ПОВЫШЕНИЕ УРОВНЯ ГИДРАТАЦИИ ОРГАНИЗМА КОШКИ
INCREASING THE LEVEL OF HYDRATION OF A CAT'S ORGANISM

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0001] Домашняя кошка (Felis domesticus) успешно выживает в условиях пустыни и адаптируется к сохранению воды в организме выработкой мочи, которая очень концентрирована по сравнению с мочой большинства других млекопитающих. Однако, выработка высококонцентрированной мочи может оказывать вредное воздействие, такое как усиление развития мочекаменной болезни и других менее хорошо охарактеризованных состояний, как идиопатический цистит кошек. Состояние мочевыводящих путей из-за плохой гидратации организма иногда называют заболеванием нижнего отдела мочевыводящих путей кошек (FLUTD). FLUTD может вызывать у кошек состояние, угрожающее жизни. В частности, проблема, с которой сталкиваются владельцы кошек с FLUTD, заключается в том, что это заболевание становится угрожающим для жизни кошки до того момента времени, когда симптомы становятся заметными владельцу. Кристаллические вещества в виде камней могут оседать в мочевыводящих путях кошки и затруднять их проходимость. Типы камней включают струвит, оксалат кальция, урат, цистин, фосфат кальция и силикат. Камни из струвита и оксалата кальция несомненно являются самыми распространенными у кошек. Если заболевание оставить без лечения, то кошка с «заблокированными» путями умрет, так как моча задерживается и повреждает почки, а токсины накапливаются в крови.
[0002] Если кошку можно побудить больше пить, то это может разбавить мочу и тем самым улучшить состояние мочевыводящей системы, возникшее вследствие низкой гидратации. Такое разбавление действует на двух уровнях: первый, через снижение концентрации электролитов в моче (предполагающий, что кошка не пьет больше, просто для компенсации повышенного содержания солей в пище), и затем через увеличение частоты мочеиспускания и следовательно уменьшение количества времени, проведенного мочой в мочевом пузыре. Обычно кошки пьют только около 30 миллилитров воды на килограмм массы тела в сутки и трудно увеличить самопроизвольное питье. Обеспечение влажной пищей помогает увеличить потребление воды животным, которое не пьет очень много, но этого не достаточно, из-за того что все еще не достаточно воды поглощается или из-за того что происходит недостаточное увеличение диуреза. В дополнение к этому, кошки, у которых проявляется урологический синдром, часто страдают ожирением или имеют избыточный вес. Таким образом, когда необходимо лечить нарушения со стороны мочевыводящих путей, и в особенности FLUTD, предпочтительным может быть обеспечение влажной пищей, но этого не достаточно, т.е. такая пища не обеспечивает достаточной гидратации организма, может не приниматься кошкой или даже может вызывать дополнительный набор веса и/или ожирение, если потребляемое количество плохо контролируется.
[0003] Известно, что некоторые корма для кошек содержат определенные омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты, такие как докозагексаеновая кислота («ДГК») и эйкозапентаеновая кислота («ЭПК»), например, как описано в патенте США 8252742. Известно также, что некоторые корма для кошек содержат как омега-3, так и омега-6 полиненасыщенные кислоты в конкретных количествах и соотношениях, таких как описаны в патенте США 6946488. Тем не менее, в известном уровне техники отсутствует описание какого-либо влияния в рационе таких жирных кислот на гидратацию.
[0004] Вследствие этого, сегодня существует необходимость в способах и композициях для увеличения гидратации организма кошек, которые тем самым приводят к лечению, уменьшению, подавлению или облегчению состояний, таких как FLUTD.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0005] Неожиданно было установлено, что регулирование соотношения определенных омега-3 и омега-6 полиненасыщенных кислот в пище для кошек может приводить к увеличенной гидратации организма кошек, в частности, соотношением арахидоновой кислоты («АК») к ЭПК. Авторами изобретения обнаружено, что большее соотношение АК к ЭПК увеличивает выделение мочи, измеренное методом определения удельного веса мочи, как у молодых, так и зрелых взрослых кошек, без дегидратации животных. Значение осмоляльности крови указывает на то, что у животных увеличилась гидратация, вероятнее всего из-за увеличенного потребления воды.
[0006] Исследованиями авторов измерено влияние рационов, обеспечивавших получение больших соотношений по сравнению с меньшими соотношениями АК : ЭПК, как на удельный вес мочи, так и на относительное перенасыщение мочи (RSS). Большее значение RSS означает, что с большей вероятностью могут образовываться камни (содержится больше растворимых веществ, из которых образуются камни). Удельный вес мочи положительно коррелирует со значением (RSS). Кошки, получающие корма с высоким соотношением АК : ЭПК, имеют меньший удельный вес мочи и имеют лучшее (пониженное) значение RSS, соответствующее сниженному риску образования камней.
[0007] Настоящее изобретение относится к способу повышения уровня гидратации организма кошки, включающему кормление кошки пищей, содержащей арахидоновую кислоту и эйкозапентаеновую кислоту, причем соотношение арахидоновой кислоты к эйкозапентаеновой кислоте составляет 3:1 или более, а количество арахидоновой кислоты составляет от 0,05 до 0,5% сухой массы пищи.
