ПРОИЗВОДНЫЕ 4-ФЕНИЛ-5-ОКСО-1,4,5,6,7,8-ГЕКСАГИДРОХИНОЛИНА В КАЧЕСТВЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ БЕСПЛОДИЯ
4-PHENYL-5-OXO-1,4,5,6,7,8-HEXAHYDROCHINOLINE DERIVATIVES AS MEDICATIONS FOR TREATMENT OF INFERTILITY

Данное изобретение относится к производным 2-метил-4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина, содержащим их фармацевтическим композициям и к применению упомянутых производных для производства лекарственных средств для лечения бесплодия.
Гонадотропины играют важную роль в различных функциях организма, включая метаболизм, регуляцию температуры тела и процесс размножения. Гонадотропины воздействуют на специфические типы клеток гонад, инициируя дифференцировку яичника и яичек, а также стероидогенез. Гипофизарный гонадотропин ФСГ (фолликул-стимулирующий гормон), например, играет центральную роль в стимуляции развития и созревания фолликула, тогда как ЛГ (лютеинизирующий гормон) индуцирует овуляцию (Sharp, R.M. Clin Endocrinol. 33:787-807, 1990; Dorrington and Armstrong, Recent Prog. Horm. Res. 35:301-342, 1979). В настоящее время ФСГ применяется в клинике для стимуляции яичников, т.е. гиперстимуляции яичников для оплодотворения in vitro (IVF) и индукции овуляции у бесплодных ановуляторных женщин (Insler, V., Int. J. Fertility 33:85-97, 1988, Navot и Rosenwaks, J. Vitro Fert. Embryo Transfer 5:3-13, 1988), так же, как и при мужском гипогонадизме и мужском бесплодии.
Гонадотропин ФСГ выделяется из передней доли гипофиза под влиянием высвобождающего гонадотропин гормона и эстрогенов, а также из плаценты в период беременности. В женском организме ФСГ воздействует на яичники, стимулирует рост фолликулов и является основным гормоном, регулирующим секрецию эстрогенов. В мужском организме ФСГ отвечает за интактное состояние семявыносящих канальцев и воздействует на сертолиевы клетки, поддерживая гаметогенез. Очищенный ФСГ используют в клинике для лечения бесплодия у женщин и при некоторых типах нарушения сперматогенеза у мужчин. Гонадотропины, предназначенные для терапевтических целей, могут быть выделены из мочи человека и обладают невысокой чистотой (Morse et al, Amer. J. Reproduct. Immunol. and Microbiology 17:143, 1988). В качестве альтернативы, они могут быть изготовлены как рекомбинантные гонадотропины. Рекомбинантный ФСГ человека коммерчески доступен и применяется при нарушениях репродуктивной функции (Olijve et al. Mol. Hum Reprod. 2:371, 1996; Devroey et al. Lancet 339:1170, 1992).
Действие гормона ФСГ опосредовано специфическим рецептором плазматической мембраны, который является членом большого семейства рецепторов, связанных с G-белками. Эти рецепторы состоят из одиночного полипептида, имеющего семь трансмембранных доменов, и способны взаимодействовать с Gs-белком, что приводит к активации аденилатциклазы.
Рецептор ФСГ является высокоспецифичной мишенью в процессе роста фолликула в яичнике и экспрессируется исключительно в яичниках. Блокада рецептора или ингибирование внутриклеточной сигнализации, которая в норме индуцируется после активации рецептора, опосредованной ФСГ, нарушает развитие фолликула и, таким образом, овуляцию и способность к оплодотворению. Низкомолекулярные антагонисты ФСГ могут представлять собой основу для новых контрацептивов, тогда как низкомолекулярные агонисты ФСГ могут быть использованы для тех же клинических целей, что и природный ФСГ, т.е. для лечения бесплодия и для гиперстимуляции яичников с целью проведения оплодотворения in vitro.
Низкомолекулярные миметики ФСГ со свойствами агонистов описаны в международной патентной заявке WO 2000/08015 (Applied Research Systems ARS Holding N.V.) и WO 2002/09706 (Affymax Research Institute).
Некоторые производные тетрагидрохинолина недавно описаны в международной патентной заявке WO 2003/004028 (AKZO NOBEL N.V.) в качестве веществ, модулирующих ФСГ, имеющих свойства агонистов или антагонистов.
Продолжает существовать потребность в низкомолекулярных миметиках гормона, которые селективно активируют рецептор ФСГ.
С этой целью данное изобретение представляет производные 2-метил-4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина общей формулы I
в которой
1
R представляет собой (1-6C)алкил, (2-6C)алкенил или (2-6C)алкинил;
2
R представляет собой галоген;
3
5
6
2
R представляет собой SONRR или (1-4C)алкокси, необязательно замещенный одним или более атомами фтора;
7
X представляет собой O или NR;
4
8
8
8
8
R представляет собой R-(2-8C)алкил, R-(3-8C)алкенил, R-(3-8C)алкинил или R-(2-4C)алкокси(2-4C)-алкил;
2
Z представляет собой CN или NO;
5
6
R и R независимо представляют собой H или (1-4C)алкил; или
5
6
R вместе с R и N, к которому они присоединены, образуют 3-8-членное насыщенное кольцо, необязательно содержащее дополнительный гетероатом, выбранный из O и S;
8
9
11
9
11
9
10
2
2
R представляет собой OH, (1-4C)алкокси, NH; NRC(О)R, NRSOR или C(O)NRR;
7
9
R и R независимо представляют собой H или (1-4C)алкил;
10
2
2
3
R представляет собой (1-4C)алкил, (1-4C)алкокси(1-4C)алкил или фенил(1-4C)алкил, или (2-5C)гетероарил(1-4C)алкил, причем оба необязательно замещены по (гетеро)ароматическому кольцу одним или более заместителями, выбранными из OH, NH, галогена, NO, CF, CN, (1-4C)-алкила, (1-4C)алкокси и (ди)(1-4C)алкиламино;
11
2
2
3
R представляет собой (1-4C)алкил, (2-4C)алкенил, (2-4C)алкинил, (1-4C)алкокси(1-4C)алкил, (3-6C)-циклоалкил, (1-4C)алкокси, (ди)(1-4C)алкиламино или фенил, или (2-5C)гетероарил, причем оба необязательно замещены по (гетеро)ароматическому кольцу одним или более заместителями, выбранными из OH, NH, галогена, NO, CF, CN, (1-4C)алкила, (1-4C)алкокси и (ди)(1-4C)алкиламино; или их фармацевтически приемлемые соли.
Производные 2-метил-4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по данному изобретению представляют собой мощные активаторы рецептора ФСГ и могут быть использованы для тех же клинических целей, что и природный ФСГ, так как они действуют как его агонисты, с тем преимуществом, что их можно получить путем синтеза, они могут проявлять измененные свойства стабильности и могут быть введены различными способами.
Таким образом, агонисты рецептора ФСГ по данному изобретению могут быть использованы для лечения нарушений фертильности, например, для контролируемой гиперстимуляции яичников и процедур экстракорпорального оплодотворения (IVF).
Термин (1-4C)алкил так, как он используется в определениях, означает разветвленную или неразветвленную алкильную группу, имеющую 1-4 атома углерода и представляющую собой метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил и трет-бутил.
Термин (1-6C)алкил означает разветвленную или неразветвленную алкильную группу, имеющую 1-6 атомов углерода, например метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил и н-гексил.
Термин (2-4C)алкил так, как он используется в определениях, означает разветвленную или неразветвленную алкильную группу, имеющую 2-4 атома углерода.
Термин (2-8C)алкил так, как он используется в определениях, означает разветвленную или неразветвленную алкильную группу, имеющую 2-8 атомов углерода.
Термин (3-8C)алкенил означает разветвленную или неразветвленную алкенильную группу, имеющую 3-8 атомов углерода, такую как 2-пропенил, 2-бутенил, 3-бутенил, пентенил, гексенил и октенил.
Термин (2-6C)алкенил означает разветвленную или неразветвленную алкенильную группу, имеющую 2-6 атомов углерода, такую как этенил, н-пропенил, 2-метил-2-пропенил, 2-бутенил, 3-бутенил, пентенил и гексенил.
Термин (2-4C)алкенил подобным образом означает разветвленную или неразветвленную алкенильную группу, имеющую 2-4 атома углерода, такую как этенил, 2-пропенил, 2-метил-2-пропенил, 2-бутенил и 3-бутенил.
Термин (3-8C)алкинил означает разветвленную или неразветвленную алкинильную группу, имеющую 3-8 атомов углерода, такую как 2-пропинил, 2-бутинил, 3-бутинил, пентинил, гексинил и октинил.
Термин (2-6C)алкинил означает алкинильную группу, имеющую 2-6 атомов углерода, такую как этинил, 2-пропинил, 2-бутинил, 3-бутинил, пентинил и гексинил.
Термин (2-4C)алкинил подобным образом означает алкинильную группу, имеющую 2-4 атома углерода, такую как этинил, 2-пропинил, 2-бутинил и 3-бутинил.
Термин (1-4C)алкокси означает алкоксигруппу, имеющую 1-4 атомов углерода, причем алкильный остаток имеет такое же значение, как определено ранее. (1-2C)алкокси группы являются предпочтительными.
Термин (3-6C)циклоалкил означает циклоалкильную группу, имеющую 3-6 атомов углерода, являющуюся циклопропилом, циклобутилом, циклопентилом и циклогексилом.
