СПОСОБ УНИЧТОЖЕНИЯ ВОДЯНОЙ ПЛЕСЕНИ В ВОДЕ ДЛЯ РЫБОВОДСТВА
METHOD OF DESTRUCTION OF WATER MOULD IN WATER FOR FISHING

Область техники, к которой относится изобретение
[0001] Настоящее изобретение предлагает способ уничтожения водяной плесени в пресной воде или морской воде для рыбоводства, в котором используется хлорит (диоксид хлора как активный ингредиент).
Уровень техники
[0002] В последние годы широкое распространение получило рыбоводство как средство обеспечения рыбных ресурсов. Однако основной проблемой стали бактериальные или вирусные инфекции, которыми страдают рыбы, моллюски и ракообразные, например, вследствие ухудшения среды их обитания, вызванного загрязнением воды. В число таких инфекций рыб, моллюсков и ракообразных входит вызываемое водяной плесенью инфекционное заболевание, возбудителями которого являются оомицеты рода Saprolegnia, и которое, таким образом, называется термином “сапролегниоз”. Вызываемая ими инфекция проявляется как воспаление или язва в форме белой или серой нити (водяной плесени), растущей на поверхности ран рыбы или икры. Кроме того, заболевание водяной плесенью возникает при инфицировании бактериями, которые принадлежат к роду аэромонад (Aeromonas), или подобными бактериями, и, в конечном счете, оно приводит к смерти инфицированных организмов. Кроме того, заболевание водяной плесенью также вызывает гибель икры рыб вследствие недостатка кислорода во время инкубации. Заболевание водяной плесенью вызывают оомицеты, и, таким образом, в случае заболевания водяной плесенью невозможно применять средства против плесени, которую вызывают грибы.
[0003] В качестве эффективного средства для профилактики и лечения заболевания водяной плесенью у рыб до настоящего времени широко использовался малахитовый зеленый (тетраметил-4,4-диаминотрифенилметан). Однако было обнаружено, что малахитовый зеленый является канцерогенным и тератогенным для животных и, таким образом, японский закон о фармацевтической продукции в настоящее время запрещает использование малахитового зеленого в рыбоводстве. Кроме того, японский закон о пищевой санитарии запрещает распространение и продажу выращенной рыбы, в которой был обнаружен малахитовый зеленый. Таким образом, требуется разработка низкотоксичных средств для профилактики и лечения заболевания водяной плесенью. С другой стороны, вследствие запрещения использования малахитового зеленого заболевание, которое вызывает смерть рыбы, полностью покрытой водяной плесенью, часто встречается в рыбоводных или нерестовых хозяйствах в различных регионах, что представляет собой основную проблему японской рыбоводческой отрасли.
-
2
[0004] Патентный документ 1 описывает, что при электролизе водопроводной воды или воды, полученной посредством добавления в водопроводную воду электролита, такого как соль, получается сильнокислая вода на стороне положительного электрода и сильнощелочная вода на стороне отрицательного электрода, причем в сильнокислой воде содержится остаточный хлор (растворенный хлор), в том числе хлорноватистая кислота (HOCl), гипохлорит-ион (OCl) или газообразный хлор (Cl), и этот остаточный хлор, особенно хлорноватистая кислота, эффективно уничтожает зооспоры и гифы (нити) водяной плесени.
[0005] Патентный документ 2 описывает средство для лечения или профилактики инфекций рыб, моллюсков и ракообразных, содержащее разнообразные растворимые в воде минеральные вещества, извлеченные из сожженных организмов. Рыба, моллюски и ракообразные или икринки рыб, моллюсков и ракообразных погружаются в водный раствор этих растворимых в воде минеральных веществ в целях лечения или профилактики инфекций рыб, моллюсков и ракообразных.
[0006] Патентный документ 3 описывает применяемое в рыбоводстве средство для уничтожения водяной плесени, содержащее в качестве активного ингредиента определенное бензотиазолилазосоединение.
[0007] Согласно недавнему сообщению средство Pyceze (товарный знак компании Novartis Animal Health K.K.), содержащее бронопол (2-бром-2-нитропропан-1,3-диол) в качестве активного ингредиента, является подходящим для стерилизации подлежащей инкубации икры рыб в целях подавления эпидемического паразитического обрастания водяной плесенью (см. непатентные документы 1-3).
