Влияние аторвастатина на содержание гормонов в липопротеиновых комплексах крови человека

Осочук С.С., Буянова С.В.

Витебский государственный медицинский университет

Влияние аторвастатина на содержание гормонов в липопротеиновых комплексах крови человека

mmmm-

The influence of atorvastatin on Cortisol and hormones of thyroid gland distribution in lipoproteins of healthy people are investigated. High density lipoproteins (HDL), low density lipoproteins (LDL) and very low density lipoproteins (VLDL) allocated with ultracentrifuge Beckman LE 80K. In conclusions: the HDL and VLDL do not participate in transport of cortisol, the LDL only 12,5% of volunteers are capable to transfer of cortisol, the transport of T3 and T4 in lipoproteins has sexual differences. The degree of influence of atorvastatin on maintenance T4 and cortisol in HDL are 12,9 and 12,3 %, accordingly.

OSOCHUK S.S., BUYANOVA S.V The influence of Atorvastatin on hormone content in lipoprotein complexes of human blood.

Одним из современных фармакологических средств профилактики атеросклероза являются стати-ны - ингибиторы ключевого фермента синтеза холестерола (ХС) ОМГ-редуктазы (КФ 1.1.1.34). Наиболее широко используемый препарат этой группы - производное пиролл-гептановой кислоты атор-вастатин (АТУ) [3]. АТУ как липофильное вещество, способен транспортироваться в составе липопротеиновых комплексов (ЛПК), проникать через цитоплазматичес-кие мембраны [5] и таким образом действовать на метаболизм ХС в периферических клетках. Снижение активности синтеза ХС в надпочечниках и других тканях может изменить активность продукции гормонов стероидной природы. Вторично изменение активности синтеза ХС способно привести к изменению липидного обмена, продукции и активности регулирующих его гормонов, в частности тироидных, а также к ряду других изменений, таких как продукция коэнзима О10 [6]. С этим связаны изменения антиок-сидантной активности ЛПК и др.

Цель исследования - изучить влияние АТУ на транспорт кортизола и тироидных гормонов в составе ЛПК. Исследование этого аспекта действия препарата позволит дополнить информацию о его влиянии на метаболизм человека.

Материалы и методы Обследованы 16 здоровых добровольцев, принимавших аторвастатин перорально однократно утром за 4 часа до завтрака в дозе 80 мг. Аторвастатин был предоставлен для исследований СООО «Лекфарм» (Беларусь). Кровь

для исследований забирали из локтевой вены в гепаринизированные пробирки до приема, через 24 и 60 часов после приема препарата. Плазму получали центрифугированием в рефрижераторной центрифуге РС-6 при 3000 оборотах в минуту, расфасовывали в пластиковые пробирки и до обработки хранили в морозильной камере при -60оС. Липопротеины высокой плотности (ЛПВП), низкой плотности (ЛПНП) и очень низкой плотности (ЛПОНП) выделяли методом ультрацентрифугирования [5] на центрифуге Optima LE80K с ротором 50,4 Ti. Содержание кортизола и тироидных гормонов (Т3 и Т4) определяли в выделенных ЛПК с использованием коммерческих радиоиммунных наборов производства ИБОХ (НАН РБ) на у-счетчике Vizard (Финляндия). Абсолютное количество гормонов рассчитывали по стандарту и выражали в пМ/мл ЛПК; удельное содержание гормонов рассчитывали на 1 мг белка, определенного по методу Лоури.

Исследованные показатели были сопоставлены у мужчин и женщин с целью выявления гендерных отличий. Показатели, по которым не было выявлено ген-дерных отличий, в дальнейшем обрабатывались статистически в объединенных группах. Для показателей с тендерными отличиями дальнейшая обработка проводилась с учетом половой принадлежности. Обследованные были разделены на гормон-позитивные (+) и гормон-негативные (-) в зависимости от наличия в составе ЛПК детектируемых избранным методом гормонов. Для оценки влияния АТУ на формирование гормон-позитивных и гормон-негативных групп был применен метод греко-латинских квадратов с предварительным построением таблицы сопряженности, содержащей частоты для взаимодействующих значений изучаемого бинарного признака каждой из сравниваемых групп [1]. Оценка достоверности изменений содержания гормонов в гормон-позитивных группах проводилась с использованием медианного теста, а также сравнения средних значений для зависимых и независимых выборок с использованием критериев Манна-Уитни и критерия Уилкоксона [1].

