Способ прогнозирования прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени на фоне папилломавирусной инфекции
METHOD FOR PREDICTION OF PROGRESSION OF LOW-GRADE CERVICAL SQUAMOUS INTRAEPITHELIAL LESION WITH UNDERLYING HUMAN PAPILLOMAVIRUS INFECTION

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и найдет применение для прогнозирования прогрессии цервикальной интраэпителиальной неоплазии низкой степени (LSIL), ассоциированной с вирусом папилломы человека (ВПЧ) высокого канцерогенного риска (ВКР).
Одной из наиболее значимых медицинских и социальных проблем женского репродуктивного здоровья является рак шейки матки (РШМ) [[Назарова Н.М., Прилепская В.Н., Гусаков К.И., Сычева Е.Г. ВПЧ-ассоциированные заболевания у женщин и мужчин: клинические и практические аспекты. // Медицинский оппонент.- 2018. - №4. - С. 22-29. elibrary ID: 36574688]. С 2008 года доказана роль ВПЧ, как основного этиологического фактора цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN) и инвазивного рака.
В настоящее время терапевтические подходы дифференцированы в зависимости от стадии поражения цервикального эпителия российским протоколом ведения пациенток с цервикальными неоплазиями и синтезированы в клинических рекомендациях 2020 года «Цервикальная интраэпителиальная неоплазия, эрозия и эктропион шейки матки» [Цервикальная интраэпителиальная неоплазия, эрозия и эктропион шейки матки, 2020], которые согласуются с Приказом Минздрава РФ №1130н [Приказ МЗ РФ от 20.10.20 №1130н «Об утверждении порядка оказания медицинской помощи по профилю акушерство и гинекология»]. Согласно данным документам: у молодых пациенток с LSIL (признаки ВПЧ инфекции, койлоцитоз), или планирующих беременность, предпочтительна выжидательная тактика с динамическим наблюдением за состоянием шейки матки в течение 18-24 месяцев в виде цитологического контроля 1 раз в 6 мес. и ВПЧ-тестирования 1 раз в год. Хирургическое лечение рекомендуется в случае отсутствия регрессии через 18-24 мес.
Предпочтения выжидательной тактики при динамическом наблюдении обоснованы результатами демонстрирующими спонтанный регресс цервикальной интраэпителиальной дисплазии умеренной степени (CIN II) у каждой второй пациентки, персистенцию - не более чем в 30% случаев, а прогрессию до цервикальной интраэпителиальной неоплазии тяжелой степени (CIN III) лишь у 18% больных [Liang Y., Chen М., Qin L., Wan В., Wang H. A meta-analysis of the relationshipbetweenvaginalmicroecology, human papillomavirusinfection and cervicalintraepithelialneoplasia // Infect. Agent. Cancer. - 2019. - Vol. 14. - P. 29. https://doi. org/10.1186/s13027-019-0243-8].
При этом в возрастной группе пациенток до 30 лет данные результаты еще более благоприятны: регресс отмечают у 60%, а прогрессию только у 11% больных [Юлдашева Д.Ю., Аскарова У.Ж., Ахмедова Г.А. Отягощающие факторы, способствующие персистированию ВПЧ у женщин с цервикальными интраэпителиальными неоплазиями. // Биология и интегративная медицина. - 2017. - №2. - С. 55-63. elibrary ID: 28947771].
Эти данные свидетельствуют о том, что обоснованный выбор тактических вариантов ведения пациенток на основе достаточно точных методов прогнозирования прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени, позволит снизить частоту необоснованных инвазивных процедур в виде хирургического вмешательства с соответствующими осложнениями.
Из существующего уровня техники известен способ диагностики цервикальных интраэпителиальных неоплазий на основе определения относительного содержания мРНК гена р 16 (INK4a) с использованием количественной ПЦР, который включает забор исследуемого материала путем соскоба из шейки матки, его цитологический анализ, отличающийся тем, что при наличии интраэпителиальной неоплазии по цитологическому исследованию проводится также анализ гена гипоксантин-гуанин фосфорибозилтрансферазы (HPRT-1), при этом сравнивают уровень экспрессии мРНК р16 (INK4a) с уровнем экспрессии мРНК HPRT-1 и, если отношение уровня экспрессии мРНК гена р16 (INK4a) к мРНК HPRT-1 свыше 93 отн. ед., то ставится диагноз CIN3 (рак in situ), а если значение превышает 201 отн. ед. - ставится диагноз плоскоклеточного рака (патент РФ №2464570, опубликовано 20.10.2012, Бюл.№29)
Недостатками данного технического решения являются сложность и трудоемкость в силу необходимости использования нескольких методов исследования, таких как гистологическое, генетическое, ПЦР-исследование.