[0008] В другом варианте реализации настоящее изобретение относится к способу лечения у кошки заболевания или патологического состояния, возникающего вследствие низкой гидратации, включающему кормление кошки пищей, содержащей арахидоновую кислоту и эйкозапентаеновую кислоту, причем соотношение арахидоновой кислоты к эйкозапентаеновой кислоте составляет 3:1 или более, а количество арахидоновой кислоты составляет от 0,05 до 0,5% сухой массы.
[0009] В другом варианте реализации настоящее изобретение относится к аппетитной диетически полноценной пищевой композиции для кошек, содержащей арахидоновую кислоту и эйкозапентаеновую кислоту в количестве, эффективном для повышения гидратации организма кошки, причем данная пищевая композиция в сочетании с водой является аппетитной и диетически полноценной, как единственный рацион для кошки, и при этом соотношение на основе сухой массы арахидоновой кислоты к эйкозапентаеновой кислоте составляет 3:1 или более, а соотношение на основе сухой массы омега-6 жирных кислот к омега-3 жирным кислотам в данной композиции составляет от 10:1 до менее 20:1.
[0010] Дополнительные области применения настоящего изобретения будут очевидны из приведенного далее подробного описания. Должно быть понятно, что подробное описание и конкретные примеры, хотя и показывают предпочтительные варианты осуществления изобретения, предназначены только для иллюстрации и не ограничивают объема изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[0011] Настоящее изобретение станет более понятным из подробного описания и сопроводительных графических материалов, на которых показано:
[0012] Фиг. 1 - Распределение числа кошек на единицу удельного веса мочи (см. пример 1). Кошек оценивали по генотипам, которые отличались для высоких значений удельного веса (более 1,054 по сравнению с менее 1,054).
[0013] Фиг. 2 - Гистограмма сравнения удельного веса мочи зрелых кошек, с диетическим питанием, имевшей большее соотношение АК : ЭПК (около 3:1) по сравнению с меньшим соотношением АК : ЭПК (около 0,5:1) (см. пример 2).
[0014] Фиг. 3 - Гистограмма сравнения осмоляльности крови зрелых кошек, с диетическим питанием, имевшей большее соотношение АК : ЭПК (около 3:1) по сравнению с меньшим соотношением АК : ЭПК (около 0,5:1) (см. пример 2).
[0015] Фиг. 4 - Гистограмма сравнения удельного веса мочи молодых кошек, с диетическим питанием, имевшей большее соотношение АК : ЭПК (16:1 и 8:1) по сравнению с меньшим соотношением АК : ЭПК (около 0,4:1) (см. пример 3).
[0016] Фиг. 5 - Гистограмма сравнения осмоляльности крови молодых кошек, с диетическим питанием, имевшей большее соотношение АК : ЭПК (около 16:1 и 8:1) по сравнению с меньшим соотношением АК : ЭПК (около 0,4:1) (см. пример 3).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0017] Следующее описание предпочтительного варианта (вариантов) реализации изобретения носит лишь иллюстративный характер и никоим образом не предназначено для ограничения данного изобретения, его заявки или вариантов применения.
[0018] Во всем тексте настоящей заявки диапазоны используются в качестве сокращенного обозначения для описания каждого значения, которое находится в пределах диапазона. В качестве предельного значения диапазона может быть выбрано любое значение в пределах диапазона. Кроме того, все ссылочные источники, цитируемые в настоящем документе, полностью включены в настоящий документ посредством ссылок. В случае противоречия определений в настоящем описании и в процитированной ссылке следует руководствоваться настоящим описанием. Если не указано иное, следует понимать, что все проценты и количества, приведенные в настоящем документе и в других разделах спецификации, относятся к массовым процентам. Все проценты, выраженные в данном документе, являются массовыми по сухому веществу, если специально не оговорено иное.
[0019] В контексте данного изобретения термин «лечить» или «лечение», как используется в данном документе, означает реверсию, облегчение, смягчение или подавление прогрессирования нарушения или патологического состояния, к которому применяется такой термин, или одного или более симптомов такого нарушения или патологического состояния. При использовании по тексту данного документа и прилагаемой формуле изобретения, слова в единственном числе означают также множественное число, если из контекста явно не следует иное.
[0020] Определение удельного веса мочи представляет собой измерение степени разбавления мочи. Чем больше значение удельного веса мочи, тем более плотной/концентрированной является моча. Нормальный диапазон значений удельного веса мочи для кошек, как правило, составляет между 1,030 и 1,060. Очень низкое значение удельного веса является показателем почечной недостаточности, тогда как высокое значение удельного веса мочи означает, что моча более концентрирована и, поэтому, существует большая вероятность того, что будут оседать камни и вызывать осложнения.
[0021] Удельный вес мочи регулируется комбинацией (а) выработки мочи посредством гломерулярной фильтрации в собирающие протоки почки и (b) резорбции воды из собирающих протоков для возврата в кровоток. Этот процесс частично регулируется эйкозаноидным простагландином Е2 (PGE2). PGE2 связывается с рецепторами простагландина Е на тубулярной клетке почки и посредством активации вторичных мессенджеров, контролирует водные каналы и натриевые каналы, регулирующие баланс воды и ионов натрия в организме.
