СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО АДАПТОГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ
METHOD OF OBTAINING MEDICATION, POSSESSING ADAPTOGENIC ACTIVITY

Изобретение относится к фармации и касается способа получения средства из растительного сбора, обладающего адаптогенной активностью.
Известные и популярные адаптогены растительного и животного происхождения (настойка плодов лимонника, заманихи, аралии, корня женьшеня, экстракт левзеи, родиолы розовой, элеутерококка, пантокрин, рантакрин, и др.) обладают способностью вводить организм в состояние неспецифически повышенной сопротивляемости путем регуляции течения стрессорных реакций, повышения резистентности клеток и организма в повреждающему действию вредных факторов [К.В.Яременко. Учение Н.В.Лазарева о СНПС и адаптогенах как базовая теория профилактической медицины. // Психофармакология и биологическая наркология. 2005. Т.5. №4. С.1086-1092]. Несмотря на увеличивающийся арсенал новых адаптогенов, разработка и внедрение новых средств с адаптогенной активностью из широкораспространенного и доступного растительного сырья остается актуальной задачей практической фармации.
В связи с вышеизложенным, на основе изучения литературных данных о химическом составе, фармакологических свойствах отдельных растений разработана рецептура растительной композиции, состоящей из 4-х растений. Задача, на решение которой направлено заявляемое изобретение, заключается в создании лекарственного средства, обладающего адаптогенной активностью и представляющего собой 40%-ный спиртовый экстракт, полученный из измельченной растительной смеси следующего состава (мас. ч.):
семена кардамона настоящего
34,0
древесина караганы гривастой
24,0
корневища девясила высокого
23,0
корневища имбиря обыкновенного
19,0
Для приготовления предлагаемого средства 34,0 г семян кардамона, 24,0 г караганы гривастой, 23,0 г корневищ девясила высокого, 19,0 г корневищ имбиря измельченных до размера частиц 0,5-2,0 мм, смешивают, экстрагируют при комнатной температуре 40% спиртом этиловым при соотношении сырье:экстрагент 1:10 в течение 72 ч (3 суток), затем экстракцию повторяют в тех же условиях в течение 24 ч, извлечения фильтруют, сепарируют для очистки от балластных веществ.
Приведенные в тексте данные экспериментальных испытаний позволяют сделать заключение о соответствии предлагаемого средства критерию «существенные отличия», т.к. подобного состава композиции не было обнаружено в доступных литературных источниках, а предложенные в формуле изобретения состав и соотношение ингредиентов средства позволяют получать продукт с постоянным составом биологически активных веществ (БАВ), обладающих адаптогенной активностью. Технический результат, получаемый при осуществлении изобретения, выражается в расширении ассортимента высокоэффективных и безвредных лекарственных средств для повышения резистентности организма при повышенной физической и умственной нагрузке.
Для доказательства существенности предложенных признаков способа, а именно, концентрации экстрагента, соотношения сырье:экстрагент, времени экстракции были проведены серии экспериментов, данные которых представлены ниже.
