Роль новых методов диагностики в оценке состояния кишечной микробиоты у детей с хроническим гастродуоденитом

Вестник Челябинского государственного университета. 2014. № 13 (342). Образование и здравоохранение. Вып. 4. С. 42-49.

УдК 616.33-002-078 ББК 53.4:54.1

роль новых методов диагностики в оценке состояния кишечной микробиоты У детей с хроническим гастродуоденитом

М. М. ГуровО', Т. А. Романова*, В. П. Новикова**, И. А. Авилова***

*ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», Белгород, Россия ** ФГБУ «Федеральный медицинский исследовательский центр им. В. А. Алмазова», Санкт-Петербург, Россия ***ФГБОУ ВПО «Юго-Западный государственный университет», Курск, Россия

Применение газовой хроматографии и масс-спектроскопии, по сравнению с обычными, микробиологическими исследованиями кала может существенно расширить спектр обнаруживаемых организмов, включённых в биоплёнки кишечника, а также понимание возможных изменений в различных фазах хронического гастродуоденита. Применение этого метода в клинической практике представляет собой значительную возможность для проведения коррекции заболеваний у детей с хроническим гастродуоденитом. Было обследовано 340 детей в возрасте от 12 до 18 лет. Анализируется состав и количество микроорганизмов кишечной стенки при помощи газовой хромато-масс-спектрометрии в острой фазе ремиссии и после применения пробиотических препаратов.

Ключевые слова: хронический гастродуоденит, дети, микрофлора кишечника, газовая хроматография — масс-спектрометрия.

Поддержание микроэкологического статуса человека является необходимым условием стабильного функционирования организма. Это обусловлено широким спектром сигнальных и гормоно-подобных соединений, вырабатываемых микро-биотой, аналогичных или идентичных гормонам человека (ацетилхолин, дофамин, адреналин и норадреналин, серотонин, гамма-аминомасляная кислота, эндорфины и энкефалины), участвующих во внутри- и межсистемных взаимодействиях (ЪепаМ I, 1992; Шендеров Б. А., 1998). Кроме того, микрофлора модулирует физиологические функции организма опосредованно, за счёт влияния на процессы биоусвояемости макро- и микро-нутриентов [2; 3; 7; 10; 13; 14]. В связи с этим нарушение состояния микробиоценоза кишечника как самого большого биотопа человеческого организма может иметь самостоятельное патологическое значение и рассматривается в качестве до-нозологического состояния, повышающего риск возникновения различных отклонений в здоровье ребёнка (Урсова Н. И., 2006; Шаип М. И., 2004; Ы^ке^ R. К., 2006). Данные исследования ме-тагенома (MetaHIT) микрофлоры желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) позволили выявить предикторы неблагоприятных изменений со стороны микробиоты, характерные для ряда хронических заболеваний, включая воспалительные заболева-

ния кишечника, сахарный диабет 2-го типа, ожирение [12]. В связи с этим заслуживает внимания оценка выраженности изменений и динамического состояния микрофлоры толстой кишки при наиболее часто встречающейся патологии ЖКТ в детском возрасте — хроническом гастродуоде-ните (ХГД) как фактора, негативно влияющего на течение основного заболевания [1; 2], а в случае ремиссии — на полноту наступления восстановительных процессов [8; 9]. Изменение кишечной микрофлоры выявлено у 100 % пациентов с ХГД в фазе обострения, при этом выраженность дисбактериоза (по данным Г. В. Римарчук, 2003) могла достигать 2-4-й степени [8]. По мнению ряда исследователей, нарушения микробиоты при ХГД носят стойкий характер [15], сохраняясь до трёх месяцев после клинического выздоровления, а при наличии фоновых заболеваний ЖКТ — до 1 года и более (по результатам микробиологического исследования фекалий) [1]. Таким образом, своевременная диагностика, клиническая интерпретация и направленная коррекция микробиотических нарушений при ХГД имеет самостоятельное терапевтическое и профилактическое значение. В то же время имеющиеся в арсенале практического здравоохранения методы для оценки состояния микрофлоры немногочисленны и характеризуются рядом существенных

ограничений и недостатков. Бактериологическое исследование, традиционно применяющееся в педиатрической практике, является трудоёмким, продолжительным (7-10 дней) и малоинформативным. Полученные результаты позволяют оценить состояние только внутри просветной флоры, не идентифицируя основную часть бактерий и других микроорганизмов, входящих в состав микробной биоплёнки [4].