[0008] С другой стороны, хлорит (диоксид хлора как активный ингредиент) также привлекает внимание в качестве низкотоксичного дезинфицирующего средства в области рыбоводства. Патентный документ 4 описывает использование диоксида хлора в концентрации от 0,01 до 2 мг/л в целях стерилизации воды для рыбоводства и профилактики у рыб вирусных заболеваний, таких как герпес карпа типа 3 (Cyprinid herpesvirus 3 или CyHV-3). Патентный документ 5 описывает, как возбудители инфекции, прикрепляющиеся к оплодотворенной икре рыб, моллюсков и ракообразных, уничтожаются посредством погружения оплодотворенной икры в воду, содержащую диоксид хлора в концентрации от 0,01 до 1 мг/л, для цели повышения скорости инкубации оплодотворенной икры. Патентный документ 6 описывает, что диоксид хлора эффективно лечит скутикоцилиатоз, представляющий собой паразитарное заболевание рыб.
Список цитируемой литературы
Патентная литература
[0009] Патентный документ 1 - Японский патент JP 2001-238561 A
Патентный документ 2 - Японский патент JP 2009-23997 A
Патентный документ 3 - Японский патент JP 61-60041 B
Патентный документ 4 - Японский патент JP 2006-280212 A
Патентный документ 5 - Японский патент JP 2007-259808 A
Патентный документ 6 - Японский патент JP 3882939 B1
Непатентная литература
[0010] Непатентный документ 1 - Информация экспериментальной рыбоводческой станции префектуры Нагано, рекомендация по применению средства Pyceze для уничтожения водяной плесени на икре рыб, обновление от 20 июня 2014 г.
Непатентный документ 2 - Новости форельного хозяйства Fuji при экспериментальной рыбоводческой станции префектуры Сидзуока, выпуск № 190 (январь 2006 г.).
Непатентный документ 3 - Отчет об исследовании лососевых Научно-исследовательского агентства по рыбоводству (FRA), № 5 (март 2011 г.), с. 15-17.
Сущность изобретения
Техническая проблема
[0011] Изобретения, описанные в патентных документах 4-6, предлагают применять хлористую кислоту или диоксид хлора в области рыбоводства, но не предназначаются для борьбы с заболеванием водяной плесенью. С другой стороны, способ, описанный в патентном документе 1, признан практически непригодным, поскольку остаточный хлор производит значительное воздействие на рыбу. Кроме того, способы, описанные в патентных документах 2 и 3, по существу, также не представляют собой распространенные способы борьбы с заболеванием водяной плесенью в рыбоводческих хозяйствах.
[0012] Таким образом, в настоящее время, кроме бронопола, по существу, нет никакого химического вещества, которое могли бы использовать японские рыбоводческие или нерестовые хозяйства для профилактики заболевания водяной плесенью. Бронопол является менее токсичным, чем малахитовый зеленый, но его использование ограничивается однократным ежедневным воздействием в концентрации 50 частей на миллион в течение одного часа или в концентрации 100 частей на миллион в течение 30 минут. Когда бронопол используется для оплодотворенной икры, период его применения ограничивается рассматриваемым периодом. Кроме того, требуется 3333-кратное разбавление или 6666-кратное разбавление перед выпуском воды, когда концентрация бронопола составляет 50 частей на миллион или 100 частей на миллион соответственно. Таким образом, предельная концентрация бронопола в выпускаемой воде составляет 0,015 части на миллион или менее.
[0013] С другой стороны, диоксид хлора используется, например, для уничтожения бактерий или борьбы с плесенью, но отсутствует содержащее диоксид хлора товарное средство для уничтожения плесени. Кроме того, отсутствует публичный исследовательский отчет о результатах использования диоксида хлора в рыбоводческих или нерестовых хозяйствах для цели борьбы с заболеванием водяной плесенью. То же самое можно сказать о хлоритных средствах, содержащих диоксид хлора в качестве активного стерилизующего ингредиента.