[0022] Изобретателями с использованием исследования ассоциаций на уровне целого генома между генотипами кошек и индивидуального удельного веса их мочи обнаружен генетический локус, содержащий ген синтазы 3 простагландина Е, ключевого фермента в механизме, который синтезирует PGE2 из АК. Кроме того, было обнаружено, что разные соотношения АК (предшественника PGE2) к ЭПК в рационе кошек коррелируют со значениями удельного веса их мочи. Таким образом, было обнаружено, что контролирование количества АК в рационе может снизить удельный вес мочи у кошек. Было также выявлено, что даже хотя моча более разбавлена у кошек, кормившихся композицией по данному изобретению, значение осмоляльности их крови также уменьшилось, указывая на то, что эти животные пьют больше воды и что их общий водный баланс увеличился, т.е. их организмы стали более гидратированными.
[0023] Высокое значение относительного перенасыщения мочи («RSS») является показателем предрасположенности к образованию мочевых камней, как оксалатных, так и струвитных камней. Было обнаружено, что снижение удельного веса коррелирует со снижением значения RSS. Поэтому, биологическая польза от выработки в организме кошек более гидратированной мочи заключается в снижении риска образования камней.
[0024] В одном варианте реализации изобретения композиции по настоящему изобретению являются диетически полноценными пищевыми композициями для кошек. Диетически полноценная композиция обеспечивает рацион, который включает достаточно питательных веществ для поддержания нормального состояния здоровья здоровой кошки. Диетически полноценная композиция является аппетитной и в сочетании с водой обеспечивает единственный источник всех питательных веществ, необходимых для поддержания нормального состояния здоровья здоровой кошки. Диетически полноценные композиции знакомы специалистам в данной области. К примеру, питательные вещества и ингредиенты, такие как описанные в данном документе, а также другие подходящие для кормовых композиций для животных, и их рекомендованные количества, могут быть найдены, к примеру, в публикации Official Publication of the Associate of American Feed Control Officials («AAFCO»), Inc., Nutrient Requirements of Dogs and Cats, 2006. К примеру, диетически полноценные пищевые продукты могут содержать белки, жиры, углеводы, пищевые волокна, аминокислоты, минералы, витамины и другие ингредиенты в количествах, известных специалистам в данной области.
[0025] Белок может быть получен из различных источников, известных специалистам в этой области техники, в том числе из растительных источников, источников животного происхождения или обоих источников. Источники животного происхождения включают, например, мясо, мясные субпродукты, морепродукты, молочные продукты, яйца и т.д. Мясо включает, например, мясо птицы, рыбы и млекопитающих (например, крупного рогатого скота, свиней, овец, коз и тому подобное). Мясные субпродукты включают, например, легкие, почки, мозг, печень, желудки и кишечники (освобожденные от всего или практически всего их содержимого). Белок может быть цельным, практически полностью гидролизованным или частично гидролизованным. Типичные количества белка в композиции по данному изобретению составляют по меньшей мере около 15% (или от около 15% до около 55%, или от около 30% до около 55%, или от около 33% до около 36%).
[0026] Жир может обеспечиваться любым из множества источников, известных специалистами в данной области, включающих мясо, мясные субпродукты, рыбий жир и масла растений. Источники растительного жира включают пшеницу, льняное семя, рожь, ячмень, рис, сорго, кукурузу, овес, просо, зародыши пшеницы, зародыши кукурузы, соевые бобы, арахис и семя хлопчатника, а также масла, полученные из этих и других растительных источников жира. Композиции по данному изобретению, как правило, содержат по меньшей мере около 9% (или от около 9% до около 35%, или от около 10% до около 25%, или от около 15% до около 22%) общего содержания жира.
[0027] АК может обеспечиваться из множества источников природного происхождения. Печень, например, куриная печень, имеет относительно высокое содержание АК. С другой стороны, рыбий жир содержит относительно большое количество ЭПК, таким образом, предпочтительно не добавлять рыбий жир, чтобы избежать высоких соотношений АК : ЭПК. В дополнение к АК и ЭПК, жирные кислоты, которые могут включаться в качестве части жирового компонента в композиции по настоящему изобретению, содержат другие омега-3 и омега-6 жирные кислоты, такие как ДГК, альфа-линоленовая кислота, гамма-линоленовая кислота, линолевая кислота, октадекатетраеновая кислота (стеаридоновая кислота) или их смеси. Соотношение на основе сухой массы омега-6 и омега-3 жирных кислот в композициях по данному изобретению обычно составляет 10:1 или более, в другом варианте реализации изобретения - по меньшей мере 10:1 или меньше чем 20:1, в другом варианте реализации изобретения - от около 10:1 до 18:1, в другом варианте реализации изобретения - от около 12:1 до 17:1.
[0028] Углеводы могут обеспечиваться любым из множества источников, известных специалистам в данной области, включая овсяные волокна, целлюлозу, арахисовую шелуху, свекольный жом, пропаренный рис, кукурузный крахмал, кукурузную глютеновую муку или любые комбинации этих источников. Виды зерна, обеспечивающие углеводами, включают, но не ограничиваются, пшеницей, кукурузой, ячменем и рисом. Содержание углеводов в пищевых продуктах может определяться любым из множества способов, известных специалистам в данной области. Обычно, процентное содержание углеводов может рассчитываться по содержанию безазотистых экстрактивных веществ («БЭВ»), которое может рассчитываться следующим образом: БЭВ=100%-влажность %-белок %-жир %-зола %-неочищенные волокна %.
