Уровень гомоцистеина при травме опорно-двигательного аппарата (экспериментальная модель на лабораторных животных в условиях метиониновой диеты)

УДК 616.7-001-008.9-07 Кубанский научный медицинский вестник № 5 (128) 2011

физическую активность, была ниже по сравнению с группой, не выполнявшей физическую нагрузку, в 1,26 раза (8,7± 1,8 ммоль/л против 11,0± 3,5 ммоль/л) [7].

В таком случае в смешанной группе животных, находившихся на диетоиндуцированной диете, надо было ожидать значений ГЦ в пределах тех цифр, что и в группе III, однако мы получили примерно в 3 раза большее значение, чем в контрольной группе, что может говорить о наличии дополнительного механизма, способствующего увеличению ГЦ на фоне уже имевшейся умеренной ГГЦ.

Считается, что ГГЦ вызывает дисфункцию эндотелия. В частности, для артерий требуется большее время на сокращение стенки и уменьшения диаметра при воздействии медиаторов (ацетилхолина) [2, 16]. Используя традиционную морфометрию гистопрепаратов с рутинной окраской гематоксилин-эозином, установили, что диаметр мелких артерий задней конечности животных в группе III был уменьшен в 1,17 раза, что, соответственно, должно приводить к уменьшению притока крови к конечности. Диаметр артерий в опытной группе II был также уменьшен, что можно расценивать как реакция на механическое воздействие. Данное значение в группе

IV было сопоставимо с контрольными цифрами. Диаметр вен в опытных группах II-IV, напротив, был больше по сравнению с контролем соответственно на 17,17% 11,84% и 5,59%. В исследуемых гистопрепаратах частота встречаемости тромбов в сосудах задней конечности составила 9% от общего количества во II группе, а в IV этот показатель составил уже 30%. Коэффициент корреляции между морфометрическими показателями и концентрацией ГЦ колебался в пределах 0,2-0,3.

Таким образом, данная модифицированная экспериментальная модель диетоиндуцированной ГГЦ может быть использована для изучения особенностей патогенеза тромбообразования при травме ОДА в условиях умеренной ГГЦ.

ЛИТЕРАТУРА

1. Баранова И. Е., Большакова О. О. Клиническое значение го-моцистеинемии // Артериальная гипертензия - 2004. - № 10 (1). -С. 45-50.

2. Angela M., Devlin A. M., Arning E., Bottiglieri T., Faraci F. M., Rozen R., Lentz S. R. Effect of Mthfr genotype on diet-induced hyperhomocysteinemia and vascular function in mice // Blood. - 2004. -Vol. 103. № 2624. - 2629 p.

3. Anne S. Henkel, Marc S. Elias and Richard M. Green. Homocysteine supplementation attenuates the unfolded protein response in a murine nutritional model of steatohepatitis // J. biol. chem. - 2009. - November 13, № 284 (46). - P. 31807-31816.

4. Canepa A., Carrera A. Homocysteine, folate, vitamin B12, and C677T MTHFR mutation in children with renal failure // Pediatr nephrol. -2003. - №18. - C. 225-229.

5. Cattaneo M. Hyperhomocysteinemia and venous thromboembolism // Semin thromb hemost. - 2006. - № 32. - P. 716-723.

6. Chen Z., Karaplis A. C., Ackerman S. L., Pogribny I. P., Melnyk S., Lussier-Cacan S., Chen M. F., PaiA., John S. W., Smith R. S., Bottiglieri T., Bagley P., Selhub J., Rudnicki M. A., James S. J., Rozen R. Mice deficient in methylenetetrahydrofolate reductase exhibit hyperhomocysteinemia and decreased methylation capacity, with neuropathology and aortic lipid deposition // Hum. mol. genet. - 2001. - № 10. - P. 433- 443.

7. Czajkowska A., Lutoslawska G., Mazurek K., Ambroszkiewicz J., Zmijewski P. The relationship between physical activity and plasma homocysteine level in young men // Pediatr endocrinol diabetes metab. - 2008. - № 14 (3). - P. 177-180.

8. Dankner R., Geulayov G., Farber N., Novikov I., Segev S., Sela B. A. Cardiorespiratory fitness and plasma homocysteine levels in adult males and females // Isr. med. assoc. j. - 2009. - Feb, №11 (2). - P. 78-82.

