Особенности фолликулогенеза у свиней в период пубертата

ОСОБЕННОСТИ ФОЛЛИКУЛОГЕНЕЗА У СВИНЕЙ В ПЕРИОД ПУБЕРТАТА

О.Б. Сеин, Д.О. Сеин, М.С. Кононова

Аннотация. В статье приводятся результаты морфологического исследования яичников у ремонтных свинок крупной белой породы в период полового созревания. Показано, что во время пубертата в яичниках свиней происходят существенные структурные изменения, которые с увеличением возраста приобретают стабильный характер. Полученные данные рекомендуется учитывать при разработке новых способов и средств биологической стимуляции репродуктивной функции у свиноматок.

Ключевые слова: атрезия, гистосрезы, гранулеза, пубертат, ремонтные свинки, тека, фолликул, фолликулогенез, яичник.

Половое созревание представляет собой период онтогенетического развития особи, характеризующийся наиболее выраженными темпами созревания репродуктивного комплекса. Начинается этот период с определенной стадии постнатального развития и оканчивается к моменту достижения особью состояния, когда она становится способной к воспроизведению себе подобных. Одним из наиболее отчетливых морфологических корреляторов полового созревания являются активный рост гонад, который у самок тесным образом связан с фоллику-логенезом.

Фолликулогенез - поступательное развитие фолликулов от стадии примордиальных до пре-овуляторных (граафовых пузырьков), играет важную роль не только в росте и развитии яичников, от него зависит формирование гормонального статуса и воспроизводительная функция самки в целом.

Исследованию фолликулогенеза у свиней посвящено много работ, однако они носят преимущественно фрагментарный характер и не охватывают все возрастные периоды. В нашей работе были изучены особенности фолликулогенеза у свиней в период пубертата - период, когда у самки формируются основные репродуктивные качества.

Эксперименты выполнялись на ремонтных свинках крупной белой породы 5-, 6- и 10- ме-

сячного возраста. Отбор яичников у животных проводили при внутрихозяйственном убое и убое в условиях мясокомбината. После визуального обследования яичников, подсчета фолликулов, желтых тел и морфометрических измерений их подвергали гистологическому анализу.

Гистологические исследования осуществляли по общепринятой схеме: фиксация материала, обезвоживание в спиртах возрастающей концентрации, заливка в парафин, приготовление парафиновых срезов на санном микротоме, окрашивание препаратов (Г. А. Меркулов, 1969; Д.С. Саркисов и др., 1996). Фиксировали материал в 10% нейтральном формалине. Окрашивали гистосрезы гематоксилин-эозином. Для морфометрических измерений применяли винтовой окуляр-микрометр. Морфометрией определяли: количество первичных фолликулов в одном поле зрения микроскопа; вторичных, третичных фолликулов и желтых тел в 1 см2 гистосреза; толщину гранулезы и внутренней теки зрелых фолликулов; диаметр зрелых фолликулов и желтых тел. С использованием микроскопа МБП - 15 и цифровой фотокамеры с гистологических препаратов делали фотоснимки. Гистологические исследования проводили на кафедре терапии и акушерства Курской ГСХА и кафедре гистологии Курского ГМУ.

Информация об авторах

Сеин Олег Борисович, доктор биологических наук, профессор, декан факультета ветеринарной медицины, заведующий кафедрой терапии и акушерства Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова, тел. (4712) 53-14-04, E-mail: academy@kgsha.ru.

Сеин Дмитрий Олегович, кандидат биологических наук, ассистент кафедры терапии и акушерства Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова, тел. (4712) 53-14-04, E-mail: academy@kgsha.ru.

Кононова Мария Сергеевна, аспирант кафедры терапии и акушерства Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И. Иванова, тел. (4712) 53-14-04, E-mail: academy@kgsha.ru.

Визуальная оценка яичников у неполовозрелых свинок показала, что у 5- 6- месячных свинок органы представляют собой образования овальной формы со слабо выраженной бугристой поверхностью, что связано с формированием растущих фолликулов (рисунок 1.). Под оболочкой яичников находились компактно расположенные группы первичных фолликулов, количество которых колебалось в пределах

30.5 ±3,5-40,7 ±6,0.

Вторичные фолликулы представляли собой преимущественно округлые образования с яйцеклеткой в центре, окруженной 2-6 слоями фолликулярных кубических клеток с темно-фиолетовыми крупными округлыми ядрами, которые вплотную прилегали к овоциту.

Количество третичных фолликулов в 1 см2 гистосреза составляло 5,5 ±1,8 - 8,7 ± 1,4, а толщина клеток гранулезы - 48,9 ± 8,6 - 59,5 ± 7,3 мкм (рисунок 2.).

Часть третичных фолликулов находилась на различной стадии атрезии. Количество атрети-ческих фолликулов в 1 см2 гистосреза составляло 19,5 ± 6,7 - 25,0 ± 7,3. При этом атретиче-ские тела имели неправильную форму, окрашивались в бледно-фиолетовый цвет, клетки фолликулярного эпителия были рассеяны, яйцеклетка была не изменена, или представлена образованием неправильной формы.

У половозрелых 6- месячных свинок, по сравнению с неполовозрелыми животными-аналогами, яичники имели большую массу и линейные параметры. В связи с увеличением количества третичных фолликулов они приобретали вид «тутовой ягоды». В тканях яичников преобладала доля коркового вещества по сравнению с мозговым веществом.

