АНТИТЕЛА ПРОТИВ ФАКТОРА РОСТА НЕРВОВ И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ

1. Способ получения антитела, подходящего для применения у собаки, включающий:
- получение донорного антитела от вида, отличного от собаки, причем донорное антитело характеризуется специфичностью связывания в отношении целевого антигена, присутствующего у собак;
- сравнение каждого аминокислотного остатка в аминокислотной последовательности каркасных участков донорного антитела с каждым аминокислотным остатком, присутствующим в соответствующем положении в аминокислотной последовательности каркасных участков одного или нескольких собачьих антител, для идентификации одного или нескольких аминокислотных остатков в пределах аминокислотной последовательности каркасных участков донорного антитела, которые отличаются от одного или нескольких аминокислотных остатков в соответствующем положении в пределах аминокислотной последовательности каркасных участков одного или нескольких собачьих антител; и
- замещение одного или нескольких идентифицированных аминокислотных остатков в донорном антителе одним или несколькими аминокислотными остатками, присутствующими в соответствующем положении в одном или нескольких собачьих антителах.
2. Нейтрализующее антитело или его антигенсвязующий фрагмент, которые способны специфично связываться с собачьим фактором роста нервов (NGF), причем антитело или связующий фрагмент антитела содержит вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:3 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью с ней, и/или вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2 или SEQ ID NO:4 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 90% идентичностью с ней.
3. Антитело или его антигенсвязующий фрагмент по п. 2, в котором легкая цепь содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5 или SEQ ID NO:10 или аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере 85% идентичностью с ней.
4. Антитело или его антигенсвязующий фрагмент по п. 2 или 3, в котором тяжелая цепь содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:16, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:18, SEQ ID NO:19, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21 и SEQ ID NO:22.
5. Антитело против собачьего NGF или его связующий собачий NGF-фрагмент, содержащие вариабельный участок легкой цепи, содержащий по меньшей мере одно из:
каркасного участка FR1, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:23 или SEQ ID NO:24,
каркасного участка FR2, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:25,
каркасного участка FR3, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:26 или SEQ ID NO:27, и
каркасного участка FR4, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:28,
и/или вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий по меньшей мере одно из:
каркасного участка FR1, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:29,
каркасного участка FR2, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:30,
каркасного участка FR3, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:31 или SEQ ID NO:32, и
каркасного участка FR4, состоящего из или содержащего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:33.
6. Антитело против собачьего NGF или связующий собачий NGF-фрагмент по п. 5, которые содержат вариабельный домен легкой цепи, имеющий участок FR1 SEQ ID NO:23, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: аминокислотный остаток Q3 представляет собой V, Т5 представляет собой М, S7 представляет собой Т, А9 представляет собой L, L13 представляет собой V, Q15 представляет собой Р или R, E16 представляет собой G, K18 представляет собой Т или Р, VI9 представляет собой А, Т20 представляет собой S, Т22 представляет собой S, T5 представляет собой I, A9 представляет собой Р, S12 представляет собой A, S14 представляет собой R или Т, Е16 представляет собой D, E17 представляет собой D, K18 представляет собой А, Е или L, T22 представляет собой Y, и С23 представляет собой Y, или имеющий участок FR1 SEQ ID NO:24, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: остаток V3 представляет собой Q, T5 представляет собой М, S7 представляет собой Т, А9 представляет собой L, L13 представляет собой V, Q15 представляет собой Р или R, E16 представляет собой G, K18 представляет собой Т или Р, V19 представляет собой А, Т20 представляет собой S, T22 представляет собой S, T5 представляет собой I, A9 представляет собой Р, S12 представляет собой A, S14 представляет собой R или Т, Е16 представляет собой D, E17 представляет собой D, K18 представляет собой А, Е или L, T22 представляет собой Y, и С23 представляет собой Y.
7. Антитело против собачьего NGF или связующий собачий NGF-фрагмент по п. 5 или 6, которые содержат вариабельный домен легкой цепи, имеющий участок FR2 SEQ ID NO:25, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: Y2 представляет собой F, Q3 представляет собой R, A9 представляет собой S, K11 представляет собой Q, L12 представляет собой R, Y2 представляет собой I или L, Q3 представляет собой I или L, Q4 представляет собой Н, К5 представляет собой R, P6 представляет собой А или S, G7 представляет собой D, A9 представляет собой Р или Т, К11 представляет собой Е или R, L12 представляет собой A, G, Р или S, I14 представляет собой L, и Y15 представляет собой Е, F, N, S или V.
