3,4-ДИГИДРОБЕНЗОКСАЗИНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ И ИНГИБИТОРЫ АКТИВНОСТИ ВАНИЛЛОИДНЫХ РЕЦЕПТОРОВ ПОДТИПА 1 (VR1)
3,4-DIHYDROBENZOXAZINE COMPOUNDS AND VANILLOID RECEPTOR SUBTYPE 1 (VR1) INHIBITORS

Область техники
Настоящее изобретение относится к новым 3,4-дигидробензоксазиновым соединениям, оказывающим ингибирующий эффект на активность ваниллоидных рецепторов подтипа 1 (VR1), и к их фармацевтически приемлемым солям, фармацевтическим композициям, включающим в качестве активного ингредиента указанное соединение или его фармацевтически приемлемую соль, и к способу лечения и/или предотвращения заболеваний, в возникновении которых участвуют ваниллоидные рецепторы подтипа 1 (VR1), таких как боль, острая боль, хроническая боль, невропатическая боль, боль при ревматоидном артрите, невралгия и т.д., в частности боль.
Предшествующий уровень техники
+
2+
Капсаицин, который является основным ингредиентом красного перца, представляет собой ингредиент, вызывающий жжение, а также вещество, вызывающее боль. Сообщалось, что многие ноцицептивные нервы, в частности немиелинированные С волокна, обладают чувствительностью к капсаицину, и известно, что С волокна селективно выключаются при введении капсаицина детенышам грызунов. Сообщалось также, что имеется много участков действия капсаицина, распределенных в коже, роговице и слизистой оболочке ротовой полости, и их распределение также наблюдается в мышцах, суставах и внутренних органах, в частности в сердечно-сосудистой системе, дыхательной системе и в мочевыводящей системе, и он важен для активации сенсорных нервов. Кроме того, чувствительность к капсаицину наблюдается в нервах преоптической области таламуса, и предполагается его участие в регуляции температуры тела. Введение капсаицина приводит к наблюдаемой деполяризации входящим током Na и Ca в ноцицептивных нервах и к выделению глутаминовой кислоты и нейропептидов (главным образом, субстанции Р и пептида, связанного с геном кальцитонина) из центрального бокового конца первичного афферентного волокна дорзального рога спинного мозга. В настоящее время, когда наблюдалась специфическая связывающая активность ресинифератоксина (RTX), который вызывает почти аналогичные капсаицину эффекты, и был выявлен капсазепин в качестве конкурентного ингибитора, липорастворимый капсаицин считается действующим на рецепторный белок (см. Szallasi A., Blumberg P.M. (1999) Pharmacol. Rev. 51, 159-212 (непатентный документ 1)).
2+
Ген рецептора капсаицина был клонирован в 1997 г. (см., например, Caterina M.J., Schumacher M.A., Tominaga M., Posen Т.А., Levine J.D., Julius D. (1997) Nature 389, 816-824 (непатентный документ 2)). По его аминокислотной последовательности предполагалось, что он представлял собой ионный канал, имеющий шеститрансмембранный домен. Поскольку капсаицин имеет в структуре ваниллильную группу, он относится к виду ваниллоидов наряду с его аналогами, такими как RTX, и клонированный рецептор был назван ваниллоидным рецептором подтипа 1 (далее именуемым как VR1; этот VR1 можно также именовать TRPV1 (транзиторный рецепторный потенциальный ваниллоид 1)). Затем был выполнен электрофизиологический функциональный анализ с использованием метода фиксации потенциала путем обеспечения экспрессии VR1 ооцитами Xenopus Laevis и человеческими культивированными клетками, и было выявлено, что VR1 прямо активируются капсаицином без посредничества внутриклеточного второго информатора (см., например, Caterina M.J., Schumacher M.A., Tominaga M., Posen Т.А., Levine J.D., Julius D. (1997) Nature 389, 816-824 (непатентный документ 2)) и что VR1 является неселективным катионным ионным каналом, имеющим высокую проницаемость Ca со свойством направленного наружу выпрямления (см., например, Premkumar L.S., Agarwal S., Steffen D. (2002) J. Physiol. 545, 107-117 (непатентный документ 3)).
2+
Хотя капсаицин представляет собой вещество, вызывающее боль, он используется в качестве анальгетического средства для уменьшения боли при диабетической нейропатии или ревматическом неврозе (см., например, Szallasi A., Blumberg P.M. (1999) Pharmacol. Rev. 51, 159-212 (непатентный документ 1)). Понятно, что такое уменьшение происходит в результате феномена, при котором окончание сенсорного нерва, подвергнутое воздействию капсаицина, прекращает отвечать на нервный стимул, то есть происходит десенсибилизация. Хотя считается, что механизм десенсибилизации VR1 включает регуляцию, опосредованную Ca, регуляцию, зависимую от потенциала, регуляцию активности VR1 фосфорилированием и дефосфорилированием и т.д., многие моменты остаются неясными.
Так же, как капсаицин, тепло и кислота также вызывают боль, и известно, что чувствительные к капсаицину ноцицептивные нервы реагируют на 2 или более типа стимуляции. Было обнаружено, что VR1 непосредственно активировался не только капсаицином, но тепловой стимуляцией 43°С или более (см., например, Yang D., Gereau R.W. 4th. (2002) J. Neurosci. 22, 6388-6393 (непатентный документ 4)). Температура 43°С в значительной степени согласуется с порогом температуры, которая вызывает боль у людей и животных, свидетельствуя о том, что VR1 участвует в приеме ноцицептивной тепловой стимуляции.
Подкисление происходит в органе в случае воспаления или ишемии и, как известно, она вызывает или усиливает боль (см., например, Bevan S., Geppetti P. (1994) Trends Neurosci. 17, 509-512 (непатентный документ 5)). Оказалось, что когда рН снаружи клеток снижается в пределах подкисления, которое происходит в случае поражения органа, VR1 может непосредственно активироваться одним подкислением (протонным), и предполагается, что VR1 представляет собой действительную молекулу, которая принимает стимуляцию подкислением в органе, которая происходит в случае воспаления или ишемии (см., например, Yang D., Gereau R.W. 4th. (2002) J. Neurosci. 22, 6388-6393 (непатентный документ 4)).
Иммуногистологический анализ с использованием специфического антитела подтвердил, что количество немиелинированных С волокон, экспрессирующих VR1, увеличивается в воспаленной области по сравнению со здоровой областью (см., например, Carlton S.M., Coggeshall R.E. (2001) Neurosci. Lett. 310, 53-56 (непатентный документ 6)). Усиление экспрессии VR1 в подслизистом сплетении действительно наблюдалось при воспалительном кишечном заболевании у людей (см., например, Yiangou Y., Facer P., Dyer N.H., Chan C.L., Knowles C., Williams N.S., Anand P. (2001) Lancet 357, 1338-1339 (непатентный документ 7)). Такое увеличение количества экспрессии VR1 вызывает периферическую сенсибилизацию в воспаленном органе и предположительно воздействует на продолжительность воспалительной гипералгезии.
Сообщалось также, что внеклеточная АТФ, брадикинин и нервный ростовой фактор, которые представляют собой вещества, связанные с воспалением, увеличивают активность VR1 (см, например, Tominaga M., Wada M., Masu M. (2001) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98, 6951-6956 (непатентный документ 8); Shu X., Mendell L.M. (1999) Neurosci. Lett. 274, 159-162 (непатентный документ 9)); Chuang H.H., Prescott E.D., Kong H., Shields S., Jordt S.E., Basbaum A.I., Chao, M.V., Julius D. (2001) Nature 411, 957-962 (непатентный документ 10) и Sugiura T., Tominaga M., Katsuya H., Mizumura K. (2002) J. Neurophysiol. 88, 544-548 (непатентный документ 11), и без сомнения считается, что VR1 участвует в возникновении боли и гиперчувствительности к боли, включая боль, вызванную воспалением (см., например, Numazaki M., Tominaga M. (2003) Biochemistry 75, 359-37 (непатентный документ 12)).
Клетки сенсорных нервов у мышей с недостаточностью VR1 не реагировали на стимуляцию капсаицином, протонами и теплом. Сообщают также, что при анализе действия мыши с недостаточностью VR1 не проявляли болевой реакции после введения капсаицина и не наблюдается снижения чувствительности к тепловой стимуляции при воспалительной гипералгезии (см., например, Caterina M.J., Leffler A., Malmberg A.B., Martin W.J., Trafton J., Peterson-Zeitz K.R., Koltzenburg M., Basbaum A.I., Julius D. (2000) Science 288, 306-313 (непатентный документ 13) и Davis L.B., Gray J., Gunthorpe M.J. et al. (2000) Nature 405, 183-187 (непатентный документ 14)). Таким образом, на индивидуальном уровне по анализам у мышей с недостаточностью VR1 было также подтверждено, что VR1 функционирует в качестве рецептора болевой стимуляции широкого диапазона.
Кроме того, что касается связи между ваниллоидными рецепторами подтипа 1 (VR1) и заболеваниями, то уже сообщалось, что вещество, которое ингибирует активность VR1, можно применять в качестве терапевтического средства для лечения различных заболеваний.
В частности, в отношении терапевтического средства против боли имеется сообщение, что капсазепин, который известен как антагонист VR1, проявлял значительный обезболивающий эффект на экспериментальной модели (см., например, Ikeda Y., Ueno A., Naraba H., Oh-ishi S. (2001) Life Science 69, 2911-2919 (непатентный документ 15)) и ожидается его применение в качестве нового терапевтического средства против боли, оказывающего ингибирующий эффект на активность VR1.
В отношении повышенного напряжения мочевого пузыря с частым мочеиспусканием и недержанием мочи было подтверждено, что сократительная функция мочевого пузыря у мышей с недостаточностью VR1 снижается, и имеется сообщение о том, что соединение, обладающее фармакологическим механизмом действия, подобным капсаицину, или соединение, оказывающее ингибирующее действие на VR1, т.е. соединение, ингибирующее активность ваниллоидных рецепторов подтипа 1 (VR1), можно применять для улучшения функции мочевого пузыря, например, в качестве терапевтического средства по поводу частого мочеиспускания, недержания мочи и т.д. (см, например, (2002) Nat. Neurosci. 5, 856-860 (непатентный документ 16)).
Кроме того, в другой ссылке сообщается, что вещество, обладающее ингибирующим эффектом на ваниллоидные рецепторы подтипа 1 (VR1), в частности антагонист рецептора VR1, можно применять для предотвращения и лечения заболеваний, связанных с активностью VR1, в частности внезапного недержания мочи, избыточно активного мочевого пузыря, хронической боли, невропатической боли, послеоперационной боли, боли при ревматоидном артрите, невралгии, нейропатии, гипералгезии, повреждения нервов, ишемического симптома, нейродегенеративных расстройств, инсульта, недержания мочи и воспалительных заболеваний (см., например, документ JP 2003-192673 (патентный документ 1)).
Кроме того, известно также, что заболевания, релевантные активности ваниллоидных рецепторов, могут включать боль, острую боль, хроническую боль, нейропатическую боль, послеоперационную боль, мигрень, суставную боль, нейропатию, повреждение нервов, диабетическое нервное заболевание, нейродегенеративное заболевание, нейрогенное кожное расстройство, инсульт, гиперчувствительность мочевого пузыря, синдром раздражимой кишки, патологию дыхательных органов, такую как астма и хроническое обструктивное легочное заболевание, раздражение кожи, глаз или слизистой оболочки, лихорадку, язву желудка и 12-перстной кишки, воспалительное кишечное заболевание, воспалительные заболевания и т.д. (см., например, JP 2004-506714 T2 (патентный документ 2)).
Соответственно, можно сказать, что вещества, обладающие антагонистической активностью в отношении ваниллоидных рецепторов подтипа 1 (VR1), можно применять в качестве терапевтического средства для лечения состояний, при которых участвуют С волокна, например, без ограничения, зуд, аллергический ринит, частое мочеиспускание и недержание мочи по типу избыточно активного мочевого пузыря, инсульт, синдром раздражимой кишки, респираторные заболевания, такие как астма и хроническое обструктивное легочное заболевание, дерматит, мукозит, язва желудка и 12-перстной кишки, воспалительное кишечное заболевание и т.д., но также боль, острую боль, хроническую боль, нейропатическую боль, послеоперационную боль, мигрень, суставную боль, нейропатию, повреждение нервов, диабетическое нервное заболевание, нейродегенеративное заболевание, ревматоидный артрит, невралгию, нейропатию, гипералгезию, нейрогенное кожное расстройство, инсульт, избыточную массу тела, внезапное недержание мочи, ишемический симптом и воспалительные заболевания и т.д.
Далее описаны соединения, которые, как считают, относительно напоминают известный антагонист ваниллоидных рецепторов подтипа 1 (VR1), и соединение по настоящему изобретению.
Амиды, представленные следующими общими формулами [A], [B] и [C], раскрыты в документе WO 03/068749 как соединения, проявляющие антагонизм в отношении VR1 (патентный документ 3).
Соединение мочевины, представленное следующей общей формулой [D], раскрыто в документе WO 03/080578 в качестве соединения, проявляющего антагонизм в отношении VR1 (патентный документ 4).
Хинуклидин-3'-ил 1-фенил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-карбоксилат раскрыт в качестве соединения, проявляющего ингибирующий эффект против вызванной капсаицином экстравазации белка плазмы в мочевом пузыре, в документе WO 03/006019 (патентный документ 5).
Соединение мочевины, представленное следующей общей формулой [E], раскрыто в документе WO 03/053945 в качестве соединения, проявляющего антагонизм в отношении VR1 (патентный документ 6).
Соединение, представленное следующей общей формулой [F], раскрыто в документе WO 03/099284 в качестве соединения, проявляющего активность связывания с VR1 (патентный документ 7).
Однако эти соединения отличаются от соединения по настоящему изобретению по структуре, и не найдено описания, которое предполагает соединение по настоящему изобретению.
