СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ОСТЕОМИЕЛИТА У ЖИВОТНЫХ
METHOD OF TREATING CHRONIC OSTEOMYELITIS IN ANIMALS

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам иммунотерапии заболеваний, протекающих со снижением иммунного статуса, конкретно к способам лечения больных хроническим остеомиелитом животных.
Известен способ лечения больных хроническим остеомиелитом (патент №2073514), включающий введение антибактериальных и десенсибилизирующих средств, витаминов, анаболов с дополнительным введением до и после операции ксимедона по 0,5 г 4 раза в день в течение 20 суток и последующим повторением курсов лечения через 6 месяцев на протяжении 1,5 лет.
Недостатками данного способа являются длительный курс лечения (до 20 суток) и необходимость проведения повторных курсов лечения данным препаратом через 6 месяцев на протяжении 1,5 лет.
Известен способ лечения остеомиелита (прототип - патент РФ на изобретение №2152214), включающий иммуностимулирующие препараты, согласно которому корригируют интерфероновый статус введением индукторов интерферона класса неовир, циклоферон в дозе 500-1600 мг на курс лечения. Данные стимуляторы интерферонообразования вводят с момента поступления больного внутримышечно через день курсом 5-7 инъекций в дозе 4-6 мг/кг, в итоге курс лечения по длительности составляет 14 суток.
Недостатками данного способа являются длительный курс лечения (до 14 суток) и необходимость проведения повторного курса лечения при существенном снижении интерферонового статуса.
Технической задачей является сокращение сроков лечения, устранение необходимости в проведении повторных курсов терапии.
Техническая задача достигается способом лечения хронического остеомиелита у животных путем осуществления традиционной комплексной терапии, включающей иммуностимулирующий препарат-корректор интерферонового статуса, отличающийся тем, что дополнительно индуцируют рост, деление и активность Т- и В-лимфоцитов иммунной системы введением ронколейкина на 1, 2, 3 и 6 сутки терапии в нормативной дозе 20 тыс.МЕ/кг живого веса.
Отличие предлагаемого изобретения от прототипа состоит в том, что дополнительно индуцируют рост, деление и активность Т- и В-лимфоцитов иммунной системы введением ронколейкина на 1, 2, 3 и 6 сутки терапии в нормативной дозе 20 тыс.МЕ/кг живого веса.
Способ осуществляют следующим образом.
Проводят традиционную комплексную терапию, включающую санацию гнойного очага, его дренирование, антибактериальную, дезинтоксикационную, десенсибилизирующую и антиоксидантную терапию, одновременно проводят стимуляцию иммунитета: коррекцию интерферонового статуса, дополнительное индуцирование роста, деления и активности Т- и В-лимфоцитов путем введения ронколейкина в дозе 80 тыс.МЕ/кг живого веса на курс лечения. При этом вводят с момента поступления больного животного внутримышечно или подкожно на 1, 2, 3 и 6 сутки по 20 тыс.ME на 1 кг живого веса.
