Способ прогнозирования риска некроза свободного аутодермотрансплантата
METHOD FOR PREDICTING THE RISK OF NECROSIS OF A FREE DERMAL AUTOGRAFT

Изобретение относится к области медицины, а именно к общей хирургии, реконструктивно-пластической хирургии, комбустиологии, травматологии, и может быть использовано для прогнозирования риска некроза при закрытии раневого дефекта мягких тканей методом свободной кожной пластики расщепленным аутодермотрансплантатом.
Одной из причин неудачного исхода свободной кожной пластики является неудовлетворительное кровоснабжение аутодермотрансплантата. В частности, известно, что первичные признаки прорастания сосудов, кровоснабжающих свободный аутодермотрансплантат, отмечаются со вторых суток после перемещения его на реципиентную рану, а полноценное кровоснабжение по вновь образованным сосудам начинает осуществляться с 5-7 суток (Берлин Л.Б. Морфология кожи после ожогов и свободной пересадки. - Л.: Медицина, 1966. - 222 с.). Если по какой-либо причине процесс ангиогенеза замедлен, и сосудистое русло между трансплантатом и подлежащими тканями не успевает восстановиться, то в ткани трансплантата нарастают некробиотические процессы, и он отторгается от реципиентного ложа (Задорожный А.А. Динамика кровотока в аутотрансплантатах кожи разных участков тела у крыс по данным лазерной допплеровской флоуметрии / А.А. Задорожный, С.И. Катаев, С.Ю. Штрыголь // Методология флоуметрии. - 2001. - №5. - с. 179-196). Субъективно не всегда возможно визуально правильно оценить приживление и, следовательно, возможный риск отторжения трансплантата. В результате невозможно своевременное проведение адекватной терапии, направленной на стимуляцию процессов приживления.
Известно, что в этот критический период первых 5-7 суток питание пересаженной кожи в основном осуществляется диффузно - за счет проникновения межклеточной жидкости из реципиентного ложа в межклеточные пространства аутодермотрансплантата. Кислород в этот период доставляется клеткам аутодермотрансплантата в двух состояниях - свободном, за счет диффузии из подлежащих тканей, и связанном с гемоглобином (оксигемоглобин) - через сосудистое русло. Таким образом, показателем активности ангиогенеза и прогноза жизнеспособности аутодермотрансплантата в первые 5-7 суток может быть количество оксигемоглобина в его ткани, поскольку нарастание количества оксигемоглобина свидетельствует об увеличении числа и площади функционирующих сосудов, связывающих аутодермотрансплантат и подлежащее реципиентное ложе.
В настоящее время оптические методы диагностики биологических тканей, позволяющие оценивать уровень метаболизма, гемодинамику, изменение биохимического состава биологических тканей, активно развиваются. Одним из таких методов является оптическая диффузионная спектроскопия (ОДС), принцип действия которой основан на измерении спектров поглощения биотканей с последующей оценкой концентраций основных тканевых хромофоров (оксигемоглобин, дезоксигемоглобин, меланин, вода, липиды). Точность оценки концентраций хромофоров зависит от множества факторов: спектрального диапазона, в котором проводятся измерения, количества измерений при различных расстояниях между источником и детектором, однородности рассеяния и поглощения света в ткани, алгоритмов обработки данных и др. (Турчин И.В. Методы оптической биомедицинской визуализации: от субклеточных структур до тканей и органов // Успехи физических наук. - 2016. - Т. 186. - №5. - с. 550-567). В связи с этим следует отметить, что точность определения относительных изменений концентраций хромофоров в ткани методом ОДС существенно выше точности определения их абсолютных значений, поскольку при измерении динамики какой-либо величины структура ткани в измерительном объеме практически не меняется.
