МУТАНТНЫЕ АНТИГЕНЫ GAS57 И АНТИТЕЛА ПРОТИВ GAS57

1. Очищенный мутантный антиген GAS57, содержащий аминокислотную модификацию в одном или нескольких положениях аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот D151, H279 и S617, где указанные положения аминокислот пронумерованы согласно SEQ ID NO:1, и где протеолитическая активность очищенного мутантного антигена GAS57, направленная против интерлейкина-8 (IL-8), по меньшей мере на 50% ниже активности GAS57 дикого типа, определенной с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН или с помощью ELISA-анализа.
2. Очищенный мутантный антиген GAS57 по п.1, содержащий по меньшей мере одну аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из D151A и S617A.
3. Очищенный мутантный антиген GAS57 по п.2, содержащий SEQ ID NO:2 [D151A], SEQ ID NO:3 или SEQ ID NO:4.
4. Очищенный мутантный антиген GAS57 по п.1, который представляет собой гибридный белок, содержащий второй антиген GAS57.
5. Очищенный мутантный антиген GAS57 по п.1, связанный с белком-носителем.
N. meningitidis
H. influenzae
C. difficile
C. difficile
6. Очищенный мутантный антиген GAS57 по п.5, где указанный белок-носитель выбран из группы, состоящей из бактериального токсина, бактериального токсоида, внешнего мембранного белка , белка теплового шока, белка коклюша, белка D , цитокина, лимфокина, гормона, фактора роста, токсина A , токсина B и железосодержащего белка.
7. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая очищенный мутантный антиген GAS57 по п.1.
8. Молекула нуклеиновой кислоты по п.7, кодирующая аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3 и SEQ ID NO:4.
9. Молекула нуклеиновой кислоты по п.7, содержащая нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из кодирующих последовательностей, представленных в SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7 и SEQ ID NO:8.
10. Препарат антител, которые специфически связываются с GAS57 дикого типа и ингибируют способность GAS57 дикого типа расщеплять человеческий IL-8.
11. Препарат антител по п.10, которые также ингибируют способность GAS57 дикого типа расщеплять человеческие хемокины, выбранные из группы, состоящей из CXCL1/GROα, CXCL2/GROβ, CXCL3/GROγ, CXCL4, CXCL12/SDF-1α, CXCL12/SDF-1β, CXCL12/SDF-1γ, CXCL5/ENA 78, CXCL6/GCP-2, CXCL7/NAP-2, CXCL9/MIG, CXCL10/IP10, CXCL11, CXCL13, CXCL14 и CXCL16.
2
12. Препарат антител по п.10, где указанными антителами являются поликлональные антитела, моноклональные антитела, гуманизованные антитела, химерные антитела, F(ab')-фрагменты, F(ab)-фрагменты, молекулы Fv, нековалентные гетеродимеры, одноцепочечные молекулы Fv (sFv), конструкции фрагментов димерных антител, конструкции фрагментов тримерных антител, миниантитела или их смеси.
13. Композиция, включающая
(a) активный агент, выбранный из
(i) очищенного мутантного антигена GAS57, содержащего аминокислотную модификацию в одном или нескольких положениях аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот D151, H279 и S617, где указанные положения аминокислот пронумерованы в SEQ ID NO:1, и где протеолитическая активность очищенного мутантного антигена GAS57, направленная против интерлейкина-8 (IL-8), по меньшей мере на 50% ниже активности GAS57 дикого типа, как было подтверждено с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН или с помощью ELISA-анализа;
(ii) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей очищенный мутантный антиген GAS57; и
(iii) препарата антител, которые специфически связываются с GAS57 дикого типа и ингибируют способность GAS57 дикого типа расщеплять человеческий IL-8; и
(b) фармацевтически приемлемый носитель.
14. Композиция по п.13, также содержащая активный агент, который может быть использован в вакцине для детей.
15. Композиция по п.14, где указанный активный агент выбран из группы, состоящей из
N. meningitidis, S. pneumoniae, Bordetella pertussis, Moraxella catarrhalis, Clostridium tetani, Chorinebacterim diphteriae
(a) полипептидного антигена, выбранного из группы, состоящей из полипептидов , респираторно-синцитиального вируса, полиовируса, вируса кори, вируса паротита, вируса коревой краснухи и ротавируса; и
(b) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей указанный полипептидный антиген.
16. Композиция по п.13, также содержащая второй активный агент, который может быть использован в целях приготовления вакцины для введения пожилым людям или индивидуумам с ослабленным иммунитетом.
17. Композиция по п.16, где указанный второй активный агент выбран из группы, состоящей из
Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureaus, Staphylococcus epidermis, Pseudomonas aeruginosa, Legionella pneumophila, Listeria monocytogenes
(a) полипептидного антигена, выбранного из группы, состоящей из полипептидных антигенов , вируса гриппа и вируса парагриппа; и
(b) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей указанный полипептидный антиген.
