Биологические показатели глубокозамороженной спермы разного срока хранения быков чёрно-пёстрой породы

Н.И. Коростелева, В.А. Плешаков

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ГЛУБОКОЗАМОРОЖЕННОИ СПЕРМЫ РАЗНОГО СРОКА ХРАНЕНИЯ БЫКОВ ЧЁРНО-ПЁСТРОЙ

ПОРОДЫ

В связи с возникшей необходимостью использовать запас криоконсервирован-ной спермы быков местной популяции

черно-пестрой породы для регулирования кровности голштинизированных помесей были изучены её биологические свойства.

Исследования биологических показателей криоконсервированной спермы, хранившейся 18,16,8 лет и 4 года, проводились в лаборатории при ФГУГ1 “Барнаульское” по племенной работе.

Было обнаружено, что время хранения не оказало существенного влияния на активность, абсолютную выживаемость (Б), время выживаемости и на количество спермиев с прямолинейно-поступательным движением. Различия по этим показателям между спермой разных сроков хранения незначительны и статистически недостоверны. Только коэффициент осмотической резистентности несколько ухудшился в процессе хранения криоконсервированной спермы. Разница между группами является статистически достоверной (р < 0,05).

, В результате голштинизации постепенно вытесняется генофонд местной популяции чёрно-пёстрой породы и теряется её наследственность, обуславливающая приспособительные качества этого скота к природно-климатическим условиям Алтайского края. Поэтому необходимо иметь запас спермы скота исходной популяции, чтобы в случае необходимости провести “прилитие крови” высококровным гол-штинизированным помесям.

Криоконсервированная сперма относится к органическому веществу. Все органические вещества обладают свойством распада, разложения, и время в этом процессе играет не последнюю роль.

Нами была поставлена задача: изучить биологические показатели криоконсервированной спермы быков-производителей

различного срока хранения в жидком азоте.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Объектом исследования была сперма быков чёрно-пёстрой породы, замороженная в необлицованные гранулы по 0,2 мл и хранившаяся в жидком азоте при минус 196 градусах Цельсия. Сроки хранения изучаемой спермы - 18, 16, 8 лет и 4 года.

Была изучена сперма 12 быков, полученная на искусственную вагину с интервалом 4-7 дней. Отбор быков проводили по возрасту, породной и линейной принадлежности. Вся сперма получена с августа по октябрь. На каждое исследование использовали по пять гранул от одного быка.

Замороженную сперму быков приготавливали из свежеполученной неразбавленной спермы по ГОСТ 23745 - 79 путём разбавления специальной средой (лактозо-желточно-глицеринов ая среда).

Необлицованные гранулы замороженной спермы брали стерильным пинцетом, переносили в стерильные флаконы со стерильным 2,9%-ным раствором нейтрализованного цитрата натрия и оттаивали в водяной бане при температуре (38 ± 0,5) °С, тщательно перемешивали круговыми движениями до её полного растворения.

Исследования проводились на основании ГОСТов: ГОСТ 20909.4 - 75, ГОСТ 26030 - 83, ГОСТ 27777 - 88.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

В результате проведённых исследований в сперме разных сроков хранения были обнаружены неподвижные спермии, спермии с прямолинейно-поступательным движением, с манежным и колебательным движением.

Результаты исследований биологических показателей спермы представлены в таблице 1. Наибольшую активность имела сперма, хранившаяся 8 лет (4 балла) и 4 года (3,7 балла). Сперма, хранившаяся

в течение 18 и 16 лет в жидком азоте, оценена на 3,5 балла. Различия по активности глубокозамороженной спермы разных сроков хранения статистически недостоверны. Изменчивость этого показателя средняя (12-14%). Однако лучшую абсолютную выживаемость (Э), при пяти градусах Цельсия, и время выживаемости, при той же температуре, имели спермии, хранившиеся 18 лет - 159 и 96 часов соответственно. Сперма других сроков хранения имеет несколько меньшую абсолютную выживаемость (8) и время выживаемости, но различия между всеми группами статистически недостоверны.

Наблюдается достаточно высокая изменчивость выживаемости (Су - 19-22%) и особенно абсолютной выживаемости спермы (Су - 20 - 35%).

Спермии, хранившиеся 18 лет, имели больший размер (106 микрон) и, соответственно, больший запас питательных веществ, необходимых для жизнедеятельности, что сказалось на повышенной абсолютной выживаемости.

Высокая подвижность спермиев и большой процент живых являются необходимым условием, но не гарантией оплодотворяющей способности спермы.

Важным показателем является количество спермиев с прямолинейным поступательным движением, так как именно они

239

поднимаются по половым путям самки и участвуют в оплодотворении.

Наибольшее количество спермиев с прямолинейным поступательным движением содержится в сперме, хранившейся 18 лет в жидком азоте, - 18,4 млн. шт. (табл.

1). Следующее ранговое место по этому показателю занимает сперма, хранившаяся четыре года - 15,94 млн. шт. Наименьшее количество спермиев с прямолинейным поступательным движением в глубокозамороженной сперме, хранившейся 16 лет,

- 14,28 млн. шт. Однако различия между группами незначительны и статистически недостоверны.

