ГОМОЛОГИ ФОСФАТАЗЫ ФОСФАТИДНОЙ КИСЛОТЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Нуклеиновая кислота, включающая нуклеотидную последовательность, указанную в любом из подпунктов (а)-(е) ниже:
(а) нуклеотидную последовательность, которая кодирует белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 2, и обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(b) нуклеотидную последовательность, которая поддается гибридизации в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 4, и которая кодирует белок, обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(c) нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, идентичной на 70% или больше нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 4, и которая кодирует белок, обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(d) нуклеотидную последовательность, которая кодирует аминокислотную последовательность, идентичную на 70% или больше аминокислотной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 2, и которая кодирует белок, обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты; или
(e) нуклеотидную последовательность, которая поддается гибридизации в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 2, и которая кодирует белок, обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты.
2. Нуклеиновая кислота по п.1, которая включает нуклеотидную последовательность, указанную в любом из подпунктов (а)-(с) ниже:
(а) нуклеотидную последовательность, которая кодирует белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением 1-10 аминокислот в аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 2, и обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты;
(b) нуклеотидную последовательность, которая поддается гибридизации в условиях использования 2 х SSC при 50°С с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 4, и которая кодирует белок, обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты; или
(c) нуклеотидную последовательность, которая кодирует аминокислотную последовательность, идентичную на 90% или больше аминокислотной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 2, и которая кодирует белок, обладающий активностью фосфатазы фосфатидной кислоты.
3. Нуклеиновая кислота, включающая нуклеотидную последовательность, указанную в любом из подпунктов (а)-(с) ниже, или ее фрагмент:
(а) нуклеотидную последовательность, указанную в SEQ ID NO: 4;
(b) нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 2; или
(с) нуклеотидную последовательность, указанную в SEQ ID NO: 1.
4. Нуклеиновая кислота, включающая нуклеотидную последовательность, указанную в любом из подпунктов (а)-(е) ниже:
(а) нуклеотидную последовательность, которая кодирует следующий белок:
белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 2, и который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты;
(b) нуклеотидную последовательность, которая поддается гибридизации в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 4, и которая кодирует следующий белок:
белок, который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты;
(c) нуклеотидную последовательность, которая состоит из нуклеотидной последовательности, идентичной на 70% или больше нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 4, и которая кодирует следующий белок:
белок, который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты;
(d) нуклеотидную последовательность, которая кодирует следующий белок:
белок, который состоит из аминокислотной последовательности, идентичной на 70% или больше аминокислотной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 2, и который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты; или
(e) нуклеотидную последовательность, которая поддается гибридизации в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 2, и которая кодирует следующий белок:
белок, который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты.
5. Нуклеиновая кислота по п.4, которая включает нуклеотидную последовательность, указанную в любом из подпунктов (а)-(с) ниже:
(а) нуклеотидную последовательность, которая кодирует следующий белок:
белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением 1-10 аминокислот в аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 2, и который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты;
ο
(b) нуклеотидную последовательность, которая поддается гибридизации в условиях использования 2 х SSC при 50С с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 4, и которая кодирует следующий белок:
белок, который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты; или
(c) нуклеотидную последовательность, которая кодирует следующий белок:
белок, который состоит из аминокислотной последовательности, идентичной на 90% или больше аминокислотной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 2, и который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты.
6. Белок, указанный в подпункте (а) или (b) ниже:
(а) белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в SEQ ID NO: 2, и который обладает активностью фосфатазы фосфатидной кислоты; или
(b) белок, который состоит из аминокислотной последовательности, идентичной на 70% или больше аминокислотной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 2, и который обладает активностью фосфатазы фосфатидной кислоты.
7. Белок, указанный в подпункте (а) или (b) ниже:
(а) белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в SEQ ID NO: 2, и который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, состоящий из указанной выше аминокислотной последовательности, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты; или
(b) белок, который состоит из аминокислотной последовательности, идентичной на 70% или больше аминокислотной последовательности, состоящей из SEQ ID NO: 2, и который обладает способностью к обеспечению жирнокислотной характеристики, в которой гарантируется большая степень по крайней мере одного или более показателей i)-vi), указанных ниже, в жирнокислотной характеристике хозяина, экспрессирующего белок, состоящий из указанной выше аминокислотной последовательности, чем в жирнокислотной характеристике хозяина, не экспрессирующего этот белок:
i) содержания олеиновой кислоты;
ii) отношения содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношения содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношения общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношения содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительного показателя содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты.
8. Белок, состоящий из аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO: 2.
9. Рекомбинантный вектор, включающий нуклеиновую кислоту по любому из пп.1-5.
10. Трансформант, трансформированный рекомбинантным вектором по п.9.
11. Композиция жирной кислоты, полученная путем культивирования трансформанта по п.10, в жирнокислотной характеристике которой по крайней мере один или более показателей i)-vi), указанных ниже, больше, чем в жирнокислотной характеристике продукта культивирования, полученного путем культивирования хозяина, который не трансформирован рекомбинантным вектором по п.9:
i) содержание олеиновой кислоты;
ii) отношение содержания пальмитолеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iii) отношение содержания олеиновой кислоты к содержанию пальмитиновой кислоты;
iv) отношение общего содержания стеариновой и олеиновой кислот к содержанию пальмитиновой кислоты;
18
16
v) отношение содержания жирных кислот Ск содержанию жирных кислот С; и
vi) относительный показатель содержания арахидоновой кислоты, дигомо-γ-линоленовой кислоты и/или γ-линоленовой кислоты.
12. Способ приготовления композиции жирной кислоты, который включает получение композиции жирной кислоты по п.11 из продукта культивирования, полученного путем культивирования трансформанта по п.10.
13. Пищевой продукт, включающий композицию жирной кислоты по п.11.