Известен способ прогнозирования риска рецидивирования у ВПЧ 16-позитивных больных с плоскоклеточным интраэпителиальным поражением тяжелой степени на основе определения физического статуса вируса, включающий выделение ДНК из биологического материала соскобов эпителия цервикалыюго канала и наружной части шейки матки, молекулярно-генетическое исследование биологического материала с помощью ПЦР в режиме реального времени, определение наличия и типирование вируса папилломы человека (ВПЧ), анализ внутриклеточного статуса ВПЧ 16 типа и при определении эписомальной формы ВПЧ 16 типа прогнозируют благоприятный исход заболевания, при наличии интегрированной формы прогнозируют возникновение рецидива заболевания (патент РФ №2719581, опубликовано 21.04.2020, Бюл.№12)
Недостатками данного технического решения являются сложность и трудоемкость в силу необходимости использования нескольких методов исследования, таких как гистологическое, генетическое, ПЦР-исследование.
Известен способ прогнозирования прогресса папилломавирусной инфекции у пациенток с хроническим рецидивирующим ВПЧ - ассоциированным цервицитом, заключающийся в том, что у пациентки определяют генотипы полиморфизмов Ser249Pro в гене TLR6 и Pro72Arg в гене ТР53 и при выявлении у пациентки аллеля Ser в гене TLR6 и гомозиготного генотипа Pro/Pro или Arg/Arg в гене ТР53 прогнозируют низкий риск прогрессирования ПВИ; при выявлении у пациентки мутации Pro/Pro в гене TLR6 либо гетерозиготного генотипа Pro/Arg в гене ТР53 прогнозируют средний риск прогрессирования ПВИ; при определении у пациентки мутации Pro/Pro в гене TLR6 и гетерозиготного генотипа Pro/Arg в гене ТР53 прогнозируют высокий риск прогрессирования ПВИ (патент РФ №2646785, опубликовано 07.03.2018 г, Бюл.№7)
Недостатками данного технического решения являются сложность и трудоемкость в силу необходимости использования большого количества исследуемых факторов и их вариаций.
Наиболее близким к заявленному техническому решению является способ прогнозирования варианта течения заболевания у больных с плоскоклеточными эпителиальными поражениями низкой степени на фоне папилломавирусной инфекции, отличающийся тем, что рассчитывают диагностический коэффициент ДК для каждого из признаков по формуле ДК=101g⋅(Р1/Р2), где Р1 - относительная частота признака при первом верифицируемом состоянии, выраженная в долях единицы; Р2 - относительная частота признака при втором верифицируемом состоянии; при выявлении высокой вирусной нагрузки вируса папилломы человека (ВПЧ) 16, 18 типов ≤5 lg присваивают ДК плюс 3,2, средней 3-5 lg - минус 4,1, низкой ≤3 lg - минус 11,1; клинико-кольпоскопического индекса 0-1 баллов присваивают ДК минус 10,5, 2-3 балла - минус 1,7, 4-5 баллов - плюс 6,4, 6-7 баллов - плюс 16,4, 8 баллов и выше - плюс 11,2; иммуногистохимического индекса р 16ink4α 0-4 балла присваивают ДК минус 10,4, 5 баллов и выше - плюс 8,4; возраста 15-24 лет присваивают ДК минус 3,0, 25-34 лет - плюс 0,3, 35-45 лет - плюс 4,2; начала половой жизни до 15 лет присваивают ДК плюс 8,0, 15-18 лет - плюс 2,2, 19-22 года - минус 2,5, старше 23 лет - минус 7,1; интервала от менархе до сексуального дебюта 2-3 года присваивают ДК плюс 4,1, 4-5 лет - минус 0,5, 6 лет и более - минус 4,5; при сумме ДК менее минус 13 битов вероятность благоприятного исхода плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени (LSIL) составляет 95%, при ДК от плюс 13 до плюс 19 битов вероятность перехода плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени (LSIL) в плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени (HSIL) составляет 95%, при ДК более плюс 20 битов - вероятность 99% (патент РФ №2472444, опубликовано 20.01.2013, Бюл. №2).
