Биохимические показатели обмена соединительной ткани в диагностике гломерулонефрита собак

УДК 619:612.75:616.61:636.7:616-076

Ключевые слова: гломерулонефрит, собаки, биохимия, соединительная ткань

Key words: glomerulonephritis, dogs, biochemistry, connective tissue

Морозенко Д. В.

БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ОБМЕНА СОЕДИНИТЕЛьНОй ТКАНИ

в диагностике гломерулонефрита СОБАК

biochemical markers of connective tissue metabolism at the diagnosis of the glomerulonephritis in dogs

Белоцерковский национальный аграрный университет Адрес: 09117, Украина, Киевская обл., г. Белая Церковь, Соборная пл., 8/1

Bila Tserkva National Agrarian university Address: 09117, ukraine, Kiev region, Bila Tserkva, Soborna square, 8/1

Морозенко Дмитрий Владимирович, к. в. н., соискатель

Morozenko Dmitry V., Ph.D. in Veterinary Science, Candidate for a Degree

Аннотация. В статье рассматривается вопрос применения биохимических показателей обмена соединительной ткани (гликопротеинов, сиаловых кислот, оксипролина, гликозаминогликанов, уроновых кислот) в диагностике гломерулонефрита у собак. Установлено, что гломерулонефрит у собак характеризуется возрастанием в сыворотке крови концентрации гликопротеинов, сиаловых кислот и хондроитинсульфатов. Данные биохимические тесты можно использовать для оценки активности воспаления и эндогенной интоксикации в организме собак при гло-мерулонефрите. Уровень экскреции оксипролина и уроновых кислот можно применять как маркеры катаболизма коллагена и протеогликанов для оценки степени фиброзных изменений в почках.

Summary. The paper considers the issue regarding the use of biochemical markers of connective tissue metabolism (glycoproteins, sialic acids, hydroxyl-proline, glycosaminoglycans, uronic acids) at the diagnosis of glomerulonephritis in dogs. It has been established that glomerulonephritis in dogs is characterized by the increase of concentration of glycoproteins, sialic acids and chondroitin sulfates. These biochemical tests can be used for evaluation of the activity of inflammation and endointoxication in the organism of dogs with glomerulonephritis. The level of excretion of hydroxy-proline and uronic acids can be used as markers of collagen and proteoglycans catabolism to assess the degree of renal fibrosis.

Введение

Гломерулонефрит - диффузное воспалительное заболевание почек с первичным поражением клубочков, развивающееся на иммунной основе [6]. На сегодняшний день достаточно широко изучены клинико-био-химические аспекты диагностики гломеру-лонефрита у собак, показатели белкового, минерального и липидного обмена, а также клеточного и гуморального иммунитета при данном заболевании [7]. Однако известно, что патологический иммунный ответ, вызывающий повреждение почечной ткани (клубочков, интерстиция и канальцев), нередко принимает хроническое течение и приводит к формированию гломерулосклероза - основе прогрессирования почечной недостаточности. Развитие и прогрессирование гломерулонефрита сопровождается накоплением в почечных клубочках мезангиального ма-

трикса за счет коллагена IV типа и ламини-на [2]. Характерной особенностью структуры коллагена является то, что 12-14 % его аминокислотных остатков приходится на иминокислоту оксипролин - биохимический маркер, отражающий катаболизм коллагена в норме и при патологии. Известно, что у детей увеличение содержания оксипролина в моче при остром гломерулонефрите и снижение при хроническом гломерулонефрите дает основание предположить, что снижение уровня экскреции оксипролина связано с переходом заболевания в хроническую форму [3].

