Печеночная недостаточность у животных при остром токсическом гепатите и оптимизация ее фитосредством на основе экстракта зубчатк

мечались следующие жалобы: боль в животе (в 100%), связь боли в животе с приемом пищи (в 72,4%), ощущение тяжести, переполнения желудка (в 20,4%), отрыжка (в 38,8%), изжога (в 44,7%), тошнота (в 44,4%), ощущение горечи во рту (в 20%).

При рентгеноскопии желудка и ДПК признаки дуоденальных нарушений были отмечены в 88,8% случаев. Наиболее часто встречающимися рентгенологическими симптомами нарушения дуоденальной проходимости были: увеличение размеров желудка — 33,4%, замедленный пассаж контрастной массы по ДПК — 58,8%, ускоренная эвакуация из желудка — 11,4%, антиперистальтика - 10,9%.

В связи с недостаточной информации рентгенологического осмотра желудка и ДПК мы дополнили этот метод зондовой (у 34) и беззондовой (у 9) релаксационной дуоденографией. На дуоденограммах признаками ХНДП были: артериомезентериальная компрессия нижней горизонтальной части ДПК, проксимальный перидуоденит, и тотальный периодуоденит.

Стандартный рентгенологический метод исследования желудка и ДПК дополнялся релаксационной дуоденографией, которая была проведена у 44 больных. Признаками ХНДП на дуоденограммах были: проксимальный перидуоденит — 51,6%, ДГР — 34,4%; рубцово-спаечный процесс в области дуоденоеюнального перехода — 30,3%.

При рентгенологическом исследовании желудочно-кишечного тракта с хорошими и удовлетворительными результатами отмечены достоверные улучшения эваку-аторной функции желудка, желчного пузыря и ДПК у 28 из 40 больных, что составило 70%.

В клинической картине у пациентов основной группы отмечалась положительная динамика, которая проявлялась: уменьшением боли в животе — 31,2%, уменьшением ощущения тяжести и переполнения желудка — 29,9%, уменьшением отрыжки — 17,1%, изжо-

ги — 5,3%, тошноты — 21,8%, ощущения горечи во рту — 7%.

Показатели внутридуоденального давления у пациентов основной группы были достоверно ниже, чем у контрольной и составляли 187,5±11,6 и 231±22,2 мм вод. ст. соответственно (рр=0,01).

Анализ отдаленных результатов лечения пациентов с дуоденальным стазом позволил выделить больных с хорошим, удовлетворительным и неудовлетворительными результатами в каждой исследуемой группе. У больных основной группы, хорошие результаты лечения наблюдались у 31% больных. Эти больные не предъявляли никаких жалоб, выполняли прежнюю работу. У 59% больных результаты лечения были удовлетворительными. У 28% из них клиническая картина проявилась тошнотой, тупыми болями в эпигастральной области и в правом подреберье. Неудовлетворительные результаты были получены у 10% пациентов основной группы. У этих больных сохранялись нелокализован-ные боли в животе, метеоризм, неустойчивый стул.

У пациентов контрольной группы хорошие результаты получены в 11%, удовлетворительные — в 37,7%, неудовлетворительные — в 52,3% случаев.

Таким образом, в комплекс предоперационного обследования больных с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, хроническим холециститом и желчекаменной болезнью необходимо включать рентгенологическое исследование, внутридуоденаль-ную манометрию и исследование секреторной функции желудка. Применение препарата «Полифитохол» в лечении больных с нарушением дуоденальной проходимости является более яркой альтернативой применения холинолитиков, так как он не только улучшает функцию ДПК, но и оказывает желчегонное, противовоспалительное и гепатозащитное действие, что немаловажно т.к. дуоденальный стаз и заболевание гепатобиллиар-ной зоны тесно взаимосвязаны.

литература

1. Витебский Я.Д., Кушниренко О.Ю., Ручкин В.И. Пути улучшения результатов гастрэктомий // Хирургия. — 1986. — № 1. — С. 39-41.

2. Дуденко Ф.И., Пляшкевич А.В., Зуев А.С. Результаты оперативного лечения больных с хронической непроходимостью двенадцатиперстной кишки // Клиническая хирургия. — 1989. — № 8. — С. 28-30.

3. Мирзаев А.П. Дуоденальный стаз. — Л., 1976. - 233 с.

4. Мищенко Ф.Ф., Чернобровый Н.П., Козак И.А. Влияние типа операции и сочетанной патологии на результаты лече-

ния больных с хроническими нарушениями дуоденальной проходимости // Вестник хирургии. — 1992. — Т. 148, № 4. — С. 23-27.

