 14, в котором все сырьевые материалы, используемые для проведения реакции, добавляют в реакционный сосуд, смешивают до однородного состояния и затем оставляют при заданной температуре при перемешивании для создания достаточных условий для протекания реакции.
19. Способ по п. 1 или 2, в котором рекомбинантная клетка представляет собой клетку микроорганизма.
20. Способ по п. 19, в котором микроорганизм представляет собой Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae или Pichia pastoris.