Система регуляторных Т-клеток и аутоиммунные процессы

Труды Карельского научного центра РАН № 3. 2013. С. 18-30

УДК 612.112.94:57.016.4:616-002.2:615.37

СИСТЕМА РЕГУЛЯТОРНЫХ Т-КЛЕТОК И АУТОИММУННЫЕ ПРОЦЕССЫ

П. Н. Кравченко, Е. К. Олейник

Институт биологии Карельского научного центра РАН

В обзоре представлены последние данные о роли основных субпопуляций регуляторных Т-клеток (Treg) в норме и при аутоиммунных заболеваниях. Рассмотрены механизмы функционирования регуляторных Т-клеток при диабете 1 типа, ревматоидном артрите, системной красной волчанке и рассеянном склерозе, также приведены результаты определения количества CD4+CD25+Т-клеток при данных патологиях. Представлены сведения о новых молекулярных маркерах регуляторных Т-клеток. Обсуждены современные подходы к иммунотерапии больных аутоиммунными заболеваниями.

Ключевые слова: Treg клетки, аутоиммунитет, диабет 1 типа, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, рассеянный склероз.

P. N. Kravchenko, E. K. Oleinik. THE SYSTEM OF REGULATORY T CELLS AND AUTOIMMUNITY

We summarize the latest data on the role of the main subpopulations of regulatory T-cells (Treg cells) in the normal condition and in autoimmune diseases. The mechanisms of Treg cell functioning are considered for type 1 diabetes, rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus and multiple sclerosis; the results on the quantities of CD+CD25+T-cells at these pathologies are reported. Data on new molecular markers of Treg cells are presented. Current approaches to the immunotherapy for patients with autoimmune diseases are discussed.

Key words: Treg cells, autoimmunity, type 1 diabetes, rheumatoid arthritis,

systemic lupus erythematosus, multiple sclerosis.

Введение

Регуляторные Т-клетки (Тгед) играют важную роль в поддержании иммунологической толерантности, и нарушения в их функционировании приводят к развитию различных патологий. В связи с этим в последние годы ведется активное изучение таких клеток с целью поиска эффективных способов влияния на их активность и численность. Известно, что в иммунной системе Тгед клетки участвуют в контроле различных физиологических состояний организма и представ-

лены несколькими субпопуляциями [Ярилин, До-нецкова, 2006]. Нарушения в системе регуляторных клеток (количественные или функциональные) могут способствовать развитию иммунологической недостаточности, снижению противоопухолевого иммунитета, развитию аутоиммунных заболеваний. Показано, что удаление С04+С025 РОХР3-клеток приводит к экспансии Т-эффекторных клеток с последующим развитием аутоиммунных расстройств [ЭакадисЫ et а1.,

2010]. Мутация гена РОХР3+ у человека ассоциирована с исчезновением клеток с фенотипом

0

CD4CD25+ и снижением супрессорной активности. Это приводит к формированию тяжелого иммунодефицита, так называемого IPEX-синдрома (Immunodysregulation, Polyendocrinopathy, and Enteropathy, X-Linked, X-ассоциированная иммунная дисрегуляция), при котором развиваются энтеропатия, тиреоидит, экзема, лимфопролиферативный синдром, гемолитическая анемия, тромбоцитопения, тяжелые инфекции [Sakaguchi et al., 2010].

Аутоиммунные заболевания характеризуются повреждением тканей и нарушением физиологических функций, вызванным иммунным ответом против собственных антигенов. В развитие аутоиммунных процессов могут вовлекаться аутоантигены, широко распространенные в организме, которые становятся причиной системных повреждений. В качестве аутоантигенов могут выступать любые ткани, клетки и компоненты плазмы. Например, при ревматоидном артрите антигеном является иммуноглобулин G (IgG), антиген клеточных ядер (RANA); при рассеянном склерозе - антигены мозговой ткани; при инсулинзависимом (ювенильном) диабете - цитоплазматические антигены островковых клеток поджелудочной железы. Спектр аутоиммунных заболеваний широк, а к наиболее известным из них относятся инсулинзависимый диабет, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, болезнь Крона, IPEX, тиреоидит Хасимо-то, псориаз, витилиго и др. Одной из причин аутоиммунизации могут быть инфекции, которые сами по себе не способны вызвать подобные заболевания. Однако инфекции могут провоцировать сбои иммунитета и приводить к аутоиммунизации. Известно, что ревматизм может развиваться вследствие перенесенной стрептококковой инфекции, а диабет - после попадания в организм вируса гепатита А.

Развитие аутоиммунных процессов в организме может быть связано с нарушениями в функциях регуляторных клеток. В тимусе в процессе дифференцировки лимфоцитов происходит селекция и гибель аутореактивных клонов, что обеспечивает толерантность к собственным тканям организма. В норме иммунная система сдерживает аутореактивность лимфоцитов с помощью регуляторных механизмов, а нарушения в этих механизмах могут привести к аутоиммунизации.

Разнообразие клинических проявлений аутоиммунных заболеваний объясняется различиями в локализации и механизмах повреждения собственных тканей и органов. Механизмы нарушения толерантности к аутоантигенам связывают с изменениями экспрессии собственных антигенов, вызванными воспалением

или повреждением тканей, воздействием вирусов и бактерий, свободных радикалов или ионизирующей радиации, некоторыми лекарственными препаратами. Аутоиммунные процессы могут быть также связаны с «молекулярной мимикрией» (сходством аутоантигенов с антигенами возбудителей инфекционных заболеваний). В настоящее время аутоиммунные заболевания входят в число самых распространенных видов патологий.

Краткая характеристика регуляторных клеток

Первоначально Treg человека были охарактеризованы S. Sakaguchi с соавт. [1995] как CD4+ Т-клетки, которые конститутивно экспрессируют рецептор a-цепи IL-2 (CD25). Последующие исследования показали, что только CD4+ Т-клетки, экспрессирующие высокий уровень CD25 (CD25high), имеют in vitro супрессорную активность. Хотя CD25 используется для определения Treg, в последнее время было показано, что он также экспрессируется на активированных CD4+ Т-клетках. Поэтому в настоящее время большинство исследователей для идентификации Treg стали использовать CD127 (a-цепь IL-7), к Treg относят CD127low, а CD127high - к активированным Т-клеткам [Liu et al., 2006; Seddiki et al., 2006].

В настоящее время известно, что наивные CD4+ Т-клетки после активации антигеном могут дифференцироваться в различные линии ^ клеток, включающих в себя Т-хелперы 1 (ТМ), Т-хелперы 2 (^2), фолликулярные Т-хелперы (Tfh), Т-хелперы 9 (^9), Т-хелперы 17 (ТМ7). Treg представлены несколькими субпопуляциями Т-клеток, состоящими из естественных CD4CD25 FOXP3+ (nTreg) и индуцированных регуляторных клеток (iTreg). iTreg включают в себя регуляторные клетки первого типа (Tr1), продуцирующие IL-10, Т-хелперы 3 (^3), продуцирующие TGF-p [Sakaguchi et al., 2010; Chen et al., 2011], CD8+ регуляторные Т-клетки, такие как CD8CD28- клетки, CD8CD122+, CD8 CD122 FOXP3+ и т. д. [Wang, 2008; Zheng et al., 2009]. Считается, что Т-клетки CD4CD8-, натуральные киллерные Т-клетки (natural killers Т-cells, NKT) и у5 Т-клетки также обладают регуляторной активностью, но пока эти клетки изучены в меньшей степени, чем CD4+ регуляторные клетки [McMurchy et al., 2011].

Впервые регуляторные клетки человека были выделены из периферической крови и охарактеризованы как CD4 CD25high T-клетки несколькими группами исследователей в 2001 году [Cvetanovich, Hafler, 2010].

0

Транскрипционный фактор FOXP3 является каноническим специфическим маркером для Treg, так как он необходим для дифференци-ровки и функционирования этих клеток. По уровню экспрессии FOXP3 Treg могут быть разделены на несколько популяций: покоящиеся Treg с фенотипом CD25hlghCD45RA+FOXP3low, активированные

Treg с фенотипом CD25hlghCD45RAFOXP3hlgh. Эти популяции обладают супрессорными свойствами in vitro. А третья, с фенотипом CD25hlghCD45RAFOXP3low - цитокин-секрети-рующая, с потенциалом Th17, не проявляла супрессорных свойств [Mlyara et al., 2009].