5. Панцырев Ю.М., Чернякевис С.А., Никитин М.В. Значение нарушений дуоденальной проходимости в хирургии пило-родуоденальных язв // Хирургия. — 1985. — № 2. — С. 10-14.

6. Репин В.Н., Дворянских В.Н., Овечкин А.В. Оперативное лечение хронической непроходимости двенадцатиперстной кишки после радикальных операций на желудке при язвенной болезни // Клиническая хирургия. — 1989. — № 8. — С. 30-32.

Адрес для переписки: Плеханов Александр Николаевич — д.м.н., профессор, зав. кафедрой факультетской хирургии БГУ,

Республика Бурятия, 670031, Улан-Удэ, ул. Павлова, 12, факс (3012) 21-76-78, тел. (3012) 23-37-24, 55-11-61

© убашеев и.о., Плеханов а.н., бальхаев и.м., лоншакова к.с., убашеева е.и. — 2009

печеночная недостаточность у животных при остром токсическом гепатите и оптимизация ее фитосредством на основе экстракта зубчатки красной

И.О. Убашеев, А.Н. Плеханов2,3, И.М. Бальхаев1-2, К.С. Лоншакова, Е.И. Убашеева ('Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, г. Улан-Удэ, директор — д.б.н., проф. Л.Л. Убугунов;

2Бурятский государственный университет, г. Улан-Удэ, ректор — д.п.н., проф., член-корр. РАО С.В. Калмыков;

3Бурятский филиал НЦРВХ СО РАМН, Улан-Удэ, директор — д.м.н. Е.Н. Цыбиков)

Резюме. В настоящей работе дана экспериментальная морфофункциональная оценка влияния фитосредства на основе экстракта зубчатки обыкновенной при остром токсическом гепатите у белых крыс на основании гистологических, гистохимических, гистоэнзимологических, цитологических, цитофотометрических, биохимических и статистических данных, позволивших авторам выявить основной механизм действия исследуемого средства, который сводился к ингибированию перекисного окисления липидов клеточных мембран и стабилизации их. ключевые слова: токсический гепатит, лечение, печеночная недостаточность.

hepatic failure in animals at acute toxic hepatitis and its optimization by phitodrugs

I.O. Ubasheyev, A.N. Plekhanov2,3, J.M. Balchayev1,2, K.S. Lonshakova, E.I. Ubasheyeva ('Institute of General and Experimental Biology, SD RAS, Ulan-Ude;

2Buryat State University, Ulan-Ude;

3Buryat Branch of SCRRS SB RAMS, Ulan-Ude)

Summary. The authors carried out morphofunctional estimation of the influence of a medicinal means of plant origin at acute toxic hepatitis in white rats on the basis histological, histochemical, histoenzymological, cytological, cytophotometri-cal, biochemical and statistical datas. The latter allowed the authors to reveal the basic mechanism of action of a researched means, which was in inhibition of lipids peroxidation of cells membranes and their stabilization.

Key words: toxic hepatitis, therapy, hepatic failure.

Известно, что печеночная недостаточность может осложнять у людей течение не только заболеваний печени, но и других органов и систем организма. Существует множество причин, которые могут обусловить развитие печеночной недостаточности. Ею могут осложняться почти все формы заболеваний печени, в том числе и при хирургических заболеваниях. Интоксикации гепатотропными веществами (четыреххлористый углерод, бензол, фторо-тан), лекарственными препаратами (парацетамол, изо-ниазид, антидепрессанты, нестероидные противовоспалительные средства, тетрациклин и др.) могут привести к симптомокомплексу недостаточности печени [6].

Целью настоящей работы явилась оценка гепато-протекторного действия при печеночной недостаточности у белых крыс на фоне острого ССЪ4-гепатита экстракта зубчатки красной.

материалы и методы

Экстракт зубчатки красной получен по ресурсосберегающей технологии и представлял собой легкорастворимый аморфный порошок коричневого цвета.

Острый токсический гепатит у белых крыс вызывали путем введения четыреххлористого углерода (ССЪ4) в виде 50% масляного раствора в объеме 0,4 мл/100 г массы животного, трехкратно через день, подкожно.

Печень убитых животных подвергали исследованию на 7, 14, 21-е сутки с начала эксперимента. Испытуемое лекарственное средство вводили в течение 14 дней вну-трижелудочно в дозе 0,3 г/кг массы крысы. В качестве препарата сравнения животным вводили аллохол в дозе 80 мг/кг. Животным контрольной группы вводили только раствор ССЪ4. Всего в опытах использовано 96 белых беспородных крыс с массой 170-200 г.