[0029] Пищевые волокна относятся к компонентам растения, которые устойчивы к расщеплению пищеварительными ферментами животных. Пищевые волокна включают растворимые и нерастворимые волокна. Растворимые волокна устойчивы к расщеплению и поглощению в тонком кишечнике и претерпевают полную или частичную ферментацию в толстом кишечнике, например, свекольный жом, гуаровая камедь, корень цикория, оболочки семян подорожника, пектин, голубика, клюква, тыква, яблоки, овес, бобовые, цитрусовые, ячмень или горох. Нерастворимые волокна могут обеспечиваться любым из множества источников, включающих целлюлозу, цельнозерновые продукты, пустой овес, кукурузные отруби, семя льна, жмых винограда, сельдерей, стручковую фасоль, цветную капусту, очистки картофеля, кожуру фруктов, кожуру овощей, шелуху арахиса и волокна сои. Неочищенные волокна включают неперевариваемые компоненты, содержащиеся в клеточных стенках и содержимом клеток растений как зерновые, например, шелуха зерновых, таких как рис, кукуруза и бобы. Типичные количества волокон в композиции по данному изобретению составляют от около 0 до 10% или от около 1% до около 5%.
[0030] Аминокислоты, включающие незаменимые аминокислоты, могут добавляться к композициям по данному изобретению в виде свободных аминокислот, или обеспечиваться любым из множества источников, например, неочищенным белком, для композиции по данному изобретению. Незаменимые аминокислоты представляют собой аминокислоты, которые не могут синтезироваться организмом de novo или в достаточных количествах и, поэтому, должны обеспечиваться рационом. Незаменимые аминокислоты варьируют от вида к виду в зависимости от метаболизма организма. К примеру, принято считать, что для собак и кошек (и людей) незаменимыми аминокислотами являются фенилаланин, лейцин, метионин, лизин, изолейцин, валин, треонин, триптофан, гистидин и аргинин. В дополнение к ним, таурин, хотя и формально не является аминокислотой, но представляет собой производное цистеина - незаменимое питательное вещество для кошек.
[0031] Композиции по настоящему изобретению также могут содержать одно или более минеральных веществ и/или микроэлементов, например, кальций, фосфор, натрий, калий, магний, марганец, медь, цинк, хлор или соли железа, в количествах, необходимых для предупреждения недостаточности и поддержания состояния здоровья. Эти количества известны специалистам в этой области, к примеру, как приведено в публикации Official Publication of the Associate of American Feed Control Officials, Inc. («AAFCO»), Nutrient Requirements of Dogs and Cats, 2006. Типичные количества минеральных веществ составляют от около 0,1 до около 4% или от около 1% до около 2%.
1
2
6
12
[0032] Композиции по настоящему изобретению также могут включать витамины в количествах, необходимых для предупреждения недостаточности и поддержания состояния здоровья. Эти количества, а также способы измерения известны специалистам в данной области техники. К примеру, в публикации Official Publication of the Associate of American Feed Control Officials, Inc. («AAFCO»), Nutrient Requirements of Dogs and Cats, 2006 приведены рекомендованные количества таких ингредиентов для собак и кошек. Как подразумевается в данном документе, подходящие витамины могут включать, но не ограничиваются, витамином A, витамином B, витамином B, витамином B, витамином B, витамином C, витамином D, витамином E, витамином H (биотин), витамином K, фолиевой кислотой, инозитом, ниацином и пантотеновой кислотой. Типичные количества витаминов в композиции по данному изобретению составляют около от 0 до около 3% или от около 1% до около 2%.
[0033] Композиции по настоящему изобретению могут дополнительно содержать другие пищевые добавки, такие как улучшители вкуса и стабилизаторы в количествах и комбинациях, знакомых специалисту в данной области. Стабилизирующие вещества включают, к примеру, вещества, которые способствуют увеличению срока годности композиции. Остальные примеры других таких пищевых добавок, потенциально подходящих для включения в композиции по данному изобретению включают, к примеру, консерванты, красители, антиоксиданты, ароматизаторы, синергисты и комплексообразователи, консервирующие газы, стабилизаторы, эмульгаторы, загустители, желеобразователи и влагоудерживающие вещества. Примеры эмульгаторов и/или загустителей включают, к примеру, желатин, простые эфиры целлюлозы, крахмал, сложные эфиры крахмала, простые эфиры крахмала и модифицированные крахмалы. Концентрация таких пищевых добавок в композиции, как правило, может составлять до около 5% по массе. В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация таких пищевых добавок (особенно когда такие добавки являются основными диетически балансирующими веществами, такими как витамины и минеральные вещества) составляет по массе от около 0% до около 2,0%. В некоторых вариантах реализации изобретения концентрация таких пищевых добавок (снова особенно когда такие добавки являются основными диетически балансирующими веществами) составляет по массе от около 0% до около 1,0%.
