Оценка метаболических систем ацетилирования и окисления у больных стрептококковыми ангинами и их терапевтическая коррекция ксимедоном

выше нормы (р<0,05). ССА после базисной терапии гриппа была пониженной, дополнительное применение эмоксипина повышало этот показатель до значений в контроле (р>0,05).

Токсины гриппа обладают выраженным мембранодеструктивным действием, о чем свидетельствуют высокие показатели ССЭ при гриппозной инфекции как в разгаре заболевания, так и в периоде ранней реконвалесценции (соответственно 47,02±1,30% и 39,30±0,60%; р12<0,001). Эмоксипин, обладая мембранопротек-тивными свойствами, уменьшает ССЭ (31,49±0,40%; р<0,001), приводя к её нормализации (30,12±1,43%).

Таким образом, нами впервые у больных гриппом выявлено антиоксидантное и дезинтоксикационное действие эмоксипина. При его применении уменьшается выраженность клинических симптомов интоксикации (общая слабость, головная боль, температура тела), нормализуются значения гемограммы (сегментоядерные нейтрофилы, лейкоциты) и уменьшаются биохимические критерии эндотоксикоза

УДК 616.322-002%576.851.214:[577.152.199+577.152.23]:615.375

(нормализуются уровень МСМ при X 254 и 280 нм, ЭКА и ССА), снижаются показатели малонового диальдегида, индекс токсичности по альбумину, повышается активность каталазы. Кроме того, эмок-сипин оказывает мембранопротективное действие, что подтверждается нормализацией сорбционной способности эритроцитов. Полученные результаты свидетельствуют о перспективности использования эмоксипина в комплексной терапии больных гриппом и возможности его применения в инфектологии.

Поступила 21.12.07.

ENDOGENOUS INTOXICATION AND THE

POSSIBILITY OF ITS CORRECTION DURING INFLUENZA

V.F. Pavelkina, M.G. Laseeva

Summary

It was established that infectious process during influenza accompanied by significant expression of endogenous intoxication syndrome, which is multi-factorial in nature and accompanied by a decline of antioxidant system. An antioxidant, emoxipin, leads to correction of endotoxicosis and antioxidant protection that allows to recommend the drugs for use in other infections.

ОЦЕНКА МЕТАБОЛИЧЕСКИХ СИСТЕМ АЦЕТИЛИРОВАНИЯ И ОКИСЛЕНИЯ У БОЛЬНЫХ СТРЕПТОКОККОВЫМИ АНГИНАМИ И ИХ ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ КСИМЕДОНОМ

Ирина Эдуардовна Кравченко1, Сергей Юрьевич Гармонов3, Райса Галиулловна Зарипова2, Вильдан Хайруллаевич Фазылов1, Алла Валерьевна Яковлева3

1 Кафедра инфекционных болезней (зав. — проф. В.Х. Фазылов) Казанского государственного медицинс-

кого университета, 3кафедра аналитической химии (зав. — проф. В. Ф. Сопин) Казанского государственно-

го технологического университета,2Республиканская клиническая инфекционная больница (главврач — В.А. Саматов), е-mail: kravchencoie@mail.ru

Реферат

Изучено состояние метаболических ферментных систем ацетилирования и микросомального окисления у больных стрептококковой ангиной при терапевтической коррекции препаратом “ксимедон”. Установлена взаимосвязь клинических форм заболевания с особенностями течения биохимических процессов в организме. С целью коррекции метаболических процессов обосновано включение в комплексную патогенетическую терапию больных ангиной препарата пиримидинового ряда ксимедона.

Ключевые слова: стрептококк, ангина, биотрансформация, фенотип, ксимедон.

Эффективность, безопасность применения и индивидуальная переносимость лекарственных средств (ЛС) во многом определяется генетическими факторами, детерминирующими процессы метаболизма [1, 12]. В связи с этим особое значение приобретают фармакогенетические исследования для выявления особенностей действия лекарственных препаратов при различных патологических состояниях, а также оценки при этом целенаправлен-

ной индукции или репрессии ферментных систем под влиянием различных ЛС [2]. На фенотипическом уровне влияние генетических факторов, контролирующих активность ферментов печени, мета-болизирующих лекарственные вещества, проявляется в виде метаболического полиморфизма [12].

