Сравнительная оценка антибиотикорезистентности штаммов v. cholerae non О1/non О139, выделенных от людей в Ростовской области в разные годы

8. Окунева И.А. Характеристика течения поствакцинального периода при иммунизации детей против клещевого энцефалита. В кн.: Сборник статей научной сессии молодых ученых Пермской государственной медицинской академии им. акад. Е.А. Вагнера. Пермь; 2014; т. 1: 55-6.

9. Фельдблюм И.В., Меньшикова М.Г., Данилина Т.В., Окунева И.А. и др. Оценка реактогенности, безопасности и иммуно-генности отечественной вакцины «ЭнцеВир» с уменьшенной антигенной нагрузкой при иммунизации детей 3-17 лет по экстренной схеме вакцинации. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2013; 4: 53-7.

Поступила 02.10.14

REFERENCES

1. Korenberg E.I., Pomelova V.G., Osin N.S. Infections with Natural Focality Transmitted by Ixodid Ticks [Prirodnoochagovye infektsii, peredayushchiesya iksodovymi kleshchami]. Moscow; 2013.

2. Onishchenko G.G., Fedorov Yu.M., Pakskina N.D. Surveillance for tick-borne encephalitis virus and its prevention measures in the Russian Federation. Voprosy virusologii. 2007; 5: 8-10.

3. Poponnikova T.V., Galieva G.Yu., Novikov V.E., Galaganova L.G. Tick-borne encephalitis in children: haracteristics of clinical picture and differential diagnostics under modern conditions. Rossiyskiy zhurnal detskoy nevrologii. 2011; 6 (2): 11-24. (in Russian).

4. Vorob'eva M.S., Rasshchepkina M.N., Ladyzhenskaya I.P. Vaccines, immunoglobulins and test systems for the diagnosis and prevention of tick-borne encephalitis. Voprosy virusologii. 2007; 6: 30-6.

5. Morozova O.V., Bakhvalova V.N., Potakova O.F. et al. Study of the immunogenic and protective effects of inactivated vaccines tick -borne encephalitis

6. Heinz F.X. et al. Field effectiveness of vaccination against tickborne encephalitis. Vaccine. 2007; 25: 7559-67.

7. Pollabauer E.M. et al. Comparison of immunogeniciti and

safety between two pediatric TBE vaccines. Vaccine. 2010; 28: 4680-5.

8. Okuneva I.A. Current characteristic ofpost-vaccination period for infant immunization against tick-borne encephalitis. In: Sbornik statej nauchnoj sessii molodyh uchenyh Permskoj gosudarstven-noj medicinskoj akademii im. akad. E.A. Vagnera. Perm'; 2014: vol. 1: 55-6.

9. Fel'dblyum I.V., Men'shikova M.G., Danilina T.V., Okuneva I.A. et al. Study of reactogenicity, safety and immunogenicity Russian vaccine «Encevir» with the reduced antigenic load the immunization of children aged 3-17 on special vaccination scheme. Epidemiologiya i infektsionnye bolezni. 2013; 4: 53-7.

Received 02.10.14

Сведения об авторах:

Окунева Ирина Александровна, ассистент каф. эпидемиологии с курсом гигиены и эпидемиологии ФПК и ППС ГБОУ ВПО ПГМА им. акад. Е.А. Вагнера Минздрава России, 614000, г. Пермь, ул. Дзержинского, 1б; Данилина Татьяна Викторовна, начальник отдела клинических исследований ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России, 127473, г. Москва, Волконский переулок, д. 10; Меньшикова Марина Геннадьевна, к.м.н., доцент каф. эпидемиологии с курсом гигиены и эпидемиологии ФПК и ППС ГБОУ ВПО ПГМА им. акад. Е.А. Вагнера Минздрава России, 614000, г. Пермь, ул. Дзержинского, 1б; Павроз Ксения Андреевна, к.м.н., ассистент каф. эпидемиологии с курсом гигиены и эпидемиологии ФПК и ППС ГБОУ ВПО ПГМА им. акад. Е.А. Вагнера Минздрава России, 614000, г. Пермь, ул. Дзержинского, 1б; Трофимов Денис Михайлович, зам. начальника Управления регистрации и медицинских исследований ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России, 127473, г. Москва, Волконский переулок, д. 10; Ершов Алексей Евгеньевич, начальник Управления регистрации и медицинских исследований ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России, 127473, г. Москва, Волконский переулок, д. 10.

