СПОСОБ МОДУЛИРОВАНИЯ АНТАГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ МОНОКЛОНАЛЬНОГО АНТИТЕЛА

1. Способ повышения антагонистической активности моноклонального антитела, направленного против специфической молекулы-мишени, или его двухвалентного функционального фрагмента или производного, при этом указанное антитело способно ингибировать одну или более биологическую активность указанной молекулы-мишени, где указанный способ включает этап реконфигурации шарнирной области, заключающийся в модификации аминокислотной последовательности указанной шарнирной области путем удаления, добавления или замены по меньшей мере одной аминокислоты.
2. Способ по п.1, где указанная модификация выбрана среди:
i) удаления по меньшей мере одной аминокислоты из аминокислотной последовательности указанной шарнирной области, и/или
ii) добавления по меньшей мере одного дисульфидного мостика в указанную шарнирную область.
3. Способ по п.2, где модификация i) заключается в удалении не более 2, 3 или 4 аминокислот из аминокислотной последовательности указанной шарнирной области.
4. Способ по п.1, где указанное моноклональное антитело является двухвалентным антителом.
5. Способ по п.1, где указанное моноклональное антитело является химерным антителом.
6. Способ по п.1, где указанное моноклональное антитело является гуманизированным антителом.
7. Способ по п.1, где указанное моноклональное антитело является человеческим антителом.
8. Способ по п.1, где указанное моноклональное антитело представляет собой IgG1.
9. Способ по п.1, где указанная молекула-мишень является трансмембранным рецептором.
10. Способ по п.9, где указанный трансмембранный рецептор выбран из группы, состоящей из тирозинкиназных рецепторов, тетраспанина и GPCR (рецепторов, связанных с G белком).
11. Способ по п.1, где указанная модификация заключается по меньшей мере в удалении аминокислоты, выбранной среди аминокислоты в позиции Н1, H2, Н3, Н5, Н6, Н7, Н8, Н9, Н11, Н12 или Н14.
12. Способ по п.11, где указанная модификация заключается по меньшей мере в удалении аминокислоты в «верхней шарнирной» области, расположенной между позициями Н1 и Н9 аминокислотной последовательности указанной шарнирной области.
13. Способ по п.1, где указанная модификация заключается в удалении по меньшей мере одного цистеина из «верхней шарнирной» области, предпочтительно расположенного в позиции Н4.
14. Способ по п.1, где указанная модификация заключается во введении по меньшей мере одного цистеина в «верхнюю шарнирную» область.
15. Способ по п.14, где указанная модификация заключается в замене треонина в позиции Н7 в «верхней шарнирной» области на цистеин.
16. Способ по п.14, где указанная модификация заключается в замене лизина в позиции H6 в «верхней шарнирной» области на цистеин.
17. Способ по п.14, где указанная модификация заключается в замене пролина в позиции Н1 в «верхней шарнирной» области на цистеин.
18. Способ по п.14, где указанная модификация заключается в замене лизина в позиции Н2 в «верхней шарнирной» области на цистеин.
19. Способ по п.14, где указанная модификация заключается в замене серина в позиции Н3 в «верхней шарнирной» области на цистеин.
20. Способ по п.14, где указанная модификация заключается в замене аспартата в позиции Н5 в «верхней шарнирной» области на цистеин.
21. Способ по п.14, где указанная модификация заключается в замене гистидина в позиции Н8 в «верхней шарнирной» области на цистеин.
22. Способ по п.14, где указанная модификация заключается в замене треонина в позиции Н9 в «верхней шарнирной» области на цистеин.
23. Способ по п.1, где указанная модификация заключается в замене аминокислот Н1-Н14 из шарнирной области IgG1 на аминокислоты Н1-Н14 из шарнирной области IgG2, где указанное моноклональное антитело, антагонистическую активность которого нужно улучшить, представляет собой IgG1.
24. Способ скрининга антагонистического моноклонального антитела, направленного против специфической молекулы-мишени, или его двухвалентного функционального фрагмента или производного, при этом указанное антитело способно ингибировать одну или более биологическую активность указанной молекулы-мишени, где указанный способ включает этапы:
(а) выбора исходного антитела с исходным уровнем ингибирования указанной одной или более биологической активности указанной молекулы-мишени,
(б) изменения аминокислотной последовательности шарнирной области указанного исходного антитела с помощью способа по п.1,
(в) оценки модифицированного антитела этапа (б) в отношении его способности ингибировать указанную одну или более биологическую активность указанной молекулы-мишени и
(г) выбор как положительный результат антитела этапа (в) с уровнем ингибирования одной или более биологической активности указанной молекулы-мишени более высоким, чем исходный уровень указанного ингибирования.
