Способ дифференциальной диагностики жировой болезни печени алкогольного и неалкогольного генеза
METHOD FOR DIFFERENTIAL DIAGNOSIS OF FATTY LIVER DISEASE OF ALCOHOLIC AND NON-ALCOHOLIC GENESIS

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в медицине, а именно: гепатологии и гастроэнтерологии в качестве способа дифференциальной диагностики жировой болезни печени алкогольного и неалкогольного генеза.
Важным критерием, позволяющим отличить неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП) от алкогольной жировой болезни печени (АЖБП), служит употребление пациентами алкоголя в гепатотоксичных дозах. У большинства больных НАЖБП ассоциирована с метаболическим синдромом (МС) [5]. В патогенезе алкогольной (АЖБП) и неалкогольной (НАЖБП) жировой болезни печени, возникшей на фоне метаболического синдрома, наблюдается совпадение большей части метаболических путей, что создает сложности в диагностике [4, 6]. Кроме того отмечаются изменения эластичности, вязкоупругих характеристик (ВУХ) эритроцитов, способности их к деформации [1, 2].
Предшествующий уровень техники. При диагностике жировой болезни широко используют ряд методов это:
- биопсия печени;
- ультразвуковое исследование;
- лабораторные показатели эритроцитов;
- биохимические тесты.
Биопсия печени, будучи «золотым стандартом» для определения степени фиброза и цирроза, оказывается малоприемлемой для дифференциальной диагностики жировой болезни печени вследствие целого ряда недостатков, главные из которых: инвазивность, ошибки биоптата, влияние «человеческого фактора» (различная интерпретация результатов одного образца биопсии), зависимость результата от качества биоптата, а также ошибка, заложенная в самой процедуре биопсии (фрагментарность вследствие различной степени изменений в различных участках ткани печени). Рекомендовать биопсию для уточнения или постановки окончательного диагноза зачастую невозможно из-за сложности выполнения процедуры, необходимости госпитализации, высокого риска осложнений, а также высокой стоимости самой процедуры. Кроме того, морфологическая картина при алкогольном и неалкогольном жировом поражении печени бывает сходной, тельца Мэллори, считавшиеся ранее специфичными для алкогольного гепатита, обнаруживают и при неалкогольном стеатогепатите. В связи с инвазивностью, большой погрешностью гистологического исследования, связанной с «ошибками попадания» иглы при пункционной биопсии печени, различием в интерпретации результатов, для ранней диагностики патологических процессов в настоящее время уделяют большее внимание более точным и достоверным методам диагностики [3, 4].
Ультразвуковое исследование (УЗИ) печени помимо размеров, структуры, характера паренхимы, с применением специальной аппаратуры позволяет определить степень жировой инфильтрации и фиброза. Однако УЗИ не позволяет дифференцировать алкогольную и неалкогольную жировую болезнь печени. Кроме того, интерпретация данных УЗИ на практике вызывает сложности из-за получения трудновоспроизводимых данных с большими различиями в интерпретации. Метод ультразвуковой эластометрии с помощью аппарата FibroScan позволяет также оценить Controlled Attenuation Parameter (CAP™) - контролируемый параметр затухания, который используется для неинвазивной оценки и количественного определения стеатоза. САР™ является величиной затухания ультразвука, которая соответствует уменьшению амплитуды ультразвуковых волн при их распространении через ткань печени. Использование данного параметра расширяет спектр неинвазивных методов обследования и последующего наблюдения за пациентами с заболеваниями печени, однако дискриминировать алкогольное и неалкогольное поражение печени не позволяет.
Лабораторными показателями эритроцитов в диагностике хронического потребления алкоголя являются: увеличение среднего корпускулярного объема, повышенный уровень триангулоцитов, появление в мембранах клеток красной крови аномального фосфолипида - фосфатидилэтанола, однако изменение этих параметров не является специфичным для жировой болезни печени алкогольного генеза. [7-9].
