Оксидантный статус и дисфункция эндотелия (экспериментальное исследование)

графию и особенности фасций и клетчаточных слоев забрюшин-ного пространства.

2. Кроме общеизвестных клетчаточных слоев забрюшинно-го пространства: забрюшинного клетчаточного слоя, околопо-чечной, околомочеточниковой, околоободочной клетчатки выделяется позадипанкреатическая клетчатка.

3. Позадипанкреатическая клетчатка спереди ограничена задней поверхностью поджелудочной железы, сзади предпочеч-ной фасцией, в стороны, вверх и вниз распространяется в виде клетчаточных щелей, где передней границей слоя становится париетальная брюшина.

4. Предпочечные фасции из правого и левого боковых отделов переходят в срединный отдел, где соединяются друг с другом. Позадипочечные фасции позади почек срастаются с внутри-брюшной фасцией.

5. Гистотопографический метод дает возможность изучить анатомию и топографию аортальных параганглиев, лимфатических сосудов и других анатомических образований срединной части забрюшинного пространства на макромикроскопическом уровне.

Литература

1. Габуния, Р.И. Компьютерная томография в клинической диагностике: рук-во для врачей / Р. И. Габуния, Е. Колесникова.-М., Медицина, 1995.- 352 с.

2. Мёллер, Т.Б. Норма при КТ- и МРТ-исследованиях / Мёллер Т.Б., Райф Э. // М., «МЕДпресс-информ», 2008.- С.44-76.

3. Савченко, А.П. Компьютерно-томографическая анатомия почек и забрюшинного пространства / Савченко А.П., Мамаев

В.В., Пхакадзе Е.Г. // Вестник рентгенологии и радиологии, 1989.- № 1. - С. 77-81.

4. Стромберг Г.Г. Анатомо-клиническое исследование за-брюшинной клетчатки и нагноительных процессов в ней // Дисс. ... докт.мед.наук.- СПб, 1909.- 420 с.

MACROMICROSCOPIC ANATOMIA OF THE RETROPERITONEAL SPACE

5.N. LYASHCHENKO, T.K. SAMODELKINA, E.V. GAVRILOV

Orenburg State Medical Academy,

Chair of Operative Surgery and Clinical Anatomy

The article concerns the questions of macro-microscopic structure and topography of lateral and median parts of retroperitoneal space. The alternative anatomy of fascial structures of retroperitoneal space is considered. Morphometric characteristics of cellular layers are given; the additional retro-pancreatic layer is marked out.

Key words: anatomy, topography, fascial structures of retroperitoneal space.

УДК 543.862 : 611-018.74 : 616.13-004.6]-092.9

ОКСИДАНТНЫЙ СТАТУС И ДИСФУНКЦИЯ ЭНДОТЕЛИЯ

Е.П. ТУРМОВА*, Е.А. БЫЧКОВ*, А. А. ГРИГОРЮК*, П. А. ЛУКЬЯНОВ**, Е. А. ЧАГИНА*

В исследовании была проведена оценка оксидантного статуса и содержания NADPH-диафоразы в сыворотке крови и в артериях 30 крыс во время 6-месячной экспериментальной гиперлипидемии. Окислительный коэффициент в сыворотке крови был увеличен к 6месячному возрасту крыс.

Ключевые слова: гиперлипидемия, оксидантный статус, NADPH-диафоразы.

С современных позиций ключевым звеном в патогенезе атеросклероза считается эндотелиальная дисфункция (ЭД), которая является дисбалансом между основными функциями эндотелия: вазодилатацией и вазоконстрикцией, ингибированием и содействием пролиферации, антитромботической и протромботической, антиокислительной и проокислительной [1,2,4,7,11]. Исследования последних лет показали, что при атеросклерозе наблюдается как интенсификация процессов перекисного окисления липидов, так и

* Владивостокский государственный медицинский университет, кафедра патологической физиологии. Владивосток,690002, проспект Острякова 2, тел. 8 (4232) 45-07-00, e-mail: patphis-vl@mail.ru

Тихоокеанский институт биоорганической химии ДВО РАН.

