СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ АНТИБИОТИКОВ
WAY OF ANTIBIOTICS APPLICATION

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к усовершенствованным способам применения липопептидных антибиотиков, в частности даптомицина, обладающих мощной бактерицидной активностью против грамположительных бактерий, включая штаммы, устойчивые к действию антибиотиков.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Быстрый рост грамположительных инфекционных заболеваний, включая заболевания, вызываемые действием резистентных бактерий, явился причиной возобновления интереса к разработке новых классов антибиотиков. Одним из таких классов является класс липопептидных антибиотиков, включающий в себя даптомицин. Даптомицин обладает мощной бактерицидной активностью in vitro против клинически релевантных грамположительных бактерий, вызывающих серьезные заболевания, представляющие угрозу для жизни. Эти бактерии включают в себя такие резистентные патогены как ванкомицинустойчивые энтерококки (VRE), метициллинустойчивые Staphylococcus aureus (MRSA), с промежуточной чувствительностью к гликопептиду Staphylococcus aureus (GISA), коагулазаотрицательный стафилококк (CNS) и пенициллинорезистентный Streptococcus pneumoniae (RPSP), для которых имеется очень небольшое количество терапевтических альтернатив (см. Tally с сотр., 1999, Ехр. Opin. Invest. Drugs 8:1223-1238, далее в тексте «Tally»). Применение даптомицина обеспечивает быстрое зависящее от концентрации бактерицидное действие и относительно длительный концентрационнозависимый постантибиотический эффект in vivo.
Даптомицин описан Baltz в Biotechnology of anibiotics, 2-е изд. под редакцией W.R.Strohl (New York: Marcel Dekker, Inc.), 1977, стр.415-435, далее в тексте «Baltz». Даптомицин представляет собой циклический липопептидный антибиотик, который может быть получен в результате ферментации Streptomyces roseosporus. Это вещество содержит деканоильную боковую цепочку, связанную с N-терминальным триптофаном циклического 13-аминокислотного пептида (см. фиг.1а, из работы Baltz с сотр., на которую ссылались выше). Рассматриваемое соединение в настоящее время выпускается в виде рецептур для внутривенного и перорального применений с целью лечения серьезных инфекционных заболеваний, вызываемых действием таких бактерий, но не ограничивающихся ими, как метициллинорезистентный Staphylococcus aureus (MRSA) и ванкомицинорезистентные энтерококки (VRE).
Механизм действия даптомицина отличается от механизмов действия антибиотиков других классов, включающих в себя β-лактамы, аминогликозиды, гликопептиды и макролиды. Не ограничиваясь какой-либо конкретной теорией, предполагают, что даптомицин уничтожает грамположительные бактерии путем разрушения многообразных аспектов функционирования плазматической мембраны бактерий, не проникая при этом в цитоплазму. Механизмы антибактериального действия даптомицина могут включать в себя ингибирование синтеза пептидогликана, ингибирование синтеза липотейхоевой кислоты и диссипацию потенциала бактериальной мембраны (см., например, приведенную выше ссылку на работы Baltz).
Эффективность и безопасность даптомицина изучали в неклинических исследованиях, а также на I и II фазах клинического исследования. Даптомицин хорошо переносился пациентами-добровольцами при внутривенном применении каждые 24 часа в дозе 1 или 2 мг/кг (см. цитированную выше работу Baltz и содержащиеся в ней ссылки). Кроме этого, однократная доза даптомицина оказалась хорошо переносимой в интервале дозировок 0,5-6 мг/кг (см. цитированную выше ссылку на работу Baltz, Европейский патент 386951, выданный на имя Eli Lilly and Co., а также работу Woodworth с сотр., 1992 г., в Antimicrob. Agents Chemother. 36'318-25). Разовая доза даптомицина также оказалась хорошо переносимой при совместном применении с другим антибиотиком, тобрамиоином (см. работу Woodworth с сотр., 1994, J.Antimicrob. Chemother. 33:655-59). Однако продолжительное лечение путем применения каждые 12 часов 3 мг/кг даптомицина вызывало редкие побочные эффекты (см. цитированную выше работу Baltz). Временная мышечная слабость и мышечные боли наблюдались у двух из пяти пациентов в период с 6-го по 11-й дни при лечении путем применения каждые 12 часов 4 мг/кг даптомицина (см. цитированную выше ссылку на работу Tally). У двух объектов исследования, испытывающих симптомы мышечной слабости и боли, за 1-2 дня до проявления этих симптомов наблюдались повышенные уровни содержания фосфокиназы оратина (СРК). Лечение прекращали через 3-4 дня после регистрации начального повышения уровня содержания СРК. Через 1-2 дня после прекращения применения даптомицина уровень содержания СРК у одного из пациентов возвращался к уровню порядка 10000 ед/л и 20812 ед/л у другого пациента (см. ссылку на работу Tally). На основании результатов проведенных исследований, а также принимая во внимание тот факт, что для обеспечения эффективного действия даптомицина против многочисленных других типов бактериальных инфекций потребуются более высокие дозы, клинические исследования даптомицина были прекращены (см. ссылку на Baltz).
В описанных выше клинических исследованиях, а также в сериях токсикологических исследований, проведенных на животных, было установлено, что скелетные мышцы служат первичной тканевой мишенью в проявлении токсических свойств даптомицина. Повторное ежедневное применение в токсикологических испытаниях на крысах и собаках высоких дозировок даптомицина (75 мг/кг/день на крысах и 40 мг/кг/день на собаках) приводило к мягкой миопатии скелетных мышц (см. ссылку на Tally, приведенную выше). Было также обнаружено, что повышение уровней СРК представляет собой чувствительную меру развития миопатии, и вследствие этого указанные значения могут использоваться для измерения действия даптомицина на мышечную ткань (Tally et al).
Хотя низкие дозировки даптомицина не вызывают мышечной токсичности и оказываются эффективными при лечении многих инфекционных заболеваний, вызванных грамположительными бактериями, лечение некоторых типов грамположительных бактериальных инфекций, например глубоко укоренившихся инфекций или инфекционных заболеваний, вызванных действием некоторых резистентных к антибиотикам бактериальных штаммов, может потребовать применения повышенных дозировок даптомицина для достижения эффективных результатов. Так, например, некоторые ванкомицинрезистентные штаммы бактерий демонстрируют в 2-4 раза более высокую минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) даптомицина, чем большинство ванкомицинвосприимчивых штаммов. В этой связи имеется насущная необходимость в разработке способов применения эффективных количеств даптомицина при минимальном нежелательном влиянии на скелетные мышцы.
