АНТИТЕЛА ПРОТИВ EPCAM И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Антитело, которое содержит:
тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 31 и SEQ ID NO: 32, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 12.
2. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2.
3. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
4. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 31, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
5. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
6. Антитело по любому из пп. 1-5, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой фрагмент антитела, который выбран из группы, состоящей из  Fab, Fab’, F(ab’)2, scFv, dsFv, ds-scFv, димеров, минител, диател, фрагментов биспецифичного антитела, скелетов, отличных от скелетов иммуноглобулина, мультимеров и любых комбинаций указанных фрагментов.
7. Антитело по любому из пп. 1-5, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой Fab-фрагмент антитела, и указанные легкая цепь и тяжелая цепь связаны ковалентной связью.
8. Антитело по п. 7, отличающееся тем, что указанная ковалентная связь представляет собой дисульфидную связь.
9. Антитело по любому из пп. 1-6, отличающееся тем, что указанное антитело связывается с антигеном раковой клетки.
10. Антитело по п. 9, отличающееся тем, что указанный антиген раковой клетки представляет собой молекулу адгезии эпителиальной клетки (EpCAM).
11. Композиция, содержащая антитело по любому из пп. 1-10, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, носитель, буфер или стабилизатор.
12. Иммуноконъюгат, содержащий антитело, присоединенное к эффекторной молекуле, причем указанное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 31 и SEQ ID NO: 32, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 12.
13. Иммуноконъюгат по п. 12, отличающийся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2.
14. Иммуноконъюгат по п. 12, отличающийся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
15. Иммуноконъюгат по п. 12, отличающийся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 31, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
16. Иммуноконъюгат по п. 12, отличающийся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
17. Иммуноконъюгат по любому из пп. 12-16, отличающийся тем, что указанное антитело представляет собой фрагмент антитела, который выбран из группы, состоящей из Fab, Fab’, F(ab’)2, scFv, dsFv, ds-scFv, димеров, минител, диател, фрагментов биспецифичного антитела, скелетов, отличных от скелета иммуноглобулина, мультимеров и любых комбинаций указанных фрагментов.
18. Иммуноконъюгат по любому из пп. 12-16, отличающийся тем, что указанное антитело представляет собой фрагмент антитела Fab, и указанные легкая цепь и тяжелая цепь связаны ковалентной связью.
19. Иммуноконъюгат по п. 18, отличающийся тем, что указанная ковалентная связь представляет собой дисульфидную связь.
20. Иммуноконъюгат по любому из пп. 12-19, отличающийся тем, что указанная эффекторная молекула выбрана из группы, состоящей из  радиоактивного изотопа, противоопухолевого средства, иммуномодулирующего средства, модификатора биологического ответа, лектина, токсина, хромофора, флуорофора, хемилюминесцирующего соединения, фермента, иона металла и любых комбинаций указанных средств.
21. Иммуноконъюгат по любому из пп. 12-19, отличающийся тем, что указанная эффекторная молекула представляет собой токсин, который выбран из группы, состоящей из абрина, модессина, вискумина, гелонина, буганина, сапорина, рицина, цепи А рицина, бриодина, люффина, момордина, рестриктоцина, экзотоксина A Pseudomonas, коклюшного токсина, столбнячного токсина, ботулинического токсина, токсина шигеллы, холерного токсина, дифтерийного токсина и любых комбинаций указанных токсинов.
22. Иммуноконъюгат по любому из пп. 12-19, отличающийся тем, что указанное антитело связывается с антигеном раковой клетки.
23. Иммуноконъюгат по п. 22, отличающийся тем, что указанный антиген раковой клетки представляет собой молекулу адгезии эпителиальной клетки (EpCAM).
24. Иммуноконъюгат по любому из пп. 12-19, отличающийся тем, что указанная эффекторная молекула представляет собой экзотоксин A Pseudomonas (SEQ ID NO: 3).
25. Иммуноконъюгат по любому из пп. 12-19, отличающийся тем, что указанная эффекторная молекула представляет собой токсин буганин (SEQ ID NO: 4).
26. Иммуноконъюгат по любому из пп. 12-19, отличающийся тем, что указанная эффекторная молекула представляет собой токсин буганин, который выбран из SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 42 и SEQ ID NO: 43.
27. Композиция, содержащая иммуноконъюгат по любому из пп. 12-26 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, носитель, буфер или стабилизатор.
28. Применение иммуноконъюгата при лечении субъекта, страдающего от рака, причем указанный иммуноконъюгат содержит антитело, присоединенное к эффекторной молекуле, причем указанное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 31 и SEQ ID NO: 32, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 12.