[0014] Задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы предложить способ уничтожения водяной плесени в воде для рыбоводства посредством использования диоксида хлора, который является менее токсичным и более безопасным, чем бронопол.
Решение проблемы
2
2
2
2
2
-
[0015] Диоксид хлора (ClO) представляет собой газ при обычной температуре. Таким образом, органическая или неорганическая кислота добавляется в водный раствор хлорита, такого как хлорит натрия (NaClO) или хлорит калия (KClO), имеющий pH около 12, и подкисляет раствор, производя диоксид хлора. В щелочном водном растворе хлорит устойчиво существует как хлорит-ион (ClO). С другой стороны, в кислом водном растворе хлорит существует в таком состоянии, в котором совместно присутствуют хлористая кислота (HClO), хлорит-ион и диоксид хлора.
[0016] В случае применения для стерилизации хлорит обычно используется вместе с органической или неорганической кислотой. Когда хлорит используется в рыбоводческой отрасли, органическая или неорганическая кислота иногда не применяется, как описано в патентных документах 4 и 5. Согласно патентным документам 4 и 5, диоксид хлора эффективно уничтожает вирусы или другие болезнетворные микроорганизмы в низкой концентрации, составляющей 1 часть на миллион или менее. Однако невозможно ожидать, что препарат на основе диоксида хлора будет представлять собой эффективное средство против водяной плесени. Таким образом, до настоящего времени препарат на основе диоксида хлора не использовался на практике в качестве средства для уничтожения водяной плесени. Как описано выше, содержащий бронопол препарат представляет собой единственное средство, которое в настоящее время разрешено для практического применения в Японии.
[0017] Автор настоящего изобретения выполнил всесторонние исследования с использованием диоксида хлора, который является менее токсичным и более безопасным, чем бронопол, для уничтожения водяной плесени. В результате этого автор настоящего изобретения неожиданно обнаружил, что когда органическая или неорганическая кислота не используется, и концентрация диоксида хлора в воде для рыбоводства превышает уровень, который описан в патентных документах 4 или 5, наблюдается более значительный эффект уничтожения водяной плесени, чем в случае применения препарата бронопола. Обнаружение этого факта привело к доработке настоящего изобретения.
[0018] Более конкретно, настоящее изобретение предлагает способ уничтожения водяной плесени в воде для рыбоводства посредством использования хлорита, причем данный способ включает добавление хлорита в воду для рыбоводства, имеющую pH в диапазоне от 5,5 до 8,5, в концентрации, составляющей от 2,5 частей на миллион до 200 частей на миллион в пересчете на эффективный диоксид хлора, и осуществление реакции в течение 60 минут или более для уничтожения водяной плесени, причем в воду для рыбоводства не добавляется органическая или неорганическая кислота.
[0019] Хлорит добавляется в воду для рыбоводства, имеющую pH в диапазоне от 5,5 до 8,5, в концентрации, составляющей от 2,5 частей на миллион до 200 частей на миллион в пересчете на эффективный диоксид хлора, и затем после окончания периода, составляющего 60 минут или более, зооспоры водяной плесени могут уничтожаться, и возникновение “мутности” можно подавлять, даже когда вода для рыбоводства используется без замены. Кроме того, поверхность рыбьих икринок можно также дезинфицировать, чтобы подавлять рост водяной плесени. Препарат диоксида хлора используется для лечения рыб от таких заболеваний, как криптокариоз (болезнь белых пятен). Однако тот факт, что препарат диоксида хлора является весьма эффективным также и для борьбы с заболеванием водяной плесенью, был впервые обнаружен автором настоящего изобретения.
[0020] Здесь термин “вода для рыбоводства” согласно настоящему изобретению означает не только воду, используемую для выращивания рыбы, но также воду, используемую для инкубации рыбьей икры (вода для инкубации икры). Кроме того, “вода для рыбоводства” может представлять собой морскую воду или пресную воду. Кроме того, “вода для рыбоводства” означает также воду, используемую для выращивания, но не для разведения рыбы.
