Лабораторное обеспечение эпидемиологического надзора за клещевыми инфекциями в Республике Башкортостан

НАЦИОНАЛЬНЫЕ ПРИОРИТЕТЫ РОССИИ. 2011. № 2 (5). СПЕЦИАЛЬНЫЙ ВЫПУСК

щей D. reticulates, D. marginatus, слепней рода Chrisops, погадок хищных птиц.

Видовой состав мелких млекопитающих, среди которых отмечена циркуляция возбудителя туляремии, указывает на то, что за последние годы в области отмечается активность луго-полевых очагов, что подтверждают единичные серопозитивные находки среди клещей рода Dermacentor.

В результате высокой иммунной прослойки сельского населения, проживающего на очаговых территориях, в 2007-2011 гг. заболеваний туляремией не регистрировалось.

В последние годы отмечается активность очагов боррелиоза на территории Воронежской области. Впервые в области заболеваемость была зарегистрирована в 2001 г. - 5 больных, с 2003 г. заболеваемость стала регистрироваться ежегодно - до 37 случаев в год. Антиген возбудителя боррелиоза обнаружен при исследовании иксодовых клещей (в пробах обнаружена Borrelia burgdorferi sensu lato).

Численность клещей Ixodes ricinus, переносчиков боррелий, продолжает оставаться на высоком уровне - до 14,5-16,6 имаго на 1 флаго/час. Клещи нападают практически в течение всего теплого периода с пиками активности в марте - апреле и в сентябре - октябре. Всего за медицинской помощью по поводу укуса клещами в год обращается до 1,5 тыс. человек. При серологических исследованиях материала от людей на наличие специфических антител к возбудителю боррелиоза методом ИФА положительные результаты обнаружены от 1,73 % в 2008 г. до 10,3 % в 2007 г.

Таким образом, на территории Воронежской области существуют активные природные очаги зооноз-ных инфекций, наиболее актуальны: ГЛПС, клещевой боррелиоз, туляремия, лептоспироз. Формирование природно-антропургических очагов требует совершенствования эпизоотолого-эпидемиологического надзора и проведения комплекса профилактических мероприятий.

ЛАБОРАТОРНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОГО НАДЗОРА ЗА КЛЕЩЕВЫМИ ИНФЕКЦИЯМИ В РЕСПУБЛИКЕ БАШКОРТОСТАН

Г.Д. Минин, Е.В. Рожкова, Г.Г. Умикамалова, Л.И. Коробов, Ш.И. Ибрагимов, А М. Сыса, Т.П. Самойленко

ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Башкортостан», ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет»

Актуальность. В Республике Башкортостан (РБ), расположенной на Южном Урале, являющейся природным очагом клещевого энцефалита, официально зарегистрированы только две клещевые инфекции: клещевой энцефалит (КЭ) и боррелиоз (КБ). Вместе с тем в сопредельных с РБ Челябинской, Пермской областях в последнее время регистрируются другие клещевые инфекции: моноцитарный эрлихиоз (МЭЧ), гранулоцитарный анаплазмоз человека (ГАЧ) (В.А. Борисов, 2010 г.; А.Н. Конькова-Рейдман, 2010 г.), а в Республике Татарстан - лихорадка Западного Нила (ЛЗН). По данным официальных документов Роспотребнадзора, в 2010 г. в ряде субъектов РФ отмечалось увеличение числа эндемичных территорий (КЭ).

Цель работы - провести анализ частоты серологической верификации диагнозов КЭ и КБ. Задачи: 2) проанализировать результаты лабораторных исследований клещей и сывороток из неэндемичных территорий для обсуждения вопроса о расширения ареала распространения клещевого энцефалита в РБ; 3) показать эффективность ПЦР метода исследования клещей; 4) представить первый опыт исследования сывороток и клещей на наличие МЭЧ, ГАЧ, ЛЗН.

Материалы и методы исследования. Исследования проводились на базе лаборатории вирусологических исследований и лаборатории особо опасных инфекций и ПЦР ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Башкортостан».

Методом ИФА на наличие ^ М и ^ G к КЭ исследовано 215 парных сывороток, 76 одиночных в 2010 г. и 178 парных, 74 одиночных сывороток от больных за 7 мес. 2011 г. Методом ИФА на наличие ^ М и ^ G к КБ исследовано 113 парных сывороток, 89 одиночных в 2010 г.

В 2010 г. методом ИФА на наличие антигена вируса КЭ было исследовано 1174 экземпляра клещей из природных очагов, 6209 клещей, снятых с людей. За 7 месяцев 2011 г. было исследовано 739 экземпляров клещей из природных очагов на наличие вируса клещевого энцефалита, 6390 клещей, снятых с людей.

Впервые в РБ в 2010 г. для выполнения госзаказа Управления Роспотребнадзора по Республике Башкортостан было исследовано методом ПЦР 418 экземпляров клещей на наличие РНК патогенных боррелий, за 7 месяцев 2011 г. - 500 клещей.