Нелипопептидная стрептограминовая антибиотическая комбинация хинупристин/дальфопристин также обладает активностью против грамположительных микроорганизмов, включая такие резистентные к антибиотикам бактерии как метициллинорезистентный Staphylococcus aureus, гликопептидный посредник S.aureus и гликопептидорезистентный Enteracoccus faecium (см. Rubinstein с сотр., 1999, J.Antimicrob. Chemother. 44, раздел А, 37-46, далее в тексте "Rubinstein"). Было показано, что комбинация хинупристин/дальфопристин обладает эффективностью в лечении нозокомиальной пневмонии, при исследовании экстренного применения в случаях, осложненных инфекцией кожи и бактериемией (см. ссылку на Rubinstein). J.Bernard с сотр. в 1994 г. в Eur. J.Clin. Microbiol. Infect. Dis. 13:768-771 и WO 98/22170 описано применение комбинации хинупристин/дальфопристин в клинических исследованиях. Примерно 13% пациентов, получивших лечение 7,5 мг/кг комбинации хинупристин/дальфопристин, в период от 8 до 12 ч после применения ощущали артериальные боли или миалгию, включая мышечные боли, и примерно 5% пациентов демонстрировали повышенные уровни содержания СРК (см. ссылку на Rubinstein). На основании этих результатов был сделан вывод о том, что комбинация хинупристин/дальфопристин также вызывает мышечную токсичность.
Аминогликозиды, представляющие собой другой класс антибиотиков, также обладают токсичностью при применении в больших дозировках. С целью снижения токсичности их чаще применяли в высоких дозах через большие промежутки времени, чем в низких дозировках через малые промежутки времени (Barclay с сотр., 1994, Clin. Pharmacokinetic. 27:32-48). Однако аминогликозиды отличаются от даптомицина во многих отношениях, особенно различиями в локализации токсичности. Аминогликозиды проявляют токсичность в отношении почек и центральной нервной системы, тогда как токсическое действие даптомицина особенно выражено в воздействии на скелетные мышцы. Токсичность аминогликозидов и даптомицина развивается по разным механизмам. Кроме того, структура аминогликозидов существенно отличается от структуры даптомицина, и несмотря на то, что они действуют только на грамотрицательные бактерии, механизм их антибактериального действия отличается от механизма действия даптомицина, а кроме того, они характеризуются другим механизмом резистентности. Таким образом, существующая возможность снижения токсичности в отношении пациентов при более редком применении аминогликозидов не может гарантировать такой же эффект в случае применения даптомицина.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к проблеме скелетной мышечной токсичности при применении высоких дозировок таких липопептидных антибиотиков как даптомицин или комбинации хинупристин/дальфопристин. Настоящее изобретение предусматривает способы применения антибиотиков, минимизирующие скелетную мышечную активность при одновременном сохранении достаточно высокого уровня эффективности.
Способ согласно изобретению характеризуется применением менее частых доз с повышенной концентрацией антибиотика. Такая схема лечения более безопасна и более эффективна, чем более частое применение дозировок с пониженными концентрациями антибиотика. Так, в соответствии с одним из способов настоящего изобретения, даптомицин применяют на пациенте, нуждающемся в лечении, с интервалом между дозировками, минимизирующим токсическое воздействие на скелетные мышцы. Согласно другому способу согласно изобретению, липопептидный антибиотик, отличный от даптомицина, например его производное А54145 или производное этого препарата, применяют на пациенте, нуждающемся в лечении, с интервалами между приемами доз, уменьшающими токсическое воздействие на скелетные мышцы. Согласно третьему способу согласно изобретению, комбинацию хинупристин/дальфопристин применяют на пациенте, нуждающемся в таком лечении, с интервалами между приемом доз, минимизирующими токсическое воздействие на скелетные мышцы.
Способы согласно изобретению характеризуются применением высокой дозировки антибиотика, вызывающей скелетную мышечную токсичность при интервалах между приемами доз от 24 часов до одного раза в неделю. В соответствии с одним из технических решений настоящего изобретения, даптомицин применяют в дозе от 3 до 75 мг/кг с интервалом от 24 часов до одного раза в неделю. Согласно другому техническому решению, комбинацию хинупристин/дальфопристин применяют в дозе от 7,5 до 75 мг/кг с интервалом от 24 часов до одной недели.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фиг.1 изображены уровни фосфокиназы креатина сыворотки (СРК) в исследовании А на собаках (верхний график) и исследовании В на собаках (нижний график). Уровни содержания СРК в сыворотке крови, определяемые через два часа после дозировки даптомицина, использовали в качестве величины, по которой можно судить о мышечной токсичности.
На фиг.2 приведены концентрации даптомицина в сыворотке крови в равновесном состоянии через 18 дней после применения дозы, причем значения концентрации определяли методом ВЭЖХ в исследовании А на собаках (верхний график) и исследовании В на собаках (нижний график).
max
На фиг.3 приведена зависимость между различными дозировками даптомицина и его токсичностью в отношении скелетных мышц (связанной с уровнем содержания СРК), а также его эффективностью (связанной с максимальной концентрацией в сыворотке крови, С, при минимальной ингибиторной концентрации даптомицина (МИК)).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
max
24ч
Для изучения потенциальных эффектов фракционирования доз на токсичность проводили два исследования на собаках, в которых сравнивали эффекты, получаемые при ежедневном внутривенном введении (q24 ч) и при применении каждые 8 часов (q8 ч). Исследования проводили на собаках, поскольку этот вид животных дает наиболее предсказуемые клинические эффекты. Целью таких исследований служила оценка взаимосвязи между фармакокинетикой, включая значения С и AUС, и токсичностью в отношении скелетных мышц с тем, чтобы определить оптимальный клинический режим дозировок, обеспечивающий минимальную возможность проявления токсичности в отношении скелетных мышц.
max
24ч
max
В исследовании А изучали вопрос о взаимосвязи вызванной действием даптомицина токсичности в отношении скелетных мышц с максимальной концентрацией даптомицина в кровотоке после применения (С), а не с общей концентрацией даптомицина в кровотоке за 24 часа (AUC). В исследовании А дневную дозу даптомицина фракционировали на дозы для многократного применения в течение дня с целью снижения С (см. пример 1 и фиг.2, верхний график).
