Распределение генов фолатного цикла в популяции подростков г. Барнаула Алтайского края

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

4. Приказ Минздрава РФ от 30.07.2001 № 291 (ред. от 15. 11. 2001) «О мерах по предупреждению распространения инфекций, передаваемых половым путем» (вместе с «Положением об организации деятельности республиканского, краевого, областного, окружного кожно-венерологического диспансера»).

5. Таранушенко, Т.Е. Клинические проявления раннего врожденного сифилиса в неонатальном периоде /Таранушенко Т.Е., Матыски-на Н.В. //Вопросы современной педиатрии. - 2006. - № 5. - С. 372.

6. Herremans, T. A review of diagnostic tests for congenital syphilis in newborns /Herremans T., Kortbeek L., Notermans D.W. //Eu. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. - 2010. - V. 29, N 5. - P. 495-501.

7. Kruger, C. Congenital syphilis: still a serious, under-diagnosed threat for children in resource-poor countries /Kruger C., Malleyeck I. //World J. Pediatr. - 2010. - V. 6(2). - P. 125-131.

Статья поступила в редакцию 26.06.2014 г.

Строзенко Л.А., Гордеев В.В., Лобанов Ю.Ф., Момот А.П., Воронина Е.Н.

Алтайский государственный медицинский университет, Гематологический научный центр Минздрава России, Алтайский филиал,

г. Барнаул,

Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН,

г. Новосибирск

РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕНОВ ФОЛАТНОГО ЦИКЛА В ПОПУЛЯЦИИ ПОДРОСТКОВ Г. БАРНАУЛА АЛТАЙСКОГО КРАЯ

Материалом для изучения распределения полиморфных вариантов генов фолатного цикла послужили образцы ДНК 1306 подростков (580 мальчиков и 726 девочек) в возрасте 15-16 лет. Результаты исследования у подростков носительс-тва полиморфных вариантов генов MTHFR (677C>T; 1298А>С), MTR (А2756в А>в), MTRR (А66в A>G) позволяют сделать следующее заключение: гетерозиготный полиморфный вариант 677 СТ гена MTHFR встречается у 40,5 % школьников и лишь 9,0% являются носителями гомозиготного варианта 677 ТТ гена MTHFR. У девочек частота встречаемости полиморфного варианта A2756G гена MTR в гомозиготном состоянии и полиморфизма A66G гена MTRR в гетерозиготном состоянии статистически значимо выше, чем у мальчиков подростков. Выявлен высокий процент гомозиготного генотипа 66GG (41,8 %) и частоты аллеля 66G гена MTRR (56,9 %), что дает основание предположить адаптивное преимущество полиморфного варианта А66G в процессе эволюции.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: полиморфные варианты генов; фолатный цикл; подростки; гетерозиготность; генное разнообразие.

Strozenko L.A., Gordeev V.V., Lobanov Yu.F., Momot A.P., Voronina E.N.

Altai State Medical University,

Hematology Research Center, Barnaul

Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine, Novosibirsk

DISTRIBUTION OF GENES IN THE FOLATE CYCLE ADOLESCENT POPULATION OF BARNAUL, ALTAI REGION

Material for studying the distribution of polymorphic variants of the genes of folate cycle served as DNA samples in 1306 adolescents (580 boys and 726 girls) aged 15-16 years. Results of the study in adolescents carrier polymorphic variants of genes MTHFR (677C>T; 1298A>C), MTR (A2756G A>G), MTRR (A66G A>G) leads to the following conclusion: heterozygous polymorphic variant 677 CT MTHFR gene occurs in 40,5 % of students and only 9,0 % are carriers of the homozygous variant 677 TT gene MTHFR. In girls, the incidence of polymorphic variant A2756G MTR gene in the homozygous state and polymorphism A66G MTRR gene in the heterozygous state significantly higher than adolescent boys. Revealed a high percentage of homozygous genotype 66GG (41,8 %) and allele frequency 66G gene MTRR (56,9 %), which suggests an adaptive advantage polymorphic variant A66G during evolution.

KEY WORDS: polymorphic variants of genes; the folate cycle; teens; heterozygosity; gene diversity.

В настоящее время опубликовано много работ, посвященных анализу нарушений обмена метионина и полиморфным вариантам генов фолатного цикла. Ключевым ферментом фолатного метаболизма является метилентетрагидрофолатредуктаза

Корреспонденцию адресовать:

СТРОЗЕНКО Людмила Анатольевна,

656066, Алтайский край, г. Барнаул, ул. Малахова, д. 113, кв. 58. Тел.: 8 (3852) 46-72-03.

