Полиморфизм генов фолатного цикла в семьях с привычным невынашиванием беременности, пороками развития плода и анэмбрионией

ФИЗИОЛОГИЯ ЗАЧАТИЯ И ЭМБРИОГЕНЕЗА

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ФОЛАТНОГО ЦИКЛА В СЕМЬЯХ С ПРИВЫЧНЫМ НЕВЫНАШИВАНИЕМ БЕРЕМЕННОСТИ, ПОРОКАМИ РАЗВИТИЯ ПЛОДА И АНЭМБРИОНИЕЙ

И.Н. Фетисова, Л.П. Перетятко, Ж.А. Дюжев, М.А. Липин, А.Л. Голубева, Е.В. Проценко

Федеральное государственное учреждение «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» ул. Победы, 20, Иваново, Россия, 153731

Проведен анализ аллельного полиморфизма генов фолатного обмена метилентетрагидрофо-лат-редуктазы (MTHFR) и метионинсинтазы-редуктазы (MTRR) в супружеских парах с привычным невынашиванием беременности, врожденными пороками плода (ВПР), анэмбрионией и в контрольной группе. В парах с ВПР по сравнению с контролем выявлено увеличение частоты носи-тельства низкофункциональных аллелей MTHFR 677T у женщин и MTR 66G у мужчин. В группе пациентов с анэмбрионией отмечено увеличение количества пар, в которых оба супруга являются носителями аллеля MTRR 66G, а также повышение частоты генотипа MTHFR 1298C/C у мужчин в сравнении с контрольной группой. Полученные данные свидетельствуют о возможном участии наследственных тромбофилических факторов в патогенезе нарушения репродуктивной функции.

Исследование роли генетических факторов при различных формах нарушения репродуктивной функции в супружеской паре является одним из наиболее перспективных направлений современной генетики и приоритетной областью здравоохранения. В настоящее время патологию репродукции рассматривают как муль-тифакториальное заболевание, являющееся результатом совместного действия множества наследственных и средовых факторов.

Особый интерес представляет вопрос о роли низкофункциональных аллелей генов фолатного обмена в самопроизвольном прерывании беременности [1, 2, 4, 8, 10, 11, 14]. Среди целого спектра механизмов нарушения фертильности можно обозначить как эффекты гипергомоцистеинемии, так и нарушения процессов ме-

тилирования ДНК в соматических и половых клетках. Эндотелиальная дисфункция, наблюдаемая при гипергомоцистеинемии, сопровождаемая развитием атеро-за сосудов, десинхронизацией процессов фибринолиза и фибринообразования, ва-зоконстрикцией, возможно, способствует нарушению нидации плодного яйца, инвазии трофобласта и плацентации, что и обусловливает развитие акушерской патологии [1]. Одной из главных причин невынашивания беременности первого триместра является наличие геномных мутаций у плода, возникновение которых в большинстве случаев обусловлено нерасхождением хромосом в гаметогенезе у родителей. В литературе высказывается предположение, что наличие низкофункциональных аллелей генов фолатного обмена вследствие изменения профиля метилирования ДНК в клетке может приводить к нарушению расхождения хромосом в процессе формирования гамет и возникновению поли- и анеуплоидии у плода. Кроме того, дефицит метильных групп в быстро делящихся клетках эмбриона приводит к повышенному включению уридилового нуклеотида вместо тимидилового в синтезируемую цепь ДНК. В результате образуется аномально легко фрагментируемая ДНК, синтез ее резко замедляется. Это ведет к нарушению клеточного цикла быстро делящихся клеток плода, и, возможно, способствует запусканию механизмов апоптоза [5]. В работах, выполненных на абортивном материале, было показано, что риск самопроизвольного прерывания беременности повышается в 14 раз при наличии у эмбриона аллелей гена MTHFR 677Т и/или 1298С в гомо- или гетерозиготном состоянии [9].

