СПОСОБ ДЕТЕКТИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМА И НАБОР ДЛЯ ДЕТЕКТИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМА

1. Способ получения измеряемого образца для детектирования живых клеток микроорганизма в тестируемом образце при помощи проточной цитометрии, который включает следующие стадии:
а) стадия обработки тестируемого образца ферментом, обладающим активностью по разрушению клеток, отличающихся от клеток микроорганизма, коллоидных частиц белков или липидов, присутствующих в исследуемом образце, и
b) стадия обработки тестируемого образца ядом топоизомеразы и/или ядом ДНК-гиразы.
2. Способ по п.1, в котором стадию b) проводят после стадии а).
3. Способ по п.1, в котором тестируемый образец состоит из любого: молока, молочного продукта, пищевого продукта, полученного при использовании молока или молочного продукта в качестве исходного материала, образца крови, образца мочи, образца спинно-мозговой жидкости, образца синовинальной жидкости и образца плевральной жидкости.
4. Способ по п.2, в котором тестируемый образец состоит из любого: молока, молочного продукта, пищевого продукта, полученного при использовании молока или молочного продукта в качестве исходного материала, образца крови, образца мочи, образца спинно-мозговой жидкости, образца синовинальной жидкости и образца плевральной жидкости.
5. Способ по п.1, в котором микроорганизм представляет собой бактерию.
6. Способ по п.2, в котором микроорганизм представляет собой бактерию.
7. Способ по п.3, в котором микроорганизм представляет собой бактерию.
8. Способ по п.4, в котором микроорганизм представляет собой бактерию.
9. Способ по п.1, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
10. Способ по п.2, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
11. Способ по п.3, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
12. Способ по п.4, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
13. Способ по п.5, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
14. Способ по п.6, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
15. Способ по п.7, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
16. Способ по п.8, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
17. Способ по любому из пп.1-16, в котором яд топоизомеразы выбирают из амсакрина, камптотецина, доксорубицина, эллиптицина, этопозида, митоксантрона, саинтопина, топотекана и СР-115953.
18. Способ по любому из пп.1-16, в котором яд ДНК-гиразы выбирают из ципрофлоксацина, офлоксацина, эноксацина, пефлоксацина, флероксацина, норфлоксацина, налидиксовой кислоты, оксолиновой кислоты и пиромидиновой кислоты.
19. Способ по любому из пп.1-16, в котором яд топоизомеразы представляет собой этидий моноазид, и способ включает стадию подвергания тестируемого образца, к которому добавляют этидий моноазид, облучению видимым светом.
20. Способ по любому из пп.1-16, который дополнительно включает следующую стадию с):
с) стадия обработки тестируемого образца, обработанного на стадиях а) и b), агентом, окрашивающим ядра.
21. Способ по п.17, который дополнительно включает следующую стадию с):
с) стадия обработки тестируемого образца, обработанного на стадиях а) и b), агентом, окрашивающим ядра.
22. Способ по п.18, который дополнительно включает следующую стадию с):
с) стадия обработки тестируемого образца, обработанного на стадиях а) и b), агентом, окрашивающим ядра.
23. Способ по п.19, который дополнительно включает следующую стадию с):
с) стадия обработки тестируемого образца, обработанного на стадиях а) и b), агентом, окрашивающим ядра.
24. Способ по п.20, в котором агент, окрашивающий ядра, включает первый окрашивающий агент, который может проникать через клеточные стенки живых клеток, поврежденных клеток и мертвых клеток, и второй окрашивающий агент, который более легко проникает через клеточные стенки мертвых клеток, по сравнению с клеточными стенками живых клеток и поврежденных клеток, по сравнению с первым окрашивающим агентом.
25. Способ по любому из пп.21-23, в котором агент, окрашивающий ядра, включает первый окрашивающий агент, который может проникать через клеточные стенки живых клеток, поврежденных клеток и мертвых клеток, и второй окрашивающий агент, который более легко проникает через клеточные стенки мертвых клеток, по сравнению с клеточными стенками живых клеток и поврежденных клеток, по сравнению с первым окрашивающим агентом.
26. Способ по п.20, в котором агент, окрашивающий ядра, состоит из пропидий йодида и SYTO9.
27. Способ по любому из пп.21-24, в котором агент, окрашивающий ядра, состоит из пропидий йодида и SYTO9.
28. Способ по п.25, в котором агент, окрашивающий ядра, состоит из пропидий йодида и SYTO9.
29. Способ детектирования живых клеток микроорганизма в тестируемом образце при помощи проточной цитометрии, который включает следующие стадии:
а) стадия обработки тестируемого образца ферментом, обладающим активностью с точки зрения разрушения клеток, отличающихся от клеток микроорганизма, коллоидных частиц белков или липидов, присутствующих в исследуемом образце,
b) стадия обработки тестируемого образца ядом топоизомеразы и/или ядом ДНК-гиразы,
с) стадия обработки тестируемого образца, обработанного на стадиях а) и b), агентом, окрашивающим ядра, и
d) стадия детектирования микроорганизмов в тестируемом образце, обработанном агентом, окрашивающим ядра, проточной цитометрией.
30. Способ по п.29, в котором стадию b) проводят после стадии а).
