2
СПОСОБ НОРМАЛИЗАЦИИ УРОВНЯ α АНТИПЛАЗМИНА ПРИ АНЕМИИ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ
METHOD OF NORMALISING ANTIPLASMIN LEVEL IN ANEMIA OF NEWBORN CALVES AND PIGS

Изобретение относится к биологии и ветеринарии, а именно к гематологии.
2
Аналогов предлагаемого способа нормализации уровня αантиплазмина у новорожденных телят и поросят с анемией не существует.
Имеются сведения о применении при анемии у телят и поросят ферроглюкина (Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных. Под ред. В.М.Данилевского. М.: «Агропромиздат», 1991. - 576 с.).
В качестве эффективных стимуляторов жизнедеятельности растущего организма в современной ветеринарии применяются фоспренил - препарат на основе фосфатов полипренолов, получаемых из хвои (Деева А.В., Салахова З.А., Лобова Т.П. и др. Повышение сохранности и продуктивности поросят при использовании фоспренила и гамавита. // Ветеринария. - 2006. - №4. - с.13-15), и крезацин (производный ароксиалкилкарбоновых кислот). Крезацин представляет собой белый кристаллический порошок, хорошо растворимый в воде, со слабым специфическим запахом, сладковато-горьковатого вкуса. Он проявляет эффективное стимулирующее действие на живые организмы, повышая выживаемость животных в неблагоприятных и экстремальных условиях, стимулируя или нормализуя жизненные процессы (Байматов В.Н., Латыпов М.М. Влияние крезацина на состояние птицы. Ветеринария, 2006, №11, с.49-51).
2
Однако никогда ранее лечебный комплекс, состоящий из ферроглюкина, фоспренила и крезацина не применялся у новорожденных телят и поросят с анемией с целью нормализации уровня αантиплазмина.
2
Целью изобретения является повышение эффективности коррекции уровня αантиплазмина у новорожденных телят и поросят с анемией.
2
Сущность заявляемого способа заключается в том, что для оптимизации уровня αантиплазмина новорожденным телятам и поросятам с анемией назначаются ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 суток, фоспренил внутримышечно, двоекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,07 мл/кг через шесть дней после первой инъекции ферроглюкина и крезацин 4 мг/кг при включении его в схему выпаивания на 10 суток.
2
2
Способ позволяет нормализовать уровень αантиплазмина у новорожденных телят и поросят с анемией через 3 суток после завершения лечения, переводя его на уровень, близкий к таковому для здоровых телят и поросят. При соблюдении рекомендаций заявляемого способа возможно поддержание в последующем активности уровня α антиплазмина в оптимальном состоянии, что позволит у новорожденных телят и поросят существенно снизить риск тромботических осложнений, оздоровить стадо, увеличить привесы, снизить падеж и повысить качество и объем получаемой мясной продукции.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.
2
Для диагностики у новорожденных телят и поросят с анемией нарушения уровня αантиплазмина проводится его оценка по следующей методике (Баркаган З.С., Момот А.П. Основы диагностики нарушений гемостаза. М., 1999).
2
2
2
2
αантиплазмин (α-АП) является наиболее важным ингибитором фибринолиза, в присутствии которого происходит быстрое формирование необратимого, лишенного активности комплекса "плазмин-α-АП". Метод основан на определении способности α-АП исследуемого образца плазмы инактивировать добавляемый в плазму очищенный плазмин. Содержание остаточного плазмина определяется по степени гидролиза хромогенного субстрата, специфичного по отношению к этому ферменту.
2
образец
избыток
2
остаток
α-АП+плазмин=[α-АП-плазмин]+плазмин
2
4
Используются следующие реактивы: 1. Плазмин свиньи или быка, лиофилизированный, соответственно. Разводится в буфере до концентрации 0,1 СТА Е/мл. 2. Хромогенный субстрат D-Norvalylcyclohexylalanillysil-p-nitroanilide. Разводится в дистиллированной воде до концентрации 3 ммоль/л. 3. Раствор буфера: KHPO (100 ммоль/л), NaCl 9 г/л, глицерин (250 г/л), рН 7,5.
2
2
Для выполнения исследования необходима также стандартная или контрольная нормальная плазма с известным содержанием α-АП или пулированная (взятая не менее чем от 10 здоровых телят или поросят соответственно), активность α-АП в которой принимается за 100%.
Применяется следующее оборудование: спектрофотометр с термостатируемой кюветой. Температура реакции +37°С. Используемая длина волны 405 нм. Ширина оптического пути кюветы -1 см.
Материалом для исследования служит цитратная бедная тромбоцитами плазма.
Предварительно все смешиваемые реагенты подогреваются до +37°С. Ход определения приводится в таблице.
Таблица.
