Противовоспалительная мазь для животных
ANTI-INFLAMMATORY OINTMENT FOR ANIMALS

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к ветеринарной фармации, в частности, к противовоспалительным мазям для животных и может быть использовано в ветеринарии и животноводстве для лечения воспалительных процессов у животных.
Уровень техники
Известна композиция - лекарственная форма нестероидного противовоспалительного средства кетопрофена для наружного применения, обладающая противовоспалительным и анальгетическим действием, содержащая в качестве активного агента кетопрофен, а в качестве вспомогательных веществ пропиленгликоль, воду, цетиловый спирт, полиэтиленоксид 1500 и глицерин. Композиция выполнена в виде мази и обеспечивает увеличение биодоступности кетопрофена и усиление фармакологического действия. Существенным отличительным признаком заявляемого изобретения является сочетание растворителя, сурфактанта и основообразующих компонентов, позволяющее увеличить высвобождение лекарственного вещества кетопрофена из лекарственного средства, а именно при изготовлении данной мази в качестве растворителя используется пропиленгликоль, сурфактанта - цетиловый спирт, основообразующих компонентов - полиэтиленоксид, глицерин и вода очищенная при следующем соотношении компонентов, в г на 100 г продукта: кетопрофен - 5,0, пропиленгликоль - 3,3, цетиловый спирт - 4,0, полиэтиленоксид 1500 - 52,7, глицерин - 17,7, вода очищенная - 17,3. (См. пат. RU №2404760, кл. А61К 31/192, А61К 31/12, А61К 47/10, А61К 47/30, А61К 47/02, А61Р 29/00, опубл. 27.11.2010 г.)
Недостатком данной композиции является отсутствие в составе компонентов, обеспечивающих достижение антиоксидантного эффекта, а также недостаточный противовоспалительный эффект.
Известна мазь противовоспалительная, включающая сульфаниламид (стрептоцид), камфару рацемическую, вазелин, жир свиной топленый, дополнительно содержит антиоксиданты - бутилгидроксианизол и бутилгидрокситолуол. Сульфаниламид введен в состав мази в микронизированном состоянии, при этом не меньше 90% частиц имеют размер до 20 мкм и не больше 10% частиц имеют размер до 90 мкм. Изобретение может использоваться как фармакологическое средство для внешнего применения, предназначенное для местного консервативного лечения трещин, неглубоких ран в стадии грануляции, царапин на коже, воспаления слизистых оболочек, отеков, проктологических заболеваний, в частности анальных трещин, острого и хронического геморроя, и т.п.(См. пат. RU №2493837, кл. А61К 31/125, А61К 31/63, А61К 31/355, А61К 47/44, А61Р 17/00, опубл. 27.09.2013 г.).
Недостатком данной мази является невысокий противовоспалительный эффект, что обусловлено отсутствием в ее составе компонентов из числа нестероидных противовоспалительных лекарственных средств и/или стероидных лекарственных противовоспалительных средств.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятое авторами за прототип является средство для лечения воспалений и травм молочной железы у коров, содержащее в качестве активного компонента кетопрофен, а в качестве основы кремнийорганический глицерогидрогель состава:
Si(C3H7O3)4⋅xC3H8O3⋅yH2O, где 3≤х≤10, 20≤у≤40 с динамической вязкостью 4,8-28,5 Па⋅с (20±0,5°С), при соотношении компонентов, мас. %: кетопрофен - 2, кремнийорганический глицерогидрогель - остальное, причем средство готовят путем механического перемешивания компонентов. Изобретение обеспечивает повышение эффективности лечения. (См. пат. RU №2356556, кл. А61К 33/00, А61К 31/192, А61К 47/30, А61Р 15/00, А61Р 31/04, опубл. 27.05.2009 г.).
Недостатком данного средства является недостаточный противовоспалительный эффект, что связано с присутствием в его составе компонентов только из числа нестероидных лекарственных противовоспалительных средств и отсутствием компонентов из числа стероидных противовоспалительных средств и антиоксидантного эффекта, а также невысокая скорость проникновения действующих веществ в пораженные ткани.
Краткое описание чертежей и иных материалов
На фиг. 1 дана противовоспалительная мазь для животных. Острая токсичность противовоспалительной мази для животных, табл. 1.
На фиг. 2, тоже, графическое изображение острой токсичности для белых мышей противовоспалительной мази для животных, рис. 1.