снижение уровня антиоксидантной защиты [3,4,6,8]. Повреждение эндотелия сопровождается активацией (праймингом) полиморфноядерных лейкоцитов (нейтрофилов), усилением продукции и секреции ими активных форм кислорода: (синглентного кислорода) Ои перекиси водорода (H2O2), и интенсификацией перекисного окисления белков и жирных кислот [12].

Оксид азота (NO) - сигнальная молекула, которая осуществляет межклеточные взаимодействия, и регулирует перекисное окиление липидов. В физиологических условиях NO выступает в роли антиоксиданта, тормозит радикальные окислительные реакции, связываясь со свободными ионами Fe2+, входящими в состав гемма. При гиперпродукции активных форм кислорода происходит окисление липопротеидов, что способствуют повышению синтеза кавеолина-1 и приводит к снижению образования NO эндотелием [1,11,13].

При активации свободнорадикальной активности происходит реакция супероксид-аниона кислорода О2- с NO и образуется пероксинитрит (ONOO-), который является пусковым фактором в развитии воспаления и повреждения тканей, по токсичности значительно превосходит NO и лишает его биологического действия, как фактора релаксации [3,6]. Пероксинитрит стимулирует апоптоз и некроз клеток эндотелия, и повышает их чувствительность к другим повреждающим факторам. Свое действие перок-синитрит реализует за счет инициации перекисного окисления липидов (ПОЛ) в мембранах и липопротеинах [3]. Синтез NO в организме катализируется семейством NO-синтаз (NOS). NOS, используют L-аргинин в качестве субстрата и NADPH-диафоразу в качестве кофактора. NADPH-диафораза участвует в транспортировке электронов к простетической группе энзима. Из семейства NADPH-зависимых дегидрогеназ лишь NO-синтаза является мембрано-связанным ферментом, что обусловливает ее большую стабильность при альдегидной фиксации. Определение NADPH-диафоразы основано на образовании диформазана в присутствии эндогенного p-NADPH и солей тетразолия. Плотность осадка диформазана, выпадающего в цитоплазме после гистохимического окрашивания на NADPH-диафоразу, адекватна содержанию и активности NO-синтазы в клетке [9,13].

Цель исследования — оценить оксидантный статус и содержание NADPH-диафоразы артерий при длительной экспериментальной гиперлипидемии у крыс.

Материалы и методы исследования. Для развития гипер-холестеринемии у 15 крыс линии Вистар, массой 200-250 г, использовали метод К.А. Мещерской и Н.П. Королевой в модификации, с добавлением в корм животным холестерина, метилтио-урацила и витамина Д в течение 6 месяцев (180 суток) [5]. Эксперимент проводился со строгим соблюдением требований Европейской конвенции по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, а также выводу их из эксперимента и последующей утилизации. В постановке опытов руководствовались «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных, утвержденными на заседании этической комиссии НИИ нормальной физиологии им П.К. Анохина РАМН (Протокол № 1, 3 сентября 2005 г.), требованиями Всемирного общества защиты животных (WSPA) и Европейской конвенции по защите экспериментальных животных. Контролем в ходе эксперимента служили 15 здоровых крыс (питающихся обычным рационом) (II группа). В динамике исследования (через 2, 4 и 6 месяцев) по 5 животных из каждой группы выводили из эксперимента под эфирным наркозом путем декапитации. Проводили забор крови и сосудов: аорты и бедренной артерии.

Исследование одобрено междисциплинарным этическим комитетом (протокол № 4, дело № 21 от 24.01.11). Определение общей оксидантной (ООА) и общей антиоксидантной (ОАА) активности плазмы крови и биоптатов сосудов (аорты и бедренной артерии) крыс проводили спектрофотометрическим методом, разработанным в лаборатории химии неинфекционного иммунитета ТИБОХ ДВО РАН с использованием индикатора - пигмента морского ежа Scaphechinus mirabilis - гистохрома [4]. Для суждения о дисбалансе антиоксидантной и оксидантной систем определялся оксидантный индекс (ОИ). Формула расчета:

ОИ=ООА/ОАА.

