КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ СИНДРОМА ШЕГРЕНА
COMPOSITION FOR THE PREVENTION OR TREATMENT OF SJOGREN'S SYNDROME

[Область техники, к которой относится изобретение]
[0001] Настоящее изобретение относится к композиции для предупреждения или лечения синдрома Шегрена.
[Уровень техники]
[0002] Синдром Шегрена является хроническим воспалительным заболеванием экзокринных желез и, в частности, характеризуется уменьшением продукции слезной жидкости и слюны из-за разрушения нормальных тканей слюнных желез и слезных желез. Это заболевание впервые было описано Йоханом Микуличем-Радецким в 1888 году, а назвали его в честь Хенрика Шегрена, шведского офтальмолога, описавшего заболевание у больных ревматоидным артритом в 1933 году.
[0003] Несмотря на то, что главным симптомом этой болезни является уменьшение увлажнения глаз и снижение продукции слюны, эта болезнь, в дополнение к поражению слюнных желез и слезных желез, также может включать различные симптомы поражения кожи, бронхов, слизистой оболочки влагалища у женщин, легких и почек.
[0004] Синдром Шегрена, который возникает вместе с другими аутоиммунными заболеваниями, такими как ревматоидный артрит, системная красная волчанка, склеродермия или дерматомиозит, называют вторичным синдромом Шегрена. Между тем, случай, когда различные симптомы синдрома Шегрена появляются без определенного ревматического заболевания, называют первичным синдромом Шегрена. Наиболее частым заболеванием с вторичным синдромом Шегрена является ревматоидный артрит, при этом у примерно 15% пациентов с ревматоидным артритом наблюдается синдром Шегрена.
[0005] Частота случаев синдрома Шегрена в 9 раз выше у женщин, чем у мужчин, особенно у женщин средних лет, и, по некоторым оценкам, составляет примерно 8 случаев на 10000 женщин.
[0006] Хотя причина этого заболевания еще не была полностью установлена, считается, что в патогенезе этого заболевания участвуют различные факторы, при этом в качестве причин этого заболевания указывались наследственные факторы, такие как случаи заболевания в семье, вирусы, цитокины и аутоиммунные антитела.
[0007] В настоящее время лечения этого заболевания не существует, и главная цель лечения этого заболевания состоит в том, чтобы облегчить симптомы и предотвратить осложнения. Конкретный способ лечения этого заболевания изменяется в зависимости от тяжести симптомов, таких как первичные или вторичные симптомы.
[0008]
[0009] Публикация заявки на патент Республики Корея 10-2018-0084153 относится к композиции, включающей пиримидин и пиридиновые соединения, обладающие ингибирующей активностью в отношении BTK, а также к способу получения этих соединений, и раскрывает, что эти соединения могут применяться для лечения гиперпролиферативных заболеваний, включая рак, волчанку, аллергические заболевания, болезнь Шегрена и ревматоидный артрит.
[0010] В публикации заявки на патент Республики Корея 10-2018-0049144 раскрыто пролекарство нестероидного противовоспалительного средства (НПВС), обладающее очень высокой скоростью проникновения через кожу и оболочки, и его новое фармацевтическое применение.
[0011] (Патентный документ 1) Публикация заявки на патент Республики Корея 10-2018-0084153
[0012] (Патентный документ 2) Публикация заявки на патент Республики Корея 10-2018-0049144
[Описание]
[Техническая задача]
[0013] Цель настоящего изобретения состоит в предоставлении композиции для предупреждения или лечения синдрома Шегрена. Впрочем, цели, достигаемые настоящим изобретением, не ограничиваются целью, описанной выше, и другие цели, не описанные в настоящем документе, будут четко поняты специалистами в данной области из следующего описания.
[Решение технической задачи]
[0014] В одном варианте осуществления настоящего изобретения предложена композиция для предупреждения или лечения синдрома Шегрена, содержащая соединение, представленное следующей Формулой 1, или его фармацевтически приемлемую соль.
[0015] [Формула 1]
[0016]
[0017] в которой
[0018] X представляет собой любой из кислорода, азота или серы; и
1
6
1
6
1
3
1
6
2
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
3
1
6
1
3
1
3
1
6
1
3
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
3
8
3
8
1
6
3
8
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
6
1
3
1
6
1
3
1
6
1
6
1
3
1
6
1
3
1
6
1
6
3
6
1
6
1
6
1
3
3
8
1
6
3
8
1
6
1
6
1
3
1
6
1
3
1
6
1
6
1
6
3
8
1
6
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
3
8
1
6
3
8
1
6
1
6
1
6
1
3
1
6
1
6
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
3
1
3
1
6
3
8
1
6
[0019] Y представляет собой C-C алкил, C-C галогеналкил, (C-C алкилокси)C-C алкил, (C-C алкенилокси)C-C алкил, (C-C алкилкарбонилокси)C-C алкил, (C-C алкилсульфанил)C-C алкил, (арилсульфанил)C-C алкил, (арилсульфонил)C-C алкил, (C-C алкиламино)C-C алкил, [(C-C алкил)(C-C алкил)амино]C-C алкил, [(C-C алкил)(арил)амино]C-C алкил, [(C-C алкил)(арил)C-C алкил]амино C-C алкил, [(C-C алкил) (гетероарил)амино]C-C алкил, (арилкарбониламино)C-C алкил, C-C алкенил, C-C алкинил, C-C оксоалкил, C-C циклоалкил, (C-C циклоалкил)C-C алкил, (C-C циклоалкенил)C-C алкил, (C-C гетероциклоалкил)C-C алкил, [(C-C алкил)C-C гетероциклоалкил]C-C алкил, [(арил)C-C алкил]C-C гетероциклоалкилC-C алкил, [(C-C алкилоксикарбонил)C-C гетероциклоалкил]C-C алкил, [(C-C алкилоксикарбонил) C-C гетероциклоалкил]C-C алкил, (C-C гетероциклоалкил)C-C алкенил, [(C-C алкил) C-C гетероциклоалкенил]C-C алкил, (арил)C-C алкил, [(C-C алкил)арил]C-C алкил, [(C-C алкилокси)арил]C-C алкил, [(арилокси)арил]C-C алкил, [(C-C алкилсульфанил)арил]C-C алкил, [(C-C алкилоксикарбонил)-арил]C-C алкил, [(арилоксикарбонил)арил]C-C алкил, (арил)C-C алкенил, (гетероарил)C-C алкил, [(алкилоксикарбонил)-гетероарил]C-C алкил, [(C-C алкил)C-C гетероарил]C-C алкил, [(C-C циклоалкил)гетероарил]C-C алкил, [(арил)гетероарил]C-C алкил, [(C-C алкил)гетероарил]C-C алкил, [(арил)C-C алкил]гетероарил C-C алкил, (C-C алкилоксикарбонил)C-C алкил, [(C-C гетероциклоалкил)C-C алкилоксикарбонил]C-C алкил, (C-C гетероциклоалкилкарбонил)C-C алкил, [(C-C алкил)C-C гетероциклоалкилкарбонил]C-C алкил, [(C-C алкил)C-C гетероциклоалкилкарбонил]C-C алкил, [(C-C циклоалкил)-оксикарбонилокси]C-C алкил, [(C-C гетероциклоалкил)-оксикарбонилокси]C-C алкил, (уреидо)C-C алкил, (арилуреидо)C-C алкил, [(арил)(C-C алкилуреидо]C-C алкил, (C-C алкиламинокарбонил)C-C алкил, [(C-C гетероциклоалкил)-аминокарбонил]C-C алкил, [(C-C алкил)C-C гетероциклоалкил]-аминокарбонил C-C алкил, [(C-C алкил)(C-C алкилокси)-аминокарбонил]C-C алкил или (оксо C-C гетероциклоалкил)C-C алкил,
1
6
2
6
2
6
2
6
3
8
3
8
3
8
1
3
[0020] где C-C алкил, C-C алкенил, C-C алкинил, C-C оксоалкил, C-C циклоалкил, C-C циклоалкенил, C-C гетероциклоалкенил, арил или гетероарил может быть замещен по меньшей мере одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из C-C алкильной, фтор, хлор, бром, гидрокси, оксо, нитро и цианогруппы.
