Возможная ассоциация полиморфизма генов онкосупрессора p53 и ферментов биотрансформации ксенобиотиков с развитием хронического лимфолейкоза

Гематол. и трансфузиол., 2012, т. 57, № 3

Возможная ассоциация полиморфизма генов онкосупрессора P53 и ферментов биотрансформации ксенобиотиков с развитием хронического лимфолейкоза

В.А. Овсепян, В.А. Росин, Т.П. Загоскина ФГБУН Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА

Введение. Целью настоящего исследования явилось изучение возможной ассоциации между заболеваемостью хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ) и полиморфизмом генов онкосупрессора p53 и ферментов биотрансформации ксенобиотиков цитохрома P450 1A1 (CYP1A1), глутатион-S-трансфераз ц1 (GSTM1), 91 (GSTT1) и п1 (GSTP1).

Материалы и методы. В обсервационную группу были включены 139 больных ХЛЛ (средний возраст 61 год). Группу сравнения составили 235 практически здоровых добровольцев (средний возраст 59 лет). Все обследованные являлись жителями Кировской области. Материалом для исследования полиморфизма послужила ДНК, выделенная из лейкоцитов стабилизированной глюгициром венозной крови больных ХЛЛ стандартным методом фенольно-хлороформной экстракции. Анализ делеционного полиморфизма генов GSTM1 и GSTT1 проводили методом мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР). Генотипирование полиморфизмов A2455G (Ile462Val), A1578G (Ile105Val) и G199C (Arg72Pro) соответственно в генах CYP1A1, GSTP1 и ТР53 выполняли методом ПЦР с последующим анализом полиморфизма длины рестрикционных фрагментов.

Результаты и обсуждение. Установлено статистически значимое преобладание встречаемости мажорного ("дикого") генотипа GSTP*105IleIle среди здоровых индивидуумов над таковой у больных ХЛЛ (34% против 45,5% у здоровых лиц, %2 = 5,11; p < 0,05; OR = 0,62, 95% Cl = 0,4-0,94). Из анализа отношения шансов следует, что указанный генотип ассоциируется с пониженным риском развития ХЛЛ (OR = 0,62; 95% CI = 0,4-0,94) и соответственно с протективным эффектом в отношении развития заболевания. Подобный эффект может быть обусловлен эффективной детоксикацией эндогенных и экзогенных генотоксикантов благодаря нормальной ферментативной активности

полноценной глютатион^-трасферазы п1, препятствующей опухолевой трансформации. Напротив, генотипы, содержавшие хотя бы один минорный ("мутантный") 105Val аллель гена GSTP1 (GSTP1*105xVal, где x - Ile или Val), чаще встречались у больных ХЛЛ, чем в группе здоровых (54,5% против у больных 66% х2 = 5,11; p < 0,05; OR = 1,62; 95% CI = 1,06-2,47). В тоже время не обнаружено значимых межгрупповых различий по частоте встречаемости полиморфных вариантов генов CYP1A1, GSTM1, GSTT1 и ТР53 в группах больных и здоровых лиц. Для оценки вклада межгенных взаимодействий в формирование предрасположенности к ХЛЛ был проведен также анализ частот встречаемости двухгенотипных сочетаний полиморфных вариантов вышеуказанных генов среди больных и здоровых индивидов. Установлено несколько двухгенотипных комбинаций с участием полиморфных вариантов гена GSTP1 статистически значимо различающихся по распространенности в указанных группах. Так, совместное носительство полиморфных вариантов генов CYP1A1*IleIle и GSTP1*105IleIle встречалось значимо чаще среди здоровых лиц по сравнению с группой больных (27,5% против 40,8% контрольной группой; %2 = 6,24; p < 0,05) и ассоциировалось с пониженным риском возникновения болезни (OR = 0,55, 95% CI = 0,34-0,88;p < 0,05). Напротив, зарегистрированы преобладание распространенности комбинации генотипов GSTP1*105ValVal и GSTT1*00 среди больных над таковой у здоровых лиц (0,9% против 5,3% у больных; p < 0,05) и повышенный риск ХЛЛ у носителей такой комбинации (OR = 5,54; 95% CI = 1,16-26,5; p < 0,05). Значительно чаще встречалось у больных по сравнению с контрольной группой (1,7% против 10,3% у больных; %2 = 8,0; p < 0,01) и ассоциировалось с повышенным риском заболевания также совместное носитель-ство генотипов GSTP1*105ValValи TP53*72ArgPro (OR = 5,35; 95% CI = 1,48-19,37;p < 0,01).

