Продукция in vitro цитокинов Th1/Th2- типа клетками цельной периферической крови женщин с идиопатическим привычным выкидышем при проведении иммуноцитотерапии

2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue

Иммунология репродукции Immunology of reproduction

жёлых» молекул, однако данный механизм требует дальнейшего изучения.

Заключение. Таким образом, проведенные исследования показали, что, несмотря на отсутствие клиники, при бессимптомной бактериоспермии наблюдается секреция иммуноглоублинов классов M и G в спермоплазму, а уровень иммуноглобулина А существенно снижается.

Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ и Администрации Пермского края в рамках научного проекта «р_а 16-44-590429».

ПРОДУКЦИЯ IN VITRO ЦИТОКИНОВ Th1/Th2-ТИПА КЛЕТКАМИ ЦЕЛЬНОЙ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЖЕНЩИН С ИДИОПАТИЧЕСКИМ ПРИВЫЧНЫМ ВЫКИДЫШЕМ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ИММУНОЦИТОТЕРАПИИ

Вторушина В.В., Кречетова Л.В., Тетруашвили Н.К.

ФГБУ«Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова» Министерства здравоохранения РФ, Москва, Россия

Патогенез идиопатического привычного выкидыша (ПВ) связывают с дисбалансом иммунных реакций, происходящих между иммунной системой матери и феталь-ными клетками, который приводит к нарушению формирования толерантности к аллоантигенам плода и, следовательно, к отторжению плода на ранних сроках гестации. Признание иммунного генеза ранних потерь, с одной стороны, способствует поиску маркеров нарушенной толерантности, а с другой, поискам методов иммунокор-ригирующей терапии, самым дискуссионным из которых является иммуноцитотерапия (ИЦТ). Противоречивость выводов об эффективности ИЦТ связана с разнообразием методов подготовки клеток для введения, протоколов иммунизации, неоднородностью выборок пациентов для терапии. Сформулированы различные гипотезы о механизмах ее иммуномодулирующего действия. Наиболее распространенной была гипотеза о необходимости смены активного иммунного ответа провоспалительной направленности (Thl-типа), на фоне которого беременность у женщин с ПВ не пролонгируется, на ответ противовоспалительной направленности (1Ь2-типа). При отсутствии четких подтверждений этой гипотезы становится очевидной необходимость исследований соотношения Thl-типа и 1Ь2-типа ответов на ИЦТ у женщин с привычным выкидышем при разных исходах данной беременности.

Целью настоящей работы была оценка цитокиновой продукции митоген-стимулированными in vitro клетками цельной периферической крови пациенток с идиопати-ческим ПВ после предгестационной ИЦТ и в I триместре наступившей беременности.

В исследование были включены 26 пациенток с ПВ, 12 фертильных женщин вне беременности и 6 женщин в 12 недель физиологической беременности. Предгеста-ционная ИЦТ проводилась дважды с интервалом в один месяц на 5-9 день менструального цикла, заключалась во внутрикожном введении 50 млн клеток лейкоцитарной взвеси партнера в ладонную поверхность предплечья в 10-12 точек. Во время наступившей беременности ИЦТ проводили на сроке 5-6 и 8-9 недель гестации. Забор периферической крови производили вне беременности до проведения ИЦТ и после 2-х процедур ИЦТ на 18-22 день менструального цикла, во время беременности — на сроках 5-6, 8-9 и 12 недель. Для получения супернатантов

клеток цельной крови использовали набор «Цитокин-стимул-бест» (Вектор-Бест, Россия). В соответствии с рекомендацией производителя стимулирование цельной крови осуществлялось в СО2-инкубаторе при 37 °С в течение 24-х часов. Концентрацию цитокинов провоспалительной (IFNy, TNFa IL-ф, IL-2, IL-6, IL-8, Ш-12р70) и противовоспалительной (IL-4, IL-10) направленности оценивали с помощью мультиплексного анализа с использованием стандартного набора Human Th1/Th2 11-plex Ready-to-Use Kit (eBioscience, США) на проточном цитофлуориметре FACSCalibur (Becton Dickinson, США). Расчет результатов производили с помощью программы FlowCytomix-Pro-3.0.

Согласно полученным нами результатам до проведения ИЦТ у женщин с ПВ продукция TNFa, IL-1P, IL-2, IL-6, IL-8 была значимо ниже, чем у женщин контрольной группы, а продукция IFNy имела выраженную тенденцию к снижению. Проведение 2-х процедур ИЦТ в качестве предгестационной подготовки не оказало влияния на уровень продукции цитокинов у женщин с ПВ. При этом сохранились отличия, выявленные до ИЦТ, от продукции цитокинов у женщин контрольной группы — продукция TNFa, IL-1P, IL-2, IL-6, IL-8 осталась сниженной, а уровень IL-4 был значимо ниже. В 5-6 недель наступившей беременности после предгестацион-ной ИЦТ у пациенток с ПВ не наблюдалось изменений в характере цитокиновой продукции по сравнению с результатами, полученными после 2-ой процедуры ИЦТ вне беременности. После проведения 2-х процедур ИЦТ в I триместре беременности при обследовании в 8-9 и 12 недель гестации у женщин с ПВ достоверно преобладала продукция IFNy по сравнению с результатами после 2-ой процедуры ИЦТ вне беременности.

Полученные результаты указывают на преобладание ^2-направленности иммунного ответа у женщин с иди-опатическим привычным выкидышем до назначения им-муноцитотерапии. Проведение иммуноцитотерапии в качестве предгестационной подготовки и во время I триместра беременности приводит к преобладанию TM-типа цитокиновой продукции, необходимой для успешной пролонгации беременности. Для понимания значимости иммуноцитотерапии в программе лечения пациенток с идиопатическим привычным выкидышем требуется проведение дальнейших исследований.

ВЛИЯНИЕ КАРНИТИНА НА ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС СЕМЕННОЙ ПЛАЗМЫ ПРИ БЕСПЛОДИИ

Галимова Э.Ф., Гайсина А.Р., Травников О.Ю., Хайбуллина З.Г., Баймурзина Ю.Л., Гайсина А.Ф., Галимов Ш.Н.

Башкирский государственный медицинский университет, Уфа, Россия

Введение. Группу информативных маркеров репродуктивной функции образуют цитокины и родственные соединения — хемокины и ростовые факторы. Большинство известных цитокинов экспрессируется в зрелом яичке независимо от воспаления или активации иммунных процессов, т.е. их функции не ограничиваются регуляцией иммунитета. Цитокины важны для зачатия посредством как прямых воздействий на зародышевые клетки, эмбрион и негемопоэтические структуры в гонадах и матке, так и косвенного влияния путем создания иммуноло-гически восприимчивой среды для образования гамет,