Термин (3-6C)циклоалкил(1-4C)алкил означает циклоалкилалкильную группу, циклоалкильная группа которой имеет 3-6 атомов углерода с тем же значением, которое определено ранее, и алкильная группа имеет 1-4 атома углерода с тем же значением, которое определено ранее.
Термин (2-5C)гетероарил означает замещенную или незамещенную ароматическую группу, имеющую 2-5 атомов углерода, и, по меньшей мере, включающую в себя один гетероатом, выбранный из N, O и S, такую как имидазолил, тиадиазолил, пиридинил, тиенил или фурил. Предпочтительными гетероарильными группами являются тиенил, фурил и пиридинил. (2-5C)гетероарильная группа может быть присоединена через атом углерода или гетероатом, если это возможно.
2
2
3
Термин (2-5C)гетероарил(1-4C)алкил означает гетероарилалкильную группу, гетероарильная группа которой содержит 2-5 атомов углерода, с тем же значением и предпочтениями, что определены ранее, и алкильная группа содержит 1-4 атома углерода с тем же значением, что определено ранее. (2-5C)гетероарильная группа может быть замещена по (гетеро)ароматическому кольцу одним или более заместителями, выбранными из OH, NH, галогена, NO, CF, CN, (1-4C)алкила, (1-4C)алкокси и (ди)(1-4C)алкиламино.
2
2
3
Термин фенил(1-4C)алкил означает фенильную группу, присоединенную к алкильной группе, имеющей 1-4 атома углерода, как определено ранее. Фенильная группа может быть замещена одним или более заместителями, выбранными из OH, NH, галогена, NO, CF, CN, (1-4C)алкила, (1-4C)алкокси и (ди)(1-4C)алкиламино.
Термин (ди)(1-4C)алкиламино, так как он используется в данном документе, означает аминогруппу, однозамещенную или двухзамещенную алкильными группами, каждая из которых содержит 1-4 атома углерода и имеет то же значение, что определено ранее.
5
6
В определении Формулы I R вместе с R и N, к которому они присоединены, могут образовывать 3-8-членное кольцо, необязательно содержащее дополнительный гетероатом, выбранный из O и S. Примерами такого кольца являются пирролидин-1-ил, пиперидин-1-ил, азепин-1-ил, морфолин-4-ил и тиоморфолин-4-ил.
Термин галоген означает фтор, хлор, бром или йод; хлор, бром или йод являются предпочтительными.
Термин фармацевтически приемлемая соль представляет такие соли, которые с точки зрения специалиста в области медицины пригодны для использования в контакте с тканями человека и низших животных без нежелательной токсичности, раздражения, аллергической реакции и тому подобного и приемлемы с точки зрения разумного соотношения польза/риск. Фармацевтически приемлемые соли известны в данной области техники. Они могут быть получены в ходе окончательного выделения и очистки соединений по данному изобретению или отдельно - путем реакции функциональной группы свободного основания с подходящей неорганической кислотой, такой как соляная кислота, фосфорная кислота или серная кислота, или с органической кислотой, такой как, например, аскорбиновая кислота, лимонная кислота, винная кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, фумаровая кислота, гликолевая кислота, янтарная кислота, пропионовая кислота, уксусная кислота, метансульфоновая кислота и им подобные.
Один из аспектов данного изобретения касается соединений, имеющих формулу I, в которой X представляет собой O.
1
1
1
Данное изобретение также относится к соединениям формулы I, в которой R представляет собой (1-6C)алкил. В частности, данное изобретение относится к соединениям, в которых R представляет собой (1-4C)алкил. Наиболее предпочтительно, R представляет собой н-пропил.
Другим аспектом данного изобретения являются соединения формулы I, в которой
2
R представляет собой Cl, Br или I.
Еще один аспект данного изобретения касается соединений формулы I, в которых Z представляет собой CN.
3
5
6
2
Данное изобретение также относится к соединениям общей формулы I, в которой R представляет собой SONRR.
1
11
Еще один аспект данного изобретения касается соединений, в которых одно или более конкретных определений групп от R до R, а также X и Z, как они определены выше в данном документе, скомбинированы в определении производных 2-метил-4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина формулы I.
50
-8
Еще один аспект данного изобретения касается соединений формулы I, которые в тесте на связывание имеют EC менее чем 10 M (как описано в примере 33).
Пригодные способы получения производных 2-метил-4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по данному изобретению описаны ниже.
1
2
3
4
Производные 1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина формулы I по данному изобретению могут быть получены исходя из циклогексан-1,3-дионов общей формулы II, енаминов общей формулы III и бензальдегидов общей формулы IV, в которых R, R, R, R, X и Z определены ранее, с помощью хорошо описанной трехкомпонентной циклоконденсации типа реакции Ганча.
Соответствующие реакции циклоконденсации типа реакции Ганча можно найти в: Bioorg. Med. Chem Lett. 12 (2002) 1481-1484, J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1 (2002) 1141-1156, Synlett (2002) 89-92, Drug Dev. Res. 51 (2000) 233-243, J. Med. Chem. 42 (1999) 1422-1427, ibid. 5266-5271, ibid. 41 (1998) 2643-2650, WO 9408966, Arzneim.-Forsch./Drug Res. 45 (1995) 1054-1056, J. Med. Chem. 34 (1991) 2248-2260, ibid. 17 (1974) 956-65, Chem. Rev. 72 (1972), 1-42. Упомянутая выше реакция обычно проводится при повышенной температуре в протонсодержащих растворителях, как, например, уксусная кислота, (изо)пропанол, этанол, метанол или их смеси.
1
2
3
4
В качестве альтернативы, соединения общей формулы I-a, в которой R, R, R, R и Z определены ранее и X представляет собой O, могут быть получены стандартным O-алкилированием соединений общей формулы V-a. В обычном эксперименте соединения V-a взаимодействуют в растворителе, таком как дихлорметан, N,N-диметилформамид, диметилсульфоксид, этанол, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан или толуол, с соответствующим образом замещенными алкилгалогенидами формулы VI (Hal представляет собой Cl, Br, I), в присутствии основания, такого как триэтиламин, N,N,-диизопропилэтиламин (DiPEA), карбонат калия, карбонат цезия или гидрид натрия, не обязательно в присутствии каталитического количества йодида калия или йодида тетрабутиламмония, с получением O-алкилированных производных формулы I-a. В качестве альтернативы, O-алкилированные соединения общей формулы I-a могут быть получены с помощью известных в данной области техники реакций Мицунобу со спиртами формулы VII, трифенилфосфином (необязательно на полимерной подложке) и диалкилазодикарбоксилатом (например, диэтилазодикарбоксилатом) в соответствующем растворителе, таком как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран или дихлорметан, при повышенной температуре или температуре окружающей среды.
1
2
3
4
7
Подобным образом, соединения общей формулы I-b, в которой R, R, R, R и Z определены ранее, а X представляет собой NR, могут быть получены путем N-алкилирования соединений общей формулы V-b с соединениями общей формулы VI, с применением тех же способов, которые описаны для преобразований соединений V-a-I-a.
В качестве альтернативы соединения общей формулы I-b могут быть получены путем восстановительного аминирования соответствующим образом замещенных альдегидов формулы VIII, в которой E-A представляет собой замещенную алкильную группу (например, 3-этокси-пропионовый альдегид, (2-метоксиэтокси)-ацетальдегид, 7-гидрокси-пентаналь) с соединениями V-b и подходящим восстанавливающим агентом, таким как цианоборгидрид натрия или триацетоксиборгидрид натрия, или цинк/уксусная кислота. Реакции восстановительного аминирования хорошо известны в данной области техники. Дополнительно, соединения общей формулы V-b могут быть преобразованы в соответствующие имины формулы V-c путем реакции с альдегидами VIII способами, хорошо известными специалистам в данной области техники, с последующим восстановлением с помощью восстанавливающего агента, такого как боргидрид натрия, с получением соединений I-b.
1
2
3
8
Кроме того, производные 1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина I по данному изобретению могут быть получены исходя из соответствующим образом функционализированных производных 1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина общей структуры IX, в которой R, R, R, X и Z определены ранее и Y представляет собой замещенную алкильную, алкенильную, алкинильную или алкоксиалкильную группу, а FG представляет собой функциональную группу (например, галогенид, защищенный гидроксил, защищенную аминогруппу, азидо, циано, карбоновую кислоту, эфир и им подобную), которая может быть в итоге преобразована в группы, определенные как R.
Protective groups in Organic Synthesis
Например, соединения общей формулы I-c могут быть получены путем удаления защитной группы из соединений общей формулы IX-a, в которой PG представляет собой подходящую защитную группу, такую как трет-бутилдиметилсилил (TBDMS), тетрагидропиранил (THP) или бензоат. Манипуляции с защитными группами хорошо известны в данной области техники: например, смотри: , T.W. Greene и P.G.M. Wuts, John Wiley & sons, Inc., New York, 1999.
1
2
3
Соединения общей формулы I-d, в которой R, R, R, X и Z определены ранее, получают из соединений общей формулы IX-b, в которой LG - это уходящая группа, путем обработки водным раствором аммиака в подходящем растворителе, таком как 1,4-диоксан, ацетонитрил или тетрагидрофуран. В качестве альтернативы соединения общей формулы IX-b могут быть обработаны азидом натрия в подходящем растворителе, таком как N,N-диметилформамид или тетрагидрофуран, с получением соединений общей формулы IX-c, которые могут быть восстановлены с помощью известного в данной области техники восстановления по Штаудингеру с использованием трифенилфосфина (необязательно на полимерной подложке) во влажном THF, необязательно в присутствии водной HCl, с получением соединений общей формулы I-d.
