РЕЖИМ ДОЗИРОВКИ СЕЛЕКТИВНОГО АГОНИСТА РЕЦЕПТОРА S1P1
MODE OF DOSING SELECTIVE S1P1 RECEPTOR AGONIST

Область изобретения
1
1
1
1
1
1
1
Настоящее изобретение относится к режиму дозировки селективного агониста рецептора S1P, который вводят пациенту следующим способом: в начальной фазе лечения селективный агонист рецептора S1P вводят в дозе, которая индуцирует десенсибилизацию сердца, причем указанный агонист вводят в более низкой дозе по сравнению с конечной дозой, а частота дозирования обеспечивает продолжительную десенсибилизацию сердца, пока не происходит следующее острое снижение частоты сердечных сокращений, а затем дозу титруют до конечной дозы селективного агониста рецептора S1P. В настоящем изобретении предлагается также набор, включающий различные стандартные лекарственные формы селективного агониста рецептора S1P, предназначенные для введения по изобретению, причем одна или более стандартных лекарственных форм содержит более низкую дозу селективного агониста рецептора S1P, предназначенную для начальной фазы лечения, а другие стандартные лекарственные формы содержат более высокую дозу селективного агониста рецептора S1P вплоть до конечной дозы указанного селективного агониста рецептора S1P.
Предпосылки создания настоящего изобретения
1
В настоящем изобретении предлагается режим дозировки селективного агониста рецептора S1P, причем в начальной фазе лечения сведено к минимуму побочное действие на организм субъектов/пациентов, или при повторном лечении после прерывания введения лекарственного средства.
1
1
1
2
3
4
5
Селективные агонисты рецептора S1P являются соединениями, которые активируют предпочтительно подтипы рецептора S1P человека по сравнению с членами семейства сфингозин-1-фосфат-чувствительных рецепторов человека S1P, S1P, S1P, S1P и S1P, сопряженных с белком G. Агонисты рецептора S1P уменьшают число лимфоцитов, циркулирующих в периферической крови человека или животных после, например, перорального введения, следовательно, они являются перспективными терапевтическими агентами для лечения различных заболеваний, связанных с разрегулированной иммунной системой. Например, было установлено, что неселективный агонист рецептора FTY720 снижает частоту клинических рецидивов у пациентов с рассеянным склерозом (Kappos L и др., N. Engl. J. Med., Sep 14, 355 (11): 1124-40 (2006)).
1
3
K, ACh
1
Однако в литературе описаны агонисты рецептора S1P для снижения частоты сердечных сокращений на моделях грызунов, причем действие указанных агонистов связано с активацией рецептора S1P в ткани синусно-предсердного узла сердца, что приводит к увеличению входящего калиевого тока выпрямления I и замедляет синусно-предсердный кардиостимулятор (Hale J.J. и др., Bioorg. Med. Chem. Lett., 14 (13): 3501-3505 (2004), Bunemann M. и др., J. Physiol., 489: 701-707 (1995), Guo J. и др., Pflugers Arch., 438: 642-648 (1999), Ochi R. и др., Cardiovasc. Res., 70: 88-96 (2006)). Тем не менее неселективный агонист рецептора FTY720 снижает частоту сердечных сокращений у человека (Koyrakh L. и др., Am. J. Transplant, 5: 529-536 (2005)), a литературные данные свидетельствуют о том, что селективные соединения S1Pоказывают незначительное действие на частоту сердечных сокращений у людей, по сравнению с неселективными агонистами рецептора SIP (Himmel H.M. и др., Mol. Pharmacol., 58: 449-454 (2000), Peters S.L., Alewijnse A.E., Curr. Opin. Pharmacol., 7 (2): 186-192 (2007), Fujishiro J. и др.. Transplantation, 82 (6): 804-812 (2006), Sanna M.G. и др., J. Biol. Chem., 279 (14): 13839-13848 (2004)).