[0021] Кроме того, концентрация “в пересчете на эффективный диоксид хлора” согласно настоящему изобретению представляет собой измеренное значение концентрации диоксида хлора в воде, которую можно измерять, используя способ определения хлорита натрия, описанный в восьмом издании японских стандартов пищевых добавок, или имеющийся в продаже измерительный прибор, например AL100-MT, изготовленный компанией MK Scientific, Inc.
[0022] В воду для рыбоводства добавляются разнообразные химические реагенты или аналогичные вещества, и в ней присутствуют разнообразные органические вещества. Таким образом, даже когда хлорит добавляется в воду для рыбоводства, чтобы обеспечить заданную концентрацию диоксида хлора, произведенный диоксид хлора нейтрализуют химические реагенты, органические вещества или другие вещества, и в результате этого уменьшается эффективная концентрация диоксида хлора. Например, в воду для инкубации рыбьей икры в большом количестве добавляется катехин для укрепления оболочек икринок. Однако катехин по своей природе представляет собой восстановитель, и, таким образом, катехин реагирует с диоксидом хлора, представляющим собой окислитель, прежде чем он используется для подавления роста водяной плесени. Таким образом, для подавления роста водяной плесени в воде для рыбоводства важно устанавливать эффективную концентрацию диоксида хлора, который остается в воде для рыбоводства и производит дезинфицирующий эффект, на уровне в пределах соответствующего интервала.
[0023] Хлорит, добавляемый в воду для рыбоводства, может присутствовать в форме порошка или водного раствора. Согласно настоящему изобретению концентрация хлорита в воде для рыбоводства, имеющей pH в диапазоне от 5,5 до 8,5, в концентрации, составляющей от 2,5 частей на миллион до 200 частей на миллион в пересчете на эффективный диоксид хлора. В частности, когда в воду для рыбоводства добавляется хлорит в форме водного раствора, может добавляться водный раствор хлористой кислоты в качестве пищевой добавки.
[0024] Здесь выражение “в воду для рыбоводства не добавляется органическая или неорганическая кислота” согласно настоящему изобретению означает не только случай, где в воду для рыбоводства совершенно не добавляется органическая или неорганическая кислота, но также случай, где органическая или неорганическая кислота добавляется в концентрации, составляющей 4 частей на миллион или ниже. Аналогичным образом, выражение “ не содержится органическая или неорганическая кислота” согласно настоящему изобретению означает не только случай, где органическая или неорганическая кислота совершенно не содержится, но также случай, где при добавлении в воду для рыбоводства органическая или неорганическая кислота содержится в концентрации, составляющей 4 частей на миллион или ниже.
Полезные эффекты изобретения
[0025] Согласно настоящему изобретению можно эффективно бороться с заболеванием водяной плесенью в воде для рыбоводства, обеспечивая повышение безопасности и снижение стоимости. Кроме того, можно устранить необходимость разбавления воды для рыбоводства перед ее выпуском.
Описание вариантов осуществления
[0026] Далее будет описан вариант осуществления настоящего изобретения. Настоящее изобретение не ограничивается следующим описанием.
[0027] [Эксперимент 1: продолжительность сенсибилизации 30 минут]
Как описывают “Методы исследования городской водопроводной воды (издание 2001 г.) Японской ассоциации водоснабжения, VIII Микробные исследования, 4.4.2.2 Метод выращивания водяной плесени”, одну конопляную семядолю с водяной плесенью и 300 мл стерилизованной водопроводной воды помещали в стерилизованную коническую колбу объемом 500 мл, а затем 5 стерилизованных конопляных семядолей помещали в коническую колбу и выдерживали при обычной температуре. Водяную плесень рода Saprolegnia получали из инкубационного отделения рыбоводческого хозяйства для разведения лосося и форели. Через 15 суток воду в конической колбе наблюдали в микроскоп при 1000-кратном увеличении, чтобы определить присутствие и количество зооспор водяной плесени. Воду в конической колбе разбавляли стерилизованной водопроводной водой, получая суспензию зооспор, содержащую от 10 до 12 зооспор водяной плесени на 100 мкл. Следует отметить, что используемая водопроводная вода представляла собой водопроводную воду из города Кобе, имеющую pH = 6,0.
