МЕМБРАНА ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРИ НАПРАВЛЕННОЙ РЕГЕНЕРАЦИИ ТКАНЕЙ
MEMBRANE TO BE USED IN TARGETED ANGIOGENESIS

Изобретение относится к медицине и медицинской промышленности и используется при направленной регенерации тканей в качестве изолирующей мембраны при оперативном восстановлении костных дефектов (любого рода деструкции костной ткани, при удалении из костной ткани кист и опухолей и т.д.), в пластической и реконструктивной хирургии при восстановлении объема органа или ткани, в качестве пластического материала в хирургической стоматологии, челюстно-лицевой хирургии, в офтальмохирургии в качестве пластического и реконструктивного материала, а также в качестве носителя биологически активных веществ, лекарственных средств и клеток.
В основе метода направленной регенерации тканей лежит принцип оптимизации формирования свободного пространства между поверхностью кости в области имплантата или костного дефекта и мягкими тканями над ними (Nyman S., 1982) путем физического отделения анатомических образований (части десны от кости или имплантата) друг от друга мембранным материалом.
Материал, в виде тефлоновой пластины, помещали между мягкими тканями и костным дефектом и через несколько месяцев после операции авторы наблюдали замещение костного дефекта новой костной тканью. Авторы выдвинули идею, согласно которой новая костная ткань будет успешно восстанавливаться (направляться), если костный дефект изолируется от мягкой соединительной ткани каким-либо материалом (Gottlow J, Nyman S, Lindhe J, Karring T, Wennstrom J. New attachment formation in the human periodontium by guided tissue regeneration. Case reports. J Clin Periodontol, 1986; 13:604-16).
Однако основным недостатком мембраны из полимерных нерассасывающихся материалов, является необходимость их удаления через определенный промежуток времени, что требует повторного оперативного вмешательства и может привести к осложнениям (Cortellini Р, Pini Prato GP, Baldi С, Clauser С. Guided tissue regeneration with different materials. International Journal of Periodontics and Restorative Dentistry 1990; 10:137-51).
К резорбируемым мембранам относят мембраны на основе биоматериалов и некоторых полимеров (например, полимеров молочной кислоты). Резорбируемые мембраны на основе коллагена получили наибольшее распространение, особенно при восстановлении костных дефектов пародонтальной ткани.
Наиболее близким по техническому решению задачи является мембрана для использования при направленной регенерации тканей, выполненная в виде пластины из коллагена типа I, полученная из перитонеальной оболочки телят или свиней, насыщенная сульфатированными гликозаминогликанами (сГАГ) - гиалуроновую кислоту, хондроитин-6-сульфат, кератин сульфат, дерматан сульфат.
При этом она получена путем нанесения пасты из коллагена типа II на поверхность из коллагена типа I с последующим сублимационным высушиванием, в результате чего образуется двухслойная структура, имеющая один плотный, а другой рыхлый губчатый слой (Заявка на патент РФ №2000109319 от 02.20.2003), который является аналогом настоящего изобретения.
Недостатком указанной мембраны является ее набухаемость при закрытии костного дефекта, что приводит к натяжению швов, а в ряде случаев к обнажению раны и, как следствие этого, к инфицированию раневого и костного дефекта. Применение в качестве исходных материалов, содержащих растворимые коллагены хряща (тип II) или перитонеальной оболочки (тип I), приводит к быстрой биодеградации мембраны, которая наступает быстрее, чем успеет сформироваться новая костная ткань. Недостаточная механическая и каркасная функция мембраны ведет к пролабированию центральной части мембраны в зону дефекта и таким образом к снижению объема, необходимого пространства для заполнения новой тканью. Коллагены хряща и перитонеальной оболочки являются растворимыми и, как следствие этого, подвержены действию протеолитических ферментов, которые в избытке образуются на ранних стадиях заживления мягких тканей. Быстро разрушающиеся волокна коллагена мембраны, особенно коллаген гиалинового хряща, приводят к появлению антигенных остатков коллагена, что повышает антигенность и одновременно снижает ее биосовместимость.