[0021] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения соль может быть солью присоединения кислоты, образованной с фармацевтически приемлемой свободной кислотой.
[0022] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения свободная кислота может быть органической кислотой или неорганической кислотой.
[0023] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения органическая кислота может быть выбрана из группы, состоящей из лимонной кислоты, уксусной кислоты, молочной кислоты, винной кислоты, малеиновой кислоты, фумаровой кислоты, муравьиной кислоты, пропионовой кислоты, щавелевой кислоты, дихлоруксусной кислоты, трифторуксусной кислоты, адипиновой кислоты, аскорбиновой кислоты, бензойной кислоты, 4-ацетамидобензойной кислоты, глюконовой кислоты, сульфоновой кислоты, метансульфоновой кислоты, каприновой кислоты, капроновой кислоты, каприловой кислоты, карбоновой кислоты, коричной кислоты, цикламиновой кислоты, додецилсульфоновой кислоты, этан-1,2-дисульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, 2-гидроксиэтансульфоновой кислоты, галактаровой кислоты, гентизиновой кислоты, глутаровой кислоты, 2-оксоглутаровой кислоты, глицерофосфорной кислоты, гиппуровой кислоты, олеиновой кислоты, оротовой кислоты, пальмитиновой кислоты, памовой кислоты, пироглутаминовой кислоты, себациновой кислоты, стеариновой кислоты, тиоциановой кислоты, ундециленовой кислоты, изомасляной кислоты, лауриновой кислоты, миндальной кислоты, нафталин-1,5-дисульфоновой кислоты, нафталин-2-сульфоновой кислоты, нафтойной кислоты, никотиновой кислоты, гликолевой кислоты, янтарной кислоты, 4-толуолсульфоновой кислоты, камфорсульфоновой кислоты, глутаминовой кислоты, аспарагиновой кислоты, салициловой кислоты, 4-аминосалициловой кислоты, малоновой кислоты, яблочной кислоты и бензолсульфоновой кислоты, а неорганическая кислота может быть выбрана из группы, состоящей из соляной кислоты, бромноватой кислоты, серной кислоты, азотной кислоты и фосфорной кислоты.
[0024] Согласно варианту осуществления настоящего изобретения фармацевтически приемлемая соль соединения Формулы 1 может быть выбрана из следующего:
[0025] 1) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гликолят;
[0026] 2) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата лактат;
[0027] 3) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата салицилат;
[0028] 4) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата оксалат;
[0029] 5) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата малонат;
[0030] 6) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата малеат;
[0031] 7) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата тартрат;
[0032] 8) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата малеат;
[0033] 9) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата фумарат;
[0034] 10) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата цитрат;
[0035] 11) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата бензолсульфонат;
[0036] 12) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата тозилат;
[0037] 13) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гидрохлорид;
[0038] 14) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата сульфат;
[0039] 15) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата фосфат;
[0040] 16) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата ацетат;
[0041] 17) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата дихлорацетат;
[0042] 18) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата адипат;
[0043] 19) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата аскорбат;
[0044] 20) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата бензоат;
[0045] 21) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 4-ацетамидобензоат;
[0046] 22) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата капринат;
[0047] 23) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата капронат;
[0048] 24) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата каприлат;
[0049] 25) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата карбонат;
[0050] 26) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата циннамат;
[0051] 27) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата цикламат;
[0052] 28) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата додецилсульфонат;
[0053] 29) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата этан-1,2-дисульфонат;
[0054] 30) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата этансульфонат;
[0055] 31) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 2-гидроксиэтансульфонат;
[0056] 32) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата формиат;
[0057] 33) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата галактарат;
[0058] 34) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гентизат;
[0059] 35) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата глутамат;
[0060] 36) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата глутарат;
[0061] 37) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 2-оксоглутарат;
[0062] 38) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата глицерофосфат;
[0063] 39) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гиппурат;
[0064] 40) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата олеат;
[0065] 41) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата оротат;
[0066] 42) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата пальмитат;
[0067] 43) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата памоат;
[0068] 44) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата пропионат;
[0069] 45) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата пироглутамат;
[0070] 46) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 4-аминосалицилат;
[0071] 47) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата себацинат;
[0072] 48) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата стеарат;
[0073] 49) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата тиоцианат;
[0074] 50) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата ундециленат;
[0075] 51) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гидробромат;
[0076] 52) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата изобутират;
[0077] 53) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата лаурат;
[0078] 54) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата DL-манделат;
[0079] 55) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата метансульфонат;
[0080] 56) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата нафталин-1,5-дисульфонат;
[0081] 57) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата нафталин-2-сульфонат;
[0082] 58) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 2-нафтоат;
[0083] 59) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата никотинат;
[0084] 60) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата нитрат;
[0085] 61) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата сукцинат;
[0086] 62) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата сульфонат; и
[0087] 63) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата L-аспартат.
[0088]
[0089] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения композиция может дополнительно содержать носитель, эксципиент, разбавитель, наполнитель, антиагрегант, смазывающее вещество, смачивающее вещество, ароматизатор, эмульгатор или консервант.
[0090] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения композиция может быть сформулирована в форме порошка, гранулы, таблетки, эмульсии, сиропа, аэрозоля, мягкой или твердой желатиновой капсулы, стерильного раствора для инъекций или стерильного порошка.
[0091] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения композиция может увеличивать продукцию слезной жидкости и секрецию слюны.
[0092] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения композиция может снижать уровни экспрессии мРНК провоспалительных цитокинов и хемотаксических цитокинов иммунных клеток в тканях слезных и слюнных желез.
[0093] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения композиция может активировать выживание и рост клеток, формирующих ткани слезных желез и слюнных желез.
[Полезные эффекты]
[0094] Композиция для предупреждения или лечения синдрома Шегрена согласно варианту осуществления настоящего изобретения может увеличивать продукцию слезной жидкости и секрецию слюны, а также может снижать уровни экспрессии мРНК провоспалительных цитокинов и хемотаксических цитокинов иммунных клеток в тканях слезных и слюнных желез.
[0095] Кроме того, композиция для предупреждения или лечения синдрома Шегрена согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения может снижать уровни экспрессии цитокиновых белков в тканях слезных и слюнных желез, уменьшать воспаление и способна регенерировать ткань путем увеличения роста клеток. Таким образом, композиция может замедлять возникновение синдрома Шегрена и, таким образом, может применяться в целях предупреждения или лечения синдрома Шегрена.
[0096]
[Описание чертежей]
[0097] ФИГ. 1 представляет собой график, на котором показана продукция слезной жидкости в модели синдрома Шегрена.
