КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ АНГИОПОЭТИН-ПОДОБНОГО БЕЛКА 3
COMPOSITIONS AND METHODS FOR MODULATING THE EXPRESSION OF ANGIOPOIETIN-LIKE PROTEIN 3

Перечень последовательностей
Настоящее изобретение зарегистрировано вместе с перечнем последовательностей в электронном формате. Перечень последовательностей представлен в виде файла под названием BIOL0254WOSEQ_ST25.txt, созданного 28 апреля 2015 года, размером 0,98 Мб. Информация о перечне последовательностей в электронном формате в полном объеме включена в настоящий документ посредством ссылки.
Область техники
В настоящем документе предложены способы, соединения и композиции для снижения экспрессии мРНК и ангиопоэтин-подобного белка 3 (ANGPTL3) у животного. В настоящем документе предложены также способы, соединения и композиции, содержащие ингибитор ANGPTL3, для облегчения у животного заболеваний или патологических состояний, связанных с ANGPTL3. Такие способы, соединения и композиции пригодны, например, для лечения, предупреждения, отсрочки или облегчения любого одного или более из сердечно-сосудистого заболевания или метаболического синдрома, или его симптома у животного.
Уровень техники
Диабет и ожирение (которые иногда обобщенно называют «диажирением») связаны друг с другом в том отношении, что ожирение, как известно, обостряет патологию ожирения, и более 60% диабетиков страдают от ожирения. Большинство случаев ожирения у людей связано с резистентностью к инсулину и резистентностью к лептину. Действительно, было сделано предположение, что ожирение может оказывать еще большее влияние на действие инсулина, чем сам диабет (Sindelka et al., Physiol Res., 2002, 51, 85-91). Кроме того, известно, что некоторые соединения, имеющиеся в продаже для лечения диабета, вызывают рост массы, что является очень нежелательным побочным эффектом при лечении указанного заболевания.
Сердечно-сосудистые заболевания также взаимосвязаны с ожирением и диабетом. Сердечно-сосудистые заболевания охватывают широкий ряд этиологии и имеют настолько же широкое разнообразие причинных факторов и взаимосвязанных компонентов. Многие причинные факторы способствуют таким симптомам как повышенные уровни холестерина в плазме, включая холестерин липопротеинов невысокой плотности (не-HDL-C), а также другие расстройства, связанные с липидами. Такие расстройства, связанные с липидами, в целом, называют дислипидемией, включая гиперлипидемию, гиперхолестеринемию и гипертриглицеридемию, среди прочих показаний. Повышенный уровень холестерина не-HDL связан с атерогенезом и его осложнениями, включая сердечно-сосудистые заболевания, такие как артериосклероз, болезнь коронарной артерии, инфаркт миокарда, ишемический инсульт и другие формы болезней сердца. Указанные заболевания являются наиболее распространенными типами заболеваний в промышленно развитых странах. Действительно, по оценкам, 12 миллионов людей в Соединенных Штатах Америки страдают от болезни коронарной артерии, и примерно 36 миллионов людей нуждаются в лечении повышенных уровней холестерина.
Эпидемиологические и экспериментальные данные демонстрируют, что высокие уровни циркулирующих триглицеридов (TG) могут способствовать сердечно-сосудистому заболеванию и множеству метаболических расстройств (Valdivielso et al., 2009, Atherosclerosis Zhang et al., 2008, Circ Res. 1; 102(2):250-6). TG, полученные из экзогенных или эндогенных источников, внедряются и секретируются в хиломикронах из кишечника или в липопротеинах очень низкой плотности (VLDL) из печени. Попадая в кровоток, TG гидролизуются липопротеинлипазой (LpL), и затем образованные свободные жирные кислоты поглощаются локальными тканями и используются как источник энергии. Благодаря выраженному действию, которое LpL оказывает на TG в плазме и метаболизм в целом, большой интерес представляет собой открытие и разработка соединений, которые влияют на активность LpL.
Метаболический синдром представляет собой сочетание медицинских расстройств, которые увеличивают риск сердечно-сосудистого заболевания и диабета. У некоторых индивидуумов симптомы, включая высокое кровяное давление, высокий уровень триглицеридов, сниженное содержание HDL и ожирения, как правило, возникают совместно. Такое сочетание поражает многих людей кластерным образом. В некоторых исследованиях рассчитана распространенность в США, составляющая до 25% населения. Метаболический синдром известен под многими другими названиями, такими как (метаболический) синдром X, синдром резистентности к инсулину, синдром Ривена или CHAOS. При высокой распространенности сердечно-сосудистых расстройств и метаболических расстройств сохраняется потребность в улучшенных подходах к лечению указанных состояний.
Ангиопоэтины представляют собой семейство секретируемых факторов роста. В месте с их соответствующими эндотелий-специфичными рецепторами, ангиопоэтины играют важную роль в ангиогенезе. Один из членов семейства, ангиопоэтин-подобный 3 (также известный как ангиопоэтин-подобный белок 3, ANGPT5, ANGPTL3 или ангиопоэтин 5), экспрессируется преимущественно в печени и предположительно играет роль в регуляции метаболизма липидов (Kaplan et al., J. Lipid Res., 2003, 44, 136-143). Полногеномные исследования ассоциаций (GWAS), изучающие геном на наличие общих вариантов, связанных с концентрациями HDL, LDL и триглицеридов в плазме, выявили связь между триглицеридами и однонуклеотидными полиморфизмами (SNP) вблизи ANGPTL3 (Wilier et al., Nature Genetics, 2008, 40(2):161-169). Индивидуумы с гомозиготными мутациями ANGPTL3 с потерей функцией демонстрируют очень низкие уровни всех атерогенных липидов и липопротеинов в плазме, таких как общий холестерин (ТС) и TG, холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL-C), аполипопротеин В (ароВ), не-HDL-C, а также HDL-C (Romeo et al. 2009, J Clin Invest, 119(1):70-79; Musunuru et al. 2010 N Engl J Med, 363:2220-2227; Martin-Campos et al. 2012, Clin Chim Acta, 413:552-555; Minicocci et al. 2012, J Clin Endocrinol Metab, 97:e1266-1275; Noto et al. 2012, Arterioscler Thromb Vasc Biol, 32:805-809; Pisciotta et al. 2012, Circulation Cardiovasc Genet, 5:42-50). Такой клинический фенотип назван термином «наследственная комбинированная гиполипидемия (FHBL2). Несмотря на снижение секреции VLDL, субъекты с FHBL2 не демонстрируют увеличение содержания печеночного жира. Кроме того, они имеют более низкие уровни глюкозы и инсулина в плазме и, что важно, у таких субъектов нет диабета и сердечно-сосудистого заболевания. До настоящего времени не описаны противоположные клинические фенотипы (Minicocci et al. 2013, J of Lipid Research, 54:3481-3490). Было показано, что снижение ANGPTL3 приводит к снижению уровней TG, холестерина и LDL в животных моделях (U.S., серийный номер 13/520997; публикация РСТ WO 2011/085271). Мыши с дефицитом ANGPTL3 имеют очень низкие уровни триглицеридов (TG) в плазме и холестерина, тогда как сверхэкспрессия приводит к противоположному эффекту (Koishi et al. 2002; Koster 2005; Fujimoto 2006). Соответственно, потенциальная роль ANGPTL3 в метаболизме липидов делает его перспективной мишенью для терапевтического вмешательства.
До настоящего времени существуют лишь ограниченные стратегии для лечения кардиометаболического заболевания путем прямого направленного воздействия на уровни ANGPTL3. Ранее были предложены или разработаны фрагменты полипептида ANGPTL3 (U.S. серийный номер 12/128545), анти-ANGPTL3 антитела (U.S. серийный номер 12/001012) и ингибиторы нуклеиновой кислоты ANGPTL3, в том числе антисмысловые олигонуклеотиды (U.S. серийный номер 13/520997; публикация РСТ WO 2011/085271; в полном объеме включенные в настоящий документ посредством ссылки), но ни одно из указанных соединений, напрямую нацеленных на ANGPTL3, не было одобрено для лечения кардиометаболического заболевания. Соответственно, существует неудовлетворенная потребность в высокоэффективных и переносимых соединениях для ингибирования ANGPTL3. Изобретение, описанное в настоящем документе, относится к открытию новых, высокоэффективных ингибиторов экспрессии ANGPTL3 и к их применению при лечении.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем описании предложены композиции и способы модулирования экспрессии мРНК и белка ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации композиция представляет собой специфический ингибитор ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 снижает экспрессию мРНК и белка ANGPTL3.
В некоторых вариантах реализации композиция представляет собой специфический ингибитор ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой нуклеиновую кислоту. В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой модифицированный олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой модифицированный олигонуклеотид с присоединенной группой конъюгата.
В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, причем модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 смежных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 77.
В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, причем модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 1140-1159 SEQ ID NO: 1, при этом последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1.
В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, причем модифицированный олигонуклотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 9715-9734 SEQ ID NO: 2, при этом последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 2.
В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, причем модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований SEQ ID NO: 77, где модифицированный олигонуклеотид содержит: (a) сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; (b) сегмент 5' крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; (с) сегмент 3' крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5' крыла и сегментом 3' крыла, причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар, где каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин.
В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, состоящую из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований SEQ ID NO: 77, где модифицированный олигонуклеотид состоит из: (a) сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; (b) сегмент 5' крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; (с) сегмент 3' крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5' крыла и сегментом 3' крыла, причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар, где каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин.
С некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения. В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, содержащие антисмысловой олигонуклеотид, комплементарный транскрипту нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены способы, включающие приведение в контакт клетки с сопряженным антисмысловым соединением, содержащим антисмысловой олигонуклеотид, комплементарный транскрипту нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены способы, включающие приведение в контакт клетки с сопряженным антисмысловым соединением, содержащим антисмысловой олигонуклеотид, и уменьшение количества или активности транскрипта нуклеиновой кислоты в клетке.
Ранее был описан асиалогликопротеиновый рецептор (ASGP-R). См. например, Park et al., PNAS, том. 102, №47, сс. 17125-17129 (2005). Такие рецепторы экспрессируются на клетках печени, в частности, гепатоцитах. Кроме того, было показано, что соединения, содержащие кластеры трех N-ацетилгалактозаминовых (GalNAc) лигандов, способны связываться с ASGP-R, приводя к захвату указанного соединения в клетку. См. например, Khorev et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry, 16, 9, сс. 5216-5231 (май, 2008). Соответственно, конъюгаты, содержащие такие кластеры GalNAc, использовали для облегчения захвата некоторых соединений в клетки печени, в частности, гепатоциты. Например, было показано, что некоторые GalNAc-содержащие конъюгаты увеличивают активность дуплексных миРНК соединений в клетках печени in vivo. В таких случаях GalNAc-содержащий конъюгат, как правило, прикрепляется к смысловой цепи дуплекса миРНК. Поскольку смысловая цепь отбрасывается перед окончательной гибридизацией антисмысловой цепи с нуклеиновой кислотой-мишенью, то маловероятно, что такой конъюгат будет влиять на активность. Как правило, конъюгат присоединяется к 3'-концу смысловой цепи миРНК. См. например, патент США 8106022. Некоторые группы конъюгата, описанные в настоящем документе, более активны и/или синтезируются легче, чем группы конъюгата, описанные ранее.
В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения конъюгаты присоединяются к одноцепочечным антисмысловым соединениям, включая, но не ограничиваясь ими, антисмысловые соединения на основе РНКазы Н и антисмысловые соединения, которые изменяют сплайсинг целевой нуклеиновой кислоты пре-мРНК. В таких вариантах реализации конъюгат должен оставаться присоединенным к антисмысловому соединению достаточно долго для обеспечения преимущества (улучшенного захвата в клетки), но затем он должен либо расщепляться, либо иным образом не препятствовать последующим стадиям, необходимым для активности, таким как гибридизация с целевой нуклеиновой кислотой и взаимодействие с РНКазой Н или ферментами, связанными со сплайсингом или модулированием сплайсирования. Такой баланс свойств более важен при осаждении одноцепочечных антисмысловых соединений, чем соединений миРНК, где конъюгат может быть просто присоединен к смысловой цепочке. В настоящем документе описаны одноцепочечные антисмысловые соединения, обладающие улучшенной активностью в клетках печени in vivo, по сравнению с таким же антисмысловым соединением, не имеющим конъюгата. Учитывая необходимый баланс свойств для этих соединений, такая улучшенная активность является неожиданной.
В некоторых вариантах реализации группы конъюгата согласно настоящему документу содержат расщепляемый фрагмент. Как было отмечено, не ограничиваясь каким-либо механизмом, логично, что конъюгат должен сохраняться у соединения достаточно долго для обеспечения усиления захвата, но после этого желательно, чтобы некоторая его часть или, в идеале, весь конъюгат расщеплялся, выделяя исходное соединение (например, антисмысловое соединение) в его наиболее активной форме. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой расщепляемый нуклеозид. Такие варианты реализации обладают преимуществом эндогенных нуклеаз в клетке за счет присоединения остальной части конъюгата (кластера) к антисмысловому олигонуклеотиду через нуклеозид при помощи одной или более расщепляемых связей, таких как фосфодиэфирная связь. В некоторых вариантах реализации кластер связан с расщепляемым нуклеозидом через фосфодиэф ирную связь. В некоторых вариантах реализации расщепляемый нуклеозид присоединен к антисмысловому олигонуклеотиду (антисмысловому соединению) фосфодиэфирную связью. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата может содержать два или три расщепляемых нуклеозида. В таких вариантах реализации указанные расщепляемые нуклеозиды связаны друг с другом, с антисмысловым соединением и/или с кластером посредством расщепляемых связей (таких как фосфодиэфирная связь). Некоторые конъюгаты по настоящему документу не содержат расщепляемый нуклеозид, а вместо этого содержат расщепляемую связь. Показано, что достаточное расщепление конъюгата из олигонуклеотида обеспечивается по меньшей мере за счет одной связи, которая легко поддается расщеплению в клетке (расщепляемая связь).
В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения представляют собой пролекарства. Такие пролекарства вводят животному, и они в конечном итоге метаболизируются до более активной формы. Например, сопряженные антисмысловые соединения расщепляются с удалением всего или части конъюгата, приводя к активной (или более активной) форме антисмыслового соединения, не содержащего всего или части конъюгата.
В некоторых вариантах реализации конъюгаты присоединены на 5'-конце олигонуклеотида. Некоторые такие 5'-конъюгаты расщепляются более эффективно, чем аналоги, имеющие такую же группу конъюгата, присоединенную на 3'-конце. В некоторых вариантах реализации улучшенная активность может коррелировать с улучшенным расщеплением. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды, содержащие конъюгат на 5'-конце, обладают более высокой эффективностью, чем олигонуклеотиды, содержащие конъюгат на 3'-конце (см., например, Примеры 56, 81, 83 и 84). Кроме того, 5'-присоединение обеспечивает более простой синтез олигонуклеотида. Как правило, олигонуклеотиды синтезируют на твердой подложке в направлении от 3' к 5'. Для получения 3'-сопряженного олигонуклеотида, как правило присоединяют предварительно сопряженный 3'-нуклеозид к твердой подложке, а затем обычным путем создают олигонуклеотид. Однако присоединение такого сопряженного нуклеозида к твердой подложке усложняет синтез. Кроме того, используя такой подход, конъюгат затем присутствует в ходе всего синтеза олигонуклеотида и может разрушаться во время последующих стадий или может ограничивать типы реакций и реагентов, которые можно использовать. Используя структуры и методики, описанные в настоящем документе для 5'-сопряженных олигонуклеотидов, можно синтезировать олигонуклеотид при помощи стандартных автоматизированных методик и внедрять в конъюгат последний (5'-крайний) нуклеозид или после отделения олигонуклеотида от твердой подложки.
С учетом известного уровня техники и настоящего описания, специалисты в данной области техники могут легко получить любые из конъюгатов и сопряженных олигонуклеотидов, описанных в настоящем документе. Кроме того, синтез некоторых таких конъюгатов и сопряженных олигонуклеотидов, описанных в настоящем документе, проще и/или требует меньше стадий и, следовательно, менее дорогой, чем синтез ранее описанных конъюгатов, что дает преимущество при производстве. Например, синтез некоторых групп конъюгата состоит из меньшего количества синтетических стадий, что приводит к увеличению выхода, по сравнению с ранее описанными группами конъюгата. Группы конъюгатов, такие как GalNAc3-10 в Примере 46 и GalNAc3-7 в Примере 48 гораздо проще, чем ранее описанные конъюгаты, такие как описаны в публикациях U.S. 8106022 или U.S. 7262177, для которых необходима сборка большего количества химических промежуточных соединений. Соответственно, эти и другие конъюгаты, описанные в настоящем документе, обладают преимуществом по сравнению с ранее описанными соединениями для применения с любым олигонуклеотидом, включая одноцепочечные олигонуклеотиды и любую цепь двухцепочечных олигонуклеотидов (например, миРНК).
Точно так же, в настоящем документе описаны группы конъюгатов, имеющие только один или два лиганда GalNAc. Как показано, такие сопряженные группы усиливают активность антисмысловых соединений. Такие соединения гораздо проще получить, чем конъюгаты, содержащие три лиганда GalNAc. Группы конъюгатов, содержащие один или два лиганда GalNAc, могут быть присоединены к любым антисмысловым соединениям, включая одноцепочечные олигонуклеотиды и любую цепь двухцепочечных олигонуклеотидов (например, миРНК).
В некоторых вариантах реализации конъюгаты, описанные в настоящем документе, существенно не изменяют некоторые показатели переносимости. Например, в настоящем документе показано, что сопряженные антисмысловые соединения являются не более иммуногенными, чем несопряженные исходные соединения. Поскольку активность улучшается, то варианты реализации, в которых переносимость остается такой же (или в действительности если даже переносимость ухудшается лишь незначительно, по сравнению с приростом активности), обладают улучшенными характеристиками для терапии.
В некоторых вариантах реализации сопряжение позволяет изменять антисмысловые соединения так, чтобы они обладали менее выраженными последствиями в отсутствие сопряжения. Например, в некоторых вариантах реализации замена одной или более тиофосфатных связей полностью тиофосфатного антисмыслового соединения на фосфодиэфирные связи приводит к улучшению некоторых показателей переносимости. Например, в некоторых случаях такие антисмысловые соединения, имеющие один или более фосфодиэфиров, являются менее иммуногенными, чем такие же соединения, в которых каждая связь представляет собой тиофосфат. Однако в некоторых случаях, как показано в Примере 26, такое же замещение одной или более тиофосфатных связей на фосфодиэфирные связи приводит также к снижению клеточного захвата и/или к снижению активности. В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, допускают такое изменение связей с небольшим снижением или без снижения захвата и активности, по сравнению с сопряженным полностью тиофосфатным аналогом. В действительности, в некоторых вариантах реализации, например, в Примерах 44, 57, 59 и 86, олигонуклеотиды, содержащие конъюгат и по меньшей мере одну фосфодиэфирную межнуклеозидную связь, фактически демонстрируют повышенную активность in vivo даже по сравнению с полностью тиофосфатным аналогом, также содержащим такой же конъюгат. Более того, поскольку сопряжение приводит к значительному увеличению захвата /активности, то небольшое снижение такого существенного прироста может быть приемлемым для достижения улучшенной переносимости. Соответственно, в некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения содержат по меньшей мере одну фосфодиэфирную связь.
В некоторых вариантах реализации сопряжение антисмысловых соединений по настоящему документу приводит к улучшенной доставке, захвату и активности в гепатоцитах. Следовательно, в ткань печени доставляется большее количество соединения. Однако в некоторых вариантах реализации такая улучшенная доставка сама по себе не объясняет общего увеличения активности. В некоторых таких вариантах реализации в гепатоциты поступает большее количество соединения. В некоторых вариантах реализации даже такой улучшенный захват гепатоцитов сам по себе не объясняет общего увеличения активности. В таких вариантах реализации увеличивается продуктивный захват сопряженного соединения. Например, как показано в Примере 102, некоторые варианты реализации GalNAc-coдержащих конъюгатов увеличивают обогащение антисмысловых олигонуклеотидов в гепатоцитах, по сравнению с не паренхимальными клетками. Такое обогащение преимущественно для олигонуклеотидов, которые направлены на гены, экспрессируемые в гепатоцитах.
В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения по настоящему документу приводят к уменьшению воздействия на почки. Например, как показано в Примере 20, концентрации антисмысловых олигонуклеотидов, содержащих некоторые варианты реализации GalNAc-содержащих конъюгатов, в почках ниже, чем концентрации антисмысловых олигонуклеотидов, не имеющих GalNAc-содержащего конъюгата. Это имеет несколько преимущественных терапевтических применений. Для терапевтических показаний, в которых не требуется проявление активности в почках, воздействие на почки подвергает их риску токсичности без соответствующей пользы. Более того, высокая концентрация в почках обычно приводит к выводу соединения с мочой, обеспечивая более быстрое выведение. Соответственно, для внепочечных мишеней накопление в почках является нежелательным.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные формулой:
где
А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент
С представляет собой линкер конъюгата
D представляет собой группу ветвления
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
На представленной выше схеме и в аналогичных схемах в настоящем документе группа ветвления «D» разветвляется такое количество раз, которое необходимо для соответствия количеству групп (E-F), указанному количеством «q». Следовательно, если q=1, то формула представляет собой:
если q=2, то формула представляет собой:
если q=3, то формула представляет собой:
если q=4, то формула представляет собой:
если q=5, то формула представляет собой:
В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:
.
В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:
.
В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:
.
В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:
В вариантах реализации, имеющих более одной конкретной переменной (например, более одного «m» или «n»), если не указано иное, каждая такая конкретная переменная выбрана независимо. Следовательно, для структуры, имеющей более одного n, каждый n выбран независимо, так что они могут быть или не быть одинаковыми между собой.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид ISIS 563580 с 5'-Х, где Х представляет собой группу конъюгата, содержащую GalNAc. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из модифицированного олигонуклеотида ISIS 563580 с 5'-Х, где Х представляет собой группу конъюгата, содержащую GalNAc.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит сопряженный модифицированный олигонуклеотид ISIS 703801. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из сопряженного модифицированного олигонуклеотида ISIS 703801.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит сопряженный модифицированный олигонуклеотид ISIS 703802. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из сопряженного модифицированного олигонуклеотида ISIS 703802.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 с 5'-GalNAc, с вариабельностью сахарных модификаций в крыльях. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из модифицированного олигонуклеотида с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 с 5'-GalNAc, с вариабельностью сахарных модификаций в крыльях.
1
2
1
2
1
2
1
2
2
2
3
2
3
2
2
2
3
2
2
где либо R представляет собой -ОСНСНOСН (МОЕ), и R представляет собой Н; либо R и R вместе образуют мостик, где R представляет собой -O-, и R представляет собой -СН-, -СН(СН)- или -СНСН-, и R и R напрямую связаны так, что образующийся мостик выбран из: -O-СН-, -О-СН(СН)- и -O-СНСН-;
3
4
3
4
3
4
3
4
3
4
2
2
3
2
3
2
2
2
3
2
2
и для каждой пары R и R у одного кольца, независимо для каждого кольца: либо R выбран из Н и -ОСНСНOСН, и R представляет собой Н; либо R и R вместе образуют мостик, где R представляет собой -O-, и R представляет собой -СН-, -СН(СН)- или -СНСН-, и R и R напрямую связаны так, что образующийся мостик выбран из: -O-СН-, -O-СН(СН)- и -O-СНСН-;
5
3
и R выбран из Н и -СН;
-
-
и Z выбран из S и О.
В некоторых вариантах реализации предложена композиция, содержащая сопряженное антисмысловое соединение, описанное в настоящем документе, или его соль и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
В некоторых вариантах реализации модулирование экспрессии ANGPTL3 происходит в клетке или ткани. В некоторых вариантах реализации модулирование происходит в клетке или ткани в организме животного. В некоторых вариантах реализации животное представляет собой человека. В некоторых вариантах реализации модулирование представляет собой снижение уровня мРНК ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации модулирование представляет собой снижение уровня белка ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации происходит снижение и мРНК, и белка ANGPTL3. Такое снижение может происходить в зависимости от времени или в зависимости от дозы.
В некоторых вариантах реализации предложены композиции и способы для применения в терапии. В некоторых вариантах реализации предложены композиции и способы предупреждения, лечения, отсрочки, замедления прогрессирования и/или облегчения заболеваний, расстройств и патологических состояний, связанных с ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации такие заболевания, расстройства и патологические состояния представляют собой сердечно-сосудистые и/или метаболические заболевания, расстройства и патологические состояния. В некоторых вариантах реализации композиции и способы терапии включают введение специфического ингибитора ANGPTL3 индивидууму, нуждающемуся в этом. В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой нуклеиновую кислоту. В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой модифицированный олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой модифицированный олигонуклеотид с присоединенной группой конъюгата.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Следует понимать, что изложенное выше общее описание и следующее подробное описание являются лишь примерными и пояснительными, и не являются ограничивающими заявленное изобретение. В настоящем документе использование единственного числа включает множественное число, если специально не указано иное. При использовании в настоящем документе, термин «или» означает «и/или», если не указано иное. Кроме того, использование термина «включая», а также других форм, таких как «включает» и «включенный», не является ограничивающим. Также, такие термины как «элемент» или «компонент» охватывают как элементы и компоненты, содержащие одну единицу, так и элементы и компоненты, которые содержат более одной субъединицы, если специально не указано иное.
Используемые в данном документе заголовки разделов предназначены исключительно для целей структурирования и не должны восприниматься как такие, которые ограничивают описываемый объект изобретения. Все документы или части документов, цитируемые в настоящей заявке, включая, но не ограничиваясь ими, патенты, патентные заявки, статьи, книги и трактаты, в явной форме включены в настоящий документ посредством ссылки в отношении частей документов, обсуждаемых в данном описании, а также в полном объеме.
Определения
е
е
При отсутствии конкретных определений, номенклатура, используемая в связи с ними, а также в связи с приемами и методиками аналитической химии, синтетической органической химии, а также медицинской и фармацевтической химии, описанная в настоящем документе, является общеизвестной и общепринятой в данной области техники. Для химического синтеза и химического анализа могут быть использованы стандартные методики. Некоторые такие методики и приемы представлены, например, в публикациях "Carbohydrate Modifications in Antisense Research" под редакцией Sangvi и Cook, American Chemical Society, федеральный округ Вашингтон, 1994; "Remington's Pharmaceutical Sciences," Mack Publishing Co., Истон, штат Пенсильвания, 21 издание, 2005; и "Antisense Drug Technology, Principles, Strategies, and Applications" под редакцией Stanley Т. Crooke, CRC Press, Бока-Ратон, штат Флорида; а также в книге Sambrook et al., "Molecular Cloning, A laboratory Manual," 2 издание, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989, которые включены в настоящий документ посредством ссылки для всех целей. В допустимых случаях, все патенты, заявки, опубликованные заявки и другие публикации, инвентаризационные номера GENBANK и связанная информация о последовательностях, доступная через базы данных, такие как Национальный Центр Биотехнологической Информации (NCBI) и другие данные, на которые присутствует ссылка в данном описании, включены посредством ссылки в части документа, обсуждаемой в данном описании, а также в полном объеме.
Если не указано иное, следующие термины имеют следующие значения:
В данном контексте «нуклеозид» означает соединение, содержащее фрагмент азотистого основания и сахарный фрагмент. Нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, природные нуклеозиды (которые находятся в ДНК и РНК) и модифицированные нуклеозиды. Нуклеозиды могут быть связаны с фосфатным фрагментом.
В данном контексте «химическая модификация» означает химическое отличие в соединении, по сравнению с природным аналогом. Химические модификации олигонуклеотидов включают нуклеозидные модификации (включая модификации сахарного фрагмента и модификации азотистого основания) и модификации межнуклеозидных связей. В отношении олигонуклеотида химическая модификация включает не только отличия в последовательности азотистых оснований.
В данном контексте «фуранозил» означает структуру, содержащую 5-членное кольцо, содержащее четыре атома углерода и один атом кислорода.
В данном контексте «природный сахарный фрагмент» означает рибофуранозил, встречающийся в природной РНК, или дезоксирибофуранозил, встречающийся в природной ДНК.
В данном контексте «сахарный фрагмент» означает природный сахарный фрагмент или модифицированный сахарный фрагмент нуклеозида.
В данном контексте «модифицированный сахарный фрагмент» означает замещенный сахарный фрагмент или заменитель сахара.
В данном контексте «замещенный сахарный фрагмент» означает фуранозил, который не является природным сахарным фрагментом. Замещенные сахарные фрагменты включают, но не ограничиваются ими, фуранозилы, содержащие заместители в 2'-положении, 3'-положении, 5'-положении и/или 4'-положении. Некоторые замещенные сахарные фрагменты представляют собой бициклические сахарные фрагменты.
В данном контексте «2'-замещенный сахарный фрагмент» означает фуранозил, содержащий заместитель в 2'-положении, отличный от Н или ОН. Если не указано иное, то 2'-замещенный сахарный фрагмент не является бициклическим сахарным фрагментом (т.е. 2'-заместитель 2'-замещенного сахарного фрагмента не образует мостик с другим атомом фуранозильного кольца).
2
2
3
В данном контексте «МОЕ» означает -ОСНСНOСН.
В данном контексте «2'-F нуклеозид» относится к нуклеозиду, содержащему сахар, который содержит фтор в 2'-положении. Если не указано иное, то фтор в 2'-F нуклеозиде находится в рибо-положении (заменяя ОН природной рибозы).
В данном контексте термин «заменитель сахара» означает структуру, которая не содержит фуранозила и способна заменять природный сахарный фрагмент нуклеозида, так что образующиеся нуклеозидные субъединицы могут связываться вместе и/или связываться с другими нуклеозидами с образованием олигомерного соединения, которое может гибридизоваться с комплементарным олигомерным соединением. Такие структуры включают кольца, содержащие другое количество атомов, чем фуранозил (например, 4, 6 или 7-членные кольца); замену кислорода фуранозила некислородным атомом (например, углеродом, серой или азотом); или одновременное изменение количества атомов и замену кислорода. Такие структуры также могут содержать замещения, соответствующие замещениям, описанным для замещенных сахарных фрагментов (например, 6-членные карбоциклические бициклические заменители сахара, необязательно содержащие дополнительные заместители). Заменители сахара включают также более сложные сахарные замены (например, некольцевые системы пептидной нуклеиновой кислоты). Заменители сахара включают, без ограничения, морфолино, циклогексенилы и циклогекситы.
В данном контексте «бициклический сахарный фрагмент» означает модифицированный сахарный фрагмент, содержащий 4-7-членное кольцо (включая, но не ограничиваясь фуранозилом), содержащее мостик, связывающий два атома 4-7-членного кольца с образованием второго кольца, что приводит к получению бициклической структуры. В некоторых вариантах реализации 4-7-членное кольцо представляет собой сахарное кольцо. В некоторых вариантах реализации 4-7-членное кольцо представляет собой фуранозил. В некоторых таких вариантах реализации мостик соединяет 2'-углерод и 4'-углерод фуранозила.
В данном контексте «нуклеотид» означает нуклеозид, дополнительно содержащий фосфатную линкерную группу. В данном контексте «связанные нуклеозиды» могут быть или не быть связаны фосфатными связями и, следовательно, включают, но не ограничиваются ими, «связанные нуклеотиды». В данном контексте «связанные нуклеозиды» представляют собой нуклеозиды, которые связаны в непрерывную последовательность (т.е. между связанными нуклеозидами нет дополнительных нуклеозидов).
В данном контексте «азотистое основание» означает группу атомов, которая может быть связана с сахарным фрагментом с образованием нуклеозида, который может быть внедрен в олигонуклеотид, и при этом указанная группа атомов может связываться с комплементарным природным азотистым основанием другого олигонуклеотида или нуклеиновой кислоты. Азотистые основания могут быть природными или могут быть модифицированными. «Последовательность азотистых оснований» означает порядок последовательных азотистых оснований, независимый от любого сахара, связи или модификации азотистого основания.
В данном контексте термины «немодифицированное азотистое основание» или «природное азотистое основание» означают природные гетероциклические азотистые РНК или ДНК: пуриновые основания аденин (А) и гуанин (G) и пиримидиновые основания тимин (Т), цитозин (С) (включая 5-метил С) и урацил (U).
В данном контексте «модифицированное азотистое основание» означает любое азотистое основание, которое не является природным азотистым основанием.
В данном контексте «модифицированный нуклеозид» означает нуклеозид, содержащий по меньшей мере одну химическую модификацию, по сравнению с природными нуклеозидами РНК или ДНК. Модифицированные нуклеозиды содержат модифицированный сахарный фрагмент и/или модифицированное азотистое основание.
В данном контексте «бициклический нуклеозид» или «BNA» означает нуклеозид, содержащий бициклический сахарный фрагмент.
3
В данном контексте «затрудненный этил-нуклеозид» или «cEt» означает нуклеозид, содержащий бициклический сахарный фрагмент, который содержит мостик 4'-СН(СН)-O-2'.
2
В данном контексте «нуклеозид закрытой нуклеиновой кислоты» или «ЗНК» означает нуклеозид, содержащий бициклический сахарный фрагмент, который содержит мостик 4'-СН-O-2'.
В данном контексте «2'-замещенный нуклеозид» означает нуклеозид, содержащий заместитель в 2'-положении, отличный от Н или ОН. Если не указано иное, то 2'-замещенный нуклеозид не является бициклическим нуклеозидом.
В данном контексте «дезоксинуклеозид» означает нуклеозид, содержащий 2'-Н фуранозильный сахарный фрагмент, находящийся в природных дезоксирибонуклеозидах (ДНК). В некоторых вариантах реализации 2'-дезоксинуклеозид может содержать модифицированное азотистое основание или может содержать азотистое основание РНК (например, урацил).
В данном контексте «олигонуклеотид» означает соединение, содержащее множество связанных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит один или более не модифицированных рибонуклеозидов (РНК) и/или немодифицированных дезоксирибонуклеозидов (ДНК), и/или один или более модифицированных нуклеозидов.
В данном контексте «олигонуклеозид» означает олигонуклеотид, в котором ни одна из межнуклеозидных связей не содержит атом фосфора. В данном контексте олигонуклеотиды включают олигонуклеозиды.
В данном контексте «модифицированный олигонуклеотид» означает олигонуклеотид, содержащий по меньшей мере один модифицированный нуклеозид и/или по меньшей мере одну модифицированную межнуклеозидную связь.
В данном контексте «связь» или «линкерная группа» означает группу атомов, которая связывает вместе две или более других групп атомов.
В данном контексте «межнуклеозидная связь» означает ковалентную связь между соседними нуклеозидами в олигонуклеотиде.
В данном контексте «природная межнуклеозидная связь» означает фосфодиэфирную связь 3' с 5'.
В данном контексте «модифицированная межнуклеозидная связь» означает любую межнуклеозидную связь, отличную от природной межнуклеозидной связи.
В данном контексте «концевая межнуклеозидная связь» означает связь между последними двумя нуклеозидами олигонуклеотида или его определенной области.
В данном контексте «фосфорная линкерная группа» означает линкерную группу, содержащую атом фосфора. Фосфорные линкерные группы включают, без ограничения, группы, имеющие формулу:
где:
a
d
2
1
1
1
6
1
6
R и R, каждый независимо, представляют собой О, S, CH, NH или NJ, где J представляет собой C-С алкил или замещенный C-С алкил;
b
R представляет собой О или S;
c
1
6
1
6
1
6
1
6
R представляет собой ОН, SH, C-С алкил, замещенный C-С алкил, C-С алкокси, замещенный C-С алкокси, амино или замещенный амино; и
1
b
J представляет собой R представляет собой О или S.
Фосфорные линкерные группы включают, без ограничения, фосфодиэфир, тиофосфат, дитиофосфат, фосфонат, фосфорамидат, фосфортиоамидат, тионоалкилфосфонат, фосфотриэфиры, тионоалкил-фосфотриэфиры и боранофосфат.
В данном контексте «межнуклеозидная фосфорная линкерная группа» означает фосфорную линкерную группу, которая напрямую связывает два нуклеозида.
В данном контексте «немежнуклеозидная фосфорная линкерная группа» означает фосфорную линкерную группу, которая не связывает напрямую два нуклеозида. В некоторых вариантах реализации немежнуклеозидная фосфорная линкерная группа связывает нуклеозид с группой, отличной от нуклеозида. В некоторых вариантах реализации немежнуклеозидная фосфорная линкерная группа связывает две группы, ни одна из которых не является нуклеозидом.
2
3
2
2
2
2
2
В данном контексте «нейтральная линкерная группа» означает линкерную группу, которая не имеет заряда. Нейтральные линкерные группы включают, без ограничения, фосфотриэфиры, метилфосфонаты, MMI (-СН-N(СН)-O-), амид-3 (-CH-C(=O)-N(H)-), амид-4 (-CH-N(H)-C(=O)-), формацеталь (-O-СН-O-) и тиоформацеталь (-S-CH-O-). Дополнительные нейтральные линкерные группы включают линкеры, содержащие силоксан (диалкилсилоксан), карбоксилатный эфир, карбоксамид, сульфид, сульфонатный эфир и амиды (см., например: Carbohydrate Modifications in Antisense Research; Y.S. Sanghvi and P.D. Cook, ред. ACS Symposium Series 580; главы 3 и 4, (сс. 40-65)). Дополнительные нейтральные линкерные группы включают неионные линкеры, содержащие смешанные составные части N, О, S и CH.
В данном контексте «межнуклеозидная нейтральная линкерная группа» означает нейтральную линкерную группу, которая напрямую связывает два нуклеозида.
В данном контексте «немежнуклеозидная нейтральная линкерная группа» означает нейтральную линкерную группу, которая не связывает напрямую два нуклеозида. В некоторых вариантах реализации немежнуклеозидная нейтральная линкерная группа связывает нуклеозид с группой, отличной от нуклеозида. В некоторых вариантах реализации немежнуклеозидная нейтральная линкерная группа связывает две группы, ни одна из которых не является нуклеозидом.
В данном контексте «олигомерное соединение» означает полимерную структуру, содержащую две или более субструктур. В некоторых вариантах реализации олигомерное соединение содержит олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации олигомерное соединение содержит одну или более сопряженных групп и/или концевых групп. В некоторых вариантах реализации олигомерное соединение состоит из олигонуклеотида. Олигомерные соединения включают также природные нуклеиновые кислоты. В некоторых вариантах реализации олигомерное соединение содержит скелет одной или более связанных мономерных субъединиц, при этом каждая связанная мономерная субъединица прямо или косвенно присоединена к гетероциклическому основному фрагменту. В некоторых вариантах реализации олигомерные соединения могут содержать также мономерные субъединицы, которые не связаны с гетероциклическим основным фрагментом, обеспечивая таким образом сайты с удаленными основаниями. В некоторых вариантах реализации линкеры, соединяющие мономерные субъединицы, сахарные фрагменты или заменители и гетероциклические основные фрагменты, могут быть независимо модифицированы. В некоторых вариантах реализации единица линкер-сахар, которая может содержать или не содержать гетероциклическое основание, может быть замещена миметиком, таким как мономеры в пептидных нуклеиновых кислотах.
В данном контексте «концевая группа» означает один или более атомов, присоединенных к любому или к обоим 3'- или 5'-концам олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации концевая группа представляет собой группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации концевая группа содержит один или более нуклеозидов концевой группы.
В данном контексте «конъюгат» или «группа конъюгата» означает атом или группу атомов, связанную с олигонуклеотидом или олигомерным соединением. Как правило, группы конъюгата модифицируют одно или более свойств соединения, к которому они присоединены, включая, но не ограничиваясь ими, свойства фармакодинамики, фармакокинетики, связывания, поглощения, клеточного распределения, клеточного захвата, заряда и/или выведения.
В данном контексте «линкер конъюгата» или «линкер» в контексте группы конъюгата означает часть группы конъюгата, содержащую любой атом или группу атомов и ковалентно связывающую (1) олигонуклеотид с другой частью группы конъюгата или (2) две или более частей группы конъюгата.
Группы конъюгата представлены в настоящем документе как радикалы, обеспечивающие связь для образования ковалентного присоединения к олигомерному соединению, такому как антисмысловой олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации точка присоединения в олигомерном соединении представляет собой 3'-атом кислорода 3'-гидроксильной группы 3'-концевого нуклеозида олигомерного соединения. В некоторых вариантах реализации точка присоединения у олигомерного соединения представляет собой 5'-атом кислорода 5'-гидроксильной группы 5'-концевого нуклеозида олигомерного соединения. В некоторых вариантах реализации связь для образования присоединения к олигомерному соединению представляет собой расщепляемую связь. В некоторых таких вариантах реализации такая расщепляемая связь составляет весь или часть расщепляемого фрагмента.
3
4
a
В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат расщепляемый фрагмент (например, расщепляемую связь или расщепляемый нуклеозид) и часть углеводного кластера, такую как часть кластера GalNAc. Такая часть углеводного кластера содержит: направляющий фрагмент и необязательно линкер конъюгата. В некоторых вариантах реализации часть углеводного кластера определяют по количеству и сущности лиганда. Например, в некоторых вариантах реализации часть углеводного кластера содержит 3 группы GalNAc и обозначена «GalNAc». В некоторых вариантах реализации часть углеводного кластера содержит 4 группы GalNAc и обозначена «GalNAc». Конкретные части углеводных кластеров (имеющие конкретную связку, группы ветвления и линкера конъюгата) описаны в настоящем документе и обозначены римской цифрой с последующим нижним индексом «а». Соответственно, «GalNac3-1» относится к конкретной части углеводного кластера группы конъюгата, имеющей 3 группы GalNAc и конкретно определенную связку, группы ветвления и линкера. Такой фрагмент углеводного кластера присоединен к олигомерному соединению через расщепляемый фрагмент, такой как расщепляемая связь или расщепляемый нуклеозид.
В данном контексте «расщепляемый фрагмент» означает связь или группу, которая может быть расщеплена при физиологических условиях. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент расщепляется внутри клетки или во внутриклеточных отделах, таких как лизосома. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент расщепляется эндогенными ферментами, такими как нуклеазы. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент содержит группу атомов, имеющую один, два, три, четыре или более четырех расщепляемых связей.
В данном контексте «расщепляемая связь» означает любую химическую связь, которая может быть расщеплена. В некоторых вариантах реализации расщепляемая связь выбрана из: амида, полиамида, сложного эфира, эфира, одного или обоих сложных эфиров фосфодиэфира, фосфатного сложного эфира, карбамата, дисульфида или пептида.
В данном контексте «углеводный кластер» означает соединение, имеющее один или более углеводных остатков, присоединенных к скелету или линкерной группе, (см., например, Maier et al., "Synthesis of Antisense Oligonucleotides Conjugated to a Multivalent Carbohydrate Cluster for Cellular Targeting," Bioconjugate Chemistry, 2003, (14): 18-29, полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки, или Rensen et al., "Design and Synthesis of Novel N-Acetylgalactosamine-Terminated Glycolipids for Targeting of Lipoproteins to the Hepatic Asiaglycoprotein Receptor," J. Med. Chem. 2004, (47): 5798-5808, где представлены примеры углеводных сопряженных кластеров).
В данном контексте «модифицированный углевод» означает любой углевод, имеющий одну или более модификаций, по сравнению с природными углеводами.
В данном контексте «производное углевода» означает любое соединение, которое может быть синтезировано с использованием углевода в качестве исходного материала или промежуточного соединения.
В данном контексте «углевод» означает природный углевод, модифицированный углевод или производное углевода.
В данном контексте «защитная группа» означает любое соединение или защитную группу, известную специалистам в данной области техники. Неограничивающие примеры защитных групп представлены в книге "Protective Groups in Organic Chemistry", Т.W. Greene, P.G.M. Wuts, ISBN 0-471-62301-6, John Wiley & Sons, Ink, Нью-Йорк, полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки.
В данном контексте «одноцепочечное» означает олигомерное соединение, которое не гибридизовано с его комплементом и которое не обладает достаточной самокомплементарностью для образования устойчивого собственного дуплекса.
В данном контексте «двухцепочечное» означает пару олигомерных соединений, которые гибридизованы друг с другом, или одно самокомплементарное олигомерное соединение, которое образует шпилечную структуру. В некоторых вариантах реализации двухцепочечное олигомерное соединение содержит первое и второе олигомерное соединение.
В данном контексте «антисмысловое соединение» означает соединение, содержащее или состоящее из олигонуклеотида, по меньшей мере часть которого комплементарна целевой нуклеиновой кислоте, с которой возможна его гибридизация, что приводит к получению по меньшей мере одной антисмысловой активности.
В данном контексте «антисмысловая активность» означает любое обнаруживаемое и/или измеримое изменение, обусловленное гибридизацией антисмыслового соединения с его нуклеиновой кислотой-мишенью. В некоторых вариантах реализации антисмысловая активность включает модулирование количества или активности транскрипта целевой нуклеиновой кислоты (например, мРНК). В некоторых вариантах реализации антисмысловая активность включает модулирование сплайсинга пре-мРНК.
В данном контексте «антисмысловое соединение на основе РНКазы H» означает антисмысловое соединение, в котором по меньшей мере часть антисмысловой активности антисмыслового соединения обусловлена гибридизацией антисмыслового соединения с целевой нуклеиновой кислотой и последующим расщеплением целевой нуклеиновой кислоты под действием РНКазы Н.
В данном контексте «антисмысловое соединение на основе RISC» означает антисмысловое соединение, в котором по меньшей мере часть антисмысловой активности антисмыслового соединения обусловлена РНК-индуцируемым комплексом сайленсинга (RISC).
В данном контексте «обнаружение» или «измерение» означает, что выполнено испытание или анализ для обнаружения или измерения. Такое обнаружение и/или измерение может приводить к результату с нулевым значением. Следовательно, даже если испытание для обнаружения или измерения приводит к обнаружению отсутствия активности (нулевой активности), то стадия обнаружения или измерения активности была выполнена.
В данном контексте «обнаруживаемая и/или измеримая активность» означает статистически значимую активность, которая не является нулевой.
В данном контексте «по существу не измененный» означает небольшое или отсутствие изменения конкретного параметра, в частности, по сравнению с другим параметром, который изменился гораздо больше. В некоторых вариантах реализации параметр является по существу не измененным, если его изменение составило менее 5%. В некоторых вариантах реализации параметр является по существу не измененным, если его изменение составило менее двух раз, тогда как изменение другого параметра составило по меньшей мере десять раз. Например, в некоторых вариантах реализации антисмысловая активность представляет собой изменение количества целевой нуклеиновой кислоты. В некоторых таких вариантах реализации количество нецелевой нуклеиновой кислоты является по существу не измененным, если оно изменяется гораздо меньше, чем изменяется количество целевой нуклеиновой кислоты, но это изменение не обязательно должно быть нулевым.
В данном контексте «экспрессия» означает процесс, посредством которого ген в конечном итоге преобразуется в белок. Экспрессия включает, но не ограничивается этим, транскрипцию, пост-транскрипционную модификацию (например, сплайсинг, полиаденилирование, добавление 5'-кэпа) и трансляцию.
В данном контексте «целевая нуклеиновая кислота» означает молекулу нуклеиновой кислоты, с которой предполагается гибридизация антисмыслового соединения с получением заданной антисмысловой активности. Антисмысловые олигонуклеотиды обладают достаточной комплементарностью с их нуклеиновыми кислотами-мишенями для обеспечения гибридизации при физиологических условиях.
В данном контексте «комплементарность азотистого основания» или «комплементарность» в отношении азотистых оснований означает азотистое основание, которое способно к спариванию оснований с другим азотистым основанием. Например, в ДНК аденин (А) комплементарен тимину (Т). Например, в РНК аденин (А) комплементарен урацилу (U). В некоторых вариантах реализации комплементарное азотистое основание означает азотистое основание антисмыслового соединения, которое способно к спариванию с азотистым основанием его целевой нуклеиновой кислоты. Например, если азотистое основание в определенном положении антисмыслового соединения способно к водородному связыванию с азотистым основанием в определенном положении нуклеиновой кислоты-мишени, то это положение водородного связывания между олигонуклеотидом и нуклеиновой кислотой-мишенью считается комплементарным по этой паре азотистых оснований. Азотистые основания, содержащие определенные модификации, могут сохранять способность к спариванию с противоположным азотистым основанием и, следовательно, все еще могут обладать комплементарностью азотистых оснований.
В данном контексте «некомплементарные» в отношении азотистых оснований означает пару азотистых оснований, которые не образуют водородные связи друг с другом.
В данном контексте «комплементарные» в отношении олигомерных соединений (например, связанных нуклеозидов, олигонуклеотидов или нуклеиновых кислот) означает способность таких олигомерных соединений или их областей к гибридизации с другим олигомерным соединением или его областью за счет комплементарности азотистых оснований. Комплементарные олигомерные соединения не обязательно должны обладать комплементарностью азотистых оснований в каждом нуклеозиде. До не которой степени допустимы некоторые несоответствия. В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны по 70% азотистых оснований (комплементарность 70%). В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны на 80%. В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны на 90%. В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны на 95%. В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны на 100%.
В данном контексте «несоответствие» означает азотистое основание первого олигомерного соединения, которое не способно спариваться с азотистым основанием в соответствующем положении второго олигомерного соединения при выравнивании первого и второго олигомерного соединения. Любое или оба первое и второе олигомерные соединения могут быть олигонуклеотидами.
В данном контексте «гибридизация» означает спаривание комплементарных олигомерных соединений (например, антисмыслового соединения и его целевой нуклеиновой кислоты). Не ограничиваясь конкретным механизмом, наиболее распространенный механизм спаривания включает водородное связывание, которое может представлять собой уотсон-криковское, хугстиновское или обратное хугстиновское водородное связывание между комплементарными азотистыми основаниями.
В данном контексте «специфически гибридизуется» означает способность олигомерного соединения гибридизоваться с одним сайтом нуклеиновой кислоты с большей аффинностью, чем оно гибридизуется с другим сайтом нуклеиновой кислоты.
В данном контексте «полностью комплементарный» в отношении олигонуклеотида или его части означает, что каждое азотистое основание олигонуклеотида или его части способно к спариванию с азотистым основанием комплементарной нуклеиновой кислоты или ее непрерывной частью. Следовательно, полностью комплементарная область не содержит несоответствий или негибридизованных азотистых оснований в обеих цепях.
В данном контексте «процент комплементарности» означает процент азотистых оснований олигомерного соединения, которые комплементарны равной по длине части целевой нуклеиновой кислоты. Процент комплементарности рассчитывают делением количества азотистых оснований олигомерного соединения, которые комплементарны азотистым основаниям в соответствующих положениях целевой нуклеиновой кислоты, на общую длину олигомерного соединения.
В данном контексте «процент идентичности» означает количество азотистых оснований в первой нуклеиновой кислоте, которые относятся к тому же типу (независимо от химической модификации), что и азотистые основания в соответствующих положениях второй нуклеиновой кислоты, деленное на общее количество азотистых оснований в первой нуклеиновой кислоте.
В данном контексте «модулирование» означает изменение количества или качества молекулы, функции или активности, по сравнению с количеством или качеством молекулы, функции или активности до модулирования. Например, модулирование включает изменение, как увеличение (стимуляцию или индукцию), так и снижение (ингибирование или уменьшение) генной экспрессии. В качестве дополнительного примера, модулирование экспрессии может включать изменение выбора сайта сплайсинга при процессинге пре-мРНК, что приводит к изменению абсолютного или относительного количества определенного сплайс-варианта, по сравнению с его количеством в отсутствие модулирования.
В данном контексте «химический мотив» означает характерный участок химических модификаций в олигонуклеотиде или его области. Мотивы могут быть определены по модификациям в определенных нуклеозидах и/или в определенных линкерных группах олигонуклеотида.
В данном контексте «нуклеозидный мотив» означает характерный участок нуклеозидных модификаций в олигонуклеотиде или его области. Связи такого олигонуклеотида могут быть модифицированными или немодифицированными. Если не указано иное, мотивы, описывающие в настоящем документе только нуклеозиды, представляют собой нуклеозидные мотивы. Следовательно, в таких случаях связи не ограничены.
В данном контексте «сахарный мотив» означает характерный участок сахарных модификаций в олигонуклеотиде или его области.
В данном контексте «линкерный мотив» означает характерный участок линкерных модификаций в олигонуклеотиде или его области. Нуклеозиды такого олигонуклеотида могут быть модифицированными или немодифицированными. Если не указано иное, мотивы, описывающие в настоящем документе только линкеры, представляют собой линкерные мотивы. Следовательно, в таких случаях нуклеозиды не ограничены.
В данном контексте «мотив модификации азотистого основания» означает характерный участок модификаций азотистых оснований вдоль олигонуклеотида. Если не указано иное, то мотив модификации азотистого основания не зависит от последовательности азотистых оснований.
В данном контексте «мотив последовательности» означает характерный участок азотистых оснований, расположенных вдоль олигонуклеотида или его части. Если не указано иное, то мотив последовательности не зависит от химических модификаций и, следовательно, может иметь любую комбинацию химических модификаций, включая отсутствие химических модификаций.
В данном контексте «тип модификации» в отношении нуклеозида или нуклеозида определенного «типа» означает химическую модификацию нуклеозида и включает модифицированные и немодифицированные нуклеозиды. Соответственно, если не указано иное, «нуклеозид, имеющий модификацию первого типа» может быть немодифицированным нуклеозидом.
В данном контексте «по-разному модифицированные» означает химические модификации или химические заместители, которые отличны друг от друга, включая отсутствие модификаций. Так, например, МОЕ нуклеозид и немодифицированный нуклеозид ДНК являются «по-разному модифицированными», даже несмотря на то, что нуклеозид ДНК не является модифицированным. Точно так же, ДНК и РНК являются «по-разному модифицированными», даже несмотря на то, что оба представляют собой природные немодифицированные нуклеозиды. Нуклеозиды, которые являются одинаковыми, но содержат различные азотистые основания, не являются по-разному модифицированными. Например, нуклеозид, содержащий 2'-ОМе модифицированный сахар и немодифицированное азотистое основание аденин, и нуклеозид, содержащий 2'-ОМе модифицированный сахар и немодифицированное азотистое основание тимин, не являются по-разному модифицированными.
В данном контексте «модификации одного типа» относится к модификациям, которые являются одинаковыми друг относительно друга, включая отсутствие модификаций. Так, например, два немодифицированных нуклеозида ДНК имеют «модификацию одного типа», даже несмотря на то, что нуклеозид ДНК является немодифицированным. Такие нуклеозиды, имеющие модификацию одного типа, могут содержать различные азотистые основания.
В данном контексте «отдельные области» означает части олигонуклеотида, в которых химические модификации или мотив химических модификаций любой из соседних частей содержит по меньшей мере одно отличие для обеспечения возможности различать области друг от друга.
В данном контексте «фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель» означает любое вещество, подходящее для использования при введении животному. В некоторых вариантах реализации фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель представляет собой стерильный солевой раствор. В некоторых вариантах реализации такой стерильный солевой раствор представляет собой солевой раствор фармацевтической марки.
В данном контексте термин «метаболическое расстройство» означает заболевание или состояние, которое характеризуется, прежде всего, дисрегуляцией метаболизма - сложного набора химических реакций, связанных с расщеплением пищи с выработкой энергии.
В данном контексте термин «сердечно-сосудистое заболевание» или «сердечнососудистое расстройство» означает заболевание или состояние, которое характеризуется, прежде всего, ухудшенной функцией сердца или кровеносных сосудов. Примеры сердечнососудистых заболеваний или расстройств включают, но не ограничиваются ими, аневризму, стенокардию, аритмию, атеросклероз, цереброваскулярное заболевание (инсульт), коронарную болезнь сердца, гипертонию, дислипидемию, гиперлипидемию и гиперхолестеринемию.
В данном контексте термин «моно- или полициклическая кольцевая система» включает все кольцевые системы, выбранные из одиночных или полициклических радикальных кольцевых систем, в которых указанные кольца конденсированы или связаны, и включает одиночные или смешанные кольцевые системы, индивидуально выбранные из алифатических, алициклических, арильных, гетероарильных, аралкильных, арилалкильных, гетероциклических, гетероарильных, гетероароматических и гетероарилалкильных. Такие моно- и полициклические структуры могут содержать кольца, каждое из которых имеет одинаковую степень насыщенности, или каждое независимо имеет переменные степени насыщенности, включая полностью насыщенные, частично насыщенные или полностью ненасыщенные. Каждое кольцо может содержать кольцевые атомы, выбранные из С, N, О и S с образованием гетероциклических колец, а также колец, содержащих только кольцевые атомы С, которые могут быть представлены в смешанном мотиве, как, например, в бензимидазоле, в котором одно кольцо имеет только кольцевые атомы углерода, а конденсированное кольцо имеет два атома азота. Моно- или полициклическая кольцевая система может быть дополнительно замещена группами заместителей, как, например, фталимид, который имеет две группы =O, присоединенные к одному из колец. Моно- или полициклические кольцевые системы могут быть присоединены к исходным молекулам при помощи различных способов, таких как непосредственно через кольцевой атом, путем конденсации через несколько кольцевых атомов, через группу заместителя или через бифункциональный линкерный фрагмент.
В данном контексте «пролекарство» означает неактивную или менее активную форму соединения, которая при введении субъекту метаболизируется с образованием активного или более активного соединения (например, лекарства).
В данном контексте «заместитель» и «группа заместителя» означает атом или группу, которая заменяет атом или группу указанного исходного соединения. Например, заместитель модифицированного нуклеозида представляет собой любой атом или группу, которая отлична от атома или группы, находящейся в природном нуклеозиде (например, модифицированный 2'-заместитель представляет собой любой атом или группу в 2'-положении нуклеозида, отличную от Н или ОН). Группы заместителей могут быть защищенными или незащищенными. В некоторых вариантах реализации соединения настоящего описания имеют заместители в одном или более чем в одном положении исходного соединения. Заместители также могут быть дополнительно замещены другими группами заместителей и могут быть присоединены напрямую или через линкерную группу, такую как алкильная или углеводородная группа, к исходному соединению.
aa
aa
aa
bb
cc
bb
bb
cc
bb
aa
3
2
bb
cc
bb
aa
bb
bb
cc
bb
bb
cc
bb
bb
bb
cc
bb
bb
cc
bb
bb
aa
bb
bb
2
bb
2
bb
cc
bb
2
bb
aa
bb
cc
Точно так же, в данном контексте «заместитель» в отношении химической функциональной группы означает атом или группу атомов, которая отлична от атома или группы атомов, обычно содержащихся в указанной функциональной группе. В некоторых вариантах реализации заместитель вытесняет атом водорода функциональной группы (например, в некоторых вариантах реализации заместитель замещенной метильной группы представляет собой атом или группу, отличную от водорода, которая вытесняет один или более атомов водорода незамещенной метильной группы). Если не указано иное, то группы, пригодные для применения в качестве заместителей, включают, без ограничения, галоген, гидроксил, алкил, алкенил, алкинил, ацил (-C(O)R), карбоксил (-C(O)O-R), алифатические группы, алициклически группы, алкокси, замещенный окси (-O-R), арил, аралкил, гетероциклический радикал, гетероарил, гетероарилалкил, амино (-N(R)(R)), имино (=NR), амидо (-C(O)N(R)(R) или -N(R)C(O)R), азидо (-N), нитро (-NO), циано (-CN), карбамидо (-OC(O)N(R)(R) или -N(R)C(O)OR), уреидо (-N(R)C(O)N(R)(R)), тиоуреидо (-N(R)C(S)N(R)(R)), гуанидил (-N(R)C(=NR)N(R)(R)), амидинил (-C(=NR)N(R)(R) или -N(R)C(=NR)(R)), тиол (-SR), сульфинил (-S(O)R), сульфонил (-S(O)R) и сульфонамидил (-S(O)N(R)(R) или -N(R)S(O)R). Где каждый R, R and R независимо представляет собой Н, необязательно связанную химическую функциональную группу или дополнительную группу заместителя, при этом предпочтительный перечень включает, без ограничения, алкил, алкенил, алкинил, алифатические, алкокси, ацил, арил, аралкил, гетероарил, алициклические, гетероциклические и гетероарилалкил. Выбранные заместители в соединениях, описанных в настоящем документе, находятся в рекурсивной степени.
1
12
В данном контексте «алкил» означает насыщенный прямой или разветвленный углеводородный радикал, содержащий до двадцати четырех атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, без ограничения, метил, этил, пропил, бутил, изопропил, н-гексил, октил, децил, додецил и т.п. Алкильные группы обычно содержат от 1 до примерно 24 атомов углерода, более часто от 1 до примерно 12 атомов углерода (C-C алкил), более предпочтительно от 1 до примерно 6 атомов углерода.
В данном контексте «алкенил» означает прямой или разветвленный углеводородный радикал, содержащий до двадцати четырех атомов углерода и имеющий по меньшей мере одну двойную углерод-углеродную связь. Примеры алкенильных групп включают, без ограничения, этенил, пропенил, бутенил, 1-метил-2-бутен-1-ил, диены, такие как 1,3-бутадиен и т.п. Алкенильные группы обычно содержат от 2 до примерно 24 атомов углерода, более часто от 2 до примерно 12 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до примерно 6 атомов углерода. Алкенильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать одну или более дополнительных групп заместителей.
В данном контексте «алкинил» означает прямой или разветвленный углеводородный радикал, содержащий до двадцати четырех атомов углерода и имеющий по меньшей мере одну тройную углерод-углеродную связь. Примеры алкинильных групп включают, без ограничения, этинил, 1-пропинил, 1-бутинил и т.п. Алкинильные группы обычно содержат от 2 до примерно 24 атомов углерода, более часто от 2 до примерно 12 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до примерно 6 атомов углерода. Алкинильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать одну или более дополнительных групп заместителей.
В данном контексте «ацил» означает радикал, образованный за счет удаления гидроксильной группы от органической кислоты, и имеет общую формулу -С(O)-Х, где Х обычно является алифатическим, алициклическим или ароматическим. Примеры включают алифатические карбонилы, ароматические карбонилы, алифатические сульфонилы, ароматические сульфинилы, алифатические сульфинилы, ароматические фосфаты, алифатические фосфаты и т.п. Ацильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.
В данном контексте «алициклическая» означает циклическую кольцевую систему, в которой кольцо является алифатическим. Кольцевая система может содержать одно или более колец, при этом по меньшей мере одно кольцо является алифатическим. Предпочтительные алициклические системы включают кольца, имеющие от примерно 5 до примерно 9 атомов углерода в кольце. Алициклические группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.
В данном контексте «алифатический» означает прямой или разветвленный углеводородный радикал, содержащий до двадцати четырех атомов углерода, в котором насыщенность между любыми двумя атомами углерода представляет собой одинарную, двойную или тройную связь. Алифатическая группа предпочтительно содержит от 1 до примерно 24 атомов углерода, более часто от 1 до примерно 12 атомов углерода, при этом более предпочтительно от 1 до примерно 6 атомов углерода. Прямая или разветвленная цепь алифатической группы может быть прервана одним или более гетероатомами, которые включают азот, кислород, серу и фосфор. Такие алифатические группы, прерванные гетероатомами, включают, без ограничения, полиалкокси, такие как полиалкиленгликоли, полиамины и полиимины. Алифатические группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.
В данном контексте «алкокси» означает радикал, образованный между алкильной группой и атомом кислорода, при этом атом кислорода используется для присоединения алкокси-группы к исходной молекуле. Примеры алкокси-групп включают, без ограничения, метокси, этокси, пропокси, изопропокси, н-бутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, н-пентокси, неопентокси, н-гексокси и т.п. Алкокси-группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.
1
12
В данном контексте «аминоалкил» означает аминозамещенный C-C алкильный радикал. Алкильная часть указанного радикала образует ковалентную связь с исходной молекулой. Аминогруппа может быть расположена в любом положении, и аминоалкильная группа может быть замещена дополнительной группой заместителя в алкильной и/или амино-части.
1
12
В данном контексте «аралкил» и «арилалкил» означает ароматическую группу, которая ковалентно связана с C-C алкильным радикалом. Часть алкильного радикала образовавшейся аралкильной (или арилалкильной) группы образует ковалентную связь с исходной молекулой. Примеры включают, без ограничения, бензил, фенетил и т.п. Аралкильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей, присоединенные к алкильной, арильной или к обеим группам, которые образуют указанную радикальную группу.
В данном контексте «арил» и «ароматический» означают радикалы моно- или полициклической карбоциклической кольцевой системы, имеющие одно или более ароматических колец. Примеры арильных групп включают, без ограничения, фенил, нафтил, тетрагидронафтил, инданил, инденил и т.п. Предпочтительные арильные кольцевые системы имеют от примерно 5 до примерно 20 атомов углерода в одном или более кольцах. Арильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.
В данном контексте «гало» и «галоген» означает атом, выбранный из фтора, хлора, брома и йода.
В данном контексте «гетероарил» и «гетероароматический» означает радикал, содержащий моно- или полициклическое ароматическое кольцо, кольцевую систему или конденсированную кольцевую систему, в котором по меньшей мере одно из колец является ароматическим и содержит один или более гетероатомов. Гетероарил включает также конденсированные кольцевые системы, включая системы, в которых одно или более из конденсированных колец не содержат гетероатомов. Гетероарильные группы, как правило, содержат один кольцевой атом, выбранный из серы, азота или кислорода. Примеры гетероарильных групп включают, без ограничения, пиридинил, пиразинил, пиримидинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, изоксазолил, тиадиазолил, оксадиазолил, тиофенил, фуранил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензоксазолил, хиноксалинил и т.п. Гетероарильные радикалы могут быть присоединены к исходной молекуле напрямую или через линкерный фрагмент, такой как алифатическая группа или гетероатом. Гетероарильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.
В данном контексте «сопряженное соединение» означает любые атомы, группы атомов или группу связанных атомов, подходящую для применения в качестве группы конъюгата. В некоторых вариантах реализации сопряженные соединения могут обладать или влиять на одно или более свойств, включая, но не ограничиваясь ими, свойства фармакодинамики, фармакокинетики, связывания, абсорбции, клеточного распределения, клеточного захвата, заряда и/или выведения.
В данном контексте, если не указано или не модифицировано иным образом, «двухцепочечные» относится к двум отдельным олигомерным соединениям, которые гибридизованы друг с другом. Такие двухцепочечные соединения могут иметь один или более негибридизованных нуклеозидов у одного или обоих концов одной или обеих цепей (выступы) и/или один или более внутренних негибридизованных нуклеозидов (несоответствий), при условии, что существует достаточная комплементарность для сохранения гибридизации при физиологически релевантных условиях.
2
2
3
В данном контексте «2'-O-метоксиэтил» (также 2'-МОЕ и 2'-O(СН)-ОСН) относится к O-метоксиэтил-модификации в 2'-положении фуранозного кольца. 2'-O-метоксиэтил-модифицированный сахар представляет собой модифицированный сахар.
В данном контексте «2'-O-метоксиэтил-нуклеотид» означает нуклеотид, содержащий 2'-O-метоксиэтил-модифицированный сахарный фрагмент.
«3' Сайт-мишень» или «3' сайт терминации» обозначает нуклеотид нуклеиновой кислоты-мишени, комплементарный 3'-крайнему нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.
В данном контексте «5' сайт-мишень» или «5 сайт инициации» обозначает нуклеотид нуклеиновой кислоты-мишени, комплементарный 5'-крайнему нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.
В данном контексте «5-метилцитозин» означает цитозин, модифицированный метильной группой в 5'-положении. 5-метилцитозин представляет собой модифицированное азотистое основание.
В данном контексте «примерно» означает в пределах ±10% от значения. Например, если указано, что «маркер может быть увеличен на примерно 50%», то подразумевается, что маркер может быть увеличен на 45%-55%.
В данном контексте «активный фармацевтический агент» означает вещество или вещества в фармацевтической композиции, которые обеспечивают терапевтический эффект при введении индивидууму. Например, в некоторых вариантах реализации антисмысловой олиго нуклеотид, нацеленный на ANGPTL3, представляет собой активный фармацевтический агент.
В данном контексте «активная область-мишень» или «область-мишень» означает область, на которую нацелено одно или более активных антисмысловых соединений.
В данном контексте «активные антисмысловые соединения» означает антисмысловые соединения, которые снижают уровни целевой нуклеиновой кислоты или уровни белка.
В данном контексте «адипогенез» означает развитие жировых клеток из преадипоцитов. «Липогенез» означает выработку или образование жира, либо жировую дегенерацию, либо жировую инфильтрацию.
В данном контексте «тучность» или «ожирение» относится к состоянию ожирения или избыточно высокого количества телесного жира или жировой ткани по сравнению с тощей массой тела. Количество телесного жира относится к распределению жира в теле и к размеру и массе отложений жировой ткани. Распределение телесного жира может быть оценено посредством измерений кожных складок, соотношения окружностей талии/бедер или такими технологиями как ультразвуковое исследование, компьютерная томография или магнитно-резонансное исследование. Согласно указаниям Центра профилактики и контроля заболеваемости, индивидуумы с индексом массы тела (BMI) 30 или более считаются тучными. Термин «ожирение» в данном контексте включает патологические состояния, в которых существует увеличение телесного жира за пределами физических потребностей в результате избыточного накопления жировой ткани в организме. Термин «ожирение» включает, но не ограничивается ими, следующие патологические состояния: возрастное ожирение; алиментарное ожирение; эндогенное или метаболическое ожирение; эндокринное ожирение; наследственное ожирение; гиперинсулинарное ожирение; гиперпластическое-гипертрофическое ожирение; гипогонадное ожирение; гипотиреоидное ожирение; пожизненное ожирение; морбидное ожирение и экзогенное ожирение.
В данном контексте «вводятся совместно» огтносится к совместному введению двух агентов любым способом, при котором фармакологические эффекты обоих проявляются у пациента одновременно. Совместное введение не требует, чтобы оба агента были введены в одной фармацевтической композиции, в одной лекарственной форме или одним способом введения. Эффекты обоих агентов не обязательно должны проявляться одновременно. Эффекты должны только перекрываться в промежутке времени и не обязательно должны иметь одинаковую продолжительность.
В данном контексте «введение» означает обеспечение агентом животного и включает, но не ограничивается этим, введение медицинским работником и самостоятельное введение.
В данном контексте «агент» означает активное вещество, которое может обеспечивать терапевтический эффект при введении животному. «Первый агент» означает терапевтическое соединение согласно настоящему изобретению. Например, первый агент может представлять собой антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на ANGPTL3. «Второй агент» означает второе терапевтическое соединение согласно настоящему изобретению (например, второй антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на ANGPTL3) и/или терапевтическое соединение, не нацеленное на ANGPTL3.
В данном контексте «улучшение» относится к уменьшению по меньшей мере одного показателя, признака или симптома связанного заболевания, расстройства или патологического состояния. Степень тяжести показателей может быть определена субъективными или объективными показателями, которые известны специалистам в данной области техники.
В данном контексте «ANGPTL3» означает любую нуклеиновую кислоту или белок ANGPTL3.
В данном контексте «экспрессия ANGPTL3» означает уровень мРНК, транскрибированной из гена, кодирующего ANGPTL3, или уровень белка, транслированного из мРНК. Экспрессия ANGPTL3 может быть определена известными в данной области техники способами, такими как нозерн или вестерн-блоттинг.
В данном контексте «нуклеиновая кислота ANGPTL3» означает любую нуклеиновую кислоту, кодирующую ANGPTL3. Например, в некоторых вариантах реализации изобретения, нуклеиновая кислота ANGPTL3 включает последовательность ДНК, кодирующую ANGPTL3, последовательность РНК, транскрибированную из ДНК, кодирующей ANGPTL3 (в том числе, геномной ДНК, содержащей интроны и экзоны), и последовательность мРНК, кодирующую ANGPTL3. «мРНК ANGPTL3» обозначает мРНК, кодирующую белок ANGPTL3.
В данном контексте «животное» относится к человеку или животному, не являющемуся человеком, включая, но не ограничиваясь ими, мышей, крыс, кроликов, собак, кошек, свиней и приматов, включая, но не ограничиваясь ими, обезьян и шимпанзе.
В данном контексте «липопротеин, содержащий ароВ» означает любой липопротеин, который содержит аполипопротеин В в качестве компонента своего белка, и включает LDL, VLDL, IDL и липопротеин (а), и может быть, в целом, мишенью для агента и терапии для понижения липидов. «LDL, содержащий АроВ-100» означает LDL, содержащий изоформу АроВ-100.
В данном контексте «атеросклероз» означает отвердевание артерий, поражающее крупные и средние артерии, которое характеризуется наличием жировых отложений. Жировые отложения называют «атеромами» или «бляшками», которые состоят, главным образом, из холестерина и других жиров, кальция и рубцовой ткани, и повреждает выстилку артерий.
В данном контексте «кардиометаболическое заболевание» или «кардиометаболическое расстройство» представляют собой заболевания или расстройства, касающиеся одновременно сердечно-сосудистой системы и метаболической системы. Примеры кардиометаболических заболеваний или расстройств включают, но не ограничиваются ими, диабет и дислипидемию.
В данном контексте «совместное введение» означает введение индивидууму двух или более агентов. Два или более агентов могут быть в одной фармацевтической композиции или могут быть в отдельных фармацевтических композициях. Каждый из двух или более агентов может быть введен таким же или другим способом введения. Совместное введение включает параллельное или последовательное введение.
В данном контексте «холестерин» представляет собой молекулу стерина, находящуюся в клеточных меабранах всех животных тканей. Холестерин транспортируется в плазме крови животных липопротеинами, включая липопротеин очень низкой плотности (VLDL), липопротеин средней плотности (IDL), липопротеин низкой плотности (LDL) и липопротеин высокой плотности (HDL). «Холестерин плазмы» относится к сумме всех липопротеинов (VDL, IDL, LDL, HDL) эстерифицированного и/или неэстерифицированного холестерина, присутствующих в плазме или сыворотке.
В данном контексте «ингибитор абсорбции холестерина» означает агент, который ингибирует абсорбцию экзогенного холестерина, получаемого с пищей.
В данном контексте «коронарная болезнь сердца (CHD)» означает сужение мелких кровеносных сосудов, которые доставляют кровь и кислород в сердце, что зачастую является результатом атеросклероза.
В данном контексте «сахарный диабет» или «диабет» представляет собой синдром, характеризующийся нарушенным метаболизмом и патологически высоким содержанием сахара в крови (гипергликемия) вследствие недостаточных уровней инсулина или сниженной чувствительности к инсулину. Характерные симптомы включают избыточное выделение мочи (полиурия) вследствие высоких уровней глюкозы в крови, чрезмерную жажду и повышенное потребление жидкостей (полидипсия) в попытке компенсировать усиленное мочевыделение, расплывчатое зрение в результате высокого содержания глюкозы в крови, влияющего на оптические свойства глаз, необъяснимую потерю веса и сонливость.
В данном контексте «диабетическая дислипидемия» или «диабет 2 типа с дислипидемией» означает патологическое состояние, характеризующееся диабетом 2 типа, сниженным уровнем HDL-C, повышенным уровнем триглицеридов и повышенным содержанием мелких, плотных частиц LDL.
В данном контексте «разбавитель» означает компонент композиции, который не обладает фармакологической активностью, но является фармацевтически необходимым или желательным. Например, разбавитель в композиции для инъекции может представлять собой жидкость, например, солевой раствор.
В данном контексте «дислипидемия» относится к расстройству метаболизма липидов и/или липопротеинов, включая сверхвыработку или дефицит липидов и/или липопротеинов. Дислипидемия может проявляться повышением содержания липидов, таких как холестерин и триглицериды, а также липопротеинов, таких как холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL).
В данном контексте «дозированная единица» означает форму, в которой представлен фармацевтический агент, например, пилюля, таблетка или другая дозированная единица, известная в данной области техники. В некоторых вариантах реализации дозированная единица представляет собой пробирку, содержащую лиофилизированный антисмысловой олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации дозированная единица представляет собой пробирку, содержащую восстановленный антисмысловой олигонуклеотид.
В данном контексте «доза» означает определенное количество фармацевтического агента, обеспечиваемое за одно введение или за определенный период времени. В некоторых вариантах реализации изобретения доза может быть введена в виде одного, двух или более болюсов, таблеток или инъекций. Например, в определенных вариантах реализации, где необходимо подкожное введение, нужная доза требует объема, который не помещается в одной инъекции, поэтому для достижения желаемой дозы могут быть использованы две или более инъекций. В некоторых вариантах реализации фармацевтический агент вводят путем инфузии в течение длительного периода времени или непрерывно. Дозы могут быть указаны как количество фармацевтического агента в час, день, неделю, или месяц. Дозы могут быть выражены в мг/кг или г/кг.
В данном контексте «эффективное количество» или «терапевтически эффективное количество» означает количество активного фармацевтического агента, достаточное для достижения требуемого физиологического результата у индивидуума, нуждающегося в таком агенте. Эффективное количество может варьироваться среди индивидуумов в зависимости от состояния здоровья и физического состояния индивидуума, подлежащего лечению, таксономической группы индивидуумов, подлежащих лечению, рецептуры композиции, оценки индивидуального состояния здоровья и других релевантных факторов.
В данном контексте «глюкоза» представляет собой моносахарид, используемый клетками в качестве источника энергии и метаболического промежуточного соединения. «Глюкоза плазмы» относится к содержанию глюкозы в плазме.
В данном контексте «X липопротеинов высокой плотности (HDL-C)» означает холестерин, связанный с частицами липопротеинов высокой плотности. Концентрацию HDL-С в сыворотке (или плазме) обычно количественно определяют в мг/дл или нмоль/л. «HDL-C в сыворотке» и «HDL-C в плазме» означают HDL-C в сыворотке и плазме, соответственно.
В данном контексте «ингибитор редуктазы HMG-CoA» означает агент, который действует посредством ингибирования фермента редуктазы HMG-CoA, такой как аторвастатин, флувастатин, ловастатин, правастатин и симвастатин.
В данном контексте «гиперхолестеринемия» означает состояние, характеризующееся повышенным уровнем холестерина или циркулирующего холестерина (в плазме), холестерина LDL и холестерина VLDL, в соответствии с руководством отчета экспертной комиссии Национальной программы по холестерину (NCEP) по обнаружению, оценке и лечению высокого содержания холестерина у взрослых (см. Arch. Int. Med. (1988) 148, 36-39).
В данном контексте «гиперлипидемия» или «гиперлипемия» представляет собой состояние, характеризующееся повышенным уровнем липидов в сыворотке или циркулирующих липидов (в плазме). Такое состояние проявляется в виде патологически высокой концентрации жиров. Липидные фракции в кровотоке представляют собой холестерин, липопротеины низкой плотности, липопротеины очень низкой плотности и триглицериды.
В данном контексте «гипертриглицеридемия» означает состояние, характеризующееся повышенными уровнями триглицеридов.
В данном контексте «идентификация» или «выбр субъекта, страдающего от метаболического или сердечно-сосудистого заболевания» означает идентификацию или выбор субъекта, у которого диагностировано метаболическое заболевание, сердечнососудистое заболевание или метаболический синдром; или идентификацию или выбор субъекта, имеющего любой симптом метаболического заболевания, сердечно-сосудистого заболевания или метаболического синдрома, включая, но не ограничиваясь ими, гиперхолестеринемию, гипергликемию, гиперлипидемию, гипертриглицеридемию, гипертонию, повышенную резистентность к инсулину, сниженную чувствительность к инсулину, массу тела выше нормы и/или содержание телесного жира выше нормы, или любую их комбинацию. Такая идентификация может быть проведена любым способом, включая, но не ограничиваясь ими, стандартные клинические тесты или испытания, такие как измерение холестерина в сыворотке или циркулирующего холестерина (в плазме), измерение глюкозы в сыворотке или в кровотоке (в плазме), измерение триглицеридов в сыворотке или циркулирующих триглицеридов (в плазме), измерение кровяного давления, измерение содержания телесного жира, измерение массы тела и т.п.
В данном контексте «идентификация» или «выбор субъекта с диабетом» означает идентификацию или выбор субъекта, у которого выявлен диабет, или идентификацию или выбор субъекта, имеющего любой симптом диабета (1 типа или 2 типа), такой как, но не ограничиваясь ими, уровень глюкозы натощак по меньшей мере 110 мг/дл, гликозурия, полиурия, полидипсия, повышенная резистентность к инсулину и/или сниженная чувствительность к инсулину.
В данном контексте «идентификация» или «выбор субъекта с ожирением» означает идентификацию или выбор субъекта, у которого диагностировано ожирение, или идентификацию или выбор субъекта с BMI более 30 и/или окружностью талии более 102 см у мужчин или более 88 см у женщин.
В данном контексте «идентификация» или «выбор субъекта с дислипидемией» означает идентификацию или выбор субъекта, у которого диагностировано расстройства метаболизма липидов и/или липопротеинов, включая сверхвыработку или дефицит липидов и/или липопротеинов. Дислипидемия может проявляться повышением содержания липидов, таких как холестерин и триглицериды, а также липопротеинов, таких как холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL).
В данном контексте «идентификация» или «выбор субъекта, имеющего повышенную тучность» означает идентификацию или выбор субъекта, имеющего повышенное количество телесного жира (или тучность), включая один или оба из распределения жира в организме и размера и массы отложений жировой ткани. Распределение телесного жира может быть оценено посредством измерений кожных складок, соотношения окружностей талии/бедер или такими технологиями как ультразвуковое исследование, компьютерная томография или магнитно-резонансное исследование. Согласно указаниям Центра профилактики и контроля заболеваемости, индивидуумы с индексом массы тела (BMI) 30 или более считаются тучными.
В данном контексте «улучшенный сердечно-сосудистый результат» означает уменьшение возникновения неблагоприятных сердечно-сосудистых явлений или их риска. Примеры неблагоприятных сердечно-сосудистых явлений включают, без ограничения, смерть, повторный инфаркт, инсульт, кардиогенный шок, отек легких, остановку сердца и атриальную дизритмию.
В данном контексте «непосредственно примыкающий» означает отсутствие промежуточных элементов между непосредственно примыкающими элементами.
В данном контексте «индивидуум» или «субъект», или «животное» означает человека или животное, выбранное для лечения или терапии.
В данном контексте «резистентность к инсулину» определяют как состояние, при котором нормальное количество инсулина является недостаточным для получения нормальной инсулиновой реакции клеток, например, жировых, мышечных и/или печеночных клеток. Резистентность к инсулину в жировых клетках приводит к гидролизу запасенных триглицеридов, что повышает уровни свободных жирных кислот в плазме крови. Резистентность к инсулину в мышцах снижает поглощение глюкозы, тогда как резистентность к инсулину в печени снижает запасы глюкозы, и оба эффекта приводят к повышению глюкозы в крови. Высокие уровни инсулина и глюкозы в плазме, обусловленные резистентностью к инсулину, зачастую приводят к метаболическому синдрому и диабету 2 типа.
В данном контексте «чувствительность к инсулину» представляют собой меру эффективности переработки глюкозы в организме индивидуума. Индивидуум, имеющий высокую чувствительность к инсулину, эффективно перерабатывает глюкозу, тогда как индивидуум с низкой чувствительностью к инсулину не может эффективно перерабатывать глюкозу.
В данном контексте «внутривенное введение» означает введение в вену.
В данном контексте «снижение липидов» означает снижение одного или более липидов у субъекта. Снижение липидов может происходить при введении одной или более доз в динамике.
В данном контексте «агент, снижающий липиды» означает агент, например, специфический модулятор ANGPTL3, введенный субъекту для достижения эффекта снижения липидов у субъекта. Например, в некоторых вариантах реализации агент, снижающий липиды, вводят субъекту для снижения одного или более из ароВ, ароС-III, общего холестерина, LDL-С, VLDL-C, IDL-C, не-HDL-C, триглицеридов, мелких плотных частиц LDL и Lp(a) у субъекта.
В данном контексте «терапия для снижения липидов» означает терапевтический режим, обеспечиваемый субъекту для снижения одного или более липидов у субъекта. В некоторых вариантах реализации терапию для снижения липидов обеспечивают для снижения одного или более из ароВ, ароС-III, общего холестерина, LDL-C, VLDL-C, IDL-C, не-HDL-C, триглицеридов, мелких плотных частиц LDL и Lp(a) у субъекта.
В данном контексте «липопротеин», такой как VLDL, LDL и HDL, относится к группе белков, находящихся в сыворотке, плазме и лимфе, которые важны для транспорта липидов. Химический состав каждого липопротеина отличается в том отношении, что HDL имеет более высокое содержание белка относительно липида, тогда как VLDL имеет более низкое содержание белка относительно липида.
В данном контексте «холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL-C)» означает холестерин, находящийся в частицах липопротеинов низкой плотности. Концентрацию LDL-С в сыворотке (или плазме) обычно количественно определяют в мг/дл или нмоль/л. «LDL-C в сыворотке» и «LDL-C в плазме» означают LDL-C в сыворотке и плазме, соответственно.
В данном контексте «основные факторы риска» относятся к факторам, которые способствуют высокому риску конкретного заболевания или патологического состояния. В некоторых вариантах реализации основные факторы риска коронарной болезни сердца включают, без ограничения, курение, гипертонию, низкий HDL-C, семейный анамнез коронарной болезни сердца, возраст и другие факторы, описанные в настоящем документе.
В данном контексте «метаболическое расстройство» или «метаболическое заболевание» относится к состоянию, характеризующемуся изменением или нарушением метаболической функции. «Метаболический» и «метаболизм» представляют собой термины, хорошо известные в данной области техники и включают, в целом, весь диапазон биохимических процессов, протекающих в живом организме. Метаболические расстройства включают, но не ограничиваются ими, гипергликемию, преддиабет, диабет (I типа и 2 типа), ожирение, резистентность к инсулину, метаболический синдром и дислипидемию на фоне диабета 2 типа.
В данном контексте «метаболический синдром» означает состояние, характеризующееся комбинацией липидных и нелипидных сердечно-сосудистых факторов риска метаболического происхождения. В некоторых вариантах реализации метаболический синдром идентифицируют по наличию любых 3 из следующих факторов: окружность талии более 102 см у мужчин или более 88 см у женщин; содержание триглицеридов в сыворотке по меньшей мере 150 мг/дл; HDL-C менее 40 мг/дл у мужчин или менее 50 мг/дл у женщин; кровяное давление по меньшей мере 130/85 мм рт.ст.; и содержание глюкозы натощак по меньшей мере 110 мг/дл. Указанные определители могут быть легко измерены в клинической практике (JAMA, 2001, 285: 2486-2497).
В данном контексте «смешанная дислипидемия» означает состояние, характеризующееся повышенным холестерином и повышенными триглицеридами.
В данном контексте «ингибитор МТР» означает агент, который ингибирует фермент микросомальный белок-переносчик триглицеридов.
В данном контексте «неалкагольная жировая дистрофия печени» или «NAFLD» означает состояние, характеризующееся жировым воспалением печени, которое не обусловлено избыточным употреблением алкоголя (например, употреблением алкоголя более 20 г/сутки). В некоторых вариантах реализации NAFLD связана с резистентностью к инсулину и метаболическим синдромом. NAFLD охватывает спектр заболеваний от простого накопления триглицеридов в гепатоцитах (стеатоз печени) до стеатоза печени с воспалением (стеатогепатит), фиброза и цирроза.
В данном контексте «неалкагольный стеатогепатит» (NASH) возникает в результате прогрессирования NAFLD за пределы отложения триглицеридов. Для развития NASH необходима «вторичная травма», способная вызывать некроз, воспаление и фиброз. Потенциальные факторы «вторичной травмы» могут быть сгруппированы в широкие категории: факторы, вызывающие усиление окислительного стресса, и факторы, ускоряющие экспрессию провоспалительных цитокинов. Сделано предположение, что повышенные триглицериды в печени приводят к усилению окислительного стресса в гепатоцитах животных и людей, указывая на потенциальную причинно-следственную связь между накоплением триглицеридов в печени, окислительным стрессом и прогрессированием стеатоза печени до NASH (Browning и Horton, J Clin Invest, 2004, 114, 147-152). Hypertriglyceridemia and hyperfattyacidemia can cause triglyceride accumulation in peripheral tissues (Shimamura et al., Biochem Biophys Res Commun, 2004, 322, 1080-1085).
В данном контексте «нуклеиновая кислота» относится к молекулам, состоящим из мономерных нуклеотидов. Нуклеиновая кислота включает рибонуклеиновые кислоты (РНК), дезоксирибонуклеиновые кислоты (ДНК), одноцепочечные нуклеиновые кислоты, двухцепочечные нуклеиновые кислоты, малые интерферирующие рибонуклеиновые кислоты (миРНК) и микроРНК. Нуклеиновая кислота также может содержать комбинацию указанных элементов в одной молекуле.
В данном контексте «парентеральное введение» означает введение другим путем, отличным от введения через пищеварительный тракт. Парентеральное введение включает местное введение, подкожное введение, внутривенное введение, внутримышечное введение, внутриартериальное введение, внутрибрюшинное введение или внутричерепное введение, например, интратекальное или интрацеребровентрикулярное введение. Введение может быть непрерывным или постоянным, или кратковременным, или прерывистым.
В данном контексте «фармацевтический агент» означает вещество, которое обеспечивает терапевтический эффект при введении индивидууму. Например, в некоторых вариантах реализации антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на ANGPTL3, представляет собой фармацевтический агент.
В данном контексте «фармацевтическая композиция» означает смесь веществ, пригодных для введения индивидууму. Например, фармацевтическая композиция может содержать один или более активных агентов и стерильный водный раствор.
В данном контексте «фармацевтически приемлемый носитель» означает среду или разбавитель, который не нарушает структуру или функцию олигонуклеотида. Некоторые из таких носителей обеспечивают возможность составления фармацевтической композиции, например, в виде таблеток, пилюль, драже, капсул, жидкостей, гелей, сиропов, взвесей, суспензий и пастилок для перорального проглатывания субъектом. Некоторые из таких носителей обеспечивают возможность составления фармацевтических композиций для инъекций или инфузий. Например, фармацевтически приемлемый носитель может представлять собой стерильный водный раствор.
В данном контексте «фармацевтически приемлемые соли» означает физиологически и фармацевтически приемлемые соли антисмысловых соединений, т.е. соли, которые сохраняют требуемую биологическую активность исходного олигонуклеотида и не вызывают нежелательных токсикологических эффектов.
В данном контексте «часть» означает определенное количество смежных (т.е. связанных) азотистых оснований нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации часть представляет собой определенное число смежных азотистых оснований нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации часть представляет собой определенное число смежных азотистых оснований антисмыслового соединения.
В данном контексте «предупреждать» относится к отсрочке или предотвращению возникновения или развития заболевания, расстройства или патологического состояния в течение периода времени от нескольких минут до неопределенного срока. Предупреждение означает также снижение риска развития заболевания, расстройства или патологического состояния.
В данном контексте «побочные эффекты» означает физиологические реакции, приписываемые лечению, которые отличны от желаемых эффектов. В некоторых вариантах реализации побочные эффекты включают реакции в месте инъекции, аномалии функциональных проб печени, отклонения в функциях почек, гепатотоксичность, нефротоксичность, аномалии центральной нервной системы, миопатии и недомогание. Например, повышение уровней аминотрансферазы в сыворотке может указывать на гепатотоксичность или нарушение функции печени. Например, повышенный билирубин может указывать на гепатотоксичность или нарушение функции печени.
В данном контексте «статин» означает агент, который ингибирует активность редуктазы HMG-CoA.
В данном контексте «подкожное введение» означает введение непосредственно под кожу.
В данном контексте «таргетинг» или «целевой» означает процесс конструирования и выбора антисмыслового соединения, которое будет специфически гибридизоваться с целевой нуклеиновой кислотой и вызывать желаемый эффект.
В данном контексте «целевая нуклеиновая кислота», «целевая РНК» и «целевой РНК транскрипт» относятся к нуклеиновой кислоте, способной стать мишенью для антисмысловых соединений.
В данном контексте «область-мишень» определяют как часть нуклеиновой кислоты-мишени, имеющую по меньшей мере одну идентифицируемую структуру, функцию или характеристику.
В данном контексте «сегмент-мишень» означает последовательность нуклеотидов нуклеиновой кислоты-мишени, на которую нацелено антисмысловое соединение. «5' Сайт-мишень» или «5' сайт инициации» относится к 5'-крайнему нуклеотиду целевого сегмента. «3' Сайт-мишень» или «3' сайт терминации» относится к 3'-крайнему нуклеотиду целевого сегмента.
В данном контексте «терапевтически эффективное количество» означает количество агента, которое обеспечивает терапевтический эффект для индивидуума.
В данном контексте «терапевтическое изменение образа жизни» означает изменение рациона и образа жизни с целью снижения массы жира/жировой ткани и/или холестерина. Такое изменение может снижать риск развития сердечного заболевания и может включать рекомендации по диетическому употреблению общих суточных калорий, общих жиров, насыщенных жиров, полиненасыщенных жиров, мононенасыщенных жиров, углеводов, белков, холестерина, нерастворимых волокон, а также рекомендации по физической активности.
В данном контексте «триглицерид» означает липид или нейтральный жир, состоящий из глицерина, связанного с тремя молекулами жирной кислоты.
В данном контексте «диабет 2 типа» (также известный как «сахарный диабет 2 типа» или «сахарный диабет, тип 2», называемый ранее «сахарным диабетом 2 типа», «инсулино независимым диабетом (NIDDM)», «диабетом на фоне ожирения» или «возрастным диабетом») представляет собой метаболическое расстройство, которое характеризуется, главным образом, резистентностью к инсулину, относительным дефицитом инсулина и гипергликемией.
В данном контексте «лечить» относится к введению фармацевтической композиции для изменения или облегчения заболевания, расстройства или патологического состояния. Некоторые варианты реализации изобретения
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, ANGPTL3 имеет последовательность с номером доступа GenBank NM_014495.2 (включенную в настоящий документ как SEQ ID NO: 1). В некоторых вариантах реализации ANGPTL3 имеет последовательность с номером доступа GenBank NT_032977.9, нуклеотиды с 33032001 по 33046000 (включенную в настоящий документ как SEQ ID NO: 2).
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части SEQ ID NO: 1-2.
В некоторых вариантах реализации соединение содержит миРНК или антисмысловой олигонуклеотид, направленный на ANGPTL3, известный в данной области техники, и группу конъюгата, описанную в настоящем документе. Примеры антисмысловых олигонуклеотидов, направленных на ANGPTL3, которые подходят для сопряжения, включают, но не ограничиваются ими, те, которые описаны в US 8653047 (WO 2011/085271), полное содержание которого включено в настоящий документ посредством ссылки. В некоторых вариантах реализации соединение содержит антисмысловой олигонуклеотид, имеющий последовательность азотистых оснований любой из SEQ ID NO: 34-111, описанных в US 8653047, и группу конъюгата, описанную в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации соединение содержит смысловую или антисмысловую цепь миРНК, имеющую последовательность азотистых оснований любой из SEQ ID NO: 34-111, описанных в US 8653047, и группу конъюгата, описанную в настоящем документе. Последовательности азотистых оснований всех вышеупомянутых справочных SEQ ID NO включены в настоящий документ посредством ссылки.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов в длину и направлен на ANGPTL3. Мишень ANGPTL3 может иметь последовательность, выбранную из любой из SEQ ID NO: 1-2.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 1140-1159 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований, комплементарных равной по длине части азотистых оснований 1140-1159 SEQ ID NO: 1.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, комплементарную азотистым основаниями 1140-1159 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 1907-1926 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований, комплементарных равной по длине части азотистых оснований 1907-1926 SEQ ID NO: 1.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, комплементарную азотистым основаниями 1907-1926 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 147-162 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15 или 16 последовательных азотистых оснований, комплементарных равной по длине части азотистых оснований 147-162 SEQ ID NO: 1.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, комплементарную азотистым основаниями 147-162 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1.
В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30, 15-30, 18-24, 19-22, 13-25, 14-25, 15-25 или 16-24 связанных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30 связанных нуклеозидов, или их количество находится в диапазоне, определенном любыми двумя из указанных значений. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид имеет 16 связанных нуклеозидов в длину. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид имеет 20 связанных нуклеозидов в длину.
В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части SEQ ID NO: 1 или 2.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований, выбранной из любой из SEQ ID NO: 15-27, 30-73, 75-85, 87-232, 238, 240-243, 245-247, 249-262, 264-397, 399-469, 471-541, 543-600, 604-760, 762-819, 821-966, 968-971, 973-975, 977-990, 992-1110, 1112-1186, 1188-1216, 1218-1226, 1228-1279, 1281-1293, 1295-1304, 1306-1943, 1945-1951, 1953-1977, 1979-1981, 1983-2044, 2046-2097, 2099-2181, 2183-2232, 2234-2238, 2240-2258, 2260-2265, 2267-2971, 2973-2976, 2978-4162, 4164-4329, 4331-4389, 4391-4394, 4396-4877.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательностей азотистых оснований SEQ ID NO: 77. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 563580 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 563580 и группы конъюгата.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид ISIS 563580 с 5'-Х, где Х представляет собой группу конъюгата, содержащую GalNAc. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из модифицированного олигонуклеотида ISIS 563580 с 5'-Х, где Х представляет собой группу конъюгата, содержащую GalNAc.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит сопряженный модифицированный олигонуклеотид ISIS 703801. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из сопряженного модифицированного олигонуклеотида ISIS 703801.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит сопряженный модифицированный олигонуклеотид ISIS 703802. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из сопряженного модифицированного олигонуклеотида ISIS 703802.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 с 5'-GalNAc, с вариабельностью сахарных модификаций в крыльях. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из модифицированного олигонуклеотида с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 с 5'-GalNAc, с вариабельностью сахарных модификаций в крыльях.
1
2
1
2
1
2
1
2
2
2
3
2
3
2
2
2
3
2
2
где либо R представляет собой -OCHCHOCH (МОЕ), и R представляет собой Н; либо R и R вместе образуют мостик, где R представляет собой -O-, и R представляет собой -СН-, -СН(СН)- или -СНСН-, и R и R напрямую связаны так, что образующийся мостик выбран из: -O-СН-, -О-СН(СН)- и -O-СНСН-;
3
4
3
4
3
4
3
4
3
4
2
2
3
2
3
2
2
2
3
2
2
и для каждой пары R и R у одного кольца, независимо для каждого кольца: либо R выбран из Н и -ОСНСНOСН, и R представляет собой H; либо R и R вместе образуют мостик, где R представляет собой -O-, и R представляет собой -СН-, -СН(СН)- или -СНСН-, и R и R напрямую связаны так, что образующийся мостик выбран из: -O-СН-, -O-СН(СН)- и -O-СНСН-;
5
3
и R выбран из Н и -СН;
-
-
и Z выбран из S и О.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 20. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 544199 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 544199 и группы конъюгата.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 35. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 560400 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 560400 и группы конъюгата.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 90. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 567233 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 567233 и группы конъюгата.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 93. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 567320 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 567320 и группы конъюгата.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 94. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 567321 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 567321 и группы конъюгата.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15 или 16 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 110. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 559277 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 559277 и группы конъюгата.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15 или 16 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 114. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 561011 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 561011 и группы конъюгата.
В некоторых вариантах реализации последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% или на 100% комплементарна любой из SEQ ID NO: 1-2, по результатам измерения по всей длине модифицированного олигонуклеотида.
В некоторых вариантах реализации соединение, описанное в настоящем документе, представляет собой одноцепочечный олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации соединение, описанное в настоящем документе, представляет собой одноцепочечный модифицированный олигонуклеотид.
В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна межнуклеозидная связь указанного модифицированного олигонуклеотида представляет собой модифицированную межнуклеозидную связь. В некоторых вариантах реализации модифицированная межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную межнуклеозидную связь. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере 1, по меньшей мере 2, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7, по меньшей мере 8, по меньшей мере 9 или по меньшей мере 10 межнуклеозидных связей указанного модифицированного олигонуклеотида представляют собой тиофосфатные мженуклеозидные связи. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную межнуклеозидную связь. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит по меньшей мере 1, по меньшей мере 2, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7, по меньшей мере 8, по меньшей мере 9 или по меньшей мере 10 фосфодиэфирных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь модифицированного олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфирной межнуклеозидной связи и тиофосфатной межнуклеозидной связи.
2
n
В некоторых вариантах реализации по меньшей мере один нуклеозид модифицированного олигонуклеотида содержит модифицированный сахар. В некоторых вариантах реализации меньшей мере один модифицированный сахар представляет собой бициклический сахар. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере один модифицированный сахар содержит 2'-O-метоксиэтил, стерически затрудненный этил, 3'-фтор-ГНК или мостик 4'-(СН)-O-2', где n равен 1 или 2.
В некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере один нуклеозид в указанном модифицированном олигонуклеотиде содержит модифицированное азотистое основание. В некоторых вариантах реализации модифицированное азотистое основание представляет собой 5-метилцитозин.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид имеет: a) сегмент гэп, состоящий из связанных дезоксинуклеозидов; b) сегмент 5'-крыла, состоящий из связанных нуклеозидов; и с) сегмент 3'-крыла, состоящий из связанных нуклеозидов. Сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла, и при этом каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит модифицированный сахар.
В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит: сегмент гэп, состоящий из связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла, и при этом каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит модифицированный сахар.
В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 20 связанных нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части SEQ ID NO: 1-2, где модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.
В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов и содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.
В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 20 связанных нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований последовательности азотистых оснований, выбранной из SEQ ID NO: 77, где модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.
В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 и содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.
В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 20 связанных нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований последовательности азотистых оснований, выбранной из SEQ ID NO: 20, где модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.
В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 20 и содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.
В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 16 связанных нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 110, где модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из трех связанных нуклеозидов; и сегмент 3'-крыла, состоящий из трех связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый сегмент крыла содержит по меньшей мере один 2'-O-метоксиэтильный сахар и по меньшей мере один cEt сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.
В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 16 связанных нуклеозидов с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 110 и содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из трех связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из трех связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый сегмент крыла содержит по меньшей мере один 2'-O-метоксиэтильный сахар и по меньшей мере один cEt сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата связана с модифицированным олигонуклеотидом на 5'-конце модифицированного олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата связана с модифицированным олигонуклеотидом на 3'-конце модифицированного олигонуклеотида.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит только один лиганд. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит один или более лигандов. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит только два лиганда. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит два или более лигандов. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит три или более лигандов. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит только три лиганда. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд выбран из: полисахарида, модифицированного полисахарида, маннозы, галактозы, производного маннозы, производного галактозы, D-маннопиранозы, L-маннопиранозы, D-арабинозы, L-галактозы, D-ксилофуранозы, L-ксилофуранозы, D-глюкозы, L-глюкозы, D-галактозы, L-галактозы, α-D-маннофуранозы, β-D-маннофуранозы, α-D-маннопиранозы, β-D-маннопиранозы, α-D-глюкопиранозы, β-D-глюкопиранозы, α-D-глюкофуранозы, β-D-глюкофуранозы, α-D-фруктофуранозы, α-D-фруктопиранозы, α-D-галактопиранозы, β-D-галактопиранозы, α-D-галактофуранозы, β-D-галактофуранозы, глюкозамина, сиаловой кислоты, α-D-галактозамина, N-ацетилгалактозамина, 2-амино-3-О-[(R)-1-карбоксиэтил]-2-дезокси-β-D-глюкопиранозы, 2-дезокси-2-метиламино-L-глюкопиранозы, 4,6-дидезокси-4-формамидо-2,3-ди-O-метил-D-маннопиранозы, 2-дезокси-2-сульфоамино-D-глюкопиранозы, N-гликолоил-α-нейраминовой кислоты, 5-тио-β-D-глюкопиранозы, метил-2,3,4-три-O-ацетил-1-тио-6-О-тритил-α-D-глюкопиранозида, 4-тио-β-D-галактопиранозы, этил-3,4,6,7-тетра-O-ацетил-2-дезокси-1,5-дитио-α-D-глюко-гептопиранозида, 2,5-ангидро-D-аллононитрила, рибозы, D-рибозы, D-4-тиорибозы, L-рибозы, L-4-тиорибозы. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд представляет собой N-ацетилгалактозамин.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит по меньшей мере одну фосфорную линкерную группу или нейтральную линкерную группу.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит структуру, выбранную из:
,
и .
; ;
;
где n равен от 1 до 12; и
где m равен от 1 до 12.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата имеет связку, имеющую структуру, выбранную из:
и
где L представляет собой либо фосфорную линкерную группу, либо нейтральную линкерную группу;
1
2
Z представляет собой C(=O)O-R;
2
1
6
1
6
Z представляет собой Н, C-С алкил или замещенный C-С алкил;
2
1
6
1
6
R представляет собой Н, C-С алкил или замещенный C-С алкил; и
1
1
каждый m независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m больше 0 для каждой связки.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата имеет связку, имеющую структуру, выбранную из:
и
2
3
где Z представляет собой Н или СН; и
1
1
каждый m независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m больше 0 для каждой связки.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата имеет связку, имеющую структуру, выбранную из:
; ;
;
где n равен от 1 до 12; и
где m равен от 1 до 12.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата ковалентно присоединена к модифицированному олигонуклеотиду.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:
где
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент
С представляет собой линкер конъюгата
D представляет собой группу ветвления
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:
где:
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент
С представляет собой линкер конъюгата
D представляет собой группу ветвления
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд;
каждый n независимо равен 0 или 1; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:
где
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент;
С представляет собой линкер конъюгата;
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:
где
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
С представляет собой линкер конъюгата;
D представляет собой группу ветвления;
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:
где
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
С представляет собой линкер конъюгата;
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:
где
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент;
D представляет собой группу ветвления;
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:
где
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент;
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:
где
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
D представляет собой группу ветвления;
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и
где каждый L независимо представляет собой фосфорную линкерную группу или нейтральную линкерную группу; и
каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
; ; и .
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и .
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
; ; и
В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит пирролидин. В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата не содержит пирролидин.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата содержит ПЭГ.
В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит амид. В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата содержит по меньшей мере два амида. В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата не содержит амид. В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит полиамид.