Кроме того, рыхлая пористость мембраны имеется только в сухой мембране, которая при помещении ее в ткань пациента быстро утрачивается в результате набухания коллагена, что резко снижает ее проницаемость и, как следствие этого, резко уменьшается площадь адгезии клеток, способствующих формированию новой костной ткани, или интеграции клеток при пластических операциях. Недостаточная механическая прочность и отсутствие остеокондуктивных свойств не позволяют использовать данную мембрану при пластике дефектов тонких костных структур, таких, например, как кости орбиты, носа и т.п. В таких случаях данная мембрана не может быть использована в качестве одновременно изолирующей и в качестве костного материала, поскольку его приживление и его адаптация к окружающим тканям костного дефекта, пролиферация и миграция клеток в строму материала довольно длительны и требуют больших сроков биодеградации, достаточных для формирования новой ткани в зоне дефекта. Кроме того, некоторые гликозаминогликаны, в частности гиалуроновая кислота является биоинертной и не оказывает стимулирующего действия на восстановление дефектов.
Отсутствие сквозных отверстий в мембране не позволяет использовать ее при установке дентальных имплантатов с целью направленной регенерации и оптимизации остеоинтеграции.
Техническим результатом, согласно изобретению, является создание мембраны для использования при направленной регенерации тканей, с высокими механическими и прочностными свойствами, с низкими антигенными свойствами, в повышении биосовместимости за счет использования свойств нерастворимого костного коллагена типа I, полученного из губчатой костной ткани, а также ускорение процессов репарации и обеспечения направленного процесса интеграции новой ткани в зону дефекта, снижение биорезорбции и таким образом повышения изолирующих качеств и сокращение сроков лечения и реабилитации за счет дополнительного насыщения с ГАГ.
Технический результат, согласно изобретению, достигается тем, что мембрана для использования при направленной регенерации тканей выполнена в виде пластины из коллагена, насыщенного сГАГ; при этом она выполнена из коллагена типа I костной ткани, полученного из костей сельскохозяйственных животных, насыщенного сГАГ в смеси гепарина и хондроитин сульфата в соотношении 1:3; при том она выполнена из недеминерализованного или деминерализованного коллагена типа I, выделенного из губчатой части кости, при этом при дентальной имплантации она содержит не менее одного отверстия.
Отличительной способностью коллагена костной ткани типа 1, выделенного из губчатой костной ткани, является его нерастворимость в физиологических разведениях растворов кислот и щелочей, устойчивость к тканевым протеазам. Его низкая биорезорбция, обусловленная высокой степенью упаковки волокон, не требует дополнительной сшивки, что выгодно отличает его от коллагенов, полученных из других источников соединительной ткани.
Губчатая часть кости выбрана для изготовления мембраны, согласно изобретению, выбрана в качестве места забора материала для мембраны, потому что имеет более молодой коллаген по сравнению с кортикальным (более частое ремоделирование по сравнению с кортикальной частью). Естественная пористость губчатой кости придает материалу огромную площадь (общая поверхность в 9,4 раза выше, чем в компактной кости), что особенно важно для связывания клеток и биологически активных молекул.
Мембрана, согласно изобретению, выполнена из материала на основе костного недеминерализованного коллагена типа I, полученного из губчатой костной ткани, выполнена в виде тонкой плотной и гибкой пластины.
Недеминерализованный коллаген костной ткани обладает, по сравнению с аналогом, рядом преимуществ, таких как механическая прочность и упругость благодаря сохранной структуре коллагена и связанного с ним минерального компонента кости - гидроксиапатита. Такая структура придает мембране прочность и надежно перекрывает костный дефект или в случае перелома кости (например, орбиты, или костей синуса) служит каркасным матриксом для формирования новой костной ткани.
Минеральный компонент костной ткани обладает свойством связывать морфогенетический белок кости, индуцирующий формирование новой костной ткани, а костный коллаген имеет сайты связывания сульфатированных гликозаминогликанов, обладающих способностью активировать факторы роста и таким образом модулировать и стимулировать клетки и формирование новой ткани.