[0098] ФИГ. 2 является графиком, на котором показана скорость слюноотделения в модели синдрома Шегрена.
[0099] На ФИГ. 3 показаны результаты измерения экспрессии белков IL-17A и p-AKT и их количественный анализ.
[00100] На ФИГ. 4a и 4b показаны результаты количественного определения мРНК провоспалительных цитокинов и хемотаксических цитокинов.
[00101] На ФИГ. 5 показаны результаты измерения экспрессии белка IL-17A и аутоантител (против SSA/Ro и против SSB/La) в плазме крови.
[00102] На ФИГ. 6 представлены фотографии, на которых показаны изменения воспалительных фенотипов в модели заболевания на животных.
[00103] На ФИГ. 7 показаны баллы заболевания, полученные при оценке фенотипических изменений.
[Наилучший вариант]
[00104] Далее настоящее изобретение будет описано подробно, чтобы его могли легко осуществить средние специалисты в области техники, к которой относится настоящее изобретение.
[00105] Настоящее изобретение может быть реализовано во множестве различных форм и не ограничивается вариантами осуществления и примерами, описанными в настоящем документе.
[00106] Следует понимать, что если в тексте настоящего описания указано, что какая-либо часть "включает" какой-либо компонент, это не исключает присутствия других компонентов, и она может дополнительно включать другие компоненты, если не указано иное. При использовании в настоящем описании термин, представляющий некую степень, например "приблизительно" и "по существу", означает, что любое значение является идентичным или близким к указанному числовому значению, когда предусмотрена неизбежная погрешность процесса производства, и используется для предотвращения любого недобросовестного нарушения в результате неправомерного применения изобретения, содержащего точное или абсолютное числовое значение, которое указано для лучшего понимания настоящего изобретения. При использовании в тексте настоящего описания термин "этап (выполнения) ~" или "этап ~" не означает "этап для ~".
[00107] В настоящем описании термин "их комбинация", включаемый в выражения по типу структур Маркуша, относится к смеси или комбинации одной или более единиц, выбранных из группы, состоящей из компонентов, описанных выражением по типу структур Маркуша, и относится к включению одной или более единиц, выбранных из группы, состоящей из компонентов.
[00108] В настоящем документе описание "A и/или B" означает "A", "B" или "A и B".
[00109] При использовании в настоящем изобретении термин "гетероциклоалкил" или "гетероциклоалкенил" относится к циклоалкильной группе, имеющей один или больше атомов азота, кислорода и серы в качестве замещающего атома(ов) на насыщенных атомах углерода или имеющей одинаковые или разные атомы заместителей в одном, двух или трех последовательных или непоследовательных положениях. Примеры гетероциклоалкила или гетероциклоалкенила включают, без ограничения перечисленными, азиридин, оксиран, азетидин, оксетан, пирролидин, пирролин, пиразолидин, пиразолин, имидазолидин, имидазолин, триазолидин, оксазолидин, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, тиазолидин, диоксолан, диоксол, оксатиолан, тетрагидрооксазин, тиоморфолин, дитиан, пиперидин, пиперазин, пиран, диоксан и азепан.
[00110] Термин "арил" при использовании в настоящем документе охватывает бензол, нафталин, антрацен или фенантрен, но не ограничивается этим. Кроме того, при использовании в настоящем документе термин "гетероарил" относится к арильной группе, имеющей один или более атомов азота, кислорода и серы в качестве замещающего атома(ов) или имеющей одинаковые или разные атомы заместителей в одном, двух или трех последовательных или непоследовательных положениях. Конкретные примеры гетероарила включают, без ограничения перечисленными, пиррол, имидазол, пиразол, триазол, фуран, тиофен, оксазол, изоксазол, тиазол, изотиазол, оксадиазол, тиадиазол, пиридин, пиримидин, пиразин, пиридазин, триазин, азепин, индол, бензимидазол, индазол, бензоксазол, бензоизоксазол, бензотиазол, бензотриазол, бензофуран, бензотиофен, хинолин, изохинолин, хиноксалин, хиназолин, циннолин, нафтиридин, фталазин, бензопиран, бензоксазин, бензотриазин, хроман, хромен, бензодиоксан, акридин, фенотиазин, феноксазин и карбазол.
[00111]
[00112] Настоящее изобретение относится к композиции для предупреждения или лечения синдрома Шегрена. Композиция для предупреждения или лечения синдрома Шегрена согласно настоящему изобретению может содержать соединение, представленное следующей Формулой 1, или его фармацевтически приемлемую соль.
[00113]
[00114] Синдром Шегрена представляет собой аутоиммунное заболевание, при котором воспалительные клетки инфильтрируют слезные и слюнные железы, что приводит к хроническому воспалению неизвестной этиологии. Известно, что это заболевание вызвано потерей контроля иммунной системы, которая является защитной системой организма. По этой причине воспалительные клетки проникают в слезные и слюнные железы, которые являются секретирующими железами, поддерживающими влажность тела, при этом нормальные клетки разрушаются и уже не могут поддерживать свою функцию. Композицию согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения можно вводить перорально, повышая, таким образом, продукцию слезной жидкости и секрецию слюны, при этом она может снижать уровни экспрессии мРНК провоспалительных цитокинов и хемотаксических цитокинов иммунных клеток в тканях слезных и слюнных желез. Кроме того, композиция может снижать уровни экспрессии цитокиновых белков в тканях слезных и слюнных желез, уменьшать воспаление, а также обладает способностью регенерировать ткань в результате увеличения роста клеток. Таким образом, композиция может замедлять возникновение синдрома Шегрена и, таким образом, может применяться в качестве терапевтического средства при лечении синдрома Шегрена.
[00115]
[00116] Далее компоненты и свойства композиции для предупреждения или лечения синдрома Шегрена согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения будут описаны более подробно.
