Изменения уровня цитокинов в сыворотке крови детей при геморрагической лихорадке с почечным синдромом

ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Изменения уровня цитокинов в сыворотке крови детей при геморрагической лихорадке с почечным синдромом

Хасанова Г.М.1, Тутельян А.В.2, Валишин Д.А.1, Свирина А.С.1, Хасанова А.Н.1, Мухетдинова Г.А.1

ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа, Россия

ФБУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора, Москва, Россия

Проведен анализ уровня сывороточных цитокинов у 47 детей, больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом (ГЛПС), из них у 25 была среднетяжелая форма течения ГЛПС, у 22 - ГЛПС тяжелой формы течения. Возраст обследованных в группах составил от 5 до 17 лет. Средний возраст в 1-й группе -11,1+1,6 года, во 2-й группе - 11,3+1,3 года. Для сравнения цитокинового статуса были обследованы 24 здоровых ребенка в возрасте от 5 до 17 лет (средний возраст контрольной группы - 11,2+1,4 года). Содержание цитокинов ИЛ-^, ФНОа, ИФН-а, ИФН-у, ИЛ-10 у больных изучали в лихорадочный, олигурический, полиурический периоды и в периоде реконвалесценции, через 1 мес после выписки из стационара. Отмечено увеличение концентрации провоспалительных цитокинов ИЛ-^ и ФНОа, ИЛ-10 начиная с лихорадочного периода. Пик нарастания данных цитокинов отмечался в олигурический период. В периоде полиурии уровень провоспалительных цитокинов снижался, за исключением ИЛ-10, уровень которого продолжал нарастать в полиурическом периоде. Уровень ИФН-а и ИФН-у у детей при ГЛПС снижался начиная с лихорадочного периода, наибольшее снижение отмечено в олигурическом периоде при тяжелой форме ГЛПС.

Ключевые слова:

геморрагическая лихорадка с почечным синдромом, цитокины, дети

Для цитирования: Хасанова Г.М., Тутельян А.В., Валишин Д.А., Свирина А.С., Хасанова А.Н., Мухетдинова Г.А. Изменения уровня цитокинов в сыворотке крови детей при геморрагической лихорадке с почечным синдромом // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2019. Т. 8, № 3. С. 31-34. doi: 10.24411/2305-3496-2019-13005 Статья поступила в редакцию 14.06.2019. Принята в печать 15.07.2019.

Changes in the level of cytokines in the serum of children blood with hemorrhagic fever with renal syndrome

Khasanova G.M.1, Tutelyan A.V.2, Valishin D.A.1, Svirina A.S.1, Khasanova A.N.1, Mukhetdinova G.A.1

Bashkir State Medical University , Ufa, Russia

Central Research Institute of Epidemiology Rospotrebnadzor,

Moscow, Russia

The article analyzes the level of serum cytokines in children with HFRS. The study was conducted in 47 children of them in 25 of whom had HFRS medium-severe form, in 22 - HFRS of severe form. The age of those examined in these two groups was 5-17 years. The mean age in the 1st group was 11.1+1.6 years, in the 2nd group - 11.3+1.3 years. To compare the cytokine status, 24 healthy children aged 5 to 17 years were examined for the cytokine status, the mean age of the control group was 11.2+1.4 years. The content

i

2

of cytokines IL-1ß TNFa INFa INF-y IL-10 in patients was studied in febrile, oliguric, polyuric periods and in the period of convalescence, 1 month after discharge from the hospital. The cytokine content was determined by an enzyme immunoassay using commercial reagent kits of Protein Contour LLP (St. Petersburg). Statistical processing of the research results was carried out using parametric and nonparametric statistics using statistical programs Statistica 7.0 for Windows. The mean value (M) and the mean value error (m) were calculated in Microsoft Excel.

Keywords:

hemorrhagic fever with renal syndrome, cytokines, children

For citation: Khasanova G.M., TuteLyan A.V., VaLishin D.A., Svirina A.S., Khasanova A.N., Mukhetdinova G.A. Changes in the level of cytokines in the serum of children bLood with hemorrhagic fever with renaL syndrome. Infektsionnye boLezni: novosti, mneniya, obuchenie [Infectious Diseases: News, Opinions, Training]. 2019; 8 (3): 31-4. doi: 10.24411/2305-3496-2019-13005 (in Russian) Received 14.06.2019. Accepted 15.07.2019.

