СОЕДИНЕНИЯ ИМИДАЗОЛОТИАЗОЛА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ
IMIDAZOLOTHIAZOL DERIVATIVES FOR TREATING DISEASES

Настоящая заявка заявляет приоритет предварительной заявки на патент США, серийный № 60/743543, поданной 17 марта 2006 года, озаглавленной "Imidazolothiazole Derivatives For The Treatment Of Disease". Описание упомянутой выше заявки включается сюда в виде ссылки во всей его полноте.
Область техники, к которой относится изобретение
Предлагаются новые низкомолекулярные соединения, композиции и способы лечения заболеваний. Предложенные соединения представляют собой модуляторы активности ферментов, таких как киназы, и являются пригодными для лечения, предотвращения или облегчения заболевания или расстройства, связанного с активностью фермента, или одного или нескольких его симптомов.
Уровень техники
Протеинкиназы (PK) представляют собой ферменты, которые катализируют фосфорилирование гидроксигрупп на тирозиновых, сериновых и треониновых остатках белков. Протеинкиназы, и в частности, относящиеся к семейству рецепторных тирозиновых протеинкиназ (RTK), действуют, прежде всего, как рецепторы факторов роста и играют центральную роль в путях передачи сигналов, регулирующих ряд клеточных функций, таких как клеточный цикл, клеточный рост, клеточная дифференциация и гибель клеток. Аберрантная или избыточная активность, или нарушение регуляции активности рецепторной тирозиновой протеинкиназы (RPTK) наблюдается при множестве болезненных состояний, включая доброкачественные и злокачественные пролиферативные расстройства, а также воспалительные расстройства и расстройства иммунной системы, которые возникают в результате неправильного активирования иммунной системы, вызывая, например, аутоиммунные заболевания.
Нарушение регуляции активности рецепторной тирозиновой киназы семейства рецепторов факторов роста тромбоцитов (PDGFR), в качестве одного из примеров, вовлечена в различные пролиферативные расстройства. Генная амплификация или положительная регуляция PDGFR происходит у пациентов с глиомами или саркомами (Kumabe et al., Oncogene, 7:627-633 (1992), Ostman and Heldin Cancer Res. 80:1-38 (2001)). Конститутивное активирование PDGFR-α обнаружено у пациентов с хронической миеломоноцитарной лейкемией (CMML) (Magnusson et al. Blood 100:1088-1091 (2002)). Увеличение числа функциональных мутаций и малых делеций в гене PDGFR-α также обнаружено у пациентов с желудочно-кишечными опухолями (GIST) (Heinrich et al. Science 299: 708-710 (2003)) и у пациентов с идиопатическим гиперэозинофильным синдромом (Cools et al. N. Engl. J. Med. 348:1201-1214 (2003)). PDGFR-β, как обнаружено, экспрессируется в строме опухоли для большинства солидных опухолей, что делает этот рецептор потенциальной мишенью для противоопухолевой терапии (Pietras et al. Cancer Cell 3:439-443 (2003), Pietras et al. Cancer Res. 62: 5476-5484 (2002)). PDGFR-β также, как обнаружено, экспрессируется в сосудистой системе опухоли, и исследования предполагают ингибирование PDGFR-β в качестве одного из механизмов антиангиогенной терапии (См. Bergers et al, J. Clin. Invest. 111(9): 1287-1295(2003), Saharinen et al. J. Clin. Invest. 111:1277-1280 (2003)).
Второй член семейства PDGFR, Flt3 (также называемый Flk2), играет важную роль в пролиферации и дифференциации гематопоэтических стволовых клеток и активирующая мутация или сверхэкспрессирование этого рецептора наблюдаются при AML (См. Heinrich Mini-Reviews in Medicinal Chemistry (2004) 4(3):255-271, Kiyoi et al. Int J Hematol (2005) 82:85-92). Разработано более дюжины известных ингибиторов Flt3, и некоторые из них показали перспективное клиническое воздействие против AML (См. Levis et al. Int J Hematol. (2005) 82:100-107). Рецептор Flt3 также экспрессируется в большой части предшественников дендритных клеток, и стимулирование рецепторов вызывает пролиферацию и дифференциацию этих предшественников в дендритные клетки (DC). Поскольку дендритные клетки являются главными инициаторами опосредованной T-лимфоцитами иммунной реакции, включая аутоиммунную реакцию, ингибирование Flt3 представляет собой механизм отрицательного регулирования опосредованных DC воспалительных и аутоиммунных реакций. Одно из исследований показывает, что ингибитор Flt3 CEP-701 является эффективным для уменьшения потерь миелина при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите (EAE), мышиной модели для рассеянного склероза (см. Whartenby et al. PNAS (2005) 102: 16741-16746). Высокий уровень лиганда Flt3 обнаружен в сыворотке пациентов с гистиоцитозом клеток Лангерганса и при системной красной волчанке, что дополнительно свидетельствует о передаче сигналов с помощью Flt3 при нарушении регуляции предшественников дендритных клеток при этих аутоиммунных заболеваниях (См. Rolland et al. J Immunol. (2005) 174:3067-3071).
Третий член семейства PDGFR, рецептор колониестимулирующего фактора-1 (CSF-1R) (также называемый рецептором фактора стимулирования колоний макрофагов (M-CSFR) или fms) экспрессируется многими карциномами груди и раковыми заболеваниями эпителия человека, особенно репродуктивных органов женщин (Kacinski (1997) Mol. Reprod. Dev. 46:71-74), и представляет собой потенциальную мишень для терапии раковых заболеваний. Высокий уровень экспрессирования CSF-1 при солидных опухолях и лейкемиях также говорит о том, что CSF-1R может представлять собой терапевтическую мишень при раковых заболеваниях крови и солидных опухолях (Haran-Ghera (1997) Blood 89:2537-2545). Высокий уровень экспрессирования CSF-1 также обнаружен при гистиоцитозе клеток Лангерганса (Rolland et al. J Immunol. (2005) 174:3067-3071).
Kit (или рецептор фактора стволовых клеток, или SCFR) является другим членом семейства PDGFR, и присутствие мутаций kit представляет собой ключевой диагностический маркер для стромальных опухолей желудочно-кишечного тракта (GIST) (Duensing et al. (2004) Cancer Investigation 22(1): 106-116). Gleevec (иматиниб мезилат или STI571), первый одобренный FDA ингибитор RPTK, изначально одобренный для опосредованной c-Abl-хронической миелоидной лейкемии, получил одобрение FDA для опосредованных Kit GIST в 2002 году и имеет доказанный на молекулярном уровне подход ингибирования Kit для лечения GIST (Giorgi and Verweij, Mol Cancer Ther 4(3):495-501(2005)). Увеличение функциональных мутаций рецептора Kit также связывается с лейкемией тучных клеток/миелоидной лейкемией и семиномами/дисгерминомами (Blume-Jensen Nature 411(17): 355-365(2001)). Мутации Kit также идентифицируются при определенных меланомах и определяются как потенциальная терапевтическая мишень для меланомы (Curtain et al. J Clin. Oncol. 24(26):4340-4346 (2006)).
Рецептор фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR) представляет другое семейство RTK, которое вовлечено в ангиогенез опухолей. VEGF и его рецепторы VEGFR1 (также называемый Flt1) и VEGFR2 (также называемый KDR) сверхэкспрессируются в подавляющем большинстве клинически важных раковых заболеваний человека, включая раковые заболевания желудочно-кишечного тракта, поджелудочной железы, мочевого пузыря, почек, эндометрия, и при саркоме Капоши. VEGFR2 также активно экспрессируются при определенных интракраниальных опухолях, включая мультиформную глиобластому и спорадическую и связанную с синдромом фон Хиппеля-Ландау (VHL) капиллярную гемангиобластому. В настоящее время в клинической разработке находится более дюжины ингибиторов VEGFR2 для антиангиогенной терапии (Paz and Zhu, Frontiers in Bioscience 10:1415-1439 (2005)).
Другой член семейства VEGFR, VEGFR3 (также называемый Fit 4) идентифицируется как рецептор лимфангиогенного фактора роста, который играет ключевую роль в росте новых лимфатических сосудов (лимфангиогенезе). Активирование пути передачи сигналов VEGFR3, как показано, стимулирует метастатическое распространение клеток опухолей (см. Stacker et al. Nature Rev 2:573-583(2002)), и по этой причине его ингибирование могло бы стать основой для лечения состояний, отличающихся аномальным функционированием лимфатических сосудов (см. Stacker et al. Current Pharmaceutical Design 10:65-74 (2004), Achen et al. British Journal of Cancer 94:1355-1360 (2006)).
Киназа Ret представляет собой еще один RTK, который, как показано, экспрессируется при медуллярной тироидной карциноме, состоянии, которое является частью синдромов множественной эндокринной неоплазии 2A и 2B (MENS 2A и 2B). Ret является конститутивно активным при медуллярной тироидной карциноме (как при наследственной, так и при спорадической) и при папиллярной тироидной карциноме. Некоторые известные ингибиторы RTK, имеющие Ret-ингибиторную активность, как показано, являются эффективными при ингибировании роста опухоли на моделях голых мышей (Stock et al., Cancer Res 63:5559-5563 (2003)) и Carlomagno et al., Journal of the National Cancer Institute 98(5):326-334 (2006)).
В дополнение к этому, возможно, что ингибиторы определенных киназ могут быть пригодными для лечения заболеваний, когда киназа не подвергается нарушению регуляции, но, тем не менее, является критически важной для поддержания болезненного состояния. В таких случаях ингибирование активности киназы действовало бы либо как лекарство, либо как паллиатив для этих заболеваний. Например, множество вирусов, таких как вирус папилломы человека, разрушает клеточный цикл и перемещает клетки в S-фазу клеточного цикла (Vousden, FASEB Journal, 7:872-879 (1993)). Предотвращение вхождения клеток в фазу синтеза ДНК после вирусной инфекции посредством ингибирования основных активностей инициирования S-фазы может прервать жизненный цикл вируса посредством предотвращения репликации вируса. Такой же принцип может использоваться для защиты нормальных клеток организма от токсичности циклоспецифичных химиотерапевтических агентов (Stone et al., Cancer Research, 56:3199-3202 (1996); Kohn et al., Journal of Cellular Biochemistry, 54:44-452 (1994)).
Наконец, хотя сверхактивирование путей передачи сигналов RTK часто представляет собой основной механизм для ракового заболевания, ослабление дезактивации RTK, такое как ослабленная отрицательная регуляция RTK посредством индуцированного лигандами эндоцитоза или ослабление петель отрицательной обратной связи, также может представлять собой причину некоторых злокачественных образований. Другая стратегия использования молекул, обсуждаемых здесь, заключается по этой причине в исправлении и облегчении любого существующего механизма отрицательной регуляции RTK.
Принимая во внимание большое количество ингибиторов протеинкиназ и множество опосредованных PK пролиферативных, воспалительных и иммуннофункциональных заболеваний, имеется насущная необходимость в создании новых классов соединений, которые пригодны для использования в качестве ингибиторов PK и, таким образом, при лечении заболеваний, связанных с PK, как здесь обсуждается.
Сущность изобретения
Предлагаются соединения для применения при медицинском лечении, фармацевтические композиции и способы модулирования активности, связывания или субклеточного распределения киназ. В одном из вариантов осуществления соединения для использования в композициях и способах, представленных в настоящем описании, имеют формулу (I):
где
связь b представляет собой одинарную связь или двойную связь;
5
X представляет собой -S-, -N(R) или -O-;
1
3
5
2
q
Z и Z, каждый, независимо представляет собой -N(R), -(CH), -O-, -S- или прямую связь;
2
Z представляет собой -C(O) или -C(S);
m представляет собой целое число от 1 до 2;
n представляет собой целое число от 1 до 3;
каждый из q независимо представляет собой целое число от 1 до 4;
0
R представляет собой водород, галоген, гидрокси, необязательно замещенный алкил или необязательно замещенный алкокси;
1
6
7
6
7
6
8
6
7
6
9
7
6
6
7
6
7
6
7
7
6
7
6
7
6
7
7
6
7
6
7
6
7
7
6
7
9
7
6
8
6
8
6
7
8
6
7
6
7
6
7
7
6
7
7
6
7
8
6
7
7
6
7
7
7
6
7
8
6
7
8
6
7
8
6
7
7
8
6
7
8
6
7
7
6
7
7
7
6
7
7
6
7
8
6
8
6
7
8
6
8
6
8
6
7
8
6
8
6
8
6
7
6
7
7
6
7
6
9
7
6
9
7
6
7
9
7
6
9
7
5
9
7
6
9
7
7
6
9
7
6
9
7
6
9
7
7
6
9
7
6
9
7
6
9
7
7
6
9
8
6
9
8
6
9
7
8
6
6
9
7
9
7
6
9
7
9
7
6
7
9
7
t
2
2
2
2
2
t
t
2
t
2
t
2
t
t
2
t
2
2
2
2
t
2
2
2
2
2,
2
2
2
2
2
каждый из R независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероциклилалкенила, необязательно замещенного гетероаралкила, необязательно замещенного гетероаралкенила, -ROR, -RSR, -RS(O)R (где t равно 1 или 2), -RN(R), -ROROR, -RCN, -RC(O)R, -RC(S)R, -RC(NR)R, -RC(O)OR, -RC(S)OR, -RC(NR)OR, -RC(O)N(R), RC(S)N(R), -RC(NR)N(R), -RC(O)N(R)RN(R), -RC(O)SR, -RC(S)SR, -RC(NR)SR, -RS(O)OR (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R) (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R)N(R) (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R)N=C(R), -RS(O)N(R)C(O)R (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R)C(O)N(R) (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R)C(NR)N(R) (где t равно 1 или 2), -RN(R)C(O)R, -RN(R)C(O)OR, -RN(R)C(O)SR, -RN(R)C(NR)SR, -RN(R)C(S)SR, -RN(R)C(O)N(R), -RN(R)C(NR)N(R), -RN(R)C(S)N(R), -RN(R)S(O)R (где t равно 1 или 2), -ROC(O)R, -ROC(NR)R, -ROC(S)R, -ROC(O)OR, -ROC(NR)OR, -ROC(S)OR, -ROC(O)SR, -ROC(O)N(R), -ROC(NR)N(R), -ROC(S)N(R), -RORN(R), -RSRN(R) -RN(R)RN(R), -RC(O)RC(O)R, -RC(O)RC(S)R, -RC(O)RC(NR)R, -RC(O)RC(O)OR, -RC(O)RC(S)OR, -RC(O)RC(NR)OR, -RC(O)RC(O)N(R), -RC(O)RC(S)N(R), -RC(O)RC(NR)N(R), -RC(O)RC(O)SR, -RC(O)RC(S)SR, -RC(O)RC(NR)SR, -RC(O), -RC(O)RN(R)RN(R), -RC(O)RN(R)ROR и -RC(O)N(R)ROR;
2
12
12
12
13
12
12
12
12
12
13
2
t
2
t
каждый из R независимо выбирают из водорода, галогена, нитро, циано, необязательно замещенного алкила, -OR, -SR, -N(R), -S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R), -C(O)SR или -N(R)S(O)R (где t равно 1 или 2);
3
12
12
12
13
12
12
12
12
12
13
2
t
2
t
R представляет собой водород, галоген, нитро, циано, необязательно замещенный алкил, -OR, -SR, -N(R), -S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R), -C(O)SR или -N(R)S(O)R (где t равно 1 или 2);
4
R выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкенила и необязательно замещенного арила;
5
каждый из R независимо представляет собой водород или необязательно замещенный алкил;
6
каждый из R независимо представляет собой одинарную связь, необязательно замещенный алкилен с прямой или разветвленной цепью или необязательно замещенный алкенилен с прямой или разветвленной цепью;
7
каждый из R независимо выбирают из (i) или (ii) ниже
7
(i) R выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила, или
7
(ii) два (R) вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенный гетероциклил или необязательно замещенный гетероарил;
8
R независимо выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила;
9
каждый из R независимо представляет собой необязательно замещенный алкилен с прямой или разветвленной цепью или необязательно замещенный алкенилен с прямой или разветвленной цепью;
12
каждый из R независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила; и
13
R независимо выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила.
В одном из вариантов осуществления соединение выбирают при условии, что
1
2
3
4
1
(i) если -ZZZR представляет собой -NHC(O)Bu, тогда R не может представлять собой этокси;
1
2
3
4
1
p
p
(ii) если -ZZZR представляет собой -C(O)OR, где R = метил или этил, тогда R не может представлять собой гидроксил, метокси или метоксикарбонил;
1
2
3
4
1
p
p
(iii) если -ZZZR представляет собой -NHC(O)C(O)OR, где R = метил или этил, тогда R не может представлять собой метокси;
1
2
3
4
1
2
p
p
(iv) если -ZZZR представляет собой -CHC(O)OR, где R = метил или этил, тогда R не может представлять собой метокси или этокси;
1
2
3
4
1
3
(v) если -ZZZR представляет собой -OC(O)CH, тогда R не может представлять собой метил, метокси или этокси;
в виде индивидуального изомера, смеси изомеров, рацемической смесь изомеров, сольвата, гидрата или пролекарства, или в виде его фармацевтически приемлемой соли.
В одном из вариантов осуществления соединение, представленное в настоящем описании, представляет собой фармацевтически приемлемую соль соединения формулы (I). В одном из вариантов осуществления соединения, представленные в настоящем описании, представляют собой сольват соединения формулы (I). В одном из вариантов осуществления соединения, представленные в настоящем описании, представляют собой гидрат соединения формулы (I). В одном из вариантов осуществления соединение, представленное в настоящем описании, представляет собой пролекарство соединения формулы (I).
50
50
Такие соединения могут связываться с одной или несколькими киназами с высоким сродством и модулировать их активность. В определенном варианте осуществления такие соединения демонстрируют EC, IC или сродство связывания менее чем 1 мкМ, а в определенных вариантах осуществления менее примерно чем 0,5 мкМ, 250 нМ, 100 нМ или 50 нМ. В одном из аспектов соединения, представленные в настоящем описании, являются селективными к конкретной киназе или к конкретному подмножеству киназ, то есть являются, по меньшей мере, в 5, 10 или, в другом аспекте, по меньшей мере, в 20, 50, 100 раз более активными, согласно измерению с помощью любого из анализов in vitro, описанных здесь, при связывании с желаемой киназой (киназами), по сравнению с непредпочтительной киназой или киназами. В одном из аспектов соединения селективно ингибируют желаемую киназу (киназы) без значительного воздействия на нежелательную киназу (киназы).
Также предусматриваются фармацевтические композиции, предназначенные для введения с помощью соответствующего способа, и средства, содержащие эффективные концентрации одного или нескольких соединений, представленных в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемых солей, сольватов, гидратов и пролекарств, и необязательно содержащие по меньшей мере один фармацевтический носитель, наполнитель, основу, связывающее вещество, разбавитель, разрыхляющий агент, смазывающее вещество, глидант, подслащивающий агент или ароматизирующий агент.
Такие фармацевтические композиции доставляют количества, эффективные для лечения, предотвращения или облегчения заболеваний или расстройств, которые модулируются или подвергаются другому влиянию протеинкиназ (заболеваний, связанных с PK), или одного или нескольких их симптомов или причин. Такие заболевания или расстройства включают в себя, но не ограничиваясь этим,
A) Раковые заболевания, включая, но не ограничиваясь этим, рак головы и шеи (локализованный на губе, в ротовой полости, мезофаринксе, гипофаринксе, глотке, носоглотке, носовой полости и параназальных синусах слюнных желез); рак легких, включая мелкоклеточный рак легких, немелкоклеточный рак легких; раковые заболевания желудочно-кишечного тракта, включая рак пищевода, рак желудка, рак толстой и прямой кишки, рак заднего прохода, рак поджелудочной железы, рак печени, рак желчного пузыря, рак желчных проходов вне печени, рак фатеровой ампулы; рак груди; гинекологические раковые заболевания, включая рак шейки матки, рак матки, вагинальный рак, рак женских половых органов, рак яичников, гестационное трофобластическое раковое новообразование; рак яичек; раковые заболевания мочеполового тракта, включая рак почек, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак пениса, рак уретры; неврологические опухоли; эндокринные новообразования, включая карциноидные опухоли и опухоли островковых клеток, феохромоцитому, кортикальную карциному надпочечников, карциному щитовидной железы и метастазы в эндокринные железы.
Дополнительные примеры раковых заболеваний представляют собой карциному базальных клеток; сквамозно-клеточную карциному; хондросаркому (рак, возникающий в клетках хрящей); мезенхимальную хондросаркому; саркомы мягких тканей, включая злокачественные опухоли, которые могут возникать в любой из мезодермальных тканей (мышцы, сухожилия, сосуды, которые переносят кровь или лимфу, суставы и жир); саркомы мягких тканей включают в себя саркому альвеолярных мягких тканей, ангиосаркому, фибросаркому, лейомиосаркому, липосаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому, гемангиоперицитому, мезенхимому, шванному, периферические нейроэктодермальные опухоли, рабдомиосаркому, синовиальную саркому; гестациональные трофобластические опухоли (злокачественное образование, при котором ткани, формируемые в матке, становятся раковыми после зачатия); лимфому Ходжкина и ларингиальный рак.
В одном из вариантов осуществления рак включает в себя различные типы лейкемий, таких как хроническая лимфоцитарная лейкемия, хроническая миелоцитарная лейкемия, острая лимфобластическая лейкемия, острая миелогенная лейкемия и острая миелобластическая лейкемия.
В некоторых вариантах осуществления острая лейкемия включает в себя, но не ограничиваясь этим, недифференцированную AML (M0), миелобластическую лейкемию (M1), миелобластическую лейкемию (M2), промиелоцитарную лейкемию (M3 или вариант M3 [M3V]), миеломоноцитарную лейкемию (M4 или вариант M4 с эозинофилией [M4E]), моноцитарную лейкемию (M5), эритролейкемию (M6), мегакариобластическую лейкемию (M7). В некоторых вариантах осуществления острая лимфоцитарная лейкемия (ALL) включает в себя лейкемию, которая возникает в бластических клетках костного мозга (B-лимфоциты), тимусе (T-лимфоциты) и лимфатических узлах. Острая лимфоцитарная лейкемия делится на категории как L1 выглядящие зрелыми лимфобласты (T-лимфоциты или пре-B- лимфоциты), L2 незрелые и плеоморфные (различной формы) лимфобласты (T-лимфоциты или пре-B-лимфоциты) и L3-лимфобласты (B-лимфоциты; клетки Беркета).
В одном из вариантов осуществления рак представляет собой рак желудка, желудочно-кишечного тракта, костей, яичников, толстой кишки, легких, мозга, глотки, лимфатической системы, мочеполового тракта, сквамозно-клеточную карциному, астроцитому, саркому Капоши, глиобластому, рак легких, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, меланому, рак простаты, рак груди, мелкоклеточный рак легких, лейкемию, глиому, рак толстой и прямой кишки, рак мочеполовой системы, рак желудочно-кишечной системы, гематологическое раковое заболевание или рак поджелудочной железы. В частности, острую миелогенную лейкемию (AML), острые лимфобластические лейкемии предшественников B-лимфоцитов, миелодиспластические лейкемии, острые лимфобластические лейкемии T-лимфоцитов и хронические миелогенные лейкемии (CML).
Раковые заболевания, подлежащие лечению, могут быть первичными или метастатическими. В одном из вариантов осуществления рак представляет собой солидную или возникающую в крови метастатическую опухоль. В другом варианте осуществления рак представляет собой метастатический рак костей.
B) Незлокачественные пролиферативные заболевания; атеросклероз, рестеноз после сосудистой ангиопластики и фибропролиферативные расстройства, такие как облитерирующий бронхиолит.
C) Воспалительные заболевания или расстройства, связанные с иммунной дисфункцией, включая иммуннодефицит, иммуномодуляцию, аутоиммунные заболевания, отторжение тканей, заживление ран, заболевание почек, аллергию, воспалительное заболевание желудка, красную волчанку, артрит, остеоартрит, ревматоидный артрит, астму и ринит.
D) Инфекционные заболевания, опосредованные либо вирусными, либо бактериальными патогенами.
В настоящем описании предусматриваются композиции и способы лечения заболевания, включающие введение субъекту эффективного количества соединения, модулирующего Kit или рецептор фактора стволовых клеток (SCFR). В одном из вариантов осуществления заболевание представляет собой рак. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой карциному. В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой мелкоклеточный рак легких или рак груди. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой карциному простаты. Еще в одном варианте осуществления рак представляет собой эндометриальный рак. В другом варианте осуществления рак представляет собой глиому. В другом варианте осуществления рак представляет собой злокачественную опухоль или гематологическое злокачественное состояние, такое как лейкемия и лимфома. В некоторых вариантах осуществления, лейкемия представляет собой острую миелогенную лейкемию (AML). В некоторых вариантах осуществления, лейкемия представляет собой лейкемию тучных клеток. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой системный мастоцитоз. Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой миелодиспластический синдром (MDS). В некоторых вариантах осуществления, злокачественная опухоль представляет собой опухоль половых клеток. В другом варианте осуществления опухоль половых клеток представляет собой семиому и/или дисгерминому. Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой стромальную опухоль желудочно-кишечного тракта (GIST). Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой опухоль тучных клеток, меланому или нейробластому.
В настоящем описании предусматриваются композиции и способы лечения заболевания, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения, модулирующего рецептор фактора роста, полученного из тромбоцитов (PDGF). В одном из вариантов осуществления заболевание представляет собой рак. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой карциному. В другом варианте осуществления карцинома представляет собой карциному яичников. Еще в одном варианте осуществления карцинома представляет собой карциному груди. В другом варианте осуществления карцинома представляет собой карциному клеток надпочечников. Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой саркому. В других вариантах осуществления, рак представляет собой злокачественную опухоль или гематологическое злокачественное состояние, такое как лейкемия и лимфома. В некоторых вариантах осуществления, лейкемия представляет собой острую лимфобластическую лейкемию (ALL). В другом варианте осуществления лейкемия представляет собой хроническую миелогенную лейкемию (CML). В некоторых вариантах осуществления, лимфома представляет собой лимфому T-лимфоцитов. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой идиопатический гиперэозинофильный синдром (HES). В другом варианте осуществления заболевание представляет собой хроническую эозинофильную лейкемию (CEL). В некоторых вариантах осуществления, злокачественная опухоль представляет собой меланому или глиобластому. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой ангиогенез опухоли. В дополнительном варианте осуществления заболевание представляет собой незлокачественное пролиферативное заболевание. В некоторых вариантах осуществления, незлокачественное пролиферативное заболевание представляет собой атеросклероз или рестеноз. Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой фибропролиферативное расстройство. В некоторых вариантах осуществления, фибропролиферативное расстройство представляет собой облитерирующий бронхиолит. В другом варианте осуществления фибропролиферативное расстройство представляет собой идиопатический миелофиброз.
В настоящем описании предусматриваются композиции и способы лечения заболеваний, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения, модулирующего рецептор Flt-3. В одном из вариантов осуществления заболевание представляет собой рак. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой карциному. В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой мелкоклеточный легких рак или рак груди. В других вариантах осуществления, рак представляет собой злокачественную опухоль или гематологическое злокачественное состояние, такое как лейкемия и лимфома. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой гематологическое злокачественное состояние, такое как лейкемия и/или лимфома. В некоторых вариантах осуществления, лейкемия представляет собой острую миелогенную лейкемию (AML) или представляет собой хроническую миелоидную лейкемию (CML). В некоторых вариантах осуществления, рак представляет собой острую лимфобластическую лейкемию (ALL), миелодиспластическую лейкемию, острую лимфобластическую лейкемию T-лимфоцитов и острую лимфобластическую лейкемию B-лимфоцитов. В другом варианте осуществления расстройство представляет собой миелодиспластический синдром. Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой расстройство иммунной системы и/или воспалительное заболевание. В другом варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой системную красную волчанку. В другом варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой воспалительное заболевание желудка. В другом варианте осуществления воспалительное заболевание желудка представляет собой болезнь Крона и/или язвенный колит. В другом варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой хроническое обструктивное легочное заболевание.
В настоящем описании предусматриваются композиции и способы лечения заболевания, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения, модулирующего VEGFR. В одном из вариантов осуществления заболевание представляет собой рак. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой карциному. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой солидную опухоль. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой метастатическую опухоль. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой стромальные опухоли. Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой нейроэндокринные опухоли. Еще в одном варианте осуществления заболевание или расстройство представляет собой ангиогенез опухоли. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой саркому. В другом варианте осуществления саркома представляет собой саркому Капоши, гемангиосаркому и/или лимфангиосаркому.
В настоящем описании предусматриваются композиции и способы лечения заболевания, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения, модулирующего CSF-1R (или fms-). В одном из вариантов осуществления заболевание представляет собой рак. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой карциному. Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой метастатическую опухоль. В другом варианте осуществления метастатическая опухоль представляет собой метастазы в костях. Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой гистиоцитоз клеток Лангерганса. Еще в одном варианте осуществления заболевание представляет собой расстройство иммунной системы и/или воспалительное заболевание. В другом варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой системную красную волчанку. В другом варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой воспалительное заболевание желудка. В другом варианте осуществления воспалительное заболевание желудка представляет собой болезнь Крона и/или язвенный колит. В другом варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой ревматоидный артрит. Еще в одном варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой рассеянный склероз. Еще в одном варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой системную красную волчанку. Еще в одном варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой аллергический ринит и/или астму. В другом варианте осуществления расстройство иммунной системы представляет собой диабет типа 1.
В настоящем описании предусматриваются композиции и способы лечения заболевания, включающие введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения, модулирующего Ret. В одном из вариантов осуществления заболевание представляет собой рак. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой карциному. Еще в одном варианте осуществления карцинома представляет собой тироидную карциному. Еще в одном варианте осуществления тироидная карцинома представляет собой спорадическую или наследственную медуллярную карциному. В другом варианте осуществления тироидная карцинома представляет собой папиллярную тироидную карциному. Еще в одном варианте осуществления тироидная карцинома представляет собой карциному щитовидной железы. В другом варианте осуществления заболевание представляет собой множественную эндокринную неоплазию 2A или 2B.
В настоящем описании также рассматриваются комбинированные терапии с использованием одного или нескольких соединений или композиций, представленных в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемых производных в сочетании с другими фармацевтическими активными агентами для лечения заболеваний и расстройств, описанных здесь.
В одном из вариантов осуществления такие дополнительные фармацевтические агенты включают в себя один или несколько из следующих агентов: противораковые агенты и противовоспалительные агенты.
Соединение или композиция, представленные в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемое производное, может вводиться одновременно с введением одного или нескольких из указанных выше агентов, до или после него. Также предусматриваются фармацевтические композиции, содержащие соединение, представленное в настоящем описании, и один или несколько из указанных выше агентов.
При осуществлении этих способов эффективные количества соединений или композиций, содержащих терапевтически эффективные концентрации соединений, которые приготавливаются для системной доставки, включая парентеральную, пероральную или внутривенную доставку, или для локального или местного применения, вводятся индивидууму, демонстрирующему симптомы заболевания или расстройства, которое должно лечиться. Эти количества являются эффективными для облегчения или устранения одного или нескольких симптомов заболеваний или расстройств.