E-mail: strozen@mail.ru

(MTHFR), которая переводит фолиевую кислоту в ее активную форму — 5-метилтетрагидрофолат. Образовавшийся продукт является углеродным донором, доставляющим метильную группу для метилирования гомоцистеина [1]. Существует несколько аллельных вариантов гена MTHFR, вызывающих тяжелую недостаточность фермента, но большинство из них встречаются редко. Практическое значение имеют два полиморфных варианта: С677Т в экзоне 4 и А1298С в экзоне 7. Наиболее изучена нуклеотидная замена С677Т, приводящая к замене аминокислоты Ala на

и^ггя в^^узбассе

№1(60) 2015

РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕНОВ ФОЛАТНОГО ЦИКЛА В ПОПУЛЯЦИИ ПОДРОСТКОВ Г. БАРНАУЛА АЛТАЙСКОГО КРАЯ

аминокислоту Val в 222 положении белка [2-4]. У лиц, гетерозиготных по данному полиморфному варианту, отмечается термолабильность фермента и снижение его активности до 35 %, у гомозигот — до 70 % [5]. Второй распространенной нуклеотидной заменой в этом гене является транзиция А1298С, приводящая к замене глутаминовой кислоты на аланин в регуляторном домене фермента (p.Glu429Ala). Есть данные, что аллель С1298 незначительно снижает активность фермента. Компаунд-гетерозиготность по двум аллелям Т677 и С1298 сопровождается снижением активности фермента на 40-50 %, повышением концентрации гомоцистеина в плазме и снижением уровня фолата, как при гомозиготном носительстве аллеля Т677 [1, 2].

Реметилирование гомоцистеина в метионин катализирует цитоплазматический фермент метионин-синтаза (MTR). Восстановление функции данного фермента возможно только при участии фермента мети-онин-синтазы-редуктазы (MTRR). Следует отметить, что полиморфный вариант гена MTRR A66G в 4 раза снижает активность фермента и является наиболее распространенным в популяции [2, 4].

По мнению ряда авторов, полиморфные варианты генов MTHFR и MTRR, обуславливая различную функциональную значимость белковых продуктов, могут рассматриваться как фактор риска развития некоторых заболеваний.

На сегодняшний день показана ассоциация полиморфных вариантов генов системы фолатного цикла с развитием таких патологических состояний, как арахнодактилия, смещение хрусталика, атеросклероз, атеротромбоз, дефект невральной трубки, умственная отсталость, аутизм, эпилепсия, шизофрения, депрессия, врожденные пороки развития, нарушение расхождения хромосом в оогенезе (повышается риск рождения детей с синдромом Дауна) [3-7]. Поэтому исследование полиморфных вариантов генов фолатного цикла у подростков является важным диагностическим критерием, прежде всего, для установления предрасположенности к патологическим состояниям и разработки индивидуальных программ первичной профилактики. Подобные исследования в Алтайском крае не проводились.

Работа выполнена в рамках Протокола ведения Всероссийского регистра «Генетические факторы риска тромбоза у жителей, проживающих на территории РФ, клиническое фенотипирование и тромбопрофилактика тромботических осложнений» [8].

Цель исследования — определить частоту встречаемости полиморфных вариантов генов метилентет-

рагидрофолатредуктазы — MTHFR (С677Т; А1298С), В12-зависимой метионин-синтазы — MTR (A2756G) и метионин-синтазы редуктазы — MTRR (A66G) у подростков г. Барнаула Алтайского края.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В качестве материала для проведения молекулярно-генетического исследования на носительство полиморфных маркеров генов системы фолатного цикла использованы образцы ДНК 1306 подростков (580 мальчиков и 726 девочек) в возрасте 15-16 лет, отобранных методом случайной выборки.

Определение аллельных вариантов генов осуществлялось в группе фармакогеномики Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН (г. Новосибирск). В основе анализа лежал метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (Real-Time PCR) с использованием конкурирующих TagMan зондов. Подросткам было проведено генетическое исследование четырех полиморфных вариантов, ассоциированных с нарушениями фолатного цикла: метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR Ala223Val, С677Т, rs1801133 и MTHFR Е429А, А1298С, rs1801131), В^-зависимой метионинсинтазы (MTR Asp919Gly, A2756G, rs1805087) и ме-тионин-синтазы-редуктазы (MTRR Ile22Met, A66G, rs1801394).

