Сравнительная оценка структурных изменений лимфоидных органов при различных способах экспериментального токсического селенового воздействия

Структура первичной опухоли и метастазов в мочеточнике была практически идентична и соответствовала инфильтративному протоковому раку молочной железы 3 степени гистологической злокачественности. Опухолевые клетки первичной опухоли также имели интенсивную ядерную экспрессию ЕЯ, не экспрессировали Р§Я и белок Нег2/пеи. Морфологические картины метастатической и первичной опухолей представлены на рис. 1, 2.

Рис. 1. Гистологическая структура (А), экспрессия цитокератина 7 (Б) и антигена ВСА-225 (В) в метастазе рака молочной железы в мочеточнике. Окр. гематоксилином и эозином (А), иммуногистохимические реакции (Б, В). Микрофото. Х 200.

т « ^  V. ^ % ф,

> * ' * % <> ' •' * • а* »."* * 'Тф 4 * Ч і Ajftr 6

Рис. 2. Гистологическая структура (А) и экспрессия рецепторов эстрогенов в первичной опухоли молочной железы (Б). Окр. гематоксилином и эозином (А), иммуногистохимическая реакция (Б). Микрофото. Х 200.

Первые доступные в литературе описания метастазирова-ния карцином различных локализаций в мочеточник приведены в работе Presman D. et al [10]. Однако до настоящего времени общее число опубликованных наблюдений не превышает 200 и большинство из них сделаны на аутопсийном материале [4,10,12]. Среди первичных локализаций карцином, метастазирующих в мочевыводящие пути, по данным Richie J.P. et al [11] большую часть случаев составил рак молочной железы (10 случаев), другими первичными локализациями были ободочная или прямая кишка (7), шейка матки (6), простата (6) и другие из общего числа 46 наблюдений. В серии 215 аутопсий пациенток, умерших от рака молочной железы, Grabstald H. et al [7] выявили 42 (18,3%) случая метастазирования в мочеполовые органы, из них 9,8% составили метастазы в почках, 6,4% - в мочеточниках, 2,1% - в мочевом пузыре. При этом менее чем 5% пациенток имели при жизни симптомы поражения мочевыделительной системы. Случай первичного проявления рака молочной железы метастазами в мочеточник описывают Hudolin T. et al [8]. Авторы наблюдали пациентку в возрасте 59 лет, у которой имелись боли в правой поясничной области, лихорадка. Диагностирован стеноз мочеточника на протяжении 1 см, выполнено наложение нефростомы с последующей резекцией стенозированного участка. При морфологическом исследовании диагностирована инфильтрация стенозированного участка опухолевыми клетками с экспрессией цитокератинов и ER. Первичной опухоли в молочных железах и других метастатических очагов вначале не найдено. Обнаружена первичная опухоль и метастазы в левые надключичные лимфоуз-

лы через 11 месяцев. Многими авторами указывается на гормональную чувствительность опухолевых клеток (экспрессию рецепторов половых стероидов).

В зарубежной и отечественной литературе приведены наблюдения метастазирования рака молочной железы и в другие органы: в тело матки, прямую кишку, околоушную слюнную железу, желудок, вульву, желчный пузырь, глазное яблоко, коленный сустав, червеобразный отросток [1,2,5,6,9]. Нами ранее описано наблюдение метастазирования рака молочной железы с нейроэндокринной дифференцировкой в кожу головы через 9 лет после удаления первичной опухоли [3].

Приведенное наблюдение, по нашему мнению, представляет несомненный практический интерес, дополняя имеющиеся сведения и представления и феноменах, нередко наблюдаемых при метастазировании злокачественных опухолей.

Работа выполнена при поддержке Федеральным грантом в рамках ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» (госконтракт № 02.740.11.0712

Литература

1. Маммология / Вишневская Я.В. [и др], 2006.- №1.- С. 4-9.

2. Пиголкин, Ю.И. / Пиголкин Ю.И., Должанский О.В., Костин А.Ю. // Архив патол, 2008.- Т.- 70.- №3.- С. 46-48.

3. Матер. III Всероссийской конференции «Клиническая морфология новообразований эндокринных желез» / Корсакова

Н. А. [и др.].- М., 2010.- С. 63-67.