Биохимические тесты для диагностики алкогольного и неалкогольного поражение печени основаны на методах, которые отличаются между собой в зависимости от этиологии процесса:
- метод диагностики, основанный на наличии сопутствующих биохимических нарушений, в частности, липидного, углеводного обмена. К ним относятся FibroTest, FibroMaxTest, Fibrometer. Так, в составе ФиброМакс имеется ряд неинвазивных тестов, позволяющих выявить наличие стеатоге-патита (СтеатоТест), неалкогольную (НешТест) и алкогольную (АшТест) форму стеатогепатита [10];
- метод СтеатоСкрин, позволяющий подтвердить или опровергнуть стеатоз печени, установленный по результатам УЗИ, а также выявить признаки стеатоза печени у лиц группы высокого риска. Для данного метода исследована корреляция с гистологическими признаками стеатоза печени, что позволяет использовать его с высокой степенью достоверности и неинвазивно определять наличие стеатоза печени у пациентов. [11, 12].
Недостатками всех выше указанных методов являются высокая трудоемкость и стоимость, малая доступность оборудования, необходимость специального обучения персонала, осуществляющего способы, и необходимость применения широкой номенклатуры различных реагентов. Эти факторы определяют невозможность применения данных методов для массовой диагностики, в целях скрининга. Диагностическая точность заболевания зачастую зависит от выраженности синдромов гемолиза, цитолиза, холестаза, наличия у пациента сопутствующей инфекции, что может сказаться на уровне исследуемых биохимических показателей и затруднить интерпретацию результата, тем более, в свете дифференциальной диагностики жировой болезни печени алкогольного и неалкогольного генеза. Приведенные методы не предусматривают измерение амплитуды деформации эритроцитов, их вязкоупругих характеристик, после внесения алкоголя в клеточную суспензию и экспозиции в ней клеток до проведения измерений.
Наиболее близкими аналогами (прототипом) является способ определения и исследования способности эритроцитов к деформации. Измерения осуществляется с помощью цитодифрактометров, реоскопов, эктацитометра [13-17]. Принцип их измерения состоит в помещение эритроцитов в суспензии между двумя прозрачными поверхностями и создание встречного сдвигового течения в сечении потока, имитирующее условия в кровеносных сосудах. Течение формируется путем вращения поверхностей во встречном направлении. Деформация эритроцитов измеряется оптическими средствами, например, с помощью фоточувствительной матрицы.
Следующий способ определения ВУХ клетки основан на использовании атомно-силовой микроскопии. Он проводится путем давления зонда микроскопа (кантиливира) на мембрану [18].
Вышеперечисленные способы имеют общее и существенное ограничение, которое сдерживает их применение в широкой практической медицине: низкую точность и высокую трудоемкость.
w
0
мин
мax
j
мин
cp
мax
j
i,j
i
i
j,i
4
6
Наиболее близким аналогом (прототипом) является способ дифференциальной диагностики заболеваний печени (патент РФ №2296327, МПК G01N 27/00, опубл. 27.03.2007 г.), включающий отбор проб эритроцитов, разведение их изотоническим раствором, поддерживающим жизнедеятельность клеток эритроцитов, с заданным коэффициентом k, определение динамической вязкости η суспензии эритроцитов в указанном изотоническом растворе и перенос смеси исследуемых эритроцитов с заданной концентрацией клеток в измерительную кювету, отличающийся тем, что в кювете формируют неоднородное переменное электрическое поле с частотой f от 10 кГц до 5 МГц и средней напряженностью Е электрического поля в зазоре между электродами в пределах от 10 до 10В/м, измеряют средние скорости  движения каждой клетки в суспензии и их минимальный радиус R, средний радиус R и максимальный радиус R через определенные интервалы времени в период воздействия электрического поля и после его отключения по истечении времени t путем видеозаписи изображения движения клеток и изменения их размера, полученные данные в цифровом виде вводят и обрабатывают в компьютере, имеющем вычислительную программу накопления и обработки данных, в результате чего определяют средние значения характеристик x эритроцитов для данного образца (где j - порядковый номер характеристики от 1 до 8). Причем вышеописанный процесс измерения средних скоростей  движения каждой клетки в суспензии, их минимальный R, средний R, максимальный R радиусы и определения характеристик x эритроцитов проводят многократно для проб эритроцитов здоровых пациентов (в норме) и пациентов с различными видами патологий, диагноз (состояние здоровья) которых определен заранее другими методами, например иммуноферментным методом, с определением характеристик эритроцитов  (где i - порядковый номер диагноза от 1 до 7, в том числе норма и различные виды патологий: i=1 - норма, i=2 вирусный гепатит, i=3 - алкогольный гепатит, i=4 - смешанный гепатит, i=5 - вирусный цирроз, i=6 - алкогольный цирроз, i=7 - смешанный цирроз) и формируют из характеристик клеток  статистически достоверный массив данных для последующего использования его в дифференциальной диагностике заболеваний печени, а затем проводят аналогичные измерения образцов проб эритроцитов пациентов с различными видами патологий с определением лением характеристик эритроцитов x в реальном масштабе времени с последующим сравнением этих характеристик с соответствующими значениями  находящимися в базе данных компьютера, и определением показателя Δ близости измеряемых характеристик эритроцитов к каждому из представленных семи видов диагноза. Минимальное значение Δизмеряемых параметров эритроцитов человека x соответствует i-му диагнозу, который и принимают как окончательно поставленный диагноз.
