НОВЫЕ МОЛЕКУЛЫ ИСКУССТВЕННЫХ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ

1. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, включающая
а. по меньшей мере один 5' нетранслируемый элемент (5' UTR), происходящий из 5' UTR гена, выбранного из группы, включающей HSD17B4, ASAH1, АТР5А1, МР68, NDUFA4, NOSIP, RPL31, SLC7A3, TUBB4B и UBQLN2 гены;
б. по меньшей мере один 3' нетранслируемый элемент (3' UTR), происходящий из гена, выбранного из группы, включающей PSMB3, CASP1, СОХ6В1, GNAS, NDUFA1 и RPS9 гены;
в. и по меньшей мере один кодирующий элемент, функционально связанный с указанным 5' UTR-элементом или указанным 3' UTR.
2. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где указанный 5'UTR-элемент и/или указанный 3'UTR-элемент гетерологичны по отношению к указанному кодирующему участку.
3. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1 или 2, где каждый из указанных UTRs-элементов включает существующую в природе последовательность ДНК, а также ее гомологи, варианты, фрагменты и соответствующую последовательность РНК.
4. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-3, включающая
а-1. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена HSD17B4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена PSMB3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или а-2. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NDUFA4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена PSMB3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или а-3. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена SLC7A3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена PSMB3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или а-4. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NOSIP, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена PSMB3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или а-5. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена МР68, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена PSMB3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или b-1. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена UBQLN2, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или b-2. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена ASAH1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или b-3. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена HSD17B4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или b-4. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена HSD17B4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена С ASP 1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или b-5. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NOSIP, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена СОХ6В1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или с-1. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NDUFA4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или с-2. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NOSIP, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена NDUFA1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или с-3. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NDUFA4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена СОХ6В1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или с-4. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NDUFA4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена NDUFA1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или с-5. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена АТР5А1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена PSMB3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или d-Ι. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена RPL31, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена PSMB3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или d-2. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена АТР5А1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена С ASP1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или d-3. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена SLC7A3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена GNAS1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или d-4. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена HSD17B4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена NDUFA1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или d-5. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена SLC7A3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена NDUFA1, или из соответствующей последовательности PFIK, ее гомолога, фрагмента или варианта; или е-1. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена TUBB4B, или из соответствующей последовательности PFIK, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности PFIK, ее гомолога, фрагмента или варианта; или е-2. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена RPL31, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или е-3. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена МР68, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или е-4. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NOSIP, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или е-5. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена АТР5А1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или е-6. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена АТР5А1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена СОХ6В1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или f-Ι. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена АТР5А1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена GNAS, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или f-2. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена АТР5А1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена NDUFA1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или f-3. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена HSD17B4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена СОХ6В1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или f-4. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена HSD17B4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена GNAS1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или f-5. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена МР68, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена СОХ6В1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или g-1. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена МР68, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена NDUFA1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или g-2. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NDUFA4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена С ASP1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или g-3. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NDUFA4, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена GNAS, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или g-4. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена NOSIP, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена CASP1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или g-5. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена RPL31, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена CASP1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или h-1. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена RPL31, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена СОХ6В1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или h-2. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена RPL31, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена GNAS, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или h-3. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена RPL31, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена NDUFA1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или h-4. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена SLC7A3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена С ASP1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или h-5. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена SLC7A3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена СОХ6В1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или i-1. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена SLC7A3, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена RPS9, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта; или i-2. по меньшей мере один 5'UTR-элемент, происходящий из 5'UTR гена Ndufa4.1 или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта, и по меньшей мере один 3'UTR-элемент, происходящий из 3'UTR гена CASP1, или из соответствующей последовательности РНК, ее гомолога, фрагмента или варианта.
5. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по п. 4, включающая UTR-элементы согласно а-1, а-2, а-3, а-4 или а-5, предпочтительно согласно а-1.
6. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по п. 4, включающая UTR-элементы согласно а-2 ((NDUFA4 / PSMB3); а-5 (МР68 / PSMB3); с-1 (NDUFA4 / RPS9); а-1 (HSD17B4 / PSMB3); е-3 (МР68 / RPS9); е-4 (NOSIP / RPS9); а-4 (NOSIP / PSMB3); е-2 (RPL31 / RPS9); е-5 (АТР5А1 / RPS9); d-4 (HSD17B4 /NUDFA1); b-5 (NOSIP / СОХ6В1); а-3 (SLC7A3 / PSMB3); b-1 (UBQLN2 / RPS9); b-2 (ASAH1 /RPS9); b-4 (HSD17B4 / CASP1); e-6 (ATP5A1 / C0X6B1); b-3 (HSD17B4 / RPS9); g-5 (RPL31 / CASP1); h-1 (RPL31 / C0X6B1); и/или c-5 (ATP5A1 /PSMB3).
7. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по п. 4, включающая UTR-элементы согласно а-1 (HSD17B4 / PSMB3); а-3 (SLC7A3 / PSMB3); е-2 (RPL31 /RPS9); а-5 (МР68 / PSMB3); d-1 (RPL31 / PSMB3); а-2 (NDUFA4 / PSMB3); h-1 (RPL31 / СОХ6В1); b-1 (UBQLN2 / RPS9); а-4 (NOSIP / PSMB3); c-5 (ATP5A1 / PSMB3); b-5 (NOSIP / COX6B1); d-4 (HSD17B4 / NDUFA1); i-1 (SLC7A3 / RPS9); i-2 (NDUFA4.1 / CASP1); f-3 (HSD17B4 / COX6B1); b-4 (HSD17B4 / CASP1); g-5 (RPL31 / CASP1); c-2 (NOSIP / NDUFA1); e-4 (NOSIP / RPS9); c-4 (NDUFA4 / NDUFA1); и/или d-5 (SLC7A3 /NDUFA1).
8. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по п. 4, включающая UTR-элементы согласно а-4 (NOSIP / PSMB3); а-1 (HSD17B4 / PSMB3); а-5 (МР68 / PSMB3); d-3 (SLC7A3 / GNAS); а-2 (NDUFA4 / PSMB3); а-3 (SLC7A3 / PSMB3); d-5 (SLC7A3 / NDUFA1); i-1 (SLC7A3 / RPS9); d-1 (RPL31 / PSMB3); d-4 (HSD17B4 / NDUFA1); b-3 (HSD17B4 / RPS9); f-3 (HSD17B4 / COX6B1); f-4 (HSD17B4 / GNAS); h-5 (SLC7A3 / COX6B1); g-4 (NOSIP / CASP1); c-3 (NDUFA4 / COX6B1); b-1 (UBQLN2 / RPS9); c-5 (ATP5A1 / PSMB3); h-4 (SLC7A3 / CASP1); h-2 (RPL31 / GNAS); e-1 (TUBB4B / RPS9); f-2 (ATP5A1 / NDUFA1); c-2 (NOSIP / NDUFA1); b-5 (NOSIP / COX6B1); и/или e-4 (NOSIP / RPS9.1).
9. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-8, где
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена HSD17 В4, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 1 или последовательности ДНК, которая, в порядке возрастания мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO:1, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 2 или последовательности РНК, которая, в порядке возрастания мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 2, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена ASAH1, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 3 или последовательности ДНК, которая, в порядке возрастания мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 3, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 4 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 4, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена АТР5А1, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 5 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 5, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 6 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 6, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена МР68, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 7 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 7, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 8 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 8, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена NDUF А4, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 9 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 9, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 10 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 10, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена NOSIP, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 11 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 11, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 12 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 12, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена RPL31, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 13 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 13, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 14 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, из 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 14, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена SLC7A3, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 15 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 15, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 16 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 16, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена TUBB4B, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 17 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 17, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 18 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 18, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 5'UTR-элемент, происходящий из гена UBQLN2, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 19 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 19, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 20 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 20, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 3'UTR-элемент, происходящий из гена PSMB3, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 23 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 23, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 24 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 24, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 3'UTR-элемент, происходящий из гена CASP1, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 25 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 25, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 26 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 26, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 3 UTR-элемент, происходящий из гена СОХ6В1, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 27 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 27, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 28 или последовательности РНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 28, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 3'UTR-элемент, происходящий из гена GNAS, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 29 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 29, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 30 или последовательности РНК, которая, порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 30, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 3'UTR-элемент, происходящий из гена NDUFA1, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 31 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 31, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 32 или последовательности РНК, которая, порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 32, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей;
- указанный 3 UTR-элемент, происходящий из гена RPS9, содержит или состоит из последовательности ДНК согласно SEQ ID NO: 33 или последовательности ДНК, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 33, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей; или содержит или состоит из последовательности РНК согласно SEQ ID NO: 34 или последовательности РНК, которая, порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 34, или фрагмента, или варианта указанных последовательностей.
10. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9, где указанный кодирующий участок располагается между указанным 5'UTR и указанным 3 UTR, предпочтительно в прямом направлении от указанного 5'UTR и в обратном направлении от указанного 3 UTR.
11. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-10, где по меньшей мере один кодирующий участок кодирует по меньшей мере один представляющий интерес (поли-)пептид или белок, необязательно выбранный из антигенного (поли-)пептида или белка, аллергенного (поли-)пептида или белка, терапевтически значимого (поли-)пептида или белка, антитела, или фрагмента, варианта или производного указанного, представляющего интерес (поли-)пептида или белка.
12. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по п. 11, где указанный по меньшей мере один (поли-)пептид или белок выбран из опухолевого антигена, антигена патогена, аутоантигена, аллоантигена или аллергенного антигена.
13. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по п. 12, где указанный по меньшей мере один антиген патогена выбран из антигена бактерий, вирусов, грибов или простейших.
14. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по п. 11, где указанный по меньшей мере один терапевтически значимый (поли-)пептид или белок выбран из -терапевтически значимого (поли-)пептида или белка, замещающего отсутствующий, дефицитный или мутантный белок;
- терапевтически значимого (поли-)пептида или белка, имеющего преимущество для лечения наследственного или приобретенного заболевания, инфекционного заболевания или неоплазии (например, ракового или опухолевого заболевания);
- адъювантного или иммуностимулирующего терапевтически значимого (поли-)пептида или белка;
- терапевтически значимого антитела;
- пептидного гормона;
- агента редактирования генов;
- ингибитора иммунной контрольной точки;
- Т-клеточного рецептора;
- фермента и/или
- варианта, фрагмента или производного любого из указанных терапевтически значимых (поли-)пептидов или белков.
15. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 10-14, где кодирующий участок также кодирует
(а) по меньшей мере один эффекторный домен;
(б) по меньшей мере одну пептидную или белковую мишень;
(в) по меньшей мере один сигнал или последовательность локализации;
(г) по меньшей мере один сигнал ядерной локализации (NLS);
(д) по меньшей мере один сигнальный пептид и/или
(е) по меньшей мере один пептидный линкер;
(ж) по меньшей мере один секреторный сигнальный пептид (SSP);
(з) элемент мультимеризации, в том числе элементы димеризации, тримеризации, тетрамеризации или олигомеризации;
(и) элемент, формирующий вирусоподобную частицу (VLP);
(к) трансмембранный элемент;
(л) элемент, нацеливающий на дендритную клетку;
(м) элемент иммунологического адъюванта;
(н) элемент, обеспечивающий презентацию антигена;
(о) 2А пептид;
(п) элемент, увеличивающий время полужизни белка, и/или
(р) элемент пост-трансляционной модификации (например, гликозилирования),
где искусственная молекула нуклеиновой кислоты также необязательно содержит по меньшей мере один участок внутренней посадки рибосомы (IRES) и по меньшей мере один сайт связывания miPHK.
16. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-15, где указанный по меньшей мере один кодирующий участок, кодирует (поли-)пептид или белок, который содержит или состоит из любой аминокислотной последовательности согласно SEQ ID NOs: 41-45 или из аминокислотной последовательности, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична любой из аминокислотных последовательностей SEQ ID NOs: 41-45, или из варианта или фрагмента любой из указанных последовательностей.
17. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-15, где указанный по меньшей мере один кодирующий участок указанной искусственной молекулы нуклеиновой кислоты содержит или состоит из любой нуклеотидной последовательности согласно SEQ ID NOs: 46-49 или из нуклеотидной последовательности, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична любой из указанных нуклеотидных последовательностей.
18. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-16, где указанная искусственная молекула нуклеиновой кислоты содержит или состоит из любой нуклеотидной последовательности согласно SEQ ID NOs: 50-368 или из нуклеотидной последовательности, которая, в порядке предпочтения, по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентична любой из указанных нуклеотидных последовательностей.
19. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-17, где указанная искусственная молекула нуклеиновой кислоты представляет собой РНК.
20. РНК по п. 19, которая является моно-, би- или мультицистронной.
21. РНК по п. 19 или 20, которая представляет собой мРНК, вирусную РНК, самореплицирующуюся РНК или РНК-репликон.
22. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-21, где указанная искусственная молекула нуклеиновой кислоты представляет собой модифицированную нуклеиновую кислоту, предпочтительно стабилизированную нуклеиновую кислоту или где искусственная молекула нуклеиновой кислоты содержит по меньшей мере один модифицированный или не существующий в природе нуклеотид, модификацию остова, модификацию сахара или модификацию основания.
23. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-22, где
- содержание G/C по меньшей мере в одном кодирующем участке искусственной молекулы нуклеиновой кислоты увеличено по сравнению с содержанием G/C в соответствующей кодирующей последовательности соответствующей искусственной нуклеиновой кислоты дикого типа, и/или, где
- содержание С по меньшей мере в одном кодирующем участке искусственной молекулы нуклеиновой кислоты увеличено по сравнению с содержанием С в соответствующей кодирующей последовательности соответствующей искусственной нуклеиновой кислоты дикого типа, и/или, где
- кодоны по меньшей мере в одном кодирующем участке искусственной молекулы нуклеиновой кислоты адаптированы к использованию кодонов человека, где индекс адаптации кодонов (CAI), предпочтительно увеличен или максимизирован по меньшей мере в одной кодирующей последовательности искусственной молекулы нуклеиновой кислоты,
где аминокислотная последовательность, кодируемая искусственной нуклеиновой кислотой, предпочтительно не является модифицированной по сравнению с аминокислотной последовательностью, кодируемой соответствующей искусственной нуклеиновой кислотой дикого типа.
24. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-23, содержащая 5'-САР структуру, предпочтительно m7GpppN или Capl.
25. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-24, содержащая по меньшей мере одну гистоновую структуру "петля-на-стебле".
26. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по п. 25, где по меньшей мере одна гистоновая структура «петля-на-стебле» содержит нуклеотидную последовательность, согласно следующим формулам (I) или (II):
формула (I) (последовательность «петля-на-стебле» без стеблевых ограничивающих элементов):
формула (II) (последовательность «петля-на-стебле» со стеблевыми ограничивающими элементами):
где:
где последовательности стебля 1 и стебля 2 способны к спариванию нуклеотидов с формированием обратно комплементарной последовательности, где спаривание оснований может происходить между последовательностями стебля 1 и стебля 2, или с формированием частично обратно комплементарной последовательности, где неполное спаривание оснований может происходить между стеблем 1 и стеблем 2.
27. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по п. 25 или 26, где по меньшей мере одна гистоновая структура «петля-на-стебле» содержит нуклеотидную последовательность, согласно следующим формулам (Ia) или (IIa):
формула (Ia) (последовательность "петля-на-стебле" без стеблевых ограничивающих элементов):
формула (IIa) (последовательность «петля-на стебле» со стеблевыми ограничивающих элементов):
28. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-27, необязательно содержащая последовательность поли(А), предпочтительно включающую от 10 до 200, от 10 до 100, от 40 до 80 или от 50 до 70 аденозиновых нуклеотидов.
29. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-28, необязательно содержащая последовательность поли(С), предпочтительно включающую от 10 до 200, от 10 до 100, от 20 до 70, от 20 до 60 или от 10 до 40 цитозиновых нуклеотидов.
30. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-29, содержащая, предпочтительно в направлении от 5' к 3', следующие элементы:
а) структуру 5'-кэп, предпочтительно m7GpppN или Cap1
б) 5' UTR-элемент, который включает или состоит из нуклеотидной последовательности, которая происходит из 5' UTR, определенного в любом из п.п. 1-9, предпочтительно содержащего нуклеотидную последовательность, соответствующую любой нуклеотидной последовательности из SEQ ID NO: 1-20, или ее гомологу, фрагменту или варианту;
в) по меньшей мере одну кодирующую последовательность, определенную в любом из п.п. 10-18;
г) 3' UTR-элемент, который включает или состоит из нуклеотидной последовательности, которая происходит из 3' UTR, определенного в любом из п.п. 1-9, предпочтительно содержащего нуклеотидную последовательность, соответствующую любой нуклеотидной последовательности из SEQ ID NO: 23-24, или ее гомологу, фрагменту или варианту;
д) необязательно хвост поли(А), предпочтительно состоящий из от 10 до 1 ООО, от 10 до 500, от 10 до 300, от 10 до 200, от 10 до 100, от 40 до 80 или от 50 до 70 аденозиновых нуклеотидов;
е) необязательно хвост поли(С), предпочтительно состоящий из от 10 до 200, от 10 до 100, от 20 до 70, от 20 до 60 или от 10 до 40 цитозиновых нуклеотидов и
ж) необязательно гистоновую структуру «петля-на-стебле».