Процессы ацетилирования занимают одно из центральных мест в обмене веществ и рассматриваются как генетически детерминированная способность организма метаболизировать соединения, содержащие в своей молекуле аминогруппы [1, 2]. В зависимости от скорости аце-тилирования в человеческой популяции выделяются 2 группы. К одной из них относятся лица, метаболизирующие тест-препараты с высокой скоростью (быстрое ацетилирование), ко второй — с низкой (медленное ацетилирование). Окислительные процессы под контролем ферментов системы цитохрома Р-450 — микро-сомальных оксидаз, являются наиболее распространенным путем метаболических превращений в организме человека различных по структуре веществ [12, 2]. По их активности различают лиц с медленным, средним и быстрым фенотипами окисления (ФО). Статусы ацетилиро-вания и окисления используют в качестве фенотипических маркеров при оценке предрасположенности человека к заболеваниям, а также для прогнозирования нежелательных побочных эффектов ЛС. Поскольку полиморфизм ферментов биотрансформации ЛС оказывает влияние на характер ответной реакции, существует и обратная зависимость — когда лекарственный препарат способен модифицировать активность ферментов детоксикации. Так, при использовании ингибиторов цитохрома Р450, а именно циметидина, ранитидина, достоверно угнеталась активность N-ацетилтрансферазы (NAT) в печени, фамотидин в низких дозах несколько снижал, а в высоких — повышал активность NAT [14, 15].

На сегодняшний день сохраняется устойчиво высокий уровень заболеваемости

населения ангиной с относительно частым развитием осложнений и метатон-зиллярных заболеваний. Этиологическим фактором в развитии патологических процессов при ангине является ß-гемо-литический стрептококк, оказывающий на организм разностороннее патогенное действие [5, 6, 9]. В этом плане представляет интерес изучение процессов ацетили-рования и микросомального окисления у больных с различными формами стрептококковой ангины.

Ранее нами было установлено, что включение в комплексную терапию больных ангиной отечественного лекарственного препарата пиримидинового ряда ксимедо-на оказывает эффективное модулирующее действие на иммунную систему, цитогенетический статус и положительное влияние на клиническое течение болезни, выражающееся в сокращении длительности ведущих клинических синдромов [5, 6 ]. В 2006 г. была обнаружена способность ксимедона стимулировать процессы ацетилирования и окисления [3, 7, 8].

Цель настоящей работы — изучить состояние и взаимосвязь метаболических ферментных систем ацетилирования и микросомального окисления у больных стрептококковой ангиной и возможности их терапевтической коррекции.

Под наблюдением находились 85 больных ангиной (57 женщин и 28 мужчин) в возрасте от 17 до 35 лет. Причиной тонзиллита у всех больных явился ß-гемолитический стрептококк группы А. По кратности заболевания больные были подразделены на 2 группы: с первой формой — впервые заболевшие ангиной или через 2 года после ранее перенесенной (42 чел.) и с рецидивирующей — частыми рецидивами ангины в анамнезе (43). Преобладала лакунарная ангина — у 71 (83,5%). Фибринозно-некротическая ангина имела место у 14 (16,5 %). Группу здоровых составили 110 добровольцев обоего пола в возрасте от 18 до 25 лет.

Все больные были подразделены на две группы: основную (43 чел.) и сравнения (42). Больные из группы сравнения

получали общепринятую этиотропную терапию (преимущественно антибиотики пенициллинового ряда) и местное лечение — орошение миндалин 3% перекисью водорода для удаления гнойного детрита. В комплексную терапию больных основной группы был включен приём ксимедо-на по 0,5 г три раза в день до еды в течение 7 дней в соответствии с инструкцией, утвержденной Фармакологическим комитетом МЗ РФ [10].

Для выявления фенотипа ацетилиро-вания (ФА) использовалась методика, основанная на определении концентрации экскретируемого с мочой пациента изониа-зида (гидразида изоникотиновой кислоты, ГИНК) по реакции с ванадатом аммония [8] на спектрофотометре СФ-26. В качестве стандартного фармакогенетического маркера использовали изониазид в таблетках по 0,3 г. Тест-препарат изониазид вводили однократно внутрь в дозе 0,45 г. Мочу собирали каждые 2 часа в течение 6 часов. В пробах мочи определяли содержание свободного изониазида. При значении фракции дозы экскретируемого с мочой ГИНК до 7% подразумевают быстрый фенотип ацетилирования, а при больших значениях — медленный фенотип.