Для опытов использовано сырье, качество которого соответствует действующим статьям ГФ XI изд. [Государственная фармакопея СССР: Вып.1. Общие методы анализа. МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина. - 1987. - 337 с.; Вып.2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье. МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина. - 1990. - 400 с.] и соответствующих ГОСТов [ГОСТ 29046-91. Пряности. Имбирь. ТУ; ГОСТ 29052-91. Пряности. Кардамон. ТУ]. Сырье измельчали по отдельности, согласно требованиям соответствующих ГОСТов и ГФ Х изд. [Государственная фармакопея СССР. Х изд. - М., 1968. Статья 349 «Настои и отвары». С.370-372]: корневища девясила высокого и древесину караганы гривастой - до размера частиц 0,5-2,0 мм; корневища имбиря - до 0,5 мм, семена кардамона - до 0,5 мм. В качестве сырья использованы готовые сухие порошки пищевых пряностей: имбирь молотый, кардамон молотый (производитель ООО «Новосибирский пищевой комбинат»), свежие корневища имбиря. Количественное определение сухого остатка, действующих веществ в экстракте проведено по описанным в литературе методам: полифенолов (дубильных веществ), водорастворимых полисахаридов по методикам ГФ XI изд.; аскорбиновой кислоты - фотоколориметрическим методом [Е.А.Приступа, Д.М.Попов. Совершенствование технологии приготовления и контроля качества витаминных чаев. / Актуальные проблемы фармацевтической технологии: Научн. труды ВНИИФ. - Т.32. - М., 1997. - С.151-159]. Действующими веществами семян кардамона настоящего [Формазюк В.И. Энциклопедия пищевых лекарственных растений: Культурные и дикорастущие растения в практической медицине. - К.: Изд-во А.С.К., 2003. - 792 с.], корневищ имбиря обыкновенного [Badreldin H.Ali, G. Blunden, M.O. Tanira, A. Nemmar. Some phytochemical, pharmacological and toxicological properties of ginger (Zingiber officinale Roscoe): A review of recent research. // Food and Chemical Toxicology. 2008. V.43. P.409-420], корневищ девясила высокого [Беляков К.В. Применение физико-химических методов анализа в контроле качества и стандартизации сырья девясила высокого, мать-и-мачехи обыкновенной, одуванчика лекарственного. // Автореф. дисс.… канд. фарм.наук. - М. 1999. - 23 с.; Konishi Т., Shimada Y., Nagao Т., Okabe N., Konoshima T. Antiproliferative sesquiterpene lactones from the roots of Inula helenium. // Biol. Pharm. Bull. 2002. V.25. No 10. P.1370-1372] являются эфирные масла. При определении экстрактивных веществ эфирные масла улетучиваются в ходе высушивания аналитической пробы. Поскольку количественное содержание эфирных масел в спиртовых извлечениях оценить затруднительно, выход биологически активных веществ контролировали по содержанию полифенолов в пересчете на таннин. Результаты опытов по подбору параметров экстракции приведены в табл.1.
Таблица 1
Подбор параметров экстракции исходной растительной смеси
Испытуемый параметр
Выход экстрактивных веществ, %
Выход полифенолов, %
1. Концентрация экстрагента
20% этанол
15,26
2,32
40% этанол
14,54
2,63
50% этанол
14,86
2,60
60% этанол
13,34
2,54
70% этанол
13,15
2,01
80% этанол
12,06
1,80
96% этанол
9,35
1,55
2. Соотношение сырье:экстрагент
1:8
11,50
2,05
1:10
14,42
2,63
1:12
14,65
2,69
1:15
16,14
2,74
1:20
18,47
2,98
1:25
21,02
3,15
3. Время и кратность настаивания
I контакт фаз, время настивания, ч
24
14,42
2,56
48
15,37
2,63
72
18,23
2,83
96
17,28
2,88
II контакт фаз
24
13,54
0,91
48
13,32
0,92
72
13,45
0,88
96
13,65
0,85
III контакт фаз
24
5,79
0,24
48
5,85
0,24
72
5,80
0,27
IV контакт фаз
24
3,7
0,09
48
3,3
0,12
72
3,5
0,08
При экстракции растительной смеси 40-50% этанолом извлекается достаточное количество экстрактивных и полифенольных веществ, и в качестве оптимального экстрагента для получения адаптогенного средства выбран 40% этанол. При увеличении объема экстрагента на 50% (соотношение сырье:экстрагент 1:15) выход экстрактивных веществ повышается всего на 11,9%, полифенолов - на 4,1%, что свидетельствует о нецелесообразности увеличения соотношения сырье:экстрагент выше 1:10. При настаивании адаптогенного средства в течение 72 ч (I экстракция) при соотношении сырье:экстрагент 1:10 наблюдается достижение равновесной концентрации экстрактивных веществ и полифенолов. При второй экстракции равновесная концентрация достигается в течение 24 ч. При двукратной экстракции сырья в течение 72 ч и 24 ч выход экстрактивных веществ и полифенолов составляет 77% и 91% от исходного содержания в сырье соответственно. При третьей и четвертой экстракции выход полифенолов составляет 5,8% и 2% соответственно. Таким образом, наиболее оптимальными условиями для получения спиртового экстракта из исходной смеси являются 40% спирт этиловый, соотношение сырье:экстрагент 1:10, время первой экстракции - 72 ч, второй - 24 ч.