Препарат обладает иммунокоррегирующими свойствами, направленными на осуществление противобактериального иммунитета, процессов восстановления поврежденных тканей, а при стойком иммунодефиците действует как иммунореабилитатор. Ронколейкин как стимулятор интерферонообразования, фактор роста, деления и активности Т-, В-лимфоцитов, использован в комплексном лечении 10 экспериментально больных кроликов с хроническим остеомиелитом. Проведен сравнительный анализ эффективности лечения с 10 экспериментально больными хроническим остеомиелитом кроликами, вкомплексном лечении которых применялся циклоферон по методу прототипа. Остеомиелит моделировали по методике Кошкина В.И., Нагибина В.И. (1970 г.) на 3-4-месячных кроликах породы «Нидерландская красная», массой 3,5-4,0 кг, подобранных по принципу аналогов. Модель основана на факторе длительного раздражения костного мозга и микробной флоры, которая бы длительное время находилась в месте введения и не могла бы быстро распространяться по кровяному руслу. В качестве инфекционного агента использовали однодневную культуру золотистого стафилококка. Кролика фиксировали к столу в положении лежа на спине. После удаления шерсти область нижней трети диафиза большеберцовой кости обрабатывали 10% раствором настойки йода. Под общей и местной анестезией на внешней поверхности нижней трети диафиза голени производили продольный разрез кожи длиной 2 см. Мышцы тупо раздвигали по ходу волокон до кости, надкостницу продольно рассекали и сдвигали в сторону. В отличие от вышеуказанной модели в освобожденной костной площадке проводили перфорацию кости не перфоратором, а спицей Киршнера, проходя первый кортикал до костномозгового канала. Также сочли излишним использование капроновой губки в качестве депонирующего элемента для бактериального агента. Микробную взвесь вводили непосредственно в костный канал шприцем. Отверстие в кости не пломбировали. Модель развивалась в течение 1-1,5 месяца. Все животные хорошо переносили моделирование, оставались подвижными. При наружном осмотре животные щадили пораженную конечность. Пальпаторное обследование обнаруживало плотный инфильтрат.К 30-45 суткам после заражения рентгенологически отмечали появление периостальных наслоений, очагов просветления в месте введения патогенного агента, в метафизе большеберцовой кости деструктивную полость с нечеткими контурами, имеющую округлую форму и окруженную склерозированной костной тканью, ослабление четкости рисунка кости, экзастозы. При иммунологическом исследовании у больных остеомиелитом животных выявлены глубокие нарушения в иммунной системе (таблица №1).
Таблица №1
Иммунологические показатели в процессе моделирования хронического остеомиелита у кроликов
Срок моделирования
Показатели
Содержание γ-ИНФ, (пг/мл)
Содержание Т-лимфоцитов, (%)
Содержание В-лимфоцитов, (%)
До начала моделирования
М-19,14
М-37,3
М-13,1
m-1,32
m-1,20
m-1,12
К концу моделирования (к 45 суткам)
М-8,94
М-23,4
М-9,2
m-1,03
m-0,23
m-0,13
Как видно из таблицы 1, количество Т-лимфоцитов в периферической крови экспериментальных животных к 45 суткам достоверно ниже (23,4%), чем до экспериментального моделирования (37,3%). В процессе экспериментального моделирования наблюдалась тенденция к стойкому снижению В-лимфоцитов. Так, до заражения их процент в среднем составлял 13,1, а уже к 45-м суткам болезни - 9,2. Уровень γ-ИНФ (γ-интерферон) перед экспериментальным моделированием составлял 19,14 пг/мл, а к 45-м суткам после операции резко снизился до 8,94 пг/мл. По данным иммунологических показателей, все кролики нуждались в иммунной реабилитации.
После окончания курса лечения экспериментально больных животных хроническим остеомиелитом кроликов по предлагаемому способу и по способу прототипа у кроликов, которым вводился ронколейкин, наблюдалось более благоприятное течение процесса по сравнению с группой, которой вводили циклоферон. Оно выражалось в ранней нормализации температуры, исчезновении рентгенологических признаков воспаления, развитии грануляционной ткани. Клиническое улучшение подтверждается данными лабораторных исследований, приведенных в таблице №2.
