СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНАЛОГОВ МЕТИОНИНА
METHOD OF PRODUCING METHIONINE ANALOGUES

Настоящее изобретение относится к способу получения аналогов метионина, а также селеновых производных аналогов метионина, из имеющихся в избытке и доступных соединений, полученных из биомассы.
Метионин и его аналоги, такие как 2-гидрокси-4-метилтиобутановая кислота (НМТВА) и 2-оксо-4-метилтиобутановая кислота (КМВ), а также соли, хелаты, в частности хелаты металлов (Zn, Ca, Mn, Mg, Cu, Na …) и сложные эфиры этих кислот, такие как изопропиловый и трет-бутиловый эфиры НМТВА, широко используются в кормлении животных. Селеновые производные метионина и его гидрокси-аналогов также составляют основной интерес в кормлении животных.
Учитывая постоянно растущие объемы потребления этих ингредиентов во всем мире, необходимо разработать способы изготовления из возобновляемых, энергосберегающих и незагрязняющих источников.
Таким образом, авторы разработали способ получения этих соединений из органических кислот, их солей или производных, которые могут быть получены из биомассы, в частности путем биологических превращений, таких как ферментативные способы.
Согласно изобретению этот способ позволяет получить соединение или его соль, где указанное соединение имеет формулу (I)
где X выбран из О; N-R', где R' представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу; и N-OR'', где R'' представляет собой Н, С1-С6 алкильную группу или алкиларильную группу;
1
R представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу;
2
R представляет собой Н, С1-С6 алкильную группу или алкиларильную группу; и
3
4
4
4
2
2
R представляет собой CHSR или CHSeR, где R представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу,
из соединения формулы (II) или его соли
1
2
где R, R и X определены выше; и
5
6
6
R представляет собой Н или COOR, где R представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу.
4
Этот способ позволяет изготавливать аналоги метионина, такие как КМВ, из кислот, таких как щавелевоуксусная кислота и пировиноградная кислота, с интересующими выходами для промышленного использования без высвобождения субпродуктов в избыточных количествах, и включая умеренные реакционные условия и доступные реагенты. Кроме того, эти соединения представляют собой чрезвычайно интересные предшественники метионина в его разных активных формах D, L; D и L, и НМТВА в ее разных энантиомерных формах D, L; D и L. В действительности они могут быть превращены в указанный метионин или указанную НМТВА в ходе простого восстановления, например с гидридами типа NaBH или в ходе каталитического или биокаталитического гидрирования или в ходе рацемического или энантиоселективного биохимического превращения, или любым другим способом, известным квалифицированным специалистам в данной области техники.
А именно, способ по изобретению осуществляют в присутствии соединения формулы (III)
где Y представляет собой Н;
7
7
4
4
4
4
4
8
9
OR, где R представляет собой Н, С1-С6 алкильную группу или ацильную группу формулы CO-R, где R соответствует предыдущему определению; SR или SeR, где R соответствует предыдущему определению; или NRR,
8
9
где R и R одинаковые или разные, каждый в отдельности или вместе представляют собой С1-С6 алкильную группу или алкиларильную группу;
10
10
4
4
4
4
4
11
12
11
12
Z, одинаковый с или отличный от Y, представляет собой OR, где R представляет собой Н, С1-С6 алкильную группу или CO-R, где R соответствуют предыдущему определению; циклическую или ациклическую группу N(COR)(COR), где Rсоответствует предыдущему определению; или группу NRR, где R и R одинаковые или разные, каждый в отдельности или вместе представляют собой С1-С6 алкильную группу или алкиларильную группу;
или Y и Z вместе представляют собой =O;
и указанный способ включает следующие стадии, согласно которым:
соединение (II) подвергают взаимодействию с соединением (III), что приводит к получению соединения, имеющему структуру (IV)
1
2
где R, R, X и Z определены выше,
4
4
4
таким образом полученное соединение (IV) подвергают взаимодействию с RSH или его солью, или RSeH или его солью, где R соответствует предыдущему определению, уже находящимся в реакционной среде или добавленным в ходе способа, затем, по завершении реакции, выделяют соединение (I) или его соль.
4
4
4
Как описано далее в данном документе, согласно варианту способа в ходе реакции соединения (IV) с RSH или его солью, или RSeH или его солью, где R соответствует предыдущему определению, уже находящимся в реакционной среде или добавленным в ходе способа, получают соединение, имеющее структуру (V)
1
2
где R, R и Z определены выше,
А представляет собой ОН; HN-R', где R' представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу; или HN-OR'', где R'' представляет собой Н, С1-С6 алкильную группу или алкиларильную группу; и
4
4
4
В представляет собой SR или SeR, где R соответствует предыдущему определению.