Результаты и обсуждение Сравнение исследуемых показателей у мужчин и женщин (табл. 1) показало, что у женщин до приема АТУ гормон-позитивная подгруппа ЛПНП была достоверно большей, чем у мужчин (р=0,038),

Таблица 1 | Характеристика пациентов, прооперированных по поводу ДРЩЖ, с нормальной и избыточной массой тела в зависимости от возраста

Мужчины Женщины

Гормон + Гормон - Гормон + Гормон -

Т3 ЛПНП до ATV

37,5% 62,5% 87,5% (Рм=0,038) 12,5%

Т3 ЛПОНП через 60 часов после ATV

0,28±0,07 нМ/л

Примечание: P - достоверно по сравнению с мужчинами.

что говорит о наличии тендерных отличий физико-химических свойств ЛПНП.

Содержание Т3 в ЛПОНП у мужчин через 60 часов после приема АТУ было достоверно выше, чем у женщин (р=0,02).

Исследование ЛПВП добровольцев до приема АТУ показало, что в 100% случаев отсутствовал кортизол, Т3 определялся в 75% случаев, а Т4 - у 46,6% обследованных (табл. 2). Через 24 часа после приема АТУ кортизол определялся в ЛПВП у 31,25% обследованных, что достоверно выше, чем в контрольной группе (р=0,014), а Т4 - у 87,5% (р=0,015). В распределении Т3 достоверных изменений не наблюдалось. Учитывая, что ЛПВП у здоровых людей захватывается главным образом печенью, можно сделать вывод о возможности увеличения активности влияния кортизола и Т4 на печень через 24 часа после однократного приема АТУ.

Через 60 часов после приема препарата ЛПВП утратили способность к транспорту кортизола, однако на 25% увеличилась группа, способная переносить Т3 (р=0,032), а группа, способная транспортировать Т4, уменьшилась на 40,35% (р=0,01) по сравнению с исходным состоянием и на 81,25% (р=0,0001) по сравнению с предыдущим сроком исследований.

Полученные данные позволяют заключить, что через 60 часов после приема АТУ транспорт кортизола осуществлялся без участия ЛПВП. Вместе с тем, способность ЛПВП к переносу Т3 возросла, Т4 - снизилась. Учитывая, что3 для Т3 описана более высокая, чем для Т4, аф3финность к ядерным рецепторам тироидных гормонов [3], вероятно, возможность воздействия этих гормонов на печень максимальна на данном сроке исследований.

Исследование содержания гормонов в ЛПНП показало, что через 24 часа после приема АТУ количество гормон-позитивных по связыванию Т3 женщин было достоверно выше (87,5%; р=0,038), чем гормон-позитивных мужчин (37,5%). Через 60 часов такого разделения уже не наблюдалось, при этом гормон-позитивная по транспорту Т4 группа достоверно уменьшилась на 31,25% (с 37,5% до 6,25%, р=0,032). Последний факт согласуется с достоверным, по сравнению с 24-часовым исследованием, уменьшением гормон-позитивной по Т4 группы, переносящей Т4 в составе ЛПОНП (р=0,014). 4

Таким образом, приведенные данные позволяют заключить, что в течение

Таблица 21 Влияние АТУ на распределение гормонов в ЛПК, %

Время обследования Кортизол Т3 Т4

+ - + - + -

ЛПВП

До АТУ 0 100 75 25 46,6 53,4

Через 24 ч 31,25 68,75 75 25 87,5 12,5

Р=0,014 Р=0,015

Через 60 ч 0 100 100 0 6,25 93,7

Р=0,032 Р=0,01; Р2=0,0001

ЛПНП

До АТУ 12,5 87,5 М Ж М Ж 37,5 62,5

37,5 87,5 Рм=0,038 62,5 12,5

Через 24 ч 25 75 37,5 87,5 Рм=0,038 62,5 12,5 31,25 68,75

Через 60 ч 0 100 75 100 25 0 6,25 93,75

Р1=0,032

ЛПОНП

До АТУ 0 100 87,5 12,5 6,25 93,75

Через 24 ч 12,5 87,5 87,5 12,5 31,25 68,75

Через 60 ч 0 100 100 0 0 100

Р2=0,014

Примечание: Р, - достоверно по сравнению с контролем, Р2 - по сравнению с 24-часовым исследованием.

