СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК БЕЗ БЕЛКОВ И БЕЗ СЫВОРОТКИ

1. Способ получения рекомбинантного фактора VIII из клеточной культуры, включающий
введение клеток млекопитающих, которые содержат последовательности, кодирующие рекомбинантный фактор VIII в среду, не содержащую белков и не содержащую сыворотки, содержающую ультрафильтрованный гидролизат сои, где по меньшей мере 40 % указанного гидролизата сои имеет молекулярную массу ≤500 Дальтон, где указанные клетки экспрессируют указанный рекомбинантный фактор VIII;
выращивание указанных клеток в этой среде и экспрессирование указанного рекомбинантного фактора VIII с получением смеси указанных клеток и указанного рекомбинантного фактора VIII в указанной среде,
выделение указанного рекомбинантного фактора VIII из этой смеси.
2. Способ по п.1, где указанная среда содержит гидролизат сои в количестве превышающем 10 % по весу в пересчете на общий сухой вес среды.
3. Способ по п.1, где указанная среда содержит очищенный гидролизат сои.
4. Способ по п.1, где гидролизат сои имеет содержание эндотоксина <500 ед./г.
5. Способ по п.1, где по меньшей мере 50% гидролизата сои имеет молекулярный вес ≤500 Дальтон.
6. Способ по п.4, где по меньшей мере 55% гидролизата сои имеет молекулярный вес ≤500 Дальтон.
7. Способ по п.1, где указанная среда также содержит аминокислоту.
8. Способ по п.7, где указанная аминокислота выбрана из группы, состоящей из L-аспарагина, L-цистина, L-пролина, L-триптофана, L-глутамина или их смесей.
9. Способ по п. 1, где указанная среда также содержит дополнительные вещества, выбранные из группы, состоящей из буферных веществ, стабилизаторов окисления, стабилизаторов, противодействующих механическому воздействию, и ингибиторов протеаз.
10. Применение среды, не содержащей белков и не содержащей сыворотки, содержащей ультрафильтрованный гидролизат сои, где по меньшей мере 40 % указанного гидролизата сои имеет молекулярную массу ≤500 Дальтон для культивирования рекомбинантных клеток млекопитающих, которые содержат последовательности, кодирующие рекомбинантный фактор VIII.
11. Применение среды, не содержащей белков и не содержащей сыворотки, содержащей ультрафильтрованный гидролизат сои, где по меньшей мере 40 % указанного гидролизата сои имеет молекулярную массу ≤500 Дальтон, для культивирования рекомбинантных клеток млекопитающих, которые содержат последовательности, кодирующие рекомбинантный фактор VIII, выбранных из группы, состоящей из клеток СНО и клеток BHK.
12. Способ культивирования рекомбинантных клеток млекопитающих, которые содержат последовательности, кодирующие рекомбинантный фактор VIII, включающий введение указанных клеток в среду, не содержащую белков и не содержащую сыворотки, содержающую ультрафильтрованный гидролизат сои, где по меньшей мере 40 % указанного гидролизата сои имеет молекулярную массу ≤500 Дальтон и выращивание указанных клеток в указанной среде.
13. Композиция клеточной культуры, содержащая рекомбинантные клетки млекопитающих, содержащие последовательности, кодирующие рекомбинантный фактор VIII и среду, не содержащую белков и не содержащую сыворотки, содержающую ультрафильтрованный гидролизат сои, где по меньшей мере 40 % указанного гидролизата сои имеет молекулярную массу ≤500 Дальтон.
14. Способ получения не содержащей белков и не содержащей сыворотки клеточной культуральной среды, содержащей ультрафильтрованный гидролизат сои, где по меньшей мере 40 % указанного гидролизата сои имеет молекулярную массу ≤500 Дальтон, включающий
получение гидролизата сои;
ультрафильтрацию указанного гидролизата сои с использованием ультрафильтрации;
очищение указанной фракции гидролизата сои с использованием эксклюзионной хроматографии по размеру;
отбор фракции гидролизата сои, состоящей из гидролизата сои, имеющего молекулярную массу ≤500 Дальтон.