СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ СИНДРОМА ДРАВЕ
METHODS OF TREATING DRAVET SYNDROME

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
По настоящей заявке испрашивается приоритет по заявке на патент США № 62/490,357, поданной 26 апреля 2017 года. Раскрытие предшествующей заявки следует рассматривать как часть (и включенной посредством ссылки) раскрытия настоящей заявки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к лечению заболевания путем введения фармацевтических соединений. В частности, изобретение относится к лечению синдрома Драве путем введения антагониста кальциевых каналов Т–типа.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Кальциевые каналы Т–типа являются каналами, активируемыми низким напряжением, которые открываются во время деполяризации мембраны и опосредуют приток кальция в клетки после потенциала действия или сигнала деполяризации. Известно, что кальциевые каналы Т–типа присутствуют в сердечной и гладких мышцах, а также присутствуют во многих нейронах в центральной нервной системе. Кальциевые каналы Т–типа (скоротечные кальциевые каналы) отличаются от кальциевых каналов L–типа (медленных кальциевых каналов) своей способностью активироваться более отрицательным мембранным потенциалом, низкой проводимостью канала и отсутствием реакции на традиционные блокаторы кальциевых каналов, нацеленные на кальциевые каналы L–типа.
Кальциевые каналы Т–типа открываются после небольшой деполяризации мембраны. Кальциевые каналы Т–типа изучены в основном в контексте функции нейронов и кардиомиоцитов, они вовлечены в патогенез нарушений, связанных с гипервозбудимостью, таких как эпилепсия и сердечная дисфункция. Потенциал–зависимые кальциевые каналы обычно не экспрессируются в невозбудимых клетках, но есть доказательства того, что кальциевые каналы Т–типа экспрессируются в раковых клетках невозбудимых линий.
Кальциевые каналы Т–типа активируются и инактивируются небольшой деполяризацией мембран и имеют медленные скорости дезактивации. Таким образом, эти каналы могут проводить ток деполяризации при низких мембранных потенциалах и опосредовать клеточные токи «окна», которые возникают в пределах наложения потенциалов активации и инактивации в стационарном состоянии при низких значениях мембранного потенциала или потенциале покоя. Кальциевые каналы Т–типа могут поддерживать ток окна при нестимулированных мембранных потенциалах или потенциалах покоя, тем самым обеспечивая постоянный входящий кальциевый ток, проводимый частью каналов, которые не инактивируются. Опосредование тока окна позволяет кальциевым каналам Т–типа регулировать внутриклеточные уровни кальция, как в электровозбудимых клетках, таких как нейроны, так и в невозбудимых тканях, в условиях нестимулированных или покоящихся клеток.
1
2
1
1
Потенциал–зависимые кальциевые каналы состоят из нескольких субъединиц. Субъединица α1 является основной субъединицей, которая образует трансмембранную пору канала. Субъединица α также определяет тип кальциевого канала. Субъединицы β, αδ и γ, присутствующие только в некоторых типах кальциевых каналов, являются вспомогательными субъединицами и играют второстепенные роли в канале. Субъединица α состоит из четырех доменов (I–IV), каждый из которых содержит 6 трансмембранных сегментов (S1–S6), а гидрофобные петли между сегментами S5 и S6 каждого домена образуют поры канала. Подтипы кальциевого канала Т–типа определяются конкретной субъединицей α, как показано в таблице 1.
Таблица 1. Подтипы кальциевых каналов Т–типа
Обозначение
α<sub>1</sub> субъединица
Ген
Cav3.1
α<sub>1</sub>G
CACNA1G
Cav3.2
α<sub>1</sub>H
CACNA1H
Cav3.3
α<sub>1</sub>I
CACNA1I
Синдром Драве представляет собой тяжелую форму эпилепсии, также известную как эпилепсия с полиморфными припадками, полиморфная эпилепсия младенчества (PMEI) или тяжелая миоклоническая эпилепсия младенчества (SMEI). Это редкое генетическое заболевание, которое, судя по оценкам, поражает примерно 1 ребенка на каждые 20000–40000 новорожденных.
Синдром характеризуется продолжительными лихорадочными и афебрильными судорогами, возникающими в течение первого года жизни ребенка. Дети с синдромом Драве обычно отстают в развитии языковых и моторных навыков, имеют проблемы, связанные с гиперактивностью и сном, хроническими инфекциями, проблемы с ростом и весом, также имеются и другие нарушения. Проявления этого расстройства не уменьшаются со временем. По мере прогрессирования заболевания возникают другие типы судорожных приступов, такие как миоклонические и парциальные приступы, задержка психомоторного развития и атаксия. Заболевание также характеризуется когнитивными нарушениями, поведенческими расстройствами, такими как гиперактивность и импульсивность, и моторным дефицитом. Синдром Драве также связан с нарушениями сна, включая сонливость и бессонницу. Синдром Драве связан и с преждевременной смертью.
В большинстве случаев генетические мутации при синдроме Драве не являются наследственными, и у больного впервые возникает мутантный ген. Болезнь включает дефекты в генах натриевых каналов, известных как SCN1A и SCN2A. Мутация в любом из этих двух генов может привести к развитию у человека нефункциональных натриевых каналов, которые имеют важное значение в пути передачи химических сигналов в мозг, приводя к фенотипическому проявлению у индивидуума в виде миоклонической эпилепсии. Правильно функционирующий канал реагирует на разность потенциалов на мембране и образует поры, через которые могут проходить только ионы натрия. Приток натрия вызывает генерацию потенциала действия путем временного изменения заряда клетки. Когда ген мутирован, окончательно транслированный белок имеет неправильную укладку сегментов, формирующих поры в клеточной мембране, поскольку содержит аминокислоты с другими химическими свойствами, что делает канал неактивным. Мутация также может привести к уменьшению количества каналов, формируемых у индивидуума, что приводит к развитию синдрома Драве.
Ген SCN1A является наиболее клинически значимым. Как правило, миссенс–мутация в сегменте S5 или S6 поры натриевого канала приводит к потере функции канала и к развитию синдрома Драве. Для развития дефектного натриевого канала необходимо всего лишь гетерозиготное наследование мутации SCN1A; у пациентов с синдромом Драве все еще сохраняется одна нормальная копия гена.
Приступы при синдроме Драве трудно поддаются лечению, но их можно несколько уменьшить с помощью противосудорожных препаратов. Поскольку течение расстройства и тяжесть судорог варьируют от человека к человеку, сложно установить стандартный протокол лечения. Некоторые противосудорожные препараты, такие как препараты, относящиеся к блокаторам натриевых каналов, например карбамазепин, габапентин, ламотриджин и фенитоин, могут усугубить судороги у большинства пациентов с синдромом Драве. Поэтому современные методы лечения синдрома Драве, как правило, являются недостаточными.
Следовательно, существует потребность в новых и эффективных методах лечения синдрома Драве.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к способу лечения синдрома Драве (т.е. тяжелой миоклонической эпилепсии младенчества (SMEI)). Способ включает введение нуждающемуся в таком лечении субъекту терапевтически эффективного количества антагониста кальциевых каналов Т–типа. Изобретение также относится к применению антагониста кальциевых каналов Т–типа для лечения синдрома Драве. Настоящее изобретение также относится к применению антагониста кальциевых каналов Т–типа для производства лекарственного средства для лечения синдрома Драве.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой антагонист кальциевых каналов, который селективно нацеливается на кальциевые каналы Т–типа.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой антагонист кальциевых каналов, который селективно нацеливается на кальциевые каналы Т–типа относительно кальциевых каналов L–типа.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой малую молекулу.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой антитело.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой миРНК (малую интерферирующую РНК, siRNA).
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа селективно нацеливается на Cav3.1.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа селективно нацеливается на Cav3.2.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа селективно нацеливается на Cav3.3.
В некоторых вариантах осуществления антагонисты кальциевых каналов Т–типа антагонируют с кальциевыми каналами Т–типа в клетке, когда мембранный потенциал клетки находится в диапазоне от примерно –60 мВ до примерно –30 мВ, например равен примерно –40 мВ.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа выбирают из группы, состоящей из мибефрадила, дилтиазема, нифедипина, нитрендипина, нимодипина, нилудипина, нигулдипина, никардипина, нисолдипина, амлодипина, фелодипина, исрадипина, риозидина, галлопамила, верапамила, тиапамила, пимозида, тиоридазина, NNC 55–0396, TTL–1177, анандамида, пимозида, пенфлуридола, клопимозида, флуспирилена, галоперидола, дроперидола, бенперидола, триперидола, мелперона, ленперона, азаперона, домперидона, антрафенина, арипипразола, ципрофлоксацина, дапипразола, дропропизина, этоперидона, итраконазола, кетоконазола, леводропропизина, мепипразола, нафтопидила, нефазодона, ниапразина, оксипертина, позаконазола, тразодона, урапидила, веснаринона, манидипина, нилвадипина, бенидипина, эфонидипина, флунаризина, анандамида, ломеризина, зонисамида, U–92032, тетралола, мибефрадила, NNC 55–0396, TTA–A2, TTA–A8, TTA–P1, 4–аминометил–4–фторпиперидина (TTA–P2), TTA–Q3, TTA–Q6, MK–5395 (CX–5395), MK–6526, MK–8998 (CX–8998), Z941, Z944, этосуксимида, фенсукцимида, месукцимида, десметилметсукцимида, эфонидипина, триметадиона, диметадиона, ABT–639, TTL–1177, KYSO5044, никеля и куртоксина и их комбинаций.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой TTA–A2.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение или облегчение по меньшей мере одного неврологического симптома у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления неврологический симптом включает одно или более из следующего: судорожные приступы, гиперактивность, импульсивность, аутистическое поведение, сонливость, бессонница, психомоторная задержка, атаксия, когнитивные нарушения, нарушения неврологического развития, задержка развития и поведенческие нарушения.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты судорожных приступов у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести судорожных приступов у субъекта. В некоторых вариантах осуществления судорожные приступы представляют собой фебрильные судороги. В некоторых вариантах осуществления фебрильные судороги представляют собой простые фебрильные судороги. В некоторых вариантах осуществления фебрильные судороги представляют собой сложные судороги. В некоторых вариантах осуществления судорожные приступы представляют собой миоклонические судороги. В некоторых вариантах осуществления судорожные приступы представляют собой парциальные (частичные) судорожные приступы.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты гиперактивности у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести гиперактивности у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты импульсивности у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести импульсивности у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты аутистического поведения у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести аутистического поведения у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты сонливости у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести сонливости у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты бессонницы у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести бессонницы у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение психомоторной задержки у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты атаксии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести атаксии у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести когнитивных нарушений у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение когнитивной функции у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение памяти у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение кратковременной памяти у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение рабочей памяти у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение долговременной памяти у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение неврологического развития субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение задержки развития субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты поведенческих нарушений у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести поведенческих нарушений у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает продление жизни субъекта. Лечение может снизить риск преждевременной смерти или отсрочить смерть.