Пример 1. Измельченные до размера частиц 0,5-2,0 мм и просеянные древесину караганы гривастой, освобожденной от коры - 24,0 г; корневища девясила высокого - 23.0 г; смешивают с порошком кардамона молотого - 34,0 г; порошком имбиря молотого - 19,0 г, экстрагируют 1000 мл 40% спирта этилового при комнатной температуре в течение 72 ч при периодическом перемешивании, извлечение фильтруют в сборник через плотный слой сукна. Получают 800-850 мл извлечения, к шроту приливают 40% спирт этиловый в таком же объеме, настаивают при периодическом перемешивании в течение 24 ч, извлечение фильтруют в сборник. Полученный слив в объеме 750-800 мл объединяют с первым сливом, очищают от растительной пыли сепарированием и отстаивают в течение 2 суток на холоде (температура не выше 10-12°С) для очистки от балластных веществ, выпадающих в осадок при длительном хранении. Получают 1550-1650 мл 40% спиртового экстракта. Содержание сухого остатка полученного экстракта - 18,00±1,50 мг/мл.
Содержание биологически активных веществ в исходной растительной смеси, экстракте водно-спиртовом, шроте приведены в табл.2.
Таблица 2
Содержание биологически активных веществ в исходной растительной смеси, экстракте водно-спиртовом, шроте
Наименование
Содержание биологически активных веществ (в %)
в исходной смеси
в настойке
в шроте
Полифенолы, в пересчете на таннин
1,56±0,07
2,63±0,17
0,47±0,03
Аскорбиновая кислота
5,95±0,15
16,77±0,03
0,70±0,01
Водорастворимые полисахариды
22,5±1,90
-
19,5±1,22
Примечание: прочерк означает, что вещества не обнаружены
Для оценки адаптогенной активности испытуемого средства изучали влияние испытуемого средства на общую физическую, силовую, скоростную выносливости подопытных животных на различных моделях. Предварительно перед экспериментами, с целью исключения влияния спирта этилового, испытуемое средство и препарат сравнения - жидкий экстракт элеутерококка (ВФС 42-1281-82) деалкоголизировали на роторном испарителе при 37°С до 1/10 от исходного объема, полученный водный остаток доводили дистиллированной водой до первоначального объема. Статистическую обработку полученных данных осуществляли общепринятым методом с использованием критерия Манна-Уитни [Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. математическая статистика в клинических исследованиях. М., 2000. - 236 с.]. Различия считали достоверными при вероятности 95% (Р<0,05).
Определение острой токсичности адаптогенного средства. Эксперименты проведены на мышах линии СВА обоего пола массой 18-20 г. Острую токсичность адаптогенного средства определяли с использованием метода Кербера [Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1963. - 148 с.] при его однократном внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении в виде деалкоголизированного водного раствора в дозах от 1,0 - до 395,0 мл/кг массы животного. Конечный вводимый объем животным составлял 1,0 мл/кг. Животные контрольных групп получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. Наблюдение за животными осуществляли в течение 14 дней с момента введения испытуемого средства. В течение всего периода эксперимента наблюдали за общим состоянием и поведением животных, регистрировали видимые признаки интоксикации и количество погибших животных с осмотром внутренних органов и гистологическим исследованием жизненно важных органов при гибели животных.
Установлено, что внутрижелудочное и внутрибрюшинное введение адаптогенного средства в объемах 1,0-395 мл/кг не вызывало гибели животных в течение всего периода наблюдения. У животных, получавших испытуемое средство, не отмечали видимых признаков интоксикации; поведенческие реакции и общее состояние не отличалось от такового у животных контрольной группы; животные опытных групп оставались активными, хорошо принимали корм, стул был нормальным в течение всего периода наблюдения. Полученные данные позволяют отнести адаптогенное средство к группе практически не токсичных веществ по классификации Сидорова К.К. [Сидоров К.К. О классификации токсичности ядов при парентеральных способах введения. // Токсикология новых промышленных химических веществ. - М., 1973. С.47-51].
Изучение влияния адаптогенного средства на общую физическую выносливость подопытных животных.