31. Композиция, содержащая по меньшей мере одну или множество искусственных молекул нуклеиновых кислот, предпочтительно РНК, по любому из пп. 1-30 и фармацевтически приемлемый носитель и/или эксципиент.
32. Композиция по п. 31, где по меньшей мере две молекулы из указанного множества искусственных молекул нуклеиновых кислот содержат (а) одну и ту же или различную комбинацию UTR-элементов по любому из пп. 1-9 и/или (б) кодируют различные пептиды или белки, необязательно выбранные из пептидов или белков, согласно любому из п.п. 11-17.
33. Композиция по п. 31 или 32 для использования в качестве лекарственного средства, необязательно, для использования в качестве вакцины.
34. Композиция по п. 33, предпочтительно содержащая по меньшей мере одну искусственную молекулу нуклеиновой кислоты, включающую UTR-комбинацию по п. 6, где указанная композиция и/или указанная искусственная молекула нуклеиновой кислоты адаптирована/адаптированы для нацеленной доставки в печень.
35. Композиция по п. 33, предпочтительно содержащая, по меньшей мере одну искусственную молекулу нуклеиновой кислоты, включающую UTR-комбинацию по п. 7, где указанная композиция и/или указанная искусственная молекула нуклеиновой кислоты адаптирована/адаптированы для подкожного, внутрикожного, внутридермального, местного или трансдермального применения.
36. Композиция по п. 33, предпочтительно содержащая по меньшей мере одну искусственную молекулу нуклеиновой кислоты, включающую UTR-комбинацию по п. 8, где указанная композиция и/или указанная искусственная молекула нуклеиновой кислоты адаптирована/адаптированы для внутримышечного применения.
37. Композиция или вакцина по любому из пп. 31-36, где искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК находится в форме комплекса с одним или более катионными или поликатионными соединениями, предпочтительно с катионными или поликатионными полимерами, катионными или поликатионными пептидами или белками, например, протамином, катионными или поликатионными полисахаридами и/или катионными или поликатионными липидами или полимерными носителями.
38. Композиция или вакцина по п. 37, где отношение N/P искусственной молекулы нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК к одному или более катионным или поликатионным пептидам или белкам находится в диапазоне от около 0,1 до 10, включая диапазоны от около 0,3 до 4, от около 0,5 до 2, от около 0,7 до 2 и от около 0,7 до 1,5.
39. Композиция или вакцина по любому из пп. 31-38, где искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК находится в форме комплекса с одним или более липидами, таким образом, формируя липидные наночастицы, липоплексы и/или, предпочтительно липосомы.
40. Композиция или вакцина по любому из пп. 31-39, также содержащая по меньшей мере один активный ингредиент и/или по меньшей мере один адъювант.
41. Композиция или вакцина по любому из пп. 31-40, также содержащая некодирующую РНК, выбранную из группы, включающей малую, интерферирующую РНК (siPHK), антисмысловую РНК (asPHK), кольцевую РНК (cirPHK), рибозимы, аптамеры, рибосвитчи, иммуностимулирующую РНК (isPHK), транспортную РНК (tPHK), рибосомальную РНК (rPHK), малую ядерную РНК (snPHK), малую нуклеолярную РНК (snoPHK), микроРНК (miPHK) и Piwi-взаимодействующую РНК (piPHK).
42. Композиция или вакцина по п. 41, где иммуностимулирующая РНК (isPHK) содержит по меньшей мере одну РНК-последовательность, согласно формуле (III) (GlXmGn), формуле (IV) (ClXmCn), формуле (V) (NuGlXmGnNv) и/или формуле (VI) (NuClXmCnNv)a.
43. Композиция или вакцина по любому из пп. 41 или 42, содержащая полимерный карго комплекс, сформированный полимерным носителем, предпочтительно содержащим перекрестно-сшитые дисульфидными связями катионные пептиды, предпочтительно Cys-Arg12 и/или Cys-Arg12-Cys и isPHK.
44. Набор, предпочтительно набор из частей, содержащий искусственную молекулу нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-30, или композицию или вакцину по любому из пп. 31-43 и, необязательно, жидкий носитель и/или необязательно технические инструкции с информацией по применению и дозированию искусственной молекулы нуклеиновой кислоты или композиции или вакцины.
45. Набор по п. 44, содержащий в качестве части Рингер-лактатный раствор.
46. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-30, композиция или вакцина по любому из пп. 31-43 или набор по любому из пп. 44 или 45 для применения в качестве лекарственного средства.
47. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-30, композиция или вакцина по любому из пп. 31-43 или набор по любому из пп. 44 или 45 для применения в лечении генетических заболеваний, рака, инфекционных заболеваний, воспалительных заболеваний, (ауто)иммунных заболеваний, аллергий и/или для применения в генной терапии и/или для иммуномодуляции.
48. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК, композиция или вакцина, или набор для применения согласно п. 47, где указанное применение включает (а) введение пациенту, который в этом нуждается, указанной искусственной молекулы нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК, указанной композиции или указанного набора.
49. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 6-30, композиция или вакцина по любому из пп. 31-43 или набор по любому из пп. 44 или 45, где указанная композиция или набор содержат по меньшей мере одну искусственную молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп. 6-30 для применения в способе усиления эффективности экспрессии указанной искусственной молекулы нуклеиновой кислоты в ткани печени, клетках печени или линиях клеток печени.
50. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 7-30, композиция или вакцина по любому из пп. 31-43 или набор по любому из пп. 44 или 45, где указанная композиция или набор содержат по меньшей мере одну искусственную молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп. 7-30 для применения в способе усиления эффективности экспрессии указанной искусственной молекулы нуклеиновой кислоты в ткани кожи, клетках кожи или линиях клеток кожи.
51. Искусственная молекула нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 8-30, композиция или вакцина по любому из пп. 31-43 или набор по любому из пп. 44 или 45, где указанная композиция или набор содержат по меньшей мере одну искусственную молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп. 8-30 для применения в способе усиления эффективности экспрессии указанной искусственной молекулы нуклеиновой кислоты в мышечной ткани, мышечных клетках или линиях мышечных клеток.
52. Способ лечения или профилактики заболевания, необязательно выбранного из генетических заболеваний, рака, инфекционных заболеваний, воспалительных заболеваний, (ауто)иммунных заболеваний, аллергий и/или для использования в генной терапии и/или для иммуномодуляции, где указанный способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества искусственной молекулы нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК по любому из пп. 1-30, композиции или вакцины по любому из пп. 31-43 или набора по любому из пп. 44 или 45.
53. Способ усиления эффективности экспрессии искусственной молекулы нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК, содержащей по меньшей мере один кодирующий участок, кодирующий пептид или белок, предпочтительно по любому из пп. 11-16, где указанный способ включает (а) объединение указанного кодирующего участка с по меньшей мере одним 5UTR-элементом, происходящим из 5'UTR гена, выбранного из группы, состоящей из HSD17 В4, ASAH1, АТР5А1, МР68, NDUFA4, NOSIP, RPL31, SLC7A3, TUBB4B и UBQLN2 или из соответствующей РНК-последовательности, или ее гомолога, фрагмента или варианта;
(б) объединение указанного кодирующего участка с по меньшей мере одним 3 UTR-элементом, происходящим из 3'UTR гена, выбранного из группы, состоящей из PSMB3, CASP1, СОХ6В1, GNAS, NDUFA1 и RPS9 или из соответствующей РНК-последовательности, или ее гомолога, фрагмента или варианта; и
(в) получение искусственной молекулы нуклеиновой кислоты, предпочтительно РНК, по любому из пп. 1-30.
54. Способ идентификации комбинации 5'UTR и 3'UTR, способной усиливать эффективность экспрессии в желаемой ткани или клетке, происходящей из желаемой ткани, включающий:
(а) получение библиотеки искусственных молекул нуклеиновой кислоты ("тестируемые конструкции"), каждая из которых содержит репортерную открытую рамку считывания ("репортерную ORF"), кодирующую подлежащий детекции репортерный полинуклеотид, предпочтительно выбранный из люциферазы или eGFP, функционально связанный с одним из 5'UTRs и/или с одним из 3'UTRs, определенных в п. 3;
(б) обеспечение искусственной молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей указанную "репортерную ORF", функционально связанную с 5'и 3'UTRs, предпочтительно RPL32 и ALB7, в качестве "референсной конструкции";
(в) введение указанных тестируемых конструкций и референсной конструкции в желаемую ткань или клетку в условиях, подходящих для обеспечения их экспрессии;
(г) выявление и количественное определение экспрессии указанного полипептида с «репортерной ORF» тестируемых конструкций и с референсной конструкции;
(д) сравнение экспрессии полипептида с тестируемых конструкций и с референсной конструкции;
где тестируемые конструкции, характеризующиеся усиленной экспрессией полипептида по сравнению с референсной конструкцией, идентифицируют как способные усиливать эффективность экспрессии в желаемой ткани или клетки.