60 часов после однократного приема АТУ в его максимальной дозировке способность ЛПК к транспорту кортизола и тироидных гормонов модифицируется с различной степенью выраженности, что, возможно, способно оказать вторичное влияние на метаболический профиль тканей, захватывающих эти ЛПК.

Учитывая выявленные отличия во влиянии АТУ на способность ЛПК связывать гормоны, для гормон-позитивных групп было проведено сравнение средних значений содержания гормонов в ЛПК с использованием критерия Манна-Уитни для независимых выборок, а также медианный тест (табл. 3). Проведенный анализ гормон-позитивных групп до и после приема АТУ не выявил достоверных отличий. Медианный тест также показал, что исследуемые показатели относятся к одной генеральной совокупности.

Таким образом, можно заключить, что, увеличивая процент гормон-позитивных ЛПК, АТУ не изменяет абсолютное содержание гормонов в их составе, за исключением описанной выше способности воздействовать на содержание Т3 в гормон-позитивных группах мужчин. 3

Оценка распределения гормонов по ЛПК волонтеров гормон-позитивных групп показала, что до приема АТУ распределение кортизола Т3 и Т4 по ЛПК не имело достоверных отличий (см. табл.3).

Через 24 часа после приема АТУ содержание Т3 ЛПВП было выше, чем в ЛПНП (р=0,02), а в ЛПНП ниже, чем в ЛПОНП (р=0,009). Удельное содержание Т3 наиболее высоким было в составе ЛПОНП (р=0,0009 и 0,007). Такое распределение Т3 позволяет предполагать наличие возможности оказания влияния на метаболизм печени через ЛПВП и периферических тканей через ЛПОНП. Учитывая, что содержание Т3 в ЛПОНП было больше, чем в ЛПНП, можно предположить, что в ходе липолитической трансформации Т3 было элиминировано клетками, что могло изменить их метаболический профиль.

Через 60 часов после приема АТУ содержание Т3 в ЛПОНП имело описанные выше гендерные отличия и не отличалось от исходного (до приема АТУ) содержания гормона.

Таким образом, оценка распределения гормонов по ЛПК показала, что наиболее выраженные изменения происходят через 24 часа после приема АТУ.

Оценка всей выборки с использованием критерия Уилкоксона для зависимых выборок продемонстрировала достоверное увеличение в ЛПВП содержания кортизола и Т4 через 24 часа и Т3 через 60 часов после приема АТУ (р=0,04; 0,027 и 0,034 соответственно) (табл. 4). Через 60 часов после приема АТУ количество кортизола возвращалось к исходным значениям, а Т4 было достоверно ниже, чем через 24 часа (р=0,027). Полученные данные свидетельствуют о возможности воздействия транспортируемых в составе ЛПВП гормонов на метаболизм печени в течение всего срока наблюдения.

Исследование количества гормонов в составе ЛПНП не выявило достоверных отличий в течение всего эксперимента.

В составе ЛПОНП через 24 часа достоверно увеличивалось содержание Т3 и Т4 (р=0,049 и 0,046 соответственно). Через 60 часов содержание исследуемых гормонов не отличалось от исходных значений до приема препарата. Учитывая, что в составе ЛПНП не было выявлено достоверных отличий после приема препарата, а в ЛПОНП они определяются через 24 часа, можно предположить, что Т3 и Т4 элиминируются из ЛПОНП в ходе их липоли-тической трансформации и способны воздействовать на органы, задействованные в этом процессе. Данный вывод согласуется с результатами, полученными при анализе распределения гормонов в ЛПК гормон-позитивных групп.

Учитывая, что статины принимаются пациентами длительное время, можно предположить, что изменения гормон-связывающей активности ЛПК у таких пациентов будут носить более выраженный характер, что требует дополнительных исследований.

Для уточнения возможности влияния АТУ на распределение гормонов в составе ЛПК был проведен анализ с использованием факториальной ANOVA (табл. 5).

Анализ выявил достоверное влияние АТУ на содержание Т4 и удельное содержание кортизола ЛПВП через 24 часа после приема препарата. Степень воздействия для Т4 составила 12,9%, а для удельного содержания кортизола - 12,3%.