На фиг. 3, тоже, графическое изображение острой токсичности для белых крыс противовоспалительной мази для животных, рис. 2.
На фиг. 4, тоже, гематологические и биохимические показатели коров, которым проводили лечение мастита, табл. 2.
На фиг. 5, тоже, показатели качества молока, полученного от коров, которым проводили лечение мастита, табл. 3.
На фиг. 6, тоже, сроки выздоровления у коров, которым проводили лечение мастита и количество утилизированного молока, табл. 4.
Раскрытие изобретения
Задачей изобретения является разработка противовоспалительной мази для животных, обладающей выраженным противовоспалительным, обезболивающим и антиоксидантным действием, низкой токсичностью, удобством применения, высокой эффективностью в лечении локальных воспалительных процессов у животных.
Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, сводится к выраженному местному противовоспалительному, обезболивающему, противоотечному и антиоксидантному действию, а также нормализации местной температуры в очаге воспалительного процесса, низкой токсичности, удобству применения, высокой эффективности в лечении локальных воспалительных процессов у животных.
Технический результат достигается с помощью противовоспалительной мази для животных, включающей кетопрофен, при этом она дополнительно содержит метилпреднизолона ацепонат, токоферола ацетат, бета-каротин, и диметилсульфоксид, в качестве мазевой основы используют ланолин безводный и вазелин, а в качестве антиоксиданта для мазевой основы используют бутилгидрокситолуен, при следующем соотношении компонентов в мас. %:
Кетопрофен
2,5-4,5
метилпреднизолона ацепонат
0,09-0,11
токоферола ацетат
0,4-0,6
бета-каротин
0,75-1,25
бутилгидрокситолуен
0,4-0,6
диметилсульфоксид
10,0-15,0
ланолин безводный
25,0-23,0
вазелин
остальное
Общим с заявленным прототипом является наличие в составе кетопрофена в качестве активного компонента. Отличием от ближайшего аналога, заявляемой противовоспалительной мази для животных является присутствие дополнительно метилпреднизолона ацепоната, токоферола ацетата, бета-каротина, и диметилсульфоксида, чем обусловлено достижение более высокого противовоспалительного и противоотечного эффекта, наличие антиоксидантного действия и увеличение скорости проникновения действующих веществ в очаг воспалительного процесса, а также использование в качестве мазевой основы ланолина безводного и вазелина, стабилизированных антиоксидантом бутилгидрокситолуеном, предотвращающим ее окисление, что дает возможность проводить более качественно и эффективно профилактику и лечение локальных воспалительных заболеваний у животных.
Заявляемая противовоспалительная мазь для животных представляет собой однородную мазь белого цвета со слабым желтоватым оттенком, без запаха, обладающую выраженным местным противовоспалительным эффектом, обеспечивающую местное антиоксидантное, обезболивающее и противоотечное действие, способствующую нормализации местной температуры в очаге воспаления, удобна в применении.
Воспаление - это одна из типовых защитных реакций на местное повреждение, присущая всем млекопитающим, его классические внешние признаки известны с античных времен. Обобщение большого количества новых данных позволило выйти на качественно новый уровень понимания воспаления как универсального патологического процесса, лежащего в основе большого числа заболеваний (См. Беспалова И.Д., Рязанцева Н.В., Калюжин В.В., Афанасьева Д.С., Мурашев Б.Ю., Осихов И.А. // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2013. - Т. 117. - №2. - С. 5-9.).
Воспаление - универсальный защитный биологический механизм в ответ на любое повреждение. С позиции иммунопатофизиологии - это защитная реакция организма, которая характеризуется последовательной сменой фаз и опосредуется участием целого рада клеток, гуморальных факторов. При этом, мобилизация клеток фагоцитарного ряда сопровождается воспалительной реакцией микрососудов, белковых систем плазмы крови и периваскулярных мезензимальных клеток. Воспаление - преимущественно локальный процесс, направленный на отграничение патологического очага и клинически сопровождается рядом признаков - гиперемия, отек, боль и нарушение функции органа (См. Кашуба Э.А., Чернецова Л.Ф., Кузьменко М.Я., Максимова Н.А. // Медицинская наука и образование Урала. - 2006. - Т. 7. - №1 (40). - С. 29-30.).
Воспаление как основной, главный типовой патологический процесс является универсальным, генетически запрограммированным на любое флогогенное воздействие различной природы комплексом реакций на повреждение (См. Черешнева М.В., Черешнев В.А. // Медицинская иммунология. - 2011. - Т. 13. - №6. - С. 557-568.).