В исследовании В изучался вопрос о существовании пороговой концентрации даптомицина в плазме, связанной с токсичностью в отношении скелетных мышц. В рамках такой гипотезы применение многократных доз за 24-часовой период времени, не вызывающее наблюдаемого эффекта (NOELq24 ч), так, что уровни содержания даптомицина в плазме крови поддерживаются на значении ниже некоторого неопределяемого порога токсичности, не может быть ассоциировано с токсичностью в отношении скелетных мышц (пример 2).
max
max
max
24ч
Неожиданно было установлено, что мышечная токсичность не связана со значением С непосредственным образом. Так, например, уровни содержания в сыворотке крови фосфокиназы креатина (СРК) и число случаев микроскопической миопатии, наблюдаемые при дозе 25 мг/кг, применяемой каждые 8 часов (q8 ч), оказались выше, чем соответствующие величины, наблюдаемые при дозе 75 мг/кг, применяемой каждые 24 часа (q24 ч), несмотря на меньшее значение С для дозы 25 мг/кг q8 ч (пример 1, таблица 2). В отличие от этого, существенное увеличение максимальных уровней СРК наблюдали при изменении интервала между дозами от q24 ч до q8 ч как при дозе 5 мг/кг, так и 25 мг/кг, хотя значения С оказались сравнимыми для каждой дозы как для q24 ч, так и q8 ч (пример 1, таблица 2 и пример 2, таблица 4). Токсичность, по-видимому, также не связана с AUС, поскольку токсичность, наблюдаемая при дозе 25 мг/кг при q8 ч, выше, чем при дозе 75 мг/кг q24 ч, практически при одинаковом AUS.
max
max
th
th
Результаты, полученные в исследованиях А и В, позволяют сделать вывод о том, что фармакокинетический параметр, определяющий связанную с действием даптомицина токсичность в отношении скелетных мышц на собаках, не связан со значением С. Кроме этого, по-видимому, токсичность не связана с AUС или внутренней токсичностью вещества в плазме крови, а по всей вероятности связана с интервалом дозировок даптомицина. Не ограничиваясь конкретной теорией, можно предположить, что воздействие на скелетные мышцы связано с длительностью существования низких концентраций даптомицина в плазме крови, обеспечивающих восстановление субклинических повреждений миофибрилл. На основании полученных данных можно заключить, что ключевой детерминантой мышечной токсичности является интервал между дозами, а не величина самой дозы. Кроме того, поскольку было установлено, что С и/или AUС являются ключевыми фармакокинетическими параметрами, связанными с уничтожением очагов инфекции (J.Legget с сотр., Abstract №154, стр.123, Program and Abstracts of 27 Interscience Conference on Antimicrobial agents and chemotherapy, American Society for Microbiology, Washington, D.C., 1987; A.Louie с сотр., Abstract №1769, N.Safdar с сотр., Abstract №1770, Program and Abstracts of 39 Interscience Conference on Antimicrobial agents and chemotherapy, American Society for Microbiology, San Francisco, CA, September 26-29, 1999), фармакологическая активность даптомицина может быть оптимизирована путем ежедневного приема однократной дозы. Полученные результаты предполагают, что при ежедневном однократном приеме можно минимизировать мышечную токсичность под действием даптомицина при потенциально оптимальной антимикробной активности (фиг.3).
max
max
max
max
Эти наблюдения были дополнительно подтверждены результатами клинического исследования. Проведенные исследования показали, что применение даптомицина в дозе 4 мг/кг q24 ч, 6 мг/кг q24 ч или в начальной дозе 6 мг/кг и последующими дозами 3 мг/кг q12 ч не приводит к повышению уровней СРК, связанных с применением даптомицина, и к какой-либо мышечной слабости или болевому синдрому у любого пациента (пример 4). Предсказанное значение С должно быть выше (86,8 мкг/мл) при схеме приема лекарственного средства 6 мг/кг q24 ч, чем при схеме 4 мг/кг q12 ч (69,2 мкг/мл). Действительно, ни один из девяти пациентов, тестируемых по схеме приема, предсказывающей более высокое значение С, не испытывал нежелательных воздействий на скелетные мышцы (таблица 5), тогда как два из пяти пациентов, тестируемых по схеме приема лекарственного средства, предсказывающей пониженные значения С, испытывали нежелательные воздействия на скелетные мышцы (Tally, см. выше). Таким образом, результаты, представленные в примере 3, демонстрируют, что С не является причиной скелетной мышечной токсичности у людей, что дополнительно подтверждает применимость результатов по дозированию даптомицина, полученных в исследованиях на собаках, к лечению людей.
max
max
Не ограничиваясь какой-либо конкретной теорией, полученные результаты можно объяснить с позиции гипотезы о том, что токсичность в отношении скелетных мышц связана со временем между приемом доз, которое необходимо для восстановления повреждения скелетных мышц. Так, например, в примере 1 показано, что уровни содержания СРК значительно выше в том случае, когда на собаках применяли дозу 75 мг/кг/день, разделенную на три дневных дозировки (25 мг/кг q8 ч), чем в случае приема той же дозы один раз в день (75 мг/кг/q24 ч). Ежедневное однократное применение может обеспечить большее время между приемами доз (при отсутствии уровней токсичности в крови) для восстановления субклинического мышечного повреждения, связанного с действием даптомицина. Таким образом, ежедневная однократная дозировка обеспечивает пониженную токсичность. Новая восстановительная гипотеза согласуется с остановкой развития токсичности после продолжительных перерывов в приеме лекарственного средства. Так, например, не наблюдалось развития токсичности в шестимесячном исследовании по приему доз в сравнении с соответствующими месячными исследованиями на крысах и собаках. Кроме того, новая восстановительная гипотеза согласуется с наблюдениями, касающимися понижения уровней содержания СРК, несмотря на продолжение лечения даптомицином и наличие регенеративных изменений в скелетных мышцах (фиг.1). Более того, поскольку С и/или AUС представляют собой ключевые детерминанты эффективности на животных моделях инфицирования, фармакологическая активность даптомицина может быть оптимизирована путем ежедневного однократного дозирования. Помимо этого, поскольку безопасность и эффективность не зависят от указанной детерминанты (С), граница безопасности для даптомицина может быть увеличена путем изменения схемы приема лекарственного средства.