29. Применение по п. 28, отличающееся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2.
30. Применение по п. 28, отличающееся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
31. Применение по п. 28, отличающееся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 31, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
32. Применение по п. 28, отличающееся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
33. Применение по любому из пп. 28-32, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой фрагмент антитела, который выбран из группы, состоящей из  Fab, Fab’, F(ab’)2, scFv, dsFv, ds-scFv, димеров, минител, диател, фрагментов биспецифичного антитела, скелетов, отличных от скелета иммуноглобулина, мультимеров и любых комбинаций указанных фрагментов.
34. Применение по любому из пп. 28-33, отличающееся тем, что указанная эффекторная молекула выбрана из группы, состоящей из  радиоактивного изотопа, противоопухолевого средства, иммуномодулирующего средства, модификатора биологического ответа, лектина, токсина, хромофора, флуорофора, хемилюминесцирующего соединения, фермента, иона металла и любых комбинаций указанных средств.
35. Применение по любому из пп. 28-34, отличающееся тем, что указанный иммуноконъюгат находится в форме для парентерального введения, которая выбрана из группы, состоящей из  подкожной, внутримышечной, интраперитонеальной, внутриполостной, интратекальной, внутриопухолевой, чрескожной и внутривенной инъекции.
36. Применение по любому из пп. 28-35, отличающееся тем, что указанный иммуноконъюгат находится в лекарственной форме, составляющей от приблизительно 0,01 мг/кг/дозу до приблизительно 2000 мг/кг/дозу.
37. Применение по любому из пп. 28-36, дополнительно включающее применение одного или более  противораковых средств, отличающееся тем, что указанные противораковые средства вводят совместно, одновременно или последовательно с иммуноконъюгатом.
38. Применение по п. 37, отличающееся тем, что указанные противораковые средства выбраны из тамоксифена, торемифена, ралоксифена, дролоксифена, иодоксифена, мегестрола ацетата, анастрозола, летразола, боразола, эксеместана, флутамида, нилутамида, бикалутамида, ципротерона ацетата, гозерелина ацетата, лупролида, финастерида, герцептина, метотрексата, 5-фторурацила, цитозина арабинозида, доксорубицина, дауномицина, эпирубицина, идарубицина, митомицина-C, дактиномицина, митрамицина, цисплатина, карбоплатина, мелфалана, хлорамбуцила, бусульфана, циклофосфамида, ифосфамида, нитрозомочевины, тиотефана, винкристина, таксола, таксотера, этопозида, тенипозида, амсакрина, иринотекана, топотекана, эпотилонов, Ирессы, Тарцевы, ингибиторов ангиогенеза, ингибиторов EGF, ингибиторов VEGF, ингибиторов CDK, цитокинов, ингибиторов Her1 и Her2 и моноклональных антител.
39. Применение по любому из пп. 28-38, отличающееся тем, что указанный рак выбран из группы, состоящей из рака легких, рака желудка, рака почек, рака щитовидной железы, рака молочной железы, рака мочевого пузыря, рака яичников, рака толстой и прямой кишки, рака головы и шеи, гепатоклеточной карциномы, рака пищевода, поджелудочной железы и предстательной железы.
40. Способ обнаружения или мониторинга рака у субъекта, включающий следующие этапы:
- осуществление контакта исследуемого образца, отобранного у указанного субъекта, с антителом с образованием комплекса антитело-антиген, причем указанное антитело содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепи, которая выбрана из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 31 и SEQ ID NO: 32, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 12;
- измерение количества комплекса антитело-антиген в исследуемом образце; и
- нормирование результатов относительно контроля.
41. Способ визуализации опухоли у субъекта, причем указанный способ включает:
-введение указанному субъекту антитела, которое содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 31 и SEQ ID NO: 32, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 12; и
-обнаружение антитела посредством визуализации in vivo.
42. Способ по п. 41, отличающийся тем, что указанное антитело дополнительно содержит эффекторную молекулу, которая выбрана из группы, состоящей из  радиоактивного изотопа, хромофора, флуорофора, хемилюминесцирующего соединения, фермента, иона металла и любых комбинаций указанных средств.
43. Способ по п. 41 или 42, отличающийся тем, что указанная визуализация in vivo выбрана из группы, состоящей из визуализации с применением флуоресценции в ближней инфракрасной области (NIRF, near-infrared fluorescence), визуализации на основе отражения флуоресценции (FRI, fluorescence reflectance imaging), опосредованной флуоресценцией томографии (FMT, fluorescence-mediated tomography), позитронно-эмиссионной томографии (PET, positron emission tomography), однофотонной эмиссионной томографии (SPECT, single photon emission tomography), магнитно-резонансной визуализации (MRI, magnetic resonance imaging), PET в сочетании с компьютерной томографией (PET/CT), PET в сочетании с магнитно-резонансной визуализацией (PET/MRI) и любых комбинаций указанных способов.
