СОЕДИНЕНИЯ
COMPOUNDS

Родственная заявка
По настоящей заявке испрашивается приоритет по международной заявке No. PCT/CN2015/084893, поданной 23 июля 2015 года, в Государственное Ведомство по интеллектуальной собственности Народной Республики Китай, полное содержание которой включено в настоящее описание в качестве ссылки.
Область техники
Настоящее изобретение относится к новым соединениям, которые ингибируют активность киназы LRRK2, к способам их получения, композициям, содержащим их, и их использованию при лечении заболеваний, характеризующихся активностью киназы LRRK2, например, болезни Паркинсона, бокового амиотрофического склероза (ALS) и болезни Альцгеймера.
Уровень техники
см.
см.
см.
см.
Болезнь Паркинсона (PD) представляет собой нейродегенеративное нарушение, характеризующееся селективной дегенерацией и гибелью клеток дофаминергических нейронов в существенной области черной субстанции головного мозга. Болезнь Паркинсона обычно считалась спорадической и неизвестной этиологии, но за последние 15 лет произошло важное развитие понимания генетической основы этого заболевания и связанных с ним патогенных механизмов. Одной из областей развития является понимание белка богатой лейцином повторной киназы 2 (LRRK2). Ряд миссенс-мутаций в гене LRRK2 был тесно связан с аутосомно-доминантной болезнью Паркинсона в семейных исследованиях ( WO2006068492 и WO2006045392; Trinh and Farrer 2013, Nature Reviews in Neurology 9: 445-454; Paisan-Ruiz et al., 2013, J. Parkinson's Disease 3: 85-103). Мутация G2019S в LRRK2 является наиболее частой миссенс-мутацией и связана с клиническим фенотипом, который очень похож на спорадическую болезнь Паркинсона. Мутация LRRK2 G2019S также присутствует примерно в 1,5% случаев спорадической болезни Паркинсона ( Gilks et al., 2005, Lancet, 365: 415-416). В дополнение к известным патогенным кодирующим мутациям в LRRK2 были идентифицированы дополнительные варианты кодирования аминокислот LRRK2, которые также связаны с риском развития болезни Паркинсона ( Ross et al., 2011 Lancet Neurology 10: 898-908). Кроме того, полногеномный поиск ассоциаций (GWAS) идентифицировал LRRK2 как локус восприимчивости болезни Паркинсона, что указывает на то, что LRRK2 может также иметь отношение к спорадическим случаям болезни Паркинсона без мутаций, которые вызывают аминокислотные замены в белке LRRK2. ( Satake et al., 2009 Nature Genetics 41:1303-1307; Simon-Sanchez et al 2009 Nature Genetics 41: 1308-1312)
см.
см.
см.
см.
LRRK2 является членом семейства белков ROCO, и все члены этого семейства имеют пять консервативных доменов. Наиболее распространенная патогенная мутация G2019S встречается в высококонсервативном домене киназы LRRK2. Эта мутация приводит к увеличению активности киназы LRRK2 в ферментных анализах in vitro рекомбинантных белков LRRK2 ( Jaleel et al., 2007, Biochem J, 405: 307-317) и в белках LRRK2, очищенных от клеток, полученных от пациентов с G2019S PD ( Dzamko et al., 2010 Biochem. J. 430:405-413). Было показано, что менее частая патогенная мутация LRRK2, которая дает аминокислотную замену у другого остатка, R1441, повышает активность киназы LRRK2, уменьшая скорость гидролиза GTP GTPазным доменом LRRK2 ( Guo et al., 2007 Exp Cell Res. 313: 3658-3670; West et al., 2007 Hum. Mol Gen. 16: 223-232). Таким образом, данные свидетельствуют о том, что активность киназы и GTPазы LRRK2 важны для патогенеза и что домен киназы LRRK2 может регулировать общую функцию LRRK2 ( Cookson, 2010 Nat. Rev. Neurosci. 11: 791-797).
см.
см.
Имеются данные, свидетельствующие о том, что повышенная активность киназы LRRK2 связана с нейрональной токсичностью в моделях культуры клеток ( Smith et al., 2006 Nature Neuroscience 9: 1231-1233) и соединения ингибиторов киназы защищают от опосредованной LRRK2 гибели клеток ( Lee et al., 2010 Nat. Med. 16: 998-1000).
см.
см.
Было обнаружено, что индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (iPSC), полученные от пациентов с болезнью Паркинсона LRRK2 G2019S, проявляют дефекты в росте нейритов и повышенную восприимчивость к ротенону, которые могут быть улучшены либо генетической коррекцией мутации G2019S, либо обработкой клеток ингибиторами малых молекул активности LRRK2-киназы ( Reinhardt et al., 2013 Cell Stem Cell 12: 354-367). Увеличенное митохондриальное повреждение, связанное с мутацией LRRK2 G2019S в iSPC, также блокируется генетической коррекцией мутации G2019S ( Sanders et al., 2013 Neurobiol. Dis. 62: 381-386).
см.
см.
см.
см.
см.
см.
см.
Дополнительные данные связывают функцию и дисфункцию LRRK2 с аутофагиально-лизосомными путями ( Manzoni and Lewis, 2013 Faseb J. 27:3234-3429). Белки LRRK2 дают дефекты в шаперон-опосредованной аутофагии, которые отрицательно влияют на способность клеток разрушать альфа-синуклеин (Orenstein et al., 2013 Nature Neurosci. 16 394-406). В других моделях клеток было отмечено, что селективные ингибиторы LRRK2 стимулируют макроавтофагию ( Manzoni et al., 2013 BBA Mol. Cell Res. 1833: 2900-2910). Эти данные свидетельствуют о том, что ингибиторы малых молекул активности киназы LRRK2 могут быть полезны при лечении заболеваний, характеризующихся дефектами клеточного протеостаза, которые возникают в результате аберрантных путей аутофагии/лизосомальной деградации, включая формы болезни Паркинсона, связанные с мутациями GBA ( Swan and Saunders-Pullman 2013 Curr. Neurol. Neurosci Rep. 13: 368), другие альфа-синуклеинопатии, таупатии, болезнь Альцгеймера (Li et al., 2010 Neurodegen. Dis. 7: 265-271) и другие нейродегенеративные заболевания ( Nixon 2013 Nat. Med. 19: 983-997) и болезнь Гоше ( Westbroek et al., 2011 Trends. Mol. Med. 17: 485-493). В качестве промоторов аутофагии ингибиторы малых молекул киназы LRRK2 также могут быть полезны при лечении других заболеваний, включая диабет, ожирение, болезнь двигательного нейрона, эпилепсию и некоторые виды рака (см. Rubinsztein et al., 2012 Nat.Rev. Drug Discovery 11: 709-730), заболевание легких, такие как хроническая обструктивная болезнь легких, идиопатический легочный фиброз (см. Araya et al., 2013 Intern. Med. 52: 2295-2303) и аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка (см. Martinez et al., 2016 Nature 533: 115-119). В качестве промоторов аутофагии и фагоцитарных процессов ингибиторы малых молекул LRRK2-киназы могут также быть полезными в увеличении ответов организма при лечении ряда внутриклеточных бактериальных инфекций, паразитарных инфекций и вирусных инфекций, включая такие заболевания, как туберкулез (см. Rubinsztein et al., 2012 Nat.Rev. Drug Discovery 11: 709-730; Araya et al., 2013 Intern. Med. 52: 2295-2303; Gutierrez, Biochemical Society Conference; Leucine rich repeat kinase 2: ten years along the road to therapeutic intervention, Henley Business School, UK 12 July 2016), ВИЧ, вирус Западного Нила и вирус чикунгунья (см. Shoji-Kawata et al., 2013 Nature 494: 201-206). Ингибиторы LRRK2 могут быть полезны при лечении таких заболеваний отдельно или в комбинации с лекарственными средствами, которые непосредственно нацелены на возбудитель инфекции. Кроме того, значительно повышенные уровни мРНК LRRK2 наблюдались также в фибробластах пациентов с болезнью Нимана-Пика типа С (NPC) по сравнению с фибробластами нормальных субъектов, что указывает на то, что аберрантная функция LRRK2 может играть роль в лизосомных болезнях ( Reddy et al., 2006 PLOS One 1 (1):e19 doi: 10.1371/journal.pone.0000019 - supporting information Dataset S1). Это наблюдение позволяет предположить, что ингибиторы LRRK2 могут быть полезны для лечения NPC.
см.
см.
см.
см.
см.
см.
Сообщалось также, что PD-ассоциированная мутантная форма G2019S L2R122 усиливает фосфорилирование тубулин-ассоциированного тау-белка ( Kawakami et al., 2012 PLoS ONE 7: e30834, doi 10,1371), и были предложены модели заболевания, в которых LRRK2 действует против хода транскрипции от патогенного воздействия тау-белка и альфа-синуклеина ( Taymans & Cookson, 2010, BioEssays 32: 227-235). В подтверждение этого, экспрессия LRRK2 была связана с повышенной агрегацией нерастворимого Тау и повышенным фосфорилированием Тау в модели трансгенных мышей ( Bailey et al., 2013 Acta Neuropath. 126:809-827). Сообщается, что сверхэкспрессия PD патогенного мутантного белка LRRK2 R1441G вызывает симптомы болезни Паркинсона и гиперфосфорилирование Тау в моделях трансгенных мышей ( Li, Y. et al. 2009, Nature Neuroscience 12: 826-828). Поэтому эти данные дают основание предполагать, что ингибиторы LRRK2 каталитической активности киназы могут быть полезны для лечения таупатий, характеризующихся гиперфосфорилированием тау-белка, такими как болезнь аргирофильных зерен, болезнь Пика, кортикобазальная дегенерация, прогрессирующий надъядерный паралич и семейная лобно-височная деменция и паркинсонизм, связанный с хромосомой 17 (FTDP-17) ( Goedert, M and Jakes, R (2005) Biochemica et Biophysica Acta 1739, 240-250). Кроме того, ингибиторы LRRK2 могут быть полезны при лечении других заболеваний, характеризующихся пониженными уровнями дофамина, такими как симптомы синдрома отмены/рецидива, связанные с лекарственной зависимостью ( Rothman et al., 2008, Prog. Brain Res, 172: 385).
см.
см.
см.
Другие исследования также показали, что сверхэкспрессия мутантной формы G2019S LRRK2 порождает дефекты в пролиферации и миграции нейропрогениторной клетки субвентикулярной зоны (SVZ) в моделях трансгенных мышей ( Winner et al., 2011 Neurobiol. Dis. 41:706-716) и уменьшает длину и ветвление нейритов моделей клеток культуры ( Dachsel et al., 2010 Parkinsonism & Related Disorders 16: 650-655). Кроме того, сообщалось, что агенты, которые способствуют пролиферации и миграции нейропрогениторной клетки SVZ, также улучшают неврологические последствия после ишемического поражения в моделях инсульта у грызунов ( Zhang et al., 2010 J. Neurosci. Res. 88: 3275-3281). Эти данные свидетельствуют о том, что соединения, которые ингибируют аберрантную активность LRRK2, могут быть полезны для лечения, предназначенного для стимулирования восстановления функций ЦНС после повреждения нейронов, таких как ишемический инсульт, травматическое повреждение головного мозга, повреждение спинного мозга.
см.
Также были идентифицированы мутации в LRRK2, которые клинически связаны с переходом от легких когнитивных нарушений (MCI) к болезни Альцгеймера ( WO2007149798). Эти данные свидетельствуют о том, что ингибиторы активности киназы LRRK2 могут быть полезными для лечения заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, другие виды деменции и родственные нейродегенеративные расстройства.
см.
Аберрантная регуляция нормальных белков LRRK2 также наблюдается в некоторых тканях заболеваний и моделях заболевания. Нормальные механизмы трансляционного контроля LRRK2 miR-205 нарушаются в некоторых случаях спорадической PD, где значительное снижение уровней miR-205 в образцах головного мозга с PD совпадает с повышенными уровнями белка LRRK2 в этих образцах ( Cho et al., (2013) Hum. Mol. Gen. 22: 608-620). Таким образом, ингибиторы LRRK2 могут использоваться для лечения пациентов со спорадической PD, которые имеют повышенные уровни нормальных белков LRRK2.
см.
В экспериментальной модели болезни Паркинсона на мартышках повышение мРНК LRRK2 наблюдается таким образом, что коррелирует с уровнем L-допа индуцированной дискинезии ( Hurley, M.J et al., 2007 Eur. J. Neurosci. 26: 171-177). Это говорит о том, что ингибиторы LRRK2 могут иметь полезность в улучшении таких дискинезий.
см.
Значительно повышенные уровни мРНК LRRK2 были зарегистрированы в биопсийных образцах мышц пациента с ALS ( Shtilbans et al., 2011 Amyotrophic Lateral Sclerosis 12: 250-256). Предполагается, что повышенные уровни активности LRRK2-киназы могут быть характерной особенностью ALS. Таким образом, это наблюдение показало, что ингибитор LRRK2 может быть полезен для лечения ALS.
см.
in vitro
см.
in vitro
Имеются также данные, свидетельствующие о том, что активность киназы LRRK2 может играть роль в опосредовании микроглиальных провоспалительных реакций ( Moehle et al., 2012, J. Neuroscience 32: 1602-1611). Это наблюдение указывает на возможную полезность ингибиторов LRRK2 для лечения аберрантных нейровоспалительных механизмов, способствующих целому ряду нейродегенеративных заболеваний, включая болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, ВИЧ-индуцированную деменцию, боковой амиотрофический склероз, ишемический инсульт, травматическое повреждение головного мозга и повреждение спинного мозга. Некоторые данные также свидетельствуют о том, что LRRK2 играет роль в регуляции дифференцировки нейрональных предшественников  ( Milosevic, J. et al., 2009 Mol. Neurodegen. 4: 25). Эти данные свидетельствуют о том, что ингибиторы LRRK2 могут быть полезными в получении нейрональных клеток-предшественников  для последующего терапевтического применения в клеточной терапии расстройств ЦНС.
см
см.
Сообщалось, что пациенты с болезнью Паркинсона, несущие мутацию G2019S LRRK2, демонстрируют повышенную частоту случаев рака, не относящегося к раку кожи, включая рак почки, рак молочной железы, рак легкого, рак предстательной железы, а также острый миелобластный лейкоз (AML). Поскольку имеются доказательства того, что мутация G2019S в LRRK2 повышает каталитическую активность киназного домена LRRK2, малые молекулы ингибиторы LRRK2 могут быть полезными при лечении рака, например, рака почки, рака молочной железы, рака легкого, рака предстательной железы (например, солидные опухоли) и рака крови (. AML; Saunders-Pullman et al., 2010, Movement Disorders, 25:2536-2541; Inzelberg et al., 2012 Neurology 78: 781-786). Амплификация и сверхэкспрессия LRRK2 также отмечались при папиллярной карциноме почки и тиреоидной карциноме, где кооперативность между LRRK2 и онкогеном MET может способствовать росту опухолевых клеток и выживанию ( Looyenga et al., 2011 PNAS 108: 1439-1444.)
см.
см.
Некоторые исследования показали генетическую связь распространенных вариантов LRRK2 с восприимчивостью к анкилозирующему спондилиту ( Danoy P, et al., 2010. PLoS Genet.; 6(12):e1001195; и лепрозной инфекции. ( Zhang FR, et al. 2009, N Engl J Med. 361:2609-18.) Эти данные свидетельствуют о том, что ингибиторы LRRK2 могут быть полезными при лечении анкилозирующего спондилита и лепрозной инфекции.
м.
см.
Мета-анализ трех полногеномных ассоциативных сканирований для болезни Крона выявил ряд локусов, связанных с этим заболеванием, включая локус, содержащий ген LRRK2 (с Barrett et al., 2008, Nature Genetics, 40: 955-962). Доказано также, что LRRK2 является геном-мишенью IFN-γ, который может быть вовлечен в сигнальные пути, относящиеся к патогенезу болезни Крона ( Gardet et al., 2010, J. Immunology, 185: 5577-5585). Эти данные свидетельствуют о том, что ингибиторы LRRK2 могут быть полезными при лечении болезни Крона.
см.
см.
см.
Как ген-мишень IFN-γ, LRRK2 также может играть роль в механизмах Т-клеток, которые лежат в основе других заболеваний иммунной системы, таких как рассеянный склероз и ревматоидный артрит. Кроме того потенциальная полезность ингибиторов LRRK2 вытекает из сообщения о том, что B-лимфоциты составляют основную популяцию клеток, экспрессирующих LRRK2 ( Maekawa et al. 2010, BBRC 392: 431-435). Это говорит о том, что ингибиторы LRRK2 могут быть эффективными при лечении заболеваний иммунной системы, для которых истощение B-клеток является эффективным или может быть эффективным при таких заболеваниях, как лимфомы, лейкозы, рассеянный склероз ( Ray et al., 2011 J. Immunol. 230: 109), ревматоидный артрит, системная красная волчанка, аутоиммунная гемолитическая анемия, истинная эритроцитарная аплазия, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ITP), синдром Эванса, васкулит, буллезные заболевания кожи, сахарный диабет 1 типа, синдром Шегрена, болезнь Девика и воспалительные миопатии ( Engel et al., 2011 Pharmacol. Rev. 63: 127-156; Homam et al., 2010 J. Clin. Neuromuscular Disease 12: 91-102).
Сущность изобретения
Настоящее изобретение обеспечивает, в первом аспекте, соединения формулы (I) и их соли (например, фармацевтически приемлемые соли)
где
X выбран из CH или N;
3
Y выбран из CH, N или CR,
3
1-3
1-3
где R выбран из группы, состоящей из галогена, C алкила, CN и C галогеналкила;
1
R выбран из группы, состоящей из
5- или 6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из
1-3
1-3
Cалкила, необязательно дополнительно замещенного одним C алкоксилом,
1-3
Cалкоксила,
галогена,
гидроксила,
2
3
-SOCH,
3
-COCH,
оксогруппы, и
оксетанила,
1-3
-O-4-6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним или двумя заместителями Cалкила, которые могут быть одинаковыми или различными, и
1-6
C алкоксила; и
2
R представляет собой
,
где
1
2
7
7
1-3
Z и Z независимо представляют собой N или CR, где R представляет собой H или Cалкокси, но
1
2
7
Z и Z не могут оба быть CR;
a
Rвыбран из группы, состоящей из
H,
CN,
1-3
Cалкила,
1-3
Cалкоксила,
1-3
-O-Cгалогеналкила, и
3-6
Cциклоалкила; и
b
R выбран из группы, состоящей из
2-окса-6-азаспиро[3.4]октанила,
3-6
Cциклоалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом,
3
-CONHCH,
3
-NHCOCH, и
4-6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из
гидроксила,
CN,
3
-CONHCH,
оксетанила,
1-3
C алкила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
1-3
Cалкоксила, необязательно замещенного одним гидроксилом.
В следующем аспекте настоящего изобретения, изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
Еще один аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для использования при лечении или профилактике болезни Паркинсона или болезни Альцгеймера.
Подробное описание изобретения
Вышеупомянутые и другие аспекты настоящего изобретения будут теперь более подробно описаны в отношении описания и способов, представленных в настоящем описании. Следует понимать, что настоящее изобретение может быть осуществлено в различных формах и не должно истолковываться как ограниченное вариантами осуществления, изложенными в настоящем описании. Скорее, эти варианты осуществления предусмотрены таким образом, что настоящее раскрытие будет исчерпывающим и полным, и будет полностью передавать объем изобретения для специалиста в данной области техники.
Терминология, используемая в описании настоящего изобретения, предназначена только для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения изобретения. Как используется в описании вариантов осуществления изобретения и прилагаемой формулы изобретения, формы единственного числата кже включают множественные формы, если контекст явно не указывает иначе.
Кроме того, как используется в настоящем описании, «и/или» относится к любым и всем возможным сочетаниям одного или нескольких связанных перечисленных элементов. Далее будет понятно, что термины «содержит» и/или «содержащий» при использовании в настоящем описании определяют наличие заявленных признаков, целых чисел, стадий, операций, элементов и/или компонентов, но не исключают наличия или добавление одного или нескольких других признаков, целых чисел, стадий, операций, элементов, компонентов и/или их групп.
Как правило, номенклатура, используемая в настоящем описании, и лабораторные методики в органической химии, медицинской химии, биологии, описанные в настоящем описании, являются хорошо известными и обычно применяемыми в данной области. Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем описании, как правило, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в данной области техники, к которому относится это раскрытие. В случае, когда существует множество определений для используемого в настоящем описании термина, в этом разделе преобладают, если не указано иное.
Все патенты, патентные заявки и публикации, упомянутые в настоящем описании, включены в качестве ссылки в полном объеме. В случае конфликта терминологии настоящая спецификация является определяющей.
А. Определения
1-3
Как используется в настоящем описании термин «алкил» относится к моновалентной насыщенной углеводородной цепи, имеющей определенное количество атомов углерода. Например, C алкил относится к алкильной группе, имеющей от 1 до 3 атомов углерода. Алкильные группы могут быть прямыми или разветвленными. В некоторых вариантах, разветвленные алкильные группы могут иметь одну, две или три ветви. Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил, этил и пропил (н-пропил и изопропил).
1-6
1-3
Как используется в настоящем описании, «алкоксил» относится к группе -O-алкил. Например, Cалкоксильные группы содержат от 1 до 6 атомов углерода. Cалкоксильные группы содержат от 1 до 3 атомов углерода. Примеры алкоксильных групп включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, пропокси, бутоксил, пентилокси и гексилокси.
3-6
Как используется в настоящем описании, «циклоалкил» относится к насыщенному моноциклическому углеводородному кольцу из 3-6 атомов углерода. Например, Cциклоалкил содержит 3-6 атомов углерода в качестве атомов-членов в кольце. Примеры циклоалкила включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.
ʺ
ʺ
Как используется в настоящем описании, «галоген» относится к фтору (F), хлору (Cl), брому (Br) или иоду (I). Гало относится к радикалам галогена: фтор (-F), хлор (-Cl), бром (-Br) или иод (-I).
1-3
1-3
Как используется в настоящем описании, «галогеналкил» относится к алкильной группе, как определено выше, с одним или несколькими атомами галогена, выбранными из F, Cl, Br или I, которые замещены на любой или все атомы углерода алкильной группы путем замещения атомов водорода, присоединенных к атомам углерода, и которые могут быть одинаковыми или различными. Например, Cгалогеналкил относится к Cалкильной группе, замещенной одним или несколькими атомами галогена. В некоторых вариантах осуществления «галогеналкил» относится к алкильной группе, замещенной одним или несколькими атомами галогена, независимо выбранными из F или Cl. Примеры галогеналкильных групп включают, но не ограничиваются ими, хлорметил, бромэтил, трифторметил и дихлорметил.
2
2
Как используется в настоящем описании, «гетероциклил» представляет собой моновалентный радикал, полученный в результате удаления атома водорода из 3, 4, 5 или 6-членного насыщенного или ненасыщенного, но не ароматического моноциклического кольца, которое состоит из атомов углерода кольца и 1 или 2 кольцевых гетероатомов, независимо выбранные из азота, кислорода, серы или серы, замещенной двумя оксогруппами (например, SO). В одном варианте осуществления гетероциклил, содержащий 1 или 2 кольцевых гетероатомов, независимо выбранных из азота или кислорода. В одном варианте осуществления «5-6-членный гетероциклил» относится к насыщенному или содержащему моноциклическое кольцо с одной двойной связью, состоящее из 5 или 6 кольцевых атомов, и 1 или 2 из которых представляют собой кольцевые гетероатомы, независимо выбранные из азота или кислорода. Типичный «5-6-членный гетероциклил» включает, но не ограничивается ими, пиперидинил (например, пиперидин-4-ил, пиперидин-1-ил, пиперидин-3-ил), пирролидинил (например, пирролидин-3-ил, пирролидин-1-ил), 1,2,3,6-тетрагидропиридинил (например, 1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил), пиперидинонил (например, пиперидин-2-онил), тетрагидро-2Н-пиранил (например, тетрагидро-2H-пиран-4-ил, тетрагидро-2H-пиран-2-ил, тетрагидро-2H-пиран-3-ил), тетрагидрофуранил (например, тетрагидрофуран-3-ил), морфолинил (например, морфолин-2-ил, морфолин-4-ил), пиперазинил (например, пиперазин-1-ил). В одном варианте осуществления «4-6-членный гетероциклил» относится к насыщенному и моноциклическому кольцу, состоящему из 4-6 кольцевых атомов, и 1 или 2 из которых представляют собой кольцевые гетероатомы, независимо выбранные из азота, кислорода, серы или серы, замещенной двумя оксогруппами (например, SO). В одном варианте осуществления 4-6-членный гетероциклил содержит 1 или 2 кольцевые гетероатома, независимо выбранные из азота или кислорода. Типичный «4-6-членный гетероциклил» включает, но не ограничивается ими, пиперидинил (например, пиперидин-4-ил, пиперидин-3-ил), пирролидинил (например, пирролидин-3-ил, пирролидин-1-ил), тетрагидрофуранил (например, тетрагидрофуран-3-ил), азетидинил (например, азетидин-3-ил, азетидин-1-ил), морфолинил (например, морфолин-4-ил), пиперазинил (например, пиперазин-1-ил) тиоморфолинил 1,1-диоксид (например, тиоморфолин-4-ил 1,1-диоксид), тетрагидро-2H-пиранил (например, тетрагидро-2H-пиран-4-ил) и оксетанил (например, оксетан-3-ил). В одном варианте осуществления «6-членный гетероциклил» относится к насыщенному моноциклическому кольцу, состоящему из 6 кольцевых атомов и 1 или 2 из которых представляют собой кольцевые гетероатомы, независимо выбранные из азота, кислорода. Типичный «6-членный гетероциклил» включает, но не ограничивается ими, пиперидинил (например, пиперидин-4-ил, пиперидин-3-ил), 1,2,3,6-тетрагидропиридинил (например, 1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил), пиперидинонил (например, пиперидин-2-онил), тетрагидро-2Н-пиранил (например, тетрагидро-2Н-пиран-4-ил), морфолинил (например, морфолин-4-ил), пиперазинил (например, пиперазин-1-ил).
Как используется в настоящем описании «оксо» относится к группе (=O).
2
3
3
3
Как используется в настоящем описании, «замещенный» по отношению к группе указывает, что один или несколько атомов водорода, присоединенные к атому-члену (например, атому углерода) внутри группы замещены заместителем, выбранным из группы определенных заместителей. Следует понимать, что термин «замещенный» включает неявное условие, что такое замещение находится в соответствии с разрешенной валентностью замещаемого атома и заместителя и что замещение приводит к стабильному соединению (то есть к тому, которое не подвергается спонтанно преобразованию, такому как перегруппировка, циклизация, элиминирование и является достаточно устойчивым, чтобы выдержать выделение из реакционной смеси). Когда указано, что группа может содержать один или несколько заместителей, один или несколько (при необходимости) атомов-членов в группе могут быть замещены. Кроме того, один атом-член внутри группы может быть замещен более чем одним заместителем, если такое замещение соответствует разрешенной валентности атома. Типичные заместители включают, но не ограничиваются ими, алкил, алкоксил, галоген, гидрокси, -SOCH, -COCH, оксогруппу, оксетанил, CN, -CONHCH и гетероциклоалкил (например, пиперазинил). Подходящие заместители определены здесь для каждой замещенной или необязательно замещенной группы.
Как используется в настоящем описании, «необязательно замещенный» означает, что группа, такая как гетероциклил, алкил и алкоксил, может быть незамещенной, может быть замещена одним, двумя или тремя заместителем(заместителями), как определено.
Как используется в настоящем описании, термин «заболевание» относится к любому изменению состояния организма или некоторых органов, прерывающему или нарушающему выполнение функций и/или вызывающему такие симптомы, как дискомфорт, дисфункция, дистресс или даже смерть у пораженного индивида или тех, кто находится в контакте с индивидом. Заболевание может также включать подавленное состояние, боль, болезненное состояние, недомогание, нарушение, утомление, расстройство, недовольство, интердиспозиция и/или аффектацию.
Как используется в настоящем описании, «лечить» или «лечение» по отношению к заболеванию означает: (1) улучшать заболевание или одно или несколько биологических проявлений заболевания; (2) препятствовать (а) одной или нескольким точкам в биологическом каскаде, который приводит к заболеванию или ответственен за заболевание или b) одному или нескольким биологическим проявлениям заболевания; (3) ослаблять один или нескольких симптомов или эффектов, связанных с заболеванием; (4) замедлять прогрессирование заболевания или одного или нескольких биологических проявлений заболевания и/или (5) уменьшать вероятность тяжести заболевания или биологических проявлений заболевания.
Как используется в настоящем описании, «предотвращать», предотвращениеʺ или "профилактика" означает профилактическое введение лекарственного средства для уменьшения вероятности наступления или отсрочки начала заболевания или его биологического проявления.
Как используется в настоящем описании, «субъект» означает млекопитающее (например, собаку, кошку, лошадь, корову, овцу, козу, обезьяну и т.д.) и человека, включая мужчин и женщин, и включая новорожденных, детей грудного возраста, подростков, адолесцентов, взрослых и субъектов пожилого возраста, кроме того, включая различные рассовые и этнические группы, включая, но не ограничиваясь ими, белых, черных, азиатов, американских индейцев и латиноамериканцев.
in situ
Как используется в настоящем описании, «фармацевтически приемлемая соль(соли)» относится к соли(солям), которые сохраняют желаемую биологическую активность данного соединения и проявляют минимальные нежелательные токсикологические эффекты. Эти фармацевтически приемлемые соли можно получить  во время окончательного выделения и очистки соединения или путем отдельного взаимодействия очищенного соединения в форме его свободной кислоты или свободного основания с подходящим основанием или кислотой, соответственно.
Как используется в настоящем описании, «терапевтически эффективное количество» в отношении соединения по изобретению или другого фармацевтически активного агента означает количество соединения, достаточное для лечения или профилактики заболевания у пациента, но достаточно низкое для того, чтобы избежать серьезных побочных эффектов (при разумном соотношении польза/риска) в рамках здравого медицинского суждения. Терапевтически эффективное количество соединения будет варьировать в зависимости от конкретного выбранного соединения (например, принимая во внимание активность, эффективность и период полувыведения соединения); выбранного пути введения; заболевания, подлежащего лечению; тяжести заболевания, подлежащего лечению; возраста, размера, массы и соматической болезни пациента, подлежащего лечению; медицинского анамнеза пациента, подлежащего лечению; продолжительности лечения; характера сопутствующей терапии; желаемого терапевтического эффекта; и подобных факторов, но, тем не менее, должны быть определены квалифицированным специалистом.
В. Соединения
В первом аспекте настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I) или его соль (например, его фармацевтически приемлемую соль)
где
X выбран из CH или N;
3
Y выбран из CH, N или CR,
3
1-3
1-3
где R выбран из группы, состоящей из галогена, C алкила, CN и C галогеналкила;
1
R выбран из группы, состоящей из
5- или 6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из
1-3
1-3
Cалкила, необязательно дополнительно замещенного одним C алкоксилом,
1-3
Cалкоксила,
галогена,
гидроксила,
2
3
-SOCH,
3
-COCH,
оксогруппы, и
оксетанила,
1-3
-O-4-6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним или двумя заместителями Cалкил, которые могут быть одинаковыми или различными, и
1-6
C алкоксила; и
2
R представляет собой
где
1
2
7
7
1-3
Z и Z независимо представляют собой N или CR, и где R представляет собой H или Cалкоксил, но
1
2
7
Z и Z не могут оба быть CR;
a
Rвыбран из группы, состоящей из
H,
CN,
1-3
Cалкила,
1-3
Cалкоксила,
1-3
-O-Cгалогеналкила, и
3-6
Cциклоалкила; и
b
R выбран из группы, состоящей из
2-окса-6-азаспиро[3.4]октанила,
3-6
Cциклоалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом,
3
-CONHCH;
3
-NHCOCH;
4-6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из
гидроксила,
CN,
3
-CONHCH,
оксетанила,
1-3
Cалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
1-3
Cалкоксила, необязательно замещенного одним гидроксилом.
В одном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его соли (например, его фармацевтически приемлемой соли)
где
X выбран из CH или N;
3
Y выбран из CH, N или CR,
3
1-3
где R выбран из группы, состоящей из галогена и C алкила;
1
R выбран из группы, состоящей из
5- или 6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из
1-3
1-3
Cалкила, необязательно дополнительно замещенного одним C алкоксилом,
галогена,
гидроксила,
2
3
-SOCH,
3
-COCH,
оксогруппы, и
оксетанила,
1-3
-O-4-6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним или двумя заместителями Cалкил, которые могут быть одинаковыми или различными, и
1-6
C алкоксила; и
2
R представляет собой
где
1
2
7
7
1-3
Z и Z независимо представляют собой N или CR, где R представляет собой H или Cалкоксил, но
1
2
7
Z и Z не могут оба быть CR,
a
Rвыбран из группы, состоящей из
H,
CN,
1-3
Cалкила,
1-3
Cалкоксила,
1-3
-O-Cгалогеналкила, и
3-6
Cциклоалкила; и
b
R выбран из группы, состоящей из
2-окса-6-азаспиро[3.4]октанила,
3-6
Cциклоалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом,
3
-CONHCH,
3
-NHCOCH, и
4-6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из
гидроксила,
CN,
3
-CONHCH,
оксетанила,
1-3
Cалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
1-3
Cалкоксила, необязательно замещенного одним гидроксилом.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I), где X представляет собой CH.
3
3
3
3
3
3
3
3
3
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Y представляет собой CH или CR. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Y представляет собой CH. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Y представляет собой CR и R представляет собой F или метил. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Y представляет собой CR и R представляет собой метил. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Y представляет собой CR и R представляет собой Cl или F. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Y представляет собой CR и R представляет собой Cl.
1
1
1
1
1
1
1
1
1
2
3
3
1-3
1-3
2
3
3
1-3
1-3
1-3
1-3
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где R представляет собой 5- или 6-членный гетероциклил, необязательно замещенный одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, гидроксила, -SOCH, -COCH, оксетанила, оксогруппы и Cалкила, необязательно дополнительно замещенного одним C алкоксилом и где 5 или 6-членный гетероциклил является насыщенным или содержит одну двойную связь и содержит один или два члена кольца, представляющих собой гетероатом, независимо выбранный из азота или кислорода. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где R представляет собой 5- или 6-членный гетероциклил, необязательно замещенный одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, гидроксила, -SOCH, -COCH, оксетанила, оксогруппы и Cалкила, необязательно дополнительно замещенного одним C алкоксилом, и где 5- или 6-членный гетероциклил выбран из группы, состоящей из пиперидинила, пирролидинила (например, пирролидин-3-ил), 1,2,3,6-тетрагидропиридинила (например, 1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил), пиперидинонила (например, пиперидин-2-онил), тетрагидро-2H-пиранила (например, тетрагидро-2H-пиран-4-ил), тетрагидрофуранила (например, тетрагидрофуран-3-ил), морфолинила и пиперазинила (например, пиперазин-1-ил). В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где R представляет собой 6-членный гетероциклил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, оксетанила и Cалкила, и где 6-членный гетероциклил является насыщенным и содержит один или два члена кольца, представляющих собой гетероатом, выбранный из азота или кислорода. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где R представляет собой пиперидинил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена и Cалкила. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления R представляет собой пиперидинил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из фтора и метила. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, R представляет собой пиперидинил, замещенный одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из оксетанила и F. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, R представляет собой пиперидинил, замещенный одним заместителем оксетанил. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, R представляет собой пиперидин-4-ил, замещенный одним заместителем оксетанил. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, R представляет собой пиперидин-4-ил, замещенный одним заместителем оксетан-3-ил.
1
1-3
1
1-3
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Rпредставляет собой -O-4-6-членный гетероциклил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями Cалкил, которые могут быть одинаковыми или различными. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Rпредставляет собой -O-4-6-членный гетероциклил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из Cалкила и, где -O-4-6-членный гетероциклил выбран из группы, состоящей из -O-пиперидинила (например, -O-пиперидин-4-ил, -O-пиперидин-3-ил), -O-пирролидинила (например, -O-пирролидин-3-ил), -O-тетрагидрофуранила (например, -O-тетрагидрофуран-3-ил) и -O-азетидинила (например, -O-азетидин-3-ил).
1
1-6
1
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Rпредставляет собой Cалкоксил. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где Rпредставляет собой -O-изопропил.
2
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где R представляет собой
где
a
Rвыбран из группы, состоящей из
H,
CN,
1-3
Cалкила,
1-3
Cалкоксила, и
3-6
Cциклоалкила; и
b
R выбран из группы, состоящей из
2-окса-6-азаспиро[3.4]октанила,
3-6
Cциклоалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом,
3
-CONHCH,
3
-NHCOCH, и
4-6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из
гидроксила,
CN,
3,
-CONHCH
оксетанила,
1-3
Cалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
1-3
Cалкоксила, необязательно замещенного одним гидроксилом.
2
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где R представляет собой
,
где
a
R выбран из группы, состоящей из
H,
CN,
1-3
Cалкила,
1-3
Cалкоксила, и
циклопропила; и
b
R выбран из группы, состоящей из
3-6
Cциклоалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом,
3
-CONHCH,
3
-NHCOCH, и
4-6-членного гетероциклила, необязательно замещенного одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из
гидроксила,
CN,
3,
-CONHCH
оксетанила,
1-3
Cалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
1-3
Cалкоксила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
4-6-членный гетероциклил выбран из группы, состоящей из морфолинила, азетинидила, пиперазинила, тиоморфолинил 1,1-диоксида и оксетанила.
2
В следующем варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и любому из вышеприведенных вариантов осуществления, где R представляет собой
,
где
a
1-3
1-3
Rпредставляет собой Cалкил или Cалкоксил, и
b
R представляет собой 4-6-членный гетероциклил, необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из
гидроксила,
1-3
Cалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
1-3
Cалкоксила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
4-6-членный гетероциклил выбран из группы, состоящей из морфолинила, азетинидила, пиперазинила и оксетанила.
В следующем варианте осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (А) или его фармацевтически приемлемую соль
где,
1
1-3
R представляет собой пиперидинил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена и Cалкила;
a
1-3
1-3
Rпредставляет собой Cалкил или Cалкоксил; и
b
R представляет собой 4-6-членный гетероциклил, необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из
гидроксила,
1-3
Cалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
1-3
Cалкоксила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
4-6-членный гетероциклил выбран из группы, состоящей из морфолинила, азетинидила, пиперазинила и оксетанила.
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединениям формулы (А) и их фармацевтически приемлемым солям, где
1
R представляет собой пиперидинил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из F и метила;
a
Rпредставляет собой метил или метоксил; и
b
R представляет собой 4-6-членный гетероциклил, необязательно замещенный одним гидроксилом, и 4-6-членный гетероциклил выбран из группы, состоящей из морфолинила, азетинидила, пиперазинила и оксетанила.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой его соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой его фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (A) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение любого из примеров Е1-Е121, свободное основание, свободную кислоту или его соль (например, фармацевтически приемлемую соль).
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение любого из примеров Е122-Е273, свободное основание, свободную кислоту или его соль (например, фармацевтически приемлемую соль).
В некотором варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению, имеющему структуру, выбранную из группы, состоящей из
H
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина,
H
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина,
H
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолина,
H
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолина,
H
4-(6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)-6-морфолинопиримидин-2-карбонитрила,
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-этилпиримидин-4-ил)морфолина,
H
6-(6-(6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октана,
H
N
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамида,
H
N
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамида,
H
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина,
H
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина,
H
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолина,
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолина,
цис
H
()-4-(6-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина,
ц
H
N
(ис)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамида,
цис
()-1-(2-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-5-метоксипиридин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
()-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-N-метилморфолин-2-карбоксамида,
(цис)-
1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
()-1-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
()-3-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанола
цис
H
()-1-(2-циклопропил-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
()-1-(2-(дифторметокси)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
()-2-((1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанола,
цис
()-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола,
цис
()-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола,
цис
()-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метокси-N-метилпиримидин-4-карбоксамида,
цис
()-N-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил) ацетамида,
цис
()-4-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксида,
цис
H
()-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина,
цис
()-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолина,
1-(6-(6-(3,3-дифторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-карбонитрила,
цис
()-1-(6-(5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол,
цис
()-1-(6-(5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
()-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
()-1-(6-(6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
H
()-4-(4-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пиридин-2-ил)морфолина,
4-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-1-метилпиперидин-2-она,
1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазола,
3-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)-4-метилморфолина,
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((1-метилпиперидин-3-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина,
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((1-метилпирролидин-3-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин,
1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол гидрохлорида,
1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазола и
1-(2-метокси-6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазола,
или его соли (например, фармацевтически приемлемой соли).
В некотором варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению, имеющему структуру, выбранную из группы, состоящей из
цис
()-(1s,3s)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорида,
цис
()-(1r,3r)-3-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанола,
цис
1-(6-(6-(()-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола,
цис
1-(6-(6-(()-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диола,
цис
()-2-((1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанола,
цис
(4-(6-(6-(()-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
цис
(4-(6-(6-(()-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
цис
(4-(6-(6-((()-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
цис
()-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида,
1-(6-(азетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола,
цис
()-1-(6-(6-(1-этил-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
()-1-(6-(6-(3-фтор-1-изопропилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
цис
()-(1r,3r)-3-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанола,
4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина,
цис
6-(()-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола,
цис
4-(6-(6-(()-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолина,
4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолина,
4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолина,
6-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октана,
4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
(4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ола,
цис
1-(6-(6-(()-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ола,
(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида,
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина,
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолина,
2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина,
4-(2-этил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина,
(4-(2-этил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (соль HCl),
4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (соль HCl),
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (соль TFA),
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолин 2,2,2-трифторацетата,
(4-(6-(5-хлор-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
1-(6-(5-хлор-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
(4-(6-(5-хлор-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
1-(6-(5-хлор-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола,
(транс)-4-фтор-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола,
(транс)-4-фтор-1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола,
N-метил-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-карбоксамида,
1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
(транс)-1-метил-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ола,
(транс)-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-1-метилпиперидин-3-ола,
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(4-метилморфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(4-метилморфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
1-(6-метокси-4-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-1-ил)пиридин-2-ил)азетидин-3-ола,
1-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
2-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-ил)этанола,
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диола,
1-(2-метокси-6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола,
2-((1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанола,
(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
1-(6-(6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
(4-(6-(6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
1-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (соль HCl),
1-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (соль TFA),
1-(6-(5-хлор-6-изопропокси-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
1-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-ола,
1-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-ол (соль HCl),
1-(5-хлор-1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-ола,
5-метил-1-(2-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)пиримидин-4-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола,
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-3-метилпирролидин-3-ола,
1-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанола,
1-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанола,
(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола,
(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола и
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ола,
или его соли (например, фармацевтически приемлемой соли).
