СТЕРИЛЬНАЯ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКАЯ СМОЛА И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ В СПОСОБАХ ПРОИЗВОДСТВА

1. Способ снижения бионагрузки хроматографической смолы, включающий:
подвергание контейнера, содержащего композицию, содержащую хроматографическую смолу и по меньшей мере один антиоксидант и/или хелатирующее средство, воздействию дозы гамма-излучения, достаточной для снижения бионагрузки контейнера и хроматографической смолы, где по меньшей мере один антиоксидант и/или хелатирующее средство присутствует в количестве, достаточном для улучшения утраты связывающей способности хроматографической смолы после воздействия дозы гамма-излучения.
2. Способ по п. 1, дополнительно включающий помещение композиции в контейнер перед воздействием.
3. Способ по п. 1, где контейнер является сосудом для хранения.
4. Способ по п. 1, где контейнер является хроматографической колонкой.
5. Способ по п. 1, где контейнер является наполненной хроматографической колонкой.
6. Способ по п. 1, где композиция является суспензией седиментированной хроматографической смолы в жидкости, содержащей по меньшей мере один антиоксидант и/или хелатирующее средство.
7. Способ по п. 1, где композиция является твердой смесью.
8. Способ по п. 1, где композиция содержит по меньшей мере один антиоксидант, выбранный из группы, состоящей из: восстановленного глутатиона, восстановленного тиоредоксина, восстановленного цистеина, каротиноида, мелатонина, ликопина, токоферола, восстановленного убихинона, аскорбата, билирубина, мочевой кислоты, липоевой кислоты, флавоноида, фенилпропионовой кислоты, лидокаина, нарингенина, фуллерена, глюкозы, маннита, 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила и диметилметоксихроманола.
9. Способ по п. 1, где композиция содержит по меньшей мере один антиоксидант, выбранный из группы, состоящей из: маннита, аскорбата натрия, гистидина и метионина.
10. Способ по п. 1, где композиция содержит маннит, аскорбат натрия, гистидин и метионин.
11. Способ по п. 6, где жидкость содержит:
(i) от 75 мМ до приблизительно 125 мМ маннита;
(ii) от 75 мМ до приблизительно 125 мМ метионина;
(iii) от 75 мМ до приблизительно 125 мМ аскорбата натрия;
(iv) от 75 мМ до приблизительно 125 мМ гистидина;
(v) от 30 мМ до приблизительно 70 мМ метионина и от приблизительно 30 мМ до приблизительно 70 мМ гистидина;
(vi) от приблизительно 10 мМ до приблизительно 50 мМ метионина, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 50 мМ гистидина и от приблизительно 10 мМ до приблизительно 50 мМ аскорбата натрия; или
(vii) от приблизительно 5 мМ до приблизительно 45 мМ аскорбата натрия, от приблизительно 5 мМ до приблизительно 45 мМ метионина, от приблизительно 5 мМ до приблизительно 45 мМ маннита и от приблизительно 5 мМ до приблизительно 45 мМ гистидина.
12. Способ по п. 6 или 11, где жидкость является буферным раствором.
13. Способ по п. 1, где композиция содержит по меньшей мере одно хелатирующее средство, выбранное из группы, состоящей из: этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), натриевой соли 2,3-димеркапто-1-пропансульфоновой кислоты (DMPS), димеркаптоянтарной кислоты (DMSA), металлотионеина и дефероксамина.
14. Способ по п. 1, где композиция содержит по меньшей мере одну хроматографическую смолу, выбранную из группы, состоящей из: анионообменной хроматографической смолы, катионообменной хроматографической смолы, аффинной хроматографической смолы, смолы для хроматографии с гидрофобными взаимодействиями и эксклюзионной хроматографической смолы.
15. Способ по п. 14, где композиция содержит аффинную хроматографическую смолу, содержащую белковый лиганд.
16. Способ по п. 15, где белковый лиганд является протеином A.