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2015 УДК 579.843.1:579.252.55].083.1

Селянская Н.А., Веркина Л.М., Березняк Е.А., Титова С.В., Железняк Н.Г., Архангельская И.В.

сравнительная оценка антибиотикорезистентности штаммов v. CHOLERAE non 01/N0N о139, выделенных от людей в ростовской области в разные Годы

ФКУЗ «Ростовский-на-Дону противочумный институт» Роспотребнадзора, 344002, г. Ростов-на-Дону, ул. М. Горького, д. 117

Цель - изучить антибиотикорезистентность штаммов Vibrio cholerae non 01/non О139, выделенных от людей в Ростовской области в разные годы. Материалы и методы. 86 штаммов V. cholerae non 01/non О139 (ctx-tcp-), выделенных от людей в Ростовской области в 1968-2014 гг. Антибиотикограммы штаммов определяли методом серийных разведений в плотной питательной среде. Результаты. В 2005-2014 гг. в сравнении с 1968-1975 гг. увеличилось число полиантибиоти-корезистентных штаммов при снижении количества антибиотикочувствительных культур. Разнообразие спектра анти-биотикочувствительности V. cholerae non 01/non 0139 согласуется с данными литературы о высокой пластичности генома и вариабельности свойств этих штаммов. Заключение. Для эффективной этиотропной терапии и предупреждения роста количества устойчивых штаммов необходимо определение антибиотикочувствительности каждой выделенной от больного культуры с своевременной заменой антибактериального препарата при его неэффективности. Ключевые слова: антибиотикограмма; антибиотикорезистентность; V. cholerae non 01/non 0139.

Для цитирования: Эпидемиология и инфекционные болезни. 2015; 20 (3): 32-35.

Для корреспонденции: Селянская Надежда Александровна, e-mail: ppdn@inbox.ru

SelyanskayaN.A., VerkinaL.M., BereznyakE.A., TitovaS.V, ZheleznyakN.G., ArkhangelskayaI.V.

COMPARATIVE STUDY OF ANTIBIOTIC RESISTANCE OF V.CHOLERAE NON 01/ NON 0139 STRAINS ISOlATED FROM HUMANS IN THE ROSTOV REGION IN VARIOUS YEARS

Rostov-on-Don Institute for Plague Control of Federal Agency for Consumer Rights Protection andHuman Welfare Supervision, 117, Maksima Gorkogo, Rostov-on-Don, Russian Federation, 344002

Purpose: to estimate the antibiotic resistance of Vibrio cholerae non 01/ non 0139 strains isolated from humans in the Rostov Region over the last 45years. Materials and methods. Eighty six strains of V. cholerae non 01/non 0139 (ctx- tcp-) were tested which had been isolated from humans in the Rostov region in 1968-2014. Antibiograms of strains tested were determined by the method of serial dilutions in solid medium. Results. In 2005-2014, as compared to 1968-1975, strains possessing multiple antibiotic resistance grew in number whereas the number of susceptible cultures decreased. The antimicrobial sensitivy spectrum of V. cholerae non 01/non 0139 strains is consistent with previous records of high genome plasticity and variability of these strains. Conclusion. For successful etiotropic therapy and prevention of resistant strains spread the monitoring of antibiotic sensitivy is needed of each isolated clinical culture with subsequent timely replacement of antimicrobial in case of its inefficiency.

Key words: antibiogram, antibiotic resistance, V. cholerae non 01/ non 0139.