Для справки, заявители ранее подали патентную заявку на ингибитор VR1, представленный следующей формулой (PCT/JP 2005/013446 (патентный документ 8)):
[Непатентный документ 1] Szallasi A., Blumberg P.M. (1999) Pharmacol. Rev. 51, 159-212
[Непатентный документ 2] Caterina M.J., Schumacher M.A. Tominaga M., Posen Т.А., Levine J.D., Julius D. (1997) Nature 389, 816-824
[Непатентный документ 3] Premkumar L.S., Agarwal S., Steffen D. (2002) J. Physiol. 545, 107-117
[Непатентный документ 4] Yang D., Gereau R.W. 4th. (2002) J. Neurosci. 22, 6388-6393
[Непатентный документ 5] Bevan S., Geppetti P. (1994) Trends Neurosci. 17, 509-512
[Непатентный документ 6] Carlton S.M., Coggeshall R.E. (2001) Neurosci. Lett. 310, 53-56
[Непатентный документ 7] Yiangou Y., Facer P., Dyer N.H., Chan C.L., Knowles C., Williams N.S., Anand P. (2001) Lancet 357, 1338-1339
[Непатентный документ 8] Tominaga M., Wada M., Masu M. (2001) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98, 6951-6956
[Непатентный документ 9] Shu X., Mendell L.M. (1999) Neurosci. Lett. 274, 159-162
[Непатентный документ 10] Chuang H.H., Prescott E.D., Kong H., Shields S., Jordt S.E., Basbaum A.I., Chao, M.V., Julius D. (2001) Nature 411, 957-962
[Непатентный документ 11] Sugiura T., Tominaga M., Katsuya H., Mizumura K. (2002) J. Neurophysiol. 88, 544-548
[Непатентный документ 12] Numazaki M., Tominaga M. (2003) Biochemistry 75, 359-371
[Непатентный документ 13] Caterina M.J., Leffler A., Malmberg A.B., Martin W.J., Trafton J., Peterson-Zeitz K.R., Koltzenburg M., Basbaum A.I., Julius D. (2000) Science 288, 306-313
[Непатентный документ 14] Davis L.B., Gray J., Gunthorpe M.J. et al. (2000) Nature 405, 183-187
[Непатентный документ 15] Ikeda Y., Ueno A., Naraba H., Oh-ishi S., (2001) Life Science 69, 2911-2919
[Непатентный документ 16] (2002) Nat. Neurosci. 5, 856-860
[Патентный документ 1] JP 2003-192673 A2
[Патентный документ 12] JP 2004-506714 T2
[Патентный документ 13] WО 03/068749
[Патентный документ 14] WО 03/080578
[Патентный документ 15] WО 03/006019
[Патентный документ 16] WО 03/053945
[Патентный документ 17] WО 03/099284
[Патентный документ 18] PCT/JP 2005/013446
Описание изобретения
Проблемы, подлежащие разрешению изобретением
В качестве обезболивающего средства в настоящее время используются главным образом наркотические анальгетики (морфин и т.д.), ненаркотические анальгетики (NSAID (нестероидные противовоспалительные препараты)) и т.д. Однако применение наркотических анальгетиков резко ограничено вследствие развития устойчивости/зависимости и других серьезных побочных эффектов. Хорошо известно, что при длительном введении ненаркотических анальгетиков часто возникают расстройства верхних отделов желудочно-кишечного тракта и расстройства печени и очень желательны обезболивающие средства с небольшим количеством побочных эффектов при более высоком обезболивающем эффекте. Кроме того, пока не были обнаружены эффективные обезболивающие средства против вызванной диабетом невропатической боли, постгерпетической невралгии и невропатической боли, такой как невралгия тройничного нерва, и пока ожидается разработка эффективного обезболивающего средства по поводу указанных расстройств.
Подобные капсаицину соединения, которые действуют на VR1, рассматривают как соединения, которые развивают обезболивающий эффект, основываясь на фармакологическом механизме, совершенно отличном от механизма существующих обезболивающих средств (блокада чувствительных к капсаицину чувствительных нервов), и ожидается, что ввиду их эффективности их можно будет использовать в качестве терапевтического средства против невропатической боли и боли, которая возникает при различных состояниях, таких как ревматический артрит, против которого существующие обезболивающие средства неэффективны.
То обстоятельство, что конечной мишенью различных связанных с воспалением веществ является VR1, свидетельствует о возможности того, что средство, которое действует на VR1, эффективно в отношении различных воспалительных болей и интерстициального цистита, и возлагаются большие надежды на него как на обезболивающее средство, которое заменит существующие обезболивающие средства.
Поэтому задачей настоящего изобретения является создание нового обезболивающего средства, действие которого основано на фармакологическом механизме, совершенно отличном от механизмов действия существующих обезболивающих средств (блокада чувствительных к капсаицину нервов), т.е. ингибитора активности VR1, и создание нового соединения для ингибирования активности VR1.
Конкретнее, задачей настоящего изобретения является создание ингибитора активности VR1, имеющего не только высокую ингибирующую активность в отношении VR1, но также имеющего высокую всасываемость и устойчивость, вероятность практического применения которого выше, чем у существующих средств.
Другой задачей настоящего изобретения является разработка способа лечения и/или предотвращения заболеваний, в которых участвует активность ваниллоидных рецепторов подтипа 1 (VR1), таких как боль, хроническая боль, невропатическая боль, боль при ревматоидном артрите, невралгия, и т.д., в частности боль.
Средства разрешения проблем
В результате интенсивных исследований по разработке обезболивающего средства на основе нового механизма действия, которое заменит обычные обезболивающие средства, такие как ненаркотические анальгетики, пиразолоновые анальгетики, непиразолоновые анальгетики и NSAID, заявители обнаружили 3,4-дигидробензоксазиновое соединение, которое обладает превосходной ингибирующей активностью в отношении действия VR1 и имеет значительно лучшую всасываемость и устойчивость, и создали настоящее изобретение. Настоящее изобретение более детально описано ниже.
1. 3,4-Дигидробензоксазиновое соединение, представленное следующей общей формулой [1], или его фармацевтически приемлемая соль:
где Х обозначает
(1) атом азота или
3
(2) CR;
1
Rобозначает
(1) атом водорода или
(2) атом галогена;
2
1-6
Rобозначает С алкоксигруппу, которая может быть замещена одинаковыми или различными 1-5 заместителями, выбранными из следующей группы:
(1) атома галогена и
(2) гидроксильной группы; и
3
1
3
Rобозначает атом галогена (однако Rобозначает атом галогена, когда Х обозначает CR).
2. 3,4-Дигидробензоксазиновое соединение по п.1, выбранное из следующей группы соединений или их фармацевтически приемлемой соли:
1) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(4-трет-бутокси-3,5-дифторфенил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид,
2) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-изопропоксифенил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид,
3) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-этоксифенил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид,
4) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[2-(2,2-диметилпропилокси)пиридин-5-ил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид,
5) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(2-трет-бутоксипиридин-5-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид,
6) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[2-(2,2,2-трифторэтилокси)пиридин-5-ил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид,
7) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(2-изобутоксипиридин-5-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид,
8) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид,
9) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропилокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид, и
10) (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(1,1-диметил-2-гидроксиэтилокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид.
3. Фармацевтическая композиция, включающая 3,4-дигидробензоксазиновое соединение или его фармацевтически приемлемую соль по пп.1 или 2 и фармацевтически приемлемый носитель.
4. Фармацевтическая композиция, включающая 3,4-дигидробензоксазиновое соединение или его фармацевтически приемлемую соль по пп.1 или 2 и фармацевтически приемлемый носитель, для лечения и/или предотвращения заболевания, выбранного из боли, острой боли, хронической боли, невропатической боли, боли при ревматоидном артрите, невралгии, нейропатии, гипералгезии, мигрени, суставной боли, острой постгерпетической невралгии, постгерпетической невралгии, хронической постгерпетической невралгии, послеоперационной боли, боли при раке, воспалительной боли, интерстициального цистита, посттравматической невралгии, диабетической нейропатии, нейродегенеративного заболевания, инсульта, ишемического симптома, повреждения нервов, нейрогенного кожного расстройства, воспалительного заболевания, зуда, аллергического ринита, инсульта, синдрома раздражимой кишки, астмы, хронического обструктивного легочного заболевания, дерматита, мукозита, язвы желудка и 12-перстной кишки, воспалительного кишечного заболевания, гиперчувствительности мочевого пузыря, частого мочеиспускания и недержания мочи.
5. Фармацевтическая композиция для лечения и/или предотвращения боли, включающая 3,4-дигидробензоксазиновое соединение или его фармацевтически приемлемую соль по пп.1 или 2 и фармацевтически приемлемый носитель.
6. Фармацевтическая композиция по п.5, где боль представляет собой острую боль, хроническую боль, нейропатическую боль, боль при ревматоидном артрите, невралгию, нейропатию, гипералгезию, мигрень, суставную боль, острую постгерпетическую невралгию, постгерпетическую невралгию, хроническую постгерпетическую невралгию, послеоперационную боль, боль при раке, воспалительную боль, интерстициальный цистит, посттравматическую невралгию, диабетическую нейропатию или нейродегенеративное заболевание.
7. Ингибитор активности ваниллоидных рецепторов подтипа 1 (VR1), включающий 3,4-дигидробензоксазиновое соединение или его фармацевтически приемлемую соль по пп.1 или 2 и фармацевтически приемлемый носитель.
8. Способ лечения и/или предотвращения заболевания, выбранного из боли, острой боли, хронической боли, невропатической боли, боли при ревматоидном артрите, невралгии, нейропатии, гипералгезии, мигрени, суставной боли, острой постгерпетической невралгии, постгерпетической невралгии, хронической постгерпетической невралгии, послеоперационной боли, боли при раке, воспалительной боли, интерстициального цистита, посттравматической невралгии, диабетической нейропатии, нейродегенеративного заболевания, инсульта, ишемического симптома, повреждения нервов, нейрогенного кожного расстройства, воспалительного заболевания, зуда, аллергического ринита, инсульта, синдрома раздражимой кишки, астмы, хронического обструктивного легочного заболевания, дерматита, мукозита, язвы желудка и 12-перстной кишки, воспалительного кишечного заболевания, гиперчувствительности мочевого пузыря, частого мочеиспускания и недержания мочи, отличающийся тем, что способ включает введение фармакологически эффективного количества 3,4-дигидробензоксазинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1 или 2.
9. Способ лечения и/или предотвращения боли, отличающийся тем, что способ включает введение фармакологически эффективного количества 3,4-дигидробензоксазинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1 или 2.
10. Способ лечения и/или предотвращения боли по п.9, где боль представляет собой острую боль, хроническую боль, нейропатическую боль, боль при ревматоидном артрите, невралгию, нейропатию, гипералгезию, мигрень, суставную боль, острую постгерпетическую невралгию, постгерпетическую невралгию, хроническую постгерпетическую невралгию, послеоперационную боль, боль при раке, воспалительную боль, интерстициальный цистит, посттравматическую невралгию, диабетическую нейропатию или нейродегенеративное заболевание.
11. Коммерческая упаковка, включающая фармацевтическую композицию по любому из пп.3-6, и написанные инструкции, относящиеся к указанной фармацевтической композиции, где сказано, что указанную композицию можно применять или следует применять для лечения и/или предотвращения заболевания, выбранного из боли, острой боли, хронической боли, невропатической боли, боли при ревматоидном артрите, невралгии, нейропатии, гипералгезии, мигрени, суставной боли, острой постгерпетической невралгии, постгерпетической невралгии, хронической постгерпетической невралгии, послеоперационной боли, боли при раке, воспалительной боли, интерстициального цистита, посттравматической невралгии, диабетической нейропатии, нейродегенеративного заболевания, инсульта, ишемического симптома, повреждения нервов, нейрогенного кожного расстройства, воспалительного заболевания, зуда, аллергического ринита, инсульта, синдрома раздражимой кишки, астмы, хронического обструктивного легочного заболевания, дерматита, мукозита, язвы желудка и 12-перстной кишки, воспалительного кишечного заболевания, гиперчувствительности мочевого пузыря, частого мочеиспускания и недержания мочи.
12. Применение 3,4-дигидробензоксазинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1 или 2 для получения фармацевтической композиции по п.4 для лечения и/или предотвращения заболевания, выбранного из боли, острой боли, хронической боли, невропатической боли, боли при ревматоидном артрите, невралгии, нейропатии, гипералгезии, мигрени, суставной боли, острой постгерпетической невралгии, постгерпетической невралгии, хронической постгерпетической невралгии, послеоперационной боли, боли при раке, воспалительной боли, интерстициального цистита, посттравматической невралгии, диабетической нейропатии, нейродегенеративного заболевания, инсульта, ишемического симптома, повреждения нервов, нейрогенного кожного расстройства, воспалительного заболевания, зуда, аллергического ринита, инсульта, синдрома раздражимой кишки, астмы, хронического обструктивного легочного заболевания, дерматита, мукозита, язвы желудка и 12-перстной кишки, воспалительного кишечного заболевания, гиперчувствительности мочевого пузыря, частого мочеиспускания и недержания мочи.
13. Применение 3,4-дигидробензоксазинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1 или 2 для получения фармацевтической композиции для лечения и/или предотвращения боли по пп.5 или 6.
14. Применение 3,4-дигидробензоксазинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п.13, где боль представляет собой острую боль, хроническую боль, нейропатическую боль, боль при ревматоидном артрите, невралгию, нейропатию, гипералгезию, мигрень, суставную боль, острую постгерпетическую невралгию, постгерпетическую невралгию, хроническую постгерпетическую невралгию, послеоперационную боль, боль при раке, воспалительную боль, интерстициальный цистит, посттравматическую невралгию, диабетическую нейропатию или нейродегенеративное заболевание.
2
15. Лекарственное средство, включающее комбинацию фармацевтической композиции, включающей 3,4-дигидробензоксазиновое соединение или его фармацевтически приемлемую соль по пп.1 или 2 и фармацевтически приемлемый носитель, с одним или более средств, выбранных из группы, которая состоит из противовирусного средства, антидепрессанта, противосудорожного средства, антиаритмического средства, местного анестетика, анестетика, антагониста рецептора N-метил-D-аспартата, стероида коры надпочечников, нервной блокады, нестероидного противовоспалительного анальгетика, наркотического вещества, антагонистического анальгетика, агониста α-адреналинового рецептора, лекарственного средства для наружного применения, антагониста кальциевых каналов, средства, открывающего калиевые каналы, и жаропонижающего средства.
16. Применение 3,4-дигидробензоксазинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1 или 2 для получения лекарственного препарата п.15.
2
17. Способ лечения и/или предотвращения заболевания, выбранного из боли, острой боли, хронической боли, невропатической боли, боли при ревматоидном артрите, невралгии, нейропатии, гипералгезии, мигрени, суставной боли, острой постгерпетической невралгии, постгерпетической невралгии, хронической постгерпетической невралгии, послеоперационной боли, боли при раке, воспалительной боли, интерстициального цистита, посттравматической невралгии, диабетической нейропатии, нейродегенеративного заболевания, инсульта, ишемического симптома, повреждения нервов, нейрогенного кожного расстройства, воспалительного заболевания, зуда, аллергического ринита, инсульта, синдрома раздражимой кишки, астмы, хронического обструктивного легочного заболевания, дерматита, мукозита, язвы желудка и 12-перстной кишки, воспалительного кишечного заболевания, гиперчувствительности мочевого пузыря, частого мочеиспускания и недержания мочи, отличающийся тем, что одно или более средств, выбранных из группы, которая состоит из противовирусного средства, антидепрессанта, противосудорожного средства, антиаритмического средства, местного анестетика, анестетика, антагониста рецептора N-метил-D-аспартата, стероида коры надпочечников, нервной блокады, нестероидного противовоспалительного анальгетика, наркотического вещества, антагонистического анальгетика, агониста α-адреналинового рецептора, лекарственного средства для наружного применения, антагониста кальциевых каналов, средства, открывающего калиевые каналы, и жаропонижающего средства, используются в комбинации с фармацевтически эффективным количеством 3,4-дигидробензоксазинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1 или 2.
18. Способ лечения и/или предотвращения боли, отличающийся тем, что в способе используется введение 3,4-дигидробензоксазинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли по пп.1 или 2 в комбинации с вызываемой стимуляцией аналгезией, выбранной из акупунктуры, чрескожной электроакупунктурной стимулирующей терапии, терапии путем чрескожной электрической стимуляции нервов, терапии серебряной спайковой точки (SSP), терапии стимуляцией периферических нервов, терапии электрической стимуляцией спинного мозга, электросудорожной терапии, лазерной терапии и низкочастотной терапии.
19. Способ лечения и/или предотвращения послеоперационной невралгии, отличающийся тем, что 3,4-дигидробензоксазиновое соединение или его фармацевтически приемлемая соль по пп.1 или 2 вводится после выполнения хирургической операции, выбранной из удаления рубцовой ткани, криохирургического нейрохирургического вмешательства, иссечения периферических нервов, иссечения дорзальных корешков спинного мозга, симпатэктомии, деструкции входной зоны дорзальных корешков спинного мозга, кордотомии и иссечения лобной доли.