В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит амин.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата содержит одну или более дисульфидных связей.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата содержит белок-связывающий фрагмент. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент содержит липид. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент выбран из: холестерина, холевой кислоты, адамантан-уксусной кислоты, 1-пирен-масляной кислоты, дигидротестостерона, 1,3-бис-O(гексадецил)глицерина, геранилоксигексиловой группы, гексадецилглицерина, борнеола, ментола, 1,3-пропандиола, гептадециловой группы, пальмитиновой кислоты, миристиновой кислоты, O3-(олеоил)литохолевой кислоты, O3-(олеоил)холеновой кислоты, диметокситритила или феноксазина, витамина (например, фолата, витамина А, витамина Е, биотина, пиридоксаля), пептида, углевода (например, моносахарида, дисахарида, трисахарида, тетрасахарида, олигосахарида, полисахарида), эндосомолитического компонента, стероида (например, уваола, гецигенина, диосгенина), терпена (например, тритерпена, например, сарсасапогенина, фриделина, литохолевой кислоты, дериватизованной эпифриделанолом) или катионного липида. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент выбран из: насыщенной или ненасыщенной жирной кислоты с длиной цепи от С16 до С22, холестерина, холевой кислоты, витамина Е, адамантана или 1-пентафтор пропила.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и
где каждый n независимо равен от 1 до 20; и p равен от 1 до 6.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и
где каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и
где n равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и .
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и ;
где каждый n независимо равен 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет одну из следующих структур:
и
1
где каждый А независимо представляет собой O, S, C=O или NH; и
каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:
и
1
где каждый A независимо представляет собой О, S, С=O или NH; и
каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит простой эфир.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:
и
каждый n независимо равен от 1 до 20; и
m равен от 2 до 6.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:
и .
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит:
или
где каждый j представляет собой целое число от 1 до 3; и
где каждый n представляет собой целое число от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит:
или
В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:
и
где L выбран из фосфорной линкерной группы и нейтральной линкерной группы;
1
2
Z представляет собой C(=O)O-R;
2
1
6
1
6
Z представляет собой Н, C-С алкил или замещенный C-С алкил;
2
1
6
1
6
R представляет собой Н, C-С алкил или замещенный C-С алкил; и
1
1
каждый m независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m больше 0 для каждой связки.
В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:
и
2
3
где Z представляет собой Н или СН; и
2
2
каждый m независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m больше 0 для каждой связки.
В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:
где n равен от 1 до 12; и
где m равен от 1 до 12.
В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна связка содержит этиленгликоль.
В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна связка содержит амид. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна связка содержит полиамид.
В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна связка содержит амин.
В некоторых вариантах реализации по меньшей мере две связки отличны друг от друга. В некоторых вариантах реализации все связки являются одинаковыми.
В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:
и
где каждый n независимо равен от 1 до 20; и
каждый p равен от 1 до примерно 6.
В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:
и
В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет следующую структуру:
где каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:
или ; где каждый n независимо равен 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7.
В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:
.
В некоторых вариантах реализации лиганд представляет собой галактозу.
В некоторых вариантах реализации лиганд представляет собой манноза-6-фосфат.
В некоторых вариантах реализации каждый лиганд выбран из:
и
1
где каждый R выбран из ОН и NHCOOH.
В некоторых вариантах реализации каждый лиганд выбран из:
и
В некоторых вариантах реализации каждый лиганд имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации каждый лиганд имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит фрагмент, направляющий на клетку.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит фрагмент, направляющий на клетку, который имеет следующую структуру:
где каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
где каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру: .
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:
;
1
10
где каждый Y выбран из О, S замещенного или незамещенного C-С алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
;
1
10
где каждый Y выбран из О, S замещенного или незамещенного C-C алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила.
В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:
;
1
10
где каждый Y выбран из О, S замещенного или незамещенного C-C алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит расщепляемый фрагмент, выбранный из: фосфодиэфира, амида или сложного эфира.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит фосфодиэфирный расщепляемый фрагмент.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата не содержит расщепляемый фрагмент, и при этом группа конъюгата содержит тиофосфатную связь между группой конъюгата и олигонуклеотидом.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит амидный расщепляемый фрагмент.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит сложноэфирный расщепляемый фрагмент.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
где каждый n независимо равен от 1 до 20;
13
2
2
3
Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
где каждый n независимо равен от 1 до 20;
13
2
2
3
Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
где каждый n независимо равен от 1 до 20;
13
2
2
3
Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
Z представляет собой Н или связанную твердую подложку; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
где каждый n независимо равен от 1 до 20;
13
2
2
3
Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;
Z представляет собой И или связанную твердую подложку; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
,
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
,
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(CH)-OCH;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(CH)-OCH;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:
13
2
2
3
где Q представляет собой Н или O(СН)-ОСН;
А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
x
x
x
13
2
2
3
13
В некоторых вариантах реализации B выбран из аденина, гуанина, тимина, урацила или цитозина, или 5-метилцитозина. В некоторых вариантах реализации B представляет собой аденин. В некоторых вариантах реализации B представляет собой тимин. В некоторых вариантах реализации Q представляет собой O(СН)-ОСН. В некоторых вариантах реализации Q представляет собой Н.
В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложено пролекарство, содержащее композиции или соединения, описанные в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации предложены способы применения сопряженных антисмысловых соединений и композиций, описанных в настоящем документе, для ингибирования экспрессии ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции ингибируют ANGPTL3 по меньшей мере на 5%, по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 35%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 45%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90% или по меньшей мере на 95%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 50%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 55%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 60%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 65%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 70%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 75%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 80%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 85%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 90%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 95%.
50
В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, имеют IC менее 20 мкМ, менее 10 мкМ, менее 8 мкМ, менее 5 мкМ, менее 2 мкМ, менее 1 мкМ или менее 0,8 мкМ при испытании в клетках человека, например, в клеточной линии Нер3В, как описано в примерах 2-3 и 7-10.
В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, являются эффективными, поскольку имеют вязкость менее 40 сП, менее 35 сП, менее 30 сП, менее 25 сП, менее 20 сП или менее 15 сП при измерении по параметрам, описанным в примере 13.
В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, являются хорошо переносимыми, что демонстрируется измерениями переносимости in vivo, описанными в примерах. В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются хорошо переносимыми, что демонстрируется увеличением значения ALT и/или AST не более чем в 4 раза, 3 раза, 2 раза или 1,5 раза по сравнению с животными, которым вводили солевой раствор.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложена соль сопряженных антисмысловых соединений, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат соль модифицированного олигонуклеотида с группой конъюгата.
В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, дополнительно содержат фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
В некоторых вариантах реализации животное представляет собой человека.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены способы, включающие введение животному сопряженных антисмысловых соединений или композиций, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации введение сопряженного антисмыслового соединения или композиции является терапевтическим. В некоторых вариантах реализации введение сопряженного антисмыслового соединения или композиции обеспечивает лечение, предупреждение или замедление прогрессирования заболевания, связанного с ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации заболевание связано с повышенным ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации введение сопряженного антисмыслового соединения или композиции обеспечивает предупреждение, лечение, облегчение или замедление прогрессирования сердечно-сосудистого и/или метаболического заболевания.
В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе предложены способы лечения человека с сердечно-сосудистым и/или метаболическим заболеванием, включающие идентификацию человека с сердечно-сосудистым и/или метаболическим заболеванием и введение человеку терапевтически эффективного количества любого из сопряженных антисмысловых соединений или композиций, описанных в настоящем документе, для лечения человека от сердечно-сосудистого и/или метаболического заболевания.
В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения и композиции, описанные в настоящем документе, для применения в терапии. В некоторых вариантах реализации терапию применяют для лечения, предупреждения или замедления прогрессирования заболевания, связанного с ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации терапию применяют для лечения, предупреждения или замедления прогрессирования заболевания, связанного с повышенным ANGPTL3.
В некоторых вариантах реализации заболевание представляет собой сердечно-сосудистое и/или метаболическое заболевание, расстройство или патологическое состояние. В некоторых вариантах реализации метаболическое и/или сердечно-сосудистое заболевание включает, но не ограничивается ими, ожирение, диабет, резистентность к инсулину, атеросклероз, дислипидемию, липодистрофию, коронарную болезнь сердца, неалкагольную жировую дистрофию печени (NAFLD), неалкагольный стеатогепатит (NASH), жирнокислотную гиперацидемию или метаболический синдром, или их комбинацию. Дислипидемия может представлять собой гиперлипидемию. Гиперлипидемия может представлять собой комбинированную гиперлипидемию (CHL), гиперхолестеринемию, гипертриглицеридемию или гиперхолестеренемию и гипертриглицеридемию одновременно. Комбинированная гиперлипидемия может быть наследственной или ненаследственной. Гиперхолестеринемия может представлять собой наследственную гомозиготную гиперхолестеринемию (HoFH), наследственную гетерозиготную гиперхолестеринемию (HeFH). Гипертриглицеридемия может представлять собой синдром семейной хиломикронемии (FCS) или гиперлипопротеинемию типа IV. NAFLD может представлять собой стеатоз печени или стеатогепатит. Диабет может представлять собой диабет 2 типа или диабет 2 типа с дислипидемией. Резистентность к инсулину может представлять собой резистентность к инсулину с дислипидемией.
В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, разработаны в качестве первого агента, и способы их применения, описанные в настоящем документе, дополнительно включают введение второго агента. В некоторых вариантах реализации первый агент и второй агент вводят совместно. В некоторых вариантах реализации первый агент и второй агент вводят совместно последовательно или параллельно.
В некоторых вариантах реализации второй агент представляет собой агент для снижения глюкозы. Агент для снижения глюкозы может включать, но не ограничивается ими, терапевтическое изменение образа жизни, агонист PPAR, ингибитор дипептидилпептидазы (IV), аналог GLP-1, инсулин или аналог инсулина, стимулятор секреции инсулина, ингибитор SGLT2, аналог человеческого амилина, бигуанид, ингибитор альфа-глюкозидазы или их комбинации. Агент для снижения глюкозы может включать, но не ограничивается ими, метформин, сульфонилмочевину, росиглитазон, меглитинид, тиазолидиндион, ингибитор альфа-глюкозидазы или их комбинации. Сульфонилмочевина может представлять собой ацетогексамид, хлорпропамид, толбутамид, толазамид, глимепирид, глипизид, глибурид или гликлазид. Мелгитинид может представлять собой натеглинид или репаглинид. Тиазолидиндион может представлять собой пиоглитазон или росиглитазон. Альфа-глюкозидаза может представлять собой акарбозу или миглитол.
R
В некоторых вариантах реализации второй агент представляет собой терапию для снижения липидов. В некоторых вариантах реализации терапия для снижения липидов может включать, но не ограничивается ими, терапевтическое изменение образа жизни, ингибитор редуктазы HMG-CoA, ингибитор абсорбции холестерина, ингибитор МТР (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на МТР), ингибитор АроВ (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмылосое соединение, направленное на АроВ), ингибитор АроС3 (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на АроС3), ингибитор PCSK9 (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на PCSK9), ингибитор СЕТР (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на СЕТР), фибрат, лечебное масло (например, криля или рыбий жир (например, Vascepa), льняное масло или другие масла с высоким содержанием омега-3 жирных кислот, таких как α-линоленовая кислота (ALA), докозагексаеновая кислота (DHA) или эйкозапентаеновая кислота (ЕРА)), или любые их комбинации. Ингибитор редуктазы HMG-CoA может представлять собой аторвастатин, розувастатин, флувастатин, ловастатин, правастатин или симвастатин. Ингибитор абсорбции холестерина может представлять собой эземитиб. Фибрат может представлять собой фенофибрат, безафибрат, ципрофибрат, клофибрат, гемфиброзил и т.п.
В некоторых вариантах реализации введение включает парентеральное введение. В некоторых вариантах реализации введение включает подкожное введение.
В некоторых вариантах реализации введение сопряженного антисмыслового соединения, описанного в настоящем документе, приводит к снижению уровней липидов, включая уровни триглицеридов, уровни холестерина, резистентность к инсулину, уровни глюкозы или их комбинации. Один или более из указанных уровней могут быть независимо снижены на по меньшей мере 5%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 35%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90% или по меньшей мере 95%. Введение сопряженного антисмыслового соединения может приводить к улучшению чувствительности к инсулину или чувствительности к инсулину печени. Введение сопряженного антисмыслового соединения, описанного в настоящем документе, может приводить к уменьшению атеросклеротических бляшек, ожирения, глюкозы, липидов, резистентности к глюкозе, холестерина или к улучшению чувствительности к инсулину, или любой их комбинации.
В некоторых вариантах реализации предложено применение сопряженного антисмыслового соединения, описанного в настоящем документе, в производстве лекарственного средства для лечения, облегчения, отсрочки или предупреждения одного или более заболеваний, связанных с ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации предложено применение сопряженного антисмыслового соединения, описанного в настоящем документе, в производстве лекарственного средства для лечения, облегчения, отсрочки или предупреждения одного или более из метаболического заболевания или сердечно-сосудистого заболевания.
В некоторых вариантах реализации предложен набор для лечения, предупреждения или облегчения одного или более из метаболического заболевания или сердечно-сосудистого заболевания, описанного в настоящем документе, где указанный набор содержит: а) сопряженное антисмысловое соединение, описанное в настоящем документе; и необязательно b) дополнительный агент или терапию, описанную в настоящем документе. Набор может дополнительно содержать инструкции или этикетку по применению набора для лечения, предупреждения или облегчения одного или более из метаболического заболевания или сердечно-сосудистого заболевания.
Антисмысловые соединения
Олигомерные соединения включают, но не ограничиваются ими, олигонуклеотиды, олигонуклеозиды, аналоги олигонуклеотидов, миметики олигонуклеотидов, антисмысловые соединения, антисмысловые олигонуклеотиды и миРНК. Олигомерное соединение может быть «антисмысловым» к нуклеиновой кислоте-мишени, что означает, что оно способно подвергаться гибридизации с нуклеиновой кислотой-мишенью посредством водородного связывания.
В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит последовательность азотистых оснований, которая при написании в 5'-3' направлении содержит обратный комплемент целевого сегмента нуклеиновой кислоты-мишени, на которую она направлена. В некоторых таких вариантах реализации антисмысловой олигонуклеотид имеет последовательность азотистых оснований, которая при написании в 5'-3' направлении содержит обратный комплемент целевого сегмента нуклеиновой кислоты-мишени, на которую она направлена.
В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение, направленное на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, имеет от 10 до 30 нуклеотидов в длину. Иными словами, антисмысловые соединения имеют от 10 до 30 связанных азотистых оснований. В других вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 8-80, 10-80, 12-50, 12-30, 15-30, 18-24, 19-22 или 20 связанных азотистых оснований. В некоторых таких вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79 или 80 связанных азотистых оснований в длину, или их количество находится в диапазоне, определенном любыми двумя из указанных выше значений.
В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит укороченный или усеченный модифицированный олигонуклеотид. Укороченный или усеченный модифицированный олигонуклеотид может иметь один нуклеозид, удаленный с 5' конца (5' усечение), или в альтернативном варианте с 3' конца (3' усечение). Укороченный или усеченный олигонуклеотид может иметь два или более нуклеозидов, удаленных с 5' конца, или в альтернативном варианте может иметь два или более нуклеозидов, удаленных с 3' конца. В альтернативном варианте удаленные нуклеозиды могут быть рассеяны по всему модифицированному олигонуклеотиду, например, в антисмысловом соединении, имеющем один или более нуклеозидов, удаленных с 5' конца, и один или более нуклеозидов, удаленных с 3' конца.
При наличии одного дополнительного нуклеозида в удлиненном олигонуклеотиде, дополнительный нуклеозид может быть расположен на 5', 3' конце или в центральной части олигонуклеотида. При наличии двух или более дополнительных нуклеозидов, дополнительные нуклеозиды могут быть расположены рядом друг с другом, например, в олигонуклеотиде, имеющем дав нуклеозида, добавленных на 5' конце (5' присоединение), или в альтернативном варианте на 3' конце (3' присоединение), или в центральной части олигонуклеотида. В альтернативном варианте добавленные нуклеозиды могут быть рассеяны по всему антисмысловому соединению, например, в олигонуклеотиде, имеющем один или более нуклеозидов, присоединенных к 5' концу, один или более нуклеозидов, присоединенных к 3' концу, и/или один или более нуклеозидов, присоединенных в центральной части.
Длина антисмыслового соединения, такого как антисмысловой олигонуклеотид, может быть увеличена или уменьшена, и/или могут быть введены некомплементарные основания без аннулирования активности. Например, в Woolf et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 7305-7309, 1992) описан ряд антисмысловых олигонуклеотидов длиной 13-25 азотистых оснований, которые были испытаны на их способность индуцировать расщепление целевой РНК в модели инъекции в ооцит. Антисмысловые олигонуклеотиды длиной 25 азотистых оснований с 8 или 11 некомплементарными основаниями вблизи концов антисмысловых олигонуклеотидов были способны управлять прямым расщеплением целевой мРНК, хотя и в меньшей степени, чем антисмысловые олигонуклеотиды, которые не содержали никаких несоответствий. Аналогичным образом целевое специфическое расщепление было достигнуто с применением антисмысловых нуклеотидов из 13 азотистых оснований, включая такие, что имели 1 или 3 несоответствия.
Gautschi et al (J. Natl. Natl. Cancer Inst. 93: 463-471, March 2001) продемонстрировали способность олигонуклеотида, обладающего 100% комплементарностью мРНК bcl-2 и содержащего 3 рассогласованных основания по отношению к мРНК bcl-xL, уменьшать экспрессию как bcl-2, так и bcl-xL in vitro и in vivo. Кроме того, данный олигонуклеотид продемонстрировал высокую противоопухолевую активность in vivo.
Maher и Dolnick (Nuc. Acid. Res. 16: 3341-3358,1988) провели испытания серии тандемов антисмысловых олигонуклеотидов из 14 азотистых оснований и антисмысловых олигонуклеотидов из 28 и 42 азотистых оснований, состоящих из последовательности двух или трех тандемов антисмысловых олигонуклеотидов, соответственно, на их способность к блокированию трансляции ДГФР человека в анализе на ретикулоцитах кролика. Каждый из трех антисмысловых олигонуклеотидов из 14 азотистых оснований в одиночку был способен ингибировать трансляцию, хотя и на более низком уровне, чем антисмысловые олигонуклеотиды из 28 или 42 азотистых оснований.
Некоторые мотивы и механизмы антисмысловых соединений
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения имеют химически модифицированные субъединицы, организованные в паттерны или мотивы, для придания антисмысловым соединениям таких свойств, как усиленная ингибирующая активность, повышенная аффинность связывания с целевой нуклеиновой кислотой или устойчивость к разложению нуклеазами in vivo.
Химерные антисмысловые соединения обычно содержат по меньшей мере одну область, модифицированную таким образом, чтобы придать повышенную устойчивость к разложению под действием нуклеаз, усиление клеточного поглощения, повышенную аффинность связывания с целевой нуклеиновой кислотой, и/или повышенную ингибирующую активность. Вторая область химерного антисмыслового соединения может придавать другое требуемое свойство, например, служить в качестве субстрата для клеточной эндонуклеазы РНКазы Н, которая расщепляет нить РНК в дуплексе РНК: ДНК.
Антисмысловая активность может быть результатом любого механизма, затрагивающего гибридизацию антисмыслового соединения (например, олигонуклеотида) с целевой нуклеиновой кислотой, при этом гибридизация в конечном итоге приводит к биологическому эффекту. В некоторых вариантах реализации модулируют количество и/или активность нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации уменьшают количество и/или активность нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации гибридизация антисмыслового соединения с целевой нуклеиновой кислотой в конечном итоге приводит к разложению целевой нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации гибридизация антисмыслового соединения с целевой нуклеиновой кислотой не приводит к разложению целевой нуклеиновой кислоты. В некоторых таких вариантах реализации наличие антисмыслового соединения, гибридизованного с целевой нуклеиновой кислотой (занятость) приводит к модулированию антисмысловой активности. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, имеющие определенный химический мотив или паттерн химических модификаций, особенно подходят для использования одного или более механизмов. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения действуют более чем по одному механизму и/или по неустановленным механизмам. Соответственно, антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, не ограничены конкретным механизмом.
Антисмысловые механизмы включают, без ограничения, антисенс, опосредованный РНКазой Н; механизмы РНКи, в которых участвует каскад RISC и которые включают, без ограничения, механизмы миРНК, кшРНК и микроРНК; и механизмы на основе занятости. Некоторые антисмысловые соединения могут действовать более чем по одному такому механизму и/или по дополнительным механизмам.
Антисенс, опосредованный РНКазой Н
В некоторых вариантах реализации антисмысловая активность по меньшей мере частично обусловлена разрушением РНК-мишени под действием РНКазы Н. РНКаза Н представляет собой клеточную эндонуклеазу, которая расщепляет цепь РНК дуплекса РНК: ДНК. В данной области техники известно, что одноцепочечные антисмысловые соединения, которые являются «ДНК-подобными», вызывают активность РНКазы Н в клетках млекопитающих. Соответственно, антисмысловые соединения, содержащие по меньшей мере часть ДНК или ДНК-подобных нуклеозидов, могут активировать РНКазу Н, приводя к расщеплению нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, использующие РНКазу Н, содержат один или более модифицированных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации такие антисмысловые соединения содержат по меньшей мере один блок из 1-8 модифицированных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации модифицированные нуклеозиды не поддерживают активность РНКазы Н. В некоторых вариантах реализации такие антисмысловые соединения представляют собой гэпмеры, как описано в настоящем документе. В некоторых таких вариантах реализации гэп гэпмера содержит нуклеозиды ДНК. В некоторых таких вариантах реализации гэп гэпмера содержит ДНК-подобные нуклеозиды. В некоторых таких вариантах реализации гэп гэпмера содержит нуклеозиды ДНК и ДНК-подобные нуклеозиды.
3
Некоторые антисмысловые соединения, имеющие мотив гэпмера, считают химерными антисмысловыми соединениями. В гэпмере внутренняя область, имеющая множество нуклеотидов, которые поддерживают расщепление РНКазой Н, расположена между внешними областями, имеющими множество нуклеотидов, химически отличающихся от нуклеозидов внутренней области. В случае антисмыслового олигонуклеотида, имеющего гэпмерный мотив, сегмент гэп, как правило, служит в качестве субстрата для расщепления эндонуклеазой, в то время как сегменты крыльев содержат модифицированные нуклеозиды. В некоторых вариантах реализации указанные области гэпмера различаются по типам сахарных фрагментов в составе каждой отдельной области. Типы сахарных фрагментов, которые используют для дифференциации областей гэпмера, в некоторых вариантах реализации могут включать β-D-рибонуклеозиды, β-D-дезоксирибонуклеозиды, 2'-модифицированные нуклеозиды (такие 2'-модифицированные нуклеозиды могут включать, среди прочего, 2'-МОЕ и 2'-O-СН) и модифицированные бициклическими сахарами нуклеозиды (такие модифицированные бициклическими сахарами нуклеозиды могут включать те, которые содержат стерически затрудненный этил). В некоторых вариантах реализации нуклеозиды в крыльях могут содержать несколько модифицированных сахарных фрагментов, включая, например, 2'-МОЕ и бициклические сахарные фрагменты, такие как фрагменты со стерически затрудненным этилом или ЗНК. В некоторых вариантах реализации крылья могут содержать несколько модифицированных и немодифицированных сахарных фрагментов. В некоторых вариантах реализации крылья могут содержать различные комбинации 2'-МОЕ нуклеозидов, бициклических сахарных фрагментов, таких как нуклеозиды со стерически затрудненным этилом или ЗНК нуклеозиды, и 2'-дезоксинуклеозидов.
Каждая отдельная область может содержать одинаковые сахарные фрагменты, различные или чередующиеся сахарные фрагменты. Мотив крыло-гэп-крыло часто описывают как «Х-Y-Z», где «X» обозначает длину 5' крыла, «Y» обозначает длину гэпа, a «Z» обозначает длину 3' крыла. «X» и «Z» могут содержать одинаковые, различные или чередующиеся сахарные фрагменты. В некоторых вариантах реализации «X» и «Y» могут содержать один или более 2'-дезоксинуклеозида. «Y» может содержать 2'-дезоксинуклеозиды. В данном контексте гэпмер, описанный как «Х-Y-Z», имеет такую конфигурацию, что гэп расположен непосредственно возле каждого из 5' крыла и 3' крыла. Таким образом, между 5'-крылом и гэп или гэп и 3'-крылом нет промежуточных нуклеотидов. Любое из антисмысловых соединений, описанных в настоящем документе, может иметь гэпмерный мотив. В некоторых вариантах реализации «X» и «Z» являются одинаковыми; в других вариантах реализации они различны. В некоторых вариантах реализации «Y» составляет от 8 до 15 нуклеозидов. X, Y или Z могут составлять 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30 или более нуклеозидов.
В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение, направленное на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, имеет гэпмерный мотив, в котором гэп состоит из 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или 16 связанных нуклеозидов.
В некоторых вариантах реализации антисмысловой олигонуклеотид имеет сахарный мотив, описанный Формулой А, представленной ниже:
m
n
p
r
t
g
v
w
x
y
z
(J)-(B)-(J)-(B)-(A)-(D)-(A)-(B)-(J)-(B)-(J)
где:
каждый А независимо представляет собой 2'-замещенный нуклеозид;
каждый В независимо представляет собой бициклический нуклеозид;
каждый J независимо представляет собой либо 2'-замещенный нуклеозид, либо 2'-дезоксинуклеозид;
каждый D представляет собой 2'-дезоксинуклеозид;
m равен 0-4; n равен 0-2; р равен 0-2; r равен 0-2; t равен 0-2; v равен 0-2; w равен 0-4; х равен 0-2; у равен 0-2; z равен 0-4; g равен 6-14;
при условии, что:
по меньшей мере один из m, n и r отличен от 0;
по меньшей мере один из w и y отличен от 0;
сумма m, n, р, r и t равна от 2 до 5; и
сумма v, w, х, у и z равна от 2 до 5.
Соединения РНКи
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения представляют собой соединения интерферирующей РНК (РНКи), которые включают двухцепочечные соединения РНК (также называемые малой интерферирующей РНК или миРНК) и одноцепочечные соединения РНКи (или оцРНК). Такие соединения по меньшей мере частично действуют по пути RISC для разрушения и/или изолирования нуклеиновой кислоты-мишени (следовательно, включают соединения микроРНК/микроРНК-миметики). В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения содержат модификации, которые делают их особенно подходящими для таких механизмов.
1. Соединения оцРНК
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, включая соединения, особенно подходящие для применения в качестве одноцепочечных РНКи соединений (оцРНК), содержат модифицированный 5'-терминальный конец. В некоторых таких вариантах реализации 5'-терминальный конец содержит модифицированный фосфатный фрагмент. В некоторых вариантах реализации такой модифицированный фосфат является стабилизированным (например, устойчивым к разложению/расщеплению по сравнению с немодифицированным 5'-фосфатом). В некоторых вариантах реализации такие 5'-концевые нуклеозиды стабилизируют 5'-фосфорный фрагмент. Некоторые модифицированные 5'-концевые нуклеозиды описаны в известном уровне техники, например, в WO/2011/139702.
В некоторых вариантах реализации 5'-нуклеозид соединения оцРНК имеет формулу IIc:
где:
1
T представляет собой необязательно защищенный фосфорный фрагмент;
2
Т представляет собой межнуклеозидную линкерную группу, связывающую соединение Формулы IIc с олигомерным соединением;
А имеет одну из формул:
или
1
2
1
6
1
6
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
3
4
Q и Q, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-Cалкокси, замещенный C-C алкокси, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил, замещенный C-C алкинил или N(R)(R);
3
5
6
7
Q представляет собой О, S, N(R) или C(R)(R);
3
4
5
6
7
1
6
1
6
1
6
каждый R, R R, R и R независимо представляет собой Н, C-C алкил, замещенный C-C алкил или C-C алкокси;
3
14
15
16
15
16
17
18
15
17
15
16
15
2
М представляет собой О, S, NR, C(R)(R), C(R)(R)C(R)(R), C(R)=C(R), OC(R)(R) или OC(R)(Bx);
14
1
6
1
6
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
R представляет собой H, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкокси, замещенный C-C алкокси, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил или замещенный C-C алкинил;
15
16
17
18
1
6
1
6
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
R, R, R и R, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкокси, замещенный C-C алкокси, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил или замещенный C-C алкинил;
1
Bx представляет собой фрагмент гетероциклического основания;
2
2
1
1
6
1
6
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
или если присутствует Вх, то Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания, a Bx представляет собой Н, галоген, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкокси, замещенный C-C алкокси, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, С-С алкинил или замещенный C-C алкинил;
4
5
6
7
1
6
1
6
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
J, J, J и J, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкокси, замещенный C-C алкокси, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил или замещенный С-С алкинил;
4
5
7
19
20
21
20
21
20
21
5
6
7
1
6
1
6
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
или J образует мостик с одним из J или J, где указанный мостик состоит из 1-3 связанных бирадикальных групп, выбранных из О, S, NR, C(R)(R), C(R)=C(R), C[=C(R)(R)] и С(=O), а другие два из J, J и J, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкокси, замещенный C-C алкокси, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, С-С алкинил или замещенный C-C алкинил;
19
20
21
1
6
1
6
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
каждый R, R и R независимо представляет собой Н, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкокси, замещенный C-C алкокси, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил или замещенный C-C алкинил;
8
9
n
m
1
j
G представляет собой Н, ОН, галоген или O-[C(R)(R)]-[(C=O)-X]-Z;
8
9
1
6
1
6
каждый R и R независимо представляет собой Н, галоген, C-C алкил или замещенный C-C алкил;
1
1
X представляет собой О, S или N(E);
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
2
3
Z представляет собой Н, галоген, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил, замещенный C-C алкинил или N(E)(E);
1
2
3
1
6
1
6
E, Е и Е, каждый независимо, представляют собой Н, C-C алкил или замещенный C-C алкил;
n равен от 1 до примерно 6;
m равен 0 или 1;
j равен 0 или 1;
1
1
2
1
1
3
2
1
2
1
2
2
1
2
каждая замещенная группа содержит одну или более необязательно защищенных групп заместителей, независимо выбранных из галогена, OJ, N(J)(J),=NJ, SJ, N, CN, OC(=X)J, OC(=X)N(J)(J) и C(=X)N(J)(J);
2
3
X представляет собой О, S или NJ;
1
2
3
1
6
каждый J, J и J независимо представляет собой Н или C-C алкил;
2
3
если j равен 1, то Z отличен от галогена или N(Е)(Е); и
где указанное олигомерное соединение содержит от 8 до 40 мономерных субъединиц и может подвергаться гибридизации с по меньшей мере частью нуклеиновой кислоты-мишени.
3
2
2
3
В некоторых вариантах реализации М представляет собой О, СН=СН, ОСН или ОС(Н)(Вх). В некоторых вариантах реализации М представляет собой О.
4
5
6
7
4
5
7
В некоторых вариантах реализации J, J, J и J представляют собой Н. В некоторых вариантах реализации J образует мостик с одним из J или J.
В некоторых вариантах реализации А имеет одну из формул:
где:
1
2
1
6
1
6
1
6
1
6
1
2
1
2
1
2
1
2
3
3
Q и Q, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C-C алкил, замещенный C-С алкил, C-C алкокси или замещенный C-C алкокси. В некоторых вариантах реализации Q и Q представляют собой Н. В некоторых вариантах реализации Q и Q, каждый независимо, представляют собой Н или галоген. В некоторых вариантах реализации Q и Q представляет собой Н, а другой из Q и Q представляет собой F, СН или ОСН.
1
В некоторых вариантах реализации T имеет формулу:
где:
a
c
1
6
1
6
1
6
1
6
R и R, каждый независимо, представляют собой защищенный гидроксил, защищенный тиол, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкокси, замещенный C-C алкокси, защищенный амино или замещенный амино; и
b
b
a
c
3
2
3
3
2
R представляет собой О или S. В некоторых вариантах реализации R представляет собой О, a R и R, каждый независимо, представляют собой ОСН, ОСНСН или СН(СН).
3
2
2
3
2
3
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
3
2
2
3
2
2
3
2
3
10
11
2
2
10
11
2
2
2
2
10
11
2
10
11
2
12
2
2
10
11
2
2
12
13
10
11
10
11
12
13
1
6
3
3
2
3
2
3
2
2
2
2
3
2
2
2
2
3
2
2
3
2
2
2
3
2
2
2
3
2
2
3
2
2
3
В некоторых вариантах реализации G представляет собой галоген, ОСН, OCHF, OCHF, OCF, ОСНСН, O(CH)F, OCHCHF, OCHCF, ОСН-СН=СН, O(СН)-ОСН, O(CH)-SCH, O(CH)-OCF, O(CH)-N(R)(R), O(CH)-ON(R)(R), O(CH)-O(CH)-N(R)(R), OCHC(=O)-N(R)(R), OCHC(=O)-N(R)-(CH)-N(R)(R) или O(CH)-N(R)-C(=NR)[N(R)(R)], где R, R, R и R, каждый независимо, представляют собой Н или C-C алкил. В некоторых вариантах реализации G представляет собой галоген, ОСН, OCF, ОСНСН, OCHCF, ОСН-СН=СН, O(СН)-ОСН, O(CH)-O(CH)-N(CH), OCHC(=O)-N(H)CH, OCHC(=O)-N(H)-(CH)-N(CH) или OCH-N(H)-C(=NH)NH. В некоторых вариантах реализации G представляет собой F, ОСН или O(СН)-ОСН. В некоторых вариантах реализации G представляет собой O(СН)-ОСН.
В некоторых вариантах реализации 5'-концевой нуклеозид имеет Формулу IIe:
В некоторых вариантах реализации изобретения антисмысловые соединения, включая соединения, которые особенно подходят для оцРНК, содержат один или более типов модифицированных сахарных фрагментов и/или природных сахарных фрагментов, расположенных вдоль олигонуклеотида или его области в определенном паттерне или мотиве сахарной модификации. Такие мотивы могут содержать любые сахарные модификации, рассмотренные в настоящем документе, и/или другие известные модификации сахара.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат или состоят из области, имеющей одинаковые сахарные модификации. В некоторых таких вариантах реализации каждый нуклеозид указанной области содержит одинаковую РНК-подобную сахарную модификацию. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой 2'-F нуклеозид. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой 2'-ОМе нуклеозид. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой 2'-МОЕ нуклеозид. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой cEt нуклеозид. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой ЗНК нуклеозид. В некоторых вариантах реализации однородная область образует весь или по существу весь олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации область образует весь нуклеотид, за исключением 1-4 концевых нуклеозидов.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат одну или более областей чередующихся сахарных модификаций, где нуклеозиды чередуются между нуклеотидами, имеющими сахарную модификацию первого типа, и нуклеотидами, имеющими сахарную модификацию второго типа. В некоторых вариантах реализации нуклеозиды обоих типов представляют собой РНК-подобные нуклеозиды. В некоторых вариантах реализации чередующиеся нуклеозиды выбраны из: 2'-ОМе, 2'-F, 2'-МОЕ, ЗНК и cEt. В некоторых вариантах реализации чередующиеся модификации представляют собой 2'-F и 2'-ОМе. Такие области могут быть смежными или могут быть прерваны по-другому модифицированными нуклеозидами или конъюгированными нуклеозидами.
x
y
В некоторых вариантах реализации каждая чередующаяся область чередующихся модификаций состоит из одного нуклеозида (т.е. паттерн представляет собой (AB)A, где А представляет собой нуклеозид, имеющий сахарную модификацию первого типа, и В представляет собой нуклеозид, имеющий сахарную модификацию второго типа; x равен 1-20, и у равен 0 или 1). В некоторых вариантах реализации одна или более чередующихся областей в чередующемся мотиве содержит более одного нуклеозида некоторого типа. Например, олигонуклеотиды могут содержать одну или более областей любого из следующих нуклеозидных мотивов:
AABBAA;
ABBABB;
AABAAB;
ABBABAABB;
ABABAA;
AABABAB;
ABABAA;
ABBAABBABABAA; BABBAABBABABAA; или
ABABBAABBABABAA;
где А представляет собой нуклеозид первого типа, и В представляет собой нуклеозид второго типа. В некоторых вариантах реализации каждый А и В выбран из 2'-F, 2'-ОМе, БНК и МОЕ.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды, имеющие такой чередующийся мотив, содержат также модифицированный 5'-концевой нуклеозид, такой как нуклеозид формулы IIc или IIe.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат область, имеющую мотив 2-2-3. Такие области содержат следующий мотив:
2
х
2
y
3
-(А)-(В)-(А)-(С)-(А)-
где: А представляет собой первый тип модифицированного нуклеозида;
В и С представляют собой нуклеозиды, модифицированные иначе, чем А, однако В и С могут иметь одинаковые или разные модификации относительно друг друга;
x и у равны от 1 до 15.
В некоторых вариантах реализации А представляет собой 2'-ОМе модифицированный нуклеозид. В некоторых вариантах реализации В и С представляют собой 2'-F модифицированные нуклеозиды. В некоторых вариантах реализации А представляет собой 2'-ОМе модифицированный нуклеозид, а В и С представляют собой 2'-F модифицированные нуклеозиды.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеозиды имеют следующий сахарный мотив:
x
y
z
5'-(Q)-(AB)A-(D)
где:
Q представляет собой нуклеозид, содержащий стабилизированный фосфатный фрагмент. В некоторых вариантах реализации Q представляет собой нуклеозид, имеющий Формулы IIc или IIe;
А представляет собой первый тип модифицированного нуклеозида;
В представляет собой второй тип модифицированного нуклеозида;
D представляет собой модифицированный нуклеозид, содержащий модификацию, отличную от нуклеозида, смежного с ним. Так, если у равен 0, то D должен быть модифицирован иначе, чем В, а если у равен 1, то D должен быть модифицирован иначе, чем А. В некоторых вариантах реализации D отличен и от А, и от В.
X равен 5-15;
Y равен 0 или 1;
Z равен 0-4.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеозиды имеют следующий сахарный мотив:
x
z
5'-(Q)-(A)-(D)
где:
Q представляет собой нуклеозид, содержащий стабилизированный фосфатный фрагмент. В некоторых вариантах реализации Q представляет собой нуклеозид, имеющий Формулы IIc или IIe;
А представляет собой первый тип модифицированного нуклеозида;
D представляет собой модифицированный нуклеозид, содержащий модификацию, отличную от А.
X равен 11-30;
Z равен 0-4.
В некоторых вариантах реализации А, В, С и D в представленных выше мотивах выбраны из: 2'-ОМе, 2'-F, 2'-МОЕ, ЗНК и cEt. В некоторых вариантах реализации D представляет собой концевые нуклеозиды. В некоторых вариантах реализации такие концевые нуклеозиды не предназначены для гибридизации с нуклеиновой кислотой-мишенью (хотя может происходить случайная гибридизация одного или более из них). В некоторых вариантах реализации азотистое основание каждого нуклеозида D представляет собой аденин, независимо от идентичности азотистого основания в соответствующем положении нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации азотистое основание каждого нуклеозида D представляет собой тимин.
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, включая соединения, которые особенно подходят для применения в качестве оцРНК, содержат модифицированные межнуклеозидные связи, расположенные вдоль олигонуклеотида или его области в определенном порядке или в мотиве модифицированной межнуклеозидной связи. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат область, имеющую мотив чередующихся межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат область одинаково модифицированных межнуклеозидных связей. В некоторых таких вариантах реализации олигонуклеотид содержит область, которая равномерно связана тиофосфатными межнуклеозидными связями. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид равномерно связан тиофосфатными межнуклеозидными связями. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфира и тиофосфата. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфира и тиофосфата, и по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфат.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 6 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 10 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 6 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 8 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 10 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 12 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых таких вариантах реализации по меньшей мере один такой блок расположен на 3' конце олигонуклеотида. В некоторых таких вариантах реализации по меньшей мере один такой блок расположен в пределах 3 нуклеозидов от 3' конца олигонуклеотида.
Олигонуклеотиды, имеющие любые из различных сахарных мотивов, описанных в настоящем документе, могут иметь любой связывающий мотив. Например, олигонуклеотиды, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые описаны выше, могут иметь связывающий мотив, выбранный из неограничивающей таблицы, представленной ниже:
2. Соединения миРНК
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения представляют собой двухцепочечные РНКи соединения (миРНК). В таких вариантах реализации одна или обе цепи могут содержать любой мотив модификации, описанный выше для оцРНК. В некоторых вариантах реализации оцРНК соединения могут представлять собой немодифицированные РНК. В некоторых вариантах реализации соединения миРНК могут содержать немодифицированные нуклеозиды РНК, но модифицированные межнуклеозидные связи.
Некоторые варианты реализации относятся к двухцепочечным композициям, в которых каждая цепь содержит мотив, определенный положением одного или более модифицированных или немодифицированных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации предложены композиции, содержащие первое и второе олигомерное соединение, которые полностью или по меньшей мере частично гибридизованы с образованием дуплексной области, и дополнительно содержащие область, которая комплементарна нуклеиновой кислоте-мишени и гибридизуется с ней. Удобно, что такая композиция содержит первое олигомерное соединение, которое представляет собой антисмысловую цепь, имеющую полную или частичную комплементарность нуклеиновой кислоте-мишени, и второе олигомерное соединение, которое представляет собой смысловую цепь, имеющую одну или более областей, комплементарных и образующих по меньшей мере одну дуплексную область с первым олигомерным соединением.
Композиции согласно некоторым вариантам реализации модулируют генную экспрессию посредством гибридизации с нуклеиновой кислотой-мишенью, что приводит к потере ее нормальной функции. В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота-мишень представляет собой ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации разрушение ANGPTL3-мишени облегчается активированным комплексом RISC, который образуется с композициями, описанными в настоящем документе.
Некоторые варианты реализации относятся к двухцепочечным композициям, в которых одна из цепей подходит, например, для воздействия на предпочтительное включения противоположной цепи в RISC (или расщепляющий) комплекс.Указанные композиции подходят для направленного воздействия на выбранные молекулы нуклеиновых кислот и для модулирования экспрессии одного или более генов. В некоторых вариантах реализации композиции согласно настоящему изобретению гибридизуются с частью РНК-мишени, что приводит к потере нормальной функции РНК-мишени.
Некоторые варианты реализации относятся к двухцепочечным композициям, в которых обе цепи содержат гемимерный мотив, полностью модифицированный мотив, позиционно модифицированный мотив или чередующийся мотив. Каждая цепь композиций согласно настоящему изобретению может быть модифицирована для выполнения определенной роли, например, в каскаде миРНК. Используя различные мотивы в каждой цепи или одинаковый мотив с различными химическими модификациями в каждой цепи, может быть обеспечено направленное воздействие на антисмысловую цепь комплекса RISC при ингибировании внедрения смысловой цепи. В рамках такой модели каждая цепь может быть модифицирована независимо, так что она лучше выполняет свою конкретную роль. Антисмысловая цепь может быть модифицирована на 5'-конце для усиления его роли в одной области RISC, тогда как 3'-конец может быть модифицирован иначе для усиления его роли в другой области RISC.
Молекулы двухцепочечных олигонуклеотидов могут представлять собой молекулу двухцепочечного полинуклеотида, содержащую самокомплементарные смысловые и антисмысловые области, где антисмысловая область содержит нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности в молекуле нуклеиновой кислоты-мишени или ее части, а смысловая область имеет нуклеотидную последовательность, соответствующую последовательности нуклеиновой кислоты-мишени или ее части. Двухцепочечные молекулы олигонуклеотида могут быть собраны из двух отдельных олигонуклеотидов, где одна цепь представляет собой смысловую цепь, а другая цепь представляет собой антисмысловую цепь, где антисмысловая и смысловая цепи являются самокомплементарными (т.е. каждая цепь содержит последовательность нуклеотидов, которая комплементарна последовательности нуклеотидов в другой цепи; например, если антисмысловая цепь и смысловая цепь образуют дуплекс или двухцепочечную структуру, например, если двухцепочечная область имеет от примерно 15 до примерно 30, например, примерно 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30 пар оснований; антисмысловая цепь содержит последовательность нуклеотидов, которая комплементарна последовательности нуклеотидов в молекуле нуклеиновой кислоты-мишени или ее части, а смысловая цепь содержит последовательность нуклеотидов, соответствующую последовательности нуклеиновой кислоты-мишени или ее части (например, от примерно 15 до примерно 25 или более нуклеотидов двухцепочечной молекулы олигонуклеотида комплементарны нуклеиновой кислоте-мишени или ее части. В альтернативном варианте двухцепочечный олигонуклеотид собран из одного олигонуклеотида, при этом самокомплементарные смысловые и антисмысловые области миРНК связаны посредством линкера(-ов), основанных на нуклеиновой кислоте или не основанных на нуклеиновой кислоте.
Двухцепочечный олигонуклеотид может представлять собой полинуклеотид с дуплексной, асимметричной дуплексной, шпилечной или асимметричной шпилечной вторичной структурой, имеющий самокоплементарные смысловые и антисмысловые области, при этом антисмысловая область содержит нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности в отдельной молекуле целевой нуклеиновой кислоты или ее части, а смысловая область имеет нуклеотидную последовательность, соответствующую последовательности целевой нуклеиновой кислоты или ее части. Двухцепочечный олигонуклеотид может представлять собой кольцевой одноцепочечный полинуклеотид, имеющий две или более петлевых структур и ствол, содержащий самокомплементарные смысловые и антисмысловые области, при этом антисмысловая область содержит нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности в молекуле нуклеиновой кислоты-мишени или ее части, а смысловая область имеет нуклеотидную последовательность, соответствующую последовательности нуклеиновой кислоты-мишени или ее части, и при этом кольцевой полинуклеотид может быть процессирован in vivo или in vitro с получением активной молекулы миРНК, способной опосредовать РНКи.
В некоторых вариантах реализации двухцепочечный олигонуклеотид содержит отдельные смысловые и антисмысловые последовательности или области, при этом смысловая и антисмысловая области ковалентно связаны нуклеотидными или ненуклеотидными линкерными молекулами, известными в данной области техники, или в альтернативном варианте реализации связаны нековалентно посредством ионных взаимодействий, водородного связывания, ван-дер-ваальсовских взаимодействий, гидрофобных взаимодействий и/или стэкинг-взаимодействий. В некоторых вариантах реализации двухцепочечный олигонуклеотид содержит нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности гена-мишени. В другом варианте реализации двухцепочечный олигонуклеотид взаимодействует с нуклеотидной последовательностью гена-мишени таким образом, который вызывает ингибирование экспрессии гена-мишени.
В данном контексте двухцепочечные олигонуклеотиды не ограничены молекулами, содержащими только РНК, а дополнительно охватывают химически модифицированные нуклеотиды и ненуклеотиды. В некоторых вариантах реализации молекулы малой интерферирующей нуклеиновой кислоты не имеют нуклеотидов, содержащих 2'-гидрокси (2'-ОН). В некоторых вариантах реализации малые интерферирующие нуклеиновые кислоты необязательно не содержат рибонуклеотидов (например, нуклеотидов, имеющих группу 2'-ОН). Такие двухцепочечные олигонуклеотиды, которые не требуют наличия рибонуклеотидов в молекуле для поддержания РНКи, могут тем не менее иметь присоединенный линкер или линкеры или другие присоединенные или связанные группы, фрагменты или цепи, содержащие один или более нуклеотидов с группами 2'-ОН. Необязательно, двухцепочечный олигонуклеотиды могут содержать рибонуклеотиды в примерно 5, 10, 20, 30, 40 или 50% положений нуклеотидов. В контексте настоящего документа термин миРНК считают эквивалентным другим терминам, используемым для описания молекул нуклеиновых кислот, которые могут опосредовать последовательность-специфичную РНКи, например, малой интерферирующей РНК (миРНК), двухцепочечной РНК (дцРНК), микро-РНК (микроРНК), короткой шпилечной РНК (кшРНК), малого интерферирующего олигонуклеотида, малой интерферирующей нуклеиновой кислоты, малого интерферирующего модифицированного олигонуклеотида, химически модифицированной миРНК, РНК посттранскрипционного сайленсинга гена (ptgsPHK) и других. Кроме того, в данном контексте термин РНК считают эквивалентным другим терминам, используемым для описания последовательность-специфической интерференции РНК, такой как посттранскрипционный сайленсинг гена, трансляционное ингибирование или эпигенетика. Например, двухцепочечные олигонуклеотиды могут быть использованы для эпигенетического сайленсинга генов на посттранскрипционном уровне и на дотранскрипционном уровне. В неограничивающем примере эпигенетическое регулирование генной экспрессии молекулами миРНК согласно настоящему изобретению может быть результатом миРНК-опосредованной модификации структуры хроматина или паттерна метилирования для изменения генной экспрессии (см., например, Verdel et al., 2004, Science, 303,672-676; Pal-Bhadra et al., 2004, Science, 303,669-672; Allshire, 2002, Science, 297, 1818-1819; Volpe et al., 2002, Science, 297, 1833-1837; Jenuwein, 2002, Science, 297, 2215-2218; и Hall et al., 2002, Science, 297, 2232-2237).
Подразумевается, что соединения и композиции согласно некоторым вариантам реализации, предложенным в настоящем документе, могут направленно воздействовать на ANGPTL3 посредством дцРНК-опосредованного сайленсинга гена или механизма РНКи, включая, например, эффекторные молекулы «шпилечной» или двухцепочечной РНК из ствола-петли, в которых одна цепь РНК с самокомплементарными последовательностями может принимать двухцепочечную конформацию, или эффекторные молекулы дуплексной дцРНК, содержащие две отдельные цепи РНК. В различных вариантах реализации дцРНК полностью состоит из рибонуклеотидов или состоит из смеси рибонуклеотидов и дезоксинуклеотидов, таких как гибриды РНК/ДНК, описанные, например, в WO 00/63364, поданной 19 апреля 2000 года, или в патенте США Ser. №60/130377, поданном 21 апреля 1999 года. дцРНК или эффекторная молекула дцРНК может представлять собой одну молекулу с областью самокомплементарности, так что нуклеотиды в одном сегменте молекулы участвуют в спаривании оснований с нуклеотидами в другом сегменте молекулы. В различных вариантах реализации дцРНК, которая состоит из одной молекулы, полностью состоит из рибонуклеотидов или содержит область рибонуклеотидов, которая комплементарна области дезоксирибонуклеотидов. В альтернативном варианте реализации дцРНК может содержать две разные цепи, которые имеют область комплементарности друг с другом.
В различных вариантах реализации обе цепи полностью состоят из рибонуклеотидов, одна цепь полностью состоит из рибонуклеотидов, и одна цепь полностью состоит из дезоксирибонуклеотидов, или одна или обе цепи содержат смесь рибонуклеотидов и дезоксирибонуклеотидов. В некоторых вариантах реализации области комплементарности по меньшей мере на 70, 80, 90, 95, 98 или 100% комплементарны друг другу и последовательности нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации область дцРНК, которая находится в двухцепочечной конформации, содержит по меньшей мере 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 50, 75,100, 200, 500, 1000, 2000 или 5000 нуклеотидов или содержит все нуклеотиды в кДНК или другой последовательности нуклеиновой кислоты-мишени, находящейся в дцРНК. В некоторых вариантах реализации дцРНК не содержит одноцепочечных областей, таких как одноцепочечные концы, или дцРНК представляет собой шпильку. В других вариантах реализации дцРНК имеет одну или более одноцепочечных областей или выступов. В некоторых вариантах реализации гибриды РНК/ДНК содержат цепь или область ДНК, которая представляет собой антисмысловую цепь или область (например, имеет по меньшей мере 70, 80, 90, 95, 98 или 100% комплементарность с нуклеиновой кислотой-мишенью), и цепь или область РНК, которая представляет собой смысловую цепь или область (например, имеет по меньшей мере 70, 80, 90, 95, 98 или 100% идентичность с нуклеиновой кислотой-мишенью) и наоборот.
В различных вариантах реализации гибрид РНК/ДНК получают in vitro с помощью методов ферментного или химического синтеза, таких как описаны в настоящем документе или в WO 00/63364, поданной 2000 года, или в патенте США Ser. №60/130377, поданном 21 апреля 1999 года. В других вариантах реализации цепь ДНК, синтезированная in vitro, связана в комплекс с цепью РНК, полученной in vivo или in vitro до, после или одновременно с трансформацией ДНК цепи в клетку. В других вариантах реализации дцРНК представляет собой одну кольцевую нуклеиновую кислоту, содержащую смысловую и антисмысловую область, или дцРНК содержит кольцевую нуклеиновую кислоту и вторую кольцевую нуклеиновую кислоту или линейную нуклеиновую кислоту (см., например, WO 00/63364, поданную 2000 года, или в патенте США Ser. №60/130377, поданном 21 апреля 1999 года). Иллюстративные кольцевые нуклеиновые кислоты включают лариатные структуры, в которых свободная 5' фосфорильная группа нуклеотида становится связанной с 2' гидроксильной группой другого нуклеотида путем закольцовывания.
В других вариантах реализации дцРНК содержит один или более модифицированных нуклеотидов, в которых 2' положение сахара содержит галоген (такой как группа фтора) или содержит алкокси-группу (такую как метокси-группа), что увеличивает период полувыведения дцРНК in vitro или in vivo по сравнению с соответствующей дцРНК, в которой соответствующее 2' положение содержит водород или гидроксильную группу. В других вариантах реализации дцРНК содержит одну или более связей между смежными нуклеотидами, отличных от природной фосфодиэфирной связи. Примеры таких связей включают фосфорамидные, тиофосфатные и дитиофосфатные связи. дцРНК также могут представлять собой химически модифицированные молекулы нуклеиновых кислот, как описано в патенте патент США №6673661. В других вариантах реализации дцРНК содержит одну или две кэпированных цепей, как описано, например, в WO 00/63364, поданной 2000 года, или в патенте США Ser. №60/130377, поданном 21 апреля 1999 года.
В других вариантах реализации дцРНК может представлять собой любую из по меньшей мере частично дцРНК молекул, описанных в WO 00/63364, а также любую из дцРНК молекул, описанных в предварительной заявке США 60/399998; и в предварительной заявке США 60/419532, и в PCT/US2003/033466, содержание которых включено в настоящий документ посредством ссылки. Любая из дцРНК может быть экспрессирована in vitro или in vivo с помощью способов, описанных в настоящем документе, или стандартных способов, таких как описаны в WO 00/63364.
Занятость
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения предположительно не приводят к расщеплению нуклеиновой кислоты-мишени посредством РНКазы Н или не приводят к расщеплению или секвестрации по пути RISC. В некоторых таких вариантах реализации антисмысловая активность может быть результатом занятости, при этом наличие гибридизованного антисмыслового соединения нарушает активность нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых таких вариантах реализации антисмысловое соединение может быть равномерно модифицировано или может содержать смесь модификаций и/или модифицированных и немодифицированных нуклеозидов.
Нуклеиновые кислоты-мишени, области-мишени и нуклеотидные последовательности
Нуклеотидные последовательности, которые кодируют ANGPTL3, включают, без ограничения, следующие: последовательность человека с номером доступа GenBank NM_014495.2 (включенную в настоящий документ как SEQ ID NO: 1) или с номером доступа GenBank NT_032977.9, нуклеотиды с 33032001 по33046000 (включенную в настоящий документ как SEQ ID NO: 2). Понятно, что последовательность, изложенная в каждом SEQ ID NO в примерах, содержащихся в настоящем документе, является независимой от любой модификации сахарного фрагмента, межнуклеозидной связи или азотистого основания. Следовательно, антисмысловое соединение, определяемое по SEQ ID NO, может независимо содержать одну или более модификаций сахарного фрагмента, межнуклеозидной связи или азотистого основания. Антисмысловые соединения, описанные по номеру Isis (Isis №) указывают сочетание последовательности азотистых оснований и мотива.
В некоторых вариантах реализации целевая область представляет собой структурно определенную область нуклеиновой кислоты-мишени. Например, целевая область может охватывать 3' UTR, 5' UTR, экзон, интрон, экзон /интронное сочленение, кодирующую область, область инициации трансляции, область терминации трансляции или другими определенные области нуклеиновой кислоты. Структурно определенные области для ANGPTL3 могут быть получены по номеру доступа из баз данных последовательностей, таких как NCBI, и такая информация включена в данное описание посредством ссылки. В некоторых вариантах реализации целевая область может охватывать последовательность от 5' сайта-мишени одного целевого сегмента в пределах области-мишени до 3' сайта-мишени другого целевого сегмента в пределах указанной области-мишени.
В некоторых вариантах реализации «целевой сегмент» представляет собой меньший, субфрагмент области-мишени в составе нуклеиновой кислоты. Например, сегмент-мишень может представлять собой последовательность нуклеотидов нуклеиновой кислоты-мишени, на которую нацелено одно или более антисмысловых соединений. «5' Сайт-мишень» или «5' сайт инициации» относится к 5'-крайнему нуклеотиду целевого сегмента. «3' Сайт-мишень» или «3' сайт терминации» относится к 3'-крайнему нуклеотиду целевого сегмента.
Таргетирование включает в себя определение по меньшей мере одного целевого сегмента, с которым гибридизируется антисмысловое соединение, например, для достижения желаемого эффекта. В некоторых вариантах реализации желаемый эффект представляет собой снижение уровней мРНК нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации желаемый эффект представляет собой снижение уровней белка, кодируемого нуклеиновой кислотой-мишенью, или фенотипическое изменение, связанное с нуклеиновой кислотой-мишенью.
Область-мишень может содержать один или более целевых сегментов. Несколько целевых сегментов в области-мишени могут быть перекрывающимися. В альтернативном варианте они могут быть не перекрывающимися. В некоторых вариантах реализации целевые сегменты в пределах области-мишени разделены не более чем примерно 300 нуклеотидами. В некоторых вариантах реализации целевые сегменты в пределах области-мишени разделены числом нуклеотидов, равным, равным примерно, не более чем, не более чем примерно 250, 200, 150, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20 или 10 нуклеотидами в нуклеиновой кислоте-мишени, или находится в пределах, определяемых любыми двумя из предшествующих значений. В некоторых вариантах реализации целевые сегменты в пределах области-мишени разделены не более чем, или не более чем примерно 5 нуклеотидами в нуклеиновой кислоте-мишени. В некоторых вариантах реализации целевые сегменты непрерывны. Предусмотрены области-мишени, определенные диапазоном, имеющим стартовую нуклеиновую кислоту, которая представляет собой любую из 5' сайта-мишени или 3' сайта-мишени, перечисленных в настоящем документе.
Подходящие целевые сегменты могут быть расположены в 5' UTR, кодирующем участке, в 3' UTR, интроне, экзоне или в экзон/интронном сочленении. Целевые сегменты, содержащие стартовый кодон или стоп-кодон, также представляют собой подходящие целевые сегменты. Подходящий целевой сегмент может специфически исключать некоторые структурно определенные области, такие как стартовый кодон или стоп-кодон.
Определение подходящих целевых сегментов может включать в себя сравнение последовательности нуклеиновой кислоты-мишени с другими последовательностями по всему геному. Например, для идентификации областей подобия среди различных нуклеиновых кислот может быть использован алгоритм BLAST. Это сравнение может предотвратить выбор последовательностей антисмыслового соединения, которые гибридизуются неспецифическим образом с последовательностями, отличными от выбранной нуклеиновой кислоты-мишени (например, нецелевые или побочные последовательности).
Могут быть вариации в активности (например, определенной по процентному снижению уровней нуклеиновой кислоты-мишени) антисмысловых соединений внутри активной целевой области. В некоторых вариантах реализации изобретения снижение уровней мРНК ANGPTL3 является индикатором ингибирования экспрессии ANGPTL3. Снижение уровней белка ANGPTL3 также указывает на подавление экспрессии мРНК-мишени. Кроме того, на ингибирование экспрессии мРНК и/или белка ANGPTL3 указывают фенотипические изменения, такие как снижение уровня холестерина LDL, триглицеридов или глюкозы.
Гибридизация
В некоторых вариантах реализации гибридизация происходит между антисмысловым соединением, описанным в настоящем документе, и нуклеиновой кислотой ANGPTL3. Наиболее распространенный механизм гибридизации включает водородное связывание (например, уотсон-криковское, хугстиновское или обратное хугстиновское водородное связывание) между комплементарными азотистыми основаниями молекул нуклеиновых кислот.
Гибридизация может происходить в различных условиях. Жесткие условия являются последовательность-зависимыми и определяются природой и составом гибридизуемых молекул нуклеиновых кислот.
е
Способ определения того, является ли последовательность специфически гибридизуемой с целевой нуклеиновой кислотой, хорошо известны в данной области техники (Sambrook и Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3 изд., 2001). В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, представленные в настоящем документе, являются специфически гибридизуемыми с нуклеиновой кислотой ANGPTL3.
Комплементарность
Антисмысловое соединение и нуклеиновая кислота-мишень комплементарны друг другу, если достаточное количество азотистых оснований антисмыслового соединения может образовывать водородную связь с соответствующими азотистыми основаниями нуклеиновой кислоты-мишени, таким образом, что будет достигаться желательный эффект (например, антисмысловое ингибирование нуклеиновой кислоты-мишени, такой как нуклеиновая кислота ANGPTL3).
Антисмысловое соединение может гибридизоваться с одним или несколькими сегментами нуклеиновой кислоты ANGPTL3 таким образом, что промежуточные или смежные сегменты не участвуют в гибридизации (например, петлевая структура, рассогласование или структура шпильки).
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, представленные в настоящем изобретении, или определенные их части, являются или по меньшей мере на 70%, 75%, 80%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или на 100% комплементарны нуклеиновой кислоте ANGPTL3, области-мишени, сегменту-мишени или определенной ее части. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, представленные в настоящем изобретении, или определенные их части, являются или по меньшей мере на 70%, 75%, 80%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или на 100% комплементарны последовательности одной или более из SEQ ID NO: 1-2. Процент комплементарности антисмыслового соединения с целевой нуклеиновой кислотой может быть определен с использованием стандартных методов.
Например, антисмысловое соединение, в котором 18 из 20 азотистых оснований антисмыслового соединения являются комплементарными к области-мишени, и поэтому будут специфически гибридизоваться, имеет 90 процентов комплементарности. В данном примере оставшиеся некомплементарные азотистые основания могут быть расположены кластерно или вперемешку с комплементарных азотистыми основаниями и не обязаны быть смежными друг с другом или комплементарными азотистыми основаниям. Таким образом, антисмысловое соединение, длина которого составляет 18 азотистых оснований, содержащее 4 (четыре) некомплементарных азотистых основания, фланкированных двумя областями полной комплементарности с нуклеиновой кислотой-мишенью, обладает общей комплементарностью с нуклеиновой кислотой-мишенью 77,8%, и таким образом, входит в границы объема настоящего изобретения. Процент комплементарности антисмыслового соединения с областью нуклеиновой кислоты-мишени может быть определен с помощью программ BLAST (основное средство поиска локального выравнивания) и программ PowerBLAST, известных в данной области техники (Altschul et al., J. Mol. Biol., 1990, 215, 403 410; Zhang и Madden, Genome Res., 1997, 7, 649 656). Процент гомологии, идентичность или комплементарность последовательностей, могут быть определены, например, программой Gap (висконсинский пакет анализа последовательностей, версия 8 для Unix, Genetics Computer Group, Висконсинский Университет, Мэдисон, штат Висконсин), с использованием настроек по умолчанию, которые используют алгоритм Смита и Ватермана (Adv. Appl. Math., 1981, 2, 482 489).
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, предложенные в настоящем документе, или их определенные части полностью комплементарны (т.е. на 100% комплементарны) нуклеиновой кислоте-мишени или ее определенной части. Например, антисмысловое соединение может быть полностью комплементарно нуклеиновой кислоте ANGPTL3 или ее области-мишени, или ее сегменту-мишени, или ее последовательности-мишени. В данном контексте «полностью комплементарный» означает, что каждое азотистое основание антисмыслового соединения способно точно спариваться с соответствующими азотистыми основаниями нуклеиновой кислоты-мишени. Например, антисмысловое соединение из 20 азотистых оснований полностью комплементарно целевой последовательности, которая имеет 400 азотистых оснований в длину, при условии, что существует соответствующая часть целевой нуклеиновой кислоты из 20 азотистых оснований, которая полностью комплементарна указанному антисмысловому соединению. Полностью комплементарный может также использоваться в отношении определенного фрагмента первой и/или второй нуклеиновой кислоты. Например, фрагмент из 20 азотистых оснований антисмыслового соединения, состоящего из 30 азотистых оснований, может быть «полностью комплементарным» последовательности-мишени, которая имеет 400 азотистых оснований в длину. Фрагмент из 20 азотистых оснований олигонуклеотида, состоящего из 30 азотистых оснований, полностью комплементарен целевой последовательности, если целевая последовательность имеет соответствующий фрагмент из 20 азотистых оснований, при этом каждое его азотистое основание комплементарно фрагменту из 20 азотистых оснований антисмыслового соединения. В то же время, все антисмысловое соединение из 30 азотистых оснований может быть полностью комплементарным целевой последовательности в зависимости от того, будут ли остальные 10 азотистых оснований антисмыслового соединения также комплементарны целевой последовательности.
Некомплементарное азотистое основание может располагаться на 5' конце или 3' конце антисмыслового соединения. В альтернативном варианте некомплементарное азотистое основание или азотистые основания могут быть внутри антисмыслового соединения. При наличии двух или более некомплементарных нуклеиновых оснований, они могут быть смежными (т.е. связанными) или несмежными. В одном варианте реализации некомплементарное азотистое основание расположено в сегменте крыла гэпмера антисмыслового олигонуклеотида.
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, которые содержат точно или до 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 азотистых оснований в длину, содержат не более 4, не более 3, не более 2 или не более 1 некомплементарного азотистого основания(-ий) относительно нуклеиновой кислоты-мишени, такой как нуклеиновая кислота ANGPTL3, или ее определенной части.
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, которые содержат точно или до 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28,29 или 30 азотистых оснований в длину, содержат не более 6, не более 5, не более 4, не более 3, не более 2 или не более 1 некомплементарного азотистого основания(-ий) относительно нуклеиновой кислоты-мишени, такой как нуклеиновая кислота ANGPTL3, или ее определенной части.
Антисмысловые соединения, представленные в настоящем документе, включают также те, которые являются комплементарными части целевой нуклеиновой кислоты. В данном контексте «часть» относится к определенному количеству смежных (т.е. связанных) азотистых оснований в пределах области или сегмента нуклеиновой кислоты-мишени.
«Часть» также может относиться к определенному количеству смежных азотистых оснований антисмыслового соединения. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения комплементарны части целевого сегмента из по меньшей мере 8 азотистых оснований. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения комплементарны части целевого сегмента из по меньшей мере 10 азотистых оснований. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения комплементарны части целевого сегмента из по меньшей мере 15 азотистых оснований. Также предусмотрены антисмысловые соединения, которые являются комплементарными части из по меньшей мере 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более азотистых оснований целевого сегмента, или количества в диапазоне, определяемом любыми двумя из указанных значений.
Идентичность
Антисмысловые соединения, представленные в настоящем документе, также могут иметь определенный процент идентичности конкретной нуклеотидной последовательности, SEQ ID NO или последовательности соединения, представленного конкретным номером Isis, или его части. В данном контексте антисмысловое соединение идентично последовательности, описанной в настоящем документе, если оно имеет такую же способность к спариванию азотистых оснований. Например, РНК, которая содержит урацил вместо тимидина в описанной последовательности ДНК, считают идентичной последовательности ДНК, поскольку и урацил, и тимидин спариваются с аденином. Предусмотрены также укороченные и удлиненные варианты антисмысловых соединений, описанных в настоящем документе, а также соединений, обладающих неидентичными основаниями по отношению к антисмысловым соединениям, предложенным в настоящем документе. Неидентичные основания могут быть смежными друг с другом или рассеянными по всему антисмысловому соединению. Процент идентичности антисмыслового соединения рассчитывают по количеству оснований, которые имеют идентичное спаривание оснований, относительно последовательности, с которой идет сравнение.
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения или их части по меньшей мере на 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичны одному или более антисмысловым соединениям из SEQ ID NO, или их части, как описано в настоящем документе.
Модификации
Нуклеозид представляет собой комбинацию азотистое основание-сахар. Азотистое основание (также известное как основание) - часть нуклеозида, обычно представляющая собой фрагмент гетероциклического основания. Нуклеотиды представляют собой нуклеозиды, которые дополнительно содержат фосфатную группу, ковалентно связанную с сахарной частью нуклеозида. Для тех нуклеозидов, которые содержат пентофуранозильный сахар, фосфатная группа может быть связана с 2', 3' или 5' гидроксильным фрагментом сахара. Олигонуклеотиды образуются посредством ковалентного связывания соседних нуклеозидов друг с другом с образованием линейного полимерного олигонуклеотида. В олигонуклеотидной структуре фосфатные группы обычно называют как образующие межнуклеозидные связи олигонуклеотида.
Модификации антисмысловых соединений охватывают замещения или изменения межнуклеозидных связей, сахарных фрагментов или азотистых оснований. Модифицированные антисмысловые соединения зачастую предпочтительны по сравнению с нативными формами за счет желаемых свойств, таких как, например, улучшенное клеточное поглощение, повышенная аффинность связывания с нуклеиновой кислотой-мишенью, повышенная стабильность в присутствии нуклеаз или повышенная ингибирующая активность.
Химически модифицированные нуклеозиды также могут быть использованы для повышения аффинности связывания укороченного или усеченного антисмыслового олигонуклеотида с его нуклеиновой кислотой-мишенью. Следовательно, сопоставимые результаты часто могут быть получены с помощью более коротких антисмысловых соединений, которые имеют такие химически модифицированные нуклеозиды.
Модифицированные межнуклеозидные связи
Природная межнуклеозидная связь РНК и ДНК представляет собой 3'-5' фосфодиэфирную связь. Часто выбор делается в пользу антисмысловых соединений, содержащих одну или более модифицированных, т.е., не встречающихся в природе межнуклеозидных связей, по сравнению с антисмысловыми соединениями, содержащими природные межнуклеозидные связи, из-за желательных свойств, например, таких как увеличение захвата клеткой, повышенная аффинность к нуклеиновым кислотам-мишеням и повышенная устойчивость в присутствии нуклеаз.
Олигонуклеотиды, имеющие модифицированные межнуклеозидные связи, включают межнуклеозидные связи, которые сохраняют атом фосфора, а также межнуклеозидные связи, которые не имеют атома фосфора. Иллюстративные фосфорсодержащие межнуклеозидные связи включают, но не ограничиваются ими, фосфодиэфиры, фосфотриэфиры, метилфосфонаты, фосфорамидаты и тиофосфаты. Способы получения фосфорсодержащих и не содержащих фосфор связей хорошо известны.
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, направленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, содержат одну или более модифицированных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации модифицированные межнуклеозидные связи представляют собой тиофосфатные связи. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь антисмыслового соединения представляет собой тиофосфатную межнуклеозидную связь.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат модифицированные межнуклеозидные связи, расположенные вдоль олигонуклеотида или его области определенным образом или в виде мотива модифицированной межнуклеозидной связи. В некоторых вариантах реализации межнуклеозидные связи расположены в разорванном мотиве. В таких вариантах реализации межнуклеозидные связи в каждой из двух областей крыльев отличны от межнуклеозидных связей в области гэп. В некоторых вариантах реализации межнуклеозидные связи в крыльях являются фосфодиэфирными, а межнуклеозидные связи в гэп являются тиофосфатными. Нуклеозидный мотив выбран независимо, так что олигонуклеотид, имеющий разорванный мотив межнуклеозидных связей, может иметь или не иметь разорванный нуклеозидный мотив, и если он имеет разорванный нуклеозидный мотив, то длина крыльев и гэп может быть или не быть одинаковой.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат область, имеющую мотив чередующихся межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды согласно настоящему изобретению содержат область одинаково модифицированных межнуклеозидных связей. В некоторых таких вариантах реализации олигонуклеотид содержит область, которая равномерно связана тиофосфатными межнуклеозидными связями. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид равномерно связан тиофосфатными межнуклеозидными связями. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфира и тиофосфата. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфира и тиофосфата, и по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфат.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 6 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 10 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 6 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 8 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 10 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 12 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых таких вариантах реализации по меньшей мере один такой блок расположен на 3' конце олигонуклеотида. В некоторых таких вариантах реализации по меньшей мере один такой блок расположен в пределах 3 нуклеозидов от 3' конца олигонуклеотида.
В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат одну или более метилфосфонатных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды, имеющие гэпмерный нуклеозидный мотив, содержат линкерный мотив, содержащий все тиофосфатные связи, за исключением одной или двух метилфосфонатных связей. В некоторых вариантах реализации одна метилфосфонатная связь находится в центральном гэпе олигонуклеотида, имеющего гэпмерный нуклеозидный мотив.
В некоторых вариантах реализации желательно распределять количество тиофосфатных межнуклеозидных связей и фосфодиэфирных межнуклеозидных связей для сохранения устойчивости к нуклеазе. В некоторых вариантах реализации желательно распределять количество и положение тиофосфатных межнуклеозидных связей, а также количество и положение фосфодиэфирных межнуклеозидных связей для сохранения устойчивости к нуклеазе. В некоторых вариантах реализации количество тиофосфатных межнуклеозидных связей может быть уменьшено, а количество фосфодиэфирных межнуклеозидных связей может быть увеличено. В некоторых вариантах реализации количество тиофосфатных межнуклеозидных связей может быть уменьшено, а количество фосфодиэфирных межнуклеозидных связей может быть увеличено при сохранении устойчивости к нуклеазе. В некоторых вариантах реализации желательно уменьшить количество тиофосфатных межнуклеозидных связей при сохранении устойчивости к нуклеазе. В некоторых вариантах реализации желательно увеличить количество фосфодиэфирных межнуклеозидных связей при сохранении устойчивости к нуклеазе.
Модифицированные сахарные фрагменты
1
2
1
2
1
12
Антисмысловые соединения могут необязательно содержать один или более нуклеозидов, в которых модифицирована сахарная группа. Такие нуклеозиды с модифицированным сахаром могут придавать антисмысловым соединениями повышенную устойчивость к нуклеазам, повышенную аффинность связывания или некоторые другие полезные биологические свойства. В некоторых вариантах реализации нуклеозиды содержат химически модифицированные фрагменты рибофуранозного кольца. Примеры химически модифицированных рибофуранозных колец включают, без ограничения, введение групп заместителей (включая 5' и 2' группы заместителей, соединение мостиком негеминальных кольцевых атомов с образованием бициклических нуклеиновых кислот (БНК), замену атома кислорода в рибозильном кольце на S, N(R) или C(R)(R) (R, R и R, каждый независимо, представляют собой Н, С-С алкил или защитную группу) и их комбинации. Примеры химически модифицированных сахаров включают 2'-F-5'-метил-замещенный нуклеозид (см. международную заявку РСТ WO 2008/101157, опубликованную 8/21/08, где представлены другие описанные 5',2'-бис-замещенные нуклеозиды) или замену атома кислорода рибозильного кольца на S с дополнительным замещением в 2'-положении (см. опубликованную заявку на патент США US2005-0130923, опубликованную 16 июня 2005 года), или в альтернативном варианте с 5'-замещением БНК (см. международную заявку РСТ WO 2007/134181, опубликованную 11/22/07, где ЗНК замещена, например, 5'-метильной или 5'-винильной группой).
3
2
3
2
2
2
2
3
1
10
3
2
2
2
3
2
2
m
n
2
m
n
2
1
2
2
m
n
1
m
n
1
10
Примеры нуклеозидов, имеющих модифицированные сахарные фрагменты, включают, без ограничения, нуклеозиды, содержащие 5'-винильные, 5'-метильные (R или S), 4'-S, 2'-F, 2'-ОСН, 2'-ОСНСН, 2'-OCCHF и 2'-O(СН)OCH группы заместителей. Заместитель в 2' положении также может быть выбран из аллила, амино, азидо, тио, О-аллила, O-C-C алкила, OCF, OCHF, O(CH)SCH, O(CH)-O-N(R)(R), O-CH-C(=O)-N(R)(R) и O-CH-C(=O)-N(R)-(CH)-N(R)(R), где каждый R, R и R независимо представляет собой Н или замещенный или незамещенный C-С алкил.
2
2
2
2
3
2
3
3
3
2
3
2
3
2
1
12
2
3
2
2
В данном контексте «бициклические нуклеозиды» относятся к модифицированным нуклеозидам, содержащим бициклический сахарный фрагмент. Примеры бициклических нуклеиновых кислот (БНК) включают, без ограничения, нуклеозиды, содержащие мостик между 4' и 2' атомами рибозильного кольца. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, предложенные в настоящем документе, содержат один или более БНК нуклеозидов, при этом мостик содержит одну из формул: 4'-(СН)-O-2' (ЗНК); 4'-(CH)-S-2'; 4'-(СН)-O-2' (ЭНК); 4'-СН(СН)-O-2' и 4'-СН(CHOCH)-O-2' (и их аналоги, см. патент США 7399845, выданный 15 июля 2008 года); 4'-С(СН)(СН)-O-2' (и их аналоги, см. PCT/US2008/068922, опубликованную как WO 2009/006478 8 января 2009 года); 4'-СН-N(OCH)-2' (и их аналоги, см. PCT/US2008/064591, опубликованную как WO/2008/150729 11 декабря 2008 года); 4'-CH-O-N(CH)-2' (см. опубликованную заявку на патент США US2004-0171570, опубликованную 2 сентября 2004 года); 4'-CH-N(R)-O-2', где R представляет собой Н, С-С алкил или защитную группу (см. патент США 7427672, выданный 23 сентября 2008 года); 4'-СН-С(Н)(СН)-2' (см. Zhou et al, J. Org Chem., 2009, 74, 118-134); и 4'-CH-C-(=CH)-2' (и их аналоги, см. PCT/US2008/066154, опубликованную как WO 2008/154401 8 декабря 2008 года).
Дополнительные бициклические нуклеозиды описаны в опубликованной литературе (см., например: Srivastava et al., J. Am. Chem. Soc, 2007,129(26) 8362-8379; Frieden et al., Nucleic Acids Research, 2003, 21, 6365-6372; Elayadi et al., Curr. Opinion Invens. Drugs, 2001, 2, 558-561; Braasch et al., Chem. Biol, 2001, 8, 1-7; Orum et al., Curr. Opinion Mol Ther., 2001, 3, 239-243; Wahlestedt et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2000, 97, 5633-5638; Singh et al., Chem. Commun., 1998, 4, 455-456; Koshkin et al., Tetrahedron, 1998, 54, 3607-3630; Kumar et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, 8, 2219-2222; Singh et al., J. Org. Chem., 1998, 63, 10035-10039; патенты США №: 7741457; 7399845; 7053207; 7034133; 6794499; 6770748; 6670461; 6525191; 6268490; публикации патентов США №: US2008-0039618; US2007-0287831; US2004-0171570; заявки на патент США, серийные номера: 61/097787; 61/026995; и международные заявки: WO 2009/006478; WO 2008/154401; WO 2008/150729; WO 2009/100320; WO 2011/017521; WO 2009/067647; WO 2010/036698; WO 2007/134181; WO 2005/021570; WO 2004/106356; WO 99/14226. Каждый из указанных бициклических нуклеозидов может быть получен с одной или более стереохимическими конфигурациями сахара, включая, например, α-L-рибофуранозу и β-D-рибофуранозу (см. международную заявку РСТ PCT/DK98/00393, опубликованную 25 марта 1999 года как WO 99/14226).
В данном контексте «моноциклические нуклеозиды» относятся к нуклеозидам, содержащим модифицированные сахарные фрагменты, которые не являются бициклическими сахарными фрагментами. В некоторых вариантах реализации сахарный фрагмент или аналог сахарного фрагмента нуклеозида может быть модифицирован или замещен в любом положении.
В данном контексте «4'-2' бициклический нуклеозид» или «4' к 2' бициклический нуклеозид» относится к бициклическому нуклеозиду, содержащему фуранозное кольцо, содержащее мостик, соединяющий два атома углерода фуранозного кольца, соединяющий 2' атом углерода и 4' атом углерода сахарного кольца.
a
b
n
a
b
a
a
a
2
x
a
a
b
1
12
1
12
2
12
2
12
2
12
2
12
5
20
5
20
5
7
5
7
1
1
2
1
3
1
2
1
1
В некоторых вариантах реализации бициклические сахарные фрагменты нуклеозидов БНК включают, но не ограничиваются ими, соединения, имеющие по меньшей мере один мостик между 4' и 2' атомами углерода пентофуранозильного сахарного фрагмента, включая, без ограничения, мостики, содержащие 1 или от 1 до 4 связанных групп, независимо выбранных из -[C(R)(R)]-, -C(R)=C(R)-, -C(R)=N-, -C(=NR)-, -C(=O)-, -C(=S)-, -O-, -Si(R)-, -S(=O)- и -N(R)-; где: x равен 0, 1 или 2; n равен 1, 2, 3 или 4; каждый R и R независимо представляет собой Н, защитную группу, гидроксил, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил, замещенный C-C алкинил, С-С арил, замещенный С-С арил, гетероциклический радикал, замещенный гетероциклический радикал, гетероарил, замещенный гетероарил, С-С алициклический радикал, замещенный С-С алициклический радикал, галоген, OJ, NJJ, SJ, N, COOJ, ацил (С(=O)-Н), замещенный ацил, CN, сульфонил (S(=O)-J) или сульфоксил (S(=O)-J); и
1
2
1
12
1
12
2
12
2
12
2
12
2
12
5
20
5
20
1
12
1
12
каждый J и J независимо представляет собой Н, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил, замещенный C-C алкинил, С-С арил, замещенный С-С арил, ацил (С(=O)-Н), замещенный ацил, гетероциклический радикал, замещенный гетероциклический радикал, C-C аминоалкил, замещенный C-C аминоалкил или защитную группу.
a
b
n
a
b
n
a
b
a
b
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
1
12
В некоторых вариантах реализации мостик бициклического сахарного фрагмента представляет собой -[C(R)(R)]-, -[C(R)(R)]-O-, -C(RR)-N(R)-O- или -C(RR)-O-N(R)-. В некоторых вариантах реализации мостик представляет собой 4'-СН-2', 4'-(СН)-2', 4'-(СН)-2', 4'-СН-O-2', 4'-(СН)-O-2', 4'-CH-O-N(R)-2' и 4'-CH-N(R)-O-2'-, где каждый R независимо представляет собой Н, защитную группу или C-C алкил.
2
2
В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды дополнительно определяют по изомерной конфигурации. Например, нуклеозид, содержащий мостик 4'-(СН)-O-2', может быть в α-L конфигурации или в β-D конфигурации. Ранее α-L-метиленокси (4'-СН-O-2') БНК были внедрены в антисмысловые олигонуклеотиды, которые демонстрировали антисмысловую активность (Frieden et al., Nucleic Acids Research, 2003, 21, 6365-6372).
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
3
2
3
1
12
В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды включают нуклеозиды, имеющие 4'-2' мостик, где такие мостики включают, без ограничения,, α-L-4'-(СН)-O-2', β-D-4'-CH-O-2', 4'-(СН)-O-2', 4'-CH-O-N(R)-2', 4'-CH-N(R)-O-2', 4'-СН(СН)-O-2', 4'-CH-S-2', 4'-CH-N(R)-2', 4'-СН-СН(СН)-2' и 4'-(СН)-2', где R представляет собой Н, защитную группу или C-C алкил.
В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:
где:
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;
a
b
c
2
c
2
c
2
2
c
2
c
c
2
-Q-Q-Q- представляет собой -CH-N(R)-CH-, -C(=O)-N(R)-CH-, -CH-O-N(R)-, -CH-N(R)-O- или -N(R)-O-CH;
c
1
2
R представляет собой C-C алкил или аминозащитную группу; и
a
b
T и T, каждый независимо, представляют собой Н, гидроксил-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки.
В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:
где:
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;
а
b
Т и T, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;
a
1
6
2
6
2
6
1
6
2
6
2
6
Z представляет собой C-C алкил, С-С алкенил, С-С алкинил, замещенный C-C алкил, замещенный С-С алкенил, замещенный С-С алкинил, ацил, замещенный ацил, замещенный амид, тиол или замещенный тиол.
c
c
d
c
3
c
e
c
d
c
d
e
1
6
1
6
c
В одном из вариантов реализации каждая из замещенных групп независимо является моно или полизамещенной группами заместителей, выбранными из галогена, оксо, гидроксила, OJ, NJJ, SJ, N, OC(=X)J и NJC(=X)NJJ, где каждый J, J и J независимо представляет собой Н, C-C алкил ил изамещенный C-C алкил, и X представляет собой О или NJ.
В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:
где:
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;
a
b
T и T, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;
b
1
6
2
6
2
6
1
6
2
6
2
6
Z представляет собой C-C алкил, C-C алкенил, C-C алкинил, замещенный C-C алкил, замещенный C-С алкенил, замещенный C-C алкинил или замещенный ацил (С(=O)-).
В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:
где:
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;
a
b
T и T, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;
d
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
R представляет собой C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкенил, замещенный С-С алкенил, С-С алкинил или замещенный С-С алкинил;
a
b
c
d
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
1
6
1
6
1
6
1
6
каждый q, q, q и q независимо представляет собой Н, галоген, C-C алкил, замещенный C-C алкил, С-С алкенил, замещенный С-С алкенил, C-C алкинил или замещенный C-C алкинил, C-С алкоксил, замещенный C-С алкоксил, ацил, замещенный ацил, C-С аминоалкил или замещенный C-С аминоалкил;
В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:
где:
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;
a
b
T и T, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;
a
b
e
f
1
12
1
12
2
12
2
12
2
12
2
12
1
12
1
12
j
j
j
2
j
j
k
3
j
j
k
j
j
k
j
k
j
k
j
k
q, q, q и q, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, C-C алкил, замещенный С-C алкил, С-С алкенил, замещенный С-С алкенил, С-С алкинил, замещенный С-С алкинил, С-С алкокси, замещенный С-С алкокси, OJ, SJ, SOJ, SOJ, NJJ, N, CN, C(=O)OJ, C(=O)NJJ, C(=O)J, O-C(=O)NJJ, N(H)C(=NH)NJJ, N(H)C(=O)NJJ или N(H)C(=S)NJJ;
e
f
g
h
или q и q вместе представляют собой=C(q)(q);
g
h
1
12
1
12
q и q, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C-С алкил или замещенный С-С алкил.
2
Описаны синтез и получение бициклических нуклеозидов аденина, цитозина, гуанина, 5-метилцитозина, тимина и урацила, имеющих мостик 4'-СН-O-2', а также их олигомеризация и свойства распознавания нуклеиновых кислот (Koshkin et al., Tetrahedron, 1998, 54, 3607-3630). Описан также синтез бициклических нуклеозидов в WO 98/39352 и WO 99/14226.
2
2
Были также получены аналоги различных бициклических нуклеозидов, которые имеют 4'-2' мостиковые группы, такие как 4'-СН-O-2' и 4'-CH-S-2' (Kumar et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, 8, 2219-2222). Описано также получение олигодезоксирибонуклеотидных дуплексов, содержащих бициклические нуклеозиды, для применения в качестве субстратов для полимераз нуклеиновых кислот (Wengel et al., WO 99/14226). Кроме того, в данной области техники описан синтез 2'-амино-БНК, нового конформационно ограниченного высокоаффинного аналога олигонуклеотида (Singh et al., J. Org. Chem., 1998, 63, 10035-10039). Кроме того, ранее были получены 2'-амино- и 2'-метиленамино-БНК, и была описана термостабильность их дуплексов с комплементарными нитями РНК и ДНК.
В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:
где:
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;
a
b
T и T, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;
i
j
k
l
1
12
1
12
2
12
2
12
2
12
2
12
1
12
1
12
j
j
j
2
j
j
k
3
j
j
k
j
j
k
j
k
j
k
j
k
каждый q, q, q и q независимо представляет собой Н, галоген, C-C алкил, замещенный С-С алкил, С-С алкенил, замещенный С-С алкенил, С-С алкинил, замещенный С-С алкинил, C-C алкоксил, замещенный С-С алкоксил, OJ, SJ, SOJ, SOJ, NJJ, N, CN, C(=O)OJ, C(=O)NJJ, C(=O)J, O-C(=O)NJJ, N(H)C(=NH)NJJ, N(H)C(=O)NJJ или N(H)C(=S)NJJ; и
i
j
l
k
g
h
g
h
1
12
1
12
q и q или q и q вместе представляют собой=C(q)(q), где q и q, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, С-С алкил или замещенный C-C алкил.
2
3
2
Описан один карбоциклический бициклический нуклеозид, имеющий мостик 4'-(СН)-2', и мостик из аналога алкенила 4'-СН=СН-СН-2' (Freier et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25(22), 4429-4443 и Albaek et al., J. Org. Chem., 2006, 71, 7731-7740). Описан также синтез и получение карбоциклических бициклических нуклеозидов вместе с их олигомеризацией и биохимическими исследованиями (Srivastava et al., J. Am. Chem. Soc. 2007, 129(26), 8362-8379).
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
3
2
3
В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, (А) α-L-метиленокси (4'-СН-O-2') БНК, (В) β-D-метиленокси (4'-СН-O-2') БНК, (С) этиленокси (4'-(СН)-O-2') БНК, (D) аминоокси (4'-CH-O-N(R)-2') БНК, (Е) оксиамино (4'-CH-N(R)-O-2') БНК, (F) метил(метиленокси) (4'-СН(СН)-O-2') БНК (также называемый стерически затрудненным этилом или cEt), (G) метилентио (4'-CH-S-2') БНК, (Н) метиленамино (4'-CH-N(R)-2') БНК, (I) метилкарбоциклическую (4'-СН-СН(СН)-2') БНК, (J) пропиленкарбоциклическую (4'-(СН)-2') БНК и (K) винил-БНК, как показано ниже.
1
6
1
6
где Вх представляет собой фрагмент основания, a R независимо представляет собой Н, защитную группу, C-C алкил или C-C алкокси.
В данном контексте термин «модифицированный тетрагидропирановый нуклеозид» или «модифицированный ТГП нуклеозид» означает нуклеозид, имеющий шестичленный тетрагидропирановый «сахар», заменивший пентофуранозильный остаток в обычных нуклеозидах, и он может быть упомянут как заменитель сахара. ТГП-модифицированные нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, те, которые в данной области техники называют гекситоловой нуклеиновой кислотой (ГНК), анитоловой нуклеиновой кислотой (АНК), манитоловой нуклеиновой кислотой (МНК) (см. Leumann, Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 841-854) или фтор-ГНК (F-ГНК), имеющие тетрагидропирановую кольцевую систему, как показано ниже.
В некоторых вариантах реализации выбраны заменители сахара, имеющие формулу:
где:
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;
3
4
3
4
3
4
T и T, каждый независимо, представляют соой межнуклеозидную линкерную группу, связывающую аналог тетрагидропиранового нуклеозида с олигомерным соединением, или один из Т и Т представляет собой межнуклеозидную линкерную группу, связывающую аналог тетрагидропиранового нуклеозида с олигомерным соединением или олигонуклеотидом, а другой из Т и Т представляет собой Н, гидроксил-защитную группу, связанную группу конъюгата или 5' или 3'-концевую группу;
1
2
3
4
5
6
7
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
q, q, q, q, q, q и q, каждый независимо, представляют собой Н, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил или замещенный C-C алкинил; и
1
2
1
2
1
3
1
1
2
3
1
2
1
1
2
3
1
6
один из R и R представляет собой водород, а другой выбран из галогена, замещенного или незамещенного алкокси, NJJ, SJ, N, OC(=X)J, OC(=X)NJJ, NJC(=X)NJJ и CN, где X представляет собой О, S или NJ, и каждый J, J и J независимо представляет собой Н или C-С алкил.
1
2
3
4
5
6
7
1
2
3
4
5
6
7
1
2
3
4
5
6
7
1
2
1
2
1
2
1
2
В некоторых вариантах реализации каждый q, q, q, q, q, q и q представляет собой H. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере один из q, q, q, q, q, q и q отличен от H. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере один из q, q, q, q, q, q и q представляет собой метил. В некоторых вариантах реализации предложены ТГП нуклеозиды, в которых один из R и R представляет собой F. В некоторых вариантах реализации R представляет собой фтор, a R представляет собой Н; R представляет собой метокси, a R представляет собой Н, и R представляет собой метоксиэтокси, a R представляет собой Н.
В некоторых вариантах реализации заменители сахара содержат кольца, имеющие более 5 атомов и более одного гетероатома. Например, описаны нуклеозиды, содержащие морфолиносахарные фрагменты, и их применение в олигомерных соединениях (см., например: Braasch et al., Biochemistry, 2002, 41, 4503-4510; и патенты США 5698685; 5166315; 5185444; и 5034506). В данном контексте термин «морфолино» означает заменитель сахара, имеющий следующую формулу:
.
В некоторых вариантах реализации морфолино могут быть модифицированными, например, добавлением или изменением различных групп заместителей относительно представленной выше структуры морфолино. Такие заменители сахара в данном контексте называют «модифицированными морфолино».
2
Предложены также комбинации модификаций, без ограничения, такие как 2'-F-5'-метил-замещенные нуклеозиды (см. международную заявку РСТ WO 2008/101157, опубликованную 8/21/08, где описаны другие 5', 2'-бис-замещенные нуклеозиды) и замену рибозильного кольцевого атома кислорода на S с дополнительным замещением в 2'-положении (см. опубликованную заявку на патент США US2005-0130923, опубликованную 16 июня 2005 года) или в альтернативном варианте с 5'-замещением бициклической нуклеиновой кислоты (см. международную заявку РСТ WO 2007/134181, опубликованную 11/22/07, где 4'-СН-O-2' бициклический нуклеозид дополнительно замещен в 5' положении 5'-метильной или 5'-винильной группой). Описан также синтез и получение карбоциклических бициклических нуклеозидов вместе с их олигомеризацией и биохимическими исследованиями (см., например, Srivastava et al., J. Am. Chem. Soc. 2007,129(26), 8362-8379).
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения содержат один или более модифицированных циклогексенильных нуклеозидов, которые представляют собой нуклеозиды, имеющие шестичленный циклогексенил вместо пентофуранозильного остатка в природных нуклеозидах. Модифицированные циклогексенильные нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, нуклеозиды, описанные в данной области техники (см., например, параллельную опубликованную заявку РСТ WO 2010/036696, опубликованную 10 апреля, 2010, Robeyns et al., J. Am. Chem. Soc, 2008,130(6), 1979-1984;  et al., Tetrahedron Letters, 2007, 48, 3621-3623; Nauwelaerts et al., J. Am. Chem. Soc, 2007,129(30), 9340-9348; Gu et al.,, Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids, 2005, 24(5-7), 993-998; Nauwelaerts et al., Nucleic Acids Research, 2005, 33(8), 2452-2463; Robeyns et al., Acta Crystallographica, Section F: Structural Biology and Crystallization Communications, 2005, F61(6), 585-586; Gu et al., Tetrahedron, 2004, 60(9), 2111-2123; Gu et al., Oligonucleotides, 2003, 13(6), 479-489; Wang et al., J. Org. Chem., 2003, 68, 4499-4505; Verbeure et al., Nucleic Acids Research, 2001, 29(24), 4941-4947; Wang et al., J. Org. Chem., 2001, 66, 8478-82; Wang et al., Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids, 2001, 20(4-7), 785-788; Wang et al., J. Am. Chem., 2000, 122, 8595-8602; опубликованную заявку PCT WO 06/047842; и опубликованную заявку РСТ WO 01/049687; полное содержание каждой из которых включено в настоящий документ посредством ссылки). Некоторые модифицированные циклогексенильные нуклеозиды имеют формулу X.
где независимо для каждого указанного по меньшей мере одного циклогексенильного нуклеозидного аналога формулы X:
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;
3
4
3
4
3
4
T и T, каждый независимо, представляют собой межнуклеозидную линкерную группу, которая связывает циклогексенильный нуклеозидный аналог с антисмысловым соединением, или один из T и T представляет собой межнуклеозидную линкерную группу, которая связывает тетрагидропирановый нуклеозидный аналог с антисмысловым соединением, а другой из T и T представляет собой Н, гидроксил-защитную группу, связанную группу конъюгата или 5'-или 3'-концевую группу; и
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1
6
1
6
2
6
2
6
2
6
2
6
q, q, q, q, q, q, q, q и q, каждый независимо, представляют собой Н, C-C алкил, замещенный C-C алкил, C-C алкенил, замещенный C-C алкенил, C-C алкинил, замещенный C-C алкинил или другие группы-заместители сахара.
В данной области техники известны также многие другие моноциклические, бициклические и трициклические кольцевые системы, и они подходят в качестве заменителей сахара, которые могут быть использованы для модификации нуклеозидов для внедрения в олигомерные соединения, предложенные в настоящем документе (см., например, обзорную статью: Leumann, Christian J. Bioorg. & Med. Chem., 2002, 10, 841-854). Такие кольцевые системы могут быть подвергнуты различным дополнительным замещениям для дополнительного повышения их активности.
2
n
m
3
2
n
2
2
n
3
2
n
2
n
2
2
3
2
n
2
n
3
2
1
12
3
3
3
3
2
3
2
2
3
2
В данном контексте «2'-модифицированный сахар» означает фуранозильный сахар, модифицированный в 2' положении. В некоторых вариантах реализации такие модификации включают заместители, выбранные из: галогенидов, включая, но не ограничиваясь ими, замещенный и незамещенный алкокси, замещенный и незамещенный тиоалкил, замещенный и незамещенный аминоалкил, замещенный и незамещенный алкил, замещенный и незамещенный аллил и замещенный и незамещенный алкинил. В некоторых вариантах реализации 2' модификации выбраны из заместителей, включающих, но не ограничиваясь ими: O[(CH)O]CH, O(CH)NH, O(CH)CH, O(CH)F, O(CH)ONH, OCHC(=O)N(H)CH и O(CH)ON[(CH)CH], где n и m равны от 1 до примерно 10. Другие 2' группы заместителей также могут быть выбраны из: C-C алкила, замещенного алкила, алкенила, алкинила, алкарила, аралкила, О-алкарила или О-аралкила, SH, SCH, OCN, Cl, Br, CN, F, CF, OCF, SOCH, SOCH, ONO, NO, N, NH, гетероциклоалкила, гетероциклоалкарила, аминоалкиламино, полиалкиламино, замещенного силила, РНК расщепляющей группы, репортерной группы, интеркалятора, группы для улучшения фармакокинетических свойств или группы для улучшения фармакодинамических свойств антисмыслового соединения, и других заместителей с подобными свойствами. В некоторых вариантах реализации модифицированные нуклеозиды содержат 2'-МОЕ боковую цепь (Baker et al., J. Biol. Chem., 1997, 272, 11944-12000). Такие 2'-MOE замещения описаны как улучшающие аффинность связывания по сравнению с немодифицированными нуклеозидами и с другими модифицированными нуклеозидами, такими как 2'-O-метил, О-пропил и О-аминопропил. Было показано, что олигонуклеотиды, имеющие 2'-МОЕ заместитель, являются антисмысловыми ингибиторами экспрессии генов с перспективными возможностями для применения in vivo (Martin, Helv. Chim. Acta, 1995, 78, 486-504; Altmann et al., Chimia, 1996, 50, 168-176; Altmann et al., Biochem. Soc. Trans., 1996, 24, 630-637; и Altmann et al., Nucleosides Nucleotides, 1997, 16, 917-926).
1
10
3
2
2
3
2
2
3
2
2
m
n
2
m
n
m
n
1
10
В данном контексте «2'-модифицированный» или «2'-замещенный» относится к нуклеозиду, содержащему сахар, содержащий заместитель в 2' положении, отличный от Н или ОН. 2'-модифицированные нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, бициклические нуклеозиды, в которых мостик, соединяющий два атом углерода сахарного кольца, соединяет 2' атом углерода и другой атом углерода сахарного кольца; и нуклеозиды с немостиковыми 2' заместителями, такими как аллил, амино, азидо, тио, О-аллил, O-C-С алкил, -OCF, O-(CH)-O-CH, 2'-O(CH)SCH, O-(CH)-O-N(R)(R), or O-CH-C(=O)-N(R)(R), где каждый R и R независимо представляет собой Н или замещенный или незамещенный C-С алкил. 2'-модифицированные нуклеозиды могут также содержать другие модификации, например, в других положениях сахара и/или азотистого основания.
В данном контексте «2'-F» относится к нуклеозиду, содержащему сахар, содержащий группу фтора в 2' положении сахарного кольца.
3
3
В данном контексте «2'-ОМе» или «2'-ОСН», «2'-O-метил» или «2'-метокси» относятся к нуклеозиду, содержащему сахар, содержащий группу -ОСН в 2' положении сахарного кольца.
2
2
3
2
2
3
В данном контексте «МОЕ» или «2'-МОЕ», или «2'-OCHCHOCH», или «2'-O-метоксиэтил» относится к нуклеозиду, содержащему сахар, содержащий группу -ОСНСНОСН в 2' положении сахарного кольца.
Способы получения модифицированных сахаров хорошо известны специалистам в данной области техники. Некоторые иллюстративные патенты США, которые описывают получение таких модифицированных сахаров, включают, без ограничения, патенты США: 4981957; 5118800; 5319080; 5359044; 5393878; 5446137; 5466786; 5514785;5519134;5567811; 5576427; 5591722; 5597909; 5610300; 5627053; 5639873; 5646265; 5670633; 5700920; 5792847 и 6600032, а также международную заявку PCT/US2005/019219, поданную 2 июня 2005 года и опубликованную как WO 2005/121371 22 декабря 2005 года, полное содержание каждого из которых включено в настоящий документ посредством ссылки.
В данном контексте «олигонуклеотид» относится к соединению, содержащему множество связанных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации один или более из множества нуклеозидов являются модифицированными. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит один или более рибонуклеозидов (РНК) и/или дезоксирибонуклеозидов (ДНК).
В нуклеотидах, имеющих модифицированные сахарные фрагменты, фрагменты азотистых оснований (природные, модифицированные или их комбинации) сохраняются для гибридизации с соответствующей нуклеиновой кислотой-мишенью.
3
3
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения содержат один или более нуклеозидов, имеющих модифицированные сахарные фрагменты. В некоторых вариантах реализации модифицированный сахарный фрагмент представляет собой 2'-МОЕ. В некоторых вариантах реализации 2'-МОЕ модифицированные нуклеозиды расположены в гэпмерном мотиве. В некоторых вариантах реализации модифицированный сахарный фрагмент представляет собой бициклический нуклеозид, имеющий мостиковую группу (4'-СН(СН)-O-2'). В некоторых вариантах реализации (4'-СН(СН)-O-2') модифицированные нуклеозиды расположены в крыльях гэпмерного мотива.
Модифицированные азотистые основания
Модификации или замещения азотистого основания (или основания) структурно отличаются и функционально взаимозаменимы с природными или синтетическими немодифицированными азотистыми основаниями. Природные и модифицированные азотистые основания могут участвовать в водородном связывании. Такие модификации азотистых оснований могут влиять на стабильность к действию нуклеаз, аффинность связывания или некоторые другие полезные биологические свойства антисмысловых соединений. Модифицированные азотистые основания включают синтетические и природные азотистые основания, такие как, например, 5-метилцитозин (5-me-С). Некоторые замещения азотистых оснований, включая 5-метилцитозиновые замещения, особенно подходят для повышения аффинности связывания антисмыслового соединения с нуклеиновой кислотой-мишенью. Например, было показано, что 5-метилцитозиновые замещения повышают стабильность дуплекса нуклеиновой кислоты на 0,6-1,2°C (Sanghvi, Y.S., Crooke, S.T. и Lebleu, В., ред., Antisense Research and Applications, CRC Press, Boca Raton, 1993, cc. 276-278).
Дополнительные модифицированные азотистые основания включают 5-гидроксиметилцитозин, ксантин, гипоксантин, 2-аминоаденин, 6-метил и другие алкильные производные аденина и гуанина, 2-пропил и другие алкильные производные аденина и гуанина, 2-тиоурацил, 2-тиотимин и 2-тиоцитозин, 5-галогенурацил и цитозин, 5-пропинил (-C≡C-CH3) урацил и цитозин и другие алкинильные производные пиримидиновых оснований, 6-азоурацил, цитозин и тимин, 5-урацил (псевдоурацил), 4-тиоурацил, 8-галоген, 8-амино, 8-тиол, 8-тиоалкил, 8-гидроксил и другие 8-замещенные аденины и гуанины, 5-галоген, в частности, 5-бром, 5-трифторметил и другие 5-замещенные урацилы и цитозины, 7-метилгуанин и 7-метиладенин, 2-F-аденин, 2-аминоаденин, 8-азагуанин и 8-азааденин, 7-дезазагуанин и 7-дезазааденин, и 3-дезазагуанин и 3-дезазааденин.
Фрагменты гетероциклических оснований также могут включать те, в которых пуриновое или пиримидиновое основание заменено другими гетероциклами, например, 7-дезазааденин, 7-дезазагуанозин, 2-аминопиридин и 2-пиридон. Азотистые основания, которые особенно подходят для повышения аффинности связывания антисмысловых соединений, включают 5-замещенные пиримидины, 6-азапиримидины и N-2, N-6 и O-6 замещенные пурины, включая 2-аминопропиладенин, 5-пропинилурацил и 5-пропинилцитозин.
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, направленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, содержат одно или более модифицированных азотистых оснований. В некоторых вариантах реализации укороченные или гэп-расширенные антисмысловые олигонуклеотиды, направленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, содержат одно или более модифицированных азотистых оснований. В некоторых вариантах реализации модифицированное азотистое основание представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждый цитозин представляет собой 5-метилцитозин.
Составы и способы для разработки фармацевтических композиций
Антисмысловые олигонуклеотиды могут быть смешаны с фармацевтически приемлемыми активными или инертными веществами для получения фармацевтических композиций или составов. Композиции и способы составления фармацевтических композиций зависят от множества критериев, включая, но не ограничиваясь этим, способ введения, тяжесть заболевания или дозу, подлежащую введению.
Антисмысловое соединение к нуклеиновой кислоте ANGPTL3 могут быть использованы в фармацевтических композициях путем объединения антисмыслового соединения с подходящим фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Фармацевтичски приемлемый разбавитель включает фосфатно-солевой буферный раствор (PBS). PBS представляет собой разбавитель, подходящий для применения в композициях, доставляемых парентерально. Соответственно, в одном из вариантов реализации в способах, описанных в настоящем документе, используют фармацевтическую композицию, содержащую антисмысловое соединение, направленное на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, и фармацевтически приемлемый разбавитель. В некоторых вариантах реализации фармацевтически приемлемый разбавитель представляет собой PBS. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой антисмысловой олигонуклеотид.
