МУТЕИНЫ КИСЛОТНОЙ ЗОНЫ ВНЕКЛЕТОЧНОГО ДОМЕНА РЕЦЕПТОРА ФАКТОРА РОСТА ФИБРОБЛАСТОВ

1. Полипептид, содержащий мутеин кислотной зоны внеклеточного домена (ECD) рецептора FGFR4, у которого мутеин кислотной зоны FGFR4 ECD выбран из химеры кислотной зоны FGFR4 ECD и варианта длинного кислотного бокса FGFR4 и у которого мутеин кислотной зоны FGFR4 ECD имеет большее количество кислотных остатков в линкерной зоне D1-D2, чем FGFR4 ECD дикого типа.
2. Полипептид по п.1, у которого химера кислотной зоны FGFR4 ECD выбрана из химеры линкера D1-D2 домена FGFR4 ECD, химеры экзона 4 FGFR4 ECD, химеры кислотного бокса FGFR4 ECD, химеры длинного кислотного бокса FGFR4 ECD и химеры короткого кислотного бокса FGFR4 ECD.
3. Полипептид по п.2, у которого:
a) химера линкера D1-D2 домена FGFR4 ECD содержит D1-D2 линкер, выбранный из D1-D2 линкера FGFR1, D1-D2 линкера FGFR2 и D1-D2 линкера FGFR3, вместо D1-D2 линкера FGFR4;
b) химера экзона 4 FGFR4 ECD содержит экзон 4, выбранный из экзона 4 FGFR1, экзона 4 FGFR2 и экзона 4 FGFR3, вместо экзона 4 FGFR4;
c) химера кислотного бокса FGFR4 ECD содержит:
i) кислотный бокс, выбранный из кислотного бокса FGFR1, кислотного бокса FGFR2 и кислотного бокса FGFR3, вместо кислотного бокса FGFR4;
ii) зону кислотного бокса, выбранную из зоны кислотного бокса FGFR1, зоны кислотного бокса FGFR2 и зоны кислотного бокса FGFR3, вместо кислотного бокса FGFR4;
iii) зону кислотного бокса, выбранную из зоны кислотного бокса FGFR1, зоны кислотного бокса FGFR2 и зоны кислотного бокса FGFR3, вместо зоны кислотного бокса FGFR4;
iv) кислотный бокс, выбранный из кислотного бокса FGFR1, кислотного бокса FGFR2 и кислотного бокса FGFR3, вместо зоны кислотного бокса FGFR4;
d) химера длинного кислотного бокса FGFR4 ECD содержит длинный кислотный бокс, выбранный из длинного кислотного бокса FGFR1, длинного кислотного бокса FGFR2 и длинного кислотного бокса FGFR3, вместо длинного кислотного бокса FGFR4; и
е) химера короткого кислотного бокса FGFR4 ECD содержит короткий кислотный бокс, выбранный из короткого кислотного бокса FGFR1, короткого кислотного бокса FGFR2 и короткого кислотного бокса FGFR3, вместо короткого кислотного бокса FGFR4.
4. Полипептид по п.3, у которого:
a) химера линкера D1-D2 FGFR4 ECD содержит:
i) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: 22, 26, 28 и 32, вместо D1-D2 линкера FGFR4, выбранного из SEQ ID NOs: 16 и 17; или
ii) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 35 до 38;
b) химера экзона 4 FGFR4 ECD содержит:
i) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: 23, 92, 29 и 33, вместо экзона 4 FGFR4, выбранного из SEQ ID NOs: 18 и 19; или
ii) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 39 до 42;
c) химера кислотного бокса FGFR4 ECD содержит:
i) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: 24, 30 и 34 вместо кислотного бокса FGFR4, имеющего последовательность аминокислот SEQ ID NO: 20;
ii) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 56 до 65, вместо кислотного бокса FGFR4, имеющего последовательность аминокислот SEQ ID NO: 20; или
iii) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 56 до 65, вместо зоны кислотного бокса FGFR4, имеющей последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 46 до 55;
iv) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: 24, 30 и 34, вместо зоны кислотного бокса FGFR4, имеющей последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 46 до 55; или
v) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 43 до 45 и 157;
d) химера длинного кислотного бокса FGFR4 ECD содержит:
i) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 98 до 100, вместо длинного кислотного бокса FGFR4, выбранного из SEQ ID NOs: 96 и 97; или
ii) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 105 до 107; и
e) химера короткого кислотного бокса FGFR4 ECD содержит:
i) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 102 до 104, вместо короткого кислотного бокса FGFR4, имеющего последовательность аминокислот SEQ ID NO: 101; или
ii) последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 108 до 110.
5. Полипептид по п.1, у которого вариант длинного кислотного бокса FGFR4 ECD содержит вариант FGFR4 ECD с увеличенным количеством кислых аминокислотных остатков в длинном кислотном боксе по сравнению с длинным кислотным боксом дикого типа FGFR4.
6. Полипептид по п.5, у которого:
a) по меньшей мере два некислотных остатка в составе длинного кислотного бокса FGFR4 ECD каждый независимо замещен кислотным остатком, выбранным из Glu (Е) и Asp (D);
b) по меньшей мере три некислотных остатка в составе длинного кислотного бокса FGFR4 ECD каждый независимо замещен кислотным остатком, выбранным из Glu (Е) и Asp (D); или
c) по меньшей мере четыре некислотных остатка в составе длинного кислотного бокса FGFR4 ECD каждый независимо замещен кислотным остатком, выбранным из Glu (Е) и Asp (D).