[0034] Подразумеваются пищевые продукты любой консистенции или содержания влаги, например, композиции по данному изобретению могут быть, к примеру, сухой, влажной или полувлажной пищевой композицией для животных. В некоторых вариантах реализации изобретения содержание влаги составляет от около 3% до около 90% от общей массы композиции. «Полувлажная» композиция относится к пищевой композиции, содержащей от около 25 до около 35% влаги. «Влажная» пищевая композиция относится к пищевой композиции, имеющей содержание влаги от около 60 до 90% или более. «Сухая» пищевая композиция относится к пищевой композиции с содержанием влаги от около 3 до около 11% и часто выпускаемой в форме небольших частиц или гранул.
[0035] При приготовлении композиции по настоящему изобретению во влажной форме или консервированной в консервной банке форме любой ингредиент (например, АА, ЭПК) в целом может быть включенным, к примеру, в композицию во время переработки состава, например, во время и/или после смешивания других компонентов данной композиции. Распределение этих компонентов в композиции может выполняться обычными средствами. В одном варианте реализации изобретения измельченные белковые ткани животных и птиц смешиваются с другими ингредиентами, включающими рыбий жир, злаковые зерна, другие диетически балансирующие ингредиенты, специализированные пищевые добавки (например, смеси витаминов и минеральных вещества, неорганические соли, целлюлозу и свекольный жом, наполнители и тому подобное); а также добавляется вода, которая необходима для процесса переработки. Эти ингредиенты предпочтительно смешиваются в емкости, подходящей для подогрева при смешивании компонентов. Нагрев смеси может осуществляться с использованием любого подходящего способа, такого как, к примеру, введение острого пара или путем использования емкости, оборудованной теплообменником. После добавления последнего ингредиента смесь нагревается до диапазона температур от около 50°F (10°C) до около 212°F (100°C). В некоторых вариантах реализации изобретения смесь нагревается до диапазона температур от около 70°F (21°C) до около 140°F (60°C). Температуры за пределами этих диапазонов в целом являются приемлемыми, но могут быть непрактичными с коммерческой точки зрения без применения других технологических добавок. При нагреве до соответствующей температуры вещество, как правило, будет находиться в форме густой жидкости. Густую жидкость заливают в консервные банки. Накрывают крышкой, и контейнер герметично закрывают. Потом закрытые контейнеры помещают в обычное оборудование, предназначенное для стерилизации содержимого. Обычно выполняемого нагреванием до температур более чем 230°F (110°C) в течение соответствующего периода времени, которое зависит от, к примеру, используемой температуры и состава.
[0036] Пищевые композиции для кошек могут альтернативно готовиться в сухой форме с использованием обычных процессов. Как правило, измельчают и смешивают сухие ингредиенты, включающие, к примеру, белок животного происхождения, белок растительного происхождения, зерно и т.п. Потом с сухой смесью добавляют и смешивают влажные и жидкие ингредиенты, включающие жиры, масла, белок растительного происхождения, воду и т.п. Затем смесь перерабатывают в гранулы или аналогичные сухие кусочки. Гранулы часто формируются с использованием процесса экструзии, в котором смесь сухих и влажных ингредиентов подвергается механической обработке высоким давлением и температурой, продавливается через небольшие отверстия и срезается вращающимся ножом для образования гранул. Потом влажные гранулы высушиваются и не обязательно покрываются одним или несколькими внешними покрытиями, которые могут включать, к примеру, ароматизаторы, жиры, масла, порошки и тому подобное. Гранулы также могут быть изготовлены из теста с использованием скорее процесса выпекания, чем экструзии, в котором тесто перед обработкой сухим жаром помещается на форму.
[0037] В способах гидратации организма кошек или лечения заболевания или патологического состояния у кошек по данному изобретению вводимая пища может быть диетически полноценной пищей для кошек или необходимые количества и соотношения АК и ЭПК могут вводиться отдельно, например, в виде отдельного ингредиента или в виде части отдельного ингредиента, как правило, в виде такой добавки, чтобы общий потребляемый рацион соответствовал количествам и соотношениям АК и ЭПК, необходимым для достижения полезного действия по данному изобретению. В способе по данному изобретению лечения заболевания или патологического состояния у кошек указанное заболевание или патологическое состояние может быть, к примеру, развитием мочекаменной болезни, идиопатическим циститом у кошек или FLUTD.
[0038] Таким образом, в данном изобретении в одном варианте реализации изобретения предложен способ повышения уровня гидратации организма кошки, включающий обеспечение кошки рационом, содержащим эффективное количество арахидоновой кислоты, причем рацион включает большее количество арахидоновой кислоты, чем эйкозапентаеновой кислоты (Способ 1). К примеру, в изобретении предложено
1.1. Способ 1, в котором рацион состоит из воды и пищевой композиции для кошек, которая является аппетитной и диетически полноценной для кошки, данная пищевая композиция для кошек содержит арахидоновую кислоту и эйкозапентаеновую кислоту, при этом соотношение арахидоновой кислоты к эйкозапентаеновой кислоте составляет 3:1 или более, например, по меньшей мере 5:1, например, по меньшей мере 10:1, а количество арахидоновой кислоты в композиции составляет от 0,05 до 0,5% сухой массы.
1.2. Способ 1, в котором рацион содержит эффективное количество добавки, содержащей арахидоновую кислоту вместе с диетически полноценной пищей для кошек.