Недавно был идентифицирован транскрипционный фактор Hellos (из семейства Ikaros), который экспрессируется только на nTreg и не обнаруживается на lTreg. Поэтому этот транскрипционный фактор может использоваться в качестве маркера для определения nTreg [Thornton et al., 2010].

Регуляторные клетки экспрессируют ряд функциональных молекул, которые могут использоваться как поверхностные маркеры, -GITR, CTLA-4 (CD152), galectln-1, CD3B, CD62L, OX-40L, CD103, TNF-R2, TGF-pR1, CD5,

l-selectln, CD45RO, CD45RA, LAG-3, neuropllln-1 (Nrp1) [Свиридова и др., 2007; Tran et al., 2009a; Shevach, 2009; Sakaguchl et al., 2010].

В последнее время стали появляться сообщения о регуляторных В-клетках [Yanaba et al., 200B; Gray and Gray, 2010; Noh et al., 2010; Noh, Lee, 2011]. В-клетки делятся на классические CD5+ B1 клетки и CD5- - традиционные B2 клетки. B1 клетки секретируют несколько специфических аутоантител и могут участвовать в развитии аутоиммунных патологий. CD5+ клетки характеризуются экспрессией поверхностных маркеров B220lo, IgMhl, IgD+, CD9+, CD43+ и CD23k>. В2 клетки определяются фенотипически как B220hl, IgMhl/l°, IgD+, CD9-, CD43- и CD23hl. B1 клетки секретируют IL-10, TGF-p и FoxP3, и они определены как Br1 (B10), Br3 и Breg соответственно [Noh, Lee, 2011].

Регуляторные клетки и аутоиммунные заболевания

В иммунной системе существует ряд механизмов для контроля аутотолерантности, центральным из которых является клональная селекция и апоптоз аутореактивных T-клеток в тимусе. Однако небольшое количество аутореактивных Т-клеток может быть обнаружено в периферической крови у здоровых доноров [Danke et al., 2004]. В норме иммунная система сдерживает аутореактивность лимфоцитов с

помощью регуляторных механизмов. Нарушение их может привести к аутоиммунизации. Аутоиммунные реакции могут возникать из-за снижения количества Treg, вследствие их недостаточного развития, пролиферации или выживания, возникновения дефектов в функциях самих Treg, резистентности эффекторных Т-клеток к действию Treg [Buckner, 2010].

Диабет 1 типа

Сахарный диабет 1 типа (Type 1 Diabetes, T1D) - заболевание эндокринной системы, характеризующееся абсолютной недостаточностью инсулина. Диабет 1 типа возникает, когда собственная иммунная система человека начинает атаковать и уничтожать инсулин-продуци-рующие бета-клетки (р-клетки) островков поджелудочной железы. В результате утрачивается способность организма вырабатывать инсулин, и количество глюкозы достигает опасного уровня. Это заболевание может развиваться в любом возрасте, но чаще наблюдается в ранние периоды онтогенеза.

Ключевую роль в иммунопатогенезе этого заболевания играют цитокины: IL-1, IFN-y, TNF-a, IL-4, IL-10 [Кравец и др., 2010]. IL-1p усиливает экспрессию NF-kB в р-клетках, что приводит к активации индуцибельной NO-синтетазы

(iNOS). Продукция NO снижает функцию митохондрий, в результате чего происходит уменьшение уровня аденозинтрифосфата (АТФ) и секреции инсулина. IL-1 р в сочетании с IFN-y проявляет цитотоксическое действие на р-клетки. IFN-y усиливает экспрессию антигенов МНС I и II класса, а также экспрессию адгезивных молекул на р-клетках. TNF-a индуцирует апоптоз и некроз р-клеток. В то же время цитокины IL-4 и IL-10 проявляют защитное действие при T1D. Предварительная инкубация р-клеток человека с IL-4 предотвращает апоптоз, вызванный смесью IL-1, TNF-a и IFN-y. Но у мышей трансгенная экспрессия IL-4 способствует развитию аутоиммунного сахарного диабета [Кравец и др., 2010].

Регуляторные Т-клетки могут влиять на различные стадии T1D. Как и при реакции «трансплантат против хозяина», вполне вероятно, что Treg сначала активируются в лимфоузлах поджелудочной железы. Затем CD4CD25FOXP3+ Treg и Tr1 различными способами блокируют активацию и экспансию эффекторных T-клеток. Экспрессия эффекторными клетками молекул адгезии и рецепторов хемокинов также подавляется Treg, в результате чего происходит снижение миграции эффекторных клеток в орган-мишень [Roncarolo, 2007].

0

В ряде исследований представлено количественное содержание Сй4+Сй25+ Тгед в периферической крови больных ТЮ в сравнении со здоровыми донорами (табл. 1).

Таблица 1. Содержание регуляторных Сй4+С025+ Т-клеток в периферической крови больных диабетом 1 типа

Фенотип Treg Количество Treg, %

больные здоровые

CD4+CD25+ 4,7 5,2

CD4+CD25hl 1,2 1,7

Источник

Brusko et al., 2005; Jin et al., 2009

С возрастом количество Treg у больных T1D снижается [Brusko et al., 2005; Jin et al., 2009]. В то же время Y. Jin с соавт. [2009] отмечают рост Treg в группе в возрасте до 14 лет.

По данным ряда исследователей, функциональная активность Treg у больных T1D снижается [Lindley et al., 2005; Lawson et al.,2008; Jin et al., 2009]. В исследованиях с NOD мышами (non-obese diabetic mice, экспериментальная модель диабета 1 типа) было показано, что снижение функциональной активности Treg в местах воспаления связано с понижением уровня IL-2 [Bettini, Vignali, 2009]. Также был обнаружен дефект в сигнальном пути IL-2R Treg больных. Это нарушение приводило к уменьшению восприимчивости Treg клеток к IL-2, вследствие чего снижалась его доступность Treg клеткам [Long et al., 2010].

Обнаружение способности iNKT-клеток продуцировать регуляторный цитокин IL-4 привлекло особое внимание к этим клеткам, и они стали рассматриваться как потенциальные регуляторы иммунных ответов. Были представлены данные о снижении количества (до 30 %) iNKT-клеток у NOD мышей в сравнении с неаутоиммунными штаммами, что было связано с дефектами в этих клетках [Novak, Lehuen, 2011]. Дальнейшие исследования показали, что исправление повреждений iNKT-клеток значительно снизило и частоту T1D у NOD мышей. Непосредственный анализ перенесенных диабетогенных T-клеток в iNKT реципиентов показал, что присутствие iNKT-клеток ингибирует продукцию IL-2 и IFN-y, а затем и пролиферацию популяции эффектор-ных CD4+ T-клеток. Лечение NOD мышей синтетическими лигандами iNKT-клеток, такими как a-GalCer, ОСН и a-GalCer (С20:2), значительно снижает тяжесть заболевания T1D в NOD колонии. a-GalCer (a-Galactosyceramide) - гликолипид, полученный от морской губки Agelas Mauritianus, - специфично и эффективно стимулирует iNKT-клетки, связываясь с высокой чувствительностью с тетрамерами CD1d молекулы.

Это объясняется тем, что CD1d молекула, в отличие от классической MHC молекулы, презен-тирует антигены гликолипидной и липидной структуры. Оптимальные результаты были достигнуты только в случаях, когда лечение начиналось на очень ранней стадии при ежедневном приеме a-GalCer. Эффекторные CD4+ T-клетки не способны к пролиферации в присутствии a-GalCer-активированных клеток iNKT. Введение a-GalCer приводит к привлечению

CD11cCD8a- миелоидных дендритных клеток, вызывающих иммунологическую толерантность в лимфатических узлах поджелудочной железы, и увеличивает экспрессию CD86. Эти изменения необходимы для индукции анергии эффек-торных T-клеток [Novak, Lehuen, 2011]. У NOD мышей дефект iNKT-клеток по сравнению с неаутоиммунными штаммами обнаруживается в периферической лимфоидной ткани, но не в периферической крови. Эти данные показывают, что исследование iNKT-клеток в периферической крови не отражает состояние iNKT-клетки в органе-мишени - поджелудочной железе в случае T1D. Данные, касающиеся взаимодействия между iNKT-клетками и регуляторными T-клетками при T1D, малочисленны. Tем не менее в лабораторных условиях стимулирование iNKT-клеток a-GalCer не меняет ни фенотип, ни количество, ни функции регуляторных CD4CD25FOXP3+ T-клеток [Novak, Lehuen, 2011]. Tаким образом, действительную значимость взаимодействия iNKT с CD4 CD25+ T-клетками в защите от T1D предстоит еще установить.

