УСТРАНЕНИЕ ИНТЕРФЕРЕНЦИИ ПРИ ИММУННОМ АНАЛИЗЕ, ОБУСЛОВЛЕННОЙ АНТИТЕЛАМИ К УГЛЕВОДАМ

1. Способ анализа для определения присутствия антитела к лекарственному средству, содержащему углеводный фрагмент, в образце жидкости, содержащей антитело, взятом у субъекта, причем указанный способ включает следующие этапы:
(a) объединение
(i) образца жидкости с
(ii) лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент, и
(iii) дополнительным углеводом; и
b) определение того, происходит или нет специфичное связывание между антителом в образце и лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент;
при этом не осуществляют предварительного смешивания дополнительного углевода с образцом жидкости перед определением того, происходит или нет специфичное связывание между антителом в образце и лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент.
2. Способ анализа для определения присутствия антитела к лекарственному средству, содержащему углеводный фрагмент, в образце жидкости, содержащей антитела, взятом у субъекта, причем указанный способ включает следующие этапы:
(a) объединение
(i) образца жидкости с
(ii) лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент, и
(iii) дополнительным углеводом; и
(b) определение того, происходит или нет специфичное связывание между антителом в образце и лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент;
при этом лекарственное средство, содержащее углеводный фрагмент, не содержит гликопротеин.
3. Способ анализа по п.1 или 2, отличающийся тем, что анализ проводят после того, как субъект подвергают действию лекарственного средства, содержащего углеводный фрагмент.
4. Способ анализа по п.1 или 2, отличающийся тем, что анализ проводят до того, как субъект подвергают действию лекарственного средства, содержащего углеводный фрагмент.
5. Способ анализа по п.1 или 2, в котором дополнительный углевод добавляют после объединения образца и лекарственного средства, содержащего углеводный фрагмент.
6. Способ анализа по п.1 или 2, в котором образец жидкости, взятый у субъекта, содержит по меньшей мере одно из: цельной крови; сыворотки; слизи, слюны, молозива и плазмы.
7. Способ анализа по п.6, в котором этап определения включает по меньшей мере одно из сэндвич-анализа, «мостикового анализа» и анализа конкурентного связывания.
8. Способ анализа по п.1, 2 или 7, в котором этап определения включает по меньшей мере одно из следующего: определение изменения коэффициента преломления на твердой оптической поверхности, находящейся в контакте с образцом; определение изменения люминесценции; измерение изменения цвета; определение изменения радиоактивности; измерение с использованием интерферометрии в биослое; измерение с использованием кантилевера; измерение с использованием получения изображений без метки; и измерение с использованием акустической детекции.
9. Способ анализа по п.8, в котором этап определения включает проведение анализа, выбранного из группы, состоящей из: твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA); электрохемилюминесцентного анализа (ECL); радиоиммуноанализа (RIA); твердофазного иммуноанализа (SPRIA); иммуноблоттинга; иммунопреципитации; сортировки клеток с флуоресцентными метками (FACS).
10. Способ анализа по п.9, в котором этап определения включает анализ связывания.
11. Способ анализа по п.7, 9, 10, в котором этап определения включает твердофазный иммуноферментный анализ.
12. Способ анализа по п.1 или 2, в котором дополнительный углевод представляет собой бактериальный липополисахарид (LPS) или его фрагмент, декстран или его фрагмент, леван или его фрагмент, полисахарид пневмококка или его фрагмент, агарозу или ее фрагмент, целлюлоза или ее фрагмент, каррагинан или его фрагмент и метилгикозид или его фрагмент.
13. Способ анализа п.1 или 2, в котором дополнительный углевод на этапе а) присутствует в комбинации в концентрации от приблизительно 10 нг/мл до приблизительно 1 мг/мл.
14. Способ анализа по п.1 или 2, в котором лекарственное средство, содержащее углеводный фрагмент, дополнительно содержит носитель, конъюгированный с лекарственным средством.
15. Способ анализа по п.14, в котором носитель выбран из группы, состоящей из: моно- и поликлональных антител и химически или генетически модифицированных аналогов антител; антиген-распознающих фрагментов антител и их химически или генетически модифицированных аналогов; низкомолекулярных модульных иммунофармацевтических средств (SMIP) и их химически или генетически модифицированных аналогов; нанотел и их химически или генетически модифицированных аналогов; растворимых рецепторов и их химически или генетически модифицированных аналогов; факторов роста и их химически или генетически модифицированных аналогов; аптамеров; липосом; негликозилированных белков и наночастиц.
