Особенности экспрессии комплемент ингибирующих рецепторов моноцитами у женщин с угрозой прерывания беременности в сроке 22-27 недель

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Салахова Л.М., Малышкина А.И., Сотникова Н.Ю., Крошкина Н.В.

Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова,

г. Иваново

ОСОБЕННОСТИ ЭКСПРЕССИИ КОМПЛЕМЕНТ ИНГИБИРУЮЩИХ РЕЦЕПТОРОВ МОНОЦИТАМИ У ЖЕНЩИН С УГРОЗОЙ ПРЕРЫВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ В СРОКЕ 22-27 НЕДЕЛЬ

Проблема преждевременных родов является одной из ведущих в области охраны здоровья матери и ребенка и имеет первостепенное значение для формирования здорового поколения людей с самого раннего периода их жизни. Целью работы было установить особенности экспрессии СD46 и CD55 молекул, участвующих в процессах регуляции комплемента, в популяции моноцитов у женщин с угрозой прерывания беременности в сроке 22-27 недель беременности. Установлено, что отличительной чертой пациенток с угрожающими преждевременными родами в данном сроке гестации являлось повышение частоты встречаемости маркеров вирусной инфекции при снижении экспрессии моноцитами CD46 и CD55 молекул, что может служить триггером развития данной патологии.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: невынашивание беременности: преждевременные роды: врожденный иммунитет; система комплемента; комплемент ингибирующие молекулы.

Salakhova L.M., Malyshkina A.I., Sotnikova N.U., Kroshkina N.V.

Ivanovo Scientific Research Institute of Maternity and Childhood V.N. Gorodkova, Ivanovo FEATURES OF THE EXPRESSION OF COMPLEMENT INHIBITING RECEPTORS BY MONOCYTES AT WOMEN WITH THREAT OF INTERRUPTION OF PREGNANCY IN TERM OF 22-27 WEEKS

The problem of premature birth is one of leaders in the field of health protection of mother and the child and has paramount value for formation of healthy generation of people since the earliest period of their life. The aim of the work was to establish the character of the expression of complement regulatory surface proteins CD46 and CD55 by monocytes of women with threatened miscarriage at 22-27 weeks of pregnancy. It was found that the patients with threatened preterm delivery at 2227 weeks of gestation were characterized by the high rate of markers of viral infection with simultaneous decrease of the expression of CD46 and CD55 molecules by monocytes.

KEY WORDS: interruption of pregnancy: premature birth; congenital immunity: complement system; complement inhibiting molecules.

Проблема невынашивания беременности находится в центре внимания современной науки о репродукции человека. Проблема недонашивания и преждевременных родов является одной из ведущих в области охраны здоровья матери и ребенка и имеет первостепенное значение для формирования здорового поколения людей с самого раннего периода их жизни [1].

Недоношенность представляет важную социальную проблему в связи с большими материальными затратами, связанными с выхаживанием новорожденных, а также значительной долей этих детей среди инвалидов и больных с хронической патологией. Не менее значителен психо-социальный аспект преждевременных родов, так как рождение неполноценного ребенка или его смерть становятся тяжелой психической травмой, приводят к заметному снижению жизненной активности и часто к отказам от последующих беременностей. Основные трудности, связанные с изучением проблемы невынашивания беременности, обусловлены полиэтиологичностью этой патологии [2].

Корреспонденцию адресовать:

САЛАХОВА Лилия Мунавировна,

153045, г. Иваново, ул. 3-я Полетная, д. 2, кв. 40. Тел.: +7-960-509-90-99.

E-mail: salahova86@list.ru

В настоящее время среди причин невынашивания беременности преобладают иммунные нарушения в организме женщины и инфекции, передаваемые половым путем [3]. Остается неясным, почему одни и те же инфекционные агенты в одних случаях вызывают прерывание беременности, а в других практически не влияют на ее течение [2]. Все более очевидным становится тот факт, что нормальное осуществление репродуктивной функции возможно благодаря наличию уникальных иммунологических механизмов и гармоничному их функционированию [2, 4, 5]. В связи с этим, осложнения беременности необходимо рассматривать с точки зрения нарушения регулирующей роли иммунитета на разных этапах развития системы «мать-плацента-плод». Зона контакта мать/плод строго контролируется иммунной системой, особенно системой врожденного иммунитета [4, 6].