В некоторых вариантах осуществления селективный антагонист кальциевых каналов Т–типа в значительной степени проникает через гематоэнцефалический барьер. В других вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа практически не проникает через гематоэнцефалический барьер.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает введение субъекту дополнительного терапевтического агента, который может представлять собой, например, дополнительный ингибитор кальциевых каналов Т–типа или противосудорожный агент.
В некоторых вариантах осуществления противосудорожный агент выбирают из ацетазоламида, клобазама, клоназепама, ацетата эсликарбазепина, этосуксимида, лакосамида, леветирацетама, нитразепама, окскарбазепина, перампанела, пирацетама, фенобарбитала, прегабалина, примидона, ретигабина, руфинамида, вальпроата, стирипентола, тиагабина, топирамата, вигабатрина и зонисамида.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает введение дополнительной терапии, которая может быть выбрана, например, из группы, состоящей из кетогенной диеты, физиотерапии, трудотерапии, коммуникативной терапии и поведенческой терапии.
Хотя при использовании настоящего изобретения на практике или при его тестировании могут быть использованы способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в настоящей заявке, ниже приведено описание подходящих способов и материалов. Все публикации, патентные заявки, патенты и другие цитируемые документы, упомянутые в настоящем описании, включены в настоящее описание во всей своей полноте посредством ссылки. Если в цитате указан номер первой страницы цитируемого документа, следует понимать, что приведена ссылка на всю цитируемую статью. В случае конфликта преимущество имеет настоящее описание изобретения, включая определения. При этом, материалы, способы и примеры являются исключительно иллюстративными и не предназначены для ограничения изобретения.
Другие признаки и преимущества изобретения станут очевидными из приведенного ниже описания и формулы изобретения.
ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фиг. 1 представляет собой схему, показывающую скрещивание мыши с синдромом Драве с мышью, нокаутной (KO) по гену Cav3.1, с получением гибридного гетерозиготного нокаута CACNA1G в мышиной модели синдрома Драве.
Фиг. 2А представляет собой график, показывающий на мышиной модели синдрома Драве влияние делеции CACNA1G, обеспечивающее защитное преимущество при спонтанных генерализованных тонико–клонических приступах.
Фиг. 2В представляет собой график, показывающий на мышиной модели синдрома Драве влияние делеции CACNA1G, обеспечивающее преимущество в выживании.
Scn1a
+/–
Фиг. 3 представляет собой схему, показывающую протокол для модели судорожных приступов, индуцированных гипертермией у мышей , для оценки эффекта лекарственного средства, являющегося селективным антагонистом Cav3.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Согласно описанию настоящего изобретения, потенциал–зависимые кальциевые каналы Т–типа вовлечены в развитие синдрома Драве (т.е., тяжелой миоклонической эпилепсии младенчества; SMEI). В настоящем описании также показано, что модуляция потенциал–зависимых кальциевых каналов Т–типа может быть эффективной для лечения синдрома Драве.
I. Определения
Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем описании, имеют общепринятые значения, как их обычно понимают специалисты в области техники, к которой относится настоящее изобретение.
В случае использования выражений «например» и «такой как» и их грамматических эквивалентов подразумевается, что за ними следует фраза «без ограничений», если в явном виде не указано иное.
Формы единственного числа также подразумевают множественное число, если из контекста в явном виде не следует иное.
Термин «примерно» означает «приблизительно» (например, плюс или минус приблизительно 10% от указанного значения).
Термин «малая молекула» означает органическое соединение с молекулярной массой примерно 1000 или менее.
Термин «субъект», относящийся к субъекту, получающему лечение, означает любое животное, включая млекопитающих, например человека.
Фраза «терапевтически эффективное количество» относится к количеству активного соединения или фармацевтического агента, которое вызывает биологическую или лечебную реакцию, обнаруживаемую исследователем, ветеринаром, врачом или другим клиницистом в ткани, системе, у животного, индивидуума или человека.
Термин «лечение» относится к одному или более из: (1) профилактике заболевания; например, профилактике заболевания, состояния или нарушения у индивидуума, который может быть предрасположен к развитию заболевания, состояния или нарушения, но у которого еще отсутствует или не проявлена патология или симптоматика заболевания; (2) подавление развития заболевания; например, подавление развития заболевания, состояния или нарушения у индивидуума, у которого имеется или проявлена патология или симптоматика заболевания, состояния или нарушения (т.е. купирование дальнейшего развития патологии и/или симптоматики); и (3) облегчение заболевания; например, облегчение заболевания, состояния или нарушения у индивидуума, у которого имеется или проявлена патология или симптоматика заболевания, состояния или нарушения (т.е. регресс патологии и/или симптоматики), такое как уменьшение тяжести заболевания или уменьшение или облегчение одного или более симптомов заболевания.
Термин «антагонисты кальциевых каналов Т–типа» относится к веществу, которое снижает активность кальциевых каналов Т–типа, например, через связывание или ингибирование или блокирование иным образом активности канала, или путем уменьшения экспрессии кальциевых каналов Т–типа.
Фраза «фармацевтически приемлемый» используется в настоящем описании для обозначения тех соединений, материалов, композиций и/или дозированных форм, которые в рамках здравого медицинского суждения пригодны для использования в контакте с тканями людей и животных, не вызывая чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений, и которые соизмеримы с разумным соотношением польза/риск.
Понятно, что некоторые признаки изобретения, которые для лучшего понимания описаны в контексте отдельных вариантов осуществления, в одном из вариантов осуществления также могут быть предоставлены в комбинации. И наоборот, различные признаки изобретения, которые для краткости описаны в контексте одного варианта осуществления, также могут быть представлены отдельно или в любой подходящей более узкой комбинации.
50
В настоящем описании могут быть использованы следующие сокращения и символы: ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота); дцРНК (двухцепочечная РНК); г (грамм); IC (половина максимальной ингибирующей концентрации); кг (килограмм); мг (миллиграмм); мРНК (матричная РНК); РНК (рибонуклеиновая кислота); РНКи (РНК–интерференция); миРНК (малая интерферирующая РНК); мас. (масса).
II. Способы лечения
В настоящей заявке представлены способы лечения синдрома Драве у нуждающегося в этом субъекта. Субъект может включать мышей, крыс, других грызунов, кроликов, собак, кошек, свиней, крупный рогатый скот, овец, лошадей, приматов и людей. В некоторых вариантах осуществления субъект является человеком. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение или облегчение неврологического симптома, ассоциированного с синдромом Драве. В некоторых вариантах осуществления неврологический симптом включает одно или более из следующего: судорожные приступы, гиперактивность, импульсивность, аутистическое поведение, сонливость, бессонница, психомоторная задержка, атаксия, когнитивные нарушения, нарушение неврологического развития, задержка развития и поведенческие нарушения. В некоторых вариантах осуществления способ включает введение терапевтически эффективного количества антагониста кальциевых каналов Т–типа, описанных в настоящей заявке, нуждающемуся в лечении субъекту.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты судорожных приступов у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести судорожных приступов у субъекта. В некоторых вариантах осуществления судорожные приступы, ассоциированные с синдромом Драве, представляют собой фебрильные судороги. В некоторых вариантах осуществления фебрильные судороги представляют собой простые фебрильные судороги. В некоторых вариантах осуществления фебрильные судороги представляют собой сложные судороги. В некоторых вариантах осуществления судорожные приступы, ассоциированные с синдромом Драве, представляют собой миоклонические судороги. В некоторых вариантах осуществления судорожные приступы, ассоциированные с синдромом Драве, представляют собой парциальные судорожные приступы.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты гиперактивности у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести гиперактивности у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты импульсивности у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести импульсивности у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты аутистического поведения у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести аутистического поведения у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты сонливости у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести сонливости у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты бессонницы у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести бессонницы у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение психомоторной задержки у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты атаксии у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести атаксии у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести когнитивных нарушений у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение когнитивной функции у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение памяти у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение кратковременной памяти у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение рабочей памяти у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение долговременной памяти у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает улучшение неврологического развития субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение задержки развития субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение частоты поведенческих нарушений у субъекта. В некоторых вариантах осуществления лечение включает уменьшение тяжести поведенческих нарушений у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает продление жизни субъекта. Лечение может снизить риск преждевременной смерти или отсрочить смерть.
В некоторых вариантах осуществления селективный антагонист кальциевых каналов Т–типа в значительной степени проникает через гематоэнцефалический барьер. В других вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа практически не проникает через гематоэнцефалический барьер.
В некоторых вариантах осуществления лечение включает введение субъекту дополнительного терапевтического агента, который может представлять собой, например, дополнительный ингибитор кальциевых каналов Т–типа или противосудорожный агент.
