Дендритные противоопухолевые вакцины

ОБЗОРНЫЕ СТАТЬИ

REVIEWS

© А. Ю. Барышников, 2001 УДК 615.371/.372:616-006.04

А. Ю. Барышников

ДЕНДРИТНЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ВАКЦИНЫ

НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей

Многочисленные исследования как на лабораторных животных, так и у человека показали, что иммунная система может распознавать, а в некоторых случаях и разрушать опухолевые клетки [11]. Эффекторные клетки охарактеризованы как С08+-цитотоксические Т-лимфоциты. Однако проблема состоит в том, что эти Т-клетки не индуцируются или слабо индуцируются.

Первые попытки создать противоопухолевые вакцины и тем самым повысить противоопухолевый иммунитет появились четверть века назад. На протяжении десятилетия продолжались интенсивные поиски методов создания противоопухолевых вакцин, которые, к сожалению, так и не нашли свое применение в клинике. Это связано с тем, что общепринятые адъюванты стимулируют гуморальный, а не Т-клеточный ответ. Кроме того, опохулеассоциированные антигены являются слабыми и недостаточными для индукции сильного иммунного ответа [4]. Благодаря успехам в молекулярной биологии вновь возродились надежды на вакцинотерапию как метод лечения и профилактики онкологических заболеваний. В настоящее время открылись новые методические возможности, и идея создания противоопухолевых вакцин вновь возродилась. Среди многих современных подходов к созданию противоопухолевых вакцин особое место занимают вакцины на основе дендритных клеток.

Дендритные клетки впервые были описаны R. М. Steinman и Z. A. Cohn в 1973 г. [14]. Оказалось, что они являются основными клетками иммунной системы, презентирующими (представляющими) антиген лимфоцитам и являющимися по сути инициаторами иммунологических реакций.

Дендритные клетки, так же как все клетки гемопоэтической системы, происходят из полипотентной стволовой клетки. Из миелоидных предшественников развиваются зрелые дендритные клетки периферической крови и тканевые макрофаги, интерстициальные дендритные клетки, клетки Лангерганса и эпителиальные дендритные клетки. Из предшественников лимфоцитов происходят тимические (интердигитальные) дендритные клетки [15]. При этом предшественники дендритных клеток имеют маркеры предшественников миелоидного или лимфоидного ряда кроветворения, и лишь зрелые дендритные клетки экспрессируют собственный спектр антигенов, отличающий их от других клеток.

A.I.Baryshnikov

DENDRITIC ANTITUMOR VACCINES

Institute of Experimental Diagnosis and Therapy of Tumors

It was demonstrated in many animal and human studies that the immune system can recognize and even destroy tumor cells [11]. The effector cells were characterized as CD8+ cytotoxic T-Iymphocytes. However, the problem is that these T-Iymphocytes are not or poorly induced. First attempts to develop antitumor vaccines and thus increase antitumor immunity were made a quarter of century ago. There was intense search for methods to create antitumor vaccines which unfortunately failed to reach the clinical stage. The point is that conventional adjuvants stimulate humoral rather than T-cell response. Besides, tumor-associated antigens are weak and cannot induce a strong immune response [4]. The progress in molecular biology stirred up hopes for vaccine therapy as a method to prevent and treat cancer. Vaccines developed on the basis of dendritic cells are a modern approach to the development of antitumor vaccines.

R.M.Steinman and Z.A.Cohn were the first to describe dendritic cells in 1973 [14]. As appeared these cells were principal immunity components responsible for antigen presentation to lymphocytes and in fact initiation of immune reactions.

The dendritic cells like all hemopoietic cells originate from polypotent stem cells. Myeloid precursors give rise to mature dendritic cells of peripheral blood and tissue macrophages, interstitial dendritic cells, Langerhans cells and epithelial dendritic cells. Thymic (interdigital) dendritic cells originate from lymphocyte precursors [15]. The precursors of the dendritic cells have markers of precursors of myeloid and lymphoid hemopoietic cells, and only mature dendritic cells express their own set of antigens different from other cells. Precursors of immature dendritic cells are found in bone marrow and reach various tissues through circulation. Immature dendritic cells can capture antigens but cannot activate T-cells to a full extent [1]. The dendritic cells become mature in the presence of antigen stimulus. The dendritic cell maturation proceeds under the effect of a variety of stimulating factors such as granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF), interleukine-4 and tumor necrosis factor a. Using these mediators one may grow dendritic cells in vitro in unlimited amount [13].

