Влияние имплантируемых коллаген-хитозановых и желатин-хитозановых губок на состояние организма крысы: экспериментальное исследование

lungs during bleomycin injury and repair / P. M. Wang [et al] // Am. J. Pathol. - 2011. - № 178 (6). - P. 2560-2572.

23. Wehlin, L. Reduced intracellular oxygen radical production in whole blood leukocytes from COPD patients and asymptomatic smokers / L. Wehlin [et al] // Chest. - 2005. -№ 128. - P. 2051-2058.

24. Woodside, D. G. Cell adhesion antagonists: therapeutic potential in asthma and chronic obstructive pulmonary disease / D. G. Woodside, P. Vanderslice // Bio Drugs. - 2008. - № 22 (2). -P. 85-100.

25. Woolhouse, I. S. Endothelial interactions of neutrophils underflow in chronic obstructive pulmonary disease / I. S. Woolhouse [et al] // Eur. Respir. J. - 2005. - № 25. - P. 612-617.

26. Xia, M. Recent developments in CCR2 antagonists / M. Xia, Z. Sui // Expert. Opin. Ther. Pat. - 2009. - № 19 (3). -P. 295-303.

27. Yamagata, T. Overexpression of CD-11b and CXCR1 on circulating neutrophils: its possible role in COPD / T. Yamagata [et al] // Chest. - 2007. - № 132. - P. 890-899.

28. Yawn, B. P. Co-morbidities in people with COPD: a result of multiple diseases, or multiple manifestations of smoking and reactive inflammation? / B. P. Yawn, A. Kaplan // Prim. Care Respir. J. -2008. - № 17. - P. 199-205.

29. Zemans, R. L. Transepithelial Migration of Neutrophils / R. L. Zemans [et al] // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. - 2009. -Vol. 40. - P. 519-535.

30. Zen, K. Cleavage of the CD11b extracellular domain by the leukocyte serprocidins is critical for neutrophil detachment during chemo taxis / K. Zen [et al] // Blood. - 2011. - № 117 (18). -P. 4885-4894.

31. Zhang, J. Role of the CX3CL1-CX3CR1 axis in chronic inflammatory lung diseases / J. Zhang, J. M. Patel // Int. J. Clin. Exp. Med. - 2010. - № 3 (3). - P. 233-244.

РЕЗЮМЕ

О. Н. Титова, Н. А. Кузубова, Е. А. Суркова

Молекулярные основы эндотелиально-лейкоцитарного взаимодействия при хронической обструктивной болезни легких

Хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) характеризуется миграцией циркулирующих лейкоцитов через эндотелий сосудов в ткань легкого, вызывая деструктивные процессы и ремоделирование легочной ткани. Обзор посвящен особенностям адгезии и трансмиграции лейкоцитов в очаг воспаления у больных ХОБЛ. Понимание процессов постоянного перемещения лейкоцитов из кровотока в легкие будет способствовать поиску новых терапевтических подходов и лекарственных средств при лечении ХОБЛ.

Ключевые слова: лейкоциты, миграция, ХОБЛ.

SUMMARY

O. N. Titova, N. A. Kuzubova, E. A. Surkova

Molecular basis of endothelium-leukocyte interaction interaction in chronic obstructive pulmonary disease

COPD is characterized by migration of the circulating leukocytes through the vascular endothelium into the lung tissue - a distructive process leading to remodelling of the pulmonary tissue. Attention is paid to specificity of the adhesion and transmigration of the leukocytes into the inflammatory focus in COPD patients. Better understonding of the processes of constant transmigration of leukocytes into the lung tissue will facilitate search for new therapeutic methods and medicaments for management of COPD patients.

Key words: leukocytes, migration, COPD.

© Коллектив авторов, 2012 г.

