2,6-ДИФЕНИЛ-4-(п-МЕТОКСИФЕНИЛ)-4H-СЕЛЕНОПИРАН - СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ОТРАВЛЕНИЙ СОЕДИНЕНИЯМИ РТУТИ
2,6-DIPHENYL-4-("п"-METOXYPHENYL)-4-SELENOPYRAN - MEDICATION FOR TREATMENT AND PREVENTION OF POISONING WITH MERCURY COMPOUNDS

I. Область применения
В качестве средства для лечения и профилактики отравлений соединениями ртути.
II. Предшествующий уровень техники
50
Известно, что соединения селена способны снижать степень тяжести отравления соединениями ртути, мышьяка, кадмия, свинца и др. [Гигиенические критерии состояния окружающей среды. 58. Селен. - Женева: Всемирная организация здравоохранения. - 1989. - 270 с.], однако большинство исследований проведено на примере селенита натрия, который обладает высокой токсичностью (LD=7-9 мг/кг) [Червяков Д.К., Евдокимов П.Д., Вишер А.С. Лекарственные средства в ветеринарии. Справочник / М.: Колос, 1977, с.432].
Исследования биологической активности малотоксичных селеноорганических соединений представлено лишь единичными примерами.
6
5
2
2
50
Известен способ применения бис(бензоилметил)селенида (торговое название - ДАФС-25) общей формулы: (CHCOOCH)Se, в качестве средства для лечения и профилактики болезней, вызываемых недостаточностью селена в организме сельскохозяйственных животных и птиц [Патент РФ №2051681, БИ. - 1996. - №1] и в качестве средства для лечения и профилактики инфекционных заболеваний и отравлений [Патент РФ №2171110, БИ. - 2001. - №21]. Относительно малотоксичный препарат (LD=385 мг/кг) был испытан при отравлении животных микотоксинами.
50
Известно, что арилзамещенные 4Н-селенопираны являются одними из наименее токсичных органических соединений селена (LD>700 мг/кг) и могут быть использованы в качестве препаратов, обладающих антимикробной и антифаговой активностью [Авт.свид. СССР №1246566, БИ. - 1998. - №10].
В качестве средства для лечения и профилактики отравлений соединениями мышьяка запатентован 2,4,6-трифенил-4Н-селенопиран, который показал очень хорошие результаты [Патент РФ №2314098, БИ. - 2008. - №1].
Известно изобретение, где структурный аналог 4Н-селенопиранов - 2,4-дифе-нил-7,8-бензо-5,6-дигидроселенохромен представлен как средство для лечения и профилактики отравлений соединениями тяжелых металлов (кадмия, кобальта, мышьяка и ртути) [Патент РФ №2325155, БИ. - 2008. - №15].
III. Сущность изобретения
Целью данного изобретения является поиск препарата, который повышает устойчивость животных и человека к отравлению соединениями ртути.
Указанное достигается путем введения в организм 2,6-дифенил-4-(п-метоксифенил)-4Н-селенопирана, который легко получается из соответствующего 1,5-дикетона и селенида цинка в условиях кислотного катализа [Древко Б.И., Сучков М.А., Филимонов А.Е., Харченко В.Г. Журнал Общей химии. - 1999. - Т.69, вып.1. - C.84-85].
Для исследования способности 2,6-дифенил-4-(п-метоксифенил)-4Н-селенопирана снижать степень тяжести отравления соединениями ртути (на примере азотнокислой ртути II) в качестве объекта исследования были взяты беспородные белые мыши in vivo со средней массой 20 г (18-21 г), из которых были созданы 3 контрольные группы и одна экспериментальная группа по десять животных в каждой.
Животным первой контрольной группы перорально вводили оливковое масло в количестве 10 мкл в день на протяжении 3 дней. На 3 сутки через 1 час после введения масла производили декапитацию. Производились отбор крови для анализа и вскрытие животных.
Животным второй контрольной группы перорально вводили раствор 2,6-ди-фенил-4-(п-метоксифенил)-4Н-селенопирана в оливковом масле в количестве 10 мкл в день на протяжении 3 дней. В 10 мкл оливкового масла содержалось 20,5 мкг 4Н-селенопирана, что для животного весом 20 г составляет дозу 1,02 мг/кг живого веса. На 3 сутки через 1 час после введения препарата производили декапитацию. Производились отбор крови для анализа и вскрытие животных.
3
2
Животным третьей контрольной группы перорально вводили раствор 2,8 мг Hg(NO) в 10 мкл дистиллированной воды ежедневно в течение 3 суток, что для животного весом 20 г составляет дозу 140 мг/кг живого веса. На 3 сутки через 1 час после введения токсиканта производили декапитацию. Производился отбор крови для анализа. При вскрытии наблюдали изменение размера и формы некоторых органов.
Поджелудочная железа сильно уменьшилась в размерах. Желудок был неправильной формы, со значительными кровоизлияниями. Печень увеличилась в размере, неправильной формы. Почки уменьшились в размере до 5 мм. Легкие правильной формы, наблюдаются очаги кровоизлияния. Сердце уменьшено в размере, наблюдаются некротические повреждения.