Исследование NADPH-диафоразы выполнялось на микроденситометре Vickers-M85 (величина маски -2, длина волны 550 нм, увеличение 400), при помощи программы “ImageJ1.37 v”, результаты выражали в единицах оптической плотности.

Для математической обработки полученных данных использовали программу 8Р88 V. 16. Сравнение средних значений в выборках осуществляли с помощью непараметрического и-критерия Вилкоксона-Манна-Уитни. Корреляционный анализ проводили методом ранговой корреляции Спирмену.

Результаты и их обсуждение. Установлено, что показатели ООА у крыс с гиперхолестеринемией 2 и 4 месяце исследования были ниже, чем у контрольных крыс (ри<0,05) (табл.1). К 6 месяцу уровень ООА в крови увеличивался и незначительно превышал контрольные величины. У опытных крыс определено динамическое изменение антиоксидантной активности, на 2 месяце она была достоверно выше показателей контрольных крыс, к 4 месяцу она снижалась и оставалась на таком уровне к 6 месяцу эксперимента, (табл.1).

Таблица 1

Динамика общей оксидантной, антиоксидантной активности и оксидантного индекса

Показатель Динамика эксперимента I группа

ООА 2 мес. 0,27

4 мес. 0,32

6 мес. 0,59

АОА 2 мес. 1,27 •

4 мес. 0,99

6 мес. 1,01

S О 2 мес. 0,21

4 мес. 0,34

6 мес. 0,58

Примечание: данные представленные в виде Median (LQ-UQ).

• - достоверность между экспериментальными группами и контрольной группой (рц<0,05); х - достоверность различий показателей между 2 и 4 месяцами эксперимента (ри<0,05); хх - достоверность различий показателей между 4 и 6 месяцами эксперимента (ри<0,05); ххх - достоверность различий показателей между 2 и 6 месяцами эксперимента (ри<0,05).

Динамика оксидантного индекса (ОИ) сыворотки крови крыс также выявила его снижение в опытной группе на 2 и 4 месяце эксперимента, по сравнению с контрольными животными, тогда как к 6 месяцу исследования его значения, напротив, стали превышать показатели здоровых крыс (ри<0,05) (табл. 1).

При проведении исследования ООА, АОА в биоптатах артерий зарегистрировано, что в аорте опытной группы крыс показатели ООА и АОА были ниже, чем в контрольной группе животных (табл. 2). В биоптатах бедренных артерий значения АОА не имели достоверных различий с группой контроля. Определение ОИ показало равнозначную картину: в артериях опытной группы он был ниже, чем в контрольной группе животных, при этом в аорте крыс с гиперлипидемией он также был ниже, чем в бедренных артериях (ри<0,05) (табл. 2).

Таблица 2

Показатели общей оксидантной и антиоксидантной активности в стенке аорты и бедренных артерий крыс

Группы крыс ООА АОА ОИ

аорта Бедренные артерии аорта Бедренные артерии аорта Бедренные артерии

I группа

II группа

Примечание: данные представленные в виде Median (LQ-UQ).

• - достоверность между экспериментальными группами и контрольной группой (ри<0,05). * - достоверность различий между показателями в иоптатах аорты и бедренных артерий (ри<0,05).

Зарегистрировано снижение NADPH-диафоразы в биопта-тах аорты и бедренных артерий у крыс с гиперлипидемией (ри<0,05) (табл. 3). При этом в бедренных артериях содержание NADPH-диафоразы было ниже, чем в аорте, как у опытных, так и у контрольных животных, что можно объяснить анатомическими особенностями строения стенок данных сосудов (в бедренных артериях более выражен мышечный компонент) (ри<0,05).

Таблица 3

Показатели содержания NADPH-диафоразы в артериях крыс

Динамика эксперимента I группа

NADPH-диафораза аорта крыс

2 мес. 38

4 мес. 33

6 мес. 27

Примечание: данные представленные в виде Median (LQ-UQ).

