УСТРОЙСТВО ДЛЯ ОЦЕНКИ "ОСТРОЙ" ТОКСИЧНОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА МЕЛКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

Полезная модель относится к области экспериментальной биологии и фармакологии, а именно к устройствам, которые могут быть использованы для оценки «острой» токсичности биологически активных соединений на мелких лабораторных животных - мышах.
Проведение токсикологических исследований необходимо для оценки любых биологически активных веществ, в частности, это обязательный раздел исследований потенциальных лекарственных средств. Такие исследования позволяют установить класс опасности в соответствии с ГОСТ, характер и выраженность повреждающего действия биологически активных веществ на организм экспериментальных животных, выявить чувствительные к воздействию исследуемого фактора органы и системы организма, а также изучить обратимость вызываемых повреждений. Особенно информативными при оценке «острой» токсичности являются первые часы после воздействия исследуемого фактора.
Известно устройство для содержания лабораторных животных (SU 519174), содержит клетку, снабженную лазом, жестко прикрепленного к корпусу камеры, решетчатого дна, задвижки и кормушки с наклонным бункером.
Недостатками данного устройства является неудобство использования и наблюдения за животным, устройство предназначено для содержания преимущественно крыс, экспериментальное животное имеет доступ к корму, что отражается на результатах проводимых исследований.
Известно устройство «Клетка для животных» (RU 161632), состоящее из стенок, крышки с ручкой, основания, на котором закреплена крестообразная перегородка, делящая клетку на 4 части. Закрепление крышки осуществляется гайками-барашками, закручивающимися сверху крышки.
Недостатком данного устройства является сложность конструкции, неудобство и невозможность длительного наблюдения за животными, недостаточное количество отверстий для нормального функционирования жизнедеятельности живого организма.
Прототипом предлагаемой полезной модели являются пластиковые клетки Т-3 для содержания лабораторных животных для оценки «острой» токсичности, описанный в RU 2641380; Сорокина А.В., Алексеева С.В., Немова Е.П. и др. Доклиническое исследование безопасности дипептидного соединения ГБ-115// Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2010. - Т. 73. - №6. - С. 29-32; Иващенко А.В., Яманушкин П.М., Митькин О.Д. и др. Доклиническое изучение безопасности нового фармакологического вещества AV0012 для лечения гепатита С// Экспериментальная и клиническая фармакология.- 2014. - Т.77. - №12. - С. 33-37.
Недостатком прототипа является неудобство использования, ограниченность наблюдения за реакцией животного в ответ на действие исследуемого фактора.
Техническим результатом заявляемой полезной модели является создание устройства для размещения мелких лабораторных животных - мышей в течение нескольких часов, что обеспечивает удобство наблюдения за состоянием животного в первые часы после воздействия исследуемого фактора, что значительно повышает информативность при оценке «острой» токсичности и качество постановки эксперимента.
Указанный технический результат решается тем, что изготовлено из полиметилметакрилата в виде контейнера с пятью отсеками, причем передняя, задняя, внутренние боковые стенки и крышка имеют перфорацию, а в верхней части задней стенки расположены пять фиксаторов.
Полезная модель поясняется подробным описанием и иллюстрациями, на которых изображено:
Фиг. 1 - внешний вид устройства: а) 1- основание; 2- передняя стенка; 3- задняя стенка; 4- внутренние боковые стенки; 5- фиксатор; 6 - крышка; 7- сквозное отверстие; б) фото устройства, 1- основание; 2- передняя стенка; 3 - задняя стенка; 4 - внутренние боковые стенки; 5 - фиксатор; 6- крышка; 7 - перфорация; в) фото устройства, вид сверху; 1- основание; 2- передняя стенка; 3- задняя стенка; 4- внутренние боковые стенки; 5- фиксатор; 6 - крышка; 7- перфорация.
Фиг. 2 - схема устройства с размерами; а) вид сзади; б) вид сверху; в) вид сбоку; г) фрагмент А - вид сзади; д) фрагмент Б - вид сбоку.