В следующем варианте осуществления соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (В) или его фармацевтически приемлемую соль
где
1
1-3
R представляет собой пиперидинил, замещенный одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, Cалкила и оксетанила;
a
1-3
1-3
Rпредставляет собой Cалкил или Cалкоксил; и
b
R представляет собой 4-6-членный гетероциклил, замещенный одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из
гидроксила,
1-3
Cалкила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
1-3
Cалкоксила, необязательно замещенного одним гидроксилом, и
4-6-членный гетероциклил выбран из группы, состоящей из морфолинила, азетинидила, пиперазинила и оксетанила.
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединениям формулы (В) и их фармацевтически приемлемым солям, где
1
R представляет собой пиперидинил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из Cl, F и оксетанила;
a
Rпредставляет собой метил или метоксил; и
b
1-3
R представляет собой 4-6-членный гетероциклил, необязательно замещенный одним заместителем Cалкил, необязательно замещенным одним гидроксилом,
и 4-6-членный гетероциклил выбран из группы, состоящей из морфолинила, азетинидила, пиперазинила и оксетанила.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой соль
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
,
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
,
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
,
или его соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
,
или его фармацевтически приемлемую соль.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой соль
.
В одном варианте осуществления соединение формулы (I) или формулы (B) представляет собой фармацевтически приемлемую соль
.
in situ
et al
et al
В дополнение к форме свободного основания или форме свободной кислоты соединений, описанных в настоящем документе, форма соли соединений также входит в объем настоящего изобретения. Соли или фармацевтически приемлемые соли соединений, описанных в настоящем описании, могут быть получены  во время окончательного выделения и очистки соединения или отдельным взаимодействием очищенного соединения в форме его свободной кислоты или в форме его свободного основания с подходящим основанием или кислотой, соответственно. Для обзоров подходящих фармацевтически солей см. Berge , J. Pharm, Sci., 66, 1-19, 1977; P L Gould, International Journal of Pharmaceutics, 33 (1986), 201-217; и Bighley , Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Marcel Dekker Inc, New York 1996, Volume 13, page 453-497.
В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению могут содержать основную группу и поэтому способны образовывать фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли путем обработки подходящей кислотой. Подходящие кислоты включают фармацевтически приемлемые неорганические кислоты и фармацевтически приемлемые органические кислоты. Эти соли могут быть кристаллическими или аморфными. Примеры фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей включают гидрохлорид, гидробромид, нитрат, метилнитрат, сульфат, бисульфат, сульфамат, фосфат, ацетат, гидроксиацетат, фенилацетат, пропионат, бутират, изобутират, валерат, малеат, гидроксималеат, акрилат, фумарат, малат, тартрат, цитрат, салицилат, п-аминосалицилат, гликоллат, лактат, гептаноат, фталат, оксалат, сукцинат, бензоат, о-ацетоксибензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, манделат, таннат, формиат, стеарат, аскорбат, пальмитат, олеат, пируват, памоат, малонат, лаурат, глутарат, глутамат, эстолат, метансульфонат (мезилат), этансульфонат (эзилат), 2-гидроксиэтансульфонат, бензолсульфонат (безилат), п-аминобензолсульфонат, п-толуолсульфонат (тозилат) и нафталин-2-сульфонат. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемые соли включают L-тартрат, этандисульфонат (эдизилат), сульфат, фосфат, п-толуолсульфонат (тозилат), хлористоводородная соль, метансульфонат, цитрат, фумарат, бензолсульфонат, малеат, гидробромат, L-лактат, малонат и S-камфор-10-сульфонат. В некоторых вариантах осуществления некоторые из этих солей образуют сольваты. В некоторых вариантах осуществления некоторые из этих солей являются кристаллическими.
Соединения формулы (I), их соли (например, их фармацевтически приемлемые соли) могут существовать в стереоизомерных формах (например, содержит один или несколько асимметрических атомов углерода). Индивидуальные стереоизомеры (энантиомеры и диастереомеры) и их смеси включены в объем настоящего изобретения. Изобретение также охватывает индивидуальные изомеры соединений формулы (I), их солей (например, их фармацевтически приемлемых солей) в виде смесей с их изомерами, в которых инвертирован один или несколько хиральных центров. Аналогично, понятно, что соединения формулы (I), их соли (например, их фармацевтически приемлемые соли) могут существовать в таутомерных формах, отличных от указанных в формуле, и они также включены в объем настоящего изобретения. Следует понимать, что настоящее изобретение включает все комбинации и подмножества конкретных групп, определенных выше. Объем настоящего изобретения включает смеси стереоизомеров, а также очищенные энантиомеры или энантиомерно/диастереомерно обогащенные смеси. Также в объем изобретения входят индивидуальные изомеры соединений формулы (I), их соли (например, их фармацевтически приемлемые соли), а также любые их полностью или частично уравновешенные смеси. Настоящее изобретение также включает индивидуальные изомеры соединений формулы (I), их соли (например, их фармацевтически приемлемые соли), а также смеси с их изомерами, в которых инвертирован один или несколько хиральных центров. Следует понимать, что настоящее изобретение включает все комбинации и подмножества конкретных групп, определенных выше. Различные изомерные формы могут быть разделены или отделены друг от друга обычными способами или любой данный изомер может быть получен обычными методами синтеза или стереоспецифическим или асимметрическим синтезом.
3
11
14
18
11
18
Настоящее изобретение также включает изотопно-меченые соединения и соли, которые идентичны соединениям формулы (I) или их солям, за исключением того факта, что один или несколько атомов заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречающегося в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения формулы (I) или их соли включают изотопы водорода, углерода, азота, фтора, такие как H, C, C и F. Такое изотопно-меченое соединение формулы (I) или его соли являются полезными в анализах распределения лекарственного средства и/или субстрата. Например, изотопы C и F полезны в ПЭТ (позитронно-эмиссионная томография). ПЭТ полезен при визуализации головного мозга. Изотопно-меченые соединения формулы (I) и их соли обычно могут быть получены путем осуществления описанных ниже способов путем замены неизотопного меченого реагента легко доступным изотопно-меченым реагентом. В одном варианте осуществления соединения формулы (I) или их соли не являются изотопно-мечеными.
Некоторые соединения формулы (I) или их соли могут существовать в твердой или жидкой форме. В твердом состоянии соединения формулы (I) или соли могут существовать в кристаллической или аморфной форме или в виде их смеси. В отношении соединений формулы (I) или солей, которые находятся в кристаллической форме, квалифицированный специалист поймет, что могут быть получены фармацевтически приемлемые сольваты, в которых молекулы растворителя внедряются в кристаллическую решетку во время кристаллизации. Сольваты могут включать неводные растворители, такие как этанол, изопропанол, ДМСО, уксусная кислота, этаноламин и этилацетат, или они могут включать воду в качестве растворителя, который внедряется в кристаллическую решетку. Сольваты, в которых вода является растворителем, который внедряется в кристаллическую решетку, обычно называют «гидратами». Гидраты включают стехиометрические гидраты, а также композиции, содержащие различные количества воды. Настоящее изобретение включает все такие сольваты.
Специалистам в данной области также должно быть понятно, что определенные соединения формулы (I), их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, которые существуют в кристаллической форме, включая их различные сольваты, могут проявлять полиморфизм (т.е. способность к существованию в различных кристаллических структурах). Эти различные кристаллические формы обычно известны как «полиморфы». Полиморфы имеют один и тот же химический состав, но отличаются по упаковке, геометрическому расположению и другим дескриптивным характеристикам кристаллического твердого состояния. Таким образом, полиморфы могут иметь различные физические свойства, такие как форма, плотность, твердость, способность к деформации, стабильность и растворимость. Полиморфы обычно показывают различные точки плавления, ИК-спектры и порошковые рентгеновские дифрактограммы, которые можно использовать для идентификации. Специалисту в данной области должно быть понятно, что различные полиморфы могут быть получены, например, путем изменения или регулирования условий реакции или реагентов, используемых для получении соединения. Например, изменения температуры, давления или растворителя могут в результате привести к полиморфам. Кроме того, при определенных условиях один полиморф может самопроизвольно преобразоваться в другой полиморф. Изобретение включает все такие полиморфы.
Специалисту в данной области также понятно, что настоящее изобретение может содержать различные дейтерированные формы соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей. Каждый доступный атом водорода, присоединенный к атому углерода, может быть независимо заменен атомом дейтерия. Средний специалист в данной области знает, как синтезировать дейтерированные формы соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей. Коммерчески доступные дейтерированные исходные материалы могут быть использованы при получении дейтерированных форм соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей или могут быть синтезированы с использованием общепринятых методик с использованием дейтерированных реагентов (например, литий-алюминий дейтерид).
Соединения, описанные в настоящем описании, их соли (например, фармацевтически приемлемые соли), дейтерированная форма, сольваты или их гидраты могут существовать в одной или нескольких полиморфной форме. Следовательно, в следующем аспекте изобретение обеспечивает полиморф соединения, описанного в настоящем документе, его солей (например, фармацевтически приемлемых солей) или полиморф сольвата или гидрата соединения, описанного в настоящем документе, или его соли (например, фармацевтически приемлемой соли).
Как используются в настоящем описании, термины «соединение(я) по изобретению» или «соединение(я) по настоящему изобретению» означают соединение вышеуказанных формул, как определено в настоящем описании, в любой форме, т.е., любую соль или несолевую форму (например, в форме свободной кислоты или основания или в виде соли, например, его фармацевтически приемлемой соли), дейтерированную форму и любую его физическую форму (например, включая нетвердые формы (например, жидкие или полутвердые формы) и твердые формы (например, аморфные или кристаллические формы, специфические полиморфные формы, сольватированные формы, включая гидратированные формы (например, моно-, ди- и полугидраты)) и смеси различных форм. В контексте фармацевтической композиции и способов лечения, описанных в настоящем описании, термины «соединения по изобретению» означают соединение вышеуказанных формул, как определено в настоящем описании, в форме любой его фармацевтически приемлемой соли или несолевой форме (например, в форме свободной кислоты или основания), дейтерированной форме и любой его физической форме (например, включая нетвердые формы (например, жидкие или полутвердые формы) и твердые формы (например, аморфные или кристаллические формы, специфические полиморфные формы, сольватированные формы, включая гидратированные формы (например, моно-, ди- и полугидраты)) и смеси различных форм.
Соответственно, соединение по изобретению включает соединение формулы (I) или его соль, например, его фармацевтически приемлемую соль. Типичные соединения по настоящему изобретению включают описанные специфические соединения.
С. Способы использования
Соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли представляют собой ингибиторы киназной активности LRRK2 и, как полагают, могут потенциально использоваться для лечения или профилактики неврологических заболеваний. Примеры неврологических заболеваний включают, но ими не ограничиваются, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, деменцию (включая деменцию с тельцами Леви и сосудистую деменцию, ВИЧ-индуцированную деменцию), боковой амиотрофический склероз (ALS), возрастное нарушение памяти, легкое нарушение когнитивной функции, болезнь аргирофильных зерен, болезнь Пика, кортикобазальная дегенерация, прогрессирующий надъядерный паралич, семейную лобно-височную деменцию и паркинсонизм, связанный с хромосомой 17 (FTDP-17), абстинентный синдром/срыв, связанный с лекарственной зависимостью, L-допа индуцированную дискинезию, ишемический инсульт, травматическое повреждение головного мозга, повреждение спинного мозга. Другие нарушения включают, но ими не ограничиваются, лизосомные болезни (например, болезнь Ниманна-Пика тип C, болезнь Гоше), болезнь Крона, рак щитовидной железы, рак почки (включая папиллярный рак почки), рак молочной железы, рак легкого и рак предстательной железы, лейкозы (включая острый миелобластный лейкоз (AML)), лимфомы, лейкозы, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, системную красную волчанку, аутоиммунную гемолитическую анемию, истинную эритроцитарную аплазию, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (ITP), синдром Эванса, васкулит, буллезные заболевания кожи, сахарный диабет 1 типа, синдром Шегрена, болезнь Девика и воспалительные миопатии.
Один аспект изобретения обеспечивает соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль для применения в терапии. В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для использования при лечении или профилактике заболевания, опосредованного LRRK2. В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для использования при лечении или профилактике болезни Паркинсона. В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для использования при лечении болезни Паркинсона.
Еще один аспект изобретения обеспечивает применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в получении лекарственного средства для лечения или профилактики заболевания, опосредованного LRRK2. Еще один аспект изобретения обеспечивает применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в получении лекарственного средства для лечения или профилактики болезни Паркинсона. Еще один аспект изобретения обеспечивает применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в получении лекарственного средства для лечения болезни Паркинсона.
Еще один аспект изобретения обеспечивает способ лечения или профилактики заболевания, опосредованного LRRK2, который включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Еще один аспект изобретения обеспечивает способ лечения или профилактики болезни Паркинсона, который включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. В одном варианте осуществления субъектом является человек.
В контексте настоящего изобретения лечение болезни Паркинсона относится к лечению спорадической болезни Паркинсона и/или семейной болезни Паркинсона. В одном варианте осуществления семейная болезнь Паркинсона включает пациентов, экспрессирующих киназу LRRK2, несущую мутацию G2019S или мутацию R1441G. В другом варианте осуществления семейная болезнь Паркинсона включает пациентов, экспрессирующих киназу LRRK2, несущую мутацию G2019S, мутацию N1437H, мутацию R1441G, мутацию R1441C, мутацию R1441H, мутацию Y1699C, мутацию S1761R или мутацию I2020T, для болезни Паркинсона. В другом варианте осуществления спорадическая болезнь Паркинсона включает пациентов, экспрессирующих киназу LRRK2, несущую мутацию G2019S, мутацию N1437H, мутацию R1441G, мутацию R1441C, мутацию R1441H, мутацию Y1699C, мутацию S1761R или мутацию I2020T для болезни Паркинсона. В другом варианте осуществления болезнь Паркинсона включает пациентов, экспрессирующих киназу LRRK2, несущую другие кодирующие мутации, такие как G2385R, или некодирующие однонуклеотидные полиморфизмы в локусе LRRK2, которые связаны с болезнью Паркинсона. В одном варианте осуществления лечение болезни Паркинсона относится к лечению семейной болезни Паркинсона, включает пациентов, экспрессирующих киназу LRRK2, несущую мутацию G2019S. В другом варианте осуществления болезнь Паркинсона включает пациентов, экспрессирующих аберрантно высокие уровни нормальной киназы LRRK2. Лечение болезни Паркинсона может быть симптоматическим или может модифицировать заболевание. В одном варианте осуществления лечение болезни Паркинсона относится к симптоматическому лечению. В одном варианте осуществления лечение болезни Паркинсона относится к модифицированию болезни.
Соединения по настоящему изобретению могут также быть полезными при лечении пациентов, идентифицируемых как склонные к развитию тяжелого паркинсонизма посредством одной или нескольких малозаметных признаков, связанных с развитием заболевания, таких как история семьи, дефицит обоняния, констипация, нарушение познавательной способности, походка, или биологических показаний развития заболевания, полученных от молекулярных, биохимических, иммунологических или связанных с получением изображений технологий. В этом контексте лечение может быть симптоматическим или модифицировать заболевание.
В контексте настоящего изобретения лечение болезни Альцгеймера относится к лечению спорадической болезни Альцгеймера и/или семейной болезни Альцгеймера. Лечение болезни Альцгеймера может быть симптоматическим или может модифицировать заболевание. В одном из вариантов осуществления лечение болезни Альцгеймера относится к симптоматическому лечению. Подобным же образом, лечение деменции (включая деменцию с тельцами Леви и сосудистую деменцию, и ВИЧ-индуцированную деменцию), возрастного нарушения памяти, легкого нарушения когнитивной функции, болезни аргирофильных зерен, бокового амиотрофического склероза (ALS), болезни Пика, кортикобазальной дегенерации, прогрессирующего надъядерного паралича, семейной лобно-височной деменции и паркинсонизма, связанного с хромосомой 17 (FTDP-17), ишемического инсульта, травматического повреждения головного мозга, повреждения спинного мозга, лизосомных болезней (например, болезнь Ниманна-Пика тип C, болезнь Гоше) болезни Крона, рака щитовидной железы, рака почки (включая папиллярный рак почки), рака молочной железы, рака легкого и рака предстательной железы, лейкозов (включая острый миелобластный лейкоз (AML)), лимфомы, лейкоза, рассеянного склероза, ревматоидного артрита, системной красной волчанки, аутоиммунной гемолитической анемии, истинной эритроцитарной аплазии, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры (ITP), синдрома Эванса, васкулита, буллезного заболевания кожи, сахарного диабета 1 типа, синдрома Шегрена, болезни Девика и воспалительных миопатий может быть симптоматическим или модифицировать заболевание. В некоторых вариантах осуществления лечение деменции (включая деменцию с тельцами Леви, сосудистую деменцию и ВИЧ-индуцированную деменцию), возрастного нарушения памяти, легкого нарушения когнитивной функции, болезни аргирофильных зерен, бокового амиотрофического склероза (ALS), болезни Пика, кортикобазальной дегенерации, прогрессирующего надъядерного паралича, семейной лобно-височной деменции и паркинсонизма, связанного с хромосомой 17 (FTDP-17), ишемического инсульта, травматического повреждения головного мозга, повреждения спинного мозга, лизосомных болезней (например, болезнь Ниманна-Пика тип C, болезнь Гоше), болезни Крона, рака щитовидной железы, рака почки (включая папиллярный рак почки), рака молочной железы, рака легкого и рака предстательной железы, лейкозов (включая острый миелобластный лейкоз (AML)), лимфомы, лейкозов, рассеянного склероза, ревматоидного артрита, системной красной волчанки, аутоиммунной гемолитической анемии, истинной эритроцитарной аплазии, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры (ITP), синдрома Эванса, васкулита, буллезного заболевания кожи, сахарного диабета 1 типа, синдрома Шегрена, болезни Девика и воспалительных миопатий относится к симптоматическому лечению.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение также обеспечивает способ лечения анкилозирующего спондилита и/или лепрозной инфекции, который включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. В одном варианте осуществления субъектом является человек.
В контексте настоящего изобретения лечение симптомов синдрома отмены/рецидива, связанных с лекарственной зависимостью, и L-допа индуцированной дискинезии, относится к симптоматическому лечению.
В следующем аспекте изобретение обеспечивает соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль для использования при лечении вышеуказанных нарушений, например, болезни Паркинсона. В некоторых вариантах осуществления изобретение обеспечивает соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль для использования в профилактике болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, деменции (включая деменцию с тельцами Леви, сосудистую деменцию и ВИЧ-индуцированную деменцию), возрастного нарушения памяти, легкого нарушения когнитивной функции, болезни аргирофильных зерен, бокового амиотрофического склероза (ALS), болезни Пика, кортикобазальной дегенерации, прогрессирующего надъядерного паралича, семейной лобно-височной деменции или паркинсонизма, связанного с хромосомой 17 (FTDP-17), лизосомных болезней (например, болезнь Ниманна-Пика тип C, болезнь Гоше) или рака почки, молочной железы, легкого, предстательной железы, а также острого миелобластного лейкоза (AML). В одном варианте осуществления изобретение обеспечивает соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль для использования в профилактике болезни Паркинсона.
Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения вышеуказанных заболеваний, например, болезни Паркинсона у млекопитающих, включая человека, который включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.
Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для использования при лечении вышеуказанных нарушений, например, болезни Паркинсона. Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для использования в профилактике болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, деменции (включая деменцию с тельцами Леви и сосудистую деменцию), возрастного нарушения памяти, легкого нарушения когнитивной функции, болезни аргирофильных зерен, бокового амиотрофического склероза (ALS), болезни Пика, кортикобазальной дегенерации, прогрессирующего надъядерного паралича, семейной лобно-височной деменции или паркинсонизма, связанного с хромосомой 17 (FTDP-17), или рака почки, молочной железы, легкого, предстательной железы, а также острого миелобластного лейкоза (AML), лизосомных болезней (например, болезнь Ниманна-Пика тип C, болезнь Гоше). В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли при получении лекарственного средства для использования в профилактике болезни Паркинсона.
in vitro
Настоящее изобретение также обеспечивает применение ингибиторов LRRK2 для продуцирования нейрональных клеток-предшественников  для последующего терапевтического применения в клеточной терапии расстройств ЦНС.
Настоящее изобретение также обеспечивает применение ингибиторов LRRK2 для стимуляции восстановления функций ЦНС после повреждения нейронов, включая, но ими не ограничиваясь, ишемический инсульт, травматическое повреждение головного мозга и повреждение спинного мозга.
Настоящее изобретение также обеспечивает применение ингибиторов LRRK2 для лечения аберрантных нейровоспалительных механизмов, которые способствуют ряду нейродегенеративных заболеваний, включая болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, ВИЧ-индуцированную деменцию, боковой амиотрофический склероз, ишемический инсульт, травматическое повреждение головного мозга и повреждение спинного мозга.
Настоящее изобретение также обеспечивает применение ингибиторов LRRK2 для лечения диабета, ожирения, болезни двигательного нейрона, эпилепсии, рака, заболеваний легких, таких как хроническое обструктивное заболевание легких, идиопатический легочный фиброз и аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка.
Настоящее изобретение также обеспечивает применение ингибиторов LRRK2 для лечения бактериальных инфекций, паразитарных инфекций или вирусных инфекций, включая туберкулез, ВИЧ, вирус Западного Нила и вирус чикунгунья. Когда соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль предназначено для использования при лечении бактериальных инфекций, паразитарных инфекций или вирусных инфекций, его можно использовать в комбинации с лекарственными средствами, которые предположительно полезны в качестве симптоматического лечения, которые непосредственно нацелены на возбудителя инфекции.
Настоящее изобретение также обеспечивает применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в получении лекарственного средства для лечения туберкулеза. Еще один аспект изобретения обеспечивает применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в получении лекарственного средства для лечения туберкулеза.
Еще одним аспект изобретения обеспечивает способ лечения туберкулеза, который включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль. В одном варианте осуществления субъектом является человек.
Когда соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль предназначено для использования при лечении болезни Паркинсона, его можно использовать в комбинации с лекарственными средствами, которые, как предполагают, полезны в качестве симптоматических методов лечения болезни Паркинсона. Подходящие примеры таких других терапевтических средств включают L-допа и агонисты допамина (например, прамипексол, ропинирол).
4
6
TM
Когда соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль предназначено для применения при лечении болезни Альцгеймера, его можно использовать в сочетании с лекарственными средствами, которые, как утверждается, полезны в качестве либо модификации болезни, либо симптоматического лечения болезни Альцгеймера. Подходящими примерами таких других терапевтических средств могут быть симптоматически средства, например, те, которые, как известно, изменяют холинергическую передачу, такие как агонисты мускаринового рецептора М1 или аллостерические модуляторы, агонисты мускаринового рецептора М2, ингибиторы ацетилхолинэстеразы (такие как тетрагидроаминоакридин, донепезил гидрохлорид, ривастигмин и галантамин), агонисты никотиновых рецепторов или аллостерические модуляторы (такие как агонисты α7 или аллостерические модуляторы или агонисты α4β2 или аллостерические модуляторы), агонисты PPAR (такие как агонисты PPARγ), частичные агонисты 5-HT рецептора, антагонисты 5-HT рецептора, например, SB-742457 или антагонисты рецептора 5HT1A и антагонисты NMDA рецептора или модуляторы, или средства, модифицирующие заболевание, такие как ингибиторы β или γ-секретазы, например, семагацестат, стабилизаторы митохондрий, стабилизаторы микротрубочек или модуляторы патологии Тау-белка, такие как ингибиторы агрегации тау-белка (например, метиленовый синий и REMBER), НПВП, например таренфлурбил, трамипрозил; или антитела, например, бапинейзумаб или соланезумаб; протеогликаны, например, трамипросат.
Когда соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль используют в комбинации с другими терапевтическими средствами, соединение можно вводить последовательно или одновременно любым удобным путем.
Настоящее изобретение также обеспечивает в следующем аспекте комбинацию, содержащую соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль вместе с одним или несколькими дополнительным терапевтическим средством или средствами.
Комбинации, упомянутые выше, могут быть удобно представлены для использования в форме фармацевтической композиции, и, таким образом, фармацевтические композиции, содержащие комбинацию, как определено выше, вместе с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом, составляют следующий аспект изобретения. Отдельные компоненты таких комбинаций могут вводиться либо последовательно, либо одновременно в отдельных или комбинированных фармацевтических композициях.
Когда соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль используют в комбинации со вторым терапевтическим средством, действующим против одного и того же болезненного состояния, доза каждого соединения может отличаться от дозы, когда соединение используется отдельно. Соответствующие дозы будут легко определены специалистом в данной области.
D. Композиция
Соединения по настоящему изобретению могут быть составлены в фармацевтические композиции перед введением субъекту. Согласно одному аспекту настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый эксципиент. В соответствии с другим аспектом изобретение относится к способу получения фармацевтической композиции, включающему смешивание соединения, описанного в настоящем документе, с фармацевтически приемлемым эксципиентом.
Фармацевтические композиции могут быть представлены в виде единичных дозированных форм, содержащих заранее определенное количество активного ингредиента на единичную дозу. Такая единица может содержать, например, 0,1 мг, 0,5 мг, или 1 мг-50 мг, 100 мг, 200 мг, 250 мг, 500 мг, 750 мг или 1 г соединения по настоящему изобретению, в зависимости от заболевания, подлежащего лечению, способа введения и возраста, массы и состояния субъекта, или фармацевтические композиции могут быть представлены в виде единичных дозированных форм, содержащих заранее определенное количество активного ингредиента на единичную дозу. В других вариантах осуществления единичные дозы композиций представляют собой композиции, содержащие суточную дозу или субдозу, как описано в настоящем документе, или их соответствующую фракцию, активного ингредиента. Кроме того, такие фармацевтические композиции могут быть получены любым из способов, хорошо известных специалистам в данной области.
Терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению будет зависеть от ряда факторов, включая, например, возраст и массу предполагаемого реципиента, точно установленное состояние, требующее лечения, и его тяжесть, природу препарата и путь введения и, в конечном счете, будет на усмотрении врача, назначающего лекарственное средство. Однако терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению для лечения заболеваний, описанных в настоящем изобретении, обычно будет находиться в диапазоне от 0,1 до 100 мг/кг массы тела реципиента в день и, чаще, в диапазоне от 1 до 10 мг/кг массы тела в день. Таким образом, для взрослого млекопитающего массой 70 кг фактическое количество в день обычно составляет от 70 до 700 мг, и это количество может быть дано в разовой дозе в день или в виде нескольких субдоз в день, как, например, две, три, четыре, пять или шесть доз в день. Или введение доз может выполняться периодически, например один раз в день, один раз в неделю или один раз в месяц. Терапевтически эффективное количество соли или сольвата и тому подобное может быть определено как доля терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) per se. Предполагается, что аналогичные дозы будут подходящими для лечения других заболеваний, упомянутых выше.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут содержать одно или несколько соединений по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции могут содержать более одного соединения по изобретению. Например, в некоторых вариантах осуществления фармацевтические композиции могут содержать два или более соединений по изобретению. Кроме того, фармацевтические композиции могут необязательно дополнительно содержать одно или несколько дополнительных фармацевтически активных соединений.
Как используется в настоящем описании термин «фармацевтически приемлемый эксципиент» означает фармацевтически приемлемый материал, композицию или носитель, занятый в получении формы или консистенции фармацевтической композиции. Каждый эксципиент может быть совместим с другими ингредиентами фармацевтической композиции при смешивании таким образом, чтобы избежать взаимодействия, которые могли бы существенно снизить эффективность соединения по настоящему изобретению при введении субъекту, и взаимодействия, которые приводят к фармацевтическим композициям, которые не являются фармацевтически приемлемыми.
Соединения по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый эксципиент или эксципиенты могут быть составлены в лекарственную форму, приспособленную для введения субъекту желаемым путем введения. Например, лекарственные формы включают формы, которые адаптированы для (1) перорального введения (включая буккальное или сублингвальное), такие как таблетки, капсулы, каплеты, пилюли, пастилки, порошки, сиропы, эликсиры, суспензии, растворы, эмульсии, саше и крахмальная облатка; (2) парентерального введения (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное или интрадермальное), такие как стерильные растворы, суспензии и порошки для разведения; (3) трансдермального введения, такие как трансдермальные пластыри; (4) ректального введения, такие как суппозитории; (5) назальной ингаляции, такие как сухие порошки, аэрозоли, суспензии и растворы; и (6) местного введения (включая буккальное, сублингвальное или трансдермальное), такие как кремы, мази, лосьоны, растворы, пасты, спреи, пены и гели. Такие композиции могут быть получены любыми способами, известными в области фармации, например, путем объединения соединения формулы (I) с носителем(ями) или эксципиентом(ами).
Фармацевтические композиции, приспособленные для перорального введения, могут быть представлены в виде дискретных единиц, таких как капсулы или таблетки; порошки или гранулы; растворы или суспензии в водных или неводных жидкостях; пригодные в пищу пенки или крема; или жидкие эмульсии масло-в-воде или жидкие эмульсии вода-в-масле.
Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты будут варьировать в зависимости от конкретной выбранной лекарственной формы. Кроме того, подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны с учетом конкретной функции, которую они могут выполнять в композиции. Например, некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны ввиду того, что они способны облегчать получение однородных лекарственных форм. Некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны ввиду того, что они способны облегчать получение стабильных лекарственных форм. Некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны ввиду того, что они способны облегчать перенос или транспортировку соединения или соединений по изобретению после введения субъекту из органа или части тела в другой орган или часть тела. Некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть выбраны ввиду того, что они способны улучшать соблюдение пациентом режима и схемы лечения.
Подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты включают следующие типы эксципиентов: разбавители, наполнители, связующие вещества, разрыхлители, смазывающие вещества, скользящие вещества, гранулирующие средства, покрывающие средства, смачивающие средства, растворители, сорастворители, суспендирующие средства, эмульгаторы, подсластители, ароматизаторы, средства, маскирующие вкус, красители, средства против слеживания, увлажнители, хелатирующие средства, пластификаторы, средства, повышающие вязкость, антиоксиданты, консерванты, стабилизаторы, поверхностно-активные вещества и буферные агенты. Для специалиста очевидно, что некоторые фармацевтически приемлемые эксципиенты могут выполнять более чем одну функцию и могут выполнять альтернативные функции в зависимости от того, насколько много эксципиента присутствует в композиции и какие другие эксципиенты присутствуют в композиции.
Remington's Pharmaceutical Sciences
The Handbook of Pharmaceutical Additives
The Handbook of Pharmaceutical Excipients
Специалисты обладают необходимыми знаниями и умениями для того, чтобы быть способными выбрать подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты в соответствующих количествах для использования в настоящем изобретении. Кроме того, имеется большое количество доступных специалистам ресурсов, в которых описаны фармацевтически приемлемые эксципиенты и которые могут быть полезны в выборе подходящих фармацевтически приемлемых эксципиентов. Примеры включают  (Mack Publishing Company),  (Gower Publishing Limited), and  (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press).
Remington's Pharmaceutical Sciences
Фармацевтические композиции по изобретению получают с использованием методов и способов, известных специалистам в данной области техники. Некоторые способы, обычно используемые в данной области, описаны в  (Mack Publishing Company).
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к твердой пероральной лекарственной форме, такой как таблетка или капсула, содержащей терапевтически эффективное количество соединения по изобретению и разбавителя или наполнителя. Подходящие разбавители и наполнители включают лактозу, сахарозу, декстрозу, маннит, сорбит, крахмал (например, кукурузный крахмал, картофельный крахмал и пре-желатинизированный крахмал), целлюлозу и ее производные (например, микрокристаллическую целлюлозу), сульфат кальция и двухосновный фосфат кальция. Преоральная твердая лекарственная форма может дополнительно содержать связующее вещество. Подходящие связующие вещества включают крахмал (например, кукурузный крахмал, картофельный крахмал и пре-желатинизированный крахмал), желатин, аравийскую камедь, альгинат натрия, альгиновую кислоту, трагакант, гуаровую камедь, повидон и целлюлозу и ее производные (например, микрокристаллическую целлюлозу). Пероральная твердая лекарственная форма может дополнительно содержать разрыхлитель. Подходящие разрыхлители включают кросповидон, натрий крахмал гликолят, кроскармелозу, альгиновую кислоту и натрий карбоксиметилцеллюлозу. Пероральная твердая дозированная форма может дополнительно содержать смазывающее вещество. Подходящие смазывающие вещества включают стеариновую кислоту, стеарат магния, стеарат кальция и тальк.
В определенном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг (рассчитано как свободное основание) соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг (рассчитано как свободное основание) соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг (рассчитано как свободное основание) соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг (рассчитано как свободное основание) соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг (рассчитано как свободное основание) соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг (рассчитано как свободное основание) соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг (рассчитано как свободное основание) соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей 0,01-1000 мг (рассчитано как свободное основание) соединения, имеющего структуру
,
или его фармацевтически приемлемой соли, и 0,01-5 г одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение направлено на фармацевтическую композицию для лечения нейродегенеративного заболевания, содержащую соединение, описанное в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый эксципиент. В другом варианте осуществления настоящее изобретение направлено на фармацевтическую композицию для лечения болезни Паркинсона, содержащую соединение, описанное в настоящем документе, или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый эксципиент.
Е. Способ получения соединений
Используемый способ при получении соединений, описанных в настоящем документе, зависит от желаемых соединений. Такие факторы, как выбор конкретного заместителя и различные возможные местоположения конкретного заместителя, все играют роль на пути, который следует соблюдать при получении конкретных соединений по настоящему изобретению. Эти факторы легко определяет специалист в данной области техники.
В общем, соединения по настоящему изобретению могут быть получены стандартными методами, известными в данной области, и известными способами, аналогичными им. Общие способы получения соединений по настоящему изобретению приведены ниже. Все исходные вещества и реагенты, описанные в нижеприведенных общих экспериментальных схемах, являются коммерчески доступными или могут быть получены способами, известными специалисту в данной области.
Protecting Groups in Chemical Synthesis
Специалисту в данной области понятно, что если заместитель, описанный здесь, несовместим с описанными здесь способом синтеза, заместитель может быть защищен подходящей защитной группой, которая стабильна в условиях реакции. Защитная группа может быть удалена на подходящем этапе реакционной последовательности с получением желаемого промежуточного или целевого соединения. Специалистам в данной области хорошо известны подходящие защитные группы и способы защиты и снятия защиты для различных заместителей с использованием таких подходящих защитных групп; примеры которых можно найти в T. Greene and P. Wuts, (3rd ed.), John Wiley & Sons, NY (1999). В некоторых случаях заместитель может быть выбран в качестве реакционноспособного в условиях реакции. В этих обстоятельствах условия реакции преобразуют выбранный заместитель в другой заместитель, который либо является полезным в промежуточном соединении, либо является желательным заместителем в целевом соединении.
Общая схема 1 обеспечивает примерные способы синтеза для получения соединений по настоящему изобретению.
Общая схема 1
1
2
Общая схема 1 предоставляет иллюстративный синтез для получения соединения 3, которое представляет собой соединения формулы (I). На схеме 1 X, Y, R и R имеют значения, как определены в формуле I.
2
3
Стадия (i) может быть реакцией замещения путем взаимодействия соединения 1 с соединением 2 с использованием подходящего основания, такого как CsCO, в подходящем растворителе, таком как N,N-диметилформамид (DMF), при подходящей температуре, такой как примерно 100°С, с получением соединения 3.
3
4
Стадия (ii) может быть реакцией сочетания с использованием подходящих реагентов, таких как CuI и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин, в присутствии подходящего основания, такого как KPO, в подходящем растворителе, таком как толуол, при подходящей температуре, такой как режим нагревания с обратным холодильником, с получением соединения 3.
2
3
Стадия (iii) может быть реакцией сочетания с использованием соответствующих реагентов, таких как Pddba и ди-трет- бутил(2',4',6'-триизопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)фосфин, в присутствии подходящего основания, такого как трет-бутоксид натрия, в подходящем растворителе, таком как толуол, при подходящей температуре, такой как 100°С, с получением соединения 3.
Общая схема 2
1a
1
1
1
Общая схема 2 предоставляет иллюстративный синтез для получения промежуточных соединений 1. R представляет собой R, когда R присоединен к кольцу через атом углерода R. Защитной группой могут быть любые подходящие защитные группы, например, тетрагидро-2H-пиран-2-ил (THP), (триметилсилил)этокси)метил (SEM) или ацетил (Ac).
2
2
3
2
2
Промежуточные соединения 1b могут быть получены на стадии (iv) взаимодействием исходного материала 1a с подходящими реагентами, такими как DHP, в присутствии подходящих кислот, таких как TsOH, в подходящих растворителях, таких как DCM, при подходящих температурах, таких как 20°С-40°С. Стадия (v) может быть реакцией кросс-сочетания между промежуточными соединениями 1b с подходящими реагентами, такими как бороновая кислота или сложные эфиры, с использованием подходящих палладиевых катализаторов, таких как Pd(dppf)Cl, в присутствии подходящих оснований, таких как NaCO, в подходящих растворителях, таких как 1,4-диоксан, при подходящих температурах, таких как 60°С-100°С, с получением соединений 1с, которые могут быть подвергнуты взаимодействию с подходящими окисляющими реагентами, такими как HO на стадии (vi), в подходящем растворителе, таком как THF, при подходящих температурах, таких как от -60°С C до -10°C для обеспечения промежуточного соединения 1d. Стадия (vii) может быть реакцией окисления путем взаимодействия промежуточных соединений 1d с окислителями, такими как DMP, в подходящих растворителях, таких как DCM, при подходящих температурах, таких как от 0°C до 25°C, с получением промежуточного соединения 1e. Промежуточные соединения 1f могут быть получены на стадии (viii) путем взаимодействия 1е с флюидизатором, таким как DAST, в подходящих растворителях, таких как DCM, при подходящих температурах, таких как от -78°C до 0°C. Стадия (ix) может быть реакцией удаления защитной группы путем взаимодействия 1е с подходящими кислотами, такими как HCl, в подходящих растворителях, таких как 1,4-диоксан, при подходящих температурах, таких как от 25°С до 40°С, с получением промежуточного соединения 1.
Промежуточные соединения 1d могут также непосредственно вступать в реакцию с флюидизатором, таким как DAST, на стадии (x) в подходящих растворителях, таких как DCM, при подходящих температурах, таких как от -78°C до 0°C, для получения промежуточного соединения 1g, которое взаимодействует с подходящими кислотами, такими как HCl на стадии (xi) в подходящих растворителях, таких как 1,4-диоксан, при подходящих температурах, таких как от 25°С до 40°С, с получением промежуточного соединения 1. Промежуточное соединение 1 также может быть получено взаимодействием 1с с подходящими восстанавливающими реагентами, такими как водород, в присутствии подходящих катализаторов, таких как Pd/C, в полярных растворителях, таких как MeOH, при соответствующих температурах, таких как от 25°C до 80°C на стадии (xii) для обеспечения промежуточного соединения 1h, с последующей реакцией удаления защитной группы с подходящими кислотами, такими как HCl, в подходящих растворителях, таких как 1,4-диоксан, при подходящих температурах, таких как от 25°C до 40°C на стадии (xiii).
Общая схема 3
1b
1
1
1
1c
1
1
1
d
1
1
1
Общая схема 3 предоставляет иллюстративный синтез для получения промежуточных соединений 1. R представляет собой R, когда R присоединен к кольцу через атом кислорода R. R представляет собой R, когда R присоединен к кольцу через атом азота R. R представляет собой R, когда R присоединен к кольцу через атом азота или атом кислорода R. Защитной группой может быть любая подходящая защитная группа, например,тетрагидро-2H-пиран-2-ил (THP), (триметилсилил)этокси)метил (SEM) или ацетил (Ac).
3
4
2
2
2
3
3
Промежуточные соединения 1i могут быть получены взаимодействием промежуточных соединений 1b с подходящими реагентами, такими как 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) с использованием соответствующих катализаторов, таких как Pd(PPh), в присутствии подходящих оснований, таких как KOAc, в подходящих растворителях, таких как DMF, при подходящих температурах, таких как 80°C-120°C, с последующим взаимодействием с подходящими реагентами, такими как HO, в присутствии подходящих оснований, таких как NaOH, в подходящих растворителях, таких как THF, при соответствующих температурах, таких как от 25°C-80°C на стадии (xiv). Промежуточные соединения 1j могут быть получены путем взаимодействия 1i с подходящими алкилирующими реагентами, такими как 2-йодпропан на стадии (xv), в присутствии подходящих оснований, таких как CsCO, в подходящих растворителях, таких как CHCN, при подходящих температурах, таких как 25°С-100°С. Стадия (xvi) может быть реакцией удаления защитной группы путем взаимодействия 1j с подходящими кислотами, такими как HCl, в подходящих растворителях, таких как 1,4-диоксан, при подходящих температурах, таких как 25°С-40°С, с получением промежуточного соединения 1.