Метод определения резистентности (В.К. Милованов, 1933), основан на растворяющем действии изотонического раствора хлористого натрия на липопротеид-ный покров спермы. Чем менее устойчивы спермии, тем более сильное действие на них оказывает этот раствор, вызывая набухание и смывание (как установили Е.П. Нагорный и И.В. Смирнов, 1958 (цит. по В.К. Милованову, 1962)) липопротеидно-го покрова. Спермии, лишённые покрова, легко погибают под влиянием неполноценной Среды.

На основании ГОСТа 20909.4-75: чем больше коэффициент резистентности, тем выше осмотическая резистентность спермы.

. ,.?м ' СДА . Г1. ^ , *>' •

У'-'

Таблица 1

Биологические показатели криоконсервированной спермы разного срока хранения быков чёрно-пёстрой породы

Он СГ Сроки хр., лет Колич. быков, гол. Активность, балл Абсолютная выживаемость (Б) Время выживаемости, ч. Кппд, млн. шт. Як

Х±ш Су, % Х±ш Су, % Х±ш Су, % Х±ш Су, % Х±т Су

1 18 3 3,5±0,22 14,29 159,0^20,65 31,82 96,0±7,59 19,37 18,4±1,63 19,71 0,27±0,010 8,00

2 16 3 3,5±0,22 14,29 140,5±10,77 18,78 90,0±8,05 21,91 14,3±1,41 22,14 0,24±0,017 16,11

3 8 3 4,00±0,00 0 145,5±20,85 35,11 90,0±8,05 21,91 15,6±0,42 6,01 0,26±0,018 15,06

4 4 3 3,70±0,20 12,09 141,0±11,95 20,76 84,0±7,59 22,13 15,9±0,98 13,70 0,35±0,022 13,85

Примечание. Кппд - количество спермиев с прямолинейным поступательным движением, млн. шт.; Кк - коэффициент осмотической резистентности.

>

п

Г;

240_____________________________________________________________________________________________________________________________Вестник Алтайского государственного аграрного университета №2 2003 г.

По нашим исследованиям, коэффициент осмотической резистентности больше у спермы, которая хранилась менее всего,

- четыре года, что на 0,08 (23%) больше, чем у спермы хранившейся 18 лет, на 0,11 (31 %) больше, чем у спермы, хранившейся 16 лет и на 0,09 (26%) больше, чем у спермы, хранившейся восемь лет. Разница между всеми группами является статистически достоверной (р < 0,05).

Изменчивость данного показателя находится в пределах 8-16%.

Причиной этого является, по-видимому, старение липопротеидного по-

становится менее устоичив к раствору хлористого натрия.

На основании проведённых исследований можно сделать вывод, что время хранения глубокозамороженной спермы не повлияло существенно на её биологические показатели. В процессе хранения криоконсервированной спермы несколь-ко ухудшился только коэффициент осмотической резистентности.

ЛИТЕРАТУРА

1. Милованов В.К. Биология воспроизводства и искусственное осеменение животных. - М.: Сельхозиздат, 1962. - 696 с.

крова, который в результате хранения

Л.С. Солонецкая, А.И. Афанасьева, А.М. Еранов

ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ И ОЦЕНКА ИЗМЕНЕНИЙ МОРФОБИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ ПРИ АДАПТАЦИИ КОЗ К РАВНИННЫМ УСЛОВИЯМ

У коз горноалтайской пуховой породы изучены морфобиохимические показатели крови и функциональное состояние организма при адаптации к равнинным условиям. Установлено, что перемещение коз из естественных условий обитания вызывает повышение уровня обмена веществ. Стабилизация показателей функционального состояния организма коз наблюдалась к третьему дню пребывания животных в условиях физиологического двора, а морфобиохимические показатели крови - к 30 дню.

Козоводство в Горном Алтае издавна является традиционной отраслью животноводства, поставляющей ценные виды сырья: пух, шерсть, шкуры и мясо. В 1982 году успешно завершилась многолетняя селекционно-племенная работа по выведению новой породы пуховых коз - горноалтайской [3].

Торноалтайские пуховые козы как ценный генофонд широко использовались в России и за рубежом. Они неоднократно вывозились в Монголию, Шотландию, Казахстан, Таджикистан, Дагестан, Туву и другие регионы, а также эмбрионами в Англию [1]. Племенные животные в раз-

личных природно-экологических условиях удовлетворительно адаптировались.

Способность адаптироваться к различным условиям существования является одним из важнейших свойств живых организмов. В механизмах адаптации к комплексу климато-географических факторов большое значение имеет состояние системы крови, изменения которой являются важным показателем влияния внешней среды на организм [2].

Известно, что адаптация животных к новым природно-экологическим условиям связана со сменой привычных для животного условий кормления и содержания, температурно-влажностного режима, суточного стереотипа и др., которые неизбежно приводят к активации всех жизненно важных функций организма.

Учитывая вышеизложенные данные, целью наших исследований мы поставили определение функционального состояния и морфобиохимических показателей крови коз при адаптации их к равнинным условиям.

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Опыт проводили на козах горноалтайской пуховой породы (п=5). Животные были завезены из Усть-Коксинского райо-