Условия проведения исследования соответствовали «Правилам клинической практики в Российской Федерации», утвержденным Приказом Минздрава России от 19.06.2003 г. № 266, и стандартам локального биоэтического комитета Алтайского государственного медицинского университета. От участников исследования (или их родителей) было получено подписанное информированное согласие.

Статистическая обработка результатов исследования проводилась с помощью пакета программ Statistic 6.1. Распределение значений количественных показателей оценивали с помощью критерия Шапиро-Уилка. Попарное сравнение частот аллелей и генотипических групп в разных популяциях проводили посредством точного критерия Фишера (ТКФ). Кроме того, в нашем исследовании были использованы следующие параметры доказательной медицины [9]:

- относительный риск (ОР) - отношение частоты

изучаемого исхода во второй подгруппе к его частоте в первой подгруппе ОР = А/(А+В)/С/(С+Э).

Сведения об авторах:

СТРОЗЕНКО Людмила Анатольевна, канд. мед. наук, доцент, кафедра педиатрии № 2, ГБОУ ВПО «АГМУ Минздравсоцразвития России», г. Барнаул, Россия. E-mail: strozen@mail.ru

ГОРДЕЕВ Виктор Витальевич, доктор мед. наук, доцент, профессор, кафедра педиатрии № 2, ГБОУ ВПО «АГМУ Минздравсоцразвития России», г. Барнаул, Россия. E-mail: gordeev-victor@jandex.ru

ЛОБАНОВ Юрий Федорович, доктор мед. наук, профессор, зав. кафедрой педиатрии № 2, ГБОУ ВПО «АГМУ Минздравсоцразвития России», г. Барнаул, Россия. E-mail: luf@list.ru

МОМОТ Андрей Павлович, доктор мед. наук, профессор, директор, ФГБУ «Гематологический научный центр» Минздрава России, Алтайский филиал, г. Барнаул, Россия. E-mail: xyzan@yandex.ru

ВОРОНИНА Елена Николаевна, канд. биол. наук, мл. науч. сотрудник, Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, г. Новосибирск, Россия. E-mail: voronina_l@mail.ru

№1(60) 2015 с/Н?гь и^пя вс7|узбассе

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Значение ОР от 0 до 1 соответствует снижению риска, более 1 — его увеличению. ОР равный 1 означает отсутствие эффекта. ОР рассчитывается также на основе таблицы сопряженности, где приведены все возможные исходы исследования; - отношение шансов (ОШ) — отношение шансов события в одной группе к шансам события в другой группе, или отношение шансов того, что событие произойдет, к шансам того, что событие не произойдет. Значения ОШ от 0 до 1 соответствуют снижению риска, более 1 — его увеличению. ОШ равное 1 означает отсутствие эффекта. ОШ = A/B : C/D.

Для каждого показателя вычисляли 95% доверительный интервал (95% ДИ), означающий, что истинное значение величины с вероятностью в 95 % лежит в пределах рассчитанного интервала. Величина ДИ характеризует степень доказательности данных, в то время как значение p указывает на вероятность отклонения нулевой гипотезы.

Соответствие распределения генотипических частот равновесию Харди-Вайнберга проверяли посредством критерия х2, используя при этом онлайн калькулятор (http://www.oege.org/software/hardy-we-iberg.shtml).

Состояние генного разнообразия оценивали вычислением: индекса относительного отклонения (D) наблюдаемой гетерозиготности от ожидаемой и показателя информационного содержания полиморфизма (PIC).

Различие сравниваемых величин считали статистически значимым при p < 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Исследованные гены фолатного метаболизма и число обследованных подростков с учетом половых различий представлены в таблице 1.

В результате исследования установлено, что 40,5 % подростков г. Барнаула Алтайского края являются гетерозиготными носителями полиморфного варианта С677Т гена MTHFR, что практически равнозначно показателю в украинской популяции (40,7 %) и несколько ниже соответствующих частот в испанской (43,8 %) и европейских (42,8 %) популяциях [10]. Однако, существенно отличается от афро-американ-ской популяции, где частота гетерозиготного генотипа 677СТ статистически значимо ниже (21,6 %, p = 0,0002). По данным Н.Г. Горовенко, в Украине час-

Таблица 1

Распределение частот генотипов генов фолатного обмена MTHFR, MTR и MTRR у подростков г. Барнаула Алтайского края

Ген Генотип Мальчики

677СС 295

MTHFR 677 СТ 677 ТГ 230

n = 580 n = 726 n = 1306

1298 AA 84

MTHFR 1298 AC 1298 CC 63

n = 169 n = 272 oi II о

2756 AA 100

MTR 2756 AG 2756 GG 35

n = 146 n = 159 n = 405

66 AA 51

MTRR 66 AG 66 GG 37

n = 154 n = 279 n = 433

Примечание:; * статистически значимые различия показателей у мальчиков и девочек (использован точный критерий Фишера).

