К вопросу стандартизации полиэкстракта «Дигда-ши-тан», обладающего гепатозащитным действием

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ

© КОРНОПОЛЬЦЕВА Т.В., АСЕЕВА Т.А., СИЗЫХ М.А. - 2008

К ВОПРОСУ СТАНДАРТИЗАЦИИ ПОЛИЭКСТРАКТА «ДИГДА-ШИ-ТАН», ОБЛАДАЮЩЕГО ГЕПАТОЗАЩИТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ

Т.В. Корнопольцева, Т.А. Асеева, М.А. Сизых

Резюме. С учетом оптимальных параметров путем экстрагирования растительного материала получен полиэкстракт. Определены основные его показатели. Для стандартизации полиэкстракта была разработана спектрофотометрическая методика определения действующих веществ — флавоноидов в пересчете на ГСО лютеолин, которая может быть использована для определения его подлинности.

Ключевые слова: дигда-ши-тан, полиэкстракт, стандартизация.

TO THE PROBLEM OF THE STANDARDIZATION OF POLYEXCTRACT, POSSESSING HEPATOPROTECTIVE ACTION

T.V. Kornopoltzeva, T.A. Aseeva, M.A. Sizykh

Summary. Taking into accourt the optimum parameters of extraction of plant material polyexctract has been obtained. The main its factors are determined. For standardization of polyexctract spectrofotometric methods of the determination of acting substances - flavonoids in recalculation on luteolin-standard was designed, which can be used for determination of its authenticity.

Key words: polyexctract, spectrofotometric, methods.

Терапия заболеваний печени и желчных путей является актуальной проблемой для современной медицины. В перечне фармакотерапевтических средств, используемых для лечения заболеваний печени и билиарной системы, а также для профилактики возможных осложнений гепатита и предупреждения хронизации процесса, ведущее место принадлежит фитопрепаратам. Их влияние отличается широтой спектра фармакологического действия благодаря содержанию в них различных классов биологически активных веществ, доступностью, взаимозаменяемостью. В этом плане большой интерес представляют средства растительного происхождения, применяющиеся в народной и традиционной медицине. В арсенале тибетской медицины при заболеваниях печени используются многокомпонентные препараты, в состав которых входит более 100 видов растений из флоры Забайкалья, большинство из них отнесены к группе растений с потенциальной холере-тической и гепатозащитной активностью [11,12]. Преимущественная фармакотерапевтичес-кая эффективность многокомпонентных фитопрепаратов обусловлена не только их воздействием на патологический процесс, но и их регулирующим влиянием на различные функциональные системы организма с повышением резистентности организма в целом [8,9].

Гепатопротекторный полиэкстракт под условным названием «дигда-ши-тан» [5], получен из следующих растений: надземной части горечавника бородатого — Gentianopsis barbata

Ma; надземной части зубчатки поздней Odontites vulgaris Moench (семейство Scrophulariaceae); плодов яблони ягодной; Malus baccata (L.) Borkh. (семейство Rosaceae) и корней софоры желтоватой

— Sophora flavescens Soland (семейство Fabaceae).

По данным литературы в используемых растениях присутствуют компоненты с желчегонным и гепатоза-щитным действием (горечавка, зубчатка, яблоня) [8-10]; противовоспалительного действия — яблоня [2,4,12] способствующие повышению резистентности организма, стимуляции дезинтоксикационной функции печени.

Входящие в исходный состав полиэкстракта растения содержат флавоноидные, ксантоновые соединения, эфирное масло, дубильные вещества, карденолиды, алкалоиды, сапонины, кумарины, горечи [7,11], фенол-карбоновые кислоты, углеводы, микро- и макроэлементы и тритерпеновые сапонины [1,3,6].

Целью работы явилось определение оптимальных параметров для получения полиэкстракта и его стандартизация по ГСО лютеолину.

Материалы и методы Растительный материал (надземные части горечавника, зубчатки и плоды яблони) собраны в Кабанском районе Бурятии, корни софоры — в окрестностях поселка Ор-

50 100 1М КО МО ЮО 550

Г4мг*р*тур« /*С

Примечание: ТГ — потеря массы, %; ДСК — теплопоглощение, мкВ/мг. Рис. 1. Дериватограмма полиэкстракта сухого гепатопротекторного.

ловск, Читинской области в 2007 году. Гербарные образцы находятся в Институте общей и экспериментальной биологии СО РАН.

Методом мацерации с учетом оптимальных параметров экстракции получена субстанция — сухой полиэкстракт. Наличие основных биологически активных веществ определяли по общепринятым методикам [9,10]. Определение потери в массе при высушивании проводили на дери-ватографе 8ТА 449 С

(Германия). Спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре Agilent-8453Е (США) в кварцевых кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм. Результаты эксперимента статистически обработаны [9].

Результаты и обсуждение

Методом мацерации растительного материала 50-60% этиловым спиртом при соотношении растительный материал-экстрагент, рав-

ным запахом и горьковатым вяжущим вкусом. Гигроскопичен, комкуется. Полиэкстракт растворим в 50% этаноле, хорошо растворим в воде. Потеря в массе при высушивании соответствует ГФ XI и не превышает 5%. На пяти опытных образцах потеря в массе при высушивании варьирует от 2,05 до 4,23%. Установлено, что

основное удаление влаги начинается при температуре 50оС, а при температуре 150оС происходит разложение экстракта (рис. 1).