Citation: Epidemiologiya i Infektsionnye Bolezni. 2015; 20

Vibrio cholerae non 01/non О139 способны вызывать у людей заболевания, варьирующие по характеру клинических проявлений от диарей различной степени тяжести до системных заболеваний с внеки-шечной локализацией возбудителя, в том числе септицемии [1]. Вызванные этими микроорганизмами диареи в виде спорадических случаев или групповых вспышек токсикоинфекций зарегистрированы во многих странах мира и на территории России.

Вспышки острых кишечных инфекций (ОКИ), вызванные V. cholerae non 01/non 0139, отмечались в Ростове-на-Дону и области более 40 лет назад (60-70-e годы ХХ века). При бактериологическом обследовании населения Ростовской области и Краснодарского края в 1966 - 1968 гг. с охватом 46 516 человек от больных ОКИ штаммы V. cholerae non 01/non 0139 выделялись в 0,6% случаев, у контактных лиц, реконвалесцентов и работников общественного питания - в 0,08-0,26% [2].

В последние годы в Ростовской области также зарегистрированы случаи 0КИ у людей, от которых были выделены культуры V. cholerae non 01/ non 0139. При микробиологическом мониторинге материала от 43 764 больных 0КИ, проведенном в Астраханской, Волгоградской, Ростовской областях в 2005-2007 гг., V. cholerae non 01/non 0139 были выделены в 0,07-0,14% случаев [3].

0бнаружение генов продукции холерного токсина и других факторов патогенности среди V. cholerae non 01/non 0139 [4] свидетельствует о существовании реальной угрозы образования новых вирулентных для человека штаммов, склонных к эпидемическому распространению [5], что вызывает повышенное внимание к этой группе микроорганизмов.

Многочисленные исследования свидетельствуют о широком распространении и нарастании в последние десятилетия антибиотикорезистентности среди штаммов холерных вибрионов [6].

Поэтому целью нашего исследования стало изучение антибиотикорезистентности Vcholerae non 01/non 0139, выделенных от людей в Ростовской области в разные годы.

Материалы и методы

Штаммы: из музея живых культур ФКУЗ «Ростовский-на-Дону противочумный институт» было взято 86 штаммов V. cholerae non 01/non О139 (ctx-tcp-), выделенных от людей в Ростовской области: 57 штаммов в 1968 - 1975 гг. и 29 штаммов - в 2005 - 2014 гг. Антибиотикочувствительные штаммы V. cholerae 01 Р-5879 ctx+tcpA+toxR+ (1972 г., г. Таганрог) и V. cholerae non 01/non 0139 Р-9741 (КМ 162) (ctx-tcp-) служили в качестве контроля.

Чувствительность/устойчивость штаммов холерного вибриона к 11 антибактериальным препаратам изучали методом серийных разведений в плотной питательной среде (агар Мюллера-Хинтона, рН 7,5, HIMEDIA, Индия). Посевная доза взвесей 16-18-часовых агаровых культур составляла n • 106 м.к. по отраслевому стандарту мутности ГИСК им. Л.А. Та-расевича (ОСО-42-25-59-86 П).

Интерпретацию результатов проводили в соответствии с МУК 4.2.2495-09 (2009) [7].

Доверительные интервалы для частот и долей рассчитывали по методу Вальда с коррекцией по Агрести-Коуллу с вероятностью 95% [8].

Результаты и обсуждение

Установлено, что среди V. cholerae non 01/non 0139, выделенных в 1968-1975 гг., 7% культур были устойчивы к ампициллину (МПК 128 мг/л), 17,8% - к кана-мицину (МПК 32 мг/л), 3,5% - к рифампицину (МПК 128 мг/л), 14% - к триметоприму/ сульфаметоксазолу (МПК 128/640 мг/л) (рис. 1).