Эксперименты проведены на мышах линии СВА обоего пола массой 19 - 20 г. Для определения общей физической выносливости использовали общепринятую методику плавания в бассейне с температурой воды 20,0±0,5°С с грузом, составляющим 5% от массы тела в соответствии с методическими рекомендациями, изложенными в руководстве [Определение безопасности и эффективности биологически активных добавок к пище. Методические указания. - М., 1999. - 86 с.]. С целью определения дозозависимого эффекта деалкоголизированный раствор исследуемого средства вводили внутрижелудочно однократно за 1 ч до тестирования в объемах 0,5; 1,0; 3,0; 5,0 и 7,0 мл/кг. При изучении время-зависимого эффекта препарат вводили профилактически однократно в объеме 3,0 мл/кг за 0,5; 1,0; 3,0; 6,0 и 24,0 часа до тестирования. Для исследования зависимости от кратности введения испытуемое средство вводили профилактически в объемах 1,0; 3,0 и 5,0 мл/кг в течение 3-х, 7 и 14 дней 1 раз в день за 30 мин до кормления. Животные контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. В качестве препарата сравнения здесь и далее использовали деалкоголизированный раствор экстракта элеутерококка в объемах 3,0 и 5,0 мл/кг. Общую физическую выносливость животных определяли путем плавания животных до полного утомления, критерием которого служило 10-секундное погружение животного под воду. Полученные данные приведены в табл.3-5.
Как следует из данных, приведенных в таблице 3, однократное введение испытуемого средства белым мышам в объемах 0,5 и 1,0 мл/кг не оказывало существенного влияния на продолжительность плавания животных, тогда как при использовании средства в объеме 3,0 мл/кг г отмечалось повышение общей физической выносливости на 32% по сравнению с данными у мышей контрольной группы. При увеличении объема испытуемого средства отмечалось повышение его адаптогенной активности. Так, при введении в объеме 5,0 мл/кг продолжительность плавания животных опытной группы повышалась в среднем на 45% по сравнению с таковым у мышей контрольной группы. При однократном введении препарата в более высоких дозах (5,0 и 7,0 мл/кг) выявлено аналогичное адаптогенное действие: физическая работоспособность повышалась в среднем на 40-45% по сравнению с данными животных контрольной группы. При этом эффективность испытуемого средства была аналогичной таковой у препарата сравнения - экстракта элеутерококка в аналогичных дозах. Учитывая, что время плавания животных, получавших испытуемое средство в объеме 3,0 мл/кг, статистически не отличалось от такового у мышей, получавших его в объемах 5,0 и 7,0 мл/кг, в дальнейших экспериментах, в качестве экспериментально-терапевтического был использован объем исследуемого средства, соответствующий 3,0 мл/кг.
Таблица 3
Влияние адаптогенного средства на общую физическую выносливость белых мышей в зависимости от вводимого объема
Группы животных
Объем, мл/кг
n
Продолжительность плавания, мин
Контрольная (Н<sub>2</sub>О)
-
12
14,6±1,32
Опытная 1 (испытуемое средство)
0,5
15
14,8±1,35
Опытная 2 (испытуемое средство)
1,0
15
15,5±1,40
Опытная 3 (испытуемое средство)
3,0
15
19,3±1,70<sup>∗</sup>
Опытная 4 (испытуемое средство)
5,0
15
22,2±1,48<sup>∗</sup>
Опытная 5 (испытуемое средство)
7,0
12
20,5±2,08<sup>∗</sup>
Опытная 6 (элеутерококк)
3,0
12
19,8±1,23<sup>∗</sup>
Опытная 7 (элеутерококк)
5,0
8
20,4±2,34<sup>∗</sup>
Примечание: <sup>∗</sup> - здесь и далее значения, достоверно отличающиеся от данных контрольной группы при Р<0,05
Установлено также, что выраженность адаптогенного эффекта испытуемого средства зависит от времени введения (табл.4).