Большое число исследований посвящено взаимосвязи полиморфизма генов фолатного обмена с пороками развития плода, в частности, с дефектами нервной трубки (анэнцефалия, spina bifida), а также незаращением верхней губы и неба [3,

12, 13]. Негативное влияние на гисто- и органогенез мутантных вариантов генов фолатного обмена может быть связано как с прямым эмбриотоксическим действием гомоцистеина, так и с нарушением процессов пролиферации и дифференци-ровки клеток вследствие дефицита метильных групп. Снижение метилирования в клетке, связанное с недостаточной активностью ферментов фолатного обмена или с дефицитом метильных групп, приводит к изменению профиля метилирования центромерных районов хромосом, нарушению расхождения хромосом в ооге-незе и повышает риск рождения ребенка с синдромом Дауна (трисомия по хромосоме 21) [7]. Изменение профиля метилирования ДНК ассоциировано также с нарушением расхождения хромосомы 18. Для других аутосом (хромосомы 2, 7, 10,

13, 14, 15, 16, 22) и половых хромосом такой ассоциации не показано [6].

Целью настоящего исследования явилось изучение полиморфизма генов фолатного цикла (гены 5,10-метилентетрагидрофолат-редуктазы — MTHFR, ме-тионин-синтаза-редуктазы — MTRR) в семьях с нормальной и нарушенной репродукцией. Группу наблюдения составили 19 семей с первичной привычной потерей беременности (ППБ) ранних сроков, под которой подразумевалось самопроизвольное прерывание двух и более беременностей до 12 недель при отсутствии в анамнезе указаний на роды, медицинские аборты, внематочную беременность.

Из них у 11 пар наличие двух самопроизвольных прерываний первой и второй беременности до 12 недель сочеталось с наличием врожденного порока развития (ВПР) плода при последующих беременностях, у 8 пар при самопроизвольном прерывании беременности до 12 недель имела место анэмбриония (АЭ). Супружеские пары с указанием в анамнезе на ВПР плода составили 1 подгруппу, пары с анэмбрионией — 2 подгруппу.

Контрольную группу составили 54 супружеские пары, имеющие одного и более здорового ребенка при указании на нормально протекавшие у женщины беременность и роды. В анамнезе у женщин контрольной группы не было случаев невынашивания беременности, перинатальной смертности, рождения детей с ВПР, периодов бесплодия.

У супругов 1-й подгруппы было отмечено достоверное увеличение частоты встречаемости низкофункциональных аллелей в генах MTHFR и MTRR по сравнению с контрольной выборкой. Так, у пациенток с ППБ и ВПР плода достоверно чаще, чем у здоровых женщин, встречался аллель MTHFR 677Т (40,9 и 18,3% соответственно, р = 0,020, ОЯ = 3,1 (1,2—8,0)); у мужчин этой группы в 86,4% случаев был выявлен аллель MTRR 66G против 51,9% в контроле (р = 0,004, ОЯ = 5,2 (1,8—15,2)) (табл. 1, 3).

Таблица 1

Частоты аллелей в генах МТЧРй и МТЙЙу женщин в подгруппах с ППБ и ВПР плода, ППБ и АЭ и в контроле

Аллель 1-я и 2-я подгруппы Контроль Р ОЯ С1-95%

п N % п N %

ППБ и ВПР МГИГЯ 677С 13 22 59,1 85 104 81,7 0,020 0,3

МГИГЙ 677Т 9 22 40,9 19 104 18,3 3,1

МГИГЙ 1298А 17 22 77,3 75 104 72,1 0,612 1,2

МГИГЙ 1298С 5 22 22,7 29 104 27,9 0,8

МГЙЙ 66А 10 22 45,5 54 108 50,0 0,697 0,8

МГЙЙ 66в 12 22 54,5 54 108 50,0 1,2

ППБ и АЭ МГИГЙ 677С 11 16 68,8 85 104 81,7 0,225 0,5

МГИГЙ 677Т 5 16 31,3 19 104 18,3 2,1

МГИГЙ 1298А 11 16 68,8 75 104 72,1 0,783 0,8

МГИГЙ 1298С 5 16 31,3 29 104 27,9 1,2

МГЙЙ 66А 7 16 43,8 54 108 50,0 0,634 0,8

МГЙЙ 66в 9 16 56,3 54 108 50,0 1,3

Факты значительного увеличения частоты носительства аллелей 677Т и 66G в генах MTHFR и MTRR у супругов с ВПР плода могут свидетельствовать в пользу гипотезы о негативной роли данных полиморфизмов при расхождении хромосом в ходе гаметогенеза и возникновении несбалансированных гамет. Формирование пороков развития в данном случае может быть связано с наличием хромосомной аномалии у плода.