2
3
2
3
Стадия (xvii) может быть реакцией сочетания Бухвальда между промежуточными соединениями 1b с различными аминами, такими как 1-метилпиперазин, с использованием подходящих палладиевых катализаторов, таких как Pd(dba), в присутствии подходящих оснований, таких как CsCO, и соответствующих лигандов, таких как BINAP, в соответствующих растворителях таких как PhMe, при подходящих температурах, таких как 80°С-130°С, для получения промежуточного соединения 1к, который взаимодействует с подходящими кислотами, такими как HCl, в подходящих растворителях, таких как 1,4-диоксан, при подходящих температурах, таких как 25°С-40°С на стадии (xviii) с получением промежуточных соединений 1.
Общая схема 4
Общая экспериментальная схема 4 предоставляет иллюстративный синтез для получения промежуточных соединений 2.
3
2
2
Стадия (xvii) может быть взаимодействием между промежуточными соединениями 2a с различными аминами, такими как морфолин, с использованием подходящих оснований, таких как TEA, в подходящих растворителях, таких как EtOH, при подходящих температурах, таких как 25°С-100°С, с получением промежуточного соединения 2. Промежуточные соединения 2 также могут быть получены реакцией сочетания между промежуточными соединениями 2а с подходящими реагентами, такими как бороновая кислота, в присутствии катализаторов, таких как Pd(PPh)Cl, в подходящих растворителях, таких как 1,4-диоксан, при температуре 25°С-130°С на стадии (xx).
Исходный материал и реагенты, описанные в вышеуказанных схемах, являются либо коммерчески доступными, либо могут быть легко получены из коммерчески доступных соединений, используя способы, известные специалисту в данной области техники.
ПРИМЕРЫ
Общие экспериментальные способы
Следующие описания и примеры иллюстрируют настоящее изобретение. Эти примеры не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения, а скорее для предоставления квалифицированному химику руководства для получения и использования соединений, композиций и способов по настоящему изобретению. Хотя описаны конкретные варианты осуществления настоящего изобретения, квалифицированный химик поймет, что могут быть сделаны различные изменения и модификации без отклонения от сущности и объема изобретения.
Химические названия соединений, описанных в настоящей заявке, следуют принципу номенклатуры ИЮПАК.
Нагревание реакционных смесей с микроволновыми излучением проводили на микроволновой печи Smith Creator (приобретенный у Personal Chemistry, Forboro/MA, теперь принадлежащем Biotage), Emrys Optimizer (приобретенный у Personal Chemistry) или Explorer (предоставлено CEM Discover, Matthews/NC).
Обычные способы могут быть использованы здесь для проведения реакций и очистки продуктов примеров.
Ссылки в приведенных ниже примерах, касающиеся сушки органических слоев или фаз, могут относиться к сушке раствора над сульфатом магния или сульфатом натрия и отфильтровыванию высушивающего средства в соответствии с общепринятыми методиками. Продукты обычно можно получить путем удаления растворителя путем выпаривания при пониженном давлении.
et al
Int. J. Mass Spectrom
Очистка соединений в примерах может быть осуществлена обычными способами, такими как хроматография и/или перекристаллизация с использованием подходящих растворителей. Хроматографические методы известны специалисту в данной области и включают, например, колоночную хроматографию, флэш-хроматографию, ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) и MDAP (управляемая по массе автоматизированная препаративная хроматография, также называемая масс-контролируемая система очистки ЖХМС). MDAP описывается, например, в W. Goetzinger , ., 2004, 238, 153-162.
2
Для тонкослойной хроматографии использовались тонкослойные пластины Analtech Silica Gel GF и E. Merck Silica Gel 60 F-254. И флэш- и гравитационную хроматографию проводили на силикагеле E. Merck Kieselgel 60 (230-400 меш). Препаративную ВЭЖХ проводили с использованием препаративной системы Gilson с использованием колонки с обращенной фазой Luna 5u C18(2) 100A, элюируя градиентом 10-80 (0,1% TFA в ацетонитриле/0,1% водном TFA) или градиентом 10-80 (ацетонитрил/вода). Система CombiFlash, используемая для очистки в этой заявке, была приобретена у Isco, Inc. Очистку с помощью CombiFlash проводили с использованием предварительно упакованной колонки SiO, детектора с длиной волны УФ излучения при 254 нм и смешанных растворителей.
Термины ʺCombiFlashʺ, ʺBiotageʺ, ʺBiotage 75ʺ и ʺBiotage SP4ʺ при использовании в настоящем описании относятся к коммерчески доступным автоматическим системам очистки с использованием предварительно упакованных картриджей с силикагелем.
1
19
3
6
3
Конечные соединения характеризовались ЖХМС (условия, перечисленные ниже) или ЯМР. Спектры H ЯМР или FЯМР регистрировали с использованием спектрометра Bruker Avance 400 МГц. CDCl представляет собой дейтерохлороформ, ДМСО-d представляет собой гексадейтериодиметилсульфоксид, и CDOD представляет собой тетрадейтериометанол. Значения химических сдвигов приводят в миллионных долях (м.д.) по отошению в внутреннему стандарту тетраметилсилану (ТМС) или ЯМР-растворителю. Сокращения для данных ЯМР следующие: с=синглет, д=дублет, т=триплет, кв=квартет, м=мультиплет, дд=двойной дублет, дт=двойной триплет, явн=явный, шир.=широкий. J обозначает константу взаимодействия ЯМР, измеряемую в Герцах.
Все температуры указаны в градусах Цельсия. Все остальные аббревиатуры описаны в ACS Style Guide (American Chemical Society, Washington, DC, 1986).
Абсолютную стереохимию можно определить способами, известными специалисту в данной области, например, рентгеновским или вибрационным круговым дихроизмом (VCD).
Когда описывается энантиомер или диастереоизомер, и абсолютная стереохимия хирального центра неизвестна, использование «*» в хиральном центре означает, что абсолютная стереохимия хирального центра неизвестна, т.е. соединение, как показано на рисунке, представлять собой или единственный R-энантиомер или единственный S-энантиомер. Когда абсолютная стереохимия известна и соединение представляет собой единственный энантиомер, жирный или пунктирный клинообразный символ () используют по мере необходимости, без использования «*» в хиральном центре.
В последующих способах после каждого исходного материала обычно указывается ссылка на промежуточное соединение. Это предоставляется только для помощи квалифицированному химику. Исходный материал необязательно должен быть получен из указанной партии.
Условия ЖХМС:
Оборудование: ВЭЖХ: Agilent 1200 и МС: Agilent 6120
1) Кислотные условия:
3
Подвижная фаза: вода, содержащая 0,05% TFA/0,05% CHCN
Колонка: Agilent SB-C18 4,6×30 мм-1,8 микрон
Обнаружение: МС и детектор с фотодиодной матрицей (PDA)
2) Основные условия:
4
3
3
Подвижная фаза: вода, содержащая 10 ммоль NHHCO/CHCN
Колонка: XBridgeTM C18 4,6×50 мм-3,5 микрон
Обнаружение: МС и детектор с фотодиодной матрицей (PDA)
3) Основные условия:
4
3
Подвижная фаза: вода, содержащая 0,02% NHOAc/CHCN
Колонка: Welch Ultimate XB-C18 5 мкм 4,6*33 мм
Обнаружение: МС и детектор с фотодиодной матрицей (PDA)
Условия MDAP:
1) Кислотные условия:
Оборудование: Waters instrument
Колонка: Sunfire Prep C18 column (5 мкм, 19×50 мм)
Подвижная фаза: вода, содержащая 0,05% TFA/ацетонитрил.
2) Основные условия:
Оборудование: Waters instrument
Колонка: Xbridge Prep C18 column (5 мкм, 19×50 мм)
Подвижная фаза: вода, содержащая 0,04% аммиак/ацетонитрил.
Условия препаративной ВЭЖХ
Оборудование: Waters instrument
Колонка: Xbridge Prep C18 column OBD (10 мкм, 19×250 мм)
Подвижная фаза: вода, содержащая 0,08% аммиак/ацетонитрил.
Оборудование для разделения для хиральной ВЭЖХ:
1. Gilson Gx-281 Prep LC (Gilson 806 Manometric Module, Gilson 811D Dynamic Mixer,Gilson Gx-281 prep liquid handler, Gilson 306 Pump *2, Gilson 156 Detector),
2. Agilent 1200 series Prep LC (Agilent G1361A Prep pump *2, Agilent G2260A Prep ALS, Agilent G1315D DAD Detector, Agilent G1364B Prep FC),
2
3. Thar SFC Prep 80 (TharSFC ABPR1, TharSFC SFC Prep 80 CO Pump, TharSFC Co-Solvent Pump, TharSFC Cooling Heat Exchanger and Circulating Bath, TharSFC Mass Flow Meter, TharSFC Static Mixer, TharSFC Injection Module, Gilson UV Detector, TharSFC Fraction Collection Module).
Условия анализа хиральной ВЭЖХ:
Оборудование: Agilent 1200 series HPLC или Thar Analytical SFC
Колонка и подвижная фаза: описаны в приведенных ниже примерах.
Колонка для хирального разделения: Chiral pak IE: размер частиц 5 мкм; размеры: 4,6 мм* 250 мм.
D

[α] получали с использованием автоматического поляриметра: SGW-1.
Сокращения и источники материалов
Следующие сокращения и материалы используются в настоящем документе ниже:
ACN - ацетонитрил
водн. -водный
BINAP - 2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтил
Boc - трет-бутилоксикарбонил
2
трет-
BocO - ди-бутилдикарбонат
конц. -концентрированный
DAST- N,N-диэтиламиносеры трифторид
DCE- 1,2-дихлорэтан
DCM - дихлорметан
DEA- диэтаноламин
H
DHP - 3,4-дигидро-2-пиран
DIBAL-H - диизобутилалюминий гидрид
DIEA - N,N-диизопропилэтиламин
N
N
DIPEA - ,-диизопропилэтиламин
N
N
DMA - ,-диметилацетамид
DMAP - 4-диметиламинопиридин
DMEDA- N,N'-диметилэтилендиамин
N
N
DMF -,-диметилформамид
DMP - Периодинан Десса-Мартина
DMSO - диметилсульфоксид
DPPF - 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен
EA - этилацетат
EDC - 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид
EDCI- 3-(этилиминометиленамино)-N,N-диметилпропан-1-амин
EtOH - этанол
EtOAc - этилацетат
3
EtN - триэтиламин
HAc - уксусная кислота
H
HATU - 2-(1-7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметил уроний гексафторфосфат
HOBT - гидроксибензотриазол
iPrOH - изопропиловый спирт
MOMCl - монохлордиметиловый эфир
MsCl - метансульфонилхлорид
NaHMDS - бис(триметилсилил)амид натрия
N
NIS - -йодсукцинимид
NMP - 1-метил-2-пирролидон
NMO - 4-метилморфолин 4-оксид
PMB - п-метоксибензил
2
PhNTf- N,N-бис-(трифторметансульфонил)анилин
PPTS - пиридиний п-толуолсульфонат
PTSA - п-толуолсульфоновая кислота
Ком.тем. -комнатная температура
Rt - время удерживания
насыщ. -насыщенный
SEM-Cl - 2-(триметилсилил)этоксиметил хлорид
TBDPSCl - трет-бутил(хлор)дифенилсилан
TEA - триэтиламин
TFA - трифторуксусная кислота
TFAA - трифторуксусный ангидрид
THF - тетрагидрофуран
TsCl- 4-толуолсульфонилхлорид
TsOH - п-толуолсульфоновая кислота
PE - петролейный эфир
Описание D1
6-бром-5-метил-1H-индазол (D1)
2
2
4
2
4
К раствору 5-бром-2,4-диметиланилина (15,0 г, 75,0 ммоль) в хлороформе (150 мл) добавляли AcO (15,0, 150 ммоль) на бане со льдом. Добавляли KOAc (8,00 г, 82,5 ммоль), 18-краун-6 (10,0 г, 37,5 ммоль) и изоамилнитрит (26,3 г, 225 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 36 часов. Реакционную смесь концентрировали и остаток растворяли в EtOAc (500 мл). Органический раствор промывали водой (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растворяли в THF (100 мл) и добавляли NaOH (4 M, 40,0 мл, 160 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разделяли между EtOAc (400 мл) и водой (200 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 10:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения (5,1 г, выход 32%) в виде оранжевого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,20 (шир. с, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,75 (с, 1H), 7,61 (с, 1H), 2,50 (с, 3H).
Описание D2
6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D2)
2
4
2
3
2
4
К раствору 6-бром-5-метил-1H-индазола (5,10 г, 24,2 ммоль) в сухом DCM (120 мл) добавляли DHP (4,10 г, 48,4 ммоль), TsOH (0,800 г, 4,80 ммоль) и MgSO(5,0 г) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали до 35°C и перемешивали в течение часа. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат промывали NaCO (10%, 100 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 50:1 до 20:1) с получением указанного в заголовке соединения (6,0 г, выход 84%) в виде оранжевого твердого вещества.
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,90 (с, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 5,63 (дд, 9,6, 3,0 Гц, 1H), 4,05-4,00 (м, 1H), 3,78-3,70 (м, 1H), 2,58-2,44 (м, 4H), 2,20-2,02 (м, 2H), 1,78-1,65 (м, 3H).
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,19 мин в 3 мин; МС Вычисл.: 294; МС Найдено: 295 [M+1].
Описание D3
Трет-
бутил 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(
2H
)-карбоксилат (D3)
трет-
2
3
2
2
2
4
К суспензии 6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (5,50 г, 18,6 ммоль), бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (6,90 г, 22,3 ммоль) и NaCO (4,90 г, 46,5 ммоль) в диоксане (150 мл) и воде (130 мл) добавляли Pd(dppf)Cl (658 мг, 0,900 ммоль). Смесь дегазировали N 3 раза и затем перемешивали при 80°C в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разделяли между EtOAc (300 мл) и водой (200 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (7,3 г, выход 99%) в виде слабо коричневого твердого вещества.
1
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,28 (с, 1H), 5,67 (дд, 9,6, 2,8 Гц, 1H), 5,63 (шир. с, 1H), 4,07-4,01 (м, 3H), 3,78-3,70 (м, 1H), 3,67-3,64 (м, 2H), 2,62-2,53 (м, 1H), 2,45-2,39 (м, 2H), 2,34 (с, 3H), 2,18-2,12 (м, 1H), 2,07-2,02 (м, 1H), 1,81-1,73 (м, 2H), 1,69-1,61 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
Описание D4 и D5
Транс-трет-
бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D4)
и
трет-
бутил 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D5)
трет-
2H
трет-
3
2
2
2
2
4
К раствору бутил 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1()-карбоксилата (6,00 г, 15,1 ммоль) в сухом THF (120 мл) добавляли раствор BH-THF (1 M, 151 мл, 151 ммоль) в атмосфере N и сохраняли внутреннюю температуру ниже 10°C. Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. После охлаждения реакционной смеси до 0°C, осторожно добавляли NaOH (вод, 2 M, 22,7 мл, 45,3 ммоль) и сохраняли внутреннюю температуру ниже 10°C. Затем, HO (30%, 20,0 мл, 151 ммоль) добавляли по каплям и сохраняли внутреннюю температуру ниже 10°C. Смесь перемешивали при 40°C в течение часа. Растворитель выпаривали и добавляли EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 5:1 до 2:1) с получением указанного в заголовке соединения бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (D4) (2,0 г чистого и 3,45 г с 80% чистотой) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,89 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,41 (с, 1H), 5,68-5,65 (м, 1H), 4,48-4,45 (м, 1H), 4,22 (шир. с, 1H), 4,02-4,00 (м, 1H), 3,96-3,89 (м, 1H), 3,80-3,71 (м, 1H), 3,03-2,95 (м, 1H), 2,83-2,68 (м, 2H), 2,60-2,50 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,20-2,10 (м, 1H), 2,06-2,02 (м, 1H), 1,94-1,62 (м, 6H), 1,51 (с, 9H).
трет-
трет-
3
2
2
2
2
2
3
2
4
К раствору бутил 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (33,0 г, 83,0 ммоль) в сухом THF (300 мл) добавляли BH-THF (1 M, 332 мл, 332 ммоль) при 10°C. Смесь постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и осторожно добавляли NaOH (водн, 2 M, 125 мл, 249 ммоль). Затем HO (30%, 87 мл, 830 ммоль). Температуру поддерживали ниже 10°C во время добавления NaOH и HO. Смесь перемешивали в течение часа при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляли NaSO (10%, 100 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделяли и водный экстрагировали EtOAc (100 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и выпаривали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 3:1 до 1:1) с получением трет-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата в виде основного продукта (D4) (23 г, выход 67%) в виде белого твердого вещества и бутил 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D5) в виде минорный продукт (6,7 г, выход 20%) в виде слабо коричневого твердого вещества.
1
3
D4, полученный в этой партии H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,89 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,41 (с, 1H), 5,68-5,65 (м, 1H), 4,48-4,45 (м, 1H), 4,22 (шир. с, 1H), 4,02-4,00 (м, 1H), 3,96-3,89 (м, 1H), 3,80-3,71 (м, 1H), 3,03-2,95 (м, 1H), 2,83-2,68 (м, 2H), 2,62-2,50 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,20-2,10 (м, 1H), 2,06-2,02 (м, 1H), 1,94-1,62 (м, 6H), 1,51 (с, 9H).
1
3
J
D5:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,90 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,34 (с, 1H), 5,68 (дд, =9,6 Гц, 2,7 Гц, 1H), 4,33-4,28 (м, 2H), 4,06-4,02 (м, 1H), 3,80-3,72 (м, 1H), 3,00-2,82 (м, 3H), 2,65-2,51 (м, 1H), 2,44 (с, 3H), 2,22-2,11 (м, 1H), 2,08-2,00 (м, 1H), 1,88-1,80 (м, 2H), 1,77-1,63 (м, 5H), 1,51 (с, 9H).
Описание D6
трет-
бутил 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-3-оксопиперидин-1-карбоксилат (D6)
3
2
2
3
2
4
К раствору трет-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (3,45 г, 8,30 ммоль) в сухом дихлорметане (80 мл) добавляли DMP (7,04 г, 16,6 ммоль) на бане со льдом. После перемешивания в течение 30 минут на бане со льдом смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали еще 1,5 часа. Реакционную смесь постепенно выливали в водный раствор (100 мл, 10% NaHCO и 10% NaSO) и перемешивали в течение 15 мин. Органический слой отделяли и водный экстрагировали дихлорметаном (200 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 10:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,6 г, выход 47%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,92 (с, 1H),7,53 (с, 1H), 7,29 (с, 1H), 5,68-5,65 (м, 1H), 4,36-4,29 (м, 1H), 4,13-3,87 (м, 4H), 3,76-3,68 (м, 1H), 3,59-3,47 (м, 1H), 2,62-2,47 (м, 1H), 2,40-2,27 (м, 5H), 2,21-2,09 (м, 1H), 2,09-1,97 (м, 1H), 1,78-1,64 (м, 3H), 1,51 (с, 9H). ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,15 мин через 3 мин; МС Вычисл.: 413; МС Найдено: 414 [M+1].
Описание D7
трет-
бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D7)
2
2
3
2
4
К раствору трет-бутил 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-3-оксопиперидин-1-карбоксилата (1,60 г, 3,90 ммоль) в сухом DCM (80 мл) добавляли DAST (6,30 г, 39,0 ммоль) в атмосфере N при -65°C. После перемешивания при -60°C в течение 30 минут смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь осторожно выливали в водный раствор NaCO (10%, 100 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали DCM (80 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и выпаривали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 10:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,0 г, выход 59%) в виде слабо желтого твердого вещества.
1
+
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,93 (с, 1H), 7,52 (с, 2H), 5,74-5,67 (м, 1H), 4,42 (шир. с, 2H), 4,07-3,99 (м, 1H), 3,80-3,71 (м, 1H), 3,51-3,41 (м, 1H), 3,17-2,83 (м, 2H), 2,65-2,51 (м, 1H), 2,45 (с, 3H), 2,34-2,07 (м, 3H), 1,93-1,83 (м, 1H), 1,83-1,71 (м, 2H), 1,71-1,62 (м, 1H), 1,52 (с, 9H). ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,39 мин через 3 мин; МС Вычисл.: 435; МС Найдено: 436 [M+1].
Описание D8
6-(3,3-Дифторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол гидрохлорид (D8)
К раствору трет-бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (1,00 г, 2,30 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли насыщ. HCl/диоксан (5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (770 мг, выход >100%) в виде слабо коричневого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=1,89 мин через 3 мин; МС Вычисл.: 251; МС Найдено: 252 [M+1].
Описание D9
6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (D9)
3
2
3
2
4
3
К раствору 6-(3,3-дифторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол гидрохлорида (420 мг, 1,70 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли формальдегид (37%, 3 мл) и NaBHCN (536 мг, 8,50 ммоль) при комнатной температуре. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в NaCO (10%, 20 мл). После перемешивания в течение 15 минут водный слой экстрагировали DCM (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в насыщ. NH/MeOH (3 мл) и перемешивали в течение ночи. Смесь выпаривали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (380 мг, выход 86%) в виде желтого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=1,81 мин через 3 мин; МС Вычисл.: 265; МС Найдено: 266 [M+1].
Описание D10 и D11
6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1) (D10) и 6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2) (D11)
Рацемат 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (380 мг, 1,43 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ (Chiralpak IC 5 мкм 4,6×250 мм, фаза: Hex/EtOH=80/20, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C) с получением 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (D10) (Rt: 6,740 мин, 120 мг, выход 32%) в виде белого твердого вещества и 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (D11) (Rt: 7,990 мин, 110 мг, выход 29%) в виде белого твердого вещества.
1
3
D10: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 11,60 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,72 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 3,46-3,27 (м, 2H), 3,17-3,12 (м, 1H), 2,59 (с, 3H), 2,53-2,25 (с, 6H), 2,00-1,92 (м, 1H).
1
3
D11:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 11,71 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 3,44-3,30 (м, 2H), 3,17-3,13 (м, 1H), 2,60 (с, 3H), 2,53-2,26 (с, 6H), 1,99-1,92 (м, 1H).
Описание D12
4-(6-Хлорпиримидин-4-ил)морфолин (D12)
К раствору 4,6-дихлор-пиримидина (10,0 г, 67,1 ммоль) в i-PrOH (70 мл) добавляли морфолин (5,84 г, 67,1 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2,5 часов при нагревании с обратным холодильником. После охлаждения твердое вещество получали фильтрованием. Твердое вещество разделяли между DCM (50 мл) и водой (50 мл). Органическую фазу концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (6,6 г, выход 50%).
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,38 (м, 1H), 6,48 (м, 1H), 3,75-3,78 (м, 4H), 3,60-3,63 (м, 4H).
Описание D13
4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (D13)
3
Смесь 4,6-дихлор-2-метоксипиримидина (700 мг, 3,91 ммоль), морфолина (340 мг, 3,91 ммоль) и NaHCO (822 мг, 9,78 ммоль) в этаноле (20 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли 20 мл воды. Смесь перемешивали в течение 30 минут и фильтровали. Твердое вещество собирали и промывали водой и эфиром. Указанное в заголовке соединение (660 мг, выход 73%) получали после высушивания под вакуумом в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,18 (с, 1H), 3,93 (с, 3H), 3,77-3,74 (м, 4H), 3,63-3,61 (м, 4H).
Описание D14
4-(6-хлор-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолин (D14)
2
4
К суспензии NaH (60%, 536 мг, 13,4 ммоль) в сухом THF (20 мл) добавляли EtOH (617 мг, 13,4 ммоль) при 0°C в атмосфере N. Суспензию перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Затем, суспензию охлаждали до -78°C и раствор 4,6-дихлор-2-метансульфонил-пиримидина (2,03 г, 8,90 ммоль) в THF (20 мл) добавляли к перемешиваемой смеси медленно, затем смесь перемешивали при -78°C в течение 1 часа. Добавляли насыщ. раствор NHCl (10 мл) и EtOAc (40 мл). Органический слой сушили и концентрировали в вакууме. Остаток очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=50:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,62 г, выход 94%) в виде бесцветного масла.
1
3
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,01 (с, 1H), 4,45 (кв, 7,2 Гц, 2H), 1,41 (т, 7,2 Гц, 3H).
Описание D15
4-(6-хлор-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолин (D15)
i
2
2
4
К раствору 4,6-дихлор-2-этоксипиримидина(2,10 г, 10,9 ммоль) в -PrOH (50 мл) добавляли морфолин (1,99 г, 22,8 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 90°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли HO (100 мл) и экстрагировали EtOAc (100 мл×3). Органические слои сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (2,1 г, выход 80%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,16 (с, 1H), 4,35 (кв, 7,2 Гц, 2H), 3,77-3,73 (м, 4H), 3,62-3,60 (м, 4H), 1,38 (т, 7,2 Гц, 3H).
Описание D16
4,6-дихлор-2-изопропоксипиримидин (D16)
2
2
4
К суспензии NaH (60%, 248 мг, 6,20 ммоль) в сухом THF (10 мл) добавляли i-PrOH (373 мг, 6,20 ммоль) на бане со льдом и в атмосфере N. После перемешивания в течение 20 мин, суспензию охлаждали до -60°C и добавляли 4,6-дихлор-2-(метилсульфонил)пиримидин (1,0 г, 4,4 ммоль) в сухом THF (10 мл) по каплям и держали температуру ниже -55°C. Полученную смесь перемешивали в течение часа при -55°C. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл) медленно и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (700 мг, выход 77%) в виде слабо желтой жидкости.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,98 (с, 1H), 5,34-5,21 (м, 1H), 1,40-1,37 (м, 6H).
Описание D17
4-(6-хлор-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолин (D17)
2
4
Раствор 4,6-дихлор-2-изопропоксипиримидина (660 мг, 3,19 ммоль) и морфолина (584 мг, 6,69 ммоль) в i-PrOH (20 мл) нагревали с обратным холодильником в течение часа. Реакционную смесь концентрировали и остаток разделяли между водой (30 мл) и EtOAc (20 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 10:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения (600 мг, выход 73%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: 5-95% CHCN в течение 3 мин; Rt=1,99 мин; МС Вычисл.: 257, МС Найдено: 258 [M+H].
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,14 (с, 1H), 5,27-5,14 (м, 1H), 3,76-3,73 (м, 4H), 3,61-3,58 (м, 4H), 1,35 (д, 6,3 Гц, 6H).
Описание D18
4-хлор-6-морфолинопиримидин-2-амин (D18)
2
К суспензии 4,6-дихлорпиримидин-2-амина (10 г, 61 ммоль) в MeOH (100 мл) добавляли морфолин (7,97 мл, 91 ммоль), DIPEA (22,5 мл, 121 ммоль) и смесь перемешивали при 65°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Около половины метанола выпаривали при пониженном давлении и затем фильтровали. Твердое вещество собирали, промывали EtO (20 мл) и затем сушили с получением 4-хлор-6-морфолинопиримидин-2-амина (9,6 г, 73% выход) в виде белого твердого вещества. ESI(MS): 215,1[M+H]
Описание D19
4-(6-хлор-2-иодпиримидин-4-ил)морфолин (D19)
2
2
3
2
4
насыщ.
К перемешиваемой смеси 4-хлор-6-морфолинопиримидин-2-амина (3 г, 14 ммоль), дийодметана (5,63 мл, 70 ммоль) и CuI (2,66 г, 14 ммоль) в THF (50 мл) добавляли 2-метил-2-нитропропан (4,99 мл, 43 ммоль) по каплям при 70°C. После добавления реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 3 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, EtOAc (200 мл) добавляли для разбавления раствора, добавляли NaSO (, 30 мл) и органический слой промывали водой (50 мл×2). Затем органический слой сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (PE:EtOAc=100:0-60:40) с получением 4-(6-хлор-2-иодпиримидин-4-ил)морфолина (2,2 г, 48,4% выход) в виде белого твердого вещества. ESI (MS): 325,9[M+H].
Описание D20
4-хлор-6-морфолинопиримидин-2-карбонитрил (D20)
2
2
4
4-(6-хлор-2-иодпиримидин-4-ил)морфолин (500 мг, 1,54 ммоль) и Zn(CN) (90 мг, 0,77 ммоль) растворяли в DMF (10 мл), добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (170 мг, 0,15 ммоль) и смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли для разбавления раствора EtOAc (30 мл), добавляли воду (10 мл) и органический слой отделяли. Органический слой дополнительно промывали водой (20 мл×3) и сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (PE:EtOAc=100:0→60:40) с получением 4-хлор-6-морфолинопиримидин-2-карбонитрила (280 мг, 81,3% выход) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): 7,06 (с, 1H), 3,66-3,87 (м, 8H).
ESI(MS): 225,1[M+H].
Описание D21
2-этилпиримидин-4,6-диол (D21)
2
Добавляли натрий (1,27 г, 55,3 ммоль) к безводному метанолу (50 мл) на бане со льдом. После того, как натрий полностью растворился добавляли пропионимидамид гидрохлорид (2,00 г, 18,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин. Затем добавляли по каплям диэтилмалонат (3,80 г, 23,9 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 часов. Смесь концентрировали в вакууме. Полученный остаток растворяли в воде (120 мл) и раствор подкисляли конц. HCl до pH=5. Смесь фильтровали и твердое вещество собирали. Твердое вещество последовательно промывали HO (15 мл), изопропанол (10 мл) и PE (10 мл), и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (0,96 г, выход: 38%) в виде белого твердого вещества.
1
d
J
J=
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 11,59 (шир. с, 2H), 5,01 (с, 1H), 2,46 (кв, =7,8 Гц, 2H), 0,97 (т,7,8 Гц, 3H).
3
+
ЖХ-МС: 5-95% CHCN в течение 3 мин, Rt=0,25 мин; МС Вычисл.:140, МС Найдено: 141 [M+H].
Описание D22
4,6-дихлор-2-этилпиримидин (D22)
3
3
2
4
В колбу (50 мл), содержащую 2-этилпиримидин-4,6-диол (963 мг, 6,87 ммоль), добавляли POCl(10 мл). Затем смесь нагревали до 100°C в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду (100 мл) и подщелачивали насыщенным NaHCO до pH=6-7. Затем смесь экстрагировали этилацетатом (40 мл×2). Органический слой сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (920 мг, выход 76%) в виде бесцветного масла.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,25 (с, 1H), 2,95 (кв, = 7,8 Гц, 2H), 1,35 (т, =7,8 Гц, 3H).
Описание D23
4-(6-хлор-2-этилпиримидин-4-ил)морфолин (D23)
К раствору 4,6-дихлор-2-этилпиримидина (920 мг, 5,20 ммоль) в изопропаноле (25 мл) добавляли морфолин (0,949 г, 10,9 ммоль). Смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 1 часа. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Затем остаток очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (960 мг, выход 81%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,31 (с, 1H), 3,79-3,75 (м, 4H), 3,64-3,61 (м, 4H), 2,74 (кв, =7,5 Гц, 2H), 1,28 (т, =7,5 Гц, 3H). ЖХ-МС: 5-95% CHCN за 3 мин, Rt=1,49 мин; МС Вычисл.:227, МС Найдено: 228 [M+H].
Описание D24
6-(6-Хлорпиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октан (D24)
3
2
4
Смесь 4,6-дихлор-пиримидина (0,800 г, 5,36 ммоль), 1-окса-6-азаспиро[3.4]октан оксалат (0,850 г, 5,36 ммоль) и EtN (1,35 г, 13,4 ммоль) в i-PrOH (10 мл) перемешивали при 90°C в течение 3 часов. Затем смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток обрабатывали этилацетатом (1 мл) и эфиром (15 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин и фильтровали. Твердое вещество сушили с получением желаемого соединения (1,0 г, выход 82%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): 8,38 (с, 1H), 6,30 (с, 1H), 4,72-4,63 (м, 4H), 3,87-3,33 (м, 4H), 2,37-2,27 (м, 2H).
Описание D25
(
R
)-Метил морфолин-2-карбоксилат гидрохлорид (D25)
2
К раствору морфолин-2-карбоновой кислоты (850 мг, 3,68 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли SOCl (1 мл) по каплям при 0°C. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут и перемешивали при 60°C в течение 2 часов. Смесь концентрировали при пониженном давлении с получением желаемого соединения (670 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества, который использовали на следующей стадии без очистки.
3
+
ЖХ-МС: 5-95% CHCN, Rt=0,35 мин, МС Вычисл.: 145, МС Найдено: 146 [M+H].
Описание D26
(
R
)-Метил 4-(6-хлорпиримидин-4-ил)морфолин-2-карбоксилат (D26)
R
2
4
К раствору ()-метил морфолин-2-карбоксилат гидрохлорида (335 мг, 1,85 ммоль) и TEA (2 мл) в EtOH (15 мл) добавляли 4,6-дихлор-пиримидин (412 мг, 2,77 ммоль). Смесь нагревали до 40°C в течение 1 часа. Затем реакционную смесь охлаждали и разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением желаемого соединения (460 мг, выход 97%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХ-МС: 5-95% CHCN, Rt=1,68 мин; МС Вычисл.:257, МС Найдено: 258 [M+H].
Описание D27
(
R
)-4-(6-Хлорпиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (D27)
R
3
2
3
Раствор ()-метил 4-(6-хлорпиримидин-4-ил)морфолин-2-карбоксилата (460 мг, 1,79 ммоль) в CHNH/CHOH (28-32%, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и очищали при помощи колонки (PE/EtOAc=1/1) с получением желаемого соединения (440 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,41 (шир.с, 1H), 6,62 (с, 2H), 4,46-4,38 (м, 2H), 4,12-3,98 (м, 2H), 3,72-3,60 (м, 1H), 3,12-2,91 (м, 2H), 2,86 (д, 4,8 Гц, 3H).
3
+
ЖХ-МС: 5-95% CHCN, Rt=1,21 мин; МС Вычисл.: 256, МС Найдено: 257 [M+H]
Описание D28
(
S
)-Метил морфолин-2-карбоксилат гидрохлорид (D28)
S
трет-
2
К раствору ()-4-(бутоксикарбонил)морфолин-2-карбоновой кислоты (1,00 г, 4,33 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли SOCl (2 мл) по каплям при 0°C. Затем смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 часа. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением белого твердого вещества (780 мг, выход 99%), который использовали на следующей стадии без очистки.
1
d
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-): δ 9,85 (шир. с, 1H), 9,56 (шир. с, 1H), 4,56-4,51 (м, 1H), 4,02-3,96 (м, 1H), 3,84-3,79 (м, 1H), 3,68 (с, 3H), 3,40-3,35 (м, 1H), 3,19-2,94 (м, 3H).
Описание D29
(
S
)-Метил 4-(6-хлорпиримидин-4-ил)морфолин-2-карбоксилат (D29)
S
2
4
К раствору ()-метил морфолин-2-карбоксилат гидрохлорида (780 мг, 4,30 ммоль) в EtOH (15 мл) добавляли 4,6-дихлор-пиримидин (769 мг, 5,16 ммоль) и TEA (2 мл). Смесь нагревали до 40°C в течение 1 часа. Затем реакционную смесь охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением желаемого соединения (1,0 г, выход 90%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХ-МС: 5-95% CHCN, Rt=1,68 мин; МС Вычисл.:257, МС Найдено: 258 [M+H].
Описание D30
(
S
)-4-(6-Хлорпиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (D30)
S
3
2
3
К раствору ()-метил 4-(6-хлорпиримидин-4-ил)морфолин-2-карбоксилата (1,00 г, 3,89 ммоль) в MeOH (20 мл) добавляли CHNH/CHOH (28-32%, 4 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и концентрировали. Остаток очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=1:1) с получением желаемого соединения (709 мг, выход 70%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,40 (с, 1H), 6,62 (с, 2H), 4,45-4,36 (м, 2H), 4,10-3,99 (м, 2H), 3,71-3,63 (м, 1H), 3,11-2,91 (м, 2H), 2,86 (д, 4,8 Гц, 3H).
Описание D31
(
R
)-Метил 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-карбоксилат (D31)
2
4
К раствору (R)-метил морфолин-2-карбоксилат гидрохлорида (335 мг, 1,85 ммоль) и TEA (1 мл) в EtOH (10 мл) добавляли раствор 4,6-дихлор-2-метокси-пиримидина (496 мг, 2,77 ммоль) в EtOH (5 мл). Смесь нагревали до 40°C в течение 1 часа. Затем реакционную смесь разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (450 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХ-МС: 5-95% CHCN, Rt=1,68 мин; МС Вычисл.:287, МС Найдено: 288 [M+H].
Описание D32
(
R
)-4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (D32)
R
3
2
3
Раствор ()-метил 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-карбоксилата (450 мг, 1,57 ммоль) в CHNH/CHOH (30%, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (420 мг, выход: 93%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,59 (шир. с, 1H), 6,29 (с, 1H), 4,42-4,32 (м, 2H), 4,06-3,97 (м, 2H), 3,93 (с, 3H), 3,70-3,61 (м, 1H), 3,09-2,91 (м, 2H), 2,86 (д, 5,1 Гц, 3H). ЖХ-МС: 5-95% CHCN, Rt=1,31 мин; МС Вычисл.: 286, МС Найдено: 287 [M+H].
Описание D33
6-(3,3-Дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (D33)
3
2
3
2
4
К раствору 6-(3,3-дифторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол гидрохлорида (300 мг, 1,05 ммоль) в метаноле (1 мл) и 1,2-дихлорэтана (5 мл) добавляли оксетан-3-он (864 мг, 12,0 ммоль). Затем, смесь перемешивали в течение 40 мин. Медленно добавляли NaBHCN (756 мг, 12,0 ммоль) и перемешивали еще 2 часа. Реакционную смесь выливали в водный раствор NaCO (10%, 20 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Водный слой экстрагировали дихлорметаном (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (DCM:MeOH=30:1) с получением указанного в заголовке соединения (200 мг, выход 62%) в виде желтого твердого вещества.
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 40% воды и 60% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 3 мин), Rt=0,97 мин; МС Вычисл.:307, МС Найдено: 308 [M+H].
Описание D34 и D35
6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (энантиомер 1) (D34) и 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (энантиомер 2) (D35)
H
H
Рацемат 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (300 мг, 0,98 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ (Chiralpak IB 5 мкм 4,6×250 мм; Фаза: Hex/EtOH=50/50; скорость потока: 1,0 мл/мин) с получением 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 1) (D34) (80 мг, Rt=9,1 мин, выход 27%) и 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (D35) (90 мг, Rt=12,0 мин, выход 30%) оба в виде белого твердого вещества.
1
3
D34: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,00 (с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,57 (с, 2H), 4,74-4,66 (м, 4H), 3,77-3,68 (м, 1H), 3,45-3,29 (м, 1H), 3,19-3,10 (м, 1H), 3,02-2,97 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,41-2,13 (м, 3H), 1,96-1,88 (м, 1H).
1
3
D35: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,00 (с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,57 (с, 2H), 4,74-4,66 (м, 4H), 3,77-3,68 (м, 1H), 3,46-3,29 (м, 1H), 3,19-3,09 (м, 1H), 3,02-2,97 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,41-2,13 (м, 3H), 1,94-1,90 (м, 1H).
Описание D36
6-бром-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1
H
-индазол (D36)
H
2
4
К раствору 6-бром-5-метил-1-индазола (22,0 г, 104 ммоль) в DMF (100 мл) добавляли NaH (8,32 г, 208 ммоль, 60% в материальном масле) при 0°C. После смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин, добавляли SEMCl (26,0 г, 208 ммоль) и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли воду со льдом (400 мл) и экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=20:1) с получением указанного в заголовке продукта (19,5 г, выход 55%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,88 (с, 1H), 7,82 (с,1H), 7,56 (с,1H), 5,66 (с,2H), 3,54-3,49 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 0,90-0,85 (м, 2H), 0,06 (с, 9H).
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 4 мин]: Rt=3,141 мин; МС Вычисл.: 340; МС Найдено: 341 [M+H].
Описание D37
трет-
бутил 4-(5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1
H
-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2
H
)-карбоксилат (D37)
H
трет-
H
2
3
2
2
2
4
К раствору 6-бром-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазола(19,5 г, 57,2 ммоль) в диоксане (400 мл) добавляли бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2)-карбоксилат (19,5 г, 62,9 ммоль) и NaCO (15,2 г, 143 ммоль), воду (80 мл) и Pd(dppf)Cl (2,12 г, 2,86 ммоль). Смесь перемешивали при 80°C в течение ночи в атмосфере N. Растворитель удаляли в вакууме и остаток экстрагировали EtOAc (2×200 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (21,5 г, выход 85%) в виде бесцветного масла.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): 7,91 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,30 (с, 1H), 5,71 (с, 2H), 5,63 (шир. с, 1H), 4,08-4,07 (м, 2H), 3,68-3,64 (м, 2H), 3,55 (т, =8,1 Гц, 2H), 2,40-2,37 (м, 5H), 1,52 (с, 9H), 0,89 (т, =8,1 Гц, 2H), 0,06 (с, 9H).
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 4 мин]: Rt=3,568 мин; МС Вычисл.: 443; МС Найдено: 444 [M+H].
Описание D38
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1
H
-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D38)
трет-
H
H
3
2
2
2
2
3
2
4
К раствору бутил 4-(5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2)-карбоксилат (16,0 г, 36,1 ммоль) в THF (160 мл) добавляли раствор BH-THF (1 M, 144 мл, 144 ммоль) при 0°C. Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и осторожно добавляли NaOH (вод., 2 M, 54 мл, 108 ммоль) при 0°C. Затем добавляли по каплям HO (30%, 38,0 мл, 361 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение часа. Смесь выливали в насыщ. раствор NaSO (400 мл) и экстрагировали EtOAc (300 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл×2), сушили над NaSO и выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат 10:1-2:1) с получением указанного в заголовке соединения (10,0 г, выход 60%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,89 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 5,66 (с, 2H), 4,50-4,42 (м, 1H), 4,27-4,18 (м, 1H), 3,97-3,89 (м, 1H), 3,56-3,51 (м, 2H), 3,04-2,96 (м, 1H), 2,84-2,68 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 1,85-1,80 (м, 1H), 1,73-1,67 (м, 1H), 1,50 (с, 9H), 0,89-0,84 (м, 2H), -0,08 (с, 9H).