Фармацевтические композиции, содержащие антисмысловые соединения, включают любые фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры или соли таких сложных эфиров или любой другой олигонуклеотид, который, при введении животному, включая человека, способен обеспечить (прямо или косвенно) биологически активный метаболит или его остаток. Соответственно, например, настоящее описание относится также к фармацевтически приемлемым солям антисмысловых соединений, пролекарствам, фармацевтически приемлемым солям таких пролекарств и к другим биоэквивалентам. Подходящие фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваются ими, соли натрия и калия.
Пролекарство может включать внедрение дополнительных нуклеозидов с одного или обоих концов антисмыслового соединения, которые расщепляются в организме под действием эндогенных нуклеаз с образованием активного антисмыслового соединения.
Сопряженные антисмысловые соединения
Антисмысловые соединения могут быть ковалентно связаны с одним или более фрагментами или конъюгатами, которые усиливают активность, клеточное распределение или клеточное поглощение полученных антисмысловых олигонуклеотидов. Типичные группы конъюгата включают фрагменты холестерина и липидные фрагменты. Дополнительные группы конъюгата включают углеводы, фосфолипиды, биотин, феназин, соль фолиевой кислоты, фенантридин, антрахинон, акридин, флуоресцеины, родамины, кумарины, и красители.
Антисмысловые соединения могут также быть модифицированными, чтобы иметь одну или более стабилизирующих групп, которые обычно присоединяются к одному или обоим концам антисмысловых соединений для улучшения свойств, таких как, например, устойчивость к нуклеазам. Стабилизирующие группы включают кэпирующие структуры. Такие концевые модификации защищают антисмысловое соединение с концевой нуклеиновой кислотой от разрушения под действием экзонуклеаз и могут способствовать доставке и/или локализации внутри клетки. Кэп может быть расположен на 5'-конце (5'-кэп) или на 3'-конце (3'-кэп), или может находиться на обоих концах. Кэпирующие структуры хорошо известны в данной области техники и включают, например, инвертированные дезокси кэпы с удаленными азотистыми основаниями. Дополнительные 3' и 5'-стабилизирующие группы, которые могут быть использованы для кэпирования одного или обоих концов антисмыслового соединения для придания устойчивости к нуклеазам, включают группы, описанные в WO 03/004602 опубликованном 16 января 2003 года.
В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные формулой:
где
А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент
С представляет собой линкер конъюгата
D представляет собой группу ветвления
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:
.
В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:
В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:
В настоящем описании предложены следующие неограничивающие нумерованные варианты реализации:
где:
2
T представляет собой нуклеозид, нуклеотид, мономерную субъединицу или олигомерное соединение.
В вариантах реализации, имеющих более одной конкретной переменной (например, более одного «m» или «n»), если не указано иное, каждая такая конкретная переменная выбрана независимо. Следовательно, для структуры, имеющей более одного n, каждый n выбран независимо, так что они могут быть или не быть одинаковыми между собой.
i. Некоторые расщепляемые фрагменты
В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой расщепляемую связь. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент содержит расщепляемую связь. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит расщепляемый фрагмент. В некоторых таких вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к антисмысловому олигонуклеотиду. В некоторых таких вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен непосредственно к фрагменту, направляющему на клетку. В некоторых таких вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к линкеру конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент содержит фосфат или фосфодиэфир. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой расщепляемый нуклеозид или нуклеозидный аналог. В некоторых вариантах реализации нуклеозид или нуклеозидный аналог содержит необязательно защищенное гетероциклическое основание, выбранное из пурина, замещенного пурина, пиримидина или замещенного пиримидина. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой нуклеозид, содержащий необязательно защищенное гетероциклическое основание, выбранное из урацила, тимина, цитозина, 4-N-бензоилцитозина, 5-метилцитозина, 4-N-бензоил-5-метилцитозина, аденина, 6-N-бензоиладенина, гуанина и 2-N-изобутирилгуанина. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой 2'-дезоксинуклеозид, который присоединен к 3'-положению антисмыслового олигонуклеотида фосфодиэфирной связью и присоединен к линкеру фосфодиэфирной или тиофосфатной связью. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой 2'-дезоксиаденозин, который присоединен к 3'-положению антисмыслового олигонуклеотида фосфодиэфирной связью и присоединен к линкеру фосфодиэфирной или тиофосфатной связью. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой 2'-дезоксиаденозин, который присоединен к 3'-положению антисмыслового олигонуклеотида фосфодиэфирной связью и присоединен к линкеру фосфодиэфирной связью.
В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к 3'-положению антисмыслового олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к 5'-положению антисмыслового олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к 2'-положению антисмыслового олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к антисмысловому олигонуклеотиду фосфодиэфирной связью. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к указанному линкеру либо фосфодиэфирной, либо тиофосфатной связью. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к указанному линкеру фосфодиэфирной связью. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата не содержит расщепляемый фрагмент.
В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент расщепляется после введения указанного комплекса в организм животного только после его поглощения целевой клеткой. Внутри клетки расщепляемый фрагмент расщепляется, высвобождая таким образом активный антисмысловой олигонуклеотид. Не ограничиваясь теорией, предполагают, что расщепляемый фрагмент расщепляется под действием одной или более нуклеаз внутри клетки. В некоторых вариантах реализации одна или более нуклеаз расщепляют фосфодиэфирную связь между расщепляемым фрагментом и линкером. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент имеет структуру, выбранную из следующих:
и
1
2
3
где каждый из Вх, Bx, Вх и Вх независимо представляет собой фрагмент гетероциклического основания. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент имеет структуру, выбранную из следующих:
i. Некоторые линкеры
В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат линкер. В некоторых таких вариантах реализации линкер ковалентно связан с расщепляемым фрагментом. В некоторых таких вариантах реализации линкер ковалентно связан с антисмысловым олигонуклеотидом. В некоторых вариантах реализации линкер ковалентно связан с фрагментом, направляющим на клетку. В некоторых вариантах реализации линкер дополнительно содержит ковалентное присоединение к твердой подложке. В некоторых вариантах реализации линкер дополнительно содержит ковалентное присоединение к белковому связывающему фрагменту. В некоторых вариантах реализации линкер дополнительно содержит ковалентное присоединение к твердой подложке и дополнительно содержит ковалентное присоединение к белковому связывающему фрагменту. В некоторых вариантах реализации линкер содержит несколько положений для присоединения связанных лигандов. В некоторых вариантах реализации линкер содержит несколько положений для присоединения связанных лигандов и не присоединен к группе ветвления. В некоторых вариантах реализации линкер дополнительно содержит одну или более расщепляемых связей. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата не содержит линкер.
В некоторых вариантах реализации линкер содержит по меньшей мере одну линейную группу, содержащую группы, выбранные из алкильных, амидных, дисульфидных, полиэтиленгликолевых, тиоэфирных (-S-) и гидроксиламино (-O-N(H)-) групп. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит группы, выбранные из алкильных, амидных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит группы, выбранные из алкильных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит по меньшей мере одну фосфорную линкерную группу. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит по меньшей мере одну фосфодиэфирную группу. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит по меньшей мере одну нейтральную линкерную группу. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к фрагменту, направляющему на клетку, и к расщепляемому фрагменту. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к фрагменту, направляющему на клетку, и к антисмысловому олигонуклеотиду. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к фрагменту, направляющему на клетку, к расщепляемому фрагменту и к твердой подложке. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к фрагменту, направляющему на клетку, к расщепляемому фрагменту, к твердой подложке и к белковому связывающему фрагменту. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит одну или более расщепляемых связей.
В некоторых вариантах реализации линкер содержит линейную группу, ковалентно присоединенную к группе скелета. В некоторых вариантах реализации скелет содержит разветвленную алифатическую группу, которая содержит группы, выбранные из алкильных, амидных, дисульфидных, полиэтиленгликолевых, простых эфирных, тиоэфирных и гидроксиламино-групп. В некоторых вариантах реализации скелет содержит разветвленную алифатическую группу, которая содержит группы, выбранные из алкильных, амидных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации скелет содержит по меньшей мере одну моно- или полициклическую кольцевую систему. В некоторых вариантах реализации скелет содержит по меньшей мере две моно- или полициклические кольцевые системы. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к группе скелета, а группа скелета ковалентно присоединена к расщепляемому фрагменту и линкеру. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к группе скелета, а группа скелета ковалентно присоединена к расщепляемому фрагменту, линкеру и твердой подложке. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к группе скелета, а группа скелета ковалентно присоединена к расщепляемому фрагменту, линкеру и белковому связывающему фрагменту. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к группе скелета, а группа скелета ковалентно присоединена к расщепляемому фрагменту, линкеру, белковому связывающему фрагменту и твердой подложке. В некоторых вариантах реализации группа скелета содержит одну или более расщепляемых связей.
В некоторых вариантах реализации линкер содержит белок-связывающий фрагмент. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент представляет собой липид, такой как, например, включая, но не ограничиваясь ими, холестерин, холевая кислота, адамантан-уксусная кислота, 1-пирен-масляная кислота, дигидротестостерон, 1,3-бис-O(гексадецил)глицерин, геранилоксигексиловая группа, гексадецилглицерин, борнеол, ментол, 1,3-пропандиол, гептадециловая группа, пальмитиновая кислота, миристиновая кислота, O3-(олеоил)литохолевая кислота, O3-(олеоил)холеновая кислота, диметокситритил или феноксазин, витамин (например, фолат, витамин А, витамин Е, биотин, пиридоксаль), пептид, углевод (например, моносахарид, дисахарид, трисахарид, тетрасахарид, олигосахарид, полисахарид), эндосомолитический компонент, стероид (например, уваол, гецигенин, диосгенин), терпен (например, тритерпен, например, сарсасапогенин, фриделин, литохолевая кислота, дериватизованная эпифриделанолом) или катионный липид. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент представляет собой насыщенную или ненасыщенную жирную кислоту с длиной цепи от С16 до С22, холестерин, холевую кислоту, витамин Е, адамантан или 1-пентафторпропил.
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
где каждый n независимо равен от 1 до 20; и p равен от 1 до 6.
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
где каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
где n равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
и
где каждый L независимо представляет собой фосфорную линкерную группу или нейтральную линкерную группу; и
каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
; и
.
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
и
.
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
где n равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
и .
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
и .
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
и .
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру:
В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру:
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
и .
В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:
и ;
где каждый n независимо равен 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7.
ii. Некоторые фрагменты, направляющие на клетку
В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат фрагменты, направляющие на клетку. Некоторые такие фрагменты, направляющие на клетку, увеличивают клеточный захват антисмысловых соединений. В некоторых вариантах реализации фрагменты, направляющие на клетку, содержат группу ветвления, одну или более связок и один или более лигандов. В некоторых вариантах реализации фрагменты, направляющие на клетку, содержат группу ветвления, одну или более связок, один или более лигандов и одну или более расщепляемых связей.
1. Некоторые группы ветвления
В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат направляющий фрагмент, содержащий группу ветвления и по меньшей мере два связанных лиганда. В некоторых вариантах реализации группа ветвления присоединяет линкер конъюгата. В некоторых вариантах реализации группа ветвления присоединяет расщепляемый фрагмент. В некоторых вариантах реализации группа ветвления присоединяет антисмысловой олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации группа ветвления ковалентно присоединена к линкеру и каждому из связанных лигандов. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит разветвленную алифатическую группу, которая содержит группы, выбранные из алкильных, амидных, дисульфидных, полиэтиленгликолевых, простых эфирных, тиоэфирных и гидроксиламино-групп. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит группы, выбранные из алкильных, амидных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит группы, выбранные из алкильных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит моно- или полициклическую кольцевую систему. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит одну или более расщепляемых связей. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата не содержит группу ветвления.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:
где каждый n независимо равен от 1 до 20;
j равен от 1 до 3; и
m равен от 2 до 6.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:
где каждый n независимо равен от 1 до 20; и
m равен от 2 до 6.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:
и
1
где каждый A независимо представляет собой О, S, С=O или NH; и
каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:
и
1
где каждый A независимо представляет собой О, S, С=O или NH; и
каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:
и
1
где A представляет собой О, S, С=O или NH; и
каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:
В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:
2. Некоторые связки
В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат одну или более связок, ковалентно присоединенных к группе ветвления. В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат одну или более связок, ковалентно присоединенных к линкерной группе. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкильных, простых эфирных, тиоэфирных, дисульфидных, амидных и полиэтиленгликолевых групп в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкильных, замещенных алкильных, простых эфирных, тиоэфирных, дисульфидных, амидных, фосфодиэфирных и полиэтиленгликолевых групп в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкильных, простых эфирных и амидных групп в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкильных, замещенных алкильных, фосфодиэфирных, простых эфирных и амидных групп в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкила и фосфодиэфира в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка содержит по меньшей мере одну фосфорную линкерную группу или нейтральную линкерную группу.
В некоторых вариантах реализации связка содержит одну или более расщепляемых связей. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к группе ветвления либо через амидную, либо через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к группе ветвления через фосфордиэфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к группе ветвления через фосфорную линкерную группу или через нейтральную линкерную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к группе ветвления через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к лиганду либо через амидную, либо через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к лиганду через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к лиганду либо через амидную, либо через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к лиганду через простую эфирную группу.
В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет длину от примерно 8 до примерно 20 атомов в цепи между лигандом и группой ветвления. В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет длину от примерно 10 до примерно 18 атомов в цепи между лигандом и группой ветвления. В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет длину примерно 13 атомов в цепи.
В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:
и
где каждый n независимо равен от 1 до 20; и
каждый p равен от 1 до примерно 6.
В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:
и .
В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:
где каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:
и
где L представляет собой либо фосфорную линкерную группу, либо нейтральную линкерную группу;
1
2
Z представляет собой C(=O)O-R;
2
1
6
1
6
Z представляет собой Н, C-C алкил или замещенный C-C алкил;
2
1
6
1
6
R представляет собой Н, C-C алкил или замещенный C-C алкил; и
1
1
каждый m независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m больше 0 для каждой связки.
В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:
.
В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:
и
2
3
где Z представляет собой Н или СН; и
1
1
каждый m независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m больше 0 для каждой связки.
В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:
или; где каждый n независимо равен 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7.
В некоторых вариантах реализации связка содержит фосфорную линкерную группу. В некоторых вариантах реализации связка не содержит ни одной амидной связи. В некоторых вариантах реализации связка содержит фосфорную линкерную группу и не содержит ни одной амидной связи.
3. Некоторые лиганды
В некоторых вариантах реализации настоящего описания представлены лиганды, при этом каждый лиганд ковалентно присоединен к связке. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд выбран так, чтобы он обладал аффинностью по меньшей мере к одному типу рецептора на клетке-мишени. В некоторых вариантах реализации лиганды выбраны так, чтобы они обладали аффинностью по меньшей мере к одному типу рецептора на поверхности клетки печени млекопитающего. В некоторых вариантах реализации лиганды выбраны так, чтобы они обладали аффинностью к печеночному асиалогликопротеиновому рецептору (ASGP-R). В некоторых вариантах реализации каждый лиганд представляет собой углевод. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд независимо выбран из галактозы, N-ацетилгалактозамина, маннозы, глюкозы, глюкозамина и фукозы. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд представляет собой N-ацетилгалактозамин (GalNAc). В некоторых вариантах реализации направляющий фрагмент содержит 2-6 лигандов. В некоторых вариантах реализации направляющий фрагмент содержит 3 лиганда. В некоторых вариантах реализации направляющий фрагмент содержит 3 N-ацетилгалактозаминовых лиганда.
В некоторых вариантах реализации лиганд представляет собой углевод, углеводное производное, модифицированный углевод, поливалентный углеводный кластер, полисахарид, модифицированный полисахарид или полисахаридное производное. В некоторых вариантах реализации лиганд представляет собой аминосахар или тиосахар. Например, аминосахара могут быть выбраны из любого количества соединений, известных в данной области техники, например, глюкозамина, сиаловой кислоты, α-D-галактозамина, N-ацетилгалактозамина, 2-ацетамидо-2-дезокси-D-галактопиранозы (GalNAc), 2-амино-3-O-[(R)-1-карбоксиэтил]-2-дезокси-β-D-глюкопиранозы (β-мурамовой кислоты), 2-дезокси-2-метиламино-L-глюкопиранозы, 4,6-дидезокси-4-формамидо-2,3-ди-O-метил-D-маннопиранозы, 2-дезокси-2-сульфоамино-D-глюкопиранозы и N-сульфо-D-глюкозамина, и N-гликолоил-α-нейраминовой кислоты. Например, тиосахара могут быть выбраны из группы, состоящей из 5-тио-β-D-глюкопиранозы, метил-2,3,4-три-O-ацетил-1-тио-6-O-тритил-α-D-глюкопиранозида, 4-тио-β-D-галактопиранозы и этил-3,4,6,7-тетра-O-ацетил-2-дезокси-1,5-дитио-α-O-gluco-гептопиранозида.
В некоторых вариантах реализации «GalNac» или «Gal-NAc» относится к 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозе, обычно упоминаемой в литературе как N-ацетилгалактозамин. В некоторых вариантах реализации «N-ацетилгалактозамин» относится к 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозе. В некоторых вариантах реализации «GalNac» или «Gal-NAc» относится к 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозе. В некоторых вариантах реализации «GalNac» или «Gal-NAc» относится к 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозе, которая включает и β-форму: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-β-D-галактопиранозу, и α-форму: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозу. В некоторых вариантах реализации обе формы, β-форма: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-β-D-галактопираноза, и α-форма: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопираноза, могут быть использованы взаимозаменяемо. Соответственно, в структурах, в которых изображена одна форма, подразумевается, что эти структуры включают также и другую форму. Например, если показана структура для α-формы: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозы, то подразумевается, что эта структура включает также и другую форму. В некоторых предпочтительных вариантах реализации β-форма 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозы является предпочтительным вариантом реализации.
В некоторых вариантах реализации один или более лигандов имеют структуру, выбранную из:
и
1
где каждый R выбран из ОН и NHCOOH.
В некоторых вариантах реализации один или более лигандов имеют структуру, выбранную из:
В некоторых вариантах реализации один или более лигандов имеют структуру, выбранную из:
.
В некоторых вариантах реализации один или более лигандов имеют структуру, выбранную из:
.
iii. Некоторые конъюгаты
В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат структурные особенности, представленные выше. В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата содержат следующую структуру:
где каждый n независимо равен от 1 до 20.
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата содержат следующую структуру:
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:
где каждый n независимо равен от 1 до 20;
Z представляет собой Н или связанную твердую подложку;
Q представляет собой антисмысловое соединение;
X представляет собой О или S; и
Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата содержат следующую структуру:
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата содержат следующую структуру:
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:
В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:
В некоторых вариантах реализации конъюгаты не содержат пирролидин.
b. Некоторые сопряженные антисмысловые соединения
В некоторых вариантах реализации конъюгаты связаны с нуклеозидом антисмыслового олигонуклеотида в 2', 3' или 5' положении нуклеозида. В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:
где
А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент
С представляет собой линкер конъюгата
D представляет собой группу ветвления
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:
где
А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;
С представляет собой линкер конъюгата
D представляет собой группу ветвления
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.
В некоторых таких вариантах реализации группа ветвления содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.
В некоторых вариантах реализации каждая связка содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.
В некоторых вариантах реализации конъюгаты связаны с нуклеозидом антисмыслового олигонуклеотида в 2', 3' или 5' положении нуклеозида.
В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:
где
А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент
С представляет собой линкер конъюгата
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации конъюгаты связаны с нуклеозидом антисмыслового олигонуклеотида в 2', 3' или 5' положении нуклеозида. В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:
где
А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;
С представляет собой линкер конъюгата
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:
где
А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;
В представляет собой расщепляемый фрагмент
D представляет собой группу ветвления
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:
где
А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;
D представляет собой группу ветвления
каждый Е представляет собой связку;
каждый F представляет собой лиганд; и
q представляет собой целое число от 1 до 5.
В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.
В некоторых вариантах реализации каждая связка содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.
В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет структуру, выбранную из следующих:
В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет структуру, выбранную из следующих:
В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет структуру, выбранную из следующих:
В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:
Иллюстративные патенты Соединенных штатов Америки, публикации патентных заявок Соединенных штатов Америки и публикации международных патентных заявок, в которых описано получение некоторых из указанных выше конъюгатов, сопряженных антисмысловых соединений, связок, линкеров, групп ветвления, лигандов, расщепляемых фрагментов, а также других модификаций, включают, без ограничения, US 5994517, US 6300319, US 6660720, US 6906182, US 7262177, US 7491805, US 8106022, US 7723509, US 2006/0148740, US 2011/0123520, WO 2013/033230 и WO 2012/037254, каждая из которых включена в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.
Иллюстративные публикации, в которых описано получение некоторых из указанных выше конъюгатов, сопряженных антисмысловых соединений, связок, линкеров, групп ветвления, лигандов, расщепляемых фрагментов, а также других модификаций, включают, без ограничения, BIESSEN et al., "The Cholesterol Derivative of a Triantennary Galactoside with High Affinity for the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor: a Potent Cholesterol Lowering Agent" J. Med. Chem. (1995) 38:1846-1852, BIESSEN et al., "Synthesis of Cluster Galactosides with High Affinity for the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor" J. Med. Chem. (1995) 38: 1538-1546, LEE et al., "New and more efficient multivalent glyco-ligands for asialoglycoprotein receptor of mammalian hepatocytes" Bioorganic & Medicinal Chemistry (2011) 19: 2494-2500, RENSEN et al., "Determination of the Upper Size Limit for Uptake and Processing of Ligands by the Asialoglycoprotein Receptor on Hepatocytes in vitro and in vivo" J. Biol. Chem. (2001) 276(40): 37577-37584, RENSEN et al., "Design and Synthesis of Novel N-Acetylgalactosamine-Terminated Glycolipids for Targeting of Lipoproteins to the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor" J. Med. Chem. (2004) 47: 5798-5808, SLIEDREGT et al., "Design and Synthesis of Novel Amphiphilic Dendritic Galactosides for Selective Targeting of Liposomes to the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor" J. Med. Chem. (1999) 42: 609-618, и Valentijn et al., "Solid-phase synthesis of lysine-based cluster galactosides with high affinity for the Asialoglycoprotein Receptor" Tetrahedron, 1997, 53(2), 759-770, каждый из которых включен в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.
В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения содержат олигонуклеотид на основе РНКазы Н (такой как гэпмер) или сплайс-модулирующий олигонуклеотид (такой как полностью модифицированный олигонуклеотид) и любую группу конъюгата, содержащую по меньшей мере одну, две или три группы GalNAc. В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение содержит любую группу конъюгата, описанную в любой из следующих ссылок: Lee, Carbohydr Res, 1978, 67, 509-514; Connolly et al., J Biol Chem, 1982, 257, 939-945; Pavia et al., Int J Pep Protein Res, 1983, 22, 539-548; Lee et al., Biochem, 1984, 23, 4255-4261; Lee et al., Glycoconjugate J, 1987, 4, 317-328; Toyokuni et al., Tetrahedron Lett, 1990, 31, 2673-2676; Biessen et al., J Med Chem, 1995, 38, 1538-1546; Valentijn et al., Tetrahedron, 1997, 53, 759-770; Kim et al., Tetrahedron Lett, 1997, 38, 3487-3490; Lee et al., Bioconjug Chem, 1997, 8, 762-765; Kato et al., Glycobiol, 2001, 11, 821-829; Rensen et al., J Biol Chem, 2001, 276, 37577-37584; Lee et al., Methods Enzymol, 2003, 362, 38-43; Westerlind et al., Glycoconj J, 2004, 21, 227-241; Lee et al., Bioorg Med Chem Lett, 2006, 16(19), 5132-5135; Maierhofer et al., Bioorg Med Chem, 2007, 15, 7661-7676; Khorev et al., Bioorg Med Chem, 2008, 16, 5216-5231; Lee et al., BioorgMed Chem, 2011, 19, 2494-2500; Kornilova et al., Analyt Biochem, 2012, 425, 43-46; Pujol et al., Angew Chemie Int Ed Engl, 2012, 51, 7445-7448; Biessen et al., J Med Chem, 1995, 38, 1846-1852; Sliedregt et al., J Med Chem, 1999, 42, 609-618; Rensen et al., J Med Chem, 2004, 47, 5798-5808; Rensen et al., Arterioscler Thromb Vase Biol, 2006, 26, 169-175; van Rossenberg et al., Gene Ther, 2004, 11, 457-464; Sato et al., J Am Chem Soc, 2004, 126, 14013-14022; Lee et al., J Org Chem, 2012, 77, 7564-7571; Biessen et al., FASEB J, 2000, 14, 1784-1792; Rajur et al., Bioconjug Chem, 1997, 8, 935-940; Duff et al., Methods Enzymol, 2000, 313, 297-321; Maier et al., Bioconjug Chem, 2003, 14, 18-29; Jayaprakash et al., Org Lett, 2010, 12, 5410-5413; Manoharan, Antisense Nucleic Acid Drug Dev, 2002, 12, 103-128; Merwin et al., Bioconjug Chem, 1994, 5, 612-620; Tomiya et al., Bioorg Med Chem, 2013, 21, 5275-5281; в международных заявках WO 1998/013381; WO 2011/038356; WO 1997/046098; WO 2008/098788; WO 2004/101619; WO 2012/037254; WO 2011/120053; WO 2011/100131; WO 2011/163121; WO 2012/177947; WO 2013/033230; WO 2013/075035; WO 2012/083185; WO 2012/083046; WO 2009/082607; WO 2009/134487; WO 2010/144740; WO 2010/148013; WO 1997/020563; WO 2010/088537; WO 2002/043771; WO 2010/129709; WO 2012/068187; WO 2009/126933; WO 2004/024757; WO 2010/054406; WO 2012/089352; WO 2012/089602; WO 2013/166121; WO 2013/165816; в патентах 4751219; 8552163; 6908903; 7262177; 5994517; 6300319; 8106022; 7491805; 7491805;7582744;8137695; 6383812; 6525031; 6660720; 7723509; 8541548; 8344125; 8313772; 8349308;8450467; 8501930; 8158601; 7262177; 6906182; 6620916; 8435491; 8404862; 7851615; в опубликованных заявках на патент США US 2011/0097264; US 2011/0097265; US 2013/0004427; US 2005/0164235; US 2006/0148740; US 2008/0281044; US 2010/0240730; US 2003/0119724; US 2006/0183886; US 2008/0206869; US 2011/0269814; US 2009/0286973; US 2011/0207799; US 2012/0136042; US 2012/0165393; US 2008/0281041; US 2009/0203135; US 2012/0035115; US 2012/0095075; US 2012/0101148; US 2012/0128760; US 2012/0157509; US 2012/0230938; US 2013/0109817; US 2013/0121954; US 2013/0178512; US 2013/0236968; US 2011/0123520; US 2003/0077829; US 2008/0108801; и US 2009/0203132; полное содержание которых включено в настоящий документ посредством ссылки.
Клеточная культура и лечение антисмысловыми соединениями
Влияние антисмысловых соединений на уровень, активность или экспрессию нуклеиновых кислот ANGPTL3 может быть испытано in vitro на различных типах клеток.
Различные типы клеток, используемые для таких анализов, имеются в продаже у коммерческих поставщиков (например, Американская коллекция типов культур (АТСС), Манассас, штат Вирджиния; Zen-Bio, Inc., Research Triangle Park, штат Северная Каролина; Clonetics Corporation, Уолкерсвиль, штат Мэриленд) и клетки культивируют согласно инструкциям производителей с применением коммерчески доступных реагентов (например, Invitrogen Life Technologies, Карлсбад, штат Калифорния). Иллюстративные типы клеток включают, но не ограничиваются ими, клетки HepG2, клетки Hep3B, клетки Huh7 (гепатоцеллюлярная карцинома), первичные гепатоциты, клетки А549, фибробласты GM04281 и клетки LLC-MK2.
Тестирование антисмысловых олигонуклеотидов in vitro
Описываемые в настоящем документе способы лечения клеток с помощью антисмысловых олигонуклеотидов могут быть изменены соответствующим образом для лечения другими антисмысловыми соединениями.
В целом, клетки могут быть обработаны антисмысловыми олигонуклеотидами при 60-80% уровне конфлюентности в культуре.
Реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает катионный липидный трансфекционный реагент LIPOFECTIN (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния). Антисмысловые олигонуклеотиды могут быть смешаны с реагентом LIPOFECTIN в OPTI-MEM 1 (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния) для достижения желаемой конечной концентрации антисмысловых олигонуклеотидов и концентрации LIPOFECTIN обычно в пределах от 2 до 12 мкг/мл при 100 нМ антисмыслового олигонуклеотида.
Другой реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает LIPOFECTAMINE 2000 (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния). Антисмысловой олигонуклеотид смешивают с LIPOFECTAMINE 2000 в среде OPTI-MEM 1 со сниженным содержанием сыворотки (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния) для достижения желаемой концентрации антисмысловых олигонуклеотидов и концентрации LIPOFECTAMINE обычно в пределах от 2 до 12 мкг/мл при 100 нМ антисмыслового олигонуклеотида.
Другой реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает Cytofectin (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния). Антисмысловой олигонуклеотид смешивают с Cytofectin в среде OPTI-MEM 1 со сниженным содержанием сыворотки (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния) для достижения желаемой концентрации антисмысловых олигонуклеотидов и концентрации Cytofectin обычно в пределах от 2 до 12 мкг/мл при 100 нМ антисмыслового олигонуклеотида.
Другой реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает Oligofectamine™ (Invitrogen Life Technologies, Карлсбад, штат Калифорния). Антисмысловой олигонуклеотид смешивают с Oligofectamine™ в среде Opti-MEM™-1 со сниженным содержанием сыворотки (Invitrogen Life Technologies, Карлсбад, штат Калифорния) для достижения желаемой концентрации олигонуклеотида и соотношения Oligofectamine™ к олигонуклеотиду примерно 0,2-0,8 мкл на 100 нМ.
Другой реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает FuGENE 6 (Roche Diagnostics Corp., Индианаполис, штат Индиана). Антисмысловое олигомерное соединение смешивают с FuGENE 6 в 1 мл среды RPMI, не содержащей сыворотки, для достижения желаемой концентрации олигонуклеотида с соотношением FuGENE 6 к олигомерному соединению 1-4 мкл FuGENE 6 на 100 нМ.
е
Другая технология, используемая для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает электропорацию (Sambrook and Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3 изд., 2001).
Клетки обрабатывают антисмысловыми олигонуклеотидами с помощью стандартных способов. Клетки обычно собирают через 16-24 часов после обработки антисмысловым олигонуклеотидом, после чего уровни РНК или белков нуклеиновых кислот-мишеней измеряют методами, известными в данной области техники и описанными в настоящем документе. Как правило, если обработку проводят в нескольких повторениях, данные представляют как среднее значение для многократных обработок.
Концентрация используемого антисмыслового олигонуклеотида варьируется в зависимости от линии клеток. Способы определения оптимальной концентрации антисмыслового олигонуклеотидна для конкретной линии клеток хорошо известны в данной области техники. Антисмысловые олигонуклеотиды обычно используют в концентрациях от 1 нМ до 300 нМ, при трансфекции с использованием реагентов LIPOFECTAMINE2000, Lipofectin или Cytofectin. Антисмысловые олигонуклеотиды используют в более высоких концентрациях в диапазоне от 625 до 20000 нМ при трансфекции с использованием электропорации.
Выделение РНК
е
Анализ РНК может быть проведен на общей клеточной РНК или поли(А)+ мРНК. Способы выделения РНК хорошо известны в данной области техники (Sambrook and Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3 изд., 2001). РНК получают с использованием способов, хорошо известных в данной области техники, например, с использованием реагента TRIZOL (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния) по рекомендуемым протоколам производителя.
Анализ ингибирования целевых уровней или экспрессии
е
Ингибирование уровней или экспрессии нуклеиновой кислоты ANGPTL3 может быть проанализировано различными способами, известными в данной области техники (Sambrook and Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3 изд., 2001). Например, уровни целевой нуклеиновой кислоты могут быть количественно измерены, например, нозерн-блоттингом, конкурентной полимеразной цепной реакцией (ПЦР) или количественной ПЦР в реальном времени. Анализ РНК может быть проведен на общей клеточной РНК или поли(А) + мРНК. Способы выделения РНК хорошо известны в данной области техники. Нозерн-блоттинг также является общепринятым в данной области техники. Количественная ПЦР в реальном времени может быть удобно выполнена с помощью имеющихся в продаже систем обнаружения последовательностей ABI PRISM 7600, 7700, или 7900 производства компании PE-Applied Biosystems, Фостер-Сити, штат Калифорния, и используемых в соответствии с инструкциями производителя.
Количественный анализ уровней целевой РНК методом ПЦР в реальном времени
Количественное определение уровней целевой РНК может быть проведено путем количественной ПЦР в реальном времени с использованием систем обнаружения последовательностей ABI PRISM 7600, 7700 или 7900 (PE-Applied Biosystems, Фостер-Сити, штат Калифорния) в соответствии с инструкциями производителя. Способы количественной ПЦР в реальном времени хорошо известны в данной области техники.
Перед проведением ПЦР в реальном времени изолированную РНК подвергают реакции обратной транскрипции (ОТ), которая производит комплементарную ДНК (кДНК), которую затем используют в качестве субстрата для амплификации в ПЦР в реальном времени. Реакции ОТ и ПЦР в реальном времени проводят последовательно в одном и том же образце. Реагенты для ОТ и ПЦР в реальном времени могут быть приобретены у компании Invitrogen (Карлсбад, штат Калифорния). Реакции ОТ и ПЦР в реальном времени проводят способами, хорошо известными специалистам в данной области техники.
Количества гена-мишени (или РНК), полученные путем ПЦР в реальном времени, нормализуют с использованием либо уровня экспрессии гена, экспрессия которого постоянна, такого как циклофилин А или GADPH, или на основе количественной оценки суммарной РНК с использованием реагента PIBOGREEN (Life Technologies™, Inc. Карлсбад, штат Калифорния). Экспрессия циклофилина А или GADPH может быть количественно определена с помощью ПЦР в реальном времени, которую проводят одновременно с мишенью, мультиплексно или отдельно. Общая РНК может быть количественно определена с помощью реагента для количественного определения РНК PIBOGREEN. Способы количественного определения РНК с использованием PIBOGREEN изложены в публикации Jones, L.J., et al, (Analytical Biochemistry, 1998, 265, 368-374). Для измерения флуоресценции RIBOGREEN может быть использован прибор CYTOFLUOR 4000 (РЕ Applied Biosystems).
Способы конструирования зондов и праймеров для ПЦР в реальном времени хорошо известны в данной области техники, и могут включать использование программного обеспечения, такого как PRIMER EXPRESS (Applied Biosystems, Фостер-Сити, штат Калифорния). Зонды и праймеры, используемые в ПЦР в реальном времени, конструировали для гибридизации с определенными последовательностями ANGPTL3, и они описаны ниже в разделе «Примеры». Специфичные к мишени зонды ПЦР могут иметь FAM, ковалентно связанный с 5' концом, и TAMRA или MGB, ковалентно связанный с 3' концом, где FAM представляет собой флуоресцентный краситель, a TAMRA или MGB представляют собой гасители флуоресценции.
Анализ уровней белка
е
Антисмысловое ингибирование нуклеиновых кислот ANGPTL3 может быть оценено путем измерения уровней белка ANGPTL3. Уровни белка ANGPTL3 могут быть оценены или количественно измерены различными способами, хорошо известными в данной области техники, такими как иммунопреципитация, вестерн-блоттинг (иммуноблоттинг), иммуноферментный анализ (ELISA), количественный анализ белка, анализ активности белка (например, анализ активности каспазы), иммуногистохимия, иммуноцитохимия или сортировка флуоресцентно-активированных клеток (FACS) (Sambrook and Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3 изд., 2001). Антитела, направленные на мишень, могут быть идентифицированы и получены из различных источников, таких как каталог антител MSRS (Aerie Corporation, Бирмингем, штат Мичиган), или могут быть получены с помощью обычных способов генерации моноклональных или поликлональных антител, хорошо известных в данной области техники.
Тестирование антисмысловых соединений in vivo
Антисмысловые соединения, например, антисмысловые олигонуклеотиды, испытывали на животных с целью оценки их способности ингибировать экспрессию ANGPTL3 и производить фенотипические изменения. Тестирование быть проведено на здоровых животных или в экспериментальных моделях заболеваний. Для введения животным антисмысловые олигонуклеотиды составляли с фармацевтически приемлемым разбавителем, таким как фосфатно-солевой буфер. Введение включает парентеральные пути введения. После периода лечения с помощью антисмысловых олигонуклеотидов, РНК выделяют из ткани и измеряют изменения экспрессии нуклеиновой кислоты ANGPTL3. Измеряют также изменения уровней белка ANGPTL3.
Некоторые показания
В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложены способы лечения индивидуума, включающие введение одной или более фармацевтических композиций, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации индивидуум страдает метаболическим заболеванием и/или сердечно-сосудистым заболеванием. В некоторых вариантах реализации индивидуум страдает комбинированной гиперлипидемией (например, наследственной или ненаследственной), гиперхолестеринемией (например, наследственной гомозиготной гиперхолестеринемией (HoFH), наследственной гетерозиготной гиперхолестеринемией (HeFH)), дислипидемией, липодистрофией, гипертриглицеридемией (например, гетерозиготным дефицитом LPL, гомозиготным дефицитом LPL), болезнью коронарной артерии (CAD), семейным синдромом хиломикронемии (FCS), гиперлипопротеинемией типа IV), метаболическим синдромом, неалкагольной жировой дистрофией печени (NAFLD), неалкагольным стеатогепатитом (NASH), диабетом (например, диабетом 2 типа, диабетом 2 типа с дислипидемией), резистентностью к инсулину (например, резистентностью к инсулину с дислипидемией), утолщением сосудистых стенок, высоким кровяным давлением (например, легочной артериальной гипертензией), склерозом (например, атеросклерозом, системным склерозом, прогрессирующим склерозом кожи и пролиферативной облитерирующей васкулопатией, такой как цифровая язва и вовлечение в опухоль легочных сосудов), или их комбинацией.
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, направленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, описанные в настоящем документе, модулируют метаболизм липидов и/или энергетический обмен у животного. В некоторых вариантах реализации соединения, направленные на ANGPTL3, описанные в настоящем документе, модулируют физиологические маркеры или фенотипы гиперхолестеринемии, дислипидемии, липодистрофии, гипертриглицеридемии, метаболического синдрома NAFLD, NASH и/или диабета. Например, введение соединений животным может модулировать один или более уровней VLDL, неэстерифицированных жирных кислот (NEFA), LDL, холестерина, триглицеридов, глюкозы, инсулина или ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации модулирование физиологических маркеров или фенотипов может быть связано с ингибированием ANGPTL3 указанными соединениями.
В некоторых вариантах реализации соединения, направленные на ANGPTL3, описанные в настоящем документе, снижают и/или предупреждают одно или более из накопления TG в печени (т.е. стеатоз печени), атеросклероза, утолщения сосудистых стенок (например, утолщение комплекса интима-медиа артериальной стенки), комбинированной гиперлипидемии (например, наследственной или ненаследственной), гиперхолестеринемии (например, наследственной гомозиготной гиперхолестеринемии (HoFH), наследственной гетерозиготной гиперхолестеринемии (HeFH)), дислипидемии, липодистрофии, гипертриглицеридемии (например, гетерозиготного дефицита LPL, гомозиготного дефицита LPL, семейного синдрома хиломикронемии (FCS), гиперлипопротеинемии типа IV), метаболического синдрома, неалкагольной жировой дистрофии печени (NAFLD), неалкагольного стеатогепатита (NASH), диабета (например, диабета 2 типа, диабета 2 типа с дислипидемией), резистентности к инсулину (например, резистентности к инсулину с дислипидемией), высокого кровяного давления и склероза, или любой их комбинации. В некоторых вариантах реализации соединения, направленные на ANGPTL3, описанные в настоящем документе, улучшают чувствительность к инсулину.
В некоторых вариантах реализации введение антисмыслового соединения, направленного на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, приводит к снижению экспрессии ANGPTL3 на по меньшей мере 15%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 25%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 35%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 99%, или на значение в диапазоне между любыми двумя из указанных значений.
В некоторых вариантах реализации фармацевтические композиции, содержащие антисмысловое соединение, направленное на ANGPTL3, используют для получения лекарственного средства для лечения пациента страдающего или предрасположенного к метаболическому заболеванию или сердечно-сосудистому заболеванию. В некоторых вариантах реализации фармацевтические композиции, содержащие антисмысловое соединение, направленное на ANGPTL3, используют для получения лекарственного средства для лечения пациента, страдающего или предрасположенного к одному или более из комбинированной гиперлипидемии (например, наследственной или ненаследственной), гиперхолестеринемии (например, наследственной гомозиготной гиперхолестеринемии (HoFH), наследственной гетерозиготной гиперхолестеринемии (HeFH)), дислипидемии, липодистрофии, гипертриглицеридемии (например, семейного синдрома хиломикронемии (FCS), гиперлипопротеинемии типа IV), метаболического синдрома, неалкагольной жировой дистрофии печени (NAFLD), неалкагольного стеатогепатита (NASH), диабета (например, диабета 2 типа, диабета 2 типа с дислипидемией), резистентности к инсулину (например, резистентности к инсулину с дислипидемией), утолщения сосудистых стенок, высокого кровяного давления и склероза, или любой их комбинации.
Введение
В некоторых вариантах реализации соединения и композиции, описанные в настоящем документе, вводят парентерально.
В некоторых вариантах реализации парентеральное введение осуществляют инфузией. Инфузия может быть постоянной или непрерывной, или кратковременной, или прерывистой. В некоторых вариантах реализации фармацевтические агенты, вводимые инфузией, доставляют с помощью насоса.
В некоторых вариантах реализации парентеральное введение осуществляют инъекцией. Инъекция может быть доставлена с помощью шприца или насоса. В некоторых вариантах реализации инъекция представляет собой болюсную инъекцию. В некоторых вариантах реализации инъекцию вводят непосредственно в ткань или орган. В некоторых вариантах реализации инъекция является подкожной.
Некоторые комбинированные терапии
В некоторых вариантах реализации первый агент, содержащий модифицированный олигонуклеотид, описанный в настоящем документе, вводят вместе с одним или более вторыми агентами. В некоторых вариантах реализации такие вторые агенты предназначены для лечения того же заболевания, расстройства или патологического состояния, что и первый агент, описанный в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации такие вторые агенты предназначены для лечения другого заболевания, расстройства или патологического состояния, чем первый агент, описанный в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации такие вторые агенты предназначены для лечения нежелательного побочного эффекта одной или более фармацевтических композиций, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации вторые агенты вводят совместно с первым агентом для лечения нежелательного эффекта первого агента. В некоторых вариантах реализации вторые агенты вводят совместно с первым агентом для получения комбинированного эффекта. В некоторых вариантах реализации вторые агенты вводят совместно с первым агентом для получения синергетического эффекта.
В некоторых вариантах реализации первый агент и один или более вторых агентов вводят одновременно. В некоторых вариантах реализации первый агент и один или более вторых агентов вводят в разное время. В некоторых вариантах реализации первый агент и один или более вторых агентов получают вместе в виде одного фармацевтического состава. В некоторых вариантах реализации первый агент и один или более вторых агентов получают по отдельности.
R
В некоторых вариантах реализации вторые агенты включают, но не ограничиваются ими, агент для понижения глюкозы или агент для понижения липидов. Агент для снижения глюкозы может включать, но не ограничивается ими, терапевтическое изменение образа жизни, агонист PPAR, ингибитор дипептидилпептидазы (IV), аналог GLP-1, инсулин или аналог инсулина, стимулятор секреции инсулина, ингибитор SGLT2, аналог человеческого амилина, бигуанид, ингибитор альфа-глюкозидазы или их комбинации. Агент для снижения глюкозы может включать, но не ограничивается ими, метформин, сульфонилмочевину, росиглитазон, меглитинид, тиазолидиндион, ингибитор альфа-глюкозидазы или их комбинации. Сульфонилмочевина может представлять собой ацетогексамид, хлорпропамид, толбутамид, толазамид, глимепирид, глипизид, глибурид или гликлазид. Мелгитинид может представлять собой натеглинид или репаглинид. Тиазолидиндион может представлять собой пиоглитазон или росиглитазон. Альфа-глюкозидаза может представлять собой акарбозу или миглитол. В некоторых вариантах реализации терапия для снижения липидов может включать, но не ограничивается ими, терапевтическое изменение образа жизни, ниацин, ингибитор редуктазы HMG-CoA, ингибитор абсорбции холестерина, ингибитор МТР (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на МТР), фибрат, ингибитор PCSK9 (например, антитела PCSK9, полипептиды, низкомолекулярные соединения нуклеиновых кислот, направленные на PCSK9), ингибитор СЕТР (например, низкомолекулярный, такой как торцетрапиб и анацетрапиб, полипептиды, антитела или соединения нуклеиновых кислот, направленные на СЕТР), ингибитор ароС-III (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или соединения нуклеиновых кислот, направленные на ароС-III), ингибитор ароВ (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или соединения нуклеиновых кислот, направленные на ароВ), лечебные масла с высоким содержанием омега-3 жирных кислот, омега-3 жирные кислоты или любые их комбинации. Ингибитор редуктазы HMG-CoA может представлять собой аторвастатин, розувастатин, флувастатин, ловастатин, правастатин, симвастатин и т.п. Ингибитор абсорбции холестерина может представлять собой эземитиб. Фибрат может представлять собой фенофибрат, безафибрат, ципрофибрат, клофибрат, гемфиброзил и т.п. Лечебное масло с высоким содержанием омега-3 жирных кислот может представлять собой масло криля, рыбий жир (например, Vascepa), льняное масло и т.п. Омега-3 жирные кислоты могут представлять собой ALA, DHA, ЕРА и т.п.
Некоторые соединения
Антисмысловые олигонуклеотиды, направленные на человеческий ANGPTL3, описаны в более ранней публикации (см. публикацию патента РСТ №WO 2011/085271, опубликованную 14 июля 2011 года, включенную в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме). Некоторые олигонуклеотиды (233676, 233690, 233710, 233717, 233721, 233722, 337459, 337460, 337474, 337477, 337478, 337479, 337481, 337484,337487,337488, 337490, 337491, 337492, 337497, 337498, 337503, 337505, 337506, 337508, 337513, 337514, 337516, 337520, 337521, 337525, 337526 и 337528), описанные в указанном документе, включая десять самых эффективных антисмысловых соединений in vitro, использовали в качестве эталонов для некоторых in vitro отборов антисмысловых соединений, описанных ниже, а также в документе US с серийным номером 61/920652. Среди наиболее эффективных соединений, описанных в WO 2011/085271, было обнаружено, что ISIS 233722 имеет весьма разнообразную способность ингибирования ANGPTL3. Соответственно, несмотря на то, что изначально в некоторые испытания in vitro было включено соединение 233722, его не выбирали в качестве эталона для дальнейших испытаний. Среди ранее идентифицированных эффективных in vitro эталонных соединений выбрали пять соединений (233710, 233717, 337477, 337478, 337479 и 337487) для проведения испытаний in vivo, как описано ниже, на трансгенных мышах huANGPTL3, для оценки наиболее эффективного соединения для снижения транскрипта мРНК человека и экспрессии белка (пример 126). Антисмысловой олигонуклеотид с наивысшей первоначальной in vivo эффективностью для снижения уровней ANGPTL3 (233710) использовали в качестве эталона для in vivo оценки новых антисмысловых соединений, описанных ниже.
В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, имеют преимущество, заключающееся в улучшении одного или более свойств по сравнению с антисмысловыми соединениями, описанными в WO 2011/085271 и в документе US с серийным номером 61/920652. Такие улучшенные свойства продемонстрированы в примерах, представленных в настоящем документе, и ниже представлено не исчерпывающее обобщение примеров для простоты упоминания.
50
50
В первом отборе, описанном в настоящем документе, примерно 3000 новых разработанных антисмысловых соединений, представляющих собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, нацеленных на человеческий ANGPTL3, испытывали в клетках Нер3В для оценки их влияния на мРНК человеческого ANGPTL3 in vitro (пример 116). Степень ингибирования мРНК новыми антисмысловыми соединениями оценивали с помощью некоторых разработанных ранее антисмысловых соединений (233717, 337484, 337487, 337492 и 337516), использованных в выборочных испытаниях в качестве эталонов. Среди примерно 3000 новых разработанных антисмысловых соединений из данного первого отбора выбрали примерно 85 антисмысловых соединений для in vitro испытаний дозозависимого ингибирования для определения их полумаксимальной ингибирующей концентрации (IC) (примеры 117-118). Из примерно 85 новых антисмысловых соединений, испытанных на их полумаксимальную ингибирующую концентрацию (IC), выбрали примерно 38 антисмысловых соединений, которые демонстрировали эффективное дозозависимое снижение ANGPTL3, для in vivo испытания эффективности и переносимости (ALT и AST) на мышах (примеры 126-127), используя антисмысловое соединение 233710 в качестве эталона.
50
50
Во втором отборе, описанном в настоящем документе, примерно 2000 новых разработанных антисмысловых соединений, направленных на человеческий ANGPTL3, с МОЕ гэпмерным мотивом или смешанным мотивом (дезокси, 5-10-5 МОЕ и сЕТ гэпмеры) также испытывали в клетках Нер3В для оценки их влияния на мРНК человеческого ANGPTL3 in vitro (примеры 119-121). Степень ингибирования новыми антисмысловыми соединениями оценивали с помощью некоторых разработанных ранее антисмысловых соединений (233717, 337487, 337513, 337514 и 337516), использованных в выборочных испытаниях в качестве эталонов. Среди примерно 2000 новых разработанных антисмысловых соединений из данного второго отбора выбрали примерно 147 антисмысловых соединений для in vitro испытаний дозозависимого ингибирования для определения их полумаксимальной ингибирующей концентрации (IC) (примеры 122-125). Из примерно 147 новых антисмысловых соединений, испытанных на их полумаксимальную ингибирующую концентрацию (IC), выбрали примерно 73 антисмысловых соединений, которые демонстрировали эффективное дозозависимое снижение ANGPTL3, для in vivo испытания эффективности и переносимости (например, ALT и AST) на мышах (примеры 126-127), используя антисмысловое соединение 233710 в качестве эталона.
Из примерно 111 антисмысловых соединений из первого и второго отборов, которые испытывали на эффективность и переносимость у мышей, выбрали 24 соединения для более тщательного исследования переносимости у мышей, оценивая метаболические маркеры в печени, такие как аланинтрансаминаза (ALT), аспартаттрансаминаза (AST), альбумин и билирубин, а также метаболические маркеры в почках, АМК и креатинин, а также массу органов (пример 127).
Параллельно с in vivo испытаниями на мышах выбрали семнадцать антисмысловых соединений для испытания вязкости (пример 128). В целом, антисмысловые соединения, не обладающие оптимальной вязкостью, не использовали для дальнейших исследований.
На основании результатов испытания переносимости у мышей выбрали двадцать антисмысловых соединений для in vivo испытания переносимости у крыс (пример 129). У крыс измеряли метаболические маркеры печени, такие как ALT, AST, альбумин и билирубин, массу тела и органов, а также метаболические маркеры почек, такие как АМК, креатинин и отношение общего белка/креатинина, для определения переносимости соединения in vivo.
Двадцать антисмысловых соединений, испытанных на крысах, также испытывали на перекресную реактивность с генной последовательностью ANGPTL3 резус-макак (пример 130). Хотя антисмысловые соединения в указанном испытании проверяли на яванских макаках, последовательность ANGPTL3 яванских макак не была доступна для сравнения с последовательностями соединений полной длины, поэтому последовательности антисмысловых соединений сравнивали с последовательности весьма родственных резус-макак. Было обнаружено, что последовательности восьми антисмысловых соединений имеют 0-2 несоответствия с генной последовательностью ANGPTL3 резуса, и их дополнительно исследовали на яванских макаках (пример 130). Восемь антисмысловых соединений (ISIS 563580, ISIS 560400, ISIS 567320, ISIS 567321, ISIS 544199, ISIS 567233, ISIS 561011 и ISIS 559277) испытывали на ингибирование экспрессии мРНК и белка ANGPTL3, а также переносимости у обезьян. В испытаниях переносимости измеряли массу тела, метаболические маркеры в печени (ALT, AST и билирубин), метаболические маркеры в почках (АМК и креатинин), гематологические параметры (количество кровяных клеток, гемоглобин и гематокрит) и провоспалительные маркеры (CRP и С3). Кроме того, измеряли концентрацию полноразмерного олигонуклеотида в печени и почках и рассчитывали соотношение полноразмерного олигонуклеотида в почках/печени.
Последовательность эффективного и переносимого антисмыслового соединения, ISIS 563580, проверенную на яванских макаках, дополнительно модифицировали конъюгатом GalNAc и/или изменениями химического состава скелета, как показано в примерах 113-115 и 131, и оценивали на предмет увеличения эффективности.
Соответственно, в настоящем документе предложены антисмысловые соединения с одной или более улучшенными характеристиками, например, улучшенными относительно антисмысловых соединений, описанных в WO 2011/085271 и в документе US с серийным номером 61/920,52. В некоторых вариантах реализации в настоящем документе предложены антисмысловые соединения, содержащие модифицированный олигонуклеотид, описанный в настоящем документе, направленный на или специфически гибридизуемый с областью нуклеотидов любой из SEQ ID NО: 1-2.
В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными благодаря их эффективности для ингибирования экспрессии ANGPTL. В некоторых вариантах реализации соединения или композиции ингибируют ANGPTL3 по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 45%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90% или по меньшей мере на 95%.
50
50
50
50
50
50
50
В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными, поскольку имеют in vitro IC менее 20 мкМ, менее 10 мкМ, менее 8 мкМ, менее 6 мкМ, менее 2 мкМ, менее 1 мкМ, менее 0,9 мкМ, менее 0,8 мкМ, менее 0,7 мкМ, менее 0,6 мкМ или менее 0,5 мкМ при испытании в клетках человека, например, в клеточной линии Hep3B (как описано в примерах 117-118 и 122-125). В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC <1,0 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 24, 34, 35, 36, 37, 42, 43, 44, 47, 50, 51, 57, 58, 60, 77, 79, 82, 87, 88, 90, 91, 93, 94, 100, 101, 104, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 169, 170, 177, 188, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC<0,9 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 35, 36, 42, 43, 44, 50, 57, 60, 77, 79, 87, 88, 90, 91, 93, 94, 101, 104, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 122, 123, 124, 125, 126,127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136,137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 177, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC <0,8 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 35, 36, 42, 43, 44, 50, 57, 60, 77, 79, 87, 88, 90, 91, 93, 94, 101, 104, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 177, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 217, 218, 219, 220,221, 222, 223, 224, 225, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC <0,7 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 36, 42, 43, 57, 60, 114, 117, 127, 131, 177, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC <0,6 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 36, 42, 43, 57, 60, 114, 117, 127, 131, 177, 209, 210, 211, 212, 213, 215, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 224, 225, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC <0,5 мкМ, включают SEQ ID NO: 43, 114, 117, 127, 131, 177, 209, 210, 211, 212, 215, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 229, 230 и 232.
В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными, поскольку имеют вязкость менее 40 сП, менее 35 сП, менее 30 сП, менее 25 сП, менее 20 сП, менее 15 сП или менее 10 сП при измерении с помощью анализа (описанного в примере 128). Олигонуклеотиды, имеющие вязкость более 40 сП, имеют неоптимальную вязкость. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие вязкость <20 сП, включают SEQ ID NO: 16, 18, 20, 34, 35, 36, 38, 49, 77, 90, 93 и 94. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие вязкость <15 сП, включают SEQ ID NO: 16, 18, 20, 34, 35, 38, 49, 90, 93 и 94. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие вязкость <10 сП, включают SEQ ID NO: 18, 34, 35, 49, 90, 93 и 94.
В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются хорошо переносимыми, что демонстрируется результатами измерений переносимости in vivo, описанных в примерах. В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются хорошо переносимыми, что демонстрируется увеличением значения ALT и/или AST не более чем в 3 раза, 2 раза или 1,5 раза по сравнению с животными, которым вводили солевой раствор.
50
В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными, поскольку имеют одно или более из ингибирующей эффективности более 50%, значения in vitro IC по меньшей мере 1 мкМ, вязкости менее 20 сП и не более чем 3-кратного увеличения ALT и/или AST.
50
В некоторых вариантах реализации ISIS 563580 (SEQ ID NO: 77) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное соединение является эффективным ингибитором у ANGPTL3 трансгенных мышей и наиболее хорошо переносимым антисмысловым соединением. Оно имеет приемлемую вязкость примерно 16,83 сП и значение IC <0,8 мкМ in vitro. У мышей оно вызывает не более чем 3-кратное увеличение уровней ALT и/или AST по сравнению с животными, обработанными солевым раствором. Кроме того, у обезьян указанное соединение было одним из наиболее хорошо переносимых и эффективных соединений для ингибирования ANGPTL3, и имело наилучшее соотношение концентрации полноразмерного олигонуклеотида.
50
В некоторых вариантах реализации ISIS 544199 (SEQ ID NO: 20) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное соединение является эффективным и переносимым антисмысловым соединением. Оно имеет приемлемую вязкость 1,7 сП и значение IC <0,5 мкМ in vitro. У мышей оно вызывает не более чем 3-кратное увеличение уровней ALT и/или AST по сравнению с животными, обработанными солевым раствором. Кроме того, у обезьян указанное соединение было одним из наиболее эффективных соединений для ингибирования ANGPTL3, и имело хорошее соотношение концентрации полноразмерного олигонуклеотида.
50
В некоторых вариантах реализации ISIS 559277 (SEQ ID NO: 110) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное соединение является эффективным и переносимым антисмысловым соединением. Оно имеет значение IC <0,8 мкМ in vitro. У мышей оно вызывает не более чем 3-кратное увеличение уровней ALT и/или AST по сравнению с животными, обработанными солевым раствором. Кроме того, у обезьян указанное соединение было одним из наиболее эффективных соединений для ингибирования ANGPTL3, и имело хорошее соотношение концентрации полноразмерного олигонуклеотида.
В некоторых вариантах реализации GalNAc-сопряженное антисмысловое соединение, ISIS 658501 (SEQ ID NO: 4912), является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное антисмысловое соединение является более эффективным, чем его исходное соединение ISIS 563580 (SEQ ID NO: 77), что продемонстрировано уровнями ингибирования.
В некоторых вариантах реализации GalNAc-сопряженное антисмысловое соединение, ISIS 703801 (SEQ ID NO: 77) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное антисмысловое соединение является в несколько раз более эффективным, чем его исходное соединение ISIS 563580 (SEQ ID NO: 77). ISIS 703801 имеет значение ID50 1, тогда как ISIS 563580 имеет значение ID50 6.
В некоторых вариантах реализации GalNAc-сопряженное антисмысловое соединение, ISIS 703802 (SEQ ID NO: 77) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное антисмысловое соединение является в несколько раз более эффективным, чем его исходное соединение ISIS 563580 (SEQ ID NO: 77). ISIS 703802 имеет значение ID50 0,3, тогда как ISIS 563580 имеет значение ID50 6.
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры иллюстрируют некоторые варианты реализации настоящего описания и не являются ограничивающими. Более того, если представлены конкретные варианты реализации, авторы изобретения подразумевают общее применение указанных конкретных вариантов реализации. Например, описание олигонуклеотида, содержащего конкретный мотив, дает обоснованное основание для дополнительных олигонуклеотидов, содержащих такой же или похожий мотив. И, например, если конкретная высокоаффинная модификация возникает в определенном положении, то в этом же положении считаются подходящими другие высокоаффинные модификации, если не указано иное.
Пример 1: Общий способ получения фосфорамидитов, Соединений 1,1а и 2
Соединения 1, 1а и 2 были получены по способам, общеизвестным в данной области техники, как описано в настоящем документе (см. Seth et al., Bioorg. Med. Chem., 2011, 21 (4), 1122-1125, J. Org. Chem., 2010, 75 (5), 1569-1581, Nucleic Acids Symposium Series, 2008, 52 (1), 553-554); и см. также опубликованные Международные заявки РСТ (WO 2011/115818, WO 2010/077578, WO 2010/036698, WO 2009/143369, WO 2009/006478 и WO 2007/090071) и патент США 7569686).
Пример 2. Получение Соединения 225
Соединение 3 (2-ацетамидо-1,3,4,6-тетра-O-ацетил-2-дезокси-β-D-галактопираноза или галактозамина пентаацетат) имеется в продаже. Соединение 5 получили по опубликованным методикам (Weber et al., J. Med. Chem., 1991, 34, 2692).
Пример 3. Получение Соединения 11
Соединения 8 и 9 имеются в продаже.
Пример 226. Получение Соединения 18
Соединение 11 получили по способам, описанным в Примере 3. Соединение 14 имеется в продаже. Соединение 17 получили по такому же способу, как описан в публикации Rensen et al., J. Med. Chem., 2004, 47, 5798-5808.
Пример 227. Получение Соединения 23
Соединения 19 и 21 имеются в продаже.
Пример 6. Получение Соединения 24
Соединения 18 и 23 получили так, как описано в способах в Примерах 4 и 5.
Пример 7. Получение Соединения 228
Соединение 24 получили по способам, представленным в Примере 6.
Пример 8. Получение Соединения 229
Соединение 24 получили по способам, представленным в Примере 6.
3
Пример 9. Общее получение сопряженных ASO, содержащих GalNAc-1 на 3'-конце, Соединения 29
3
Где защищенный GalNAc-1 имеет структуру:
3
3
3
a
3
a
Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-1 (GalNAc-1) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Где GalNAc-1 имеет формулу:
3
3
Защищенный GalNAc-1, связанный с твердой подложкой, Соединение 25, получили по способам, представленным в Примере 7. Олигомерное соединение 29, содержащее GalNAc-1 на 3'-конце, получили по стандартным способам в автоматическом синтезаторе ДНК/РНК (см. Dupouy et al., Angew. Chem. Int. ред., 2006, 45, 3623-3627). Фосфорамидитные строительные блоки, Соединения 1 и 1a, получили так, как описано в способах в Примере 1. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными и не предназначены для ограничения, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки для получения олигомерных соединений, имеющих заданную последовательность и состав. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения разорванных олигомерных соединений, описанных в настоящем документе. Такие разорванные олигомерные соединения могут иметь заданный состав и последовательность оснований, продиктованную любой данной мишенью.
3
Пример 10: Общее получение сопряженных ASO, содержащих GalNAc-1 на 5'-конце, Соединения 34
3
Unylinker™ 30 имеется в продаже. Олигомерное соединение 34, содержащее кластер GalNAc-1 на 5'-конце, получили по стандартным способам в автоматическом синтезаторе ДНК/РНК (см. Dupouy et al., Angew. Chem. Int. ред., 2006, 45, 3623-3627). Фосфорамидитные строительные блоки, Соединения 1 и 1a, получили так, как описано в способах в Примере 1. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными и не предназначены для ограничения, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки для получения олигомерных соединений, имеющих заданную последовательность и состав. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения разорванных олигомерных соединений, описанных в настоящем документе. Такие разорванные олигомерные соединения могут иметь заданный состав и последовательность оснований, продиктованную любой данной мишенью.
Пример 11: Получение Соединения 39
Соединения 4, 13 и 23 получили так, как описано в способах в Примерах 2, 4 и 5. Соединение 35 получили по такому же способу, как описан в публикации Rouchaud et al., Eur. J. Org. Chem., 2011, 12, 2346-2353.
Пример 237: Получение Соединения 40
Соединение 38 получили по способам, представленным в Примере 11.
Пример 13: Получение Соединения 44
Соединения 23 и 36 получили так, как описано в способах в Примерах 5 и 11. Соединение 41 получили по такому же способу, как описан в публикации WO 2009082607.
Пример 14: Получение Соединения 239
Соединение 43 получили по способам, представленным в Примере 13.
Пример 15: Получение Соединения 47
Соединение 46 имеется в продаже.
Пример 16: Получение Соединения 240
Соединения 48 и 49 имеются в продаже. Соединения 17 и 47 получили так, как описано в способах в Примерах 4 и 15.
Пример 17: Получение Соединения 241
Соединение 53 получили по способам, представленным в Примере 16.
Пример 18: Получение Соединения 242
Соединение 53 получили по способам, представленным в Примере 16.
3
Пример 19: Общий способ получения сопряженных ASO, содержащих GalNAc-1 в 3'-положении, при помощи твердофазных методик (получение ISIS 647535,647536 и 651900)
m
Если не указано иное, все реагенты и растворы, использованные для синтеза олигомерных соединений, приобретены у коммерческих поставщиков. Стандартные фосфорамидитные строительные блоки и твердую подложку использовали для внедрения нуклеозидных остатков, которые включают, например, остатки Т, A, G и С. 0,1 М раствор фосфорамидита в безводном ацетонитриле использовали для β-D-2'-дезоксирибонуклеозида и 2'-МОЕ.
3
3
3
3
Синтез антисмысловых олигонуклеотидов (ASO) выполнили на синтезаторе ABI 394 (в масштабе 1-2 мкмоль) или на синтезаторе  Oligopilot производства GE Healthcare Bioscience (в масштабе 40-200 мкмоль) по способу фосфорамидитного связывания на твердой подложке VIMAD, наполненной GalNAc-1 (110 мкмоль/г, Guzaev et al., 2003), упакованной в колонку. Для стадии связывания фосфорамидиты вводили в 4-кратном избытке по сравнению с загрузкой на твердой подложке, а конденсацию фосфорамидита выполняли в течение 10 минут. Все остальные стадии выполняли по стандартным протоколам, предоставленным производителем. Для удаления диметокситритильной (DMT) группы с 5'-гидроксильной группы нуклеотида использовали 6% раствор дихлоруксусной кислоты в толуоле. На стадии связывания в качестве активатора использовали 4,5-дицианоимидазол (0,7 М) в безводном CHCN. Тиофосфатные связи внедряли сульфированием при помощи 0,1 М раствора гидрида ксантана в 1:1 смеси пиридина/CHCN в течение 3 минут времени контакта. В качестве окислительного агента для получения фосфодиэфирных межнуклеозидных связей использовали 20% раствор трет-бутилгидропероксида в CHCN, содержащий 6% воды, в течение 12 минут времени контакта.
После сборки требуемой последовательности цианоэтил-фосфатные защитные группы снимали при помощи 1:1 (об./об.) смеси триэтиламина и ацетонитрила в течение 45 минут времени контакта. Связанные с твердой подложкой ASO суспендировали в водном растворе аммиака (28-30 масс. %) и нагревали при 55°C в течение 6 часов.
3
Затем отфильтровывали не связанные ASO и выпаривали аммиак кипячением. Остаток очищали жидкостной хроматографией высокого давления на сильной анионообменной колонке (GE Healthcare Bioscience, Source 30Q, 30 мкм, 2,54×8 см, А=100 мМ ацетата аммония в 30% водном CHCN, В=1,5 М NaBr в А, 0-40% В за 60 мин., скорость потока 14 мл. мин-1, λ=260 нм). Остаток обессоливали при помощи ВЭЖХ на обращенно-фазовой колонке с получением заданных ASO с выделенным выходом 15-30% относительно первоначальной загрузки на твердую подложку. ASO характеризовали при помощи ион-парной ВЭЖХ, совмещенной с МС-анализом на системе Agilent 1100 MSD.
Антисмысловые олигонуклеотиды, не содержащие конъюгат, синтезировали по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов, общеизвестным в данной области техники.
3
3
Применяя эти способы, получили три отдельных антисмысловых соединения, направленных на АроС III. Как показано ниже в Таблице 17, каждое из трех антисмысловых соединений, направленных на АроС III, имеет одну и ту же последовательность нуклеооснований. ISIS 304801 представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, содержащий только тиофосфатные связи; ISIS 647535 является таким же, как ISIS 304801, за исключением того, что он содержит GalNAc-1, сопряженный у его 3'-конца; и ISIS 647536 является таким же, как ISIS 647535, за исключением того, что некоторые межнуклеозидные связи этого соединения представляют собой фосфодиэфирные связи. Как дополнительно показано в Таблице 17, были синтезированы два отдельных антисмысловых соединения, направленных на SRB-1. ISIS 440762 представляет собой 2-10-2 cEt гэпмер, содержащий только тиофосфатные межнуклеозидные связи; ISIS 651900 является таким же, как ISIS 440762, за исключением того, что он содержит GalNAc-1 у его 3'-конца.
3
3
3
3
a
3
do
3
Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «k» означает 6'-(S)-CH бициклический нуклеозид (например, cEt); «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает -O-Р(=O)(ОН)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. «GalNAc-1» означает группу конъюгата, имеющую структуру, показанную ранее в Примере 9. Следует отметить, что GalNAc-1 содержит расщепляемый аденозин, которые связывает ASO с остальной частью конъюгата, обозначенной «GalNAc-1." Номенклатура, используемая в представленной выше таблице, показывает полную последовательность азотистых оснований, включая аденозин, который является частью конъюгата. Следовательно, в представленной выше таблице последовательности также могут быть перечислены с окончанием «GalNAc-1", без «A". Такое условное применение нижнего индекса «а» для обозначения части группы конъюгата, не содержащей расщепляемого нуклеозида или расщепляемого фрагмента, используется во всех представленных Примерах. Эта часть группы конъюгата, не содержащая расщепляемого фрагмента, упоминается в настоящем документе как «кластер» или «кластер конъюгата» или «кластер GalNAc». В некоторых случаях группа конъюгата для удобства описана путем отдельного представления ее кластера и ее расщепляемого фрагмента.
Пример 20: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого АроС III у huApoC III трансгенных мышей
ISIS 304801 и ISIS 647535, каждый из которых направлен на человеческий АроС III и описан выше, отдельно испытывали и оценивали в дозозависимом исследовании на их способность ингибировать человеческий АроС III у трансгенных мышей с человеческим АроС III.
Лечение
Трансгенных мышей с человеческим АроСIII выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали ad libitum доступ к пище Teklad lab. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Получили ASO в PBS и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 микрона. ASO растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Трансгенным мышам с человеческим АроС III один раз в неделю в течение двух недель внутрибрюшинно вводили инъекции ISIS 304801 или 647535 при 0,08, 0,25, 0,75, 2,25 или 6,75 мкмоль/кг или PBS в качестве контроля. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Через сорок восемь часов после введения последней дозы каждую мышь обескровили и усыпили, и собрали ткани.
Анализ мРНК АроС III
50
Уровни мРНК АроС-III в печени мышей определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни мРНК АроС III определяли относительно общей РНК (при помощи Ribogreen), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК АроС III для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначены как «% PBS». Полумаксимальная эффективная доза (ED) каждого ASO представлена также ниже в Таблице 18.
3
3
Показано, что оба антисмысловых соединения снижают РНК АроС III, по сравнению с контрольным образцом, обработанным PBS. Кроме того, антисмысловое соединение, сопряженное с GalNAc-1 (ISIS 647535), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc-1 (ISIS 304801).
Анализ белка АроС III (турбидиметрический анализ)
Анализ белка АроС III в плазме выполнили по способам, описанным в работе Graham et al., Circulation Research, до печати опубликованной онлайн 29 марта 2013 года.
Приблизительно 100 мкл плазмы, выделенной из мышей, анализировали без разбавления, используя клинический анализатор Olympus и имеющийся в продаже турбидиметрический аналитический набор АроС III (Kamiya, кат. №KAI-006, Kamiya Biomedical, Сиэтл, штат Вашингтон). Протокол анализа выполняли по описанию поставщика.
3
3
Как показано ниже в Таблице 19, оба антисмысловых соединения снижают белок АроС III, по сравнению с PBS контрольным образцом. Кроме того, антисмысловое соединение, сопряженное с GalNAc-1 (ISIS 647535), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc-1 (ISIS 304801).
Триглицериды и холестерин плазмы выделили по способу Bligh и Dyer (Bligh, E.G. и Dyer, W.J. Can. J. Biochem. Physiol. 37: 911-917, 1959)(Bligh, E and Dyer, W, Can J Biochem Physiol, 37, 911-917, 1959) (Bligh, E and Dyer, W, Can J Biochem Physiol, 37, 911-917, 1959) и измерили при помощи клинического анализатора Beckmann Coulter и имеющихся в продаже реагентов.
3
3
Уровни триглицеридов измерили относительно мышей, инъецированных PBS, и выразили как «% PBS». Результаты представлены в Таблице 20. Показано, что оба антисмысловых соединения снижают уровни триглицеридов. Кроме того, антисмысловое соединение, сопряженное с GalNAc-1 (ISIS 647535), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc-1 (ISIS 304801).
3
3
Образцы плазмы анализировали при помощи ВЭЖХ для определения количества общего холестерина и различных фракций холестерина (HDL и LDL). Результаты представлены в таблицах 21 и 22. Показано, что оба антисмысловых соединения снижают общие уровни холестерина; оба снижают LDL; и оба повышают HDL. Кроме того, антисмысловое соединение, сопряженное с GalNAc-1 (ISIS 647535), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc-1 (ISIS 304801). Увеличение уровней HDL и снижение уровней LDL представляет собой преимущественный сердечно-сосудистый эффект антисмыслового ингибирования АроС III.
Фармакокинетический анализ (ФК)
3
50
Исследовали также ФК ASO. Образцы печени и почек измельчали и экстрагировали по стандартным протоколам. Образцы анализировали на MSD1, используя ИП-ВЭЖХ-МС. Определили содержание (мкг/г) в ткани ISIS 304801 и 647535 полной длины, и результаты представлены в Таблице 23. Показано, что концентрации в печени антисмысловых соединений полной длины были одинаковыми для двух антисмысловых соединений. Следовательно, даже несмотря на то, что CalNAc-1-сопряженное антисмысловое соединение является более активным в печени (как показано по данным РНК и белка, представленным выше), его содержание в печени не намного выше. Действительно, рассчитанное значение ЕС (представленное в Таблице 23) подтверждает, что наблюдаемое увеличение эффективности сопряженного соединения не может быть приписано исключительно повышенному накоплению. Такой результат позволяет предположить, что конъюгат улучшает эффективность по другому механизму, чем простое накопление в печени, возможно за счет увеличения продуктивного захвата антисмыслового соединения в клетки.
3
3
Эти результаты показывают также, что концентрация CalNAc-1-сопряженного антисмыслового соединения почках ниже, чем концентрация антисмыслового соединения, не содержащего конъюгата GalNAc. Это имеет несколько преимущественных терапевтических применений. Для терапевтических показаний, в которых не требуется проявление активности в почках, воздействие на почки подвергает их риску токсичности без соответствующей пользы. Более того, высокая концентрация в почках обычно приводит к выводу соединения с мочой, обеспечивая более быстрое выведение. Соответственно, для внепочечных мишеней накопление в почках является нежелательным. Эти данные позволяют предположить, что сопряжение с GalNAc-1 снижает накопление в почках.
3
Идентифицировали также метаболиты ISIS 647535 и подтвердили их массы при помощи масс-спектрометрического анализа высокого разрешения. Сайты расщепления и структуры наблюдаемых метаболитов представлены ниже. Относительный % от общей длины ASO рассчитали по стандартным технологиям, а результаты представлены в Таблице 23а. Основной метаболит ISIS 647535 представляет собой ASO полной длины без всего конъюгата (то есть ISIS 304801), который образуется в результате расщепления по сайту расщепления A, представленному ниже. Кроме того, наблюдали также дополнительные метаболиты, образующиеся из других сайтов расщепления. Эти результаты позволяют предположить, что может быть пригодным также внедрение других расщепляемых связей, таких как сложные эфиры, пептиды, дисульфиды, фосфорамидаты или ацил-гидразоны, между caxapoм GalNAc-1 и ASO, которые могут расщепляться под действием ферментов внутри клетки или которые могут расщепляться в восстановительной среде цитозоля, или которые лабильны в кислотном pH внутри эндосом и лизосом.
Пример 21: Антисмысловое ингибирование человеческого АроС III у трансгенных мышей с АроС III в исследовании одного введения
ISIS 304801, 647535 и 647536, каждый из которых направлен на человеческий АроС III и описан в Таблице 17, дополнительно оценивали в исследовании однократного введения на их способность ингибировать человеческий АроС III у трансгенных мышей с человеческим АроС III.
Лечение
Трансгенных мышей с человеческим ApoCIII выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали ad libitum доступ к пище Teklad lab. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Получили ASO в PBS и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 микрона. ASO растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Трансгенным мышам с человеческим АроС III внутрибрюшинно ввели однократную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 304801, 647535 или 647536 (описанных выше), или PBS в качестве контрольного образца. Экспериментальная группа состояла из 3 животных, а контрольная группа состояла из 4 животных. Перед лечением, а также после последней дозы у каждой мыши брали кровь и анализировали образцы плазмы. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения.
Образцы собрали и анализировали для определения уровней мРНК АроС III и белка в печени; триглицеридов в плазме; и холестерина, включая фракции HDL и LDL, которые анализировали так, как описано выше (Пример 20). Данные этих анализов представлены ниже в Таблицах 24-28. Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Уровни ALT и AST показали, что антисмысловые соединения хорошо переносятся при всех введенных дозах.
3
3
3
Эти результаты демонстрируют усиление эффективности антисмысловых соединений, содержащих конъюгат GalNAc-1 на 3'-конце (ISIS 647535 и 647536), по сравнению с антисмысловым соединением, не содержащим конъюгат GalNAc-1 (ISIS 304801). Кроме того, ISIS 647536, который содержит конъюгат GalNAc-1 и несколько фосфодиэфирных связей, был таким же эффективным, как ISIS 647535, который содержит тот же конъюгат, и все межнуклеозидные связи в этом ASO являются тиофосфатными.
3
3
Эти результаты подтверждают, что конъюгат GalNAc-1 улучшает эффективность антисмыслового соединения. Эти результаты показывают также равную эффективность GalNAc-1-сопряженных антисмысловых соединений, в которых антисмысловые олигонуклеотиды имеют смешанные связи (ISIS 647536, который имеет шесть фосфодиэфирных связей), и полностью тиофосфатной версии того же антисмыслового соединения (ISIS 647535).
3
Тиофосфатные связи обеспечивают несколько свойств антисмысловых соединений. Например, они устойчивы к нуклеазному расщеплению и связываются с белками, что приводит к накоплению соединения в печени, а не в почках/моче. Эти свойства являются желательными, особенно при лечении показаний в печени. Однако тиофосфатные связи связаны также с воспалительной реакцией. Соответственно, уменьшение количества тиофосфатных связей в соединении предположительно снижает риск воспаления, но снижает также концентрацию соединения в печени, повышает концентрацию в почках и моче, снижает стабильность в присутствии нуклеаз и уменьшает общую эффективность. Представленные результаты демонстрируют, что CalNAc-1-сопряженное антисмысловое соединение, в котором некоторые тиофосфатные связи заменены фосфодиэфирными связи, настолько же эффективно против мишени в печени, как и аналог, содержащий только тиофосфатные связи. Такие соединения предположительно являются менее провоспалительными (см. Пример 24, в котором описан эксперимент, демонстрирующий, что уменьшение тиофосфатов (PS) приводит к снижению воспалительного действия).
3
Пример 22: Влияние модифицированного CalNAc-1-сопряженного ASO, направленного на SRB-1, in vivo
ISIS 440762 и 651900, каждый из которых направлен на SRB-1 и описан в Таблице 17, оценили в дозозависимом исследовании на их способность ингибировать SRB-1 у Balb/c мышей.
Лечение
Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 440762, 651900 или PBS в качестве контрольного образца. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 48 часов после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни мРНК SRB-1 определяли относительно общей РНК (при помощи Ribogreen), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначены как «% PBS».
3
3
3
Как показано в Таблице 29, оба антисмысловых соединения снижают уровни мРНК SRB-1. Кроме того, антисмысловое соединение, содержащее конъюгат GalNAc-1 (ISIS 651900), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc-1 (ISIS 440762). Эти результаты демонстрируют, что преимущество эффективности конъюгатов GalNAc-1 наблюдается при использовании антисмысловых олигонуклеотидов, комплементарных различным мишеням и имеющих различные химически модифицированные нуклеозиды, в этом случае модифицированные нуклеозиды содержат стерически затрудненные этил-сахарные фрагменты (бициклический сахарный фрагмент).
Пример 23: Протокол анализа человеческих мононуклеарных клеток периферической крови (hPBMC)
Анализ hPBMC выполнили при помощи пробирочного способа BD Vautainer СРТ.
Получили образец цельной крови, полученной от доноров-добровольцев, давших информированное согласие в Медицинской клинике США (Faraday & El Camino Real, Карлсбад), и собрали его в 4-15 пробирки BD Vacutainer СРТ по 8 мл (VWR, кат. №BD362753). Приблизительный исходный общий объем цельной крови в пробирке СРТ для каждого донора записали в формуляре анализа РВМС.
++
++
7
Непосредственно перед центрифугированием образец крови повторно перемешали, осторожно переворачивая пробирки 8-10 раз. Пробирки СРТ центрифугировали при комнатной температуре (18-25°C) в горизонтальном (с избыточной поворачиваемостью) роторе в течение 30 минут с фактором разделения (RCF) 1500-1800 с затормаживанием (2700 об./мин. Beckman Allegra 6R). Клетки сняли с лейкоцитарной поверхности раздела (между слоями фиколла и полимерного геля); перенесли в стерильную 50 мл коническую пробирку и сгруппировали по 5 СРТ пробирок/50 мл коническая пробирка/донор. Затем клетки дважды промыли PBS (без Са, Mg; GIBCO). Пробирки пополнили до 50 мл и перемешали, переворачивая несколько раз. Затем образец центрифугировали при 330×g в течение 15 минут при комнатной температуре (1215 об./мин. в Beckman Allegra 6R) и аспирировали максимальное количество надосадочной жидкости, не нарушая осадок. Клеточный осадок сняли, осторожно поворачивая пробирку, и повторно суспендировали клетки в RPMI + 10% FBS + пенициллин/стрептомицин (~1 мл/10 мл исходного объема цельной крови). Пипеткой взяли 60 мкл образца и поместили во флакон с пробой (Beckman Coulter), содержащий 600 мкл реагента VersaLyse (Beckman Coulter, кат. №А09777), и осторожно перемешивали на вортексе в течение 10-15 секунд. Образец оставили инкубироваться в течение 10 минут при комнатной температуре, и снова перемешали перед подсчетом. Суспензию клеток считывали на анализаторе жизнеспособности клеток Vicell XR (Beckman Coulter), используя клетки типа РВМС (сохранили фактор разбавления 1:11 с другими параметрами). Записали количество живых клеток/мл и жизнеспособность. Клеточную суспензию разбавили до 1×10 живых РВМС/мл в RPMI + 10% FBS + пенициллин/стрептомицин.
5
2
Клетки поместили на планшет при 5×10 в 50 мкл/лунку 96-луночного тканевого культурального планшета (Falcon Microtest). 50 мкл/лунку 2х концентрации олигомеров/контроля, разбавленных в RPMI + 10% FBS + пенициллин/стрептомицин, добавили в соответствии с экспериментальной матрицей (в целом 100 мкл/лунку). Планшеты установили на шейкер и оставили перемешиваться в течение примерно 1 мин. После инкубации в течение 24 часов при 37°C; 5% CO, планшеты центрифугировали при 400×g в течение 10 минут, затем удалили надосадочную жидкость для анализа цитокинов MSD (то есть человеческих IL-6, IL-10, IL-8 и MCP-1).
3
Пример 24: Оценка провоспалительных эффектов в анализе hPBMC для GalNAc-1-сопряженных ASO
Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO), перечисленные в Таблице 30, оценили на провоспалительное действие в анализе hPBMC, используя протокол, описанный в Примере 23. ISIS 353512 представляет собой внутренний стандарт, который, как известно, обладает высоким ответом на высвобождение IL-6 в этом анализе. hPBMC выделили из свежих образцов, полученных от доноров-добровольцев, и обработали ASO в концентрациях 0, 0,0128, 0,064, 0,32, 1,6, 8, 40 и 200 мкМ. Через 24 часа обработки измерили уровни цитокинов.
50
max
max
50
max
50
Уровни IL-6 использовали в качестве первичного значения. ЕС и E рассчитывали по стандарным способам. Результаты выразили как среднее отношение E/EC для двух доноров и обозначили как «E/ЕС». Более низкое соотношение означает относительное снижение провоспалительного ответа, а более высокое соотношение означает относительное увеличение провоспалительного ответа.
3
3
3
3
3
В отношении исследуемых соединений, наименее провоспалительным соединением было ASO, соединенное при помощи PS/PO (ISIS 616468). GalNAc-1-сопряженное ASO, ISIS 647535, было немного менее провоспалительным, чем его несопряженный аналог, ISIS 304801. Эти результаты показывают, что внедрение нескольких РО связей снижает провоспалительную реакцию, а добавление конъюгата GalNAc-1 не делает соединение более провоспалительным, и может снижать провоспалительную реакцию. Соответственно, можно ожидать, что антисмысловое соединение, содержащее смешанные PS/PO связи и конъюгат GalNAc-1, может вызывать более слабые провоспалительные реакции, по сравнению с антисмысловым соединением, связанным только посредством PS, с конъюгатом GalNAc-1 или без него. Эти результаты показывают, что GalNAc-1-сопряженные антисмысловые соединения, в частности, соединения, имеющие меньшее содержание PS, являются менее провоспалительными.
3
3
3
В целом, эти результаты позволяют предположить, что GalNAc-1-сопряженное соединение, в частности, соединение со сниженным содержанием PS, может быть введено в более высокой дозе, чем аналогичное полностью PS антисмысловое соединение без конъюгата GalNAc-1. Поскольку не ожидается, что период полувыведения для этих соединений будет существенно различаться, то такое введение в более высокой дозе обусловит менее частое введение доз. В действительности, такое введение может быть еще более редким, поскольку GalNAc-1-сопряженные соединения являются более эффективными (см. Примеры 20-22), а повторное введение дозы необходимо только при снижении концентрации соединения ниже заданного уровня, при этом такой заданный уровень обусловлен эффективностью.
3
do'
3
a
3
Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «k» означает 6'-(S)-CH бициклический нуклеозид (например, cEt); «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает -O-Р(=O)(OH)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. «A-GalNAc-1» означает конъюгат, имеющий структуру GalNAc-1, показанную в Примере 9, присоединенную к 3'-концу антисмыслового олигонуклеотида, как показано.
3
Пример 25: Влияние модифицированного GalNAc-1-сопряженного ASO, направленного на человеческий АроС III, in vitro
ISIS 304801 и 647535, описанные выше, испытали in vitro. Первичные гепатоцитарные клетки трансгенных мышей при плотности 25000 клеток на лунку обработали концентрациями 0,03, 0,08, 0,24, 0,74, 2,22, 6,67 и 20 мкМ модифицированных олигонуклеотидов. После обработки в течение приблизительно 16 часов, из клеток выделили РНК и измерили уровни мРНК при помощи количественной ПЦР в реальном времени, а уровни мРНК hApoC III скорректировали в соответствии с общим содержанием РНК, измеренным при помощи RIBOGREEN.
50
IC рассчитали по стандартным способам, а результаты представлены в Таблице 32. Показано, что наблюдали сравнимую эффективность в клетках, обработанных ISIS 647535, по сравнению с контрольным образцом, ISIS 304801.
3
В этом эксперименте in vitro не наблюдали такого большого преимущества эффективности сопряжения с GalNAc-1, как наблюдали in vivo. Последующие эксперименты свободного захвата в первичных гепатоцитах in vitro не показали повышенной эффективности олигонуклеотидов, содержащих различные конъюгаты GalNAc, по сравнению с олигонуклеотидами, не содержащими конъюгаты GalNAc (см. Примеры 60, 82 и 92).
Пример 26: Влияние линкеров PO/PS на активность ASO в отношении АроС III
Трансгенным мышам с человеческим АроС III внутрибрюшинной инъекцией вводили 25 мг/кг ISIS 304801 или ISIS 616468 (оба описаны выше) или PBS в качестве контрольного образца, один раз в неделю в течение двух недель. Экспериментальная группа состояла из 3 животных, а контрольная группа состояла из 4 животных. Перед лечением, а также после последней дозы у каждой мыши брали кровь и анализировали образцы плазмы. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения.
Образцы собрали и анализировали для определения уровней белка АроС III в печени, как описано выше (Пример 20). Данные этих анализов представлены ниже в Таблице 33.
Эти результаты демонстрируют снижение эффективности антисмысловых соединений с PO/PS (ISIS 616468) в крыльях, по сравнению с соединениями, содержащими только PS (ISIS 304801).
Пример 27: Соединение 56
Соединение 56 имеется в продаже у компании Glen Research или может быть получено по опубликованным методикам, описанным авторами Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25 (22), 4447-4454.
Пример 28: Получение Соединения 60
Соединение 4 получили по способам, представленным в Примере 2. Соединение 57 имеется в продаже. Соединение 60 подтвердили структурным анализом.
Соединение 57 является иллюстративным, и его не следует считать ограничивающим, поскольку могут быть использованы другие монозащищенные замещенные или незамещенные алкилдиолы, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании, для получения фосфорамидитов, имеющих заданный состав.
Пример 29: Получение Соединения 63
Соединения 61 и 62 получили по такому же способу, как описан в публикации Tober et al., Eur. J. Org. Chem., 2013, 3, 566-577; и Jiang et al, Tetrahedron, 2007, 63 (19), 3982-3988.
Альтернативно, Соединение 63 получили по таким же способам, как описаны в научной и патентной литературе авторами Kim et al., Synlett, 2003, 12, 1838-1840; и Kim et al., в опубликованной международной заявке РСТ WO 2004063208. Пример 30: Получение Соединения 63b
Соединение 63а получили по таким же способам, как описаны авторами Hanessian et al., Canadian Journal of Chemistry, 1996, 74 (9), 1731-1737.
Пример 31: Получение Соединения 63d
Соединение 63c получили по таким же способам, как описаны авторами Chenef al., Chinese Chemical Letters, 1998, 9 (5), 451-453.
Пример 32: Получение Соединения 67
Соединение 64 получили по способам, представленным в Примере 2. Соединение 65 получили по таким же способам, как описаны авторами Or et al., в опубликованной международной заявке РСТ WO 2009/003009. Защитные группы, использованные для Соединения 65, являются иллюстративным, и их не следует считать ограничением, поскольку могут быть использованы другие защитные группы, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании.
Пример 33: Получение Соединения 264
Соединение 64 получили по способам, представленным в Примере 2. Соединение 68 имеется в продаже. Защитная группа, использованная для Соединения 68, является иллюстративной, и ее не следует считать ограничением, поскольку могут быть использованы другие защитные группы, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании.
Пример 34: Получение Соединения 75а
Соединение 75 получили по опубликованным способам, описанным авторами Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25 (22), 4447-4454.
Пример 265: Получение Соединения 79
Соединение 76 получили по опубликованным способам, описанным авторами Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25 (22), 4447-4454.
Пример 266: Получение Соединения 79а
Соединение 77 получили по способам, представленным в Примере 35.
3
Пример 37: Общий способ получения сопряженного олигомерного соединения 82, содержащего фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc-2 на 5'-конце, нетвердой подложке (Способ I),
3
где GalNAc-2 имеет структуру:
3
3
3
a
3
a
Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-2 (GalNAc-2) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Где GalNAc-2 имеет формулу:
VIMAD-связанное олигомерное соединение 79b получили по стандартным способам в автоматическом синтезаторе ДНК/РНК (см. Dupouy et al., Angew. Chem. Int. ред., 2006, 45, 3623-3627). Фосфорамидитные Соединения 56 и 60 получили так, как описано в способах в Примерах 27 и 28, соответственно. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными, и их не следует считать ограничением, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании, для получения олигомерного соединения, содержащего фосфодиэфир-связанную группу конъюгата на 5'-конце. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения олигомерных соединений, описанных в настоящем документе, которые имеют любую заданную последовательность и состав.
3
Пример 38: Альтернативный способ получения олигомерного соединения 82, содержащего фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc-2 на 5'-конце (Способ II)
3
3
VIMAD-связанное олигомерное соединение 79b получили по стандартным способам в автоматическом синтезаторе ДНК/РНК (см. Dupouy et al., Angew. Chem. Int. ред., 2006, 45, 3623-3627). GalNAc-2 кластерный фосфорамидит, Соединение 79, получили по способам, представленным в Примере 35. Альтернативный способ обеспечивает возможность одностадийной установки фосфодиэфир-связанного GalNAc-2 конъюгата на олигомерное соединение на последней стадии синтеза. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными, и их не следует считать ограничением, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании, для получения олигомерных соединений, содержащих фосфодиэфирный конъюгат на 5'-конце. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения олигомерных соединений, описанных в настоящем документе, которые имеют любую заданную последовательность и состав.
3
3
Пример 39: Общий способ получения олигомерного соединения 83h, содержащего конъюгат GalNAc-3 на 5'-конце (GalNAc-1, модифицированный для 5'-концевого присоединения), на твердой подложке
3
Соединение 18 получили по способам, представленным в Примере 4. Соединения 83а и 83b имеются в продаже. Олигомерное Соединение 83е, содержащее связанный через фосфодиэфир гексиламин, получили по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов. В результате обработки защищенного олигомерного соединения водным раствором аммиака получили 5'-GalNAc-3 сопряженное олигомерное соединение (83h).
3
Где GalNAc-3 имеет структуру:
3
3
3
a
3
a
Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-3 (GalNAc-3) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Где GalNAc-3 имеет формулу:
3
Пример 40: Общий способ получения олигомерного соединения 89, содержащего связанный фосфодиэфирным линкером GalNAc-4 конъюгат на 3'-конце, на твердой подложке
3
Где GalNAc-4 имеет структуру:
Где СМ представляет собой расщепляемый фрагмент. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой:
3
3
3
a
3
a
Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-4 (GalNAc-4) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Где GalNAc-4 имеет формулу:
Защищенное Соединение 30 на функционализированной твердой подложке Unylinker имеется в продаже. Соединение 84 получили по таким же способам, как описаны в литературе (см. Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25 (22), 4447-4454; Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1999, 27, 3035-3041; и Hornet et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25, 4842-4849).
Фосфорамидитные строительные блоки, Соединения 60 и 79а, получили так, как описано в способах в примерах 28 и 36. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными и не предназначены для ограничения, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки для получения олигомерного соединения, имеющего фосфодиэфир-связанный конъюгат на 3'-конце, которое имеет заданную последовательность и состав. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения олигомерных соединений, описанных в настоящем документе, которые имеют любую заданную последовательность и состав.
3
Пример 41: Общий способ получения ASO, содержащих фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc-2 (см. Пример 37, Вх представляет собой аденин) в 5'-положении, по твердофазному способу (получение ISIS 661134)
m
3
Если не указано иное, все реагенты и растворы, использованные для синтеза олигомерных соединений, приобретены у коммерческих поставщиков. Стандартные фосфорамидитные строительные блоки и твердую подложку использовали для внедрения нуклеозидных остатков, которые включают, например, остатки T, A, G и C. Фосфорамидитные соединения 56 и 60 использовали для синтеза фосфодиэфир-связанного конъюгата GalNAc-2 на 5'-конце. 0,1 М раствор фосфорамидита в безводном ацетонитриле использовали для β-D-2'-дезоксирибонуклеозида и 2'-МОЕ.
3
3
3
Синтез антисмысловых олигонуклеотидов (ASO) выполнили на синтезаторе ABI 394 (в масштабе 1-2 мкмоль) или на синтезаторе  Oligopilot производства GE Healthcare Bioscience (в масштабе 40-200 мкмоль) по способу фосфорамидитного связывания на твердой подложке VIMAD (110 мкмоль/г, Guzaev et al., 2003), упакованной в колонку. Для стадии связывания фосфорамидиты вводили в 4-кратном избытке по сравнению с исходной загрузкой на твердой подложке, а конденсацию фосфорамидита выполняли в течение 10 минут. Все остальные стадии выполняли по стандартным протоколам, предоставленным производителем. Для удаления диметокситритильных (DMT) групп с 5'-гидроксильных групп нуклеотида использовали 6% раствор дихлоруксусной кислоты в толуоле. На стадии связывания в качестве активатора использовали 4,5-дицианоимидазол (0,7 М) в безводном CHCN. Тиофосфатные связи внедряли сульфированием при помощи 0,1 М раствора гидрида ксантана в 1:1 смеси пиридина/CHСN в течение 3 минут времени контакта. В качестве окислительного агента для получения фосфодиэфирных межнуклеозидных связей использовали 20% раствор трет-бутилгидропероксида в CHCN, содержащий 6% воды, в течение 12 минут времени контакта.
После сборки требуемой последовательности цианоэтил-фосфатные защитные группы снимали при помощи 20% диэтиламина в толуоле (об./об.) в течение 45 минут времени контакта. Связанные с твердой подложкой ASO суспендировали в водном растворе аммиака (28-30 масс. %) и нагревали при 55°C в течение 6 часов.
3
Затем отфильтровывали не связанные ASO и выпаривали аммиак кипячением. Остаток очищали жидкостной хроматографией высокого давления на сильной анионообменной колонке (GE Healthcare Bioscience, Source 30Q, 30 мкм, 2,54×8 см, А=100 мМ ацетата аммония в 30% водном CHCN, В=1,5 М NaBr в А, 0-40% В за 60 мин., скорость потока 14 мл. мин-1, λ=260 нм). Остаток обессоливали при помощи ВЭЖХ на обращенно-фазовой колонке с получением заданных ASO с выделенным выходом 15-30% относительно первоначальной загрузки на твердую подложку. ASO характеризовали при помощи ион-парной ВЭЖХ, совмещенной с МС-анализом на системе Agilent 1100 MSD.
3
3
a
Нижние индексы: «e» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «k» означает 6'-(S)-CH бициклический нуклеозид (например, cEt); «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает -O-Р(=O)(ОН)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. Структура GalNAc-2 показана в Примере 37.
3
Пример 42: Общий способ получения ASO, содержащих конъюгат GalNAc-3 в 5'-положении, via твердофазным методикам (получение ISIS 661166)
Синтез ISIS 661166 выполнили по таким же способам, как представлены в Примерах 39 и 41.
3
ISIS 661166 представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, в котором 5'-положение содержит конъюгат GalNAc-3. Это ASO характеризовали при помощи ион-пар ной ВЭЖХ, совмещенной с МС-анализом на системе Agilent 1100 MSD.
3
Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. Структура «5'-GalNAc-3a» представлена в Примере 39.
3
Пример 43: Дозозависимое исследование фосфодиэфир-связанного GalNAc-2 (см. Примеры 37 и 41, Вх представляет собой аденин) на 5'-конце, направленного на SRB-1, in vivo
3
3
ISIS 661134 (см. Пример 41), содержащий фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc-2 на 5'-конце, испытывали в дозозависимом исследовании на антисмысловое ингибирование SRB-1 у мышей. Несопряженные ISIS 440762 и 651900 (конъюгат (GalNAc-1 на 3'-конце, см. Пример 9) включены в исследование для сравнения и описаны ранее в Таблице 17.
Лечение
50
Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 440762, 651900, 661134 или PBS в качестве контрольного образца. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни мРНК SRB-1 определяли относительно общей РНК (при помощи Ribogreen), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначены как «% PBS». ED измеряли по таким же способам, как описаны ранее, и указанные значения представлены ниже.
3
3
3
3
Как показано в Таблице 35, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Действительно, антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc-2 на 5'-конце (ISIS 661134) или конъюгат GalNAc-1, связанный на 3'-конце (ISIS 651900), демонстрируют значительное улучшение эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 440762). Кроме того, ISIS 661134, который содержит фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc-2 на 5'-конце, был настолько же эффективным, как ISIS 651900, который содержит конъюгат GalNAc-1 на 3'-конце.
3
3
Структуры 3' GalNAc-1 и 5' GalNAc-2 описаны ранее в Примерах 9 и 37.
Фармакокинетический анализ (ФК)
3
3
3
3
3
3
ФК для ASO из группы высокой дозы (7 мг/кг) исследовали и оценили таким же образом, как описано в Примере 20. Образцы печени измельчили и экстрагировали по стандартным протоколам. Идентифицировали метаболиты полной длины 661134 (5' GalNAc-2) и ISIS 651900 (3' GalNAc-1) и подтвердили их массы при помощи масс-спектрометрического анализа высокого разрешения. Результаты показали, что основной метаболит, обнаруженный для ASO, содержащего фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc-2 на 5'-конце (ISIS 661134), представлял собой ISIS 440762 (данные не показаны). Не наблюдали никаких дополнительных метаболитов в обнаруживаемом количестве. В отличие от него, для ASO, содержащего конъюгат GalNAc-1 на 3'-конце (ISIS 651900), наблюдали дополнительные метаболиты, аналогичные тем, которые описаны ранее в Таблице 23а. Эти результаты позволяют предположить, что наличие фосфодиэфир-связанного конъюгата GalNAc-1 или GalNAc-2 может улучшать ФК профиль ASO без ухудшения их эффективности.
3
Пример 44: Влияние PO/PS линкеров на антисмысловое ингибирование ASO, содержащих конъюгат GalNAc-1 (см. Пример 9) у 3'-конца, направленных на SRB-1
3
ISIS 655861 и 655862, содержащие конъюгат GalNAc-1 на 3'-конце, каждый из которых направлен на SRB-1, испытали в исследовании однократного введения на их способность ингибировать SRB-1 у мышей. Исходное несопряженное соединение, ISIS 353382, включили в исследование для сравнения.
Эти ASO представляют собой 5-10-5 МОЕ гэпмеры, в которых гэп-область содержит десять 2'-дезоксирибонуклеозидов, и каждая область крыльев содержит пять 2'-МОЕ модифицированных нуклеозидов. Эти ASO получили по таким же способам, как показаны ранее в Примере 19, и они описаны ниже в Таблице 36.
3
Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. Структура «GalNAc-1» показана в Примере 9.
Лечение
50
Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 353382, 655861, 655862 или PBS в качестве контрольного образца. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Перед лечением, а также после последней дозы у каждой мыши брали кровь и анализировали образцы плазмы. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПНР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК PIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни мРНК SRB-1 определяли относительно общей РНК (при помощи Ribogreen), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначены как «% PBS». ED измеряли по таким же способам, как описаны ранее, и указанные значения представлены ниже.
3
Как показано в Таблице 37, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом, по сравнению с контрольным образцом, обработанным PBS. Действительно, антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc-1 на 3'-конце (ISIS 655861 и 655862), демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 353382). Кроме того, ISIS 655862 со смешанными PS/PO связями демонстрирует усиление эффективности, по сравнению с соединением, содержащим только PS (ISIS 655861).
Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также массу органов. Результаты показывают, что не наблюдали какого-либо увеличения уровней трансаминазы (Таблица 38) или массы органов (данные не показаны) у мышей, обработанных ASO, по сравнению с PBS контролем. Кроме того, ASO со смешанными PS/PO связями (ISIS 655862) демонстрирует схожие уровни трансаминазы, по сравнению с соединением, содержащим только PS (ISIS 655861).
Пример 45: Получение PFP эфира, Соединения 110а
Соединение 4 (9,5 г, 28,8 ммоль) обработали по отдельности соединением 103а или 103b (38 ммоль) и TMSOTf (0,5 экв.), и молекулярными ситами в дихлорметане (200 мл), и перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Затем органический слой отфильтровали через целит, затем промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (2%-->10% метанол/дихлорметан) с получением соединений 104а и 104b с выходом >80%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединения 104а и 104b обработали в тех же условиях, что и соединения 100a-d (Пример 47), с получением соединений 105а и 105b с выходом >90%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединения 105а и 105b по отдельности обработали соединением 90 при тех же условиях, что и соединения 901a-d, с получением соединений 106а (80%) и 106b (20%). Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединения 106а и 106b обработали в тех же условиях, что и соединения 96a-d (Пример 47), с получением соединения 107а (60%) и 107b (20%). Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединения 107а и 107b обработали в тех же условиях, что и соединения 97a-d (Пример 47), с получением соединений 108а и 108b с выходом 40-60%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединения 108а (60%) и 108b (40%) обработали в тех же условиях, что и соединения 100a-d (Пример 47), с получением соединений 109а и 109b с выходом >80%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединение 109а обработали в тех же условиях, что и соединения 101a-d (Пример 47), с получением соединения 110а с выходом 30-60%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой. Альтернативно, Соединение 110b может быть получено таким же образом, исходя из Соединения 109b.
3
Пример 46: Общий способ сопряжения с PFP эфирами (олигонуклеотид 111); получение ISIS 666881 (GalNAc-10)
3
3
Синтезировали и очистили 5'-гексиламино-модифицированный олигонуклеотид по стандартным способам твердофазного получения олигонуклеотидов. 5'-Гексиламино-модифицированный олигонуклеотид растворили в 0,1 М растворе тетрабората натрия, pH 8,5 (200 мкл) и добавили 3 эквивалента выбранного PFP-эстерифицированного кластера GalNAc, растворенного в ДМСО (50 мкл). Если при добавлении раствора ASO эфир PFP выпадал в осадок, то добавляли ДМСО до перехода всего эфира PFP в раствор. Реакция была завершена примерно через 16 часов перемешивания при комнатной температуре. Полученный раствор разбавили водой до 12 мл, а затем центрифугировали при 3000 об./мин. в центробежном фильтре с отсечением по массе 3000 Да. Этот прием повторили два раза для удаления низкомолекулярных примесей. Затем раствор лиофилизировали досуха и повторно растворили в концентрированном водном растворе аммиака, и перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов, затем концентрировали in vacuo для удаления большей части аммиака. Сопряженный олигонуклеотид очистили и обессолили при помощи ОФ-ВЭЖХ, и лиофилизировали с получением GalNAc сопряженного олигонуклеотида.