Таблица 4
Влияние адаптогенного средства в объеме 3,0 мл/кг на общую физическую выносливость белых мышей в зависимости от времени введения
Группы животных
Время после введения, ч
n
Продолжительность плавания, мин
Контрольная (Н<sub>2</sub>О)
-
20
15,2±1,38
Опытная 1 (испытуемое средство)
0,5
15
18,9±1,50
Опытная 2 (испытуемое средство)
1,0
15
21,4±1,46<sup>∗</sup>
Опытная 3 (испытуемое средство)
3,0
15
20,3±2,05<sup>∗</sup>
Опытная 4 (испытуемое средство)
6,0
15
19,2±1,23<sup>∗</sup>
Опытная 5 (испытуемое средство)
24,0
15
15,7±1,20
Из данных, приведенных в указанной таблице, следует, что стимулирующий эффект испытуемого препарата проявляется уже через 30 минут после его однократного введения в объеме 3,0 мл/кг: продолжительность плавания белых мышей увеличивалась на 25% по сравнению с контролем (различие не достоверно). Через 1,0 час после введения препарата работоспособность белых мышей повысилась почти на 40% и оставалась на этом уровне еще в течение 3-х часов, после чего адаптогенное действие начинало снижаться: через 6 часов время плавания мышей опытной группы превышало данные в контроле только на 24%, а по прошествии суток с момента введения препарата работоспособность животных опытной группы снижалась до уровня мышей в контроле.
При исследовании зависимости фармакологического эффекта препарата от кратности его введения установлено, что многократное профилактическое его введение белым мышам сопровождается повышением адаптогенной активности (табл.5).
Таблица 5
Влияние адаптогенного средства на общую физическую выносливость белых мышей в зависимости от кратности введения
Группы животных
Объем, мл/кг
n
Продолжительность плавания, мин
при 3-дневном введении
при 7-дневном введении
при 14-дневном введении
Контрольная(Н<sub>2</sub>О)
-
12
16,4±1,53
17,5±1,55
17,2±1,42
Опытная 1 (испытуемое средство)
1,0
15
23,4±2,30<sup>∗</sup>
25,6±1,33<sup>∗</sup>
28,3±2,15<sup>∗</sup>
Опытная 2 (испытуемое средство)
3,0
15
28,0±2,11<sup>∗</sup>
33,8±2,40<sup>∗</sup>
29,4±1,46<sup>∗</sup>
Опытная 3 (испытуемое средство)
5,0
15
29,3±2,52<sup>∗</sup>
30,5±3,02<sup>∗</sup>
31,2±2,58<sup>∗</sup>
Опытная 4 (элеутерококк)
3,0
12
28,6±1,84<sup>∗</sup>
28,5±1,85<sup>∗</sup>
27,6±2,35<sup>∗</sup>
Как следует из приведенной таблицы, наиболее выраженное повышение физической выносливости отмечается при его 7-дневном введении в объемах 3,0 и 5,0 мл/кг: продолжительность плавания мышей указанных опытных групп увеличивается соответственно на 93% и 74% по сравнению с данными животных контрольной группы. Несколько менее выраженное действие препарат оказывал при его введении в течение 3-х дней, а при введении в течение 14 дней его эффективность была аналогичной таковой при введении в течение 7 дней. При этом адаптогенная активность испытуемого средства при многократном введении превосходила таковую у препарата сравнения - экстракта элеутерококка.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что испытуемое средство оказывает стимулирующее действие на общую физическую выносливость, характеризующуюся преобладанием аэробных процессов энергообеспечения тканей. Установлено, что при однократном введении наиболее выраженное адаптогенное действие препарат оказывает в объемах 3,0-5,0 мл/кг при введении за 1,0 часа до исследования; его эффективность повышается при многократном профилактическом введении: наиболее выраженное повышение физической выносливости отмечается при его 7-дневном профилактическом введении в объеме 3,0 мл/кг.
Пример 2. Измельченные до размера частиц 0,5-2,0 мм и просеянные древесину караганы гривастой - 24,0 г; корневища девясила высокого - 23.0 г; семена кардамона - 34,0 г; свежие корневища имбиря с влажностью 84%, разрезанные до размера частиц 0,5 мм - 35,0 г, смешивают, экстрагируют 1000 мл 40% спирта этилового при комнатной температуре в течение 72 ч при периодическом перемешивании, извлечение фильтруют в сборник через плотный слой сукна. Получают 880 мл извлечения, к шроту приливают спирт этиловый в таком же объеме, настаивают при периодическом перемешивании в течение 24 ч, извлечение фильтруют в сборник. Полученный слив в объеме 850 мл объединяют с первым сливом, очищают от растительной пыли сепарированием и отстаивают в течение 2 суток на холоде (температура не выше 10-12°С) для очистки от балластных веществ, выпадающих в осадок при длительном хранении. Получают 1730 мл 40% спиртового экстракта. Содержание сухого остатка полученного экстракта водно-спиртового - 14,54±1,20 мг/мл.