Лечение может представлять собой введение эффективной дозы конкретного соединения. Примеры подходящих для людей доз включают дозы в диапазоне от примерно 1 мг до примерно 2000 мг, например, от примерно 1 мг до примерно 2000 мг, от примерно 2 мг до примерно 2000 мг, от примерно 5 мг до примерно 2000 мг, от примерно 10 мг до примерно 2000 мг, от примерно 20 мг до примерно 2000 мг, от примерно 50 мг до примерно 2000 мг, от примерно 100 мг до примерно 2000 мг, от примерно 150 мг до примерно 2000 мг, от примерно 200 мг до примерно 2000 мг, от примерно 250 мг до примерно 2000 мг, от примерно 300 мг до примерно 2000 мг, от примерно 400 мг до примерно 2000 мг, от примерно 500 мг до примерно 2000 мг, от примерно 1000 мг до примерно 2000 мг, от примерно 1 мг до примерно 1000 мг, от примерно 2 мг до примерно 1000 мг, от примерно 5 мг до примерно 1000 мг, от примерно 10 мг до примерно 1000 мг, от примерно 20 мг до примерно 1000 мг, от примерно 50 мг до примерно 1000 мг, от примерно 100 мг до примерно 1000 мг, от примерно 150 мг до примерно 1000 мг, от примерно 200 мг до примерно 1000 мг, от примерно 250 мг до примерно 1000 мг, от примерно 300 мг до примерно 1000 мг, от примерно 400 мг до примерно 1000 мг, от примерно 500 мг до примерно 1000 мг, от примерно 1 мг до примерно 500 мг, от примерно 2 мг до примерно 500 мг, от примерно 5 мг до примерно 500 мг, от примерно 10 мг до примерно 500 мг, от примерно 20 мг до примерно 500 мг, от примерно 50 мг до примерно 500 мг, от примерно 100 мг до примерно 500 мг, от примерно 150 мг до примерно 500 мг, от примерно 200 мг до примерно 500 мг, от примерно 1 мг до примерно 250 мг, от примерно 2 мг до примерно 250 мг, от примерно 5 мг до примерно 250 мг, от примерно 10 мг до примерно 250 мг, от примерно 20 мг до примерно 250 мг, от примерно 50 мг до примерно 250 мг, от примерно 100 мг до примерно 250 мг, от примерно 1 мг до примерно 100 мг, от примерно 2 мг до примерно 100 мг, от примерно 5 мг до примерно 100 мг, от примерно 10 мг до примерно 100 мг, от примерно 20 мг до примерно 100 мг, от примерно 50 мг до примерно 100 мг. Дозы могут составлять, например, примерно 1 мг, примерно 2 мг, примерно 5 мг, примерно 10 мг, примерно 20 мг, примерно 50 мг, примерно 100 мг, примерно 150 мг, примерно 200 мг, примерно 250 мг, примерно 300 мг, примерно 400 мг, примерно 500 мг, примерно 1000 мг, примерно 1500 мг или примерно 2000 мг. Дозы могут быть меньше примерно 2000 мг, меньше примерно 1500 мг, меньше примерно 1000 мг, меньше примерно 5000 мг, меньше примерно 400 мг, меньше примерно 250 мг, меньше примерно 200 мг, меньше примерно 150 мг, меньше примерно 100 мг, меньше примерно 50 мг, меньше примерно 20 мг или меньше примерно 10 мг. Каждая из доз может представлять собой дозу, вводимую с частотой один раз в сутки, два раза в сутки, три раза в сутки или четыре раза в сутки, или реже одного раза в сутки. Каждая из доз также может представлять собой дозу, которую вводят взрослому человеку, эквивалентную (пропорциональную) дозе, вводимой пациенту детского возраста.
Доза может представлять собой дозу, которая обеспечивает уровень в плазме (например, устойчивое состояние или максимальный уровень), равный примерно 100 нг/мл, примерно 200 нг/мл, 500 нг/мл, примерно 1 мкг/мл, примерно 2 мкг/мл, примерно 5 мкг/мл, примерно 10 мкг/мл, примерно 20 мкг/мл, примерно 50 мкг/мл, примерно 100 мкг/мл, примерно 200 мкг/мл, примерно 250 мкг/мл или примерно 500 мкг/мл, примерно 1000 мкг/мл или в диапазоне между этими значениями, или концентрацию, которая меньше этих значений.
В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 1 недели или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 2 недель или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 3 недель или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 4 недель или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 8 недель или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 12 недель или примерно 13 недель, или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 24 недель или 26 недель, или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 6 месяцев или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 12 месяцев или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 18 месяцев или более. В некоторых вариантах осуществления лечение продолжают в течение примерно 24 месяцев или более.
III. Антагонисты кальциевых каналов Т–типа
Антагонист кальциевых каналов Т–типа, используемый в любом из способов, описанных в настоящей заявке, или в любом из его вариантов осуществления, может представлять собой один или более агонистов кальциевых каналов Т–типа, описанных ниже.
Антагонист кальциевых каналов Т–типа может представлять собой антагонист человеческих кальциевых каналов Т–типа, если субъектом лечения является человек.
Антагонист кальциевых каналов Т–типа может представлять собой малую молекулу. Примеры малых молекул, антагонистов кальциевых каналов Т–типа, которые можно использовать в способах, представленных в настоящей заявке, включают, без ограничения, мибефрадил, дилтиазем, нифедипин, нитрендипин, нимодипин, нилудипин, нигулдипин, никардипин, нисолдипин, амлодипин, фелодипин, исрадипин, риозидин, галлопамил, верапамил, тиапамил, пимозид, тиоридазин, NNC 55–0396, TTL–1177, анандамид, производные бензазепина, производные дифенилбутилпиперидина (например, пимозид, пенфлуридол, клопимозид и флуспирилен), производные бутирофенона (например, галоперидол, дроперидол, бенперидол, триперидол, мелперон, ленперон, азаперон и домперидон) и производные фенилпиперазина (например, антрафенин, арипипразол, ципрофлоксацин, дапипразол, дропропизин, этоперидон, итраконазол, кетоконазол, леводропропезин, мепипразол, нафтопидил, нефазодон, ниапразин, оксипертин, посаконазол, тразодон, урапидил и веснаринон), производные дигидропиридина (например, манидипин, нилвадипин, бенидипин и эфонидипин), флунаризин, анандамид, ломеризин, зонисамид, U–92032, тетралол, производные тетралола (например, мибефрадил), производные мибефрадила (например, NNC 55–0396 дигидрохлорид), TTA–A2, TTA–A8, TTA–P1, 4–аминометил–4–фторпиперидин (TTA–P2), TTA–Q3, TTA–Q6, MK–5395 (CX–5395), MK–6526, MK–8998 (CX–8998), Z941, Z944, сукцинимидные противосудорожные средства (например, этосуксимид, фенсукцинимид и месукцинимид, также известный как метсукцинимид, N–десметилметсукцинимид, также известный как (альфа)–метил–(альфа)–фенил–сукцинимид) и эфонидипин (например, (R)–эфонидипин), триметадион, диметадион, ABT–639, TTL–1177, KYSO5044, куртоксин. Любой из ингибиторов кальциевых каналов Т–типа может быть в форме фармацевтически приемлемой соли. Структуры типичных ингибиторов кальциевых каналов Т–типа показаны ниже.
В некоторых вариантах осуществления малая молекула, антагонист кальциевых каналов Т–типа, может быть выбрана из группы, состоящей из соединений, описанных в патентах, а также в опубликованных заявках на патент, как указано в Giordanetto et al., «T–type calcium channels inhibitors: a patent review», Expert Opin. Ther. Pat., 2011, 21, 85–101, включая WO2004035000, WO9304047, WO2006098969, WO2009009015, WO2007002361, WO2007002884, WO2007120729, WO2009054982, WO2009054983, WO2009054984, US20090270413, WO2008110008, WO2009146539, WO2009146540, US8, 133,998, WO2010083264, WO2006023881, WO2006023883, WO2005007124, WO2005009392, US2005245535, WO2007073497, WO200707852, WO2008033447, WO2008033456, WO2008033460, WO2008033464, WO2008033465, WO2008050200, WO20081 17148, WO2009056934, EP1568695, WO2008007835, KR754325, US7319098, US20100004286, EP1757590, KR2009044924, US2010094006, WO2009035307, US20090325979, KR75758317, WO2008018655, US20080293786 и US20100056545, каждый из этих документов включен в настоящее описание во всей своей полноте посредством ссылки.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой малую молекулу. В некоторых вариантах осуществления малая молекула имеет молекулярную массу 1000 или менее, например, примерно 900 или менее, примерно 800 или менее, примерно 700 или менее, примерно 600 или менее, примерно 500 или менее, примерно 400 или менее, или в диапазоне от примерно 100 до примерно 500, от примерно 200 до примерно 500, от примерно 200 до примерно 400, от примерно 300 до примерно 400 или от примерно 300 до примерно 500.
50
50
50
50
50
50
50
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой селективный антагонист кальциевых каналов Т–типа. «Селективный» в контексте настоящего описания означает, что антагонист кальциевых каналов Т–типа является более сильным при антагонировании с кальциевыми каналами Т–типа по сравнению с другими типами кальциевых каналов, например, по сравнению с любым одним или более из кальциевых каналов L–типа, N–типа, P–типа, Q–типа и/или R–типа, например, по сравнению с кальциевыми каналами L–типа. Селективность может быть определена, например, путем сравнения IC соединения при ингибировании кальциевых каналов Т–типа с его IC при ингибировании других типов кальциевых каналов: если IC для ингибирования каналов Т–типа ниже, чем IC для ингибирования других типов кальциевых каналов, соединение считается селективным. Отношение IC, равное 0,1 (или ниже), означает 10–кратную (или более) селективность. Отношение IC, равное 0,01 (или ниже), означает 100–кратную (или более) селективность. Отношение IC, равное 0,001 (или ниже), означает 1000–кратную (или более) селективность. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа имеет селективность по отношению к кальциевым каналам Т–типа, которая является 10–кратной или более, 100–кратной или более или 1000–кратной или более по сравнению с селективностью к другим типам кальциевых каналов, например, любому одному или более кальциевым каналам L–типа, N–типа, P–типа, Q–типа и/или R–типа, например, к кальциевым каналам L–типа.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой селективный ингибитор кальциевых каналов Т–типа, который выбирают из группы, состоящей из фенсукцимида, метсукцимида, метил–фенил–сукцинимида, R изомера эфонидипина, триметадиона, диметадиона, мибефрадила, TTA–A2, TTA–A8, TTA–P1, TTA–P2, TTA–Q3, TTA–Q6, MK–5395 (CX–5395), MK–6526, MK–8998 (CX–8998), Z941, Z944, ABT–639, TTL–1177, KYSO5044, N C 55–0396 дигидрохлорида, куртоксина иди их производных.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой антагонист кальциевых каналов, который селективно нацеливается на кальциевые каналы Т–типа относительно кальциевых каналов L–типа.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой TTA–A2.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может отличаться от верапамила. Лечение может проводиться без приема верапамила. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальция Т–типа вводят в комбинации с верапамилом.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может отличаться от этосукцимида. Лечение может проводиться без приема этосукцимида. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальция Т–типа вводят в комбинации с этосукцимидом.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может отличаться от зонисамида. Лечение может проводиться без приема зонисамида. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальция Т–типа вводят в комбинации с зонисамидом.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может отличаться от диметадиона. Лечение может проводиться без приема диметадиона. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальция Т–типа вводят в комбинации с диметадионом.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может отличаться от вальпроата. Лечение может проводиться без приема вальпроата. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальция Т–типа вводят в комбинации с вальпроатом.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может отличаться от топирамата. Лечение может проводиться без приема топирамата. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальция Т–типа вводят в комбинации с топираматом.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может отличаться от каннабиноида, такого как каннабидиол или тетрагидроканнабинол. Лечение может проводиться без приема каннабиноида, такого как каннабидиол или тетрагидроканнабинол. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальция Т–типа вводят в комбинации с каннабиноидом, таким как каннабидиол или тетрагидроканнабинол.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевого канала Т–типа может представлять собой молекулу, которая не действует как блокатор пор кальциевого канала Т–типа. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может представлять собой, например, аллостерический ингибитор кальциевых каналов Т–типа.