В настоящем описании также рассматривается комбинированная терапия с использованием одного или нескольких соединений или композиций, представленных в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемых солей, в сочетании с другими фармацевтически активными агентами для лечения заболеваний и расстройств, описанных здесь.
В одном из вариантов осуществления такие дополнительные фармацевтические агенты включают в себя один или несколько из следующих агентов: противораковые агенты и противовоспалительные агенты.
Соединение или композиция, предусмотренная здесь, или ее фармацевтически приемлемая соль, сольват, гидрат или пролекарство могут вводиться одновременно с введением одного или нескольких из указанных выше агентов, до или после него. Также предусматриваются фармацевтические композиции, содержащие соединение, представленное в настоящем описании, и один или несколько указанных выше агентов.
При осуществлении способов эффективные количества соединений или композиций, содержащих терапевтически эффективные концентрации соединений, которые приготавливаются для пероральной, системной, включая парентеральную или внутривенную, доставки, или для локального или местного применения, вводятся индивидууму, демонстрирующему симптомы заболевания или расстройства, которые должны лечиться. Эти количества являются эффективными для лечения, управления или облегчения заболевания, или облегчения, или устранения одного или нескольких симптомов заболевания или расстройства.
Кроме того, предусматривается фармацевтическая упаковка или набор, содержащий один или несколько контейнеров, заполненных одним или несколькими ингредиентами фармацевтических композиций. Необязательно прилагаемым к такому контейнеру (контейнерам) может быть описание в форме, предписанной правительственным агентством, регулирующим производство, использование или продажу фармацевтических препаратов или биологических продуктов, это описание отражает одобрение агентством производства, использования или продажи для введения людям. Упаковка или набор может иметь этикетку с информацией относительно способа введения, последовательности введения лекарственных средств (например, отдельно, последовательно или одновременно) или что-либо подобное.
Эти и другие аспекты предметы изобретения, описанные здесь, станут очевидными при упоминании следующего далее подробного описания.
Краткое описание чертежа
Чертеж изображает результаты эксперимента по замедлению роста опухоли на модели привитой лейкемии человека MV4-11. Соединение, представленное в настоящем описании, вводится с помощью перорального зонда (p.o.) ежедневно в течение двадцати восьми дней (qd×28) мышам с имплантированными опухолями MV4-11. Соединение при 3 мг/кг и 10 мг/кг ингибирует рост привитых опухолей MV4-11 статистически значимым образом (p<0,01) по сравнению с контролем - носителем, в отсутствие заболеваемости или смертности.
Подробное описание
В настоящем описании предусматриваются имидазолотиазольные соединения формулы (I), которые имеют активность в качестве модуляторов протеинкиназ. Кроме того, предусматриваются способы лечения, предотвращения или облегчения заболеваний, которые модулируются протеинкиназами, и фармацевтические композиции и лекарственные формы, пригодные для использования в таких способах. Способы и композиции описываются подробно разделах ниже.
A. Определения
Если не определяется иного, все технические и научные термины, используемые здесь, имеют такое же значение, как обычно понимается в данной области. Все патенты, заявки, опубликованные заявки и другие публикации включаются в виде ссылок во всей их полноте. В случае если имеется множество определений для термина, используемого здесь, термины из этого раздела имеют преимущества, если не утверждается иного.
"Алкил" относится к радикалу с прямой или разветвленной углеводородной цепью, состоящей только из атомов углерода и водорода, не содержащему ненасыщенности, имеющему от одного до десяти атомов углерода, и он присоединяется к остальной части молекулы посредством одинарной связи, например, к метилу, этилу, н-пропилу, 1-метилэтилу (изопропилу), н-бутилу, н-пентилу, 1,1-диметилэтилу (трет-бутилу) и тому подобное.
"Алкенил" относится к радикалу с прямой или разветвленной углеводородной цепью, состоящей только из атомов углерода и водорода, содержащему по меньшей мере одну двойную связь, имеющему от двух до десяти атомов углерода, и он присоединяется к остальной части молекулы посредством одинарной связи или двойной связь, например, к этенилу, проп-1-енилу, бут-1-енилу, пент-1-енилу, пента-1,4-диенилу и тому подобное.
"Алкинил" относится к радикалу с прямой или разветвленной углеводородной цепью, состоящей только из атомов углерода и водорода, содержащему по меньшей мере одну тройную связь, имеющему от двух до десяти атомов углерода, и он присоединяется к остальной части молекулы посредством одинарной связи или тройной связи, например, к этинилу, проп-1-инилу, бут-1-инилу, пент-1-инилу, пент-3-инилу и тому подобное.
"Алкилен" и "алкиленовая цепь" относятся к прямой или разветвленной двухвалентной углеводородной цепи, состоящей только из атомов углерода и водорода, не содержащей ненасыщенности и имеющей от одного до восьми атомов углерода, например, метилену, этилену, пропилену, н-бутилену и тому подобное. Алкиленовая цепь может присоединяться к остальной части молекулы посредством любых двух атомов углерода в цепи.
"Алкенилен" или "алкениленовая цепь" относится к ненасыщенному двухвалентному радикалу с прямой или разветвленной цепью, состоящему только из атомов углерода и водорода, имеющему от одного до восьми атомов углерода, где ненасыщенность присутствует только в виде двойных связей, и где двойная связь может существовать между любыми двумя атомами углерода в цепи, например к этенилену, проп-1-енилену, бут-2-енилену и тому подобное. Алкениленовая цепь может присоединяться к остальной части молекулы посредством любых двух атомов углерода в цепи.
"Алкокси" относится к радикалу, имеющему формулу -OR, где R представляет собой алкил или галогеналкил. "Необязательно замещенный алкокси" относится к радикалу, имеющему формулу -OR, где R представляет собой необязательно замещенный алкил, как здесь определено.
"Алкинилен" или "алкиниленовая цепь" относится к ненасыщенному двухвалентному радикалу с прямой или разветвленной цепью, состоящему только из атомов углерода и водорода, имеющему от одного до восьми атомов углерода, где ненасыщенность присутствует только в виде тройной связи и где тройная связь может существовать между любыми двумя атомами углерода в цепи, например, к этинилену, проп-1-инилену, бут-2-инилену, пент-1-инилену, пент-3-инилену и тому подобное. Алкиниленовая цепь может присоединяться к остальной части молекулы посредством любых двух атомов углерода в цепи.
"Амино" относится к радикалу, имеющему формулу -NR'R", где R' и R", каждый, независимо представляет собой водород, алкил или галогеналкил. "Необязательно замещенный амино" относится к радикалу, имеющему формулу -NR'R", где как R', так и R", или один из них, являются необязательно замещенными алкилом, как здесь определено.
"Противораковые агенты" относятся к антиметаболитам (например, к 5-фтор-урацилу, метотрексату, флударабину), агентам против образования трубочек (например, к винкаалкалоидам, таким как винкристин, винбластин; к таксанам, таким как паклитаксел, доцетаксел), алкилирующим агентам (например, к циклофосфамиду, мельфалану, кармустину, нитрозомочевинам, таким как бисхлорэтилнитрозомочевина и гидроксимочевина), агентам на основе платины (например, к цисплатину, карбоплатину, оксалиплатину, JM-216, CI-973), антрациклинам (например, к доксорубицину, даунорубицину), противоопухолевым антибиотикам (например, к митомицину, идарубицину, адриамицину, дауномицину), ингибиторам топоизомеразы (например, к этопозиду, камптотецинам), агентам против ангиогенеза (например, к Sutent и бевацизумабу) или к любым другим цитоксическим агентам (к эстрамустин фосфату, преднимустину), к гормонам или агонистам, антагонистам, частичным агонистам или частичным антагонистам гормонов, ингибиторам киназы и к радиационному лечению.
"Противовоспалительные агенты" относятся к ингибиторам матриксной металлопротеиназы, ингибиторам провоспалительных цитокинов (например, молекулам анти-TNF, растворимым рецепторам TNF и IL1), нестероидным противовоспалительным лекарственным средствам (NSAID), таким как ингибиторы простагландинсинтазы (например, к холинмагнийсалицилату, салицилсалициловой кислоте), ингибиторам COX-1 или COX-2), или к агонистам рецепторов глюкокортикоидов, таких как кортикостероиды, метилпреднизон, преднизон или кортизон.
"Арил" относится к радикалу карбоциклической кольцевой системы, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим. Арил может быть полностью ароматическим, его примеры представляют собой фенил, нафтил, антраценил, аценнафтиленил, азуленил, флуоренил, иденил и пиренил. Арил может также содержать ароматическое кольцо в сочетании с неароматическим кольцом, его примеры представляют собой аценафен, иден и флуорен.
a
b
a
b
"Аралкил" относится к радикалу формулы -RR, где R представляет собой алкильный радикал, как определено выше, замещенный R, арильным радикалом, как определено выше, например, бензилом. Как алкильный, так и арильный радикалы могут быть необязательно замещенными, как здесь определено.
a
b
a
b
"Аралкокси" относится к радикалу формулы -ORR, где -RR представляет собой аралкильный радикал, как определено выше. Как алкильный, так и арильный радикалы могут быть необязательно замещенными, как здесь определено.
"Циклоалкил" относится к стабильному одновалентному моноциклическому или бициклическому углеводородному радикалу, состоящему только из атомов углерода и водорода, имеющему от трех до десяти атомов углерода, и он является насыщенным и присоединенным к остальной части молекулы посредством одинарной связи, например, к циклопропилу, циклобутилу, циклопентилу, циклогексилу, декалинилу, норборнану, норборнену, адамантилу, бицикло[2.2.2]октану и тому подобное.
a
d
a
d
"Циклоалкилалкил" относится к радикалу формулы -RR, где R представляет собой алкильный радикал, как определено выше, и R представляет собой циклоалкильный радикал, как определено выше. Алкильный радикал и циклоалкильный радикал могут быть необязательно замещенными, как здесь определено.
"Гало", "галоген" или "галогенид" относится к F, Cl, Br или I.
"Галогеналкил" относится к алкильной группе, в которой один или несколько атомов водорода заменяются галогеном. Такие группы включают в себя, но не ограничиваясь этим, хлорметил, трифторметил и 1-хлор-2-фторэтил.
"Галогеналкенил" относится к алкенильной группе, в которой один или несколько атомов водорода заменяются галогеном. Такие группы включают в себя, но не ограничиваясь этим, 1-хлор-2-фторэтенил.
"Гетероциклил" относится к стабильному 3-15-членному кольцевому радикалу, который состоит из атомов углерода и из одного-пяти гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы. В одном из вариантов осуществления радикал гетероциклической кольцевой системы может представлять собой моноциклическую, бициклическую, или трициклическую, или тетрациклическую кольцевую систему, которая может включать в себя конденсированные или соединенные мостиком кольцевые системы; и атомы азота или серы в радикале гетероциклической кольцевой системы могут быть необязательно окисленными; атом азота может быть необязательно кватернизованным и гетероциклильный радикал может быть частично или полностью насыщенным или ароматическим. Гетероциклическая кольцевая система может присоединяться к главной структуре по любому гетероатому или атому углерода, если это приводит к созданию стабильного соединения. Примеры таких гетероциклических радикалов включают в себя, но не ограничиваясь этим, акридинил, азепинил, бензимидазолил, бензиндолил, бензизоксазинил, бензо[4,6]имидазо[1,2-a]пиридинил, бензодиоксанил, бензодиоксолил, бензофуранонил, бензофуранил, бензонафтофуранил, бензопиранонил, бензопиранил, бензотетрагидрофуранил, бензотетрагидротиенил, бензотиадиазолил, бензотиазолил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензотиопиранил, бензоксазинил, бензоксазолил, бензотиазолил, β-карболинил, карбазолил, хроманил, хромонил, циннолинил, кумаринил, декагидроизохинолинил, дибензофуранил, дигидробензизотиазинил, дигидробензизоксазинил, дигидрофурил, дигидропиранил, диоксоланил, дигидропиразинил, дигидропиридинил, дигидропиразолил, дигидропиримидинил, дигидропирролил, диоксоланил, 1,4-дитианил, фуранонил, фуранил, имидазолидинил, имидазолинил, имидазолил, имидазопиридинил, имидазотиазолил, индазолил, индолинил, индолизинил, индолил, изобензотетрагидрофуранил, изобензотетрагидротиенил, изобензотиенил, изохроманил, изокоумаринил, изоиндолинил, изоиндолил, изохинолинил, изотиазолидинил, изотиазолил, изоксазолидинил, изоксазолил, морфолинил, нафтиридинил, октагидроиндолил, октагидроизоиндолил, оксадиазолил, оксазолидинонил, оксазолидинил, оксазолопиридинил, оксазолил, оксиранил, перимидинил, фенантридинил, фенантролинил; фенарсазинил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, фталазинил, пиперазинил, пиперидинил, 4-пиперидонил, птеридинил, пуринил, пиразинил, пиразолидинил, пиразолил, пиридазинил, пиридинил, пиридопиридинил, пиримидинил, пирролидинил, пирролинил, пирролил, хиназолинил, хинолинил, хиноксалинил, хинуклидинил, тетрагидрофурил, тетрагидрофуранил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидропиранил, тетрагидротиенил, тетразолил, тиадиазолопиримидинил, тиадиазолил, тиаморфолинил, тиазолидинил, тиазолил, тиофенил, триазинил, триазолил и 1,3,5-тритианил.
a
f
a
f
"Гетероаралкил" относится к радикалу формулы -RR, где R представляет собой алкильный радикал, как определено выше, и R представляет собой гетероарильный радикал, как здесь определено. Алкильный радикал и гетероарильный радикал могут быть необязательно замещенными, как здесь определено.
a
f
a
f
"Гетероаралкокси" относится к радикалу формулы -ORR, где -RR представляет собой гетероаралкильный радикал, как определено выше. Алкильный радикал и гетероарильный радикал могут быть необязательно замещенными, как здесь определено.
"Гетероарил" относится к гетероциклильному радикалу, как определено выше, который является ароматическим. Гетероарильный радикал может присоединяться к главной структуре по любому гетероатому или атому углерода, если это приводит к созданию стабильного соединения. Примеры таких гетероарильных радикалов включают в себя, но не ограничиваясь этим, акридинил, бензимидазолил, бензиндолил, бензизоксазинил, бензо[4,6]имидазо[1,2-a]пиридинил, бензофуранил, бензонафтофуранил, бензотиадиазолил, бензотиазолил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензотиопиранил, бензоксазинил, бензоксазолил, бензотиазолил, β-карболинил, карбазолил, циннолинил, дибензофуранил, фуранил, имидазолил, имидазопиридинил, имидазотиазолил, индазолил, индолизинил, индолил, изобензотиенил, изоиндолинил, изохинолинил, изотиазолидинил, изотиазолил, нафтиридинил, октагидроиндолил, октагидроизоиндолил, оксазолидинонил, оксазолидинил, оксазолопиридинил, оксазолил, оксиранил, перимидинил, фенантридинил, фенантролинил, фенарсазинил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, фталазинил, птеридинил, пуринил, пиразинил, пиразолил, пиридазинил, пиридинил, пиридопиридинил, пиримидинил, пирролил; хиназолинил, хинолинил, хиноксалинил, тетразолил, тиадиазолил, тиазолил, тиофенил, триазинил и триазолил.
a
e
a
e
"Гетероциклилалкил" относится к радикалу формулы -RR, где R представляет собой алкильный радикал, как определено выше, и R представляет собой гетероциклильный радикал, как здесь определено. Алкильный радикал и гетероциклильный радикал могут быть необязательно замещенными, как здесь определено.
a
e
a
e
"Гетероциклилалкокси" относится к радикалу формулы -ORR, где -RR представляет собой гетероциклилалкильный радикал, как определено выше. Алкильный радикал и гетероциклильный радикал могут быть необязательно замещенными, как здесь определено.
50
"IC" относится к количеству, концентрации или дозировке конкретного исследуемого соединения, при которой достигается 50% ингибирование максимальной реакции, такой как рост или пролиферация клеток, измеренной посредством любого in vitro или клеточного исследования, как описано в настоящем описании.
x
y
z
x
x
x
y
z
x
w
x
x
y
z
x
x
x
x
x
x
y
z
x
x
w
x
w
x
y
z
y
z
v
v
x
w
x
x
w
x
x
x
y
z
t
3
2
2
2
2
2
2
2
"Необязательно замещенный алкил", "необязательно замещенный алкенил" и "необязательно" относится к алкильным радикалам, алкенильным радикалам и алкинильным радикалам, соответственно, замещенный алкинил, который может быть необязательно замещенным одним или несколькими заместителями, независимо выбирают из группы, состоящей из нитро-, галоген-, азидо-, циано-, циклоалкила, гетероарила, гетероциклила, -OR, -N(R)(R), -SR, -C(J)R, -C(J)OR, -C(J)N(R)(R), -C(J)SR, -S(O)R (где t равно 1 или 2), -OC(J)R, -OC(J)OR, -OC(J)N(R)(R), -OC(J)SR, -N(R)C(J)R, -N(R)C(J)OR, -N(R)C(J)N(R)(R), -N(R)C(J)SR, -Si(R), -N(R)S(O)R, -N(R)S(O)N(R)(R), -S(O)N(R)(R), -P(O)(R), -OP(O)(R), -C(J)N(R)S(O)R, -C(J)N(R)N(R)S(O)R, -C(R)=N(OR) и -C(R)=NN(R)(R), где
x
R представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил, арил, аралкил, гетероарил или гетероаралкил;
y
z
R и R, каждый, независимо представляют собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил, арил, аралкил, гетероарил или гетероаралкил; или
y
z
R и R, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклил или гетероарил;
w
R представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил, арил, аралкил, гетероарил или гетероаралкил;
v
x
y
z
x
R представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил, арил, аралкил, гетероарил, гетероаралкил, гидрокси, -OR или -N(R)(R); и J представляет собой O, NR или S.
Если не указано конкретно иного, в данном описании считается, что замещение может осуществляться на любом атоме углерода алкильной, алкенильной или алкинильной группы.
u
x
u
y
z
u
x
u
x
u
x
u
y
z
u
x
u
w
u
x
u
x
u
y
z
u
x
u
x
x
u
x
x
u
x
y
z
u
x
x
u
w
u
x
w
u
x
y
z
u
y
z
u
v
u
v
u
x
w
u
x
x
w
u
x
x
u
x
y
z
t
3
2
2
2
2
2
2
2
"Необязательно замещенный арил", "необязательно замещенный циклоалкил", "необязательно замещенный гетероарил" и "необязательно замещенный гетероциклил" относится к арильному, циклоалкильному, гетероциклильному и гетероарильному радикалам, соответственно, которые являются необязательно замещенными одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из нитро, галогена, галогеналкила, галогеналкенила, азидо, циано, оксо, тиоксо, имино, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, циклоалкилалкила, гетероциклила, гетероциклилалкила, гетероарила, гетероаралкила, -ROR, -RN(R)(R), -RSR, -RC(J)R, -RC(J)OR, -RC(J)N(R)(R), -RC(J)SR, -RS(O)R (где t равно 1 или 2), -ROC(J)R, -ROC(J)OR, -ROC(J)N(R)(R), -ROC(J)SR, -RN(R)C(J)R, -RN(R)C(J)OR, -RN(R)C(J)N(R)(R), -RN(R)C(J)SR, -RSi(R), -RN(R)S(O)R, -RN(R)S(O)N(R)(R), -RS(O)N(R)(R), -RP(O)(R), -ROP(O)(R), -RC(J)N(R)S(O)R, -RC(J)N(R)N(R)S(O)R, -RC(R)=N(OR) и -RC(R)=NN(R)(R),
где
u
каждый из R независимо представляет собой алкилен или прямую связь;
v
x
y
z
каждый из R независимо представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил, арил, аралкил, гетероарил, гетероаралкил, гидрокси, -OR или -N(R)(R);
w
R представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил, арил, аралкил, гетероарил или гетероаралкил;
x
каждый из R независимо представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил, арил, аралкил, гетероарил или гетероаралкил;
y
z
R и R, каждый, независимо представляют собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил, арил, аралкил, гетероарил или гетероаралкил;
y
z
R и R, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероцикл или гетероарил; и
x
J представляет собой O, NR или S.
Если не указано конкретно иного, в настоящем описании считается, что замещение может осуществляться на любом атоме циклоалкильной, гетероциклильной, арильной или гетероарильной группы.
"Оксо" относится к =O.
"Фармацевтически приемлемые производные" соединения включают в себя его соли, сложные эфиры, простые енольные эфиры, сложные енольные эфиры, ацетали, кетали, сложные ортоэфиры, гемиацетали, гемикетали, кислоты, основания, сольваты, гидраты или пролекарства. Такие производные могут легко быть получены специалистами в данной области с использованием известных способов модификации. Полученные соединения могут вводиться животным или людям без существенных токсических воздействий и либо являются фармацевтически активными, либо являются пролекарствами.
Фармацевтически приемлемые соли включают в себя, но не ограничиваясь этим, аминовые соли, такие как, но не ограничиваясь этим, соли N,N'-дибензилэтилендиамина, хлорпрокаина, холина, аммония, диэтаноламина и других гидроксиалкиламинов, этилендиамина, N-метилглюкамина, прокаина, N-бензилфенэтиламина, 1-пара-хлорбензил-2-пирролидин-1'-илметилбензимидазолов, диэтиламина и других алкиламинов, пиперазина и трис(гидроксиметил)аминометана; соли щелочных металлов, таких как, но не ограничиваясь этим, лития, калия и натрия; соли щелочноземельных металлов, таких как, но не ограничиваясь этим, бария, кальция и магния; соли переходных металлов, таких как, но не ограничиваясь этим, цинка; и соли других металлов, таких как, но не ограничиваясь этим, гидрофосфат натрия и динатрийфосфат; и также включая, но не ограничиваясь этим, соли минеральных кислот, такие как, но не ограничиваясь этим, гидрохлориды и сульфаты; и соли органических кислот, такие как, но не ограничиваясь этим, ацетаты, лактаты, малаты, тартраты, цитраты, аскорбаты, сукцинаты, бутираты, валераты и фумараты.
Фармацевтически приемлемые сложные эфиры включают в себя, но не ограничиваясь этим, сложные алкиловые, алкениловые, алкиниловые, ариловые, гетероариловые, аралкиловые, гетероаралкиловые, циклоалкиловые и гетероциклиловые эфиры кислотных групп, включая, но не ограничиваясь этим, карбоновые кислоты, фосфорные кислоты, фосфиновые кислоты, сульфоновые кислоты, сульфиновые кислоты и бороновые кислоты.
Фармацевтически приемлемые простые енольные эфиры включают в себя, но не ограничиваясь этим, производные формулы C=C(OR), где R представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, аралкил, гетероаралкил, циклоалкил или гетероциклил. Фармацевтически приемлемые сложные енольные эфиры включают в себя, но не ограничиваясь этим, производные формулы C=C(OC(O)R), где R представляет собой водород, алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, аралкил, гетероаралкил, циклоалкил или гетероциклил.
Как здесь используется и если не указано иного, термин "гидрат" обозначает соединение, представленное в настоящем описании, или его соль, которое дополнительно содержит стехиометрическое или нестехиометрическое количество воды, связанной с помощью нековалентных межмолекулярных сил.
Как здесь используется и если не указано иного, термин "сольват" означает сольват, образовавшийся от ассоциирования одной или нескольких молекул растворителя с соединением, предусмотренным здесь. Термин "сольват" включает в себя гидраты (например, моногидрат, дигидрат, тригидрат, тетрагидрат, и тому подобное).
"Пролекарство" представляет собой соединение, которое при введении in vivo метаболизируется посредством одной или нескольких стадий или процессов или иным образом преобразуется в биологически, фармацевтически или терапевтически активную форму соединения. Для получения пролекарства фармацевтически активное соединение модифицируется таким образом, что активное соединение будет регенерироваться с помощью метаболических процессов. Пролекарство может конструироваться для изменения метаболической стабильности или транспортных характеристик лекарственного средства, для маскировки побочных воздействий или токсичности, для улучшения запаха лекарственного средства или для изменения других характеристик или свойств лекарственного средства. Имея представление о фармакодинамических процессах и метаболизме лекарственных средств in vivo, специалисты в данной области, когда фармацевтически активное соединение известно, могут конструировать пролекарства соединения (см., например, Nogrady (2005) Medicinal Chemistry A Biochemical Approach, Oxford University Press, New York).
"Сульфид" относится к радикалу, имеющему формулу -SR, где R представляет собой алкильную или галогеналкильную группу. "Необязательно замещенный сульфид" относится к радикалу, имеющему формулу -SR, где R представляет собой необязательно замещенный алкил, как здесь определено.
Как здесь используется, "по существу чистый" означает достаточно гомогенный, чтобы выглядеть не содержащим легкодетектируемых примесей, как определяется с помощью стандартных способов анализа, таких как тонкослойная хроматография (ТСХ), гель-элетрофорез, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) и масс-спектрометрия (МС), используемых специалистами в данной области для достижения такой чистоты, или достаточно чистый, так что дополнительная очистка не изменяла бы заметным образом физические и химические свойства, такие как ферментативная и биологическая активность вещества. Способы очистки соединений для получения по существу химически чистых соединений известны специалистам в данной области. По существу химически чистое соединение может, однако, представлять собой смесь стереоизомеров. В таких случаях дополнительная очистка могла бы повысить удельную активность соединения.
Если конкретно не утверждается иного, когда соединение может принимать альтернативные таутомерные, региоизомерные и/или стереоизомерные формы, все альтернативные изомеры, как предполагается, охватываются рамками предмета формулы изобретения. Например, когда соединение описывается как имеющее одну из двух таутомерных форм, предполагается, что оба таутомера охватываются здесь.
Таким образом, соединения, представленные в настоящем описании, могут быть энантиомерно чистыми или могут представлять собой стереоизомерные или диастереомерные смеси. В случае аминокислотных остатков, такие остатки могут находиться либо в L-, либо в D-форме. Конфигурация существующих в природе аминокислотных остатков, как правило, L. Когда не указывается, остаток находится в L-форме. Как здесь используется, термин "аминокислота" относится к α-аминокислотам, которые являются рацемическими, либо в D- либо в L-конфигурации. Обозначение "d", предшествующее обозначению аминокислоты (например, dAla, dSer, dVal и тому подобное) относится к D-изомеру аминокислоты. Обозначение "dl", предшествующее обозначению аминокислоты (например, dlPip), относится к смеси L- и D-изомеров аминокислоты. Необходимо понять, что хиральные центры соединений, представленных в настоящем описании, могут подвергаться эпимеризации in vivo. Как таковой, специалист в данной области заметит, что введение соединения в его (R) форме является эквивалентным для соединений, которые подвергаются эпимеризации in vivo, введению соединения в его (S) форме.
Необходимо понять, что соединения, представленные в настоящем описании, могут содержать хиральные центры. Такие хиральные центры могут находиться либо в (R), либо в (S) конфигурации, или могут представлять собой их смесь.
Оптически активные (+) и (-), (R) и (S), или (D) и (L) изомеры могут быть получены с использованием хиральных синтонов или хиральных реагентов, или разделены с использованием обычных методик, таких как ВЭЖХ с обращенной фазой.
Как здесь используется, термин "энантиомерно чистый" или "чистый энантиомер" обозначает, что соединение содержит более 75% мас., более 80% мас., более 85% мас., более 90% мас., более 91% мас., более 92% мас., более 93% мас., более 94% мас., более 95% мас., более 96% мас., более 97% мас., более 98% мас., более 98,5% мас., более 99% мас., более 99,2% мас., более 99,5% мас., более 99,6% мас., более 99,7% мас., более 99,8% мас. или более 99,9% мас. энантиомера.
Когда количество любого данного заместителя не указано (например, галогеналкил), могут присутствовать один или несколько заместителей. Например, "галогеналкил" может содержать один или несколько одинаковых или различных атомов галогенов.
В настоящем описании, если имеется какое-либо различие между химическим наименованием и химической структурой, предпочтительно, преобладает структура.
Как здесь используется, аббревиатуры для любых защитных групп, аминокислот и других соединений находятся, если не указано иного, в соответствии с их обычно используемыми признанными аббревиатурами или соответствует IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature (см., Biochem. 1972, 77:942-944).
B. Соединения
В одном из вариантов осуществления предусматриваются соединения формулы (I):
где
связь b представляет собой одинарную связь или двойную связь;
5
X представляет собой -S-, -N(R)- или -O-;
1
3
5
2
q
Z и Z, каждый независимо, представляют собой -N(R), -(CH), -О-, -S- или прямую связь;
2
Z представляет собой -C(O)- или -C(S)-;
m представляет собой целое число от 1 до 2;
n представляют собой целое число от 1 до 3;
каждый из q независимо представляет собой целое число от 1 до 4;
0
R представляет собой водород, галоген, гидрокси, необязательно замещенный алкил или необязательно замещенный алкокси;
1
6
7
6
7
6
8
6
7
6
6
7
6
7
6
7
7
6
7
6
7
6
7
7
6
7
6
7
6
7
7
6
7
9
7
6
8
6
8
6
7
8
6
7
6
7
6
7
7
6
7
7
6
7
8
6
7
7
6
7
7
7
6
7
8
6
7
8
6
7
8
6
7
7
8
6
7
8
6
7
7
6
7
7
7
6
7
7
6
7
8
6
8
6
7
8
6
8
6
8
6
7
8
6
8
6
8
6
7
6
7
7
6
7
6
9
7
6
9
7
6
7
9
7
6
9
7
6
9
7
6
9
7
7
6
9
7
6
9
7
6
9
7
7
6
9
7
6
9
7
6
9
7
7
6
9
8
6
9
8
6
9
7
8
t
2
2
2
2
2
t
t
2
t
2
t
2
t
t
2
t
2
2
2
2
t
2
2
2
2
2
2
2
2
2
каждый из R независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероциклилалкенила, необязательно замещенного гетероаралкила, необязательно замещенного гетероаралкенила, -ROR, -RSR, -RS(O)R (где t равно 1 или 2), -RN(R), -RCN, -RC(O)R, -RC(S)R, -RC(NR)R, -RC(O)OR, -RC(S)OR, -RC(NR)OR, -RC(O)N(R), -RC(S)N(R), -RC(NR)N(R), -RC(O)N(R)RN(R), -RC(O)SR, -RC(S)SR, -RC(NR)SR, -RS(O)OR (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R) (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R)N(R) (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R)N=C(R), -RS(O)N(R)C(O)R (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R)C(O)N(R) (где t равно 1 или 2), -RS(O)N(R)C(NR)N(R) (где t равно 1 или 2), -RN(R)C(O)R, -RN(R)C(O)OR, -RN(R)C(O)SR, -RN(R)C(NR)SR, -RN(R)C(S)SR, -RN(R)C(O)N(R), -RN(R)C(NR)N(R), -RN(R)C(S)N(R), -RN(R)S(O)R (где t равно 1 или 2), -ROC(O)R, -ROC(NR)R, -ROC(S)R, -ROC(O)OR, -ROC(NR)OR, -ROC(S)OR, -ROC(O)SR, -ROC(O)N(R), -ROC(NR)N(R), -ROC(S)N(R), -RORN(R), -RSRN(R), -RN(R)RN(R), -RC(O)RC(O)R, -RC(O)RC(S)R, -RC(O)RC(NR)R, -RC(O)RC(O)OR, -RC(O)RC(S)OR, -RC(O)RC(NR)OR, -RC(O)RC(O)N(R), -RC(О)RC(S)N(R), -RC(O)RC(NR)N(R), -RC(O)RC(O)SR, -RC(O)RC(S)SR и -RC(O)RC(NR)SR;
2
12
12
12
13
12
12
12
12
12
13
2
t
2
t
каждый из R независимо выбирают из водорода, галогена, нитро, циано, необязательно замещенного алкила, -OR, -SR, -N(R), -S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R), -C(O)SR или -N(R)S(O)R (где t равно 1 или 2);
3
12
12
12
13
12
12
12
12
12
13
2
t
2
t
R представляет собой водород, галоген, нитро, циано, необязательно замещенный алкил, -OR, -SR, -N(R), -S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R), -C(O)SR или -N(R)S(O)R (где t равно 1 или 2);
4
R выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкенила и необязательно замещенного арила;
5
каждый из R независимо представляет собой водород или необязательно замещенный алкил;
6
каждый из R независимо представляет собой одинарную связь, необязательно замещенный алкилен с прямой или разветвленной цепью или необязательно замещенный алкенилен с прямой или разветвленной цепью;
7
каждый из R независимо выбирают из (i) или (ii) ниже
7
(i) R выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила, или
7
(ii) два (R) вместе с атомом, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенный гетероциклил или необязательно замещенный гетероарил;
8
R независимо выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила;
9
каждый из R независимо представляет собой необязательно замещенный алкилен с прямой или разветвленной цепью или необязательно замещенный алкенилен с прямой или разветвленной цепью;
12
каждый из R независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила; и
13
R независимо выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила;
при условии, что,
1
2
3
4
1
(i) если -ZZZR представляет собой -NHC(O)Bu, тогда R не может представлять собой этокси;
1
2
3
4
1
p
p
(ii) если -ZZZR представляет собой -C(O)OR, где R = H, метил или этил, тогда R не может представлять собой гидроксил, метокси или метоксикарбонил;
1
2
3
4
1
p
p
(iii) если -ZZZR представляет собой -NHC(O)C(O)OR, где R = H, метил или этил, тогда R не может представлять собой метокси;
1
2
3
4
1
2
p
p
(iv) если -ZZZR представляет собой -CHC(O)OR, где R = H, метил или этил, тогда R не может представлять собой метокси или этокси;
1
2
3
4
1
3
(v) если -ZZZR представляет собой -OC(O)CH, тогда R не может представлять собой метил, метокси или этокси.