• - достоверность между экспериментальными группами и контрольной группой (ри<0,05). * - достоверность различий между показателями в иоптатах аорты и бедренных артерий (ри<0,05).

Установлена прямая корреляционная связь между показателями АОА и уровнем NADPH-диафоразы в аорте опытных крыс r=0,74 p<0,05.

Таким образом, в динамике длительной экспериментальной гиперлипидемии наблюдается изменение оксидантной активности, как в сыворотки крови, так и сосудистой стенке. Снижение антиоксидантной активности на 2 месяце исследования, вероятно, вызвано включением компенсаторных метаболических процессов, повышением антиоксидантной ферментативной активности. Увеличение оксидантного индекса в сыворотке крови опытных крыс, к 6 месяцу эксперимента, указывает на истощение, или снижение функции ферментов актиоксидантной системы. Низкий уровень ООА и АОА к 6 месяцу гиперлипидемии в аорте опытных крыс, наличие прямой корреляционной связи между показателями АОА и уровнем NADPH-диафоразы аорты подтверждает, что длительная гиперлипидемия вызывает угнетение функции эндотелия, возможно, апоптотической гибели эндотелиоцитов, способствует снижению активности их антиоксидантных ферментов и ферментов семейства NO-синтаз.

Литература

1. Воробьева Е.Н., Шумахер Г.И., Осипова И.В., Хорева М.А. и др. Роль дисфункции эндотелия в патогенезе атеросклероза // Кардиоваскулярная терапия и профилактика, 2006.- № 5(6).-

С. 129-136;

2. Влияние индуцированого воспаления на метаболизм коллагена в атеросклеротических бляшках у мышей / Шляхто Е.В., Гавришева Н.А., Овчинникова О.А., Ханссон Г.К. // Медицинская иммунология, 2008.- № 6.- С. 507-512.

3. Зотова И.В., Затейщиков ДА., Сидоренко Б.А. Синтез оксида азота и развитие атеросклероза // Кардиология, 2002.- №

4.- С. 57-67.

4. Матриксные металлопротеиназы, оксидантный статус и дисфункция эндотелия с гиперхолестринемией и у пациентов с различными формами ишемической болезни сердца / Лупач Н.М., Хлудеева Е.А., Потапов В.Н., Лукьянов П.А. // Российский медицинский журнал, 2010.- № 4.- С. 71-74.

5. Мещерская КА., Бородина Г.П., Королева Н.П. О методике отбора средств, влияющих на обмен холестерина. // Элеутерококк и другие адаптогены из дальневосточных растений. / Под ред. К.А. Мещерской.- Владивосток, 1966.- С. 289-294.

6. Титов В.Н. Общность атеросклероза и воспаления: специфичность атеросклероза как воспалительного процесса (гипотеза). // Клиническая лабораторная диагностика, 2006.- № 4.- С. 310.

7. Хаитов Р.М., Игнатьева Г .А., Сидорович И.Г. Иммунология. Норма и патология: Учебник.- 3-е изд., перераб. и доп.- М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2010.- 752 с.

8. Чичерина Е.Н., Милютина О.В. Системное воспаление и атеросклероз общих сонных аретарий у больных хронической обструктивной болезнью легких // Клиническая медицина, 2009.-№ 2.- С. 18-21.

9. Шуматова ТА., Приходченко Н.Г., Григорян Л.А., Павлова Я.Е. Нитроксидергические механизмы в патогенезе персисти-рующих диарей у детей первого года жизни//Тихоокеанский медицинский журнал, 2010.- № 3.- С. 59-61.

10. Allison B. Reiss, Amy D. Glass Atherosclerosis: Лттиге and inflammatory aspects // Jornnal of investigative medicine.- 2006.-Vol. 54.- N. 3.- P.123-131.

