ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩАЯ МОЛЕКУЛА, СОДЕРЖАЩАЯ FCRN-СВЯЗЫВАЮЩИЙ ДОМЕН, КОТОРАЯ ОБЕСПЕЧИВАЕТ КЛИРЕНС АНТИГЕНОВ

1. Способ уменьшения связывающей активности в отношении существующего ADA у антигенсвязывающей молекулы, содержащей FcRn-связывающий домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и повышенной связывающей активностью в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH, где указанный способ включает стадии:
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, которая содержит FcRn-связывающий домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и повышенной связывающей активностью в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH; и
b) замены аминокислоты в FcRn-связывающем домене в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой или глутамином с получением антигенсвязывающей молекулы, содержащей модифицированный FcRn-связывающий домен.
2. Способ уменьшения связывающей активности в отношении существующего ADA у антигенсвязывающей молекулы, содержащей FcRn-связывающий домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и повышенной связывающей активностью в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH, где указанный способ включает стадии:
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, которая содержит FcRn-связывающий домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и повышенной связывающей активностью в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH; и
b) замены аминокислоты в FcRn-связывающем домене в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой или глутамином и в положении EU438 с получением антигенсвязывающей молекулы, содержащей модифицированный FcRn-связывающий домен.
3. Способ по п. 1, где стадия b) включает замену аминокислоты в FcRn-связывающем домене в одном или более дополнительных положениях, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436 и EU438.
4. Способ по любому из пп. 1-3, где стадия b) включает введение аминокислотных замен в FcRn-связывающем домене, где аминокислотные замены представляют собой одно из сочетаний:
1
EU438R/EU440E
2
EU438R/EU440D
3
EU438K/EU440E
4
EU438K/EU440D
5. Способ увеличения общего числа антигенов, с которыми может связываться одна антигенсвязывающая молекула,  без значительного повышения связывающей активности в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где указанный способ включает стадии:
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии a), путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой и глутамином.
6. Способ по п. 5, где на стадии с) изменяют модифицированный FcRn-связывающий домен, описанный на стадии b), путем замены аминокислот в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более дополнительных положениях, выбранных из группы, включающей  EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436 и EU438.
7. Способ облегчения внеклеточного высвобождения не содержащей антигена антигенсвязывающей молекулы, которая была поглощена клетками в антиген-связанной форме, без значительного повышения связывающей активности указанной антигенсвязывающей молекулы в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где способ включает стадии:
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436, и EU428; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой и глутамином.
8. Способ по п. 7, где на стадии с) изменяют модифицированный FcRn-связывающий домен, описанный на стадии b), путем замены аминокислот в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более дополнительных положениях, выбранных из группы, включающей  EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436 и EU438.
9. Способ повышения способности антигенсвязывающей молекулы удалять антиген из плазмы без значительного повышения связывающей активности в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где указанный способ включает стадии:
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434, EU436 и EU428; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой или глутамином.
10. Способ по п. 9, где на стадии с) изменяют модифицированный FcRn-связывающий домен, описанный на стадии b), путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более дополнительных положениях, выбранных из группы, включающей  EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436 и EU438.
11. Способ улучшения фармакокинетических характеристик антигенсвязывающей молекулы без значительного повышения связывающей активности в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где указанный способ включает стадии:
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена путем замены аминокислоты в последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой или глутамином.
12. Способ по п. 11, где на стадии с) изменяют модифицированный FcRn-связывающий домен, описанный на стадии b), путем замены аминокислот в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более дополнительных положениях, выбранных из группы, включающей  EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436 и EU438.
13. Способ уменьшения концентрации общего или свободного антигена в плазме без значительного повышения связывающей активности в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH по сравнению с исходным антителом, где указанный способ включает стадии:
a) обеспечения антигенсвязывающей молекулы, содержащей исходный FcRn-связывающий домен, где антигенсвязывающая молекула содержит антигенсвязывающий домен, который способен связываться с указанным антигеном,
b) изменения исходного FcRn-связывающего домена путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более из положений, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436; и
c) изменения модифицированного FcRn-связывающего домена, описанного на стадии b), путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой или глутамином.
14. Способ по п. 13, где на стадии с) изменяют модифицированный FcRn-связывающий домен, описанный на стадии b), путем замены аминокислот в аминокислотной последовательности исходного FcRn-связывающего домена в одном или более дополнительных положений, выбранных из группы, включающей  EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436 и EU438.
