АНАЛИЗЫ ДЛЯ СКРИНИНГА АКТИВНОСТИ МОДУЛЯТОРОВ ЧЛЕНОВ СЕМЕЙСТВА (17-БЕТА)ГИДРОКСИСТЕРОИДДЕГИДРОГЕНАЗ (HSD17B)

1. Способ скрининга исследуемого соединения в отношении способности ингибировать белок, являющийся членом семейства (17–бета)гидроксистероиддегидрогеназ (HSD17B), включающий:
+
a) приведение первого белка, являющегося членом семейства HSD17B, в контакт с исследуемым соединением, субстратом белка, являющегося членом семейства HSD17B, НАД, предварительно восстановленной формой люциферина, ферментом, который восстанавливает предварительно восстановленную форму люциферина с образованием люциферина, и люциферазой;
+
b) приведение такого же самого второго белка, являющегося членом семейства HSD17B, в контакт с контролем, субстратом белка, являющегося членом семейства HSD17B, НАД, предварительно восстановленной формой люциферина, ферментом, который восстанавливает предварительно восстановленную форму люциферина с образованием люциферина, и люциферазой;
c) детекцию длины волны излучения люциферина, образуемого с помощью люциферазы в соответствии со стадией a) и в соответствии со стадией b); и
d) идентификацию исследуемого соединения в качестве ингибитора белка, являющегося членом семейства HSD17B, если излучение длины волны люциферина, образуемого в соответствии со стадией a), ниже, чем длины волны люциферина, образуемого в соответствии со стадией b).
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что белок, являющийся членом семейства HSD17B, представляет собой один или несколько из HSD17B1, HSD17B2, HSD17B3, HSD17B4, HSD17B5, HSD17B6, HSD17B7, HSD17B8, HSD17B9, HSD17B10, HSD17B11, HSD17B12, HSD17B13 или HSD17B14.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что белок, являющийся членом семейства HSD17B, представляет собой один или несколько из HSD17B1, HSD17B2, HSD17B4, HSD17B5, HSD17B10, HSD17B11 или HSD17B13.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что белок, являющийся членом семейства HSD17B, представляет собой HSD17B13.
5. Способ по любому из пп. 1–4, отличающийся тем, что субстрат белка, являющегося членом семейства HSD17B, содержит стероидный гормон или его производное.
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что субстрат белка, являющегося членом семейства HSD17B, содержит эстрогеновый гормон.
7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что указанный эстрогеновый гормон содержит эстрадиол (E2).
8. Способ по п. 6, отличающийся тем, что указанный эстрогеновый гормон содержит эстрон (E1).
9. Способ по п. 5, отличающийся тем, что субстрат белка, являющегося членом семейства HSD17B, содержит андрогеновый гормон.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что указанный андрогеновый гормон содержит андростандиол, тестостерон или дигидрокситестостерон (DHT).
11. Способ по п. 5, отличающийся тем, что субстрат белка, являющегося членом семейства HSD17B, содержит производное андрогенового гормона.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что указанное производное андрогенового гормона содержит трилостан.
13. Способ по любому из пп. 1–4, отличающийся тем, что субстрат белка, являющегося членом семейства HSD17B, содержит жирную кислоту.
14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что указанная жирная кислота содержит рицинолевую кислоту.
15. Способ по любому из пп. 1–4, отличающийся тем, что субстрат белка, являющегося членом семейства HSD17B, содержит биоактивный липид.
16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что указанный биоактивный липид содержит эйкозаноид.
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что эйкозаноид содержит лейкотриен.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что указанный лейкотриен содержит лейкотриен В4.
19. Способ по п. 4, отличающийся тем, что первый и второй белок, являющийся членом семейства HSD17B, представляет собой белок HSD17B13, который содержит аминокислотную последовательность, которая на, по меньшей мере, приблизительно 90% идентична SEQ ID NO:1.
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что первый и второй белок HSD17B13 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1.
21. Набор, содержащий:
белок, являющийся членом семейства a (17–бета)гидроксистероиддегидрогеназ (HSD17B), или клетку, экспрессирующую белок, являющийся членом семейства HSD17B;
субстрат белка, являющегося членом семейства HSD17B; и
инструкции для применения белка, являющегося членом семейства HSD17B, и его субстрата в способе скрининга исследуемого соединения в отношении способности ингибировать белок, являющийся членом семейства HSD17B.
+
22. Набор по п. 21, отличающийся тем, что указанный набор дополнительно содержит НАД, предварительно восстановленную форму люциферина, фермент, который восстанавливает предварительно восстановленную форму люциферина с образованием люциферина, и люциферазу.
23. Способ скрининга исследуемого соединения в отношении способности ингибировать белок, являющийся членом семейства (17–бета)гидроксистероиддегидрогеназ (HSD17B), включающий:
a) приведение первой клетки, экспрессирующей белок, являющийся членом семейства HSD17B, в контакт с исследуемым соединением и субстратом белка, являющегося членом семейства HSD17B;
b) приведение второй клетки, экспрессирующей такой же белок, являющийся членом семейства HSD17B, в контакт с контролем и субстратом белка, являющегося членом семейства HSD17B;
c) определение уровня расхода субстрата клеткой в соответствии со стадией a) и в соответствии со стадией b); и
d) идентификацию исследуемого соединения в качестве ингибитора белка, являющегося членом семейства HSD17B, если уровень расхода субстрата в соответствии со стадией a) ниже, чем уровень расхода субстрата, образуемого в соответствии со стадией b).
24. Способ скрининга исследуемого соединения в отношении способности ингибировать белок, являющийся членом семейства (17–бета)гидроксистероиддегидрогеназ (HSD17B), включающий:
a) приведение первой клетки, экспрессирующей белок, являющийся членом семейства HSD17B, в контакт с исследуемым соединением и субстратом белка, являющегося членом семейства HSD17B;
b) приведение второй клетки, экспрессирующей такой же белок, являющийся членом семейства HSD17B, в контакт с контролем и субстратом белка, являющегося членом семейства HSD17B;
c) определение уровня продукта субстрата, образуемого клеткой в соответствии со стадией a) и в соответствии со стадией b); и
d) идентификацию исследуемого соединения в качестве ингибитора белка, являющегося членом семейства HSD17B, если уровень продукта субстрата, образуемого в соответствии со стадией a), ниже, чем уровень продукта субстрата, образуемого в соответствии со стадией b).
25. Комплекс, содержащий белок, являющийся членом семейства HSD17B, и субстрат белка, являющегося членом семейства HSD17B.
26. Комплекс по п. 25, присутствующий в композиции, содержащей носитель.
27. Композиция, содержащая белок, являющийся членом семейства HSD17B, субстрат белка, являющегося членом семейства HSD17B, и носитель.