Антиоксидантное действие гуминовых веществ при микотоксикозе у свиней

Заключение. Результаты проведенных исследований показывают, что разработанная композиция на основе калия персульфата и органических кислот (янтарная и лимонная кислота) обладает выраженным бактерицидным действием в виде 5-10%-ных растворов, не оказывает негативного влияния на организм животных и вполне может быть использована для дезинфекции воздуха и поверхностей животноводческих помещений в присутствии животных.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бессарабов, Б.Ф. Аэрозольная обработка - надежная защита птицы от болезней / Б.Ф. Бессарабов // Птицеводство. 2006. № 3. С. 34-36.

2. Методические указания по применению аэрозолей в промышленном птицеводстве / Б.Я. Бирман [и др.]; РУП «БелНИИЭВ им. С.Н. Вышелесского». Минск, 2002. 51 с.

3. Богуш, А.А. Бактерицидные и коррозионные свойства дезинфицирующего средства пермокс / А.А. Богуш [и др.] // Эпизоотология, иммунобиология, фармакология и санитария. 2007. №3. С.61-65.

4. Боченин, Ю.И. Аэрозоли в профилактике инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных / Ю.И. Боченин [и др.] // Ветеринарный консультант. 2004. №23-24. С.10-18.

5. Высоцкий, А.Э. Методы испытания противомикробной активности дезинфицирующих препаратов в ветеринарии / А.Э. Высоцкий, С.А. Иванов // Ветеринарная медицина Беларуси. 2005. № 1. С. 46-48.

6. Высоцкий, А.Э. Строительные конструкции животноводческих помещений -резервуары эндопатогенных бактерий / А.Э. Высоцкий, С.А. Иванов // Ученые записки: сб. науч. тр. / ВГАВМ. Витебск, 2005. Т. 41. Ч.1. С.18-19.

7. Готовский, Д.Г. Влияние микробного стресса на некоторые гематологические, биохимические и иммунологические показатели цыплят / Д.Г. Готовский, М.В. Базылев // Ученые записки: сб. науч. тр. / ВГАВМ. Витебск, 2002. Т.38.Ч.2. С.32-33.

8. Готовский, Д.Г. Влияние микробной обсемененности воздуха на сохранность и продуктивность цыплят-бройлеров / Д.Г. Готовский // Исследования молодых ученых в решении проблем животноводства: сб. науч. тр. / ВГАВМ. Витебск, 2002. С. 69-70.

9. Композиция для дезинфекции воздуха животноводческих помещений: пат. 10591 Респ. Беларусь, МПК (2006) А 61 Ь9/14 / В.А. Медведский, Д.Г. Готовский, В.Н. Алеш-кевич, В.В. Петров; заявитель и патентообладатель Учреждение образования «Витебская ордена "Знак Почета" государственная академия ветеринарной медицины». № а 20060203; заявл. 03.09.06.

10. Черник, М.И. Экологические чистые дезинфектанты и их применение в птицеводстве: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.06 / М.И. Черник. Минск, 2008. 17 с.

УДК 636.4:612.015.3

АНТИОКСИДАНТНОЕ ДЕЙСТВИЕ ГУМИНОВЬ|Х

веществ при микОтоксикозе у СВИНЕЙ

А.Н. МАЛЬЦЕВ, А.А. ГРЕКОВА, И.К. ДРЕМЗА, УО «Гродненский государственный аграрный университет» г. Гродно, Республика Беларусь, 230008

а.н. бОродинсКии, о.в. кОноваленко

Ставропольский государственный медуниверситет ГУ «Институт фармакологии и биохимии» НАН Беларуси г. Гродно, Республика Беларусь, 230008

Введение. В условиях продолжительного окислительного стресса, вызванного патологическими факторами, среди которых важное место занимают токсические вещества, собственные защитные силы зачастую не справляются с обезвреживанием генерируемых свободных ра-

дикалов, что приводит к повреждению клеточных структур и в первую очередь мембран. В таких случаях стратегия фармакологического вмешательства предусматривает оптимизацию антирадикальных мероприятий не только за счет упомянутых выше собственных систем антирадикальной защиты, но и путем введения экзогенных соединений, обладающих антиоксидантными свойствами. При этом предпочтение отдается естественным метаболитам и препаратам, приготовленным на основе природных компонентов, которые обладают антиок-сидантными, мембранстабилизирующими, метаболическими свойствами и содержат в своем составе коферменты антиоксидантных ферментов. В связи с этим мы изучили антитоксические и прежде всего антиоксидантные свойства приготовленных на основе торфа гумино-вых веществ при «окислительном» стрессе, вызванном воздействием микотоксинов.