3
3
3
3
a
d
3
3
3
a
Олигонуклеотид 111 сопряжен с GalNAc-10. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-10 (GalNAc-10) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(ОН)-A-Р(=O)(ОН)-, как показано ниже в олигонуклеотиде (ISIS 666881), синтезированном с GalNAc-10. Структура GalNAc-10 (GalNAc-10-CM-) представлена ниже:
По указанному общему способу получили ISIS 666881. Синтезировали и очистили 5'-гексиламино-модифицированный олигонуклеотид, ISIS 660254, по стандартным способам твердофазного получения олигонуклеотидов. ISIS 660254 (40 мг, 5,2 мкмоль) растворили в 0,1 М растворе тетрабората натрия, pH 8,5 (200 мкл) и добавили 3 эквивалента PFP эфира (Соединения 110а), растворенного в ДМСО (50 мкл). Эфир PFP выпал в осадок при добавлении раствора ASO, поэтому потребовалось добавление дополнительного количества ДМСО (600 мкл) для полного растворения PFP эфира. Реакция была завершена через 16 часов перемешивания при комнатной температуре. Раствор разбавили водой до общего объема 12 мл, а затем центрифугировали при 3000 об./мин. в центробежном фильтре с отсечением по массе 3000 Да. Этот прием повторили два раза для удаления низкомолекулярных примесей. Раствор лиофилизировали досуха и повторно растворили в концентрированном водном растворе аммиака, перемешивая при комнатной температуре в течение 2,5 часов, затем концентрировали in vacuo для удаления большей части аммиака. Сопряженный олигонуклеотид очистили и обессолили при помощи ОФ-ВЭЖХ, и лиофилизировали с получением ISIS 666881 с выходом 90% по массе (42 мг, 4,7 мкмоль).
m
Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
3
Пример 47: Получение олигонуклеотида 102, содержащего GalNAc-8
Трехкислотное соединение 90 (4 г, 14,43 ммоль) растворили в ДМФА (120 мл) и N,N-диизопропилэтиламине (12,35 мл, 72 ммоль). По каплям добавили пентафторфенила трифторацетат (8,9 мл, 52 ммоль) в атмосфере аргона и оставили реакционную смесь перемешиваться при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавили Boc-диамин 91а или 91b (68,87 ммоль) вместе с N,N-диизопропилэтиламином (12,35 мл, 72 ммоль) и оставили реакционную смесь перемешиваться при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (2%-->10% метанол/дихлорметан) с получением соединений 92а и 92b с приблизительным выходом 80%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединение 92а или 92b (6,7 ммоль) обрабатывали 20 мл дихлорметана и 20 мл трифторуксусной кислоты при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученный раствор выпарили, а затем растворили в метаноле и обрабатывали смолой DOWEX-OH в течение 30 минут. Полученный раствор отфильтровали и упарили до маслянистого вещества при пониженном давлении с получением 85-90% выхода соединений 93а и 93b.
Соединения 7 или 64 (9,6 ммоль) обрабатывали HBTU (3,7 г, 9,6 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламином (5 мл) в ДМФА (20 мл) в течение 15 минут. К смеси добавили либо соединение 93а, либо 93b (3 ммоль) и оставили перемешиваться при комнатной температуре на 16 часов. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (5%-->20% метанол/дихлорметан) с получением соединений 80а-d с выходом 40-60%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединения 96a-d (0,75 ммоль) по отдельности гидрировали на никеле Ренея в течение 3 часов в этаноле (75 мл). Затем катализатор удалили фильтрованием через целит, а этанол удалили при пониженном давлении с получением соединений 97a-d с выходом 80-90%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединение 23 (0,32 г, 0,53 ммоль) обрабатывали HBTU (0,2 г, 0,53 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламином (0,19 мл, 1,14 ммоль) в ДМФА (30 мл) в течение 15 минут. К смеси по отдельности добавили соединения 97a-d (0,38 ммоль) и оставили перемешиваться при комнатной температуре на 16 часов. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (2%-->20% метанол/дихлорметан) с получением соединений 98a-d с выходом 30-40%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединение 99 (0,17 г, 0,76 ммоль) обрабатывали HBTU (0,29 г, 0,76 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламином (0,35 мл, 2,0 ммоль) в ДМФА (50 мл) в течение 15 минут. К смеси по отдельности добавили соединения 97a-d (0,38 ммоль) и оставили перемешиваться при комнатной температуре на 16 часов. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (5%-->20% метанол/дихлорметан) с получением соединений 100а-d с выходом 40-60%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
2
Соединения 100a-d (0,16 ммоль) по отдельности гидрировали на 10% Pd(OH)/C в течение 3 часов в метаноле/этилацетате (1:1,50 мл). Затем катализатор удалили фильтрованием через целит, а органические растворители удалили при пониженном давлении с получением соединений 101a-d с выходом 80-90%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
Соединения 101a-d (0,15 ммоль) по отдельности растворили в ДМФА (15 мл) и пиридине (0,016 мл, 0,2 ммоль). По каплям добавили пентафторфенила трифторацетат (0,034 мл, 0,2 ммоль) в атмосфере аргона и оставили реакционную смесь перемешиваться при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (2%-->5% метанол/дихлорметан) с получением соединений 102a-d с приблизительным выходом 80%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.
3
3
3
3
a
d
Олигомерное соединение 160, содержащее группу конъюгата GalNAc-8, получили по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-8 (GalNAc-8) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В предпочтительном варианте реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-.
3
3
a
Структура GalNAc-8 (GalNAc-8-CM-) представлена ниже:
3
Пример 48: Получение олигонуклеотида 119, содержащего GalNAc-7
Соединение 112 синтезировали по способу, описанному в литературе (J. Med. Chem. 2004, 47, 5798-5808).
Соединение 112 (5 г, 8,6 ммоль) растворили в 1:1 смеси метанола/этилацетата (22 мл/22 мл). Добавили гидроксид палладия на углероде (0,5 г). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 12 часов. Реакционную смесь отфильтровали через слой целита и промыли этот слой 1:1 смесью метанола/этилацетата. Фильтрат и промывочные растворы объединили и концентрировали досуха с получением Соединения 105а (количественно). Структуру подтвердили по ЖХМС.
2
2
3
2
4
1
Соединение 113 (1,25 г, 2,7 ммоль), HBTU (3,2 г, 8,4 ммоль) и DIEA (2,8 мл, 16,2 ммоль) растворили в безводном ДМФА (17 мл) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 5 минут. К этой смеси добавили раствор Соединения 105а (3,77 г, 8,4 ммоль) в безводном ДМФА (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. Растворитель удалили при пониженном давлении с получением маслянистого вещества. Остаток растворили в CHCl (100 мл) и промыли насыщенным водным раствором NaHCO (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл). Органическую фазу отделили, высушили (NaSO), отфильтровали и выпарили. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали от 10 до 20% МеОН в дихлорметане с получением Соединения 114 (1,45 г, 30%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и Н ЯМР.
1
Соединение 114 (1,43 г, 0,8 ммоль) растворили в 1:1 смеси метанола/этилацетата (4 мл/4 мл). Добавили палладий на углероде (влажный, 0,14 г). Реакционную смесь продували водородом и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 12 часов. Реакционную смесь фильтровали через слой целита. Слой целита промыли метанолом/этилацетатом (1:1). Фильтрат и промывочные растворы объединили и выпарили при пониженном давлении с получением Соединения 115 (количественно). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и Н ЯМР.
2
2
3
2
4
1
Соединение 83а (0,17 г, 0,75 ммоль), HBTU (0,31 г, 0,83 ммоль) и DIEA (0,26 мл, 1,5 ммоль) растворили в безводном ДМФА (5 мл) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 5 минут. К этой смеси добавили раствор Соединения 115 (1,22 г, 0,75 ммоль) в безводном ДМФА и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 6 часов. Растворитель удалили при пониженном давлении, а остаток растворили в CHCl. Органический слой промыли насыщенным водным раствором NaHCO и насыщенным солевым раствором, и высушили над безводным NaSO, и отфильтровали. Органический слой концентрировали досуха, а полученный остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали от 3 до 15% МеОН в дихлорметане с получением Соединения 116 (0,84 г, 61%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и Н ЯМР.
1
Соединение 116 (0,74 г, 0,4 ммоль) растворили в 1:1 смеси метанола/этилацетата (5 мл/5 мл). Добавили палладий на углероде (влажный, 0,074 г). Реакционную смесь продували водородом и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 12 часов. Реакционную смесь фильтровали через слой целита. Слой целита промыли метанолом/этилацетатом (1:1). Фильтрат и промывочные растворы объединили и выпарили при пониженном давлении с получением соединения 117 (0,73 г, 98%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и H ЯМР.
3
2
4
1
1
19
Соединение 117 (0,63 г, 0,36 ммоль) растворили в безводном ДМФА (3 мл). К этому раствору добавили N,N-диизопропилэтиламин (70 мкл, 0,4 ммоль) и пентафторфенила трифторацетат (72 мкл, 0,42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов и вылили в насыщенный водный раствор NaHCO. Смесь экстрагировали дихлорметаном, промыли насыщенным солевым раствором и высушили над безводным NaSO. Дихлорметановый раствор концентрировали досуха и очистили силикагелевой колоночной хроматографией, и элюировали от 5 до 10% МеОН в дихлорметане с получением соединения 118 (0,51 г, 79%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и Н и Н и F ЯМР.
3
3
3
3
a
d
Олигомерное соединение 119, содержащее группу конъюгата GalNAc-7, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-7 (GalNAc-7) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-.
3
3
a
Структура GalNAc-7 (GalNAc-7-CM-) представлена ниже:
3
Пример 49: Получение олигонуклеотида 132, содержащего GalNAc-5
4
3
2
4
1
+
Соединение 120 (14,01 г, 40 ммоль) и HBTU (14,06 г, 37 ммоль) растворили в безводном ДМФА (80 мл). Добавили триэтиламин (11,2 мл, 80,35 ммоль) и перемешивали в течение 5 минут. Реакционную смесь охладили на ледяной бане и добавили раствор соединения 121 (10 г, ммоль) в безводном ДМФА (20 мл). Добавили дополнительное количество триэтиламина (4,5 мл, 32,28 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение 18 часов в атмосфере аргона. Реакцию контролировали по ТСХ (этилацетат:гексан; 1:1; Rf=0,47). Растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток растворили в EtOAc (300 мл) и промыли 1 М раствором NaHSO (3×150 мл), насыщенным водным раствором NaHCO (3×150 мл) и насыщенным солевым раствором (2×100 мл). Органический слой высушили над NaSO и концентрировали. Высушивающий агент удалили фильтрованием, а органический слой концентрировали на ротационном испарителе. Неочищенную смесь очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали при помощи 35-50% EtOAc в гексане с получением соединения 122 (15,50 г, 78,13%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и Н ЯМР. Масса m/z 589,3 [М+Н].
2
4
+
К охлажденному раствору соединения 122 (7,75 г, 13,16 ммоль), растворенного в метаноле (15 мл) добавили раствор LiOH (92,15 ммоль) в воде (20 мл) и ТГФ (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 минут и контролировали по ТСХ (EtOAc: гексан; 1:1). Реакционную смесь концентрировали до половины объема при пониженном давлении. Оставшийся раствор охладили на ледяной бане и нейтрализовали добавлением концентрированной HCl. Реакционную смесь разбавили, экстрагировали EtOAc (120 мл) и промыли насыщенным солевым раствором (100 мл). При стоянии в течение ночи образовалась и осветлилась эмульсия. Органический слой отделили, высушили (NaSO), отфильтровали и выпарили с получением Соединения 123 (8,42 г). Избыточную массу вероятно обусловливает остаточная соль. Данные ЖХМС согласовались со структурой. Продукт использовали без какой-либо дополнительной очистки. Мол. масса, расчетная: 574,36% мол. масса, найденная: 575,3 [М+Н].
Соединение 126 синтезировали по способу, описанному в литературе(J. Am. Chem. Soc. 2011, 733, 958-963).
4
3
2
4
1
+
Соединение 123 (7,419 г, 12,91 ммоль), HOBt (3,49 г, 25,82 ммоль) и соединение 126 (6,33 г, 16,14 ммоль) растворили в ДМФА (40 мл), а полученную реакционную смесь охладили на ледяной бане. К смеси добавили N,N-диизопропилэтиламин (4,42 мл, 25,82 ммоль), PyBop (8,7 г, 16,7 ммоль), затем Bop-связывающий агент (1,17 г, 2,66 ммоль) в атмосфере аргона. Ледяную баню убрали и оставили раствор нагреваться до комнатной температуры. По данным ТСХ (ДХМ:МеОН:АА; 89:10:1), реакция была завершена через 1 час. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в EtOAc (300 мл) и промыли 1 М раствором NaHSO (3×150 мл), насыщенным водным раствором NaHCO (3×150 мл) и насыщенным солевым раствором (2×100 мл). Отделенную органическую фазу высушили (NaSO), отфильтровали и концентрировали. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле с градиентом от 50% гексанов в EtOAc до 100% EtOAc с получением Соединения 127 (9,4 г) в виде белого пенистого вещества. Данные ЖХМС и Н ЯМР согласовались со структурой. Масса m/z 778,4 [М+Н].
1
+
Трифторуксусную кислоту (12 мл) добавили к раствору соединения 127 (1,57 г, 2,02 ммоль) в дихлорметане (12 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выпарили совместно с толуолом (30 мл) при пониженном давлении досуха. Полученный остаток дважды совместно выпаривали с ацетонитрилом (30 мл) и толуолом (40 мл) с получением Соединения 128 (1,67 г) в виде трифторацетатной соли и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Данные ЖХМС и Н ЯМР согласовались со структурой. Масса m/z 478,2 [М+Н].
2
5
4
3
2
4
1
+
Соединение 7 (0,43 г, 0,963 ммоль), HATU (0,35 г, 0,91 ммоль) и HOAt (0,035 г, 0,26 ммоль) смешали вместе и высушивали в течение 4 часов над PO при пониженном давлении в круглодонной колбе, а затем растворили в безводном ДМФА (1 мл) и перемешивали в течение 5 минут. К этой смеси добавили раствор соединения 128 (0,20 г, 0,26 ммоль) в безводном ДМФА (0,2 мл) и добавили N,N-диизопропилэтиламин (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере аргона. По данным ЖХМС и ТСХ (7% МеОН/ДХМ), реакция была завершена через 20 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в ДХМ (30 мл) и промыли 1 М раствором NaHSO (3×20 мл), насыщенным водным раствором NaHCO (3×20 мл) и насыщенным солевым раствором (3×20 мл). Органическую фазу отделили, высушили над NaSO, отфильтровали и концентрировали. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле, используя 5-15% МеОН в дихлорметане, с получением Соединения 129 (96,6 мг). Данные ЖХМС и Н ЯМР согласовались со структурой. Масса m/z 883,4 [М+2Н].
2
2
1
+
Соединение 129 (0,09 г, 0,051 ммоль) растворили в метаноле (5 мл) в сцинтилляционной пробирке объемом 20 мл. К смеси добавили небольшое количество 10% Pd/C (0,015 мг) и продули реакционный сосуд газообразным H. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H в течение 18 часов. Реакционную смесь отфильтровали через слой целита и промыли слой целита метанолом. Фильтрат и промывочные растворы слили вместе и концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 130 (0,08 г). Данные ЖХМС и Н ЯМР согласовались с указанной структурой. Продукт использовали без дополнительной очистки. Масса m/z 838,3 [М+2Н].
3
4
3
2
4
+
В коническую круглодонную колбу объемом 10 мл добавили соединение 130 (75,8 мг, 0,046 ммоль), 0,37 М пиридин/ДМФА (200 мкл) и мешалку. К этому раствору по каплям добавили 0,7 М пентафторфенилтрифторацетат/ДМФА (100 мкл) при перемешивании. По данным ЖХМС реакция была завершена через 1 час. Растворитель удалили при пониженном давлении и растворили остаток в CHCl (~10 мл). Органический слой разделили между NaHSO (1 М, 10 мл), насыщенным водным раствором NaHCO (10 ил) и насыщенным солевым раствором (10 мл), с каждым раствором по три раза. Органическую фазу отделили и высушили над NaSO, отфильтровали и концентрировали с получением Соединения 131 (77,7 мг). Данные ЖХМС согласовались со структурой. Использовали без дополнительной очистки. Масса m/z 921,3 [М+2Н].
3
3
3
3
a
d
Олигомерное Соединение 132, содержащее группу конъюгата GalNAc-5, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-5 (GalNAc-5) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-.
3
3
a
Структура GalNAc-5 (GalNAc-5-CM-) представлена ниже:
4
Пример 50: Получение олигонуклеотида 144, содержащего GalNAc-11
Синтез Соединения 134. В колбу Меррифилда добавили аминометиловую смолу VIMAD (2,5 г, 450 мкмоль/г), которую промыли ацетонитрилом, диметилформамидом, дихлорметаном и ацетонитрилом. Смолу оставили набухать в ацетонитриле (4 мл). Соединение 133 предварительно активировали в 100 мл круглодонной колбе путем добавления 20 (1,0 ммоль, 0,747 г), TBTU (1,0 ммоль, 0,321 г), ацетонитрила (5 мл) и DIEA (3,0 ммоль, 0,5 мл). Этот раствор оставили перемешиваться на 5 минут, а затем добавили в колбу Меррифилда при встряхивании. Суспензию оставили встряхиваться на 3 часа. Реакционную смесь слили, а смолу промыли ацетонитрилом, ДМФА и ДХМ. Заполнение новой смолы количественно определили по измерению абсорбции DMT катиона при 500 нм (коэффициент экстинкции = 76000) в ДХМ, которое составило 238 мкмоль/г. Смолу кэпировали трехкратным суспендированием в растворе уксусного ангидрида в течение десяти минут.
+
Соединение 141, связанное с твердой подложкой, синтезировали многократным повторением способов твердофазного синтеза пептидов при помощи Fmoc. Взяли небольшое количество твердой подложки и суспендировали в водном растворе аммиака (28-30 масс. %) в течение 6 часов. Расщепленное соединение анализировали по ЖХ-МС и наблюдали, что масса согласуется со структурой. Масса m/z 1063,8 [М+2Н].
Соединение 142, связанное с твердой подложкой, синтезировали по способам твердофазного синтеза пептидов.
Соединение 143, связанное с твердой подложкой, синтезировали при помощи стандартного твердофазного синтеза на ДНК синтезаторе.
4
Соединение 143, связанное с твердой подложкой, суспендировали в водном аммиаке (28-30 масс. %) и нагревали при 55°C в течение 16 часов. Раствор охладили, а твердую подложку отфильтровали. Фильтрат концентрировали, а остаток растворили в воде и очистили при помощи ВЭЖХ на сильной анионообменной колонке. Фракции, содержащие соединение 144 полной длины, слили вместе и обессолили. Полученное GalNAc-11-сопряженное олигомерное соединение анализировали при помощи ЖХ-МС и наблюдали, что масса согласуется со структурой.
4
4
4
а
d
Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-11 (GalNAc-11) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-.
4
4
а
Структура GalNAc-11 (GalNAc-11-СМ) представлена ниже:
3
Пример 51: Получение олигонуклеотида 155, содержащего GalNAc-6
Соединение 146 синтезировали так, как описано в литературе (Analytical Biochemistry 1995, 229, 54-60).
2
2
3
4
2
2
1
Соединение 4 (15 г, 45,55 ммоль) и соединение 35b (14,3 грамм, 57 ммоль) растворили в CHCl (200 мл). Добавили активированные молекулярные сита (, 2 г, порошкообразные) и оставили реакционную смесь перемешиваться в течение 30 минут в атмосфере азота. Добавили TMS-OTf (4,1 мл, 22,77 ммоль) и оставили реакционную смесь перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции смесь погасили, вылив в насыщенный водный раствор NaHCO (500 мл) с дробленым льдом (~150 г). Органический слой отделили, промыли насыщенным солевым раствором, высушили над MgSO, отфильтровали и концентрировали до оранжевого маслянистого вещества при пониженном давлении. Неочищенный материал очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 2-10% МеОН в CHCl с получением Соединения 112 (16,53 г, 63%). ЖХМС и Н ЯМР согласовались с ожидаемым соединением.
2
2
1
Соединение 112 (4,27 г, 7,35 ммоль) растворили в 1:1 МеОН/EtOAc (40 мл). Реакционную смесь очистили пропусканием потока аргона через раствор в течение 15 минут. Добавили катализатор Перлмана (гидроксид палладия на углероде, 400 мг) и пропускали через раствор газообразный водород в течение 30 минут. После завершения (ТСХ, 10% МеОН в CHCl, и ЖХМС), катализатор удалили фильтрованием через слой целита. Фильтрат концентрировали на ротационном испарителе и быстро высушили под высоким вакуумом с получением Соединения 105а (3,28 г). Данные ЖХМС и Н ЯМР согласовались с заданным продуктом.
3
4
2
2
1
Соединение 147 (2,31 г, 11 ммоль) растворили в безводном ДМФА (100 мл). Добавили N,N-диизопропилэтиламин (DIEA, 3,9 мл, 22 ммоль), затем HBTU (4 г, 10,5 ммоль). Реакционную смесь оставили перемешиваться в течение ~15 минут в атмосфере азота. К этой смеси добавили раствор соединения 105а (3,3 г, 7,4 ммоль) в сухом ДМФА и перемешивали в течение 2 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавили EtOAc и промыли насыщенным водным раствором NaHCO и насыщенным солевым раствором. Органическую фазу отделили, высушили (MgSO), отфильтровали и концентрировали до оранжевого сиропообразного вещества. Неочищенный материал очистили колоночной хроматографией и элюировали 2-5% МеОН в CHCl с получением Соединения 148 (3,44 г, 73%). ЖХМС и Н ЯМР согласовались с ожидаемым продуктом.
Соединение 148 (3,3 г, 5,2 ммоль) растворили в 1:1 МеОН/EtOAc (75 мл). Реакционную смесь очистили пропусканием потока аргона через раствор в течение 15 минут. Добавили катализатор Перлмана (гидроксид палладия на углероде) (350 мг). Через раствор продували газообразный водород в течение 30 минут. После завершения (ТСХ, 10% МеОН в ДХМ, и ЖХМС), катализатор удалили фильтрованием через слой целита. Фильтрат концентрировали на ротационном испарителе и быстро высушили под высоким вакуумом с получением Соединения 149 (2,6 г). Данные ЖХМС согласовались с заданным продуктом. Остаток растворили в сухом ДМФА (10 мл) и сразу использовали на следующей стадии.
3
4
2
2
1
Соединение 146 (0,68 г, 1,73 ммоль) растворили в сухом ДМФА (20 мл). К нему добавили DIEA (450 мкл, 2,6 ммоль, 1,5 экв.) и HBTU (1,96 г, 0,52 ммоль). Реакционную смесь оставили перемешиваться в течение 15 минут при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавили раствор соединения 149 (2,6 г) в безводном ДМФА (10 мл). pH реакционной смеси довели до рН=9-10 добавлением DIEA (при необходимости). Реакционную смесь оставили перемешиваться в течение 2 часов при комнатной температуре в атмосфере азота. После завершения реакции смесь разбавили EtOAc (100 мл) и промыли насыщенным водным раствором NaHCO, затем насыщенным солевым раствором. Органическую фазу отделили, высушили над MgSO, отфильтровали и концентрировали. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 2-10% МеОН в CHCl с получением Соединения 150 (0,62 г, 20%). ЖХМС и Н ЯМР согласовались с заданным продуктом.
Соединение 150 (0,62 г) растворили в 1:1 МеОН/EtOAc (5 л). Реакционную смесь очистили пропусканием потока аргона через раствор в течение 15 минут. Добавили катализатор Перлмана (гидроксид палладия на углероде) (60 мг). Через раствор продували газообразный водород в течение 30 минут. После завершения (ТСХ, 10% МеОН в ДХМ, и ЖХМС), катализатор удалили фильтрованием (тефлоновый фильтр с переходной канюлей шприца, 0,45 мкм). Фильтрат концентрировали на ротационном испарителе и быстро высушили под высоким вакуумом с получением Соединения 151 (0,57 г). Данные ЖХМС согласовались с заданным продуктом. Продукт растворили в 4 мл сухого ДМФА и сразу использовали на следующей стадии.
2
2
3
4
2
2
1
Соединение 83а (0,11 г, 0,33 ммоль) растворили в безводном ДМФА (5 мл) и добавили N,N-диизопропилэтиламин (75 мкл, 1 ммоль) и PFP-ТФК (90 мкл, 0,76 ммоль). При соприкосновении реакционная смесь стала пурпурной и постепенно изменила цвет на оранжевый в течение следующих 30 минут. Ход реакции контролировали по ТСХ и ЖХМС. После завершения (образования эфира PFP) добавили раствор соединения 151 (0,57 г, 0,33 ммоль) в ДМФА. pH реакционной смеси довели до рН=9-10 добавлением N,N-диизопропилэтиламина (при необходимости). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота в течение ~30 минут. После завершения реакции большую часть растворителя удалили при пониженном давлении. Остаток разбавили CHCl и промыли насыщенным водным раствором NaHCO, затем насыщенным солевым раствором. Органическую фазу отделили, высушили над MgSO, отфильтровали и концентрировали до оранжевого сиропообразного вещества. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле (2-10% МеОН в CHCl) с получением Соединения 152 (0,35 г, 55%). ЖХМС и Н ЯМР согласовались с заданным продуктом.
Соединение 152 (0,35 г, 0,182 ммоль) растворили в 1:1 МеОН/EtOAc (10 мл). Реакционную смесь очистили пропусканием потока аргона через раствор в течение 15 минут. Добавили катализатор Перлмана (гидроксид палладия на углероде) (35 мг). Через раствор продували газообразный водород в течение 30 минут. После завершения (ТСХ, 10% МеОН в ДХМ, и ЖХМС), катализатор удалили фильтрованием (тефлоновый фильтр с переходной канюлей шприца, 0,45 мкм). Фильтрат концентрировали на ротационном испарителе и быстро высушили под высоким вакуумом с получением Соединения 153 (0,33 г, количественно). Данные ЖХМС согласовались с заданным продуктом.
2
2
3
4
2
2
1
Соединение 153 (0,33 г, 0,18 ммоль) растворили в безводном ДМФА (5 мл) при перемешивании в атмосфере азота. К нему добавили N,N-диизопропилэтиламин (65 мкл, 0,37 ммоль) и PFP-ТФК (35 мкл, 0,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота в течение ~30 минут. При соприкосновении реакционная смесь стала пурпурной и постепенно изменила цвет на оранжевый. pH реакционной смеси поддерживали при рН=9-10 добавлением дополнительного количества N,N-диизопропилэтиламина. Ход реакции контролировали по ТСХ и ЖХМС. После завершения реакции большую часть растворителя удалили при пониженном давлении. Остаток разбавили СНCl (50 мл) и промыли насыщенным водным раствором NaHCO, затем насыщенным солевым раствором. Органический слой высушили над MgSO, отфильтровали и концентрировали до оранжевого сиропообразного вещества. Остаток очистили колоночной хроматографией и элюировали 2-10% МеОН в CHCl с получением Соединения 154 (0,29 г, 79%). ЖХМС и Н ЯМР согласовались с заданным продуктом.
3
3
3
3
a
d
Олигомерное Соединение 155, содержащее группу конъюгата GalNAc-6, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-6 (GalNAc-6) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-.
3
3
a
Структура GalNAc-6 (GalNAc-6-CM-) представлена ниже:
3
Пример 52: Получение олигонуклеотида 160, содержащего GalNAc-9
Соединение 112 синтезировали по способу, описанному в литературе (J. Med. Chem. 2004, 47, 5798-5808).
-
Соединение 156 (18,60 г, 29,28 ммоль) растворили в метаноле (200 мл). Добавили палладий на углероде (6,15 г, загрузка 10 масс. % (в пересчете на сухое вещество), матрица из порошкообразного углерода, влажный). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 18 часов. Реакционную смесь отфильтровали через слой целита и тщательно промыли слой целита метанолом. Объединенный фильтрат промыли и концентрировали досуха. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 5-10% метанола в дихлорметане с получением Соединения 157 (14,26 г, 89%). Масса m/z 544,1 [М-Н].
3
2
4
1
Соединение 157 (5 г, 9,17 ммоль) растворили в безводном ДМФА (30 мл). Добавили HBTU (3,65 г, 9,61 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (13,73 мл, 78,81 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 5 минут. К нему добавили раствор соединения 47 (2,96 г, 7,04 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 часов. Реакционную смесь вылили в насыщенный водный раствор NaHCO. Смесь экстрагировали этилацетатом, а органический слой промыли насыщенным солевым раствором и высушили (NaSO), отфильтровали и выпарили. Полученный остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 50% этилацетатом в гексане с получением Соединения 158 (8,25 г, 73,3%). Структуру подтвердили анализом МС и Н ЯМР.
2
5
3
2
4
31
Соединение 158 (7,2 г, 7,61 ммоль) высушили над PO при пониженном давлении. Высушенное соединение растворили в безводном ДМФА (50 мл). К нему добавили 1Н-тетразол (0,43 г, 6,09 ммоль) и N-метилимидазол (0,3 мл, 3,81 ммоль), и цианоэтил-N,N,N',N'-тетраизопропил-фосфородиамидит (3,65 мл, 11,50 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона в течение 4 часов. Реакционную смесь разбавили этилацетатом (200 мл). Реакционную смесь промыли насыщенным раствором NaHCO и насыщенным солевым раствором. Органическую фазу отделили, высушили (NaSO), отфильтровали и выпарили. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 50-90% этилацетатом в гексане с получением Соединения 159 (7,82 г, 80,5%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и Р ЯМР.
3
3
3
3
a
d
3
3
a
Олигомерное соединение 160, содержащее группу конъюгата GalNAc-9, получили по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов. Три единицы соединения 159 связали с твердой подложкой, затем с фосфорамидитами нуклеотидов. В результате обработки защищенного олигомерного соединения водным раствором аммиака получили соединение 160. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-9 (GalNAc-9) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc-9 (GalNAc-9-CM) представлена ниже:
3
3
Пример 53: Альтернативный способ получения Соединения 18 (GalNAc-1a и GalNAc-3а)
Выполнили реакцию лактона 161 с диаминопропаном (3-5 экв.) или моно-Вос-защищинным диаминопропаном (1 экв.) с получением спирта 162а или 162b. При использовании для описанной выше реакции незащищенного пропандиамина, избыток диамина удалили выпариванием под высоким вакуумом, а свободную аминогруппу в 162а защитили при помощи CbzCl с получением 162b в виде белого твердого вещества после очистки колоночной хроматографией. Спирт 162b затем взаимодействовал с соединением 4 в присутствии TMSOTf с получением 163а, которое преобразовали в 163b путем снятия Cbz группы при помощи каталитического гидрирования. Пентафторфениловый (PFP) эфир 164 получили взаимодействием трехкислотного соединения 113 (см. Пример 48) с PFP-ТФК (3,5 экв.) и пиридином (3,5 экв.) в ДМФА (от 0,1 до 0,5 М). Триэфир 164 непосредственно взаимодействовал с амином 163b (3-4 экв.) и DIPEA (3-4 экв.) с получением Соединения 18. Представленный выше способ значительно облегчает очистку промежуточных соединений и минимизирует образование побочных продуктов, которые образуются при использовании способа, описанного в Примере 4.
3
3
Пример 54: Альтернативный способ получения Соединения 18 (GalNAc-1a и GalNAc-3а)
Три-PFP эфир 164 получили из кислоты 113 по способу, представленному выше в Примере 53, выполнили реакцию этого эфира с моно-Вос-защищенным диамином с получением 165 практически с количественным выходом. Boc группы сняли хлористоводородной кислотой или трифторуксусной кислотой с получением триамина, который взаимодействовал с активированной кислотой PFP 166 в присутствии подходящего основания, такого как DIPEA, с получением Соединения 18.
PFP-защищенную кислоту Gal-NAc 166 получили из соответствующей кислоты обработкой PFP-ТФК (1-1,2 экв.) и пиридином (1-1,2 экв.) в ДМФА. Кислоту-предшественник, в свою очередь, получили из соответствующего спирта окислением с использованием TEMPO (0,2 экв.) и BAIB в ацетонитриле и воде. Спирт-предшественник получили из сахарного промежуточного соединения 4 взаимодействием с 1,6-гександиолом (или 1,5-гександиолом или другим диолом для других значений n) (2-4 экв.) и TMSOTf, используя условия, описанные ранее в Примере 47.
3
Пример 55: Дозозависимое исследование олигонуклеотидов, содержащих либо 3', либо 5'-группу конъюгата (сравнение GalNAc-1, 3, 8 и 9), направленных на SRB-1, in vivo
3
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Несопряженный ISIS 353382 включили в качестве стандарта. Каждая из различных групп конъюгата GalNAc была присоединена либо к 3', либо к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида (расщепляемый фрагмент).
m
Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
3
3
3
3
Структура GalNAc-1a показана ранее в Примере 9. Структура GalNAc-9 показана ранее в Примере 52. Структура GalNAc-3 показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc-8 показана ранее в Примере 47.
Лечение
Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 353382, 655861, 664078, 661161, 665001 или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.
3
3
3
3
3
3
3
3
Как показано в Таблице 40, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Действительно, антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфир-связанные конъюгаты GalNAc-1 и GalNAc-9 на 3'-конце (ISIS 655861 и ISIS 664078), а также конъюгаты GalNAc-3 и GalNAc-8, связанные на 5'-конце (ISIS 661161 и ISIS 665001) демонстрируют существенное улучшение эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 353382). Кроме того, ISIS 664078, содержащий конъюгат GalNAc-9 на 3'-конце, был по существу настолько же эффективным, как ISIS 655861, который содержит конъюгат GalNAc-1 на 3'-конце. 5'-сопряженные антисмысловые олигонуклеотиды, ISIS 661161 и ISIS 665001, содержащие GalNAc-3 или GalNAc-9, соответственно, обладают повышенной эффективностью, по сравнению с 3'-сопряженными антисмысловыми соединениями (ISIS 655861 и ISIS 664078).
Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором. Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в таблице.
3
3
3
Пример 56: Дозозависимое исследование олигонуклеотидов, содержащих либо 3', либо 5'-группу конъюгата (сравнение GalNAc-1, 2, 3, 5, 6, 7 и 20), направленных на SRB-1, in vivo Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Несопряженный ISIS 353382 включили в качестве стандарта. Каждая из различных групп конъюгата GalNAc была присоединена к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида фосфодиэфир-связанным 2'-дезоксиаденозиновым нуклеозидом (расщепляемый фрагмент), за исключением ISIS 655861, в котором группа конъюгата GalNAc присоединена к 3'-концу.
m
Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
3
a
3
a
3
a
3
а
3
a
3
a
3
a
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9. Структура GalNAc-2 показана ранее в Примере 37. Структура GalNAc-3 показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc-5 показана ранее в Примере 49. Структура GalNAc-6 показана ранее в Примере 51. Структура GalNAc-7 показана в Примере 48. Структура GalNAc-10 показана в Примере 46.
Лечение
Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 353382, 655861, 664507, 661161, 666224, 666961, 666981, 666881 или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.
Как показано в Таблице 43, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Действительно, сопряженные антисмысловые олигонуклеотиды демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 353382). 5'-сопряженные антисмысловые олигонуклеотиды демонстрируют небольшое усиление эффективности, по сравнению с 3'-сопряженным антисмысловым олигонуклеотидом.
Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором. Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 44.
Пример 57: Исследование продолжительности действия олигонуклеотидов, содержащих 3'-группу конъюгата, направленных на АроС III, in vivo
Мышам однократно ввели инъекцию дозы, указанной ниже, и в течение 42 дней наблюдали уровни АроС-III и триглицеридов в плазме (TG в плазме). Исследование выполнили, используя в каждой группе 3 трансгенных мышей, которые экспрессируют человеческий АРОС-III.
m
Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
3
a
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9.
Как можно видеть в представленной выше таблице, продолжительность действия увеличивается при добавлении 3'-группы конъюгата, по сравнению с несопряженным олигонуклеотидом. Дополнительное увеличение продолжительности действия наблюдали для смешанного сопряженного PO/PS олигонуклеотида 647536, по сравнению с сопряженным олигонуклеотидом 647535, содержащим только PS.
3
4
Пример 58: Дозозависимое исследование олигонуклеотидов, содержащих либо 3', либо 5'-группу конъюгата (сравнение GalNAc-1 и GalNAc-11), направленных на SRB-1, in vivo
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Несопряженный ISIS 440762 включили в качестве несопряженного стандарта. Каждая из групп конъюгата была присоединена к 3'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи расщепляемого фрагмента фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида.
3
a
3
а
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9. Структура GalNAc-11 показана ранее в Примере 50.
Лечение
Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 440762, 651900, 663748 или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.
3
4
3
4
Как показано в Таблице 47, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфир-связанные конъюгаты GalNAc-1 и GalNAc-11 на 3'-конце (ISIS 651900 и ISIS 663748), демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 440762). Эти два сопряженных олигонуклеотида, GalNAc-1 и GalNAc-11, были одинаково эффективными.
m
3
Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «k» означает 6'-(S)-СН бициклический нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает -O-Р(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором. Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 48.
3
Пример 59: Действие CalNac-1-сопряженных ASO, направленных на FXI, in vivo
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в исследовании действия многократных нарастающих доз на антисмысловое ингибирование FXI у мышей. ISIS 404071 включили в качестве несопряженного стандарта. Каждая из групп конъюгата была присоединена к 3'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи расщепляемого фрагмента фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида.
m
Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
3
a
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9.
Лечение
Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) дважды в неделю в течение 3 недель вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 404071, 656172, 656173 или PBS в качестве контрольного образца.
50
Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК FXI в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Измерили также уровни белка FXI в плазме при помощи твердофазного иммуноферментного анализа. Уровни мРНК FXI определяли относительно общей РНК (при помощи RIBOGREEN), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК FXI для каждой экспериментальной группы. Результаты нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначали как «% PBS». EDs измеряли по таким же способом, как описаны ранее, и указанные значения представлены ниже.
3
Как показано в Таблице 50, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК FXI дозозависимым образом. Олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата 3'-GalNAc-1, демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 404071). Между эти двумя сопряженными олигонуклеотидами дополнительное усиление эффективности было обеспечено за счет замены некоторых PS связей на РО (ISIS 656173)
3
Как показано в Таблице 50а, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни белка FXI дозозависимым образом. Олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата 3'-GalNAc-1, демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 404071). Между эти двумя сопряженными олигонуклеотидами дополнительное усиление эффективности было обеспечено за счет замены некоторых PS связей на РО (ISIS 656173)
Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин, общий альбумин, CRE и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором. Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в таблице.
Пример 60: Действие сопряженных ASO, направленных на SRB-1, in vitro
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в исследовании действия многократных нарастающих доз на антисмысловое ингибирование SRB-1 в первичных гепатоцитах мышей. ISIS 353382 включили в качестве несопряженного стандарта. Каждая из групп конъюгата была присоединена к 3' или 5'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи расщепляемого фрагмента фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида.
m
Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатный межнуклеозидный линкер (PS); «о» означает фосфодиэфирный межнуклеозидный линкер (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
3
a
3
3
3
3
3
3
3
3
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9. Структура GalNAc-3a показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc-8a показана ранее в Примере 47. Структура GalNAc-9а показана ранее в Примере 52. Структура GalNAc-6a показана ранее в Примере 51. Структура GalNAc-2a показана ранее в Примере 37. Структура GalNAc-10a показана ранее в Примере 46. Структура GalNAc-5a показана ранее в Примере 49. Структура GalNAc-7a показана ранее в Примере 48.
Лечение
Олигонуклеотиды, перечисленные выше, испытывали in vitro в первичных гепатоцитарных клетках мышей, помещенных на планшеты при плотности 25000 клеток на лунку и обработанных 0,03, 0,08, 0,24, 0,74, 2,22, 6,67 или 20 нМ модифицированного олигонуклеотида. После обработки в течение приблизительно 16 часов, из клеток выделили РНК и измерили уровни мРНК при помощи количественной ПЦР в реальном времени, а уровни мРНК SRB-1 III скорректировали в соответствии с общим содержанием РНК, измеренным при помощи RIBOGREEN.
50
IC рассчитали по стандартным способам, а результаты представлены в Таблице 53. Результаты показывают, что при условиях свободного поглощения, в которых не использованы никакие реагенты или электроимпульсные приемы для искусственного ускорения входа олигонуклеотидов в клетки, олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были существенно более эффективными в гепатоцитах, чем исходный олигонуклеотид (ISIS 353382), который не содержит конъюгат GalNAc.
а
Среднее для нескольких повторов.
3
Пример 61: Получение олигомерного соединения 175, содержащего GalNAc-12
3
3
3
a
d
3
3
a
Соединение 169 имеется в продаже. Соединение 172 получили добавлением бензил(перфторфенил)глутарата к соединению 171. Бензил(перфторфенил)глутарат получили добавлением PFP-ТФК и DIEA к 5-(бензилокси)-5-оксопентановой кислоте в ДМФА. Олигомерное Соединение 175, содержащее группу конъюгата GalNAc3-12, получили из соединения 174 по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-12 (GalNAc-12) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-Р(=O)(ОН)-. Структура GalNAc-12 (GalNAc-12-CM-) представлена ниже:
3
Пример 62: Получение олигомерного соединения 180, содержащего GalNAc-13
3
3
3
a
d
3
3
a
Соединение 176 получили по общему способу, представленному в Примере 2. Олигомерное Соединение 180, содержащее группу конъюгата GalNAc3-13, получили из соединения 177 по общим способам, представленным в Примере 49. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-13 (GalNAc-13) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc-13 (GalNAc-13-CM-) представлена ниже:
3
Пример 63: Получение олигомерного соединения 188, содержащего GalNAc-14
3
3
3
3
a
d
3
3
a
Соединения 181 и 185 имеются в продаже. Олигомерное Соединение 188, содержащее группу конъюгата CalNAc-14,получили из соединения 187 по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-14 (GalNAc-14) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc-14 (GalNAc-14-CM-) представлена ниже:
3
Пример 64: Получение олигомерного соединения 188, содержащего GalNAc-15
3
3
3
d
3
3
a
Соединение 189 имеется в продаже. Соединение 195 получили по общему способу, представленному в Примере 31. Олигомерное соединение 197, содержащее группу конъюгата GalNAc3-15, получили из соединений 194 и 195 по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-15 (GalNAc-15a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc-15 (GalNAc-15-CM-) представлена ниже:
3
Пример 65: Дозозависимое исследование олигонуклеотидов, содержащих 5'-группу конъюгата (сравнение GalNAc-3, 12, 13, 14 и 15), направленных на SRB-1, in vivo
3
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Несопряженный ISIS 353382 включили в качестве стандарта. Каждая из групп конъюгата GalNAc была присоединена к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи расщепляемого фрагмента фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида.
m
Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатный межнуклеозидный линкер (PS); «о» означает фосфодиэфирный межнуклеозидный линкер (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
3
a
3
3
3
3
Структура GalNAc-3 показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc-12a показана ранее в Примере 61. Структура GalNAc-13a показана ранее в Примере 62. Структура GalNAc-14а показана ранее в Примере 63. Структура GalNAc-15a показана ранее в Примере 64.
Лечение
Шести-восьминедельным мышам C57bl6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) один или два раза ввели подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 353382, 661161, 671144, 670061, 671261, 671262 или солевого раствора. Мыши, которым вводили дозу два раза, вторую дозу вводили через три дня после первой дозы. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.
3
Как показано в Таблице 55, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Не наблюдали значительной разницы нокдауна мишени между животными, получавшими одну дозу, и животными, получавшими две дозы (см. ISIS 353382 в дозах 30 и 2 × 15 мг/кг; и ISIS 661161 в дозах 5 и 2 × 2,5 мг/кг). Антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфир-связанные конъюгаты GalNAc-3, 12, 13, 14 и 15, демонстрируют существенное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 335382).
мРНК SRB-1 (% от солевого раствора)
Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором (данные не показаны). Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 56.
3
Пример 66: Влияние различных расщепляемых фрагментов на антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих кластер 5'-GalNAc
3
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Каждая из групп конъюгата GalNAc была присоединена к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи фосфодиэфир-связанного нуклеозида (расщепляемый фрагмент (СМ)).
m
Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатный межнуклеозидный линкер (PS); «о» означает фосфодиэфирный межнуклеозидный линкер (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
3
3
Структура GalNAc-3a показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc-13a показана ранее в Примере 62.
Лечение
Шести-восьминедельным мышам C57bl6 (Jackson Laboratory, Ббар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 661161, 670699, 670700, 670701, 671165 или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.
Как показано в Таблице 58, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Все антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие различные расщепляемые фрагменты, демонстрируют одинаковую эффективность.
Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором (данные не показаны). Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 56.
3
Пример 67: Получение олигомерного соединения 199, содержащего GalNAc-16
3
3
3
3
d
3
3
а
Олигомерное Соединение 199, содержащее группу конъюгата GalNAc-16, получили по общим способам, представленным в Примерах 7 и 9. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-16 (GalNAc-16a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc-16 (GalNAc-16-СМ-) представлена ниже:
3
Пример 68: Получение олигомерного соединения 200, содержащего GalNAc-17
3
3
3
3
a
d
3
3
а
Олигомерное Соединение 200, содержащее группу конъюгата GalNAc-17, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-17 (GalNAc-17) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc-17 (GalNAc-17-СМ-) представлена ниже:
3
Пример 69: Получение олигомерного соединения 201, содержащего GalNAc-18
1
3
3
3
3
a
d
3
3
а
Олигомерное Соединение 201, содержащее группу конъюгата GalNAc-18, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-18 (GalNAc-18) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -Р(=O)(ОН)-A-Р(=O)(ОН)-. Структура GalNAc-18 (GalNAc-18-СМ-) представлена ниже:
3
Пример 70: Получение олигомерного соединения 204, содержащего GalNAc-19
3
3
3
a
d
3
3
a
Олигомерное Соединение 204, содержащее группу конъюгата GalNAc-19, получили из соединения 64 по общим способам, представленным в Примере 52. Кластерная часть GalNAc3 группы конъюгата GalNAc-19 (GalNAc-19) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -Р(=O)(ОН)-A-Р(=O)(ОН)-. Структура GalNAc-19 (GalNAc-19-CM-) представлена ниже:
3
Пример 71: Получение олигомерного соединения 210, содержащего GalNAc-20
3
3
3
3
a
d
3
3
a
Соединение 205 получили добавлением PFP-ТФК и DIEA к 6-(2,2,2-трифторацетамидо)гексановой кислоте в ацетонитриле, которую получили добавлением трифторуксусного ангидрида к 6-аминогексановой кислоте. Реакционную смесь нагрели до 80°С, затем охладили до комнатной температуры. Олигомерное Соединение 210, содержащее группу конъюгата GalNAc-20, получили из соединения 208 по общим способам, представленным в Примере 52. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-20 (GalNAc-20) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc-20 (GalNAc-20-CM-) представлена ниже:
3
Пример 72: Получение олигомерного соединения 215, содержащего GalNAc-21
3
3
3
3
a
d
3
3
a
Соединение 211 имеется в продаже. Олигомерное Соединение 215, содержащее группу конъюгата GalNAc-21, по лучили из соединения 213 по общим способам, представленным в Примере 52. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-21 (GalNAc-21) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc-21 (GalNAc-21-CM-) представлена ниже:
3
Пример 73: Получение олигомерного соединения 221, содержащего GalNAc-22
3
3
3
3
a
d
3
3
a
Соединение 220 получили из соединения 219, используя тетразолид диизопропиламмония. Олигомерное Соединение 221, содержащее группу конъюгата GalNAc-21, получили из соединения 220 по общим способам, представленным в Примере 52. Кластерная часть GalNAc группы конъюгата GalNAc-22 (GalNAc-22) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc-22 (GalNAc-22-CM-) представлена ниже:
3
Пример 74: Влияние различных расщепляемых фрагментов на антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих кластер 5'-GalNAc
3
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Каждая из групп конъюгата GalNAc была присоединена к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида.
m
Во всех таблицах заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а C означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатный межнуклеозидный линкер (PS); «о» означает фосфодиэфирный межнуклеозидный линкер (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.
3
a
3
3
Структура GalNAc-3 показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc-17a показана ранее в Примере 68, а структура GalNAc-18a показана в Примере 69.
Лечение
Шести-восьминедельным мышам C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 60, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.
Как показано в Таблице 61, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, демонстрируют равные эффективности и являются значительно более эффективными, чем исходный олигонуклеотид, не имеющий конъюгата GalNAc.
Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором (данные не показаны). Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 62.
Пример 75: Фармакокинетический анализ олигонуклеотидов, содержащих 5'-группу конъюгата
ФК ASO, представленных выше в Таблицах 54, 57 и 60, оценили с использованием образцов печени, которые получили после выполнения способов лечения, описанных в Примерах 65, 66 и 74. Образцы печени измельчили и экстрагировали по стандартным протоколам, и анализировали при помощи ИП-ВЭЖХ-МС вместе с внутренним стандартом. Суммарный уровень (мкг/г) всех метаболитов в ткани измерили интегрированием соответствующих УФ пиков, а уровни в ткани ASO полной длины, не содержащих конъюгата («исходное», в данном случае Isis №353382), измерили с использованием подходящих ион-экстракционных хроматограмм (EIC).
3
3
3
3
3
Результаты, представленные выше в Таблице 63, демонстрируют, что наблюдали более высокие уровни в печени олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc, чем исходного олигонуклеотида, не содержащего группу конъюгата GalNAc (ISIS 353382) через 72 часа после введения олигонуклеотида, особенно с учетом введения различных доз для олигонуклеотидов с группой конъюгата GalNAc и без нее. Кроме того, через 72 часа 40-98% каждого олигонуклеотида, содержащего группу конъюгата GalNAc, было метаболизировано до исходного соединения, что указывает на то, что группы конъюгата GalNAc расщепляются в указанных олигонуклеотидах.
3
Пример 76: Получение олигомерного соединения 230, содержащего GalNAc-23
3
2
4
2
2
2
4
3
2
4
Соединение 222 имеется в продаже. 44,48 мл (0,33 моль) соединения 222 обрабатывали тозилхлоридом (25,39 г, 0,13 моль) в пиридине (500 мл) в течение 16 часов. Затем реакционную смесь выпарили до маслянистого вещества, растворили в EtOAc и промыли водой, насыщенным раствором NaHCO, насыщенным солевым раствором и высушили над NaSO. Этилацетат концентрировали досуха и очистили колоночной хроматографией, элюировали EtOAc в гексанах (1:1), затем 10% метанола в CHCl с получением соединения 223 в виде бесцветного маслянистого вещества. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. 10 г (32,86 ммоль) 1-тозилтриэтиленгликоля (соединение 223) обрабатывали азидом натрия (10,68 г, 164,28 ммоль) в ДМСО (100 мл) при комнатной температуре в течение 17 часов. Затем реакционную смесь вылили в воду и экстрагировали EtOAc. Органический слой три раза промыли водой и высушили над NaSO. Органический слой концентрировали досуха с получением 5,3 г соединения 224 (92%). Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. 1-Азидотриэтиленгликоль (соединение 224, 5,53 г, 23,69 ммоль) и соединение 4 (6 г, 18,22 ммоль) обработали 4А молекулярными ситами (5 г) и TMSOTf (1,65 мл, 9,11 ммоль) в дихлорметане (100 мл) под инертной атмосферой. Через 14 часов реакционную смесь отфильтровали для удаления сит, а органический слой промыли насыщенным раствором NaHCO, водой, насыщенным солевым раствором и высушили над NaSO. Органический слой концентрировали досуха и очистили колоночной хроматографией, элюировали градиентом от 2 до 4% метанола в дихлорметане с получением соединения 225. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 225 (11,9 г, 23,59 ммоль) гидрировали в EtOAc/метаноле (4:1, 250 мл) на катализаторе Перлмана. Через 8 часов катализатор удалили фильтрованием, а растворители удалили досуха с получением соединения 226. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой.
2
4
3
2
4
4
2
4
Для получения соединения 227 раствор нитрометантриспропионовой кислоты (4,17 г, 15,04 ммоль) и основание Хюнига (10,3 мл, 60,17 ммоль) в ДМФА (100 мл) по каплям обработали пентафтортрифторацетатом (9,05 мл, 52,65 ммоль). Через 30 минут реакционную смесь вылили в ледяную воду и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли водой, насыщенным солевым раствором и высушили над NaSO. Органический слой концентрировали досуха, а затем перекристаллизовали из гептана с получением соединения 227 в виде белого твердого вещества. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 227 (1,5 г, 1,93 ммоль) и соединение 226 (3,7 г, 7,74 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в ацетонитриле (15 мл) в течение 2 часов. Затем реакционную смесь выпарили досуха и очистили колоночной хроматографией, элюируя градиентом от 2 до 10% метанола в дихлорметане, с получением соединения 228. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 228 (1,7 г, 1,02 ммоль) обработали никелем Ренея (примерно 2 г, влажный) в этаноле (100 мл) в атмосфере водорода. Через 12 часов катализатор удалили фильтрованием, а органический слой выпарили до твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Это твердое вещество (0,87 г, 0,53 ммоль) обработали бензилглутаровой кислотой (0,18 г, 0,8 ммоль), HBTU (0,3 г, 0,8 ммоль) и DIEA (273,7 мкл, 1,6 ммоль) в ДМФА (5 мл). Через 16 часов ДМФА удалили при пониженном давлении при 65°С до маслянистого вещества, и это маслянистое вещество растворили в дихлорметане. Органический слой промыли насыщенным раствором NaHCO, насыщенным солевым раствором и высушили над NaSO. После выпаривания органического слоя соединение очистили колоночной хроматографией и элюировали градиентом от 2 до 20% метанола в дихлорметане с получением связанного продукта. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. С бензилового эфира сняли защиту на катализаторе Перлмана в атмосфере водорода в течение 1 часа. Затем катализатор удалили фильтрованием, а растворители удалили досуха с получением кислоты. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Эту кислоту (486 мг, 0,27 ммоль) растворили в сухом ДМФА (3 мл). Добавили пиридин (53,61 мкл, 0,66 ммоль) и продули реакционную смесь аргоном. К реакционной смеси медленно добавили пентафтортрифторацетат (46,39 мкл, 0,4 ммоль). Цвет реакционной смеси изменился с бледно-желтого на винный, и появился легкий дымок, который улетучился с потоком аргона. Реакционную смесь оставили перемешиваться при комнатной температуре на один час (завершение реакции подтвердили по ЖХМС). Растворитель удалили при пониженном давлении (ротационный испаритель) при 70°С. Остаток разбавили ДХМ и промыли 1 н. NaHSO, насыщенным солевым раствором, насыщенным раствором бикарбоната натрия и снова насыщенным солевым раствором. Органический слой высушили над NaSO, отфильтровали и концентрировали досуха с получением 225 мг соединения 229 в виде хрупкой желтой пены. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой.
3
3
3
a
3
3
a
Олигомерное Соединение 230, содержащее группу конъюгата GalNAc-23, получили из соединения 229 по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc3 группы конъюгата GalNAc-23 (GalNAc-23) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc-23 (GalNAc-23-CM) представлена ниже:
3
Пример 77: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих конъюгат GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.
3
a
3
a
3
3
3
3
a
3
a
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9, GalNAc-3 показана в Примере 39, GalNAc-9a показана в Примере 52, GalNAc-10a показана в Примере 46, GalNAc-19 а показана в Примере 70, GalNAc-20 показана в Примере 71, и GalNAc-23 показана в Примере 76.
Лечение
Шести-восьминедельным мышам C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 64, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.
Как показано в Таблице 65, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом.
Измерили также уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором (данные не показаны). Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 66.
3
Пример 78: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на ангиотензиноген, содержащих конъюгат GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования ангиотензиногена (AGT) у нормотензивных мышей Спрага-Доули.
3
a
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9.
Лечение
Шестинедельным самцам крыс Спрага-Доули один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом три дозы олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 67, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Крыс усыпили через 72 часа после последней дозы. Уровни мРНК AGT в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни белка AGT в плазме измерили при помощи твердофазного иммуноферментного анализа для определения общего ангиотензиногена (кат. № JP 27412, IBL International, Торонто, штат Онтарио) с разбавлением плазмы 1:20000. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент от уровней мРНК AGT в печени или от уровней белка AGT в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу с PBS.
Как показано в Таблице 68, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК AGT в печени и уровни белка в плазме дозозависимым образом, и олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был значительно более эффективным, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc.
Измерили также уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в плазме, а также массу тела в момент усыпления, используя стандартные протоколы. Результаты представлены ниже в Таблице 69.
3
Пример 79: Продолжительность действия in vivo олигонуклеотидов, направленных на АРОС-III, содержащих конъюгат GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 70, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9, GalNAc-3 показана в Примере 39, GalNAc-7 показана в Примере 48, GalNAc-10 показана в Примере 46, и GalNAc-13 показана в Примере 62.
Лечение
Шести-восьминедельным трансгенным мышам, экспрессирующим человеческий АРОС-III, ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 70, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 3 животных. Образцы крови брали до введения дозы для определения исходного значения, а также через 72 часа, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 5 недель и 6 недель после введения дозы. Уровни триглицеридов и белка АРОС-III в плазме измеряли так, как описано в Примере 20. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент от уровней триглицеридов и АРОС-III в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных и исходным значениям, и они демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, обладают более продолжительным действием, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий группу конъюгата (ISIS 304801) даже несмотря на то, что доза исходного соединения была в три раза выше, чем доза олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc.
3
Пример 80: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на альфа-1 антитрипсин (А1АТ), содержащих конъюгат GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 72, испытали в исследовании дозозависимого ингибирования А1АТ у мышей.
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9, GalNAc-3 показана в Примере 39, GalNAc-7 показана в Примере 48, GalNAc-10 показана в Примере 46, и GalNAc-13 показана в Примере 62.
Лечение
Шестинедельным самцам мышей C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом три дозы олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 72, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. Уровни мРНК А1АТ в печени определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни белка А1АТ в плазме определили при помощи твердофазного иммуноферментного анализа для определения мышиного альфа 1-антитрипсина (кат. №41-A1AMS-E01, Alpco, Салем, штат Нью-Гэмпшир). Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК А1АТ в печени и белка в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу с PBS.
Как показано в Таблице 73, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК А1АТ в печени и уровни белка А1АТ в плазме дозозависимым образом. Олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были значительно более эффективными, чем исходное соединение (ISIS 476366).
Во время усыпления измерили уровни трансаминазы в печени и АМК в плазме по стандартным протоколам. Измерили также массы тела и массы органов. Результаты представлены ниже в Таблице 74. Масса тела представлена как % относительно исходного значения. Массы органов представлены как % от массы тела относительно контрольной группы с PBS.
3
Пример 81: Продолжительность действия in vivo олигонуклеотидов, направленных на А1АТ, содержащих кластер GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 72, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.
Лечение
Шестинедельным самцам мышей C57BL/6 ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 72, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови брали за день до введения дозы для определения исходного значения, а также на 5, 12, 19 и 25 день после введения дозы. Уровни белка А1АТ в плазме измерили при помощи твердофазного иммуноферментного анализа (см. Пример 80). Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней белка А1АТ в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были более эффективными и имели более продолжительное действие, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 476366). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие 5'-GalNAc конъюгат (ISIS 678381, 678382, 678383 и 678384), были, в целом, еще более эффективными с еще более продолжительным действием, чем олигонуклеотид, содержащий 3'-GalNAc конъюгат (ISIS 656326).
3
Пример 82: Антисмысловое ингибирование in vitro под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих конъюгат GalNAc
2
50
Первичные гепатоциты печени мышей высеивали в 96-луночные планшеты при 15000 клеток на лунку за 2 часа до обработки. Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 76, добавили в концентрации 2, 10, 50 или 250 нМ в среде Уильяма Е, и инкубировали клетки в течение ночи при 37°С в 5% СО. Клетки лизировали через 16 часов после добавления олигонуклеотида, а общую РНК очистили при помощи RNease 3000 BioRobot (Qiagen). Уровни мРНК SRB-1 определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Значения IC определили при помощи программы Prism 4 (GraphPad). Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие множество различных групп конъюгата GalNAc и множество различных расщепляемых фрагментов, являются значительно более эффективными в in vitro эксперименте свободного поглощения, чем исходные олигонуклеотиды, не содержащие группу конъюгата GalNAc (ISIS 353382 и 666841).
3
3
a
3
а
3
a
3
а
3
a
3
a
3
а
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
Структура GalNAc-1 а показана ранее в примере 9, GalNAc-3 показана в примере 39, GalNAc-5 показана в примере 49, GalNAc-6 показана в примере 51, GalNAc-7 показана в примере 48, GalNAc-8 показана в примере 47, GalNAc-9 показана в примере 52, GalNAc-10 показана в примере 46, GalNAc-12 показана в примере 61, GalNAc-13 показана в примере 62, GalNAc-14 показана в примере 63, GalNAc-15 показана в примере 64, GalNAc-17 показана в примере 68, GalNAc-18 показана в примере 69, GalNAc-19 показана в примере 70, GalNAc-20 показана в примере 71, и GalNAc-23 показана в примере 76.
3
Пример 83: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на фактор XI, содержащих кластер GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 77, испытали в исследовании дозозависимого ингибирования фактора XI у мышей.
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9, GalNAc-3 показана в Примере 39, GalNAc-7 показана в Примере 48, GalNAc-10 показана в Примере 46, и GalNAc-13 показана в Примере 62.
Лечение
Шести-восьминедельным мышам один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом три дозы олигонуклеотида, перечисленного ниже, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последней дозы. Уровни мРНК фактора XI в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени и нормализовали к циклофилину по стандартным протоколам. Измерили также трансаминазы в печени, АМК и билирубин. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент для каждой экспериментальной группы, нормализованный к контролю с PBS.
Как показано в Таблице 78, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК фактора XI в печени дозозависимым образом. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были более эффективными, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 404071). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие 5'-GalNAc конъюгат (ISIS 663086, 678347, 678348 и 678349), были еще более эффективными, чем олигонуклеотид, содержащий 3'-GalNAc конъюгат (ISIS 656173).
3
Пример 84: Продолжительность действия in vivo олигонуклеотидов, направленных на фактор XI, содержащих конъюгат GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 77, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.
Лечение
Шести-восьминедельным мышам ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 77, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови брали из хвостовой вены за день до введения дозы для определения исходного значения, а также на 3, 10 и 17 день после введения дозы. Уровни белка фактора XI в плазме определяли твердофазным иммуноферментным анализом, используя иммобилизованные и биотинилированные детекторные антитела для фактора XI производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота (кат.№AF2460 и №BAF2460, соответственно), а также реагент OptEIA, набор В (кат. №550534, BD Biosciences, Сан-Хосе, штат Калифорния). Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней белка фактора XI в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были более эффективными и имели более продолжительное действие, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 404071). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие 5'-GalNAc конъюгат (ISIS 663086, 678347, 678348 и 678349), были еще более эффективными с еще более продолжительным действием, чем олигонуклеотид, содержащий 3'-GalNAc конъюгат (ISIS 656173).
3
Пример 85: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих конъюгат GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 76, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.
Лечение
Шести-восьминедельным мышам C57BL/6 один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом три дозы олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 76, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 48 часов после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 в печени для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.
Как показано в Таблицах 80 и 81, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом.
Измерили также уровни трансаминазы в печени, общего билирубина, АМК и массы тела по стандартным протоколам. Средние значения для каждой экспериментальной группы представлены ниже в Таблице 82.
3
Пример 86: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на TTR, содержащих кластер GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 83, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования человеческого транстиретина (TTR) у трансгенных мышей, экспрессирующих человеческий TTR ген.
Лечение
Восьминедельным TTR трансгенным мышам один раз в неделю в течение трех недель, в целом три дозы, вводили подкожную инъекцию олигонуклеотида и дозы, перечисленных в представленных ниже таблицах, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. В течение эксперимента в различных временных точках брали образцы крови из хвостовой вены и измеряли уровни белка TTR в плазме, ALT и AST, которые представлены в Таблицах 85-87. После усыпления животных измерили уровни ALT, AST и человеческого TTR в плазме, а также массы тела, массы органов и уровни мРНК человеческого TTR в печени. Уровни белка TTR измерили при помощи клинического анализатора (AU480, Beckman Coulter, штат Калифорния). Реагент для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc., использовали по стандартным протоколам для определения уровней мРНК человеческого TTR в печени. Результаты, показанные в Таблицах 84-87, представляют собой средние значения для каждой экспериментальной группы. Уровни мРНК представляют собой средние значения относительно среднего значения для PBS группы. Уровни белка в плазме представляют собой средние значения относительно среднего значения для PBS группы в исходном состоянии. Массы тела представляют собой среднее процентное изменение массы от исходного значения до умерщвления для каждой отдельной экспериментальной группы. Представленные массы органов нормализованы к массе тела животного, а затем представлена средняя нормализованная масса органов для каждой экспериментальной группы относительно средней нормализованной массы органов для PBS группы.
В Таблицах 84-87 «BL» означает исходное значения измерений, выполненных непосредственно перед введением первой дозы. Как показано в Таблицах 84 и 85, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни экспрессии TTR дозозависимым образом. Олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были более эффективными, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 420915). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc и смешанные PS/PO межнуклеозидные связи, были еще более эффективными, чем олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc и только PS связи.
3
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
Легенда для Таблицы 85 представлена в Примере 74. Структура GalNAc-1 показана в Примере 9. Структура GalNAc-3 показана в Примере 39. Структура GalNAc-7 показана в Примере 48. Структура GalNAc-10 показана в Примере 46. Структура GalNAc-13 показана в Примере 62. Структура GalNAc-19 показана в Примере 70.
3
Пример 87: Продолжительность действия in vivo однократных доз олигонуклеотидов, направленных на TTR, содержащих кластер GalNAc
ISIS №420915 и 660261 (см. Таблицу 83), испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей. ISIS №420915, 682883 и 682885 (см. Таблицу 83) также испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.
Лечение
Восьминедельным самцам трансгенных мышей, которые экспрессируют человеческий TTR, ввели однократную подкожную инъекцию 100 мг/кг ISIS №420915 или 13,5 мг/кг ISIS №660261. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови из хвостовой вены брали до введения дозы для определения исходных показателей и на 3, 7, 10, 17, 24 и 39 день после введения дозы. Уровни белка TTR в плазме измеряли так, как описано в Примере 86. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней белка TTR в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням.
Лечение
Самкам трансгенных мышей, которые экспрессируют человеческий TTR, ввели однократную подкожную инъекцию 100 мг/кг ISIS №420915, 10,0 мг/кг ISIS №682883 или 10,0 мг/кг 682885. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови из хвостовой вены брали до введения дозы для определения исходных показателей и на 3, 7, 10, 17, 24 и 39 день после введения дозы. Уровни белка TTR в плазме измеряли так, как описано в Примере 86. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней белка TTR в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням.
Результаты в Таблицах 88 и 89 демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, являются более эффективными и имеют более продолжительное действие, чем исходный олигонуклеотид без конъюгата (ISIS 420915).
3
Пример 88: Сплайсинг-модулирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SMN, содержащих конъюгат GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 90, испытали на сплайсинг-модулирование человеческих генов выживаемости мотонейронов (SMN) у мышей.
3
a
3
b
3
a
6
Структура GalNAc-7 показана ранее в Примере 48. «X» означает 5'-первичный амин, полученный компанией Gene Tools (Филомат, штат Орегон), aGalNAc-7 означает структуру GalNAc-7, не содержащую часть -NH-С-О линкера, как показано ниже:
ISIS №703421 и 703422 представляют собой морфолино-олигонуклеотиды, при этом каждый нуклеотид из двух олигонуклеотидов представляет собой морфолино-нуклеотид.
Лечение
Шестинедельным трансгенным мышам, экспрессирующим человеческий SMN, ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 91, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 2 самцов и 2 самок. Мышей усыпили через 3 дня после введения дозы для определения уровней мРНК человеческого SMN в печени с экзоном 7 и без него, используя ПЦР в реальном времени по стандартным протоколам. Общую РНК измерили при помощи реагента Ribogreen. Уровни мРНК SMN нормализовали к общей мРНК, а затем нормализовали к средним значениям в группе, обработанной солевым раствором. Полученные средние отношения мРНК SMN, содержащей экзон 7, к мРНК SMN, не содержащей экзон 7, представлены в Таблице 91. Результаты демонстрируют, что полностью модифицированные олигонуклеотиды, которые модулируют сплайсинг и содержат конъюгат GalNAc, являются значительно более эффективными для изменения сплайсинга в печени, чем исходные олигонуклеотиды, не содержащие конъюгат GalNAc. Кроме того, эта тенденция сохраняется для химизма многократных модификаций, включая 2'-МОЕ и морфолино-модифицированные олигонуклеотиды.
3
Пример 89: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на аполипопротеин А (Аро(а)), содержащих конъюгат GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 92, испытали в исследовании дозозависимого ингибирования Аро(а) у трансгенных мышей.
3
a
Структура GalNAc-7 показана в Примере 48.
Лечение
Восьминедельным самкам мышей C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом шесть доз олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 92, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 3-4 животных. Образцы крови из хвостовой вены брали за день до введения первой дозы и еженедельно после введения каждой дозы для определения уровней белка Аро(а) в плазме. Мышей усыпили через два дня после последнего введения. Уровни мРНК Аро(а) в печени определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни белка Аро(а) в плазме определили при помощи твердофазного иммуноферментного анализа, и определили уровни трансаминазы в печени. Результаты анализа мРНК и белка в плазме в Таблице 93 представлены как среднее процентное значение для экспериментальной группы относительно группы, обработанной PBS. Уровни белка в плазме дополнительно нормализовали к исходному значению (BL) для группы с PBS. Средние абсолютные уровни трансаминазы и массы тела (% относительно среднего исходного значения) представлены в Таблице 94.
Как показано в Таблице 93, лечение олигонуклеотидами снижает уровни мРНК Аро(а) в печени и уровни белка в плазме дозозависимым образом. Кроме того, олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был значительно более эффективным с более продолжительным действием, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгат GalNAc. Как показано в Таблице 94, представленные олигонуклеотиды не влияют на уровни трансаминазы и массы тела, что указывает на хорошую переносимость олигонуклеотидов.
3
Пример 90: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на TTR, содержащих кластер GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в таблице 95, испытывали в дозозависимом исследовании на антисмысловое ингибирование человеческого транстиретина (TTR) у трансгенных мышей, которые экспрессируют человеческий ген TTR.
Лечение
Каждой TTR трансгенной мыши один раз в неделю в течение трех недель, в целом три дозы, вводили подкожные инъекции олигонуклеотида и дозы, перечисленных в таблице 96, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Перед введением первой дозы взяли образец крови из хвостовой вены для определения уровней белка TTR в плазме в исходном состоянии (BL). Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. Уровни белка TTR измерили при помощи клинического анализатора (AU480, Beckman Coulter, штат Калифорния). Реагент для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc., использовали по стандартным протоколам для определения уровней мРНК человеческого TTR в печени. Результаты, показанные в Таблице 96, представляют собой средние значения для каждой экспериментальной группы. Уровни мРНК представляют собой средние значения относительно среднего значения для PBS группы. Уровни белка в плазме представляют собой средние значения относительно среднего значения для PBS группы в исходном состоянии. «BL» означает исходное значения измерений, выполненных непосредственно перед введением первой дозы. Как показано в Таблице 96, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни экспрессии TTR дозозависимым образом. Олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был более эффективным, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 420915), а олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфирный или дезоксиаденозиновый расщепляемый фрагмент, демонстрировали значительное усиление эффективности, по сравнению с исходным соединением, не содержащим конъюгат (см. ISIS №682883 и 666943 по сравнению с 420915, а также см. Примеры 86 и 87).
3
а
3
a
3
а
3
a
Легенда для Таблицы 95 представлена в Примере 74. Структура GalNAc-3 показана в Примере 39. Структура GalNAc-7 показана в Примере 48. Структура GalNAc-10 показана в Примере 46. Структура GalNAc-13 показана в Примере 62.
3
Пример 91: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на фактор VII, содержащих конъюгат GalNAc, у приматов, не являющихся человеком
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 97, испытали в нетерминальном исследовании повышения дозы на антисмысловое ингибирование фактора VII у обезьян.
Лечение
Обезьянам, ранее не подверженным экспериментам, на 0, 15 и 29 день вводили подкожные инъекции повышающихся доз олигонуклеотидов, перечисленных в Таблице 97, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 самцов и 1 самки. Перед введением первой дозы и в различные временные точки после нее брали образцы крови для определения уровней белка фактора VII в плазме. Уровни белка фактора VII определяли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты, показанные в Таблице 98, представляют собой средние значения для каждой экспериментальной группы относительно среднего значения для группы PBS в исходном состоянии (BL), измерения выполнены непосредственно перед введением первой дозы. Как показано в Таблице 98, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни экспрессии фактора VII дозозависимым образом, и олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был значительно более эффективным у обезьян, чем олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc.
3
а
Легенда для Таблицы 97 представлена в Примере 74. Структура GalNAc-10 показана в Примере 46.
3
Пример 92: Антисмысловое ингибирование в первичных гепатоцитах под действием олигонуклеотидов, направленных на Аро-CIII, содержащих конъюгат GalNAc
50
Первичные мышиные гепатоциты высеивали в 96-луночные планшеты при 15000 клеток на лунку и добавляли олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 99, направленные на мышиный АроС-III в концентрации 0,46, 1,37, 4,12 или 12,35, 37,04, 111,11 или 333,33 нМ, или 1,00 мкМ. После инкубации с олигонуклеотидами в течение 24 часов клетки лизировали и очистили общую РНК при помощи RNeasy (Qiagen). Уровни мРНК АроС-III определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc.) по стандартным протоколам. Значения IC определили при помощи программы Prism 4 (GraphPad). Результаты демонстрируют, что независимо от того, является ли расщепляемый фрагмент фосфодиэфиром или фосфодиэфир-связанным дезоксиаденозином, олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были значительно более эффективными, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата.
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
3
a
Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9, GalNAc-3 показана в Примере 39, GalNAc-7 показана в Примере 48, GalNAc-10 показана в Примере 46, GalNAc-13 показана в Примере 62, и GalNAc-19 показана в Примере 70.
3
Пример 93: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих смешанные крылья и 5'-GalNAc конъюгат
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 100, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.
3
a
3
a
3
Структура GalNAc-3 показана ранее в Примере 39, а структура GalNAc-7 показана ранее в Примере 48. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «k» означает 6'-(S)-СН бициклический нуклеозид (cEt); «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО). Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины.
Лечение
Шести-восьминедельным мышам C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 100, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. Уровни мРНК SRB-1 в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени. Уровни мРНК SRB-1 нормализовали к уровням мРНК циклофилина по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, по сравнению с контрольной группой, обработанной солевым раствором. Как показано в Таблице 101, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом, а гэпмерные олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc и имеющие крылья, которые представляют собой либо полностью cEt, либо смешанные сахарные модификации, были существенно более эффективными, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата и содержащий полностью cEt модифицированные крылья.
Измерили также массы тела, уровни трансаминазы в печени, общий билирубин и АМК, а средние значения для каждой экспериментальной группы представлены в Таблице 101. Масса тела показана как средний процент массы тела относительно исходной массы тела (% BL), измеренный непосредственно перед введением дозы олигонуклеотида.
3
Пример 94: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих 2'-сахарные модификации и 5'-GalNAc конъюгат
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 102, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.
3
a
3
a
Верхний индекс «m» означает 2'-0-метил-модифицированный нуклеозид. Полная легенда к таблице представлена в Примере 74. Структура GalNAc-3 показана ранее в Примере 39, а структура GalNAc-7 показана в Примере 48.
Лечение
Исследование проводили по протоколу, описанному в Примере 93. Результаты представлены ниже в Таблице 103 и демонстрируют, что и 2'-МОЕ, и 2'-ОМе-модифицированные олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были значительно более эффективными, чем соответствующие исходные олигонуклеотиды, не содержащие конъюгата. Результаты измерений массы тела, трансаминазы в печени, общего билирубина и АМК демонстрируют, что эти соединения хорошо переносятся.
3
Пример 95: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих бициклические нуклеозиды и 5'-GalNAc конъюгат
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 104, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.
2
3
a
3
а
3
a
Нижний индекс «g» означает фтор-ГНК нуклеозид, нижний индекс «1» означает закрытый нуклеозид, содержащий мостик 2'-O-СН-4'. Другие сокращения представлены в легенде таблицы Примера 74. Структура GalNAc-1 показана ранее в Примере 9, структура GalNAc-3 показана ранее в Примере 39, и структура GalNAc-7 показана ранее в Примере 48.
Лечение
Исследование проводили по протоколу, описанному в Примере 93. Результаты представлены ниже в Таблице 105 и демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc и различные бициклические нуклеозидные модификации, были значительно более эффективными, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата и содержащий бициклические нуклеозидные модификации. Кроме того, олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc и фтор-ГНК модификации, был существенно более эффективным, чем исходное соединение, не содержащее конъюгата и содержащее фтор-ГНК модификации. Результаты измерений массы тела, трансаминазы в печени, общего билирубина и АМК демонстрируют, что эти соединения хорошо переносятся.
3
Пример 96: Связывание белка плазмы антисмысловыми олигонуклеотидами, содержащими группу конъюгата GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 70, направленные на АроС-III, и олигонуклеотиды в Таблице 106, направленные на Аро(а), испытали в анализе ультрафильтрации для оценки связывания белка в плазме.
3
a
Легенда таблицы представлена в Примере 74. Структура GalNAc-7 показана ранее в Примере 48.
2
2
Элементы для ультрафильтрации Ultrafree-MC (номинальное ограничение молекулярной массы 30000, слабосвязывающая регенерированная целлюлозная мембрана, Millipore, Бедфорд, штат Массачусетс) предварительно кондиционировали с 300 мкл 0,5% Tween 80 и центрифугировали при 2000 g в течение 10 минут, затем с 300 мкл 300 мкг/мл раствора контрольного олигонуклеотида в HO и центрифугировали при 2000 g в течение 16 минут. Для оценки неспецифического связывания с фильтрами каждого исследуемого олигонуклеотида из Таблиц 70 и 106, используемых в испытаниях, 300 мкл 250 нг/мл раствора олигонуклеотида в НО при рН 7,4 поместили в предварительно кондиционированные фильтры и центрифугировали при 2000 g в течение 16 минут.Нефильтрованные и фильтрованные образцы анализировали твердофазным иммуноферментным анализом для определения концентраций олигонуклеотидов. Для получения средней концентрации для каждого образца использовали три экземпляра. Среднюю концентрацию фильтрованного образца относительно нефильтрованного образца использовали для определения процента олигонуклеотида, прошедшего через фильтр без плазмы (% выделения).
Замороженные образцы цельной плазмы, собранные в К3-ЭДТК и полученные от здоровых, не принимающих лекарства людей-добровольцев, яванских макак и мышей CD-1, приобрели у компании Bioreclamation LLC (Вестбери, штат Нью-Йорк). Исследуемые олигонуклеотиды добавляли к 1,2 мл аликвотам плазмы в двух концентрациях (5 и 150 мкг/мл). Аликвоту (300 мкл) каждого маркированного образца плазмы поместили на предварительно кондиционированный фильтровальный элемент и инкубировали при 37°С в течение 30 минут, затем сразу выполнили центрифугирование при 2000 g в течение 16 минут. Аликвоты фильтрованных и нефильтрованных маркированных образцов плазмы анализировали твердофазным иммуноферментным анализом для определения концентрации олигонуклеотида в каждом образце. Использовали три экземпляра каждой концентрации для определения среднего процента связанного и несвязанного олигонуклеотида в каждом образце. Среднюю концентрацию фильтрованного образца относительно концентрации нефильтрованного образца использовали для определения процента олигонуклеотида в плазме, не связанного с белками плазмы (% несвязанного). Окончательные значения несвязанного олигонуклеотида корректировали на неспецифическое связывание путем деления % несвязанного на % выделения для каждого олигонуклеотида. Окончательные значения % связанного олигонуклеотида определили вычитанием окончательных значений % несвязанного из 100. Результаты показаны в Таблице 107 для двух концентраций испытанного олигонуклеотида (5 и 150 мкг/мл) в плазме каждого вида. Результаты демонстрируют, что группы конъюгата GalNAc не оказывают существенного влияния на связывание белка плазмы. Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие только PS межнуклеозидные связи и смешанные PO/PS связи, - оба варианта связывают белки плазмы, при этом олигонуклеотиды, содержащие только PS связи, связывают белки плазмы в несколько большей степени, чем олигонуклеотиды, содержащие смешанные PO/PS связи.
3
Пример 97: Модифицированные олигонуклеотиды, направленные на TTR, содержащие группу конъюгата GalNAc
Олигонуклеотиды, представленные в Таблице 108, содержащие конъюгат GalNAc, предназначены для воздействия на TTR.
3
3
a
3
а
3
a
3
a
3
a
Легенда для Таблицы 108 представлена в Примере 74. Структура GalNAc-1 показана в Примере 9. Структура GalNAc-3 показана в Примере 39. Структура GalNAc-7 показана в Примере 48. Структура GalNAc-10 показана в Примере 46. Структура GalNAc-13 показана в Примере 62. Структура GalNAc-19 показана в Примере 70.
Пример 98: Оценка про воспалительного действия олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc, в анализе hPMBC
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 109, исследовали на провоспалительное действие в анализе hPMBC, описанном в Примерах 23 и 24. (См. Таблицы 30, 83, 95 и 108, где представлено описание олигонуклеотидов). ISIS 353512 обладает высоким ответом, и его использовали в качестве положительного контроля, а другие олигонуклеотиды описаны в Таблицах 83, 95 и 108. Результаты, представленные в Таблице 109, получены с использованием крови, полученной от одного донора-добровольца. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие смешанные PO/PS межнуклеозидные связи, вызывают значительно более слабые провоспалительные реакции, по сравнению с теми же олигонуклеотидами, содержащими только PS связи. Кроме того, в этом анализе группа конъюгата GalNAc не оказывает существенного влияния.
Пример 99: Связывающие аффинности олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc, в отношении асиалогликопротеинового рецептора
125
125
125
125
6
-8
125
-11
-5
-2
125
125
2
D
Связывающие аффинности олигонуклеотидов, перечисленных в Таблице 110 (см. Таблицу 76, в которой представлено описание олигонуклеотидов), в отношении асиалогликопротеинового рецептора испытали в анализе конкурентного связывания рецепторов. Конкурирующий лиганд, α1-кислый гликопротеин (AGP), инкубировали в 50 мМ ацетатно-натриевом буфере (рН 5) с 1 ед. нейраминидазы-агарозы в течение 16 часов при 37°С, а > 90% дезалилирование подтвердили анализом с сиаловой кислотой или эксклюзионной хроматографией (SEC). Для йодирования АГФ использовали монохлорид йода по способу, описанному авторами Atsma et al. (см. J Lipid Res. январь 1991 г.; 32(1): 173-81.) В этом способе дезалилированный al-кислый гликопротеин (de-AGP) добавляли к 10 мМ хлориду йода, NaI и 1 М глицина в 0,25 М NaOH. После инкубации в течение 10 минут при комнатной температуре, I-меченный de-AGP отделили от свободного I двукратным концентрированием смеси с использованием спин-колонки с номинальным отсечением по молекулярной массе 3 кДа. Белок испытали на эффективность мечения и чистоту на системе ВЭЖХ, оснащенной колонкой Agilent SEC-3 (7,8×300 мм) и счетчиком β-RAM. Конкуретные исследования с использованием I-меченного de-AGP и ASO, содержащих различные GalNAc-кластеры, выполнили следующим образом. Человеческие клетки HepG2 (10 клеток/мл) поместили на 6-луночные планшеты в 2 мл соответствующей питательной среды. Использовали среду MEM с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), 2 мМ L-глутамина и 10 мМ HEPES. Клетки выращивали в течение 16-20 часов при 37°С с 5% и 10% СО, соответственно. Перед экспериментом клетки промыли средой без FBS. Клетки выращивали в течение 30 минут при 37°С с 1 мл конкурентной смеси, содержащей соответствующую питательную среду с 2% FBS, 10 М I-меченным de-AGP и ASO, содержащим GalNAc-кластер в концентрациях в диапазоне от 10 до 10 М. Неспецифическое связывание определили в присутствии 10 М GalNAc сахара. Клетки дважды промыли средой без FBS для удаления несвязанного I-меченного de-AGP и конкурирующего GalNAc ASO. Клетки лизировали с использованием буфера RLT производства компании Qiagen, содержащего 1% β-меркаптоэтанола. Лизаты перенесли в круглодонные аналитические пробирки после быстрого 10-минутного цикла замораживания/оттаивания, и анализировали на γ-счетчике. Неспецифическое связывание вычли, а затем разделили импульсы белка I на значение импульсов при самой низкой концентрации GalNAc-ASO. Кривые ингибирования построили по уравнению моносайтового конкурентного связывания, используя алгоритм нелинейной регрессии для расчета связывающей аффиности (K).
Результаты в Таблице 110 были получены в экспериментах, выполненных в пять разных дней. Результаты для олигонуклеотидов, отмеченных верхним индексом «а», представляют собой средние значения экспериментов, выполненных в два разных дня. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc на 5'-конце, связывают асиалогликопротеиновый рецептор человеческих клеток HepG2 с аффинностью, которая в 1,5-16 раз больше, чем для олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc на 3'-конце.
Пример 100: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc, направленных на Аро(а), in vivo
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 111а, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.
3
a
Структура GalNAc-7 показана в Примере 48.
Лечение
Каждой самке трансгенных мышей, экспрессирующих человеческий Аро(а), один раз в неделю, в целом 6 доз, вводили подкожную инъекцию олигонуклеотида и дозы, перечисленной в Таблице 111b, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 3 животных. Образцы крови брали за день до введения дозы для определения исходных уровней белка Аро(а) в плазме, а также через 72 часа, 1 неделю и 2 недели после введения первой дозы. Дополнительные пробы крови брали через 3 недели, 4 недели, 5 недель и 6 недель после введения первой дозы. Уровни белка Аро(а) в плазме измеряли при помощи твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты в Таблице 111b представлены как средний процент от уровней белка Аро(а) в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням (% BL). Результаты показывают, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, демонстрируют эффективное снижение экспрессии Аро(а). Этот мощный эффект наблюдали для олигонуклеотида, содержащего только PS межнуклеозидные связи, и для олигонуклеотида, содержащего смешанные РО и PS связи.
Пример 101: Антисмысловое ингибирование олигонуклеотидами, содержащими кластер GalNAc, связанный через стабильный фрагмент
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 112, испытали на ингибирование экспрессии мышиного АРОС-III in vivo. Мышам С57В1/6 ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 112, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Каждой мыши, проходившей лечение с ISIS 440670, вводили дозу 2, 6, 20 или 60 мг/кг. Каждой мыши, проходившей лечение с ISIS 680772 или 696847, вводили 0,6, 2, 6 или 20 мг/кг. Группа конъюгата GalNAc в ISIS 696847 связана через стабильный фрагмент, тиофосфатную связь, вместо легко расщепляемой фосфодиэфир-содержащей связи. Животных усыпили через 72 часа после введения дозы. Уровни мРНК АРОС-III в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени. Уровни мРНК АРОС-III нормализовали к уровням мРНК циклофилина по стандартным протоколам. Результаты представлены в Таблице 112 как средний процент уровней мРНК АРОС-III для каждой экспериментальной группы, по сравнению с контрольной группой, обработанной солевым раствором. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, были существенно более эффективными, чем олигонуклеотид, не содержащий группу конъюгата. Кроме того, олигонуклеотид, содержащий группу конъюгата GalNAc, связанную с олигонуклеотидом через расщепляемый фрагмент (ISIS 680772), был еще более эффективным, чем олигонуклеотид, содержащий группу конъюгата GalNAc, связанную с олигонуклеотидом через стабильный фрагмент (ISIS 696847).
3
a
Структура GalNAc-7 показана в Примере 48.
Пример 102: Распределение в печени антисмысловых олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc
Оценили распределение в печени ISIS 353382 (см. Таблицу 36), который не содержит конъюгата GalNAc, и ISIS 655861 (см. Таблицу 36), который содержит конъюгат GalNAc. Самцам мышей balb/c ввели однократную подкожную инъекцию ISIS 353382 или 655861 в дозе, перечисленной в Таблице 113. Каждая экспериментальная группа состояла из 3 животных, за исключением группы с дозой 18 мг/кг для ISIS 655861, которая состояла из 2 животных. Животных усыпили через 48 часов после введения дозы для определения распределения олигонуклеотидов в печени. Для измерения количества молекул антисмыслового олигонуклеотида на клетку, метку трис-бипиридина рутения (II) (MSD TAG, Meso Scale Discovery) конъюгировали с олигонуклеотидным образцом, используемым для обнаружения антисмысловых олигонуклеотидов. Результаты, представленные в Таблице 113, представляют собой средние концентрации олигонуклеотида для каждой экспериментальной группы в единицах измерения миллионов молекул олигонуклеотида на клетку. Результаты демонстрируют, что при равных дозах олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, содержался в более высоких концентрациях в целом в печени и в гепатоцитах, чем олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc. Кроме того, олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, содержался в более низких концентрациях в непаренхиматозных клетках печени, чем олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc. И тогда как концентрации ISIS 655861 в гепатоцитах и непаренхиматозных клетках печени были одинаковыми в расчете на одну клетку, содержание гепатоцитов в печени составляет приблизительно 80% по объему. Следовательно, основная часть олигонуклеотида ISIS 655861, содержащегося в печени, находилась в гепатоцитах, тогда как основная часть олигонуклеотида ISIS 353382, содержащегося в печени, находилась в непаренхиматозных клетках печени.
3
Пример 103: Продолжительность действия in vivo олигонуклеотидов, направленных на АРОС-III, содержащих конъюгат GalNAc
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 114, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.
3
a
3
a
Структура GalNAc-3 показана в Примере 39, a GalNAc-19 показана в Примере 70.
Лечение
Самкам трансгенных мышей, экспрессирующим человеческий АРОС-Ш, ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 114, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 3 животных. Образцы крови из брали до введения дозы для определения исходных показателей и на 3, 7, 14, 21, 28, 35 и 42 день после введения дозы. Уровни триглицеридов и белка АРОС-Ш в плазме измеряли так, как описано в Примере 20. Результаты в Таблице 115 представлены как средний процент уровней триглицеридов и АРОС-III в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням. Сравнение результатов в Таблице 71 примера 79 с результатами, представленными ниже в таблице 115, демонстрирует, что олигонуклеотиды, содержащие смесь фосфодиэфирных и тиофосфатных межнуклеозидных связей, обладают увеличенной продолжительностью действия, чем эквивалентные олигонуклеотиды, содержащие только тиофосфатные межнуклеозидные связи.
2
Пример 104: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат 5'-GalNAc
3
2
4
Соединение 120 имеется в продаже, а синтез соединения 126 описан в Примере 49. Соединение 120 (1 г, 2,89 ммоль), HBTU (0,39 г, 2,89 ммоль) и HOBt (1,64 г, 4,33 ммоль) растворили в ДМФА (10 мл) и добавили N,N-диизопропилэтиламин (1,75 мл, 10,1 ммоль). Примерно через 5 минут в реакционную смесь добавили бензиловый эфир аминогексановой кислоты (1,36 г, 3,46 ммоль). Через 3 часа реакционную смесь вылили в 100 мл 1 М раствора NaHSO4 и экстрагировали 2 × 50 мл этилацетата. Органические слои объединили и промыли 3 × 40 мл насыщенного раствора NaHCO и 2 × насыщенным солевым раствором, высушили при помощи NaSO, отфильтровали и концентрировали. Продукт очистили силикагелевой колоночной хроматографией (ДХМ:ЕА:гексаны, 1:1:1) с получением соединения 231. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 231 (1,34 г, 2,438 ммоль) растворили в дихлорметане (10 мл) и добавили трифторуксусную кислоту (10 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и выпарили вместе с толуолом (3 × 10 мл).
3
4
2
4
2
2
a
2
2
2
a
Остаток высушили при пониженном давлении с получением соединения 232 в виде трифторацетатной соли. Синтез соединения 166 описан в Примере 54. Соединение 166 (3,39 г, 5,40 ммоль) растворили в ДМФА (3 мл). Раствор соединения 232 (1,3 г, 2,25 ммоль) растворили в ДМФА (3 мл) и добавили N,N-иизопропилэтиламин (1,55 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, затем вылили в воду (80 мл), а водный слой экстрагировали EtOAc (2 × 100 мл). Органическую фазу отделили и промыли насыщенным водным раствором NaHCO (3 × 80 мл), 1 М NaHSO (3 × 80 мл) и насыщенным солевым раствором (2 × 80 мл), затем высушили (NaSO), отфильтровали и концентрировали. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией с получением соединения 233. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 233 (0,59 г, 0,48 ммоль) растворили в метаноле (2,2 мл) и этилацетате (2,2 мл). Добавили палладий на углероде (10 масс. % Pd/C, влажный, 0,07 г) и перемешивали реакционную смесь в атмосфере водорода в течение 3 часов. Реакционную смесь отфильтровали через слой целита и концентрировали с получением карбоновой кислоты. Карбоновую кислоту (1,32 г, 1,15 ммоль, не содержащая кластера кислота) растворили в ДМФА (3,2 мл). К ней добавили добавили - диизопропилэтиламин (0,3 мл, 1,73 ммоль) и PFP-ТФК (0,30 мл, 1,73 ммоль). Через 30 минут перемешивания при комнатной температуре реакционную смесь вылили в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (2 × 50 мл). Выполнили стандартную процедуру выделения продукта, как описано выше, с получением соединения 234. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Олигонуклеотид 236 получили по общему способу, описанному в Примере 46. Кластерная часть GalNAc (GalNAc-24) группы конъюгата GalNAc-24 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc-24 (GalNAc-24-CM) представлена ниже:
1
Пример 105: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc-25
Синтез соединения 166 описан в Примере 54. Олигонуклеотид 236 получили по общему способу, описанному в Примере 46.
Альтернативно, олигонуклеотид 236 синтезировали по схеме, изображенной ниже, а соединение 238 использовали для получения олигонуклеотида 236 по способам, описанным в Примере 10.
1
1
1
1
1
a
Кластерная часть GalNAc (GalNAc-25a) группы конъюгата GalNAc-25 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc-25 (GalNAc-25-CM) представлена ниже:
2
3
Пример 106: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих 5'-GalNAc или 5'-GalNAc конъюгат
Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблицах 116 и 117, испытали в дозозависимых исследованиях антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Лечение
50
Шестинедельным самцам мышей C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию 2, 7 или 20 мг/кг ISIS №440762; или 0,2, 0,6, 2, 6 или 20 мг/кг ISIS №686221, 686222 или 708561; или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. Уровни мРНК SRB-1 в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени. Уровни мРНК SRB-1 нормализовали к уровням мРНК циклофилина по стандартным протоколам. Антисмысловые олигонуклеотиды снижают уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом, и результаты ED представлены в таблицах 116 и 117. Хотя в предшествующих исследованиях показано, что трехвалентные GalNAc-сопряженные олигонуклеотиды существенно более эффективны, чем двухвалентные GalNAc-сопряженные олигонуклеотиды, которые в свою очередь существенно более эффективны, чем одновалентные GalNAc-сопряженные олигонуклеотиды (см., например, Khorev et al., Bioorg. & Med. Chem., Vol. 16, 5216-5231 (2008)), обработка антисмысловыми олигонуклеотидами, содержащими одновалентные, двухвалентные и трехвалентные кластеры GalNAc, приводит к снижению уровней мРНК SRB-1 с одинаковой эффективностью, как показано в Таблицах 116 и 117.
3
a
2
Легенда к таблице представлена в Примере 93. Структура GalNAc-13 показана ранее в Примере 62, а структура GalNAc-24a показана в Примере 104.
Легенда к таблице представлена в Примере 93. Структура GalNAci-25a показана в Примере 105.
Оценили также концентрации олигонуклеотидов, представленных в Таблицах 116 и 117, в печени, используя способы, описанные в Примере 75. Результаты, показанные ниже в Таблицах 117а и 117b, представляют собой средние значения общего содержания антисмысловых олигонуклеотидов в тканях для каждой экспериментальной группы, измеренные по УФ, в единицах измерения мкг олигонуклеотида на грамм ткани печени. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюагата GalNAc, накапливаются в печени в существенно более высоких количествах, чем при той же дозе олигонуклеотида, не содержащего группу конъюгата GalNAc. Кроме того, антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие один, два или три лиганда GalNAc в своих соответствующих группах конъюгата, накапливаются в печени в равных количествах. Этот результат является неожиданным с учетом данных, представленных выше в литературном источнике Khorev et al., и он согласуется с данными активности, представленными выше в Таблицах 116 и 117.
1
1
Пример 107: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc-26 или GalNAc-27
1
1
a
1
1
1
a
Олигонуклеотид 239 синтезировали связыванием соединения 47 (см. Пример 15) с кислотой 64 (см. Пример 32), используя HBTU и DIEA в ДМФА. Полученное амид-содержащее соединение фосфитилировали, затем присоединили к 5'-концу олигонуклеотида по способам, описанным в Примере 10. Кластерная часть GalNAc (GalNAc-26) группы конъюгата GalNAc-26 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc-26 (GalNAc-26-CM) представлена ниже:
1
Для присоединения группы конъюгата GalNAc к 3'-концу олигонуклеотида амид, образованный по реакции соединений 47 и 64, присоединили к твердой подложке по способам, описанным в Примере 7. Затем выполнили синтез олигонуклеотида по способам, описанным в Примере 9, с получением олигонуклеотида 240.
1
1
a
1
1
1
a
Кластерная часть GalNAc (GalNAc-27) группы конъюгата GalNAc-27 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc-27 (GalNAc-27-CM) представлена ниже:
Пример 108: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc, направленных на Аро(а), in vivo
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 118, испытали в исследовании однократной дозы на мышах.
3
a
Структура GalNAc-7 показана в Примере 48.
Лечение
Самцам трансгенных мышей, экспрессирующим человеческий Аро(а), ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида и дозы, перечисленных в Таблице 119, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови брали за день до введения дозы для определения исходных уровней белка Аро(а) в плазме, а также через 1 неделю после введения первой дозы. Образцы крови брали дополнительно еженедельно в течение примерно 8 недель. Уровни белка Аро(а) в плазме измеряли при помощи твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты в Таблице 119 представлены как средний процент от уровней белка Аро(а) в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням (% BL). Результаты показывают, что антисмысловые олигонуклеотиды снижают экспрессию белка Аро(а). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, демонстрируют еще более эффективное снижение экспрессии Аро(а), чем олигонуклеотид не содержащий группу конъюгата.
1
1
Пример 109: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc-28 или GalNAc-29
1
1
a
1
1
1
a
Олигонуклеотид 241 синтезировали по таким же способам, как описаны в Примере 71, с получением фосфорамидитного промежуточного соединения, после чего выполнили приемы, описанные в Примере 10, для синтеза олигонуклеотида. Кластерная часть GalNAc (GalNAc-28) группы конъюгата GalNAc-28 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc-28 (GalNAc-28-CM) представлена ниже:
1
Для присоединения группы конъюгата GalNAc к 3'-концу олигонуклеотида использовали такие же способы, как описаны в Примере 71, с получение гидроксильного промежуточного соединения, которое затем присоединили к твердой подложке по способам, описанным в Примере 7. Затем выполнили синтез олигонуклеотида по способам, описанным в Примере 9, с получением олигонуклеотида 242.
1
1
a
1
1
1
a
Кластерная часть GalNAc (GalNAc-29) группы конъюгата GalNAc-29 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc-29 (GalNAc-29-CM) представлена ниже:
1
Пример 110: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc-30
1
1
10
1
1
а
1
1
а
Олигонуклеотид 246, содержащий группу конъюгата GalNAc-30, где Y выбран из О, S, замещенного или незамещенного C-C алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила, синтезировали так, как показано выше. Кластерная часть GalNAc (GalNAc-30) группы конъюгата GalNAc-30 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации Y представляет собой часть расщепляемого фрагмента. В некоторых вариантах реализации Y представляет собой часть стабильного фрагмента, а расщепляемый фрагмент находится в олигонуклеотиде. Структура GalNAc-30 представлена ниже:
2
2
Пример 111: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc-31 или GalNAc-32
2
1
10
2
2
a
2
2
a
Олигонуклеотид 250, содержащий группу конъюгата GalNAc-31, где Y выбран из О, S, замещенного или незамещенного C-С алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила, синтезировали так, как показано выше. Кластерная часть 1NAC (GalNAc-31) группы конъюгата GalNAc-31 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации Y-содержащая группа, которая находится непосредственно возле 5'-конца олигонуклеотида, представляет собой часть расщепляемого фрагмента. В некоторых вариантах реализации Y-содержащая группа, которая находится непосредственно возле 5'-конца олигонуклеотида, представляет собой часть стабильного фрагмента, а расщепляемый фрагмент находится в олигонуклеотиде. Структура GalNAc-31 представлена ниже:
2
Синтез олигонуклеотида, содержащего конъюгат GalNAc-32, представлен ниже.
2
1
10
2
2
a
2
2
a
Олигонуклеотид 252, содержащий группу конъюгата GalNAc-32, где Y выбран из О, S, замещенного или незамещенного C-С алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила, синтезировали так, как показано выше. Кластерная часть 1NAC (GalNAc-32) группы конъюгата GalNAc-32 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации Y-содержащая группа, которая находится непосредственно возле 5'-конца олигонуклеотида, представляет собой часть расщепляемого фрагмента. В некоторых вариантах реализации Y-содержащая группа, которая находится непосредственно возле 5'-конца олигонуклеотида, представляет собой часть стабильного фрагмента, а расщепляемый фрагмент находится в олигонуклеотиде. Структура GaINAc-32 представлена ниже:
1
Пример 112: Модифицированные олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc
1
Олигонуклеотиды в Таблице 120, направленные на SRB-1, были синтезированы с группой конъюгата GalNAc для дополнительной проверки эффективности олигонуклеотидов, содержащих группы конъюгата, которые содержат один лиганд GalNAc.
Пример 113: Антисмысловые олигонуклеотиды, направленные на ангиопоэтин-подобный белок 3 и содержащие группу конъюгата GalNAc
Олигонуклеотиды, представленные в таблице 121, были сконструированы для направленного воздействия на человеческий ангиопоэтин-подобный белок 3 (ANGPTL3).
Пример 114: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc, направленных на человеческий ANGPTL3
Каждому шестинедельному самцу трансгенных мышей С57В1/6, экспрессирующих человеческий ANGPTL3, один раз в неделю вводили внутрибрюшинную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом две дозы олигонуклеотидов, перечисленных в таблице 122 (и описанных в таблице 121), или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через два дня после введения последней дозы. Уровни мРНК ANGPTL3 в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК ANGPTL3 в печени для каждой экспериментальной группы нормализованный к контролю с PBS.
Как показано в таблице 122, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК ANGPTL3 в печени дозозависимым образом, и олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был значительно более эффективным, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc.
Во время усыпления измерили также уровни аланинаминотрансферазы (ALT) в печень по стандартным протоколам. Результаты демонстрируют, что ни одна из экспериментальных групп не демонстрировала повышенных уровней ALT, указывая на то, что данные олигонуклеотиды были хорошо переносимыми.
Пример 115: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов содержащих группу конъюгата GalNAc, направленных на мышиный ANGPTL3
Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 123, испытали в дозозависимом исследовании на мышах.
3
a
Структура GalNAc-7 показана в Примере 48.
-/-
Мышей, нокаутных по рецептору липопротеинов низкой плотности (LDLR), выдерживали на вестерн-рационе в течение 1 недели, затем один раз в неделю вводили внутрибрюшинные инъекции дозы, представленной ниже, олигонуклеотида, перечисленного в таблице 123, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 5 животных. Образцы крови брали до введения первой дозы для определения исходных значений триглицеридов в плазме и через 2 недели после введения первой дозы. Результаты в таблице 124 представлены как средний процент от уровней триглицеридов в плазме для каждой экспериментальной группе, нормализованных к исходным уровням (% BL). Результаты показывают, что антисмысловые олигонуклеотиды снижают уровни триглицеридов дозозависимым образом. Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, демонстрируют еще более эффективное снижение уровней триглицеридов, чем олигонуклеотид, не содержащий группу конъюгата.
Пример 116: Антисмысловое ингибирование человеческого ангиопоэтин-подобного белка 3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами
Были сконструированы антисмысловые олигонуклеотиды, направленные на нуклеиновую кислоту ангиопоэтин-подобного белка 3 (ANGPTL3) и были протестированы на их воздействие in vitro на мРНК ANGPTL3. Антисмысловые олигонуклеотиды были протестированы в серии экспериментов, которые имели аналогичные условия культивирования. Результаты каждого эксперимента представлены в отдельных таблицах, показанных ниже. Культивированные клетки Нер3В с плотностью 20000 клеток на лунку трансфицировали с использованием электропорации с 4500 нМ антисмыслового олигонуклеотида. После периода обработки длительностью примерно 24 часов, РНК выделяли из клеток и уровни мРНК ANGPTL3 измеряли методом количественной ПЦР в реальном времени. Набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB (прямая последовательность CCGTGGAAGACCAATATAAACAATT, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 4; обратная последовательность
AGTCCTTCTGAGCTGATTTTCTATTTCT, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 5; последовательность зонда AACCAACAGCATAGTCAAATA, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 6) использовали для измерения уровней мРНК. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
Впервые сконструированные химерные антисмысловые олигонуклеотиды, указанные в представленных ниже таблицах, были сконструированы как 5-10-5 МОЕ гэпмеры. Гэпмеры 5-10-5 МОЕ имеют 20 нуклеозидов в длину, причем центральный сегмент гэп состоит из десяти 2'-дезоксинуклеозидов и окружен сегментами крыльев с 5' конца и с 3' конца, содержащими по пять нуклеозидов каждый. Каждый нуклеозид сегмента 5' крыла и нуклеозид сегмента 3' крыла имеет 2'-МОЕ модификации. Межнуклеозидные связи в каждом гэпмере представляют собой тиофосфатные (P=S) связи. Все остатки цитозина в каждом гэпмере представляют собой 5-метилцитозины. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена человека. «Сайт терминации» обозначает самый крайний 3' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена человека. Каждый гэпмер, перечисленный в представленных ниже таблицах, нацелен на мРНК ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 1 (с номером доступа GENBANK NM_014495.2) или геномную последовательность ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 2 (с номером доступа GENBANK NT_032977.9, усеченную по нуклеотидам с 33032001 по 33046000). «н/д» означает, что антисмысловой олигонуклеотид не направлен на указанную конкретную последовательность гена с 100% комплементарностью.
Пример 117: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами

5-10-5 МОЕ гэпмеры из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0,75 мкМ, 1,50 мкМ, 3,00 мкМ, 6,00 мкМ и 12,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
50
Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.