Для определения концентраций хромофоров в поверхностных тканевых слоях (до 2 мм) могут быть использованы как контактные (Клешнин М.С., Турчин И.В. Оценка оксигенации в поверхностных слоях биотканей на основе оптической диффузионной спектроскопии с автоматизированной калибровкой измерений // Квантовая электроника. - 2019. - Т. 49. - №7. - с. 628-632), так и бесконтактные ОДС-устройства (О'Sullivan T.D. et al. Diffuse optical imaging using spatially and temporally modulated light // J. Biomed. Opt. 2012. V. 17, №7. p. 0713111). Контактные ОДС-устройства имеют прикладываемый к поверхности тканей щуп, в котором расположены торцы оптических волокон. Часть волокон используется для облучения тканей светом оптического диапазона длин волн, другая часть - для приема диффузно рассеянного света. При использовании бесконтактных ОДС-устройств поверхность ткани освещается либо равномерно (Zherebtsov Е. et al. Hyperspectral imaging of human skin aided by artificial neural networks // Biomedical optics express. - 2019. - T. 10. - №7. - c. 3545-3559), либо светом, имеющим некоторую периодическую пространственную структуру (использование структурированного освещения) (Gioux S. et al. First-in-human pilot study of a spatial frequency domain oxygenation imaging system // Journal of biomedical optics. -2011. - T. 16. - №8. - c. 086015). Диффузно рассеянный свет при этом регистрируется цифровой камерой.
На сегодняшний день спектроскопические измерения, проводимые при помощи оптических волокон, приводимых в контакт с биотканью, представляют собой гораздо более точный метод измерения концентраций хромофоров по сравнению с методом, основанном на получении цифровой камерой двумерных изображений биотканей при их бесконтактном освещении на разных длинах волн. Во-первых, это связано с тем, что при использовании контактных щупов ОДС-устройств, как правило, регистрируется спектр обратно рассеянного света в широком диапазоне 400-1000 нм с шагом 1-2 нм, что позволяет анализировать различные особенности спектра обратно-рассеянного излучения, обеспечивая тем самым более точное определение содержания различных хромофоров в ткани по сравнению с использованием бесконтактных ОДС-устройств, где используется ограниченный дискретный набор длин волн - около 3-7. Кроме того, при измерениях оптоволоконным щупом есть возможность селектировать фотоны, прошедшие различные пути, путем регистрации обратно рассеянного тканью излучения несколькими приемными волокнами, находящимися на разных расстояниях от волокна, доставляющего зондирующее излучение на ткань. Это позволяет измерить коэффициент экстинкции ткани и, соответственно, вычислить спектр показателя поглощения, по которому, в свою очередь, можно определить концентрации хромофоров. При использовании равномерного освещения объекта исследования нельзя напрямую измерить эти величины, приходится прибегать к довольно сложным методам обработки изображений (кластеризация, машинное обучение и т.д.), в которых фигурирует большое число свободных параметров, которые будут меняться в зависимости от анатомических особенностей строения кожи. Следует отметить, что с развитием технологий обработки данных точность измерений концентраций хромофоров, выполненных с использованием бесконтактных ОДС-устройств, возрастет, а с развитием технологий гиперспектральной визуализации возрастает количество спектральных диапазонов, в которых можно регистрировать обратно рассеянное излучение. Однако стоимость таких регистрирующих устройств существенно превосходит стоимость спектрометров, применяемых в контактных ОДС-устройствах.
Согласно литературным данным (Lu Н. et al. Sustained Poststimulus Elevation in Cerebral Oxygen Utilization after Vascular Recovery // J Cereb Blood Flow Metab. 2004. V. 24, №7. p. 764-770), содержание общего гемоглобина отражает кровенаполнение ткани, оксигемоглобина - поступление кислорода, а дезоксигемоглобина - его потребление. Данные исследований по сравнению результатов, полученных с использованием ОДС и стандартных методов определения оксигенации (полярографии, иммуногистохимического анализа с маркером гипоксии), показали, что метод ОДС позволяет корректно определить изменения уровня оксигенации биологических тканей и выявить тканевые механизмы возникающих изменений (Maslennikova A.V. et al. Comparative study of tumor hypoxia by diffuse optical spectroscopy and immunohistochemistry in two tumor models // J. Biophoton. 2010. V. 3, №12. p. 743-751; Orlova A.G. et al. Diffuse optical spectroscopy monitoring of oxygen state and hemoglobin concentration during SKBR-3 tumor model growth // Laser Phys. Lett. 2017. V. 14, №1. p. 015601).