Цель работы - изучить антиоксидантные свойства гуминовых веществ при микотоксикозе у свиней.

Материал и методика исследований. Работа проводилась на сельскохозяйственных животных - свиньях крупной белой породы в возрасте 7-9 месяцев, средний вес которых составлял (65±2,5) кг. В группе экспериментальных кормов, приготовленых из зерновых в лаборатории кафедры, ветеринарной лабораторией обнаружилось значительное количество микотоксинов. В частности, на момент исследования в кормах для свиней были обнаружены следующие микотоксины: зеараленон и Т-2 токсин в концентрациях, превышающих уровень ПДК. Перед началом и концом эксперимента свиньи прошли ветеринарный осмотр, результаты которого показали наличие симптомов хронического микотоксикоза у экспериментальной группы животных.

Для профилактики и лечения микотоксикоза нами использовались гуминовые вещества, предварительно приготовленные в виде суспензии торфа из расчета 200 г сухого торфа на 1 л воды. Животным экспериментальных групп гуминовые вещества вводились вместе с кормом 1 раз в день в течение 30 дней. Контаминированный микотоксинами сухой корм (зерносмесь) смешивался с суспензией торфа из расчета 50 мл последней на 1 кг корма. Корм задавался согласно нормам кормления.

Мы исследовали показатели, характеризующие прооксидантно-антиоксидантное состояние крови и ее микроэлементный состав. Содержание конечного продукта окислительной деградации липидов -малонового диальдегида (МДА) определяли спектрофотометрически по содержанию соединений, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой [1], каталазную активность плазмы крови определяли спектрофо-тометрическим методом в реакции Н2Ог с молибдатом аммония [2], содержание а-токоферола и ретинола исследовали методом жидкостной хроматографии на приборе «Милихром 4», активность ферментов клеточного повреждения - АсАТ и АлАТ и содержание общего холестерина в сыворотке крови определяли с помощью наборов фирмы «Ьа-сЬета» (Чехия), кислотную резистентность эритроцитов измеряли в буферной среде спектрофотометрически (/,=730 нм, рН=4) и выражали

в процентах негемолизированных эритроцитов относительно их общего количества. Содержание микроэлементов измеряли методом атом-но-адсорбционной спектрофотометрии на аппарате АА8 типа Ш.

Результаты исследований и их обсуждение. Исследование показателей прооксидантно-антиоксидантного баланса в организме свиней с признаками микотоксикоза показало активацию процесса перекисно-го окисления липидов (ПОЛ), о чем свидетельствовало увеличение скорости образования в крови больных животных альдегидных продуктов пероксидации липидов и снижение уровня антиоксидантной защиты.

Применение гуминовых веществ сопровождалось повышением ан-тиоксидантной активности крови при снижении скорости пероксида-ции липидов. Наблюдалось уменьшение содержания малонового ди-альдегида (МДА), повышение каталазной активности и увеличение содержания антиоксидантных витаминов Е и А в плазме крови у животных с микотоксикозом.

Антиоксидантные эффекты добавляемых в корм животных гумино-вых веществ, предположительно, могут быть связаны с входящими в их состав микроэлементами (табл. 1).

Таблица 1. Влияние гуминовых веществ на содержание в плазме крови свиней антиоксидантных витаминов при микотоксикозе

Условия Витамин Е

До лечения 1,62 ±0,21 0,24 ± 0,07

После лечения 5,43 ±0,55* 0,27 ± 0,02

*Р<0,05 по сравнению с исходными данными.

Так, концентрация меди не изменялась, а цинка и марганца в крови животных с микотоксикозом в нашем эксперименте существенно повышалась. Известно, что медь, цинк и марганец являются кофакторами большой группы ферментов, участвующих в регуляции белкового и других видов обмена. Они также являются кофакторами антиокси-дантного фермента - супероксиддисмутазы (табл. 3).