Недеминерализованный костный коллаген благодаря своей пористо-губчатой структуре имеет огромную поверхность, благодаря которой создаются оптимальные условия функционирования материала как изолирующего барьера, так и костнопластического материала, обладающего остеокондуктивными, так и остеоинуктивными свойствами.
Как показали наши гистоморфологические исследования, время биорезорбции костного недеминерализованного коллагена типа I, полученного из губчатой костной ткани, составляет от 5 до 8 месяцев.
Согласно изобретению мембрана для использования при направленной костной регенерации выполнена в виде пористой пластины из деминерализованного коллагена типа I костной ткани, полученного из губчатой костной ткани.
Процесс деминерализации костной ткани позволяет получать гибкие эластичные мембраны, позволяющие перекрывать костный дефект над мембраной без напряжения и натяжения.
Эти мембраны не набухают в растворах кислот и щелочей в физиологических концентрациях, устойчивы к действию протеолитических ферментов и макрофагов.
Мембрана, согласно изобретению, удобна при наложении на костные дефекты альвеолярного гребня, в области фуркаций и при пластике синуса, а также при всевозможных операциях на пародонте при реконструкции костных дефектов альвеолярной кости, то есть там, где нет возможности и необходимости использовать жесткие мембраны из недеминерализованного коллагена.
При закрытии костного дефекта из мембраны, выполненной из деминерализованного коллагена, быстро активируются клетки, формирующие новую костную ткань, благодаря аффинному сродству костного коллагена, насыщенного сульфатированными гликозаминогликанами к клеткам периоста и эндоста.
Деминерализованный коллаген костной ткани, полученный из губчатой костной ткани, благодаря своей архитектонике и эластичности, кроме того, является уникальным пластическим материалом, который хорошо интегрируется с окружающими тканями, способствует быстрому формированию сосудов, без которых не возможен процесс остеогенеза. Материал способен восстанавливать объем мягких тканей и улучшать их трофику, например, при восстановлении рецессии десны.
Мембрана, согласно изобретению, интегрируется с окружающими тканями без явлений фиброза, полностью резорбируется через 4-6 месяцев с момента имплантации.
При помещении мембраны, согласно изобретению, над костным дефектом (например, после удаления костной кисты или при его моделировании у животных) костный дефект заполняется новой костной тканью. Над поверхностью мембраны (со стороны мягких тканей) начинается интеграция клеток в поверхностные слои мембраны, причем их миграция быстро заканчивается, поскольку они не могут преодолеть расстояние, создаваемое пористой структурой. Насыщение коллагена, согласно изобретению, сГАГ позволяет повысить адгезивные свойства и таким образом снизить миграционные клеточные процессы.
Хорошо известно, что скорость роста соединительной ткани гораздо выше, чем костной, что и является, по нашему мнению, основным моментом применения мембран при восстановлении и реконструкции костных дефектов, вне зависимости от причин их появления. Без применения мембран фиброзная соединительная ткань быстро заполняет костный дефект и возникает ситуация утраты костной ткани.
При оперативных вмешательствах на пародонте зона дефекта или зона пародонтального кармана быстро заполняется грануляционной (фиброзной) тканью. Высокой пролиферативной активностью в этом случае обладает апикальный эпителий, который быстро спускается в дефект и препятствует новому прикреплению десны. Для ограничения его действия в зону дефекта помещают мембрану, препятствующую его пролиферации.
Из ранних экспериментальных исследований известно, что в культуре клеток эпителиальная ткань вообще плохо растет на подложках из коллагена (Harris, A.K. 1973. Behavior of cultured cells on substrata of variable adhesiveness. Exp. Cell Res. 77:285-297). Это объясняется тем, что и при своем росте и миграции эпителию требуется специальная подложка из коллагена типа IV, которую он сам и синтезирует при взаимодействии с фибробластами.
