КОМПОЗИЦИИ, ВКЛЮЧАЮЩИЕ НЕНАСЫЩЕННЫЕ ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ И СОЕДИНЕНИЯ, ВЫСБОЖДАЮЩИЕ ОКСИД АЗОТА, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ УСИЛЕНИЯ КОГНИТИВНОЙ ФУНКЦИИ И СВЯЗАННЫХ С НЕЙ ФУНКЦИЙ
COMPOSITIONS CONTAINING UNSATURATED FATTY ACIDS AND COMPOUNDS RELEASING NITROGEN OXIDE AND USING THEM FOR IMPROVING COGNITIVE FUNCTIONS AND RELATED FUNCTIONS

Перекрестные ссылки на родственные заявки
Данная заявка устанавливает приоритет Предварительной заявки на патент США, серийный №61/010,097, зарегистрированной 04 января 2008, и Предварительной заявки на патент США, серийный №61/137,382, зарегистрированной 30 июля 2008, раскрытия которых включены здесь посредством ссылки.
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится в целом к композициям и способам для усиления когнитивной функции, и в частности, к композициям, включающим ненасыщенные жирные кислоты и соединения, высвобождающие оксид азота, и их применению для усиления когнитивной функции у млекопитающих.
Уровень техники
Старые или стареющие животные часто страдают от некоторой степени нарушения когнитивной функции. Часто наблюдаются изменения, включающие ухудшение когнитивной функции, прогрессирующее с возрастом, и возрастные изменения морфологии головного мозга и цереброваскулярной функции, например, старение мозга. Возрастное или связанное с возрастом когнитивное ухудшение может само по себе проявляться во многих отношениях, например, нарушением кратковременной памяти, снижением способности к обучению, снижением скорости обучения, снижением внимания, снижением двигательной активности, и/или деменцией, среди прочих показателей. В некоторых случаях специфическая этиология такого когнитивного ухудшения остается неизвестной. В других случаях когнитивное ухудшение является результатом проявления или прогрессирования установленных заболеваний, расстройств или синдромов, например, болезни Альцгеймера (БА). Известно, что связанное с возрастом когнитивное ухудшение отличается от БА и может встречаться независимо от нее.
Животные модели когнитивного ухудшения существенно облегчают изучение таких состояний, включая их физиологию, неврологию, анатомию и патологию. Собаки являются полезной моделью животных, демонстрирующей связанное с возрастом когнитивное ухудшение обучения и памяти, которое может варьировать в зависимости от функции и когнитивной задачи (Adams В. et al., 2000a; Chan A.D.F. et al., 2002; Su M.-Y. et al., 1998; and Tapp P.D. et al., 2003). В то время как исследование такого нарушения у собак полезно само по себе, так как они являются домашними животными, тот факт, что наблюдающееся ухудшение отражает возрастные ухудшения у человека (Adams В. et al., 2000b), делает эти исследования еще более ценными. У старых собак развивается нейропатология, похожая на ту, что наблюдается как у людей при нормальном старении, так и у пациентов с БА, такая как бета-амилоидный белок (Cotman C.W. and Berchtold, 2002; and Cummings B.J. et al., 1996). Однако у собак отмечаются не все признаки БА, в частности, не наблюдаются тау-содержащие нейрофибриллярные клубки (Dimakopoulos А.С. et al., 2002). Таким образом, заболевание у животных отличается, и обозначается как синдром когнитивной дисфункции собак (СКДС).
Как у здоровых, так и у больных собак, таких как те, у которых поставлен диагноз СКДС, может клинически отмечаться прогрессирующее когнитивное ухудшение и невропатологические изменения (London E.D. et al., 1983). Кроме того, у стареющих собак и у тех, у кого поставлен диагноз СКДС, проявляются различные нарушения поведения. Например, они могут не отзываться на свое имя или на знакомые команды, могут теряться или путаться даже в знакомом окружении, могут больше не приветствовать своих хозяев или гостей и не реагировать на них, могут проявлять нарушенную дневную активность, могут ходить по кругу, могут не проявлять привязанности, и могут терять контроль над мочевым пузырем и кишечником.
Хотя были достигнуты успехи, остается потребность в разработке композиций и способов, улучшающих когнитивную способность, в частности у стареющих людей и других животных. Также необходимы композиции и способы для лечения и/или профилактики когнитивного ухудшения, нейродегенеративных состояний, инсульта и деменции. Такие средства лечения будут полезны для улучшения общего качества жизни для всех, принимающих лечение. У домашних животных эти средства лечения будут повышать удовлетворение хозяина и улучшать связь хозяина и домашнего животного.
Сущность изобретения
Таким образом, задачей настоящего изобретения является обеспечение композиций и способов, пригодных для повышения когнитивной функции у животного.
Другой задачей настоящего изобретения является обеспечение способов для снижения или профилактики ухудшения социального взаимодействия, снижения или профилактики возрастных изменений поведения, повышения способности к обучению, поддержки оптимальной функции головного мозга, облегчения обучения и запоминания, уменьшения потери памяти, замедления старения головного мозга, профилактики или лечения инсультов, и профилактики или лечения деменции у животных.
Другой задачей изобретения является обеспечение объекта производства в форме наборов, содержащих одно или более из соединений, пригодных для производства композиции настоящего изобретения в комбинации с продуктами питания или другими ингредиентами и устройствами, пригодными для повышения когнитивной функции у животного.
Другой задачей изобретения является обеспечение упаковки, включающей композицию настоящего изобретения и этикетку, прикрепленную к упаковке, указывающую на содержимое упаковки и/или эффекты при применении композиции у животного.
Одна или более из этих задач решаются с применением новых композиций и способов для повышения когнитивной функции. В целом, композиции включают одну или более ненасыщенную жирную кислоту и соединения, высвобождающие оксид азота. Способы в целом включают применение композиций в количестве, эффективном для повышения когнитивной функции, в частности для профилактики, снижения и/или замедления возрастного когнитивного ухудшения, когнитивного нарушения, нейродегенеративных состояний, инсульта и деменции у животных.
Другие и дополнительные задачи, характеристики и преимущества настоящего изобретения легко понятны для специалистов в данной области техники.
Определения
Далее могут применяться следующие аббревиатуры: АК - арахидоновая кислота, АЛК - альфа-линоленовая кислота, ANOVA - дисперсионный анализ, ДГК -докозагексаеновая кислота, ДПК - докозапентаеновая кислота, ЭПК - эйкозапентаеновая кислота, ЛК - линолевая кислота, НЖК - ненасыщенные жирные кислоты (как применяется здесь, НЖК относится к одной или более таким жирным кислотам), NO - оксид азота, NO-ВС - соединения, высвобождающие оксид азота, и L-Арг - L-аргинин.
Термин «животное» означает любое животное, которое может получать пользу от одного или более способов настоящего изобретения, включая повышение когнитивной функции; изменение когнитивной, двигательной или поведенческой функции; снижение или профилактику уменьшения социального взаимодействия; снижение или профилактику возрастных изменений поведения; повышение способности к обучению, поддержку оптимальной функции головного мозга, облегчение обучения и запоминания, уменьшение потери памяти, замедление старения головного мозга, профилактику или лечение инсультов, и профилактику или лечение деменции; и/или поддержку ясности и четкости сознания. В основном животное является человеком, птицей, коровой, собакой, лошадью, кошкой, козлом, волком, мышью, овцой и свиньей. Предпочтительно, термин «животное» означает животное, для которого необходимо повышение когнитивной функции, или которое может получать пользу от улучшения когнитивной функции. «Домашнее животное» является любым домашним животным, и включает без ограничения кошек, собак, кроликов, морских свинок, хорьков, хомячков, мышей, песчанок, лошадей, коров, коз, овец, ослов, свиней и тому подобных. Предпочтительно животное является человеком или домашним животным, таким как собака или кошка.
Термин «повышение когнитивной функции» означает одно или более из повышения когнитивной, двигательной или поведенческой функции у животного, или профилактики, уменьшения или замедления ухудшения когнитивной, двигательной или поведенческой функции у животного.
Термин «ненасыщенные жирные кислоты» или «НЖК» означает полиненасыщенные жирные кислоты или мононенасыщенные жирные кислоты, включая монокарбоновые кислоты, имеющие по меньшей мере одну двойную связь. НЖК включают (n-6) жирные кислоты, такие как линолевая кислота (ЛК) и арахидоновая кислота (АК), и (n-3) жирные кислоты, такие как эйкозапентаеновая кислота (ЭПК), альфа-линоленовая кислота (АЛК), докозапентаеновая кислота (ДПА) и докозагексаеновая кислота (ДГК). НЖК также включают миристолевую кислоту, пальмитолевую кислоту, олеиновую кислоту, линолевую кислоту, цис-вакценовую кислоту и эруковую кислоту.
Термин «рыбий жир» обозначает жирный или масляный экстракт, относительно богатый НЖК, неочищенный или очищенный, полученный из морского животного, предпочтительно холодноводной рыбы, такой как, без ограничения, лосось, тунец, скумбрия, сельдь, морской окунь, полосатый окунь, палтус, зубатка, и сардины; а также акулы, креветки и моллюска, и их любых комбинаций. Рыбий жир в основном является термином, используемым поставщиками ингредиентов, и охватывающим диапазон продуктов с различным содержанием и чистотой НЖК.
Термин «соединения, высвобождающие оксид азота» или «NO-ВС» означает любое соединение или соединения, которые вызывают высвобождение оксида азота у животного или могут приводить к нему. Примеры таких соединений включают L-аргинин, L-аргинин-содержащие пептиды и белки, и их аналоги или производные, которые, как известно или определено, высвобождают оксид азота, такие как аргинин-альфа-кетоглутарат, GEA 3175, натрия нитопруссид, глицерил-тринитрат, S-нитрозо-N-ацетил-пеницилламин, нитроглицерин, S-NO-глутатион, NO-конъюгированные нестероидные противовоспалительные средства (например, NO-напроксен, NO-аспирин, NO-ибупрофен, NO-диклофенак, NO-флубипрофен, и NO-кетопрофен), NO-высвобождающее Соединение-7, NO-высвобождающе соединение-5, NO-высвобождающее соединение-12, NO-высвобождающее соединение-18, диазениум диолаты и их производные, диэтиламин NONOaT, и любое органическое или неорганическое соединение, биомолекулу, или его аналог, гомолог, конъюгат или производное, которое может вызывать высвобождение оксида азота, в частности «свободного» NO, у животного. NO-ВС также определяются как включающие добавки, которые могут быть превращены в соединения, высвобождающие оксид азота при метаболизме в организме, например, цитруллин и орнитин.
Термин «эффективное количество» означает количество соединения, материала, композиции, медикамента, или другого материала, эффективное для достижения конкретного биологического результата. Такой результат может включать без ограничения одно или более из следующего: повышение когнитивной функции, повышение активности в дневное время суток, улучшение способности к обучению (скорости или легкости обучения), улучшение внимания, улучшение социального поведения, улучшение двигательной активности и/или улучшение цереброваскулярной функции, в частности у стареющих животных. В различных воплощениях «эффективное количество» относится к количеству, подходящему для профилактики уменьшения одного или более из указанных качеств, или в некоторых воплощениях, для улучшения одного или более из вышеприведенных качеств, например, когнитивной функции или активности, скорости обучения или способности к обучению, способности решать проблемы, диапазона внимания и способности к сосредоточению на задаче или проблеме, двигательной функции или активности, социального поведения, и тому подобного. В других воплощениях эффективное количество пригодно для снижения степени или скорости ухудшения когнитивных навыков или функций животного, и/или эффективное количество пригодно для замедления проявления такого ухудшения. Такая эффективность может быть достигнута, например, путем применения композиций настоящего изобретения у животного или популяции животных. Предпочтительно профилактика, уменьшение или замедление такого ухудшения, или улучшение у индивидуума или популяции относится к группе, например, контрольному животному или популяции, не получающей лечение, или получающей композицию или медикамент.
Термин «когнитивная функция» относится к специальной, нормальной или надлежащей физиологической активности головного мозга, включающей одно или более из следующего: ментальная стабильность, способность к запоминанию/вспоминанию, способность к решению проблем, способность к рассуждению, способность к размышлению, способность к различению или осуществлению выбора, способность к обучению, легкость обучения, восприятие, интуиция, внимание и психическая ориентированность. «Повышенная когнитивная функция» или «улучшенная когнитивная функция» относится к любому улучшению специальной, нормальной или надлежащей физиологической активности головного мозга, включая одну или более из следующего: ментальная стабильность, способность к запоминанию/вспоминанию, способность к решению проблем, способность к рассуждению, способность к размышлению, способность к различению или осуществлению выбора, способность к обучению, легкость обучения, восприятие, интуиция, внимание и психическая ориентированность, как оценивается любыми средствами, пригодными в данной области техники.
Термин «поведение» означает все, что делает животное в ответ на что-либо, или реакцию на данную стимуляцию или набор условий. «Усиленное поведение» или «улучшенное поведение» означает любое улучшение в том, что делает животное в ответ на что-либо, или в реакции на данный стимул или набор условий. «Поведение» применяют здесь в качестве синонима «поведенческим функциям».
