СПОСОБ ОЦЕНКИ СУТОЧНОГО МОЛОДНЯКА ПТИЦЫ
METHOD FOR QUALITY ASSESSING DAILY YOUNG POULTRY

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно птицеводству, и может быть использовано при оценке качества суточных цыплят.
Целью изобретения является повышение точности способа.
Суточный молодняк птицы обычно оценивают по внешним признакам. Так, согласно ОСТ 10329-2003 «Суточный молодняк кур. Технические условия» суточный молодняк кур по внешним признакам должен соответствовать следующим требованиям: хорошие подвижность и устойчивость на ногах, активная реакция на звук (постукивание), хорошо выраженный рефлекс клевания; голова - широкая, пропорциональная; клюв -правильной формы, пигментированный; глаза - круглые, выпуклые, блестящие; корпус (на ощупь) - плотный; спина - ровная, умеренно длинная, широкая; грудная кость - киль длинный, упругий; живот (на ощупь) - мягкий, подобранный; плюсны - прямые, крепкие, пигментированные; крылья - плотно прижаты к туловищу; пух - полностью подсохший, равномерно распределенный по телу, гладкий, шелковистый; пупочное кольцо - плотно закрытое; клоака - чистая, розовая, влажная. Масса суточных мясных цыплят для промышленного стада должна быть не менее 32 г, для племенного - 34 г. При использовании требований указанного ОСТа все же трудно предсказать будущую продуктивность цыплят, так как многие изменения на биохимическом уровне не проявляются во внешних признаках, который можно оценить визуально.
Наши исследования убедительно показали, что антиокислительная активность является интегральным показателем способности организма птиц противостоять патологическим процессам, при которых повышается количество активных форм кислорода (Surai, 2002). Так, в физиологических условиях в каждой клетке каждый день образуется около 20 миллиардов свободных радикалов, способных повреждать все типы биологических молекул, включая жиры, белки и нуклеиновые кислоты, что приводит к нарушению важнейших физиологических функций и биохимических процессов. Следует иметь ввиду, что в стресс-уловиях количество образовавшихся свободных радикалов может многократно возрастать. Это в свою очередь приводит к снижению продуктивных и воспроизводительных качеств птицы, снижению иммунитета и здоровья птиц в целом. Для защиты от пагубного влияния свободных радикалов и токсических продуктиов их метаболизма в процессе эволюции в организме животных, включая птиц, были развиты защитные механизмы, которые получили обобщенное название «антиоксидантаная система» организма (Surai, 2018). Данная система состоит из множества различных антииоксидантов, часть из которых синтезируется в самом организме птиц (глутатион, тиоредоксин, аскорбиновая кислота и др.), другие-поступают с кормом (витамин Е, каротиноиды, селен и др.). Часть антиоксидантов, например витамины Е и С, способны непосредственно улавливать свободные радикалы и обрывать цепи переокисления. Другие антиоксиданты, напрмер, карнитин и таурин, способствуют поддержанию структурной целостности митохондрий- главного места образования свободных радикалов. К тому же, целая группа антиоксидантных ферментов, включая супероксиддимсмутазу, глутатионпероксидазу и каталазу, участвует в дектоксикации свободных радикалов и превращении их в безвредные нетоксичные соединения.
Следует особо подчеркнуть, что промышленное птицеводство сопряжено с целым рядом стрессов, включая средовые стрессы (отклонение от оптималоьной температуры, повышенное количество аммиака и др.), кормовые (микотоксины и окисленные жиры в кормах), технологические (посадка цыплят в корпус, прореживание, смена рационов, сортировка птицы, вакцинация и др.) и биологические/внутренние (бактериальные или вирусные инфекции, высокая скорость роста и др.) стрессы (SuraiandFisinin. 2016; 2016а). Во всех вышеупомянутых случаях возникает потребность в усиленной защите организма от стрессов, которая осуществляется путем активации витагенов (SuraiandFisinin, 2016b; Suraietal., 2017) с последующим синтезом защитных молекул. Если же антиоксидантная система не полностью справляется с защитой, то возникает окислительный стресс и происходит повреждение биологических молекул, что влечет за собой снижение продуктивных и воспроизводительных качеств птицы. К сожалению, окислительный стресс на начальных стадиях не проявляется внешне и определить его визуально невозможно. Это касается, прежде всего, свежевылупившихся цыплят.