Преимущества изобретения
3,4-Дигидробензоксазиновое соединение по настоящему изобретению эффективно ингибирует активность ваниллоидных рецепторов подтипа 1 (VR1), и поэтому оно эффективно при медикаментозном лечении и/или предотвращении заболеваний, таких как боль, острая боль, хроническая боль, невропатическая боль, боль при ревматоидном артрите, невралгия, нейропатия, гипералгезия, мигрень, суставная боль, острая постгерпетическая невралгия, постгерпетическая невралгия, хроническая постгерпетическая невралгия, послеоперационная боль, боль при раке, воспалительная боль, интерстициальный цистит, посттравматическая невралгия, диабетическая нейропатия, нейродегенеративное заболевание, инсульт, ишемический симптом, повреждение нервов, нейрогенное кожное расстройство, воспалительное заболевание, зуд, аллергический ринит, инсульт, синдром раздражимой кишки, астма, хроническое обструктивное легочное заболевание, дерматит, мукозит, язва желудка и 12-перстной кишки, воспалительное кишечное заболевание, гиперчувствительность мочевого пузыря, частое мочеиспускание по типу избыточно активного мочевого пузыря и недержание мочи по типу избыточно активного мочевого пузыря.
В частности, оно эффективно в качестве терапевтического средства и профилактического средства против заболеваний, сопровождающихся болевым состоянием, таких как боль, острая боль, хроническая боль, невропатическая боль, боль при ревматоидном артрите, невралгия, нейропатия, гипералгезия, мигрень, суставная боль, острая постгерпетическая невралгия, постгерпетическая невралгия, хроническая постгерпетическая невралгия, послеоперационная боль, боль при раке, воспалительная боль, интерстициальный цистит, посттравматическая невралгия, диабетическая нейропатия и нейродегенеративное заболевание. Кроме того, ожидаются также эффекты вследствие механизма, отличного от механизма действия обычных анальгетиков.
3,4-Дигидробензоксазиновое соединение по настоящему изобретению, представленное указанной выше общей формулой [1], не только оказывает выраженный ингибирующий эффект на активность VR1, но также противодействует окислительному метаболизму и оказывает превосходный эффект в отношении длительности ингибирующего действия. Соединение по настоящему изобретению, кроме того, имеет такие свойства, как высокая всасываемость и/или высокая устойчивость к действию желудочного сока. Специалисты в данной области не могли прогнозировать такие эффекты.
Поэтому новое соединение по настоящему изобретению вероятнее всего найдет практическое применение в качестве лекарственного средства.
Наилучший способ осуществления изобретения
Ниже приведены определения каждого термина, используемого в настоящем описании.
1-6
1-4
1-6
1-4
«С алкильная группа» представляет линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода, предпочтительно «С алкильную группу». «C алкильная группа», в частности, включает метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу, бутильную группу, изобутильную группу, втор-бутильную группу, трет-бутильную группу, пентильную группу, изопентильную группу, трет-пентильную группу, гексильную группу и т.д. «С алкильная группа» представляет линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую от 1 до 4 атомов углерода, и, в частности, включает метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу, бутильную группу, изобутильную группу, втор-бутильную группу, трет-бутильную группу и т.д.
«Атом галогена» представляет собой атом фтора, атом хлора, атом брома или атом йода, и предпочтительными являются атом фтора и атом хлора, а особенно предпочтительным является атом фтора.
1-6
1-6
«С алкоксигруппа» представляет собой алкоксигруппу, в которой ее алкильная часть представляет собой «С алкильную группу» указанного выше определения. В частности, она включает метоксигруппу, этоксигруппу, пропоксигруппу, изопропоксигруппу, бутоксигруппу, изобутоксигруппу, втор-бутоксигруппу, трет-бутилоксигруппу, пентилоксигруппу, изопентилоксигруппу, 2-метилбутоксигруппу, неопентилоксигруппу, 1-этилпропоксигруппу, гексилоксигруппу, 4-метилпентилоксигруппу, 3-метилпентилоксигруппу, 2-метилпентилоксигруппу, 1-метилпентилоксигруппу, 3,3-диметилбутоксигруппу, 2,2-диметилбутоксигруппу, 1,1-диметилбутоксигруппу, 1,2-диметилбутоксигруппу, 1,3-диметилбутоксигруппу, 2,3-диметилбутоксигруппу, 2-этилбутоксигруппу и т.д.
1-6
1-6
1-6
1-6
«С алкоксигруппа, которая может замещена 1-5 атомами галогена», представляет, в дополнение к указанной выше «С алкоксигруппе», галогеналкоксигруппу, в которой «С алкильная группа», составляющая часть С алкоксигруппы, замещена 1-5, предпочтительно 1-3, предпочтительнее 3 и одинаковыми или различными атомами галогена, предпочтительно одинаковыми 3 атомами галогена. В частности, такая галогеналкоксигруппа включает фторметоксигруппу, дифторметоксигруппу, трифторметоксигруппу, бромметоксигруппу, хлорметоксигруппу дихлорметоксигруппу, 2-хлорэтоксигруппу, 1,2-дихлорэтоксигруппу, 2,2-дихлорэтоксигруппу, трихлорметоксигруппу, 2-фторэтоксигруппу, 2,2,2-трифторэтоксигруппу, 2,2,2-трихлорэтоксигруппу, 4-фторбутоксигруппу и т.д.
1-6
1-6
1-6
1-6
«Салкоксигруппа, которая может замещена 1-5 гидроксильными группами», представляет, в дополнение к указанной выше «С алкоксигруппе», алкоксигруппу, в которой «С алкоксигруппа», составляющая часть С алкоксигруппы, замещена 1-5, предпочтительно 1-2, предпочтительнее 1 гидроксильной группы. В частности, такая алкоксигруппа, замещенная гидроксильной группой, включает гидроксиметоксигруппу, 2-гидроксиэтоксигруппу, 1-гидроксиэтоксигруппу, 3-гидроксипропоксигруппу, 4-гидроксибутоксигруппу, 5-гидроксипентилоксигруппу, 6-гидроксигексилоксигруппу, 2-гидрокси-2-метилпропоксигруппу, 1,1-диметил-2-гидроксиэтилоксигруппу и т.д.
В общей формуле [1], предпочтительные примеры и особенно предпочтительные примеры каждого символа следующие. Однако настоящее изобретение не ограничено ими.
[Предпочтительный R
]
1
1
Rобозначает атом водорода или атом галогена. Атом галогена а настоящем документе обозначает предпочтительно атом фтора или атом хлора, особенно предпочтительно атом фтора.
1
1
3
Однако Rпредпочтительно обозначает атом водорода, когда Х обозначает атом азота, и Rобозначает атом галогена, особенно предпочтительно атом фтора, когда Х обозначает CR.
3
1
1
Предпочтительнее и R, и Rобозначают атом фтора. Конкретнее, Rимеет следующие значения:
1
Rобозначает
(1) атом водорода или
(2) атом галогена,
предпочтительно
1) атом водорода или
(2) атом фтора
1
(однако Rпредпочтительно обозначает
атом фтора,
3
когда Х обозначает CR).
[Предпочтительный R
]
2
2
1-6
1-6
Rобозначает С алкоксигруппу, которая может быть замещена одинаковыми или различными 1-5 заместителями, выбранными из атома галогена и гидроксильной группы, предпочтительно С алкоксигруппы, которая может быть замещена 1-3 атомами галогена или 1-3 гидроксильными группами.
1-6
В настоящем изобретении «С алкоксигруппа» может означать алкоксигруппу, в которой часть алкильной группы является линейной, или алкоксигруппу, в которой часть алкильной группы является разветвленной.
1-6
2-5
Предпочтительная «С алкоксигруппа» означает С алкоксигруппу, которая может быть разветвленной. В частности, она включает этоксигруппу, изопропоксигруппу, изобутоксигруппу, трет-бутоксигруппу, 2,2-диметилпропоксигруппу и т.д.
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2-5
«С алкоксигруппа, которая может быть замещена 1-3 атомами галогена», представляет, в дополнение к указанной выше С алкоксигруппе, С алкоксигруппу, замещенную 1-3 атомами галогена. С алкоксигруппа, замещенная 1-3 атомами галогена, представляет С алкоксигруппу, замещенную одинаковыми или различными 1-3 атомами галогена, предпочтительно одинаковыми 1-3 атомами галогена, особенно предпочтительно 1-3 атомами фтора. В частности, она включает 2,2,2-трифторэтоксигруппу, 2,2,2-трихлорэтоксигруппу, 2,2,2-трибромэтоксигруппу, 2,2,2-трийодэтоксигруппу, и т.д. Особенно предпочтительной «Салкоксигруппой, замещенной 1-3 атомами галогена», является С алкоксигруппой, замещенной 1-3 атомами фтора. В частности, она включает 2,2,2-трифторэтоксигруппу и т.д.
1-6
1-6
1-6
1-6
2-5
«С алкоксигруппа, которая может быть замещена 1-3 гидроксильными группами», представляет, в дополнение к указанной выше С алкоксигруппе, С алкоксигруппу, замещенную 1-3 гидроксильными группами, предпочтительно 1 гидроксильной группой, С алкоксигруппа, замещенная 1-3 гидроксильными группами, предпочтительно представляет собой С алкоксигруппу, замещенную 1 гидроксильной группой. В частности, она включает 2-гидрокси-2-метилпропоксигруппу, 2-гидрокси-1,1-диметилэтоксигруппу и т.д.
[Предпочтительный R
]
3
3
3
1
Rобозначает атом галогена. Атом галогена в настоящем изобретении представляет предпочтительно атом фтора или атом хлора, особенно предпочтительно атом фтора. Особенно предпочтительно и R, и R означают атомы фтора.
[Предпочтительные R
и R
, когда Х означает атом азота]
1
2
1
2
1-6
Когда Х означает атом азота, то предпочтительно Rозначает атом водорода, а R означает С алкоксигруппу, которая может быть замещена одинаковыми или различными 1-3 атомами галогена.
1
2
1
2
1-6
Особенно предпочтительно Rозначает атом водорода, а R означает С алкоксигруппу, которая может быть замещена одинаковыми 3 атомами галогена. Предпочтительнее Rозначает атом водорода, а R означает трет-бутоксигруппу, изобутоксигруппу, 2,2,2-трифторэтоксигруппу или 2,2-диметилпропоксигруппу.
[Предпочтительные R
, R
и R
, когда Х означает CR
]
1
2
3
3
3
1
3
1
3
Когда Х означает CR, предпочтительными Rи R являются Rи R, которые означают одинаковые или различные атомы галогена, особенно предпочтительно одинаковые атомы галогена.
3
1
Предпочтительнее и R, и R означают атомы фтора.
3
2
2-5
1-6
1-6
Когда Х означает CR, предпочтительный Rозначает С алкоксигруппу, такую как этоксигруппа, изопропоксигруппа, изобутоксигруппу, трет-бутоксигруппу, 2,2-диметилпропоксигруппу и т.д.; С алкоксигруппу, замещенную 1-3 атомами галогена, предпочтительно атомами фтора, такую как 2,2,2-трифторэтоксигруппа, 2,2,2-трихлорэтоксигруппа, 2,2,2-трибромэтоксигруппа, 2,2,2-трийодэтоксигруппа, и т.д.; или С алкоксигруппу, замещенную 1 или 2 гидроксильными группами, такую как 2-гидрокси-2-метилпропоксигруппа, 2-гидрокси-1,1-диметилэтоксигруппа и т.д.
3
1
3
2
1-6
Конкретнее, когда Х означает CR, R и R означают предпочтительно одинаковые или различные атомы галогена, особенно предпочтительно атомы фтора, а R означают предпочтительно С алкоксигруппу, которая может быть замещена одинаковыми или различными 1-3 заместителями, выбранными из атома фтора и гидроксильной группы, конкретнее этоксигруппу, трет-бутоксигруппу, изопропоксигруппу, 2,2,2-трифторэтоксигруппу, 2-гидрокси-2-метилпропоксигруппу или 2-гидрокси-1,1-диметилэтоксигруппу.
«Фармацевтически приемлемая соль» в настоящем изобретении может представлять собой любой вид соли, пока она образует соль с соединением, представленным указанной выше общей формулой [1], и может быть получена взаимодействием его, например, с неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота или бромистоводородная кислота; с органической кислотой, такой как щавелевая кислота, малоновая кислота, лимонная кислота, фумаровая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, янтарная кислота, винная кислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота, глюконовая кислота, аскорбиновая кислота, метилсульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота или бензилсульфоновая кислота; или аминокислотой, такой как лизин, аргинин или аланин. Гидрированное соединение, гидрат и сольват каждого соединения также включены в настоящее изобретение.
Кроме того, существуют различные изомеры соединения, представленного указанной выше общей формулой [1]. Например, существуют Е-изомер и Z-изомер в качестве геометрических изомеров, и когда существует асимметричный атом углерода, существуют энантиомеры и диастереомеры в качестве стереоизомеров на их основе, и могут существовать таутомеры. Поэтому все эти изомеры и их смеси включены в объем настоящего изобретения. Кроме того, настоящее изобретение также охватывает пролекарственные соединения этих соединений и соединения метаболитов в качестве эквивалентных соединений, кроме соединения, представленного указанной выше общей формулой [1].
«Пролекарство» представляет собой производное соединения по настоящему изобретению, имеющему группу, которая может быть разрушена химически или метаболически, и после введения в живой организм оно в результате химической модификации превращается в соединение, которое обладает активностью в качестве лекарственного средства и проявляет оригинальный фармакологический эффект; в него также включены комплексы и соли, не связанные ковалентной связью.
Пролекарство используется для улучшения всасывания после орального введения или нацеливания на участок-мишень. Части, подлежащие модификации для образования пролекарства, включают реактивные функциональные группы, такие как гидроксильная группа и аминогруппа в соединении по настоящему изобретению. Определенные примеры модифицирующей группы для гидроксильной группы включают ацетильную группу, пропионильную группу, изобутирильную группу, пивалоильную группу, бензоильную группу, 4-метилбензоильную группу, диметилкарбамоильную группу, сульфогруппу и т.д. Определенные примеры модифицирующей группы для аминогруппы включают гексилкарбамоильную группу, 3-метилтио-1-(ацетиламино)пропилкарбонильную группу, 1-сульфо-1-(3-этокси-4-гидроксифенил)метильную группу, метил-(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ильную) группу и т.д.
«Фармацевтическая композиция» охватывает комбинированное лекарственное средство с другими лекарственными средствами и т.д., кроме так называемой «композиции», которая включает лекарственное средство в качестве активного ингредиента и комбинируемый с ним агент и т.д. Очевидно, что фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно применять в комбинации с любым видом других лекарственных средств, пока это допускается в области медицины. Поэтому можно также сказать, что фармацевтическая композиция представляет собой фармацевтическую композицию для комбинированного применения с другими лекарственными средствами.
«Боль» означает любой тип болевого состояния, независимо от вида состояния (например, является ли он тупой болью или острой болью, хронической или острой и т.д.), независимо от того, какое заболевание вызывает боль (например, независимо от того, возникает ли боль в результате ревматизма или вызвана раком и т.д.). Поэтому используемый в настоящем документе термин «боль» охватывает, в дополнение к так называемой «боли», острую боль, хроническую боль, нейропатическую боль, боль при ревматоидном артрите, невралгию, нейропатию, гипералгезию, мигрень, суставную боль, острую постгерпетическую невралгию, постгерпетическую невралгию, хроническую постгерпетическую невралгию, послеоперационную боль, боль при раке, воспалительную боль, интерстициальный цистит, посттравматическую невралгию, диабетическую нейропатию и нейродегенеративное заболевание.