тота этого генотипа среди детей от 2 до 12 лет достигает 38,0 % [11]. Аналогичные исследования в Ростове-на-Дону позволили установить, что 47,9 % подростков являются гетерозиготными носителями полиморфного варианта С677Т гена MTHFR и только у 7,1 % обследованных был зафиксирован гомозиготный вариант 677ТТ [12].

Частота гомозиготного носительства аллеля Т677 гена MTHFR у подростков Барнаула составила 9,0 %. Данный показатель выше по сравнению с популяцией украинцев (у взрослых — 7,04 %, у детей — 4,0 %), статистически значимо преобладает над популяцией афро-американцев (1,0 %; p < 0,001), ниже, чем в европейской (11,3 %), испанской (26,0 %; p < 0,001) и еврейской (26,5 %; p < 0,001) популяциях. Есть данные о том, что в русской популяции (Россия) частота аллеля Т677 составляет 31,8 % [13].

В ходе анализа распространенности полиморфного варианта А1298С гена MTHFR установлено, что частота гетерозиготного генотипа 1298АС у обследованных подростков составила 39,5 %, что соответствует показателям в украинской (39,5 %) и еврейской (38,3 %) популяциях, несколько ниже европейской (47,2 %), достоверно выше, чем в испанской (27,1 %;

Information about authors:

STROZENKO Lyudmila Anatoljevna, candidate of medical sciences, docent, Department of Pediatrics N 2, Altai State Medical University, Barnaul, Russia. E-mail: strozen@mail.ru

GORDEEV Viktor Vitaljevna, doctor of medical sciences, docent, professor, Department of Pediatrics N 2, Altai State Medical University, Barnaul, Russia. E-mail: gordeev-victor@jandex.ru

LOBANOV Yuri Fedorovich, doctor of medical sciences, professor, head of the Department of Pediatrics N 2, Altai State Medical University, Barnaul, Russia. E-mail: luf@list.ru

MOMOT Andrey Pavlovich, doctor of medical sciences, professor, director, Hematology Research Center, Barnaul, Russia. E-mail: xyzan@yan-dex.ru

VORONINA Elena Nikolaevna, candidate of biological sciences, junior research scientist, Institute of chemical biology and fundamental medicine, Novosibirsk, Russia. E-mail: voronina_l@mail.ru

с/$(ръ и^ггя всу^бассе

№1(60) 2015

РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕНОВ ФОЛАТНОГО ЦИКЛА В ПОПУЛЯЦИИ ПОДРОСТКОВ Г. БАРНАУЛА АЛТАЙСКОГО КРАЯ

p = 0,027) и афро-американской (26,8 %; p = 0,020) популяциях.

Генотип 1298СС у подростков выявлен с частотой 9,7 %, что практически совпадает с украинской (8,5 %), еврейской (8,1 %), европейскими (8,8 %), а также испанской (4,2 %; р = 0,108) популяциями. Следует отметить, что достоверные различия в частоте встречаемости гомозиготного генотипа 1298СС, по сравнению с другими популяциями мира выявлены лишь у афро-американцев (2,1 %; p = 0,013).

Для полиморфного варианта А66G гена MTRR в проведенном нами исследовании была обнаружена высокая частота генотипа 66GG в популяции подростков (41,8 %), по сравнению с частотами других популяций, за исключением украинской (35,5 %). По данным литературы, в популяции жителей Африки распространенность аллеля G66 отставляет 10,3 %, в европейских популяциях — 29,6 %, у испанцев —

7,3 %, у евреев Ашкенази — 19,5 % [10], что статистически значимо отличается от распределения в популяции подростков г. Барнаула Алтайского края (56,9 %; p < 0,001).

Попарное сравнение частот аллелей между двумя исследуемыми популяциями подростков (барнаульской и ростовской) статистически значимых различий не выявило. У ростовских подростков установлено значимое преобладание частоты генотипа 66AG гена MTRR (42,9 % против 30,3 % у подростков Барнаула; р = 0,007) и генотипа 2756AG гена MTR (34,3 % против 22,7 %; р = 0,007). В то же время, у барнаульской популяции подростков была выше частота генотипа 2756GG гена MTR (9,7 % против 2,1 % у подростков Ростова; р = 0,005).