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 4 мин]: Rt=2,851 мин; МС Вычисл.: 461; МС Найдено: 462 [M+H].
Описание D39
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1
H
-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D39)
трет-
H
2
3
2
4
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (11,0 г, 23,7 ммоль) в сухом DCM (100 мл) добавляли DAST (11,4 г, 71,1 ммоль) в атмосфере N при -78°C. Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли насыщ. раствор NaHCO (200 мл). Смесь экстрагировали DCM (100 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и выпаривали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат от 10:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения (4,20 г, выход 38%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,91 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,47 (с, 1H), 5,73 (с, 2H), 4,83-4,56 (м, 2H), 4,31-4,17 (м, 1H), 3,58-3,53 (м, 2H), 3,26-3,18 (м, 1H), 2,92-2,80 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 1,95-1,87 (м, 1H), 1,83-1,72 (м, 1H), 1,53 (с, 9H), 0,92-0,87 (м, 2H), -0,06 (с, 9H).
Описание D40
(цис)-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1
H
-индазол (D40)
трет-
H
3
2
4
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (2,60 г, 5,61 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли насыщ. HCl/диоксан (20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO (200 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (1,9 г, выход 93%) в виде желтого масла.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 3 мин), Rt=2,12 мин; МС Вычисл.: 363; МС Найдено: 364 (M+1).
Описание D41, D42 и D43
(цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1
H
-индазол (D41),
(цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1
H
-индазол (энантиомер 1) (D42) и
(цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1
H
-индазол (энантиомер 2) (D43)
H
H
H
H
H
3
2
3
К раствору (цис)-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазола (1,60 г, 4,41 ммоль) в CHCN (20 мл) добавляли 1-бром-2-метокси-этан (1,23 г, 8,82 ммоль) и KCO (1,22 г, 8,82 ммоль). Затем смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Органический слой концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=2:1) с получением неочищенного продукта (720 мг). Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазол (D41) (520 мг, выход 28%) в виде желтого масла. Продукт (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазол (D41) разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ (Chiralpak AD-3 33 мкм 4,6×150 мм, Фаза: Hex/EtOH=95/5, скорость потока (F): 1 мл/мин, температура: 30°C) с получением (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазола (энантиомер 1) (D42) (Rt: 4,501 мин, 230 мг, выход 12%) в виде желтого масла и (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазола (энантиомер 2) (D43) (Rt: 7,828 мин, 230 мг, выход 12%) в виде желтого масла.
1
3
J
D41: H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,88 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 5,68 (с, 2H), 5,01-4,83 (м, 1H), 3,56-3,46 (м, 5H), 3,39 (с, 3H), 3,10-2,99 (м, 2H), 2,74-2,68 (м, 2H), 2,46 (с, 3H), 2,28-2,17 (м, 2H), 1,91-1,90 (м, 2H), 0,87 (т, =8,0 Гц, 2H), -0,07 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,72 мин; МС Вычисл.: 421 МС Найдено: 422 [M+1].
Описание D44
(цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (энантиомер 1) (D44)
H
3
2
4
3
3
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазол (энантиомер 1) (230 мг, 0,546 ммоль) в диоксане (4 мл) добавляли конц.HCl (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO (60 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растворяли в NH-CHOH (10 мл, 5 м) и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (160 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,48 мин; МС Вычисл.: 291 МС Найдено: 292 [M+1].
Описание D45
(цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (энантиомер 2) (D45)
H
3
2
4
3
3
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1-индазола (энантиомер 2) (230 мг, 0,546 ммоль) в диоксане (4 мл) добавляли конц.HCl (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO (60 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растворяли в NH-CHOH (10 мл, 5 м) и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (160 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,40 мин; МС Вычисл.: 291 МС Найдено: 292 [M+1].
Описание D46
(цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D46)
трет-
2
2
3
2
4
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (24,5 г, 59,0 ммоль) в сухом DCM (200 мл) добавляли DAST (38,0 г, 236 ммоль) в атмосфере N при -65°C. Смесь постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь осторожно выливали в водный раствор NaCO (10%, 300 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделяли и водный экстрагировали DCM (250 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и выпаривали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (11,8 г, выход 48%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,41 (с, 1H), 5,74-5,67 (м, 1H), 4,80-4,59 (м, 2H), 4,21 (шир. с, 1H), 4,07-3,99 (м, 1H), 3,80-3,71 (м, 1H), 3,25-3,19 (м, 1H), 2,89-2,79 (м, 2H), 2,65-2,51 (м, 1H), 2,45 (с, 3H), 2,19-2,15 (м, 1H), 2,15-2,04 (м, 1H), 1,93-1,88 (м, 1H), 1,80-1,74 (м, 5H), 1,52 (с, 9H).
3
+
ЖХМС: 5-95% CHCN, Rt=2,25 мин через 3 мин; МС Вычисл.: 417; МС Найдено: 418 (M+1).
Описание D47
((цис)-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1
H
-индазол (D47)
3
3
3
2
4
3
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (1,60 г, 3,84 ммоль) в CHOH (10 мл) добавляли HCl/CHOH (5 M, 20 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO (200 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колонки C18 (5%-60% CHCN в воде ) с получением указанного в заголовке соединения (600 мг, выход 49%) в виде желтого масла.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,46 мин; МС Вычисл.: 317; МС Найдено: 318 [M+1].
Описание D48
(цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2
H
-пиран-2-ил)-1
H
-индазол (D48)
3
2
3
К раствору (цис)-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (600 мг, 1,89 ммоль) в CHCN (5 мл) добавляли 1-бром-2-метокси-этан (525 мг, 3,78 ммоль) и KCO (521 мг, 3,78 ммоль). Затем смесь нагревали до 60°C при микроволновом излучении в течении 1,5 ч. Смесь концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (500 мг, выход 71%) в виде желтого масла.
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,90 (с, 1H), 7,55 (д, =8,4 Гц, 1H), 7,49 (с, 1H), 5,67-5,64 (м, 1H), 5,10-4,87 (м, 1H), 4,05-4,02 (м, 1H), 3,78-3,71 (м, 1H), 3,61-3,50 (м, 3H), 3,38 (с, 3H), 3,15-3,03 (м, 2H), 2,84-2,79 (м, 2H), 2,60-2,52 (м, 1H), 2,44 (с, 3H), 2,31-1,95 (м, 7H), 1,79-1,72 (м, 2H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,66 мин; МС Вычисл.: 375 МС Найдено: 376 [M+1].
Описание D49
(цис)-6-(3-Фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (D49)
3
2
4
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (500 мг, 1,33 ммоль) в диоксане (4 мл) добавляли конц. HCl (8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO (200 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (350 мг, выход 90%) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,49 мин; МС Вычисл.: 291 МС Найдено: 292 [M+1].
Описание D50 и D51
(цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (энантиомер 1') (D50) и (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (энантиомер 2') (D51)
H
H
H
(цис)-6-(3-Фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол (350 мг, 1,20 ммоль) разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ способом (Chiralpak IC 33 мкм 4,6×250 мм, фаза: Hex/EtOH=70/30, скорость потока: 1 мл/мин, температура: окружающая среда) с получением (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 1')(D50) (100 мг, выход 29%, Rt: 11,255 мин, 100% э.и.) в виде белого твердого вещества и (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2') (D51) (100 мг, выход 29%, Rt: 13,747 мин, 99,3% э.и.) в виде белого твердого вещества.
+
D50: ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,50 мин; МС Вычисл.: 291 МС Найдено: 292 [M+1].
+
D51: ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,49 мин; МС Вычисл.: 291 МС Найдено: 292 [M+1].
Описание D52
1-Бензгидрил-3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин (D52)
К раствору 1-бензгидрилазетидин-3-ол, гидрохлорида (5 г, 18,13 ммоль) в DCM (50 мл) добавляли PPTS (2,278 г, 9,07 ммоль) и DHP (6,63 мл, 72,5 ммоль). Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После концентрирования остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (30-50% MeOH в PE) с получением 1-бензгидрил-3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидина (5 г, 15,46 ммоль, 85% выход).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,76 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 323; МС Найдено: 324 [M+1].
Описание D53
3-((Тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин (D53)
Смесь 1-бензгидрил-3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидина (1 г, 3,09 ммоль) и Pd-C (3,29 г, 3,09 ммоль) и метанол (15 мл) перемешивали в атмосфере водорода из баллона при комнатной температуре в течение 16 часов. После фильтрации, фильтрат концентрировали с получением 3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидина (450 мг, 2,86 ммоль, 93% выход) в виде неочищенного продукта.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=0,63 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 157; МС Найдено: 158 [M+1].
Описание D54
2-хлор-5-(метоксиметокси)пиридин (D54)
3
2
4
К раствору 6-хлорпиридин-3-ола (5,0 г, 38,5 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (9,92 г, 76,9 ммоль) в безводном DCM (120 мл) при 0°C в атмосфере азота добавляли метилхлорметиловый эфир (6,15 г, 76,9 ммоль) по каплям. Полученной смеси давали нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь экстрагировали DCM и промывали насыщ. NaHCO несколько раз. Органическую фазу объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи колонки, элюируя PE/EtOAc (10:1-7:1) с получением указанного в заголовке соединения (4,16 г, 63%) в виде желтого масла.
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): 8,15 (д, =2,7 Гц, 1H), 7,34 (дд, =8,4, 3,0 Гц 1H) 7,21 (д, =9,0 Гц, 1H), 5,16 (с, 2H), 3,47 (с, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHAc) и 95% CHCN за 6,5 мин, чистота составляет >95%, Rt=3,642 мин; МС Вычисл.:173, МС Найдено: 174 [M+H].
Описание D55
2-хлор-4-иод-5-(метоксиметокси)пиридин (D55)
4
nBuLi (7,92 мл, 15,84 ммоль) добавляли по каплям в течение 30 мин к охлажденному -78°C раствору 2-хлор-5-(метоксиметокси)пиридина (2,5 г, 14,40 ммоль), растворенному в THF (50 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при -78°C. Добавляли раствор йода (4,39 г, 17,28 ммоль) в THF (5 мл) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов. Реакцию гасили насыщ. NHCl и добавляли тиосульфит натрия. Смесь перемешивали в течение 30 минут и затем экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты промывали тиосульфитом натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Очистка при помощи хроматографии на силикагеле (20-30% EA в PE) дает 2-хлор-4-иод-5-(метоксиметокси)пиридин (3,9 г, 13,02 ммоль, 90% выход).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=3,29 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 299; МС Найдено: 300 [M+1].
Описание D56
6-хлор-4-йодпиридин-3-ол (D56)
К раствору 2-хлор-4-иод-5-(метоксиметокси)пиридина (3,9 г, 13,02 ммоль) и метанола (30 мл) добавляли водн. концентрированную HCl (0,989 мл, 32,6 ммоль). Реакционный раствор кипятили с обратным холодильником в течение 4 часов, давали охладиться до комнатной температуры, и концентрировали в вакууме, остаток 6-хлор-4-йодпиридин-3-ол (3,33 г, 13,02 ммоль, 100% выход) использовали непосредственно без дальнейшая очистка.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,71 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 255; МС Найдено: 256 [M+1].
Описание D57
2-хлор-4-иод-5-метоксипиридин (D57)
2
4
6-хлор-4-йодпиридин-3-ол (3,3 г, 12,92 ммоль) растворяли в DMF (30 мл) и обрабатывали карбонатом калия (12,50 г, 90 ммоль), затем метилиодидом (1,212 мл, 19,38 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Смесь выливали в 20% водную лимонную кислоту и экстрагировали этилацетатом. Органические экстракты промывали водой, насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле (20-25% EA в PE) дает 2-хлор-4-иод-5-метоксипиридин (2,8 г, 10,39 ммоль, 80% выход).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,05 (1 H, с), 7,97 (1 H, с), 3,95 (3 H, м)
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=3,18 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 269; МС Найдено: 270 [M+1].
Описание D58
2-хлор-5-метокси-4-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиридин (D58)
Смесь 3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидина (210 мг, 1,336 ммоль), 2-хлор-4-иод-5-метоксипиридина (300 мг, 1,113 ммоль), 18-краун-6 (294 мг, 1,113 ммоль), карбоната калия (308 мг, 2,227 ммоль) и DMA (5 мл) подвергали действию излучения при помощи микроволновая печь до 180°C в течение 4 часов, затем разбавляли этилацетатом, промывали водой, насыщенным солевым раствором, сушили над сульфитом натрия, концентрировали и очищали при помощи колонки С18 (0,5% TFA в воде, вода/ацетонитрил) с получением 2-хлор-5-метокси-4-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиридина (200 мг, 0,669 ммоль, 60,1% выход).
1
d
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-): δ 7,69 (1 H, с) 6,29 (1 H, с) 4,64 (1 H, м) 4,56 (1 H, м) 4,28 (2 H, м) 3,90 (2 H, дт) 3,78 (4 H, м) 3,46 (1 H, дд) 1,68 (2 H, м) 1,47 (4 H, м)
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=2,42 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 298; МС Найдено: 299 [M+1].
Описание D59
(цис)-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол гидрохлорид (D59)
трет-
H
H
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2-пиран-2-ил)-1-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (2,50 г, 6,00 ммоль) в HCl/диоксане (6 моль/л, 40 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и фильтровали. Твердое вещество промывали холодным 1,4-диоксаном (5 мл) для получения указанного в заголовке соединения (1,4 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
3
+
ЖХ-МС: 5-95% CHCN, Rt=1,73 мин; МС Вычисл.:233, МС Найдено: 234 [M+H].
Описание D60
(цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (D60)
H
3
4
К раствору (цис)-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол гидрохлорида (1,40 г, 6,00 ммоль) и оксетан-3-она (2,16 г, 30,0 ммоль) в метаноле (5 мл) и 1,2-дихлорэтане (50 мл) добавляли NaBHCN (1,13 г, 18,0 ммоль). Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали дихлорметаном (100 мл×3). Объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (DCM:MeOH=30:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,0 г, выход 57,6%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХ-МС: 5%-95% CHCN, Rt=1,85 мин; МС Вычисл.:289, МС Найдено: 290 [M+H].
Описание D61 и D62
(цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (энантиомер 1) (D61) и (цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол (энантиомер 2) (D62)
H
H
H
Рацемат (цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол (1,20 г, 4,15 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ (Chiralpak OJ-H 5 мкм 4,6×250 мм; Фаза: Hex/EtOH=50/50; скорость потока: 1,0 мл/мин) с получением (цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 1) (D61) (350 мг, Rt=8,07 мин, выход 29%) и (цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (D62) (350 мг, Rt=14,21 мин, выход 29%) оба в виде белого твердого вещества.
1
3
D61: H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 10,02 (шир. с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 4,95-4,76 (м, 1H), 4,73-4,69 (м, 2H), 4,69-4,64 (м, 2H), 3,66-3,63 (м, 1H), 3,26-3,23 (м, 1H), 3,15-3,07 (м, 1H), 2,84-2,81 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,13-2,08 (м, 1H), 2,07-1,93 (м, 2H), 1,86-1,83 (м, 1H).
1
3
D62:H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 10,02 (шир. с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 4,95-4,76 (м, 1H), 4,73-4,69 (м, 2H), 4,69-4,64 (м, 2H), 3,67-3,61 (м, 1H), 3,28-3,22 (м, 1H), 3,14-3,04 (м, 1H), 2,84-2,81 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,13-2,08 (м, 1H), 2,07-1,93 (м, 2H), 1,86-1,83 (м, 1H).
Описание D63
(цис)-
6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (D63)
(цис)-
2
3
2
3
2
4
3
2
4
К раствору 6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол гидрохлорида (2,1 г, неочищенный, 6,2 ммоль) в метаноле (14 мл) добавляли CHO (37%, 14 мл) на бане со льдом. Затем NaBHCN (1,2 г, 18,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь выливали в NaCO (10%, 150 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали DCM (70 мл×3) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в NH/MeOH (5 M, 20 мл) и перемешивали в течение ночи. ЖХМС показала завершенную реакцию. Реакционную смесь выливали в воду (150 мл) и водный слой экстрагировали DCM (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (DCM/MeOH=40/1) с получением указанного в заголовке соединения (1,04 г, выход 68%) в виде белого твердого вещества.
3
+=
ЖХМС: 5-95% CHCN за 2,5 мин; Rt=1,43 мин, [M+H]248.
Описание D64 и D65
(цис)-
6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1) (D64) и
(цис)-
6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2) (D65)
(цис)-
(цис)-
(цис)-
6-(3-Фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол(1,2 г, 4,9 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ (Chiralpak OJ-H 5 мкм 4,6×250 мм, фаза: Hex/EtOH=80/20, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C) с получением 6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1)(D64)(430 мг, выход 36%, Rt=7,203 мин, 100% э.и.) и 6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (D65) (430 мг, выход 36%, Rt=12,351 мин, 99,1% э.и.) оба в виде белого твердого вещества.
1
3
D64:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,61 (шир. с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 5,01-5,76 (м, 1H), 3,40-3,34 (м, 1H), 3,14-3,01 (м, 1H), 2,97-2,93 (м, 1H), 2,47 (с, 6H), 2,27-2,10 (м, 2H), 1,98-1,79 (м, 2H).
1
3
D65: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,92 (шир. с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 5,02-5,77 (м, 1H), 3,42-3,35 (м, 1H), 3,15-3,01 (м, 1H), 2,99-2,94 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,28-2,11 (м, 2H), 1,98-1,79 (м, 2H).
Описание D66
1-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (D66)
2
4
Суспензию 4,6-дихлор-2-метоксипиримидина (1,0 г, 5,6 ммоль), азетидин-3-ол гидрохлорида (614 мг, 5,60 ммоль) и TEA (1,70 г, 16,8 ммоль) в i-PrOH (20 мл) нагревали до 85°C и перемешивали в течение 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разделяли с EtOAc (50 мл) и водой (50 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл×3) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (1,17 г, выход 97%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 5,86 (с, 1H), 4,84-4,79 (м, 1H), 4,34-4,30 (м, 2H), 3,98-3,95 (м, 2H), 3,92 (с, 3H), 3,13 (шир. с, 1H).
3
+=
ЖХМС: 5-95% CHCN за 2,5 мин; Rt=1,27 мин, [M+H]216.
Описание D67
4-хлор-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (D67)
2
3
2
4
К суспензии 1-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (500 мг, 2,32 ммоль) в сухом DCM (10 мл) добавляли DHP (390 мг, 4,64 ммоль) и TsOH (79 мг, 0,46 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь промывали NaCO (10%, 40 мл) и затем экстрагировали DCM (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE/EtOAc=5/1) с получением указанного в заголовке соединения (690 мг, выход 99%) в виде светло желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,88 (с, 1H), 4,72-4,64 (м, 2H), 4,35-4,23 (м, 2H), 4,09-3,96 (м, 2H), 3,92 (с, 3H), 3,90-3,83 (м, 1H), 3,57-3,50 (м, 1H), 1,88-1,69 (м, 2H), 1,66-1,49 (м, 4H).
3
+
ЖХМС: 5-95% CHCN за 2,5 мин; Rt=1,46 мин, [M+H]=300.
Описание D68
(цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1
H
-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D68)
H
3
2
2
К раствору (цис)-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазол гидрохлорида (500 мг, 2,14 ммоль) в CHOH (5 мл) и HO (1 мл) добавляли KOH (242 мг, 4,29 ммоль) и (Boc)O (700 мг, 3,21 ммоль) на бане со льдом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (180 мг, выход 25%) в виде бесцветного масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,98 (с, 1H), 7,96 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,39 (с, 1H), 4,76-4,54 (м, 2H), 4,27-4,10 (м, 1H), 3,25-3,14 (м, 1H), 2,91-2,76 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 1,97-1,84 (м, 1H), 1,71-1,62 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
Описание D69 и D70
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(5-метил-1
H
-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D69) и (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1
H
-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D70)
трет-
H
H
(цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (140 мг, 0,420 ммоль) разделяли хиральной препаративной ВЭЖХ способом (Chiralpak IB 5 мкм 20*250 нм, Hex:i-PrOH=80:20, поток: 20 мл/мин, 205 нм, T=30°C) с получением (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (D69) (68 мг, выход 48%) в виде белого твердого вещества и (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (D70) (47 мг, выход 33%) в виде белого твердого вещества.
-
D69:ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,64 мин; МС Вычисл.: 333 МС Найдено: 332 [M-1].
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,07 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,39 (с, 1H), 4,78-4,53 (м, 2H), 4,32-4,12 (м, 1H), 3,26-3,13 (м, 1H), 2,93-2,75 (м, 2H), 2,47 (с, 3H), 1,94-1,79 (м, 1H), 1,69-1,60 (м, 1H), 1,49 (с, 9H).
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6×250 мм, Фаза: Hex/IPA=80/20, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C, Rt: 6,142 мин, 100% э.и.
-
D70:ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,64 мин; МС Вычисл.: 333 МС Найдено: 332 [M-1].
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,45 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,39 (с, 1H), 4,75-4,55 (м, 2H), 4,26-4,16 (м, 1H), 3,24-3,17 (м, 1H), 2,90-2,74 (м, 2H), 2,46 (с, 3H), 1,93-1,87 (м, 1H), 1,70-1,61 (м, 1H), 1,50 (с, 9H).
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6×250 мм, Фаза: Hex/IPA=80/20, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C, Rt: 7,671 мин, 100% э.и.
Описание D71
4,6-дииод-2-метилпиримидин (D71)
К раствору NaI (11,9 г, 79,7 ммоль) в HI (55%, 50 мл) добавляли 4,6-дихлор-2-метилпиримидин (10,0 г, 61,3 ммоль) по частям. Полученная суспензия нагревали до 40°C и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали и фильтровали. Твердое вещество промывали водой и затем растирали с метанолом (50 мл). Смесь фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (9,0 г, выход 42%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,07 (с, 1H), 2,67 (с, 3H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,59 мин, МС Вычисл.: 346; МС Найдено: 347 [M+H].
Описание D72
1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (D72)
Суспензию 4,6-дииод-2-метилпиримидина (2,00 г, 5,80 ммоль), азетидин-3-ол гидрохлорида (700 мг, 6,38 ммоль) и TEA (1,76 г, 17,4 ммоль) в i-PrOH (12 мл) нагревали до 75°C и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и остаток растирали с водой (50 мл), фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (1,2 г, выход 71%) в виде белого твердого вещества.
1
d
J=
J=
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-): δ 6,69 (с, 1H), 5,79 (д, 6,4 Гц, 1H), 4,59-4,52 (м, 1H), 4,22-4,18 (м, 2H), 3,72 (дд, 9,6, 4,4 Гц, 2H), 2,29 (с, 3H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,18 мин, МС Вычисл.: 291; МС Найдено: 292 [M+H].
Описание D73
4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (D73)
2
3
4
К суспензии 1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (1,20 г, 4,12 ммоль) в сухом DCM (20 мл) добавляли DHP (1,38 г, 16,4 ммоль) и TsOH (280 мг, 1,64 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником и перемешивали в течение 20 часов. Реакционную смесь разбавляли DCM до 100 мл и затем промывали NaCO (насыщ., 50 мл) и насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,5 г, выход 97%) в виде бесцветного масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,48 (с, 1H), 4,70-4,60 (м, 2H), 4,33-4,18 (м, 2H), 4,08-3,92 (м, 2H), 3,90-3,80 (м, 1H), 3,57-3,48 (м, 1H), 2,45 (с, 3H), 1,89-1,69 (м, 2H), 1,64-1,49 (м, 4H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,59 мин, МС Вычисл.: 375; МС Найдено: 376 [M+H].
Описание D74
(цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1
H
-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D74)
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (83 мг, 0,25 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (112 мг, 0,300 ммоль), CuI (142 мг, 0,750 ммоль), KPO (159 мг, 0,750 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (106 мг, 0,750 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (5 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие: от 65% воды (0,1% TFA) и 35% CHCN до 20% воды (0,1% TFA) и 80% CHCN за 20 мин) с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 55%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 3 мин], Rt=2,38 мин; МС Вычисл.: 580; МС Найдено: 581 [M+H].
Описание D75
(цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорид (энантиомер 1) (D75)
H
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1)(80 мг, 0,14 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли HCl/метанол (8 моль/л, 5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход >100%) в виде желтого твердого вещества.
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 10,02 (шир. с, 1H), 9,46 (шир. с, 1H), 8,78 (с, 1H), 8,40 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 6,62 (с, 1H), 5,36-5,04 (м, 1H), 4,66-4,57 (м,1H), 4,43-4,29 (м, 2H), 3,97-3,85 (м, 2H), 3,73-3,63 (м, 1H), 3,58-3,42 (м, 1H), 3,38-3,28 (м, 1H), 3,21-3,04 (м, 2H), 2,65 (с, 3H), 2,44 (с, 6H), 2,10-1,94 (м, 2H).
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 2,5 мин], Rt=1,25 мин; МС Вычисл.: 396; МС Найдено: 397[M+H].
Описание D76
(цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D76)
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (83 мг, 0,25 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (112 мг, 0,300 ммоль), CuI (142 мг, 0,750 ммоль), KPO (159 мг, 0,750 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (106 мг, 0,750 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (5 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие: от 65% воды (0,1% TFA) и 35% CHCN до 20% воды (0,1% TFA) и 80% CHCN за 20 мин) с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 55%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 2,5 мин], Rt=1,89 мин; МС Вычисл.: 580; МС Найдено: 581 [M+H].
Описание D77
(цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорид (энантиомер 2) (D77)
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (80 мг, 0,14 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли HCl/метанол (8 моль/л, 5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход >100%) в виде желтого твердого вещества.
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 10,23 (шир.с, 1H), 9,50 (шир.с, 1H), 8,77 (с, 1H), 8,43 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 6,64 (с, 1H), 5,38-5,14 (м, 1H), 4,69-4,58 (м,1H), 4,46-4,35 (м, 2H), 3,99-3,89 (м, 2H), 3,72-3,62 (м, 1H), 3,58-3,47 (м, 1H), 3,38-3,30 (м, 1H), 3,22-3,04 (м, 2H), 2,69 (с, 3H), 2,44 (с, 6H), 2,15-1,92 (м, 2H).
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 2,5 мин], Rt=1,20 мин; МС Вычисл.: 396; МС Найдено: 397 [M+H].
Описание D78
5-(3-(Бензилокси)циклобутанкарбонил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4,6-дион (D78)
4
4
2
4
К раствору 3-(бензилокси)циклобутанкарбоновой кислоты (5,00 г, 24,3 ммоль), 2,2-диметил-1,3-диоксан-4,6-диона (3,84 г, 26,7 ммоль) и DMAP (4,45 г, 36,5 ммоль) в DCM (100 мл) добавляли EDCI (5,60 г, 29,2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 часов. К смеси добавляли раствор KHSO (5%, 100 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Органический слой отделяли и промывали раствором KHSO (5%, 50 мл×2) и насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением желаемого соединения (8,6 г, выход >100%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,34-7,28 (м, 5H), 4,46 (с, 2H), 4,32-3,97 (м, 2H), 2,69-2,32 (м, 4H), 1,73 (с, 6H).
Описание D79
Этил 3-(3-(бензилокси)циклобутил)-3-оксопропаноат (D79)
Раствор 5-(3-(бензилокси)циклобутанкарбонил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4,6-диона (8,60 г, 25,9 ммоль) в этаноле (80 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (6,2 г, выход 87%) в виде бесцветного масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,34-7,30 (м, 5H), 4,42-4,40 (м, 2H), 4,22-3,94 (м, 3H), 3,44-3,41 (м, 2H), 3,37-2,83 (м, 1H), 2,56-2,41 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,29-1,24 (м, 3H).
Описание D80
6-(3-(Бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ол (D80)
3
3
К раствору CHONa (1,17 г, 21,7 ммоль) в CHOH (40 мл) добавляли ацетимидамид гидрохлорид (1,03 г, 10,9 ммоль) при 0°C. Затем этил 3-(3-(бензилокси)циклобутил)-3-оксопропаноат (2,00 г, 7,25 ммоль) добавляли к смеси. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем, реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в воде (100 мл). К смеси добавляли раствор конц. HCl до pH=5. Смесь фильтровали и твердое вещество собирали и сушили. Твердое вещество растирали с (PE:EtOAc=10:1, 20 мл) с получением указанного в заголовке соединения (1,42 г, выход 73%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 13,12 (с, 1H), 7,35-7,29 (м, 5H), 6,20-6,16 (м, 1H), 4,46-4,44 (м, 2H), 4,36-3,97 (м, 1H), 3,40-2,80 (м, 1H), 2,64-2,55 (м, 1,5H), 2,47-2,42 (м, 4H), 2,17-2,12 (м, 1,5H).
Описание D81 и D82
4-((1s,3s)-3-(Бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метилпиримидин и 4-((1r,3r)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метилпиримидин
3
3
2
4
К раствору 6-(3-(бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ола (1,24 г, 4,59 ммоль) в толуоле (50 мл) добавляли TEA (556 мг, 5,51 ммоль) и POCl (843 мг, 5,51 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в насыщ. раствор NaHCO (100 мл). Полученную смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=20:1) с получением указанного в заголовке соединения цис-изомера (D81) (600 мг, выход 45%) в виде бесцветного масла и транс-изомера (D82) (200 мг, выход 15%) в виде бесцветного масла.
1
3
D81:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,36-7,29 (м, 5H), 7,04 (с, 1H), 4,47 (с, 2H), 4,14-4,04 (м, 1H), 3,10-3,04 (м, 1H), 2,72-2,63 (м, 5H), 2,32-2,22 (м, 2H).
1
3
D82:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,36-7,29 (м, 5H), 7,01 (с, 1H), 4,46 (с, 2H), 4,41-4,36 (м, 1H), 3,58-3,47 (м, 1H), 2,70 (с, 3H), 2,55-2,52 (м, 4H).
ЖХ-МС: N/A.
Описание D83
(цис)-трет-Бутил 4-(1-(6-((1s,3s)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D83)
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (83 мг, 0,25 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-((1s,3s)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метилпиримидин (144 мг, 0,500 ммоль), CuI (142 мг, 0,750 ммоль), KPO (159 мг, 0,750 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (106 мг, 0,750 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (30%, 5 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (Условие: от 55% воды (0,1% TFA) и 45% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 20 мин) с получением указанного в заголовке соединения (60 мг, выход 41%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,67 (с, 1H), 8,28 (с, 1H), 8,02 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 7,36-7,30 (м, 5H), 4,80-4,56 (м, 2H), 4,48 (с, 2H), 4,30-4,14 (м, 2H), 3,37-3,23 (м, 2H), 2,94-2,82 (м, 7H), 2,54 (с, 3H), 2,34-2,23 (м, 2H), 2,06-1,91 (м, 1H), 1,83-1,73 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
ЖХ-МС: N/A.
Описание D84
(цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1s,3s)-3-гидроксициклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D84)
3
2
К раствору (цис)-трет-бутил 4-(1-(6-((1s,3s)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (60 мг, 0,10 ммоль) в CHOH (3 мл) добавляли Pd/C (30 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H (баллон) в течение ночи. Смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (40 мг, выход 80%) в виде желтого твердого вещества.
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=2,03 мин; МС Вычисл.: 495; МС Найдено: 496 [M+H].
Описание D85
(цис)-(1s,3s)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорид (энантиомер 1) (D85)
3
3
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1s,3s)-3-гидроксициклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата(энантиомер 1)(40 мг, 0,081 ммоль) в CHOH (2,5 мл) добавляли HCl/CHOH (8 моль/л, 2,5 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (35 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=1,80 мин; МС Вычисл.: 395; МС Найдено: 396 [M+H].
Описание D86
(цис)-трет-бутил 4-(1-(6-((1s,3s)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D86)
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (83 мг, 0,25 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-((1s,3s)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метилпиримидин (144 мг, 0,500 ммоль), CuI (142 мг, 0,750 ммоль), KPO (159 мг, 0,750 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (106 мг, 0,750 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (30%, 5 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (препаративная ВЭЖХ: от 55% воды (0,1% TFA) и 45% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 20 мин) с получением указанного в заголовке соединения (60 мг, выход 41%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,72 (с, 1H), 8,23 (с, 1H), 7,91 (с, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,36-7,29 (м, 5H), 4,82-4,54 (м, 2H), 4,48 (с, 2H), 4,30-4,15 (м, 2H), 3,36-3,20 (м, 2H), 2,90-2,80 (м, 7H), 2,53 (с, 3H), 2,37-2,25 (м, 2H), 2,03-1,90 (м, 1H), 1,84-1,71 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
ЖХ-МС: N/A.
Описание D87
(цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1s,3s)-3-гидроксициклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D87)
3
2
К раствору (цис)-трет-бутил 4-(1-(6-((1s,3s)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (60 мг, 0,10 ммоль) в CHOH (3 мл) добавляли Pd/C (30 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H (баллон) в течение ночи. Смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (40 мг, выход 80%) в виде желтого твердого вещества.
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=2,03 мин; МС Вычисл.: 495; МС Найдено: 496 [M+H].
Описание D88
(цис)-(1s,3s)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорид (энантиомер 2) (D88)
3
3
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1s,3s)-3-гидроксициклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата(энантиомер 2)(40 мг, 0,081 ммоль) в CHOH (2,5 мл) добавляли HCl/CHOH (8 моль/л, 2,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (35 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=1,80 мин; МС Вычисл.: 395; МС Найдено: 396 [M+H].
Описание D89
2-циклопропил-4,6-дийодпиримидин (D89)
2
К суспензии NaI (2,10 г, 13,7 ммоль) в HI (55%, 10 мл) добавляли 4,6-дихлор-2-циклопропилпиримидин (2,00 г, 10,6 ммоль). Полученную смесь нагревали до 40°C и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли HO (100 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Смесь фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (2,9 г, выход 74%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,95 (с, 1H), 2,21-2,12 (м, 1H), 1,15-1,09 (м, 4H).
Описание D90
1-(2-циклопропил-6-иодпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (D90)
Суспензию 2-циклопропил-4,6-дийодпиримидин (1,00 г, 2,69 ммоль), азетидин-3-ол гидрохлорид (323 мг, 2,95 ммоль) и TEA (678 мг, 6,72 ммоль) в i-PrOH (10 мл) нагревали до 90°C и перемешивали в течение 1 часа. Смесь охлаждали и концентрировали. Затем остаток разбавляли водой (20 мл) и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (1,1 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 6,59 (с, 1H), 5,77-5,73 (м, 1H), 4,55-4,48 (м, 1H), 4,21-4,12 (м, 2H), 3,74-3,66 (м, 2H), 1,88-1,79 (м, 1H), 0,90-0,81 (м, 4H).
Описание D91
2-циклопропил-4-иод-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (D91)
2
3
2
4,
К раствору 1-(2-циклопропил-6-иодпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (1,10 г, 3,47 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли DHP (1,16 г, 13,9 ммоль) и TsOH·HO (640 мг, 3,47 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 40°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и выливали в насыщенный NaHCO (100 мл) и затем экстрагировали DCM (50 мл×2). Объединенные органические слои сушили над NaSO фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением светло-желтого масла. Масло очищают при помощи С18 с получением указанного в заголовке соединения (250 мг, выход 18%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,42 (с, 1H), 4,67-4,62 (м, 2H), 4,25-4,17 (м, 2H), 3,98-3,82 (м, 3H), 3,56-3,49 (м, 1H), 1,99-1,94 (м, 1H), 1,84-1,79 (м, 2H), 1,70-1,62 (м, 4H), 1,06-1,03 (м, 2H), 0,96-0,88 (м, 2H).
Описание D92
(цис)-трет-бутил 4-(1-(2-циклопропил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D92)
3
4
2
3
2
2
4
К суспензии (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (80 мг, 0,24 ммоль), 2-циклопропил-4-иод-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (106 мг, 0,264 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль), KPO (102 мг, 0,480 ммоль) в сухом толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль). Смесь дегазировали N 3 раза и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем разбавляли NH·HO (5%, 20 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH =25:1) с получением указанного в заголовке соединения (120 мг, выход: 83%) в виде светло-желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,79 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,55 (с, 1H), 4,71-4,62 (м, 4H), 4,38-4,30 (м, 2H), 4,29-4,20 (м, 1H), 4,18-4,04 (м, 2H), 3,93-3,86 (м, 1H), 3,57-3,49 (м, 1H), 3,27-3,16 (м, 1H), 2,95-2,76 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,16-2,06 (м, 1H), 2,01-1,93 (м, 1H), 1,83-1,74 (м, 4H), 1,63-1,58 (м, 3H), 1,51 (с, 9H), 1,25-1,23 (м, 2H), 1,05-1,03 (м, 2H).
Описание D93
(цис)-трет-бутил 4-(1-(2-циклопропил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D93)
3
4
2
3
2
2
4
К суспензии (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (80 мг, 0,24 ммоль), 2-циклопропил-4-иод-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (106 мг, 0,264 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль), KPO (102 мг, 0,480 ммоль) в сухом толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль). Смесь дегазировали N 3 раза и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем разбавляли NH·HO (5%, 20 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=25:1) с получением указанного в заголовке соединения (110 мг, выход 76%) в виде светло-желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,80 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,55 (с, 1H), 4,71-4,62 (м, 4H), 4,38-4,20 (м, 3H), 4,18-4,04 (м, 2H), 3,93-3,86 (м, 1H), 3,57-3,49 (м, 1H), 3,27-3,16 (м, 1H), 2,95-2,76 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,16-2,06 (м, 1H), 2,01-1,93 (м, 1H), 1,83-1,58 (м, 7H), 1,51 (с, 9H), 1,25-1,23 (м, 2H), 1,05-1,03 (м, 2H).
Описание D94
4-(3-Гидроксиазетидин-1-ил)-6-иодпиримидин-2-ол (D94)
Смесь 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (450 мг, 2,17 ммоль) в HBr (40%, 5 мл) перемешивали при 80°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали, и остаток выпаривали с толуолом (5 мл×3) с получением указанного в заголовке соединения (390 мг, выход 91%) в виде желтого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 4 мин], Rt=1,312 мин, МС Вычисл.: 293, МС Найдено: 294 [M+H].
Описание 95
1-(2-(Дифторметокси)-6-иодпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (D95)
2
3
2
4
К смеси 4-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-6-иодпиримидин-2-ола (390 мг, 1,33 ммоль) и KCO (918 мг, 6,65 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли метил 2-хлор-2,2-дифторацетат (961 мг, 6,65 ммоль). Смесь перемешивали при 115°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (30 мл×2). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, выход 22%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,35 (т, 72,0 Гц, 1H), 6,47 (с, 1H), 4,86-4,80 (м, 1H), 4,40-4,27 (м, 2H), 4,01-3,92 (м, 2H), 2,31 (шир. с, 1H).
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 10-95% CHCN за 3 мин], Rt=1,74 мин; МС Вычисл.: 343; МС Найдено: 344 [M+H].
Описание D96
Этил 2-((1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)ацетат (D96)
2
3
2
4
К раствору 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (921 мг, 3,00 ммоль) в DMF (15 мл) добавляли CsCO (1,95 г, 6,00 ммоль) и этил-2-бромацетат (752 мг, 4,50 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К смеси добавляли воду (60 мл) и EtOAc (20 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=4:1) с получением желаемого соединения (1,0 г, выход 85%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,33 (с, 1H), 4,54-4,49 (м, 1H), 4,26-4,21 (м, 4H), 4,09 (с, 2H), 4,05-4,02 (м, 2H), 3,88 (с, 3H), 1,28 (т, =7,2 Гц, 3H).
Описание D97
2-((1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол (D97)
2
4
К раствору этил 2-((1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)ацетата (1,00 г, 2,54 ммоль) в THF (15 мл) добавляли DIBAL-H (1 M в толуоле, 8,9 мл, 8,9 ммоль) по каплям при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 часов. К смеси добавляли воду со льдом (20 мл). Полученную смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали с получением желаемого соединения (800 мг, выход 90%) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 3 мин), Rt=1,47 мин; МС Вычисл.: 351; МС Найдено: 352 [M+H].
Описание D98
4-иод-2-метокси-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин (D98)
2
3
2
4
К раствору 2-((1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанола (800 мг, 2,28 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли DHP (383 мг, 4,56 ммоль) и TsOH (78 мг, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли насыщ. раствор NaCO (20 мл) и перемешивали в течение 10 минут. Полученную смесь экстрагировали DCM (20 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO, и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (620 мг, выход 63%) в виде бесцветного масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,32 (с, 1H), 4,61-4,54 (м, 1H), 4,49-4,34 (м, 1H), 4,30-3,19 (м, 2H), 3,98-3,86 (м, 7H), 3,64-3,52 (м, 4H), 1,89-1,73 (м, 2H), 1,60-1,53 (м, 4H).
Описание D99
(цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D99)
3
4
3
2
2
4
4
3
3
4
3
3
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (80 мг, 0,24 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-иод-2-метокси-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин (156 мг, 0,360 ммоль), CuI (137 мг, 0,720 ммоль), KPO (153 мг, 0,720 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (102 мг, 0,720 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (насыщ., 5 мл). EtOAc (10 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (препаративная ВЭЖХ: от 30% воды (0,1% NHHCO) и 70% CHCN до 15% воды (0,1% NHHCO) и 85% CHCN за 20 мин) с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 52%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,47 (с, 1H), 4,80-4,49 (м, 4H), 4,36-4,15 (м, 3H), 4,09-4,02 (м, 5H), 3,91-3,82 (м, 2H), 3,68-3,64 (м, 4H), 3,30-3,17 (м, 1H), 2,95-2,75 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,02-1,63 (м, 8H), 1,51 (с, 9H).
