Использование биохимического анализа слюны для скрининговой оценки компенсаторно-адаптивных возможностей организма у юношей с пролапсом митрального клапана

С. А. ЧЕПУРНЕНКО

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БИОХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА СЛЮНЫ ДЛЯ СКРИНИНГОВОЙ ОЦЕНКИ КОМПЕНСАТОРНОАДАПТИВНЫХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ ОРГАНИЗМА У ЮНОШЕЙ С ПРОЛАПСОМ МИТРАЛЬНОГО КЛАПАНА

Кафедра клинической биохимии № 1, кафедра внутренних болезней № 1 ГОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет»,

ГУЗ «Ростовская областная клиническая больница», Ростовский областной центр кардиологии и сердечно-сосудистой хирургии, диспансерное кардиологическое отделение

Введение

В современных социально-экологических условиях при действии различных факторов окружающей среды большинство функциональных сдвигов носит выраженный компенсаторно-адаптивный характер. в этом аспекте перспективным направлением может являться биохимический анализ слюны. Доступность и полная неинвазивность получения для лабораторного исследования подчёркивают её ценность как в диагностике преморбидных и патологических состояний, так и для оценки эффективности проводимого лечения [11]. Анализ слюны представляет собой одну из наиболее значимых альтернатив анализу крови, в ряде случаев не только дополняя, но даже заменяя его [2].

Целью настоящей работы явилась оценка активности ферментов антиоксидантной защиты (АОЗ) и показателей аэробного и анаэробного обмена в слюне у юношей с пролапсом митрального клапана (ПМК) для выявления молекулярных основ формирования индивидуальной реактивности организма и поиска эффективных маркеров снижения компенсаторноадаптивных возможностей, доступных для скринингового обследования.

Методика исследования

В основу работы легли результаты клинических, инструментальных и биохимических исследований, проведенных у 137 юношей призывного возраста с ПМК. Все пациенты находились на обследовании в кардиологическом диспансерном отделении № 2 ГУЗ «Кардиологический диспансер» Ростовской области с 2000 по 2004 г.

В качестве контрольных оценивались показатели у 30 доноров мужского пола того же возраста без указаний в анамнезе на сердечно-сосудистые заболевания.

Для решения поставленных задач помимо общеклинических данных при обследовании пациентов с ПМК и здоровых лиц в день обращения в лечебное учреждение проводили эхокардиоскопию на аппарате Sim 5000 plus с датчиком 2 МГц, а также тет-раполярную грудную реографию и велоэргометрию по стандартным методикам. В слюне, полученной по методике В. Е. Зайчика и Ш. Т. Багирова [5], исследовали активность каталазы (К) [7], глутатионредук-тазы (ГР) [13] и супероксиддисмутазы (СОД) [12], а также содержание пировиноградной кислоты (ПВК) [1] и лактата (Л) [9]. Статистическая обработка полу-

ченного материала проводилась с использованием компьютерной программы Microsoft Excel Windows. Сравнение средних значений двух выборок производилось методом Стьюдента. Разница считалась достоверной при p<0,05.

Результаты исследования

Все пациенты в соответствии с клинико-функциональным статусом были рандомизированы на 2 группы: с высокими (1-я клиническая группа) и сниженными (2-я клиническая группа) компенсаторно-приспособительными возможностями организма.

Выявлены выраженные отличия в активности ферментов АОЗ в слюне у всех пациентов с ПМК по сравнению с контролем. У больных 1-й группы по сравнению со здоровыми лицами активность СОД была угнетена в 8,24 раза, а ГР в 2,05 раза (p<0,05). У больных 2-й группы изменения носили однонаправленный характер с большей степенью выраженности по сравнению с 1-й группой. Активность СОД и ГР во 2-й группе была ниже, чем в контроле, соответственно в 20,9 и 13,44 раза (p<0,05). Активность СОД и ГР во 2-й группе по сравнению с 1-й в была ниже соответственно в 2,53 и 6,56 раза (p<0,05).