В одном из вариантов осуществления соединение представляет собой индивидуальный изомер, смесь изомеров, рацемическую смесь изомеров, сольват, гидрат или пролекарство; или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном из вариантов осуществления соединение, представленное в настоящем описании, представляет собой фармацевтически приемлемую соль соединения формулы (I). В одном из вариантов осуществления соединения, представленные в настоящем описании, представляют собой сольваты соединения формулы (I). В одном из вариантов осуществления соединения, представленные в настоящем описании, представляют собой гидраты соединения формулы (I). В одном из вариантов осуществления соединение, представленное в настоящем описании, представляет собой пролекарство соединения формулы (I).
1
2
3
4
1
2
3
4
В одном из вариантов осуществления группа -ZZZR присоединяется в пара-положении на фенильном кольце. В одном из вариантов осуществления группа -ZZZR присоединяется в мета-положении на фенильном кольце.
4
4
4
4
4
4
В одном из вариантов осуществления R представляет собой необязательно замещенный гетероциклил или необязательно замещенный гетероарил, а другие переменные являются такими, как описано в настоящем описании. Заместители на R, когда присутствуют, выбираются из одной или нескольких, в одном из вариантов осуществления одной, двух, трех или четырех групп, выбранных из галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила. В одном из вариантов осуществления R представляет собой 3-12 членный необязательно замещенный гетероциклил, где гетероатомы выбираются из одного или нескольких атомов азота, серы или кислорода. В одном из вариантов осуществления R представляет собой 5-10-членный необязательно замещенный гетероциклил. В одном из вариантов осуществления R представляет собой 5-12-членный необязательно замещенный гетероарил, где гетероатомы выбираются из одного или нескольких атомов азота, серы или кислорода. В одном из вариантов осуществления R представляет собой 5-6-членный необязательно замещенный гетероарил.
4
В другом варианте осуществления R выбирают из группы, состоящей из
,
10
где каждый из R независимо выбирают из водорода, галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила.
4
В другом варианте осуществления R выбирают из группы, состоящей из
10
и каждый из R независимо выбирают из водорода, галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила.
4
В другом варианте осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (I), где R выбирают из группы, состоящей из
10
10
10
10
и каждый из R независимо выбирают из водорода, галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила. В одном из вариантов осуществления R представляет собой водород, алкил, галогеналкил или галогенарил. В одном из вариантов осуществления R представляет собой водород, метил, трет-бутил, трифторметил или п-хлорфенил. В одном из вариантов осуществления R представляет собой трет-бутил.
4
В одном из вариантов осуществления R представляет собой
10
10
10
10
10
где R является таким, как описано в настоящем описании. В одном из вариантов осуществления R представляет собой алкил. В одном из вариантов осуществления R представляет собой водород. В одном из вариантов осуществления один R представляет собой алкил, а другой R представляет собой водород.
4
В одном из вариантов осуществления R представляет собой
1
6
9
7
6
2
В другом варианте осуществления R представляет собой -RORN(R), где R представляет собой прямую связь, необязательно замещенный алкилен с прямой или разветвленной цепью или необязательно замещенный алкенилен с прямой или разветвленной цепью;
7
два (R) вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют необязательно замещенный гетероциклил или необязательно замещенный гетероарил и
9
R представляет собой необязательно замещенный алкилен с прямой или разветвленной цепью или необязательно замещенный алкенилен с прямой или разветвленной цепью.
1
В другом варианте осуществления R представляет собой
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
где K представляет собой -C(O), -(CH)-, -(CH)O-, -(CH)O(CH)-, -(CH)C(O), -C(O)NH(CH)-, -C(O)NH(CH)NH(CH)-, -(CH)C(O)NH(CH)-, -O(CH)-, -OC(O), -OC(O)(CH)- или прямую связь;
2
14
15
Y представляет собой -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)-, -N(R)-, -C(H)R- или -C(O)-;
p представляет собой целое число от 0 до 2;
каждый из q независимо представляет собой целое число от 1 до 4;
14
13
12
12
12
12
t
2
R представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный арил, S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R) или -C(O)SR;
15
12
12
12
13
12
12
12
12
12
13
2
t
2
t
R представляет собой водород, галоген, нитро, циано, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный арил, -OR, -SR, -N(R), -S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R), -C(O)SR или -N(R)S(O)R (где t равно 1 или 2);
12
каждый из R независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила, необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила; и
13
каждый из R независимо выбирают из группы, состоящей из необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного циклоалкилалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного аралкила, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного гетероциклилалкила; необязательно замещенного гетероарила и необязательно замещенного гетероаралкила.
1
6
7
6
7
6
7
6
9
7
6
9
7
6
7
9
7
6
9
7
9
7
6
7
9
7
7
2
2
2
В другом варианте осуществления R представляет собой галоген, алкил, -ROR, -RN(R), -RC(O)OR, -ROROR, -RORN(R), -RC(O)N(R)RN(R), -RC(O)RN(R)ROR или -RC(O)N(R)ROR и R представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный циклоалкилалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный гетероциклилалкил, необязательно замещенный гетероарил и необязательно замещенный гетероаралкил.
1
В одном из вариантов осуществления R представляет собой фтор, бром, метил, этил, гидрокси, метокси, диэтиламино или карбокси.
В одном из вариантов осуществления q равно 1-3. В одном из вариантов осуществления q равно 1, 2, 3 или 4. В одном из вариантов осуществления K представляет собой прямую связь.
5
5
В одном из вариантов осуществления X представляет собой -S-. В другом варианте осуществления X представляет собой -N(R)-, где R представляет собой водород или низший алкил. В другом варианте осуществления X представляет собой -O-.
1
2
3
1
2
3
3
3
2
В одном из вариантов осуществления -ZZZ- представляет собой -NHC(O)NH-, -NHC(O)N(CH), -N(CH)C(O)NH-, -C(O)NH-, -NHC(O), -NCHC(O)NH-. В одном из вариантов осуществления -ZZZ- представляет собой -NHC(O)NH-.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (Ia):
где переменные являются такими, как здесь определено.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (Ia):
где переменные являются такими, как здесь определено.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (II):
где
5
X представляет собой -S-, -N(R)- или -O-;
1
2
3
4
10
10
16
1
2
3
4
2
X, X, X, X, каждый независимо, выбирают из -C(R)-, -C(R)-, -N-, -N(R)-, -O- и -S-, при условии, что не более чем два из X, X, X и X представляют собой гетероатомы и при этом два соседних X не являются оба -O- или -S-;
10
и каждый из R независимо выбирают из водорода, галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила;
16
каждый из R независимо выбирают из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила; и
0
1
2
3
n, R, R, R, R являются такими, как описывается выше для формулы (I);
в виде индивидуального изомера, смеси изомеров, рацемической смеси изомеров; сольвата, гидрата или пролекарства; или в виде его фармацевтически приемлемой соли.
В одном из вариантов осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (II), где n равно 0-3. В одном из вариантов осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (II), где n равно 0-3.
2
3
В другом варианте осуществления соединение, представленное в настоящем описании, имеет формулу (II), где R и R независимо выбираются из водорода, галогена или необязательно замещенного низшего алкила.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (III):
где
6
X представляет собой -S-, -N(R)- или -O-;
1
10
X представляет собой -C(R)- или -N-;
2
X представляет собой -O- или -S-;
10
где каждый из R независимо выбирают из водорода, галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероциклила и необязательно замещенного гетероарила;
0
1
2
3
5
и оставшиеся параметры из n, R, R, R, R, R и X являются такими, как определено выше для формулы (I);
в виде индивидуального изомера, смеси изомеров, рацемической смеси изомеров, сольвата, гидрата или пролекарства, или в виде его фармацевтически приемлемой соли.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (IIIa):
где переменные являются такими, как описано в настоящем описании.
1
2
В другом варианте осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (III), где X представляет собой -N- и X представляет собой -O-.
2
3
В другом варианте осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (III), где R и R независимо выбираются из водорода, галогена или необязательно замещенного низшего алкила.
В другом аспекте соединение представляет собой формулу (III), где
2
12
12
12
13
12
12
12
12
12
13
2
t
2
t
каждый из R независимо выбирают из водорода, галогена, нитро, циано, необязательно замещенного алкила, -OR, -SR, -N(R), -S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R), -C(O)SR или -N(R)S(O)R (где t равно 1 или 2);
3
каждый из R независимо выбирают из водорода, галогена, нитро, циано, необязательно замещенного алкила;
В одном из вариантов осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (II), где n равно 0-3. В одном из вариантов осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (II), где n равно 0.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (IV):
где
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
K представляет собой -(CH)-, -(CH)O-, -(CH)O(CH)-, -(CH)C(O)-, -(CH)C(O)NH(CH)-, -O(CH)-, -OC(O)-, -OC(O)(CH)- или прямую связь;
5
X представляет собой -S-, -N(R)- или -O-;
1
10
X представляет собой -C(R)- или -N-;
2
X представляет собой -O- или -S-;
2
14
15
Y представляет собой -O-, -S-, -S(O), -S(O)-, -N(R)-, -C(H)R- или -C(O)-;
p представляет собой целое число от 0 до 2;
каждый из q независимо представляет собой целое число от 1 до 4;
10
R независимо выбирают из водорода, галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила или необязательно замещенного арила;
14
13
12
12
12
12
t
2
R независимо представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный арил, S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R) или -C(O)SR;
15
12
12
12
2
R независимо представляет собой водород, галоген, нитро, циано, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный арил, -OR, -SR, -N(R),
t
2
t
13
12
12
12
12
12
13
S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -С(O)OR, -C(O)N(R), -C(O)SR или -N(R)S(O)R (где t равно 1 или 2);
0
2
3
5
12
13
и оставшиеся параметры из R, R, R, R, R, R и X являются такими, как определено выше для формулы (I);
в виде индивидуального изомера, смеси изомеров или в виде рацемической смеси изомеров, или в виде сольвата, или в виде пролекарства, или в виде его фармацевтически приемлемой соли.
14
13
13
14
13
13
t
t
В одном из вариантов осуществления R представляет собой алкил или -S(O)R, где t равно 1 или 2, и R представляет собой алкил. В одном из вариантов осуществления R представляет собой метил, этил или -S(O)R, где t равно 2, и R представляет собой метил.
1
2
В другом варианте осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (IV), где X представляет собой -N- и X представляет собой -O-.
2
3
В другом варианте осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (IV), где R и R независимо выбирают из водорода, галогена или необязательно замещенного низшего алкила.
2
3
В другом варианте осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (IV), где как R, так и R представляют собой водород.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (IVa):
или индивидуальный изомер, смесь изомеров, рацемическую смесь изомеров, сольват, пролекарство, или в виде его фармацевтически приемлемой соли, и переменные являются такими, как определено в настоящем изобретении.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (IVb):
или индивидуальный изомер, смесь изомеров, рацемическую смесь изомеров, сольват, пролекарство, или в виде его фармацевтически приемлемой соли, где переменные являются такими, как определено в настоящем изобретении.
В другом аспекте соединение, представленное в настоящем описании, представляет собой формулу (V):
2
q
2
q
2
q
2
q
2
q
где K представляет собой -O(CH)-, -(CH)O-, -(CH)O(CH)- или -(CH)-;
p представляет собой целое число от 0 до 2;
каждый из q независимо представляет собой целое число от 1 до 4;
1
10
X представляет собой -C(R)- или -N-;
2
X представляет собой -O- или -S-;
2
14
15
Y представляет собой -O-, -S-, -S(O)-, -S(O)-, -N(R)-, -C(H)R- или -C(O)-, и m равно 0, 1 или 2;
10
R независимо выбирают из водорода, галогена, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила или необязательно замещенного арила;
14
13
12
12
12
12
t
2
R независимо представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный арил, S(O)R, -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R) или -C(O)SR;
15
12
12
12
13
12
12
12
12
12
13
2
t
2
t
R независимо представляет собой водород, галоген, нитро, циано, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный арил, -OR, -SR, -N(R), -S(O)R (где t равно 1 или 2), -C(O)R, -C(O)OR, -C(O)N(R), -C(O)SR или -N(R)S(O)R (где t равно 1 или 2);
2
3
12
13
и оставшиеся параметры из R, R, R, R и X являются такими, как определено выше для формулы (I); в виде индивидуального изомера, смеси изомеров, рацемической смеси изомеров, сольвата, гидрата или пролекарства или в виде его фармацевтически приемлемой соли.
В другом варианте осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (VI):
2
q
2
q
2
q
2
q
где K представляет собой -O(CH)-, -(CH)O- или -(CH)O(CH)-;
каждый из q независимо представляет собой от 1 до 4;
14
Y представляет собой -O-, -S- или -N(R)-;
10
R представляет собой необязательно замещенный низший алкил;
14
13
t
R представляет собой водород, необязательно замещенный низший алкил или -S(O)R;
13
R представляет собой низший алкил; и
t равно 1 или 2.
В другом варианте осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (VI):
2
q
где K представляет собой -(CH)-;
каждый из q независимо представляет собой от 1 до 4;
14
Y представляет собой -O-, -S- или -N(R)-; и
14
13
t
R представляет собой водород, необязательно замещенный низший алкил или -S(O)R (где t равно 1 или 2).
В другом варианте осуществления соединения, представленные в настоящем описании, имеют формулу (VIa):
или представляют собой индивидуальный изомер, смесь изомеров, рацемическую смесь изомеров, сольват, пролекарство или находятся в виде его фармацевтически приемлемой соли, где переменные являются такими, как определено в настоящем изобретении.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (VII):
или его индивидуальный изомер, смесь изомеров, рацемическая смесь изомеров, сольват, пролекарство, или оно находится в виде его фармацевтически приемлемой соли, где переменные являются такими, как определено в настоящем изобретении.
1
2
3
4
4
4
В одном из вариантов осуществления -ZZZ-R представляет собой -NHC(O)NH-R или -C(O)NHR.
В другом аспекте здесь предусматривается соединение формулы (VIIa):
или его индивидуальный изомер, смесь изомеров, рацемическая смесь изомеров, сольват, пролекарство, или оно находится в виде его фармацевтически приемлемой соли, где переменные являются такими, как определено в настоящем изобретении.
Также интерес представляют любые фармацевтически приемлемые производные соединений, описанных здесь, включая, без ограничения, соли, сложные эфиры, простые енольные эфиры, сложные енольные эфиры, сольваты, гидраты и пролекарства соединений, описанных здесь.
Некоторые примеры соединений представлены в таблицах A, B и C, ниже:
Примеры соединений, представленные здесь, также включают в себя
3-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-морфолин-4-илэтил)пропионамид;
3-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-пиперидин-1-илэтил)пропионамид;
3-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-пирролидин-1-илэтил)пропионамид;
3-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-диэтиламиноэтил)пропионамид;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(4-метилпиперазин-1-ил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-(4-{7-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил}фенил)мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(2-пиперидин-1-илэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(3-морфолин-4-илпропокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-(4-{7-[3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропокси]бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил}фенил)мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-(4-{7-[3-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)пропокси]бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил}фенил)мочевину;
N-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-N'-(4-{7-[3-(4-этилпиперазин-1-ил)пропил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил}фенил)мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(3-морфолин-4-ил-3-оксопропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевину;
3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-1-метил-1-{4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевину;
N-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-морфолин-4-илбензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевину;
N-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(3-пиперидин-1-илпропил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевину;
N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[5-(2-морфолин-4-илэтокси)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевину;
2-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-морфолин-4-илэтил)ацетамид;
2-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-пиперидин-1-илэтил)ацетамид;
2-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-пирролидин-1-илэтил)ацетамид;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-(4-{7-[2-(4-этилпиперазин-1-ил)2-оксоэтил]бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил}фенил)мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-гидроксибензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-метоксибензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(2-диэтиламиноэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевину;
Этил {2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}ацетат;
3-{2-[4-({[(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}уксусную кислоту;
2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-иловый эфир пирролидин-2-карбоновой кислоты;
Этил 3-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил} амино)фенил]имидазо [2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}пропаноат;
3-{2-[4-({[(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}пропановую кислоту;
3-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N,N-диэтилпропионамид;
2-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-диэтиламиноэтил)ацетамид;
2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-иловый эфир 2-амино-3-метилмасляной кислоты;
1-(4-Бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-илфенил)-3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)мочевину;
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-фторбензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевину и
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-метилбензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевину.
В одном из вариантов осуществления соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными в способах модулирования активности подсемейства рецепторов фактора роста тромбоцитов (PDGFR), которые включают PDGFR α, PDGFR β, CSF-1R, c-kit и Flt3.
В одном из вариантов осуществления соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности подсемейства рецепторов киназы печени эмбриона ("flk"), которое включает в себя домен вставки киназы - киназу-1 рецептора печени эмбриона (KDR/FLK-1), flk-1R, flk-4 и fms-подобную тирозиновую киназу 1 (flt-1).
В другом аспекте соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности подсемейства рецепторных тирозиновых киназ "HER", которое включает в себя EGFR (рецептор эпителиального фактора роста), HER2, HER3 и HER4.
В другом аспекте соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности подсемейства рецепторов инсулина (IR), которое включает в себя инсулиноподобный рецептор фактора роста I (IGF-1R).
В одном из вариантов осуществления соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности подгруппы рецепторов васкулярного эндотелиального фактора роста ("VEGF").
В одном из вариантов осуществления соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности подгруппы рецепторов фактора роста фибробластов ("FGF"), которые включают в себя рецепторы FGFR1, FGFR2, FGFR3, и FGFR4 и лиганды, FGF1, FGF2, FGF3, FGF4, FGF5, FGF6 и FGF7.
В другом аспекте соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности семейства рецепторов c-Met.
В другом аспекте соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности семейства тирозиновых протеинкиназ Abl.
В одном из вариантов осуществления соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности рецепторной киназы fms-подобной тирозиновой киназы 3 (киназы FLT-3).
В одном из вариантов осуществления соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности подсемейства Src, которое включает в себя Src, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr и Yrk.
В одном из вариантов осуществления соединения и композиции, представленные в настоящем описании, являются эффективными для модулирования активности одной или нескольких киназ, выбранных из группы, состоящей из sterile 20, sterile 11, sterile, подсемейства camk (кальмодулин-регулируемые киназы и родственные киназы), подсемейства AGC (протеинкиназы A, протеинкиназы G и протеинкиназы C), подсемейства CMGC (cdk, киназы map, гликогеновые синтетаза киназы и clk), подсемейства sterile 20 и Frk, Btk, Csk, Abl, Zap70, Fes, Fps, Fak, Jak и Ack (и соответствующие их подсемейства).
В другом варианте осуществления здесь предусматриваются способы применения описанных соединений и композиций или их фармацевтически приемлемых солей, сольватов, гидратов или пролекарств для локального или системного лечения или профилактики заболеваний, расстройства и состояний у человека и животных, модулируемых или иным образом подвергающихся влиянию, опосредованных через активность киназы.
C. Приготовление фармацевтической композиции
Фармацевтические композиции, представленные в настоящем описании, содержат терапевтически эффективные количества одного или нескольких соединений, представленных в настоящем описании, которые являются пригодными для использования при предотвращении, лечении или облегчении заболеваний, опосредованных протеинкиназами, или одного или нескольких их симптомов.
Композиции содержат одно или несколько соединений, представленных в настоящем описании. Соединения могут быть включены в состав соответствующих фармацевтических препаратов, таких как растворы, суспензии, таблетки, диспергируемые таблетки, пилюли, капсулы, порошки, препараты с замедленным высвобождением или эликсиры для перорального введения или в стерильных растворах или суспензиях для парентерального введения, а также препаратов трансдермальных пластырей и сухих порошков для ингаляций. Как правило, соединения, описанные выше, приготавливаются в виде фармацевтических композиций с использованием технологий и процедур, хорошо известных в данной области.
В композициях эффективные концентрации одного или нескольких соединений или их фармацевтически приемлемых солей, сольватов, гидратов или пролекарств смешиваются с пригодным для использования фармацевтическим носителем или основой. Концентрации соединений в композициях являются эффективными для доставки количества, которое при введении лечит, предотвращает или ослабляет один или несколько симптомов заболеваний, опосредованных протеинкиназами.
Как правило, композиции приготавливают для введения в виде одной дозы. Для приготовления композиции некоторую массовую долю соединения растворяют, суспендируют, диспергируют или иным образом смешивают с основой при эффективной концентрации, так что состояние, которое лечится, ослабляется или облегчается. Фармацевтические носители или основы, пригодные для введения соединений, представленных в настоящем описании, включают в себя любые такие носители, известные в данной области как пригодные для использования в конкретном способе введения.
В дополнение к этому, соединения могут использоваться в виде единственного фармацевтически активного ингредиента в композиции или могут объединяться с другими активными ингредиентами. Липосомные суспензии, включая тканенаправленные липосомы, такие как опухоленаправленные липосомы, могут также быть пригодными в качестве фармацевтически приемлемых носителей. Они могут быть получены в соответствии со способами, известными специалисту в данной области. Например, могут быть получены липосомные препараты, как известно в данной области. Вкратце, липосомы, такие как многослойные везикулы (MLV), могут формироваться посредством сушки яичного фосфатидилхолина и фосфатидилсерина мозга (молярное отношение 7:3) на внутренних стенках колбы. Добавляют раствор соединения, предусмотренного здесь, в фосфатном солевом буфере, в котором отсутствуют двухвалентные катионы (PBS), и колбу встряхивают до тех пор, пока липидная пленка не диспергируется. Полученные везикулы промывают для удаления неинкапсулированного соединения, гранулируют посредством центрифугирования, а затем повторно суспендируют в PBS.
Активное соединение включается в фармацевтически приемлемый носитель в количестве, достаточном для оказания терапевтически полезного воздействия в отсутствие нежелательных побочных воздействий на пациента, которого лечат. Терапевтически эффективная концентрация может определяться эмпирически посредством исследования соединений в системах in vitro и in vivo, описанных здесь, а затем экстраполироваться по ним на дозы для людей.
Концентрация активного соединения в фармацевтической композиции будет зависеть от скоростей поглощения, дезактивации и экскреции активного соединения, физико-химических характеристик соединения, временного графика дозирования и вводимого количества, а также от других факторов, известных специалистам в данной области. Например, количество, которое доставляется, является достаточным для облегчения одного или нескольких симптомов заболеваний, опосредованных протеинкиназой.
Как правило, терапевтически эффективная доза должна давать концентрацию в сыворотке активного ингредиента примерно от 0,1 нг/мл примерно до 50-100 мкг/мл. Фармацевтические композиции, как правило, должны обеспечивать дозу примерно от 0,001 мг примерно до 2000 мг соединения на килограмм массы тела в день. Фармацевтические стандартные дозированные формы приготавливают для получения примерно от 1 мг примерно до 1000 мг, а в определенных вариантах осуществления примерно от 10 мг примерно до 500 мг, примерно от 20 мг примерно до 250 мг или примерно от 25 мг примерно до 100 мг главного активного ингредиента или сочетания главных ингредиентов на стандартную дозированную форму. В определенных вариантах осуществления фармацевтические стандартные дозированные формы приготавливают для получения примерно 1 мг, 20 мг, 25 мг, 50 мг, 100 мг, 250 мг, 500 мг, 1000 мг или 2000 мг главного активного ингредиента. В определенных вариантах осуществления, фармацевтические стандартные дозированные формы приготавливают для получения примерно 50 мг главного активного ингредиента.
Активный ингредиент может вводиться за один раз или может разделяться на некоторое количество более мелких доз, которые должны вводиться через некоторые интервалы времени. Понятно, что точная дозировка и продолжительность лечения являются функцией заболевания, которое лечится, и могут определяться эмпирически с использованием известных протоколов исследований или посредством экстраполяции данных исследований in vivo или in vitro. Необходимо отметить, что концентрации и величины доз могут также изменяться вместе с тяжестью состояния, которое должно облегчаться. Кроме того, необходимо понять, что для любого конкретного субъекта конкретные режимы дозирования должны регулироваться по времени в соответствии с индивидуальной потребностью и с профессиональным суждением лица, осуществляющего введение или руководящего введением композиций, и что пределы концентраций, приводимые здесь, являются только примерными и не предназначены для ограничения рамок или осуществления заявляемых композиций.
Фармацевтически приемлемые производные включают в себя кислоты, основания, простые эфиры и сложные енольные эфиры, соли, сложные эфиры, гидраты, сольваты и формы пролекарств. Производное выбирают таким образом, что фармакокинетические свойства превосходят соответствующее нейтральное соединение.
Таким образом, эффективные концентрации или количества одного или нескольких соединений, описанных здесь, или их фармацевтически приемлемых производных смешиваются с соответствующим фармацевтическим носителем или основой для системного, местного или локального введения с образованием фармацевтических композиций. Соединения включаются в количестве, эффективном для облегчения одного или нескольких симптомов, или для лечения или предотвращения заболеваний, опосредованных протеинкиназами. Концентрация активного соединения в композиции будет зависеть от скоростей поглощения, дезактивации, экскреции активного соединения, временного графика введения, вводимого количества, конкретного препарата, а также других факторов, известных специалистам в данной области.
Композиции предназначаются для введения обычными способами, включая, но не ограничиваясь этим, пероральный, парентеральный, ректальный, местный и локальный. Для перорального введения могут приготавливаться капсулы и таблетки. Композиции находятся в жидкой, полужидкой или твердой форме и приготавливаются способом, пригодным для каждого вида введения.
Растворы или суспензии, используемые для парентерального, интрадермального, подкожного или местного применения, могут содержать любой из следующих компонентов: стерильный разбавитель, такой как вода для инъекций, солевой раствор, фиксированное масло, полиэтиленгликоль, глицерин, пропиленгликоль, диметилацетамид или другой синтетический растворитель; противомикробные агенты, такие как бензиловый спирт и метилпарабены; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота и бисульфит натрия; хелатирующие агенты, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA); буферы, такие как ацетаты, цитраты и фосфаты; и агенты для регулировки тоничности, такие как хлорид натрия или декстроза. Парентеральные препараты могут заключаться в ампулы, одноразовые шприцы или флаконы на одну или множество доз, изготовленные из стекла, пластика или другого соответствующего материала.
В случаях, в которых соединения демонстрируют недостаточную растворимость, могут использоваться способы солюбилизации соединений. Такие способы известны специалистам в данной области и включают в себя, но не ограничиваясь этим, использование сорастворителей, таких как диметилсульфоксид (ДМСО), использование поверхностно-активных веществ, таких как TWEEN, или растворение в водном растворе бикарбоната натрия.
При смешивании или добавлении соединения (соединений), полученная смесь может представлять собой раствор, суспензию, эмульсию или что-либо подобное. Форма полученной смеси зависит от ряда факторов, включая предполагаемый способ введения и растворимости соединений в выбранном носителе или основе. В одном из вариантов осуществления эффективная концентрация является достаточной для ослабления симптомов заболевания, расстройства или состояния, которое лечится, и может определяться эмпирически.
Фармацевтические композиции предусматриваются для введения людям и животным в стандартных дозированных формах, таких как таблетки, капсулы, пилюли, порошки, гранулы, стерильные парентеральные растворы или суспензии и пероральные растворы или суспензии, и эмульсии масло-вода, содержащие соответствующее количество соединений или их фармацевтически приемлемых производных. Фармацевтические терапевтически активные соединения и их производные, как правило, приготавливаются и вводятся в стандартной дозированной форме или в форме с множеством доз. Стандартные дозированные формы, как здесь используется, относятся к физически отдельным единицам, пригодным для субъектов людей и животных и упакованным индивидуально, как известно в данной области. Каждая единичная доза содержит заданное количество терапевтически активного соединения, достаточного для получения желаемого терапевтического воздействия, в ассоциации с фармацевтическим носителем, основой или разбавителем. Примеры стандартных дозированных форм включают в себя ампулы и шприцы и индивидуально упакованные таблетки или капсулы. Стандартные дозированные формы могут вводиться частями или во множестве частей. Форма с множеством доз представляет собой множество идентичных стандартных дозированных форм, упакованных в один контейнер, для введения в виде отдельных стандартных дозированных форм. Примеры форм с множеством доз включают в себя флаконы, бутылки с таблетками или капсулами или бутылки емкостью в пинты или галлоны. Следовательно, форма с множеством доз представляет собой множество единичных доз, которые не разделяются в упаковках.
