ОНКОЛИТИЧЕСКИЙ HSV-ВЕКТОР

1. Рекомбинантный онколитический вирус простого герпеса (oHSV), включающий:
(a) не-HSV лиганд, расположенный на поверхности oHSV-капсида, который является специфичным для молекулы, присутствующий на поверхности раковой клетки; и
(b) множество копий одной или более последовательностей-мишеней микроРНК, встроенных в локус гена HSV, необходимого для репликации HSV в нормальных (нераковых) клетках.
2. oHSV по п. 1, где лиганд вводят в гликопротеин, присутствующий на поверхности HSV.
3. oHSV по п. 1 или 2, где белком вирусной оболочки является gD или gC.
4. oHSV по любому из пп. 1-3, где лиганд вводят между остатками 1 и 25 gD.
5. oHSV по любому из пп. 1-4, где указанный лиганд обладает способностью специфически связываться с EGFR или EGFRvIII.
6. oHSV по любому из пп. 1-5, где лиганд представляет собой одноцепочечное антитело (scFv), или пептидный или непептидный гормон, или фактор роста, который связывается с клеточным рецептором.
7. oHSV по любому из пп. 1-6, где указанной последовательностью-мишенью микроРНК является обратный комплемент микроРНК.
8. oHSV по любому из пп. 1-7, который включает две или более (2, 3, 4, 5 или 6 в тандеме) указанных последовательностей-мишеней микроРНК, встроенных в локус указанного гена HSV.
9. oHSV по п. 8, который включает 4 тандемных копии указанных последовательностей-мишеней микроРНК, встроенных в локус указанного гена HSV.
10. oHSV по п. 8 или 9, где множество копий указанных последовательностей-мишеней микроРНК разделены спейсерами длиной в четыре или более нуклеотидов, присутствующих в геноме oHSV.
11. oHSV по любому из пп. 1-10, где указанный ген HSV, в который встроена(ы) указанная(ые) последовательность(и)-мишень(и) микроРНК, представляет собой ICP4.
12. oHSV по любому из пп. 1-11, где указанная(ые) последовательность(и)-мишень(и) микроРНК встроена(ы) в 3'-нетранслируемую область (3’ UTR) указанного гена HSV.
13. oHSV по любому из пп. 1-12, где указанной микроРНК является miR-124.
14. oHSV по любому из пп. 1-12, где указанной микроРНК является miR-122, miR-124, miR-128, miR-137 и/или miR-199, или комбинация двух или более указанных микроРНК.
15. Рекомбинантный oHSV, включающий:
(a) не-HSV лиганд, специфичный к белку, присутствующему на поверхности раковой клетки, где указанный белок представляет собой scFv, специфически связывающийся с EGFR или EGFRvIII и встроенный между остатками 1 и 25 гликопротеина gD oHSV, и
(b) четыре копии обратного комплемента микроРНК miR-124, каждая из которых разделена спейсерами длиной в восемь нуклеотидов, встроенных в 3’ UTR ICP4 генома oHSV.
16. oHSV по любому из пп. 1-15, содержащий делецию области внутренних повторов (стыка), включающей одну копию каждого из диплоидных генов ICP0, ICP34.5, LAT и ICP4 вместе с промотором гена ICP47.
17. oHSV по любому из пп. 1-16, также содержащий мутацию гена gB или gH, которая облегчает встраивание вектора посредством неканонических рецепторов.
18. oHSV по любому из пп. 1-17, также содержащий трансген.
19. oHSV по п. 18, где трансген кодирует онколитический фактор.
20. oHSV по п. 18, где трансген кодирует белок или полипептид, усиливающий латеральное распределение oHSV.
21. oHSV по п. 20, где трансген кодирует металлопротеиназу 9 («MMP9»).
21. oHSV по п. 18, где трансген кодирует белок или полипептид, индуцирующий противораковый иммунный ответ у пациента.
22. oHSV по п. 18, где трансген кодирует белок или полипептид, который катализирует превращение пролекарства.
23. oHSV по п. 22, где трансген кодирует цитозиндезаминазу или тимидинкиназу.
24. oHSV по п. 18, где трансген кодирует пурин-нуклеозид-фосфорилазу (PNP).
25. oHSV по п. 1, который представляет собой KGE-4:T124.
26. Нуклеиновая кислота, кодирующая oHSV по любому из пп. 1-25.
27. Нуклеиновая кислота по п. 26, которая представляет собой искусственную бактериальную хромосому (BAC).
28. Вирусный штамм, содержащий вектор oHSV по любому из пп. 1-25.
29. Композиция, содержащая oHSV по любому из пп. 1-25 и фармацевтически приемлемый носитель.
30. Композиция, содержащая вирусный штамм по п. 28 и фармацевтически приемлемый носитель.
31. Способ уничтожения раковой клетки, включающий обработку клетки oHSV по любому из пп. 1-25 штаммом по п.28 или композицией по п. 29 или 30 в условиях, достаточных для инфицирования указанной раковой клетки указанным oHSV и, тем самым, для репликации oHSV в раковой клетке, где указанная репликация приводит к гибели такой клетки.
in vivo
32. Способ по п. 31, где клетка присутствует .
33. Способ по п. 31 или 32, где клетка присутствует в опухоли.
34. Способ по п. 33, где опухолью является мультиформная глиобластома.
35. Способ по любому из пп. 31-34, где клеткой является человеческая клетка.
36. Способ по п. 33 или 34, где опухоль присутствует в головном мозге животного.
37. Способ по п. 36, где oHSV вводят в клетку животного путем интракраниальной инъекции oHSV, штамма или композиции.
38. Способ по п. 37, где животным является человек.