В последнее время особое внимание привлекают двойные негативные регуляторные T-клетки (Double negative T cells, DN Treg). У грызунов CD3CD4CD8- регуляторные T-клетки составляют 1-3 % периферических T-клеток [Shalev et al., 2011]. Эти DN Treg экспрессируют уникальный набор маркеров на поверхности клеток, включающий TCRaP, CD25, LFA-1, CD69, CD45, CD30, CD62L и CTLA-4. Активированные DN Treg клетки могут синтезировать своеобразный профиль цитокинов, характеризующийся увеличенной продукцией IFN-y, TNF-a и низким уровнем TGF-p. В то же время секретирование IL-2, IL-4, IL-13 или IL-10 не было обнаружено в этих клетках. DN Treg клетки могут подавлять иммунные реакции с участием CD4+ и CD8+ T-клеток in vitro и in vivo. Было показано, что лечение с активированными антиген-специфиче-скими DN Treg клетками может предотвратить развитие реакции «трансплантат против хозяина» (GVHD) и развитие аутоиммунного диабета

1 типа, индуцированного патогенными CD8+ T-клетками NOD мышей. DN Treg клетки были также идентифицированы и у человека. Эти

@

клетки составляют 1-2 % от общего числа CD3+ T-клеток в крови и лимфоузлах у здоровых доноров. Подобно DN Treg клеткам мышей, активированные DN Treg клетки человека секрети-руют высокие уровни IFN-y, но не IL-2, и очень низкие уровни IL-10 и IL-4. DN Treg клетки были способны распознавать MHC-пептидные комплексы APCs, тем самым приобретая способность к индукции апоптоза и подавлению пролиферации антиген-специфических цитотоксиче-ских T-лимфоцитов (cytotoxic T lymphocyte (CTL)) [Shalevet al., 2011].

Ревматоидный артрит

По современным представлениям, ревматоидный артрит (Rheumatoid Arthritis, RA) -это хроническое заболевание неизвестной этиологии, со сложным аутоиммунным патогенезом, характеризующееся хроническим воспалением синовиальной оболочки суставов и прогрессирующей деструкцией хрящевой и костной ткани. С риском развития RA связывают гены STAT4, PTPN22, HLA-DRB1 [Cope, 2008].

Развитие RA вызывается проникновением в полость сустава экзогенного или эндогенного антигена. Он поглощается макрофагами и дендритными клетками, где подвергается процессингу и затем презентируется CD4+ T-лимфоцитам. Сенсибилизированные Т-клетки путем прямых межклеточных взаимодействий и выработки цитокинов активируют макрофаги и фибро-бласты, которые в свою очередь продуцируют провоспалительные цитокины, стимулирующие рост и пролиферацию Т-лимфоцитов, а также моноцитов, синовиоцитов, хондроцитов, эндотелиальных клеток.

Провоспалительный IL-1, продукции которого способствует TNF-a, повышает выработку NO-синтетазы и содержание оксида азота, что в дальнейшем способствует гибели хондроцитов. При RA обнаружен повышенный уровень IL-17 и его рецепторов (IL-17A и IL-17C) в синовиальной ткани, синовиальной жидкости и супернатантах культур мононуклеарных клеток синовиальной оболочки [Lubberts et al., 2004]. IL-17 индуцирует синтез провоспалительных цитокинов TNF-a, IL-6, IL-1 р, гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (granulocyte-macrophage colony stimulating factor, GM-CSF) и хемокина CCL20; оказывает синергическое действие на продукцию медиаторов воспаления совместно с TNF-a и IL-1Р; непосредственно стимулирует стромальные клетки, макрофаги, хондро-циты, вызывая разрушение хрящевой и костной ткани [Miossec, 2007; Cope, 2008].

Пролиферация эффекторных Т-лимфоцитов может подавляться Treg клетками экспрессией CTLA-4 и иммуносупрессорных цитокинов TGF-p-1, IL-10 и IL-35 [Steward-Tharp et al., 2010].

В ряде исследований представлено количественное содержание CD4CD25+ Treg в периферической крови больных RA в сравнении со здоровыми донорами (табл. 2).

Таблица 2. Содержание регуляторных С04+С025+ Т-клеток в периферической крови больных ревматоидным артритом

Фенотип Treg Количество Treg, % Источник

боль- ные здоро- вые

CD4+CD25+ 4 5,5 11,1 Mottonen et al., 2005; Liu et al., 2005; Aerts et al., 2008

CD4+CD25brlght 4 2,1 5,1 Liu et al., 2005; Lee et al., 2008; Aerts et al., 2008

CD4+CD25+FOXP3+ 5,0 5,4 Venken et al., 2007

CD4+CD25low t 19 14 Aerts et al., 2008

CD4+CD25-/low 4 5,6 5,9

CD4+CD25/lowFOXP3+ 4 4,8 5,6

Примечание. i - уменьшение количества Treg клеток в периферической крови больных;

t - увеличение количества Treg клеток в периферической крови больных.

У больных RA снижена супрессорная функция Treg клеток в периферической крови, Treg клетки подавляют пролиферацию эф-фекторных Т-лимфоцитов, но не их способность синтезировать провоспалительные цитокины [Ehrenstein et al., 2004]. Более высокое содержание Treg клеток обнаружено в синовиальной жидкости, чем в периферической крови у больных RA [Mottonen et al., 2005; Liu et al., 2005].

Было показано также снижение числа iNKT-клеток в периферической крови больных RA. Исследования показали, что нарушения в этих клетках вызывают воспаление синовиальной оболочки сустава, что свидетельствует о возможном участии iNKT-клеток в аутоиммунизации [Novak, Lehuen, 2011]. Дефекты iNKT-клеток у CD1d-/- или Ja18-/- мышей весьма благоприятно влияют на течение заболевания. При коллаген-индуцированном артрите, а также ан-титело-опосредованной модели RA блокада iNKT-CD1d привела к снижению тяжести заболевания. Противоречивые результаты были получены в экспериментах, анализирующих терапевтический эффект синтетических лигандов iNKT-клеток. a-GalCer и OCH защищают мышей от CIA (collagen induced arthritis mice, экспериментальная модель коллаген-индуцированного

0

артрита), индуцируя сдвиг иммунного ответа в сторону Th2. Однако в антитело-опосредо-ванной модели RA a-GalCer усиливал воспаление суставов [Novak, Lehuen, 2011].

Notley с соавторами [2010] показали, что у мышей CIA, которым однократно вводили анти-CD3 антитела, снижалась тяжесть течения заболевания, что проявлялось в уменьшении степени воспаления и повреждения сустава. Это сопровождалось экспансией двух субпопуляций Treg: CD4CD25+FoxP3+ и CD8CD25FoxP3+. Авторы отмечают, что CD4 CD25 FoxP3+ Treg у этих мышей не проявляли иммунной супрессии в отличие от популяции индуцированных CD8CD25Foxp3+ Treg, которая была способна подавлять эффекторные Т-клетки и продукцию IFN-y и IL-17.

Системная красная волчанка

Системная красная волчанка (Systemic Lupus Erythematosus, SLE) является аутоиммунным заболеванием, затрагивающим многие органы, включая кожу, суставы, почки и центральную нервную систему. Это заболевание характеризуется В- и Т- клеточными нарушениями, связанными с отсутствием толерантности и последующей активацией и экспансией аутореактивных лимфоцитов, секретированием воспалительных цитокинов и продукцией широкого спектра аутоантител. При системной красной волчанке аутоантитела направлены против внутриядерных нуклеиновых кислот, белков и нуклеопротеиновых комплексов.