18. Способ ингибирования протеолитической активности GAS57 дикого типа, включающий контактирование GAS57 дикого типа с препаратом антител по п.10.
Streptococcus pyogenes
19. Способ лечения или предупреждения инфекционного заболевания, вызываемого , где указанный способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, содержащей
(a) активный агент, выбранный из
(i) очищенного мутантного антигена GAS57, содержащего аминокислотную модификацию в одном или нескольких положениях аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот D151, H279 и S617, где указанные положения аминокислот пронумерованы в SEQ ID NO:1, и где протеолитическая активность очищенного мутантного антигена GAS57, направленная против интерлейкина-8 (IL-8), по меньшей мере на 50% ниже активности GAS57 дикого типа, как было подтверждено с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН или с помощью ELISA-анализа;
(ii) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей очищенный мутантный антиген GAS57; и
(iii) препарата антител, которые специфически связываются с GAS57 дикого типа и ингибируют способность GAS57 дикого типа расщеплять человеческий IL-8; и
(b) фармацевтически приемлемый носитель.
20. Набор, содержащий
(a) контейнер, включающий активный агент, выбранный из
(i) очищенного мутантного антигена GAS57, содержащего аминокислотную модификацию в одном или нескольких положениях аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот D151, H279 и S617, где указанные положения аминокислот пронумерованы в SEQ ID NO:1, и где протеолитическая активность очищенного мутантного антигена GAS57, направленная против интерлейкина-8 (IL-8), по меньшей мере на 50% ниже активности GAS57 дикого типа, как было подтверждено с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН или с помощью ELISA-анализа;
(ii) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей очищенный мутантный антиген GAS57; и
(iii) препарата антител, которые специфически связываются с GAS57 дикого типа и ингибируют способность GAS57 дикого типа расщеплять человеческий IL-8; и
Streptococcus pyogenes
(b) инструкции по применению указанной композиции для лечения или предупреждения инфекционного заболевания, вызываемого .
Streptococcus pyogenes
21. Способ получения композиции для предупреждения или лечения инфекционного заболевания, вызываемого , где указанный способ включает объединение
(a) активного агента, выбранного из
(i) очищенного мутантного антигена GAS57, содержащего аминокислотную модификацию в одном или нескольких положениях аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот D151, H279 и S617, где указанные положения аминокислот пронумерованы в SEQ ID NO:1, и где протеолитическая активность очищенного мутантного антигена GAS57, направленная против интерлейкина-8 (IL-8), по меньшей мере на 50% ниже активности GAS57 дикого типа, как было подтверждено с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН или с помощью ELISA-анализа;
(ii) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей очищенный мутантный антиген GAS57; и
(iii) препарата антител, которые специфически связываются с GAS57 дикого типа и ингибируют способность GAS57 дикого типа расщеплять человеческий IL-8; и
(b) фармацевтически приемлемого носителя.
22. Способ по п.21, где указанным активным агентом является мутантный антиген GAS57 или антитела против указанного антигена, и где указанный мутантный антиген GAS57 или антитела против указанного антигена получают способом, включающим
(a) культивирование клетки-хозяина, содержащей экспрессионную конструкцию, кодирующую мутантный антиген GAS57 или антитела против указанного антигена; и
(b) выделение указанного мутантного антигена GAS57 или антител против указанного антигена.
Streptococcus pyogenes
23. Применение активного агента для изготовления лекарственного препарата для лечения или предупреждения инфекционного заболевания, вызываемого , где указанный агент выбран из группы, состоящей из
(a) очищенного мутантного антигена GAS57, содержащего аминокислотную модификацию в одном или нескольких положениях аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот D151, H279 и S617, где указанные положения аминокислот пронумерованы в SEQ ID NO:1, и где протеолитическая активность очищенного мутантного антигена GAS57, направленная против интерлейкина-8 (IL-8), по меньшей мере на 50% ниже активности GAS57 дикого типа, как было подтверждено с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с ДСН или с помощью ELISA-анализа;
(b) молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей очищенный мутантный антиген GAS57; и
(c) препарата антител, которые специфически связываются с GAS57 дикого типа и ингибируют способность GAS57 дикого типа расщеплять IL-8.
24. Очищенный мутантный антиген GAS57 по любому из пп.1-6, молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп.7-9, препарат антител по любому из пп.10-12 или композиция по любому из пп.13-17, применяемые в терапии.
Streptococcus pyogenes
25. Очищенный мутантный антиген GAS57 по любому из пп.1-6, молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп.7-9, препарат антител по любому из пп.10-12 или композиция по любому из пп.13-17, применяемые для лечения или предупреждения инфекционного заболевания, вызываемого .