[00117]
[00118] Композиция для предупреждения или лечения синдрома Шегрена согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать соединение, представленное следующей Формулой 1, или его фармацевтически приемлемую соль:
[00119] [Формула 1]
[00120]
[00121] где
[00122] X представляет собой любой из кислорода, азота или серы; и
1
6
1
6
1
3
1
6
2
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
3
1
6
1
3
1
3
1
6
1
3
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
3
8
3
8
1
6
3
8
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
6
1
3
1
6
1
3
1
6
1
6
1
3
1
6
1
3
1
6
1
6
3
6
1
6
1
6
1
3
3
8
1
6
3
8
1
6
1
6
1
3
1
6
1
3
1
6
1
6
1
6
3
8
1
6
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
3
8
1
6
3
8
1
6
1
6
1
6
1
3
1
6
1
6
1
6
3
8
1
6
1
3
3
8
1
6
1
3
1
3
1
6
3
8
1
6
[00123] Y представляет собой C-C алкил, C-C галогеналкил, (C-C алкилокси)C-C алкил, (C-C алкенилокси)C-C алкил, (C-C алкилкарбонилокси)C-C алкил, (C-C алкилсульфанил)C-C алкил, (арилсульфанил)C-C алкил, (арилсульфонил)C-C алкил, (C-C алкиламино)C-C алкил, [(C-C алкил)(C-C алкил)амино]C-C алкил, [(C-C алкил) (арил) амино]C-C алкил, [(C-C алкил) (арил) C-C алкил]амино C-C алкил, [(C-C алкил)(гетероарил)-амино]C-C алкил, (арилкарбониламино)C-C алкил, C-C алкенил, C-C алкинил, C-C оксоалкил, C-C циклоалкил, (C-C циклоалкил)C-C алкил, (C-C циклоалкенил)C-C алкил, (C-C гетероциклоалкил)C-C алкил, [(C-C алкил)C-C гетероциклоалкил]C-C алкил, [(арил)C-C алкил]C-C гетероциклоалкилC-Cалкил, [(C-C алкилоксикарбонил)C-C гетероциклоалкил]C-C алкил, [(C-C алкилоксикарбонил)C-C гетероциклоалкил]C-C алкил, (C-C гетероциклоалкил)C-C алкенил, [(C-C алкил)C-C гетероциклоалкенил]C-C алкил, (арил)C-C алкил, [(C-C алкил)арил]C-C алкил, [(C-C алкилокси)арил]C-C алкил, [(арилокси)арил]C-C алкил, [(C-C алкилсульфанил)арил]C-C алкил, [(C-C алкилоксикарбонил)-арил]C-C алкил, [(арилоксикарбонил)арил]C-C алкил, (арил)C-C алкенил, (гетероарил)C-C алкил, [(алкилоксикарбонил)-гетероарил]C-C алкил, [(C-C алкил)C-C гетероарил]C-C алкил, [(C-C циклоалкил)гетероарил]C-C алкил, [(арил)гетероарил]C-C алкил, [(C-C алкил)гетероарил]C-C алкил, [(арил)C-C алкил] гетероарил C-Cалкил, (C-C алкилоксикарбонил)C-C алкил, [(C-C гетероциклоалкил)C-C алкилоксикарбонил]C-C алкил, (C-C гетероциклоалкилкарбонил)C-C алкил, [(C-C алкил)C-C гетероциклоалкилкарбонил]C-C алкил, [(C-C алкил)C-C гетероциклоалкилкарбонил]C-C алкил, [(C-C циклоалкил)-оксикарбонилокси]C-C алкил, [(C-C гетероциклоалкил)-оксикарбонилокси]C-C алкил, (уреидо)C-C алкил, (арилуреидо)C-C алкил, [(арил)(C-C алкилуреидо]C-C алкил, (C-C алкиламинокарбонил)C-C алкил, [(C-C гетероциклоалкил)-аминокарбонил]C-C алкил, [(C-C алкил) C-C гетероциклоалкил]-аминокарбонил C-C алкил, [(C-C алкил)(C-C алкилокси)аминокарбонил]C-C алкил или (оксо C-C гетероциклоалкил)C-C алкил,
1
6
2
6
2
6
2
6
3
8
3
8
3
8
1
3
[00124] где C-C алкил, C-C алкенил, C-C алкинил, C-C оксоалкил, C-C циклоалкил, C-C циклоалкенил, C-C гетероциклоалкенил, арил или гетероарил может быть замещен по меньшей мере одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из C-C алкильной, фтор, хлор, бром, гидрокси, оксо, нитро и цианогруппы.
[00125]
1
3
[00126] В настоящем описании X-Y обозначает аминокислоту или (C-C алкиловый) сложный эфир аминокислоты. Аминокислота относится, без ограничения, к глицину, лейцину, метионину, валину, аланину, изолейцину, пролину, триптофану, фенилаланину, серину, треонину, аспарагину, глутаминовой кислоте, лизину, гистидину или тирозину.
[00127]
[00128] Было экспериментально подтверждено, что композиция для предупреждения или лечения синдрома Шегрена согласно настоящему изобретению является эффективной для профилактики или лечения синдрома Шегрена, так как содержит соединение, представленное Формулой 1, или его фармацевтически приемлемую соль.
in vivo
[00129] Соединение, представленное Формулой 1, является предшественником ребамипида, обладающим превосходной скоростью всасывания  по сравнению с ребамипидом.
[00130]
[00131] Фармацевтически приемлемая соль соединения, представленного Формулой 1, согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения может быть солью присоединения кислоты, образованной с фармацевтически приемлемой свободной кислотой. В качестве свободной кислоты может использоваться органическая кислота или неорганическая кислота. Примеры органической кислоты включают, без ограничения перечисленными, лимонную кислоту, уксусную кислоту, молочную кислоту, винную кислоту, малеиновую кислоту, фумаровую кислоту, муравьиную кислоту, пропионовую кислоту, щавелевую кислоту, дихлоруксусную кислоту, трифторуксусную кислоту, адипиновую кислоту, аскорбиновую кислоту, бензойную кислоту, 4-ацетамидобензойную кислоту, глюконовую кислоту, сульфоновую кислоту, метансульфоновую кислоту, каприновую кислоту, капроновую кислоту, каприловую кислоту, карбоновую кислоту, коричную кислоту, цикламиновую кислоту, додецилсульфоновую кислоту, этан-1,2-дисульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, 2-гидроксиэтансульфоновую кислоту, галактаровую кислоту, гентизиновую кислоту, глутаровую кислоту, 2-оксоглутаровую кислоту, глицерофосфорную кислоту, гиппуровую кислоту, олеиновую кислоту, оротовую кислоту, пальмитиновую кислоту, помовую кислоту, пироглутаминовую кислоту, себациновую кислоту, стеариновую кислоту, тиоциановую кислоту, ундециленовую кислоту, изомасляную кислоту, лауриновую кислоту, миндальную кислоту, нафталин-1,5-дисульфоновую кислоту, нафталин-2-сульфоновую кислоту, нафтойную кислоту, никотиновую кислоту, гликолевую кислоту, янтарную кислоту, 4-толуолсульфоновую кислоту, камфорсульфоновую кислоту, глутаминовую кислоту, аспарагиновую кислоту, салициловую кислоту, 4-аминосалициловую кислоту, малоновую кислоту, яблочную кислоту и бензосульфоновую кислоту. Кроме того, примеры неорганической кислоты включают, без ограничения перечисленными, соляную кислоту, бромноватую кислоту, серную кислоту, азотную кислоту и фосфорную кислоту.
[00132]
[00133] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения соединения-соли предшественника ребамипида включают, без ограничения перечисленными, следующее:
[00134] 1) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гликолят;
[00135] 2) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата лактат;
[00136] 3) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата салицилат;
[00137] 4) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата оксалат;
[00138] 5) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата малонат;
[00139] 6) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата малеат;
[00140] 7) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата тартрат;
[00141] 8) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата малеат;
[00142] 9) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата фумарат;
[00143] 10) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата цитрат;
[00144] 11) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата бензолсульфонат;
[00145] 12) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата тозилат;
[00146] 13) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гидрохлорид;
[00147] 14) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата сульфат;
[00148] 15) 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата фосфат;
[00149] 16) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата ацетат;
[00150] 17) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата дихлорацетат;
[00151] 18) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата адипат;
[00152] 19) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата аскорбат;
[00153] 20) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата бензоат;
[00154] 21) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 4-ацетамидобензоат;
[00155] 22) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата капринат;
[00156] 23) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата капронат;
[00157] 24) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата каприлат;
[00158] 25) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата карбонат;
[00159] 26) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата циннамат;
[00160] 27) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата цикламат;
[00161] 28) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата додецилсульфонат;
[00162] 29) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата этан-1,2-дисульфонат;
[00163] 30) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата этансульфонат;
[00164] 31) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 2-гидроксиэтансульфонат;
[00165] 32) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата формиат;
[00166] 33) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата галактарат;
[00167] 34) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гентизат;
[00168] 35) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата глутамат;
[00169] 36) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата глутарат;
[00170] 37) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 2-оксоглутарат;
[00171] 38) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата глицерофосфат;
[00172] 39) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гиппурат;
[00173] 40) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата олеат;
[00174] 41) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата оротат;
[00175] 42) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата пальмитат;
[00176] 43) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата памоат;
[00177] 44) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата пропионат;
[00178] 45) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата пироглутамат;
[00179] 46) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 4-аминосалицилат;
[00180] 47) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата себацинат;
[00181] 48) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата стеарат;
[00182] 49) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата тиоцианат;
[00183] 50) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата ундециленат;
[00184] 51) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата гидробромат;
[00185] 52) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата изобутират;
[00186] 53) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата лаурат;
[00187] 54) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата DL-манделат;
[00188] 55) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата метансульфонат;
[00189] 56) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата нафталин-1,5-дисульфонат;
[00190] 57) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата нафталин-2-сульфонат;
[00191] 58) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата 2-нафтоат;
[00192] 59) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата никотинат;
[00193] 60) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата нитрат;
[00194] 61) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата сукцинат;
[00195] 62) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата сульфонат; и
[00196] 63) 2-морфолин-4-ил-этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата L-аспартат.