Термин «двигательная функция» или «двигательная активность» означает биологическую активность тканей, которые влияют на движение у животного или вызывают его. Такая ткань включает без ограничения мышцы и моторный нейроны. «Повышенная двигательная активность (или функция)» или «улучшенная двигательная активность (или функция)» относятся к любому улучшению биологической активности тканей, влияющих на движение у животного или вызывающих его.
Термин «ухудшение» любой из вышеуказанных категорий или специфических типов качеств или функций у индивидуума (фенотипа) в целом противоположен улучшению или повышению качества или функции. «Эффективное количество» композиции может быть количеством, необходимым для профилактики ухудшения в целом или для профилактики ухудшения по существу («профилактики» ухудшения), для снижения степени или скорости ухудшения («снижения» ухудшения) на протяжении любого интервала времени или в любой момент времени, или для замедления проявления, степени или прогрессирования ухудшения («замедления» ухудшения). Профилактика, снижение, или замедление «ухудшения» часто являются более полезной сравнительной основой при работе со стареющими животными, не страдающими заболеванием (например, «здоровыми стареющими животными»). Профилактика, снижение и замедление любого из проявления вредного качества или состояния, или скорости ухудшения конкретной функции может быть измерено и оценено на индивидуальной основе, или в некоторых воплощениях на основе популяции. Совокупный эффект профилактики, снижения или замедления должен состоять в меньшем ухудшении когнитивной, двигательной или поведенческой функции в единицу времени, или в данной конечной точке. Другими словами, в идеале, для индивидуума или популяции когнитивная, двигательная и поведенческая функция сохраняются на максимально возможном уровне в течение как можно более длительного времени. Таким образом, не требуется, чтобы это было совокупным повышением когнитивной, двигательной или поведенческой функции в любом воплощении. С этой целью индивидуум может сравниваться с контрольным индивидуумом, группой или популяцией. Популяция может также сравниваться с фактическим индивидуумом, для нормализованных измерений для индивидуума, или с группой или популяцией, как это удобно.
Термин «стареющий» означает имеющий большой возраст, так что животное имеет возраст, превышающий 50% от средней продолжительности жизни для его конкретного вида и/или породы в пределах вида. Например, если средняя продолжительности жизни для данной породы собак составляет 10 лет, то собака данной породы старше 5 лет считается «стареющей» в терминах настоящего изобретения. «Здоровыми стареющими животными» являются те, у которых нет известных заболеваний, в частности заболеваний, приводящим к таким когнитивным нарушениям, которые могут влиять на результаты. В исследованиях с применением здоровых стареющих животных группами животных предпочтительно являются также здоровые стареющие животные, хотя в качестве образцов сравнения могут подходить другие здоровые животные с подходящими когнитивными, двигательными или поведенческими функциями. Если применяются животные с диагнозом специфического заболевания, или когнитивными, двигательными или поведенческими ограничениями, то группа животных должна включать животных, имеющих подобный диагноз, или тех, у которых присутствуют подобные признаки заболевания или когнитивного, двигательного или поведенческого ограничения.
Термин «корм» или «продукт питания» или «пищевая композиция» означает продукт или композицию, предназначенные для потребления животным, включая человека, и обеспечивающие питание для животного.
Как применяется здесь, «продукт питания, изготовленный для потребления человеком» является любой композицией, специально предназначенной для потребления человеком. Термин «корм для животного» или «пищевая композиция для животного» означает композицию, предназначенную для потребления животными, предпочтительно домашними животными. «Полный и диетически сбалансированный корм для домашних животных» является кормом, содержащим все известные необходимые питательные вещества для назначенного реципиента или потребителя корма, в соответствующих количествах и пропорциях, на основании, например, рекомендаций признанных авторитетов в области питания домашних животных. Такие корма, таким образом, способны служить в качестве единственного источника диетического потребления для поддержания жизни или стимуляции продукции, без добавления дополнительных источников питания. Диетически сбалансированные пищевые композиции для животных широко известны и применяются в данной области техники. Этот термин включает любой продукт питания, корм, легкую закуску, диетическую добавку, угощение, пищевой суррогат, или заменитель пищи, предназначенный для человека или другого животного. Продукт питания для животных включает пищу или корм, предназначенный для любых домашних или диких видов. В предпочтительных воплощениях продукт питания для животных представляет полноценную питательную композицию, например, гранулированный, экструдированный или сухой корм. Примеры таких кормов для животных включают экструдированный корм для животных, такой как корм для собак и кошек.
Термин «диетическая добавка» означает продукт, предназначенный для потребления в дополнение к нормальному рациону животного. Диетические добавки могут быть в любой форме, например, твердой, жидкой форме, форме таблеток, капсул, порошка и тому подобного. Предпочтительно они обеспечиваются в удобных дозированных формах. В некоторых воплощениях они обеспечиваются в оптовых потребительских упаковках, таких как оптовые потребительские порошки, жидкости, гели или масла. В другом воплощении добавки обеспечиваются в оптовых количествах для включения в другие продукты питания, такие как закуски, угощения, батончики с добавками, напитки и тому подобное.
Термин «долговременное применение» означает периоды повторного применения или потребления свыше одного месяца. Для некоторых воплощений предпочтительными являются периоды больше двух, трех или четырех месяцев. Также предпочтительными являются более длительные периоды, включающие более 5, 6, 7, 8, 9 или 10 месяцев. Также являются предпочтительными периоды более 11 месяцев или 1 года. В изобретение включено долговременное применение, превышающее 1, 2, 3 или более лет. Для некоторых стареющих животных, животное будет продолжать потребление на регулярной основе в течение оставшейся жизни. Иногда это обозначается как потребление в течение «длительных» периодов.
Термин «регулярная основа» означает прием композиций или употребление композиций по меньшей мере один раз в месяц, более предпочтителен прием раз в неделю. Более частый прием или употребление, например, два, три или семь раз в неделю, выполняется в предпочтительных воплощениях. Еще более предпочтительными являются режимы, включающие потребление по меньшей мере один раз в сутки. Специалисту в данной области техники понятно, что уровень в крови соединения или конкретных метаболитов этого соединения, или тех, которые возникают в результате потребления этого соединения, может быть полезным инструментом для оценки или определения частоты приема дозы. Здесь применяется частота, обеспечивающая поддержание необходимого уровня в крови определяемого соединения в приемлемых диапазонах, независимо от того, выражена ли она здесь специально в примерах. Специалисту в данной области техники понятно, что частота приема дозы является функцией композиции, предназначенной для потребления или применения, и что для некоторых композиций может требоваться более или менее частое применение для поддержания необходимого уровня определяемого соединения в крови.
Термин «пероральное применение» или «пероральный прием» означает, что животное поглощает или человек получает указания для кормления, или кормит животное одной или более композициями, описанными здесь. Когда человек получает указание для кормления, это указание может быть таким, чтобы инструктировать и/или информировать человека о том, что применение композиции может и/или будет обеспечивать упомянутый эффект, например, усиливать когнитивную функцию, улучшать функцию печени, повышать дневную активность, улучшать способность к обучению, повышать внимание, улучшать социальное поведение, улучшать двигательную активность, и/или улучшать цереброваскулярную функцию, или предотвращать, снижать или замедлять ухудшение таких вышеописанных функций или качеств. Такое указание может быть устным указанием (например, устной инструкцией, например, от врача, ветеринара, или другого специалиста здравоохранения, или радио или телевидения (т.е. рекламой)), или письменным указанием (например, посредством письменной инструкции, например, от врача, ветеринара, или другого специалиста здравоохранения (например, рецептом), специалиста по продажам, или организации (например, через маркетинговые брошюры, буклеты, или другие инструктирующие принадлежности); посредством письменных средств (например, Интернета, электронной почты, веб-сайта, или других компьютерных сред), и/или упаковки, связанной с композицией (например, этикетки на контейнере, содержащем композицию); или их комбинацией (например, этикеткой или упаковочным вкладышем с инструкциями о доступе к веб-сайту для дополнительной информации).

Термин «когнитивное лекарственное средство» означает любое соединение, композицию или лекарственное средство, пригодное для влияния на когнитивную функцию, например, ингибиторы моноаминоксидазы В, такие как селегилин; вазодилятаторы, такие как ницерголин и винпоцетин; фосфатидилсерин; пропентофилин; антихолинэстеразные средства (ингибиторы холинэстеразы), такие как такрин, галантамин, ривастигмин, винпоцетин, донепезил (Арицепт (донепезил гидрохлорид)), метрифонат, и физостигмин; лецитин; холиновые холиномиметики, такие как миламелин и ксаномелин; ионотропные антагонисты рецептора Н-метил-В-аспартата (NDMA), такие как мемантин; противовоспалительные лекарственные средства, такие как преднизолон, диклофенак, индометацин, пропентофилин, напроксен, рофекоксин, ибупрофен и сулдинак; металл-хелатирующие агенты, такие как клихинол; Ginkgo biloba; бисфосфонаты; селективные модуляторы рецептора эстрогена, такие как ралоксифен и эстроген, фитоэстроген; ингибиторы бета и гамма секретазы; лекарственные средства, снижающие уровень холестерина, такие как статины; кальцитонин; ризедронат; алендронат и их комбинации.
Термин «в сочетании» означает, что композицию, включающую НЖК, NO-ВС, пищевую композицию, когнитивное лекарственное средство или другое соединение или композицию настоящего изобретения применяют у животного (1) вместе с пищевой композицией или (2) отдельно, с одной и той же или различной частотой, посредством одного и того же или другого пути применения, примерно в одно и то же время или периодически. «Периодически» означает, что агент применяют по режиму дозирования, подходящему для конкретного агента, и что пищу дают животному обычным образом, который подходит для конкретного животного. «Примерно в то же время» в целом означает, что пищу и агент применяют в одно и то же время или в пределах примерно 72 часов между тем и другим. «В сочетании» конкретно включает схемы применения, в которых когнитивное лекарственное средство применяют в течение предписанного периода, а композиции, включающие НЖК и NO-ВС, применяют независимо.
Термин «индивидуальный» по отношению к животному означает индивидуального животного любого вида или класса.
Термин «микроорганизм» охватывает по меньшей мере бактерий, плесень и другие грибки и дрожжи. Пробиотики являются полезными микроорганизмами, которые могут выжить или даже размножиться и разрастаться в желудочно-кишечном тракте животного. Пробиотики могут вносить вклад в общее здоровье животного в целом, и в частности, в здоровье желудочно-кишечного тракта животного.
Термин «единая упаковка» означает, что компоненты набора физически связаны, в одном или с одним или более контейнерами, и считаются единицей для производства, распространения, продажи, или применения. Контейнеры включают, без ограничения, мешки, ящики или картонные коробки, бутылки, упаковки любого типа или дизайна или материала, внешнюю обертку, целлофановую оболочку, прикрепляющие компоненты (например, скрепляющие скобками, приклеивающие, или тому подобные), или комбинации любых из вышеописанных. Например, набор в единой упаковке может обеспечивать контейнеры с индивидуальными композициями и/или пищевыми композициями, физически связанными так, что они считаются единицей для производства, распространения, продажи и применения.
Термин «виртуальная упаковка» означает, что все компоненты набора связаны с помощью инструкций на одном или более физическом или виртуальном компоненте набора, указывающем пользователю, как получить другие компоненты, например, на мешке или другом контейнере, содержащем один компонент и инструкции, рекомендующие пользователю обратиться на веб-сайт, посмотреть зарегистрированное послание или службу факсов, посмотреть визуальное послание, или связаться с обслуживающим персоналом или инструктором для получения, например, инструкций о том, как применять набор, или информацию о безопасности или техническую информацию об одном или более компонентах набора. Примеры информации, которая может обеспечиваться как часть виртуального набора, включают инструкции по применению; информацию о безопасности, такую как перечень данных о безопасности материалов; информацию о токсикологическом контроле; информацию о потенциальных побочных реакциях; результаты клинических исследований; диетологическую информацию, такую как пищевой состав или калорийный состав; общую информацию о когнитивной, поведенческой или двигательной функции; заболеваниях, которые могут влиять на когнитивную, поведенческую или двигательную функцию; лечении когнитивной, поведенческой или моторной функции; или общую информацию о лечении или профилактике когнитивной, поведенческой, или двигательной функции; самопомощи, относящейся к когнитивной, поведенческой или двигательной функции; информацию для лица, осуществляющего уход за животными с когнитивными, поведенческими или двигательными проблемами; и применении, благоприятных эффектах, и возможных побочных эффектах или противопоказаниях для когнитивных лекарственных средств.
Термин «здоровье и благополучие животного» означает полное физическое, душевное и социальное благополучие животного, а не просто отсутствие заболевания или недомогания.
Термин «продление активной жизни» означает продление числа лет здоровой жизни животного, а не просто продление числа лет жизни животного, например, животное будет здоровым в течение активной части его жизни в течение относительно долгого времени.
Все проценты, приведенные здесь, являются массовыми процентами композиции по отношению (в расчете на) к массе сухого вещества, если не установлено иначе. Специалисту в данной области техники понятно, что термин «в расчете на сухое вещество» означает, что концентрация ингредиента в процентах в композиции измерена или определена после удаления какой-либо свободной влаги из композиции.
Как применяется в изобретении, используемые диапазоны являются условными, чтобы избежать установления размера и описания всякого и каждого значения в пределах диапазона. В пределах диапазона может быть выбрано любое подходящее значение, где это уместно, такое как верхнее значение, нижнее значение, или предельное значение диапазона.