Таблица 2

Частоты генотипов по генам МТЧРй и МТЙЙ у женщин в подгруппах с ППБ и ВПР плода, ППБ и АЭ и в контроле

Генотип 1-я и 2-я подгруппы Контроль Р ОЯ С1-95%

п N % п N %

ППБ М7НГН677 С/С 3 11 27,3 34 52 65,4 0,040 0,2

и ВПР М7НГН677 С/Т 7 11 63,6 17 52 32,7 0,086 3,4

М7НГН677 Т/Т 1 11 9,1 1 52 1,9 0,321 4,9

МГИГЙ1298 А/А 6 11 54,5 27 52 51,9 0,999 1,1

МГИГЙ1298 А/С 5 11 45,5 21 52 40,4 0,750 1,2

МГНГН1298 С/С 0 11 0,0 4 52 7,7 0,999 0,5

МГИИ66 А/А 2 11 18,2 13 54 24,1 0,999 0,8

МГИИ66 А/в 6 11 54,5 28 54 51,9 0,999 1,1

МГИИ66 в/в 3 11 27,3 13 54 24,1 0,999 1,3

ППБ МГНГН677 С/С 4 8 50,0 34 52 65,4 0,449 0,5

и АЭ МГНГН677 С/Т 3 8 37,5 17 52 32,7 0,999 1,3

МГНГН677 Т/Т 1 8 12,5 1 52 1,9 0,251 6,9

МГНГН1298 А/А 4 8 50,0 27 52 51,9 0,999 0,9

МГНГН1298 А/С 3 8 37,5 21 52 40,4 0,999 0,9

МГНГН1298 С/С 1 8 12,5 4 52 7,7 0,524 2,2

МГИИ66 А/А 0 8 0,0 13 54 24,1 0,186 0,2

МГИИ66 А/в 7 8 87,5 28 54 51,9 0,123 4,6

МГИИ66 в/в 1 8 12,5 13 54 24,1 0,677 0,6

При анализе распределения генотипов по генам фолатного обмена была выявлена та же закономерность, что и в отношении распределения аллелей указанных генов. Генотип МТИГЯ 6770/0 у женщин 1-й подгруппы встречался достоверно реже, чем у здоровых женщин (27,3 и 65,4% соответственно, р = 0,04, ОЯ = 0,2 (0,1—0,8)) (см. табл. 2).

Таблица 3

Частоты аллелей генов МТЧРй и МТЙЙ у мужчин в подгруппах с ППБ и ВПР плода, ППБ и АЭ и в контроле

Аллель 1-я и 2-я подгруппы Контроль Р ОЯ С1-95%

п N % п N %

ППБ МГИГЙ 677С 14 20 70,0 66 100 66,0 0,732 1,2

и ВПР МГИГЙ 677Т 6 20 30,0 34 100 34,0 0,9

МГИГЙ 1298А 13 18 72,2 71 100 71,0 0,919 1,0

МГИГЙ 1298С 5 18 27,8 29 100 29,0 1,0

МГЙЙ 66А 3 22 13,6 52 108 48,1 0,004 0,2

МГЙЙ 66в 19 22 86,4 56 108 51,9 5,2

ППБ и АЭ МГИГЙ 677С 15 16 93,8 66 100 66,0 0,037 5,4

МГИГЙ 677Т 1 16 6,3 34 100 34,0 0,2

МГИГЙ 1298А 8 16 50,0 71 100 71,0 0,094 0,4

МГИГЙ 1298С 8 16 50,0 29 100 29,0 2,4

МГЙЙ 66А 6 16 37,5 52 108 48,1 0,430 0,7

МГЙЙ 66в 10 16 62,5 56 108 51,9 1,5

У мужчин 1-й подгруппы ни в одном случае не был отмечен гомозиготный генотип MTRR 66А/А, в то время как в контрольной группе 24,1% мужчин являлись его носителями (р = 0,102). Вместе с тем генотип MTRR 66G/G был отмечен у 72,7% мужчин в семьях с ППБ и ВПР плода (в контроле 27,8%, р = 0,005, ОЯ = 6,2 (1,8—21,8)) (табл. 4). Столь высокая частота встречаемости гомозиготного носительства аллеля 66G в гене MTRR у мужчин данной выборки позволяет предположить неслучайную взаимосвязь генотипа MTRR 66G/G у отца с нарушением эмбрионального развития и формированием ВПР плода в супружеской паре.