Фиг. 3 - фото использования устройства: а) вид сбоку; б) вид сверху.
Устройство представляет собой контейнер из органического стекла - полиметилметакрилата с пятью отсеками (Фиг. 1 а) и состоит из основания 1, передней стенки 2, задней стенки 3, крышки 6 и четырех внутренних боковых стенок 4 для создания отсеков (Фиг. 1 а, б, в). На верхней части задней стенки контейнера имеются фиксаторы 5, обеспечивающие надежное прилегание крышки. Все стенки и крышка выполнены с перфорацией 7 (для нормального функционирования жизнедеятельности опытных животных).
Заявленное устройство для оценки «острой» токсичности биологически активных соединений на мелких лабораторных животных используют следующим образом.
Устройство (Фиг. 1 а, б, в) устанавливают на лабораторном столе в рабочей комнате. На основание 1 укладывают фильтровальную бумагу для визуализации реакций экспериментального животного в ответ на воздействие исследуемого фактора. После введения исследуемого вещества в определенной дозе в отсек контейнера помещают по 2 животных весом до 27 г. После проведения всех манипуляций контейнер накрывают крышкой 6.
Устройство позволяет оценивать воздействие исследуемого фактора, примененного в 5 вариантах/дозах одновременно, используя до 10 животных. Простота в использовании устройства позволяет быть задействованным в эксперименте одному человеку.
Пример выполнения.
50
Проводили определение показателей «острой» токсичности соединения под шифром ИТМ-5 экспресс-методом по В.Б. Прозоровскому на 8 аутбредных мышах-самцах весом 24-27 г (Фиг.3). Данное устройство позволило минимизировать количество животных для определения величины LD - средней эффективной дозы, которая вызывает гибель 50% особей в исследуемой группе.
50
Для выполнения эксперимента было выполнено устройство из органического стекла - полиметилметакрилата с пятью отсеками (Фиг. 2 а, б, в, г, д). С устройства (Фиг. 1 б, в; Фиг.3) сняли крышку 6 и на дно каждого отсека укладывали фильтровальную бумагу. Исследуемое соединение животным вводили внутрибрюшинно в дозах 316, 398, 501, 631 мг/кг. После введения ИТМ-5 животных помещали в отсеки и накрывали крышкой. В течение первых пяти часов проводили наблюдение, оценивая и регистрируя состояние животных: гиперкинезы различной степени выраженности, вплоть до гибели. По окончании наблюдения в течение первых пяти часов выживших особей отсаживали в клетки со свободным доступом к корму и воде для дальнейших наблюдений в течение 14 суток. Из контейнера удаляли фильтровальную бумагу, само устройство подвергали чистке моющим средством. По результатам исследования рассчитывали среднюю эффективную дозу и соответствующий ей размах отклонений от среднего значения. Для соединения ИТМ-5 величина LD оказалась равной 410 (268 ÷ 552) мг/кг.
Применение устройства в эксперименте позволило:
- добиться надежной изоляции мелких лабораторных животных в течение нескольких часов;
- повысить качество работы экспериментатора и точность описания токсических реакций;
- снизить стресс лабораторных животных.
- обеспечить хорошие эстетические свойства, прозрачность и надежную изоляцию подопытных животных друг от друга.
Предлагаемая полезная модель направлена на улучшение качества и удобства наблюдения за лабораторными животными в течение первых часов после воздействия исследуемого фактора, что повышает надежность полученных результатов в ходе проведения токсикологических исследований. Устройство выполнено из органического стекла - полиметилметакрилата. Материал обеспечивает хорошие эстетические свойства, прозрачность, а также надежно изолирует подопытных животных друг от друга.
Устройство просто по конструкции, удобно в работе, надежно в эксплуатации, просто в изготовлении и не требует больших затрат. Устройство промышленно применимо, так как может изготавливаться серийно в виде набора для экспериментальной биологии и фармакологии.