1.3. Способ 1, 1.1 или 1.2, в котором рацион содержит омега-6 и омега-3 жирные кислоты в массовом соотношении на основе сухой массы 10:1 или более.
1.4. Способ 1.3, в котором в композиции соотношение омега-6 жирных кислот к омега-3 жирным кислотам составляет от 10:1 до 20:1, например, от 12:1 до 18:1.
1.5. Любой из предшествующих способов, в котором кошка является взрослой кошкой.
1.6. Любой из предшествующих способов, в котором кошка является котом.
1.7. Любой из предшествующих способов, который является способом лечения у кошки заболевания или патологического состояния, возникающего вследствие низкой гидратации, причем кошка нуждается в таком лечении.
1.8. Способ 1.7, в котором заболевание или патологическое состояние выбрано из развития мочекаменной болезни (включая образование камней мочевого пузыря или камней почек), идиопатического цистита кошек и FLUTD.
1.9. Способ 1.7 или 1.8, в котором кошка идентифицируется как находящаяся под повышенным риском развития заболевания или патологического состояния, возникающего вследствие низкой гидратации, например, заболевания или патологического состояния, выбранного из развития мочекаменной болезни (включая образование камней мочевого пузыря или камней почек), идиопатического цистита кошек и FLUTD), причем риск оценивается (а) измерением удельного веса мочи кошки, и кошка, имеющая удельный вес мочи по меньшей мере 1,05, например более 1,06, например более 1,07, считается находящейся под повышенным риском, и/или (b) при этом у кошки экспрессируется ОНП или есть мутация в гене PTGES3, связанная с повышенным риском.
1.10. Предыдущий способ, в котором кошка идентифицируется как находящаяся под повышенным риском на основе проявления одного или более видов однонуклеотидного полиморфизма (ОНП), выбранных из chrB4.101464677, chrB4.101341304 и chrB4.101438741.
1.11. Любой из предшествующих способов, в котором исходный удельный вес мочи кошки составляет более 1,055, например, более 1,06.
1.12. Любой из предшествующих способов, в котором удельный вес мочи кошки через один месяц практического применения данного способа, например, через три месяца, например, через шесть месяцев, снижается относительно исходного удельного веса мочи кошки, например, до менее чем 1,055.
1.13. Любой из предшествующих способов, в котором кошка имеет мутацию гена PTGES3.
1.14. Любой из предшествующих способов, в котором кошка проявляет один или более видов однонуклеотидного полиморфизма (ОНП), выбранных из chrB4.101464677, chrB4.101341304 и chrB4.101438741.
1.15. Любой из предшествующих способов, в котором кошка остается на рационе в течение по меньшей мере месяца, например, по меньшей мере трех месяцев, например, по меньшей мере шести месяцев.
1.16. Любой из предшествующих способов, в котором повышение гидратации организма кошки измеряется по уменьшению удельного веса мочи.
1.17. Любой из предшествующих способов, в котором повышение гидратации организма кошки измеряется по уменьшению осмоляльности крови.
1.18. Любой из предшествующих способов, в котором способ вызывает увеличение уровня простагландина Е2.
1.19. Любой из предшествующих способов, в котором кошка, получающая рацион в соответствии с данным способом, проявляет увеличенное потребление воды, но не увеличенное потребление хлорида натрия.
1.20. Любой из предшествующих способов, в котором кошка, получающая рацион, имеет возраст по меньшей мере 2 года, например, по меньшей мере 5 лет.
1.21. Любой из предшествующих способов, в котором рацион кошки включает любую из Композиций 1, и далее как предложено ниже.
[0039] В другом варианте реализации в данном изобретении предлагается пищевая композиция для кошек, содержащая арахидоновую кислоту и эйкозапентаеновую кислоту в количестве, эффективном для повышения гидратации организма кошки, причем данная пищевая композиция в сочетании с водой является аппетитной и диетически полноценной, как единственный рацион для кошки, и при этом соотношение арахидоновой кислоты к эйкозапентаеновой кислоте на основе сухой массы составляет 3:1 или более, а соотношение омега-6 жирных кислот к омега-3 жирным кислотам в композиции на основе сухой массы составляет от 10:1 до менее 20:1 (Композиция 1). К примеру, в изобретении предложено:
1.1. Композиция 1, в которой количество арахидоновой кислоты составляет от 0,05 до 0,5% сухой массы.
1.2. Композиция 1 или 1.1, в которой композиция содержит по сухой массе по меньшей мере 5%, например по меньшей мере 7%, печени птицы, например, печени курицы, и менее 1% рыбьего жира.
1.3. Любая из предшествующих композиций, содержащих в основном ингредиенты, как приведено ниже для Рациона В примера 3, в которой «в основном как приведено» означает, что каждый перечисленный ингредиент присутствует в композиции в количестве ±5%, например, ±2% от количества, как приведено, по основе сухой массы.
1.4. Любая из предшествующих композиций находится в форме сухой пищевой композиции, например, гранулированного продукта.
1.5. Композиция 1 или 1.1 для применения в любом из Способов 1 и далее.
[0040] В другом варианте реализации в изобретении предложено использование арахидоновой кислоты или ингредиента или композиции, содержащей арахидоновую кислоту, например, любой из Композиций 1 и далее, для повышения уровня гидратации организма кошки, например, любым из Способов 1 и далее.