Анализ содержания конечных продуктов гликолиза в слюне (табл. 2) выявил превышение концентрации ПВК по сравнению с контролем в 1-й и 2-й группах в 1,14 и 2,28 раза соответственно (p<0,05). Уровень Л в 1-й и 2-й группах по сравнению с контролем был ниже в 1,63 и 3,14 раза (p<0,05). Соотношение лактат/пируват (Л/П) было ниже, чем в контроле, в 1-й группе - в 1,85 раза, а во 2-й группе -в 7,2 раза (p<0,05), что, вероятно, было связано с компенсаторной перестройкой обмена глюкозы в зависимости от исходной реактивности организма у юношей с ПМК. Такой дисбаланс между явным снижением концентрации Л и повышением концентрации ПВК свидетельствовал о нарушении координированного хода окислительных процессов в слюне у больных с ПМК. Данный факт мог служить предпосылкой к формированию различных вариантов компенсаторной перестройки организма, связанной с различной выраженностью и продолжительностью тканевой гипоксии.

Между 1-й и 2-й группами наблюдалась достоверная разница в концентрации Л в слюне и соотношении Л/П. Во 2-й группе уровень Л был ниже, чем в 1-й группе, на 32,8%. Коэффициент Л/П был в 3,89 раза ниже во 2-й группе по сравнению с 1-й (p<0,05).

УДК. 616.126.42 - 008.9 - 074

Вынужденное снижение использования энергетических субстратов и уменьшение интенсивности физиологически важных способов высвобождения энергии являются документальным свидетельством вовлечения в патологический процесс всего организма, что постепенно может привести к энергодефициту [6].

Обсуждение

У больных с ПМК выявлено угнетение активности СОД, наиболее выраженное в группе со сниженными компенсаторно-адаптивными возможностями организма, в то время как активность К достоверно не отличалась от контроля. Явный дисбаланс в работе ферментов первой линии АОЗ приводил к накоплению потенциально опасных активных форм кислорода (АФК) и снижению резистентности организма к окислительному повреждению. Угнетение активности ГР, наиболее выраженное во 2-й группе, в данном случае могло быть связано со снижением продукции пероксида водорода вследствие угнетения активности СОД. Не исключается также тот факт, что повреждение основных ферментов АОЗ - СОД и ГР могло быть связано с накоплением АФК, которые участвуют в передаче сигналов от первичных мессенджеров, направленных на запуск каскада реакций, необходимых для приспособления и выживания организма в экстремальных условиях [4, 8].

Кроме того, выявлено различное соотношение показателей, характеризующих метаболизм глюкозы, в зависимости от состояния компенсаторно-адаптивных возможностей организма у юношей с ПМК. Коэффициент Л/П был ниже по сравнению с контролем в 1-й группе в 1,85 раза, а во 2-й группе - в 7,2 раза (р<0,05).

Известно, что воздействие гипоксического стимула вызывает формирование компенсаторно-приспособительных реакций, направленных на повышение функциональной активности клеток [3, 10]. Этим можно объяснить более высокие значения коэффициента Л/П в 1-й клинической группе по сравнению со 2-й. Проведенный в рамках исследования анализ позволяет сделать вывод, что у пациентов с ПМК

соотношение Л/П косвенно отражает степень адап-тированности организма. Можно сказать, что таким образом реализовывались приспособительные реакции у пациентов с ПМК.

Таким образом, в ходе исследования установлено, что снижение компенсаторно-приспособительных возможностей организма у больных с ПМК приводит к ответу кислородного гомеостаза слюны, а для поддержания обменных процессов на достаточном уровне включается модуляционный механизм адаптации. Низкий коэффициент Л/П во 2-й клинической группе отражает ограниченные функциональные возможности клеток. Необходимо подчеркнуть и важную закономерность: изменения метаболических процессов в слюне отличались достаточной выраженностью и наглядностью. тем самым подтверждается многогранное значение исследования слюны в диагностическом и прогностическом аспекте при изучении состояния компенсаторно-приспособительных возможностей организма у юношей с ПМК.

Наличие взаимосвязей между показателями АОЗ, обмена глюкозы в слюне у больных ПМК и показателями кардиогемодинамики (табл. 3) даёт возможность их применения для оценки степени адаптированности организма. Полученные данные могут быть использованы с целью выделения групп больных, нуждающихся в проведении комплексных реабилитационных мероприятий перед службой в армии.

Выводы

1. в слюне у больных с ПМК обнаружено выраженное угнетение активности СОД и ГР при нормальном функционировании К.

2. Угнетение активности ГР в слюне в 3 и более раз является показателем снижения компенсаторно-приспособительных реакций у больных ПМК.