УДК 612.017.1+615.384]-089.843]-092.4

Б. А. Парамонов, С. Ф. Антонов, Н. А. Абрамов, Т. Ш. Нугаев, Д. А. Козулин, Д. Ю. Андреев

ВЛИЯНИЕ ИМПЛАНТИРУЕМЫХ КОЛЛАГЕН-ХИТОЗАНОВЫХ И ЖЕЛАТИН-ХИТОЗАНОВЫХ ГУБОК НА СОСТОЯНИЕ ОРГАНИЗМА КРЫСЫ: ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Северо-Западный государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова; Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов; Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова

С середины 1960-х гг. в хирургической практике активно применяются губочные покрытия. Губки из природных полимеров могут обеспечить доставку и пролонгацию действия различных лекарственных веществ, прежде всего, обладающих противовоспали-

тельным действием. Для раневых покрытий лучше всего подходят природные биодеградируемые полимеры -коллаген, хитозан, желатин. Они дешевы, биосовместимы, легко усваиваются организмом, совместимы с большинством лекарственных веществ, к тому же их природные источники неограничены.

Коллаген проявляет стимулирующее действие на репарационные процессы в основном на первой стадии раневого процесса, тогда как в последующем он тормозит заживление вследствие образования пленки с низкой воздухопроницаемостью. Хитозан, помимо стимулирования пролиферации на первых стадиях, очень полезен на завершающей фазе заживления - перестройке рубца (его присутствие в ране помогает избежать образования грубых рубцов) [1]. Хитозан хорошо проводит воздух к заживляемой поверхности. Смешанная полимерная матрица позволяет использовать достоинства обоих биополимеров. Таким образом, коллаген-хитозановые и же-латин-хитозановые губки представляют большой научно-практический интерес в современной хирургии.

Целью работы явилось изучить влияние губок на общее состояние организма крысы при подкожной имплантации и внутрибрюшинном введении.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Клинико-экспериментальная работа базируется на данных, полученных в опытах на 52 крысах. Содержание и использование лабораторных животных соответствовало правилам, принятым в учреждении, рекомендациям национального совета по исследованиям, национальным законам.

Исследовали следующие виды губок:

- коллаген-хитозановые губки;

- желатин-хитозановые губки;

- коллагеновые губки, содержащие также хинозол, борную кислоту и TWEEN-80.

В ходе исследования использовали стерильные и нестерильные образцы губок.

Опыты на животных. Эксперименты выполнены на белых крысах с массой тела 200-220 г, полученных из питомника «Рапполово» (пос. Рапполово Ленинградской обл.). Животных выдерживали в карантине 2 недели до начала экспериментов.

Животных вводили в наркоз внутримышечным введением кетамина (70 мг/кг) и дроперидола (1 мг/кг).

Для внутрибрюшинного введения разрезали кожу и париетальную брюшину. Кусочки губки (КХГ и ЖХГ) размером (5x5 мм) помещали в брюшную полость на поверхность кишечника. После этого зашивали брюшину и кожу. В другой группе на спине у животных разрезали кожу и губки такого же размера вводили между кожей и фасцией. После этого кожную рану ушивали.

В третьей серии опытов животным моделировали перитонит, для чего в брюшную полость вводили1 мл суспензии E. ColiАТСС 75822, содержащей 1x109 микробных тел в 1 мл.

Животных первых двух групп забивали спустя 1 и 10 дней, а третьей группы - через 1 сутки. Для этого животных вводили в состояние наркотического сна, после чего осуществляли декапитацию. Извлекали на холоду следующие органы: печень, почки, селезенку, сердце, легкие, отмывали холодным физиологическим раствором от крови в течение 30-50 секунд, после чего замораживали их в жидком азоте. Образцы хранились до момента исследования в сосуде Дюара с жидким азотом. Полученную кровь стабилизировали 4 %-м раствором цитрата натрия в соотношении 1:6-1:8, после чего охлаждали и немедленно использовали в исследованиях (табл. 1).

