СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ ИЗ ОПУХОЛИ ОБОГАЩЕННЫХ ПОПУЛЯЦИЙ РЕАКТИВНЫХ В ОТНОШЕНИИ ОПУХОЛИ Т-КЛЕТОК

1. Способ получения популяции клеток, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, включающий:
(a) получение общей популяции Т-клеток из образца опухоли;
(b) специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих один или более из TIM-3, LAG-3, 4-1ВВ и PD-1, из общей популяции; и
(c) отделение селектированных на стадии (b) клеток от неселектированных с получением клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками.
2. Способ введения клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, млекопитающему, включающий:
(a) получение общей популяции Т-клеток из образца опухоли;
(b) специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих один или более из TIM-3, LAG-3, 4-1ВВ и PD-1, из общей популяции;
(c) отделение селектированных на стадии (b) клеток от неселектированных с получением клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками; и
(d) введение клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, млекопитающему.
3. Способ получения фармацевтической композиции, содержащей клеточную популяцию, обогащенную реактивными в отношении опухоли Т-клетками, включающий:
(a) получение общей популяции Т-клеток из образца опухоли;
(b) специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих один или более из TIM-3, LAG-3, 4-1ВВ и PD-1, из общей популяции;
(c) отделение селектированных на стадии (b) клеток от неселектированных с получением клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками; и
(d) объединение клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, с фармацевтически приемлемым носителем с получением фармацевтической композиции, содержащей клеточную популяцию, обогащенную реактивными в отношении опухоли Т-клетками.
4. Способ по любому из пп. 1-3, где (b) включает специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих два или более из TIM-3, LAG-3 и PD-1, из общей популяции.
+
+
+
+
5. Способ по любому из пп. 1-3, где (b) включает специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, представляющих собой LAG-3/PD-1 или TIM-3/PD-1, из общей популяции.
-
+
-
+
-
+
6. Способ по любому из пп. 1-3, где (b) включает специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, представляющих собой 4-1BB/PD-1, 4-1BB/LAG-3 или 4-1ВВ/TIM-3, из общей популяции.
7. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих TIM-3, из общей популяции.
8. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих LAG-3, из общей популяции.
9. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих 4-1 ВВ, из общей популяции.
10. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих PD-1, из общей популяции.
+
+
+
+
+
-
11. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) 4-1BB/PD-1, (ii) 4-1ВВ/PD-1 и/или (iii) 4-1BB/PD-1, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
12. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) LAG-3/PD-1, (ii) LAG-3/PD-1 и/или (iii) LAG-3/PD-1, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
13. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) TIM-3/PD-1, (ii) TIM-3/PD-1 или (iii) TIM-3/PD-1, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
14. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) TIM-3/LAG-3, (ii) TIM-3/LAG-3 или (iii) TIM-3/LAG-3, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
15. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) 4-1BB/LAG-3, (ii) 4-1BB/LAG-3 или (iii) 4-1BB/LAG-3, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
16. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) 4-1BB/TIM-3, (ii) 4-1ВВ/TIM-3 или (iii) 4-1BB/TIM-3, из общей популяции.
17. Способ по любому из пп. 1-3, где клеточную популяцию, обогащенную реактивными в отношении опухоли Т-клетками, получают без обследования для распознавания аутологичной опухоли.
18. Способ по любому из пп. 1-3, где к общей популяции Т-клеток не применяют неспецифической стимуляции перед стадией (b).
19. Способ по любому из пп. 1-3, дополнительно включающий в себя рост числа Т-клеток в обогащенной клеточной популяции, полученной на стадии (с).
20. Способ по любому из пп. 1-3, дополнительно включающий в себя культивирование обогащенной клеточной популяции, полученной на стадии (с), в присутствии любого одного или более из TWS119, интерлейкина (IL-21), IL-12, IL-15, IL-7, трансформирующего ростового фактора (TGF) бета и ингибитора AKT (AKTi).
21. Способ по любому из пп. 1-3, дополнительно включающий в себя стимуляцию обогащенной клеточной популяции, полученной на стадии (с), с помощью ракового антигена и/или с помощью аутологичных опухолевых клеток.