[0028] Суспензию зооспор добавляли в стерилизованную пробирку объемом 5 мл, содержащую 3 конопляных семядоли, и перемешивали, а затем выдерживали при комнатной температуре в течение 3 суток. После этого в стерилизованную пробирку добавляли 900 мкл химического раствора, и полученную в результате смесь перемешивали, а затем выдерживали в течение 30 минут для сенсибилизации. После сенсибилизации жидкость выливали из стерилизованной пробирки, и только конопляные семядоли переносили в стеклянную чашку Петри (Petri), содержащую 40 мл стерилизованной водопроводной воды, и инкубировали при 15°C в течение 7 суток.
[0029] Через 7 суток стеклянную чашку Петри наблюдали в микроскоп, чтобы определить два следующих факта: (1) присутствие или отсутствие зооспор в воде в стеклянной чашке Петри; и (2) возникновение или отсутствие “мутности” в воде в стеклянной чашке Петри. На основании результатов наблюдения определяли минимальную смертельную для зооспор концентрацию активного ингредиента, содержащегося в химическом растворе.
[0030] Здесь в качестве химического раствора использовали каждый из следующих четырех химических растворов: химический раствор 1 (водный раствор хлорита натрия); химический раствор 2 (водный раствор, содержащий такую же массовую процентную долю хлорита натрия и яблочную кислоту); химический раствор 3 (водный раствор, содержащий такую же массовую процентную долю хлорита натрия, хлористоводородную кислоту и сульфид железа(II)); и химический раствор 4 (водный раствор, содержащий бронопол под товарным знаком Pyceze). Каждый из этих химических растворов разбавляли стерилизованной водопроводной водой. Более конкретно, каждый из химических растворов 1-3 разбавляли таким образом, что концентрация диоксид хлора составляла от 0,1 части на миллион до 1200 частей на миллион, а химический раствор 4 разбавляли таким образом, что концентрация бронопола составляла от 0,1 части на миллион до 1200 частей на миллион. Следует отметить, что в качестве препарата хлорита натрия была использована “Пищевая добавка в форме водного раствора хлорита натрия с концентрацией диоксида хлора 50000 частей на миллион”, изготовленная компаний Sukegawa Chemicals Co., Ltd.
[0031] [Эксперимент 2: продолжительность сенсибилизации 60 минут]
Эксперимент 2 осуществляли таким же образом, как эксперимент 1, за исключением того, что смесь, полученную путем добавления 900 мкл химического раствора в стерилизованную пробирку, перемешивали и затем выдерживали в течение 60 минут для сенсибилизации.
[0032] Результаты экспериментов 1 и 2 представлены в таблицах 1 и 2, соответственно. Таблицы 1 и 2 также представляют результаты сравнительного исследования, в котором добавляли 900 мкл стерилизованной водопроводной воды вместо химического раствора. Следует отметить, что представлены также значения pH смеси в стерилизованной пробирке после добавления 900 мкл каждого из химических растворов 1-3.
[0033]
[Таблица 1]
Химический раствор
Параметры
Концентрация (частей на миллион)
1200
500
300
200
100
50
25
10
5
2,5
1
0,5
0,25
0,1
Химический раствор 1
pH
7,0
7,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
Зооспоры
-
-
-
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
+
Мутность
-
-
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Химический раствор 2
pH
3,0
4,0
4,5
4,5
5,0
5,0
5,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
Зооспоры
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Мутность
-
-
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Химический раствор 3
pH
7,0
7,0
6,5
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
Зооспоры
-
-
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
+
+
Мутность
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Химический раствор 4
Зооспоры
-
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
+
+
+
Мутность
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Стерилизованная вода(сравнительный раствор)
Зооспоры
+
Мутность
+
[0034]
[Таблица 2]
Химический раствор
Параметры
Концентрация (частей на миллион)
1200
500
300
200
100
50
25
10
5
2,5
1
0,5
0,25
0,1
Химический раствор 1
pH
7,0
7,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
Зооспоры
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
+
+
+
Мутность
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
+
+
+
+
Химический раствор 2
pH
3,0
4,0
4,5
4,5
5,0
5,0
5,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
Зооспоры
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
+
Мутность
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Химический раствор 3
pH
7,0
7,0
6,5
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
6,0
Зооспоры
-
-
-
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
+
Мутность
-
-
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Химический раствор 4
Зооспоры
-
-
-
-
-
-
-
+
+
+
+
+
+
+
Мутность
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Стерилизованная вода(сравнительный раствор)
Зооспоры
+
Мутность
+
[0035] Как можно видеть в таблице 1, в случае продолжительности сенсибилизации, составляющей 30 минут, не наблюдались ни зооспоры, ни “мутность”, когда концентрация диоксида хлора в химических растворах 1 и 2 составляла 300 частей на миллион или выше, и когда концентрация диоксида хлора в химическом растворе 3 составляла 1200 частей на миллион или выше. С другой стороны, в случае химического раствора 4 наблюдалась “мутность”, даже когда концентрация бронопола составляла 1200 частей на миллион.