Биохимические методы исследования. Для оценки интенсивности процессов перекисного окисления ли-

Таблица 1 Общая характеристика экспериментов, выполненных на животных

Вид исследования, экспериментальные модели Кол-во животных

Имплантация губок в брюшную полость 32

Подкожная имплантация губок 10

Внутрибрюшинное введение микроорганизм о! 10

Всего 52

пидов в исследуемых тканях исследовались концентрации малонового диальдегида в тканях. Состояние антиоксидантной системы оценивали по изменению концентрации восстановленного глутатиона.

Подготовка тканей органов для биохимического исследования. Перед исследованием ткани печени, почек, селезенки, легких, сердца лабораторных животных извлекала из жидкого азота, взвешивали, измельчали и гомогенизировали в микроизмельчителе тканей РТ-2 (Россия) с пестиковым гомогенизатором при 3000 оборотов в минуту, добавляя охлажденный до температуры 0 оС 0,1 М калий-фосфатный буфер с рН 7,4 в соотношении «ткань:буфер» - 1:6. Полученный гомогенат использовали для определения концентрации восстановленного глутатиона и МДА. Время от момента размораживания тканей до отбора проб гомогенатов и осаждения в них белка кислотами не превышало 45-60 с.

Определение показателей системы глутатиона в тканях лабораторных животных. Определение концентрации восстановленного глутатиона - концентрацию восстановленного глутатиона в гомогенатах исследуемых тканей и гемолизате эритроцитов - определяли с использованием 5,5-дитио-бис(-2-нитробен-зойной) кислоты (ДТНБ) по методике О. Ь. Е11шап (1959) [3] в нашей модификации.

Принцип метода основан на обюразовании при взаимодействии ДТНБ (реактива Эллмана) с кислото-растворимыми тиоловыми группами окрашенного продукта - 5-тио, 2нитробензойной кислоты (ТНБ), имеющего максимум поглощения на длине волны 412 нм.

Ход определения: к 0,6 мл гомогената тканей добавляли 0,2 мл 20 %-го раствора сульфосалициловой кислоты. Пробы центрифугировали в течение 10 мин при 3000 об./мин при температуре +2 оС. 0,2 мл полученного супернатанта переносили в пробирки, содержащие 2,55 мл 0,1 М ТРИС-НС1 буфера с 0,01 %-м этилендиаминтетраацетатом (ЭДТА) рН 8,5. К полученной смеси добавляли 25 мкл раствора ДТНБ в 1 мл абсолютного метанола. После развития окраски пробы фотометрировали на спектрофотометре СФ-26 против дистиллированной воды на длине волны 412 нм в кювете с диной оптического пути 10 мм. Для чего из коммерческого препарата ВГ готовили растворы ВГ с концентрациями от 0,02 до 2,0 ммоль/л, из них отбирали пробы для определения содержания восстановленного глутатиона по описанной выше методике и по полученным значениям экстинкции строили калибровочную кривую. По калибровочной кривой рассчитывали концентрацию восстановленного глутатиона и выражали в мкмоль/г ткани.

Определение активности каталазы. Активность ка-талазы определяли методом М. А. Королюка (1988) [2]. Принцип метода основан на ферментативном разложении каталазой перекиси водорода, о скорости процесса судят по снижению экстинции проб на длине волны 260 нм, на которой раствор Н202 имеет максимум све-топоглощения.