Нестероидные противовоспалительные препараты, основными показаниями для назначения которых являются воспалительные процессы различной природы и локализации, боль, лихорадка, относятся к числу широко применяемых в клинической практике лекарственных средств (См. Лазутина P.P. // Международный вестник ветеринарии. - 2010. - №2. - С. 16-18.).
Кетопрофен - это нестероидное противовоспалительное средство семейства производных пропионовой кислоты с обезболивающим, противовоспалительным и жаропонижающим действием. Он представляет собой рацемическую смесь, среди компонентов которой S-изомер ингибирует циклооксигеназу (См. Сарци-Путтини П., Атцени Ф., Ланата Л., Баньяско М., Коломбо М., Фишер Ф., Димпорцано М. // Российский медицинский журнал. - 2012. - Т. 20. - №5. - С. 259-264.).
Кетопрофен - химически и фармакологически является следующим поколением ибупрофена. Кетопрофен был одобрен к применению в США в 1986 г., а его растворимая пероральная форма - в 2009 г. Таким образом, опыт применения кетопрофена превышает тридцать лет. Его действие подразделяют на противовоспалительное, анальгетическое и антипиретическое, однако все 3 эффекта связаны с торможением продукции простагландинов ввиду неселективного ингибирования обоих типов циклооксигеназы. Основной противовоспалительный эффект связан с блокадой циклооксигеназы -2, однако в ряде тканей воспалительный процесс опосредуется и циклооксигеназы -1. Возрастание ее активности показано в суставах при ревматоидном артрите и остеоартрозе, особенно в синовиальной оболочке, а также при бурситах. Неселективность кетопрофена в данном случае является преимуществом с точки зрения противовоспалительного эффекта (См. Таратухин Е.О. // Терапия. - 2017. - №7 (17). - С. 21-24.).
По химической структуре кетопрофен (2RS)-2-(3-бензоилфенил)пропановая кислота является производным арилпропионовой кислоты, обладающей сильными кислотными свойствами, а также высокой липофильностью, обуславливающей легкость проникновения лекарственного средства через гематоэнцефалический барьер. В молекуле кетопрофена карбоксильная и бензольная группы по отношению к бензольному кольцу находятся в анти-положении. (См. Беляцкая А.В., Краснюк (мл.) И.И., Краснюк И.И., Мачикина Т.Е., Коростелева Ю.А., Степанова О.И., Кашликова И.М., Сковпень Ю.В., Воробьев А.Н. // Разработка и регистрация лекарственных средств. - 2017. - №2. - (19). - С. 102-107.)
Кетопрофен нашел широкое системное применение при воспалительных и дегенеративных заболеваниях опорно-двигательного препарата (артроз, остеохондроз, ревматоидный артрит), купировании болевого синдрома в посттравматический и послеоперационный период, при ишиалгии, радикулите и почечных коликах, а также часто используется в гинекологической, стоматологической и онкологической практике. Как наружное средство кетопрофен используется при болезненных воспалительных поражениях кожи и суставов, при спортивных травмах сухожилий, связок и мышц. В виде растворов кетопрофен используется в стоматологии при симптоматическом лечении воспалительных процессов полости рта, глотки и гортани. (См. Беляцкая А.В., Краснюк (мл.) И.И., Краснюк И.И., Мачикина Т.Е., Коростелева Ю.А., Степанова О.И., Кашликова И.М., Сковпень Ю.В., Воробьев А.Н. // Разработка и регистрация лекарственных средств. - 2017. - №2. - (19). - С. 102-107.)
Учитывая то, что при пероральном применении кетопрофен может оказывать ульцерогенное действие, наиболее часто используются лекарственные формы для наружного применения (См. Губанов О.Д., Вергейчик Е.Н., Губанова Л.Б. // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. - 2009. - №2. - С. 161-164.).
Местные глюкокортикоидные средства обладают комплексным противовоспалительным и иммуномодулирующим эффектом. Они подавляют продукцию и высвобождение таких факторов, как цитокины, простагландины и лейкотриены, которые участвуют в воспалении. Кроме того, местные глюкокортикостероиды обладают сосудосуживающим действием, уменьшают внутриклеточный отек и тканевую инфильтрацию (См. Левина Ю.Г., Алексеева А.А., Вишнева Е.А., Эфендиева К.Е., Томилова А.Ю. // Педиатрическая фармакология. - 2014. - Т. 11. - №5. - С. 52-58.).