Индуцирующую способность природных лекарственных средств на содержание цитохрома Р-450 в печени исследовали по методике И.И. Карузиной и А.И. Арчакова [1]. Количественное определение фермента осуществляли на спектрофотометре «Спекорд М-40» (Германия) по дифференциальному спектру обработанных окисью углерода проб, используя коэффициент молярной экстинции 104 мМ-1 см-1.

Цифровые данные, полученные в опытах этой серии, обрабатывали по Е.В. Монцевичюте-Эрингене [3], параметрическому критерию (I) Сть юдента - Фишера [7].

Для взятия гистоматериала убивали белых крыс декапитацией. Кусочки печени фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Депарафиниро-ванные гистологические срезы органа для оценки морфологической картины окрашивали по общепринятой методике гематоксилин - эозином и пикрофуксином по Ван-Гизону [2]. Для оценки состояния перекисного окисления липидов выявляли содержание в печени пигмента липофусцина по Шморлю [5].

В свежезамороженных срезах печени, полученных намикротом-криостатеМК-25, определяли количество гликогена ШИК-реакцией, нейтральных жиров — суданом черным «Б», активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ-азы) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ-азы) — по На-хласу, активность щелочной и кислой фосфатаз — по Гомори [5].

Микроскопирование и микрофотографирование гистологических, гистохимических препаратов осуществляли на немецком микроскопе «Мойк» со встроенной видеокамерой и с помощью ряда прикладных программ.

Результаты и обсуждение

В патогенезе экспериментального токсического гепатита у белых крыс в наших опытах пусковой реакцией в развитии ряда наблюдавшихся метаболических нарушений следует считать циркуляторную (в результате нарушения местного кровообращения) и гистоток-сическую (вследствие непосредственного воздействия токсического агента — ССЪ4 на ферментные системы печеночной клетки) гипоксии.

Основным механизмом в развитии патологии в печени подопытных животных следует считать усиление свободнорадикального окисления липидов (СВРОЛ) в организме, которое приводит к дестабилизации клеточных мембран из-за нарушения их проницаемости.

Дестабилизация клеточных мембран вызывала цитолиз гепатоцитов в печени подопытных крыс. Важными последствиями синдрома цитолиза следует считать отек ткани, дистрофию в паренхиме печени. Морфоло-

Таблица 1

Динамика содержания гликогена

Условия опыта Срок исследования, сутки

7 14 21 28

Интактные животные, п=7 2,4±0,004 2,3±0,05 2,3±0,04 2,4±0,02

Контроль (^Ц), п=7 1,7±0,06 1,4±0,07 1,6±0,04 1,9±0,03

ГСЦ + экстракт зубчатки красной, п=7 1,9±0,04 2,0±0,04* 2,3±0,03* 2,4±0,03*

ГСЦ + аллохол, п=7 1,8±0,04 1,9±0,04* 1,8±0,03 2,0±0,03

Примечание: * - значимость разницы между опытом и контролем во всех случаях 0,05.

Таблица 2

Показатели митотической активности гепатоцитов крыс при остром токсическом гепатите (М±т), %%

Условия опыта Сроки исследования, сутки

7 14 21 28

CCI_4 (контроль) 0,3±0,002 0,7±0,002 0,7±0,002 0,3±0,001

CCI_4 + аллохол 2,0±0,002 1,0±0,003 1,0±0,002 0,7±0,002

CCI_4 + экстракт зубчатки красной 2,7±0,003 2,3±0,004 2,0±0,004 0,7±0,002

Примечание: значимость разницы между опытом и контролем во всех случаях <0,01.

Таблица 3

Показатели регенерации в печени белых крыс при токсическом гепатите

Условия опыта Показатели по суткам исследования

7-е 14-е 21-е 28-е

Число двуядерных клеток

CCL4 + (контроль) 10,6±0,001 22,3±0,02 21,0±0,02 18,3±0,02

CCL4 + аллохол 18,6±0,004 19,6±0,01 19,0±0,01 26,0±0,02

CCL4 + экстракт зубчатки красной 26,7± 0,09 29,0±0,01 27,3±0,02 21,3±0,02

Число гипертрофированных клеток

CCL4 + (контроль) 10,6±0,04 22,4±0,02 24,0±0,01 27,6±0,07

CCL4 + аллохол 37,6±0,03 36,3±0,01 27,3±0,02 28,5±0,07

CCL4 + экстракт зубчатки красной 59,0±0,03 44,0±0,01 28,0±0,03 22,3±0,06

Примечание: разница между опытом и контролем значима (р<0,05).