i
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не оказывает влияния на один или более натриевых каналов, таких как натриевые каналы, имеющие альфа субъединицы Nav1.1, Nav1.2, Nav1.3, Nav1.4, Nav1.5, Nav1.6, Nav1.7, Nav1.8 или Nav1.9 и/или субъединицы Navβ1, Navβ2, Navβ3, Navβ4. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием натриевых каналов, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах K). Ингибитор кальциевых каналов Т–типа может быть ингибитором, который практически не уменьшает неинактивирующий натриевый ток в таламокортикальных нейронах, например, ингибитором, который уменьшает инактивирующий натриевый ток примерно на 20% или менее, примерно на 10% или менее, примерно на 5% или менее, примерно на 2% или менее или примерно на 1% или менее.
i
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не оказывает влияния на один или более калиевых каналов, таких как калиевые каналы, активируемые кальцием (BK–каналы, SK–каналы, IK–каналы), калиевые каналы внутреннего выпрямления (ROMK, GPCR–регулируемые, АТФ–чувствительные), калиевые каналы с тандемом поровых доменов (TWIK (TWIK–1, TWIK–2, KCNK7), TREK (TREK–1, TREK–2, TRAAK), TASK (TASK–1, TASK–3, TASK–5), TALK (TASK–2, TALK–1, TALK–2), THIK (THIK–1, THIK–2), TRESK) или потенциал–зависимые калиевые каналы (hERG, KvLQT, KvLQT2). Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием калиевых каналов, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах К).
А
С
A–ρ
В
А
i
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не влияет на один или более рецепторов ГАМК, таких как рецепторы ГАМК, рецепторы (ГАМК) подкласса ГАМК или рецепторы ГАМК. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не оказывает влияния на одну или более субъединиц рецепторов ГАМК, таких как α–субъединицы (ГАМКA1, ГАМКA2, ГАМКA3, ГАМКA4, ГАМКA5, ГАМКA6), β–субъединицы (ГАМКB1, ГАМКB2, ГАМКB3), γ–субъединицы (ГАМКG1, ГАМКG2, ГАМКG3), δ–субъединицы (ГАМКD), ε–субъединицы (ГАМКE), π–субъединицы (ГАМКP), θ–субъединицы (ГАМКQ), в частности ГАМКА5, ГАМКB3 и ГАМКG5. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием рецепторов ГАМК, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах К или сродства связывания).
i
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не влияет на один или более каннабиноидных рецепторов, таких как каннабиноидный рецептор типа 1 (CB1) или каннабиноидный рецептор типа 2 (CB2). В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не влияет на рецепторы CB1. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не влияет на рецепторы CB2. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием рецепторов CB1 и/или CB2, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах К или сродства связывания).
i
50
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не влияет на уровни ГАМК в мозге (например, уровни в ЦНС). Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с увеличением концентраций ГАМК, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах К или сродства связывания, по сравнению с эффективной дозой ED для увеличения концентрации ГАМК).
i
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не влияет на один или более AMPA или каинатных рецепторов к глутамату, таких как рецепторы AMPA, содержащие GluR1, GluR2, GluR3 или GluR4, например, объединяющие две единицы GluR2 с двумя единицами GluR1, двумя единицами GluR3 или двумя единицами GluR4 и/или каинатные рецепторы, содержащие рецепторы GluR5, GluR6, GluR7, KA1 и/или KA2. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не влияет на одну или более субъединиц АМРА и/или каинитных рецепторов, таких как указано выше. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием АМРА или каинатных рецепторов, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах К или сродства связывания).
i
50
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не ингибирует деацетилазу гистонов. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием деацетилазы гистонов, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах К или сродства связывания по сравнению с IC для ингибирования деацетилазы гистонов).
i
50
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не ингибирует ГАМК–трансаминазу. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием ГАМК–трансаминазы, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах К или сродства связывания по сравнению с IC для ингибирования ГАМК–трансаминазы).
i
50
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не ингибирует сукцинат–полуальдегид дегидрогеназу. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием сукцинат–полуальдегид дегидрогеназы, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах К или сродства связывания по сравнению с IC для ингибирования сукцинат–полуальдегид дегидрогеназы).
i
50
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который практически не ингибирует карбоангидразу или один или более ее изоферментов. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием карбоангидразы, например, имеющим по меньшей мере 2–кратную, по меньшей мере 5–кратную, по меньшей мере 10–кратную, по меньшей мере 20–кратную, по меньшей мере 100–кратную, по меньшей мере 500–кратную или по меньшей мере 1000–кратную селективность (выраженную, например, в единицах К или сродства связывания по сравнению с IC для ингибирования карбоангидразы).
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который при введении животным, например людям, не вызывает одного или более из следующих побочных эффектов или нежелательных явлений: поражение печени, морфологические изменения в печени животных, функциональные изменения в печени животных, поражение почек, морфологические изменения в почках животных, функциональные изменения в почках животных, системная красная волчанка, суицидальные мысли, суицидальное поведение, суицидальные идеи, повышенный риск суицида, возникновение или ухудшение симптомов депрессии, необычные изменения настроения или поведения, врожденные дефекты, аллергическую реакцию.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть антагонистом, который при введении животным не вызывает одного или более из следующих побочных эффектов или нежелательных явлений: нежелательные явления, затрагивающие желудочно–кишечную систему, такие как анорексия, неопределенное расстройство желудка, тошнота и рвота, судороги, боли в эпигастральной и брюшной полости, потеря веса, диарея, гипертрофия и отек десен; нежелательные явления, затрагивающие кроветворную систему, такие как лейкопения, агранулоцитоз, панцитопения, с или без подавления костного мозга и эозинофилия; нежелательные явления, затрагивающие нервную систему, включая неврологические реакции, сенсорные реакции или психические или психологические отклонения, такие как сонливость, головная боль, головокружение, эйфория, икота, раздражительность, гиперактивность, вялость, усталость, атаксия, спутанность сознания, нарушения сна, ночные страхи, неспособность сосредоточиться, агрессивность, параноидальный психоз, повышенное либидо или повышенное состояние депрессии с явными суицидальными намерениями; нежелательные явления, затрагивающие покровную систему, включая дерматологические проявления, такие как крапивница, синдром Стивенса–Джонсона, системная красная волчанка, зудящая эритематозная сыпь и гирсутизм; нежелательные явления, затрагивающие органы чувств, такие как миопия; и нежелательные явления, затрагивающие мочеполовую систему, такие как вагинальное кровотечение или микроскопическая гематурия.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой антитело. В данной области известны различные способы получения антител. См., Antibodies: A Laboratory Manual, CSH Press, Eds., Harlow, and Lane (1988); Harlow, Antibodies, Cold Spring Harbor Press, NY (1989). Например, антитела могут быть получены путем иммунизации подходящего млекопитающего–хозяина образцом цельных клеток, полученных от пациента. Антитела могут быть получены методами культивирования клеток, включая генерацию моноклональных антител, описанную в настоящей заявке, или путем трансфекции генов антител в подходящие клетки–хозяева бактерий или млекопитающих для продуцирования рекомбинантных антител.
В некоторых вариантах антитело представляет собой моноклональное антитело. «Моноклональное антитело» представляет собой антитело, полученное из популяции практически гомогенных антител, т.е. антитела, составляющие популяцию, являются идентичными, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций, которые присутствуют в незначительных количествах.
В некоторых вариантах осуществления антитело, представленное в настоящей заявке, может быть получено рекомбинантными способами. В некоторых вариантах осуществления антитело представляет собой «гуманизированное» или человеческое антитело. «Гуманизированные» или человеческие антитела также могут быть получены и являются предпочтительными для использования в терапевтических целях. Способы гуманизации мышиных и других нечеловеческих антител путем замены одной или более последовательностей нечеловеческих антител соответствующими последовательностями человеческих антител хорошо известны. См., например, Jones et al., Nature, 1986, 321, 522–25; Riechmann et al., Nature, 1988, 332, 323–27; Verhoeyen et al., Science, 1988, 239, 1534–36, Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, 89, 4285; and Sims et al., J. Immunol., 1993, 151, 2296. Эти гуманизированные антитела разрабатывают с целью минимизации нежелательного иммунологического ответа на молекулы античеловеческих антител грызунов, что ограничивает продолжительность и эффективность терапевтического применения этих фрагментов у людей–реципиентов. Соответственно, предпочтительными антителами, используемыми в терапевтических способах, описанных в настоящей заявке, являются антитела, которые являются либо полностью человеческими, либо гуманизированными, имеющими высокое сродство, но при этом имеющими низкую или нулевую антигенность у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой олигонуклеотидный ингибитор. Примеры олигонуклеотидных ингибиторов включают, без ограничения, антисмысловые олигонуклеотиды, РНКи, дцРНК, миРНК и рибозимы. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой миРНК. Используемый в настоящем описании «антисмысловой олигонуклеотид» относится к фрагменту одноцепочечной ДНК или РНК, обычно химически модифицированному, последовательность (3'–5') которого комплементарна смысловой последовательности молекулы мРНК. Антисмысловые молекулы эффективно ингибируют экспрессию генов, образуя дуплексы РНК/ДНК. Антисмысловой означает работу различных механизмов, включая физическую блокировку способности рибосом перемещаться вдоль матричной РНК и ускорение скорости, с которой мРНК деградирует в цитозоле.
in vivo
Чтобы избежать переваривания ДНКазой, антисмысловые олигонуклеотиды могут быть химически модифицированы. Например, фосфоротиоатные олигодезоксинуклеотиды стабилизируют, чтобы они противостояли расщеплению нуклеазой, путем замены серной группой одного немостикового кислорода фосфорильной группы в ДНК. Улучшенная стабильность антисмысловых олигонуклеотидов также может быть достигнута путем использования молекул с 2–метоксиэтил (MOE) замещенными остовами, как описано в общем виде в патенте США № 6,451,991, включенном посредством ссылки, и в опубликованной заявке на патент США № 2003/0158143–А1. Таким образом, антисмысловой олигонуклеотид может быть модифицирован для улучшения стабильности  относительно немодифицированного олигонуклеотида той же последовательности. Модификация может быть, например, (2'–O–2–метоксиэтил) модификацией. Остов олигонуклеотида может быть полностью фосфоротиоатным, а сахарные фрагменты нуклеотидов 1–4 и 18–21 могут содержать 2'–O–метоксиэтильные модификации, в то время как остальные нуклеотиды могут представлять собой 2'–дезоксинуклеотиды.