9. Den Heijer M., Willems H. P., Blom H. J., Gerrits W. B., Cattaneo M., Eichinger S. et al. Homocysteine lowering by B vitamins and the secondary prevention of deep vein thrombosis and pulmonary embolism: A randomized, placebo-controlled, double-blind trial // Blood. - 2007. - № 109. - P. 139-144.

10. De Marco P., Merello E., Calevo M. G., Mascelli S., Raso A., Cama A., Capra V. Evaluation of a methylenetetrahydrofolate-dehydrogenase 1958G>A polymorphism for neural tube defect risk // J. hum genet. - 2005. - №51 (2). - P. 98-103.

11. Nutrient requirement of the mouse. In: Subcommittee on animal nutrition, board on agriculture, national research council. Nutrient requirements of laboratory animals. Fourth rev ed. Washington, DC: National academy press. - 1995. - P. 80-102.

12. Nygard O., Vollset S., Refsum H. et al. Total homocysteine and cardiovascular disease // J. intern. med. - 1999. - № 246. - P. 425-454.

13. Pfeiffer C. M., Twite D., Shih J., Holets-McCormack S. R., Gunter E. W. Method comparison for total plasma homocysteine between the Abbott IMx analyzer and an HPLC assay with internal standardization // Clin. chem. - 1999. - Jan., № 45 (1). - P. 152-153.

14. Sanjana D. and Steven R. Lentz Murine. Models of hyperhomocysteinemia and their vascular phenotypes // Arterioscler thromb. vasc. biol. - 2008. - № 28. - P. 1596-1605.

15. Watanabe M., Osada J., Aratani Y., Kluckman K., Reddick R., Malinow M. R., Maeda N. Mice deficient in cystathionine synthase: animal models for mild and severe homocyst(e)inemia // Proc. natl. acad. Sci U S A. - 1995. - № 92. - P. 1585-1589.

16. Zhang F., Slungaard A., Vercellotti G. M., ladecola C. Superoxide-dependent cerebrovascular effects of homocysteine // Am j. physiol. - 1998. - № 274. - P. 1704-1711.

Поступила 15.07.2011

д. п. березовский1, в. ю. мажугин1, т. г. Фалеева16, к. м. кураян2, н. н. крайнова3, о. в. Хабарова3, г. л. Волошина45, т. а. варавва5, и. в. корниенко56

УРОВЕНЬ ГОМОЦИСТЕИНА ПРИ ТРАВМЕ ОПОРНО-дВИГАТЕЛЬНОГО АППАРАТА (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОдЕЛЬ НА ЛАБОРАТОРНых

животных в условиях метиониновой диеты)

1мП0МЕГП I мммт пгтпппп  пгггт пгп 111111 П1 сш ггтггл гг^пгт гтмггл птпппмгпггл тпггпп ш п пгггпф344022,  гшгмп-пшц пш к пш/мшмшпп, 29.

E-mail: dpb@mail.ru, ИШ: (S63) 263-23-9I, 250-4I-04, пппм (S63) 253-06-II;

2^  ппп пиггпггмпп тпіггтиги, іі ЦІ344006,  шсг-ш-псщ ^ з ГГГПМГІПМГГтЦП05/42;

3По  ппги пгп пгмгт ми гмг-гшшгш п/гшш пгми ц  ШЩІ3440І0,   ШіІГ-Ш-ПіІЩ Ш м тппптмЦП27. СГГ]: (S63) 255-79-32, 255-79-49;

4пгмгт ми пгмг-гпмтгт п/Гшш пти  Зк мгпмРї  Уммпці344002,  шп-ш-пищ ^ сггпггтпмці49. сШ: (S63) 262-07-66, 240-2I-43, пппм (S63) 240-44-64;

5кйй гпггггпп   пггг птггп II тптгмпиСПм, ііі ЦІ344090,   ГМПГШМ-ПГМЦ, ПП ШМ/рп, I94/I;

6і6-п пііі i мііи ^ппп пгми  і і її гтггпгпмгпт п пгппппмтги пгсгпт ттгт и

пггг ^тпггп гпгггп умшці344000,  гшгмм-пгмц ^ игтгмитщі60

Считается, что повышенный уровень гомоцистеина (ГЦ) является независимым фактором тромбообразования. Однако в литературе не освещен вопрос, как травматическая болезнь влияет на уровень ГЦ. Мы изучили уровень ГЦ при травме опорно-двигательного аппарата на лабораторных животных в условиях эксперимента. Все животные были рандомизированы в 5 экспериментальных групп. Повышенный уровень ГЦ у лабораторных животных создавался за счет их содержания на метиони-новой диете. Длительность эксперимента в среднем составила 6 недель. Установлен максимальный уровень ГЦ в экспериментальной группе животных, находившихся на метиониновой диете и имевших травму опорно-двигательного аппарата (23,5±1,2 ммоль/л) против 8,27±1,18 ммоль/л в контроле и 12,14±0,92 ммоль/л в группе животных, получавших только метионин.