Препараты с замедленным высвобождением могут также быть получены. Соответствующие примеры препаратов с замедленным высвобождением включают в себя полупроницаемые матрицы твердых гидрофобных полимеров, содержащие соединение, представленное в настоящем описании, эти матрицы находятся в форме формованных изделий, например пленок или микрокапсул. Примеры матриц с замедленным высвобождением включают в себя сложные полиэфиры, гидрогели (например, поли(2-гидроксиэтилметакрилат), или поли(виниловый спирт)), полилактиды, сополимеры L-глютаминой кислоты и этил-L-глютамата, недеградируемого этилена-винилацетата, деградируемые сополимеры молочной кислоты - гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPOT™ (микросферы для инъекций, состоявшие из сополимера молочной кислоты - гликолевой кислоты и лепролида ацетата), и поли-D-(-)-3-гидроксимасляную кислоту. Хотя полимеры, такие как этилен-винилацетат и молочная кислота - гликолевая кислота, делают возможным высвобождение молекул в течение более 100 дней, определенные гидрогели высвобождают белки в течение более коротких периодов времени. Когда инкапсулированные соединения остаются в организме в течение продолжительного времени, они могут денатурировать или агрегировать в результате экспонирования для влажности при 37ºC, что приводит к потере биологической активности и возможных изменений в их структуре. Могут быть разработаны рациональные стратегии стабилизации в зависимости от используемого механизма действия. Например, если механизм агрегации, как обнаружено, представляет собой образование межмолекулярных S-S связей посредством тио-дисульфидного обмена, стабилизация может достигаться посредством модификации сульфгидрильных остатков, лиофилизации из кислотных растворов, контроля содержания влажности, использования соответствующих добавок и разработки конкретных композиций полимерной матрицы.
Могут быть получены дозированные формы или композиции, содержащие активный ингредиент в пределах от 0,005% до 100%, при этом остаток состоит из нетоксичного носителя. Для перорального введения фармацевтически приемлемая нетоксичная композиция формируется посредством инкорпорирования любого из обычно используемых наполнителей, таких, например, как фармацевтические сорта маннита, лактозы, крахмала, стеарата магния, талька, производных целлюлозы, натрийкросскармелозы, глюкозы, сахарозы, карбоната магния или сахарина натрия. Такие композиции включают в себя растворы, суспензии, таблетки, капсулы, порошки и препараты с замедленным высвобождением, такие как, но не ограничиваясь этим, импланты и микроинкапсулированные системы доставки и биологически деградируемые, биологически совместимые полимеры, такие как коллаген, этилен-винилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, сложные полиортоэфиры, полимолочная кислота и другие. Способы получения этих композиций известны специалистам в данной области. Рассматриваемые композиции могут содержать примерно 0,001%-100% активного ингредиента, в определенных вариантах осуществления примерно 0,1-85%, как правило, примерно 75-95%.
Активные соединения или фармацевтически приемлемые производные могут быть получены с носителями, которые защищают соединение против быстрого выделения из организма, такими как препараты с распределенным по времени высвобождением, или покрытия.
Композиции могут содержать другие активные соединения для получения желаемого сочетания свойств. Соединения, представленные в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемые производные, как здесь описывается, могут также преимущественно вводиться для терапевтических или профилактических целей вместе с другим фармакологическим агентом, который, как известно в данной области, имеет ценность при лечении одного или нескольких заболеваний или медицинских состояний, упоминаемых выше, таких как заболевания, опосредованные протеинкиназами. Необходимо понять, что такая комбинированная терапия составляет дополнительный аспект композиций и способов лечения, представленных в настоящем описании.
1. Композиции для перорального введения
Пероральные фармацевтические дозированные формы представляют собой либо твердые продукты, гели, либо жидкости. Твердые дозированные формы представляют собой таблетки, капсулы, гранулы и объемные порошки. Типы пероральных таблеток включают в себя прессованные, жевательные лепешки и таблетки, которые могут иметь энтеральное покрытие, сахарное покрытие или пленочное покрытие. Капсулы могут представлять собой твердые или мягкие желатиновые капсулы, в то время как гранулы и порошки могут предусматриваться в нешипучей или шипучей форме вместе с сочетанием других ингредиентов, известных специалистам в данной области.
В определенных вариантах осуществления препараты представляют собой твердые дозированные формы, такие как капсулы или таблетки. Таблетки, пилюли, капсулы, пастилки и тому подобное могут содержать любой из следующих ингредиентов или соединений сходной природы: связывающее вещество; разбавитель; разрыхляющий агент; смазывающее вещество; глидант; подслащивающий агент и ароматизирующий агент.
Примеры связывающих веществ включают в себя микрокристаллическую целлюлозу, смолу трагаканта, раствор глюкозы, смолу акации, раствор желатина, сахарозу и крахмальную пасту. Смазывающие вещества включают в себя тальк, крахмал, стеарат магния или кальция, ликоподий и стеариновую кислоту. Разбавители включают в себя, например, лактозу, сахарозу, крахмал, каолин, соль, маннит и дикальцийфосфат. Глиданты включают в себя, но не ограничиваясь этим, коллоидную двуокись кремния. Разрыхляющие агенты включают в себя натрийкросскармелозу, натрийкрахмалгликолят, альгиновую кислоту, кукурузный крахмал, картофельный крахмал, бентонит, метилцеллюлозу, агар и карбоксиметилцеллюлозу. Подкрашивающие агенты включают в себя, например, любой из одобренных сертифицированных водорастворимых красителей FD и C, их смеси и водонерастворимые красители FD и C, суспендированные на гидрате окиси алюминия. Подслащивающие агенты включают в себя сахарозу, лактозу, маннит и искусственные подслащивающие агенты, такие как сахарин, и любое количество высушенных распылением ароматизаторов. Ароматизирующие агенты включают в себя природные ароматы, экстрагированные из растений, таких как фрукты, и синтетические смеси соединений, которые производят приятные ощущения, таких как, но не ограничиваясь этим, перечная мята и метилсалицилат. Смачивающие агенты включают в себя моностеарат пропиленгликоля, сорбитанмоноолеат, монолаурат диэтиленгликоля и простой полиоксиэтиленлауриловый эфир. Рвотные покрытия включают в себя жирные кислоты, жиры, воски, шеллак, аммониированный шеллак и ацетатфталаты целлюлозы. Пленочные покрытия включают в себя гидроксиэтилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль 4000 и ацетатфталат целлюлозы.
Если является желательным пероральное введение, соединение должно создаваться в композиции, которая защищает его от кислотной окружающей среды желудка. Например, композиция может приготавливаться в энтеральном покрытии, которое поддерживает его целостность в желудке и высвобождает активное соединение в кишечнике. Композиция может также приготавливаться в сочетании с антацидом или другим таким ингредиентом.
Когда стандартная дозированная форма представляет собой капсулу, она может содержать, в дополнение к материалу указанного выше типа, жидкий носитель, такой как жирное масло. В дополнение к этому, стандартная дозированная форма может содержать различные другие материалы, которые модифицируют физическую форму стандартной дозированной формы, например покрытие из сахара и других энтеральных агентов. Соединения могут также вводиться как компонент эликсира, суспензии, сиропа, вафли, шипучего напитка, жевательной резинки или чего-либо подобного. Сироп может содержать, в дополнение к активным соединениям, сахарозу как подслащивающий агент и определенные консерванты, красители и подкрашивающие вещества, и ароматизаторы.
Активные материалы могут также смешиваться с другими активными материалами, которые не ослабляют желаемого действия, или с материалами, которые поддерживают желаемое действие, такими как антациды, блокаторы H2 и диуретики. Активный ингредиент представляет собой соединение или его фармацевтически приемлемое производное, как описывается здесь. Могут включаться более высокие концентрации, примерно до 98% мас. активного ингредиента.
Фармацевтически приемлемые носители, включаемые в таблетки, представляют собой связывающие вещества, смазывающие вещества, разбавители, разрыхляющие агенты, подкрашивающие агенты, ароматизирующие агенты и смачивающие агенты. Таблетки с энтеральным покрытием благодаря энтеральному покрытию противостоят действию желудочного сока и растворяются или разрыхляются в нейтральном или щелочном кишечнике. Таблетки с сахарным покрытием представляют собой прессованные таблетки, на которые наносятся различные слои фармацевтически приемлемых веществ. Таблетки с пленочными покрытиями представляют собой прессованные таблетки, на которые наносится полимер или другое пригодное для использования покрытие. Многократно прессованные таблетки представляют собой прессованные таблетки, изготовленные с помощью более чем одного цикла прессования с использованием фармацевтически приемлемых веществ, рассмотренных ранее. Подкрашивающие агенты могут также использоваться в указанных выше дозированных формах. Ароматизирующие и подслащивающие агенты используются в прессованных таблетках, таблетках с сахарным покрытием, многократно прессованных таблетках и жевательных таблетках. Ароматизирующие и подслащивающие агенты являются особенно пригодными при формировании жевательных таблеток и лепешек.
Жидкие пероральные дозированные формы включают в себя водные растворы, эмульсии, суспензии, растворы и/или суспензии, разведенные из нешипучих гранул, и шипучие препараты, разведенные из шипучих гранул. Водные растворы включают в себя, например, эликсиры и сиропы. Эмульсии представляют собой либо масло-в-воде, либо вода-в-масле.
Эликсиры представляют собой прозрачные, подслащенные, водноспиртовые препараты. Фармацевтически приемлемые носители, используемые в эликсирах, включают в себя растворители. Сиропы представляют собой концентрированные водные растворы сахара, например, сахарозы, и могут содержать консервант. Эмульсия представляет собой двухфазную систему, в которой одна жидкость диспергируется в форме малых глобул в другой жидкости. Фармацевтически приемлемые носители, используемые в эмульсиях, представляют собой неводные жидкости, эмульсифицирующие агенты и консерванты. Суспензии используют фармацевтически приемлемые суспендирующие агенты и консерванты. Фармацевтически приемлемые вещества, используемые в нешипучих гранулах, для разведения в виде жидкой пероральной дозированной формы, включают в себя разбавители, подслащивающие агенты и смачивающие агенты. Фармацевтически приемлемые вещества, используемые в шипучих гранулах для разведения в виде жидкой перорально дозируемой формы, включают в себя органические кислоты и источник двуокиси углерода. Подкрашивающие агенты и ароматизирующие агенты используются во всех указанных выше дозированных формах.
Растворители включают в себя глицерин, сорбит, этиловый спирт и сироп. Примеры консервантов включают в себя глицерин, метил- и пропилпарабен, бензойную кислоту, бензоат натрия и спирт. Примеры неводных жидкостей, используемых в эмульсиях, включают в себя минеральное масло и хлопковое масло. Примеры эмульсифицирующих агентов включают в себя желатин, смолу акации, смолу трагаканта, бентонит и поверхностно-активные вещества, такие как полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат. Суспендирующие агенты включают в себя натрийкарбоксиметилцеллюлозу, пектин, смолу трагаканта, веегам и смолу акации. Разбавители включают в себя лактозу и сахарозу. Подслащивающие агенты включают в себя сахарозу, сиропы, глицерин и искусственные подслащивающие агенты, такие как сахарин. Смачивающие агенты включают в себя моностеарат пропиленгликоля, сорбитанмоноолеат, монолаурат диэтиленгликоля и простой полиоксиэтиленлауриловый эфир. Органические добавки включают в себя лимонную и винную кислоту. Источники двуокиси углерода включают в себя бикарбонат натрия и карбонат натрия. Подкрашивающие агенты включают в себя любые одобренные сертифицированные водорастворимые красители FD и C и их смеси. Ароматизирующие агенты включают в себя природные ароматы, экстрагируемые из растений, таких как фрукты, и смеси синтетических соединений, которые дают ощущение приятного вкуса.
Для твердой дозированной формы раствор или суспензия, например, в пропиленкарбонате, растительных маслах или триглицеридах, инкапсулируются в желатиновую капсулу. Для жидкой дозированной формы раствор, например, в полиэтиленгликоле, может разбавляться достаточным количеством фармацевтически приемлемого жидкого носителя, например, воды, для легкого отмеривания с целью введения.
Альтернативно, жидкие или полутвердые пероральные препараты могут быть получены посредством растворения или диспергирования активного соединения или соли в растительных маслах, гликолях, триглицеридах, сложных пропиленгликолевых эфирах (например, в пропиленкарбонате) и в других таких носителях, и инкапсулирования этих растворов или суспензий в твердых или мягких оболочках желатиновых капсул. Другие пригодные для использования препараты включают в себя, но не ограничиваясь этим, препараты, содержащие соединение, представленное в настоящем описании, диалкилированный моно- или полиалкиленгликоль, включая, но не ограничиваясь этим, 1,2-диметоксиметан, диглим, триглим, тетраглим, простой диметиловый эфир полиэтиленгликоля-350, простой диметиловый эфир полиэтиленгликоля-550, простой диметиловый эфир полиэтиленгликоля-750, где 350, 550 и 750 относится к примерной средней молекулярной массе полиэтиленгликоля, и один или несколько антиоксидантов, таких как бутилированный гидрокситолуол (BHT), бутилированный гидроксианизол (BHA), пропилгаллат, витамин E, гидрохинон, гидроксикумарины, этаноламин, лецитин, цефалин, аскорбиновая кислота, яблочная кислота, сорбит, фосфорная кислота, тиодипропионовая кислота и их сложные эфиры, и дитиокарбаматы.
Другие препараты включают в себя, но не ограничиваясь этим, водноспиртовые растворы, содержащие фармацевтически приемлемый ацеталь. Спирты, используемые в этих препаратах, представляют собой любые фармацевтически приемлемые смешиваемые с водой растворители, имеющие одну или несколько гидроксильных групп, включая, но не ограничиваясь этим, пропиленгликоль и этанол. Ацетали включают в себя, но не ограничиваясь этим, ди(низший алкил)ацетали низших алкилальдегидов, такие как ацетальдегид диэтилацеталь.
Во всех вариантах осуществления препараты таблеток и капсул могут иметь покрытие, как известно специалисту в данной области, для модифицирования или замедления растворения активного ингредиента. Таким образом, например, они могут покрываться обычным перевариваемым в кишечнике покрытием, таким как фенилсалицилат, воски и ацетатфталат целлюлозы.
2. Препараты для инъекций, растворы и эмульсии
Парентеральное введение, как правило, отличающееся инъекцией, либо подкожной, либо внутримышечной, либо внутривенной, также рассматривается здесь. Препараты для инъекций могут приготавливаться в обычных формах, либо как жидкие растворы или суспензии, либо как твердые формы, пригодные для растворения или суспендирования в жидкости перед инъекцией, либо в виде эмульсий. Пригодные для использования наполнители представляют собой, например, воду, солевой раствор, декстрозу, глицерин или этанол. В дополнение к этому, если это желательно, фармацевтические композиции для введения могут также содержать малые количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульсифицирующие агенты, буферные агенты для установления pH, стабилизаторы, усилители растворимости и другие агенты, такие, например, как ацетат натрия, сорбитанмонолаурат, триэтаноламинолеат и циклодекстрины. В одном из вариантов осуществления композиция вводится как водный раствор с гидроксипропил-бета-циклодекстрином (HPBCD) в качестве наполнителя. В одном из вариантов осуществления водный раствор содержит примерно от 1% примерно до 50% HPBCD. В одном из вариантов осуществления водный раствор содержит примерно 1%, 3%, 5%, 10% или примерно 20% HPBCD.
Имплантирование системы с медленным высвобождением или с замедленным высвобождением, такие, что поддерживается постоянный уровень дозирования, также рассматриваются здесь. Вкратце, соединение, представленное в настоящем описании, диспергируется в твердой внутренней матрице, например в полиметилметакрилате, полибутилметакрилате, пластифицированном или непластифицированном поливинилхлориде, пластифицированном нейлоне, пластифицированном полиэтилентерефталате, природном каучуке, полиизопрене, полиизобутилене, полибутадиене, полиэтилене, сополимерах этилен-винилацетат, силиконовых каучуках, полидиметилсилоксанах, сополимерах силикон-карбонат, гидрофильных полимерах, таких как гидрогели сложных эфиров акриловой и метакриловой кислоты, коллагене, поперечно-сшитом поливиниловом спирте и поперечно-сшитом частично гидролизованном поливинилацетате, который окружен внешней полимерной мембраной, например, полиэтиленом, полипропиленом, сополимерам этилен/пропилен, сополимерами этилен/этилакрилат, сополимерами этилен/винилацетат, силиконовыми каучуками, полидиметилсилоксанами, неопреновым каучуком, хлорированным полиэтиленом, поливинилхлоридом, сополимерами винилхлорида с винилацетатом, винилиденхлоридом, этиленом и пропиленом, иономерным полиэтилентерефталатом, бутиловым каучуком, эпихлоргидриновыми каучуками, сополимером этилен/виниловый спирт, терполимером этилен/винилацетат/виниловый спирт и сополимером этилен/винилоксиэтанол, которые нерастворимы в телесных жидкостях. Соединение диффундирует сквозь наружную полимерную мембрану на стадии контроля скорости высвобождения. Процент активного соединения, содержащегося в таких парентеральных композициях, сильно зависит от их конкретной природы, а также от активности соединения и потребностей субъекта.
Парентеральное введение композиций включает в себя внутривенное, подкожное и внутримышечное введение. Препараты для парентерального введения включают в себя стерильные растворы, готовые для инъекции, стерильные сухие растворимые продукты, такие как лиофилизированные порошки, готовые для объединения с растворителем непосредственно перед использованием, включая гиподермические таблетки, стерильные суспензии, готовые для инъекции, стерильные сухие нерастворимые продукты, готовые для объединения с основой непосредственно перед использованием, и стерильные эмульсии. Растворы могут быть либо водными, либо неводными.
Если они вводятся внутривенно, пригодные для использования носители включают в себя физиологический раствор или раствор фосфатного буфера (PBS), и растворы, содержащие загущающие и солюбилизирующие агенты, такие как глюкоза, полиэтиленгликоль и полипропиленгликоль, и их смеси.
Фармацевтически приемлемые носители, используемые в парентеральных препаратах, включают в себя водные основы, неводные основы, противомикробные агенты, изотонические агенты, буферы, антиоксиданты, локальные анестетики, суспендирующие и диспергирующие агенты, эмульсифицирующие агенты, секвестрирующие или хелатирующие агент, и другие фармацевтически приемлемые вещества.
Примеры водных основ включают в себя раствор хлорида натрия для инъекций, раствор Рингера для инъекций, изотонический раствор декстрозы для инъекций, стерильную воду для инъекций, декстрозный и лактатный растворы Рингера для инъекций. Неводные парентеральные основы включают в себя фиксированные масла растительного происхождения, хлопковое масло, кукурузное масло, кунджутное масло и арахисовое масло. Противомикробные агенты в бактериостатических или фунгистатических концентрациях должны добавляться к парентеральным препаратам, упакованным в контейнеры с множеством доз, они включают в себя фенолы или крезолы, соединения ртути, бензиловый спирт, хлорбутанол, сложные эфиры метил- и пропил-п-гидроксибензойной кислоты, тимерозаль, хлорид бензалкония и хлорид бензэтония. Изотонические агенты включают в себя хлорид натрия и декстрозу. Буферы включают в себя фосфатный и цитратный буфер. Антиоксиданты включают в себя бисульфат натрия. Локальные анестетики включают в себя гидрохлорид прокаина. Суспендирующие и диспергирующие агенты включают в себя натрийкарбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу и поливинилпирролидон. Эмульсифицирующие агенты включают в себя Полисорбат 80 (TWEEN 80). Секвестрирующие или хелатирующие агенты для ионов металлов включают в себя EDTA. Фармацевтические носители также включают в себя этиловый спирт, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль для смешиваемых с водой основ, и гидроксид натрия, хлористоводородную кислоту, лимонную кислоту или молочную кислоту для установления pH.
Концентрация фармацевтически активного соединения подбирается таким образом, что инъекция обеспечивает эффективное количество для создания желаемого фармакологического воздействия. Точная доза зависит от возраста, массы и состояния пациента или животного, как известно в данной области.
Препараты в виде стандартных единичных доз для парентерального введения упаковываются в ампулу, флакон или шприц с иглой. Все препараты для парентерального введения должны быть стерильными, как известно и как осуществляется в данной области.
Иллюстративно, внутривенное или внутриартериальное вливание стерильного водного раствора, содержащего активное соединение, представляет собой эффективный способ введения. Другой вариант осуществления представляет собой стерильный водный или масляный раствор или суспензию, содержащий активный материал, инъекция которого делается при необходимости для создания желаемого фармакологического воздействия.
Препараты для инъекций создаются для локального и системного введения. Как правило, терапевтически эффективная доза приготавливается, чтобы она содержала концентрацию, по меньшей мере, примерно от 0,1% мас./мас. примерно до 90% мас./мас. или более, например, более чем 1% мас./мас. активного соединения по отношению к ткани (тканям), которая лечится. Активный ингредиент может вводиться за один раз или может разделяться на некоторое количество меньших доз, чтобы вводиться через некоторые интервалы времени. Понятно, что конкретная доза и длительность лечения является функцией ткани, которая лечится, и может определяться эмпирически с использованием известных протоколов исследований или посредством экстраполяции от данных исследований in vivo или in vitro. Необходимо отметить, что значения концентраций и доз также могут изменяться с возрастом индивидуума, который лечится. Кроме того, необходимо понять, что для любого конкретного субъекта конкретные режимы дозирования должны подбираться по времени в соответствии с индивидуальной потребностью и профессиональным суждением лица, осуществляющего введение или руководящего введением препаратов, и что пределы концентраций, приведенные здесь, являются только примерными и не предназначены для ограничения рамок или практики использования препаратов, указанных в формуле изобретения.
Соединение может суспендироваться в микронизированной или другой пригодной для использования форме или может дериватизироваться для получения более растворимого активного продукта или для получения пролекарства. Форма получаемой смеси зависит от ряда факторов, включая предлагаемый способ введения и растворимость соединения в выбранном носителе или основе. Эффективная концентрация является достаточной для облегчения симптомов состояния и может определяться эмпирически.
3. Лиофилизированные порошки
Также представляют интерес лиофилизированные порошки, которые могут разводиться для введения как растворы, эмульсии и другие смеси. Они могут также разводиться и приготавливаться в виде твердых продуктов или гелей.
Стерильный, лиофилизированный порошок приготавливают посредством растворения соединения, предусмотренного здесь, или его фармацевтически приемлемого производного, в соответствующем растворителе. Растворитель может содержать наполнитель, который улучшает стабильность, или другой фармакологический компонент порошка или разведенного раствора, полученного из порошка. Наполнители, которые могут использоваться, включают в себя, но не ограничиваясь этим, декстрозу, сорбитал, фруктозу, кукурузный сироп, ксилит, глицерин, глюкозу, сахарозу, гидроксипропил-бета-циклодекстрин (HPBCD) или другой пригодный для использования агент. Растворитель может также содержать буфер, такой как цитратный буфер, натрий- или калийфосфатный буфер или другой такой буфер, известный специалистам в данной области, как правило, примерно при нейтральных значениях pH. Последующее стерильное фильтрование раствора, а затем лиофилизация при стандартных условиях, известных специалистам в данной области, дает желаемый препарат. Как правило, полученный раствор будет распределяться порциями во флаконы для лиофилизации. Каждый флакон будет содержать одну дозу (10-1000 мг, 100-500 мг, 10-500 мг, 50-250 мг или 25-100 мг) или множество доз соединения. Лиофилизированный порошок может храниться при соответствующих условиях, например, примерно при температуре от 4ºC до комнатной температуры.
Разведение этого лиофилизированного порошка водой для инъекций дает препарат для использования при парентеральном введении. Для разведения добавляют примерно 1-50 мг, примерно 5-35 мг или примерно 9-30 мг лиофилизированного порошка на мл стерильной воды или другого пригодного для использования носителя. Точное количество зависит от выбранного соединения. Такое количество может определяться эмпирически.
4. Местное введение
Смеси для местного введения приготавливают, как описано для локального и системного введения. Полученная смесь может представлять собой раствор, суспензию, эмульсии или что-либо подобное, и могут приготавливаться в виде кремов, гелей, мазей, эмульсий, растворов, эликсиров, лосьонов, суспензий, микстур, паст, пен, аэрозолей, полосканий, спреев, суппозиториев, повязок, дермальных пластырей или любых других препаратов, пригодных для местного введения.
Соединения или их фармацевтически приемлемые производные могут приготавливаться как аэрозоли для местного нанесения, например, посредством ингаляций. Эти препараты для введения в респираторный тракт могут находиться в форме аэрозоля или раствора для небулайзера или в виде дисперсного порошка микронных размеров для инсуффляции, сами по себе или в сочетании с инертным носителем, таким как лактоза. В таком случае частицы препарата, как правило, будут иметь диаметры меньшие, чем 50 микрон или меньшие, чем 10 микрон.
Соединения могут приготавливаться для локального или местного нанесения, например для местного нанесения на кожу и слизистые мембраны, например глаза, в форме гелей, кремов и лосьонов и для нанесения на глаз или для интрацистернального или интраспинального применения. Местное введение предполагается для трансдермальной доставки, а также для введения в глаза или на слизистые, или для ингаляционной терапии. Назальные растворы активного соединения, самого по себе или в сочетании с другими фармацевтически приемлемыми наполнителями, также могут вводиться.
Эти растворы, особенно те, которые предназначаются для офтальмологического применения, могут приготавливаться в виде 0,01%-10% изотонических растворов, с pH примерно 5-7, с соответствующими солями.
5. Композиции для других способов введения
Другие способы введения, такие как местное нанесение, трансдермальные пластыри и ректальное введение, также предполагаются здесь.
Например, фармацевтические дозированные формы для ректального введения представляют собой ректальные суппозитории, капсулы и таблетки для системного воздействия. Ректальные суппозитории, как здесь используется, означают твердые тела для введения в задний проход, которые плавятся или размягчаются при температуре тела, высвобождая один или несколько фармакологически или терапевтически активных ингредиентов. Фармацевтически приемлемые вещества, используемые в ректальных суппозиториях, представляют собой основы или носители и агенты для повышения температуры плавления. Примеры основ включают в себя масло какао (какао-масло), глицерин-желатин, карбовоск (полиоксиэтиленгликоль) и соответствующие смеси моно-, ди- и триглицеридов жирных кислот. Могут использоваться сочетания различных основ. Агенты для повышения температуры плавления суппозиториев включают в себя спермацет и воск. Ректальные суппозитории могут быть получены либо посредством способа прессования, либо посредством формования. Типичная масса ректального суппозитория равна примерно 2-3 грамма.
Таблетки и капсулы для ректального введения производятся с использованием такого же фармацевтически приемлемого вещества и с помощью таких же способов, как и для препаратов для перорального введения.
6. Композиции с замедленным высвобождением
Активные ингредиенты, представленные в настоящем описании, могут вводиться с помощью средств с контролируемым высвобождением или с помощью устройств доставки, которые хорошо известны специалистам в данной области. Примеры включают в себя, но не ограничиваясь этим, те, которые описаны в патентах США №№: 3845770; 3916899; 3536809; 3598123; и 4008719, 5674533, 5059595, 5591767, 5120548, 5073543, 5639476, 5354556, 5639480, 5733566, 5739108, 5891474, 5922356, 5972891, 5980945, 5993855, 6045830, 6087324, 6113943, 6197350, 6248363, 6264970, 6267981, 6376461, 6419961, 6589548, 6613358, 6699500 и 6740634, каждый из которых включается сюда в качестве ссылок. Такие дозированные формы могут использоваться для обеспечения медленного или контролируемого высвобождения одного или нескольких активных ингредиентов с использованием, например, гидропропилметилцеллюлозы, других полимерных матриц, гелей, проницаемых мембран, осмотических систем, многослойных покрытий, микрочастиц, липосом, микросфер или их сочетания для обеспечения желаемого профиля высвобождения в различных пропорциях. Соответствующие препараты с контролируемым высвобождением, известные специалистам в данной области, включая те, которые описаны здесь, могут легко выбираться для использования вместе с активными ингредиентами, раскрытыми здесь.
Все фармацевтические продукты с контролируемым высвобождением имеют общую цель улучшения лекарственной терапии, по сравнению с той, которая достигается посредством их неконтролируемых аналогов. В идеале, использование оптимально сконструированного препарата с контролируемым высвобождением при медицинском лечении отличается использованием минимального количества лекарственного вещества, используемого для лечения или контроля состояния, за минимальное количество времени. Преимущества препаратов с контролируемым высвобождением включают в себя более продолжительную активность лекарственного средства, уменьшенную частоту дозирования и повышенную совместимость с пациентом. В дополнение к этому, препараты с контролируемым высвобождением могут использоваться для оказания влияния на время наступления действия или другие характеристики, такие как уровни лекарственного средства в крови, и могут таким образом влиять на возникновения побочных (например, отрицательных) воздействий.
Большинство препаратов с контролируемым высвобождением конструируется для высвобождения сначала некоторого количества лекарственного средства (активного ингредиента), которое быстро производит желаемое терапевтическое воздействие, и постепенного и непрерывного высвобождения других количеств лекарственного средства для поддержания этого уровня терапевтического или профилактического воздействия в течение продолжительного периода времени. Для поддержания этого постоянного уровня лекарственного средства в организме лекарственное средство должно высвобождаться из дозированной формы при скорости, которая будет возмещать то количество лекарственного средства, которое метаболизируется и выделяется из организма. Контролируемое высвобождение активного ингредиента может стимулироваться с помощью различных условий, включая, но не ограничиваясь этим, pH, температуру, ферменты, воду или другие физиологические состояния или соединения.
В определенных вариантах осуществления агент может вводиться с использованием внутривенного вливания, имплантируемого осмотического насоса, трансдермального пластыря, липосом или других способов введения. В одном из вариантов осуществления может использоваться насос. В другом варианте осуществления могут использоваться полимерные материалы. Еще в одном варианте осуществления система с контролируемым высвобождением может помещаться вблизи от терапевтической мишени, то есть, требуя, таким образом, только части системной дозы. В некоторых вариантах осуществления устройство с контролируемым высвобождением вводится субъекту вблизи места несоответствующей иммунной активации или опухоли. Активный ингредиент может диспергироваться в твердой внутренней матрице, например, полиметилметакрилате, полибутилметакрилате, пластифицированном или непластифицированном поливинилхлориде, пластифицированном нейлоне, пластифицированном полиэтилентерефталате, природном каучуке, полиизопрене, полиизобутилене, полибутадиене, полиэтилене, сополимерах этилен-винилацетат, силиконовых каучуках, полидиметилсилоксанах, сополимерах силикона и карбоната, гидрофильных полимерах, таких как гидрогели сложных эфиров акриловой и метакриловой кислоты, коллагене, поперечно-сшитом поливиниловом спирте и поперечно-сшитом частично гидролизованном поливинилацетате, которая окружается внешней полимерной мембраной, например, полиэтиленом, полипропиленом, сополимерами этилен/пропилен, сополимерами этилен/этилакрилат, сополимерами этилен/винилацетат, силиконовыми каучуками, полидиметилсилоксанами, неопреновым каучуком, хлорированным полиэтиленом, поливинилхлоридом, сополимерами винилхлорида с винилацетатом, винилиденхлоридом, этиленом и пропиленом, иономерным полиэтилентерефталатом, бутиловым каучуком, эпихлоргидриновыми каучуками, сополимером этилен/виниловый спирт, терполимером этилен/винилацетат/виниловый спирт и сополимером этилен/винилоксиэтанол, который является нерастворимым в телесных жидкостях. Затем активный ингредиент диффундирует через наружную полимерную мембрану на стадии контроля скорости высвобождения. Процент активного ингредиента, содержащийся в таких парентеральных композициях, сильно зависит от его конкретной природы, а также от потребностей субъекта.
