СИСТЕМА ПОЛИЦИСТРОННОЙ ЭКСПРЕССИИ ДЛЯ БАКТЕРИЙ

1. Грамположительная бактерия, содержащая единицу полицистронной экспрессии, причем указанная единица полицистронной экспрессии содержит эндогенный ген и один или несколько экзогенных генов, причем указанный эндогенный ген и указанные один или несколько экзогенных генов находятся под транскрипционным контролем промотора, эндогенного по отношению к грамположительной бактерии, причем указанный промотор является промотором рибосомального гена или промотором гена гликолиза.
2. Грамположительная бактерия по п.1, в которой указанный промотор выбран из группы, состоящей из промотора eno, usp45, gap, pyk, rpmB и rpIS указанной грамположительной бактерии.
3. Грамположительная бактерия по п.1 или 2, в которой указанные один или несколько экзогенных генов транскрипционно связаны с 3′-концом указанного эндогенного гена.
4. Грамположительная бактерия по п.3, в которой указанные один или несколько экзогенных генов являются наиболее 3′ удаленным геном единицы полицистронной экспрессии.
5. Грамположительная бактерия по п.1 или 2, в которой указанный эндогенный ген и указанные один или несколько экзогенных генов транскрипционно связаны посредством межгенного участка или участков, активных у грамположительной бактерии.
6. Грамположительная бактерия по п.5, в которой межгенный участок или участки являются эндогенными по отношению к указанной грамположительной бактерии.
7. Грамположительная бактерия по п.5, в которой указанный межгенный участок выбран из группы, состоящей из межгенных участков, предшествующих rpIW, rpIP, rpmD, rpIB, rpsG, rpsE, rpIN, rpIM, rpIE и rpIF.
8. Грамположительная бактерия по п.1 или 2, в которой указанный один или несколько экзогенных генов кодируют продукт.
9. Грамположительная бактерия по п.8, в которой указанный продукт представляет собой белок, полипептид и/или пептид, оказывающий терапевтический или профилактический эффект на субъекта.
10. Грамположительная бактерия по п.8, в которой указанный продукт представляет собой антиген для индукции иммунитета или иммунотолерантности, невакциногенный терапевтически активный полипептид, антитело или его функциональный фрагмент, такой как Fab, химерный белок или мультимерный белок.
11. Грамположительная бактерия по п.8 для применения в качестве лекарственного средства, предпочтительно для применения при введении или доставке указанного продукта субъекту.
12. Грамположительная бактерия по п.1 или 2, в которой эндогенный ген расположен в своем естественном локусе на хромосоме у грамположительной бактерии.
13. Грамположительная бактерия по п.12, в которой эндогенный ген транскрипционно связан с одним или несколькими экзогенными генами посредством встраивания в хромосому одного или нескольких экзогенных генов в указанный локус, предпочтительно посредством встраивания в хромосому одного или нескольких экзогенных генов 3′ от эндогенного гена в указанном локусе.
L
H
14. Грамположительная бактерия по п.1 или 2, в которой один экзогенный ген кодирует легкую цепь (V) антитела или ее функциональный фрагмент, а другой экзогенный ген кодирует тяжелую цепь (V) антитела или ее функциональный фрагмент, причем более предпочтительно функциональным фрагментом является Fab.
L
H
15. Грамположительная бактерия по п.14, в которой экзогенный ген, кодирующий V или ее функциональный фрагмент, транскрипционно связан с 3′-концом экзогенного гена, кодирующего V или ее функциональный фрагмент.
16. Грамположительная бактерия по п.1 или 2, где грамположительная бактерия является молочнокислой бактерией, предпочтительно Lactococcus, Lactobacillus или Enterococcus, более предпочтительно Lactococcus lactis или Enterococcus faecium, или где грамположительной бактерией является представитель рода Bifidobacterium.
17. Рекомбинантная нуклеиновая кислота, содержащая единицу полицистронной экспрессии, причем указанная единица полицистронной экспрессии содержит эндогенный по отношению к грамположительной бактерии ген и один или несколько экзогенных по отношению к грамположительной бактерии генов, причем указанный эндогенный ген и указанные один или несколько экзогенных генов находятся под транскрипционным контролем промотора, эндогенного по отношению к грамположительной бактерии, причем указанный промотор является промотором рибосомального гена или промотором гена гликолиза.
18. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.17, в которой указанный промотор выбран из группы, состоящей из промотора eno, usp45, gap, pyk, rpmB и rpIS указанной грамположительной бактерии.
19. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.17 или 18, в которой указанные один или несколько экзогенных генов транскрипционно связаны с 3′-концом указанного эндогенного гена.
20. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.19, в которой указанные один или несколько экзогенных генов являются наиболее 3′ удаленным геном единицы полицистронной экспрессии.
21. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.17 или 18, в которой указанный эндогенный ген и указанные один или несколько экзогенных генов транскрипционно связаны посредством межгенного участка или участков, активных у грамположительной бактерии.
22. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.21, в которой межгенный участок или участки являются эндогенными по отношению к указанной грамположительной бактерии.
23. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.21, в которой указанный межгенный участок выбран из группы, состоящей из межгенных участков, предшествующих rpIW, rpIP, rpmD, rpIB, rpsG, rpsE, rpIN, rpIM, rpIE и rpIF.
24. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.17 или 18, в которой указанный один или несколько экзогенных генов кодируют продукт.
25. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.24, в которой указанный продукт представляет собой белок, полипептид и/или пептид, оказывающий терапевтический или профилактический эффект на субъекта.
26. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.24, в которой указанный продукт представляет собой антиген для индукции иммунитета или иммунотолерантности, невакциногенный терапевтически активный полипептид, антитело или его функциональный фрагмент, такой как Fab, химерный белок или мультимерный белок.
27. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.24, для применения в качестве лекарственного средства, предпочтительно для применения при введении или доставке указанного продукта субъекту.
L
H
28. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.17 или 18, в которой один экзогенный ген кодирует легкую цепь (V) антитела или ее функциональный фрагмент, а другой экзогенный ген кодирует тяжелую цепь (V) антитела или ее функциональный фрагмент, причем более предпочтительно функциональным фрагментом является Fab.
L
H
29. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.28, в которой экзогенный ген, кодирующий V или ее функциональный фрагмент, транскрипционно связан с 3′-концом экзогенного гена, кодирующего V или ее функциональный фрагмент.
30. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.17 или 18, где грамположительная бактерия является молочнокислой бактерией, предпочтительно Lactococcus, Lactobacillus или Enterococcus, более предпочтительно Lactococcus lactis или Enterococcus faecium, или где грамположительной бактерией является представитель рода Bifidobacterium.
31. Рекомбинантная нуклеиновая кислота, содержащая межгенный участок, активный у грамположительной бактерии, функционально связанный с геном, экзогенным по отношению к указанной грамположительной бактерии, причем указанный межгенный участок выбран из группы, состоящей из межгенных участков, предшествующих rpIW, rpIP, rpmD, rpIB, rpsG, rpsE, rpIN, rpIM, rpIE и rpIF.
32. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п.31, в которой межгенный участок представляет собой эндогенный межгенный участок грамположительной бактерии.
33. Фармацевтическая композиция, содержащая грамположительную бактерию по любому из пп.1-16.
34. Вектор, содержащий рекомбинантную нуклеиновую кислоту по любому из пп.17-32.