Недеминерализованный и деминерализованный коллаген костной ткани типа I вообще имеют высокое сродство к пролиферирующему периосту, который успешно формирует над поверхностью мембраны первичную костную мозоль, а со стороны дефекта благодаря высокому сродству к клеткам, формирующим новую костную ткань (эндосту и остеобластам), а также благодаря наличию сГАГ мембрана представляет собой временный матрикс из твердого субстрата и только на нем могут расти клетки костной ткани (Green J, Schotland S, Stauber DJ, Kleeman CR, Clemens TL (1995): Cell-matrix interaction in bone: type I collagen modulates signal transduction in osteoblast-like cells. Am J Physiol 268: C1090-C1103).
Согласно изобретению в качестве сГАГ применена смесь гепарина и хондроитин-4 сульфата в соотношении 1:3.
Метаболизм соединительной ткани тесно связан с протеогликанами, а именно с их функциональными группами - сГАГ, которые играют важнейшую роль в формировании волокон коллагена, их пространственной организации и минерализации остеоида.
Зрелая костная ткань содержит в основном такие сГАГ, как хондроитин-4- и хондроитин-6-сульфаты, дерматансульфат и кератансульфат.
сГАГ играют важную роль в контроле роста и дифференцировки. сГАГ - это одноцепочные молекулы, часть которых сульфатирована. Сульфатация части цепи с-ГАГ обеспечивает связывание многих активных биомолекул, таких, например, как факторы роста.
Из материала на основе коллагена и сГАГ формируется комплекс, который активно влияет на процесс репарации соединительной ткани. Это объясняется тем, что, являясь, как и другие белки, амфотерным полиэлектролитом и имея в своей структуре свободные активные сайты и радикалы, коллаген способен образовывать ионные связи при большом диапазоне рН (Friess W. Collagen-biomaterial for drug delivery Eur J Pharm Biopharm, 1998, Mar; 45.2.113-36).
Гепарин имеет широкое применение в медицине и медицинской промышленности благодаря своим антикоагулянтным свойствам.
Гепарин широко применяется в медицинской промышленности в качестве покрытия изделий медицинского назначения, и в частности, изделий на основе коллагена, с целью повышения биосовместимости материалов.
В мембране для использования при направленной регенерации тканей, согласно изобретению, гепарин использован в качестве биологически активного средства, так как известна его способность аффинно связывать коллаген типа I и, в частности, костный коллаген (San Antonio, J.D., Lander, A.D., Wright, Т.C. & Karnovsky, M.J. 1992. J. Cell. Physiol. 150, 8-16, Keller, K.M., Keller, J.M. & Kuhn, K. 1986. Biochim. Biophys. Acta 882, 1-5).
Установлено, что коллаген, связанный с гепарином, обладает способностью повышать его устойчивость к биодеградации.
Гепарин входит в состав мембраны в смеси с другим сГАГ - хондроитин 4 сульфатом, поскольку именно этим сочетанием достигается синергичное и адекватное воздействие этих веществ на адгезию клеток, снижение их миграции, повышение устойчивости к биодеградации.
Соотношение гепарина и хондроитин сульфата 1:3 определено нами экспериментально на модельных экспериментах в культурах клеток фибробластов, где в качестве подложек использовали мембраны недеминерализованного и деминерализованного коллагена, насыщенных ими в этой пропорции.
Увеличение в смеси доли гепарина может вызвать антикоагулянтный эффект, а увеличение доли хондроитин сульфата может приводить к уменьшению активных сайтов связывания для гепарина и таким образом к снижению биологической активности материала.
Такой комплекс способен быть эффективным и активным субстратом для активации и связывания факторов роста, костных морфогенетических белков, агрегации тромбоцитов, остеобластов и остеокластов, что способствует ремоделированию костной ткани и стимуляции репарации мягких тканей и костного дефекта.
сГАГ, являясь модуляторами роста соединительной ткани, способствуют клеточной адгезии и специфическому связыванию факторов роста и молекул, необходимых для тканевой реконструкции не только костной и других типов соединительной ткани.