Для повышения информативности и своевременной диагностики дисбиоза очевидный интерес представляет метод газовой хроматографии — масс-спектрометрии (ГХ-МС). В качестве маркеров оценки состояния кишечной микробиоты используются видоспецифичные высшие жирные кислоты (ЖК) — генетически детерминированные структурные компоненты клеточной стенки [4; 6]. Данный метод позволяет существенно расширить спектр определения клинически значимых (более 104 клеток/мл) микроорганизмов пристеночной микрофлоры (бактерий, грибов, вирусов), вплоть до видов при наличии видового маркера. К другим достоинствам метода относятся его чувствительность и быстрое получение результатов (в течение 2,5 ч), что позволяет проводить динамическую оценку состояния микробиоты [5]. В 2010 г. Росздравнадзором разрешена к применению в качестве новой медицинской технологии «Оценка микроэкологического статуса человека методом хромато-масс-спектрометрии» на территории Российской Федерации (Разрешение ФС 2010/038 от 24 февраля 2010 г.).

Целью нашего исследования было оценить значение метода ГХ-МС и для динамической харак-теристикисостояния кишечной микробиоты у детей с хроническим гастродуоденитом в различные фазы течения заболевания и на фоне проводимой терапии.

Материалы и методы исследования. Обследовано 340 детей в возрасте от 12 до 18 лет с ХГД, ассоциированным с хеликобактерной инфекцией в фазе обострения и 90 детей через 6 мес. после успешной эрадикации Н. pylori, для исключения влияния возбудителя на клиническую картину заболевания. Группу сравнения составили 22 ребёнка — школьники 9-го класса средней школы с I группой здоровья, сопоставимых по возрасту и гендерному составу с детьми основной группы. Все пациенты (и/или их законные представители) дали добровольное информированное согласие на проведение инвазивных методов обследования.

В фазе обострения ХГД дети получали трёхком-понентную эрадикационную терапию в течение 10 дней, включавшую ингибитор протонной помпы (омепразол), висмута субцитрат (де-нол) и ни-фуратель (макмирор) в стандартных дозировках. Одновременно с целью профилактики дисбио-тических нарушений дети получали лактулозу в преобиотической дозировке (5,0) в течение двух недель.

Методы исследования включали сбор анамнеза и жалоб, объективное обследование, клинический анализ крови, анализ мочи, биохимические анализы крови, анализ кала на определение яиц глистов, скрытой крови, копрограмму. Применялись также инструментальные методы исследования: ультразвуковое исследование органов брюшной полости и забрюшинного пространства на аппарате фирмы Siemens, Sonolina SL-1 по общепринятым методикам, фиброгастродуоденоскопия (ФГДС) проводилась с использованием гибких фиброколоноскопов фирмы OlympusGIF 80 по традиционной методике. Эндоскопическая картина слизистой оболочки желудка (СОЖ) и двенадцатиперстной кишки (ДПК) оценивалась по критериям Сиднейской классификации. Диагностика хеликобактерной (НР) инфекции осуществлялась в соответствии со «Стандартами (протоколами) диагностики и лечения болезней органов пищеварения Министерства здравоохранения РФ, 1998 г.». Отрицательный результат после эрадикаци-онной терапии подтверждался на основании негативных результатов трёх методов исследования — Хелик-теста, Хелпил-теста и идентификации в СОЖ с помощью гистологического метода.