В конкретных случаях соединений IX-d, в которых LG представляет собой бромид в положении аллила, реакция с азидом натрия, за которой следует восстановление по Штаудингеру, может дать региоизомерные продукты, являющиеся соединениями общих формул I-e и I-f, соответственно.
1
2
3
11
11
11
11
11
11
2
2
Соединения общей формулы I-g и I-h, в которой R, R, R, R, X и Z определены ранее, могут быть получены обычным N-ацилированием или N-сульфонилированием соединений общей формулы IX-f, которые синтезируют из производных IX-e и (1-4C)алкиламинов общей формулы HN-Alk. В обычном эксперименте соединения IX-f реагируют в растворителе, таком как дихлорметан, N,N-диметилформамид, этанол, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, толуол, 1-метил-пирролидин-2-он или пиридин, с соответствующим образом замещенным ацилгалогенидом (например, R-C(О)-Cl), ангидридом кислоты (R-C(O)-O-C(O)-R) или сульфонилгалогенидом (например, R-SO-Cl) в присутствии основания, такого как триэтиламин, N,N,-диизопропилэтиламин (DiPEA) или пиридин, с получением N-ацилированных или N-сульфонилированных производных формул I-g и I-h, соответственно. В качестве альтернативы N-ацилированные соединения общей формулы I-g могут быть получены путем реакции производных IX-f с карбоновыми кислотами общей формулы R-COOH
в присутствии конденсирующего реагента, такого как диизопропил карбодиимид (DIC), (3-диметиламинопропил)-этил-карбодиимид (EDCI), тетрафторборат O-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (TBTU) или гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (HATU), и основания, являющегося третичным амином (например, DiPEA), в растворителе, таком как N,N-диметилформамид или дихлорметан, при температуре окружающей среды или повышенной температуре.
9
10
1
2
3
9
10
9
10
Производные карбоновых кислот общей формулы IX-h, доступные путем омыления соответствующих алкиловых эфиров IX-g, могут быть конденсированы с аминами общей структуры RRNH с использованием конденсирующего реагента - как описано ранее для получения производных I-g из соединений IX-f - с получением соединений формулы I-i, в которой R, R, R, R, R, X и Z определены ранее, а Y представляет собой алкильную, алкенильную, алкинильную или алкоксиалкильную группу. В качестве альтернативы, соединения общей формулы IX-h могут быть известными в данной области техники способами преобразованы в соответствующие хлорангидриды IX-i: обработка карбоновых кислот общей формулы IX-h тионилхлоридом или оксалилхлоридом и диметилформамидом (DMF) в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или толуол, дает соответствующие хлорангидриды IX-i. Последующая реакция с аминами общей структуры RRNH, необязательно в присутствии подходящего основания, являющегося третичным амином, дает соединения общей формулы I-i.
1
2
3
11
Соединения общей формулы I-d могут быть N-ацилированы с получением соединений общей формулы I-j, в которой R, R, R, R, X и Z определены ранее. Это ацилирование может быть осуществлено с помощью тех же синтетических процедур, которые были описаны для получения производных I-g из соединений IX-f.
1
2
3
11
Подобно реакциям N-сульфонилирования производных IX-f с получением соединений I-h соединения I-d могут быть сульфонилированы с получением соединений I-k, в которых R, R, R, R, X и Z определены ранее.
1
2
3
4
1
2
3
4
Соединения общей формулы I-1, в которых R, R, R, R и Z определены ранее, могут быть подвергнуты восстановительному алкилированию с помощью простых альдегидов или кетонов (формальдегид, ацетальдегид, пропионовый альдегид, бутиральдегид, ацетон или бутан-2-он) с использованием той же методологии, которая описана для получения соединений I-b из V-b, с получением соединений общей формулы I-m, в которой R, R, R, R и Z определены ранее.
Замещенные циклогексан-1,3-дионы общей формулы II коммерчески доступны или могут быть получены с помощью процедур, описанных в литературе. Соответствующие примеры можно найти в: J. Med. Chem. 43 (2000) 4678-4693, Tetpahedron 56 (2000) 4753-4758, J. Med. Chem. 35 (1992) 3429-3447, ibid. 24 (1981) 1026-1034, Org. Synt. Coll. Vol. V (1973) 400, Chem Ber. 88 (1955) 316-327, Justus Liebig Ann. Chem. 570 (1950) 15-31.
Соединение формулы III-a является коммерчески доступным, а соединение III-b описано в литературе, смотри, например: Drug Dev. Res. 51 (2000) 225-232.
2
3
4
2
3
4
7
Бензальдегиды общей формулы IV-a, в которой R, R и R определены ранее, а X представляет собой O, легко получить из бензальдегидов общей формулы X-a с применением тех же способов, что описаны для преобразования соединений формулы V-a в соединения I-a. Подобным образом, соединения общей формулы IV-b, в которой R, R и R определены ранее, а X представляет собой N-R, получают из производных X-b с использованием тех же способов, которые описаны для преобразования соединений формулы V-b в производные I-b.
Производные 1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина общей формулы V могут быть получены с помощью вышеупомянутой реакции циклоконденсации типа реакции Ганча циклогександионов II с енаминами III и альдегидами X.
2
орто
Соединения общей формулы V-d-e, в которой R представляет собой Br, также могут быть получены путем -бромирования фенолов или анилинов, которое хорошо известно специалистам в данной области техники. Таким образом, соединения формулы V-f-g, синтезированные из соединений II и III и альдегидов XI путем реакции циклоконденсации типа реакции Ганча, дают соединения формулы V-d-e при обработке бромом в подходящем растворителе, таком как уксусная кислота, этанол или дихлорметан или их смеси, необязательно в присутствии ацетата натрия. В качестве альтернативы для достижения этого преобразования может быть использован N-бромсукцинимид в N,N-диметилформамиде или ацетонитриле. Например, смотри: J. Chem. Soc. Perkin Trans.2 6 (2000) 1113-1118, J. Org. Chem. 44 (1979), 4733-4735.
3
5
6
Дополнительно, соединения общей формулы V-j, в которой R представляет собой аминосульфонильную группу и X представляет собой O, могут быть получены путем реакции аминов общей формулы RRNH с соединениями общей формулы V-i необязательно в присутствии основания, являющегося третичным амином, такого как триэтиламин или DiPEA. Соединения V-i получают хлорсульфонилированием соединений общей формулы V-h. Например, смотри в литературе, касающейся хлорсульфонилирования фенолов: Tetpahedron 53 (1997) 4145-4158, Bioorg. Med. Chem. Lett. 13 (2003) 379-382.
Соединения общих формул VI, VII и VIII коммерчески доступны, описаны в литературе и могут быть легко получены специалистами в данной области техники.
Производные 1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина общей формулы IX могут быть получены путем вышеупомянутой реакции циклоконденсации типа реакции Ганча циклогександионов II с енаминами IE и альдегидами XII. В качестве альтернативы алкилирование производных общей формулы V реагентами XIII-XV, которые описаны в литературе, коммерчески доступны и могут быть легко получены, может также давать производные IX с помощью тех же способов, которые используются для получения соединений I-a-b из V-a-b, как описано ранее.
2
Бензальдегиды общей формулы X и XI коммерчески доступны или могут быть изготовлены в соответствии с процедурами, описанными в литературе: J. Chem. Soc, Perkin Trans. 2 (2000) 1119-1124, J. Chem. Soc. Chem Commun. 4 (1993) 419-420, Synth. Commun. 20 (1990) 2659-2666, Chem. Pharm. Bull. 34 (1986) 121-129, Indian J. Chem Sect. B 20 (1981) 1010-1013, Monatsh. Chem. 106 (1975) 1191-1201, DE 1070162, J. Org. Chem. 23 (1958) 120, Tetpahedron Lett. 25 (1984), 2901-2904, J. Org. Chem. 25 (1960), 2053-2055, J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2 (1992), 2235-2242. Кроме того, бензальдегиды общей формулы X-c, в которой R представляет собой бромид и X представляет собой N-H, могут быть получены бромированием соединений общей формулы XVI с использованием тех же процедур, которые описаны для преобразования соединений общих формул V-g-V-e.
2
Соединения общей формулы XVI могут быть получены восстановлением нитрогруппы в соединениях общей формулы XVII до соответствующей аминогруппы. Обычно, соединения XVII обрабатывали цинком и уксусной кислотой в подходящем растворителе, таком как THF или диоксан, при температурах между 0°С и температурой кипения. Альтернативные способы включают в себя обработку железом, SnCl или водородом в присутствии катализатора, являющегося переходным металлом, такого как палладий или платина на угле, с использованием способов и реагентов, хорошо известных специалистам в данной области техники.
2
3
5
6
Бензальдегиды общей формулы X-d, в которой R определен ранее, R представляет собой аминосульфонильную группу и X представляет собой O, могут быть получены хлорсульфонилированием соединений общей формулы XI-c с последующей реакцией с аминами общей формулы RRNH, с использованием тех же процедур, которые описаны для синтеза соединений общей формулы V-j из V-h через V-i. Гидроксильная группа соединений X-d может быть трифторметансульфонилирована способами, известными в данной области техники, с получением соединений XVIII, которые могут быть подвергнуты нуклеофильному ароматическому замещению аммонием с получением бензальдегидов X-e. О соответствующих реакциях ароматического замещения см.: J. Med. Chem. 6 (1963) 272-275, Indian J. Chem. Sect. B 18 (1979), 88-90. Кроме того, производные X-d могут быть преобразованы в соединения формулы XIX, в которой PG представляет собой H или необязательную защитную группу, такую как 4-нитробензил или 2,5-диметоксибензил, после чего проводят перегруппировку Смайлса с получением после снятия защитных групп (если необходимо) продуктов общей формулы X-e. Примеры реакций перегруппировки такого типа см.: J. Org. Chem. 48 (1983) 5140-5143, Tetpahedron Lett. 30 (1989) 931-934, Тетrаhedron 53 (1997) 11919-11928, Synth. Cornmun. 33 (2003) 2725-2736.