Кпючeвыe слова: гипергомоцистеинемия, тромбоз, травма, морфометрия.

d. p. berezovsky1, v. y. majugin1, t. g. faleeva16, k. m. kurajan2, N. N. KRAINOVA3, О. V. HABAROVA3, G. L. VOLOSHINA45, T. A. VARAVVA5, I. V. KORNIENKO56

LEVEL OF HOMOCYSTEINE AT A TRAUMA OF THE LOCOMOTOR APPARATUS

1 Chair of forensic medicine with a course of jurisprudence the Rostov state medical university,

Russia, 344022, Rostov-on-Don, the lane Nakhichevan, 29.

E-mail: dpb@mail.ru, tel.: (863 263-23-91, 250-41-04, fax (863) 253-06-11;

2Southern federal university,

Russia, 344006, Rostov-on-Don, st. Bolshaya Sadovaya, 105/42;

3GUZ regional consultative and diagnostic centre,

Russia, 344010, Rostov-on-Don, st. Pushkinskaya, 127. Tel.: (863) 255-79-32, 255-79-49;

4Advisory and diagnostic centre science,

Russia, 344002, Rostov-on-Don, str. Turgenev, 49.

Tel.: (863) 262-07-66, 240-21-43, fax (863) 240-44-64;

5Scientiic research Istitute of biology of southern federal university,

Russia, 344090, Rostov-on-Don, Stachki ave, 194/1;

616-й National centre for forensic and forensics southern military district, Rostov-on-Don

It is considered that the raised level of homocysteine (He) is the independent factor of thrombotic. However, the question how the traumatic illness influences on Hc level isn't consecrated in the literature. We have studied He level at a trauma of the locomotor apparatus on laboratory animals in experimental conditions. All animals have been randomized in 5 experimental groups. The raised level of He at laboratory animals was created by keeping them on methionine diets. The duration of the experiment was on average 6 weeks. The He maximum level of the experimental group of animals being on methionine diet and having a trauma of the locomotor apparatus (23,5±1,2 mmol/l), against 8,27±1,18 mmol/l in control and 12,14±0,92 mmol/l in group of the animals receiving only methionine is established.

Key words: hyperhomocysteinemia, thrombosis, trauma, morphometry.

Введение

Исследования, проведённые за последние годы, показывают, что гомоцистеин (ГЦ) является независимым фактором риска сосудистых заболеваний [7, 22]. По данным клинических исследований, увеличение концентрации ГЦ (гипергомоцистеинемия -ГГЦ) в плазме на 5 мкмоль/л увеличивает риск сосудистых заболеваний и общей смертности в 1,3-1,7 раза [2]. Нормализация уровня ГЦ в плазме может предотвращать возникновение сосудистых осложнений.

ГЦ - это аминокислота с формулой

HSCH2CH2CH(NH2)CO2H. Он является гомологом аминокислоты цистеина и отличается на одну метиленовую группу (-СН2-). ГЦ биосинтезируется из метионина удалением терминальной Се метильной группы. Он может быть обратно конвертирован в метионин при помощи витаминов В-группы.

В течение жизни уровень ГЦ в крови постепенно повышается. До периода полового созревания уровни ГЦ у мальчиков и девочек примерно одинаковы (около 5 мкмоль/л). В период полового созревание уровень ГЦ

Кубанский научный медицинский вестник № 5 (128) 2011

Кубанский научный медицинский вестник № 5 (128) 2011

повышается до 6-7 мкмоль/л, у мальчиков это повышение более выражено, чем у девочек. У взрослых уровень ГЦ колеблется в районе 10-11 мкмоль/л, у мужчин этот показатель обычно выше, чем у женщин. Однако с возрастом у женщин скорость нарастания концентрации выше, чем у мужчин, что объясняют снижением функции почек, а более высокие уровни ГЦ у мужчин -большей мышечной массой [18].