7. Препараты направленного действия
Соединения, представленные в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемые производные, могут также приготавливаться для нацеливания на конкретную ткань, рецептор или другую область организма субъекта, который должен лечиться. Множество таких способов нацеливания хорошо известны специалистам в данной области. Все такие способы нацеливания предполагаются здесь для использования в настоящих композициях. Относительно неограничивающих примеров способов нацеливания, см., например, патенты США №№ 6316652, 6274552, 6271359, 6253872, 6139865, 6131570, 6120751, 6071495, 6060082, 6048736, 6039975, 6004534, 5985307, 5972366, 5900252, 5840674, 5759542 и 5709874.
В одном из вариантов осуществления суспензии липосом, включая тканенаправленные липосомы, такие как опухоленаправленные липосомы, также могут быть пригодными в качестве фармацевтически приемлемых носителей. Они могут быть получены в соответствии со способами, известными специалистам в данной области. Вкратце, липосомы, такие как многослойные везикулы (MLV), могут формироваться посредством сушки яичного фосфатидилхолина и фосфатидилсерина мозга (молярное отношение 7:3) на внутренних стенках колбы. Раствор соединения, предусмотренного здесь, в фосфатном солевом буфере, где нет двухвалентных катионов (PBS), добавляют и колбу встряхивают до тех пор, пока липидная пленка не диспергируется. Полученные везикулы промывают для удаления неинкапсулированного соединения, гранулируют посредством центрифугирования, а затем повторно суспендируют в PBS.
D. Оценка активности соединений
Стандартные физиологические, фармакологические и биохимические процедуры являются доступными для исследования соединений, с целью идентификации тех из них, которые обладают биологическими активностями, которые селективно модулируют активность киназ.
Такие анализы включают в себя, например, биохимические анализы, такие как анализы связывания, анализы инкорпорирования радиоактивности, анализы поляризации флюоресценции, анализы на основе резонансного переноса энергии флюоресценции (FRET) (см., в целом, Glickman et al., J. Biomolecular Screening, 7 No. 1 3-10 (2002)), а также множество анализов на клеточной основе.
Системы высокопроизводительного скрининга являются коммерчески доступными (см., например, Zymark Corp., Hopkinton, MA; Air Technical Industries, Mentor, OH; Beckman Instruments Inc., Fullerton, CA; Precision Systems, Inc., Natick, MA), и они делают возможным осуществление этих анализов в высокопроизводительном режиме. Эти системы, как правило, автоматизируют процедуры полностью, включая все пипетирование образца и реагентов, распределение жидкостей, распределенные во времени инкубирования и конечное считывание микропланшета в детекторе (детекторах), соответствующем анализу. Эти конфигурируемые системы обеспечивают высокопроизводительную и быструю первую стадию, а также высокий уровень гибкости и точной настройки. Производители таких систем поставляют подробные протоколы для различных высокопроизводительных систем. Так, например, Zymark Corp. выпускает технические бюллетени, описывающие системы скрининга для детектирования модулирования транскрипции генов, связывания лигандов, и тому подобное.
В одном из вариантов осуществления ингибирование определяется in vitro. В одном из конкретных вариантов осуществления ингибирование оценивается с помощью анализа фосфорилирования. Может использоваться любой пригодный для использования анализ фосфорилирования. Например, могут использоваться анализы мембранного аутофосфорилирования, анализы аутофосфорилирования рецепторов в интактных клетках и ELISA. См., например, Gazit, et al., J. Med. Chem. (1996) 39:2170-2177, Chapter 18 in Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel, et al., eds. 2001).
В дополнение к этому, разнообразные методологии анализов на клеточной основе могут успешно использоваться в скриннинговых анализах для идентификации и установления профиля специфичности соединений, представленных в настоящем описании. Клетки, пригодные при таких анализах, включают в себя клетки дикого типа или мутировавшие формы. В одном из вариантов осуществления дикий тип представляет собой киназу, которая не является активной конститутивно, но активируется при димеризации. Например, мутантная киназа FLT3 является конститутивно активной посредством внутренних мутаций тандемной дупликации или точечных мутаций в домене активирования. Пригодные для использования клетки включают в себя такие, которые получают с помощью культуры клеток, из образцов, взятых у пациента, а также клетки, полученные с использованием рутинных технологий молекулярной биологии, например, ретровирусной трансдукции, трансфицирования, мутагенеза, и тому подобное. Примерные клетки включают в себя клетки Ba/F3 или 32Dc13, трансдуцированные, например, ретровирусными конструктами MSCV FLT3-ITD (Kelly et al., 2002); линию клеток Molm-13 и Molm14 (Fujisaki Cell Center, Okayama, Japan); HL60 (AML-M3), AML193 (AML-M5), КG-1, КG-1a, CRL-1873, CRL-9591 и THP-1 (American Tissue Culture Collection, Bethesda, MD); или любую пригодную для использования линию клеток, полученную от пациента с гематопоэтическим злокачественным состоянием.
50
50
50
50
50
50
50
50
В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные здесь, значительно ингибируют рецепторные тирозиновые киназы. Значительное ингибирование активности рецепторной тирозиновой киназы относится к значению IC, равному или меньшему, чем 100 мкМ. В одном из вариантов осуществления соединение может ингибировать активность с IC, равной или меньшей чем 50 мкM, в другом варианте осуществления равной или меньшей чем 10 мкM, в другом варианте осуществления меньшей чем 1 мкМ, меньшей чем 100 нМ, или меньшей чем 50 нМ. Более низкие значения IC являются предпочтительными, поскольку IC дает индикацию относительно эффективности соединения in vivo. Другие факторы, известные в данной области, такие как время полужизни, биологическое распределение и токсичность соединения, также должны рассматриваться при терапевтических применениях. Такие факторы могут придать соединению с более низким IC более высокую эффективность in vivo, чем у соединения, имеющего более высокое значение IC. В одном из вариантов осуществления соединение, которое ингибирует активность, вводится при дозе, когда эффективное фосфорилирование тирозина, то есть IC, меньше, чем его цитотоксические воздействия, LD.
Связывание соединения также может определяться с использованием фагового дисплея белков слияния, экспонируемых на наружной поверхности головки фага, например, с использованием системы скрининга сродства на основе фагового дисплея, как описано в Fabian et al., (Nat Biotechnol. 2005 23(3):329-36). Этот подход использует анализ конкурентного связывания для определения относительного сродства соединения, представляющего интерес, с белком, экспрессируемым как белок слияния на поверхности бактериофага T7. Анализ использует фаг, меченый киназой, представляющей интерес, и иммобилизованную ловушку, которые объединяются с соединением, которое должно исследоваться. Исследуемое соединение, которое связывается с киназой непосредственно или опосредованно, конкурирует с иммобилизованной ловушкой и предотвращает связывание фага, меченного киназой, с твердой подложкой. Если соединение не связывается с киназой, меченый фаг может связываться с твердой подложкой посредством взаимодействия между киназой и иммобилизованным байтом. Результаты могут считываться посредством количественного определения белка слияния, связанного с твердой подложкой, которое может осуществляться либо посредством традиционного анализа бляшек, либо посредством количественной PCR (QPCR) с использованием фагового генома в качестве шаблона.
E. Способы применения соединений и композиций
Также здесь предусматриваются способы применения описанных соединений и композиций или их фармацевтически приемлемых солей, сольватов, гидратов или пролекарств для лечения, предотвращения или облегчения заболеваний или расстройств, которое может опосредоваться или подвергаться другому влиянию через активность протеинкиназы, или одного или нескольких симптомов заболеваний или расстройств, которые опосредуются или подвергаются другому влиянию через активность протеинкиназы (см., Krause and Van Etten, N Engl J. Med. (2005) 353(2):172-187, Blume-Jensen and Hunter, Nature (2001) 411(17): 355-365 and Plowman et al., DN&P, 7:334-339 (1994)). В соответствии с приведенным выше описанием такие заболевания или расстройства включают в себя, но не ограничиваясь этим,
1) карциномы, которые включают в себя Kit-опосредованные карциномы, аденокарциному, сквамозно-клеточную карциному, аденосквамозную карциному, тератокарциному, рак головы и шеи, рак мозга, интракраниальную карциному, глиобластому, включая PDGFR-опосредованную глиобластому, мультиформную глиобластому, включая PDGFR-опосредованную мультиформную глиобластому, нейробластому, рак глотки, множественные эндокринные неоплазии 2A и 2B (MENS 2A и MENS 2B), включая RET-опосредованные MENS, рак щитовидной железы, включая спорадическую и наследственную медуллярную тироидную карциному, папиллярную тироидную карциному, карциному паращитовидной железы, включая любую RET-опосредованную тироидную карциному, фолликулярный тироидный рак, анапластический тироидный рак, бронхиальный карциноид, карциному овсяновидных клеток, рак легких, мелкоклеточный рак легких, включая fit-3 и/или Kit-опосредованный мелкоклеточный рак легких, рак желудка/кишечника, рак желудочно-кишечной системы, стромальные опухоли желудочно-кишечной системы (GIST), включая Kit-опосредованные GIST и PDGFRα-опосредованные GIST, рак толстой кишки, рак толстой и прямой кишки, рак поджелудочной железы, карциному островковых клеток, печеночный рак /рак печени, метастазы в печени, рак мочевого пузыря, рак клеток надпочечников, включая PDGFR-опосредованный рак клеток надпочечников, раковые заболевания мочеполового тракта, рак яичников, включая Kit-опосредованный и/или PDGFR-опосредованный рак яичников, эндометриальный рак, включая CSF-1R-опосредованный эндометриальный рак, рак шейки матки, рак груди, включая Flt-3-опосредованный и/или PDGFR-опосредованный рак груди, рак простаты, включая Kit-опосредованный рак простаты, опухоли половых клеток, включая Kit-опосредованные опухоли половых клеток, семиномы, включая Kit-опосредованные семиномы, дисгерминомы, включая Kit-опосредованные дисгерминомы, меланому, включая PDGFR-опосредованную меланому, метастазы в костях, включая CSF-1R-опосредованные метастазы в костях, метастатические опухоли, включая VEGFR-опосредованные опухоли, стромальные опухоли, нейроэндокринные опухоли, ангиогенез опухолей, включая VEGFR-опосредованный ангиогенез опухолей, смешанные мезодермальные опухоли;
b) саркомы, включая PDGFR-опосредованные саркомы, остеосаркому, остеогенную саркому, рак костей, глиому, включая PDGFR-опосредованную и/или CSF-1R-опосредованную глиому, астроцитому, опухоли сосудов, включая VEGFR-опосредованные опухоли сосудов, саркому Капоши, карциносаркому, гемангиосаркомы, включая VEGFR3-опосредованные гемангиосаркомы, лимфангиосаркому, включая VEGFR3-опосредованную лимфангиосаркому;
c) миелому, лейкемию, миелопролиферативные заболевания, острую миелогенную лейкемию (AML), включая опосредованную flt-3 и/или Kit-опосредованную и/или CSF1R-опосредованную острую миелоидную лейкемию, хронические миелогенные лейкемии (CML) включая Flt-3-опосредованную и/или PDGFR-опосредованную хроническую миелоидную лейкемию, миелодиспластические лейкемии, включая Flt-3-опосредованную миелодиспластическую лейкемию, миелодиспластический синдром, включая Flt-3 опосредованный и/или Kit-опосредованный миелодиспластический синдром, идиопатический гиперэозинофильный синдром (HES), включая PDGFR-опосредованный HES, хроническую эозинофильную лейкемию (CEL), включая PDGFR-опосредованную CEL, хроническую миеломоноцитарную лейкемию (CMML), лейкемию тучных клеток, включая Kit-опосредованную лейкемию тучных клеток, или системный мастоцитоз, включая Kit-опосредованный системный мастоцитоз; и
d) лимфому, лимфопролиферативные заболевания, острую лимфобластическую лейкемию (ALL), острые лимфобластические лейкемии B-лимфоцитов, острые лимфобластические лейкемии T- лимфоцитов, лейкемию природных клеток киллеров (NK), лимфому B- лимфоцитов, лимфому T-лимфоцитов и лимфому природных клеток киллеров (NK), любая из которых может быть Flt-3 опосредованной и/или PDGFR-опосредованной, гистиоцитоз клеток Лангерганса, включая CSF-1R-опосредованный и flt-3-опосредованный гистиоцитоз клеток Лангерганса, опухоли тучных клеток и мастоцитоз;
2) Незлокачественные пролиферационные заболевания; атеросклероз, включая PDGFR-опосредованный атеросклероз, рестеноз после сосудистой ангиопластики, включая PDGFR-опосредованный рестеноз и фибропролиферативные расстройства, такие как облитерирующий бронхиолит и идиопатический миелофиброз, которые оба могут быть PDGFR-опосредованными;
3) Воспалительные заболевания или расстройства, связанные с иммунной дисфункцией, иммуннодефицитом, иммунномодулированием, аутоиммунные заболевания, отторжение трансплантированных тканей, заболевание реакции прививки против хозяина, заживление ран, заболевание почек, рассеянный склероз, тироидит, диабет 1 типа, саркоидоз, аллергический ринит, воспалительное заболевание желудка, включая болезнь Крона и язвенный колит (UC), системную красную волчанку (SLE), артрит, остеоартрит, ревматоидный артрит, остеопороз, астму и хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), включая любое из указанных выше заболеваний, которые являются flt-3-опосредованными и/или CSF-1R-опосредованными; и
4) Инфекционные заболевания, опосредованные либо через вирусные, либо через бактериальные патогены, и сепсис, включая Kit-опосредованный сепсис.
Также предусматриваются способы модулирования активности или субклеточного распределения киназ в клетке, ткани или организме в целом, с использованием соединений и композиций, представленных в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемых производных.
Киназы, представляющие большой интерес, то есть такие, которые опосредуют одно или несколько из указанных выше заболеваний или расстройств, включают, но не ограничиваясь этим, следующие ферменты:
1) подсемейство рецепторов фактора роста тромбоцитов (PDGFR), которое включает в себя PDGFR α, PDGFR β, CSF-1R, Kit и Flt3;
2) подсемейство рецепторов эндотелиального фактора роста сосудов (VEGF), которое включает в себя VEGFR1 (Flt1), VEGFR2 (KDR или Flk1) и VEGFR3 (Flt4);
3) подсемейство рецепторов инсулина (IR), которое включает в себя рецептор инсулиноподобного фактора роста I (IGF-1R);
4) Ret;
5) подсемейство HER (EGFR);
6) подсемейство FGFR;
7) подсемейство HGFR (Met);
8) подсемейство тирозиновых протеинкиназ Abl;
9) подсемейство Src, которое включает в себя Src, Yes1, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr и Yrk;
10) Frk, Btk, Csk, Abl, Syk, Fes, Fps, Fak, Jak и Ack (и их соответствующие подсемейства);
11) киназа, выбранная из группы, состоящей из простаты, sterile 20, sterile 11 и sterile 7;
12) подсемейство киназ cam (кальмодулин-регулируемые киназы и родственные киназы);
13) подсемейство AGC; и
14) подсемейство CMGC (cdk, киназа map, гликоген синтетаза киназа и clk).
F. Комбинированная терапия
Кроме того, специалистам в данной области будет понятно, что соединения, изомеры, пролекарства и фармацевтически приемлемые производные, представленные в настоящем описании, включая фармацевтические композиции и препараты, содержащие эти соединения, могут использоваться в разнообразных видах комбинированной терапии для лечения состояний и заболеваний, описанных выше. Таким образом, здесь также предполагается использование соединений, изомеров, пролекарств и фармацевтически приемлемых производных, представленных в настоящем описании, в сочетании с другими активными фармацевтическими агентами для лечения заболеваний/состояний, описанных здесь.
В одном из вариантов осуществления такие дополнительные фармацевтические агенты включают в себя, но не ограничиваясь этим, противораковые агенты и противовоспалительные агенты.
Соединение или композиция, представленные в настоящем описании, или его фармацевтически приемлемое производное, может вводиться одновременно с введением одного или нескольких указанных выше агентов, до или после него.
Также предусматриваются фармацевтические композиции, содержащие соединение, представленное в настоящем описании, или его фармацевтически приемлемое производное, и один или несколько из указанных выше агентов.
Также предусматривается комбинированная терапия, которая лечит или предотвращает наступление симптомов или связанных с ним осложнений рака и родственных заболеваний и расстройств, включающая в себя введение субъекту, нуждающемуся в этом, одного из соединений или композиций, описанных здесь, или их фармацевтически приемлемых производных, вместе с одним или несколькими противораковыми агентами.
G. Получение соединений
3
1
Исходные вещества в примерах синтеза, представленных в настоящем описании, являются доступными либо из коммерческих источников, либо посредством процедур из литературы (например, March Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, (1992) 4th Ed.; Wiley Interscience, New York). Все коммерчески доступные соединения используются без дополнительной очистки, если не указано иного. CDCl (99,8% D, Cambridge Isotope Laboratories) используют во всех экспериментах, как указано. Спектры протонного (H) ядерного магнитного резонанса (ЯМР) записывают на спектрометре Bruker Advance 300 MHz NMR. Значимые пики табулируются и, как правило, содержат: количество протонов и мультиплетность (s, синглет; d, дублет; t, триплет; q, квартет; m, мультиплет; br s, уширенный синглет). Химические сдвиги регистрируются в миллионных долях (δ) по отношению к тетраметилсилану. Масс-спектры низкого разрешения (МС) получают как масс-спектры с электрораспылительной ионизацией (ESI), которые регистрируют на приборе Shimadzu HPLC/MS с использованием условий с обращенной фазой (ацетонитрил/вода, 0,05% уксусная кислота). ВЭЖХ осуществляют с использованием систем и колонок ВЭЖХ Varian. Флэш-хроматографию осуществляют с использованием Merck Silica Gel 60 (меш 230-400), следуя стандартам протокола (Still et al. (1978) J. Org. Chem. 43:2923).
Понятно, что в следующем далее описании сочетания заместителей и/или переменные изображенных формул могут использоваться, только если такие вклады приводят к получению стабильных соединений при стандартных условиях.
Специалистам в данной области будет также понятно, что в способе, описанном ниже, функциональные группы промежуточных соединений могут потребовать защиты с помощью соответствующих защитных групп. Такие функциональные группы включают в себя гидрокси, амино, меркапто и группу карбоновой кислоты. Соответствующие защитные группы для гидрокси включают в себя триалкилсилил или диарилалкилсилил (например, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил), тетрагидропиранил, бензил и тому подобное. Соответствующие защитные группы для амино, амидино и гуанидино включают в себя трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил и тому подобное. Соответствующие защитные группы для меркапто включают в себя -C(O)R (где R представляет собой алкил, арил или аралкил), п-метоксибензил, тритил и тому подобное. Соответствующие защитные группы для группы карбоновой кислоты включают в себя сложные алкиловые, ариловые или аралкиловые эфиры.
Защитные группы могут вводиться или удаляться в соответствии со стандартными методиками, которые хорошо известны специалистам в данной области, и как описывается здесь. Использование защитных групп описывается подробно в Green, T.W. and P.G.M. Wutz, Protective Groups in Organic Synthesis (1991), 2nd Ed., Wiley-lnterscience.
Специалист в данной области смог бы легко установить, какие сочетания для каждого заместителя являются возможными для условий реакции каждой cхемы. Кроме того, заместители выбираются из компонентов, как указано в описании выше, и могут присоединяться к исходным материалам, промежуточным соединениям, и/или конечным продуктам в соответствии со схемами, известными специалистам в данной области.
Также будет понятно, что соединения, представленные в настоящем описании, могут существовать в виде одного или нескольких изомеров, то есть как E/Z изомеры, энантиомеры и/или диастереомеры.
1
3
1
2
3
4
Соединения формулы (I) могут быть, как правило, получены, как изображено на следующих схемах, если не отмечено иного, разнообразные заместители R - R, X, Z, Z, Z и R являются такими, как определено в разделе «Сущность изобретения».
Общие схемы синтеза и примеры
Различные варианты осуществления далее иллюстрируются с помощью следующих схем синтеза и примеров, которые не должны рассматриваться как ограничивающие каким-либо образом. Экспериментальные процедуры для генерирования показанных данных обсуждается более подробно ниже. Для всех препаратов здесь множество доз может пропорционально объединяться, как известно в данной области. Покрытия, слои и инкапсулирования наносятся обычными путями, с использованием оборудования, обычно применяемого для этих целей.
th
Предмет изобретения описывается иллюстративным образом, и необходимо понять, что используемая терминология предназначается для описания, а не ограничения. Таким образом, специалистам в данной области будет ясно, что условия, такие как выбор растворителя, температуры реакции, объемов, времени реакции, могут изменяться, в то же время производя желаемые соединения. В дополнение к этому, специалист в данной области поймет также, что многие реагенты, приведенные в следующих далее примерах, могут быть заменены другими пригодными для использования реагентами. См., например, Smith & March, Advanced Organic Chemistry, 5 ed. (2001).
Общий синтез производных мочевины - Схема 1
Определенные мочевины могут быть получены посредством образования изоцианатных промежуточных соединений с последующим их взаимодействием с анилиновыми производными. Начальное получение изоцианато промежуточного соединения (1) может осуществляться посредством взаимодействия соответствующего аминового производного в сухом толуоле при 0ºC посредством добавления по каплям трихлорметилхлорформиата (1,1 экв.). Как правило, реакционную смесь перемешивают при 0ºC и позволяют нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Затем растворитель может быть удален, и полученная смесь перекристаллизовывается из соответствующей системы растворителей, например, из этилацетата.
Промежуточное соединение (1) может затем взаимодействовать с замещенным соответствующим образом анилиновым производным, с образованием соответствующей мочевины.
Как правило, соответствующее изоцианатное производное (1) взаимодействует с замещенным соответствующим образом анилином (1 экв.), растворенным в толуоле, при повышенной температуре. Реакционной смеси, как правило, дают возможность перемешиваться при 50ºC в течение от трех до шести часов. После завершения реакции растворитель удаляют и смесь очищают с помощью ВЭЖХ.
Преобразование мочевин в тиомочевины - Схема 2
Мочевины могут преобразовываться в тиомочевины посредством использования реагента Лоусона. Как правило, реагент Лоусона добавляют к исходной мочевине в толуоле и реакционную смесь нагревают до 100ºC в течение 8 часов, затем охлаждают, растворитель удаляют в вакууме и тиомочевину очищают с помощью ВЭЖХ.
Синтез N-замещенных мочевин - Схема 3
N-замещенные мочевины могут образовываться, при условии, что R не содержит химически активных первичных или вторичных аминов. Как правило, раствор соответствующего изоцианата в диметилацетамиде добавляют к раствору соответствующего N-алкилбензоламинового производного, и смесь нагревают при 80ºC в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры добавляют воду, и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические фазы промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом магния и выпаривают. Очистка продукта может осуществляться с помощью флэш-хроматографии (например, на силикагеле, и с использованием гексана, 0-50% EtOAc, в качестве системы растворителей).
Общий синтез бензотиазола и бензоксазольных производных - Схема 4
Соответствующие 2-амино-6-гидроксибензопроизводные могут быть получены в соответствии с несколько модифицированной процедурой, известной из литературы Lau and Gompf: J. Org. Chem. 1970, 35, 4103-4108. Как правило, к перемешиваемому раствору тиомочевины или мочевины в смеси этанола и концентрированной хлористоводородной кислоты добавляют раствор 1,4-бензохинона в горячем этаноле. Реакционную смесь, как правило, перемешивают в течение 24 часов при комнатной температуре, а затем концентрируют досуха. Остаток растирают с горячим ацетонитрилом, и полученный твердый продукт фильтруют и сушат. Свободное основание получают посредством растворения гидрохлоридной соли в воде, нейтрализации ацетатом натрия и сбора твердого продукта посредством фильтрования. Полученное соединение используют далее для получения соответствующего бензильного производного.
Общий синтез изомеров бензотиазола - Схема 5
Два изомера бензотиазола, показанных ниже (2-аминобензотиазол-4-ол и 2-аминобензотиазол-6-ол), являются коммерчески доступными.
Два производных, которые не являются коммерчески доступными (2-аминобензотиазол-5-ол и 2-аминобензотиазол-7-ол), могут быть получены посредством циклизации 3-метоксианилина с тиоцианатом аммония с последующим деметилированием с помощью трибромида бора, как показано на схеме ниже:
Сложноэфирные замещения на бензотиазоле могут быть получены посредством циклизации (4-амино)фенилуксусной кислоты с помощью тиоцианата аммония, с последующим метилированием с помощью добавления по каплям концентрированной серной кислоты в метаноле, как показано ниже:
Общий синтез бензильных производных- Схема 6
2
5
Продукт реакции из схемы 4 и 5 взаимодействует с 2'-бром-4-нитроацетофеноном, растворенном в этаноле и, как правило, нагревается с обратным холодильником в течение ночи. Затем раствор охлаждают до 0ºC на водяной бане со льдом, и продукт собирают посредством вакуумного фильтрования. После сушки в вакууме с PO продукт может быть выделен.
Общая стадия восстановления - Схема 7
4
3
4
Любые стандартные реакции, опосредованные переходными металлами, как показано в i, ii или iii, могут использоваться для восстановления нитрогруппы до амина. Опосредованные серой восстановления или любые другие способы восстановления, известные специалистам в данной области, могут также использоваться для восстановления нитрогруппы. Как правило, хлорид аммония и порошок железа (i) добавляют к суспензии промежуточного соединения из схемы 6 в соответствующем растворителе (изопропиловый спирт/вода (3:1) или 70% этанол), затем нагревают с обратным холодильником в течение от 3 часов до целой ночи при энергичном перемешивании. Полученную смесь фильтруют через целит, и осадок на фильтре промывают горячим изопропиловым спиртом (150 мл). Фильтрат концентрируют, выливают в насыщенный раствор бикарбоната натрия и экстрагируют 3 раза дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат над MgSO и концентрируют, с получением восстановленного промежуточного соединения. В альтернативной последовательности реакций, где группа R1 модифицируется в солюбилизирующую группу на конечной стадии, суспензия промежуточного соединения из схемы 6 в этаноле может смешиваться с хлоридом олова (iii) и нагреваться примерно до 95ºC в течение ночи. Затем смесь разбавляют водой, доводят pH примерно до pH 8 с помощью NaHCO и экстрагируют три раза дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат над MgSO и концентрируют, с получением восстановленного промежуточного соединения.
Общие реакции аминового связывания - Схема 8
3
4
A. Для получения мочевины суспензия промежуточного соединения указанного выше, как правило, взаимодействует с соответствующим изоцианатом в толуоле или эквивалентном апротонном растворителе и нагревается при 40-120ºC в течение ночи. Реакцию гасят посредством выливания в смесь метиленхлорида и воды, содержащей немного MeOH, и нейтрализуют насыщенным водным раствором NaHCO. Водную фазу экстрагируют дважды метиленхлоридом, объединенные органические экстракты сушат над MgSO и фильтруют. Фильтрат концентрируют и добавляют этиловый эфир к осадку продукта. Осадок собирают посредством фильтрования, промывают этиловым эфиром и сушат в вакууме, с получением свободного основания.
B. Для получения фениламидов, как показано выше, как правило, соответствующим образом замещенная карбоновая кислота взаимодействует при условиях HOBt (1-гидроксибензотиазол гидрата) и EDCI (N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимид гидрохлорида) в безводном ДМФ с соответствующим образом замещенным бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-илфениламином.
Синтез производных простых эфиров - Схема 9
Как правило, бензильное производное взаимодействует с соответствующим хлоралкильным производным в сухом ДМФ. К этой смеси добавляют карбонат калия и, необязательно, иодид тетрабутиламмония. Затем суспензию нагревают до 80-90ºC в течение 5-8 часов или до тех пор, пока реакция не завершится, как определяется с помощью ЖХ-МС. Смесь охлаждают до комнатной температуры, выливают в воду, и позволяют ей осаждаться в течение 1-3 часов. Полученный осадок собирают посредством вакуумного фильтрования и сушат в вакууме. Полученное промежуточное соединение после восстановления может затем связываться с мочевиной или амидным производным, как изображено на схеме 7 или 8. В альтернативной последовательности синтеза эта модификация осуществляется после стадии связывания, с образованием мочевины или амида.
Общая схема добавления заместителей углеродных цепей - Схема 10
Длина углеродной цепи заместителя на бензочасти имидазобензотиазольного кольца может регулироваться посредством использования соответствующей 4-аминофенилкарбоновой кислоты на стадии образования бензотиазола (схема 5). После второй стадии циклизации с помощью 2'-бром-4-нитроацетофенона (схема 6), восстановления нитрогруппы (схема 7) и связывания с образованием амида или мочевины (схема 8), полученное промежуточное соединение может взаимодействовать с амином, с получением амидных аналогов, как показано ниже, которые могут затем восстанавливаться до аминовых аналогов.
Альтернативно, в момент синтеза [2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1b][1,3]бензотиазол-7-ил]ацетата, как показано ниже, суспензия ацетата может взаимодействовать с гидроксидом лития, затем взаимодействовать с амином, с образованием амидного аналога, восстанавливаться с помощью любого количества восстанавливающих агентов, таких как борандиметилсульфид, с получением алкиламинового заместителя, и связываться, наконец, с соответствующим изоцианатом, с получением мочевины.
Общая схема альтернативных производных мочевины - Схема 10
4
3
Для введения изменений на положении R, мочевины могут быть получены следующим способом: Соответствующим образом замещенный бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фениламин (1 экв.) растворяют в 10 мл апротонного растворителя (например, безводного CHCl) и охлаждают до 0ºC. Добавляют дифосген или любой эквивалент фосгена (1,5 экв.), и смесь перемешивают в течение 3 часов, в то же время, позволяя нагреваться до комнатной температуры. После выпаривания растворителя в вакууме при 20ºC остаток растворяют в 10 мл безводного ТГФ, и добавляют 1,4 экв. амина, и смесь перемешивают при температуре 25ºC-125ºC в течение ночи. Растворитель выпаривают в вакууме, и сырой продукт очищают с помощью ВЭЖХ.
Получение 3-изоцианато-5-трет-бутилизоксазола из 3-амино-5-трет-бутилизоксазола - Схема 11
2
2
3-Амино-5-трет-бутилизоксазол в толуоле и CHCl охлаждают до -20ºC. Когда температура достигает <10ºC, добавляют за один раз трифосген. Охлаждение продолжают до < -20ºC. Добавляют по каплям триэтиламин в толуоле в течение 60 минут при -20ºC - -15ºC. Реакционную смесь перемешивают после завершения добавления в течение 30 минут при -20ºC - -15ºC. Реакцию отслеживают с помощью ТСХ: ТСХ должна показывать образование ~80% изоцианата.
В определенном варианте осуществления соли кислот и соединений, представленных в настоящем описании, могут быть получены посредством добавления кислоты, включая избыток кислоты, к свободному основанию, полученному, как описано в настоящем описании.