17. Способ по п. 14, где композиция содержит анионообменную хроматографическую смолу.
18. Способ по п. 17, где анионообменная хроматографическая смола содержит N-бензил-N-метил-этаноламиногруппы.
19. Способ по п. 1, где доза составляет от приблизительно 15 кГр до приблизительно 45 кГр.
20. Способ по п. 19, где доза составляет от приблизительно 20 кГр до приблизительно 30 кГр.
21. Способ по п. 20, где доза составляет от приблизительно 23 кГр и приблизительно 27 кГр.
22. Способ по п. 1, где воздействие осуществляют при температуре от приблизительно -25°C до приблизительно 0°C, включительно.
23. Способ по п. 1, где воздействие осуществляют при температуре от приблизительно 0°C до приблизительно 25°C, включительно.
24. Хроматографическая смола со сниженной бионагрузкой, получаемая способом по п. 3.
-8
-5
25. Хроматографическая смола со сниженной бионагрузкой по п. 24, где смола имеет уровень гарантии стерильности (SAL) от приблизительно 1×10до приблизительно 1×10.
-7
-6
26. Хроматографическая смола со сниженной бионагрузкой по п. 25, где смола имеет уровень гарантии стерильности (SAL) от приблизительно 1×10до приблизительно 1×10.
27. Хроматографическая смола со сниженной бионагрузкой по п. 24, где хроматографическая смола включает по меньшей мере одну смолу, выбранную из группы, состоящей из: анионообменной хроматографической смолы, катионообменной хроматографической смолы, аффинной хроматографической смолы, смолы для хроматографии с гидрофобными взаимодействиями и эксклюзионной хроматографической смолы.
28. Хроматографическая смола со сниженной бионагрузкой по п. 27, где хроматографическая смола содержит аффинную хроматографическую смолу, содержащую белковый лиганд.
29. Хроматографическая смола со сниженной бионагрузкой по п. 28, где белковый лиганд является протеином A.
30. Хроматографическая смола со сниженной бионагрузкой по п. 27, где хроматографическая смола содержит анионообменную хроматографическую смолу.
31. Хроматографическая смола со сниженной бионагрузкой по п. 30, где анионообменная хроматографическая смола содержит N-бензил-N-метил-этаноламиногруппы.
32. Способ получения наполненной хроматографической колонки со сниженной бионагрузкой, включающей:
получение хроматографической смолы со сниженной бионагрузкой по п. 24; и
наполнение хроматографической смолой колонки со сниженной бионагрузкой в асептических условиях.
33. Наполненная хроматографическая колонка со сниженной бионагрузкой, получаемая способом по п. 32.
34. Наполненная хроматографическая колонка со сниженной бионагрузкой, получаемая способом по п. 5.
-8
-5
35. Наполненная хроматографическая колонка со сниженной бионагрузкой по п. 34, где смола в наполненной колонке имеет уровень гарантии стерильности (SAL) от приблизительно 1×10 до приблизительно 1×10.
-7
-6
36. Наполненная хроматографическая колонка со сниженной бионагрузкой по п. 35, где смола имеет уровень гарантии стерильности (SAL) от приблизительно 1×10до приблизительно 1×10.
37. Наполненная хроматографическая колонка со сниженной бионагрузкой по п. 34, где смола в наполненной колонке содержит, по меньшей мере одну смолу, выбранную из группы, состоящей из: анионообменной хроматографической смолы, катионообменной хроматографической смолы, аффинной хроматографической смолы, смолы для хроматографии с гидрофобными взаимодействиями и эксклюзионной хроматографической смолы.
38. Наполненная хроматографическая колонка со сниженной бионагрузкой по п. 37, где смола содержит аффинную или псевдоаффинную хроматографическую смолу, содержащую белковый лиганд.
39. Наполненная хроматографическая колонка со сниженной бионагрузкой по п. 38, где лиганд является протеином A.