Однако способ-прототип является сложным и трудоемким в воспроизведении, требует наличия базы данных характеристик эритроцитов здоровых и больных пациентов для сравнительного анализа, а также высокую квалификацию специалистов, проводящих анализ.
Техническим результатом заявляемого изобретения является создание более простого и менее трудоемкого способа дифференциальной диагностики жировой болезни печени алкогольного и неалкогольного генеза, а также увеличение объективности оценки показателей исследования вне зависимости от квалификации и опыта специалиста, производящего исследования.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе дифференциальной диагностики жировой болезни печени алкогольного и неалкогольного генеза, включающем отбор проб эритроцитов, разведение их раствором, поддерживающим жизнедеятельность клеток эритроцитов, перенос суспензии исследуемых эритроцитов в измерительную кювету, в которой формируют под действием переменного напряжения в зазоре между двумя электродами неоднородное переменное электрическое поле с частотой около 1 МГц, измеряют параметры каждой клетки в суспензии в период воздействия на эритроциты электрического поля и после его отключения по истечении времени путем видеозаписи изображения движения клеток и изменения их размера, полученные данные в цифровом виде вводят и обрабатывают в компьютере, имеющем вычислительную программу накопления и обработки данных, в результате чего определяют средние значения изменения размеров эритроцитов для данного образца, согласно изобретения, видеорегистрацию изменения размера каждого эритроцита при его перемещении от одного электрода к другому в период воздействия электрического поля и после его отключения проводят с получением нескольких кадров видеоизображения; на основе компьютерного анализа полученных видеокадров производят программное вычисление:
i
1,2
- радиусов (d) для каждого в отдельности наблюдаемого эритроцита и находят его среднее арифметическое значение (D) до и после выключения электрического поля, среднее арифметическое значение n измерений радиуса каждого эритроцита до выключения электрического поля из уравнения (1):
где:  - сумма результатов измерений радиусов
i - (от 1 до n) номер эритроцита в выборке, среднее арифметическое значение n измерений для радиусов каждого эритроцита после выключения электрического поля (2):
где:  сумма результатов измерений радиусов
для j-го эритроцита.
- средний радиус (An) амплитуды деформации для каждого наблюдаемого эритроцита (3):
где:  - средний радиус эритроцита под действием поля [м];
- средний радиус эритроцита после выключения поля [м].
- среднюю амплитуду деформации (М), среднеквадратическое отклонение (δ) и среднюю ошибку амплитуды деформации (m) эритроцитов находятся, согласно известных уравнений для нормального распределения (4):
полученное значение средней амплитуды деформации (М) в выборке эритроцитов является начальным - M1; затем в эту же измерительную камеру со взвесью эритроцитов вносят от 9,95 до 10,05 мкл 0,0195-0,0205% раствора этанола и осуществляют экспозицию смеси в течение около 300 сек, а затем проводят видеорегистрацию изменения размера каждого обработанного этанолом эритроцита при его перемещении от одного электрода к другому в период воздействия электрического поля и после его отключения с получением нескольких кадров видеоизображения; на основе анализа полученных видеокадров производят программное вычисление:
i
1,2
- радиусов (d) для каждого в отдельности наблюдаемого эритроцита и находят его среднее арифметическое значение (D) до и после выключения электрического поля, среднее арифметическое значение n измерений радиуса каждого эритроцита до выключения электрического поля из уравнения (1);
- среднее арифметическое значение n измерений для радиусов каждого эритроцита после выключения электрического поля (2);
- средний радиус (An) амплитуды деформации для каждого наблюдаемого эритроцита (3);
- среднюю амплитуду деформации (М), среднеквадратическое отклонение (δ) и среднюю ошибку амплитуды деформации (m) эритроцитов находятся, согласно известных уравнений для нормального распределения (4); причем, средняя амплитуда деформации (М) в выборке эритроцитов после экспозиции в растворе этанола является (М2), далее определяют разность М1 - М2 и если эта разность статистически значима [20] и положительная, то средние М1 и М2 относятся к разным генеральным совокупностям, и делается вывод о наличии - неалкогольной жировой болезни печени, а если эта разность значима и отрицательная, то средние М1 и М2 относятся к разным генеральным совокупностям, и делается вывод о наличии - алкогольной жировой болезни печени.