Среди культур, выделенных в 2005-2014 гг., резистентность к канамицину (МПК 32 мг/л) составила 6,9%, к ампициллину - 69% (МПК 16 мг/л), к тримето-приму/ сульфаметоксазолу - 10,3% (МПК 16/80 мг/л), к стрептомицину - 27,6% (МПК 64 мг/л), к фуразо-лидону - 79% (МПК 16 мг/л) (см. рис. 1).

Все изученные штаммы сохраняли чувствительность к тетрациклинам (МПК 0,5-1 мг/л), левоми-цетину (МПК 0,5-4 мг/л), ципрофлоксацину (МПК 0,01-0,05 мг/л).

У штаммов, выделенных в 2005-2012 гг., в срав-

% штаммов

80-,

Ар Sm Km Tmp/Smz Rifr Furr Cz

Ц 1968-1975 гг. Ц 2005-2014 гг.

Рис. 1. Распределение штаммов V. holerae non 01/non 0139, выделенных от людей в Ростовской области, по устойчивости к антибактериальным препаратам (АБП), %. Устойчивость: Ap - к ампициллину; Sm - к стрептомицину; Km - к ка-намицину; Rif - к рифампицину; Tmp/Smz - к триметоприму/сульфаме-токсазолу; Fur1 - к фуразолидону; Cz - к цефтазидиму.

нении со штаммами, выделенными в 1968-1975 гг., увеличилось количество культур, устойчивых к ампициллину, появилась устойчивость к стрептомицину, фуразолидону, цефтазидиму при некотором снижении процента резистентности к триметоприму/ сульфаметоксазолу и канамицину. В 2005-2014 гг. все штаммы холерных вибрионов оказались чувствительны к рифампицину.

Распределение штаммов V. cholerae non 01/non

un-1-1-1-1-1-1

ЧШ 1 АБП 2 АБП 3 АБП 4 АБП МЛУ Щ 1968-1975 гг. Ц 2005-2014 гг.

Рис. 2. Распределение штаммов V. cholerae non 01/non 0139, выделенных от людей в Ростовской области, по количеству маркеров антибиотикорезистентности.

ЧШ - чувствительные штаммы; АБП - устойчивость к соответствующему числу антибактериальных препаратов; МЛУ - множественная лекарственная устойчивость.

0139, выделенных от людей в Ростовской области, по количеству маркеров антибиотикорезистентно-сти представлено на рис. 2.

Количество антибиотикочувствительных культур, выделенных в 2005-2014 гг., уменьшилось в 2,6 раза в сравнении с 1968-1975 гг. Произошло увеличение в 2 раза числа штаммов, имеющих устойчивость одновременно к одному, двум и трем антибактериальным препаратам, а также появились культуры,

Антибиотикорезистентные фенотипы штаммов Vcholerae non О1/^п О139, выделенных от людей в Ростовской области

Годы выделения Число маркеров устойчивости Km* Ap Cz Rif Tmp/Smz Furr Sm Количество выявленных фенотипов

абс. %

1968-1975 0 + + + + + + + 46 81,0

1 - + + + + + + 1 1,75

1 + - + + + + + 1 1,75

1 + + + - + + + 1 1,75

1 + + + + - + + 3 5,25

2 + - + - + + + 1 1,75

2 + + + - - + + 2 3,5

2 + - + + - + + 1 1,75

2 - + + + - + + 4 7,0

3 - - + + - + + 4 7,0

2005-2014 0 + + + + + + + 9 31

1 + - + + + + + 6 20,7

2 + - + + + - + 4 13,8

2 + - + + + + - 1 3,5

2 - + + + - + + 1 3,5

2 + - - + + + + 2 6,9

3 + - + + - - 5 17,2

4 - - + + - - 1 3,5

4 + - + - - - 2 6,9

П р и м е ч а н и е. Устойчивость: Ар - к ампициллину; Sm - к стрептомицину; Кт - к канамицину; ШР - к рифампицину; Tmp/Smz - к триметоприму/ сульфаметоксазолу; РиГ - к фуразолидону; + - чувствительность; - - устойчивость к АБП; ДИ - доверительный интервал.