Мембраны из недеминерализованного и деминерализованного коллагена костной ткани типа I могут быть получены из губчатой костной ткани по способу, описанному в Пат. РФ №2278679 от 27.06.2006, от различных животных, что не исключает возможности их получения из донорских тканей человека.
В изобретении использовали коммерческий гепарин (Сигма США) с концентрацией не менее 1000 мкг/мл и активностью не менее 150 ЕД, что не исключает использования гепарина от других производителей с той же активностью.
сГАГ (хондроитин сульфат) получают по способу, описанному в Патенте РФ №2162331, из различных источников - трахеи, кости или роговицы.
Современным направлением в дентальной имплантации является повышение остеоинтеграции и оптимизации имплантата и костной ткани, в которую он помещен.
С этой целью, согласно изобретению, мембрана для использования при направленной регенерации тканей снабжена, по крайней мере, одним сквозным отверстием, которое позволяет устанавливать мембрану во время имплантации и таким образом надежно изолировать врастание соединительной ткани в свободное пространство между имплантатом и костной тканью. Размеры сквозных отверстий могут быть различными в зависимости от диаметра имплантата.
При дентальной имплантации возникают проблемы устойчивости имплантата в костной ткани, которая, как правило, связана с миграцией соединительной фиброзной ткани в свободное пространство между имплантатом и костной тканью или с недостаточной плотностью костной ткани, обусловленной остеопорозом или какими-либо другими причинами.
При этом может использоваться мембрана как из недеминерализованного, так и деминерализованного коллагена костной ткани, в которой предварительно сделано, по крайней мере, одно отверстие. Число отверстий в мембране определяется числом устанавливаемых имплантатов.
Например, при широком альвеолярном гребне и установке одного имплантата, с целью обеспечения направленной костной регенерации и одновременного поднятия альвеолярного гребня, между имплантатом и костной кортикальной пластиной устанавливают мембрану для использования при направленной регенерации тканей из недеминерализованного коллагена костной ткани с одним сквозным отверстием.
Например, при узком альвеолярном гребне и установке двух имплантатов, с целью обеспечения направленной костной регенерации и одновременного поднятия альвеолярного гребня, между имплантатами и костной кортикальной пластиной устанавливают мембрану для использования при направленной регенерации тканей из деминерализованного коллагена костной ткани с двумя сквозными отверстиями.
Как показали экспериментальные и клинические исследования, установленная мембрана для использования при направленной регенерации тканей способствует быстрому заполнению пространства между имплантатом и костной тканью вновь сформированной новой костной ткани, что значительно повышает устойчивость имплантата. В поверхностных слоях между кортикальной пластинкой и периостом формируется плотная костная ткань, предотвращающая врастание соединительной ткани между имплантатом и костной пластиной. Альвеолярный гребень при этом поднимается на 1,5-2,0 мм, что значительно улучшает качество дентальной имплантации.
Краткая технология получения мембран для использования при направленной регенерации тканей
Полученные известным способом недеминерализованный или деминерализованный коллаген из костной ткани нарезают на пластины толщиной от 1,0 до 2,0 мм, при необходимости делают трепаном сквозное отверстие, помещают в смесь раствора гепарина и хондроитин сульфата, взятых в соотношении 1:3. Насыщение сГАГ проводят на магнитной мешалке для их лучшей доступности к строме костного коллагена в течение 24 часов.
После процесса насыщения раствор, ранее содержащий сГАГ, сливают, промывают водой деионизованной и высушивают пластины.
После этого мембраны фасуют и стерилизуют.
Получение мембран, согласно изобретению, контролируют на каждой стадии обработки, при этом используют основные методики оценки его характеристик, принятые для данного типа мембран.
Снижение антигенности материала доказывается иммунологическим методом путем иммунизации животных - крыс породы Вистар (10 животных опытных, 10 контрольных). Из опытных образцов материала-аналога готовили водно-солевые экстракты, которые смешивали с неполным адъювантом Фрейнда. Аналогичные экстракты готовили и из контрольных образцов материала-аналога.