There are two populations of dendritic cells of different origin in peripheral blood of humans [10]. They differ by antigen CDllc expression. The CDllc- dendritic cells have lymphoid

Предшественники незрелых дендритных клеток существуют в костном мозге и, циркулируя в крови, достигают различных тканей. Незрелые дендритные клетки способны захватывать антиген, но не обладают способностью в полной мере активировать Т-клетки [1]. В присутствии антигенного стимула дендритные клетки созревают. Созревание дендритных клеток происходит под влиянием различных стимулирующих факторов, основными из которых являются гранулоцитарно- макрофа-гальный колониестимулирующий фактор (ГМ-КСФ), интерлейкин-4 и опухоленекротический фактор а. Используя эти медиаторы, можно выращивать дендритные клетки in vitro в неограниченном количестве [13].

В периферической крови человека существуют две популяции дендритных клеток, имеющие различное происхождение [10]. Они различаются по экспрессии антигена CDllc. Выделенные из периферической крови CDllc" дендритные клетки обладают лимфовдной морфологией и экспрессируют лимфоидные маркеры, a CDllc"1" дендритные клетки имеют моноцитарную морфологию и экспрессируют моноцитарные антигены. Только CDllc+ дендритные клетки способны захватывать антиген.

В настоящее время хорошо изучены молекулярные характеристики дендритных клеток. На поверхностной мембране дендритных клеток имеются различные рецепторы и молекулы, которые можно классифицировать по основному механизму действия.

— Рецепторы захвата антигенов, с помощью которых чужеродные белки попадают в дендритные клетки для расщепления на пептиды и презентации другим иммунокомпетентным клеткам: MMR, DЕС-205, FceR, FcgR(CD32, CD64).

— Молекулы презентации антигенов: антигены гистосовместимости I и II классов.

— Рецепторы сигнальных молекул: TNF-R, CD40, TRANCE/RANK-L.

— Рецепторы цитокинов: Cytokine-R, GM-CSF, IL-1, IL-10, TGF-b.

— Рецепторы миграции: CDlla,b,c, CD49d, E-cadherin, CD44, CCR1,5,6,7, CD88.

— Молекулы адгезии и костимуляции: CD50, CD54, CD58, CD80, CD86.

— Другие молекулы: CD2, CD9, CD25, CD83, CD93.

Дендритные клетки продуцируют цитокины, необходимые в

иммунном ответе: IL-12, IL-18, IL-6, IL-15, TNF, Chemokines. Дендритные клетки взаимодействуют с лимфоцитами посредством рецепторно-лигандных соотношений. При этом рецептор может быть как у дендритной клетки, так и у лимфоидной. Рецепторы взаимодействия дендритных клеток и лимфоцитов представлены в таблице.

Опухолеассоциированные антигены являются слабыми, т. е. низкоиммуногенными. С помощью дендритных клеток можно усилить иммунный ответ на слабые опухолевые антигены. С этой целью наращивают в культуре клеток in vitro большое количество дендритных клеток и их нагружают опухолевыми антигенами. Источники антигенов для нагрузки дендритных клеток могут быть разными: лизат опухолевых клеток, рекомбинантные белки, нативные пептиды, синтетические пептиды, мРНК, кДНК. Некоторые исследователи делают гибри-домную клетку из дендритных клеток и опухолевых клеток. Нагружают дендритные клетки антигенами либо простой

morphology and express lymphoid markers, while CDllc"1" dendritic cells have monocytic morphology and express monocytic antigens. Only CDllc"1" dendritic cells can capture antigens.

Molecular characteristics of dendritic cells are presently well known. There are various receptors and molecules on dendritic cell membrane that may be classified by principal mechanism of action.

- Antigen capture receptors responsible for capture of foreign proteins and their transfer into dendritic cells to further undergo splitting into peptides and presentation to other immunocompetent cells: MMR, DEC-205, FceR, FcgR, CD32, CD64.