Перед раскрытием изобретения более подробно некоторые термины, используемые в тексте, определены ниже.
В формулах, определяющих соединения и реагенты, полученные или включенные, термин "алкил" обозначает линейный или разветвленный одновалентный углеводородный радикал, имеющий 1-20 атомов углерода, преимущественно 1-6 атомов углерода, такой как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, неопентил, н-гексил, или циклический одновалентный углеводородный радикал, имеющий 3-20 атомов углерода, преимущественно 3-6 атомов углерода, такой как циклопропил, циклогексил.
Алкиларильная группа означает арильную группу, включающую 6-20 атомов углерода, указанная арильная группа замещена по меньшей мере одной алкильной группой, соответствующей вышеприведенному определению.
Изобретение подробно описано далее в данном документе, и представлены его преимущественные варианты.
Раскрытый выше способ можно выполнять в соответствии с несколькими подходами.
Согласно первому подходу предпочтительно подвергают взаимодействию соединение (II) с формальдегидом или параформальдегидом, в гидратированной или негидратированной форме, в основной среде и в присутствии MeSH или его соли, такой как соли натрия, калия или кальция метилмеркаптана.
Согласно второму подходу подвергают взаимодействию соединение (II) с соединением (III), указанное соединение (III) выбрано из 1-[(метилсульфанил)метил]-пиперидина, 1-[(метилсульфанил)метил]-пирролидина и 1-[(метилсульфанил)метил]-диэтиламина. Этот второй подход приводит к промежуточному соединению, которое может быть выделено или не выделено, которое является предметом настоящего изобретения. Это соединение имеет формулу (V):
1
где R представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу;
2
R представляет собой Н, С1-С6 алкильную группу или алкиларильную группу;
А представляет собой ОН, HN-R', где R' представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу, или HN-OR'', где R'' представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу, или алкиларильную группу;
4
4
4
В представляет собой SR или SeR, где R представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу;
10
10
4
4
4
4
4
11
12
11
12
Z представляет собой OR, где R представляет собой Н; С1-С6 алкильную группу; группу CO-R, где R представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу, циклическую или ациклическую группу N(COR)(COR), где R соответствует предыдущему определению; или NRR, где R и R, одинаковые или разные, каждый в отдельности или вместе представляют собой С1-С6 алкильную группу или алкиларильную группу.
2
5
6
6
11
12
11
12
2
2
2
3
3
Согласно второму подходу преимущественно приводят в контакт щавелевоуксусную кислоту или ее сложный эфир, то есть соединение формулы (II), в которой X представляет собой О, R представляет собой Н, и R представляет собой COR, где R представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу, с соединением формулы (III) типа CH(Y)(Z), в котором Y и Z соответственно представляют собой группу SCH и группу NRR, как определено ранее; предпочтительно группа NRRпредставляет собой группу пиперидинила. Следовательно, изобретение также относится к соединению формулы (V), в которой А представляет собой ОН, В представляет собой SCH, R представляет собой Н, и Z представляет собой группу пиперидинила.
Согласно третьему подходу возможно подвергнуть взаимодействию соединение (II) с соединением (III), выбранным из метилендипиперидина, метилендипирролидина и метиленди(диэтиламин). Промежуточное соединение этого третьего подхода, которое может быть выделено или не выделено, также является предметом изобретения. Оно имеет формулу (IV):
где X выбран из О; N-R', где R' представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу; и N-OR'', где R'' представляет собой Н, С1-С6 алкильную группу или арильную группу;
1
R представляет собой Н или С1-С6 алкильную группу;
2
R представляет собой Н, С1-С6 алкильную группу или алкиларильную группу; и
8
9
8
9
Z представляет собой NRR, где R и R, одинаковые или разные, каждый в отдельности или вместе представляют собой С1-С6 алкильную группу или алкиларильную группу.
2
5
6
6
8
9
11
12
8
9
11
12
2
1
2
Как будет проиллюстрировано в примерах, согласно третьему подходу преимущественно приводят в контакт щавелевоуксусную кислоту или ее сложный эфир, то есть соединение формулы (II), в которой X представляет собой О, R представляет собой Н, и R представляет собой COR с R=H, с соединением формулы (III), в которой Y и Z соответственно представляют собой группу NRR и группу NRR, как определено ранее. Предпочтительно, по меньшей мере один из NRR и NRR, а еще лучше оба, представляют собой одну и ту же группу пиперидинила. Таким образом, изобретение относится к промежуточному соединению формулы (IV), в которой X представляет собой О, R представляет собой Н, и Z представляет собой группу пиперидинила, R является таким, как определено ранее, а именно Н, когда соединение (II) представляет собой щавелевоуксусную кислоту, или С1-С6 алкильной группо й, когда соединение (II) представляет собой соответствующий сложный эфир щавелевоуксусной кислоты.