40. Наполненная хроматографическая колонка со сниженной бионагрузкой по п. 37, где смола содержит анионообменную хроматографическую смолу.
41. Наполненная хроматографическая колонка со сниженной бионагрузкой по п. 40, где анионообменная хроматографическая смола содержит N-бензил-N-метил-этаноламиногруппы.
42. Композиция, содержащая хроматографическую смолу и по меньшей мере один антиоксидант и/или хелатирующее средство, где по меньшей мере один антиоксидант и/или хелатирующее средство присутствует в количестве, достаточном для улучшения утраты связывающей способности хроматографической смолы после обработки дозой гамма-излучения, достаточной для снижения бионагрузки композиции.
43. Композиция по п. 42, где композиция является суспензией седиментированной хроматографической смолы в жидкости, содержащей по меньшей мере один антиоксидант и/или хелатирующее средство.
44. Композиция по п. 42, где композиция является твердой смесью.
45. Композиция по п. 42, где композиция содержит, по меньшей мере один антиоксидант, выбранный из группы, состоящей из: восстановленного глутатиона, восстановленного тиоредоксина, восстановленного цистеина, каротиноида, мелатонина, ликопина, токоферола, восстановленного убихинона, аскорбата, билирубина, мочевой кислоты, липоевой кислоты, флавоноида, фенилпропионовой кислоты, лидокаина, нарингенина, фуллерена, глюкозы, маннита, 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила и диметилметоксихроманола.
46. Композиция по п. 42, где композиция содержит по меньшей мере один антиоксидант, выбранный из группы, состоящей из: маннита, аскорбата натрия, гистидина и метионина.
47. Композиция по п. 42, где композиция содержит маннит, аскорбат натрия, гистидин, и метионин.
48. Композиция по п. 43, где жидкость содержит:
(i) от 75 мМ до приблизительно 125 мМ маннита;
(ii) от 75 мМ до приблизительно 125 мМ метионина;
(iii) от 75 мМ до приблизительно 125 мМ аскорбата натрия;
(iv) от 75 мМ до приблизительно 125 мМ гистидина;
(v) от 30 мМ до приблизительно 70 мМ метионина и от приблизительно 30 мМ до приблизительно 70 мМ гистидина;
(vi) от приблизительно 10 мМ до приблизительно 50 мМ метионина, от приблизительно 10 мМ до приблизительно 50 мМ гистидина и от приблизительно 10 мМ до приблизительно 50 мМ аскорбата натрия; или
(vii) от приблизительно 5 мМ до приблизительно 45 мМ аскорбата натрия, от приблизительно 5 мМ до приблизительно 45 мМ метионина, от приблизительно 5 мМ до приблизительно 45 мМ маннита и от приблизительно 5 мМ до приблизительно 45 мМ гистидина.
49. Композиция по п. 43 или 48, где жидкость является буферным раствором.
50. Композиция по п. 42, где композиция содержит по меньшей мере одно хелатирующее средство, выбранное из группы, состоящей из: этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), натриевой соли 2,3-димеркапто-1-пропансульфоновой кислоты (DMPS), димеркаптоянтарной кислоты (DMSA), металлотионеина и дефероксамина.
51. Композиция по п. 42, где хроматографическая смола содержит по меньшей мере одну смолу, выбранную из группы, состоящей из: анионообменной хроматографической смолы, катионообменной хроматографической смолы, аффинной хроматографической смолы, смолы для хроматографии с гидрофобными взаимодействиями и эксклюзионной хроматографической смолы.
52. Композиция по п. 51, где смола содержит аффинную хроматографическую смолу, содержащую белковый лиганд.
53. Композиция по п. 52, где белковый лиганд является протеином A.
54. Способ осуществления хроматографии со сниженной бионагрузкой на колонках, включающий:
(a) получение наполненной хроматографической колонки со сниженной бионагрузкой по п. 33 или 34; и
(b) осуществление хроматографии на колонках с использованием наполненной хроматографической колонки со сниженной бионагрузкой и буфера со сниженной бионагрузкой в замкнутой системе.