- Antigen presentation molecules: class I and II histocompatibility antigens.

Signal molecule receptors: TNF-R, CD40,

TRANCE/RANK-L.

- Cytokine receptors: Cytokine-R, GM-CSF, IL-1, IL-10, TGF-b.

- Migration receptors: CDlla,b,c, CD94d, E-cadherin, CD44, CCR1,5,6,7, CD88.

Таблица Table

Молекулы, участвующие во взаимодействии дендритных клеток и лимфоцитов

Molecules participating in interaction of dendritic cells and lymphocytes

Дендритные клетки Лимфоциты

Процесс CD11a

Процесс pacnc MHC Class I MHC Class II )знавания / Recognition TCR TCR

Процесс кости CD80 (B7-1) CD86 (B7-2) CD72 CD24 CD58 CD54 муляции / Costimulation CD28 CTLA-4 CD5 CD24 CD2 LFA-1

Процесс в CD40 RANK

Процесс эги/ CD95 (Fas/APO-1) минации / Elimination CD95-L

Dendritic cells Lymphocytes

инкубацией смеси дендритных клеток и антигена либо трансфектируют липофекцией [8].

Схема создания дендритной вакцины следующая. У больного берут кровь и выделяют моноциты. Их культивируют in vitro в присутствии ГМ-КСФ и интерлейкина-4. При этом из предшественников образуется большое количество зрелых дендритных клеток. Одновременно у больного извлекается опухоль, получается из нее кратковременная культура клеток, и из этих культуральных клеток выделяются пептиды. Затем дендритные клетки инкубируют с опухолевыми пептидами и вводят больному.

С целью определения иммунного ответа, индуцированного дендритными клетками, их инкубируют с лимфоцитами периферической крови больного и тестируют количество образовавшихся цитотоксических Т-лимфоцитов.

На экспериментальных моделях было показано, что противоопухолевые дендритные вакцины индуцируют протек-тивный и терапевтический противоопухолевый иммунитет. В пилотных клинических исследованиях по вакцинации дендритными вакцинами была показана индукция противоопухолевого иммунного ответа и регрессия опухоли у больных с лимфомами и меланомой.

Клинические испытания дендритных вакцин стали возможными после развития методов получения большого количества человеческих дендритных клеток. С этой целью применяется два общих подхода: 1) очистка незрелых предшественников дендритных клеток из периферической крови и 2) in vitro диф-ференцировка дендритных клеток из моноцитов периферической крови или CD34+ гемопоэтических предшественников. Количество циркулирующих незрелых предшественников дендритных клеток в периферической крови составляет менее 0,5 %. Культивируя в течение 5—7 дней прикрепившиеся мо-нонуклеары периферической крови в присутствии ГМ-КСФ и интерлейкина- 4 удается получить около 3—8-106 дендритных клеток из 40 мл крови.

Способность дендритных вакцин индуцировать иммунный ответ исследовалась на здоровых добровольцах. М. Dhodakar и соавт. [3] вводили подкожно 9 здоровым добровольцам дендритные вакцины, направленные против keyhole limper hemo-cyanin (KLH) и столбнячного токсина (СТ), нативные дендритные клетки, KLT или СТ. Введение нативных дендритных клеток или одних антигенов не индуцировало иммунный ответ. Напротив, инъекция дендритных вакцин приводила к индукции иммунных CD4+-T~ хелперных клеток, С'Б4+-Т-ци-тотоксических клеток и Т-клеток памяти. Иммунный ответ наблюдался начиная с 30-го дня после инъекции до 90-го дня.

В настоящее время имеется несколько публикаций о применении дендритных вакцин в иммунотерапии рака у человека. Тем не менее результаты показали эффективность этого метода терапии. Первое исследование дендритных вакцин у человека было посвящено неходжкинским лимфомам [5]. Дендритные клетки нагружали клональным идиотипическим иммуноглобулином, экспрессированным на лимфомных клетках, и они индуцировали образование цитотоксических Т-клеток, имевших клиническую эффективность. У 4 больных с лимфомой низкой степени злокачественности, резистентным ко всем методам химиотерапии, получили лейкоферезом мононуклеары периферической крови. Из них выделили ме-

- Adhesion and costimulation molecules: CD50, CD54, CD58, CD80, CD86.