Процесс инкубации связан с повышенной температурой и влажностью, что сопряжено с повышенным образованием свободных радикалов (Surai, 2002, 2018). Любые нарушения в процессе инкубации отражаются на жизнеспособности цыплят, но, как упоминалось выше, обнаружить их визуально у суточных цыплят практически невозможно.
Таким образом, современное птицеводство нуждается в дополнительных методах оценки качества суточного молодняка, принимающих во внимание вышеуказанные особенности роста и развития цыплят.
При этом известно, что все антиоксиданты работают сообща, эффективно взаимодействуя друг с другом. В последние годы появился термин «редокс-баланс» клетки или организма, который по своей сути является балансом между антиоксидантами и прооксидантами.
Прототипом заявленного изобретения является «Способ оценки суточного молодняка сельскохозяйственной птицы», заключающийся в том, что выборочно убивают определенное количество цыплят и определяют жирорастворимые витамины в органах и тканях молодняка. При этом в качестве биологического материала используют печень суточных цыплят, а из жирорастворимых витаминов определяют суммарные запасы свободного альфа-токоферола во всей печени [Авторское свидетельство СССР SU 1799540, 1993 г.].
Недостатком данного метода является низкая точность метода из-за изменений в составе рациона птиц, которые произошли за последние 25 лет. В частности, дозы витамина Е в рационе кур родительского стада за это время возросли в 5-10 раз (от 10-20 мг/кг в 1990х, до 100 г/т в настоящее время (ROSS 308, 2016). Это привело к тому, что содержание витамина Е в печени суточных цыплят существенно (в 4-5 раз) увеличилось и перестало быть лимитирующим фактором в физиологии развития цыплят. В частности, наши исследования показали, что при использовании современных рационов для кур родительского стада мясных цыплят, содержащих витамин Е в количестве 100 мг/кг, запасы витамина Е в печени существенно (в 4-5 раз) превышают 400 мкг, заявленных в прототипе в качестве показателя кондиционности цыплят. Таким образом, в современных условиях кормления цыплят, даже относительно слабые цыплята содержат общие запасы витамина Е в печени превышающие 400 мкг, что не дает практической возможности использования данного метода для эффективной оценки качества суточных цыплят. При этом в наших исследованиях было доказано, что концентрация витамина Е в печени свежевылупившихся цыплят напрямую зависит от используемых доз витамина Е в рационе кур родительского стада (Таблица 1).
Таблица 1. Влияние различных доз витамина Е в рационе родительского стада мясных кур на его содержание в печение свежевылупившихся цыплят
Таким образом, использование метода-прототипа на 10 различных партиях свежевылупившихся цыплят, показало, что все они были отнесены к первой категории кондиционности (содержание витамина Е в печени колебалось от 1450 до 2300 мкг), независимо от их качества.
В разработанном нами новом способе поставленная цель достигается тем, что в способе оценки суточного молодняка сельскохозяйственной птицы, включающем выборочный убой и определение биохимических параметров в биологическом материале, в качестве биологического материала используют плазму крови а в качестве биохимических параметров используют общую антиоксидантную активность (ОАА) и количество конечных продуктов перекисного окисления липидов (TBARS). При этом о качестве суточного молодняка судят по соотношению общей антиоксидантной активности к количеству конечных продуктов перекисного окисления липидов (OAA/TBARS).
Наиболее существенными отличительными от прототипа признаками предлагаемого технического решения являются:
1. В качестве биологического материла используют плазму крови. Это существенно упрощает отбор образцов для анализа.
2. В качестве биохимических параметров используют общую антиоксидантную активность (ОАА) и количество конечных продуктов ПОЛ (TBARS). Данные параметры легко определить и на рынке существуют коммерческие наборы для определения данных параметров.
3. Конечную оценку качества суточного молодняка проводят по отношению общей антиоксидантной активности (ОАА) к количеству конечных продуктов ПОЛ (TBARS). Это дает высокую точность определения за счет учета как положительных (антиоксидантная активность), так и отрицательных (перекисное окисление липидов) параметров, существенно влияющих на жизнеспособность молодняка.
