Биспецифическое антитело, которое специфично связывается с IV и II cубдоменами внеклеточного домена HER2 человека

1. Биспецифическое антитело, которое специфично связывается с IV субдоменом внеклеточного домена (ECD4) HER2 (рецептор эпидермального фактора роста 2) человека и II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2 человека, включающее:
1) первую антигенсвязывающую часть, которая специфично связывается с IV субдоменом внеклеточного домена (ECD4) HER2, и представляет собой одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv) трастузумаба с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 1;
2) вторую антигенсвязывающую часть, которая специфично связывается с II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2, и представляет собой участок связывания антигена (Fab), включающий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 2, и вариабельный домен легкой цепи (VL) с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 6;
3) кристаллизующийся фрагмент иммуноглобулина (Fc-фрагмент).
2. Биспецифическое антитело по п. 1, где антитело представляет собой антитело IgG.
3. Биспецифическое антитело по п. 2, где антитело IgG относится к изотипу IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 человека.
4. Биспецифическое антитело по п. 3, где антитело IgG относится к изотипу IgG1 человека.
5. Биспецифическое антитело по п. 1, где кристаллизующийся фрагмент иммуноглобулина (Fc-фрагмент) включает две аминокислотные последовательности второго и третьего константных доменов (CH2-CH3), представленные SEQ ID NO: 10-11, соответственно.
6. Биспецифическое антитело по п. 1, где вторая антигенсвязывающая часть, которая специфично связывается с II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2, представляет собой участок связывания антигена (Fab), включающий:
а) вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и первый константный домен тяжелой цепи (CH1), с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 12;
б) вариабельный домен легкой цепи (VL) и константный домен легкой цепи (CK), с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 13;
7 Биспецифическое антитело, которое специфично связывается с IV субдоменом внеклеточного домена (ECD4) HER2 (рецептор эпидермального фактора роста 2) человека и II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2 человека, состоящее из:
1) аминокислотной последовательности, которая специфично связывается с IV субдоменом внеклеточного домена (ECD4) HER2, включающей константные домены CH2 и CH3, и одноцепочечный вариабельного фрагмент (scFv) трастузумаба, с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 14;
2) тяжелой цепи антитела, которое специфично связывается с II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2, включающей вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и первый, второй и третий константные домены тяжелой цепи (CH1-CH2-CH3), с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 15;
3) легкой цепи антитела, которое специфично связывается с II субдоменом внеклеточного домена (ECD2) HER2, включающей вариабельный домен легкой цепи (VL) и константный домен легкой цепи (CK), с аминокислотной последовательностью, представленной SEQ ID NO: 13,
при этом части 1)-3) соединены между собой дисульфидными мостиками.
8. Нуклеиновая кислота, которая кодирует антитело по любому из пп. 1-7.
9. Нуклеиновая кислота по п. 8, где нуклеиновая кислота представляет собой ДНК.
10. Экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из пп. 8-9.
11. Способ получения клетки-хозяина для получения антитела по любому из пп. 1-7, включающий трансформирование клетки вектором по п. 10.
12. Клетка-хозяин для получения антитела по любому из пп. 1-7, содержащая нуклеиновую кислоту по любому из пп. 8-9.
13. Способ получения антитела по любому из пп. 1-7, заключающийся в культивировании клетки-хозяина по п. 12 в культуральной среде в условиях, достаточных для получения указанного антитела, при необходимости, с последующим выделением и очисткой полученного антитела.
14. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого HER2, содержащая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп. 1-7 в терапевтически эффективном количестве, в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами.
15. Фармацевтическая композиция по п. 14, предназначенная для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого HER2, выбранного из группы: рак молочной железы (РМЖ), злокачественное новообразование желудка, немелкоклеточный рак лёгкого, злокачественное новообразование головы и/или шеи, плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ), колоректальный рак (КРР), эзофагеальный рак, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак ЖКТ, рак почек, рак шейки матки, рак эндометрия, рак матки, злокачественная меланома, рак глотки, рак ротовой полости или рак кожи.
16. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого HER2, содержащая антитело по любому из пп. 1-7 в терапевтически эффективном количестве и по меньшей мере одно терапевтически активное противоопухолевое соединение в терапевтически эффективном количестве.
17. Фармацевтическая композиция по п. 16, предназначенная для лечения заболевания или нарушения, опосредуемого HER2, выбранного из группы: рак молочной железы (РМЖ), злокачественное новообразование желудка, немелкоклеточный рак лёгкого, злокачественное новообразование головы и/или шеи, плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ), колоректальный рак (КРР), эзофагеальный рак, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак ЖКТ, рак почек, рак шейки матки, рак эндометрия, рак матки, злокачественная меланома, рак глотки, рак ротовой полости или рак кожи.
18. Фармацевтическая композиция по пп. 16-17, где терапевтически активное противоопухолевое соединение выбирают из цитотоксического средства, химиотерапевтического средства, антитела или противогормонального средства.
19. Способ ингибирования биологической активности HER2 у субъекта, нуждающемуся в таком ингибировании, включающий введение субъекту эффективного количества антитела по любому из пп. 1-7.
20. Способ лечения заболевания или нарушения, опосредованного HER2, включающий введение субъекту антитела по любому из пп. 1-7 или фармацевтической композиции по п. 14, нуждающемуся в таком лечении, в терапевтически эффективном количестве.
21. Способ лечения заболевания или нарушения по п.20, где заболевание или нарушение выбрано из группы: рак молочной железы (РМЖ), злокачественное новообразование желудка, немелкоклеточный рак лёгкого, злокачественное новообразование головы и/или шеи, плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ), колоректальный рак (КРР), эзофагеальный рак, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак ЖКТ, рак почек, рак шейки матки, рак эндометрия, рак матки, злокачественная меланома, рак глотки, рак ротовой полости или рак кожи.
22. Применение антитела по любому из пп. 1-7 или фармацевтической композиции по п. 14 для лечения у субъекта, нуждающегося в таком лечении, заболевания или нарушения, опосредуемого HER2.
23. Применение по п. 20, где заболевание или нарушение выбрано из группы: рак молочной железы (РМЖ), злокачественное новообразование желудка, немелкоклеточный рак лёгкого, злокачественное новообразование головы и/или шеи, плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ), колоректальный рак (КРР), эзофагеальный рак, рак яичника, рак поджелудочной железы, рак ЖКТ, рак почек, рак шейки матки, рак эндометрия, рак матки, злокачественная меланома, рак глотки, рак ротовой полости или рак кожи.