Основываясь на описанных выше результатах, настоящее изобретение предусматривает способы применения даптомицина, минимизирующие токсичность в отношении скелетных мышц по сравнению с известными способами применения даптомицина. Такие способы могут находить применение при клиническом лечении людей, а также в ветеринарной практике. Величина используемой дозы и интервал между дозами такого способа являются параметрами, обеспечивающими безопасность и эффективность при клиническом и ветеринарном применениях. Основная мысль настоящего изобретения состоит в том, что более длительные интервалы между дозами обеспечивают применение более высоких доз даптомицина.
В соответствии с одним из технических решений настоящего изобретения, доза даптомицина составляет 3-75 мг/кг. В соответствии с предпочтительным техническим решением доза составляет 6-25 мг/кг. Согласно еще более предпочтительному техническому решению доза для человека составляет 6-12 мг/кг. Возможные для использования дозировки составляют 7, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 16, 18, 20, 22 или 25 мг/кг. В предпочтительном техническом решении для ветеринарного применения дозировка составляет 3-25 мг/кг. Другие дозировки, вышеуказанных, ниже их или имеющие промежуточные значения, также могут использоваться и могут быть определены специалистом в данной области в соответствии со способами настоящего изобретения.
В соответствии с одним из технических решений настоящего изобретения, интервал между приемами составляет от 24 часов до одной недели. Согласно предпочтительному воплощению, даптомицин применяют однократно с интервалом в 24 часа, 48 часов, 72 часа, 96 часов или раз в неделю. Применение с уменьшенной частотой, например однократно за 96 часов или раз в неделю, может оказаться желательным для пациентов с ухудшенной почечной функцией или нуждающихся в гемодиализе. В соответствии с более предпочтительным техническим решением, интервал составляет 24-48 часов. Согласно еще более предпочтительному техническому решению интервал составляет 24 часа. Предпочтительный интервал для ветеринарного применения может быть несколько короче или длиннее интервалов между введением доз для человека, в зависимости от того длиннее или короче период полужизни даптомицина в конкретном виде животного по сравнению с соответствующим значением для человека. Настоящее изобретение также предусматривает применение даптомицина для приготовления медикаментов, предназначенных для лечения бактериальных инфекций у пациентов при указанных выше значениях доз и интервалах между введением этих доз. Могут использоваться другие интервалы, имеющие промежуточные или меньшие значения относительно указанных, как для клинического, так и для ветеринарного применений, и они могут быть определены специалистом в данной области в соответствии со способами настоящего изобретения.
Согласно одному из технических решений, способ включает в себя стадию применения однократной дозы в 3-75 мг/кг даптомицина каждые 24 часа или один раз в неделю. Согласно предпочтительному техническому решению, даптомицин применяют однократно в дозе 3-25 мг/кг каждые 24, 48, 72 или 96 часов. В соответствии с более предпочтительным техническим решением даптомицин применяют однократно в дозе 3-12 мг/кг каждые 24 или 48 часов. В соответствии с еще более предпочтительным техническим решением, даптомицин применяют однократно в дозе 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 мг/кг каждые 24 часа. В случае ветеринарного применения даптомицин используют в дозе в 3-25 мг/кг каждые 24 часа.
В соответствии с таким способом, даптомицин можно применять для уничтожения или уменьшения бактериального заражения. В соответствии с одним из технических решений, даптомицин применяют в течение периода от 3 дней до 6 месяцев. Согласно предпочтительному техническому решению, даптомицин применяют в течение 7-56 дней. Согласно еще более предпочтительному техническому решению, даптомицин применяют 7-28 дней. В еще более предпочтительном техническом решении даптомицин применяют в течение 7-14 дней. Если желательно, то даптомицин можно применять в течение более длительного или короткого периода.
Кроме этого, следует отметить, что несмотря на тот факт, что настоящее изобретение представлено примерами, в которых используют даптомицин, результаты и способ настоящего изобретения также применимы к другим липопептидным антибиотикам и к комбинации хинупристин/дальфопристин или другим антибиотикам, вызывающим токсичность в отношении скелетных мышц. В этой связи настоящее изобретение также предусматривает способы для применения других липопептидных антибитиков, минимизирующих токсичность в отношении скелетных мышц при сохранении эффективности действия. Настоящее изобретение также предусматривает использование липопептидных антибиотиков для приготовления медикаментов, предназначенных для лечения бактериального инфицирования пациента, когда применяемая доза представляет собой терапевтически эффективное количество липопептидного антибиотика, при дозировочном интервале, не вызывающем мышечной токсичности. Без каких-либо ограничений липопептидные антибиотики включают в себя даптомицин, производные даптомицина, а также другие антибиотики, включающие в себя белковый домен и липидный домен, например А54145 (Baltz, см. выше) или производные А54145.
Настоящее изобретение также предусматривает способы для применения комбинации хинупристин/дальфопристин, минимизирующие токсичность в отношении скелетных мышц при сохранении эффективности действия. Такие способы могут использоваться на человеке в условиях клинического лечения, а также в ветеринарии. Используемые в таких способах дозировки и интервалы введения являются безопасными и эффективными в рамках клинического и ветеринарного лечения. Главная идея способа настоящего изобретения состоит в том, что в результате увеличения интервалов между приемами дозировок лекарственного средства могут применяться более высокие дозы комбинации хинупристин/дальфопристин. В соответствии с одним из технических решений, дозировка комбинации хинупристин/дальфопристин составляет от 7,5 до 75 мг/кг при дозировочном интервале от 24 часов до раза в неделю. В соответствии с предпочтительным техническим решением, дозировка составляет от 7,5 до 30 мг/кг. Согласно еще более предпочтительному техническому решению, дозировка для человека составляет от 7,5 до 20 мг/кг. Согласно предпочтительному техническому решению в области ветеринарии, дозировка составляет от 7,5 до 50 мг/кг. В соответствии с предпочтительным техническим решением, дозировочный интервал составляет 24, 48, 72 и 96 часов. Согласно более предпочтительному техническому решению, дозировочный интервал составляет 24 часа. Предпочтительный дозировочный интервал для ветеринарного применения может быть в некоторой степени меньшим или большим, чем предпочтительный дозировочный интервал для человека, в зависимости от меньшего или большего периода полужизни комбинации хинупристин/дальфопристин в организме у конкретной разновидности животного, чем у человека. Настоящее изобретение также предусматривает использование комбинации хинупристин/дальфопристин для приготовления медикаментов, предназначенных для лечения бактериального инфекционного заболевания пациента, причем используемая доза представляет собой терапевтически эффективное количество комбинации хинупристин/дальфопристин при интервале между приемами лекарственного средства, не приводящем к мышечной токсичности.