Недостатками данного технического решения являются сложность и трудоемкость в силу необходимости использования большого количества исследуемых факторов и их вариаций.
Недостатки прототипа устраняются в заявляемом техническом решении.
Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение является разработать достоверный простой способ прогноза риска прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени на фоне папилломавирусной инфекции.
Данная задача решается за счет того, что у пациентки с выявленным цервикальным плоскоклеточным интраэпителиальнымпоражением низкой степени, ассоциированного с вирусом папилломы человека высокого канцерогенного риска однократно в венозной крови определяют методом хемилю-минесцентного иммуноанализа на микрочастицах концентрацию фолиевой кислоты и, при ее уровне ниже 3,1 нг/мл, прогнозируют высокий риск прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиальногопоражения низкой степени.
Технический результат заключается в простоте метода при обеспечении высокой точностии информативности прогноза риска прогрессии LSIL, ассоциированного с вирусом папилломы человека высокого канцерогенного риска за счет однократного определения в венозной крови уровня фолиевой кислоты, что позволяет выбрать патогенетически обоснованную тактику ведения пациентки для предотвращения прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени и обеспечить своевременную профилактику рака шейки матки (РШМ).
РШМ остается одной из самых серьезных угроз для жизни женщин, профилактика и раннее лечение которого, по мнению ВОЗ (2018) является чрезвычайно важной. Известно, что в глобальном масштабе во всем мире каждые 2 минуты одна женщина умирает от РШМ [Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В., ред. Состояние онкологической помощи населению России в 2019 году. М.: МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России; 2020. 236].
РШМ относится к опухолям визуальной локализации, что способствует его обнаружению как на ранних стадиях заболевания, так и диагностике его предшествующей формы (предрака) - цервикальной интраэпителиальной неоплазии (CervicalIntraepithelialNeoplasia - CIN) [Протасова А.Э. Цервикальная интраэпителиальная неоплазия и рак шейки матки. Вирус папилломы человека единственный фактор риска? // Эффективная фармакотерапия. 2019. Т. 15. №32. С. 42-46.]
Поскольку ВПЧ признанный этиологический фактор РШМ, наиболее перспективной стратегией в цервикальном скрининге считается ВПЧ-типирование [US Preventive ServicesTask Force; Curry S.J., Krist A.H. etal. Screening for cervical cancer: US Preventive Services Task Force recommendation statement. JAMA. 2018; 320(7): 674-86. DOI: 10.1001/jama.2018.10897].
В связи с высокой распространенностью ВПЧ, естественной историей его течения, а именно возможностью как регрессировать, так и прогрессировать, поиск эффективных методов, массово снижающих риск персистенции ВПЧ, предотвращающих развитие дисплазии эпителия шейки матки и прогрессии от легкой степени к инвазивному раку, имеет значимое практическое значение [Tranbaloc P. Naturalhistory of precursorlesions of cervicalcancer // Gynecol. Obstet. Fertil. 2008. Vol. 36. No 6. P. 650-655].
Исследованиями C.J. Piyathilake и соавт. (2014) установлено, что перси-стенция ВПЧ, развитие CIN и РШМ зависят от метилирования ДНК самого вируса [Piyathilake C.J., Macaluso М., Chambers М.М. etal. Folate and vitamin В12 may play a critical role in lowering the HPV 16 methylation associated risk of developing higher grades of CIN // Cancer Prev. Res. (Phila.). 2014. Vol. 7. JVb 11. P. 1128-1137]. Полноценное метилирование ДНК ВПЧ после внедрения в клетку подавляет синтез его онкобелков Е6 и Е7, которые стимулируют клеточную пролиферацию, препятствуют апоптозу раковых клеток, подавляют выработку интерферона, нарушают протективные регуляторные механизмы репарации ДНК, что в целом дестабилизирует геном [Курмышкина О.В., Волкова Т.О., Ковчур П.И. и др. Гены раннего ответа в патогенезе рака шейки матки: обзор // Опухоли женской репродуктивной системы. 2011. №. 1. С. 96-106].