В данной области является очевидным, что для того, чтобы быть эффективным, антисмысловой олигонуклеотид не обязательно должен иметь 100% идентичность комплементу своей последовательности–мишени. Следовательно, антисмысловые олигонуклеотиды могут иметь последовательность, которая по меньшей мере примерно на 70% идентична комплементу последовательности–мишени. В одном из вариантов осуществления антисмысловые олигонуклеотиды могут иметь последовательность, которая по меньшей мере примерно на 80% идентична комплементу последовательности–мишени. В других вариантах осуществления они имеют последовательность, которая по меньшей мере примерно на 90% идентична или по меньшей мере примерно на 95% идентична комплементу последовательности–мишени, что допускает наличие гэпов (зазоров) или несовпадений нескольких оснований. Идентичность может быть определена, например, с помощью программы BLASTN группы разработки программного обеспечения (GCG) Университета Висконсина.
Антисмысловые олигонуклеотиды по настоящему изобретению обычно имеют в длину от 7 до 100 нуклеотидов. В одном из вариантов осуществления антисмысловые олигонуклеотиды содержат от примерно 7 до примерно 50 нуклеотидов или нуклеотидных аналогов. В другом варианте осуществления антисмысловые олигонуклеотиды содержат от примерно 7 до примерно 35 нуклеотидов или нуклеотидных аналогов. В других вариантах осуществления антисмысловые олигонуклеотиды содержат от примерно 12 до примерно 35 нуклеотидов или нуклеотидных аналогов и от примерно 15 до примерно 25 нуклеотидов или нуклеотидных аналогов.
Ингибиторы олигонуклеотидов в соответствии с настоящим изобретением могут представлять собой молекулы миРНК, которые нацелены на представляющий интерес ген, при этом последовательность миРНК соответствует части указанного гена. Молекулы РНК, используемые в настоящем изобретении, обычно содержат часть РНК и некоторую дополнительную часть, например дезоксирибонуклеотидную часть.
in vitro
Настоящее изобретение также относится к модуляторам рибозимных олигонуклеотидов, которые специфически нацеливаются на мРНК, кодирующую представляющий интерес белок, такой как белки, содержащие кальциевый канал Т–типа. Рибозимы представляют собой молекулы РНК, обладающие ферментативной активностью, которая позволяет рибозиму осуществлять многократное расщепление специфических нуклеотидных последовательностей других отдельных молекул РНК. Такие ферментативные молекулы РНК могут быть нацелены практически на любой транскрипт мРНК, обеспечивая эффективное расщепление . Kim et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1987, 84, 8788; Haseloff et al., Nature, 1988, 334, 585; Cech, JAMA, 1988, 260, 3030; and Jefferies et al., Nucleic Acids Res., 1989, 17, 1371.
Как правило, рибозим содержит две части, расположенные в непосредственной близости друг к другу: мРНК–связывающую часть, имеющую последовательность, комплементарную последовательности мРНК–мишени, и каталитическую часть, которая расщепляет мРНК–мишень. Рибозим действует сначала путем распознавания и связывания мРНК–мишени за счет комплементарного спаривания оснований через участок рибозима, связывающий мРНК–мишень. После специфического связывания со своей мишенью, рибозим катализирует расщепление целевой мРНК. Такое стратегическое расщепление нарушает способность мРНК–мишени направлять синтез кодируемого белка. После связывания и расщепления мРНК–мишени, рибозим высвобождается и может повторно связывать и расщеплять новые молекулы мРНК–мишени.
В некоторых вариантах осуществления селективный антагонист кальциевых каналов Т–типа в значительной степени проникает через гематоэнцефалический барьер.
В некоторых вариантах осуществления селективный антагонист кальциевых каналов Т–типа практически не проникает через гематоэнцефалический барьер.
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой антагонист кальциевых каналов, который селективно нацеливается на кальциевые каналы Т–типа. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой малую молекулу, раскрытую в настоящем описании.
50
50
50
50
50
50
50
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа селективно нацеливается на Cav3.1. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа селективно нацеливается на Cav3.2. В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа селективно нацеливается на Cav3.3. «Селективный» в контексте настоящего описания означает, что антагонист кальциевых каналов Т–типа является более эффективным при антагонировании с кальциевыми каналами одного Т–типа относительно кальциевых каналов другого типа, например, более эффективным при антагонировании с Cav3.1 по сравнению с Cav3.2 или Cav3.3 или обоими; более эффективным при антагонировании с Cav3.2 по сравнению с Cav3.1 или Cav3.3 или обоими; более эффективным при антагонировании с Cav3.3 о сравнению с Cav3.1 или Cav3.2 или обоими. Селективность может быть определена, например, путем сравнения IC соединения при ингибировании одного типа кальциевого канала T–типа с его IC при ингибировании других типов кальциевого канала T–типа: если IC при ингибировании одного типа каналов T–типа ниже, чем IC при ингибировании другого типа кальциевых каналов Т–типа, то соединение считается селективным. Отношение IC, равное 0,1 (или ниже), означает 10–кратную (или более) селективность. Отношение IC, равное 0,01 (или ниже), означает 100–кратную (или более) селективность. Отношение IC, равное 0,001 (или ниже), означает 1000–кратную (или более) селективность. В некоторых вариантах осуществления селективность по отношению к Cav3.1, Cav3.2 или Cav3.3 является 10–кратной или более, 100–кратной или более или 1000–кратной или более.
50
50
50
50
50
50
50
В некоторых вариантах осуществления антагонист кальциевых каналов Т–типа нацеливается на селективно кальциевые каналы Т–типа (например, Cav3.1, Cav3.2 и/или Cav3.3) относительно натриевых каналов, таких как натриевые каналы, имеющие альфа субъединицы Nav1.1, Nav1.2, Nav1.3, Nav1.4, Nav1.5, Nav1.6, Nav1.7, Nav1.8 или Nav1.9 и/или субъединицы Navβ1, Navβ2, Navβ3, Navβ4. Антагонист кальциевых каналов Т–типа может быть селективным по отношению к кальциевым каналам Т–типа по сравнению с ингибированием натриевых каналов. Селективность может быть определена, например, путем сравнения IC соединения при ингибировании кальциевых каналов Т–типа с его IC при ингибировании одного или более типов натриевых каналов: если IC при ингибировании кальциевых каналов Т–типа ниже, чем IC при ингибировании натриевых каналов, соединение считается селективным. Отношение IC, равное 0,1 (или ниже), означает 10–кратную (или более) селективность. Отношение IC, равное 0,01 (или ниже), означает 100–кратную (или более) селективность. Отношение IC, равное 0,001 (или ниже), означает 1000–кратную (или более) селективность. В некоторых вариантах осуществления селективность по отношению к кальциевым каналам Т–типа является 10–кратной или более, 100–кратной или более или 1000–кратной или более.
Эффективность соединения при ингибировании кальциевых каналов Т–типа может меняться в зависимости от состояния кальциевого канала Т–типа, который ингибирует антагонист кальциевых каналов Т–типа. Кальциевые каналы Т–типа могут возникать в разных состояниях в зависимости от потенциала клеточной мембраны. Антагонисты кальциевых каналов Т–типа, которые являются эффективными в описанных в настоящей заявке способах, могут включать антагонисты кальциевых каналов Т–типа, которые блокируют кальциевые каналы Т–типа, когда мембранный потенциал находится в диапазоне от примерно –60 мВ до примерно –30 мВ, например, предпочтительно при примерно –40 мВ. Мембранный потенциал «в диапазоне от примерно –60 до примерно –30 мВ» может включать мембранные потенциалы в диапазоне от –70 мВ до –20 мВ или в диапазоне от –65 мВ до –25 мВ, а также может охватывать диапазоны мембранного потенциала, такие как от примерно –40 мВ до примерно –30 мВ, от примерно –50 мВ до примерно –30 мВ, от примерно –70 мВ до примерно –30 мВ, от примерно –50 мВ до примерно –40 мВ, от примерно –60 мВ до примерно –40 мВ, примерно –70 мВ до примерно –40 мВ, от примерно –60 мВ до примерно –50 мВ и от примерно –70 до примерно –50 мВ, а также примерно –30 мВ, примерно –40 мВ, примерно –50 мВ и примерно –60 мВ. В некоторых вариантах осуществления антагонисты кальциевых каналов Т–типа, которые являются эффективными в описанных в настоящей заявке способах, могут включать антагонисты кальциевых каналов Т–типа, которые блокируют кальциевые каналы Т–типа, когда мембранный потенциал находится в диапазоне от примерно –100 мВ до примерно –80 мВ, например, предпочтительно при примерно –90 мВ. Мембранный потенциал «в диапазоне от примерно –100 до примерно –80 мВ» может включать мембранные потенциалы в диапазоне от –110 мВ до –70 мВ или в диапазоне от –105 мВ до –75 мВ, а также может охватывать диапазоны мембранного потенциала, такие как от примерно –100 мВ до примерно –80 мВ, от примерно –90 мВ до примерно –80 мВ и от примерно –100 мВ до примерно –90 мВ, а также примерно –100 мВ, примерно –90 мВ и примерно –80 мВ.