Как применяется здесь и в формуле изобретения, слово в форме единственного числа включает множественное число, и наоборот, если в контексте ясно не указано противоположное. Например, обозначения «детеныш», «способ» или «корм» включают множество таких «детенышей», «способов» или «кормов». Приведенные здесь обозначения, например, «антиоксидант», включают множество таких антиоксидантов, в то время как ссылка на «предметы» включает отдельный предмет. Подобным образом, слова «включать», «включает» и «включающий» должны интерпретироваться включительно, а не исключительно. Подобным образом термины «содержать», «содержащий» и «или» должны истолковываться как включающие, если такая конструкция не запрещается ясно в контексте. При использовании термина «примеры», в частности, сопровождающегося перечислением терминов, он применяется просто в качестве образца и иллюстрации, и не должен считаться ограничивающим или всеобъемлющим.
Способы и композиции и другие преимущества, раскрытые здесь, не ограничиваются конкретной методологией, протоколами и реагентами, описанными здесь, поскольку, как понятно специалисту в данной области техники, они могут варьировать. Далее, терминология, применяемая здесь, предназначена только для описания частных воплощений, и не предназначена для ограничения объема того, что раскрывается или заявляется.
Если не определено иначе, все технические и научные термины, термины данной области техники, и аббревиатуры, применяемые здесь, имеют значение, обычно принятое специалистами в данной области(-ях) техники, или в области(-ях), где применяется термин. Хотя любые композиции, способы, предметы производства или другие средства или материалы, подобные или эквивалентные тем, что описаны здесь, могут применяться для осуществления настоящего изобретения, предпочтительными композициями, способами, предметами производства, или другими средствами или материалами являются те, что описаны здесь.
Все патенты, заявки на патент, публикации, технические и/или научные статьи, и другие ссылки, цитированные или упомянутые здесь, включены здесь посредством ссылки во всей полноте, до степени, позволенной законом. Обсуждение этих ссылок предназначено просто для обобщения притязаний, приведенных здесь. Не допускается, что любые такие патенты, заявки на патент, публикации или ссылки, или их любая часть, являются релевантным материалом предшествующего уровня техники. Право оспорить точность и применимость любого утверждения таких патентов, заявок на патент, публикаций и других ссылок в качестве релевантного материала предшествующего уровня техники особо охраняется. Полные цитаты для публикаций, не процитированных полностью в пределах описания, приведены далее в конце описания.
Раскрытие изобретения
В одном аспекте изобретение обеспечивает композиции, пригодные для усиления когнитивной функции у животного. Композиции включают одну или более ненасыщенную жирную кислоту (НЖК) и одно или более соединение, высвобождающее оксид азота (NO-ВС) в количестве, эффективном для повышения когнитивной функции у животного. В некоторых воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или их комбинации. Изобретение основано на том открытии, что композиции, включающие НЖК и NO-ВС, с витаминами В и/или антиоксидантами или без них, являются эффективными для усиления когнитивной функции у животных. Композиции являются пригодными для влияния на одно или более из когнитивной, двигательной или поведенческой функции у животных, независимо от здоровья или возраста, например, у молодых, взрослых или старых животных. Композиции повышают одну или более когнитивную, двигательную или поведенческую функцию у животных, включая здоровых животных всех возрастов или животных, подверженных или страдающих ухудшением когнитивной функции в результате процесса старения или заболевания. Подобным образом, композиции предотвращают, снижают или замедляют ухудшение когнитивной функции у животных, в частности стареющих животных, подверженных или страдающих ухудшением когнитивной функции в результате процесса старения или заболевания. Композиции являются особо эффективными для уменьшения или замедления эффектов возрастного или связанного с заболеванием когнитивного ухудшения у людей и домашних животных, особенно собак и кошек. Композиции также являются пригодными для повышения когнитивной функции, когда когнитивное ухудшение вызвано изменением функции головного мозга, в особенности старением головного мозга, или повреждением при заболевании, в особенности при инсультах.
НЖК может быть любой НЖК, пригодной для применения у животного. НЖК могут быть получены из любого подходящего источника, синтетического или природного. Предпочтительными источниками НЖК являются природные источники таких жирных кислот, и включают без ограничения, примулу; темно-зеленые овощи, такие как шпинат; водоросли и сине-зеленые водоросли, такие как спирулина; семена растений и масла из растений, таких как лен, канола, соя, грецкий орех, тыква, сафлор, кунжут, зародыш пшеницы, подсолнечник, кукуруза и конопля; и рыбы, такой как лосось, тунец, скумбрия, сельдь, морской окунь, полосатый окунь, палтус, зубатка, сардины, акула, креветка и моллюск; и экстракты масел из любого одного или более из вышеизложенного. НЖК может также быть синтетической, и как таковая может быть произведена в соответствии с любыми способами, пригодными в данной области техники, из любого подходящего исходного материала. НЖК может включать смесь любой одной или более НЖК или любого одного или более источника, такого как те, что приведены в примерах выше, природного или синтетического. В предпочтительных воплощениях НЖК являются полиненасыщенными жирными кислотами с длинной цепью (ДЦПНЖК), включающими одну или более монокарбоновую кислоту, имеющую по меньшей мере 20 углеродных атомов и по меньшей мере две двойных связи. Предпочтительно, НЖК являются (n-6) жирными кислотами или (n-3) жирными кислотами, наиболее предпочтительно n-3 ДЦПНЖК.
NO-ВС может быть любым NO-ВС, пригодным для применения у животного. NO-ВС может быть получено из любого подходящего источника, синтетического или природного. В различных воплощениях NO-ВС включает аргинин. Предпочтительные источники аргинина включают, без ограничения, животные и растительные белки. Примеры растений, считающихся богатыми аргинином и пригодных для применения здесь, включают без ограничения бобовые, такие как соя, люпины, и плоды рожкового дерева; зерновые, такие как пшеница и рис; и фрукты, такие как виноград. Семена и орехи таких растений, как какао и арахис, также считаются богатыми аргинином, и таким образом, пригодны для применения здесь. Некоторыми примерами подходящих животных белков, считающихся богатыми аргинином, являются белки продуктов домашней птицы и рыбы. NO-ВС могут также быть произведены синтетически, в соответствии с любыми подходящими способами в данной области техники. Как и для НЖК, содержание NO-ВС в любой композиции, раскрытой здесь, может включать смесь любого природного или синтетического NO-ВС. Как НЖК, так и NO-ВС, природные или синтетические, могут быть получены непосредственно или обеспечены из коммерческого источника.
В одном аспекте композиции дополнительно включают один или более витаминов группы В, один или более антиоксидантов, или их комбинации. Витамины группы В могут быть любыми витаминами В, пригодными для применения у животного. Витамины группы В включают витамины В1 (тиамин), В2 (рибофлавин), ВЗ (также обозначаемый как Р или РР) (ниацин, включая никотиновую кислоту и/или никотинамид), В5 (пантотеновая кислота), В6 (пиридоксин), В7 (также обозначаемый как Н) (биотин), В8 (мио-инозитол), В9 (также обозначаемый как М или В-с) (фолиевая кислота), В 12 (кобаламин), или их соли, конъюгаты или производные, для которых установлена активность витаминов группы В. Комбинации любого из вышеизложенного также применяются здесь, и иногда упоминаются как «смеси» витаминов группы В. Поскольку потребность в витаминах различается у разных видов, не все из перечисленных соединений считаются витаминами для всех видов. Например, поскольку известно, что мио-инозитол может синтезироваться у человека, он уже не считается витамином, поскольку не требуется для адекватного питания человека.
Антиоксиданты могут быть любыми антиоксидантами, пригодными для применения у животного. Антиоксиданты хорошо известны в данной области техники, в частности в области пищевой технологии и пищевых рецептур. Природные антиоксидантные соединения включают витамины (такие как А, С и Е, и их производные, конъюгаты или аналоги), а также растительные экстракты, включая экстракты из фруктов, овощей, трав, семян, и других типов и/или частей растений. Такие соединения, как α-липоевая кислота, хлорофилл и его производные, глутатион, убихинолы (например, кофермент Q10), каротиноиды (например, ликопен), флавоноиды, фенольные кислоты и полифенолы, и пикногенол, хорошо известны как отличные антиоксиданты. Некоторые примеры растительных источников антиоксидантов включают источники из фруктов, таких как ягоды (вишня, ежевика, земляника, малина, водяника, голубика, черника/дикая голубика, черная смородина), гранат, виноград, апельсин, слива, ананас, киви и грейпфрут; источники из овощей, включая капусту кормовую, перец чили, краснокочанную капусту, перец, петрушку, артишок, брюссельскую капусту, шпинат, лимон, имбирь, чеснок и красную свеклу; источники из сухофруктов, таких как абрикосы, сливы, и финики; из бобовых, включая кормовые бобы, бобы пинто, и сою. Источники также включают орехи и семена, такие как орех пекан, грецкий орех, фундук, арахис и семена подсолнечника; зерновые, такие как ячмень, просо, овес, и кукуруза. Многие природные антиоксиданты также доступны из широкого спектра специй, включая гвоздику, корицу, розмарин и душицу. Менее широко известные источники антиоксидантов включают Ginkgo biloba, и тропические растения, такие как линдера и папайя. Антиоксидантные свойства различных видов чая и зеленого чая, а также ферментированных продуктов, таких как красное вино, привлекли значительный интерес в последние годы, и таким образом, являются пригодными для применения здесь. Селен является отличной ловушкой кислорода и хорошо работает, особенно с витамином или родственными соединениями токоферола. Синтетические диетические антиоксиданты включают бутилированный гидроксианизол (БГА) и бутилированный гидрокситолуол (БГТ), которые обычно применяются в продуктах питания. Любое из вышеприведенного, вместе или в комбинации, пригодно для применения здесь, как комбинации природных и синтетических антиоксидантов. В одном воплощении антиоксиданты включают астаксантин по отдельности или в комбинации с другими антиоксидантами.
Композиции включают НЖК и NO-ВС, и витамины В и антиоксиданты, если они включены в композицию в количестве, эффективном для усиления когнитивной функции. В целом композиции включают от примерно 0,1% до примерно 50% НЖК, и от примерно 0,1% до примерно 20% NO-ВС. При включении в композицию, композиция включает от примерно 0,1 до 40-кратного количества от рекомендуемой суточной нормы (РСН) витаминов В и от примерно 0,0001% до примерно 25% антиоксидантов. В различных воплощениях композиции включают от примерно 1 до примерно 30% НЖК, предпочтительно от примерно 1 до примерно 15% НЖК; и от примерно 1 до примерно 15% NO-ВС, предпочтительно от примерно 1 до примерно 10% NO-ВС. В различных воплощениях витамины В включают от примерно 1 до 20-кратного количества от РСН, предпочтительно от примерно 1 до 10-кратного количества от РСН, а антиоксиданты включают от примерно 0,0001% до примерно 15%, наиболее предпочтительно от примерно 0,001% до примерно 5%, наиболее предпочтительно от примерно 0,001% до примерно 2%. В одном воплощении композиции включают НЖК, NO-ВС, смесь одного или более витаминов В и один или более антиоксидантов в таких количествах. В одном воплощении композиция включает от примерно 0,5 г до примерно 10 г НЖК, и от примерно 0,5 г до примерно 10 г NO-ВС, с РСН для витаминов В и антиоксидантов или без них.
Композиции могут дополнительно включать такие вещества, как минералы, другие витамины, функциональные добавки; включая, например, вкусовые вещества, красители, эмульгаторы, антимикробные средства или другие консерванты. Минералы, которые могут быть пригодными для таких композиций, включают, например, кальций, фосфор, калий, натрий, железо, хлорид, хлор, бор, медь, цинк, магний, марганец, йод, селен и тому подобное. Примеры дополнительных витаминов, пригодных для применения здесь, включают такие жирорастворимые витамины, как A, D, Е и K. Инулин, аминокислоты, ферменты, коферменты и тому подобные могут быть пригодны для включения в различные воплощения.
В одном воплощении композиции являются пищевыми композициями, включая пищевые композиции для человека и домашних животных. Такие композиции включают продукты питания, предназначенные для обеспечения необходимых диетических потребностей для животных, угощения для животных (например, бисквиты) или диетические добавки. Композиции могут быть сухой композицией (например, подушечками), полусухой композицией или любой их смесью. В другом воплощении композиция является диетической добавкой, такой как подливка, питьевая вода, напиток, йогурт, порошок, гранулы, спрэд, суспензия, жвачка, легкая закуска, угощение, закуска, брикет, пиля, капсула, таблетка или любая другая лекарственная форма. Диетическая добавка может включать высокую концентрацию НЖК и NO-ВС, и факультативно витамины В и антиоксиданты. Это позволяет применять добавку у животных в маленьких количествах, или альтернативно, разбавить ее перед применением у животного. Диетическая добавка может требовать смешивания, или предпочтительно, смешиваться с водой или другим растворителем перед применением у животного.
В одном воплощении композиции являются охлажденными или замороженными композициями. В другом воплощении НЖК и NO-ВС предварительно смешиваются с другими компонентами для обеспечения необходимых полезных количеств. В других воплощениях НЖК и NO-ВС применяются для покрытия продукта питания, закуски, пищевой композиции для домашних животных, или угощения для животных. В одном воплощении НЖК и NO-ВС добавляют в композицию непосредственно перед выдачей животному, например, с помощью распыляемого порошка или смеси. Такие композиции могут дополнительно включать витамины В и/или антиоксиданты.