Понятно, что указанное выше подробное описание и прилагаемые примеры являются только иллюстративными и не должны приниматься как ограничение на рамки предмета изобретения. Различные изменения и модификации описанных вариантов осуществления будут ясны специалистам в данной области. Такие изменения и модификации, включая, но не ограничиваясь этим, те, которые относятся к химическим структурам, заместителям, производным, промежуточным соединениям, синтезу, препаратам и/или способам применения, предусмотренным здесь, могут быть проделаны без отклонения от их духа и рамок. Патенты США и публикации, упоминаемые здесь, включаются сюда в качестве ссылок.
Примеры
Пример 1
Получение N-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-N'-имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение A1]
A. Для получения промежуточного соединения 2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазола, 2-аминобензотиазол (751 мг, 5 ммоль) и 2-бром-4'-нитроацетофенон (1,22 г, 5 ммоль) растворяют в этаноле и нагревают с обратным холодильником в течение ночи. Затем раствор охлаждают при комнатной температуре в течение 24 часов. Осадок собирают посредством фильтрования, промывают метанолом и сушат в вакууме.
3
3
3
2
2
3
B. Для получения 2-(4-аминофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазола, промежуточное соединение со стадии A (428 мг, 1,5 ммоль) приготавливают в виде суспензии в изопропиловом спирте, и к нему добавляют порошок железа (419 мг, 7,5 ммоль). Суспензию нагревают с обратным холодильником в течение ночи с энергичным перемешиванием. Завершение реакции подтверждают с помощью ЖХ-МС. К смеси добавляют 1н. HCl и позволяют охлаждаться до комнатной температуры. Осадок собирают посредством фильтрования и промывают несколькими объемами метанола для растворения всего органического материала. Фильтраты выпаривают и подвергают азеотропной возгонке вместе с толуолом. Полученное масло добавляют к холодному насыщенному раствору NaHCO (20 мл) и обрабатывают ультразвуком. Суспензию разбавляют толуолом и подвергают азеотропной возгонке. Полученный остаток растирают с CHCl, и осадок фильтруют и промывают с CHCl. Фильтраты концентрируют и очищают с помощью флэш-хроматографии (CHCl/5% MeOH/0,5% EtN).
2
2
6
1
+
C. Для получения указанного в заголовке соединения, суспензию промежуточного соединения со стадии B (133 мг, 0,5 ммоль) и 5-трет-бутилизоксазол-3-изоцианата (83 мг, 0,5 ммоль) в метиленхлориде нагревают до 90ºC в течение двух часов. Полученную суспензию концентрируют и очищают с помощью флэш-хроматографии (CHCl/MeOH). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,65 (c, 1H), 8,9 (c,1H), 8,7 (c, 1H), 8,05 (д, 1H), 7,95 (д, 1H), 7,8 (д, 2H), 7,65 (м, 3H), 7,4 (т, 1H), 6,55 (c, 1H), 1,3 (c, 9H); ЖХ-МС (ESI) 432 (M+H).
D. Следующие далее соединения получают из соответствующих функционализованных 2-аминобензотиазолов посредством циклизации с 2-бром-4'-нитроацетофеноном с последующим восстановлением и связывания с изоксазолизоцианатом при условиях реакции, описанных в стадиях B и C.
+
1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-фторбензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевина; ЖХ-МС (ESI) 450 (M+H); [Соединение A2]
+
1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-метилбензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевина; ЖХ-МС (ESI) 445 (M+H); [Соединение A3]
1
3
1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-гидроксибензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевина; H ЯМР (CDCl) 10,0 (c, 1H); 9,6 (c, 1H); 8,9 (c, 1H); 8,6 (c, 1H); 7,9 (м, 3H); 7,6 (м, 2H); 7,4 (c, 1H); 6,7 (c, 1H); 1,4 (c, 9H); [Соединение A4] и
1
4
1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-метоксибензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевина; H ЯМР (метанол-d) 8,3 (c, 1H); 7,8 (д, 3H); 7,5 (м, 4H); 7,2 (д, 1H); 6,4 (c, 1H); 3,8 (c, 3H); 1,4 (c, 9H). [Соединение A5]
Пример 2
Получение 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-морфолин-4-илбензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевины; [Соединение A6]
4
3
2
2
4
3
A. Получение промежуточного соединения 6-морфолин-4-илбензотиазол-2-амина: К раствору 4-N-морфолинoанилина (1,78 г, 10 ммоль) в уксусной кислоте (20 мл) добавляют NHSCN (2,28 г, 30 ммоль) в малом количестве несколько раз. После перемешивания смеси в течение 30 минут к смеси добавляют раствор брома в уксусной кислоте (1,6 г в 5 мл) и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Затем смесь нагревают при 90ºC в течение 30 минут, а затем охлаждают и нейтрализуют насыщенным NaHCO, а затем экстрагируют три раза CHCl. Объединенные органические фазы сушат над MgSO и концентрируют досуха. К остатку добавляют 30 мл 10% HCl, и нейтрализуют насыщенным NaHCO, с получением твердого вещества коричневого цвета (1,541 г, 66%).
3
2
B. Получение промежуточного соединения 7-морфолин-4-ил-2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазола: Смесь промежуточного соединения со стадии A (0,300 г, 1,27 ммоль) и 2-бром-4'-нитроацетофенона (0,341 г, 1,4 ммоль) объединяют в этаноле (10 мл) и нагревают с обратным холодильником в течение ночи. Реакцию гасят насыщенным NaHCO и экстрагируют этилацетатом. Экстракт концентрируют и очищают с помощью флэш-хроматографии на SiO с использованием 0-100% этилацетата/гексана, с получением твердого вещества коричневого цвета (0,211 г, 44%).
2
2
3
2
2
4
2
.
C. Получение 4-(7-морфолин-4-илимидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил)фениламина: Смесь промежуточного соединения со стадии B (0,200 г, 0,53 ммоль) и SnCl HO (0,600 г, 2,65 ммоль) в этаноле (10 мл) нагревают при 95ºC в течение ночи. Завершение реакции подтверждают с помощью ЖХ-МС. Смесь выливают в 40 мл воды и pH доводят до 8 с использованием насыщенного раствора NaHCO, а затем экстрагируют три раза CHCl. Объединенные органические фазы сушат над MgSO и концентрируют. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии на SiO с использованием метанола/этилацетата в качестве элюентов, с получением восстановленного промежуточного соединения (0,112 г, 61%).
2
3
1
D. Получение указанного в заголовке соединения: К суспензии промежуточного соединения со стадии B (0,110 г, 0,3 ммоль), добавляют 5-(трет-бутил)изоксазол-3-изоцианат (0,052 г, 0,3 ммоль) в ТГФ (10 мл) и нагревают с обратным холодильником в течение ночи. Завершение реакции подтверждают с помощью ЖХ-МС. После удаления ТГФ остаток очищают с помощью флэш-хроматографии на SiO с использованием метанола/этилацетата в качестве элюентов, с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества (0,042 г, 27%); H ЯМР (CDCl) δ 9,3 (ушир., 1H), 7,84 (д и с, 3H), 7,60 (д, 2H), 7,50 (д и с, 2H), 7,19 (c, 1H), 7,04 (д, 1H), 5,84 (c, 1H), 3,90 (т, 4H), 3,19 (т, 4H), 1,36 (c, 9H).
1
3
E. 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(4-метилпиперазин-1-ил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевину получают способом, подобным стадиям A-D, за исключением того, что на стадии A 6-морфолин-4-илбензотиазол-2-иламин заменяют 6-(4-метилпиперазин-1-ил)-1,3-бензотиазол-2-амином. H ЯМР (CDCl) δ 9,3 (ушир., 1H), 7,84 (д и с, 3H), 7,59 (ушир., 1H), 7,56 (д, 2H), 7,49 (д, 1H), 7,20 (д, 1H), 7,05 (дд, 1H), 5,86 (c, 1H), 3,250 (т, 4H), 2,62 (т, 4H), 2,38 (c, 3H), 1,36 (c, 9H). [Соединение A7]
Пример 3
Получение
N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение B1]
A. Промежуточное соединение 2-амино-1,3-бензотиазол-6-ол получают в соответствии с незначительно модифицированной процедурой из литературы, Lau и Gompf. J. Org. Chem. 1970, 35, 4103-4108. К перемешиваемому раствору тиомочевины (7,6 г, 0,10 моль) в смеси 200 мл этанола и 9 мл концентрированной хлористоводородной кислоты добавляют раствор 1,4-бензохинона (21,6 г, 0,20 моль) в 400 мл горячего этанола. Реакционную смесь перемешивают в течение 24 часов при комнатной температуре, а затем концентрируют досуха. Остаток растирают с горячим ацетонитрилом, и полученный твердое вещество фильтруют и сушат.
6
Свободное основание получают посредством растворения гидрохлоридной соли в воде, нейтрализуют ацетатом натрия, и твердый продукт собирают посредством фильтрования. Продукт (2-амино-1,3-бензотиазол-6-ол) получают в виде твердого вещества черного цвета, которое очищают с помощью ЖХ-МС (M+H = 167) и ЯМР. Выход: 13,0 г (78%). ЯМР (ДМСО-d) δ 7,6 (м, 2H), 6,6 (д, 1H).
2
5
6
B. Для получения промежуточного соединения 2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ола, 2-амино-1,3-бензотиазол-6-ол (20,0 г, 0,12 моль) и 2-бром-4'-нитроацетофенон (29,3 г, 0,12 моль) растворяют в 600 мл этанола и нагревают с обратным холодильником в течение ночи. Затем раствор охлаждают до 0°C на водяной бане со льдом, и продукт собирают посредством вакуумного фильтрования. После сушки в вакууме с PO, промежуточное соединение (2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ол) выделяют. Выход: 17,0 г (46%) ЯМР (ДМСО-d) δ 10 (c, 1H), 8,9 (c, 1H), 8,3 (д, 2H), 8,1 (д, 2H), 7,8 (д, 1H), 7,4 (c, 1H), 6,9 (д, 1H).
6
C. Для получения промежуточного соединения 7-(2-морфолин-4-илэтокси)2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазола: 2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ол (3,00 г, 9,6 ммоль) суспендируют в 100 мл сухого ДМФ. К этой смеси добавляют карбонат калия (4,15 г, 30 ммоль, 3 экв.), гидрохлорид хлорэтилморфолина (4,65 г, 25 ммоль, 2,5 экв.) и, необязательно, иодид тетрабутиламмония (7,39 г, 2 ммоль). Затем суспензию нагревают до 90ºC в течение 5 часов или до тех пор, пока завершение не наблюдают с помощью ЖХ-МС. Смесь охлаждают до комнатной температуры, выливают в 800 мл воды и позволяют постоять в течение 1 часа. Полученный осадок собирают посредством вакуумного фильтрования и сушат в вакууме. Промежуточное соединение (7-(2-морфолин-4-илэтокси)2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол) получают без дополнительной очистки. Выход: 3,87 г (95%). ЯМР (ДМСО-d) δ 8,97 (c, 1H), 8,30 (д, 2H), 8,0 (д, 2H), 7,9 (д, 1H), 7,7 (c, 1H), 7,2 (д, 1H), 4,1 (т, 2H), 5,6 (м, 4H), 2,7 (т, 2H).
4
6
D. Для получения промежуточного соединения 7-(2-морфолин-4-илэтокси)2-(4-аминофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазола: К суспензии 7-(2-морфолин-4-илэтокси)-2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазола (3,87 г, 9,1 ммоль) в 100 мл изопропилового спирта/воды (3:1) добавляют аммоний хлорид (2,00 г, 36,4 ммоль) и порошок железа (5,04 г, 90,1 ммоль). Суспензию нагревают с обратным холодильником в течение ночи с энергичным перемешиванием, завершение реакции подтверждают с помощью ЖХ-МС. Смесь фильтруют через целит, и осадок на фильтре промывают горячим изопропиловым спиртом (150 мл). Фильтрат концентрируют приблизительно до 1/3 от исходного объема, выливают в насыщенный бикарбонат натрия и экстрагируют 3 раза дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат над MgSO и концентрируют, с получением продукта в виде твердого вещества оранжевого цвета, содержащего малое количество (4-6%) исходного материала. (Выход: 2,75 г, 54%). 80% этанол/вод может использоваться вместо изопропилового спирта/воды - в этом случае реакция по существу завершается через 3,5 часа и только микроскопические количества исходного вещества наблюдаются в полученном продукте. ЯМР (ДМСО-d) δ 8,4 (c, 1H), 7,8 (д, 1H), 7,65 (д, 1H), 7,5 (д, 2H), 7,1 (д, 1H), 6,6 (д, 2H), 4,1 (т, 2H), 3,6 (м, 4H), 2,7 (т, 2H).
3
4
6
3
E. Суспензию 7-(2-морфолин-4-илэтокси)2-(4-аминофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазола (4,06 г, 10,3 ммоль) и 5-трет-бутилизоксазол-3-изоцианата (1,994 г, 12 ммоль) в толуоле нагревают при 120ºC в течение ночи. Реакцию гасят, выливая в смесь метиленхлорида и воды, содержащей немного метанола, и нейтрализуют насыщенным водным раствором NaHCO. Водную фазу экстрагируют дважды метиленхлоридом, объединенные органические экстракты сушат над MgSO и фильтруют. Фильтрат концентрируют примерно до 20 мл объема, и добавляют этиловый эфир, полученный при образовании твердого продукта. Осадок собирают посредством фильтрования, промывают этиловым эфиром и сушат в вакууме с получением свободного основания. Выход: 2,342 г (41%). ЯМР (ДМСО-d) δ 9,6 (ушир., 1H), 8,9 (ушир., 1H), 8,61 (c, 1H), 7,86 (д, 1H), 7,76 (д, 2H), 7,69 (д, 1H), 7,51 (д, 2H), 7,18 (дд, 1H), 6,52 (c, 1H), 4,16 (т, 2H), 3,59 (т, 4H), 3,36 (перекрывание, 4H), 2,72 (т, 2H), 1,30 (c, 9H). ЯМР (CDCl) δ 9,3 (ушир., 1H), 7,84 (м, 4H), 7,59 (д, 2H), 7,49 (д, 1H), 7,22 (д, 1H), 7,03 (дд, 1H), 5,88 (c, 1H), 4,16 (т, 2H), 3,76 (т, 4H), 2,84 (т, 2H), 2,61 (т, 4H), 1,37 (c, 9H).
F. Для получения гидрохлоридной соли, гидрохлорида N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины, свободное основание растворяют в смеси 20 мл метиленхлорида и 1 мл метанола. Раствор 1,0M HCl в этиловом эфире (1,1 экв.) добавляют по каплям, с последующим добавлением этилового эфира. Осадок собирают посредством фильтрования или центрифугирования и промывают простым этиловым эфиром, с получением гидрохлоридной соли. Выход: 2,44 г (98%)
6
ЯМР (ДМСО-d) δ 11,0 (ушир., 1H), 9,68 (c, 1H), 9,26 (c, 1H), 8,66 (c, 1H), 7,93 (д, 1H), 7,78 (м, 3H), 7,53 (д, 2H), 7,26 (дд, 1H), 6,53 (c, 1H), 4,50 (т, 2H), 3,97 (м, 2H), 3,81 (т, 2H), 3,6 (перекрывание, 4H), 3,23 (м, 2H), 1,30 (c, 9H).
G. Альтернативно, соединение B1 может быть получено, если взять промежуточное соединение из примера 4B и осуществить его взаимодействие с гидрохлоридом хлорэтилморфолина при условиях, описанных на стадии C.
1
1
+
6
H. Гидрохлорид N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[5-(2-морфолин-4-илэтокси)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины, соединение, имеющее общую формулу (I), где R замещается в 5-положении трициклического кольца, получают способом, описанным на стадиях A-F, но с использованием циклизации продукта 2-аминобензотиазол-4-ол с 2-бром-4'-нитроацетофеноном на стадии A. H ЯМР (ДМСО-d) δ 11,6 (ушир., 1H), 9,78 (ушир., 1H), 9,56 (ушир., 1H), 8,64 (c, 1H), 7,94 (д, 2H), 7,70 (c, 1H), 7,56 (д, 2H), 7,45 (т, 1H), 7,33 (д, 1H), 6,54 (c, 1H), 4,79 (т, 2H), 3,87 (м, 6H), 3,60 (м, 2H), 3,34 (м, 2H), 1,30 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 561 (M+H). [Соединение B11]
I. Гидрохлорид N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[6-(2-морфолин-4-илэтокси)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение B12] также получают посредством получения сначала исходного бензотиазола, 5 метоксибензотиазол-2-ил-амина:
2
2
3
2
2
4
Для получения исходного 5-метоксибензотиазол-2-иламина: К суспензии (3-метоксифенил)тиомочевины (1,822 г, 10 ммоль) в CHCl (20 мл) при 0ºC добавляют по каплям раствор брома (1,76 г, 11 ммоль) в 10 мл трихлорметана в течение периода в тридцать минут. Реакционную смесь перемешивают в течение 3 часов при комнатной температуре, затем нагревают 3 часа с обратным холодильником в течение одного часа. Осадок фильтруют и промывают дихлорметаном. Твердый продукт суспендируют в насыщенном растворе NaHCO и экстрагируют CHCl. Экстракт сушат над MgSO и концентрируют, с получением твердого вещества белого цвета (1,716 г, 95%).
2
3
2
2
4
Для получения 2-аминобензотиазол-5-ола: К суспензии 5-метоксибензотиазол-2-иламина в 16 мл 48% HBr/HO нагревают до 105ºC на масляной бане в течение 10 часов. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры осадок собирают посредством фильтрования и промывают ацетоном. Фильтрат суспендируют в насыщенном растворе NaHCO и экстрагируют CHCl. Экстракт сушат над MgSO и концентрируют, с получением твердого вещества белого цвета (0,986 г, 63%).
Гидрохлорид N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[6-(2-морфолин-4-илэтокси)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины получают из 2-аминобензотиазол-5-ола с предыдущей стадии и следуя способу, описанному в
1
+
6
H ЯМР (ДМСО-d) δ 11,1 (ушир., 1H), 9,69 (ушир., 1H), 9,28 (ушир., 1H), 8,71 (c, 1H), 7,97 (д, 1H), 7,79 (д и с, 3H), 7,56 (д, 2H), 7,13 (дд, 1H), 6,53 (c, 1H), 4,56 (т, 2H), 3,98 (м, 2H), 3,82 (т, 2H), 3,65 (м, 2H), 3,55 (м, 2H), 3,25 (м, 2H), 1,31 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 561 (M+H). [Соединение B12].
1
+
6
J. N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{3-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевину получают способом, описанным на стадиях A-E, но в котором 2-бром-3'-нитроацетофенон заменяется 2-бром-4'-нитроацетофеноном на стадии B; H ЯМР (ДМСО-d) δ 11,1 (ушир., 1H), 9,76 (c, 1H), 9,34 (c, 1H), 8,76 (c, 1H), 8,01 (c, 1H), 8,05 (д, 1H), 7,79 (д, 1H), 7,50 (д, 1H), 7,37 (т, 1H), 7,32 (c, 1H), 7,27 (дд, 1H), 6,55 (c, 1H), 4,51 (т, 2H), 3,98 (м, 2H), 3,83 (т, 2H), 3,61 (м, 4H), 3,24 (м, 2H), 1,31 (c, 9H); ЖХ-МС ESI: MH 561. [Соединение B13].
1
+
6
K. Сложный этиловый эфир 2-{3-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-карбоновой кислоты получают способом, описанным на стадиях A-E, но в котором стадия B осуществляется следующим способом: Смесь сложного этилового эфира 2-аминобензотиазол-6-карбоновой кислоты (0,889 г, 4 ммоль) и 2-бром-3'-нитроацетофенона (1,220 г, 5 ммоль) в DME (15 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После удаления DME добавляют 2-метоксиэтанол и нагревают при 140ºC в течение 4 часов. Образуется твердое вещество желтого цвета, которое фильтруют, промывают этанолом и диэтиловым эфиром, и сушат в вакууме (0,964 г, 66%); H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,60 (c, 1H), 8,96 (c, 1H), 8,64 (c, 1H), 8,70 (д, 1H), 8,14 (c, 3H), 7,52 (дд, 1H), 7,36 (т, 1H), 7,39 (т, 1H), 6,54 (c, 1H), 4,36 (кв, 2H), 1,36 (т, 3H), 1,31 (c, 9H); ЖХ-МС ESI: MH 504. [Соединение B 14]
Пример 4
Получение 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(2-диэтиламиноэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение B2]
2
2
4
.
A. К суспензии промежуточного соединения 2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ола из примера 3B (2,24 г, 7,2 ммоль) в этаноле (40 мл) добавляют SnCl HO (7,90 г, 35 ммоль) и нагревают с обратным холодильником. Добавляют концентрированную HCl к реакционной смеси, и осадок образуется постепенно. Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 20 часов, а затем позволяют охлаждаться до комнатной температуры. Раствор выливают на лед и нейтрализуют 10% NaOH и устанавливают pH приблизительно 6. Органическую фазу экстрагируют три раза этилацетатом (80 мл × 3). Экстракты сушат над MgSO и концентрируют, с получением твердого вещества желтого цвета (1,621 г, 80%).
B. К суспензии промежуточного соединения со стадии A (1,00 г, 3,55 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляют 5-трет-бутилизоксазол-3-изоцианат (0,650 г, 3,9 ммоль) и нагревают с обратным холодильником в течение ночи на масляной бане при 90ºC. Завершение реакции проверяют с помощью ЖХ-МС. Растворитель удаляют, и полученную смесь растворяют в метаноле, который удаляют, с получением второго промежуточного соединения в виде твердого вещества (1,103 г, 69%).
2
3
2
2
4
3
1
C. К раствору 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-гидроксибензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил)фенил]мочевины (0,25 г, 0,56 ммоль) со стадии B, 2-диэтиламиноэтанола (0,094 г, 0,8 ммоль) и трифенилфосфина (0,168 г, 0,8 ммоль) в ТГФ (6 мл) добавляют по каплям раствор диизопропилазодикарбоксилата (0,162 г, 0,8 ммоль) в ТГФ (3 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После выпаривания растворителя остаток очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка C18, элюируют MeCN/HO, содержащим 0,05% AcOH). Соответствующие фракции объединяют, нейтрализуют насыщенным раствором NaHCO и экстрагируют CHCl. Экстракты сушат над MgSO и концентрируют, с получением продукта в виде твердого вещества. H ЯМР (CDCl) δ 9,3 (ушир., 1H), 8,3 (ушир., 1H), 7,83 (c, 1H), 8,81 (д, 2H), 7,56 (д, 2H), 7,47 (д, 1H), 7,20 (д, 1H), 7,0 (дд, 1H), 5,94 (c, 1H), 4,09 (т, 2H), 2,91 (т, 2H), 2,67 (кв, 4H), 1,37 (c, 9H), 1,07 (т, 6H).
2
2
6
1
D. Свободное основание со стадии C (0,020 г) растворяют в CHCl (0,5 мл) и к раствору добавляют по каплям 1,0M HCl/диоксан. Образуется твердое вещество, и растворитель удаляют с получением гидрохлоридной соли (0,020 г). H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,1 (ушир., 1H), 9,67 (ушир., 1H), 9,24 (ушир., 1H), 8,66 (c, 1H), 7,93 (д, 1H), 7,76 (д и с, 3H), 7,54 (д, 2H), 7,24 (дд, 1H), 6,53 (c, 1H), 4,44 (т, 2H), 3,24 (м, 6H), 1,29 (c, 9H), 1,24 (т, 6H).
3
2
2
4
2
2
3
2
2
4
3
2
2
2
4
E. Альтернативная последовательность реакций для соединения B2: К суспензии промежуточного соединения 2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ола из примера 3B (1,00 г, 3,2 ммоль) в ДМФ (15 мл) добавляют карбонат калия (1,38 г, 10 ммоль) и гидрохлорид (2-хлорэтил)диэтиламина (0,826 г, 4,8 ммоль), нагревают до 80ºC в течение ночи. Завершение реакции подтверждают с помощью ЖХ-МС. Добавляют к смеси 80 мл воды, фильтруют и промывают водой и диэтиловым эфиром, с получением первого промежуточного соединения в виде твердого вещества желтого цвета. Желтое твердое вещество промежуточного соединения переносят в колбу, и добавляют хлорид аммония (0,513 г, 9,6 ммоль) и 80% этанол (30 мл), и смесь нагревают с обратным холодильником при 100ºC, в этот момент добавляют порошок железа (1,787 г, 32 ммоль) и продолжают нагревать смесь с обратным холодильником при 100ºC в течение 3 часов. Завершение реакции подтверждают с помощью ЖХ-МС. Добавляют к смеси этанол (30 мл) и нагревают. Осадок фильтруют и промывают горячим этанолом. Добавляют к раствору насыщенный NaHCO и органический слой экстрагируют CHCl и сушат над MgSO и концентрируют, с получением второго промежуточного соединения в виде твердого вещества (1,089 г). Суспензию этого второго промежуточного соединения (1,08 г, 2,8 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляют к 5-трет-бутилизоксазол-3-изоцианату (0,605 г, 3,64 ммоль), и реакционную смесь нагревают до 120ºC в течение ночи. Реакцию гасят с помощью CHCl и воды с метанолом, и подщелачивают насыщенным NaHCO до установления pH примерно 8. Водный слой дважды экстрагируют CHCl. Органические слои объединяют, сушат над MgSO и концентрируют, с получением конечного продукта [Соединение B2]. Остаток очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка C18, элюируют 35-65% CHCN/HO, содержащим 0,05% AcOH). Соответствующие фракции объединяют, ацетонитрил удаляют, и экстрагируют CHCl. Экстракты сушат над MgSO и концентрируют, с получением твердого вещества белого цвета (0,894 г).
F. Соединения ниже получают способом, описанным на стадиях A-D:
1
3
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(2-пиперидин-1-илэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевины; H ЯМР (CDCl) δ 9,3 (ушир., 1H), 8,9 (ушир., 1H), 8,84 (c, 1H), 8,82 (д, 2H), 7,57 (д, 2H), 7,47 (д, 1H), 7,20 (д, 1H), 7,0 (дд, 1H), 5,89 (c, 1H), 4,15 (т, 2H), 2,81 (т, 2H), 2,53 (т, 4H), 1,63 (м, 4H), 1,5 (м, 2H), 1,37 (c, 9H). [Соединение B3]
1
3
и гидрохлорид 1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-(4-{7-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил}фенил)мочевины; H ЯМР (CDCl) δ 9,3 (ушир., 1H), 7,85 (c, 1H), 7,81 (д, 2H), 7,75 (ушир., 1H), 7,59 (д, 2H), 7,48 (д, 1H), 7,22 (д, 1H), 7,0 (дд, 1H), 5,87 (c, 1H), 4,16 (т, 2H), 2,87 (т, 2H), 2,65 (ушир., 4H), 2,5 (ушир., 4H), 2,31 (c, 3H), 1,37 (c, 9H). [Соединение B4]
Пример 5
Получение сложного 2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-илового эфира (2R)-2-амино-3-метилмасляной кислоты [Соединение B5]
6
+
A. Указанное в заголовке соединение, полученное способом, подобным способу примера 3, но где фенолмочевину (0,125 г, 0,3 ммоль) растворяют в безводном ДМФ (3 мл). К этому раствору добавляют карбонат калия (0,082 г, 0,6 ммоль) и Boc-L-валин-N-гидроксисукцинимид (0,6 ммоль). Раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, а затем концентрируют досуха. Полученное твердое вещество очищают с использованием ВЭЖХ, собирая соответствующие фракции. Их концентрируют досуха, и полученное твердое вещество растворяют в метаноле, и раствор обрабатывают 4M HCl в диоксане (2 мл). Когда отщепление защитной Boc-группы завершается, согласно масс-спектрометрии, раствор концентрируют досуха. Твердый продукт опять растворяют в минимальном объеме метанола, и осуществляют осаждение гидрохлорида посредством добавления этилового эфира. ЯМР (ДМСО-d) 8,2 (c, 1H); 7,8 (c, 1H); 7,7 (д, 1H); 7,6 (д, 2H); 7,5 (c, 2H); 7,4 (c, 1H); 7,2 (д, 2H); 6,6 (c, 1H); 6,3 (c, 1H); 4,2 (c, 1H); 2,2 (м, 1H); 1,3 (c, 9H); 1,0 (м, 6H). ЖХ-МС: ESI 582 (M+H).
+
B. Способом, подобным способу стадии A, получают сложный 2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-иловый эфир (2S)-пирролидин-2-карбоновой кислоты с использованием Boc-L-пролин-N-гидроксисукцинимида; ЖХ-МС: ESI 545 (M+H). [Соединение B6]
Пример 6
Получение гидрохлорида 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-{7-(3-морфолин-4-илпропокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение B7]
1
+
3
A. Указанное в заголовке соединение получают способом, описанным в примере 4A-D, но в нем 2-диэтиламиноэтанол заменяют 3-морфолин-4-илпропан-1-олом на стадии C. H ЯМР (CDCl) δ 9,35 (ушир., 1H), 7,87 (c, 1H), 7,83 (д, 2H), 7,59 (д, 2H), 7,51 (д, 1H), 7,45 (c, 1H), 7,22 (д, 1H), 7,02 (дд, 1H), 5,84 (c, 1H), 4,08 (т, 2H), 3,74 (т, 4H), 2,53 (м, 6H), 2,01 (м, 2H), 1,37 (c, 9H). ЖХ-МС: ESI 575 (M+H).
Пример 7
Получение 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-(4-{7-[3-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)пропокси]бензо[d]имидазо-[2,1-b]тиазол-2-ил}фенил)мочевины [Соединение B10]
A. Для получения промежуточного соединения 7-(3-хлорпропокси)2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3}бензотиазола, промежуточное соединение из примера 3B (0,500 г, 1,6 ммоль) суспендируют в ДМФ, и к суспензии добавляют карбонат калия (0,221 г, 1,6 ммоль) и 1-бром-4-хлорпропан (0,756 г, 4,8 ммоль). Затем суспензию нагревают до 80ºC в течение ночи. Смесь концентрируют досуха, и сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, с использованием этанола/гексана, 1:1 (0,440 г, 85%).
B. Для получения промежуточного соединения 7-[3-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)пропокси]-2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазола, промежуточное соединение со стадии A (1,37 г, 3,5 ммоль) суспендируют в ДМФ, и к суспензии добавляют иодид тетрабутиламмония (0,150 г) и 1-метансульфонилпиперазин (1,20 г, 7,0 ммоль). Затем суспензию нагревают до 90ºC в течение ночи. После завершения реакции смесь выливают в воду и фильтруют.
C. Для восстановления промежуточного нитросоединения со стадии B до амина: к суспензии промежуточного соединения со стадии B в изопропиловом спирте (45 мл) добавляют 10% HCl (5 мл) и порошок железа (1,82 г). Суспензию нагревают с обратным холодильником в течение 2 часов, и завершение реакции проверяют с помощью ЖХ-МС. Смесь фильтруют и промывают метанолом и DCM. Фильтрат концентрируют, выливают в насыщенный раствор бикарбоната натрия и экстрагируют три раза дихлорметаном (выход: 1,00 г, 2,6 ммоль).
