Тканевой уровень цитокинов при колоректальном раке

сти (специально разработанная для оценки только опорно-двигательной функции).

Шкала уровня физической активности:

1 - физическая активность и самообслуживание в пределах кровати (резко снижена);

2 - физическая активность и минимальное самообслуживание в пределах палаты / квартиры (значительно снижена);

3 - легкое ограничение физической активности, способна выполнять привычную работу по дому (незначительно снижена);

4 - передвигается и обслуживает себя без ограничений (не снижена).

Эта шкала отражает динамический аспект эффективности или неэффективности различных подходов к лечению, в том числе при различной выраженности анатомического дефекта.

Совместное использование этих шкал позволяет дать комплексную оценку поражения скелета и уровня физической активности.

Внедрение ее в практическую работу отделений Тюменского областного онкологического диспансера свидетельствует о ее достаточной эффективности у больных РМЖ, возможности использования, как в клинической, так и научной работе.

ТКАНЕВОЙ УРОВЕНЬ ЦИТОКИНОВ ПРИ КОЛОРЕКТАЛЬНОМ РАКЕ

О.И. Кит, А.В. Шапошников, Е.Ю. Златник, Е.А. Никипелова, Г. И. Закора, Ю.А. Геворкян, М.А. Аверкин. П.Б. Шуликов

РНИОИ, г. Ростов-на-Дону

Важное место в осуществлении межклеточных взаимодействий и реализации противоопухолевого ответа иммунной системы принадлежит цитокиновой регуляции.

Цитокины - биологически активные вещества, которые являются продуктами иммунокомпе-тентных клеток и одновременно регулируют их активность через соответствующие рецепторы. По основным механизмам действия цитокины подразделяются на ростовые (колонестимули-рующие) факторы, контролирующие продукцию иммунокомпетентных клеток; провоспалитель-ные (1Ь-1, 6, 8, 12, 18, ЮТ-а и др.), обеспечивающие мобилизацию и активацию клеток - участников воспаления; противовоспалительные цитокины (1Ь-2, 4 и др.) с альтернативным характером действия, ограничивающие развитие воспаления, регулирующие клеточный и гуморальный иммунитет. Цитокины также регулируют процессы ангиогенеза, регенерации, пролиферации, апоптоза, метаболические процессы и т.д. Основными продуцентами провоспалительных

цитокинов являются активированные моноциты, макрофаги, ДК, КК, а также Т- и В-лимфоциты; противовоспалительных - Т-клетки, преимущественно, СВ3+СБ4+СБ8- (ТЪ1 и ТЬ2). Продуцентами цитокинов могут быть не только иммуноком-петентные клетки, но и клетки микроокружения опухоли.

Многие цитокины (ІЬ-1а, ІЬ-6, ІЬ-8, ІЬ-10, Т№-а., ІЬ-23, ІЬ-24) могут вырабатываться и лимфоцитами и опухолевыми клетками. Известно, что ІЬ-6, ІЬ-8, ІЬ-10, ІЬ-1а и его рецепторный антагонист ІЬ-1ЯЛ не только способны продуцироваться опухолевыми клетками, но и проявляют себя как факторы усиления опухолевой прогрессии, активирующие ангиогинез и миграцию опухолевых клеток, а ТКБ-а, являясь индуктором апоптоза и неоангиогенеза, может вызывать усиление гибели например, лимфоцитов, находящихся на данной территории, и распространение туда опухолевых клеток.

Цитокины являются молекулами короткодистантного взаимодействия, их локальное содержание играет важную роль в межклеточных взаимодействиях и иммунологических реакциях при развитии злокачественного процесса.

Цель исследования: изучить тканевой

уровень цитокинов при колоректальном раке

Материалы и методы.

Для изучения местного уровня цитокинов, нами было проведено исследование участков ткани кишки у 20 больных первичными спорадическими аденокарциномами толстого кишечника (ІІІ стадии), в возрасте от 36 до 76 лет. Больные, у которых рак толстой кишки развился из предшествующих полипов, язвенного колита или болезни Крона, в исследования не были включены.

В ходе оперативных вмешательств проводилось удаление опухолевого очага с последующим исследованием ткани опухоли, а также визуально неизмененных участков кишки, отступя 1-3см (перитуморальная зона) и 10 см (линия резекции) от края опухоли. Последнюю мы считали нормой, так как для тканей нормы нет. Полученные образцы ех Іешрогае помещались в среду 199 для исследования в иммунологической лаборатории. Аналогичные участки, взятые в формалине, направляли в патоморфологическую лабораторию РНИОИ для верификации диагноза.

Локальный уровень провоспалительных (ТОТ-а, ІЬ-6, ІЬ-8, ІЬ-10, ІЬ-1ЯЛ) и противовоспалительных цитокинов (ІЬ-2), выделенных из образцов ткани кишки, определяли иммунофер-ментным методом. Образцы ткани отмывали в среде для удаления клеток крови, размельчали и гомогенизировали в растворе Версена на магнитной мешалке в течение 15 минут при температуре 22°С, фильтровали через капроновый фильтр.