[00197]
[00198] Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения соединение, представленное Формулой 1, может быть представлено любой из следующих Формул 1-1-1-6:
[00199] [Формула 1-1]
[00200]
[00201] [Формула 1-2]
[00202]
[00203] [Формула 1-3]
[00204]
[00205] [Формула 1-4]
[00206]
[00207] [Формула 1-5]
[00208]
[00209] [Формула 1-6]
[00210]
[00211] В то же время, фармацевтически приемлемая соль соединения Формулы 1 согласно настоящему изобретению может быть получена из соединения Формулы 1, получаемого при взаимодействии соединения следующей Формулы 2 с соединением следующей Формулы 3:
[00212] [Формула 2]
[00213]
[00214]
[00215] [Формула 3]
[00216] Y-Z
[00217] где
[00218] X и Y имеют определенное выше значение, и Z является гидроксигруппой, аминогруппой, амином, галогеном или уходящей группой.
[00219]
2
[00220] В одном варианте осуществления настоящего изобретения Z представляет собой гидроксил, -NH, Cl, Br, алкилсульфонил или арилсульфонил.
[00221]
[00222] В частности, фармацевтически приемлемая соль соединения Формулы 1 согласно настоящему изобретению может быть получена из соединения Формулы 1, получаемого способом, показанным на следующей Схеме реакции 1, но не ограниченным этим.
[00223] [Схема реакции 1]
[00224]
[00225] где X представляет собой любой из кислорода, азота или серы.
[00226] Соединение формулы 2, используемое в качестве исходного материала в Схеме реакции 1 выше, может быть получено способом, описанным в патенте США 4,578,381. Неорганическая соль, показанная на Схеме реакции 1 выше, может быть неорганическим основанием, таким как бикарбонат натрия, карбонат натрия, бикарбонат калия, карбонат калия или карбонат цезия, растворителем может быть ацетон, диметилформамид, диметилсульфоксид или ацетонитрил, и реакцию могут проводить при температуре от 10 до 100°C в течение 1-24 часов. На представленной выше схеме реакции DCC обозначает дициклогексилкарбодиимид; DMAP обозначает 4-диметиламинопиридин; HOBT обозначает 1-гидроксибензотриазол; и EDCI обозначает гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида. Кроме того, Y-OM или Y-OT представляет собой сульфонильную группу и включает алкилсульфонильную группу, такую как метансульфонильная группа; или арилсульфонильную группу, такую как паратолуолсульфонильная, бензолсульфонильная или 4-нитробензолсульфонильная группа.
[00227]
[00228] Соединение Формулы 2, в которой X в Схеме реакции 1 выше представляет собой серу, может быть получено способом, показанным на Схеме реакции 2 ниже.
[00229] [Схема реакции 2]
[00230]
[00231] На Схеме реакции 2 выше, гидросульфид натрия может использоваться в количестве 1-10 эквивалентов, предпочтительно 4-6 эквивалентов, и сульфид натрия может использоваться в количестве 1-5 эквивалентов, предпочтительно 2-3 эквивалентов. На Схеме реакции 2 выше, диметилформамид, диметилсульфоксид или ацетонитрил могут использоваться в качестве растворителя, и реакцию могут проводить при 10-100°C в течение 1-24 часов. На представленной выше схеме реакции NCS означает N-хлорсукцинимид.
[00232]
[00233] Фармацевтически эффективное количество соединения, представленного Формулой 1, или его соли согласно настоящему изобретению может составлять 0,5-100 мг/день, в частности 1-30 мг/день на 1 кг массы тела пациента. Впрочем, фармацевтически эффективное количество может быть соответствующим образом изменено в зависимости от тяжести симптомов заболевания, возраста пациента, массы тела, состояния здоровья и пола, пути введения и периода лечения.
[00234]
[00235] Кроме того, композиция согласно настоящему изобретению может дополнительно содержать фармацевтически приемлемые добавки. При использовании в настоящем документе термин "фармацевтически приемлемый" означает то, что является физиологически приемлемым и при введении человеку обычно не вызывает аллергических реакций, таких как желудочно-кишечное расстройство и головокружение, или аналогичных реакций. Примеры добавок включают носители, эксципиенты и разбавители. Примеры носителей, эксципиентов и разбавителей включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, ксилит, эритрит, мальтит, крахмал, гуммиарабик, альгинат, желатин, фосфат кальция, силикат кальция, целлюлозу, метилцеллюлозу, поливинилпирролидон, воду, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеарат магния и минеральное масло. Кроме того, композиция может дополнительно содержать наполнитель, антиагрегант, смазывающее вещество, смачивающее вещество, ароматизатор, эмульгатор, консервант и т.п.
[00236] Кроме того, фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут быть сформулированы с использованием способов, известных в данной области, для обеспечения быстрого, замедленного или отсроченного высвобождения действующего вещества после введения млекопитающему. Кроме того, фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может быть сформулирована таким образом, чтобы обеспечивать быстрое, замедленное или отсроченное высвобождение действующего вещества после введения млекопитающему с применением способов, известных в данной области. Состав может иметь форму порошков, гранул, таблеток, эмульсий, сиропов, аэрозолей, мягких или твердых желатиновых капсул, стерильных растворов для инъекций или стерильных порошков.
[00237]
[00238] Фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению могут вводить различными путями, включая пероральный, трансдермальный, подкожный, внутривенный или внутримышечный пути. Дозу действующего вещества могут соответствующим образом выбирать в зависимости от различных факторов, таких как путь введения, а также возраст, пол, вес и тяжесть заболевания пациента. Кроме того, действующее вещество могут вводить в комбинации с соединением, которое, как известно, обладает профилактическим или терапевтическим эффектом, в зависимости от типа заболевания, подлежащего лечению.
[Способ осуществления изобретения]
-/-
[00239] Далее будут подробно описаны эксперименты для оценки противовоспалительного действия и регенерации ткани при пероральном введении композиции согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения при использовании модели синдрома Шегрена (Nfkbiz или IkB-ξ-дефицитные мыши, C57BL/6).
