АНТАГОНИСТЫ

1. Антитело или фрагмент, содержащие сайт связывания, который специфически связывается с пропротеиновой конвертазой субтилизин-кексинового типа 9 (PCSK9), причем сайт связывания включает домен VH, который кодируется нукпеотидной последовательностью, полученной в результате рекомбинации сегмента гена VH, сегмента гена DH и сегмента гена JH человека, при этом сегмент гена VH выбран из IGHV4-31, IGHV4-59, IGHV4-4 и IGHV3-9.
2. Антитело или фрагмент по п. 1, отличающиеся тем, что (i) сегмент гена VH представляет собой IGHV4-31, а сегмент гена DH представляет собой сегмент гена человека IGHD3-9; или (ii) сегмент гена VH представляет собой IGHV4-59, а сегмент гена DH представляет собой сегмент гена человека IGHD3-10; или (iii) сегмент гена VH представляет собой IGHV4-4, а сегмент гена DH представляет собой сегмент гена человека IGHD2-15; или (iv) сегмент гена VH представляет собой IGHV3-9, а сегмент гена DH представляет собой сегмент гена человека IGHD3-9.
3. Антитело или фрагмент по п. 1 или 2, отличающиеся тем, что сегмент гена JH представляет собой сегмент гена человека IGHJ6.
4. Антитело или фрагмент по любому предыдущему пункту, отличающиеся тем, что сайт связывания содержит последовательность CDRH3, выбранную из SEQ ID №271, 285, 15, 77, 29, 91, 211 и 225.
5. Антитело или фрагмент по любому предыдущему пункту, отличающиеся тем, что сайт связывания содержит домен VH, содержащий SEQ ID №259, 1, 65 или 199.
6. Антитело или фрагмент по любому предыдущему пункту, отличающиеся тем, что сайт связывания содержит домен VH, содержащий SEQ ID №259, спаренный с доменом VL, содержащим SEQ ID №289.
7. Антитело или фрагмент по любому из пп. 1-5, отличающиеся тем, что сайт связывания включает домен VH, содержащий SEQ ID №319, спаренный с доменом VL, содержащим SEQ ID №349.
8. Антитело или фрагмент, которые специфически связываются с PCSK9 и содержат последовательность CDRH3 антитела к PCSK9 по любому предыдущему пункту или указанную последовательность CDRH3, содержащую 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы).
9. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), которые специфически связываются с PCSK9 и содержат домен VH, который содержит последовательность CDRH3 антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или указанную последовательность, содержащую 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы).
10. Антитело или фрагмент по п. 9, отличающиеся тем, что домен VH содержит (i) последовательность CDRH3 антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или указанную последовательность CDRH3, содержащую 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы); и (ii) последовательность CDRH1 указанного выбранного антитела; или указанную последовательность CDRH1, содержащую 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы).
11. Антитело или фрагмент по п. 9 или 10, отличающиеся тем, что домен VH содержит (iii) последовательность CDRH3 антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или указанную последовательность CDRH3, содержащую 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы); и (iv) последовательность CDRH2 указанного выбранного антитела; или указанную последовательность CDRH2, содержащую 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы).
12. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), содержащие сайт связывания, который специфически связывается с PCSK9, причем сайт связывания содержит домен VH, который содержит аминокислотную последовательность домена VH антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или аминокислотную последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 70%.
13. Антитело или фрагмент по пп. 9, 10, 11 или 12, отличающиеся тем, что выбранное антитело представляет собой CL-274711 или CL-148219QLT.
14. Антитело или фрагмент по любому предыдущему пункту, содержащие первую и вторую копии указанного домена VH.
15. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), содержащие сайт связывания, который специфически связывается с PCSK9, причем сайт связывания содержит домен VL, который кодируется нуклеотидной последовательностью, полученной путем рекомбинации сегмента гена VL и сегмента гена JL человека, причем сегмент гена VL выбран из IGKV3-11, IGKV2-28 и IGKV2-29.
16. Антитело или фрагмент по п. 15, отличающиеся тем, что сегмент гена JL представляет собой сегмент гена человека, выбранный из IGKJ4, IGJK3 и IGKJ1.
17. Антитело или фрагмент, которые специфически связываются с PCSK9 и содержат последовательность CDRL3 антитела к PCSK9 по любому предыдущему пункту или указанную последовательность CDRL3, содержащую 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы).
18. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), которые специфически связываются с PCSK9 и содержат домен VL, который содержит последовательность CDRL3, выбранную из SEQ ID №301, 315, 47, 107, 61, 121, 241 и 255, или указанную выбранную последовательность CDRL3, содержащую 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы).
19. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), которые специфически связываются с PCSK9 и содержат домен VL, который содержит последовательность CDRL3 (и необязательно CDRH3) антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или указанную последовательность(-и), каждая из которых содержит 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы).
20. Антитело или фрагмент по п. 19, отличающиеся тем, что домен VL содержит (i) последовательность CDRL3 (и необязательно CDRH3) антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или указанную последовательность(-и) CDR3, каждая из которых содержит 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы); и (ii) последовательность CDRL1 (и необязательно CDRH1) указанного выбранного антитела; или указанную последовательность(-и) CDR1, каждая из которых содержит 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы).
21. Антитело или фрагмент по п. 19 или 20, отличающиеся тем, что домен VL содержит (iii) последовательность CDRL3 (и необязательно CDRH3) антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или указанную последовательность(-и) CDR3, каждая из которых содержит 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы); и (iv) последовательность CDRL2 (и необязательно CDRH2) указанного выбранного антитела; или указанную последовательность(-и) CDR2, каждая из которых содержит 3, 2 или 1 аминокислотную замену(-ы).
22. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), содержащие сайт связывания, который специфически связывается с PCSK9, причем сайт связывания содержит домен VL, который содержит аминокислотную последовательность домена VL антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или аминокислотную последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 70%.
23. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), которые специфически связываются с PCSK9 и содержат аминокислотную последовательность тяжелой цепи антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или аминокислотную последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 70%.
24. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), которые специфически связываются с PCSK9 и содержат аминокислотную последовательность легкой цепи антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или аминокислотную последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 70%.
25. Антитело или фрагмент по п. 23, содержащие аминокислотную последовательность легкой цепи указанного выбранного антитела; или аминокислотную последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 70%.
26. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), которые специфически связываются с эпитопом PCSK9 человека, идентичным эпитопу, с которым связывается антитело по любому предыдущему пункту.
27. Антитело или фрагмент по п. 26, отличающиеся тем, что эпитоп идентифицируют сканированием неродственными аминокислотами или рентгеновской кристаллографией.
28. Антитело или фрагмент по п. 27, отличающиеся тем, что контактные остатки эпитопа определены по снижению аффинности по меньшей мере в 10 раз при сканировании неродственными аминокислотами, например аланиновом сканировании, что определено с помощью SPR.
29. Антитело или фрагмент (необязательно по любому предыдущему пункту), которые конкурируют за связывание с PCSK9 человека с антителом по любому предыдущему пункту.
30. Антитело или фрагмент по любому предыдущему пункту, которые специфически связываются с PCSK9, содержащей аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID №189-194.
31. Антитело или фрагмент по любому предыдущему пункту, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент содержат константную область человека, необязательно константную область lgG4 или константную область lgG1.
32. Антитело или фрагмент по п. 31, отличающиеся тем, что константная область представляет собой константную область lgG4-PE, необязательно константная область содержит аминокислотную последовательность SEQ ID №3 или 152.
33. Антитело или фрагмент по любому предыдущему пункту, дополнительно содержащие антигенсвязывающий сайт, который специфически связывает другой антиген-мишень, необязательно ANGPTL3.
34. Антитело или фрагмент к PCSK9, как определено в любом предыдущем пункте, для лечения или профилактики PCSK9-опосредованного заболевания или патологического состояния (необязательно гиперхолестеринемии) у субъекта.
35. Антитело или фрагмент к PCSK9 по п. 34, отличающиеся тем, что заболевание или патологическое состояние выбрано из гиперхолестеринемии, гиперлипидемии, гиперхолестеринемии, дислипидемии, холестатического заболевания печени, нефротического синдрома, гипотиреоза, ожирения, диабета, атеросклероза или сердечнососудистого заболевания.
36. Антитело или фрагмент по п. 34 или 35, отличающиеся тем, что антитело или фрагмент вводят субъекту одновременно или последовательно со статином.
37. Комбинация количества антитела или фрагмента к PCSK9 и количества статина (необязательно включающая несколько доз указанного антитела и/или статина), причем указанное антитело или фрагмент соответствует любому из пп. 1-36.
38. Антитело, фрагмент или комбинация по любому из пп. 1-37 для применения в способе лечения или профилактики гиперхолестеринемии у субъекта, который ранее находился на схеме лечения статинами в первой дозе, причем способ включает снижение дозы статина, вводимой субъекту, или отсутствие введения статина субъекту, при этом способ включает введение субъекту антитела или фрагмента.
