МУТАНТЫ FAD-2 И ВЫСОКООЛЕИНОВЫЕ РАСТЕНИЯ

1. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок дельта-12-олеатдесатуразу (FAD2), причем указанный белок FAD2 имеет аминокислотную замену в положении 108 относительно белка FAD2 дикого типа.
2. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок FAD2, причем указанный белок FAD2 имеет аминокислотную замену в положении 118 относительно белка FAD2 дикого типа.
3. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок FAD2, причем указанный белок FAD2 имеет аминокислотную замену в положении 108 и в положении 118 относительно белка FAD2 дикого типа.
4. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где указанный белок FAD2 является белком FAD2 Brassica, более конкретно - белком FAD2 Brassica napus.
5. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п.2, где указанный белок FAD2 является белком FAD2 Brassica, более конкретно - белком FAD2 Brassica napus.
6. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п.3, где указанный белок FAD2 является белком FAD2 Brassica, более конкретно - белком FAD2 Brassica napus.
7. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п.1, где указанная аминокислота в положении 108 заменена на аспарагиновую кислоту.
8. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты п.2, где указанная аминокислота в положении 118 заменена на фенилаланин.
9. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п.3, где указанная аминокислота в положении 108 заменена на аспарагиновую кислоту, и указанная аминокислота в положении 118 заменена на фенилаланин.
10. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, включающая нуклеиновую кислоту SEQ ID NO:1, 5, 11 или 12, ее комплементарная форма или РНК-форма.
11. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, включающая нуклеотидную последовательность, имеющую, по крайней мере, 80% идентичности с SEQ ID NO:1 или 11, или с их комплементарной формой или РНК-формой, кодирующая белок FAD2, имеющий аминокислотную замену в положении 108 относительно белка FAD2 дикого типа.
12. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, включающая нуклеотидную последовательность, имеющую, по крайней мере, 80% идентичности с SEQ ID NO:5 или 12, или с их комплементарной формой или РНК-формой, кодирующая белок FAD2, имеющий аминокислотную замену в положении 118 относительно белка FAD2 дикого типа.
13. Фрагмент из, по крайней мере, 10 нуклеотидов выделенной молекулы нуклеиновой кислоты по п.1, причем указанный фрагмент включает мутированный кодон, соответствующий указанной аминокислотной замене в положении 108.
14. Фрагмент из, по крайней мере, 10 нуклеотидов выделенной молекулы нуклеиновой кислоты по п.2, причем указанный фрагмент включает мутированный кодон, соответствующий указанной аминокислотной замене в положении 118.
15. Фрагмент из, по крайней мере, 10 нуклеотидов выделенной молекулы нуклеиновой кислоты по п.3, причем указанный фрагмент включает мутированный кодон, соответствующий указанной аминокислотной замене в положении 108, и мутированный кодон, соответствующий указанной аминокислотной замене в положении 118.
16. Белок FAD2, имеющий аминокислотную замену в положении 108 или положении, соответствующем положению 108, относительно белка FAD2 дикого типа, такого как белок FAD2 дикого типа, представленный аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:4 или 8.
17. Белок FAD2, имеющий аминокислотную замену в положении 118 или положении, соответствующем положению 118, относительно белка FAD2 дикого типа, такого как белок FAD2 дикого типа, представленный аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:4 или 8.
18. Белок FAD2, имеющий аминокислотную замену в положении 108 или положении, соответствующем положению 108, и аминокислотную замену в положении 118 или положении, соответствующем положению 118 относительно белка FAD2 дикого типа, такого как представленный аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:4 или 8.
19. Белок FAD2, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2 или 6.
20. Вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.
21. Вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.2.
22. Вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.3.
23. Вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.7.
24. Вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.8.
25. Вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.9.
26. Клетка-хозяин, включающая вектор по п.20.
27. Клетка-хозяин, включающая вектор по п.21.
28. Клетка-хозяин, включающая вектор по п.22.
29. Растение, стабильно трансформированное вектором по п.20, причем указанное растение для трансформации выбрано из группы, состоящей из подсолнечника, соевых бобов, хлопка, кукурузы и семени рапса.
30. Растение, стабильно трансформированное вектором по п.21, причем указанное растение для трансформации выбрано из группы, состоящей из подсолнечника, соевых бобов, хлопка, кукурузы и семени рапса.
