ОРГАНОИДНО-НАПРАВЛЕННЫЕ НАНОНОСИТЕЛИ

1. Способ доставки нуклеиновой кислоты к органоиду растительной клетки, не являющемуся ядром, включающий воздействие на клетку композицией, содержащей по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту и по меньшей мере один органоидно-направленный наноноситель, при котором по меньшей мере один органоидно-направленный наноноситель доставляет по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту через клеточную мембрану клетки и в органоид, не являющийся ядром и являющийся хлоропластом, при этом органоидно-направленный наноноситель является полипептидом, имеющим последовательность транзитного пептида хлоропласта, отношение зарядов от приблизительно 2 до приблизительно 4,2 и гидрофильность от приблизительно 0 до приблизительно -0,2.
2. Способ по п. 1, в котором нуклеиновая кислота является ДНК.
3. Способ по п. 1 или 2, в котором органоидно-направленный наноноситель является полипептидом, содержащим последовательность, выбираемую из:
MGGCVSTPKSCVGAKLR (SEQ ID NO: 6);
MQTLTASSSVSSIQRHRPHPAGRRSSSVTFS (SEQ ID NO: 7);
MKNPPSSFASGFGIR (SEQ ID NO: 8);
MAALIPAIASLPRAQVEKPHPMPVSTRPGLVS (SEQ ID NO: 9); и
MSSPPPLFTSCLPASSPSIRRDSTSGSVTSPLR (SEQ ID NO: 10).
4. Способ получения генетически модифицированной растительной клетки, включающий воздействие на растительную клетку, содержащую органоид, не являющийся ядром, композицией, включающей по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту и по меньшей мере один органоидно-направленный наноноситель, при этом по меньшей мере один органоидно-направленный наноноситель доставляет по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту через клеточную мембрану клетки и в органоид, не являющийся ядром, с тем, чтобы трансфицировать указанный органоид, при этом органоид не являющийся ядром,
является хлоропластом, а органоидно-направленный наноноситель является полипептидом с последовательностью транзитного пептида хлоропласта, отношением зарядов от приблизительно 2 до приблизительно 4,2 и гидрофильностью от приблизительно 0 до приблизительно -0,2.
5. Способ по п. 4, в котором растительная клетка является эмбриогенной микроспорой.
6. Способ получения генетически модифицированного растения, включающий получение генетически модифицированной растительной клетки способом по п. 4 или 5 и выращивание растения из генетически модифицированной растительной клетки.
7. Хлоропласт-направленный наноноситель, являющийся полипептидом с последовательностью транзитного пептида хлоропласта, отношением зарядов от приблизительно 2 до приблизительно 4,2 и гидрофильностью от приблизительно 0 до приблизительно -0,2.
8. Хлоропласт-направленный наноноситель по п. 7, в котором полипептид имеет последовательность, выбираемую из:
MGGCVSTPKSCVGAKLR (SEQ ID NO: 6);
MQTLTASSSVSSIQRHRPHPAGRRSSSVTFS (SEQ ID NO: 7);
MKNPPSSFASGFGIR (SEQ ID NO: 8);
MAALIPAIASLPRAQVEKPHPMPVSTRPGLVS (SEQ ID NO: 9); и
MSSPPPLFTSCLPASSPSIRRDSTSGSVTSPLR (SEQ ID NO: 10).
9. Способ идентификации полипептида хлоропласт-направленного наноносителя, включающий:
а) выбор из базы данных пептидных последовательностей первой разновидности сигнальных пептидных последовательностей, специфичных для хлоропластов,
б) выбор из первой разновидности сигнальных пептидных последовательностей второй разновидности пептидных последовательностей с суммарным положительным зарядом по меньшей мере 2,0,
в) выбор из второй разновидности пептидных последовательностей третьей разновидности пептидных последовательностей со средней гидрофильностью не более 0,
г) воздействие на клетку пептидом с последовательностью, выбираемой из третьей разновидности пептидных последовательностей, и идентификация пептида как полипептида хлоропласт-направленного наноносителя, если пептид проникает внутрь мембраны клетки и локализуется в хлоропласте клетки.
10. Способ по п. 9, в котором стадии от а) до в) проводят на компьютере.
11. Способ по п. 9 или 10, включающий между стадией в) и стадией г) дополнительную стадию выбора из третьей разновидности пептидных последовательностей четвертой разновидности пептидных последовательностей с не более, чем 35 остатками, и в котором стадия г) включает воздействие на клетку пептида с последовательностью, выбранной из четвертой разновидности пептидных последовательностей.
12. Способ по п. 11, в котором дополнительную стадию проводят на компьютере.