[0041] В другом варианте реализации в изобретении предложено использование арахидоновой кислоты или ингредиента или композиции, содержащей арахидоновую кислоту, для изготовления пищевой композиции для кошек для применения в соответствии с любым из Способов 1 и далее.
[0042] Данное изобретение также направлено на способы идентификации кошек с повышенным риском развития заболевания или патологического состояния, возникающего вследствие низкой гидратации, например, заболевания или патологического состояния, выбранного, например, из развития мочекаменной болезни (включая образование камней мочевого пузыря или камней почек), идиопатического цистита кошек и FLUTD, причем риск оценивается (а) измерением удельного веса мочи кошки, и кошка, имеющая удельный вес мочи по меньшей мере 1,05, например более 1,06, например более 1,07, считается находящейся под повышенным риском, и/или (b) при этом у кошки экспрессируется ОНП или есть мутация в гене PTGES3, связанная с повышенным риском.
[0043] К примеру, в одном варианте реализации изобретения кошка идентифицирована как находящаяся под повышенным риском на основе проявления одного или более видов однонуклеотидного полиморфизма (ОНП), выбранных из chrB4.101464677, chrB4.101341304 и chrB4.101438741. То, имеет ли кошка один из этих ОНП может измеряться обычными подходами для генотипирования, например, выбранными из (i) методов гибридизации, использующих последовательность-специфические олигонуклеотидные зонды (например, динамическую аллель-специфическую гибридизацию, молекулярные маяки или ОНП-микрочипы), (ii) методик, основанных на применении ферментов, таких как полиморфизм рестрикционных фрагментов (RFLP), методы с применением полимеразной цепной реакции (например, тетрапраймерная ARMS-ПЦР со специфическими праймерами, которые могут допускать детекцию ОНП), флэп-эндонуклеазы, которая допускает детекцию однонуклеотидных мисматчей, методики с достройкой праймеров (например, гибридизация зонда с основаниями непосредственно выше и против направления считывания от ОНП-нуклеотида с последующим проведением «минисеквенирующей» реакции, в которой ДНК-полимераза достраивает гибридизированный праймер добавлением основания, которое комплементарно данному ОНП-нуклеотиду), 5'-нуклеаз с использованием прямого и обратного ПЦР-праймеров, которые будут амплифицировать участок, включающий ОНП, и анализы с лигированием олигонуклеотидов, и (iii) постамплификационных методик на основе физических свойств ДНК, таких как анализ одноцепочечного конформационного полиморфизма, гель-электрофорез в градиенте температуры, денатурирующая высокоэффективная жидкостная хроматография, определение плавления целого ампликона с высоким разрешением, использование белков, связывающих ДНК-мисматчи, и коммерческих систем, таких как SNPlex (Applied Biosystems). В одном варианте реализации изобретения ОНП идентифицируют с использованием ОНП-микрочипа, такого как чип Illumina Feline SNP60, описанный в примере 1.
[0044] Таким образом, в варианте реализации изобретения предложен способ идентификации кошки, находящейся под повышенным риском развития заболевания или патологического состояния, возникающего вследствие низкой гидратации, например, заболевания или патологического состояния, выбранного из развития мочекаменной болезни (включая образование камней мочевого пузыря или камней почек), идиопатического цистита кошек и FLUTD, включающий исследование того, проявляет ли кошка один или более видов однонуклеотидного полиморфизма (ОНП), выбранных из chrB4.101464677, chrB4.101341304 и chrB4.101438741, например, используя любой из методов детекции ОНП, предложенных выше. В дополнительном варианте реализации в изобретении предложен диагностический набор для идентификации кошки, находящейся под повышенным риском развития заболевания или патологического состояния, возникающего вследствие низкой гидратации, например, заболевания или патологического состояния, выбранного из развития мочекаменной болезни (включая образование камней мочевого пузыря или камней почек), идиопатического цистита кошек и FLUTD, включающий последовательность-специфический олигонуклеотидный зонд, который распознает один или более видов однонуклеотидного полиморфизма (ОНП), выбранных из chrB4.101464677, chrB4.101341304 и chrB4.101438741, вместе с инструкциями для применения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1. Генетические исследования.
[0045] Значения удельного веса определяли у 533 кошек, которых генотипировали с использованием чипа Illumina Feline SNP60 (полное описание в табл. 1).
[0046] Распределение животных по заданному удельному весу мочи отображено на графике на фиг. 1. Выполнялся анализ локусов количественных признаков QTL, учитывая отклонение от нормального распределения. Строился Манхеттэнский график, на графике отмечался каждый генотипированный однонуклеотидный полиморф («ОНП») в зависимости от значимости его корреляции с фенотипом удельного веса мочи. Наблюдался только один пик для ОНП значительно выше порога ложного обнаружения 10 (-6), что указывало на то, что этот генетический локус вовлечен в определение удельного веса мочи. Эти ОНП расположены в локусе на кошачьей хромосоме В4. Аннотация и р-значения для 3 наиболее значимых ОНП даны в табл. 2. PTGES3 является наиболее вероятным геном-кандидатом в этом локусе на основании биологической релевантности, определенной как описано выше. Этот ген фланкирован тремя ОНП, двумя в обратном направлении считывания от сайта инициации транскрипции и одним в прямом направлении считывания транскрибируемой последовательности. Положения ОНП даны относительно сайта инициации транскрипции PTGES3 в табл. 3, а расположение гена PTGES3 в геноме кошки описано в табл. 4, включая построение сборки генома кошки, использованное в этом анализе.