16. Способ анализа по п.15, в котором носитель специфично связывается с антигеном, экспрессируемым на поверхность раковых клеток.
17. Способ анализа по п.16, в котором антитиген, экспрессируемый на поверхность раковых клеток, выбран из группы, состоящей из: 5T4; CD19; CD20; CD22; CD33; антигена Льюса Y; HER-2; рецептора Fc типа I к иммуноглобулину G (Fc гамма R1); CD52; рецептора к эпидермальному фактору роста (EGFR); фактора роста эндотелия сосудов (VEGF); комплекса ДНК/гистоны; карциноэмбрионального антигена (СЕА); CD47; VEGFR2 (рецептор 2 фактора роста эндотелия сосудов или рецептор, содержащий инсерционный киназный домен, KDR); молекулы адгезии клеток эндотелия (Ep-CAM); белка активации фибробластов (FAP); Trail-рецептор-1 (DR4); рецептора прогестерона; онкофетального антигена СА 19.9 и фибрина.
18. Способ анализа по любому из пп.15-17, в котором носитель представляет собой моноклональное антитело.
19. Способ анализа по п.18, в котором моноклональное антитело выбрано аз группы, состоящей из: анти-CD22 моноклонального антитела; анти-5T4 моноклонального антитела; моноклонального антитела к антигену Льюиса Y и анти-CD33 моноклонального антитела.
20. Способ анализа по п.1 или 2, в котором лекарственное средство, содержащее углеводный фрагмент, выбрано из группы, состоящей из: цитотоксического агента; радиотерапевтического агента; иммуномодулирующего агента; анти-ангиогенного агента; антипролиферативного агента; про-апоптотического агента; химиотерапевтического агента и терапевтической нуклеиновой кислоты.
21. Способ анализа по п.20, в котором лекарственное средство, содержащее углеводный фрагмент, представляет собой цитотоксический агент.
22. Способ анализа по п.21, в котором цитотоксический агент представляет собой ингибитор полимеризации тубулина; алкилирующий агент, который связывается с ДНК и разрушает ее, ингибитор синтеза белка или ингибитор тирозинкиназы.
23. Способ анализа по п.21, в котором цитотоксический агент выбран из калихимицинов, тиотепа, таксанов, винкристина, даунорубицина, доксорубицина, эпирубицина, актиномицина, аутрамицина, азасеринов, блеомицинсв, тамоксифена, идарубицина, доластатинов/ауристатинов, гемиастерлинов и миатансиноидов.
24. Способ анализа по п.23, в котором цитотоксический агент представляет собой калихимицин.
25. Способ анализа по п.24, в котором калихимицин представляет собой N-ацетил-гамма-диметилгидразид калихимицин.
26. Способ анализа по п.25, в котором N-ацетил-гамма-диметилгидразид калихимицин конъюгирован с моноклональным антителом-носителем, причем указанное моноклональное антитело специфично связывается с антитигеном, выбранным из группы, состоящей из 5T4; CD19; CD20; CD22; CD33; антигена Льюиса Y; HER-2; рецептора Fc типа I к иммуноглобулину G (Fc гамма R1); CD52; рецептора к эпидермальному фактору роста (EGFR); фактора роста эндотелия сосудов (VEGF); комплекса ДНК/гистоны; карциноэмбрионального антигена (CEA); CD47; VEGFR2 (рецептор 2 фактора роста эндотелия сосудов или рецептор, содержащий инсерционный киназный домен, KDR); молекулы адгезии клеток эндотелия (Ер-САМ); белка активации фибробластов (FAP); Trial-рецептор-1 (DR4); рецептора прогестерона; онкофетального антигена СА 19.9 и фибрина.