7. Полипептид по п.5, у которого:
a) по меньшей мере один кислотный остаток вставлен между аминокислотами 103 и 104 из SEQ ID NOs: 1 и 2; или
b) два кислотных остатка вставлены между аминокислотами 103 и 104 из SEQ ID NOs: 1 и 2.
8. Полипептид по п.5, у которого количество кислотных остатков в длинном кислотном боксе FGFR4 равно по меньшей мере семи.
9. Полипептид по п.5, у которого:
a) остатки домена FGFR4 ECD от 104 до 114 (SEQ ID NO: 145) замещены остатками FGFR1 ECD от 106 до 117 (SEQ ID NO: 149);
b) остатки домена FGFR4 ECD от 104 до 114 (SEQ ID NO: 145) замещены остатками FGFR1 ECD от 107 до 117 (SEQ ID NO: 150);
c) остатки домена FGFR4 ECD от 104 до 110 (SEQ ID NO: 146) замещены остатками FGFR1 ECD от 105-113 (SEQ ID NO: 151);
d) остатки домена FGFR4 ECD от 113 до 116 (SEQ ID NO: 147) замещены остатками FGFR1 ECD от 116-119 (SEQ ID NO: 152);
e) остатки домена FGFR4 ECD от 109 до 113 (SEQ ID NO: 148) замещены остатками FGFR1 ECD от 112-116 (SEQ ID NO: 153); или
f) вариант длинного кислотного бокса FGFR4 ECD содержит последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 111 до 119.
10. Полипептид по п.1, у которого мутеин кислотной зоны FGFR4 содержит по меньшей мере одну точечную мутацию, которая ингибирует гликозилирование.
11. Полипептид по п.10, у которого по меньшей мере одна точечная мутация, которая ингибирует гликозилирование, выбрана из N91A, N156A, N237A, N269A, N290A и N301A.
12. Полипептид по п.10, у которого мутеин кислотной зоны FGFR4 содержит последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: 120, 121 и 168.
13. Молекула слияния FGFR4 ECD, содержащая полипептид по любому из пп.1-12 и сливающийся элемент (партнер).
14. Молекула по п.13, у которой сливающийся элемент (партнер) выбран из Fc, альбумина и полиэтиленгликоля.
15. Молекула по п.14, у которой сливающийся элемент (партнер) является Fc.
16. Молекула по п.15, содержащая последовательность аминокислот, выбранную из SEQ ID NOs: от 86 до 88, от 124 до 140, 143, 144 и 158.
17. Молекула слияния FGFR4 ECD, имеющая последовательность аминокислот из SEQ ID NO: 86.
18. Полинуклеотид, содержащий последовательность нуклеиновых кислот, которая кодирует полипептид по любому из пп.1-12 или молекулу слияния FGFR4 ECD по любому из пп.13-17.
19. Фармацевтическая композиция, содержащая полипептид или молекулу слияния FGFR4 по любому из пп.1-17 и фармацевтически приемлемый носитель.
20. Способ лечения нарушений ангиогенеза у пациентов, включающий введение больному фармацевтической композиции по п.19.
21. Способ по п.20, при котором нарушения ангиогенеза выбраны из рака и дегенерации желтого пятна.
22. Способ по п.21, при котором рак выбран из рака прямой кишки, печени, легких, груди и простаты.
23. Полипептид, содержащий мутеин кислотной зоны FGFR2 ECD, который имеет большее количество кислотных остатков в линкерной зоне D1-D2, чем FGFR2 ECD дикого типа.
24. Полипептид по п.23, у которого мутеин кислотной зоны FGFR2 ECD является химерой короткого кислотного бокса FGFR2 ECD.
25. Полипептид по п.24, у которого химера короткого кислотного бокса FGFR2 ECD содержит по меньшей мере короткий кислотный бокс FGFR1 вместо по меньшей мере короткого кислотного бокса FGFR2.
26. Полипептид по п.24, у которого:
a) остатки домена FGFR2 ECD от 111 до 118 (SEQ ID NO: 155) замещены остатками FGFR1 ECD от 105 до 112 (SEQ ID NO: 154); или
b) химера короткого кислотного бокса FGFR2 ECD содержит последовательность аминокислот SEQ ID NO: 122.
27. Полипептид, содержащий мутеин кислотной зоны FGFR3 ECD, имеющий большее количество кислотных остатков в линкерной зоне D1-D2, чем FGFR3 ECD дикого типа.
28. Полипептид по п.27, у которого мутеин кислотной зоны FGFR3 ECD является химерой короткого кислотного бокса FGFR3 ECD.
29. Полипептид по п.28, у которого FGFR3 ECD химера короткого кислотного бокса содержит по меньшей мере короткий кислотный бокс FGFR1 вместо по меньшей мере короткого кислотного бокса FGFR3.
30. Полипептид по п.28, у которого:
a) остатки домена FGFR3 ECD от 110 до 117 (SEQ ID NO: 156) замещены остатками FGFR1 ECD от 105 до 112 (SEQ ID NO: 154); или
b) химера короткого кислотного бокса FGFR3 ECD содержит последовательность аминокислот SEQ ID NO: 123.