ГГЦ приводит к дисфункции эндотелия и пролиферации стенки сосудов, усилению перекисного окисления липидов, нарушению баланса в гемостазе, при этом повышается риск развития тромбоза, в том числе и глубоких вен нижних конечностей (ТГВНК).

Венозный тромбоз с локализацией в дистальных отделах глубоких вен нижних конечностей (голень) осложняется ТЭЛА от 1% до 5% [1, 8, 12].

ТГВНК и тромбоэмболия легочной артерии (ТЭЛА), в свою очередь, занимают важнейшее место в структуре послеоперационных осложнений и смертности в лечебных учреждениях хирургического профиля, в частности, у пациентов с травмой опорно-двигательного аппарата при оперативных методах лечения [3, 5, 23].

К сожалению, на сегодняшний день методы прогнозирования вероятности возникновения тромботических осложнений не являются совершенными. Это объясняется и тем, что возникающий тромбоз является многофакторным процессом.

В доступной литературе достаточно много публикаций, освещающих влияние повышенного уровня ГЦ на органы и ткани, в частности на сердечно-сосудистую систему [2, 7]. Однако в доступной научной литературе мы не нашли сведений о том, как непосредственно само травматическое воздействие (травматическая болезнь) может повлиять на уровень ГЦ, который, в свою очередь, и запускает порочный круг.

Исходя из вышеизложенного, мы поставили перед собой цель - оценить уровень ГЦ в плазме экспериментальных животных при травматическом воздействии. Поставленная цель была достигнута путем решения задач:

1) формирование перелома костей голени у лабораторных животных;

2) использование метиониновой диеты для увеличения уровня плазменного ГЦ лабораторных животных;

3) определение уровня ГЦ в крови лабораторных животных в различных экспериментальных группах;

4) исследование формулы крови у лабораторных животных;

5) гистологическое исследование мягких тканей из зоны сформированного перелома и интактной конечности;

6) выявление частоты встречаемости тромбоза вен у лабораторных животных;

7) сравнение полученных результатов в экспериментальных группах.

Материалы и методы исследования

В качестве лабораторных животных для эксперимента были выбраны беспородные крысы (самцы) массой 250-300 г. Животные содержались в стандартных клетках в условиях 12-часового режима освещения и свободного доступа к корму и воде. Содержание животных соответствовало санитарным правилам, утвержденным М3 СССР 06.07.73 г., по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев). Кормили животных натуральными и брикетированными кормами в соответствии с нормами, утвержденными приказом М3 СССР № 755 от 12.08.77 г. [4, 6]. Перед началом эксперимента животные проходили карантин и акклиматизацию в условиях вивария в течение 14 дней.

Животные были рандомизированы в одну из пяти групп, в каждой из которых находилось по восемь особей:

I группа (соп^) - контрольная (интактные животные);

II группа (Тгаит) - животные, которым не вводили внутрижелудочно при помощи зонда метионин, однако был сформирован закрытый перелом костей голени спустя две недели от момента начала эксперимента. Перелом формировали при помощи специально сконструированного устройства, позволяющего дозирован-но воздействовать на конечность животного;

III группа (НЬюу) - животные, которым ежедневно вводили внутрижелудочно при помощи зонда метионин в концентрации 24,6 г/кг [21] в течение шести недель;

IV группа (НЬюу Т гаит) - животные, которым в течение первых четырех недель внутрижелудочно вводили метионин, затем после четырех недель от начала эксперимента формировали закрытый перелом костей голени. И еще в течение двух недель внутрижелудочно вводили метионин;

V группа (ННСу Тгаит 2 недели) - животные, которым в течение первых двух недель внутрижелудочно вводили метионин, затем после двух недель от начала эксперимента формировали закрытый перелом костей голени. И еще в течение двух недель внутрижелудочно вводили метионин.

В ходе эксперимента осуществляли еженедельный контроль массы лабораторных животных в группах. По окончании срока эксперимента животных декапитиро-вали под эфирным наркозом.

СИЕШШ 1

Схема и условия эксперимента

Длительность эксперимента

1-я неделя 2-я неделя 3-я неделя 4-я неделя 5-я неделя 6-я неделя

I - контрольная группа животных

II Травма

III - введение метионина

IV - введение метионина Травма + метионин

V - введение метионина Травма + метионин

Примечание: I__________I - длительность посттравматического периода.