Полученные данные по распространенности генотипов исследуемых полиморфных вариантов в популяции подростков с учетом гендерных особенностей представлены в таблице 2.

У девочек-подростков частота встречаемости полиморфного варианта A2756G гена MTR в гомозиготном состоянии (10,8 % против 7,5 % у мальчиков; р = 0,012) и полиморфного варианта A66G гена MTRR в гетерозиготном состоянии (ОШ = 0,62; 95% ДИ: от 0,40 до 0,97; р = 0,037) статистически значимо выше, чем у мальчиков-подростков. По остальным полиморфным вариантам различий не выявлено.

При исследовании частоты встречаемости генотипов и аллелей в популяции подростков установлено, что распределение частот двух генотипов С677Т и А1298С гена MTHFR соответствовало равновесию Харди-Вай-нберга. Отклонение было зафиксировано для частот генотипов A2756G гена MtR (х2 = 40,205; р = 0) и A66G гена MTRR (х2 = 63,541; р = 0) (табл. 3).

Как видно из таблицы 3, наблюдаемое распределение генотипов С677Т и А1298С гена MTHFR согласуется с ожидаемыми частотами распределения. Для генотипа A2756G гена MTR выявлено, что фактическое количество Htzg (AG) статистически значимо снижено по сравнению с теоретическим (22,7 % и 33,1 %, соответственно; р = 0,001), а наблюдаемая частота Hmzg (GG) гена MTR достоверно выше, чем ожидаемая (9,6 % и 4,4 %, соответственно; р = 0,005). Наблюдаемое распределение Hmzg (AA) и Hmzg (GG) генотипа A66G гена MTRR также статистически значимо повышено по сравнению с ожидаемым (х2 = 63,541; р = 0) за счет эксцесса гетерозиготных генотипов. Выявленные отклонения можно рассматривать как возникшие в силу стохастических (случайных) причин. Однако достоверное отклонение распределения от ожидаемого может быть обусловлено смещением выборки по каким-либо показателям, важным для реализации функциональной значимости данных полиморфных вариантов [12]. Для прояснения данного момента требуется провести дополнительное исследование на расширенной выборке подростков Алтайского края.

Исследование генного разнообразия в популяции подростков выявило высокий уровень теоретической гетерозиготности по полиморфным вариантам генов фолатного метаболизма (от 0,332 до 0,492), что при диаллельном полиморфизме является показателем значительного разнообразия популяции, близкого к максимальному (0,5). Гетерозиготность обуславливает высокую жизнеспособность организмов, хорошую приспособляемость к изменяющимся условиям среды. Другой показатель генного разнообразия — PIC (информационное содержание полиморфизма), дает представление, насколько информативен выбранный маркер. Генетические маркеры генов фолатного цикла оказались высоко информативными: маркер С677Т и А1298С гена MTHFR (0,421) и (0,429); маркер А2756G гена MTR (0,428); маркер А66G гена

Таблица 2

Гендерные особенности структуры полиморфизмов генов фолатного цикла у подростков г. Барнаула

Генотипы полиморфизмов Мальчики, n (%) Девочки, n (%) ОР (95% ДИ) ОШ (95% ДИ) z/р

C677T MTHFR: Htzg (CT) 230 (39,6) 299 (41,2) 0,96 (0,84-1,10) 0,94 (0,75-1,17) 0,559/0,576

C677T MTHFR: Hmzg (TT) 55 (9,5) 63 (8,7) 1,09 (0,77-1,54) 1,10 (0,75-1,61) 0,504/0,614

A1298C MTHFR: Htzg (AC) 63 (37,3) 111 (40,8) 0,91 (0,72-1,16) 0,86 (0,58-1,28) 0,737/0,461

A1298C MTHFR: Hmzg (CC) 22 (13,0) 21 (7,7) 1,69 (0,96-2,97) 1,79 (0,95-3,36) 1,804/0,071

A2756G MTR: Htzg (AG) 35 (24,0) 57 (22,0) 1,09 (0,75-1,57) 1,12 (0,69-1,81) 0,453/0,651

A2756G MTR: Hmzg (GG) 11 (7,5) 28 (10,8)* 0,42 (0,21-0,83) 0,40 (0,19-0,82) 2,513/0,012

A66G MTRR: Htzg (AG) 37 (24,0) 94 (33,7)* 0,71 (0,51-0,99) 0,62 (0,40-0,97) 2,087/0,037

A66G MTRR: Hmzg (GG) 66 (42,9) 115 (41,2) 1,04 (0,83-1,31) 1,07 (0,72-1,59) 0,331/0,741

Примечание: z - z-статистика; * статистически значимые различия показателей у мальчиков и девочек (использован точный критерий Фишера); ОР - относительный риск; ОШ - отношение шансов.