[00240]
1. Подготовка к экспериментам
[00241]
[00242] 1.1 Подопытные животные и условия
-/-
[00243] Животные возрастом 7-12-недель для использования в модели аутоиммунного заболевания, синдрома Шегрена (Nfkbiz или IkB-ξ-дефицитные самцы мышей, C57BL/6) были приобретены в больнице Asan, Сеул. Среду в виварии поддерживали при условиях температуры 25±5°C и влажности 55-70% с циклом 12 часов света/12 часов темноты. Животным обеспечивали доступ к стерилизованному наполнителю, гранулированному сухому корму Teklad 2018S (Envigo, стерилизуемый) для лабораторных животных и стерильной очищенной воде без ограничения. Сразу после поступления животных, их взвешивали и распределяли в группы с учетом их возраста и фенотипа синдрома Шегрена. Все эксперименты на животных в этом исследовании выполняли согласно Стандартным операционным процедурам с одобрения комиссии по этике экспериментов на животных Samjin Pharmaceutical Co., Ltd. (номер разрешения: SJ-2016-001).
[00244]
[00245] 1.2 Экспериментальное оборудование и реагенты
[00246] - Экспериментальное оборудование: стерилизованные клетки, стерилизованная вода, увлажнитель, влагопоглотитель, терморегулятор влажности, шприцы на 1 мл, маркеры, весы, флаконы на 20 мл, зонды (иглы для кормления), хирургические инструменты, e-трубки, стереомикроскоп, ламинарный бокс и микропипетки
[00247] - Реагенты и материалы: нить, пропитанная феноловым красным (Zone-Quick; Oasis Glendora, CA), смесь IQ SYBR Green Supermix (Bio-rad), набор для получения кДНК (BR170-8891, Bio-rad), Альфаксалон (анестетик), антитело к фосфо-Akt (S473) (Cell Signaling, #4060), антитело к IL-17A (Santacruz, #sc-374218), антитело к бета-актину (Sigma-Aldrich, #A5316), пилокарпина гидрохлорид (Sigma, P6503), гепарин (Green Cross Corp.)
[00248] - Буфер для лизиса RIPA (50 мМ Трис-Cl pH 7,4, 150 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 1% Triton X-100, 0,1% SDS, 1% дезоксихолата натрия, 0,5 мМ фенилметилсульфонилфторида, 2 мкг/мл лейпептина, 2 мкг/мл апротинина, 10 мМ NaF и 1 мМ ортованадата натрия.
[00249] - Набор для ИФА: IL-17A (Signosis, #EA-2516), антитело к SSA (Signosis, #EA-5202), антитело к SSB (Signosis, #EA-5204)
[00250]
[00251] 1.3. Экспериментальные группы и состав эксципиентов
[00252] [Таблица 1]
<b>Группы</b>
<b>Назначенное вмешательство</b>
Плацебо компаратор (N/C, контроль)
ЛС: плацебо (несущая среда, 3% Tween 80)
Активный компаратор SA001 (80 мг/кг, два раза в день)
ЛС: пероральное введение SA001 два раза в день в течение 5 недель
[00253] SA001 представляет собой малонат 2-(морфолин-4-ил)этил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата и был получен следующим способом.
[00254]
[00255]
[00256] 1 г (2,07 ммоль) 2-морфолин-4-илэтил-2-(4-хлорбензоиламино)-3-(2-оксо-1,2-дигидрохинолин-4-ил)пропионата и 0,22 г (2,07 ммоль) малоновой кислоты подвергали реакции с получением указанного в заголовке соединения (1,1 г) в виде белого твердого вещества.
1
[00257] H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): 11,71 (с, 1H), 9,06 (д, 1H), 7,83 (т, 3H), 7,59 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,52 (т, 1H), 7,32 (д, 1H), 7,24 (т, 1H), 6,46 (с, 1H), 4,77 (м, 1H), 4,24 (м, 2H), 3,51-3,46 (м, 5H), 3,29 (к, 1H), 3,19 (с, 2H), 2,70-2,61 (м, 2H), 2,51 (т, 2H), 2,47 (ш, 4H).
[00258]
2. Экспериментальный метод
[00259]
[00260] 2.1 Схема введения и длительность введения
[00261]: Пероральное введение (п/о), два раза в день (10 ч, 16 ч), в течение 5 недель (35 дней)
[00262]
[00263] 2.2 Анестезия (в/в)
[00264]: Альфаксалон (13 мг/кг; разведение PBS),
[00265]
[00266] 2.3 Измерение продукции слезной жидкости (проба Ширмера)
[00267] Продукцию слезной жидкости измеряли у животных с помощью нити, пропитанной феноловым красным (Zone-Quick; Oasis, Glendora, CA), через 1 минуту после анестезии. Один конец нити с феноловым красным помещали за нижнее веко с латеральной (внешней) стороны глазной щели у животных и оставляли на 60 секунд. После пропитки нити слезой под действием капиллярных сил, измеряли длину (мм) нити, цвет которой изменился. При уменьшении уровня секреции слезной жидкости развивается синдром сухого глаза, вызванный симптомами синдрома Шегрена. Таким образом, было определено, что, чем больше уровень секреции слезной жидкости, тем больше эффект тестируемого вещества.
[00268]
[00269] 2.4 Измерение скорости слюноотделения
[00270] Пилокарпина гидрохлорид (Sigma, P6503, который хранили при 4°C после приготовления раствора с концентрацией 1 мг/мл в PBS), вводили внутрибрюшинно (в/б инъекция) в количестве 100 мкл/животное, и через 2 минуты животным делали анестезию и измеряли скорость слюноотделения путем отбора слюны с помощью микропипетки.
[00271] *Поток слюны в мкл/минута=слюна (мкл)/3
[00272]
[00273] 2.5 Изъятие тканей слезных желез и слюнных желез и количественный анализ экспрессии белка (иммуноблоттинг)
[00274] Ткани слезных желез и слюнных желез подопытных животных извлекали, помещали в PBS и гомогенизировали во льду. К каждой гомогенизированной ткани добавляли 1 мл буфера для лизиса RIPA (50 мМ Трис-Cl, pH 7,4, 150 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 1% Triton X-100, 0,1% SDS, 1% дезоксихолата натрия, 0,5 мМ фенилметилсульфонилфторида, 2 мкг/мл леупептина, 2 мкг/мл апротинина, 10 мМ NaF и 1 мМ ортованадата натрия), после чего выдерживали во льду в течение 5 минут. Затем каждый раствор ткани центрифугировали (при 13000 об/мин в течение 20 минут), и собирали только супернатант, а затем выполняли коррекцию концентрации белка. Образцы инкубировали с антителом к Akt (1:400) и антителом к интерлейкину 17А (1:200) и подвергали иммунопреципитации (IP) (в течение ночи) с последующим отбором образцов. Каждый образец подвергали ДСН-ПААГЭ и переносу на поливинилиденфторидные (ПВДФ) мембраны. Затем образцы Akt-IP инкубировали с антителом к фосфорилированному Akt (S473) (разведение 1:100000 в блокирующем буфере (TBS+Tween 20) + 0,1% снятого молока) при 4°C в течение ночи, а образцы IL-17A-IP инкубировали с первичным антителом к IL-17A (разведение 1:100000 в блокирующем буфере (TBS+Tween 20) + 0,1% снятого молока) при 4°C в течение ночи. Затем образцы инкубировали с HRP-конъюгированным вторичным антителом, после чего белковые полосы проявляли раствором ECL в темноте и количественно исследовали путем экспозиции рентгеночувствительных пленок.