4. Nepron / Akmal M. [et al.], 1986.- Vol. 42.- P. 23-28.

5. Gagnon Y., Tetu B. // Cancer, 1989.- Vol. 64.- P. 892-898.

6. Gialas I., Petsis D., Bogdanos I. et al. // J BUON, 2002.-Vol. 7.- P. 283-285.

7. Grabstald Y., Kaufman R. // J. Urol, 1969.- Vol. 102.-P. 569-576.

8. Hudolin T., Nola N., Milas I. et al. // Breast, 2004.- Vol. 13.-P. 530-532.

9. Murguia E., Quiroga D., Canteros G. et al. // J. Hepatobil. Pancreat. Surg, 2006.- Vol.13.- №6.- P. 591-593.

10. Pressman D., Ehrlich L. // J. Urol, 1948.- Vol. 59.- P. 312325.

11. Recloux P., Weiser M., Piccart M. et al. // Cancer, 1988.-Vol.61.- P. 1904-1907.

12. Zunarelli T., Pollastri C.A., Calo M. et al. // Pathologica, 1995.- Vol. 87.- P. 712-714.

LATENT MAMMARY GLAND CANCER WITH METASTASIS IN URETER

A.A. DOLZHIKOV, T.S. MUKHINA, S.L. LUGOVSKOY, P.M. BYKOV

Belgorod State University, Research and Educational Centre of Applied Immune Morphology and Cytogenetics

The article presents the observation of undoubted practical interest, complementing the existing information and representations and phenomena, frequently observed in metastatic tumors.

Key words: mammary gland, ureter, cancer, metastasis.

УДК: 616.42 - 092.9: 546.23

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА СТРУКТУРНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ ЛИМФОИДНЫХ ОРГАНОВ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБАХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ТОКСИЧЕСКОГО СЕЛЕНОВОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ

О.В. НИКИТЕНКО, И.Н. ПУТАЛОВА*

Введение селенита натрия в токсической дозе в течение короткого периода (5 суток) вызывает выраженные структурные преобразования тимуса, селезенки, подвздошных лимфатических узлов, которые приводят к их функциональной недостаточности, о чем свидетельствует развитие синдрома эндогенной интоксикации в организме. После отмены препарата отмечены признаки восстановления в подвздошном лимфатическом узле и тимусе, которые могут указывать на наличие резервов в организме и возможность адаптации к измененным метаболическим процессам.

Ключевые слова: тимус, селезенка, подвздошный лимфатический узел, селенит натрия, пероральное введение, внутрибрюшинное введение.

ГОУ ВПО «Омская государственная медицинская академия» Минздрав-соцразвития России, кафедра анатомии человека, 644043, г. Омск, ул. Партизанская, 20, 8 (3812) 24-43-84

Современные неблагоприятные экологические условия окружающей среды приводят к загрязнению внутренней среды организма, при этом одними из первых на экзогенные влияния реагируют органы лимфоидной системы (тимус, селезенка, лимфатические узлы), которые участвуют в поддержании постоянства внутренней среды организма и имеют высокие потенциальные возможности в обеспечении процессов адаптации и компенсации при различных негативных воздействиях [3,6,12]. Изучением влияния экологических факторов на эндоэкологическую среду организма, занимается экологическая лимфология [3]. Большое внимание в исследованиях по данному научному направлению уделяется воздействию на организм токсических веществ, однако в представленных работах отсутствуют сведения о действии микроэлемента селена в токсической дозе на структуру и функции лимфоидных органов.

Селен является наиболее действенным среди биоантиоксидантов фактором защиты от развития различных патологических состояний и неотъемлемым компонентом процессов эндоэколо-гической реабилитации организма [1,15]. Вместе с тем, селен может проявлять себя как прооксидант, при избыточном поступлении в организм соединения селена, особенно неорганические, оказывают негативное влияние на организм [4,13]. Известно, что порог между терапевтической и токсической дозами селена не определен, поэтому неконтролируемое применение селенсодержащих препаратов может приводить к передозировке. Также отравление селеном возможно у людей, проживающих на территориях с высоким содержанием селена в почвах и водах, работающих на предприятиях химической, металлургической промышленностей [5,14].

