Биологическая активность сухого экстракта горца сахалинского

Мембранозащитный эффект СЭШБ, на наш взгляд, обусловлен непосредственным влиянием флавоноид-ных соединений этого лекарственного растения. При взаимодействии свободных радикалов с флавоноида-ми образуются радикалы, неспособные продолжать свободнорадикальный процесс. Кроме того, фенольные соединения растительного происхождения способны не только нейтрализовать свободные радикалы, но и одновременно могут взаимодействовать с другими ингибиторами и восстанавливать активность более сильного ингибитора. Вследствие этого уменьшается «расход» эндогенных антиоксидантов в организме, что способствует более рациональному использованию внутренних резервов антиоксидантной системы [6]. Таким образом, можно полагать, что антиоксидантные свойства СЭШБ обеспечивают стабилизацию мембранных структур гепатоцитов, тем самым предупреждают развитие синдромов цитолиза и холестаза при этанольном повреждении печени.

Литература

1. Бабенко Г.А., Гайнацкий М.Н. Определение активности ка-талазы в эритроцитах и сыворотке крови йодометрическим методом //Лабораторное дело. 1976. № 3. С. 157—158.

2. Барабой В.А. Антиоксиданты и здоровье // Валеология: диагностика, средства и практика обеспечения здоровья. СПб, 1993. С. 107-114.

3. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения / пер. с англ. М.: Высшая школа, 1991. 400 с.

4. Голубинская В.О., Мартьянова А.А., Тарасова О.С. и др. Изменения исследовательского поведения и тревожности у неонатально десимпатизированных крыс // Вестник московского университета. 1998. № 1. С. 12-15.

5. Жуков Д.А. Биология поведения: гуморальные механизмы. СПб.: Речь, 2007. 443 с.

6. Лапин И.П. Стресс. Тревога. Депрессия. Алкоголизм. Эпилепсия (нейрокинурениновые механизмы и новые подходы к лечению). СПб.: ДеАН, 2004. 224 с.

7. Мансурова И.Д., Олимова С.О. Активность микросомаль-ной этанолокисляющей системы при алкогольной интоксикации // Экспериментальная гепатология. 1985. № 7. С. 41.

8. Маняхин А.Ю., Зорикова С.П., Зорикова О.Г. Динамика накопления флавоноидов в корнях шлемника байкальского Scutellaria baicalensis Georgi // Естественные и технические науки. 2009. № 3 (41). С. 159-163.

9. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. С. 66-68.

10. Agular R., Gil L., Flint J. Learned fear, emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F2 intercross of Roman rat strains // Brain Res. Bull. 2002. Vol. 57, No. 1. P. 17-26.

11. Anderson B. Open-field and response-flexibility measures in the rat// Psychobiology. 1991. Vol. 19, No. 4. P. 335-358.

12. Barros H.M., Tannhauser S.L., Tannhauser M.A. et al. The effects of GABAergic drugs on grooming behaviour in the open field // Pharmacol. Toxicol. 1994. Vol. 74, No. 6. P. 339-344.

13. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for Experimental and Other Scientific Purposes Strasbourg, 18.Ш.1986 // URL: http://convention.coe.Int/Treaty/rus/ Treaties/Html/123.htm (дата обращения 1.12.2009 г).

14. Santacata V., Alvarez P., Pelaez R. et al. Effect of the lesion of the mamillary bodies on the performance in the open field // Physiol. Behav. 1982. Vol. 9. P. 501-504.

Поступила в редакцию 21.12.2009.

BIOLOGICAL ACTIVITY OF BAICAL SKULLCAP-DERIVED DRYEXTRACT A.Yu. Manyakhin, S.P. Zorikova, O.G. Zorikova Interdepartmental Research Education Centre “Plant Resources”: Gornotayozhnaya Station, FEB RAS

Summary — The experiment conducted on laboratory animals (mice and rats) allowed to estimate biological activity of Baical skullcap-based dry extract derived from materials introduced in Primorsky Krai. This drug proved to regulate the pattern of behavioral responses modified due to the action of man-induced xenobiotics, and had anti-oxidative effect in stabilizing hepato-cyte membranes on the ethanol-induced hepatitis model.