Животных иммунизировали по схеме, описанной в «Лабораторная иммунология», М., 1980.
Через 1,5 мес животных выводили из эксперимента и определяли титр антител методом преципитации и методом Кунса-Уэллера путем непрямой иммунофлуоресценции на флуоромикроскопе Оптон, для чего материал резали на криостате и помещали срезы на стекло, наносили антисыворотку в различных разведениях и меченные флуоресцеином антикроличьи Ig овцы инкубировали в течение 15-30 мин и тщательно отмывали фосфатным буфером, заключали в глицерин и просматривали в микроскопе через отсекающий фильтр при длине волны 440 нм. Результаты этих исследований приведены в таблице.
Вид материала
Титр Ат 1:50
Титр Ат 1:100
Титр Ат 1:1000
Предлагаемый материал - мембрана
++++
нет
нет
Материал - аналог
++++
++++
+
Где ++ - визуальная оценка интенсивности свечения.
Структуру стромы мембраны определяли путем исследования гистологических срезов электронно-микроскопическим и методом сканирующей микроскопии.
С помощью данных методов было установлено, что пористо-волокнистая структура костной ткани и отдельные волокна коллагена имеют типичный вид без каких-либо изменений и нарушений (фиг.1).
Контроль насыщенности мембранного материала проводили гистоморфологическим путем окрашивания альциановым синим (фиг.2).
Изолирующие свойства мембраны, согласно изобретению, исследовали на кроликах породы Шиншилла (30 животных). Наркоз проводили с помощью внутримышечной инъекции 4 мл раствора Зоолитила 100 (Франция). Далее проводили линейный разрез в области предплечья и тупым путем отслаивали мягкие ткани и надкостницу. С помощью физиодиспенсера WH implantmed создавали костные дефекты в лучевой кости кролика длиной до 1 см, глубиной на 2/3 ее толщины.
В группе опытных животных (10 кроликов) созданный дефект закрывали мембраной из недеминерализованного коллагена, насыщенного сГАГ гепарином и хондроитин сульфатом в соотношении 1:3. Мягкие ткани над мембраной ушивали наглухо. В другой группе опытных животных (10 кроликов) созданный дефект закрывали мембраной из деминерализованного коллагена типа 1, полученного из губчатой костной ткани, насыщенного сГАГ гепарином и хондроитин сульфатом в соотношении 1:3. Мягкие ткани над мембраной ушивали наглухо.
В группе контрольных животных (10 кроликов) костные дефекты без заполнения испытуемым материалом и ушивали их наглухо. Через 10 дней швы снимали и продолжали наблюдения за животными.
На сроки 1, 2 и 3 месяца животных выводили из эксперимента ударными дозами Зоолитила 100 и воздушной эмболией, с выполнением Приказа Росздравнадзора (после внутримышечной инъекции 4 мл Зоолитила 100 вводили 20.0 мл раствора Тиопентала натрия).
Фрагменты кости декальцинировали, обезвоживали, заливали в парафин и готовили гистологические срезы, применяя различные окраски в зависимости от поставленных задач (окраска гематоксилином и эозином по Ван-Гизону, по Крейбергу). Препараты изучали и фотографировали на фотомикроскопе Mild-Leitz /Germany/. Результаты проведенных исследований показали, что на сроки 1, 2 и 3 месяца после операции и имплантации мембран все подопытные животные были здоровы, ограничений движения оперированной конечности не отмечали, контрактур не было. Гистоморфологические исследования направленной регенерации тканей показали, что на срок 1 месяц в зоне под мембраной, согласно изобретению, начинаются процессы формирования остеоида в зоне, близкой к периферии, и со дна дефекта (фиг.3), явления воспаления или отторжения материала отсутствуют. В периостальной области идут процессы образования провизорной костной мозоли.