В состав базальных мембран почечных клубочков входят также сульфатированные протеогликаны, которые представляют собой белково-углеводные соединения - гли-козаминогликаны, ковалентно связанные с белком [9]. При деградации гликозамино-гликанов возможно выделение с мочой боль-

шого количества глюкуроновой кислоты -одного из основных компонентов ГАГ, что наблюдается при травматических и воспалительных процессах в почках [8]. По данным О. Я. Склярова [1], при хроническом гломе-рулонефрите у людей уже на начальных стадиях заболевания изменяется метаболизм соединительной ткани почек, что проявляется повышением экскреции оксипролина и гли-козаминогликанов с мочой. Таким образом, целью нашей работы явилось изучение биохимических показателей обмена соединительной ткани в крови и моче для выяснения их диагностической информативности при гломерулонефрите у собак.

Материалы и методы

Исследования проводились на беспородных собаках в возрасте от 2 до 7 лет (п = 20), которые поступали в клинику ветеринарной медицины «Пес + Кот» г. Харькова. В качестве контрольной группы использовали клинически здоровых собак (п = 15). Животным было проведено клиническое исследование, ультразвуковое сканирование почек, клинический и биохимический анализ крови и мочи, на основании чего был установлен диагноз гломерулонефрит. Содержание в сыворотке крови гликопротеинов определяли по методу О. П. Штейнберга и Я. Н. Доценко, сиаловых кислот - по методу Гесса, хондро-итинсульфатов - по методу №теШ - Csoka в модификации Л. И. Слуцкого, фракции гли-козаминогликанов - по методу М. Р. Штерна. Содержание оксипролина в моче определяли по реакции с хлорамином Б, уроновых кислот - по реакции с карбазолом [4].

Результаты и обсуждение

Возрастание содержания гликопротеинов в сыворотке крови собак при гломерулонеф-рите на 74,2 % и сиаловых кислот на 59,3 % по сравнению с клинически здоровыми животными говорит о воспалительном процессе в почках (табл. 1). При гломерулонефрите воспаление в почечных клубочках характеризуется усиленной гиперплазией мезанги-альных клеток, пролиферацией эндотелия клубочковой капиллярной сети и капсулы, коллагенизацией мембран капилляров и по-

явлением лимфоидно-клеточных инфильтратов. При этом в тканях почек накапливаются гликозаминогликаны и гликопротеины. Возрастание концентрации гликопротеинов при гломерулонефрите, по нашему мнению, происходит за счет а2-макроглобулина (се-ромукоида) - компонента а2-фракции глобулинов, который обладает антиоксидантными свойствами и способностью ингибировать активность эндопептидаз и фибринолиз. Повышенное содержание в сыворотке крови сиаловых кислот у больных гломерулонеф-ритом собак свидетельствует о высокой активности воспаления в почках и длительности его течения.

Содержание хондроитинсульфатов в сыворотке крови собак при гломерулонефрите увеличилось на 39,8 % (р < 0,001). Известно, что почки собак содержат одинаковое количество хондроитинсульфата и гиалуроновой кислоты в мозговом и корковом веществе [5]. Также возрастание хондроитинсульфатов в крови может зависеть от нарушения метаболической функции печени из-за ее токсического поражения вследствие гиперазотемии, которая характерна для хронического гломерулонефрита. Концентрация общих гликозаминогликанов в сыворотке крови не изменилась, а содержание гепарансульфата увеличилось на 45,5 % (р < 0,05). Такие изменения являются вполне закономерными, так как доказана важная структурная роль ге-парансульфата в базальных мембранах гло-мерулярного аппарата почки. Возрастание концентрации гепарансульфата в сыворотке крови собак можно связывать со структурными изменениями базальных мембран клеток печени и почек, что вызывает развитие протеинурии при гломерулонефрите [10].

Увеличение экскреции с мочой больных собак оксипролина на 58,6 % и уроновых кислот на 44,6 % свидетельствует о нарушении метаболизма соединительной ткани почек (табл. 1). Такие изменения экскреции могут быть вызваны развитием гломеруло-склероза уже на начальных стадиях воспалительного процесса в почках. Известно, что при гистохимическом исследовании почечных клубочков больных гломерулонефритом было обнаружено повышенное содержание

Таблица 1.