11. Davignon J. Ganz P. Role of endotelian dysfunction in atherosclerosis //Circulation. - 2004; 109: 27-32.

12. Fonroni A. Raij L. Metabolic syndrome and endothelial dysfunction // Current Hupertension Reports. - 2005. - № 7: 88-95.

13. ParkI.K, Son1 H, Kim1SW, Paick1J-S Initial validation of a novel rat model of vasculogenic erectile dysfunction with generalized atherosclerosis International Journal of Impotence Research (2005) 17, 424^30

OXIDATIVE STATUS AND ENDOTHELIAL DYSFUNCTION

YE.P.TURMOVA, YE. A. BICHKOV, A.A. GRIGORJUK,

P.A. LUKYANOV, YE. A. CHAGINA

Vladivostok State Medical University, Chair of Pathophysiology,

Pacific Institute of Bioorganic Chemistry, Vladivostok.

The research assessed the oxidant status and NADPH-diaphorase content in blood serum and in arteries in 30 rats during 6 month of experimental hyper-lipoidemia. The oxidative coefficient in blood serum was increased by rats' 6 month age.

The prolonged hyperlipoidemia causes suppression of endothelial NADPH.

Key words: hyper-lipoidemia, oxidative status, NADPH.

УДК 616.31-053-083

МЕДИКО-СОЦИАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕТЕЙ ДОШКОЛЬНОГО ВОЗРАСТА ПО ДАННЫМ СОЦИАЛЬНО-ГИГИЕНИЧЕСКОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ

Е.В.ВУСАТАЯ, Б.Н. ДРЕМАЛОВ, О.П.КРАСНИКОВА, К.И.НИГАМОВА, Е.Н.ЧУЛОЧНИКОВА*

Данные проведенного исследования свидетельствуют о необходимости изучения влияния медико-социальных факторов на риск развития нарушений состояния стоматологического здоровья детей для планирования программ по оказанию стоматологической помощи детям дошкольного возраста и организации профилактических мероприятий.

Ключевые слова: кариес, дети, медико-социальная характеристика, социально-гигиеническое обследование.

Медико-социальные исследования стоматологической заболеваемости, ее зависимости от условий окружающей среды, материальных, бытовых, санитарно-гигиенических условий жизни, образа жизни, состояния здравоохранения (своевременность и качество медицинской помощи, эффективность профилактических мероприятий) имеют большое значение для укрепления здоровья детей. В современных условиях для оптимизации организации профилактических и лечебных мероприятий необходима переоценка влияния социально-гигиенических факторов на стоматологическую заболеваемость.

Исследование осуществлялось в рамках стоматологической поликлиники ВГМА им. Н.Н.Бурденко. Было проведено стоматологическое обследование 225 детей в возрасте 2-6 лет. При осмотре регистрировали поражение твердых тканей зубов, состояние тканей пародонта, оценивали состояние гигиены полости рта. Сбор информации осуществлялся на основании специально разработанных анкет для родителей, в частности особенности течения беременности (токсикозы), характер вскармливания ребенка, характер и режим питания, общее состояние ребенка (наличие соматических заболеваний, резистентность организма), осведомленность родителей в мерах индивидуальной профилактики кариеса и др. Статистическую обработку данных осуществляли с помощью ЭВМ. Сравнительный анализ показателей стоматологического обследования проводился с использованием ^критерия Стьюдента с общепринятым для медицинских исследований уровнем достоверности р=0,05.

Проведенное нами исследование медико-социальных характеристик детей дошкольного возраста позволило выявить следующие их особенности:

- распространенность кариеса зубов у детей дошкольного возраста, по нашим данным, составила 67,1%, при этом распространенность кариеса молочных зубов увеличивается с 2 до 6 лет в 3 раза;

* Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н.Бурденко, Кафедра стоматологии детского возраста, 394000 г. Воронеж,

ул. Студенческая, д. 10. 8 (483) 264-47-87

- средняя интенсивность кариеса временных зубов у обследуемых детей составляет 4,53, к 3 годам интенсивность кариеса временных зубов увеличивается в 10 раз, к 6 годам в 20 раз, в связи с этим наиболее благоприятным возрастом для проведения профилактических мероприятий являются периоды первого и второго года жизни ребенка;