Описание изобретения
1
1
1
Получение и медицинское применение соединения (R)-5-[3-[хлор-4-(2,3-дигидроксипропокси)бенз[Z]илиден]-2-([Z]-пропилимино)-3-орто-толилтиазолидин-4-она (в данном контексте «соединение 1») описаны в заявке РСТ WO 2005/054215, указанное соединение является селективным агонистом рецептора S1P, и повторное введение перорально в дозе 5 мг или более человеку приводит к устойчивому, продолжительному и дозозависимому снижению числа лимфоцитов в периферической крови. Однако неожиданно было установлено, что селективный агонист рецептора S1P, соединение 1, временно снижает частоту сердечных сокращений у людей, причем максимальное действие наблюдается через 1-3 ч после введения. У некоторых субъектов при этом указанное действие сопровождается аналогичным кратковременным увеличением интервала PR на электрокардиограмме (ЭКГ), и связанным с ним нерегулярным сердечным ритмом (так называемым периодом Веннебаха). Периодическая усталость или головокружение также наблюдаются в период после введения дозы. Указанные острые эффекты Соединения 1 на частоту сердечных сокращений и ритм, и усталость/головокружение снижаются при введении в дозе 10 мг по сравнению с дозой 20 мг. Все эти эффекты снижаются при повторном введении. Таким образом, через 2-4 дня перорального введения один раз в сутки Соединения 1 в дозе от 5 до 20 мг уже не наблюдается острое снижение частоты сердечных сокращений, по сравнению с исходной частотой до введения дозы. Аналогичным образом после повторного перорального введения в дозе от 5 до 20 мг Соединения 1 уже не наблюдается временное увеличение интервала PR на ЭКГ по сравнению с исходным интервалом до введения дозы, а также не наблюдается усталость или головокружение. Острое действие на частоту сердечных сокращений, предсердно-желудочковую проводимость или усталость и головокружение, хотя они и не являются серьезными побочными эффектами, все-таки являются нежелательными и, следовательно, существует необходимость в сведении к минимуму указанных эффектов с целью повышения переносимости и безопасности Соединения 1 и других селективных агонистов рецептора S1P, a также в сведении к минимуму проблем, связанных с мониторингом в начальной фазе лечения или после прерывания лечения в период повторного лечения.
1
1
1
1
Предмет настоящего изобретения включает режим дозировки селективных агонистов рецептора S1P, таких как, прежде всего, соединение 1, при котором сводится к минимуму частота или тяжесть указанных отрицательных эффектов. Режим дозировки по настоящему изобретению заключается в том, что селективный агонист рецептора S1P вводят пациенту в начальной фазе лечения в дозе, которая индуцирует десенсибилизацию сердца, причем указанная доза ниже конечной дозы, а частота введения поддерживает десенсибилизацию сердца, до тех пор, пока не произойдет следующее острое снижение частоты сердечных сокращений, а затем дозу титруют до конечной дозы селективного агониста рецептора S1P. Преимущество режима дозировки по настоящему изобретению заключается в том, что можно индуцировать десенсибилизацию сердца и поддерживать ее при введении более низкой дозы по сравнению с конечной дозой, причем в этот период наблюдается менее выраженное снижение частоты сердечных сокращений по сравнению с введением конечной дозы в другом режиме дозировки. Следовательно, режим дозировки по настоящему изобретению обеспечивает улучшение переносимости за счет сведения к минимуму отрицательных эффектов у субъектов/пациентов в течение первых дней введения селективного агониста рецептора S1P или в ходе повторного лечения после периода прерывания лечения.
1
1
Режим дозировки (т.е. величину и частоту введения дозы) в период начального лечения можно подбирать эмпирически при сравнении величины острого снижения частоты сердечных сокращений в период между начальными дозами. Частота введения не должна вызывать дискомфорт у пациента, то есть период между дозами должен быть более продолжительным по сравнению с периодом острого снижения частоты сердечных сокращений и короче периода, требуемого для восстановления после десенсибилизации. Таким образом, эмпирически подобранная частота введения дозы зависит от относительных констант скорости нескольких независимых процессов: константа скорости для концентрации агониста рецептора S1P в организме должна превышать предел концентрации, связанный с десенсибилизацией, константа скорости десенсибилизации сердца и константа скорости восстановления после десенсибилизации сердца. Последние две константы скорости (для десенсибилизации сердца и для реабилитации после десенсибилизации) являются собственными свойствами биологических процессов, лежащих в основе указанных явлений. Первая константа скорости (для предела превышения концентрации) определяется фармакокинетикой агониста рецептора S1P, то есть скоростью абсорбции, распределения, метаболизма и выведения лекарственного средства. С учетом вышеуказанных трех констант скорости приемлемая продолжительность интервала дозировки является дозозависимой.