Методом качественного анализа в извлечениях и сухом полиэкстракте установлено наличие витаминов,

группы, сапонинов тритерпеновой группы, алкалоидов, флавоноидов, оксикоричных кислот, иридоидов.

Выход готового продукта составляет 27%.

Для стандартизации сухого экстракта была разработана спектрофотометрическая методика определения действующих веществ — флавоноидов. В качестве стандартного вещества был выбран ГСО лютеолина, максимум дифференциального спектра которого совпадает с максимумом дифференциального спектра экстракта (рис. 2). Параллельно определяли количество экстрактивных веществ по общепринятой методике. Результаты определения приведены в таблице 1.

Были проведены эксперименты с добавками лютеолина непосредственно при экстракции сырья (табл. 2). Исходя из полученных данных, содержание флавоноидов в сухом полиэкстракте в пересчете на лютеолин-стан-дарт составляет 4,5%, причем опыт с добавками лютео-лина не превышает относительной ошибки метода.

Таким образом, разработана методика количественного определения флавоноидов в пересчете на лютео-лин-стандарт в сухом полиэкстракте, которая может использоваться при определении его подлинности.

Таблица 2

Таблица 1

Метрологическая характеристика определения суммы экстрактивных веществ и суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин - стандарт в полиэкстракте сухом “дигда-ши-

тан”

Исследуемые биологически активные вещества Х ср. f S Sx x А отн.

Содержание флавоноидов в пересчете на лютеолин - стандарт, % 4,51 99 0,123 0,0410 0,09 4,76

Содержание суммы экстрактивных веществ, % 27,2 99 1,08 0,343 0,775 1,76

в частности С, дубильных веществ пирокатехиновой

ном 1:(14-16) и трехкратной экстракцией при температуре 55-65оС получен полиэкстракт, представляющий

«її

------полиэкстракт; — в — ГСО-лютеолин

Рис. 2. Дифференциальные спектры поглощения этанольных растворов полиэкстракта гепатопротекторного и ГСО-лютеолина.

собой аморфный порошок коричневого цвета с прият-

Результаты опытов с добавками лютеолина

Найдено фла-воноидов в экстракте, г Добавлено лютеолина, г Должно быть флавоноидов и лютеолина Найдено флавоноидов и лютеолина, г Абсолютная ошибка, Относительная ошибка, %

0,01722 0,00430 0,02152 0,02100 0,00052 2,43

0,01716 0,00429 0,02145 0,02090 0,00055 2,56

0,01720 0,00860 0,02580 0,02500 0,00080 3,10

0,01708 0,00854 0,02562 0,02610 -0,00048 1,87

0,01696 0,01267 0,02963 0,03019 -0,00055 1,87

0,01710 0,01282 0,02992 0,03039 -0,00047 1,58

ЛИТЕРАТУРА

1. Блинова К.Ф., Стуккей К.Л. Качественное фитохимическое исследование некоторых растений тибетской медицины Забайкалья // Вопросы фармакогнозии / Труды ЛХФИ. - 1961. - Вып. Г. - С.135-155.

2. Брехман И.И, Гаммерман А.Ф., Грушицкий И.В., Яцен-ко-Хмелевский А.А. Растительные лекарственные средства Вьетнама и роль профессора До тат Лоя в их изучении // Растительные ресурсы. — 1967. — Т 3, вып. 1.

- С.114-127.

3. Будаева С. Б. Фармакогностическая характеристика Odontites vulgaris Moench. и разработка на ее основе лекарственного средства: Автореферат дисс. ... канд. фарм. наук. — Улан-Удэ, 2000. — 20 с.

4. Даргаева Т.Д., Николаева Г.Г., Николаев С.М. Исследование яблони ягодной, произрастающей в Бурятии // Изучение препаратов растительного и синтетического происхождения. — Томск, 1978. — Ч. 2. — С.16-17.

5. Дашинамжилов Ж.Б., Яценко Т.В., Асеева Т.А., Николаев С. С. Гепатозащитное действие лекарственного рас-

тительного сбора дигда-ши-тан при повреждении печени этанолом // Растительные ресурсы. — 2007. — Т. 42, вып. 1. - С.130-135.

6. Деготь А.В., Куриная Н.В. Выделение и хроматографическое определение суммы флавоноидов зубчатки поздней и ортанты желтой // Материалы итоговой научной конф. — Киев, 1970. — Вып. 2. — С.17.

7. Карпович В.Н. Фитохимическое исследование забайкальских видов горечавковых // Вопросы фармакогнозии / Труды ЛХФИ. — 1961. — Т.12, вып. 1. — С.201-208.

8. Михайлов И.П., Шретер А.И. Современные препараты из лекарственных растений: Справочник. — М., 1999.

Адрес для переписки:

Корнопольцева Татьяна Владимировна — к.фарм.н., РАН; E-mail: gchehirova@mail.ru

- 336 с.