1
6
D. Получение указанного в заголовке соединения: к промежуточному соединению со стадии C, растворенному в хлороформе, добавляют 5-трет-бутилизоксазол-3-изоцианат (0,431 г, 2,6 ммоль), и смесь нагревают с обратным холодильником в течение приблизительно 3 часов. Сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, с использованием 5-20% метанола/DCM с 0,5% триэтиламина. H ЯМР (ДМСО-d) 9,8 (c, 1H); 9,5 (c, 1H); 8,8 (c, 1H); 8,0 (д, 1H); 7,7 (м, 3H); 7,6 (д, 2H); 7,2 (д, 1H); 6,5 (c, 1H); 4,3 (м, 3H); 3,7 (м, 5H); 3,4 (м, 4H); 3,2 (м, 1H); 3,0 (c, 3H); 2,3 (м, 2H); 1,3 (c, 9H).
E. Следующие далее соединения получают способом, описанным на стадиях A-D, но с использованием соответствующего вторичного амина на стадии B.
1
6
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(3-тиоморфолин-4-илпропокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевина; H ЯМР (ДМСО-d) 11 (c, 1H); 9,7 (c, 1H); 9,3 (c, 1H); 8,7 (c, 1H); 7,9 (д, 2H); 7,8 (м, 3H); 7,5 (м, 2H); 7,2 (д, 1H); 6,5 (c, 1H); [Соединение B8] и
1
4
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-(4-{7-[3-(4-метилпиперазин-1-ил)пропокси]бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил}фенил)мочевина; H ЯМР (метанол-d) 8 (c, 1H); 7,7 (д, 2H); 7,6 (д, 1H); 7,5 (д, 2H); 6,9 (м, 1H); 6,4 (c, 1H); 3,9 (м, 1H); 3,3 (c, 3H); 2,5 (м, 8H); 2,3 (c, 3H); 1,8 (м, 2H); 1,3 (c, 9H); [Соединение B9]
Пример 8
Получение этил 2-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}ацетата
[Соединение C1]
4
2
5
6
1
+
A. Для получения промежуточного соединения (2-амино-1,3-бензотиазол-6-ил)уксусной кислоты, раствор брома (2,3 мл) в 10 мл уксусной кислоты добавляют по каплям в течение 30 мин к раствору (4-аминофенил)уксусной кислоты (7,00 г, 46,3 ммоль) и NHSCN (7,00 г, 92 ммоль) в 90% уксусной кислоте (100 мл) при 0ºC. После завершения добавления холодную баню удаляют и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. К смеси добавляют воду (300 мл), а затем карбонат натрия до тех пор, пока не установится pH 5. Полученный желтый осадок собирают посредством фильтрования, промывают водой и простым эфиром и сушат в вакууме с PO, с получением продукта в виде твердого вещества желтого цвета. Выход: 7,89 г (82%) H ЯМР (ДМСО-d) δ 7,51 (c, 1H), 7,40 (ушир., 2H), 7,24 (д, 1H), 7,07 (д, 1H), 3,50 (c, 2H); ЖХ-МС: ESI 209 (M+H).
2
4
3
4
6
1
+
B. Для получения промежуточного соединения метил (2-аминобензотиазол-6-ил)ацетата, 2 мл концентрированной HSO добавляют по каплям к раствору (2-амино-1,3-бензотиазол-6-ил)уксусной кислоты (7,89 г, 37,9 ммоль) в 200 мл метанола и реакционную смесь нагревают при 50ºC в течение 90 минут. После выпаривания большей части метанола добавляют дихлорметан (150 мл) и смесь нейтрализуют насыщенным раствором NaHCO. Водную фазу экстрагируют дихлорметаном. Органические экстракты объединяют, сушат над MgSO и концентрируют, с получением продукта в виде твердого вещества желтого цвета (6,51 г, 77%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 7,54 (c, 1H), 7,44 (ушир., 2H), 7,27 (д, 1H), 7,09 (д, 1H), 3,66 (c, 2H), 3,61 (c, 3H); ЖХ-МС: ESI 223 (M+H).
1
+
6
C. Для получения промежуточного соединения метил [2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]ацетата, смесь метил (2-амино-1,3-бензотиазол-6-ил)ацетата (6,26 г, 28 ммоль) и 2-бром-4'-нитроацетофенона (8,786 г, 36 ммоль) в абсолютном этаноле (80 мл) нагревают при 90ºC в течение 12 часов. Образуется твердое вещество желтого цвета, его собирают посредством фильтрования, промывают этанолом и сушат в вакууме, с получением продукта в виде твердого вещества желтого цвета (5,01 г, 48%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,07 (c, 1H), 8,32 (д, 2H), 8,12 (д, 2H), 7,97 (c, 1H и д, 2H), 7,50 (д, 1H), 3,84 (c, 2H), 3,65 (c, 3H); ЖХ-МС: ESI 368 (M+H).
4
6
1
+
D. Для получения промежуточного соединения этил [2-(4-аминофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]ацетата: смесь метил [2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]ацетата (5,00 г, 13,6 ммоль) и хлорида дигидрата олова(II) (15,795 г, 70 ммоль) в этаноле (150 мл) нагревают при 95ºC в течение 8 часов. Дополнительно добавляют хлорид дигидрата олова(II) и перемешивают при 95ºC в течение ночи. Реакцию гасят водой (200 мл) и дихлорметаном (500 мл), и pH доводят примерно до 7 с помощью 10% гидроксида натрия. Водную фазу экстрагируют дихлорметаном, объединенные органические экстракты сушат над MgSO и концентрируют. Остаток извлекают в дихлорметане и простом эфире и позволяют ему стоять в течение ночи для образования твердого вещества желтого цвета, которое отфильтровывают и сушат, с получением продукта в виде твердого вещества желтого цвета (2,55 г, 53%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 8,4 (c, 1H), 7,87 (м, 2H), 7,49 (д, 2H), 7,40 (д, 1H), 6,60 (д, 2H), 5,19 (c, 2H), 4,07 (кв, 2H), 3,79 (c, 2H), 1,18 (т, 3H); ЖХ-МС: ESI 352 (M+H).
1
+
6
E. Для получения указанного в заголовке соединения, смесь этил [2-(4-аминофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]ацетата (2,50 г, 7,1 ммоль) и 5-трет-бутил-3-изоцианатоизоксазола (1,412 г, 8,5 ммоль) в толуоле (60 мл) нагревают при 110ºC в течение ночи. Осадок собирают посредством фильтрования, промывают простым эфиром и сушат в вакууме, с получением продукта в виде твердого вещества белого цвета (3,592 г, 98%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,54 (c, 1H), 8,89 (c, 1H), 8,67 (c, 1H), 7,93 (c, 1H), 7,90 (д, 1H), 7,80 (д, 2H), 7,53 (д, 2H), 7,47 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 4,11 (кв, 2H), 3,81 (c, 2H), 1,31 (c, 9H), 1,20 (т, 3H); ЖХ-МС: ESI 518 (M+H).
Пример 9
Получение 2-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}уксусной кислоты [Соединение C2]
2
5
6
1
+
A. К суспензии этил 2-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]ацетата из примера 8 (2,00 г, 3,86 ммоль) в 30 мл ТГФ добавляют гидроксид моногидрата лития (0,966 г, 23 ммоль) и 15 мл воды. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После выпаривания ТГФ водную смесь подкисляют 10% раствором HCl до pH 6. Образуется белый твердый продукт, его собирают посредством фильтрования, промывают водой и простым эфиром и сушат в вакууме с PO, с получением продукта в виде твердого вещества белого цвета (1,815 г, 96%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 12,4 (ушир., 1H), 9,58 (c, 1H), 8,94 (c, 1H), 8,68 (c, 1H), 7,92 (c, 1H), 7,90 (д, 1H), 7,80 (д, 2H), 7,54 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 3,72 (c, 2H), 1,30 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 490 (M+H).
1
6
B. Для получения его натриевой соли: к раствору 2-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}уксусной кислоты (0,13 г, 0,27 ммоль) в MeOH (20 мл) и воде (1 мл) добавляют метоксид натрия (0,017 г, 0,031 ммоль). После выпаривания MeOH к остатку добавляют EtOH, а затем выпаривают три раза, с получением продукта в виде твердого вещества белого цвета (0,112 г). H ЯМР (ДМСО-d) δ 11,1 (ушир., 1H), 10,25 (ушир., 1H), 8,45 (c, 1H), 7,74 (м, 2H), 7,44 (д, 3H), 7,1 (д, 2H), 6,44 (c, 1H), 3,34 (c, 2H), 1,23 (c, 9H).
Пример 10
Получение этил 3-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}пропаноата [Соединение C3]
4
2
5
6
1
+
A. Для получения промежуточного соединения 3-(2-амино-1,3-бензотиазол-6-ил)пропановой кислоты, раствор брома (3 мл) в 10 мл уксусной кислоты добавляют по каплям в течение 30 мин к раствору 3-(4-аминофенил)пропановой кислоты (10,00 г, 60,5 ммоль) и NHSCN (9,21 г, 121 ммоль) в 120 мл уксусной кислоты при 0ºC. После завершения добавления холодную баню удаляют и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. К смеси добавляют воду (300 мл), а затем карбонат натрия до установления pH 5. Полученный желтый осадок собирают посредством фильтрования, промывают водой и простым эфиром и сушат в вакууме вместе с PO. Выход: 13,425 г (99%) H ЯМР (ДМСО-d) δ 12,11 (ушир., 1H), 7,49 (c, 1H), 7,37 (ушир., 2H), 7,23 (д, 1H), 7,06 (д, 1H), 2,82 (т, 2H), 2,5 (т, 2H, перекрывание с растворителем); ЖХ-МС: ESI 223 (M+H).
2
4
3
4
3
1
+
B. При получении промежуточного соединения метил 3-(2-амино-1,3-бензотиазол-6-ил)пропаноата) 2 мл концентрированной HSO добавляют по каплям к раствору 3-(2-амино-1,3-бензотиазол-6-ил)пропановой кислоты со стадии A (13,42 г, 60,4 ммоль) в метаноле (150 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После выпаривания большей части растворителя добавляют дихлорметан (200 мл) и смесь нейтрализуют насыщенным раствором NaHCO. Водную фазу экстрагируют дихлорметаном, объединенные органические экстракты сушат над MgSO и концентрируют, с получением продукта в виде твердого вещества желтого цвета (9,762 г, 68%). H ЯМР (CDCl) δ 7,37 (c, 1H и д, 1H), 7,15 (д, 1H), 5,30 (ушир., 2H), 3,68 (c, 3H), 3,00 (т, 2H), 2,17 (т, 2H); ЖХ-МС: ESI 237 (M+H).
1
+
6
C. Для получения промежуточного соединения метил 3-[2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]пропаноата: Смесь метил 3-(2-амино-1,3-бензотиазол-6-ил)пропаноата (9,76 г, 41,3 ммоль) со стадии A и 2-бром-4'-нитроацетофенона (13,178 г, 54 ммоль) в абсолютном этаноле (150 мл) нагревают при 90ºC в течение 12 часов. Образуется твердое вещество желтого цвета, его собирают посредством фильтрования, промывают этанолом и сушат в вакууме, с получением продукта в виде твердого вещества желтого цвета (6,015 г, 38%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,05 (c, 1H), 8,30 (д, 2H), 8,11 (д, 2H), 7,92 (c, 1H), 7,90 (д, 1H), 7,45 (д, 1H), 3,60 (c, 3H), 3,09 (т, 2H), 2,68 (т, 2H); ЖХ-МС: ESI 382 (M+H).
4
3
1
+
D. Для получения промежуточного соединения этил 3-[2-(4-аминофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]пропаноата: Смесь метил 3-[2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]пропаноата (6,01 г, 15,8 ммоль) со стадии B и хлорид дегидрата олова(II) (18,05 г, 80 ммоль) в этаноле (200 мл) нагревают при 90ºC в течение 12 часов. Реакцию гасят 400 мл воды и 400 мл дихлорметана и pH доводят примерно до 7 с помощью карбоната натрия. Водную фазу экстрагируют дихлорметаном, объединенные органические экстракты сушат над MgSO и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле с использованием градиента гексана/этилацетата, 0-100%, с получением продукта в виде твердого вещества желтого цвета (3,824 г, 66%). H ЯМР (CDCl) δ 7,86 (c, 1H), 7,61 (д, 2H), 7,53 (c, 1H), 7,48 (д, 1H), 7,29 (д, 1H), 6,75 (д, 2H), 4,14 (кв, 2H), 3,73 (ушир., 2H), 3,06 (т, 2H), 2,67 (т, 2H), 1,23 (т, 3H). ЖХ-МС: ESI 366 (M+H).
1
+
6
E. Смесь этил 3-[2-(4-аминофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]пропаноата (3,80 г, 10,4 ммоль) со стадии C и 5-трет-бутил-3-изоцианатоизоксазола (2,08 г, 12,5 ммоль) в толуоле (80 мл) нагревают при 110ºC в течение ночи. Образуется осадок, его собирают посредством фильтрования, промывают простым эфиром и сушат в высоком вакууме, с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (5,056 г, 91%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,62 (c, 1H), 9,08 (c, 1H), 8,70 (c, 1H), 7,91 (c, 1H), 7,89 (д, 1H), 7,79 (д, 2H), 7,54 (д, 2H), 7,46 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 4,06 (кв, 2H), 2,98 (т, 2H), 2,70 (т, 2H), 1,30 (c, 9H), 1,15 (т, 3H); ЖХ-МС: ESI 532 (M+H).
2
5
6
1
+
F. Получение 3-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}пропановой кислоты: К суспензии этил 3-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}пропаноата со стадии E (3,00 г, 5,6 ммоль) в ТГФ (30 мл) добавляют гидроксид моногидрата лития (1,428 г, 34 ммоль) и 20 мл воды. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После выпаривания органического растворителя, водную фазу подкисляют 10% раствором HCl до pH 6. Образуется твердое вещество белого цвета, его собирают посредством фильтрования, промывают водой и простым эфиром, и сушат в вакууме с PO, с получением продукта в виде твердого вещества белого цвета (2,791 г, 99%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,66 (c, 1H), 9,21 (c, 1H), 8,68 (c, 1H), 7,90 (c, 1H), 7,88 (д, 1H), 7,79 (д, 2H), 7,54 (д, 2H), 7,46 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 2,95 (т, 2H), 2,62 (т, 2H), 1,31 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 503 (M+H). [Соединение C4]
1
6
G. Соответствующую натриевую соль продукта со стадии F получают способом, описанным в примере 9B; H ЯМР (ДМСО-d) δ 12,2 (ушир., 1H), 11,2 (ушир., 1H), 8,58 (c, 1H), 7,9 (д, 1H), 7,81 (c, 1H), 7,5 (д, 1H), 7,46 (д, 2H), 7,21 (д, 2H), 6,49 (c, 1H), 2,9 (т, 2H), 2,45 (т, 2H), 1,29 (c, 9H).
Пример 11
Получение этилового эфира 2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-карбоновой кислоты [Соединение C26]
A. Для получения промежуточного соединения этилового эфира 2-(4-нитрофенил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-карбоновой кислоты сложный этиловый эфир 2-аминобензотиазол-6-карбоновой кислоты и 2-бром-4'-нитроацетофенон объединяют в 2-метоксиэтаноле и перемешивают при 40ºC в течение 24 часов. Образование промежуточного соединения подтверждают с помощью ЖХ-МС. Реакционную смесь нагревают дополнительно при 140ºC в течение 18 часов, фильтруют, промывают этанолом и сушат в высоком вакууме, с получением твердого вещества желтого цвета.
2
2
3
2
3
4
.
B. Для получения промежуточного соединения сложного этилового эфира 2-(4-аминофенил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-карбоновой кислоты добавляют SnCl HO (6,770 г, 30 ммоль) к промежуточному соединению со стадии A (2,204 г, 6 ммоль) в этаноле (40 мл) и нагревают с обратным холодильником в течение 20 часов. Реакцию гасят водой, нейтрализуют насыщенным NaHCO и экстрагируют CHCl с некоторым количеством метанола. Экстракт сушат над MgSO и концентрируют, с получением твердого вещества желтого цвета (1,518 г, 75%).
2
2
6
1
+
C. Для получения указанного в заголовке соединения смесь промежуточного соединения со стадии B (1,51 г, 4,48 ммоль) и 5-трет-бутил-3-изоцианатоизоксазола (997 мг, 6 ммоль) в толуоле (40 мл) нагревают при 100ºC в течение ночи. Образование продукта подтверждают с помощью ЖХ-МС. Осадок собирают посредством фильтрования и промывают CHCl и сушат в высоком вакууме с получением твердого вещества серого цвета (2,245 г, 99,5%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,5 (ушир., 2H), 8,76 (c, 1H), 8,70 (д, 1H), 8,1 (дд, 1H), 8,08 (д, 1H), 7,80 (д, 2H), 7,55 (д, 2H), 6,53 (c, 1H), 4,37 (кв, 2H), 1,36 (т, 3H), 1,30 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 504 (M+H).
D. Промежуточное соединение со стадии C подвергают основному гидролизу, как описано в примере 10F, с получением карбоновой кислоты.
1
+
6
E. 2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-карбоксилат натрия получают способом, описанным в примере 9B, с использованием соединения со стадии D; H ЯМР (ДМСО-d) δ 8,67 (c, 1H), 8,47 (д, 1H), 8,10 (дд, 1H), 8,87 (д, 1H), 7,78 (д, 2H), 7,67 (д, 2H), 6,55 (c, 1H), 1,31 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 476 (M+H). [Соединение C27]
Пример 12
Получение N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-(4-{7-[3-(4-этилпиперазин-1-ил)-3-оксопропил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил}фенил)мочевины [Соединение C5]
2
5
3
1
+
A. К раствору 3-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}пропановой кислоты из примера 10F (0,310 г, 0,61 ммоль) в ДМФ (8 мл) при комнатной температуре добавляют гидрохлорид N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида (0,173 г, 0,9 ммоль) и 1-гидроксибензотиазолгидрат (0,122 г, 0,9 ммоль). После 1 часа перемешивания, добавляют 1-этилпиперазин (0,5 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакцию гасят 60 мл воды, осадок собирают посредством фильтрования, промывают водой и простым эфиром и сушат в вакууме вместе с PO, с получением продукта в виде твердого вещества белого цвета (0,174 г, 48%). H ЯМР (CDCl) δ 9,54 (c, 1H), 8,88 (c, 1H), 8,65 (c, 1H), 7,88 (c, 1H), 7,85 (д, 1H), 7,79 (д, 2H), 7,52 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 6,50 (c, 1H), 3,49 (м, 6H, перекрывание с растворителем), 2,89 (м, 2H), 2,71 (м, 2H), 2,25 (м, 4H), 1,30 (c, 9H), 0,97 (т, 3H); ЖХ-МС: ESI 600 (M+H).
1
6
B. Для получения его гидрохлоридной соли продукт на стадии A обрабатывают способом, описанным в примере 3F. H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,85 (ушир., 1H), 9,69 (ушир., 1H), 9,41 (ушир., 1H), 8,71 (c, 1H), 7,88 (д и с, 2H), 7,73 (д, 2H), 7,51 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 6,47 (c, 1H), 4,41 (м, 2H), 4,05 (м, 1H), 3,35 (м, 3H), 2,69-3,10 (м, 8H), 1,24 (c, 9H), 1,17 (т, 3H).
C. Следующие далее соединения получают способом, подобным способу стадии A, но заменяют 1-этилпиперазин другими аминами, такими как пиперидин, морфолин и N,N-диэтиламин. Соответствующую гидрохлоридную соль получают таким же способом, как описано на стадии B.
1
+
6
N-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(3-оксо-3-пиперидин-1-илпропил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевина; (0,381 г, 84%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,65 (c, 1H), 9,00 (c, 1H), 8,65 (c, 1H), 7,90 (c, 1H), 7,86 (д, 1H), 7,78 (д, 2H), 7,54 (д, 2H), 7,46 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 3,41 (м, 4H), 2,93 (т, 2H), 2,68 (т, 2H), 1,54 (м, 2H), 1,42 (м, 4H), 1,30 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 571 (M+H); [Соединение C6]
1
+
6
N-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(3-морфолинo-4-ил-3-оксопропил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевина; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,56 (c, 1H), 8,90 (c, 1H), 8,66 (c, 1H), 7,89 (c, 1H), 7,85 (д, 1H), 7,79 (д, 2H), 7,52 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 6,52 (c, 1H), 3,52 (м, 4H), 3,50 (м, 4H), 2,94 (т, 2H), 2,70 (т, 2H), 1,30 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 573 (M+H); [Соединение C7]
1
6
3-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N,N-диэтилпропионамид; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,7 (ушир., 1H), 9,23 (ушир., 1H), 8,65 (c, 1H), 7,87 (д и с, 2H), 7,76 (д, 2H), 7,53 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 6,52 (c, 1H), 3,25 (м, 6H), 2,94 (м, 2H), 2,65 (м, 2H), 1,30 (c, 9H), 1,02 (м, 6H); [Соединение C8]
1
6
Гидрохлорид 3-(2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-морфолин-4-илэтил)пропионамида; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,6 (ушир., 1H), 9,61 (ушир., 1H), 9,17 (ушир., 1H), 8,64 (c, 1H), 8,20 (т, 1H), 7,82 (д и с, 2H), 7,71 (д, 2H), 7,48 (д, 2H), 7,36 (д, 1H), 6,46 (c, 1H), 3,86 (м, 2H), 3,71 (т, 2H), 3,77 (м, 4H), 2,88-3,07 (м, 6H), 2,45 (м, 2H), 1,23 (c, 9H); [Соединение C9]
1
6
Гидрохлорид 3-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-пиперидин-1-илэтил)пропионамида; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,04 (ушир., 1H), 9,70 (ушир., 1H), 9,36 (ушир., 1H), 8,72 (c, 1H), 8,29 (т, 1H), 7,88 (д и с, 2H), 7,76 (д, 2H), 7,53 (д, 2H), 7,42 (д, 1H), 6,50 (c, 1H), 3,39 (м, 4H), 3,95 (м, 4H), 2,77 (м, 2H), 2,47 (м, 2H), 1,69 (м, 5H), 1,27 (с и м, 10H); [Соединение C10]
1
6
Гидрохлорид 3-(2-{4-[3-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-пирролидин-1-илэтил)пропионамида; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,4 (ушир., 1H), 9,71 (ушир., 1H), 9,34 (ушир., 1H), 8,73 (c, 1H), 8,26 (т, 1H), 7,90 (д и с, 2H), 7,78 (д, 2H), 7,55 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 3,52 (м, 2H), 3,40 (м, 2H), 3,15 (м, 2H), 2,8-3,00 (м, 4H), 2,5 (2H), 1,93 (м, 2H), 1,85 (м, 2H), 1,30 (c, 9H); [Соединение C11]; и
1
6
Гидрохлорид 3-(2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил) уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-диэтиламиноэтил)пропионамида; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,95 (ушир., 1H), 9,64 (ушир., 1H), 9,25 (ушир., 1H), 8,66 (c, 1H), 8,23 (т, 1H), 7,83 (д и с, 2H), 7,72 (д, 2H), 7,48 (д, 2H), 7,38 (д, 1H), 6,46 (c, 1H), 3,34 (м, 2H), 2,88-3,07 (м, 8H), 2,5 (2H), 1,24 (c, 9H), 1,10 (т, 6H). [Соединение C12).
D. Следующие далее соединения получают способом, подобным способу стадии A, но заменяют пропановую кислоту 3-{2-[4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}уксусной кислотой из примера 9A и с использованием соответствующих замещенных аминов. Соответствующие гидрохлоридные соли получают способом, описанным в примере 3F.
1
6
Гидрохлорид 2-(2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-морфолин-4-илэтил)ацетамида; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,76 (ушир., 1H), 9,65 (ушир., 1H), 9,24 (ушир., 1H), 8,70 (c, 1H), 8,51 (ушир., 1H), 7,91 (д и с, 2H), 7,76 (д, 2H), 7,50 (м, 3H), 6,50 (c, 1H), 3,90 (м, 2H), 3,76 (т, 2H), 3,59 (c, 2H), 3,40 (м, 4H), 3,14 (м, 2H), 2,99 (м, 2H), 1,27 (c, 9H); [Соединение C13]
1
6
Гидрохлорид 2-(2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-пиперидин-1-илэтил)ацетамида; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,8 (ушир., 1H), 9,60 (ушир., 1H), 9,15 (ушир., 1H), 8,64 (c, 1H), 8,47 (т, 1H), 7,86 (д и с, 2H), 7,72 (д, 2H), 7,48 (д, 2H), 7,42 (д, 1H), 6,46 (c, 1H), 3,54 (c, 2H), 3,37 (м, 4H), 3,05 (м, 2H), 2,81 (м, 2H), 1,64 (м, 6H), 1,24 (c, 9H); [Соединение C14]
1
6
Гидрохлорид 2-(2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-пирролидин-1-илэтил)ацетамида; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,95 (ушир., 1H), 9,70 (ушир., 1H), 9,26 (ушир., 1H), 8,67 (c, 1H), 8,35 (т, 1H), 7,90 (д и с, 2H), 7,78 (д, 2H), 7,54 (д, 2H), 7,46 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 3,59 (c, 2H), 3,34 (2H), 2,86 (м, 6H), 1,80 (м, 4H), 1,30 (c, 9H); [Соединение C15]
1
6
Гидрохлорид 2-(2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил)-N-(2-диэтиламиноэтил)ацетамида; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,85 (ушир., 1H), 9,65 (ушир., 1H), 9,18 (ушир., 1H), 8,70 (c, 1H), 8,49 (т, 1H), 7,93 (д и с, 2H), 7,79 (д, 2H), 7,54 (д, 2H), 7,48 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 3,61 (c, 2H), 3,43 (м, 2H), 3,14 (м, 6H), 1,30 (c, 9H), 1,18 (т, 6H); [Соединение C16], и
1
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-(4-{7-[2-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил]бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил}фенил)мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,9 (ушир., 1H), 9,78 (ушир., 1H), 9,40 (ушир., 1H), 8,81 (c, 1H), 8,01 (д, 1H), 7,95 (c, 1H), 7,86 (д, 2H), 7,63 (д, 2H), 7,50 (д, 1H), 6,60 (c, 1H), 4,55 (д, 1H), 4,3 (д, 1H), 4,00 (c, 2H), 3,57 (м, 3H), 3,21 (м, 3H), 3,00 (м, 2H), 1,37 (c, 9H), 1,35 (т, 3H); [Соединение C17]; и
1
6
1-(5-трет-Бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(2-морфолин-4-ил-2-оксоэтил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевина; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,55 (c, 1H), 8,88 (c, 1H), 8,66 (c, 1H), 7,88 (д, 1H), 7,85 (c, 1H), 7,78 (д, 2H), 7,53 (д, 2H), 7,41 (дд, 1H), 6,53 (c, 1H), 3,86 (c, 2H), 3,55 (м, 6H), 3,47 (м, 2H), 1,30 (c, 9H). [Соединение C18].
E. Следующие далее соединения получают способом, подобным способу стадии A, но заменяют пропановую кислоту 2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-карбоновой кислотой из примера 11D и используют соответствующие замещенные амины. Соответствующие гидрохлоридные соли получают способом, описанным в примере 3F.
1
+
6
Гидрохлорид (2-морфолин-4-илэтил)амида 2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-карбоновой кислоты; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,5 (ушир., 1H), 9,65 (c, 1H), 9,17 (c, 1H), 9,02 (т, 1H), 8,76 (c, 1H), 8,59 (c, 1H), 8,09 (м, 2H), 7,79 (д, 2H), 7,56 (д, 2H), 6,53 (c, 1H), 4,00 (м, 2H), 3,82 (м, 4H), 3,57 (м, 2H), 3,35 (м, 2H), 3,17 (м, 2H), 1,31 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 588 (M+H); [Соединение C19];
1
+
6
Гидрохлорид (2-пиперидин-1-илэтил)амида 2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-карбоновой кислоты; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,8 (ушир., 1H), 9,66 (c, 1H), 9,20 (c, 1H), 9,03 (т, 1H), 8,76 (c, 1H), 8,59 (д, 1H), 8,09 (м, 2H), 7,79 (д, 2H), 7,56 (д, 2H), 6,53 (c, 1H), 3,72 (м, 2H), 3,56 (м, 2H), 3,26 (м, 2H), 2,96 (м, 2H), 1,80 (м, 5H), 1,4 (м, 1H), 1,30 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 586 (M+H); [Соединение C20];
1
+
6
Гидрохлорид (2-пирролидин-1-илэтил)амида 2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-карбоновой кислоты; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,2 (ушир., 1H), 9,68 (c, 1H), 9,24 (c, 1H), 8,99 (т, 1H), 8,77 (c, 1H), 8,60 (д, 1H), 8,09 (м, 2H), 7,79 (д, 2H), 7,56 (д, 2H), 6,53 (c, 1H), 3,67 (м, 4H), 3,37 (м, 2H), 3,06 (м, 2H), 2,00 (м, 4H), 1,31 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 572 (M+H); [Соединение C21];
1
+
6
Гидрохлорид (2-диэтиламиноэтил)амида 2-{4-[3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)уреидо]фенил}имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-карбоновой кислоты; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,8 (ушир., 1H), 9,62 (c, 1H), 9,13 (c, 1H), 8,98 (т, 1H), 8,74 (c, 1H), 8,55 (д, 1H), 8,07 (м, 2H), 7,77 (д, 2H), 7,53 (д, 2H), 6,51 (c, 1H), 3,66 (м, 2H), 3,22 (м, 6H), 1,28 (c, 9H), 1,22 (т, 6H); ЖХ-МС: ESI 574 (M+H); [Соединение C22];
1
+
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(4-этилпиперазин-1-карбонил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,7 (ушир., 1H), 9,73 (c, 1H), 9,27 (c, 1H), 8,84 (c, 1H), 8,27 (c, 1H), 8,12 (д, 1H), 7,86 (д, 2H), 7,76 (д, 1H), 7,64 (д, 2H), 6,60 (c, 1H), 3,54 (м, 4H), 3,16 (м, 6H), 1,37 (c, 9H), 1,33 (т, 3H); ЖХ-МС: ESI 572 (M+H); [Соединение C23];
1
+
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(пиперазин-1-карбонил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,63 (c, 1H), 9,10 (c, 1H), 9,06 (ушир., 2H), 8,76 (c, 1H), 8,19 (c,1H), 8,04 (д, 1H), 7,80 (д, 2H), 7,69 (д, 1H), 7,55 (д, 2H), 6,52 (c, 1H), 3,73 (м, 4H), 3,21 (м, 4H), 1,30 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 544 (M+H) [Соединение C24]; и
1
+
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(4-метилпиперазин-1-карбонил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,8 (ушир., 1H), 9,63 (c, 1H), 9,22 (c, 1H), 8,72 (c, 1H), 8,13 (c, 1H), 8,00 (д, 1H), 7,72 (д,2H), 7,62 (д, 1H), 7,49 (д, 2H), 6,46 (c, 1H), 3,33 (м, 4H), 3,06 (м, 4H), 2,74 (c, 3H), 1,24 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 558 (M+H) [Соединение C25].