Гомогенат стерильно отбирали и хранили при -20°С в течение 1 месяца до иммунофермент-ного исследования, которое проводили с помо-

№ 3-4, 2011 Тюменский медицинский журнал

21

щью наборов фирмы «Вектор-Бест». Результаты выражали в пг/мл. Кроме того, в гомогенате определяли биуретовым методом количество белка и удельное содержание цитокинов в расчете на один грамм белка.

Статистическую обработку результатов осуществляли с использованием параметрических методов (t-критерия Стьюдента).

Результаты и обсуждение.

Было выяснено, что уровни большинства ци-токинов в опухоли статистически достоверно выше, чем в образцах немалигнизированных тканей кишечника. Так, содержание IL-1RA, TNF-a, IL-2, IL-6, IL-8 в ткани опухоли в 2 - 4 раза было выше, чем в перитуморальной зоне. При этом в области линии резекции содержание цитокинов не отличается от регистрируемого в перитумо-ральной области, кроме IL-8, уровень которого статистически достоверно ниже не только по сравнению с тканью опухоли, но и с тканью пе-ритуморальной зоны. Уровень IL-10 также в 1,8 раза был выше в ткани опухоли, по сравнению с его содержанием в перитуморальной зоне, но из-за значительных колебаний индивидуальных показателей, различия оказались статистически недостоверными.

Для более детального анализа различий уровней цитокинов было определено содержание общего белка в исследуемых тканях, а также рассчитано удельное содержание цитокинов в перерасчете на грамм белка (пг/мл на 1 г белка). Изучение содержания общего белка в исследуемых тканях показало, что оно было максимальным в перитуморальной зоне. Вариабельность данных по этому показателю незначительна, поэтому проведенный расчет удельного содержания цито-кинов обнаружил тенденции аналогичные описанным выше.

Выводы.

Результаты изучения содержания

провоспалительных (TNF-a, IL-6, IL-8, IL-10, IL-1RA) и противовоспалительных цитокинов (IL-2) в ткани опухоли и немалигнизированных участках кишки при раке толстого кишечника III стадии показали, что наибольший уровень их был в ткани аденокарциномы по сравнению с другими исследуемыми участками. Высокий уровень противовоспалительного цитокина IL-2 (в 2-4 раза выше, чем в визуально немалигнизи-рованных тканях) можно связать с повышенным количеством в ткани опухоли Т-хелперно-индукторных лимфоцитов (как было показано нами ранее), являющимися основными продуцентами IL-2, который в свою очередь не только участвует в противоопухолевом иммунитете, но и может поддерживать рост клеток опухоли, учитывая III стадию процесса. Вместе с тем известно, что провоспалительные цитокины TNF-a, IL-6,

1Ь-8, 1Ь-10, 1Ь-1ЯА способны продуцироваться собственно опухолевыми клетками и проявляют себя как факторы усиления опухолевой прогрессии, активирующие ангиогинез и миграцию опухолевых клеток, что подтверждается нашими результатами - их высоким содержанием в ткани опухоли по сравнению с немалигнизированными участками кишки.

В ткани аденокарциномы толстой кишки уровень большинства провоспалительных цито-кинов превышает их содержание в прилежащих к ней тканях, скорее всего, за счет аутокринной продукции опухолью на фоне воспалительного процесса. Найденные изменения свидетельствуют о важной роли тканевых иммунно - воспалительных реакций в патогенезе рака толстой кишки.

ВОЗМОЖНОСТИ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ПЕРВИЧНО-МНОЖЕСТВЕННОГО РАКА ТОЛСТОЙ КИШКИ

О.И. Кит, Е.М. Франциянц, Ю.А. Геворкян,

М.А. Аверкин, А.В. Дашков, Н.В. Солдаткина, Д.А. Харагезов, П.Б. Шуликов

РНИОИ, г. Ростов-на-Дону, Россия

Значение проблемы рака толстой кишки не снижается на протяжении многих лет и становится более острой в связи с ростом заболеваемости, которая составляет в структуре онкозаболеваемости 9-14%. При этом отмечается увеличение частоты встречаемости первично-множественного рака толстой кишки, который составляет 17% от всех наблюдений полинеоплазий и считается одной из наиболее частых локализаций синхронных и метахронных опухолей, уступая лишь первично-множественному раку кожи (50% всех наблюдений), (Чиссов и соавт., 2010; Вашакмадзе Л.А. и соавт., 2002).

Причина развития первично-множественных опухолей толстой кишки до конца не изучена, однако большинство исследователей считают механизм развития полинеоплазий полиэтиоло-гичным. Исследования показали, что первичномножественные опухоли толстой кишки возникают у больных на фоне значительных изменений защитных механизмов организма. Это происходит при хронических воспалительных процессах в кишечнике (от 3,7% до 20%); воздействии ионизирующего излучения; при полипозе толстой кишки (при полинеоплазиях толстой кишки частота выявления полипозов в 2 раза выше, чем при солитарных опухолях и достигает 60-75%); при наследственных нарушениях, таких как синдромы Линча, Фромери, Гарднера (Вашакмадзе Л.А. и соавт., 2002). Кроме того, провоцирующими фак-

22

Тюменский медицинский журнал № 3-4, 2G11