39. Комбинация по п. 37 или 38, включающая статин в суточной дозе от 10 до 20 мг (например, 10 мг); или <60 мг (например, 40 мг).
40. Антитело, фрагмент или комбинация по любому предыдущему пункту для введения человеку или животному, страдающему повышенным уровнем холестерина, для снижения уровня холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС-ЛПНП) в плазме у субъекта после того, как субъект получил антитело или фрагмент к PCSK9.
41. Применение антитела, фрагмента или комбинации, как определено в любом предыдущем пункте, при производстве лекарственного препарата для введения субъекту для лечения или профилактики PCSK9-опосредованного заболевания или патологического состояния, необязательно гиперхолестеринемии.
42. Способ лечения или профилактики PCSK9-опосредованного заболевания или патологического состояния у субъекта (необязательно гиперхолестеринемии), включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антитела, фрагмента или комбинации, как определено в любом из пп. 1-40, при этом тем самым лечится или предотвращается PCSK9-опосредованное заболевание или патологическое состояние.
43. Применение по п. 41 или способ по п. 42, отличающиеся тем, что заболевание или патологическое состояние, опосредованное PCSK9, представляет собой гиперхолестеринемию.
44. Антитело, фрагмент, комбинация, применение или способ по любому из пп. 34-43, дополнительно включающие применение к субъекту дополнительной терапии, например дополнительного терапевтического агента, при этом дополнительный терапевтический агент необязательно выбран из группы, состоящей из:
а. Статина;
b. Ингибитора ANGPTL3 (например, антитело к ANGPTL3, например эвинакумаб)
c. Фибрата;
d. Секвестранта желчных кислот;
e. Никотиновой кислоты; и
f. Ниацина.
45. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело, фрагмент или комбинацию, как определено в любом из пп. 1-40 и 44, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, разбавитель или носитель и необязательно в комбинации с дополнительным терапевтическим агентом, выбранным из агентов, перечисленных в п. 44.
46. Фармацевтическая композиция по п. 45 для лечения и/или профилактики патологического состояния или заболевания, опосредованного PCSK9, необязательно гиперхолестеринемии.
47. Фармацевтическая композиция по п. 45 или 46 в комбинации с этикеткой или инструкциями по применению для лечения и/или профилактики указанного заболевания или патологического состояния у человека; при этом этикетка или инструкции необязательно содержат номер разрешения на продажу (необязательно номер разрешения FDA или ЕМА); при этом набор необязательно содержит в/в или инъекционное устройство, которое содержит антитело или фрагмент.
48. Нуклеиновая кислота, которая кодирует домен VH и/или домен VL антитела или фрагмента, как определено в любом из пп. 1-33.
49. Нуклеиновая кислота, которая кодирует домен VH, содержащий аминокислотную последовательность домена VH антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или аминокислотную последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 70%.
50. Нуклеиновая кислота, которая кодирует домен VL, содержащий аминокислотную последовательность домена VL антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); или аминокислотную последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 70%.
51. Нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична последовательности SEQ ID №260 или 320.
52. Нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь и/или легкую цепь антитела или фрагмента, как определено в любом из пп. 1-33.
53. Нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность VH, которая по меньшей мере на 70% идентична SEQ ID №259 или 319; и аминокислотную последовательность С-области, которая по меньшей мере на 70% идентична последовательности IGHG4, необязательно по меньшей мере на 70% идентична SEQ ID №3 или 152.
54. Нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность VL, которая по меньшей мере на 70% идентична SEQ ID №289 или 349; и аминокислотную последовательность С-области, которая по меньшей мере на 70% идентична последовательности IGKC, необязательно по меньшей мере на 70% идентична SEQ ID №156.
55. Нуклеиновая кислота (например, в клетке-хозяине, например в клетке СНО, или НЕК293, или Cos), содержащая
a. нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична последовательности тяжелой цепи антитела, выбранного из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT); и/или
b. нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 70% идентична последовательности легкой цепи антитела, выбранного, соответственно, из CL-274711, CL-148219QLT, CL-274698, CL-148219 и CL-148489 (например, CL-274711 или CL-148219QLT).
56. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту(-ы) (например, нуклеиновую кислоту(-ы) по любому из пп. 48-55); при этом вектор необязательно представляет собой вектор СНО или HEK293.
57. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту(-ы) (например, нуклеиновую кислоту(-ы) по любому из пп. 48-55) или вектор по п. 56.
58. Антитело, фрагмент, комбинация, вектор, клетка-хозяин, применение или способ, как описано в данном документе.