Пример 118: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами

5-10-5 МОЕ гэпмеры из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0,813 мкМ, 1,625 мкМ, 3,25 мкМ, 6,50 мкМ и 13,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
50
Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.
Пример 119: Антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В дезокси, МОЕ и (S)-cEt гэпмерами
Были сконструированы дополнительные антисмысловые олигонуклеотиды, нацеленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, и протестировано их влияние на мРНК ANGPTL3 in vitro. Культивированные клетки Нер3В с плотностью 20000 клеток на лунку трансфицировали с использованием электропорации с 4500 нМ антисмыслового олигонуклеотида. После периода обработки примерно 24 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
Новые химерные антисмысловые олигонуклеотиды в представленных ниже таблицах были сконструированы как дезокси, МОЕ и (S)-cEt олигонуклеотиды. Дезокси, МОЕ и (S)-cEt олигонуклеотиды имеют 16 нуклеозидов в длину, причем нуклеозид содержит либо модификацию сахара МОЕ, либо модификацию сахара (S)-cEt, либо дезокси модификацию сахарного остатка. Сахарные модификации каждого антисмыслового олигонуклеотида описаны как «ееk-d10-kke», где «k» означает модификацию сахара (S)-cEt; «d» означает дезоксирибозу; число означает количество дезоксирибозных сахарных остатков; и «е» означает МОЕ модификацию сахара. Межнуклеозидные связи в каждом олигонуклеотиде представляют собой тиофосфатные (P=S) связи. Все остатки цитозина в каждом олигонуклеотиде представляют собой 5-метилцитозины. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен олигонуклеотид в последовательности гена человека. «Сайт терминации» обозначает самый крайний 3' нуклеозид, на который направлен олигонуклеотид в последовательности гена человека. Каждый олигонуклеотид, перечисленный в представленных ниже таблицах, нацелен на мРНК ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 1 (с номером доступа GENBANK NM_014495.2) или геномную последовательность ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 2 (с номером доступа GENBANK NT_032977.9, усеченную по нуклеотидам с 33032001 по 33046000). «н/д» означает, что антисмысловой олигонуклеотид не направлен на указанную конкретную последовательность гена с 100% комплементарностью.
Пример 120: Антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В дезокси, МОЕ и (S)-cEt гэпмерами
Были сконструированы дополнительные антисмысловые олигонуклеотиды, нацеленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, и протестировано их влияние на мРНК ANGPTL3 in vitro. ISIS 337487 и ISIS 233717, которые представляют собой 5-10-5 МОЕ гэпмеры, также включили в анализ в качестве эталонных олигонуклеотидов. Культивированные клетки Нер3В с плотностью 20000 клеток на лунку трансфицировали с использованием электропорации с 4500 нМ антисмыслового олигонуклеотида. После периода обработки примерно 24 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
Новые химерные антисмысловые олигонуклеотиды в представленных ниже таблицах были сконструированы как дезокси, МОЕ и (S)-cEt олигонуклеотиды или 5-10-5 МОЕ гэпмеры. Дезокси, МОЕ и (S)-cEt олигонуклеотиды имеют 16 нуклеозидов в длину, причем нуклеозид содержит либо модификацию сахара МОЕ, либо модификацию сахара (S)-cEt, либо дезокси модификацию сахарного остатка. Сахарные модификации каждого антисмыслового олигонуклеотида описаны как «еек-d10-kke», где «к» означает модификацию сахара (S)-cEt; «d» означает дезоксирибозу; число означает количество дезоксирибозных сахарных остатков; и «е» означает МОЕ модификацию. Гэпмеры 5-10-5 МОЕ имеют 20 нуклеозидов в длину, причем центральный сегмент гэп состоит из десяти 2'-дезоксинуклеозидов и окружен сегментами крыльев с 5' конца и с 3' конца, содержащими по пять нуклеозидов каждый. Межнуклеозидные связи в каждом олигонуклеотиде представляют собой тиофосфатные (P=S) связи. Все остатки цитозина в каждом олигонуклеотиде представляют собой 5-метилцитозины. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен олигонуклеотид в последовательности гена человека. «Сайт терминации» обозначает самый крайний 3' нуклеозид, на который направлен олигонуклеотид в последовательности гена человека. Каждый олигонуклеотид, перечисленный в представленных ниже таблицах, нацелен на мРНК ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 1 (с номером доступа GENBANK NM_014495.2) или геномную последовательность ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 2 (с номером доступа GENBANK NT 032977.9, усеченную по нуклеотидам с 33032001 по 33046000). «н/д» означает, что антисмысловой олигонуклеотид не направлен на указанную конкретную последовательность гена с 100% комплементарностью.
Пример 121: Антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами
Были сконструированы дополнительные антисмысловые олигонуклеотиды, нацеленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, и протестировано их влияние на мРНК ANGPTL3 in vitro. Культивированные клетки Нер3В с плотностью 20000 клеток на лунку трансфицировали с использованием электропорации с 4500 нМ антисмыслового олигонуклеотида. После периода обработки длительностью примерно 24 часов, РНК выделяли из клеток и уровни мРНК ANGPTL3 измеряли методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
Впервые сконструированные химерные антисмысловые олигонуклеотиды, указанные в представленных ниже таблицах, были сконструированы как 5-10-5 МОЕ или 3-10-4 МОЕ гэпмеры. Гэпмеры 5-10-5 МОЕ имеют 20 нуклеозидов в длину, причем центральный сегмент гэп состоит из десяти 2'-дезоксинуклеозидов и окружен сегментами крыльев с 5' конца и с 3' конца, содержащими по пять нуклеозидов каждый. Гэпмеры 3-10-4 МОЕ имеют 17 нуклеозидов в длину, причем центральный гэп состоит из десяти 2'-дезоксинуклеозидов и окружен сегментами крыльев с 5' конца и с 3' конца, содержащими три и четыре нуклеозида соответственно. Каждый нуклеозид сегмента 5' крыла и нуклеозид сегмента 3' крыла имеет 2'-МОЕ модификации. Каждый нуклеозид сегмента 5' крыла и нуклеозид сегмента 3' крыла имеет 2'-МОЕ модификации. Межнуклеозидные связи в каждом гэпмере представляют собой тиофосфатные (P=S) связи. Все остатки цитозина в каждом гэпмере представляют собой 5-метилцитозины. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена человека. «Сайт терминации» обозначает самый крайний 3' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена человека. Каждый гэпмер, перечисленный в представленных ниже таблицах, нацелен на мРНК ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 1 (с номером доступа GENBANK NM_014495.2) или геномную последовательность ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 2 (с номером доступа GENBANK NT 032977.9, усеченную по нуклеотидам с 33032001 по 33046000). «н/д» означает, что антисмысловой олигонуклеотид не направлен на указанную конкретную последовательность гена с 100% комплементарностью.
Пример 122: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В
Дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотиды из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. ISIS 233717 и ISIS 337847, которые представляют собой 5-10-5 МОЕ гэпмеры, также включили в испытания. Антисмысловые олигонуклеотиды были протестированы в серии экспериментов, которые имели аналогичные условия культивирования. Результаты каждого эксперимента представлены в отдельных таблицах, показанных ниже.

Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0,813 мкМ, 1,625 мкМ, 3,25 мкМ, 6,500 мкМ и 13,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
50
Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.
Пример 123: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В
Дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотиды из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. ISIS 337847, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания. Антисмысловые олигонуклеотиды были протестированы в серии экспериментов, которые имели аналогичные условия культивирования. Результаты каждого эксперимента представлены в отдельных таблицах, показанных ниже.

Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0.160 мкМ, 0,481 мкМ, 1,444 мкМ, 4,333 мкМ и 13,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
50
Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.
Пример 124: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами

МОЕ гэпмеры из описанных выше примеров, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0.160 мкМ, 0,481 мкМ, 1,444 мкМ, 4,333 мкМ и 13,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
50
Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.
Пример 125: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидами

Дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотиды из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0,111 мкМ, 0,333 мкМ, 1,00 мкМ, 3,00 мкМ и 9,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.
50
Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.
Пример 126: Антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 у трансгенных мышей huANGPTL3
Антисмысловые олигонуклеотиды, описанные в представленных выше испытаниях, дополнительно оценивали на их способность снижать транскрипт мРНК человеческого ANGPTL3 у мышей С57В1/6 с трансгеном человеческого ANGPTL3 (Tg мыши).
Испытание 1
Самок Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров в дозе 50 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с RTS3492_MGB с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Уровни мРНК измеряли также с набором праймерных зондов человека RTS1984 (прямая последовательность CTTCAATGAAACGTGGGAGAACT, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 7; обратная последовательность TCTCTAGGCCCAACCAAAATTC, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 8; последовательность зонда AAATATGGTTTTGGGAGGCTTGAT, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 9). Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.
Анализ белка
Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней белка ANGPTL3.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 10 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 2
Самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров в дозе 50 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группы, которым вводили инъекции PBS, служили в качестве контрольных групп, с которыми сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с RTS1984 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.
Анализ белка
Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней белка ANGPTL3.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 8 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 3
Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров в дозе 2,5 мг/кг, 12,5 мг/кг или 25 мг/кг один раз в неделю в течение 3 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группы, которым вводили инъекции PBS, служили в качестве контрольных групп, с которыми сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

50
50
По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения, методом ПЦР в реальном времени, экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 (прямая последовательность AAATTTTAGCCAATGGCCTCC, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 10; обратная последовательность TGTCATTAATTTGGCCCTTCG, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 11; последовательность зонда TCAGTTGGGACATGGTCTTAAAGACTTTGTCC, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 12). Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS. ED каждого гэпмера также представлены в следующей таблице, «н.д.» означает, что ED не может быть определен.
Анализ белка
50
Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней белка ANGPTL3. «н.д.» означает, что ED не может быть определен.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 17 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 4
Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 10 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 5
Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров или дезокси, МОЕ и cEt гэпмеров в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с RTS1984 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 9 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 6
Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. ISIS 233710, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания в качестве эталона. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение некоторыми антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.
Анализ белка
Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение некоторыми олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней белка ANGPTL3.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 10 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 7
Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. ISIS 233710, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания в качестве эталона. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.
Анализ белка
Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение некоторыми олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней ANGPTL3. В данном случае значение «0» значает, что лечение олигонуклеотидом ISIS не привело к ингибированию экспрессии; в некоторых случаях могли быть записаны увеличившиеся уровни экспрессии.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 9 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 8
Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. ISIS 233710, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания в качестве эталона. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловым и олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.
Анализ белка
Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней ANGPTL3.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 8 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 9
Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. ISIS 233710, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания в качестве эталона. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение некоторыми антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS. В данном случае значение «0» значает, что лечение олигонуклеотидом ISIS не привело к ингибированию экспрессии; в некоторых случаях могли быть записаны увеличившиеся уровни экспрессии.
Анализ белка
Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение некоторыми олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней ANGPTL3. В данном случае значение «0» значает, что лечение олигонуклеотидом ISIS не привело к ингибированию экспрессии; в некоторых случаях могли быть записаны увеличившиеся уровни экспрессии.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 9 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 10
Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров или дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 5 мг/кг, 12,5 мг/кг или 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022, а также с RTS3492_MGB, с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение некоторыми антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 8 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Пример 127: Переносимость антисмысловых олигонуклеотидов, направленных на человеческий ANGPTL3, у мышей CD1
Мыши CD1 (Charles River, штат Массачусетс) представляют собой многоцелевую мышиную модель, часто используемую для испытания безопасности и эффективности. Мышей лечили антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS, отобранными в исследованиях, описанных выше, и оценивали изменения уровней различных химических маркеров в плазме.
Испытание 1
Самцам мышей CD1 (одно животное на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции однократной дозы 200 мг/кг дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотида. Одному самцу мыши CD1 вводили подкожную инъекцию однократной дозы PBS. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 4 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Масса тела
На следующий день после введения однократной дозы олигонуклеотида ISIS проводили измерение массы тела, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 2
Самцам мышей CD1 (одно животное на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции однократной дозы 200 мг/кг дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотида. Одному самцу мыши CD1 вводили подкожную инъекцию однократной дозы PBS. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 5 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Масса тела
На 5 день после введения однократной дозы олигонуклеотида ISIS проводили измерение массы тела, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 3
Самцам мышей CD1 (четыре животных на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции по 100 мг/кг 5-10-5 МОЕ гэпмеров один раз в неделю в течение 6 недель. Одной группе из 4 самцов самцов мышей CD1 вводили внутрибрюшинные инъекции PBS один раз в неделю в течение 6 недель. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 45 день измеряли уровни в плазме различных маркеров функции печени и почек, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из указанных маркеров, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Масса тела
Массу тела измеряли на 43 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 45 день измерили массу почек, печени и селезенки. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 4
Самцам мышей CD1 (четыре животных на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции по 50 мг/кг или 100 мг/кг 5-10-5 МОЕ гэпмеров или дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов, один раз в неделю в течение 6 недель. Одной группе из 4 самцов самцов мышей CD1 вводили внутрибрюшинные инъекции PBS один раз в неделю в течение 6 недель. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 46 день измеряли уровни в плазме различных маркеров функции печени и почек, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из указанных маркеров, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Масса тела
Массу тела измеряли на 44 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 46 день измерили массу почек, печени и селезенки. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 5
Самцам мышей CD1 (четыре животных на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции по 50 мг/кг дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов, один раз в неделю в течение 6 недель. Одной группе из 4 самцов самцов мышей CD1 вводили внутрибрюшинные инъекции PBS один раз в неделю в течение 6 недель. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 43 день измеряли уровни в плазме различных маркеров функции печени и почек, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из указанных маркеров, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Масса тела
Массу тела измеряли на 41 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 43 день измерили массу почек, печени и селезенки. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Пример 128: Измерение вязкости антисмысловых олигонуклеотидов ISIS, направленных на человеческий ANGPTL3
Вязкость отобранных антисмысловых олигонуклеотидов из исследований, описанных выше, измеряли с целью выбрать антисмысловые олигонуклеотиды, имеющие вязкость более 40 сантипуаз (сП). Олигонуклеотиды, имеющие вязкость более 40 сП, имеют неоптимальную вязкость.
Олигонуклеотиды ISIS (32-35 мг) взвешивали в стеклянной пробирке, добавляли 120 мкл воды и растворяли антисмысловой олигонуклеотид с получением раствора, нагревая пробирку при 50°C. Часть (75 мкл) предварительно нагретого образца помещали пипеткой в микровискозиметр (Cambridge). Температуру микровискозиметра устанавливали на 25°C и измеряли вязкость образца. Другую часть (20 мкл) предварительно нагретого образца помещали пипеткой в 10 мл воды для УФ-считывания при 260 нм при 85°C (УФ-прибор Cary). Результаты представлены в следующей таблице, где концентрация каждого антисмыслового олигонуклеотида составляла 350 мг/мл, и демонстрируют, что большинство растворов антисмысловых соединений оптимальны по своей вязкости в соответствии с критерием, указанным выше.
Пример 129: Переносимость антисмысловых олигонуклеотидов, направленных на человеческий ANGPTL3, у крыс Спрага-Доули
Крысы Спрага-Доули представляют собой многоцелевую модель, используемую для испытания безопасности и эффективности. Крыс лечили антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS из исследований, описанных в представленных выше примерах, и оценивали изменения уровней различных химических маркеров в плазме.
Испытание 1
Самцов крыс Спрага-Доули выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали свободный доступ к нормальному корму для крыс Purina, рацион 5001. Группам по 4 крысы Спрага-Доули один раз в неделю в течение 6 недель вводили подкожные инъекции PBS или 100 мг/кг 5-10-5 МОЕ гэпмеров. Через сорок восемь часов после введения последней дозы крыс усыпляли и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Функция печени
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию печени измеряли уровни трансаминаз в плазме, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). На 45 день измеряли уровни ALT (аланинтрансаминазы и AST (аспартаттрансаминазы) в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице. Измеряли также уровни билирубина в плазме, используя тот же клинический анализатор химического состава, и результаты, выраженные в МЕ/л, также представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Функция почек
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию почек измеряли уровни азота мочевины крови (АМК) и креатинина в плазме с использованием автоматического клинического анализатора химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты, представленные в следующей таблице, выражены в мг/дл. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции почек, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний. Измерял уровни общего белка и креатинина в моче и рассчитывали соотношение общего белка в моче к креатинину. Результаты представлены в следующей таблице.
Масса органов
Массу тела измеряли на 42 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 45 день измеряли массу печени, селезенки и почек, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 2
Самцов крыс Спрага-Доули выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали свободный доступ к нормальному корму для крыс Purina, рацион 5001. Группам по 4 крысы Спрага-Доули один раз в неделю в течение 6 недель вводили подкожные инъекции PBS или 50 мг/кг или 100 мг/кг 5-10-5 МОЕ гэпмеров или дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов. Через сорок восемь часов после введения последней дозы крыс усыпляли и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Функция печени
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию печени измеряли уровни трансаминаз в плазме, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). На 44 день измеряли уровни ALT (аланинтрансаминазы и AST (аспартаттрансаминазы) в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице. Измеряли также уровни билирубина в плазме, используя тот же клинический анализатор химического состава, и результаты, выраженные в МЕ/л, также представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Функция почек
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию почек измеряли уровни азота мочевины крови (АМК) и креатинина в плазме на 44 день с использованием автоматического клинического анализатора химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты, представленные в следующей таблице, выражены в мг/дл. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции почек, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний. Измерял уровни общего белка и креатинина в моче и рассчитывали соотношение общего белка в моче к креатинину. Результаты представлены в следующей таблице.
Масса органов
Массу тела измеряли на 42 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 44 день измеряли массу печени, селезенки и почек, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Испытание 3
Самцов крыс Спрага-Доули выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали свободный доступ к нормальному корму для крыс Purina, рацион 5001. Группам по 4 крысы Спрага-Доули один раз в неделю в течение 6 недель вводили подкожные инъекции PBS или 50 мг/кг дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов. Через сорок восемь часов после введения последней дозы крыс усыпляли и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Функция печени
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию печени измеряли уровни трансаминаз в плазме, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). На 44 день измеряли уровни ALT (аланинтрансаминазы и AST (аспартаттрансаминазы) в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице. Измеряли также уровни билирубина в плазме, используя тот же клинический анализатор химического состава, и результаты, выраженные в МЕ/л, также представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Функция почек
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию почек измеряли уровни азота мочевины крови (АМК) и креатинина в плазме на 44 день с использованием автоматического клинического анализатора химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты, представленные в следующей таблице, выражены в мг/дл. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции почек, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний. Измерял уровни общего белка и креатинина в моче и рассчитывали соотношение общего белка в моче к креатинину. Результаты представлены в следующей таблице.
Масса органов
Массу тела измеряли на 42 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 44 день измеряли массу печени, селезенки и почек, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.
Пример 130: Влияние антисмысловых олигонуклеотидов ISIS, нацеленных на ANGPTL3 человека, у яванских макак
Яванских макак лечили антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS, отобранными в исследованиях, описанных в представленных выше примерах. Оценивали эффективность и переносимость антисмысловых олигонуклеотидов, а также их фармакокинетический профиль в печени и почках.
Во время проведения испытаний геномная последовательность яванских макак отсутствовала в базе данных Национального центра биотехнологической информации (NCBI); поэтому перекрестная реактивность с последовательностью гена яванских макак не может быть подтверждена. Вместо этого последовательности антисмысловых олигонуклеотидов ISIS, использованные на яванских макаках, сравнивали с последовательностью резус-макак на предмет гомологии. Предполагается, что олигонуклеотиды ISIS с гомологией к последовательности резус-макак, являются также полностью перекрестно реактивными с последовательностью яванских макак. Испытанные человеческие антисмысловые олигонуклеотиды являются перекрестно реактивными с геномной последовательностью резуса (номер доступа GENBANK NW_001108682.1, усеченная с нуклеотида 3049001 по 3062000, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 3). Чем выше комплементарность между человеческим олигонуклеотидом и последовательностью макаки резус, тем вероятнее, что человеческий олигонуклеотид может перекрестно реагировать с последовательностью макак резус. Сайты инициации и терминации каждого олигонуклеотида, направленного на SEQ ID NO: 3, представлены в следующей таблице. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена резус-макаки. «Рассогласование» указывает на количество азотистых оснований в человеческом олигонуклеотиде, которые не соответствуют геномной последовательности резуса.
Лечение
Перед началом исследования обезьян выдерживали на карантине в течение по меньшей мере 30 дней, в течение которых ежедневно следили за общим состоянием здоровья животных. Возраст обезьян составлял 2-4 года, а масса от 2 до 4 кг. Девяти группам по 5 случайным образом распределенных самцов яванских макак вводили подкожные инъекции олигонуклеотида ISIS или PBS в четырех местах на спине по часовой стрелке (т.е. слева, сверху, справа и снизу), по одному месту на дозу. Обезьянам вводили насыщающие дозы PBS или 40 мг/кг олигонуклеотида ISIS каждые два дня в течение первой недели (1, 3, 5 и 7 день), а затем вводили дозы один раз в неделю в течение 12 недель (14, 21, 28, 35, 42, 49, 56, 63, 70, 77 и 84 день) PBS или 40 мг/кг олигонуклеотида ISIS.
В течение периода испытаний обезьян два раза в сутки наблюдали на наличие признаков заболевания или недомогания. Животных, испытывающих более чем мимолетную или слабую боль или недомогание вследствие лечения, травмы или болезни, лечили ветеринары с применением одобренных обезболивающих или агентов для облегчения боли, после консультации с руководителем исследования. Животных с ослабленным здоровьем или в состоянии возможной агонии идентифицировали для дальнейшего наблюдения и возможного усыпления. Например, у одного животного в экспериментальной группе ISIS 567321 на 45 день была обнаружена агония, и испытание прекратили. Плановое усыпление животных проводили на 86 день (примерно через 48 часов после введения последней дозы) путем обескровливания после анестезии с кетамином/ксилазином и введения пентобарбитала натрия. Описанные в примерах протоколы одобрены Комитетом по содержанию и использованию лабораторных животных (IACUC).
Снижение печеночной мишени
Анализ РНК

На 86 день выделили РНК из ткани печени для анализа экспрессии мРНК ANGPTL3 с помощью ПНР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS. Анализ уровней мРНК ANGPTL3 показал, что ISIS 544199 и ISIS 559277, которые являются полностью перекрестно реактивными с последовательностью резуса, существенно снижают уровни экспрессии. Другие олигонуклеотиды ISIS, направленные на последовательность обезьян с рассогласованиями, также могут снижать уровни мРНК ANGPTL3.
Анализ белка
Примерно 1 мл крови взяли у всех доступных животных на 85 день и поместили в пробирки, содержащие калиевую соль ЭДТК. Образцы крови сразу поместили на лед и центрифугировали (3000 об./мин. в течение 10 минут при 4°C) с получением плазмы.
Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Анализ ANGPTL3 в плазме показал, что ISIS 563580, 544199 и ISIS 559277 устойчиво снижают уровни белка. Другие олигонуклеотиды ISIS также могут снижать уровни ANGPTL3.
Исследования переносимости
Измерения массы тела
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на общее состояние здоровья животных измеряли массу тела, и результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что влияние лечения антисмысловыми олигонуклеотидами на массу тела находится в пределах ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов. В частности, лечение с применением ISIS 563580 хорошо переносилось с точки зрения массы тела обезьян.
Функция печени
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию печени из всех экспериментальных групп взяли образцы крови. Образцы крови брали из головной, подкожной или бедренной вены через 48 часов после введения дозы. Обезьяны не принимали пищу в течение ночи до сбора крови. Кровь собирали в пробирки без антикоагулянта для отделения сыворотки. Пробирки выдерживали при комнатной температуре в течение не менее 90 минут, а затем центрифугировали (примерно 3000 об./мин. в течение 10 минут) для получения сыворотки. Уровни различных маркеров функции печени измеряли с помощью анализатора химического состава Toshiba 200FR NEO (Toshiba Co., Япония). Измеряли уровни ALT и AST в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице. Таким же образом измеряли билирубин, маркер функции печени, и результаты, выраженные в мг/дл, представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что большинство антисмысловых олигонуклеотидов не оказывают воздействия на функцию печени, выходящего за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов. В частности, лечение с применением ISIS 563580 хорошо переносилось с точки зрения функции печени обезьян.
Функция почек
Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию почек из всех экспериментальных групп взяли образцы крови. Образцы крови брали из головной, подкожной или бедренной вены через 48 часов после введения дозы. Обезьяны не принимали пищу в течение ночи до сбора крови. Кровь собирали в пробирки без антикоагулянта для отделения сыворотки. Пробирки выдерживали при комнатной температуре в течение не менее 90 минут, а затем центрифугировали (примерно 3000 об./мин. в течение 10 минут) для получения сыворотки. Уровни АМК и креатинина измеряли с помощью анализатора химического состава Toshiba 200FR NEO (Toshiba Co., Япония). Результаты, представленные в следующей таблице, выражены в мг/дл.
Данные химического анализа плазмы показывают, что большинство олигонуклеотидов ISIS не оказывали какого-либо влияния на почечную функцию за пределами ожидаемого для антисмысловых олигонуклеотидов диапазона. В частности, лечение с применением ISIS 563580 хорошо переносилось с точки зрения функции почек обезьян.
Гематология
2
Чтобы оценить влияние олигонуклеотидов ISIS на гематологические параметры яванских макак, образцы крови объемом примерно 0,5 мл крови отбирали у каждого из доступных экспериментальных животных в пробирки, содержащие К-ЭДТА. Образцы анализировали на содержание красных кровяных телец (RBC), содержание белых кровяных телец (WBC), количество отдельных белых кровяных телец, таких как моноциты, нейтрофилы, лимфоциты, а также на количество тромбоцитов, содержание гемоглобина и гематокрита, используя анализатор гематологии ADVIA120 (Bayer, США). Данные представлены в следующих таблицах.
Данные показывают, что олигонуклеотиды не вызывали каких-либо изменений гематологических параметров за пределами ожидаемого для антисмысловых олигонуклеотидов диапазона. В частности, лечение с применением ISIS 563580 хорошо переносилось с точки зрения гематологических параметров обезьян.
Влияние на провоспалительные молекулы
Для оценки воспалительного эффекта олигонуклеотидов ISIS у яванских макак для анализа взяли образцы крови для проведения анализа С-реактивного белка и уровней С3 на 84 день до введения дозы. У каждого животного взяли примерно 1,5 мл крови и поместили в пробирки без антикоагулянта для отделения сыворотки. Пробирки выдерживали при комнатной температуре в течение не менее 90 минут, а затем центрифугировали при 3000 об./мин в течение 10 минут при комнатной температуре для получения сыворотки. С-реактивный белок (CRP) и комплемент С3, которые служат маркерами воспаления, измеряли с помощью анализатора химического состава Toshiba 200FR NEO (Toshiba Co., Япония). Результаты демонстрируют, что лечение с применением ISIS 563580 является переносимым у обезьян.
Измерение концентрации олигонуклеотида
Измеряли концентрацию полноразмерного олигонуклеотида. Использованные способы представляют собой модификацию ранее опубликованных способов (Leeds et al., 1996; Geary et al., 1999), которые состоят из экстракции фенолом-хлороформом (жидкость-жидкость) с последующей твердофазной экстракцией. Внутренний стандарт (ISIS 355868, 27-мер 2'-O-метоксиэтил-модифицированного тиофосфатного олигонуклеотида, GCGTTTGCTCTTCTTCTTGCGTTTTTT, обозначенный в настоящем документе как SEQ ID NO: 13), добавляли до экстракции. Концентрации в образце ткани рассчитывали с помощью калибровочных кривых, где нижний предел количественного обнаружения (LLOQ) составляет примерно 1,14 мкг/г. Результаты, выраженные в мкг/г ткани печени или почек, представлены в следующей таблице. Рассчитывали соотношение концентраций полноразмерного олигонуклеотида в почках относительно печени. Установили, что соотношение концентраций полноразмерного олигонуклеотида в почках относительно печени после лечения ISIS 563580 было наиболее оптимальным, по сравнению с другими исследованными соединениями.
Пример 131: Сравнение антисмыслового ингибирования человеческого ANGPTL3 у трансгенных мышей huANGPTL3 ISIS олигонуклеотидами, содержащими группу конъюгата GalNAc, и ISIS олигонуклеотидами, не содержащими группу конъюгата GalNAc
3
a
Антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие GalNAc-7, испытывали в сравнении с их несопряженными аналогами на способность снижать транскрипт мРНК человеческого ANGPTL3 у Tg мышей. Гэпмеры, направленные на SEQ ID NO: 1, описаны в следующей таблице и в таблице 121. Символы в колонке «Химия скелета» означают следующее: «s» означает сложный тиоэфир, а «о» означает фосфатный сложный эфир.
Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.
Группам по 4 мыши вводили подкожные инъекции ISIS 563580 в дозе 5 мг/кг, 10 мг/кг, 15 мг/кг или 30 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Группам по 4 мыши вводили внутрибрюшинные инъекции ISIS 703801 или ISIS 703802 в дозах 0,3 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг или 10 мг/кг, один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.
Анализ РНК

По окончании периода лечения из ткани печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с набором человеческих праймерных зондов hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контрольного образца с PBS, нормализованное по RIBOGREEN. Нулевое значение означает просто, что указанный антисмысловой олигонуклеотид не ингибирует экспрессию на измеримом уровне.
50
Результаты демонстрируют, что сопряженные соединения гораздо более эффективны для снижения экспрессии ANGPTL3, чем их несопряженные аналоги, по данным процентного ингибирования и по значениям ID. Сопряженный олигонуклеотид со смешанным химическим составом скелета (703802) был более эффективен для ингибирования экспрессии, чем сопряженный олигонуклеотид с полностью тиофосфатным химическим составом скелета (703801).
Анализ белка
Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Нулевое значение означает просто, что указанные антисмысловой олигонуклеотид не ингибирует экспрессию на измеримом уровне.
Результаты демонстрируют, что сопряженные соединения гораздо более эффективны для снижения экспрессии ANGPTL3, чем их несопряженные аналоги, по данным процентного ингибирования. Сопряженный олигонуклеотид со смешанным химическим составом скелета (703802) был более эффективен для ингибирования экспрессии, чем сопряженный олигонуклеотид с полностью тиофосфатным химическим составом скелета (703801).
Пример 132: Переносимость GalNAc-сопряженного антисмыслового олигонуклеотида, направленного на человеческий ANGPTL3, у мышей CD1
Самцам мышей CD1 (четыре животных на экспериментальную группу) вводили подкожные инъекции различных доз ISIS 703802, описанных в следующей таблице, в течение 6 недель (на 1, 3, 5, 8, 14, 21, 28, 35 и 42 день). Одной группе из 4 самцов самцов мышей CD1 вводили подкожные инъекции PBS в течение 6 недель. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Химические маркеры плазмы
Для оценки влияния ISIS 703802 на 44 день измеряли уровни в плазме различных маркеров функции печени и почек, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Было показано, что ISIS 703802 представляет собой переносимое соединение даже в высоких дозах.
Масса тела
По окончании исследования, на 44 день измерили массу тела, почек, печени и селезенки. ISIS 703802 не вызывает существенного изменения массы тела и органов даже при введении в высоких дозах.
Пример 133: Переносимость GalNAc-сопряженного антисмыслового олигонуклеотида, направленного на человеческий ANGPTL3, у крыс Спрага-Доули
Крысы Спрага-Доули представляют собой многоцелевую модель, используемую для испытания безопасности и эффективности. Самцов крыс Спрага-Доули выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали свободный доступ к нормальному корму для крыс Purina, рацион 5001. Группам по 4 крысы Спрага-Доули вводили подкожные инъекции различных доз ISIS 703802, описанных в следующей таблице, в течение 6 недель (на 1, 3, 5, 8, 14, 21, 28, 35 и 42 день). Одной группе из 4 крыс вводили подкожные инъекции PBS в течение 6 недель. Крыс усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.
Функция печени и почек
Для оценки влияния ISIS 703802 на функцию печени измеряли уровни трансаминаз в плазме, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). На 44 день измеряли уровни ALT (аланинтрансаминазы и AST (аспартаттрансаминазы) в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице.
Для оценки влияния ISIS 703802 на функцию почек измеряли уровни альбумина, азота мочевины крови (АМК), креатинина и билирубина в плазме с использованием того же автоматического клинического анализатора химического состава, и результаты представлены в следующей таблице, выраженные в г/дл или мг/дл.
Для дополнительного анализа влияния ISIS 703802 на функцию почек измеряли уровни белка и креатинина в моче и рассчитывали соотношение общего белка в моче к креатинину. Результаты представлены в следующей таблице.
Было показано, что ISIS 703802 представляет собой переносимое соединение даже в высоких дозах.
Масса органов
По окончании исследования, на 44 день измеряли массу тела, печени, селезенки и почек, и результаты представлены в следующей таблице. ISIS 703802 не вызывает существенного изменения массы тела, почек и печени даже при введении в высоких дозах.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110>  Isis Pharmaceuticals
<120>  КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ АНГИОПОЭТИН-ПОДОБНОГО БЕЛКА 3
<130>  BIOL0254WO
<150> 61/987467
<151> 2014-05-01
<150> 62/049230
<151> 2014-09-11
<160>  4914
<170>  PatentIn версии 3.5
<210>  1
<211>  2126
<212>  ДНК
<213>  Homo sapiens
<400>  1
ttccagaaga aaacagttcc acgttgcttg aaattgaaaa tcaagataaa aatgttcaca       60
attaagctcc ttctttttat tgttcctcta gttatttcct ccagaattga tcaagacaat      120
tcatcatttg attctctatc tccagagcca aaatcaagat ttgctatgtt agacgatgta      180
aaaattttag ccaatggcct ccttcagttg ggacatggtc ttaaagactt tgtccataag      240
acgaagggcc aaattaatga catatttcaa aaactcaaca tatttgatca gtctttttat      300
gatctatcgc tgcaaaccag tgaaatcaaa gaagaagaaa aggaactgag aagaactaca      360
tataaactac aagtcaaaaa tgaagaggta aagaatatgt cacttgaact caactcaaaa      420
cttgaaagcc tcctagaaga aaaaattcta cttcaacaaa aagtgaaata tttagaagag      480
caactaacta acttaattca aaatcaacct gaaactccag aacacccaga agtaacttca      540
cttaaaactt ttgtagaaaa acaagataat agcatcaaag accttctcca gaccgtggaa      600
gaccaatata aacaattaaa ccaacagcat agtcaaataa aagaaataga aaatcagctc      660
agaaggacta gtattcaaga acccacagaa atttctctat cttccaagcc aagagcacca      720
agaactactc cctttcttca gttgaatgaa ataagaaatg taaaacatga tggcattcct      780
gctgaatgta ccaccattta taacagaggt gaacatacaa gtggcatgta tgccatcaga      840
cccagcaact ctcaagtttt tcatgtctac tgtgatgtta tatcaggtag tccatggaca      900
ttaattcaac atcgaataga tggatcacaa aacttcaatg aaacgtggga gaactacaaa      960
tatggttttg ggaggcttga tggagaattt tggttgggcc tagagaagat atactccata     1020
gtgaagcaat ctaattatgt tttacgaatt gagttggaag actggaaaga caacaaacat     1080
tatattgaat attcttttta cttgggaaat cacgaaacca actatacgct acatctagtt     1140
gcgattactg gcaatgtccc caatgcaatc ccggaaaaca aagatttggt gttttctact     1200
tgggatcaca aagcaaaagg acacttcaac tgtccagagg gttattcagg aggctggtgg     1260
tggcatgatg agtgtggaga aaacaaccta aatggtaaat ataacaaacc aagagcaaaa     1320
tctaagccag agaggagaag aggattatct tggaagtctc aaaatggaag gttatactct     1380
ataaaatcaa ccaaaatgtt gatccatcca acagattcag aaagctttga atgaactgag     1440
gcaaatttaa aaggcaataa tttaaacatt aacctcattc caagttaatg tggtctaata     1500
atctggtatt aaatccttaa gagaaagctt gagaaataga ttttttttat cttaaagtca     1560
ctgtctattt aagattaaac atacaatcac ataaccttaa agaataccgt ttacatttct     1620
caatcaaaat tcttataata ctatttgttt taaattttgt gatgtgggaa tcaattttag     1680
atggtcacaa tctagattat aatcaatagg tgaacttatt aaataacttt tctaaataaa     1740
aaatttagag acttttattt taaaaggcat catatgagct aatatcacaa ctttcccagt     1800
ttaaaaaact agtactcttg ttaaaactct aaacttgact aaatacagag gactggtaat     1860
tgtacagttc ttaaatgttg tagtattaat ttcaaaacta aaaatcgtca gcacagagta     1920
tgtgtaaaaa tctgtaatac aaatttttaa actgatgctt cattttgcta caaaataatt     1980
tggagtaaat gtttgatatg atttatttat gaaacctaat gaagcagaat taaatactgt     2040
attaaaataa gttcgctgtc tttaaacaaa tggagatgac tactaagtca cattgacttt     2100
aacatgaggt atcactatac cttatt                                          2126
<210>  2
<211>  14000
<212>  ДНК
<213>  Homo sapiens
<400>  2
caagactacg tgaccattac ctctactctg tcagtgttat ttgtgagaaa ttgcacaaat       60
tttgcaaaaa gtgttagtat cctactacag taggatataa tatagaagga aataatttca      120
taaagcctgt ctttggtact agtgctcagt tactttcatt aactaaaaaa ggggctactc      180
ttcaaattcc cttctctaaa aagaatgtac tatatcaaaa gggggtaaac actactacgt      240
atacattctg cacttagaaa tccctatatg ttgattttat cattctctta ttcaataaat      300
attgtttcta caatgtgtaa ggcattactg tactaaagca ttataaggaa tataagttaa      360
aaacacatac aaatcttgcc aatcaacagc ttatagtgta ataggggaga gaagctggcc      420
catctatatt ctccctcaac tagcaagtgg atgaaatatc agggtcaata gttataagcc      480
acaaaagctg acagcttaat taagagaagt tttgaaatat gtatttcatg accaataatt      540
acaactgtaa cttttctatt taaagaagga gaaaatttga atttcttctc tagctcaaca      600
tacacttcta taattccatt acatgaacca gagtaaaggg taagatggaa atgaagaata      660
ttttcttacc cttttgtggt tctatattgg acacttaaaa atcatacaca acctaatcaa      720
aagatgtaat tctttaaaaa ggtacgagac caaaattcag aaaatctaga ctataacaaa      780
atttctcaat ttacattatc ttaatatgca attaattttc accagtaaaa tactatagta      840
tgggtacaaa tgcattgatt agttctaatt acaaaaatgg ctaatatata atactgtgta      900
gtgtttatga tacatcagat aatgttctaa gtgctctgaa aatataaact tttaatcttt      960
tatacgaccc tataaaatag gtgttattct cactggagag atgagaaaac aggggttcag     1020
agatgtgaag taatttgacc aaaggtcaca aagctgaaga atatgaaatc cgggattctg     1080
attcaggcag tcttattcca gaatcatgct cttaaccact atggaatact gcctctactg     1140
taactattat acccaaaacc cttaatccta agtcatcaaa aggaagagcc tctattttac     1200
acaatgaaga ggcatttcta agaatagaaa tttagggacg agcacagtgg cttactcctt     1260
taatatcagc actttgagag gctgatatgg gaggttcact tgaagtcagg agttcaaggt     1320
cagcttgggc aacatagtga aacacagtct ctacaaaata tttaaaaatt agctgggtgt     1380
ggtggcatgc atctatagtc tcagctactt gggagacaga gggaggaggc ttgctcgagc     1440
ccaggagttc gtggctatag tgagctatga tcatgccact gcactccagc ctggacaaca     1500
gagcaagacc ctgtctctaa aaaagaaaag aaatttggaa atggtttatt ttgtattaac     1560
aatttataat ttacactgaa atttattatg ataaaacttt tccctgtgtt aaaaagctat     1620
taactttatg aaaaatttct tttaggtaag gttgattata tatacccaca cacatacaca     1680
ggttaaaagt tagtttcatg tgacataata actagcattt tgagcactac ctgtttgccc     1740
agcactgttc taagtgctct acatgtatta ttgttaaatt atcataacac tatgaattat     1800
gtactataat taccccagct ttacagatga ggagactaat ccatggggag gttaagtaac     1860
ttgtccaagg ccagacagct agagccggct tttggaccca caccacagtc tgactccagc     1920
acccatattc ttaacaattt caccatatta atatgtcaag attaagcagt tttaaaggat     1980
gctattttct cacaaatttc ttaatatgaa cactcaataa gaataatcac taatataagc     2040
atttagtatt tttttaacac taagttggaa gcatagtgga acatttattt ttagaaatat     2100
tattaattgg ctgggctcac gcttgtaatc ggctgggctc atgcctgtaa attttgggag     2160
gccaaggtaa aagaattgct tgagcccagt atttccagac cagcatgggc aatacattaa     2220
gacatcatct ttaaaaaaaa aatgttatta atctcctctt tttgttaaat gtatattatc     2280
aaaattgtta ctaagctaac aaacttcaga aaaacttatg atgggcaagc tgcttgtgac     2340
attgaaggta tttaagattc aattctagtt tggtcctaga tgaccacata tccattgttc     2400
cttcaacgag cacatggtaa agagcctaga acacagagac acagaacaca gtggagaaaa     2460
gggagtgaaa tgtctttaat gacacttact atatatggga ttttgtgaca atatacaagg     2520
atggttaaga catataaggt gatgcaaaaa aacatattaa caattatagt gacaaaaaat     2580
gaggagcata taattataca ttgatttata cagagtacca gaggaacaca gcattgagag     2640
ccgtaacacc acctgaggga gtggagaaag gcttcagaga gaaagtgttt tttggaatgg     2700
atcactgttt ccaaaagaac taaagtacag tttgagaaat gcatacttaa ttcattactt     2760
ttttcccctc aactttaata ataaatttac ccaacaaaaa agtttatttt tgacttgtaa     2820
atctcttaaa atcataaaaa agtaaaatta gcttttaaaa acaggtagtc accatagcat     2880
tgaatgtgta gtttataata cagcaaagtt aaatacaatt tcaaattacc tattaagtta     2940
gttgctcatt tctttgattt catttagcat tgatctaact caatgtggaa gaaggttaca     3000
ttcgtgcaag ttaacacggc ttaatgatta actatgttca cctaccaacc ttaccttttc     3060
tgggcaaata ttggtatata tagagttaag aagtctaggt ctgcttccag aagaaaacag     3120
ttccacgttg cttgaaattg aaaatcaaga taaaaatgtt cacaattaag ctccttcttt     3180
ttattgttcc tctagttatt tcctccagaa ttgatcaaga caattcatca tttgattctc     3240
tatctccaga gccaaaatca agatttgcta tgttagacga tgtaaaaatt ttagccaatg     3300
gcctccttca gttgggacat ggtcttaaag actttgtcca taagacgaag ggccaaatta     3360
atgacatatt tcaaaaactc aacatatttg atcagtcttt ttatgatcta tcgctgcaaa     3420
ccagtgaaat caaagaagaa gaaaaggaac tgagaagaac tacatataaa ctacaagtca     3480
aaaatgaaga ggtaaagaat atgtcacttg aactcaactc aaaacttgaa agcctcctag     3540
aagaaaaaat tctacttcaa caaaaagtga aatatttaga agagcaacta actaacttaa     3600
ttcaaaatca acctgaaact ccagaacacc cagaagtaac ttcacttaaa gtaagtagaa     3660
aataaagagg gttcatgttt atgttttcaa tgtggatctt ttaaaaaaaa tatttctaag     3720
gcatgccatt tgaaatactt tgttgcattg ttgaaatact tttttttcca agaaaaataa     3780
tctccagaaa ataaaatttc ctattataat ttcaagttag ttttttgttt ccctaatgtt     3840
atatatgaaa acactgaaaa tttgcatttt atatgaaaat tacaaatcgg ttaaattata     3900
caatctagaa cactatgtca ttacactatt gtaaattact gaaggtaagt aaaaagttaa     3960
aaaaaattta aaactattct ccagtgttta aaacagatta aataatacag taaatggaaa     4020
agatttattc atatgaaaat atgctgggct ttttctttta attgaagttc agaaaatcaa     4080
attttagaga tagtacaatt taaataaaat gttaaggaca aaaatatgtg ctatttgaaa     4140
gaagcataca aggggaagga attgccaata ttcatttttc aaatccatta ttagtttaaa     4200
aatttagatt atgatagtgt tacaggaaat taatagaaaa gaaagaggaa agcaacttat     4260
aaccaaccta ctctctatat ccagactttt gtagaaaaac aagataatag catcaaagac     4320
cttctccaga ccgtggaaga ccaatataaa caattaaacc aacagcatag tcaaataaaa     4380
gaaatagaaa atcaggtaag tcagtatttt aatggtatgt cccatctttc acacaggtct     4440
gtaaaaacac tgaatcctaa aattatttac aagctttaac tggatcatga gtaaaattat     4500
cacatcagca taactgttaa aattgcaggc tctgaagcta ataaactacc tgcatttaaa     4560
ccatggctct aaaactttgt gtgaccttga ataaattact tcaccccttt atctctcagt     4620
ttcctcacat atactacaaa gataataaca gaacttatag gattattgta agaaaaaaaa     4680
ttaattcata gcagccaatg tcatcttact aaaattcaaa ttagatcatg tttctctttg     4740
ctcaaaacca cacaatagct ttccatttca ctcatattgg ctctttagac caagattacc     4800
caacccttcg tcatctcact gacttcacct cctctactct agttattctg accgctttac     4860
cagtattcaa acacatcaaa catactgcca cctcaaagcc tttgcccttg ttgtttcctc     4920
taactggaac gctcttctgc cctggtatct acgtggccca ctctctgatt tcccttaggg     4980
tcgttatcaa acaaaaaatt cccaatgaag acttacaagg tcacttaacc aaaaatcaca     5040
accgcctggt cccatccctg aaaacttcta cttccttagc tacttttctc ctgcacactc     5100
acctttattt aacataacat aaattttagt tatttatctc ttctattcct gcactaaaat     5160
gtaagctctg tgaatacagg gattttttcc attatcttca tattttccat tatttgtata     5220
tactccagaa tatagaatac tgtatggcac acagtaggca tttctgttga attaataaat     5280
gtaatgtcat attcacacag aagcgtgtgc tatgattatt attacttgga ttactagaaa     5340
tagtgtgcct cataattaaa ggtcaacatt caacaatgta attaatctac aatgtaaaca     5400
tctggtgaag tgacagaggg aagcacttgt ttagaaaaaa gctatgtcag aatccatgta     5460
ttctaatatg cagtacaata gtttaaaaat attaataata ctctcaaaca gctattcaag     5520
aggattcaaa aaacataata taaactcaga gaaactggta aacaaaatca ttttcaagag     5580
atataaaaca aatattatta ccaatttcca ctaaacaaac ataatgttag tagtgctgct     5640
aaaaggtttt ttatcaacta cttttggttt ccatactttc cttcttatga tgttattatt     5700
ctaaattctt ttcaattata tcttttacta tgattaaatg aacctgctcc ccaaagcaaa     5760
atgttactat agtaatatac attgtgtcta aaaataaaaa tgtgtgaaga aaccaaaaca     5820
atgaatttct gagttggaag aagagttaga tcatttaact ttctcatatt taaattaaaa     5880
aaacaaaact ctaaaaattt aagtaacttt aagatcacat agttacttag tagaaaagag     5940
taatacccag caagcaaact ttacaataga tccttttaaa taaggtccta ggaaatatca     6000
ttcatgccag catcaaaaaa ctaacactaa taatgcaaga tattatatat tctgcttttc     6060
ttactgtcaa tgagaaaaac tatcattcaa taaattgcaa acccaacaca cttaaataaa     6120
aataaaatgt tactgctaaa ctaacgataa actactgaat atatagaaag taagcaaaca     6180
aacttgccaa cctgccaaca tctacagata tgtttacagg tcaaaaatta tcaaattatc     6240
aagaaagcct ggttcaaatt atgtattatg tctttatcac aggtctgaag atcagtaaga     6300
cctaaaactg aaaattatta aacttaaaat ctgaacagaa tatcaaatat attttattca     6360
tataaataaa agaatacatt acaatattct aagcaaagca gtctctactt ttggccttgc     6420
tctgttttcc gaccaatgtc tgcttttttg ccttgcttta tttttttatc ttattaaata     6480
atgtccctga ttaaatattt tgagaacagg taatctgtac aatctgaata acactgttta     6540
tctaaatatc aaacaccgtt ataacattat gaactgaaag acaaactgta cttctgacat     6600
ccttactcag atttccccta attgtatatt cagtatcatt ttaaaaaaca gatttatatt     6660
cttttatcag ctcagaagga ctagtattca agaacccaca gaaatttctc tatcttccaa     6720
gccaagagca ccaagaacta ctccctttct tcagttgaat gaaataagaa atgtaaaaca     6780
tgatggtaag acactttggt gggtttcctt cttgaagcta ttattatcaa attccctatt     6840
cttaggactt gttctagact aaaagatagt taagagatat ccatcaaata caatgtatca     6900
acctaaactg gatgctgggg ttctttttac accctataaa agacatacct aagacaatca     6960
gagaaataca aatatggact tgattattag ataatataga aggtttatta attttcttag     7020
atgtgatcat ggtattgcag ttttaaagga gaacaatctc ctgtttaaga gatacatgct     7080
gaaatattta cggagttaaa ggtcactgga ctccagactg gtgatagaac aagactctgt     7140
ctctaaaaaa taattaattt tttaaaagaa aatagtttgg taagatgatt cttacattct     7200
taaataacac gccatctaag aaaaatgctt taacataaac attactgaaa aaatgctaca     7260
tttgccacaa cttcataaaa tgtcaagtga aatctcaagc tccaaagata ttattcctat     7320
tactaaatct gatgtaataa cattttattg attctaggca ttcctgctga atgtaccacc     7380
atttataaca gaggtgaaca tacaagtggc atgtatgcca tcagacccag caactctcaa     7440
gtttttcatg tctactgtga tgttatatca ggtaaaacct gtctaaggag aatagacagt     7500
agttagttca acttactcat tacgtattag gaagattaac ctggttatca ttgttttata     7560
catatatata tgaaatatat atgagtattc gtataaatat aatactttta ccttgtttat     7620
gtatttactc aatattctcc ttttcctcta aaataatctg aagtgactat tatcaataag     7680
tttactatgc caaaattcat taattgcctt tcacttaact tttgggacca taataaataa     7740
taaaatgtat tgccataaca ttaataaact accttacaaa accaccaatt aaaatcaaac     7800
aaacaaaaaa gtgttattta catctgtcaa cataaatcta ctaaaaatac atgatttcat     7860
tcattatatt caggtagtcc atggacatta attcaacatc gaatagatgg atcacaaaac     7920
ttcaatgaaa cgtgggagaa ctacaaatat ggttttggga ggcttgatgg taaggggact     7980
acattcaatc attcattcac ttgctaatct acaaatattt actgagaacc tcttatggac     8040
caggtattag gaaaagtagt aacgaacgag aagcagtctc agccttcata taatttatta     8100
tcaaacaatt acacatttgt tagtaaatta cacttattac aactgttatt atttgaatta     8160
tatttatcac aattacatgt ctgttcttaa atatacttat cacaatttaa ttccacggct     8220
tacaatgatc ataactataa ttattaaaga caattttgat taaatgttat gtcataagta     8280
gtaactgtta caaataagct gtgaaaagaa ccactcctag cattagtcac tctattctct     8340
cattaacgtt ttacatatca attaattgga agttaaaagg accaggaaac tcagacatac     8400
agtatacatt ttaaaatttc aattatttaa atataatata tagaatgtat ggcttataat     8460
gaattagtta actcaatgca aattattcta ttttgattac aaatagtaaa ataagcaaga     8520
taaaataaca gatgtttaaa atccaaaaag cacatacaaa aatccatgaa tgatgtctaa     8580
gtactcactt ataaagtaga agacattcat tattatatca aatttttaaa tgctcagtac     8640
tatttgacca tttaaaaatt ttgtattcaa actaccagtg aaagccctac ctagaaggta     8700
tactcagtga taagttttgt agctccaaat cttctaatag tgagtgtaac cccaaaataa     8760
aaggctgaca ggtaagtcga gaatactcac ttaattctgg taagaaagca acccatttgt     8820
acttgtattt accagcaatc cttaaaatga agcttcctac taactcaata gcaataagac     8880
aatagtgaat gtttaatgaa aacagtattt tataaatact ttaataaaaa ggattgtgat     8940
gaagaacaat ctatttatat ttgttatttg tttttaattc caataaaaat aatttttaaa     9000
attacagaaa aaagttatta agaaccatgc ttttaaattt aaaatgattt tttaaattta     9060
ttcctgtctt tttctacaaa gaaagcatac attaagcaaa taccaaaggc caggtttaca     9120
tttgaagaaa gtgacattat tattactcaa gtctctagga atacttaaca catctcttga     9180
ctgtatatgg atgttaataa atagctgaca gtaaagttta tccatataaa gacttgcaaa     9240
tattcctcta ccaatgacga gactttaaaa tatctataat aatgtaacac atttcactgg     9300
tgaaacatgt cttgtcatat gcattataga aaggataatc agactttcag ttatattaat     9360
atttttaaca tttttgtgca catagctatc ttcaataaaa ttgttttaaa aggtattatt     9420
ttaagataca ctaaaatgat caagggattc aagactaaac aactcaatta gttgcaccaa     9480
taaaaaacac ttaaaaaaac tgtcagtgtc caacctgtac ttaataactc acagattttt     9540
aaaacttttc ttttcaggag aattttggtt gggcctagag aagatatact ccatagtgaa     9600
gcaatctaat tatgttttac gaattgagtt ggaagactgg aaagacaaca aacattatat     9660
tgaatattct ttttacttgg gaaatcacga aaccaactat acgctacatc tagttgcgat     9720
tactggcaat gtccccaatg caatcccgga aaacaaagat ttggtgtttt ctacttggga     9780
tcacaaagca aaaggacact tcaactgtcc agagggttat tcaggtatct ttttctgata     9840
ccaatacttt attttcatat cttcaaagta tcttcccaca ttattagcta ttatctgcaa     9900
tgacaacttt taaaaatccg aatcccaaat aagcgttttc tctctagacg aaaacctctt     9960
aactataatg aaagtgttca ttctagttca atcaggtatt ttacctctaa tcttcctcag    10020
attttctatt ttttggtagt gtatagatta tttatacaga ttatttaaaa ttgggactta    10080
tacagattat ttaaaactgg gatacatgca tctaaaacac tgtaatattt ataagaaagg    10140
aagataaact tacggggaaa tacagtaaca gtaactacat acgagtctgt acccattaaa    10200
ttgcatatct atctccttta ggaggctggt ggtggcatga tgagtgtgga gaaaacaacc    10260
taaatggtaa atataacaaa ccaagagcaa aatctaagcc agagaggaga agaggattat    10320
cttggaagtc tcaaaatgga aggttatact ctataaaatc aaccaaaatg ttgatccatc    10380
caacagattc agaaagcttt gaatgaactg aggcaaattt aaaaggcaat aatttaaaca    10440
ttaacctcat tccaagttaa tgtggtctaa taatctggta ttaaatcctt aagagaaagc    10500
ttgagaaata gatttttttt atcttaaagt cactgtctat ttaagattaa acatacaatc    10560
acataacctt aaagaatacc gtttacattt ctcaatcaaa attcttataa tactatttgt    10620
tttaaatttt gtgatgtggg aatcaatttt agatggtcac aatctagatt ataatcaata    10680
ggtgaactta ttaaataact tttctaaata aaaaatttag agacttttat tttaaaaggc    10740
atcatatgag ctaatatcac aactttccca gtttaaaaaa ctagtactct tgttaaaact    10800
ctaaacttga ctaaatacag aggactggta attgtacagt tcttaaatgt tgtagtatta    10860
atttcaaaac taaaaatcgt cagcacagag tatgtgtaaa aatctgtaat acaaattttt    10920
aaactgatgc ttcattttgc tacaaaataa tttggagtaa atgtttgata tgatttattt    10980
atgaaaccta atgaagcaga attaaatact gtattaaaat aagttcgctg tctttaaaca    11040
aatggagatg actactaagt cacattgact ttaacatgag gtatcactat accttatttg    11100
ttaaaatata tactgtatac attttatata ttttaacact taatactatg aaaacaaata    11160
attgtaaagg aatcttgtca gattacagta agaatgaaca tatttgtggc atcgagttaa    11220
agtttatatt tcccctaaat atgctgtgat tctaatacat tcgtgtaggt tttcaagtag    11280
aaataaacct cgtaacaagt tactgaacgt ttaaacagcc tgacaagcat gtatatatgt    11340
ttaaaattca ataaacaaag acccagtccc taaattatag aaatttaaat tattcttgca    11400
tgtttatcga catcacaaca gatccctaaa tccctaaatc cctaaagatt agatacaaat    11460
tttttaccac agtatcactt gtcagaattt atttttaaat atgatttttt aaaactgcca    11520
gtaagaaatt ttaaattaaa cccatttgtt aaaggatata gtgcccaagt tatatggtga    11580
cctacctttg tcaatactta gcattatgta tttcaaatta tccaatatac atgtcatata    11640
tatttttata tgtcacatat ataaaagata tgtatgatct atgtgaatcc taagtaaata    11700
ttttgttcca gaaaagtaca aaataataaa ggtaaaaata atctataatt ttcaggacca    11760
cagactaagc tgtcgaaatt aacgctgatt tttttagggc cagaatacca aaatggctcc    11820
tctcttcccc caaaattgga caatttcaaa tgcaaaataa ttcattattt aatatatgag    11880
ttgcttcctc tatttggttt ccttaaaaaa aaaaaaaact ctcataggac atgtttcatt    11940
ttgttccttt caggagtagt aaattagacg ttttccccat ataaagcttt tttctaccag    12000
aaagatactt ctggtagaag aagagaaagg agctctttat ggttcacacg actgtctcct    12060
gtcctaacta ctttgcttaa agtgctcaaa ttccatcact actcacagtt gtctaatcta    12120
agtctaatcc cctttgatct ctcagactac cttccctttt atctctctac tacttaataa    12180
taagaatatc tttttttcaa acttgacctt cattttgctt tcacaatact atactctcca    12240
tggattatcc cttatctgaa tccatcttta taaccctatt cctttctcat atttagtact    12300
gtgggccaat ggacaacctt caatcatctt ttctacactg accctcagac attctatctg    12360
ctctcacgga ctcctttatt taccatgaat aaagttccaa aatctacata ttcatcccaa    12420
gtctctttcc agttcccctt cttacattgc ctatttgcca tttctccctt caatacccta    12480
tacttcactc aaattcaaca taccaaaaat aaaaggccag gcacggtggc tcacacctgt    12540
aatcccagga ctttgggagg ctgaggcagg tggatcacct gaggtcagga gtctgaccag    12600
cctgaccaat atggtgaaac cccgtctcta cctaaaatac aaaaattagc caggcgtggt    12660
ggcatgtgcc tacagtccca gctactcaag aggctgagac aggagaatcg cttgaaccca    12720
ggaggcggag gttgcagtga gctgagatca caccaatgca ctgggtgaca gaacaagact    12780
gactcaaaaa aaaataaata acaaattccc cagcccctta ctgctactgc tatccctttc    12840
tacccacctt tccctccttt atactctttc acaccatctt cctcacttct ttatatccat    12900
taatatgacc agcatgttcc cagtcacaga agcctggaac ccggaagaca tctctggctt    12960
ttcactcaac tttgtaaact acctcttttg tatcataagc caccaagttc aatacaatct    13020
tctcttgaaa cgtctcttaa tcttataagc tttcttcccc aaagactgtc tttaacttca    13080
gtgctagatt atataagtag tctcttcttt cctcctaatt ttacgtccct ctccctgtca    13140
atcttccgaa aaggaatttg taatggctgc atactgcctg gacctgtgtc tttcaagctc    13200
atctactgaa gaagtgtaac agcagaggat aatgaaaaca aatcctttta ttgtctggag    13260
ttacaggata aaataactta ctatatgcac aaatttcttt cagaatctta ttgggatctt    13320
agcttaaatc ttagaatttt actttaaaat tgcatatgaa ttgtgtttta tactttataa    13380
atctatcttc atgcctgcag tggctcacac ctgtaatcca agtattttgg gaggccgggg    13440
cgggagtact gcttgaaccc aggagtccaa gatcagcctg tgcaacacgg caaaactcca    13500
cctctacaaa aaatacaaaa attagctggg tgtggtggca ggtgcctgta atcccaacta    13560
cttgggaggc tgaggcagga gaatcgctgg agcctgggaa gtcaagcctg cagcgaacca    13620
tgatcctaac actgcattct agcctgggca acagagtgag actctgtctc aaaaaaaatc    13680
ttcatataaa aatatttatt tccccccaag tatttaaaaa gtgatgttcc tagaagatgt    13740
gtcatgttta tcctgtgaac ttgcacgtcc catatagttg tgccctcaca agaatgtata    13800
ctccaattag aagagtatag gcctttggaa caaaatccaa aatccttcca ggttttcaaa    13860
agtctctatc acctggcccc aaattacctc ttcagccatt ttttcccaca acacaaacct    13920
tctgctctca tcaaaacgat ctacttttaa acatctcctc tatgccttcc taatgtattc    13980
catttgtcta gaatgtctcc                                                14000
<210>  3
<211>  13000
<212>  ДНК
<213>  Macaca mulatta
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (4504)..(4523)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (5370)..(5795)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (7498)..(7517)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (9552)..(9895)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<400>  3
cccagctact gaggaggctg aggcaggaga atggcgtaaa cccgggaggc ggagcttgca       60
gtgagctgag atctggccac tgcaccccag cctgggcaac agagcaagac tccgtctcaa      120
aaaacaaaac aaaacaaaac aaaacaaaac aaaacaaaga atgtagtata tcaaaaagag      180
gtaaccagta ctacatatac attctgcact tggaaaatcc ctatatgttg attttatcat      240
tctcttagtc attcaataaa cattgcttct acaatgtgtg aggcattact gtactaaagc      300
attataagga atatacatta aaaacacata caaatcttgc caataaacgg cttatagtat      360
aataggggag agaagttggc ccatctatct tctccttcaa ctagcaagta gatgaaatat      420
cagggtcaat agttgtaagc cataaaagct gacagcttag ttaagagaag ttttgaaata      480
tgtatttcat ggccaaataa ttacaactgt aacttttcta tttaaagaag gagaaaattt      540
gaatttcttc tctagctcaa catacacttt tataattcta taacatgaac cagagtaaag      600
ggtaagatgg aaatgaagaa tattttctta cccttttgtg gttccatatt ggacacttaa      660
aaatcataca caacctaatc aaaagacata attcattaaa aaggtacgag accaaaacta      720
aaaaaatcta gactataaca aaatttccca atttacatta tcttaatatg caattaattt      780
tcaccagtaa aatactatac tatgggtaca aatgcattga ttagttctaa ttacaaaaat      840
ggctaatata taatattatg tagtgtttat gacacaccag gtaatgttct aagtgctttg      900
aaaatataaa cttttaatct ttatacaacc ctataaaata ggtgtcattc tcactggaca      960
gatgagaaaa caggggttca gaaatgtgaa gtaatttgac caaaggtcac aaaactgaag     1020
aatatcaaat ccaggattct gattcaggca gtcttgttcc agaatcatgc tcttaaccac     1080
tatggaatac tacctgtatt atagtattac atatactgta ctataactat tacacccaaa     1140
acccttaata ctacctgtac tataactatt atacccaaaa tcctgagtca tcaaaaagaa     1200
gagcctctat tttatacaat gaagaggcat ttctaagaat agaaatttag ggacgagcac     1260
agtggcttac tcctgtaata tcagcacttt gagaggctga tgtgggaagt tcacttgaag     1320
tcaggagttc gaggccagct tggacaacat agtgagaccc actctctaca aaatatttaa     1380
aaattagctg ggcgtgttgg catgcatcta tagtctcagc tactggggag gctgagggag     1440
gaggctcact caagcccagg aattcgtggc tatagtgagc tatgatcatg ccactgtact     1500
ccagcctgga caacagagca agaccctgtc tctaaaaaaa agaaaagaaa agaaatttgg     1560
aaatggttca ttttgtagta acaatttata atttacactg aaattcatta tgataaaact     1620
tttccctgtg ttaaaaagat attaacttta tgaaaaattt attttaggta aggttgatta     1680
tatatactca cacacataca caggttaaaa gttagtttca tgtgacataa taactagcat     1740
tttgagcact acctgtttgc ccaacactgt tctaagtgct ctacatgtat tattgttaaa     1800
ttatcataac actatgaatt atgtactata attaccccag ctttacagat gaggagacta     1860
atccaagggg aagttaagta acttgtccaa ggtcagacag cgagagctgg ctttggaccc     1920
cactacagtc tgactccagc acccatattc ttaacaattt caccatatta atatgtcaag     1980
attaagtagt tttaaaggat actattttct cacaaagttc ttaatatgaa cacttaataa     2040
gaataatcac taatattagt atttttcttt ttaacactaa gttggaagca cagtggaaca     2100
tttattttta gaaatattat taattggctg ggctcacgcc tgtaattgac tgggctcatg     2160
tccgtaaatt ttgggaggcc aaggcaaaag aatcgcttga gcccaatagt tccagaccag     2220
cataggcaat acattaagac atcgtcttta aaaaaacaaa gttattaatc tcttcttttt     2280
gttaaatgta tattatcaaa attgttacac taagctcaca aacttcagaa aaacttatga     2340
tgggtaagtt gcttgtgaca ttgaaagtat ttaagattca attctgtttg atcctagaag     2400
accacatatc cattgttcct tcagtaaaca catgataaag agcctagaac agagagacag     2460
agaacacagt ggagaaaggg gagtgaaatg tctttaatga cacttactat atgtgggatt     2520
ttgtgataat atacaaggat gattaagaca tataaggtga tgcaaaaaaa ccatattaac     2580
aattatagtg acaaaaataa ggagtacata attatacgtt gatttataca gagtaccaaa     2640
ggaatacagc attgagagct gtaccactac ccgagggaat ggagaaaggc ttcagagaga     2700
aagtgttttt tgggatggat caatgtttcc aaaagaaccg aagtgcagtt tgagaaacgc     2760
atacttaatt aattcttttc ctcaacttta ataataaatt tactcaacaa aaaagtttat     2820
ttttgacttg taaatctctt aaaatcataa aaaagtaaaa tcagctttta aaaacaggta     2880
gtcaccatat cattgaatgt gcagtttata atacagcaaa gttaaataca atttcaaatt     2940
acctattaag ttagttgctc atttctttga tttcatttag cattgatgta actcaatgtg     3000
gaagaaggtt acattcgtgc aagttaacat ggcttaatga ttaactatat tcacctgcca     3060
accttgcctt ttctgtggca aatattggta tatatagagt taagaagtct aggtctgctt     3120
ccagaagaac acagttccac gttgcttgaa attgaaaatc aggataaaaa tgttcacaat     3180
taagctcctt ctttttattg ttcctctagt tatttcctcc agaattgacc aagacaattc     3240
atcatttgat tctgtatctc cagagccaaa atcaagattt gctatgttag acgatgtaaa     3300
aattttagcc aatggcctcc ttcagttggg acatggtctt aaagactttg tccataagac     3360
taagggccaa attaatgaca tatttcaaaa actcaacata tttgatcagt ctttttatga     3420
tctatcactg caaaccagtg aaatcaaaga agaagaaaag gaactgagaa gaactacata     3480
taaactacaa gtcaaaaatg aagaggtaaa gaatatgtca cttgaactca actcaaaact     3540
tgaaagcctc ctagaagaaa aaattctact tcaacaaaaa gtgaaatatt tagaagagca     3600
actaactaac ttaattcaaa atcaacctga aactccagaa catccagaag taacttcact     3660
taaagtaagt agaaaataaa gagggttcat gtttatgttt tcaatgtgga acattaaaaa     3720
aaaatatttc taaggcatgc tacttgaaat actttgttgc attgttggaa tacttttttt     3780
tccaagaaaa ataatctcca gaaaataaaa tttcccatta taattttgtt agtttttgtt     3840
tccctaatgt tatatatgaa aacactgaaa ctttacattt tatatgaaaa ttacaaattg     3900
gttaagtaac acaatctaga acactatgtc attacactat tgcaaattac tgaaggtaag     3960
taaaattttt taaaaattta aaactattct ctagtgttta aaacagatta aagtaataca     4020
gtaaatggaa aagatttatt cctattaaaa tatgctgggc tttttctctt aattgaagtt     4080
cagaaaaaca aatcttagag atagcacaat ttaaataaaa tgttaagaac aaaaatacat     4140
gctatttgaa agaagcatac aaggggaagg aattgccaat attcattttt caaatccatt     4200
attagtttaa aaatttagat tatgatagtg ttacaggaaa ttaaaactct aatagaaaag     4260
aagaaagtaa cttataacca atctaatctc tatattcaga gttttgtaga aaaacaagat     4320
aatagcatca aagaccttct ccagactgtg gaagaacaat ataagcaatt aaaccaacag     4380
cacagtcaaa taaaagaaat agaaaatcag gtaagtcaat attttaatgg tatgtcccat     4440
ctttcacaca ggtttgtaaa acattgaatc ctaaaattat ttacagcttt aactggatca     4500
tgannnnnnn nnnnnnnnnn nnngaaaata attaattcat agcagccaat gtcatcctat     4560
taaaattcaa attagatcat gtttctcctt gctcaaaacc acacaatagc tttccatctc     4620
actcatattg gctctttaga ccaagattac ccgacccttc atcatctcac tgacttcacc     4680
tcctctactc tagtcatttt gatcgcttta ccggtattca aacacatcaa acatgctgcc     4740
acctcgaagc ctttgccctt gttgtttcct ctatctggaa tgctcttttg tcctggtatc     4800
tacagggccc actctttgat ctcccttagg gtcgttatca aacataaaat tctcaatgaa     4860
gatttccaag gtcacttaac caaaaattac aactgcctgg tcccatccct gaaaacttct     4920
acttccttaa ctacttttct cctgcacact cacctttatt taacataaat tttagttatt     4980
tatctcttct attcctgcac taaaatgtaa gctctgtgaa taaaggggtt tttttccatt     5040
atcttcatat tttccattat ttgtatatac tccagaatat agaatactgt atggcacata     5100
ctaggcattt ctgttgaatt aataaatgta atgtcatatt cacacagagt gtgtgctata     5160
attattatta cttggattac tagaaatagt gtgcctcata attaaaggtc aacattcaac     5220
aacgtaatta atctacaatg taaacaactg gtgaagtgag gggggaagca cttgtttaga     5280
ataaagctat gtcagaatct aagtattcta atatacagta aatagttaaa aaatattaat     5340
aatactctta aacagtcatt caagaggatn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     5400
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     5460
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     5520
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     5580
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     5640
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     5700
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     5760
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnntaacg ttaaaatcac atagttactt     5820
agtagaaaag agtaatatcc agcaagtaaa ctttacaata gatcctttta aataaggtcc     5880
taggaaatgt catttatgcc aggatcaaaa aactaacact cataatgcaa gatattatat     5940
attctgcttt tcttactgtc aatgagaaaa actatcattc aataaattgc aaacccaaca     6000
cacttaaata aaatgttatt gcaaaactaa cgataaacta ctgaatatat ggaaagtaag     6060
caaataaact tgccaacctg ccaacatcta cagatgtgtt tacaggtcaa aaattatcaa     6120
attatcaaga aagccaggtt caaattatgt attatgtctt taaagcaggt ctgaagatca     6180
gtaagaccta aaactgaaaa ttattgaact taaaatctga acagaatatc aaacatattc     6240
tattcatata aaaaaaaata cattacaaca ttctaagcaa agcagtctct acttttggcc     6300
ttgttctgtt ttctgaccaa tgtctgcttt tttgccttgt tttatttttt taatttatta     6360
aataatgtcc ctgattaaat attttgagaa caggtaatct gtacaatctg aataacactg     6420
tttatctaaa tatcaaacac cataacatta tgaactgaaa gacaaactgt acttttgaca     6480
tccttactca gatctcccct aattatgtat tcagtatcat tttaaaaaac agatttatat     6540
tcttttatca gctcagaatg actaatattc aagaacccac agaaatttct ctatcttcca     6600
agccaagagc accaagaact actccctttc ttcagctgaa tgaaataaga aatgtaaaac     6660
atgatggtaa gacactttgg tgggtttcct tcttgaagct attatcaaat tccctattct     6720
taggacttgt tctagactaa aagattaaga gatagccatc aaatacaatg gatcatccta     6780
aattggatcc tggggttctt cttctaccct ataaaagata tacctaagac aatcacagaa     6840
atataaatat ggacttgatt attagataat atagaaggtt tattaatttt cttagacgtg     6900
atcatggtat tgcaatttta aaggagaaca acctcctgtt taagagatac atgctgaaat     6960
atttaaggag ttaaaggtca ctggactcct ggctgggtga cagaacaaga ctctgtctct     7020
aaaaaaataa ttttttaaaa gaaaatagtt tggtaagaat gattcttaca ttcttaaata     7080
acatgccatc gaagaaaaat gctttaacat aaacattact gaaaaaaatg ctacatttgc     7140
cacaatttca taaaatgtca agtgaaatct caagctccaa agacattatt cctattacta     7200
aatctgatgt aataacattt tattgattct aggcattcct gctgattgta ccaccattta     7260
caatagaggt gaacatataa gtggcatgta tgccatcaga cccagcaact ctcaagtttt     7320
tcatgtctac tgtgatgttg tatcaggtaa aacctgtcta aggagaatag acagtagtta     7380
gttcaagtta ctcagtatgt attaggaaga ttaacctggt tataattgtt ttatacatat     7440
atatatatga aatatatgta acatgagtat tagtataaat ctaatacttt tatcttgnnn     7500
nnnnnnnnnn nnnnnnnatg gatcacaaaa cttcaatgaa acgtgggaga actacaaata     7560
tggtttcggg aggcttgatg gtaaggtgac tacattcaat cattcattca tttgctaatc     7620
tacaaatatt tactgagaac ctattgtgga ctgggcatta ggaaaagtag taatgaagaa     7680
gcagcagtct cagccttcat ataatttatt atcaaacaat tacacatttg ttagtaaatt     7740
attacaactg ttataatttg atttatattt atcacagtta catgtctgtt cttaaatata     7800
cttatcacaa tttaatttga tggcttacaa tgatcataac tataattatt aaagacaatt     7860
ctgattaaat gttatataag tagtaactgt tacaaataag ctgtgaaaag aaccactcct     7920
agcattagtc actctattct ctcattaacg ttttacgtat caattaattg gaagttaaaa     7980
ggaccaagaa actcagacat acagtataaa ttttaaaatt tcaattattt aaatgtaata     8040
tatagaatgt gtggcttata atgaattagt taactcaatg caaattattc tgattacaaa     8100
ataatgttaa ataagcaaga taaaataaca gatgtttaaa atccaaaaag cacatacaaa     8160
aatccatgaa tgatgtctaa gtactcactt ataaagtaga agacattcat tattatatca     8220
aatttttaaa tgctcagtac tatttgccca tttaaaaatt ttgtattcaa attacccgtt     8280
aaagccctac ctagatggta tactccgtga tatgttttgt agctccaaat cttctaatag     8340
tgagtgtaac cccaaaataa aaggctgaca ggtaagttaa gaatactcac ttaattctgg     8400
taagaaacta acccatttgt acttgtattt accagcaatc cttaaaatga agcttcctac     8460
taactcaata gcaataagac aacagtgact gtttaatgaa aacagtaatt tattaagcat     8520
tttactaaat actttaataa aaaggattgt gataaaaagt ctatttatat ttgttattta     8580
tgtttttaat tccaaataaa aataattttt aaaattatag aaaaaagtta ttaagaacca     8640
tgctttttca tttaaaatga tttttaaaat ttattcctgt ctttttctac aaagaaaaca     8700
tatattaagc aaataccaaa ggccaggttt agacttatta ttactcaagt ctctgggaat     8760
acttaacaaa aatctcttga ctgtatatgg atgttaataa atacctgata gtaaagttta     8820
tccatataaa gacttacaag aaaatattcc tctaccaatg acgagacttt aaagtatcta     8880
taataatgta acatatttca ctggttaaat atgtcttgta atatgcatta tagaaaggat     8940
aatctgactt tcagttctat taatattttt aacattattg tgcatataga tatcttcaat     9000
aaaattgttt taaaaggtat tattttaaga tactctaaaa tgatcaaggg attcaagact     9060
aaacaactca attagttgca ccaataaaaa acacttaaaa aaacagtgtc caacctgtag     9120
ttaataattc acagattttt aaaacttttc ttttcaggag aattctggtt gggcctagag     9180
aagatatact ccatagtgaa gcaatctaat tacgttttac gaattgagtt ggaagactgg     9240
aaagacaaca aacattatat tgaatattct ttttacttgg gaaatcacga aaccaactat     9300
acgctacatg tagttaagat tactggcaat gtccccaatg caatcccgga aaacaaagat     9360
ttggtgtttt ctacttggga tcacaaagca aaaggacact tcagctgtcc agagagttat     9420
tcaggtatct ttttctgata acaatacttt attttcatat cttcaaagta tctgcccaca     9480
ttattagcta ttatctgcaa tgacaacttt taaaaatccg aatcccaaat aagcgttttc     9540
tttctagatg annnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     9600
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     9660
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     9720
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     9780
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn     9840
nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnacact     9900
ataatattta ttaaaaagga agataaactc atggggaaat acagtaacta catacgagtc     9960
tgtacccact aaactgcgta tctatctcct ttaggaggct ggtggtggca tgatgagtgt    10020
ggagaaaaca acctaaatgg taaatataac aaaccaagaa caaaatctaa gccagagcgg    10080
agaagaggat tatcctggaa gtctcaaaat ggaaggttat actctataaa atcaaccaaa    10140
atgttgatcc atccaacaga ttcagaaagc tttgaatgaa ctgaggcaaa tttaaaaggc    10200
aataaattaa acattaaact cattccaagt taatgtggtt taataatctg gtattaaatc    10260
cttaagagaa ggcttgagaa atagattttt ttatcttaaa gtcactgtca atttaagatt    10320
aaacatacaa tcacataacc ttaaagaata ccatttacat ttctcaatca aaattcctac    10380
aacactattt gttttatatt ttgtgatgtg ggaatcaatt ttagatggtc gcaatctaaa    10440
ttataatcaa caggtgaact tactaaataa cttttctaaa taaaaaactt agagacttta    10500
attttaaaag tcatcatatg agctaatatc acaattttcc cagtttaaaa aactagtttt    10560
cttgttaaaa ctctaaactt gactaaataa agaggactga taattataca gttcttaaat    10620
ttgttgtaat attaatttca aaactaaaaa ttgtcagcac agagtatgtg taaaaatctg    10680
taatataaat ttttaaactg atgcctcatt ttgctacaaa ataatctgga gtaaattttt    10740
gataggattt atttatgaaa cctaatgaag caggattaaa tactgtatta aaataggttc    10800
gctgtctttt aaacaaatgg agatgatgat tactaagtca cattgacttt aatatgaggt    10860
atcactatac cttaacatat ttgttaaaac gtatactgta tacattttgt gtattttaat    10920
acttaatact atgaaaacaa gtaattgtaa acgtatcttg tcagattaca ataggaatga    10980
acatattggt gacatcgagt taaagtttat atttccccta aatatgctgc gattccaata    11040
tattcatgta ggttttcaag cagaaataaa ccttgtaaca agttactgac taaacagcct    11100
gacaagtatg tatatatgtt taaaattcaa taaataaaga cccagtcttc taaattataa    11160
aaatttaaat tagtcttgca caaattaaat tattcatcac aaaagatgta ttgttatttt    11220
taagtcattt aagccctaaa tccctaaaga ttagatacaa attttttttt gccagagtat    11280
aaattgtcag aatttatttt taaatatatt ttttaaaact accagtaaga aattttaaat    11340
taaacccatt tgttaaagga tatagtgccc aagttatacg gtgacctacc tttgtcaata    11400
tttagcatta tgtatttcaa attatccaat atacatgtca tatatatttt tatatgttgc    11460
atatataaaa gatatacacg atttatgtga atcctatgta aatattttgt tccagaaaag    11520
tacaaaataa taaaggtaaa aataatccat aattttcagg accacagact aagctgtcaa    11580
aattaacatt gatttttttt agggccagaa taccaaaata gctcctctct tccccaaaaa    11640
ttggacaatt tcaaatgcaa aataattcat tatttaatat atgagttgct tccactattt    11700
ggtttccttt aaaaaaaaaa aaaaaacact ctcataggac atgtttcatt ttgttccttt    11760
taggagtagt aaattagatt ttttccccat acaaagcttt cttttaccag aaagatactt    11820
ctggcagaag aggagaaagg agctcttttc tttatggttc acacgactgt ctcctgtcct    11880
cactactttg cttaaagtgc tcaaattcca ccactaactc acagttgtct aatctaagca    11940
aagtctaatc ccctttgatc tctgagtcta ccttcccttt catctctcta ctacttacta    12000
atgtgaatat ctttttttca aacttgacct tcattttgct ttcacaatac tatactctcc    12060
atggattttc ccttacttga atccatcttt ataaccctat tcctttctca tatttagtac    12120
tgtgggccaa tggacaacct ttaatcatct tttctacact gactctcaga tattctatct    12180
gctctcacgg actcatctat gtaccatgaa taaagttcca aaatctacgt attcatccta    12240
agtctctttc cagttcccct tcttacattg cctatctgcc atttctccct ttaataacct    12300
atacttcact taaattcaac atatcaaaaa taacaggccg ggcacggtgg ctcatgactg    12360
taatcccagc actttgggag gccgaggcgg gtggatcacc tgaggtcagg agtttcagac    12420
cagcctgacc aacagggtga aaccccgtct ccacttaaaa tacaaaaatt agccaggtgt    12480
ggtggcatgt gcctatagtc ccagttactc aagaggctga gacaggagaa ttgcttgaac    12540
ccaggaggcg gaggttgcag tgagctgaga tcacaccact gcactccatc ctgggtgaca    12600
gaacaagact gactcaaaaa aataaataat tcaccagccc ctgactgcta ctgctatctc    12660
tttctaccca actttccctc ctttcgactc tgtcacacca tctttctcac ttctttatat    12720
ccattaatat gaccagcatg ttcccagtca cagaagcctg aaacctggaa gacatctcta    12780
gcttttccct caacttcgta aactacttct tttgtataag ccaccaagtt caatacaatc    12840
ttctcttgaa acatctctta atcttataag ctttcttccc caaagtctgt ctttaacttg    12900
agtgctagat tatattagtc tcctctttcc tcctaatttt atgtccctct ccctgtcaat    12960
cttctgaaaa gaaatttgta atggctgcat attgcttgga                          13000
<210>  4
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Праймер
<400>  4
ccgtggaaga ccaatataaa caatt                                             25
<210>  5
<211>  28
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Праймер
<400>  5
agtccttctg agctgatttt ctatttct                                          28
<210>  6
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Зонд
<400>  6
aaccaacagc atagtcaaat a                                                 21
<210>  7
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Праймер
<400>  7
cttcaatgaa acgtgggaga act                                               23
<210>  8
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Праймер
<400>  8
tctctaggcc caaccaaaat tc                                                22
<210>  9
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Зонд
<400>  9
aaatatggtt ttgggaggct tgat                                              24
<210>  10
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Праймер
<400>  10
aaattttagc caatggcctc c                                                 21
<210>  11
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Праймер
<400>  11
tgtcattaat ttggcccttc g                                                 21
<210>  12
<211>  32
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Зонд
<400>  12
tcagttggga catggtctta aagactttgt cc                                     32
<210>  13
<211>  27
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  13
gcgtttgctc ttcttcttgc gtttttt                                           27
<210>  14
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  14
tgaattaatg tccatggact                                                   20
<210>  15
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  15
agttcttggt gctcttggct                                                   20
<210>  16
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  16
gttgtctttc cagtcttcca                                                   20
<210>  17
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  17
gctttgtgat cccaagtaga                                                   20
<210>  18
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  18
ggttgttttc tccacactca                                                   20
<210>  19
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  19
accttccatt ttgagacttc                                                   20
<210>  20
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  20
tacacatact ctgtgctgac                                                   20
<210>  21
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  21
tttcagcatg tatctcttaa                                                   20
<210>  22
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  22
accaggttaa tcttcctaat                                                   20
<210>  23
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  23
agttatgatc attgtaagcc                                                   20
<210>  24
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  24
ggagtggttc ttttcacagc                                                   20
<210>  25
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  25
tggtcctttt aacttccaat                                                   20
<210>  26
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  26
gcattgagtt aactaattca                                                   20
<210>  27
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  27
catccatata cagtcaagag                                                   20
<210>  28
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  28
cacttgtatg ttcacctctg                                                   20
<210>  29
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  29
tctattcgat gttgaattaa                                                   20
<210>  30
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  30
ttgattttca atttcaagca                                                   20
<210>  31
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  31
ggctctggag atagagaatc                                                   20
<210>  32
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  32
tcttgatttt ggctctggag                                                   20
<210>  33
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  33
gtcattaatt tggcccttcg                                                   20
<210>  34
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  34
ttcactggtt tgcagcgata                                                   20
<210>  35
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  35
cttagatttt gctcttggtt                                                   20
<210>  36
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  36
gcttagattt tgctcttggt                                                   20
<210>  37
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  37
ggcttagatt ttgctcttgg                                                   20
<210>  38
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  38
gctcatatga tgccttttaa                                                   20
<210>  39
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  39
agctcatatg atgcctttta                                                   20
<210>  40
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  40
tagctcatat gatgcctttt                                                   20
<210>  41
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  41
tattagctca tatgatgcct                                                   20
<210>  42
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  42
ccacaaatat gttcattctt                                                   20
<210>  43
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  43
tgccacaaat atgttcattc                                                   20
<210>  44
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  44
taaactttaa ctcgatgcca                                                   20
<210>  45
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  45
acgaggttta tttctacttg                                                   20
<210>  46
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  46
catgcttgtc aggctgttta                                                   20
<210>  47
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  47
tacatgcttg tcaggctgtt                                                   20
<210>  48
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  48
tccaactcag aaattcattg                                                   20
<210>  49
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  49
ttgctgggta ttactctttt                                                   20
<210>  50
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  50
tttgcttgct gggtattact                                                   20
<210>  51
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  51
tggcatgaat gatatttcct                                                   20
<210>  52
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  52
gcaataccat gatcacatct                                                   20
<210>  53
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  53
actccgtaaa tatttcagca                                                   20
<210>  54
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  54
tggcaaatgt agcatttttt                                                   20
<210>  55
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  55
aagccataca ttctatatat                                                   20
<210>  56
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  56
tcagctattt attaacatcc                                                   20
<210>  57
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  57
gaggaatatt tgcaagtctt                                                   20
<210>  58
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  58
ttggtagagg aatatttgca                                                   20
<210>  59
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  59
accagtgaaa tgtgttacat                                                   20
<210>  60
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  60
tgaaagtctg attatccttt                                                   20
<210>  61
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  61
atttaatggg tacagactcg                                                   20
<210>  62
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  62
ataccatgat cacatctaag                                                   20
<210>  63
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  63
gacctttaac tccgtaaata                                                   20
<210>  64
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  64
tctggagtcc agtgaccttt                                                   20
<210>  65
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  65
atgtaagaat catcttacca                                                   20
<210>  66
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  66
agcatttttc ttagatggcg                                                   20
<210>  67
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  67
cattttatga agttgtggca                                                   20
<210>  68
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  68
cacttgacat tttatgaagt                                                   20
<210>  69
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  69
tcctggtcct tttaacttcc                                                   20
<210>  70
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  70
gacatcattc atggattttt                                                   20
<210>  71
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  71
agtacttaga catcattcat                                                   20
<210>  72
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  72
ggtcaaatag tactgagcat                                                   20
<210>  73
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  73
ggtagtttga atacaaaatt                                                   20
<210>  74
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  74
ctctgttata aatggtggta                                                   20
<210>  75
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  75
ttcttggtgc tcttggcttg                                                   20
<210>  76
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  76
ggtacattca gcaggaatgc                                                   20
<210>  77
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  77
ggacattgcc agtaatcgca                                                   20
<210>  78
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  78
cactcatcat gccaccacca                                                   20
<210>  79
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  79
ctccacactc atcatgccac                                                   20
<210>  80
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  80
tttctccaca ctcatcatgc                                                   20
<210>  81
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  81
gctgacgatt tttagttttg                                                   20
<210>  82
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  82
cacatactct gtgctgacga                                                   20
<210>  83
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  83
tttacacata ctctgtgctg                                                   20
<210>  84
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  84
gctttcttac cagaattaag                                                   20
<210>  85
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  85
gttgctttct taccagaatt                                                   20
<210>  86
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  86
ataccagatt attagaccac                                                   20
<210>  87
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  87
gcttcatttt aaggattgct                                                   20
<210>  88
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  88
gcttaatgta tgctttcttt                                                   20
<210>  89
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  89
gttaagtatt cctagagact                                                   20
<210>  90
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  90
tccatatttg tatttctctg                                                   20
<210>  91
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  91
cgtaagttta tcttcctttc                                                   20
<210>  92
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  92
cacattaact tggaatgagg                                                   20
<210>  93
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  93
ccagattatt agaccacatt                                                   20
<210>  94
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  94
taccagatta ttagaccaca                                                   20
<210>  95
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  95
gctttctctt aaggatttaa                                                   20
<210>  96
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  96
ctcaagcttt ctcttaagga                                                   20
<210>  97
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  97
tctcaagctt tctcttaagg                                                   20
<210>  98
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  98
ccatttgttt aaagacagcg                                                   20
<210>  99
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  99
acttagtagt catctccatt                                                   20
<210>  100
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  100
gacttagtag tcatctccat                                                   20
<210>  101
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  101
tgacttagta gtcatctcca                                                   20
<210>  102
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  102
gtcaatgtga cttagtagtc                                                   20
<210>  103
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  103
accatataac ttgggcacta                                                   20
<210>  104
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  104
ggtcaccata taacttgggc                                                   20
<210>  105
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  105
gacaaaggta ggtcaccata                                                   20
<210>  106
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  106
gccaatatga gtgaaatgga                                                   20
<210>  107
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  107
tttctaaaca agtgcttccc                                                   20
<210>  108
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  108
ctgcatatta gaatacatgg                                                   20
<210>  109
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  109
cataatttga accaggcttt                                                   20
<210>  110
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  110
aaatcttgat tttggc                                                       16
<210>  111
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  111
ttcttggtgc tcttgg                                                       16
<210>  112
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  112
cgtggaactg ttttct                                                       16
<210>  113
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  113
cttgatcaat tctgga                                                       16
<210>  114
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  114
gtcttgatca attctg                                                       16
<210>  115
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  115
tggctctgga gataga                                                       16
<210>  116
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  116
tgattttggc tctgga                                                       16
<210>  117
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  117
cttgattttg gctctg                                                       16
<210>  118
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  118
ggtgctcttg gcttgg                                                       16
<210>  119
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  119
atcttctcta ggccca                                                       16
<210>  120
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  120
gttgtctttc cagtct                                                       16
<210>  121
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  121
gtttgttgtc tttcca                                                       16
<210>  122
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  122
gtgatttccc aagtaa                                                       16
<210>  123
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  123
tggatcaaca ttttgg                                                       16
<210>  124
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  124
gaatctgttg gatgga                                                       16
<210>  125
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  125
ttctgaatct gttgga                                                       16
<210>  126
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  126
gttcattcaa agcttt                                                       16
<210>  127
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  127
cagttcattc aaagct                                                       16
<210>  128
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  128
ttaacttgga atgagg                                                       16
<210>  129
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  129
agaccacatt aacttg                                                       16
<210>  130
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  130
agattattag accaca                                                       16
<210>  131
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  131
ccagattatt agacca                                                       16
<210>  132
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  132
atctatttct caagct                                                       16
<210>  133
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  133
atagacagtg acttta                                                       16
<210>  134
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  134
atactctgtg ctgacg                                                       16
<210>  135
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  135
actctgtgct gacgat                                                       16
<210>  136
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  136
acatactctg tgctga                                                       16
<210>  137
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  137
gtagcaaaat gaagca                                                       16
<210>  138
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  138
tcaaacattt actcca                                                       16
<210>  139
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  139
taaagacagc gaactt                                                       16
<210>  140
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  140
tgtttaaaga cagcga                                                       16
<210>  141
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  141
agtagtcatc tccatt                                                       16
<210>  142
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  142
ttagtagtca tctcca                                                       16
<210>  143
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  143
acaaaggtag gtcacc                                                       16
<210>  144
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  144
tgacatgtat attgga                                                       16
<210>  145
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  145
gtacttttct ggaaca                                                       16
<210>  146
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  146
cttggtctaa agagcc                                                       16
<210>  147
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  147
tctgtagatg ttggca                                                       16
<210>  148
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  148
ataatttgaa ccaggc                                                       16
<210>  149
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  149
agcagacatt ggtcgg                                                       16
<210>  150
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  150
cagattgtac agatta                                                       16
<210>  151
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  151
gtagaggaat atttgc                                                       16
<210>  152
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  152
aaagtctgat tatcct                                                       16
<210>  153
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  153
tagtcttgaa tccctt                                                       16
<210>  154
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  154
aagttgtcat tgcaga                                                       16
<210>  155
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  155
tctgtataag tcccaa                                                       16
<210>  156
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  156
gatgcatgta tcccag                                                       16
<210>  157
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  157
gtaagtttat cttcct                                                       16
<210>  158
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  158
ctgttactgt atttcc                                                       16
<210>  159
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  159
tgcagcgata gatcat                                                       16
<210>  160
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  160
ctggtttgca gcgata                                                       16
<210>  161
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  161
ctttgatttc actggt                                                       16
<210>  162
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  162
gttcttctca gttcct                                                       16
<210>  163
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  163
gttagttagt tgctct                                                       16
<210>  164
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  164
gtatgttcac ctctgt                                                       16
<210>  165
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  165
gagttgctgg gtctga                                                       16
<210>  166
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  166
aaacttgaga gttgct                                                       16
<210>  167
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  167
gtccatggac tacctg                                                       16
<210>  168
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  168
ccatctattc gatgtt                                                       16
<210>  169
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  169
tagattttgc tcttgg                                                       16
<210>  170
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  170
ccattttgag acttcc                                                       16
<210>  171
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  171
tagagtataa ccttcc                                                       16
<210>  172
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  172
ctcatcatgc caccac                                                       16
<210>  173
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  173
cacactcatc atgcca                                                       16
<210>  174
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  174
gagaaatgta aacggt                                                       16
<210>  175
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  175
ctcatatgat gccttt                                                       16
<210>  176
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  176
agctcatatg atgcct                                                       16
<210>  177
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  177
ttagctcata tgatgc                                                       16
<210>  178
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  178
ttgtgatatt agctca                                                       16
<210>  179
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  179
actgggaaag ttgtga                                                       16
<210>  180
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  180
aatctgacaa gattcc                                                       16
<210>  181
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  181
ctcgatgcca caaata                                                       16
<210>  182
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  182
taactcgatg ccacaa                                                       16
<210>  183
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  183
tgcttgtcag gctgtt                                                       16
<210>  184
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  184
acatgcttgt caggct                                                       16
<210>  185
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  185
cagttatgct gatgtg                                                       16
<210>  186
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  186
aagttttaga gccatg                                                       16
<210>  187
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  187
ctgtcacttc accaga                                                       16
<210>  188
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  188
tggattctga catagc                                                       16
<210>  189
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  189
aaccttttag cagcac                                                       16
<210>  190
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  190
ttgcttgctg ggtatt                                                       16
<210>  191
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  191
gtcttttata gggtgt                                                       16
<210>  192
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  192
ttgtcttagg tatgtc                                                       16
<210>  193
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  193
ctctgattgt cttagg                                                       16
<210>  194
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  194
gtatttctct gattgt                                                       16
<210>  195
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  195
tttttcttag atggcg                                                       16
<210>  196
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  196
gggctttcac tggtag                                                       16
<210>  197
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  197
acagtcaaga gatgtg                                                       16
<210>  198
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  198
atcttgattt tggctctgga                                                   20
<210>  199
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  199
gttcttggtg ctcttggctt                                                   20
<210>  200
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  200
tagttcttgg tgctcttggc                                                   20
<210>  201
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  201
aggttgtttt ctccacactc                                                   20
<210>  202
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  202
acacatactc tgtgctgacg                                                   20
<210>  203
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  203
gtggcaaatg tagcattttt                                                   20
<210>  204
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  204
gccacaaata tgttcattct                                                   20
<210>  205
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  205
tcttggtgct cttggct                                                      17
<210>  206
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  206
ccagattatt agaccac                                                      17
<210>  207
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  207
gctcatatga tgccttt                                                      17
<210>  208
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  208
gcttgtcagg ctgttta                                                      17
<210>  209
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  209
tgtcttgatc aattct                                                       16
<210>  210
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  210
ttgattttgg ctctgg                                                       16
<210>  211
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  211
actggtttgc agcgat                                                       16
<210>  212
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  212
agattttgct cttggt                                                       16
<210>  213
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  213
cattttgaga cttcca                                                       16
<210>  214
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  214
tccattttga gacttc                                                       16
<210>  215
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  215
accagattat tagacc                                                       16
<210>  216
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  216
tagacagtga ctttaa                                                       16
<210>  217
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  217
tgagaaatgt aaacgg                                                       16
<210>  218
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  218
gctcatatga tgcctt                                                       16
<210>  219
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  219
cttagtagtc atctcc                                                       16
<210>  220
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  220
agagtataac cttcca                                                       16
<210>  221
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  221
cagattatta gaccac                                                       16
<210>  222
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  222
tagctcatat gatgcc                                                       16
<210>  223
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  223
ccttttagca gcacta                                                       16
<210>  224
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  224
accttttagc agcact                                                       16
<210>  225
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  225
aaacctttta gcagca                                                       16
<210>  226
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  226
atctgtagat gttggc                                                       16
<210>  227
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  227
taatttgaac caggct                                                       16
<210>  228
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  228
ttttcttaga tggcgt                                                       16
<210>  229
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  229
atctgtataa gtccca                                                       16
<210>  230
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  230
aatctgtata agtccc                                                       16
<210>  231
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  231
atgcatgtat cccagt                                                       16
<210>  232
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  232
tagatgcatg tatccc                                                       16
<210>  233
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  233
agtagttctt ggtgctcttg                                                   20
<210>  234
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  234
ggttcttgaa tactagtcct                                                   20
<210>  235
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  235
aaatttctgt gggttcttga                                                   20
<210>  236
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  236
tggcttggaa gatagagaaa                                                   20
<210>  237
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  237
gtattagaat cacagcatat                                                   20
<210>  238
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  238
gattttcaat ttcaagcaac                                                   20
<210>  239
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  239
agcttaattg tgaacatttt                                                   20
<210>  240
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  240
gaaggagctt aattgtgaac                                                   20
<210>  241
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  241
caataaaaag aaggagctta                                                   20
<210>  242
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  242
gaacaataaa aagaaggagc                                                   20
<210>  243
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  243
ctggaggaaa taactagagg                                                   20
<210>  244
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  244
attctggagg aaataactag                                                   20
<210>  245
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  245
tcaaatgatg aattgtcttg                                                   20
<210>  246
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  246
ttgattttgg ctctggagat                                                   20
<210>  247
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  247
gcaaatcttg attttggctc                                                   20
<210>  248
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  248
atagcaaatc ttgattttgg                                                   20
<210>  249
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  249
cgtctaacat agcaaatctt                                                   20
<210>  250
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  250
tggctaaaat ttttacatcg                                                   20
<210>  251
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  251
ccattggcta aaatttttac                                                   20
<210>  252
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  252
aggaggccat tggctaaaat                                                   20
<210>  253
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  253
tgaaggaggc cattggctaa                                                   20
<210>  254
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  254
gtcccaactg aaggaggcca                                                   20
<210>  255
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  255
ccatgtccca actgaaggag                                                   20
<210>  256
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  256
agaccatgtc ccaactgaag                                                   20
<210>  257
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  257
tttaagacca tgtcccaact                                                   20
<210>  258
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  258
gtctttaaga ccatgtccca                                                   20
<210>  259
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  259
ggacaaagtc tttaagacca                                                   20
<210>  260
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  260
tcttatggac aaagtcttta                                                   20
<210>  261
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  261
tatgtcatta atttggccct                                                   20
<210>  262
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  262
gatcaaatat gttgagtttt                                                   20
<210>  263
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  263
gactgatcaa atatgttgag                                                   20
<210>  264
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  264
tcttctttga tttcactggt                                                   20
<210>  265
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  265
cttctcagtt ccttttcttc                                                   20
<210>  266
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  266
gttcttctca gttccttttc                                                   20
<210>  267
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  267
tgtagttctt ctcagttcct                                                   20
<210>  268
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  268
tatatgtagt tcttctcagt                                                   20
<210>  269
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  269
gtttatatgt agttcttctc                                                   20
<210>  270
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  270
tgtagtttat atgtagttct                                                   20
<210>  271
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  271
gacttgtagt ttatatgtag                                                   20
<210>  272
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  272
tcatttttga cttgtagttt                                                   20
<210>  273
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  273
cctcttcatt tttgacttgt                                                   20
<210>  274
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  274
tctttacctc ttcatttttg                                                   20
<210>  275
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  275
catattcttt acctcttcat                                                   20
<210>  276
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  276
gtgacatatt ctttacctct                                                   20
<210>  277
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  277
gagttcaagt gacatattct                                                   20
<210>  278
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  278
tgagttgagt tcaagtgaca                                                   20
<210>  279
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  279
agttttgagt tgagttcaag                                                   20
<210>  280
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  280
tcaagttttg agttgagttc                                                   20
<210>  281
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  281
ggaggctttc aagttttgag                                                   20
<210>  282
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  282
tttcttctag gaggctttca                                                   20
<210>  283
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  283
attttttctt ctaggaggct                                                   20
<210>  284
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  284
gtagaatttt ttcttctagg                                                   20
<210>  285
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  285
gctcttctaa atatttcact                                                   20
<210>  286
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  286
agttagttag ttgctcttct                                                   20
<210>  287
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  287
caggttgatt ttgaattaag                                                   20
<210>  288
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  288
tttcaggttg attttgaatt                                                   20
<210>  289
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  289
ggagtttcag gttgattttg                                                   20
<210>  290
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  290
gttctggagt ttcaggttga                                                   20
<210>  291
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  291
ttaagtgaag ttacttctgg                                                   20
<210>  292
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  292
tgctattatc ttgtttttct                                                   20
<210>  293
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  293
ggtctttgat gctattatct                                                   20
<210>  294
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  294
gaaggtcttt gatgctatta                                                   20
<210>  295
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  295
ctggagaagg tctttgatgc                                                   20
<210>  296
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  296
ctgagctgat tttctatttc                                                   20
<210>  297
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  297
atttctgtgg gttcttgaat                                                   20
<210>  298
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  298
gagaaatttc tgtgggttct                                                   20
<210>  299
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  299
gatagagaaa tttctgtggg                                                   20
<210>  300
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  300
cttggaagat agagaaattt                                                   20
<210>  301
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  301
gtgctcttgg cttggaagat                                                   20
<210>  302
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  302
cttggtgctc ttggcttgga                                                   20
<210>  303
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  303
gggagtagtt cttggtgctc                                                   20
<210>  304
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  304
ctgaagaaag ggagtagttc                                                   20
<210>  305
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  305
atcatgtttt acatttctta                                                   20
<210>  306
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  306
gccatcatgt tttacatttc                                                   20
<210>  307
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  307
gaatgccatc atgttttaca                                                   20
<210>  308
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  308
caggaatgcc atcatgtttt                                                   20
<210>  309
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  309
gacttcttaa ctctatatat                                                   20
<210>  310
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  310
ctagacttct taactctata                                                   20
<210>  311
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  311
gacctagact tcttaactct                                                   20
<210>  312
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  312
ggaagcagac ctagacttct                                                   20
<210>  313
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  313
tctggaagca gacctagact                                                   20
<210>  314
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  314
tcttctggaa gcagacctag                                                   20
<210>  315
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  315
ctaatcttta gggatttagg                                                   20
<210>  316
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  316
tgtatctaat ctttagggat                                                   20
<210>  317
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  317
taacttgggc actatatcct                                                   20
<210>  318
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  318
attgacaaag gtaggtcacc                                                   20
<210>  319
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  319
atatgacatg tatattggat                                                   20
<210>  320
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  320
ttttgtactt ttctggaaca                                                   20
<210>  321
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  321
tagtctgtgg tcctgaaaat                                                   20
<210>  322
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  322
agcttagtct gtggtcctga                                                   20
<210>  323
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  323
gacagcttag tctgtggtcc                                                   20
<210>  324
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  324
gtattctggc cctaaaaaaa                                                   20
<210>  325
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  325
attttggtat tctggcccta                                                   20
<210>  326
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  326
tttgcatttg aaattgtcca                                                   20
<210>  327
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  327
ggaagcaact catatattaa                                                   20
<210>  328
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  328
tatcagaaaa agatacctga                                                   20
<210>  329
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  329
ataatagcta ataatgtggg                                                   20
<210>  330
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  330
tgcagataat agctaataat                                                   20
<210>  331
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  331
tgtcattgca gataatagct                                                   20
<210>  332
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  332
taaaagttgt cattgcagat                                                   20
<210>  333
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  333
cggattttta aaagttgtca                                                   20
<210>  334
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  334
gggattcgga tttttaaaag                                                   20
<210>  335
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  335
tttgggattc ggatttttaa                                                   20
<210>  336
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  336
acgcttattt gggattcgga                                                   20
<210>  337
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  337
tttaagagat ttacaagtca                                                   20
<210>  338
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  338
gactacctgt ttttaaaagc                                                   20
<210>  339
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  339
tatggtgact acctgttttt                                                   20
<210>  340
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  340
actttgctgt attataaact                                                   20
<210>  341
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  341
attgtattta actttgctgt                                                   20
<210>  342
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  342
gagcaactaa cttaataggt                                                   20
<210>  343
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  343
gaaatgagca actaacttaa                                                   20
<210>  344
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  344
aatcaaagaa atgagcaact                                                   20
<210>  345
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  345
accttcttcc acattgagtt                                                   20
<210>  346
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  346
cacgaatgta accttcttcc                                                   20
<210>  347
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  347
ttaacttgca cgaatgtaac                                                   20
<210>  348
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  348
tatatatacc aatatttgcc                                                   20
<210>  349
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  349
tcttaactct atatatacca                                                   20
<210>  350
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  350
ctttaagtga agttacttct                                                   20
<210>  351
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  351
tctacttact ttaagtgaag                                                   20
<210>  352
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  352
gaaccctctt tattttctac                                                   20
<210>  353
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  353
acataaacat gaaccctctt                                                   20
<210>  354
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  354
ccacattgaa aacataaaca                                                   20
<210>  355
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  355
gcatgcctta gaaatatttt                                                   20
<210>  356
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  356
caatgcaaca aagtatttca                                                   20
<210>  357
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  357
ctggagatta tttttcttgg                                                   20
<210>  358
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  358
ttcatatata acattaggga                                                   20
<210>  359
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  359
tcagtgtttt catatataac                                                   20
<210>  360
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  360
gacatagtgt tctagattgt                                                   20
<210>  361
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  361
caatagtgta atgacatagt                                                   20
<210>  362
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  362
ttacttacct tcagtaattt                                                   20
<210>  363
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  363
atcttttcca tttactgtat                                                   20
<210>  364
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  364
agaaaaagcc cagcatattt                                                   20
<210>  365
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  365
gtatgcttct ttcaaatagc                                                   20
<210>  366
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  366
ccttcccctt gtatgcttct                                                   20
<210>  367
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  367
cctgtaacac tatcataatc                                                   20
<210>  368
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  368
tgacttacct gattttctat                                                   20
<210>  369
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  369
gatgggacat accattaaaa                                                   20
<210>  370
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  370
gtgaaagatg ggacatacca                                                   20
<210>  371
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  371
cctgtgtgaa agatgggaca                                                   20
<210>  372
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  372
cattggctgc tatgaattaa                                                   20
<210>  373
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  373
gatgacattg gctgctatga                                                   20
<210>  374
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  374
gagaaacatg atctaatttg                                                   20
<210>  375
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  375
atggaaagct attgtgtggt                                                   20
<210>  376
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  376
gtctaaagag ccaatatgag                                                   20
<210>  377
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  377
aatcttggtc taaagagcca                                                   20
<210>  378
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  378
gagatttaca agtcaaaaat                                                   20
<210>  379
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  379
atttaacttt gctgtattat                                                   20
<210>  380
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  380
atcaatgcta aatgaaatca                                                   20
<210>  381
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  381
tattttctgg agattatttt                                                   20
<210>  382
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  382
aaaatgaata ttggcaattc                                                   20
<210>  383
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  383
aaagtcaatg tgacttagta                                                   20
<210>  384
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  384
aaggtatagt gatacctcat                                                   20
<210>  385
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  385
cagcaggaat gccatcatgt                                                   20
<210>  386
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  386
tgatggcata catgccactt                                                   20
<210>  387
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  387
tgctgggtct gatggcatac                                                   20
<210>  388
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  388
gagttgctgg gtctgatggc                                                   20
<210>  389
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  389
aaaacttgag agttgctggg                                                   20
<210>  390
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  390
gacatgaaaa acttgagagt                                                   20
<210>  391
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  391
acatcacagt agacatgaaa                                                   20
<210>  392
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  392
agttttgtga tccatctatt                                                   20
<210>  393
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  393
tgaagttttg tgatccatct                                                   20
<210>  394
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  394
cgtttcattg aagttttgtg                                                   20
<210>  395
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  395
ccatatttgt agttctccca                                                   20
<210>  396
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  396
aaaccatatt tgtagttctc                                                   20
<210>  397
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  397
aattctccat caagcctccc                                                   20
<210>  398
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  398
atcttctcta ggcccaacca                                                   20
<210>  399
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  399
gagtatatct tctctaggcc                                                   20
<210>  400
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  400
ctatggagta tatcttctct                                                   20
<210>  401
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  401
gcttcactat ggagtatatc                                                   20
<210>  402
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  402
agattgcttc actatggagt                                                   20
<210>  403
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  403
ccagtcttcc aactcaattc                                                   20
<210>  404
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  404
gtctttccag tcttccaact                                                   20
<210>  405
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  405
gtttgttgtc tttccagtct                                                   20
<210>  406
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  406
aatgtttgtt gtctttccag                                                   20
<210>  407
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  407
cgtgatttcc caagtaaaaa                                                   20
<210>  408
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  408
gttttccggg attgcattgg                                                   20
<210>  409
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  409
tctttgtttt ccgggattgc                                                   20
<210>  410
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  410
ccaaatcttt gttttccggg                                                   20
<210>  411
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  411
acaccaaatc tttgttttcc                                                   20
<210>  412
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  412
agaaaacacc aaatctttgt                                                   20
<210>  413
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  413
caagtagaaa acaccaaatc                                                   20
<210>  414
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  414
gatcccaagt agaaaacacc                                                   20
<210>  415
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  415
tttgctttgt gatcccaagt                                                   20
<210>  416
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  416
tccttttgct ttgtgatccc                                                   20
<210>  417
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  417
gaagtgtcct tttgctttgt                                                   20
<210>  418
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  418
tgccaccacc agcctcctga                                                   20
<210>  419
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  419
ctcatcatgc caccaccagc                                                   20
<210>  420
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  420
ccatttaggt tgttttctcc                                                   20
<210>  421
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  421
atatttacca tttaggttgt                                                   20
<210>  422
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  422
cttggtttgt tatatttacc                                                   20
<210>  423
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  423
atagagtata accttccatt                                                   20
<210>  424
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  424
ttttatagag tataaccttc                                                   20
<210>  425
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  425
tggttgattt tatagagtat                                                   20
<210>  426
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  426
attttggttg attttataga                                                   20
<210>  427
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  427
tcaacatttt ggttgatttt                                                   20
<210>  428
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  428
ggatggatca acattttggt                                                   20
<210>  429
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  429
gttggatgga tcaacatttt                                                   20
<210>  430
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  430
tctgttggat ggatcaacat                                                   20
<210>  431
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  431
ctgaatctgt tggatggatc                                                   20
<210>  432
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  432
agctttctga atctgttgga                                                   20
<210>  433
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  433
cattcaaagc tttctgaatc                                                   20
<210>  434
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  434
gttcattcaa agctttctga                                                   20
<210>  435
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  435
tcagttcatt caaagctttc                                                   20
<210>  436
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  436
gcctcagttc attcaaagct                                                   20
<210>  437
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  437
atttgcctca gttcattcaa                                                   20
<210>  438
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  438
ttaaatttgc ctcagttcat                                                   20
<210>  439
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  439
gccttttaaa tttgcctcag                                                   20
<210>  440
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  440
aggatttaat accagattat                                                   20
<210>  441
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  441
cttaaggatt taataccaga                                                   20
<210>  442
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  442
tctcttaagg atttaatacc                                                   20
<210>  443
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  443
gacagtgact ttaagataaa                                                   20
<210>  444
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  444
tgtgattgta tgtttaatct                                                   20
<210>  445
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  445
aggttatgtg attgtatgtt                                                   20
<210>  446
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  446
ctttaaggtt atgtgattgt                                                   20
<210>  447
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  447
ggtattcttt aaggttatgt                                                   20
<210>  448
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  448
attgattccc acatcacaaa                                                   20
<210>  449
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  449
ctaaaattga ttcccacatc                                                   20
<210>  450
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  450
ccatctaaaa ttgattccca                                                   20
<210>  451
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  451
ttgtgatatt agctcatatg                                                   20
<210>  452
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  452
actagttttt taaactggga                                                   20
<210>  453
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  453
gtcaagttta gagttttaac                                                   20
<210>  454
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  454
tatttagtca agtttagagt                                                   20
<210>  455
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  455
gatttttaca catactctgt                                                   20
<210>  456
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  456
ctgcttcatt aggtttcata                                                   20
<210>  457
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  457
cagcaggaat gccatcatgt                                                   20
<210>  458
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  458
tgatggcata catgccactt                                                   20
<210>  459
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  459
tgctgggtct gatggcatac                                                   20
<210>  460
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  460
gagttgctgg gtctgatggc                                                   20
<210>  461
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  461
aaaacttgag agttgctggg                                                   20
<210>  462
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  462
gacatgaaaa acttgagagt                                                   20
<210>  463
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  463
acatcacagt agacatgaaa                                                   20
<210>  464
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  464
agttttgtga tccatctatt                                                   20
<210>  465
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  465
tgaagttttg tgatccatct                                                   20
<210>  466
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  466
cgtttcattg aagttttgtg                                                   20
<210>  467
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  467
ccatatttgt agttctccca                                                   20
<210>  468
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  468
aaaccatatt tgtagttctc                                                   20
<210>  469
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  469
aattctccat caagcctccc                                                   20
<210>  470
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  470
atcttctcta ggcccaacca                                                   20
<210>  471
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  471
gagtatatct tctctaggcc                                                   20
<210>  472
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  472
ctatggagta tatcttctct                                                   20
<210>  473
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  473
gcttcactat ggagtatatc                                                   20
<210>  474
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  474
agattgcttc actatggagt                                                   20
<210>  475
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  475
ccagtcttcc aactcaattc                                                   20
<210>  476
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  476
gtctttccag tcttccaact                                                   20
<210>  477
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  477
gtttgttgtc tttccagtct                                                   20
<210>  478
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  478
aatgtttgtt gtctttccag                                                   20
<210>  479
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  479
cgtgatttcc caagtaaaaa                                                   20
<210>  480
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  480
gttttccggg attgcattgg                                                   20
<210>  481
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  481
tctttgtttt ccgggattgc                                                   20
<210>  482
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  482
ccaaatcttt gttttccggg                                                   20
<210>  483
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  483
acaccaaatc tttgttttcc                                                   20
<210>  484
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  484
agaaaacacc aaatctttgt                                                   20
<210>  485
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  485
caagtagaaa acaccaaatc                                                   20
<210>  486
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  486
gatcccaagt agaaaacacc                                                   20
<210>  487
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  487
tttgctttgt gatcccaagt                                                   20
<210>  488
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  488
tccttttgct ttgtgatccc                                                   20
<210>  489
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  489
gaagtgtcct tttgctttgt                                                   20
<210>  490
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  490
tgccaccacc agcctcctga                                                   20
<210>  491
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  491
ctcatcatgc caccaccagc                                                   20
<210>  492
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  492
ccatttaggt tgttttctcc                                                   20
<210>  493
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  493
atatttacca tttaggttgt                                                   20
<210>  494
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  494
cttggtttgt tatatttacc                                                   20
<210>  495
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  495
atagagtata accttccatt                                                   20
<210>  496
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  496
ttttatagag tataaccttc                                                   20
<210>  497
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  497
tggttgattt tatagagtat                                                   20
<210>  498
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  498
attttggttg attttataga                                                   20
<210>  499
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  499
tcaacatttt ggttgatttt                                                   20
<210>  500
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  500
ggatggatca acattttggt                                                   20
<210>  501
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  501
gttggatgga tcaacatttt                                                   20
<210>  502
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  502
tctgttggat ggatcaacat                                                   20
<210>  503
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  503
ctgaatctgt tggatggatc                                                   20
<210>  504
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  504
agctttctga atctgttgga                                                   20
<210>  505
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  505
cattcaaagc tttctgaatc                                                   20
<210>  506
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  506
gttcattcaa agctttctga                                                   20
<210>  507
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  507
tcagttcatt caaagctttc                                                   20
<210>  508
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  508
gcctcagttc attcaaagct                                                   20
<210>  509
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  509
atttgcctca gttcattcaa                                                   20
<210>  510
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  510
ttaaatttgc ctcagttcat                                                   20
<210>  511
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  511
gccttttaaa tttgcctcag                                                   20
<210>  512
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  512
aggatttaat accagattat                                                   20
<210>  513
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  513
cttaaggatt taataccaga                                                   20
<210>  514
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  514
tctcttaagg atttaatacc                                                   20
<210>  515
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  515
gacagtgact ttaagataaa                                                   20
<210>  516
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  516
tgtgattgta tgtttaatct                                                   20
<210>  517
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  517
aggttatgtg attgtatgtt                                                   20
<210>  518
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  518
ctttaaggtt atgtgattgt                                                   20
<210>  519
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  519
ggtattcttt aaggttatgt                                                   20
<210>  520
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  520
attgattccc acatcacaaa                                                   20
<210>  521
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  521
ctaaaattga ttcccacatc                                                   20
<210>  522
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  522
ccatctaaaa ttgattccca                                                   20
<210>  523
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  523
ttgtgatatt agctcatatg                                                   20
<210>  524
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  524
actagttttt taaactggga                                                   20
<210>  525
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  525
gtcaagttta gagttttaac                                                   20
<210>  526
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  526
tatttagtca agtttagagt                                                   20
<210>  527
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  527
gatttttaca catactctgt                                                   20
<210>  528
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  528
ctgcttcatt aggtttcata                                                   20
<210>  529
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  529
cagcaggaat gccatcatgt                                                   20
<210>  530
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  530
tgatggcata catgccactt                                                   20
<210>  531
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  531
tgctgggtct gatggcatac                                                   20
<210>  532
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  532
gagttgctgg gtctgatggc                                                   20
<210>  533
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  533
aaaacttgag agttgctggg                                                   20
<210>  534
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  534
gacatgaaaa acttgagagt                                                   20
<210>  535
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  535
acatcacagt agacatgaaa                                                   20
<210>  536
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  536
agttttgtga tccatctatt                                                   20
<210>  537
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  537
tgaagttttg tgatccatct                                                   20
<210>  538
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  538
cgtttcattg aagttttgtg                                                   20
<210>  539
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  539
ccatatttgt agttctccca                                                   20
<210>  540
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  540
aaaccatatt tgtagttctc                                                   20
<210>  541
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  541
aattctccat caagcctccc                                                   20
<210>  542
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  542
atcttctcta ggcccaacca                                                   20
<210>  543
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  543
gagtatatct tctctaggcc                                                   20
<210>  544
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  544
ctatggagta tatcttctct                                                   20
<210>  545
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  545
gcttcactat ggagtatatc                                                   20
<210>  546
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  546
agattgcttc actatggagt                                                   20
<210>  547
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  547
ccagtcttcc aactcaattc                                                   20
<210>  548
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  548
gtctttccag tcttccaact                                                   20
<210>  549
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  549
gtttgttgtc tttccagtct                                                   20
<210>  550
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  550
aatgtttgtt gtctttccag                                                   20
<210>  551
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  551
cgtgatttcc caagtaaaaa                                                   20
<210>  552
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  552
gttttccggg attgcattgg                                                   20
<210>  553
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  553
tctttgtttt ccgggattgc                                                   20
<210>  554
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  554
ccaaatcttt gttttccggg                                                   20
<210>  555
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  555
acaccaaatc tttgttttcc                                                   20
<210>  556
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  556
agaaaacacc aaatctttgt                                                   20
<210>  557
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  557
caagtagaaa acaccaaatc                                                   20
<210>  558
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  558
gatcccaagt agaaaacacc                                                   20
<210>  559
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  559
tttgctttgt gatcccaagt                                                   20
<210>  560
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  560
tccttttgct ttgtgatccc                                                   20
<210>  561
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  561
gaagtgtcct tttgctttgt                                                   20
<210>  562
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  562
tgccaccacc agcctcctga                                                   20
<210>  563
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  563
ctcatcatgc caccaccagc                                                   20
<210>  564
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  564
ccatttaggt tgttttctcc                                                   20
<210>  565
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  565
atatttacca tttaggttgt                                                   20
<210>  566
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  566
cttggtttgt tatatttacc                                                   20
<210>  567
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  567
atagagtata accttccatt                                                   20
<210>  568
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  568
ttttatagag tataaccttc                                                   20
<210>  569
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  569
tggttgattt tatagagtat                                                   20
<210>  570
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  570
attttggttg attttataga                                                   20
<210>  571
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  571
tcaacatttt ggttgatttt                                                   20
<210>  572
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  572
ggatggatca acattttggt                                                   20
<210>  573
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  573
gttggatgga tcaacatttt                                                   20
<210>  574
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  574
tctgttggat ggatcaacat                                                   20
<210>  575
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  575
ctgaatctgt tggatggatc                                                   20
<210>  576
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  576
agctttctga atctgttgga                                                   20
<210>  577
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  577
cattcaaagc tttctgaatc                                                   20
<210>  578
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  578
gttcattcaa agctttctga                                                   20
<210>  579
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  579
tcagttcatt caaagctttc                                                   20
<210>  580
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  580
gcctcagttc attcaaagct                                                   20
<210>  581
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  581
atttgcctca gttcattcaa                                                   20
<210>  582
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  582
ttaaatttgc ctcagttcat                                                   20
<210>  583
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  583
gccttttaaa tttgcctcag                                                   20
<210>  584
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  584
aggatttaat accagattat                                                   20
<210>  585
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  585
cttaaggatt taataccaga                                                   20
<210>  586
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  586
tctcttaagg atttaatacc                                                   20
<210>  587
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  587
gacagtgact ttaagataaa                                                   20
<210>  588
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  588
tgtgattgta tgtttaatct                                                   20
<210>  589
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  589
aggttatgtg attgtatgtt                                                   20
<210>  590
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  590
ctttaaggtt atgtgattgt                                                   20
<210>  591
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  591
ggtattcttt aaggttatgt                                                   20
<210>  592
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  592
attgattccc acatcacaaa                                                   20
<210>  593
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  593
ctaaaattga ttcccacatc                                                   20
<210>  594
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  594
ccatctaaaa ttgattccca                                                   20
<210>  595
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  595
ttgtgatatt agctcatatg                                                   20
<210>  596
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  596
actagttttt taaactggga                                                   20
<210>  597
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  597
gtcaagttta gagttttaac                                                   20
<210>  598
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  598
tatttagtca agtttagagt                                                   20
<210>  599
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  599
gatttttaca catactctgt                                                   20
<210>  600
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  600
ctgcttcatt aggtttcata                                                   20
<210>  601
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  601
cagtgttatt cagattgtac                                                   20
<210>  602
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  602
agtgtcttac catcatgttt                                                   20
<210>  603
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  603
caccagcctc ctaaaggaga                                                   20
<210>  604
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  604
gaggaggtga agtcagtgag                                                   20
<210>  605
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  605
tagagtagag gaggtgaagt                                                   20
<210>  606
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  606
tgtttgatgt gtttgaatac                                                   20
<210>  607
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  607
gaaacaacaa gggcaaaggc                                                   20
<210>  608
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  608
tgtttgataa cgaccctaag                                                   20
<210>  609
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  609
tttttggtta agtgaccttg                                                   20
<210>  610
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  610
gtagaagttt tcagggatgg                                                   20
<210>  611
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  611
aggaagtaga agttttcagg                                                   20
<210>  612
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  612
aggtgagtgt gcaggagaaa                                                   20
<210>  613
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  613
ttaaataaag gtgagtgtgc                                                   20
<210>  614
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  614
agtgcaggaa tagaagagat                                                   20
<210>  615
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  615
cattttagtg caggaataga                                                   20
<210>  616
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  616
ctatattctg gagtatatac                                                   20
<210>  617
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  617
cagtattcta tattctggag                                                   20
<210>  618
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  618
gtgccataca gtattctata                                                   20
<210>  619
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  619
ctgtgtgaat atgacattac                                                   20
<210>  620
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  620
tgaggcacac tatttctagt                                                   20
<210>  621
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  621
gacctttaat tatgaggcac                                                   20
<210>  622
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  622
gaatgttgac ctttaattat                                                   20
<210>  623
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  623
ttgttgaatg ttgaccttta                                                   20
<210>  624
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  624
tctactaagt aactatgtga                                                   20
<210>  625
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  625
ctcttttcta ctaagtaact                                                   20
<210>  626
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  626
aaggatctat tgtaaagttt                                                   20
<210>  627
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  627
ctaggacctt atttaaaagg                                                   20
<210>  628
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  628
atttcctagg accttattta                                                   20
<210>  629
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  629
ttgacagtaa gaaaagcaga                                                   20
<210>  630
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  630
ttctcattga cagtaagaaa                                                   20
<210>  631
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  631
agtttttctc attgacagta                                                   20
<210>  632
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  632
attgaatgat agtttttctc                                                   20
<210>  633
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  633
ttgggtttgc aatttattga                                                   20
<210>  634
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  634
agtgtgttgg gtttgcaatt                                                   20
<210>  635
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  635
tatttaagtg tgttgggttt                                                   20
<210>  636
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  636
atatattcag tagtttatcg                                                   20
<210>  637
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  637
agatgttggc aggttggcaa                                                   20
<210>  638
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  638
tctgtagatg ttggcaggtt                                                   20
<210>  639
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  639
ttgataattt ttgacctgta                                                   20
<210>  640
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  640
ggctttcttg ataatttgat                                                   20
<210>  641
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  641
gtcttactga tcttcagacc                                                   20
<210>  642
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  642
tttaggtctt actgatcttc                                                   20
<210>  643
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  643
tcagttttag gtcttactga                                                   20
<210>  644
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  644
tgatattctg ttcagatttt                                                   20
<210>  645
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  645
tagagactgc tttgcttaga                                                   20
<210>  646
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  646
aggccaaaag tagagactgc                                                   20
<210>  647
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  647
ggcaaaaaag cagacattgg                                                   20
<210>  648
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  648
aatcagggac attatttaat                                                   20
<210>  649
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  649
tatttaatca gggacattat                                                   20
<210>  650
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  650
ctcaaaatat ttaatcaggg                                                   20
<210>  651
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  651
tacctgttct caaaatattt                                                   20
<210>  652
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  652
gtacagatta cctgttctca                                                   20
<210>  653
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  653
ggtgtttgat atttagataa                                                   20
<210>  654
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  654
ttgtctttca gttcataatg                                                   20
<210>  655
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  655
acagtttgtc tttcagttca                                                   20
<210>  656
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  656
tctgagctga taaaagaata                                                   20
<210>  657
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  657
cccaccaaag tgtcttacca                                                   20
<210>  658
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  658
cttcaagaag gaaacccacc                                                   20
<210>  659
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  659
aatagcttca agaaggaaac                                                   20
<210>  660
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  660
acaagtccta agaataggga                                                   20
<210>  661
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  661
gtctagaaca agtcctaaga                                                   20
<210>  662
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  662
tctaataatc aagtccatat                                                   20
<210>  663
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  663
accttctata ttatctaata                                                   20
<210>  664
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  664
gcatgtatct cttaaacagg                                                   20
<210>  665
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  665
gtccagtgac ctttaactcc                                                   20
<210>  666
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  666
tcttaccaaa ctattttctt                                                   20
<210>  667
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  667
gtaatgttta tgttaaagca                                                   20
<210>  668
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  668
ttgtggcaaa tgtagcattt                                                   20
<210>  669
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  669
gagatttcac ttgacatttt                                                   20
<210>  670
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  670
ggagcttgag atttcacttg                                                   20
<210>  671
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  671
catcagattt agtaatagga                                                   20
<210>  672
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  672
gttattacat cagatttagt                                                   20
<210>  673
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  673
cagcaggaat gcctagaatc                                                   20
<210>  674
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  674
ctccttagac aggttttacc                                                   20
<210>  675
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  675
gtctattctc cttagacagg                                                   20
<210>  676
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  676
atgaatgatt gaatgtagtc                                                   20
<210>  677
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  677
atatgaaggc tgagactgct                                                   20
<210>  678
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  678
ataaattata tgaaggctga                                                   20
<210>  679
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  679
atatttaaga acagacatgt                                                   20
<210>  680
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  680
atttgtaaca gttactactt                                                   20
<210>  681
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  681
cacagcttat ttgtaacagt                                                   20
<210>  682
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  682
gtgactaatg ctaggagtgg                                                   20
<210>  683
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  683
gaatagagtg actaatgcta                                                   20
<210>  684
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  684
atgagagaat agagtgacta                                                   20
<210>  685
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  685
tatactgtat gtctgagttt                                                   20
<210>  686
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  686
aactaattca ttataagcca                                                   20
<210>  687
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  687
tttggatttt aaacatctgt                                                   20
<210>  688
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  688
tgtatgtgct ttttggattt                                                   20
<210>  689
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  689
catggatttt tgtatgtgct                                                   20
<210>  690
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  690
tcattcatgg atttttgtat                                                   20
<210>  691
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  691
acttagacat cattcatgga                                                   20
<210>  692
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  692
gtgagtactt agacatcatt                                                   20
<210>  693
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  693
tttataagtg agtacttaga                                                   20
<210>  694
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  694
gtcttctact ttataagtga                                                   20
<210>  695
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  695
atgaatgtct tctactttat                                                   20
<210>  696
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  696
caaatagtac tgagcattta                                                   20
<210>  697
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  697
ttagaagatt tggagctaca                                                   20
<210>  698
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  698
tcactattag aagatttgga                                                   20
<210>  699
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  699
gggttacact cactattaga                                                   20
<210>  700
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  700
acttacctgt cagcctttta                                                   20
<210>  701
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  701
cttaccagaa ttaagtgagt                                                   20
<210>  702
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  702
aatacaagta caaatgggtt                                                   20
<210>  703
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  703
ctggtaaata caagtacaaa                                                   20
<210>  704
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  704
ggattgctgg taaatacaag                                                   20
<210>  705
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  705
tcattttaag gattgctggt                                                   20
<210>  706
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  706
agttagtagg aagcttcatt                                                   20
<210>  707
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  707
gctattgagt tagtaggaag                                                   20
<210>  708
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  708
agcatggttc ttaataactt                                                   20
<210>  709
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  709
ctttgtagaa aaagacagga                                                   20
<210>  710
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  710
acctggcctt tggtatttgc                                                   20
<210>  711
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  711
agtctttata tggataaact                                                   20
<210>  712
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  712
cgtcattggt agaggaatat                                                   20
<210>  713
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  713
gattatcctt tctataatgc                                                   20
<210>  714
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  714
gtcttgaatc ccttgatcat                                                   20
<210>  715
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  715
ggtgcaacta attgagttgt                                                   20
<210>  716
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  716
gtgtttttta ttggtgcaac                                                   20
<210>  717
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  717
attctcctga aaagaaaagt                                                   20
<210>  718
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  718
atgccaccac cagcctccta                                                   20
<210>  719
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  719
atatccttta acaaatgggt                                                   20
<210>  720
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  720
gcactatatc ctttaacaaa                                                   20
<210>  721
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  721
acttgggcac tatatccttt                                                   20
<210>  722
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  722
gaaacatgtc ctatgagagt                                                   20
<210>  723
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  723
ttgagcactt taagcaaagt                                                   20
<210>  724
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  724
ggaatttgag cactttaagc                                                   20
<210>  725
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  725
tagattagac aactgtgagt                                                   20
<210>  726
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  726
aaaatgaagg tcaagtttga                                                   20
<210>  727
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  727
gtgaaagcaa aatgaaggtc                                                   20
<210>  728
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  728
gtattgtgaa agcaaaatga                                                   20
<210>  729
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  729
tggagagtat agtattgtga                                                   20
<210>  730
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  730
aggaatagaa gagataaata                                                   20
<210>  731
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  731
tggagtatat acaaataatg                                                   20
<210>  732
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  732
tgtttacatt gtagattaat                                                   20
<210>  733
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  733
cagaatatat aatatcttgc                                                   20
<210>  734
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  734
tgcaatttat tgaatgatag                                                   20
<210>  735
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  735
cataatacat aatttgaacc                                                   20
<210>  736
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  736
ataattttca gttttaggtc                                                   20
<210>  737
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  737
tttcagtaat gtttatgtta                                                   20
<210>  738
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  738
aatgcctaga atcaataaaa                                                   20
<210>  739
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  739
gtaaatattt gtagattagc                                                   20
<210>  740
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  740
acaaatgtgt aattgtttga                                                   20
<210>  741
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  741
tactaacaaa tgtgtaattg                                                   20
<210>  742
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  742
tgataagtat atttaagaac                                                   20
<210>  743
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  743
ttaacttcca attaattgat                                                   20
<210>  744
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  744
tctgttattt tatcttgctt                                                   20
<210>  745
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  745
atcacaatcc tttttattaa                                                   20
<210>  746
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  746
agagacttga gtaataataa                                                   20
<210>  747
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  747
aacaaaatga aacatgtcct                                                   20
<210>  748
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  748
cagcaggaat gccatcatgt                                                   20
<210>  749
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  749
tgatggcata catgccactt                                                   20
<210>  750
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  750
tgctgggtct gatggcatac                                                   20
<210>  751
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  751
gagttgctgg gtctgatggc                                                   20
<210>  752
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  752
aaaacttgag agttgctggg                                                   20
<210>  753
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  753
gacatgaaaa acttgagagt                                                   20
<210>  754
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  754
acatcacagt agacatgaaa                                                   20
<210>  755
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  755
agttttgtga tccatctatt                                                   20
<210>  756
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  756
tgaagttttg tgatccatct                                                   20
<210>  757
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  757
cgtttcattg aagttttgtg                                                   20
<210>  758
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  758
ccatatttgt agttctccca                                                   20
<210>  759
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  759
aaaccatatt tgtagttctc                                                   20
<210>  760
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  760
aattctccat caagcctccc                                                   20
<210>  761
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  761
atcttctcta ggcccaacca                                                   20
<210>  762
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  762
gagtatatct tctctaggcc                                                   20
<210>  763
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  763
ctatggagta tatcttctct                                                   20
<210>  764
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  764
gcttcactat ggagtatatc                                                   20
<210>  765
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  765
agattgcttc actatggagt                                                   20
<210>  766
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  766
ccagtcttcc aactcaattc                                                   20
<210>  767
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  767
gtctttccag tcttccaact                                                   20
<210>  768
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  768
gtttgttgtc tttccagtct                                                   20
<210>  769
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  769
aatgtttgtt gtctttccag                                                   20
<210>  770
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  770
cgtgatttcc caagtaaaaa                                                   20
<210>  771
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  771
gttttccggg attgcattgg                                                   20
<210>  772
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  772
tctttgtttt ccgggattgc                                                   20
<210>  773
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  773
ccaaatcttt gttttccggg                                                   20
<210>  774
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  774
acaccaaatc tttgttttcc                                                   20
<210>  775
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  775
agaaaacacc aaatctttgt                                                   20
<210>  776
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  776
caagtagaaa acaccaaatc                                                   20
<210>  777
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  777
gatcccaagt agaaaacacc                                                   20
<210>  778
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  778
tttgctttgt gatcccaagt                                                   20
<210>  779
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  779
tccttttgct ttgtgatccc                                                   20
<210>  780
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  780
gaagtgtcct tttgctttgt                                                   20
<210>  781
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  781
tgccaccacc agcctcctga                                                   20
<210>  782
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  782
ctcatcatgc caccaccagc                                                   20
<210>  783
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  783
ccatttaggt tgttttctcc                                                   20
<210>  784
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  784
atatttacca tttaggttgt                                                   20
<210>  785
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  785
cttggtttgt tatatttacc                                                   20
<210>  786
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  786
atagagtata accttccatt                                                   20
<210>  787
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  787
ttttatagag tataaccttc                                                   20
<210>  788
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  788
tggttgattt tatagagtat                                                   20
<210>  789
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  789
attttggttg attttataga                                                   20
<210>  790
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  790
tcaacatttt ggttgatttt                                                   20
<210>  791
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  791
ggatggatca acattttggt                                                   20
<210>  792
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  792
gttggatgga tcaacatttt                                                   20
<210>  793
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  793
tctgttggat ggatcaacat                                                   20
<210>  794
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  794
ctgaatctgt tggatggatc                                                   20
<210>  795
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  795
agctttctga atctgttgga                                                   20
<210>  796
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  796
cattcaaagc tttctgaatc                                                   20
<210>  797
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  797
gttcattcaa agctttctga                                                   20
<210>  798
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  798
tcagttcatt caaagctttc                                                   20
<210>  799
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  799
gcctcagttc attcaaagct                                                   20
<210>  800
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  800
atttgcctca gttcattcaa                                                   20
<210>  801
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  801
ttaaatttgc ctcagttcat                                                   20
<210>  802
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  802
gccttttaaa tttgcctcag                                                   20
<210>  803
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  803
aggatttaat accagattat                                                   20
<210>  804
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  804
cttaaggatt taataccaga                                                   20
<210>  805
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  805
tctcttaagg atttaatacc                                                   20
<210>  806
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  806
gacagtgact ttaagataaa                                                   20
<210>  807
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  807
tgtgattgta tgtttaatct                                                   20
<210>  808
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  808
aggttatgtg attgtatgtt                                                   20
<210>  809
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  809
ctttaaggtt atgtgattgt                                                   20
<210>  810
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  810
ggtattcttt aaggttatgt                                                   20
<210>  811
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  811
attgattccc acatcacaaa                                                   20
<210>  812
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  812
ctaaaattga ttcccacatc                                                   20
<210>  813
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  813
ccatctaaaa ttgattccca                                                   20
<210>  814
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  814
ttgtgatatt agctcatatg                                                   20
<210>  815
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  815
actagttttt taaactggga                                                   20
<210>  816
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  816
gtcaagttta gagttttaac                                                   20
<210>  817
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  817
tatttagtca agtttagagt                                                   20
<210>  818
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  818
gatttttaca catactctgt                                                   20
<210>  819
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  819
ctgcttcatt aggtttcata                                                   20
<210>  820
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  820
caccagcctc ctaaaggaga                                                   20
<210>  821
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  821
gacttcttaa ctctatatat                                                   20
<210>  822
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  822
ctagacttct taactctata                                                   20
<210>  823
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  823
gacctagact tcttaactct                                                   20
<210>  824
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  824
ggaagcagac ctagacttct                                                   20
<210>  825
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  825
tctggaagca gacctagact                                                   20
<210>  826
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  826
tcttctggaa gcagacctag                                                   20
<210>  827
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  827