устойчивые к 4 (10,5%) антибиотикам. Множественная лекарственная устойчивость штаммов возросла с 7 до 27,8% (см. рис. 2).

Анализ профилей антибиотикорезистентности штаммов V. cholerae non 01/non О139, выделенных в Ростовской области в разные периоды времени, показал вариабельность фенотипов устойчивости к антибактериальным препаратам. Штаммы имели до 10 различных профилей антибиотикорезистентно-сти, включающие как чувствительные, так и с множественной (более 3 АБП) антибиотикоустойчиво-стью (см. таблицу).

Разнообразие спектра антибиотикочувстви-тельности изученных V. cholerae non О1/поп О139 согласуется с данными ретроспективного ПЦР и VNTR-анализа этих штаммов, который выявил вариабельность серотипических и генотипических свойств и отсутствие корреляции между ними [9]. Данные, полученные В.Д. Кругликовым и соавт. [10], указывают на высокую пластичность генома холерных вибрионов.

Заключение

Таким образом, у V. cholerae non О1/поп О139, выделенных от людей в Ростовской области в 2005 -2014 гг., наблюдается уменьшение количества анти-биотикочувствительных культур, нарастание числа штаммов, имеющих множественную антибиотикоу-стойчивость, а также расширение спектра устойчивости к антибактериальным препаратам в сравнении со штаммами, выделенными ранее.

Выбор средства для этиотропной терапии ОКИ, вызванных этими микроорганизмами, должен основываться на данных антибиотикограммы каждой выделенной культуры.

ЛИТЕРАТУРА

1. Семиотрочев В.Л., Ривкус Ю.З. Классификация заболеваний, вызываемых микроорганизмами рода Vibrio. Здоровье населения и среда обитания. 2012; 2 (227): 32-6.

2. Онищенко Г.Г., Ганин И.С., Голубинский Е.П. Вибрионы не 01 серологической группы и их значение в патологии человека. М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ; 2001.

3. Куличенко А.,Н., Савельев В.Н., Грижебовский Г.М., Таран А.В., Ефременко В.И. Актуальные вопросы микробиологического мониторинга холеры на территории Южного Федерального округа. В кн.: Материалы IX Межгосударственной научно-практической конференции государств-участников СНГ «Современные технологии в реализации глобальной стратегии борьбы с инфекционными болезнями на территории государств-участников содружества независимых государств». Волгоград; 2008; 234-6.

4. Монахова Е.В., Смоликова Л.М., Божко Н.В. ПЦР-детекция генов системы секреции третьего типа (TTSS) и других факторов пато-генности/персистенции у холерных вибрионов различных серо-групп. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2010; 6: 20-5.

5. Ерошенко Г.А., Куклева Л.М., Шавина Н.Ю., Кутырев В.В. Молекулярно-эпидемиологическая характеристика и возможное происхождение V. cholerae не О1/не О139 с полным и ограниченным набором генов вирулентности. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2007; 5: 24-8.

6. Селянская Н.А., Рыжко И.В., Веркина Л.М., Тришина А.В., Миронова А.В., Акулова М.В. Антибиотикограммы штаммов

V. cholerae не О1/не О139, выделенных от людей в 1968-2009 гг. Антибиотики и химиотерапия. 2011; 1-2: 18-21.

7. Определение чувствительности возбудителей опасных бактериальных инфекций (чума, сибирская язва, холера, туляремия, бруцеллез, сап, мелиоидоз) к антибактериальным препаратам. Методические указания. МУ 4.2.2495-09. М.; 2009.

8. Гржибовский А.М. Доверительные интервалы для частот и долей. Экология человека. 2008; 5: 57-60.

9. Архангельская И.В., Водопьянов А.С., Водопьянов С.О., Непомнящая Н.Б., Кругликов В.Д., Ускова Н.Н. и др. Сравнительный анализ свойств штаммов холерных вибрионов не О1/не О139 се-рогрупп, циркулирующих на территории Ростовской области. В кн.: Материалы проблемной комиссии Координационного научного совета по санитарно-эпидемиологической охране территории Российской Федерации «Холера и патогенные для человека вибрионы». Ростов-н/Д; 2012: 124-9.