Причина появления этого заболевания до конца не ясна. Предполагается, что патогенез SLE может быть связан не только с дефектами в Treg, но и обусловлен генетической предрасположенностью [Moser et al., 2009]. Комбинации аллелей риска и механизмы, которые приводят к предрасположенности к аутоиммунизации, изучены мало. В последнее время анализ генома значительно увеличил количество генов, связанных с SLE [Crispin et al., 2010]. Функция этих генов изменчива. Некоторые, такие как IRF5, STAT4, IRAK1, TREX1 и TLR8, участвуют в считывании НК и продукции интерферона, в то время как другие контролируют Т-(PTPN22, TNFSF4, PDCD1) или В- (BANK1, BLK, LYN) клеточные сигнальные пути (например, PTPN22 регулирует активацию лимфоцитов) [Crispin et al., 2010]. Гены IRF5 и STAT4 дополнительно увеличивают риск SLE [Abelson et al.,

2009], а гены TNIP1, PRDM1, JAZF1, UHRF1BP1 и IL-10 определены как локусы риска для SLE [Gateva et al., 2009].

В ряде исследований представлено количественное содержание Сй4+Сй25+ Тгед в периферической крови больных ЭЬЕ в сравнении со здоровыми донорами (табл. 3).

Таблица 3. Содержание регуляторных Сй4+С025+ Т-клеток в периферической крови больных системной красной волчанкой

Фенотип ^eg Количество ^eg, % Источник

боль- ные здоро- вые

CD4+CD25+ 4 6,1 22,1 Lin et al., 2007; Lyssuk et al., 2007; Lee et al., 2008; Zhang et al., 2008; Azab et al., 2008; Showdary Venigala et al., 2008; Barreto et al., 2009

CD4+CD25high 1 2,2 3,8 Lee et al., 2008; Zhang et al., 2008; Habibagahi et al., 2010

CD4+CD25+FOXP3+ 4 1,8 5,4 Lyssuk et al., 2007; Venken et al., 2007; Yan et al., 2008

CD4+CD25highFOP3+ t 2,6 1,7 Showdary Venigala et al., 2008; Suen et al., 2008

CD4+CD45+FOXP3'° t 4,2 3,0 Miyara et al., 2009

CD4+CD45TOXP3'° t 10,4 3,0

CD4+CD45FOXP3hi 4 1,2 3,0

CD4+CD25+CD127- 4 4,5 9,4 Yang et al., 2009

CD4+CD25brghtCD 127- 4 0,4 0,9 Henriques et al., 2010

CD4+CD25FOXP3+ t 7,5 1,4 Bonelli et al., 2011

Примечание. i - уменьшение количества Treg клеток в периферической крови больных;

t - увеличение количества Treg клеток в периферической крови больных.

Большинство исследований показали значительное снижение супрессорной способности CD4CD25+ Treg у пациентов с активной SLE по сравнению со здоровыми донорами [Lyssuk et al., 2007; Bonelli et al., 2008]. Тем не менее есть данные о таком же снижении супрессорной активности CD4 CD25++ Treg у пациентов с неактивной SLE [Lyssuk et al., 2007]. В то же время ряд авторов отмечают нормальный уровень супрессии Treg у больных как с активной, так и с неактивной формой заболевания [Yan et al., 2008; Vargas-Rojas et al., 2008]. Предполагается, что эффекторные клетки у больных с SLE становятся резистентными к действию CD4CD25+ Treg [Vargas-Rojas et al., 2008].

M. Bonelli с соавт. [2011] исследовали CD4CD25FOXP3+ Т-клетки, уровень которых в крови больных был очень высок. Эти клетки фенотипически и в определенной степени функционально походили на регуляторные клетки.

0

Обработка мононуклеаров периферической крови (PBMCs) SLE пациентов анти-DNA lg G-пептидом показала увеличение количества CD4 CD25high Tregs in vitro и усиление их супрессорной функции [Dinesh et al., 2010].

Сыворотка крови больных SLE характеризуется высокой концентрацией IL-6, который может оказывать влияние на иммунные клетки [Scheinecker et al., 2010]. Было показано, что повышенное количество IL-6 приводит к увеличению резистентности эффекторных Т-кле-ток к Treg опосредованной супрессии. Также IL-6 может оказать влияние на функции Treg и перенаправить дифференцировку Treg в IL-17 продуцирующие ^17-клетки [Scheinecker et al., 2010]. Это может быть причиной увеличения уровня IL-17 у SLE пациентов [Ouyang et al., 2008].

Изучение CD8Treg у SLE больных показало, что количество этих регуляторных клеток в периферической крови может быть несколько ниже или не отличаться от показателей у здоровых доноров [Dinesh et al., 2010]. Filaci с соавт. [Dinesh et al., 2010] в своем исследовании обнаружили, что CD8+ Treg клетки больных секре-тируют небольшое количество IL-6 и значительное количество IL-12 по сравнению со здоровыми донорами. Регуляторная функция зависела от IFN-y и IL-6. Авторы предположили, что дисфункция CD8+ Treg клеток у больных скорее всего связана с дисбалансом между ингибиторным (IL-6) и стимулирующим (IL-12) цитокинами.

L. Zhang с соавт. [2009] показали, что трансплантация аутологичных гематопоэтических стволовых клеток может вызвать длительную ремиссию у больных волчанкой. При этом было обнаружено увеличение количества CD4 CD25highFOXP3+, CD8 FOXP3+ и CD8 CD103+ Т-клеток. Причем CD8FOXP3+ Т-клетки экспрессировали высокий уровень LAP (latency-associated peptid), CD103, PD-1, PD-L1 и CTLA-4. Супрессорную функцию CD8+ ^eg проявляли секрецией TGF-p [Zhang et al., 2009].

Рассеянный склероз

Рассеянный склероз (Multiple Sclerosis, MS) - аутоиммунное заболевание центральной нервной системы, которое почти неизбежно приводит на определенной стадии своего развития к инвалидизации. Риск заболевания повышается у носителей генов МНС

II класса, DRB1 *1501, DRB5*0101 и

DQB1*0602 [Barcellos et al., 2002].

В основе патогенеза лежит аутоиммунный процесс, выражающийся в дифференцировке

и активации миелин-реактивных Т-клеток, индуцирующих развитие демиелинизирующего процесса. Причем ведущая роль в развитии иммунопатологического процесса при рассеянном склерозе принадлежит популяции CD4+ Т-клеток. Считается, что CD4+T-лимфоциты первыми встречаются с антигеном и приобретают свойства эффекторных миелинспецифи-ческих клеток [Delgado, Sheremata, 2006].

На следующем этапе происходит проникновение активированных Т-лимфоцитов через гематоэнцефалический барьер в ЦНС и их взаимодействие с антигенами миелина. В результате развивается воспалительный процесс, который приводит к повреждению головного и спинного мозга.

Важную роль в развитии MS отводят T-хел-перным клеткам 17 (Th17). Эти клетки, секре-тируя IL-17 и IL-22, увеличивают проницаемость гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), что способствует попаданию нейроантигенов на периферию, активации и пролиферации миелин-реактивных Т- и B-клеток и последующему проникновению этих клеток в ЦНС [Се-ледцов и др., 2010]. Проникать через ГЭБ способны только активированные лимфоциты, которые вызывают нейротоксический эффект не только опосредованно, но и непосредственно - через контактное межклеточное взаимодействие. Значимая роль в нем может принадлежать Fas-лиганду.

Количество ^eg в периферической крови больных рассеянным склерозом практически не отличается от количества у здоровых доноров. Однако некоторые авторы отмечают снижение CD4CD25 FOXP3+ ^eg у больных по сравнению со здоровыми (табл. 4).

Таблица 4. Содержание регуляторных С04+С025+ Т-клеток в периферической крови больных рассеянным склерозом

Фенотип^eg Количество ^eg, % Источник

боль ные здо- ровые

CD4+CD25+ 7 б Puthetl et al., 2004

CD4+CD25hlgh і 1,2 2,3 Vlglletta et al., 2004; Puthetl et al., 2004; Feger et al., 2007

CD4+CD25+FOXP3+ і 3,5 5,7 Haas et al., 2007; Venken et al., 2007

CD4+CD25t"ghtFOXP3+РD 1- t 2,5 1,1 Saresella et al., 2008

C D4+CD25hlghCD127low 4,б 4,7 Mlkulkova et al., 2010

Примечание. I - уменьшение количества Тгед клеток в периферической крови больных;

т - увеличение количества Тгед клеток в периферической крови больных.

