Эффективность трансартериальной химиоэмболизации развившихся перевиваемых опухолей животных с помощью отечественных микросфер на основе поливинилового спирта

78

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

в 1-ю вошли пациенты с опухолевой радикулопатией (n = 7), во 2-ю — с опухолевой миелопатией (n = 12). В результате проведения интратекальной химиотерапии цитозаром отмечено уменьшение внутриспинального роста на 70 и 46 %, увеличение двигательной активности по шкале Карновского с 30 и 45 баллов до 65 и 70 баллов, снижение интенсивности корешковых болей с 10 и 9,5 единиц до 5,5 и 4,5 единиц по 2 группам соответственно.

Заключение. Таким образом, клинические результаты интратекальной терапии цитозаром больных ММ, осложненной внутриспинальным опухолевым ростом, показали его высокую противоопухолевую эффективность при лечении этой категории пациентов и подтвердили полученные данные в исследованиях чувствительности in vitro DISC-методом.

Ф.И. Турсунова1, Т.И. Фетисов12, О.А. Власова2, В.П. Максимова2, И.Е. Мойжесс2, Г.А. Белицкий2, М.Г. Якубовская2, К.И. Кирсанов2

ВЛИЯНИЕ ДИМИНАЗЕНА НА ЦИТОТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ПРЕПАРАТОВ IN VITRO

ФГБОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва, Россия;

2ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия

Введение. В последние годы для терапии злокачественных новообразований было разработано множество тар-гетных препаратов. Однако, несмотря на большое количество побочных эффектов и доказанную канцерогенную активность, противоопухолевые цитостатики продолжают применяться в качестве базовой терапии. Механизм действия генотоксических противоопухолевых препаратов тесно сопряжен с системой репарации, активность которой значительно влияет на эффективные дозы препарата. Частым событием при опухолевой трансформации является возникновение мутаций, которые приводят к инактивации путей репарации. Например, при мутации в генах BRCA-1 или BRCA-2 утрачивается такое звено репарации, как гомологическая рекомбинация. Подавление активности ферментов, отвечающих за NER- и BER-репарацию в данных клетках, приводит к увеличению эффективности генотоксических воздействий. Данный эффект получил название синтетическая летальность. Семейство белков PARP, которое играет ключевую роль в репарации одно-, двухцепо-чечных разрывов и в экцизионной репарации, является перспективным направлением таргетной терапии. В связи с этим разработаны ингибиторы белка PARP-1, которые уже нашли применение в терапии некоторых видов опухолей. Однако данные препараты не лишены некоторых недостатков, к которым относится низкая избирательность. Ранее мы показали, что узкобороздочные лиганды (УБЛ) ингибируют PARP-1 по ДНК-зависимому механизму. Высказано предположение, что при совместном использовании УБЛ с цитостатиками будет наблюдаться синергиче-ский эффект их действия.

Цель исследования — оценка эффекта от совместного применения УБЛ и цитостатиков на клетках опухолевых культур.

Материалы и методы. Использовали клетки рака молочной железы (MDA-MB-453) и рака толстого кишечни-

ка (НТ-29). Клетки обрабатывали УБЛ, доксорубицином и цисплатином, а также их комбинациями. Цитотоксич-ность препаратов и их комбинаций определяли при помощи MTT-теста.

Результаты. Показано, что при действии диминазена и доксорубицина на опухолевые клетки наблюдается си-нергический эффект действия препаратов (для HT-29—0 + 15 * 42, для MDA-MB-231-5 + 3 * 37), тогда как при совместном действии диминазена и цисплатина эффект был близок к аддитивному.

Заключение. Таким образом, продемонстрировано, что совместное применение классического цитостатика доксорубицина и ингибитора белка репарационной системы PARP-1 диминазена приводит к повышению чувствительности опухолей к химиопрепаратам и к возникновению эффекта синтетической летальности. Данный эффект может быть использован в терапии злокачественных новообразований с целью снижения дозы препаратов и тем самым уменьшения частоты возникновения нежелательных реакций на препараты.