2
Бензальдегиды общей формулы XII получают из вышеупомянутых альдегидов формулы X путем алкилирования с соединениями общей формулы XIII или XIV, по аналогии с получением альдегидов IV-a-b из X-a-b. В качестве альтернативы бензальдегиды формулы XII, в которой X представляет собой NH, могут быть получены теми же способами, которые описаны для преобразования производных X-d в X-e, с использованием в последовательности реакций соответствующим образом замещенных аминов общей формулы HN-Y-FG.
Соединения по данному изобретению обладают, по меньшей мере, двумя хиральными атомами углерода и могут, следовательно, быть получены в виде чистых энантиомеров или в виде смеси энантиомеров, или как смесь диастереомеров. Способы получения чистых энантиомеров хорошо известны в данной области техники, например кристаллизация солей, которые получены из оптически активных кислот и рацемической смеси, или с помощью хроматографии с использованием хиральных колонок. Для разделения диастереомеров могут быть использованы колонки для обычной или обращенно-фазовой хроматографии.
Соединения по данному изобретению могут образовывать гидраты или сольваты. Специалистам в данной области техники известно, что заряженные соединения образуют гидратированные молекулы при лиофилизации в воде или образуют сольватированные молекулы, когда их концентрируют в растворе соответствующего органического растворителя. Соединения по данному изобретению включают в себя гидраты или сольваты перечисленных соединений.
Было обнаружено, что производные 2-метил-4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина по данному изобретению являются агонистами рецептора ФСГ. Способы определения связывания гонадотропинов с рецептором, также как и испытания биологической активности как in vitro, так и in vivo, хорошо известны. В целом, экспрессированный рецептор приводят в контакт с тестируемым соединением, и измеряют связывание и стимуляцию или ингибирование функционального ответа.
Чтобы измерить функциональный ответ, выделенную ДНК, кодирующую ген рецептора ФСГ, предпочтительно рецептора человека, экспрессируют в подходящих клетках-хозяевах. Такими клетками могут быть клетки яичников китайского хомячка, но пригодны и другие клетки. Предпочтительны клетки, происходящие из млекопитающих (Jia et al, Mol.Endocrin., 5:759-776, 1991).
Способы конструирования клеточных линий, экспрессирующих рекомбинантный ФСГ, хорошо известны в данной области техники (Sambrook et al., Molecular Cloning: a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, последняя редакция). Экспрессию рецептора проводят путем экспрессии ДНК, кодирующей желаемый белок. Все технологии сайт-направленного мутагенеза, сшивания дополнительных последовательностей, ПЦР (полимеразной цепной реакции) и конструирования пригодных систем экспрессии в настоящее время хорошо известны в данной области техники. Полная ДНК или ее части, кодирующие желаемый белок, могут быть сконструированы синтетически с помощью стандартных твердофазных технологий, предпочтительно с включением сайтов рестрикции, для облегчения сшивания. Подходящие элементы, управляющие транскрипцией и трансляцией включенной кодирующей последовательности, могут быть внесены в кодирующую последовательность ДНК. Как это хорошо известно, в настоящее время доступны системы экспрессии, совместимые с широким разнообразием клеток-хозяев, включая прокариотических хозяев, таких как бактерии, и эукариотических хозяев, таких как дрожжи, растительные клетки, клетки насекомых, клетки млекопитающих, клетки птиц и им подобные.
Клетки, экспрессирующие рецептор, затем приводят в контакт с тестируемым соединением для наблюдения связывания или стимуляции, или ингибирования функционального ответа.
В качестве альтернативы для измерения связывания соединения могут быть использованы изолированные клеточные мембраны, содержащие экспрессированный рецептор.
Для измерения связывания могут быть использованы радиоактивные или флуоресцентные соединения. В качестве эталонного соединения может быть использован рекомбинантный ФСГ человека.
В качестве альтернативы также могут быть проведены исследования конкурентного связывания.
Другие исследования включают в себя скрининг соединений - агонистов ФСГ - путем определения опосредованной рецептором стимуляции накопления цАМФ. Таким образом, этот способ включает экспрессию рецептора на поверхности клетки-хозяина и воздействие на клетку-хозяина тестируемым соединением. Затем измеряют количество цАМФ. Уровень цАМФ повышается вследствие стимулирующего эффекта тестируемого соединения после связывания с рецептором.
В дополнение к прямому измерению, например, уровня цАМФ в подвергшихся воздействию клетках, могут быть использованы клеточные линии, которые в дополнение к трансфекции ДНК, кодирующей рецептор, также трансфецированы второй ДНК, кодирующей репортерный ген, экспрессия которого зависит от уровня цАМФ. Такие репортерные гены должны индуцироваться цАМФ и должны быть сконструированы таким образом, чтобы соединяться с новыми, реагирующими на цАМФ элементами. В целом, экспрессия репортерного гена должна контролироваться каким-либо реактивным элементом, отвечающим на изменение уровня цАМФ. Подходящими репортерными генами являются, например, LacZ, ген щелочной фосфатазы, люциферазы светлячка и зеленого флуоресцирующего белка. Принципы таких исследований трансактивации хорошо известны в данной области техники и описаны, например, в Stratowa, C., Himmler, A. and Czernilofsky, A., (1995) Curr. Opin. Biotechnol. 6:574.
Данное изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей производное 2-метил-4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина или его фармацевтически приемлемые соли, имеющее общую формулу I, в смеси с фармацевтически приемлемыми добавками и, необязательно, другими терапевтическими агентами. Добавки должны быть «приемлемыми» в том смысле, что они должны быть совместимы с другими ингредиентами композиции и не представлять опасности для потребителя.
Композиции включают, например, пригодные для перорального, подъязычного, подкожного, внутривенного, внутримышечного, назального, местного или ректального введения и тому подобного, композиции в разовых формах введения.
Для перорального введения активный ингредиент может быть представлен в виде отдельных единиц, таких как таблетки, капсулы, порошки, грануляты, растворы, суспензии и тому подобное.
Для парентерального введения фармацевтическая композиция по данному изобретению может быть представлена в разовой дозе или в виде многодозовых контейнеров, например инъекционных жидкостей в предварительно определенных количествах, например в герметичных флаконах и ампулах, которые также могут храниться в высушенном сублимацией (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления перед использованием стерильного жидкого носителя например, воды.
Смешанный с такими фармацевтически приемлемыми добавками, например, как описанные в стандартном источнике, Gennaro, A.R. et al, Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th Edition., Lippincott Williams & Wilkins, 2000, см. специально Часть 5: Фармацевтическое производство), активный агент может быть спрессован в твердые единицы дозирования, такие как пилюли, таблетки, или может быть загружен в капсулы или суппозитории. С помощью фармацевтически приемлемых жидкостей активный агент может применяться в виде жидкой композиции, например как инъекционный препарат в форме раствора, суспензии, эмульсии или в виде спрея, например назального спрея.
Для изготовления твердых единиц дозирования рассматривается использование общепринятых добавок, таких как наполнители, красящие вещества, полимерные связующие вещества и тому подобное. В целом, может быть использована любая фармацевтически приемлемая добавка, которая не влияет на функцию активных соединений. Подходящие носители, с которыми активный агент по данному изобретению может быть введен как твердая композиция, включают лактозу, крахмал, производные целлюлозы и подобные или их смеси, использованные в подходящих количествах. Для парентерального введения могут быть использованы водные суспензии, изотонические солевые растворы и стерильные инъекционные растворы, содержащие фармацевтически приемлемые диспергирующие агенты и/или увлажняющие агенты, такие как пропиленгликоль или бутиленгликоль.
Данное изобретение также включает фармацевтическую композицию, описанную выше в данном документе, в комбинации с упаковочным материалом, подходящим для упомянутой композиции, упомянутый упаковочный материал включает в себя инструкции по применению композиции, как описано выше в данном документе.
Точная доза и режим введения активного ингредиента или его фармацевтической композиции могут варьировать в зависимости от конкретного соединения, пути введения, возраста и состояния отдельных пациентов, которым вводится лекарственное средство.
В целом, парентеральное введение требует более низкой дозировки, чем другие способы введения, которые более зависимы от абсорбции. Однако подходящая дозировка для человека может составлять 0,05-25 мг на кг веса тела. Желаемая доза может быть представлена в виде одной дозы или как множественные поддозы, вводимые через соответствующие интервалы времени в течение дня, или, в случае реципиентов-женщин, как дозы, которые должны вводиться в соответствующие ежедневные интервалы в течение менструального цикла. Дозировка, также как и режим введения, может различаться между реципиентами-женщинами и мужчинами.
Таким образом, соединения по данному изобретению могут быть использованы в терапии.
Другой аспект данного изобретения состоит в применении производного 2-метил-4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина, имеющего общую формулу I, для производства лекарственного средства, которое используется для лечения нарушений, чувствительных к путям передачи внутриклеточного сигнала, опосредованным рецептором ФСГ, предпочтительно, для лечения нарушений фертильности. Таким образом, пациентам, которые в этом нуждаются, могут быть введены подходящие количества соединений по данному изобретению.