Таблица 3 Изменение содержания гормонов в гормон-позитивных группах

Время обследования 1руппа

Кортизол, нМ/мл Кортизол, пМ/мг белка Т3, пМ/мл Т3, пМ/мг белка Т4, пМ/мл Т4, пМ/мг белка

ЛПВП

До ATV -//- -//- 0,11±0,06 п=12 0,41±0,19 п=12 0,72±1,85 п=8 1,6±3,77 п=8

Через 24 ч 1,78±1,3 п=5 6,8±3,9 п=5 0,15±0,1 п=12 0,55±0,49 п=12 0,12±0,13 п=14 0,47±0,44 п=14

Через 60 ч -//- -//- 0,15±0,06 п=16 0,39±0,11 п=16 0,18 п=1 0,53 п=1

ЛПНП

До ATV 0,59±0,21 п=2 5,1±3,25 п=2 0,09±0,07 п=10 0,76±0,8 п=11 0,47±1,06 п=6 2,4±5,11 п=6

Через 24 ч 2,12±1,93 п=4 11,1±13,4 п=4 0,06±0,04 п=10 PvP=0,02 0,3±0,3 п=10 0,02±0,02 п=5 0,08±0,09 п=5

Через 60 ч -//- -//- 0,02±0,01 п=14 PVP=0,000003 0,09±0,03 п=14 PVP=0,000003 4,23 п=1 11,4 п=1

ЛПОНП

До ATV -//- -//- 0,08±0,06 п=14 1,55±1,66 п=14 0,05 п=1 0,005 п=1

Через 24 ч 2,48±2,58 п=2 52,7±43,3 п=2 0, PN 13±0,04 п=14 ,,=0,009 1,95±1,2 п=14 PVP=0,0009 PNP=0,0007 0,02±0,01 п=5 0,3±0,3 п=2

Через 60 ч -//- -//- М Ж 3,04±4,56 п=16 -//- -//-

0,09±0,02 0,06±0,02 РМ=0,02

Примечание: Рур - в сравнении с ЛПВП, Рнр - в сравнении с ЛПНП.

Таблица 4 Изменение содержания гормонов в ЛПК добровольцев для зависимых выборок

Время обследования Группа

Кортизол, пМ/мл Кортизол, пМ/мг белка Т3, пМ/мл Т3, пМ/мг белка Т4, пМ/мл Т4, пМ/мг белка

До АТ^ -//- -//- 0,09±0,07 0,3±0,2 0,03±0,04 0,12±0,2

Через 24 ч 0,55±1,1 P1=0,04 2,1±3,8 0,11±0,1 0,4±0,5 0,1±0,07 P1=0,027 0,4±0,4

Через 60 ч -//- -//- 0,15±0,06; P1=0,034 0,39±0,11 0,011±0,04; P2=0,027 0,03±0,13

ЛПНП

До АТ^ 0,07±0,2 0,6±1,9 0,02±0,04 0,2±0,3 0,17±0,7 0,89±3,1

Через 24 ч 0,5±1,2 2,8±7,8 0,04±0,05 0,19±0,28 0,007±0,02 0,03±0,06

Через 60 ч -//- -//- 0,21±0,16 0,07±0,04 0,26±1,05 0,7±2,85

ЛПОНП

До АТ^ -//- -//- 0,07±0,06 1,35±1,6 0,00003±0,0001 0,0003±0,001

Через 24 ч 0,31±1,08 8,8±24,3 0,12±0,06; P1=0,049 1,64±1,32 0,005±0,01; P1=0,046 0,05±0,15

Через 60 ч -//- -//- 0,07±0,03; P2=0,038 3,04±4,56 -//- -//-

Таблица 5 Влияние ATV на содержание гормонов в ЛПК

Показатель SS Degr. of MS F P

Т4 ЛПВП через 24 ч 34655,9 1 34655,88 4,459826 0,043138

Error 233120,4 30 7770,68 - -

Удельный кортизол ЛПВП через 24 ч 143,888 1 143,8884 4,335503 0,045670

Error 1028,840 31 33,1884 - -

Таким образом, исходя из полученных результатов, можно сделать следующие выводы:

1. У здоровых людей ЛПВП и ЛПОНП не участвуют в транспорте кортизола, ЛПНП способны переносить кортизол лишь у 12,5% обследованных.