Описание D100
(цис)-2-((1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол гидрохлорид (энантиомер 1) (D100)
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (80 мг, 0,13 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 моль/л, 4 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (60 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 3 мин]: Rt=1,62 мин; МС Вычисл.: 456; МС Найдено: 457[M+H].
Описание D101
(цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D101)
3
4
3
2
2
4
4
3
3
4
3
3
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (80 мг, 0,24 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-иод-2-метокси-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин (156 мг, 0,360 ммоль), CuI (137 мг, 0,720 ммоль), KPO (153 мг, 0,720 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (102 мг, 0,720 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (насыщ., 5 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (препаративная ВЭЖХ: от 30% воды (0,1% NHHCO) и 70% CHCN до 15% воды (0,1% NHHCO) и 85% CHCN за 20 мин) с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 52%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,47 (с, 1H), 4,79-4,50 (м, 4H), 4,36-4,17 (м, 3H), 4,09-4,03 (м, 5H), 3,92-3,84 (м, 2H), 3,67-3,58 (м, 4H), 3,28-3,17 (м, 1H), 2,96-2,75 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,00-1,64 (м, 8H), 1,51 (с, 9H).
Описание D102
(цис)-2-((1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол гидрохлорид (энантиомер 2) (D102)
К раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (80 мг, 0,13 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 моль/л, 4 мл) и Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (60 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 3 мин]: Rt=1,60 мин; МС Вычисл.: 456; МС Найдено: 457 [M+H].
Описание D103
(S)-1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D103)
4
К суспензии 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (300 мг, 0,829 ммоль) и (S)-пирролидин-3-ол гидрохлорида (113 мг, 0,912 ммоль) в i-PrOH (8 мл) добавляли TEA (252 мг, 2,49 ммоль). Полученную смесь нагревали до 75°C и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем разделяли между водой (50 мл) и EtOAc (40 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (255 мг, выход 96%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,45 (с, 1H), 4,60 (с, 1H), 3,89 (с, 3H), 3,82-3,25 (м, 4H), 2,31-2,04 (м, 3H).
Описание D104
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1) (D104)
трет-
3
4
2
4
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (80 мг, 0,24 ммоль), (S)-1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (83 мг, 0,26 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль) и KPO (102 мг, 0,480 ммоль) в сухом толуоле (4 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль). Полученную смесь дегазировали N и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. ТСХ показала, что реакция завершена. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 100 мл) и EtOAc (70 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (70 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (140 мг, неочищенный; два изомера в соотношении 10:3) в виде слабо коричневого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 3 мин), Rt=2,36 мин; МС Вычисл.: 526; МС Найдено: 527 [M+1].
Описание D105
(цис)-(3S)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол гидрохлорид (диастереоизомер 1) (D105)
трет-
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1) (140 мг неочищенный, 0,240 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (140 мг неочищенный, выход >100%) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 3 мин), Rt=1,64 мин; МС Вычисл.: 426; МС Найдено: 427 [M+1].
Описание D106
(цис)-
трет-
Бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2) (D106)
трет-
3
4
2
4
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2) (80 мг, 0,24 ммоль), (S)-1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (83 мг, 0,26 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль) и KPO (102 мг, 0,480 ммоль) в сухом толуоле (4 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль). Полученную смесь дегазировали N и нагревали до 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали и затем разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 100 мл) и EtOAc (70 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (70 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (140 мг, неочищенный) в виде слабо коричневого твердого вещества.
+
ЖХ-МС: 3,0 мин, 5-95%; Rt: 2,36 мин, 527 [M+H] .
Описание D107
(цис)-(3S)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол гидрохлорид (диастереоизомер 2) (D107)
трет-
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2) (140 мг неочищенный, 0,24 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (140 мг неочищенный) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: 3,0 мин, 5-95%; Rt: 1,64 мин, 427 [M+H] .
Описание D108
(R)-Пирролидин-3-ол гидрохлорид (D108)
трет-
(R)-бутил 3-гидроксипирролидин-1-карбоксилат (250 мг, 1,34 ммоль) растворяли в HCl/диоксан (4 M, 5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (150 мг, выход 90%) в виде белого твердого вещества.
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,47 (шир. с, 1H), 9,24 (шир. с, 1H), 4,38 (с, 1H), 3,57-2,96 (м, 4H), 1,95-1,79 (м, 2H).
Описание D109
(R)-1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D109)
4
К суспензии 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (366 мг, 1,01 ммоль) и (R)-пирролидин-3-ол гидрохлорида (150 мг, 1,21 ммоль) в i-PrOH (10 мл) добавляли TEA (307 мг, 3,03 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 75°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем разделяли между водой (50 мл) и EtOAc (40 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (255 мг, выход 96%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,45 (с, 1H), 4,60 (с, 1H), 3,90 (с, 3H), 3,81-3,28 (м, 4H), 2,10-1,88 (м, 3H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,28 мин; МС Вычисл.: 321; МС Найдено: 322 [M+1].
Описание D110
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1) (D110)
трет-
3
4
2
4
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (80 мг, 0,24 ммоль), (R)-1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (85 мг, 0,26 ммоль), CuI (46mg, 0,24 ммоль) и KPO (102 мг, 0,480 ммоль) в сухом толуоле (4 мл) добавляли N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль). Полученную смесь дегазировали N и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 70 мл) и EtOAc (50 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (150 мг, неочищенный; два изомера в соотношении 10:3) в виде слабо коричневого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 3,0 мин), Rt=2,05 мин; МС Вычисл.: 526; МС Найдено: 527 (M+1).
Описание D111
(цис)-(3R)-1-(6-(6-(3-Фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол гидрохлорид (диастереоизомер 1) (D111)
трет-
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1) (150 мг неочищенный, 0,240 ммоль) в диоксане (3 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (200 мг неочищенный) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 3,0 мин), Rt=1,89 мин; МС Вычисл.: 426; МС Найдено: 427 [M+1].
Описание D112
(цис)-
трет-
Бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2) (D112)
трет-
3
4
2
4
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (80 мг, 0,24 ммоль), (R)-1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (85 мг, 0,26 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль) и KPO (102 мг, 0,480 ммоль) в сухом толуоле (4 мл) добавляли N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль). Полученную смесь дегазировали N и перемешивали до 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали и затем разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 70 мл) и EtOAc (50 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (150 мг, неочищенный) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 3,0 мин), Rt=2,06 мин; МС Вычисл.: 526; МС Найдено: 527 [M+1].
Описание D113
(цис)-(3R)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол гидрохлорид (диастереоизомер 2) (D113)
трет-
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2) (150 мг неочищенный, 0,24 ммоль) в диоксане (3 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (180 мг неочищенный) в виде белого твердого вещества. Неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей стадии.
Описание D114
Этил 4-(бензилокси)-3-оксобутаноат (D114)
2
4
Бензиловый спирт (6,90 г, 63,8 ммоль) добавляли по каплям к перемешиваемой суспензии гидрида натрия (60%, 5,37 г, 134 ммоль) в сухом THF (50 мл) на бане со льдом для поддержания температуры ниже 10°C. Смесь перемешивали в течение часа. Этил 4-хлор-3-оксобутаноат (10,0 г, 60,8 ммоль) добавляли по каплям в течение 40 минут при комнатной температуре, и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь осторожно добавляли к HCl (5%, 100 мл) при 5°C и затем экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE/EtOAc=10/1) с получением указанного в заголовке соединения (12,1 г, выход 85%) в виде желтого масла.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 2,5 мин], Rt=1,55 мин, МС Вычисл.: 236; МС Найдено: 237 [M+H].
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,38-7,30 (м, 5H), 4,59 (с, 2H), 4,22-4,10 (м, 4H), 3,53 (с, 2H), 1,25 (т, =7,2 Гц, 3H).
Описание D115
6-((Бензилокси)метил)-2-метоксипиримидин-4-ол (D115)
К суспензии MeONa (7,99 г, 148 ммоль) в MeOH (120 мл) добавляли метил карбамимидат гидрохлорид (7,02 г, 63,5 ммоль) на бане со льдом. Далее добавляли этил 4-(бензилокси)-3-оксобутаноат (10,0 г, 42,3 ммоль). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Затем, реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 4 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разделяли между водой (300 мл) и EtOAc (100 мл). Водный слой подкисляли конц. HCl до pH=5. Белый осадок собирали фильтрованием. Твердое вещество промывали водой и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (6,0 г, выход 58%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 2,5 мин], Rt=1,39 мин, МС Вычисл.: 246; МС Найдено: 247 [M+H].
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,37-7,29 (м, 5H), 6,38 (с, 1H), 4,64 (с, 2H), 4,35 (с, 2H), 3,96 (с, 3H).
Описание D116
4-((
ензилокси)метил)-6-хлор-2-метоксипиримидин (D116)
Б
2
2
3
2
4
К раствору 6-((бензилокси)метил)-2-метоксипиримидин-4-ола (2,9 г, 12 ммоль) в DCM (60 мл) добавляли SOCl (1,7 г, 14 ммоль) и DMF (1 мл). Полученную белую суспензию нагревали до 40°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем постепенно выливали в NaCO (10%, 100 мл) и перемешивали в течение 10 минут. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE/EtOAc=4/1) с получением указанного в заголовке соединения (1,8 г, выход 58%) в виде желтого масла.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 2,5 мин], Rt=1,71 мин, МС Вычисл.: 264; МС Найдено: 265 [M+H].
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,38-7,29 (м, 5H), 7,22 (с, 1H), 4,65 (с, 2H), 4,55 (с, 2H), 4,00 (с, 3H).
Описание D117
(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)метанол (D117)
2
3
2
4
Суспензию 4-((бензилокси)метил)-6-хлор-2-метоксипиримидина (1,8 г, 6,8 ммоль) в TFA (12 мл) нагревали до 70°C и перемешивали в течение 6,5 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и постепенно выливали в NaCO (10%, 50 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE/EtOAc от 5/1 до 2/1) с получением указанного в заголовке соединения (450 мг, выход 38%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,05 (с, 1H), 4,69 (с, 2H), 4,03 (с, 3H), 2,46 (шир. с, 1H).
Описание D118
6-хлор-2-метоксипиримидин-4-карбальдегид (D118)
3
2
2
3
2
4
К раствору (6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)метанола (450 мг, 2,58 ммоль) в сухом DCM (25 мл) добавляли NaHCO (2,17 г, 25,8 ммоль). DMP (1,64 г, 3,87 ммоль) добавляли по частям на бане со льдом. Полученную суспензию нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в NaSO (10%, 50 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали DCM (20 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (390 мг, выход 79%) в виде желтого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 2,5 мин], Rt=1,02 мин, МС Вычисл.: 172; МС Найдено: 191 [M+19].
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,90 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 4,11 (с, 3H).
Описание D119
Метил 6-хлор-2-метоксипиримидин-4-карбоксилат (D119)
3
2
3
2
4
К суспензии 6-хлор-2-метоксипиримидин-4-карбальдегида (350 мг, 2,03 ммоль) и NaHCO (3,41 г, 40,6 ммоль) в MeOH (10 мл) и воде (1 мл) добавляли раствор Br в MeOH (10 мл) и воду (1 мл) по каплям на бане со льдом. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Реакционную смесь выливали в NaHSO (10%, 100 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл×3) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (320 г, выход 78%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,64 (с, 1H), 4,10 (с, 3H), 4,00 (с, 3H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 2,5 мин, Rt=1,45 мин; МС Вычисл.: 202; МС Найдено: 203 [M+H].
Описание D120
(цис)-Метил 6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-карбоксилат (энантиомер 2) (D120)
2
3
2
4
Суспензию (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (50 мг, 0,20 ммоль), метил 6-хлор-2-метоксипиримидин-4-карбоксилата (81 мг, 0,40 ммоль) и CsCO (130 мг, 0,400 ммоль) в NMP (2 мл) нагревали до 100°C в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (30 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (15 мл×3) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором 3 раза, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM/MeOH=15/1) с получением указанного в заголовке соединения (20 мг, выход 24%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,28 (с, 1H), 8,17 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 5,06-4,77 (м, 1H), 4,23 (с, 3H), 4,02 (с, 3H), 3,42-3,34 (м, 1H), 3,18-3,05 (м, 1H), 3,02-2,92 (м, 1H), 2,50 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,28-2,11 (м, 2H), 2,01-1,86 (м, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 2,5 мин, Rt=1,85 мин; МС Вычисл.: 413; МС Найдено: 414 [M+H].
Описание D121
(цис)-Метил 6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-карбоксилат (энантиомер 1) (D121)
2
3
2
4
Суспензию (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (50 мг, 0,20 ммоль), метил 6-хлор-2-метоксипиримидин-4-карбоксилата (81 мг, 0,40 ммоль) и CsCO (130 мг, 0,400 ммоль) в NMP (2 мл) нагревали до 100°C в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (30 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (15 мл×3) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором 3 раза, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM/MeOH=15/1) с получением указанного в заголовке соединения (20 мг, выход 25%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,28 (с, 1H), 8,17 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 5,05-4,82 (м, 1H), 4,23 (с, 3H), 4,02 (с, 3H), 3,41-3,39 (м, 1H), 3,17-3,07 (м, 1H), 3,01-2,99 (м, 1H), 2,50 (с, 3H), 2,46 (с, 3H), 2,33-2,13 (м, 2H), 1,96 (шир. с, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 2,5 мин, Rt=1,84 мин; МС Вычисл.: 413; МС Найдено: 414 [M+H].
Описание D122
6-иод-2-метокси-N-(4-метоксибензил)пиримидин-4-амин (D122)
-
3
К раствору 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (527 мг, 1,45 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли 4-метоксибензиламин (600 мг, 4,38 ммоль) и EtN (3,64 ммоль, 367 мг). Смесь перемешивали при 70°C в течение 3 часов. Затем смесь охлаждали и концентрировали. Остаток очищали колонкой (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (512 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,21 (д, 8,7 Гц, 2H), 6,87 (д, 8,7 Гц, 1H), 6,49 (с, 1H), 4,44 (шир. с, 2H), 3,90 (с, 3H), 3,80 (с, 3H).
Описание D123
(цис)-6-(6-(3-Фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метокси-N-(4-метоксибензил)пиримидин-4-амин (энантиомер 2) (D123)
3
4
2
2
2
4
2
2
К суспензии (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (100 мг, 0,405 ммоль),6-иод-2-метокси-N-(4-метоксибензил)пиримидин-4-амина(225 мг, 0,607 ммоль), KPO (172 мг, 0,809 ммоль), CuI (154 мг, 0,809 ммоль) в сухом толуоле (5 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (230 мг, 1,62 ммоль). Полученную в результате зеленую суспензию дегазировали N 3 раза и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли HO (10 мл) и EtOAc (10 мл×4). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:MeOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (108 мг, выход 44%) в виде светло-желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,84 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,29-7,25 (м, 2H), 6,90-6,87 (м, 2H), 6,68 (с, 1H), 5,30-5,17 (м, 1H), 4,95-4,76 (м, 1H), 4,55-4,50 (м, 2H), 4,11 (с, 3H), 3,80 (с, 3H), 3,36-3,30 (м, 1H), 3,10-3,00 (м, 1H), 2,94-2,89 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,26-2,10 (м, 2H), 1,92-1,87 (м, 2H).
Описание D124
(цис)-6-(6-(3-Фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-амин (энантиомер 2) (D124)
3
2
4
2
2
К раствору (цис)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метокси-N-(4-метоксибензил)пиримидин-4-амина(энантиомер 2)(105 мг, 0,214 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли TFA (20 мл) при комнатной температуре медленно. Затем смесь перемешивали при 40°C в течение 48 часов. Затем смесь охлаждали и доводили до значения pH =7-8 насыщенным NaHCO на бане со льдом. Затем смесь экстрагировали DCM (50 мл×4). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:MeOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (83 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,73 (с, 1H), 4,97-4,72 (м, 3H), 4,11 (с, 3H), 3,36-3,31 (м, 1H), 3,12-3,00 (м, 1H), 2,96-2,87 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,23-2,05 (м, 2H), 1,99-1,82 (м, 2H).
Описание D125
(цис)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метокси-N-(4-метоксибензил)пиримидин-4-амин (энантиомер 1) (D125)
3
4
2
3
2
2
4
2
2
.
К суспензии (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (60 мг, 0,24 ммоль),6-иод-2-метокси-N-(4-метоксибензил)пиримидин-4-амина(90 мг, 0,24 ммоль), KPO (103 мг, 0,485 ммоль), CuI (92 мг, 0,585 ммоль) в сухом толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (138 мг, 0,970 ммоль). Полученную в результате зеленую суспензию дегазировали N 3 раза и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали и остаток разделяли с NHHO (5%, 10 мл) и EtOAc (20 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:MeOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (61 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,86 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,31-7,27 (м, 2H), 6,92-6,89 (м, 2H), 6,69 (с, 1H), 5,19 (шир. с, 1H), 4,97-4,75 (м, 1H), 4,57-4,56 (м, 2H), 4,12 (с, 3H), 3,82 (с, 3H), 3,38-3,32 (м, 1H), 3,11-3,02 (м, 1H), 2,95-2,89 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,23-2,10 (м, 2H), 1,96-1,82 (м, 2H).
Описание D126
(цис)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-амин (энантиомер 1) (D126)
2
2
3
2
4
К раствору (цис)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метокси-N-(4-метоксибензил)пиримидин-4-амина(энантиомер 1)(61 мг, 0,124 ммоль) в CHCl (10 мл) добавляли TFA (10 мл) при комнатной температуре медленно. Смесь перемешивали при 40°C в течение ночи. Затем, смесь перемешивали при 45°C в течение 4 часов. Смесь охлаждали и доводили до значения pH =7-8 насыщенным NaHCO на бане со льдом. Добавляли DCM (30 мл×3) для экстракции желаемого. Объединенные органические растворы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (39 мг, выход 85%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,73 (с, 1H), 4,94-4,72 (м, 3H), 4,12 (с, 3H), 3,36-3,31 (м, 1H), 3,11-3,02 (м, 1H), 2,94-2,88 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,23-2,06 (м, 2H), 1,95-1,82 (м, 2H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,53 мин; МС Вычисл.: 370; МС Найдено: 371 [M+1].
Описание D127
4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксид (D127)
2
4
К раствору тиоморфолин 1,1-диоксид гидрохлорида (0,950 г, 5,52 ммоль) и DIPEA (1,78 г, 13,8 ммоль) в NMP (5 мл) добавляли 4,6-дииод-2-метоксипиримидин (1,00 г, 2,76 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение 1 часа. Смесь выливали в воду (20 мл). EtOAc (30 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали водой (20 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток суспендировали EtOAc (15 мл) и фильтровали. Твердое вещество собирали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (0,65 г, выход 64%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,77 (с, 1H), 4,16-4,13 (м, 4H), 3,93 (с, 3H), 3,08-3,05 (м, 4H).
Описание D128
(цис)-
трет-
Бутил 4-(1-(6-(1,1-диоксидотиоморфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D128)
трет-
,
,
3
4
2
2
4
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (80 мг, 0,24 ммоль),4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксида (106 мг, 0,288 ммоль) CuI (46 мг, 0,24 ммоль) KPO (254 мг, 1,20 ммоль), и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (29 мг, 0,24 ммоль) в NMP (2 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере N в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли этилацетатом (50 мл) и водой (30 мл). Органический раствор промывали водой (2×50 мл), насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток суспендировали EtOAc/эфир (0,5 мл/5 мл) с получением 130 мг белого твердого вещества. Твердое вещество далее очищали с помощью хиральной препаративной ВЭЖХ с помощью метода (Chiralpak IB 5 мкм 20×250 мм, Фаза: MeOH/EtOH=50/50, скорость потока: 10 мл/мин, температура: 30°C, 230 нм)) с получением указанного в заголовке соединения (38 мг, выход 28%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,80 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 4,79-4,51 (м, 2H), 4,27-4,18 (м, 5H), 4,10 (с, 3H), 3,30-3,20 (м, 1H), 3,12-3,07 (м, 4H), 2,93-2,77 (м, 2H), 2,50 (с, 3H), 1,97-1,94 (м, 1H), 1,81-1,69 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 20-95% Ацетонитрил за 4 мин), Rt=2,603 мин; МС Вычисл.: 574; МС Найдено: 575 [M+H].
Описание D129
(цис)-4-(6-(6-(3-Фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксид гидрохлорид (энантиомер 1) (D129)
трет-
К смеси (цис)-бутил 4-(1-(6-(1,1-диоксидотиоморфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H- индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата(энантиомер 1)(38 мг, 0,066 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли конц. HCl (2 мл) по каплям при 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (37 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 4 мин), Rt=2,216 мин; МС Вычисл.: 474; МС Найдено: 475 [M+H].
Описание D130
(цис)-
трет-
Бутил 4-(1-(6-(1,1-диоксидотиоморфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D130)
трет-
,
,
,
3
4
2
2
4
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (80 мг, 0,24 ммоль)4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксида (106 мг, 0,288 ммоль) CuI (46 мг, 0,24 ммоль) KPO (254 мг, 1,20 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (29 мг, 0,24 ммоль) в NMP (2 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере N в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли этилацетатом (50 мл) и водой (30 мл). Органический раствор промывали водой (2×30 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ методом (Chiralpak IB 5 мкм 20×250 мм, Фаза: MeOH/EtOH=50/50, скорость потока: 10 мл/мин, температура: 30°C, 230 нм)) с получением указанного в заголовке соединения (51 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,80 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,78-4,49 (м, 2H), 4,31-4,19 (м, 5H), 4,09 (с, 3H), 3,30-3,23 (м, 1H), 3,12-3,06 (м, 4H), 2,91-2,77 (м, 2H), 2,50 (с, 3H), 1,98-1,93 (м, 1H), 1,81-1,68 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
Описание D131
(цис)-4-(6-(6-(3-Фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксид гидрохлорид (энантиомер 2) (D131)
трет-
К смеси (цис)-бутил 4-(1-(6-(1,1-диоксидотиоморфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2)(51 мг, 0,087 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли конц. HCl (2 мл) по каплям при 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (45 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 4 мин), Rt=2,239 мин; МС Вычисл.: 474; МС Найдено: 475 [M+H].
Описание D132
(цис)-
трет-
Бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D132)
трет-
3
4
3
2
2
4
.
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (45 мг, 0,14 ммоль)в толуоле (10 мл) добавляли 4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (64 мг, 0,20 ммоль), KPO (86 мг, 0,41 ммоль), CuI (77 мг, 0,41 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (58 мг, 0,41 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NHHO (10 мл). Желаемое экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2×10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (37 мг, выход 52%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,82-4,51 (м, 2H), 4,29-4,17 (м, 1H), 4,07 (с, 3H), 3,81-3,78 (м, 4H), 3,73-3,71 (м, 4H), 3,29-3,18 (м, 1H), 2,93-2,78 (м, 2H), 2,50 (с, 3H), 1,98-1,92 (м, 1H), 1,82-1,73 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,89 мин; МС Вычисл.: 526 МС Найдено: 527 [M+1].
Описание D133
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D133)
трет-
3
4
3
2
2
4
.
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (65 мг, 0,20 ммоль)в толуоле (10 мл) добавляли 4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (93 мг, 0,29 ммоль), KPO (124 мг, 0,585 ммоль), CuI (111 мг, 0,585 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (83 мг, 0,59 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NHHO (10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2×10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (37 мг, выход 36%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,81-4,56 (м, 2H), 4,28-4,17 (м, 1H), 4,07 (с, 3H), 3,80-3,77 (м, 4H), 3,73-3,71 (м, 4H), 3,28-3,20 (м, 1H), 2,92-2,79 (м, 2H), 2,50 (с, 3H), 1,97-1,91 (м, 1H), 1,82-1,71 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,90 мин; МС Вычисл.: 526, МС Найдено: 527 [M+1].
Описание D134
4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин (D134)
2
4
К смеси 4,6-дииод-2-метилпиримидина (1,10 г, 3,18 ммоль) в i-PrOH (20 мл) добавляли морфолин (1,11 г, 12,7 ммоль). Смесь перемешивали при 45°C в течение 2 часов. Затем реакционную смесь нагревали до 65°C и перемешивали в течение 30 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду (50 мл). Добавляли EtOAc (50 мл×2) для экстракции желаемого. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (980 мг, выход 100%).
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,76 (с, 1H), 3,76-3,73 (м, 4H), 3,59-3,56 (м, 4H), 2,45 (с, 3H).
Описание D135
(цис)-
трет-
Бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D135)
трет-
3
4
2
3
2
2
4
3
3
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (50 мг, 0,15 ммоль), 4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолина (50 мг, 0,17 ммоль), CuI (28 мг, 0,15 ммоль), KPO (64 мг, 0,30 ммоль) в сухом толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (43 мг, 0,30 ммоль). Смесь дегазировали N 3 раза и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (5%, 15 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (препаративная ВЭЖХ: от 50% воды (0,1% HCl) и 50% CHCN до 20% воды (0,1% HCl) и 80% CHCN за 20 мин) с получением смеси (63 мг с 60% de-Boc соединением) в виде белого твердого вещества.
+
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 3 мин), Rt=1,89 мин; МС Вычисл.: 510, МС Найдено: 411 (M-100+H), чистота: 60%; Rt=2,39 мин, МС Вычисл.: 510, МС Найдено: 511 (M+H), чистота: 40%.
Описание D136
(цис)-
трет-
Бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1
H
-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D136)
трет-
3
4
2
3
2
2
4
3
3
К суспензии бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (50 мг, 0,15 ммоль), 4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолина (50 мг, 0,17 ммоль), CuI (28 мг, 0,15 ммоль), KPO (64 мг, 0,30 ммоль) в сухом толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (43 мг, 0,30 ммоль). Смесь дегазировали N 3 раза и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (5%, 15 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (препаративная ВЭЖХ: от 50% воды (0,1% HCl) и 50% CHCN до 20% воды (0,1% HCl) и 80% CHCN за 20 мин) с получением смеси (63 мг с 60% de-Boc соединения) в виде белого твердого вещества.
+
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 3 мин), Rt=1,89 мин; МС Вычисл.:410, МС Найдено: 411 (M-100+H), чистота: 60%; Rt=2,39 мин; МС Вычисл.: 510, МС Найдено: 511 [M+H], чистота: 40%.
Описание D137
1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-карбонитрил (D137)
2
4
Раствор 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (1,00 г, 2,76 ммоль), азетидин-3-карбонитрил гидрохлорида (0,52 г, 4,42 ммоль) и DIPEA (1,78 г, 13,8 ммоль) в NMP (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение 1 часа. Смесь разделяли с EtOAc (100 мл) и водой (100 мл). Органический слой промывали водой (100 мл) и насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали колонкой (DCM) с получением указанного в заголовке соединения (600 мг, выход 69%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,36 (с, 1H), 4,40-4,27 (м, 4H), 3,91 (с, 3H), 3,66-3,58 (м, 1H).
Описание D138
трет-
Бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D138)
2
4
К раствору 6-(3,3-дифторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол гидрохлорида (1,00 г, 3,48 ммоль)в MeOH (8 мл) и воде (2 мл) добавляли KOH (471 мг, 8,40 ммоль) и BocO (917 мг, 4,20 ммоль) на бане со льдом. Смесь нагревали до 25°C и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и затем экстрагировали DCM (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO, и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (660 мг, выход 54%) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 3 мин), Rt=2,03 мин; МС Вычисл.: 351; МС Найдено: 352 [M+1].
Описание D139 и D140
трет-
Бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D139) и трет-бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D140)
трет-
трет-
Рацемический бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (660 мг, 1,88 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ (Chiralpak IB 250 мм×20 мм. Фаза: Hex/EtOH=90/10, скорость потока: 15 мл/мин, W: 214 нм, температура: окружающая среда) с получением бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1)(D139) (290 мг, выход 44%) в виде белого твердого вещества и трет-бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2)(D140)(260 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества.
1
3
D139: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,10 (шир. с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 4,68-4,22 (м, 2H), 3,55-3,36 (м, 1H), 3,22-2,79 (м, 2H), 2,47 (с, 3H), 2,28-2,11 (м, 1H), 1,89-1,84 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IB 250 мм×4,6 мм, 5 мкм. Фаза: Hex/EtOH=90/10, скорость потока: 1,0 мл/мин, W: 230 нм; Rt: 7,543 мин, 100% э.и.
1
3
D140:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,97 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 4,67-4,20 (м, 2H), 3,56-3,37 (м, 1H), 3,22-2,80 (м, 2H), 2,47 (с, 3H), 2,30-2,11 (м, 1H), 1,91-1,83 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IB 250 мм×4,6 мм, 5 мкм. Фаза: Hex/EtOH=90/10, скорость потока: 1,0 мл/мин, W: 230 нм; Rt: 10,446 мин, 100% э.и.
Описание D141
трет-
Бутил 4-(1-(6-(3-цианоазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3,3-дифторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D141)
трет-
3
4
2
3
2
2
4
Смесь бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (100 мг, 0,285 ммоль), 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-карбонитрила (135 мг, 0,427 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (81 мг, 0,57 ммоль), CuI (108 мг, 0,570 ммоль) и KPO (120 мг, 0,570 ммоль) в толуоле (10 мл) нагревали до 110°C и перемешивали в течение 4 часов в атмосфере N. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (30 мл) и промывали NH.HO (10%, 20 мл×3). Объединенные органические слои сушили над NaSO и концентрировали. Остаток диспергировали в 1,5 мл EtOAc и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения (90 мг, выход 58%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,95 (с, 1H), 8,10 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 6,50 (с, 1H), 4,49-4,36 (м, 6H), 4,09 (с, 3H), 3,69-3,59 (м, 1H), 3,56-3,42 (м, 1H), 3,22-3,06 (м, 1H), 2,98-2,81 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,28-2,12 (м, 1H), 1,93-1,89 (м, 1H),1,51 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 30-95% Ацетонитрил за 3 мин), Rt=2,12 мин, МС Вычисл.: 539; МС Найдено: 540 [M+1].
Описание D142
трет-
Бутил 4-(1-(6-(3-цианоазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3,3-дифторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D142)
трет-
3
4
2
3
2
2
4
Смесь бутил 3,3-дифтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (100 мг, 0,285 ммоль), 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-карбонитрила (135 мг, 0,427 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (81 мг, 0,57 ммоль), CuI (108 мг, 0,570 ммоль) и KPO (120 мг, 0,570 ммоль) в толуоле (10 мл) нагревали до 110°C и перемешивали в течение 4 часов в атмосфере N. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (30 мл) и промывали NH.HO (10%, 20 мл×2) и насыщенным солевым раствором (30 мл). Органический слой сушили над NaSO и концентрировали. Остаток диспергировали в EtOAc (1 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Твердое вещество собирали фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 52%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,95 (с, 1H), 8,10 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 6,50 (с, 1H), 4,49-4,36 (м, 6H), 4,09 (с, 3H), 3,69-3,61 (м, 1H), 3,57-3,43 (м, 1H), 3,26-3,04 (м, 1H), 2,99-2,80 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,27-2,12 (м, 1H), 1,93-1,88 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 30-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,43 мин, МС Вычисл.: 539; МС Найдено: 540 [M+1].
Описание D143
1-(6-бром-5-фтор-1H-индазол-1-ил)этанон (D143)
3
2
4
К раствору 5-бром-4-фтор-2-метиланилина (15,0 г, 73,5 ммоль) в CHCl (300 мл) добавляли AcO (22,7 г, 222 ммоль) на бане со льдом. Полученную смесь перемешивали в течение еще 30 мин. К реакционной смеси добавляли 18-краун-6 (9,70 г, 36,8 ммоль), KOAc (2,2 г, 22 ммоль) и изоамилнитрит (17,3 г, 148 ммоль) при комнатной температуре. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разделяли с водой (500 мл) и EtOAc (600 мл). Органический слой отделяли и водный экстрагировали EtOAc (200 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (от PE:EtOAc=50:1 до DCM:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (5,0 г, выход 26%) в виде оранжевого твердого вещества.
1
3
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,74 (д, 5,7 Гц, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,43 (д, 7,5 Гц, 1H), 2,78 (с, 3H).
Описание D144
6-Бром-5-фтор-1H-индазол (D144)
4
К раствору 1-(6-бром-5-фтор-1H-индазол-1-ил)этанона (6,4 г, 25 ммоль) в THF (100 мл) добавляли NaOH (4 M, 13 мл, 50 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разделяли между водой (300 мл) и EtOAc (200 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (200 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт растирали с PE (20 мл) и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (4,4 г, выход 81%) в виде коричневого твердого вещества.
1
3
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,10 (шир. с, 1H), 8,04 (с, 1H), 7,75 (д, 5,4 Гц, 1H), 7,47 (д, 8,4 Гц, 1H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,45 мин, МС Вычисл.: 214, 216; МС Найдено: 215, 217 [M+H].
Описание D145
6-Бром-5-фтор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D145)
2
3
4
К суспензии 6-бром-5-фтор-1H-индазола (4,4 г, 20 ммоль) в сухом DCM (100 мл) добавляли DHP (3,4 г, 40 ммоль) и TsOH (0,7 г, 4 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь промывали NaCO (насыщ. 200 мл) и затем водный слой экстрагировали DCM (100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (6,0 г, выход 98%) в виде слабо-оранжевого твердого вещества.
1
3
J=
J=
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,95 (с, 1H), 7,85 (д, 5,4 Гц, 1H), 7,41 (д, 8,1 Гц, 1H), 5,66 (дд,=9,3, 2,7 Гц, 1H), 4,03-3,99 (м, 1H), 3,79-3,71 (м, 1H), 2,57-2,44 (м, 1H), 2,21-2,07 (м, 2H), 1,90-1,60 (м, 3H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,71 мин, МС Вычисл.: 298, 300; МС Найдено: 299, 301 [M+H].
Описание D146
трет-
Бутил 4-(5-фтор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (D146)
трет-
2
3
2
2
4
Суспензию 6-бром-5-фтор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (5,0 г, 17 ммоль), бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (5,6 г, 18 ммоль), NaCO (4,6 г, 43 ммоль), Pd(dppf)Cl (622 мг, 0,850 ммоль) в диоксане (50 мл) и воде (10 мл) дегазировали N 3 раза. Смесь нагревали до 90°C и перемешивали в течение 5 часов. Реакционную смесь охлаждали и растворитель удаляли в вакууме. Остаток разделяли между водой (200 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (100 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 20:1 до 10:1) с получением указанного в заголовке соединения (5,6 г, выход 83%) в виде маслянистого твердого вещества.
1
3
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,95 (с, 1H), 7,40 (д, 5,7 Гц, 1H), 7,32 (д, 10,5 Гц, 1H), 5,96 (шир. с, 1H), 5,70-5,67 (м, 1H), 4,10-4,02 (м, 3H), 3,80-3,61 (м, 3H), 2,61-2,42 (м, 3H), 2,21-2,03 (м, 2H), 1,82-1,63 (м, 3H), 1,50 (с, 9H).
Описание D147
(транс)-
трет-
Бутил 4-(5-фтор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-3-гидрокси пиперидин-1-карбоксилат (D147)
трет-
3
2
2
2
2
2
3
4
К раствору бутил 4-(5-фтор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (6,2 г, 15 ммоль) в сухом THF (45 мл) добавляли BH/THF (1 M, 45 мл, 45 ммоль) при 0°C в атмосфере N. Полученную смесь нагревали до 20°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали на бане со льдом и NaOH (4 M, 11 мл, 45 ммоль) добавляли по каплям и осторожно. Затем добавляли HO (30%, 17,0 г, 150 ммоль) и держали температуру ниже 5°C. Затем реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь постепенно выливали в NaSO (20%, 200 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделяли и водный экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 5:1 до 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (4,5 г, выход 69%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,94 (с, 1H), 7,44 (д, =5,1 Гц, 1H), 7,35 (д, =10,2 Гц, 1H), 5,67 (дд, =9,3, 2,4 Гц, 1H), 4,53-4,35 (м, 1H), 4,31-4,08 (м, 1H), 4,05-3,85 (м, 2H), 3,78-3,70 (м, 1H), 3,07-2,95 (м, 1H), 2,85-2,47 (м, 3H), 2,20-2,00 (м, 2H), 1,86-1,66 (м, 6H), 1,49 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,62 мин, МС Вычисл.: 419; МС Найдено: 420 [M+H].
Описание D148
(цис)-
трет-
Бутил 3-фтор-4-(5-фтор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D148)
трет-
2
2
3
4
Раствор (транс)-бутил 4-(5-фтор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-3-гидрокси пиперидин-1-карбоксилата (4,7 г, 11 ммоль) в сухом DCM (100 мл) охлаждали до -60°C под защитой N. Добавляли по каплям DAST (7,1 г, 44 ммоль). Полученную смесь перемешивали при -60°C в течение 1 часа и затем постепенно нагревали до 20°C и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь постепенно выливали в NaCO (насыщ., 150 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Органический слой отделяли и водный экстрагировали DCM (100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 10:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения (2,8 г, выход 60%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,96 (с, 1H), 7,45 (д, =5,4 Гц, 1H), 7,35 (д, =10,2 Гц, 1H), 5,69 (дд, =9,0, 2,4 Гц, 1H), 4,92-4,65 (м, 1H), 4,65-4,41 (м, 1H), 4,27-4,10 (м, 1H), 4,04-4,00 (м, 1H), 3,81-3,71 (м, 1H), 3,30-3,15 (м, 1H), 2,92-2,76 (м, 2H), 2,62-2,48 (м, 1H), 2,20-2,04 (м, 3H), 1,81-1,66 (м, 4H), 1,50 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), два пика, Rt=1,76, 1,82 мин, МС Вычисл.: 421; МС Найдено: 422 [M+H].
Описание D149
(цис)-5-Фтор-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-1H-индазол гидрохлорид (D149)
трет-
(цис)-Бутил 3-фтор-4-(5-фтор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (1,2 г, 2,8 ммоль) растворяли в HCl/MeOH (8 M, 20 мл) и перемешивали при 30°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (900 мг, неочищенный) в виде бледно-желтого твердого вещества. Неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей стадии.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,15 мин, МС Вычисл.: 237; МС Найдено: 238 [M+H], чистота: 91% (254 нм).
Описание D150
(цис)-5-Фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол (D150)
3
2
3
4
3
К раствору (цис)-5-фтор-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-1H-индазол гидрохлорида(0,90 г неочищенного, 2,8 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли формальдегид (37%, 6 мл) и NaBHCN (352 мг, 5,60 ммоль) по частям при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в NaCO (насыщ., 100 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали DCM (50 мл×3) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в NH/MeOH (3M, 20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и неочищенный продукт растирали с PE/DCM (50 мл, 3/1) с получением указанного в заголовке соединения (270 мг) в виде белого твердого вещества. Жидкую часть концентрировали и затем очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (150 мг) в виде белого твердого вещества. Соединение получали в 57% выход.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 7,99 (с, 1H), 7,52 (д, =5,4 Гц, 1H), 7,43 (д, =10,8 Гц, 1H), 5,29-4,87 (м, 1H), 3,31-3,29 (м, 1H), 3,18-3,05 (м, 1H), 2,96-2,93 (м, 1H), 2,43 (с, 3H), 2,28-2,18 (м, 2H), 2,02-1,83 (м, 2H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 20-95% ацетонитрил за 3 мин), Rt=1,63 мин, МС Вычисл.: 251; МС Найдено: 252 [M+H].
Описание D151 и D152
(цис)-5-Фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол (энантиомер 1) (D151) и (цис)-5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол (энантиомер 2) (D152)
(цис)-5-Фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол(500 мг, 1,99 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ [условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 20*250 мм, Фаза: Hex/IPA=80/20, скорость потока: 15 мл/мин, 205 нм, T=30°C] с получением указанного в заголовке соединения (цис)-5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол (энантиомер 1) (D151) (140 мг, выход 28%) и (цис)-5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол (энантиомер 2) (D152) (90 мг, выход 18%) оба в виде белого твердого вещества.
1
3
D151: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,53 (шир. с, 1H), 8,01 (с, 1H), 7,43-7,37 (м, 2H), 5,02-4,78 (м, 1H), 3,38-3,31 (м, 1H), 3,19-3,07 (м, 1H), 2,94-2,89 (м, 1H), 2,43 (с, 3H), 2,24-2,09 (м, 2H), 2,04-1,80 (м, 2H).
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH/DEA=80/20/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,236 мин, 99,31% э.и.
1
3
D152: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,53 (шир. с, 1H), 8,01 (с, 1H), 7,43-7,37 (м, 2H), 5,02-4,78 (м, 1H), 3,38-3,31 (м, 1H), 3,19-3,07 (м, 1H), 2,94-2,89 (м, 1H), 2,43 (с, 3H), 2,24-2,09 (м, 2H), 2,04-1,80 (м, 2H).
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH/DEA=80/20/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,236 мин, 97,19% э.и.
Описание D153
(цис)-5-Фтор-6-((3S,4R)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (энантиомер 1) (D153)
3
4
2
3
2
3
3
К суспензии (цис)-5-фтор-6-((3S,4R)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазола (энантиомер 1) (56 мг, 0,22 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (105 мг, 0,269 ммоль), CuI (42 мг, 0,22 ммоль) и KPO (95 мг, 0,45 ммоль) в сухом толуоле (4 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (63 мг, 0,44 ммоль). Суспензию дегазировали N и нагревали до 110°C в течение 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи колонки С-18 (CHCN/HO: 50-90%) с получением неочищенного продукта в виде желтого твердого вещества. Желтое твердое вещество насыпали CHCN (1 мл). Твердое вещество собирали фильтрованием и промывали CHCN (1 мл) с получением указанного в заголовке соединения (50 мг, выход 44%) в виде белого твердого вещества.