Изучение влияния адаптогенного средства на скоростную выносливость подопытных животных.
Эксперименты проведены на мышах линии СВА обоего пола массой 18-20 г. Влияние испытуемого средства на скоростную физическую выносливость определяли по продолжительности бега животных на 10-дорожечном третбане при скорости движения полотна третбана 40 м/мин [Определение безопасности и эффективности биологически активных добавок к пище. Методические указания. - М., 1999. - 86 с.]. Исследуемое средство вводили внутрижелудочно в объеме 3,0 мл/кг однократно за 1 ч до тестирования, а также профилактически, многократно, в течение 7 дней в указанном объеме 1 раз в день за 30 мин до кормления. Животным контрольной группы внутрижелудочно вводили аналогичный объем дистиллированной воды. В качестве препарата сравнения использовали деалкоголизированный раствор экстракта элеутерококка в объеме 3,0 мл/кг. Скоростную физическую выносливость оценивали по продолжительности бега животных до полного утомления, критерием которого служило 10-секундное нахождение животного на электрической сетке третбана под напряжением 70 В. Полученные данные приведены в таблице 6.
Таблица 6
Влияние адаптогенного средства на скоростную физическую выносливость белых мышей
Группы животных
n
Продолжительность бега, с
при однократном введении
при 7-дневном введении
Контрольная (Н<sub>2</sub>О)
10
210,3±15,6
218,5±23,6
Опытная 1 (испытуемое средство)
12
226,5±19,3
296,0±29,4<sup>∗</sup>
Опытная 2 (элеутерококк)
12
218,0±23,5
268,3±25,5<sup>∗</sup>
Как следует из данных, приведенных в табл.6, однократное введение данного средства в указанном объеме, а также препарата сравнения не оказывало значительного влияния на скоростную физическую выносливость белых мышей, продолжительность бега животных опытной группы статистически не отличалась от таковой у животных контрольной группы (р≥0,05).
Установлено, что многократное профилактическое введение испытуемого средства в течение 7 дней сопровождалось существенным повышением скоростной выносливости, о чем свидетельствовало увеличение продолжительности бега животных опытной группы на 35% по сравнению с данными мышей контрольной группы. При этом эффективность испытуемого средства превосходила таковую у экстракта элеутерококка. Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что испытуемый препарат в объеме 3,0 мл/кг повышает скоростную физическую выносливость, характеризующуюся преобладанием анаэробных процессов в тканях только при многократном введении.
Изучено влияние адаптогенного средства на скоростную выносливость на фоне дозированных физических нагрузок. Эксперименты проведены на мышах линии СВА обоего пола массой 18-20 г. Предварительную дозированную физическую нагрузку осуществляли с помощью принудительного бега животных в третбане при скорости движения ленты 28 м/мин в течение 5 мин. Животных, получивших предварительную физическую нагрузку, распределяли на 2 подгруппы. В первой подгруппе мыши подвергались однократной физической нагрузке в течение 5 минут. После этого животным внутрижелудочно вводили испытуемое средство в объеме 3,0 мл/кг и через 1 час определяли скоростную физическую выносливость с помощью метода, описанного в предыдущем примере. Животные второй подгруппы ежедневно получали дозированную физическую нагрузку в течение 7 дней. В первый день длительность бега составляла 5 мин, в последующие дни продолжительность нагрузки последовательно увеличивали на 1 мин. Сразу за проведением нагрузки мышам вводили испытуемое средство в объеме 3,0 мл/кг. Животным контрольной группы вводили дистиллированную воду в аналогичном объеме. На 7 день, через 1 ч после последнего введения указанного средства, определяли скоростную выносливость по продолжительности бега в третбане до полного утомления. Полученные данные приведены в табл.7.
