АНТИГЕЛЬМИНТНОЕ СРЕДСТВО
ANTHELMINTIC AGENT

Изобретение касается области ветеринарии и может быть использовано для профилактики и лечения стронгилятозов.
Стронгилятозов желудочно-кишечного тракта в настоящее время насчитывается более 400 видов. Они широко распространены и наносят значительный экономический ущерб, связанный со снижением количества и качества продукции животноводства и большими затратами на лечебно-профилактические мероприятия.
Известен структурный аналог 4- или 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксан формулы
1
2
2
1
2
2
где R=NO, R=Н или R=H, R=NO, обладающий фунгицидной активностью, см. Патент RU №2032678, МПК C07D 271/12, 1995.
Указанные соединения не проявляют антигельминтную активность. Наиболее близким по структуре к заявляемому объекту является 5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан формулы
1
где R: 2-хлорфениламин или 2,5-дихлорфениламин или 4,5-дихлорфениламин или 2-гидроксифениламин или 4-гидроксифениламин или 4-бромфениламин или 2-метил-5-хлорфениламин или 4-аминодифенил, обладающие акарицидной и бактерицидной активностью, см. Патент RU №2255935, МПК C07D 271/12, 2005.
Задачей изобретения является применение 5,7-дизамещеного-4,6-динитробензофуроксана с R: 4-гидроксифениламин или 4,5-дихлорфениламин в качестве антигельминтного средства.
Техническая задача решается применением 5,7-дизамещенного-4,6-динитробензофуроксана общей формулы
1
где R: 4-гидроксифениламин или 4,5-дихлорфениламин в качестве антигельминтного средства.
Решение технической задачи позволяет применить соединения 5,7-дизамещенного-4,6-динитробензофуроксана общей формулы
1
где R: 4-гидроксифениламин или 4,5-дихлорфениламин в качестве антигельминтного средства.
Заявляемые вещества, обладают малой токсичностью, проявляют высокую антигельминтную активность в течение короткого времени 3-45 минут.
5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан получают взаимодействием 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана с 4-гидроксифениламином (1) и 4,5-дихлорфениламином (2) в среде диметилсульфоксида или изопропилового спирта по схеме:
Приводим пример получения соединения формулы 5,7-бис-(4-гидроксифениламино)-4,6-динитробензофуроксан (1).
Пример 1.
пл
К раствору 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана (50 г) в растворителе диметилсульфоксиде (450 мл) добавляют раствор 4-гидроксифениламина (68 г) в растворе диметилсульфоксида (400 мл) и выдерживают реакционную смесь при температуре 20-25°С. Полноту протекания реакции контролируют тонкослойной хроматографией. По окончании реакции добавляют в реакционную смесь воду. Осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Выход 43 г (85%), T 195-196°C (из этилового спирта).
-1
ИК-спектр, см: 1690 (C=N-O), 3360 (NH)
18
12
6
8
CHNO
Вычислено, %: C 49; H 2,7; N 19
Найдено, %: C 48.9; H 2,69; N 19
1H
Спектр ПМР, ацетон δ м.д. 9,0 (2Н, NH), 7,2 (4Н бензола), 4,0 (2Н ОН).
Пример 2 аналогичен примеру.1, в качестве растворителя берут изопропиловый спирт.
Приводим пример получения соединения формулы 5,7-бис-(4,5-дихлорфениламино)-4,6-динитробензофуроксан (2).
Пример 3.
пл
К раствору 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуоксана (50 г) в растворителе диметилсульфоксиде (450 мл) добавляют раствор 4,5-дихлорфениламина (68 г) в растворе диметилсульфоксида (400 мл) и выдерживают реакционную смесь при температуре 60°C. Полноту протекания реакции контролируют тонкослойной хроматографией. По окончании реакции добавляют в реакционную смесь воду. Осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Выход 43 г (85%), T 185-186°C (из этилового спирта).
