Способ создания модели для изучения эффектов введения объем-образующих веществ у лабораторных животных
METHOD OF CREATING MODEL FOR STUDYING EFFECTS OF INTRODUCTION OF VOLUME-FORMING SUBSTANCES IN LABORATORY ANIMALS

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной урологии. Актуальность диагностики и лечения стрессового недержания мочи продолжает оставаться высокой, по данным европейской и американской статистик около 5% женщин в возрасте 40-60 лет отмечают симптомы стрессового недержания мочи. В России этот процент немного ниже и составляет 25-46%. По данным эпидеологических исследований доказано, что стрессовое недержание мочи имеет тенденцию к росту. Это связано с изменением образа жизни современного человека (гиподинамия), ухудшением экологической обстановки [1].
Подкомитетом по стандартизации Международного общества по проблемам удержания мочи стрессовое недержание мочи определяется как непроизвольная потеря мочи, возникающая при повышении внутрибрюшного давления в результате физического напряжения, кашля, чиханья, при поднятии тяжести и т.д. Утрата прочности, растяжение соединительнотканных образований, поддерживающих шейку мочевого пузыря и проксимального отдела уретры, является основным патогенетическим звеном в развитии заболевания [2]. Часто этот недуг возникает у многорожавших и сочетается с нарушениями связочного аппарата газовых органов и промежности, с опущением стенок влагалища и дна мочевого пузыря. Вследствие чего имеются выраженные нарушения замыкательного аппарата шейки мочевого пузыря, изменение ее формы, подвижности.
Наиболее распространенным способом лечения стрессового недержания мочи является хирургический. Однако при небольших степенях недержания мочи использование хирургии сдерживается долей неудачных результатов и осложнении этого вида лечения [3]. Хирургическое лечение показано не всем пациенткам, а существующие на сегодняшний день хирургические способы коррекции недержания мочи, к сожалению, не лишены недостатков (нарушения сексуальной функции, дискомфорт при половой жизни, создание избыточной обструкции нижних мочевых путей, неврит запирательного нерва, ограничения послеоперационного периода и др.), кроме того, рецидивы недержания мочи после хирургического лечения составляют от 5,7% до 30-40% [4]. Консервативные способы включают в себя поведенческую терапию, различной конструкции пессарии, уретральные обтураторы, тренировку мышц тазового дна, в том числе в режиме биологической обратной связи и с использованием конусов. Критерием излечения является полное исчезновение симптомов недержания мочи, но в подавляющем большинстве случаев консервативная терапия стрессового недержания мочи не приносит ожидаемого эффекта, и в случае отрицательной или даже слабой положительной динамики необходимо оперативное лечение. Желание пациенток и специалистов снизить риск и количество побочных эффектов, достигнуть положительных результатов наиболее безопасным и экономически выгодным способом стимулирует развитие высоких медицинских технологий на пути совершенствования методов консервативного лечения недержания мочи при напряжении.
Известен полиакриламидный гидрогель, не обладающий цитотоксическим действием на фибробласты человека. Он нетоксичен, не является канцерогеном, аллергеном и мутагеном; устойчив к ферментативному и микробиологическому расщеплению. Кроме того, полимер не растворяется в воде. Этот гидрогель полезен в качестве материала для эндопротезов [5].
3
Известна также композиция для лечения недержания мочи, содержащая фрагменты жизнеспособной мышечной ткани и носитель, при этом фрагменты мышечной ткани имеют размер частиц от примерно 0,1 до примерно 3 мм. Способ лечения недержания мочи включает в себя инъекцирование в мочеполовую ткань и в колоректальную ткань композиции [6].
Недостатком предложенных известных веществ является недостаточная проработка способов их применения.
В мировой литературе имеются редкие упоминания об использовании объем-образующих веществ для коррекции недержания мочи. Широкого распространения они не получили также вследствие небольшого опыта их применения [7, 8].
Таким образом, представляется актуальным создать модель для изучения реакции тканей на введение объем-образующего вещества и область шейки мочевого пузыря и уретры при малотравматичном введении препарата.
Наиболее близким к предлагаемому способу является способ введения объем-образующего вещества на примере препарата Коллост в парауретральную область, который включает нижнюю серединную лапаротомию, выделение мочевого пузыря и мобилизацию уретры. В ткани парауретральной реализации данного способа выделение (дессекция) шейки мочевого пузыря и начального отдела уретры привносит неизбежную хирургическую травму в данном регионе, что затрудняет трактовку роли введенного объем-образующего вещества в развитие соединительной ткани в месте вмешательства, а также не позволяет оценить эффекты введения препарата.