Не ограничиваясь какой–либо теорией, предполагается, что антагонисты кальциевых каналов Т–типа, которые являются эффективными в описанных в настоящей заявке способах, могут включать антагонисты кальциевых каналов Т–типа, которые селективно блокируют кальциевые каналы Т–типа, когда мембранный потенциал находится в диапазоне от примерно –60 мВ до примерно –30 мВ, например при примерно –40 мВ, по сравнению с блокадой кальциевых каналов Т–типа, когда мембранный потенциал находится в диапазоне от примерно –100 мВ до примерно –80 мВ, например, при примерно –90 мВ.
50
50
Когда мембранный потенциал составляет примерно –40 мВ эффективный ингибитор канала Т–типа может ингибировать кальциевые каналы Т–типа при значении IC для ингибирования кальциевых каналов Т–типа, составляющем примерно 10 мкМ или менее, например, примерно 1 мкМ или менее, примерно 500 нМ или менее, примерно 100 нМ или менее, примерно 50 нМ или менее, примерно 10 нМ или менее, примерно 5 нМ или менее или примерно 1 нМ или менее. Эффективный антагонист кальциевых каналов Т–типа может селективно ингибировать кальциевые каналы Т–типа при мембранном потенциале, составляющем примерно –40 мВ, по сравнению с ингибированием кальциевых каналов Т–типа при мембранном потенциале, составляющем примерно –90 мВ. Например, отношение IC антагониста кальциевых каналов Т–типа при ингибировании кальциевых каналов Т–типа, которое является селективным при мембранном потенциале примерно –40 мВ, по сравнению с ингибированием кальциевых каналов Т–типа при мембранном потенциале примерно –90 мВ, может составлять примерно 1:2 или менее, например, примерно 1:5 или менее, примерно 1:10 или менее, примерно 1:20 или менее, примерно 1:50 или менее, примерно 1:100 или менее, примерно 1:500 или менее, примерно 1:1000 или менее. В некоторых вариантах осуществления селективность ингибирования кальциевых каналов Т–типа при примерно –40 мВ является 2–кратной или более, 5–кратной или более, 10–кратной или более, 100–кратной или более или 1000–кратной или более по сравнению с ингибированием кальциевых каналов Т–типа при примерно –90 мВ.
50
50
Когда мембранный потенциал составляет примерно –90 мВ эффективный ингибитор канала Т–типа может ингибировать кальциевые каналы Т–типа при значении IC для ингибирования кальциевых каналов Т–типа, составляющем примерно 10 мкМ или менее, например, примерно 1 мкМ или менее, примерно 500 нМ или менее, примерно 100 нМ или менее, примерно 50 нМ или менее, примерно 10 нМ или менее, примерно 5 нМ или менее или примерно 1 нМ или менее. Эффективный антагонист кальциевых каналов Т–типа может селективно ингибировать кальциевые каналы Т–типа при мембранном потенциале, составляющем примерно –90 мВ, по сравнению с ингибированием кальциевых каналов Т–типа при мембранном потенциале, составляющем примерно –40 мВ. Например, отношение IC антагониста кальциевых каналов Т–типа при ингибировании кальциевых каналов Т–типа, которое является селективным при мембранном потенциале примерно –90 мВ, по сравнению с ингибированием кальциевых каналов Т–типа при мембранном потенциале примерно –40 мВ, может составлять примерно 1:2 или менее, например, примерно 1:5 или менее, примерно 1:10 или менее, примерно 1:20 или менее, примерно 1:50 или менее, примерно 1:100 или менее, примерно 1:500 или менее, примерно 1:1000 или менее. В некоторых вариантах осуществления селективность ингибирования кальциевых каналов Т–типа при примерно –90 мВ является 2–кратной или более, 5–кратной или более, 10–кратной или более, 100–кратной или более или 1000–кратной или более по сравнению с ингибированием кальциевых каналов Т–типа при примерно –40 мВ.
Все соединения и их фармацевтически приемлемые соли могут находиться вместе с другими веществами, такими как вода и растворители (например, гидраты и сольваты), или могут быть выделенными. В некоторых вариантах осуществления соединения, представленные в настоящем описании, или их фармацевтически приемлемые соли, по существу являются выделенными. «По существу выделенный» означает, что соединение по меньшей мере частично или практически полностью отделено от среды, в которой оно было образовано или обнаружено. Частичное отделение может включать, например, композицию, обогащенную представленными в настоящем описании соединениями. «По существу выделенное» может включать композиции, содержащие по меньшей мере примерно 50%, по меньшей мере примерно 60%, по меньшей мере примерно 70%, по меньшей мере примерно 80%, по меньшей мере примерно 90%, по меньшей мере примерно 95%, по меньшей мере примерно 97%, или по меньшей мере примерно 99% по массе соединений, представленных в настоящем описании, или их солей. Способы выделения соединений и их солей являются обычными способами данной области.
Используемый в настоящем описании термин «фармацевтически приемлемые соли» относится к производным раскрытых соединений, в которых исходное соединение модифицировано путем преобразования существующего кислотного или основного фрагмента в его солевую форму. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают, без ограничения, соли минеральных или органических кислот основных остатков, таких как амины; щелочные или органические соли кислотных остатков, таких как карбоновые кислоты; и т.п. Фармацевтически приемлемые соли по настоящей заявке включают обычные нетоксичные соли исходного соединения, образованные, например, из нетоксичных неорганических или органических кислот. Фармацевтически приемлемые соли по настоящей заявке могут быть синтезированы обычными химическими способами из исходного соединения, которое содержит основной или кислотный фрагмент. Как правило, такие соли могут быть получены путем взаимодействия свободных кислотных или основных форм этих соединений со стехиометрическим количеством подходящего основания или кислоты в воде или в органическом растворителе или в смеси этих двух веществ; как правило, предпочтительными являются неводные среды, такие как эфир, этилацетат, спирты (например, метанол, этанол, изопропанол или бутанол) или ацетонитрил. Списки подходящих солей можно найти в работе Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 and Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977). Способы получения солевых форм описаны, например, в Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, Wiley–VCH, 2002.
IV. Виды комбинированной терапии
Для лечения синдрома Драве соединения, представленные в настоящем описании, можно использовать в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими агентами. Примеры дополнительных терапевтических агентов включают, без ограничения, антагонисты кальциевых каналов (включая антагонисты кальциевых каналов L–типа и Т–типа), противосудорожные агенты, агонисты ГАМК(A)–рецепторов и положительные аллостерические модуляторы или генную терапию или терапию, основанную на реактивации генов.
В некоторых вариантах осуществления лечение антагонистом кальциевых каналов Т–типа может осуществляться в отсутствие дополнительных терапевтических агентов, полезных для лечения синдрома Драве. В некоторых вариантах осуществления лечение может осуществляться с помощью одного антагониста кальциевых каналов Т–типа. В некоторых вариантах осуществления лечение антагонистом кальциевых каналов Т–типа может проводиться в отсутствие противосудорожного агента.
Один или более дополнительных терапевтических агентов можно вводить пациенту одновременно или последовательно, используя один и тот же или разные графики введения, которые обычно определяются конкретной используемой комбинацией и решением врача, назначающего лечение.
Примеры антагонистов кальциевых каналов включают, без ограничения, антагонисты кальциевых каналов Т–типа, описанные в настоящей заявке, и антагонисты кальциевых каналов L–типа. В некоторых вариантах осуществления дополнительный антагонист кальциевых каналов выбирают из антагониста кальциевых каналов Т–типа, представленного в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления дополнительный антагонист кальциевых каналов является антагонистом кальциевых каналов L–типа. В некоторых вариантах осуществления дополнительный антагонист кальциевых каналов является антагонистом кальциевых каналов Т–типа. В некоторых вариантах осуществления дополнительный антагонист кальциевых каналов представляет собой антагонист кальциевых каналов Т–типа, выбранный из группы, состоящей из мибефрадила, МК–5395 (СХ–5395), МК–6526, МК–8998 (СХ–8998) и Z944. В некоторых вариантах осуществления дополнительный антагонист кальциевых каналов представляет собой антагонист кальциевых каналов Т–типа и антагонист кальциевых каналов L–типа. В некоторых вариантах осуществления дополнительный антагонист кальциевых каналов представляет собой антагонист кальциевых каналов Т–типа или антагонист кальциевых каналов L–типа, выбранный из группы, состоящей из ACT–28077, мибефрадила и TTL–1177. В некоторых вариантах осуществления дополнительный антагонист кальциевых каналов представляет собой мибефрадил.
Примеры противосудорожных агентов включают, без ограничения, ацетазоламид, клобазам, клоназепам, ацетат эсликарбазепина, этосуксимид, лакосамид, леветирацетам, нитразепам, окскарбазепин, перампанел, пирацетам, фенобарбитал, прегабалин, примидон, ретигабин, руфинамид, вальпроат, например вальпроат натрия, стирипентол, тиагабин, топирамат, вигабатрин и зонисамид.
Примеры агонистов ГАМК(А)–рецепторов включают габоксадол, бамалузол, гамма–аминомасляную кислоту, габамид, гамма–амино–бета–гидроксибутировую кислоту, габоксадол, иботеновую кислоту, изогувацин, изонипекатиновую кислоту, мускимол, фенибут, пикамилон, прогабид, квискваламин, SL 75102 и тиомусцимол.
Примеры положительных аллостерических модуляторов ГАМК(А)–рецепторов включают авермектины (например, ивермектин), барбитураты (например, фенобарбитал), бензодиазепины (например, адиназолам, альпразолам, бентазепам, бретазенил, бромазепам, бротизолам, камазепам, хлордиазепоксид, циназепам, цинолазепам, клобазам, клоназепам, клоназолам, клоразепат, клотиазепам, клоксазолам, делоразепам, диазепам, диклазепам, эстазолам, этил карфлузепат, этизолам, этил лофлазепат, флубромазепам, флубромазолам, флунитразепам, флуразепам, флутазолам, флутопразепам, галазепам, кетазолам, лопразолам, лоразепам, лорметазепам, медазепам, мексазолам, мидазолам, нифоксипам, ниметазепам, нитразепам, нордиазепам, оксазепам, феназепам, пиназепам, празепам, премазепам, пиразолам, квазепам, рилмазафон, темазепам, тиеналпразолам, тетразепам, и тразолам), бромиды (например, бромид калия), карбаматы (например, мепробамат, каризопродол), хлоралоз, хлормезанон, клометиазол, дигидроэрголины (например, эрголоид (дигидроэрготоксин)), этазепин, этифоксин, имидазолы (например, этомидат), кавалактоны (обнаруженные в кава), лореклезол, нейроактивные стероиды (например, аллопрегнанолон, ганаксолон), нонбензодиазепины (например, залеплон, золпидем, зопиклон, эсзопиклон), петрихлорал, фенолы (например, пропофол), пиперидиндионы (например, глутетимид, метиприлон), пропанидид, пиразолопиридины (например, этазолат), квиназолиноны (например, метаквалон), компоненты шлемника, стирипентол, сульфонилалканы (например, сульфонметан, тетронал, трионал) и компоненты валерианы (например, валериановая кислота, валериновая кислота).