[0047] Три последовательности ОНП и 200 пар оснований, фланкирующих последовательность, представлены ниже с предоставлением ID номера ОНП, специфических ОНП и последовательности ОНП плюс фланкирующие последовательности длиной 200 п.н.
chrB4.101464677 [Т/С]
chrB4.101341304 [A/G]
chrB4.101438741 [A/G]
Пример 2. Исследование зрелых кошек с использованием различающихся соотношений АК к ЭПК.
[0048] В рационе 1 соотношение АК к ЭПК составляло 3 к 1, а в рационе 2 соотношение АК к ЭПК - 0,5 к 1. Рацион 1 содержал 20,84% общего содержания жира, 0,10% АК (0,48% от общего содержания жира) и 0,03% ЭПК (0,14% от общего содержания жира). В исследованных продуктах, содержавших приблизительно 31,5% белка, большее соотношение АК относительно концентрации жиров составляло 20,8%, тогда как меньшее соотношение АК к ЭПК составляло 15,7% жира. Соотношение омега-6 жирных кислот к омега-3 жирным кислотам в рационе 1 составляло 14,4. Животные находились на кормлении двумя рационами (27 кошек питались рационом с большим соотношением АК к ЭПК, а 54 кошки питались рационом с меньшим соотношением АК к ЭПК). Моча собиралась и анализировалась по удельному весу мочи на 0 сутки и 180 сутки, данные представлены в табл. 5 (г/мл).
[0049] Группа кошек на рационе с большим соотношением АК (большее), проявила статистически значимое снижение удельного веса мочи через 180 суток. Группа кошек на рационе с меньшим соотношением АК (меньшее), не проявила изменение удельного веса их мочи. В дополнение к удельному весу мочи, в качестве индикатора уровня гидратации также измеряли осмоляльность крови, данные представлены в табл. 6 (мМ/литр).
[0050] Как и в случае с удельным весом наблюдалось значительное уменьшение осмоляльности крови у кошек, питавшихся рационом с большим содержанием АК, но не было изменения у кошек, питавшихся рационом с меньшим соотношением АК к ЭПК (фиг. 3). Это указывает не только на то, что высокий уровень АК делает мочу более разбавленной, но и на то, что кровь также становится более разбавленной, указывая, что кошки принимают больше воды и что их общий водный баланс увеличивается. Другими словами организм кошек становится более гидратированным.
Пример 3. Исследование кормления котят различающимися соотношениями АК к ЭПК.
[0051] В контрольном рационе соотношение АК к ЭПК составляло от 0,4 до 1, в рационе A (увеличенное соотношение АК/ЭПК) соотношение АК к ЭПК составляло >8 к 1, а в рационе B (рацион с более увеличенным АК/ЭПК) соотношение АК к ЭПК составляло >16 к 1. Контрольный рацион содержал 15,06% общего содержания жира, 0,09% АК (0,6% от общего содержания жира) и 0,23% ЭПК (1,53% от общего содержания жира); рацион A содержал 14,67% общего содержания жира, 0,08% АК (0,55% от общего содержания жира) и <0,01% ЭПК (<0,01% от общего содержания жира), а рацион B содержал 16,01% общего содержания жира, 0,16% АК (1% от общего содержания жира) и <0,01% ЭПК (<0,01% от общего содержания жира). Соотношение омега-6 жирных кислот к омега-3 жирным кислотам в рационе A составляло 18,1, а в рационе B - 17,5. Животные находились на кормлении тремя рационами. Мочу собирали и анализировали на удельный вес мочи на 0 сутки, 28 сутки и 56 сутки. Результаты приведены в табл. 3 (г/мл).
[0052] В группе котят на рационах A и B, рацион с большим соотношение АК обеспечил статистически значимое снижение удельного веса мочи через 28 суток. В группе котят на контрольном рационе не продемонстрировано изменения удельного веса их мочи.
[0053] В отличие от взрослых кошек, для котят не показано статистически значимых отличий осмоляльности крови. См. табл. 8 (значения приведены в мМ/литр).
[0054] По этим данным можно предположить, что способность поддерживать нормальные значения осмоляльности может быть лучшей у более молодых животных, независимо от рациона, что может помочь объяснить, почему мочекаменная болезнь более распространена у взрослых кошек. Это дает возможность предположить, что рацион может иметь большее влияние на образование камней у взрослых животных.
[0055] Составы для контрольного рациона, рациона A и рациона B были следующими.
Пример 4. Корреляция RSS по оксалату кальция с АК и ЭПК.
Методика CORR
2 с переменными: АК, ЭПК
1 переменная: RSS по оксалату кальция
Методика GLM
Зависимая переменная: RSS по оксалату кальция
1 с переменными: соотношение
1 переменная: RSS по оксалату кальция
Существует статистически значимая взаимосвязь между тем, что увеличенное содержание АК в крови связано с уменьшенным уровнем RSS, тогда как увеличенная концентрация ЭПК, связана с увеличенным уровнем RSS.