22. Способ по любому из пп. 1-3, дополнительно включающий в себя трансдукцию или трансфекцию клеток обогащенной популяции, полученной на стадии (с), с помощью нуклеотидной последовательности, кодирующей любой один или более из IL-12, IL-7, IL-15, IL-2, IL-21, mir155 и анти-PD-l миРНК.
23. Способ лечения или предупреждения рака у млекопитающего, нуждающегося в этом, включающий:
(a) получение популяции клеток, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, способом по п.1 или получение фармацевтической композиции способом по п.3, и введение указанной популяции клеток или фармацевтической композиции млекопитающему в количестве, эффективном для лечения или предупреждения рака у млекопитающего; или
(b) введение популяции клеток, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, млекопитающему способом по п. 2 в количестве, эффективном для лечения или предупреждения рака у млекопитающего.
24. Изолированная или очищенная клеточная популяция, обогащенная реактивными в отношении опухоли Т-клетками, полученная при помощи способа по п. 1 или 3.
25. Изолированная или очищенная клеточная популяция, включающая в себя одну или более из:
+
+
+
(a) CD8/4-1BB/PD-1 Т-клеток,
+
-
+
(b) CD8/4-1ВВ/PD-1 Т-клеток,
+
+
-
(c) CD8/4-1BB/PD-1 Т-клеток,
+
+
+
(d) CD8/LAG-3/PD-1 Т-клеток,
+
-
+
(e) CD8/LAG-3/PD-1 Т-клеток,
+
+
-
(f) CD8/LAG-3/PD-1 Т-клеток,
+
+
+
(g) CD8/TIM-3/PD-1 Т-клеток,
+
-
+
(h) CD8/TIM-3/PD-1 Т-клеток,
+
+
-
(i) CD8/TIM-3/PD-1 Т-клеток,
+
+
+
(j) CD8/TIM-3/LAG-3 Т-клеток,
+
-
+
(k) CD8/TIM-3/LAG-3 Т-клеток,
+
+
-
(l) CD8/TIM-3/LAG-3 Т-клеток,
+
+
+
(m) CD8/4-1BB/LAG-3 Т-клеток,
+
-
+
(n) CD8/4-1BB/LAG-3 Т-клеток,
+
+
-
(o) CD8/4-1BB/LAG-3 Т-клеток,
+
+
+
(р) CD8/4-1BB/TIM-3 Т-клеток,
+
-
+
(q) CD8/4-1ВВ/TIM-3 Т-клеток и
+
+
-
(r) CD8/4-1BB/TIM-3 Т-клеток,
где клеточная популяция обогащена реактивными в отношении опухоли Т-клетками.
26. Изолированная или очищенная клеточная популяция по п. 25, включающая в себя:
+
+
+
(a) CD8/4-1BB/PD-1 Т-клетки,
+
-
+
(b) CD8/4-1ВВ/PD-1 Т-клетки,
+
+
-
(c) CD8/4-1BB/PD-1 Т-клетки,
+
+
+
(d) CD8/LAG-3/PD-1 Т-клетки,
+
-
+
(е) CD8/LAG-3/PD-1 Т-клетки,
+
+
-
(f) CD8/LAG-3/PD-1 Т-клетки,
+
+
+
(g) CD8/TIM-3/PD-1 Т-клетки,
+
-
+
(h) CD8/TIM-3/PD-1 Т-клетки,
+
+
-
(i) CD8/TIM-3/PD-1 Т-клетки,
+
+
+
(j) CD8/TIM-3/LAG-3 Т-клетки,
+
-
+
(k) CD8/TIM-3/LAG-3 Т-клетки,
+
+
-
(l) CD8/TIM-3/LAG-3 Т-клетки,
+
+
+
(m) CD8/4-1BB/LAG-3 Т-клетки,
+
-
+
(n) CD8/4-1BB/LAG-3 Т-клетки,
+
+
-
(о) CD8/4-1BB/LAG-3 Т-клетки,
+
+
+
(р) CD8/4-1BB/TIM-3 Т-клетки,
+
-
+
(q) CD8/4-1BB/TIM-3 Т-клетки или
+
+
-
(r) CD8/4-1BB/TIM-3 Т-клетки.
27. Изолированная или очищенная клеточная популяция по п. 26, включающая в себя:
+
+
+
(a) CD8/LAG-3/PD-1 Т-клетки или
+
+
+
(b) CD8/TIM-3/PD-1 Т-клетки.