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 50% воды и 50% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 3,0 мин], Rt=1,91 мин; МС Вычисл.: 514; МС Найдено: 515 [M+H].
Описание D154
(цис)-5-Фтор-6-((3S,4R)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (энантиомер 2) (D154)
3
4
2
К суспензии (цис)-5-фтор-6-((3S,4R)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазола (энантиомер 2) (52 мг, 0,21 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (97 мг, 0,25 ммоль), CuI (39 мг, 0,21 ммоль) и KPO (88 мг, 0,42 ммоль) в сухом толуоле (4 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (59 мг, 0,42 ммоль). Суспензию дегазировали N и нагревали до 110°C в течение 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (40 мг, выход 38%) в виде белого твердого вещества.
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды и 30% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 2,5 мин], Rt=1,66 мин; МС Вычисл.: 514; МС Найдено: 515 [M+H].
Описание D155
(цис)-5-Фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (энантиомер 1) (D155)
3
4
2
4
К суспензии (цис)-5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазола (энантиомеры 1) (40 мг, 0,16 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (72 мг, 0,19 ммоль), CuI (30 мг, 0,06 ммоль) и KPO (68 мг, 0,32 ммоль) в сухом толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (46 мг, 0,32 ммоль). Суспензию дегазировали N и перемешивали при 110°C в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между разбавленным аммиаком (30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (70 мг, выход 89%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,94 (д, =6,6 Гц, 1H), 8,10 (с, 1H), 7,36 (д, =9,9 Гц, 1H), 6,59 (с, 1H), 5,12-4,84 (м, 1H), 4,76-4,67 (м, 2H), 4,41-4,33 (м, 2H), 4,15-4,03 (м, 2H), 3,93-3,85 (м, 1H), 3,59-3,51 (м, 1H), 3,41-3,32 (м, 1H), 3,22-3,10 (м, 1H), 2,99-2,94 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,30-2,13 (м, 2H), 2,13-2,02 (м, 2H), 1,90-1,65 (м, 6H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 3 мин), Rt=2,40 мин, МС Вычисл.: 499; МС Найдено: 500 [M+H].
Описание D156
(цис)-5-Фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (энантиомер 2) (D156)
3
4
2
4
К суспензии (цис)-5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазола (энантиомер 2) (40 мг, 0,16 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (72 мг, 0,19 ммоль), CuI (30 мг, 0,06 ммоль) и KPO (68 мг, 0,32 ммоль) в сухом толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (46 мг, 0,32 ммоль). Суспензию дегазировали N и нагревали до 110°C в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между разбавленным аммиаком (30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM/MeOH=10/1) с получением указанного в заголовке соединения (68 мг, выход 86%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,94 (д, =6,6 Гц, 1H), 8,10 (с, 1H), 7,36 (д, =9,9 Гц, 1H), 6,59 (с, 1H), 5,12-4,84 (м, 1H), 4,76-4,67 (м, 2H), 4,41-4,33 (м, 2H), 4,15-4,03 (м, 2H), 3,93-3,85 (м, 1H), 3,59-3,51 (м, 1H), 3,41-3,32 (м, 1H), 3,22-3,10 (м, 1H), 2,99-2,94 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,30-2,13 (м, 2H), 2,13-2,02 (м, 2H), 1,90-1,65 (м, 6H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 3 мин), Rt=2,39 мин, МС Вычисл.: 499; МС Найдено: 500 [M+H].
Описание D157
6-Бром-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D157)
4
3
2
4
Смесь 6-бром-1H-индазола (10,0 г, 0,051 моль), DHP (8,57 г, 0,102 моль), PTSA (1,75 г, 10,2 ммоль) и MgSO (18,0 г, 0,153 моль) в THF (50 мл) нагревали до кипения с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Смесь фильтровали. Фильтрат разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Комбинированные органические слои промывали насыщ. водным NaHCO и насыщенным солевым раствором, сушили над NaSOи концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE: EtOAc=40:1) с получением желаемого соединения (12,0 г, выход 84%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,99 (с,1H), 7,80 (с, 1H), 7,58 (д, =8,7 Гц, 1H), 7,30-7,26 (м, 1H), 5,67 (дд, =9,3, 2,7 Гц, 1H), 4,06-4,02 (м, 1H), 3,81-3,72 (м, 1H), 2,60-2,47 (м, 1H), 2,19-2,04 (м, 2H), 1,81-1,64 (м, 3H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды и 10% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 4,0 мин, чистота составляет > 95%, Rt=2,632 мин; МС Вычисл.: 280; МС Найдено: 281 [M+H].
Описание D158
трет-
Бутил 4-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (D158)
2
2
3
2
2
4
Суспензию 6-бром-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (4,00 г, 14,2 ммоль), трет-бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (4,82 г, 15,6 ммоль), Pd(dppf)Cl (0,5 г, 0,7 ммоль) и NaCO (3,70 г, 34,9 ммоль) в диоксане (140 мл) и воде (28 мл) дегазировали N 3 раза. Затем смесь перемешивали при 85°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали и растворитель удаляли под вакуумом. Остаток разделяли между водой (200 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (100 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 10:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения (5,32 г, выход 97%) в виде коричневого маслянистого твердого вещества.
1
3
J=
J=
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,98 (с, 1H), 7,65 (д, 8,4 Гц, 1H), 7,49 (с, 1H), 7,23 (д,8,7 Гц, 1H), 6,11 (шир. с, 1H), 5,72 (дд, 9,3, 2,4 Гц, 1H), 4,11-4,01 (м, 3H), 3,80-3,72 (м, 1H), 3,67 (т,5,4 Гц, 2H), 2,67-2,53 (м, 3H), 2,22-2,04 (м, 2H), 1,84-1,63 (м, 3H), 1,50 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 3 мин), Rt=2,48 мин; МС Вычисл.: 383; МС Найдено: 384 [M+H].
Описание D159
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D159)
трет-
3
2
2
2
2
2
3
2
4
К раствору бутил 4-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (5,32 г, 13,8 ммоль) в сухом THF (140 мл) добавляли BH/THF (1 M, 55,2 мл, 55,2 ммоль) при 0°C в атмосфере N. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до 3°C и осторожно добавляли по каплям NaOH (2 M, 20,7 мл, 41,4 ммоль). Затем HO (30%, 15,6 г, 138 ммоль) и сохраняли внутреннюю температуру ниже 5°C. Затем реакционную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь постепенно выливали в NaSO (10%, 200 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Органический слой отделяли и водный экстрагировали EtOAc (100 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 4:1 до 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (5,2 г, выход 93%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,99 (с, 1H), 7,70 (д, =8,4 Гц, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,08 (д, =8,4 Гц, 1H), 5,70 (дд, =11,7, 2,4 Гц, 1H), 4,52-4,36 (м, 1H), 4,36-4,17 (м, 1H), 4,08-4,03 (м, 1H), 3,85-3,70 (м, 2H), 2,84-2,52 (м, 4H), 2,23-2,01 (м, 2H), 1,87-1,67 (м, 6H), 1,50 (с, 9H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,62 мин; МС Вычисл.: 401; МС Найдено: 402 [M+H].
Описание D160
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D160)
трет-
2
3
2
4
Раствор бутил 3-гидрокси-4-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (5,20 г, 13,0 ммоль) в сухом DCM (200 мл) охлаждали до -60°C и добавляли по каплям DAST (8,40 г, 52,1 ммоль). Полученную смесь постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь постепенно выливали в NaCO (10%, 300 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Органический слой отделяли и водный экстрагировали DCM (100 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (4,0 г, выход 75%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,99 (с, 1H), 7,69 (дд, =8,4, 2,4 Гц, 1H), 7,49-7,40 (м, 1H), 7,09-7,06 (м, 1H), 5,71 (дд, =9,3, 2,7 Гц, 1H), 4,79-4,46 (м, 2H), 4,21 (шир. с, 1H), 4,07-4,03 (м, 1H), 3,80-3,72 (м, 1H), 3,05-2,74 (м, 3H), 2,66-2,52 (м, 1H), 2,23- 1,91 (м, 3H), 1,89- 1,59 (м, 4H), 1,50 (с, 9H).
Описание D161
(цис)-6-(3-Фторпиперидин-4-ил)-1H-индазол гидрохлорид (D161)
трет-
Бутил 3-фтор-4-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (1,0 г, 2,5 ммоль) растворяли в HCl/MeOH (5M, 20 мл) и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (740 мг, неочищенное) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,19 мин; МС Вычисл.: 219; МС Найдено: 220 [M+H].
Описание D162
(цис)-6-(3-Фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол (D162)
3
2
3
2
4
3
К раствору 6-(3-фторпиперидин-4-ил)-1H-индазол гидрохлорида (740 мг, 2,48 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли формальдегид (37%, 5 мл) и NaBHCN (314 мг, 5,00 ммоль) по частям на бане со льдом. Полученный раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в NaCO (10%, 100 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали DCM (40 мл×3) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в NH/MeOH (3M, 20 мл) и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и очищенный при помощи C18 (вода:ацетонитрил от 95:5 до 50:50) с получением указанного в заголовке соединения (320 мг, выход 55%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,15 (шир. с, 1H), 8,04 (с, 1H), 7,72 (д, =8,4 Гц, 1H), 7,39 (с, 1H), 7,11 (д, =8,4 Гц, 1H), 4,89-4,65 (м, 1H), 3,36-3,28 (м, 1H), 2,94-2,90 (м, 1H), 2,85-2,72 (м, 1H), 2,42 (с, 3H), 2,20-2,06 (м, 2H), 2,00-1,90 (м, 2H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,36 мин; МС Вычисл.: 233; МС Найдено: 234 [M+H].
Описание D163
(цис)-1-(6-(6-(3-Фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (D163)
3
4
2
4
К суспензии 6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазола (150 мг, 0,643 мг), 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (217 мг, 0,707 ммоль), CuI (122 мг, 0,643 ммоль) и KPO (274 мг, 1,29 ммоль) в сухом толуоле (10 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (183 мг, 1,29 ммоль). Темно-синюю суспензию дегазировали N и нагревали до 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали и остаток разделяли между водой (50 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой отделяли и водный экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (DCM:MeOH от 40:1 до 20:1) с получением указанного в заголовке соединения (210 мг, выход 79%; два изомера в соотношении 85:15) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,71 (д, =6,0 Гц, 1H), 7,22 (д, =6,3 Гц, 1H), 6,49 (с, 1H), 4,86-4,68 (м, 2H), 4,49-4,38 (м, 2H), 4,10 (с, 1H), 4,04-4,03 (м, 2H), 3,34-3,27 (м, 1H), 2,94-2,76 (м, 2H), 2,40 (с, 3H), 2,19-1,91 (м, 4H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,46 мин; МС Вычисл.: 412; МС Найдено: 413 [M+H].
Описание D164
трет-Бутил 3-(((трифторметил)сульфонил)окси)-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксилат (D164)
2
2
4
К раствору NaHMDS (2 моль/л, 52 мл, 104 ммоль) в THF(100 мл) добавляли раствор трет-бутил 3-оксопирролидин-1-карбоксилата (16,0 г, 86,5 ммоль) в THF (100 мл) при -70°C по каплям. Реакционную смесь перемешивали при -70°C в течение 15 мин. Затем раствор PhNTf (37,0 г, 104 ммоль) в THF (200 мл) добавляли по каплям к смеси при -70°C. Реакционную смесь перемешивали при -70°C в течение 1 часа. Смесь нагревали до -30°C и гасили водой со льдом (100 мл). Смесь нагревали до комнатной температуры и экстрагировали EtOAc (400 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл×3), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением неочищенного указанного в заголовке соединения (40 г, выход 100%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,75-5,70 (м, 1H), 4,28-4,14 (м, 4H), 1,48 (с, 9H).
Описание D165
трет-Бутил 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксилат (D165)
2
2
2
К раствору трет-бутил 3-(((трифторметил)сульфонил)окси)-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксилата (40,0 г неочищенный, 86,5 ммоль) в диоксане (400 мл) добавляли KOAc (25,5 г, 260 ммоль), PinB (25,4 г, 100 ммоль), DPPF (4,77 г, 8,65 ммоль) и Pd(dppf)Cl (7,00 г, 8,65 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали и очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc 40:1-10:1) с получением указанного в заголовке соединения (19 г, выход 74%) в виде бесцветного масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,49-6,43 (м, 1H), 4,21-4,14 (м, 4H), 1,46 (с, 9H), 1,27 (с, 12H).
Описание D166
трет-Бутил 3-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксилат (D166)
2
3
2
2
К суспензии 6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (3,00 г, 10,2 ммоль), трет-бутил 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксилата (4,40 г, 15,2 ммоль) и NaCO (3,23 г, 30,5 ммоль) в диоксане (75 мл) и воде (15 мл) добавляли Pd(dppf)Cl (823 мг, 1,02 ммоль). Смесь нагревали до 100°C в атмосфере N в течение 1,5 ч. Смесь охлаждали и концентрировали и остаток разделяли между EtOAc (50 мл) и водой (50 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные EtOAc слои концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 20:1 до 10:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,44 г, выход 90%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,93 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,40-7,38 (м, 1H), 5,85 (с, 1H), 5,69-5,64 (м, 1H), 4,53 (с, 1H), 4,42 (с, 1H), 4,37-4,34 (м, 2H), 4,05-4,02 (м, 1H), 3,77-3,70 (м, 1H), 2,55 (шир. с, 1H), 2,45 (д, =5,1 Гц, 3H), 2,15-2,04 (м, 2H), 1,79-1,66 (м, 3H), 1,52 (с, 9H).
Описание D167
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил) пирролидин-1-карбоксилат (D167)
трет-
3
2
2
2
2
2
3
2
4
К раствору бутил 3-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксилата (5,80 г, 15,1 ммоль) в сухом THF (120 мл) добавляли раствор BH-THF (1 M, 60,6 мл, 60,6 ммоль) на бане со льдом под защитой N. Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. После охлаждения реакционной смеси до 0°C, добавляли NaOH (водн, 2 M, 23 мл, 45,4 ммоль) и сохраняли внутреннюю температуру ниже 5°C. Затем добавляли по каплям HO (30%, 15,2 мл, 151 ммоль) и сохраняли внутреннюю температуру ниже 5°C. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре и перемешивали в течение 3 часов. Добавляли NaSO (10%, 200 мл) и перемешивали в течение 15 мин на бане со льдом. Органический слой отделяли и водный экстрагировали EtOAc (100 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и выпаривали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 10:1 до 4:1) с получением указанного в заголовке соединения (2,53 г, выход 42%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,91 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,34 (с, 1H), 5,67-5,61 (м, 1H), 4,38 (шир. с, 1H), 4,05-4,01 (м, 1H), 3,94 (шир. с, 1H), 3,76-3,69 (м, 3H), 3,60 (шир. с, 2H), 3,38 (шир. с, 1H), 2,55 (шир. с, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,13-1,99 (м, 2H), 1,78-1,63 (м, 3H), 1,51 (с, 9H).
Описание D168
(цис)-
трет-
Бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пирролидин-1-карбоксилат (D168)
трет-
2
2
3
2
4
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пирролидин-1-карбоксилата(2,50 г, 6,23 ммоль) в сухом DCM (100 мл) добавляли DAST (4,02 г, 24,9 ммоль) в атмосфере N и сохраняли внутреннюю температуру ниже -65°C. Смесь постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь осторожно выливали в насыщенный водный раствор NaCO (100 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделяли и водный экстрагировали DCM (100 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и выпаривали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,2 г, выход 48%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,92 (с, 1H),7,53 (с, 1H), 7,26 (с, 1H), 5,65-5,58 (м, 1H), 5,08-4,89 (м, 1H), 4,04-3,68 (м, 7H), 2,56-2,49 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,15-2,05 (м, 2H), 1,75-1,66 (м, 3H), 1,52 (с, 9H).
Описание D169
(цис)-6-(4-Фторпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол гидрохлорид (D169)
трет-
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пирролидин-1-карбоксилата(1,40 г, 3,47 ммоль) в HCl/диоксане (5 моль/л, 30 мл) перемешивали при 35°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и фильтровали. Твердое вещество промывали холодным 1,4-диоксаном (5 мл) с получением неочищенного соединения в виде белого твердого вещества (1,1 г, выход 100%) без дополнительной очистки.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,17 мин, МС Вычисл.: 219; МС Найдено: 220 [M+H].
Описание D170
(цис)-6-(4-Фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол (D170)
3
3
3
2
4
3
К суспензии (цис)-6-(4-фторпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол гидрохлорида (1,10 г, 4,30 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли раствор формальдегида (37%, 10 мл), CHCOOH (кат.) и NaBHCN (811 мг, 12,9 ммоль). Затем смесь перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в NaHCO (насыщенный, 100 мл) и перемешивали в течение 10 минут. Затем смесь экстрагировали дихлорметаном (50 мл×5). Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в NH/MeOH (3M, 20 мл) и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали и очищали при помощи колоночной хроматографии (DCM:MeOH от 80:1 до 40:1) с получением указанного в заголовке соединения (450 мг, выход 45%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,01 (шир. с, 1H), 7,96 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,43 (с, 1H), 5,22-5,00 (м, 1H), 3,94-3,78 (м, 1H), 3,31-3,28 (м, 1H), 3,06-3,04 (м, 1H), 2,97-2,95 (м, 1H), 2,69-2,62 (м, 1H), 2,48 (с, 6H).
Описание D171 и D172
(цис)-6-(4-Фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1) (D171) и (цис)-6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2) (D172)
Рацемат (цис)-6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол (450 мг, 1,93 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ способом (Chiralpak IA 5 мкм 30*250 мм, Фаза: Hex/EtOH=90/10, скорость потока: 25 мл/мин, 205 нм, T=30°C) с получением (цис)-6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (D171)(120 мг, выход 27%) и (цис)-6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (D172) (120 мг, выход 27%) оба в виде белого твердого вещества.
1
3
D171: H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 10,66-10,20 (м, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 5,18-5,03 (м, 1H), 3,91-3,79 (м, 1H), 3,31-3,27 (м, 1H), 3,05-2,93 (м, 2H), 2,66-2,62 (м, 1H), 2,48 (с, 6H).
1
3
D172: H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 11,11 (шир. с, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,40 (с, 1H), 5,17-5,02 (м, 1H), 3,91-3,78 (м, 1H), 3,30-3,28 (м, 1H), 3,10-2,89 (м, 2H), 2,62-2,61 (м, 1H), 2,48 (с, 6H).
Описание D173
(цис)-6-(4-Фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1) (D173)
3
4
2
3
2
2
4
К суспензии 6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (50 мг, 0,21 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (92 мг, 0,24 ммоль), CuI (41 мг, 0,214 ммоль), KPO (91 мг, 0,43 ммоль) в сухом толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (61 мг, 0,43 ммоль). Смесь дегазировали N 3 раза и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (5%, 15 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (83 мг, выход 78%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,77 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 5,24-5,04 (м, 1H), 4,76-4,67 (м, 2H), 4,40-4,33 (м, 2H), 4,12-4,07 (м, 6H), 3,96-3,89 (м, 2H), 3,59-3,50 (м, 1H), 3,36-3,28 (м, 1H), 3,13-3,01 (м, 1H), 2,93-2,78 (м, 1H), 2,64-2,58 (м, 1H), 2,50 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 1,90-1,70 (м, 2H), 1,61-1,51 (м, 3H).
Описание D174
(цис)-6-(4-Фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2) (D174)
3
4
2
3
2
2
4
К суспензии (цис)-6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (15 мг, 0,064 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (28 мг, 0,071ммоль), CuI (13 мг, 0,064 ммоль), KPO (27 мг, 0,13 ммоль) в сухом толуоле (1 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (18 мг, 0,13 ммоль). Смесь дегазировали N 3 раза и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (5%, 5 мл) и экстрагировали EtOAc (5 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (23 мг, выход 74%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,77 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 5,22-5,06 (м, 1H), 4,71-4,64 (м, 2H), 4,42-4,35 (м, 2H), 4,12-4,07 (м, 6H), 3,95-3,89 (м, 2H), 3,57-3,51 (м, 1H), 3,35-3,29 (м, 1H), 3,12-3,01 (м, 1H), 2,90-2,78 (м, 1H), 2,64-2,58 (м, 1H), 2,51 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 1,90-1,71 (м, 2H), 1,61-1,52 (м, 3H).
Описание D175
(транс)-
трет-
Бутил 4-циано-3-гидроксипиперидин-1-карбоксилат и (транс)-
трет-
бутил 3-циано-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилат (D175)
трет-
трет-
4
3
2
2
4
Суспензию бутил 7-окса-3-азабицикло[4.1.0]гептан-3-карбоксилата (13,0 г, 65,3 ммоль) NaCN (10,6 г, 0,216 моль) и LiClO (22,2 г, 0,209 моль) в CHCN (150 мл) нагревали до 95°C в атмосфере Nв течение двух дней. Смесь охлаждали до комнатной температуры, и разбавляли водой (150 мл) и EtOAc (200 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (200 мл×2). Объединенные органические слои сушили над NaSO, концентрировали в вакууме. Остаток очищали при помощи колонки на силикагеле, элюируя смесью PE/EtOAc (от 5/1 до 1:1) с получением смеси указанного в заголовке соединения и (транс)-бутил 3-циано-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (D172) (7,06 г, выход 48%) в соотношении 3:1, в виде желтого масла.
1
3
J=
H ЯМР основного продукта (400 МГц, CDCl): δ 3,98 (дд,13,6 Гц, 3,2 Гц, 1H), 3,89-3,75 (м, 2H), 3,18-2,99 (м, 2H), 2,70-2,65 (м, 1H), 2,16-2,06 (м, 1H), 1,80-1,72 (м, 1H), 1,46 (с, 9H).
Описание D176
(транс)-
трет-
Бутил 4-карбамотиоил-3-гидроксипиперидин-1-карбоксилат и (транс)-
трет-
бутил 3-карбамотиоил-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилат (D176)
трет-
трет-
трет-
4
2
2
4
3
Смесь (транс)-бутил 4-циано-3-гидроксипиперидин-1-карбоксилата и (транс)-бутил 3-циано-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (7,00 г, 30,6 ммоль, 3:1) растворяли в DMF (40 мл), и добавляли водный раствор (NH)S (S%≥8%, 40 мл). После добавления полученный раствор перемешивали в течение двух дней. Реакционную смесь разбавляли водой (100 мл), и экстрагировали EtOAc (100 мл×3) и DCM (100 мл). Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищнного продукта в виде черного масла. Черное масло дополнительно очищали при помощи колонки С18, элюируя CHCN/вода с получением смеси указанного в заголовке соединения и (транс)-бутил 3-карбамотиоил-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (4,05 г, выход 51%) в соотношении 3:1 в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР основного продукта (400 МГц, CDCl): δ 7,80 (с, 2H), 4,38-4,27 (м, 1H), 4,22-4,09 (м, 1H), 3,97-3,87 (м, 1H), 2,76-2,65 (м, 1H), 2,64-2,50 (м, 2H), 1,89-1,84 (м, 2H), 1,46 (с, 9H).
Описание D177
(транс)-
трет-
Бутил 3-гидрокси-4-(имино(метилтио)метил)пиперидин-1-карбоксилат и (транс)-
трет-
бутил 4-гидрокси-3-(имино(метилтио)метил)пиперидин-1-карбоксилат (D177)
трет-
трет-
трет-
3
Смесь (транс)-бутил 4-карбамотиоил-3-гидроксипиперидин-1-карбоксилата и (транс)-бутил 3-карбамотиоил-4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (4,05 г, 15,6 ммоль, 3:1) в ацетоне (100 мл) добавляли CHI (3,32 г, 23,4 ммоль). После добавления полученный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь концентрировали в вакууме с получением смеси указанного в заголовке соединения и (транс)-бутил 4-гидрокси-3-(имино(метилтио)метил)пиперидин-1-карбоксилата (4,24 г, выход 100%) в соотношении 3:1 в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР основного продукта (400 МГц, CDCl): δ 4,44-4,14 (м, 2H), 4,04-3,87 (м, 1H), 3,52-3,38 (м, 1H), 2,93 (с, 3H), 2,84-2,69 (м, 2H), 2,05-1,98 (м, 1H), 1,91-1,73 (м, 1H), 1,47 (с, 9H).
Описание D178
3-Амино-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбонитрил (D178)
2
3
2
2
4
К раствору 5-амино-1H-пиразол-4-карбонитрила(20,0 г, 185,2 ммоль) в DMF (80 мл) добавляли PMBCl (32,8 г, 207 ммоль) и KCO (30,7 г, 222 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 70°C в течение 2 часов. Смесь разделяли между HO (400 мл) и EtOAc (400 мл). Органические слои промывали насыщенным солевым раствором (200 мл×2), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Затем остаток очищали колонкой (петролейный эфир:EtOAc от 5:1 до 2:1) с получением указанного в заголовке соединения (25 г, выход: 59%) в виде белого твердого вещества.
1
+
d
J
J
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 8,16 (с, 1H), 7,18 (д, =9,0 Гц, 2H), 6,88 (д, =9,0 Гц, 2H), 5,53 (с, 2H), 4,97 (с, 2H), 3,71 (с, 3H). ЖХ-МС (5-95%) Rt=1,86 мин; МС Вычисл.:228, МС Найдено: 229 [M+H].
Описание D179
3-Амино-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбальдегид (D179)
2
2
2
3
2
4
DIBAL-H (151 мл, 151 ммоль) добавляли медленно к раствору 3-амино-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбонитрила (8,60 г, 37,7 ммоль) в толуоле (200 мл) при -78°C в атмосфере N. После добавления, раствор перемешивали в течение 20 мин и затем нагревали до 0°C. Раствор медленно выливали в HCl (4 н, 220 мл). Смесь разбавляли HO (400 мл) и экстрагировали EtOAc (150 мл×3). Органическую фазу промывали HO (100 мл), насыщенным NaHCO(100 мл), сушили над безводным NaSO, фильтровали и выпаривали с получением указанного в заголовке соединения (5,13 г, выход 59%) в виде желтого твердого вещества.
1
d
J
J
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,61 (с, 1H), 8,13 (с, 1H), 7,22 (д, =8,4 Гц, 2H), 6,89 (д, =8,4 Гц, 2H), 5,64 (шир. с, 2H), 5,01 (с, 2H), 3,71 (с, 3H).
Описание D180
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(2-(4-метоксибензил)-2
H
-пиразоло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D180)
трет-
трет-
трет-
3
Смесь (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(имино(метилтио)метил)пиперидин-1-карбоксилата и (транс)-бутил 4-гидрокси-3-(имино(метилтио)метил)пиперидин-1-карбоксилата (4,24 г, 15,5 ммоль, 3:1) и 3-амино-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбальдегида (4,29 г, 18,6 ммоль) растворяли в сухом DCM (150 мл). Полученный раствор нагревали до кипения с обратным холодильником в течение двух дней. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. остаток очищали при помощи колонки C18, элюируя CHCN/вода (от 0/100 до 100/0) с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт промывали EtOAc (6 мл) с получением (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(2-(4-метоксибензил)-2H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (568 мг, выход 8%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 9,35 (с, 1H), 8,56 (с, 1H), 7,38 (д, =8,4 Гц, 2H), 6,94 (д, =8,4 Гц, 2H), 5,63 (с, 2H), 4,34-4,30 (м, 1H), 4,17-4,10 (м, 2H), 3,80 (с, 3H), 3,06-3,00 (м, 1H), 2,95-2,82 (м, 1H), 2,81-2,65 (м, 1H), 2,03-1,97 (м, 1H), 1,90-1,78 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
Описание D181
(цис)-
трет-
Бутил 3-фтор-4-(2-(4-метоксибензил)-2
H
-пиразоло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D181)
трет-
H
2
3
2
4
DAST (1,50 мл) добавляли медленно к раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(2-(4-метоксибензил)-2-пиразоло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (300 мг, 0,683 ммоль) в сухом DCM (20 мл) в атмосфере N при -68°C. После добавления смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь разбавляли насыщ. водным раствором NaHCO (50 мл) и экстрагировали EtOAc (100 мл×3). Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали, концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (305 мг, выход 100%) в виде желтого масла, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 2,5 мин, чистота >90%, Rt=1,62 мин; МС Вычисл.: 441; МС Найдено: 442, [M+H].
Описание D182
(цис)-6-(3-Фторпиперидин-4-ил)-2-(4-метоксибензил)-2
H
-пиразоло[3,4-d]пиримидин гидрохлорид (D182)
трет-
H
Раствор (цис)-бутил 3-фтор-4-(2-(4-метоксибензил)-2-пиразоло[3,4-d]пиримидин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (305 мг, 0,692 ммоль) в HCl/MeOH (5 M, 20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение двух часов. Смесь концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке продукта (265 мг, выход 100%) в виде желтого масла, который использовали непосредственно на следующей стадии.
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 2,5 мин, Rt=1,27 мин; МС Вычисл.: 341; МС Найдено: 342 [M+H].
Описание D183
(цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-2-(4-метоксибензил)-2
H
-пиразоло[3,4-d]пиримидин (D183)
H
3
2
3
3
К раствору (цис)-6-(3-фторпиперидин-4-ил)-2-(4-метоксибензил)-2-пиразоло[3,4-d]пиримидин гидрохлорида(265 мг, 0,701 ммоль) в CHCN (30 мл) добавляли 1-бром-2-метокси-этан (484 мг, 3,51 ммоль), и KCO (484 мг, 3,51 ммоль). Полученную суспензию нагревали до 65°C и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали, концентрировали в вакууме. Остаток очищали при помощи колонки C18, элюируя CHCN/вода (от 0/100 до 100/0) с получением указанного в заголовке соединения (140 мг, выход 52%) в виде желтого масла.
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,21 (с, 1H), 7,95 (с, 1H), 7,33 (д, =8,4 Гц, 2H), 6,90 (д, =8,4 Гц, 2H), 5,53 (с, 2H), 5,50-5,24 (м, 1H), 3,80 (с, 3H), 3,55 (т, =5,4 Гц, 2H), 3,39-3,37 (м, 4H), 3,22-3,12 (м, 1H), 2,96-2,91 (м, 1H), 2,70-2,67 (м, 2H), 2,36-2,21 (м, 2H), 2,06-2,00 (м, 2H).
Описание D184 и D185
(цис)-6-(3-Фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1
H
-пиразоло[3,4-d]пиримидин (энантиомер 1) (D184) и (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1
H
-пиразоло[3,4-d]пиримидин (энантиомер 2) (D185)
H
H
H
2
3
2
4
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-2-(4-метоксибензил)-2-пиразоло[3,4-d]пиримидина (140 мг, 0,351 ммоль) в TFA (6 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение двух дней. Смесь концентрировали в вакууме и растворяли в воде (30 мл). Добавляли EtOAc (30 мл). Две фазы разделяли и CsCO (10 экв.) добавляли к водному раствору. EtOAc (20 мл×4) добавляли к водному раствору для извлечения желаемого. Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью хиральной ВЭЖХ способом (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF- 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C) с получением (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1-пиразоло[3,4-d]пиримидина (энантиомер 1)(D184)(35 мг, выход 36%, Rt=8,487 мин, 100% э.и.) и (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1-пиразоло[3,4-d]пиримидина (энантиомер 2) (D185) (35 мг, выход 36%, Rt=13,986 мин, 99,5% э.и.) оба в виде бесцветного масла.
1
3
J
J
D184: H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,94 (с, 1H), 7,96 (с, 1H), 5,05-4,81 (м, 1H), 3,29 (т, =5,4 Гц, 2H), 3,13-3,02 (м, 4H), 2,88-2,75 (м, 1H), 2,75-2,66 (м, 1H), 2,42 (т, =5,4 Гц, 2H), 2,02-1,92 (м, 2H), 1,76-1,65 (м, 2H).
1
3
J
J
D185: H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,95 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 5,09-4,84 (м, 1H), 3,30 (т, =5,4 Гц, 2H), 3,15-3,03 (м, 4H), 2,94-2,79 (м, 1H), 2,75-2,67(м, 1H), 2,44 (т, =5,4 Гц, 2H), 2,06-1,92 (м, 2H), 1,79-1,66 (м, 2H).
Описание D186
4-(4-йодпиридин-2-ил)морфолин (D186)
2
3
2
4
Суспензию 2-фтор-4-йодпиридина (1,78 г, 7,98 ммоль), морфолина (1,0 мл, 11,5 ммоль) и KCO (3,32 г, 24,1 ммоль) в сухом DMSO (12 мл) нагревали до 70°C в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли EtOAc (100 мл) и водой (100 мл). Органический слой сушили над NaSO и концентрировали в вакууме. Остаток очищали при помощи колонки на силикагеле (PE:EtOAc от 1:0 до 30:1) с получением желаемого соединения (2,15 г, выход 93%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
3
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,84 (д, =4,8 Гц, 1H), 7,00-6,99 (м, 2H), 3,80 (д, =4,8 Гц, 4H), 3,49 (д, =4,8 Гц, 4H). ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 3 мин, Rt=1,92 мин; МС Вычисл.: 290; МС Найдено: 291, [M+H].
Описание D187
5-Метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол гидрохлорид (D187)
трет-
Бутил 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (1,0 г, 2,5 ммоль) растворяли в HCl/MeOH (5 моль/л, 10 мл). Затем, смесь перемешивали в течение 6 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (820 мг, выход >100%) в виде светло-желтого твердого вещества, используемого на следующей стадии без очистки.
3
+
ЖХ-МС: 5-95% CHCN, Rt=1,13 мин, МС Вычисл.: 215, МС Найдено: 216 [M+H].
Описание D188
5-Метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол (D188)
3
2
3
2
4
К раствору 5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол гидрохлорида (820 мг неочищенного продукта, 2,50 ммоль) в DCE (15 мл) добавляли оксетан-3-он (1,80 г, 25,0 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 мин. Затем смесь охлаждали на бане со льдом и к смеси добавляли NaBHCN (473 мг, 7,50 ммоль). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Затем, реакционную смесь выливали в водный раствор NaCO (10%, 100 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Затем смесь экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (DCM:MeOH=40:1) с получением указанного в заголовке соединения (473 мг, выход 70%) в виде белого твердого вещества
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,11 (шир. с, 1H), 7,96 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,38 (с, 1H), 4,72-4,69 (м, 4H), 3,61-3,52 (м, 1H), 2,96-2,93 (м, 2H), 2,88-2,78 (м, 1H), 2,44 (с, 3H), 2,06-1,98 (м, 2H), 1,90-1,82 (м, 4H).
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин], Rt=1,37 мин; МС Вычисл.: 271; МС Найдено: 272 [M+H].
Описание D189
1-(2-Метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол (D189)
3
4
3
2
2
4
.
К раствору 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (60 мг, 0,22 ммоль)в толуоле (10 мл) добавляли 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (105 мг, 0,270 ммоль), KPO (140 мг, 0,660 ммоль), CuI (125 мг, 0,660 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (94 мг, 0,66 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NHHO (10 мл). Желаемое экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2×20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растирали с PE:EtOAc=5:1 (3 мл) с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 68%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,47 (с, 1H), 4,74-4,65 (м, 6H), 4,42-4,33 (м, 2H), 4,15-4,00 (м, 5H), 3,93-3,85 (м, 1H), 3,59-3,50 (м, 2H), 2,98-2,79 (м, 3H), 2,45 (с, 3H), 2,06-1,74 (м, 8H), 1,68-1,58 (м, 4H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,763 мин; МС Вычисл.: 534; МС Найдено: 535 [M+H].
Описание D190
1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ол (D190)
Смесь 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (300 мг, 0,829 ммоль), 3-метилазетидин-3-ол гидрохлорида (122 мг, 0,99 ммоль) и TEA (251 мг, 2,49 ммоль) в MeOH (10 мл) нагревали при 50°C и перемешивали в течение 1,5 часов. Смесь концентрировали и остаток очищали колонкой (PE:EtOAc=2:1) с получением указанного в заголовке соединения (250 мг, выход 94%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,33 (с, 1H), 3,98 (с, 4H), 3,89 (с, 3H), 2,27-2,23 (м, 1H), 1,60 (с, 3H).
Описание D191
1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ол (D191)
4
Суспензию 4,6-дииод-2-метилпиримидина (300 мг, 0,867 ммоль), 3-метилазетидин-3-ол гидрохлорида (118 мг, 0,954 ммоль) и TEA (263 мг, 2,60 ммоль) в i-PrOH (8 мл) нагревали до 75°C и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду (50 мл). Добавляли EtOAc (30 мл×3) для экстракции желаемого. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (270 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,48 (с, 1H), 4,03-3,92 (м, 4H), 2,63 (с, 1H), 2,45 (с, 3H), 1,59 (с, 3H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,09 мин; МС Вычисл.: 305; МС Найдено: 306 [M+H].
Описание D192
5-метил-6-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол (D192)
2
2
2
2
2
4
3
2
3
2
2
2
4
2
2
3
К смеси 5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол гидрохлорида (252 мг, 1,00 ммоль) в CHCl (10 мл) добавляли TEA (2 мл). К смеси добавляли метансульфонилхлорид (171 мг, 1,50 ммоль). Реакционную смесь выливали в воду (10 мл). Смесь экстрагировали CHCl (2×10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растворяли в CHOH (10 мл). KCO (1,38 г, 10,0 ммоль) добавляли к раствору. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в воду (30 мл). Смесь экстрагировали CHCl (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (60 мг, выход 20%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,97 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,33 (с, 1H), 4,02-3,98 (м, 2H), 2,96-2,78 (м, 6H), 2,44 (с, 3H), 2,00-1,80 (м, 4H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,40 мин; МС Вычисл.: 293; МС Найдено: 294 [M+H].
Описание D193
1-(2-Метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол (D193)
3
4
3
2
2
4
.
К раствору 5-метил-6-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (60 мг, 0,20 ммоль)в толуоле (10 мл) добавляли 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (102 мг, 0,260 ммоль), KPO (127 мг, 0,600 ммоль), CuI (114 мг, 0,600 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (85 мг, 0,60 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1,5 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NHHO (10 мл). Желаемое экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2×10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc (3 мл) с получением указанного в заголовке соединения (70 мг, выход 63%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,75 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,47 (с, 1H), 4,72-4,66 (м, 2H), 4,41-4,33 (м, 2H), 4,15-3,97 (м, 7H), 3,91-3,84 (м, 1H), 3,57-3,50 (м, 1H), 2,98-2,80 (м, 6H), 2,46 (с, 3H), 1,99-1,66 (м, 6H), 1,62-1,57 (м, 4H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,75 мин; МС Вычисл.: 556 МС Найдено: 557[M+H].
Описание D194
1-(4-(5-Метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-ил)этанон (D194)
2
4
2
4
2
2
3
К смеси 5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол гидрохлорида (280 мг, 1,30 ммоль)в THF (5 мл) добавляли TEA (1 мл) и уксусный ангидрид (204 мг, 2,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Остаток диспергировали в воде (10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растворяли в THF (5 мл). NaOH (1 M, 1 мл) добавляли к раствору. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. EtOAc (2×20 мл) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, выход 30%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,00 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,29(с, 1H), 4,87-4,82 (м, 1H), 4,00-3,95 (м, 1H), 3,26-3,18 (м, 1H), 3,07-2,99 (м, 1H), 2,72-2,63 (м, 1H), 2,45 (с, 3H), 2,17 (с, 3H), 1,94-1,85 (м, 2H), 1,70-1,62 (м, 2H).
Описание D195
Бензил 4-(1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (D195)
2
2
2
2
4
Реакционную смесь 6-иод-1H-индазола (1 г, 4,10 ммоль), бензил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (1,41 г, 4,10 ммоль), PdCl(dppf)-CHCl аддукт (0,335 г, 0,410 ммоль) и карбонат натрия (1,30 г, 12,3 ммоль) барботировали азотом и перемешивали при 74°C (масляная ванна) в течение ночи. Затем реакционную смесь фильтровали, концентрировали для удаления растворителя и разбавляли этилацетатом (180 мл) и водой (50 мл). Отделенную органическую часть сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали. Очищали через систему ISCO (этилацетат/петролейный эфир) с получением указанного в заголовке продукта.
3
3
+
ЖХ-МС (ESI) [подвижная фаза: от 95% воды (0,05% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,05% TFA) и 95% CHCN за 5,0 мин]: m/z 334 [M+H]; Rt=3,50 мин.
Описание D196
Бензил 4-(1-(6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (D196)
2
4
Смесь бензил 4-(1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (300 мг, 0,900 ммоль), 4-(6-хлорпиримидин-4-ил)морфолина (180 мг, 0,900 ммоль) и карбоната цезия (586 мг, 1,80 ммоль) в DMF (8 мл) герметизировали в пробирке для микроволновой печи и облучали при помощи микроволной печи при 120°C в течение 2 ч. Затем реакционную смесь фильтровали и разбавляли этилацетатом (200 мл) и водой (60 мл). Отделенную органическую часть сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали. Очистка через систему Biotage с колонкой с обращенной фазой (0,5% TFA в воде и ацетонитриле) дает указанный в заголовке продукт.
3
3
+
ЖХ-МС (ESI) [подвижная фаза: от 95% воды (0,05% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,05% TFA) и 95% CHCN за 5,0 мин]: m/z 497 [M+H]; Rt=4,30, 4,40 мин.
Описание D197
4-(6-(6-(Пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (D197)
Смесь бензил 4-(1-(6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (100 мг, 0,200 ммоль) и Pd-C (21,4 мг, 0,0200 ммоль) в метаноле (40 мл) перемешивали при 60°C в атмосфере водорода overn (50 фунт/кв. дюйм) в течение двух дней. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3
3
+
ЖХ-МС (ESI) [подвижная фаза: от 95% воды (0,0,05% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,05% TFA) и 95% CHCN за 5,0 мин]: m/z 365 [M+H]; Rt=2,21 мин.