№1(60) 2015 с/Н?гь и^пя вс7|узбассе

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Таблица 3

Распространенность генотипов С677Т и А1298С гена MTHFR, A2756G гена MTR и A66G гена MTRR в популяции подростков г. Барнаула

Локус Генотип N.O. (%) N.E. (%) х2 d.f. = 1 Частота аллеля Ho ± SE He ± SE D

СС 50,5 50,0 0,637 p = 0,425 C = 0,707 T = 0,293 Ho = He = 0,405 ± 0,014 0,414 ± 0,014

С677Т СТ 40,5 41,4 0,022

ТТ 9,0 8,6

АА 50,8 49,7 1,148 p = 0,284 A = 0,705 C = 0,295 Ho = He = 0,395 ± 0,023 0,416 ± 0,023

А1298С АС 39,5 41,6 0,050

СС 9,7 8,7

AA 67,6 62,4 40,205 p = 0 A = 0,790 G = 0,210 Ho = He = ^ 0,227 ± 0,021 0,332 ± 0,023

A2756G AG 22,7 33,2 0,316

GG 9,7 4,4

AA 27,9 19,2 63,541 p = 0 A = 0,431 G = 0,569 II II О О) X X 0,303 ± 0,022 0,492 ± 0,024

A66G AG 30,3 46,3 0,384

GG 41,8 31,5

Примечание. N.O. - наблюдаемая частота генотипов; N.E. - ожидаемая частота генотипов; критерий х2 использован для оценки соответствия наблюдаемого распределения генотипов ожидаемому, исходя из равновесия Харди-Вайнберга; d.f. - число степеней свободы; Ho SE и He SE - соответственно, наблюдаемая и ожидаемая гетерозиготность с ошибкой; D - относительное отклонение наблюдаемой гетерозиготности от ожидаемой.

MTRR (0,457), что согласуется с достаточно высокой степенью средней ожидаемой гетерозиготности по этим локусам.

Учитывая полученные данные по частотам полиморфных вариантов MTHFR C677T и A1298C, а также полиморфизмам MTR A2756G и MTRR A66G, проведено исследование и сравнение частоты их гетерозиготных компаундов с другими популяциями (табл. 4).

По нашим данным, частоты компаундов С677Т Htzg /A1298C Htzg встречались у 16,3 % подростков г. Барнаула, что практически довольно близко к частотам данных компаундов в украинской (12,6 %), испанской (14,6 %), европейских (22,6 %) и еврейской (22,3 %) популяциях, но, тем не менее, статистически значимо выше частоты распределения в аф-ро-американской популяции (4,1 %; р = 0,002). Есть данные, что компаунд-гетерозиготность по двум аллелям Т677 и С1298 сопровождается снижением активности фермента на 40-50 %, повышением концентрации гомоцистеина в плазме и снижением уровня фолата, как при гомозиготном носительстве аллеля Т677 [1]. Частота встречаемости гетрозиготных компаундов С677Т Htzg /A66G Htzg и A1298C Htzg/A66G Htzg у барнаульских подростков (13,6 %) и (9,9 %) была достоверно значимо ниже (р < 0,05) по сравнению с украинской (20,0 %), европейской (22,6 %) и еврейской (21,5 %; 26,8 %) популяциями.

Следует иметь в виду, что дефицит ферментов фолатного цикла приводит к снижению метилирования ДНК и, как следствие, к нарушению клеточного цикла, что способствует запусканию патологических механизмов и появлению клинических симптомов [4-6].

В ранее проведенном нами исследовании по изучению гендерных особенностей качества жизни с носи-тельством компаунд-гетерозигот 677СТ/1298АС было выявлено нивелирование гендерных особенностей

и снижение показателей качества жизни у мальчиков, т.к. детерминируется более низкая ферментативная активность при носительстве одновременно двух полиморфных вариантов [15].