Способы настоящего изобретения включают в себя применение даптомицина, других липопептидных антибиотиков или комбинации хинупристин/дальфопристин на пациенте, нуждающемся в таком лечении, в количестве, являющемся эффективным для снижения степени тяжести или устранения инфекционного заболевания, вызванного грамположительными бактериями, причем такое применение приводит к уменьшению токсичности в отношении скелетных мышц в сравнении с другими способами применения даптомицина, других липопептидных антибиотиков или комбинации хинупристин/дальфопристин. Антибиотик можно применять перорально, парентерально, путем ингаляции, локально, ректально, назально, трансбуккально, вагинально или с помощью имплантированного контейнера, внешнего насоса или катетера. Даптомицин, другие липопептидные антибиотики или комбинация хинупристин/дальфопристин могут также непосредственно инъецироваться либо применяться в области абсцесса, в желудочек сердца или сустав. Парентеральное применение включает в себя подкожную, внутривенную, внутримышечную, интраартикулярную, внутрисуставную, внутриполостную, подоболочную, внутрипеченочную, внутриочаговую и интракраниальную инъекцию или вливание. В соответствии с предпочтительным техническим решением, применение антибиотика осуществляют путем внутривенного, подкожного или перорального применения.
Способы настоящего изобретения могут применяться для лечения пациента с бактериальной инфекцией, вызванной или усиленной любым типом грамположительных бактерий. В соответствии с предпочтительным техническим решением, даптомицин, липопептидный антибиотик или хинупристин/дальфопристиновую комбинацию применяют на пациенте в соответствии со способом настоящего изобретения. Согласно другому предпочтительному воплощению, бактериальная инфекция может быть вызвана или обострена бактериями, включающими в себя, но не ограничивающимися ими, метициллиновосприимчивые и метициллинорезистентные стафилококки (включая Staphylococcus aureus, epidermidis, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis, Staphylococcus saprophyticus, а также коагулазаотрицательные стафилококки с промежуточной чувствительностью к гликопротеиду Staphylococcus aureus (GISA)), пенициллинвосприимчивые и пенициллинрезистентные стрептококки (включая Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Streptococcus avium, Streptococcus bovis, Streptococcus lactis, Streptococcus sangius, а также стрептококки группы С, стрептококки группы G и зеленеющие стрептококки), энтерококки (включая такие ванкомицинвосприимчивые и ванкомицинорезистентные штаммы, как Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium), Clostridium difficile, Clostridium clostridiiforme, Clostridium innocuum, Clostridium perfingens, Clostridium ramosum, Haemophilis influenzae, Listeria monocytogenes, Corynebacterium jeikeium, Bifidobacterium spp., Eubacterium aerofaciens, Eubacterium lentum, Lactobacillus acidophilis, Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum, Lactococcus spp., Leuconostoc spp., Pediococcus, Peptostreptococcus anaerobius, Peptostreptococcus asaccarolyticus, Peptostreptococcus magnus, Peptostreptococcus micros, Peptostreptococcus prevotii, Peptostreptococcus productus, Propionibacterium acnes и Actinomyces spp.
В экспериментах in vitro антибактериальная активность даптомицина против классически «резистентных» штаммов сравнима с активностью против классически «восприимчивых» штаммов. Кроме этого, минимальная ингибитopующая кoнцeнтpaция (МИК) для даптомицина против восприимчивых штаммов обычно в 4 раза ниже соответствующего значения для ванкомицина. Таким образом, в соответствии с предпочтительным техническим решением, даптомицин вводят, в соответствии со способами настоящего изобретения, пациенту с бактериальной инфекцией, устойчивой к действию других антибиотиков, включая ванкомицин. Кроме этого, в отличие от гликопептидных антибиотиков, даптомицин демонстрирует быструю концентрационнозависимую бактерицидную активность против грамположительных микроорганизмов. Таким образом, в соответствии с предпочтительным техническим решением, даптомицин вводят, в соответствии со способами настоящего изобретения, пациенту, нуждающемся в быcтродeйcтвующeм лечении антибиотиками. Комбинация из хинупристин/дальфопристин также может быть использована для борьбы с резистентными к антибиотикам штаммами бактерий, и она может применяться в случаях необходимости экстренной помощи.
Способы настоящего изобретения могут быть использованы для борьбы с грамположительными бактериальными инфекциями любого органа или ткани организма. Без каких-либо конкретных ограничений, такие органы или ткани включают в себя мышечную ткань, кожу, кровоток, почки, сердце, легкие и кости. Способы настоящего изобретения без каких-либо ограничений могут применяться для лечения инфекционных заболеваний кожи и мягких тканей, бактериемии и инфекционных заболеваний мочевых путей. Способы настоящего изобретения могут применяться для лечения таких распространенных респираторных инфекционных заболеваний как средний отит, синусит, хронические бронхит и пневмония, включая пневмонию, вызываемую резистентными к лекарствам Streptococcus pneumoniae или Haemophilus influenzae. Способы согласно изобретению могут использоваться для лечения смешанных инфекционных заболеваний, вызванных действием различных типов грамположительных бактерий или грамположительных и грамотрицательных бактерий. Инфекционные заболевания такого типа включают в себя интраабдоминальные инфекции и акушерско-гинекологические инфекции. Способы настоящего изобретения могут применяться в понижающей терапии внутрибольничных инфекций, включая без каких-либо ограничений пневмонию, интраабдоминальный сепсис, инфекционные заболевания кожи и мягких тканей, а также костные и суставные инфекции. Кроме этого, без конкретных ограничений, способы настоящего изобретения могут применяться для лечения инфекции, включая эндокардит, септический артрит и остеомиелит. В соответствии с предпочтительным техническим решением, любые из перечисленных выше заболеваний можно лечить с использованием даптомицина в соответствии со способами настоящего изобретения. Согласно другому предпочтительному техническому решению, любую из упомянутых выше болезней можно лечить с использованием липопептидного антибиотика или комбинации хинупристин/дальфопристин в соответствии со способами настоящего изобретения.