3
2
Животным опытной группы перорально вводили Hg(NO) (140 мг/кг) и через один час перорально вводили препарат 1, растворенный в подсолнечном масле, в количестве 10 мкл, с дозой 1,02 мг/кг. Токсикант и препарат вводили в течение 3 суток. На 3 сутки через 1,5 часа после введения токсиканта производили декапитацию. Производился отбор крови для анализа. Вскрытие показало, что произошли незначительные изменения органов. Поджелудочная железа уменьшилась в размерах до 12 мм, но ее масса приблизительно соответствовала норме. Желудок нормального размера, наблюдаются участки кровоизлияний. Печень незначительно уменьшена в размерах, наблюдаются очаги кровоизлияний. Почки нормальной формы без существенных изменений. В легких отмечаются незначительные кровоизлияния. Сердце незначительно уменьшено в размере. Результаты взвешивания внутренних органов животных приведены в таблице 1.
Таким образом, показано, что 2,6-дифенил-4-(п-метоксифенил)-4Н-селенопиран нормализует состояние органов животных при их отравлении соединениями ртути.
Таблица 1
органы
контроль 1, общий
Hg(NO<sub>3</sub>)<sub>2</sub>
Hg(NO<sub>3</sub>)<sub>2</sub>+преп.
поджелудочная железа
0,23±0,02
0,13±0,01
0,20+0,02
желудок
0,45±0,06
0,44±0,06
0,50±0,06
легкие
0,40±0,04
0,33±0,02
0,41±0,04
почки
0,68±0,06
0,60±0,06
0,63±0,06
сердце
0,19±0,01
0,14±0,01
0,16±0,01
кишечник
3,81±0,36
0,74±0,16
3,74±0,33
печень
2,66±0,14
3,45±0,21
2,41±0,15
р≥0,95
Для сопоставления результатов по изменению количественного содержания определенных биохимических параметров крови провели клинико-лабораторное исследование крови. Результаты исследования представлены в таблице 2.
Анализы крови мышей проводились на биохимическом анализаторе Screen master PLUS. Screen master PLUS является полуавтоматическим биохимическим анализатором. Определяет субстраты, ферменты, электролиты, гормоны и некоторые гематологические параметры. Технические характеристики: оптический диапазон - 6 светофильтров; от 340 до 630 нм; линейный диапазон - от 0,006 до 2,500 опт.ед. Точность - 0,001 опт.ед. Данные анализов приведены в таблице 2.
Таблица 2
Количественное содержание биохимических параметров
Г, ммоль/л
Б, Г/Л
ЛДГ, ЕД/л
ACT
Щ, ЕД/л
АЛТ ЕД/л
К, мкмоль/л
АСТ/АЛТ
Контроль (оливковое масло)
6,9±0,7
54±5
2009±62
308±22
53±4
98±6
37±6
3,1
Контроль (4Н-селенопиран)
9,4
66±5
2414±72
263±42
59±6
95±6
47±6
2,8
Азотнокислая ртуть
14,5±0,8
35±4
3453±93
345±18
100±10
167±9
681±42
2,1
4Н-селенопиран+азотнокислая ртуть
5,3±0,6
64±5
2068±68
250±41
54±3
80±6
64±8
3,1
р≥0,95; * здесь и далее применяемые сокращения: Г - глюкоза; Б -  общий белок; ЛДГ - лактатдегидрогеназа; АСТ/АЛТ - коэффициент де Ритиса; Щ - щелочная фосфатаза; АЛТ - Аланинаминотрансфераза; К - креатинин; ACT - Аспартатаминотрансфераза.
Основной мишенью для соединений ртути являются нервная ткань, почки, печень и сердце. Увеличение индикаторных ферментов печения ЛДГ, ЩФ, АЛТ и ACT в крови свидетельствует о поражении этого органа. Причиной увеличения ЩФ может также быть поражение ртутью желудочно-кишечного тракта, особенно кишечника, в стенках которого содержится этот фермент. Изменение активности ACT и АЛТ привело к уменьшению коэффициента де Ритиса, что также свидетельствует о печеночной патологии. Увеличение ЛДГ говорит и о поражении сердечной мышцы, вызванной также гипоксией.
Об изменениях в поджелудочной железе свидетельствует повышение глюкозы в крови. Соли ртути могли вызвать нарушение синтеза инсулина, который способствует утилизации глюкозы тканями.
Показателем поражения почек служит концентрации общего белка и креатинина. Снижение концентрации общего белка может быть результатом нарушением синтеза его печенью или потерей белка с почками. Последнее предположение подтверждается нарушением выведения креатинина.
Таким образом, показано, что 2,6-дифенил-4-(п-метоксифенил)-4Н-селенопиран нормализует биохимические показатели крови при отравлении солями ртути.
На основе проведенных исследований можно сделать вывод о том, что при помощи введения 2,6-дифенил-4-(п-метоксифенил)-4Н-селенопирана можно снижать степень тяжести отравления азотнокислой ртутью.