[00275]
[00276] 2.6 Выделение и количественный анализ (количественная ОТ-ПЦР) суммарной мРНК из тканей слезных желез и слюнных желез
(прямой 5'-TTG AGT GCC AAT TCG ATG AT-3' и обратный 5'-TTG AGG GCT TGT TGA GAT GA-3'); IL-17A (прямой 5'-TGT CTC TGA TGC TGT TGC TG-3' и обратный 5'-AGT CCT TGG CCT CAG TGT TT-3'); IFN-g (прямой 5'-AGC TCT TCC TCA TGG CTG TT-3' и обратный 5'-TTT GCC AGT TCC TCC AGA TA-3'); BAFF (прямой 5'-GGT GAC CCT GTT CCG ATG TA-3' и обратный 5'-CTC CGT TGC GTG AAA TCT GT-3'); FLT3L (прямой 5'-TGG CAG GGT CTA AGA TGC AA-3' и обратный 5'-AGG TGG GAG ATG TTG GTC TG-3'); IL-1 (прямой 5'-AGC TTC AAA TCT CGC AGC AG-3' и обратный 5'-TCT CCA CAG CCA CAA TGA GT-3'); IL-6 (прямой 5'-GAC TGA TGC TGG TGA CAA CC-3' и обратный 5'-AGA CAG GTC TGT TGG GAG TG-3'); IL-12A (прямой 5'-CCT GCA CTG CTG AAG ACA TC-3' и обратный 5'-CCA GGC AAC TCT CGT TCT TG-3'); IL-18 (прямой 5'-GCT GCC ATG TCA GAA GAC TC-3' и обратный 5'-ACT GCG GTT GTA CAG TGA AG-3'); IL-21 (прямой 5'-AGT GGC CCA TAA ATC AAG CC-3' и обратный 5'-AAA GCT GCA TGC TCA CAG T-3'), IL-22 (прямой 5'-AAT CAG CTC AGC TCC TGT CA-3' и обратный 5'-TCG CCT TGA TCT CTC CAC TC-3'); ФНО (прямой 5'-TCT CTT CAA GGG ACA AGG CT-3' и обратный 5'-GGC AGA GAG GAG GTT GAC TT-3'); IFN (прямой 5'-GCT CTG TGC TTT CCT GAT GG-3' и обратный 5'-GTA CCA GGA GTG TCA AGG CT-3'); хемокины: CXCL13 (прямой 5'-ATG AGG CTC AGC ACA GCA A-3' и обратный 5'-GAA TAC CGT GGC CTG GAG AG-3'); CXCR5 (прямой 5'-CTC AAC CGA GAC CTT CCT GT-3' и обратный 5'-GTG CAG AGC GAT CAC AGT TT-3'); и GAPDH (прямой 5'-TGG AGA AAC CTG TAT GTA TGG G-3' и обратный 5'-GGC CTG ATA AGA ACA AAC CC-3').
TM
[00277] Из половины каждой ткани, гомогенизированной с PBS, выделяли суммарную РНК с использованием TRIzol в соответствии с протоколами производителя и превращали в кДНК при использовании системы обратной транскрипции (iScript cDNA synthesis BR170-8891, Bio-Rad, US). По кДНК количественно определяли мРНК с помощью ПЦР в реальном времени. Праймеры, используемые в ПЦР, были синтезированы в компании Bionics Co Ltd. (Сеул, Корея). В ПЦР использовали следующие праймеры: мышиные цитокины: IL-2  ПЦР проводили путем реакции смеси SsoAdvanced Universal SYBR Green Supermix (Bio-rad), каждого праймера (0.5 pmole) и матрицы кДНК с помощью ПЦР системы (CFX connect, Bio-rad, US) при следующих условиях: начальная денатурация при 95°C в течение 3 мин; 39 циклов, каждый из которых состоял из денатурации при 95°C в течение 10 сек, отжига при 55°C в течение 30 сек и достройки при 65°C в течение 5 сек.
[00278]
[00279] 2.7 Количественный анализ (ИФА) аутоантител и цитокина (IL-17A) в плазме крови
[00280] В качестве маркеров синдрома Шегрена антитело к SSA/Ro (Signosis, #EA-5202, US) и антитело к SSB/La (Signosis, #EA-5204, US), которые являются аутоантителами на основе РНП частиц, и цитокин интерлейкин-17A (Signosis, #EA-2516, US), который участвует в развитии аутоиммунных заболеваний, определяли количественно с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) для определения секреции и продукции этих маркеров в сыворотке.
[00281]
[00282] 2.8 Анализ воспалительных фенотипов у животных (индексы болезни)
[00283] Степень воспалительного ответа в модели на животных оценивали согласно следующим критериям и анализировали.
[00284] 1: окологлазная отечность
[00285] 2: выделения из глаза, которые трудно открыть
[00286] 3: эрозия кожи вокруг глаз
[00287] 4: воспаление, достигающее кожи вокруг рта
[00288] 5: эрозия и потеря волос на всем лице.
[00289]
[00290] 2.9 Статистические данные
[00291] Результаты эксперимента были выражены как среднее значение±стандартная ошибка (SE) и проанализированы с использованием t-критерия Даннета после однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с помощью IBM SPSS Statics 21 (IBM Corporation, Poughkeepsie, NY, USA). Значение вероятности (p) <0,05 считалось статистически значимым.
[00292]
[00293] 3. Результаты эксперимента
[00294] 3.1 Влияние на продукцию слезной жидкости
[00295] ФИГ. 1 представляет собой график, на котором показана продукция слезной жидкости в модели синдрома Шегрена. В отношении ФИГ. 1 можно подтвердить, что продукция слезной жидкости в модели синдрома Шегрена значительно повышается при ввеедении композиции согласно настоящему изобретению (среднее±SE, N=11). *p<0,05 в сравнении с контрольной (Контроль) группой.
[00296]
[00297] 2.2 Влияние на скорость слюноотделения
[00298] ФИГ. 2 представляет собой график, на котором показана скорость слюноотделения в модели синдрома Шегрена. В отношении ФИГ. 2 можно подтвердить, что скорость слюноотделения (1.00.2) в группе, в которой вводили композицию согласно настоящему изобретению, значимо увеличилась по сравнению с контрольной группой (0.750.05) (среднее±SE, N=11). *p<0,05 в сравнении с контрольной (Контроль) группой.
[00299]
[00300] 2.3 Влияние на экспрессию белка цитокина (IL-17A) и фосфо-Akt в слюнных и слезных железах
[00301] На ФИГ. 3 показаны результаты измерения экспрессии белка IL-17A и p-AKT и результаты их количественного определения.
[00302] Аутоиммунные заболевания в основном вызваны дифференцировкой и активацией Т-хелперов 17 (Th17), при этом тяжесть аутоиммунных заболеваний можно оценивать путем количественного определения повышенной экспрессии провоспалительного цитокина интерлейкина-17A (IL-17A), продуцируемого этими Т-клетками.
[00303] В результате количественного определения экспрессии белка IL-17A в тканях слезных желез и слюнных желез в группе, в которой вводили композицию согласно настоящему изобретению в дозе 100 мг/кг, было подтверждено, что экспрессия белка IL-17A в группе значительно уменьшилась по сравнению с контрольной группой.
[00304] Кроме того, в результате количественного определения p-AKT, активированной формы Akt, участвующей в выживании и росте клеток, было подтверждено, что экспрессия p-AKT значительно увеличилась в группе, в которой вводили композицию согласно настоящему изобретению (среднее±SE, N=3). *p<0,05 в сравнении с контрольной (Контроль) группой. Таким образом, можно отметить, что композиция согласно настоящему изобретению уменьшает воспаление и обладает эффектом регенерации ткани.