Подсчет лейкоцитарной формулы производили путем приготовления мазков периферической крови на предметных стеклах. Подсчитывали не менее 200 клеток, а затем выводили процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Подсчет тромбоцитов в мазке крови производили по отношению к 1000 эритроцитов. Фиксацию мазков осуществляли по Г рюнвальду, окрашивание - по Романовскому-Гимзе.

Уровень ГЦ в крови определяли методом C. M. Pfeiffer et al. [20] с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

значимо увеличен по отношению к контролю, и максимальные значения мы наблюдали в IV экспериментальной группе, где уровень ГЦ по отношению к контролю был увеличен на 185,19% (р<0,05). Стоит отметить, что при сравнении уровня ГЦ в III и IV группах мы также наблюдали статистически значимые различия. Уровень ГЦ в IV группе по отношению к III группе был увеличен на 93,57%.

При гистологическом исследовании мягких тканей из зоны сформированного перелома и интактной конечности нами установлено отсутствие тромбов в просвете

сШЕШ 2

Формула крови лабораторных животных в экспериментальных группах

Номер груп- пы Эозинофилы Папочко- ядерные нейтрофилы Сегменто- ядерные нейтрофилы Лимфоциты Моноциты Тромбоциты

I 1,14±0,32 2,71±0,78 13,14±2,38 78,86±2,59 3,43±0,57 71±5,3

II 4,50*±0,87 3,13±0,52 28,50*±4,34 56,88*±4,66 6,88*±0,88 82,25±24,57

III 2,88±0,72 3,13±0,99 18,13±3,88 69,13±5,05 6,50*±1,07 51,17±6,35

IV 1,83±0,60 1,33±0,42 18,50±6,42 69,50±5,70 8,67*±1,63 31,33±3,18

V 0,44±0,19 3,00±2,15 19,78±2,19 69,11 ±5,13 6,89±2,25 50±6,7

сШЕШ 3

Уровень гомоцистеина в сыворотке крови лабораторных животных экспериментальных групп

Номер группы I II III IV V

Концентрация гомоцистеина (моль/л) 8,27±1,18 9,21±0,7 12,14*±0,92 23,5*±1,2 9,63*±1,44

Примечание: * - p<0,05.

Для гистологического исследования изымались мягкие ткани из зоны сформированного перелома, а также интактной конечности.

Полученные данные обработаны методом вариационной статистики с помощью пакета программ «Windows XP Excel». Параметры приведены в виде средних величин со стандартным отклонением (M±SD). Достоверность различий оценивалась по парному t-критерию Стьюдента. Статистически значимыми считались различия при р<0,05.

Результаты исследования

Во всех группах изменения средней массы тела были однотипными, и статистически значимых различий нами выявлено не было.

Показатели формулы крови у животных экспериментальных групп указаны в таблице 2.

Во всех экспериментальных группах уровень ГЦ был увеличен по отношению к контролю, что отражено в таблице 3 и на рисунке 1.

Во II экспериментальной группе (traum) уровень ГЦ незначительно и статистически недостоверно был повышен по отношению к контролю (9,21±0,7 ммоль/л против 8,27±1,18 ммоль/л). Во всех остальных экспериментальных группах уровень ГЦ был статистически

1 2 3 4 5

уровень гомоцистеина

Концентрация гомоцистеина в экспериментальных группах

сосудов в I (соп^) группе. Во II (Тгаит) и III (НЬюу) группах тромбы отмечались с одинаковой частотой - 9%. С наибольшей частотой тромбы отмечались в IV (Тгаит+НЬюу) и V ^гаит+НЬюу 2 нед.) группах, равной 30%.

Обсуждение

Полагают, что ГГЦ является более информативным показателем для прогноза тромботических осложнений [1, 5, 13, 14]. Однако в повседневной клинической и/ или экспертной практике не так часто можно встретить

Кубанский научный медицинский вестник № 5 (128) 2011

Кубанский научный медицинский вестник № 5 (128) 2011

целенаправленного определения уровня ГЦ у пациента с целью прогноза риска тромботических осложнений или для установления причинно-следственной связи между имеющимся повреждением и возникшим тромботическим осложнением. Тем более непонятно влияние травматической болезни на уровень ГЦ в плазме крови. Все причины, приводящие к ГГЦ, подразделяют на врожденные и приобретенные. К врожденным относятся мутации генов ферментов, участвующих в обмене ГЦ: метилентетрагидрофолатредуктазы (МТГФР), метионинсинтетазы (МС), цистатион-р-синтетазы

