Смешанная Коксаки в — герпесвирусная инфекция у детей в возрастном аспекте

В. А. Булгакова. Клинико-иммунологические взаимосвязи персистирующей вирусной инфекции и атопической бронхиальной астмы у детей

точности иммунного ответа при аллергии. Присутствие инфекционных возбудителей в верхних дыхательных путях в период ремиссии астмы может быть связано с недооценкой инфекционного фактора в патогенезе и отсутствием адекватного лечения. Высокий уровень серопозитивных пациентов с бронхиальной астмой к возбудителям хламидийной и микоплазменной инфекций, а также к вирусам герпеса 1, 4 и 5 типов может свидетельствовать о латентном персисти-ровании этих возбудителей и одновременном их длительном воздействии на иммунную систему, приводящем к утяжелению хронического воспалительного процесса в бронхах, формированию иммуносупрессии у пациентов с атопической бронхиальной астмой и склонности их к частым респираторным инфекциям. Персистирующая вирусная инфекция у детей с атопической бронхиальной астмой объясняет развитие вторичной иммуносупрессии, в формировании которой существенное значение может принадлежать нарушениям процессов апоптоза иммунных клеток, выявленное у обследованных детей.

Литература:

1. Bacharier L. B. Diagnosis and treatment of asthma in childhood: a PRACTALL consensus report // Allergy. - 2008. - V. 63. - P. 534.

2. Busse WW., Gern J.E. Viruses in asthma // J. Allergy Clin. Immunol. — 1997. - V. 100. - P. 147-150.

3. Смоленов И.В. Астма и свистящие хрипы, индуцированные вирусной инфекцией // Consilium medicum (приложение). -2001. - С. 9-13.

4. Кузьменко Л.Г. Значение внутриклеточных патогенов в формировании хронических бронхолегочных заболеваний // Детские инфекции. - 2003. - № 1. - С. 54-57.

5. www.biochemmack.ru

6. Human herpesvirus 8 viral FLICEinhibitory protein inhibits Fasmediated apoptosis through binding and prevention of procaspase 8 maturation / C. Belanger et al. // J. Hum. Virol. - 2001. - V. 4, № 2. - P. 62-73.

7. Johnston S.L. Viruses and asthma // Allergy. - 1998. - V. 53. -P. 922-932.

8. Катосова Л.К. Условно-патогенная флора дыхательных путей и ее роль в этиологии пневмоний / Под ред. В.К. Таточенко. -Чебоксары, 1994. - 323 с.

9. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. Под редакцией Быкова А.С., Воробьева А.А., Зверева В.В. -2е изд. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2008. - С. 201-254.

10. Рабсон А., Ройт А., Делвз П. Основы иммунологии. - М.: Мир, 2006. - 320 с.

11. Растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы при социально-значимых заболеваниях. Сообщение II. Исследование их роли при вирусных инфекциях / В.В. Новиков, И.В. Евсегнеева, А.В. Караулов, А.Ю. Барышников // Росс. биотерапевтический журнал. - 2005. - № 3. - С. 131 — 142.

12. Система FAS - FASL в норме и патологии / С Г. Аббасова, В.М. Липкин, Н.Н. Трапезников, Н.Е. Кушлинский // Вопр. биол., мед., фарм. химии. - 1999. - № 3. - С. 3-17.

13.Апоптоз в иммунологических процессах / Р.И. Сепиашвили и др. // Аллергология и иммунология. - 2000. - Т. 1, № 1. -С. 15-23.

14.Апоптоз и активность рибосомальных цистронов клеток периферической крови при бронхиальной астме / В.И. Минеев, И.И. Нестерович, Е.С. Оранская, А.Л. Тафеев // Аллергология. - 2001. - № 1. - С. 3-9.