Таблица №2
Иммунологические показатели у кроликов в процессе их лечения по предлагаемому способу и по способу прототипа
Срок лечения
Показатели
Содержание γ-ИНФ, (пг/мл)
Содержание Т-лимфоцитов, (%)
Содержание В-лимфоцитов, (%)
по предлагаемому способу
по прототипу
no предлагаемому способу
по прототипу
no предлагаемому способу
по прототипу
До начала лечения
М-8,94
M-8,94
М-23,4
M-23,4
М-9,2
М-9,2
m-1,03
m-1,03
m-0,23
m-0,23
m-0,13
m-0,13
На 1 сутки лечения
М-8,95
M-8,93
М-23,5
M-23,4
М-9,3
М-9,2
m-1,11
m-0,12
m-0,27
m-0,42
m-0,03
m-0,15
На 2 сутки лечения
М-16,93
М-10,83
М-25,4
M-23,7
М-10,1
М-9,2
m-0,96
m-1,17
m-0,13
m-0,17
m-0,15
m-0,23
На 3 сутки лечения
М-25,28
М-12,72
М-28,8
M-24,1
М-12,62
М-9,3
m-1,01
m-1,01
m-1,01
m-1,03
m-0,32
m-0,18
На 4 сутки лечения
М-25,29
М-14,61
М-28,8
M-24,4
М-14,3
М-9,3
m-1,03
m-0,89
m-0,23
m-1,18
m-0,65
m-0,56
На 5 сутки лечения
М-23,87
М-16,51
M-26,1
M-24,7
М-12,9
М-9,4
m-1,19
m-1,05
m-1,14
m-0,65
m-1,12
m-0,6
На 6 сутки лечения
М-23,85
M-20,29
M-26,4
M-24,9
М-13,0
М-9,6
m-0,94
m-1,11
m-0,31
m-0,23
m-0,01
m-0,47
На 7 сутки наблюдения (через 6 суток от начала лечения)
M-28,18
М-20,32
M-29,3
M-25,1
М-14,8
М-9,6
m-1,74
m-1,07
m-1,42
m-0,87
m-1,12
m-1,04
На 8 сутки наблюдения (через 7 суток от начала лечения)
M-28,13
М-21,06
M-29,7
M-25,3
М-14,5
М-9,5
m-0,94
m-0,74
m-1,12
m-1,17
m-0,95
m-1,24
На 9 сутки наблюдения (через 8 суток от начала лечения)
M-28,15
M-21,86
M-29,9
M-25,6
М-14,6
М-9,6
m-0,91
m-1,02
m-1,08
m-0,82
m-0,82
m-0,14
На 10 сутки наблюдения (через 9 суток от начала лечения)
M-28,20
М-22,61
M-29,8
M-25,9
М-14,7
М-9,6
m-1,06
m-0,57
m-0,85
m-1,25
m-1,04
m-0,84
Через 14 суток от начала лечения
М-28,86
M-27,02
M-32,14
M-26,3
М-17,6
М-9,6
m-1,94
m-1,17
m-1,59
m-0,76
m-1,43
m-0,68
Через 20 суток после курса лечения
М-28,03
M-25,63
M-39,6
M-20,6
M-22,3
М-8,8
m-1,87
m-1,24
m-1,64
m-0,87
m-1,18
m-0,07
Иммунологические показатели уровня γ-ИНФ, Т- и В-лимфоцитов, представленные в таблице 2, свидетельствуют о том, что за первые трое суток введения происходит накопление препарата в крови, который провоцирует клетки организма к выработке γ-интерферона, Т- и В-лимфоцитов. Затем на 4 и 5 сутки уровень γ-интерферона, Т- и В-лимфоцитов остается практически без изменений, поэтому нет необходимости ежедневного введения препарата. Тем не менее, на 5-е сутки уровень γ-интерферона Т- и В-лимфоцитов несколько уменьшается, поэтому на 6-е сутки снова вводится ронколейкин. А после истечения 6-х суток, кроме нормализации иммунологических показателей, наблюдается улучшение состояния животных по клиническим признакам и стойкий терапевтический эффект в течение последующих суток наблюдения без регистрации случаев возникновения рецидивов.
Из таблицы 2 также видно, что применение препарата-корректора ронколейкина в комплексном лечении хронического остеомиелита через 6 суток курса терапии приводит к достоверному повышению в 1,3 раза уровня Т-лимфоцитов в периферической крови группы больных животных, леченных по предлагаемому способу. У больных животных, которым ронколейкин не применялся, а вводился циклоферон, через 6 суток лечения повышение Т-лимфоцитов было минимальным (в 1,1 раза). Через 6 суток от начала лечения наблюдалось увеличение количества В-лимфоцитов в 1,6 раза у кроликов, в комплексном лечении которых применялся ронколейкин, и практически не изменилось у экспериментальных животных, которым инъецировали циклоферон. Так, процент Т-лимфоцитов на 20-е сутки после окончания курса терапии составил 39,6 в крови кроликов, лечение которых проводилось по предлагаемому способу, и 20,6 - в крови кроликов группы сравнения. Относительное содержание В-лимфоцитов к этому же периоду составило 22,3 и 8,8% соответственно. Изменения в клеточном звене иммунитета кроликов, леченных по методу прототипа, позволяют выявить недостаточное функционирование иммунной системы. По окончании курса терапии по предлагаемому способу у экспериментально больных кроликов через 6 суток содержание γ-ИНФ увеличилось в 3 раза, в то время как у кроликов, леченных по методу прототипа, содержание γ-ИНФ увеличилось в 3 раза только через 14 суток. Кроме того, у животных, которым применялся ронколейкин, в отдаленном периоде (к 20-м суткам) после окончания курса терапии показатель γ-ИНФостался на высоком уровне, в то время как в группе кроликов, которым применялся циклоферон, произошло его снижение в 1,2 раза.