Независимо от фиксированного подхода соединение (II) преимущественно выбрано из щавелевоуксусной кислоты и пировиноградной кислоты.
Как указано ранее, способ по изобретению позволяет получить разные аналоги метионина. В особенности 2-оксо-4-метилтиобутановая кислота (КМВ) или ее соль, такая как соли кальция, магния, марганца, меди, цинка, натрия или аммония, и ее селеновый аналог или его соль являются продуктами способа по изобретению при экономически привлекательных условиях и выходах.
Другим предметом изобретения является способ получения D,L-метионина, D- или L-метионина, D,L-2-гидрокси-4-метилтиобутановой кислоты (НМТВА) или D- или L-ГМТБК из 2-оксо-4-метилтиобутановой кислоты (КМВ), согласно которому получают КМВ согласно способу по изобретению, как определено выше, затем превращают таким образом полученную КМВ в метионин или НМТВА, химически или биологически, методиками, известными квалифицированным специалистам в данной области техники.
Настоящее изобретение описано более подробно с помощью следующих примеров, иллюстрирующих синтез КМВ из щавелевоуксусной кислоты и пировиноградной кислоты согласно разным синтетическим подходам, все их которых находятся в объеме изобретения.
Пример 1: Получение КМВ в ходе первого подхода в присутствии NaOH, НСНО и MeSNa
Общая схема синтеза является следующей:
В реактор помещают 100 мг щавелевоуксусной кислоты и добавляют 1 М раствор NaOH (2 экв.). Температуру реактора устанавливают на 30°С и растворение щавелевоуксусной кислоты происходит немедленно. Через 2 минуты добавляют 37% в весовом отношении раствор формальдегида (1 экв). Продолжают перемешивать в течение 2 минут при 30°С, затем добавляют MeSNa (2 экв., 108 мг) за один раз, и реакционную среду перемешивают при 30°С.
Наблюдение за реакцией с помощью ВЭЖХ-УФ (высокоэффективная жидкостная хроматография с ультрафиолетовым излучением) (колонка С18 Hydro-RP) осуществляют после 10 минут контакта, затем каждые 20 минут.Лучшие характеристики были измерены после 30 минут контакта при 30°С со следующими результатами:
щавелевоуксусная кислота
Превращение  равно 100%,
Порция выработки КМВ равна 75%,
Селективность КМВ равна 75%. Пример 2: Получение КМВ в ходе второго подхода при использовании активированного тиометильного производного и щавелевоуксусной кислоты
Общая схема синтеза является следующей:
1-ая стадия: Синтез активированного тиометильного производного [соединения (III)]
В 1 л реактор в атмосфере аргона вводят последовательно при перемешивании при 20°С:
- 90,0 г пиперидина,
-180 мл ТГФ (тетрагидрофуран),
- 34,4 г параформальдегида.
порция
Реакционную среду охлаждают до 10°С, затем добавляют MeSH, барботируя реакционную среду, при 10°С до необходимого количества (1 экв.). Добавление завершают через 4 часа, затем заданную температуру увеличивают до 20°С. Реакционную среду перемешивают в течение 3 часов при этой температуре. Контроль с помощью ГХ-ПИД (газовая хроматография с пламенно-ионизационным детектором) (колонка Equity-1) указывает на то, что превращение пиперидина завершено и RR в частицах "активированного тиометила" составляет 97%.
2
4
Добавляют 180 мл метил-трет-бутилового эфира (МТВЕ), затем 180 мл насыщенного водного раствора NaCl к реакционной среде, две фазы перемешивают в течение 5 минут и затем разделяют. Органическую фазу дважды промывают 180 мл насыщенного водного раствора NaCl, затем сушат над NaSO и концентрируют при пониженном давлении (10 мбар, 30°С). Производное "активированного тиометила" получают в форме бесцветной жидкости без дополнительной очистки (150,4 г). Были получены следующие характеристики:
Полное превращение пиперидина,
Выработка выделенного активированного тиометильного производного равна 95%,
1
Титр равен 94% (дозировано в ходе Н ЯМР (ядерный магнитный резонанс) в сравнении с 3,5-диметиланизолом).