В число современных топических глюкокортикоидов препаратов четвертого поколения входит метилпреднизолона ацепонат. Доказана его высокая противовоспалительная активность, а особенности механизма действия заключаются в активации пролекарства в очаге воспаления за счет ферментов - эстераз, высокой скорости проникновения в кожу и быстром начале действия благодаря высокой липофильности и сродству к рецепторам клеток - эффекторов воспаления. Метилпреднизолона ацепонат характеризуется минимизированным проникновением (0,27-2,5%) в кровь и полной быстрой инактивацией за счет связывания с глюкуроновой кислотой благодаря компактности молекулы. Высокая противовоспалительная активность метилпреднизолона ацепоната, определяющаяся его особыми фармакологическими свойствами, сочетается с минимальной выраженностью нежелательных явлений (См. Кунгуров Н.В., Кохан М.М., Кениксфест Ю.В., Стукова Е.И., Корюкина Е.Б., Ведерникова С.В. // Вестник дерматологии и венерологии. - 2013. - №5. - С. 138-151.).
Метилпреднизолона ацепонат представляет собой активный негалогенизированный синтетический глюкокортикостероид, относящийся к 3-му классу активности по Европейской классификации. Его молекула имеет уникальное строение, что обуславливает его противовоспалительные свойства. Введение метильной группы в положение С6 обусловливает высокую активность препарата, а отсутствие фтора и хлора в положениях С6, С9 или С12, типичных для большинства сильных глюкокортикостероидов, сводит к минимуму местные и системные побочные эффекты. Двойная эстерификация (в положениях С17 и С21) обеспечивает оптимальную липофильность молекулы, быстрое проникновение через эпидермис и высокую концентрацию. Стабильная концентрация метилпреднизолона ацепоната поддерживается в течение суток, что позволяет применять его один раз в день. За счет оптимальной липофильности концентрация метилпреднизолона ацепоната поддерживается в воспалительном очаге в течение суток, при этом создается его депо (См. Елисютина О.Г. // Стационарозамещающие технологии: Амбулаторная хирургия. - 2014. - №3-4. - С. 56-59.).
Одна из наиболее значимых причин патологических процессов в организме, вызывающих развитие многих болезней - избыточное накопление в кислородных свободных радикалов, то есть оксидантный стресс. За счет вредного воздействия свободных радикалов повреждаются стенки сосудов, мембраны, окисляются липиды. Концентрация свободных радикалов возрастает за счет снижения естественной антиоксидантной системы (См. Никитина Е.В., Романова Н.К. // Вестник Казанского технологического университета. - 2010. - №10. - С. 375-381.).
Основная масса воспалительных заболеваний связана с активацией процессов свободнорадикального окисления и перекисного окисления липидов как на местном уровне, так и на уровне целого организма (См. Мелконян К.И., Быков И.М., Павлюченко И.И., Белкина Н.В. // Кубанский научный медицинский вестник. - 2009. - №3. - С. 74-78.).
Антиоксид антами называются вещества растительного, животного происхождения, а также синтетические, способные при химическом взаимодействии тормозить развитие процессов свободно-радикального окисления (См. Окуневич И.В., Сапронов Н.С. // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. - 2004. - Т. 3. - №3. - С. 2-17.).
Известна практика применения антиоксидантных средств в лечении воспалительных заболеваний. Выявлен положительный эффект комплексного применения антиоксидантных препаратов с целью коррекции нарушений состояния антиоксидантной системы, вызванных воспалительными заболеваниями среднего уха, что подтверждает правомерность представлений об общей биологической значимости антиоксидантной системы и процессов свободно-радикального окисления в генезе формирования патологических состояний (См. Бакулина Л.С., Плужников Н.Н., Исаев А.В., Мальцев А.Б., Жданова И.Ю. // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. - 2018. - №2. - С. 284-291.).
Токоферол является важнейшим звеном системы экзогенной биоантиоксидантной защиты клеточных и субклеточных мембранных фосфолипидов от перекисного окисления. Он не образуется в животном организме, а является продуктом биосинтеза растительных клеток. Концентрируясь в составе мембран, витамин Е выступает в качестве их универсального протектора, независимо от вида тканей. Токоферолы, будучи гасящими антиоксидантами и выступая в роли ловушек радикалов, способны переносить фенольный водород на пероксидный радикал (См. Ермакова Н.В., Ярован Н.И. // Современные проблемы науки и образования. - 2014. - №3. - С. 721-726.].