- Other molecules: CD2, CD9, CD25, CD83, CD93.

The dendritic cells produce cytokines mediating the immune response such as IL-12, IL-18, IL-6, IL-15, TNF, Chemokines.

The dendritic cells interact with lymphocytes through recep-tor-ligand relations. Both dendritic and lymphoid cells can bear receptors. The receptors of dendritic cell-Iymphocyte interactions are summarized in the table.

Tumor-associated antigens are weak, i.e. poorly immunogenic. Dendritic cells can enhance immune response to weak tumor-associated antigens. For this purpose a large amount of dendritic cells are grown in vitro and loaded with tumor antigens. The antigens to load the dendritic cells are taken from various sources such as tumor cell lysate, recombinant proteins, native peptides, synthetic peptides, mRNA, cDNA. Some investigators produce hybridoma cells from dendritic and tumor cells. The dendritic cell loading with antigens is performed by simple incubation of dendritic cells and antigen mixture or by transfection [8].

The following procedure is used to produce dendritic vaccines. Blood is harvested from a patient to isolate monocytes. The monocytes are cultured in vitro in the presence of GM-CSF and interleukine-4 to generate a large amount of mature dendritic cells. At the same time the tumor is removed from the patient to make a short-term cell culture. Then peptides are isolated from this cell culture. The resultant dendritic cells and tumor peptides are then incubated and administered to the patient.

To assess the immune response induced by the dendritic cells the latter are incubated with the patient's peripheral lymphocytes and the number of generated cytotoxic T-lymphocytes is counted.

It was demonstrated experimentally that antitumor dendritic vaccines induce both protective and therapeutic antitumor immunity. Pilot clinical studies of the dendritic vaccines demonstrated that they induced antitumor immune response and tumor regression in patients with lymphoma and melanoma.

The development of methods to produce large amounts of human dendritic cells made possible clinical trials of the dendritic vaccines. There are two general approaches: (1) to purify immature dendritic cell precursors from peripheral blood, and (2) to differentiate dendritic cells from monocytes of peripheral blood or CD34+ hemopoietic precursors in vitro. Circulating peripheral immature precursors of dendritic cells are less than 0.5%. Culture of peripheral mononuclears in the presence of GM-CSF and interleukine-4 for 5-7 days results in generation of about 3-8xl06 dendritic cells from 40 ml blood.

The ability of the dendritic cells to induce immune response was studied in normal volunteers. M.Dhodakar et al. [3] administered subcutaneously to 9 normal volunteers dendritic vaccines against keyhole limper hemocyanin (KLH) and tetanus toxoid (TT), native dendritic cells, KLT and TT. The native dendritic cells and the antigen alone failed to induce immune response. In contrast, the dendritic cell vaccination resulted in induction of immune CD4+ T-helpers, CD8+ T-cytotoxic cells and memory T-cells. The immune response was seen from day 30 through day 19 after injection.

There are few reports about the use of dendritic vaccines in immunotherapy of man. Nevertheless, this therapeutic modality was shown effective. The first human study of dendritic vaccines

тодом градиентного центрифугирования дендритные клетки. Затем дендритные клетки инкубировали в течение ночи с идиотипическим белком. После 3-кратной отмывки дендритные клетки вводили внутривенно больным. Пациенты получили две инъекции с интервалом 1 мес и третью инъекцию через 5—6 мес. У больных отсутствовали какие-либо токсические проявления после введения дендритных клеток, и у всех развивался клеточный и гуморальный иммунитет на введенный контрольный антиген, но не антиидиотипический ответ. У 1 вакцинированного больного мононуклеары периферической крови, стимулированные in vitro идиотипическим белком, были способны лизировать аутологичные опухолевые клетки. Отмечался также клинический ответ. У 1 больного наступила полная ремиссия с регрессией опухолевых узлов. Больной находился в ремиссии до момента публикации статьи (42 мес). У второго больного болезнь была определена с помощью полимеразной цепной реакции при использовании идиотипспецифических праймеров. После вакцинации больной оставался в ремиссии более 36 мес. У двух последних больных была отмечена стабилизация процесса.

