ПЕПТОИДНЫЕ ЛИГАНДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОБРАБОТКИ АУТОИММУННЫХ Т-КЛЕТОК

1. Способ идентификации лиганда, который специфически распознается аутоиммунными Т-клетками, включающий:
(a) получение первой популяции Т-клеток от здорового индивидуума, где указанную популяцию метят первой детектируемой меткой;
(b) получение второй популяции Т-клеток от индивидуума с аутоиммунным заболеванием, где указанную популяцию метят второй детектируемой меткой;
(c) контактирование указанных первой и второй Т-клеточных популяций с множеством лигандов-кандидатов; и
(d) оценку связывания указанных первой и второй Т-клеточных популяций с указанными лигандами-кандидатами,
где, в случае, если указанный лиганд связывается с указанной второй Т-клеточной популяцией, но не с указанной первой Т-клеточной популяцией, указанный лиганд распознается аутоиммунными клетками, но не распознается нормальными Т-клетками.
2. Способ по п.1, где указанным аутоиммунным заболеванием является рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
3. Способ по п.1, в котором указанным лигандом является 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер.
4. Способ по п.1, в котором указанные первая и вторая метки являются флуоресцентными или хемилюминесцентными.
5. Способ по п.1, в котором указанные первая и вторая метки являются квантовыми точками.
6. Способ по п.1, в котором указанный лиганд связан с носителем.
7. Способ по п.6, в котором указанным носителем являются гранула, чип, фильтр, тест-полоска, мембрана, полимерная матрица или лунка.
8. Способ по п.7, в котором контактирование включает приведение указанного носителя в контакт с указанными первой и второй Т-клеточными популяциями одновременно.
+
9. Способ по п.1, в котором указанная T-клеточная популяция включает CD4-T-клетки.
10. Способ по п.1, где указанными индивидуумами являются человек или мышь.
11. Способ взятия аутоиммунных T-клеток у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, включающий:
(a) получение лиганда, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный лиганд связан с носителем;
(b) контактирование образца, содержащего Т-клетки и взятого от указанного индивидуума, с указанным лигандом, связанным с носителем, в течение периода времени, достаточного для связывания аутоиммунных Т-клеток с указанным лигандом, связанным с носителем; и
(c) отделение указанного носителя от указанного образца.
12. Способ по п.11, дополнительно включающий возращение образца со стадии (c) указанному индивидууму.
13. Способ по п.11, где указанным аутоиммунным заболеванием является рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
14. Способ по п.11, в котором указанным лигандом является 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер.
15. Способ по п.11, в котором указанным носителем являются гранула, чип, фильтр, тест-полоска, мембрана, полимерная матрица или лунка.
16. Способ по п.11, в котором указанным образцом является кровь, цереброспинальная жидкость или сперма.
ex vivo
17. Способ по п.16, в котором указанным образцом является кровь, и указанную кровь берут у указанного индивидуума, обрабатывают  и возвращают указанному индивидууму.
18. Способ по п.17, в котором указанную кровь пропускают через указанный лиганд, связанный с носителем, и возвращают указанному индивидууму по замкнутой цепи кровообращения.
19. Способ по п.11, дополнительно включающий взятие указанного образца у указанного индивидуума.
20. Способ по п.11, где указанным индивидуумом является человек или мышь.
21. Способ по п.11, в котором лигандом является пептоид, описанный в п.п. 44-63.
22. Способ уничтожения аутоиммунных Т-клеток, взятых у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, включающий:
(a) получение лиганда, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный лиганд конъюгирован с токсином; и
(b) контактирование образца, содержащего Т-клетки и взятого у указанного индивидуума, с указанным конъюгатом в течение периода времени, достаточного для связывания по меньшей мере одной аутоиммунной Т-клетки с указанным конъюгатом,
где указанный конъюгат вызывает гибель указанной аутоиммунной Т-клетки.
ex vivo
23. Способ по п.22, в котором указанный образец обрабатывают , и где указанный способ дополнительно включает возвращение образца указанному индивидууму.