4. При величине отношения OAA/TBARS>800 цыплят относят к 1-й категории, при отношении OAA/TBARS 300-800 цыплят относят ко второй категории и при отношении OAA/TBARS<300 цыплят относят к третьей категории, непригодной для выращивания.
Выбор плазмы крови в качестве биологического материала, объясняется тем, что у суточных цыплят состояние антиоксидантной защиты в целом организме напрямую коррелирует с антиоксидантным статусом их плазмы крови. Например, по нашим данным коэффициент корреляции между общей антиоксидантной активностью плазмы крови и печени составляет +0.86.
Выбор в качестве биохимических параметров общей антиоксидантной активности и количества конечных продуктов ПОЛ определяется тем, что в наших исследованиях экспериментально доказано, что в организме суточного цыпленка антиоксидантный статус зависит от баланса между антиоксидантами и прооксидантами и именно общая антиоксидантная активность плазмы крови наиболее точно отражает антиоксидантный статус организма (Surai, 2002). С другой стороны, количество конечных продуктов ПОЛ в плазме крови отражает конечный результат действия антиоксидантной защиты и увеличение количества TBARS происходит в стресс-условиях, когда антиоксидантная система не полностью справляется с окислительным стрессом, возникающим в силу различных стресс-факторов (Surai, 2018). Это, как правило, связано со снижением жизнеспособности цыплят, с ухудшением их роста и развития.
Выбор отношения общей AOA/TBARS в качестве основного параметра оценки качества суточного молодняка базируется на результатах наших исследований по взаимосвязи общей антиоксидатной активности и ПОЛ в плазме крови цыплят. Именно данное соотношение наиболее полно отражает состояние организма суточных цыплят и может эффективно прогнозировать их жизнеспособность, которая напрямую зависит от данного параметра.
В свете обнаруженных нами новых фактов регуляции антиоксидантной защиты и учитывая особенности суточного молодняка, где антиоксидантная защита играет решающую роль в поддержании его жизнеспособности представляется наиболее обоснованным выбор данного биохимического показателя для оценки качества суточного молодняка птиц.
В отличие от суточного молодняка, у взрослых особей антиоксидантаная система более развитая и больший вклад в антиоксидантную защиту и поддержание жизнеспособности вносят различные антиоксидантные ферменты.
С другой стороны, использование других органов, например, печени для оценки качества суточного молодняка более трудоемко и усложняет сам процесс выполнения теста и требует определенного оборудования для гомогенизации органа и взвешивания образца.
Таким образом, выбор плазмы крови в качестве биологического материала при оценке суточного молодняка является наиболее оптимальным вариантом в данном способе и позволяет упростить процедуру оценки.
Выбор из биохимических параметров общей антиоксидантной активности и количества продуктов ПОЛ позволяет упростить метод при существенном повышении точности и достоверности оценки качества суточного молодняка. Для определения обоих биохимических параметров существуют коммерческие наборы реактивов, что дает возможность стандартизировать данные определения. Обоснованность данного выбора определяется тем, что общая антиоксидантная активность крови отражает сумму всех антиоксидантов, присутствующих в крови, включая аскорбиновую кислоту, глутатион, мочевую кислоту, витамин Е, каротиноиды и другие. При этом высокая антиоксидантная активность плазмы крови является важнейшим элементом адаптации цыпленка к стрессовым условиям внешней среды (Surai, 2018). Учитывая тот факт, что промышленное птицеводство сопряжено с целым рядом стрессовых ситуаций на всех этапах жизни и развития цыпленка, от моменты его вылупления из яйца до убоя на мясо (SuraiandFisinin, 2016; 2016а), эффективность антиоксидантной защиты рассматривается в качестве решающего фактора жизнеспособности цыплят. Таким образом, с одной стороны, пониженная общая антиоксидантная активность плазмы крови свидетельствует о неадекватной антиоксидантной защите и потенциальных проблемах при дальнейшем выращивании таких цыплят. При этом следует иметь ввиду, что данный показатель учитывает как наличие антиоксидантов, так и прооксидантов в крови, т.е по сути дела отражает редокс-баланс в организме, который является важнейшим регулятором многих физиологических функций, определяет экспрессию важнейших генов, включая витагены, ответственные за адаптацию организма к стрессам (SuraiandFisinin, 2016b). С другой стороны, высокая антиоксидантная активность плазмы крови свидетельствует о высокой адаптационной способности данных цыплят и они способны преодолевать различные коммерческие стрессы с минимальными потерями.