А.Ю. Фадеев, М.Н. Якунина, Е.М. Трещалина ЭФФЕКТИВНОСТЬ ТРАНСАРТЕРИАЛЬНОЙ ХИМИОЭМБОЛИЗАЦИИ РАЗВИВШИХСЯ ПЕРЕВИВАЕМЫХ ОПУХОЛЕЙ ЖИВОТНЫХ С ПОМОЩЬЮ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ МИКРОСФЕР НА ОСНОВЕ ПОЛИВИНИЛОВОГО СПИРТА ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия

Введение. Трансартериальная (внутриартериальная, в/а) химиоэмболизация (ТАСЕ) с применением нагруженными цитостатиками микросфер (МС) — высокоэффективный малоинвазивный метод интервенционной радиологии для лечения нерезектабельных опухолей с регионарным кровотоком. Для ТАСЕ используют импортные МС (DC-Bead), которые в России отсутствуют, но изучаются МС из поливинилового спирта, не нагруженные и нагруженные доксорубицином (DOX) (МИТХТ им. М.В. Ломоносова, ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России). На этом фоне разработка отечественного аналогового препарата в условиях импортозамещения является актуальной.

Цель исследования — изучить эффективность ТАСЕ с помощью отечественных MC/DOX.

Задачи. 1. На крысах с внутримышечным (в/м) гепа-тоцеллюлярным раком РС1 скринировать МС/DOX в диапазоне доз. 2. На кроликах с в/м анапластическим раком VX2 оценить перспективность новых МС/DOX для ТАСЕ.

Материалы и методы. Опыты проводили на 49 крысах (7 гр. по 6 особей) с в/м РС1 Vcp = 4,5 см3, получивших МС/DOX d = 0,2 мм с высвобождением 60 % DOX за 7 дней, и 24 кроликах (4 гр. по 6 особей) с в/м VX2 Vcp > 2 см3, получивших МС/DOX d = 0,4 и 0,6 с высвобождением 70 % DOX за 16 дней. Агенты вводили крысам в бедренную артерию однократно в диапазоне доз в объемах не более 0,1 мл с кумулятивной дозой по DOX (КД) не более 10,5 мг/кг, кроликам в объемах не более 1,0 мл (КД — не более 12,8 мг/кг). Использовали контроли роста опухоли (КРО), разбавителя (КР) и эмболизации (МС). Об эф-

Спецвыпуск / том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

79

фективности в/а TACE судили по блокированию сосудистого русла под контролем рештеноконтрастной ангиографии. Эффективность в/а TACE оценивали для РС1 по показателю скорости роста опухоли (соотношение объемов опухолевых узлов до и после лечения, Vt/V0), для VX2 — по соотношению площади опухоли (St/S0), времени удвоения объема опухоли «т» и коэффициенту эффективности «К» («т»опыта/«т»контроля) под патоморфологическим контролем степени лечебного патоморфоза (ЛП). На 14 с констатировали число частичных ремиссий (ЧР). Полученные в опытах результаты подвергнуты статистической обработке с оценкой достоверности приp < 0,05.

Результаты. На крысах с в/м РС1 и в/а введением MC/DOX в объемах 0,034-0,1 мл (КД = 3,3-10,5 мг/кг) получен слабый эффект TACE: «т» = 11-16 дней; К = 5,58,9; ЛП = 1 ст. Уровень эффекта связан с малым сечением артерии, не позволяющим ввести необходимые объемы микросфер и дозу DOX. На кроликах с в/м VX2 с введением относительно высоких доз получен значимый достоверный верифицированный патоморфологически циторедук-тивный эффект МС/DOX при максимальной из изученных дозировок. В группе MC/D0X-0,5 мл (КД = 6,4 мг/кг) — эффект TACE на уровне группы МС. Количественные показатели в 2,6 раза меньше группы КРО (p < 0,02): St/S0 = 2,5; «т» = 8,0 дней; К = 2, ЛП = 1 ст., ЧР = 0 на фоне выраженного блокирования мелких артериол при сохранении магистрального кровоснабжения. В группе MC/D0X-1,0 мл (КД = 12,8 мг/кг) — эффект TACE, St1/S0 = 1,75; «т» = 7,0; К = 1,9, ЛП = 3 ст., ЧР = 5/6. Эффект реализован на 16 с после высвобождения полной КД = 32 мг.

Заключение. Последовательное изучение нагруженных цитостатиками МС на моделях внутримышечно транс-планированных перевиваемых опухолей крыс и кроликов позволяет отобрать и выявить значимый эффект TACE с использованием стандартных показателей и необходимого контроля. Полученные данные позволяют считать новые отечественные нагруженные DOX МС перспективными для ТАСЕ и рекомендовать завершение доклинического изучения.