Одним из важнейших факторов врожденного иммунитета является система комплемента — биохимический каскад реакций, конечным продуктом которого является цитолитический комплекс мембранной атаки (МАК). Центральный компонент этого протеолитического каскада — С3. Известно, что урогенитальные инфекции, связь которых с нарушениями развития беременности надежно установлена, воздействуя на состояние организма, влияют в первую очередь на общее состояние иммунной системы, а

№2(57) 2014 <ыН?гь и^пя вс7|узбассе

ОСОБЕННОСТИ ЭКСПРЕССИИ КОМПЛЕМЕНТ ИНГИБИРУЮЩИХ РЕЦЕПТОРОВ МОНОЦИТАМИ ___________У ЖЕНЩИН С УГРОЗОЙ ПРЕРЫВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ В СРОКЕ 22-27 НЕДЕЛЬ

именно, способствуют возрастанию содержания циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) и уровня С3-компонента комплемента [7].

По литературным данным [8], на поверхности син-цитиотрофобласта происходит распознавание отцовских антигенов, которые могут активировать систему комплемента, что приводит к гибели клеток трофоб-ласта. Существуют 3 пути активации комплемента: классический, альтернативный и лектиновый, которые регулируются мембранными и плазменными белками. В норме клетки плаценты экспрессируют на своей поверхности три комплемент ингибирующие молекулы: мембранный кофакторный белок (МКБ, или MCP — membrane-assotiated cofactor of proteolysis, CD46), фактор, ускоряющий диссоциацию (ФУД, или DAF — decay accelerating factor, CD55) и протектин (CD59), которые блокирует формирование и функцию терминального МАК [9]. Дефицит регуляторных белков MCP, DAF и CD-59 приводит к обширному отложению С3-компонента комплемента, притоку нейтрофилов и воспалению в развивающейся плаценте. Поэтому для процессов репродукции большое значение имеют механизмы регуляции системы комплемента, поскольку неконтролируемая активация комплемента вызывает некроз клеток плаценты и потерю плода [10].

Цель исследования — выявить особенности экспрессии рецепторов CD46 и CD55 в популяции моноцитов у женщин с угрозой прерывания беременности в сроке 22-27 недели гестации.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Было обследовано 33 беременных женщины с клиническими признаками угрозы невынашивания беременности в сроке 22-27 недели (I группа). В группу контроля (II группа) вошли 16 практически здоровых беременных женщин в этом же сроке гестации с отсутствием симптомов угрожающих преждевременных родов. В качестве материала для исследования использовалась периферическая венозная кровь. Ме-

тодом иммуноферментного анализа определяли IgG, IgA и IgM к возбудителям урогенитальных инфекций (Chlamidia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureap-lasma urealiticum, CMV, HSV). Экспрессия рецепторов CD46 и CD55 моноцитами периферической крови определялась методом проточной цитофлюо-риметрии на цитометре FACSCanto II с использованием программы FACSDiva.

Статистический анализ полученных результатов осуществлялся в пакете прикладных лицензионных программ Microsoft Office 2010, Statistica for Windows 6.0. Проверка рядов данных на нормальность распределения осуществлялась с помощью критериев Колмогорова и Шапиро-Уилка. Достоверность различий между показателями независимых выборок оценивалась по t-критерию Стьюдента. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез принимался равным 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

Возраст беременных колебался от 16 до 38 лет. Группы практически не отличались по среднему возрасту, который составил 26,94 ± 1,41 лет в контрольной группе и 27,97 ± 0,95 лет в основной (р > 0,05). В группе контроля подавляющее число женщин имели высшее образование по сравнению с группой сравнения (81,3 % против 45,5 %, р = 0,01). Характер становления менструальной функции в группах наблюдения особенностей не имел. Средние значения и распределение сроков менархе не имели достоверных различий между собой. Средний возраст менархе в первой группе составил 12,91 ± 0,21 лет, во второй — 13,44 ± 0,29 лет (р > 0,05). Средний возраст начала половой жизни у женщин сравниваемых групп был практически одинаковым: 17,67 ± 0,35 лет и 18,88 ± 0,51 лет, соответственно (р > 0,05 во обоих случаях).