0

У больных MS выявлен дисбаланс CD4+ и CD8+ Т-клеток за счет повышения количества CD8+ Т-клеток [Mikulkova et al., 2010]. Также установлено снижение функциональной активности Treg больных, как в стадии ремиссии, так и в стадии обострения заболевания [Viglietta et al., 2004; Venken et al., 2007]. Выявлено увеличение количества Treg в спинномозговой жидкости по сравнению с количеством Treg в периферической крови [Fritzsching et al., 2011]. Fritzsching с соавт. [2011] обнаружили в цереброспинальной жидкости больных субпопуляцию CD45ROhiCD49hi Treg, которая была чувствительна к CD95-опосредован-ному апоптозу. В другом исследовании была обнаружена субпопуляция регуляторных клеток, экспрессирующая CD39, которая была способна подавлять не только пролиферацию эффекторных клеток, но и продукцию IFN-y, а также продукцию провоспалительного цито-кина IL-17. Однако CD4FOXP3CD39+ Treg, выделенные из крови больных, не проявляли способности к супрессии Th17 иммунного ответа [Fletcher et al., 2009].

Предполагается, что Tr1 клетки, возможно, играют защитную роль у больных рассеянным склерозом. Генерация продуцирующих IL-10 Т-клеток была ослаблена у больных в сравнении со здоровыми. У EAE мышей Experimental аutoimmune еncephalomyelitis - экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит, модель рассеянного склероза) перенесенные in vitro генерированные Tr1 клетки, специфичные к яичному альбумину, могут предотвратить развитие неврологических симптомов при интракраниальном введении белка [Pot et al.,

2011]. Клетки Tr1, индуцированные in vivo растворимым основным белком миелина (MBP) p87-99, могут снизить тяжесть заболевания EAE у крыс, иммунизированных MBP. Кроме того, Meiron с соавт. [Pot et al., 2011] сообщили, что стромальный клеточно-зависимый фактор 1а (stromal cell-derived factor 1а (CXCL12)) перенаправляет поляризацию эффекторных Th1 клеток в CD4 CD25 FoxP3 IL-10high антиген-специфические регуляторные Т-клетки, которые подавляют аутоиммунное воспаление у EAE мышей.

CD8 CD122+ Т-клетки определяют как естественно образованные IL-10 продуцирующие регуляторные Т-клетки. Они непосредственно подавляют продукцию IFN-y и пролиферацию CD4+ и CD8+ Т-клеток in vitro. CD8 CD122+ Т-клетки также играют важную регуляторную функцию in vivo, на что указывает их способность подавлять EAE и предотвращать развитие аномальных Т-клеток у

CD122-дефицитных мышей. Эта субпопуляция проявляет свои функции в основном за счет секретирования IL-10. Удаление гена IL-10 или использование анти-^-10 моноклональных антител (мАТ) отменяет супрессорную активность CD8 CD122+ Т-клеток in vitro [Shalev et al., 2011].

В настоящее время определена еще одна субпопуляция регуляторных клеток, экспрессирующая TCRap и CD8aa [Trevor et al., 2008]. Высокая концентрация таких клеток была обнаружена в популяции внутриэпителиальных лимфоцитов кишки (40 %), в то время как в селезенке и лимфатических узлах их число было значительно ниже (< 1 %). Предполагается, что эти клетки могут играть важную роль в регуляции иммунитета слизистых оболочек. В поддержку данной концепции исследователи продемонстрировали, что TCRap+CD8aa+ Treg клетки предотвращают колит, индуцированный CD4CD45RBhigh Т-клетками, у SCID мышей (severe combined immunodeficiency, модель тяжелого комбинированного иммунодефицита). Эта ингибирующая активность зависела от продукции IL-10, так как TCRap+CD8aa+ Treg клетки от IL-10-дефицитных мышей не могли эффективно предотвратить болезнь [Shalev et al., 2011]. В дополнительных экспериментах было показано, что TCRaP+CD8aa+ Treg клетки могут подавлять развитие EAE [Trevor et al., 2008].

Иммунотерапия при аутоиммунных заболеваниях

В настоящее время основным направлением в иммунотерапии больных аутоиммунными заболеваниями является подавление чрезмерной активации Т-лимфоцитов. Наиболее часто используется метод, который связан с блокадой ко-стимуляции Т-клеток с помощью препарата абатацепт [Davis et al., 2008]. Абатацепт (CTLA-4lg) - это димерный белок человека, который способен избирательно угнетать активацию Т-клеток, подобно CTLA-4. Это вещество связывается с CD80/86 на APCs, блокируя взаимодействие CD80/86 с CD28 на Т-клетках. При этом не затрагиваются другие пути ко-стимуля-ции Т-лимфоцитов, а в результате происходит угнетение активации и пролиферации Т-клеток, что в свою очередь приводит к уменьшению продукции провоспалительных цитокинов (TNF-a, IL-6, IL-1) и аутоантител [Davis et al., 2008; Goronzy et al., 2008; Folgarone et al., 2009].

Как терапевтическая мишень при аутоиммунных заболеваниях привлекает внимание PD-1. С молекулами PD-1/PD-L1 связывают ингибирующие сигналы, которые регулируют централь-

0

ный и периферический механизмы толерантности. Rajasalu и соавт. [2010] продемонстрировали, что селективный дефицит PD-L1 на р-клетках или отсутствие PD-1 на CD8+ Т-клетках вызывает начало T1D у мышей. Установлено, что PD-L1 может способствовать развитию и функционированию Treg. Исследования показали, что PD-L^lg-опосредованная блокада способствует TGF-p-индуцированной генерации de novo CD4+ FoxP3+ iTreg [Kornete, Piccirillo, 2011].

Одним из перспективных подходов к иммунотерапии аутоиммунных заболеваний считается связывание рецепторов семейства TNF. Рецепторы этого семейства необходимы для включения сигнальных путей NF-kB- и MAP-киназ, участвуя в усилении пролиферации Т-клеток на разных этапах иммунного ответа. В снижении пролиферации Т-эффекторов важным является блокирование специфичных для этих клеток молекул 0X40, 4-1BB, 4DR3. Как потенциальная терапевтическая мишень рассматривается молекула CD154 (CD40L), которая характерна для активированных клеток [Steward-Tharp et al., 2010]. Показано, что блокада ко-стимуляторов анти-CD4, анти-CD154(CD40L) мАТ не изменяет уровень пролиферации антиген-стимулированных Тгед клеток in vivo и in vitro. Однако использование этих молекул значительно снижает количество антиген-специфических эффекторных клеток, приводя к доминированию Тгед клеток над эф-фекторными [Miyara et al., 2009a].

В настоящее время установлено, что Tr1 клетки играют важную роль в контроле аутоиммунных заболеваний, влияют на активность наивных клеток и Т-клеток памяти, а также на функции дендритных клеток. Они способны подавлять функции Th 1 и Th2 [Fehervari, Sakaguchi, 2005; Beissert et al., 2006]. Регулирование их функций и количества с помощью IL-27-содержащих препаратов или различных лигандов арил-углеводородного рецептора AhR (aryl hydrocarbon receptor) могут подавить иммунное воспаление через индукцию Tr1 клеток [Pot et al., 2011].

В качестве терапевтических мишеней можно рассматривать iNKT-клетки. Они секретиру-ют ингибиторный цитокин IL-4 и способны предотвратить развитие некоторых аутоиммунных заболеваний в экспериментальных моделях [Novak, Lehuen, 2011].

В последнее время внимание исследователей привлекают Th-17, которые секретируют провоспалительный цитокин IL-17, способствуя развитию аутоиммунных процессов. Ведутся поиски молекулярных мишеней для ингибирования этих клеток. Как наиболее подходящая мишень в настоящее время изучается лиганд

рецептора CCR6 - CCL20, который способствует миграции Th-17 в орган-мишень [Steward-Tharp et al., 2010].

В качестве терапевтических мишеней в последнее время рассматриваются CD8+ и DN Treg, которые могут предотвратить развитие аутоиммунных заболеваний. Известно, что CD8+ Treg способны подавлять эффекторные Т-клетки, продукцию IFN-y и IL-17 [Dinesh et al.,

2010], а DN Treg клетки могут ингибировать иммунные реакции с участием CD4+ и CD8+ Т-клеток in vitro и in vivo [Shalev et al., 2011].

В качестве биологических агентов для создания новых препаратов в лечении аутоиммунных заболеваний предлагается использовать рапамицин, анти-CD4, анти-CD40L (CD154) мАТ, которые способны индуцировать экспансию антиген-специфических Treg клеток in vitro и снижать количество эффек-торных Т-клеток [Miyara et al., 2009a]. По данным Ohkura et al. [2011], введение рапамици-на может предупредить развитие диабета 1 типа у NOD мышей.

