Апоптоз лимфоцитов и клеточные факторы иммунитета у больных бактериальным вагинозом

Перспективным направлением в экспериментальной фармакологии является изыскание химических веществ, выступающих в роли индукторов генетического аппарата, ответственного за формирование структурной основы своевременной адаптации к гипоксии. Сегодня в свете проблемы гипоксии большое внимание уделяют специфическому белку — гипоксией индуцированному фактору (HIF-1a), активность которого увеличивается при снижении напряжения кислорода в крови. Этот фактор играет главную роль в системном ответе на гипоксию, синтезируется во многих тканях организма, в том числе в нервной ткани, где его экспрессия максимальна в нейронах [2].

Данный обзор исследований свидетельствует о том, что состояние гипоксии сопровождает и определяет развитие многих заболеваний, поскольку почти все они прямо или косвенно связаны с возникновением митохондриальной дисфункции.

Литература

1. Левченкова О. С., Новиков В. Е. Индукторы регуляторного фактора адаптации к гипоксии // Российский медико-биологический вестник имени академика И. П. Павлова. № 2. 2014. С. 134-144.

2. Левченкова О. С., Новиков В. Е. Новые направления поиска лекарственных средств с антигипоксической активностью и мишени для их действия // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2013. № 5. Т. 76. С. 37-47.

3. Lyamzaev K. G. Nepryakhina O. K. et al. Novel mechanism of elimination of malfunctioning mitochondria (mitoptosis): formation of mitoptotic bodies and extrusion of mitochondrial material from the cell // Biochim. Biophys. Acta. 2008. Vol / 1777. P. 817-825.

Apoptosis of lymphocytes and cellular immunity factors in patients with bacterial vaginosis Rzayeva L.1, Javadzade M.2, Kerimov S.3

Апоптоз лимфоцитов и клеточные факторы иммунитета у больных бактериальным вагинозом Рзаева Л. Ф.1, Джавадзаде М. М.2, Керимов С. Г.3

1Рзаева Лейла Фархад Кызы /Rzayeva Leyla - дерматовенеролог,

Городской кожно-венерологический диспансер;

2Джавад-заде Мир-Риад Мир-Мамед оглы / Javad-zade Mir-Riad - доктор медицинских наук,

профессор;

3Керимов Санан Гуси оглы /Kerimov Sanan - доктор медицинских наук, заведующий кафедрой,

кафедра дерматовенерологии,

Азербайджанский государственный институт усовершенствования врачей им. А. Алиева, г. Баку, Азербайджанская Республика

Аннотация: представлены результаты иммунофенотипирования лимфоцитов у женщин с бактериальным вагинозом и хламидиозом, маркера активации (СД95+) и морфологических признаков апоптоза лимфоцитов. Выявлено иммунодефицитное состояние клеточных факторов, повышение готовности лимфоцитов к апоптозу (СД95+) и лишь в единичных лимфоцитах - морфологические признаки позднего апоптоза.

251

Abstract: the paper presents the results of immunophenotyping of lymphocytes in women with bacterial vaginismus and chlamydia, a marker of activation (СД95+) and morphological signs of apoptosis of lymphocytes. Revealed immunodeficiency cellular factors, the readiness of lymphocytes to apoptosis (СД95+) and only in isolated lymphocytes - morphological signs of late apoptosis.

Ключевые слова: бактериальный вагиноз, хламидиоз, морфология лимфоцитов, СД95+ маркер апоптоза.

Keywords: bacterial vaginosis, chlamydia, morphology of lymphocytes, СД95+ marker of apoptosis.

Бактериальный вагиноз (БВ) - инфекционно-невоспалительное заболевание, связанное с дисбиозом влагалищного биотопа, сопровождающееся чрезмерно высокой концентрацией облигатно и факультативно-анаэробных условно-патогенных микроорганизмов и резким снижением концентрации молочнокислых влагалищных бактерий. БВ - распространенное заболевание, частота которого колеблется от 12 до 42 % в структуре заболеваний половых органов [1]. Причины, способствующие возникновению и рецидивирующему течению БВ определяются свойствами возбудителя. Gardnerella vaginalis - грамвариабельный полиморфный микроорганизм, участвующий в образовании «ключевых клеток» (Glue cells) при БВ. При БВ вырабатываемые метаболиты G. vaginalis ингибируют привлечение лейкоцитов, подавляют функциональную активность нейтрофилов и лимфоцитов, обладают выраженными цитотоксическими свойствами [2]. На настоящий момент огромный интерес представляет экспрессия СД95+ антигена лимфоцитами, поскольку лимфоциты чувствительны к Fas-опосредованному апоптозу [3]. Важной представляется оценка роли апоптоза лимфоцитов в качестве основного проявления ответа лимфоцитов на инфекцию.