Способ иллюстрируется следующими графическими материалами. На фиг. 1 представлена схема измерительного вычислительного комплекса (ИВК). На фиг. 2 изображена схема измерительной ячейки.
Описание устройства для измерения амплитуды деформации эритроцитов.
Измерение амплитуды деформации эритроцитов осуществляют с помощью измерительного вычислительного комплекса (ИВК). ИВК включает следующие приборы и устройства (фиг. 1):
- компьютер (1) для регистрации потока видеоизображения и обработки потока информации от видеокамеры, расчета характеристик электрического поля в измерительной камере, расчета параметров клетки, хранения видеофайлов и результатов расчета параметров клетки, управления работой (включение/выключение) видеозаписи по заданной программе;
- осциллограф (2) Актаком ADS2111MV для регистрации переменного напряжения на электродах измерительной ячейки;
- ртутный термометр (3) 0-50°С для измерения температуры клеточной суспензии;
- генератор (4) переменного напряжения Г3-112/1;
- микроскоп (5) Микмед-6 для наблюдения за клеткой и ее реакцией в измерительной камере в ответ на действие НПЭП;
- объект микрометры (6) ОМ-О, ОМ-П для калибровки ИВК и измерения линейных размеров клетки, расстояния между электродами измерительной камеры;
- усилитель (7) переменного напряжения Г3 112/1;
- измерительную ячейку (8);
- комплекс визуализации (9) МС-14 для трансляции потока видеоизображения клетки через микроскоп в компьютер о динамике ее движения в измерительной камере;
Измерительная ячейка (8) содержит (фиг. 2) : основание, выполненное в виде стеклянной пластины (10), на которой имеются металлические электроды (11) с зазором относительно друг друга для образования измерительной камеры (12). Электроды (11) с измерительной камерой (12) накрыты покровным стеклом (13).
Описание способа дифференциальной диагностики жировой
болезни печени алкогольного и неалкогольного генеза Для разработки метода дифференциальной диагностики жировой болезни печени алкогольного и неалкогольного генеза использовалась кровь волонтеров с одобрения Этического Комитета Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательского института терапии и профилактической медицины» (протокол заседания №122 от 29.11.2016). Все волонтеры дали информированное согласие на участие в работе в соответствии с Хельсинской декларацией Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. №266.
Для проведения измерений у обследуемого натощак кровь объемом от 1,95 до 2,05 мл забирают вакутейнерами в 3,65-3,85% цитратный буфер в соотношении 9:1, и через от 5 до 20 минут пробу объемом от 9 до 11 мкл вносят в 0,3 М раствор сахарозы с объемом от 285 до 295 мкл и перемешивают.
f
6
Полученную клеточную суспензию объемом от 5 до 10 мкл вносят в измерительную камеру 12, образованную двумя металлическими электродами 11, накрывают покровным стеклом размером 18*18 мм и помещают в измерительную ячейку 8. Расстояние между электродами 100-150 мкм. На электроды 11 подают переменное напряжение амплитудой U=10 В и частотой  10 Гц и проводят регистрацию поведения эритроцитов в электрическом поле в автоматическом режиме с использованием ИВК. Под действием поля эритроциты оседают на грани электродов 11 и вытягиваются вдоль силовых линий поля (от электрода к электроду). На четвертой секунде после включения электрического поля производят видеорегистрацию эритроцитов, осевших на гранях электродов, в количестве от 1 до 30 видеокадров с использованием комплекса (9) визуализации. Затем, сразу после выключения, осуществляют повторную видеорегистрацию эритроцитов на гранях электродов, также в количестве от 1 до 30 видеокадров. За это время эритроциты возвращаются в исходное состояние и не меняют координат своего местоположения в измерительной камере. На основе анализа полученных, например, 60 видеокадров производят измерение радиусов (di) для каждого в отдельности наблюдаемого эритроцита и находят его среднее арифметическое значение (D1,2) до и после выключения электрического поля. Среднее арифметическое значение n измерений радиуса каждого эритроцита до выключения электрического поля находится из уравнения (1):
где:  - сумма результатов измерений радиусов
i - (от 1 до n) номер эритроцита в выборке. Аналогично находится среднее арифметическое значение n измерений для радиусов каждого эритроцита после выключения электрического поля (2):
где:  сумма результатов измерений радиусов
для j-го эритроцита.