ctaatcttta gggatttagg                                                   20
<210>  828
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  828
tgtatctaat ctttagggat                                                   20
<210>  829
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  829
taacttgggc actatatcct                                                   20
<210>  830
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  830
attgacaaag gtaggtcacc                                                   20
<210>  831
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  831
atatgacatg tatattggat                                                   20
<210>  832
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  832
ttttgtactt ttctggaaca                                                   20
<210>  833
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  833
tagtctgtgg tcctgaaaat                                                   20
<210>  834
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  834
agcttagtct gtggtcctga                                                   20
<210>  835
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  835
gacagcttag tctgtggtcc                                                   20
<210>  836
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  836
gtattctggc cctaaaaaaa                                                   20
<210>  837
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  837
attttggtat tctggcccta                                                   20
<210>  838
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  838
gaaattgtcc aatttttggg                                                   20
<210>  839
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  839
tttgcatttg aaattgtcca                                                   20
<210>  840
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  840
ggaagcaact catatattaa                                                   20
<210>  841
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  841
tatcagaaaa agatacctga                                                   20
<210>  842
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  842
ataatagcta ataatgtggg                                                   20
<210>  843
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  843
tgcagataat agctaataat                                                   20
<210>  844
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  844
tgtcattgca gataatagct                                                   20
<210>  845
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  845
taaaagttgt cattgcagat                                                   20
<210>  846
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  846
cggattttta aaagttgtca                                                   20
<210>  847
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  847
gggattcgga tttttaaaag                                                   20
<210>  848
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  848
tttgggattc ggatttttaa                                                   20
<210>  849
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  849
acgcttattt gggattcgga                                                   20
<210>  850
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  850
tttaagagat ttacaagtca                                                   20
<210>  851
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  851
gactacctgt ttttaaaagc                                                   20
<210>  852
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  852
tatggtgact acctgttttt                                                   20
<210>  853
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  853
actttgctgt attataaact                                                   20
<210>  854
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  854
attgtattta actttgctgt                                                   20
<210>  855
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  855
gagcaactaa cttaataggt                                                   20
<210>  856
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  856
gaaatgagca actaacttaa                                                   20
<210>  857
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  857
aatcaaagaa atgagcaact                                                   20
<210>  858
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  858
accttcttcc acattgagtt                                                   20
<210>  859
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  859
cacgaatgta accttcttcc                                                   20
<210>  860
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  860
ttaacttgca cgaatgtaac                                                   20
<210>  861
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  861
tatatatacc aatatttgcc                                                   20
<210>  862
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  862
tcttaactct atatatacca                                                   20
<210>  863
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  863
ctttaagtga agttacttct                                                   20
<210>  864
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  864
tctacttact ttaagtgaag                                                   20
<210>  865
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  865
gaaccctctt tattttctac                                                   20
<210>  866
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  866
acataaacat gaaccctctt                                                   20
<210>  867
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  867
ccacattgaa aacataaaca                                                   20
<210>  868
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  868
gcatgcctta gaaatatttt                                                   20
<210>  869
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  869
caatgcaaca aagtatttca                                                   20
<210>  870
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  870
ctggagatta tttttcttgg                                                   20
<210>  871
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  871
ttcatatata acattaggga                                                   20
<210>  872
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  872
tcagtgtttt catatataac                                                   20
<210>  873
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  873
gacatagtgt tctagattgt                                                   20
<210>  874
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  874
caatagtgta atgacatagt                                                   20
<210>  875
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  875
ttacttacct tcagtaattt                                                   20
<210>  876
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  876
atcttttcca tttactgtat                                                   20
<210>  877
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  877
agaaaaagcc cagcatattt                                                   20
<210>  878
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  878
gtatgcttct ttcaaatagc                                                   20
<210>  879
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  879
ccttcccctt gtatgcttct                                                   20
<210>  880
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  880
cctgtaacac tatcataatc                                                   20
<210>  881
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  881
tgacttacct gattttctat                                                   20
<210>  882
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  882
gatgggacat accattaaaa                                                   20
<210>  883
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  883
gtgaaagatg ggacatacca                                                   20
<210>  884
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  884
cctgtgtgaa agatgggaca                                                   20
<210>  885
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  885
cattggctgc tatgaattaa                                                   20
<210>  886
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  886
gatgacattg gctgctatga                                                   20
<210>  887
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  887
gagaaacatg atctaatttg                                                   20
<210>  888
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  888
atggaaagct attgtgtggt                                                   20
<210>  889
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  889
gtctaaagag ccaatatgag                                                   20
<210>  890
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  890
aatcttggtc taaagagcca                                                   20
<210>  891
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  891
ggagcttgag atttcacttg                                                   20
<210>  892
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  892
catcagattt agtaatagga                                                   20
<210>  893
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  893
gttattacat cagatttagt                                                   20
<210>  894
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  894
cagcaggaat gcctagaatc                                                   20
<210>  895
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  895
ctccttagac aggttttacc                                                   20
<210>  896
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  896
gtctattctc cttagacagg                                                   20
<210>  897
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  897
atgaatgatt gaatgtagtc                                                   20
<210>  898
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  898
atatgaaggc tgagactgct                                                   20
<210>  899
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  899
ataaattata tgaaggctga                                                   20
<210>  900
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  900
atatttaaga acagacatgt                                                   20
<210>  901
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  901
atttgtaaca gttactactt                                                   20
<210>  902
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  902
cacagcttat ttgtaacagt                                                   20
<210>  903
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  903
gtgactaatg ctaggagtgg                                                   20
<210>  904
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  904
gaatagagtg actaatgcta                                                   20
<210>  905
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  905
atgagagaat agagtgacta                                                   20
<210>  906
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  906
tatactgtat gtctgagttt                                                   20
<210>  907
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  907
aactaattca ttataagcca                                                   20
<210>  908
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  908
tttggatttt aaacatctgt                                                   20
<210>  909
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  909
tgtatgtgct ttttggattt                                                   20
<210>  910
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  910
catggatttt tgtatgtgct                                                   20
<210>  911
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  911
tcattcatgg atttttgtat                                                   20
<210>  912
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  912
acttagacat cattcatgga                                                   20
<210>  913
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  913
gtgagtactt agacatcatt                                                   20
<210>  914
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  914
tttataagtg agtacttaga                                                   20
<210>  915
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  915
gtcttctact ttataagtga                                                   20
<210>  916
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  916
atgaatgtct tctactttat                                                   20
<210>  917
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  917
caaatagtac tgagcattta                                                   20
<210>  918
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  918
ttagaagatt tggagctaca                                                   20
<210>  919
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  919
tcactattag aagatttgga                                                   20
<210>  920
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  920
gggttacact cactattaga                                                   20
<210>  921
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  921
acttacctgt cagcctttta                                                   20
<210>  922
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  922
cttaccagaa ttaagtgagt                                                   20
<210>  923
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  923
aatacaagta caaatgggtt                                                   20
<210>  924
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  924
ctggtaaata caagtacaaa                                                   20
<210>  925
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  925
ggattgctgg taaatacaag                                                   20
<210>  926
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  926
tcattttaag gattgctggt                                                   20
<210>  927
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  927
agttagtagg aagcttcatt                                                   20
<210>  928
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  928
gctattgagt tagtaggaag                                                   20
<210>  929
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  929
agcatggttc ttaataactt                                                   20
<210>  930
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  930
ctttgtagaa aaagacagga                                                   20
<210>  931
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  931
acctggcctt tggtatttgc                                                   20
<210>  932
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  932
agtctttata tggataaact                                                   20
<210>  933
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  933
cgtcattggt agaggaatat                                                   20
<210>  934
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  934
gattatcctt tctataatgc                                                   20
<210>  935
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  935
gtcttgaatc ccttgatcat                                                   20
<210>  936
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  936
ggtgcaacta attgagttgt                                                   20
<210>  937
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  937
gtgtttttta ttggtgcaac                                                   20
<210>  938
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  938
attctcctga aaagaaaagt                                                   20
<210>  939
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  939
atgccaccac cagcctccta                                                   20
<210>  940
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  940
atatccttta acaaatgggt                                                   20
<210>  941
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  941
gcactatatc ctttaacaaa                                                   20
<210>  942
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  942
acttgggcac tatatccttt                                                   20
<210>  943
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  943
gaaacatgtc ctatgagagt                                                   20
<210>  944
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  944
ttgagcactt taagcaaagt                                                   20
<210>  945
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  945
ggaatttgag cactttaagc                                                   20
<210>  946
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  946
tagattagac aactgtgagt                                                   20
<210>  947
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  947
aaaatgaagg tcaagtttga                                                   20
<210>  948
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  948
gtgaaagcaa aatgaaggtc                                                   20
<210>  949
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  949
gtattgtgaa agcaaaatga                                                   20
<210>  950
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  950
tggagagtat agtattgtga                                                   20
<210>  951
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  951
gagatttaca agtcaaaaat                                                   20
<210>  952
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  952
atttaacttt gctgtattat                                                   20
<210>  953
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  953
atcaatgcta aatgaaatca                                                   20
<210>  954
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  954
tattttctgg agattatttt                                                   20
<210>  955
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  955
aaaatgaata ttggcaattc                                                   20
<210>  956
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  956
aatgcctaga atcaataaaa                                                   20
<210>  957
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  957
gtaaatattt gtagattagc                                                   20
<210>  958
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  958
acaaatgtgt aattgtttga                                                   20
<210>  959
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  959
tactaacaaa tgtgtaattg                                                   20
<210>  960
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  960
tgataagtat atttaagaac                                                   20
<210>  961
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  961
ttaacttcca attaattgat                                                   20
<210>  962
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  962
tctgttattt tatcttgctt                                                   20
<210>  963
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  963
atcacaatcc tttttattaa                                                   20
<210>  964
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  964
agagacttga gtaataataa                                                   20
<210>  965
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  965
aacaaaatga aacatgtcct                                                   20
<210>  966
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  966
gattttcaat ttcaagcaac                                                   20
<210>  967
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  967
agcttaattg tgaacatttt                                                   20
<210>  968
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  968
gaaggagctt aattgtgaac                                                   20
<210>  969
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  969
caataaaaag aaggagctta                                                   20
<210>  970
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  970
gaacaataaa aagaaggagc                                                   20
<210>  971
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  971
ctggaggaaa taactagagg                                                   20
<210>  972
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  972
attctggagg aaataactag                                                   20
<210>  973
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  973
tcaaatgatg aattgtcttg                                                   20
<210>  974
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  974
ttgattttgg ctctggagat                                                   20
<210>  975
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  975
gcaaatcttg attttggctc                                                   20
<210>  976
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  976
atagcaaatc ttgattttgg                                                   20
<210>  977
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  977
cgtctaacat agcaaatctt                                                   20
<210>  978
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  978
tggctaaaat ttttacatcg                                                   20
<210>  979
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  979
ccattggcta aaatttttac                                                   20
<210>  980
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  980
aggaggccat tggctaaaat                                                   20
<210>  981
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  981
tgaaggaggc cattggctaa                                                   20
<210>  982
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  982
gtcccaactg aaggaggcca                                                   20
<210>  983
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  983
ccatgtccca actgaaggag                                                   20
<210>  984
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  984
agaccatgtc ccaactgaag                                                   20
<210>  985
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  985
tttaagacca tgtcccaact                                                   20
<210>  986
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  986
gtctttaaga ccatgtccca                                                   20
<210>  987
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  987
ggacaaagtc tttaagacca                                                   20
<210>  988
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  988
tcttatggac aaagtcttta                                                   20
<210>  989
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  989
tatgtcatta atttggccct                                                   20
<210>  990
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  990
gatcaaatat gttgagtttt                                                   20
<210>  991
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  991
gactgatcaa atatgttgag                                                   20
<210>  992
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  992
tcttctttga tttcactggt                                                   20
<210>  993
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  993
cttctcagtt ccttttcttc                                                   20
<210>  994
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  994
gttcttctca gttccttttc                                                   20
<210>  995
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  995
tgtagttctt ctcagttcct                                                   20
<210>  996
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  996
tatatgtagt tcttctcagt                                                   20
<210>  997
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  997
gtttatatgt agttcttctc                                                   20
<210>  998
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  998
tgtagtttat atgtagttct                                                   20
<210>  999
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  999
gacttgtagt ttatatgtag                                                   20
<210>  1000
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1000
tcatttttga cttgtagttt                                                   20
<210>  1001
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1001
cctcttcatt tttgacttgt                                                   20
<210>  1002
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1002
tctttacctc ttcatttttg                                                   20
<210>  1003
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1003
catattcttt acctcttcat                                                   20
<210>  1004
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1004
gtgacatatt ctttacctct                                                   20
<210>  1005
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1005
gagttcaagt gacatattct                                                   20
<210>  1006
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1006
tgagttgagt tcaagtgaca                                                   20
<210>  1007
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1007
agttttgagt tgagttcaag                                                   20
<210>  1008
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1008
tcaagttttg agttgagttc                                                   20
<210>  1009
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1009
ggaggctttc aagttttgag                                                   20
<210>  1010
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1010
tttcttctag gaggctttca                                                   20
<210>  1011
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1011
attttttctt ctaggaggct                                                   20
<210>  1012
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1012
gtagaatttt ttcttctagg                                                   20
<210>  1013
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1013
gctcttctaa atatttcact                                                   20
<210>  1014
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1014
agttagttag ttgctcttct                                                   20
<210>  1015
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1015
caggttgatt ttgaattaag                                                   20
<210>  1016
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1016
tttcaggttg attttgaatt                                                   20
<210>  1017
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1017
ggagtttcag gttgattttg                                                   20
<210>  1018
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1018
gttctggagt ttcaggttga                                                   20
<210>  1019
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1019
ttaagtgaag ttacttctgg                                                   20
<210>  1020
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1020
tgctattatc ttgtttttct                                                   20
<210>  1021
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1021
ggtctttgat gctattatct                                                   20
<210>  1022
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1022
gaaggtcttt gatgctatta                                                   20
<210>  1023
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1023
ctggagaagg tctttgatgc                                                   20
<210>  1024
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1024
ctgagctgat tttctatttc                                                   20
<210>  1025
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1025
atttctgtgg gttcttgaat                                                   20
<210>  1026
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1026
gagaaatttc tgtgggttct                                                   20
<210>  1027
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1027
gatagagaaa tttctgtggg                                                   20
<210>  1028
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1028
cttggaagat agagaaattt                                                   20
<210>  1029
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1029
gtgctcttgg cttggaagat                                                   20
<210>  1030
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1030
cttggtgctc ttggcttgga                                                   20
<210>  1031
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1031
gggagtagtt cttggtgctc                                                   20
<210>  1032
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1032
ctgaagaaag ggagtagttc                                                   20
<210>  1033
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1033
atcatgtttt acatttctta                                                   20
<210>  1034
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1034
gccatcatgt tttacatttc                                                   20
<210>  1035
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1035
gaatgccatc atgttttaca                                                   20
<210>  1036
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1036
caggaatgcc atcatgtttt                                                   20
<210>  1037
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1037
aaagtcaatg tgacttagta                                                   20
<210>  1038
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1038
aaggtatagt gatacctcat                                                   20
<210>  1039
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1039
actgttttct tctggaagca                                                   20
<210>  1040
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1040
aaataaggta tagtgatacc                                                   20
<210>  1041
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1041
acaaataagg tatagtgata                                                   20
<210>  1042
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1042
taacaaataa ggtatagtga                                                   20
<210>  1043
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1043
tttaacaaat aaggtatagt                                                   20
<210>  1044
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1044
atatatttta acaaataagg                                                   20
<210>  1045
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1045
cagtatatat tttaacaaat                                                   20
<210>  1046
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1046
tacagtatat attttaacaa                                                   20
<210>  1047
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1047
tatacagtat atattttaac                                                   20
<210>  1048
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1048
atagtattaa gtgttaaaat                                                   20
<210>  1049
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1049
tcatagtatt aagtgttaaa                                                   20
<210>  1050
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1050
gttttcatag tattaagtgt                                                   20
<210>  1051
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1051
attatttgtt ttcatagtat                                                   20
<210>  1052
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1052
ctttacaatt atttgttttc                                                   20
<210>  1053
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1053
attcctttac aattatttgt                                                   20
<210>  1054
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1054
agattccttt acaattattt                                                   20
<210>  1055
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1055
caagattcct ttacaattat                                                   20
<210>  1056
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1056
gacaagattc ctttacaatt                                                   20
<210>  1057
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1057
ctgacaagat tcctttacaa                                                   20
<210>  1058
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1058
aatctgacaa gattccttta                                                   20
<210>  1059
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1059
gtaatctgac aagattcctt                                                   20
<210>  1060
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1060
ctgtaatctg acaagattcc                                                   20
<210>  1061
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1061
tactgtaatc tgacaagatt                                                   20
<210>  1062
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1062
cttactgtaa tctgacaaga                                                   20
<210>  1063
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1063
ttcttactgt aatctgacaa                                                   20
<210>  1064
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1064
cattcttact gtaatctgac                                                   20
<210>  1065
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1065
ttcattctta ctgtaatctg                                                   20
<210>  1066
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1066
tgttcattct tactgtaatc                                                   20
<210>  1067
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1067
tatgttcatt cttactgtaa                                                   20
<210>  1068
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1068
aatatgttca ttcttactgt                                                   20
<210>  1069
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1069
acaaatatgt tcattcttac                                                   20
<210>  1070
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1070
cgatgccaca aatatgttca                                                   20
<210>  1071
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1071
ctcgatgcca caaatatgtt                                                   20
<210>  1072
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1072
aactcgatgc cacaaatatg                                                   20
<210>  1073
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1073
ttaactcgat gccacaaata                                                   20
<210>  1074
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1074
ctttaactcg atgccacaaa                                                   20
<210>  1075
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1075
aactttaact cgatgccaca                                                   20
<210>  1076
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1076
aatataaact ttaactcgat                                                   20
<210>  1077
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1077
gaaatataaa ctttaactcg                                                   20
<210>  1078
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1078
gggaaatata aactttaact                                                   20
<210>  1079
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1079
gaatcacagc atatttaggg                                                   20
<210>  1080
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1080
tagaatcaca gcatatttag                                                   20
<210>  1081
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1081
gtattagaat cacagcatat                                                   20
<210>  1082
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1082
atgtattaga atcacagcat                                                   20
<210>  1083
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1083
gaatgtatta gaatcacagc                                                   20
<210>  1084
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1084
acgaatgtat tagaatcaca                                                   20
<210>  1085
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1085
acacgaatgt attagaatca                                                   20
<210>  1086
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1086
ctacacgaat gtattagaat                                                   20
<210>  1087
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1087
acctacacga atgtattaga                                                   20
<210>  1088
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1088
aaacctacac gaatgtatta                                                   20
<210>  1089
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1089
gaaaacctac acgaatgtat                                                   20
<210>  1090
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1090
ttgaaaacct acacgaatgt                                                   20
<210>  1091
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1091
acttgaaaac ctacacgaat                                                   20
<210>  1092
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1092
ctacttgaaa acctacacga                                                   20
<210>  1093
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1093
tatttctact tgaaaaccta                                                   20
<210>  1094
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1094
tttatttcta cttgaaaacc                                                   20
<210>  1095
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1095
ggtttatttc tacttgaaaa                                                   20
<210>  1096
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1096
gaggtttatt tctacttgaa                                                   20
<210>  1097
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1097
ttacgaggtt tatttctact                                                   20
<210>  1098
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1098
tgttacgagg tttatttcta                                                   20
<210>  1099
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1099
cttgttacga ggtttatttc                                                   20
<210>  1100
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1100
aacttgttac gaggtttatt                                                   20
<210>  1101
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1101
gtaacttgtt acgaggttta                                                   20
<210>  1102
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1102
cagtaacttg ttacgaggtt                                                   20
<210>  1103
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1103
ttcagtaact tgttacgagg                                                   20
<210>  1104
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1104
cgttcagtaa cttgttacga                                                   20
<210>  1105
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1105
cttgtcaggc tgtttaaacg                                                   20
<210>  1106
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1106
tgcttgtcag gctgtttaaa                                                   20
<210>  1107
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1107
tatacatgct tgtcaggctg                                                   20
<210>  1108
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1108
tatatacatg cttgtcaggc                                                   20
<210>  1109
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1109
catatataca tgcttgtcag                                                   20
<210>  1110
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1110
tggaactgtt ttcttctgga                                                   20
<210>  1111
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1111
cgtggaactg ttttcttctg                                                   20
<210>  1112
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1112
tcttgatttt caatttcaag                                                   20
<210>  1113
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1113
ttttatcttg attttcaatt                                                   20
<210>  1114
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1114
catttttatc ttgattttca                                                   20
<210>  1115
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1115
attgtgaaca tttttatctt                                                   20
<210>  1116
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1116
taattgtgaa catttttatc                                                   20
<210>  1117
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1117
aagaaggagc ttaattgtga                                                   20
<210>  1118
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1118
aaaagaagga gcttaattgt                                                   20
<210>  1119
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1119
taaaaagaag gagcttaatt                                                   20
<210>  1120
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1120
taactagagg aacaataaaa                                                   20
<210>  1121
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1121
aataactaga ggaacaataa                                                   20
<210>  1122
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1122
gaaataacta gaggaacaat                                                   20
<210>  1123
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1123
aggaaataac tagaggaaca                                                   20
<210>  1124
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1124
ggaggaaata actagaggaa                                                   20
<210>  1125
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1125
caattctgga ggaaataact                                                   20
<210>  1126
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1126
atcaattctg gaggaaataa                                                   20
<210>  1127
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1127
cttgatcaat tctggaggaa                                                   20
<210>  1128
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1128
gtcttgatca attctggagg                                                   20
<210>  1129
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1129
ttgtcttgat caattctgga                                                   20
<210>  1130
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1130
aattgtcttg atcaattctg                                                   20
<210>  1131
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1131
tgaattgtct tgatcaattc                                                   20
<210>  1132
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1132
gatgaattgt cttgatcaat                                                   20
<210>  1133
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1133
atgatgaatt gtcttgatca                                                   20
<210>  1134
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1134
aaatgatgaa ttgtcttgat                                                   20
<210>  1135
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1135
aatcaaatga tgaattgtct                                                   20
<210>  1136
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1136
agaatcaaat gatgaattgt                                                   20
<210>  1137
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1137
tagagaatca aatgatgaat                                                   20
<210>  1138
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1138
ctggagatag agaatcaaat                                                   20
<210>  1139
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1139
ctctggagat agagaatcaa                                                   20
<210>  1140
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1140
ttggctctgg agatagagaa                                                   20
<210>  1141
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1141
attttggctc tggagataga                                                   20
<210>  1142
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1142
aatcttgatt ttggctctgg                                                   20
<210>  1143
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1143
acatagcaaa tcttgatttt                                                   20
<210>  1144
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1144
taacatagca aatcttgatt                                                   20
<210>  1145
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1145
tctaacatag caaatcttga                                                   20
<210>  1146
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1146
attggctaaa atttttacat                                                   20
<210>  1147
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1147
ggccattggc taaaattttt                                                   20
<210>  1148
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1148
gaggccattg gctaaaattt                                                   20
<210>  1149
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1149
actgaaggag gccattggct                                                   20
<210>  1150
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1150
caactgaagg aggccattgg                                                   20
<210>  1151
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1151
cccaactgaa ggaggccatt                                                   20
<210>  1152
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1152
atgtcccaac tgaaggaggc                                                   20
<210>  1153
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1153
taagaccatg tcccaactga                                                   20
<210>  1154
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1154
aagtctttaa gaccatgtcc                                                   20
<210>  1155
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1155
caaagtcttt aagaccatgt                                                   20
<210>  1156
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1156
tatggacaaa gtctttaaga                                                   20
<210>  1157
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1157
cgtcttatgg acaaagtctt                                                   20
<210>  1158
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1158
aatatgtcat taatttggcc                                                   20
<210>  1159
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1159
gaaatatgtc attaatttgg                                                   20
<210>  1160
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1160
tttgaaatat gtcattaatt                                                   20
<210>  1161
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1161
agtttttgaa atatgtcatt                                                   20
<210>  1162
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1162
tgagtttttg aaatatgtca                                                   20
<210>  1163
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1163
caaatatgtt gagtttttga                                                   20
<210>  1164
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1164
ctgatcaaat atgttgagtt                                                   20
<210>  1165
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1165
aagactgatc aaatatgttg                                                   20
<210>  1166
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1166
taaaaagact gatcaaatat                                                   20
<210>  1167
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1167
cataaaaaga ctgatcaaat                                                   20
<210>  1168
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1168
atcataaaaa gactgatcaa                                                   20
<210>  1169
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1169
tagatcataa aaagactgat                                                   20
<210>  1170
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1170
gatagatcat aaaaagactg                                                   20
<210>  1171
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1171
gcgatagatc ataaaaagac                                                   20
<210>  1172
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1172
cagcgataga tcataaaaag                                                   20
<210>  1173
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1173
tgcagcgata gatcataaaa                                                   20
<210>  1174
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1174
tttgcagcga tagatcataa                                                   20
<210>  1175
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1175
ggtttgcagc gatagatcat                                                   20
<210>  1176
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1176
ctggtttgca gcgatagatc                                                   20
<210>  1177
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1177
cactggtttg cagcgataga                                                   20
<210>  1178
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1178
atttcactgg tttgcagcga                                                   20
<210>  1179
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1179
ttgatttcac tggtttgcag                                                   20
<210>  1180
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1180
cttcttcttt gatttcactg                                                   20
<210>  1181
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1181
gttccttttc ttcttctttg                                                   20
<210>  1182
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1182
ttgtatgttc acctctgtta                                                   20
<210>  1183
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1183
cttgtatgtt cacctctgtt                                                   20
<210>  1184
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1184
gccacttgta tgttcacctc                                                   20
<210>  1185
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1185
tgccacttgt atgttcacct                                                   20
<210>  1186
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1186
atgccacttg tatgttcacc                                                   20
<210>  1187
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1187
catgccactt gtatgttcac                                                   20
<210>  1188
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1188
acatgccact tgtatgttca                                                   20
<210>  1189
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1189
tacatgccac ttgtatgttc                                                   20
<210>  1190
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1190
gcatacatgc cacttgtatg                                                   20
<210>  1191
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1191
ggcatacatg ccacttgtat                                                   20
<210>  1192
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1192
tggcatacat gccacttgta                                                   20
<210>  1193
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1193
atggcataca tgccacttgt                                                   20
<210>  1194
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1194
tctgatggca tacatgccac                                                   20
<210>  1195
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1195
gtctgatggc atacatgcca                                                   20
<210>  1196
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1196
gggtctgatg gcatacatgc                                                   20
<210>  1197
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1197
tgggtctgat ggcatacatg                                                   20
<210>  1198
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1198
ctgggtctga tggcatacat                                                   20
<210>  1199
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1199
gagagttgct gggtctgatg                                                   20
<210>  1200
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1200
tgagagttgc tgggtctgat                                                   20
<210>  1201
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1201
ttgagagttg ctgggtctga                                                   20
<210>  1202
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1202
cttgagagtt gctgggtctg                                                   20
<210>  1203
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1203
acttgagagt tgctgggtct                                                   20
<210>  1204
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1204
aacttgagag ttgctgggtc                                                   20
<210>  1205
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1205
gaaaaacttg agagttgctg                                                   20
<210>  1206
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1206
tgaaaaactt gagagttgct                                                   20
<210>  1207
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1207
atgaaaaact tgagagttgc                                                   20
<210>  1208
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1208
catgaaaaac ttgagagttg                                                   20
<210>  1209
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1209
gtagacatga aaaacttgag                                                   20
<210>  1210
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1210
cagtagacat gaaaaacttg                                                   20
<210>  1211
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1211
taacatcaca gtagacatga                                                   20
<210>  1212
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1212
ataacatcac agtagacatg                                                   20
<210>  1213
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1213
tataacatca cagtagacat                                                   20
<210>  1214
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1214
atataacatc acagtagaca                                                   20
<210>  1215
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1215
gatataacat cacagtagac                                                   20
<210>  1216
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1216
tgatataaca tcacagtaga                                                   20
<210>  1217
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1217
ctgatataac atcacagtag                                                   20
<210>  1218
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1218
cctgatataa catcacagta                                                   20
<210>  1219
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1219
acctgatata acatcacagt                                                   20
<210>  1220
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1220
tacctgatat aacatcacag                                                   20
<210>  1221
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1221
ctacctgata taacatcaca                                                   20
<210>  1222
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1222
actacctgat ataacatcac                                                   20
<210>  1223
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1223
gactacctga tataacatca                                                   20
<210>  1224
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1224
ggactacctg atataacatc                                                   20
<210>  1225
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1225
tggactacct gatataacat                                                   20
<210>  1226
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1226
atggactacc tgatataaca                                                   20
<210>  1227
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1227
catggactac ctgatataac                                                   20
<210>  1228
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1228
ccatggacta cctgatataa                                                   20
<210>  1229
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1229
tccatggact acctgatata                                                   20
<210>  1230
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1230
gtccatggac tacctgatat                                                   20
<210>  1231
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1231
tgtccatgga ctacctgata                                                   20
<210>  1232
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1232
atgtccatgg actacctgat                                                   20
<210>  1233
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1233
aatgtccatg gactacctga                                                   20
<210>  1234
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1234
taatgtccat ggactacctg                                                   20
<210>  1235
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1235
ttaatgtcca tggactacct                                                   20
<210>  1236
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1236
attaatgtcc atggactacc                                                   20
<210>  1237
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1237
aattaatgtc catggactac                                                   20
<210>  1238
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1238
gttgaattaa tgtccatgga                                                   20
<210>  1239
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1239
tgttgaatta atgtccatgg                                                   20
<210>  1240
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1240
atgttgaatt aatgtccatg                                                   20
<210>  1241
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1241
gatgttgaat taatgtccat                                                   20
<210>  1242
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1242
cgatgttgaa ttaatgtcca                                                   20
<210>  1243
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1243
tcgatgttga attaatgtcc                                                   20
<210>  1244
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1244
ttcgatgttg aattaatgtc                                                   20
<210>  1245
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1245
attcgatgtt gaattaatgt                                                   20
<210>  1246
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1246
tattcgatgt tgaattaatg                                                   20
<210>  1247
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1247
ctattcgatg ttgaattaat                                                   20
<210>  1248
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1248
atctattcga tgttgaatta                                                   20
<210>  1249
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1249
catctattcg atgttgaatt                                                   20
<210>  1250
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1250
ccatctattc gatgttgaat                                                   20
<210>  1251
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1251
tccatctatt cgatgttgaa                                                   20
<210>  1252
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1252
atccatctat tcgatgttga                                                   20
<210>  1253
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1253
gatccatcta ttcgatgttg                                                   20
<210>  1254
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1254
tgatccatct attcgatgtt                                                   20
<210>  1255
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1255
gtgatccatc tattcgatgt                                                   20
<210>  1256
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1256
tgtgatccat ctattcgatg                                                   20
<210>  1257
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1257
ttgtgatcca tctattcgat                                                   20
<210>  1258
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1258
tttaggttgt tttctccaca                                                   20
<210>  1259
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1259
atttaggttg ttttctccac                                                   20
<210>  1260
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1260
taccatttag gttgttttct                                                   20
<210>  1261
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1261
gttatattta ccatttaggt                                                   20
<210>  1262
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1262
tgttatattt accatttagg                                                   20
<210>  1263
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1263
ttgttatatt taccatttag                                                   20
<210>  1264
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1264
tttgttatat ttaccattta                                                   20
<210>  1265
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1265
tggtttgtta tatttaccat                                                   20
<210>  1266
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1266
ctcttggttt gttatattta                                                   20
<210>  1267
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1267
gctcttggtt tgttatattt                                                   20
<210>  1268
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1268
tgctcttggt ttgttatatt                                                   20
<210>  1269
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1269
ttttgctctt ggtttgttat                                                   20
<210>  1270
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1270
attttgctct tggtttgtta                                                   20
<210>  1271
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1271
gattttgctc ttggtttgtt                                                   20
<210>  1272
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1272
agattttgct cttggtttgt                                                   20
<210>  1273
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1273
tagattttgc tcttggtttg                                                   20
<210>  1274
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1274
ctctctggct tagattttgc                                                   20
<210>  1275
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1275
cctctctggc ttagattttg                                                   20
<210>  1276
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1276
tcctctctgg cttagatttt                                                   20
<210>  1277
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1277
cttctcctct ctggcttaga                                                   20
<210>  1278
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1278
tcttctcctc tctggcttag                                                   20
<210>  1279
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1279
ctcttctcct ctctggctta                                                   20
<210>  1280
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1280
taatcctctt ctcctctctg                                                   20
<210>  1281
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1281
ataatcctct tctcctctct                                                   20
<210>  1282
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1282
gataatcctc ttctcctctc                                                   20
<210>  1283
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1283
agataatcct cttctcctct                                                   20
<210>  1284
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1284
aagataatcc tcttctcctc                                                   20
<210>  1285
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1285
caagataatc ctcttctcct                                                   20
<210>  1286
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1286
ccaagataat cctcttctcc                                                   20
<210>  1287
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1287
tccaagataa tcctcttctc                                                   20
<210>  1288
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1288
ttccaagata atcctcttct                                                   20
<210>  1289
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1289
cttccaagat aatcctcttc                                                   20
<210>  1290
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1290
acttccaaga taatcctctt                                                   20
<210>  1291
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1291
gacttccaag ataatcctct                                                   20
<210>  1292
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1292
agacttccaa gataatcctc                                                   20
<210>  1293
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1293
gagacttcca agataatcct                                                   20
<210>  1294
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1294
tgagacttcc aagataatcc                                                   20
<210>  1295
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1295
ttgagacttc caagataatc                                                   20
<210>  1296
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1296
tttgagactt ccaagataat                                                   20
<210>  1297
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1297
ttttgagact tccaagataa                                                   20
<210>  1298
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1298
attttgagac ttccaagata                                                   20
<210>  1299
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1299
ccattttgag acttccaaga                                                   20
<210>  1300
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1300
cttccatttt gagacttcca                                                   20
<210>  1301
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1301
taaccttcca ttttgagact                                                   20
<210>  1302
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1302
ataaccttcc attttgagac                                                   20
<210>  1303
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1303
tataaccttc cattttgaga                                                   20
<210>  1304
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1304
gtataacctt ccattttgag                                                   20
<210>  1305
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1305
gagtataacc ttccattttg                                                   20
<210>  1306
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1306
agagtataac cttccatttt                                                   20
<210>  1307
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1307
ttatagagta taaccttcca                                                   20
<210>  1308
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1308
gattttatag agtataacct                                                   20
<210>  1309
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1309
tgattttata gagtataacc                                                   20
<210>  1310
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1310
ttgattttat agagtataac                                                   20
<210>  1311
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1311
gttgatttta tagagtataa                                                   20
<210>  1312
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1312
tttggttgat tttatagagt                                                   20
<210>  1313
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1313
ggatcaacat tttggttgat                                                   20
<210>  1314
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1314
tggatcaaca ttttggttga                                                   20
<210>  1315
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1315
atggatcaac attttggttg                                                   20
<210>  1316
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1316
aatctgttgg atggatcaac                                                   20
<210>  1317
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1317
gaatctgttg gatggatcaa                                                   20
<210>  1318
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1318
ttctgaatct gttggatgga                                                   20
<210>  1319
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1319
tttctgaatc tgttggatgg                                                   20
<210>  1320
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1320
ctttctgaat ctgttggatg                                                   20
<210>  1321
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1321
aaagctttct gaatctgttg                                                   20
<210>  1322
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1322
ttgcctcagt tcattcaaag                                                   20
<210>  1323
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1323
aaatttgcct cagttcattc                                                   20
<210>  1324
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1324
cttttaaatt tgcctcagtt                                                   20
<210>  1325
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1325
tattgccttt taaatttgcc                                                   20
<210>  1326
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1326
ttattgcctt ttaaatttgc                                                   20
<210>  1327
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1327
ttaaattatt gccttttaaa                                                   20
<210>  1328
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1328
tttaaattat tgccttttaa                                                   20
<210>  1329
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1329
gtttaaatta ttgcctttta                                                   20
<210>  1330
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1330
tgtttaaatt attgcctttt                                                   20
<210>  1331
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1331
atgtttaaat tattgccttt                                                   20
<210>  1332
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1332
tttaataagt tcacctattg                                                   20
<210>  1333
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1333
atttaataag ttcacctatt                                                   20
<210>  1334
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1334
tatttaataa gttcacctat                                                   20
<210>  1335
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1335
ttatttaata agttcaccta                                                   20
<210>  1336
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1336
gttatttaat aagttcacct                                                   20
<210>  1337
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1337
agttatttaa taagttcacc                                                   20
<210>  1338
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1338
aaaagttatt taataagttc                                                   20
<210>  1339
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1339
tatttagaaa agttatttaa                                                   20
<210>  1340
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1340
taaaagtctc taaatttttt                                                   20
<210>  1341
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1341
ataaaagtct ctaaattttt                                                   20
<210>  1342
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1342
aataaaagtc tctaaatttt                                                   20
<210>  1343
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1343
ttagctcata tgatgccttt                                                   20
<210>  1344
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1344
attagctcat atgatgcctt                                                   20
<210>  1345
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1345
atattagctc atatgatgcc                                                   20
<210>  1346
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1346
gatattagct catatgatgc                                                   20
<210>  1347
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1347
tgatattagc tcatatgatg                                                   20
<210>  1348
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1348
gtgatattag ctcatatgat                                                   20
<210>  1349
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1349
gaaagttgtg atattagctc                                                   20
<210>  1350
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1350
ggaaagttgt gatattagct                                                   20
<210>  1351
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1351
gggaaagttg tgatattagc                                                   20
<210>  1352
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1352
tgggaaagtt gtgatattag                                                   20
<210>  1353
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1353
ctgggaaagt tgtgatatta                                                   20
<210>  1354
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1354
actgggaaag ttgtgatatt                                                   20
<210>  1355
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1355
aactgggaaa gttgtgatat                                                   20
<210>  1356
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1356
aaactgggaa agttgtgata                                                   20
<210>  1357
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1357
taaactggga aagttgtgat                                                   20
<210>  1358
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1358
ttaaactggg aaagttgtga                                                   20
<210>  1359
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1359
tttaaactgg gaaagttgtg                                                   20
<210>  1360
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1360
ttttaaactg ggaaagttgt                                                   20
<210>  1361
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1361
gttttttaaa ctgggaaagt                                                   20
<210>  1362
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1362
agttttttaa actgggaaag                                                   20
<210>  1363
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1363
tagtttttta aactgggaaa                                                   20
<210>  1364
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1364
gtactagttt tttaaactgg                                                   20
<210>  1365
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1365
agagtactag ttttttaaac                                                   20
<210>  1366
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1366
caagagtact agttttttaa                                                   20
<210>  1367
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1367
tttaacaaga gtactagttt                                                   20
<210>  1368
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1368
ttttaacaag agtactagtt                                                   20
<210>  1369
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1369
gttttaacaa gagtactagt                                                   20
<210>  1370
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1370
agttttaaca agagtactag                                                   20
<210>  1371
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1371
gagttttaac aagagtacta                                                   20
<210>  1372
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1372
agagttttaa caagagtact                                                   20
<210>  1373
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1373
tttagagttt taacaagagt                                                   20
<210>  1374
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1374
gtttagagtt ttaacaagag                                                   20
<210>  1375
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1375
aagtttagag ttttaacaag                                                   20
<210>  1376
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1376
caagtttaga gttttaacaa                                                   20
<210>  1377
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1377
tagtcaagtt tagagtttta                                                   20
<210>  1378
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1378
ttagtcaagt ttagagtttt                                                   20
<210>  1379
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1379
tttagtcaag tttagagttt                                                   20
<210>  1380
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1380
tgtatttagt caagtttaga                                                   20
<210>  1381
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1381
ctgtatttag tcaagtttag                                                   20
<210>  1382
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1382
tctgtattta gtcaagttta                                                   20
<210>  1383
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1383
gtcctctgta tttagtcaag                                                   20
<210>  1384
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1384
agtcctctgt atttagtcaa                                                   20
<210>  1385
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1385
cagtcctctg tatttagtca                                                   20
<210>  1386
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1386
ccagtcctct gtatttagtc                                                   20
<210>  1387
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1387
accagtcctc tgtatttagt                                                   20
<210>  1388
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1388
taccagtcct ctgtatttag                                                   20
<210>  1389
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1389
ttaccagtcc tctgtattta                                                   20
<210>  1390
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1390
attaccagtc ctctgtattt                                                   20
<210>  1391
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1391
aattaccagt cctctgtatt                                                   20
<210>  1392
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1392
caattaccag tcctctgtat                                                   20
<210>  1393
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1393
acaattacca gtcctctgta                                                   20
<210>  1394
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1394
tacaattacc agtcctctgt                                                   20
<210>  1395
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1395
gtacaattac cagtcctctg                                                   20
<210>  1396
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1396
tgtacaatta ccagtcctct                                                   20
<210>  1397
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1397
ctgtacaatt accagtcctc                                                   20
<210>  1398
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1398
actgtacaat taccagtcct                                                   20
<210>  1399
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1399
aactgtacaa ttaccagtcc                                                   20
<210>  1400
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1400
gaactgtaca attaccagtc                                                   20
<210>  1401
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1401
agaactgtac aattaccagt                                                   20
<210>  1402
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1402
taagaactgt acaattacca                                                   20
<210>  1403
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1403
ttaagaactg tacaattacc                                                   20
<210>  1404
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1404
tttaagaact gtacaattac                                                   20
<210>  1405
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1405
acttgaaatt ataataggaa                                                   20
<210>  1406
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1406
aaaaaactaa cttgaaatta                                                   20
<210>  1407
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1407
gaaacaaaaa actaacttga                                                   20
<210>  1408
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1408
gtgttttcat atataacatt                                                   20
<210>  1409
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1409
aattttcagt gttttcatat                                                   20
<210>  1410
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1410
aaaatgcaaa ttttcagtgt                                                   20
<210>  1411
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1411
gtaattttca tataaaatgc                                                   20
<210>  1412
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1412
gatttgtaat tttcatataa                                                   20
<210>  1413
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1413
taaccgattt gtaattttca                                                   20
<210>  1414
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1414
taatttaacc gatttgtaat                                                   20
<210>  1415
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1415
ttgtataatt taaccgattt                                                   20
<210>  1416
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1416
ctagattgta taatttaacc                                                   20
<210>  1417
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1417
gtgttctaga ttgtataatt                                                   20
<210>  1418
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1418
aatgacatag tgttctagat                                                   20
<210>  1419
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1419
agtgtaatga catagtgttc                                                   20
<210>  1420
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1420
ttacaatagt gtaatgacat                                                   20
<210>  1421
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1421
ttcagtaatt tacaatagtg                                                   20
<210>  1422
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1422
ttaccttcag taatttacaa                                                   20
<210>  1423
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1423
ttaacttttt acttaccttc                                                   20
<210>  1424
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1424
gaatagtttt aaattttttt                                                   20
<210>  1425
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1425
acactggaga atagttttaa                                                   20
<210>  1426
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1426
tttaaacact ggagaatagt                                                   20
<210>  1427
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1427
tctgttttaa acactggaga                                                   20
<210>  1428
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1428
gtattattta atctgtttta                                                   20
<210>  1429
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1429
ttactgtatt atttaatctg                                                   20
<210>  1430
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1430
taaatctttt ccatttactg                                                   20
<210>  1431
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1431
atgaataaat cttttccatt                                                   20
<210>  1432
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1432
gcatattttc atatgaataa                                                   20
<210>  1433
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1433
gcccagcata ttttcatatg                                                   20
<210>  1434
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1434
aaaagaaaaa gcccagcata                                                   20
<210>  1435
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1435
ctgaacttca attaaaagaa                                                   20
<210>  1436
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1436
gattttctga acttcaatta                                                   20
<210>  1437
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1437
tctaaaattt gattttctga                                                   20
<210>  1438
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1438
actatctcta aaatttgatt                                                   20
<210>  1439
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1439
ttaaattgta ctatctctaa                                                   20
<210>  1440
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1440
acattttatt taaattgtac                                                   20
<210>  1441
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1441
gtccttaaca ttttatttaa                                                   20
<210>  1442
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1442
catatttttg tccttaacat                                                   20
<210>  1443
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1443
tagcacatat ttttgtcctt                                                   20
<210>  1444
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1444
tcaaatagca catatttttg                                                   20
<210>  1445
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1445
cttctttcaa atagcacata                                                   20
<210>  1446
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1446
cttgtatgct tctttcaaat                                                   20
<210>  1447
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1447
attccttccc cttgtatgct                                                   20
<210>  1448
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1448
ttggcaattc cttccccttg                                                   20
<210>  1449
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1449
gaatattggc aattccttcc                                                   20
<210>  1450
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1450
tgaaaaatga atattggcaa                                                   20
<210>  1451
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1451
taatggattt gaaaaatgaa                                                   20
<210>  1452
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1452
actaataatg gatttgaaaa                                                   20
<210>  1453
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1453
cataatctaa atttttaaac                                                   20
<210>  1454
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1454
cactatcata atctaaattt                                                   20
<210>  1455
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1455
aatttcctgt aacactatca                                                   20
<210>  1456
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1456
ctattaattt cctgtaacac                                                   20
<210>  1457
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1457
cttttctatt aatttcctgt                                                   20
<210>  1458
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1458
ctctttcttt tctattaatt                                                   20
<210>  1459
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1459
agttgctttc ctctttcttt                                                   20
<210>  1460
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1460
ttataagttg ctttcctctt                                                   20
<210>  1461
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1461
gttggttata agttgctttc                                                   20
<210>  1462
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1462
agtaggttgg ttataagttg                                                   20
<210>  1463
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1463
tagagagtag gttggttata                                                   20
<210>  1464
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1464
ggatatagag agtaggttgg                                                   20
<210>  1465
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1465
agtctggata tagagagtag                                                   20
<210>  1466
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1466
tacaaaagtc tggatataga                                                   20
<210>  1467
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1467
gtttttctac aaaagtctgg                                                   20
<210>  1468
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1468
ttacctgatt ttctatttct                                                   20
<210>  1469
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1469
atactgactt acctgatttt                                                   20
<210>  1470
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1470
ttaaaatact gacttacctg                                                   20
<210>  1471
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1471
taccattaaa atactgactt                                                   20
<210>  1472
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1472
ggacatacca ttaaaatact                                                   20
<210>  1473
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1473
aaagatggga cataccatta                                                   20
<210>  1474
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1474
agacctgtgt gaaagatggg                                                   20
<210>  1475
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1475
tttacagacc tgtgtgaaag                                                   20
<210>  1476
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1476
gtgtttttac agacctgtgt                                                   20
<210>  1477
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1477
attcagtgtt tttacagacc                                                   20
<210>  1478
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1478
ttaggattca gtgtttttac                                                   20
<210>  1479
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1479
ataattttag gattcagtgt                                                   20
<210>  1480
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1480
gcttgtaaat aattttagga                                                   20
<210>  1481
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1481
gttaaagctt gtaaataatt                                                   20
<210>  1482
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1482
tgttttatat ctcttgaaaa                                                   20
<210>  1483
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1483
ttggtaataa tatttgtttt                                                   20
<210>  1484
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1484
ggaaattggt aataatattt                                                   20
<210>  1485
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1485
ttagtggaaa ttggtaataa                                                   20
<210>  1486
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1486
tttgtttagt ggaaattggt                                                   20
<210>  1487
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1487
ttatgtttgt ttagtggaaa                                                   20
<210>  1488
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1488
taacattatg tttgtttagt                                                   20
<210>  1489
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1489
actactaaca ttatgtttgt                                                   20
<210>  1490
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1490
gcagcactac taacattatg                                                   20
<210>  1491
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1491
ttttagcagc actactaaca                                                   20
<210>  1492
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1492
aaacctttta gcagcactac                                                   20
<210>  1493
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1493
gataaaaaac cttttagcag                                                   20
<210>  1494
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1494
tagttgataa aaaacctttt                                                   20
<210>  1495
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1495
caaaagtagt tgataaaaaa                                                   20
<210>  1496
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1496
atggaaacca aaagtagttg                                                   20
<210>  1497
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1497
aaagtatgga aaccaaaagt                                                   20
<210>  1498
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1498
gaaggaaagt atggaaacca                                                   20
<210>  1499
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1499
cataagaagg aaagtatgga                                                   20
<210>  1500
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1500
taacatcata agaaggaaag                                                   20
<210>  1501
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1501
gaataataac atcataagaa                                                   20
<210>  1502
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1502
gaatttagaa taataacatc                                                   20
<210>  1503
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1503
tataattgaa aagaatttag                                                   20
<210>  1504
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1504
tagtaaaaga tataattgaa                                                   20
<210>  1505
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1505
aatcatagta aaagatataa                                                   20
<210>  1506
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1506
caggttcatt taatcatagt                                                   20
<210>  1507
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1507
ctatagtaac attttgcttt                                                   20
<210>  1508
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1508
gtatattact atagtaacat                                                   20
<210>  1509
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1509
acaatgtata ttactatagt                                                   20
<210>  1510
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1510
tagacacaat gtatattact                                                   20
<210>  1511
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1511
tatttttaga cacaatgtat                                                   20
<210>  1512
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1512
acacattttt atttttagac                                                   20
<210>  1513
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1513
ttggtttctt cacacatttt                                                   20
<210>  1514
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1514
ttcattgttt tggtttcttc                                                   20
<210>  1515
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1515
cagaaattca ttgttttggt                                                   20
<210>  1516
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1516
cttcttccaa ctcagaaatt                                                   20
<210>  1517
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1517
tgatctaact cttcttccaa                                                   20
<210>  1518
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1518
ttaaatgatc taactcttct                                                   20
<210>  1519
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1519
tgagaaagtt aaatgatcta                                                   20
<210>  1520
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1520
tacttaaatt tttagagttt                                                   20
<210>  1521
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1521
aaagttactt aaatttttag                                                   20
<210>  1522
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1522
atcttaaagt tacttaaatt                                                   20
<210>  1523
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1523
atgtgatctt aaagttactt                                                   20
<210>  1524
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1524
taactatgtg atcttaaagt                                                   20
<210>  1525
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1525
ttactctttt ctactaagta                                                   20
<210>  1526
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1526
gggtattact cttttctact                                                   20
<210>  1527
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1527
taaagtttgc ttgctgggta                                                   20
<210>  1528
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1528
tattgtaaag tttgcttgct                                                   20
<210>  1529
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1529
taaaaggatc tattgtaaag                                                   20
<210>  1530
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1530
ttatttaaaa ggatctattg                                                   20
<210>  1531
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1531
ggaccttatt taaaaggatc                                                   20
<210>  1532
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1532
gatatttcct aggaccttat                                                   20
<210>  1533
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1533
tgaatgatat ttcctaggac                                                   20
<210>  1534
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1534
gatgctggca tgaatgatat                                                   20
<210>  1535
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1535
ttttttgatg ctggcatgaa                                                   20
<210>  1536
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1536
gttagttttt tgatgctggc                                                   20
<210>  1537
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1537
ttagtgttag ttttttgatg                                                   20
<210>  1538
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1538
gcattattag tgttagtttt                                                   20
<210>  1539
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1539
atcttgcatt attagtgtta                                                   20
<210>  1540
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1540
ataatatctt gcattattag                                                   20
<210>  1541
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1541
cagtaagaaa agcagaatat                                                   20
<210>  1542
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1542
tcattgacag taagaaaagc                                                   20
<210>  1543
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1543
gatagttttt ctcattgaca                                                   20
<210>  1544
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1544
gtttgcaatt tattgaatga                                                   20
<210>  1545
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1545
gtgttgggtt tgcaatttat                                                   20
<210>  1546
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1546
ttaagtgtgt tgggtttgca                                                   20
<210>  1547
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1547
ttttatttaa gtgtgttggg                                                   20
<210>  1548
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1548
tttagcagta acattttatt                                                   20
<210>  1549
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1549
gttagtttag cagtaacatt                                                   20
<210>  1550
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1550
tctatatatt cagtagttta                                                   20
<210>  1551
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1551
ttactttcta tatattcagt                                                   20
<210>  1552
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1552
gtttgcttac tttctatata                                                   20
<210>  1553
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1553
agtttgtttg cttactttct                                                   20
<210>  1554
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1554
tggcaagttt gtttgcttac                                                   20
<210>  1555
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1555
ttactgttac tgtatttccc                                                   20
<210>  1556
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1556
atgtagttac tgttactgta                                                   20
<210>  1557
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1557
atgcaattta atgggtacag                                                   20
<210>  1558
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1558
tagatatgca atttaatggg                                                   20
<210>  1559
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1559
aggagataga tatgcaattt                                                   20
<210>  1560
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1560
cctaaaggag atagatatgc                                                   20
<210>  1561
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1561
agcctcctaa aggagataga                                                   20
<210>  1562
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1562
caccaccagc ctcctaaagg                                                   20
<210>  1563
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1563
atctaagaaa attaataaac                                                   20
<210>  1564
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1564
atgatcacat ctaagaaaat                                                   20
<210>  1565
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1565
aactgcaata ccatgatcac                                                   20
<210>  1566
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1566
taaaactgca ataccatgat                                                   20
<210>  1567
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1567
ctttaaaact gcaataccat                                                   20
<210>  1568
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1568
tctcctttaa aactgcaata                                                   20
<210>  1569
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1569
tgttctcctt taaaactgca                                                   20
<210>  1570
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1570
gattgttctc ctttaaaact                                                   20
<210>  1571
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1571
aggagattgt tctcctttaa                                                   20
<210>  1572
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1572
aacaggagat tgttctcctt                                                   20
<210>  1573
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1573
ttaaacagga gattgttctc                                                   20
<210>  1574
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1574
ctcttaaaca ggagattgtt                                                   20
<210>  1575
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1575
ctttaactcc gtaaatattt                                                   20
<210>  1576
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1576
agtgaccttt aactccgtaa                                                   20
<210>  1577
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1577
ggagtccagt gacctttaac                                                   20
<210>  1578
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1578
accagtctgg agtccagtga                                                   20
<210>  1579
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1579
tcatcttacc aaactatttt                                                   20
<210>  1580
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1580
gaatcatctt accaaactat                                                   20
<210>  1581
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1581
taagaatcat cttaccaaac                                                   20
<210>  1582
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1582
aagaatgtaa gaatcatctt                                                   20
<210>  1583
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1583
gttatttaag aatgtaagaa                                                   20
<210>  1584
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1584
cgtgttattt aagaatgtaa                                                   20
<210>  1585
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1585
taaagcattt ttcttagatg                                                   20
<210>  1586
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1586
tgttaaagca tttttcttag                                                   20
<210>  1587
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1587
tttatgttaa agcatttttc                                                   20
<210>  1588
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1588
atgtttatgt taaagcattt                                                   20
<210>  1589
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1589
gcattttttc agtaatgttt                                                   20
<210>  1590
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1590
tgtagcattt tttcagtaat                                                   20
<210>  1591
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1591
caaatgtagc attttttcag                                                   20
<210>  1592
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1592
aagttgtggc aaatgtagca                                                   20
<210>  1593
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1593
atgaagttgt ggcaaatgta                                                   20
<210>  1594
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1594
tttatgaagt tgtggcaaat                                                   20
<210>  1595
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1595
tgacatttta tgaagttgtg                                                   20
<210>  1596
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1596
cttgagattt cacttgacat                                                   20
<210>  1597
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1597
tttggagctt gagatttcac                                                   20
<210>  1598
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1598
atctttggag cttgagattt                                                   20
<210>  1599
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1599
aatatctttg gagcttgaga                                                   20
<210>  1600
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1600
aataatatct ttggagcttg                                                   20
<210>  1601
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1601
aggaataata tctttggagc                                                   20
<210>  1602
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1602
aataggaata atatctttgg                                                   20
<210>  1603
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1603
agtaatagga ataatatctt                                                   20
<210>  1604
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1604
ttacatcaga tttagtaata                                                   20
<210>  1605
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1605
aaatgttatt acatcagatt                                                   20
<210>  1606
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1606
ataaaatgtt attacatcag                                                   20
<210>  1607
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1607
cctagaatca ataaaatgtt                                                   20
<210>  1608
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1608
aggaatgcct agaatcaata                                                   20
<210>  1609
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1609
attcagcagg aatgcctaga                                                   20
<210>  1610
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1610
tacattcagc aggaatgcct                                                   20
<210>  1611
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1611
ttacctgata taacatcaca                                                   20
<210>  1612
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1612
gttttacctg atataacatc                                                   20
<210>  1613
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1613
caggttttac ctgatataac                                                   20
<210>  1614
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1614
ttagacaggt tttacctgat                                                   20
<210>  1615
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1615
attctcctta gacaggtttt                                                   20
<210>  1616
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1616
actgtctatt ctccttagac                                                   20
<210>  1617
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1617
actactgtct attctcctta                                                   20
<210>  1618
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1618
actaactact gtctattctc                                                   20
<210>  1619
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1619
tgaactaact actgtctatt                                                   20
<210>  1620
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1620
agttgaacta actactgtct                                                   20
<210>  1621
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1621
attaattgat atgtaaaacg                                                   20
<210>  1622
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1622
ccaattaatt gatatgtaaa                                                   20
<210>  1623
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1623
tccttttaac ttccaattaa                                                   20
<210>  1624
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1624
gtttcctggt ccttttaact                                                   20
<210>  1625
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1625
tctgagtttc ctggtccttt                                                   20
<210>  1626
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1626
atgtctgagt ttcctggtcc                                                   20
<210>  1627
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1627
tgtatgtctg agtttcctgg                                                   20
<210>  1628
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1628
atgtatactg tatgtctgag                                                   20
<210>  1629
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1629
aaaatgtata ctgtatgtct                                                   20
<210>  1630
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1630
ttttaaaatg tatactgtat                                                   20
<210>  1631
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1631
catacattct atatattata                                                   20
<210>  1632
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1632
attataagcc atacattcta                                                   20
<210>  1633
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1633
ttcattataa gccatacatt                                                   20
<210>  1634
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1634
taattcatta taagccatac                                                   20
<210>  1635
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1635
tgagttaact aattcattat                                                   20
<210>  1636
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1636
tttgcattga gttaactaat                                                   20
<210>  1637
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1637
taatttgcat tgagttaact                                                   20
<210>  1638
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1638
gaataatttg cattgagtta                                                   20
<210>  1639
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1639
atagaataat ttgcattgag                                                   20
<210>  1640
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1640
aaaatagaat aatttgcatt                                                   20
<210>  1641
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1641
ttgtaatcaa aatagaataa                                                   20
<210>  1642
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1642
tatttgtaat caaaatagaa                                                   20
<210>  1643
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1643
tactatttgt aatcaaaata                                                   20
<210>  1644
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1644
ttttactatt tgtaatcaaa                                                   20
<210>  1645
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1645
gcttatttta ctatttgtaa                                                   20
<210>  1646
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1646
cttgcttatt ttactatttg                                                   20
<210>  1647
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1647
ttatcttgct tattttacta                                                   20
<210>  1648
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1648
gttattttat cttgcttatt                                                   20
<210>  1649
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1649
aaacatctgt tattttatct                                                   20
<210>  1650
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1650
ggattttaaa catctgttat                                                   20
<210>  1651
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1651
ctttttggat tttaaacatc                                                   20
<210>  1652
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1652
gtgctttttg gattttaaac                                                   20
<210>  1653
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1653
ttttgtatgt gctttttgga                                                   20
<210>  1654
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1654
taagtgagta cttagacatc                                                   20
<210>  1655
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1655
tactttataa gtgagtactt                                                   20
<210>  1656
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1656
ttctacttta taagtgagta                                                   20
<210>  1657
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1657
aatgtcttct actttataag                                                   20
<210>  1658
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1658
aataatgaat gtcttctact                                                   20
<210>  1659
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1659
tataataatg aatgtcttct                                                   20
<210>  1660
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1660
tgatataata atgaatgtct                                                   20
<210>  1661
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1661
aaaatttgat ataataatga                                                   20
<210>  1662
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1662
catttaaaaa tttgatataa                                                   20
<210>  1663
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1663
gtactgagca tttaaaaatt                                                   20
<210>  1664
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1664
aatggtcaaa tagtactgag                                                   20
<210>  1665
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1665
ttaaatggtc aaatagtact                                                   20
<210>  1666
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1666
agtttgaata caaaattttt                                                   20
<210>  1667
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1667
actggtagtt tgaatacaaa                                                   20
<210>  1668
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1668
ttcactggta gtttgaatac                                                   20
<210>  1669
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1669
gctttcactg gtagtttgaa                                                   20
<210>  1670
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1670
agggctttca ctggtagttt                                                   20
<210>  1671
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1671
ggtagggctt tcactggtag                                                   20
<210>  1672
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1672
ctaggtaggg ctttcactgg                                                   20
<210>  1673
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1673
cttctaggta gggctttcac                                                   20
<210>  1674
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1674
taccttctag gtagggcttt                                                   20
<210>  1675
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1675
gtataccttc taggtagggc                                                   20
<210>  1676
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1676
tgagtatacc ttctaggtag                                                   20
<210>  1677
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1677
cactgagtat accttctagg                                                   20
<210>  1678
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1678
tatcactgag tataccttct                                                   20
<210>  1679
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1679
acttatcact gagtatacct                                                   20
<210>  1680
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1680
acaaaactta tcactgagta                                                   20
<210>  1681
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1681
gctacaaaac ttatcactga                                                   20
<210>  1682
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1682
ggagctacaa aacttatcac                                                   20
<210>  1683
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1683
gatttggagc tacaaaactt                                                   20
<210>  1684
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1684
gaagatttgg agctacaaaa                                                   20
<210>  1685
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1685
ctattagaag atttggagct                                                   20
<210>  1686
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1686
cactcactat tagaagattt                                                   20
<210>  1687
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1687
tgtcagcctt ttattttggg                                                   20
<210>  1688
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1688
acctgtcagc cttttatttt                                                   20
<210>  1689
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1689
tcgacttacc tgtcagcctt                                                   20
<210>  1690
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1690
ttctcgactt acctgtcagc                                                   20
<210>  1691
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1691
gtattctcga cttacctgtc                                                   20
<210>  1692
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1692
taacatccat atacagtcaa                                                   20
<210>  1693
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1693
tattaacatc catatacagt                                                   20
<210>  1694
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1694
atttattaac atccatatac                                                   20
<210>  1695
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1695
gctatttatt aacatccata                                                   20
<210>  1696
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1696
ctgtcagcta tttattaaca                                                   20
<210>  1697
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1697
ttactgtcag ctatttatta                                                   20
<210>  1698
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1698
actttactgt cagctattta                                                   20
<210>  1699
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1699
taaactttac tgtcagctat                                                   20
<210>  1700
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1700
ggataaactt tactgtcagc                                                   20
<210>  1701
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1701
tatggataaa ctttactgtc                                                   20
<210>  1702
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1702
ttatatggat aaactttact                                                   20
<210>  1703
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1703
ttgcaagtct ttatatggat                                                   20
<210>  1704
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1704
tatttgcaag tctttatatg                                                   20
<210>  1705
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1705
gaatatttgc aagtctttat                                                   20
<210>  1706
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1706
gtagaggaat atttgcaagt                                                   20
<210>  1707
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1707
gttacattat tatagatatt                                                   20
<210>  1708
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1708
tgtgttacat tattatagat                                                   20
<210>  1709
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1709
gaaatgtgtt acattattat                                                   20
<210>  1710
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1710
ttcaccagtg aaatgtgtta                                                   20
<210>  1711
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1711
tgtttcacca gtgaaatgtg                                                   20
<210>  1712
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1712
acatgtttca ccagtgaaat                                                   20
<210>  1713
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1713
aagacatgtt tcaccagtga                                                   20
<210>  1714
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1714
gacaagacat gtttcaccag                                                   20
<210>  1715
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1715
tatgacaaga catgtttcac                                                   20
<210>  1716
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1716
gcatatgaca agacatgttt                                                   20
<210>  1717
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1717
taatgcatat gacaagacat                                                   20
<210>  1718
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1718
ctataatgca tatgacaaga                                                   20
<210>  1719
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1719
tttctataat gcatatgaca                                                   20
<210>  1720
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1720
tcctttctat aatgcatatg                                                   20
<210>  1721
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1721
tctgattatc ctttctataa                                                   20
<210>  1722
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1722
aagtctgatt atcctttcta                                                   20
<210>  1723
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1723
aactgaaagt ctgattatcc                                                   20
<210>  1724
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1724
tataactgaa agtctgatta                                                   20
<210>  1725
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1725
gttaaaaata ttaatataac                                                   20
<210>  1726
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1726
tgtgcacaaa aatgttaaaa                                                   20
<210>  1727
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1727
ctatgtgcac aaaaatgtta                                                   20
<210>  1728
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1728
tagctatgtg cacaaaaatg                                                   20
<210>  1729
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1729
agatagctat gtgcacaaaa                                                   20
<210>  1730
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1730
tgaagatagc tatgtgcaca                                                   20
<210>  1731
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1731
tattgaagat agctatgtgc                                                   20
<210>  1732
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1732
ttttattgaa gatagctatg                                                   20
<210>  1733
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1733
caattttatt gaagatagct                                                   20
<210>  1734
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1734
aaacaatttt attgaagata                                                   20
<210>  1735
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1735
gtgtatctta aaataatacc                                                   20
<210>  1736
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1736
ttagtgtatc ttaaaataat                                                   20
<210>  1737
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1737
tgatcatttt agtgtatctt                                                   20
<210>  1738
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1738
cccttgatca ttttagtgta                                                   20
<210>  1739
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1739
aatcccttga tcattttagt                                                   20
<210>  1740
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1740
ttgaatccct tgatcatttt                                                   20
<210>  1741
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1741
ttagtcttga atcccttgat                                                   20
<210>  1742
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1742
ttgtttagtc ttgaatccct                                                   20
<210>  1743
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1743
gagttgttta gtcttgaatc                                                   20
<210>  1744
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1744
attgagttgt ttagtcttga                                                   20
<210>  1745
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1745
ctaattgagt tgtttagtct                                                   20
<210>  1746
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1746
caactaattg agttgtttag                                                   20
<210>  1747
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1747
attggtgcaa ctaattgagt                                                   20
<210>  1748
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1748
tttattggtg caactaattg                                                   20
<210>  1749
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1749
ttttttattg gtgcaactaa                                                   20
<210>  1750
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1750
taagtgtttt ttattggtgc                                                   20
<210>  1751
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1751
actgacagtt tttttaagtg                                                   20
<210>  1752
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1752
gacactgaca gtttttttaa                                                   20
<210>  1753
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1753
ttggacactg acagtttttt                                                   20
<210>  1754
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1754
aggttggaca ctgacagttt                                                   20
<210>  1755
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1755
tacaggttgg acactgacag                                                   20
<210>  1756
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1756
tatattggat aatttgaaat                                                   20
<210>  1757
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1757
atgtatattg gataatttga                                                   20
<210>  1758
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1758
gacatgtata ttggataatt                                                   20
<210>  1759
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1759
atgacatgta tattggataa                                                   20
<210>  1760
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1760
tatatatgac atgtatattg                                                   20
<210>  1761
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1761
atgtgacata taaaaatata                                                   20
<210>  1762
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1762
atatgtgaca tataaaaata                                                   20
<210>  1763
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1763
tttatatatg tgacatataa                                                   20
<210>  1764
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1764
cttttatata tgtgacatat                                                   20
<210>  1765
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1765
atcttttata tatgtgacat                                                   20
<210>  1766
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1766
catatctttt atatatgtga                                                   20
<210>  1767
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1767
tcatacatat cttttatata                                                   20
<210>  1768
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1768
tagatcatac atatctttta                                                   20
<210>  1769
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1769
catagatcat acatatcttt                                                   20
<210>  1770
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1770
cacatagatc atacatatct                                                   20
<210>  1771
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1771
aggattcaca tagatcatac                                                   20
<210>  1772
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1772
ttaggattca catagatcat                                                   20
<210>  1773
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1773
acttaggatt cacatagatc                                                   20
<210>  1774
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1774
ttacttagga ttcacataga                                                   20
<210>  1775
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1775
tatttactta ggattcacat                                                   20
<210>  1776
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1776
aatatttact taggattcac                                                   20
<210>  1777
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1777
tgtacttttc tggaacaaaa                                                   20
<210>  1778
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1778
gattattttt acctttatta                                                   20
<210>  1779
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1779
tagattattt ttacctttat                                                   20
<210>  1780
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1780
attatagatt atttttacct                                                   20
<210>  1781
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1781
gaaaattata gattattttt                                                   20
<210>  1782
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1782
ggtcctgaaa attatagatt                                                   20
<210>  1783
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1783
gtggtcctga aaattataga                                                   20
<210>  1784
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1784
ctgtggtcct gaaaattata                                                   20
<210>  1785
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1785
gtctgtggtc ctgaaaatta                                                   20
<210>  1786
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1786
tcgacagctt agtctgtggt                                                   20
<210>  1787
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1787
tttcgacagc ttagtctgtg                                                   20
<210>  1788
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1788
aatttcgaca gcttagtctg                                                   20
<210>  1789
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1789
ttaatttcga cagcttagtc                                                   20
<210>  1790
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1790
cgttaatttc gacagcttag                                                   20
<210>  1791
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1791
tggccctaaa aaaatcagcg                                                   20
<210>  1792
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1792
tctggcccta aaaaaatcag                                                   20
<210>  1793
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1793
tggtattctg gccctaaaaa                                                   20
<210>  1794
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1794
tttggtattc tggccctaaa                                                   20
<210>  1795
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1795
ccattttggt attctggccc                                                   20
<210>  1796
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1796
gaggagccat tttggtattc                                                   20
<210>  1797
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1797
gagaggagcc attttggtat                                                   20
<210>  1798
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1798
aagagaggag ccattttggt                                                   20
<210>  1799
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1799
tgaaattgtc caattttggg                                                   20
<210>  1800
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1800
tttgaaattg tccaattttg                                                   20
<210>  1801
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1801
catttgaaat tgtccaattt                                                   20
<210>  1802
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1802
tgcatttgaa attgtccaat                                                   20
<210>  1803
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1803
attttgcatt tgaaattgtc                                                   20
<210>  1804
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1804
ataatgaatt attttgcatt                                                   20
<210>  1805
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1805
taaataatga attattttgc                                                   20
<210>  1806
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1806
ctcatatatt aaataatgaa                                                   20
<210>  1807
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1807
aactcatata ttaaataatg                                                   20
<210>  1808
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1808
tagaggaagc aactcatata                                                   20
<210>  1809
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1809
aatagaggaa gcaactcata                                                   20
<210>  1810
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1810
caaatagagg aagcaactca                                                   20
<210>  1811
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1811
accaaataga ggaagcaact                                                   20
<210>  1812
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1812
aaaccaaata gaggaagcaa                                                   20
<210>  1813
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1813
ggaaaccaaa tagaggaagc                                                   20
<210>  1814
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1814
taaggaaacc aaatagagga                                                   20
<210>  1815
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1815
tttaaggaaa ccaaatagag                                                   20
<210>  1816
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1816
tgttttcttc tggaagcaga                                                   20
<210>  1817
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1817
cttactttaa gtgaagttac                                                   20
<210>  1818
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1818
ttttctactt actttaagtg                                                   20
<210>  1819
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1819
acatgaaccc tctttatttt                                                   20
<210>  1820
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1820
gaaaacataa acatgaaccc                                                   20
<210>  1821
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1821
agatccacat tgaaaacata                                                   20
<210>  1822
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1822
ttaaaagatc cacattgaaa                                                   20
<210>  1823
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1823
gccttagaaa tatttttttt                                                   20
<210>  1824
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1824
caaatggcat gccttagaaa                                                   20
<210>  1825
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1825
tatttcaaat ggcatgcctt                                                   20
<210>  1826
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1826
caaagtattt caaatggcat                                                   20
<210>  1827
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1827
tgcaacaaag tatttcaaat                                                   20
<210>  1828
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1828
tcaacaatgc aacaaagtat                                                   20
<210>  1829
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1829
gaaaaaaaag tatttcaaca                                                   20
<210>  1830
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1830
gattattttt cttggaaaaa                                                   20
<210>  1831
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1831
gaaattttat tttctggaga                                                   20
<210>  1832
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1832
aaattataat aggaaatttt                                                   20
<210>  1833
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1833
ctgaatataa tgaatgaaat                                                   20
<210>  1834
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1834
tacctgaata taatgaatga                                                   20
<210>  1835
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1835
gactacctga atataatgaa                                                   20
<210>  1836
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1836
atggactacc tgaatataat                                                   20
<210>  1837
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1837
tccatggact acctgaatat                                                   20
<210>  1838
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1838
accatcaagc ctcccaaaac                                                   20
<210>  1839
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1839
ccttaccatc aagcctccca                                                   20
<210>  1840
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1840
agtcccctta ccatcaagcc                                                   20
<210>  1841
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1841
tgtagtcccc ttaccatcaa                                                   20
<210>  1842
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1842
gaatgtagtc cccttaccat                                                   20
<210>  1843
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1843
attgaatgta gtccccttac                                                   20
<210>  1844
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1844
atgattgaat gtagtcccct                                                   20
<210>  1845
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1845
gattagcaag tgaatgaatg                                                   20
<210>  1846
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1846
gtagattagc aagtgaatga                                                   20
<210>  1847
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1847
tttgtagatt agcaagtgaa                                                   20
<210>  1848
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1848
atatttgtag attagcaagt                                                   20
<210>  1849
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1849
ccataagagg ttctcagtaa                                                   20
<210>  1850
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1850
ggtccataag aggttctcag                                                   20
<210>  1851
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1851
cctggtccat aagaggttct                                                   20
<210>  1852
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1852
taatacctgg tccataagag                                                   20
<210>  1853
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1853
tcctaatacc tggtccataa                                                   20
<210>  1854
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1854
ttttcctaat acctggtcca                                                   20
<210>  1855
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1855
tacttttcct aatacctggt                                                   20
<210>  1856
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1856
cgttactact tttcctaata                                                   20
<210>  1857
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1857
aaggctgaga ctgcttctcg                                                   20
<210>  1858
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1858
gataataaat tatatgaagg                                                   20
<210>  1859
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1859
gtttgataat aaattatatg                                                   20
<210>  1860
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1860
gtgtaattgt ttgataataa                                                   20
<210>  1861
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1861
aatgtgtaat tgtttgataa                                                   20
<210>  1862
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1862
gtaatttact aacaaatgtg                                                   20
<210>  1863
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1863
agtgtaattt actaacaaat                                                   20
<210>  1864
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1864
ataagtgtaa tttactaaca                                                   20
<210>  1865
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1865
gtaataagtg taatttacta                                                   20
<210>  1866
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1866
gttgtaataa gtgtaattta                                                   20
<210>  1867
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1867
acagttgtaa taagtgtaat                                                   20
<210>  1868
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1868
ataacagttg taataagtgt                                                   20
<210>  1869
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1869
ttcaaataat aacagttgta                                                   20
<210>  1870
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1870
ataattcaaa taataacagt                                                   20
<210>  1871
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1871
aattgtgata aatataattc                                                   20
<210>  1872
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1872
atgtaattgt gataaatata                                                   20
<210>  1873
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1873
gacatgtaat tgtgataaat                                                   20
<210>  1874
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1874
acagacatgt aattgtgata                                                   20
<210>  1875
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1875
agaacagaca tgtaattgtg                                                   20
<210>  1876
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1876
ttaagaacag acatgtaatt                                                   20
<210>  1877
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1877
aagtatattt aagaacagac                                                   20
<210>  1878
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1878
ttaaattgtg ataagtatat                                                   20
<210>  1879
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1879
gaattaaatt gtgataagta                                                   20
<210>  1880
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1880
gtggaattaa attgtgataa                                                   20
<210>  1881
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1881
gccgtggaat taaattgtga                                                   20
<210>  1882
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1882
taagccgtgg aattaaattg                                                   20
<210>  1883
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1883
ttgtaagccg tggaattaaa                                                   20
<210>  1884
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1884
tcattgtaag ccgtggaatt                                                   20
<210>  1885
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1885
tgatcattgt aagccgtgga                                                   20
<210>  1886
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1886
tatagttatg atcattgtaa                                                   20
<210>  1887
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1887
aattatagtt atgatcattg                                                   20
<210>  1888
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1888
ctttaataat tatagttatg                                                   20
<210>  1889
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1889
tgtctttaat aattatagtt                                                   20
<210>  1890
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1890
aattgtcttt aataattata                                                   20
<210>  1891
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1891
tcaaaattgt ctttaataat                                                   20
<210>  1892
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1892
atttaatcaa aattgtcttt                                                   20
<210>  1893
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1893
taacatttaa tcaaaattgt                                                   20
<210>  1894
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1894
acataacatt taatcaaaat                                                   20
<210>  1895
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1895
atgacataac atttaatcaa                                                   20
<210>  1896
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1896
tacttatgac ataacattta                                                   20
<210>  1897
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1897
ttactactta tgacataaca                                                   20
<210>  1898
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1898
aacagttact acttatgaca                                                   20
<210>  1899
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1899
tgtaacagtt actacttatg                                                   20
<210>  1900
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1900
cttatttgta acagttacta                                                   20
<210>  1901
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1901
tttcacagct tatttgtaac                                                   20
<210>  1902
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1902
tcttttcaca gcttatttgt                                                   20
<210>  1903
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1903
ggttcttttc acagcttatt                                                   20
<210>  1904
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1904
ctaggagtgg ttcttttcac                                                   20
<210>  1905
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1905
atgctaggag tggttctttt                                                   20
<210>  1906
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1906
ctaatgctag gagtggttct                                                   20
<210>  1907
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1907
agagtgacta atgctaggag                                                   20
<210>  1908
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1908
agagaataga gtgactaatg                                                   20
<210>  1909
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1909
ttaatgagag aatagagtga                                                   20
<210>  1910
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1910
ctgttggttt aattgtttat                                                   20
<210>  1911
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1911
tgctgttggt ttaattgttt                                                   20
<210>  1912
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1912
tatgctgttg gtttaattgt                                                   20
<210>  1913
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1913
actatgctgt tggtttaatt                                                   20
<210>  1914
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1914
tgactatgct gttggtttaa                                                   20
<210>  1915
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1915
atttgactat gctgttggtt                                                   20
<210>  1916
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1916
ttatttgact atgctgttgg                                                   20
<210>  1917
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1917
ttttatttga ctatgctgtt                                                   20
<210>  1918
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1918
tcttttattt gactatgctg                                                   20
<210>  1919
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1919
tttcttttat ttgactatgc                                                   20
<210>  1920
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1920
cttctgagct gattttctat                                                   20
<210>  1921
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1921
tccttctgag ctgattttct                                                   20
<210>  1922
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1922
agtccttctg agctgatttt                                                   20
<210>  1923
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1923
ctagtccttc tgagctgatt                                                   20
<210>  1924
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1924
tactagtcct tctgagctga                                                   20
<210>  1925
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1925
aatactagtc cttctgagct                                                   20
<210>  1926
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1926
tgaatactag tccttctgag                                                   20
<210>  1927
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1927
cttgaatact agtccttctg                                                   20
<210>  1928
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1928
ttcttgaata ctagtccttc                                                   20
<210>  1929
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1929
tgggttcttg aatactagtc                                                   20
<210>  1930
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1930
tgtgggttct tgaatactag                                                   20
<210>  1931
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1931
tctgtgggtt cttgaatact                                                   20
<210>  1932
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1932
tagagaaatt tctgtgggtt                                                   20
<210>  1933
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1933
aagatagaga aatttctgtg                                                   20
<210>  1934
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1934
ggaagataga gaaatttctg                                                   20
<210>  1935
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1935
cttggcttgg aagatagaga                                                   20
<210>  1936
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1936
ctcttggctt ggaagataga                                                   20
<210>  1937
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1937
aagggagtag ttcttggtgc                                                   20
<210>  1938
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1938
aaagggagta gttcttggtg                                                   20
<210>  1939
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1939
gaaagggagt agttcttggt                                                   20
<210>  1940
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1940
agaaagggag tagttcttgg                                                   20
<210>  1941
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1941
aagaaaggga gtagttcttg                                                   20
<210>  1942
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1942
gaagaaaggg agtagttctt                                                   20
<210>  1943
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1943
tcaactgaag aaagggagta                                                   20
<210>  1944
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1944
attcaactga agaaagggag                                                   20
<210>  1945
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1945
cattcaactg aagaaaggga                                                   20
<210>  1946
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1946
tcattcaact gaagaaaggg                                                   20
<210>  1947
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1947
tttcattcaa ctgaagaaag                                                   20
<210>  1948
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1948
atttcattca actgaagaaa                                                   20
<210>  1949
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1949
tatttcattc aactgaagaa                                                   20
<210>  1950
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1950
ttatttcatt caactgaaga                                                   20
<210>  1951
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1951
cttatttcat tcaactgaag                                                   20
<210>  1952
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1952
tcttatttca ttcaactgaa                                                   20
<210>  1953
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1953
ttcttatttc attcaactga                                                   20
<210>  1954
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1954
atttcttatt tcattcaact                                                   20
<210>  1955
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1955
tacatttctt atttcattca                                                   20
<210>  1956
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1956
ttcagcagga atgccatcat                                                   20
<210>  1957
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1957
attcagcagg aatgccatca                                                   20
<210>  1958
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1958
cattcagcag gaatgccatc                                                   20
<210>  1959
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1959
acattcagca ggaatgccat                                                   20
<210>  1960
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1960
tacattcagc aggaatgcca                                                   20
<210>  1961
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1961
gtacattcag caggaatgcc                                                   20
<210>  1962
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1962
tggtacattc agcaggaatg                                                   20
<210>  1963
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1963
gtggtacatt cagcaggaat                                                   20
<210>  1964
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1964
ggtggtacat tcagcaggaa                                                   20
<210>  1965
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1965
tggtggtaca ttcagcagga                                                   20
<210>  1966
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1966
atggtggtac attcagcagg                                                   20
<210>  1967
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1967
aatggtggta cattcagcag                                                   20
<210>  1968
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1968
aaatggtggt acattcagca                                                   20
<210>  1969
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1969
taaatggtgg tacattcagc                                                   20
<210>  1970
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1970
tataaatggt ggtacattca                                                   20
<210>  1971
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1971
ttataaatgg tggtacattc                                                   20
<210>  1972
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1972
gttataaatg gtggtacatt                                                   20
<210>  1973
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1973
tgttataaat ggtggtacat                                                   20
<210>  1974
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1974
ctgttataaa tggtggtaca                                                   20
<210>  1975
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1975
tctgttataa atggtggtac                                                   20
<210>  1976
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1976
cacctctgtt ataaatggtg                                                   20
<210>  1977
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1977
tcacctctgt tataaatggt                                                   20
<210>  1978
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1978
ttcacctctg ttataaatgg                                                   20
<210>  1979
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1979
gttcacctct gttataaatg                                                   20
<210>  1980
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1980
atgttcacct ctgttataaa                                                   20
<210>  1981
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1981
tatgttcacc tctgttataa                                                   20
<210>  1982
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1982
gtatgttcac ctctgttata                                                   20
<210>  1983
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1983
tgtatgttca cctctgttat                                                   20
<210>  1984
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1984
taatcgcaac tagatgtagc                                                   20
<210>  1985
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1985
gtaatcgcaa ctagatgtag                                                   20
<210>  1986
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1986
agtaatcgca actagatgta                                                   20
<210>  1987
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1987
cagtaatcgc aactagatgt                                                   20
<210>  1988
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1988
ccagtaatcg caactagatg                                                   20
<210>  1989
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1989
gccagtaatc gcaactagat                                                   20
<210>  1990
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1990
tgccagtaat cgcaactaga                                                   20
<210>  1991
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1991
ttgccagtaa tcgcaactag                                                   20
<210>  1992
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1992
attgccagta atcgcaacta                                                   20
<210>  1993
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1993
cattgccagt aatcgcaact                                                   20
<210>  1994
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1994
acattgccag taatcgcaac                                                   20
<210>  1995
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1995
gacattgcca gtaatcgcaa                                                   20
<210>  1996
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1996
gggacattgc cagtaatcgc                                                   20
<210>  1997
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1997
ttgttttccg ggattgcatt                                                   20
<210>  1998
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1998
tttgttttcc gggattgcat                                                   20
<210>  1999
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  1999
aatctttgtt ttccgggatt                                                   20
<210>  2000
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2000
aaatctttgt tttccgggat                                                   20
<210>  2001
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2001
aaacaccaaa tctttgtttt                                                   20
<210>  2002
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2002
aaaacaccaa atctttgttt                                                   20
<210>  2003
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2003
gtagaaaaca ccaaatcttt                                                   20
<210>  2004
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2004
agtagaaaac accaaatctt                                                   20
<210>  2005
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2005
cccaagtaga aaacaccaaa                                                   20
<210>  2006
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2006
tcccaagtag aaaacaccaa                                                   20
<210>  2007
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2007
gtgatcccaa gtagaaaaca                                                   20
<210>  2008
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2008
tgtgatccca agtagaaaac                                                   20
<210>  2009
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2009
ttgtgatccc aagtagaaaa                                                   20
<210>  2010
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2010
tttgtgatcc caagtagaaa                                                   20
<210>  2011
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2011
cttttgcttt gtgatcccaa                                                   20
<210>  2012
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2012
tgtccttttg ctttgtgatc                                                   20
<210>  2013
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2013
gtgtcctttt gctttgtgat                                                   20
<210>  2014
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2014
agtgtccttt tgctttgtga                                                   20
<210>  2015
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2015
ttgaagtgtc cttttgcttt                                                   20
<210>  2016
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2016
gttgaagtgt ccttttgctt                                                   20
<210>  2017
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2017
agttgaagtg tccttttgct                                                   20
<210>  2018
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2018
cagttgaagt gtccttttgc                                                   20
<210>  2019
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2019
acagttgaag tgtccttttg                                                   20
<210>  2020
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2020
gacagttgaa gtgtcctttt                                                   20
<210>  2021
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2021
ggacagttga agtgtccttt                                                   20
<210>  2022
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2022
tggacagttg aagtgtcctt                                                   20
<210>  2023
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2023
ctggacagtt gaagtgtcct                                                   20
<210>  2024
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2024
tctggacagt tgaagtgtcc                                                   20
<210>  2025
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2025
ctctggacag ttgaagtgtc                                                   20
<210>  2026
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2026
cctctggaca gttgaagtgt                                                   20
<210>  2027
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2027
ccctctggac agttgaagtg                                                   20
<210>  2028
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2028
accctctgga cagttgaagt                                                   20
<210>  2029
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2029
aaccctctgg acagttgaag                                                   20
<210>  2030
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2030
taaccctctg gacagttgaa                                                   20
<210>  2031
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2031
ataaccctct ggacagttga                                                   20
<210>  2032
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2032
aataaccctc tggacagttg                                                   20
<210>  2033
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2033
gaataaccct ctggacagtt                                                   20
<210>  2034
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2034
tgaataaccc tctggacagt                                                   20
<210>  2035
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2035
ctgaataacc ctctggacag                                                   20
<210>  2036
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2036
cctgaataac cctctggaca                                                   20
<210>  2037
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2037
tcctgaataa ccctctggac                                                   20
<210>  2038
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2038
ctcctgaata accctctgga                                                   20
<210>  2039
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2039
cctcctgaat aaccctctgg                                                   20
<210>  2040
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2040
gcctcctgaa taaccctctg                                                   20
<210>  2041
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2041
agcctcctga ataaccctct                                                   20
<210>  2042
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2042
cagcctcctg aataaccctc                                                   20
<210>  2043
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2043
ccagcctcct gaataaccct                                                   20
<210>  2044
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2044
accagcctcc tgaataaccc                                                   20
<210>  2045
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2045
caccagcctc ctgaataacc                                                   20
<210>  2046
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2046
ccaccagcct cctgaataac                                                   20
<210>  2047
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2047
accaccagcc tcctgaataa                                                   20
<210>  2048
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2048
caccaccagc ctcctgaata                                                   20
<210>  2049
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2049
ccaccaccag cctcctgaat                                                   20
<210>  2050
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2050
catgccacca ccagcctcct                                                   20
<210>  2051
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2051
atcatgccac caccagcctc                                                   20
<210>  2052
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2052
catcatgcca ccaccagcct                                                   20
<210>  2053
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2053
acactcatca tgccaccacc                                                   20
<210>  2054
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2054
ttctccacac tcatcatgcc                                                   20
<210>  2055
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2055
ttttctccac actcatcatg                                                   20
<210>  2056
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2056
gttttctcca cactcatcat                                                   20
<210>  2057
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2057
atttaagaac tgtacaatta                                                   20
<210>  2058
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2058
catttaagaa ctgtacaatt                                                   20
<210>  2059
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2059
acatttaaga actgtacaat                                                   20
<210>  2060
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2060
aacatttaag aactgtacaa                                                   20
<210>  2061
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2061
caacatttaa gaactgtaca                                                   20
<210>  2062
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2062
acaacattta agaactgtac                                                   20
<210>  2063
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2063
tacaacattt aagaactgta                                                   20
<210>  2064
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2064
ctacaacatt taagaactgt                                                   20
<210>  2065
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2065
actacaacat ttaagaactg                                                   20
<210>  2066
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2066
tactacaaca tttaagaact                                                   20
<210>  2067
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2067
atactacaac atttaagaac                                                   20
<210>  2068
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2068
aatactacaa catttaagaa                                                   20
<210>  2069
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2069
taatactaca acatttaaga                                                   20
<210>  2070
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2070
ttaatactac aacatttaag                                                   20
<210>  2071
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2071
gaaattaata ctacaacatt                                                   20
<210>  2072
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2072
ttttgaaatt aatactacaa                                                   20
<210>  2073
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2073
gttttgaaat taatactaca                                                   20
<210>  2074
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2074
agttttgaaa ttaatactac                                                   20
<210>  2075
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2075
tagttttgaa attaatacta                                                   20
<210>  2076
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2076
ttagttttga aattaatact                                                   20
<210>  2077
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2077
cgatttttag ttttgaaatt                                                   20
<210>  2078
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2078
acgattttta gttttgaaat                                                   20
<210>  2079
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2079
gacgattttt agttttgaaa                                                   20
<210>  2080
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2080
tgacgatttt tagttttgaa                                                   20
<210>  2081
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2081
ctgacgattt ttagttttga                                                   20
<210>  2082
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2082
tgctgacgat ttttagtttt                                                   20
<210>  2083
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2083
gtgctgacga tttttagttt                                                   20
<210>  2084
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2084
tgtgctgacg atttttagtt                                                   20
<210>  2085
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2085
ctgtgctgac gatttttagt                                                   20
<210>  2086
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2086
tctgtgctga cgatttttag                                                   20
<210>  2087
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2087
ctctgtgctg acgattttta                                                   20
<210>  2088
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2088
actctgtgct gacgattttt                                                   20
<210>  2089
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2089
tactctgtgc tgacgatttt                                                   20
<210>  2090
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2090
atactctgtg ctgacgattt                                                   20
<210>  2091
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2091
catactctgt gctgacgatt                                                   20
<210>  2092
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2092
acatactctg tgctgacgat                                                   20
<210>  2093
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2093
tttttacaca tactctgtgc                                                   20
<210>  2094
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2094
cagattttta cacatactct                                                   20
<210>  2095
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2095
acagattttt acacatactc                                                   20
<210>  2096
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2096
tacagatttt tacacatact                                                   20
<210>  2097
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2097
ttacagattt ttacacatac                                                   20
<210>  2098
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2098
tattacagat ttttacacat                                                   20
<210>  2099
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2099
tgtattacag atttttacac                                                   20
<210>  2100
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2100
cagtttaaaa atttgtatta                                                   20
<210>  2101
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2101
catcagttta aaaatttgta                                                   20
<210>  2102
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2102
aagcatcagt ttaaaaattt                                                   20
<210>  2103
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2103
gaagcatcag tttaaaaatt                                                   20
<210>  2104
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2104
tagcaaaatg aagcatcagt                                                   20
<210>  2105
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2105
gtagcaaaat gaagcatcag                                                   20
<210>  2106
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2106
tgtagcaaaa tgaagcatca                                                   20
<210>  2107
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2107
ttgtagcaaa atgaagcatc                                                   20
<210>  2108
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2108
tttgtagcaa aatgaagcat                                                   20
<210>  2109
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2109
aacatttact ccaaattatt                                                   20
<210>  2110
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2110
caaacattta ctccaaatta                                                   20
<210>  2111
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2111
atcaaacatt tactccaaat                                                   20
<210>  2112
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2112
catatcaaac atttactcca                                                   20
<210>  2113
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2113
tcatatcaaa catttactcc                                                   20
<210>  2114
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2114
atcatatcaa acatttactc                                                   20
<210>  2115
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2115
taaataaatc atatcaaaca                                                   20
<210>  2116
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2116
tcataaataa atcatatcaa                                                   20
<210>  2117
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2117
ttcataaata aatcatatca                                                   20
<210>  2118
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2118
tttcataaat aaatcatatc                                                   20
<210>  2119
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2119
gtttcataaa taaatcatat                                                   20
<210>  2120
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2120
ggtttcataa ataaatcata                                                   20
<210>  2121
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2121
aggtttcata aataaatcat                                                   20
<210>  2122
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2122
taggtttcat aaataaatca                                                   20
<210>  2123
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2123
attaggtttc ataaataaat                                                   20
<210>  2124
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2124
cattaggttt cataaataaa                                                   20
<210>  2125
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2125
tcattaggtt tcataaataa                                                   20
<210>  2126
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2126
ttcattaggt ttcataaata                                                   20
<210>  2127
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2127
cttcattagg tttcataaat                                                   20
<210>  2128
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2128
gcttcattag gtttcataaa                                                   20
<210>  2129
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2129
ttctgcttca ttaggtttca                                                   20
<210>  2130
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2130
taattctgct tcattaggtt                                                   20
<210>  2131
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2131
tatgtagttc ttctcagttc                                                   20
<210>  2132
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2132
tagtttatat gtagttcttc                                                   20
<210>  2133
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2133
cttgtagttt atatgtagtt                                                   20
<210>  2134
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2134
ttgacttgta gtttatatgt                                                   20
<210>  2135
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2135
ttttgacttg tagtttatat                                                   20
<210>  2136
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2136
atttttgact tgtagtttat                                                   20
<210>  2137
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2137
tcttcatttt tgacttgtag                                                   20
<210>  2138
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2138
tacctcttca tttttgactt                                                   20
<210>  2139
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2139
attctttacc tcttcatttt                                                   20
<210>  2140
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2140
caagtgacat attctttacc                                                   20
<210>  2141
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2141
ttcaagtgac atattcttta                                                   20
<210>  2142
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2142
ttgagttcaa gtgacatatt                                                   20
<210>  2143
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2143
agttgagttc aagtgacata                                                   20
<210>  2144
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2144
tttgagttga gttcaagtga                                                   20
<210>  2145
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2145
tttcaagttt tgagttgagt                                                   20
<210>  2146
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2146
gctttcaagt tttgagttga                                                   20
<210>  2147
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2147
aggctttcaa gttttgagtt                                                   20
<210>  2148
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2148
taggaggctt tcaagttttg                                                   20
<210>  2149
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2149
ttctaggagg ctttcaagtt                                                   20
<210>  2150
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2150
tcttctagga ggctttcaag                                                   20
<210>  2151
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2151
gaattttttc ttctaggagg                                                   20
<210>  2152
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2152
aagtagaatt ttttcttcta                                                   20
<210>  2153
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2153
tgaagtagaa ttttttcttc                                                   20
<210>  2154
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2154
gttgaagtag aattttttct                                                   20
<210>  2155
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2155
tttgttgaag tagaattttt                                                   20
<210>  2156
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2156
tttttgttga agtagaattt                                                   20
<210>  2157
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2157
ttgctcttct aaatatttca                                                   20
<210>  2158
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2158
agttgctctt ctaaatattt                                                   20
<210>  2159
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2159
ttagttgctc ttctaaatat                                                   20
<210>  2160
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2160
tagttagttg ctcttctaaa                                                   20
<210>  2161
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2161
taagttagtt agttgctctt                                                   20
<210>  2162
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2162
attaagttag ttagttgctc                                                   20
<210>  2163
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2163
gaattaagtt agttagttgc                                                   20
<210>  2164
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2164
ttgaattaag ttagttagtt                                                   20
<210>  2165
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2165
ttttgaatta agttagttag                                                   20
<210>  2166
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2166
tgattttgaa ttaagttagt                                                   20
<210>  2167
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2167
ggttgatttt gaattaagtt                                                   20
<210>  2168
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2168
agtttcaggt tgattttgaa                                                   20
<210>  2169
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2169
ctggagtttc aggttgattt                                                   20
<210>  2170
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2170
ggtgttctgg agtttcaggt                                                   20
<210>  2171
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2171
tgggtgttct ggagtttcag                                                   20
<210>  2172
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2172
tctgggtgtt ctggagtttc                                                   20
<210>  2173
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2173
cttctgggtg ttctggagtt                                                   20
<210>  2174
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2174
tacttctggg tgttctggag                                                   20
<210>  2175
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2175
gttacttctg ggtgttctgg                                                   20
<210>  2176
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2176
aagttacttc tgggtgttct                                                   20
<210>  2177
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2177
gtgaagttac ttctgggtgt                                                   20
<210>  2178
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2178
ttttaagtga agttacttct                                                   20
<210>  2179
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2179
agttttaagt gaagttactt                                                   20
<210>  2180
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2180
aaagttttaa gtgaagttac                                                   20
<210>  2181
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2181
acaaaagttt taagtgaagt                                                   20
<210>  2182
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2182
ctacaaaagt tttaagtgaa                                                   20
<210>  2183
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2183
ttctacaaaa gttttaagtg                                                   20
<210>  2184
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2184
tgtttttcta caaaagtttt                                                   20
<210>  2185
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2185
cttgtttttc tacaaaagtt                                                   20
<210>  2186
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2186
tattatcttg tttttctaca                                                   20
<210>  2187
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2187
gatgctatta tcttgttttt                                                   20
<210>  2188
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2188
tttgatgcta ttatcttgtt                                                   20
<210>  2189
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2189
tctttgatgc tattatcttg                                                   20
<210>  2190
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2190