55. Способ по п. 54, где хроматографию со сниженной бионагрузкой на колонках с использованием наполненной хроматографической колонки со сниженной бионагрузкой осуществляют непрерывно в течение периода по меньшей мере 4 дней.
56. Способ по п. 55, где хроматографию со сниженной бионагрузкой на колонках с использованием наполненной хроматографической колонки со сниженной бионагрузкой осуществляют непрерывно в течение периода по меньшей мере 5 дней.
57. Способ по п. 56, где хроматографию со сниженной бионагрузкой на колонках с использованием наполненной хроматографической колонки со сниженной бионагрузкой осуществляют непрерывно в течение периода по меньшей мере 7 дней.
58. Способ по п. 57, где хроматографию со сниженной бионагрузкой на колонках с использованием наполненной хроматографической колонки со сниженной бионагрузкой осуществляют непрерывно в течение периода, по меньшей мере 14 дней.
59. Способ по п. 58, где хроматографию со сниженной бионагрузкой на колонках с использованием наполненной хроматографической колонки со сниженной бионагрузкой осуществляют непрерывно в течение периода по меньшей мере 28 дней.
60. Способ по п. 54, где смола в наполненной хроматографической колонке со сниженной бионагрузкой в (a) имеет процентную долю связывающей способности от приблизительно 75% до приблизительно 100% по сравнению с той же смолой, не подвергнутой гамма-облучению.
61. Способ по п. 54, где смола в наполненной хроматографической колонке со сниженной бионагрузкой содержит по меньшей мере одну смолу, выбранную из группы, состоящей из: анионообменной хроматографической смолы, катионообменной хроматографической смолы, аффинной хроматографической смолы, смолы для хроматографии с гидрофобными взаимодействиями и эксклюзионной хроматографической смолы.
62. Способ по п. 61, где смола содержит аффинную хроматографическую смолу, содержащую белковый лиганд.
63. Способ по п. 62, где белковый лиганд является протеином A.
64. Способ по п. 61, где смола содержит анионообменную хроматографическую смолу.
65. Интегрированный, замкнутый и непрерывный способ производства очищенного рекомбинантного белка со сниженной бионагрузкой, включающий:
(a) получение жидкой среды для культивирования, содержащей рекомбинантный белок, по существу, не содержащий клетки; и
(b) непрерывный фидинг жидкой среды для культивирования в многоколоночную систему хроматографии (MCCS), содержащую по меньшей мере одну наполненную хроматографическую колонку со сниженной бионагрузкой по п. 33 или 34;
где в способе используют буфер со сниженной бионагрузкой, способ является интегрированным, и его осуществляют непрерывно от жидкой среды для культивирования до элюата из MCCS, являющегося очищенным рекомбинантным белком.
66. Способ по п. 65, где посредством MCCS осуществляют по меньшей мере две разные типовые операции.
67. Способ по п. 65, где способ включает переключение колонок.
68. Способ по п. 65, где посредством MCCS осуществляют типовые операции захвата рекомбинантного белка и инактивация вирусов.
69. Способ по п. 65, где посредством MCCS осуществляют типовые операции захвата и очистки рекомбинантного белка.
70. Способ по п. 65, где MCCS содержит по меньшей мере две наполненные хроматографические колонки со сниженной бионагрузкой.
71. Способ по п. 65, где MCCS является системой периодической противоточной хроматографии.
72. Способ по п. 65, где MCCS включает множество колонок для аффинной или псевдоаффинной хроматографии, катионообменной хроматографии, анионообменной хроматографии, или эксклюзионной хроматографии, или любой их комбинации.