Забор образцов кала для исследования на дис-бактериоз кишечника проводился с соблюдением стандартных рекомендаций. Результаты оценивались в соответствии с отраслевым стандартом «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника», приказ № 231 от 9 июня 2003 г. У 30 детей с ХГД была проведена оценка состава и количества микроорганизмов кишечной стенки методом ГХ-МС в фазе обострения, ремиссии и после курса лечения пробиотическим препаратом. В качестве пробиотического препарата применялся комплексный пробиотик «Бифиформ», содержащий Bifidobacteriumlongum не менее 107 и Enterococcusfaecium, не менее 107, по 1 капсуле 2 раза в день после еды в течение месяца. Значимыми считались отклонения, превышающие нормативные показатели в два и более раз [11].

Математико-статистическая обработка данных проведена с использованием программы StatSoft Statistica 6.0. и Microsoft Exel 7.0 для Windows-XP. Полученные в результате исследования данные проанализированы с помощью описательной статистики с определением средней арифметической (М) и среднего квадратичного отклонения (5). Нормальность распределения оценивалась с применением критерия Шапиро—Уилка. Оценка статистической значимости различий для данных, имеющих нормальное распределение, проводилась с использованием i-критерия Стьюдента для зависимых выборок, для сравнения качественных данных в двух группах рассчитывался доверительный интервал (ДИ) для отношения шансов (ОШ). Для выявления корреляционной зависимости вычислялся коэффициент корреляции рангов Спирмена (г). Полученные результаты оценивались как статистически значимые при уровне вероятностир < 0,05.

результаты исследования и их обсуждение. Особенности состояния микрофлоры толстой кишки в различные фазы ХГД представлены в табл. 1.

Как следует из таблицы, фаза обострения нарушения микробиоценоза характеризовалась уменьшением количества облигатной флоры (би-фидо-, лактобактерии, кишечная палочка) и повышением численности УПФ. В фазе ремиссии выявленные изменения сохранялись и характеризовались более выраженным ростом УПФ, стрептококков, дрожжеподобных грибов. Избыточная пролиферация Candidaalbicans, которая расценивалась как кандидозный дисбактериоз, выявлялась у 16,5 % (95 % ДИ 12-21,2) детей в фазе обострения, в фазе ремиссии — у 30 % (95 % ДИ 22,2-38,8) детей (р = 0,0412).

Изучение метаболитов пристеночной микрофлоры у детей с ХГД методом ГХ-МС (рис. 1) так же свидетельствовало о наличии дисбиотических нарушений в фазе обострения с некоторой тенденцией к нормализации показателей в фазе ремиссии. Тем не менее у детей с ХГД через 6 месяцев после проведённой эрадикационной терапии с добавлением пребиотикалактулозы сохранялись нарушения микробного пейзажа со значимым повышением численности представителей се-

Таблица 1

результаты исследования кала на дисбактериоз у детей с ХГд в различные фазы течения заболевания

Микроорганизмы (^ мт/г фекалий) 1-я группа 2-я группа 3-я группа Р

Дети с ХГД в фазе обострения, n = 340, М

Бифидобактерии 6,02±0,98 5,67±1,3 8,29±1,4 р1 2 =0,042 р1'3 =0,001 р2'3 =0,001

Лактобациллы 6,93±1,25 6,16±1,2 8,02±1,3 р12 =0,016 р1'3 =0,003 р2'3 =0,004

Кишечная палочка 19,1±3,8 27,5±5,1 24±4,3 р12 =0,001 р1'3 =0,002 р2'3 =0,003

Условно-патогенные микроорганизмы 0,65±0,085 1,16±0,12 0,43±0,04 р12 =0,003 р1'3 =0,002 р2'3 =0,001

Энтерококки 0,42±0,04 0,38±0,035 0,25±0,015 р1,2 -нд. р1 3 =0,001 р12,,33 =0,003

Дрожжеподобные грибы 0,44±0,045 0,87±0,096 0,11±0,012 р12 =0,001 р1'3 =0,001 р2,3 =0,002

Стрептококки 2,71±0,24 3,25±0,35 1,25±0,15 р12 =0,002 р1'3 =0,001 р2,3 =0,001

мейства клостридий (Clostridiumhystolyticum (2), Clostridiumpropionicum (4), Clostridiumramosum (6)), актиномицет (13) и снижением содержания лактобактерий (7), эубактерий (8) (ЕиЬаМеп-иттот^оте, Е. nodatum, Е. sabureum), бифидо-бактерий (9).