Задача изобретения - создание модели введения объем-образующих веществ у лабораторных животных в область шейки мочевого пузыря и уретры для изучения их влияния на ткани при малоинвазивном введении препарата.
Поставленная задача достигается тем, что при соблюдении правил асептики и антисептики способ создания модели для изучения эффектов введения объем-образующих веществ у лабораторных животных, включающий в себя операции введения объемно-образующего вещества в области шейки мочевого пузыря и уретры, согласно изобретению нижнесрединным разрезом, не вскрывая брюшины, оттягивают мочевой пузырь, выполняют укол прямой иглой 17-19 G на глубину 0,3-0,5 см латеральнее боковых стенок мочевого пузыря и вводят 2-3 мл объем-образующего вещества. В качестве объем-образующего вещества может быть использован коллаген «Коллост», либо гиалуроновая кислота.
Критериями создания модели у лабораторного животного считают визуальное определение введенного препарата.
Достигаемым техническим результатом является разработка способа создания модели для изучения эффектов введения объем-образующих веществ в область шейки мочевого пузыря и уретры без хирургического вмешательства (диссекции) в изучаемой области.
На фигуре представлена фотография мочевого пузыря и уретры, обнаженных внебрюшинно: 1 - мочевой пузырь, 2 - уретра, 3 - игла. На фотографии в пределах клетчаточного пространства осуществляется введение препарата в область шейки мочевого пузыря.
Способ моделирования был осуществлен на 16 половозрелых кроликах породы «Шиншилла», самках, весом 2,8-3,1 кг.
Способ осуществляли следующим образом
Животное фиксировали в положении на спине за разведенные конечности. Манипуляцию проводят с соблюдением правил асептики и антисептики. Для обезболивания использовали 2% раствор препарата Рометар, который вводили внутримышечно из расчета 0,2 мл на 1 кг массы тела кролика.
Действие препарата Манипуляцию проводят с соблюдением правил асептики и антисептики. Для обезболивания использовали 2% раствор препарата Рометар, который вводили внутримышечно из расчета 0,2 мл на 1 кг массы тела кролика. Действие препарата начиналось через 5-10 минут после введения и продолжалось в течение 1-2 ч. Соблюдая правила асептики и антисептики, выполняли нижнесрединный разрез, без вскрытия брюшины. В область шейки мочевого пузыря 1 и уретры 2 (располагаются вне брюшины) латеральнее боковых стенок мочевого пузыря параллельно оси органа выполняют по одному вколу с каждой стороны иглой 3 17-9 G на глубину 0,3-0,5 см и вводят 2-3 мл объем-образующего вещества.
Условия содержания животных и порядок работы с ними строго соответствовали законодательству Российской Федерации, положениям Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей, требованиям и рекомендациям Руководства по содержанию и использованию лабораторных животных [10-11].
Источники информации
1. Недержание мочи у женщин: руководство. / А.И. Неймарк, М.В. Раздорская. - М.: ГЭОТАР - Медиа, 2013, - 128 с.
2. Papa Petros /Function, dysfunction and management/ According to the integral Theory // The Female Pelvic Flood. - 2010 - №2.
3. Гвоздев М.Ю., Касян Г.Р., Лынова Ю.Л., Пушкарь Д.Ю. Осложения оперативного лечения недержания мочи с использованием синтетической петли. // Уральский медицинский журнал. - 2012 - №2.
4. U. Ulmsten, 1995, Р.Е.Р. Petros, 2009, G. Novara, 2010, P. Abrams, L. Cardozo, 2009, И.А. Аполихина, 2010.
5. Патент №2301814, A61L 27/16, опубликован 27.06.2007.
6. Патент №2459627, A61K 35/34, опубликован 20.07.2011.
7. Lightner D., et al. Randomized controlled multisite trial of injected bulking agents for women with intrinsic sphincter deficiency: mid-urethral injection of Zuidex via the implacer versus proximal urethral injection of Contigen cystoscopically /Urology, 2009/ 74(4): p. 771-5.
8. Ghoniem G., et al. Cross-linked polydimethylsiloxane injection for female stress urinary incontinence: results of a multicenter, randomized, controlled, single-blind study. JUrol, 2009? 181(1): p. 204-210.
9. О.Б. Лоран, Л.А. Синякова, В.К. Шишла, П.В. Королева. Клеточные изменения в парауретральной зоне экспериментальных животных при воздействии геля Коллост. // Урология - 2012 - №3, с. 19.
10. Международные рекомендации по проведению медико-биологических исследований с использованием животных. 1993 г.
11. Горбунова И.А. Регламентация экспериментов на животных - этика, законодательства, альтернативы. М. 1998 г.