В некоторых вариантах осуществления терапия может предоставляться в виде монотерапии. В некоторых вариантах осуществления терапия может предоставляться в отсутствие дополнительной противоэпилептической терапии. Терапия может предоставляться в отсутствие каких–либо дополнительных агентов, описанных в этом разделе. Например, терапия может быть предоставлена в отсутствие дополнительного противосудорожного средства, такого как ацетазоламид, клобазам, клоназепам, ацетат эсликарбазепина, этосуксимид, лакосамид, леветирацетам, нитразепам, окскарбазепин, перампанел, пирацетам, фенобарбитал, прегабалин, примидон, ретигабин, руфинамид, вальпроат, например вальпроат натрия, стирипентол, тиагабин, топирамат, вигабатрин или зонисамид.
В некоторых вариантах осуществления антагонисты кальциевых каналов Т–типа, представленные в настоящем описании, могут использоваться в комбинации с одним или более дополнительными видами терапии, включая, без ограничения, кетогенную диету, физиотерапию, трудотерапию, терапию общения (например, логопедию) и поведенческую терапию.
В некоторых вариантах осуществления антагонисты кальциевых каналов Т–типа, представленные в настоящем описании, могут использоваться в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими агентами и одним или более дополнительными видами терапии, выбранными из группы, состоящей из кетогенной диеты, физиотерапии, трудотерапии, коммуникативной терапии (например, логопедии) и поведенческой терапии.
V. Фармацевтические композиции
Ингибиторы кальциевых каналов Т–типа, используемые в описанных в настоящей заявке способах, можно вводить в форме фармацевтических композиций. Таким образом, настоящее изобретение относится к ингибитору кальциевых каналов Т–типа и, по меньшей мере, одному фармацевтически приемлемому носителю для применения в заявленных способах лечения или для производства лекарственного средства для лечения состояний, описанных в настоящей заявке. Эти композиции могут быть получены способом, известным в области фармацевтики, и могут вводиться различными путями. Введение может быть местным (включая трансдермальное, эпидермальное, офтальмологическое и нанесение на слизистые оболочки, включая интраназальную, вагинальную и ректальную доставку), легочным (например, путем ингаляции или инсуффляции порошков или аэрозолей, в том числе с помощью небулайзера; интратрахеально или интраназально), пероральным или парентеральным. Парентеральное введение включает внутривенное, внутриартериальное, подкожное, внутрибрюшинное внутримышечное введение или инъекцию или инфузию; или внутричерепное, например, интратекальное или внутрижелудочковое введение. Парентеральное введение может быть в виде однократной болюсной дозы или может быть выполнено, например, с помощью перфузионного насоса непрерывного действия. Фармацевтические композиции и составы для местного применения могут включать трансдермальные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, спреи, жидкости и порошки. Обычные фармацевтические носители, водные, порошковые или масляные основы, загустители и тому подобное могут быть необходимыми или желательными.
В настоящей заявке представлены фармацевтические композиции, которые содержат в качестве активного ингредиента ингибитор кальциевых каналов Т–типа (который может быть в форме фармацевтически приемлемой соли) в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями (наполнителями). В некоторых вариантах осуществления композиция подходит для местного применения. При изготовлении композиций по изобретению активный ингредиент обычно смешивают с наполнителем, разбавляют наполнителем или помещают в такой носитель в форме, например, капсулы, саше, бумаги или другого контейнера. Если наполнитель служит в качестве разбавителя, он может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, который действует как несущая среда, носитель или среда для активного ингредиента. Таким образом, композиции могут быть в форме таблеток, пилюль, порошков, пастилок, саше, облаток, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (в виде твердого вещества или в жидкой среде), мазей, содержащих, например, до 10 мас.% активного соединения, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных растворов для инъекций и стерильных упакованных порошков.
При приготовлении композиции ингибитор кальциевых каналов Т–типа может быть размолот перед объединением с другими ингредиентами для получения соответствующего размера частиц. Если активное соединение является практически нерастворимым, его можно размолоть до размера частиц менее 200 меш. Если активное соединение является практически нерастворимым, размер частиц можно регулировать путем измельчения для получения по существу равномерного распределения в составе, например, до примерно 40 меш.
Соединения по изобретению могут быть измельчены с помощью известных процедур измельчения, таких как влажный размол, для получения частиц подходящего размера для формирования таблеток и других типов композиций. Мелкодисперсные (наночастицы) препараты соединений по изобретению могут быть получены способами, известными в данной области.
Некоторые примеры подходящих наполнителей включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, крахмалы, аравийскую камедь, фосфат кальция, альгинаты, трагакант, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, воду, сироп и метилцеллюлозу. Составы могут дополнительно включать лубриканты, такие как тальк, стеарат магния и минеральное масло; смачивающие агенты; эмульгирующие и суспендирующие агенты; консерванты, такие как метил– и пропилгидроксибензоаты; подсластители; и ароматизаторы.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит силицированную микрокристаллическую целлюлозу (SMCC) и по меньшей мере одно соединение, описанное в настоящей заявке, или его фармацевтически приемлемую соль. В некоторых вариантах осуществления силицированная микрокристаллическая целлюлоза содержит примерно 98% микрокристаллической целлюлозы и примерно 2% диоксида кремния, мас./мас.
В некоторых вариантах осуществления для получения композиции используют процесс влажной грануляции. В некоторых вариантах осуществления для получения композиции используют процесс сухой грануляции.
Композиции могут быть приготовлены в виде единичной дозированной формы, причем каждая доза содержит от примерно 5 до примерно 1000 мг (1 г), чаще от примерно 100 мг до примерно 500 мг активного ингредиента. В некоторых вариантах осуществления каждая доза содержит примерно 10 мг активного ингредиента. В некоторых вариантах осуществления каждая доза содержит примерно 50 мг активного ингредиента. В некоторых вариантах осуществления каждая доза содержит примерно 25 мг активного ингредиента. Термин «единичные дозированные формы» относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз для людей и других млекопитающих, причем каждая единица содержит заранее определенное количество активного материала, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, в комбинации с подходящим фармацевтическим наполнителем.
Компоненты, используемые для приготовления фармацевтических композиций, имеют высокую степень чистоты и практически не содержат потенциально вредных примесей (например, по меньшей мере соответствуют национальной системе качества пищевых продуктов, как правило, соответствуют по меньшей мере аналитической степени чистоты и, чаще всего, соответствуют по меньшей мере фармацевтическим стандартам). В частности, для потребления человеком композицию предпочтительно изготавливают или получают в виде составов в соответствии со стандартами надлежащей практики организации производства, определенными в применимых нормативных актах Управления США по контролю за качеством пищевых продуктов и лекарственных препаратов. Например, подходящие составы могут быть стерильными и/или практически изотоническими и/или полностью соответствовать всем правилам надлежащей практики организации производства, установленным Управлением США по контролю за качеством пищевых продуктов и лекарственных препаратов.
Активное соединение может быть эффективным в широком диапазоне доз и обычно вводится в терапевтически эффективном количестве. Однако следует понимать, что количество фактически вводимого соединения обычно определяет врач в соответствии с соответствующими обстоятельствами, включая состояние, подлежащее лечению, выбранный путь введения, фактическое вводимое соединение, возраст, вес и реакцию отдельного пациента, тяжесть симптомов у пациента и т.п.
in vitro
Терапевтическая доза соединения по настоящему изобретению может меняться в зависимости, например, от конкретного применения, для которого назначено лечение, от способа введения соединения, состояния здоровья и состояния пациента и от оценки лечащего врача. Пропорция или концентрация соединения по изобретению в фармацевтической композиции может меняться в зависимости от ряда факторов, включая дозу, химические характеристики (например, гидрофобность) и путь введения. Например, соединения по изобретению могут быть предоставлены в водном физиологическом буферном растворе, содержащем от примерно 0,1 до примерно 10% мас./об. соединения для парентерального введения. Некоторые типичные диапазоны доз составляют от примерно 1 мкг/кг до 1 г/кг массы тела в сутки. В некоторых вариантах осуществления диапазон доз составляет от примерно 0,01 мг/кг до примерно 100 мг/кг массы тела в сутки. Доза может зависеть от таких переменных как: тяжесть заболевания, общее состояние здоровья конкретного пациента, относительная биологическая эффективность выбранного соединения, состав наполнителя и путь введения. Эффективные дозы могут быть получены экстраполяцией кривых доза–ответ, полученных из тест–систем  или на моделях животных. Эффективные дозы для человека могут составлять, например, примерно 1 мг, 2 мг, 5 мг, 10 мг, 15 мг, 20 мг, 25 мг, 30 мг, 35 мг, 40 мг, 45 мг, 50 мг, 55 мг, 60 мг, 65 мг, 70 мг, 75 мг, 80 мг, 85 мг, 90 мг, 95 мг, 100 мг, 110 мг, 120 мг, 125 мг, 130 мг, 140 мг, 150 мг, 160 мг, 170 мг , 180 мг, 190 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 350 мг, 400 мг, 500 мг, 600 мг, 700 мг, 800 мг, 900 мг или 1000 мг. Дозы могут вводиться, например, один раз в сутки, два раза в сутки, три раза в сутки или четыре раза в сутки.
В некоторых вариантах осуществления, когда антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой мибефрадил, он может вводиться в дозе, например, примерно 0,1 мг, 0,3 мг, 1 мг, 3 мг, 5 мг, 10 мг, 15 мг или 30 мг. Дозы могут вводиться, например, один раз в сутки, два раза в сутки, три раза в сутки или четыре раза в сутки.
В некоторых вариантах осуществления, когда антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой MK–5395 (CX–5395), MK–5395 может вводиться в дозе, например, примерно 0,3 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг, 5 мг/кг, 10 мг/кг, 30 мг/кг или 100 мг/кг. Дозы могут вводиться, например, один раз в сутки, два раза в сутки, три раза в сутки или четыре раза в сутки.