Такой подход позволяет на основании представительной выборки (n=30) определить средний радиус амплитуды деформации для каждого наблюдаемого эритроцита (3):
где:  - средний радиус эритроцита под действием поля [м];
- средний радиус эритроцита после выключения поля [м].
Средняя амплитуда деформации (М), среднеквадратическое отклонение (δ) и средняя ошибка амплитуды деформации (т) эритроцитов находятся, согласно известных уравнений для нормального распределения (4):
Полученное значение средней амплитуды деформации (М) в выборке эритроцитов соответствует начальным - M1.
Затем в эту же кювету со взвесью эритроцитов вносили от 9,95 до 10,05 мкл 0,0195-0,0205% р-ра этанола и осуществляли ее экспозицию в течение от 295 до 305 сек. По окончания времени экспозиции осуществляют включение электрического поля, видеорегистрацию эритроцитов, осевших на гранях электродов, в количестве от 1 до 30 видеокадров. Затем, сразу после выключения, осуществляют повторную видеорегистрацию эритроцитов на гранях электродов, также в количестве от 1 до 30 кадров. За это время эритроциты возвращаются в исходное состояние и не меняют координат своего местоположения в измерительной камере. На основе анализа полученных, например, 60 видеокадров производят измерение программными средствами радиусов (di) для каждого в отдельности наблюдаемого эритроцита и находят его среднее арифметическое значение (D1,2) до и после выключения электрического поля. Среднее арифметическое значение n измерений радиуса каждого эритроцита до выключения электрического поля находится из уравнения (1). Аналогично находится среднее арифметическое значение n измерений для радиусов каждого эритроцита после выключения электрического поля по формуле (2). Далее на основании представительной выборки (n=30) определяют средний радиус амплитуды деформации для каждого наблюдаемого эритроцита по формуле (3). Средняя амплитуда деформации (М), сред-неквадратическое отклонение (δ) и средняя ошибка амплитуды деформации (m) эритроцитов находятся, согласно известных уравнений для нормального распределения по формулам (4).
Средняя амплитуда деформации (М) в выборке эритроцитов после экспозиции в растворе этанола соответствует (М2). В процессе проведения диагностики сравнивают результаты средней амплитуды деформации выборок1 с тем, чтобы оценить достоверность разности M1 - М2.
Если эта разность статистически значима [20] и положительная, то средние М1 и М2 относятся к разным генеральным совокупностям, и делается вывод о наличии - неалкогольной жировой болезни печени.
Если эта разность статистически значима [20] и отрицательная, то средние М1 и М2 относятся к разным генеральным совокупностям, и делается вывод о наличии - алкогольной жировой болезни печени.
Достоверность разности средних М1 - М2 и постановка диагноза печени принимается, согласно выражению (5) и статистическим показателям параметров эритроцитов, см. таблицу:
У пациента с жировой алкогольной болезнью печени происходит увеличение амплитуды деформации клеток. У пациента с неалкогольной жировой болезни печени - снижение амплитуды деформации.
Клинические примеры использования данного способа дифференциальной диагностики этиологии жировой болезни печени, демонстрирующие возможность эффективного применения амплитуды деформации эритроцитов в клинической практике для определения алкогольного или неалкогольного генеза жировой болезни печени у пациентов с неясной этиологией заболевания.
Ниже приведены конкретные примеры способа диагностики.
Пример 1. У больного А., 52 лет, обратившегося в поликлинику в связи обследованием по поводу приема на работу, обнаружены гепатомегалия, единичные сосудистые звездочки, наличие избыточной массы тела (ИМТ 26,5 кг/м). При осмотре печень увеличена, выступает на 1,5-2 см из-под реберной дуги, мягкоэластической консистенции, безболезненная при пальпации, селезенка не пальпируется. Со слов больного, употребляет алкоголь редко (не более 1-2 раз в месяц, преимущественно некрепкие алкогольные напитки).