44. Способ по любому из пп. 41-43, отличающийся тем, что указанное антитело представляет собой фрагмент антитела, который выбран из группы, состоящей из  Fab, Fab’, F(ab’)2, scFv, dsFv, ds-scFv, димеров, минител, диател, фрагментов биспецифичного антитела, скелетов, отличных от скелета иммуноглобулина, мультимеров и любых комбинаций указанных фрагментов.
45. Способ по любому из пп. 41-43, отличающийся тем, что указанное антитело представляет собой Fab-фрагмент антитела, и  указанные легкая цепь и тяжелая цепь связаны ковалентной связью.
46. Способ по любому из пп. 41-45, дополнительно включающий резекцию опухоли или части органа после визуализации in vivo.
47. Способ лечения субъекта, страдающего от рака, причем указанный способ включает:
введение терапевтически эффективного количества иммуноконъюгата, содержащего антитело, присоединенное к эффекторной молекуле, причем указанное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 31 и SEQ ID NO: 32, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, которая выбрана из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 12.
48. Способ по п. 47, отличающийся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2.
49. Способ по п. 47, отличающийся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 11, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
50. Способ по п. 47, отличающийся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 31, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
51. Способ по п. 47, отличающийся тем, что указанная тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 32, и указанная легкая цепь содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 12.
52. Способ по любому из пп. 47-51, отличающийся тем, что указанное антитело представляет собой фрагмент антитела, который выбран из группы, состоящей из Fab, Fab’, F(ab’)2, scFv, dsFv, ds-scFv, димеров, минител, диател, фрагментов биспецифичного антитела, скелетов, отличных от скелета иммуноглобулина, мультимеров и любой комбинации указанных фрагментов.
53. Способ по любому из пп. 47-52, отличающийся тем, что указанная эффекторная молекула выбрана из группы, состоящей из  радиоактивного изотопа, противоопухолевого средства, иммуномодулирующего средства, модификатора биологического ответа, лектина, токсина, хромофора, флуорофора, хемилюминесцирующего соединения, фермента, иона металла и любой комбинации указанных средств.
54. Способ по любому из пп. 47-53, отличающийся тем, что введение указанного иммуноконъюгата осуществляют посредством парентерального введения, которое выбрано из группы, состоящей из подкожной, внутримышечной, интраперитонеальной, внутриполостной, интратекальной, внутриопухолевой, чрескожной и внутривенной инъекции.
55. Способ по любому из пп. 47-54, отличающийся тем, что введение указанного иммуноконъюгата осуществляют в дозе от приблизительно 0,01 мг/кг/дозу до приблизительно 2000 мг/кг/дозу.
56. Способ по любому из пп. 47-55, отличающийся тем, что указанный иммуноконъюгат вводят совместно, одновременно или последовательно с одним или более противораковыми средствами.
57. Способ по п. 56, отличающийся тем, что указанные противораковые средства выбраны из тамоксифена, торемифена, ралоксифена, дролоксифена, иодоксифена, мегестрола ацетата, анастрозола, летразола, боразола, эксеместана, флутамида, нилутамида, бикалутамида, ципротерона ацетата, гозерелина ацетата, лупролида, финастерида, герцептина, метотрексата, 5-фторурацила, цитозина арабинозида, доксорубицина, дауномицина, эпирубицина, идарубицина, митомицина-C, дактиномицина, митрамицина, цисплатина, карбоплатина, мелфалана, хлорамбуцила, бусульфана, циклофосфамида, ифосфамида, нитрозомочевины, тиотефана, винкристина, таксола, таксотера, этопозида, тенипозида, амсакрина, иринотекана, топотекана, эпотилонов, Ирессы, Тарцевы, ингибиторов ангиогенеза, ингибиторов EGF, ингибиторов VEGF, ингибиторов CDK, цитокинов, ингибиторов Her1 и Her2 и моноклональных антител.
58. Способ по любому из пп. 47-57, отличающийся тем, что указанный рак выбран из группы, состоящей из  рака легких, рака желудка, рака почек, рака щитовидной железы, рака молочной железы, рака мочевого пузыря, рака яичников, рака толстой и прямой кишки, рака головы и шеи, гепатоклеточной карциномы, рака пищевода, поджелудочной железы и предстательной железы.