Перекисное окисление липидов (ПОЛ) является результатом нарушения редокс-баланса (антиоксидант-прооксидантного баланса) в организме в целом и в индивидуальных тканях в частности (Conradetal., 2018). ПОЛ в мембранах приводит к нарушению их структуры и биологических свойств. В то же время, перекиси липидов оказывают токсическое действие на многие процессы в организме, вызывая воспаление и апоптоз (GaschlerandStockwell, 2017). Таким образом, в результате ПОЛ происходит накопление конечных продуктов окисления липидов, включая различные перекиси, которые реагируя с тиобарбитуровой кислотой образуют цветной комплекс, который может быть определен фотометрически (TBARS). Следовательно, определяя TBARS в плазме крови можно следить за конечным результатом антиоксидатной защиты, т.е. повышение TBARS ссвидетельствует об окислительном стрессе и возможном повреждении жизненно-важных органов и тканей в организме цыпленка (Surai, 2002).
Предлагаемое соотношение OAO/TBARS является наиболее точным индикатором состояния антиоксидантной защиты в организме и может служить фактором предсказания здоровья и будущей продуктивности цыплят-бройлеров.
Известно, что в первые дни жизни цыпленка происходит становление всех основных функций организма, у молодняка с низкой антиоксидантной активностью обнаруживается, как правило, различные нарушения в метаболизме, вызванные как неполноценностью инкубационных яиц, так и нарушениями в процессе инкубации (Surai et al., 1999).
Таким образом, предлагаемый способ оценки суточного молодняка сельскохозяйственных птиц основан на результатах изучения биологических основ развития цыпленка в первые дни жизни и на использовании впервые обнаруженного авторами явления - адаптационного изменения антиоксидантной активности плазмы крови и ее связи с основными функциями растущего организма.
Использование заявляемого способа позволит, с одной стлороны, более точно прогнозировать физиологическое состояние молодняка сельскохозяйственной птицы и отбирать для выращивания наиболее полноценных цыплят, что в условиях промышленного птицеводства значительно повысит рентабельность отрасли за счет повышенных среднесуточных привесов, лучшей конверсии и сохранности цыплят-бройлеров. С другой стороны, ситуация с цыплятами, характеризующиеся пониженным показателем предлагаемого индекса и отнесенные ко второй категории, может быть исправлена за счет скармливания или выпаивания специальных антиоксидантных добавок/композиций (Сурай и др., 2017; Григорьева и др., 2017). В заключение, цыплят, отнесенных к третьей категории (брак) выращивать экономически нецелесообразно. Предлагаемый способ позволит более точно устанавливать причины плохого роста, развития, нарушения иммунитета и других отрицательных последствий стреса в условиях промышленного птицеводства.
Обоснованность предлагаемого критерия определяется тем, что общая антиоксидантная активность является критическим фактором и играет ключевую роль в процессах регуляции роста и развития молодняка, сопряженных с окислительным стрессом и увеличением уровня перекисного окисления липидов (ПОЛ) в их тканях. Учитывая тот факт, что в первую неделю жизни концентрация основных антиоксидантов, например, витамина Е существенно снижается, то высокая общая антиоксидантная активность является наиболее эффективным критерием оценки антиоксидантной системы организма в данный период отнтогенеза и соответственно наиболее точном прогноз-фактором для будущего роста, развития и сохранности растущего молодняка. С другой стороны, известно, что в первые дни жизни цыпленка происходит становление всех основных функций организма и у молодняка с низкой общей антиоксидантной активностью плазмы крови отмечается пониженная адаптационная способность к стрессам и, соответственно, снижена продуктивность.
Таким образом, предлагаемый способ оценки качества суточного молодняка учитывает ряд принципиальных особенностей обмена веществ, включая механизмы антиоксидантной защиты, в первые дни жизни и дает возможность объективно оценить качество суточного молодняка птицы, отбираемого на выращивание.