Дендритные вакцины применялись также при лечении множественной миеломы [16]. В этих исследованиях дендритные клетки нагружали идиотипическим М-белком. Вакцину вводили внутривенно дважды с месячным интервалом после аутологичной трансплантации костного мозга. Затем больные получали 5 подкожных инъекций идиотипического М-протеина. Авторы отметили хороший клинический результат вакцинотерапии [5]. Н. ВоЫеп и соавт. [2] описали результаты вакцинации больных множественной миеломой дендритными клетками, происшедшими из СБ34+-клеток периферической крови, преймированными пептидами, полученными из М-протеина с помощью переваривания протеазами. Авторы не обнаружили специфического Т-клеточного ответа, хотя у 3 из 7 больных развился гуморальный антиидиотипический ответ. Y. J. Wen и соавт. [19] сообщили о вакцинации 1 больного миеломой дендритными клетками, происшедшими из моноцитов и нагруженными идиотипическим М-протеином. Обнаружили у больного антиидиотипический Т-клеточный ответ и цитотоксичность, но без значительного клинического ответа.

Дендритные вакцины применялись у больных меланомой. F. О. Nestle и соавт. [9] описали иммунизацию 16 больных меланомой дендритными клетками, нагруженными меланомны-ми пептидами или опухолевыми лизатами. Дендритные клетки выращивали из моноцитов периферической крови с помощью ГМ-КСФ и интерлейкина-4. Дендритные клетки преймирова-ли смесью пептидов gplOO, MART-1, тирозиназы, MAGE-1 или MAGE-3 в сочетании с индивидуальными молекулами HLA I класса. Дендритные клетки вводили в непораженный лимфоузел. Больные получали по 6—10 инъекций по 1 млн клеток каждые 1—4 нед. Токсические проявления были минимальные с умеренной реакцией в месте введения. Иммунологический мониторинг выявил кожную реакцию гиперчувствительности замедленного типа у 11 пациентов. В коже больных обнаружили пептидспецифические цитотоксические Т-лим-фоциты. Регрессия опухолей была видна у 5 из 16 больных, включая 2 полных ответа, длящихся свыше 15 мес. М. Т. Lotze и соавт. [7] вакцинировали 6 больных меланомой пептидами, рестриктированными HLA-A2, происшедшими из MART-1,

was performed in patients with non-Hodgkin's lymphoma [5]. Dendritic cells were loaded with clonal idiotypic immunoglobulin expressed on lymphoma cells and induced generation of cytotoxic T-cells that had clinical efficacy. Mononuclears were obtained by leukoferesis from peripheral blood of 4 patients with low-grade lymphoma refractory to all chemotherapy schedules. Dendritic cells were isolated by gradient centrifugation from these cells. The dendritic cells then were incubated overnight with idiotypic protein. After washing three times the dendritic cells were administered intravenously to the patients. The patients received two injections at a 1-month interval and the third injection at 5-6 months. The administration of the dendritic cells had no adverse effects and induced cellular and humoral immunity to the control antigen rather than anti-idiotypic response. In 1 patient peripheral mononuclears stimulated in vitro with idiotypic protein induced lysis of autologous tumor cells with a clinical response. Another patient presented with complete disease regression. The response in this patient was still lasting at the moment of publication (42 months). In the second patient the disease was determined by polymerase chain reaction using idiotype-specific primers. The response in this patient lasted for 36 months after vaccination. The remaining two patients presented with stable disease.

Dendritic vaccines were used in patients with multiple myeloma [16]. In these studies dendritic cells were loaded with idiotypic M-protein. The vaccine was administered intravenously two times with a 1-month interval after autologous bone marrow transplantation. Then the patients received 5 subcutaneous injections of idiotypic M-protein. The authors reported of a good clinical response to the vaccine therapy [5]. H.Bohlen et al. [2] described results of immunizing multiple myeloma patients with dendritic cells from peripheral CD34+ cells primed with peptides that were derived from M-protein by protease digestion. The authors failed to find specific T-cell response though 3 of 7 patients developed humoral anti-idiotypic response. Y.J.Wen et al. [19] reported about vaccination of 1 myeloma patient with dendritic cells of monocytic origin loaded with idiotypic M-protein. The patient presented with anti-idiotypic T-cell response and cytotoxicity but no considerable clinical response.

