Адгезионная подложка для получения ориентированного биопсийного материала эндометрия

Полезная модель относится к сфере медицины и является дополнительным решением для биопсийной диагностики в патологической анатомии. Предназначена для удержания фрагментов ткани эндометрия в процессе гистологической проводки биопсийного материала.
Биопсийное исследование тканей человека является ведущим подходом в диагностике заболеваний человека, прежде всего новообразований, по отношению к которым исследование фрагментов ткани является так называемым «золотым стандартом», без которого диагноз просто невозможен. Аккуратная работа с таким материалом является основой диагностического исследования. Объективной сложностью работы с биопсийными образцами ткани является обеспечение их сохранности на всех этапах обработки такого материала, который включает в себя процессы фиксации в формалине, обезвоживание тканей и пропитку их парафином.
Известен способ фиксации гистологического образца (патент РФ № 2362491), полученного при тканевой толстоигольной биопсии, при подготовке к гистологическому исследованию путем размещения гистологического образца между пластинами с последующей фиксацией в фиксирующем растворе, причем перед помещением пластин в фиксирующий раствор их скрепляют, гистологический образец размещают в канавках, выполненных на одной из пластин, причем глубина и ширина канавок равны диаметру биопсийной иглы, а их длина - длине паза биопсийной иглы.
Недостатком данного способа, а также устройства для его осуществления является его сложность, а также невозможность получения ориентированного в заданной плоскости биопсийного материала ткани эндометрия
Стандартом получения биопсийного материала ткани эндометрия принято считать раздельное диагностическое выскабливание, при котором образцы ткани эндометрия и цервикального канала извлекаются через канал шейки матки с помощью специализированного инструмента - кюретки. В процессе забора биопсийного материала врач срезает поверхностный слой эндометрия и извлекает его из полости матки в виде множества фрагментов. Проблемой исследования таких образцов ткани является выраженная фрагментация и деформация тканевых фрагментов, поскольку они имеют очень рыхлую, тонкую структуру. Минимизация деформации на этапе забора и обработки материала очень важна для возможности изготовления качественного гистологического препарата, в котором срез проходит через все извлеченные для исследования фрагменты. Однако существующий стандарт исследования материала не предполагает обязательного наличия какого-либо вспомогательного подхода для обеспечения этих требований.
Существующие традиционные подходы обработки материала ткани эндометрия предполагают ручное выравнивание фрагментов ткани с помощью тонкой иглы или заостренной деревянной палочки на этапе заливки материала в парафин.
При этом метод имеет множество недостатков:
1. Существенно удлиняется процесс заливки материала, поскольку лаборант затрачивает время на обработку каждого из мелких фрагментов ткани.
2. Процесс проводки биопсийного материала, лишенного естественной единой для всех фрагментов основы, приводит к его значительной фрагментации.
3. Невозможность обеспечения правильного положения материала в будущем парафиновом блоке, поскольку предварительно фиксированные в формалине фрагменты ткани уже достаточно уплотнены и имеют деформацию, невозможно обеспечить расположение фрагментов в одной плоскости и, соответственно, выполнить в дальнейшем гистологический срез, проходящий через все исследуемые фрагменты ткани.
4. Ручной подход предполагает верное расположение по отношению к одному фрагменту, тогда как остальные фрагменты, непосредственно не удерживаемые иглой, заворачиваются и смещаются.
5. Фрагменты ткани значительно смещаются при извлечении иглы.
Технической задачей заявляемого решения является уменьшение фрагментации биопсийного материала и расположение биопсийного материала ткани эндометрия в заданной плоскости.
Техническим результатом заявляемого решения является уменьшение фрагментации биопсийного материала и получение гистологического среза, проходящего через большую площадь фрагментов ткани эндометрия.
Указанный технический результат достигается тем, что предложена адгезионная подложка для получения ориентированного биопсийного материала эндометрия, отличающаяся тем, что подложка выполнена из целлюлозы с размерами, совпадающими с размерами стандартных форм для заливки биопсийного материала в парафин, при этом толщина подложки составляет не менее 0,45 мкм, подложка выполнена из ацетата целлюлозы, размер поверхности подложки составляет 10×10 мм, а толщина - 0,5 мкм; подложка выполнена из нитрата целлюлозы, размер поверхности подложки составляет 15×15 мм, а толщина - 0,7 мкм; подложка выполнена из ацетата целлюлозы, размер поверхности подложки составляет 20×20 мм, а толщина - 1,0 мкм.
Возможность достижения технического результата обеспечивается тем, что
подложка из ацетата или нитрата целлюлозы обладает хорошими адгезионными свойствами, позволяющими надежно закреплять биопсийный материал эндометрия на подложке перед его фиксацией в формалине и последующей заливкой в парафине, при этом выбор размера такой подложки 1×1см, 1,5×1,5 см, 2×2 см определяется исследуемым объемом биопсийного материала, а минимальная толщина не менее 0,45 мкм обеспечивает прочность и сохранение плоскостной формы. При этом заливку биопсийного материала парафином можно выполнить как с подложкой, размещаемой вне плоскости будущего гистологического среза, так и отделить исследуемый материал от подложки основы перед заливкой материала парафином.