К перспективным направлениям развития иммунотерапевтических стратегий следует отнести исследования по трансплантации стволовых клеток у больных аутоиммунными заболеваниями. Уже есть положительный опыт трансплантации аутологичных гемато-поэтических стволовых клеток у больных системной красной волчанкой, которая приводила к длительной ремиссии [Zhang et al., 2009].

Таким образом, наиболее перспективными направлениями изучения аутоиммунных заболеваний с целью повышения эффективности иммунотерапии являются поиск новых способов усиления экспансии Treg клеток, использование молекул-мишеней для индукции иммунной модуляции и трансплантация стволовых клеток.

Заключение

Развитие аутоиммунных заболеваний приводит к разрушению тканей и нарушению физиологических функций организма. До недавнего времени развитие органоспецифических аутоиммунных заболеваний связывали со смещением баланса провоспалительных ТМ клеток, характеризующихся продукцией IL-2, IFN-y, TNF-a, GM-CSF, с противовоспалительными ^2, секретирующими IL-4, IL-10 и IL-13, в сторону первых. Исследования последних лет показали, что немаловажную роль в развитии аутоиммунных заболеваний играют Th17, которые способны индуцировать воспаление.

0

Изучение механизмов взаимодействия между Th17 и Treg показало, что транскрипционные факторы - RORyt/RORa и FOXP3 - подавляют функции друг друга. IL-2, являющийся фактором роста для Treg, ингибирует дифференцировку Th17, в то время как IL-21, ингибирующий экспансию Treg, способствует дифференцировке Th17. Арил-углеводородный рецептор AhR, экспрессирующийся как в Treg, так и в Th17, может оказывать разное действие на дифференцировку этих клеток в зависимости от лиганда. С одной стороны, связывание AhR с одним из естественных лигандов FICZ (6-formmylindolo [3,2-b] carbazole) способствует дифференцировке Th17 и увеличению продукции IL-22. С другой стороны - связывание AhR с другим синтетическим лигандом, TCDD (2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin), в первую очередь увеличивает экспансию Treg за счет повышения экспрессии FOXP3 [Pot et al., 2011; JSger, Kuchroo, 2010]. Таким образом, иммунологические механизмы поддержания толерантности и развитие аутоиммунных процессов во многом зависят от баланса между Treg и Th17, а также от активации других регуляторных клеток.

Литература

Кравец Е. Б., Саприна Т. В., Лазаренко Ф. Э., Прохоренко Т. С., Рязанцева Н. В. Роль цитокинов в патогенезе аутоиммунного диабета, вопросы иммуноинтервенции // Бюллетень сибирской медицины. 2010. № 1. С. 76-83.

Свиридова В. С., Кологривова Е. Н., Пронина Н. А., Елисеева Л. В., Читалкина А. А. Т-лимфоциты - ключевые иммунорегуляторные клетки // Бюллетень сибирской медицины. 2007. № 1. С. 83-88.

Селедцов Д. В., Селедцов В. И., Иванова И. П., Литвинова Л. С. Антиген-специфическая иммунотерапия рассеянного склероза // Цитокины и воспаление. 2010. Т. 9, № 1. С. 3-12.

Ярилин А. А., Донецкова А. Д. Естественные регуляторные Т-клетки и фактор FOXP3 // Иммунология. 2006. № 3. С. 176-188.

Abelson A. K., Delag-Vega A. M., Kozyrev S. V. et al. STAT4 associates with SLE through two independent effects that correlate with gene expression and act additively with IRF5 to increase risk // Annals of the Rheumatic Disseases. 2009. Vol. 68. P. 1746-1753.

Aerts N. E., Dombrecht E. J., Ebo D. G., Bridts C. H., Stevens W. J., De Clerck L. S. Activated T cells complicate the identification of regulatory T cells in rheumatoid arthritis // Cell Immunol. 2008. Vol. 251. P. 109-115.

Azab N. A., Bassyouni I. H., Emad Y., Abd El-Wahab G. A., Hamdy G., Mashahit M. A. CD4+CD25+ regulatory T cells (TREG) in systemic lupus erythematosus (SLE) patients: the possible influence of treatment with corticosteroids // Clin. Immunol. 2008. Vol. 127. P. 151-157.

Barcellos L., Oksenberg J., Bucher P. et al. Genetic basis for clinical expression in multiple sclerosis // Brain. 2002. Vol. 125, N 1. P. 150-158.

Barreto M., Ferreira R. C., Lourenco L. et al. Low frequency of CD4+CD25+ Treg in SLE patients: a heritable trait associated with CTLA4 and TGFbeta gene variants // BMC Immunology. 2009. 10:5.

doi:10.1186/1471-2172-10-5.

Beissert S., Schwarz A., Schwarz T. Regulatory T cells // J. Invest. Dermatol. 2006. Vol. 126. P. 15-24.

Bettini M., Vignali D. A. A. Regulatory T cells and inhibitory cytokines in autoimmunity // Curr. Opin. Immunol. 2009. Vol. 21, N 6. P. 612-618.

Bonelli M., Savitskaya A., von Dalwigk K. et al. Quantitative and qualitative deficiencies of regulatory T cells in patients with systemic lupus erythematosus (SLE) // Int. Immunol. 2008. Vol. 20. P. 861-868. doi:10.1093/intimm/dxn044.

Bonelli M., Savittskaya A., Steiner C.-W., Rath E., Smolen J. S., Scheinecker C. Phenotypic and functional analysis of CD4+CD25 FoxP3+ T cells in patients with systemic lupus erynhematosus // J. Immunol. 2011. Vol. 182. P. 1689-1695.

Brusko T. M., Wasserfall C. H., Clare-Salzler M. J., Schatz D. A., Atkinson M. A. Functional defects and the influence of age on the frequency of CD4+CD25+ T-cells in type 1 diabetes // Diabetes. 2005. Vol. 54. P. 1407-1414.

Buckner J. H. Mechanisms of impared regulation by CD4+CD25+ FoxP3+ regulatory T cells in human aytoummune diseases // Immunology. 2010. Vol. 10. P. 849-859.

Chen Z., Lin F., Gao Y. et al. FoxP3 and RORyt: transcriptional regulation of Treg and Th17 // International Immunopharmacology. 2011. Vol. 11. P. 536-542.

Cope A. P. T cells in rheumatoid arthritis // Arthritis Research & Therapy. 2008. Vol. 10 (Suppl 1) : S1.

Crispin J. C., Liossis S.-N. C., Kis-Toth K. et al. Pathogenesis of human systemic lupus erythematosus: recent advances // Trends in Molecular Medicine. 2010. Vol. 16, N 2. P. 47-57.

Cvetanovich G. L., Hafler D. A. Human regulatory T cells in autoimmune diseases // Curr. Opin. Immunol.

2010. Vol. 22. P. 753-760.

Danke N. A., Koelle D. M., Yee C., Beheray S., Kwok W. W. Autoreaktive T cells in healthy individuals // J. Immunol. 2004. Vol. 172. P. 5967-5972.

Davis P. M., Nadler S. G., Stetsko D. K., Suchard S. J. Abatacept modulates human dendritic cell-stimulated T-cell proliferation and effector function independent of IDO induction // Clin. Immunol. 2008. Vol. 126. P. 38-47.

Delgado S., Sheremata W. A. The role of CD4+ T-cells in the development of MS // Neurological Research. 2006. Vol. 28, N 3. P. 245-249.

Dinesh R. K., Skaggs B. J., Cava A. L., Hahn B. H., Singh R. P. CD8+ Tregs in lupus, autoimmunity, and beyond // Autoimmunity Reviews. 2010. Vol. 9. P. 560-568.

Ehrenstein M. R., Evans J. G., Singh A. et al. Compromised function of regulatory T cells in rheumatoid arthritis and reversal by anti-TNFalpha therapy // J. Exp. Med. 2004. Vol. 200. P. 277-285.

Falgarone G., Semerano L., Rulle S., Boisseier M.-C. Targeting Lymphocyte activation to treat rheumatoid arthritis // Joint Bone Spine. 2009. Vol. 76. P. 327-332.

