СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА, ПРОФИЛАКТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
METHOD FOR PRODUCING DRUG FOR INCREASING NON-SPECIFIC RESISTANCE OF THE ORGANISM, PREVENTION OF DISEASES IN FARM ANIMALS

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной медицины, а именно к способам получения препаратов для повышения неспецифической резистентности организма, профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных.
Известен способ получения биологически активного препарата из дрожжей (SU 1808331 A1 А61К 35/72, 15.04.93) в виде очищенного полисахаридного комплекса, обладающий иммуностимулирующей активностью. Иммобилизация полисахаридов дрожжевых клеток в агаровом геле (ТУ 10.07.236-91 на производство препарата «Достим») или в 10-14% водно-солевом растворе поливинилпирролидона (RU 2137480 C1 А61К 31/79, 35/72, 20.09.99) повышает иммуностимулирующую активность препаратов.
Наиболее близким аналогом (прототипом) по решаемой задаче является способ получения препарата для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза организма животных (PS-2), включающий смешивание 0,2-0,3% суспензии агара и концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляют (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорид и формалин, объем доводят дистиллированной водой до 100 мас. ч. Препарат обладает иммуностимулирующей активностью (RU 2332214 С1 А61K 31/429, 31/115, А61K 36/06, А61K 36/02, А61Р 37/04, 27.08.2008).
К недостаткам препарата можно отнести отсутствие антибактериальной активности к возбудителям болезней животных.
Изобретение направлено на стимуляцию неспецифической резистентности организма, профилактику и лечение желудочно-кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных, расширяющих ассортимент средств как для повышения активности клеточных и гуморальных факторов неспецифической резистентности и специфического иммуногенеза организма, так и для повышения антибактериальной активности против возбудителей заболеваний сельскохозяйственных животных.
Технический результат заключается в смешивании 90 мас. ч. 0,2-0,3% суспензии агара и 2,5 мас. ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляют 3,5 мас. ч. производного бензимидазола (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 5000 мг фторхинолонового антибиотика - энрофлоксацин - [1-циклопропил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(4-этил-1-пиперазинил)-3-хинолинкарбоновая кислота; 2500 мг антибиотика группы аминогликозидов - гентамицина сульфат - (3R,4R,5R)-2-{[(1S,2S,3R,4S,6R)-4,6-диамино-3-{[(2R,3R,6S)-3-aмино-6-[(1R)-1-(метиламино)этил]оксан-2-у1]окси}-2-гидроксициклогексил]окси}-5-метил-4-(метиламино)оксан-3,5-диол и 0,2 мас. ч. формалина, объем доводят дистиллированной водой до 100 мас.ч. Полученный препарат разливают во флаконы по 50-100 мл, после стерилизации используют для повышения неспецифической резистентности организма, профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных.
Отличие заявляемого решения от известного аналога заключается в том, что при введении антибиотиков энрофлоксацина и гентамицина сульфат совместно с полисахаридным комплексом и (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлоридом усиливается их действие на факторы неспецифической резистентности организма, активируется фагоцитоз и значительно расширяется спектр бактерицидной активности против возбудителей заболеваний сельскохозяйственных животных.
Для осуществления способа использовали следующие вещества:
1) агар микробиологический ГОСТ 17206;
2) концентрат очищенного полисахаридного комплекса дрожжей SU 1808331;
3) (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2.1-b]-тиазола гидрохлорид ТУ 9333-024;
4) энрофлоксацин ПВИ-3-2.8/02363 от 04.10.2013;
5) гентамицина сульфат ЛС-002216 от 19.09.2011;
6) формалин ГОСТ 1625;
7) вода дистиллированная ГОСТ 6709.
Способ осуществляется следующим образом:
Пример 1. 90 мас. ч. 0,2% суспензии агара смешивали 2,5 мас. ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжей. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас. ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 5000 мг фторхинолонового антибиотика энрофлоксацина, 2500 мг антибиотика группы аминогликозидов гентамицина сульфат и 0,2 мас. ч. формалина, объем доводили дистиллированной водой до 100 мас. ч. Полученный препарат после стерилизации использовали для повышения неспецифической резистентности организма, профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных.
Пример 2. 90 мас. ч. 0,3% суспензии агара смешивали 2,5 мас. ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжей. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас. ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 50 мг фторхинолонового антибиотика энрофлоксацина, 25 мг антибиотика группы аминогликозидов гентамицина сульфат и 0,2 мас. ч. формалина, объем доводили дистиллированной водой до 100 мас. ч. Полученный препарат после стерилизации использовали для повышения неспецифической резистентности организма, профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных.
Пример 3. Объектами исследований были поросята крупной белой породы. В научно-хозяйственном опыте были подобраны четыре группы новорожденных поросят (контрольная, 1-я, 2-я и 3-я опытные) по принципу аналогов с учетом клинико-физиологического состояния, возраста и живой массы по 10 животных в каждой группе.