Таблица 4

Частоты генотипов по генам МТЧРй и МТЙЙ у мужчин в подгруппах с ППБ и ВПР плода, ППБ и АЭ и в контроле

Генотип 1-я и 2-я подгруппы Контроль P OR CI-95%

n N % n N %

ППБ MTHFR677 C/C 5 10 50,0 23 50 46,0 0,999 1,2

и ВПР MTHFR677 C/T 4 10 40,0 20 50 40,0 0,999 1,0

MTHFR677 T/T 1 10 10,0 7 50 14,0 0,999 0,9

MTHFR 1298 A/A 5 9 55,6 26 50 52,0 0,999 1,1

MTHFR 1298 A/C 3 9 33,3 19 50 38,0 0,999 0,9

MTHFR1298 C/C 1 9 11,1 5 50 10,0 0,999 1,5

MTRR66 A/A 0 11 0,0 13 54 24,1 0,102 0,1

MTRR66 A/G 3 11 27,3 26 54 48,1 0,320 0,4

MTRR66 G/G 8 11 72,7 15 54 27,8 0,012 6,2

ППБ MTHFR677 C/C 7 8 87,5 23 50 46,0 0,053 5,9

и АЭ MTHFR677 C/T 1 8 12,5 20 50 40,0 0,237 0,3

MTHFR677 T/T 0 8 0,0 7 50 14,0 0,577 0,3

MTHFR 1298 A/A 3 8 37,5 26 50 52,0 0,479 0,6

MTHFR 1298 A/C 2 8 25,0 19 50 38,0 0,698 0,6

MTHFR1298 C/C 3 8 37,5 5 50 10,0 0,071 5,3

MTRR66 A/A 1 8 12,5 13 54 24,1 0,670 0,6

MTRR66 A/G 4 8 50,0 26 54 48,1 0,999 1,1

MTRR66 G/G 3 8 37,5 15 54 27,8 0,681 1,6

Оценка сочетаний аллелей по генам фолатного обмена выявила достоверное снижение частоты сочетания MTHFR 677C/- + MTHFR 1298A/- + MTRR 66 А-у мужчин 1-й подгруппы по сравнению с контролем (11,1 и 57,4% соответственно, р = 0,013, OR = 0,1 (0,0—0,6)). У женщин в семьях с ППБ и ВПР плода была несколько увеличена частота сочетания MTHFR 677Т/- + MTHFR 1298А/-+ MTRR 66G/-, однако разница по сравнению с контролем не была достоверной (54,5 и 26,0% в 1-й подгруппе и в контроле соответственно, р = 0,064).

У супругов 1-й подгруппы по сравнению с контролем была отмечена несколько более высокая частота носительства низкофункциональных аллелей в гомо- или гетерозиготном состоянии одновременно в нескольких генах фолатного цикла. Так, генотип MTHFR 677С/Т + MTHFR 1298А/С + MTRR66 G/G у женщин 1-й подгруппы отмечалась в 18,2% случаев, в то время как в контроле — лишь в 2,0%

случаев (р = 0,081). Среди мужчин 1-й подгруппы и контрольной выборки 22,2 и 2,1% обследованных соответственно имели генотип МТИГЯ 677С/Т + МТИГЯ 1298А/А + МТЯЯ 66G/G (р = 0,064).

Анализ распределения аллелей и генотипов по генам фолатного обмена в паре показал, что количество семей, в которых оба супруга являлись носителями низкофункциональных аллелей, существенно преобладало в 1-й подгруппе по сравнению с контролем. Так, комбинация МТШЯ 677Т/- + МТШЯ 1298А/- + МТЯЯ 66G/- у обоих супругов была отмечена в 37,5% пар 1-й подгруппы и в 9,1% пар контрольной выборки (р = 0,064). В то же время одновременное наличие аллелей «дикого» типа МТШЯ 677С/- +МТШЯ 1298А/- +МТЯЯ 66А/- у обоих супругов наблюдалось в 40,9% семей контроля при отсутствии таких пар в 1-й подгруппе (р = 0,039, ОЯ = 0,1 (0,0—0,7)).