После внедрения в клетку вирус папилломы человека использует донаторы метальных групп человека (фолаты и витамин В12) для стабилизации (метилирования) собственной ДНК. Метилирование генома ВПЧ-16 зависит от уровня фолатов как донаторов метальной группы и ведет к значительному подавлению синтеза онкобелка Е6. Снижение экспрессии генов онкобелков в клетках, инфицированных ВПЧ обеспечивается оптимальным уровнемфолатов [[Piyathilake C.J., Macaluso М., Chambers М.М. etal. Folate and vitamin В12 may play a critical role in lowering the HPV 16 methylation associated risk of developing higher grades of CIN // Cancer Prev. Res. (Phila.). 2014. Vol. 7. №11. P. 1128-1137].
Рядом исследований установлена ассоциативная связь между снижением относительного риска развития CIN умеренной степени и выше и оптимальной концентрацией фолатов в сыворотке крови [Kondo A., Asada Y., Shibata К. etal. Dietary folate intakes and effects of folic acid supplementation on folate concentrations among Japanese pregnant women // J. Obstet. Gynaecol. Res. 2011. Vol. 37. No 4. P. 331-336]. Результаты рандомизированного двойного слепого плацебоконтролируемого исследования убедительно доказывают влияние фолатного статуса на возможность регресса уже развившейся цервикальной дисплазии: в группе женщин, получавших фолиевую кислоту, CIN I регрессировала в 83,3% случаев [Asemi Z., Vahedpoor Z., Jamilian M. etal. Effects of long- term folate supplementation on metabolic status and regression of cervical intraepithelial neoplasia: a randomized, double-blind, placebo-controlled trial //Nutrition. 2016. Vol. 32. No 6. P. 681-686].
Наши исследования показали, что уточнение роли фолатного статуса в установлении риска персистенции ВПЧ, развитии цервикальных дисплазий, а также их прогрессии представляют важный инструмент мониторинга за ВПЧ-инфицированными пациентками.
Точность заявляемого нами метода повышается в виду того, что определяемый нами в крови критический уровень фолиевой кислоты в 3,1 нг/млпри прогнозировании риска прогрессии LSIL, ассоциированного с ВГГЧВКР имеет также, установленную нами в ходе исследования, положительную взаимосвязь с экспрессией маркера p16ink4α - биологическим маркером начала канцерогенеза. Повышение его экспрессии рассматривается как непрямой маркер активной онкогенной экспрессии ВПЧ ВКР.
В частности, выявленная нами прогрессия цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени на фоне инфицированности ВПЧ высокого канцерогенного риска сопровождается экспрессией белка онкопредиктора p16ink4α и однонаправленным снижением уровня фолиевой кислоты в сыворотке крови ниже физиологической нормы 3,1 нг/мл.
Полученные в ходе собственных исследований (в рамках профилактического обследования здоровых групп населения согласно Приказу Минздрава РФ №1130н) данные позволили сформулировать вывод о том, что параметр фолатного статуса, а именно уровень фолиевой кислоты в сыворотке крови ниже 3,1 нг/мл у пациенток с LSIL, ассоциированного с ВПЧ ВКР, является значимым для того, чтобы отнести таковых к группе высокого риска по прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени на фоне папилломавирусной инфекции.
Подробное описание способа и примеры его клинического выполнения
У пациенток осуществляют исследование соскобов с поверхности шейки матки методом жидкостной цитологии. При цитологическом заключении LSIL выполняют тест на ВПЧ ВКР методом ПЦР Real-time. При сочетании LSIL и выявлении ВПЧ ВКР в клинически значимой концентрации (более 10 копий ДНКВПЧ на 105 клеток) данным пациенткам исследуют фолатный статус, а именно концентрацию фолиевой кислоты в крови однократно взятой из локтевой вены в объеме 1 мл натощак в утреннее время суток методом хеми-люминесцентного иммуноанализа на микрочастицах.
Для забора материала методом жидкостной цитологии шейку матки обнажали в зеркалах, в цервикальный канал вводили Cervex-Brush, поворачивали 3 раза по часовой стрелке для адекватного получения клеточного материала из зоны трансформации и цервикального канала. После этого наконечник Cervex-Brush снимали и помещали в маркированный контейнер CYTOScreen со стабилизирующим раствором PreservCyt. В течение 2 - 4 ч контейнер отправляли в лабораторию, в которой автоматизировано в процессоре ThinPrep 5000 (TP 5000) изготавливали и окрашивали препараты с последующим их анализом ручным способом. Интерпретацию результатов осуществлялисогласно классификации TBS (The BethesdaSystem).