Исследование Е.Я. Гречаниной по распространенности полиморфного варианта A66G MTRR Hmzg и его присоединению к C677Т MTHFR Htzg в украинской популяции позволило сделать вывод о том, что имеет место взаимная компенсация мутантных аллелей, которая может повышать приспособленность индивида, то есть носить характер адаптивного гетерозиса [2, 10].

По данным А. Wilson и др., наличие компаунда гомозиготных и гетерозиготных генотипов MTHFR C677T и MTRR A66G связано с 3-х и 4-х кратным риском развития дефекта не-заращения невральной трубки (ДНТ). Полиморфный вариант гена MTRR A66G может увеличивать риск развития ДНТ в популяции как независимо, так и в сочетании с другими мутациями и внешними факторами [10].

Таким образом, проведенное исследование позволяет сделать вывод, что 40,5 % подростков г. Барнаула являются гетерозиготными носителями полиморфного варианта С677Т гена MTHFR, а частота минорного аллеля Т677 гена MTHFR в популяции подростков составляет 9,0 %. Гетерозиготный генотип 1298АС гена MTHFR встречается у 39,5 % подростков, что практически соответствует показателям распределения данного генотипа в других популяциях. Популяция подростков является полиморфной по аллелям A2756G MTR и A66G MTRR, а частоты генотипов в исследуемой популяции отличаются от африканских и европейских. У девочек-подрос-тков частота встречаемости полиморфного варианта A2756G гена MTR в гомозиготном состоянии и полиморфного варианта A66G гена MTRR в гетерозиготном состоянии статистически значимо выше, чем у мальчиков-подростков. Наблюдается высокий процент гомозиготного генотипа 66GG (41,8 %) и часто-

Таблица 4

Распределение гетерозиготных компаундов генов фолатного цикла в различных популяциях

Популяции C677T MTHFR/ A1298C MTHFR C677T MTHFR/ A66G MTRR A1298C MTHFR/ A66G MTRR

Барнаул 16,3

Украинцы 12,6 (23/199) 20,1 (40/199)* 20,0 (40/200)*

Афро-американцы 4,1

Европейцы 22,6 (36/159) 20,1 (32/159) 22,6 (36/159)*

Испанцы 14,6

Евреи Ашкенази 22,3 (33/148) 21,5 (26/121)* 26,8 (33/123)*

Примечание: * р < 0,05 по сравнению с барнаульцами.

с/$(ръ и^ггя в^^узбассе

№1(60) 2015

РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕНОВ ФОЛАТНОГО ЦИКЛА В ПОПУЛЯЦИИ ПОДРОСТКОВ Г. БАРНАУЛА АЛТАЙСКОГО КРАЯ

ты аллеля G66 гена MTRR (56,9 %), что дает основа- морфизма A66G в процессе эволюции или возмож-ние предположить адаптивное преимущество поли- ный «эффект основателя» [2, 10].

ЛИТЕРАТУРА:

1. Полиморфизм генов фолатного обмена и болезни человека /И.Н. Фетисова, А.С. Добролюбов, М.А. Липин, А.В. Поляков //Вестник новых медицинских технологий. - 2007. - Т. 10, № 1. - С. 91-96.

2. Наследственные нарушения обмена серосодержащих аминокислот /Е.Я. Гречанина, Р. Маталон, Ю.Б. Гречанина, И.В. Новикова и др. //Российский вестник перинаталогии и педиатрии. - 2009. - № 1. - С. 53-61.

3. Rozen, R. Genetic predisposition to hyperhomocysteinemia: deficiency of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) /R. Rozen //Thromb. Haemost. - 1997. - V. 78. - P. 523-526.

4. Жиляева, Т.В. Нарушения обмена фолатов в свете дизонтогенетической гипотезы этиологии шизофрении /Т.В. Жиляева //Социальная и клиническая психиатрия. - 2012. - Т. 22, № 1. - С.88-94.

5. Botto, L.D. 5,10-Methylenetetrahydrofolate reductase gene variants and congenital anomalies: a HuGE review /L.D. Botto, Q. Yang //Am.

J. Epidemiol. - 2000. - V. 151. - Р. 862-877.

6. Homocysteine remethylation enzyme polymorphisms and increased risks for neural tube defects /H. Zhu, N.J. Wicker, G.M. Shaw et al. //Mol.

Genet. Metab. - 2003. - V. 78. - Р. 216-221.

7. Система фолатного обмена и врожденные пороки развития: эффект материнского генотипа /А.С. Вайнер, Д.А. Жечев, А.Н. Ширшова, Е.А. Кудрявцева и др. //Мать и Дитя в Кузбассе. - 2012. - № 4(51). - С. 7-12.

