Ферменты лактазы с улучшенной активностью при низких температурах

1. Способ получения молочного продукта, включающий:
(а) смешивание субстрата на молочной основе, содержащего лактозу в концентрации по меньшей мере 10 г/л, и пептида или димерного пептида, проявляющего активность бета-галактозидазы, в концентрации от 10 до 55 мг/л;
(б) инкубацию смеси при температуре от 1°С до 10°С в течение периода времени, достаточного для снижения концентрации лактозы в смеси до менее 0,2 г/л.
2. Способ снижения содержания лактозы в субстрате на молочной основе, включающий:
(а) смешивание субстрата на молочной основе, содержащего лактозу в концентрации по меньшей мере 10 г/л, и пептида или димерного пептида, проявляющего активность бета-галактозидазы, в концентрации от 10 до 55 мг/л;
(б) инкубацию смеси при температуре от 1°С до 10°С в течение периода времени, достаточного для снижения концентрации лактозы в смеси до менее 0,2 г/л.
3. Способ по п. 1 или 2, где пептид или димерный пептид, проявляющий активность бета-галактозидазы, представляет собой:
(1) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 22, 33, 14, 7, 9, 11, 30 и 1, или пептид, имеющий идентичность аминокислотной последовательности более 85% с любой из этих последовательностей;
(2) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 22, 33, 14, 13, 19, 7, 9, 11, 26 и 27, 30 и 1, или пептид, имеющий идентичность аминокислотной последовательности более 85% с любой из этих последовательностей;
(3) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, или его обладающие ферментативной активностью фрагменты, или аминокислотная последовательность любого из них, имеющая не более 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 замен, добавлений или делеций аминокислот.
4. Способ по любому из пп. 1-3, где пептид или димерный пептид, проявляющий активность бета-галактозидазы, добавляют в концентрации от 35 до 52 мг/л, в концентрации от 40 до 52 мг/л или в концентрации от 45 до 52 мг/л.
5. Способ по любому из пп. 1-4, где субстрат на молочной основе, содержащий лактозу, представляет собой:
(1) коровье молоко, овечье молоко, козье молоко, буйволиное молоко, верблюжье молоко или указанное молоко в пастеризованной, сырой и/или фильтрованной форме; или
(2) кисломолочный продукт, полученный из молока (1) путем ферментации.
6. Способ по п. 5, где субстрат на молочной основе, содержащий лактозу, представляет собой коровье молоко, содержащее лактозу в концентрации от примерно 37 до 50 г/л, или указанное молоко в термически обработанной, пастеризованной и/или фильтрованной форме.
7. Способ по любому из пп. 1-5, где концентрации лактозы менее 0,2 г/л достигают после инкубации в течение по меньшей мере 4 часов, по меньшей мере 8 часов, по меньшей мере 12 часов или по меньшей мере 24 часов.
8. Способ по любому из пп. 1-7, где температура инкубации на стадии (б) находится в диапазоне от 2°С до 7°С или в диапазоне от 3°С до 6°С.
9. Способ по любому из пп. 1-8, где при инкубации на стадии (б) концентрация лактозы в смеси снижается до менее 0,05 г/л, до менее 0,02 г/л или до менее 0,01 г/л.
10. Способ по любому из пп. 1-9, где смесь, содержащую субстрат на молочной основе и пептид или димерный пептид, проявляющий активность бета-галактозидазы, нагревают до температуры по меньшей мере 60°С в течение по меньшей мере четырех секунд до или после инкубации при температуре от 1°С до 10°С.
11. Способ по п. 10, при котором смесь, содержащую субстрат на молочной основе и пептид или димерный пептид, проявляющий активность бета-галактозидазы, нагревают до температуры 72°С в течение примерно 15 секунд до или после инкубации смеси при низких температурах на стадии (б) или нагревают до температуры 140°С в течение примерно четырех секунд до или после инкубации смеси при температуре от 1°С до 10°С.
12. Способ получения молочного продукта по любому из пп. 1 или 3-9, включающий стадию ферментации субстрата на молочной основе с молочнокислыми бактериями.
13. Способ по п. 12, где стадию ферментации выполняют до или после инкубации с пептидом или димерным пептидом, проявляющим активность бета-галактозидазы,
14. Способ по любому из пп. 1 или 3-9, где молочный продукт представляет собой кисломолочный продукт, сыр, йогурт, сливочное масло, молочный спред, пахту, напиток из сквашенного молока, сметану, напиток на основе молочной сыворотки, мороженое, сгущенное молоко, карамелизированное сгущенное молоко или ароматизированный молочный напиток.
15. Применение пептида или димерного пептида, проявляющего активность бета-галактозидазы, для получения молочного продукта с пониженным содержанием лактозы при температуре от 1°С до 10°С в течение периода времени, достаточного для снижения концентрации лактозы в смеси до менее 0,2 г/л, где пептид или димерный пептид, проявляющий активность бета-галактозидазы, представляет собой:
(1) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 22, 33, 14, 7, 9, 11, 30 и 1, или пептид, имеющий идентичность аминокислотной последовательности более 85% с любой из этих последовательностей;
(2) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 22, 33, 14, 13, 19, 7, 9, 11, 26 и 27, 30 и 1, или пептид, имеющий идентичность аминокислотной последовательности более 85% с любой из этих последовательностей;
(3) пептид, имеющий аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33 или его обладающие ферментативной активностью фрагменты, или аминокислотная последовательность любого из них, имеющая не более 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 или 22 замен, добавлений или делеций аминокислот.