Описание D198
Бензил 4-(5-метил-1-(6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (D198)
2
2
2
Смесь 4-(6-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (1,4 г, 3,74 ммоль), бензил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (1,284 г, 3,74 ммоль), PdCl(dppf)-CHCl аддукта (0,306 г, 0,374 ммоль) и карбоната натрия (0,793 г, 7,48 ммоль) в 1,4-диоксане (30 мл) и воде (10,00 мл) в равной степени разделяли на две партии, герметизировали в сосудах для микроволновой печи и облучали при помощи микроволной печи при 120°C в течение 2 ч. Объединенную реакционную смесь концентрировали для удаления растворителя, разбавляли этилацетат (120 мл) и водой (40 мл). Отделенную органическую часть сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3
3
+
ЖХ-МС (ESI) [подвижная фаза: от 95% воды (0,05% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,05% TFA) и 95% CHCN за 5,0 мин]: m/z 511 [M+H]; Rt=4,43 мин.
Описание D199
5-Метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-индазол (D199)
3
3
4
2
-
+
К смеси 6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (5,78 г, 19,6 ммоль), бис(пинаколато)диборона (9,95 г, 39,2 ммоль) и CHCOO K (7,68 г, 78,3 ммоль) в диоксане (50 мл) добавляли Pd(PPh) (6,60 г, 5,09 ммоль). Смесь нагревали до 90°C и перемешивали в атмосфере N в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc от 100:1 до 60:1) с получением целевого продукта (2,7 г, выход 41%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,98 (с, 1H), 7,94 (с, 1H), 7,47 (с, 1H), 5,77 (дд, =9,6, 2,8 Гц, 1H), 4,05-4,02 (м, 1H), 3,81-3,75 (м, 1H), 2,61 (с, 3H), 2,19-2,13 (м, 1H), 2,04-2,00 (м, 1H), 1,84-1,72 (м, 2H), 1,65-1,59 (м, 2H), 1,38 (с, 12H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,914 мин МС Вычисл.: 342, МС Найдено: 343 [M+H].
Описание D200
6-(2-Фторпиридин-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D200)
2
3
2
2
4
К раствору 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-индазола (2,40 г, 7,02 ммоль) в диоксане (50 мл) добавляли 4-бром-2-фторпиридин (1,85 г, 10,5 ммоль), NaCO (2,24 г, 21,1 ммоль), воду (10 мл) и Pd(dppf)Cl (816 мг, 1,00 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разделяли с водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2×10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 20:1 до 10:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,40 г, выход 64%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 2,5 мин], Rt=1,66 мин; МС Вычисл.: 311; МС Найдено: 312 [M+H].
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,28 (д, =5,1 Гц, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 7,41 (с, 1H), 7,20 (д, =5,1 Гц, 1H), 6,96 (с, 1H), 5,72-5,68 (м, 1H), 4,07-4,01(м, 1H), 3,77-3,69 (м, 1H), 2,65-2,49 (м, 1H), 2,32 (с, 3H), 2,19-2,06 (м, 2H), 1,79-1,66 (м, 3H).
Описание D201
6-(2-(Бензилокси)пиридин-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D201)
2
4
NaH (500 мг, 12,5 ммоль) диспергировали DMF (10 мл). К смеси добавляли фенилметанол (729 мг, 6,75 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. К смеси добавляли раствор 6-(2-фторпиридин-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (1,40 г, 4,50 ммоль) в DMF (10 мл). Смесь нагревали до 40°C и перемешивали в течение 1 часа. Смесь гасили водой со льдом (60 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2×40 мл) и насыщенным солевым раствором (2×50 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (2,10 г, выход > 100%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 2,5 мин], Rt=1,71 мин; МС Вычисл.: 399; МС Найдено:400 [M+H].
1
3
J=
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,23 (д, 5,1 Гц, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,59 (с, 1H), 7,59-7,51 (м, 2H), 7,42-7,36 (м, 4H), 6,93 (д, =4,8 Гц, 1H), 6,83 (с, 1H), 5,69-5,66 (м, 1H), 5,45 (с, 2H), 4,05-4,02 (м, 1H), 3,75-3,69 (м, 1H), 2,61-2,51 (м, 1H), 2,32 (с, 3H), 2,13-2,04 (м, 2H), 1,74-1,61 (м, 3H).
Описание D202
4-(5-Метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиридин-2(1H)-он (D202)
3
2
К раствору 6-(2-(бензилокси)пиридин-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (2,10 г, 5,26 ммоль) в CHOH (40 мл) добавляли Pd/C (200 мг). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов в атмосфере H из баллона. Реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (1,50 г, выход 92%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 2,5 мин], Rt=1,37 мин; МС Вычисл.: 309; МС Найдено: 310 [M+H].
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 13,27 (шир. с, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,60 (с, 1H), 7,45-7,38 (м, 2H), 6,62 (с, 1H), 6,37-6,35 (м, 1H), 5,71-5,67 (м, 1H), 4,07-4,03(м, 1H), 3,75-3,71 (м, 1H), 2,61-2,50 (м, 1H), 2,37 (с, 3H), 2,16-2,07 (м, 2H), 1,83-1,59 (м, 3H).
Описание D203
1-Метил-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиридин-2(1H)-one (D203)
3
2
4
2
2
3
NaH (584 мг, 14,6 ммоль) диспергировали в DMF (5 мл), и раствор 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиридин-2(1H)-она (1,50 г, 4,85 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли к смеси. Смесь перемешивали при 0°C в течение 10 минут. К смеси добавляли CHI (1,38 г, 9,70 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь гасили водой со льдом (80 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (3×50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (CHCl:CHOH=100:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,06 г, выход 68%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 2,5 мин], Rt=1,43 мин; МС Вычисл.: 323; МС Найдено: 324 [M+H].
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,97 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,41 (с, 1H), 7,33-7,30 (м, 1H), 6,59 (с, 1H), 6,22-6,19 (м, 1H), 5,69-5,65 (м, 1H), 4,06-4,02 (м, 1H), 3,75-3,69 (м, 1H), 3,61 (с, 3H), 2,59-2,47 (м, 1H), 2,35 (с, 3H), 2,16-2,04 (м, 2H), 1,81-1,63 (м, 3H).
Описание D204
1-Метил-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-он (D204)
3
2
К раствору 1-метил-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиридин-2(1H)-она (1,10 г, 3,4 ммоль) в CHOH (20 мл) добавляли Pd/C (200 мг). Реакционную смесь перемешивали при 60°C в течение ночи в атмосфере H (50 фунт/кв. дюйм). Реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (1,10 г, выход 99%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN в воде за 2,5 мин], Rt=1,45 мин; МС Вычисл.: 327; МС Найдено: 328 [M+H].
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,90 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 7,35-7,31 (м, 1H), 5,68-5,65 (м, 1H), 4,05-4,01 (м, 1H), 3,78-3,71 (м, 1H), 3,51-3,37 (м, 3H), 3,02 (с, 3H), 2,80-2,75 (м, 1H), 2,60-2,56 (м, 2H), 2,51 (с, 3H), 2,12-2,03 (м, 4H), 1,77-1,68 (м, 3H).
Описание D205
1-Метил-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-он (D205)
3
2
4
2
2
3
К раствору 1-метил-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-она (1,10 г, 3,36 ммоль) в диоксане (12 мл) добавляли конц. HCl (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO (100 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (CHCl:CHOH=100:1) с получением указанного в заголовке соединения (500 мг, выход 61%) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин], Rt=1,28 мин; МС Вычисл.: 243 МС Найдено: 244 (M+1).
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,96 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,28 (с, 1H), 3,49-3,30 (м, 3H), 3,03 (с, 3H), 2,81-2,73 (м, 1H), 2,56-2,50 (м, 1H), 2,43 (с, 3H), 2,15-1,97 (м, 2H).
Описание D206 и D207
1-метил-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-он (энантиомер 1) (D206) и 1-метил-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-он (энантиомер 2) (D207)
2
3
1-Метил-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-он (500 мг, 2,06 ммоль) разделяли SFC (Chiralpak OD-H 33 мкм 4,6×150 мм, Фаза: CO/CHOH=70/30, скорость потока: 50 мл/мин, температура: 30°C) с получением 1-метил-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-она (энантиомер 1)(D206)(190 мг, выход 42%) в виде белого твердого вещества и 1-метил-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-она (энантиомер 2) (D207) (200 мг, выход 44%) в виде белого твердого вещества.
1
3
D206:H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,97 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,29 (с, 1H), 3,49-3,33 (м, 3H), 3,04 (с, 3H), 2,80-2,74 (м, 1H), 2,57-2,50 (м, 1H), 2,44 (с, 3H), 2,16-2,12 (м, 1H), 2,07-1,97 (м, 1H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,30 мин; МС Вычисл.: 243 МС Найдено: 244 (M+1).
2
3
SFC: (Chiralpak OD-H 5 мкм 4,6×150 мм, Фаза: CO/CHOH=70/30, скорость потока: 2,1 мл/мин, температура: 30°C), Rt=3,31 мин, 100% э.и.
1
3
D207:H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,97 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,28 (с, 1H), 3,49-3,33 (м, 3H), 3,04 (с, 3H), 2,80-2,75 (м, 1H), 2,56-2,49 (м, 1H), 2,44 (с, 3H), 2,18-2,12 (м, 1H), 2,08-1,97 (м, 1H).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,29 мин; МС Вычисл.: 243 МС Найдено: 244 (M+1).
2
3
SFC: (Chiralpak OD-H 5 мкм 4,6×150 мм, Фаза: CO/CHOH=70/30, скорость потока: 2,1 мл/мин, температура: 30°C), Rt=4,37 мин, 99,3% э.и.
Описание D208
4-(1-(2-Метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-1-метилпиперидин-2-он (энантиомер 1) (D208)
3
4
3
2
2
4
.
К раствору 1-метил-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-она (энантиомер 1) (энантиомер 1) (60 мг, 0,25 ммоль)в толуоле (5 мл) добавляли 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (106 мг, 0,270 ммоль), KPO (105 мг, 0,494 ммоль), CuI (94 мг, 0,494 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (70 мг, 0,49 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NHHO (5 мл). Желаемое экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2×20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc (5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (52 мг, выход 42%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,72 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 4,74-4,65 (м, 2H), 4,40-4,34 (м, 2H), 4,15-4,00 (м, 5H), 3,92-3,84 (м, 1H), 3,55-3,34 (м, 4H), 3,03 (с, 3H), 2,81-2,74 (м, 1H), 2,51-2,39 (м, 4H), 2,19-2,01 (м, 2H), 1,88-1,62 (м, 6H).
Описание D209
Описание 4-(1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-1-метилпиперидин-2-она (энантиомер 2) (D209)
3
4
3
2
2
4
.
К раствору 1-метил-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-2-она (60 мг, 0,25 ммоль) (энантиомер 2)в толуоле (5 мл) добавляли 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (106 мг, 0,270 ммоль), KPO (105 мг, 0,494 ммоль), CuI (94 мг, 0,494 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (70 мг, 0,49 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NHHO (5 мл). Желаемое экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc/PE (2/1, 10 мл) с получением указанного в заголовке соединения (50 мг, выход 40%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,71 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 4,74-4,67 (м, 2H), 4,41-4,31 (м, 2H), 4,15-4,02 (м, 5H), 3,91-3,84 (м, 1H), 3,56-3,34 (м, 4H), 3,03 (с, 3H), 2,81-2,75 (м, 1H), 2,49-2,39 (м, 4H), 2,17-2,05 (м, 2H), 1,86-1,70 (м, 2H), 1,70-1,50 (м, 4H).
Описание D210
6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1
H
-индазол (D210)
2
2
2
К смеси 2-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (939 мг, 4,47 ммоль), 6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (1200 мг, 4,07 ммоль), PdCl(dppf)-CHClаддукта (332 мг, 0,407 ммоль) и трикалийфосфата (2589 мг, 12,20 ммоль) добавляли DMF (10 мл) и воду (2,500 мл). Реакционную смесь нагревали до 100°C в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, после фильтрации, фильтрат концентрировали и очищали при помощи колонки с силикагелем (30% EA в PE) с получением 6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (610 мг, 2,044 ммоль, 50,3% выход).
+
MS: 299,0 [M+H].
Описание D211
5-Метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1
H
-индазол (D211)
Смесь 6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (610 мг, 2,044 ммоль), Pd-C (435 мг, 0,409 ммоль, 10%) и метанола (10 мл) перемешивали в атмосфере водорода из баллона при комнатной температуре в течение 16 часов. После фильтрации, фильтрат концентрировали с получением неочищенного 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (614 мг, 2,044 ммоль, 100% выход).
+
MS: 301,1 [M+H].
Описание D212
5-Метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1
H
-индазол (D212)
3
H
Раствор 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (610 мг, 2,031 ммоль), HCl (4,06 мл, 20,31 ммоль) и метанола (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционный раствор нейтрализовали водн. NaHCO до pH=7, и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы сушили и концентрировали с получением 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1-индазола (430 мг, 1,988 ммоль, 98% выход).
+
MS: 217,1 [M+H].
Описание D213
трет-
Бутил 4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D213)
трет-
Реакционную смесь бутил пиперазин-1-карбоксилата (0,610 г, 3,28 ммоль), 4,6-дииод-2-метилпиримидина (1,03 г, 2,98 ммоль) и DIPEA (1,300 мл, 7,44 ммоль) и изопропанола (20 мл) нагревали при 70°C в течение 16 часов. Реакция не была завершена и после концентрации в вакууме, остаток очищали при помощи колонки с силикагелем (30-40% EA в PE) с получением трет-бутил 4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (330 мг, 0,816 ммоль, 27,4% выход).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,75 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 404; МС Найдено: 405 [M+1].
Описание D214
трет-
Бутил 4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D214)
трет-
трет-
В круглодонную колбу добавляли трикалийфосфат (263 мг, 1,237 ммоль), 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол (112 мг, 0,519 ммоль), иодид меди(I) (37,7 мг, 0,198 ммоль) и магнитный мешальник. Реакционный сосуд оборудовали резиновой перегородкой, откачивали и заполняли аргоном и эту последовательность повторяли еще один раз. Бутил 4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (200 мг, 0,495 ммоль), N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (113 мг, 0,792 ммоль) и толуол (5 мл) затем последовательно добавляли в потоке аргона. Смесь перемешивали при 120°C в течение 16 часов. После фильтрации, фильтрат концентрировали и очищали с помощью колонки с силикагелем (30-40% EA в PE) с получением бутил 4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (90 мг, 0,183 ммоль), который использовался непосредственно на следующей стадии.
Описание D215
5-Метил-1-(2-метил-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1
H
-индазол (D215)
трет-
Раствор бутил 4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (90 мг, 0,183 ммоль) и HCl (0,365 мл, 1,827 ммоль, 5 M в изопропаноле) и метанола (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток использовали непосредственно без дальнейшей очистки.
+
MS: 393,3 [M+H].
Описание D216
трет-Бутил 4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D216)
3
2
3
К раствору 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (1,50 г, 4,14 ммоль) в CHCN (20 мл) добавляли трет-бутил пиперазин-1-карбоксилат (1,16 г, 6,21 ммоль) и KCO (1,14 г, 8,28 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,73 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 2,5 мин], Rt=1,73 мин, МС Вычисл.: 420, МС Найдено: 421 [M+H].
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,63 (с, 1H), 3,90 (с, 3H), 3,60-3,59 (м, 4H), 3,51-3,47 (м, 4H), 1,47 (с, 9H).
Описание D217
6-(Фуран-3-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D217)
2
3
2
2
4
К раствору 6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (295 мг, 1,00 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли фуран-3-илбороновую кислоту (468 мг, 1,50 ммоль), NaCO (265 мг, 2,50 ммоль), воду (2 мл) и Pd(dppf)Cl (74 мг, 0,10 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 3 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток выливали в воду (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE: EtOAc=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (240 мг, выход 85%) в виде желтого масла.
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,95 (с, 1H), 7,56 (с, 2H), 7,52-7,50 (м, 2H), 6,62 (с, 1H), 5,69 (дд, =9,6, 2,4 Гц, 1H), 4,06-4,02 (м, 1H), 3,77-3,70 (м, 1H), 2,63-2,54 (м, 1H), 2,42 (с, 3H), 2,17-2,03 (м, 2H), 1,79-1,68 (м, 3H).
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 2,5 мин], Rt=1,73 мин; МС Вычисл.: 282; МС Найдено: 283 [M+H].
Описание D218
5-Метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол (D218)
3
2
К раствору 6-(фуран-3-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (360 мг, 1,28 ммоль) в CHOH (5 мл) добавляли Pd/C (10%, 50 мг). Реакционную смесь нагревали до 50°C и перемешивали в течение ночи в атмосфере H (50 фунт/кв. дюйм). Реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (300 мг, выход 82%) в виде бесцветного масла.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,91 (с, 1H), 7,49-7,46 (м, 2H), 5,71-5,68 (м, 1H), 4,18-3,89 (м, 5H), 3,79-3,67 (м, 2H), 2,62-2,53 (м, 1H), 2,46-2,38 (м, 4H), 2,18-2,14 (м, 1H), 2,06-1,98 (м, 2H), 1,81-1,73 (м, 3H).
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 2,5 мин], Rt=1,69 мин; МС Вычисл.: 286; МС Найдено: 287 [M+H].
Описание D219
5-Метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол (D219)
3
2
4
Раствор 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазола (300 мг, 1,05 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли конц. HCl (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO (100 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (200 мг, выход 94%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,96 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 4,17-4,00 (м, 2H), 3,95-3,88 (м, 2H), 3,74-3,66 (м, 1H), 2,46-2,37 (м, 4H), 2,04-1,93 (м, 1H).
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин], Rt=1,42 мин; МС Вычисл.: 202, МС Найдено: 203 [M+1].
Описание D220
трет-Бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D220)
3
4
2
3
2
2
4
.
.
К раствору 5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазола (180 мг, 0,891 ммоль) в толуоле (15 мл) добавляли трет-бутил 4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (563 мг, 1,34 ммоль), KPO3HO (754 мг, 3,56 ммоль), CuI (676 мг, 3,56 ммоль), и N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (505 мг, 3,56 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NHHO (30%, 50 мл). Добавляли EtOAc (3×20 мл) для экстракции желаемого. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2×20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 10:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения (260 мг, выход 59%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,84 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,19-4,13 (м, 4H), 4,07-4,02 (м, 1H), 3,98-3,94 (м, 2H), 3,74-3,71 (м, 5H), 3,54-3,51 (м, 4H), 2,48-2,39 (м, 4H), 2,04-1,97 (м, 1H), 1,48 (с, 9H).
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин], Rt=1,94 мин; МС Вычисл.: 494, МС Найдено: 495 [M+1].
Описание D221 и D222
трет-
Бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (D221) и трет-бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (D222)
трет-
Бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (260 мг, 0,526 ммоль) разделяли хиральной препаративной ВЭЖХ способом (Chiralpak IA 5 мкм 4,6×250 мм, Фаза: Hex/IPA=70/30, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C) с получением трет-бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (энантиомер 1)(D221)(90 мг, выход 34%, Rt: 5,170 мин, 100% э.и.) в виде белого твердого вещества и трет-бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил) пиперазин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (D222) (90 мг, выход 34%, Rt: 6,099 мин, 95% э.и.) в виде белого твердого вещества.
1
3
D221: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,84 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,19-4,03 (м, 5H), 3,98-3,93 (м, 2H), 3,74-3,71 (м, 5H), 3,54-3,51 (м, 4H), 2,51-2,42 (м, 4H), 2,06-1,98 (м, 1H), 1,48 (с, 9H).
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин], Rt=1,95 мин; МС Вычисл.: 494, МС Найдено: 495 [M+1].
1
3
D222: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,84 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,19-4,03 (м, 5H), 3,98-3,94 (м, 2H), 3,74-3,71 (м, 5H), 3,54-3,51 (м, 4H), 2,50-2,42 (м, 4H), 2,05-1,96 (м, 1H), 1,48 (с, 9H).
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин], Rt=1,94 мин; МС Вычисл.: 494, МС Найдено: 495 [M+1].
Описание D223
трет-
Бутил 3-оксоморфолин-4-карбоксилат (D223)
2
2
2
4
Морфолин-3-он (8,00 г, 79,2 ммоль) растворяли в сухом THF (100 мл), и затем добавляли (Boc)O (25,9 г, 0,119 моль) и DMAP (966 мг, 7,92 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N в течение ночи. Добавляли имидазол (5,39 г, 79,2 ммоль). После перемешивания в течение 30 минут добавляли EtOAc (150 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением масла, которое затвердевало после стояния. Твердое вещество промывали PE (100 мл) с получением желаемого соединения (10,5 г, выход 66%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 4,20 (с,2H), 3,88-3,85 (м, 2H), 3,74-3,70 (м, 2H), 1,51 (с, 9H).
3
3
+
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 3,0 мин, чистота составляет > 95%, Rt=1,56 мин; МС Вычисл.: 201; МС Найдено: 202 [M+H]; 146 [M-56+H].
Описание D224
трет-
Бутил (2-(2-оксо-2-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)этокси)этил)карбамат (D224)
2
2
4
трет-
n-BuLi (3,86 мл, 9,25 ммоль, 2,4 M в гексане) вводили медленно в раствор 6-бром-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (2,00 г, 7,12 ммоль) в сухом THF (20 мл) в атмосфере N при -78°C. После добавления, смесь перемешивали в течение дополнительных полчаса. Затем медленно добавляли раствор бутил 3-оксоморфолин-4-карбоксилата (2,15 г, 10,7 ммоль) в сухом THF (4 мл). И затем смесь перемешивали еще три часа. Смесь гасили водой (30 мл) при -78°C и нагревали до комнатной температуры. Смесь разбавляли EtOAc (100 мл). Органический слой промывали водой (50 мл×3) и насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали в вакууме. Остаток очищали при помощи колонки на силикагеле, элюируя смесью PE/EtOAc (10/1-4/1) с получением указанного в заголовке соединения (950 мг, выход 33%) в виде бесцветного масла.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,24 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,80 (дд, =8,7, 0,6 Гц, 1H), 7,69 (дд, =8,7, 1,5 Гц, 1H), 5,823-5,80 (м, 1H), 5,24 (шир. с, 1H), 4,88 (с, 2H), 4,07-3,99 (м, 1H), 3,85-3,76 (м, 1H), 3,72-3,68 (м, 2H), 3,44-3,36 (м, 2H), 2,64-2,53 (м, 1H), 2,23-2,07 (м, 2H), 1,85-1,66 (м, 3H), 1,45 (с, 9H).
Описание D225
5-(1H-Индазол-6-ил)-3,6-дигидро-2H-1,4-оксазин (D225)
трет-
HCl/диоксан (5 M, 10 мл) медленно добавляли к раствору бутил (2-(2-оксо-2-(1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)этокси)этил)карбамата (950 мг, 2,36 ммоль) в диоксане (10 мл) на бане со льдом. После добавления, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение четырех часов. Смесь концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта (560 мг, выход >100%) в виде желтого твердого вещества.
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 2,5 мин, Rt=1,22 мин; МС Вычисл.: 201; МС Найдено: 202 [M+H].
Описание D226
3-(1H-индазол-6-ил)морфолин (D226)
4
NaBH (179 мг, 4,72 ммоль) медленно добавляли к раствору неочищенного 5-(1H-индазол-6-ил)-3,6-дигидро-2H-1,4-оксазина (560 мг, 2,36 ммоль) в MeOH (50 мл) на бане со льдом. После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа, добавляли воду (10 мл) и смесь концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта (600 мг, выход >100%) в виде желтого масла, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 2,5 мин, Rt=1,12 мин; МС Вычисл.: 203; МС Найдено: 204 [M+H].
Описание D227 и D228
3-(1H-Индазол-6-ил)-4-метилморфолин (энантиомер 1) (D227) и 3-(1H-индазол-6-ил)-4-метилморфолин (энантиомер 2) (D228)
3
3
3
2
4
3
3
2
NaBHCN (474 мг, 7,55 ммоль) медленно добавляли к раствору неочищенного 3-(1H-индазол-6-ил)морфолина (600 мг, 2,36 ммоль), водного HCHO (37%, 4 мл) и CHCOOH (10 капель) в MeOH (50 мл) на бане со льдом. После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение в течение дополнительных 1,5 часов. Смесь гасили водным NaHCO (насыщ. 50 мл). Смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали DCM (100 мл×3). Органические слои промывали водой (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт растворяли в NH/MeOH (5 M, 20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Смесь концентрировали в вакууме и очищали при помощи колонки С18, элюируя CHCN/HO с получением желаемого соединения (300 мг, выход 59%) в виде бесцветного масла. Бесцветное масло отделяли с помощью хиральной ВЭЖХ способом (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE- 5 мкм 20 мм*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 12 мл/мин, 205 нм, T=30°C) с получением 3-(1H-индазол-6-ил)-4-метилморфолина (энантиомер 1)(D227) (97 мг, выход 32%, Rt=5,853 мин, 100% э.и.) и 3-(1H-индазол-6-ил)-4-метилморфолина (энантиомер 2)(D228)(111 мг, выход 37%, Rt=7,949 мин, 94% э.и.) оба в виде бесцветного масла.
1
3
J
J
J
J
D227: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,09 (с, 1Н), 7,73 (д, =8,4 Гц, 1H), 7,59 (с, 1H), 7,18 (д, =8,1 Гц, 1H), 3,99-3,96 (м, 1H), 3,90-3,78 (м, 2H), 3,54-3,46 (м, 1H), 3,28-3,24 (м, 1H), 2,98 (д, =12,0 Гц, 1H), 2,50 (тд, =11,7, 3,3 Гц, 1H), 2,13 (с, 3H).
1
3
J
J
J
J
D228: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,08 (с, 1Н), 7,73 (д, =8,4 Гц, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,18 (д, =8,4 Гц, 1H), 3,99-3,98 (м, 1H), 3,89-3,77 (м, 2H), 3,53-3,46 (м, 1H), 3,28-3,24 (м, 1H), 2,97 (д, =11,7 Гц, 1H), 2,50 (тд, =11,7, 3,6 Гц, 1H), 2,13 (с, 3H).
Описание D229
1-(6-Бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанон (D229)
2
4
Уксусный ангидрид (4,69 мл, 50 ммоль) добавляли к раствору 5-бром-2,4-диметиланилина (5 г, 25,0 ммоль) в хлороформе (100 мл) при охлаждении на бане со льдом и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Затем добавляли ацетат калия (2,58g, 26,25 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Затем добавляли раствор 18-краун-6 (1,32 г, 5,00 ммоль) в хлороформе (10 мл) с последующим добавлением трет-бутилнитрита (6,54 мл, 55 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали и значение рН органического слоя доводили до 8 с использованием насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Органический слой отделяли, сушили над безводным NaSOи концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (PE:EtOAc=100:0-20:80) с получением 1-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанона (5,8 г, 91,7% выход) в виде желтого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=3,72 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 252; МС Найдено: 253 [M+1].
Описание D230
1-(6-
идрокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанон (D230)
Г
Стадия 1:
2
4
К перемешиваемому раствору 1-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанона (2,3 г,9,09 ммоль) в DMF (50 мл) добавляли 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (4,6 г, 18 ммоль) и KOAc (2,6 г, 26,5 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 15 мин в атмосфере азота, затем, добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (1 г, 0,64 ммоль) и полученный раствор перемешивали при 90°C в атмосфере азота в течение ночи. Добавляли для разбавления раствора EtOAc (150 мл) и органический слой промывали водой (50 мл×3), сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт 1-(5-метил-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-индазол-1-ил)этанон использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=4,25 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 300; МС Найдено: 301 [M+1].
Стадия 2:
2
2
2
4
Неочищенный продукт (полученный на стадии 1) растворяли в THF (15 мл). Добавляли NaOH (1 н, 18 мл) и раствор охлаждали до 0°C, добавляли HO и раствор перемешивали при этой температуре в течение еще 1 часа. Значение рН реакционной смеси доводили до 5, используя 1 н HCl и затем экстрагировали EtOAc (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (PE:EtOAc=100:0→80:20) с получением 1-(6-гидрокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанона (370 мг, 21,41% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=2,57 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 190; МС Найдено: 191 [M+1].
Описание D231
1-(6-Изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанон (D231)
2
3
2
4
К перемешиваемому раствору 1-(6-гидрокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанона (200 мг, 1,05 ммоль) и 2-йодпропана (157 мкл, 1,5 ммоль) добавляли DIPEA (388 мкл, 2,1 ммоль) и полученный раствор перемешивали при 40°C в течение 1 часа. Затем добавляли KCO (290 мг, 2,1 ммоль) и температуру реакции повышали до 60°C и перемешивали при этой температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и EtOAc (30 мл) добавляли для разбавления реакционной смеси. Органический слой промывали водой (30 мл×3), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (PE:EtOAc=100:0-80:20) с получением 1-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанона (140 мг, выход 57%) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=3,91 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 232; МС Найдено: 233 [M+1].
Описание D232
трет-Бутил 4-((1-ацетил-5-метил-1H-индазол-6-ил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (D232)
Стадия 1:
трет-
трет-
2
4
К охлажденному льдом раствору бутил 4-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (600 мг, 2,98 ммоль) в PhMe (20 мл) добавляли DIPEA (1,65 мл, 8,9 ммоль) и MsCl (461 мкл, 6 ммоль) последовательно. Полученную смесь затем перемешивали при этой температуре в течение 1 часа. Добавляли воду (10 мл) для гашения реакции и смесь экстрагировали EtOAc (20 мл). Органический слой отделяли, сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенный продуктбутил 4-((метилсульфонил)окси)пиперидин-1-карбоксилат использовали на следующей стадии без дополнительных очисток.
Стадия 2:
2
3
2
4
Промежуточное соединение (полученное на стадии 1) растворяли в DMF (10 мл). Затем добавляли 1-(6-гидрокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанон (160 мг, 841 мкмоль), DIPEA (310 мкл, 1,6 ммоль) и KCO (232 мг, 1,68 ммоль) и смесь перемешивали при 90°C в течение ночи. К реакционной смеси добавляли EtOAc (50 мл) и воду (20 мл) и слой разделяли, органический слой промывали водой (20 мл×2), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (PE: EtOAc=100:0-80:20) с получением трет-бутил 4-((1-ацетил-5-метил-1H-индазол-6-ил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (285 мг, выход 91%) в виде белого твердого вещества.
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=4,23 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 373; МС Найдено: 374 [M+1]+.
Описание D233
1-(5-метил-6-(пиперидин-4-илокси)-1H-индазол-1-ил)этанон (D233)
трет-
Бутил 4-((1-ацетил-5-метил-1H-индазол-6-ил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (285 мг, 763 мкмоль) растворяли в DCM (20 мл). Добавляли TFA (2 мл) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Растворитель удаляли и остаток (200 мг, выход 96%) использовали на следующей стадии без дополнительных очисток.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,3 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 273; МС Найдено: 274 [M+1].
Описание D234
1-(5-Метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)этанон (D234)
2
3
2
4
насыщ.
1-(5-Метил-6-(пиперидин-4-илокси)-1H-индазол-1-ил)этанон (200 мг, 732 мкмоль) растворяли в DMF (5 мл). Затем добавляли 30% водный формальдегид (366 мкмоль, 3,66 ммоль), NaBH(OAc) (310 мг, 1,5 ммоль), AcOH (1 капля) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли EtOAc (20 мл) для разбавления реакционной смеси и органический слой промывали водным NaHCO ( 20 мл) и водой (10 мл×2) последовательно. Затем органический слой сушили над безводным NaSOи концентрировали. Неочищенный продукт использовали на следующих стадиях без дополнительных очисток. (180 мг, выход 86%)
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,34 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 287; МС Найдено: 288 [M+1].
Описание D235
(S)-трет-Бутил 3-((метилсульфонил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (D235)
трет-
.
2
2
4
К раствору (S)-бутил 3-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (750 мг, 3,73 ммоль) и TEA (1,88 г, 18,7 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли MsCl (550 мг, 4,85 ммоль) при 0°CРаствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Смесь промывали HO (10 мл×2) и насыщенным солевым раствором (10 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали с получением целевого продукта (970 мг, выход 93%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 4,76-4,68 (м, 1H), 3,67-3,57 (м, 2H), 3,48-3,40 (м, 1H), 3,35-3,27 (м, 1H), 3,04 (с, 3H), 2,07-1,77 (м, 3H), 1,57-1,50 (м, 1H), 1,45 (с, 9H).
ЖХ-МС: N/A
Описание D236
5-Метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ол (D236)
2
2
3
2
4
К раствору 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-индазола (2,70 г, 7,89 ммоль) в THF (80 мл) и водного раствора NaOH (1 N, 40 мл) добавляли водный HO (37%, 4,48 г, 39,5 ммоль) при 0-15°C. Смесь разбавляли насыщ. NaHSO (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=6:1) и неочищенный продукт суспендировали PE (3,5 мл) с получением целевого продукта (1,70 г, выход 94%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,85 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 6,93 (с, 1H), 5,58 (дд, =9,6, 2,7 Гц, 1H), 5,44 (с, 1H), 4,04-3,99 (м, 1H), 3,75-3,66 (м, 1H), 2,60-2,47 (м, 1H), 2,32 (с, 3H), 2,17-2,01 (м, 2H), 1,81-1,63 (м, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,113 мин, МС Вычисл.:232, МС Найдено: 233 [M+H].
Описание D237
(3R)-
трет-
Бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (D237)
2
3
3
3
2
2
4
трет-
Смесь 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ола (500 мг, 2,16 ммоль) и CsCO(3,51 г, 10,8 ммоль) в CHCN (20 мл) перемешивали при 80°C в течение 10 минут. Затем раствор (S)-бутил 3-((метилсульфонил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (960 мг, 3,46 ммоль) в CHCN (10 мл) добавляли по каплям. Полученную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения смеси смесь концентрировали. Смесь разделяли с HO (20 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=6:1) с получением целевого продукта (0,19 г, выход 21%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,83 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 6,94 (шир. с, 1H), 5,66-5,63 (м, 1H), 4,42 (шир. с, 1H), 4,01-3,94 (м, 1H), 3,79-3,70 (м, 1H), 3,61-3,24 (м, 3H), 2,63-2,52 (м, 1H), 2,25 (с, 3H), 2,21-2,11 (м, 1H), 2,08-1,83 (м, 5H), 1,81-1,63 (м, 4H), 1,32-1,23 (м, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,752 мин, МС Вычисл.:415, МС Найдено: 416 [M+H].
Описание D238
(R)-5-Метил-6-(пиперидин-3-илокси)-1H-индазол (D238)
трет-
3
2
К раствору (3R)-бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (190 мг, 0,458 ммоль) в метаноле (2 мл) при 0°C добавляли по каплям конц. HCl (2 мл). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали и добавляли 2 мл насыщ. NH.HO. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (120 мг, выход 95%) в виде желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=1,752 мин, МС Вычисл.:231, МС Найдено: 232 [M+H].
Описание D239
(R)-5-Метил-6-((1-метилпиперидин-3-ил)окси)-1H-индазол (D239)
3
3
2
4
3
К раствору (R)-5-метил-6-(пиперидин-3-илокси)-1H-индазола (100 мг, 0,433 ммоль) и водного раствора HCHO (37%, 1,5 мл) в MeOH (4 мл) добавляли NaBHCN (136 мг, 2,16 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(5 мл). EtOAc (2×10 мл) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растворяли в насыщ. NH-метанол (10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь концентрировали и остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=2:1) с получением целевого продукта (75 мг, выход 71%) в виде слабо-желтого масла.
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=1,903 мин, МС Вычисл.:245, МС Найдено: 246 [M+H].
Описание D240
(R)-
трет-
Бутил 3-((метилсульфонил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (D240)
трет-
.
2
2
4
К раствору (R)-бутил 3-гидроксипиперидин-1-карбоксилата (800 мг, 4,00 ммоль) и TEA (2,02 г, 20,0 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли MsCl (590 мг, 5,20 ммоль) при 0°CРаствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Смесь промывали HO (10 мл×2) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением целевого продукта (1,08 г, выход 97%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 4,70 (шир. с, 1H), 3,75-3,60 (м, 2H), 3,47-3,39 (м, 1H), 3,35-3,27 (м, 1H), 3,04 (с, 3H), 2,00-1,75 (м, 3H), 1,54-1,45 (м, 1H), 1,45 (с, 9H).
Описание D241
(3S)-
трет-
Бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)пиперидин-1-карбоксилат (D241)
2
3
3
3
2
2
4
Смесь 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ола (560 мг, 2,42 ммоль) и CsCO(2,36 г, 7,26 ммоль) в CHCN (20 мл) перемешивали при 80°C в течение 15 мин. Затем добавляли по каплям раствор (R)-трет-бутил 3-((метилсульфонил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (1,08 г, 3,87 ммоль) в CHCN (10 мл). Полученную смесь перемешивали при нагревании с с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения смесь концентрировали. Смесь разделяли с HO (20 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=6:1) с получением целевого продукта (0,18 г, выход 18%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,84 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 7,01-6,85 (м, 1H), 5,66-5,63 (м, 1H), 4,42 (шир. с, 1H), 4,03-3,90 (м, 1H), 3,77-3,64 (м, 1H), 3,62-3,21 (м, 3H), 2,63-2,52 (м, 1H), 2,25 (с, 3H), 2,20-2,14 (м, 1H), 2,10-1,85 (м, 5H), 1,81-1,62 (м, 4H), 1,38-1,21 (м, 9H).
Описание D242
(S)-5-Метил-6-((1-метилпиперидин-3-ил)окси)-1H-индазол (D242)
трет-
3
2
2
3
3
2
4
3
К раствору (3S)-бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)пиперидин-1-карбоксилата (180 мг, 0,430 ммоль) в метаноле (2 мл) при 0°C добавляли по каплям конц. HCl (2 мл). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 20 мин. Реакционную смесь концентрировали и добавляли 2 мл насыщ. NH.HO. Смесь концентрировали с получением неочищенного промежуточного соединения. Промежуточное соединение и водный раствор HC(=O) (37%, 1,0 мл) в MeOH (4 мл) добавляли NaBHCN (275 мг, 4,40 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(5 мл). EtOAc (2×30 мл) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растворяли в насыщ. NH-метанол (5 мл) и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали и остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:1) с получением целевого продукта (95 мг, выход 91%) в виде слабо-желтого масла.
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=1,903 мин, МС Вычисл.:245, МС Найдено: 246 [M+H].
Описание D243
(R)-
трет-
Бутил 3-((метилсульфонил)окси)пирролидин-1-карбоксилат (D243)
трет-
2.
2
3
2
4
К раствору (R)-бутил 3-гидроксипирролидин-1-карбоксилата (1,00 г, 5,35 ммоль) и TEA (1,62 мг, 16,1 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли MsCl (0,920 г, 8,03 ммоль) при 0°C в атмосфере NСмесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 1 ч. Смесь разбавляли HO (40 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщ. водн.NaHCO солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали в вакууме с получением целевого продукта (1,4 г, выход 100%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,29-5,24 (м, 1H), 3,72-3,43 (м, 4H), 3,05 (с, 3H), 2,35-2,08 (м, 2H), 1,47 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,152 мин МС Вычисл.: 265, МС Найдено: 210 [M-56+H].
Описание D244
(3S)-
трет-
Бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)пирролидин-1- карбоксилат (D244)
2
3
2
2
4
трет-
К смеси 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ола (300 мг, 1,29 ммоль) и KCO(534 мг, 3,87 ммоль) в DMF (15 мл) добавляли (R)-бутил 3-((метилсульфонил)окси)пирролидин-1-карбоксилат (513 мг, 1,94 ммоль). Смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 6 ч. Смесь разбавляли HO (30 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=6:1) с получением целевого продукта (0,55 г, выход > 100%) в виде желтого масла.
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,85 (с, 1H), 7,43 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 5,64 (дд, =9,0, 3,0 Гц, 1H), 5,03-4,99 (м, 1H), 4,01-3,93 (м, 1H), 3,77-3,54 (м, 5H), 2,64-2,50 (м, 1H), 2,24-2,02 (м, 7H), 1,83-1,65 (м, 3H), 1,47 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,726 мин МС Вычисл.: 401, МС Найдено: 402 [M+H].
Описание D245
(S)-5-Метил-6-((1-метилпирролидин-3-ил)окси)-1H-индазол (D245)
трет-
3
2
3
2
4
3
К раствору (3S)-бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)пирролидин-1-карбоксилата (552 мг, 1,38 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли насыщ. HCl/диоксан (5 мл). Раствор нагревали до 40°C и перемешивали в течение ночи. Раствор непосредственно концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в MeOH (10 мл) и добавляли водный раствор HCHO (37%, 4 мл). Раствор перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. NaBHCN (520 мг, 8,28 ммоль) добавляли к раствору и смесь перемешивали в течение 1 часа. Смесь разбавляли насыщ. NaCO (30 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в насыщ. NH/MeOH (15 мл) и раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Раствор выпаривали под вакуумом и остаток очищали на колонке с силикагелем (DCM: MeOH=10:1) с получением целевого продукта (230 мг, выход 72%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,89 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 6,71 (с, 1H), 4,91-4,73 (м, 1H), 3,23-3,19 (м, 1H), 2,88-2,76 (м, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,43-2,38 (м, 1H), 2,27 (с, 3H), 2,14-2,09 (м, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=1,670 мин МС Вычисл.: 231, МС Найдено: 232 [M+H].
Описание D246
(S)-
трет-
Бутил 3-((метилсульфонил)окси)пирролидин-1-карбоксилат (D246)
2.