2+
«Ингибитор активности ваниллоидных рецепторов подтипа 1 (VR1)» означает вещество, которое ингибирует функцию ваниллоидных рецепторов подтипа 1 как ионного канала и устраняет или ослабляет их активность. В частности, он включает антагонист ваниллоидных рецепторов подтипа 1 и т.д. Антагонист ваниллоидных рецепторов подтипа 1 означает вещество, которое ингибирует эффект агониста, действующего на ваниллоидные рецепторы подтипа 1, ингибируя посредством этого функцию ваниллоидных рецепторов подтипа 1 как ионного канала. Ингибитор по настоящему изобретению не должен конкурировать с агонистом, но может также ингибировать функцию VR1 как ионного канала. В частности, агонисты, которые действуют на ваниллоидные рецепторы подтипа 1, включают капсаицин, производные капсаицина, кислотную стимуляцию (протонную), тепловую стимуляцию, и т.д., ингибитор активности ваниллоидных рецепторов подтипа 1 (VR1) может представлять собой вещество, которое ингибирует входящий ток Са в клетку, вызванный агонистической стимуляцией капсаицина, кислотной стимуляцией (протонной) или тепловой стимуляцией.
Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно вводить человеку, а также другим млекопитающим (мышам, крысам, хомякам, кроликам, кошкам, собакам, коровам, лошадям, овцам, обезьянам и т.д.). Поэтому фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно также применять в качестве лекарственного средства для животных, кроме человека.
Когда соединение по настоящему изобретению используется в качестве фармацевтического препарата, его можно смешивать с обычным фармакологически приемлемым носителем, эксципиентом, разбавителем, наполнителем, разрыхлителем, стабилизатором, консервантом, буфером, эмульгатором, отдушкой, красящим агентом, подслащивающим агентом, загустителем, корректором нежелательных эффектов, агентом, содействующим растворению, и другими дополнительными агентами, в частности водой, растительным маслом, спиртом, таким как этанол или бензиловый спирт, углеводороды, такие как полиэтиленгликоль, глицеринтриацетат, желатин, лактоза и крахмал, стеарат магния, тальк, ланолин, вазелин и т.д., для изготовления лекарственного средства в такой форме, как таблетка, пилюля, порошок, гранула, суппозиторий, средство для инъекции, глазные капли, жидкое лекарственное средство, капсулированное средство, пастилка, аэрозольное средство, эликсир, суспензия, эмульсия и сироп для системного или местного введения оральным или парентеральным путем.
Хотя дозировка варьируется в зависимости от возраста, массы тела, состояния, терапевтического эффекта, способов введения и т.д., она обычно вводится взрослым в диапазоне от 0,01 мг до 1 г на дозу, от 1 до нескольких раз в день в форме орального препарата или инъекционного препарата, такого как раствор для внутривенных инъекций, и т.д.
«Предотвращение» представляет собой так называемое предотвращение и означает, например, профилактическое подавление начала невралгии или хронического течения невралгии. В отношении боли конкретно включено профилактическое подавление начала острой постгерпетической невралгии, начала постгерпетической невралгии, перехода в постгерпетическую невралгию от острой герпетической боли, хронического течения постгерпетической невралгии, начала послеоперационной боли, хронического течения послеоперационной боли, начала симптомов боли при раке, хронического течения боли при раке, начала симптомов воспалительной боли, начала интерстициального цистита, хронического течения воспалительной боли, начала посттравматической невралгии или хронического течения посттравматической невралгии.
«Лекарственное средство, включающее комбинацию» означает лекарственное средство, отличающееся тем, что он представляет собой препаративную форму, содержащую фармацевтическую композицию, включающую соединение [1] или его фармацевтически приемлемую соль по настоящему изобретению и фармацевтическую композицию или агент, подлежащий объединению с композицией по настоящему изобретению, причем лекарственное средство отличается тем, что оно представляет собой набор, включающий фармацевтическую композицию, включающую соединение [1] или его фармацевтически приемлемую соль по настоящему изобретению и фармацевтическую композицию или агент, подлежащий объединению с композицией по настоящему изобретению, причем лекарственное средство отличается тем, что оно представляет собой набор, включающий фармацевтическую композицию, включающую соединение [1] или его фармацевтически приемлемую соль по настоящему изобретению и фармацевтическую композицию или агент, подлежащий объединению с композицией по настоящему изобретению, и вводится соответственно одинаковыми или различными путями введения и т.д.
2
Соединение и фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно применять в комбинации с одним или более других средств в соответствии со способом, общепринятым в настоящее время в обычных медицинских учреждениях. При использовании в комбинации лекарственное средство, подлежащее применению, можно вводить одновременно или отдельно через интервал времени. Хотя имеются различные соединения, которые можно применять в комбинации с соединением по настоящему изобретению, особенно предпочтительными являются противовирусное средство, антидепрессант, противосудорожное средство, антиаритмический препарат, местный анестетик, обезболивающее лекарственное средство, антагонист рецепторов N-метил-D-аспартата, стероид коры надпочечников, нервная блокада, нестероидный противовоспалительный анальгетик, наркотические анальгетики, антагонистический анальгетик, агонист α-адреналиновых рецепторов, средство для обезболивания стимуляцией, препараты для наружного применения, антагонист кальциевых каналов, средство, открывающее калиевые каналы, и жаропонижающее средство.
Противовирусное средство, в частности, включает видарабин, ацикловир, ганцикловир, зидовудин, диданозин, амантадин, и идоксуридин, интерферон и т.д.
Антидепрессант, в частности, включает амитриптилин, имипрамин, кломипрамин, тримипрамин, лофепрамин, досулепин, десипрамин, амоксапин, нортриптилин, флуоксетин, флувоксамин, мапротилин, миансерин, сетиптилин, тразодон и т.д.
Противосудорожное средство, в частности, включает габапентин, прегабалин, фенобарбитал, примидон, фенитоин, мефенитоин, нирванол, этотоин, триметадион, этосуксимид, ацетилфенетурид, карбамазепин, зонисамид, ацетазоламид, диазепам, клоназепам, нитразепам, дифенилгидантоин, вальпроевую кислоту, баклофен и т.д.
Антиаритмическое лекарственное средство, в частности, включает хинидин, дисопирамид, прокаинамид, аймалин, праймалин, цибензолин, лидокаин, мексилетин, априндин, тоникаид, фенитоин, флекаинид, плицикаинид, пропафенон, пропранолол, амиодарон, верапамил, бепридил, и т.д.
Местный анестетик, в частности, включает лидокаин, мексилетин, кокаин, прокаин, бупивакаин, мепивакаин, прилокаин, тетракаин, дибукаин, этиламинобензоат, и т.д.
Обезболивающее средство, в частности, включает бензодиазепин, диазепам, мидазолам, тиопентал, тиамилал, пропофол, баклофен, дроперидол, суфентанил, и т.д. Антагонист рецепторов N-метил-D-аспартата, в частности, включает кетамин, декстрометорфан, мемантин, амантадин и т.д.
Стероид коры надпочечников, в частности, включает кортизол, кортизон, преднизолон, триамцинолон, дексаметазон, бетаметазон, параметазон, флуоцинолон ацетонид, флуоцинонид, беклометазон, флудрокортизон, и т.д.
Нервная блокада, в частности, включает блокаду звездчатого ганглия, блокаду эпидурального ганглия, блокаду ганглия плечевого сплетения, блокаду нервного корешка, блокаду грудного/поясничного симпатического ганглия, блокаду точки запуска, блокаду субарахноидального ганглия, блокаду тройничного нерва, блокаду симпатических нервов, местную инфильтрационную блокаду, блокаду периферических нервов и т.д.
Нестероидный противовоспалительный анальгетик, в частности, включает целекоксиб, рофекоксиб, этодолак, мелоксикам, нимесулид, диклофенак натрий, мефенамовую кислоту, залтопрофен, локсопрофен натрий, сулиндак, набуметон, дифлунизал, пироксикам, ибупрофен, напроксен, фенопрофен, ацетилсалициловую кислоту, толметин, индометацин, флурбипрофен, оксапрозин, кетопрофен, мофезолак, ацетаминофен, кеторолак, зомепирак, нитроаспирин, тиапрофен, ампироксикам, тиарамид, эпиризол и т.д.
Наркотические анальгетики, в частности, включают морфин, фентанил, оксикодон, метадон, кодеин, кокаин, петидин, опий, ипекак и т.д.
Антагонистический анальгетик, в частности, включает пентагин, бупренорфин, налорфин, циклазоцин, буторфанол и т.д.
2
Агонист α-адреналинового рецептора, в частности, включает клонидин, дексмедетомидин, тизанидин, гуанфацин, гуанабенз и т.д.
Лекарственный препарат для наружного применения, в частности, включает капсаициновый крем и т.д.
Жаропонижающее средство, в частности, включает диклофенак натрий, мефенамовую кислоту, локсопрофен натрий, ибупрофен, ацетилсалициловую кислоту, индометацин, ацетаминофен, и т.д.
Способ стимуляционной аналгезии, в частности, включает акупунктуру, чрескожную электроакупунктурную стимулирующую терапию, терапию путем чрескожной электрической стимуляции нервов, терапию серебряной спайковой точки (SSP), терапию стимуляцией периферических нервов, терапию электрической стимуляцией спинного мозга, электросудорожную терапию, лазерную терапии и низкочастотную терапию и т.д.
Кроме того, соединение по настоящему изобретению может применяться в соответствии с общим способом, обычно выполняемым в данной области, путем введения после выполнения хирургической операции для предотвращения или лечения боли. Хотя различные хирургические операции можно выполнять в комбинации с соединением по настоящему изобретению, особенно предпочтительными являются иссечение рубцовой ткани, криодеструкция нервов, иссечение периферических нервов, иссечение дорзальных корешков спинного мозга, симпатэктомию, деструкцию входной зоны дорзальных корешков спинного мозга и иссечение лобной доли.
Хотя применение соединения по настоящему изобретению было описано, главным образом, в виде применения для предотвращения или лечения боли, соединение по настоящему изобретению можно применять при состояниях, при которых участвуют С волокна, например зуде, аллергическом рините, частом мочеиспускании и недержании мочи по типу избыточно активного мочевого пузыря, синдрома раздражимой кишки, респираторного заболевания, такого как астма и хроническое обструктивное легочное заболевание, дерматита, мукозита, язвы желудка и 12-перстной кишки, воспалительного кишечного заболевания и т.д.
Далее конкретно описывается способ получения соединения по настоящему изобретению, представленного общей формулой [1], однако следует понимать, что настоящее изобретение не ограничивается этими способами получения.
Поэтому соединение по настоящему изобретению может быть синтезировано в соответствии со следующими способами получения А или В, но его можно получить в соответствии с приведенными ниже примерами или со ссылкой на эти способы. Получение соединения по настоящему изобретению, порядок операций взаимодействия можно подходящим образом изменять. Его можно выполнять начиная со считающейся рациональной стадии реакции или замещения части. Например, соединение (X) можно ввести перед введением соединения (II), и этот порядок может быть изменен на обратный. Что касается образования 3,4-дигидроэнзоксазина, то реакцию закрытия кольца можно выполнить для образования этого гетерокольца перед введением соединения (II) и/или соединения (Х) или, альтернативно, реакцию закрытия кольца можно выполнять для образования этого гетерокольца после введения соединения (II) и/или соединения (Х). Защиту и снятие защиты можно подходящим образом проводить, когда соединение имеет функциональную реакционноспособную группу. Для усиления развития реакции, возможно использование реагентов, отличных от проиллюстрированных.
Ход следующего способа получения представляет собой пример типичного способа получения, но получение соединения по настоящему изобретению конкретно не ограничивается следующим способом. Каждое соединение, полученное на каждой стадии, можно выделить и очистить обычным способом, но в зависимости от конкретного случая соединение можно использовать на следующей стадии без выделения и очистки.
1. Способ получения А:
(где R представляет карбоксил защитную группу (в настоящем документе карбоксил защитная группа представляет карбоксил защитную группу, обычно используемую в области синтетической органической химии, и включает, например, метильную группу, этильную группу, пропильную группу, трет-бутильную группу, бензильную группу, пара-метоксибензильную группу и т.д.), и образует сложный эфир, который легко дает карбоновую кислоту посредством реакции гидролиза или каталитического гидрирования. X' и X” являются одинаковыми или различными, и каждый представляет атом галогена, такой как хлор- или бром- или сульфонилоксигруппа, такая как 3-нитробензолсульфонилоксигруппа, п-толуолсульфонилоксигруппа, бензолсульфонилоксигруппа, п-бромбензолсульфонилоксигруппа, метансульфонилоксигруппа или трифторметансульфонилоксигруппа. R' представляет защитную группу фенольной гидроксильной группы, которую можно легко удалить реакцией гидролиза или каталитического гидрирования (защитная группа фенольной гидроксильной группы представляет защитную группу фенольной гидроксильной группы, в целом используемую в области синтетической органической химии, и включает, например, метоксиметильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, бензильную группу, трет-бутильную группу, тетрагидропиранильную группу, ацетильную группу и т.д.). R” представляет защитную группу гидроксильной группы, которую можно легко удалить реакцией гидролиза или каталитического гидрирования (защитная группа гидроксильной группы представляет защитную группу гидроксильной группы, в целом используемую в области синтетической органической химии, и включает, например, метоксиметильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, бензильную группу, тетрагидропиранильную группу, ацетильную группу и т.д.). Каждый другой символ имеет значения, определенные выше).
Первая стадия
Это первая стадия получения соединения (III) катализируемой палладием реакцией аминирования Buchwald/Hartwig из соединения (I) и соединения (II).
3
4
Соединение (III) можно получить взаимодействием соединения (I) с соединением (II) в толуоле, 1,4-диоксане, тетрагидрофуране или им подобных соединениях или в смешанном растворителе из этих соединений с использованием палладиевого катализатора, такого как смесь ацетата палладия и 2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтила, бис(дифенилфосфин)ферроценпалладий хлорид (II) или трис(дибензилиденацетон)дипалладий вместе с основанием, таким как карбонат натрия, трикалийфосфат (KPO), карбонат калия, карбонат цезия, бикарбонат натрия, бикарбонат калия или трет-бутоксид калия, при температуре от 20°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно при температуре от 60°С до температуры кипения с обратным холодильником в течение от 5 часов до 96 часов, предпочтительно в течение от 8 часов до 48 часов.
Вторая стадия
Это стадия удаления R' из соединения (III) и получения соединения (IV).
Например, когда R' обозначает метоксиметильную группу, бензилоксиметильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, трет-бутильную группу, тетрагидропиранильную группу или ацетильную группу, соединение (IV) можно получить взаимодействием соединения (III) без растворителя или в воде, метаноле, этаноле, пропаноле, тетрагидрофуране и т.д., или смешанном растворителе из этих соединений, используя кислоту, такую как хлористоводородная кислота или трифторуксусная кислота при температуре от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 0 до 50°С в течение от 0,5 часа до 24 часов, предпочтительно от 0,5 часа до 8 часов.
Когда R' обозначает бензильную группу и т.д., соединение (IV) можно получить реакцией в метаноле, этаноле, пропаноле, тетрагидрофуране или растворителе, представляющего смесь этих соединений, в присутствии катализатора палладий-на-угле и т.д., с использованием водорода или формиата аммония при температуре примерно от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником, предпочтительно примерно от 20°С до температуры кипения с обратным холодильником в течение от 0,5 часа до 96 часов, предпочтительно от 1 часа до 48 часов.
