ПРИМЕНЕНИЕ ИНТРОНА-1 ГЕНА БЕТА-АКТИНА КУРИЦЫ

1. Вектор экспрессии, использующийся в рекомбинантной продукции полипептида в клетке млекопитающего, который включает: (a) последовательность промотора млекопитающего; (b) последовательность ДНК, кодирующую рекомбинантный полипептид; (c) сайт poly A; и (d) GC-богатый фрагмент ДНК, который повышает экспрессию полипептида.
2. Вектор экспрессии по п.1, в котором GC-богатый фрагмент слит с 5'-фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего.
3. Вектор экспрессии по п.1, в котором GC-богатый фрагмент слит с 3'-фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего.
4. Вектор экспрессии по п.1, в котором GC-богатый фрагмент слит с 3'-фланкирующей областью сайта poly A вектора экспрессии в клетках млекопитающего.
5. Способ рекомбинантной продукции полипептида, включающий экспрессию полипептида в клетке млекопитающего в условиях высокой плотности растущей культуры клеток под контролем вектора экспрессии, который включает: (a) последовательность промотора млекопитающего; (b) последовательность ДНК, кодирующую рекомбинантный полипептид; (c) сайт poly A; и (d) GC-богатый фрагмент ДНК, который повышает экспрессию полипептида.
6. Способ по п.5, в котором GC-богатый фрагмент вектора экспрессии слит с 5'-фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего.
7. Способ по п.5, в котором GC-богатый фрагмент вектора экспрессии слит с 3'-фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего.
8. Способ по п.5, в котором GC-богатый фрагмент слит с 3'-фланкирующей областью сайта poly A вектора экспрессии млекопитающего.
9. Способ повышения эффективности вектора экспрессии гена, который включает введение в вектор интрона-1 бета-актина курицы или его функционального эквивалента.
10. Способ по п.9, в котором функциональный эквивалент интрона-1 бета-актина курицы является GC-богатым фрагментом.
11. Вектор экспрессии для применения в рекомбинантной продукции полипептида в клетке млекопитающего, который включает: (a) интрон-1 бета-актина курицы или его функциональный эквивалент, слитый с фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего; (b) последовательность гена, кодирующего рекомбинантный полипептид; (c) сайт poly A, (d) интрон-1 бета-актина курицы или его функциональный эквивалент; и (e) основу вектора pBR322.
12. Вектор экспрессии по п.11, в котором функциональные эквиваленты элементов (a) и (d) являются GC-богатыми фрагментами ДНК.
13. Вектор экспрессии по п.11, в котором интрон-1 бета-актина курицы из элемента (a) или его функциональный эквивалент слиты с 5'-фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего.
14. Вектор экспрессии по п.11, в котором интрон-1 бета-актина курицы из элемента (a) или его функциональный эквивалент слиты с 3'-фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего или расположены после последовательности poly A.
15. Вектор экспрессии по п.11, в котором интрон-1 бета-актина курицы из элемента (a) или его функциональный эквивалент слиты с 3'-фланкирующей областью сайта poly A вектора экспрессии млекопитающего.
16. Вектор экспрессии по п.11, который включает последовательность SEQ ID NO:4.
17. Вектор экспрессии по п.11, который включает последовательность SEQ ID NO:5.
18. Вектор экспрессии по п.11, который включает последовательность SEQ ID NO:6.
19. Вектор экспрессии по п.11, который включает последовательность SEQ ID NO:7.
20. Вектор экспрессии по п.11, который включает последовательность SEQ ID NO:8.
21. Вектор экспрессии по п.11, который включает последовательность SEQ ID NO:9.
22. Вектор экспрессии по п.11, который включает последовательность SEQ ID NO:10.
23. Вектор экспрессии по п.11, который включает последовательность SEQ ID NO:11.
24. Вектор экспрессии по п.11, который включает последовательность SEQ ID NO:12.
25. Способ рекомбинантной продукции полипептида, включающий экспрессию полипептида в клетке млекопитающего в условиях высокой плотности растущей культуры клеток под контролем вектора экспрессии, включающего: (a) интрон-1 бета-актина курицы или его функциональный эквивалент, слитый с фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего; (b) последовательность гена, кодирующего рекомбинантный полипептид; (c) сайт poly A; (d) интрон-1 бета-актина курицы или его функциональный эквивалент; и (e) основу вектора pBR322.
26. Способ по п.25, в котором функциональные эквиваленты для элементов (a) и (d) являются GC-богатыми фрагментами ДНК.
27. Способ по п.25, в котором интрон-1 бета-актина курицы из элемента (a) или его функциональный эквивалент слиты с 5'-фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего вектора экспрессии.
28. Способ по п.25, в котором интрон-1 бета-актина курицы из элемента (a) или его функциональный эквивалент слиты с 3'-фланкирующей областью последовательности промотора млекопитающего вектора экспрессии.
29. Способ по п.25, в котором интрон-1 бета-актина курицы из элемента (a) или его функциональный эквивалент слиты с 3'-фланкирующей областью сайта poly A вектора экспрессии млекопитающего.
30. Способ по п.25, в котором вектор экспрессии включает последовательность SEQ ID NO:4.
31. Способ по п.25, в котором вектор экспрессии включает последовательность SEQ ID NO:5.
32. Способ по п.25, в котором вектор экспрессии включает последовательность SEQ ID NO:6.
33. Способ по п.25, в котором вектор экспрессии включает последовательность SEQ ID NO:7.
34. Способ по п.25, в котором вектор экспрессии включает последовательность SEQ ID NO:8.
35. Способ по п.25, в котором вектор экспрессии включает последовательность SEQ ID NO:9.
36. Способ по п.25, в котором вектор экспрессии включает последовательность SEQ ID NO:10.
37. Способ по п.25, в котором вектор экспрессии включает последовательность SEQ ID NO:11.
38. Способ по п.25, в котором вектор экспрессии включает последовательность SEQ ID NO:12.
39. Способ повышения эффективности существующего вектора экспрессии для применения в рекомбинантной продукции полипептида в клетке млекопитающего, включающий введение в указанный вектор интрона-1 бета-актина курицы или его функционального эквивалента во фланкирующую область существующего промотора или в сайт poly A.