Для анализа гидратации и оксигенации тканей сразу после операции может быть использована спектроскопия, выполненная в видимом и/или ближнем инфракрасном (ИК) диапазоне длин волн. Так, по патенту US 8060188 (публ. 15.11.2011 г., МПК А61В 5/00) известен неинвазивный способ прогнозирования некроза участка ткани, в котором нарушено кровоснабжение, включающий доступ к указанному участку, сбор спектроскопических изображений указанного участка ткани, оценка жизнеспособности указанного участка путем определения относительного соотношения концентраций оксигемоглобина и дезоксигемоглобина (индекс насыщения кислородом), определение областей участка ткани ниже определенного порога индекса насыщения кислородом, который станет некротическим без корректирующих мер, и областей участка ткани выше определенного порога индекса насыщения кислородом, который останется жизнеспособным. При этом используются длины волн как видимого диапазона (430 нм, 530 нм, 565 нм), так и ближнего инфракрасного (в пределах 790-1080 нм).
Существенным недостатком способа-аналога является то, что в нем измеряют абсолютное значение отношения концентраций окси- и дезоксигемоглобина, а не динамику изменения этого отношения. Абсолютные значения концентраций окси- и дезоксигемоглобина зависят от применяемой модели распространения света в биотканях и алгоритма обработки данных. Поскольку учесть все параметры, влияющие на распространение света в тканях невозможно (различная толщина тканевых слоев, спектров рассеяния и поглощения в них, расположение сосудов), то и реконструируемые значения могут значительно отличаться от действительности, ограничивая применимость используемого метода обработки данных. А изменение концентрации какого-либо хромофора, измеренное в одной точке в разное время методами ОДС, является более стабильной величиной (величиной, измеряемой с меньшей погрешностью, по сравнению с погрешностью измерения абсолютного значения концентрации хромофора), поскольку толщина тканевых слоев и показатели рассеяния в них со временем практически не меняются, меняются только концентрации окси- и дезоксигемоглобина.
Существенным ограничением способа-аналога является область применения - несвободный (кровоснабжаемый) кожный лоскут. Часть измерений, которая проводится в ближнем ИК диапазоне, обладает глубиной диагностики около 1 см, что достаточно для оценки риска некроза в случае несвободного кожного лоскута, но не подходит для случая свободного аутодермотрансплантата, поскольку в указанном диапазоне в область чувствительности попадает большой объем подлежащих тканей, что уменьшает в обратно рассеянном свете долю света, пришедшего из тонкого подкожного слоя, ответственного за питание трансплантата, и, как следствие, уменьшает чувствительность метода к изменению степени оксигенации данного слоя. Все измерения в видимом диапазоне длин волн (500-600 нм) обладают глубиной диагностики измерений около 1 мм и подходят для свободного аутодермотрансплантата. Разница в глубинах диагностики связана с тем, что в ближнем ИК диапазоне показатель поглощения ткани намного меньше, чем в видимом, и, соответственно, свет намного глубже распространяется. Таким образом, чувствительность метода в случае свободного аутодермотрансплантата при измерениях в ближнем ИК диапазоне будет недостаточной.
Существует принципиальная разница в питании тканей кожного лоскута, то есть участка ткани, сохраняющего связь с материнским ложем через постоянную питающую ножку, и трансплантата, полностью отсеченного от донорской области участка кожи. В кожном лоскуте сохраняется кровоснабжение через имеющиеся кровеносные сосуды, в расщепленном аутодермотрансплантате питание первые 4-5 суток осуществляется за счет диффузии кислорода и нутриентов, а затем формируются новые сосуды, связывающие трансплантат с реципиентным ложем. Пластика кожного дефекта расщепленным аутодермотрансплантатом является одной из самых распространенных операций в силу своей малой травматичности и технической простоты, меньших проблем с донорской областью. Непригодность измерений во всех диапазонах способа-аналога для оценки кровоснабжения и прогноза развития некротических процессов в процессе свободной кожной пластики расщепленным аутодермотрансплантатом, является существенным его недостатком.
Наиболее близким аналогом по технической сущности предлагаемого способа является способ прогнозирования риска отторжения свободного полнослойного кожного аутодермотрансплантата при реконструкции века, известный по патенту RU 2456917 (публ. 27.07.2012 г., МПК А61В 5/026, А61В 8/06), который выбран в качестве прототипа для заявляемого изобретения. В способе-прототипе используется оценка изменения состояния микроциркуляторного кровотока методом лазерной допплеровской флоуметрии, позволяющим оценивать динамику капиллярного кровотока. Способ-прототип заключается в том, что после операции с 4 по 7 сутки ежедневно определяют градиент капиллярного кровотока по данным лазерной допплеровской флоуметрии между пересаженным аутодермотрансплантатом и окружающими его здоровыми тканями или симметричными участками противоположного или здорового века. При отсутствии тенденции к увеличению градиента при его величине равной и ниже 15% прогнозируют риск отторжения аутодермотрансплантата.