Первичные фолликулы располагались небольшими группами с хорошо выраженными промежутками между ними. Их количество в 1 поле зрения микроскопа составляло 37,5 ± 3,8 -

51.5 ± 7,3. Количество вторичных фолликулов в

1 см2 гистосреза было в пределах 24,0 ± 4,5 -

33.5 ± 5,6. Третичные фолликулы находились на разной стадии развития. При этом более мелкие располагались в глубине коркового вещества, имели сформированную теку и небольшую полость. Другие, более крупные и с хорошо выраженной полостью, выступали на поверхности яичника. Яйцеклетки в таких фолликулах хорошо просматривались. Количество третичных фолликулов в яичнике составляло

7.5 ± 2,3-11,4 ±3,0. Толщина клеток гранулезы достигала 50,5 ± 8,7 - 68,7 ± 9,3 мкм. Как и у неполовозрелых 5 - 6 - месячных свинок у половозрелых животных этого возраста в яичниках обнаруживались атретические фолликулы,

количество которых находилось в пределах

21.5 ±5,4-30,8 ±7,2.

При достижении свинками возраста 10 месяцев яичники приобретали вид виноградной грозди. На его поверхности хорошо просматривались преовуляторные фолликулы и желтые тела прошлого полового цикла (рисунок 3.).

Анализ гистологических препаратов у свинок достигших 10-месячного возраста показал, что объем и строение коркового вещества их яичников претерпевали определенные изменения В корковом веществе увеличивалось количество половых клеток, в связи с этим активизировались процессы фолликулогенеза, гормонпродуцирую-щие структуры яичника становились более выраженными. Количество первичных фолликулов составляло 37,5 ± 4,0 - 42,0 ± 5,2, вторичных фолликулов - 25,6 ± 3,7 - 30,4 ±5,5, третичных фолликулов - 10,0 ± 2,4 — 13,5 ± 2,0, толщина гранулезы -

56.5 ± 6,8 - 61,8 ± 5,7 мкм, количество атретических фолликулов - 30,5 ± 4,0 - 35,6 ± 3,7.

В ходе проведения гистологических исследований нами была выявлена характерная особенность - у всех подопытных животных в яичниках обнаруживались кистозные перерождения фолликулов (рисунок 4.). Однако у 10- месячных свинок этот процесс встречался значительно реже, чем у животных 5-6- месячного возраста.

Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что фол-ликулогенез у свиней в период формирования половой функции претерпевает определенные изменения, которые, прежде всего, сопровождаются характерными перестройками гистологической структуры яичников. Количественные и морфометрические показатели, полученные нами у свинок во время пубертата, имели более широкие границы колебаний, что говорит о нестабильности интерьерных процессов протекающих в яичниках в этот возрастной период. В то же время у 10-месячных свинок эти показатели приобретали стабильный характер, что указывает на готовность яичников к функциональной активности. Несомненно, все изменения, выявленные нами в яичниках свинок в период формирования половой функции, тесно связаны с эндокринной системой, которая в это время находится в состоянии активной функциональной деятельности. При созревании гипоталамуса начинает продуцироваться люлибе-рин (рилизинг-гормон ЛГ), устанавливается равновесие между фолликулостимулирующим (ФСГ) и лютеинизирующим (ЛГ) гормонами. Половые циклы становятся у свинок регулярными, повторяются через относительно равные промежутки времени и их продолжительность находится в пределах 19-22 суток.

Рисунок 1 - Яичник неполовозрелой свинки, возраст 5 месяцев. На поверхности просматриваются растущие фолликулы в виде уплощенных стекловидных точек

Рисунок 3 - Яичник половозрелой свинки, возраст 10 месяцев. Просматриваются пре-овуляторные фолликулы и желтые тела прошлого полового цикла

Данное заключение подтверждает ранее проведенные нами исследования гонадотропных и половых гормонов в крови ремонтных свинок (О.Б. Се-ин, 1993; Д.О. Сеин, 2005). Было установлено, что динамика гормонов в период становления половой функции у свинок имеет разнонаправленный характер. С наступлением ритмичной половой цикличности она приобретает определенную закономерность, которая выражается для ЛГ высоким содержанием в начале половой охоты и более низкой концентрацией на 2 - 11 сутки цикла; для ФСГ -подъемом на 2-е сутки и низким содержанием в последующие сутки; для эстрадиола-17р - высоким уровнем в начале половой охоты, на 20-е сутки и более низкой концентрацией на 2 - 16- е сутки цик-

Рисунок 2 - Яичник неполовозрелой свинки, возраст 5 месяцев. Фрагмент третичного фолликула с яйцеклеткой окруженной клетками фолликулярного эпителия. Окраска гематоксилин-эозином, ув.

Рисунок 4 - Яичник половозрелой свинки, возраст 10 месяцев. На гистосрезе видны третичные фолликулы с распадающейся гранулезой и фолликулярные кисты

ла; для прогестерона - минимальным содержанием во время охоты и характерным «пиком» на 11-е сутки цикла.

Полученные нами результаты исследования особенностей фолликулогенеза у свиней в период пубертата могут быть использованы при разработке новых способов и средств биологической стимуляции репродуктивной функции свиноматок.

Список использованных источников

1 Сеин О.Б. Становление половой функции у свиней / О.Б. Сеин // Научно-технический бюл. ВИЖ. - 1989.Вып.95. - С. 53 - 57.

2 Сеин ДО. Морфофункциональное состояние аденогипофиза у ремонтных свинок в период становления половой функции.