73. Способ по п. 72, где MCCS включает колонку для аффинной хроматографии, и аффинную хроматографию осуществляют способом с механизмом захвата, выбранным из группы, состоящей из: механизма захвата со связыванием протеина A, механизма захвата со связыванием субстрата, механизма захвата со связыванием антитела или фрагмента антитела, механизма захвата со связыванием аптамера и механизма захвата со связыванием кофактора.
74. Способ по п. 73, где аффинную хроматографию осуществляют способом с механизмом захвата со связыванием протеина A, и рекомбинантный белок является антителом или фрагментом антитела.
75. Интегрированный, замкнутый и непрерывный способ производства очищенного рекомбинантного белка со сниженной бионагрузкой, включающий:
(a) получение жидкой среды для культивирования, содержащей рекомбинантный белок, по существу, не содержащий клетки;
(b) непрерывный фидинг жидкой среды для культивирования в первую многоколоночную систему хроматографии (MCCS1);
(c) захват рекомбинантного белка в жидкой среде для культивирования с использованием MCCS1;
(d) получение элюата из MCCS1, содержащего рекомбинантный белок, и непрерывный фидинг элюата во вторую многоколоночную систему хроматографии (MCCS2);
(e) непрерывный фидинг рекомбинантного белка из элюата в MCCS2 и последующую элюцию рекомбинантного белка, чтобы, таким образом, получать очищенный рекомбинантный белок, где:
в способе используют буфер со сниженной бионагрузкой, способ является интегрированным, и его осуществляют непрерывно от жидкой среды для культивирования до очищенного рекомбинантного белка, и
по меньшей мере одна колонка в MCCS1 и/или MCCS2 включает наполненную хроматографическую колонку со сниженной бионагрузкой по п. 33 или 34.
76. Способ по п. 75, где посредством MCCS1 и/или MCCS2 осуществляют по меньшей мере две разные типовые операции.
77. Способ по п. 75, где способ включает переключение колонок.
78. Способ по п. 75, где посредством MCCS1 осуществляют типовые операции захвата рекомбинантного терапевтического белка и инактивации вирусов.
79. Способ по п. 75, где посредством MCCS2 осуществляют типовые операции очистки и тонкой очистки рекомбинантного белка.
80. Способ по п. 75, где MCCS1 и/или MCCS2 включают по меньшей мере две хроматографические колонки.
81. Способ по п. 75, где MCCS1 является первой системой периодической противоточной хроматографии (PCCS1).
82. Способ по п. 75, где захват осуществляют с использованием аффинной хроматографии, катионообменной хроматографии, анионообменной хроматографии, или эксклюзионной хроматографии, или любой их комбинации.
83. Способ по п. 82, где аффинную хроматографию осуществляют с механизмом захвата, выбранным из группы, состоящей из: механизма захвата со связыванием протеина A, механизма захвата со связыванием субстрата, механизма захвата со связыванием антитела или фрагмента антитела, механизма захвата со связыванием аптамера и механизма захвата со связыванием кофактора.
84. Способ по п. 83, где аффинную хроматографию осуществляют с механизмом захвата со связыванием протеина A, и рекомбинантный белок является антителом или фрагментом антитела.
85. Способ по п. 75, где MCCS2 является второй системой периодической противоточной хроматографии (PCCS2).
86. Способ по п. 65 или 75, где рекомбинантный белок является терапевтическим рекомбинантным белком.
87. Способ по п. 86, дополнительно включающий составление очищенного терапевтического рекомбинантного белка в фармацевтической композиции.
88. Способ по п. 65 или 75, где способ осуществляют непрерывно в течение периода по меньшей мере 4 дней.
89. Способ по п. 88, где способ осуществляют непрерывно в течение периода по меньшей мере 5 дней.
90. Способ по п. 89, где способ осуществляют непрерывно в течение периода по меньшей мере 7 дней.
91. Способ по п. 90, где способ осуществляют непрерывно в течение периода по меньшей мере 14 дней.
92. Способ по п. 91, где способ осуществляют непрерывно в течение периода по меньшей мере 28 дней.