Цель исслеования — выявление особенностей структурнофункциональных перестроек лимфоидных органов (тимуса, селезенки, подвздошного лимфатического узла) при пероральном и внутрибрюшинном способах введения селенита натрия в токсической дозе и после его отмены.

Материалы и методы исследования. В эксперименте использовали 87 белых крыс-самцов линии Wistar. Животные были разделены на три группы. Первая группа (контроля) состояла из 10 интактных животных. Животные второй и третьей групп (по 30 крыс) получали 1 раз в день селенит натрия, из расчета 5 мг/кг массы животного, что соответствует токсической дозе [11]. Животным второй группы селенит натрия вводили перорально, третьей - внутрибрюшинно. Вторая группа животных служила группой сравнения для третьей группы животных.

Объектом исследования служили тимус, селезенка, подвздошный лимфатический узел. Забой животных проводили на 2 сутки (однократное введение препарата), 6 (пятикратное введение) и 14 сутки эксперимента (9 сутки после отмены).

Материал подвергали гистологической обработке по стандартной методике (фиксировали в жидкости Теллесницкого, обезвоживали и обезжиривали в серии восходящих спиртов, просветляли в ксилолах, заливали в парафин-воск, на ротационном микротоме изготавливали срезы толщиной 10 и 5 мкм), срезы окрашивали гематоксилином и эозином, азур II - эозином [7,9]. Анализ структурных и клеточных элементов производили с помощью МБС-10, микроскопа ЛОМО Микмед-2.

Регистрацию ВНиСММ плазмы крови осуществляли по методу М.Я. Малаховой [8] в ультрафиолетовой области спектра на спектрофотометре ЛОМО СФ - 26.

Количественные данные подвергали статистической обработке с использованием пакета прикладных программ 8ТЛТ18Т1СЛ 6,0. На первом этапе статистического анализа проводили тест на нормальность распределения признаков (критерии Колмогорова-Смирнова, Шапиро-Уилка). Статистическую обработку проводили по методике, применяемой для нормального распределения признаков. Различия между независимыми выборками определяли с использованием ^теста. Критическая величина значимости различий принята на уровне р<0,05 [2,10].

Результаты и их обсуждение. На 2 сутки после перораль-ного введения селенита натрия и до конца эксперимента животные выглядели малоактивными, неохотно принимали пищу. Летальных исходов животных в этой группе не было. В группе после внутрибрюшинного введения отмечали ухудшение общего состояния крыс с первых суток, летальность животных в первые два дня составила 36%.

После однократного перорального введения селенита натрия микроанатомическая организация тимуса и селезенки соот-

ветствует контролю. Напротив, после внутрибрюшинного введения препарата уже на 2 сутки отметили уменьшение значений морфометрических показателей: в тимусе - общей площади среза, площади коркового вещества (рис. 1); в селезенке - уменьшение площадей периартериальных лимфоидных муфт и вторичных лимфоидных узелков. В клеточном составе изученных органов у животных этой группы определяли меньшее количество клеток лимфоидного ряда и, наоборот, большее - макрофагов и дегенерирующих клеток, чем в группе сравнения. Это указывает на более ранние и выраженные инволютивные изменения в тимусе и селезенке при внутрибрюшинном введении препарата в сравнении с пероральным, что может быть обусловлено особенностью лимфооттока из брюшинной полости.

После однократного внутрибрюшинного введения селенита натрия отмечали, что площадь подвздошного лимфатического узла в 2 раза больше, чем в контроле и в группе сравнения, за счет всех структурных компонентов. Сохраняется, как в контроле, промежуточный морфотип узла, а после перорального введения он меняется на компактный. Это обусловлено тем, что при внутрибрюшинном введении узел является регионарным, а при пероральном - отдаленным. В первом случае он находится в состоянии напряжения, и основная его функция - дренажно-детоксикационная, с целью максимальной разгрузки региона, а во втором - отражает системную реакцию и состояние токсического прессинга на организм, поэтому доминирует детоксикационная функция.