Третья стадия
Эта стадия представляет собой стадию получения соединения (VI) взаимодействием соединения (IV) и соединения (V) в основных условиях.
Соединения (VI) можно получить взаимодействием соединения (IV) и соединения (V), т.е. глицидилхлорида, глицидилтозилата, глицидилнозилата и т.д. в хлороформе, тетрагидрофуране, N,N-диметилформамиде, диметилсульфоксиде, N,N-диметилацтамиде, этилацетате, метаноле, воде или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, в присутствии основания, такого как карбонат натрия, карбонат калия, гидроксид натрия, гидроксид калия или триэтиламин, при температуре от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 0 до 60°С в течение от 0,5 часа до 24 часов.
Четвертая стадия
Эта стадия превращения соединения (VI) в соединение (VII) в основных условиях.
Соединение (VII) можно получить взаимодействием соединения (VI) в хлороформе, тетрагидрофуране, N,N-диметилформамиде, N,N-диметилацетамиде, диметилсульфоксиде, этилацетате или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, в присутствии основания, такого как карбонат натрия, карбонат калия, гидроксид натрия, гидроксид калия или триэтиламин, при температуре от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 0 до 60°С в течение от 0,5 часа до 24 часов.
Пятая стадия
Эта стадия предназначена для удаления R из соединения (VII) и получения соединения (VIII).
Например, когда R обозначает метильную группу, этильную группу, пропильную группу и т.д., то соединение (VIII) можно получить гидролизом соединения (VII) в воде, метаноле, этаноле, пропаноле, тетрагидрофуране и т.д. или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, используя основание, такое как гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид лития, карбонат калия или карбонат натрия, при температуре от -20°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 20°С до температуры кипения с обратным холодильником в течение от 0,5 часа до 24 часов, предпочтительно от 0,5 часа до 8 часов.
Например, когда R обозначает трет-бутильную группу, то соединение (VIII) можно получить взаимодействием соединения (VII) без растворителя или в воде, метаноле, этаноле, пропаноле, тетрагидрофуране и т.д. или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, таком как хлористоводородная кислота или трифторуксусная кислота, при температуре от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 0 до 50°С в течение от 0,5 часа до 24 часов, предпочтительно от 0,5 часа до 8 часов.
Когда R обозначает бензильную группу, пара-метоксибензильную группу и т.д., то соединение (VIII) можно получить взаимодействием соединения (VII) в метаноле, этаноле, пропаноле, тетрагидрофуране и т.д. или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, используя водород или формиат аммония в присутствии катализатора палладий-на-углероде и т.д. при температуре примерно от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 20 до 50°С в течение от 0,5 часа до 96 часов, предпочтительно от 1 часа до 48 часов.
Шестая стадия
Эта стадия предназначена для защиты гидроксильной группы соединения (VIII) и получения соединения (IX).
Например, когда R” обозначает ацетильную группу, то соединение (IX) можно получить взаимодействием соединения (VIII) в хлороформе, тетрагидрофуране, толуоле, этилацетате, пиридине или без растворителя, используя ацетилхлорид или уксусный ангидрид в присутствии или в отсутствие основания, такого как пиридин или триэтиламин, при температуре от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 0 до 50°С в течение от 0,5 часа до 24 часов, предпочтительно от 0,5 часа до 8 часов.
Когда R” обозначает тетрагидропиранильную группу, то соединение (IX) можно получить взаимодействием соединения (VIII) в хлороформе, тетрагидрофуране, толуоле, этилацетате или без растворителя, используя 2,3-дигидропиран, в присутствии кислого катализатора, такого как п-толуолсульфоновая кислота или хлорид водорода, при температуре от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником, предпочтительно от 0 до 50°С в течение от 0,5 часа до 24 часов, предпочтительно от 0,5 часа до 8 часов.
Когда R” обозначает метоксиметильную группу, метоксиэтоксиметильную группу или бензильную группу, то соединение (IX) можно получить взаимодействием соединения (VIII) в растворителе, таком как тетрагидрофуран или N,N-диметилформамид, используя метоксиметилхлорид, метоксиэтоксиметилхлорид, бензилхлорид или бензилбромид, в присутствии основания, такого как гидрид натрия или диизопропиламид лития, при температуре от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником, предпочтительно от 0 до 50°С в течение от 0,5 часа до 24 часов, предпочтительно от 0,5 часа до 8 часов.
Седьмая стадия
Эта стадия предназначена для получения соединения (XI) реакцией конденсации соединения (IX) и соединения (X).
Например, когда реакция конденсации выполняется с использованием конденсирующего агента, соединение (IX) взаимодействует с соединением (X) в N,N-диметилформамиде, метиленхлориде, хлороформе и т.д. или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, используя конденсирующий агент, такой как дициклогексилкарбодиимид или 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид, при температуре от -20°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 0 до 50°С в течение от 1 часа до 48 часов, предпочтительно от 1 часа до 24 часов для получения соединения (XI). В этом случае можно добавлять добавки, такие как гидроксибензотриазол или N-гидроксиянтарную кислоту.
Когда реакция конденсации идет через хлорангидрид кислоты, то соединение (IX) взаимодействует с тионилхлоридом, оксалилхлоридом и т.д. в хлороформе, метиленхлориде, тетрагидрофуране и т.д. или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, для получения хлорида кислоты (IX), и оно взаимодействует с соединением (X) в толуоле, хлороформе, тетерагидрофуране или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, в присутствии основания, такого как триэтиламин или пиридин, при температуре от -20°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 0 до 40°С в течение от 0,5 часа до 24 часов, предпочтительно от 0,5 часа до 12 часов для получения соединения (XI).
Восьмая стадия
Эта стадия предназначена для удаления защитной группы гидроксильной группы соединения (XI) и получения соединения, представленного общей формулой [1].
Например, когда R” обозначает ацетильную группу, то соединение, представленное общей формулой [1], можно получить взаимодействием соединения (XI) в тетрагидрофуране, этаноле, метаноле, изопропаноле, воде или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, в присутствии основания, такого как гидроксид лития, гидроксид натрия, гидроксид калия или карбонат калия, при температуре от -20°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 0 до 40°С в течение от 0,5 часа до 24 часов, предпочтительно от 0,5 часа до 12 часов.
Когда R” обозначает метоксиметильную группу, метоксиэтоксиметильную группу, тетрагидропиранильную группу или ацетильную группу, то соединение, представленное общей формулой [1], можно получить реакцией соединения (XI) без растворителя или в воде, метаноле, этаноле, пропаноле, тетрагидрофуране и т.д. или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, используя кислоту, такую как хлористоводородная кислота или трифторуксусная кислота, при температуре от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником, предпочтительно от 0 до 50°С в течение от 0,5 часа до 24 часов, предпочтительно от 0,5 часа до 8 часов.
Когда R” обозначает бензильную группу, то соединение, представленное общей формулой [1], можно получить взаимодействием соединения (XI) в метаноле, этаноле, пропаноле, тетрагидрофуране и т.д. или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, используя водород или формиат аммония, в присутствии катализатора палладий-на-углероде и т.д., при температуре примерно от 0°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 20 до 50°С в течение от 0,5 часа до 96 часов, предпочтительно от 1 часа до 48 часов.
Поэтому соединения, представленные указанными выше общими формулами с (I) по (XI), можно использовать в качестве промежуточных соединений для получения соединения по настоящему изобретению, представленного общей формулой [1].
2. Способ получения В
:
Это способ получения соединения по настоящему изобретению, представленного общей формулой [1], которое получают непосредственно из соединения (VIII) без защиты гидроксильной группы.
(где каждый символ имеет такое же значение, как определено выше).
Соединение по настоящему изобретению, представленное общей формулой [1], можно получить взаимодействием соединения (VIII) с соединением (X) в N,N-диметилформамиде, метиленхлориде, хлороформе и т.д. или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений, используя конденсирующий агент, такой как дициклогексилкарбодиимид или 1-этил-3-(3-диметилааминопропил)карбодиимид, при температуре от -20°С до температуры кипения с обратным холодильником, предпочтительно от 0 до 50°С в течение от 1 часа до 48 часов, предпочтительно от 1 часа до 24 часов. В этом случае можно добавлять добавки, такие как гидроксибензотриазол или N-гидроксиянтарную кислоту.
3. Способ получения С
Соль соединения по настоящему изобретению, представленного общей формулой [1], можно получить в соответствии с обычным способом, например, следующим путем:
Соединение по настоящему изобретению, представленное общей формулой [1], растворяют или суспендируют в растворителе (например, в воде, метаноле, этаноле, изопропиловом спирте, ацетоне, 2-бутаноне, тетрагидрофуране, этилацетате, изобутилацетате, простом диэтиловом эфире, простом диизопропиловом эфире, толуоле, н-гексане, н-гептане или в растворителе, представляющем смесь указанных соединений) и добавляют твердую неразбавленную или разбавленную растворенную форму (используя в качестве растворителя разбавления, например, воду, метанол, этанол, изопропиловый спирт, ацетон, 2-бутанон, тетрагидрофуран, этилацетат, изобутилацетат, простой диэтиловый эфир, простой диизопропиловый эфир, толуол, н-гексан, н-гептан или растворитель, представляющий смесь указанных соединений), гидрокислоты (например, хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, серной кислоты, метансульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, нафталин-1,5-дисульфоновой кислоты, нафталин-2-сульфоновой кислоты, фумаровой кислоты или малеиновой кислоты и т.д.), и смесь можно перемешивать или оставить стоять при температуре от -20°С до температуры кипения с обратным холодильником предпочтительно от 0 до 50°С в течение от 1 часа до 48 часов, предпочтительно от 1 часа до 24 часов, для получения соли соединения по настоящему изобретению, представленного общей формулой [1].
ПРИМЕРЫ
Далее получение соединения по настоящему изобретению будет конкретно описано со ссылкой на примеры. Однако настоящее изобретение не ограничивается данными примерами. Наряду с получением каждого соединения описаны его данные ЯМР.
Пример 1-1
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(4-трет-бутокси-3,5-дифторфенил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
Первая стадия
Получение метил 3-нитросалицилата
3-нитросалициловую кислоту (500 г) растворяют в метаноле (2,25 л), добавляют концентрированную серную кислоту (0,25 л) и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 22 часов. Реакционный раствор охлаждают на льду и осажденное твердое вещество собирают фильтрацией и сушат для получения указанного в заголовке соединения (517,3 г).
6
(400 МГц, ДМСО-d): 3,95 (с, 3H), 7,16 (т, J=8,1 Гц, 1H), 8,11 (дд, J=7,9, 1,9 Гц, 1H), 8,21 (дд, J=8,3, 1,9 Гц, 1H), 11,49 (с, 1H).
Вторая стадия
Получение метил 2-(2-метоксиэтокси)метилокси-3-нитробензоата
Метил 3-нитросалицилат (516,3 г), полученный на предыдущей стадии, растворяют в N,N-диметилформамиде (2,0 л), добавляют карбонат калия (362 г), затем при перемешивании добавляют 1-хлорметокси-2-метоксиэтан (0,329 л) при охлаждении льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционный раствор распределяют между водой и этилацетатом, этилацетатный слой промывают водой и затем концентрируют, получая указанное в заголовке соединение (706,9 г).
6
(400 МГц, ДМСО-d): 3,22 (с, 3H), 3,41-3,43 (м, 2H), 3,65-3,68 (м, 2H), 3,87 (с, 3H), 5,16 (с, 2H), 7,47 (т, J=7,9 Гц, 1H), 8,06 (дд, J=7,9, 1,8 Гц, 1H), 8,11 (дд, J=7,9, 1,8 Гц, 1H).
Третья стадия
Получение метил 3-амино-2-(2-метоксиэтокси)метилоксибензоата
Метил 2-(2-метоксиэтокси)метилокси-3-нитробензоат (704,5 г), полученный на предыдущей стадии, растворяют в этилацетате (1 л) и тетрагидрофуране (1 л), добавляют 5% палладий-на-углероде (содержание воды 50%) (35 г) и смесь перемешивают в течение 4 часов в атмосфере водорода. Полученный реакционный раствор фильтруют и фильтрат концентрируют, получая указанное в заголовке соединение (617,7 г).
(400 МГц, ДМСО-d6): 3,24 (с, 3H), 3,46-3,48 (м, 2H), 3,78-3,79 (м, 5H), 4,98 (с, 2H), 5,16 (с, 2H), 6,84-6,84 (м, 1H), 6,88-6,91 (м, 2H).
Четвертая стадия
Получение метил 3-(5-пиколин-2-ил)аминосалицилата
Карбонат цезия (415 г), ацетат палладия (8,8 г), 2,2'-бис(дифенилфосфин)-1,1'-бинафтил (25 г), метил 3-амино-2-(2-метоксиэтокси)метилоксибензоат (200 г), полученный на предыдущей стадии, и 2-хлор-5-пиколин (103 г) добавляют к толуолу (1 л) в указанном порядке и перемешивают при 100°С в течение 2 дней. Реакционный раствор фильтруют и фильтрат концентрируют. К остатку добавляют метанол (500 мл) и 6 N хлористоводородную кислоту (200 мл), смесь кипятят с обратным холодильником и перемешивают в течение 0,5 часа. К реакционному раствору добавляют активированный уголь (25 г), смесь перемешивают в течение 1 часа и затем фильтруют. К фильтрату добавляют 1 N цитрат калия (2 л) и осажденный кристаллический продукт собирают фильтрацией (218 г). Кристаллы, собранные фильтрацией, растворяют в этилацетате (1 л), к нему добавляют силикагель (100 г) и смесь перемешивают при комнатной температуре и затем фильтруют. Фильтрат концентрируют. Остаток перекристаллизовывают ацетоном:водой (2:1) (2 л) и кристалл фильтруют и сушат для получения указанного в заголовке соединения (128 г).
6
(400 МГц, ДМСО-d): 2,18 (с, 3H), 3,92 (с, 3H), 6,89 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,04 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=7,9, 1,5 Гц, 1H), 7,42 (дд, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 7,98 (с, 1H), 8,19 (с, 1H), 8,48 (дд, J=8,2, 1,5 Гц, 1H), 11,30 (с, 1H).
Пятая стадия
Получение метил (R)-2-(оксиран-2-ил)метилокси-3-(5-пиколин-2-ил)аминобензоат
Метил 3-(5-пиколин-2-ил)аминосалицилат (139,5 г), полученный на предыдущей стадии, и (R)-глицидилнозилат (139,7 г) растворяют в диметилсульфоксиде (700 мл), добавляют карбонат калия (74,6 г) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционному раствору добавляют этилацетат (1 л) и смесь фильтруют. Фильтрат промывают водой, затем сушат на безводным сульфатом натрия и затем концентрируют. Остаток суспендируют в 2-пропаноле (400 мл) и суспензию перемешивают при комнатной температуре и кристаллизуют. Кристалл собирают фильтрацией и сушат для получения указанного в заголовке соединения (124 г).
6
(400 МГц, ДМСО-d): 2,19 (с, 3H), 2,76 (кв., J=2,6 Гц, 1H), 2,86 (дд, J=5,0, 4,3 Гц, 1H), 3,40-3,41 (м, 1H), 3,86 (с, 3H), 3,93 (кв., J=5,7 Гц, 1H), 4,16 (дд, J=11,2, 2,6 Гц, 1H), 6,94 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,16 (т, J=7,9 Гц, 1H), 7,24 (дд, J=7,7, 1,8 Гц, 1H), 7,46 (дд, J=8,5, 2,3 Гц, 1H), 8,01 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,19 (с, 1H), 8,53 (дд, J=8,2, 1,8 Гц, 1H).