Композиции могут факультативно включать одно или более дополнительное вещество, стимулирующее или поддерживающее общее здоровье. Предпочтительные вещества могут быть связаны с улучшением душевного здоровья или улучшением когнитивной функции, или могут быть веществами, которые ингибируют, замедляют или снижают потерю когнитивной функции, например, травами или растениями, усиливающими когнитивную функцию.
В различных воплощениях корм для животных или композиции для угощения животных включают от примерно 15% до примерно 50% неочищенного белка. Неочищенный белковый материал может включать растительные белки, такие как соевая мука, концентрат соевых белков, кукурузная глютеновая мука, глютен пшеницы, семена хлопка, и арахисовая мука, или животные белки, такие как казеин, альбумин, и белки мяса. Примеры белка мяса, пригодных здесь, включают белок свинины, ягнятины, конины, птицы, рыбы и их смеси.
Композиции могут дополнительно включать от примерно 5% до примерно 40% жира. Композиции могут дополнительно включать источник углеводов. Композиции могут включать от примерно 15% до примерно 60% углеводов. Примеры таких углеводов включают злаки или зерновые, такие как рис, кукуруза, майло, сорго, люцерна, ячмень, соя, канола, овес, пшеница, и их смеси. Композиции могут также факультативно включать другие материалы, такие как сухая сыворотка и другие молочные субпродукты.
В некоторых воплощениях минеральный остаток композиций находится в диапазоне от менее 1% до примерно 15%, предпочтительно от примерно 5% до примерно 10%.
Содержание влаги может варьировать в зависимости от природы композиции. В предпочтительном воплощении композиция является полным и диетически сбалансированным кормом для домашних животных. В данном воплощении корм для домашних животных может быть «сырым кормом», «сухим кормом», или кормом с промежуточным содержанием влаги. «Сырой корм» описывает корм для животных, который типично является твердым кормом в консервных банках или мешках из фольги, и имеет содержание влаги типично в диапазоне от примерно 70% до примерно 90%. «Сухой корм» описывает корм для домашних животных, который имеет сходный с сухим кормом состав, но содержит ограниченное количество влаги, типично в диапазоне от примерно 5% до примерно 15% или 20%, и таким образом представлен, например, в виде маленьких бисквито-подобных подушечек. В одном предпочтительном воплощении композиции имеют содержание влаги от примерно 5% до примерно 20%. Сухие продукты питания включают разные продукты питания или различное содержание влаги, так что они являются относительно стабильными при хранении, и устойчивыми к повреждению или контаминации микробами или грибками. Также предпочтительными являются сухие пищевые композиции, которые являются экструдированными продуктами питания, такими как корм для домашних животных, или закуски для человека или домашних животных.
Композиции могут также включать один или более источников волокон. Термин «волокна» включает все источники «массы» в продуктах питания, перевариваемые или не перевариваемые, растворимые или нерастворимые, ферментируемые или не ферментируемые. Предпочтительными волокнами являются волокна из растительных источников, таких как морские растения, но могут также применяться микробные источники волокон. Может применяться множество растворимых или нерастворимых волокон, как хорошо известно рядовому специалисту в данной области техники. Источник волокон может быть мякотью свеклы (из сахарной свеклы), аравийской камедью, камедью акации сеяльской, подорожником, рисовыми отрубями, камедью плодов рожкового дерева, мякотью цитрусовых, фруктоолигосахаридом, пектином, олигофруктозой с короткой цепью, маннан-олигофруктозой, соевыми волокнами, арабиногалактаном, галактоолигосахаридом, арабиноксиланом, или их смесью.
Альтернативно, источник волокон может быть ферментируемыми волокнами. Ранее было описано, что ферментируемые волокна приносят пользу иммунной системе домашнего животного. Ферментируемые волокна или другие композиции, известные специалистам в данной области техники, обеспечивающие пребиотик для повышения роста пробиотиков в кишечнике, также могут быть включены в композицию с целью повышения пользы, обеспечиваемой настоящим изобретением для иммунной системы животного.
В других воплощениях композиции дополнительно включают пребиотики, пробиотики, или их комбинации. Пробиотики являются живыми микроорганизмами, оказывающими при поглощении благоприятное влияние при профилактике и лечении конкретных медицинских состояний. Считается, что пробиотики проявляют биологические эффекты посредством феномена, известного как колонизационная резистентность. Пробиотики облегчают процесс, при котором природная анаэробная флора ограничивает концентрацию потенциально вредных (в основном аэробных) бактерий в пищеварительном тракте. Другие способы действия, такие как поставка ферментов или влияние на активность ферментов в желудочно-кишечном тракте, также могут вносить вклад в некоторые или другие функции, приписываемые пробиотикам. Пребиотики являются не перевариваемыми пищевьми ингредиентами, которые благоприятно влияют на здоровье хозяина путем избирательной стимуляции роста и/или активности бактерий в кишечнике. Пребиотики включают фруктоолигосахариды (ФОС), ксилоолигосахариды (КОС), галактоолигосахариды (ГОС), и манноолигосахариды (типично для продуктов питания не для людей, таких как корм для домашних животных). Пребиотики, фруктоолигосахариды (ФОС) естественно встречаются во многих продуктах питания, таких как пшеница, лук, бананы, мед, чеснок, и лук-порей. ФОС могут также быть выделены из корня цикория, или синтезированы ферментативно из сахарозы. Ферментация ФОС в толстой кишке приводит к большому числу физиологических эффектов, включая повышение числа бифидобактерий в толстой кишке, увеличение абсорбции кальция, повышение веса кала, сокращение времени прохождения по желудочно-кишечному тракту, и возможно, снижение уровня липидов в крови. Полагают, что повышение бифидобактерий приносит пользу здоровью человека за счет выработки соединений, ингибирующих возможные патогенны, за счет уменьшения уровня аммиака в крови, и за счет продукции витаминов и пищеварительных ферментов. Считается, что пробиотические бактерии, такие как лактобациллы или бифидобактерии, положительно влияют на иммунный ответ за счет улучшения микробного баланса в кишечнике, что приводит к увеличению продукции антител и фагоцитарной активности (разрушению или цитолизу) белых кровяных клеток. Bifidobacterium lactis может быть эффективной пробиотической диетической добавкой для усиления некоторых аспектов клеточного иммунитета у пожилых. Пробиотики повышают системный клеточный иммунный ответ, и могут быть пригодными в качестве диетической добавки для усиления естественного иммунитета у других здоровых взрослых. Пробиотики включают многие типы бактерий, но обычно их выбирают из четырех родов бактерий: Lactobacillus acidophilus, Bifidobacteria, Lactococcus и Pediococcus. Полезные виды включают виды Enterococcus и Saccharomyces. Количество пробиотиков и пребиотиков для применения у животного определяется специалистом в данной области техники на основе типа и природы пребиотика и пробиотика и типа и природы животного, например, возраста, веса, общего здоровья, пола, степени микробной недостаточности, наличия вредных бактерий, и рациона животного. В целом, Пробиотики применяют у животного в количествах от примерно одного до примерно двадцати миллиардов колониеобразующих единиц (КОЕ) в сутки для здорового поддержания кишечной микрофлоры, предпочтительно от примерно 5 миллиардов до примерно 10 миллиардов живых бактерий в сутки. В целом, пребиотики применяют в количествах, достаточных для положительной стимуляции здоровой микрофлоры в кишечнике и стимуляции воспроизводства этих «хороших» бактерий. Типичные количества составляют от одного до примерно 10 грамм на порцию, или от примерно 5% до примерно 40% от рекомендованных суточных пищевых волокон для животного. Пробиотики и пребиотики могут формировать часть композиции любыми подходящими средствами. В целом, агенты смешивают с композицией или наносят на поверхность композиции, например, путем орошения или распыления. Когда агенты являются частью набора, то агенты могут смешиваться с другими материалами или в своей собственной упаковке.
Композиции и диетические добавки могут быть специально составлены для назначенных реципиентов или потребителей, таких как взрослые животные, или для старых или молодых животных. Например, может быть приготовлена композиция, приспособленная для щенков или котят, или приспособленная для активных, беременных, кормящих, или стареющих животных. В целом, специализированные композиции будут включать энергетические и диетические потребности для животных на различных стадиях развития или возраста.
Некоторые аспекты изобретения предпочтительно применяются в комбинации с полным и сбалансированным кормом. В соответствии с некоторыми воплощениями, обеспеченными здесь, композиции, включающие НЖК и NO-ВС, предпочтительно применяются с коммерческим продуктом питания высокого качества. Как применяется здесь, «коммерческий продукт питания высокого качества» относится к рациону, произведенному для обеспечения потребления 80% или более ключевых питательных веществ, как установлено, например, в рекомендациях Национального совета по исследованиям для собак, или в указаниях, установленных Ассоциацией американских официальных контролеров по качеству кормов. Подобные высокие стандарты питательных веществ могут применяться для других животных.
В одном воплощении пищевые композиции включают любой из множества ингредиентов или их комбинаций, выбранных по их вкладу в общую композицию. Таким образом, специалист в области пищевой технологии может сделать выбор из природных (например, растительных или растительного происхождения, животных или животного происхождения, и микробных или микробного происхождения), и синтетических ингредиентов или компонентов. В частных воплощениях ингредиенты могут включать любой из хлебных злаков и/или его фракции или компоненты, мясо и мясные субпродукты, рыбу, моллюски или другие морепродукты, другие животные продукты или субпродукты, яйца из любого источника, витамины, минералы, соли, подсластители, волокна, ароматизаторы или другие вкусовые вещества, и функциональные ингредиенты, такие как эмульгаторы, стабилизаторы, пластификаторы, функциональные оболочки и тому подобное. Зерновые, пригодные в изобретении, включают все растения, известные как «зерновые» культуры, применяемые в настоящее время в коммерческом сельском хозяйстве или просто известные практически или ботанически как «зерновые». Например, «зерновые» включают кукурузу, пшеницу, рис, ячмень, сорго, просо, овес, тритикале, гречиху, росичку и лебеду кино. Специалистам в данной области техники понятно, что в данной пищевой композиции не является необычным применение одного или более таких зерновых продуктов. Мясо, пригодное для изобретения, включает продукты от любого животного, предпочтительно мышечную ткань, такую как мясо цыпленка или другой птицы, ягненка, овцы, телятину, говядину или свинину. Другие животные продукты и субпродукты, пригодные в изобретении, включают молочные продукты или субпродукты, полученные из молока любых видов. Другие важные компоненты или ингредиенты включают жиры, и специалисту в данной области техники понятно, что многие источники растительных, животных или микробных жиров доступны для создания рецептур пищевых композиций. В одном воплощении источником жира является растительный жир, такой как кукурузное, соевое масло или масло канола, предпочтительно одно из легко доступных. В другом воплощении животный жир, такой как сало, пригоден для обеспечения калорий и жира, а также для придания запаха для животных, потребляющих мясо. Конечно, комбинации любых из вышеописанных ингредиентов, таких как жиры, известны в данной области техники и пригодны для оптимизации пищевых композиций на основании функциональных свойств, а также цены и доступности.
Специалисту в данной области техники также понятно, что при создании рецептур пищевых композиций изобретения рецептуры могут слегка варьировать, так чтобы позволить создателю учитывать цену и/или доступность определенных ингредиентов в композициях, а также вариации от партии к партии различных ингредиентов. Таким образом, данная пищевая композиция или рецептура может слегка варьировать от серии к серии, завода к заводу, или даже от сезона к сезону в зависимости от таких факторов. Вне зависимости от такой вариации специфических ингредиентов, выбранных для производства конкретной серии пищевой композиции, общая композиция (например, состав белка, углеводов, жира, волокон, или другого компонента) может быть постоянной или по меньшей мере по существу постоянной, например, в соответствии с заявлением на этикетке, таким как заявление или гарантия минимума или максимума процентного содержания компонента.
В других воплощениях, композиции изобретения включают НЖК и NO-ВС и, если они включены в композицию, витамины В и антиоксиданты, в количестве, эффективном для одного или более из уменьшения или профилактики ухудшения социального взаимодействия, снижения или профилактики возрастных поведенческих изменений, повышения способности к обучению, поддержания оптимальной функции головного мозга, облегчения обучения и запоминания, снижения потери памяти, замедления старения головного мозга, профилактики или лечения инсультов, профилактики или лечения деменции, и поддержания ясности и четкости сознания у животного.
Специалисту в данной области техники понятно, как определить подходящее количество НЖК, NO-ВС, витаминов В, антиоксидантов и любых других ингредиентов для добавления в данную композицию. Специалист по составлению рецептур может признать важным вид, возраст, рост, вес, здоровье животного и тому подобное для определения того, как лучше составить конкретную композицию, продукт питания, или фармацевтическую композицию, включающую НЖК, NO-ВС и другие компоненты. Другие факторы, которые могут учитываться для рецептуры, включают тип композиции (например, пищевой композиции для домашних животных по сравнению с диетической добавкой), необходимую дозировку каждого компонента (НЖК, NO-ВС), среднее потребление специфических типов композиций различными животными (например, на основе видов, массы тела, активности/энергетической потребности, и тому подобного) и условия производства, при которых готовят композицию. Предпочтительно, концентрации НЖК и NO-ВС для добавления в композиции подсчитывают на основе энергетических и диетических потребностей животного. При составлении рецептур композиций настоящего изобретения специалист в данной области техники может определить количества НЖК, NO-ВС, и других компонентов композиции и других соединений или ингредиентов, например, в пищевой композиции, на основе необходимых дозировок и характеристик животного.