Еще один аспект данного изобретения состоит в применении производного 2-метил-4-фенил-5-оксо-1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина, имеющего общую формулу I, для производства лекарственного средства для лечения бесплодия.
Данное изобретение проиллюстрировано нижеследующими примерами.
Общие [сведения]:
В примерах использованы следующие сокращения: DMA - N,N-диметиланилин, DiPEA - N,N-диизопропилэтиламин, TFA - трифторуксусная кислота, HATU - гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония, DMF - N,N-диметилформамид, THF - тетрагидрофуран, EtOAc - этилацетат.
Если не указано иное, все конечные продукты в нижеизложенных примерах лиофилизировали из смесей вода/1,4-диоксан, смесей вода/трет-бутанол или вода/ацетонитрил. Если соединение получали в виде соли TFA, TFA добавляли в соответствующем количестве к смеси растворителей перед лиофилизацией.
Названия конечных продуктов, описанных в примерах, были сгенерированы с помощью программы Beilstein Autonom (версия: 2.02.304).
Следующие аналитические способы высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) были использованы для определения времени удерживания:
Способ 1
3
2
3
: Колонка: 5 мкм Luna C-18(2) 150 × 4,6 мм; поток: 1 мл/мин; детектирование: 210 нм; температура колонки: 40°С; растворитель A: CHCN/H0=1/9 (объем/объем); растворитель B: CHCN; растворитель C: 0,1 M водная трифторуксусная кислота; градиент: растворитель A/B/C=75/20/5 до 15/80/5 (объем/объем/объем) в течение 30,00 мин, затем без градиента в течение дополнительных 10,00 минут при A/B/C=15/80/5 (объем/объем/объем).
Способ 2
: Идентичен способу 1, за исключением использованного градиента: Градиент: растворитель A/B/C=95/0/5 до 15/80/5 (объем/объем/объем) в течение 20,00 мин, затем без градиента в течение дополнительных 10,00 мин в A/B/C=15/80/5 (объем/объем/объем).
1
Соотношение диастереомеров (Диаст. соотн.) определяли, если с использованием соответствующего аналитического способа ВЭЖХ наблюдалось базовое разделение индивидуальных диастереомеров. В качестве альтернативы соотношение диастереомеров определяли с помощью H ЯМР-анализа, когда идентифицируются различающиеся сигналы, соответствующие диастереомерам. Описанные соотношения диастереомеров относятся к конфигурациям C-4 и C-7 ядра 1,4,5,6,7,8-гексагидрохинолина.
Использовали следующие способы препаративной очистки с помощью ВЭЖХ:
Способ A:
2
3
3
Колонка=Luna C-18. Градиент: 0,1% трифторуксусная кислота в HO/CHCN (9/1, объем/объем)/CHCN=80/20 до 0/100 (объем/объем) в течение 30-45 мин, в зависимости от легкости разделения. Детектирование: 210 нм.
Способ B
2
3
3
: Колонка=Luna C-18. Градиент: HO/CHCN (9/1, объем/объем)/CHCN, составляющий 80/20 до 0/100 (объем/объем) в течение 30-45 мин, в зависимости от легкости разделения. Детектирование: 210 нм.
Пример 1
{4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-енил)-амид фуран-2-карбоновой кислоты
(a) 4-(3-бром-5-этокси-4-гидрокси-фенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
Смесь 3-бром-5-этокси-4-гидрокси-бензальдегида (6 г), 3-аминокротонитрила (2,01 г) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (3,8 г) в этаноле (20 мл) перемешивали при 80°С в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом и осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc 1/1 (объем/объем) в качестве элюента. Выход: 6,3 г. MS-ESI: [M+H]=445/447.
(b) 4-[3-бром-4-(4-бром-бут-2-енилокси)-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
+
Смесь 4-(3-бром-5-этокси-4-гидрокси-фенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрила (3,04 г), 1,4-дибромбутена (11,68 г) и карбоната калия (1,887 г) в диоксане (100 мл) перемешивали при 80°С в течение 5 ч. Смесь выливали в воду и экстрагировали дихлорметаном. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок растворяли в ацетонитриле, промывали петролейным эфиром и гептаном, чтобы удалить основную часть избытка дибромбутена. Слой ацетонитрила концентрировали под вакуумом и осадок перекристаллизовывали из дихлорметана и гептана. Выход: 3,02 г. MS-ESI: [M+H]=579,2.
(c) Смесь 4-[4-(4-азидо-бут-2-енилокси)-3-бром-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрила и 4-[4-(2-азидо-бут-3-енилокси)-3-бром-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрила
+
Смесь соединения, полученного в примере 1b (1,0 г), и азида натрия (0,34 г) в DMF (50 мл) перемешивали в течение 2 ч. Смесь сливали в воду. Образовавшийся осадок собирали с помощью фильтрации, промывали водой и высушивали под вакуумом. Выход: 914 мг: смесь 2 регио-изомеров. MS-ESI: [M+H]=540,2/542,2.
(d) Смесь 4-[4-(4-амино-бут-2-енилокси)-3-бром-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрила и 4-[4-(2-амино-бут-3-енилокси)-3-бром-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрила
+
К раствору неочищенной смеси региоизомерных соединений, полученной в примере 1c (0,914 г) в THF/дихлорметане (2/1 (объем/объем), 18 мл), добавляли воду (2 мл) и трифенилфосфин на полимерной подложке (1,13 г, нагрузка 3,0 ммоль/г). Смесь перемешивали при 40°С в течение 8 ч. Полимерную подложку отфильтровывали и промывали дихлорметаном и метанолом. Объединенные органические слои концентрировали под вакуумом. Выход: 0,8 г смеси 2 региоизомеров. MS-ESI: [M+H]=514,2/516,2.
(e) {4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-енил}-амид фуран-2-карбоновой кислоты
3
4
t
t
+
Раствор продуктов, полученных в примере 1d (88,8 мг), DiPEA (151 мкл) и 2-фуроил хлорида (34 мкл) в дихлорметане (4 мл) перемешивали в течение 17 ч. Смесь разбавляли дихлорметаном и промывали насыщенным водным NaHCO. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 46,4 мг. MS-ESI: [M+H]=608,2/610,2; ВЭЖХ: R=19,45 мин. (диаст. 1) R=19,73 мин. (диастр. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 2
N-{4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-енил}-изобутирамид
3
4
t
+
Раствор продуктов, описанных в примере 1d (200 мг), DiPEA (339 мкл) и изобутирил хлорида (81 мкл) в дихлорметане (4 мл) перемешивали в течение 17 ч. Смесь разбавляли дихлорметаном и промывали насыщенным водным NaHCO. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок очищали путем препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 82 мг. MS-ESI: [M+H]=584,2/586,2; ВЭЖХ: R=19,41 мин (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 3
{4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-енил}-амид циклопропанкарбоновой кислоты
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, было получено из смеси соединений, описанных в примере 1d (88,8 мг), DiPEA (151 мкл) и циклопропанкарбонил хлорида (31 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 2, и очищено с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Также может быть выделен региоизомер (пример 4). Выход: 39 мг. MS-ESI: [M+H]=582,2/584,2; ВЭЖХ: R=18,75 мин. (диаст. 1) R=18,99 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 4
{1-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-феноксиметил]-аллил}-амид циклопропанкарбоновой кислоты
+
t
t
См. пример 3. Региоизомер по примеру 3 также выделяли путем препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 18 мг. MS-ESI: [M+H]=582,2/584,2; ВЭЖХ: R=20,05 мин (диаст. 1) R=20,37 мин. (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 5
N-{4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси)-бут-2-енил}-2-метокси-ацетамид
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из смеси соединений, описанных в примере 1d (88,8 мг), DiPEA (151 мкл) и метоксиацетил хлорида (31 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 2, и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 44,7 мг. MS-ESI: [M+H]=586,4/588,4; ВЭЖХ: R=17,26 мин. (диаст. 1) R=17,56 мин. (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 6
Этиловый эфир {4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-енил}-карбаминовой кислоты
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из смеси соединений, описанных в примере 1d (88,8 мг), DiPEA (151 мкл) и этил хлорформата (33 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 2, и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Также может быть выделен региоизомер (пример 7). Выход: 45,4 мг. MS-ESI: [M+H]=586,2/588,2. ВЭЖХ: R=21,21 мин (диаст. 1) R=21,52 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 7
Этиловый эфир {1-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-феноксиметил]-аллил}-карбаминовой кислоты
+
t
t
См. пример 6. Региоизомер по примеру 6 выделяли с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 20 мг. MS-ESI: [M+H]=586,2/588,2; ВЭЖХ: R=22,96 мин. (диаст. 1) R=23,33 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 8
N-{1-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-феноксиметил]-аллил}-бензамид
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из смеси соединений, описанных в примере 1d (88,8 мг), DiPEA (151 мкл) и бензоил хлорида (40 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 2, и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 14,5 мг. MS-ESI: [M+H]=618,4/620,4; ВЭЖХ: R=22,97 мин (диаст. 1) R=23,27 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 3:1.
Пример 9
N-{1-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-феноксиметил]-аллил}-ацетамид
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из смеси соединений, описанных в примере 1d (88,8 мг), DiPEA (151 мкл) и ацетилхлорида (24 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 2, и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 16,7 мг. MS-ESI: [M+H]=556,2/568,2; ВЭЖХ: R=17,13 мин (диаст. 1) R=17,44 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 3:1
Пример 10
(2-метокси-этил)-амид 4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-еновой кислоты
(a) Метиловый эфир 4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-еновой кислоты
4
+
Смесь соединения, описанного в примере 1a (1,48 г), карбоната калия (0,919 г) и метил 4-бромкротоната (4,759 г) в диоксане (60 мл) перемешивали при 80°С в атмосфере азота в течение 17 ч. Смесь разбавляли дихлорметаном и промывали водой. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc (от 1/0 до 0/1) в качестве элюента. Выход: 1,2 г. MS-ESI: [M+H]=543,2/545,2.