Например, при введении Соединения 1 в дозе 20 мг один раз в день перорально наблюдается острое снижение частоты сердечных сокращений в день 1 и затем через 24 ч при введении второй дозы 20 мг не наблюдается острое снижение частоты сердечных сокращений. Десенсибилизация поддерживается в течение указанного 24-часового интервала. Однако при введении второй дозы 20 мг после первой дозы наблюдается острое снижение частоты сердечных сокращений с той же интенсивностью, что в день 1. В течение этих 7 дней режима дозировки (доза 20 мг) десенсибилизация не поддерживается. Этот пример свидетельствует о том, что необходимо подбирать пригодный интервал дозировки, чтобы поддержать десенсибилизацию сердца.
1
1
1
1
1) Прежде всего, настоящее изобретение относится к селективному агонисту рецептора S1P для применения в качестве лекарственного средства, при этом указанный селективный агонист рецептора S1P вводят пациенту (прежде всего человеку) следующим образом: в ходе начальной фазы лечения селективный агонист рецептора S1P вводят в дозе, индуцирующей десенсибилизацию сердца, причем указанная доза ниже конечной дозы, а частота введения обеспечивает поддерживание десенсибилизации сердца до тех пор, пока не происходит острое снижение частоты сердечных сокращений, и затем дозу титруют (повышают) до конечной дозы селективного агониста рецептора S1P.
1
2) В одном варианте настоящее изобретение относится к селективному агонисту рецептора S1P для применения в качестве лекарственного средства по пункту 1), при этом начальная доза ниже конечной дозы и составляет величину в 2-5-раз ниже по сравнению с конечной дозой.
1
3) В другом варианте настоящее изобретение относится к селективному агонисту рецептора S1P для применения в качестве лекарственного средства по пункту 1), при этом начальная доза составляет величину в 5-16-раз ниже по сравнению с конечной дозой.
1
4) В еще одном варианте настоящее изобретение относится к селективному агонисту рецептора S1P для применения в качестве лекарственного средства по одному из пунктов 1)-3), при этом в течение 2-4 дней начальной фазы лечения пациенту вводят более низкую дозу по сравнению с конечной дозой.
1
5) В другом варианте настоящее изобретение относится к селективному агонисту рецептора S1P для применения в качестве лекарственного средства по одному из пунктов 1)-4), при этом частота введения более низкой дозы по сравнению с конечной дозой составляет один или два раза в день.
1
1
6) В одном варианте настоящее изобретение относится к селективному агонисту рецептора S1P для применения в качестве лекарственного средства по одному из пунктов 1)-5), причем селективным агонистом рецептора S1P является (R)-5-[3-[хлор-4-(2,3-дигидроксипропокси)бенз[Z]илиден]-2-([Z]-пропилимино)-3-орто-толилтиазолидин-4-он или его фармацевтически приемлемая соль.
1
7) В еще одном варианте настоящее изобретение относится к селективному агонисту рецептора S1P для получения лекарственного средства, при этом указанное лекарственное средство вводят пациенту, как указано в любом из пп.1)-5).
1
8) В другом варианте настоящее изобретение относится к применению по п.7), причем селективным агонистом рецептора S1P является (R)-5-[3-хлор-4-(2,3-дигидроксипропокси)бенз[Z]илиден]-2-([Z]-пропилимино)-3-орто-толилтиазолидин-4-он или его фармацевтически приемлемая соль.
1
1
1
9) Настоящее изобретение также относится к набору, содержащему различные лекарственные формы селективного агониста рецептора S1P для введения по п.1), причем одна или более лекарственных форм содержат более низкую дозу по сравнению с конечной дозой указанного селективного агониста рецептора S1P и предназначены для начальной фазы лечения, а другие лекарственные формы содержат более высокую дозу по сравнению с конечной дозой указанного селективного агониста рецептора S1P вплоть до конечной дозы.
1
10) В одном варианте настоящее изобретение относится к набору по п.9), причем селективным агонистом рецептора S1P является (R)-5-[3-хлор-4-(2,3-дигидроксипропокси)бенз[Z]илиден]-2-([Z]-пропилимино)-3-орто-толилтиазолидин-4-он или его фармацевтически приемлемая соль.
11) В еще одном варианте настоящее изобретение относится к набору по пп.9) или 10), причем другие лекарственные формы содержат дозу, величина которой в 2-5-раз выше по сравнению с начальной дозой.
12) В другом варианте настоящее изобретение относится к набору по п.9) или 10), причем другие лекарственные формы содержат дозу лекарственного средства в 5-16 раз выше по сравнению с начальной дозой.