В некоторых вариантах осуществления, когда антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой MK–6526, оно может вводиться в дозе, например, примерно 0,3 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг, 5 мг/кг, 10 мг/кг, 30 мг/кг или 100 мг/кг. Дозы могут вводиться, например, один раз в сутки, два раза в сутки, три раза в сутки или четыре раза в сутки.
В некоторых вариантах осуществления, когда антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой MK–8998 (CX–8998), MK–8998 может вводиться в дозе, например, примерно 0,3 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг, 5 мг/кг, 10 мг/кг, 30 мг/кг или 100 мг/кг. Дозы могут вводиться, например, один раз в сутки, два раза в сутки, три раза в сутки или четыре раза в сутки.
В некоторых вариантах осуществления, когда антагонист кальциевых каналов Т–типа представляет собой Z944, оно может вводиться в дозе, например, примерно 0,3 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг, 5 мг/кг, 10 мг/кг, 30 мг/кг или 100 мг/кг. Дозы могут вводиться, например, один раз в сутки, два раза в сутки, три раза в сутки или четыре раза в сутки.
Для приготовления твердых композиций, таких как таблетки, основной активный ингредиент смешивают с фармацевтическим наполнителем с образованием до придания окончательной формы твердой композиции, содержащей гомогенную смесь соединения по настоящему изобретению. Когда эти композиции до придания окончательной формы указаны как гомогенные, активный ингредиент обычно равномерно распределен в объеме всей композиции, так что композицию можно легко разделить на одинаково эффективные стандартные дозированные формы, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Затем эту твердую композиции до придания окончательной формы делят на стандартные дозированные формы описанного выше типа, содержащие, например, от примерно 0,1 до примерно 1000 мг активного ингредиента по настоящему изобретению.
Жидкие формы, в которые могут быть введены соединения и композиции по настоящему изобретению для перорального или инъекционного введения, включают водные растворы, подходящие ароматизированные сиропы, водные или масляные суспензии и ароматизированные эмульсии с пищевыми маслами, такими как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло, а также эликсиры и аналогичные фармацевтические несущие среды.
Композиции для ингаляции или инсуффляции включают растворы и суспензии в фармацевтически приемлемых, водных или органических растворителях или их смесях и порошки. Жидкие или твердые композиции могут содержать подходящие фармацевтически приемлемые наполнители, описанные выше. В некоторых вариантах осуществления композиции вводят пероральным или назальным способом через дыхательные пути для получения локального или системного эффекта. Композиции можно распылять с помощью инертных газов. Распыленные растворы можно вдыхать непосредственно из распыляющего устройства, или распыляющее устройство можно прикрепить к лицевой маске, палатке или дыхательному аппарату, обеспечивающему периодическое положительное давление. Композиции в виде раствора, суспензии или порошка могут вводиться перорально или назально из устройств, которые доставляют состав соответствующим образом.
Составы для топического применения могут содержать один или более носителей. В некоторых вариантах осуществления мази могут содержать воду и один или более гидрофобных носителей, выбранных, например, из жидкого парафина, алкилового эфира полиоксиэтилена, пропиленгликоля, белого вазелина и т.п. Композиции носителя для кремов могут быть на основе воды в сочетании с глицерином и одним или более другими компонентами, например, глицеринмоностеаратом, ПЭГ–глицеринмоностеаратом и цетилстеариловым спиртом. Гели могут быть приготовлены с использованием изопропилового спирта и воды, которые подходящим образом объединены с другими компонентами, такими как, например, глицерин, гидроксиэтилцеллюлоза и т.п. В некоторых вариантах осуществления составы для топического применения содержат по меньшей мере примерно 0,1, по меньшей мере примерно 0,25, по меньшей мере примерно 0,5, по меньшей мере примерно 1, по меньшей мере примерно 2 или по меньшей мере примерно 5 мас.% соединения по изобретению.
Количество соединения или композиции, вводимое пациенту, будет меняться в зависимости от того, что вводится, цели введения, такой как для профилактики или терапии, состояния пациента, способа введения и т.п. При терапевтическом применении композиции можно вводить пациенту, уже страдающему от заболевания, в количестве, достаточном для устранения или по меньшей мере частичного ослабления симптомов заболевания и его осложнений. Эффективные дозы будут зависеть от состояния заболевания, подвергаемого лечению, а также от оценки лечащего врача, в зависимости от таких факторов, как тяжесть заболевания, возраст, вес и общее состояние пациента и т.п.
Композиции, вводимые пациенту, могут быть в форме описанных выше фармацевтических композиций. Эти композиции могут быть стерилизованы обычными методами стерилизации или могут быть стерильно отфильтрованы. Водные растворы могут быть упакованы для использования в предоставленном виде или могут быть лиофилизированы, причем лиофилизированный препарат объединяют со стерильным водным носителем перед введением. Величина рН сложных препаратов обычно составляет от 3 до 11, более предпочтительно от 5 до 9 и наиболее предпочтительно от 7 до 8. Понятно, что применение некоторых из вышеупомянутых наполнителей, носителей или стабилизаторов приведет к образованию фармацевтических солей.
in vitro
in vivo
Терапевтическая доза антагониста кальциевого канала Т–типа, используемого в описанных в настоящей заявке способах, может меняться в зависимости, например, от конкретного применения, для которого назначено лечение, от способа введения соединения, здоровья и состояния пациента и от оценки лечащего врача. Пропорция или концентрация соединения по изобретению в фармацевтической композиции может меняться в зависимости от ряда факторов, включая дозу, химические характеристики (например, гидрофобность) и путь введения. Например, антагонисты кальциевого канала Т–типа могут быть предоставлены в водном физиологическом буферном растворе, содержащем от примерно 0,1 до примерно 10% мас./об. Соединения, для парентерального введения. Некоторые типичные диапазоны доз составляют от примерно 1 мкг/кг до примерно 1 г/кг массы тела в сутки. В некоторых вариантах осуществления диапазон доз составляет от примерно 0,01 мг/кг до примерно 100 мг/кг массы тела в сутки. Доза может зависеть от таких переменных, как тип и степень прогрессирования заболевания или нарушения, общее состояние здоровья конкретного пациента, относительная биологическая эффективность выбранного соединения, состав наполнителя и путь его введения. Эффективные дозы могут быть экстраполяцией кривых доза–ответ, полученных из модельных тест–систем  или .
ПРИМЕРЫ
Изобретение также описано в приведенном ниже примере, который не ограничивает объем изобретения, определенный в формуле изобретения.
Пример 1. Влияние нокаута CACNA1G на фенотип Драве
Scn1a
+/–
Мышиную модель синдрома Драве (см., например, Miller et al., Genes Brain Behav. 2014, 13:163–72) получали с помощью мыши с нокаутом гена (KO) Cav3.1, получая гетерозиготный KO Cacna1g в мышиной модели Драве (фиг. 1). Мышей с синдромом Драве и KO Cav3.1 тестировали на наличие спонтанных тонико–клонических судорог, а также на выживаемость. Как показано на фиг. 2А и фиг. 2B, гетерозиготная делеция Cacna1g обеспечивает защитное преимущество в отношении спонтанных генерализованных тонико–клонических судорог и выживаемости в модели  Драве. Эти данные указывают на то, что Cav3.1 может быть полезной терапевтической мишенью при лечении синдрома Драве.
Пример 2. Эффекты TTA–A2 на мышиной модели Scn1a +/–
Scn1a
+/–
TTA–A2, селективный антагонист Cav3, можно оценить путем скрининга судорог, индуцированных гипертермией, на  мышиной модели (см., например, Miller et al., Genes Brain Behav. 2014, 13:163–72). Мышей случайным образом распределяют в лечебные или контрольные группы, и вводят TTA–A2 или носитель с помощью перорального зонда. Гипертермию индуцируют до тех пор, пока не начнутся судороги или не будет достигнут максимальный темп, например, как показано на фиг. 3. Количество мышей с генерализованными тонико–клоническими (ГТК) судорогами сравнивают в контрольной и лечебной группах. Как показано на фиг. 3, «–X» минуты определяют на основе фармакокинетических характеристик TTA–A2 с таким расчетом, чтобы пиковое воздействие на мозг происходило во время индукции приступа. Фармакокинетические данные для TTA–A2 приведены ниже в таблицах 2–3. Температуру животного повышают до 42,5°C и поддерживают на этом уровне в течение трех минут или до тех пор, пока не появятся ГТК судороги.
Таблица 2.
α1I
9 нМ
α1I+Kir
296 нМ
α1 VC (–100 мВ)
4200 нМ
α1 VC (–80 мВ)
98 нМ
hERG
>10000 нМ
L–тип
>10000 нМ
N–тип
>10000 нМ
Na каналы
>10000 нМ
Panlabs
0 событий >50% @ 10 мкМ
PGP, Papp
0,7, 49х10<sup>–6</sup> см/с
WAG/Rij (10 мг/кг массы тела)
87% ингибирования @ 4 часа
Таблица 3.
в/в DMSO
РО (1% метилцеллюлозы)
Виды
Clp, мл/мин/кг
Т<sub>1/2</sub> (ч)
С<sub>max</sub> (мкМ)
F (%)
AUC (мкМ•ч)
Доза (мг/кг массы тела)
Крыса
6
1,5
7,5
68
46
10
Собака
0,9
11
2,1
43
23
1
Обезьяна
17
0,9
0,3
7
0,6
3
ДРУГИЕ ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
Следует понимать, что, хотя изобретение описано в сочетании с его подробным описанием, вышеприведенное описание предназначено для иллюстрации, и не ограничивает объем изобретения, который определяется объемом приведенной ниже формулы изобретения. Описано несколько вариантов осуществления изобретения. Тем не менее, очевидно, что могут быть сделаны различные модификации без отклонения от сущности и объема изобретения. Следовательно, в объем приведенной ниже формулы изобретения входят и другие аспекты, преимущества, варианты осуществления и модификации. Также понятно, что в одном из вариантов осуществления некоторые признаки изобретения, которые для лучшего понимания описаны в контексте отдельных вариантов осуществления, также могут быть представлены в комбинации. И наоборот, различные признаки изобретения, которые для краткости описаны в контексте одного варианта осуществления, также могут быть представлены отдельно или в любой подходящей более узкой комбинации.