СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ СООТНОШЕНИЯ ЭФФЕКТОРНЫХ Т-КЛЕТОК К РЕГУЛЯТОРНЫМ Т-КЛЕТКАМ

1. Способ обеспечения противоопухолевого Т-клеточного ответа у субъекта с опухолью или раком, включающий стадию введения указанному субъекту рекомбинантного штамма Listeria, содержащего рекомбинантную нуклеиновую кислоту, при этом указанная молекула нуклеиновой кислоты содержит первую открытую рамку считывания, кодирующую рекомбинантный полипептид, и вторую открытую рамку считывания, кодирующую метаболический фермент, где указанный рекомбинантный полипептид содержит усеченный белок LLO, слитый с гетерологичным антигеном или его фрагментом, где указанная Listeria характеризуется мутацией в эндогенном гене аланинрацемазы (dal), гене трансферазы D-аминокислот (dat) и генах actA, и где указанный Т-клеточный ответ предусматривает повышение соотношения эффекторных Т-клеток к регуляторным Т-клеткам (Treg), с обеспечением тем самым противоопухолевого Т-клеточного ответа у указанного субъекта.
2. Способ по п. 1, где указанный гетерологичный антиген представляет собой антиген Е7 папилломавируса человека.
3. Способ по любому из пп. 1 и 2, где указанный усеченный белок LLO представляет собой N-терминальный LLO.
4. Способ по п. 2, где указанный LLO приведен в SEQ ID NO: 2.
5. Способ по п. 1, где указанный гетерологичный антиген представляет собой опухолеассоциированный антиген.
6. Способ по п. 5, где указанный опухолеассоциированный антиген представляет собой антиген ангиогенеза.
7. Способ по любому из пп. 1 и 2, где у указанной Listeria отсутствуют гены устойчивости к антибиотикам.
8. Способ по любому из пп. 1 и 2, где указанная рекомбинантная нуклеиновая кислота присутствует в плазмиде у указанной Listeria.
9. Способ по п. 8, где указанная плазмида представляет собой эписомную плазмиду.
10. Способ по п. 9, где указанная плазмида представляет собой мультикопийную плазмиду.
11. Способ по п. 8, где указанная плазмида представляет собой интегративную плазмиду.
12. Способ по любому из пп. 1 и 2, где указанный метаболический фермент представляет собой фермент метаболизма аминокислот.
13. Способ по п. 12, где указанный метаболический фермент представляет собой фермент трансферазу D-аминокислот или фермент аланинрацемазу.
14. Способ по любому из пп. 1 и 2, дополнительно включающий введение указанному субъекту адъюванта.
15. Способ по п. 14, где указанный адъювант включает гранулоцитарно/макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), сапонин QS21, монофосфорил-липид А, CpG-содержащий олигонуклеотид или бактериальный токсин.
16. Способ по п. 1, дополнительно включающий совместное введение с указанной рекомбинантной Listeria, введение перед ней или после нее ингибитора белка иммунных контрольных точек.
17. Способ по п. 16, где указанный белок иммунных контрольных точек представляет собой белок 1 запрограммированной гибели клеток (PD1), Т-клеточный мембранный белок 3 (TIM3), аденозиновый А2а-рецептор (A2aR) и ген 3 активации лимфоцитов (LAG3), иммуноглобулиновый рецептор клеток-киллеров (KIR) или антиген 4 цитотоксических Т-лимфоцитов (CTLA-4).
18. Способ по п. 1, дополнительно включающий совместное введение цитокина, который усиливает указанный противоопухолевый иммунный ответ.
19. Способ по п. 18, где указанный цитокин представляет собой интерферон типа I (IFN-α/IFN-β), TNF-α, IL-1, IL-4, IL-12, INF-γ.
20. Способ по п. 1, где указанный способ индуцирует экспансию эффекторных Т-клеток в периферических лимфоидных органах, что приводит к повышению количества эффекторных Т-клеток, присутствующих в очаге опухоли.
21. Способ по п. 20, где указанная экспансия эффекторных Т-клеток приводит к повышенному соотношению эффекторных Т-клеток к регуляторным Т-клеткам в периферических органах и в очаге опухоли без воздействия на количество Treg.