Для оценки фенотипа окисления (ФО) использован модифицированный антипи-риновый тест [2]. Методика его основана на определении концентрации экскрети-руемого со слюной пациента антипирина по реакции образования нитрозосоедине-ния. Больной принимал антипирин одно-

кратно 0,3 г перорально утром натощак. Слюну собирали через каждые 3 часа в течение 12 часов. Количество выведенного антипирина измеряли на спектрофотометре СФ-26 при длине волны 350 нм и определяли по градуировочному графику при значениях кумулятивного количества экскретируемого препарата до 5 мкг. При концентрации антипирина в слюне до 5 мкг/мл был констатирован быстрый фенотип окисления, от 5 до 17 мкг/мл — средний и более 17 мкг/мл — медленный.

Статистическая обработка полученных результатов исследования производилась общепринятыми методами вариационной статистики путем определения критерия х2, сравнения средних значений по t-критерию Стъюдента и показателей доли для оценки достоверности различий в сравниваемых группах с использованием стандартных программ Microsoft Exel.

При фенотипировании активности NAT по разработанной методике было получено бимодальное распределение фармакокинетических параметров экскреции ГИНК в группе здоровых лиц, ибо здесь имело место равное соотношение быстрых и медленных ацетиляторов (по 50%). Иная картина получена у больных: у 48 лиц с ангиной наблюдался быстрый ФА (58%), а у 35 — медленный (42%). Таким образом, быстрый тип ацетили-рования преобладал (р<0,05) у больных стрептококковой ангиной (рис. 1).

У больных первичной ангиной превалировал быстрый ФА (у 57,1%), рецидиви-

Рис.1. Полиморфизм фенотипов ацетилирования у здоровых добровольцев (п = 110) и больных ангиной (п = 85) при р<0,05, критерий %2.

Таблица 1

Распределение фенотипов ацетилирования при различных формах стрептококковой ангины

Показатели ФА , n/% Разница по группам (р) 1-2

Кратность заболевания быстрый 1 медлен- ный 2

первичная (п=42) 24 /57,1 18/42,9 > 0,05

рецидивирующая (п=43) 16 /37,2 27/62,8 < 0,05

Форма ангины

лакунарная (п=71) 43/60,5 28/39,5 < 0,05

фибринозно- некротическая (п=14) 5/35,7 9/64,3 > 0,05

рующей — медленный ФА (у 58,1%; р<0,05). У 60,5 % больных лакунарной ангиной достоверно чаще регистрировался быстрый фенотип ацетилирования (р<0,05), у 57,1% больных фибринозно-некротической ангиной — медленный фенотип (табл. 1). Результаты исследования показали, что у больных с быстрым ФА наблюдалось более раннее выздоровление, чем у больных с медленным ФА (табл. 2).

Имеются сведения о побочном действии лекарств и в ряде случаев — главным образом у медленных ацетиляторов — о неэффективности лечения [13, 14].

Исследования показали, что в группе сравнения в периоде реконвалесценции имеется тенденция к увеличению скорости ацетилирования среди больных с медленным ФА (индукция — 45±4,23%), но без достижения значений фармакокинетических параметров тест-препаратов, характерных для быстрых ацетиляторов (табл. 3). В группе быстрых ацетилято-ров процессы индукции NAT составляли 39±2,61%.

После курса лечения ксимедоном мы не выявили индукцию NAT в группе быстрых ацетиляторов — наоборот, произошло ингибирование активности фермента у 35% пациентов. У медленных ацетилято-ров индукция NAT составляла 62,5±9,08% и к концу лечения приводила к типизации многих медленных ацетиляторов в быстрые. Возможно, в данном случае имеет место так называемая норма-реакция,

Таблица 2

Длительность (в днях) ведущих клинических синдромов у больных с различными фенотипами ацетилирования

Клинические синдромы Быстрый ФА Медленный ФА Разница, дни р

Лихорадка 4,14±0,28 5,27±0,65 1,13 > 0,05

Интоксикация 4,8±0,27 5,9±0,49 1,1 < 0,05

Тонзиллярный 6,26±0,28 7,5±0,39 1,24 < 0,01

Регионарный лимфаденит 5±0,21 6,5±0,49 1,5 < 0,01

Таким образом, у больных с рецидивирующим течением и фибринозно-некротической формой ангины чаще регистрируется медленный ФА, при котором достоверно больше длительность ведущих клинических синдромов, чем у больных с быстрым ФА. Возможно, медленный метаболизм лекарственного препарата и его быстрое выведение из организма приводят к снижению терапевтического эффекта, что проявляется увеличением длительности заболевания, и, кроме того, к сохранению Streptococcus pyogenes в организме и формированию рецидивирующего течения ангины.