Сохранение показателя γ-ИНФ на высоком уровне свидетельствует о достижении стойкого клинического эффекта, что исключает необходимость в проведении повторных курсов терапии. Предложенный способ сокращает сроки лечения с 14 до 6 дней (таблица №3).
Таблица №3
Сравнительные показатели продолжительности курса лечения по предлагаемому способу и по способу-прототипу
Показатель
По прототипу
По предлагаемому способу
Продолжительность курса лечения (сутки)
14
6
12
9
12
9
12
9
В качестве примера проводим следующее клиническое наблюдение. Кролик №5, 4 мес., породы «Нидерландская красная», массой 3,5 кг. Диагноз - хронический остеомиелит нижней трети диафиза большеберцовой кости. Состояние животного средней тяжести. Наблюдается вялость, плохой аппетит, бледность слизистых оболочек и кожи на непигментированных участках тела животного. При наружном осмотре животное щадит пораженную конечность, при движении отмечается хромота. При пальпации отмечается резкая болезненность. Температура тела - 39,9°С. В анализе крови: эритроциты 4.9×10/л, гемоглобин 89 г/л, лейкоциты 12,6×10/л со сдвигом ядра влево, СОЭ 8 мм/ч. Содержание γ-ИНФ 8,3 пг/мл, относительное содержание Т-лимфоцитов 21%, В-лимфоцитов 8%. Температура кожи в области поражения выше на 1,5°С по сравнению с симметричным участком. При рентгенологическом исследовании отмечен в метафизе большеберцовой кости очаг деструкции с нечеткими границами, вокруг которого располжена склерозированная костная ткань, в области поражения наблюдается нечеткость границ кортикального слоя кости, имеются зоны расслоения и экзастозы. Проводилась традиционная комплексная терапия: внутримышечное введение цефазолина, витаминотерапия. Проведен курс иммунокорректора ронколейкина по 70 тыс.ME внутримышечно на 1, 2, 3 и 6 сутки, 4 инъекции. Курсовая доза составила 280 тыс.ME. На вторые сутки после введения ронколейкина температура тела снизилась, достигнув нормального значения. Через 6 суток от начала лечения состояние больного животного удовлетворительное, хромота отсутствует, животное подвижно, охотно потребляет корм и воду. Температура кожи на симметричных участках одинаковая. В анализе крови: эритроциты 7,4×10/л, гемоглобин 110 г/л, лейкоциты 8,1×10/л, СОЭ 1,5 мм/ч. Содержание γ-ИНФ 27,8 пг/л, Т-лимфоцитов 26%, В-лимфоцитов 14%. Контрольное обследование проводили на 20-е сутки после окончания курса терапии. На контрольной рентгенограмме выявили исчезновение признаков воспаления, заполнение деструктивной полости молодыми грануляциями, четкость рисунка кости. В анализе крови: эритроциты 7,8×10/л, гемоглобин 125 г/л, лейкоциты 6,1×10/л, СОЭ 1,5 мм/ч. Уровень γ-ИНФ составил 27,9 пг/л, Т-лимфоцитов 37%, В-лимфоцитов 20%.
Результаты проведенных исследований позволяют сделать вывод, что использование ронколейкина в коррекции нарушений процессов костеобразования и иммунодепрессий является эффективным и может быть использован в клинике.