Прогностическое значение генов HLA класса II у больных хроническим миелолейкозом, получающих лечение иматинибом мезилатом

Е.Г. Овсянникова, З.М. Исрапилова, Л.В. Заклякова, Е.А. Попов, И.Л. Давыдкин, Т.Ю. Клиточенко, К.Д. Капланов

Астраханская государственная медицинская академия; НИИ гематологии, трансфузиологии и интенсивной терапии Самарского медицинского государственного университета; Волгоградский областной онкологический диспансер

Введение. Внедрение в клиническую практику терапии таргетной направленности для лечения хронического миело-лейкоза (ХМЛ) способствовало достижению полных цитогенетических, больших/полных молекулярных ответов. Однако у части больных ХМЛ регистрируется резистентность к проводимой терапии и прогрессирование заболевания. В связи с этим актуальным является поиск дополнительных прогностических критериев эффективности лечения ХМЛ.

Цель исследования - определение прогностического значения генов HLA класса II локуса DR у больных ХМЛ, получающих лечение иматинибом мезилатом.

Материалы и методы. В исследование включены 50 больных ХМЛ в хронической фазе заболевания, получавших лечение гливеком в течение 24 мес, русской национальности. Диагностику и мониторинг ХМЛ проводили в соответствии с рекомендациями European LeukemiaNet (ELN-2010). Аллельные варианты генов HLA класса II локуса DRB1 определяли методом PCR-SSP (полимеразная цепная реакция с сиквенс-специфическими праймерами). Исследование проводили на базе иммуногенетической лаборатории "Межрегиональный Центр иммуногенетических и гистотипирующих реагентов "Гисанс" (Санкт-Петербург) с помощью наборов "Biotest" (Германия). В качестве контрольных данных использовали результаты генотипирования 94 доноров, жителей Астраханской области, русской национальности.

Результаты и обсуждение. Начальная доза гливека составляла 400 мг/сут. С 3-го до 24-го мес терапии увеличилось число больных ХМЛ, получающих гливек в дозе 600 мг с 18% до 70% соответственно. Через 3 мес оптимальный ответ достигли 64% больных, к 18-м мес терапии оптимальный ответ регистрировал-

ся только у 34%. Доля достижения полного цитогенетического ответа через 24 мес терапии гливеком составил 50%, полный молекулярный ответ регистрировался у 32% больных ХМЛ. Несмотря на увеличение дозы гливека до 600 мг/сут, остается часть больных, резистентных к лечению гливеком. В исследуемой группе больных ХМЛ проведено изучение аллельного полиморфизма гена HLA-DRB1 на различных этапах лечения гливеком.

Выводы:

1. "Генеральными" иммуногенетическими маркерами благоприятного прогноза ХМЛ, с развитием в контрольный срок оптимального ответа на лечение гливеком, являются специфичности DRB1*15(02), DRB1*16(02).

2. "Генеральными" иммуногенетическими маркерами неблагоприятного прогноза, характеризующими недостижение оптимального ответа в контрольные сроки, являются специфичности DRB1*11(05), DRB1*14(06).

3. Иммуногенетическим маркером благоприятного прогноза, характеризующим достижение полного цитогенетического и полного молекулярного ответов через 24 мес терапии гливеком, является специфичность DRB1*16(02).

4. Иммуногенетическими маркерами неблагоприятного прогноза ХМЛ, характеризующими отсутствие полного цитогенетического ответа через 24 мес терапии гливеком являются специфичности DRB1*11(05), DRB 1*12(05), отсутствие полного цитогенетического и полного молекулярного ответа - DRB1*14(06).

5. Специфичность DRB1*15(02) обладает протективным свойством и характеризует благоприятный исход ХМЛ с достижением полного цитогенетического и полного молекулярного ответов через 24 мес терапии гливеком.

68