(ЦВС), бетаин-гомоцистеин-метилентрансферазы

(БГМТ) [7, 11, 15, 22]. Среди основных приобретенных факторов, способствующих развитию ГГЦ, выделяют дефицит витаминов В6, В12, фолиевой кислоты, нарушение функции почек, печени, прием лекарственных препаратов и др. [17, 24]. По данным литературы, увеличение концентрации ГЦ в крови выше уровня 22 мкмоль/л связано с четырёхкратным повышением риска возникновения ТГВНК [5, 13, 14]. Особенно опасна ГГЦ для мужчин: при повышении его уровня всего на 12% выше нормы. В таком случае риск возникновения сердечного приступа у мужчин повышается в 3 раза [2, 19, 25]. Данные, которые приводят авторы в своих клинических наблюдениях, сопоставимы с данными, полученными нами на экспериментальных животных. Так, они приводят значения уровня ГЦ в норме - 10,7±3,2 ммоль/л, а у лиц с переломами шейки бедра - 11,7±4,7 ммоль/л. В то время как наши экспериментальные данные соответствовали для контроля 8,27±1,18 ммоль/л, а для животных с травмой голени - 9,21±0,7 ммоль/л.

Используемая метиониновая диета в III экспериментальной группе дала ожидаемый, уже известный по научным исследованиям и публикациям [10] результат, и уровень ГЦ в этой экспериментальной группе был повышен по отношению к контролю на 46,8% (р<0,05). Однако, несмотря на то что мы вводили метионин в концентрации 24,6 г/кг, получили значительно меньшие концентрации ГЦ. По литературным данным, уровень ГЦ составил 240-334 ммоль/л [17], в то время как в III экспериментальной группе уровень ГЦ соответствовал 12,14±0,92 ммоль/л (р<0,05). А вот само травматическое воздействие не оказывало существенных изменений на уровень ГЦ. И вполне логично, что уровень ГЦ в экспериментальной группе, где животные подверглись и травматическому воздействию, и находились на метиониновой диете, не должен был значительно отличаться от экспериментальных данных II (Тгаит) и III (НЬюу) групп. Однако мы получили значительное превышение концентрации ГЦ. Как одно из объяснений, и, по всей видимости, не единственное, связано со снижением двигательной активности травмированного животного, так как одной из причин увеличения ГЦ является гиподинамия [15]. Способствовать гиподинамии могла еще и та причина, что в условиях ГГЦ преобладают процессы резорбции кости [24]. Следовательно, надо ожидать более медленных темпов консолидации сформированного перелома.

Используемый для повышения уровня ГЦ метионин сам по себе является токсическим веществом, проявляющимся в гемолитической анемии, супрессии роста, способствует снижению массы тела [16]. Однако в нашем эксперименте мы не подтвердили высказывания в отношении снижения массы тела. На протяжении всего эксперимента масса тела во всех экспериментальных группах

еженедельно увеличивалась, и различия между группами не носили статистически достоверных значений.

Мы получили статистически значимые различия в значениях формулы крови (табл. 2) в количестве содержания эозинофилов, сегментоядерных нейтрофи-лов, лимфоцитов и моноцитов во II экспериментальной группе. За исключением моноцитов, количество которых по отношению к контролю было снижено. Что касается II, III, IV и V экспериментальных групп, то максимальный уровень тромбоцитов был также во II экспериментальной группе, минимальное количество - в IV экспериментальной группе, где организм экспериментального животного получал как травматическое, так и токсическое воздействие метионина.

Возникновение венозного тромбоза у животных, перенесших перелом нижней конечности, и у животных, находящихся на метиониновой диете, оценивалось с одинаковой частотой - 9%; сочетание же факторов тупой травмы и повышенного уровня ГЦ приводило к риску возникновения тромбоза с частотой уже 30%. Применительно к проблемам судебной медицины такие результаты могут говорить о том, что в двух случаях из десяти возникших фатальных тромботических осложнений при травме можно говорить о прямой причинной связи, и в одном случае из десяти причина будет обусловлена предшествовавшим токсическим воздействием ГЦ на эндотелий вен, что требует наличия критериев, по которым можно было бы разграничить прямое воздействие травмы от токсического воздействия ГЦ. Не исключено, что такие критерии можно будет обосновать при дальнейшем морфометрическом исследовании сосудов в зоне травмы, сравнивая с сосудами интактной конечности.