1
ИК-спектр, см-: 1680 (C=N-O), 3370 (NH)
18
8
6
6
4
CHNOCl
Вычислено, %: C 40; H 1,4; N 15,5; C 126
Найдено, %: C 39.8; H 1,39; N 15,3; Cl 25,8
14
Спектр ПМР, ацетон 5 δ м.д. 9,4 (2Н, NH), 7,5 (3Н бензола).
Пример 4 аналогичен примеру 3, в качестве растворителя берут изопропиловый спирт.
Исследование токсичности 5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан (I) при введении в желудок.
При однократном введении (I) в желудок определяют параметры токсичности и изучают симптомы острого отравления. Острую токсичность изучают на белых крысах весом 170-200 г. Соединения (I) вводят в желудок в виде 10% суспензии через металлический зонт. Животным контрольной группы вводят в соответствующих количествах эмульсию, содержащую только эмульгатор. Учитывают следующие показатели: внешний вид и поведение животных, отношение к корму, подвижность, ритм и частоту дыхания, время возникновения и характер интоксикации, ее тяжесть, обратимость, сроки гибели животных или их выздоровления. Наблюдение за клиническим состоянием животных проводят в течение 10 дней.
50
100
50
Для оценки токсичности определяют максимально переносимую дозу - МПД; дозу, вызывающую гибель 50% животных - ЛД и абсолютно смертельную дозу - ЛД. ЛД и ее доверительные границы вычисляют по методу Кербера, см., например, Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - М., Медицина, 1963. - 262 с.
После введения соединений (I) в дозах 1000-1500 мг/кг существенных изменений в общем состоянии животных не обнаружено. В дозах от 1500-2000 мг/кг наступало легкое угнетение, отказ от корма, которое через 2-2,5 часа проходило. При введении препарата в дозах от 2000-2500 мг/кг животные становились угнетенными, отказывались от корма в течение 4-5 часов, затем начинали принимать корм. Все функциональные системы животных восстановились в течение 1,5-2 суток. Гибель животных за период наблюдения (10 суток) не происходило. Препарат в дозах более 3000 мг/кг не представлялось возможным вводить в желудок животным, из-за слишком большого объема массы. Результаты исследований приведены в таблице 1.
Таблица 1Токсичность соединений (1) и (2) для теплокровных животных
Острая токсичность, мг/кг
5,7-бис(4-гидроксифениламино)-4,6-динитробензофуроксан (1)
МПД
ЛД<sub>50</sub>
ЛД<sub>100</sub>
1000
-*
-*
1500
-*
-*
2000
-*
-*
2500
-*
-*
3000
-*
-*
5,7-бис(4,5-дихлорфениламино)-4,6-динитробензофуроксан(2)
1000
-*
-*
1500
-*
-*
Продолжение таблицы 1
2000
-*
-*
2500
-*
-*
3000
-*
-*
- не смогли определить, т.к. даже доза 3000 мг/кг не вызвала гибели животных.
Из таблицы 1 видно, что соединения (I) являются малотоксичными и относятся к 4 классу токсичности.
Антигельминтная активность соединений изучена на нематодах, принадлежащих подотрядам: Ascaridata, Strongylata, Trichocephalata no общепринятой методике, см., например, Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - М. Медицина, 1963. - 262 с. Для этого нематод выделяли из свежих способов, взятых от пораженных животных, и по 10-20 штук помещали в чашки Петри, которую пропитывали суспензией, содержащей различные концентрации испытуемых соединений, и в течение 3 часов вели наблюдение и учет погибших гельминтов. Результаты исследований представлены в таблице 2.
Как видно из таблицы 2, соединения (1) и (2) обладают антигельминтной активностью в течение небольшого времени от 3 до 45 минут.
Заявляемый объект по сравнению с прототипом обладают антигельминтной активностью, а по сравнению с контрольными препаратами превосходит в 2 раза.
Таким образом, заявляемый объект может найти широкое применение в качестве антигельминтного средства.