Ход определения: для осуществления реакции ex tempore готовили 0,3 %-й раствор H2O2 на 0,1 M калий-фосфатном буфере с pH 7,4. Полученный раствор имел экстинкцию Е=0,700 при 1 =260 нм против дистиллированной воды в кювете с толщиной оптического слоя 10 мм. Ци-тозольную фракцию печени и почек дополнительно разводили 0,1 М калий-фосфатным буфером с pH 7,4 в соотношении 1:49, для мозга использовали исходную фракцию. Ге-молизат эритроцитов дополнительно разводили 5 мМ ТРИС-НС1 буфером с pH 7,4 в соотношении 1:19. Ферментативную реакцию проводили при комнатной температуре. К 2,5 мл 0,3 %-го раствора перекиси водорода добавляли 100 мкл разведенной (как указано выше) цитозольной фракции или гемоли-зата. Через 5 мин реакцию останавливали внесением 0,2 мл 72 %-го раствора трихлоруксусной кислоты. В качестве контроля использовали пробы, в которые цитозоль или гемолизат вносили после кислоты. Затем опытные и контрольные пробы центрифугировали в течении 10 мин при 3000 об./мин. Супернатант фото-метрировали на спектрофотометре СФ-56 («Ломо», Россия) против дистиллированной воды при 1=260 нм в кювете с толщиной оптического слоя 10 мм. Активность каталазы рассчитывали по разнице содержания H2O2 в опытных и контрольных пробах в соответствии с законом Бугера-Ламберта-Бэра с учетом молярного коэффициента светопоглощения e=22 М-1см-1. Активность выражали в мкмоль/(минг белка).

Определение концентрации малонового диальдегида. Концентрацию МДА определяли по методу M. Uchi-yama (1978) [4] в нашей модификации. Принцип метода основан на взаимодействии между МДА и тиобар-битуровой кислотой (ТБК) в кислой среде при высокой температуре с образованием окрашенного триметинового комплекса, имеющего максимум поглощения на 535 нм.

Ход определения: к 0,3 мл гомоге-ната тканей, разведенного 5 мМ ТРИС-HCI буфером с pH 7,6 в соотношении 1:19, добавляли 3 мл 1 %-го раствора ортофосфорной кислоты и 1 мл 0,6 %-го раствора ТБК. При этом pH смеси находился в интервале от 1,6 до 1,8, что представляло оптимальную зону для проведения ТБК-реакции с гомогенатами тканей. Закрытые крышками пробирки инкубировали на кипящей водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения проводили экстракцию ТБК-продук-тов добавлением 3 мл н-бутанола. Бутанольные экстракты фотометри-

Таблица

Массовые коэффициенты внутренних органов в случае внутрибрюшинной

Массовый коэффициент Исследуемые группы и подгруппы

спустя 1 сутки через 10 дней

хг жхг хг жхг

Сердце 3,9±0,5 3,8±0,3 3,7±0,2 4,0 ±0,5

Легкие и трахея 6,3±0,4 6,3±0,5 6,2±0,4 6,5±0,3

Тимус 1,3±0,18 1,20 ±0,2 1,24±0,22 1,22±0,24

Печень 29,7±0,5 30,3±1,0 32,2±1,9 30,4±1,9

Селезенка 5,0±0,3 5,1 ±0,4 5,2±0,6 5,2±0,3

Почка (лев.) 8,2±1,3 8,1 ±0,9 8,2±0,5 8,1±1,1

Надпочечник (лев.) 0,11±0,06 0,12± 0,05 0,13±0,05 0,12±0,03

Головной мозг 9,9±0,5 9,8±0,5 9,9±0,4 9,9±0,3

ровали на спектрофотометре СФ-26 в кювете с длиной оптического пути 10 мм на двух длинах волн (535 и 580 нм) против н-бутанола. Концентрацию ТБК-про-дуктов рассчитывали согласно методике В. Б. Гаври-лова (1987) по разнице оптических плотностей Е535_580 с учетом разведения и коэффициента пересчета К=1,88 105М-1см-1 и выражали в нмоль/г ткани (для гомогенатов тканей).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Установили, что сама по себе имплантация губок существенно не влияет на общее состояние животных (судя по поведению и физической активности) и не вызвала летальных эффектов в сроки наблюдения. При вскрытии брюшной полости спустя 24 часа после имплантации губки они присутствовали, хотя несколько уменьшились в размерах и разволокнились. При вскрытии брюшной полости на 10-е сутки визуально каких-либо следов губок обнаружить не удалось. Сравнение весовых коэффициентов внутренних органов не выявило сколько-нибудь выраженных различий при использовании обоих видов губок (табл. 2).