@

Feger U., Luther C., Poeschel S., Melms A., Tolosa E., Wiendl H. Increased frequency of CD4+CD25+ regulatory T cells in the cerebrospinal fluid but not in the blood of multiple sclerosis patients // Clin. Exp. Immunol. 2007. Vol. 147. P. 412-418.

FehervariZ., Sakaguchi S. CD4+ regulatory cells as a potencial immunotherapy // Phil. Trans. R. Soc. B. 2005. Vol. 360. P. 1647-1661.

Fletcher J. M., Lonergan R., Costelloe L. et al. CD39+Foxp3+ regulatory T cells suppress pathogenic Th17 cells and are impared in multiple sclerosis // J. Immunol. 2009. Vol. 183, N 11. P.7602-7610.

Fritzching B., Haas J., Konig F., Kunz P. et al. Intracerebral human regulatory T cells: analysis of CD4+CD25+FOXP3+ T cells in brain lesions and cerebrospinal fluid of multiple sclerosis patients // PLoS ONE. 2011. Vol. 6, N 3. e17988.

doi: 10.1371/journal.pone.0017988.

Gateva V., Sandling J. K., Hom G. et al. A large -scale replication study identifies TNIP1, PRDM1, JAZF1, UHRF1BP1 and IL-10 as risk loci for systemic lupus erythematosus // Nature Genetics. 2009. Vol. 50. P.1228-1233.

Goronzy J. J., Weyand C. M. T-cell co-stimulatory pathways in autoimmunity // Arthritis Research & Therapy. 2008. Vol. 10. (Suppl 1) : S3.

Gray D. and Gray M. What are regulatory B cells? // Eur. J. Immunol. 2010. Vol. 40. P. 2677-2679.

Haas J., Fritzsching B., Trubswetter P. et al. Prevalence of newly generated naive regulatory T cells (Treg) is critical for Treg suppressive function and determines Treg dysfunction in multiple sclerosis // J. Immunol. 2007. Vol. 179. P. 1322-1330.

Habibagahi M., Habibagahi Z., Jaberipour M., Aghdashi A. Quantification of regulatory T cells in peripheral blood of patients with systemic lupus erythematosus // Rheumatol Int. 2010. Vol. 31, N 9. P. 1219-1225.

Henriques A., Ines L., Couto M. et al. Frequency and functional activity of Th17, Tc17 and other T-cell subsets in Systemic Lupus Erythematosus. // Cell Immunol. 2010. Vol. 264. P. 97-103.

JSger A., Kuchroo V. K. Effector and regulatory T-cell subsets in autoimmunity and tissue inflammation // Scandinavian Journal of Immunology. 2010. Vol. 72. P. 173-184.

Jin Y., Chen X., Podolsky R., Hopkins D., Makala Levi H. C., Muir A., She J.-X. APC dysfunction is correlated with defective suppression of T cell proliferation in human type 1 diabetes // Clinical Immunology. 2009. Vol. 130. P. 272-279.

Kornete M., Piccirillo C. A. Critical co-stimulatory pathways in the stability of Foxp3+ Treg cell homeostasis in Type I Diabetes // Autoimmunity Reviews. 2011. Vol. 11. P. 104-111.

Lawson J. M., Tremble J., Dayan C., Beyan H., Leslie R. D. G., Peakman M., Tree T. I. M. Increased resistance to CD4+CD25hl regulatory T cell-mediated suppression in patients with type 1 diabetes // British Society for Immunology. Clin. Exp. Immunol. 2008. Vol. 154. P. 353-359.

Lee H. Y., Hong Y. K., Yun H. J., Kim Y. M., Kim J. R., Yoo W. H. Altered frequency and migration capacity of CD4+CD25+ regulatory T cells in systemic lupus erythematosus // Rheumatology (Oxford). 2008. Vol. 47. P. 789-794.

Lin S. C., Chen K. H., Lin C. H., Kuo C. C. Ling Q. D., Chan C. H. The quantitative analysis of peripheral blood FOXP3-expressing T cells in systemic lupus erythematosus and rheumatoid arthritis patients // Eur. J. Clin. Investig. 2007. Vol. 37. P. 987-996.

Lindley S., Dayan C. M., Bishop A., Roep B. O., Peakman M., Tree T. I. M. Defective Suppressor Function in CD4+CD25+ T-Cells From Patients With Type

1 Diabetes // Diabetes. 2005. Vol. 54. P. 92-99.

Liu M. F., Wang C. R., Fung L. L., Lin L. H., Tsai C. N. The presence of cytokine-suppressive CD4+CD25+ T cells in the peripheral blood and synovial fluid of patients with rheumatoid arthritis // Scand. J. Immunol. 2005. Vol. 62. P. 312-317.

Liu W. Putnam A. L., Xu-Yu Z. et al. CD127 expression inversely correlates with FoxP3 and suppressive function of human CD4+ Treg cells // J. Exp. Med. 2006. Vol. 203, N 7. P. 1701-1711.

Long S. A., Cerosaletti K., Bollyky P. L. et al. Defects in IL-2R signaling contribute to diminished maintenance of FOXP3 expression in CD4+CD25+ regulatory T-cells of type 1 diabetic subjects // Diabetes. 2010. Vol. 59, N 2. P. 407-415.

Lubberts E., Koenders M. I., van den Berg W. B. The role of T cell interleukin-17 in conducting destructive arthritis: lessons from animal models // Arthritis Research & Therapy. 2004. Vol. 7, N 1. P. 29-37.

Lyssuk E. Y., Torgashina A. V., Soloviev S. K., Nassonov E. L., Bykovskaia S. N. Reduced number and function of CD4+CD25h'ghFoxP3+ regulatory T cells in patients with systemic lupus erythematosus // Adv. Exp. Med. Biol. 2007. Vol. 601. P. 113-119.

McMurchyA. N., BushellA., Levings M. K., Wood K. J. Moving to tolerance: Clinical application of T regulatory cells // Seminars in Immunology. 2011. Vol. 23. P. 304-313.

Mikulkova Z., Praksova P., Stourac P., Bednarik J., Michalek J. Imbalance in T-cell and cytokine profiles in patients with relapsing-remitting multiple sclerosis // Journal of the Neurological Sciences. 2010. Vol. 300. P. 135-141.

Miossec P. Interleukin-17 in fashion, at last: ten years after its description, its cellular source has been identified // Arthritis & Rheumatism. 2007. Vol. 56. P.2111-2115.

Miyara M., Wing K., Sakaguchi S. Therapeutic approaches to allergy and autoimmunity based on FOXP3+ regulatory T-cell activation and expansion // J. Allergy Clin. Immunol. 2009a. Vol. 123, N 4. P. 749-755.

Miyara M., Yoshioka Y., Kitoh A. et al. Functional delineation and differentiation dynamics of human CD4+ T cells expressing the FoxP3 transcription factor // Immunity. 2009. Vol. 30. P. 899-911.

Moser K. L., Kelly J. A., Lessard C. J., Harley J. B. Recent insights into the genetic basis of systemic lupus erythematosus // Genes Immunity. 2009. Vol. 10. P. 373-379.

0

Mottonen M., Heikkinen J., Mustonen L., Isomaki P., Luukkainen R., Lassila O. CD4+CD25+ T cells with the phenotypic and functional characteristics of regulatory T cells are enriched in the synovial fluid of patients with rheumatoid arthritis // Clin. Exp. Immunol. 2005. Vol. 140. P. 360-367.

Noh G., Lee J. H. Regulatory B cells and allergic diseases // Allergy Asthma Immunology Research.

2011. Vol. 3, N 3. P. 168-177.

Noh J., Choi W. S., Noh G., Lee J. H. Presence of Foxp3-expressing CD19(+)CD5(+) B cells in human peripheral blood mononuclear cells:human CD19(+)CD5(+)Foxp3(+) regulatory B cell (Breg) // Immune Network. 2010. Vol. 10. P. 247-249.

Notley C. A., McCann F. E., Inglis J. J. and Williams R. O. ANTI-CD3 therapy expands the numbers of CD4+ and CD8+ treg cells and induces sustained amelioration of collagen-induced arthritis // Arthritis Rheum. 2010. Vol. 62. P. 171-178.

Novak J., Lehuen A. Mechanism of regulation of autoimmunity by iNKT cells // Cytokine. 2011. Vol. 53. P. 263-270.