I
Пример 1. Для оценки качества цыплят берут две партии суточного молодняка по 200 голов. По комплексу экстерьерных признаков цыплята обеих партий оценены как кондиционные. Методом случайного отбора от обеих партий берут по 10 голов цыплят для биохимического анализа. Затем отбирают печень для определения альфа-токоферола. Для этого печень помещают в фарфоровую ступку. Добавляют 10 г безводного сульфата натрия и тщательно растирают до получения однородной массы. Затем в ступку добавляют 10-12 мл хлороформа, перемешивают, оставляют на 10-15 минут для экстракции и после этого фильтруют через обеззоленный фильтр в мерную пробирку на 25 мл. Ступку ополаскивают 2 раза по 5 мл хлороворма и переносят на тот же фильтр. Объем в пробирке доводят до метки хлороформом. Отбирают из пробирки 1 мл хлороформенного раствора, упаривают досуха, растворяют в 0.2 мл хлороформа и наносят на стартовую линию хроматографической пластинки «Силуфол». Тонкослойное хроматографическое разделение витаминов проводят в камере, насыщенной парами хлороформа. После этого пластинку высушивают и опрыскивают смесью равных объемов спиртовых растворов 0.5%-ного 2,2-дипиридила и 0.2%-ного хлорного железа. При этом на белом фоне появляется розовая полоса альфа-токоферола, интенсивность окраски которой прямо пропорциональна содержанию витамина Е.
Окрашенный участок силикагеля соскабливают с пластинки, целевой компонент элюируют, затем фотометрируют полученный розовый раствор. Содержание альфа-токоферола рассчитывают по калибровочном графику. Чем больше запасы альфа-токоферола во всей печени, тем выше биологическая полноценность суточного молодняка. Для разделения суточного молодняка на категории согласно методу-прототипу используют суммарные запасы свободного альфа-токоферола во всей печени. При этом при запасах альфа-токоферола, превышающих 400 мкг цыплят относят к первой категории, при запасах 150-400 мкг - ко второй категории и при общем содержании свободного альфа-токоферола в печени суточных цыплят менее 150 мкг их относят к третей категории (брак).
Для оценки качества цыплят по предлагаемому методу отбирают кровь суточных цыплят с гепарином и получают плазму путем центрифугирования. В плазме крови определяют общую антиоксидантную активность (ОАА) и концентрацию конечных продуктов ПОЛ (TBARS).
Определение общей антиоксидантной активности плазмы крови проводят с использованием метода основанного на подавлении антиоксидантами исследуемого образца образования окрашенных продуктов при окислении хромогенных субстратов. При этом используется реакция, связанная с одноэлектронным окислением стабильного радикала 2,2'-азинобис(3-этилбензтиазолин-6-сульфониевой кислоты) (АБТС), в результате которой образуется стабильный катион-радикал АБТС + зелено-голубого цвета с максимумом поглощения λ=600 нм (Milleretal., 1993). Смысл исследования ОАА заключается в ингибировании окисления этого субстрата при инкубации с пероксидазой (метмиоглобин) и оксидазой (пероксид водорода) антиоксидантами биологической жидкости. Увеличение коэффициента абсорбции АБТС+ после фиксированного времени реакции тем ниже, чем больше антиоксидантов присутствует в образце. Большим преимуществом метода является, его высокая стандартизируемость и, соответственно, возможность сравнения данных, полученных исследователями в разных лабораториях (Rice-Evans, 2000). Набор для выполнения метода выпускается английской фирмой Randox под названием TAS (Total Antioxidant Status).
Таким образом, в наших исследованиях использовался коммерческий набор реактивов для определения общей антиоксидантной активности (ОАА) английской фирмы Randox, который широко используется в разных странах мира, как в медицинской практике, так и в научно-исследовательских работах.
В тест-набор входят следующие компоненты.
R1. Буфер -
Фосфатный буфер 80 mmol/l, рН 7.4
R2. Хромоген-
Метмиоглобин: 6.1 μmol/1
ABTS: 610 μmol/l
R3. Субстрат-
Перекись водорода (в стабилизированной форме): 250 μmol/l
Стандарт для калибровки-
Тролокс: 6-гидрокси-2,5,7,8-тетраметилхроман-2-карбоксиловая кислота
Приготовление реагентов для исследования
R1. Буфер
Содержимое флакона готово к использованию
R2. Хромоген
Содержимое флакона с хромогеном R2 растворяется в10 мл буфера R1.