Биопсийный материал ткани эндометрия помещается на подложку большей площадью фрагмента путем извлечения его из кюретки при помощи пинцета или тонкой иглы, расправляется на ней, после чего опускается в емкость с фиксирующей жидкостью, в качестве стандартной фиксирующей жидкости используется раствор 10% нейтрального забуференного (фосфатный буфер рН 7,2-7,4) формалина. Фиксацию проводят по стандартной методике. В процессе парафиновой заливки материала лаборант переносит подложку с предварительно фиксированными в формалине, прошедшими обезвоживание и пропитку парафином фрагментами ткани в соответствующую по размеру форму для заливки, после чего процесс изготовления препарата продолжается по стандартной методике.
На фиг. 1 представлен вид адгезионной подложки для гистологической проводки ткани эндометрия с расположенным на ней биопсийным материалом.
Пример 1
Берут 15 диагностических образцов ткани эндометрия и помещают на подложку, выполненную из ацетата целлюлозы, размер поверхности подложки составляет 10×10 мм, а толщина 0,5 мкм; при этом на подложку каждый фрагмент размещается большей площадью путем извлечения его из кюретки при помощи пинцета или тонкой иглы, расправляется на ней, после чего опускается в емкость с фиксирующей жидкостью, в качестве стандартной фиксирующей жидкости используется раствор 10% нейтрального забуференного (фосфатный буфер рН 7,2-7,4) формалина. Фиксацию проводят по стандартной методике. В процессе парафиновой заливки материала подложку с предварительно фиксированными в формалине, прошедшими обезвоживание и пропитку парафином фрагментами ткани помещают в форму для заливки размером 10×10 мм, после чего процесс изготовления препарата продолжается по стандартной методике.
Пример 2
Берут 30 диагностических образца ткани эндометрия и помещают на подложку, выполненную из ацетата целлюлозы размер с размером поверхности подложки 15×15 мм, при толщине 0,7 мкм; при этом на подложку каждый фрагмент размещается большей площадью путем извлечения его из кюретки при помощи пинцета или тонкой иглы, расправляется на ней, после чего опускается в емкость с фиксирующей жидкостью (в качестве стандартной фиксирующей жидкости используется раствор 10% нейтрального забуференного (фосфатный буфер рН 7,2-7,4) формалина. Фиксацию проводят по стандартной методике. В процессе парафиновой заливки материала подложку с предварительно фиксированными в формалине, прошедшими обезвоживание и пропитку парафином фрагментами ткани помещают в форму для заливки размером 15×15 мм, после чего процесс изготовления препарата продолжается по стандартной методике.
Пример 3
Берут 60 диагностических образца ткани эндометрия и помещают на подложку, выполненную из ацетата целлюлозы с размером поверхности подложки 20×20 мм, при толщине 1,0 мкм; при этом на подложку каждый фрагмент размещается большей площадью путем извлечения его из кюретки при помощи пинцета или тонкой иглы, расправляется на ней, после чего опускается в емкость с фиксирующей жидкостью (в качестве стандартной фиксирующей жидкости используется раствор 10% нейтрального забуференного (фосфатный буфер рН 7,2-7,4) формалина. Фиксацию проводят по стандартной методике. В процессе парафиновой заливки материала подложку с предварительно фиксированными в формалине, прошедшими обезвоживание и пропитку парафином фрагментами ткани помещают в форму для заливки размером 20×20 мм, после чего процесс изготовления препарата продолжается по стандартной методике.
При проведении данных апробационных испытаний адгезионной подложки для ориентировки биопсийного материала было оценено 105 диагностических образцов (соскобов) ткани эндометрия. Во всех случаях при использовании описанной полезной модели в процессе заливки материала в парафин удалось добиться отсутствия фрагментации материала, осуществить его правильное расположение на подложке, полученные гистологические срезы были выполнены через все исследованные фрагменты, что позволяло провести точную морфологическую диагностику патологического процесса в соответствии с современными стандартами.
Основными преимуществами данного решения является:
1. Формирование правильно расположенных на основе фрагментов ткани с возможностью обеспечения гистологического среза на одном уровне.
2. Отсутствие необходимости в отделении подложки от тканевого фрагмента, поскольку материал подложки при заливке располагается вне плоскости будущего гистологического среза.
3. Возможность использования различных размеров подложки в зависимости от объема исследуемого материала.
4. Отсутствие фрагментации закрепленного на основе материала в процессе его обработки.
5. Снижение трудозатрат лаборанта-гистолога за счет работы со всем объемом материала, закрепленного на одной (единой для всех фрагментов) основе, а не с каждым отдельным фрагментом как при традиционном подходе.
Таким образом, решается техническая задача заявляемого решения: уменьшение фрагментации биопсийного материала и расположение биопсийного материала ткани эндометрия в заданной плоскости.