Однако способ-прототип имеет недостатки. Так, поскольку показатель капиллярного кровотока - величина средней перфузии крови в границах времени регистрации, то значение этого параметра зависит от концентрации эритроцитов в зондируемом объеме ткани и усредненной скорости кровотока. В частности, изменения показателя капиллярного кровотока пропорциональны изменениям объемной скорости кровотока. Экспериментальные данные показывают, что спазм сосудов, вызванный введением адреналина, приводит к увеличению показателя капиллярного кровотока при общей постоянной перфузии органа (Kuznetsova L.V. et al. Dissociation between volume blood flow and laser-Doppler signal from rat muscle during changes in vascular tone // American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 1998. V. 274, №4. p. H1248-H1254). Таким образом, способ-прототип не всегда дает возможность получить объективную и точную оценку кровоснабжения аутодермотрансплантата.
Задача, решаемая изобретением - более объективная оценка кровоснабжения свободного расщепленного аутодермотрансплантата после его размещения на реципиентной ране через вновь образованные сосуды, что позволяет прогнозировать риск некротических изменений в свободном расщепленном аутодермотрансплантате и вовремя выполнить необходимые лечебные и профилактические мероприятия.
Технический результат в предлагаемом способе прогнозирования риска некроза свободного расщепленного аутодермотрансплантата достигается за счет того, что он, как и способ-прототип, основан на оценке изменения состояния микроциркуляторного кровотока в тканях аутодермотрансплантата в период, по крайней мере, с 4 по 7 сутки после свободной кожной пластики.
Новым в предлагаемом способе прогнозирования риска некроза свободного расщепленного аутодермотрансплантата является то, что для кожной пластики используют свободный расщепленный аутодермотрансплантат, после кожной пластики методом оптической диффузионой спектроскопии определяют разницу между показателями концентрации оксигемоглобина в тканях трансплантата на 4, 6 и 8 сутки, при нарастании концентрации оксигемоглобина на каждом этапе исследования более чем на 25% риск некроза свободного расщепленного аутодермотрансплантата считают низким; при увеличении концентрации оксигемоглобина на каждом этапе исследования менее чем на 25% риск некроза свободного расщепленного аутодермотрансплантата оценивают как умеренный, что требует применения дополнительных методов для повышения оксигенации раневого ложа; при отрицательной динамике изменения оксигемоглобина риск признают высоким, необходимо удаление аутодермотрансплантата для профилактики местных инфекционных осложнений.
Изобретение иллюстрируется следующими рисунками.
На фиг. 1 показано исследование датчиком аппарата ОДС на 4 сутки после свободной кожной пластики;
На фиг. 2 показано исследование датчиком аппарата ОДС на 6 сутки после свободной кожной пластики;
На фиг. 3 показано исследование датчиком аппарата ОДС на 8 сутки после свободной кожной пластики;
Фиг. 4 - вид реципиентного раневого ложа перед пластическим закрытием;
Фиг. 5 - вид трансплантатов на реципиентной ране сразу после переноса;
Фиг. 6 - вид трансплантатов через 4 суток после свободной кожной пластики;
Фиг. 7 - вид трансплантатов через 6 суток после свободной кожной пластики;
Фиг. 8 - вид трансплантатов через 8 суток после свободной кожной пластики.
Способ осуществляют следующим образом.
Для оценки кровоснабжения аутодермотрансплантата используют метод оптической диффузионной спектроскопии (ОДС).
Авторами установлено, что для оценки концентраций окси- и дезоксигемоглобина в поверхностных слоях тканей (до 2 мм) целесообразно использовать диапазон длин волн 500-600 нм, в котором показатель поглощения света в тканях достаточной высокий, и, следовательно, свет проникает на относительно небольшую глубину - не более 2 мм.