gagaaggtct ttgatgctat                                                   20
<210>  2191
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2191
gtctggagaa ggtctttgat                                                   20
<210>  2192
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2192
cggtctggag aaggtctttg                                                   20
<210>  2193
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2193
cacggtctgg agaaggtctt                                                   20
<210>  2194
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2194
tccacggtct ggagaaggtc                                                   20
<210>  2195
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2195
cttccacggt ctggagaagg                                                   20
<210>  2196
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2196
gtcttccacg gtctggagaa                                                   20
<210>  2197
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2197
tggtcttcca cggtctggag                                                   20
<210>  2198
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2198
attggtcttc cacggtctgg                                                   20
<210>  2199
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2199
atattggtct tccacggtct                                                   20
<210>  2200
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2200
ttatattggt cttccacggt                                                   20
<210>  2201
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2201
gtttatattg gtcttccacg                                                   20
<210>  2202
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2202
ttgtttatat tggtcttcca                                                   20
<210>  2203
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2203
aattgtttat attggtcttc                                                   20
<210>  2204
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2204
ttaattgttt atattggtct                                                   20
<210>  2205
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2205
gtttaattgt ttatattggt                                                   20
<210>  2206
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2206
tggtttaatt gtttatattg                                                   20
<210>  2207
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2207
gttggtttaa ttgtttatat                                                   20
<210>  2208
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2208
tttgtgatcc atctattcga                                                   20
<210>  2209
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2209
ttttgtgatc catctattcg                                                   20
<210>  2210
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2210
attgaagttt tgtgatccat                                                   20
<210>  2211
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2211
cattgaagtt ttgtgatcca                                                   20
<210>  2212
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2212
tcattgaagt tttgtgatcc                                                   20
<210>  2213
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2213
ttcattgaag ttttgtgatc                                                   20
<210>  2214
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2214
tttcattgaa gttttgtgat                                                   20
<210>  2215
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2215
atatttgtag ttctcccacg                                                   20
<210>  2216
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2216
ccaaaaccat atttgtagtt                                                   20
<210>  2217
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2217
cccaaaacca tatttgtagt                                                   20
<210>  2218
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2218
tcccaaaacc atatttgtag                                                   20
<210>  2219
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2219
ctcccaaaac catatttgta                                                   20
<210>  2220
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2220
agcctcccaa aaccatattt                                                   20
<210>  2221
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2221
caagcctccc aaaaccatat                                                   20
<210>  2222
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2222
tcaagcctcc caaaaccata                                                   20
<210>  2223
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2223
atcaagcctc ccaaaaccat                                                   20
<210>  2224
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2224
catcaagcct cccaaaacca                                                   20
<210>  2225
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2225
ccatcaagcc tcccaaaacc                                                   20
<210>  2226
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2226
tccatcaagc ctcccaaaac                                                   20
<210>  2227
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2227
ctccatcaag cctcccaaaa                                                   20
<210>  2228
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2228
aaaattctcc atcaagcctc                                                   20
<210>  2229
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2229
ccaaaattct ccatcaagcc                                                   20
<210>  2230
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2230
accaaaattc tccatcaagc                                                   20
<210>  2231
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2231
ccaaccaaaa ttctccatca                                                   20
<210>  2232
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2232
cccaaccaaa attctccatc                                                   20
<210>  2233
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2233
gcccaaccaa aattctccat                                                   20
<210>  2234
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2234
ggcccaacca aaattctcca                                                   20
<210>  2235
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2235
aggcccaacc aaaattctcc                                                   20
<210>  2236
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2236
taggcccaac caaaattctc                                                   20
<210>  2237
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2237
ctaggcccaa ccaaaattct                                                   20
<210>  2238
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2238
tctaggccca accaaaattc                                                   20
<210>  2239
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2239
ctctaggccc aaccaaaatt                                                   20
<210>  2240
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2240
tctctaggcc caaccaaaat                                                   20
<210>  2241
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2241
ttctctaggc ccaaccaaaa                                                   20
<210>  2242
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2242
cttctctagg cccaaccaaa                                                   20
<210>  2243
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2243
atatcttctc taggcccaac                                                   20
<210>  2244
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2244
tatatcttct ctaggcccaa                                                   20
<210>  2245
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2245
gtatatcttc tctaggccca                                                   20
<210>  2246
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2246
atggagtata tcttctctag                                                   20
<210>  2247
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2247
cactatggag tatatcttct                                                   20
<210>  2248
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2248
tcactatgga gtatatcttc                                                   20
<210>  2249
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2249
ttcactatgg agtatatctt                                                   20
<210>  2250
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2250
ttgcttcact atggagtata                                                   20
<210>  2251
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2251
attgcttcac tatggagtat                                                   20
<210>  2252
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2252
ttagattgct tcactatgga                                                   20
<210>  2253
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2253
attagattgc ttcactatgg                                                   20
<210>  2254
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2254
aattagattg cttcactatg                                                   20
<210>  2255
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2255
taattagatt gcttcactat                                                   20
<210>  2256
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2256
ataattagat tgcttcacta                                                   20
<210>  2257
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2257
cataattaga ttgcttcact                                                   20
<210>  2258
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2258
acataattag attgcttcac                                                   20
<210>  2259
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2259
aacataatta gattgcttca                                                   20
<210>  2260
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2260
aaacataatt agattgcttc                                                   20
<210>  2261
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2261
aaaacataat tagattgctt                                                   20
<210>  2262
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2262
taaaacataa ttagattgct                                                   20
<210>  2263
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2263
gtaaaacata attagattgc                                                   20
<210>  2264
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2264
cgtaaaacat aattagattg                                                   20
<210>  2265
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2265
ttccagtctt ccaactcaat                                                   20
<210>  2266
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2266
ctttccagtc ttccaactca                                                   20
<210>  2267
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2267
ttgttgtctt tccagtcttc                                                   20
<210>  2268
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2268
ataatgtttg ttgtctttcc                                                   20
<210>  2269
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2269
tataatgttt gttgtctttc                                                   20
<210>  2270
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2270
atataatgtt tgttgtcttt                                                   20
<210>  2271
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2271
tcaatataat gtttgttgtc                                                   20
<210>  2272
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2272
atattcaata taatgtttgt                                                   20
<210>  2273
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2273
aatattcaat ataatgtttg                                                   20
<210>  2274
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2274
gaatattcaa tataatgttt                                                   20
<210>  2275
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2275
agaatattca atataatgtt                                                   20
<210>  2276
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2276
aagaatattc aatataatgt                                                   20
<210>  2277
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2277
caagtaaaaa gaatattcaa                                                   20
<210>  2278
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2278
ccaagtaaaa agaatattca                                                   20
<210>  2279
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2279
cccaagtaaa aagaatattc                                                   20
<210>  2280
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2280
tttcccaagt aaaaagaata                                                   20
<210>  2281
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2281
atttcccaag taaaaagaat                                                   20
<210>  2282
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2282
gatttcccaa gtaaaaagaa                                                   20
<210>  2283
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2283
tgatttccca agtaaaaaga                                                   20
<210>  2284
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2284
aatcgcaact agatgtagcg                                                   20
<210>  2285
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2285
attctttaag gttatgtgat                                                   20
<210>  2286
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2286
tattctttaa ggttatgtga                                                   20
<210>  2287
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2287
acggtattct ttaaggttat                                                   20
<210>  2288
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2288
aacggtattc tttaaggtta                                                   20
<210>  2289
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2289
aaacggtatt ctttaaggtt                                                   20
<210>  2290
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2290
taaacggtat tctttaaggt                                                   20
<210>  2291
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2291
gtaaacggta ttctttaagg                                                   20
<210>  2292
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2292
tgtaaacggt attctttaag                                                   20
<210>  2293
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2293
atgtaaacgg tattctttaa                                                   20
<210>  2294
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2294
aatgtaaacg gtattcttta                                                   20
<210>  2295
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2295
aaatgtaaac ggtattcttt                                                   20
<210>  2296
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2296
gaaatgtaaa cggtattctt                                                   20
<210>  2297
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2297
agaaatgtaa acggtattct                                                   20
<210>  2298
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2298
gagaaatgta aacggtattc                                                   20
<210>  2299
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2299
tgagaaatgt aaacggtatt                                                   20
<210>  2300
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2300
ttgagaaatg taaacggtat                                                   20
<210>  2301
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2301
attgagaaat gtaaacggta                                                   20
<210>  2302
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2302
gattgagaaa tgtaaacggt                                                   20
<210>  2303
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2303
tgattgagaa atgtaaacgg                                                   20
<210>  2304
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2304
ttgattgaga aatgtaaacg                                                   20
<210>  2305
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2305
tttgattgag aaatgtaaac                                                   20
<210>  2306
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2306
ttttgattga gaaatgtaaa                                                   20
<210>  2307
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2307
attttgattg agaaatgtaa                                                   20
<210>  2308
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2308
aattttgatt gagaaatgta                                                   20
<210>  2309
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2309
gaattttgat tgagaaatgt                                                   20
<210>  2310
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2310
agaattttga ttgagaaatg                                                   20
<210>  2311
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2311
aagaattttg attgagaaat                                                   20
<210>  2312
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2312
ataagaattt tgattgagaa                                                   20
<210>  2313
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2313
tataagaatt ttgattgaga                                                   20
<210>  2314
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2314
ttataagaat tttgattgag                                                   20
<210>  2315
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2315
attataagaa ttttgattga                                                   20
<210>  2316
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2316
tattataaga attttgattg                                                   20
<210>  2317
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2317
gtattataag aattttgatt                                                   20
<210>  2318
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2318
agtattataa gaattttgat                                                   20
<210>  2319
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2319
tagtattata agaattttga                                                   20
<210>  2320
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2320
aaaacaaata gtattataag                                                   20
<210>  2321
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2321
taaaacaaat agtattataa                                                   20
<210>  2322
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2322
attcccacat cacaaaattt                                                   20
<210>  2323
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2323
gattcccaca tcacaaaatt                                                   20
<210>  2324
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2324
tgattcccac atcacaaaat                                                   20
<210>  2325
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2325
aaattgattc ccacatcaca                                                   20
<210>  2326
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2326
aaaattgatt cccacatcac                                                   20
<210>  2327
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2327
atctaaaatt gattcccaca                                                   20
<210>  2328
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2328
gaccatctaa aattgattcc                                                   20
<210>  2329
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2329
tgaccatcta aaattgattc                                                   20
<210>  2330
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2330
gtgaccatct aaaattgatt                                                   20
<210>  2331
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2331
tgtgaccatc taaaattgat                                                   20
<210>  2332
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2332
ttgtgaccat ctaaaattga                                                   20
<210>  2333
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2333
attgtgacca tctaaaattg                                                   20
<210>  2334
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2334
gattgtgacc atctaaaatt                                                   20
<210>  2335
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2335
agattgtgac catctaaaat                                                   20
<210>  2336
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2336
tagattgtga ccatctaaaa                                                   20
<210>  2337
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2337
ctagattgtg accatctaaa                                                   20
<210>  2338
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2338
tctagattgt gaccatctaa                                                   20
<210>  2339
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2339
atctagattg tgaccatcta                                                   20
<210>  2340
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2340
aatctagatt gtgaccatct                                                   20
<210>  2341
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2341
taatctagat tgtgaccatc                                                   20
<210>  2342
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2342
ataatctaga ttgtgaccat                                                   20
<210>  2343
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2343
tataatctag attgtgacca                                                   20
<210>  2344
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2344
ttataatcta gattgtgacc                                                   20
<210>  2345
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2345
tgattataat ctagattgtg                                                   20
<210>  2346
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2346
ttgattataa tctagattgt                                                   20
<210>  2347
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2347
attgattata atctagattg                                                   20
<210>  2348
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2348
tattgattat aatctagatt                                                   20
<210>  2349
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2349
ctattgatta taatctagat                                                   20
<210>  2350
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2350
cctattgatt ataatctaga                                                   20
<210>  2351
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2351
acctattgat tataatctag                                                   20
<210>  2352
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2352
cacctattga ttataatcta                                                   20
<210>  2353
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2353
tcacctattg attataatct                                                   20
<210>  2354
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2354
ttcacctatt gattataatc                                                   20
<210>  2355
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2355
gttcacctat tgattataat                                                   20
<210>  2356
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2356
agttcaccta ttgattataa                                                   20
<210>  2357
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2357
aagttcacct attgattata                                                   20
<210>  2358
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2358
ataagttcac ctattgatta                                                   20
<210>  2359
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2359
aataagttca cctattgatt                                                   20
<210>  2360
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2360
taataagttc acctattgat                                                   20
<210>  2361
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2361
ttaataagtt cacctattga                                                   20
<210>  2362
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2362
tgagtattct cgacttacct                                                   20
<210>  2363
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2363
aagtgagtat tctcgactta                                                   20
<210>  2364
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2364
attaagtgag tattctcgac                                                   20
<210>  2365
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2365
ccagaattaa gtgagtattc                                                   20
<210>  2366
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2366
tgggttgctt tcttaccaga                                                   20
<210>  2367
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2367
aaatgggttg ctttcttacc                                                   20
<210>  2368
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2368
tacaaatggg ttgctttctt                                                   20
<210>  2369
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2369
aagtacaaat gggttgcttt                                                   20
<210>  2370
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2370
gtaaatacaa gtacaaatgg                                                   20
<210>  2371
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2371
ttgctggtaa atacaagtac                                                   20
<210>  2372
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2372
taaggattgc tggtaaatac                                                   20
<210>  2373
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2373
ttttaaggat tgctggtaaa                                                   20
<210>  2374
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2374
gaagcttcat tttaaggatt                                                   20
<210>  2375
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2375
taggaagctt cattttaagg                                                   20
<210>  2376
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2376
tagtaggaag cttcatttta                                                   20
<210>  2377
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2377
ttgagttagt aggaagcttc                                                   20
<210>  2378
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2378
attgctattg agttagtagg                                                   20
<210>  2379
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2379
cttattgcta ttgagttagt                                                   20
<210>  2380
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2380
attgtcttat tgctattgag                                                   20
<210>  2381
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2381
actattgtct tattgctatt                                                   20
<210>  2382
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2382
ttcactattg tcttattgct                                                   20
<210>  2383
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2383
acattcacta ttgtcttatt                                                   20
<210>  2384
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2384
taaacattca ctattgtctt                                                   20
<210>  2385
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2385
cattaaacat tcactattgt                                                   20
<210>  2386
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2386
gttttcatta aacattcact                                                   20
<210>  2387
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2387
aaatactgtt ttcattaaac                                                   20
<210>  2388
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2388
aaagtattta taaaatactg                                                   20
<210>  2389
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2389
cctttttatt aaagtattta                                                   20
<210>  2390
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2390
caatcctttt tattaaagta                                                   20
<210>  2391
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2391
cttcatcaca atccttttta                                                   20
<210>  2392
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2392
gttcttcatc acaatccttt                                                   20
<210>  2393
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2393
attgttcttc atcacaatcc                                                   20
<210>  2394
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2394
tagattgttc ttcatcacaa                                                   20
<210>  2395
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2395
aaatagattg ttcttcatca                                                   20
<210>  2396
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2396
aacaaatata aatagattgt                                                   20
<210>  2397
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2397
caaataacaa atataaatag                                                   20
<210>  2398
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2398
tggaattaaa aacaaataac                                                   20
<210>  2399
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2399
ttattggaat taaaaacaaa                                                   20
<210>  2400
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2400
tttttattgg aattaaaaac                                                   20
<210>  2401
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2401
taataacttt tttctgtaat                                                   20
<210>  2402
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2402
gttcttaata acttttttct                                                   20
<210>  2403
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2403
aaaagcatgg ttcttaataa                                                   20
<210>  2404
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2404
aaatttaaaa gcatggttct                                                   20
<210>  2405
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2405
aggaataaat ttaaaaaatc                                                   20
<210>  2406
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2406
agacaggaat aaatttaaaa                                                   20
<210>  2407
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2407
aaaagacagg aataaattta                                                   20
<210>  2408
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2408
ctttctttgt agaaaaagac                                                   20
<210>  2409
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2409
atgctttctt tgtagaaaaa                                                   20
<210>  2410
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2410
tttgcttaat gtatgctttc                                                   20
<210>  2411
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2411
gtatttgctt aatgtatgct                                                   20
<210>  2412
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2412
ttggtatttg cttaatgtat                                                   20
<210>  2413
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2413
cctttggtat ttgcttaatg                                                   20
<210>  2414
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2414
tggcctttgg tatttgctta                                                   20
<210>  2415
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2415
taaacctggc ctttggtatt                                                   20
<210>  2416
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2416
atgtaaacct ggcctttggt                                                   20
<210>  2417
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2417
caaatgtaaa cctggccttt                                                   20
<210>  2418
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2418
cttcaaatgt aaacctggcc                                                   20
<210>  2419
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2419
tttcttcaaa tgtaaacctg                                                   20
<210>  2420
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2420
tgtcactttc ttcaaatgta                                                   20
<210>  2421
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2421
taatgtcact ttcttcaaat                                                   20
<210>  2422
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2422
aataataatg tcactttctt                                                   20
<210>  2423
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2423
gagtaataat aatgtcactt                                                   20
<210>  2424
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2424
gacttgagta ataataatgt                                                   20
<210>  2425
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2425
cctagagact tgagtaataa                                                   20
<210>  2426
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2426
attcctagag acttgagtaa                                                   20
<210>  2427
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2427
aagtattcct agagacttga                                                   20
<210>  2428
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2428
tgtgttaagt attcctagag                                                   20
<210>  2429
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2429
agagatgtgt taagtattcc                                                   20
<210>  2430
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2430
gtcaagagat gtgttaagta                                                   20
<210>  2431
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2431
acagtcaaga gatgtgttaa                                                   20
<210>  2432
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2432
tatacagtca agagatgtgt                                                   20
<210>  2433
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2433
ccatatacag tcaagagatg                                                   20
<210>  2434
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2434
gtaagttgaa ctaactactg                                                   20
<210>  2435
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2435
tgagtaagtt gaactaacta                                                   20
<210>  2436
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2436
taatgagtaa gttgaactaa                                                   20
<210>  2437
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2437
aggttaatct tcctaatacg                                                   20
<210>  2438
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2438
ataaccaggt taatcttcct                                                   20
<210>  2439
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2439
atgataacca ggttaatctt                                                   20
<210>  2440
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2440
aacaatgata accaggttaa                                                   20
<210>  2441
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2441
taaaacaatg ataaccaggt                                                   20
<210>  2442
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2442
gtataaaaca atgataacca                                                   20
<210>  2443
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2443
cgaatactca tatatatttc                                                   20
<210>  2444
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2444
atacgaatac tcatatatat                                                   20
<210>  2445
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2445
tttatacgaa tactcatata                                                   20
<210>  2446
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2446
atatttatac gaatactcat                                                   20
<210>  2447
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2447
gtattatatt tatacgaata                                                   20
<210>  2448
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2448
aaaagtatta tatttatacg                                                   20
<210>  2449
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2449
ggtaaaagta ttatatttat                                                   20
<210>  2450
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2450
acaaggtaaa agtattatat                                                   20
<210>  2451
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2451
taaacaaggt aaaagtatta                                                   20
<210>  2452
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2452
acataaacaa ggtaaaagta                                                   20
<210>  2453
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2453
ttgagtaaat acataaacaa                                                   20
<210>  2454
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2454
gagaatattg agtaaataca                                                   20
<210>  2455
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2455
aaggagaata ttgagtaaat                                                   20
<210>  2456
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2456
gaaaaggaga atattgagta                                                   20
<210>  2457
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2457
gaggaaaagg agaatattga                                                   20
<210>  2458
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2458
ttagaggaaa aggagaatat                                                   20
<210>  2459
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2459
attattttag aggaaaagga                                                   20
<210>  2460
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2460
cagattattt tagaggaaaa                                                   20
<210>  2461
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2461
cttcagatta ttttagagga                                                   20
<210>  2462
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2462
tagtcacttc agattatttt                                                   20
<210>  2463
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2463
taatagtcac ttcagattat                                                   20
<210>  2464
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2464
tgataatagt cacttcagat                                                   20
<210>  2465
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2465
tattgataat agtcacttca                                                   20
<210>  2466
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2466
acttattgat aatagtcact                                                   20
<210>  2467
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2467
taaacttatt gataatagtc                                                   20
<210>  2468
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2468
tagtaaactt attgataata                                                   20
<210>  2469
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2469
gcatagtaaa cttattgata                                                   20
<210>  2470
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2470
ttggcatagt aaacttattg                                                   20
<210>  2471
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2471
attttggcat agtaaactta                                                   20
<210>  2472
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2472
tgaattttgg catagtaaac                                                   20
<210>  2473
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2473
ttaatgaatt ttggcatagt                                                   20
<210>  2474
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2474
caattaatga attttggcat                                                   20
<210>  2475
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2475
aaaggcaatt aatgaatttt                                                   20
<210>  2476
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2476
gtgaaaggca attaatgaat                                                   20
<210>  2477
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2477
ttaagtgaaa ggcaattaat                                                   20
<210>  2478
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2478
aagttaagtg aaaggcaatt                                                   20
<210>  2479
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2479
ccaaaagtta agtgaaaggc                                                   20
<210>  2480
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2480
gtcccaaaag ttaagtgaaa                                                   20
<210>  2481
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2481
atggtcccaa aagttaagtg                                                   20
<210>  2482
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2482
attatggtcc caaaagttaa                                                   20
<210>  2483
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2483
tttattatgg tcccaaaagt                                                   20
<210>  2484
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2484
ttattattta ttatggtccc                                                   20
<210>  2485
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2485
atggcaatac attttattat                                                   20
<210>  2486
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2486
gttatggcaa tacattttat                                                   20
<210>  2487
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2487
taatgttatg gcaatacatt                                                   20
<210>  2488
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2488
tattaatgtt atggcaatac                                                   20
<210>  2489
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2489
gtttattaat gttatggcaa                                                   20
<210>  2490
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2490
gtagtttatt aatgttatgg                                                   20
<210>  2491
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2491
aaggtagttt attaatgtta                                                   20
<210>  2492
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2492
tgtaaggtag tttattaatg                                                   20
<210>  2493
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2493
ttttgtaagg tagtttatta                                                   20
<210>  2494
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2494
tggttttgta aggtagttta                                                   20
<210>  2495
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2495
tggtggtttt gtaaggtagt                                                   20
<210>  2496
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2496
aattggtggt tttgtaaggt                                                   20
<210>  2497
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2497
tttaattggt ggttttgtaa                                                   20
<210>  2498
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2498
ttgattttaa ttggtggttt                                                   20
<210>  2499
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2499
tgtttgattt taattggtgg                                                   20
<210>  2500
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2500
atgtaaataa cacttttttg                                                   20
<210>  2501
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2501
cagatgtaaa taacactttt                                                   20
<210>  2502
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2502
tgacagatgt aaataacact                                                   20
<210>  2503
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2503
atgttgacag atgtaaataa                                                   20
<210>  2504
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2504
tttatgttga cagatgtaaa                                                   20
<210>  2505
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2505
agatttatgt tgacagatgt                                                   20
<210>  2506
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2506
agtagattta tgttgacaga                                                   20
<210>  2507
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2507
tttagtagat ttatgttgac                                                   20
<210>  2508
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2508
atttttagta gatttatgtt                                                   20
<210>  2509
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2509
catgtatttt tagtagattt                                                   20
<210>  2510
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2510
gaaatcatgt atttttagta                                                   20
<210>  2511
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2511
attgtatttg atggatatct                                                   20
<210>  2512
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2512
gatacattgt atttgatgga                                                   20
<210>  2513
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2513
taggttgata cattgtattt                                                   20
<210>  2514
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2514
cagtttaggt tgatacattg                                                   20
<210>  2515
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2515
gcatccagtt taggttgata                                                   20
<210>  2516
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2516
ccccagcatc cagtttaggt                                                   20
<210>  2517
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2517
aagaacccca gcatccagtt                                                   20
<210>  2518
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2518
gtgtaaaaag aaccccagca                                                   20
<210>  2519
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2519
atagggtgta aaaagaaccc                                                   20
<210>  2520
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2520
cttttatagg gtgtaaaaag                                                   20
<210>  2521
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2521
tatgtctttt atagggtgta                                                   20
<210>  2522
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2522
ttaggtatgt cttttatagg                                                   20
<210>  2523
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2523
ttgtcttagg tatgtctttt                                                   20
<210>  2524
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2524
ctctgattgt cttaggtatg                                                   20
<210>  2525
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2525
tatttctctg attgtcttag                                                   20
<210>  2526
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2526
tcaagtccat atttgtattt                                                   20
<210>  2527
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2527
aataatcaag tccatatttg                                                   20
<210>  2528
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2528
ttatctaata atcaagtcca                                                   20
<210>  2529
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2529
ctatattatc taataatcaa                                                   20
<210>  2530
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2530
taaaccttct atattatcta                                                   20
<210>  2531
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2531
aattaataaa ccttctatat                                                   20
<210>  2532
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2532
taagtacagg ttggacactg                                                   20
<210>  2533
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2533
gttattaagt acaggttgga                                                   20
<210>  2534
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2534
tgtgagttat taagtacagg                                                   20
<210>  2535
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2535
aaatctgtga gttattaagt                                                   20
<210>  2536
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2536
gttttaaaaa tctgtgagtt                                                   20
<210>  2537
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2537
caaaattctc ctgaaaagaa                                                   20
<210>  2538
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2538
cccaaccaaa attctcctga                                                   20
<210>  2539
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2539
acctgaataa ccctctggac                                                   20
<210>  2540
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2540
aagatacctg aataaccctc                                                   20
<210>  2541
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2541
agaaaaagat acctgaataa                                                   20
<210>  2542
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2542
tggtatcaga aaaagatacc                                                   20
<210>  2543
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2543
agtattggta tcagaaaaag                                                   20
<210>  2544
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2544
aataaagtat tggtatcaga                                                   20
<210>  2545
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2545
atgaaaataa agtattggta                                                   20
<210>  2546
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2546
agatactttg aagatatgaa                                                   20
<210>  2547
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2547
tgggaagata ctttgaagat                                                   20
<210>  2548
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2548
ctaataatgt gggaagatac                                                   20
<210>  2549
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2549
cattgcagat aatagctaat                                                   20
<210>  2550
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2550
aagttgtcat tgcagataat                                                   20
<210>  2551
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2551
ttttaaaagt tgtcattgca                                                   20
<210>  2552
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2552
attcggattt ttaaaagttg                                                   20
<210>  2553
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2553
ttatttggga ttcggatttt                                                   20
<210>  2554
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2554
ttatagttaa gaggttttcg                                                   20
<210>  2555
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2555
tttcattata gttaagaggt                                                   20
<210>  2556
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2556
gaacactttc attatagtta                                                   20
<210>  2557
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2557
gaactagaat gaacactttc                                                   20
<210>  2558
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2558
tgattgaact agaatgaaca                                                   20
<210>  2559
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2559
atacctgatt gaactagaat                                                   20
<210>  2560
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2560
gtaaaatacc tgattgaact                                                   20
<210>  2561
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2561
tagaggtaaa atacctgatt                                                   20
<210>  2562
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2562
aagattagag gtaaaatacc                                                   20
<210>  2563
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2563
tgaggaagat tagaggtaaa                                                   20
<210>  2564
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2564
gaaaatctga ggaagattag                                                   20
<210>  2565
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2565
aaatagaaaa tctgaggaag                                                   20
<210>  2566
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2566
atctatacac taccaaaaaa                                                   20
<210>  2567
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2567
aaataatcta tacactacca                                                   20
<210>  2568
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2568
aaataatctg tataaataat                                                   20
<210>  2569
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2569
cccaatttta aataatctgt                                                   20
<210>  2570
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2570
taagtcccaa ttttaaataa                                                   20
<210>  2571
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2571
tctgtataag tcccaatttt                                                   20
<210>  2572
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2572
aataatctgt ataagtccca                                                   20
<210>  2573
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2573
agttttaaat aatctgtata                                                   20
<210>  2574
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2574
atcccagttt taaataatct                                                   20
<210>  2575
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2575
catgtatccc agttttaaat                                                   20
<210>  2576
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2576
tagatgcatg tatcccagtt                                                   20
<210>  2577
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2577
tgttttagat gcatgtatcc                                                   20
<210>  2578
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2578
tacagtgttt tagatgcatg                                                   20
<210>  2579
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2579
aatattacag tgttttagat                                                   20
<210>  2580
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2580
cttataaata ttacagtgtt                                                   20
<210>  2581
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2581
cttcctttct tataaatatt                                                   20
<210>  2582
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2582
tttatcttcc tttcttataa                                                   20
<210>  2583
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2583
ttccccgtaa gtttatcttc                                                   20
<210>  2584
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2584
tgtatttccc cgtaagttta                                                   20
<210>  2585
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2585
gttactgtat ttccccgtaa                                                   20
<210>  2586
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2586
tgttttcttc tggaagcaga                                                   20
<210>  2587
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2587
cagacctaga cttcttaact                                                   20
<210>  2588
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2588
agcagaccta gacttcttaa                                                   20
<210>  2589
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2589
ttttcttctg gaagcagacc                                                   20
<210>  2590
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2590
aaacatatat acatgcttgt                                                   20
<210>  2591
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2591
ttaaacatat atacatgctt                                                   20
<210>  2592
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2592
gtttattgaa ttttaaacat                                                   20
<210>  2593
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2593
ttgtttattg aattttaaac                                                   20
<210>  2594
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2594
ctttgtttat tgaattttaa                                                   20
<210>  2595
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2595
gtctttgttt attgaatttt                                                   20
<210>  2596
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2596
gggtctttgt ttattgaatt                                                   20
<210>  2597
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2597
ctgggtcttt gtttattgaa                                                   20
<210>  2598
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2598
gactgggtct ttgtttattg                                                   20
<210>  2599
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2599
tttctataat ttagggactg                                                   20
<210>  2600
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2600
aatttctata atttagggac                                                   20
<210>  2601
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2601
taaatttcta taatttaggg                                                   20
<210>  2602
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2602
caagaataat ttaaatttct                                                   20
<210>  2603
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2603
gataaacatg caagaataat                                                   20
<210>  2604
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2604
tcgataaaca tgcaagaata                                                   20
<210>  2605
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2605
tgtcgataaa catgcaagaa                                                   20
<210>  2606
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2606
gatgtcgata aacatgcaag                                                   20
<210>  2607
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2607
gtgatgtcga taaacatgca                                                   20
<210>  2608
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2608
ttgtgatgtc gataaacatg                                                   20
<210>  2609
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2609
tgttgtgatg tcgataaaca                                                   20
<210>  2610
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2610
tctgttgtga tgtcgataaa                                                   20
<210>  2611
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2611
gatctgttgt gatgtcgata                                                   20
<210>  2612
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2612
gggatctgtt gtgatgtcga                                                   20
<210>  2613
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2613
tagggatctg ttgtgatgtc                                                   20
<210>  2614
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2614
tttagggatc tgttgtgatg                                                   20
<210>  2615
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2615
gatttaggga tctgttgtga                                                   20
<210>  2616
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2616
atctaatctt tagggattta                                                   20
<210>  2617
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2617
tttgtatcta atctttaggg                                                   20
<210>  2618
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2618
aatttgtatc taatctttag                                                   20
<210>  2619
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2619
gtggtaaaaa atttgtatct                                                   20
<210>  2620
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2620
ctgtggtaaa aaatttgtat                                                   20
<210>  2621
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2621
tactgtggta aaaaatttgt                                                   20
<210>  2622
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2622
gatactgtgg taaaaaattt                                                   20
<210>  2623
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2623
agtgatactg tggtaaaaaa                                                   20
<210>  2624
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2624
caagtgatac tgtggtaaaa                                                   20
<210>  2625
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2625
gacaagtgat actgtggtaa                                                   20
<210>  2626
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2626
ctgacaagtg atactgtggt                                                   20
<210>  2627
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2627
ttctgacaag tgatactgtg                                                   20
<210>  2628
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2628
aattctgaca agtgatactg                                                   20
<210>  2629
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2629
ataaattctg acaagtgata                                                   20
<210>  2630
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2630
ctggcagttt taaaaaatca                                                   20
<210>  2631
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2631
ttcttactgg cagttttaaa                                                   20
<210>  2632
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2632
atttcttact ggcagtttta                                                   20
<210>  2633
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2633
aaatttctta ctggcagttt                                                   20
<210>  2634
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2634
tttaaaattt cttactggca                                                   20
<210>  2635
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2635
ttaatttaaa atttcttact                                                   20
<210>  2636
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2636
caaatgggtt taatttaaaa                                                   20
<210>  2637
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2637
aacaaatggg tttaatttaa                                                   20
<210>  2638
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2638
ttaacaaatg ggtttaattt                                                   20
<210>  2639
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2639
ctttaacaaa tgggtttaat                                                   20
<210>  2640
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2640
tcctttaaca aatgggttta                                                   20
<210>  2641
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2641
ctatatcctt taacaaatgg                                                   20
<210>  2642
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2642
gggcactata tcctttaaca                                                   20
<210>  2643
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2643
ttgggcacta tatcctttaa                                                   20
<210>  2644
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2644
tataacttgg gcactatatc                                                   20
<210>  2645
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2645
catataactt gggcactata                                                   20
<210>  2646
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2646
tcaccatata acttgggcac                                                   20
<210>  2647
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2647
taggtcacca tataacttgg                                                   20
<210>  2648
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2648
ggtaggtcac catataactt                                                   20
<210>  2649
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2649
aaggtaggtc accatataac                                                   20
<210>  2650
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2650
caaaggtagg tcaccatata                                                   20
<210>  2651
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2651
gtattgacaa aggtaggtca                                                   20
<210>  2652
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2652
aagtattgac aaaggtaggt                                                   20
<210>  2653
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2653
ctaagtattg acaaaggtag                                                   20
<210>  2654
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2654
tgctaagtat tgacaaaggt                                                   20
<210>  2655
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2655
aatgctaagt attgacaaag                                                   20
<210>  2656
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2656
cataatgcta agtattgaca                                                   20
<210>  2657
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2657
tacataatgc taagtattga                                                   20
<210>  2658
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2658
aatacataat gctaagtatt                                                   20
<210>  2659
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2659
gaaatacata atgctaagta                                                   20
<210>  2660
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2660
tttgaaatac ataatgctaa                                                   20
<210>  2661
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2661
ggataatttg aaatacataa                                                   20
<210>  2662
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2662
ttggataatt tgaaatacat                                                   20
<210>  2663
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2663
tattggataa tttgaaatac                                                   20
<210>  2664
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2664
atccagttaa agcttgtaaa                                                   20
<210>  2665
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2665
tcatgatcca gttaaagctt                                                   20
<210>  2666
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2666
tttactcatg atccagttaa                                                   20
<210>  2667
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2667
gataatttta ctcatgatcc                                                   20
<210>  2668
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2668
gatgtgataa ttttactcat                                                   20
<210>  2669
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2669
atgctgatgt gataatttta                                                   20
<210>  2670
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2670
cagttatgct gatgtgataa                                                   20
<210>  2671
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2671
tttaacagtt atgctgatgt                                                   20
<210>  2672
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2672
gcaattttaa cagttatgct                                                   20
<210>  2673
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2673
agagcctgca attttaacag                                                   20
<210>  2674
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2674
gcttcagagc ctgcaatttt                                                   20
<210>  2675
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2675
tattagcttc agagcctgca                                                   20
<210>  2676
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2676
tagtttatta gcttcagagc                                                   20
<210>  2677
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2677
gcaggtagtt tattagcttc                                                   20
<210>  2678
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2678
taaatgcagg tagtttatta                                                   20
<210>  2679
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2679
atggtttaaa tgcaggtagt                                                   20
<210>  2680
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2680
gagccatggt ttaaatgcag                                                   20
<210>  2681
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2681
ttttagagcc atggtttaaa                                                   20
<210>  2682
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2682
caaagtttta gagccatggt                                                   20
<210>  2683
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2683
tcacacaaag ttttagagcc                                                   20
<210>  2684
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2684
caaggtcaca caaagtttta                                                   20
<210>  2685
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2685
gggtgaagta atttattcaa                                                   20
<210>  2686
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2686
gtgaggaaac tgagagataa                                                   20
<210>  2687
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2687
tgtagtatat gtgaggaaac                                                   20
<210>  2688
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2688
atctttgtag tatatgtgag                                                   20
<210>  2689
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2689
ttattatctt tgtagtatat                                                   20
<210>  2690
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2690
ttctgttatt atctttgtag                                                   20
<210>  2691
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2691
ataagttctg ttattatctt                                                   20
<210>  2692
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2692
atcctataag ttctgttatt                                                   20
<210>  2693
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2693
caataatcct ataagttctg                                                   20
<210>  2694
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2694
taagatgaca ttggctgcta                                                   20
<210>  2695
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2695
tttagtaaga tgacattggc                                                   20
<210>  2696
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2696
ttgaatttta gtaagatgac                                                   20
<210>  2697
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2697
ctaatttgaa ttttagtaag                                                   20
<210>  2698
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2698
catgatctaa tttgaatttt                                                   20
<210>  2699
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2699
caaagagaaa catgatctaa                                                   20
<210>  2700
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2700
gttttgagca aagagaaaca                                                   20
<210>  2701
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2701
gtgtggtttt gagcaaagag                                                   20
<210>  2702
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2702
agctattgtg tggttttgag                                                   20
<210>  2703
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2703
tgaaatggaa agctattgtg                                                   20
<210>  2704
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2704
tatgagtgaa atggaaagct                                                   20
<210>  2705
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2705
aaagagccaa tatgagtgaa                                                   20
<210>  2706
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2706
ttggtctaaa gagccaatat                                                   20
<210>  2707
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2707
ggtaatcttg gtctaaagag                                                   20
<210>  2708
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2708
gtgagatgac gaagggttgg                                                   20
<210>  2709
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2709
agtcagtgag atgacgaagg                                                   20
<210>  2710
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2710
ggtgaagtca gtgagatgac                                                   20
<210>  2711
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2711
gtagaggagg tgaagtcagt                                                   20
<210>  2712
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2712
aactagagta gaggaggtga                                                   20
<210>  2713
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2713
agaataacta gagtagagga                                                   20
<210>  2714
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2714
cggtcagaat aactagagta                                                   20
<210>  2715
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2715
taaagcggtc agaataacta                                                   20
<210>  2716
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2716
actggtaaag cggtcagaat                                                   20
<210>  2717
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2717
tgaatactgg taaagcggtc                                                   20
<210>  2718
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2718
tgtgtttgaa tactggtaaa                                                   20
<210>  2719
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2719
agtatgtttg atgtgtttga                                                   20
<210>  2720
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2720
gtggcagtat gtttgatgtg                                                   20
<210>  2721
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2721
ttgaggtggc agtatgtttg                                                   20
<210>  2722
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2722
aggctttgag gtggcagtat                                                   20
<210>  2723
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2723
ggcaaaggct ttgaggtggc                                                   20
<210>  2724
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2724
aacaagggca aaggctttga                                                   20
<210>  2725
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2725
tagaggaaac aacaagggca                                                   20
<210>  2726
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2726
ccagttagag gaaacaacaa                                                   20
<210>  2727
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2727
gataccaggg cagaagagcg                                                   20
<210>  2728
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2728
aaatcagaga gtgggccacg                                                   20
<210>  2729
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2729
cctaagggaa atcagagagt                                                   20
<210>  2730
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2730
acgaccctaa gggaaatcag                                                   20
<210>  2731
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2731
tgataacgac cctaagggaa                                                   20
<210>  2732
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2732
ttttgtttga taacgaccct                                                   20
<210>  2733
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2733
gtcttcattg ggaatttttt                                                   20
<210>  2734
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2734
tgtaagtctt cattgggaat                                                   20
<210>  2735
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2735
gaccttgtaa gtcttcattg                                                   20
<210>  2736
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2736
taagtgacct tgtaagtctt                                                   20
<210>  2737
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2737
ttggttaagt gaccttgtaa                                                   20
<210>  2738
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2738
tgatttttgg ttaagtgacc                                                   20
<210>  2739
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2739
ggttgtgatt tttggttaag                                                   20
<210>  2740
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2740
caggcggttg tgatttttgg                                                   20
<210>  2741
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2741
gggaccaggc ggttgtgatt                                                   20
<210>  2742
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2742
ctaaggaagt agaagttttc                                                   20
<210>  2743
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2743
agtagctaag gaagtagaag                                                   20
<210>  2744
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2744
caggagaaaa gtagctaagg                                                   20
<210>  2745
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2745
gtgtgcagga gaaaagtagc                                                   20
<210>  2746
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2746
taaaggtgag tgtgcaggag                                                   20
<210>  2747
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2747
atgttaaata aaggtgagtg                                                   20
<210>  2748
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2748
atgttatgtt aaataaaggt                                                   20
<210>  2749
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2749
aatttatgtt atgttaaata                                                   20
<210>  2750
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2750
taactaaaat ttatgttatg                                                   20
<210>  2751
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2751
gataaataac taaaatttat                                                   20
<210>  2752
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2752
tttagtgcag gaatagaaga                                                   20
<210>  2753
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2753
aatccctgta ttcacagagc                                                   20
<210>  2754
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2754
gaaaaaatcc ctgtattcac                                                   20
<210>  2755
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2755
taatggaaaa aatccctgta                                                   20
<210>  2756
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2756
aaatatgaag ataatggaaa                                                   20
<210>  2757
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2757
ataatggaaa atatgaagat                                                   20
<210>  2758
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2758
tatacaaata atggaaaata                                                   20
<210>  2759
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2759
ttctggagta tatacaaata                                                   20
<210>  2760
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2760
attctatatt ctggagtata                                                   20
<210>  2761
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2761
ccatacagta ttctatattc                                                   20
<210>  2762
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2762
ctgtgtgcca tacagtattc                                                   20
<210>  2763
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2763
gcctactgtg tgccatacag                                                   20
<210>  2764
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2764
agaaatgcct actgtgtgcc                                                   20
<210>  2765
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2765
tcaacagaaa tgcctactgt                                                   20
<210>  2766
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2766
attaattcaa cagaaatgcc                                                   20
<210>  2767
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2767
gacattacat ttattaattc                                                   20
<210>  2768
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2768
gtgaatatga cattacattt                                                   20
<210>  2769
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2769
cttctgtgtg aatatgacat                                                   20
<210>  2770
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2770
acacgcttct gtgtgaatat                                                   20
<210>  2771
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2771
atagcacacg cttctgtgtg                                                   20
<210>  2772
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2772
taatcatagc acacgcttct                                                   20
<210>  2773
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2773
aataataatc atagcacacg                                                   20
<210>  2774
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2774
ccaagtaata ataatcatag                                                   20
<210>  2775
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2775
ctagtaatcc aagtaataat                                                   20
<210>  2776
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2776
tatttctagt aatccaagta                                                   20
<210>  2777
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2777
cacactattt ctagtaatcc                                                   20
<210>  2778
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2778
ttatgaggca cactatttct                                                   20
<210>  2779
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2779
tttaattatg aggcacacta                                                   20
<210>  2780
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2780
gttgaccttt aattatgagg                                                   20
<210>  2781
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2781
ttacattgtt gaatgttgac                                                   20
<210>  2782
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2782
attaattaca ttgttgaatg                                                   20
<210>  2783
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2783
tgtagattaa ttacattgtt                                                   20
<210>  2784
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2784
tacattgtag attaattaca                                                   20
<210>  2785
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2785
agatgtttac attgtagatt                                                   20
<210>  2786
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2786
ttcaccagat gtttacattg                                                   20
<210>  2787
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2787
gtcacttcac cagatgttta                                                   20
<210>  2788
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2788
cctctgtcac ttcaccagat                                                   20
<210>  2789
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2789
gcttccctct gtcacttcac                                                   20
<210>  2790
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2790
caagtgcttc cctctgtcac                                                   20
<210>  2791
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2791
gcttttttct aaacaagtgc                                                   20
<210>  2792
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2792
acatagcttt tttctaaaca                                                   20
<210>  2793
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2793
ttctgacata gcttttttct                                                   20
<210>  2794
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2794
atggattctg acatagcttt                                                   20
<210>  2795
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2795
aatacatgga ttctgacata                                                   20
<210>  2796
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2796
attagaatac atggattctg                                                   20
<210>  2797
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2797
ttgtactgca tattagaata                                                   20
<210>  2798
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2798
aactattgta ctgcatatta                                                   20
<210>  2799
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2799
ttttaaacta ttgtactgca                                                   20
<210>  2800
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2800
tgagagtatt attaatattt                                                   20
<210>  2801
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2801
gctgtttgag agtattatta                                                   20
<210>  2802
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2802
gaatagctgt ttgagagtat                                                   20
<210>  2803
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2803
cctcttgaat agctgtttga                                                   20
<210>  2804
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2804
tgaatcctct tgaatagctg                                                   20
<210>  2805
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2805
ttttttgaat cctcttgaat                                                   20
<210>  2806
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2806
ttatgttttt tgaatcctct                                                   20
<210>  2807
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2807
gtttatatta tgttttttga                                                   20
<210>  2808
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2808
tctgagttta tattatgttt                                                   20
<210>  2809
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2809
cagtttctct gagtttatat                                                   20
<210>  2810
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2810
gtttaccagt ttctctgagt                                                   20
<210>  2811
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2811
attttgttta ccagtttctc                                                   20
<210>  2812
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2812
aaatgatttt gtttaccagt                                                   20
<210>  2813
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2813
ctcttgaaaa tgattttgtt                                                   20
<210>  2814
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2814
tatatctctt gaaaatgatt                                                   20
<210>  2815
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2815
caggttggca agtttgtttg                                                   20
<210>  2816
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2816
gttggcaggt tggcaagttt                                                   20
<210>  2817
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2817
atatctgtag atgttggcag                                                   20
<210>  2818
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2818
taaacatatc tgtagatgtt                                                   20
<210>  2819
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2819
acctgtaaac atatctgtag                                                   20
<210>  2820
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2820
ttttgacctg taaacatatc                                                   20
<210>  2821
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2821
ataatttttg acctgtaaac                                                   20
<210>  2822
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2822
taatttgata atttttgacc                                                   20
<210>  2823
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2823
ttcttgataa tttgataatt                                                   20
<210>  2824
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2824
accaggcttt cttgataatt                                                   20
<210>  2825
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2825
tttgaaccag gctttcttga                                                   20
<210>  2826
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2826
agacataata cataatttga                                                   20
<210>  2827
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2827
ctgtgataaa gacataatac                                                   20
<210>  2828
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2828
cagacctgtg ataaagacat                                                   20
<210>  2829
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2829
atcttcagac ctgtgataaa                                                   20
<210>  2830
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2830
tactgatctt cagacctgtg                                                   20
<210>  2831
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2831
ttaataattt tcagttttag                                                   20
<210>  2832
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2832
taagtttaat aattttcagt                                                   20
<210>  2833
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2833
ttcagatttt aagtttaata                                                   20
<210>  2834
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2834
tatatttgat attctgttca                                                   20
<210>  2835
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2835
atattgtaat gtattctttt                                                   20
<210>  2836
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2836
ttagaatatt gtaatgtatt                                                   20
<210>  2837
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2837
tttgcttaga atattgtaat                                                   20
<210>  2838
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2838
actgctttgc ttagaatatt                                                   20
<210>  2839
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2839
aagtagagac tgctttgctt                                                   20
<210>  2840
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2840
gcaaggccaa aagtagagac                                                   20
<210>  2841
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2841
acagagcaag gccaaaagta                                                   20
<210>  2842
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2842
ggaaaacaga gcaaggccaa                                                   20
<210>  2843
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2843
tggtcggaaa acagagcaag                                                   20
<210>  2844
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2844
gacattggtc ggaaaacaga                                                   20
<210>  2845
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2845
aagcagacat tggtcggaaa                                                   20
<210>  2846
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2846
caaggcaaaa aagcagacat                                                   20
<210>  2847
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2847
ataaagcaag gcaaaaaagc                                                   20
<210>  2848
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2848
cattatttaa taagataaaa                                                   20
<210>  2849
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2849
aaatatttaa tcagggacat                                                   20
<210>  2850
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2850
tgttctcaaa atatttaatc                                                   20
<210>  2851
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2851
gattacctgt tctcaaaata                                                   20
<210>  2852
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2852
gattgtacag attacctgtt                                                   20
<210>  2853
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2853
attcagattg tacagattac                                                   20
<210>  2854
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2854
aaacagtgtt attcagattg                                                   20
<210>  2855
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2855
tagataaaca gtgttattca                                                   20
<210>  2856
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2856
atatttagat aaacagtgtt                                                   20
<210>  2857
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2857
gtttgatatt tagataaaca                                                   20
<210>  2858
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2858
aacggtgttt gatatttaga                                                   20
<210>  2859
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2859
gttataacgg tgtttgatat                                                   20
<210>  2860
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2860
ataatgttat aacggtgttt                                                   20
<210>  2861
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2861
agttcataat gttataacgg                                                   20
<210>  2862
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2862
ctttcagttc ataatgttat                                                   20
<210>  2863
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2863
agtacagttt gtctttcagt                                                   20
<210>  2864
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2864
tcagaagtac agtttgtctt                                                   20
<210>  2865
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2865
ggatgtcaga agtacagttt                                                   20
<210>  2866
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2866
gagtaaggat gtcagaagta                                                   20
<210>  2867
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2867
gaaatctgag taaggatgtc                                                   20
<210>  2868
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2868
tactgaatat acaattaggg                                                   20
<210>  2869
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2869
aatgatactg aatatacaat                                                   20
<210>  2870
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2870
gaatataaat ctgtttttta                                                   20
<210>  2871
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2871
taaaagaata taaatctgtt                                                   20
<210>  2872
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2872
gctgataaaa gaatataaat                                                   20
<210>  2873
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2873
ccttctgagc tgataaaaga                                                   20
<210>  2874
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2874
ctagtccttc tgagctgata                                                   20
<210>  2875
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2875
ttaccatcat gttttacatt                                                   20
<210>  2876
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2876
caaagtgtct taccatcatg                                                   20
<210>  2877
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2877
aaacccacca aagtgtctta                                                   20
<210>  2878
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2878
agaaggaaac ccaccaaagt                                                   20
<210>  2879
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2879
aataatagct tcaagaagga                                                   20
<210>  2880
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2880
aatttgataa taatagcttc                                                   20
<210>  2881
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2881
tagggaattt gataataata                                                   20
<210>  2882
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2882
aagaataggg aatttgataa                                                   20
<210>  2883
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2883
gtcctaagaa tagggaattt                                                   20
<210>  2884
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2884
tagaacaagt cctaagaata                                                   20
<210>  2885
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2885
ttagtctaga acaagtccta                                                   20
<210>  2886
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2886
atcttttagt ctagaacaag                                                   20
<210>  2887
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2887
taactatctt ttagtctaga                                                   20
<210>  2888
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2888
atctcttaac tatcttttag                                                   20
<210>  2889
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2889
tggatatctc ttaactatct                                                   20
<210>  2890
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2890
tttgatggat atctcttaac                                                   20
<210>  2891
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2891
ttaattctgc ttcattaggt                                                   20
<210>  2892
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2892
tttaattctg cttcattagg                                                   20
<210>  2893
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2893
cagtatttaa ttctgcttca                                                   20
<210>  2894
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2894
acagtattta attctgcttc                                                   20
<210>  2895
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2895
tacagtattt aattctgctt                                                   20
<210>  2896
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2896
atacagtatt taattctgct                                                   20
<210>  2897
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2897
aatacagtat ttaattctgc                                                   20
<210>  2898
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2898
taatacagta tttaattctg                                                   20
<210>  2899
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2899
tttaatacag tatttaattc                                                   20
<210>  2900
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2900
ttttaataca gtatttaatt                                                   20
<210>  2901
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2901
ttattttaat acagtattta                                                   20
<210>  2902
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2902
aacttatttt aatacagtat                                                   20
<210>  2903
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2903
gaacttattt taatacagta                                                   20
<210>  2904
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2904
cgaacttatt ttaatacagt                                                   20
<210>  2905
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2905
gcgaacttat tttaatacag                                                   20
<210>  2906
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2906
agcgaactta ttttaataca                                                   20
<210>  2907
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2907
cagcgaactt attttaatac                                                   20
<210>  2908
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2908
acagcgaact tattttaata                                                   20
<210>  2909
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2909
gacagcgaac ttattttaat                                                   20
<210>  2910
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2910
agacagcgaa cttattttaa                                                   20
<210>  2911
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2911
aaagacagcg aacttatttt                                                   20
<210>  2912
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2912
taaagacagc gaacttattt                                                   20
<210>  2913
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2913
gtttaaagac agcgaactta                                                   20
<210>  2914
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2914
tgtttaaaga cagcgaactt                                                   20
<210>  2915
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2915
ttgtttaaag acagcgaact                                                   20
<210>  2916
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2916
tttgtttaaa gacagcgaac                                                   20
<210>  2917
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2917
atttgtttaa agacagcgaa                                                   20
<210>  2918
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2918
catttgttta aagacagcga                                                   20
<210>  2919
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2919
tccatttgtt taaagacagc                                                   20
<210>  2920
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2920
ctccatttgt ttaaagacag                                                   20
<210>  2921
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2921
atctccattt gtttaaagac                                                   20
<210>  2922
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2922
catctccatt tgtttaaaga                                                   20
<210>  2923
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2923
tcatctccat ttgtttaaag                                                   20
<210>  2924
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2924
gtcatctcca tttgtttaaa                                                   20
<210>  2925
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2925
tagtcatctc catttgttta                                                   20
<210>  2926
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2926
gtagtcatct ccatttgttt                                                   20
<210>  2927
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2927
agtagtcatc tccatttgtt                                                   20
<210>  2928
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2928
tagtagtcat ctccatttgt                                                   20
<210>  2929
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2929
ttagtagtca tctccatttg                                                   20
<210>  2930
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2930
cttagtagtc atctccattt                                                   20
<210>  2931
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2931
gtgacttagt agtcatctcc                                                   20
<210>  2932
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2932
tgtgacttag tagtcatctc                                                   20
<210>  2933
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2933
atgtgactta gtagtcatct                                                   20
<210>  2934
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2934
aatgtgactt agtagtcatc                                                   20
<210>  2935
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2935
caatgtgact tagtagtcat                                                   20
<210>  2936
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2936
tcaatgtgac ttagtagtca                                                   20
<210>  2937
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2937
agtcaatgtg acttagtagt                                                   20
<210>  2938
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2938
ttaaagtcaa tgtgacttag                                                   20
<210>  2939
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2939
gttaaagtca atgtgactta                                                   20
<210>  2940
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2940
tgttaaagtc aatgtgactt                                                   20
<210>  2941
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2941
atgttaaagt caatgtgact                                                   20
<210>  2942
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2942
catgttaaag tcaatgtgac                                                   20
<210>  2943
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2943
ctcatgttaa agtcaatgtg                                                   20
<210>  2944
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2944
cctcatgtta aagtcaatgt                                                   20
<210>  2945
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2945
acctcatgtt aaagtcaatg                                                   20
<210>  2946
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2946
tacctcatgt taaagtcaat                                                   20
<210>  2947
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2947
atacctcatg ttaaagtcaa                                                   20
<210>  2948
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2948
gatacctcat gttaaagtca                                                   20
<210>  2949
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2949
tgatacctca tgttaaagtc                                                   20
<210>  2950
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2950
gtgatacctc atgttaaagt                                                   20
<210>  2951
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2951
agtgatacct catgttaaag                                                   20
<210>  2952
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2952
tagtgatacc tcatgttaaa                                                   20
<210>  2953
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2953
atagtgatac ctcatgttaa                                                   20
<210>  2954
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2954
tatagtgata cctcatgtta                                                   20
<210>  2955
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2955
gtatagtgat acctcatgtt                                                   20
<210>  2956
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2956
ggtatagtga tacctcatgt                                                   20
<210>  2957
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2957
ataaggtata gtgatacctc                                                   20
<210>  2958
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2958
aataaggtat agtgatacct                                                   20
<210>  2959
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2959
taatgtttaa attattgcct                                                   20
<210>  2960
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2960
ggttaatgtt taaattattg                                                   20
<210>  2961
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2961
aggttaatgt ttaaattatt                                                   20
<210>  2962
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2962
gaggttaatg tttaaattat                                                   20
<210>  2963
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2963
tgaggttaat gtttaaatta                                                   20
<210>  2964
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2964
aatgaggtta atgtttaaat                                                   20
<210>  2965
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2965
gaatgaggtt aatgtttaaa                                                   20
<210>  2966
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2966
ggaatgaggt taatgtttaa                                                   20
<210>  2967
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2967
tggaatgagg ttaatgttta                                                   20
<210>  2968
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2968
ttggaatgag gttaatgttt                                                   20
<210>  2969
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2969
cttggaatga ggttaatgtt                                                   20
<210>  2970
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2970
taacttggaa tgaggttaat                                                   20
<210>  2971
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2971
ttaacttgga atgaggttaa                                                   20
<210>  2972
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2972
attaacttgg aatgaggtta                                                   20
<210>  2973
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2973
cattaacttg gaatgaggtt                                                   20
<210>  2974
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2974
acattaactt ggaatgaggt                                                   20
<210>  2975
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2975
accacattaa cttggaatga                                                   20
<210>  2976
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2976
gaccacatta acttggaatg                                                   20
<210>  2977
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2977
agaccacatt aacttggaat                                                   20
<210>  2978
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2978
tagaccacat taacttggaa                                                   20
<210>  2979
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2979
ttagaccaca ttaacttgga                                                   20
<210>  2980
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2980
attagaccac attaacttgg                                                   20
<210>  2981
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2981
tattagacca cattaacttg                                                   20
<210>  2982
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2982
ttattagacc acattaactt                                                   20
<210>  2983
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2983
attattagac cacattaact                                                   20
<210>  2984
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2984
gattattaga ccacattaac                                                   20
<210>  2985
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2985
aataccagat tattagacca                                                   20
<210>  2986
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2986
taataccaga ttattagacc                                                   20
<210>  2987
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2987
tttaatacca gattattaga                                                   20
<210>  2988
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2988
atttaatacc agattattag                                                   20
<210>  2989
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2989
gatttaatac cagattatta                                                   20
<210>  2990
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2990
taaggattta ataccagatt                                                   20
<210>  2991
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2991
tttctcttaa ggatttaata                                                   20
<210>  2992
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2992
ctttctctta aggatttaat                                                   20
<210>  2993
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2993
agctttctct taaggattta                                                   20
<210>  2994
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2994
aagctttctc ttaaggattt                                                   20
<210>  2995
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2995
tcaagctttc tcttaaggat                                                   20
<210>  2996
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2996
ttctcaagct ttctcttaag                                                   20
<210>  2997
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2997
tttctcaagc tttctcttaa                                                   20
<210>  2998
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2998
tctatttctc aagctttctc                                                   20
<210>  2999
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  2999
atctatttct caagctttct                                                   20
<210>  3000
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3000
aatctatttc tcaagctttc                                                   20
<210>  3001
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3001
aaatctattt ctcaagcttt                                                   20
<210>  3002
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3002
aaaatctatt tctcaagctt                                                   20
<210>  3003
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3003
gataaaaaaa atctatttct                                                   20
<210>  3004
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3004
tagacagtga ctttaagata                                                   20
<210>  3005
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3005
atagacagtg actttaagat                                                   20
<210>  3006
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3006
aatagacagt gactttaaga                                                   20
<210>  3007
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3007
aaatagacag tgactttaag                                                   20
<210>  3008
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3008
taaatagaca gtgactttaa                                                   20
<210>  3009
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3009
ttaaatagac agtgacttta                                                   20
<210>  3010
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3010
cttaaataga cagtgacttt                                                   20
<210>  3011
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3011
tcttaaatag acagtgactt                                                   20
<210>  3012
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3012
atcttaaata gacagtgact                                                   20
<210>  3013
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3013
aatcttaaat agacagtgac                                                   20
<210>  3014
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3014
taatcttaaa tagacagtga                                                   20
<210>  3015
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3015
ttaatcttaa atagacagtg                                                   20
<210>  3016
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3016
tttaatctta aatagacagt                                                   20
<210>  3017
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3017
gtttaatctt aaatagacag                                                   20
<210>  3018
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3018
tgtttaatct taaatagaca                                                   20
<210>  3019
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3019
atgtttaatc ttaaatagac                                                   20
<210>  3020
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3020
ttgtatgttt aatcttaaat                                                   20
<210>  3021
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3021
attgtatgtt taatcttaaa                                                   20
<210>  3022
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3022
gattgtatgt ttaatcttaa                                                   20
<210>  3023
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3023
tgattgtatg tttaatctta                                                   20
<210>  3024
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3024
tatgtgattg tatgtttaat                                                   20
<210>  3025
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3025
gttatgtgat tgtatgttta                                                   20
<210>  3026
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3026
taaggttatg tgattgtatg                                                   20
<210>  3027
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3027
ttaaggttat gtgattgtat                                                   20
<210>  3028
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3028
ttctttaagg ttatgtgatt                                                   20
<210>  3029
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3029
tctggaagca gaccta                                                       16
<210>  3030
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3030
cttctggaag cagacc                                                       16
<210>  3031
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3031
aaataaggta tagtga                                                       16
<210>  3032
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3032
tagtattaag tgttaa                                                       16
<210>  3033
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3033
tcatagtatt aagtgt                                                       16
<210>  3034
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3034
agattccttt acaatt                                                       16
<210>  3035
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3035
acaagattcc tttaca                                                       16
<210>  3036
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3036
ctgacaagat tccttt                                                       16
<210>  3037
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3037
tgtaatctga caagat                                                       16
<210>  3038
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3038
tactgtaatc tgacaa                                                       16
<210>  3039
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3039
tcttactgta atctga                                                       16
<210>  3040
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3040
cattcttact gtaatc                                                       16
<210>  3041
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3041
gttcattctt actgta                                                       16
<210>  3042
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3042
atatgttcat tcttac                                                       16
<210>  3043
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3043
gccacaaata tgttca                                                       16
<210>  3044
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3044
gatgccacaa atatgt                                                       16
<210>  3045
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3045
ctttaactcg atgcca                                                       16
<210>  3046
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3046
aaactttaac tcgatg                                                       16
<210>  3047
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3047
tataaacttt aactcg                                                       16
<210>  3048
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3048
cacagcatat ttaggg                                                       16
<210>  3049
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3049
tagaatcaca gcatat                                                       16
<210>  3050
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3050
tattagaatc acagca                                                       16
<210>  3051
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3051
aatgtattag aatcac                                                       16
<210>  3052
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3052
acgaatgtat tagaat                                                       16
<210>  3053
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3053
tacacgaatg tattag                                                       16
<210>  3054
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3054
acctacacga atgtat                                                       16
<210>  3055
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3055
aaaacctaca cgaatg                                                       16
<210>  3056
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3056
ttgaaaacct acacga                                                       16
<210>  3057
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3057
tacttgaaaa cctaca                                                       16
<210>  3058
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3058
gtttatttct acttga                                                       16
<210>  3059
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3059
gaggtttatt tctact                                                       16
<210>  3060
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3060
tacgaggttt atttct                                                       16
<210>  3061
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3061
tgttacgagg tttatt                                                       16
<210>  3062
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3062
acttgttacg aggttt                                                       16
<210>  3063
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3063
cagtaacttg ttacga                                                       16
<210>  3064
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3064
gttcagtaac ttgtta                                                       16
<210>  3065
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3065
tcaggctgtt taaacg                                                       16
<210>  3066
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3066
ttgtcaggct gtttaa                                                       16
<210>  3067
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3067
tatacatgct tgtcag                                                       16
<210>  3068
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3068
gtctttgttt attgaa                                                       16
<210>  3069
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3069
tgggtctttg tttatt                                                       16
<210>  3070
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3070
gactgggtct ttgttt                                                       16
<210>  3071
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3071
ataatttagg gactgg                                                       16
<210>  3072
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3072
tctataattt agggac                                                       16
<210>  3073
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3073
cgataaacat gcaaga                                                       16
<210>  3074
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3074
tgtcgataaa catgca                                                       16
<210>  3075
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3075
tgatgtcgat aaacat                                                       16
<210>  3076
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3076
ttgtgatgtc gataaa                                                       16
<210>  3077
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3077
ctgttgtgat gtcgat                                                       16
<210>  3078
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3078
gatctgttgt gatgtc                                                       16
<210>  3079
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3079
agggatctgt tgtgat                                                       16
<210>  3080
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3080
tttagggatc tgttgt                                                       16
<210>  3081
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3081
ggatttaggg atctgt                                                       16
<210>  3082
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3082
gatttaggga tttagg                                                       16
<210>  3083
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3083
tctttaggga tttagg                                                       16
<210>  3084
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3084
taatctttag ggattt                                                       16
<210>  3085
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3085
atctaatctt taggga                                                       16
<210>  3086
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3086
tgtatctaat ctttag                                                       16
<210>  3087
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3087
aaatttgtat ctaatc                                                       16
<210>  3088
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3088
gtaaaaaatt tgtatc                                                       16
<210>  3089
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3089
gtggtaaaaa atttgt                                                       16
<210>  3090
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3090
gatactgtgg taaaaa                                                       16
<210>  3091
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3091
agtgatactg tggtaa                                                       16
<210>  3092
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3092
acaagtgata ctgtgg                                                       16
<210>  3093
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3093
ctgacaagtg atactg                                                       16
<210>  3094
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3094
attctgacaa gtgata                                                       16
<210>  3095
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3095
taaattctga caagtg                                                       16
<210>  3096
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3096
tactggcagt tttaaa                                                       16
<210>  3097
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3097
tcttactggc agtttt                                                       16
<210>  3098
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3098
atttcttact ggcagt                                                       16
<210>  3099
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3099
aaaatttctt actggc                                                       16
<210>  3100
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3100
aacaaatggg tttaat                                                       16
<210>  3101
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3101
gaatatttgc aagtct                                                       16
<210>  3102
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3102
tcattggtag aggaat                                                       16
<210>  3103
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3103
atattttaaa gtctcg                                                       16
<210>  3104
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3104
gttacattat tataga                                                       16
<210>  3105
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3105
gtgaaatgtg ttacat                                                       16
<210>  3106
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3106
tcaccagtga aatgtg                                                       16
<210>  3107
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3107
catgtttcac cagtga                                                       16
<210>  3108
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3108
acaagacatg tttcac                                                       16
<210>  3109
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3109
catatgacaa gacatg                                                       16
<210>  3110
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3110
ctataatgca tatgac                                                       16
<210>  3111
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3111
tcctttctat aatgca                                                       16
<210>  3112
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3112
tgattatcct ttctat                                                       16
<210>  3113
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3113
taactgaaag tctgat                                                       16
<210>  3114
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3114
gtgcacaaaa atgtta                                                       16
<210>  3115
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3115
agctatgtgc acaaaa                                                       16
<210>  3116
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3116
gaagatagct atgtgc                                                       16
<210>  3117
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3117
tttattgaag atagct                                                       16
<210>  3118
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3118
tcattttagt gtatct                                                       16
<210>  3119
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3119
ccttgatcat tttagt                                                       16
<210>  3120
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3120
tgaatccctt gatcat                                                       16
<210>  3121
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3121
gttgtttagt cttgaa                                                       16
<210>  3122
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3122
aattgagttg tttagt                                                       16
<210>  3123
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3123
gcaactaatt gagttg                                                       16
<210>  3124
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3124
attggtgcaa ctaatt                                                       16
<210>  3125
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3125
gttttttatt ggtgca                                                       16
<210>  3126
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3126
ggacactgac agtttt                                                       16
<210>  3127
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3127
caggttggac actgac                                                       16
<210>  3128
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3128
taagtacagg ttggac                                                       16
<210>  3129
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3129
agttattaag tacagg                                                       16
<210>  3130
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3130
tctgtgagtt attaag                                                       16
<210>  3131
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3131
accaaaattc tcctga                                                       16
<210>  3132
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3132
acctgaataa ccctct                                                       16
<210>  3133
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3133
ggtatcagaa aaagat                                                       16
<210>  3134
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3134
agtattggta tcagaa                                                       16
<210>  3135
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3135
ggaagatact ttgaag                                                       16
<210>  3136
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3136
aatgtgggaa gatact                                                       16
<210>  3137
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3137
cagataatag ctaata                                                       16
<210>  3138
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3138
tcattgcaga taatag                                                       16
<210>  3139
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3139
gattcggatt tttaaa                                                       16
<210>  3140
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3140
atttgggatt cggatt                                                       16
<210>  3141
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3141
acgcttattt gggatt                                                       16
<210>  3142
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3142
tctagagaga aaacgc                                                       16
<210>  3143
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3143
agttaagagg ttttcg                                                       16
<210>  3144
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3144
cattatagtt aagagg                                                       16
<210>  3145
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3145
cactttcatt atagtt                                                       16
<210>  3146
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3146
tagaatgaac actttc                                                       16
<210>  3147
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3147
ttgaactaga atgaac                                                       16
<210>  3148
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3148
acctgattga actaga                                                       16
<210>  3149
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3149
taaaatacct gattga                                                       16
<210>  3150
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3150
tagaggtaaa atacct                                                       16
<210>  3151
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3151
gaagattaga ggtaaa                                                       16
<210>  3152
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3152
tctgaggaag attaga                                                       16
<210>  3153
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3153
tatacactac caaaaa                                                       16
<210>  3154
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3154
ataatctata cactac                                                       16
<210>  3155
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3155
taagtcccaa ttttaa                                                       16
<210>  3156
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3156
ccagttttaa ataatc                                                       16
<210>  3157
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3157
tgtatcccag ttttaa                                                       16
<210>  3158
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3158
gttttagatg catgta                                                       16
<210>  3159
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3159
tacagtgttt tagatg                                                       16
<210>  3160
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3160
ttccccgtaa gtttat                                                       16
<210>  3161
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3161
ctgtatttcc ccgtaa                                                       16
<210>  3162
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3162
tagttactgt tactgt                                                       16
<210>  3163
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3163
cgtatgtagt tactgt                                                       16
<210>  3164
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3164
aatgggtaca gactcg                                                       16
<210>  3165
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3165
gcaatttaat gggtac                                                       16
<210>  3166
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3166
gatagatatg caattt                                                       16
<210>  3167
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3167
aaaggagata gatatg                                                       16
<210>  3168
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3168
cctcctaaag gagata                                                       16
<210>  3169
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3169
caccagcctc ctaaag                                                       16
<210>  3170
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3170
tttgtgatcc caagta                                                       16
<210>  3171
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3171
gctttgtgat cccaag                                                       16
<210>  3172
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3172
ttgctttgtg atccca                                                       16
<210>  3173
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3173
ttttgctttg tgatcc                                                       16
<210>  3174
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3174
ccttttgctt tgtgat                                                       16
<210>  3175
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3175
gtccttttgc tttgtg                                                       16
<210>  3176
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3176
gtgtcctttt gctttg                                                       16
<210>  3177
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3177
gaaatgtaaa cggtat                                                       16
<210>  3178
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3178
ttgagaaatg taaacg                                                       16
<210>  3179
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3179
tgattgagaa atgtaa                                                       16
<210>  3180
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3180
tttgattgag aaatgt                                                       16
<210>  3181
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3181
aagaattttg attgag                                                       16
<210>  3182
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3182
ataagaattt tgattg                                                       16
<210>  3183
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3183
caaatagtat tataag                                                       16
<210>  3184
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3184
cccacatcac aaaatt                                                       16
<210>  3185
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3185
gattcccaca tcacaa                                                       16
<210>  3186
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3186
ttgattccca catcac                                                       16
<210>  3187
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3187
aattgattcc cacatc                                                       16
<210>  3188
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3188
aaaattgatt cccaca                                                       16
<210>  3189
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3189
ctaaaattga ttccca                                                       16
<210>  3190
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3190
catctaaaat tgattc                                                       16
<210>  3191
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3191
accatctaaa attgat                                                       16
<210>  3192
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3192
tgaccatcta aaattg                                                       16
<210>  3193
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3193
tgtgaccatc taaaat                                                       16
<210>  3194
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3194
attgtgacca tctaaa                                                       16
<210>  3195
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3195
agattgtgac catcta                                                       16
<210>  3196
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3196
ctagattgtg accatc                                                       16
<210>  3197
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3197
atctagattg tgacca                                                       16
<210>  3198
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3198
taatctagat tgtgac                                                       16
<210>  3199
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3199
tataatctag attgtg                                                       16
<210>  3200
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3200
attataatct agattg                                                       16
<210>  3201
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3201
tgattataat ctagat                                                       16
<210>  3202
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3202
attgattata atctag                                                       16
<210>  3203
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3203
ctattgatta taatct                                                       16
<210>  3204
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3204
acctattgat tataat                                                       16
<210>  3205
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3205
tcacctattg attata                                                       16
<210>  3206
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3206
gttcacctat tgatta                                                       16
<210>  3207
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3207
aagttcacct attgat                                                       16
<210>  3208
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3208
ataagttcac ctattg                                                       16
<210>  3209
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3209
taataagttc acctat                                                       16
<210>  3210
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3210
tttaataagt tcacct                                                       16
<210>  3211
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3211
tatttaataa gttcac                                                       16
<210>  3212
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3212
gttatttaat aagttc                                                       16
<210>  3213
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3213
catatgatgc ctttta                                                       16
<210>  3214
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3214
tattagctca tatgat                                                       16
<210>  3215
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3215
gatattagct catatg                                                       16
<210>  3216
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3216
gtgatattag ctcata                                                       16
<210>  3217
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3217
agttgtgata ttagct                                                       16
<210>  3218
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3218
aaagttgtga tattag                                                       16
<210>  3219
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3219
ggaaagttgt gatatt                                                       16
<210>  3220
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3220
tgggaaagtt gtgata                                                       16
<210>  3221
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3221
aaactgggaa agttgt                                                       16
<210>  3222
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3222
ttaaactggg aaagtt                                                       16
<210>  3223
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3223
gttttttaaa ctggga                                                       16
<210>  3224
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3224
tagtttttta aactgg                                                       16
<210>  3225
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3225
gagtactagt ttttta                                                       16
<210>  3226
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3226
aagagtacta gttttt                                                       16
<210>  3227
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3227
acaagagtac tagttt                                                       16
<210>  3228
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3228
taacaagagt actagt                                                       16
<210>  3229
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3229
tttaacaaga gtacta                                                       16
<210>  3230
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3230
gttttaacaa gagtac                                                       16
<210>  3231
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3231
gagttttaac aagagt                                                       16
<210>  3232
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3232
tagagtttta acaaga                                                       16
<210>  3233
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3233
gtttagagtt ttaaca                                                       16
<210>  3234
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3234
caagtttaga gtttta                                                       16
<210>  3235
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3235
gtcaagttta gagttt                                                       16
<210>  3236
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3236
tagtcaagtt tagagt                                                       16
<210>  3237
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3237
tttagtcaag tttaga                                                       16
<210>  3238
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3238
tatttagtca agttta                                                       16
<210>  3239
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3239
tgtatttagt caagtt                                                       16
<210>  3240
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3240
tctgtattta gtcaag                                                       16
<210>  3241
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3241
cctctgtatt tagtca                                                       16
<210>  3242
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3242
gtcctctgta tttagt                                                       16
<210>  3243
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3243
cagtcctctg tattta                                                       16
<210>  3244
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3244
accagtcctc tgtatt                                                       16
<210>  3245
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3245
ttaccagtcc tctgta                                                       16
<210>  3246
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3246
aattaccagt cctctg                                                       16
<210>  3247
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3247
acaattacca gtcctc                                                       16
<210>  3248
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3248
tctgacaaga ttcctt                                                       16
<210>  3249
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3249
atctgacaag attcct                                                       16
<210>  3250
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3250
taatctgaca agattc                                                       16
<210>  3251
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3251
gtaatctgac aagatt                                                       16
<210>  3252
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3252
cttgtcaggc tgttta                                                       16
<210>  3253
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3253
gcttgtcagg ctgttt                                                       16
<210>  3254
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3254
atgcttgtca ggctgt                                                       16
<210>  3255
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3255
tacatgcttg tcaggc                                                       16
<210>  3256
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3256
atacatgctt gtcagg                                                       16
<210>  3257
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3257
aaaggtaggt caccat                                                       16
<210>  3258
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3258
caaaggtagg tcacca                                                       16
<210>  3259
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3259
gacaaaggta ggtcac                                                       16
<210>  3260
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3260
tgacaaaggt aggtca                                                       16
<210>  3261
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3261
tctgacatag cttttt                                                       16
<210>  3262
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3262
attctgacat agcttt                                                       16
<210>  3263
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3263
gattctgaca tagctt                                                       16
<210>  3264
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3264
ggattctgac atagct                                                       16
<210>  3265
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3265
atggattctg acatag                                                       16
<210>  3266
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3266
catggattct gacata                                                       16
<210>  3267
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3267
acatggattc tgacat                                                       16
<210>  3268
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3268
tacatggatt ctgaca                                                       16
<210>  3269
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3269
atacatggat tctgac                                                       16
<210>  3270
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3270
tttagcagca ctacta                                                       16
<210>  3271
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3271
ttttagcagc actact                                                       16
<210>  3272
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3272
cttttagcag cactac                                                       16
<210>  3273
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3273
aaaacctttt agcagc                                                       16
<210>  3274
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3274
gataaaaaac ctttta                                                       16
<210>  3275
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3275
tgataaaaaa cctttt                                                       16
<210>  3276
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3276
agatgttggc aggttg                                                       16
<210>  3277
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3277
tagatgttgg caggtt                                                       16
<210>  3278
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3278
gtagatgttg gcaggt                                                       16
<210>  3279
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3279
tgtagatgtt ggcagg                                                       16
<210>  3280
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3280
ctgtagatgt tggcag                                                       16
<210>  3281
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3281
tatctgtaga tgttgg                                                       16
<210>  3282
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3282
atatctgtag atgttg                                                       16
<210>  3283
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3283
catatctgta gatgtt                                                       16
<210>  3284
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3284
tttgaaccag gctttc                                                       16
<210>  3285
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3285
aatttgaacc aggctt                                                       16
<210>  3286
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3286
cataatttga accagg                                                       16
<210>  3287
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3287
acataatttg aaccag                                                       16
<210>  3288
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3288
tacataattt gaacca                                                       16
<210>  3289
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3289
atacataatt tgaacc                                                       16
<210>  3290
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3290
acattggtcg gaaaac                                                       16
<210>  3291
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3291
gacattggtc ggaaaa                                                       16
<210>  3292
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3292
agacattggt cggaaa                                                       16
<210>  3293
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3293
cagacattgg tcggaa                                                       16
<210>  3294
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3294
gcagacattg gtcgga                                                       16
<210>  3295
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3295
aagcagacat tggtcg                                                       16
<210>  3296
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3296
tgtacagatt acctgt                                                       16
<210>  3297
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3297
ttgtacagat tacctg                                                       16
<210>  3298
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3298
attgtacaga ttacct                                                       16
<210>  3299
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3299
gattgtacag attacc                                                       16
<210>  3300
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3300
agattgtaca gattac                                                       16
<210>  3301
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3301
tcagattgta cagatt                                                       16
<210>  3302
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3302
ttcagattgt acagat                                                       16
<210>  3303
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3303
attcagattg tacaga                                                       16
<210>  3304
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3304
tattcagatt gtacag                                                       16
<210>  3305
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3305
ttattcagat tgtaca                                                       16
<210>  3306
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3306
taggtatgtc ttttat                                                       16
<210>  3307
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3307
tgtcttaggt atgtct                                                       16
<210>  3308
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3308
attgtcttag gtatgt                                                       16
<210>  3309
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3309
gattgtctta ggtatg                                                       16
<210>  3310
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3310
ttcttagatg gcgtgt                                                       16
<210>  3311
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3311
atttttctta gatggc                                                       16
<210>  3312
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3312
catttttctt agatgg                                                       16
<210>  3313
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3313
gcatttttct tagatg                                                       16
<210>  3314
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3314
ataagtccca atttta                                                       16
<210>  3315
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3315
tataagtccc aatttt                                                       16
<210>  3316
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3316
gtataagtcc caattt                                                       16
<210>  3317
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3317
tgtataagtc ccaatt                                                       16
<210>  3318
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3318
ctgtataagt cccaat                                                       16
<210>  3319
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3319
taatctgtat aagtcc                                                       16
<210>  3320
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3320
ataatctgta taagtc                                                       16
<210>  3321
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3321
aataatctgt ataagt                                                       16
<210>  3322
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3322
tgcatgtatc ccagtt                                                       16
<210>  3323
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3323
tagatgcatg tatccc                                                       16
<210>  3324
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3324
ttagatgcat gtatcc                                                       16
<210>  3325
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3325
tttagatgca tgtatc                                                       16
<210>  3326
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3326
gtggaactgt tttctt                                                       16
<210>  3327
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3327
acgtggaact gttttc                                                       16
<210>  3328
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3328
ttgatcaatt ctggag                                                       16
<210>  3329
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3329
tcttgatcaa ttctgg                                                       16
<210>  3330
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3330
ggctctggag atagag                                                       16
<210>  3331
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3331
ttggctctgg agatag                                                       16
<210>  3332
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3332
gattttggct ctggag                                                       16
<210>  3333
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3333
tcttgatttt ggctct                                                       16
<210>  3334
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3334
aatcttgatt ttggct                                                       16
<210>  3335
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3335
caaatcttga ttttgg                                                       16
<210>  3336
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3336
gcagcgatag atcata                                                       16
<210>  3337
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3337
ttgcagcgat agatca                                                       16
<210>  3338
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3338
tggtttgcag cgatag                                                       16
<210>  3339
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3339
tttgatttca ctggtt                                                       16
<210>  3340
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3340
tctttgattt cactgg                                                       16
<210>  3341
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3341
agttcttctc agttcc                                                       16
<210>  3342
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3342
ttagttagtt gctctt                                                       16
<210>  3343
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3343
agttagttag ttgctc                                                       16
<210>  3344
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3344
gtgctcttgg cttgga                                                       16
<210>  3345
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3345
tggtgctctt ggcttg                                                       16
<210>  3346
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3346
tatgttcacc tctgtt                                                       16
<210>  3347
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3347
tgtatgttca cctctg                                                       16
<210>  3348
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3348
acactcatca tgccac                                                       16
<210>  3349
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3349
ccacactcat catgcc                                                       16
<210>  3350
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3350
ttagattttg ctcttg                                                       16
<210>  3351
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3351
atagagtata accttc                                                       16
<210>  3352
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3352
aatctgttgg atggat                                                       16
<210>  3353
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3353
tgaatctgtt ggatgg                                                       16
<210>  3354
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3354
ttcattcaaa gctttc                                                       16
<210>  3355
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3355
agttcattca aagctt                                                       16
<210>  3356
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3356
tcagttcatt caaagc                                                       16
<210>  3357
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3357
gattattaga ccacat                                                       16
<210>  3358
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3358
aatagacagt gacttt                                                       16
<210>  3359
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3359
agaaatgtaa acggta                                                       16
<210>  3360
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3360
tcatatgatg cctttt                                                       16
<210>  3361
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3361
attagctcat atgatg                                                       16
<210>  3362
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3362
tgtgatatta gctcat                                                       16
<210>  3363
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3363
gttgtgatat tagctc                                                       16
<210>  3364
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3364
tactctgtgc tgacga                                                       16
<210>  3365
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3365
catactctgt gctgac                                                       16
<210>  3366
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3366
gtttaaagac agcgaa                                                       16
<210>  3367
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3367
ttgtttaaag acagcg                                                       16
<210>  3368
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3368
gtagtcatct ccattt                                                       16
<210>  3369
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3369
tagtagtcat ctccat                                                       16
<210>  3370
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3370
tcttaactct atatat                                                       16
<210>  3371
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3371
cttcttaact ctatat                                                       16
<210>  3372
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3372
gacttcttaa ctctat                                                       16
<210>  3373
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3373
tagacttctt aactct                                                       16
<210>  3374
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3374
cctagacttc ttaact                                                       16
<210>  3375
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3375
gacctagact tcttaa                                                       16
<210>  3376
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3376
cagacctaga cttctt                                                       16
<210>  3377
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3377
agcagaccta gacttc                                                       16
<210>  3378
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3378
gaagcagacc tagact                                                       16
<210>  3379
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3379
tggaagcaga cctaga                                                       16
<210>  3380
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3380
ctttaacaaa tgggtt                                                       16
<210>  3381
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3381
atcctttaac aaatgg                                                       16
<210>  3382
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3382
ctatatcctt taacaa                                                       16
<210>  3383
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3383
gcactatatc ctttaa                                                       16
<210>  3384
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3384
tgggcactat atcctt                                                       16
<210>  3385
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3385
acttgggcac tatatc                                                       16
<210>  3386
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3386
ataacttggg cactat                                                       16
<210>  3387
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3387
catataactt gggcac                                                       16
<210>  3388
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3388
caccatataa cttggg                                                       16
<210>  3389
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3389
ggtcaccata taactt                                                       16
<210>  3390
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3390
gtaggtcacc atataa                                                       16
<210>  3391
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3391
aaggtaggtc accata                                                       16
<210>  3392
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3392
ttgacaaagg taggtc                                                       16
<210>  3393
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3393
gtattgacaa aggtag                                                       16
<210>  3394
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3394
taagtattga caaagg                                                       16
<210>  3395
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3395
tgctaagtat tgacaa                                                       16
<210>  3396
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3396
taatgctaag tattga                                                       16
<210>  3397
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3397
tacataatgc taagta                                                       16
<210>  3398
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3398
ggataatttg aaatac                                                       16
<210>  3399
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3399
tattggataa tttgaa                                                       16
<210>  3400
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3400
gtatattgga taattt                                                       16
<210>  3401
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3401
catgtatatt ggataa                                                       16
<210>  3402
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3402
cttttatata tgtgac                                                       16
<210>  3403
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3403
gatcatacat atcttt                                                       16
<210>  3404
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3404
atagatcata catatc                                                       16
<210>  3405
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3405
cacatagatc atacat                                                       16
<210>  3406
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3406
attcacatag atcata                                                       16
<210>  3407
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3407
aggattcaca tagatc                                                       16
<210>  3408
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3408
cttaggattc acatag                                                       16
<210>  3409
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3409
ttacttagga ttcaca                                                       16
<210>  3410
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3410
tatttactta ggattc                                                       16
<210>  3411
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3411
cctgaaaatt atagat                                                       16
<210>  3412
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3412
ggtcctgaaa attata                                                       16
<210>  3413
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3413
tgtggtcctg aaaatt                                                       16
<210>  3414
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3414
gtctgtggtc ctgaaa                                                       16
<210>  3415
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3415
ttagtctgtg gtcctg                                                       16
<210>  3416
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3416
agcttagtct gtggtc                                                       16
<210>  3417
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3417
gacagcttag tctgtg                                                       16
<210>  3418
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3418
ttcgacagct tagtct                                                       16
<210>  3419
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3419
aatttcgaca gcttag                                                       16
<210>  3420
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3420
gttaatttcg acagct                                                       16
<210>  3421
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3421
cctaaaaaaa tcagcg                                                       16
<210>  3422
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3422
ggccctaaaa aaatca                                                       16
<210>  3423
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3423
ttctggccct aaaaaa                                                       16
<210>  3424
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3424
gtattctggc cctaaa                                                       16
<210>  3425
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3425
ttggtattct ggccct                                                       16
<210>  3426
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3426
attttggtat tctggc                                                       16
<210>  3427
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3427
gccattttgg tattct                                                       16
<210>  3428
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3428
ggagccattt tggtat                                                       16
<210>  3429
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3429
agaggagcca ttttgg                                                       16
<210>  3430
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3430
aagagaggag ccattt                                                       16
<210>  3431
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3431
attgtccaat tttggg                                                       16
<210>  3432
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3432
gaaattgtcc aatttt                                                       16
<210>  3433
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3433
tttgaaattg tccaat                                                       16
<210>  3434
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3434
gcatttgaaa ttgtcc                                                       16
<210>  3435
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3435
gcaactcata tattaa                                                       16
<210>  3436
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3436
gaagcaactc atatat                                                       16
<210>  3437
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3437
gaggaagcaa ctcata                                                       16
<210>  3438
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3438
atagaggaag caactc                                                       16
<210>  3439
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3439
caaatagagg aagcaa                                                       16
<210>  3440
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3440
aaccaaatag aggaag                                                       16
<210>  3441
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3441
ggaaaccaaa tagagg                                                       16
<210>  3442
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3442
ctttaagtga agttac                                                       16
<210>  3443
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3443
tacttacttt aagtga                                                       16
<210>  3444
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3444
gaaccctctt tatttt                                                       16
<210>  3445
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3445
aaacatgaac cctctt                                                       16
<210>  3446
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3446
gatccacatt gaaaac                                                       16
<210>  3447
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3447
catgccttag aaatat                                                       16
<210>  3448
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3448
aaatggcatg ccttag                                                       16
<210>  3449
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3449
gtatttcaaa tggcat                                                       16
<210>  3450
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3450
gcaacaaagt atttca                                                       16
<210>  3451
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3451
gtatttcaac aatgca                                                       16
<210>  3452
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3452
ataacattag ggaaac                                                       16
<210>  3453
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3453
tcatatataa cattag                                                       16
<210>  3454
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3454
gtggttttga gcaaag                                                       16
<210>  3455
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3455
ctattgtgtg gttttg                                                       16
<210>  3456
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3456
ggaaagctat tgtgtg                                                       16
<210>  3457
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3457
tatgagtgaa atggaa                                                       16
<210>  3458
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3458
agccaatatg agtgaa                                                       16
<210>  3459
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3459
ctaaagagcc aatatg                                                       16
<210>  3460
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3460
ggtaatcttg gtctaa                                                       16
<210>  3461
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3461
gatgacgaag ggttgg                                                       16
<210>  3462
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3462
cagtgagatg acgaag                                                       16
<210>  3463
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3463
tgaagtcagt gagatg                                                       16
<210>  3464
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3464
aggaggtgaa gtcagt                                                       16
<210>  3465
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3465
gagtagagga ggtgaa                                                       16
<210>  3466
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3466
taactagagt agagga                                                       16
<210>  3467
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3467
tcagaataac tagagt                                                       16
<210>  3468
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3468
aagcggtcag aataac                                                       16
<210>  3469
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3469
ctggtaaagc ggtcag                                                       16
<210>  3470
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3470
tgaatactgg taaagc                                                       16
<210>  3471
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3471
tgtgtttgaa tactgg                                                       16
<210>  3472
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3472
gtttgatgtg tttgaa                                                       16
<210>  3473
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3473
cagtatgttt gatgtg                                                       16
<210>  3474
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3474
aggtggcagt atgttt                                                       16
<210>  3475
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3475
gctttgaggt ggcagt                                                       16
<210>  3476
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3476
gggcaaaggc tttgag                                                       16
<210>  3477
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3477
caacaagggc aaaggc                                                       16
<210>  3478
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3478
gaggaaacaa caaggg                                                       16
<210>  3479
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3479
ccagttagag gaaaca                                                       16
<210>  3480
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3480
ccagggcaga agagcg                                                       16
<210>  3481
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3481
tagataccag ggcaga                                                       16
<210>  3482
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3482
cagagagtgg gccacg                                                       16
<210>  3483
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3483
ggaaatcaga gagtgg                                                       16
<210>  3484
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3484
cctaagggaa atcaga                                                       16
<210>  3485
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3485
aacgacccta agggaa                                                       16
<210>  3486
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3486
tttgataacg acccta                                                       16
<210>  3487
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3487
tttttgtttg ataacg                                                       16
<210>  3488
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3488
cattgggaat tttttg                                                       16
<210>  3489
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3489
agtcttcatt gggaat                                                       16
<210>  3490
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3490
cttgtaagtc ttcatt                                                       16
<210>  3491
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3491
agtgaccttg taagtc                                                       16
<210>  3492
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3492
tggttaagtg accttg                                                       16
<210>  3493
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3493
gatttttggt taagtg                                                       16
<210>  3494
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3494
ggttgtgatt tttggt                                                       16
<210>  3495
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3495
ccaggcggtt gtgatt                                                       16
<210>  3496
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3496
atgggaccag gcggtt                                                       16
<210>  3497
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3497
aagttttcag ggatgg                                                       16
<210>  3498
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3498
aagtagaagt tttcag                                                       16
<210>  3499
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3499
ctaaggaagt agaagt                                                       16
<210>  3500
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3500
aagtagctaa ggaagt                                                       16
<210>  3501
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3501
ggagaaaagt agctaa                                                       16
<210>  3502
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3502
tgtgcaggag aaaagt                                                       16
<210>  3503
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3503
ggtgagtgtg caggag                                                       16
<210>  3504
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3504
aataaaggtg agtgtg                                                       16
<210>  3505
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3505
tgcaggaata gaagag                                                       16
<210>  3506
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3506
ttttagtgca ggaata                                                       16
<210>  3507
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3507
tattcacaga gcttac                                                       16
<210>  3508
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3508
tccctgtatt cacaga                                                       16
<210>  3509
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3509
gaaaaaatcc ctgtat                                                       16
<210>  3510
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3510
tatgaagata atggaa                                                       16
<210>  3511
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3511
ggagtatata caaata                                                       16
<210>  3512
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3512
tattctggag tatata                                                       16
<210>  3513
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3513
attctatatt ctggag                                                       16
<210>  3514
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3514
catacagtat tctata                                                       16
<210>  3515
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3515
gtgtgccata cagtat                                                       16
<210>  3516
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3516
agaaatgcct actgtg                                                       16
<210>  3517
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3517
attcaacaga aatgcc                                                       16
<210>  3518
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3518
gaatatgaca ttacat                                                       16
<210>  3519
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3519
ctgtgtgaat atgaca                                                       16
<210>  3520
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3520
acgcttctgt gtgaat                                                       16
<210>  3521
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3521
tagcacacgc ttctgt                                                       16
<210>  3522
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3522
taatcatagc acacgc                                                       16
<210>  3523
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3523
ccaagtaata ataatc                                                       16
<210>  3524
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3524
agtaatccaa gtaata                                                       16
<210>  3525
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3525
atttctagta atccaa                                                       16
<210>  3526
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3526
cacactattt ctagta                                                       16
<210>  3527
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3527
atgaggcaca ctattt                                                       16
<210>  3528
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3528
ttaattatga ggcaca                                                       16
<210>  3529
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3529
tgacctttaa ttatga                                                       16
<210>  3530
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3530
gcaatttatt gaatga                                                       16
<210>  3531
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3531
gggtttgcaa tttatt                                                       16
<210>  3532
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3532
tgtgttgggt ttgcaa                                                       16
<210>  3533
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3533
tttaagtgtg ttgggt                                                       16
<210>  3534
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3534
gtttagcagt aacatt                                                       16
<210>  3535
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3535
attcagtagt ttatcg                                                       16
<210>  3536
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3536
ctatatattc agtagt                                                       16
<210>  3537
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3537
gcttactttc tatata                                                       16
<210>  3538
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3538
agtttgtttg cttact                                                       16
<210>  3539
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3539
ttggcaagtt tgtttg                                                       16
<210>  3540
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3540
ggcaggttgg caagtt                                                       16
<210>  3541
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3541
gatgttggca ggttgg                                                       16
<210>  3542
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3542
aacatatctg tagatg                                                       16
<210>  3543
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3543
cctgtaaaca tatctg                                                       16
<210>  3544
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3544
ttttgacctg taaaca                                                       16
<210>  3545
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3545
gataattttt gacctg                                                       16
<210>  3546
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3546
tcttgataat ttgata                                                       16
<210>  3547
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3547
aggctttctt gataat                                                       16
<210>  3548
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3548
tgaaccaggc tttctt                                                       16
<210>  3549
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3549
gataaagaca taatac                                                       16
<210>  3550
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3550
acctgtgata aagaca                                                       16
<210>  3551
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3551
cttcagacct gtgata                                                       16
<210>  3552
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3552
actgatcttc agacct                                                       16
<210>  3553
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3553
ggtcttactg atcttc                                                       16