13) В одном варианте настоящее изобретение относится к набору по любому из пп.9)-12), причем другие лекарственные формы содержат более низкую дозу по сравнению с конечной дозой и предназначены для начального лечения в течение 2-4 дней.
14) В еще одном варианте настоящее изобретение относится к набору по любому из пп.9)-13), причем лекарственную форму (формы), содержащие более низкие дозы по сравнению с конечной дозой, вводят с частотой 1 или 2 раза в день.
1
1
15) В другом варианте настоящее изобретение относится к способу введения селективного агониста рецептора S1P, который заключается во введении селективного агониста рецептора S1P субъекту, как описано в любом из пп.1)-5).
1
16) В одном варианте настоящее изобретение относится к способу по п.15), причем селективным агонистом рецептора S1P является (R)-5-[3-хлор-4-(2,3-дигидроксипропокси)бенз[Z]илиден]-2-([Z]-пропилимино)-3-орто-толилтиазолидин-4-он или его фармацевтически приемлемая соль.
Общие термины, использованные в данном описании настоящего изобретения, имеют предпочтительно следующие значения:
Термин "десенсибилизация сердца", использованный в данном контексте, относится к отсутствию острого снижения частоты сердечных сокращений после введения лекарственного средства.
Термин "острое снижение частоты сердечных сокращений", использованный в данном контексте, относится к снижению частоты сердечных сокращений по сравнению с величиной до введения дозы, например, на 10 или более ударов в мин, которое является максимальным в течение нескольких часов, например в течение 1-3 ч, после введения лекарственного средства, а затем частота сердечных сокращений возвращается на исходный уровень.
1
1
Термин "конечная доза", использованный в данном контексте, относится к дозе селективного агониста рецептора S1P, которая обеспечивает конечное число лимфоцитов в периферической крови, например 400-800 лимфоцитов в 1 мкл. Конечная доза для данного агониста рецептора S1P может в значительной степени зависеть от природы и тяжести заболевания, предназначенного для лечения.
Титрование дозы с увеличением до конечной дозы можно осуществлять в один или несколько этапов. Например, приемлемый режим дозировки для Соединения 1 включает введение в дозе 5 мг перорально (один раз в день в течение 3 дней, начальная фаза лечения), затем титрование до дозы 10 мг перорально (один раз в день в течение 3 дней) и еще один цикл титрования до дозы 20 мг перорально (конечная доза) один раз в день через неограниченный интервал. Другой пример приемлемого режима дозировки для Соединения 1 включает введение в дозе 5 мг перорально (один раз в день в течение 3 дней, начальная фаза лечения), затем титрование до 20 мг перорально (конечная доза) один раз в день через неограниченный интервал.
1
1
1
2
3
4
5
1
1
1
1
2
3
4
5
Селективными агонистами рецептора S1P по настоящему изобретению являются соединения, которые активируют предпочтительно подтип рецептора S1P человека, а не подтипы членов семейства S1P, S1P, S1P, S1P и S1P, прежде всего, соединения, которые активируют рецептор S1P по сравнению с другими членами семейства по крайней мере в 5 раз по данным пригодного метода анализа. Такие приемлемые способы анализа для определения активности агониста рецептора S1P известны. Прежде всего, активность соединения в отношении агониста рецептора соединения можно определять методом анализа с использованием ГТФγS, как описано, например, в WO 2007/080542 для рецептора S1P человека. Аналогичный способ анализа можно использовать для определения активности агониста соединения в отношении других членов семейства S1P, с использованием клеток СНО, экспрессирующих рекомбинантные рецепторы S1P, S1P, S1P и S1P человека соответственно.
1
Предпочтительные агонисты селективного рецептора S1P по настоящему изобретению, их получение и применение в медицине описаны в опубликованных заявках WO 2005/054215, WO 2005/123677, WO 2006/010544, WO 2006/100635, WO 2006/100633, WO 2006/100631, WO 2006/137019, WO 2007/060626, WO 2007/086001, WO 2007/080542, WO 2008/029371, WO 2008/029370, WO 2008/029306, WO 2008/035239, WO 2008/114157 и WO 2009/024905.
1
Селективные агонисты рецептора S1P и их фармацевтически приемлемые соли можно использовать в качестве лекарственного средства, например, в форме фармацевтических композиций для энтерального или парентерального введения и для профилактики и/или лечения заболеваний или нарушений, связанных с активированной иммунной системой.