Согласно литературным данным, α-токоферол участвует в антиоксидантной защите липопротеинов сыворотки крови, стабилизирует структуру клеточных мембран, разрушает большинство активных метаболитов кислорода, способен активизировать гены, участвующие в индукции и ингибиции апоптоза (См. Хужахметова Л.К., Теплый Д.Л. // Естественные науки. - 2016. - №4 (57). - С. 72-78.).
В настоящее время убедительно показано, что каротиноиды обладают ценными специфическими свойствами, не связанными с А-витаминной активностью. В живых организмах они действуют как фотопротекторы и антиоксиданты, на молекулярном и клеточном уровне предотвращают трансформации, индуцированные окислителями, генотоксическими веществами, рентгеновским и УФ-излучением; поддерживают стабильность генома и резистентность организма к мутагенезу и канцерогенезу. Увеличивают иммунокомпетентность и контактное взаимодействие клеток, участвуют в регуляции экспрессии гена коннексина-43. Способствуют экономному расходованию антиоксидантных витаминов и ферментов, проявляют антистрессорные свойства [Кузьминова Е.В. // Ветеринарная патология. - 2007. - №3. - С. 226-228.].
Известно, что защитное действие природных каротиноидов связано с их свойством дезактивировать высокореактивные свободные радикалы кислорода, ксенобиотики и перекиси (См. Воеводин Ю.Е., Улитько В.Е., Лифанова С.П., Ерисанова О.Е. // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2014. - №1 (25). - С. 113-117.).
Каротиноиды защищают липиды низкой плотности клеточных мембран от окислительного стресса, индуцированного синглетным кислородом, квантами света, радиолизом или окислением в присутствии меди (См. Шашкина М.Я., Шашкин П.Н., Сергеев А.В. // Российский биотерапевтический журнал. - 2010. - №1. - Том 9. - С. 77-86.).
Диметилсульфоксид относится к группе дерматотропных лекарственных средств. Оказывает противовоспалительное, анальгезирующее, противомикробное действие. При местном применении быстро и хорошо проникает через биологические мембраны, в том числе через кожу, слизистые, оболочку микробных клеток. Выполняет также транспортную функцию, обеспечивая глубокое проникновение других лекарственных средств через кожу (См. Дьячкова Л.В., Трухачева Т.В., Жебентяев А.И. // Вестник фармации. - 2012. - №1 (55). - С. 35-44.).
При изготовлении мягких лекарственных форм следует решить две проблемы: проблему выбора основы и проблему выбора фармакологически активных веществ, которые будут обуславливать лечебный эффект (См. Григорьева У.А., Миняева О.А., Куприянова Н.П. // Международный журнал экспериментального образования. - 2015. - №6. - С. 38-43.).
Несмотря на то, что ассортимент рассмотренных мазевых основ достаточно разнообразен, в наше время в условиях аптек при приготовлении мягких лекарственных средств используют преимущественно вазелин. Также применяется ланолин и его несомненным преимуществом перед другими основами является то, что он способен эмульгировать водные растворы (См. Ярных Т.Г., Гаркавцева О.А. // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Медицина. Фармация. - 2012. - №10-3 (129). - С. 16-22.).
Вазелин является смесью твердых и жидких углеводородов, получаемой при фракционной дистилляции нефти, и представляет собой белое, вязкое, липкое маслообразное вещество, не имеющее запаха. Это вещество малоаллергенно, хорошо смягчает и увлажняет кожу за счет пленкообразующего эффекта. По выраженности окклюзивного эффекта вазелин считают «золотым стандартом» по отношению к другим веществам. К положительным качествам ланолина относят высокую гигроскопичность и способность впитывать воду, что оказывает на кожу охлаждающее и смягчающее действие (См. Аравийская Е.Р., Соколовский Е.В., Бахтина С.М., Пчелинцев М.В. // Вестник дерматологии и венерологии. - 2010. - №2. - С. 64-70.).
Поскольку ланолин в определенной степени может быть подвержен окислению, при промышленном производстве мазевых основ к ланолину добавляют такой антиоксидант, как гидрокситолуэн (См. Аравийская Е.Р., Соколовский Е.В., Бахтина С.М., Пчелинцев М.В. // Вестник дерматологии и венерологии. - 2010. - №2. - С. 64-70.).