когда стимулирование и так высокоактивного процесса блокируется по механизму обратной связи у быстрых ацетиляторов и, наоборот, происходит активация процессов ацетилирования в группе медленных ацетиляторов.

Функциональное состояние системы микросомального окисления было изучено у 39 здоровых добровольцев и 32 больных стрептококковой ангиной. При феноти-пировании активности цитохромов Р-450 в группе здоровых лиц имело место следующее соотношение ФО: быстрый — 20%, средний — 44% и медленный 36%. Преобладающим являлся средний ФО (рис.2).

Таблица 3

Индукция №ацетилтрансферазы на фоне базисной терапии и добавления к ней ксимедона

Группы больных Тип ацетилирова-ния Фракция дозы ГИНК до начала лечения, % Фракция дозы ГИНК после лечения, % Индукция, %

Сравнения Быстрый 3,63 ± 0,39 4,93 ± 0,93 39±2,61

Медленный 11,57 ± 0,73 8,15 ± 0,94 45±4,23

Основная Быстрый 4,25 ± 0,28 5,18 ± 0,6 нет

Медленный 10,27 ± 0,75 6,59 ± 1,01 62,5± 9,08

При фенотипировании активности Р-450 в остром периоде заболевания у 17 (53,1%) больных ангиной регистрировался медленный тип окисления, у 11 (34,4%) — средний фенотип и у 4 (12,5%) — быстрый. Соответственно, у больных стрептококковой ангиной преобладает медленный фенотип окисления (р<0,05).

В периоде ранней реконвалесценции в группе сравнения происходило уменьшение числа больных с медленным фенотипом до 33% и увеличение со средним ФО до 60%, а также сохранялось достоверно малое число пациентов с быстрым ФО (6,66%).

В основной группе на фоне лечения ксимедоном, наблюдалось перераспределение ФО таким образом, что их соотношение приближалось к соотношению биохимических фенотипов у здоровых людей (медленный и средний фенотипы — по 41,2%, быстрый — 17,6%).

Таким образом, включение ксиме-дона в комплексную патогенетическую терапию больных ангиной способствует активации системы микросомального окисления и нормализации соотношений

различных фенотипов окисления в группе реконвалесцентов ангины.

Результаты исследования показали, что у больных со средним ФО ведущие клинические синдромы купировались достоверно раньше, чем у больных с быстрыми и медленными ФО (табл.4). По данным литературы, существует взаимосвязь между системой ацетилирования и микросомального окисления. Причем по группе здоровых добровольцев было установлено, что медленному типу окисления соответствует быстрый тип ацетилиро-вания, быстрому — медленный тип. Для среднего типа окисления характерно равное распределение в сторону быстрого и медленного типов ацетилирования [4, 11].

При сопоставлении результатов аце-тиляторного статуса и процессов микро-сомального окисления у больных стрептококковой ангиной прослеживалась следующая взаимосвязь: наблюдалась

индукция у лиц с медленным фенотипом с транформацией в быстрый фенотип, у лиц с медленным фенотипом — с переходом в средний. У лиц с быстрым феноти-

°/

%

60

50

40

30

20

10

0

44

20

36

53

34,40

12,60

Здоровые

Больные

быстрый  средний

медленный

Рис. 2. Полиморфизм фенотипов окисления у здоровых добровольцев (п= 39) и больных ангиной (п = 32) р<0,05, критерий %2.

Таблица 4

Длительность (в днях) ведущих клинических синдромов у больных с различными фенотипами окисления

Клинические синдромы Фенотип р

быстрый

Интоксикация 4,9±0,22 4,3±0,33 5,2±0,36 >0,05 <0,05

Тонзиллярный синдром 6,5±0,22 6,1±0,23 6,8±0,24 >0,05 <0,05

Регионарный лимфаденит 6,4±0,24 5,4±0,22 6,2±0,26 <0,01 <0,05

пом ацетилирования и окисления происходила менее выраженная индукция.

Полученные результаты подтверждают факт влияния ксимедона на метаболические системы ацетилирования и микросо-мального окисления. Очевидно, ксимедон, воздействуя на процессы ацетилирования и окисления, иммунную систему и процессы регенерации, оказывает положительный эффект и на клиническое течение заболевания. Так, на фоне лечения кси-медоном мы получили достоверное сокращение длительности ведущих синдромов заболевания: интоксикационного — в среднем на 1,5 дня, тонзиллярного — на 2 дня и регионарного лимфаденита- на 1,5 дня, что приводило к более раннему выздоровлению пациентов.