Показана взаимосвязь изменений со стороны биоценоза кишечника и морфологических изменений со стороны СОЖ, что позволило выделить микроорганизмы, обладающие противовоспалительной активностью (анаэробные пептострепто-кокки, актиномицеты, клостридии) и микроорганизмы с защитными свойствами (бифидобакте-рии, пропионобактерии, нокардии). Содержание анаэробных пептострептококков и актиномицет положительно коррелировало с выраженностью атрофических изменений в теле желудка (г = 0,53, р < 0,05), (г = 0,46, р < 0,05) и отёка СОЖ (г = 0,42, р < 0,05). Получена положительная корреляционная связь между тяжестью очаговой деструкции желёз тела желудка и ростом актиномицет (г = 0,46, р < 0,05). Количественные показатели С1. propionicum и С1. ramosum положительно

коррелировали с интенсивностью плазмоцитар-ной инфильтрации СО тела желудка (г = 0,46, р < 0,05). Численность бифидобактерий, пропи-онобактерий и Nocardiaasteroides отрицательно коррелировала с проявлениями атрофии тела желудка (г = -0,43, р < 0,05), (г = -0,53, р < 0,05), (г = -0,43, р < 0,05), содержание бифидобактерий — с активностью воспаления в фундальном отделе желудка (г = -0,42, р < 0,05) и выраженностью отёка СОЖ (г = -0,45, р < 0,05). Кроме того, положительное влияние бифидобактерий показано на состояние СО ДПК — уменьшение субатро-фических явлений в СО (г = -0,67, р < 0,05) с достаточной высотой ворсин ДПК (г = 0,81,р < 0,05).

На фоне терапии пробиотиком («Бифиформ»), проводимой в течение месяца, получена следующая динамика со стороны просветной и пристеночной микробиоты (табл. 2, рис. 2, 3).

На фоне проведённого лечения отмечалась тенденция к уменьшению дефицита основных представителей нормофлоры, при этом наиболее отчётливая положительная динамика получена со стороны содержания эубактерий (2) и бифидобак-

13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1

П-д ремиссии

П-д обострения

-10000,00 -5000,00 0,00 5000,00 10000,00 15000,00 20000,00

Рис. 1. Изменения со стороны представителей микрофлоры в фазе обострения и ремиссии ХГД по данным масс-спектрометрии, где по оси Y представлены отдельные возбудители: 1 — Streptococcus, 2 — Clostridiumhystolyticum, 3 — Peptostreptococcusanaerobius, 4 — Clostridiumpropionicum, 5 — актиномицеты, 6 — Clostridiumramosum, 7 — Lactobacillus, 8 — Eubacteriummoniliforme, E.nodatum, E.sabureum, 9 — Bifidobacterium, 10 — Propionibacterium, 11 — Микр. грибы, кампестерол, 12 — Nocardiaasteroides, 13 — Actinomycetes 10Mel4.

По оси Хпоказано содержание микроорганизмов в Кл/г х 105, где вертикальная линия сетки с координатой «0» является нормой, отклонение в плюсовую сторону свидетельствует об избыточной пролиферации микроорганизмов, в минусовую сторону — о дефиците микрофлоры

* — различия между группами статистически значимы, р <0,01

Таблица 2

результаты микробиологического исследования кала на дисбактериоз у детей с хроническим гастродуоденитом до и после лечения

Микроорганизмы

До После

Бифидобактерии 8,29±1,4 5,67±1,3 8,5*±1,25

Лактобактерии 8,02±1,3 6,16±1,2 8,3*±1,54

Кишечная палочка 24±4,3 27,5±5,1 27,6±2,8

УПФ 0,43±0,04 1,16±0,12 0

Энтерококки 0,25±0,015 0,38±0,035 0

Дрожжеподобные грибы 0,11±0,012 0,87±0,096 0

Стрептококки 1,25±0,15 3,25±0,35 0,75±0,086*

ряд 2 Вряд!