Термин "фармацевтически приемлемые соли" относятся к нетоксичным, неорганическим или органическим кислотно-аддитивным и/или основно-аддитивным солям, см. статью "Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm., 33, 201-217 (1986).
1
Фармацевтические композиции можно получать известными способами (см., например, Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21-е издание (2005), часть 5, "Pharmaceutical Manufacturing" (Lippincott Williams & Wilkins) при переработке селективных агонистов рецептора S1P или их фармацевтически приемлемых солей, необязательно в комбинации с другими терапевтически ценными веществами, в галеновые препараты в смеси с приемлемыми, нетоксичными, инертными, фармацевтически приемлемыми твердыми или жидкими материалами-носителями, и при необходимости со стандартными фармацевтическими адъювантами.
1
Указанные заболевания или нарушения, связанные с активированной иммунной системой, профилактику и/или лечение которых можно осуществлять с использованием селективных агонистов рецептора S1P, описаны, например, в заявке WO 2005/054215.
1
Предпочтительные заболевания или нарушения, профилактику и/или лечение которых можно осуществлять с использованием селективных агонистов рецептора S1P, выбирают из группы, включающей отторжение трансплантированных органов, таких как почки, печень, сердце, легкие, поджелудочная железа, роговица и кожа, реакцию трансплантат-против-хозяина после трансплантации стволовых клеток, аутоиммунные синдромы, включая ревматоидный артрит, рассеянный склероз, воспалительные заболевания кишечника, такие как болезнь Крона и язвенный колит, псориаз, псориатический артрит, тироидит, такой как тиреоидит Хашимото и увеоретинит, атопические заболевания, такие как ринит, конъюктивит и дерматит, астму, диабет типа I, пост-инфекционные аутоиммунные заболевания, включающие ревматическую атаку и пост-инфекционный гломерулонефрит, солидные опухоли и метастазирующие опухоли.
1
1
Наиболее предпочтительные заболевания или нарушения, профилактику и/или лечение которых можно осуществлять с использованием селективных агонистов рецептора S1P, выбирают из группы, включающей отторжение трансплантированных органов, выбранных из почки, печени, сердца и легких, заболевания трансплантат-против-хозяина после трансплантации стволовых клеток, аутоиммунные синдромы, выбранные из ревматоидного артрита, рассеянного склероза, псориаза, псориатического артрита, болезни Крона, тиреоидита Хашимото и атопического дерматита. Наиболее предпочтительны заболевания или нарушения, профилактику и/или лечение которых можно осуществлять с использованием селективных агонистов рецептора S1P, выбирают из рассеянного склероза и псориаза.
1
Кроме того, селективные агонисты рецептора S1P можно использовать также в комбинации с одним или более иммуномодулирующих агентов для профилактики и/или лечения заболеваний и нарушений, указанных в данном контексте. В предпочтительном варианте настоящего изобретения указанные агенты выбирают из группы, включающей иммунодепрессанты, кортикостероиды, нестероидные противовоспалительные лекарственные средства, цитотоксические лекарственные средства, ингибиторы молекул адгезии, цитокины, ингибиторы цитокинов, антагонисты цитокиновых рецепторов и рекомбинантные цитокиновые рецепторы.
В настоящее время проводили клинические испытания с участием пациентов в фазе 1 (3 этапа). Всего 85 субъектам вводили соединение 1 в одноразовых дозах вплоть до 75 мг и в многократных дозах вплоть до 40 мг в течение 15 дней.
В ходе испытаний в режиме однократных возрастающих доз (АС-058-101) соединение 1 вводили перорально 6 группам, включающим 6 здоровых мужчин в возрасте 21-47 лет. Дозы 1, 3, 8, 20, 50 и 75 мг вводили группам, включающим 8 субъектов (6 субъектам вводили активное лекарственное средство, а 2 вводили плацебо) в ходе рандомизированных испытаний двойным слепым методом с контролем плацебо. Дозу 20 мг вводили один раз натощак и один раз на сытый желудок, чтобы исключить любое влияние пищи на фармакокинетические параметры Соединения 1. В ходе испытаний регистрировали ЭКГ, проводили клинический анализ крови, оценивали показатели жизненно-важных функций, легочную функцию, неврологические функции (в группе, в которой вводили дозу 75 мг), уровень Соединения 1 в плазме и число лимфоцитов в периферической крови (общее число и число отдельных популяций). Все 48 рандомизированных субъектов участвовали в течение всего периода испытаний, и ни один из них не был исключен из испытаний и не прерывал лечение. Для всех субъектов, леченных соединением 1 (n=36), определяли фармакокинетические (ФК) и фармакодинамические (ФД) параметры.