15. Спонтанный и глюкокортикоидиндуцированный апоптоз лимфоцитов больных атопической бронхиальной астмой: роль митохондрий и CD95 (APO1) / С.В. Бойчук, И.Г. Мустафин, Р.С. Фассахов, Д.В. Терещенко // Аллергология. - 2002. -№ 1. - С. 13-20.

16. Ежегодный доклад «О положении детей в Российской Федерации в 2009 году». - М., 2010 г. - 31 с.

Смешанная Коксаки В — герпесвирусная инфекция у детей в возрастном аспекте

В. К. Слободенюк1, И. К. Бессергенева1, Н. В. Пацук1, М. А. Бубеншикова3, А. В. Слободенюк2, Ю. В. Григорьева2

ФБУН Екатеринбургский НИИ вирусных инфекций Роспотребнадзора1,

ГБОУ ВПО Уральская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития России2, ООО «Урал — Лазер»3, Екатеринбург

Представлены результаты серологической детекции антител к вирусам Коксаки В, цитомегаловирусу, вирусу Эпштейна-Барр и вирусам простого герпеса типа 1 и 2 в сыворотках крови 3946 предположительно иммунокомпрометированных детей в возрасте от 2 до 14 лет. Антитела к вирусам Коксаки В определены в 824 случаях, из них в ассоциации с антителами к вирусам из группы герпеса в 464 образцах. На фоне Коксаки В инфицирования у детей до 3 лет выявляли преимущественно антитела к цитомегаловирусу. В сыворотках 2-3-летних детей чаще находили ассоциации, включающие антитела к Эпштейна-Барр вирусу (42,8%). Среди детей в возрасте 3-6 лет - в 53,6%. Группа детей 7-14 лет отличалась меньшим числом случаев выявления антител к Эпштейна-Барр вирусу и ростом частоты ассоциированных антител к вирусам простого герпеса типа 1 и 2. Ключевые слова: серодиагностика, Коксаки В вирусы, герпесвирусы, смешанное инфицирование, дети

Mixed Coxsackie B — Herpes Virus Infection in Children of Different Age Groups

V. K. Slobodenyuk, I. K. Bessergeneva, N. V. Patsuk, M. A. Bubenshikova2, A. V. Slobodenyuk1, Yu. V. Grigorieva1

Yekaterinburg Research Institute of Viral Infections1, Ural State Medical Academy2, «Ural - Laser Ltd.»3, Yekaterinburg

This work presents the results of detection of antibodies to Coxsackie B virus, cytomegalovirus, Epstein-Barr virus and herpes simplex viruses 1 and 2 in sera of 3,946 presumably immunocompromised children aged from 2 to 14. Antibodies to Coxsackie B virus were identified in 824 cases including 464 samples associated with antibodies to viruses from the herpes simplex group. In children under 3, antibodies to cytomegalovirus were predominantly detected on the Coxsackie B background. Virus-specific IgM antibodies to cytomegalovirus were found in 9,6% cases in children under 1, in 13,5% cases in children aged 1 to 2, and in

20,4% cases in those aged from 2 to 3 years old. Associations with antibodies to Epstein-Barr virus in the sera of children aged from 2 to 3 were found in the 1,8-fold number of cases compared with the previous age group. The proportion of such associations as related to the total number of the cases detected was 42,8%. In the 3—6 age group, this proportion increased to 53,6% cases. The 7—14 age group was notable for a smaller number of Epstein-Barr virus detections as well as for an increase in associated antibodies to herpes 1 and 2 simplex viruses. Low titres of antibodies to Chlamydia antigens were detected. Rare presence of antibodies to Mycoplasma hominis in association with Coxsackie B antibodies was identified in all the age groups. Key words: serodiagnosis, Coxsackie B viruses, herpes viruses, mixed infection, children

Контактная информация: Слободенюк Валентина Константиновна — к.м.н., доц., руководитель лаборатории энтеральных вирусных инфекций Екатеринбургского НИИ вирусных инфекций; Екатеринбург, ул. Летняя, 23; (343) 261-96-15; virus@etel.ru.