R3. Субстрат
1 мл субстрата R3 растворяется в 1.5 мл буфера R1.
Калибровочный стандарт
Содержимое флакона со стандартом растворяется в 1 мл дважды ионизированной воды
Процедура:
Длина волны- 600 nm
Кювета: 1 cm
Измерение: против воздуха
Измерение в контрольной пробе проводят следующим образом: в кювету добавляют 1 мл хромогена и 20 мкл плазмы крови и проводят измерение интенсивности поглощения на ФЭКе (или спектрофотометре) при 600 нм. Далее в кювету добавляют 0.2 мл субстрата и приводят второе измерение через 3 минуты после добавления субстрата.
Аналогичным образом проводят измерение со стандартным раствором Тролокса, добавляя в кювету вместо плазмы крови вышеупомянутый раствор калибровочного стандарта.
В холостой пробе проводят измерение при использовании вместо плазмы 20 мкл дистиллированной воды.
Расчет антиоксидантной активности проводят путем сравнения изменения поглощения в кювете с опытным образцом, по сравнению со стандартом и холостой пробой и активность выражают в микромолях на мл плазмы крови.
Определение продуктов перекисного окисления липидов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой в плазме крови цыплят
В процессе перекисного окисления липидов образуются смесь различных альдегидов и других продуктов. При этом малоновый диальдегид (МДА) используется в качестве основного показателя для оценки ПОЛ. Наиболее распространенный метод анализа продуктов ПОЛ основан на их реакции с тиобарбитуровой кислотой (ТБК). Тест с ТБК (TBARS) очень чувствителен. С его помощью можно улавливать наномолярные концентрации МДА. Установлено, что между липидной пероксидацией и МДА существуют количественные взаимосвязи и продукты, образованные при проведении ТБК-теста (TBARS), свидетельствуют о присутствии и количестве липидных перекисей.
В наших исследованиях использовался метод определении количества конечных продуктов ПОЛ по реакции с тиобарбитуровой кислотой, описанный Ohkawaetal., (1979) и используемый нами во многочисленных исследованиях (Suraietal., 1996; Surai, 2000; Blountetal., 2004 и др.).
Принцип метода. Исследование интенсивности ПОЛ ведут, определяя один из продуктов перекисного окисления - МДА - с помощью ТБК (TBARS - тест). МДА и ТБК при высокой температуре и кислом значении рН образуют окрашенный триметиновый комплекс, содержащий одну молекулу МДА и две молекулы ТБК. Максимум поглощения комплекса приходится на 532 нм.
Оборудование. Водяная баня, центрифуга со скоростью 6000 об./мин, колориметр или спектрофотометр.
Реактивы и их приготовление.
1. 0.8%-ный раствор додецил сульфата натрия
2. 20%-ная кислота с рН 3.5 (рН доводят до нужной величины с помощью KOH)
3. 0.8%-ны раствор тиобарбитуровой кислоты (ТБА)
4. Бутанол
Ход определения. К 0,2 мл плазмы крови приливают 0.2 мл 0.8%-ного додецил сульфата натрия и 1.5 мл 20%-ной уксусной кислоты и 1.5 мл 0.8%-ного раствора ТБА. Пробы перемешиваются и помещаются в водяную баню при 95°С на 60 минут. Затем пробы охлаждают в холодной воде, добавляют 4 мл бутанола. Тщательно перемешивают и центрифугируют 10 мин при 3000 об./мин. Оптическую плотность верхней бутанольной фазы измеряют при длине волны 532 нм против холостой пробы, содержащей вместо сыворотки крови воду. Расчет содержания конечных продуктов ПОЛ, реагирующих с ТБК, производят по калибровочному графику, построенному с использованием 1,1,3,3- тетраметоксипропана (1,1,3,3-Tetramethoxypropane, Sigma). Полученные результаты выражают в микромолях на миллилитр (нм/мл) плазмы крови.
Для разделения суточных цыплят на категории согласно предлагаемому способу используют соотношение ОАА (в микромолях на мл плазмы крови) к показателю TBARS (в наномолях на мл плазмы крови). При этом при данном соотношении >800 цыплят относят к первой категории, при соотношении 300-800 - ко второй категории и при соотношении ниже 300 цыплят относят к третей категории (брак) не пригодных для выращивания.