Генотипирование ДНК ВПЧ типов высокого канцерогенного риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 и 59, выделенных из клинических проб проводили с помощью набора «РеалБест ДНК ВПЧ ВКР генотип», методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени на амплификаторе CFX-96 "REAL TIME" (Bio-Rad США).
Определение концентрации фолиевой кислоты проводили однократно утром натощак с 08:00 до 11:00 часов методом хемилюминесцентного имму-ноанализа на микрочастицах, Architect i2000(Abbott) с использованием набора реагентов ADVIA Centaur FOL производства Siemens Health care Diagnostics (Германия). Референсные значения концентрации фолиевой кислоты: 3,1-20,5нг/мл.
При уровне концентрации фолиевой кислоты в сыворотке крови ниже 3,1 нг/мл прогнозируют высокий риск прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени (LSIL) на фоне па-пилломавирусной инфекции до средней или тяжелой степени. Это позволяет осуществлять своевременную адекватную патогенетическую терапию, предотвратить персистенцию ВПЧ ВКР и профилактировать прогрессию цервикальных интраэпителиальных поражений.
Работоспособность заявляемого способа подтверждается следующими клиническими примерами, продемонстрировавшими доказательства возможности реализации заявленного назначения и достижения указанного технического результата.
Пример 1.
Пациентка Д-ева, 1988 года рождения. Обратилась в августе 2019 года с диагнозом LSIL, установленным при профилактическом обследовании месяц назад. Пациентке было рекомендовано выполнение ВПЧ-тестирования, результаты которого выявили инфицированность ВПЧ 16 типом в клинически значимой концентрации (5,67 lg). Кольпоскопическое исследование выявило наличие аномальных картин I степени (вне зоны трансформации I типа тонкий ацетобелый эпителий с неровными контурами, нежная мозаика, нежная пунктация). С целью определения риска прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени согласно предлагаемому способу был исследован уровень фолиевой кислоты в сыворотке крови, в результате которого установлен дефицит фолатного статуса -концентрация фолиевой кислоты составила 3,0нг/мл. Согласно заявляемому способу выставлен неблагоприятный прогноз в отношении прогрессии LSIL. Пациентка информирована о необходимости восстановления уровня фолиевой кислоты, от которого она отказалась. При динамическом наблюдении выявлена прогрессия заболевания до HSIL.
Пример 2.
Пациентка И-ова, 1987 года рождения. Обратилась для определения лечебной тактики выявленного 2 месяца назад LSIL и ВПЧ ВКР (33 тип, 4,52 lg). По результатам расширенной кольпоскопии обнаружена аномальная кольпоскопическая картина I степени: зона трансформации I типа. Вне зоны трансформации на передней и задней губе шейки матки обширная зона ацетобелого эпителия и нежной мозаикой. Йоднегативная зона с нечеткими и неровными краями. С целью определения риска прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени согласно предлагаемому способу был исследован уровень фолиевой кислоты в сыворотке крови, в результате которого установлен дефицит фолатного статуса (концентрация фолиевой кислоты составила 2,4 нг/мл). Согласно заявляемому способу выставлен неблагоприятный прогноз в отношении прогрессии LSIL. В ходе динамического наблюдения, пациентке медикаментозно восполнен дефицит фолатного статуса. Через 12 месяцев при очередном цитологическом исследовании выявлен регресс LSIL и элиминация ВПЧ.
Пример 3.
Пациентка Б-ева, 1984 года рождения. Обратилась за медицинской помощью в связи с выявленным LSIL на фоне инфицирования 16 типом ВПЧ в концентрации 6,31 lg. При кольпоскопии: обширная зона трансформации, послеродовая деформация шейки матки. На задней губе шейки матки обнаружены аномальные кольпоскопические картины I степени: участок нежной мозаики, захватывающий зону цервикального канала, йодположительная пунктация.