О 2000 4000 6000 8000 10000

Рис. 2. Изменения со стороны отдельных представителей микробиоты в фазе ремиссии до и после применения пробиотика, по данным масс-спектрометрии, где по оси Y представлены возбудители: 1 — Streptococcus, 2 — Clostridium hystolyticum, 3 — Peptostreptococcus anaerobius, 4 — Clostridiumpropionicum, 5 — актиномицеты, 6 — Clostridiumramosum

* — различия между данными до и после проводимой терапии статистически значимы, р < 0,01

терий (3) (рис. 3), тогда как прироста содержания лактобактерий, по данным ГХ-МС, практически не произошло. Кроме того, показано значимое уменьшение представителей УПФ с отчётливой тенденцией к нормализации гомеостатиче-ских параметров кишечного микробиоценоза. Сохранение изменений после месячного курса терапии, несмотря на полученную положительную динамику, свидетельствует о необходимости применения более продолжительных курсов лечения со сменой пробиотического препарата.

Полученные результаты позволяют заключить, что у детей с ХГД, как в фазе обострения, так и в

*

ряд 2

ряд 1

-6000 -4000 -2000 0 2000 4000

Рис. 3. Изменения со стороны отдельных представителей микробиоты в фазе ремиссии

до и после применения пробиотика, по данным масс-спектрометрии, где по оси Y представлены возбудители: 1 — Lactobacillus, 2 — Eubacterium moniliforme, E. nodatum, E. sabureum, 3 — Bifidobacterium, 4 — Propionibacterium, 5 — микр. грибы, кампе-стерол, 6 — Nocardiaasteroides, 7 — Actinomycetes 10Me14, где ряд 1 — данные пациентов в фазе ремиссии до назначения пробиотика, ряд 2 — результаты пациентов через 1 мес. после терапии пробиотиком

* — различия между данными до и после проводимой терапии статистически значимы, р < 0,01

фазе ремиссии, в 100 % случаев выявлялись изменения состоянии микробиоты, как за счёт традиционно культивируемых штаммов, так и благодаря данным, полученным методом ГХ-МС, позволившим выявить некультивируемые обычными методами микроорганизмы. Показано, что изменения характеризовались уменьшением количества облигатной флоры (бифидобактерий, лакто-бактерий, пропионобактерий) и повышением чис-

ленности УПФ (представителей семейства клос-тридий, стрептококков, грибов рода Candida). Выраженность нарушений пристеночной микрофлоры кишечника достоверно (р < 0,05) связана с особенностями клинико-морфологической картины заболевания в виде усиления воспалительной реакции в фазе обострения и дисрегенератор-ных изменений со стороны СОЖ в фазе ремиссии ХГД. Наше исследование подтверждает мнение, что восстановление изменённой на фоне патологического процесса (ХГД) микробиоты происходит длительно. После традиционного месячного курса лечения пробиотиком, несмотря на положительные сдвиги по данным ГХ-МС, полного восстановления микробного профиля не происходит. При этом наибольший эффект от про-биотика (содержащего Bifidobacteriumlongum и Enterococcusfaecium) в виде увеличения численности был отмечен со стороны бифидофлоры и энтеробактерий, тогда как содержание лактобак-терий практически не изменилось.

Таким образом, метод ГХ-МС открывает возможность динамической оценки состояния мик-робиоты кишечника пациентов с такой хронической патологией ЖКТ, как ХГД, и перспективы в целенаправленном назначении пробиотиков в зависимости от выявленных изменений с последующей оценкой их эффективности. В то же время полученные результаты поднимают перед нами новые вопросы: можно ли считать клиниче-

скую ремиссию заболевания истинной ремиссией, если сохраняются изменения со стороны микробиоты, так как, по мнению Б. А. Шендерова, микроэкологические нарушения в организме хозяина являются пусковым механизмом подавляющего большинства патологических процессов.