27. Способ анализа по любому из пп.22-24, в котором дополнительный углевод представляет собой S-[(2R,4S,6S)-6-({[(2R,4S,5R)-5-({(2S,4S,5S)-5-[ацетил(этил)амино]-4-метокситетрагидро-2H-пиран-2-ил}окси)-4-гидрокси-6-метокси-2-метилтетрагидро-2H-пиран-3-ил]амино}окси)-4-гидрокси-2-мeтилтeтpaгидpo-2H-пиpaн-3-ил]4-{[(2S,3R,4R,5S,6S)-3,5-дигидpoкcи-4-мeтoкcи-6-метилтетрагидро-2H-пиран-2-ил]окси}-3-иодо-5,6-диметокси-2-метилбензолкарботиоат).
28. Способ анализа по п.1, 2, 10, в котором этап определения дополнительно включает специфичное связывание реагента-«ловушки» с антителом в образце, которое специфично связывается с лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент.
29. Способ анализа по п.28, в котором присутствие антитела, которое специфично связывает лекарственное средство, содержащее углеводный фрагмент, определяют по специфичному связыванию соединения, с которым указанное антитело специфично связывается, с лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент.
30. Способ анализа по п.29, в котором соединение выбрано из группы, состоящей из: реагента-«ловушки», дополнительно содержащего детектируемую метку; и второго антитела, дополнительно содержащего детектируемую метку, при этом второе антитело специфично связывается со связанным антителом.
31. Способ анализа по п.30, в котором детектируемая метка включает по меньшей мере одну метку, выбранную из группы, состоящей из ферментативной метки, люминесцентной метки; белковой метки; витаминной метки; радиоизотопной метки.
32. Способ анализа по любому из пп.29-31, в котором реагент-«ловушка» представляет собой калихимицин.
33. Способ анализа по п.32, в котором реагент-«ловушка» представляет собой углеводный фрагмент калихимицина или его функциональный фрагмент.
34. Способ анализа по п.33, в котором углеводный фрагмент калихимицина представляет собой S-[(2R,4S,6S)-6-({[(2R,4S,5R)-5-({(2S,4S,5S)-5-[ацетил(этил)амино]-4-метокситетрагидро-2H-пиран-2-ил}окси)-4-гидрокси-6-метокси-2-метилтетрагидро-2H-пиран-3-ил]амино}окси)-4-гидрокси-2-мeтилтeтpaгидpo-2H-пиpaн-3-ил]4-{[(2S,3R,4R,5S,6S)-3,5-дигидpoкcи-4-мeтoкcи-6-метилтетрагидро-2H-пиран-2-ил]окси}-3-иодо-5,6-диметокси-2-метилбензолкарботиоат), присутствующий на калихимицине.
35. Способ анализа согласно п.1, и дополнительно описанный в любом из пп.5, 6 или 7.
36. Способ определения присутствия лекарственного средства, содержащего углеводный фрагмент, в образце жидкости, содержащем антитело, причем указанный способ включает следующие этапы:
(a) объединение
(i) образца жидкости с
(ii) реагентом-«ловушкой», который специфично связывается с лекарственным средством, содержащем углеводный фрагмент, и
(iii) дополнительным углеводом; и
(b) определение того, происходит или нет специфичное связывание между лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент, в образце и реагента-«ловушки»;
при этом не осуществляют предварительного объединения дополнительного углевода с образцом жидкости перед определением того, происходит или нет специфичное связывание между реагентом- «ловушкой» и лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент.
37. Способ анализа для определения присутствия лекарственного средства, содержащего углеводный фрагмент, в образце жидкости, содержащей антитело, причем указанный способ включает следующие этапы:
(a) объединение
(i) образца жидкости с
(ii) реагентом-«ловушкой», который специфично связывается с лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент, и
(iii) дополнительным углеводом; и
b) определение того, происходит или нет специфичное связывание между лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент, в образце и реагентом-«ловушкой»;
при этом лекарственное средство, содержащее углеводный фрагмент, не содержит гликопротеин.
38. Способ анализа по п.36 или 37, в котором присутствие лекарственного средства, связанного с реагентом-«ловушкой», определяют при помощи соединения, которое также специфично связывается с данным лекарственным средством.
39. Способ анализа по п.38, в котором реагент-«ловушка» представляет собой по меньшей мере одно из: антитела или фрагмента антитела, которые специфично связываются с лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент, и молекулы-мишени, которая специфично связывается с лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент.