УДК 616.9:578.825.11

Энтеровирусы, наряду с представителями вирусов группы герпеса, занимают особое место среди причин инфекционной заболеваемости у детей, в том числе с летальным исходом [1—3]. При вирусологических исследованиях в случаях гибели плодов выявляли смешанное инфицирование вирусами из группы герпеса и Коксаки [4]. Не исключается также, что энтеровирусы могут являться одним из кофакторов смешанной внутриутробной инфекции у плодов [5]. При изучении последствий внутриутробного инфицирования различными возбудителями, включая Коксаки и герпесвирусы, у клинически здоровых детей в ранний нео-натальный период, заболевания проявлялись позднее в форме как соматической, так и инфекционной патологии. Высокая частота неврологических нарушений и многократных респираторных заболеваний отмечена при инфицировании цитомегаловирусом [6]. В случаях пневмоний у детей проведенные серодиагностические исследования с определением вирусспецифических 1дМ против Коксаки В, цитоме-галовируса и вируса Эпштейна—Барр показали положительные результаты ко всем перечисленным возбудителям, но с трехкратным превышением случаев определения 1дМ к вирусам Коксаки В по сравнению с герпесвирусами [7].

Полиморфизм симптоматики характерен при герпесви-русных поражениях. В отношении Коксаки В вирусов доказательства полиморфизма и персистенции получены в последние десятилетия. Найдена связь вирусов Коксаки В с врожденными миопатиями, миокардитами, диабетом 1 типа [8—10]. Определены патогенетические значения отдельных серотипов. Серотип Коксаки В3 считают доминирующим этиологическим агентом при воспалении и поражении сердечной мышцы [8]. Установлена способность вируса Коксаки В3 персистировать в ЦНС в качестве низкоуровневой нецитолитической инфекции, вызывающей длительные воспалительные поражения [11].

Учитывая возможность взаимосвязи в случаях смешанного инфицирования между названными патогенами, целью настоящей работы явилось проведение серодиагностических исследований с определением антител у иммунокомпроме-тированных детей к вирусам Коксаки В и наиболее вероятным возбудителям из группы вирусов герпеса, хламидий и микоплазм.

Материалы и методы исследования

Инфицирование патогенами устанавливали методом детекции антигенспецифических антител в сыворотках крови детей в возрасте от 2 месяцев до 14 лет. Случайная выборка детей включала 3946 случаев предположительно им-мунокомпрометированных детей, наблюдаемых амбулаторно или в соматическом стационаре, обследованных с целью выявления антител к различным ДНК-содержащим возбудителям. Исследования дополняли, определяя антитела к вирусам Кок-саки В. Забор сывороток крови проводили с января по сентябрь 2008 года в количестве не менее 340 проб в месяц.

Антитела к ДНК-содержащим патогенам выявляли, применяя тест-системы иммуноферментные ГНЦ «Вектор» для идентификации антигенспецифических иммуноглобулинов различных классов к цитомегаловирусу (ЦМВ), вирусу Эпштейна—Барр (ЭБВ) и вирусу простого герпеса типа 1 и 2 (ВПГ). К микроорганизмам из группы хламидий (Chlamy-dophila pneumonia и Chlamydophila psittaci) определяли IgM, к микоплазме (Mycoplasma hominis) — IgG.

Группоспецифические антитела к вирусам Коксаки В, учитываемые в диагностическом титре, определяли в тест-системе (усовершенствованный «Диагностикум эрит-роцитарный Коксаки В группоспецифический для РНГА», № гос. регистрации 94/161/329). Использование в тест-системе термостабильного антигена вируса Коксаки В3 позволяло придать широкую реактивность с антителами, в том числе индуцированными другими серотипами [12].