Пример 13
Получение гидрохлорида N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-(4-{7-[3-(4-этилпиперазин-1-ил)пропил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил}фенил)мочевины [Соединение D1]
3
2
3
4
6
1
+
К суспензии N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-(4-{7-[3-(4-этилпиперазин-1-ил)-3-оксопропил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил}фенил)мочевины из примера 12A (0,17 г, 0,28 ммоль) в ТГФ (10 мл) при комнатной температуре добавляют 2,0M раствор BH/MeS в ТГФ (1 мл). Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 4 часов. Реакцию гасят посредством добавления по каплям 10% раствора HCl и перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин. Смесь подщелачивают насыщенным раствором NaHCO и экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические экстракты сушат над MgSO и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, с использованием градиента гексана/этилацетата, 30-100%, а затем градиента метанола/этилацетата, 0-20%. Соответствующие фракции собирают, объединяют и концентрируют с получением свободного основания N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-(4-{7-[3-(4-этилпиперазин-1-ил)пропил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил}фенил)мочевины. Свободное основание растворяют в дихлорметане (примерно 1 мл) и метаноле (несколько капель). К этому раствору добавляют по каплям 1,0M раствор HCl/простой эфир (1,3 эквивалента) и образуется осадок. После выпаривания растворителей остаток извлекают простым эфиром, фильтруют и промывают простым эфиром, с получением продукта в виде твердого вещества белого цвета (0,011 г, 6%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,6 (c, 1H), 9,07 (c, 1H), 8,69 (c, 1H), 7,92 (м, 2H), 7,78 (д, 2H), 7,54 (д, 2H), 7,48 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 3,50 (4H, перекрывание с растворителем), 3,22 (м, 6H), 2,75 (м, 4H), 2,10 (м, 2H), 1,30 (c, 9H), 1,24 (т, 3H); ЖХ-МС: ESI 586 (M+H).
Пример 14
Получение 3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-1-метил-1-{4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]-тиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение D2] и 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение D3]
3
2
3
2
2
2
3
4
A. К суспензии N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(3-морфолинo-4-ил-3-оксопропил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины (0,38 г, 0,66 ммоль) из примера 12C в ТГФ (10 мл) при комнатной температуре добавляют по каплям 2,0M раствор BH/MeS в ТГФ (1,5 мл). Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение ночи. К смеси добавляют 10% раствор HCl для разрушения избытка BH/MeS, гасят ее CHCl, нейтрализуют насыщенным раствором NaHCO. Органический слой сушат над MgSO и концентрируют, с получением смеси двух соединений; метил{4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}амина и 4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо-[2,1-b]тиазол-2-ил]фениламина.
2
2
3
4
2
2
B. К смеси добавляют толуол и 5-трет-бутил-3-изоцианатоизоксазол (150 мг), и нагревают при 110ºC в течение ночи. Ее гасят CHCl и насыщенным раствором NaHCO. Органический слой сушат над MgSO и концентрируют. Сырую смесь разделяют с помощью флэш-хроматографии с MeOH/CHCl, 0-10%, в качестве элюента, с получением двух соединений: 3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-1-метил-1-{4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевины и 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевины.
C. Соответствующие гидрохлоридные соли получают способом, описанным в примере 3F:
1
6
Гидрохлорид 3-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-1-метил-1-{4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,7 (ушир., 1H), 9,31 (ушир., 1H), 8,81 (c, 1H), 7,94 (м, 2H), 7,88 (д, 2H), 7,49 (м, 1H), 7,38 (д, 2H), 6,50 (c, 1H), 3,94 (м, 2H), 3,76 (м, 6H), 3,30 (c, 3H), 3,09 (м, 4H), 2,77 (м, 4H), 2,08 (м, 2H), 1,28 (c, 9H); и
1
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(3-морфолин-4-илпропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,4 (ушир., 1H), 9,64 (ушир., 1H), 9,1 (ушир., 1H), 8,70 (c, 1H), 7,91 (д и с, 2H), 7,79 (д, 2H), 7,54 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 3,93 (м, 2H), 3,73 (м, 6H), 3,09 (м, 4H), 2,78 (м, 4H), 2,1 (м, 2H), 1,30 (c, 9H).
Пример 15
Получение гидрохлорида N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(3-пиперидин-1-илпропил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение D4]
3
3
3
4
6
6
1
13
+
К суспензии N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(3-оксо-3-пиперидин-1-илпропил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины из примера 12C (0,36 г, 0,63 ммоль) в ТГФ (10 мл) при комнатной температуре добавляют 1,0M раствор BH/ТГФ в ТГФ (10 мл). Смесь нагревают с обратным холодильником в течение ночи, но ЖХ-МС показывает, что реакция не завершена. По этой причине, добавляют дополнительные 5,0 мл 1,0M раствора BH/ТГФ и нагревают смесь с обратным холодильником в течение 8 часов. Реакцию гасят посредством добавления по каплям 10% раствора HCl и перемешивают при комнатной температуре в течение 20 мин. Смесь подщелачивают насыщенным раствором NaHCO и экстрагируют дихлорметаном. Объединенные органические экстракты сушат над MgSO и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле, с использованием градиента метанола/дихлорметана 0-10%. Соответствующие фракции собирают, объединяют и концентрируют, с получением свободного основания, N-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-N'-{4-[7-(3-пиперидин-1-илпропил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины (0,182 г). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,54 (c, 1H), 8,88 (c, 1H), 8,67 (c, 1H), 7,90 (c, 1H), 7,88 (д, 1H), 7,79 (д, 2H), 7,53 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 2,75 (м, 8H), 2,05 (м, 2H), 1,67 (м,2H), 1,47 (м, 4H), 1,30 (c, 9H); C ЯМР (ДМСО-d) δ 180,55, 158,75, 151,65, 146,97, 146,42, 138,99, 138,38, 130,52, 129,59, 128,77, 127,27, 125,58, 124,70, 119,05, 113,37, 108,58, 92,81, 65,28, 57,96, 32,90, 28,72, 24,93, 22,55, 20,24, 15,53; ЖХ-МС: ESI 557 (M+H).
1
+
6
Свободное основание растворяют в 2 мл дихлорметана и 0,5 мл метанола. Добавляют по каплям 1,0M раствор HCl/простого эфира (0,4 мл, 1,2 эквивалента). После стояния в течение нескольких минут образуется твердое вещество белого цвета, его собирают посредством фильтрования, промывают простым эфиром и сушат в вакууме, с получением продукта в виде твердого вещества белого цвета (0,120 г, 32%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,6 (c, 1H), 9,05 (c, 1H), 8,70 (c, 1H), 7,92 (c, 1H), 7,9 (д, 1H), 7,78 (д, 2H), 7,55 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 2,74 (м, 8H), 2,05 (м, 2H), 1,65 (м, 2H), 1,5 (м, 4H), 1,30 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 557 (M+H).
Пример 16
Получение гидрохлорида 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(2-морфолин-4-илэтил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение D5]
2
2
5
6
1
A. Получение промежуточного соединения метил [2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]уксусной кислоты: К суспензии метил [2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]ацетата из примера 8C (4,51 г, 12,28 ммоль) в ТГФ (60 мл) добавляют LiOH·HO (2,727 г, 65 ммоль) и воду (30 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение двух часов. После удаления ТГФ водную фазу подкисляют 10% раствором HCl до установления pH 6. Желтое твердое вещество собирают посредством растирания и промывают водой, и сушат в высоком вакууме с помощью PO (4,249 г, 98%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,02 (c, 1H), 8,27 (д, 2H), 8,09 (д, 2H), 8,88 (с и д, 2H), 7,43 (д, 1H), 3,56 (c, 2H).
2
5
6
1
B. Получение промежуточного соединения 1-морфолин-4-ил-2-[2-(4-нитрофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил]этанона: К промежуточному соединению со стадии A (883 мг, 2,5 ммоль) в ДМФ (14 мл) при комнатной температуре добавляют гидрохлорид N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида (0,767 г, 4 ммоль) и 1-гидроксибензотиазолгидрат (0,540 г, 4 ммоль). После перемешивания в течение 30 минут добавляют морфолин (1 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов. Реакцию гасят 100 мл воды, и осадок собирают посредством фильтрования, промывают водой и сушат в вакууме с помощью PO, с получением твердого вещества желтого цвета (0,908 г, 86%). H ЯМР (ДМСО-d) δ 9,05 (c, 1H), 8,31 (д, 2H), 8,12 (д, 2H), 7,94 (д, 1H), 7,88 (c, 1H), 7,43 (д, 1H), 3,87 (c, 2H), 3,56 (м, 6H), 3,48 (м, 2H).
3
2
3
2
2
4
C. Для получения промежуточного соединения 4-[7-(2-морфолин-4-илэтил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фениламина: суспензию 1-морфолин-4-ил-2-[2-(4-нитрофенил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-7-ил]этанона (0,905 г, 2,14 ммоль) в ТГФ (30 мл) при комнатной температуре добавляют по каплям 2,0M раствор BH-MeS в ТГФ (5 мл), а затем ее нагревают при 90ºC в течение 4 часов. В реакционную смесь осторожно добавляют по каплям 10% HCl (15 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. Ее нейтрализуют насыщенным NaHCO и экстрагируют CHCl. Экстракты объединяют, сушат над MgSO и концентрируют, с получением твердого вещества желтого цвета.
1
6
Твердое вещество желтого цвета суспендируют в метаноле (30 мл) и к нему добавляют никель Ренея (~1,0 г, влажный). Реакционную смесь встряхивают в атмосфере водорода (50 фунт/кв.дюйм) в течение 6 часов. Ее фильтруют с помощью Целита и промывают метанолом. Остаток на фильтре концентрируют, с получением продукта в виде твердого вещества. H ЯМР (ДМСО-d) δ 8,40 (c, 1H), 7,85 (c, 1H), 7,82 (д, 1H), 7,52 (д, 2H), 7,40 (д, 1H), 6,61 (д, 2H), 5,19 (c, 2H), 3,58 (т, 4H), 2,85 (т, 2H), 2,56 (т, 2H), 2,43 (т, 4H).
1
+
6
D. Реакцию связывания осуществляют способом, описанным в примере 3E, с образованием указанного в заголовке продукта, и его гидрохлоридную соль получают способом, описанным в примере 3F; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,8 (ушир., 1H), 9,66 (c, 1H), 9,20 (c, 1H), 8,71 (c, 1H), 7,97 (д и с, 2H), 7,79 (д, 2H), 7,55 (д, 2H), 7,49 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 4,01 (м, 2H), 3,77 (т, 2H), 3,54 (т, 2H), 3,41 (м, 2H), 3,18 (м, 4H), 1,30 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 545 (M+H).
E. Следующие далее соединения получают способом, описанным на стадиях A-D выше, с использованием соответствующего амина на стадии B:
1
+
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(2-пиперидин-1-илэтил)имидазо-[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,0 (ушир., 1H), 9,68 (c, 1H), 9,24 (c, 1H), 8,71 (c, 1H), 7,96 (д и с, 2H), 7,78 (д, 2H), 7,55 (д, 2H), 7,49 (д, 1H), 6,53 (c, 1H), 3,52 (м, 2H), 3,33 (м, 2H), 3,17 (м, 2H), 2,92 (м, 2H), 1,77 (м, 5H), 1,45 (м, 1H), 1,30 (c, 9H). ЖХ-МС: ESI 544 (M+H). [Соединение D6].
1
+
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-(4-{7-[2-(4-этилпиперазин-1-ил)этил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил}фенил)мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 11,3 (ушир., 1H), 9,64 (c, 1H), 9,14 (c, 1H), 8,69 (c, 1H), 7,96 (д и с, 2H), 7,78 (д, 2H), 7,51 (м, 3H), 6,52 (c, 1H), 3,75 (м, 4H), 3,21 (м, 6H), 2,53 (м, 4H), 1,30 (c, 9H), 1,27 (т, 3H); ЖХ-МС: ESI 573 (M+H). [Соединение D7].
2
2
3
2
F. Следующие далее соединения получают способом, описанным на стадиях A-D выше, за исключением того, что на стадии C осуществляют двухстадийное восстановление, на ней восстановление нитрогруппы осуществляют сначала с использованием смеси SnCl·HO в этаноле, нагреваемой с обратным холодильником в течение вплоть до нескольких часов. За этой реакцией следует второе восстановление амида до третичного амина с помощью BH-MeS в ТГФ.
1
+
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-морфолин-4-илметилимидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил)фенил]мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,7 (ушир., 1H), 9,58 (c, 1H), 9,09 (c, 1H), 8,68 (c, 1H), 8,12 (c, 1H), 8,01 (д, 1H), 7,73 (м, 3H), 7,48 (д, 2H), 6,46 (c, 1H), 4,39 (c, 2H), 3,88 (м, 2H), 3,66 (м, 2H), 3,22 (м, 2H), 3,10 (м, 2H), 1,24 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 531 (M+H). [Соединение D8].
1
+
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-{4-[7-(4-этилпиперазин-1-илметил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил]фенил}мочевины; H ЯМР(ДМСО-d) δ 11,5 (ушир., 1H), 9,71 (c, 1H), 9,32 (c, 1H), 8,77 (c, 1H), 8,25 (c, 1H), 8,06 (д, 1H), 7,82 (м, 3H), 7,56 (д, 2H), 6,53 (c, 1H), 4,39 (c, 2H), 3,65 (м, 4H), 3,38 (м, 4H), 3,15 (м, 2H), 1,30 (c, 9H), 1,22 (т, 3H); ЖХ-МС: ESI 559 (M+H). [Соединение D9].
1
+
6
Гидрохлорид 1-(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)-3-[4-(7-пиперидин-1-илметилимидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-2-ил)фенил]мочевины; H ЯМР (ДМСО-d) δ 10,5 (ушир., 1H), 9,79 (c, 1H), 9,44 (c, 1H), 8,83 (c, 1H), 8,29 (c, 1H), 8,13 (д, 1H), 7,87 (д и с, 3H), 7,62 (д, 2H), 6,60 (c, 1H), 4,44 (c, 2H), 3,40 (м, 2H), 2,95 (м, 2H), 1,84 (м, 5H), 1,45 (м, 1H), 1,37 (c, 9H); ЖХ-МС: ESI 529 (M+H). [Соединение D10].
Пример 17
Получение {4-[7-(3-морфолин-4-ил-3-оксопропил)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}амида морфолин-4-карбоновой кислоты [Соединение E1]
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
4
6
1
А. К суспензии 3-{2-(4-({[(5-трет-бутилизоксазол-3-ил)амино]карбонил}амино)фенил]имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазол-7-ил}пропановой кислоты (0,504 г, 1 ммоль) в CHCl добавляют 1,0M раствор оксалилхлорида в CHCl (2 мл), а затем несколько капель ДМФ. После его перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов растворитель выпаривают. К остатку добавляют CHCl и морфолин (2 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакцию гасят водой и CHCl, подщелачивают насыщенным раствором NaHCO и экстрагируют три раза CHCl. Экстракты объединяют, сушат над MgSO и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии с MeOH/EtOAc, 0-10%, в качестве элюента, с получением продукта в виде твердого вещества белого цвета (0,126 г). H ЯМР (ДМСО-d) δ 8,61 (c, 2H), 7,89 (c, 1H), 7,86 (д, 1H), 7,73 (д, 2H), 7,53 (д, 2H), 7,45 (д, 1H), 3,62 (м, 4H), 3,50 (м, 4H), 3,44 (м, 8H), 2,94 (м, 2H), 2,70 (м, 2H).
Пример 18
Получение 2-бензо[d]изоксазол-3-ил-N-{4-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}ацетамида
2
2
2
2
2
2
2
2
A. Бензо[d]изоксазол-3-ил-уксусную кислоту (0,260 г, 1,47 ммоль) растворяют в 10 мл сухого ДМФ. К этому раствору добавляют HOBt (1-гидроксибензотиазолгидрат, 0,238 г, 1,76 ммоль) и EDCI (гидрохлорид N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида, 0,338 г, 1,76 ммоль). Через 20 минут добавляют триэтиламин (0,354 г, 0,487 мл, 3,5 ммоль), с последующим добавлением промежуточного амина из примера 3D (0,394 г, 1,50 ммоль), реакционной смеси позволяют перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре. Затем раствор выливают в насыщенный раствором соли и экстрагируют этилацетатом, а затем CHCl. Объединенные экстракты сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют до твердого вещества. Его очищают с использованием хроматографии на силикагеле, с градиентом метанола в CHCl, 0-10%, с 0,1% триэтиламина. Соответствующие фракции собирают и концентрируют. Твердое вещество перекристаллизовывают из метанола, CHCl, этилацетата. Полученное твердое вещество собирают посредством фильтрования и растворяют в метаноле-CHCl.
1
3
B. К этому раствору со стадии A добавляют 3 мл 4M HCl/диоксана, и полученный раствор концентрируют до твердого вещества. Это твердое вещество растворяют в 3 мл метанола и добавляют этиловый эфир до тех пор, пока не образуется осадок. Этот твердый продукт собирают посредством фильтрования, сушат в высоком вакууме, с получением 72 мг гидрохлоридной соли; H ЯМР (CDCl) 7,8 (м, 3H); 7,6 (м, 5H); 4,2 (м, 4H); 3,8 (м, 2H); 3,2 (c, 3H); 3,0 (c, 3H); 3,9 (м, 1H); 2,7 (м, 2H). [Соединение E2]
C. Следующие далее соединения получают способом, описанным на стадии А, использованием соответствующей замещенной карбоновой кислоты вместо уксусной кислоты:
1
3
{4-[7-(2-Морфолин-4-илэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}амид 2-метил-4-трифторметилтиазол-5-карбоновой кислоты; H ЯМР (CDCl) 7,8 (м, 3H); 7,6 (м, 2H); 7,4 (д, 1H); 6,9 (д, 1H); 4,3 (м, 2H); 3,8 (м, 2H); 3,1 (м, 2H); 2,9 (м, 2H); [Соединение E3] и
1
3
{4-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}амид 2-(4-хлорфенил)4-метилтиазол-5-карбоновой кислоты; H ЯМР (CDCl) 7,8 (м, 2H); 7,9 (c, 1H); 7,8 (д, 1H); 7,7 (д, 1H); 7,7-7,4 (м, 6H); 7,4 (д, 1H); 7,0 (м, 1H); 4,3 (м, 2H); 3,8 (м, 5H); 3,0 (м, 3H); 2,7 (м, 5H). [Соединение E4].
Пример 19
Получение 1-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил)-3-{4-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевины [Соединение F1]
A. Указанное в заголовке соединение и соединения, перечисленные в этом разделе A, получают с использованием аналогичных процедур и реагентов, как описано в Примере 3E, с использованием 7-(2-морфолин-4-илэтокси)2-(4-аминофенил)имидазо[2,1-b][1,3]бензотиазола и соответствующего замещенного изоцианата:
1
6
Указанное в заголовке соединение: H ЯМР (ДМСО-d) 8,7 (c, 1H); 8,0 (д, 1H); 7,8 (м, 3H); 7,5 (д, 2H); 7,3 (д, 1H); 7,1 (c, 1H); 6,8 (c, 2H); 4,4 (c, 2H); 4,3 (м, 4H); 4,0 (м, 2H); 3,7 (м, 4H); 3,3 (м, 2H); [Соединение F1].
1
6
1-(4-трет-Бутилфенил)-3-{4-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевина; H ЯМР (ДМСО-d) 11,3 (c, 1H); 9,4 (c, 1H); 9,2 (c, 1H); 8,8 (c, 1H); 8,2 (д, 1H); 7,9 (c, 1H); 7,8 (д, 2H); 7,6 (д, 2H); 7,4 (д, 2H); 7,3 (д, 2H); 4,5 (c, 2H); 3,2 (м, 2H); 1,3 (c, 9H); [Соединение F2].
1
6
1-Бензо[1,3]диоксол-5-ил-3-{4-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевина; H ЯМР (ДМСО-d) 8,5 (м, 3H); 7,8-7,6 (м, 3H); 7,5 (м, 2H); 7,2 (м, 2H); 6,9 (м, 2H); 5,9 (c, 2H); 4,3 (м, 2H); 3,5 (м, 5H); 2,7 (м, 5H); [Соединение F3].
1
4
1-(2-Метилбензотиазол-5-ил)-3-{4-[7-(2-морфолин-4-илэтокси)бензо[d]имидазо[2,1-b]тиазол-2-ил]фенил}мочевина; H ЯМР (метанол-d) 8,4 (c, 1H); 8,2 (c, 1H); 7,8 (м, 4H); 7,4 (м, 4H); 7,1 (м, 1H); 4,2 (т, 2H); 3,7 (м, 5H); 2,9 (м, 2H); 2,8 (м, 4H); 1,2 (м, 2H). [Соединение F8].
Измерения константы связывания (K
) для взаимодействия низкомолекулярные соединения - киназа
d
d
d
Способы измерения сродства связывания для взаимодействий между низкомолекулярными соединениями и киназами, включая FLT3, KIT, p38, ABL, VEGFR (также KDR) и EGFR, описаны в Fabian et al (2005), Nature Biotechnology 23 (3): 329-336, которая включается сюда в виде ссылки. Посредством исследований на большом классе протеинкиназ, также определяют специфичность ингибиторов киназы, представленных в настоящем описании. Компоненты анализов включают в себя различные киназы человека, экспрессируемые как слияния с частицами бактериофага T7 и иммобилизованных лигандов, которые связаны с ATP сайтом киназ. Для анализов, киназы фаговых дисплеев и иммобилизованные на сайте ATP лиганды объединяются с соединением, которое должно исследоваться. Если исследуемое соединение связывается с киназой, оно конкурирует с иммобилизованными лигандами и предотвращает связывание с твердой подложкой. Если исследуемое соединение не связывается с киназой, белки фаговых дисплеев свободно связываются с твердой подложкой при взаимодействии между киназой и иммобилизованным лигандом. Результаты считываются посредством количественного определения белка слияния, связанного с твердой подложкой, которое осуществляется либо посредством традиционных анализов фаговых бляшек, либо с помощью количественной PCR (qPCR), с использованием фагового генома в качестве шаблона. Для определения сродства взаимодействий между исследуемой молекулой и киназой количество киназы фагового дисплея, связанной с твердой подложкой, определяется как функция концентрации исследуемого соединения. Концентрация исследуемых молекул, которая уменьшает количество фага, связанного с твердой подложкой, на 50%, равна K для взаимодействия между киназой и исследуемой молекулой. Как правило, данные собирают для двенадцати концентраций исследуемого соединения и полученную кривую связывания подгоняют к изотерме некооперативного связывания для вычисления K.
Значения сродства связывания показаны в Таблице 1, ниже, и приводятся следующим образом: "+" представляет значение константы диссоциации связывания (Kd) 1000 нМ или выше; "++" представляет значение константы диссоциации связывания (Kd) от 100 нМ до 1000 нМ; "+++" представляет значение константы диссоциации связывания (Kd) от 10 нМ до 100 нМ и "++++" представляет значение константы диссоциации связывания (Kd) меньшее чем 10 нМ.
Исследование in vivo
2
7
7
3
3
3
3
Репрезентативные соединения исследуют на модели мышей с привитыми опухолями для оценки активности in vivo при 1, 3 и 10 мг/кг против хорошо установленных подкожных опухолей MV4-11 у самок атимических голых мышей. Привитые опухоли инициируются из клеток лейкемии человека MV4-11, культивируемых в среде Искова, модифицированной Дюльбекко, дополненной 10% термически дезактивированной фетальной сыворотки теленка, 100 единиц/мл пенициллина G, 100 мкг/мл сульфата стрептомицина, 0,25 мкг/мл амфотерецина B, 2 мМ глютамина, 0,075% бикарбоната натрия и 25 мкг/мл гентамицина. Клетки опухолей поддерживаются в увлажненной атмосфере из 95% воздуха и 5% CO при 37ºC. Клетки собирают во время фазы логарифмического роста и повторно суспендируют при концентрации 5×10 клеток/мл в 50% матрицы Matrigel (BD Biosciences) и 50% PBS. Клетки MV4-11 (1×10) имплантируют подкожно в правый бок каждой исследуемой мыши и рост опухолей отслеживают. Через двенадцать дней, в день 1 исследования, мышей помещают в восьми группах, каждая содержит по десять мышей с индивидуальными размерами опухоли от 126 до 221 мм и средним размером опухоли в группе 174 мм, объем опухоли вычисляют как произведение ширина × ширина × длина в мм опухоли MV4-11. Исследуемые соединения приготовляют для дозирования при 10 мл/кг и вводят с помощью перорального зонда (p.o.) раз в день в течение двадцати восьми дней (qd×28). Каждая доза лекарственного средства вводится при объеме 0,2 мл на 20 г массы тела (10 мл/кг) и подбирается для массы тела животного. Каждое животное забивают, когда его опухоль достигает заданного конечного размера 1000 мм, или в последний день исследований (день 59), что наступит раньше. Время конечного момента (TTE) для каждой мыши вычисляют из следующего уравнения: TTE (дни) =[log 10 (объем в конечный момент в мм)-b]/м, где b представляет собой отсекаемый отрезок и m представляет собой крутизну линии, полученной с помощью линейной регрессии логарифмически преобразованного множества данных по росту опухоли. Результаты лечения определяют по замедлению роста опухоли (TGD), определяемому как увеличения медианного времени до конечного момента (TTE) в леченой группе, по сравнению с контрольной группой, выраженное в днях, или как процент от медианного TTE контрольной группы. Фиг.1 показывает медианные кривые роста опухоли, генерируемые из эксперимента in vivo, который демонстрирует, что репрезентативное соединение, представленное в настоящем описании, производит зависимую от дозы противоопухолевую активность.
Анализ клеточной пролиферации
Выживаемость и пролиферация раковых клеток может оцениваться с использованием анализа на клеточной основе с восстановлением тетразолиевой соли. В жизнеспособных клетках этот колориметрический анализ может измерять митохондриальное восстановление тетразолиевого компонента (MTS) в нерастворимом продукте формазане.
MV4-11 представляет собой хорошо характеризуемую Flt3-зависимую линию клеток человека, которые содержат внутренние тандемные дупликации (ITD), обнаруживаемые у пациентов с острой миелоидной лейкемией, и они экспрессирует конститутивно активные рецепторы Flt3 (Yee et al. Blood (2002) 100(8):2941-2949). Эта линия клеток используется для определения способности соединений, представленных в настоящем описании, к ингибированию Flt3 в интактных клетках. Линия клеток RS4-11, которая экспрессирует рецептор дикого типа (WT), также используется как контроль для проверки способности исследуемого соединения к ингибированию рецептора FLT3, содержащего ITD-мутацию. Пролиферацию клеток MV4-11 измеряют после 72-часового инкубирования с соединениями, предусмотренными здесь, а RS4-11 после 48-часового инкубирования с соединениями, предусмотренными здесь, используя в обоих случаях стандартный протокол MTS (Promega Cat #5430 "Cell Titer 96 Aqueous Non-radioactive Cell Proliferation Assay").
50
2
Клетки MV4-11 помещают на планшет, 10000 клеток на лунку в среде DMEM с 0,5% сыворотки. Клетки RS4-11 помещают на планшет, при 20000 клеток на лунку в RPMI с 0,5% сыворотки. Планшет с соединениями настраивают посредством аликвотирования в столбце 1 96-луночного 300 мкл полипропиленового планшета отрицательного контроля (DMSO), аликвотирования в столбце 12 положительного контроля (внутреннее соединение, имеющее, как показано, IC, равное 64 нМ, при анализе MV4-11) и титрования исследуемого соединения при последовательных разбавления в столбцах 2-11. Аликвота из каждой лунки планшета с соединением переносится на клетки, помещенные в планшет, а затем они инкубируются при 37ºC в 5% CO (в течение 3 дней для клеток MV4-11, 2 дней для клеток RS4-11).
2
2
Тетразолиевое соединение MTS (реагент Оуэна) оттаивают на HO бане. 20 мкл MTS тетразолия добавляют в каждую лунку оптического планшета, и клетки инкубируют при 37ºC в 5% CO в течение 2 часов. Измеряют коэффициент поглощения при 490 нм с использованием Spectramax Plus 384 Absorbance Microplate Reader от Molecular Devices.
50
50
50
50
Значения пролиферации клеток измеряют в терминах концентрации исследуемого соединения, которая достигает 50% ингибирования клеточной пролиферации, по сравнению с контролем (IC), и они приводятся в таблицах 1 и 2, ниже, следующим образом: "+" представляет значения IC меньшие, чем 10 нМ, "++" представляет значения IC в пределах между 10 нМ и 100 нМ и '+++" представляет значения IC, большие, чем 100 нМ.
<u>Таблица 1</u>
Соединение №
Анализ связывания FLT3 K<sub>d</sub> (нМ)
Клеточный Анализ пролиферации MVIC<sub>50</sub> (нМ)
Анализ связывания KIT Kd (нМ)
Анализ связывания CSF1RK<sub>d</sub> (нМ)
A1
++++
+
A2
+++
+
A3
++++
+
A4
++++
+
A5
++++
+
A6
++++
+
A7
++++
+
B1
++++
+
++++
+++
B2
++++
+
++++
B3
++++
+
++++
B4
++++
+
++++
B5
++++
+
+++
+++
B6
++++
+
+++
B7
++++
+
+++
+++
B8
++++
++
+++
B9
++++
+
+++
B10
++++
+
+++
+++
B11
++++
+
+++
++
B12
++++
+
+++
++
B13
++
+++
+
+
B14
+
+++
+
+
C1
++++
+
++++
C2
++++
+
++++
C3
++++
+
+++
+
C4
++++
+
++++
+++
C5
++++
+
++++
+++
C7
++++
+
++++
+++
C8
++++
+
++++
+++
C9
++++
+
++++
++++
C10
++++
+
++++
+++
C11
++++
+
++++
++++
C12
++++
+
++++
+++
C13
++++
+
++++
+++
C14
++++
+
++++
+++
C15
++++
+
++++
+++
<u>Таблица 2</u>
Соединение №
Анализ связывания FLT3 K<sub>d</sub> (нМ)
Клеточный анализ пролиферации MVIC<sub>50</sub> (нМ)
Анализ связывания KIT Kd (нМ)
Анализ связывания CSF1RK<sub>d</sub> (нМ)
C16
++++
+
++++
+++
C17
++++
+
++++
+++
C18
++++
+
++++
+++
C19
++++
+
++++
+++
C20
++++
+
++++
+++
C21
++++
+
++++
+++
C22
++++
+
++++
+++
C23
++++
+
++++
+++
C24
++++
+
++++
+++
C25
++++
+
++++
+++
C26
++++
+
+++
++
C27
++++
+
++++
+++
D1
++++
+
++++
D2
+++
++
++++
+++
D3
++++
+
++++
+++
D4
++++
+
+++
+++
D5
++++
+
++++
++++
D6
++++
+
++++
++++
D7
++++
+
++++
++++
D8
++++
+
++++
+++
D9
++++
+
++++
+++
D10
++++
+
++++
+++
E1
++
+++
+
+
E2
++++
+
+++
+
E3
+
+++
+
+
E4
+++
++
++
++
F1
++++
+
++++
++
F2
++++
+
++++
+++
F3
++++
+
++++
+
F8
++++
+
+++
++
Варианты осуществления, описанные выше, как предполагается, являются только иллюстративными, и специалист в данной области заметит или будет способен привести, с использованием не более чем рутинных экспериментов, различные эквиваленты конкретных соединений, материалов и процедур. Все такие эквиваленты, как считается, находятся в рамках заявляемого предмета изобретения и охватываются прилагаемой формулой изобретения.