Для кормов для домашних животных и для пищевых продуктов, составленных для потребления человеком, количество НЖК в процентах от композиции предпочтительно находится в диапазоне от примерно 0,1% до 13% от композиции, хотя может добавляться больший процент. В различных воплощениях количество НЖК составляет примерно 0,1%; 0,2%; 0,3%; 0,4%; 0,5%; 0,6%; 0,7%; 0,8%; 0,9%; 1,0%; 1,1%; 1,2%; 1,3%; 1,4%; 1,5%; 1,6%; 1,7%; 1,8%; 1,9%; 2,0%; 2,1%; 2,2%; 2,3%; 2,4%; 2,5%; 2,6%; 2,7%; 2,8%; 2,9%; 3,0%; 3,1%; 3,2%; 3.3%; 3,4%; 3,5%; 3,6%; 3,7%; 3,8%; 3,9%; 4,0%; 4,1%; 4,2%; 4,3%; 4,4%; 4,5%; 4,6%; 4,7%; 4,8%; 4,9%; 5,0% или больше, например, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20% или больше, от композиции. В некоторых воплощениях может применяться до 30, 40 или 50% НЖК.
Для кормов для домашних животных и для пищевых продуктов, составленных для потребления человеком, количество NO-ВС в процентах от композиции предпочтительно находится в диапазоне от примерно 0,1% до 12% от композиции, хотя может добавляться больший процент. В различных воплощениях количество NO-ВС составляет примерно 0,1%; 0,2%; 0,3%; 0,4%; 0,5%; 0,6%; 0,7%; 0,8%; 0,9%; 1,0%; 1,1%; 1,2%; 1,3%; 1,4%; 1,5%; 1,6%; 1,7%; 1,8%; 1,9%; 2,0%; 2,1%; 2,2%; 2,3%; 2,4%; 2,5%; 2,6%; 2,7%; 2,8%; 2,9%; 3,0%; 3,1%; 3,2%; 3.3%; 3,4%; 3,5%; 3,6%; 3,7%; 3,8%; 3,9%; 4,0%; 4,1%; 4,2%; 4,3%; 4,4%; 4,5%; 4,6%; 4,7%; 4,8%; 4,9%; 5,0% или больше, например, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12% или больше, вплоть до примерно 15% или даже 20% от композиции. В специфических воплощениях применяют 2-2,5% НЖК и 2-2,5% NO-ВС. В таких воплощениях предпочтительным NO-ВС соединением является L-аргинин. Диетические добавки могут быть составлены так, чтобы содержать в несколько раз более высокие концентрации НЖК и NO-ВС, чтобы быть пригодными для применения у животных в форме таблетки, капсулы, жидкого концентрата, эмульсии, суспензии, геля, или другой лекарственной формы, или для разбавления перед применением, например, разбавления водой, или добавления в корм животных (например, путем распыления на него или орошения), или для других способов применения, пригодных для диетических добавок.
В альтернативном воплощении, количество НЖК и NO-ВС в композиции является функцией количества, необходимого для установления специфических концентраций, или необходимого диапазона концентраций, НЖК и/или NO-ВС, или их метаболита, в сыворотке крови млекопитающего. Специфические концентрации или необходимые диапазоны НЖК и/или NO-ВС в сыворотке крови можно подсчитать путем определения уровней в сыворотке крови у животных, потребляемых рекомендуемые количества НЖК и NO-ВС, указанные выше, как понятно специалисту в данной области техники.
В предпочтительном воплощении пищевые композиции включают композицию макронутриентов, пригодную для типа составленного продукта питания. В одном воплощении пищевая композиция содержит примерно от 20 до 32% белка, примерно от 30 до 50% углеводов, примерно от 5% до 20% жира, и примерно от 15% до 25% влаги. В другом воплощении пищевая композиция является пищевой композицией для домашних животных, такой как класса «премиум» или «супер-премиум» пищевая композиция для домашних животных. В одном воплощении пищевая композиция составлена для собак и имеет содержание белка примерно 20-30%, предпочтительно примерно 24-28%, и более предпочтительно 25-27%. В одном воплощении содержание белка в пищевой композиции для собак составляет примерно 26% по массе. В другом воплощении рецептура для кошек имеет содержание белка примерно 35-45%, предпочтительно примерно 37-42%, и более предпочтительно 39-41%. В одном воплощении содержание белка в пищевой композиции для кошек составляет примерно 40%. В предпочтительном воплощении композиция является продуктом питания, включающим НЖК или NO-ВС, и дополнительно включает от примерно 15% до примерно 50% белка, от примерно 5% до примерно 40% жира, от примерно 5% до примерно 10% минерального остатка, и имеет содержание влаги от примерно 5% до примерно 20%.
В одном воплощении пищевая композиция является сырым продуктом питания, таким как консервированный корм, замороженный корм или свежий продукт питания. В одном воплощении пищевая композиция является пригодной для длительного хранения. В другом воплощении она должна быть охлаждена. В других воплощениях пищевая композиция является продуктом с промежуточной влажностью или сухим продуктом питания, как описано выше.
В предпочтительном воплощении НЖК является рыбьим жиром, а NO-ВС является аргинином или его производным, высвобождающим оксид азота. В некоторых воплощениях композиции включают от примерно 0,1% до примерно 50% рыбьего жира и от примерно 0,1% до примерно 20% аргинина. В предпочтительных воплощениях НЖК и NO-ВС находятся в предпочтительных диапазонах, приведенных здесь, где композиция является продуктом питания. Такие диапазоны обеспечивают улучшенную вкусовую привлекательность и функциональные свойства, повышающие прием продукта питания.
В различных воплощениях композиция является пищевой композицией для человека, пищевой композицией для домашних животных или диетической добавкой. Композиция, являющаяся диетической добавкой, может содержать совершенно другие концентрации или количества НЖК и NO-ВС, чем продукт питания или корм для домашних животных. В целом, вкусовая привлекательность и подобные сенсорные факторы не имеют отношения к некоторым диетическим добавкам, например тем, которые проглатываются.
В одном воплощении НЖК включает одно или более из натурального рыбьего жира, АЛК, ЭПК, ДПК, ДГК или другой n-3 жирной кислоты из любого источника. Для применения здесь, конечно, предполагаются комбинации источников НЖК. НЖК с n-3 или n-6 также предполагаются для применения в различных воплощениях.
Предпочтительно композиция составлена для домашнего животного, например, собаки или кошки. В других воплощениях животное является человеком, с возрастным когнитивным ухудшением или без него.
В одном воплощении композиция составлена для обеспечения от примерно 0,5 г до примерно 10 г каждого из НЖК и NO-ВС в сутки в одной или более части из рекомендованного размера порции. Например, если композиция предназначена для потребления два раза в сутки, с помощью рецептуры композиции может обеспечиваться доза 10 г, так что каждая рекомендуемая порция (например, 2 полных ложки, или одна 20 г порция, или тому подобное) обеспечивает по 5 г НЖК и NO-ВС.
В предпочтительном воплощении композиции включают от примерно 0,1% до примерно 50% рыбьего жира, и от примерно 0,1% до примерно 20% аргинина. Предпочтительно композиции дополнительно включают примерно 0,1-40-кратное количество от рекомендуемой суточной нормы витаминов В, от примерно 0,0001% до примерно 25% антиоксидантов, или того и другого. В одном воплощении композиция, применяемая в способах, включает от примерно 0,5 г до примерно 10 г НЖК, и от примерно 0,5 г до примерно 10 г NO-ВС, с витаминами В и антиоксидантами или без них.
В другом аспекте композиции дополнительно включают одно или более когнитивное лекарственное средство в количестве, эффективном для усиления когнитивной функции. Специалист в данной области техники может определить количество когнитивного лекарственного средства для добавления в композицию на основании рекомендуемой дозировки лекарственного средства, назначенной производителем, или по весу, виду, возрасту, состоянию здоровья животного, и тому подобному.
В другом аспекте изобретение обеспечивает фармацевтические композиции, включающие композицию настоящего изобретения и один или более из фармацевтически пригодных носителей, растворителей или наполнителей. В целом, фармацевтические композиции готовят путем смешивания соединения или композиции с наполнителями, буферными агентами, связующими агентами, пластификаторами, красителями, растворителями, уплотнителями, лубрикантами, ароматизаторами, увлажняющими агентами, и тому подобным, включая другие ингредиенты, известные специалистам в данной области техники, для применения в производстве фармацевтических средств и составлении композиций, пригодных для применения у животного в качестве фармацевтических средств. Факультативно, фармацевтические композиции дополнительно включают одно или более из витамина В и антиоксиданта.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы повышения когнитивной функции у животного. Способы в целом включают применение у животного композиции, включающей одну или более ненасыщенную жирную кислоту (НЖК) и одно или более из соединений, высвобождающих оксид азота (NO-ВС), в количестве, эффективном для повышения когнитивной функции у животного. В некоторых воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или их комбинации.
В некоторых воплощениях НЖК, NO-ВС, витамины В и антиоксиданты применяют у животного в количествах, приведенных здесь при описании композиций. В одном воплощении композицию применяют в количестве, эффективном для повышения одного или более из когнитивной, двигательной, или поведенческой функции у животных, включая животных всех возрастов, являющихся здоровыми животными, или животными, подверженными или страдающими ухудшением когнитивной функции, вызванным процессом старения или заболеванием. В другом воплощении композицию применяют в количестве, эффективном для профилактики, снижения или замедления ухудшения когнитивной функции у животных, в частности у стареющих животных, подверженных или страдающих ухудшением когнитивной функции, вызванной процессом старения или заболеванием. В некоторых воплощениях суточная доза композиций находится в диапазоне от примерно 5 мг/сутки до примерно 5,000 мг/сутки, 10,000 мг/сутки, или 20,000, или более, на животное. Предпочтительно суточная доза находится в диапазоне от примерно 30 мг/сутки до примерно 10,000 мг/сутки на животное, и более предпочтительно, от примерно 750 мг/сутки до примерно 7,500 мг/сутки на животное. Суточная доза НЖК и NO-ВС может быть измерена в граммах НЖК и NO-ВС на кг массы тела (МТ) животного. Суточная доза НЖК и NO-ВС, таким образом, может находиться в диапазоне от примерно 0,001 г/кг м.т. до примерно 50 г/кг м.т. животного, хотя может быть обеспечена большая или меньшая дозировка. Предпочтительно, суточная доза НЖК и NO-ВС составляет от примерно 0,001 г/кг м.т. до примерно 25 г/кг м.т. животного. Более предпочтительно, суточная доза НЖК и NO-ВС составляет от примерно 0,001 г/кг м.т. до примерно 10 г/кг м.т. животного. Более предпочтительно, суточная доза НЖК и NO-ВС составляет от примерно 0,001 г/кг м.т. до примерно 5 г/кг м.т. животного. Более предпочтительно, суточная доза НЖК и NO-ВС составляет от примерно 0,001 г/кг м.т. до примерно 1 г/кг м.т. животного. Более предпочтительно, суточная доза НЖК и NO-ВС составляет от примерно 0,001 г/кг м.т.до примерно 0,5 г/кг м.т. животного.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы повышения когнитивной функции у животного. Способы в целом включают применение у животного композиции, включающей одну или более ненасыщенную жирную кислоту (НЖК) и одну или более добавку, которая может метаболизироваться до получения соединений, высвобождающих оксид азота (NO-ВС) у животного в количестве, эффективном для повышения когнитивной функции у животного. В некоторых воплощениях композиции дополнительно включают один или более витамин В, или один или более антиоксидант, или их комбинации. Добавки превращаются в NO-ВС посредством метаболических процессов у животных, и NO-ВС вовлекаются в повышение когнитивной функции, как описано здесь. В предпочтительных воплощениях добавками являются цитруллин/цитруллин и орнитин. Добавки могут применяться в любом количестве, достаточном для получения количеств NO-ВС, требующихся при метаболизме. Типично, добавки применяют в композиции, включающей НЖК и добавки, предпочтительно от примерно 0,1% до примерно 50% НЖК, и от примерно 0,1% до примерно 20% добавки.