Известно, что развитие перитонита сопровождается биохимическими расстройствами. Внутрибрюшин-ное введение суспензии микроорганизмов вызвало трехкратное увеличение интенсивности процессов пеТ аб ли ца 3

Интенсивность процессов перекисного окисления липидов во внутренних органах крыс после подкожного и внутрибрюшинного введения губок

Группа Уровни МДА

печ ень почки легкие сердце селезенка

Интактные животные Внутрибрюшинное введение E. Coli 84,31± 6,07 340,4± 16,9 86,23±4,01 256,1± 18,7 83,96 ±3,0 206,1± 19,0 77,15± 10,0 212,0± 10,7 73,61± 13,2 198,37±7,0

Имплантация губок в брюшную полость

кхг Нестерильная ЖХГ Стерильная ЖХГ 88,31±3,03 98,77±2,0 89,52±4,73 82,37±7,09 96,37±4,09 89,31±6,39 90,63±5,1 84,33 ±4,1 92,12±5,6 76,15±6,0 74,22±4,2 78,35±6,9 78,23± 14,1 79,33±12,2 78,55± 10,1

Подкожное введение губок

кхг Нестерильная ЖХГ Стерильная ЖХГ 87,01±5,12 88,1±4,02 87,99±6,23 81,22±4,34 80,22±4,22 80,21±4,11 81,22±3,4 82,45±5,0 83,23±3,19 75,17± 5,10 76,28±6,10 77,11±5,72 71,32±4,4 72,55±5,3 72,52±4,2

Таблица 4

Изменения уровня восстановленного глютатиона во внутренних органах крыс после подкожного и внутрибрюшинного введения губок

Группа

Уровень восстановленного глютатиона (моль/г) во внутренних органах крыс

печень почки легкие сердце селезенка

Интактные животные 12,41± 1,32 7,29±0,91 3,17±0,52 6,96±0,77 4,78±0,58

Вн утрибрю шинное 9,55±1,01 7,09±0,12 2,67±0,52 5,99±0,49 4,15±0,39

введение E. Coli

Имплантация губок в брюшную полость

КХГ 12,45± 2,02 7,35±0,94 3,27±0,56 7,00±0,81 4,92± 0,66

Нестерильная ЖХГ 12,37± 1,28 7,36±0,93 3,33±0,61 6,94± 0,32 4,70±0,19

Стерильная ЖХГ 13,01 ± 1,03 7,38±0,83 3,31±0,62 6,96±0,43 4,69±0,34

Подкожное введение

КХГ 12,81 ± 1,02 7,55±0,54 3,53±0,54 6,93±0,33 4,70±0,24

Нестерильная ЖХГ 12,42± 2,03 7,77±0,33 3,52± 0,63 6,84± 0,45 5,00± 0,13

Стерильная ЖХГ 13,01 ± 1,13 7,54± 0,74 3,31±0,71 6,93±0,33 4,69±0,20

рекисного окисления липидов во внутренних органах животных (табл. 3). Наоборот, имплантация губок в брюшную полость не вызвала сколько-нибудь заметных изменений в поведении животных и не вызвала развития биохимических расстройств. Уровень МДА оставался тем же, что и в контрольной группе (у ин-тактных животных). Аналогичные результаты были получены у животных, которым губки вводили под кожу. Все виды губок (включая нестерильные образцы ЖХГ) не вызвали развития локального воспаления и системной воспалительной реакции. Уровни МДА были близки к показателям нормы.

Известно, что манифестация заболевания сопровождается изменением состояния антиоксидантной защиты. Наиболее высокое содержание восстановленного глютатиона (ВГ) у интактных животных было в печени -органе с наиболее интенсивным метаболизмом (табл. 4). В наибольшей степени возрастание уровня ВГ при моделировании перитонита введением суспензии микроорганизмов имело место в печени. Таким образом, развитие воспаления и интенсификация процессов ПОЛ по механизму обратных связей стимулирует защитную (антиоксидантную) систему организма.