Одну и ту же сыворотку крови ребенка использовали для выявления антител ко всем перечисленным патогенам. Результаты исследований сравнивали в следующих возрастных группах: до 1 года, от 1 до 2, от 2 до 3, от 3 до 6 и от 7 до 14 лет.

Результаты и их обсуждение

При исследовании 3946 сывороток крови детей антитела к вирусами Коксаки В идентифицировали в 824 случаях (20,9%), из них одновременное присутствие антител к возбудителям из группы герпеса выявлено в 464 образцах (56,5%).

Характер клинического проявления инфицирования Коксаки В вирусами среди обследованных детей не был связан со случаями серозного менингита — регистрируемой манифестной формы инфекции, обусловленной энте-ровирусами. Исключение проводили, используя информацию о госпитализированных детях с клиникой серозного менингита. За время наблюдения на месяцы сезонного подъема (июль — август) приходилось 76,8% случаев серозного менингита. В наших исследованиях выявленные случаи инфицирования вирусами Коксаки В имели другое количественное распределение. Наиболее высокие показатели, определяемые к числу обследованных детей по месяцам, имели место в феврале (27,4%), июле (28,1%) и августе (25,0%), а наименьшие — в январе (16,3%) и мае месяце (13,8%). По аналогии с полиомиелитом, наличие антител к вирусам Коксаки В без проявления манифестной формы свидетельствовало о вероятности другой, возможно персистентной формы инфицирования, связанной с размножением вируса в доступных органах-мишенях.

Различия в показателях инфицирования по возрастным группам обследованных детей представлены в таблице 1. Антитела к вирусами Коксаки В в сыворотках детей от 1 года до 7 лет находили в наибольшем числе случаев по сравнению как с младшей, так и старшей возрастными группами (p < 0,001). На фоне Коксаки В инфекции пока-

Таблица 1. Определение антител у иммунокомпрометированных детей разных возрастных групп к вирусам Коксаки В и герпесвирусам

Возрастные группы

До 1 года

Выявление антител к вирусам Коксаки В*

100/14,0% 150/25,9% 151/23,3% 317/21,9% 106/18,9%

Ассоциации с антителами к герпесвирусам*

55/55,0% 70/46,6% 63/41,7% 151/47,6% 30/28,3%

* — числитель — абсолютное число случаев, знаменатель —% к общему числу случаев выявления антител в группе

затели сочетанного инфицирования смещались в младшую возрастную группу, продолжая оставаться высокими в старших возрастах.

Спектр типов антител, выявленных к герпесвирусным антигенам в ассоциации с антителами к вирусам Коксаки В, существенно различался по возрастам. Частота случаев определения ассоциированных антител к исследуемым вирусам до трехлетнего возраста детей представлена в таблице 2.

Полученные результаты показали, что в данных возрастных группах смешанное инфицирование было обусловлено преимущественно Коксаки В и цитомегалови-русом. При этом наибольшее число серопозитивных случаев определяли среди детей до 1 года. В двух других группах количественные показатели незначительно уменьшались.

Выделение из общего числа исследованных сывороток случаев определения антител 1дМ класса к цитомегало-вирусу, которые свидетельствовали об активности инфекционного процесса, распределение микст-инфекции у детей по возрастам до 3 лет имело другую последовательность. На активную фазу инфицирования цитомегаловирусом в группе детей до 1 года приходилось 9,6%; от 1до 2 лет — 13,5%; от 2 до 3 лет — 20,4% выявленных случаев.

Динамика такого распределения антител 1дМ класса позволяет выделить детей от 2 до 3 лет в группу наибольшего риска сочетанного Коксаки В — цитомегаловирусного инфицирования.

Антитела к вирусам Коксаки В и Эпштейна—Барр среди детей до 1 года были идентифицированы в двух случаях, в одном из них в сочетании с активной цитомегаловирусной инфекцией (антитела к ЦМВ — 1дМ класса).