[00305]
[00306] 2.4 Влияние на экспрессию мРНК различных провоспалительных и хемотаксических цитокинов в слюнных и слезных железах
[00307] На ФИГ. 4a и 4b показаны результаты количественного определения мРНК провоспалительных цитокинов и хемотаксических цитокинов.
[00308] Результаты сравнения результатов количественного определения мРНК провоспалительных и хемотаксических цитокинов из иммунных клеток, ассоциированных с аутоиммунным заболеванием (Т-клеток и B-лимфоцитов), в тканях слезных желез и слюнных желез с результатами, полученными в контроле, являются следующими:
[00309] IL-2 (слюнные железы: в 1,3 раза, слезные железы: в 4,5 раза); интерферон-g (слюнные железы: в 1,3 раза, слезные железы: в 1,3 раза); IL-17A (слюнные железы: в 3,3 раза, слезные железы: в 2,8 раза); BAFF (слюнные железы: незначимо, слезные железы: в 1,6 раза); CXCL13 (слюнные железы: в 5 раз, слезные железы: в 2,5 раза); CXCR5 (слюнные железы: в 2,5 раза, слезные железы: незначимо); FLT3L (слюнные железы: в 13 раз, слезные железы: в 2,5 раза); IL-1β (слюнные железы: в 10 раз, слезные железы: в 2 раза); IL-6 (слюнные железы: в 2,5 раза, слезные железы: 2 раза); IL-12 (слюнные железы: незначимо, слезные железы: в 10 раз); IL-18 (слюнные железы: в 1,6 раза, слезные железы: не значительный); IL-21 (слюнные железы: в 20 раз, слезные железы: в 1,6 раза); IL-22 (слюнные железы: в 1,6 раза, слезные железы: в 1,7 раза); ФНО-α (слюнные железы: в 2,2 раза, слезные железы: в 1,6 раза); и IFN-α (слюнные железы: в 40 раз, слезные железы: в 1,6 раза). Таким образом, можно отметить, что большинство цитокинов значительно снижалось при введении композиции согласно настоящему изобретению (среднее±SE, N=6). *p<0,05, #p<0,01 в сравнении с контрольной (Контроль) группой.
[00310]
[00311] 3.5 Влияние на изменения секреции аутоантител (против SSA/Ro и против SSB/La) и цитокина (IL-17A) в плазме крови в модели заболевания на животных
[00312] На ФИГ. 5 показаны результаты измерения экспрессии белка IL-17A и аутоантител (против SSA/Ro и против SSB/La) в плазме крови.
[00313]
in vivo
[00314] При развитии синдрома Шегрена аутоантигены  SSA/Ro и SSB/La повышаются. Таким образом, B-клетки иммунной системы вырабатывают аутоантитела. Путем измерения присутствия или отсутствия аутоантител (против SSA/Ro и против SSB/La) можно оценивать тяжесть синдрома Шегрена.
[00315] Обратившись к Таблице 2 ниже и ФИГ. 5 можно заметить, что в группе, в которой вводили композицию (SA001) согласно настоящему изобретению, оба антитела против SSA (40%) и против SSB (30%) значительно снижались в плазме по сравнению с контрольной группой (см. Таблицу 1), а также снижался IL-17A (среднее±SE, N=3). *p<0,05 в сравнении с контрольной (Контроль) группой.
[00316]
[00317] [Таблица 2]
IkB-ξ-дефицитные самцы мышей
No.(%) несущая среда n=3
No.(%) SA001 (80 мг/кг) n=3
SSA/Ro
100,0±2,0
61,0±8,7
SSB/La
100,0±0,9
67,9±12,4
[00318] 3.6 Изменения воспалительных фенотипов в модели заболевания на животных
[00319] На ФИГ. 6 представлены фотографии, на которых показаны изменения воспалительных фенотипов в модели заболевания на животных, а на ФИГ. 7 показаны индексы заболевания в баллах, полученные при оценке фенотипических изменений.
[00320] По мере развития синдрома Шегрена кератин заметно повышается, и возникает воспаление из-за сильной сухости глазного яблока и симптомов слюнотечения. Таким образом, как показано на ФИГ. 6, воспалительный фенотип оценивали по пятибалльной шкале (индекс заболевания). Более высокий балл указывает на более высокую степень воспаления. Обращаясь к ФИГ. 7, наблюдали, что развитие симптомов заболевания в группе, в которой вводили SA001, было значимо замедлено по сравнению с контрольной группой через 2 недели после введения (среднее±SE, N=11). *p<0,05 по сравнению с контрольной (Контроль) группой.
[00321]
[00322] Как описано выше, продукцию слезной жидкости, скорость слюноотделения, воспалительные цитокины в различных тканях (слезные железы и слюнные железы) и аутоантитела (против SSA/Ro и против SSB/La) и IL-17A в плазме сравнивали между группами.
[00323] Продукция слезной жидкости и скорость слюноотделения имели тенденцию к значимому увеличению в группе, в которой вводили композицию согласно настоящему изобретению. Уровни экспрессии мРНК провоспалительных цитокинов и хемотаксических цитокинов, секретируемых иммунными клетками, в тканях слезных и слюнных желез значимо снижались в группе, в которой вводили лекарственное средство. Кроме того, было подтверждено, что композиция согласно настоящему изобретению снижала уровень экспрессии белка цитокина IL-17A в слезных и слюнных железах и повышала уровень активированного Akt, что указывает на выживание и рост клеток, формирующих ткани, что дает основания предположить, что композиция согласно настоящему изобретению может уменьшать воспаление и регенерировать ткани. Было отмечено, что в группе, в которой вводили композицию согласно настоящему изобретению, аутоантитела (против SSA, против SSB) (которые являются маркерами синдрома Шегрена в плазме крови и которые повышаются с началом синдрома Шегрена) значимо снижались, при этом также снижалась секреция цитокина IL-17A. В результате сравнения степени воспаления при наблюдении видимого фенотипа было подтверждено, что введение композиции согласно настоящему изобретению замедляет развитие заболевания. То есть было подтверждено, что введение композиции согласно настоящему изобретению может замедлять начало заболевания в модели заболевания, может уменьшать воспаление в непосредственно затронутых тканях слезных и слюнных желез и может усиливать рост клеток, формирующих ткани. Таким образом, можно сделать вывод, что композиция согласно настоящему изобретению эффективна для предупреждения и лечения синдрома Шегрена.
[00324]
[00325] Представленное выше описание настоящего изобретения является иллюстративным, и специалисты в данной области техники сумеют понять, что настоящее изобретение может быть легко модифицировано в другие конкретные формы без отступления от технической сущности или существенных характеристик настоящего изобретения. Таким образом, необходимо понимать, что описанные выше примерные варианты осуществления являются примерными во всех отношениях и не являются ограничивающими. Например, каждый компонент, описанный как относящийся к одному типу, может быть реализован в раздельной конфигурации. Аналогичным образом, компоненты, описанные как раздельные, могут быть реализованы в комбинированной конфигурации.
[00326] Объем настоящего изобретения определяется следующей формулой изобретения, а не подробным описанием изобретения. Необходимо понимать, что все модификации и варианты осуществления, предполагаемые исходя из значения и объема формулы изобретения, а также их эквиваленты, включены в объем настоящего изобретения.