Определение острой токсичности и изучение раздражающего действия новой лекарственной формы бензимидазола

этого моллюска. Значительная часть болот и заболоченных водоемов, служащих местом обитания данного моллюска.

Заключение. Исходя, из этих данных можно считать, что, овцы до года находятся в группе - “риска”, к инвазии фасциолами. Самая высокая экстенсивность инвазии отмечена у овец от 2-х лет и старше.

Литература: 1. Абдуллаев Х.С., «Паразитофауна, эпизоотологические

особенности фасциолеза КРС в ЦНР РФ, дегельминизация». - 1995. - С. 22.

Prevalence and age dynamics of Fasciola spp. infection in sheep in province of Erbil. Iraj. Noor-Al-Deen K.N., Malisheva N.S. Kursk State University.

Summary. The highest rate of Fasciola spp. infection among sheep of different age is noted in animals elder 2 years and more. The rate of F. hepatica infection is higher (81,8%) compared with Fasciola gigantica (12,7%). The rate of mixed Fasciola spp. infection is low (5,5%).

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ И ИЗУЧЕНИЕ РАЗДРАЖАЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ НОВОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ БЕНЗИМИДАЗОЛА

Оробец В.А., Зайченко И.В.

ФГОУ ВПО Ставропольский ГАУ

Введение. В настоящее время количество домашних плотоядных в российских городах не уменьшается, а в некоторых регионах даже наблюдается их рост, что, несомненно, приводит к загрязнению окружающей среды. Естественно, эта проблема способствует распространению заразных заболеваний среди животных и людей, в том числе и гельминтозов. Поэтому, разработка интегрированных мер наступательной профилактики и терапии опасных зоонозов имеет особую актуальность.

Учитывая преимущества и недостатки известных антигельминтных препаратов, широко применяемых в ветеринарной практике, разработана новая лекарственная форма на основе бензимидазола для лечения гельминтозов животных. Препарат представляет собой наносуспензию белого цвета с 5%-ным содержанием действующего вещества. Перед испытанием различных форм бензимидазола на целевых животных, нами были проведены токсикологические исследования на лабораторных животных.

Материалы и методы. Работа по изучению острой и хронической токсичности препарата проводилась в октябре 2009 г. на базе кафедры терапии и фармакологии СТГАУ на белых мышах (самцы и самки массой 19-21 г).

331

Для определения летальных доз использовали клинически здоровых лабораторных животных. Всего для определения острой токсичности лекарственной формы было использовано 150 лабораторных белых мышей. Использовали два способа введения препарата перорально и парентерально.

Результаты. Для нахождения минимально токсичных доз (максимально переносимых) при парентеральном введении препарата понадобились 25 лабораторных мышей. Лабораторным животным, разделенным на группы по 5 мышей в каждой, вводился препарат в возрастающих дозах. Стартовая доза составила 100 мг/кг массы тела и в группе 1, в которой она применена, не происходило изменений в поведении и симптомов ухудшения их физического состояния. В группах 2-4, в которых вводились дозы 130, 160, 190 и 220 мг/кг соответственно, также никаких видимых отклонений и летальных исходов не отмечено. Доза 250 мг/кг, введенная мышам группы 5, хотя и не вызвала смерти ни одного из четырех животных, но наблюдались кратковременные периоды возбуждения, которые сменялись периодами глубокого угнетения, причем это угнетение продолжалось 2,5±0,5 часа, а после данного промежутка времени все мыши в группе пришли в нормальное состояние и принимали корм и воду. Так как при испытании дозы равной 250 мг/кг были обнаружены явления, указывающие на отравление лабораторных животных и наступление токсического эффекта препарата, но при этом гибели не отмечено, эта доза была принята в качестве максимально переносимой (МПД) и стартовой для проведения эксперимента по определению летальных доз при парентеральном введении.

При пероральном введении показатель МПД был значительно выше. Так доза (в пересчете на действующее вещество) равная 2000 мг/кг гибели животных не вызвала, но были обнаружены признаки наступления токсического эффекта препарата.

Опыт по определению смертельных доз проводился на мышах, которые были разделены на опытные и контрольные группы методом случайной выборки, с учетом массы тела, в качестве определяющего показателя, по пять разнополых особей в каждой. Введение исследуемого препарата опытным группам осуществлялось с соблюдением правил асептики и антисептики, контрольным животным вводился соответствующий объем дистиллированной воды. За состоянием здоровья животных наблюдали 14 дней после введения, учитывали внешний вид и поведение, отношение к воде и пище, подвижность, состояние шерстного покрова и видимых слизистых, а также регистрировали гибель, в случае ее возникновения. Препарат животным вводили в возрастающих дозах с равным интервалом между ними (табл. 1), учитывали количество павших и выживших животных, процент летальности и ее выражение в пробитах (по А.А. Ступникову, 1975).