С целью определения риска прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени, согласно предлагаемому способу, был исследован уровень фолиевой кислоты в сыворотке крови, концентрация которой составила 3,1 нг/мл. Согласно заявляемому способу, выставлен благоприятный прогноз в отношении регрессии LSIL. Учитывая пороговое значение уровня фолиевой кислоты, пациентке был рекомендован прием витаминно-минерального комплекса, содержащий активную форму фолатов с высокой биодоступностью. Через 8 месяцев в ходе динамического наблюдения при цитологическом исследовании выявлено отсутствие цервикального интраэпителиального поражения, а также ВПЧ-негативный результат генотипирования ДНК ВПЧ ВКР.
Пример 4.
Пациентка К-ва, 1989 года рождения. При профилактическом осмотре диагностировано LSIL на фоне ВПЧ позитивного теста: выявлен 18 тип ВПЧ в клинически значимой концентрации - 7,36 lg. Расширенная кольпоскопия показала наличие аномальных кольпоскопических картин I степени: внутри и вне зоны трансформации II типа обширное поражение «высокой» степени, местами плотный ацетобелый эпителий с очагами нежной и грубой мозаики, занимающих более 75% эктоцервикса. С целью определения риска прогрессии цервикального плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени, согласно заявляемому способу, был исследован уровень фолиевой кислоты в сыворотке крови, концентрация которой составила 94,7нг/мл. Выставлен благоприятный прогноз в отношении регрессии LSIL. Через 18 месяцев динамического наблюдения при цитологическом исследовании выявлено отсутствие цервикального интраэпителиального поражения, а также ВПЧ-негативный результат генотипирования ДНК ВПЧ ВКР.
Заявленным способом обследовано 42 пациентки (средний возраст 26,2±2,1 года) с LSIL, ассоциированным с ВПЧ ВКР, подтвержденными результатами жидкостной цитологии и генотипирования ДНК ВПЧ ВКР в рамках профилактического обследования, регламентированного Приказом Минздрава РФ №1130н. В зависимости от уровня фолиевой кислоты в сыворотке крови исследуемые пациентки разделены на 2 группы: в 1 группе (24 пациентки) обнаружен выраженный дефицит фолатного статуса (уровень фолиевой кислоты составил менее 3,1 нг/мл). Во 2 группе значения концентраций фолиевой кислоты входили в границы физиологической нормы.
В 1 группе у 19 из 24-х пациенток возникла прогрессия LSIL (у 18 пациенток до HSIL, у 1 пациенток до cancer in situ). Во 2 группе женщин у 17-ти пациенток при динамическом наблюдении отмечен регресс цервикального интраэпителиального поражения и элиминация ВПЧ ВКР. Прогрессия LSIL до HSIL с сохраняющимся уровнем нагрузки ВПЧ выявлена только у одной пациентки данной группы.
Статистическую обработку полученных результатов выполняли с помощью биометрических методов анализа. В случае положительного решения для определения значимости статистических различий количественных показателей в сформированных группах применяли t - критерий Стьюдента. При парных сравнениях балльной оценки иммуноэкспрессии p16ink4α использовали непараметрический метод двух выборочных ранговых критериев для сравнения независимых выборок (U-тест Манна - Уитни). Использовали общепринятые уровни значимости: р<0,05; р<0,01 и р<0,001. Обработку цифрового материала проводили с использованием метода вариационной статистики при помощи программ Excel 15.0 (Microsoft Office 2016 MacOS) и Statistica 10.
Таким образом, предлагаемый способ с высокой долей достоверности и информативности позволяет прогнозировать возникновение прогрессии при цервикальном плоскоклеточном интраэпителиальном поражении низкой степени(LSIL) до HSIL, что позволит оптимизировать выбор персонализированной терапии.
Выше изложенные данные подтверждают работоспособность и высокую прогностическую ценность заявляемого способа.
Таким образом, заявляемый способ является более эффективным по сравнению с известными и обладает рядом преимуществ:
1. Обладает простотой, достоверностью и высокой прогностической точностью.
2. Прогнозирование патологии возможно в ближайшие сроки после диагностики LSIL, что способствует раннему началу патогенетической терапии.
3. Клиническое применение способа позволит осуществлять адекватную патогенетическую терапию и предотвращать прогрессию цервикальных интраэпителиальных поражений низкой степени.
4. Способ является простым и доступным для практических врачей и может использоваться в амбулаторных условиях.
5. Способ не требует применения многочисленных дорогостоящих реактивов, оборудования и позволяет снизить материальные затраты при диагностике данной патологии, в связи с чем является более рациональным и экономически оправданным.