СПОСОБ ТЕСТИРОВАНИЯ СОЛЕУСТОЙЧИВОСТИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОГО РАСТЕНИЯ

1. Способ тестирования солеустойчивости сельскохозяйственного растения, отличающийся тем, что проводят фиксацию корней проростков тестируемых растений и приготовление препаратов мацерированных клеток из фиксированных корней проростков, иммунофлуоресцентное окрашивание препарата антителами к белку, формирующему микротрубочки цитоскелета, с последующим микроскопическим анализом окрашенного препарата и сравнением препарата с контрольным образцом, при этом о солеустойчивости сельскохозяйственного растения судят по изменению цитоскелета тестируемого растения относительно цитоскелета контрольного растения.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что тестированию подвергают нормальные формы сельскохозяйственного растения.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что тестированию подвергают модифицированные формы сельскохозяйственного растения.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что тестированию подвергают 2-3 дневные проростки сельскохозяйственного растения.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что тестируемые растения выращивают в условиях акклимации к стрессовым факторам.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве контрольных экземпляров используют растения, развивающиеся в рулонной культуре.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что фиксацию корней проростков тестируемых растений осуществляют путем помещения корней проростков в раствор 4% параформальдегида в РНЕМ-буфере pH 6,9 в течение 1,5-2 ч при комнатной температуре с последующей отмывкой излишков фиксатора в том же буфере.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что приготовление препаратов мацерированных клеток из фиксированных корней проростков проводят путем отделения зоны меристемы и помещения ее в мацерирующий раствор, содержащий 2% раствор целлюлазы «Sigma» на Na-ацетатном буфере pH 5,0 на 30 с, после чего обработанные корешки накапливают в РНЕМ-буфере с последующим разделением на клетки зоны меристем и помещением продуктов разделения в 0,2% желатин и высушиванием на воздухе при +4°С.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что иммунофлуоресцентное окрашивание препарата антителами к α-тубулину проводят путем помещения образцов в 0,5% Triton X-100, приготовленный на стабилизирующем микротрубочке буфере (РНЕМ), содержащем 5% диметилсульфоксида на 30 минут, затем последовательно отмывали в 10 mM Mg-Tris-Cl буфере (pH 7,6), инкубировали в течение ночи при комнатной температуре с моноклональными антителами к α - тубулину мыши (клон DM1A), отмывали в 10 mM Mg-Tris-Cl буфере (pH 7,6), инкубировали в 20 mM Mg-Tris-Cl буфере, содержащем 0,1% фосфатного буфера (pH 8,2), инкубировали с FITC-конъюгированными антимышиными IgG, Alexa-конъюгированными антикрысиными IgG, TRITC-конъюгированными антикрысиными IgG 45 минут при 37°С, окрашивали DAPI и помещали в заливочную среду, содержащую флуорохром и хлорид магния (Vestasheld).
10. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве контрольного параметра использовали ориентацию микротрубочек в кортикальном цитоскелете клеток.