40. Способ анализа по п.38, в котором соединение, которое также связывается с лекарственным средством, помечено и выбрано из группы, состоящей из: реагента-«ловушки», дополнительно содержащего детектируемую метку, и антитела, дополнительно содержащего детектируемую метку, причем указанное антитело специфично связывается с указанным лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент.
41. Способ анализа по п.38, в котором соединение, которое также связывается с лекарственным средством, определяют по связыванию с одним или более последовательных промежуточных соединений, причем одно или более промежуточных соединений содержат детектируемую метку.
42. Способ анализа по п.40 или 41, в котором детектируемая метка включает по меньшей мере одну метку, выбранную из группы, состоящей из: ферментативной метки; люминесцентной метки; белковой метки; витаминной метки и радиоизотопной метки.
43. Способ анализа по любому из пп.36, 37, 39-41, в котором образец жидкости содержит по меньшей мере одно из: цельной крови; сыворотки; слизи, слюны; молозива и плазмы.
44. Способ анализа по любому из пп.36, 37, 39-41, в котором этап определения включает анализ, выбранный из группы, состоящей из: сэндвич-анализа; «мостикового» анализа и анализа конкурентного связывания.
45. Способ анализа по п.44, в котором этап определения включает по меньшей мере одно из: определения изменения коэффициента преломления на твердой оптической поверхности, находящейся в контакте с образцом; определения изменения люминесценции; измерения изменения цвета; определение изменения радиоактивности; измерения с использованием интерферометрии в биослое; измерения с использованием кантилевера; измерения с использование получения внутреннего изображения без метки; и измерения с использованием акустической детекции.
46. Способ анализа по п.45, в котором этап определения включает анализ, выбранный из группы, состоящей из: ELISA; ECL; RIA; SPRIA; иммуноблоттинга; иммунопреципитации и иммуноокрашивания.
47. Способ анализа по п.46, в котором этап определения включает «мостиковый» анализ.
48. Способ анализа по п.47, в котором этап определения включает ELISA.
49. Способ анализа по любому из пп.36, 37, 39-41, 45-48, в котором дополнительный углевод присутствует в образце в концентрации от приблизительно 10 нг/мл до приблизительно 1 мг/мл.
50. Способ анализа по п.49, в котором углевод, добавляемый в образец, представляет собой бактериальный липополисахарид (LPS), декстсран, леван, полисахарид пневмококка, агарозу, целлюлозу, каррагинан или метигликозид.
51. Способ анализа по любому из пп.36, 37, 39-41, 45-48, 50, в котором лекарственное средство, содержащее фрагмент углевода, дополнительно содержит носитель, конъюгированный с лекарственным средством.
52. Способ анализа по п.51, в котором носитель выбран из группы, состоящей из: моно- и полилональных антител и химически или генетически модифицированных аналогов антител; антиген-распознающих фрагментов антител и их химически или генетически модифицированных аналогов; низкомолекулярных модулярных иммунофармацевтических средств (SMIP) и их химически или генетически модифицированных аналогов; нанотел и их химически или генетически модифицированных аналогов; растворимых рецепторов и их химически или генетически модифицированных аналогов; факторов роста и их химически или генетически модифицированных аналогов; аптамеров; липосом; негликозилированных белков и наночастиц.
53. Способ анализа по п.51 или 52, в котором носитель специфично связывается с антигеном, экспрессируемым на поверхность раковой клетки.
54. Способ анализа по п.53, в котором антиген, экспрессируемый на поверхность раковой клетки, выбран из группы, состоящей из 5T4; CD19; CD20; CD22; CD33; антигена Льюиса Y; HER-2; рецептора Fc типа I к иммуноглобулину G (Fc гамма R1); CD52; рецептора к эпидермальному фактору роста (EGFR); фактора роста эндотелия сосудов (VEGF); комплекса ДНК/гистоны; карциноэмбрионального антигена (СЕА); CD47; VEGFR2 (рецептор 2 фактора роста эндотелия сосудов или рецептор, содержащий инсерционный киназный домен, KDR); молекулы адгезии клеток эндотелия (Ep-CAM); белка активации фибробластов (FAP); Trail-рецептор-1 (DR4); рецептора прогестерона; онкофетального антигена СА 19.9 и фибрина.
55. Способ анализа по п.53, в котором носитель представляет собой моноклональное антитело.