Республика Башкортостан в течение многих лет занимает одно из лидирующих мест по заболеваемости геморрагической лихорадкой с почечным синдромом (ГЛПС) без тенденции к ее снижению. Этому способствуют сложность в диагностике данного заболевания, особенно на ранних этапах, и отсутствие эффективных способов ее профилактики. Подробное и детальное изучение механизмов патологического воздействия хантавируса на организм больного необходимо для точного определения объема и вида патогенетической терапии, которая в настоящее время является основной в лечении ГЛПС. Известно, что ключевую роль в патогенезе ГЛПС играет повреждение эндотелия сосудов. Однако хантавирус не оказывает прямого цитопатического действия на эндотелиоциты, а служит лишь инициатором иммунного воспаления [1]. Цитокинам принадлежит ведущая роль в патогенезе многих инфекционных заболеваний, в том числе ГЛПС [2]. В доступной литературе отсутствуют публикации по изучению динамики сывороточных цитокинов у детей при ГЛПС.

Цель исследования - анализ динамики провоспалитель-ных цитокинов: интерлейкина-1р (ИЛ-1Р), фактора некроза опухоли а (ФНОа), интерферона-а (ИФН-а) и у (ИФН-у) у больных детей при ГЛПС различной степени тяжести течения.

Материал и методы

В исследование были включены 47 детей, больных ГЛПС, находившихся на стационарном лечении в ГБУЗ «Инфекционная клиническая больница» № 4 г. Уфы. Пациенты были распределены на 2 группы: 1-я состояла из 25 пациентов с диагнозом «ГЛПС, среднетяжелая форма течения», 2-я группа - из 22 пациентов с диагнозом «ГЛПС, тяжелая форма течения». Возраст обследованных в группах был от 5 до 17 лет. Средний возраст в 1-й группе составил 11,1±

I,6 года, во 2-й - 11,3+1,3 года.

Для сравнения показателей цитокинового статуса с таковыми у пациентов были обследованы 24 здоровых ребенка в возрасте от 5 до 17 лет (средний возраст данной группы -

II,2+1,4 года).

Содержание цитокинов у больных изучали в лихорадочный, олигурический, полиурический периоды, в периоде

реконвалесценции и через 1 мес после выписки из стационара. Сравнение полученных результатов проводили с показателями цитокинов в группе здоровых детей.

Содержание цитокинов определяли иммуноферментным методом с использованием коммерческих наборов реагентов ТОО «Протеиновый контур» (Санкт-Петербург).

Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием статистических программ Statistica 7.0 for Windows. Рассчитывали среднее значение (М) и ошибку среднего значения (m). Различия считали достоверными при р<0,05.

Результаты и обсуждение

Содержание цитокинов в различные периоды ГЛПС у обследованных больных представлено в таблице.

При анализе динамики содержания провоспалительных цитокинов ИЛ-ip и ФНОа у больных детей установлено, они повышались уже в лихорадочный период болезни, достигая максимального значения в олигурическом периоде (в 4 и 5 раз при среднетяжелой и тяжелой форме ГЛПС соответственно). Уровни этих провоспалительных цитокинов изменялись более выраженно при тяжелой форме ГЛПС, нежели при средней тяжести течения.

В периоде реконвалесценции и через 1 мес после заболевания уровни провоспалительных цитокинов оставались повышенными без достоверных различий с контрольной группой. В отличие от детей, у больных ГЛПС взрослых даже в периоде реконвалесценции выявлено достоверное увеличение провоспалительных цитокинов по сравнению с группой контроля [3].

По содержанию ИФН-а и -у наблюдалась обратная динамика: выявлено достоверное снижение их уровней уже в лихорадочном периоде болезни, сохраняющееся в периоде реконвалесценции и более выраженное при тяжелой форме течения болезни (p<0,05).