Способы настоящего изобретения могут быть реализованы на практике при одновременном применении одного или нескольких антибиотиков, отличных от липопептидного антибиотика. Даптомицин обладает способностью к сильному связыванию белка плазмы крови и не способен проходить через клеточные мембраны. Таким образом, даптомицин и другие липопептидные антибиотики, обладающие такими свойствами, едва ли способны взаимодействовать с другими антибиотиками. Принимая во внимание такую особенность, можно ожидать, что даптомицин будет давать синергический эффект при совместном применении с одним или более антибиотиками. Кроме этого, даптомицин способен улучшать профиль токсичности одного или более совместно применяемых антибиотиков. Было показано, что применение даптомицина и аминогликозида может облегчать состояние почечной токсичности, вызываемой аминогликозидом. Комбинация хинупристин/дальфопристин также может применяться в соответствии с настоящим изобретением совместно с некоторыми другими антибиотиками. Комбинация хинупристин/дальфопристин ингибирует опосредованный цитохромом Р450 3А4 метаболизм некоторых лекарственных средств, например мидазолама, нифедипина, терфенадина и циклоспорина, вследствие чего такие лекарства не следует применять совместно с комбинацией хинупристин/дальфопристин. Согласно предпочтительному техническому решению, при практической реализации настоящего изобретения антибиотик может применяться одновременно. Антибиотики и их классы, которые могут применяться совместно с даптомицином или другим липопептидным антибиотиком, без каких-либо ограничений включают в себя пенициллины и родственные лекарства, карбапенемы, цефалоспорины и родственные лекарства, аминогликозиды, бацитракин, грамицидин, мупироцин, хлорамфеникол, тиамфеникол, фузидат натрия, линкомицин, клиндамицин, макролиды, новобиоцин, полимиксины, рифамицины, спектиномицин, тетрациклины, ванкомицин, тейкопланин, стрептограмины, антифолатные агенты, включая сульфонамиды, триметоприм и их комбинации, а также пиреметамин, синтетические антибактериальные агенты, включая нитрофураны, манделат метенамина и гиппурат метенамина, нитроимидазолы, хинолоны, фторхинолоны, изониазид, этамбутол, пиразинамид, парааминосалициловая кислота (ПАС), циклосерин, капреомицин, этионамид, протионамид, тиацетазон и виомицин. Согласно предпочтительному техническому решению, антибиотики, которые могут применяться совместно с даптомицином или другими липопептидными антибиотиками настоящего изобретения, включают в себя, без каких-либо ограничений, имипенен, амикацин, нетилмуцин, фосфомицин, гентамицин, цефтриаксон и тейкопланин.
ПРИМЕР 1
max
Исследование А: Влияние С на величину СРК и токсичность в отношении скелетных мышц
max
С целью исследования эффектов С на токсичность в отношении скелетных мышц на собаках (4 самца/группу) использовали схему приема лекарственных средств, включaющую в себя внутривенный прием в течение 20 дней физиологического раствора q8 ч, 25 мг/кг даптомицина q24 ч, 75 мг/кг даптомицина q24 ч и 25 мг/кг даптомицина q8 ч. Мышечную токсичность измеряли на собаках по повышению уровней СРК до значений, превышающих нормальный интервал значений, и по микроскопическим изменениям скелетной ткани.
max
max
Равновесные концентрации даптомицина в плазме крови на 18 день определяли методом ВЭЖХ. Уровни значений С были примерно одинаковыми (в 1,23 раза более высокие) при применении 25 мг/кг q8 ч по сравнению с применением 25 мг/кг q24 ч. Уровни значений С были примерно в 2,8 раза выше при применении 75 мг/кг q24 ч по сравнению с применением 25 мг/кг q8 ч (см. данные фиг.1, верхний график (исследование А)). Значение AUС было примерно одинаковым (в 0,37 раза выше) при применении 25 мг/кг q8 ч по сравнению с применением 75 мг/кг q24 ч (см. таблицу 2 и фиг.2, верхний график).
В ходе всего периода лечения в исследовании А наблюдалось пропорциональное дозе увеличение максимальной активности СРК при увеличении дозы с 25 до 75 мг/кг при постоянном интервале между приемами лекарства в q24 ч. Однако дополнительное 4-кратное увеличение уровней СРК наблюдалось на животных, получавших дозу 25 мг/кг q8 ч по сравнению с применением дозы в 75 мг/кг q24 ч, несмотря на то, что общая дневная доза в двух таких схемах была одинаковой. Для всех режимов приема лекарственных средств значение СРК достигало максимального значения примерно через неделю лечения, после чего оно уменьшалось несмотря на продолжение лечения.
Животных, подвергаемых испытанию, умерщвляли примерно по прошествии еще одного интервала после приема последней дозы и мышечную ткань подвергали микроскопическому исследованию на предмет признаков миопатии (см. таблицу 1).
Таблица 1Схема приема лекарственной дозы
Участок повреждения*
Физиологический раствор, q8 ч
25 мг/кг q24 ч
75 мг/кг q24 ч
25 мг/кг q8 ч
Скелетная мышца
Дегенерация миофибрилл
0/24
3/24
8/24
14/24
Регенерация миофибрилл
1/24
2/24
1/24
9/24
Диафрагма
Дегенерация миофибрилл
0/4
0/4
0/4
1/4
Сердце
Дегенерация миофибрилл
0/4
0/4
0/4
0/4
*Случаи мышечно-связанных гистопатологических результатов представлены частным, числитель которого представляет собой число поврежденных участков, а знаменатель - число исследованных участков. В случае скелетных мышц шесть участков исследовали на каждой из четырех собак; всего исследовали 24 участка.
Дегенерация скелетных миофибрилл повышалась примерно в два раза при применении 25 мг/кг q8 ч по сравнению с применением 75 мг/кг q75 ч. Кроме того, дегенерация скелетных миофибрилл увеличилась в пять раз при применении 25 мг/кг q8 ч по сравнению с применением 25 мг/кг q24 ч. Дегенерация скелетных миофибрилл была минимальной тяжести и коррелировала с увеличением значения СРК в сыворотке крови в 3-25 раз. В исследовании А микроскопического дегенеративного влияния на сердечную мышцу не отмечалось.
В таблице 2 суммированы результаты исследования А.
Таблица 2
Схема приема лекарственной дозы
Общая дневная доза (мг/кг)
C<sub>max</sub> (Мкг/мл)
AUC<sub>0-24ч</sub> (мкг-ч/мл)
Максимальное значение СРК (ед/л)
Случаи микроскопической миопатии<sup>1</sup>
Физ.раствор q8 ч
0
0
0
265
0/28
25 мг/кг q24 ч
25
190
682
309*
3/28
75 мг/кг q24 ч
75
540
1840
990
8/28
25 мг/кг q8 ч
75
238
2562
4000
15/28
*Солдат, исключенный из исследования
<sup>1</sup>Число случаев микроскопической миопатии (последняя колонка) представляет собой число участков с минимальными дегенеративными изменениями, деленное на число исследованных участков. В этом эксперименте у каждой из четырех собак исследовали по семь участков; общее количество участков составляло 28.