56. Способ анализа по п.55, в котором моноклональное антитело специфично связывается с антигеном, выбранным из группы, состоящей из 5Т4; CD19; CD20; CD22; CD33; антигена Льюиса Y; HER-2; рецептора Fc типа I к иммуноглобулину G (Fc гамма R1); CD52; рецептора к эпидермальному фактору роста (EGFR); фактора роста эндотелия сосудов (VEGF); комплекса ДНК/гистоны; карциноэмбрионального антигена (СЕА); CD47; VEGFR2 (рецептор 2 фактора роста эндотелия сосудов или рецептор, содержащий инсерционный киназный домен, KDR); молекулы адгезии клеток эндотелия (Ep-CAM); белка активации фибробластов (FAP); Trail-рецептор-1 (DR4); рецептора прогестерона; онкофетального антигена CA 19.9 и фибрина.
57. Способ анализа по любому из пп.36, 37, 39-41, 45-48, 50, 52, 54-56, в котором лекарственное средство, содержащее углеводный фрагмент, выбрано из группы, состоящей из: цитотоксического агента; радиотерапевтического средства; иммуномодулирующего агента; анти-ангиогенного агента; антипролиферативного агента; про-апоптотического агента; химиотерапевтического агента и терапевтической нуклеиновой кислоты.
58. Способ анализа по п.57, в котором лекарственное средство, содержащее углеводный фрагмент, представляет собой цитотоксический агент.
59. Способ анализа по п.58, в котором цитотоксический агент представляет собой ингибитор полимеризации тубулина, алкилирующий агент, который связывается с ДНК и разрушает ее, ингибитор синтеза белка или ингибитор тирозинкиназы.
60. Способ анализа по п.59, в котором цитотоксический агент выбран из калихимицинов, тиотепа, таксанов, винкристина, даунорубицина, доксорубицина, эпирубицина, актиномицина, аутрамицина, азасеринов, блеомицинов, тамоксифена, идарубицина, доластатинов/ауристатинов, гемиастерлинов и миатансиноидов.
61. Способ анализа по п.57, в котором цитотоксический агент представляет собой калихимицин.
62. Способ анализа по п.61, в котором калихимицин представляет собой N-ацетил-гамма-диметилгидразид калихимицин.
63. Способ анализа по п.62, в котором N-ацетил-гамма-диметилгидразид калихимицин конъюгирован с моноклональным антителом-носителем, причем конъюгат носитель-лекарственное средство выбран из группы композиций, состоящей из: CMC-544; CME-548; CMD-193; и гемтузуаба озогамицина.
64. Способ анализа по любому из пп.61-63, в котором дополнительный углевод представляет собой метилгликозид.
65. Способ анализа по любому из пп.36, 37, 39-41, 45-48, 50, 52, 54-56, 58-63, в котором реагент-«ловушка» выбран из группы, состоящей из: 5T4; CD19; CD20; CD22; CD33; антигена Льюиса Y; HER-2; рецептора Fc типа I к иммуноглобулину G (Fc гамма R1); CD52; рецептора к эпидермальному фактору роста (EGFR); фактора роста эндотелия сосудов (VEGF); комплекса ДНК/гистоны; карциноэмбрионального антигена (СЕА); CD47; VEGFR2 (рецептор 2 фактора роста эндотелия сосудов или рецептор, содержащий инсерционный киназный домен, KDR); молекулы адгезии клеток эндотелия (Ep-CAM); белка активации фибробластов (FAP); Trail-рецептор-1 (DR4); рецептора прогестерона; онкофетального антигена CA 19.9 и фибрина.
66. Способ анализа по любому из пп.36, 37, 39-41, 45-48, 50, 52, 54-56, 58-63, в котором реагент-«ловушка» представляет собой антитело к калихимицину.
67. Способ анализа по любому из пп.36, 37, 39-41, 45-48, 50, 52, 54-56, 58-63, дополнительно описанный в п.7.
68. Способ анализа по п.29 или 30, в котором соединение, которое связывается с антителом, которое специфично связывается с лекарственным средством, содержащим углеводный фрагмент, определяют по связыванию одного или более последовательных промежуточных соединений, причем одно или более последовательных промежуточных соединений содержат детектируемую метку.