31. Растение, стабильно трансформированное вектором по п.22, причем указанное растение для трансформации выбрано из группы, состоящей из подсолнечника, соевых бобов, хлопка, кукурузы и семени рапса.
32. Растительное масло, полученное из семян растения по п.29, включающее более чем приблизительно 72% олеиновой кислоты по отношению к общему весу жирных кислот, присутствующих в этом масле.
33. Растительное масло, полученное из семян растения по п.30, включающее более чем приблизительно 72% олеиновой кислоты по отношению к общему весу жирных кислот, присутствующих в этом масле.
34. Растительное масло, полученное из семян растения по п.31, включающее более чем приблизительно 72% олеиновой кислоты по отношению к общему весу жирных кислот, присутствующих в этом масле.
35. Растительное масло по п.32, дополнительно включающее менее, чем приблизительно 4% линоленовой кислоты.
36. Растительное масло по п.33, дополнительно включающее менее, чем приблизительно 4% линоленовой кислоты.
37. Растительное масло по п.34, дополнительно включающее менее, чем приблизительно 4% линоленовой кислоты.
38. Способ увеличения содержания олеиновой кислоты в растении, включающий трансформирование растения вектором по п.20.
39. Способ увеличения содержания олеиновой кислоты в растении, включающий трансформирование растения вектором по п.21.
40. Способ увеличения содержания олеиновой кислоты в растении, включающий трансформирование растения вектором по п.22.
41. Способ получения линий высокомасличных растений, включающий:
(a) скрещивание первого растения по п.29 со вторым растением,
(b) получение семян от скрещивания на этапе (a),
(c) выращивание фертильных растений из таких семян,
(d) получение семян потомства от растений этапа (c), и
(e) идентификацию среди потомства тех семян, которые имеют высокое содержание олеиновой кислоты.
42. Способ получения линий высокомасличных растений, включающий:
(a) скрещивание первого растения по п.30 со вторым растением,
(b) получение семян от скрещивания на этапе (a),
(c) выращивание фертильных растений из таких семян,
(d) получение семян потомства от растений этапа (c), и
(e) идентификацию среди потомства тех семян, которые имеют высокое содержание олеиновой кислоты.
43. Способ получения линий высокомасличных растений, включающий:
(a) скрещивание первого растения по п.31 со вторым растением,
(b) получение семян от скрещивания на этапе (a),
(c) выращивание фертильных растений из таких семян,
(d) получение семян потомства от растений этапа (c), и
(e) идентификацию среди потомства тех семян, которые имеют высокое содержание олеиновой кислоты.
44. Способ получения линий высокомасличных растений, включающий:
(a) индукцию мутагенеза в, по крайней мере, некоторых клетках из растения, более конкретно растения Brassica, и предпочтительно растения Brassica napus, которое имеет содержание олеиновой кислоты в клетках менее чем 70%;
(b) регенерацию растений из, по крайней мере, одной из указанных мутагенезированных клеток;
(c) выбор регенерированных растений, которые имеют последовательность нуклеиновой кислоты по п.1 и/или которые экспрессируют белок FAD2 по п.16; и
(d) получение дальнейших поколений растений из указанных регенерированных растений.
45. Способ получения линий высокомасличных растений, включающий:
(a) индукцию мутагенеза в, по крайней мере, некоторых клетках из растения, более конкретно растения Brassica, и предпочтительно растения Brassica napus, которое имеет содержание олеиновой кислоты в клетках менее чем 70%;
(b) регенерацию растений из, по крайней мере, одной из указанных мутагенезированных клеток;
(c) выбор регенерированных растений, которые имеют последовательность нуклеиновой кислоты по п.2 и/или которые экспрессируют белок FAD2 по п.17; и
(d) получение дальнейших поколений растений из указанных регенерированных растений.
46. Способ получения линий высокомасличных растений, включающий:
(a) индукцию мутагенеза в, по крайней мере, некоторых клетках из растения, более конкретно растения Brassica, и предпочтительно растения Brassica napus, которое имеет содержание олеиновой кислоты в клетках менее чем 70%;
(b) регенерацию растений из, по крайней мере, одной из указанных мутагенезированных клеток;
(c) выбор регенерированных растений, которые имеют последовательность нуклеиновой кислоты по п.3 и/или которые экспрессируют белок FAD2 по п.18; и
(d) получение дальнейших поколений растений из указанных регенерированных растений.