Рис 1. Уменьшение площади коркового вещества тимуса на 2 сутки после внутрибрюшинного введения селенита натрия. Окраска гематоксилином и эозином. Об.Ю, ок.15.

При биохимическом исследовании в плазме крови у животных обеих экспериментальных групп выявили увеличение уровня ВНиСММ в спектре длин волн, где регистрируются вещества катаболического происхождения, что указывает на наличие уже в этот период в организме эндогенной интоксикации.

После пятикратного перорального введения селенита натрия изменения в тимусе соответствуют признакам акциденталь-ной инволюции: снижены (в 2 раза) показатели общей площади среза, площади коркового и мозгового веществ, уменьшены площади капсулы и корковых трабекул. Во всех структурнофункциональных зонах тимуса уменьшилось число лимфоидных клеток, возросло число макрофагов и дегенерирующих клеток. Однако на 6 сутки после внутрибрюшинного введения селенита натрия признаки инволюции более выражены: значение площади коркового вещества меньше контроля почти в 3 раза, а показателей в группе сравнения - в 1,5 раза.

В селезенке в этот период после перорального введения селена в белой пульпе увеличивается площадь вторичных лимфоидных узелков, за счет маргинальной зоны, в её клеточном составе возрастает число малых лимфоцитов почти в 2 раза (рис.2). После внутрибрюшинного введения селена на 6 сутки выявлено, что общая площадь среза и площадь красной пульпы её больше, чем в группе сравнения, а площадь лимфоидной паренхимы и её структурных компонентов, наоборот, имеют меньшие значения. Эти преобразования в селезенке после могут указывать на усиление ее детоксикационной функции. При этом при внутрибрю-шинном введении препарата селезенка находится в более напряженном состоянии, так как токсичные продукты в неё поступают непосредственно и опосредованно.

Рис.2. Увеличение площади вторичных лимфоидных узелков селезенки за счет маргинальной зоны на 6 сутки после перорального введения селенита натрия. Окраска гематоксилином и эозином. Об.10, ок.15.

В подвздошном лимфатическом узле на 6 сутки после перо-рального введения обнаружены положительные сдвиги: увеличение площади коркового вещества (в 1,5 раза) и количества лимфоидных клеток в нем, преобладание Т-зависимой зоны, компактный морфо-тип. После пятикратного внутрибрюшинного введения препарата общая площадь и площадь всех структурных компонентов узла больше (более чем в 2 раза), чем при пероральном введении (рис. 3). Преобразования в узле косвенно указывают на возросшую необходимость усиления биологической обработки афферентной лимфы, и эти изменения носят компенсаторный характер. В организме в этот период сохраняется эндотоксикоз: в плазме крови среднее суммарное значение экстинкций ВНиСММ и значения экстинкций в спектре катаболического пула остаются увеличенными.

Через 9 суток после отмены перорального введения селенита натрия структура тимуса не восстанавливается, вместе с тем, в мозговом веществе обнаружено увеличение числа средних лимфоцитов, возвращение значения площади капсулы к контрольным. После отмены внутрибрюшинного введения отмечали увеличение площади коркового вещества, в субкапсулярной зоне определяли увеличение числа средних и малых лимфоцитов, восстановление площади капсулы до контрольных значений. Эти данные указывают на возможность обратимости инволюции тимуса. Однако следует отметить, что деструктивные процессы в тимусе еще преобладают над репаративными: значение общей площади среза, площади структурных компонентов и количество лимфоидных клеток в них остается меньше контроля.

Рис.3. Компактный морфотип подвздошного лимфатического узла, преобладание паракортикальной (Т-зависимой) зоны на 6 сутки после внутрибрюшинного введения селенита натрия. Окраска гематоксилином и эозином. Об.10, ок.15.

В селезенке в этот период в обеих экспериментальных группах обнаруживали уменьшение значения общей площади среза, площадей красной и белой пульпы, в структурнофункциональных зонах сокращение числа лимфоидных клеток, сохранение на высоких цифрах количества дегенерирующих клеток. Можно предположить, что селезенка находится в состоянии истощения, потому что, с одной стороны, она использовала функциональные возможности в начале эксперимента, а, с другой стороны, концентрация ВНиСММ в крови в этот период достигает максимальных значений.