Таким образом определение фенотипов ацетилирования и окисления может быть использовано для прогнозирования рецидивов заболевания, тяжести течения и выбора тактики диспансерного наблюдения.

ЛИТЕРАТУРА

1. Викторов А.П., Короткий В.Н., Голопыхо Л.И., Коржик Н.П. Исследование ацетилирующей способности организма в целях индивидуализации фармакотерапии больных //Клин. хир. — 1990. — № 9. — С. 74.

2. Гармонов С.Ю., Евгеньев М.И., Зыкова И.Е. Аналитические методы исследования генетического полиморфизма организма человека //Вопр. биол. и фармацевт. химии. — 2004. — № 1. — С. 3-20.

3. Гармонов С.Ю., Погорельцев В.И., Шитова Н.С. и др. Влияние иммуномодулятора ксимедона на фармакокинетику гидразида изоникотиновой кислоты в организме человека // Химико-фармацевт. журн. — 2006. — Т.40. — №3. — С. 133-136.

4. Киселева Т.А. Метаболические ферментные системы у больных сахарным диабетом 2 типа и их фармакологическая коррекция ксимедоном: Автореф. дисс. канд. мед. наук. — Казань. — 2007. — 19 с.

5. Кравченко И.Э., Зарипова Р.Г., Фазылов В.Х. и др. Нестабильность генома у больных ангиной и возмож-

ности фармакологической коррекции ксимедоном. // Казанский мед. ж. - 2006. - № 4. - С. 257- 261.

6. Кравченко И.Э., Фазылов В.Х., Зинкевич О.Д. и др. Клинико-иммунологический статус при ангине и его коррекция препаратом «ксимедон» // Казанский мед. ж. - 2004. - № 3. - С. 168-174.

7. Погорельцев В.И., Гармонов С.Ю., Резник В.С. и др. Ксимедон в качестве индуктора активности микросомальных оксидаз печени человека // Положительное решение на выдачу патента. - Заявка 2006135296/15. Приоритет 5.10.2006. МПК8 А61К31/505, С 12N9/00. - 8с.

8. Погорельцев В.И., Гармонов С.Ю., Шитова Н.С. и др. Применение иммуномодулятора ксимедона в качестве индуктора фермента N-ацетилтрансферазы // Клин. фармакол. и фармакотеря. - 2006. - № 15(2). -С. 82-85..

9. Покровский В.И., Брико Н.И., Ряпис Л.А. Стрептококки и стрептококкозы. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 544 с.

10. Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств. - М.: Медицина; 2001.

11. Рудая Н.В., Сиваченко О.Е. Состояние системы ферментов микросомального окисления в зависимости от ацетилтрансферазной активности //Укр. биохим. журн. - 1993. - № 6. - С. 108.

12. Холодов Л.Е., Яковлев В.П. Клиническая фармакокинетика. - М.: Медицина, 1885. - 464 с.

13. Batcherol J, Welsh K., Tinoco P. et al. // Lancet. -1980. - Vol. 1. - P. 1107.

14. Mitchell J., Thorgeirssen U., Black M. // Clin. Pharmacol. Ther. - 1975. - Vol. 18. - P. 70.

15. Scheuh E, Walter R., Hadasovo E. et al. Influence of H2-receptor and proton pump inhibitors on some functions of the oxydative and conjugative drug metabolism. // Pharmazie. -1996. - Vol. 7. - 493-497.

Поступила 12.03.08.

ASSESSMENT OF ACETYLATION AND OXIDATION

METABOLIC SYSTEMS IN PATIENTS WITH

STREPTOCOCCAL TONSILLITIS AND THEIR

THERAPEUTIC CORRECTION BY XYMEDON

I.E. Kravchenko, S.Yu. Garmonov, R.G. Zaripova,

V.H. Fazylov, A.V. Yakovleva

Summary

The state of enzymatic acetylation and microsomal oxidation systems was studied in patients with streptococcal quinsy treated by ximedon correction. A relationship between clinical forms of the disease and biochemical processes in the organism was found. It is suggested that the inclusion of ximedon in pathogenetic therapy of quinsy is useful to correct the metabolic processes.

© 29. «Казанский мед. ж.», № 4.

457