25. Моноклональное антитело, направленное против специфической молекулы-мишени, или его двухвалентный функциональный фрагмент или производное, получаемое с помощью способа по п.1, характеризующееся тем, что оно включает аминокислотную последовательность шарнирной области, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID №2 (PKSCGCKPCICT), SEQ ID №3 (PKSCGCKPCICP), SEQ ID №4 (PRDCGCKPCPPCP), SEQ ID №5 (PRDCGCHTCPPCP), SEQ ID №6 (PKSCDCHCPPCP), SEQ ID №22 (CKSCDKTHTCPPCP), SEQ ID №23 (PCSCDKTHTCPPCP), SEQ ID №24 (PKCCDKTHTCPPCP), SEQ ID №25 (PKSCCKTHTCPPCP), SEQ ID №26 (PKSCDCTHTCPPCP) SEQ ID №28 (PKSCDKTCTCPPCP), SEQ ID №29 (PKSCDKTHCCPPCP), SEQ ID №33 (PSCDKTHTCPPCP), SEQ ID №35 (PKSCDKTHCPPCP), SEQ ID №36 (KCDKTHTCPPCP), SEQ ID №37 (PSCKTHTCPPCP), SEQ ID №38 (PKSCDTHCPPCP), SEQ ID №39 (PKSCTHTCPPCP), SEQ ID №41 (PKSCDKTHCPPC), SEQ ID №42 (PKSCDCHTCPPCP), SEQ ID №43 (PKSCDCTHCPPCP), SEQ ID №44 (PCSCKHTCPPCP), SEQ ID №45 (PSCCTHTCPPCP), SEQ ID №46 (PSCDKHCCPPCP), SEQ ID №47 (PKSTHTCPPCP), SEQ ID №48 (PKSCTCPPCP) или SEQ ID №49 (PKSCDKCVECPPCP).
26. Моноклональное антитело, характеризующееся тем, что оно включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID SEQ ID №2 (PKSCGCKPCICT), SEQ ID №3 (PKSCGCKPCICP), SEQ ID №4 (PRDCGCKPCPPCP), SEQ ID №5 (PRDCGCHTCPPCP), SEQ ID №6 (PKSCDCHCPPCP), SEQ ID №22 (CKSCDKTHTCPPCP), SEQ ID №23 (PCSCDKTHTCPPCP), SEQ ID №24 (PKCCDKTHTCPPCP), SEQ ID №25 (PKSCCKTHTCPPCP), SEQ ID №26 (PKSCDCTHTCPPCP) SEQ ID №28 (PKSCDKTCTCPPCP), SEQ ID №29 (PKSCDKTHCCPPCP), SEQ ID №33 (PSCDKTHTCPPCP), SEQ ID №35 (PKSCDKTHCPPCP), SEQ ID №36 (KCDKTHTCPPCP), SEQ ID №37 (PSCKTHTCPPCP), SEQ ID №38 (PKSCDTHCPPCP), SEQ ID №39 (PKSCTHTCPPCP), SEQ ID №41 (PKSCDKTHCPPC), SEQ ID №42 (PKSCDCHTCPPCP), SEQ ID №43 (PKSCDCTHCPPCP), SEQ ID №44 (PCSCKHTCPPCP), SEQ ID №45 (PSCCTHTCPPCP), SEQ ID №46 (PSCDKHCCPPCP), SEQ ID №47 (PKSTHTCPPCP), SEQ ID №48 (PKSCTCPPCP) или SEQ ID №49 (PKSCDKCVECPPCP).
27. Моноклинальное антитела по п.25 или 26, где указанное антитело является человеческим антителом.
28. Моноклональное антитела по п.25 или 26, где указанное антитело представляет собой антитело IgG1.
29. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая моноклональное антитело по пп.25-28.
30. Выделенная нуклеиновая кислота по п.29, где указанная нуклеиновая кислота содержит нуклеиновую последовательность, выбранную из группы, включающей с SEQ ID №16 по SEQ ID №20 и с SEQ ID №50 по SEQ ID №55, SEQ ID №56 и 57, SEQ ID №61, SEQ ID №63 по SEQ ID №67 и с SEQ ID №69 по SEQ ID №77.