[0036] Как можно видеть в таблице 2, в случае продолжительности сенсибилизации, составляющей 60 минут, не наблюдались ни зооспоры, ни “мутность”, когда концентрация диоксида хлора составляла 2,5 частей на миллион или выше, только при использовании химического раствора 1.
[0037] Таким образом, по результатам эксперимента 2, в котором продолжительность сенсибилизации составляла 60 минут, было подтверждено, что когда не используется органическая или неорганическая кислота, минимальная смертельная для водяной плесени рода Saprolegnia концентрация хлорита (хлорита натрия) составляла 2,5 частей на миллион. Стандартное значение pH водопроводной воды составляет от 5,8 до 8,6. Кроме того, когда значение pH смеси в стерилизованной пробирке после добавления 900 мкл химического раствора было доведено до 5,5 и 8,5, получались такие же результаты, как в экспериментах 1 и 2.
[0038] С другой стороны, в случае бронопола, который представляет собой единственный химический реагент, признанный в Японии в качестве эффективного средства для профилактики заболевания водяной плесенью в рыбоводческих хозяйствах, возникновение “мутности” невозможно предотвратить посредством сенсибилизации в течение 60 минут даже при высокой концентрации, составляющей 1200 частей на миллион. “Мутность” вызывают колонии водяной плесени. Таким образом, по результатам экспериментов 1 и 2 было подтверждено, что хлорит (хлорит натрия) производил превосходное стерилизующее воздействие на водяную плесень в значительно меньших концентрациях по сравнению с бронополом.
[0039] Когда используется бронопол, его максимальная предельная концентрация составляет 100 частей на миллион. По результатам экспериментов 1 и 2 было подтверждено, что когда бронопол используется в такой концентрация, он эффективно уничтожает зооспоры водяной плесени, но не производит никакого воздействия, снижающего “мутность”. Кроме того, “мутность” невозможно снижать, даже когда концентрация бронопола увеличивалась до высокого уровня, превышающего максимальную предельную концентрацию в 10 раз или более.
[0040] Препарат под товарным знаком Pyceze имеется в продаже в однолитровых упаковках в форме раствора, содержащего 50 мас.% бронопола в качестве активного ингредиента, и его стоимость составляет приблизительно 18 иен/л (0,15 долл. США/л) при разбавлении до концентрации бронопола, составляющей 1200 частей на миллион. С другой стороны, стоимость водного раствора хлорита натрия в концентрации, соответствующей 2,5 частям на миллион диоксида хлора, составляет 0,055 иен/л (0,00047 долл. США/л). Таким образом, способ согласно настоящему изобретению делает возможным эффективную борьбу с заболеванием водяной плесенью и дезинфекцию рыбьей икры при стоимости, составляющей менее чем 1/300 от стоимости использования бронопола. Кроме того, не требуется разбавление перед выпуском воды, используемой для рыбоводства, что дополнительно повышает экономичность и эффективность борьбы с заболеванием водяной плесенью и дезинфекции рыбьей икры.