Только часть аргинина, потребляемого индивидуумом, доступа для превращения в N0. Аргинин метаболизируется в цитрулллин и NO посредством фермента синтазы оксида азота (CNO). Всего 60% потребленного аргинина метаболизируется в печени аргиназой перед поступлением в циркуляцию, где любой оставшийся аргинин может метаболизироваться до цитрулина и NO. Альтернативным источником аргинина является эндогенная продукция аргинина из аминокислоты цитруллина. Этот путь обеспечивает примерно 20% от общей продукции аргинина в организме. Цитруллин вырабатывается в кишечнике и поступает в циркуляцию, без метаболизма в печени, с почти полным превращением в аргинин в почках. Цитруллин проходит через печень с незначительной переработкой или при ее отсутствии, и превращается в аргинин в митохондриях. Основная часть циркулирующего цитруллина превращается в почках, которые считаются высоко метаболически активной тканью. Цитруллин, циркулирующий в кровотоке, вначале превращается в аргинин, а затем в клетках - в цитруллин и NO. Цитруллин можно применять через желудочно-кишечный (ЖК) тракт в пероральных и энтеральных продуктах. Эндогенный цитруллин является продуктом метаболизма глутамина в кишечнике, вырабатывается из орнитина как часть цикла мочевины, и продуцируется синтазами оксида азота, распространенными в организме. Аргинин вырабатывается из цитруллина, главным образом в почках, посредством метаболизма аргинин-сукцинат-синтазы (ЕС6.3.4.5) и аргинин-сукцинат-лиазы (ЕС 4.3.2.1). Существенно, что превращение цитруллина в аргинин происходит постоянно, как только цитруллин циркулирует в кровотоке. В результате циркулирующий цитруллин делает возможным поддержание повышенных концентраций аргинина на протяжении времени, что в свою очередь делает возможным поддержание постоянного высвобождения NO в клетках. Поскольку аминокислота цитруллин является предшественником L-аргинина, цитруллин можно заменить на L-аргинин в пищевых композициях. В отличие от аргинина, цитруллин не метаболизируется печенью при поступлении в кровоток через абсорбцию из пищи или продукцию в кишечнике de novo. Цитруллин ферментативно превращается в аргинин митохондриями как часть цикла мочевины.
Подобным образом, орнитин является предшественником L-аргинина. В результате орнитин можно заменить на L-аргинин в пищевых композициях. В отличие от аргинина, орнитин не метаболизируется печенью при поступлении в кровоток через абсорбцию из пищи или продукцию в кишечнике de novo. Орнитин ферментативно превращается в аргинин митохондриями как часть цикла мочевины.
Применение в соответствии со способами может осуществляться на необходимой или желательной основе с переменной или постоянной частотой. Целью регулярного потребления является обеспечение животного регулярной и последовательной дозой композиции или прямыми или непрямыми метаболитами, возникающими в результате такого потребления. Такой регулярный и последовательный прием дозы направлен на создание постоянных уровней в крови компонентов композиций или их прямых или непрямых метаболитов. Таким образом, регулярное применение может быть один раз в месяц, один раз в неделю, один раз в сутки, или более одного раза в сутки. Подобным образом, применение может осуществляться через день, неделю или месяц, каждый третий день, неделю или месяц, каждый четвертый день, неделю, ил месяц, и тому подобное. Применение может осуществляться много раз в сутки. При применении в качестве дополнения к обычным диетическим потребностям, композиция может применяться у животного непосредственно, например, перорально, или иным способом. Композиции могут альтернативно контактировать, или смешиваться с ежедневным кормом или пищей, включая жидкость, такую как питьевую воду, или внутривенно вводиться животному, получающему такое лечение. Применение путем использования в качестве ежедневного корма или пищи хорошо известно специалистам в данной области техники.
Применение может также осуществляться как часть диетического режима у животного. Например, диетический режим может включать стимуляцию регулярного поглощения животным композиции, описанной здесь, в количестве, эффективном для профилактики, снижения или замедления ухудшения одного или более из когнитивной, двигательной или поведенческой функции у животного.
В соответствии со способами изобретения, применение композиций, включая применение как части диетического режима, может проводиться в период времени в диапазоне от рождения до взрослой жизни животного. В различных воплощениях животное является человеком или домашним животным, таким как собака или кошка. В некоторых воплощениях животное является молодым или растущим животным. В более предпочтительных воплощениях животное является стареющим животным. В целом предпочтительным является животное, достигшее примерно 35% от расчетной продолжительности жизни. В представленных предпочтительных воплощениях применение начинается, например, на регулярной или длительной регулярной основе, когда животное достигает более чем примерно 30%, 40%, или 50% от расчетной или предполагаемой продолжительности жизни. В некоторых воплощениях животное достигает 40, 45 или 50% предполагаемой продолжительности жизни. В других воплощениях животное является старше, достигнув 60, 66, 70, 75 или 80% вероятной продолжительности жизни. Определение продолжительности жизни может быть основано на страховых таблицах, расчетах, оценках, или тому подобном, и может учитывать прошедшие, настоящие и будущие воздействия или факторы, которые, как известно, оказывают положительное или отрицательное влияние на продолжительность жизни. Анализ вида, пола, размера, генетических факторов, факторов и стрессоров окружающей среды, настоящего и прошлого состояния здоровья, прошлого и настоящего пищевого статуса, стрессоров, и тому подобного может также оказывать влияние и учитываться при определении продолжительности жизни.
Композиция или способ усиления когнитивной функции оказывают много эффектов на животного. Многие ежедневные жизненные функции зависят от когнитивной функции или связаны с ней. Например, усиление когнитивной функции связано с профилактикой ухудшения социального взаимодействия, снижением или профилактикой возрастных изменений поведения, повышением способности к обучению, поддержанием оптимальной функции головного мозга, облегчением обучения и запоминания, снижением потери памяти, замедлением старения головного мозга, профилактикой или лечением инсультов, и профилактикой или лечением деменции у животного. Подобным образом, усиление когнитивной функции поддерживает общее здоровье и благополучие животного. Кроме того, усиление когнитивной функции является существенным для продления активной жизни у животного. Таким образом, усиление когнитивной функции приводит к благоприятному эффекту у животного в отношении одной или более из этих функций, например, усиление когнитивной функции позволяет животному лучше взаимодействовать с другими животными, позволяет животному обладать лучшей памятью, и противодействует развитию деменции. По существу, усиление когнитивной функции приводит к улучшению этих и подобных функций.
В различных воплощениях способов, композиция является пищевой композицией для человека, пищевой композицией для домашних животных или диетической добавкой. В других воплощениях композиция является пищевой композицией, дополнительно включающей от примерно 15% до примерно 50% белка, от примерно 5% до примерно 40% жира, от примерно 5% до примерно 10% минерального остатка, и имеющей содержание влаги от примерно 5% до примерно 20%.
В некоторых воплощениях НЖК является рыбьим жиром, а NO-ВС является аргинином или его производным, высвобождающим оксид азота.
В некоторых воплощениях применяемая композиция включает от примерно 0,1% до примерно 50% рыбьего жира, и от примерно 0.1% до примерно 20% аргинина. Для воплощений способов, как и для вышеприведенных композиций, НЖК включает одно или более из натурального рыбьего жира, АЛК, ЭГК, ДПК, ДГК, другой полиненасыщенной жирной кислоты из любого источника или их комбинации.
В одном воплощении композиция, применяемая в способах, составлена для обеспечения от примерно 0,5 г до примерно 10 г каждого из НЖК и NO-ВС в сутки посредством одной или более частей от рекомендованного размера порции. Композиция может дополнительно включать один или более витаминов В, и один или один или более антиоксид антов. Витамин В предпочтительно включает примерно 0,1-40-кратное количество от РСН, и антиоксидант от примерно 0,0001% до примерно 25% композиции. Предпочтительно композиция включает смесь витаминов В.
В одном воплощении композицию применяют у животного вместе с одним или более когнитивным лекарством в количестве, эффективном для усиления когнитивной и связанных функций, как определено здесь. В частном воплощении применяемая композиция является фармацевтической композицией, включающей когнитивное лекарство вместе с НЖК и NO-ВС. В предпочтительном воплощении композицию применяют у животного на ежедневной основе, предпочтительно в виде единичной дозы.
В некоторых воплощениях животное является здоровым стареющим животным. В других воплощениях животное имеет фенотип, ассоциированный с возрастным когнитивным нарушением. Например, при сравнении с контрольным животным, не имеющим такого фенотипа, животное может иметь фенотип, включающий одно или более из снижения способности отвечать на призыв, потери кратковременной памяти, снижения скорости обучения, снижения навыков решения проблем, снижения интервала внимания, снижения двигательной активности, развития дезориентации или деменции (болезни Альцгеймера у человека или ее эквивалента у других животных).
В другом аспекте композиция включает НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для улучшения одного или более из проявлений социального поведения. В предпочтительном воплощении животное является домашним животным.
Считается, что композиции после применения у животного повышают концентрации НЖК и NO-ВС в циркуляции, в крови или плазме крови животного. В некоторых воплощениях концентрация в крови прямого или непрямого метаболита, повышающаяся в результате потребления НЖК и/или NO-ВС, является пригодной в качестве индикатора дозы. Снижение концентрации одного или более соединений в кровотоке животного, получающего композиции, также может происходить при нормальном курсе. Такое снижение также является полезным инструментом для мониторинга или определения дозировок. Предпочтительно изменение количества компонента в кровотоке, подлежащего анализу, является дозозависимым. В некоторых воплощениях способ приводит к повышению одного или более кетоновых тел в крови животного. В воплощениях, в которых в композиции включены дополнительные соединения, например, витамины В или антиоксиданты, применение приводит к повышению концентраций этих соединений в циркуляции, пригодных для индикации дозы.
Изобретение также обеспечивает другие способы влияния на различные когнитивные, двигательные, или связанные с поведением функции, и влияния на различные физиологические функции, связанные с когнитивной, двигательной или поведенческой функцией, например, социальное взаимодействие и старение головного мозга. В целом способы включают применение композиций настоящего изобретения у животного в количествах, определенных здесь для композиций и способов.
В одном аспекте изобретение обеспечивает способы снижения или профилактики ухудшения социального взаимодействия у животного, включающие применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для снижения или профилактики ухудшения социального взаимодействия. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более из витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для снижения или профилактики ухудшения социального взаимодействия у животного. Способы гарантируют, что стареющее животное будет играть, участвовать в групповой деятельности, общаться с теми, кто за ним ухаживает, и тому подобное.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы снижения или профилактики возрастных изменений поведения у животного, включающие применение у животного НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для снижения или профилактики возрастных изменений поведения у животного. Предпочтительно, возрастные изменения поведения являются одним или более проявлением из забывчивости, дезориентации, сниженного социального взаимодействия, нарушения привычек для сна и прогулок (в частности, повышения активности в ночное время); потери «домашних навыков», приводящей к изменению участков и режимов дефекации и мочеиспускания; дезориентации, чувства неудовлетворенности, изменения темперамента, такого как беспокойство и агрессия; бесцельного хождения и блуждания. Такие изменения отмечаются в ответ на когнитивные ухудшения у человека и других животных. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для снижения или профилактики возрастных изменений поведения у животного.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы повышения способности к обучению у животного, включающие применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для повышения способности к обучению. Например, применение композиции у «приучающихся к горшку» детей, щенков и котят позволяет животному решать задачу более быстро, чем тогда, когда приучение осуществляют без композиции. Подобным образом, обучение собаки или кошки подчиняться речевым, сигнальным или другим командам позволяет животному решать задачу более быстро, чем тогда, когда обучение осуществляют без применения композиции. Подобным образом, композиции могут быть полезными при тренировке неприрученных или диких животных, таких как животные, используемые в цирке, или домашние животные, выращенные в дикой среде. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для повышения способности к обучению у животного.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы для поддержания оптимальной функции головного мозга у животного. Способы включат применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для профилактики или замедления ухудшения функции головного мозга, особенно со временем. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для поддержания оптимальной функции головного мозга у животного. В целом способы гарантируют, что у стареющего животного будет поддерживаться здоровая и оптимальная функция головного мозга в течение жизни и сохраниться лучшее качество жизни, особенно у старых животных. Способы также замедляют прогрессирование ментального ухудшения у стареющих животных.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы облегчения обучения и запоминания у животного. Способы включают применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС, в количестве, эффективном для облегчения обучения и запоминания у животного. В одном воплощении животное достигает по меньшей мере примерно 50% от своей продолжительности жизни. Способы помогают стареющему животному вспоминать факты и понимать инструкции. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для облегчения обучения и запоминания у животного.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы снижения потери памяти у животного. Способы включают применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для снижения потери памяти с течением времени. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для снижения потери памяти у животного.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы замедления старения головного мозга у животного. Способы включают применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для замедления старения головного мозга. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для замедления старения головного мозга у животного.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы профилактики или лечения инсультов у животного. Способы включают применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для профилактики или лечения инсультов. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для профилактики или лечения инсультов у животного. Способы основаны на открытии того факта, что снижение повреждения в результате инсультов коррелирует с некоторыми аспектами усиления когнитивной функции, например, со снижением потери памяти.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы профилактики или лечения деменции у животного. Способы включают применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для профилактики или лечения деменции. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для профилактики или лечения деменции у животного. Деменция может быть болезнью Альцгеймера (БА) у человека, синдромом когнитивной дисфункции у собак (СКДС), или подобными заболеваниями у животных. Способы основаны на том открытии, что композиции и способы настоящего изобретения предотвращают или снижают деменцию путем снижения эффектов повреждения от факторов, способствующих деменции, например, отложений амилоида или нарушения функции артерий.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы поддержания ясности и четкости сознания у животного. Способы включают применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для поддержания ясности и четкости сознания. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для поддержания ясности и четкости сознания у животного.