Шестая стадия
Получение (S)-метил 4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксилата
Метил (R)-2-(оксиран-2-ил)метилокси-3-(5-пиколин-2-ил)аминобензоат (124 г), полученный на предыдущей стадии, растворяют в N,N-диметилацетамиде (1,24 л), добавляют карбонат калия (81,8 г) и смесь перемешивают при 100°С в течение 2 часов. Реакционный раствор разделяют между водой и этилацетатом и этилацетатный слой промывают водой, затем сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют, получая указанное в заголовке соединение (142,1 г).
6
(400 МГц, ДМСО-d): 2,23 (с, 3H), 3,57-3,62 (м, 1H), 3,80 (с, 3H), 3,98-4,00 (м, 1H), 4,06-4,11 (м, 1H), 4,36-4,38 (м, 1H), 4,55 (д, J=10,8 Гц, 1H), 5,15 (т, J=5,4 Гц, 1H), 6,84 (т, J=7,9 Гц, 1H), 7,17-7,18 (м, 2H), 7,35 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,53 (д, J=8,4 Гц, 1H), 8,15 (с, 1H).
Седьмая стадия
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновой кислоты
(S)-метил 4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксилат (142 г), полученный на предыдущей стадии, растворяют в метаноле (700 мл), добавляют 4 N гидроксид натрия (150 мл), смесь кипятят с обратным холодильником и перемешивают в течение 2 часов. Реакционный раствор концентрируют, нейтрализуют 6 N хлористоводородной кислотой и затем экстрагируют этилацетатом, этилацетатный слой промывают водой, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. К остатку добавляют этилацетат (50 мл) и простой диизопропиловый эфир (400 мл) и осажденное твердое вещество фильтруют и сушат для получения указанного в заголовке соединения (101,6 г).
6
(400 МГц, ДМСО-d): 2,23 (с, 3H), 3,38 (т, J=9,9 Гц, 1H), 3,59 (дд, J=10,6, 5,7 Гц, 1H), 3,98 (дд, J=10,8, 2,6 Гц, 1H), 4,37-4,39 (м, 1H), 4,55 (дд, J=10,9, 1,2 Гц, 1H), 5,14 (ушир.с, 1H), 6,82 (т, J=7,9 Гц, 1H), 7,16-7,18 (м, 2H), 7,32 (дд, J=8,2, 1,5 Гц, 1H), 7,53 (дд, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 8,14-8,14 (м, 1H), 12,66 (ушир.с, 1H).
Восьмая стадия
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(4-трет-бутокси-3,5-дифторфенил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксильную кислоту (400 мг), полученную на предыдущей стадии, растворяют в N,N-диметилформамиде (2 мл). Добавляют 4-трет-бутокси-3,5-дифторанилин (268 мг), 1-гидроксибензотриазол (204 мг) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (281 мг) добавляют в этом порядке и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют воду и насыщенный раствор гидрокарбоната натрия и затем экстрагируют этилацетатом. Слой этилацетата промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 4:3) для получения указанного в заголовке соединения (364 мг).
Пример 1-2
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-изопропоксифенил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновую кислоту (400 мг), полученную на седьмой стадии примера 1-1, растворяют в N,N-диметилформамиде (2 мл). 3,5-Дифтор-4-изопропоксианилин (249 мг), 1-гидроксибензотриазол (204 мг) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (281 мг) добавляют в указанном порядке и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют воду и насыщенный раствор гидрокарбоната натрия и затем экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 4:3) для получения указанного в заголовке соединения (332 мг).
Пример 1-3
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-этоксифенил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновую кислоту (400 мг), полученную на седьмой стадии примера 1-1, растворяют в N,N-диметилформамиде (2 мл). 3,5-Дифтор-4-этоксианилин (230 мг), 1-гидроксибензотриазол (204 мг) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (281 мг) добавляют в указанном порядке и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют воду и насыщенный раствор гидрокарбоната натрия и затем экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 5:4) для получения указанного в заголовке соединения (358 мг).
Пример 1-4
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[2-(2,2-диметилпропилокси)пиридин-5-ил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновую кислоту (300 мг), полученную на седьмой стадии примера 1-1, растворяют в N,N-диметилформамиде (3 мл). Гидрохлорид 5-амино-2-(2,2-диметилпропилокси)пиридина (253 мг), триэтиламин (0,14 мл) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (211 мг) добавляют в указанном порядке и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют воду и насыщенный раствор гидрокарбоната натрия и затем экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле для получения указанного в заголовке соединения (340 мг).
Пример 1-5
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(2-трет-бутоксипиридин-5-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновую кислоту (148 мг), полученную на седьмой стадии примера 1-1, растворяют в N,N-диметилформамиде (5 мл). 5-Амино-2-трет-бутоксипиридин (82 мг) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (103 мг) добавляют в указанном порядке и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют воду и насыщенный раствор гидрокарбоната натрия и затем экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 1:1) для получения указанного в заголовке соединения (94 мг).
Пример 1-6
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[2-(2,2,2-трифторэтилокси)пиридин-5-ил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновую кислоту (150 мг), полученную на седьмой стадии примера 1-1, растворяют в N,N-диметилформамиде (1,5 мл). Гидрохлорид 5-амино-2-(2,2,2-трифторэтилокси)пиридина (114 мг), триэтиламин (0,07 мл) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (105 мг) добавляют в указанном порядке и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют воду и насыщенный раствор гидрокарбоната натрия и затем экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 1:1) для получения указанного в заголовке соединения (154 мг).
Пример 1-7
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(2-изобутоксипиридин-5-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновую кислоту (388 мг), полученную на седьмой стадии примера 1-1, растворяют в N,N-диметилформамиде (4 мл). Гидрохлорид 5-амино-2-изобутоксипиридина (262 мг), триэтиламин (0,18 мл) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (272 мг) добавляют в указанном порядке и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют воду и насыщенный раствор гидрокарбоната натрия и затем экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 1:1) для получения указанного в заголовке соединения (402 мг).
Пример 1-8
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
Первая стадия
Получение (S)-3-ацетоксиметил-4-(5-пиколин-2-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновой кислоты
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновую кислоту (24,1 г), полученную на седьмой стадии примера 1-1, растворяют в тетрагидрофуране (240 мл). Добавляют 4-(диметиламино)пиридин (9,8 г) и уксусный ангидрид (7,6 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Реакционный раствор разделяют между этилацетатом и раствором разбавленной уксусной кислоты и этилацетатный слой промывают водой, затем сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют. Простой диизиопропиловый эфир добавляют к концентрированному остатку и осажденный кристалл собирают фильтрацией и сушат для получения указанного в заголовке соединения (23,33 г).
6
(400 МГц, ДМСО-d) 1,99 (с, 3H), 2,23 (с, 3H), 4,03-4,11 (м, 2H), 4,18-4,21 (м, 1H), 4,48 (д, J=11,25 Гц, 1H), 4,72-4,74 (м, 1H), 6,86 (дд, J=7,61, 7,61 Гц, 1H), 7,17-7,20 (м, 2H), 7,33 (дд, J=8,16, 0,88 Гц, 1H), 7,54 (дд, J=8,49, 2,32 Гц, 1H), 8,15 (д, J=1,54 Гц, 1H), 12,64 (ушир.с, 1H).
Вторая стадия
Получение (S)-3-ацетоксиметил-4-(5-пиколин-2-ил)-N-[3,5-дифтор-4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-3-ацетоксиметил-4-(5-пиколин-2-ил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновую кислоту (400 мг), полученную на предыдущей стадии, растворяют в тетрагидрофуране (4 мл), добавляют тионилхлорид (0,102 мл) при перемешивании при охлаждении льдом и смесь перемешивают в течение 1,5 часов. Реакционный раствор концентрируют и остаток разбавляют тетрагидрофураном (4 мл). Добавляют триэтиламин (0,245 мл) и 3,5-дифтор-4-(2,2,2-трифторэтокси)анилин (267 мг) при перемешивании при комнатной температуре и смесь перемешивают в течение 0,5 часа. Реакционный раствор разделяют между водой и этилацетатом и этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, затем сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют, получая указанное в заголовке соединение (749 мг).
6
(400 МГц, ДМСО-d) 1,99 (с, 3H), 2,25 (с, 3H), 4,12-4,16 (м, 2H), 4,22-4,25 (м, 1H), 4,52 (д, J=11,25 Гц, 1H), 4,75-4,77 (м, 3H), 6,93 (дд, J=7,94, 7,94 Гц, 1H), 7,12 (д, J=7,72 Гц, 1H), 7,19 (д, J=8,60 Гц, 1H), 7,36 (д, J=8,16 Гц, 1H), 7,56-7,58 (м, 3H), 8,17 (д, J=1,54 Гц, 1H), 10,47 (с, 1H).
Третья стадия
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-3-ацетоксиметил-4-(5-пиколин-2-ил)-N-[3,5-дифтор-4-(2,2,2-трифторэтокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид (749 мг), полученный на предыдущей стадии, растворяют в метаноле (4 мл), добавляют 4 N гидроксид натрия (0,35 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре а течение 0,5 часа. Реакционный раствор концентрируют, затем разделяют между водой и этилацетатом и полученный этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, затем сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле для получения указанного в заголовке соединения (340 мг).
Пример 1-9
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропилокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
Первая стадия
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-гидроксифенил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоновую кислоту (900 мг), полученную на седьмой стадии примера 1-1, растворяют в N,N-диметилформамиде (4,5 мл). Добавляют 3,5-дифтор-4-гидроксианилин (330 мг) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (630 мг) в указанном порядке и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционному раствору добавляют воду и насыщенный раствор гидрокарбоната натрия и затем экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным раствором сульфата магния и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 1:1) для получения указанного в заголовке соединения (550 мг).
6
(400 МГц, ДМСО-d) 2,25 (с, 3H), 3,44-3,46 (м, 1H), 3,63-3,65 (м, 1H), 4,05-4,08 (м, 1H), 4,39-4,41 (м, 1H), 4,60 (д, J=9,74 Гц, 1H), 5,15 (ушир.с, 1H), 6,89 (дд, J=7,88, 7,88 Гц, 1H), 7,10 (дд, J=7,65, 1,62 Гц, 1H), 7,21 (д, J=8,35 Гц, 1H), 7,34 (дд, J=8,12, 1,62 Гц, 1H), 7,46-7,49 (м, 2H), 7,56 (дд, J=8,35, 1,86 Гц, 1H), 8,17 (дд, J=1,16, 1,16 Гц, 1H), 9,91 (ушир.с, 1H), 10,23 (с, 1H).
Вторая стадия
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-(этоксикарбонилметилокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-гидроксифенил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид (459 мг), полученный на предыдущей стадии, растворяют в N,N-диметилформамиде (4,5 мл). Добавляют карбонат калия (150 мг) и этилбромацетат (180 мг) и смесь перемешивают при 60°С в течение 3 часов. Реакционный раствор разделяют между водой и этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Осадок очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 2:3) для получения указанного в заголовке соединения (310 мг).
6
(400 МГц, ДМСО-d) 1,21 (т, J=7,06 Гц, 3H), 2,24 (с, 3H), 3,43-3,45 (м, 1H), 3,60-3,65 (м, 1H), 4,04-4,08 (м, 1H), 4,16 (кв., J=7,06 Гц, 2H), 4,38-4,39 (м, 1H), 4,59 (д, J=10,81 Гц, 1H), 4,79 (с, 2H), 5,12 (т, J=5,51 Гц, 1H), 6,89 (дд, J=7,83, 7,83 Гц, 1H), 7,08 (дд, J=7,50, 1,32 Гц, 1H), 7,20 (д, J=8,60 Гц, 1H), 7,33 (дд, J=8,16, 1,32 Гц, 1H), 7,52-7,56 (м, 3H), 8,16 (д, J=2,43 Гц, 1H), 10,39 (с, 1H).
Третья стадия
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(2-гидрокси-2-метилпропилокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-(этоксикарбонилметилокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид (310 мг), полученный на предыдущей стадии, растворяют в тетрагидрофуране (3,1 мл) и по каплям добавляют метиллитий (0,98 М раствор тетрагидрофурана) (3,7 мл) при перемешивании в условиях охлаждения льдом и затем перемешивают в течение 1,5 часов. Реакционный раствор выливают в 5% раствор лимонной кислоты и экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 1:3) для получения указанного в заголовке соединения (72 мг).
Пример 1-10
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(1,1-диметил-2-гидроксиэтилокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
Первая стадия
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(1-этоксикарбонил-1-метил)этилоксифенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-гидроксифенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид (780 мг), полученный на первой стадии примера 1-9, растворяют в диметилсульфоксиде (7,8 мл). Добавляют карбонат калия (240 мг) и этил-2-бром-2-метилпропионат (0,279 мл) и смесь перемешивают при 80°С в течение 1 часа. Реакционный раствор разделяют между водой и этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 1:1) для получения указанного в заголовке соединения (740 мг).
6
(400 МГц, ДМСО-d) 1,24 (т, J=7,19 Гц, 4H), 1,49 (с, 6H), 2,25 (с, 3H), 3,44-3,46 (м, 1H), 3,63-3,66 (м, 1H), 4,06-4,09 (м, 1H), 4,17 (кв., J=7,11 Гц, 2H), 4,39-4,41 (м, 1H), 4,60 (д, J=10,20 Гц, 1H), 5,15 (т, J=5,57 Гц, 1H), 6,90 (дд, J=7,88, 7,88 Гц, 1H), 7,09 (дд, J=7,42, 1,39 Гц, 1H), 7,22 (д, J=8,81 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=8,12, 1,62 Гц, 1H), 7,53-7,57 (м, 3H), 8,17-8,17 (м, 1H), 10,47 (с, 1H).
Вторая стадия
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(1-карбокси-1-метил)этилоксифенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
(S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-(3,5-дифтор-4-(1-этоксикарбонил-1-метил)этилоксифенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид (740 мг), полученный на предыдущей стадии, растворяют в этаноле (7,4 мл). Добавляют 4 N раствор гидроксида натрия (0,38 мл) и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционный раствор выливают в 5% раствор лимонной кислоты и экстрагируют тетрагидрофураном. Слой тетрагидрофурана промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют, получая указанное в заголовке соединение (586 мг).
6
(400 МГц, ДМСО-d) 1,45 (с, 6H), 2,25 (с, 3H), 3,45 (дд, J=9,97, 9,97 Гц, 1H), 3,63-3,64 (м, 1H), 4,06-4,08 (м, 2H), 4,38-4,41 (м, 1H), 4,59 (д, J=10,20 Гц, 1H), 6,90 (дд, J=7,88, 7,88 Гц, 1H), 7,09 (дд, J=7,65, 1,62 Гц, 1H), 7,21 (д, J=8,81 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=8,12, 1,62 Гц, 1H), 7,53-7,56 (м, 3H), 8,17 (дд, J=1,16, 0,58 Гц, 1H), 10,45 (с, 1H), 12,94 (ушир.с, 1H).