31. Способ по п.29, в котором тестируемый образец состоит из любого молока, молочного продукта, пищевого продукта, полученного при использовании молока или молочного продукта в качестве исходного материала, образца крови, образца мочи, образца спинно-мозговой жидкости, образца синовинальной жидкости и образца плевральной жидкости.
32. Способ по п.30, в котором тестируемый образец состоит из любого молока, молочного продукта, пищевого продукта, полученного при использовании молока или молочного продукта в качестве исходного материала, образца крови, образца мочи, образца спинно-мозговой жидкости, образца синовинальной жидкости и образца плевральной жидкости.
33. Способ по п.29, в котором микроорганизм представляет собой бактерию.
34. Способ по п.30, в котором микроорганизм представляет собой бактерию.
35. Способ по п.31, в котором микроорганизм представляет собой бактерию.
36. Способ по п.32, в котором микроорганизм представляет собой бактерию.
37. Способ по п.29, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
38. Способ по п.30, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
39. Способ по п.31, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
40. Способ по п.32, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
41. Способ по п.33, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
42. Способ по п.34, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
43. Способ по п.35, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
44. Способ по п.36, в котором фермент выбирают из липолитических ферментов и протеаз.
45. Способ по любому из пп.29-44, в котором яд топоизомеразы выбирают из амсакрина, камптотецина, доксорубицина, эллиптицина, этопозида, митоксантрона, саинтопина, топотекана и СР-115953.
46. Способ по любому из пп.29-44, в котором яд ДНК-гиразы выбирают из ципрофлоксацина, офлоксацина, эноксацина, пефлоксацина, флероксацина, норфлоксацина, налидиксовой кислоты, оксолиновой кислоты и пиромидиновой кислоты.
47. Способ по любому из пп.29-44, в котором яд топоизомеразы представляет собой этидий моноазид, и способ включает стадию подвергания тестируемого образца, к которому добавляют этидий моноазид, облучению видимым светом.
48. Способ по любому из пп.29-44, в котором агент, окрашивающий ядра, включает первый окрашивающий агент, который может проникать через клеточные стенки живых клеток, поврежденных клеток и мертвых клеток, и второй окрашивающий агент, который более легко проникает через клеточные стенки мертвых клеток, по сравнению с клеточными стенками живых клеток и поврежденных клеток, по сравнению с первым окрашивающим агентом.
49. Способ по п.45, в котором агент, окрашивающий ядра, включает первый окрашивающий агент, который может проникать через клеточные стенки живых клеток, поврежденных клеток и мертвых клеток, и второй окрашивающий агент, который более легко проникает через клеточные стенки мертвых клеток, по сравнению с клеточными стенками живых клеток и поврежденных клеток, по сравнению с первым окрашивающим агентом.
50. Способ по п.46, в котором агент, окрашивающий ядра, включает первый окрашивающий агент, который может проникать через клеточные стенки живых клеток, поврежденных клеток и мертвых клеток, и второй окрашивающий агент, который более легко проникает через клеточные стенки мертвых клеток, по сравнению с клеточными стенками живых клеток и поврежденных клеток, по сравнению с первым окрашивающим агентом.
51. Способ по п.47, в котором агент, окрашивающий ядра, включает первый окрашивающий агент, который может проникать через клеточные стенки живых клеток, поврежденных клеток и мертвых клеток, и второй окрашивающий агент, который более легко проникает через клеточные стенки мертвых клеток, по сравнению с клеточными стенками живых клеток и поврежденных клеток, по сравнению с первым окрашивающим агентом.
52. Способ по любому из пп.29-44, в котором агент, окрашивающий ядра, состоит из пропидий йодида и SYTO9.
53. Способ по п.45, в котором агент, окрашивающий ядра, состоит из пропидий йодида и SYTO9.
54. Способ по п.46, в котором агент, окрашивающий ядра, состоит из пропидий йодида и SYTO9.
55. Способ по п.47, в котором агент, окрашивающий ядра, состоит из пропидий йодида и SYTO9.
56. Способ по п.48, в котором агент, окрашивающий ядра, состоит из пропидий йодида и SYTO9.
57. Способ по любому из пп.49-51, в котором агент, окрашивающий ядра, состоит из пропидий йодида и SYTO9.
58. Набор для получения измеряемого образца для детектирования живых клеток, поврежденных клеток и мертвых клеток микроорганизма в тестируемом образце при использовании проточной цитометрии, который включает следующие элементы: фермент, выбранный из липолитических ферментов и протеаз, яд топоизомеразы и/или яд ДНК-гиразы и агенты, окрашивающие ядра.
59. Набор по п.58, в котором яд топоизомеразы выбирают из амсакрина, камптотецина, доксорубицина, эллиптицина, этопозида, митоксантрона, саинтопина, топотекана и СР-115953.
60. Набор по п.58, в котором яд ДНК-гиразы выбирают из ципрофлоксацина, офлоксацина, эноксацина, пефлоксацина, флероксацина, норфлоксацина, налидиксовой кислоты, оксолиновой кислоты и пиромидиновой кислоты.
61. Набор по п.58, в котором яд топоизомеразы представляет собой этидий моноазид.