Цель исследования - изучение экспрессии СД95+ на лимфоцитах, морфологии лимфоцитов и состояние клеточного иммунитета у пациенток БВ.

Материал и методы. Под наблюдением находились 15 женщин больных БВ. Группу практически здоровых составили 12 женщин без гинекологической патологии. Возраст обследованных колебался от 25 до 32 лет и существенно не отличался от среднего возраста группы здоровых. Для выявления поверхностного маркера (антигена) СД95+ и субпопуляционного состава лимфоцитов были использованы моноклональные антитела, имеющие соответствующую направленность и специфичность, конъюгирующие с люминесцирующим красителем. Фенотипирование лимфоцитов проводили с использованием набора моноклональных антител (ООО «Сорбент», Москва) для определения Т-лимфоцитов (СД3+), Т-хелперов (СД4+), цитотоксических супрессоров (СД8+) В-лимфоцитов (СД 19+), натуральных киллеров (СД56+) и апоптоз лимфоцитов (СД95+) методом иммунофлюоресценции. Апоптоз лимфоцитов определяли с помощью световой микроскопии в тонких мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе [4].

Результаты и обсуждение. У больных БВ при фенотипировании лимфоцитов выявлено статистически незначимое снижение относительного содержания основных популяций Т-лимфоцитов СД3+(57,0±1,3 %), СД4+(29,9±1,0 %), СД8+(27,0±0,8 %). Субпопуляционной индекс был снижен как за счет снижения количества СД4+, так и за счет снижения СД8+ клеток и в среднем составил 1,08±0,05. Значительное повышение В-лимфоцитов (СД19+) сочеталось с более высоким уровнем Сд56+клеток относительно практически здоровых (р<0,05). По результатам анализа экспрессии СД95+ было выявлено снижение уровня этого маркера, что может быть связано с иммунносупрессией в данной группе. Таким образом, невыраженная степень системного иммунного ответа у женщин с БВ зависит, по-видимому, от того, что G. Vaginalis и медиаторы влагалищного эпитопа при этом являются слабыми

252

иммуногенами. Апоптоз является такой же фундаментальный генетической программой, как пролиферация, дифференциация или пребывание клеток в покоящемся состоянии. Морфологические характеристики самой гибели клетки одинаковые независимо от вида пусковых моментов апоптоза. Морфологические изменения апоптоза клеток становятся видимыми при световой микроскопии только с началом необратимых изменений в ядре и цитоплазме [5]. Лимфоциты условно здоровых в световой микроскопии лейкоформулы имели правильную округлую форму, клеточная мембрана ровная, без выпячиваний и инвагинаций. Ядро, как правило, занимает большую часть клетки, округлой формы, расположено центрально и в нем заметны ядрышки, локализация хроматина периферическая, узкая цитоплазма светлобазофильная. В то же время среди лимфоцитов здоровых лиц встречались отдельные клетки с признаками апоптотической смерти: ядра приобретают лопастной вид, а далее происходит распад на микроядра, что согласуется с данными литературы [6]. Выявленные нами единичные лимфоциты с морфологическими признаками позднего апоптоза позволяют утверждать, что влагалищная инфекция, обуславливая ингибирование процессов апоптоза, не нарушает рецепцию СД95+ маркера. Повышенная экспрессия СД95+ лимфоцитов является лишь количественной характеристикой Т-звена иммунного статуса и не отражает признаков позднего апоптоза лимфоцитов. Итак, состояние иммунной системы женщин, страдающих БВ, на системном уровне характеризовалось Т-иммунодефицитом. Повышенная готовность лимфоцитов к раннему апоптозу по маркеру СД95+ сопровождалась морфологическими изменениями поздней стадии апоптотического сигнала лишь в единичных лимфоцитах, что, вероятно, обусловлено изменением позднего апоптотического сигнала, необходимого для завершения программированной клеточной гибели.

Литература

1. Кира Е. Ф. Бактериальный вагиноз. СПб.: «Нива-Люкс», 2001, 364 с.

2. Дмитриев Г. А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций. М.: «Медицинская книга», Н. Новгород: «Международная издательская группа», 2003 г., 312 с.

3. Ярилин А. А. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме. // Пат. физ. и эксп. тер., 1998, № 2, с. 38-48.

4. Яновская А. С. Способ определения популяции лимфоцитов в мазках. // Бюллет. экспер. биол. 2006, № 29, с. 58-69.

5. Зайчик А. Ш., Чурилов Л. П. Основы общей патологии. Санкт-Петербург, 1999, 624 с.

6. Маянский А. Н. Апоптоз и патология. В кн.: Микробиология для врачей (Очерки патогенетической микробиологии) Нижний Новгород: Изд-во Нижегородской государственной медицинской академии, 1999, с. 288-289.

253