УСТРОЙСТВО ДЛЯ ВЗЯТИЯ ОБРАЗЦОВ ОРГАНОВ И ТКАНЕЙ ДЛЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ И СОХРАНЕНИЯ В НИХ НАПРЯЖЕННОГО СОСТОЯНИЯ СТРУКТУР

Калмин О.В., Николенко В.Н.
Устройство для взятия образцов органов и тканей для
гистологического исследования и сохранения в них
напряженного состояния сфуктур
Полезная модель относится к области медицины, а точнее к нормальной, патологической и топографической анатомии, биомеханике и гистологии, и может быть использована при изучении сосудистых и соединительнотканных структур органов и тканей.
Размерные характеристики, пространственное расположение и конфигурация тканевых структур моделируются естественно-напряженным состоянием или заданной деформацией органов и тканей. Между тем, в образцах, взятых для гистологического исследования, нарушается естественно-напряженное или заданное деформированное состояние структур, существзтющее in situ или на определенной стадии деформирования на разрьгеной машине. Поэтому при гистологическом исследовании размерные и пространственные характеристики сосудистых и соединительнотканных структур органов и тканей отражаются в первом случае неточно по сравнению с таковыми in situ, а во втором - не соответствуют действительным изменениям фиброангиоархитектоники при деформировании.
В гистологической практике используются различные методы, частично устраняющие деформацию образцов на стадии фиксации в формалине или других фиксирующих жидкостях: способ улитки, накальшание образцов на картон, пробку, дерево, восковые пластинки, закладка образцов между предметными стеклами 1,2,3,4,5,6,7. Однако эти способы имеют ряд недостатков. Ни один из указанных методов не устраняет самой большой и существенной - начальной
МКИ A 61 в 10/00
деформации, которая возникает в момент взятия образцов из органов и тканей или из зажимов разрывной машины, так как образец ткани сначала иссекают in situ или снимают деформирующую нагрузку на разрывной машине, а только затем его накалывают на пластинку с помощью булавок или игл. Между тем, конечной целью изучения деформативно-прочностных свойств органов и тканей является получение информации о динамике и характере изменений и нарушений фиброангиоархитектоники на различных стадиях растягивающего деформирования. Однако при снятии деформируюш;ей нагрузки, в зависимости от стадии деформирования, образец ткани полностью или частично возвращается в исходное состояние, в котором его и фиксируют одним из указанных выше способов. Естественно, что данные способы не сохраняют заданного на стадии деформирования напряжения сосудистых и соединительнотканных структур. Таким образом, перечисленные выше способы являются неточными, трудоемкими и не позволяют исследовать изменения фиброангиоархитектоники на различных стадиях деформирования.
Нами впервые предложено специальное устройство для взятия образцов органов и тканей для гистологического исследования, состоящее из двух параллельно расположенных хирургических кровоостанавливающих зажимов Бильрота или Кохера, бранши которых жестко скреплены между собой пластинами. Это устройство изображено на фиг, 1, 2 (где 1 и 2 - кровоостанавливающие зажимы, 3 - скрепляющие пластины). Как вариант предлагаемой полезной модели, возможно изготовление устройства с изменяемым расстоянием между зажимами.
Предлагаемым устройством захватывают в качестве образца для гистологического исследования часть органа или ткани in situ или деформированного между зажимами разрывной мащины на определенной по графику стадии деформирования. На фиг. 3 изображен захват конструкцией из зажимов участка
бедренной артерии на трупе перед иссечением из нее образца (сегмента). На фиг. 4 изображено наложение конструкции из зажимов на блуждающий нерв, растянутый на разрывной машине ZM-40. Затем образец иссекают с внешней стороны устройства и помещают вместе с устройством в фиксирующую жидкость (формалин, спирт и др.) для химической фиксации, проводят через батарею спиртов, хлороформ и 1-ю порцию парафина. Таким образом устраняется деформация образца при химической фиксации, обезвоживании и уплотнении. После этого из образца вырезают центральную часть, расположенную между зажимами, и помещают во 2-ю порцию парафина, а затем окончательно заливают в парафиновый блок. Использование для гистологического исследования центральной части образца исключает артефакты, связанные с краевым раздавливанием ткани образца зажимами.
Затем из парафинового блока готовят срезы, обеспарафинивают их, окрашивают и заключают. При исследовании бьшо проведено взятие 8 бедренных артерий. Сначала на обнаженной артерии тушью отмечали два участка и измеряли их длину. Затем один сегмент брали с помощью предлагаемой полезной модели, второй сегмент брали обычным способом. После иссечения второго сегмента снова измеряли его длину. Установлено, что образец артерии, взятый без использования предлагаемого устройства, после иссечения укорачнвается на 15-21%. Микроскопически установлено, что этот образец укорачивается за счет сокращения мышечного слоя стенки артерии на 15.3-20.1%, что проявляется волнообразным ходом внутренней эластической мембраны и внутренней оболочки артерии. В образцах бедренной артерии, взятых с использованием предлагаемого устройства, внутренняя эластическая мембрана и внутренняя оболочка артерии имели ровный прямой ход, без извилистости. На фиг. 5 представлен продольный срез бедренной артерии, взятой без примеиения предлагаемого устройства. На фиг. 6 представлен продольный срез бедренной артерии, взятой с применением предлагаемого устройства.
Предлагаемая полезная модель является новой, так как в литературе не имеется сведений о применении подобного устройства для взятия образцов тканей для гистологического исследования.
Предлагаемая полезная модель имеет ряд преимуществ: снижает степень деформации сосудистых и соединительнотканных структур органов и тканей, упрощает методику и сокращает время подготовки образцов, позволяет исследовать деформативные и деструктивные изменения сосудистых и соединительнотканных структур органов и тканей на различных стадиях деформирования.
Положительный эффект от использования предлагаемой полезной модели заключается в снижении степени деформации сосудистых и соединительнотканных структур органов и тканей в образцах для гистологического исследования, в возможности получить более достоверную гистологическую картину фиброангиоархитектоники органов и тканей, зшрощении методики и сокращении времени подготовки образцов к фиксации и обезвоживанию. Применение предлагаемой полезной модели впервые в гистологической практике позволяет исследовать функциональные и деструктивные изменения сосудистых и соединительнотканных структур органов и тканей при деформировании на разрывных машинах.
ЛИТЕРАТУРА
1.Войно-Ясенецкий М.В., Жаботинский Ю.М. Источники ошибок при морфологических исследованиях.- Л., 1970.
2.Волкова О.В., Елецкий Ю.К. Основы гистологии с гистологической техникой.-М., 1982.
3.Меркулов Г.И. Курс патологогистологической техники. - Л., 1969.
4.Основы общей гистологии и гистологическая техника / Под ред. В.Г.Елисеева.- М., 1959.
5.Роскин Г.И. Микроскопическая техника.- М., 1951.
6.Dacaens С., Вага J., Rosa В., Daher N., Burtin P. Early oncofetal antigenic modifications during rat colonic carcinogenesis // Cancer Res.- 1983.- Vol.43. P.355-382.
7.Park C.M., Reid P.E., Walker D.S., McPherson B.R. A simple, practical swiss roll method of preparing tissues for paraffin or metacrylate embedding // J. Microscopy.- 1987.- Vol.145, №1.- P.I 15-120.
лА //
Авторы: ff/l6f- О.В.Калмин
B.H. Николенко