В одном аспекте изобретение обеспечивает способы для поддержки здоровья и благополучия животного, включающие применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для поддержки здоровья и благополучия животного. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для поддержки здоровья и благополучия животного.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы для продления активной жизни у животного, включающие применение у животного композиции, включающей НЖК и NO-ВС в количестве, эффективном для продления активной жизни животного. В предпочтительных воплощениях композиции дополнительно включают один или более витаминов В, один или более антиоксидантов, или то и другое в количествах, эффективных для продления активной жизни животного.
В способах снижения или профилактики ухудшения социального взаимодействия, снижения или профилактики возрастных изменений поведения, повышения способности к обучению, поддержания оптимальной функции головного мозга, облегчения обучения и запоминания, снижения потери памяти, замедления старения головного мозга, профилактики или лечения инсультов, профилактики или лечения деменции, поддержания ясности и четкости сознания, поддержания здоровья и благополучия, и продления активной жизни, животное предпочтительно является человеком или домашним животным, наиболее предпочтительно собакой или кошкой. Количества НЖК, NO-ВС, витаминов В, антиоксидантов и других ингредиентов, применяемых в этих способах, являются такими же самыми, как указанные количества, или в пределах диапазонов, указанных для усиления когнитивной функции.
В другом аспекте изобретение обеспечивает наборы, пригодные для применения у животного композиции, включающей одну или более НЖК и NO-ВС. Наборы включают отдельные контейнеры в единой упаковке или в отдельных контейнерах в виртуальной упаковке, как подходит для компонента набора, (а) одну или более НЖК, (b) одно или более NO-ВС, и одно или более из (1) одного или более других ингредиентов, пригодных для потребления животным; (2) одного или более витаминов В; (3) одного или более антиоксидантов; (4) одного или более когнитивных лекарственных средств; (5) одного или более пребиотиков; (6) одного или более пробиотиков; (7) одного или более диагностических устройств, пригодных для определения того, получает ли животное пользу от композиций и способов усиления когнитивной функции и связанных с ней функций; (8) инструкций о том, как объединять или подготавливать НЖК и NO-ВС и любые другие ингредиенты, обеспеченные в наборе для применения у животного; (9) инструкций о том, как применять объединенные компоненты набора, подготовленные компоненты набора, или другие компоненты набора для пользы животного; и (10) устройства для применения объединенных или приготовленных компонентов набора у животного. Компоненты обеспечиваются каждый в отдельном контейнере в единой упаковке, или в смесях различных компонентов в различных упаковках. В предпочтительных воплощениях наборы включают НЖК, NO-ВС, витамины В, и антиоксиданты. Наборы могут включать ингредиенты в различных комбинациях. Например, набор может включать смесь одного или более витаминов В и одного или более антиоксидантов в одном контейнере, и один или более других ингредиентов в одном или более других контейнерах. Подобным образом, набор может включать смесь НЖК и NO-ВС в одном контейнере, и один или более других ингредиентов в одном или более других контейнерах. Другие такие комбинации могут быть произведены специалистами в данной области техники на основе характеристик ингредиентов и их физических и химических свойств и совместимостей.
В другом аспекте изобретение обеспечивает средства предоставления информации или инструкций для одного или более из: (1) применения композиций настоящего изобретения для усиления когнитивной функции; (2) смешивания НЖК, NO-ВС, витаминов В, антиоксидантов или других компонентов изобретения для получения композиции, пригодной для усиления когнитивной функции; (3) применения наборов настоящего изобретения для усиления когнитивной функции; и (4) применения композиций у животного. Средства включают один или более физический или электронный документ, цифровую запоминающую среду, оптическую запоминающую среду, аудио презентацию, аудиовизуальную презентацию, или визуальную презентацию, содержащую информацию или инструкции. Предпочтительно средства выбирают из группы, состоящей из отображаемого веб-сайта, визуального отображаемого киоска, брошюры, этикетки на продукте, упаковочного вкладыша, рекламы, проспекта, публичного уведомления, магнитной ленты, видеоленты, DVD, CD-ROM, читаемого компьютером чипа, читаемой компьютером карты, читаемого компьютером диска, USB устройства, FireWire устройства, компьютерной памяти, и любой их комбинации.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способы производства пищевой композиции, включающей НЖК, NO-ВС, и один или более других ингредиентов, пригодных для потребления животным, например, белок, жир, углевод, волокна, витамины В, и антиоксиданты. Способы включают смешивание одного или более ингредиентов, пригодных для потребления животным, с НЖК и NO-ВС, и возможно с другими ингредиентами, такими как витамины В и/или антиоксиданты. Альтернативно, способы включают внесение НЖК и NO-ВС, и других ингредиентов, если необходимо, по отдельности или в любой комбинации, в пищевую композицию, например, в качестве оболочки или верхней части. НЖК и NO-ВС могут быть добавлены в любое время при производстве и/или обработке пищевой композиции. Это включает, например, добавление в смесь НЖК и NO-ВС как части основной рецептуры «вещества» пищевой композиции, или их добавление в качестве оболочки, т.е. в основном на поверхность пищевой композиции после ее производства. Композиции могут быть изготовлены в соответствии с любым способом, пригодным в данной области техники.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает упаковку, включающую композицию настоящего изобретения и этикетку, прикрепленную к упаковке, содержащую слово или слова, картинку, обозначение, аббревиатуру, лозунг, фразу, или другой девиз, или их комбинацию; указывающие на то, что содержимое упаковки включает композицию, пригодную для усиления когнитивной функции, снижения или профилактики ухудшения социального взаимодействия, снижения или профилактики возрастных изменений поведения, повышения способности к обучению, поддержания оптимальной функции головного мозга, облегчения обучения и запоминания, снижения потери памяти, замедления старения головного мозга, профилактики или лечения инсультов, профилактики или лечения деменции, или поддержания ясности и четкости сознания у животного, особенно у стареющего животного. Типично, такой девиз включает слова «улучшает когнитивную функцию», «улучшает память», «снижает потерю памяти у стареющих животных», «поддерживает ясность и четкость сознания» или эквивалентное выражение, напечатанное на упаковке. В изобретении пригодна любая упаковка или упаковочный материал, пригодные для вмещения композиции, например, мешок, коробка, бутылка, консервная банка, сумка, и тому подобное; произведенные из бумаги, пластика, фольги, металла и тому подобного. В предпочтительном воплощении упаковка содержит пищевую композицию, приспособленную к частному животному, такому как человек, собака или кошка, как указано на этикетке, предпочтительно для пищевой композиции для домашних животных.
В другом аспекте изобретение обеспечивает применение НЖК и NO-ВС для приготовления лекарственного средства для усиления когнитивной функции, уменьшения или профилактики ухудшения социального взаимодействия, снижения или профилактики возрастных изменений поведения, повышения способности к обучению, поддержания оптимальной функции головного мозга, облегчения обучения и запоминания, уменьшения потери памяти, замедления старения головного мозга, профилактики или лечения инсультов, профилактики или лечения деменции, и поддержания ясности и четкости сознания у животного. Лекарственное средство может дополнительно включать один или более витаминов В, антиоксиданты, или их комбинации. В целом, медикаменты готовят путем смешивания соединения или композиции с наполнителями, буферными агентами, связующими агентами, пластификаторами, красителями, разбавителями, уплотняющими агентами, лубрикантами, ароматизаторами, увлажняющими агентами, и другими ингредиентами, известные специалистам в данной области техники как пригодные для производства лекарственных средств и составления рецептур лекарственных средств, пригодных для применения у животного.
В изобретении животное может быть молодым, взрослым, старым или престарелым животным. Типично, для большинства воплощений животное является стареющим животным. В целом, животные являются старыми, находящимися в последней половине ожидаемой продолжительности жизни, и престарелыми, находящимися в последней четверти от их ожидаемой продолжительности жизни. Определение продолжительности жизни варьирует у различных животных, и известно специалистам в данной области техники. Например, животное считается молодым примерно до 16 летнего возраста. Для собаки или кошки, животное считается молодым до возраста 1 года.
Композиции изобретения, включая фармацевтические композиции и лекарственные средства, применяют у животного с помощью различных способов введения. Такие способы включают пероральный, интраназальный, внутривенный, внутримышечный, внутрижелудочный, транспилорический, подкожный, ректальный и тому подобные. Предпочтительно композиции применяют перорально.
Композиции изобретения, включая фармацевтические композиции и лекарственные средства, применяют у животного в течение времени, необходимого для осуществления одной или более задач изобретения, например, для усиления когнитивной функции, уменьшения или профилактики ухудшения социального взаимодействия, снижения или профилактики возрастных изменений поведения, повышения способности к обучению, поддержания оптимальной функции головного мозга, облегчения обучения и запоминания, уменьшения потери памяти, замедления старения головного мозга, профилактики или лечения инсультов, профилактики или лечения деменции, и поддержания ясности и четкости сознания у животного. Композиции пригодны для долговременного применения или применения по любому расписанию, совместимому с композицией и задачей.
В различных воплощениях способов и композиций изобретений, антиоксиданты включают астаксантин самостоятельно или в комбинации с другими антиоксидантами.
Примеры
Изобретение может быть дополнительно иллюстрировано следующими примерами, хотя нужно понять, что примеры включены просто с целью иллюстрации, и не предназначены для ограничения объема изобретения, если специально не указано иначе.
Пример 1
Животные и анализируемые группы
Тестировали когнитивно опытных собак породы бигль (самцов и самок в возрасте от 7,5 до 11,6 лет). Средний возраст собак составил 9,38 лет. Для квалификации собаки должны были иметь по меньшей мере 6 месячный предварительный опыт когнитивного теста, включая тренировку на задачу несовпадения положения (DNMP) и задачу нечетности.
Во время начальной базовой фазы всех собак тестировали на различной замедленной версии DNMP задачи (или на 5, если они предварительно не были способны решить задачу), обеспечивая средства оценки зрительно-пространственной рабочей памяти и задачу различения по размеру и реверсивную задачу. Выполнение этих задач применяли для разделения собак на четыре когнитивно-эквивалентные группы лечения (по двенадцать собак на группу): (1) 2% рыбий жир, 2,5% аргинина, витамины В в 1-40 раз больше РСН, 150 мг/кг витамин С, 900 мг/кг витамин Е, и 0,5 мг/кг селена («SPB» группа); и (2) контрольная группа.
Корм и вода
Собаки имели свободный доступ к воде через укрепленную на стене автоматическую систему подачи воды и/или миски с водой. Животных обеспечивали одним из пяти поддерживающих кормов для взрослых, содержащих примерно 32% белка, 20% жира, и 3% волокон в сутки. Исходное индивидуальное количество корма подсчитывали с помощью формулы «потребность в ккал = 110 ккал/сутки×(М.Т.×0,75)», где М.Т. является массой тела. Формула предназначена для поддержания постоянной массы тела при надлежащем состоянии организма.
Собак взвешивали раз в неделю в начале лечения и два раза в месяц после потребления корма и стабилизации состояния организма; потребление корма регулировали, как необходимо для поддержания относительно постоянной массы тела. Животным давали примерно 30 минут на съедение поданной пищи. Примерное количество оставшейся пищи регистрировали в таблице мониторинга потребления пищи для каждого животного.
Условия содержания
Группа когнитивного теста
Обучение различению маркировочных знаков (7-99 сутки). Эгоцентрическое обучение и реверсивный тест (100-163 сутки).
Задача различения маркировочных знаков
В данной задачи собак обучали брать один из двух объектов, на основании его близости к крайнему маркировочному знаку. Задача была направлена на оценку аллоцентрической пространственной способности, которая позволяет использовать крайние маркировочные знаки для локализации объекта в пространстве. Собак тестировали на существенно более трудных версиях той же общей проблемы.
Общие процедуры анализа: собак подвергали десяти (10) испытаниям в сутки, с 30 секундным интервалом между испытаниями. Тестирование проводили один раз в сутки, примерно шесть суток в неделю, так что в целом было проведено 80 сеансов. Была использована процедура частичной коррекции. В данной процедуре во время каждого сеанса собакам позволяли исправлять их ответ после ошибки. У каждой собаки ставили вплоть до четырех задач, в зависимости от успеха собаки в решении задачи. Чтобы перейти от первой ко второй задаче, собака должна была выполнить двухэтапный критерий. Для прохождения первого этапа собака должна была правильно решить по меньшей мере 9 из 10 задач, или 8 из 10 задач на протяжении 2 последовательных дней. Собаки должны были решить все задачи для прохождения первого этапа. Критерий второй стадии выполнялся, когда собака правильно выполняла по меньшей мере 70% из следующих 30 задач на протяжении трех последовательных сеансов. Собаки, которые не решали ни одну задачу, оценивались по шкале как 0,5, что оценивалось как ответ на основе произвольного выбора, и им давали один дополнительный день для выполнения 30 задач. Для прохождения на второй этап требовалось среднее значение по шкале 70% на протяжении всех дней анализа.
Различаемыми предметами были идентичные белые подставки и желтый деревянный стержень, 2 см × 2 см × 9 см, который служил в качестве маркировочного знака. Белые круглые подставки помещали над двумя латеральными лунками для пищи на презентационном лотке. Для удержания маркировочного знака приклеивали ярлыки-липучки диаметром 2 см в центре наверху подставок и в соответствующих местах на пищевом лотке.