В группе детей до 2 лет выявленные антитела к вирусу Эпштейна—Барр составляли 22,9% от всех случаев смешанного инфицирования, увеличиваясь в следующей возрастной группе в 1,8 раза. Находили также тройные ассоциации в составе антител к вирусам Коксаки В + ЦМВ + + ВПГ или + ЭБВ. Преимущественное присутствие антител к вирусу Эпштейна—Барр с возрастом увеличивалось.

Дальнейшие изменения в соотношении выявленных антител к исследуемым антигенам вирусов представлены на рисунке 1. Полученные результаты, с учетом всех ассоциаций, демонстрируют увеличение случаев определения антител к вирусу Эпштейна—Барр до 53,6%. Вместе с тем, ассоциации, включающие антитела к вирусам Коксаки В и цитомегаловирусу, в рассматриваемой группе обнаруживали значительно реже, чем в младших возрастных группах. Антитела класса 1дМ (УСА — 1дМ), являющиеся маркером

активности Эпштейна—Барр инфекции, в этой группе выявлялись у 4 детей, IgM к цитомегаловирусу в 5 случаях.

Среди детей 7—14 лет сочетанное инфицирование отличалось уменьшением доли выявленных антител к вирусу Эпштейна—Барр и ростом антител к вирусу простого герпеса. В 9 из 30 случаев определяли антитела (IgG) к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов. Найденное соотношение антител к ВПГ относительно общего числа смешанного инфицирования является наибольшим по сравнению с другими группами.

В наших исследованиях IgM антитела к Chlamydophila pneumonia и Chlamydophila psittaci определяли в низком титре — 1 : 10. Антитела к вирусу Коксаки В в ассоциации с Mycoplasma hominis идентифицировали в единичных случаях во всех возрастных группах.

Заключение

Используемые методы серодиагностики позволили установить инфицирование вирусами Коксаки В предположительно иммунокомпрометированных детей. В значительной части случаев антитела к вирусам Коксаки В выявляли в ассоциации с антителами к цитомегаловирусу и вирусу Эпштейна—Барр, реже к вирусу простого герпеса типа 1 и 2. Множественность случаев индикации смешанных антител к Коксаки В—герпесвирусам, в том числе подтверждающих активную фазу инфицирования цитомегало-вирусом и/или вирусом Эпштейна—Барр, позволяет предполагать у таких детей наличие сочетанной инфекции с последствиями длительных воспалительных поражений различных органов и систем. Проведение дифференциальной серодиагностики у иммунокомпрометированных детей с широким спектром определяемых антител к различным патоге-

Антитела к вирусам Коксаки В, n = 151

\ \ \

+ ЦМВ

+ ЦМВ + ВПГ

Рисунок 1. Коксаки В и герпесвирусное инфицирование в группе иммунокомпрометированных детей 3—6 лет

Таблица 2. Спектр выявленных антител у детей младших возрастных групп

* — числитель — абсолютное число случаев, знаменатель — % к общему числу случаев выявленных антител в группе

нам дает возможность оценить индивидуальный характер патологического процесса и выбрать стратегию лечения.

Литература:

1. Лозовская Л.С. Значение вертикальной передачи энтеровиру-сов группы Коксаки в этиологии врожденных иммунодефицит-ных состояний / Л.С. Лозовская, С.М. Осипов, И.В. Зубкова // Вопр. вирусол. — 1997. — 42, № 4. — С. 175—179.

2. Когут Е.П. Значение вертикальной передачи кардиотропных эн-теровирусов и хронической формы Коксаки вирусной инфекции в этиологии ревмокардита и неревматического кардита: Автореф. дисс. ... д.м.н. — М., 1998. — 41 с.

3. Enterovirus Surveillance / N. Khetsuriani, A. LaMonte-Fowlkes, S.M. Oberste, M.A. Pallansch // United States, 1970—2005, MMWR, CDC. — 2006. — 55, № 8. — P. 1—20.