Пример 2. Для проверки эффективности деления цыплят на категории по предлагаемому признаку было сформировано две группы цыплят по 200 голов и они были посажены на выращивание в идентичных условиях. В результате выращивания живая масса цыплят, отнесенных к первой категории, в 7 дневном возрасте составила 187.2 г, а отнесенных ко второй категории - 166.4 г, т.е. разница составила 20.8 г. При этом, многочисленными исследованиями проведенными ранее было доказано, что Наблюдения также показали, что попытки выращивания цыплят третьей категории (брак), как правило, экономически нецелесообразны, т.к. цыплята плохо растут, характеризуются повышенным отходом и подвержены различным заболеваниям. Следует особо подчеркнуть, что живая масса цыплят в 7-дневном возрасте является важнейшим показателем их качества, определяющим живую массу в период убоя птицы (Топа et al., 2003; https://www.poultryworld.net/Nutrition/Articles/20131/4/The-importance-of-seven-dav-weight-1211707W/). Считается, что 1 дополнительный грамм в 7 дневном возрасте транслируется в 6 г при убое в 37-дневном возрасте. Например, увеличение живой массы в 7 дневном возрасте с 160 до 180 грамм приводило к повышению живой массы при убое на 80-90 грамм (Топа et al., 2003). При этом в наставлениях для выращивания мясных цыплят (Ross и Cobb) определены целевые показатели мясных цыплят в 7-дневном возрасте и высказаны рекомендации о том, что необходимо достигать максимальной живой массы в этом возрасте.
Пример 3. (сравнительные испытания предлагаемого способа и прототипа). Испытания предлагаемого способа и прототипа проводили, выращивая цыплят-бройлеров, отобранных по способу-прототипу и по предлагаемому способу. Для этого были использованы различные выводные партии цыплят в инкубатории и было сформировано две группы суточных цыплят по 200 голов. В первую группу были отобраны цыплята отнесенные к 1 классу по предлагаемому способу, во вторую - цыплята отнесенные к 1 классу по методу прототипа. Цыплята обеих групп были посажены в отдельные секции в птичнике для выращивания и выращивались в соответствии с существующей технологией, соблюдая все основные параметры микроклимата и кормления.
В результате выращивания установлено, что живая масса цыплят отобранных на выращивание (1 категория) по предлагаемому методу превосходила массу цыплят, отобранных по методу прототипа в момент убоя (35 дней), на 116.3 г. Полученные результаты подтвердили повышенную точность определения качества суточного молодняка сельскохозяйственной птицы с использованием предлагаемого способа в сравнении с прототипом. Повышенная живая масса в конце выращивания объясняется тем, что около 10-20% цыплят, которых следовало бы отнести ко 2-й категории, были отнесены к 1-й категории из-за недостаточно точной оценки по способу прототипа.
Пример 4. (Демонстрация возможности дополнительной поддержки цыплят, отнесенных ко второй категории). Испытания предлагаемого способа и прототипа проводили, выращивая цыплят-бройлеров, отобранных по предлагаемому способу и отнесенных к первой и второй категории соответственно. Для этого были использованы различные выводные партии цыплят в инкубатории и было сформировано три группы суточных цыплят по 200 голов. В первую группу были отобраны цыплята отнесенные к 1 классу по предлагаемому способу, во вторую и третью - цыплята отнесенные ко второму классу по методу прототипа. Цыплята всех трех групп были посажены в отдельные секции в птичнике для выращивания и выращивались в соответствии с существующей технологией, соблюдая все основные параметры микроклимата и кормления. При этом цыплятам, третьей группы, отнесенным ко второму классу выпаивали в течение первых 5 дней витаген-регулирующий препарата Меджик Антистресс Микс/PerforMax (Feed-Food. Ltd., Великобритания) из расчета 1 г препарата на 1 литр питьевой воды. Как показали проведенные исследования, в 7-дневном возрасте живая масса цыплят, отобранных для выращивания по предлагаемому методу и отнесенных к первой категории составляла 185.2 г, цыплята второй группы, отнесенные ко второй категории по предлагаемому методу имели живую массу 158.9 г и цыплята третьей группы, отнесенные ко второй категории по предлагаемому методу и получавшие выпойку витаген-регулирующей добавки имели живую массу 172.1 г, соответственно. Таким образом, данные испытания показали, что при посадке на выращивание цыплят, отнесенных ко второй категории по предлагаемому методу, есть возможность существенно улучшить их рост и развитие за счет активации витагенов, ответственных за адаптацию цыплят к стрессам.