8. Протокол ведения Всероссийского регистра «Генетические факторы риска тромбоза у жителей, проживающих на территории РФ, клиническое фенотипирование и тромбопрофилактика тромбоэмболических осложнений в онтогенезе» /А.П. Момот, Е.В. Ройтман,

В.А. Елыкомов и др. //Тромбоз, гемостаз и реология. - 2010. - № 3. - С. 30-78.

9. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica /О.Ю. Реброва. -М.: Медиа-Сфера, 2006. - С. 166-176.

10. Гречанина, Е.Я. Распространенность полиморфизмов С677Т MTHFR и A66G MTRR генов системы фолатного цикла в популяции Восточной Украины /Е.Я. Гречанина, В.А. Гусар //Актуальные проблемы акушерства и гинекологии, клинической иммунологии и медицинской генетики. - Киев-Луганск, 2010. - С. 91-97.

11. Горовенко, Н.Г. Влияние полиморфизма С677Т гена MTHFR на фолатный статус и уровень гомоцистеина в сыворотке крови детей с когнитивными расстройствами /Н.Г. Горовенко, Н.В. Ольхович, З.И. Россоха и др. //Актуальные проблемы акушерства и гинекологии, клинической иммунологии и медицинской генетики. - Киев-Луганск, 2010. - С. 61-70.

12. Полиморфизм генов фолатного цикла и предрасположенность к сердечно-сосудистым заболеваниям /А.В. Миктадова, К.А. Коваленко, Е.В. Машкина, Т.П. Шкурат //Главный врач юга России. - 2011. - № 4(27). - С. 16-18.

13. Спиридонова, М.Г. О роли полиморфных вариантов гена 5,10-метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR) в патогенезе сердечнососудистых заболеваний /М.Г. Спиридонова, В.А. Степанов, В.П. Пузырев //Клиническая медицина. - 2001. - № 2. - С. 10-16.

14. Махмутова, Ж.С. Популяционно-генетический анализ полиморфизма гена метилентетрагидрофолатредуктазы при дефектах невральной трубки в Казахской популяции /Ж.С. Махмутова: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - М., 2007. - 27 с.

15. Гендерные особенности качества жизни подростков - носителей генов фолатного цикла /Л.А. Строзенко, В.В. Гордеев, Ю.Ф. Лобанов, А.П. Момот //Мать и Дитя в Кузбассе. - 2013. - № 3(54). - С. 38-43.

Статья поступила в редакцию 25.10.2014 г.

Ивлев Е.В., Григорьев Е.В., Жданов В.В., Жданов Р.В.

Кемеровская областная клиническая больница, НИИ Комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний СО РАМН, Кемеровская государственная медицинская академия,

г. Кемерово

ПАРАМЕТРЫ СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТОЙ СИСТЕМЫ ПРИ ОПЕРАЦИЯХ В ПОЛОСТИ НОСА И ПРИДАТОЧНЫХ ПАЗУХАХ У ДЕТЕЙ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СПОСОБА ОБЕСПЕЧЕНИЯ ПРОХОДИМОСТИ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ

В статье представлены результаты оценки влияния двух способов обеспечения проходимости дыхательных путей при операциях в полости носа и придаточных пазухах у детей на реакцию сердечно-сосудистой системы. В исследование были включены 140 пациентов в возрасте от 3 до 17 лет, с риском по ASA I-II степени, которым проводили анестезиологическое обеспечение операций в полости носа и придаточных пазухах.

Установка гибкой армированной ларингеальной маски в меньшей степени вызывает реакцию сердечно-сосудистой системы, чем интубация трахеи, что проявляется меньшим артериальным давлениием от 11,7 % до 20 %, и меньшей на

12,5 % частотой сердечных сокращений при обеспечении проходимости дыхательных путей. Использование гибкой армированной ларингеальной маски у детей при операциях в полости носа и на придаточных пазухах приводит к уменьшению дозы фентанила для аналгезии обеспечения проходимости дыхательных путей на 14,8 %, при индукции анестезии на 20 %, и при поддержании анестезии на 34,6 %, чем при интубации трахеи.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: гибкая армированная ларингеальная маска; эндотрахеальная трубка; нос; придаточные пазухи; фентанил; артериальное давление; частота сердечных сокращений; дети.

№1(60) 2015 сбИрь и^пя вс7|узбассе