2- ая стадия: Синтез КМВ пиперидиния
В 100 мл реактор в атмосфере аргона, снабженный ванной с термостатическим регулированием, вводят 3 г (1 экв.) щавелевоуксусной кислоты и 30 мл этанола. После растворения при 20°С (около 1 минуты) добавляют производное активированного тиометила (1 экв.), затем среду нагревают до 60°С за 30 минут, затем температуру поддерживают в течение 1 часа.
Наблюдение за реакцией с помощью ВЭЖХ-УФ (колонка С18 Hydro-RP) осуществляют после 10 минут контакта, затем каждые 20 минут. Лучшие характеристики были измерены после 1 часа контакта при 60°С:
Полное превращение щавелевоуксусной кислоты,
Порция выработки КМВ равна 78%,
Селективность КМВ равна 78%.
Реакционную среду извлекают, затем концентрируют при пониженном давлении (10 мбар, 20°С, 6 ч). КМВ пиперидиний получают в форме желтого масла без дополнительной очистки.
Выработка выделенного КМВ пиперидиния равна 60%.
Титр равен 60% (дозировано с помощью ВЭЖХ в сравнении со стандартом).
Пример 3: Получение КМВ в ходе второго подхода при использовании производного активированного тиометила и пировиноградной кислоты
Общая схема синтеза является следующей:
1-ая стадия: Синтез производного активированного тиометила
Описан на первой стадии примера 2.
2-ая стадия: Конденсация с пировиноградной кислотой
В колбу вводят 300 мг (1 экв.) пировиноградной кислоты и 3 мл этанола. После растворения при 20°С добавляют производное активированного тиометила (ТМА) (1 экв.), затем колбу помещают на плиту, предварительно нагретую до 60°С. Реакционную среду перемешивают при этой температуре в течение 1 часа.
Наблюдение за реакцией с помощью ВЭЖХ-УФ (колонка С18 Hydro-RP) осуществляют после 15 минут контакта, затем каждые 15 минут. Лучшие характеристики были измерены после 15 минут контакта при 60°С:
Превращение пировиноградной кислоты равно 57%,
Порция выработки КМВ равна 42%,
Селективность КМВ равна 74%.
Пример 4: Получение КМВ в ходе третьего подхода последовательным образом посредством частиц метилендипиперидина
Общая схема синтеза является следующей:
1-ая стадия: Синтез промежуточного соединения (IV)
В 10 мл реактор в атмосфере аргона, снабженный температурным датчиком, последовательно вводят при 0°С:
- 500 мг щавелевоуксусной кислоты,
- 5 мл ЕtOН,
- 209 мг уксусной кислоты.
+
После растворения кислоты (приблизительно после 5 минут перемешивания) добавляют дипиперидинометан (0,95 экв.) за 50 минут посредством шприцевого насоса. После добавления среду нагревают до 60°С за 1 час, затем перемешивают при этой температуре в течение 10 минут. Контроль с помощью ВЭЖХ-МС (масс-спектрометрия) (ЭСИ (электрораспыление положительно заряженных ионов)) подтверждает образование промежуточного соединения IV.
Реакционную среду охлаждают до 20°С, затем растворитель выпаривают при пониженном давлении (10 мбар, 20°С, 1 час), что дает (IV) в форме бледно-желтого масла (1,2 г).
щавелевоуксусная кислота
Полное ТТ.
выделенный
RR производного активированного тиометила равен 60%.
1
Титр равен 35% (дозировано в ходе Н ЯМР в сравнении с 3,5-диметиланизолом).
2-ая стадия: синтез КМВ пиперидиния
В 10 мл реактор в атмосфере аргона, снабженный температурным датчиком, последовательно вводят при перемешивании при 0°С:
- 300 мг промежуточного соединения (IV),
- 5 мл ЕtOН.
После того, как температура реакционной среды становится ниже 5°С, вводят газ MeSH за 1 час (посредством шприцевого насоса). Затем реакционную среду нагревают до 60°С за 1 час, затем эту температуру поддерживают в течение 30 минут.
ВЭЖХ контроль показывает полное превращение промежуточного соединения и образование большей части КМВ пиперидиния.
Реакционную среду извлекают, затем концентрируют при пониженном давлении (10 мбар, 20°С, 1 час). КМВ пиперидиний получают в форме желтого масла без дополнительной очистки (260 мг).
промежуточное соединение IV
Полное ТТ.
выделенный
RR КМВ пиперидиния равен 90%.
Титр равен 45% (дозировано с помощью ВЭЖХ в сравнении со стандартом).