Таким образом, в ответ на антигенную стимуляцию организма при развитии ГЛПС происходит массивный выброс провоспалительных цитокинов, и такая ситуация носит название «цитокиновый шторм». Стоит отметить, что эндотелий является одновременно и источником, и мишенью для цитокинов. Происходит гиперпродукция ИФН-а, ИЛ-ip.

Хасанова Г.М., Тутельян А.В., Валишин Д.А., Свирина А.С., Хасанова А.Н., Мухетдинова Г.А. ИЗМЕНЕНИЯ УРОВНЯ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ДЕТЕЙ ПРИ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКЕ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ

Содержание цитокинов у детей, больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом, в зависимости от периода и тяжести течения заболевания

Период заболевания и форма n 1 Содержание цитокина, пкг/мл |

тяжести течения болезни ИЛ-lß ФНОа ИФН-а ИФН-у ИЛ-10

Лихорадочный

Среднетяжелая 25 32,5±2,9 16,2±2,7 20,8±1,3* 9,7±1,2* 12,72±0,98

Тяжелая 22 39,5±2,5* 36,7±2,8* 18,3±1,8* 7,8±1,7* 11,92±0,49

Олигурический

Среднетяжелая 25 102,9±6,6* 69,5±3,9* 17,2± 2,1* 7,2±1* 39,81±2,39*

Тяжелая 22 128,4±7,* 89,4±2,6* 12,8±2,4* 5,5±1,2* 47,64±4,72*

Полиурический

Среднетяжелая 25 74,6±3,7* 52,9±3,7 19,5±2,1* 8,6±1,4* 59,18±5,18*

Тяжелая 22 89,4±3,9* 61,3±2,8* 16,9±1,8* 7,2±2,1* 78,29±7,21*

Реконвалесценции

Среднетяжелая 25 28,7±2,9 17,2±3,2 25,8±1,9 10,4±2,7 16,5±2,6

Тяжелая 22 31,1±2,4 18,6±3,9 18,5±1,6* 9,4±1,3* 18,6±3,2

Контрольная группа 24 25,5±2,4 10,2±2,1 28,4±3,5 13,2±1,2 11,29±2,4

Примечание. р - достоверность различий с данными контрольной группы; ** - р<0,05. Расшифровка аббревиатур дана в тексте.

В частности, ИФН-а является одним из факторов увеличения проницаемости капилляров и плазмореи, развития лихорадки, усиления процессов коагуляции и стимуляции гемо-поэза [4]. Однако при этом снижается содержание ИФН-а и -у, что указывает на низкую активность Т-хелперов и NK-клеток [5]. Также происходит активация противовоспалительного цитокина ИЛ-10. При изучении динамики изменения содержания противовоспалительного цито-кина ИЛ-10 было обнаружено, что он начинал повышаться в лихорадочном периоде ГЛПС и его увеличение продолжалось до полиурического периода. Через 1 мес после выписки из стационара концентрация ИЛ-10 в сыворотке крови все еще была выше, чем у здоровых детей в контрольной группе, как при среднетяжелой, так и при тяжелой формах течения ГЛПС (различия недостоверны), в отличие от взрослых пациентов, у которых эти различия имели достоверное значение [6].

Таким образом, у больных ГЛПС детей выявлено увеличение концентрации провоспалительных цитокинов ИЛ-1Р и ФНОа начиная с лихорадочного периода. Пик нарастания данных цитокинов отмечали в олигурическом периоде

болезни с дальнейшим снижением их концентрации к периоду реконвалесценции, в отличие от взрослых пациентов, у которых в периоде реконвалесценции, наоборот, выявлены достоверно повышенные концентрации провоспалительных цитокинов в сравнении с контрольной группой. Напротив, в содержании интерферонов (ИФН-а и -у) у детей при ГЛПС обнаружено снижение уровней начиная с лихорадочного периода с дальнейшим повышением их содержания в полиурическом периоде и в реконвалесценции. Наибольшее снижение отмечено в олигурическом периоде при тяжелой форме течения ГЛПС. Концентрация противовоспалительного цитокина ИЛ-10 у детей достоверно повышалась в олигурическом периоде и продолжала нарастать в полиурическом периоде болезни. В фазе реконвалесценции значения ИЛ-10 статистически не отличались от данных контрольной группы, в то время как у взрослых пациентов уровень ИЛ-10 в периоде реконвалесценции достоверно выше, чем в контрольной группе.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ

Хасанова Гузэль Миргасимовна (Khasanova Guzel M.) - доктор медицинских наук, профессор кафедры инфекционных болезней с курсом ИДПО ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа, Россия E-mail: guzeLmirgasimovna@maiL.ru https://orcid.org/0000-0001-7255-5302

Тутельян Алексей Викторович (Tutelyan Aleksey V.) - член-корреспондент РАН, доктор медицинских наук, профессор, заведующий лабораторией инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи, ФБУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора, Москва, Россия E-mail: bio-tav@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-2706-6689

Валишин Дамир Асхатович (Valishin Damir A.) - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой инфекционных болезней с курсом ИДПО ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа, Россия

E-mail: damirval@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-1811-9320

Свирина Анастасия Сергеевна (Svirina Anastasiya S.) - аспирант кафедры инфекционных болезней с курсом ИДПО ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа, Россия E-mail: anastasiya-03@yandex.ru

Хасанова Алия Наилевна (Khasanova Aliya N.) - ординатор кафедры госпитальной терапии № 1 ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа, Россия E-mail: alkh.non@gmail.com

Мухетдинова Гузель Ахметовна (Mukhetdinova Guzel A.) - доктор медицинских наук, профессор кафедры факультетской терапии ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, Уфа, Россия E-mail: fter-bgmu@mail.ru https://orcid.org/0000-0002-6685-8603

ЛИТЕРАТУРА

1. Иванис В.А., Максема И.Г., Афанасьева В.И., Слонова Р.А. Клинико-иммунологические особенности геморрагической лихорадки с почечным синдромом при тяжелом течении с благоприятным и летальным исходами в приморском крае // Тихоокеанский мед. журн. 2010. № 3. С. 46-50.

2. Ускова Ю.Г., Павелкина В.Ф.Динамика иммунологических показателей у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом различной степени тяжести // Практ. мед. 2016. Т. 95, № 3. С. 99-103.

3. Хасанова Г.М., Тутельян А.В., Валишин Д.А. Динамика содержания цитокинов у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом // Инфекц. бол. 2011. Т. 9, № 3. С. 31-34.

4. Huang C. High level of tumor necrosis factor alfa activity of plasma and serum from acute phase hemorrhagic fever with renal syndrome // Chung Hua J. Chin. 1992. Vol. 72, N 3. P. 151-154.

5. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины. СПб. : Фолиант, 2008. 552 с.

6. Хасанова Г.М. Актуальные аспекты иммунопатогенеза, вита-минно-микроэлементного баланса и лечения геморрагической лихорадки с почечным синдромом : дис. ... д-ра мед. наук. М., 2012. 316 с.

REFERENCES

1. Ivanls V.A., Maksema I.G., Afanasleva V.I., Slonova R.A. Clinical and Immunological features of hemorrhagic fever with renal syndrome under severe course with favorable and lethal outcomes in Primorsky Krai. Tikhookeanskiy meditsinskiy zhurnal [Pacific Medical Journal]. 2010;

2. Uskova Yu.G., Pavelkina V.F. The dynamics of immunological indicators in patients with hemorrhagic fever with renal syndrome of different severity. Prakticheskaya meditsina [Practical Medicine]. 2016; 95

3. Khasanova G.M., Tutelyan A.V., Valishin D.A. Dynamics of cytokine values in patients with hemorrhagic fever with renal syndrome. Infektsi-onnye bolezni [Infectious Diseases]. 2011; 9

4. Huang C. High level of tumor necrosis factor alfa activity of plasma and serum from acute phase hemorrhagic fever with renal syndrome. Chung Hua J. Chin. 1992; 72 (3): 151-4.

5. Ketlinskiy S.A., Simbirtsev A.S. Cytokines. Saint Petersburg: Foliant, 2008: 552 p.

6. Khasanova G.M. Actual aspects of immunopathogenesis, vitaminmicroelement balance and treatment of hemorrhagic fever with renal syndrome: Diss. Moscow, 2012: 316 p.