Сущность получения противовоспалительной мази для животных заключается в следующем: исходные компоненты в мас. %, а именно кетопрофен - 2,5-4,5, метилпреднизолона ацепонат - 0,09-0,11, токоферола ацетат - 0,4-0,6, бета-каротин - 0,75-1,25, бутилгидрокситолуен - 0,4-0,6, диметилсульфоксид 10,0-15,0, ланолин безводный - 25,0-23,0, вазелин - остальное смешивают в асептических условиях и упаковывают. При этом, изначально в диметилсульфоксиде растворяют кетопрофен, метилпреднизолона ацепонат, токоферола ацетат, бета-каротин и бутилгидрокситолуен, а затем медленно вливают полученный раствор в расплавленные и смешанные до однородной массы ланолин безводный и вазелин при ее температуре 40°С при постоянном перемешивании, далее перемешивают полученную смесь до образования однородной массы.
Осуществление изобретения
Примеры конкретного выполнения получения и испытания противовоспалительной мази для животных.
Пример 1.
Противовоспалительную мазь для животных готовят путем смешения компонентов в асептических условиях при следующем соотношении компонентов в мас. %:
кетопрофен
1,5
метилпреднизолона ацепонат
0,08
токоферола ацетат
0,3
бета-каротин
0,5
бутилгидрокситолуен
0,3
диметилсульфоксид
7,5
ланолин безводный
26,0
вазелин
остальное
Полученная мазь при применении белым лабораторным крысам, у которых был экспериментально смоделирован воспалительный процесс путем подкожного введения масла терпентинного, приводит к уменьшению болевой реакции при пальпации, уменьшению раздражения и зуда, уменьшению отека и снижению местной температуры в области воспалительного повреждения, а также положительно отражается на динамике лабораторных показателей крови, что проявляется в уменьшении количества лейкоцитов в крови за пять суток проводимого лечения на 4,73%% и снижении скорости оседания эритроцитов на 5,48% за аналогичный период. При этом основные симптомы локального воспаления (хромота, гиперемия, отек, изменение местной температуры) исчезали в среднем на 7,26±0,69 сутки проводимого лечения.
Пример 2.
Проводят аналогично примера 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас. %:
кетопрофен
2,5
метилпреднизолона ацепонат
0,09
токоферола ацетат
0,4
бета-каротин
0,75
бутилгидрокситолуен
0,4
диметилсульфоксид
10,0
ланолин безводный
25,0
вазелин
остальное
Применение полученной мази белым лабораторным крысам приводило к снижению болезненности, раздражения отечности и локальной гипертермии в области патологического процесса. При проведении лабораторного анализа на пятые сутки после начала лечения установлено, что количество лейкоцитов снизилось на 7,21%, а скорость оседания эритроцитов уменьшилась на 6,24%. Исчезновение основных симптомов локального воспаления в среднем зафиксировано на 5,39±0,41 сутки.
Пример 3.
Проводят аналогично примера 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас. %:
кетопрофен
3,5
метилпреднизолона ацепонат
0,1
токоферола ацетат
0,5
бета-каротин
,0
бутилгидрокситолуен
0,5
диметилсульфоксид
12,5
ланолин безводный
24,0
вазелин
остальное
Проведение лечения воспалительного процесса у белых лабораторных крыс с использованием полученной мази способствовало уменьшению боли, отека, раздражения, гиперемии и гиперемии в области локального воспаления. При исследовании крови на пятые сутки после начала лечения отмечается снижение в ней количества лейкоцитов и скорости оседания эритроцитов в среднем на 7,93% и 7,67% соответственно. Исчезновение основных симптомов локального воспаления в среднем зафиксировано на 4,90±0,32 сутки.
Пример 4.
Проводят аналогично примера 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:
кетопрофен
4,5
метилпреднизолона ацепонат
0,11
токоферола ацетат
0,6
бета-каротин
1,25
бутилгидрокситолуен
0,6
диметилсульфоксид
15,0
ланолин безводный
23,0
вазелин
остальное
При использовании полученной мази в лечении белых лабораторных крыс отмечают снижение болевой реакции, уменьшение проявления раздражения, отека и гиперемии в границах топографического расположения пораженных тканей. На пятые сутки проводимой терапии количество лейкоцитов в крови и скорость оседания эритроцитов уменьшились в среднем на 8,19% и 7,11% соответственно. Исчезновение основных симптомов локального воспаления в среднем зафиксировано на 5,02±0,37 сутки.