Dendritic vaccines were used in melanoma. F.O.Nestle et al. [9] described immunization of 16 melanoma patients with dendritic cells loaded with melanoma peptides or tumor lysates. The dendritic cells were cultured from peripheral monocytes with GM-CSF and interleukine-4. Priming was made with mixture of peptides ghlOO, MART-1, tyrosinase, MAGE-1 or MAGE-3 in combination with individual class I HLA molecules. The dendritic cells were administered into an intact lymph node. The patients received 6 to 10 injections 1 million cells each, every 1-4 weeks. Toxicity was minimal, reaction in the site of injection was moderate. Immunological monitoring discovered delayed hypersensitivity skin reaction in 11 patients. Peptide-specific cytotoxic T-lymphocytes were found in the patients' skin. Tumor regression was seen in 5 of 16 patients including 2 complete responses lasting more than 15 months. M.T.Lotze et al. [7] vaccinated 6 melanoma patients with HLA-restricted peptides originating from MART-1, gplOO and tyrosinase. Complete response lasting for more than 1 year was achieved in 1 patient.

B.Thurner et al. [17] administered dendritic vaccine produced

gplOO и тирозиназы. Полная ремиссия продолжительностью более года наблюдалась у 1 больного. В. Thurner и соавт. [17] лечили дендритной вакциной, полученной с использованием пептидов Mage-3A1, 11 больных меланомой IV стадии. Вакцину вводили каждые 14 дней. Первые 3 инъекции делали подкожно и внутрикожно по 3-106 дендритных клеток, затем дважды внутривенно по 6-106 и 12-106. Обнаружили значительную экспрессию CD8+ цитотоксических Т-лимфоцитов, направленных против Mage-3A1, у 8 из 11 больных. Иммунный ответ часто снижался после внутривенных инъекций антигена. Регрессия метастазов была у 6 из 11 пациентов.

F. Valone и соавт. [18] лечили больных раком простаты дендритной вакциной, в которой дендритные клетки преймировали простатической алкалинфосфатазой (ПАФ). 12 больных получили внутривенно по 0,3—1,2-109 дендритных клеток на 1 м2 ежемесячно в течение 3 мес. У всех больных развился Т-клеточный пролиферативный ответ на ПАФ. Ограниченная токсичность была у 3 пациентов. Клинические результаты не сообщались.

М. Salgallar и соавт. [12] пролечили дендритными клетками, преймированными простатаспецифическим мембранным антигеном, связанным с HLA-A2, 82 больных раком предстательной железы. Пациенты получили 6 внутривенных инъекций по 2-107 дендритных клеток с 6-недельным интервалом. Однако только у 2 больных был Т-клеточный ответ к антигену и у 4 пациентов снизились опухолевые маркеры.

Оптимистичные данные по лечению 17 больных метастатической карциномой почки гибридомной дендритной вакциной сообщили A. Kugler и соавт. [6]. Вакцину получили путем слияния опухолевых клеток с аллогенными дендритными клетками. В течение 13 мес после введения вакцины авторы наблюдали регрессию опухоли у 4 пациентов и стабилизацию процесса у 1 больного. Продемонстрировали индукцию рест-риктированного HLA-A2 цитотоксического ответа против Muc-1-антигена.

Таким образом, из представленных данных видно, что дендритные вакцины в некоторых, но не во всех случаях способны создать противоопухолевый иммунный ответ и дать видимый клинический результат. Однако исследования все еще находятся на ранних этапах и можно надеяться, что совершенствование методологии получения дендритных вакцин принесет существенный результат.

ЛИТЕРА ТУРА/REFERENCES

1. Banchereau J., Steinman R. М. // Nature. — 1998. — Vol. 393. — P.

245-252.

2. Boolean H, Diehl V, Teach H. et al. // Blood. - 1997. - Vol. 90. — P.

579a.

3. Dhodapkar М., Steinman R. М., Sapp M. et al. // J. clin. Invest. — 1999.

- Vol. 104. - P. 173-180.