3. Снижение коэффициента лактат/пируват в слюне в 2 и более раза по сравнению с контролем может быть использовано в качестве биохимического

Таблица 1

Активность антиоксидантных ферментов в слюне у юношей с ПМК в зависимости от состояния компенсаторно-приспособительных возможностей организма ^ ± m)

Показатель/ группы Контроль, N=30 1-я группа с высокими компенсаторноадаптивными возможностями, п=64 2-я группа со сниженными компенсаторноадаптивными возможностями, п=73

Каталаза, мКат/мг белка 3,01±0,122 3,08±0,63 3,19±0,71

СОД, ед. акт./мг белка 8,05±0,116 0,977±0,13* 0,385±0,14*^

Глутатионредуктаза, мкМ/мг белка 0,739±0,010 0,361±0,08* 0,055±0,04*^

Примечание: СОД - супероксиддисмутаза, * - р<0,05 по сравнению с контролем, • - р<0,05 по сравнению с группой 1.

Таблица 2

Содержание конечных продуктов гликолиза в слюне в зависимости от состояния компенсаторно-адаптивных возможностей организма у юношей с ПМК, ^ ± m)

Показатель/ типы Контроль, N=30 1-я группа с высокими компенсаторноадаптивными возможностями, п=64 2-я группа со сниженными компенсаторно-адаптивными возможностями, п=73

ПВК, мкМ/мл 0,18±0,006 0,205±0,08 0,411±0,071**

Лактат, мкМ/мл 1,79±0,14 1,10±0,11* 0,57±0,2*^

Л/ П, усл. ед. 9,94±0,13 5,37±0,15* 1,38±0,11*^

Примечание: ПВК - пировиноградная кислота, Л/П - лактат/ пируват, * - р<0,05 по сравнению с контролем,

• - р<0,05 по сравнению с группой 1.

Таблица 3

Корреляционные взаимосвязи между показателями гликолиза и активностью ферментов АОЗ в слюне и показателями кардиогемодинамики у юношей с ПМК

Показатель Коэффициенты кор реляции у больных Достове рность

с высокими компенсаторноадаптивными возможностями, п=64 со сниженными компенсаторно-адаптивными возможностями, п=73 Р1 Р2

СОД и УО 0,433 0,432 0,039 0,039

СОД и УИ 0,49 0,48 0,008 0,009

ПВКи СИ -0,384 -0,383 0,045 0,045

ПВК и МОК -0,386 -0,387 0,043 0,043

Л и УИ 0,387 0,386 0,043 0,044

Л и МОК 0,389 0,388 0,043 0,043

Л и СИ -0,39 -0,387 0,042 0,043

Л/П и УИ -0,362 -0,361 0,045 0,045

Л/П и ДП -0,409 -0,408 0,041 0,043

Л/П и Т раб 0,526 0,525 0,008 0,008

Примечание: СОД - супероксиддисмутаза, Л - лактат, Л/П - лактат/пируват, ПВК - пировиноградная кислота, УО - ударный объём, УИ - ударный индекс, СИ - сердечный индекс, МОК - минутный объём крови, ДП - двойное произведение, Траб - время работы на велоэргометре.

маркера напряжения компенсаторных механизмов у юношей с ПМК.

4. Данные тесты могут быть рекомендованы для скринингового обследования юношей в связи с их не-инвазивностью, простотой и доступностью для учреждений амбулаторно-поликлинического звена.

Поступила 25.12.06

ЛИТЕРАТУРА

1. Бабаскин М. П. Способ определения пировиноградной кислоты в крови. Авторское свидетельство № 877436, СССР. 1981. Бюл. 40.

2. Белоусова Е. С., Хозин А. А., Летуновский А. В., Балязина Е. В. Слюна как объект валеологического мониторинга // Обмен веществ при адаптации и повреждении. Тезисы докладов 2-й межвузовской международной конференции молодых учёных, специалистов и студентов. Ростов-на-Дону. 2003. С. 3-5.

3. Гипоксия: адаптация, патогенез, клиника / Под ред. Ю. Л. Шевченко. Спб, 2000. С. 12-23.

4. Дубинина Е. Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса // Вопр. мед. химии. 2001. Т. 47. № 6. С. 561-581.

УДК 615.014:614.2

5. Зайчик В. Е., Багиров Ш. Т. Содержание химических элементов в смешанной нестимулированной слюне здорового человека // Стоматология. 1991. Т. 70. № 1. С. 14-17.

6. Клиническая биохимия / Под ред. В. А. Ткачука. 2002. М.: Гэотармед. 306 с.

7. Королюк М. А., Иванов Л. И., Майрова И. Г. и др. Метод определения активности каталазы // Лабораторное дело. 1988. № 51. С. 16-19.