(b) 4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-еновая кислота
+
Раствор метилового эфира 4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-еноевой кислоты (1,2 г) в диоксане (100 мл) и 2 N гидроксида натрия (2,2 мл) перемешивали в течение 5 дней. Смесь выливали в воду и доводили pH до 2 с помощью 4 N водной HCl. Образовавшуюся смесь экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой обезвоживали (MgSO4), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Выход: 1,5 г. MS-ESI: [M+H]=529,2/531,2.
(c) (2-метокси-этил)-амид 4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-еновой кислоты
4
t
+
Смесь 4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-еновой кислоты (0,1 г), HATU (0,108 г), DiPEA (165 мкл) и 2-метоксиэтиламина (25 мкл) в дихлорметане перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 65,5 мг. MS-ESI: [M+H]=586,4/588,4; ВЭЖХ: R=16,39 мин (способ 1). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 11
Изопропил-метил-амид 4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-еновой кислоты
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из соединения, описанного в примере 10b (100 мг), DiPEA (165 мкл), HATU (108 мг), и изопропил-метил-амина (29 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 10c. Выход: 65 мг. MS-ESI: [M+H]=584,4/586,4; ВЭЖХ: R=19,27 мин (диаст. 1) R=19,54 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 12
(Пиридин-2-илметил)-амид 4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бут-2-еновой кислоты
+
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из соединения, описанного в примере 10b (100 мг), DiPEA (165 мкл), HATU (108 мг) и 2-пиколиламина (29 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 10c. Осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ A). Выход: 63 мг (в виде соли TFA). MS-ESI: [M+H]=619,4/621,4; ВЭЖХ: R=9,92 мин (способ 1). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 13
N-{4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бутил}-изобутирамид
(a) 4-[3-бром-4-(4-бром-бутокси)-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
+
Смесь соединения, описанного в примере 1a (2,23 г), 1,4-дибромбутана (8,65 г) и карбоната калия (3 г) в DMF (25 мл) перемешивали при 60°С в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и промывали гептаном, чтобы удалить большую часть избытка дибромбутана. Слой DMF разбавляли водой, и образовавшуюся смесь экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc (от 4/1 до 1/2) в качестве элюента. Выход: 2,23 г. MS-ESI: [M+H]=581,1.
(b) 4-[4-(4-амино-бутокси)-3-бром-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
+
К раствору продукта стадии (a) (2 г) в диоксане (60 мл) добавляли концентрированный водный NHOH (40 мл). Смесь перемешивали в автоклаве при 80°С в течение 17 ч и затем концентрировали под вакуумом. Выход: 2,21 г (HBr соль). MS-ESI: [M+H]=516,4/518,4.
(c) N-{4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бутил}-изобутирамид
4
t
+
Смесь продукта стадии (b) (117 мг), триэтиламина (81 мкл) и изобутирилхлорида (24 мкл) в дихлорметане (3 мл) перемешивали в течение 17 ч. Смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 0,5 N водной HCl. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc (от 1/0 до 0/1) в качестве элюента. Выход: 69 мг. MS-ESI: [M+H]=610,4/612,4; ВЭЖХ: R=19,45 мин (способ 1). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 14
{4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бутил}-амид этансульфоновой кислоты
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из соединения, описанного в примере 13b (150 мг), триэтиламина (104 мкл) и этансульфонил хлорида (28 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 13c. Выход: 99 мг. MS-ESI: [M+H]=608,2/610,2; ВЭЖХ: R=19,32 мин (диаст. 1) R=19,57 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 15
{3-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-пропил}-амид циклопропанкарбоновой кислоты
(a) 4-[3-бром-4-(3-бром-пропокси)-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из соединения, описанного в примере 1a (2 г), 1,3-дибромпропана (3,67 мл) и карбоната калия (2,49 г) в соответствии с процедурой, описанной в примере 13a. Выход: 2,47 г. MS-ESI: [M+H]=567,2.
(b) 4-[4-(3-амино-пропокси)-3-бром-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
+
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из продукта стадии (a) (2,37 г) и концентрированного водного NHOH (40 мл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 13b. Выход: 2,45 г (HBr соль). MS-ESI: [M+H]=502,3/504,3.
(c) {3-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-пропил}-амид циклопропанкарбоновой кислоты
4
Смесь продукта стадии (b) (165 мг), триэтиламина (118 мкл) и циклопропанкарбонил хлорида (31 мкл) в дихлорметане (2 мл) перемешивали в течение 17 ч. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и промывали 0,5 N водной HCl. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc (от 3/1 до 0/1) в качестве элюента.
+
t
Выход: 111,2 мг. MS-ESI: [M+H]=570,4/572,4; ВЭЖХ: R=18,23 мин (способ 1). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 16
N-{5-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-пентил}-ацетамид
(a) 4-[3-бром-4-(5-хлор-пентилокси)-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из соединения, описанного в примере 1a (2 г), 1,5-дихлорпентана (4,76 мл) и карбоната калия (2,49 г) в соответствии с процедурой, описанной в примере 13a. Выход: 2,1 г. MS-ESI: [M+H]=549,2/551,2.
(b) 4-[4-(5-амино-пентилокси)-3-бром-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
+
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из продукта стадии (a) (2,0 г) и концентрированного водного NHOH (40 мл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 13b. Выход: 2,1 г (HCl соль). MS-ESI: [M+H]=530,3/532,3.
(c) N-{5-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-пентил}-ацетамид
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из продукта стадии (b) (147,5 мг), триэтиламина (108 мкл) и ацетилхлорида (22 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 15c. Выход: 53,6 мг. MS-ESI: [M+H]=572,4/574,4; ВЭЖХ: R=17,44 мин (диаст. 1), R=17,75 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 17
N-{5-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-пентил}-2-метокси-ацетамид
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из соединения, описанного в примере 16b (147,5 мг), триэтиламина (108 мкл) и метоксиацетилхлорида (28 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 15c. Выход: 88,5 мг. MS-ESI: [M+H]=602,4/604,4; ВЭЖХ: R=18,87 мин (диаст. 1), R=19,20 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 18
{4-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-бутил}-амид фуран-2-карбоновой кислоты
+
t
Соединение, упомянутое в названии примера, было получено из соединения, описанного в примере 13b (117 мг), триэтиламина (81 мкл) и 2-фуроил хлорида (23 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 13c. Выход: 85,7 мг. MS-ESI: [M+H]=610,4/612,4; ВЭЖХ: R=19,66 мин (способ 1). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 19
N-{2-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-этил}-метансульфонамид
(a) 4-[3-бром-5-этокси-4-(2-гидрокси-этокси)-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
+
Смесь соединения, описанного в примере 1a (4 г), карбоната калия (3,73 г) и 2-бромоэтанола (1,274 мл) в DMF (30 мл) перемешивали при 60°С в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и дважды экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc (от 1/1 до 0/1) в качестве элюента. Выход: 3,1 г. MS-ESI: [M+H]=489,4/491,4.
(b) 2-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-этиловый эфир метансульфоновой кислоты
4
+
Смесь продукта стадии (a) (2,9 г), триэтиламина (2,46 мл) и метансульфонил хлорида (550 мкл) в дихлорметане (50 мл) перемешивали в течение 17 ч. Смесь экстрагировали 0,5 N водной HCl. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью дихлорметан/метанол (от 1/0 до 95/5) в качестве элюента. Выход: 3,38 г. MS-ESI: [M+H]=567,2/569,2.
(c) 4-[4-(2-амино-этокси)-3-бром-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
3
+
Смесь продукта стадии (b) (3,38 г) и концентрированного водного NHOH (60 мл) в диоксане (90 мл) перемешивали при 80°С в автоклаве в течение 17 ч. Смесь концентрировали под вакуумом. Выход: 3,82 г (соль MeSOH). MS-ESI: [M+H]=488,2/490,2.
(d) N-{2-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-этил}-метансульфонамид
4
t
+
Смесь продукта стадии (c) (130,7 мг), триэтиламина (93 мкл) и метансульфонил хлорида 21 мкл в дихлорметане (3 мл) перемешивали в течение 17 ч. Смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 0,5 N водной HCl. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 57,1 мг. MS-ESI: [M+H]=566,0/568,0; ВЭЖХ: R=12,49 мин (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 20
{6-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-гексил}-амид пропан-2-сульфоновой кислоты
(a) 4-[3-бром-4-(6-бром-гексилокси)-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из соединения, описанного в примере 1a (1 г), 1,6-дибромогексана (2,78 мл) и карбоната калия (1,24 г) в соответствии с процедурой, описанной в примере 13a. Выход: 0,93 г. MS-ESI: [M+H]=607,4/609,4.
(b) 4-[4-(6-амино-гексилокси)-3-бром-5-этокси-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
+
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из продукта стадии (a) (0,93 г) и концентрированного водного NHOH (20 мл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 13b. Выход: 1,08 г (HBr соль). MS-ESI: [M+H]=544,4/546,4.