Возможно объяснить подъем уровня ВГ следующим образом. Активные формы кислорода (кислородные радикалы) и продукты перекисного окисления липидов вызывают метаболические расстройства, главным образом, в печени - органе, который в норме занимается дезактивацией токсических продуктов. Именно в печени на наиболее высоком уровне активность ферментов микросомального окисления. Имеются также и особенности в активности функционировании печени. В частности, в случае развития оксидативного стресса потребление глютатиона здесь происходит очень интенсивно.

Гистологическое исследование биоптатов, полученных от животных различных опытных групп, позволило получить следующие данные: имплантация губок самих по себе не вызывала развития выраженного воспаления и перитонита. В ходе гистологических исследований было установлено, что структура брюшины не отличалась от таковой у интактных животных. На

поверхности брюшины быии отчетливо видны сохранные мезотелиоциты. Количество волокон фибрина было минимальным.

В случае имплантации нестерильной губки были отмечены только слабые признаки воспаления. Некоторая инфильтрация ткани лейкоцитами была спровоцирована небольшим количеством микроорганизмов, которыми были загрязнены губки. В ранние сроки в брюшной полости были отмечены отдельные жизнеспособные макрофаги.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведенное клинико-экспериментальное исследование показало, что изученные образцы губок (КХГ и ЖХГ) изготовлены из нетоксичных материалов. Резорбция губок после их имплантации (подкожной и внутрибрюшинной) происходит в короткие сроки (в течение 5-10 суток). Продукты резорбции губок также нетоксичны. При имплантации губок КХГ и ЖХГ в брюшную полость и под кожу не происходит значительного изменения в уровне МДА и ВГ по сравнению с «негативным контролем». Таким образом, кол-лаген-хитозановые и желатин-хитозановые губки подтвердили свою клиническую безопасность при применении и могут активно использоваться в современной хирургии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Иванова, Л. А. Коллаген в технологии лекарственных форм / Л. А. Иванова, И. А. Сычеников, Т. С.Кондратьева. -М.: Медицина, 1984. - С. 87-91.

2. Королюк, М. А. Метод определения активности каталазы / М. А. Королюк // Лаборат. дело. - 1988. - № 1. - С .16-19.

3. Ellman, G. L. Tissue sulfliydryl groups / G. L. Ellman // Arch. Biochem. Biophys. - 1959. - Vol. 82. - № l. - P. 70-77.

4. Uchiyama, M. Determination of malonaldehyde precursor in tissues by thiobarbituric acid test / M. Uchiyama, M. Michara // Anal. Biochem. - 1978. - Vol. 86. - № 1. - P. 271-278.

РЕЗЮМЕ

Б. А. Парамонов, С. Ф. Антонов, Н. А. Абрамов,

Т. Ш. Нугаев, Д. А. Козулин, Д. Ю. Андреев

Влияние имплантируемых коллаген-хитозановых и жела-тии-хитозаиовых губок на состояние организма крысы: экспериментальное исследование

Проведенное клинико-экспериментальное исследование влияния коллаген-хитозановых (КХГ) и желатин-хитозано-вых (ЖХГ) губок на состояние организма крыс показало, что резорбция губок после их имплантации происходит в короткие сроки. Продукты резорбции губок нетоксичны. При имплантации губок КХГ и ЖХГ в брюшинную полость и под кожу не происходит значительного изменения в уровне маркеров воспаления по сравнению с «негативным контролем». Таким образом, исследуемые губки подтвердили свою клиническую безопасность и могут использоваться в современной хирургии.

Ключевые слова: коллаген-хитозановые и желатин-хитоза-новые губки, состояние организма, подкожная и внутрибрю-шинная имплантация, безопасность.