28. Изолированная или очищенная клеточная популяция по п. 26, включающая в себя:
+
-
+
(a) CD8/4-1BB/PD-1 Т-клетки,
+
-
+
(b) CD8/4-1ВВ/LAG-3 Т-клетки или
+
-
+
(c) CD8/4-1ВВ/TIM-3 Т-клетки.
29. Применение клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, полученной при помощи способа, включающего:
(a) получение общей популяции Т-клеток из образца опухоли;
(b) специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих один или более из TIM-3, LAG-3, 4-1ВВ и PD-1, из общей популяции; и
(c) отделение селектированных на стадии (b) клеток от неселектированных с получением клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками,
для получения лекарственного средства для введения клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, млекопитающему.
30. Применение по п. 29, где (b) включает специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих два или более из TIM-3, LAG-3 и PD-1, из общей популяции.
+
+
+
+
31. Применение по п. 29, где (b) включает специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, представляющих собой LAG-3/PD-1 или TIM-3/PD-1, из общей популяции.
-
+
-
+
-
+
32. Применение по п. 29, где (b) включает специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, представляющих собой 4-1BB/PD-1, 4-1ВВ/LAG-3 или 4-1BB/TIM-3, из общей популяции.
33. Применение по п. 29, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих TIM-3, из общей популяции.
34. Применение по п. 29 или 33, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих LAG-3, из общей популяции.
35. Применение по п. 29 или 33, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих 4-1ВВ, из общей популяции.
36. Применение по п. 29 или 33, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, экспрессирующих PD-1, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
37. Применение по п. 29, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) 4-1BB/PD-1, (ii) 4-1ВВ/PD-1 и/или (iii) 4-1BB/PD-1, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
38. Применение по п. 29, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) LAG-3/PD-1, (ii) LAG-3/PD-1 и/или (iii) LAG-3/PD-1, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
39. Применение по п. 29, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) TIM-3/PD-1, (ii) TIM-3/PD-1 или (iii) TIM-3/PD-1, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
40. Применение по п. 29, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) TIM-3/LAG-3, (ii) TIM-3/LAG-3 или (iii) TIM-3/LAG-3, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
41. Применение по п. 29, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) 4-1BB/LAG-3, (ii) 4-1BB/LAG-3 или (iii) 4-1BB/LAG-3, из общей популяции.
+
+
-
+
+
-
42. Применение по п. 29, где стадия (b) включает в себя специфическое селектирование CD8+ Т-клеток, которые являются (i) 4-1BB/TIM-3, (ii) 4-1ВВ/TIM-3 или (iii) 4-1BB/TIM-3, из общей популяции.
43. Применение по п. 29 или 33, где клеточную популяцию, обогащенную реактивными в отношении опухоли Т-клетками, получают без обследования для распознавания аутологичной опухоли.
44. Применение по п. 29 или 33, где к общей популяции Т-клеток не применяют неспецифической стимуляции перед стадией (b).
45. Применение по п. 29 или 33, дополнительно включающее в себя рост числа Т-клеток в обогащенной клеточной популяции, полученной на стадии (с).
46. Применение по п. 29 или 33, дополнительно включающее в себя культивирование обогащенной клеточной популяции, полученной на стадии (с), в присутствии любого одного или более из TWS119, интерлейкина (IL-21), IL-12, IL-15, IL-7, трансформирующего ростового фактора (TGF) бета и ингибитора AKT (AKTi).
47. Применение по п. 29 или 33, дополнительно включающее в себя стимуляцию обогащенной клеточной популяции, полученной на стадии (с), с помощью опухолевого антигена и/или с помощью аутологичных опухолевых Т-клеток.
48. Применение по п. 29 или 33, дополнительно включающее в себя трансдукцию или трансфекцию клеток обогащенной популяции, полученной на стадии (с), с помощью нуклеотидной последовательности, кодирующей любой один или более из IL-12, IL-7, IL-15, IL-2, IL-21, mir155 и анти-PD-l миРНК.
49. Применение клеточной популяции, обогащенной реактивными в отношении опухоли Т-клетками, полученной при помощи способа по п. 1, фармацевтической композиции, полученной при помощи способа по п. 3, или применение по п. 29 или 33, для получения лекарственного средства для терапевтического и/или профилактического лечения рака.