332

Таблица 1

Схема опыта и результаты изучения острой токсичности лекарственной формы бензимидазола на белых мышах при внутримышечном введении

Тип введения № группы Доза препарата , мг/кг Количество животных в группе на начало опыта, гол Пало животных, гол Выжило животных, гол н о о к л 1* Ч .o' Пробиты

парентерал ьное 1 250 10 0 10 0 3,04

2 325 10 2 8 20 4,16

3 500 10 4 10 40 4,75

4 575 10 8 2 80 5,84

5 650 10 10 0 100 6,96

пероральное 1 2000 10 0 10 0 3,04

2 2400 10 3 7 30 4,48

3 2800 10 6 4 60 5,25

4 3200 10 8 2 80 5,84

5 3600 10 10 0 100 6,96

Расчет среднесмертельной дозы производили по следующей формуле: ЬД50= (сумма (А+В) х (М-Н)) / 200, где А и В - величины смежных доз, мг/кг М и Н - частоты летальных исходов смежных доз, %

200 - постоянный коэффициент

При внутримышечном введении ЬД50 препарата = (575х 20) + (825 х 20) + (1075 х 40) +(1225 х 20) / 200 = 95500 / 200 = 477,5 мг/кг

При пероральном введении ЬД50 препарата = (4400 х 30) + (5200 х 30) + (6000 х 20) +(6800 х 20) / 200 = 544000 / 200 = 2720 мг/кг

Величины LD16 и LD84 определили графически на основании доз в мг и соответствующих пробитов. На основании полученных данных в остром опыте построили пробитный график на оси абсцисс отложили пробиты, на оси ординат - дозы эффекта, нашли связующие их точки в системе координат и провели через них линию. На графике нашли величины LД16 и LД84, причем первой соответствует, пробит 4, второй пробит 6.

333

Токсичность препарата бензимидазола при парентеральном

3,04 4 4,16 4,75 5,84 6 6,96

пробиты

Токсичность препарата бензимидазола при пероральном

пробиты

Показатель ошибки средней дозы эффекта SLD50 рассчитали по следующей формуле: SLD50 = ^Д84 - ЦД16) / 2n, где LДl6 и LД84 - дозы эффекта, мг/кг;

n - суммарное количество животных в группах для которых значения пробитов находятся в пределах 3,5-6,5;

SLD при расчете острой токсичности парентерального введения (610 - 285) / (30 х 2) = 325 / 60 = 5,86;

SLD при расчете острой токсичности перорального введения (3400 - 2200) / (30 х 2) = 1200 / 60 = 20;

Острая токсичность новой лекарственной формы бензимидазола при однократном введении

Тип введения Параметры токсичности SLD50

МПД LD16 LD50 ^r 00 Q LD100

парентеральное 250 285 477,5 610 650 ±5,86

пероральное 2000 2200 2720 3400 3600 ±20

334

Таким образом, установлено, что новая лекарственные форма бензимидазола по своим токсикологическим характеристикам относятся к малоопасным для теплокровных животных веществам и позволяет, в соответствии с ГОСТ 121.007-76, отнести их к IV и III классу опасности, соответственно.

Для проведения эксперимента по изучению раздражающего действия препарата использовали четырех кроликов в возрасте 2-х месяцев. Животные были взяты из одного помета и были примерно одного веса (1,72±0,14 кг). Испытания проводили методом конъюнктивальных проб. Препарат был разведен из расчета в 1 мл воды для инъекций 1 мг. Кроликам под верхнее веко с помощью глазной пипетки ввели по одной капле новой лекарственной формы бензимидазола в правый глаз, а в левый глаз аналогично ввели воду для инъекций (контроль).

За животными наблюдали в течение часа. Сразу, после того как произвели введение, наблюдали незначительное возбуждение, которое длилось около минуты. Кролики проявляли двигательную активность, но при этом не наблюдалось развития зуда и попыток расчесывания лапками глаз.

Через 5 минут, покраснения конъюнктивы отмечено не было, а через 30 минут у трех животных в правом глазу отмечалось незначительное изменение цвета (конъюнктива приобрела слабый бледно-розовый оттенок), что может свидетельствовать о небольшом увеличении кровотока. В левом глазу изменений цвета конъюнктивы не зарегистрировано.

Осмотр животных производили через 12 часов после введения, через сутки и через двое суток. Видимых различий между состоянием левых и правых глаз у опытных кроликов при этом не наблюдали. Исходя из этого, сделан вывод, что новая лекарственная форма бензимидазола не обладает выраженным раздражающим действием и его можно применять животным, в том числе и внутримышечно.

Acute toxicity and irritative effects of new benzimidazole carbamate based dosage form. Orobec V.A., Zaichenko I.V. Stavropol State Agricultural University.

Summary. LD50 values of the tested dosage form at peroral and intramuscular administration to mice were 2720 and 475,5 mg/kg of body weight respectively. The agent didn’t show irritative effects on conjunctiva mucosa in rabbits.

335