<210>  3554
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3554
gttttaggtc ttactg                                                       16
<210>  3555
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3555
gttcagattt taagtt                                                       16
<210>  3556
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3556
atattctgtt cagatt                                                       16
<210>  3557
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3557
atattgtaat gtattc                                                       16
<210>  3558
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3558
cttagaatat tgtaat                                                       16
<210>  3559
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3559
gctttgctta gaatat                                                       16
<210>  3560
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3560
gagactgctt tgctta                                                       16
<210>  3561
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3561
aaagtagaga ctgctt                                                       16
<210>  3562
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3562
aggccaaaag tagaga                                                       16
<210>  3563
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3563
tcggaaaaca gagcaa                                                       16
<210>  3564
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3564
cattggtcgg aaaaca                                                       16
<210>  3565
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3565
agcaaggcaa aaaagc                                                       16
<210>  3566
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3566
gacattattt aataag                                                       16
<210>  3567
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3567
atcagggaca ttattt                                                       16
<210>  3568
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3568
tatttaatca gggaca                                                       16
<210>  3569
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3569
attacctgtt ctcaaa                                                       16
<210>  3570
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3570
gtacagatta cctgtt                                                       16
<210>  3571
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3571
gttattcaga ttgtac                                                       16
<210>  3572
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3572
aacagtgtta ttcaga                                                       16
<210>  3573
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3573
tagataaaca gtgtta                                                       16
<210>  3574
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3574
tgatatttag ataaac                                                       16
<210>  3575
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3575
ggtgtttgat atttag                                                       16
<210>  3576
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3576
tataacggtg tttgat                                                       16
<210>  3577
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3577
taatgttata acggtg                                                       16
<210>  3578
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3578
agttcataat gttata                                                       16
<210>  3579
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3579
gtctttcagt tcataa                                                       16
<210>  3580
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3580
acagtttgtc tttcag                                                       16
<210>  3581
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3581
agaagtacag tttgtc                                                       16
<210>  3582
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3582
gatgtcagaa gtacag                                                       16
<210>  3583
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3583
agtaaggatg tcagaa                                                       16
<210>  3584
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3584
aatctgagta aggatg                                                       16
<210>  3585
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3585
gaatatacaa ttaggg                                                       16
<210>  3586
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3586
tgatactgaa tataca                                                       16
<210>  3587
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3587
ctgagctgat aaaaga                                                       16
<210>  3588
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3588
accatcatgt tttaca                                                       16
<210>  3589
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3589
tgtcttacca tcatgt                                                       16
<210>  3590
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3590
ccaaagtgtc ttacca                                                       16
<210>  3591
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3591
aacccaccaa agtgtc                                                       16
<210>  3592
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3592
gaaggaaacc caccaa                                                       16
<210>  3593
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3593
cttcaagaag gaaacc                                                       16
<210>  3594
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3594
taatagcttc aagaag                                                       16
<210>  3595
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3595
gggaatttga taataa                                                       16
<210>  3596
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3596
agaataggga atttga                                                       16
<210>  3597
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3597
gtcctaagaa taggga                                                       16
<210>  3598
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3598
gaacaagtcc taagaa                                                       16
<210>  3599
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3599
agtctagaac aagtcc                                                       16
<210>  3600
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3600
tcttttagtc tagaac                                                       16
<210>  3601
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3601
taactatctt ttagtc                                                       16
<210>  3602
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3602
atctcttaac tatctt                                                       16
<210>  3603
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3603
aactgttttc ttctgg                                                       16
<210>  3604
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3604
tcaatttcaa gcaacg                                                       16
<210>  3605
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3605
cttaattgtg aacatt                                                       16
<210>  3606
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3606
agcttaattg tgaaca                                                       16
<210>  3607
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3607
ggagcttaat tgtgaa                                                       16
<210>  3608
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3608
aaggagctta attgtg                                                       16
<210>  3609
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3609
agaaggagct taattg                                                       16
<210>  3610
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3610
aaagaaggag cttaat                                                       16
<210>  3611
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3611
ctagaggaac aataaa                                                       16
<210>  3612
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3612
taactagagg aacaat                                                       16
<210>  3613
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3613
aataactaga ggaaca                                                       16
<210>  3614
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3614
ggaaataact agagga                                                       16
<210>  3615
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3615
gaggaaataa ctagag                                                       16
<210>  3616
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3616
tggaggaaat aactag                                                       16
<210>  3617
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3617
tctggaggaa ataact                                                       16
<210>  3618
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3618
caattctgga ggaaat                                                       16
<210>  3619
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3619
atcaattctg gaggaa                                                       16
<210>  3620
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3620
tgatcaattc tggagg                                                       16
<210>  3621
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3621
ttgtcttgat caattc                                                       16
<210>  3622
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3622
aattgtcttg atcaat                                                       16
<210>  3623
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3623
tgaattgtct tgatca                                                       16
<210>  3624
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3624
gatgaattgt cttgat                                                       16
<210>  3625
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3625
atgatgaatt gtcttg                                                       16
<210>  3626
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3626
caaatgatga attgtc                                                       16
<210>  3627
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3627
atcaaatgat gaattg                                                       16
<210>  3628
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3628
gatagagaat caaatg                                                       16
<210>  3629
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3629
tggagataga gaatca                                                       16
<210>  3630
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3630
tctggagata gagaat                                                       16
<210>  3631
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3631
tttggctctg gagata                                                       16
<210>  3632
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3632
attttggctc tggaga                                                       16
<210>  3633
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3633
atcttgattt tggctc                                                       16
<210>  3634
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3634
gcaaatcttg attttg                                                       16
<210>  3635
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3635
tagcaaatct tgattt                                                       16
<210>  3636
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3636
catagcaaat cttgat                                                       16
<210>  3637
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3637
aacatagcaa atcttg                                                       16
<210>  3638
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3638
ctaacatagc aaatct                                                       16
<210>  3639
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3639
gtctaacata gcaaat                                                       16
<210>  3640
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3640
taaaattttt acatcg                                                       16
<210>  3641
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3641
ggctaaaatt tttaca                                                       16
<210>  3642
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3642
ccattggcta aaattt                                                       16
<210>  3643
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3643
ggccattggc taaaat                                                       16
<210>  3644
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3644
gaggccattg gctaaa                                                       16
<210>  3645
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3645
aggaggccat tggcta                                                       16
<210>  3646
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3646
gaaggaggcc attggc                                                       16
<210>  3647
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3647
ctgaaggagg ccattg                                                       16
<210>  3648
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3648
aactgaagga ggccat                                                       16
<210>  3649
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3649
ccaactgaag gaggcc                                                       16
<210>  3650
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3650
tcccaactga aggagg                                                       16
<210>  3651
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3651
tgtcccaact gaagga                                                       16
<210>  3652
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3652
catgtcccaa ctgaag                                                       16
<210>  3653
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3653
accatgtccc aactga                                                       16
<210>  3654
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3654
agaccatgtc ccaact                                                       16
<210>  3655
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3655
taagaccatg tcccaa                                                       16
<210>  3656
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3656
tttaagacca tgtccc                                                       16
<210>  3657
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3657
tctttaagac catgtc                                                       16
<210>  3658
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3658
agtctttaag accatg                                                       16
<210>  3659
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3659
aaagtcttta agacca                                                       16
<210>  3660
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3660
acaaagtctt taagac                                                       16
<210>  3661
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3661
ggacaaagtc tttaag                                                       16
<210>  3662
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3662
atggacaaag tcttta                                                       16
<210>  3663
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3663
ttatggacaa agtctt                                                       16
<210>  3664
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3664
tcttatggac aaagtc                                                       16
<210>  3665
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3665
cgtcttatgg acaaag                                                       16
<210>  3666
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3666
ttaatttggc ccttcg                                                       16
<210>  3667
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3667
cattaatttg gccctt                                                       16
<210>  3668
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3668
gtcattaatt tggccc                                                       16
<210>  3669
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3669
atgtcattaa tttggc                                                       16
<210>  3670
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3670
tatgttgagt ttttga                                                       16
<210>  3671
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3671
tcaaatatgt tgagtt                                                       16
<210>  3672
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3672
gatcaaatat gttgag                                                       16
<210>  3673
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3673
gtacaattac cagtcc                                                       16
<210>  3674
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3674
ctgtacaatt accagt                                                       16
<210>  3675
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3675
aactgtacaa ttacca                                                       16
<210>  3676
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3676
agaactgtac aattac                                                       16
<210>  3677
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3677
taagaactgt acaatt                                                       16
<210>  3678
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3678
catttaagaa ctgtac                                                       16
<210>  3679
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3679
tactacaaca tttaag                                                       16
<210>  3680
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3680
ttaatactac aacatt                                                       16
<210>  3681
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3681
ttgaaattaa tactac                                                       16
<210>  3682
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3682
gttttgaaat taatac                                                       16
<210>  3683
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3683
cgatttttag ttttga                                                       16
<210>  3684
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3684
gacgattttt agtttt                                                       16
<210>  3685
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3685
ctgacgattt ttagtt                                                       16
<210>  3686
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3686
tgctgacgat ttttag                                                       16
<210>  3687
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3687
tgtgctgacg attttt                                                       16
<210>  3688
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3688
tctgtgctga cgattt                                                       16
<210>  3689
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3689
tacacatact ctgtgc                                                       16
<210>  3690
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3690
tttacacata ctctgt                                                       16
<210>  3691
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3691
gatttttaca catact                                                       16
<210>  3692
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3692
gaagcatcag tttaaa                                                       16
<210>  3693
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3693
atgaagcatc agttta                                                       16
<210>  3694
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3694
ttgtagcaaa atgaag                                                       16
<210>  3695
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3695
catttactcc aaatta                                                       16
<210>  3696
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3696
cattaggttt cataaa                                                       16
<210>  3697
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3697
ttcattaggt ttcata                                                       16
<210>  3698
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3698
gcttcattag gtttca                                                       16
<210>  3699
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3699
ctgcttcatt aggttt                                                       16
<210>  3700
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3700
ttctgcttca ttaggt                                                       16
<210>  3701
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3701
aattctgctt cattag                                                       16
<210>  3702
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3702
cagtatttaa ttctgc                                                       16
<210>  3703
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3703
gaacttattt taatac                                                       16
<210>  3704
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3704
gcgaacttat tttaat                                                       16
<210>  3705
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3705
cagcgaactt atttta                                                       16
<210>  3706
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3706
gacagcgaac ttattt                                                       16
<210>  3707
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3707
aagacagcga acttat                                                       16
<210>  3708
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3708
tttaaagaca gcgaac                                                       16
<210>  3709
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3709
gtcatctcca tttgtt                                                       16
<210>  3710
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3710
tagtcatctc catttg                                                       16
<210>  3711
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3711
acttagtagt catctc                                                       16
<210>  3712
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3712
tgacttagta gtcatc                                                       16
<210>  3713
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3713
tgtgacttag tagtca                                                       16
<210>  3714
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3714
aatgtgactt agtagt                                                       16
<210>  3715
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3715
tcaatgtgac ttagta                                                       16
<210>  3716
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3716
agtcaatgtg acttag                                                       16
<210>  3717
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3717
aaagtcaatg tgactt                                                       16
<210>  3718
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3718
ttaaagtcaa tgtgac                                                       16
<210>  3719
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3719
tgttaaagtc aatgtg                                                       16
<210>  3720
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3720
catgttaaag tcaatg                                                       16
<210>  3721
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3721
ctcatgttaa agtcaa                                                       16
<210>  3722
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3722
acctcatgtt aaagtc                                                       16
<210>  3723
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3723
atacctcatg ttaaag                                                       16
<210>  3724
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3724
tgatacctca tgttaa                                                       16
<210>  3725
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3725
agtgatacct catgtt                                                       16
<210>  3726
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3726
atagtgatac ctcatg                                                       16
<210>  3727
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3727
gtatagtgat acctca                                                       16
<210>  3728
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3728
aggtatagtg atacct                                                       16
<210>  3729
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3729
taaggtatag tgatac                                                       16
<210>  3730
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3730
aataaggtat agtgat                                                       16
<210>  3731
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3731
gtaaacttat tgataa                                                       16
<210>  3732
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3732
ggcatagtaa acttat                                                       16
<210>  3733
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3733
aattttggca tagtaa                                                       16
<210>  3734
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3734
ggcaattaat gaattt                                                       16
<210>  3735
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3735
gtgaaaggca attaat                                                       16
<210>  3736
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3736
agttaagtga aaggca                                                       16
<210>  3737
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3737
cccaaaagtt aagtga                                                       16
<210>  3738
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3738
tatggtccca aaagtt                                                       16
<210>  3739
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3739
atttattatg gtccca                                                       16
<210>  3740
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3740
gttatggcaa tacatt                                                       16
<210>  3741
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3741
attaatgtta tggcaa                                                       16
<210>  3742
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3742
gtagtttatt aatgtt                                                       16
<210>  3743
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3743
tgtaaggtag tttatt                                                       16
<210>  3744
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3744
tggttttgta aggtag                                                       16
<210>  3745
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3745
aattggtggt tttgta                                                       16
<210>  3746
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3746
gattttaatt ggtggt                                                       16
<210>  3747
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3747
gatgtaaata acactt                                                       16
<210>  3748
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3748
ttgacagatg taaata                                                       16
<210>  3749
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3749
tttatgttga cagatg                                                       16
<210>  3750
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3750
agtagattta tgttga                                                       16
<210>  3751
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3751
cctgaatata atgaat                                                       16
<210>  3752
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3752
ggactacctg aatata                                                       16
<210>  3753
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3753
accatcaagc ctccca                                                       16
<210>  3754
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3754
ccccttacca tcaagc                                                       16
<210>  3755
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3755
tgtagtcccc ttacca                                                       16
<210>  3756
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3756
attgaatgta gtcccc                                                       16
<210>  3757
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3757
gattagcaag tgaatg                                                       16
<210>  3758
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3758
tttgtagatt agcaag                                                       16
<210>  3759
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3759
aagaggttct cagtaa                                                       16
<210>  3760
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3760
gtccataaga ggttct                                                       16
<210>  3761
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3761
tacctggtcc ataaga                                                       16
<210>  3762
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3762
tcctaatacc tggtcc                                                       16
<210>  3763
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3763
tacttttcct aatacc                                                       16
<210>  3764
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3764
cgttactact tttcct                                                       16
<210>  3765
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3765
ctgagactgc ttctcg                                                       16
<210>  3766
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3766
tgaaggctga gactgc                                                       16
<210>  3767
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3767
taaattatat gaaggc                                                       16
<210>  3768
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3768
gtaattgttt gataat                                                       16
<210>  3769
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3769
tactaacaaa tgtgta                                                       16
<210>  3770
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3770
gtaatttact aacaaa                                                       16
<210>  3771
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3771
ataagtgtaa tttact                                                       16
<210>  3772
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3772
gttgtaataa gtgtaa                                                       16
<210>  3773
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3773
gtgataaata taattc                                                       16
<210>  3774
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3774
catgtaattg tgataa                                                       16
<210>  3775
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3775
gtatatttaa gaacag                                                       16
<210>  3776
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3776
ttgtgataag tatatt                                                       16
<210>  3777
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3777
tggaattaaa ttgtga                                                       16
<210>  3778
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3778
aagccgtgga attaaa                                                       16
<210>  3779
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3779
cattgtaagc cgtgga                                                       16
<210>  3780
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3780
tatgatcatt gtaagc                                                       16
<210>  3781
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3781
tatagttatg atcatt                                                       16
<210>  3782
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3782
gacataacat ttaatc                                                       16
<210>  3783
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3783
acttatgaca taacat                                                       16
<210>  3784
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3784
gttactactt atgaca                                                       16
<210>  3785
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3785
gtaacagtta ctactt                                                       16
<210>  3786
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3786
gcttatttgt aacagt                                                       16
<210>  3787
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3787
ttcacagctt atttgt                                                       16
<210>  3788
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3788
gttcttttca cagctt                                                       16
<210>  3789
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3789
ggagtggttc ttttca                                                       16
<210>  3790
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3790
atgctaggag tggttc                                                       16
<210>  3791
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3791
tgactaatgc taggag                                                       16
<210>  3792
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3792
atagagtgac taatgc                                                       16
<210>  3793
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3793
gagagaatag agtgac                                                       16
<210>  3794
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3794
attgatatgt aaaacg                                                       16
<210>  3795
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3795
caattaattg atatgt                                                       16
<210>  3796
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3796
ccttttaact tccaat                                                       16
<210>  3797
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3797
cctggtcctt ttaact                                                       16
<210>  3798
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3798
gagtttcctg gtcctt                                                       16
<210>  3799
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3799
atgtctgagt ttcctg                                                       16
<210>  3800
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3800
tactgtatgt ctgagt                                                       16
<210>  3801
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3801
ccatacattc tatata                                                       16
<210>  3802
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3802
tataagccat acattc                                                       16
<210>  3803
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3803
attcattata agccat                                                       16
<210>  3804
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3804
cattgagtta actaat                                                       16
<210>  3805
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3805
aatttgcatt gagtta                                                       16
<210>  3806
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3806
tgaagttact tctggg                                                       16
<210>  3807
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3807
agtgaagtta cttctg                                                       16
<210>  3808
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3808
taagtgaagt tacttc                                                       16
<210>  3809
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3809
gttttaagtg aagtta                                                       16
<210>  3810
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3810
aagttttaag tgaagt                                                       16
<210>  3811
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3811
gtttttctac aaaagt                                                       16
<210>  3812
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3812
atgctattat cttgtt                                                       16
<210>  3813
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3813
tgatgctatt atcttg                                                       16
<210>  3814
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3814
tttgatgcta ttatct                                                       16
<210>  3815
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3815
gtctttgatg ctatta                                                       16
<210>  3816
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3816
aggtctttga tgctat                                                       16
<210>  3817
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3817
gaaggtcttt gatgct                                                       16
<210>  3818
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3818
gagaaggtct ttgatg                                                       16
<210>  3819
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3819
tggagaaggt ctttga                                                       16
<210>  3820
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3820
tctggagaag gtcttt                                                       16
<210>  3821
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3821
ggtctggaga aggtct                                                       16
<210>  3822
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3822
acggtctgga gaaggt                                                       16
<210>  3823
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3823
ccacggtctg gagaag                                                       16
<210>  3824
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3824
ttccacggtc tggaga                                                       16
<210>  3825
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3825
tcttccacgg tctgga                                                       16
<210>  3826
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3826
ggtcttccac ggtctg                                                       16
<210>  3827
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3827
ttggtcttcc acggtc                                                       16
<210>  3828
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3828
tattggtctt ccacgg                                                       16
<210>  3829
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3829
tatattggtc ttccac                                                       16
<210>  3830
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3830
tttatattgg tcttcc                                                       16
<210>  3831
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3831
tgtttatatt ggtctt                                                       16
<210>  3832
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3832
attgtttata ttggtc                                                       16
<210>  3833
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3833
taattgttta tattgg                                                       16
<210>  3834
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3834
ggtttaattg tttata                                                       16
<210>  3835
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3835
gttggtttaa ttgttt                                                       16
<210>  3836
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3836
ctgttggttt aattgt                                                       16
<210>  3837
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3837
tgctgttggt ttaatt                                                       16
<210>  3838
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3838
tatgctgttg gtttaa                                                       16
<210>  3839
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3839
actatgctgt tggttt                                                       16
<210>  3840
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3840
tgactatgct gttggt                                                       16
<210>  3841
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3841
tttgactatg ctgttg                                                       16
<210>  3842
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3842
tatttgacta tgctgt                                                       16
<210>  3843
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3843
tttatttgac tatgct                                                       16
<210>  3844
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3844
cttttatttg actatg                                                       16
<210>  3845
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3845
gagctgattt tctatt                                                       16
<210>  3846
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3846
ctgagctgat tttcta                                                       16
<210>  3847
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3847
ttctgagctg attttc                                                       16
<210>  3848
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3848
ccttctgagc tgattt                                                       16
<210>  3849
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3849
gtccttctga gctgat                                                       16
<210>  3850
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3850
tagtccttct gagctg                                                       16
<210>  3851
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3851
actagtcctt ctgagc                                                       16
<210>  3852
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3852
atactagtcc ttctga                                                       16
<210>  3853
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3853
gaatactagt ccttct                                                       16
<210>  3854
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3854
ttgaatacta gtcctt                                                       16
<210>  3855
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3855
tcttgaatac tagtcc                                                       16
<210>  3856
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3856
gttcttgaat actagt                                                       16
<210>  3857
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3857
gggttcttga atacta                                                       16
<210>  3858
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3858
gtgggttctt gaatac                                                       16
<210>  3859
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3859
ctgtgggttc ttgaat                                                       16
<210>  3860
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3860
ttctgtgggt tcttga                                                       16
<210>  3861
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3861
aaatttctgt gggttc                                                       16
<210>  3862
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3862
agaaatttct gtgggt                                                       16
<210>  3863
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3863
tagagaaatt tctgtg                                                       16
<210>  3864
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3864
gatagagaaa tttctg                                                       16
<210>  3865
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3865
gcttggaaga tagaga                                                       16
<210>  3866
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3866
tggcttggaa gataga                                                       16
<210>  3867
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3867
cttggcttgg aagata                                                       16
<210>  3868
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3868
ctcttggctt ggaaga                                                       16
<210>  3869
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3869
tgctcttggc ttggaa                                                       16
<210>  3870
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3870
ttggtgctct tggctt                                                       16
<210>  3871
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3871
tcttggtgct cttggc                                                       16
<210>  3872
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3872
gttcttggtg ctcttg                                                       16
<210>  3873
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3873
tagttcttgg tgctct                                                       16
<210>  3874
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3874
agtagttctt ggtgct                                                       16
<210>  3875
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3875
ggagtagttc ttggtg                                                       16
<210>  3876
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3876
agggagtagt tcttgg                                                       16
<210>  3877
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3877
aaagggagta gttctt                                                       16
<210>  3878
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3878
agaaagggag tagttc                                                       16
<210>  3879
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3879
gaagaaaggg agtagt                                                       16
<210>  3880
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3880
ctgaagaaag ggagta                                                       16
<210>  3881
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3881
tcaactgaag aaaggg                                                       16
<210>  3882
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3882
tcattgaagt tttgtg                                                       16
<210>  3883
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3883
cgtttcattg aagttt                                                       16
<210>  3884
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3884
ttgtagttct cccacg                                                       16
<210>  3885
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3885
atttgtagtt ctccca                                                       16
<210>  3886
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3886
atatttgtag ttctcc                                                       16
<210>  3887
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3887
ccatatttgt agttct                                                       16
<210>  3888
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3888
aaccatattt gtagtt                                                       16
<210>  3889
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3889
ccaaaaccat atttgt                                                       16
<210>  3890
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3890
ctcccaaaac catatt                                                       16
<210>  3891
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3891
gcctcccaaa accata                                                       16
<210>  3892
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3892
aagcctccca aaacca                                                       16
<210>  3893
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3893
tcaagcctcc caaaac                                                       16
<210>  3894
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3894
tccatcaagc ctccca                                                       16
<210>  3895
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3895
tctccatcaa gcctcc                                                       16
<210>  3896
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3896
attctccatc aagcct                                                       16
<210>  3897
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3897
aaattctcca tcaagc                                                       16
<210>  3898
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3898
accaaaattc tccatc                                                       16
<210>  3899
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3899
caaccaaaat tctcca                                                       16
<210>  3900
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3900
cccaaccaaa attctc                                                       16
<210>  3901
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3901
ggcccaacca aaattc                                                       16
<210>  3902
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3902
taggcccaac caaaat                                                       16
<210>  3903
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3903
tctaggccca accaaa                                                       16
<210>  3904
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3904
tctctaggcc caacca                                                       16
<210>  3905
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3905
cttctctagg cccaac                                                       16
<210>  3906
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3906
atatcttctc taggcc                                                       16
<210>  3907
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3907
gtatatcttc tctagg                                                       16
<210>  3908
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3908
gagtatatct tctcta                                                       16
<210>  3909
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3909
tggagtatat cttctc                                                       16
<210>  3910
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3910
tatggagtat atcttc                                                       16
<210>  3911
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3911
actatggagt atatct                                                       16
<210>  3912
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3912
tcactatgga gtatat                                                       16
<210>  3913
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3913
cttcactatg gagtat                                                       16
<210>  3914
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3914
tgcttcacta tggagt                                                       16
<210>  3915
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3915
attgcttcac tatgga                                                       16
<210>  3916
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3916
agattgcttc actatg                                                       16
<210>  3917
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3917
ttagattgct tcacta                                                       16
<210>  3918
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3918
aattagattg cttcac                                                       16
<210>  3919
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3919
ataattagat tgcttc                                                       16
<210>  3920
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3920
acataattag attgct                                                       16
<210>  3921
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3921
cgtaaaacat aattag                                                       16
<210>  3922
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3922
cttccaactc aattcg                                                       16
<210>  3923
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3923
gtcttccaac tcaatt                                                       16
<210>  3924
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3924
cagtcttcca actcaa                                                       16
<210>  3925
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3925
tccagtcttc caactc                                                       16
<210>  3926
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3926
tttccagtct tccaac                                                       16
<210>  3927
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3927
gtctttccag tcttcc                                                       16
<210>  3928
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3928
ttgttgtctt tccagt                                                       16
<210>  3929
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3929
ataatgtttg ttgtct                                                       16
<210>  3930
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3930
cgtatagttg gtttcg                                                       16
<210>  3931
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3931
gcaactagat gtagcg                                                       16
<210>  3932
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3932
tcgcaactag atgtag                                                       16
<210>  3933
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3933
aatcgcaact agatgt                                                       16
<210>  3934
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3934
gtaatcgcaa ctagat                                                       16
<210>  3935
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3935
cagtaatcgc aactag                                                       16
<210>  3936
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3936
gccagtaatc gcaact                                                       16
<210>  3937
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3937
ttgccagtaa tcgcaa                                                       16
<210>  3938
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3938
cattgccagt aatcgc                                                       16
<210>  3939
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3939
gacattgcca gtaatc                                                       16
<210>  3940
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3940
gggacattgc cagtaa                                                       16
<210>  3941
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3941
tccgggattg cattgg                                                       16
<210>  3942
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3942
tttccgggat tgcatt                                                       16
<210>  3943
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3943
gttttccggg attgca                                                       16
<210>  3944
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3944
ttgttttccg ggattg                                                       16
<210>  3945
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3945
ctttgttttc cgggat                                                       16
<210>  3946
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3946
atctttgttt tccggg                                                       16
<210>  3947
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3947
aaatctttgt tttccg                                                       16
<210>  3948
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3948
acaccaaatc tttgtt                                                       16
<210>  3949
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3949
aaacaccaaa tctttg                                                       16
<210>  3950
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3950
caagtagaaa acacca                                                       16
<210>  3951
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3951
cccaagtaga aaacac                                                       16
<210>  3952
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3952
atcccaagta gaaaac                                                       16
<210>  3953
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3953
tgatcccaag tagaaa                                                       16
<210>  3954
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3954
tgtgatccca agtaga                                                       16
<210>  3955
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3955
ctgatcaaat atgttg                                                       16
<210>  3956
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3956
gactgatcaa atatgt                                                       16
<210>  3957
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3957
aagactgatc aaatat                                                       16
<210>  3958
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3958
cataaaaaga ctgatc                                                       16
<210>  3959
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3959
gatcataaaa agactg                                                       16
<210>  3960
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3960
tagatcataa aaagac                                                       16
<210>  3961
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3961
gatagatcat aaaaag                                                       16
<210>  3962
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3962
gcgatagatc ataaaa                                                       16
<210>  3963
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3963
cagcgataga tcataa                                                       16
<210>  3964
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3964
tttgcagcga tagatc                                                       16
<210>  3965
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3965
ggtttgcagc gataga                                                       16
<210>  3966
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3966
cactggtttg cagcga                                                       16
<210>  3967
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3967
ttcactggtt tgcagc                                                       16
<210>  3968
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3968
atttcactgg tttgca                                                       16
<210>  3969
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3969
tgatttcact ggtttg                                                       16
<210>  3970
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3970
tagttcttct cagttc                                                       16
<210>  3971
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3971
tgtagttctt ctcagt                                                       16
<210>  3972
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3972
tatgtagttc ttctca                                                       16
<210>  3973
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3973
tatatgtagt tcttct                                                       16
<210>  3974
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3974
gtttatatgt agttct                                                       16
<210>  3975
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3975
gtagtttata tgtagt                                                       16
<210>  3976
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3976
cttgtagttt atatgt                                                       16
<210>  3977
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3977
gacttgtagt ttatat                                                       16
<210>  3978
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3978
ttgacttgta gtttat                                                       16
<210>  3979
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3979
tttttgactt gtagtt                                                       16
<210>  3980
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3980
catttttgac ttgtag                                                       16
<210>  3981
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3981
cctcttcatt tttgac                                                       16
<210>  3982
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3982
gacatattct ttacct                                                       16
<210>  3983
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3983
gtgacatatt ctttac                                                       16
<210>  3984
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3984
ttcaagtgac atattc                                                       16
<210>  3985
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3985
agttcaagtg acatat                                                       16
<210>  3986
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3986
tgagttcaag tgacat                                                       16
<210>  3987
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3987
gttgagttca agtgac                                                       16
<210>  3988
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3988
gagttgagtt caagtg                                                       16
<210>  3989
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3989
ttgagttgag ttcaag                                                       16
<210>  3990
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3990
ttttgagttg agttca                                                       16
<210>  3991
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3991
agttttgagt tgagtt                                                       16
<210>  3992
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3992
caagttttga gttgag                                                       16
<210>  3993
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3993
ttcaagtttt gagttg                                                       16
<210>  3994
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3994
ctttcaagtt ttgagt                                                       16
<210>  3995
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3995
ggctttcaag ttttga                                                       16
<210>  3996
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3996
gaggctttca agtttt                                                       16
<210>  3997
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3997
aggaggcttt caagtt                                                       16
<210>  3998
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3998
ctaggaggct ttcaag                                                       16
<210>  3999
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  3999
ttctaggagg ctttca                                                       16
<210>  4000
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4000
tcttctagga ggcttt                                                       16
<210>  4001
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4001
tttcttctag gaggct                                                       16
<210>  4002
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4002
gttgaagtag aatttt                                                       16
<210>  4003
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4003
gttgctcttc taaata                                                       16
<210>  4004
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4004
tagttgctct tctaaa                                                       16
<210>  4005
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4005
gttagttgct cttcta                                                       16
<210>  4006
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4006
tagttagttg ctcttc                                                       16
<210>  4007
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4007
aagttagtta gttgct                                                       16
<210>  4008
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4008
ttaagttagt tagttg                                                       16
<210>  4009
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4009
aattaagtta gttagt                                                       16
<210>  4010
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4010
tgaattaagt tagtta                                                       16
<210>  4011
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4011
tttgaattaa gttagt                                                       16
<210>  4012
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4012
ggttgatttt gaatta                                                       16
<210>  4013
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4013
caggttgatt ttgaat                                                       16
<210>  4014
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4014
ttcaggttga ttttga                                                       16
<210>  4015
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4015
gtttcaggtt gatttt                                                       16
<210>  4016
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4016
gagtttcagg ttgatt                                                       16
<210>  4017
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4017
tggagtttca ggttga                                                       16
<210>  4018
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4018
ttctggagtt tcaggt                                                       16
<210>  4019
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4019
tgttctggag tttcag                                                       16
<210>  4020
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4020
ggtgttctgg agtttc                                                       16
<210>  4021
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4021
tgggtgttct ggagtt                                                       16
<210>  4022
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4022
tctgggtgtt ctggag                                                       16
<210>  4023
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4023
cttctgggtg ttctgg                                                       16
<210>  4024
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4024
tacttctggg tgttct                                                       16
<210>  4025
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4025
gttacttctg ggtgtt                                                       16
<210>  4026
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4026
aagttacttc tgggtg                                                       16
<210>  4027
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4027
ccatcatgtt ttacat                                                       16
<210>  4028
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4028
tgccatcatg ttttac                                                       16
<210>  4029
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4029
gaatgccatc atgttt                                                       16
<210>  4030
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4030
aggaatgcca tcatgt                                                       16
<210>  4031
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4031
gcaggaatgc catcat                                                       16
<210>  4032
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4032
cagcaggaat gccatc                                                       16
<210>  4033
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4033
ttcagcagga atgcca                                                       16
<210>  4034
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4034
cattcagcag gaatgc                                                       16
<210>  4035
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4035
tacattcagc aggaat                                                       16
<210>  4036
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4036
ggtacattca gcagga                                                       16
<210>  4037
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4037
gtggtacatt cagcag                                                       16
<210>  4038
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4038
tggtggtaca ttcagc                                                       16
<210>  4039
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4039
tataaatggt ggtaca                                                       16
<210>  4040
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4040
gttataaatg gtggta                                                       16
<210>  4041
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4041
ctgttataaa tggtgg                                                       16
<210>  4042
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4042
ctctgttata aatggt                                                       16
<210>  4043
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4043
acctctgtta taaatg                                                       16
<210>  4044
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4044
tcacctctgt tataaa                                                       16
<210>  4045
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4045
gttcacctct gttata                                                       16
<210>  4046
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4046
atgttcacct ctgtta                                                       16
<210>  4047
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4047
ttgtatgttc acctct                                                       16
<210>  4048
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4048
acttgtatgt tcacct                                                       16
<210>  4049
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4049
ccacttgtat gttcac                                                       16
<210>  4050
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4050
tgccacttgt atgttc                                                       16
<210>  4051
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4051
catgccactt gtatgt                                                       16
<210>  4052
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4052
tacatgccac ttgtat                                                       16
<210>  4053
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4053
catacatgcc acttgt                                                       16
<210>  4054
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4054
ggcatacatg ccactt                                                       16
<210>  4055
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4055
atggcataca tgccac                                                       16
<210>  4056
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4056
tgatggcata catgcc                                                       16
<210>  4057
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4057
tctgatggca tacatg                                                       16
<210>  4058
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4058
ggtctgatgg cataca                                                       16
<210>  4059
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4059
tgggtctgat ggcata                                                       16
<210>  4060
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4060
gttgctgggt ctgatg                                                       16
<210>  4061
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4061
gagagttgct gggtct                                                       16
<210>  4062
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4062
ttgagagttg ctgggt                                                       16
<210>  4063
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4063
acttgagagt tgctgg                                                       16
<210>  4064
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4064
aaaaacttga gagttg                                                       16
<210>  4065
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4065
tgaaaaactt gagagt                                                       16
<210>  4066
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4066
catgaaaaac ttgaga                                                       16
<210>  4067
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4067
gacatgaaaa acttga                                                       16
<210>  4068
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4068
tcacagtaga catgaa                                                       16
<210>  4069
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4069
catcacagta gacatg                                                       16
<210>  4070
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4070
aacatcacag tagaca                                                       16
<210>  4071
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4071
ataacatcac agtaga                                                       16
<210>  4072
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4072
atataacatc acagta                                                       16
<210>  4073
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4073
tgatataaca tcacag                                                       16
<210>  4074
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4074
cctgatataa catcac                                                       16
<210>  4075
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4075
tacctgatat aacatc                                                       16
<210>  4076
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4076
actacctgat ataaca                                                       16
<210>  4077
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4077
ggactacctg atataa                                                       16
<210>  4078
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4078
atggactacc tgatat                                                       16
<210>  4079
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4079
ccatggacta cctgat                                                       16
<210>  4080
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4080
atgtccatgg actacc                                                       16
<210>  4081
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4081
taatgtccat ggacta                                                       16
<210>  4082
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4082
attaatgtcc atggac                                                       16
<210>  4083
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4083
gaattaatgt ccatgg                                                       16
<210>  4084
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4084
ttgaattaat gtccat                                                       16
<210>  4085
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4085
tgttgaatta atgtcc                                                       16
<210>  4086
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4086
gatgttgaat taatgt                                                       16
<210>  4087
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4087
tcgatgttga attaat                                                       16
<210>  4088
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4088
attcgatgtt gaatta                                                       16
<210>  4089
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4089
ctattcgatg ttgaat                                                       16
<210>  4090
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4090
atctattcga tgttga                                                       16
<210>  4091
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4091
atccatctat tcgatg                                                       16
<210>  4092
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4092
tgatccatct attcga                                                       16
<210>  4093
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4093
tgtgatccat ctattc                                                       16
<210>  4094
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4094
tttgtgatcc atctat                                                       16
<210>  4095
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4095
gttttgtgat ccatct                                                       16
<210>  4096
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4096
aagttttgtg atccat                                                       16
<210>  4097
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4097
tgaagttttg tgatcc                                                       16
<210>  4098
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4098
attgaagttt tgtgat                                                       16
<210>  4099
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4099
caacattttg gttgat                                                       16
<210>  4100
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4100
gatcaacatt ttggtt                                                       16
<210>  4101
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4101
gatggatcaa catttt                                                       16
<210>  4102
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4102
gttggatgga tcaaca                                                       16
<210>  4103
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4103
ctgttggatg gatcaa                                                       16
<210>  4104
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4104
atctgttgga tggatc                                                       16
<210>  4105
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4105
ctgaatctgt tggatg                                                       16
<210>  4106
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4106
caaagctttc tgaatc                                                       16
<210>  4107
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4107
ctcagttcat tcaaag                                                       16
<210>  4108
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4108
gcctcagttc attcaa                                                       16
<210>  4109
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4109
ttgcctcagt tcattc                                                       16
<210>  4110
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4110
atttgcctca gttcat                                                       16
<210>  4111
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4111
aaatttgcct cagttc                                                       16
<210>  4112
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4112
tttaaatttg cctcag                                                       16
<210>  4113
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4113
cttttaaatt tgcctc                                                       16
<210>  4114
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4114
gccttttaaa tttgcc                                                       16
<210>  4115
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4115
gtttaaatta ttgcct                                                       16
<210>  4116
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4116
atgaggttaa tgttta                                                       16
<210>  4117
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4117
gaatgaggtt aatgtt                                                       16
<210>  4118
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4118
tggaatgagg ttaatg                                                       16
<210>  4119
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4119
cttggaatga ggttaa                                                       16
<210>  4120
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4120
aacttggaat gaggtt                                                       16
<210>  4121
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4121
cattaacttg gaatga                                                       16
<210>  4122
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4122
cacattaact tggaat                                                       16
<210>  4123
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4123
accacattaa cttgga                                                       16
<210>  4124
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4124
ttagaccaca ttaact                                                       16
<210>  4125
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4125
tattagacca cattaa                                                       16
<210>  4126
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4126
attattagac cacatt                                                       16
<210>  4127
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4127
taccagatta ttagac                                                       16
<210>  4128
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4128
aataccagat tattag                                                       16
<210>  4129
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4129
ttaataccag attatt                                                       16
<210>  4130
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4130
atttaatacc agatta                                                       16
<210>  4131
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4131
ggatttaata ccagat                                                       16
<210>  4132
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4132
aaggatttaa taccag                                                       16
<210>  4133
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4133
ttaaggattt aatacc                                                       16
<210>  4134
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4134
ctcttaagga tttaat                                                       16
<210>  4135
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4135
ttctcttaag gattta                                                       16
<210>  4136
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4136
gctttctctt aaggat                                                       16
<210>  4137
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4137
aagctttctc ttaagg                                                       16
<210>  4138
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4138
tcaagctttc tcttaa                                                       16
<210>  4139
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4139
agtgacttta agataa                                                       16
<210>  4140
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4140
acagtgactt taagat                                                       16
<210>  4141
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4141
agacagtgac tttaag                                                       16
<210>  4142
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4142
aaatagacag tgactt                                                       16
<210>  4143
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4143
ttaaatagac agtgac                                                       16
<210>  4144
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4144
tcttaaatag acagtg                                                       16
<210>  4145
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4145
aatcttaaat agacag                                                       16
<210>  4146
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4146
ttaatcttaa atagac                                                       16
<210>  4147
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4147
gtttaatctt aaatag                                                       16
<210>  4148
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4148
gtatgtttaa tcttaa                                                       16
<210>  4149
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4149
attgtatgtt taatct                                                       16
<210>  4150
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4150
gtgattgtat gtttaa                                                       16
<210>  4151
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4151
tatgtgattg tatgtt                                                       16
<210>  4152
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4152
gttatgtgat tgtatg                                                       16
<210>  4153
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4153
aggttatgtg attgta                                                       16
<210>  4154
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4154
taaggttatg tgattg                                                       16
<210>  4155
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4155
tttaaggtta tgtgat                                                       16
<210>  4156
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4156
tctttaaggt tatgtg                                                       16
<210>  4157
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4157
attctttaag gttatg                                                       16
<210>  4158
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4158
gtattcttta aggtta                                                       16
<210>  4159
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4159
cggtattctt taaggt                                                       16
<210>  4160
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4160
aacggtattc tttaag                                                       16
<210>  4161
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4161
taaacggtat tcttta                                                       16
<210>  4162
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4162
tgtaaacggt attctt                                                       16
<210>  4163
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4163
aatgtaaacg gtattc                                                       16
<210>  4164
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4164
tctggaagca gaccta                                                       16
<210>  4165
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4165
cttctggaag cagacc                                                       16
<210>  4166
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4166
aaataaggta tagtga                                                       16
<210>  4167
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4167
tagtattaag tgttaa                                                       16
<210>  4168
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4168
tcatagtatt aagtgt                                                       16
<210>  4169
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4169
agattccttt acaatt                                                       16
<210>  4170
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4170
acaagattcc tttaca                                                       16
<210>  4171
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4171
ctgacaagat tccttt                                                       16
<210>  4172
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4172
tgtaatctga caagat                                                       16
<210>  4173
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4173
tactgtaatc tgacaa                                                       16
<210>  4174
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4174
tcttactgta atctga                                                       16
<210>  4175
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4175
cattcttact gtaatc                                                       16
<210>  4176
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4176
gttcattctt actgta                                                       16
<210>  4177
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4177
atatgttcat tcttac                                                       16
<210>  4178
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4178
gccacaaata tgttca                                                       16
<210>  4179
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4179
gatgccacaa atatgt                                                       16
<210>  4180
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4180
ctttaactcg atgcca                                                       16
<210>  4181
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4181
aaactttaac tcgatg                                                       16
<210>  4182
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4182
tataaacttt aactcg                                                       16
<210>  4183
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4183
cacagcatat ttaggg                                                       16
<210>  4184
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4184
tagaatcaca gcatat                                                       16
<210>  4185
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4185
tattagaatc acagca                                                       16
<210>  4186
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4186
aatgtattag aatcac                                                       16
<210>  4187
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4187
acgaatgtat tagaat                                                       16
<210>  4188
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4188
tacacgaatg tattag                                                       16
<210>  4189
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4189
acctacacga atgtat                                                       16
<210>  4190
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4190
aaaacctaca cgaatg                                                       16
<210>  4191
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4191
ttgaaaacct acacga                                                       16
<210>  4192
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4192
tacttgaaaa cctaca                                                       16
<210>  4193
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4193
gtttatttct acttga                                                       16
<210>  4194
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4194
gaggtttatt tctact                                                       16
<210>  4195
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4195
tacgaggttt atttct                                                       16
<210>  4196
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4196
tgttacgagg tttatt                                                       16
<210>  4197
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4197
acttgttacg aggttt                                                       16
<210>  4198
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4198
cagtaacttg ttacga                                                       16
<210>  4199
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4199
gttcagtaac ttgtta                                                       16
<210>  4200
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4200
tcaggctgtt taaacg                                                       16
<210>  4201
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4201
ttgtcaggct gtttaa                                                       16
<210>  4202
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4202
tatacatgct tgtcag                                                       16
<210>  4203
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4203
gtctttgttt attgaa                                                       16
<210>  4204
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4204
tgggtctttg tttatt                                                       16
<210>  4205
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4205
gactgggtct ttgttt                                                       16
<210>  4206
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4206
ataatttagg gactgg                                                       16
<210>  4207
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4207
tctataattt agggac                                                       16
<210>  4208
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4208
cgataaacat gcaaga                                                       16
<210>  4209
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4209
tgtcgataaa catgca                                                       16
<210>  4210
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4210
tgatgtcgat aaacat                                                       16
<210>  4211
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4211
ttgtgatgtc gataaa                                                       16
<210>  4212
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4212
ctgttgtgat gtcgat                                                       16
<210>  4213
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4213
gatctgttgt gatgtc                                                       16
<210>  4214
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4214
agggatctgt tgtgat                                                       16
<210>  4215
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4215
tttagggatc tgttgt                                                       16
<210>  4216
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4216
ggatttaggg atctgt                                                       16
<210>  4217
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4217
gatttaggga tttagg                                                       16
<210>  4218
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4218
tctttaggga tttagg                                                       16
<210>  4219
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4219
taatctttag ggattt                                                       16
<210>  4220
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4220
atctaatctt taggga                                                       16
<210>  4221
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4221
tgtatctaat ctttag                                                       16
<210>  4222
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4222
aaatttgtat ctaatc                                                       16
<210>  4223
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4223
gtaaaaaatt tgtatc                                                       16
<210>  4224
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4224
gtggtaaaaa atttgt                                                       16
<210>  4225
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4225
gatactgtgg taaaaa                                                       16
<210>  4226
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4226
agtgatactg tggtaa                                                       16
<210>  4227
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4227
acaagtgata ctgtgg                                                       16
<210>  4228
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4228
ctgacaagtg atactg                                                       16
<210>  4229
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4229
attctgacaa gtgata                                                       16
<210>  4230
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4230
taaattctga caagtg                                                       16
<210>  4231
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4231
tactggcagt tttaaa                                                       16
<210>  4232
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4232
tcttactggc agtttt                                                       16
<210>  4233
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4233
atttcttact ggcagt                                                       16
<210>  4234
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4234
aaaatttctt actggc                                                       16
<210>  4235
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4235
aacaaatggg tttaat                                                       16
<210>  4236
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4236
gaatatttgc aagtct                                                       16
<210>  4237
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4237
tcattggtag aggaat                                                       16
<210>  4238
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4238
atattttaaa gtctcg                                                       16
<210>  4239
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4239
gttacattat tataga                                                       16
<210>  4240
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4240
gtgaaatgtg ttacat                                                       16
<210>  4241
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4241
tcaccagtga aatgtg                                                       16
<210>  4242
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4242
catgtttcac cagtga                                                       16
<210>  4243
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4243
acaagacatg tttcac                                                       16
<210>  4244
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4244
catatgacaa gacatg                                                       16
<210>  4245
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4245
ctataatgca tatgac                                                       16
<210>  4246
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4246
tcctttctat aatgca                                                       16
<210>  4247
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4247
tgattatcct ttctat                                                       16
<210>  4248
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4248
taactgaaag tctgat                                                       16
<210>  4249
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4249
gtgcacaaaa atgtta                                                       16
<210>  4250
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4250
agctatgtgc acaaaa                                                       16
<210>  4251
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4251
gaagatagct atgtgc                                                       16
<210>  4252
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4252
tttattgaag atagct                                                       16
<210>  4253
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4253
tcattttagt gtatct                                                       16
<210>  4254
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4254
ccttgatcat tttagt                                                       16
<210>  4255
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4255
tgaatccctt gatcat                                                       16
<210>  4256
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4256
gttgtttagt cttgaa                                                       16
<210>  4257
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4257
aattgagttg tttagt                                                       16
<210>  4258
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4258
gcaactaatt gagttg                                                       16
<210>  4259
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4259
attggtgcaa ctaatt                                                       16
<210>  4260
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4260
gttttttatt ggtgca                                                       16
<210>  4261
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4261
ggacactgac agtttt                                                       16
<210>  4262
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4262
caggttggac actgac                                                       16
<210>  4263
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4263
taagtacagg ttggac                                                       16
<210>  4264
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4264
agttattaag tacagg                                                       16
<210>  4265
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4265
tctgtgagtt attaag                                                       16
<210>  4266
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4266
accaaaattc tcctga                                                       16
<210>  4267
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4267
acctgaataa ccctct                                                       16
<210>  4268
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4268
ggtatcagaa aaagat                                                       16
<210>  4269
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4269
agtattggta tcagaa                                                       16
<210>  4270
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4270
ggaagatact ttgaag                                                       16
<210>  4271
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4271
aatgtgggaa gatact                                                       16
<210>  4272
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4272
cagataatag ctaata                                                       16
<210>  4273
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4273
tcattgcaga taatag                                                       16
<210>  4274
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4274
gattcggatt tttaaa                                                       16
<210>  4275
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4275
atttgggatt cggatt                                                       16
<210>  4276
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4276
acgcttattt gggatt                                                       16
<210>  4277
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4277
tctagagaga aaacgc                                                       16
<210>  4278
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4278
agttaagagg ttttcg                                                       16
<210>  4279
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4279
cattatagtt aagagg                                                       16
<210>  4280
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4280
cactttcatt atagtt                                                       16
<210>  4281
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4281
tagaatgaac actttc                                                       16
<210>  4282
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4282
ttgaactaga atgaac                                                       16
<210>  4283
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4283
acctgattga actaga                                                       16
<210>  4284
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4284
taaaatacct gattga                                                       16
<210>  4285
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4285
tagaggtaaa atacct                                                       16
<210>  4286
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4286
gaagattaga ggtaaa                                                       16
<210>  4287
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4287
tctgaggaag attaga                                                       16
<210>  4288
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4288
tatacactac caaaaa                                                       16
<210>  4289
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4289
ataatctata cactac                                                       16
<210>  4290
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4290
taagtcccaa ttttaa                                                       16
<210>  4291
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4291
ccagttttaa ataatc                                                       16
<210>  4292
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4292
tgtatcccag ttttaa                                                       16
<210>  4293
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4293
gttttagatg catgta                                                       16
<210>  4294
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4294
tacagtgttt tagatg                                                       16
<210>  4295
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4295
ttccccgtaa gtttat                                                       16
<210>  4296
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4296
ctgtatttcc ccgtaa                                                       16
<210>  4297
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4297
tagttactgt tactgt                                                       16
<210>  4298
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4298
cgtatgtagt tactgt                                                       16
<210>  4299
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4299
aatgggtaca gactcg                                                       16
<210>  4300
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4300
gcaatttaat gggtac                                                       16
<210>  4301
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4301
gatagatatg caattt                                                       16
<210>  4302
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4302
aaaggagata gatatg                                                       16
<210>  4303
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4303
cctcctaaag gagata                                                       16
<210>  4304
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4304
caccagcctc ctaaag                                                       16
<210>  4305
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4305
tttgtgatcc caagta                                                       16
<210>  4306
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4306
gctttgtgat cccaag                                                       16
<210>  4307
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4307
ttgctttgtg atccca                                                       16
<210>  4308
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4308
ttttgctttg tgatcc                                                       16
<210>  4309
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4309
ccttttgctt tgtgat                                                       16
<210>  4310
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4310
gtccttttgc tttgtg                                                       16
<210>  4311
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4311
gtgtcctttt gctttg                                                       16
<210>  4312
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4312
gaagtgtcct tttgct                                                       16
<210>  4313
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4313
ttgaagtgtc cttttg                                                       16
<210>  4314
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4314
agttgaagtg tccttt                                                       16
<210>  4315
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4315
acagttgaag tgtcct                                                       16
<210>  4316
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4316
ggacagttga agtgtc                                                       16
<210>  4317
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4317
ctggacagtt gaagtg                                                       16
<210>  4318
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4318
ctctggacag ttgaag                                                       16
<210>  4319
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4319
ccctctggac agttga                                                       16
<210>  4320
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4320
aaccctctgg acagtt                                                       16
<210>  4321
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4321
ataaccctct ggacag                                                       16
<210>  4322
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4322
gaataaccct ctggac                                                       16
<210>  4323
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4323
ctgaataacc ctctgg                                                       16
<210>  4324
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4324
tcctgaataa ccctct                                                       16
<210>  4325
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4325
cctcctgaat aaccct                                                       16
<210>  4326
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4326
accaccagcc tcctga                                                       16
<210>  4327
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4327
atgccaccac cagcct                                                       16
<210>  4328
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4328
tcatgccacc accagc                                                       16
<210>  4329
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4329
catcatgcca ccacca                                                       16
<210>  4330
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4330
cactcatcat gccacc                                                       16
<210>  4331
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4331
tccacactca tcatgc                                                       16
<210>  4332
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4332
tctccacact catcat                                                       16
<210>  4333
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4333
tttctccaca ctcatc                                                       16
<210>  4334
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4334
gttttctcca cactca                                                       16
<210>  4335
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4335
gttgttttct ccacac                                                       16
<210>  4336
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4336
aggttgtttt ctccac                                                       16
<210>  4337
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4337
ttaggttgtt ttctcc                                                       16
<210>  4338
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4338
taccatttag gttgtt                                                       16
<210>  4339
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4339
tttaccattt aggttg                                                       16
<210>  4340
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4340
tatttaccat ttaggt                                                       16
<210>  4341
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4341
ttgttatatt taccat                                                       16
<210>  4342
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4342
gtttgttata tttacc                                                       16
<210>  4343
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4343
cttggtttgt tatatt                                                       16
<210>  4344
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4344
ctcttggttt gttata                                                       16
<210>  4345
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4345
tgctcttggt ttgtta                                                       16
<210>  4346
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4346
tttgctcttg gtttgt                                                       16
<210>  4347
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4347
gattttgctc ttggtt                                                       16
<210>  4348
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4348
cttagatttt gctctt                                                       16
<210>  4349
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4349
ggcttagatt ttgctc                                                       16
<210>  4350
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4350
ctggcttaga ttttgc                                                       16
<210>  4351
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4351
ctctggctta gatttt                                                       16
<210>  4352
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4352
ctctctggct tagatt                                                       16
<210>  4353
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4353
tcctctctgg cttaga                                                       16
<210>  4354
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4354
tctcctctct ggctta                                                       16
<210>  4355
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4355
taatcctctt ctcctc                                                       16
<210>  4356
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4356
gataatcctc ttctcc                                                       16
<210>  4357
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4357
aagataatcc tcttct                                                       16
<210>  4358
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4358
ccaagataat cctctt                                                       16
<210>  4359
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4359
ttccaagata atcctc                                                       16
<210>  4360
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4360
acttccaaga taatcc                                                       16
<210>  4361
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4361
agacttccaa gataat                                                       16
<210>  4362
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4362
tgagacttcc aagata                                                       16
<210>  4363
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4363
tttgagactt ccaaga                                                       16
<210>  4364
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4364
attttgagac ttccaa                                                       16
<210>  4365
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4365
ttccattttg agactt                                                       16
<210>  4366
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4366
ccttccattt tgagac                                                       16
<210>  4367
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4367
aaccttccat tttgag                                                       16
<210>  4368
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4368
ataaccttcc attttg                                                       16
<210>  4369
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4369
gtataacctt ccattt                                                       16
<210>  4370
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4370
gagtataacc ttccat                                                       16
<210>  4371
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4371
tatagagtat aacctt                                                       16
<210>  4372
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4372
tttatagagt ataacc                                                       16
<210>  4373
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4373
gattttatag agtata                                                       16
<210>  4374
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4374
ttgattttat agagta                                                       16
<210>  4375
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4375
ggttgatttt atagag                                                       16
<210>  4376
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4376
ttggttgatt ttatag                                                       16
<210>  4377
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4377
taatgtttaa attattgcct                                                   20
<210>  4378
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4378
ggttaatgtt taaattattg                                                   20
<210>  4379
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4379
aggttaatgt ttaaattatt                                                   20
<210>  4380
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4380
gaggttaatg tttaaattat                                                   20
<210>  4381
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4381
tgaggttaat gtttaaatta                                                   20
<210>  4382
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4382
aatgaggtta atgtttaaat                                                   20
<210>  4383
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4383
gaatgaggtt aatgtttaaa                                                   20
<210>  4384
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4384
ggaatgaggt taatgtttaa                                                   20
<210>  4385
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4385
tggaatgagg ttaatgttta                                                   20
<210>  4386
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4386
ttggaatgag gttaatgttt                                                   20
<210>  4387
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4387
cttggaatga ggttaatgtt                                                   20
<210>  4388
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4388
taacttggaa tgaggttaat                                                   20
<210>  4389
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4389
ttaacttgga atgaggttaa                                                   20
<210>  4390
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4390
attaacttgg aatgaggtta                                                   20
<210>  4391
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4391
cattaacttg gaatgaggtt                                                   20
<210>  4392
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4392
acattaactt ggaatgaggt                                                   20
<210>  4393
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4393
accacattaa cttggaatga                                                   20
<210>  4394
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4394
gaccacatta acttggaatg                                                   20
<210>  4395
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4395
agaccacatt aacttggaat                                                   20
<210>  4396
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4396
tagaccacat taacttggaa                                                   20
<210>  4397
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4397
ttagaccaca ttaacttgga                                                   20
<210>  4398
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4398
attagaccac attaacttgg                                                   20
<210>  4399
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4399
tattagacca cattaacttg                                                   20
<210>  4400
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4400
ttattagacc acattaactt                                                   20
<210>  4401
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4401
attattagac cacattaact                                                   20
<210>  4402
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4402
gattattaga ccacattaac                                                   20
<210>  4403
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4403
aataccagat tattagacca                                                   20
<210>  4404
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4404
taataccaga ttattagacc                                                   20
<210>  4405
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4405
tttaatacca gattattaga                                                   20
<210>  4406
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4406
atttaatacc agattattag                                                   20
<210>  4407
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4407
gatttaatac cagattatta                                                   20
<210>  4408
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4408
taaggattta ataccagatt                                                   20
<210>  4409
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4409
tttctcttaa ggatttaata                                                   20
<210>  4410
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4410
ctttctctta aggatttaat                                                   20
<210>  4411
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4411
agctttctct taaggattta                                                   20
<210>  4412
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4412
aagctttctc ttaaggattt                                                   20
<210>  4413
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4413
tcaagctttc tcttaaggat                                                   20
<210>  4414
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4414
ttctcaagct ttctcttaag                                                   20
<210>  4415
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4415
tttctcaagc tttctcttaa                                                   20
<210>  4416
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4416
tctatttctc aagctttctc                                                   20
<210>  4417
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4417
atctatttct caagctttct                                                   20
<210>  4418
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4418
aatctatttc tcaagctttc                                                   20
<210>  4419
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4419
aaatctattt ctcaagcttt                                                   20
<210>  4420
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4420
aaaatctatt tctcaagctt                                                   20
<210>  4421
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4421
gataaaaaaa atctatttct                                                   20
<210>  4422
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4422
tagacagtga ctttaagata                                                   20
<210>  4423
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4423
atagacagtg actttaagat                                                   20
<210>  4424
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4424
aatagacagt gactttaaga                                                   20
<210>  4425
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4425
aaatagacag tgactttaag                                                   20
<210>  4426
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4426
taaatagaca gtgactttaa                                                   20
<210>  4427
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4427
ttaaatagac agtgacttta                                                   20
<210>  4428
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4428
cttaaataga cagtgacttt                                                   20
<210>  4429
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4429
tcttaaatag acagtgactt                                                   20
<210>  4430
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4430
atcttaaata gacagtgact                                                   20
<210>  4431
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4431
aatcttaaat agacagtgac                                                   20
<210>  4432
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4432
taatcttaaa tagacagtga                                                   20
<210>  4433
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4433
ttaatcttaa atagacagtg                                                   20
<210>  4434
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4434
tttaatctta aatagacagt                                                   20
<210>  4435
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4435
gtttaatctt aaatagacag                                                   20
<210>  4436
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4436
tgtttaatct taaatagaca                                                   20
<210>  4437
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4437
atgtttaatc ttaaatagac                                                   20
<210>  4438
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4438
ttgtatgttt aatcttaaat                                                   20
<210>  4439
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4439
attgtatgtt taatcttaaa                                                   20
<210>  4440
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4440
gattgtatgt ttaatcttaa                                                   20
<210>  4441
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4441
tgattgtatg tttaatctta                                                   20
<210>  4442
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4442
tatgtgattg tatgtttaat                                                   20
<210>  4443
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4443
gttatgtgat tgtatgttta                                                   20
<210>  4444
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4444
taaggttatg tgattgtatg                                                   20
<210>  4445
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4445
ttaaggttat gtgattgtat                                                   20
<210>  4446
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4446
ttctttaagg ttatgtgatt                                                   20
<210>  4447
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4447
gaaatgtaaa cggtat                                                       16
<210>  4448
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4448
ttgagaaatg taaacg                                                       16
<210>  4449
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4449
tgattgagaa atgtaa                                                       16
<210>  4450
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4450
tttgattgag aaatgt                                                       16
<210>  4451
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4451
aagaattttg attgag                                                       16
<210>  4452
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4452
ataagaattt tgattg                                                       16
<210>  4453
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4453
caaatagtat tataag                                                       16
<210>  4454
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4454
cccacatcac aaaatt                                                       16
<210>  4455
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4455
gattcccaca tcacaa                                                       16
<210>  4456
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4456
ttgattccca catcac                                                       16
<210>  4457
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4457
aattgattcc cacatc                                                       16
<210>  4458
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4458
aaaattgatt cccaca                                                       16
<210>  4459
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4459
ctaaaattga ttccca                                                       16
<210>  4460
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4460
catctaaaat tgattc                                                       16
<210>  4461
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4461
accatctaaa attgat                                                       16
<210>  4462
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4462
tgaccatcta aaattg                                                       16
<210>  4463
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4463
tgtgaccatc taaaat                                                       16
<210>  4464
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4464
attgtgacca tctaaa                                                       16
<210>  4465
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4465
agattgtgac catcta                                                       16
<210>  4466
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4466
ctagattgtg accatc                                                       16
<210>  4467
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4467
atctagattg tgacca                                                       16
<210>  4468
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4468
taatctagat tgtgac                                                       16
<210>  4469
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4469
tataatctag attgtg                                                       16
<210>  4470
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4470
attataatct agattg                                                       16
<210>  4471
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4471
tgattataat ctagat                                                       16
<210>  4472
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4472
attgattata atctag                                                       16
<210>  4473
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4473
ctattgatta taatct                                                       16
<210>  4474
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4474
acctattgat tataat                                                       16
<210>  4475
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4475
tcacctattg attata                                                       16
<210>  4476
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4476
gttcacctat tgatta                                                       16
<210>  4477
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4477
aagttcacct attgat                                                       16
<210>  4478
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4478
ataagttcac ctattg                                                       16
<210>  4479
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4479
taataagttc acctat                                                       16
<210>  4480
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4480
tttaataagt tcacct                                                       16
<210>  4481
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4481
tatttaataa gttcac                                                       16
<210>  4482
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4482
gttatttaat aagttc                                                       16
<210>  4483
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4483
catatgatgc ctttta                                                       16
<210>  4484
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4484
tattagctca tatgat                                                       16
<210>  4485
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4485
gatattagct catatg                                                       16
<210>  4486
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4486
gtgatattag ctcata                                                       16
<210>  4487
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4487
agttgtgata ttagct                                                       16
<210>  4488
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4488
aaagttgtga tattag                                                       16
<210>  4489
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4489
ggaaagttgt gatatt                                                       16
<210>  4490
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4490
tgggaaagtt gtgata                                                       16
<210>  4491
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4491
aaactgggaa agttgt                                                       16
<210>  4492
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4492
ttaaactggg aaagtt                                                       16
<210>  4493
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4493
gttttttaaa ctggga                                                       16
<210>  4494
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4494
tagtttttta aactgg                                                       16
<210>  4495
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4495
gagtactagt ttttta                                                       16
<210>  4496
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4496
aagagtacta gttttt                                                       16
<210>  4497
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4497
acaagagtac tagttt                                                       16
<210>  4498
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4498
taacaagagt actagt                                                       16
<210>  4499
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4499
tttaacaaga gtacta                                                       16
<210>  4500
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4500
gttttaacaa gagtac                                                       16
<210>  4501
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4501
gagttttaac aagagt                                                       16
<210>  4502
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4502
tagagtttta acaaga                                                       16
<210>  4503
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4503
gtttagagtt ttaaca                                                       16
<210>  4504
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4504
caagtttaga gtttta                                                       16
<210>  4505
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4505
gtcaagttta gagttt                                                       16
<210>  4506
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4506
tagtcaagtt tagagt                                                       16
<210>  4507
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4507
tttagtcaag tttaga                                                       16
<210>  4508
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4508
tatttagtca agttta                                                       16
<210>  4509
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4509
tgtatttagt caagtt                                                       16
<210>  4510
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4510
tctgtattta gtcaag                                                       16
<210>  4511
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4511
cctctgtatt tagtca                                                       16
<210>  4512
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4512
gtcctctgta tttagt                                                       16
<210>  4513
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4513
cagtcctctg tattta                                                       16
<210>  4514
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4514
accagtcctc tgtatt                                                       16
<210>  4515
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4515
ttaccagtcc tctgta                                                       16
<210>  4516
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4516
aattaccagt cctctg                                                       16
<210>  4517
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4517
acaattacca gtcctc                                                       16
<210>  4518
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4518
gcaaattttc agtgtt                                                       16
<210>  4519
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4519
cgatttgtaa ttttca                                                       16
<210>  4520
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4520
tttaaccgat ttgtaa                                                       16
<210>  4521
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4521
gtataattta accgat                                                       16
<210>  4522
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4522
ctagattgta taattt                                                       16
<210>  4523
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4523
agtgttctag attgta                                                       16
<210>  4524
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4524
tgacatagtg ttctag                                                       16
<210>  4525
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4525
gtgtaatgac atagtg                                                       16
<210>  4526
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4526
acaatagtgt aatgac                                                       16
<210>  4527
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4527
gtaatttaca atagtg                                                       16
<210>  4528
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4528
ccttcagtaa tttaca                                                       16
<210>  4529
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4529
tacttacctt cagtaa                                                       16
<210>  4530
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4530
ctggagaata gtttta                                                       16
<210>  4531
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4531
ttaaacactg gagaat                                                       16
<210>  4532
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4532
gcccagcata ttttca                                                       16
<210>  4533
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4533
gaaaaagccc agcata                                                       16
<210>  4534
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4534
gattttctga acttca                                                       16
<210>  4535
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4535
gtactatctc taaaat                                                       16
<210>  4536
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4536
taaattgtac tatctc                                                       16
<210>  4537
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4537
cacatatttt tgtcct                                                       16
<210>  4538
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4538
ctttcaaata gcacat                                                       16
<210>  4539
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4539
gtatgcttct ttcaaa                                                       16
<210>  4540
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4540
ccccttgtat gcttct                                                       16
<210>  4541
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4541
ttccttcccc ttgtat                                                       16
<210>  4542
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4542
tggcaattcc ttcccc                                                       16
<210>  4543
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4543
gaatattggc aattcc                                                       16
<210>  4544
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4544
ctaataatgg atttga                                                       16
<210>  4545
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4545
ctatcataat ctaaat                                                       16
<210>  4546
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4546
gtaacactat cataat                                                       16
<210>  4547
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4547
aatttcctgt aacact                                                       16
<210>  4548
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4548
aagttgcttt cctctt                                                       16
<210>  4549
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4549
ggttataagt tgcttt                                                       16
<210>  4550
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4550
taggttggtt ataagt                                                       16
<210>  4551
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4551
agagagtagg ttggtt                                                       16
<210>  4552
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4552
ggatatagag agtagg                                                       16
<210>  4553
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4553
aagtctggat atagag                                                       16
<210>  4554
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4554
ctacaaaagt ctggat                                                       16
<210>  4555
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4555
cttacctgat tttcta                                                       16
<210>  4556
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4556
tactgactta cctgat                                                       16
<210>  4557
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4557
ccattaaaat actgac                                                       16
<210>  4558
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4558
ggacatacca ttaaaa                                                       16
<210>  4559
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4559
aagatgggac atacca                                                       16
<210>  4560
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4560
gtgtgaaaga tgggac                                                       16
<210>  4561
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4561
agacctgtgt gaaaga                                                       16
<210>  4562
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4562
ttttacagac ctgtgt                                                       16
<210>  4563
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4563
cagtgttttt acagac                                                       16
<210>  4564
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4564
taggattcag tgtttt                                                       16
<210>  4565
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4565
gttaaagctt gtaaat                                                       16
<210>  4566
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4566
gatccagtta aagctt                                                       16
<210>  4567
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4567
actcatgatc cagtta                                                       16
<210>  4568
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4568
aattttactc atgatc                                                       16
<210>  4569
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4569
tgtgataatt ttactc                                                       16
<210>  4570
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4570
tgctgatgtg ataatt                                                       16
<210>  4571
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4571
gcaattttaa cagtta                                                       16
<210>  4572
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4572
gagcctgcaa ttttaa                                                       16
<210>  4573
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4573
tagcttcaga gcctgc                                                       16
<210>  4574
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4574
gtttattagc ttcaga                                                       16
<210>  4575
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4575
caggtagttt attagc                                                       16
<210>  4576
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4576
taaatgcagg tagttt                                                       16
<210>  4577
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4577
atggtttaaa tgcagg                                                       16
<210>  4578
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4578
tagagccatg gtttaa                                                       16
<210>  4579
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4579
tcacacaaag ttttag                                                       16
<210>  4580
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4580
gtgaagtaat ttattc                                                       16
<210>  4581
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4581
actgagagat aaaggg                                                       16
<210>  4582
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4582
gtatatgtga ggaaac                                                       16
<210>  4583
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4583
tttgtagtat atgtga                                                       16
<210>  4584
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4584
attatctttg tagtat                                                       16
<210>  4585
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4585
ataagttctg ttatta                                                       16
<210>  4586
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4586
aatcctataa gttctg                                                       16
<210>  4587
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4587
ctgctatgaa ttaatt                                                       16
<210>  4588
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4588
cattggctgc tatgaa                                                       16
<210>  4589
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4589
agatgacatt ggctgc                                                       16
<210>  4590
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4590
ttagtaagat gacatt                                                       16
<210>  4591
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4591
gatctaattt gaattt                                                       16
<210>  4592
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4592
ttgagcaaag agaaac                                                       16
<210>  4593
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4593
gaatgttgac ctttaa                                                       16
<210>  4594
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4594
attgttgaat gttgac                                                       16
<210>  4595
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4595
ttaattacat tgttga                                                       16
<210>  4596
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4596
ttgtagatta attaca                                                       16
<210>  4597
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4597
tttacattgt agatta                                                       16
<210>  4598
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4598
cagatgttta cattgt                                                       16
<210>  4599
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4599
cttcaccaga tgttta                                                       16
<210>  4600
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4600
agtgcttccc tctgtc                                                       16
<210>  4601
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4601
taaacaagtg cttccc                                                       16
<210>  4602
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4602
tagctttttt ctaaac                                                       16
<210>  4603
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4603
ctgacatagc tttttt                                                       16
<210>  4604
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4604
aatacatgga ttctga                                                       16
<210>  4605
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4605
tattagaata catgga                                                       16
<210>  4606
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4606
gtactgcata ttagaa                                                       16
<210>  4607
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4607
actattgtac tgcata                                                       16
<210>  4608
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4608
ttttaaacta ttgtac                                                       16
<210>  4609
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4609
gagagtatta ttaata                                                       16
<210>  4610
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4610
ctgtttgaga gtatta                                                       16
<210>  4611
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4611
gaatagctgt ttgaga                                                       16
<210>  4612
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4612
aatcctcttg aatagc                                                       16
<210>  4613
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4613
tttttgaatc ctcttg                                                       16
<210>  4614
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4614
gagtttatat tatgtt                                                       16
<210>  4615
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4615
gtttctctga gtttat                                                       16
<210>  4616
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4616
ttaccagttt ctctga                                                       16
<210>  4617
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4617
gattttgttt accagt                                                       16
<210>  4618
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4618
gttttatatc tcttga                                                       16
<210>  4619
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4619
ttggtaataa tatttg                                                       16
<210>  4620
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4620
tggaaattgg taataa                                                       16
<210>  4621
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4621
gtttagtgga aattgg                                                       16
<210>  4622
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4622
atgtttgttt agtgga                                                       16
<210>  4623
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4623
ctaacattat gtttgt                                                       16
<210>  4624
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4624
gcactactaa cattat                                                       16
<210>  4625
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4625
ttagcagcac tactaa                                                       16
<210>  4626
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4626
ttgataaaaa accttt                                                       16
<210>  4627
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4627
caaaagtagt tgataa                                                       16
<210>  4628
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4628
ggaaaccaaa agtagt                                                       16
<210>  4629
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4629
gaaagtatgg aaacca                                                       16
<210>  4630
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4630
acatcataag aaggaa                                                       16
<210>  4631
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4631
tcatagtaaa agatat                                                       16
<210>  4632
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4632
tcatttaatc atagta                                                       16
<210>  4633
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4633
gcaggttcat ttaatc                                                       16
<210>  4634
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4634
gtaacatttt gctttg                                                       16
<210>  4635
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4635
atattactat agtaac                                                       16
<210>  4636
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4636
caatgtatat tactat                                                       16
<210>  4637
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4637
tagacacaat gtatat                                                       16
<210>  4638
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4638
ggtttcttca cacatt                                                       16
<210>  4639
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4639
ctcagaaatt cattgt                                                       16
<210>  4640
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4640
cttcttccaa ctcaga                                                       16
<210>  4641
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4641
ctaactcttc ttccaa                                                       16
<210>  4642
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4642
aatgatctaa ctcttc                                                       16
<210>  4643
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4643
gaaagttaaa tgatct                                                       16
<210>  4644
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4644
atcttaaagt tactta                                                       16
<210>  4645
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4645
tatgtgatct taaagt                                                       16
<210>  4646
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4646
agtaactatg tgatct                                                       16
<210>  4647
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4647
ctactaagta actatg                                                       16
<210>  4648
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4648
tcttttctac taagta                                                       16
<210>  4649
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4649
tattactctt ttctac                                                       16
<210>  4650
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4650
gctgggtatt actctt                                                       16
<210>  4651
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4651
taaagtttgc ttgctg                                                       16
<210>  4652
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4652
ctattgtaaa gtttgc                                                       16
<210>  4653
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4653
aaggatctat tgtaaa                                                       16
<210>  4654
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4654
cttatttaaa aggatc                                                       16
<210>  4655
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4655
taggacctta tttaaa                                                       16
<210>  4656
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4656
atttcctagg acctta                                                       16
<210>  4657
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4657
catgaatgat atttcc                                                       16
<210>  4658
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4658
tgctggcatg aatgat                                                       16
<210>  4659
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4659
ttttgatgct ggcatg                                                       16
<210>  4660
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4660
ttagtttttt gatgct                                                       16
<210>  4661
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4661
gcattattag tgttag                                                       16
<210>  4662
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4662
tatcttgcat tattag                                                       16
<210>  4663
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4663
atataatatc ttgcat                                                       16
<210>  4664
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4664
cattgacagt aagaaa                                                       16
<210>  4665
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4665
agtttttctc attgac                                                       16
<210>  4666
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4666
atggatatct cttaac                                                       16
<210>  4667
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4667
tatttgatgg atatct                                                       16
<210>  4668
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4668
acattgtatt tgatgg                                                       16
<210>  4669
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4669
gttgatacat tgtatt                                                       16
<210>  4670
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4670
gtttaggttg atacat                                                       16
<210>  4671
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4671
catccagttt aggttg                                                       16
<210>  4672
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4672
ccccagcatc cagttt                                                       16
<210>  4673
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4673
aaagaacccc agcatc                                                       16
<210>  4674
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4674
gtgtaaaaag aacccc                                                       16
<210>  4675
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4675
tatagggtgt aaaaag                                                       16
<210>  4676
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4676
aggtatgtct tttata                                                       16
<210>  4677
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4677
agtccatatt tgtatt                                                       16
<210>  4678
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4678
taatcaagtc catatt                                                       16
<210>  4679
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4679
atctaataat caagtc                                                       16
<210>  4680
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4680
ccttctatat tatcta                                                       16
<210>  4681
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4681
taataaacct tctata                                                       16
<210>  4682
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4682
gatcacatct aagaaa                                                       16
<210>  4683
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4683
taccatgatc acatct                                                       16
<210>  4684
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4684
ctgcaatacc atgatc                                                       16
<210>  4685
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4685
gttctccttt aaaact                                                       16
<210>  4686
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4686
gagattgttc tccttt                                                       16
<210>  4687
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4687
aaacaggaga ttgttc                                                       16
<210>  4688
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4688
tctcttaaac aggaga                                                       16
<210>  4689
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4689
catgtatctc ttaaac                                                       16
<210>  4690
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4690
cgtaaatatt tcagca                                                       16
<210>  4691
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4691
taactccgta aatatt                                                       16
<210>  4692
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4692
gacctttaac tccgta                                                       16
<210>  4693
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4693
tccagtgacc tttaac                                                       16
<210>  4694
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4694
caccagtctg gagtcc                                                       16
<210>  4695
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4695
ttctatcacc agtctg                                                       16
<210>  4696
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4696
atcttaccaa actatt                                                       16
<210>  4697
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4697
agaatcatct taccaa                                                       16
<210>  4698
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4698
gaatgtaaga atcatc                                                       16
<210>  4699
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4699
gtgttattta agaatg                                                       16
<210>  4700
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4700
gtttatgtta aagcat                                                       16
<210>  4701
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4701
agtaatgttt atgtta                                                       16
<210>  4702
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4702
gtagcatttt ttcagt                                                       16
<210>  4703
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4703
gcaaatgtag catttt                                                       16
<210>  4704
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4704
gttgtggcaa atgtag                                                       16
<210>  4705
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4705
tatgaagttg tggcaa                                                       16
<210>  4706
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4706
gatttcactt gacatt                                                       16
<210>  4707
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4707
gcttgagatt tcactt                                                       16
<210>  4708
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4708
tttggagctt gagatt                                                       16
<210>  4709
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4709
aatatctttg gagctt                                                       16
<210>  4710
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4710
aggaataata tctttg                                                       16
<210>  4711
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4711
atttagtaat aggaat                                                       16
<210>  4712
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4712
catcagattt agtaat                                                       16
<210>  4713
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4713
gttattacat cagatt                                                       16
<210>  4714
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4714
gcctagaatc aataaa                                                       16
<210>  4715
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4715
aggaatgcct agaatc                                                       16
<210>  4716
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4716
ttcagcagga atgcct                                                       16
<210>  4717
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4717
ttacctgata taacat                                                       16
<210>  4718
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4718
caggttttac ctgata                                                       16
<210>  4719
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4719
cttagacagg ttttac                                                       16
<210>  4720
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4720
attctcctta gacagg                                                       16
<210>  4721
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4721
ctgtctattc tcctta                                                       16
<210>  4722
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4722
taactactgt ctattc                                                       16
<210>  4723
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4723
ttgaactaac tactgt                                                       16
<210>  4724
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4724
agtaagttga actaac                                                       16
<210>  4725
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4725
gtaatgagta agttga                                                       16
<210>  4726
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4726
taatcttcct aatacg                                                       16
<210>  4727
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4727
accaggttaa tcttcc                                                       16
<210>  4728
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4728
atgataacca ggttaa                                                       16
<210>  4729
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4729
cgaatactca tatata                                                       16
<210>  4730
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4730
tttatacgaa tactca                                                       16
<210>  4731
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4731
attatattta tacgaa                                                       16
<210>  4732
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4732
ggtaaaagta ttatat                                                       16
<210>  4733
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4733
gagaatattg agtaaa                                                       16
<210>  4734
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4734
cagattattt tagagg                                                       16
<210>  4735
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4735
tcacttcaga ttattt                                                       16
<210>  4736
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4736
taatagtcac ttcaga                                                       16
<210>  4737
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4737
tattgataat agtcac                                                       16
<210>  4738
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4738
tactatttgt aatcaa                                                       16
<210>  4739
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4739
cttgcttatt ttacta                                                       16
<210>  4740
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4740
catctgttat tttatc                                                       16
<210>  4741
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4741
atgtgctttt tggatt                                                       16
<210>  4742
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4742
ggatttttgt atgtgc                                                       16
<210>  4743
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4743
catcattcat ggattt                                                       16
<210>  4744
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4744
cttagacatc attcat                                                       16
<210>  4745
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4745
tgagtactta gacatc                                                       16
<210>  4746
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4746
tataagtgag tactta                                                       16
<210>  4747
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4747
ctactttata agtgag                                                       16
<210>  4748
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4748
tgaatgtctt ctactt                                                       16
<210>  4749
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4749
tataataatg aatgtc                                                       16
<210>  4750
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4750
gtactgagca tttaaa                                                       16
<210>  4751
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4751
caaatagtac tgagca                                                       16
<210>  4752
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4752
aatggtcaaa tagtac                                                       16
<210>  4753
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4753
gtagtttgaa tacaaa                                                       16
<210>  4754
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4754
tcactggtag tttgaa                                                       16
<210>  4755
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4755
taggtagggc tttcac                                                       16
<210>  4756
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4756
accttctagg tagggc                                                       16
<210>  4757
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4757
gagtatacct tctagg                                                       16
<210>  4758
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4758
atcactgagt atacct                                                       16
<210>  4759
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4759
aaacttatca ctgagt                                                       16
<210>  4760
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4760
gctacaaaac ttatca                                                       16
<210>  4761
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4761
tttggagcta caaaac                                                       16
<210>  4762
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4762
agaagatttg gagcta                                                       16
<210>  4763
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4763
actattagaa gatttg                                                       16
<210>  4764
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4764
acactcacta ttagaa                                                       16
<210>  4765
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4765
agccttttat tttggg                                                       16
<210>  4766
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4766
cctgtcagcc ttttat                                                       16
<210>  4767
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4767
gacttacctg tcagcc                                                       16
<210>  4768
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4768
attctcgact tacctg                                                       16
<210>  4769
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4769
gtgagtattc tcgact                                                       16
<210>  4770
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4770
aattaagtga gtattc                                                       16
<210>  4771
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4771
taccagaatt aagtga                                                       16
<210>  4772
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4772
gctttcttac cagaat                                                       16
<210>  4773
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4773
tgggttgctt tcttac                                                       16
<210>  4774
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4774
tacaagtaca aatggg                                                       16
<210>  4775
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4775
ggtaaataca agtaca                                                       16
<210>  4776
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4776
attgctggta aataca                                                       16
<210>  4777
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4777
ttaaggattg ctggta                                                       16
<210>  4778
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4778
gcttcatttt aaggat                                                       16
<210>  4779
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4779
gtaggaagct tcattt                                                       16
<210>  4780
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4780
gagttagtag gaagct                                                       16
<210>  4781
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4781
gctattgagt tagtag                                                       16
<210>  4782
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4782
cttattgcta ttgagt                                                       16
<210>  4783
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4783
tattgtctta ttgcta                                                       16
<210>  4784
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4784
attcactatt gtctta                                                       16
<210>  4785
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4785
atcacaatcc ttttta                                                       16
<210>  4786
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4786
ttcttcatca caatcc                                                       16
<210>  4787
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4787
agattgttct tcatca                                                       16
<210>  4788
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4788
tataaataga ttgttc                                                       16
<210>  4789
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4789
ggttcttaat aacttt                                                       16
<210>  4790
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4790
aagcatggtt cttaat                                                       16
<210>  4791
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4791
ctttgtagaa aaagac                                                       16
<210>  4792
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4792
tatgctttct ttgtag                                                       16
<210>  4793
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4793
cttaatgtat gctttc                                                       16
<210>  4794
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4794
gtatttgctt aatgta                                                       16
<210>  4795
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4795
cctttggtat ttgctt                                                       16
<210>  4796
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4796
acctggcctt tggtat                                                       16
<210>  4797
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4797
atgtaaacct ggcctt                                                       16
<210>  4798
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4798
cttcaaatgt aaacct                                                       16
<210>  4799
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4799
gtaataataa tgtcac                                                       16
<210>  4800
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4800
agacttgagt aataat                                                       16
<210>  4801
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4801
tcctagagac ttgagt                                                       16
<210>  4802
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4802
aagtattcct agagac                                                       16
<210>  4803
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4803
tgtgttaagt attcct                                                       16
<210>  4804
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4804
aagagatgtg ttaagt                                                       16
<210>  4805
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4805
ccatatacag tcaaga                                                       16
<210>  4806
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4806
taacatccat atacag                                                       16
<210>  4807
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4807
ctatttatta acatcc                                                       16
<210>  4808
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4808
tgtcagctat ttatta                                                       16
<210>  4809
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4809
ctttactgtc agctat                                                       16
<210>  4810
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4810
gataaacttt actgtc                                                       16
<210>  4811
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4811
ctttatatgg ataaac                                                       16
<210>  4812
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4812
gcaagtcttt atatgg                                                       16
<210>  4813
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4813
ctgggtatta ctcttttcta                                                   20
<210>  4814
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4814
cttgctgggt attactcttt                                                   20
<210>  4815
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4815
tgcttgctgg gtattactct                                                   20
<210>  4816
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4816
catgaatgat atttcctagg                                                   20
<210>  4817
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4817
ggcatgaatg atatttccta                                                   20
<210>  4818
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4818
ctggcatgaa tgatatttcc                                                   20
<210>  4819
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4819
tgctggcatg aatgatattt                                                   20
<210>  4820
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4820
aagtccatat ttgtatttct                                                   20
<210>  4821
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4821
gcaaatgtag cattttttca                                                   20
<210>  4822
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4822
ggcaaatgta gcattttttc                                                   20
<210>  4823
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4823
ctggtccttt taacttccaa                                                   20
<210>  4824
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4824
cctggtcctt ttaacttcca                                                   20
<210>  4825
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4825
ttcctggtcc ttttaacttc                                                   20
<210>  4826
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4826
tgcttaatgt atgctttctt                                                   20
<210>  4827
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4827
ccgtaagttt atcttccttt                                                   20
<210>  4828
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4828
ccccgtaagt ttatcttcct                                                   20
<210>  4829
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4829
cacaaatatg ttcattctta                                                   20
<210>  4830
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4830
aaactttaac tcgatgccac                                                   20
<210>  4831
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4831
ataaacttta actcgatgcc                                                   20
<210>  4832
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4832
atgcttgtca ggctgtttaa                                                   20
<210>  4833
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4833
gtcaccatat aacttgggca                                                   20
<210>  4834
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4834
aggtcaccat ataacttggg                                                   20
<210>  4835
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4835
gctgggtatt actcttt                                                      17
<210>  4836
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4836
gcatgaatga tatttcc                                                      17
<210>  4837
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4837
ggcaaatgta gcatttt                                                      17
<210>  4838
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4838
ctggtccttt taacttc                                                      17
<210>  4839
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4839
gtaagtttat cttcctt                                                      17
<210>  4840
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4840
actttaactc gatgcca                                                      17
<210>  4841
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4841
aactttaact cgatgcc                                                      17
<210>  4842
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4842
aaactttaac tcgatgc                                                      17
<210>  4843
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4843
caccatataa cttgggc                                                      17
<210>  4844
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4844
tcaccatata acttggg                                                      17
<210>  4845
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4845
gtcaccatat aacttgg                                                      17
<210>  4846
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4846
cttgattttg gctctggaga                                                   20
<210>  4847
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4847
tgattttggc tctggag                                                      17
<210>  4848
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4848
actggtttgc agcgata                                                      17
<210>  4849
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4849
tttcactggt ttgcagcgat                                                   20
<210>  4850
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4850
cactggtttg cagcgat                                                      17
<210>  4851
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4851
tcactggttt gcagcga                                                      17
<210>  4852
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4852
ttcttggtgc tcttggc                                                      17
<210>  4853
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4853
gttcttggtg ctcttgg                                                      17
<210>  4854
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4854
ttgtctttcc agtcttccaa                                                   20
<210>  4855
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4855
tgttgtcttt ccagtcttcc                                                   20
<210>  4856
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4856
cattgccagt aatcgca                                                      17
<210>  4857
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4857
acattgccag taatcgc                                                      17
<210>  4858
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4858
gacattgcca gtaatcg                                                      17
<210>  4859
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4859
ctttgtgatc ccaagtagaa                                                   20
<210>  4860
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4860
ttgtgatccc aagtaga                                                      17
<210>  4861
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4861
tgctttgtga tcccaagtag                                                   20
<210>  4862
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4862
tttgtgatcc caagtag                                                      17
<210>  4863
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4863
ctttgtgatc ccaagta                                                      17
<210>  4864
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4864
cacactcatc atgccac                                                      17
<210>  4865
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4865
gttgttttct ccacactcat                                                   20
<210>  4866
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4866
agattttgct cttggtt                                                      17
<210>  4867
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4867
tagattttgc tcttggt                                                      17
<210>  4868
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4868
ttagattttg ctcttgg                                                      17
<210>  4869
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4869
cttagatttt gctcttg                                                      17
<210>  4870
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4870
agattattag accacat                                                      17
<210>  4871
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4871
cagattatta gaccaca                                                      17
<210>  4872
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4872
accagattat tagacca                                                      17
<210>  4873
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4873
acatactctg tgctgac                                                      17
<210>  4874
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4874
ttacacatac tctgtgctga                                                   20
<210>  4875
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4875
cttagtagtc atctcca                                                      17
<210>  4876
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4876
acttagtagt catctcc                                                      17
<210>  4877
<211>  17
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4877
gacttagtag tcatctc                                                      17
<210>  4878
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4878
agcttcttgt ccagctttat                                                   20
<210>  4879
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4879
agcttcttgt ccagctttat a                                                 21
<210>  4880
<211>  14
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4880
tcagtcatga cttc                                                         14
<210>  4881
<211>  15
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4881
tcagtcatga cttca                                                        15
<210>  4882
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4882
gctgattaga gagaggtccc                                                   20
<210>  4883
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4883
tcccatttca ggagacctgg                                                   20
<210>  4884
<211>  15
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4884
atcagtcatg acttc                                                        15
<210>  4885
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4885
cggtgcaagg cttaggaatt                                                   20
<210>  4886
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4886
gcttcagtca tgacttcctt                                                   20
<210>  4887
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4887
gcttcagtca tgacttcctt a                                                 21
<210>  4888
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4888
agcttcagtc atgacttcct t                                                 21
<210>  4889
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4889
tggtaatcca ctttcagagg                                                   20
<210>  4890
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4890
tggtaatcca ctttcagagg a                                                 21
<210>  4891
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4891
tgcttcagtc atgacttcct t                                                 21
<210>  4892
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4892
cactgatttt tgcccaggat                                                   20
<210>  4893
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4893
cactgatttt tgcccaggat a                                                 21
<210>  4894
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4894
aagcttcttg tccagcttta t                                                 21
<210>  4895
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4895
acccaattca gaaggaagga                                                   20
<210>  4896
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4896
acccaattca gaaggaagga a                                                 21
<210>  4897
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4897
aacccaattc agaaggaagg a                                                 21
<210>  4898
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4898
atggtaatcc actttcagag g                                                 21
<210>  4899
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4899
tcttggttac atgaaatccc                                                   20
<210>  4900
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4900
tcttggttac atgaaatccc a                                                 21
<210>  4901
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4901
attcactttc ataatgctgg                                                   20
<210>  4902
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4902
attcactttc ataatgctgg a                                                 21
<210>  4903
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4903
tgctccgttg gtgcttgttc                                                   20
<210>  4904
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4904
atcttggtta catgaaatcc c                                                 21
<210>  4905
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4905
atgcatggtg atgcttctga                                                   20
<210>  4906
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4906
cagctttatt agggacagca                                                   20
<210>  4907
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4907
cagctttatt agggacagca a                                                 21
<210>  4908
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4908
acagctttat tagggacagc a                                                 21
<210>  4909
<211>  16
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4909
ttcagtcatg acttcc                                                       16
<210>  4910
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (1)..(5)
<223>  Основания в указанных положениях представляют собой РНК
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (16)..(20)
<223>  Основания в указанных положениях представляют собой РНК
<400>  4910
gcuucagtca tgactuccuu                                                   20
<210>  4911
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4911
tgctccgttg gtgcttgttc a                                                 21
<210>  4912
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4912
ggacattgcc agtaatcgca a                                                 21
<210>  4913
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4913
aggacattgc cagtaatcgc a                                                 21
<210>  4914
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетический олигонуклеотид
<400>  4914
gacatgttct tcacctcctc                                                   20
<---