ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ С УСТОЙЧИВОСТЬЮ К РАСТВОРИМОМУ СЕА

1. Нуклеиновая кислота, кодирующая биспецифическое одноцепочечное антитело, включающее
(a) первый связывающий домен, специфически связывающийся с CD3 человека, и
(b) второй связывающий доменом, специфически связывающийся с СЕА человека,
где указанный второй связывающий домен, специфический для СЕА человека, содержит CDR-H1, имеющую аминокислотную последовательность «SYWMH» (SEQ ID NO: 68); и CDR-H2, имеющую аминокислотную последовательность «FIRNKANGGTTEYAASVKG» (SEQ ID NO: 67) или «FILNKANGGTTEYAASVKG» (SEQ ID NO: 145); или
где указанный второй связывающий домен, специфический для СЕА человека, содержит CDR-H1, имеющую аминокислотную последовательность «TYAMH» (SEQ ID NO: 70); и CDR-H2, имеющую аминокислотную последовательность «LISNDGSNKYYADSVKG» (SEQ ID NO: 69); и
где указанный второй связывающий домен содержит по меньшей мере аминокислотную последовательность «DRGLRFYFDY» (SEQ ID NO: 66), соответствующую положениям по Kabat 95-102 CDR-H3 моноклонального антитела мыши А5В7.
2. Нуклеиновая кислота по п.1, где указанный первый связывающий домен, специфический для CD3, локализован на С-конце.
CEA
CEA
CD3
CD3
CEA
CEA
CD3
CD3
3. Нуклеиновая кислота по п.1, где указанные связывающие домены расположены в порядке VH-VL-VH-VL или VL-VH-VH-VL.
4. Нуклеиновая кислота по п.1, где аминокислотная последовательность VH-области второго связывающего домена, специфического для СЕА человека, представляет собой SEQ ID NO. 60 или 146.
5. Нуклеиновая кислота по п.1, где аминокислотная последовательность VH-области второго связывающего домена, специфического для СЕА человека, представляет собой SEQ ID NO. 58 или SEQ ID NO. 62.
6. Нуклеиновая кислота по п.1, где аминокислотная последовательность VL-области второго связывающего домена, специфического для СЕА человека, представляет собой SEQ ID NO. 64.
7. Нуклеиновая кислота по п.1, где V-области второго связывающего домена, специфического для СЕА, выбраны из группы, состоящей из
(a) VH-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 60, и VL-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 64;
(b) VH-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 146, и VL-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 64;
(c) VH-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 58, и VL-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 64;
(d) VH-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 62, и VL-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 64; и
(e) VH-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 56, и VL-области, состоящей из аминокислотной последовательности, показанной на SEQ ID NO. 64.
8. Нуклеиновая кислота по п.1, где указанное биспецифическое одноцепочечное антитело содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из
(a) аминокислотной последовательности, как показано на любой из SEQ ID NO. 6, 8, 16, 18, 24, 26, 32, 34, 40, 42, 126, 130, 134 или 143;
(b) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, как показано на SEQ ID NO. 5, 7, 15, 17, 23, 25, 31, 33, 39, 41, 125, 129, 133 или 142;
(c) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, гибридизующейся в строгих условиях с комплементарной последовательностью нуклеиновой кислоты по (b);
(d) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, которая является вырожденной в результате генетического кода по отношению к нуклеотидной последовательности по (b).
9. Нуклеиновая кислота по п.1, где по меньшей мере один из указанного первого или второго связывающего домена является химерным, гуманизированным, CDR-привитым и/или деиммунизированным или человеческим.
10. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из пп.1-9.
11. Вектор по п.10, дополнительно содержащий регуляторную последовательность, функционально связанную с указанной нуклеиновой кислотой.
12. Хозяин, трансформированный или трансфицированный нуклеиновой кислотой по любому из пп.1-9, или вектором по п.10 или 11.
13. Способ получения биспецифического одноцепочечного антитела, включающий культивирование хозяина по п.12 в условиях, обеспечивающих экспрессию биспецифического одноцепочечного антитела, и выделение продуцированного биспецифического одноцепочечного антитела из культуры.
14. Способ по п.13, дополнительно включающий смешивание выделенного биспецифического одноцепочечного антитела с подходящим составом носителей, стабилизаторов и/или эксципиентов с получением фармацевтической композиции, содержащей выделенное биспецифическое одноцепочечное антитело.