Выводы.

У детей с хроническим гастродуоденитом отмечаются изменения со стороны микрофлоры кишечника, как в фазе обострения, так и в фазе ремиссии. Применение метода газовой хроматографии — масс-спектроскопии по сравнению с традиционным микробиологическим исследованием фекалий позволило существенно расширить наши представления о спектре выявляемых микроорганизмов, входящих в биоплёнку слизистой оболочки кишечника в различные фазы заболевания. На основании данных метода газовой хроматографии — масс-спектроскопии показано, что восстановление микробиоты кишечника происходит длительно и не купируется после проведения стандартного месячного курса лечения препаратом пробиотической направленности. Применение данного метода в клинической практике открывает широкие перспективы в проведении направленной, патогенетически ориентированной в зависимости от фазы заболевания, коррекции микробиоты кишечника у детей с хроническим гастродуоденитом.

Список литературы

1. Дисбиоз кишечника : рук. по диагностике и лечению / под ред. Е. И. Ткаченко, А. Н Суворова. 2-е изд., испр. и доп. СПб. : ИнформМед, 2009. 276 с.

2. Казимирова, А. А. Микробиоценоз желудка при хроническом гастрите у детей / А. А. Казимирова, Д. К. Волосников, Л. И. Бахарева, Е. Н. Кандалова // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2007. № 2. С. 71-7.

3. Коваленко, А. А. Метаболиты кишечной микрофлоры: значение для здоровья / А. А. Коваленко, С. В. Бельмер // Вестн. педиатр. фармакологии и нутрициологии. 2007. № 4 (4). С. 27-31.

4. Методика масс-спектрометрии микробных маркеров как способ оценки пристеночной кишечной микробиоты при заболеваниях органов пищеварения : учеб.-метод. пособие / под ред. Г. А. Осипова,

B. П. Новиковой. СПб., 2013. 96 с.

5. Осипов, Г. А. Количественный ^йи микробиологический анализ по липидным маркерам в биологических жидкостях с использованием метода газовой хроматографии — масс-спектрометрии / Г. А. Осипов, Н. Ф. Федосова, К. В. Лядов // Здравоохранение и мед. технологии. 2007. № 5. С. 20-23.

6. Осипов, Г. А. Хромато-масс-спектрометрический анализ микроорганизмов и их сообществ в клинических пробах при инфекциях и дисбиозах. Химический анализ в медицинской диагностике / Г. А. Осипов. М. : Наука, 2010. С. 293-368.

7. Пилипенко, В. И. Пробиотики как сигнальные молекулы : Saccharomycesboulardii / В. И. Пилипен-ко // Клин. гастроэнтерология и гепатология. 2008. № 1 (6). С. 456-462.

8. Римарчук, Г. В. Эффективность применения пробиотиков в коррекции дисбиоза толстой кишки у больных хроническим гастродуоденитом / Г. В. Римарчук, Н. И. Урсова // Рус. мед. журн. 2003. № 11 (3).

C. 106-107.

9. Урсова, Н. И. Основные физиологические функции интестинальной микрофлоры и формирование микробиоценоза у детей / Н. И. Урсова // Вопр. практ. педиатрии. 2006. № 1 (1). С. 51-56.

10. Balamurugan, R. Bacterial successionin the colon during child hoodandado lescence: molecular studies in a southern Indian village / R. Balamurugan, H. P. Janardhan, S. George, S. P. Chittaranjan, B. S. Ramakrishna // Am. J. Clin. Nutr. 2008. № 88 (6). P. 1643-1847.

11. Beloborodova, N. V. Small molecules origination from microbes (SMOM) and their role in microbes-host relationship / N. V. Beloborodova, G. A. Osipov // Microb. Ecol. Heal. Dis. SCUP. 2010. № 12. P. 12-21.

12. Cotillard, A. Dietary intervention impact on gut microbial gene richness / A. Cotillard, S. P. Kennedy, L. G. Kong // Nature. 2013. August. D0I:10.1038/nature12480.