8. Ланкин В. З., Тихазе А. К., Беленков Ю. Н. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях. М., 2001. С. 14-48.

9. Меньшиков В. В., Делекторская Л. Н., Золотницкая Р. П. и др. Лабораторные исследования в клинике: Справочник / Под редакцией В. В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987.

10. Микашинович З. И., Рымашевский Н. В., Логинов И. А. и соавторы. Опыт применения озонотерапии в акушерстве // 3-я Всероссийская научно-практическая конференция «Озон и методы эфферентной терапии в медицине». Нижний Новгород, 1998. С. 53.

11. Микашинович З. И., Летуновский А. В., Волжин О. О., Белоусова Е. С. Биохимические исследования слюны в клинической практике. Ростов-на-Дону. 2004. С. 4.

12. Саркисян О. Г. Биохимические изменения при атрофических кольпитах и их коррекция: Дис. канд. мед. наук. Ростов-на-Дону, 2000. С. 125.

13. Юсупова Л. Б. О повышении точности определения активности глутатионредуктазы эритроцитов // Лаб. дело. 1989. № 4. С. 19-21.

S. A. CHEPURNENKO

USE OF BIOCHEMICAL ANALYSIS OF THE SALIVA FOR SCRINING ESTIMATION OF COMPENSATIVE-ADAPTIVE OPPORTUNITIES OF THE ORGANISM AT YOUNG MEN WITH MITRAL VALVE PROLAPSE

Decrease in intensity of anaerobic metabolism is revealed at 137 young men with primary mitral valve prolapse and is the most expressed at patients with low compensative opportunities of an organism. Reduction of lactate/pyruvate factor in saliva in 2 and more times in comparison with the control can be used as a biochemical marker of a pressure of compensative-adaptive mechanisms at young men with mitral valve prolapse.

Oppression of glutationreductase and superoxidedismutase activity is revealed and is the most expressed in group with the reduced compensative-adaptive opportunities of an organism. Reduction of glutationreductase activity in a saliva in 3 and more times is a marker of decrease in compensative-adaptive reactions at patients with mitral valve prolapse.

Key words: lactate, pyruvate, prolapse, mitral valve, a metabolism, glutationreductase, catalase, superoxidedismutase.

Н. М. БАТ, О. И. ЧЕКУНОВА

АНАЛИЗ СОВРЕМЕННОГО СОСТОЯНИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО РЫНКА В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ПО ПРОИЗВОДИТЕЛЯМ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

Кафедра фармации Кубанского государственного медицинского университета

Российская фармацевтическая промышленность представлена большим количеством предприятий -производителей лекарственных средств. На российском фармацевтическом рынке присутствует около 500 зарубежных компаний, более 400 отечественных производителей, зарегистрировано более 16 000, а с учетом лекарственных форм и дозировок - 170 000 лекарственных средств. В том числе отечественные производители выпускают до 2500 наименований и конкурируют друг с другом, так как выпускают продукцию одинакового ассортимента.

Целью наших маркетинговых исследований явился анализ состояния фармацевтического рынка в Российской Федерации по производителям лекарственных средств с целью их рационального выбора для закупки лекарственных средств.

Фармацевтический рынок характеризуется крайне сложными и противоречивыми особенностями, связанными с постоянным реформированием всех его частей [3]. В 2006 г. сократилось количество зарубежных производителей и в 1,2 раза по сравнению с 2005 г. возросло количество отечественных компаний. Данный факт связан с качественным изменением самого фармацевтического рынка в Российской Федера-

ции. Введенная с 2004 г. система дополнительного льготного лекарственного обеспечения становится программой, участие в которой гарантирует стабильный рынок сбыта производимой продукции для этих компаний. Наиболее важным в данной ситуации является показатель увеличения числа отечественных компаний, хотя их ассортиментный показатель - это в основном дженериковые препараты. Становление отечественной производственной инфраструктуры является неопровержимым фактом, свидетельствующим об их относительном рыночном благополучии [1, 2, 4, 7].

В результате проведенных нами исследований выявлено, что 5 зарубежных компаний (Sanofi Aventis, Berlin Chemie, Novartis, Gedeon Richter, Pfizer) контролируют 15% всего фармацевтического рынка Российской Федерации. Российский фармацевтический рынок привлекателен для зарубежных производителей по следующим причинам.

Во-первых, Российская Федерация после распада СССР осталась без развитой инфраструктуры фармацевтической отрасли. Небольшая концентрация российских производителей и относительно большое количество оптовых и розничных предприятий для