КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В СУСПЕНЗИИ

1. Способ дифференцировки человеческих плюрипотентных клеток, включающий стадии: дифференцировки клеток энтодермы передней кишки в клетки панкреатической энтодермы посредством культивирования клеток энтодермы передней кишки в динамической суспензионной культуре при рН от около 7,2 до около 7,0 в течение, по меньшей мере, около 24 часов.
2. Способ по п. 1, дополнительно включающий культивирование клеток энтодермы передней кишки в культуре, в которой концентрация клеток равна или превышает около 1,5 миллиона клеток/мл.
3. Способ по п. 1, дополнительно включающий культивирование клеток энтодермы передней кишки в культуре, в которой концентрация клеток превышает или равна около 2,0 миллиона клеток/мл.
4. Способ по п. 1, в котором клетки панкреатической энтодермы являются по существу отрицательными в отношении экспрессии PTF1A и NGN3.
5. Способ по п. 4, дополнительно включающий обогащение клеток панкреатической энтодермы, которые являются по существу отрицательными в отношении экспрессии PTF1A и NGN3, до популяции клеток панкреатической энтодермы, имеющей около 96% или более клеток, которые являются положительными в отношении совместной экспрессии PDX1 и NKX6.1 и положительными в отношении экспрессии PTF1A.
6. Способ по п. 4, дополнительно включающий дифференцировку клеток панкреатической энтодермы, которые являются по существу отрицательными в отношении экспрессии PTF1A и NGN3, до панкреатических эндокринных клеток при отсутствии стадии дифференцировки, на которой формируются клетки, положительные в отношении экспрессии PTF1A.
7. Способ дифференцировки человеческих плюрипотентных клеток, включающий стадии: дифференцировки клеток энтодермы передней кишки в клетки панкреатической энтодермы посредством культивирования клеток энтодермы передней кишки в динамической суспензионной культуре при рН от около 7,2 до около 7,0 в течение, по меньшей мере, около 24 часов, при концентрации клеток, равной или превышающей около 1,5 миллиона клеток/мл и концентрации ретиноида от около 0,5 до около 1,0 мкМ, причем культивирование выполняют при отсутствии компонентов для одного или более из ингибирования, блокирования, активации или стимулирования сигнального пути TGF-бета и сигнального пути BMP и ингибитора сигнального пути белка sonic hedgehog.