гически подобные изменения проявлялись в виде пе-риваскулярного, перицеллюлярного отека, экссудации с эмиграцией клеточных элементов, гидропической, зернистой и жировой дистрофией печени крыс.

Фармакотерапия животных с ССЪ4 — гепатитом экстрактом зубчатки красной обеспечивала нормализацию морфофункционального состояния печени. Следует предположить, что он способен влиять на молекулярные механизмы повреждения и восстановления печени, оказывая воздействие на клеточные мембраны, конкретнее — на процессы свободнорадикального окисления липидов.

Фармакологическое действие испытуемого фитос-редства вытекает из важной биологической роли поли-фенольных комплексов в биохимических процессах в живой клетке [9].

О преимущественном вкладе растительных фенолов в стимуляцию восстановительных процессов в поврежденных органах гепатобилиарной системы свидетельствуют результаты опытов С.М. Николаева [4] и И.О. Убашеева [8] в исследованиях с введением животным только полифенольного комплекса из растительных средств.

Фенольные соединения фитопрепаратов, взаимодействуя со свободными радикалами, резко замедляют процесс липопереокисления в организме в результате

образования малоактивных фенольных радикалов.

Антиокислительное влияние экстракта зубчатки красной, вследствие ингибирую-щего влияния на перекисное окисление липидов (ПОЛ), нормализует липидный слой мембран, стабилизируя их. Нормализация проницаемости мембран, улучшение микроциркуляции, ускорение утилизации токсичных переокисленных продуктов (МДА, липофусцина) в комплексе обусловливают предотвращение грубой деструкции печени и стимуляцию в ней регенераторных процессов.

У животных, которым осуществлено курсовое введение испытуемого лекарственного средства, выявлены снижение дистрофических и отечных изменений, нормализация обмена веществ клеточной энергетики (активности окислительно-восстановительных ферментов: СДГ-, ЛДГ-азы, щелочной и кислой фосфа-таз).

Морфологически стимулирующее влияние на восстановление структуры печени крыс природных средств сводилось к сокращению экссудации с эмиграцией клеточных элементов (клеточной инфильтрации), снижению периваскулярного и перицеллюлярного отека, уменьшению вакуольной, зернистой, жировой дистрофии, повышению содержания гликогена (табл. 1), нормализации содержания и понижению скорости инактивации восстановленного цитохрома Р-450, что способствовало стимуляции митоза в последних, появлению гипертрофированных и двуядерных гепатоцитов как проявлений регенерации (табл. 2, 3).

Таким образом, все вышесказанное свидетельствует о перспективности использования экстракта зубчатки красной в комплексной терапии печеночной недостаточности у больных в условиях клиники, что позволит успешно проводить лечебные мероприятия по реабилитации их после различных оперативных вмешательств при патологии печени.

литература

1. Карузина И.И., Арчаков А.И. Выделение микросомной фракции печени и характеристика ее окислительных систем // Современные методы в биохимии. — С. 49-62.

2. Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники. — М., 1969.

3. Монцевичюте-Эрингене Е.В. Упрощенные математико-статистические методы в медицинской исследовательской работе // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1964. — № 4. — С. 71-78.

4. Николаев С.М. Растительные лекарственные препараты при повреждениях гепатобилиарной системы. — Новосибирск, 1992. — 155 с.

5. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная. — М., 1962. — 962 с.

6. Плеханов А.Н. Прогнозирование, профилактика и лечение печеночной недостаточности после резекций печени (клинико-экспериментальное исследование): автореф. дисс. ... д-ра мед. наук. — Иркутск, 2002. — 33 с.

7. Плохинский Н.А. Алгоритмы биометрии. — М., 1980. — 281 с.

8. Убашеев И.О. Природные лекарственные средства при повреждениях органов и тканей. — Улан-Удэ: Изд-во БНЦ СО РАН, 1998. — 224 с.

9. Reitman S., Frenkel S. A colorimetry method for the determination of serum glutamic oxalacetic and glutamic pyruvie transaminases // Amer. J. Clin. Path. — 1957. — Vol. 28. — 1. — P. 55-59.

Адрес для переписки:

Убашеев Иннокентий Оширович — д.б.н., профессор, зав. лабораторией безопасности биологически активных веществ института общей и экспериментальной биологии СО РАН г. Удан-Удэ; Плеханов Александр Николаевич — д.м.н., профессор, главный хирург Республики Бурятия, 670000 г. Улан-Удэ, Дом Правительства, 1, Министерство здравоохранения РБ, тел. (83012) 551161, 214920, 656076; e-mail: plehanov.a@mail.ru; Бальхаев Илларион Митрофанович — к.м.н., зам. декана медицинского факультета по лечебной работе БГУ