0-24ч
mах
mах
Кроме того, токсичность, по-видимому, не связана со значением AUC или с нетоксичным концентрационным порогом в плазме крови. Увеличение СРК и число случаев миопатии было повышено при применении 25 мг/кг q8 ч в сравнении с применением 75 мг/кг q24 ч, несмотря на более низкое значение С. Кроме того, наблюдалось 5-кратное повышение токсичности, измеренное по числу случаев микроскопической миопатии, и более чем 10-кратное увеличение уровней СРК при применении дозы в 25 мг/кг трижды в день, в сравнении с однократным дневным приемом, несмотря на сравнимые значения С. Хотя значение AUC повышалось всего лишь в 0,37 раза при схеме приема лекарства 25 мг/кг q8 по сравнению со схемой 75 мг/кг q24 ч, активность СРК и число случаев миопатии увеличивались в 2-4 раза.
Не желая связывать себя конкретной теорией, авторы изобретения считают, что влияние на скелетные мышцы, по всей вероятности, связано с временным резервом при низких концентрациях в плазме крови, который имеется в распоряжении для восстановления субклинического повреждения миофибрилл. В сравнении с приемом фракционированных доз, однократное введение суточной дозы обеспечивает большее время пребывания лекарственного средства при минимальных концентрациях в плазме, что позволяет расходовать большее время на восстановление, и вследствие этого такая дозировка менее токсична. Так, например, при схеме приема лекарственной дозы в 25 мг/кг q8 ч концентрации в плазме никогда не опускаются ниже 27 мкг/мл, что является минимальным пороговым значениям для такой схемы. Напротив, концентрации в плазме при схеме 75 мг/кг q24 ч были ниже указанного значения в течение примерно 12 часов до приема следующей дозы. Дневной период минимального воздействия может объяснить причину того, почему однократная дневная схема приема лекарственного средства (75 мг/кг q24 ч) ассоциируется с меньшей токсичностью, чем при дробном введении доз (25 мг/кг q8 ч).
ПРИМЕР 2
Исследование В: влияние пороговой концентрации в плазме крови на токсичность в отношении скелетных мышц
Для изучения влияния пороговой концентрации в плазме на токсичность в отношении скелетных мышц на собаках (4 самца на группу) применяли схему приема лекарственных доз, включaющую в себя внутривенный прием в течение 20 дней физиологического раствора q8 ч, даптомицина 5 мг/кг q24 ч (приблизительно NOELq24 ч) и даптомицина 5 мг/кг q8 ч.
1/2
mах
mах
Как и в примере 1, равновесные концентрации даптомицина в плазме крови определяли методом ВЭЖХ. Интервал q8 ч составляет для собак 3 периода полужизни лекарственного средства (t=2,5 часа) и должен оказывать минимальное влияние на равновесное значение С в сравнение со схемой q24 ч. Однако для обоих режимов применения значение С для схемы 5 мг/кг q8 ч и 5 мг/кг q24 ч было примерно одинаковым (см. данные фиг.1, нижний график (исследование В)). Однако значение AUС было примерно в три раза выше (выше в 2,6 раза) при схеме 5 мг/кг q8 ч в сравнении со схемой 5 мг/кг q24 ч (см. таблицу 4 и данные фиг.2, нижний график).
Уровни содержания СРК в сыворотке определяли по методике примера 1. Изменений в значении уровней СРК для схемы 5 мг/кг q24 ч и контрольного опыта в физиологическом растворе не наблюдалось. В отличие от этого, уровни СРК по схеме 5 мг/кг q8 ч повышались по сравнению со схемой 5 мг/кг q24 ч и контрольными опытами в физиологическом растворе. При схеме 5 мг/кг q8 ч максимальные значения СРК были в 3-4 раза выше фона через неделю после применения даптомицина и после этого уменьшались несмотря на продолжение лечения аналогично тому, что наблюдалось в исследовании А (см. данные фиг.1, нижний график (исследование В)).
Животные, прошедшие обработку, умерщвлялись примерно через один дозировочный интервал после приема последней дозы, и мышечную ткань подвергали микроскопическому исследованию на симптомы миопатии, следуя методике примера 1; полученные результаты представлены в таблице 3.
Таблица 3Схема приема лекарственной дозы
Участок повреждения*
Физиологический раствор, q8 ч
5 мг/кг q24 ч
5 мг/кг q8 ч
Скелетная мышца
Дегенерация миофибрилл
0/24
2/24
11/24
Регенерация миофибрилл
0/24
3/24
8/24
Диафрагма
Дегенерация миофибрилл
0/4
1/4
0/4
Сердце
Дегенерация миофибрилл
0/4
0/4
0/4
*Случаи мышечно-связанных гистопатологических результатов представлены частным, числитель которого представляет собой число поврежденных участков, а знаменатель - число исследованных участков. В случае скелетных мышц шесть участков исследовали на каждой из четырех собак; всего исследовали 24 участка.
Дегенерация миофибрилл скелетных мышц увеличивалась в четыре раза при схеме 5 мг/кг q8 ч по сравнению со схемой 5 мг/кг q24 ч. Наблюдаемая дегенерация имела минимальную тяжесть, причем затрагивалось минимальное количество волокон, и коррелировала с повышением уровней содержания СРК в 0-4 раза. Дегенерация миофибрилл в исследовании В наблюдалась в меньшей степени, чем при использовании высоких доз в исследовании А. В исследовании В не отмечалось дегенеративного воздействия на сердечную мышцу.
В таблице 4 суммированы результаты исследования В.
