СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO ПОВЫШЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К ПСЕВДОАЛЛЕРГЕНАМ И ПОДБОРА ПРОТИВОАЛЛЕРГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

1. Способ диагностики in vitro повышенной чувствительности к псевдоаллергенам и подбора противоаллергических препаратов, заключающийся в отборе и подготовке венозной крови, введении тестируемого препарата и анализе люминол-зависимой хемилюминесценции (ХЛ),
отличающийся тем, что
6
параллельно с люминол-зависимой ХЛ проводят анализ люцигенин-зависимой ХЛ, для чего в отобранную кровь вводят антикоагулянт, формируют образцы, содержащие 0,95-1,05×10 лейкоцитов, и доводят их раствором Хенкса до объема 0,69 мл с получением проб крови,
тестируемый препарат псевдоаллергена или тестируемый препарат псевдоаллергена в смеси с противоаллергическим препаратом, и контрольный препарат в количестве 0,01 мл вводят в полученные пробы крови, и их инкубируют при постоянном перемешивании в течение 45 мин при 37°C, затем
в инкубированные пробы раздельно вводят активаторы люминол и люцигенин в количестве 2 мМ и хемилюминометром измеряют уровень спонтанной ХЛ для указанных активаторов, после чего в те же пробы вводят стимулятор свечения - сульфат бария в количестве 2 мг/мл и регистрируют уровень стимулированной ХЛ также для указанных активаторов, причем измерения ХЛ проводят в режиме постоянного перемешивания при температуре 37°C в течение 45 мин с получением временных зависимостей уровня ХЛ, а о повышенной чувствительности к псевдоаллергенам судят по индексу ИП, определяемому по выражению ИП=Sпa/Sк, где Sпa; Sк - площадь под кривыми временной зависимости уровня спонтанной и стимулированной ХЛ для тестируемого и контрольного препаратов соответственно.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что тестируемый препарат салицилат натрия разводят в физиологическом растворе и вводят в пробы крови в концентрации 3 мМ, при этом при индексе ИП ниже 0,60 для люминол-зависимой ХЛ и индексе ИП ниже 1,25 для люцигенин-зависимой ХЛ относительно показателей для контрольного препарата в виде физиологического раствора диагностируют непереносимость салицилата натрия.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что тестируемый препарат метамизол натрия разводят в физиологическом растворе и в пробы крови вводят в концентрации 6 мкМ, при этом при индексе ИП ниже 0,80 для люминол-зависимой ХЛ и индексе ИП ниже 0,9 для люцигенин-зависимой ХЛ относительно показателей для контрольного препарата в виде физиологического раствора диагностируют непереносимость метамизола натрия.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что тестируемый препарат диклофенак натрия разводят в воде для инъекций и вводят в пробы крови в концентрации бмкМ, при этом при индексе ИП ниже 1,0 для люминол-зависимой ХЛ и индексе ИП ниже 0,75 для люцигенин-зависимой ХЛ относительно показателей для контрольного препарата в виде воды для инъекций диагностируют непереносимость диклофенака натрия.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что тестируемый препарат тартразин разводят в физиологическом растворе и вводят в пробы крови в концентрации 4 мкМ, при этом при индексе ИП ниже 0,60 для люминол-зависимой ХЛ и индексе ИП ниже 0,70 для люцигенин-зависимой ХЛ относительно показателей для контрольного препарата в виде физиологического раствора диагностируют непереносимость тартразина.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что при тестировании смеси препарата псевдоаллергена с противоаллергическим препаратом сначала в пробы крови вводят противоаллергический препарат, после чего инкубируют в течение 10 мин при 37°C при постоянном перемешивании, затем одну часть полученных проб используют в качестве контрольных, а другую часть - в качестве тестируемых, для чего в пробы вводят тестируемый препарат псевдоаллергена и осуществляют повторное инкубирование.
-4
7. Способ по любому пп. 1-6, отличающийся тем, что противоаллергический препарат тавегил вводят растворенным в растворе Хенкса в конечной концентрации 1,1×10 M, а возможность назначения упомянутого препарата в качестве противоаллергического диагностируют при индексе ИП выше 1,09 в пробах с метамизолом натрия; ИП выше 1,0 в пробах с салицилатом натрия и ИП выше 1,57 в пробах с диклофенаком для люминол-зависимой ХЛ.
-4
8. Способ по любому пп. 1-6, отличающийся тем, что противоаллергический препарат зантак вводят растворенным в растворе Хенкса в конечной концентрации 1,6×10 M, а возможность назначения упомянутого препарата в качестве противоаллергического диагностируют при индексе ИП выше 1,04 в пробах с метамизолом натрия, ИП выше 0,99 в пробах с салицилатом натрия и ИП выше 1,38 в пробах с диклофенаком для люминол-зависимой ХЛ.
-5
9. Способ по любому пп. 1-6, отличающийся тем, что противоаллергический препарат интал вводят в конечной концентрации 9,8×10 М, а возможность назначения упомянутого препарата в качестве противоаллергического диагностируют при индексе ИП выше 1,08 в пробах с метамизолом натрия, ИП выше 0,98 в пробах с салицилатом натрия и ИП выше 1,51 в пробах с диклофенаком для люминол-зависимой ХЛ.
10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве хемилюминометра использован биохемилюминесцентный автоматический анализатор БЛМ 3606М-01 с компьютерной программой BLM- Obrab, производства СКТБ «Наука» КНЦ СО РАН, Россия.