- низкий уровень интенсивности кариеса выявлен у 35,1% обследуемых детей, средний уровень интенсивности кариеса - у 8,9%, высокий уровень - у 10,7%, очень высокий уровень интенсивности кариеса -у 12,4% , у 32,9% обследуемых детей выявлены интактные зубные ряды;

- в структуре поражения молочных зубов кариесом у детей в возрасте 2 лет преобладает поражение группы резцов, во все остальные возрастные периоды первое место занимают моляры, в связи с этим, для детей первого года жизни наиболее важно проведение профилактики кариеса резцов, а для детей старше 2 лет -предупреждение кариеса окклюзионной поверхности моляров;

- в структуре индекса кпу показатель «к» преобладает в возрастной группе 3 года, «п» - в возрастной группе 4 и 5 лет, «у» - в возрастной группе 6 лет;

- среднее значение индекса оценки зубного налета составило 0,7;

- плохой индекс гигиены отмечен у 61,8% детей, удовлетворительный - у 29,8%, хороший - у 8,4% детей;

- 50,7% детей чистят зубы 2 и более раз в день, 44,4% -один раз, а 4,9% детей - не чистят зубы;

- 53,8% обследуемых родителей начали чистить зубы своему ребенку в возрасте 2 лет, 30,2% с 1 года и только 16% опрошенных родителей с 6-12 месяцев;

- самостоятельно чистить зубы стали 40,9% обследуемых детей с 2 лет, с 3 лет - 34,2%, с 4 лет - 24,9%;

- 11,1% опрошенных родителей используют дополнительные средства гигиены полости рта для ребенка;

- наибольшее значение индекса зубного налета характерно для детей, чистящих зубы 1 раз и не использующих дополнительные средства гигиены (1,0), а наименьший (0,2) - для детей, чистящих зубы 2 раза в день;

- у детей, которые начинали чистить зубы с 2-2,5 лет, и кратность чистки не превышала одного раза в сутки индекс кпу составил 4,5 (высокий), а дети, родители которых начали чистить зубы с возраста «первого прорезавшегося зуба» и кратность чистки составляла, как минимум 2 раза в день, имеют очень низкий уровень интенсивности кариеса - 0,8;

- 30,2% обследуемых детей были на грудном вскармливании, 26,7% - на искусственном, 43,1% - на смешанном;

- 70,2% опрошенных матерей определялось наличие токсикозов;

- среди обследуемых преобладают семьи с «удовлетворительными» жилищно-бытовыми условиями (57,7%), наибольший кпу характерен для детей, проживающих в «удовлетворительных» условиях с «неудовлетворительным» материальным обеспечением (6,4), а наименьший - среди детей, проживающих в «хороших» жилищно-бытовых условиях с «хорошим» материальным обеспечением (3,2);

- большинство обследуемых детей имеют сниженную резистентность организма (48,4% лиц), 30,2% обследуемых - имеют резко сниженную резистентность организма, 21,4% детей - высокую резистентность организма;

- 24,9% обследуемых детей имеют какие-либо хронические заболевания;

- 74,7% лиц оценили качество своего питания ребенка как «удовлетворительное», 18,7% лиц - как «неудовлетворительное» и 6,6% - как «хорошее», наибольшее значение индекса кпу характерно для детей, имеющих резко сниженную резистентность организма, с оценкой качества питания как «неудовлетворительное» (5,4), а наименьшее отмечается среди детей, имеющих высокую резистентность организма, а качество питания - как «удовлетворительное» (3,9);

- частое употребление сладкого наблюдалось у 45,3% обследуемых детей, 12% детей никогда не употребляют сладости и 42,7% иногда употребляют сладости, наибольшее значение кпу встречается у детей, употребляющих сок из бутылочки, и любящих сладкое (5,1), а наименьшее - для детей, не употребляющих сок из бутылочки, но «сладкоежек» (4,3);