Пример 5.
Проводят аналогично примера 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас. %:
кетопрофен
5,5
метилпреднизолона ацепонат
0,12
токоферола ацетат
0,7
бета-каротин
1,5
бутилгидрокситолуен
0,7
диметилсульфоксид
17,5
ланолин безводный
22,0
вазелин
остальное
Полученная мазь была применена для лечения локального воспалительного процесса у белых лабораторных крыс, в результате отмечено уменьшение боли, отека, раздражения, гиперемии и местной температуры в области воспалительного поражения. За пять суток проводимого лечения установлено снижение количества лейкоцитов и скорости оседания эритроцитов в среднем на 6,89% и 6,52% соответственно. Исчезновение основных симптомов локального воспаления в среднем зафиксировано на 6,19±0,54 сутки. В целом на фоне положительной динамики клинических показателей, а также лабораторных маркеров воспаления в крови, можно отметить, что результат применения мази в данном примере показал меньшую эффективность чем в примерах 2, 3 и 4, а также увеличилась себестоимость мази в связи с повышением расхода активных компонентов.
Таким образом, наиболее оптимальными являются примеры 2, 3, 4, поскольку, в результате применения мази белым лабораторным крысам, получают больший положительный эффект, заключающийся в уменьшении болезненности, раздражения отечности и локальной гипертермии в области локализации воспалительного процесса, снижении к пятым суткам проводимого лечения с использованием мази скорости оседания эритроцитов - от 6,24% до 7,67% и количества лейкоцитов в крови от 7,21% до 8,19%, а также исчезновению основных симптомов воспаления в промежуток от 4,90±0,32 суток до 5,39±0,41 суток соответственно. При осуществлении этих примеров отмечено положительное влияние применения мази на основные показатели клинического статуса белых лабораторных крыс и течение патологического процесса.
Пример 6.
Для проведения оценки противовоспалительной мази для животных на острую токсичность берут следующее соотношение компонентов в мас. %:
Кетопрофен
3,5
метилпреднизолона ацепонат
0,1
токоферола ацетат
0,5
бета-каротин
1,0
бутилгидрокситолуен
0,5
диметилсульфоксид
12,5
ланолин безводный
24,0
вазелин
остальное
Исследования по изучению острой токсичности противовоспалительной мази для животных проводят на белых лабораторных мышах и лабораторных крысах при однократном внутрижелудочном введении, что позволяет определить летальные дозы, классифицировать мазь по ГОСТ 12.1.007-76 и отнести ее к 3 классу опасности «Вещества умеренно опасные» (фиг. 1, 2, 3).
Пример 7.
Эффективность противовоспалительной мази для животных изучают на коровах согласно примера 3, являющимся наиболее эффективным, который включает следующее соотношение компонентов в мас. %: кетопрофен - 3,5, метилпреднизолона ацепонат - 0,1, токоферола ацетат - 0,5, бета-каротин - 1,0, бутилгидрокситолуен - 0,5, диметилсульфоксид - 12,5, ланолин безводный - 24,0, вазелин - остальное.
Суть эксперимента заключается в том, что используют две группы лакирующих коров в период раздоя больных катаральным маститом, которых разделяют с учетом принципа аналогов на две группы по 10 животных в каждой. Мастит диагностируют во время доения и подтверждают по реакции молока с матотестом. В первой группе применяют препарат «Мастомицин» (ООО «Нита-Фарм», Россия) интерцистернально в пораженную долю молочной железы по одному шприцу дозатору объемом 10 мл с интервалом 12 часов до исчезновения клинических признаков. Аналогичное лечение проводят во второй группе, но дополнительно наружно на пораженную долю молочной железы дважды в сутки, после доения, на протяжении пяти дней тонким слоем наносят противовоспалительную мазь для животных и слегка втирают. При лабораторном исследовании крови определяют маркеры воспаления у коров. Учитывают клиническое состояние животных и ежедневно выполняют тестовое экспресс-определение мастита.
В результате проведенных исследований установлено, что в начале заболевания количество лейкоцитов и скорость оседания эритроцитов (СОЭ) значительно превышали физиологические показатели (фиг. 4). Под воздействием проводимой терапии по мере выздоровления животных данные показатели постепенно снижались. При этом, во второй группе количество эритроцитов было статистически достоверно выше чем в первой группе через пять суток после начала лечения на 28,8% и через десять суток - на 29,3%, а СОЭ - через пять суток достоверно ниже на 19,8% и через десять суток - выше на 17,4% соответственно.
