АНАЛИЗ АДРОМЕДУЛЛИНА И СПОСОБЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЗРЕЛОГО АДРОМЕДУЛЛИНА

1. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов, у которых подозревается наличие сепсиса, в котором концентрация зрелого ADM 1-52 и/или зрелого ADM 1-52-Gly в образце биологической жидкости указанного пациента с сепсисом определяют, используя анализ, включающий два связующих, которые связывают две различные области в пределах области зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly, которая представляет собой аминокислотный 21-52-амид (SEQ ID No. 1) или аминокислотный 21-52-Gly (SEQ ID No. 2), где каждая из указанных областей содержит, по меньшей мере, 4 или 5 аминокислот.
2. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по п. 1, в котором одно из указанных связующих связывается с областью, содержащейся в следующей последовательности зрелого ADM и/или зрелого ADM l-52-Gly (SEQ ID No. 4),
и в котором указанное второе из данных связующих связывается с областью, содержащейся в следующей последовательности зрелого ADM и/или зрелого ADM 1-52-Gly (SEQ ID No. 5).
3. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом в по п. 1 или 2, где чувствительность указанного анализа является достаточной, чтобы количественно определить ADM у здоровых субъектов и составляет <10 пг/мл, предпочтительно <40 пг/мл и более предпочтительно <70 пг/мл.
7
-1
4. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1 или 2, в котором указанное связующее демонстрирует аффинность связывания со зрелым ADM и/или зрелым ADM l-52-Gly, по меньшей мере, 10 М.
5. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1 или 2, в котором указанное связующее выбирают из группы, включающей анти-адромедуллиновое антитело или фрагмент анти-ADM антитела, связывающийся с ADM, или не-Ig матрицу, связывающуюся с адромедуллином.
6. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1, 2, в котором такой анализ представляет собой сэндвич анализ, предпочтительно полностью автоматизированный анализ.
7. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1, 2, в котором, по меньшей мере, одно из указанных двух связующих метят, для того чтобы детектировать.
8. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1 или 2, в котором, по меньшей мере, одно из указанных двух связующих является связанным с твердой фазой.
9. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по п. 7, в котором указанную метку выбирают из группы, включающей хемилюминесцентную метку, ферментную метку, флуоресцентную метку, метку с радиоактивным йодом.
10. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1, 2, 9, в котором концентрация зрелого ADM 1-52 и/или зрелого ADM l-52-Gly, измеренная в образце, находится в диапазоне 10-500 пг/мл.
11. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1, 2, 9, в котором пороговую чувствительность применяют таким образом, что значение выше пороговой чувствительности показывает пациента, который не поддается или плохо поддается терапии и, при этом, что значение ниже указанной пороговой чувствительности показывает пациента, который поддается терапии.
12. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1, 2, 9, в котором применяют пороговую чувствительность от 60 до 80 пг/мл, предпочтительно 70 пг/мл.
13. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1, 2, 9, в котором указанный образец выбирают из группы, включающей человеческую цитратную плазму, гепаринизированную плазму, ЭДТА плазму, цельную кровь.
14. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по п. 13, в котором указанный взятый образец непосредственно измеряют без какой-либо дополнительной подготовки образца.
15. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1, 2, 9, 14, в котором указанный способ выполняют на полностью автоматизированном устройстве.
16. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1, 2, 9, 14, в котором зрелый ADM 1-52 и/или зрелый ADM l-52-Gly определяют, по меньшей мере, в двух образцах, где указанные образцы отбирают в различных точках времени у указанных пациентов с сепсисом.
17. Способ in vitro для контролирования терапии у пациентов с сепсисом по любому из пп. 1,2, 9, 14, в котором объем измеряемого образца составляет меньше или равен 50 мкл.
18. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly и/или адромедуллина-Gly в образце, содержащем два связующих, которые связываются с двумя различными областями в пределах области зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly, которая представляет собой аминокислотный 21-52-амид SEQ ID No. 1 или аминокислотный 21-52-Gly зрелого адромедуллина SEQ ID No. 2, где каждая из указанных областей содержит, по меньшей мере, 4 или 5 аминокислот, и где указанный анализ не является сэндвич анализом, выполняемым вручную с трубкой, покрытой сложным эфиром акридиния.
19. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly и/или адромедуллина-Gly в образце, содержащем два связующих, которые связываются с двумя различными областями в пределах области зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly, которая представляет собой аминокислотный 21-52-амид (SEQ ID No. 1) или аминокислотный 21-52-Gly зрелого адромедуллина (SEQ ID No. 2), где каждая из указанных областей содержит, по меньшей мере, 4 или 5 аминокислот, и где указанный анализ является сэндвич анализом, выполняемым вручную с трубкой, покрытой сложным эфиром акридиния, и где одно из указанных связующих представляет собой антитело, связывающееся с SEQ ID No. 6 CTVQKLAHQIYQ, и где второе из указанных связующих представляет собой антитело, связывающееся с SEQ ID No. 7 APRSKISPQGY-CO-NH2.
20. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллин-Gly в образце по п. 18, в котором одно из указанных связующих связывается с областью, содержащейся в следующей последовательности зрелого ADM l-52-Gly (SEQ ID No. 4), и где указанное второе из данных связующих связывается с областью, содержащейся в следующей последовательности зрелого ADM и/или зрелого ADM l-52-Gly (SEQ ID No. 5).
21. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly в образце по любому из пп. 18-20, где чувствительность указанного анализа является достаточной, чтобы количественно определить ADM у здоровых субъектов и составляет <10 пг/мл, предпочтительно <40 пг/мл и более предпочтительно <70 пг/мл.
7
-1
22. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly в образце по любому из пп. 18-20, в котором указанное связующее демонстрирует аффинность связывания с адромедуллином, по меньшей мере, 10 М.
23. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly в образце по любому из пп. 18-20, в котором указанное связующее выбирают из группы, включающей анти-адромедуллиновое антитело или фрагмент анти-ADM антитела, связывающийся с ADM, или не-Ig матрицу, связывающуюся с адромедуллином.
24. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly в образце по любому из пп. 18-20, в котором такой анализ представляет собой сэндвич анализ, предпочтительно полностью автоматизированный анализ.
25. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly в образце по любому из пп. 18-20, в котором, по меньшей мере, один из указанных двух связующих метят, для того чтобы детектировать.
26. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллин-Gly в образце по любому из пп. 18-20, в котором, по меньшей мере, одно из указанных двух связующих является связанным с твердой фазой.
27. Анализ для определения зрелого адромедуллина и/или адромедуллин-Gly в образце по п. 25, в котором указанную метку выбирают из группы, включающей хемилюминесцентную метку, ферментную метку, флуоресцентную метку, метку с радиоактивным йодом.
28. Набор, включающий анализ по любому из пп. 18-27, в котором компоненты указанного анализа могут содержаться в одном или больше контейнере.
29. Способ калибрования анализа по любому из пп. 18-28, в котором используют связующее, которое связывается с областью, по меньшей мере, из 5 аминокислот в пределах аминокислот 1-16 (SEQ ID No. 8) зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly.
30. Способ калибрования анализа по п. 29, в котором связующее распознает и связывается с N-терминальным концом зрелого адромедуллина и/или адромедуллина-Gly.