Контактный ОДС-щуп устанавливают на определенном участке свободного расщепленного аутодермотрансплантата на 4 сутки после свободной кожной пластики (фиг. 1). Результаты ОДС-исследований (значения концентраций окси- и дезоксигемоглобина) автоматически сохраняют в программе персонального компьютера. Через 48 часов (на 6 сутки после операции) выполняют повторное исследование аутодермотрансплантата в той же точке (фиг. 2). Далее еще через 48 часов (на 8 сутки после свободной кожной пластики) выполняют подобное исследование концентрации оксигемоглобина (фиг. 3). По числовой разнице между показателем концентрации оксигемоглобина при измерениях с периодом 48 часов определяют риск некроза аутодермотрансплантата.
Если показатель концентрации оксигемоглобина в динамике увеличивается более чем на 25% на каждом этапе измерения с 48 часовым интервалом, то процессы ангиогенеза и репарации идут адекватно, дополнительного вмешательства не требуется, и риск некроза аутодермотрансплантата считают низким.
Если изменение увеличения показателя концентрации оксигемоглобина в ткани аутодермотрансплантата менее 25%, то риск некроза аутодермотрансплантата оценивают как умеренный, и для его успешного приживления требуется применение дополнительных терапевтических методов для повышения оксигенации раневого ложа (VAC-терапия, дезагрегантная и антикоагулянтная терапия и т.д.).
При отрицательной динамике изменения концентрации оксигемоглобина в ткани аутодермотрансплантата риск некроза признают высоким, необходимо удаление аутодермотрансплантата для профилактики местных инфекционных осложнений.
При периоде измерений меньшем, чем 48 часов, разница в концентрации оксигемоглобина может быть недостоверна. К тому же, частые перевязки в условиях недостаточно сформированной сосудистой сети между трансплантатом и реципиентным ложем приводят к дополнительной травматизации трансплантата, его смещению по плоскости. При большем, чем 48 часов, периоде регистрации кислородного статуса аутодермотрансплантата, терапевтические мероприятия могут быть неэффективны.
7
Клинический пример. Больной К., 1965 г.р., поступил в отделение гнойной хирургии ГБУЗ НО «ГКБ №30 Московского района г. Нижнего Новгорода» 27.10.2019 г. со следующим диагнозом: «Сахарный диабет I типа. Целевой уровень НbАlс> 7,5%. Синдром диабетической стопы, нейроишемическая форма, Wager IV. Влажная гангрена 1,2,3 пальцев правой стопы». Общее состояние пациента средней степени тяжести. Жалобы на момент поступления: повышение температуры до 38,8°С, локальный отек дистального отдела стопы, гиперемия правой стопы, болевой синдром. 27.10.2019 г. в экстренном порядке выполнена операция: ампутация 1,2,3 пальцев левой стопы с резекцией соответствующих головок плюсневых костей. После операции образовалась рана размерами 14×8 см, глубиной 3 см. По результатам микробиологического исследования раневого отделяемого выявлено наличие Enterobacter aerogenes 10КОЕ/мл. Консервативное лечение в послеоперационном периоде носило комплексный характер и включало все компоненты, необходимые пациентам с синдромом диабетической стопы: полная разгрузка пораженной конечности на период лечения в стационаре, антибактериальная (имипенем 500 мг 3 раза в сутки), дезинтоксикационная (физиологический раствор 500 мл 1 раз в сутки), обезболивающая (кетонал 2,0 2 раза в сутки), гастропротективная (омез 20 мг 2 раза в сутки), витаминная и антиоксидантная (токоферол 200 мг 2 раза в сутки, аскорутин по 2 таблетки 3 раза в сутки), антигипоксантная (актовегин 500 мл в\в капельно 1 раз в сутки), антиагрегантная (аспирин 500 мг 1 раз в сутки), сахароснижающая терапия (актрапид 4ЕД 3 раза в сутки, протафан 15ЕД 2 раза в сутки). Местное лечение в I фазу раневого процесса заключалось в ежедневных перевязках, включающих санацию гнойного очага 0,1% раствором Пронтосана, покрытие раны стерильной марлевой салфеткой с водорастворимой мазью «Офломелид», проведения химического некролиза химитрипсином. После перехода раневого процесса во II фазу местное лечение включало обработку раны метлурациловой мазью с атравматическими повязками «Бранолинд».
10.11.2019 г. принято решение о выполнение кожно-пластического этапа лечения. Метод закрытия раны - свободная кожная пластика расщепленным трансплантатом. По шкале НИИ им. И.И. Джанелидзе готовность реципиентной зоны к свободной аутодермопластике оценена в 17 баллов (фиг. 4). 10.11.19 г. выполнена свободная аутодермопластика расщепленным трансплантатом толщиной 0,35 мм.