Третья стадия
Получение (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(1,1-диметил-2-гидроксиэтилокси)фенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамида
Триэтиламин (0,191 мл), этилхлоркарбонат (0,131 мл) и затем суспензию (S)-4-(5-пиколин-2-ил)-3-гидроксиметил-N-[3,5-дифтор-4-(1-карбокси-1-метил)этилоксифенил]-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин-8-карбоксамид (586 мг), полученный на предыдущей стадии в тетрагидрофуране (5,9 мл), добавляют к тетрагидрофурану (3 мл) при перемешивании в условиях охлаждения льдом и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционный раствор охлаждают на льду и добавляют боргидрид натрия (43 мг) и метанол (5,9 мл). Реакционный раствор выливают в 10% раствор хлорида аммония и экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный слой промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над безводным сульфатом магния и затем концентрируют. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (гексан:этилацетат = 2:1) для получения указанного в заголовке соединения (136 мг).
Химическая структура и данные ЯМР соединений, полученных в примерах 1-1 - 1-10, показаны в таблице 1 и таблице 2.
Таблица 1
Пример
Химическая структура
ЯМР
1-1
<img file="00000009.tif" he="23" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 1,32 (с, 9H), 2,24 (с, 3H), 3,44-3,47 (м, 1H), 3,62-3,63 (м, 1H), 4,04-4,06 (м, 1H), 4 39 (т, J=7,28 Гц, 1H), 4,59 (д, J=10,37 Гц, 1H), 5,11 (т, J=5,40 Гц, 1H), 6,89 (дд, J=7,94, 7,94 Гц, 1H), 7,08 (дд, J=7,39, 1,21 Гц, 1H), 7,20 (д, J=8,38 Гц, 1H), 7,33 (дд, J=8,27, 1,43 Гц, 1H), 7,51-7,57 (м, 3H), 8,16 (д, J=2,43 Гц, 1H), 10,40 (с, 1H).
1-2
<img file="00000010.tif" he="23" wi="66" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 1,29 (д, J=6,03 Гц, 6H), 2,26 (с, 3H), 3,45-3,48 (м, 1H), 3,64-3,66 (м, 1H), 4,08 (дд, J=10,67, 2,32 Гц, 1H), 4,29-4,35 (м, 1H), 4,39-4,46 (м, 1H), 4,61 (д, J=10,20 Гц, 1H), 5,15 (т, J=5,57 Гц, 1H), 6,90 (дд, J=7,88, 3,94 Гц, 1H), 7,11 (дд, J=7,65, 1,62 Гц, 1H), 7,22 (д, J=8,35 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=8,35, 1,39 Гц, 1H), 7,54-7,57 (м, 3H), 8,17 (д, J=2,32 Гц, 1H), 10,41 (с, 1H).
1-3
<img file="00000011.tif" he="23" wi="65" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 1,30 (т, J=6,96 Гц, 3H), 2,25 (с, 3H), 3,44-3,46 (м, 1H), 3,62-3,64 (м, 1H), 4,11 (кв., J=6,96 Гц, 3H), 4,39-4,41 (м, 1H), 4,59 (д, J=10,20 Гц, 1H), 5,15 (т, J=5,57 Гц, 1H), 6,90 (дд, J=7,88, 7,88 Гц, 1H), 7,09 (дд, J=7,65, 1,62 Гц, 1H), 7,21 (д, J=8,81 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=8,35, 1,39 Гц, 1H), 7,53-7,58 (м, 3H), 8,17 (д, J=2,32 Гц, 1H), 10,41 (с, 1H).
1-4
<img file="00000012.tif" he="22" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 0,99 (с, 9H), 2,24 (с, 3H), 3,44 (дт, J=15,0, 5,3 Гц, 1H), 3,60-3,66 (м, 1H), 3,93 (с, 2H), 4,07 (дд, J=10,9, 2,6 Гц, 1H), 4,40 (с, 1H), 4,60 (д, J=9,7 Гц, 1H), 5,14 (т, J=5,6 Гц, 1H), 6,83-6,90 (м, 2H), 7,13 (дд, J=7,5, 1,5 Гц, 1H), 7,20 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,32 (дд, J=8,2, 1,5 Гц, 1H), 7,55 (дд, J=9,0, 2,6 Гц, 1H), 8,02 (дд, J=8,9, 2,7 Гц, 1H), 8,16 (д, J=2,6 Гц, 1H), 8,48 (д, J=2,1 Гц, 1H), 10,15 (с, 1H).
1-5
<img file="00000013.tif" he="21" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 1,52 (с, 9H), 2,24 (с, 3H), 3,44 (дт, J=14,8, 5,2 Гц, 1H), 3,60-3,66 (м, 1H), 4,06 (дд, J=11,0, 2,7 Гц, 1H), 4,40 (т, J=7,3 Гц, 1H), 4,60 (д, J=9,7 Гц, 1H), 5,14 (т, J=5,6 Гц, 1H), 6,71 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,88 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,12 (дд, J=7,7, 1,6 Гц, 1H), 7,20 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,32 (дд, J=8,1, 1,6 Гц, 1H), 7,55 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1H), 7, 99 (дд, J=8,8, 2,8 Гц, 1H), 8,16 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,44 (д, J=2,3 Гц, 1H), 10,13 (с, 1H).
1-6
<img file="00000014.tif" he="23" wi="66" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 2,24 (с, 3H), 3,44 (тд, J=9,9, 6,0 Гц, 1H), 3,60-3,66 (м, 1H), 4,07 (дд, J=10,9, 2,8 Гц, 1H), 4,40 (т, J=6,8 Гц, 1H), 4,60 (д, J=10,0 Гц, 1H), 4,97 (кв., J=9,1 Гц, 2H), 5,14 (т, J=5,6 Гц, 1H), 6,89 (т, J=7,9 Гц, 1H), 7,01 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,13 (дд, J=7,5, 1,5 Гц, 1H), 7,20 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,33 (дд, J=8,2, 1,5 Гц, 1H), 7,55 (дд, J=8,8, 2,1 Гц, 1H), 8,12 (дд, J=8,9, 2,7 Гц, 1H), 8,16 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,56 (д, J=2,3 Гц, 1H), 10,28 (с, 1H).
1-7
<img file="00000015.tif" he="23" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 0,97 (д, J=6,7 Гц, 6H), 1,97-2,07 (м, 1H), 2,24 (с, 3H), 3,45 (дт, J=15,0, 5,2 Гц, 1H), 3,60-3,66 (м, 1H), 4,01 (д, J=6,7 Гц, 2H), 4,07 (дд, J=10,8, 2,4 Гц, 1H), 4,40 (т, J=7,4 Гц, 1H), 4,60 (дд, J=10,9, 0,9 Гц, 1H), 5,13 (т, J=5,6 Гц, 1H), 6,81-6,90 (м, 2H), 7,13 (дд, J=7,5, 1,5 Гц, 1H), 7,20 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,32 (дд, J=8,1, 1,6 Гц, 1H), 7,55 (дд, J=8,6, 2,1 Гц, 1H), 8,02 (дд, J=8,9, 2,7 Гц, 1H), 8,16 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,48 (д, J=2,3 Гц, 1H), 10,14 (с, 1H).
Таблица 2
1-8
<img file="00000016.tif" he="22" wi="66" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 2,26 (с, 3H), 3,44-3,46 (м, 1H), 3,61-3,66 (м, 1H), 4,07 (дд, J=10,90, 2,55 Гц, 1H), 4,39-4,40 (м, 1H), 4,59 (д, J=10,20 Гц, 1H), 4,77 (кв., J=8,97 Гц, 2H), 5,14 (т, J=5,57 Гц, 1H), 6,90 (дд, J=7,88, 7,88 Гц, 1H), 7,10 (дд, J=7,42, 1,39 Гц, 1H), 7,21 (д, J=8,35 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=8,35, 1,39 Гц, 1H), 7,56-7,61 (м, 3H), 8,17 (д, J=1,16 Гц, 1H), 10,47 (с, 1H).
1-9
<img file="00000017.tif" he="23" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 1,22 (с, 6H), 2,25 (с, 3H), 3,40-3,48 (м, 1H), 3,61-3,66 (м, 1H), 3,80 (с, 2H), 4,07 (дд, J=10,90, 2,55 Гц, 1H), 4,39-4,40 (м, 1H), 4,58-4,61 (м, 2H), 5,14 (т, J=5,57 Гц, 1H), 6,90 (дд, J=7,88, 7,88 Гц, 1H), 7,09 (дд, J=7,88, 1,39 Гц, 1H), 7,21 (д, J=8,81 Гц, 1H), 7,34 (дд, J=8,12, 1,62 Гц, 1H), 7,52-7,56 (м, 3H), 8,17 (д, J=2,32 Гц, 1H), 10,39 (с, 1H).
1-10
<img file="00000018.tif" he="22" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>) 1,22 (с, 6H), 2,25 (с, 3H), 3,46-3,48 (м, 3H), 3,61-3, 66 (м, 1H), 4,07 (дд, J=10,90, 2,55 Гц, 1H), 4,39-4,40 (м, 1H), 4,59 (д, J=10,20 Гц, 1H), 4,93 (т, J=6,03 Гц, 1H), 5,14 (т, J=5,57 Гц, 1H), 6,90 (дд, J=7,88, 3,94 Гц, 1H), 7,08 (дд, J=7,65, 1,62 Гц, 1H), 7,21 (д, J=8,81 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=8,12, 1,62 Гц, 1H), 7,53-7,56 (м, 3H), 8,17 (д, J=2,32 Гц, 1H), 10,43 (с, 1H).
Пример тестирования
Ниже будет описан анализ для оценки ингибирования VR1 соединениями по настоящему изобретению.
in vitro
2+
Анализ был предназначен для оценки  ингибирующего эффекта одного из агонистов VR1 на вход Са в клетки, вызванный протоном (пример тестирования [1]), проводили тест метаболической устойчивости в человеческой печени S9 (пример тестирования [2]), тест in vitro проницаемости через мембраны (Пример тестирования [3]) и тест на устойчивость в растворе 1 по Фармакопее Японии (пример тестирования [4]), используя соединение по настоящему изобретению и соединения сравнительных примеров, показанных ниже в таблице 3. Соединения сравнительных примеров получали в соответствии со способом получения, описанным в документе PCT/JP2005/013446.
Таблица 3
Пример тестирования [1]: Ингибирование входа Са
в клетки
2+
:
2+
Ингибирующий эффект в отношении активности VR1 оценивали измерением захвата Са клетками.
2
2
50
6
5
2+
Клетки крысиной глиомы (C6BU1), стабильно экспрессирующие человеческий VR1, суспендировали в 20 мМ буфере MES (при рН 6,8, содержащем 20 мМ морфолинэтансульфоната (далее именуемом MES), 115 мМ NaCl, 5 мМ KCl, 1 мМ MgCl и 14 мМ D-глюкозы) для получения плотности клеток 1×10 клеток/мл. К суспензии добавляли раствор флюоресцентного красителя Fura 2-AM (Dojindo Corporate, Cat. № 343-05401) для доведения ее концентрации до 5 мкМ. Затем добавляли такое количество Pluronic F-127 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Cat. No. P6866), чтобы его содержание составляло 0,1%. Затем суспензию инкубировали при 37°С в течение 30 минут. Клетки собирали и дважды промывали 20 мМ буфера MES. Клетки снова суспендировали с получением плотности клеток 5×10 клеток/мл. 500-мкл порцию суспензии помещали в кювету (MC MEDICAL, INC., Cat. No. SSR3121), в которую добавляли 10 мкл 20 мМ буфера MES, содержащего 250 мМ CaCl, для включения Са в клетки. В то же самое время также добавляли 5 мкл раствора тестируемого соединения (в диапазоне от 100 мкМ до 10 нМ в ДМСО) для обеспечения его конечной концентрации в диапазоне от 1 мкМ до 0,1 нМ. Альтернативно, 5 мкл ДМСО добавляли в качестве контроля для обеспечения конечной концентрации 1% ДМСО. Через 10 минут после этих добавлений суспензию помещали во внутриклеточный ионометр (CAF-110; JASCO). Клетки стимулировали протонами добавлением 50 мкл 20 мМ буфера MES при рН 1,1 до установления рН суспензии на уровне 5,7. Активность испытуемого соединения определяли как разность между минимальной интенсивностью флюоресценции перед стимуляцией агонистом и ее максимумом после стимуляции. Величину ICполучали как процент доли ингибирования тестируемым соединением, в сравнении с контролем.
Пример тестирования [2] тест метаболической устойчивости в человеческой печени S9
Человеческую печень S9 (конечная концентрация: 2 мг белок/мл) суспендировали в 100 мМ буфере фосфата калия (при рН 7,4, содержащем β-никотинамид адениндинуклеотид фосфат: 1,3 мМ, D-глюкозо-6-фосфат: 3,3 мМ, хлорида магния: 3,3 мМ и глюкозо-6-фосфат дегидрогеназу: 0,45 Ед/мл) и далее смешивали с тестируемым соединением, растворенным в ДМСО. Смесь инкубировали при 37°С в течение 0 и 60 минут и затем добавляли ацетонитрил, содержащий муравьиную кислоту (конечная концентрация 0,1%). Испытуемое соединение (незаряженное) в супернатанте после центрифугирования измеряли, используя высокоэффективную жидкостную хроматографию/масс-спектрометрию (LC/MS). Остаточное соотношение (%) рассчитывали по полученной величине измерения в соответствии со следующим уравнением:
Остаточное соотношение (%) = (количество тестируемого соединения после 60 минут инкубации/количество тестируемого соединения на 0 минуте инкубации) × 100
Пример тестирования [3] тест in vitro проницаемости через мембраны
10 мМ Раствор ДМСО тестируемого соединения разводили буфером Hanks (рН 6,5) до 25 мкМ для приготовления раствора тестируемого соединения. 300 мкл апикального буфера (буфера Hanks (рН 6,5)) и 1 мл базолатерального буфера (4,5% буфера Hanks, содержащего BSA (рН 7,4)) добавляют соответственно к апикальной стороне (стороне слизистой оболочки) и базолатеральной стороне (серозной стороне) клеток Сасо2 (клеток, культивированных в течение 6 дней после высевания), высеянных на чашку для теста проницаемости (аналитическое устройство BIOCОAT HTS Caco2: BD Biosciences), и предварительно инкубированных при 37°С в течение 20 минут с последующим измерением величины трансэпителиального электрического сопротивления. Каждый буфер с апикальной стороны и базолатеральной стороны удаляли аспирацией. Затем соответственно к апикальной стороне и к базолатеральной стороне добавляли 300 мкл тестируемого соединения и 1 мл базолатерального буфера и инкубировали при 37°С в течение 2 часов при перемешивании при 60 об/мин. Затем выполняли взятие проб из каждой из апикальной стороны и базолатеральной стороны и в образец добавляли ацетонитрил и центрифугировали. Тестируемое соединение (незаряженное) в супернатанте измеряли, используя высокоэффективную жидкостную хроматографию/тандемную масс-спектрометрию (LC/MS/MS: Quantum, Thermo Quest).
Коэффициент мембранной проницаемости (Papp) рассчитывали в соответствии со следующим уравнением:
0
Papp (см/сек) = (dx/dt)/(A×C)
0
(где dx представляет количество тестируемого соединения (незаряженного) на базолатеральной стороне после инкубации, dt обозначает время инкубации, А обозначает площадь поверхности клеточной мембраны и С обозначает исходную концентрацию тестируемого соединения на апикальной стороне.)
Пример тестирования [4] тест на устойчивость в растворе 1 по Фармакопее Японии
3
Тестируемое соединение растворяли в смешанном растворе CHCN и растворе 1 по Фармакопее Японии (объемное соотношение 3:7) и доводили во флаконе для ВЭЖХ до концентрации 0,05 мМ. Тестируемое соединение измеряли ВЭЖХ при 40°С через 0 и 8 часов. Величину измерения в 0 часов определяли как 100% для определения остаточного соотношения тестируемого соединения через 8 часов.