8. Антитело против собачьего NGF или связующий собачий NGF-фрагмент по п. 5 или 6, которые содержат вариабельный домен легкой цепи, имеющий участок FR3 SEQ ID NO:26, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: S4 представляет собой D, E14 представляет собой D, Y15 представляет собой F, S16 представляет собой Т, L17 представляет собой F, T18 представляет собой К, N20 представляет собой S, L22 представляет собой V, S24 представляет собой Р, V27 представляет собой A, F31 представляет собой Y, G1 представляет собой A, V2 представляет собой А, Р3 представляет собой S, F6 представляет собой L или V, S7 представляет собой I, G8 представляет собой А, Т13 представляет собой A, S16 представляет собой R, T18 представляет собой R, S24 представляет собой А, Е25
представляет собой D, G, I или N, V27 представляет собой G, S или Т, А28 представляет собой G, и V29 представляет собой I или L, или имеющий участок FR3 SEQ ID NO:27, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: S4 представляет собой D, E14 представляет собой D, F15 представляет собой Y, S16 представляет собой Т, L17 представляет собой F, T18 представляет собой K, S20 представляет собой N, L22 представляет собой V, Р24 представляет собой S, V27 представляет собой A, Y31 представляет собой F, G1 представляет собой A, V2 представляет собой А, Р3 представляет собой S, F6 представляет собой L или V, S7 представляет собой I, G8 представляет собой А, Т13 представляет собой A, S16 представляет собой R, T18 представляет собой R, S24 представляет собой А, Е25 представляет собой D, G, I или N, V27 представляет собой G, S или Т, А28 представляет собой G, и V29 представляет собой I или L.
9. Антитело против собачьего NGF или связующий собачий NGF-фрагмент по п. 5 или 6, которые содержат вариабельный домен легкой цепи, имеющий участок FR4 SEQ ID NO:28, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: Е8 представляет собой D, G2 представляет собой S, A3 представляет собой P, Q или Т, G4 представляет собой Е, Т5 представляет собой Р, K6 представляет собой Q или S, V7 представляет собой L или W, E8 представляет собой R, или L9 представляет собой I.
10. Антитело против собачьего NGF или связующий собачий NGF-фрагмент по п. 5 или 6, которые содержат вариабельный домен тяжелой цепи, имеющий участок FR1 SEQ ID NO:29, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из следующих: D10 представляет собой G, N13 представляет собой Q, G15 представляет собой Т, G16 представляет собой Е, Т17 представляет собой S, T19 представляет собой R, V24 представляет собой A, S28 представляет собой Т, L29 представляет собой F, Т30 представляет собой S, E1 представляет собой D или G, V2 представляет собой Е, G, I, L или М, Q3 представляет собой А, Е, Н, K, L, P, R, S или V, L4 представляет собой Р или V, V5 представляет собой А, Е, L или М, Е6 представляет собой А или Q, S7 представляет собой F, L или Т, G9 представляет собой Е, D10 представляет собой А, Е, N или Т, L11 представляет собой Q, R, V или W, V12 представляет собой А, I или М, N13 представляет собой К или R, P14 представляет собой F или Т, G15 представляет собой А или Е, G16 представляет собой А, Т17 представляет собой Р, L18 представляет собой R, T19
представляет собой G, K или V, L20 представляет собой I или V, S21 представляет собой Y, V23 представляет собой А, Е, I или L, V24 представляет собой G, I, S или Т, S25 представляет собой G, Р или Т, G26 представляет собой D, R или Т, F27 представляет собой D, I, L, S, Т или V, S28 представляет собой A, D, I, L, M, N, Р или R, L29 представляет собой I, М или V, Т30 представляет собой D, G, Н, I, K, N, R, V.
11. Антитело против собачьего NGF или связующий собачий NGF-фрагмент по п. 5 или 6, которые содержат вариабельный домен тяжелой цепи, имеющий участок FR2 SEQ ID NO:30, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: L6 представляет собой Р, R8 представляет собой K, Е11 представляет собой Q, G14 представляет собой A, W1 представляет собой С, V2 представляет собой A, F, I или L, Q4 представляет собой Н или L, A5 представляет собой D, G, P, S, Т или V, G7 представляет собой Е, L или R, R8 представляет собой А, Е, G, М или Q, G9 представляет собой D, E, R, Т или V, L10 представляет собой F, М или Р, Е11 представляет собой D, H, L, Р или R, W12 представляет собой С, F, L, M, S или Y, V13 представляет собой F, I или L, G14 представляет собой L, S или Т.