10. Кругликов В.Д., Монахова Е.В., Архангельская И.В., Водопьянов А.С., Водопьянов С.О., Авдеева Е.П. и др. Характеристика штаммов холерных вибрионов не О1/не О139 серогрупп, вызвавших заболевания людей в Ростовской области. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2011; 5: 18-22.

Поступила 01.04.15

REFERENCES

1. Semiotrochev V.L., Rivkus Yu.Z. The Classification of diseases evoke microbes by genus of Vibrio. Zdorov'e naseleniya i sreda obi-taniya. 2012; 2

2. Onishchenko G.G., Ganin I.S., Golubinskiy E.P. Vibrio non O1 Se-rogroupand their Significance in Human Pathology [Vibriony ne O1 serologicheskoy gruppy i ikh znachenie vpatologii cheloveka]. Moscow: GOU VUNMTs MZ RF; 2001.

3. Kulichenko A.N., Savel'ev V.N., Grizhebovskiy G.M., Taran A.V., Efremenko V.I. Current issues of microbiological monitoring of cholera in the southern federal district. In: Materials IX Interstate Scient. Conference CIS Member SNG "Sovremennye tekhnologii v realizatsii global'noy strategii bor'by s infektsionnymi boleznyami na territorii gosudarstv-uchastnikov sodruzhestva nezavisimykh gosudarstv". Volgograd; 2008; 234-6.

4. Monakhova E.V., Smolikova L.M., Bozhko N.V. PCR detection of the type III secretion system

5. Eroshenko G.A., Kukleva L.M., Shavina N.Yu., Kutyrev V.V. Mo-lecular-epidemiological characteristic and possible origin of Vibrio cholerae non O1/non O139 with complete and limited set of virulence genes. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii. 2007; 5: 24-8.

6. Selyanskaya N.A., Ryzhko I.V., Verkina L.M., Trishina A.V., Mironova A.V., Akulova M.V. Antibiograms of Vibrio cholera non-O1/non O139 strains isolated from humans within 1968-2009. Antibiotiki i khimioterapiya. 2011; 1-2: 18-21.

7. Identification of the Pathogens of Dangerous Bacterial Infections (Plague, Anthrax, Cholera, Tularemia, Brucellosis, Glanders, Melioidoz) to Antibacterial Medicines. Methodical the Decree [Opredelenie chuvstvitel'nosti vozbyditeley opasnykh bakterialnykh infektsiy (chuma, sibirskaya yazva, kholera, tylyaremiya, brutselez, sap. melioidoz) k antibakterialnym preparatam] MU 4.2.2495-09. Moscow; 2009 (in Russian).

8. Grzhibovskiy A.M. Confidence intervals for proportions. Ekologiya cheloveka. 2008; 5: 57-60 (in Russian).

9. Arkhangel'skaya I.V., Vodop'yanov A.S., Vodop'yanov S.O., Nep-omnyashchaya N.B., Kruglikov V.D., Uskova N.N. et al. Comparative analysis of properties of strains of Vibrio cholerae non Ol/non O139 serogroup, circulating in the Rostov region. In: [Materialy problemnoy komissii Koordinatsionnogo nauchnogo soveta po sani-tarno-epidemiologicheskoy okhrane territorii Rossiyskoy Federatsii "Kholera i patogennye dlya cheloveka vibriony"]. Rostov-n/D; 2012: 124-9.

10. Kruglikov V.D., Monakhova E.V.,Arkhangel'skaya I.V., Vodop'yanov A.S., Vodop'yanov S.O., Avdeeva E.P. et al. Characteristics of Vibrio cholerae nonO1/nonO139 serogroup strains that caused diseases in population of Rostov region. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii. 2011; 5: 18-22.

Received 01.04.15