2. У здоровых людей транспорт тиро-идных гормонов осуществляется всеми ЛПК, при этом распределение на гормон-позитивные и гормон-негативные группы имеет половые отличия.

3. Аторвастатин увеличивает количество людей, ЛПК которых способны транспортировать в своем составе кор-тизол и тироидные гормоны, не оказывая выраженного влияния на содержание гормонов в ЛПК.

4. Однократный прием аторвастатина сопровождается изменением распределения гормонов в ЛПК, увеличивая удельное и абсолютное содержание Т3, главным образом в составе ЛПОНП. 3

5. Аторвастатин способен оказать

влияние на содержание Т4 и удельное содержание кортизола в ЛПВП со степенью воздействия 12,9 и 12,3% соответственно.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Липиды, липоп-ротеиды и атеросклероз. - СПб.: Питер Пресс, 1995. - 304 с.

2. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATIST ICA М. - М.: МедиаСфера, 2002. -312 с.

3. Ялымов А.А., Шехян Г.Г., Задонченко В.С. // От диспансеризации к высоким технологиям: м-лы конгр. кардиологов. Москва, 10-12 октября 2006. -М., 2006. -С. 449.

4. Darling D.S., Dickhoff WW., Gorbman A.. // Endocrinology. -1982. - Vol. 111 (6). - P. 1936-1943.

5. Fonarow G, Watson K. // Am. J. Cardiol. - 2003. -Vol. 92. -№ 1А. - Р. 27-34.

6. Lindgren T [et al.] // J. Lipid. Research. - 1964. -Vol. 5. - P. 68-74.

7. Pacanowski M.A. [et al.] // J. Clin. Lipid. - 2008. -Vol. 2 (4).-P. 289-297.

Поступила 25.01.2011 г.

Антибактериальный и противогрибковый эффект бинта медицинского марлевого, содержащего наночастицы золота

-тшшт- .. „

Смотрин С.М., Довнар Р.И., Васильков А.Ю., Гракович П.Н., Иоскевич Н.Н., Жмакин А.И.

Гродненский государственный медицинский университет

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Институт механики металлополимерных систем им. В.А. Белого НАН Беларуси, Гомель

For the first time the series of bandaging materials was gotten by method of metal vapor synthesis on basis of medical gauze bandage containing gold nanoparticles. Their antibacterial properties were researched on such microorganisms as Salmonella enteritidis, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia, Escherichia coli, Acinetobacter baumannii, Moraxella spp, Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus and there antifungal effect was defined on fungus of genus Candida (Candida spp). Investigated bandaging material has demonstrated marked antibacterial properties in relation to Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus haemolyticus and antifungal properties in relation to Candida spp. strain. SMOTRIN S.M., DOVNAR R.I., VASIL'KOV AYu., GRAKOVICH P.N., IASKEVICH M.M., ZHMAKIN A.I. Antibacterial and antifungal effect of medical gause bandage containing gold nanoparticles

Золото используется и высоко ценится человечеством более 7 тысяч лет благодаря его необычным свойствам [8, 14]. Упоминания о различных способах применения золота обнаружены в древнем Китае, Египте и Индии [16, 17]. Жители Египта считали, что золото не только охраняет от заклинаний и волшебства, но и обладает дающими жизнь свойствами [19]. В Индии оно применя-

лось для омоложения и ревитализации в пожилом возрасте [18].

В 17-19 вв. препараты золота применялись для лечения меланхолии, обмороков, эпилепсии, нервного возбуждения, золотухи и сифилиса [6, 24]. Однако использование золота при этих заболеваниях основывалось на чисто эмпирических предположениях о его лечебных свойствах.

новый импульс к применению препаратов золота в медицине дали исследования немецкого бактериолога Р. Коха, установившего в 1890 г. бактериостати-ческий эффект цианида золота in vitro по отношению к бацилле туберкулеза [13]. Ошибочное представление о том, что последняя является причиной ревматоидного артрита, привело Р. Коха и других исследователей к открытию эффективных в лечении данного заболевания препаратов золота, таких как ауротиомалат, ауротиоглюкоза и аура-нофин [11, 22]. С того времени препараты золота стали использоваться для лечения множества других ревматических заболеваний, включая псориатический артрит, ювенильный артрит, рецидивирующий ревматизм и дискоидную красную волчанку [9].

Повышение интереса к лечебным свойствам золота привело к значитель-