Влияние рибофлавина на зрительный анализатор эмбрионов кур в антенатальном онтогенезе

тов, лазерных и магнитных облучений, смены температурного режима) на инкубационное яйцо. Они способствуют ускорению роста эмбриона, повышению выводимости цыплят, увеличению их сохранности [1]. В связи с этим нами были выбраны раствор витамина В2 (рибофлавина) и дистиллированная вода для выявления изменений, происходящих в зрительном анализаторе кур в эмбриональный период.

Известно, что рибофлавин содержится в сетчатке и играет важную роль в обеспечении светочувствительной реакции глаза. Он связан со сложным процессом обмена веществ в тканях глаза. Данный фактор является основанием для применения этого витамина при некоторых заболеваниях глаз в комплексе с другими методами лечения как при наличии рибофлавино-витаминной недостаточности в глазу, так и в связи с его положительным влиянием на обменные процессы.

Рибофлавин используется при различных функциональных расстройствах зрения, при кератитах невыясненной этиологии, неинфекционных конъюнктивах, васкуляри-зации роговицы, пресенильной катаракте, первичной глаукоме и др. Он широко распространён в клетках микроорганизмов, растений и животных, однако животные не способны к его биосинтезу и получают рибофлавин с пищей. У разных видов животных при ряде заболеваний установлено нарушение обмена рибофлавина. Его недостаток может привести к поражениям кожи, нарушению зрения; при острой недоста-

точности возникает коматозное состояние.

Применяется рибофлавин не только перорально и парентерально, но и при местном введении в виде капель для глаз в 2%-ном растворе по 1-2 капли 2-3 раза в сутки [2].

Материал и методы

Целью исследований послужило определение воздействия рибофлавина на развитие зрительного анализатора эмбрионов кур мясного кросса Ф15 Уайт Хаббард. Исследования проводились в научной лаборатории ФГБОУ ВО Великолукская ГСХА на яйцах, приобретенных в ООО «Племенная птицефабрика Лебяжье» Ленинградской области. Инкубацию проводили в инкубаторе ИБЛ-770.

Для исследований отбирали яйца по результатам оценки их качества и пригодности к инкубации по массе, целостности скорлупы, степени мраморности [3]. Масса яиц составила 52-61 г.

Яйца в количестве 600 штук были разделены на 3 группы. В первой опытной группе яйца опускали в раствор витамина рибофлавина с концентрацией 0,001% по способу Сулейманова Ф.И. и соавторов (2010) [4, 5]. Прогретые в инкубаторе яйца помещали в раствор витамина В2 комнатной температуры и выдерживали 20 минут. Во второй опытной группе яйца опускали в дистиллированную воду комнатной температуры и выдерживали 20 минут. Контрольная группа яиц пре-динкубационной обработке не подвергалась.

На протяжении инкубации яиц всех групп температура воздуха в инкубаторе была стабильной и составляла 37,6±0,10 0С, относительная влажность воздуха - 54,0-57,0%, что соответствует рекомендациям ВНИТИП по инкубации яиц сельскохозяйственной птицы.

В ходе работы проводился биологический контроль путем ово-скопирования, что позволило своевременно удалять неоплодотворен-ные яйца, яйца с кровяными кольцами, замершими эмбрионами [6].

Материалом для исследования послужили глаза куриных эмбрионов с 3-го по 20-й день инкубации. Ежедневно вскрывали в одно и то же время по 5 яиц в каждой из групп и производили энуклеирование глаз.

Каждый глаз эмбриона измеряли штангенциркулем с точностью до ±0,1 мкм. Диаметр глазного яблока и его хрусталика измеряли дорсо-вентрально, ростро-каудально. Поскольку в первые двое суток развития у эмбрионов энуклеировать зрительный анализатор невозможно, исследование глазного яблока проводили с третьих, хрусталика - с четвертых суток инкубации.