Интересно отметить, что при наличии травмы (II) у животных отмечалось увеличение количества тромбоцитов, в то время как количество тромбоцитов в III экспериментальной группе было снижено до 51,17±6,35 в поле зрения, в группе экспериментальных животных, у которых был сформирован перелом в условиях метиониновой диеты (IV), содержание тромбоцитов было еще меньше. Объяснением данных результатов можно считать то, что травма является инициирующим фактором для увеличения количества тромбоцитов, метионин может оказывать токсическое воздействие, а травма на фоне метиониновой диеты способствует усилению токсического эффекта. Повышенное тром-бообразование отмечалось при сочетанном влиянии тупой травмы и метиониновой диеты (в IV и V группах), где наблюдались низкий уровень тромбоцитов и высокий уровень ГЦ. Поэтому повышение тромботических осложнений в таких условиях связано не с тромбоци-тарным звеном, а с нарушением функции эндотелия в эксперименте [9]. Таким образом, на фоне снижения количества тромбоцитов мы наблюдаем повышение частоты встречаемости тромбов, что является особенностью тромбообразования при травме опорно-двигательного аппарата в условиях ГГЦ.

ЛИТЕРАТУРА

1. Баранова Е. И., Большакова О. О. Клиническое значение гомоцистеинемии. Инфекции и антимикробная терапия. - 2001.-Т. 3, №6.

2. Костюченко Г. И., Баркаган 3. С. Гипергомоцистеинемия и коронарная болезнь сердца как проблема пожилого возраста // Клиническая геронтология. - 2003. - Т. 9, № 5.

3. Котельников М. В. Тромбоэмболия легочной артерии (современные подходы к диагностике и лечению). - М., 2002. - С. 7-10.

4. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития РФ от 23 августа 2010 г. № 708н «Об утверждении Правил лабораторной практики».

5. Румянцева А. Г. Профилактика тромбоэмболических осложнений у больных хирургического профиля // Учебно-методические рекомендации. - 2006. - С. 2.

6. Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию вивариев. 06.04.1973 года № 1045-73.

7. Фетисова И. Н. Полиморфизм генов фолатного обмена и болезни человека // Вестник Ивановской медицинской академии. -2006. - Т. 11. № 1 - 2. - С. 77-83.

8. AndersonF. A., WheelerH. B., GoldbergR. J., HosmerD. W., Patwardhan N. A., Jovanovic B., Forcier A., Dalen J. E. The а population-based perspective of the hospital incidence and case-fatality rates of deep vein thrombosis and pulmonary embolism. The Worcester DVT Study // Arch. intern. med. - 1999, May, № 151 (5). - Р. 933-938.

9. Chambers J. C., Mc Gregor A., Jean-Marie J. et al. Acute hyperhomocysteinaemia and endothelial dysfunction // Lancet. -1998. - Vol. 351, № 9095. - P. 36-37.

10. Chen F. Y., Guo Y. H., Gao W, Feng X. H., Chen L., Tang C. S. Effect of hyperhomocysteinemia on cardiac remodeling in rats Beijing // Da Xue Xue Bao. - 2006. - Apr. 18. - № 38 (2). - Р. 179-183.

11. Fukasawa M., Matsushita K., Kamiyama M. et al. The methyltetrahydrofolate reductase C677T point mutation is a risk factor for vascular access thrombosis in hemodialysis patients // Am. j. kidney dis. - 2003. - Vol. 41, № 3. - P. 637-642.

12. Guo Yan-hong, Chen Feng-ying, Wang Gui-song, Chen Li, Gao Wei. Diet-induced hyperhomocysteinemia exacerbates vascular reverse remodeling of balloon-injured arteries in rat // Chinese medical journal. - 2008. - Vol. 121.

13. Gupta A., Dennis V., Arheart K. et al. High plasma homocysteine is a risk factor for vascular complications // Am. college card. - 1997. -№3. - P. 130-136.

14. Hainaut P., Jaumotte C., Verhelst D., Wallemacq P., Gala J. L., Lavenne E., Heusterspreute M., Zech F., Moriau M. Hyperhomocysteinemia and venous thromboembolism: a risk factor more prevalent in the elderly and in idiopathic cases // Thromb res. -2002. - Apr. 15, № 106 (2). - Р. 121-125.

15. Hagen W., Fodinberg M., Heinz G. et al. Effect of MTHR genotypes and hyperhomocysteinemia on patients // Kidney int. -2001. - Vol. 59. Suppl. 78. - P. 253-257.

