ВЕЗИКУЛЫ НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ

1. Везикула наружной мембраны (OMV) грамотрицательной бактерии, где OMV содержит в просвете по меньшей мере один гетерологичный белок, который находится в свободной форме, и где OMV способна вызывать иммунный ответ на гетерологичный белок при введении млекопитающему.
2. OMV по п. 1, где гетерологичный белок представляет собой растворимый белок.
3. OMV по п. 1 или 2, где гетерологичный белок является функционально активным в просвете OMV.
4. OMV по п. 1 или 2, где иммунный ответ представляет собой гуморальный иммунный ответ.
5. OMV по п. 1 или 2, где грамотрицательная бактерия выбрана из группы, включающей в себя E. coli, Н. menigitides, Salmonella sp. и Shigella sp.
6. OMV по п. 1, где грамотрицательная бактерия относится к штамму грамотрицательных бактерий, характеризующемуся повышенной способностью к блеббингу.
7. OMV по п. 6, где грамотрицательная бактерия относится к штамму E. coli ΔtolR или штамму E. coli ΔompA.
8. OMV по п. 1, где гетерологичный белок является антигеном.
9. OMV по п. 1, где гетерологичный белок представляет собой цитоплазматический белок или периплазматический белок гетерологичного организма.
10. OMV по любому из пп. 1-2, 6-8, где гетерологичный белок представляет собой мембраноассоциированный белок гетерологичного организма с удаленным мембранным якорем.
11. OMV по п. 1, где гетерологичный белок представляет собой β-лактамазу (TEM1), fHbp Neisseria meningitides, двойной мутант внеклеточный холестеринзависимого стрептолизина О (Slo-dm) Streptococcus pyogenes, серин-протеазу клеточной оболочки SpyCEP Streptococcus pyogenes или предполагаемый поверхностный эксклюзионный белок Spy0269 Streptococcus pyogenes.
12. OMV по п. 1, где OMV содержит по меньшей мере два гетерологичных белка, которые присутствуют в ее просвете в свободной форме.
13. OMV по п. 12, где OMV содержит по меньшей мере три гетерологичных белка, которые присутствуют в ее просвете в свободной форме.
14. OMV по п. 12 или 13, где гетерологичные белки включают двойной мутант внеклеточного холестеринзависимого стрептолизина O (Slo-dm) Streptococcus pyogenes и предполагаемый поверхностный эксклюзионный белок Spy0269 Streptococcus pyogenes.
15. OMV по п. 13, где гетерологичные белки включают двойной мутант внеклеточного холестерин-зависимого стрептолизина О (Slo-dm) Streptococcus pyogenes, серин-протеазу клеточной оболочки SpyCEP Streptococcus pyogenes и предполагаемый поверхностный эксклюзионный белок Spy0269 Streptococcus pyogenes.
16. Способ получения OMV по любому из пп. 1-15, где способ включает стадию экспрессии гетерологичного белка в периплазме грамотрицательной бактерии.
17. Способ по п. 16, где гетерологичный белок экспрессируют в периплазме грамотрицательной бактерии с использованием вектора экспрессии, содержащего нуклеотидную последовательность, кодирующую гетерологичный белок, функционально связанную с нуклеиновой кислотой, кодирующей сигнальную последовательность периплазматического белка.
18. Способ по п. 17, где нативная сигнальная последовательность гетерологичного белка заменена сигнальной последовательностью периплазматического белка.
19. Способ по любому из пп. 16-18, дополнительно включающий стадию выделения OMV.
20. OMV, полученная или которую можно получить способом по любому из пп. 16-19.
21. OMV по п. 20, где грамотрицательная бактерия выбрана из группы, включающей в себя E. coli, Н. menigitides, Salmonella sp. и Shigella sp.
22. OMV по п. 20, где грамотрицательная бактерия относится к штамму грамотрицательных бактерий, характеризующемуся
повышенной способностью к блеббингу.
23. OMV п. 22, где грамотрицательная бактерия относится к штамму E. coli ΔtolR или штамму E. coli ΔompA.
24. OMV по любому из пп. 20-23, где гетерологичный белок является антигеном.
25. OMV по любому из пп. 20-23, где гетерологичный белок представляет собой цитоплазматический белок или периплазматический белок гетерологичного организма.
26. OMV по любому из пп. 20-23, где гетерологичный белок представляет собой мембраноассоциированный белок гетерологичного организма с удаленным мембранным якорем.
27. OMV по любому из пп. 20-23, где гетерологичный белок представляет собой β-лактамазу (TEM1), fHbp Neisseria meningitides, двойной мутант внеклеточный холестеринзависимого стрептолизина О (Slo-dm) Streptococcus pyogenes, серин-протеазу клеточной оболочки SpyCEP Streptococcus pyogenes или предполагаемый поверхностный эксклюзионный белок Spy0269 Streptococcus pyogenes.
28. OMV по п. 20, где OMV содержит по меньшей мере два гетерологичных белка, которые присутствуют в ее просвете в свободной форме.
29. OMV по п. 28, где OMV содержит по меньшей мере три гетерологичных белка, которые присутствуют в ее просвете в свободной форме.
30. OMV по п. 28 или п. 29, где гетерологичные белки включают двойной мутант внеклеточного холестеринзависимого стрептолизина O (Slo-dm) Streptococcus pyogenes и предполагаемый поверхностный эксклюзионный белок Spy0269 Streptococcus pyogenes.
31. OMV по п. 29, где гетерологичные белки включают двойной мутант внеклеточного холестерин-зависимого стрептолизина О (Slo-dm) Streptococcus pyogenes, серин-протеазу клеточной оболочки SpyCEP Streptococcus pyogenes и предполагаемый поверхностный эксклюзионный белок Spy0269 Streptococcus pyogenes.
32. Фармацевтическая композиция, содержащая (a) OMV по любому из пп. 1-15 или 20-31 и (b) фармацевтически приемлемый носитель.
33. Фармацевтическая композиция по п. 32, где композиция представляет собой иммуногенную композицию.
34. Фармацевтическая композиция по п. 32 или 33, где композиция представляет собой вакцину.
35. Способ генерирования иммунного ответа на гетерологичный белок у млекопитающего, включающий введение эффективного количества OMV грамотрицательной бактерии млекопитающему, где OMV содержит по меньшей мере один гетерологичный белок в своем просвете, и где иммунный ответ генерируется на гетерологичный белок, присутствующий в OMV.
36. Способ генерирования иммунного ответа на гетерологичный белок у млекопитающего, включающий введение эффективного количества OMV по любому из пп. 1-15 или 20-31, или фармацевтической композиции по пп. 32-34, млекопитающему, где иммунный ответ генерируется на гетерологичный белок, присутствующий в OMV.
37. Применение OMV по любому из пп. 1-15 или 20-31 или фармацевтической композиции по пп. 32-34 в терапии.