13. Eutamene, H. Role of probiotics in correcting abnormalities of colonic flora induced by stress / H. Euta-mene, L. Bueno // Intern. J. of Gastroenterology and Hepatology. 2007. № 56 (11). P. 1495-1997.

14. Manning, T. S. Microbial-gut interaction in health and disease. Prebiotics / T. S. Manning, G. R. Gibson // Best Pract. Res Clin. Gastroenterol. 2004. № 18 (2). P. 287-289.

15. Stanton, C. Market potential for probiotics / С. Stanton // Am. J. Clin. Nutr. 2000. № 73 (suppl.). P. 476-83.

Сведения об авторах

Гурова Маргарита Михайловна — доктор медицинских наук, профессор кафедры педиатрии с курсом детских хирургических болезней Белгородского национального исследовательского университета, Белгород, Россия. itely@mail.ru

романова татьяна Алексеевна — доктор медицинских наук, профессор, заведующая кафедрой педиатрии с курсом детских хирургических болезней Белгородского национального исследовательского университета, Белгород, Россия. romanova@bsu.edu.ru

Новикова Валерия Павловна — доктор медицинских наук, профессор кафедры детских болезней Федерального медицинского исследовательского центра им. В. А. Алмазова, Санкт-Петербург, Россия. novikova-vp@mail.ru

Авилова инга Анатольевна — доктор биологических наук, профессор кафедры технологии продуктов питания Юго-Западного государственного университета, Курск, Россия. avilova-inga@mail.ru

Bulletin of Chelyabinsk State University. 2014. № 13 (342). Education and Healthcare. Issue 4. P. 42-49.

the role of new diagnostic methods in the condition evaluation of the intestinal microbiota of children with chronic gastroduodenitis

M. M. Gurova

Doctor of Medical Sciences, Professor of the Department of Pediatrics with a Course of Children's Surgical Diseases Belgorod

of National Research University, Belgorod, Russia. itely@mail.ru

T. A. Romanova

Doctor of Medical Sciences, Professor, head of the Department of Pediatrics with a Course of Children's Surgical Diseases Belgorod of National Research University, Belgorod, Russia. romanova@bsu.edu.ru

V. P. Novikova

Doctor of Medical Sciences, Professor of the Department of Children's Diseases of the Federal Medical Research Center of V. A. Almazov, Saint Petersburg, Russia. novikova-vp@mail.ru

I. A. Avilova

Doctor of Biological Sciences, Professor of the Department of Technology of Food Products Southwestern State University,

Kursk, Russia. avilova-inga@mail.ru

Application of gas chromatography — mass-spectroscopy in comparison with traditional microbiological research of feces can significantly expand our understanding of detected organism spectrum included in biofilms of the intestine, and also possible changes in various phases of chronic gastroduodenitis. We examined 340 children aged 12 to 18 years. The composition and quantity of microorganisms of the intestinal wall in

an acute phase of remission and after application of probiotic preparations with a use of gas chromatography

mass-spectroscopy method were analyzed.

Keywords: chronic gastroduodenitis, children, intestinal microflora, gas chromatography mass-spectros-

copy.

References

1. Disbioz kishechnika [Intestinal dysbiosis] : rukovodstvo po diagnostike i lecheniyu / pod red. E. I. Tkachen-ko, A. N Suvorova. 2-e izd., ispr. i dop. SPb. : InformMed, 2009. 276 s.

2. Kazimirova, A. A. Mikrobiocenoz zheludka pri khronicheskom gastrite u deteyj [Microbiocenosis stomach in chronic gastritis in children] / A. A. Kazimirova, D. K. Volosnikov, L. I. Bakhareva, E. N. Kandalova // Zhurn. mikrobiologii, ehpidemiologii i immunobiologii. 2007. № 2. S. 71-7.

