СПОСОБ ИЗМЕНЕНИЯ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ СВОЙСТВ ЛИПОПОЛИСАХАРИДОВ ЧУМНОГО МИКРОБА В УСЛОВИЯХ IN VITRO

6
1. Способ изменения иммуномодулирующих свойств липополисахаридов чумного микроба в условиях in vitro, включающий получение препаратов липополисахаридов (ЛПС) и «мышиного» токсина (МТ) Yersinia pestis с последующим образованием их комплекса ЛПС-МТ, отличающийся тем, что модифицированную форму ЛПС-МТ используют в качестве индуктора синтеза цитокинов TNF-α и IFN-γ, для этого готовят опытную пробу, в которую добавляют ЛПС в количестве 5 мкг (50 мкл из рабочего разведения 100 мкг/мл) и МТ - в количестве 50 нг (5 мкл из рабочего разведения 10 мкг/мл), после этого пробу инкубируют в течение 30 мин при 37°C, а затем объем проб в эппендорфах доводят до 100 мкл стерильным забуференным физиологическим раствором NaCl и полученную смесь вносят в лунку планшета, содержащего культуру клеток моноцитов человека линии U-937 (1·10 клеток в лунке), последние культивируют в среде PRMI 1640, с одновременной постановкой двойного контроля, затем через 1, 4, 20 ч после начала совместной инкубации препаратов ЛПС с моноцитами проводят количественный учет синтезированных цитокинов и по регистрации количества TNF-α и IFN-γ методом ИФА определяют степень цитокининдуцирующей активности исследуемого материала и соответственно его иммуномодулирующие свойства.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что перед внесением готовых препаратов ЛПС-МТ в лунки из последних отбирают старую ростовую среду и вносят 100 мкл свежей среды PRMI, содержащей 4% FCS.