24. Способ по п.22, где указанным аутоиммунным заболеванием является рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
25. Способ по п.22, в котором указанным лигандом является 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер.
26. Способ по п.22, в котором указанным токсином является рицин, дифтерийный токсин или холерный токсин.
27. Способ по п.22, в котором указанным токсином является фотоактивируемый токсин.
28. Способ по п.22, в котором указанным фотоактивируемым токсином является трис-бипиридил-рутений(II), а стадия (b) дополнительно включает облучение указанного образца видимым светом.
29. Способ по п.22, в котором указанным образцом является кровь, цереброспинальная жидкость или сперма.
30. Способ по п.22, дополнительно включающий взятие указанного образца у указанного индивидуума.
31. Способ по п.22, где указанный индивидуумом является человек или мышь.
32. Способ по п.22, в котором лигандом является пептоид, описанный в п.п. 44-63.
33. Способ уничтожения аутоиммунных Т-клеток, взятых у индивидуума, страдающего аутоиммунным заболеванием, или находящихся у него, включающий:
(a) получение лиганда, который специфически связывается с аутоиммунными Т-клетками, где указанный лиганд конъюгирован с молекулой, содержащей Fc IgG; и
(b) контактирование популяции аутоиммунных Т-клеток с указанным конъюгатом в течение периода времени, достаточного для связывания по меньшей мере одной аутоиммунной Т-клетки с указанным конъюгатом,
где указанный конъюгат индуцирует приток иммунных эффекторов к указанным аутоиммунным Т-клеткам, что приводит к их гибели.
ex vivo
34. Способ по п.33, в котором указанную популяцию аутоиммунных Т-клеток обрабатывают , и где указанный способ дополнительно включает возвращение образца со стадии (b) указанному индивидууму.
35. Способ по п.33, где указанным аутоиммунным заболеванием является рассеянный склероз или ревматоидный артрит.
36. Способ по п.33, в котором указанным лигандом является 3-мер, 4-мер, 5-мер, 6-мер, 7-мер, 8-мер, 9-мер или 10-мер.
37. Способ по п.33, в котором указанной молекулой, содержащей Fc IgG, является антитело, одноцепочечное антитело или Fc-фрагмент.
38. Способ по п.37, в котором указанной молекулой, содержащей Fc IgG, является антитело или одноцепочечное антитело, и указанный лиганд присоединен к антигенсвязывающему сайту указанного антитела.
39. Способ по п.38, в котором указанной молекулой, содержащей Fc IgG, является Fc-фрагмент, не содержащий вариабельных областей IgG, и указанный пептоид присоединен к карбокси-концу указанного Fc-фрагмента.
40. Способ по п.33, в котором указанным образцом является кровь, цереброспинальная жидкость или сперма.
41. Способ по п.33, дополнительно включающий взятие указанного образца у указанного индивидуума.
42. Способ по п.33, в котором указанным индивидуумом является человек или мышь.
43. Способ по п.33, в котором указанным лигандом является пептоид, описанный по пп. 44-63.