В ходе фазы А в режиме многократных возрастающих доз (АС-058-102), соединение 1 вводили перорально в дозе 5, 10 и 20 мг один раз в сут в течение 7 дней здоровым мужчинам и женщинам в возрасте 22-58 лет (соотношение полов 1:1) по схеме рандомизированных испытаний двойным слепым методом с контролем плацебо. Для каждой величины дозы группу из 10 пациентов рандомизировали для введения Соединения 1 (8) или плацебо (2). В фазе А все 30 рандомизированных пациентов принимали участие в течение всего периода испытаний, а для 24 субъектов, которых лечили соединением 1, определяли ФК-параметры.
В ходе фазы В проводили испытания с увеличением (тированием) дозы, чтобы снизить влияние первой дозы Соединения 1 на автоматичность и предсердно-желудочковую проводимость синусно-предсердного узла. Лечение соединением 1 проводили в течение 4 дней в дозе 10 мг один раз в день, затем в течение 4 дней в дозе 20 мг один раз в день, в течение 7 дней в дозе 40 мг один раз в день. В рандомизированных испытаниях принимали участие 17 субъектов (9 женщин и 8 мужчин в возрасте 18-43 лет). 13 субъектам вводили активное соединение и 4 субъектам вводили плацебо. Всего 15 из 17 субъектов принимали участие в течение всего периода испытаний. Дозировку прерывали для двух пациентов из группы активного соединения по причине отрицательных побочных действий, в одном случае по причине инфекции зуба средней тяжести и отека в ротовой полости, а в другом случае, левого сдвига гранулоцитов умеренной степени по результатам клинического анализа периферической крови, который уже наблюдался в начале испытаний. 11 субъектов, которым вводили 40 мг Соединения 1 и для которых определяли ФК-параметры, принимали участие в течение всего периода испытаний.
В таблице 1 представлено снижение средней частоты сердечных сокращений через 2,5 ч после введения дозы по сравнению с величиной до введения дозы в группе пациентов, которым вводили дозу 40 мг (АС-058-102, фаза В) после каждого этапа титрования дозы 10 мг в день 1, 20 мг в день 5 и 40 мг в день 9) по сравнению со снижением без титрования дозы в день 1 (10 и 20 мг, фаза А АС-058-102 и 50 мг АС-058-101).
Таблица 1
Сравнение среднего снижения частоты сердечных сокращений через 2,5 ч после введения дозы с титрованием и без титрования дозы
Без титрования
С титрованием
Фаза А (10 и 20 мг) и 50 мг РОВД*
Среднее снижение частоты сердечных сокращений (через 2,5 ч после введения дозы по сравнению с исходным уровнем до лечения)
Фаза В (группа дозы 40 мг)
Среднее снижение частоты сердечных сокращений (через 2,5 ч после ведения дозы по сравнению с исходным уровнем до лечения)
Без титрования
С титрованием
10 мг
14 ударов/мин
10 мг
14 ударов/мин
20 мг
22 удара/мин
20 мг
9 ударов/мин
50 мг
18 ударов/мин
40 мг
4 удара/мин
РОВД* - режим однократных возрастающих дозы
Среднее снижение частоты сердечных сокращений через 2,5 ч после введения дозы по сравнению с уровнем до лечения в группе пациентов, которым вводили 40 мг (АС-058-102, фаза В), составляло 2 удара в мин, 1 удар в мин и 1 удар в мин в дни 2, 3 и 4 (10 мг) соответственно и 4 удара в мин, 3 удара в мин и 3 удара в мин в дни 6, 7 и 8 (20 мг) соответственно.
В фазе В испытаний только у одного субъекта наблюдалась кратковременная АВ-блокада первой степени после введения первой дозы 10 мг Соединения 1 в день 1, что свидетельствовало о снижении действия Соединения 1 как на автоматичность, так и на предсердно-желудочковую проводимость синусно-предсердного узла в результате титрования с повышением дозы. В ходе фазы В испытаний не наблюдали АВ-блокады второй или третьей степени, в ходе фазы В многократного введения дозы не наблюдали также изменений других параметров ЭКГ.