Исходный тест маркировочного знака (Знак-0): В исходном тесте (LO) маркировочный знак прикрепляли к центру одной из двух белых подставок. В каждой задаче экспериментатор помещал пищевое вознаграждение в левую или правую лунку для пищи, и соответственно размещал маркировочный знак. Поднимали дверцу и передвигали поднос примерно на 25 см от собаки на короткое время для осмотра, чтобы позволить собаке видеть пространственное размещение на подносе. Затем поднос давали собаке и позволяли собаке выбирать. На этом и всех последующих уровнях собаки должны были выбирать подставку, наиболее близкую к маркировочному знаку, для получения пищевого вознаграждения. Правильную сторону определяли произвольно с помощью компьютера с тем ограничением, чтобы каждая сторона была правильной в половине испытаний каждого сеанса теста. Каждой собаке предоставляли максимум 30 сеансов анализа (300 испытаний) для обучения ответу на стимул, связанный с маркировочным знаком во время LO.
Корректирующее обучение: у собак, не выполнивших исходный L0 тест, проводили программу корректирующего обучения, чтобы помочь обучится решению задачи. Корректирующее обучение состояло из 5 дополнительных дней обучения, с 15 испытаниями в день. В начале корректирующего обучения животным представляли единственный вознаграждающий стимул в большинстве испытаний. При продолжении тестирования давали дополнительные двойные представления стимула. После завершения фазы корректирующего обучения, животные получали дополнительное обучение, вплоть до максимум 10 сеансов с применением оригинального протокола. Этот протокол также применяли у собак, не прошедших L1. Собак, не прошедших L0, перемещали на L1. Собак, которые не смогли пройти корректирующее обучение после L1, перемещали на следующую задачу, если не прошло 80 сеансов теста. Если оставалось меньше 10 сеансов теста, животные на L1 получали дополнительные сеансы корректирующего обучения.
Маркировочный знак-1 (L1): как только собака обучалась задаче LO (во время исходного обучения или после корректирующего обучения), маркировочный знак передвигали на 1 см медиально и диагонально от края подставки, устанавливая знак 1 (L1). Маркировочный знак прикрепляли к пищевому подносу черным кусочком липучки шириной 2 см. Собаки, не обучившиеся в течение 30 сеансов, получали корректирующее обучение, как описано выше для L0.
Протокол эгоцентрического теста
Общая процедура анализа: в начале испытаний открывали дверь на шарнирах, чтобы показать собаке поднос со стимулом, и предоставляли собаке максимум 30 секунд, чтобы сделать выбор путем перемещения одного или более идентичных стимулов. Правильный ответ засчитывали, когда собака перемешала стимулирующий объект, покрывающий пищевое вознаграждение. Ошибку засчитывали, когда собака перемещала невознаграждаемый стимул. Животные выдерживали 12 испытаний за сеанс на протяжении периода 63 сеансов.
Фаза предпочтения: В первый день теста собаки проходили тест предпочтения, состоящий из 10 отдельных испытаний с объектами, покрывающими обе латеральных лунки для пищи, чтобы определить, имеется ли какое либо предпочтение сторон. Предпочитаемую сторону применяли в качестве положительной стороны для начальной фазы обнаружения тестирования. Таким образом, если животное более часто выбирало объект, расположенный слева, то левую сторону для животного обозначали как предпочтительную сторону. Для животных, не демонстрировавших предпочтения сторон (и отвечавших пять раз на каждую сторону), использовали бросание монеты для определения вознаграждаемой стороны.
Фаза обнаружения: Каждое испытание состояло из единичного представления подноса со стимулами, со стимулом, покрывающим вознаграждение на предпочтительной стороне латеральной лунки, или центральной лунки. Второй не-вознаграждаемый стимул покрывал лунку по направлению к стороне, не предпочитаемой собакой. Следовательно, объект, отдаленный от стороны, предпочитаемой животным, всегда вознаграждался. В любом данном испытании было три возможных пространственных конфигурации (слева от центра, слева, справа или справа от центра). Каждая конфигурация встречалась четыре раза на сеанс теста.
Критерий: Фаза обнаружения считалась успешно выполненной, когда собака достигала минимум 90% правильных результатов (33/36) по трем последовательным сеансам теста. Для выполнения этого критерия было проведено максимум 12 сеансов, или 144 испытания. Животные, не обучившиеся за 12 сеансов, получали 5 сеансов корректирующего обучения, сопровождающегося дополнительными сеансами, вплоть до 10.
Реверсивная фаза: как только животное проходило фазу поиска, вознаграждаемое положение меняли на противоположную сторону. Таким образом, если объект, ближайший к правой стороне собаки, вознаграждался в тесте поиска, в реверсивном тесте вознаграждался объект, ближайший к левой стороне. Для первого реверсивного теста критерий обучения был тем же самым, как для исходного поиска. Для выполнения этого критерия было проведено максимум 15 сеансов, или 180 испытаний. Если животное не выполняло требования критерия за 15 сеансов, проводили 5 сеансов корректирующего обучения. Затем животное получало 10 дополнительных сеансов для выполнения критерия обучения.
Повторная (множественная) реверсивная фаза: как только животное обучалось в исходном реверсивном тесте, правильную сторону переключали, и повторно тестировали животное, пока оно не переобучалось выполнять задачу. Эту процедуру выполняли до тех пор, пока животное не проходило всего 52 сеанса эгоцентрического протокола. Результаты показаны в Таблицах 1-5.
Результаты теста маркировочного знака
Таблица 1
Результаты теста знака - 0
Группа теста
Ошибки для критерия
Среднее значение
СКО
Контрольная
45,42
12,85
SPB
29,38
8,10
Что касается данных, SPB группа выполняла задания лучше, чем контрольная группа.
Таблица 2
Результаты теста ориентиры - 1
Группа теста
Ошибки для критерия
Среднее значение
СКО
Контрольная
136,96
16,26
SPB
89,29
19,03
Контрольная группа существенно отличалась от SPB группы.
Результаты эгоцентрического теста
Таблица 3
Результаты теста поиска
Группа теста
Ошибки для критерия
Среднее значение
СКО
Контрольная
25,58
2,96
SPB
20,41
2,71
Что касается данных, контрольная группа отличалась от SPB группы.
Таблица 4
Результаты реверсивного теста
Группа теста
Ошибки для критерия
Среднее значение
СКО
Контрольная
68,29
6,22
SPB
47,09
5,58
Что касается данных, контрольная группа существенно отличалась от SPB группы.
Таблица 5
Результаты повторного реверсивного теста
Группа теста
Ошибки для критерия
Среднее значение
СКО
Контрольная
2,42
0,40
SPB
4,42
0,48
Пример 2
Крыс-самцов линии Charles Rivers Sprague-Dawley (250 г, Вилмингтон, Массачусетс) акклиматизировали к условиям вивария в течение 3 суток перед операцией, с 12 часовым циклом света-темноты. Билатеральную овариэктомию проводили за 2 недели до начала диетического кормления. Спустя четыре недели после начала диетического кормления, проводили временную окклюзию средней церебральной артерии (tMCA) под анестезией после интраперитонеального введения кетамина (60 мг/кг) и ксилазина (10 мг/кг). Крыс произвольно распределяли на четыре экспериментальные группы по 15 крыс на группу:
Группа 1 - После овариэктомии + Контрольная диета
Группа 2 - После овариэктомии + Диета II
Группа 3 - Интактные + Контрольная диета
Группа 4 - Интактные + Диета II
Контрольная диета была стандартным рационом для крыс, содержащим 140 г/кг казеина, 100 г/кг сахарозы, 50 г/кг волокон, 155 г/кг декстрина, 466 г/кг кукурузного крахмала, 35 г/кг стандартной солевой смеси, 40 г/кг соевого масла, 10 г/кг стандартной витаминной смеси, 1,8 г/кг L-цистина и 2,5 г/кг хлорида натрия. Диета II была контрольной диетой плюс 2% аргинина, 2% рыбьего жира менхадена 4Х витаминов В, и антиоксиданты (витамин Е: 500 мг/кг рациона, витамин С: 150 мг/кг рациона, астаксантин: 100 мг/кг, селен: 0,40 мг/кг).
Анестезию у животных проводили путем интраперитонеального введения кетамина (60 мг/кг) и ксилазина (10 мг/кг). Временную окклюзию средней церебральной артерии проводили, как описано ранее (Simpkins et al., 1997), с небольшой модификацией. Вкратце, выделяли левую общую сонную артерию, наружную сонную артерию, и внутреннюю сонную артерию путем цервикального надреза по средней линии. 3,0 монофиламентную нить вводили во внутреннюю полость сонной артерии и осторожно затягивали до ощущения сопротивления. Операционную процедуру проводили в течение 20 минут, с минимальным кровотечением. Нить удерживали на месте в течение 60 минут, а затем удаляли для восстановления перфузии. Контролировали ректальную температуру, и поддерживали ее между 36,5 и 37°С с помощью нагревающей подложки в течение процедуры. Спустя 24 часа после установления реперфузии животных умерщвляли и извлекали головной мозг. Готовили 2 мм коронарные срезы головного мозга с применением металлической матрицы для мозга (ASI Instruments Inc.; Уоррен, Мичиган) и окрашивали путем инкубации в 2% растворе 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (ТТХ) в физиологическом растворе при 37°С, а затем фиксировали в 10% формалине. Анализ фрагментации ДНК с TdT (терминальной дезоксинуклеотидил-трансферазой)-опосредованной dUTP (дезоксиуридинтрифосфат) маркировкой разрывов (TUNEL) окклюзии СЦА является широко применяемой моделью фокального ишемического инсульта (Bederson et al., 1986). Эта in vivo модель гибели нейронов позволяет быстро индуцировать синхронизированный процесс апоптоза в большом числе нейронов и других клеток (Li et al., 1997). Таким образом, влияние кратковременной ишемии на апоптоз оценивали путем анализа фрагментации ДНК с применением TUNEL анализа. TUNEL окрашивание проводили в соответствии с модифицированными инструкциями производителя (Gavrieli et al, 1992). Фиксированные формалином, залитые парафином срезы ткани освобождали от парафина ксиленом, регидрировали ступенчатой обработкой этанолом, и проводили окончательное отмывание ФБР. Проводили пост-фиксацию срезов 4% параформальдегидом в течение 20 минут. Срезы промывали и обрабатывали в течение 15 минут раствором протеиназы К 100 пкг/мл в ФБР, уравновешивали уравновешивающим буферным раствором в течение 10 минут, а затем инкубировали в буферном растворе, содержащем TdT фермент и ФИТЦ-меченый dUTP (Promega, Мэдисон, Висконсин) при 37°С во влажной камере. Реакцию прекращали путем инкубации в 2×SSC буфере в течение 15 минут при комнатной температуре. Срезы затем закрепляли антифединговыми реагентами, содержащими DAPI (4,6-диамино-2-фенилиндол) (Molecular Probes, Юджин, Орегон). Срезы для положительного контроля погружали в раствор ДНК-азы I на 10 минут при комнатной температуре перед уравновешиванием в TdT буфере. Срезы рассматривали под флуоресцентным микроскопом с соответствующей парой фильтров возбуждения/испускания. После операции некоторые животные погибли до некроскопии. Число животных, у которых определяли объем поражения, находилось в диапазоне от 12 до 15 на группу. Результаты показаны в Таблицах 6 и 7.
Результаты анализировали с помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с применением программного обеспечения Prism (Graphpad Inc; Сан-Диего, Калифорния). Достоверность различий между группами определяли с помощью однофакторного ANOVA с последующими анализами множественного сравнения Таки. Все значения выражали в виде среднего значения ± СКО.
Что касается Таблиц 6 и 7, то результаты показали, что рацион, содержащий один или более ингредиентов, содержащихся в Диете II, оказывал благоприятное влияние на профилактику или лечение ишемии, и по существу, благоприятное влияние на многие функции, связанные с головным мозгом, например, когнитивную функцию, социальное взаимодействие, возрастные изменения поведения, ухудшение функции головного мозга, усиление функций головного мозга, профилактику или лечение инсультов, замедление старения головного мозга, и профилактику или лечение деменции, такой как болезнь Альцгеймера.
Таблица 6
Влияние Диеты II на объем поражения (мм<sup>3</sup>), индуцированного кратковременной фокальной церебральной ишемии
Контроль + кастрация
Диета II + кастрация*
Интактные + контроль
Интактные + диета II
N
13
12
14
14
Среднее значение
284,9
133,6
244,5
163,1
Среднеквадратическая ошибка
32.50
28,53
43,30
31,54
* р<0,05 Диета II + кастрация по сравнению с группой Контроль + кастрация.
Таблица 7
Влияние диеты II на индекс апоптоза (%), индуцированного церебральной ишемией
Контроль + кастрация
Диета II + кастрация*
Интактные + контроль
Интактные + диета II
N
13
12
14
14
Среднее значение
85,55
46,67
75,15
57,69
Среднеквадратическая ошибка
4,134
7,51
8,208
8,137
В описании был раскрыты типичные предпочтительные воплощения изобретения. Хотя применяются специфические термины, они применяются только в общем и описательном смысле, а не с целью ограничения. Объем изобретения устанавливается в формуле изобретения. Очевидно, что в свете вышеуказанных учений возможны многие модификации и вариации изобретения. Таким образом, нужно понять, что в пределах объема формулы изобретение может практиковаться иначе, чем конкретно описано.