12
9
9
Состав крови больного на момент обращения (количество эритроцитов - 4,5⋅10/л, содержание гемоглобина - 147 г/л, цветовой показатель - 0,96, количество лейкоцитов - 6,2⋅10/л, формула не изменена, количество тромбоцитов - 241⋅10/л, СОЭ - 8 мм/ч., гликемия натощак - 5,9 ммоль/л, общий билирубин - 15,2 мкмоль/л, связанный (прямой) - 4,2 мкмоль/л, свободный (непрямой) - 11,0 мкмоль/л, щелочная фосфатаза (ЩФ) - 210 U/1 (норма до 290 U/1), гамма-глутамилтранспептидаза (ГГТП) - 41,7 U/1 (норма до 49 U/1), АЛТ - 31 U/1 (норма до 40 U/1), ACT - 36 U/1 (норма до 37 U/1), тимоловая проба - 2,4 ед., общий холестерин - 211 мг/дл, триглицериды - 220 мг/дл, холестерин ЛПВП - 43 мг/дл, общий белок - 72,0 г/л, мочевина - 5,7 мг/дл, фибриноген - 2,8 г/л, СРБ +, протромбиновый индекс - 81,7%). Исследование методами иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразноцепной реакции (ПЦР) позволило исключить вирусную этиологию процесса. По данным УЗИ выявлены: умеренная гепатоспленомегалия, диффузные изменения в паренхиме печени по типу стеатоза, косвенные признаки хронического панкреатита.
-6
-6
Пациенту проведено исследование электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов - определена амплитуда деформации эритроцитов начально и через 5 мин экспозиции с раствором этанола. Результаты исследований показали, что изначально амплитуда деформации эритроцитов была снижена, при частоте ƒ равной 1 МГц и напряжении U=10 В, она составляла 6,3⋅10 м. Через 5 мин экспозиции с раствором этанола амплитуда деформации эритроцитов была измерена повторно и составила 8,8⋅10м, показав прирост в динамике ~на 30%, что позволяет сделать вывод об алкогольном генезе жировой болезни печени у пациента. В данном случае сложности в диагностике определялись, с одной стороны, нежеланием пациента сообщить истинную информацию о стиле потребления алкоголя в связи с опасениями, связанными с передачей сведений на место будущего трудоустройства. С другой стороны, данные общеклинических исследований не позволяли сделать вывод о систематическом приеме алкоголя (все показатели находились в пределах референтных значений или были несколько выше, что неудивительно при наличии алкогольной болезни печени на стадии жирового гепатоза). Использование предложенного способа дифференциальной диагностики позволило установить истинный генез жировой болезни печени.
2
Пример 2. Обследуемый К., 60 лет обратился к эндокринологу в связи с наличием абдоминально-висцерального ожирения (ИМТ 32 кг/м). При обследовании были выявлены проявления метаболического синдрома: артериальная гипертензия 2 ст., инсулинорезистентность, атерогенная гиперлипидемия 2 Б типа, гиперурикемия. При УЗИ исследовании органов брюшной полости описана «большая белая печень». Данные исследования биохимии не выявили изменения уровня трансаминаз, ГГПТ, уровня билирубина, установлены изменения липидного профиля (общий холестерин - 228 мг/дл, триглицериды - 330 мг/дл, холестерин ЛПВП - 37 мг/дл), повышение уровня мочевой кислоты - 0,41 ммоль/л (N до 0,35 ммоль/л), глюкозы крови - 6,4 ммоль/л (N до 5,9 ммоль/л). При опросе пациент сообщил, что употребляет алкоголь, но не часто, затрудняясь детализовать дозы и частоту.
-6
-6
Пациенту проведено исследование электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов. Исследование показало, что начальные значения амплитуды деформации эритроцитов составляли 7,9⋅10 м. После экспозиции с раствором этанола в течение 5 мин амплитуда деформации клеток снизилась на 46%, составив 5,4⋅10 м. Наблюдаемая динамика позволила сделать вывод о наличии у пациента неалкогольной жировой болезни печени. Эпизодическое употребление алкоголя в нетоксических дозах не имело значимого влияния на развитие жировой болезни печени, которую следует считать проявлением метаболического синдрома. Таким образом, выше приведенный пример осуществления заявляемого метода подтверждает достижение заявляемого технического результата, а именно: диагностики жировой болезни печени.