4. HaugtonA. N. // J. exp. Med. - 1994. - Vol. 180. - P. 1-4.

5. Hsu F. J., Engelnan E. G., Levy R. et al. // Nat. Med. — 1996. — Vol. 2.

- P. 52-58.

6. Kugler A., StuhlerG., Walden P. etal. //Ibid. — 2000. — \bl. 6. — P.

352-336.

7. Lotze М. Т., Hellerstedt B., Stolinsky L. et al. 11 Cancer J. Sci. Am. —

1997.-Vol. 3.-P. 109.

8. Liu M. // Nat. Biotechnol. — 1998. — Vol. 16. — P. 335—336.

9. Nestle F. O., Alijagic S., Gilliet M. et al. I I Nat. Med. — 1998. — Vol. 4.

- P. 328-332.

10. Robinson S. P., Patterson S., English N. et al. // Eur. J. Immunol. —

using Mage-3A1 peptides to 11 patients with stage IV melanoma. The vaccine was administered every 14 days. The first three injections were administered subcutaneously and intracuta-neously at 3xl06 dendritic cells to be followed by two intravenous injections at 6xl06 and 12x10 cells. The vaccination resulted in marked expression of CD8+ cytotoxic T-lymphocytes against Mage-3A1 in 8 of 11 patients. The immune response was often reduced after antigen intravenous injections. Metastasis regression was seen in 6 of 11 patients.

F.Valone et al. [18] administered dendritic vaccine consisting of dendritic cells primed with prostatic alkaline phosphatase (PAP) to patients with prostate cancer. 12 patients received intravenously 0.3 to 1.2xl09 dendritic cells per m2 monthly for 3 months. All the patients developed T-cell proliferative response to PAP. Limited toxicity was seen in 3 cases. Clinical results were not reported.

M.Salgallar et al. [12] administered dendritic cells primed with HLA-A2-conjugated prostate-specific membrane antigen to 82 patients with prostate cancer. The patients received 6 intravenous injections at 2xl07 dendritic cells with 6-week intervals. Only 2 patients developed T-cell response to the antigen and a decline in tumor markers was seen in 4 cases.

Optimistic data about dendritic vaccination of 17 patients with metastatic renal carcinoma were reported by A.Kugler et al. [6]. The vaccine was produced by merging tumor cells with allogeneic dendritic cells. After 13 months following'&e vaccination disease response was seen in 4 and disease stabilization in 1 patients. Induction of HLA-A2-restricted cytotoxic response against Muc-1 was demonstrated.

In conclusion, the published data demonstrate that dendritic vaccines can in some but not all cases induce antitumor immune response and have a noticeable clinical response. However, these studies are but an initial stage of research and one may hope that improvement of methodology to produce dendritic vaccines will give a considerable result.

1999. - Vol. 29. - P. 2769-2778.

11. Rosenberg S. A. U In Cancer: Principles and Practice of Oncology.

— 5—th ed. / Eds V. T. Devita, S. Heilman, S. A. Rosenberg. — Philadelphia, 1997. - P. 349-379.

12. Salgallar М., Lodge P. A., Tjou B. A. et al // Proc. Am. Assoc. Cancer Res. - 1998. - Vol. 39. - P. 173 (Abstr.).

13. Santiago—SchwarzF., Belilos E., Diamond B., Carson S. E. //

J. Leukoc. Biol. - 1992. - Vol. 52. - P. 274-281.

14. Steinman R.M., Cohn Z. A. // J. exp. Med. — 1973. — Vol. 137. —

P. 1142-1162.

15. Steinman R.M. // Ann. Rev. Immunol. — 1991. — Vol. 9. — P. 271-296.

16. Timmerman J. М., Levy R. //Ann. Rev. Med. — 1999. — Vol. 50. — P. 507-529.

17. Thurner B., Haendle I., RoderC. etal. // J. exp. Med. — 1999. — Vol. 190. - P. 1669-1678.

18. Valone F., Small E., Peshwa М. V. et al. // Proc. Am. Soc. Cancer Res. - 1998. - Vol. 39. - P. 173 (Abstr.).

19. Wen Y. J., Ling М., Bailey—Wood R., Lim S. H. // Clin. Cancer Res. - 1998. - Vol. 18. - P. 175-182.

Поступила 30.01.2001 / Submitted 30.01.2001