Через 2 месяца после операции зона дефекта под мембраной, согласно изобретению, активно заполняется вновь образованной костной тканью (фиг.4). Явлений фиброзообразования в дефекте не отмечается. Наиболее активно этот процесс идет по периферии и дну дефекта.
Наибольшая активность процесса направленной костной регенерации отмечается на срок 3 месяца после операции (фиг.5).
Дно дефекта и его периферия заполняются вновь сформированной костной тканью (фиг.6). Сам материал мембраны частично интегрирован в костную ткань самого дефекта или в мышечную ткань над дефектом.
По внешнему виду (фиг.6) мембрана представляет пластину, которая имеет различные размеры и конфигурации в зависимости от цели и задач, которые она должна выполнять при направленной регенерации тканей.
Предлагаемая мембрана для использования при направленной регенерации тканей прошла необходимые контрольные токсикологические и клинические испытания в соответствии с требованиями МЗ РФ, предъявляемыми к данному типу изделий, и разрешена к клиническому применению.
Для лучшего понимания сущности изобретение поясняется примерами конкретного применения.
Пример 1.
Пациентка К., 45 лет, с диагнозом «генерализованный пародонтит тяжелой степени». Локальная рецессия размером 6 мм в области клыков на верхней челюсти. Пациентке после профессиональной гигиены и санации полости рта была проведена лоскутная операция на верхней челюсти в области 4-16 зубов в технике Рамфьорд.
После отслойки слизисто-надкостничного лоскута проведен кюретаж костных карманов с удалением грануляционной ткани и обработка поверхностей корней 14-16 зубов с помощью аппарата Piezon-Master. Затем с помощью специального бора была проведена обработка костной ткани. Учитывая выраженный дефект альвеолярной кости и отсутствие значительной части компактной пластинки, на костный дефект наложена мембрана, согласно изобретению, из недеминерализованного костного коллагена типа I, полученного из губчатой костной ткани, насыщенного смесью гепарина и хондроитин сульфата в соотношении 1:3. Через 6 месяцев после операции рентгенологически определяли восстановление гребня альвеолярной кости.
Пример 2.
Пациент Ш., 50 лет, с диагнозом генерализованный пародонтит. Локальная рецессия мягких тканей десны размером 7 мм в области клыков на верхней челюсти. Пациенту после профессиональной гигиены и санации полости рта была проведена лоскутная операция на верхней челюсти в области 4-16 зубов в технике Рамфьорд. После отслойки слизисто-надкостничного лоскута проведены кюретаж костных карманов с удалением грануляционной ткани и обработка поверхностей корней 14-16 зубов с помощью аппарата Piezon-Master. Под слизисто-десневой лоскут была уложена мембрана из деминерализованного костного коллагена типа I, полученного из губчатой костной ткани, насыщенного смесью гепарина и хондроитин сульфата в соотношении 1:3. Через 6 месяцев после операции определяли восстановление мягких тканей десны и закрытие шеек зубов мягкими тканями.
Пример 3.
Пациент М., 25 лет. Диагноз: неправильно сросшийся перелом костей орбиты. Дефект костей орбиты.
Под внутривенным наркозом и местной анестезией пациенту была произведена пластика орбиты путем экстраокулярной имплантации мембраны из недеминерализованного костного коллагена типа I, полученного из губчатой костной ткани, насыщенного смесью гепарина и хондроитин сульфата в соотношении 1:3.
В результате проведенной пластики улучшилось зрение и движения глазного яблока. Через 6 месяцев после операции рентгенологически определяли формирование костной ткани в области синуса верхней челюсти.
Использование предлагаемой мембраны для направленной регенерации тканей позволяет получить более предсказуемый клинический эффект при восстановлении твердых и мягких тканей при различных патологических состояниях, снизить число осложнений и повысить операционный результат за счет снижения антигенности и повышения биосовместимости при использовании в качестве мембранного материала костного коллагена, насыщенного смесью гепарина и хондроитин сульфата в соотношении 1:3. Применение такой мембраны значительно снижает безопасность ее применения, особенно при длительном нахождении материала в организме.