16. Herrmann M., Wildemann B., Claes L., Klohs S., Ohnmacht M., Taban-Shomal O., Ulrich Hu" bner, Pexa A., Umanskaya N., and Herrmann W. Experimental hyperhomocysteinemia reduces bone quality in rats // Clinical chemistry. - 2007. - Vol. 53, № 8. - P. 1455-1461.

17. Homocysteine lowering trialist s collaboration. Lowering blood homocysteine with folic acid based supplements: meta-analysis of randomized trials // BMJ. - 1998. - Vol. 316, №5. - P. 894-898.

18. Meryl S. LeBoff, Narweker R., LaCroix A., LieLing Wu, Jackson R., Lee J., Douglas C. Bauer, Cauley J., Kooperberg C., Lewis C., Asha M. Thomas, and Cummings S. Homocysteine levels and risk of hip fracture in postmenopausal women // Clin. endocrinol. metab. -2009. - April. № 94 (4). - Р. 1207-1213.

19. Myerburg R. J., Kassler K. M., Castellanos A. et al. Sudden cardiac death: epidemiology, transient risk and intervention assessment // Ann. intern. med. - 1993. - Vol. 119, № 12. - P. 1187-1197.

20. Pfeiffer C. M., Twite D., Shih J., Holets-McCormack S. R., Gunter E. W. Method comparison for total plasma homocysteine between the abbott IMx analyzer and an HPLC assay with internal standardization // Clin. chem. - 1999. - Jan., № 45 (1). - Р. 152-153.

21. Sanjana D. and Steven R. Lentz Murine. Models of hyperhomocysteinemia and their vascular phenotypes // Arterioscler thromb vasc biol. - 2008. - № 28. - P. 1596-1605.

22. Spiroskil I., Kedev S., Antov S., Arsov T., Krstevska M., Dzhekova-Stojkova S., Bosilkova G., Kostovska S., Trajkov D., Petlichkovski A., Strezova A., Efinska-Mladenovska O., Spiroski M. Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR-677 and MTHFR-1298) genotypes and haplotypes and plasma homocysteine levels in patients with occlusive artery disease and deep venous thrombosis // Acta biochimica polonica. - 2008. - Vol. 55, № 3. - P. 587-594.

23. Task force report. Guidelines on diagnosis and management of acute pulmonary embolism. European society of cardiology // Europ. heart j. - 2000. - Vol. 21. - P. 1301-1336.

24. Tucker K. L., Hannan M. T., Qiao N., Jacques P. F., Selhub J., Cupples L. A., Kiel D. P. Low plasma vitamin B12 is associated with lower BMD: the framingham osteoporosis study // J. bone. miner. res. -2005. - № 20. - Р. 152-158.

25. Vasan R. S., Beiser A., Agostino R. B. et al. Plasma homocysteine and risk for congestive heart failure in adults without prior myocardial infarction // JAMA. - 2003. - Vol. 289, № 10. -P. 1251-1260.

Поступила 06.06.2011

И. К. БОГОМОЛОВА1, Н. В. ЛЕВЧЕНКО2, М. В. МАКСИМЕНЯ3, С. А. ЧАВАНИНА1, В. И. ИГНАТЬЕВ4, Н. Т. ЛЕСНИКОВ4

ИЗУЧЕНИЕ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИдОВ У детей С ГРИППОМ А/Н1N1/09

1мИ

Гло емл [

ПМГШЦТ672038,

2шш

Гло емл

ущ....... шмп

тщп inn [

хшмг

I

хпгшпш пт.

XI И

ХЕ

, СП с

ПЩ 48,  Ш (3022) 226869;

сш шш I ilium

х

xnmnnm пт.

х и

ХЕ

II 11,1672090,  , СП к ПШ

3ПШШШ ШПШЕШ Гло емл

ТИГТИЦГ20,  СП (3022) 325710;

мш

I I Ц1672090,   СП 4п Гоа жсшг I

пт I мнит

хпт ес

х

СЕ

хит

ШШ СШ[ ПГШПЩ 39и,  СП (3022) 354324;

г аишшишшш шлгппшп Щ56.

хс

тт

ППГГЩГ672007,  , СП uCL E-mail: bogomolova_ik@mail.ru, Ш (3022) 334455

Кубанский научный медицинский вестник № 5 (128) 2011 УДК 616-921.5-053.2:612.017.1