3. Kovalenko, A. A. Metabolitih kishechnoyj mikroflorih: znachenie dlya zdorovjya [Metabolites of the intestinal microflora: implications for health] / A. A. Kovalenko, S. V. Beljmer // Vestn. ped. farmakologii i nutriciologii. 2007. № 4 (4). S. 27-31.

4. Metodika mass-spektrometrii mikrobnihkh markerov kak sposob ocenki pristenochnoyj kishechnoyj mi-krobiotih pri zabolevaniyakh organov pithevareniya [Technique of mass spectrometry of microbial markers as a way to assess the wall of the intestinal microbiota in diseases of the digestive organs] : ucheb.-metod. posobie / pod red. G. A. Osipova, V. P. Novikovoyj. SPb., 2013. 96 s.

5. Osipov, G. A. Kolichestvennihyj insitu mikrobiologicheskiyj analiz po lipidnihm markeram v bio-logicheskikh zhidkostyakh s ispoljzovaniem metoda gazovoyj khromatografii — mass-spektrometrii [Quantitative microbiological analysis in situ by lipid markers in biological liquids using gas chromatography — mass-spectrometry] / G. A. Osipov, N. F. Fedosova, K. V. Lyadov // Zdravookhranenie i med. tekhnologii. 2007. № 5. S. 20-23.

6. Osipov, G. A. Khromato-mass-spektrometricheskiyj analiz mikroorganizmov i ikh soobthestv v klin-icheskikh probakh pri infekciyakh i disbiozakh [Chromatography-mass spectrometric analysis of microorganisms and their communities in clinical trials for infections and dysbiosis] / G. A. Osipov. M. : Nauka, 2010. S. 293-368.

7. Pilipenko, V. I. Probiotiki kak signaljnihe molekulih : Saccharomycesboulardii [Probiotics as signaling molecules: Saccharomyces boulardii] / V. I. Pilipenko // Klin. gastroehnterologiya i gepatologiya. 2008. № 1 (6). S. 456-462.

8. Rimarchuk, G. V. Ehffektivnostj primeneniya probiotikov v korrekcii disbioza tolstoyj kishki u boljnihkh khronicheskim gastroduodenitom [Efficacy of probiotics in correcting dysbiosis colon in patients with chronic gastroduodenitom] / G. V. Rimarchuk, N. I. Ursova // Rus. med. zhurn. 2003. № 11 (3). S. 106-107.

9. Ursova, N. I. Osnovnihe fiziologicheskie funkcii intestinaljnoyj mikroflorih i formirovanie mikrobioce-noza u deteyj [Basic physiological functions of the intestinal microflora and the formation microbiocenosischil-dren] / N. I. Ursova // Voprosih prakt. pediatrii. 2006. № 1 (1). S. 51-56.

10. Balamurugan, R. Bacterial successionin the colon during child hoodandado lescence: molecular studies in a southern Indian village / R. Balamurugan, H. P. Janardhan, S. George, S. P. Chittaranjan, B. S. Ramakrishna // Am. J. Clin. Nutr. 2008. № 88 (6). P. 1643-1847.

11. Beloborodova, N. V. Small molecules origination from microbes (SMOM) and their role in microbes-host relationship / N. V. Beloborodova, G. A. Osipov // Microb. Ecol. Heal. Dis. SCUP. 2010. № 12. P. 12-21.

12. Cotillard, A. Dietary intervention impact on gut microbial gene richness / A. Cotillard, S. P. Kennedy, L. G. Kong // Nature. 2013. August. DOI:10.1038/nature12480.

13. Eutamene, H. Role of probiotics in correcting abnormalities of colonic flora induced by stress / H. Euta-mene, L. Bueno // Intern. J. of Gastroenterology and Hepatology. 2007. № 56 (11). P. 1495-1997.

14. Manning, T. S. Microbial-gut interaction in health and disease. Prebiotics / T. S. Manning, G. R. Gibson // Best Pract. Res Clin. Gastroenterol. 2004. № 18 (2). P. 287-289.

15. Stanton, C. Market potential for probiotics / C. Stanton // Am. J. Clin. Nutr. 2000. № 73 (suppl.). P. 476-83.