Полученные данные подвергались биометрической обработке с

10,8 -

10,2 -

9,6 -

9 -

8,4 -

7,8 -

7,2 -

6,6

3 6 -

§ 5,4 -

4,8 -

4,2 3,6

3 И

1,8 10,,26

3 5 7 9 11 13 15 17 19 Сутки инкубации

Рисунок 1 - Диаметр глазного яблока дорсовентрально

анализом цифрового материала и степени достоверности.

Результаты и обсуждение

Исследование изменений мор-фометрических данных по диаметрам глазного яблока и хрусталика дорсовентрально и ростро-каудально дало возможность выявить периоды активного роста зрительного анализатора. В таблицах 1-2 и рисунках 1-4 представлено посуточное развитие глазного яблока и хрусталика эмбриона.

При измерении диаметра глазного яблока можно отметить периоды активного роста, графически показанные на рисунках 1, 2, отмечаемые на 4-5-е, 6-7-е, 9-10-е, 11-12-е сутки инкубации.

Опытная группа 1 при измерении в дорсовентральном направлении (таблица 1) закономерно превосходила контрольную, однако различия оказались достоверными (р<0,05) только на 4-7-е, 10-11-е, 13-14-е, 16-18-е и 20-е сутки. Опытная группа превосходила контрольную на 4-е сутки инкубации на 1,7%, на 5-е сутки - на 0,7%, на 7-е сутки -на 0,4%. В остальные сроки различия варьировали в пределах 0,2-0,3%.

10,8 10,2 9,6 9 8,4 7,8 7,2 6,6 6 5,4 4,8 4,2 3,6 3 2,4 1,8 1,2 0,6 0

45 Ч

^ опытная группа 1 и контрольная

группа б опытная группа 2

3 5 7 9 11 13 15 17 19 Сутки инкубации

Рисунок 2 - Диаметр глазного яблока ростро-каудально

Сходны результаты и в развитии диаметра глазного яблока рост-ро-каудально. Опытная группа 1 по всем суткам инкубации превосходит контрольную, за исключением 6-х и 9-х суток, когда группы оказались сходными. Опытная группа достоверно (р<0,05) превосходит контрольную на 3-и сутки на 6%, на 11-е и 17-20-е - на 0,2%, на 20-е сутки - на 0,1%.

В развитии хрусталика в дор-совентральном направлении (таблица 2, рис. 3) были выделены периоды наиболее активного роста в трех временных интервалах: на 4-5-е, 1314-е и 17-18-е сутки инкубации.

Наиболее заметные различия диаметра хрусталика глаз в дорсо-вентральном направлении при сравнении опытной группы 1 и контрольной наблюдались на 14-е сутки - на 0,03 мм, однако в течение всего периода инкубации опытная группа 1 превосходила контрольную. Раз-ли чия оказались достоверными (р<0,05) на 5-е, 7-е, 10-е, 13-14-е и 16-20-е сутки эмбрионального развития.

Изучение развития хрусталика ростро-каудально (рис. 4) показало наиболее интенсивный рост в трех временных интервалах: на 6-7-е, 10-11-е, 18-19-е сутки. Опытная

Таблица 1 - Морфометрические измерения диаметра глазного яблока у эмбрионов кур, мм_