Биохимические показатели обмена соединительной ткани у собак при гломерулонефрите

Показатели Контрольная группа, n = 15 Больные животные, n = 20

Сыворотка крови

Гликопротеины, г/л 0,62±0,02 1,08±0,05 ***

Сиаловые кислоты, моль/л 2,09±0,11 3,33±0,05 ***

Хондроитинсульфаты, г/л 0,196±0,007 0,274±0,019 **

Общие гликозаминогликаны, усл. ед. 20,1±0,70 20,3±0,70

Хондроитин-6-сульфат, усл. ед. 11,6±0,58 11,6±0,46

Хондронтин-4-сульфат, усл. ед. 6,3±0,25 5,5±0,47

Гепарансульфат, усл. ед. 2,2±0,24 3,2±0,17 *

Моча

Оксипролин, мг/л 35,3±4,20 56,0±2,20 **

Уроновые кислоты, мг/л 7,4±0,64 10,7±0,36 ***

Примечание: * - р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001 по сравнению с контрольной группой.

оксипролина - 5 г на 100 г сухого вещества против 2,12 на 100 г в норме [5]. Очевидно, возрастание экскреции оксипролина и уроновых кислот обусловлено изменением структуры коллагена и гликозаминогликанов в почках вследствие фиброза.

Заключение

Таким образом, по результатам наших исследований, гломерулонефрит у собак характеризуется возрастанием в сыворотке крови концентрации гликопротеинов, сиаловых кислот и хондроитинсульфатов. Данные биохимические тесты можно использовать для оценки активности воспаления и эндогенной интоксикации в организме собак при гломе-рулонефрите. Уровень экскреции оксипро-лина и уроновых кислот можно применять в качестве маркеров катаболизма коллагена и протеогликанов для оценки степени фиброзных изменений в почках.

Список литературы

1. Биохимические показатели в норме и при патологии / под ред. О. Я. Склярова. - Киев, Медицина, 2007. - 318 с.

2. Богомазова, С. Ю. Цитокины и внеклеточный матрикс при экспериментальных гломерулопатиях /

С. Ю. Богомазова, А. А. Иванов, О. П. Гладких // Архив патологии. - 1997. - № 6. - С. 75-81.

3. Гордеева, А. А. Содержание некоторых цитоки-нов и оксипролина в моче при гломерулонефрите у детей / А. А. Гордеева, Ю. В. Одинец, Т. В. Горбач // Актуальные проблемы современной медицины. -2008. - Т. 8, Выпуск 4. - С. 99-101.

4. Морозенко, Д. В. Биохимические показатели состояния соединительной ткани в диагностике болезней собак и кошек / Д. В. Морозенко, В. И. Левченко, О. П. Тимошенко. - Белая Церковь, 2012. - 42 с.

5. Слуцкий, Л. И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани. - Ленинград, Медицина, 1969. - 373 с.

6. Тилли, Л. Болезни собак и кошек / Л. Тилли, Ф. Смит. - М. : ГЭОТАР-МЕД, 2001. - 784 с.

7. Тиханин, В. В. Оценка биохимических показателей крови собак, больных гломерулонефритом / В. В. Тиханин, Л. Ю. Карпенко // Ветеринарная практика. - 1998. - № 2 (5). - С. 16-17.

8. Юлдашев, С. М. Динамика изменений содержания глюкуроновой кислоты в моче как биохимический показатель эффективности лечения больных с травматическими повреждениями почек / С. М. Юл-дашев, А. Г. Валиев, М. Т. Юлдашев // Медицинский вестник Башкортостана. - 2010. - Т. 5, № 2. - С. 45-47.

9. Rops, A. L. Heparan sulfate proteoglycans in glomerular inflammation / A. L. Rops, J. van der Vlag, J. F. Lensen // Kidney Int. - 2004. - N 65 (3). - P. 768-785.

10. Yokoyama, H. Serum and urinary concentration of heparan sulfate in patients with diabetic nephropathy / H. Yokoyama, K. Sato, M. Okudaira // Kidney Int. -1999. - N 56 (2). - P. 650-658.