Анализ особенностей полиморфизма генов фолатного цикла в семьях с ППБ и анэмбрионией выявил гораздо меньшую степень отличия от репродуктивно здоровых семей, чем в парах с ППБ и ВПР плода (см. табл. 1—4). Несмотря на то, что у женщин во 2-й подгруппе низкофункциональные аллели и генотипы, гетеро-и гомозиготные по мутантным аллелям наблюдались чаще, чем у здоровых женщин, степень отличия от контроля не была достоверной. Достоверные отличия от контрольной группы в частотах встречаемости аллелей и генотипов по генам фолатного цикла были выявлены только у мужчин 2-й подгруппы. Частота встречаемости аллеля 677Т в гене МТИГЯ у мужчин в семьях с ППБ и анэмбрионией по сравнению с контролем была значительно понижена (6,3 и 34,0% во 2-й подгруппе и в контроле соответственно, р = 0,037, ОЯ = 0,2 (0,0—0,8)) (см. табл. 3). Генотип МТИГЯ 677С/С определялся в 87,5 и 46,0% случаев у мужчин 2-й подгруппы и контрольной выборки соответственно (р = 0,053). Однако у мужчин в парах с ППБ и анэмбрионией наблюдалось увеличение частоты гомозиготного генотипа МТИГЯ 1298С/С по сравнению со здоровыми мужчинами, хотя разница не была статистически значимой (37,5 и 10,0% соответственно, р = 0,071). Отличия от контроля по этому полиморфизму были получены и при анализе сочетаний аллелей у обоих супругов в паре. Так, среди семей с указанием в анамнезе на анэмб-рионию наличие у обоих супругов аллеля «дикого» типа МТИГЯ 1298А было выявлено в 50,0%, в то время как в контрольной выборке такие семьи составили 87,5% (р = 0,027, ОЯ = 0,2 (0,0—0,6)). В семьях с анэмбрионией достоверно чаще, чем в контроле наблюдалось гетерозиготное носительство низкофункционального аллеля 66G в гене МТЯЯ обоими супругами (50,0 и 13,5% во 2-й подгруппе и в контроле соответственно, р = 0,031, ОЯ = 6,1 (1,5—25,1)).

Таким образом, в настоящем исследовании получены данные, свидетельствующие о различии особенностей генов фолатного цикла в семьях с пороками развития плода и анэмбрионией. В супружеских парах 1-й подгруппы выявлено значительное увеличение частоты носительства аллеля МТИГЯ 677Т у женщин и аллеля МТЯЯ 66G у мужчин; в семьях с анэмбрионией было отмечено увеличение частоты встречаемости аллеля МТИГЯ 1298С наряду с гетерозиготным носитель-ством аллеля 66G в гене МТЯЯ обоими супругами. При видимых отличиях сохра-

няется общая для обеих подгрупп тенденция увеличения частоты встречаемости низкофункциональных аллелей в генах фолатного цикла у супругов с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом, что может свидетельствовать о неблагоприятной роли полиморфизмов MTHFR 677T, MTHFR 1298C и MTRR 66G при нарушении репродукции в супружеской паре. Как было указано выше, негативное воздействие на эмбриогенез аллелей MTHFR 677T и MTRR 66G может быть связано с нерасхождением гомологов в гаметогенезе родителей, нарушением процессов деления и дифференцировки клеток плода при нарушении метилирования ДНК и тератогенным эффектом гипергомоцистеинемии.

ЛИТЕРАТУРА

[1] Бескоровайная Т. С. Влияние некоторых генетических факторов на нарушение репродукции у человека: Дисс. ... канд. мед. наук. — М., 2005. — 89 с.

[2] Carp H. Prevalence of genetic markers for thrombophilia in recurrent pregnancy loss / H. Carp, O. Salomon, D. Seidman, R. Dardik et al. // Hum. Reprod. — 2002. — Vol. 17(6). — P. 1633—1637.

[3] Christensen B. Genetic polymorphisms in methylenetetrahydrofolate reductase and methionine synthase, folate levels in red blood cells, and risk of neural tube defects / B. Christensen, L. Arbour, P. Tran // Am. J. Med. Genet. — 1999. — Vol. 84. — P. 151—157.

[4] Dilley A. Mutations in the factor V, prothrombin and MTHFR genes are not risk factors for recurrent fetal loss / A. Dilley, C. Benito, W.C. Hooper et al. // J. Matern. Fetal. Neonatal. Med. — 2002. — Vol. 11(3). — P. 176—182.