22. Способ по п. 21, где указанные эффекторные Т-клетки представляют собой CD4+FoxP3- и CD8+ Т-клетки.
23. Способ по п. 21, где указанные эффекторные Т-клетки представляют собой CD4+FoxP3- Т-клетки.
24. Способ по п. 21, где указанные регуляторные Т-клетки представляют собой CD4+FoxP+ Т-клетки.
25. Способ повышения соотношения эффекторных Т-клеток к регуляторным Т-клеткам (Treg) в селезенке субъекта, при этом способ включает стадию введения указанному субъекту рекомбинантного штамма Listeria, содержащего рекомбинантную нуклеиновую кислоту, кодирующую усеченный белок LLO, где указанная Listeria характеризуется мутацией в эндогенном гене аланинрацемазы (dal), гене трансферазы D-аминокислот (dat) и генах actA, где указанный Т-клеточный ответ предусматривает повышение соотношения эффекторных Т-клеток к регуляторным Т-клеткам (Treg).
26. Способ по п. 25, где указанный опухолеассоциированный антиген представляет собой антиген Е7 папилломавируса человека.
27. Способ по любому из пп. 25-26, где указанный усеченный белок LLO представляет собой N-терминальный LLO.
28. Способ по любому из пп. 25 и 26, где указанный LLO приведен в SEQ ID NO: 2.
29. Способ по любому из пп. 25 и 26, где у указанной Listeria отсутствуют гены устойчивости к антибиотикам.
30. Способ по любому из пп. 25 и 26, где указанная нуклеиновая кислота присутствует в плазмиде у указанной Listeria.
31. Способ по п. 30, где указанная плазмида представляет собой эписомную плазмиду.
32. Способ по п. 31, где указанная плазмида представляет собой мультикопийную плазмиду.
33. Способ по п. 30, где указанная плазмида представляет собой интегративную плазмиду.
34. Способ по п. 25, дополнительно включающий введение указанному субъекту адъюванта.
35. Способ по п. 34, где указанный адъювант включает гранулоцитарно/макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), сапонин QS21, монофосфорил-липид А, CpG-содержащий олигонуклеотид или бактериальный токсин.
36. Способ по п. 25, дополнительно включающий совместное введение с указанной рекомбинантной Listeria, введение перед ней или после нее ингибитора белка иммунных контрольных точек.
37. Способ по п. 36, где указанный белок иммунных контрольных точек представляет собой белок 1 запрограммированной гибели клеток (PD1), Т-клеточный мембранный белок 3 (TIM3), аденозиновый А2а-рецептор (A2aR) и ген 3 активации лимфоцитов (LAG3), иммуноглобулиновый рецептор клеток-киллеров (KIR) или антиген 4 цитотоксических Т-лимфоцитов (CTLA-4).
38. Способ по п. 25, дополнительно включающий совместное введение цитокина, который усиливает указанный противоопухолевый иммунный ответ.
39. Способ по п. 38, где указанный цитокин представляет собой интерферон типа I (IFN-α/IFN-β), TNF-α, IL-1, IL-4, IL-12, INF-γ.
40. Способ по п. 25, где указанный способ индуцирует экспансию эффекторных Т-клеток в периферических лимфоидных органах.
41. Способ по п. 40, где указанная экспансия эффекторных Т-клеток приводит к повышенному соотношению эффекторных Т-клеток к регуляторным Т-клеткам в периферических органах без воздействия на количество Treg.
42. Способ по п. 41, где указанные эффекторные Т-клетки представляют собой CD4+FoxP3- и CD8+ Т-клетки.
43. Способ по п. 41, где указанные эффекторные Т-клетки представляют собой CD4+FoxP3- Т-клетки.
44. Способ по п. 41, где указанные регуляторные Т-клетки представляют собой CD4+FoxP+ Т-клетки.
45. Способ по п. 1, где обеспечение противоопухолевого Т-клеточного ответа у субъекта с опухолью или раком создает возможность лечения указанной опухоли или рака у указанного субъекта.
46. Способ по п. 25, где обеспечение противоопухолевого Т-клеточного ответа у субъекта с опухолью или раком создает возможность лечения указанной опухоли или рака у указанного субъекта.