Среди гинекологических заболеваний воспалительные процессы гениталий (кольпит, аднексит) встречались у 9 женщин (27,3 %) первой группы и у 1 жен-

Сведения об авторах:

САЛАХОВА Лилия Мунавировна, врач акушер-гинеколог, мл. науч. сотрудник, отдел акушерства и гинекологии, ФГБУ «Ив НИИ МиД им. В.Н. Городкова» Минздрава России, г. Иваново, Россия. E-mail: salahova86@list.ru

МАЛЫШКИНА Анна Ивановна, доктор мед. наук, директор, ФГБУ «Ив НИИ МиД им. В.Н. Городкова» Минздрава России, г. Иваново, Россия. E-mail: niimid.immune@mail.ru

СОТНИКОВА Наталья Юрьевна, доктор мед. наук, профессор, зав. лабораторией клинической иммунологии, ФГБУ «Ив НИИ МиД им. В.Н. Го-родкова» Минздрава России, г. Иваново, Россия.

КРОШКИНА Наталья Владимировна, канд. биол. наук, науч. сотрудник, лаборатория клинической иммунологии, ФГБУ «Ив НИИ МиД им. В.Н. Городкова» Минздрава России, г. Иваново, Россия.

Information about authors:

SALAKHOVA Lilia Munavirovna, obstetrician-gynecologist, junior researcher, obstetrics and gynecology department, Ivanovo Scientific Research Institute of Maternity and Childhood V.N. Gorodkova, Ivanovo, Russia. E-mail: salahova86@list.ru

MALYSHKINA Anna Ivanovna, doctor of medical sciences, director, Ivanovo Scientific Research Institute of Maternity and Childhood V.N. Gorodkova, Ivanovo, Russia. E-mail: niimid.immune@mail.ru

SOTNIKOVA Natalya Yurevna, doctor of medical sciences, professor, head of laboratory of clinical immunology, Ivanovo Scientific Research Institute of Maternity and Childhood V.N. Gorodkova, Ivanovo, Russia.

KROSHKINA Natalya Vladimirovna, candidate of biological sciences, researcher, laboratory of clinical immunology, Ivanovo Scientific Research Institute of Maternity and Childhood V.N. Gorodkova, Ivanovo, Russia.

с/$(ръ и^ггя в^^узбассе

№2(57) 2014

ОСОБЕННОСТИ ЭКСПРЕССИИ КОМПЛЕМЕНТ ИНГИБИРУЮЩИХ РЕЦЕПТОРОВ МОНОЦИТАМИ У ЖЕНЩИН С УГРОЗОЙ ПРЕРЫВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ В СРОКЕ 22-27 НЕДЕЛЬ_

щины (6,3 %) второй группы (р = 0,04), миома матки — у 12,1 % беременных основной группы (р = 0,04). При оценке репродуктивной функции было выявлено, что повторнобеременными первородящими в первой группе явились 9 пациенток (27,3 %) что достоверно выше, чем в контрольной группе (6,3 %; р = 0,04).

Анализ данных о предшествующих беременностях показал, что в контрольной группе своевременные роды в анамнезе были у 5 женщин (31,3 %). У 2 женщин (12,5 %) в анамнезе был медицинский аборт. Случаев преждевременных родов, самопроизвольных выкидышей в анамнезе у женщин данной группы не было. В основной группе своевременные роды в анамнезе были у 10 женщин (30,3 %), преждевременные роды — у 5 (15,2 %), что достоверно (р = 0,02) выше, чем в группе контроля, самопроизвольные выкидыши — у 4 (12,1 %), что также достоверно (р = 0,04) выше, чем в контрольной группе. Медицинские аборты у женщин первой группы также отмечены достоверно чаще, чем контрольной (42,4 % против 12,5 %; р = 0,02); при этом 2 аборта и более имели 10 женщин (30,3 %).

У 100 % обследованных обеих групп в анамнезе имели место инфекционные заболевания детского возраста (корь, краснуха, скарлатина, ветряная оспа) (р > 0,05 в обоих случаях). Каждая женщина перенесла в своей жизни острую респираторную вирусную инфекцию. Пациентки основной группы достоверно чаще имели в анамнезе хронический тонзиллит (48,5 % против 15,4 %; р = 0,02) и хронический пиелонефрит по сравнению с контролем (33,3 % против 6,3 %;

р = 0,01).

В структуре осложнений во время беременности у пациенток первой группы преобладала угроза прерывания, начиная с первого триместра, по сравнению с группой контроля (р = 0,001). Обращает на себя внимание высокая частота острых респираторных заболеваний в первом триместре у женщин основной группы по сравнению с контрольной группой (39,4 % против 12,5 %; р = 0,03). Беременность у женщин с угрозой прерывания протекала во втором триместре чаще на фоне анемии (27,3 % против 6,3 %; р = 0,04), чем у женщин контрольной группы.