Впервые в РБ в 2010 г. методом ПЦР исследовано 38 клещей на ЛЗН, за 7 месяцев 2011 г. - 44 клеща.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, ЭКОЛОГИЯ, СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА, ПРОФИЛАКТИКА

Таблица 1

Наиболее инфицированные боррелиями территории

Зона Район Показатели, %

Горно-лесная Бурзянский 20,0 ±10,3

Гафурийский 6,5±3,1

Прибельская лесостепная Уфимский 22,0±5,8

Иглинский 28,5±7,6

Северо-восточная лесостепная Дуванский 17,6±5,3

Белокатайский 8,0±3,8

Впервые в РБ за 7 месяцев 2010 г. проведены исследования методом ИФА ^ G на МЭЧ 36 сывороток от людей, укушенных клещами, и методом ПЦР - 34 клеща на КЭ, МЭЧ, ГАЧ. Выборка на новые инфекции была нерепрезентативной, так как исследования проводились с целью освоения методик и тест-систем.

Результаты и обсуждение. Положительные результаты на ^ М к КЭ установлены в 2010 г. в сыворотках от 47 лиц (16 % от числа обследованных лиц), за 7 месяцев 2011 г. - в сыворотках от 42 лиц. Положительные результаты на ^ М или нарастание ^ G к КБ установлены в 2010 г. в сыворотках от 16 лиц (7,9 % от числа обследованных лиц). Данные совпадают с эпидемиологическими данными - заболеваемостью по окончательному диагнозу в 2010 г.: 47 случаев КЭ (1,16 на 100 тыс. нас.) и 14 случаев КБ (0,34 на 100 тыс. нас.), 2 случая КБ зарегистрированы по другим ведомствам. Показана ведущая роль лабораторий ФБУЗ в серологической верификации диагноза КЭ и КБ в РБ.

В 2010 г. выявлен 21 клещ из природных биотопов с положительным результатом на КЭ метом ИФА, что составляет 1,8 % (2009 г. - 2,7 %). За 7 месяцев 2011 г. выявлено 20 клещей с антигеном вируса КЭ, собранных из природы, что составляет 2,7 %. Таким образом, вирусоформность клещей была относительно невысокой, различия по территориям были незначительными. Более высокий процент позитивных выявлен на эндемичных территориях, особенно - в горнолесной зоне (Бурзянский - 2,9 %, Гафурийский - 7,9 % -районы). Среднемноголетние данные на первом месте по уровню заболеваемости КБ также определяют территории горно-лесной ландшафтной зоны. Таким образом, эпидемиологические данные совпали с лабораторными данными.

В Абзелиловском районе, являющемся неэндемичной территорией зауральской степной зоны, процент зараженных клещей был выше, чем в среднем по РБ, составив в 2010 г. 3,9 %.

Эти лабораторные данные свидетельствуют о необходимости обсуждения вопроса с эпидемиологами о расширении ареала распространения клещевого энцефалита на ранее неэндемичные территории РБ, в том числе зауральской степной зоны. Из 68 административных территорий РБ эндемичными по клещевому энцефалиту официально являются 39. Перечень этих территорий не расширялся несколько лет. Вместе с тем имеются эпидемиологические данные о регистрации случаев КЭ на неэндемичных территориях (зауральская

степная зона). Нами также выявлены случаи положительных результатов серологических исследований на Ig M к КЭ сывороток больных с укусами клещами на ранее неэндемичных территориях (Кушнаренковский район (северо-западная и прибельская лесостепная зона) -

1 (2010), Абзелиловский (зауральская степная зона) -

2 (2010), Учалинский район (зауральская степная зона) -2 (2010) и 3 случая (2011).

Метод темнопольной микроскопии, рекомендуемый ранее для выявления боррелий в живых клещах, несмотря на низкую себестоимость, оказался субъективным, дающим большие погрешности. Начиная с 2010 г., для обеспечения эпиднадзора за КБ внедрен более современный, высокочувствительный метод ПЦР диагностики. В 2010 г. выявлено 57 клещей с РНК патогенных боррелий, что составляет 13,6± 1,7 % от числа исследованных. Было установлено, что горно-лесная зона занимает первое место по зараженности клещей боррелия-ми (Белорецкий район - 17,0±3,7 %, Ишимбайский район - 34,1±7,1 %). Высокий уровень инфицирован-ности также отмечался в северо-западной и прибель-ской лесостепной зонах (10,7 % - 17 из 159 клещей). Выявлены различия в половой принадлежности: зараженность самок Ixodes persulcatus в 2,4 раза выше, чем самцов (22,3 % против 9,6 %).

За 7 месяцев 2011 г. методом ПЦР выявлено 79 клещей, зараженных боррелиями, что составляет 15,8 ± 1,6 % (табл. 1).

В 24 из 38 обследованных территорий РБ были положительные находки (63 %). Таким образом, этими данными подтверждено, что РБ является субъектом РФ, эндемичным по КБ.

Нами представлен первый опыт исследования сывороток и клещей на наличие МЭЧ, ГАЧ, ЛЗН. Методом ПЦР установлено отсутствие инфицированных вирусом ЛЗН клещей в 2010-2011 гг., ГАЧ в 2011 г. В 10 клещах, снятых с людей из 9 территорий, эрлихий не обнаружено.

Впервые в 2011 г. из клещей Белокатайского района (северо-восточная лесостепная зона) были выделены РНК эрлихий - 3 из 24 (12,5±6,7 %). В сыворотке одного больного с подозрением на клещевой энцефалит из Учалинского района (горно-лесная зона) с отрицательным результатом Ig M к КЭ выявлены Ig G к МЭЧ. Указанное предполагает существование природных очагов эрлихиоза в РБ и свидетельствует о необходимости продолжения целенаправленных и клинически обоснованных лабораторных исследований на МЭЧ различными методами.