Таблица 7
Влияние адаптогенного средства на скоростную выносливость белых мышей на фоне предварительных физических нагрузок
Группы животных
Продолжительность бега, с
при однократной нагрузке
при 7-дневной нагрузке
Интактная (n=8)
248,5±23,4<sup>∗</sup>
248,5±23,4
Контрольная (Н<sub>2</sub>О), (n=15)
153,3±14,5
294,0±26,5
Опытная (испытуемое средство), (n=15)
235,7±22,6<sup>∗</sup>
496,0±28,2<sup>∗</sup>
Данные, приведенные в таблице 7, свидетельствуют, что однократная дозированная нагрузка вызывает снижение работоспособности у мышей контрольной группы, на что указывает существенное уменьшение продолжительности бега животных этой группы - в среднем на 40% по сравнению с данными интактных мышей). Однократное введение указанного средства в объеме 3,0 мл/кг на фоне однократной дозированной нагрузки оказывало протекторное действие, предотвращая снижение физической работоспособности мышей опытной группы. Так, у мышей, получавших испытуемое средство, продолжительность бега статистически не отличалась от таковой у интактных животных.
Во второй серии экспериментов было установлено, что у животных контрольной группы, подвергавшихся предварительным (7-дневным) дозированным физическим нагрузкам, отмечается тенденция к увеличению продолжительности бега в третбане (различие статистически недостоверно). При этом ежедневное введение испытуемого средства на фоне дозированных нагрузок оказывало выраженное стимулирующее действие на скоростную физическую выносливость мышей опытной группы, о чем свидетельствует увеличение продолжительности бега мышей опытной группы в среднем на 70% по сравнению с данными животных контрольной группы (р≤0,01).
Полученные данные свидетельствуют, что введение испытуемого средства в указанном объеме на фоне дозированных физических нагрузок оказывает адаптогенное действие, предотвращая развитие утомления после однократной нагрузки и поддерживая физическую работоспособность мышей на уровне показателей интактных животных. Более выраженное адаптогенное действие испытуемое средство оказывает при многократном введении на фоне ежедневных дозированных физических нагрузок.
Изучение влияния испытуемого средства на силовую выносливость подопытных животных.
Эксперименты проведены на мышах линии СВА обоего пола массой 18-20 г. В опытах использовали модель «виса на шесте». Животным опытной группы внутрижелудочно вводили деалкоголизированный раствор указанного средства в объеме 3,0 мл/кг однократно за 1 ч до тестирования, а также многократно в течение 7 дней в указанном объеме, 1 раз в день за 30 мин до кормления. Животным контрольной группы внутрижелудочно вводили аналогичный объем дистиллированной воды. Влияние испытуемого средства на силовую выносливость определяли по времени «виса животных на шесте» от начала удержания до момента падения. Данные опыта приведены в табл.8.
Таблица 8
Влияние адаптогенного средства на силовую выносливость белых мышей
Группы животных
Продолжительность виса на шесте, мин
при однократном введении
при 7-дневном введении
Контрольная (Н<sub>2</sub>О, n=10)
12,5±1,42
13,0±1,62
Опытная 1 (испытуемое средство, n=15)
16,3±1,35<sup>∗</sup>
20,4±1,45<sup>∗</sup>
Опытная 2 (элеутерококк, n=12)
16,5±1,32<sup>∗</sup>
19,4±1,06<sup>∗</sup>
Как следует из данных, приведенных в таблице 8, при однократном введении данного средства в объеме 3,0 мл/кг время виса мышей опытной группы повышается на 30% по сравнению с таковым у животных контрольной группы. Многократное введение испытуемого средства сопровождается более выраженным повышением силовой выносливости животных, о чем свидетельствует увеличение продолжительности виса мышей опытной группы в среднем на 60% по сравнению с данными у животных контрольной группы. Эффективность испытуемого средства была аналогичной таковой у препарата сравнения.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что испытуемое средство обладает адаптогенной активностью, при этом наиболее выраженную активность проявляло при многократном профилактическом введении в объеме 3,0 мл/кг на фоне ежедневных дозированных физических нагрузок.