Женщины в сравниваемых группах были обследованы на наличие урогенитальной инфекции методом ИФА. Установлено, что пациентки с угрозой прерывания беременности имели высокий уровень инфици-рованности с преобладанием вирусного инфицирования (33,3 % против 6,3 %; р = 0,01) по сравнению со второй группой. Частота выявления активной инфекции CMV у женщин в основной группе была достоверно выше по сравнению с контрольной группой (р = 0,01). При исследовании других инфекционных маркеров (Chlamidia trachomatis, Mycoplasma homi-nis, Ureaplasma urealiticum, HSV) достоверных отличий между исследуемыми группами не выявлено. Анализ полученных данных показал, что у женщин в сроке 22-27 недель беременности при развитии угрожающих преждевременных родов уровень CD46 позитивных моноцитов в периферической крови составил 52,63 ± 1,16, что достоверно ниже по сравнению с таковым при неосложненной беременности (73,68 ± 0,82; p = 0,001). Кроме того, нами было выявлено снижение количества CD55+ моноцитов у женщин с угрозой невынашивания в данном сроке гестации (55,63 ± 1,33) по сравнению с аналогичными параметрами в группе контроля (72,15 ± 1,16; p = 0,001).

Таким образом, при угрожающих преждевременных родах в сроке 22-27 недель беременности происходило одновременное снижение экспрессии моноцитами белков CD46 и CD55, регулирующих комплемент. Известно, что недостаточный уровень молекул, участвующих в регуляции комплемента, может приводить к его чрезмерной активации, отложению C3 компонента комплемента. Показано, что активация каскадной системы иммунными клетками с образованием С3а, С5а компонентов комплемента и мембраноатакующего комплекса (МАК) может приводить к гибели клеток трофобласта, что в свою очередь может обуславливать развитие акушерских патологий, в том числе прерывание беременности. Вероятно, обнаруженное нами снижение экспрессии моноцитами CD46 и CD55 у женщин с угрозой прерывания беременности на фоне повышения частоты встречаемости у них маркеров урогенитальных инфекций может служить триггером развития данной патологии.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Семенова, М.В. Перинатальные исходы преждевременных родов /М.В. Семенова, О.В. Загребина //Вопр. практ. пед. - 2010. - Т. 5, Приложение № 1. - С. 73-74.

2. Невынашивание беременности, инфекция, врожденный иммунитет /О.В. Макаров [и др.]. - М., 2007. - 176 с.

3. Стрижаков, А.Н. Внутриутробная инфекция у новорожденного: прогнозирование, профилактика, лечение /А.Н. Стрижаков, П.В. Буданов //Врач. - 2006. - № 9.

4. A role for TLRs in the regulation of immune cell migration by first trimester trophoblast cells /V.M. Abrahams [et al.] //J. Immun. - 2005. -V. 175, № 12.

5. Romero, R. Novel aspects of neutrophil biology in human pregnancy /R. Romero //Am. J. Reprod. Immun. - 2005. - V. 53.

6. Посисеева, Л.В. Иммунология беременности /Л.В. Посисеева, Н.Ю. Сотникова //Акуш. и гинек. - 2007. - № 5 . - С. 42-45.

7. Зубжицкая, Л.Б. Иммуноморфологическое состояние плаценты при акушерской патологии /Л.Б. Зубжицкая, Н.Г. Кошелева, В.В. Семенов; под ред. Э.К. Айламазяна. - СПб., 2005. - 304 с.

8. Tolerance to the foeto-placental 'graft': ten ways to supprot a child for nine months /O. Thellin [et al.] //Curr. Opin. Immun. - 2000. - V. 12. -

P. 731-737.

9. Одинцов, Ю.Н. Биологические функции комплемента /Ю.Н. Одинцов, В.М. Перельмутер //Бюл. сиб. мед. - 2007. - № 2. - С. 72-82.

10. Caucheteux, S.M. At the innate frontiers between mother and fetus: linking abortion with complement activation /S.M. Caucheteux, C. Ka-nellopoulos-Langevin, D.M. Ojcius //Immun. - 2003. - V. 18. - P. 169-172.

^ ^ ^

№2(57) 2014 с/^ть h^Stm вс7|узбассе