Key words: introduced Baical skullcap, experiment, behavioral responses, anti-oxidative activity.

Pacific Medical Journal, 2010, No. 2, p. 66—69.

УДК

С.П. Зорикова, А.Ю. Маняхин, О.Г. Зорикова

Межведомственный научнообразовательный центр «Растительные ресурсы»: Горнотаежная станция ДВО РАН

БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СУХОГО ЭКСТРАКТА ГОРЦА САХАЛИНСКОГО

Ключевые слова: горец сахалинский, эксперимент, поведенческие реакции, индекс тревожности.

В эксперименте на лабораторных животных (мыши) оценена биологическая активность сухого экстракта горца сахалинского. Получен из сырья, произрастающего в Приморском крае. Препарат восстанавливал паттерн поведенческих реакций, измененных действием техногенных ксенобиотиков.

Зорикова Светлана Петровна — младший научный сотрудник Горнотаежной станции ДВО РАН; тел.: +7 (924) 130-66-16, e-mail: si19@mail.ru.

Горец сахалинский — Polygonum sachalinensis (Fr. Schmidt) Nakai — произрастает на юге Сахалина и южных Курильских островах и как заносное растение получил широкое распространение во многих регионах России. В траве содержатся кофейная, хлорогеновая и галловая кислоты, дубильные вещества, гиперозид, кверцитрин, нзокверцитрин, кемпферол, кверцетин и его гликозиды. Айны, аборигены Сахалина, употребляли листья горца в качестве наружного антисептика,

70

Тихоокеанский медицинский журнал, 2010, № 2

Таблица

Действие СЭГС при техногенном загрязнении на поведенческие реакции в ПКЛ

Показатель 1-я группа 2-я группа 3-я группа 4-я группа

Время в ОР1, с 19,7±0,6 1,7±0,62 20,1±0,53 19,6±0,43

Выходы в ОР1 4,0±0,3 0,4±0,02 4,2±0,63 3,8±0,43

Стойки 4,5±0,4 2,1±0,42 5,1±0,63 4,9±0,53

Дипинг 3,0±0,3 0,7±0,32 3,5±0,33 2,7±0,33

Груминг 7,8±0,2 12,7±0,92 7,1±0,33 7,9±0,13

Дефекация 0,4±0,1 1,6±0,12 0,5±0,03 0,9±0,03

1 Открытые рукава (лабиринта).

2 Разница с 1-й группой статистически значима.

3 Разница со 2-й группой статитстически значима.

отвар корней применяли как жаропонижающее средство, при кашле, меноррагиях, некоторых заболеваниях нервной системы [6].

Целью настоящей работы явился анализ биологической активности сухого экстракта горца сахалинского (СЭГС), полученного из сырья, произрастающего в Приморском крае.

Материал и методы. Влияние СЭГС на интегративные этологические реакции лабораторных мышей исследовали методом приподнятого крестообразного лабиринта (ПКЛ). В работе использовали 40 белых беспородных половозрелых мышей-самцов массой 20—25 г. Животные содержались в стандартных условиях вивария на стандартном пищевом рационе, разработанном в Институте питания РАМН, при свободном доступе к воде и естественном световом режиме с соблюдением всех правил и международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в экспериментальных работах [9]. Калорийность диеты обеспечивали белки (18%), липиды (26%) и углеводы (56%). При разделении животных на группы проводили ранжирование по массе тела и возрасту.

Метод исследования поведения в ПКЛ основан на безусловно-рефлекторном страхе падения с высоты и страхе открытых пространств у грызунов [7]. Животное помещали на центральную площадку лабиринта и в течение 5 мин визуально регистрировали его поведенческие акты. Рассчитывали два индекса тревожного поведения (в процентах): 1п — отношение числа заходов в открытые рукава к сумме заходов в открытые и закрытые рукава; I — отношение времени нахождения в открытых рукавах к суммарному времени нахождения открытых и закрытых рукавах лабиринта. Эти показатели являются стандартными в методике оценки тревожности лабораторных животных: чем ниже показатели, тем выше тревожность, и наоборот [1].