В настоящем документе «раствор 1 по Фармакопее Японии» представляет раствор, в котором 21 мл концентрированной хлористоводородной кислоты добавлены к 6 г хлорида натрия и далее доведены до объема 3 л дистиллированной водой.
2+
in vitro
Результаты ингибирующего эффекта в отношении входа Са в клетки (пример тестирования [1]), теста метаболической устойчивости в человеческой печени S9 (пример тестирования [2]) и теста проницаемости мембран  (пример тестирования [3]) показаны ниже в таблицах 4-6.
Таблица 4
Пример - Сравнительный пример
Химическая структура
Ингибирование VR1 IC<sub>50</sub> (нМ)
Остаточное соотношение после прохождения через человеческую печень S9 (%)
Проницаемость мембран Рарр (×10<sup>-6</sup> см/сек)
Пример1-1
<img file="00000020.tif" he="22" wi="69" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,024
90,8
8,59
Пример1-2
<img file="00000021.tif" he="23" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,038
65,3
20,96
Пример1-3
<img file="00000022.tif" he="22" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,24
59,6
26,93
Пример1-4
<img file="00000023.tif" he="23" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,019
39,7
30,25
Пример1-5
<img file="00000024.tif" he="19" wi="69" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,66
82,2
38,07
Пример1-6
<img file="00000025.tif" he="24" wi="69" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,15
91,8
37,53
Пример1-7
<img file="00000026.tif" he="23" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,14
50,4
37,94
Таблица 5
Пример1-8
<img file="00000027.tif" he="21" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,038
91,5
13,61
Пример1-9
<img file="00000028.tif" he="23" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,54
77,3
50,36
Пример1-10
<img file="00000029.tif" he="21" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,69
92,2
39,22
Ср. пример 1
<img file="00000030.tif" he="18" wi="66" img-content="undefined" img-format="tif" />
3
86,3
27,1
Ср. пример 2
<img file="00000031.tif" he="22" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
1,3
90,1
24,2
Ср. пример 3
<img file="00000032.tif" he="33" wi="65" img-content="undefined" img-format="tif" />
18
89,4
25,6
Ср. пример 4
<img file="00000033.tif" he="25" wi="65" img-content="undefined" img-format="tif" />
5,2
92,5
5,3
Ср. пример 5
<img file="00000034.tif" he="20" wi="55" img-content="undefined" img-format="tif" />
42,0
64,9
7,9
Таблица 6
Ср. пример 6
<img file="00000035.tif" he="23" wi="65" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,3
77,3
21,1
Ср. пример 7
<img file="00000036.tif" he="23" wi="62" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,4
55,1
18,2
Ср. пример 8
<img file="00000037.tif" he="23" wi="60" img-content="undefined" img-format="tif" />
7
62,9
43,1
Ср. пример 9
<img file="00000038.tif" he="22" wi="61" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,12
65,9
19,4
Ср. пример 10
<img file="00000039.tif" he="24" wi="61" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,04
82,3
6,7
Ср. пример 11
<img file="00000040.tif" he="25" wi="63" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,36
66,7
40,3
Ср. пример 12
<img file="00000041.tif" he="23" wi="66" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,03
54,5
10,4
Ср. пример 13
<img file="00000042.tif" he="20" wi="66" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,12
91,3
28,6
Обсуждение результатов теста ингибирование входа Са
в клетки (пример тестирования [1])
2+
[1]
50
50
Величины IC соединений примеров с 1-1 по 1-10, включенных в соединение по настоящему изобретению, представленное общей формулой [1], составляли, как показано в таблицах 4-6, соответственно 0024 нМ, 0,038 нМ, 0,024 нМ, 0,019 нМ, 0,66 нМ, 0,15 нМ, 0,14 нМ, 0,038 нМ, 0,54 нМ и 0,69 нМ, а средняя величина IC этих 10 соединений составила 0,25 нМ.
50
В частности, соединения примеров 1-1, 1-2, 1-4 и 1-8 имели величины IC соответственно 0,024, 0,038, 0,019 и 0,038 нМ, и они оказывали превосходный ингибирующий эффект на активность VR1.
50
50
С другой стороны, величины IC соединений сравнительных примеров 1-13 составляли, как показано в таблицах 4-6, соответственно 3 нМ, 1,3 нМ, 18 нМ, 5,2 нМ, 42,0 нМ, 0,3 нМ, 0,4 нМ, 7 нМ, 0,12 нМ, 0,04 нМ, 0,36 нМ, 0,03 нМ и 0,12 нМ, а средняя величина IC этих 13 соединений сравнительных примеров составила 5,99 нМ.
50
Как описано выше, соединение по настоящему изобретению обладало ингибирующей активностью примерно в 24 раза выше активности соединений сравнительных примеров с точки зрения средней величины IC.
[2] Обсуждение результатов теста метаболической устойчивости в человеческой печени S9 (пример тестирования [2
]
Остаточное соотношение соединений примеров с 1-1 по 1-10, включенных в соединение по настоящему изобретению, представленное общей формулой [1], после прохождения через человеческую печень S9 составляло, как показано в таблицах 4-6, соответственно 90,8%, 65,3%, 59,6%, 39,7%, 82,2%, 91,8%, 50,4%, 91,5%, 77,3% и 92,2%, а среднее остаточное соотношение 10 соединений после прохождения через человеческую печень S9 составило 74%.
В частности, соединения примеров 1-1, 1-6, 1-8 и 1-10 имели остаточное соотношение 90% или выше и проявляли значительные высокие остаточные соотношения, т.е. заметную высокую метаболическую устойчивость в печени S9. Поэтому эти соединения можно применять в качестве превосходных лекарственных средств, которые могут противодействовать окислительному метаболизму и оказывают длительный эффект.
С другой стороны, остаточное соотношение соединений сравнительных примеров с 1 по 13 после прохождения через человеческую печень S9, как показано в таблицах 4-6, составила соответственно 86,3%, 90,1%, 89,4%, 92,5%, 64,9%, 77,3%, 55,1%, 62,9%, 65,9%, 82,3%, 66,7%, 54,5% и 91,3%, и среднее остаточное соотношение этих 13 соединений сравнительных примеров составило 75%.
in vitro
[3] Обсуждение результатов теста на проницаемость мембран  (пример тестирования [3])
in vitro
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
Проницаемость мембран  соединений примеров с 1-1 по 1-10, включенных в соединение по настоящему изобретению, представленное общей формулой [1], составляла соответственно 30,25×10, 38,07×10, 37,53×10, 37,94×10, 13,61×10, 50,36×10 и 39,22×10, с точки зрения величин Рарр (см/сек), и средняя величина Рарр (см/сек) этих 10 соединений составила 30,35×10.
-6
50
В частности, соединения примеров с 1-2 по 1-10 имели мембранную проницаемость 10×10 (см/сек) или более и проявляли очень высокую мембранную проницаемость. Эти соединения имеют преимущественные свойства в качестве лекарственных средств, потому что они не только имеют высокие величины IC, но также имеют высокую всасываемость, что также очень полезно для использования в качестве лекарственного средства.
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
-6
С другой стороны, величины Рарр (см/сек) соединения сравнительных примеров с 1 по 13 составили, как показано в таблицах 4-6, соответственно 27,1×10, 24,2×10, 25,6×10, 5,3×10, 7,9×10, 21,1×10 18,2×10, 43,1×10, 19,4×10, 6,7×10, 40,3×10, 10,4×10 и 28,6×10, и средняя величина Рарр (см/сек) этих 13 соединений сравнительных примеров составила 21,38×10.
Как описано выше, соединение по настоящему изобретению имело мембранную проницаемость примерно в 1,4 раза выше соединений сравнительных примеров с точки зрения средних величин Рарр.
[4] Обсуждение результатов теста на устойчивость в растворе 1 по Фармакопее Японии (пример тестирования [4]):
В тесте устойчивости в растворе 1 по Фармакопее Японии остающиеся доли соединений примеров 1-6 и 1-8, включенных в соединение по настоящему изобретению, представленное общей формулой [1], составило соответственно 100 и 101%. С другой стороны, остаточное соотношение соединения сравнительного примера 13 составило 62,1%.
Поскольку предполагается, что раствор 1 Фармакопеи Японии имеет рН, равный рН желудочной кислоты, в целом известно, что устойчивость в нем свидетельствует об устойчивости к желудочному соку.
Поэтому указанные соединения по сравнению с соединением сравнительного примера 13 можно применять в качестве лекарственных средств ввиду их устойчивости к желудочному соку.
[5] Резюме:
(1) Относительно величины IC
50
50
50
В соответствии с документом (J. Pharmacol. Exp. Ther. 2003 Jul; 306 (1): 377-86), известно, что ВСТС, который известен как вещество, ингибирующее активность VR1, имеет ингибирующую активность (величину IC), составляющую несколько нМ. Кроме того, заявители также подтвердили в тестах, что величина IC: ВСТС составляет несколько нМ.
50
Все величины IC соединения по настоящему изобретению, в частности соединений, представленных в настоящих примерах с 1-1 по 1-10, составляют меньше чем 1 нМ.
50
-6
С другой стороны, из соединений сравнительных примеров, 7 соединений сравнительных примеров 6, 7, 9, 10, 11, 12 и 13, имели величины IC менее чем 1 нМ. Однако эти 7 соединений сравнительных примеров необязательно были удовлетворительными в отношении всех рассматриваемых показателей, потому что они имели остаточное соотношение менее чем 80% в тесте метаболической устойчивости в печени S9, и/или величины Рарр менее чем 10×10, соответствующие мембранной проницаемости, или имели более низкую устойчивость к желудочному соку.
(2) Относительно метаболической устойчивости в человеческой печени S9
Метаболическая устойчивость представляет собой важное требование для лекарственного средства, и предпочтительны лекарственные средства, имеющие метаболическую устойчивость 80% или выше. Соединения примеров 1-1, 1-6, 1-8 и 1-10 имели остаточное соотношение после прохождения через печень 90% или выше и проявляли очень высокие остаточные соотношения после прохождения через печень, т.е. очень высокую метаболическую устойчивость в печени S9.
50
-6
С другой стороны, соединения сравнительных примеров 1, 2, 3, 4, 10, 13 и т.д. также проявили превосходную метаболическую устойчивость. Однако соединения сравнительных примеров 1, 2, 3 и 4, имели величины IC 1 нМ или выше и не были удовлетворительны в свете ингибирующей активности. У соединений сравнительного примера 10 была величина Рарр 6,7×10, что неудовлетворительно в отношении мембранной проницаемости. Кроме того, соединение сравнительного примера 13 имело более низкую устойчивость в желудочном соке и не было достаточно приемлемым.
В отношении результата теста мембранной проницаемости
(3)
-6
В отношении мембранной проницаемости соединение по настоящему изобретению имело мембранную проницаемость примерно в 1,4 больше, чем соединения сравнительных примеров с точки зрения средних величин Рарр, как описано выше. В частности, соединения примеров 1-4, 1-5, 1-6, 1-7, 1-9 и 1-10 имели высокую мембранную проницаемость 30×10 или выше с точки зрения величин Рарр.
50
С другой стороны, соединения сравнительных примеров 8 и 11 имели высокую мембранную проницаемость. Однако соединение сравнительного примера 8 имело величину IC 7 нМ, соответствующую ингибирующей активности, и не было удовлетворительным в свете ингибирующей активности. Кроме того, соединение сравнительного примера 11 имело остающуюся долю после прохождения через человеческую печень S9 66,7%, служащую в качестве показателя метаболической устойчивости, и необязательно было подходящим в качестве лекарственного средства.
Характеристики соединения по настоящему изобретению с точки зрения химической структуры
(4)
50
Когда сравниваются соединение сравнительного примера 11 и соединение примера 1-2, то они отличаются тем, что первое имеет только атом фтора в фенильной группе, тогда как последнее имеет 2 атома фтора. Последнее имеет величину IC примерно в 10 раз выше, чем у первого.
50
Когда сравниваются соединение сравнительного примера 8 и соединение примера 1-6, то они отличаются только тем, что первое имеет трифторметильную группу в качестве заместителя для пиридина, тогда как последнее имеет 2,2,2-трифторэтоксигруппу. Последнее имеет более высокую остающуюся часть после прохождения через печень S9, которая примерно в 1,5 раза выше первого, и его величина IC примерно в 50 раз выше таковой первого соединения.
50
Когда сравниваются соединения сравнительных примеров 7 и 9 и соединение примера 1-8, то соединение примера 1-8, имеющее 2 атома фтора и одну 2,2,2-трифторэтоксигруппу в качестве заместителей для фенильной группы, отличается от других тем, что соединение сравнительного примера 7 имеет только одну трифторметильную группу и тем, что соединение сравнительного примера 9 имеет атом фтора и одну трифторметильную группу. Однако соединение примера 1-8 имеет более высокую остающуюся часть после прохождения через печень S9, которая примерно от 1,4 до 1,7 раз больше соединений сравнительных примеров 7 и 9, и более высокую величину IC, примерно в 3-11 раз больше таковой соединений сравнительных примеров 7 и 9.
50
Когда сравниваются соединение сравнительного примера 13 и соединение примера 1-1, то они отличаются тем, что первое имеет только один атом фтора в фенильной группе, тогда как последнее имеет 2 атома фтора. Последнее имеет величину IC, примерно в 5 раз превышающую таковую первого соединения. Этот результат не мог ожидаться даже специалистами в данной области.
Соединения, представленные общей формулой [1], в частности соединения примеров с 1-1 по 1-10, представляют собой соединения, имеющие высокую ингибирующую активность на VR1, а также высокую метаболическую устойчивость в печени S9 и/или высокую мембранную проницаемость.
Поэтому соединения примеров с 1-1 по 1-10, представленные общей формулой [1], можно применять не только в качестве лекарственных средств, имеющих высокую активность в качестве ингибиторов VR1, но также их можно применять в качестве лекарственных средств, способных противодействовать окислительному метаболизму и обладающих длительным эффектом, а также имеющих высокую всасываемость.
Поэтому настоящие соединения можно применять не только в качестве лекарственных средств, имеющих высокую эффективность в качестве ингибиторов VR1, но также ожидается их практическое применение в качестве лекарственных средств, способных противодействовать окислительному метаболизму и обладающих длительным эффектом, а также имеющих высокую всасываемость.
Промышленная применимость
3,4-Дигидробензоксазиновое соединение по настоящему изобретению эффективно ингибирует ваниллоидные рецепторы подтипа 1 (VR1), и поэтому оно эффективно при медикаментозном лечении и/или предотвращении заболеваний, таких как боль, острая боль, хроническая боль, невропатическая боль, боль при ревматоидном артрите, невралгия, нейропатия, гипералгезия, мигрень, суставная боль, острая герпетическая боль, постгерпетическая невралгия, хроническая постгерпетическая невралгия, послеоперационная боль, боль при раке, воспалительная боль, интерстициальный цистит, посттравматическая невралгия, диабетическая нейропатия, нейродегенеративное заболевание, инсульт, ишемический симптом, повреждение нерва, нейрогенное кожное расстройство, воспалительное заболевание, зуд, аллергический ринит, инсульт, синдром раздражимой кишки, астма, хроническое обструктивное легочное заболевание, дерматит, мукозит, язва желудка и 12-перстной кишки, воспалительное кишечное заболевание, гиперчувствительность мочевого пузыря, частое мочеиспускание по типу избыточно активного мочевого пузыря и недержание мочи по типу избыточно активного мочевого пузыря.