Поросятам 1-й опытной группы внутримышечно инъецировали PS-2 (прототип) в дозе 0,3 мл на голову трехкратно в 1-, 4- и 7-суточном возрасте, 2-й опытной группы - препарат по изобретению (пример 1), 3-й опытной группы - препарат по изобретению (пример 2) в указанной дозе и сроки (опытные варианты), четвертая группа была контрольной.
Показатели неспецифической резистентности организма поросят определяли в возрасте 10, 30 и 60 суток. Результаты этих исследований приведены в табл. 1.
Установлено, что предлагаемый препарат по примерам 1 и 2 повышает показатели неспецифической резистентности организма поросят в возрасте 10 суток: фагоцитарную активность - на 5,1 и 4,8%, лизоцимную активность - на 4,3 и 3,2%, бактерицидную активность - на 4,2 и 3,0%; в возрасте 30 суток - на 5,0 и 3,6%, 4,1 и 2,8%, 4,0 и 3,5%; в возрасте 60 суток - на 7,0 и 6,3%, 7,5 и 4,8%, 6,7 и 5,9%; в возрасте 90 суток - на 6,8 и 6,1%, 7,2 и 4,5%, 6,3 и 4,5% (Р<0,05-0,001).
Показатели заболеваемости и сохранности поросят представлены в табл. 2.
В контрольной группе было зафиксировано 6 случаев заболевания поросят или 40,0%, из них 2 поросенка пало и 4 выздоровели. У поросят регистрировались признаки острого воспаления гастроинтестинального тракта (диарея). Продолжительность болезни составила 8,4±1,75 суток. Возникновение болезни у поросят происходило в результате снижения защитных свойств организма, при котором усиливается активность условно-патогенной микрофлоры, что приводит к повышению риска развития болезней.
Заболеваемость поросят в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах составила 30, 10 и 20% соответственно, что в 2,0, 6,0 и 3,0 раза меньше, чем в контроле. Болезнь у них также протекала с признаками воспаления гастроинтестинального тракта (диарея), но степень проявления клинических признаков и продолжительность болезней была меньше в 1,52, 2,8 и 2,21 раза, чем в контроле. Сохранность поросят в опытных группах составила 100%.
Таким образом, под влиянием разработанного биопрепарата на основе полисахаридного комплекса дрожжевых клеток и антибиотиков энрофлоксацина и гентамицина сульфат у поросят активизировались клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности организма, снижалось количество и продолжительность заболеваний органов пищеварения.
Пример 4. Испытание препарата для изучения иммуностимулирующих свойств и профилактической эффективности проводили на телятах, подобранных по принципу пар-аналогов в 1-суточном возрасте. Были подобраны четыре группы телят (контрольная, 1-я, 2-я и 3-я опытные) по 10 животных в каждой. Телятам 1-й опытной группы внутримышечно инъецировали PS-2 (прототип) в дозе 0,1 мл/кг живой массы трехкратно в 1-, 4- и 7-суточном возрасте, 2-й опытной группы - препарат по изобретению (пример 1), 3-й опытной группы - препарат по изобретению (пример 2) в указанной дозе и сроки (опытные варианты), четвертая группа была контрольной.
Показатели неспецифической резистентности организма телят определяли в возрасте 15, 30, 60 и 90 суток. Результаты этих исследований представлены в табл. 3.
Установлено, что предлагаемый препарат по примерам 1 и 2 улучшает гематологические показатели неспецифической резистентности организма телят в возрасте 15 суток: фагоцитарную активность - на 4,1 и 3,0%, лизо-цимную активность - на 3,2 и 2,0%, бактерицидную активность - на 7,0 и 5,6%; в возрасте 30 суток - на 4,5 и 3,5%, 4,0 и 2,6%, 5,9 и 4,9%; в возрасте 60 суток - на 7,6 и 6,4%, 5,1 и 4,2%, 7,4 и 6,7%; в возрасте 90 суток - на 8,1 и 7,4%, 4,9 и 4,1%, 6,7 и 6,0% (Р<0,05-0,001).
В период выращивания телят до 180 суток вели учет их заболеваемости и сохранности, результаты исследований приведены в табл. 4.
В контрольной группе заболело 6 телят или 60%. У телят регистрировались признаки острого воспаления гастроинтестинального тракта (диарея). Средняя продолжительность болезней составила 7,8±0,75 суток. Возникновение болезней у телят было вызвано снижением неспецифических защитных свойств организма, в результате чего значительно снижается адаптивная способность организма и усиливается активность условно патогенной микрофлоры, что приводит к повышению риска развития болезней.
Заболеваемость телят в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах составила 50%, 20 и 10% соответственно, что в 1,2, 3,0 и 4,0 раза меньше, чем в контроле. Болезни у телят протекали с признаками воспаления гастроинтестинального тракта, но степень проявления клинических признаков и продолжительность болезней была меньше в 1,41, 2,10 и 2,00 раза, чем в контроле. Сохранность телят в опытных группах составила 100%.
Таким образом, под влиянием разработанного препарата на основе полисахаридного комплекса дрожжевых клеток и антибиотиков энрофлоксацина и гентамицина сульфат, как у поросят, так и у телят активизируются клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности организма, снижается количество заболеваний, и сокращаются сроки выздоровления.