Заключение
В примерах 1-4 показана осуществимость способа и его преимущества перед прототипом
Список литературы
Григорьева М.А., Величко О.А., Шабалдин С.В., Фисинин В.И., Сурай П.Ф. (2017). Регуляция активности витагенов как новая антистрессовая стратегия в птицеводстве: обоснование и производственный опыт. Сельскохозяйственная Биология 52,4: 716-730.
ОСТ 10329-2003 «Суточный молодняк кур. Технические условия» Сурай П.Ф., Фисинин В.И., Шацких Е.В., Латыпова Е.Н. (2017). Современные методы борьбы со стрессами в птицеводстве и свиноводстве: концепция витагенов в действии. Сфера. Технологии, корма, ветеринария 5,2: 40-43.
Blount, J.D., Houston, D.С., Surai, P.F., & , A.P. (2004). Egg-laying capacity is limited by carotenoid pigment availability in wild gulls Larus fuscus. Proceedings of the Royal Society of London B: Biological Sciences, 271 (Suppl 3), S79-S81.
Conrad M, Kagan VE, Bayir H, Pagnussat GC, Head B, Traber MG, Stockwell BR. (2018). Regulation of lipid peroxidation and ferroptosis in diverse species. Genes Dev. 32(9-10):602-619.
Gaschler MM, Stockwell BR. (2017). Lipid peroxidation in cell death. Biochem Biophys Res Commun. 482 (3):419-425.
Miller, N.J., Rice-Evans., C, Davies, M.J., Gopinathan, V., & Milner, A. (1993). A novel method for measuring antioxidant capacity and its application to monitoring the antioxidant status in premature neonates. Clinical science, 84 (4), 407-412.
Ohkawa H, Ohishi N, Yagi K. (1979). Assay for lipid peroxides in animal tissues by thiobarbituric acid reaction. Anal Biochem. 95 (2):351-8.
Rice-Evans СA. (2000). easurement of total antioxidant activity as a marker of antioxidant status in vivo: procedures and limitations. Free Radic Res. 2000 Nov; 33 Suppl:S59-66.
Ross 308 Parent Stock Nutrition Specification. 2016
SURAI P.F. (2000) Effect of the selenium and vitamin E content of the maternal diet on the antioxidant system of the yolk and the developing chick. British Poultry Science, 41: 235-243
Surai P.F. (2002). Natural antioxidants in avian nutrition and reproduction. Nottingham University Press, Nottingham, UK
Surai P.F. (2018). Selenium in poultry nutrition and health. Wageningen Academic Publishers, Wageningen, The Netherlands
Surai P.F., Fisinin V.I. (2016). Vitagenes in poultry production. Part 1. Technological and environmental stresses. World's Poultry Science Journal 72: 721-734.
Surai P.F., Fisinin V.I. (2016). Vitagenes in poultry production. Part 2. Nutritional and Internal stresses. World's Poultry Science Journal 72: 761-772.
Surai P.F., Fisinin V.I. (2016). Vitagenes in poultry production. Part 3. Vitagene concept development. World's Poultry Science Journal 72: 793-804.
Surai P.F., Kochish I.I., Fisinin V.I. (2017). Antioxidant systems in poultry biology: Nutritional modulation of vitagenes. European Journal of Poultry Science 81,1612-9199
Surai P.F., Speake B.K., Noble R.C. and Sparks N.H.C. (1999). Tissue-specific antioxidant profiles and susceptibility to lipid peroxidation of the newly hatched chick.. Biology Trace Element Research, 68: 63-78.
Surai P., Noble R., Speake B. (1996). Tissue-specific differences in antioxidant distribution and susceptibility to lipid peroxidation during development of the chick embryo. Biochem. Biochys. Acta, 1304: 1-10.
Топа K, Bamelis F, De Ketelaere B, Bruggeman V, Moraes VM, Buyse J, Onagbesan O, Decuypere E. (2003). Effects of egg storage time on spread of hatch, chick quality, and chick juvenile growth. Poult Sci. 82 (5):736-41.