(c) {6-[2-Бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-гексил}-амид пропан-2-сульфоновой кислоты
+
t
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из соединения, описанного на стадии (b) (134 мг), триэтиламина (89 мкл) и изопропилсульфонил хлорида (29 мкл) в соответствии с процедурой, описанной в примере 13c. Выход: 22,5 мг. MS-ESI: [M+H]=650,4/652,4; ВЭЖХ: R=20,20 мин (диаст. 1), R=20,55 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 21
4-{4-[2-(2-амино-этокси)-этокси]-3-бром-5-этокси-фенил}-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
(a) 4-{3-бром-5-этокси-4-[2-(2-гидрокси-этокси)-этокси]-фенил}-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
Алкилирование соединения, описанного в примере 1a (5 г), с (2-хлорэтокси)-этанолом (1,42 мл) проводили в соответствии со способом, описанным в примере 10a. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc в качестве элюента. Выход: 3,03 г. MS-ESI: [M+H]=533,2/535,2.
(b) 2-{2-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7.8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-этокси}-этиловый эфир метансульфоновой кислоты
+
Соединение, упомянутое в названии примера, получали аналогично способу, описанному в примере 19b, исходя из соединения, описанного в примере 21a (3,0 г), и метансульфонил хлорида (522 мкл). Выход: 2,98 г. MS-ESI: [M+H]=611,4/613,4.
(c) 4-{4-[2-(2-амино-этокси)-этокси]-3-бром-5-этокси-фенил}-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
3
t
+
Соединение, упомянутое в названии примера, получали аналогично способу, описанному в примере 19c, исходя из соединения, описанного на стадии (b) (2,98 г), что приводило к выходу 3,0 г соединения, упомянутого в названии примера (MeSOH соль). Небольшое количество соединения (214 мг) очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ A). Выход: 221,7 мг (TFA соль). MS-ESI: [M+H]=532,2/534,2; ВЭЖХ: R=15,39 мин (способ 2). Диаст. соотн.: 5:1.
Пример 22
(2-{2-[2-бром-4-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-6-этокси-фенокси]-этокси}-этил)-амид циклопропанкарбоновой кислоты
3
t
+
Соединение, упомянутое в названии примера, получали аналогично способу, описанному в примере 19d, исходя из неочищенного соединения (MeSOH соль), описанного в примере 21c (214 мг), и циклопропанкарбонил хлорида (37 мкл), в присутствии триэтиламина (141 мкл). Осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 165 мг. MS-ESI: [M+H]=600,4/602,4; ВЭЖХ: R=22,40 мин (способ 2). Диаст. соотн.: 8:1.
Пример 23
3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-2-[2-(2-гидрокси-этокси)-этокси]-N,N-диметил-бензолсульфонамид
(a) 4-(3-бром-4-гидрокси-фенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
Реакцию 3-бром-4-гидрокси-бензальдегида (13,07 г) с 3-аминокротонитрилом (5,34 г) и 5-пропилциклогексан-1,3-дионом (10,02 г) проводили в соответствии со способом, описанным в примере 1a. Выход: 20,25 г. MS-ESI: [M+H]=401/403.
(b) 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-2-гидрокси-бензолсульфонил хлорид
3
4
+
При -10°С и в атмосфере азота соединение, описанное в примере 23a (20,25 г), порциями добавляли в течение 1 ч к ClSOH (47 мл). После перемешивания при -10°С в течение 1 ч реакционной смеси позволяли нагреться (до комнатной температуры) и перемешивание продолжали в течение еще 17 ч. Реакционную смесь выливали на колотый лед (800 мл) и несколько раз экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок перекристаллизовывали из EtOAc. Выход: 23,7 г. MS-ESI: [M+H]=499,0/501,0.
(c) 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-2-гидрокси-N,N-диметил-бензолсульфонамид
+
Диметиламин барботировали через суспензию соединения, описанного в примере 23b (4,1 г), в диоксане (85 мл) в течение 30 мин. После перемешивания в течение 17 ч реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой. В ходе экстракции соединение, упомянутое в названии примера, кристаллизовалось в водном слое. Соединение, упомянутое в названии примера, получали путем фильтрования. Выход: 2,19 г. MS-ESI: [M+H]=508,2/510,2.
(d) 3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-2-[2-(2-гидрокси-этокси)-этокси]-N,N-диметил-бензолсульфонамид
+
t
Алкилирование соединения, описанного в примере 23c (740 мг), с 2-(2-хлорэтокси)-этанолом (185 мкл) проводили в соответствии со способом, описанным в примере 10a. Выход: 35,6 мг. MS-ESI: [M+H]=596/598; ВЭЖХ: R=14,73 мин (способ 1).
Пример 24
4-{3-бром-4-[2-(2-гидрокси-этокси)-этокси]-5-изопропокси-фенил}-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
(a) 3-бром-5-гидрокси-4-(4-нитро-бензилокси)-бензальдегид
4
+
Смесь 3-бром-4,5-дигидрокси-бензальдегида (2 г), 4-нитробензилбромида (2 г), карбоната лития (680 мг) и небольшого количества йодида тетрабутиламмония (около 50 мг) в DMF (15 мл) перемешивали при 60°С в течение 4 ч. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Выход: 2,82 г. MS-ESI: [M+H]=352,0/354,0.
(b) 3-бром-5-изопропокси-4-(4-нитро-бензилокси)-бензальдегид
4
+
Смесь продукта стадии (a) (2,82 г), изопропил йодида (1,6 мл) и карбоната калия (2,21 г) в DMF (25 мл) перемешивали при 60°С в течение 4 ч. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Выход: 1,66 г. MS-ESI: [M+H]=394,0/396,0.
(c) 4-[3-бром-5-изопропокси-4-(4-нитро-бензилокси)-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
Смесь продукта стадии (b) (1,06 г), 3-аминокротонитрила (221 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (415 мг) в этаноле (20 мл) перемешивали при 80°С в течение 17 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, и осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc=1/1 (объем/объем) в качестве элюента. Выход: 750 мг. MS-ESI: [M+H]=594,4/596,4.
(d) 4-(3-бром-4-гидрокси-5-изопропокси-фенил)-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
3
4
+
К раствору продукта, выделенного на стадии (c) (750 мг), и уксусной кислоты (1,5 мл) в THF (50 мл) добавляли цинковую пыль (1,5 г) при энергичном перемешивании. Смесь перемешивали в течение 2 ч, а затем фильтровали. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали насыщенным водным NaHCO. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Выход: 720 мг. MS-ESI: [M+H]=457,6/459,6.
(e) 4-{3-бром-4-[2-(2-гидрокси-этокси)-этокси] -5-изопропокси-фенил}-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
t
+
Смесь неочищенного соединения, описанного на стадии (d) (100 мг), 2-(2-хлорэтокси)этанола (27 мкл), карбоната калия (90 мг) и каталитического количества йодида тетрабутиламмония в DMF (3 мл) перемешивали в течение 20 ч. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc (от 1/0 до 0/1) в качестве элюента. Выход: 29 мг. MS-ESI: [M+H]=547,2/549,2; ВЭЖХ: R=18,25 мин (способ 1). Диаст. соотн.: 3:1.
Пример 25
4-{3-бром-5-этокси-4-[2-(2-гидрокси-этокси)-этокси]-фенил}-2-метил-3-нитро-7-пропил-4,6,7,8-тетрагидро-1H-хинолин-5-он
(a) 1-нитро-пропан-2-он
4
К охлажденному раствору нитрометана (1,73 мл) в THF (50 мл) добавляли гидрид натрия (1,28 г). После перемешивания в течение 20 мин смесь добавляли к раствору ацетилимидазола (2,72 г) в THF (50 мл) и нагревали с обратным холодильником в течение 17 ч. Образовывался осадок, который собирали фильтрованием. Твердое вещество растворяли в воде и доводили pH до 3. Водный слой экстрагировали с помощью EtOAc 3 раза. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Выход: 1,84 г.
(b) 1-метил-2-нитро-виниламин
Смесь 1-нитро-пропан-2-она (1,6 г) и ацетата аммония (1,3 г) в толуоле (25 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 17 ч. Воду удаляли из реакционной смеси с помощью насадки Дина-Старка. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc (от 1/0 до 0/1) в качестве элюента. Выход: 1,07 г.
(c) 4-(3-бром-5-этокси-4-гидрокси-фенил)-2-метил-3-нитро-7-пропил-4,6,7,8-тетра-гидро-1H-хинолин-5-он
+
Смесь 1-метил-2-нитро-виниламина (1 г), 5-пропилциклогексан-1,3-диона (1,61 г) и 3-бром-5-этокси-4-гидрокси-бензальдегида (2,57 г) в этаноле (50 мл) перемешивали с обратным холодильником в течение 17 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом. Осадок растворяли в дихлорметане. Образовывался осадок, который собирали с помощью фильтрования. Твердое вещество хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc (от 1/0 до 0/1) в качестве элюента. Выход: 2,8 г. MS-ESI: [M+H]=465,0/467,0.
(d) 4-{3-бром-5-этокси-4-[2-(2-гидрокси-этокси)-этокси]-фенил}-2-метил-3-нитро-7-пропил-4,6,7,8-тетрагидро-1H-хинолин-5-он
4
t
t
+
Смесь продукта, описанного на стадии (c) (120 мг), 2-(2-хлор-этокси)-этанола (39 мг) и карбоната калия (110 мг) в DMF (1 мл) перемешивали при 60°С в течение 17 ч. Смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1 N водной HCl. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 21,7 мг. MS-ESI: [M+H]=553,0/555,0; ВЭЖХ: R=16,12 мин (диаст. 1), R=16,46 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 4:1.