[0041] Концентрация хлорита должна составлять 2,5 части на миллион или выше в пересчете на диоксид хлора, и продолжительность сенсибилизации должна составлять 60 минут или более. Однако, например, когда зооспоры водяной плесени присутствуют в большом количестве, оказывается предпочтительным увеличение концентрации диоксида хлора до более высокого уровня и продолжительности сенсибилизации до 60 минут или более. Если концентрация диоксида хлора в воде для рыбоводства чрезмерно повышается, увеличиваются расходы на химические реагенты, и возникает риск неблагоприятного воздействия на выращиваемую рыбу или рыбью икру. По этой причине концентрация хлорита в воде для рыбоводства на практике составляет 200 частей на миллион или ниже в пересчете на эффективный диоксид хлора. Стоимость доведения концентрации диоксида хлора до 200 частей на миллион составляет 4,4 иен/л (0,037 долл. США/л), что составляет приблизительно 1/4 от 18 иен/л (0,15 долл. США/л), т.е. приблизительной стоимости доведения концентрации бронопола до 1200 частей на миллион.
[0042] Когда применяется хлорит (диоксид хлора), продолжительность сенсибилизации должна составлять 60 минут или более. Когда продолжительность сенсибилизации дополнительно увеличивается, можно ожидать, что стерилизующее воздействие на водяную плесень будет получено даже при меньшей концентрации диоксида хлора.
[0043] Здесь химические растворы 2 и 3 также содержат диоксид хлора в такой же концентрации, как химический раствор 1. Однако, как представлено в таблице 2, минимальная смертельная для зооспор концентрация диоксида хлора в качестве активного ингредиента составляла 100 частей на миллион в случае химического раствора 2 и 300 частей на миллион в случае химического раствора 3. Таким образом, было подтверждено, что, хотя химические растворы 2 и 3 также содержали диоксид хлора как активный ингредиент, который производит стерилизующее воздействие на водяную плесень, химические растворы 2 и 3 оказались менее эффективными, чем химический раствор 1. Химический раствор 1 содержит только хлорит натрия, а в химических растворах 2 и 3 содержатся также яблочная кислота (органическая кислота) и хлористоводородная кислота (неорганическая кислота) соответственно. В технике является общеизвестным, что стабилизированный диоксид хлора, такой как хлорит натрия, используется вместе с органической или неорганической кислотой в качестве активирующего компонента, чтобы производить хлористую кислоту, хлорит-ион и диоксид хлора таким образом, что проявляется стерилизующее воздействие. Однако неожиданно было впервые подтверждено, что когда органическая или неорганическая кислота не использовалась, как в случае химического раствора 1, стабилизированный диоксид хлора в меньшей концентрации производил стерилизующее воздействие на водяную плесень.
[0044] Считается, что хлорит натрия необходимо использовать вместе с кислотой, получая подкисленный раствор хлорита натрия, имеющий pH от 2,3 до 2,9 и производящий достаточное стерилизующее воздействие для использования в качестве пищевой добавки (Министерство здравоохранения, труда и социального обеспечения Японии, Рабочая группа по пищевым добавкам, подкомитет по пищевой санитарии, Совет по фармацевтической продукции и пищевой санитарии, постановление 1-2 от 03 апреля 2013 г.). Кроме того, водный раствор хлорита натрия является щелочным, и считается, что чистый хлорит натрия имеет невысокую стерилизующую способность (Japan Food Journal (Японский пищевой журнал) от 26 мая 2014 г.). Однако по результатам экспериментов 1 и 2 было подтверждено, что хлорит натрия производил превосходное стерилизующее воздействие на водяную плесень без использования органической или неорганической кислоты.
[0045] Минимальная смертельная для зооспор концентрация химического раствора 1 составляла 300 частей на миллион в эксперименте 1, в котором продолжительность сенсибилизации составляла 30 минут, но составляла 2,5 части на миллион в эксперименте 2, в котором продолжительность сенсибилизации составляла 60 минут. Таким образом, было подтверждено, что согласно настоящему изобретению, когда продолжительность сенсибилизации составляла 60 минут или более, производилось неожиданное воздействие, и в результате этого минимальная смертельная для зооспор концентрация уменьшалась до уровня 1/120 или ниже по сравнению со случаем, где продолжительность сенсибилизации составляла 30 минут, когда применялся препарат бронопола под товарным знаком Pyceze.
Промышленная применимость
[0046] Настоящее изобретение является пригодным для применения в технической области рыбоводства или рыболовства.