Рекомбинантный штамм Herpesvirus Saimiri, предназначенный для получения популяций иммортализованных аутологичных Т-лимфоцитов, экспрессирующих парные химерные рецепторы против опухолевых антигенов CD44 и CD133

1. Гетерологичная ДНК, предназначенная для введения в геном вируса “дикого” штамма Herpesvirus Saimiri, включающая в себя генетические последовательности, кодирующие парные химерные рецепторы против опухолевых антигенов CD44 (SEQ ID NO 1) и CD133 (SEQ ID NO 2).
2.  ДНК по п.1, в которой в последовательность, кодирующая первый активирующий химерный рецептор, включает в себя N-концевую сигнальную последовательность рецептора CD8, а также участки, кодирующие антиген-связывающий домен на основе моноклонального одноцепочечного VHH-антитела, специфичного к заданныму антигену №1, спейсерную область, представленную 12 аминокислотной последовательностью шарнирного домена иммуноглобулина G4, трансмембранный домен CD28 и сигнальный домен CD3zeta; последовательность, кодирующая второй костимуляторный химерный рецептор включает в себя N-концевую сигнальную последовательность рецептора CD8, а также участки, кодирующие антиген-связывающий домен на основе моноклонального одноцепочечного VHH-антитела, специфичного к антигену №2, шарнирную область длиной 228 аминокислот, трансмембранный и сигнальный домены рецептора CD28, а также сигнальный домен рецептора CD137.
3. ДНК по п.1, в которой участок гетерологичной ДНК, предназначенный для введения в геном вируса “дикого” штамма Herpesvirus Saimiri, фланкирован участками протяженностью 300-900 пар нуклеотидных оснований, гомологичных тому участку генома Herpesvirus Saimiri, в который производится интеграция целевого фрагмента посредством гомологичной рекомбинации (SEQ ID NO 3).
4. ДНК по п.3, в которой в качестве последовательности протяженностью 300-900 пар нуклеотидных оснований, гомологичной участку генома Herpesvirus Saimiri, используется последовательность вирусного гена vCD59 (SEQ ID NO 4).
5. ДНК по п. 1, в которой в состав участка гетерологичной ДНК, предназначенного для введения в геном “дикого” штамма вируса Herpesvirus Saimiri, входит последовательность, кодирующая флуоресцентный белок (SEQ ID NO 5).
6. Рекомбинантный штамм Herpesvirus Saimiri, предназначенный для быстрого получения пролиферирующих популяций аутологичных Т-лимфоцитов, экспрессирующих парные химерные антигенные рецепторы против опухолевых антигенов, содержащий в своем геноме последовательность ДНК по пп. 1-5.