44. Пептоид, имеющий формулу:
Формула I
,
Формула II
1
6
2
1
6
2
1
6
1
6
2
6
2
1
6
2
1
6
1
6
2
6
2
1
6
2
1
6
1
6
где n равно 0-8; L представляет собой линкер; Y представляет собой токсин или фрагменты антител; а Rl, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 (где к формуле I или формуле II с каждым значением n выше 4 добавляется следующая группа R в порядке нумерации) могут представлять собой водород; алкил; аллил; метил; этил; н-пропил; изопропил; н-бутил; изобутил; втор-бутил; трет-бутил; пентил; гексил; изопентил; арил; гетероарил; фуранил; индолил; тиофенил; тиазолил; имидазолил; изоксазоил; оксазоил; пиперонил; пиразоил; пирролил; пиразинил; пиридил; пиримидил; пиримидинил; пуринил; циннолинил; бензофуранил; бензотиенил; бензотриазолил; бензоксазолил; хинолин; изоксазолил; изохинолин-циклоалкил; алкенил; циклоалкенил; фенил; пиридил; метоксиэтил; (R)-метилбензил; C-Cалкил, который является незамещенным или замещен группами NH, OH, SH, N(C-Cалкил), О(C-Cалкил) или S(C-Cалкил); C-Cалкинил, который является незамещенным или замещен группами NH, OH, SH, N(C-Cалкил), O(C-Cалкил) или S(C-Cалкил); C-Cалкенил, который является незамещенным или замещен группами NH, OH, SH, N(C-Cалкил), O(C-Cалкил) или S(C-Cалкил).
45. Пептоид по п.44, где n равно 5.
1
6
2
1
6
2
1
6
1
6
2
6
2
1
6
2
1
6
1
6
2
6
2
1
6
2
1
6
1
6
46. Пептоид по п.44, где Rl представляет собой C-Cалкил, который является незамещенным или замещен группами NH, OH, SH, N(C-Cалкил), O(C-Cалкил) или S(C-Cалкил); C-Cалкинил, который является незамещенным или замещен группами NH, OH, SH, N(C-Cалкил), O(C-Cалкил) или S(C-Cалкил); C-Cалкенил, который является незамещенным или замещен группами NH, OH, SH, N(C-Cалкил), O(C-Cалкил) или S(C-Cалкил).
1
6
2
47. Пептоид по п.44, где Rl представляет собой C-Cалкил, замещенный по концу группой NH.
48. Пептоид по п.47, где Rl представляет собой 4-аминобутан.
1
6
2
1
6
2
1
6
1
6
2
6
2
1
6
2
1
6
1
6
2
6
2
1
6
2
1
6
1
6
49. Пептоид по п.44, где R2 представляет собой C-Cалкил, который является незамещенным или замещен группами NH, OH, SH, N(C-Cалкил), O(C-Cалкил) или S(C-Cалкил); C-Cалкинил, который является незамещенным или замещен группами NH, OH, SH, N(C-Cалкил), O(C-Cалкил) или S(C-Cалкил); C-Cалкенил, который является незамещенным или замещен группами NH, OH, SH, N(C-Cалкил), O(C-Cалкил) или S(C-Cалкил).
1
6
2.
50. Пептоид по п.44, где R2 представляет собой C-Cалкил, замещенный по концу группой NH
51. Пептоид по п.50, где Rl представляет собой 4-аминобутан.
1
6
2
6
2
6
52. Пептоид по п.44, где R3 представляет собой C-Cалкил, C-Cалкинил или C-Cалкенил.
53. Пептоид по п.52, где R3 представляет собой изобутил.
1
6
2
54. Пептоид по п.44, где R4 представляет собой C-Cалкил, замещенный по концу группой NH.
55. Пептоид по п.54, где R4 представляет собой 4-аминобутановую группу.
56. Пептоид по п.44, где R5 представляет собой (R)-метилбензильную группу.
57. Пептоид по п.44, где R6 представляет собой фуранильную группу.
1
6
2
58. Пептоид по п.44, где R7 представляет собой C-Cалкил, замещенный по концу группой NH.
59. Пептоид по п.58, где R7 представляет собой 4-аминобутановую группу.
1
6
60. Пептоид по п.44, где R8 представляет собой C-Cалкил.
61. Пептоид по п.60, где R8 представляет собой изобутильную группу.
62. Пептоид по п.44, где Rl, R2, R4 и R7 представляют собой 4-аминобутановые группы; R3 и R8 представляют собой изобутильные группы; R5 представляет собой (R)-метилбензильную группу, а R6 представляет собой фуранильную группу.
63. Пептоид по п.62, где R8 содержит на своем конце лизильную, гидроксильную или карбоксильную группу.