Планшет для клеточных культур, способ его получения и способ обнаружения вещества

1. Планшет для клеточных культур, содержащий одну или более лунок для культуры клеток, включающих в себя по меньшей мере один барьер для деления лунки на по меньшей мере два отделения, где барьер содержит гидрогель нановолокнистой целлюлозы, например, где толщина стенки барьера находится в диапазоне 0,5-2 мм.
2. Планшет для клеточных культур по п. 1, где гидрогель нановолокнистой целлюлозы содержит 0,8-2,5% (масс./масс.) нановолокнистой целлюлозы, предпочтительно 1,0-2,1% (масс./масс.).
3. Планшет для клеточных культур по п. 1 или 2, содержащий адгезионный агент между планшетом для клеточных культур и гидрогелем нановолокнистой целлюлозы, такой как адгезионный агент на основе коллагена, адгезионный агент на основе фибриногена, адгезионный агент на основе желатина или адгезионный агент на основе лизина, например поли-D-лизин или желатин.
4. Планшет для клеточных культур по любому из пп. 1-3, где по меньшей мере один барьер окружает по меньшей мере одну область на лунке для культуры клеток, например где барьер находится в форме окружности.
5. Планшет для клеточных культур по любому из пп. 1-4, где нановолокнистая целлюлоза при диспергировании в воде обеспечивает вязкость при нулевом сдвиге 1000-100000 Па⋅с, например в диапазоне 5000-50000 Па⋅с, и напряжение пластического течения в диапазоне 1-50 Па, например в диапазоне 3-15 Па, определенное с помощью ротационного реометра при консистенции 0,5% (масс/масс.) по массе в водной среде при 22°С±1°С и/или где нановолокнистая целлюлоза имеет средний диаметр волокон 200 нм или менее, например в диапазоне 1-200 нм.
6. Планшет для клеточных культур по любому из пп. 1-5, где нановолокнистая целлюлоза выбрана из немодифицированной нановолокнистой целлюлозы, анионно-модифицированной нановолокнистой целлюлозы и окисленной нановолокнистой целлюлозы, такой как нановолокнистая целлюлоза, окисленная 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-ил)оксилом (TEMPO).
7. Планшет для клеточных культур по любому из пп. 1-6, где по меньшей мере одно из отделений содержит гель с более низкой концентрацией по сравнению с барьером, так что гидрогель нановолокнистой целлюлозы имеет более низкую концентрацию нановолокнистой целлюлозы по сравнению с барьером, такую как концентрация 0,7% (масс./масс.) или менее, например 0,2-0,7% (масс./масс.).
8. Планшет для клеточных культур по любому из пп. 1-7, где лунка содержит один тип клеток в одном отделении и возможно такой (ие) же и/или другой(ие) тип (ы) клеток в по меньшей мере одном другом отделении, такие как клетки, выбранные из клеток печени, таких как гепатоциты, например клетки гепатоцеллюлярной карциномы, эндотелиальных клеток, адипоцитов, кардиомиоцитов, почечных клеток, иммунных клеток, таких как макрофаги и моноциты, или нервных клеток, таких как клетки нейробластомы, и стволовых клеток.
9. Способ получения планшета для клеточных культур по любому из пп. 1-8, включающий
- обеспечение планшета для культур клеток, содержащего одну или более лунок для культур клеток,
- обеспечение водной дисперсии, содержащей нановолокнистую целлюлозу, предпочтительно 0,8-2,5% (масс./масс.) нановолокнистой целлюлозы, более предпочтительно 1,0-2,1% (масс./масс.),
- формирование по меньшей мере одного барьера из нановолокнистой целлюлозы в по меньшей мере одной лунке для культуры клеток для деления лунки на по меньшей мере два отделения.
10. Способ по п. 9, в котором формирование по меньшей мере одного барьера включает в себя приготовление барьера с помощью аддитивной технологии, например путем использования кольцевого сопла.
11. Способ по п. 9 или 10, включающий покрытие одной или более лунок для культуры клеток адгезионным агентом перед получением, таким как формование или нанесение, по меньшей мере одного барьера, например таким адгезионным агентом, как адгезионный агент на основе коллагена, адгезионный агент на основе фибриногена, адгезионный агент на основе желатина или адгезионный агент на основе лизина, например поли-D-лизин или желатин.
12. Способ обнаружения вещества, включающий
- обеспечение планшета для клеточных культур по любому из пп. 1-8, содержащего первую клетку в первом отделении, и
- обнаружение по меньшей мере одного вещества в другом отделении.
13. Способ по п. 12, включающий
- внесение представляющего интерес вещества в отделение, например в первое отделение;
- инкубацию клетки в течение промежутка времени, достаточного для ответа клетки на представляющее интерес вещество;
- обнаружение в другом отделении по меньшей мере одного вещества, например определение количества по меньшей мере одного вещества, такого как представляющее интерес вещество, секретируемое клеткой вещество, продукт взаимодействия представляющего интерес вещества или другое вещество, возможно также обнаружение по меньшей мере одного вещества и/или реакции клетки в первом отделении, и предпочтительно
- оценку воздействия вещества на клетку на основании обнаруженных(ого) веществ(а) и/или реакции клетки.
14. Способ по п. 13, включающий
- дополнительное обеспечение второй клетки во втором отделении;
- обнаружение во втором отделении по меньшей мере одного вещества, секретируемого второй клеткой, и/или реакции второй клетки, и
- оценку воздействия представляющего интерес вещества на первую клетку и/или на вторую клетку на основании обнаруженных(ого) веществ(а) секретируемых(ого) второй клеткой, и/или реакции второй клетки.
15. Способ по любому из пп. 12-14, где первые клетки и/или вторые клетки выбраны из клеток печени, таких как гепатоциты, например клетки гепатоцеллюлярной карциномы, эндотелиальных клеток, адипоцитов, кардиомиоцитов, почечных клеток, иммунных клеток, таких как макрофаги и моноциты, или нервных клеток, таких как клетки нейробластомы, и стволовых клеток.