Сутки Дорсовентрально Ростро-каудально

инкубации Контроль- Опытная Опытная Контроль- Опытная Опытная

ная группа группа 1 группа 2 ная группа группа 1 группа 2

3 0,51±0,006 0,52±0,006 0,51±0,006 0,50±0,006 0,53±0,006* 0,52±0,006*

4 1,21±0,009 1,23±0,006* 1,22±0,003 1,23±0,006 1,24±0,006 1,23±0,006

5 2,80±0,006 2,82±0,006* 2,81±0,003* 2,89±0,006 2,90±0,006 2,89±0,012

6 3,42±0,006 3,43±0,003* 3,41±0,003 3,62±0,003 3,62±0,003 3,62±0,006

7 5,12±0,006 5,14±0,006* 5,13±0,009 5,20±0,006 5,21±0,003 5,21±0,006

8 5,62±0,006 5,63±0,006 5,62±0,006 5,84±0,003 5,85±0,006 5,84±0,008

9 5,95±0,006 5,96±0,006 5,93±0,012 6,34±0,003 6,34±0,006 6,33±0,009

10 7,52±0,006 7,54±0,006* 7,52±0,003 8,05±0,003 8,06±0,006 8,05±0,006

11 7,94±0,006 7,96±0,003* 7,95±0,015 8,12±0,003 8,14±0,003* 8,13±0,003

12 9,44±0,006 9,45±0,006 9,45±0,006 9,49±0,006 9,50±0,006 9,49±0,010

13 9,55±0,006 9,57±0,006* 9,56±0,006 9,63±0,006 9,64±0,006 9,63±0,006

14 9,66±0,006 9,68±0,006* 9,64±0,012 9,75±0,003 9,76±0,006 9,75±0,006

15 9,84±0,006 9,85±0,006 9,84±0,009 10,04±0,003 10,05±0,006 10,04±0,003

16 10,05±0,006 10,07±0,006* 10,07±0,006* 10,08±0,006 10,09±0,006 10,08±0,009

17 10,07±0,006 10,09±0,006* 10,07±0,015 10,15±0,003 10,17±0,003* 10,15±0,009

18 10,21±0,003 10,23±0,006* 10,22±0,003* 10,36±0,003 10,38±0,006* 10,37±0,009

19 10,52±0,006 10,53±0,006 10,52±0,003 10,62±0,006 10,64±0,006* 10,62±0,003

20 10,66±0,006 10,68±0,006* 10,63±0,013* 10,73±0,003 10,74±0,003* 10,73±0,006

Примечание: *р<0,05

группа 1 превосходила контрольную во все дни инкубации в пределах 0,1-0,2 мм. Достоверная разница

(р<0,05) отмечается по всем дням инкубации, за исключением 4-го, 10-го и 20-го.

Таблица 2 - Морфометрические измерения диаметра хрусталика

Сутки До рсовентрально Ростро-каудально

инку- Контроль- Опытная Опытная Контроль- Опытная Опытная

бации ная группа группа 1 группа 2 ная группа группа 1 группа 2

4 0,47±0,006 0,48±0,006 0,46±0,007 0,33±0,003 0,34±0,006 0,33±0,009

5 0,79±0,006 0,81±0,006* 0,81±0,006* 0,36±0,006 0,38±0,006* 0,37±0,003

6 0,91±0,007 0,92±0,006 0,91±0,006 0,46±0,006 0,48±0,006* 0,47±0,003

7 1,04±0,006 1,06±0,006* 1,05±0,006 0,62±0,003 0,64±0,006* 0,63±0,009

8 1,06±0,030 1,10±0,006 1,10±0,006 0,66±0,006 0,68±0,006* 0,67±0,003

9 1,20±0,006 1,21±0,006 1,20±0,003 0,71±0,006 0,73±0,006* 0,72±0,006

10 1,36±0,006 1,38±0,006* 1,36±0,009 0,79±0,006 0,80±0,006 0,80±0,006

11 1,49±0,006 1,50±0,006 1,51±0,006 0,89±0,006 0,91±0,006* 0,91±0,006*

12 1,67±0,006 1,68±0,006 1,68±0,006 0,93±0,006 0,95±0,006* 0,94±0,009

13 1,75±0,007 1,77±0,006* 1,77±0,006* 0,98±0,006 1,00±0,006* 1,00±0,006*

14 2,01±0,003 2,04±0,009* 2,04±0,003* 1,04±0,006 1,06±0,006* 1,05±0,009

15 2,05±0,006 2,07±0,009 2,07±0,009 1,12±0,006 1,14±0,006* 1,13±0,009

16 2,08±0,003 2,10±0,003* 2,10±0,003* 1,17±0,006 1,19±0,006* 1,18±0,009

17 2,12±0,003 2,14±0,006* 2,13±0,006* 1,27±0,006 1,29±0,006* 1,28±0,009

18 2,37±0,006 2,39±0,006* 2,38±0,012 1,31±0,006 1,33±0,006* 1,32±0,003

19 2,55±0,006 2,57±0,006* 2,56±0,006 1,46±0,006 1,48±0,006* 1,47±0,003*

20 2,66±0,006 2,68±0,006* 2,67±0,009 1,51±0,009 1,52±0,006 1,51±0,003

Примечание: *р<0,05

3 2,8 2,6 2,4 2,2 2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0

11:

4 5 6 7

8 9 1011 121314151617181920 Сутки инкубации

Рисунок 3 - Диаметр хрусталика дорсовентрально

2 1,9 1,8 1,7 1,6 1,5 1,4 1,3 1,2 1,1 1

0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0

4'

Ч? Ч Т "! 41*!

^ опытная группа 1  контрольная

группа ^ опытная группа 2

4 6 8 10 12 14 16 18 20 Сутки инкубации

Рисунок 4 - Диаметр хрусталика ростро-каудально

Воздействие дистиллированной воды на зрительный анализатор кур в антенатальном онтогенезе при морфометрии глазного яблока и хрусталика оказалось незначительным. Достоверные различия при сравнении опытной группы 2 с контрольной выявлены только по отдельным суткам инкубации. Так, диаметр глазного яблока в опытной группе 2 оказался достоверно (р<0,05) больше, чем в контрольной, дорсовен-трально на 5-е, 16-е и 18-е, ростро-каудально - на 3-и сутки; диаметр хрусталика глаза дорсовентрально -на 5-е, 13-14-е, 16-17-е, ростро-каудально - на 11-е, 13-е и 19-е сутки эмбрионального развития. В ряде случаев опытная группа 2 не отличалась по значению показателя от контрольной, а на отдельных сроках инкубации показатель контрольной группы оказался выше, в том числе

достоверно (р<0,05) на 20-е сутки инкубации при изучении глазного яблока в дорсовентральном направлении. Все это позволяет прийти к выводу об отсутствии перспектив применения дистиллированной воды для прединкубационной обработки яиц.

Выводы

При воздействии витамина В2 с концентрацией 0,001% на зрительный анализатор кур выявлена достоверная разница дорсовентрально и ростро-каудально в диаметрах глазного яблока и хрусталика по сравнению с контрольной группой, в которой пре-динкубационная обработка яиц не проводилась, что открывает дальнейшие перспективы в изучении воздействия рибофлавина на эмбрионы кур.

Библиографический список

1. Бременер С.М. Витамины и их клиническое применение / С.М. Бременер. - М.: Медицина, 1966. - 113 с.

2. Егорова В.В. Адаптация сельскохозяйственных животных и птицы: монография / В.В. Егорова. - Ульяновск: Ульяновская ГСХА, 2004. - 160 с.

3. Николаев А.Д. Динамика роста массы эмбрионов кур при инкубации / А.Д. Николаев, А.Н. Троянов, Л.П. Тельцов // Ресурсосберегающие экологически безопасные технологии получения сельскохозяйственной продукции. Лапшинские чтения: материалы науч.-практ. конф. - Саранск, 2007. - Вып.3. - С.366-371.

4. Сулейманов Ф.И. Онтогенез куриного эмбриона и его связь с морфологическими и биохимическими показателями роста и развития / Ф.И. Сулейманов, С.А. Ширяев, Т.Н. Иванова // Наука о проблемах инновационного развития АПК: материалы междунар. науч.-практ. конф. - Великие Луки, 2010. - С.64-66.

5. Сулейманов Ф.И. Стимуляция эмбрионального развития иммунокомпетентных органов у кур / Ф.И. Сулейманов, О.В. Вавилова // Птица и птицепродукты. - 2010. - №1. -С.39-41.

6. Фисинин В.И. Эмбриональное развитие птицы / В.И. Фисинин, И.В. Журавлев, Т.Г. Айдинян. - М.: Агропромиздат, 1990. - 153 с.

E-mail: oksana.sergeevna85@mail .ru

182112 Псковская область, г. Великие Луки, пр. Ленина д. 2, ФГБОУ ВО Великолукская ГСХА

Тел.: +7 (81153) 7-28-51