12. Антитело против собачьего NGF или связующий собачий NGF-фрагмент по п. 5 или 6, которые содержат вариабельный домен тяжелой цепи, имеющий участок FR3 SEQ ID NO:31, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: L2 представляет собой F, T5 представляет собой S, T8 представляет собой N, S9 представляет собой A, S11 представляет собой N, V13 представляет собой L, F14 представляет собой Y, K16 представляет собой Q, H18 представляет собой N, Q21 представляет собой R, S22 представляет собой А, Т27 представляет собой V, R32 представляет собой К, R1 представляет собой Q, L2 представляет собой V, Т3 представляет собой А, I или S, I4 представляет собой L, М, Т или V, Т5 представляет собой А или F, R6 представляет собой K, D7 представляет собой Е или N, T8 представляет собой D, G, I или S, S9 представляет собой D, G, Р, Т или V, K10 представляет собой Е, G, M, N, Q или R, S11 представляет собой D, Н, K или R, T12 представляет собой А, I, М или S, V13 представляет собой А, I или М, F14 представляет собой Н, S или Т, L15 представляет собой I, K16 представляет собой A, D, Е, Н или R, M17 представляет собой L, H18 представляет собой D, К, Р, R, S или Т, S19 представляет собой D, G, N, R или Т, L20 представляет собой V, Q21 представляет собой G, I, K, S или Т, S22 представляет собой D, G, Р, Т или V, Е23 представляет
собой A, D или V, Т25 представляет собой А, М или S, A26 представляет собой G или V, Т27 представляет собой F, I, K, L, М или Q, Y28 представляет собой Н, Y29 представляет собой F или Н, А31 представляет собой С, G, L, M, R, S, Т или V, R32 представляет собой A, D, E, G, I, L, M, N, P, Q, S, Т или V, или имеющий участок FR3 SEQ ID NO:32, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: L2 представляет собой F, T5 представляет собой S, T8 представляет собой N, S9 представляет собой A, S11 представляет собой N, V13 представляет собой L, F14 представляет собой Y, Q16 представляет собой K, H18 представляет собой N, R21 представляет собой Q, S22 представляет собой А, Т27 представляет собой V, R32 представляет собой K, R1 представляет собой Q, L2 представляет собой V, Т3 представляет собой А, I или S, I4 представляет собой L, М, Т или V, Т5 представляет собой А или F, R6 представляет собой K, D7 представляет собой Е или N, T8 представляет собой D, G, I или S, S9 представляет собой D, G, Р, Т или V, K10 представляет собой Е, G, M, N, Q или R, S11 представляет собой D, Н, К или R, T12 представляет собой А, I, М или S, V13 представляет собой А, I или М, F14 представляет собой Н, S или Т, L15 представляет собой I, K16 представляет собой A, D, Е, Н или R, M17 представляет собой L, H18 представляет собой D, K, Р, R, S или Т, S19 представляет собой D, G, N, R или Т, L20 представляет собой V, Q21 представляет собой G, I, K, S или Т, S22 представляет собой D, G, Р, Т или V, Е23 представляет собой A, D или V, Т25 представляет собой А, М или S, A26 представляет собой G или V, Т27 представляет собой F, I, K, L, М или Q, Y28 представляет собой Н, Y29 заменен представляет собой F или Н, А31 представляет собой С, G, L, M, R, S, Т или V, R32 представляет собой A, D, E, G, I, L, M, N, P, Q, S, Т или V.
13. Антитело против собачьего NGF или связующий собачий NGF-фрагмент по п. 5 или 6, которые содержат вариабельный домен тяжелой цепи, имеющий участок FR4 SEQ ID NO:33, который был модифицирован одной или несколькими из аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из следующих: W1 представляет собой L, G2 представляет собой А или S, Q3 представляет собой D, Н, Р или R, T5 представляет собой А, I, N или S, L6 представляет собой Р, Q или R, V7 представляет собой I, L или Р, Т8 представляет собой A, F, I, L, Р, S или Y, V9 представляет собой A, S10 представляет собой А, С, Р или Т, S11 представляет собой A, L или Р.
14. Антитело или антигенсвязующий фрагмент по п. 2 или 3, содержащее константный домен собаки типа НСА или HCD.
15. Выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует антитело или антигенсвязующий фрагмент по любому из пп. 2-14.
16. Антитело или связующий фрагмент антитела по п. 2 или 3 для применения при лечении или предупреждении боли, артрита или индуцируемой к пролиферации NGF опухоли у собаки и состояний, связанных с ними.
17. Нуклеиновая кислота по п. 15 для применения при лечении или предупреждении боли, артрита или индуцируемой к пролиферации NGF опухоли у собаки и состояний, связанных с ними.