Таблица 3. Микроэлементный состав сыворотки крови у свиней при микотоксикозе

Условия Медь

До лечения 0,24±0,05 0,84±0,24 21,3+7,1

После лечения 0,22±0,02 1,54±0,26* 84,0±10,6*

*Р<0,05 по сравнению с исходными данными.

Интенсификация свободнорадикальных процессов при микотокси-козах может приводить к нарушению микро- и макрореологических свойств крови. Ранее было показано, что активация в эритроцитах сво-боднорадикальных процессов уменьшает текучесть и деформируемость эритроцитарных мембран и нарушает морфологию клеток, тем

самым изменяя их агрегационные и деформационные свойства [3]. В нашем эксперименте активация процесса ПОЛ у больных животных приводила к повышению резистентности эритроцитов к окислительному стрессу, что проявлялось в повышении их устойчивости к кислотному гемолизу.

Повышение резистентности эритроцитов к кислотному гемолизу при микотоксикозе может быть связано со структурными изменениями в мембранах клеток. Так, снижение активности процессов ПОЛ при поступлении в организм животных гуминовых веществ, приводящее к нормализации кислотной резистентности эритроцитов, на наш взгляд, обусловлено уменьшением содержания холестерина в эритроцитарных мембранах и соответственно нормализацией жирнокислотного состава фосфолипидов клеточных мембран. Литературные источники свидетельствуют о повышении устойчивости клеточных мембран к ПОЛ вследствие изменения их фосфолипидного состава, соотношения фос-фолипиды - холестерин в сторону повышения содержания в них холестерина (табл. 4) [4,5].

Таблица 4. Влияние гуминовых веществ на кислотную резистентность

Условия Холестерин

До лечения 1,55±0,35 85,5 ±4,4

После лечения 0,74+0,04* 98,2 + 0,5*

*Р<0,05 по сравнению с исходными данными.

Также это может быть обусловлено изменением жирнокислотнго состава липидов и фосфолипидов мембран за счет снижения в них полиненасыщенных и увеличения насыщенных жирных кислот [6]. Полученные результаты позволяют полагать, что ответная реакция эритроцитов на изменение интенсивности ПОЛ в организме характеризует важную роль этих клеток не только в гемореологии и транспорте кислорода, но и в системе антиоксидантной защиты. По-видимому, клетки крови одними из первых реагируют на изменение активности сво-боднорадикального окисления, отражая на системном уровне состояние прооксидантно-антиоксидантного баланса и представляя собой своеобразный буфер, защищающий клетки тканей от окислительного воздействия всасывающихся в желудочно-кишечном тракте микоток-синов.

Результаты проведенных исследований, полученные на свиньях, потребляющих корм с высоким содержанием микотоксинов, показали увеличение сывороточной активности «маркерных» ферментов повреждения плазматических мембран клеток - АсАТ и АлАТ и коэффициента де Риттиса, что свидетельствовало о явлениях тканевого цитолиза (табл. 5).

Таблица 5. Влияние гуминовых веществ на сывороточную активность «маркерных» ферментов клеточного повреждения

у свиней при микотоксикозе

Условия АсАТ (мкат/л) АлАТ (мкат/л) АсАТ/АлАТ

До лечения 0,96+0,08 0,57+0,06 1,68+0,16

После лечения 0,27±0,08* 0,34±0,07 0,80±0,05*

Норма 0,62 0,42 1,33

*Р<0,05 по сравнению с исходными данными.

Как свидетельствуют данные, представленные в табл. 5, применение гуминовых веществ снижало уровни сывороточной активности «маркерных» ферментов АлАТ и АсАТ (табл. 5), что свидетельствовало о мембранстабилизирующем действии гуминовых веществ у свиней с микотоксикозом.

Заключение. Добавление в корм свиней при мокотоксикозе гуминовых веществ приводит к уменьшению в плазме крови содержания малонового диальдегида, активности маркерных ферментов (АсАТ, АлАТ), к повышению каталазной активности, увеличению содержания антиоксидантных витаминов Е и А, к повышению кислотной резистентности эритроцитов и нормализации микроэлементного состава плазмы крови, что в целом может быть обусловлено антиоксидантным действием гуминовых веществ.