Схема определения уровня α<sub>2 </sub>антиплазмина
Последовательность операций
Исследуемый образец
Контроль(плазмин)
1. Внести в кювету или пробирку:
исследуемую плазму
20 мкл (0,02 мл)
-
физиологический (0,15 М) раствор хлорида натрия
-
20 мкл (0,02 мл)
раствор плазмина
1,0 мл
1,0 мл
2. Перемешать и инкубировать при +37°С в течение 1 мин
3. Добавить хромогенный субстрат и включить секундомер
0,1 мл
0,1 мл
В течение 30 сек учитывают показатели поглощения и одновременно включают секундомер. Спустя 60 и 120 сек повторно определяют показатели поглощения.
2
Вычисляют скорость изменения поглощения за 1 мин (Δ А/мин), которая пропорциональна активности α-АП. Для этого рассчитывают разницу поглощения при 405 нм между 0 и 60 секундами инкубации, а также между 60 и 120 секундами. Определяют среднюю величину из двух показателей Δ А/мин.
плазмин
контроль
2
п
Каждая серия анализов требует не менее одного значения для раствора плазмина (Δ А/мин) и одного референтного значения, определяемого с использованием контрольной нормальной плазмы (Δ А/мин) с известным значением α-АП. Эти значения используют для вычисления внутрилабораторного коэффициента пересчета (К):
2
Содержание α-АП в исследуемом образце плазмы в виде % от нормы в дальнейшем вычисляется по формуле:
2
образец
плазмин
α-АП(% от нормы) = Кп×(Δ А/мин- Δ А/мин образец)
2
В норме уровень α-АП в плазме крови составляет 80-120%.
2
Снижение активности α-АП может быть определено при активации фибринолиза, его повышение сопряжено с риском тромбоза.
2
При диагностике у новорожденных телят и поросят с анемией повышения α-АП необходимо назначение лечения согласно заявленному способу.
Пример 1
У новорожденного поросенка с анемией №23 была взята кровь и исследована по изложенной выше схеме.
12
У данного поросенка отмечалось нарушение эритропоэза с признаками снижения уровня содержания железа в его организме, сопровождаясь изменением показателей крови. Так, количество гемоглобина у него составляло 77,0 г/л, эритроцитов 3,84×10/л, сидероцитов 0,8% при уровне железа в сыворотке 11,0 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 72,4 мкмоль/л.
2
При обследовании у поросенка была выявлена повышенная активность α-АП (146%). Животному был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 суток, фоспренил внутримышечно, двоекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,07 мл/кг через шесть дней после первой инъекции ферроглюкина и крезацин 4 мг/кг при включении его в схему выпаивания на 10 суток.
12
2
Через 3 суток после окончания лечения у поросенка нормализовалась красная кровь. Так, количество гемоглобина у него возросло до 125,0 г/л, эритроцитов - до 5,24×10/л, сидероцитов до 7,9% при увеличении железа в сыворотке до 24,4 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 32,0 мкмоль/л. У поросенка была достигнута полная нормализация активности α-АП (110%).
2
Наблюдение за поросенком в последующем зарегистрировало стабильность достигнутого уровня α-АП, составившего через 1 месяц после окончания лечения (112%).
Пример 2
У новорожденного теленка с анемией №34 была взята кровь и исследована по изложенной выше схеме.
12
У данного теленка отмечалось нарушение эритропоэза с признаками снижения уровня содержания железа в его организме, сопровождаясь изменением показателей крови. Так, количество гемоглобина у него составляло 80,9 г/л, эритроцитов 4,02×10/л, сидероцитов 1,1% при уровне железа в сыворотке 11,9 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 67,4 мкмоль/л.
2
При обследовании у теленка была выявлена повышенная активность α-АП (139%). Животному был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 суток, фоспренил внутримышечно, двоекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,07 мл/кг через шесть дней после первой инъекции ферроглюкина и крезацин 4 мг/кг при включении его в схему выпаивания на 10 суток.
Через 3 суток после окончания лечения у теленка нормализовалась красная кровь.
12
Так, количество гемоглобина у него возросло до 129,0 г/л, эритроцитов - до 5,40×10/л, сидероцитов до 8,2% при увеличении железа в сыворотке до 28,0 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 32,1 мкмоль/л.
2
У теленка была достигнута полная нормализация активности α-АП (92%).
2
2
Наблюдение за теленком в последующем не зарегистрировало отрицательной динамики α-АП. Через 1 месяц α-АП составлял 93%.
2
Использование предлагаемого способа оптимизации активности α-АП в ветеринарии поможет избежать сосудистых нарушений у новорожденных телят и поросят с анемией, оздоровить стадо, снизить падеж, увеличить привесы, повысить качество и объем получаемой мясной продукции и получать в последующем от этих телят и поросят здоровое потомство.