Источники научно-технической и патентной информации
1. Kuntz Е., Kuntz H.-D. Hepatology. Principles and practice. - Springer-Verlag Berlin, Heidelberg. - 2002. - P. 56-59;
2. Кручинина M.B., Генералов B.M., Курилович C.A., Громов А.А. Ди-электрофорез эритроцитов в диагностике диффузных заболеваний печени различной этиологии // Архив внутренней медицины. - 2011. - №.2. - с. 58-63.)
3. Гастроэнтерология. Национальное руководство // Под ред Ивашкина В.Т., Лапиной Т.Л. М: изд. группа «ГЭОТАР-Медиа». 2008. 700 с.
4. Ивашкин Н.Т. Болезни печени и желчевыводящих путей. Руководство для врачей. / Н.Т. Ивашкин, М: Вести, 2002. - 451 с. Подымова С.Д. Болезни печени. // М.: Медицина. 1993. 544 с.
5. Бельков В. В. Неинвазивные биомаркеры фиброза. До свиданья, биопсия? // Клинико-лабораторный консилиум. 2009; 30: 34-44;
6. Ahn J.M., Paik Y.-H., Kim S. H., Lee J. H., Cho J. Y., Sohn W., Gwak G.-Y., Choi M. S., Lee J. H., Koh К. C, Paik S. W., Yoo В. C. Relationship of Liver Stiffness and Controlled Attenuation Parameter Measured by Transient Elastogra-phy with Diabetes Mellitus in Patients with Chronic Liver Disease // Korean Med Sci. 2014; 29: 1113-111
7. Тарасова О.И., Мазурчик H.B., Огурцов П.П. Современные лабораторные маркеры употребления алкоголя. // Клиническая фармакология и терапия. 2007. №1 С. 1-5;
8. Буеверов А.О., Маевская М.В., Ивашкин В.Т. Алкогольная болезнь печени // Бол. орг.пищевар. - 2001. - №. - С. 16-25;
9. Хомерики С.Г., Хомерики Н.М. Алкогольная болезнь печени: механизмы развития, морфологические проявления, дифференциальная диагностика и патогенетические подходы к терапии // Consilium medicum. Гастроэнтерология. 2012, 1, с. 27-34.
10. Ивашкин В.Т. Фиброз печени /В.Т. Ивашкин, Ч.С. Павлов. М.: ГЭОТАР-Медиа. 2011.- 168 с.
11. Ивашкин В.Т., Шульпекова Ю.О. Неалкогольный стеатогепатит // Бол. орг. пищевар. -2000. - №2 - С. 41-46.;
12. Шерлок Ш., Дули Дж. Заболевания печени и желчных путей: практическое рук. Пер. с англ. под ред. З.Т. Апросиной, Н.А. Мухина. М.: Гэотар-Мед. 2002. 859 с.
13. Васин Б.Л., Долгинов Я.Ш., Еремеев Б.В., Захаров С.Д., Симанов В.А., Косырев А.Б. Устройство для определения деформируемости эритроцитов (лазерный цитодифрактометр) АС №1697304, БИ №45 (1991).
14. Захаров Станислав Дмитриевич (RU) Устройство для определения деформируемости эритроцитов крови Патент РФ 2301617:Дата 20.03.20063.
15. Bessis М., Mohandas N., Feo С.Automated ektacytometry: a new method of measuring red cell deformability and red cell indices. In: Automation in hematology, what to measure and why? Ed. D.W.Ross, G.Brecher, M.Bessis. New York, 1981, p. 153-165.
16. Fisher T.M., Stohr-Liesen M., Schmid-Schonbein H. The red cell as a fluid droplet. Tank-tread-like motion of the human erythrocyte membrane in shear flow. Science, V. 202, 894-896 (1978).
17. Захаров Станислав Дмитриевич (RU) Устройство для определения деформируемости эритроцитов крови Патент РФ 2301617 : Дата 20.03.2006.
18. Дрозд Е.С., Чижик С.А., Константинова Е.Э. // Атомно-силовая микроскопия структурно-механических свойств мембран эритроцитов/ Российский журнал биомеханики том 13, N4 (46). С 22-30.
19. Патент РФ №2296327, МПК G01N 27/00, опубл. 27.03.2007 г. (прототип).
20. Закс. Л. Статистическое оценивание. Пер. с нем. В.Н. Варигина. Под ред. Ю.П. Адлера, В.Г. Горского. М.: Статистика. 1976. стр. 72.