Антиоксидантные свойства гуминовых веществ, с одной стороны, могут быть связаны с их высокой адсорбирующей способностью в желудочно-кишечном тракте и соответственно со снижением поступления микотоксинов в кровь, с другой стороны, микроэлементы, входящие в состав гуминовых веществ, способствуют нормализации синтеза и поддержания активности антиоксидантных ферментов, в частности, супероксиддисмутазы. Кроме того, содержащиеся в торфе гу-миновые и фульвокислоты, аминокислоты и моносахариды нормализуют микрофлору кишечника, угнетающий эффект на которую оказывают микотоксины, и являются необходимыми компонентами питательных веществ организма.

ЛИТЕРАТУРА

1. Rice-Evans, C.A. Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology / C.A. Rice-Evans, A.T. Diplock, M.C.R. Symons. Amsterdam-London-New York, 1991. 297 p.

2. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк [и др.] // Лаб. дело. 1988. № 1. C.16-19.

3. Oxygen-related processes in red blood cells exposed to tert-butyl hydroperoxide / I.K. Dremza, E.A. Lapshina, J. Kujawa, I.B. Zavodnik // Redox Report. 2006. Vol. 11. N.4. P.185-192.

4. Бурлакова, Е.Б. Перекисное окисление липидов мембран и природные анти-оксиданты / Е.Б. Бурлакова, Н.Г Храпова // Успехи биол. химии. 1985. Т. 54. Вып. 9. С. 1540-1558.

5. Спектр фосфолипидов в органах мишенях при хроническом стрессе / М.А. Атад-жанов [и др.] // Патол. физиология и эксп. терапия. 1995. N° 3. С.46-48.

6. Буко, В.У. Влияние эссенциальных фосфолипидов на структурные и метаболические изменения в печени крыс при экспериментальном алкогольном поражении / В.У. Буко [и др.] // Патол. физиология и эксп. терапия. 1994. № 4. С.50-53.

7. Березов, Т.Т. Биологическая химия /Т.Т.Березов, Б.Ф.Коровкини. М.: Медицина, 1983. 513 с.

8. Горовая, А.И. Гуминовые вещества / А.И. Горовая, Д.С. Орлов, О.В. Щербен-ко. Киев: Наук. думка, 1995. 304 с.

УДК 636:611:619:815.636.2

МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОРГАНОВ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ МОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА, ВЫРАЩЕННОГО НА ЗАГРЯЗНЕННОЙ РАДИОНУКЛИДАМИ ТЕРРИТОРИИ

Н.И. ЖИЛА

Государственный научно-исследовательский контрольный институт ветеринарных препаратов и кормовых добавок г. Львов, Украина, 79019 Ю.С. СТРОНСКИЙ, М.И. ШКИЛЬ Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологии им. С.З. Гжицкого, г. Львов, Украина, 79010

Введение. Одной из наиболее техногенных катастроф в истории человечества является авария на Чернобыльской АЭС 1986 года. Тогда в атмосферу было выброшено около 450 типов разных радионуклидов. Произошло радиационное загрязнение огромных территорий Украины, Белоруссии, России, локальное - многих других европейских государств. В большей части это сельскохозяйственная почва. Безусловно, что животные, которые рождаются и выращиваются на загрязненных радионуклидами территориях, поддаются постоянному внешнему и внутреннему облучению. В связи с этим важной проблемой ветеринарной медицины является изучение длительного влияния ионизирующего излучения на организм животных в естественных условиях.

Иммунная система, как известно, одна из первых, реагирует на ионизирующее облучение. Красный костный мозг и тимус отличаются высокой чувствительностью к воздействиям радионуклидов, вследствие чего образуются нарушения иммунной реактивности организма на действие различных антигенов.

Цель работы - выяснить морфофункциональное состояния центральных и периферических органов иммунной системы молодняка крупного рогатого скота, который родился и содержался в условиях повышенного радиационного фона.

Материал и методика исследований. Для изучения проведены радиологическое, гематологическое, гистологическое, гистохимическое, цитологическое и морфометрическое исследования красного костного мозга, тимуса, селезенки, лимфатических узлов, а также крови трех возрастных групп (21-30-суточных; 6-7- и 18-24-месячных) клинически здоровых животных (п=35), которые выращивались в хозяйст-