В течение 20 дней каждому животному в пищу добавляли по 1 г измельченных листьев липы (ТШа amurensis Rupr.). Использовали листья, собранные

в двух районах Владивостока с различным уровнем техногенного загрязнения: минимальным — район Ботанического сада (индекс техногенного загрязнения — 2,58) и максимальным — район площади Луговой (индекс техногенного загрязнения — 6,30). В 1-й (контрольной) группе в пищу добавляли листья липы из района с фоновым (минимальным) техногенным загрязнением, во 2-й (контрольной) группе — листья из района с максимальным техногенным загрязнением, в 3-й (опытной) группе — листья из района с максимальным техногенным загрязнением и давали СЭГС (10 мг/кг), в 4-й (опытной) группе — листья из района с максимальным техногенным загрязнением и давали препарат сравнения (экстракт патринии скабиозолистной, РаМта scabiosifolia) в дозе 1 мл/кг. Полученные данные обрабатывали методами вариационной статистики.

Результаты исследования и обсуждение полученных данных. Тест ПКЛ предназначен для изучения поведения грызунов в условиях переменной стрес-согенности (при свободном выборе комфортных условий) и позволяет оценить уровень тревожности и способность лабораторных животных справляться со стресс-факторами. Время, проведенное в открытых рукавах лабиринта, обратно пропорционально уровню тревожности. Таким образом, чем выше показатель предпочтения открытых рукавов закрытым, тем ниже уровень тревоги у животных, и наоборот.

При воздействии максимального техногенного загрязнения отмечалось значимое уменьшение по сравнению с 1-й группой таких показателей активности, как время пребывания животных в открытых рукавах лабиринта (в 11,6 раза) и число выходов в открытые рукава (в 10 раз). Показатель вертикальной исследовательской активности — число стоек — во 2-й группе снижался практически в 2 раза. Необходимо отметить, что показатель оценки риска — дипинг (заглядывание вниз из концов открытых рукавов) — во 2-й группе также был более чем в 3 раза ниже, чем при фоновом воздействии стресс-фактора, что свидетельствовало о сужении поля когнитивного восприятия (табл.).

В соответствии с общепринятой методикой снижение активности исследовательского поведения в условиях ПКЛ однозначно представляют как результат повышения общего уровня тревожности у животных [3, 5]. Эмоциональная активность при действии стрессора проявилась в усилении груминга в 1,6 раза при одновременном увеличении числа дефекаций в 4 раза (табл.). Известно, что в этих этологических показателях смыкаются поведенческий и эндокринный компоненты стресса. В частности, автогруминг — форма поведения, индуцируемая гипофизарными и гипоталамическим стрессорными гормонами [2]. Таким образом, повышение названных показателей свидетельствует о возрастании уровня стрессорных гормонов, повышении тревожности и нарастании

Щ 1-я группа

I I 2-я группа | 3-я группа 4-я группа

1( 1п

Рис. Действие СЭГС и экстракта патринии скабиозолистной на индекс тревожности при различных уровнях техногенного загрязнения.

стрессорной реакции при действии урбанистических ксеноагентов.

При сочетанном действии стрессора и растительных экстрактов (горца и патринии) такие показатели поведенческой активности, как время пребывания животных в открытых рукавах лабиринта превышало соответственно в 11,8 и 11,5 раза показатели 2-й группы. Аналогичные изменения наблюдались и в отношении выходов в открытые рукава, частота которых в 3-й и 4-й группах возрастала практически в 10 раз. Также повышалась исследовательская активность животных, что выражалось в увеличении числа стоек с опорой на стенки в 2,4 и 2,3 раза и частоты дипинга — в 5 и 3,8 раза соответственно (табл.). Активацию исследовательского поведения в условиях ПКЛ однозначно интерпретируют как результат снижения общего уровня тревожности [4]. Снижение эмоционального напряжения у животных при сочетанном действии стрессора и препаратов выразилось в уменьшении количества актов груминга в 1,7 и 1,6 раза и актов дефекации — в 3,2 и 1,8 раза в 3-й и 4й группах соответственно, что свидетельствовало о снижении уровня стрессорных гормонов, уменьшении тревожности и ослаблении стресса (табл).

