СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ ЛОВУШЕК В МУКОЗАЛЬНЫХ СЕКРЕТАХ

Способ обнаружения нейтрофильных ловушек в мукозальных секретах, отличающийся тем, что 0,1 мл нативного препарата окрашивают 0,1 мл равнокомпонентной смеси синьки Эванса в концентрации 1:8000 и красителя Sytox Green в концентрации 1:500, инкубируют в течение 5 мин в темноте, учитывают с помощью люминесцентной микроскопии, используя фильтры, обеспечивающие возбуждающий свет с длиной волны не более 490 нм и эмиссию с длиной волны 520 нм, обнаруживают жизнеспособные клетки ярко-оранжевого цвета, клетки с зеленым ядром и ярко-оранжевой цитоплазмой (по-видимому, подвергшиеся апоптозу), погибшие клетки зеленого цвета и свободнолежащие ярко-зеленые волокна, представляющие собой нити ДНК нейтрофила (нейтрофильные ловушки), проводят подсчет 100 структур разных групп и рассчитывают процентное содержание каждой морфологической единицы, при наличии в мазках нейтрофилов с сегментированным ядром рассчитывают активность фагоцитоза (%) - число нейтрофилов содержащих бактериальные клетки в цитоплазме из 100 подсчитанных гранулоцитов, интенсивность фагоцитоза (усл. ед.) - число бактерий в 100 подсчитанных нейтрофилах в пересчете на 1 клетку, при обнаружении сетеподобных структур оценивают число нейтрофильных ловушек (%) - количество нейтрофильных ловушек, содержащих бактериальные клетки, из 100 подсчитанных сетеподобных структур и индекс нейтрофильной ловушки (усл. ед.) - число бактерий в 100 подсчитанных ловушках в пересчете на 1 структуру, полученные результаты используют для оценки противоинфекционной защиты.