Уровень восстановленного глутатиона в крови коров в начале эксперимента был значительно ниже референтных значений, что может указывать на депрессию системы антиоксидантной защиты организма под воздействием воспалительного процесса и при мастите, в частности. Данный показатель по мере выздоровления возрастал в обеих группах, но в первой группе через пять суток после его начала был ниже чем во второй группе на 8,33%, а через десять суток достоверно ниже - на 12,0%. На начальном этапе опыта в крови коров зафиксирована высокая концентрация диеновых конъюгатов, а дальнейшая динамика этого продукта перекисного окисления липидов была неодинакова у животных из первой и второй групп. В контроле через пять суток после начала лечения значения данного показателя возросли на 16,9%, а во второй группе снизились - на 3,51%. В целом в первой группе данный показатель был выше чем во второй через пять суток после начала лечения на 11,29%, а через десять суток - на 10,00%. Аналогичная динамика наблюдалась относительно малонового диальдегида (МДА) уровень которого на пятые сутки проводимого эксперимента был ниже во второй группе чем в контрольной на 7,25%, а на десятые сутки - ниже на 4,89%.
Один из наиболее значимых показателей в молочном скотоводстве является качество получаемой продукции, что отражается на ее цене. Исходя из этого, было проведено определение некоторых показателей отражающих товарную ценность молока.
Количество белка, жира и сухого обезжиренного молочного остатка на протяжении всего опыта изменялось незначительно, колебания не превышали 2,5% (фиг. 6). Плотность молока через пять суток после начала лечения во второй группе не выходила за пределы нормативных показателей действующего ГОСТа, через десять суток показатели во всех группах соответствовали норме.
Кислотность молока в начале болезни составляла в первой группе 12,3°Т, во второй - 12,7°Т. В дальнейшем данный показатель по мере выздоровления животных приходил в норму. В целом за время проведения эксперимента она нормализовалась и на десятые сутки составила в первой группе 17,5°Т, во второй - 17,7°Т, а молоко соответствовало ГОСТ Р 52054-2003. Наиболее значительные изменения происходили относительно количества соматических клеток в молоке, которое с развитием воспалительного процесса было резко увеличено. В последующем, начиная с пятого дня исследования, происходило постепенное уменьшение количества соматических клеток. Так, в первой группе на пятый день уменьшение составило 3,3 раза, во второй - 4,1 раза. За весь опытный период уменьшение количества соматических клеток составило в первой группе 4,4 раза от первоначальных показателей, а во второй - 5,4 раза соответственно.
Клиническое наблюдение и применение мастотестов дало возможность установить, что в первой группе исчезновение основных клинических признаков происходило в среднем на 1,63 суток позже чем во второй группе (фиг. 5). Этим были обусловлены большие затраты на лечение в контроле, поскольку на каждую пораженную долю вымени у этих животных затрачено в среднем на три шприца дозатора мастомицина больше. Также, в связи с тем, что молоко, полученное от коров больных маститом, не подлежит продовольственному использованию оно утилизировалось. При статистическом анализе установлено, что в перовой группе на 539,7 литров молока было утилизировано больше, чем во второй.
Таким образом, проведенные исследования позволяют сделать вывод о том, что у коров больных маститом использование новой противовоспалительной мази для животных позволяет значительно повысить эффективность стандартной терапевтической схемы и при этом способствует нормализации антиоксидантного статуса у животных.
Результаты проведенного эксперимента свидетельствуют о том, что применение противовоспалительной мази для животных является эффективным способом лечения воспалительной патологии. Происходит это за счет обеспечения выраженного локального противовоспалительного, обезболивающего, противоотечного и антиоксидантного эффекта.
Преимущества предлагаемой противовоспалительной мази для животных в том, что она содержит в комплексе кетопрофен, метилпреднизолона ацепонат, токоферола ацетат, бета-каротин и диметилсульфоксид, а в качестве мазевой основы смесь ланолина безводного и вазелина, стабилизированную бутилгидрокситолуеном, что значительно повышает ее эффективность.
Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие технические преимущества:
- повышение противовоспалительного действия;
- наличие антиоксидантного эффекта;
- увеличение скорости и степени проникновения действующего вещества в очаг воспалительного патологического процесса;
- повышенный противоотечный эффект;
- комплексное действие;
- экономичность в изготовлении и использовании.