Таблица 4
Схема приема лекарственной дозы
Общая дневная доза (мг/кг)
C<sub>max</sub> (Мкг/мл)
AUC<sub>0-24ч</sub> (мкг-ч/мл)
Максимальное значение СРК (ед/л)
Случаи микроскопической миопатии<sup>1</sup>
Физ.раствор q8 ч
0
0
0
150
0/28
5 мг/кг q24 ч
5
58
180
150
3/28
5 мг/кг q8 ч
15
58
412
500
11/28
<sup>1</sup>Число случаев микроскопической миопатии (последняя колонка) представляет собой число участков с минимальными дегенеративными изменениями, деленное на число исследованных участков. В этом эксперименте на каждой из четырех собак иccлeдовали по семь участков, общее количество участков составляло 28.
mах
При дозировочном интервале q24 ч значение NOEL составляет примерно 5 мг/кг. Схема NOELq24 ч не приводит к изменению СРК, и при этом наблюдаются лишь незначительные гистопатологические симптомы токсичности в отношении скелетных мышц. Однако проведенные эксперименты показали, что NOELq24 ч не определяет пороговое значение концентрации в плазме, вызывающей токсическое действие, поскольку применение каждые 8 часов (т.е. 5 мг/кг q8 ч) вызывает мышечную токсичность, о чем свидетельствует увеличение значения СРК и микроскопическая миопатия, хотя значение С аналогично значению, получаемому при использовании схемы 5 мг/кг q24 ч. Токсичность может быть связана со временем ниже заданной концентрации в плазме. Так, например, временной интервал для концентрации ниже 10 мкг/мл составляет 6 часов при схеме 5 мг/кг q8 ч, по сравнению с 18 часами при схеме 5 мг/кг q24 ч (см. данные фиг.1, нижний график). Полученные результаты дают основание предполагать, что максимальная концентрация даптомицина в плазме крови, не связанная с наблюдаемой токсичностью в отношении скелетных мышц, зависит от частоты приема дозы лекарственного средства.
ПРИМЕР 3
С целью изучения причины предотвращения временной токсичности в отношении скелетных мышц у пациентов при использовании повышенных интервалов между введением препарата даптомицин применяли внутривенно на госпитализированных взрослых пациентах с серьезными симптомами грамположительной бактериемии или рядом инфекционных заболеваний, связанных с грамположительными бактериями, устойчивых к действию ванкомицина, или когда такие пациенты не восприимчивы к современной терапии либо она им противопоказана. Пациентов лечили в течение периода в 7-21 день. Уровни содержания СРК в сыворотке определяли перед первым применением антибиотика и через день, в течение 7-дневного курса лечения, и далее ежедневно.
Полученные результаты показали, что введение даптомицина восьми пациентам в дозе 4 мг/кг каждые 24 часа или девяти пациентам в дозе 6 мг/кг каждые 24 часа не приводит у большинства пациентов к повышению уровней содержания СРК в сыворотке крови выше нормальных значений (20-198 ед/л) (см. таблицу 5). Более того, даже в случае нескольких пациентов, у которых наблюдалось некоторое повышение уровней СРК до значений выше нормальных, считается, что такое увеличение не связано с лечением даптомицином. Ни один из пациентов не испытывал признаков мышечной боли или слабости, и все пациенты оказались способными окончить курс лечения даптомицином. Аналогичным образом, применение на трех пациентах начальной дозы в 6 мг/кг даптомицина с последующим применением 3 мг/кг каждые 12 часов не вызывало повышения уровней содержания СРК выше нормальных значений.
Таблица 5
6 мг/кг q24 ч
Пациент
Фон перед применением дозы
Интервал<sup>1</sup> наблюдения СРК в ходе лечения
Общее число пациентов с предполагаемым негативным влиянием на скелетные мышцы, связанным с действием лекарства<sup>2</sup>/общее число оценок
Минимальный
Максимальный
1
<18
<18
194
2
129
54
140
3
Н.о.
<18
56
0/9
4
35
<18
43
5
<18
<18
<18
6
44
<18
44
7
11
6
101
8
25
8
25
9
284
171
*1324
4 мг/кг q24 ч
1
43
33
59
0/8
2
18
18
35
3
25
19
212
4
44
<18
48
5
144
<18
144
6
23
20
36
7
37
32
369**
8
<18
<18
26
6 мг/кг с последующим применением 3 мг/кг q12 ч
1
78
78
137
0/3
2
29
<18
49
3
<18
<18
34
<sup>1</sup>Нормальный интервал СРК 20-192; определяемый уровень 18.
<sup>2</sup>CPК>ULN (192 ед/л) с сопутствующими клиническими симптомами боли/слабости или CPК>ULN (192 ед/л) без сопутствующих клинических признаков боли/слабости и без выраженной причины для повышения уровней СРК.*Увеличение СРК начинается после применения 1-й дозы; возвращается к фоновому значению, хотя лечение даптомицином продолжается. Пациенты получали также лечение стероидами.**Значение проявлялось после применения 13-й дозы и возвращалось к фоновому значению при продолжении лечения.
ПРИМЕР 4
Пациентам вводили даптомицин в разных дозировках с различными интервалами. Даптомицин вводили внутривенно взрослым пациентам с диагнозом инфекционного заболевания, связанного с действием штамма грамположительных бактерий, резистентных к ванкомицину или каким-либо иным образом невосприимчивых с современным терапевтическим методам, или не переносящим их. Пациентов лечили в течение 7-14 дней. Такое лечение может продолжаться в течение 28-56 дней. Вводили различные дозы даптомицина с интервалом в 24 часа, 48 часов, 72 часа, 96 часов и неделю. Могут быть использованы также и другие интервалы между введениями препарата, имеющие промежуточные или меньшие значения, чем указанные дозировочные интервалы. Используемые дозировки могут включать в себя 7, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 16, 18, 20, 22 или 25 мг/кг. Можно также использовать дозы выше или ниже указанных либо имеющие промежуточные значения.
Эффективность лечения определяли с помощью одного или более из следующих критериев: устранение или уменьшение концентрации грамположительных бактерий в крови по сравнению с таковой в крови, взятой до лечения для микробиологического исследования; промежуток времени в днях для микробиологического разрешения или улучшения бактериального инфекционного состояния; снятие или улучшение клинических признаков и симптомов, по сравнению с таковыми, имевшими место при поступлении, а также коэффициенты выживаемости через 3-4 недели после приема последней дозы антибиотика. Уровень дозировки и интервал ее введения считаются эффективными при удовлетворительном показателе одного или более из перечисленных критериев. Уровни содержания СРК в плазме определяли до первого лечения антибиотиком и через день в течение семи дней лечения, а после этого - ежедневно. Уровень дозировки и интервал считаются безопасными в том случае, если они не вызывают повышения уровней содержания СРК в сыворотке крови значительно выше нормальных значений или если лечение не приводит к появлению болевых симптомов в скелетных мышцах или к состоянию слабости.