SUMMARY

B. A. Paramonov, S. F. Antonov, N. A. Abramov,

T. Sh. Nugaev, D. A. Kozulin, D. Yu. Andreev

The effect of collagen-chitosan and gelatin-chitosan sponges on general condition of rats

The experimental study of collagen-chitosan and gelatin-chito-san effect on the general condition of rats has shown that sponge resorbtion after implantation takes place during a very short period of time. The resorbtion products are non-toxic. In case of intraperitoneal and subcutaneous implantation there are no significant changes in the inflammatory markers' level (versus the negative «control»). The sponges under study have confirmed their high clinical safety and can be used in modern surgery.

Key words: collagen-chitosan and gelatin-chitosan sponges, general condition, subcutaneous and intraperitoneal implantation, safety.

© Коллектив авторов, 2012 г. УДК 371.21-092.19

А. В. Суворова, И. Ш. Якубова, Т. С. Чернякина, Л. Т. Блинова, А. А. Мурзина, Л. Б. Гайковая, А. А. Топанова

ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ШКОЛЬНИКОВ, ОБУЧАЮЩИХСЯ ПРИ РАЗНЫХ ФОРМАХ ОРГАНИЗАЦИИ УЧЕБНОГО ПРОЦЕССА

Северо-Западный государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова

ВВЕДЕНИЕ

Новая концепция школьного образования с приоритетом сохранения здоровья учащихся, личностной ориентацией его содержания, многообразием типов образовательных учреждений и вариативностью применяемых в них образовательных программ потребовала поиска адекватных форм организации учебного процесса школьников. Одной из наиболее перспективных в этом направлении является блочно-модульная система обучения [4].

Отличительной чертой модульного обучения является структуризация содержания обучения на обособленные элементы (блоки-модули). Использование единого временного модуля продолжительностью 30 минут обеспечивает возможность изучать учебный материал укрупненными блоками: в младших классах (начиная со 2-го) - путем сдваивания уроков по одному предмету, в средних и старших классах - за счет увеличения продолжительности урока до трех 30-минутных занятий, сохраняя при этом общепринятую продолжительность учебного дня и 10-минутные перерывы после каждого модуля.

Система блочно-модульного обучения школьников была предложена в Прибалтийских республиках в кон-

це 80-х гг. прошлого века как инновационная образовательная технология. Однако данная технология не получила гигиенического обоснования на территории Российской Федерации в связи с перестроечными процессами и распадом Советского Союза, а внедрение ее на территории России началось.

Этими обстоятельствами и определяется актуальность проведенного исследования, которое было выполнено в рамках комплексной НИР СПбГМА им. И. И. Мечникова в 2006-2010 гг.

Система неспецифической резистентности организма человека одной из первых реагирует на неблагоприятное воздействие факторов окружающей среды и является важнейшим звеном в комплексе компенсаторно-приспособительных механизмов, обуславливающих адаптацию организма в целом. Неинвазивные (саливарные) иммунологические и биохимические тесты наиболее адекватно отражают состояние неспецифической резистентности детского организма на до-нозологическом уровне. В этой связи могут использоваться для оценки влияния учебной нагрузки на состояние адаптационных механизмов у школьников при разных формах организации учебного процесса.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проводилось в условиях естественного гигиенического эксперимента. Группу наблюдения составили учащиеся (11-17 лет) школы с углубленным изучением математики, реализующей концепцию блоч-но-модульной формы обучения. В группу сравнения вошли сверстники из общеобразовательной школы, обучающиеся по традиционной системе. Исследование проводилось в 2 этапа: I - в начале учебного года (в ноябре), II - в конце учебного года (в апреле).

Оценка состояния неспецифического иммунитета проводилась по саливарным иммунологическим тестам (1§А, 1§0, в1§А, лизоцим) с расчетом интегрального показателя сбалансированности факторов местного иммунитета - коэффициента сбалансированности (Ксб) [3]: Ксб = 1§ О • 40 / 1§А • конц. лизоцима.

Показатели активности лизоцима оценивались не-фелометрическим методом по В. Г. Дорофейчук [1, 2], иммуноглобулины класса А (общий и секреторный) и О - методом иммуноферментного анализа.