Пример 26
3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-2-(2-гидрокси-этокси)-N,N-диметил-бензолсульфонамид
4
+
Смесь соединения, описанного в примере 23c (203 мг), 2-бромэтанола (29,5 мкл), карбоната калия (187 мг) и йодида калия (8 мг) в DMF (10 мл), перемешивали при 60°С в течение 17 ч. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 17 мг. MS-ESI: [M+H]=552,2/554,2; ВЭЖХ: Rt=14,56 мин (способ 1).
Пример 27
4-[3-бром-5-этокси-4-(2-гидрокси-этокси)-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
t
Соединение, упомянутое в названии примера, получали из соединения, описанного в примере 1a (350 мг), 2-бромэтанола (111 мкл), карбоната калия (326 мг) и йодида калия (8 мг) в соответствии с процедурой, описанной в примере 26. Выход: 272,3 мг. MS-ESI: [M+H]=489,2/491,2; ВЭЖХ: R=21,15 мин (способ 2). Диаст. соотн.: 6:1.
Пример 28
4-[3-бром-5-этокси-4-(4-гидрокси-бут-2-енилокси)-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
4
t
+
К раствору соединения, описанного в примере 1b (150 мг), в диоксане (2,5 мл) и воде (2,5 мл) добавляли карбонат кальция (130 мг). Смесь перемешивали в атмосфере азота при 100°С в течение 4 ч. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали 1 N водной HCl. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на силикагеле смесью гептан/EtOAc (от 1/0 до 0/1) в качестве элюента. Выход: 95 мг. MS-ESI: [M+H]=515,2/517,2; ВЭЖХ: R=16,19 мин (способ 1).
Пример 29
3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-2-(2-метокси-этокси)-N,N-диметил-бензолсульфонамид
4
t
+
Смесь соединения, описанного в примере 23c (200 мг), 2-бромэтил метилового эфира (39 мкл), карбоната калия (109 мг) и йодида калия (20 мг) в DMF (5 мл) перемешивали при 60°С в течение 17 ч. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали водой. Органический слой обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок хроматографировали на оксиде алюминия EtOAc в качестве элюента. Выход: 46,8 мг. MS-ESI: [M+H]=566,0/568,0; ВЭЖХ: R=19,84 мин (способ 1).
Пример 30
3-бром-5-(3-циано-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-4-ил)-2-[2-(2-метокси-этокси)-этокси]-N,N-диметил-бензолсульфонамид
4
t
+
Смесь соединения, описанного в примере 23c (202 мг), 2-(2-метоксиэтокси) этанола (78 мкл), диэтил азодикарбоксилата (DEAD) (75 мкл) и трифенилфосфина на полимерной подложке (237 мг (нагрузка 1,69 ммоль/г)) в дихлорметане (3 мл) и THF (0,75 мл) перемешивали в течение 17 ч. Полимер отфильтровывали и промывали метанолом. Объединенные органические слои обезвоживали (MgSO), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 22,5 мг. MS-ESI: [M+H]=610,2/612,2; ВЭЖХ: R=19,13 мин (способ 1).
Пример 31
4-[3-бром-4-(2-метокси-этиламино)-5-(морфолин-4-сульфонил)-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
(a) 3-бром-5-хлорсульфонил-4-фтор-бензойная кислота
4
3-бром-4-фтор-бензойную кислоту (2,0 г) растворяли в хлорсульфоновой кислоте (97%, 35 мл) и нагревали до 170°С в течение 72 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и по каплям добавляли к водоледяной смеси. Экстракция с помощью EtOAc, обезвоживание (MgSO) и концентрация под вакуумом дают желаемое соединение. Выход: 2,5 г.
(b) 3-бром-4-фтор-5-(морфолин-4-сульфонил)-бензойная кислота
2
4
К раствору 3-бром-5-хлорсульфонил-4-фтор-бензойной кислоты (3,0 г) в диоксане/воде (9/1 (объем/объем), 30 мл) добавляли DiPEA (5 мл) и морфолин (1,65 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали 2 M водной HCl. Органический слой обезвоживали (NaSO) и концентрировали под вакуумом. Выход: 2,6 г.
(c) 3-бром-4-(2-метокси-этиламино)-5-(морфолин-4-сульфонил)-бензойная кислота
2
4
Раствор 3-бром-4-фтор-5-(морфолин-4-сульфонил)-бензойной кислоты (500 мг) в 2-метокси-этиламине нагревали до 80°С в течение 3 ч. Смесь растворяли в 2 M водном NaOH и промывали с помощью EtOAc. Водный слой подкисляли с помощью 2 M HCl и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой обезвоживали (NaSO) и концентрировали под вакуумом. Выход: 575 мг.
(d) 3-бром-4-(2-метокси-этиламино)-5-(морфолин-4-сульфонил)-бензальдегид
3
2
.
К раствору продукта, описанного на стадии (c) (571 мг) в THF, добавляли BH THF (4,5 мл, 1 M в THF). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре, обработки водой, экстракции (EtOAc) и концентрации под вакуумом получали неочищенный спирт, который растворяли в THF. Добавляли MnO (587 мг) и смесь перемешивали в течение ночи. Фильтрование через декалит, и концентрирование под вакуумом давало желаемое неочищенное соединение, которое очищали путем кристаллизации из диэтилового эфира. Выход: 243 мг.
(e) 4-[3-бром-4-(2-метокси-этиламино)-5-(морфолин-4-сульфонил)-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
t
t
Смесь продукта стадии (d) (61 мг), 3-аминокротонитрила (12,3 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (23,1 мг) в этаноле (5 мл) перемешивали при 80°С в течение 17 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, и осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 57 мг. MS-ESI: [M+H]=607,3/609,3; ВЭЖХ: R=16,51 мин (диаст.1), R=16,83 мин (диаст. 2) (способ 1). Диаст. соотн.: 9:1.
Пример 32
4-[3-бром-4-(2-метокси-этиламино)-5-(пирролидин-1-сульфонил)-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
(a) 3-бром-4-фтор-5-(пирролидин-1-сульфонил)-бензойная кислота
2
4
К раствору 3-бром-5-хлорсульфонил-4-фтор-бензойной кислоты (3,0 г) в диоксане/воде (9/1 (объем/объем), 30 мл) добавляли DiPEA (5 мл) и пирролидин (1,55 мл). После перемешивания в течение 2 ч смесь разбавляли с помощью EtOAc и промывали 2 M водной HCl. Органический слой обезвоживали (NaSO) и концентрировали под вакуумом. Выход: 2,3 г.
(b) 3-бром-4-(2-метокси-этиламино)-5-(пирролидин-1-сульфонил)-бензойная кислота
2
4
Раствор 3-бром-4-фтор-5-(пирролидин-1-сульфонил)-бензойной кислоты (500 мг) в 2-метокси-этиламине нагревали до 80°С в течение 3 ч. Смесь растворяли в 2 M водного NaOH и промывали с помощью EtOAc. Водный слой подкисляли 2 M HCl и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой обезвоживали (NaSO) и концентрировали под вакуумом. Выход: 543 мг.
(c) 3-бром-4-(2-метокси-этиламино)-5-(пирролидин-1-сульфонил)-бензальдегид
3
2
.
К раствору продукта, описанного на стадии (c) (542 мг) в THF, добавляли BH THF (4,0 мл, 1 M в THF). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре, обработки водой, экстракции (EtOAc) и концентрирования под вакуумом получали неочищенный спирт, который растворяли в THF. Добавляли MnO (578 мг) и перемешивали смесь в течение ночи. Фильтрование через декалит и концентрирование под вакуумом давало желаемое неочищенное соединение, которое очищали путем кристаллизации из диэтилового эфира. Выход: 294 мг.
(d) 4-[3-бром-4-(2-метокси-этиламино)-5-(пирролидин-1-сульфонил)-фенил]-2-метил-5-оксо-7-пропил-1,4,5,6,7,8-гексагидро-хинолин-3-карбонитрил
+
t
Смесь продукта стадии (c) (59 мг), 3-аминокротонитрила (12,3 мг) и 5-пропилциклогексан-1,3-диона (23,1 мг) в этаноле (5 мл) перемешивали при 80°С в течение 17 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, и осадок очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Способ B). Выход: 57 мг. MS-ESI: [M+H]=591,3/593,3; ВЭЖХ: R=18,43 мин. Диаст. соотн.: 9:1.
Пример 33
Агонистическая активность соединений в отношении рецептора ФСГ человека, экспрессированного в клетках CHO
50
Агонистическую активность соединений в отношении рецептора ФСГ человека тестировали на клетках яичника китайского хомячка (CHO), стабильно трансфецированных рецептором ФСГ человека и котрансфецированных элементом, реагирующим на цАМФ (CRE)/промотором, управляющим экспрессией репортерного гена люциферазы светлячка. Связывание соединения с Gs-связанным рецептором ФСГ приводит к повышению уровня цАМФ, который в свою очередь индуцирует повышение трансактивации люциферазного репортерного конструкта. Активность люциферазы количественно определяется с помощью счетчика люминесценции. Соединения тестировали в диапазоне концентраций 0,1 нМ-10 мкМ. Это исследование было использовано для определения EC (концентрации тестируемого соединения, вызывающей полумаксимальную (50%) стимуляцию люциферазы), и эффективность соединения сравнивали с рекомбинантным ФСГ человека. Для этого использовали программное обеспечение XLfit (Excel version 2.0, built 30, ID Business Solutions Limited).
50
50
-6
-8
Соединения из всех примеров имели активность (EC) менее чем 10 M. Некоторые из соединений, такие как соединения из примеров 2, 3, 5, 6, 12, 13, 17, 20, 22, 23, 24, 26, 28, 29, 30, 31 и 32, демонстрировали EC менее чем 10 M.