Полученные три аутодермотрансплантата (№1, №2, №3, см. фиг. 5) перенесли на реципиентную рану, при этом дополнительную фиксацию швами не производили. На донорскую рану наложена марлевая повязка с йодопироном. На реципиентную рану наложена марлевая повязка пропитанная раствором водного хлоргексидина. Первую перевязку донорской зоны проводили на 8 сутки, реципиентной зоны - на 4 сутки после оперативного вмешательства, ориентируясь, прежде всего на степень пропитанности повязок раневым экссудатом. На 4 сутки после операции при смене повязки клинических признаков нежизнеспособности аутодермотрансплантатов не наблюдалось: трансплантаты бледно-розового цвета, что является нормальным для данного временного периода, плотно фиксированы к раневому ложу (фиг. 6).
Инструментальное исследование концентраций окси- и дезоксигемоглобина проводилось с помощью ОДС-прибора, описанного в работе Клешнин М.С., Турчин И.В. Оценка оксигенации в поверхностных слоях биотканей на основе оптической диффузионной спектроскопии с автоматизированной калибровкой измерений // Квантовая электроника. - 2019. - Т. 49. - №7. - с. 628-632.
При инструментальном исследовании выявлено, что показатель концентрации оксигемоглобина в трансплантате №1 составил 9,5 мкМоль/л, трансплантате №2 - 9,9 мкМоль/л, трансплантате №3 - 8,7 мкМоль/л. На 6 сутки после кожно-пластической операции трансплантат №1 сохранил бледно-розовый цвет, концентрация оксигемоглобина составила 9,3 мкМоль/л (отрицательная динамика); большая часть трансплантата №2 приобрела розовато-синюшный оттенок, что визуально подтверждает активизацию процессов ангиогенеза между ним и реципиенным ложем, концентрация оксигемоглобина - 14,3 мкМоль/л (увеличение концентрации оксигемоглобина более чем на 25%); в трансплантате №3 меньшая часть тканей имеет розово-синюшный цвет, концентрация оксигемоглобина - 10,3 мкМоль/л (увеличение концентрации оксигемоглобина менее чем на 25%) (фиг. 7). Для минимизации риска некроза свободного аутодермотрансплантата №3 принято решение применить VAC-терапию в течение 2 суток. На 8 сутки послеоперационного периода большая часть трансплантат №1 лизирована, площадь приживления составила 35%, концентрация оксигемоглобина 8,5 мкМоль/л (сохранение отрицательной динамики); площадь приживления трансплантата №2 составила 85%, концентрация оксигемоглобина 18,4 мкМоль/л, то есть увеличение концентрации оксигемоглобина по сравнению с предыдущим измерением более чем на 25%; после применения дополнительного метода воздействия (VAC-терапия) для улучшения интеграции с раневым ложем трансплантата №3 площадь его приживления составила 80%), концентрация оксигемоглобина 12,2 мкМоль/л (увеличение концентрации оксигемоглобина менее чем на 25%) (фиг. 8). Через 4 суток мы наблюдали полный некроз трансплантата №1, после чего он был удален для профилактики местных инфекционных осложнений.
Таким образом, с помощью заявляемого способа возможно неивазивное прогнозирование риска некроза свободного расщепленного аутодермотрансплантата для определения дальнейшей тактики лечения: при нарастании концентрации оксигемоглобина на каждом этапе исследования более чем на 25% риск некроза свободного расщепленного аутодермотрансплантата считают низким; при увеличении концентрации оксигемоглобина на каждом этапе исследования менее чем на 25% риск некроза свободного расщепленного аутодермотрансплантата оценивают как умеренный, что требует применения дополнительных методов для повышения оксигенации раневого ложа; при отрицательной динамике изменения оксигемоглобина риск признают высоким, необходимо удаление аутодермотрансплантата для профилактики местных инфекционных осложнений.
Возможность осуществления изобретения подтверждена описанными в заявке доступными приемами и средствами, следовательно, предлагаемое техническое решение соответствует критерию изобретения «промышленная применимость».
Проведенный анализ патентной и научно-медицинской литературы показал, что предлагаемый способ содержит признаки, отличающие его не только от прототипа, но и от других вариантов оценки риска отторжения свободного трансплантата. Эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию изобретения «новизна».