[5] Fell D. Disruption of thymidylate synthesis and glycine-serine interconversion by L-methioni-ne and L-homocystine in Raji cells / D. Fell, J. Selhub // Biochim. Biophys. Acta. — 1990. — Vol. 1033. — P. 80—84.

[6] Hassold T.J. Maternal folate polymorphisms and the etiology of human nondisjunction / T.J. Hassold, L.C. Burrage, E.R. Chan et al. // Am. J. Hum. Genet. — 2001. — Vol. 69. — P. 434— 439.

[7] Hobbs C.A. Polymorphisms in Genes Involved in Folate Metabolism as Maternal Risk Factors for Down Syndrome / C.A. Hobbs, S.L. Sherman, P. Yi et al. // Am. J. Hum. Genet. — 2000. — Vol. 67. — P. 623—630.

[8] Hohlagschwandtner M. Combined thrombophilic polymorphisms in women with idiopathic recurrent miscarriage / M. Hohlagschwandtner, G. Unfried, G. Heinze et al. // Fertil. Steril. — 2003. — Vol. 79(5). — P. 1141—1148.

[9] Isotalo P.A. Neonatal and fetal methylenetetrahydrofolate reductase genetic polymorphisms: an examination of C677T and A1298C mutations / P.A. Isotalo, G.A. Wells, J.G. Donnelly // Am. J. Hum. Genet. — 2000. — Vol. 67 — P. 986—990.

[10] Kumar K.S. Plasma homocysteine levels correlated to interactions between folate status and methylene tetrahydrofolate reductase gene mutation in women with unexplained recurrent pregnancy loss / K.S. Kumar, V. Govindaiah, S.E. Naushad et al. // J. Obstet. Gynaecol. — 2003. — Vol. 23. — P. 55—58.

[11] Lissak A. Polymorphism for mutation of cytosine to thymine at location 677 in the methylene-tetrahydrofolate reductase gene is associated with recurrent early fetal loss / A. Lissak, A. Sharon, O. Fruchter et al. // Am. J. Obstet. Gynecol. — 1999. — Vol. 181. — P. 126—130.

[12] Martinelli M. C677T variant form at the MTHFR gene and CL/P: a risk factor for mothers? / M. Martinelli, L. Scapoli, F. Pezzetti et al. // Am. J. Med. Genet. — 2001. — Vol. 98. — P. 357—360.

BecTHHK Py^H, cepua Медицина, 2009, № 6

[13] Motulsky A.G. Nutritional ecogenetics: homocysteine-related arteriosclerotic vascular disease, neural tube defects, and folic acid. (Editorial) / A.G. Motulsky // Am. J. Hum. Genet. — 1996. — Vol. 58. — P. 17—20.

[14] Murphy R.P. Prospective evaluation of the risk conferred by factor V Leiden and thermola-bile methylenetetrahydrofolate reductase polymorphisms in pregnancy / R.P. Murphy, C. Do-noghue, R.J. Nallen et al. // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. — 2000. — Vol. 20(1). — P. 266—270.

POLYMORPHISMS IN FOLATE METABOLYSM GENES IN COUPLES WITH RECURRENT EARLY PREGNANCY LOSS, CONGENITAL MALFORMATION OF FETUS AND ANEMBRYONIA

I.N. Fetisova, L.P. Peretyatko, J.A. Dyuzhev, M.A. Lipin, А.L. Golubeva, E.V. Protsenko

Ivanovo Research Institute for Maternity and Childhood n.a. V.N.Gorodkov Pobedy str., 20, Ivanovo, Russia, 153731

The analysis of allele polymorphisms in genes of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) and methionine synthase reductase (MTRR) was conducted in patients with recurrent early pregnancy loss, congenital malformation of fetus, anembryonia and normal reproduction. We revealed significant increase in frequency of low functional alleles MTHFR 677T in fermales and MTRR 66G in males in group with congenital malformation of fetus. Increased frequency of couples, in which both men and women had allele MTRR 66G, was shown in group with anembryonia. Moreover, MTHFR 1298C/C frequency in males was enhanced in this group. These results suggested the possible role of hereditary trombophilic factors in pathogenesis of human reproductive disorders.