15. Способ по любому из пп. 5-14, где аминокислотную замену, введенную на стадии а), осуществляют в трех или более положениях, в которых указанные три или более положения представляют собой одно из сочетаний:
a)
EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU286
b)
EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU308
c)
EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU286 и EU308
d)
EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU428
e)
EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU308 и EU428
f)
EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU250 и EU428
g)
EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU250 и EU308
h)
EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU250 и EU286 и EU308
i)
EU252 и EU434 и EU307 и EU311 и EU436 и EU250 и EU286 и EU308 и EU428
16. Способ по любому из пп. 5-14, где аминокислотную замену, введенную на стадии а), осуществляют в трех или более положениях, в которых указанные три или более положения представляют собой одно из сочетаний:
a)
EU252/EU434/EU307/EU311/EU286
b)
EU252/EU434/EU307/EU311/EU286/EU254
c)
EU252/EU434/EU307/EU311/EU436
d)
EU252/EU434/EU307/EU311/EU436/EU254
e)
EU252/EU434/EU307/EU311/EU436/EU250
f)
EU252/EU434/EU308/EU250
g)
EU252/EU434/EU308/EU250/EU436
h)
EU252/EU434/EU308/EU250/EU307/EU311
17. Способ по любому из пп. 5-14, где аминокислотную замену, введенную на стадии а), осуществляют в трех или более положениях, в которых указанные три или более положения представляют собой одно из сочетаний:
a)
EU252/EU315/EU434
b)
EU252/EU434/EU436
c)
EU252/EU254/EU434/EU436
18. Способ по любому из пп. 5-14, где аминокислотную замену, введенную на стадии а), осуществляют в трех или более положениях, в которых указанные три или более положения представляют собой одно из сочетаний:
a)
EU307/EU311/EU434
b)
EU307/EU309/EU311/EU434
c)
EU307/EU309/EU311/EU434
d)
EU250/EU252/EU434/EU436
19. Способ по любому из пп. 5-14, где стадия с) включает введение одной из замен или сочетаний:
1
EU438R/EU440E
2
EU438R/EU440D
3
EU438K/EU440E
4
EU438K/EU440D
20. Способ получения антигенсвязывающей молекулы, которая содержит Fc-домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и пониженной связывающей активностью в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH, где указанный способ, состоящий из стадии:
(a) обеспечения Fc-домена, обладающего повышенной связывающей активностью в отношении FcRn в нейтральных или кислых диапазонах значений pH и в отношении существующего ADA в нейтральных диапазонах значений pH,
(b) замены аминокислоты в аминокислотной последовательности Fc области
(i) в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой или глутамином, и
(ii) в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436 и EU438,
(c) изменения по меньшей мере одной аминокислоты в антигенсвязывающем домене с целью получения pH-зависимого антигенсвязывающего домена, или выбора ион кальция-зависимого антигенсвязывающего домена;
(d) получения гена, кодирующего антигенсвязывающую молекулу, в которой человеческий Fc-домен, полученный на стадии b), и антигенсвязывающий домен, полученный на стадии (с), связаны, и
(e) получения антигенсвязывающей молекулы с использованием гена, полученного на стадии (d).
21. Способ получения антигенсвязывающей молекулы, содержащей Fc домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и повышенной связывающей активностью в отношении существующего ADA при нейтральных значениях pH, где указанный способ включает стадии:
a) обеспечения Fc домена, обладающего повышенной связывающей активностью в отношении FcRn при нейтральных или кислых значениях pH и существующего ADA при нейтральных значениях pH;
b) замены аминокислоты в аминокислотной последовательности Fc области в положении EU438 глутаминовой кислотой, аргинином, серином или лизином и в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой или глутамином;
с) замены по меньшей мере одной аминокислоты в антигенсвязывающем домене для получения рН-зависимого антигенсвязывающего домена, или выбора ион кальция-зависимого антигенсвязывающего домена;
d) получения гена, кодирующего антигенсвязывающую молекулу, в котором человеческий Fc домен, полученный на стадии b), и антигенсвязывающий домен, полученный на стадии с) связаны, и
е) получения антигенсвязывающей молекулы, используя ген, полученный на стадии d).
22. Способ по п. 20, где Fc-домен, обладающий повышенной связывающей активностью в отношении FcRn и существующего ADA в нейтральных или кислых диапазонах значений pH и в отношении существующего ADA в нейтральных диапазонах значений pH, содержит аминокислотную замену в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436.
23. Способ получения антигенсвязывающей молекулы, который включает стадии:
(a) выбора исходного FcRn-связывающего домена и изменения исходного FcRn заменой аминокислоты в аминокислотной последовательности на другую аминокислоту
(i) в положении EU440 глутаминовой кислотой, аспарагиновой кислотой или глутамином, и
(ii) в одном или более положениях, выбранных из группы, состоящей из EU387, EU422, EU424, EU426, EU433, EU436 и EU438;
(b) выбора антигенсвязывающего домена антигенсвязывающей молекулы и изменения по меньшей мере одной аминокислоты в антигенсвязывающем домене для получения pH-зависимого антигенсвязывающего домена или ион кальция-зависимого антигенсвязывающего домена;
(c) получения гена, кодирующего антигенсвязывающую молекулу, в которой человеческий FcRn-связывающий домен и антигенсвязывающий домен, полученные на стадиях (a) и (b), связаны; и
(d) получения антигенсвязывающей молекулы с использованием гена, полученного в пункте (c).
24. Способ по п. 23, где на стадии а) выбирают исходный FcRn-связывающий домен и изменяют исходный FcRn путем замены аминокислоты в аминокислотной последовательности другой аминокислотой в одном или более дополнительных положениях, выбранных из группы, включающей  EU238, EU250, EU252, EU254, EU255, EU256, EU258, EU286, EU307, EU308, EU309, EU311, EU315, EU428, EU433, EU434 и EU436.