Под действием препаратов СЭГС и экстракта пат-ринии скабиозолистной показатели двигательной, исследовательской и эмоциональной активности достоверно приближались к фоновому уровню, что говорит о нормализации как психоэмоционального, так и гормонального состояния животных.

Соотношение индекса и уровня тревожности, как указано выше, выражается обратной пропорцией: чем ниже индексы, тем выше уровень тревожности исследуемого объекта, и наоборот [8, 10]. На нашем материале индексы тревожности явно отражали изменения, оказываемые действием ксеноагентов. Во 2-й группе К был в 20 раз, а 1п в 2,5 раза меньше, чем в 1, 3 и 4-й группах. Исходя из полученных данных, можно заключить, что у животных 2-й группы, в пищу которых вводили листья липы из района с максимальным уровнем техногенного загрязнения,

уровень тревожности был достоверно выше, чем в 1-й («фоновой») группе. В ПКЛ животные 2-й и 3-й групп успешно преодолевали последствия действия стрессора: регистрировалось достоверное увеличение индексов тревожности, что свидетельствовало о нормализации психосоматического состояния и наличии выраженной физиологической активности у изучаемого препарата (рис.). При этом активность СЭГС не уступала активности препарата сравнения — экстракта патринии скабиозолистной. Таким образом, СЭГС и экстракт патринии скабиозолистной проявляли биологическую активность, восстанавливая паттерн поведенческих реакций лабораторных животных, измененных действием техногенных ксенобиотиков.

Литература

1. Воронина Т.А., Островская Р.У. Экспериментальное изучение препаратов с ноотропным типом действия // Ведомости фарм. комитета. 1998. № 3. С. 25—31.

2. Жуков Д.А. Биология поведения: гуморальные механизмы. СПб.: Речь, 2007. 443 с.

3. Калуев А.В., Нуца Н.А. Сегодня и завтра фармакоэтологии тревожности: методологические проблемы и перспективы// Эксперимент. и клин. фармакол. 1998. Т. 61, № 5. С. 69—74.

4. Калуев А.В. Анализ груминга в нейробиологических исследованиях: нейрогенетика, нейрофармакология и экспериментальные модели стресса // Нейронауки. 2006. № 4 (6). С. 14-19.

5. Лапин И.П. Стресс. Тревога. Депрессия. Алкоголизм. Эпилепсия (нейрокинурениновые механизмы и новые подходы к лечению). СПб.: ДеАН, 2004. 224с.

6. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т1. /ред. А.Л. Буданцев. СПб.-М.: Товарищество научных изданий КМК, 2008. 421 с.

7. Dawson G.R., Tricklebank M.D. Use of elevated plus-maze in the search for novel antiolytic agents // Tr. Pharmacol. Sci. 1995. Vol. 16. P. 33-36.

8. Espejo E.F. Structure of the mouse behaviour on the elevated plus-maze test of anxiety // Behav. Brain Res. 1997. Vol. 86. P. 105-112.

9. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals usedfor Experimental and Other Scientific Purposes Strasbourg, 18.III.1986. URL: http://convention.coe.Int/Treaty/rus/Trea-ties/Html/123.htm (дата обращения 1.12.2009 г).

10. File S.E. The interplay of learning and anxiety in the elevated plus-maze // Behav. Brain Res. 1993. Vol. 58. P. 199-202.

Поступила в редакцию 21.12.2009.

BIOLOGICAL ACTIVITY OF POLYGONUM SACHALINENSE DRY EXTRACT

S.P. Zorikova, A.Yu. Manyakhin, O.G. Zorikova Interdepartmental Research Education Centre “Plant Resources”: Gornotayozhnaya Station, FEB RAS

Summary — The experiment conducted on laboratory animals (mice) allowed to estimate biological activity of Polygonum Sa-chalinense dry extract derived from plants growing in Primorsky Krai. This drug allows recovering the pattern of behavioral response modified due to man-induced xenobiotics.

Key words: Polygonum Sachalinense, experiment, behavioral response, anxiety index.

Pacific Medical Journal, 2010, No. 2, p. 69—71.