9. Николаев С.М., Убашеев И.О., Лоншакова К.С. и др. О мембраностабилизирующем действии зубчатки поздней при экспериментальном гепатите // Изучение препаратов растительного и синтетического происхождения. - Томск, 1978. - Ч. 2. - С.172-173.

10. Самбуева З.Г. Перспективы использования растений с желчегонным действием. - Улан-Удэ, 1992. - 94 с.

11. ТелятьевВ.В. Целебные клады. - Иркутск, 1991. - 400 с.

12. Шретер А.И. Лекарственная флора Советского Дальнего Востока. - М., 1975. - 328 с.

.с. лаб. медико-биологических исследований ИОЭБ СО

© ШАНТАНОВА Л.Н., РАДНАЕВА Д.Б., ЦЫБИКОВА Е.Н. - 2008

АКТОПРОТЕКТОРНЫЕ СВОЙСТВА СОКА ИЗ ПОБЕГОВ CALLISIA FRAGRANS L.

Л.Н. Шантанова, Д.Б. Раднаева, Е.Н. Цыбикова

Резюме. Целью проведенного исследования явилось установление актопротекторной активности сока из побегов Кал-лизии душистой (СаШ81а/ра£гат Ь). Установлено, что «сок каллизии» обладает актопротекторной активностью, о чем свидетельствует повышение общей и скоростной физической выносливости животных при его внутрижелудоч-ном введении. Более выраженное действие средство проявляет при его многократном профилактическом введении в объеме 0,5мл/кг. Биохимический анализ показал, что механизм актопротекторного действия «сока каллизии» связан с активацией ресинтеза АТФ в скелетной и сердечной мышцах, повышением концентрации гликогена, снижением выраженности метаболического ацидоза и оксидативного стресса.

Ключевые слова: каллизия душистая, актопротекторная активность, свободнорадикальное окисление, АТФ.

ACTOPROTECTIVE PROPERTIES OF THE JUICE FROM THE CALLISM FRAGRANS L. SHOOTS

L.N. Shantanova, D.B. Radnayeva, E.N. Tsybikova

Summary. The study was aimed at the estimation of the actoprotective activity of the juice from the Callisia fragrans shoots. It has been established that the juice from Callisia has actoprotective activity which is confirmed by the increase of the general and rate physical endurance of animals after intragastrical administration. The remedy shows more significant effect in repeated prophylactic administration in the dose of 0.5 ml/kg. The biochemical analysis has shown that the mechanism of the actoptotective effect of the juice from Callisia fragrans L. is due to the activation of the ATPH resynthesis in the skeletal and heart muscles, the increase of glycogen concentration as well as the decrease of metabolic acidosis manifestation and oxidative stress.

Key words: Callisia. fragrans L., actoprotective activity, free radical oxidation, ATP._

В настоящее время одной из актуальных проблем медицины является проблема адаптации человека к окружающей среде, что связано с возрастанием эколо-го-социального прессинга, действующего на человека на современном этапе развития общества. Одним из путей повышения сопротивляемости организма является применение адаптогенов, представленных как синтетическими препаратами, так и средствами природного происхождения. Последние обладают рядом преимуществ, к числу которых относятся широкий спектр фармакологической активности; плавное нарастание фармакологического эффекта, низкая токсичность и отсутствие неблагоприятных побочных реакций при длительном приеме. Это имеет особое значение ввиду широкого распространения лекарственной болезни - многочисленных осложнений, возникающих при приеме синтетических препаратов.

В народной медицине нынешнего дня широкую популярность приобрела каллизия душистая (Callisia fragrans Ь.), более известная под названием «золотой ус», а также «китайский ус», «серебряный ус», «домашняя кукурузка» и др. каллизия душистая относится к семейству Комеллиновые (Commelinoceae). Родиной растения являются тропические области Америки, где встречается несколько десятков видов данного семейства. В России этот вид легко культивируется, хорошо произ-

растает в домашних условиях в качестве комнатного растения. В народной медицине настои и отвары кал-лизии душистой используют в качестве иммуномодулирующего средства для лечения самых разнообразных заболеваний от ОРВИ до злокачественных опухолей [8]. По данным интернет-сайта «Простые рецепты на все случаи жизни», в листьях и стеблях каллизии душистой содержится значительное количество простых и сложных сахаров, а также каротиноиды, аскорбиновая кислота, флавоноиды, дубильные вещества, аминокислоты, микроэлементы [12]. В то же время данные о химическом составе и фармакологических свойствах калли-зии душистой в научной литературе практически отсутствуют. Нами разработан способ получения сока из побегов каллизии душистой (сок каллизии), содержащего в качестве консерванта 15% спирта этилового.

Целью настоящей работы явилась оценка влияния «сока каллизии» на физическую выносливость лабораторных животных.

Материалы и методы

Эксперименты проведены на крысах линии Wistar массой 160-80 г. В первой серии экспериментов определяли влияние «сока каллизии» на физическую работоспособность животных. Скоростную выносливость определяли путем принудительного бега животных в третбане при скорости движения полотна третбана 40 м/мин. Общую фи-