Ohkura N., Hamaguchi M., Sakaguchi S. FOXP3+ regulatory T cells: control of FOXP3 expression by pharmacological agents // Trends in Pharmacological Sciences. 2011. Vol. 32, N 3. P. 158-166.

Ouyang W., Kolls J. K., Zheng Y. The biological functions of T helper 17 cell effector cytokines in inflammation // Immunity. 2008. Vol. 28. P. 454-467.

Pot C., Apetoh L., Kuchroo V. K. Type 1 regulatory T cells (Tr1) in autoimmunity // Seminars in immunology. 2011. Vol. 23. P. 202-208.

Putheti P., Pettersson A., Soderstrom M., Link H., Huang Y. U. Circulating CD4+CD25+ T regulatory cells are not altered in multiple sclerosis and unaffected by disease-modulating drugs // Journal of Clinical Immunology. 2004. Vol. 24. P. 155-161.

Rajasalu T., Brosi H., Schuster C. et al. Deficiency in B7-H1 (PD-L1)/PD-1 coinhibition triggers pancreatic p-cell destruction by insulin-specific, murine CD8 T-cells // Diabetes. 2010. Vol. 59. P. 1966-1973.

Roncarolo M.-G., Battaglia M. Regulatory T-cell immunotherapy for tolerance to self antigens and alloantigens in humans // immunology. 2007. Vol. 7. P. 585-598.

Sakaguchi S., Miyara M., Costantino C. M., Hafler D. A. FoxP3+ regulatory T cells in the human immune system // Nat. Rev. Immunol. 2010. Vol. 10. P. 490-500.

Sakaguchi S., Sakaguchi N., Asano M. et al. Immunologic self=tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2 receptor a-chains (CD25). Breakdown of a single mechanism of self-tolerance causes various autoimmune diseases // J. Immunol. 1995. Vol. 155. P. 1151-1164.

Saresella M., Marventano I., Longhi R., Lissoni F. et al. CD4+CD25bright FoxP3+PD1- regulatory T cells in acute and stable relapsing-remitting multiple sclerosis and their modulation by therapy // The FASEB Journal. 2008. Vol. 22. P. 3500-3508.

Scheinecker C., Bonelli M., Smolen J. S. Pathogenetic aspects of systemic lupus erythematosus with an emphasis on regulatory T cells // Journal of Autoimmunity. 2010. Vol. 35. P. 269-275.

Seddiki N., Santner-Nanan B., Martinson J. et al. Expression of interleukin (IL)-2 and IL-7 receptors discriminates between human regulatory and activiated T cells // J. Exp. Med. 2006. Vol. 203, N 7. P. 1693-1700.

Shalev I., Schmelzle M., Robson S. C., Levy G. Making sense of regulatory T cell suppressive function // Seminars in Immunology. 2011. Vol. 23. P. 282-292.

Shevach E. M. Mechanisms of Foxp3+ T regulatory cell-mediated suppression // Immunity. 2009. Vol. 30. P. 636-645.

Showdary Venigala R. K., Tretter T., Krienke S. et al. Reduced CD4+, CD25- T cell sensitivity to the suppressive function of CD4+, CD25high, CD127-/low regulatory T cells in patients with active systemic lupus erythematosus // Arthritis Rheum. 2008. Vol. 58. P. 2120-2130.

Steward-Tharpa S. M., Songc Y.-J., Siegelc R. M., O'Sheab J. J. New insights into T cell biology and T cell-directed therapy for autoimmunity, inflammation, and immunosuppression // Ann N. Y. Acad. Sci. 2010. Vol. 1183. P. 123-148.

Suen J. L., Li H. T., Jong Y. J., Chiang B. L., Yen J. H. Altered homeostasis of CD4 FoxP3 regulatory T-cell subpopulations in systemic lupus erythematosus // Immunology. 2008. Vol. 127. P. 196-205.

Thornton A. M., Korty P. E., Tran D. Q. et al. Expression of Helios, an Ikaros transcription factor family member, differentiates thymic derived from peripherally induced FoxP3+ T regulatory cells // J. Immunol. 2010. Vol. 184. P. 3433-3441.

Tran D. Q., Andersson J., Hardwick D. et al. Selective expression of latency-associated peptide (LAP) and IL-1 receptor type I/II (CD121a/CD121b) on activated human FOXP3+ regulatory T cells allows for their purification from expansion cultures // Blood. 2009a. Vol. 113. P. 5125-5133.

Trevor R. F., Smith and Vipin Kumar. Revival of CD8+ Treg-mediated suppression // Trends in Immunology.

2008. Vol. 29, N 7. P. 337-342.

Vargas-Rojas M. I., Crispin J. C., Richaud-Patin Y., Alcocer-Varela J. Quantitative and qualitative normal regulatory T cells are not capable of inducing suppression in SLE patients due to T-cell resistance // Lupus. 2008. Vol. 17. P. 289-294.

doi:10.1177/0961203307088307.

Venken K., Hellings N., Thewissen M. et al. Compromised CD4+CD25high regulatory T-cell function in patients with relapsing-remitting multiple sclerosis is correlated with a reduced frequency of FOXP3-positive cells and reduced FOXP3 expression at the single-cell level // Immunology. 2007. Vol. 123. P. 79-89.

Viglietta V., Baecher-Allan C., Weiner H. L., Hafler D. A. Loss of functional suppression by CD4+CD25+ regulatory T cells in patients with multiple sclerosis // J. Exp. Med. 2004. Vol. 7. P. 971-979.

Wang R. F. CD8+ regulatory T cells, their suppressive mechanisms and regulation in cancer // Hum. Immunol. 2008. Vol. 69, N 11. P. 811-814.

Yan B., Ye S., Chen G., Kuang M., Shen N., Chen S. Dysfunctional CD4+, CD25+ regulatory T cells in untreated active systemic lupus erythematosus secondary to interferon-alpha-producing antigen-presenting cells // Arthritis Rheum. 2008. Vol. 58. P.801-812.

@

Yanaba K., Bouaziz J. D., Haas K. M., Poe J. C., Fujuimoto M., Tedder T. F. A regulatory B cell subset with a unique CD1dh'CD5+ phenotype controls T cell-dependent inflammatory responses // Immunity. 2008. Vol. 28. P. 639-650.

Yang J., Chu Y., Yang X. et al. Th17 and natural Treg cell population dynamics in systemic lupus erythematosus // Arthritis Rheum. 2009. Vol. 60. P. 1472-1483.

Zhang L., Bertucci A. M., Ramsey-Goldman R. et al. Regulatory T cell (Treg) subsets return in patients with refractory lurus following stem cell transplantation and TGF-beta-producing CD8+ Treg cells are associated

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ:

Кравченко Полина Николаевна

аспирантка ИБ КарНЦ РАН

ул. Пушкинская, 11, Петрозаводск,

Республика Карелия, Россия, 185910 эл. почта: k-polina13@mail.ru тел.: (8142) 769810

Олейник Евгения Константиновна

руководитель группы иммунологии, д. б. н.

Институт биологии Карельского научного центра РАН ул. Пушкинская, 11, Петрозаводск,

Республика Карелия,

Россия, 185910

эл. почта: ole@krc.karelia.ru

тел.: (8142) 769810

with immunological remission of lupus // J. Immunol.

2009. Vol. 183. P. 6346-6358.

Zhang B., Zhang X., Tang F., Zhu L., Liu Y. Reduction of forkhead box P3 levels in CD4+CD25high T cells in patients with new-onset systemic lupus erythematosus // Clin. Exp. Immunol. 2008. Vol. 153. P.182-187.

Zheng J., Liu Y., Qin G., Chan P. L., Mao H., Lam K. T., Lewis D. B., Lau Y. L., Tu W. Efficient induction and expansion of human alloantigen-specific CD8 regulatory T cells from naive precursors by CD40-activated B cells // J. Immunol. 2009. Vol. 183. P. 3742-3750.

Kravchenko, Polina

Institute of Biology, Karelian Research Centre,

Russian Academy of Sciences

11 Pushkinskaya St., 185910 Petrozavodsk,

Karelia, Russia

e-mail: k-polina13@mail.ru

tel.: (8142) 769810

Oleinik, Evgenia

Institute of Biology, Karelian Research Centre,

Russian Academy of Sciences

11 Pushkinskaya St., 185910 Petrozavodsk,

Karelia, Russia

e-mail: ole@krc.karelia.ru

tel.: (8142) 769810