Н.В. Филатова1, E.О. Зазнобина2, М.А. Лапшина1,

А.А. Балакина1, В.Д. Сень1, А.А. Терентьев1

ИНДУКЦИЯ АПОПТОЗА В ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТКАХ

MCF-7 ПРИ ДЕЙСТВИИ АМИНОНИТРОКСИЛЬНЫХ

КОМПЛЕКСОВ ПЛАТИНЫ

ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область,

Россия;

2ФГБОУ ВО «Ивановский государственный университет», Иваново, Россия

Введение. Исследование клеточной гибели является важной задачей при разработке новых соединений с противоопухолевой активностью. В связи с высокой токсичностью комплексов платины (цисплатин, оксалиплатин, карбоплатин) проводятся синтез и испытания биологических свойств комплексных соединений платины с различными лигандами и нитроксильными радикалами. Внесение нитроксильного радикала в структуру комплексов платины (IV) снижает их цитотоксичность, в то время

как удлинение аксиальных лигандов усиливает цитотокси-ческие свойства. Ранее нами исследована цитотоксичность аминонитроксильных комплексов платины (IV). На культуре клеток MCF-7, которые обладают повышенной устойчивостью к комплексам платины, показано, что аминони-троксильные комплексы платины (IV) превосходят по цитотоксичности цисплатин.

Цель исследования — изучить механизм клеточной гибели при действии аминонитроксильных комплексов платины (IV).

Материалы и методы. Исследована серия аминонитроксильных комплексов платины (IV) с общей структурой Р1 (IV) (ОТ3) С12Х2, где ^Н2 — нитроксиль-

ный радикал, а X — аксиальные лиганды. Эксперименты проводили на опухолевых клетках MCF-7 (аденокарцино-ма молочной железы человека). В качестве препаратов сравнения использовали цисплатин и сатраплатин. Все исследуемые соединения наносили в дозе ГС50 с экспозицией 6—24 ч. Состояние белка PARP и экспрессию белка р53 определяли с помощью иммуноблотинга. Внутриклеточную локализацию белка р53 исследовали методом флуоресцентной микроскопии после окрашивания ДНК красителем DAPI и белка p53 — флуоресцентно меченными антителами.

Результаты. Результаты иммуноблотинга показали, что все исследуемые соединения в дозе ГС50 вызывали увеличение экспрессии белка р53 с максимумом на 12 ч и его снижение к 24 ч. Методами иммуноблотинга и иммуно-флуоресценции установлено накопление белка р53 в ядре через 12 ч после введения исследуемых соединений. Показано, что все комплексы платины вызывают деградацию белка РАЯР, характерную для процесса апоптоза. В связи с тем что в клетках MCF-7 отстутствует каспаза-3, развитие апоптоза происходит с участием других эффекторных кас-паз, таких как каспаза-6 и каспаза-7.

Заключение. Аминонитроксильные комплексы платины (IV) в дозе ГС50 вызывают гибель клеток MCF-7 по пути р53-зависимого, каспаза-3-независимого апоптоза.

Ю.П. Финашутина, Н.А. Лыжко, Л.А. Кесаева, В.А. Мисюрин, О.Н. Солопова, Н.Н. Касаткина, А.В. Мисюрин

ВАКЦИНИРОВАНИЕ БЕЛКОМ РММЕ СДЕРЖИВАЕТ РОСТ РАМЕ-ЭКСПРЕССИРУЮЩЕЙ ОПУХОЛИ

ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия

Введение. Ген PRAME не экспрессируется в нормальных тканях, но избыточно экспрессируется в различных новообразованиях, включая солидные опухоли и гемобла-стозы. Белок способен вызывать специфический иммунный ответ у пациентов с меланомой и другими опухолями. В единичных случаях может происходить спонтанный лизис PRAME-экспрессирующей опухоли с длительным периодом выживаемости без рецидива болезни в последующем. Некоторые исследователи успешно выделили из крови пациентов острыми лейкозами Т-клетки, специфические к некоторым эпитопам белка PRAME. Возможность развития Т-клеточного ответа не исключает возможность развития В-клеточного ответа против PRAME.

Спецвыпуск/ том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