4. Владимирова Н.Ю. Эпидемиологические аспекты репродуктивных потерь / Н.Ю. Владимирова, Е.Б. Наговицина, А Л. Сятков-ская // Проблемы репродукции. — 2001. — 7, № 3. — С. 54—57.

5. Вирусная инфекция среди причин мертворождения по материалам аутопсии и вирусологических исследований / Л.Л. Нисевич и др. // Детские инфекции. — 2011. — 10, № 2. — С. 8—14.

6. Инфекционный процесс / Н.П. Чеснокова и др. — М. «Академия естествознания», 2006. — 486 с.

7. Метод и анализ трех вирусных возбудителей пневмонии у детей / Wu Min, Wang Zicai, Gu Bin, Ye Yu-bing // J. Appl. Clin. Pediat. — 2005. — 20, № 7. — Р. 677—678.

8. Наговицина Е.Б. Значение внутриутробной вирусной инфекции в этиологии врожденных пороков сердца и других кардиопатий у новорожденных детей: Автореф. дисс. ... к.м.н. — Владивосток, 2001. — 25 с.

9. Esfandiarei M. Molecular Biology and Pathogenesis of Viral Myocarditis / M. Esfandiarei, McManus // Annu. Rev. Pahol. Mech. Dis. — 2008. — № 3. — P. 127—155.

10. Enterovirus RNA sequences in sera of schoolchildren in the general population and their association with type 1 — diabetes-associated autoantibodies / V. Moya-Suri et al. // J. Med. Microbiol. — 2005. — V. 54. — P. 879—883.

11. Viral Persistence and Chronic Immunopathology in Adult Central Nervous System following Coxsackievirus Infection during the Neonatal Period / R. Feuer et al. // Journal of Virology. — 2009. — 83, № 18. — P. 9356—9369.

12. Enterovirus infectious as a risk factor for type 1 diabetes: virus analyses in a dietary intervention trial / K. Sadeharju et al. // Clin. Exp. Immunol. — 2003. — 132, № 2. — P. 271—277.

Ассоциации антител к исследуемым антигенам Возраст детей

до 1 года

Коксаки В + ЦМВ 49/89,1%* 48/68,5% 28/44,4%

Коксаки В + ЦМВ + ВПГ 1/1,8% 4/5,7% 6/9,5%

Коксаки В + ЦМВ + ЭБВ 2/3,6% 7/10,0% 15/23,8%

Коксаки В + ВПГ 3/5,5% 2/2,8% 2/3,2%

Коксаки В + ЭБВ 0 9/12,9% 11/17,5%

Коксаки В + ЭБВ + ВПГ 0 0 1/1,6%

Микробицидная активность нейтрофильных лейкоцитов в крови и цереброспинальной жидкости детей, больных гнойными и серозными менингитами

В. П. Молочный, О. Н. Солодовникова

ГБОУ ВПО Дальневосточный государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России, Хабаровск

В статье представлены результаты исследования микробицидной активности нейтрофильных лейкоцитов в крови и цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) детей, больных нейроинфекциями в острый период заболевания. Выявлены особенности изменения активности миелопероксидазы, цитохромоксидазы и кислой фосфатазы в крови и ЦСЖ у больных с гнойными менингитами в острый период болезни по сравнению с показателями изучаемых ферментов у больных серозными менингитами и здоровыми детьми.

Ключевые слова: дети, менингит, нейтрофильные лейкоциты

Microbicidal Activity of Neutrophil Leukocytes in Blood and Cerebrospinal Fluid of Children with Purulent and Serous Meningitis

V. P. Molochny, O. N. Solodovnikova

Far East State Medical University, Khabarovsk

The article presents the results of study of microbicidis activity of neutrophil leukocytes in blood and cerebrospinal fluid of the children with neuroinfection in its acute period. The peculiarities of changes in activity of myeloperoxydase, citochromoxydase and acid phosphotase in blood and cerebrospinal fluid in children with pu-