В подвздошном лимфатическом узле на 14 сутки эксперимента после перорального и внутрибрюшинного введений селенита натрия отмечали восстановление структуры: общая площадь среза достигает контрольных значений, возрастает площадь мозгового вещества, восстанавливается площадь синусной системы. Эти факты могут свидетельствовать о снижении токсического прессинга в регионе лимфосбора, причем в более благоприятном положении находится лимфатический узел после внутрибрю-шинного способа введения.

Заключение. Таким образом, токсические дозы селенита натрия, независимо от путей введения в организм подопытного животного, вызывают стереотипные структурно-клеточные преобразования первичного и вторичных лимфоидных органов, которые являются проявлениями общего адаптационного синдрома в ответ на стрессовую ситуацию; направленность изменений зависят как от способа и кратности введения препарата, так и функциональной принадлежности органов.

Литература

1. Барабой, В.А. Успехи современной биологии / В. А. Бврвьова, 2004.- Т.124.- №2.- С. 157-168.

2. Боровиков, В. STATISTICA. Искусство анализа данных на компьютере / В. Боровиков.- Спб.: Питер, 2003.- 688с.

3. Бородин, Ю.И. Фундаментальные проблемы лимфологии и клеточной биологии / Ю.И. Бородин.- Новосибирск, 2008.- С. 54-56.

4. Бун, М.М. Токсиколого-гигиеническая оценка биологического действия гексафторида селена: Автореф. дис. ... кан. биол. наук / М.М. Бун.- Иркутск, 2005.- 30 с.

5. Ильин, В.Б. Микроэлементы и тяжелые металлы в почвах и растениях Новосибирской области / В.Б. Ильин, А.И. Сысо.-Новосибирск: СО РАМН, 2001.- 229 с.

6. Коненков, В.И. Проблемы саногенного и патогенного эффектов эндо- и экзоэкологического воздействия на внутреннюю среду организма / В.И. Коненков.- Чолпон-Ата, 2009.-С.210-212.

7. Лилли, Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лилли.- М.: Мир, 1969.- 645с.

8. Малахова, М.Я. Эфферентная терапия / М.Я. Малахова, 1995.- Т.1, №1.- С. 61-64.

9. Меркулов, Г.А. Курс патогистологической техники / Г. А. Меркулов.- Л.: Медицина, 1969.- 424 с.

10. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва.- М., Медиа Сфера, 2006.- 312с.

11. Селен: совместное издание Программы ООН по окружающей среде, МОТ и ВОЗ (Гигиенические критерии состояния окружающей среды ВОЗ №58).- М.: Медицина, 1989.- 270 с.

12. Селятицкая, В.Г. Эндокринно-лимфоидные отношения в динамике адаптативных процессов / В.Г. Селятицкая, Л.А. Обухова.- Новосибирск: СО РАМН, 2001.- 168с.

13. Тутельян, В.А. Селен в организме человека: метаболизм, антиоксидантные свойства, роль в канцерогенезе / В.А. Тутельян и др.- М.: РАМН, 2002.- 220с.

14. Юшков, Г.Г. Гигиена и санитария / Г.Г. Юшков [и др.], 2005.- №1.- С.62-64.

15. Rayman, M. // Lancet, 2000.- V.356.- P.233-241.

COMPARATIVE ESTIMATION OF STRUCTURAL CHANGES IN LYMPHOID ORGANS AT DIFFERENT WAYS OF EXPERIMENTAL SELENIUM TOXIC EFFECTS

O.V. NIKITENKO, I.N. PUTALOVA Omsk State Medical Academy, Chair of Anthroponomy

The introduction of sodium selenit in a toxic dose for a short period (5 days) causes pronounced structural changes of the thymus, spleen, iliac lymph nodes, which lead to their functional insufficiency, which are evidence of the development of endogenous intoxication. After its cancellation signs of recovery in the iliac lymph node and thymus are marked, this may indicate the existence of reserves in the organism and the ability of adaptation to altered metabolic processes.

Key words: thymus, spleen, iliac lymph node, sodium selenit, peroral administration, intraperitoneal injection.