2
3
2
4
К раствору (S)-трет-бутил 3-гидроксипирролидин-1-карбоксилата (1,00 г, 5,35 ммоль) и TEA (1,62 г, 16,1 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли MsCl (920 мг, 8,03 ммоль) при 0°C в атмосфере N Раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 1 часа. Смесь разбавляли HO (30 мл) и экстрагировали DCM (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщ. раствором NaHCO и насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом с получением целевого продукта (1,5 г, выход 100%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,28-5,25 (м, 1H), 3,73-3,43 (м, 4H), 3,05 (с, 3H), 2,36-2,09 (м, 2H), 1,47 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,153 мин МС Вычисл.: 265. МС Найдено: 210 [M-56+H].
Описание D247
(3R)-
трет-
Бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)пирролидин-1-карбоксилат (D247)
2
3
2
2
4
3
2
трет-
К смеси 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ола (300 мг, 1,29 ммоль) и KCO(534 мг, 3,87 ммоль) в DMF (8 мл) добавляли (S)-бутил 3-((метилсульфонил)окси)пирролидин-1-карбоксилат (513 мг, 1,94 ммоль). Смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение ночи. Смесь разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=10:1) и далее очищают с помощью C18 (CHCN/HO=5-50%) с получением целевого продукта (0,37 г, выход 71%) в виде желтого масла.
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,85 (с, 1H), 7,47 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 5,64 (дд, =8,7, 3,0 Гц, 1H), 5,03-4,99 (м, 1H), 4,02-3,94 (м, 1H), 3,78-3,50 (м, 5H), 2,64-2,50 (м, 1H), 2,24-2,03 (м, 7H), 1,82-1,65 (м, 3H), 1,48 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=3,011 мин, МС Вычисл.:401 МС Найдено: 402 [M+H].
Описание D248
(R)-5-Метил-6-((1-метилпирролидин-3-ил)окси)-1H-индазол (D248)
трет-
3
3
2
4
3
2
2
4
2
3
2
4
3
2
К раствору (3R)-бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)пирролидин-1-карбоксилата (370 мг, 0,922 ммоль) в DCM (6 мл) добавляли CFCOOH (3 мл) при 0°C. Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин. Раствор доводили до значения pH 8-9 насыщенным водным раствором NaHCO и экстрагировали DCM (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. К остатку добавляли MeOH (3 мл), водный раствор HCHO (37%, 1 мл). Раствор перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем, добавляли NaBHCN (500 мг, 7,97 ммоль) и смесь перемешивали в течение 12 часов. Смесь разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в диоксане (3 мл) и добавляли конц. HCl (6 мл). Смесь нагревали до 40°C и перемешивали в течение 3 часов. Затем смесь доводили до значения pH 8-9 насыщ. водным NaCO и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали при помощи C18 (CHCN/HO=5-35%) с получением целевого продукта (70 мг, выход 33%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,89 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 6,69 (с, 1H), 4,90-4,84 (м, 1H), 3,13-3,07 (м, 1H), 2,84-2,76 (м, 2H), 2,70-2,62 (м, 1H), 2,45 (с, 3H), 2,42-2,32 (м, 1H), 2,27 (с, 3H), 2,13-2,07 (м, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=1,714 мин, МС Вычисл.:231, МС Найдено: 232 [M+H].
Описание D249
трет-
Бутил 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D249)
К раствору 4,6-дихлор-2-метокси-пиримидина (1,50 г, 8,38 ммоль) и TEA (2,50 г, 25,1 ммоль) в метаноле (100 мл) добавляли раствор пиперазин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (1,55 г, 8,38 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали и остаток промывали 5 мл холодного MeOH (5 мл) для получения указанного в заголовке соединения (2,4 г, выход 87%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,19 (с, 1H), 3,94 (с, 3H), 3,63-3,50 (м, 8H), 1,48 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,418 мин, МС Вычисл.:328, МС Найдено: 329 [M+H].
Описание D250
(R)-
трет-
Бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D250)
трет-
2
3
2
2
4
Смесь (R)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазола (400 мг, 1,83 ммоль), бутил 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (900 мг, 2,75 ммоль) и CsCO (1,79 г, 5,49 ммоль) в DMF (40 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Смесь разбавляли HO (100 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAc=3:1) с получением указанного в заголовке соединения (210 мг, выход 22%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,25 (с, 1H), 8,01 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,11-5,06 (м, 1H), 4,16-3,95 (м, 7H), 3,75-3,72 (м, 4H), 3,55-3,49 (м, 4H), 2,30-2,23 (м, 5H), 1,49 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 3 мин], Rt=2,24 мин, МС Вычисл.:510, МС Найдено: 511 [M+H].
Описание D251
(
S
)-
трет-
Бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D251)
S
H
трет-
2
3
2
2
4
Смесь ()-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1-индазола (330 мг, 1,51 ммоль), бутил 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (744 мг, 2,27 ммоль) и CsCO (1,47 г, 4,53 ммоль) в DMF (50 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Смесь разбавляли HO (100 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл×3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAc=3:1) с получением указанного в заголовке соединения (180 мг, выход 23%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,25 (с, 1H), 8,01 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,12-5,06 (м, 1H), 4,09-3,94 (м, 7H), 3,75-3,72 (м, 4H), 3,55-3,52 (м, 4H), 2,30-2,23 (м, 5H), 1,50 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 2,5 мин], Rt=2,37 мин, МС Вычисл.:510, МС Найдено: 511 [M+H].
Описание D252
трет-
Бутил 3-((метилсульфонил)окси)азетидин-1-карбоксилат (D252)
трет-
2
2
3
2
4
К раствору бутил 3-гидроксиазетидин-1-карбоксилата (1,00 г, 6,01 ммоль) и TEA (1,82 г, 18,0 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли MsCl (1,03 г, 9,02 ммоль) при 0°C в атмосфере N.Раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение больше 1 часа. Смесь разбавляли HO (30 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщ. водным раствором NaHCO, насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом с получением целевого продукта (1,5 г, выход > 100%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,22-5,15 (м, 1H), 4,29-4,24 (м, 2H), 4,11-4,06 (м, 2H), 3,06 (с, 3H), 1,43 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,103 мин МС Вычисл.: 251, МС Найдено: 196 [M-56+H].
Описание D253
трет-
бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)азетидин-1-карбоксилат (D253)
2
3
2
2
4
трет-
К смеси 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ола (340 мг, 1,47 ммоль) и CsCO(1,44 г, 4,41 ммоль) добавляли бутил 3-((метилсульфонил)окси)азетидин-1-карбоксилат (552 мг, 2,20 ммоль). Смесь нагревали до 80°C и перемешивали в течение 8 часов. Смесь разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=10:1) с получением целевого продукта (0,52 г, выход 92%) в виде желтого масла.
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,85 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 6,53 (с, 1H), 5,60 (дд, =8,8, 2,8 Гц, 1H), 5,02-4,97 (м, 1H), 4,41-4,36 (м, 2H), 4,10-4,05 (м, 2H), 4,01-3,97 (м, 1H), 3,75-3,69 (м, 1H), 2,57-2,48 (м, 1H), 2,30 (с, 3H), 2,18-2,13 (м, 1H), 2,09-2,04 (м, 1H), 1,79-1,66 (м, 3H), 1,47 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,741 мин МС Вычисл.: 387, МС Найдено: 388 [M+H].
Описание D254
5-Метил-6-((1-метилазетидин-3-ил)окси)-1H-индазол (D254)
трет-
3
2
2
4
3
Раствор бутил 3-((5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)окси)азетидин-1-карбоксилата (520 мг, 1,34 ммоль) в насыщ. HCl/диоксане (10 мл) нагревали до 45°C и перемешивали в течение 1 часа. Затем, раствор концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в MeOH (10 мл). Добавляли водный раствор HCHO (37%, 4 мл). Раствор перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Добавляли NaBHCN (520 мг, 8,22 ммоль) и смесь перемешивали в течение 1 часа. Смесь разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали DCM (3×15 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в насыщ. NH/MeOH (10 мл) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Раствор выпаривали под вакуумом и остаток очищали на колонке с силикагелем (DCM:MeOH=10:1) с получением целевого продукта (0,28 г, выход 95%) в виде желтого масла.
1
-d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO): δ 12,66 (шир. с, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 6,64 (м, 1H), 4,86-4,82 (м, 1H), 3,86-3,81 (м, 2H), 3,11-3,07 (м, 2H), 2,35 (с, 3H), 2,22 (с, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=1,812 мин МС Вычисл.: 217, МС Найдено: 218 [M+H].
Описание D255
(Z/E)-Метил 3-(3-амино-1-(4-метоксибензил)-1H-
пиразол-4-ил)акрилат (D255)
2
4
К полутвердой смеси 18-краун-6 (29,1 г, 108 ммоль) в THF (200 мл) при -40°C в атмосфере N добавляли метил 2-(диметоксифосфорил)ацетат (3,90 г, 21,6 ммоль), затем раствор KHMDS (21,6 мл, 21,6 ммоль). Раствор 5-амино-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-карбальдегида (5,00 г, 21,6 ммоль) в THF (100 мл) добавляли по каплям. Затем смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 20 часов. Смесь разделяли между насыщенным водным NHCl (100 мл) и EtOAc (150 мл). Водную фазу экстрагировали второй раз EtOAc (150 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали, затем очищали при помощи колонки (PE:EtOAc от 10:1 до 2:1) с получением желтого твердого вещества. Твердое вещество суспендировали EtOAc (30 мл) с получением указанного в заголовке соединения (2,9 г, выход: 47%) в виде слабо-желтого твердого вещества.
+
ЖХ-МС (5-95%) Rt=1,71 мин; МС Вычисл.:287, МС Найдено: 288 [M+H].
Описание D256
2-(4-Метоксибензил)-2H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ол (D256)
В колбу, содержащую (Z/E)-метил 3-(3-амино-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразол-4-ил)акрилат (2,9 г, 10,1 ммоль), добавляли HCl (3 н, 300 мл). Смесь нагревали до 100°C в течение 2 часов. Смесь охлаждали и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (1,6 г, выход: 62%) в виде слабо-желтого твердого вещества.
1
d
J=
J=
J=
J=
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 8,11 (с, 1H), 7,70 (д, 9,6 Гц, 1H), 7,25 (д, 8,7 Гц, 2H), 6,90 (д, 9,6 Гц, 1H), 6,05 (д, 9,3 Гц, 1H), 5,26 (с, 2H), 3,71 (с, 3H).
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=1,58 мин; МС Вычисл.: 255, МС Найдено: 256 [M+H].
Описание D257
5-Бром-2-(4-метоксибензил)-2H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ол (D257)
2
2
2
Br (212 L, 4,10 ммоль) добавляли к суспензии 2-(4-метоксибензил)-2H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ола (2,1 г, 8,2 ммоль) в AcOH (50 мл). Смесь перемешивали в течение 30 минут. Затем суспензию добавляли Br(426 л, 8,20 ммоль) и перемешивали в течение 30 минут. Смесь фильтровали и твердое вещество промывали HO (30 мл), сушили с получением указанного в заголовке соединения (1,32 г, выход 48%) в виде желтого твердого вещества.
1
+
d
J=
J=
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-): δ 12,22 (шир. с,1H), 8,27 (с,1H), 8,13 (с, 1H), 7,26 (д, 8,8 Гц, 2H), 6,91 (д, 8,8 Гц, 2H), 5,28 (с, 2H), 3,73 (с, 3H). ЖХ-МС (5-95%) Rt=1,74 мин; МС Вычисл.:333, МС Найдено: 334 [M+1].
Описание D258
5-Бром-6-изопропокси-2-(4-метоксибензил)-2H-пиразоло[3,4-b]пиридин (D258) и 5-бром-7-изопропил-2-(4-метоксибензил)-2H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6(7H)-он
2
2
3
2
К раствору 5-бром-2-(4-метоксибензил)-2H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ола (1,51 г, 4,50 ммоль) в DMF (20 мл) в атмосфере N добавляли CsCO (2,95 г, 9,06 ммоль), затем 2-иод-пропан (1,15 г, 6,80 ммоль). Смесь нагревали при 60°C и перемешивали в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли HO (100 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи колонки с использованием (PE:EtOAc=10:1) с получением смеси (1,45 г, выход 86%) в виде коричневого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
3
+
+
ЖХ-МС (5-95% CHCN): Пик 1, Rt=2,01 мин; МС Вычисл.:375, МС Найдено: 376 (M+H); пик 2,Rt=2,20 мин; МС Вычисл.:375, МС Найдено: 376 [M+H].
Описание D259
6-Изопропокси-2-(4-метоксибензил)-5-метил-2H-пиразоло[3,4-b]пиридин (D259)
2
3
3
4
2
2
К суспензии 5-бром-6-изопропокси-2-(4-метоксибензил)-2H-пиразоло[3,4-b]пиридина и 5-бром-7-изопропил-2-(4-метоксибензил)-2H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6(7H)-она (1,27 г, 3,39 ммоль), метил-бороновой кислоты (1,02 г, 16,7 ммоль) и KCO (1,40 г, 10,2 ммоль) в 1,4-диоксане (50 мл) быстро добавляли Pd(PPh) (0,42 г, 0,33 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N. Затем раствор смеси нагревали до 100°C и перемешивали в течение 8 часов в атмосфере N. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали и очищали при помощи колонки на силикагеле, элюируя PE/EtOAc (10/1) с получением неочищенного продукта в виде желтого масла. Неочищенный продукт далее очищали при помощи C18 с получением указанного в заголовке соединения (254 мг, выход 24%) в виде коричневого масла.
1
3
J=
J=
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,55 (с,1H), 7,52 (с, 1H), 7,28 (д,8,4 Гц, 2H), 6,87 (д,8,4 Гц, 2H), 5,59-5,53 (м, 1H), 5,40 (с, 2H), 3,79 (с, 3H), 2,19 (с, 3H), 1,39 (д, 6,0 Гц, 6H).
3
+
ЖХ-МС: (5-95% CHCN) Rt=2,20 мин; МС Вычисл.:311, МС Найдено: 312 [M+H].
Описание D260
6-изопропокси-5-метил-2H-пиразоло[3,4-b]пиридин (D260)
2
Раствор 6-изопропокси-2-(4-метоксибензил)-5-метил-2H-пиразоло[3,4-b]пиридина (101 мг, 0,320 ммоль) в TFA (5 мл) перемешивали при 60°C в течение 48 часов. Смесь охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли HO (5 мл) и EtOAc (5 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (5 мл). Затем объединенные органические слои концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (43 мг, выход: 69%, чистота >70%) в виде желтого твердого вещества.
3
+
ЖХ-МС: (5-95% CHCN) Rt=1,58 мин; МС Вычисл.:191, МС Найдено: 192 [M+H].
Описание D261
1-(4-йодпиридин-2-ил)-4-метилпиперазин (D261)
2
3
2
4
К раствору 2-фтор-4-йодпиридина (2,00 г, 8,97 ммоль) в DMSO (8 мл) добавляли 1-метилпиперазин (1,34 г, 13,4 ммоль) и KCO (2,47 г, 17,9 ммоль). Смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду (50 мл). Добавляли EtOAc (2×50 мл) для экстракции желаемого. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (3×20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растирали с петролейным эфиром (20 мл) с получением указанного в заголовке соединения (1,20 г, выход 44%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,82 (д, 5,4 Гц,1H), 7,01 (с, 1H), 6,94 (д, 5,4 Гц,1H), 3,55-3,52 (м, 4H), 2,51-2,47 (м, 4H), 2,33 (с, 3H).
Описание D262
2,4,6-Трихлорпиримидин-5-карбальдегид (D262)
3
Смесь пиримидин-2,4,6-триола (20,0 г, 156 ммоль) в DMF (20 мл) и POCl (200 мл) нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток выливали в воду со льдом (1 л) и фильтровали. Твердое вещество собирали и очищали колоночной хроматографией (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (12,0 г, выход 36%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (CDCl, 300 МГц): δ 10,41 (с, 1H).
Описание D263
4,6-дихлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин (D263)
2
4
2
3
К раствору 2,4,6-трихлорпиримидин-5-карбальдегида (3,50 г, 16,6 ммоль) в THF (50 мл) добавляли NH.HO (830 мг, 16,6 ммоль) медленно при -10°C. Затем, к смеси добавляли EtN(2,51 г, 24,9 ммоль) при -10°C. Смесь перемешивали при -10°C в течение 30 минут. Смесь концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,25 г, выход 40%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 11,61 (шир. с, 1H), 8,25 (с, 1H).
3
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN]: Rt=2,005 мин;
+
МС Вычисл.: 188; МС Найдено: 189 [M+H].
Описание D264
4,6-дихлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин (D264)
3
2
4
К раствору 4,6-дихлор-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина(2,60 г, 13,7 ммоль) в DCM (100 мл) добавляли DHP (2,31 г, 27,4 ммоль) и TsOH (0,471 г, 2,70 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO (30 мл). Органический слой отделяли и водный экстрагировали DCM (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:EtOAc=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,1 г, выход 83%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,19 (с, 1H), 6,00 (дд, 10,8, 2,4 Гц, 1H), 4,13-4,10 (м, 1H), 3,84-3,77 (м, 1H), 2,61-2,51 (м, 1H), 2,16-2,13 (м, 1H), 1,97-1,93 (м, 1H), 1,82-1,75 (м, 2H), 1,64-1,57 (м, 1H).
Описание D265
6-Хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин (D265)
2
2
2
К раствору 4,6-дихлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина(3,10 г, 11,3 ммоль) в диоксане (120 мл) добавляли натрия формиат гидрат (3,50 г, 33,9 ммоль), HO (12 мл) и Pd(dppf)Cl(1,83 г, 2,06 ммоль). Смесь нагревали до 80°C в течение 5 часов в атмосфере N. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,07 г, выход 40%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 9,04 (с, 1H), 8,20 (с, 1H), 6,05 (дд, 10,4, 2,4 Гц, 1H), 4,14-4,10 (м, 1H), 3,83-3,79 (м, 1H), 2,63-2,54 (м, 1H), 2,16-2,14 (м, 1H), 1,97-1,94 (м, 1H), 1,82-1,76(м, 2H), 1,65-1,61 (м, 1H).
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN] Rt=2,22 мин; МС Вычисл.: 238; МС Найдено: 239 [M+H].
Описание D266
6-Изопропокси-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин (D266)
2
4
К смеси NaH (60% в масле) (302 мг, 7,75 ммоль) в THF (10 мл) добавляли пропан-2-ол (465 мг, 7,75 ммоль) и перемешивали при 0°C в течение 10 минут. Затем добавляли раствор 6-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (370 мг, 1,55 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К смеси добавляли воду (5 мл), затем экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO, и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (петролейный эфир:EtOAc=3:1) с получением указанного в заголовке соединения(200 мг, выход 49%) в виде желтого масла.
1
3
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,92 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 5,96 (дд, 10,5, 2,1 Гц, 1H), 5,47-5,40 (м, 1H), 4,16-4,11 (м, 1H), 3,84-3,75 (м, 1H), 2,65-2,54 (м, 1H), 2,17-2,11 (м, 1H), 1,98-1,92 (м, 1H), 1,83-1,74 (м, 2H), 1,65-1,61 (м, 1H), 1,46 (т, 6,0 Гц, 6H).
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN] RT=2,36 мин; МС Вычисл.: 263; МС Найдено: 264[M+H].
Описание D267
6-Изопропокси-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин (D267)
3
2
4
К раствору 6-изопропокси-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (200 мг, 0,760 ммоль) в диоксане (3 мл) добавляли насыщ. HCl-диоксан (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(10 мл). Добавляли этилацетат (3×10 мл) для экстракции желаемого продукта. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO, и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (130 мг, выход 96%) в виде желтого твердого вещества.
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN] RT=1,84 мин; МС Вычисл.: 178; МС Найдено: 179[M+H].
Описание D268
трет-
Бутил 4-(1-ацетил-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D268)
2
3
2
3
2
4
К раствору 1-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанона (1 г, 3,95 ммоль) в толуоле (30 мл) добавляли Pd(dba) (0,362 г, 0,395 ммоль), BINAP (0,492 г, 0,790 ммоль), трет-бутил пиперазин-1-карбоксилат (1,472 г, 7,90 ммоль) и CsCO (2,57 г, 7,90 ммоль). Смесь перемешивали при 120°C в атмосфере азота в течение 3 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (100 мл) и воду (50 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (ISCO, колонка 40 г, PE:EtOAc=100:0→40:60) с получением трет-бутил 4-(1-ацетил-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилата (600 мг, 1,674 ммоль, 42,% выход) в виде бледно-желтого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=4,11 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 358; МС Найдено: 359 [M+1].
1
6
H ЯМР (DMSO-d) d: 8,29 (с, 1H), 7,88 (с, 1H), 7,67 (с, 1H), 3,51 (шир. с., 4H), 2,87 (т, J=4,6 Гц, 4H), 2,68 (с, 3H), 2,37 (с, 3H), 1,43 (с, 9H)
Описание D269
трет-
Бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D269)
трет-
2
4
Бутил 4-(1-ацетил-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилат (200 мг, 0,558 ммоль) растворяли в THF (10 мл)/воде (1,00 мл). Добавляли гидроксид натрия (1,116 мл, 1,116 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 3 часов. К реакционной смеси добавляли EtOAc (50 мл) и воду (30 мл) и слои разделяли. Органический слой собирали, сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток трет-бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилата использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=3,49 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 316; МС Найдено: 317 [M+1].
Описание D270
трет-
Бутил 4-(5-метил-1-(6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D270)
трет-бутил
2
4
В круглодонную колбу, наполненную  4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилатом (полученным на вышеуказанной стадии), добавляли иодид меди(I) (42,5 мг, 0,223 ммоль), 4-(6-иодпиримидин-4-ил)морфолин (162 мг, 0,558 ммоль) и тригидрат фосфата калия (371 мг, 1,395 ммоль). Затем, добавляли в атмосфере азота N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (0,141 мл, 0,893 ммоль) и толуол (10,00 мл). Смесь затем перемешивали при 120°C в течение 2 дней в атмосфере азота. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли EtOAc (40 мл) и воду (30 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (ISCO, колонка 24 г, PE:(EtOAc/EtOH (3:1, об:об))=100:0→60:40) с получением трет-бутил 4-(5-метил-1-(6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилата (200 мг, 0,417 ммоль, 74,7% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=4,41 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 479; МС Найдено: 480 [M+1].
1
6
H ЯМР (DMSO-d): 8,60 (с, 1H), 8,41 (с, 1H), 8,32 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,16 (с, 1H), 3,63-3,76 (м, 8H), 3,53 (шир. с., 4H), 2,90 (т, J=4,4 Гц, 4H), 2,39 (с, 3H), 1,42-1,51 (м, 9H).
Описание D271
5-Метил-6-(4-метилпиперазин-1-ил)-1H-индазол (D271)
Стадия 1:
2
3
2
3
2
4
6-Бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (260 мг, 0,88 ммоль), Pd(dba) (161 мг, 0,17 ммоль), BINAP (219 мг, 0,35 ммоль) и CsCO (574 мг, 1,76 ммоль) помещали в пробирку для микроволновой печи. Добавляли PhMe (5 мл), с последующим добавлением 1-метилпиперазина (500 мкл, 4,49 ммоль). Пробирку укупоривали азотом и нагревали при 120°C в течение 1 часа при микроволновом излучении. Пробирку охлаждали до комнатной температуры, EtOAc (30 мл) добавляли к смеси и органический слой промывали водой (50 мл×2), затем сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=2,27 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 314; МС Найдено: 315 [M+1].
Стадия 2:
Неочищенный продукт (полученный на стадии 1) растворяли в MeOH (10 мл), добавляли HCl (12N, 1 мл) и смесь перемешивали при 40°C в течение 1 часа. Затем растворитель удаляли и остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=1,75 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 230; МС Найдено: 231 [M+1].
Описание D272
4-(6-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-этилпиримидин-4-ил)морфолин (D272)
2
4
К раствору 1-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанона (300 мг, 1,185 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли карбонат калия (164 мг, 1,185 ммоль) и 4-(6-хлор-2-этилпиримидин-4-ил)морфолин (270 мг, 1,185 ммоль), затем реакционную смесь перемешивали при 120°C при микроволновом излучении в течении 2 часов. К реакционной смеси добавляли воду (50 мл) и EtOAc (100 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 раза), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (ISCO, колонка 40 г, PE: EtOAc/EtOH=100:0→50:50) с получением 4-(6-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-этилпиримидин-4-ил)морфолина (260 мг, 0,646 ммоль, 54,5% выход).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=4,47 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 401; МС Найдено: 402 [M+1].
1
6
J
J
J
H ЯМР (DMSO-d) d: 9,14 (с, 1H), 8,43 (с, 1H), 7,87 (с, 1H), 7,00 (с, 1H), 3,68 (д, =7,1 Гц, 11H), 2,82 (кв, =7,6 Гц, 2H), 2,48 (с, 3H), 1,36 (т, =7,5 Гц, 3H).
Описание D273
6-бром-1-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (D273)
2
3
2
4
6-бром-5-метил-1H-индазол (50 мг, 0,237 ммоль) и 4,6-дихлор-2-метоксипиримидин (127 мг, 0,711 ммоль) растворяли в DMF (3 мл), добавляли CsCO (154 мг, 0,474 ммоль) и смесь перемешивали при 120°C в течение 1,5 ч при микроволновом излучении. К реакционной смеси добавляли воду (20 мл) и EtOAc (50 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 раза), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (ISCO, колонка 24 г, PE:EtOAc=100:0→80:20) с получением 6-бром-1-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (48 мг, 0,136 ммоль, 57,3% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=4,47 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 352; МС Найдено: 353 [M+1].
1
d
6
3
H ЯМР (DMSO-): 8,92 (с, 1H), 8,59 (с, 1H), 7,93 (с, 1H), 7,60 (с, 1H), 4,08 (с, 3H) (Примечание: пик CH скрывается растворителем ДМСО)
Описание D274
трет-
Бутил 4-(6-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D274)
трет-
2
3
2
4
К раствору 6-бром-1-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (40 мг, 0,113 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли бутил пиперазин-1-карбоксилат (31,6 мг, 0,170 ммоль) и KCO (31,3 мг, 0,226 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 120°C в течение 1 часа при микроволновом излучении. К реакционной смеси добавляли воду (10 мл) и EtOAc (30 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 times), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=4,93 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 502; МС Найдено: 503 [M+1].
1
6
3
H ЯМР (DMSO-d): 9,02 (с, 1H), 8,45 (с, 1H), 7,88 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 3,97 (с, 3H), 3,70 (шир. с., 4H), 3,45 (шир. с., 4H), 1,44 (с, 9H) (Примечание: пик CH скрывается растворителем ДМСО).
Описание D275
6-Бром-1-(6-хлорпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (D275)
2
3
2
4
6-Бром-5-метил-1H-индазол (440 мг, 2,085 ммоль) и 4,6-дихлорпиримидин (932 мг, 6,25 ммоль) растворяли в DMF (3 мл), добавляли CsCO (1358 мг, 4,17 ммоль) и смесь перемешивали при 120°C в течение 1,5 ч при микроволновом излучении. К реакционной смеси добавляли воду (50 мл) и EtOAc (100 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 раза), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (ISCO, колонка 80 г, PE:EtOAc= 100:0→80:20) с получением 6-бром-1-(6-хлорпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (400 мг, 1,236 ммоль, 59,3% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=4,36 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 322; МС Найдено: 323 (M+1).
1
d
6
H ЯМР (DMSO-) d: 9,05 (с, 1H), 8,98 (с, 1H), 8,60 (с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,87-7,94 (м, 1H), 2,50(с, 3H)
Описание D276
трет-
Бутил 4-(6-(5-метил-6-морфолино-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D276)
Стадия 1:
2
3
2
4
6-Бром-1-(6-хлорпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (400 мг, 1,236 ммоль) и KCO(342 мг, 2,472 ммоль) растворяли в DMF (10 мл), добавляли трет-бутил пиперазин-1-карбоксилат (230 мг, 1,236 ммоль) и смесь перемешивали при 120°C в течение 1 часа при микроволновом излучении. К реакционной смеси добавляли воду (30 мл) и EtOAc (50 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 раза), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=4,80 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 472; МС Найдено: 473 [M+1].
Стадия 2:
2
3
2
3
2
4
Pd(dba) (56,6 мг, 0,062 ммоль), xantphos (71,5 мг, 0,124 ммоль), морфолин (1,077 мл, 12,36 ммоль) и CsCO (806 мг, 2,472 ммоль) добавляли к раствору неочищенного продукта (полученный на стадии 1) в толуоле (20,00 мл) и затем смесь перемешивали при 120°C в атмосфере азота в течение 3 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (100 мл) и воду (50 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (ISCO, колонка 40 г, PE:EtOAc=100:0-40:60) с получением трет-бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-морфолино-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата в виде бледно-желтого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=4,29 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 479; МС Найдено: 480 [M+1].
Описание D277
6-Бром-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол (D277)
2
2
4
К раствору 6-бром-1H-индазола (2,00 г, 10,2 ммоль) в THF (30 мл) добавляли NaH (0,820 г, 20,4 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. SEM-Cl (2,55 г, 15,3 ммоль) добавляли к смеси при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 1 ч. Смесь разбавляли HO (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колонкой с силикагелем (PE:EtOAc=60:1) с получением целевого продукта (2,62 г, выход 79%) в виде красного масла.
1
3
J
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,97 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,60 (д, =8,7 Гц, 1H), 7,30 (дд, =8,7, 1,5 Гц, 1H), 5,69 (с, 2H), 3,53 (т, =8,1 Гц, 2H), 0,89 (т, =8,1 Гц, 2H), -0,06 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,981 мин МС Вычисл.: 326, МС Найдено: 327 [M+H].
Описание D278
трет-
бутил 4-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D278)
2
3
2
3
2
К смеси 6-бром-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазола (1,00 г, 3,07 ммоль), трет-бутил пиперазин-1-карбоксилата (0,860 г, 4,61 ммоль), CsCO (2,00 г, 6,14 ммоль) и BINAP (0,770 г, 1,23 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляли Pd(dba) (0,57 г, 0,62 ммоль). Смесь нагревали до 105°C и перемешивали в течение ночи в атмосфере N. Смесь фильтровали и фильтрат непосредственно концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=6:1) с получением целевого продукта (330 г, выход 24%) в виде желтого масла.
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,939 мин МС Вычисл.: 432, МС Найдено: 433 [M+H].
Описание D279
трет-
бутил 4-(1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D279)
трет-
2
2
2
2
4
3
2
К раствору бутил 4-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилата (410 мг, 0,950 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли конц. HCl (5 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Раствор концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в метаноле (4 мл). К раствору добавляли KOH (161 мг, 2,88 ммоль) в HO (1 мл) и BocO (314 мг, 1,44 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов. Смесь разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали DCM/MeOH (20/1, 3×20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали в вакууме. Остаток очищали при помощи C18 (CHCN/HO от 5% до 80%) с получением целевого продукта (110 мг, выход 38%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,93 (с, 1H), 7,61 (д, =8,7 Гц, 1H), 6,93 (дд, =9,0, 1,8 Гц, 1H), 6,82 (с, 1H), 3,63-3,60 (м, 4H), 3,20-3,17 (м, 4H), 1,49 (с, 9H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин], Rt=2,218 мин МС Вычисл.: 302, МС Найдено: 303 [M+H].
Описание D280
трет-
бутил 4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D280)
трет-
2
3
2
2
4
К смеси бутил 4-(1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилата (110 мг, 0,364 ммоль) и CsCO (234 мг, 0,720 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (108 мг, 0,470 ммоль). Смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Смесь разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:1) и далее очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением целевого продукта (60 мг, выход 33%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,34 (с, 1H), 8,03 (с, 1H), 7,59 (д, =9,0 Гц, 1H), 7,00 (дд, =9,0, 1,8 Гц, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,09 (с, 3H), 3,81-3,71 (м, 8H), 3,64-3,60 (м, 4H), 3,29-3,26 (м, 4H), 1,50 (с, 9H).
Описание D281
6-Бром-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (D281)
2
3
2
4
6-Бром-1-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (200 мг, 0,566 ммоль) растворяли в DMF (5 мл), добавляли 1-метилпиперазин (113 мг, 1,131 ммоль) и CsCO (369 мг, 1,131 ммоль) и смесь перемешивали при 120°C в течение 30 мин при микроволновом излучении. К реакционной смеси добавляли воду (30 мл) и EtOAc (50 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 раза), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=3,07 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 416; МС Найдено: 416,9 [M+1].
Описание D282
4,6-дииод-2-метоксипиримидин (D282)
К раствору NaI (2,20 г, 14,6 ммоль) в HI (55%, 15 мл) добавляли 4,6-дихлор-2-метоксипиримидин (2,00 г, 11,2 ммоль). Смесь нагревали до 40°C и перемешивали в течение 10 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду со льдом (50 мл). Твердое вещество собирали фильтрацией и очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,2 г, выход 30%) в виде белого твердого вещества.
1
H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 7,85 (с, 1H), 4,00 (с, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHAc) и 95% CHCN за 2,5 мин, Rt=1,66 мин; МС Вычисл.: 362; МС Найдено: 363 [M+H].
Описание D283
4-иод-2-метокси-6-(пиперидин-1-ил)пиримидин (D283)
2
4
К суспензии 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (1,40 г, 3,90 ммоль) в EtOH (30 мл) добавляли морфолин (714 мг, 8,2 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 4 часов. Смесь концентрировали до тех пор, пока не выпало много белого твердого осадка. Твердое вещество собирали и промывали EtOH, получая неочищенный продукт (900 мг). Неочищенный продукт разделяли с EtOAc (30 мл) и водой (50 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO, и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc/PE (10 мл, 1/10) и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (800 мг, выход 65%) в виде белого твердого вещества.
1
H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 6,62 (с, 1H), 3,89 (с, 3H), 3,76-3,72 (м, 4H), 3,59-3,56 (м, 4H).
4
3
4
3
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHAc) и 95% CHCN за 3,0 мин, Rt=1,67 мин; МС Вычисл.: 320; МС Найдено: 321 [M+H]+.
Описание D284
1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (D284)
2
4
К смеси 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (1,25 г, 3,45 ммоль) в i-PrOH (20 мл) добавляли азетидин-3-ол гидрохлорид (374 мг, 3,45 ммоль) и TEA (3 мл). Смесь нагревали до 75°C и перемешивали в течение 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток диспергировали в воде (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (100 мл×2) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (1,06 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,33 мин, МС Вычисл.: 307; МС Найдено: 308 [M+H].
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 6,51 (с, 1H), 5,76 (шир. с, 1H), 4,57-4,49 (м, 1H), 4,20-4,15 (м, 2H), 3,76-3,68 (м, 5H).
Описание D285
4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (D285)
2
К смеси 1-(6-иод-2-метокси-пиримидин-4-ил)-азетидин-3-ола (700 мг, 2,28 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли DHP (383 мг, 4,56 ммоль) и TsOH·HO (87 мг, 0,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (700 мг, выход 78%) в виде желтого масла.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 2,5 мин), Rt=1,68 мин; МС Вычисл.: 391; МС Найдено: 392 [M+H].
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,33 (с, 1H), 4,69-4,64 (м, 2H), 4,32-4,22 (м, 2H), 4,08-3,96 (м, 2H), 4,02-3,84 (м, 4H), 3,55-3,51 (м, 1H), 1,87-1,71 (м, 2H), 1,60-1,54 (м, 4H).
Описание D286
4-(6-Иодпиримидин-4-ил)морфолин (D286)
2
4
4-(6-Хлорпиримидин-4-ил)морфолин (2,5 г, 12,52 ммоль) и йодид натрия (2,82 г, 18,78 ммоль) растворяли в hydrogen iodide (24,78 мл, 188 ммоль) (водный раствор) и раствор перемешивали при 40°C for 3 days. The pH of the reaction mixture was adjusted to 8 using 1N NaOH. EtOAc (200 мл) добавляли для растворения осадка. Затем органический слой отделяли, сушили над NaSOи затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (PE:EtOAc=100:0→60:40) с получением 4-(6-иодпиримидин-4-ил)морфолина (2,3 г, 7,11 ммоль, 56,8% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=2,16 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 291; МС Найдено: 292,0 [M+1].
Описание D287
(S)-Тетрагидрофуран-3-ил метансульфонат (D287)
2
2
4
К раствору (S)-тетрагидрофуран-3-ола (600 мг, 6,82 ммоль) и TEA (2,07 г, 20,5 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли MsCl (1,17 мг, 10,2 ммоль) на бане со льдом. Раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа. Смесь разбавляли HO (40 мл) и экстрагировали DCM (20 мл×3). Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением желаемого продукта (1,1 г, выход 96%) в виде коричневого масла.
3
1H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,33-5,28 (м, 1H), 4,04-3,84 (м, 4H), 3,03 (с, 3H), 2,26-2,20 (м, 2H).
Описание D288
5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(((R)-тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол (D288)
2
3
2
2
4
Смесь 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ола (600 мг, 2,59 ммоль), (S)-тетрагидрофуран-3-ил метансульфоната (644 мг, 3,88 ммоль), и CsCO (2,50 г, 7,76 ммоль) в DMF (40 мл) перемешивали при 100°C в течение 3 часов. Смесь разбавляли HO (100 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл×3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAc=3:1) с получением целевого продукта (610 г, выход 78%) в виде белого твердого вещества.
1
H ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 7,84 (с, 1H), 7,43 (с, 1H), 6,79 (д, J=2,1 Гц, 1H), 5,63 (дд, J=11,1, 2,7 Гц, 1H), 5,07-5,02 (м, 1H), 4,13-3,92 (м, 5H), 3,77-3,69 (м, 1H), 2,63-2,51 (м, 1H), 2,26-2,05 (м, 7H), 1,82-1,67 (м, 3H).
4
3
4
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CH3CN за 4 мин], Rt=2,413 мин, МС Вычисл.: 302, МС Найдено: 303 [M+H].
Описание D289
(R)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол (D289)
Смесь 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(((R)-тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазола (610 мг, 2,02 ммоль) в HCl/1,4-диоксане (6 M, 50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали, и остаток промывали 10 мл холодного EtOAc с получением указанного в заголовке соединения (400 мг, выход 91%) в виде белого твердого вещества.
1
H ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): δ 7,84 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 5,08-5,06 (м, 1H), 3,96-3,74 (м, 4H), 2,30-2,17 (м, 4H), 2,06-1,95 (м, 1H).
Описание D290
(R)-Тетрагидрофуран-3-ил метансульфонат (D290)
2
2
4
К раствору (R)-тетрагидрофуран-3-ола (600 мг, 6,82 ммоль) и TEA (3,07 г, 20,5 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли MsCl (1,17 мг, 10,2 ммоль) с баней со льдом. Раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа. Смесь разбавляли HO (40 мл) и экстрагировали DCM (20 мл×3). Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением желаемого продукта (1 г, выход 88%) в виде коричневого масла.
3
1H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,32-5,29 (м, 1H), 4,33-3,86 (м, 4H), 3,03 (с, 3H), 2,26-2,19 (м, 2H).
Описание D291
5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(((S)-тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол (D291)
2
3
2
2
4
Смесь 5-метил-1-(тетрагидро-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ола (550 мг, 2,37 ммоль), (R)-тетрагидрофуран-3-ил метансульфоната (590 мг, 3,56 ммоль), и CsCO (3,47 г, 10,7 ммоль) в DMF (20 мл) перемешивали при 100°C в течение 2 часов. Смесь разбавляли HO (100 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAc=3:1) с получением целевого продукта (600 г, выход 84%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,84 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 6,79 (д, J=2,1 Гц, 1H), 5,62 (дд, J=9,0, 2,1 Гц, 1H), 5,05-5,01 (м, 1H), 4,12-3,86 (м, 5H), 3,76-3,68 (м, 1H), 2,62-2,49 (м, 1H), 2,32-2,04 (м, 7H), 1,83-1,64 (м, 3H).
Описание D292
(S)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол (D292)
Смесь 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(((S)-тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазола (540 мг, 1,79 ммоль) в HCl/1,4-диоксане (6 M, 100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток промывали 20 мл EtOAc для получения указанного в заголовке соединения (300 мг, выход 77%) в виде белого твердого вещества.
4
3
4
3
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 3 мин], Rt=1,74 мин, МС Вычисл.:218, МС Найдено: 218 [M]+.
Описание D293
4-(6-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (D293)
2
3
2
4
Смесь 6-бром-5-метил-1H-индазол, гидрохлорида (4,4 г, 17,78 ммоль), CsCO (17,38 г, 53,3 ммоль) и 4-(6-хлорпиримидин-4-ил)морфолина (3,55 г, 17,78 ммоль) в DMF (35 мл) поровну разделяли в 2 сосуда для микроволновой печи, герметизировали в сосудах для микроволновой печи и облучали при помощи микроволной печи при 100°C в течение 2 ч. Желаемый продукт и региоселективный побочный продукт 4-(6-(6-бром-5-метил-2H-индазол-2-ил)пиримидин-4-ил)морфолин также были обнаружены при мониторинге ЖХМС. Затем реакционную смесь разбавляли водой (100 мл), фильтровали, экстрагировали этилацетатом (80×3 мл). Объединенные органические части сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали. Очистка через систему ISCO (этилацетат/петролейный эфир) дает смесь, которая включает указанный в заголовке продукт и региоселективный побочный продукт.
3
3
ЖХ-МС (ESI) [подвижная фаза: от 95% воды (0,05% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,05% TFA) и 95% CHCN за 5,0 мин]: m/z 375 [M+H]+ ; Rt=4,06, 4,26 мин.
Описание D294
6-(3-(Бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ол (D294)
3
3
2
4
К раствору CHONa (2,40 г, 44,5 ммоль) в CHOH (70 мл) добавляли метил карбамимидат гидрохлорид (2,10 г, 19,1 ммоль) и этил 3-(3-(бензилокси)циклобутил)-3-оксопропаноат (3,50 г, 12,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем, реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в воде (50 мл). К смеси добавляли раствор конц. HCl до pH=5. Полученную смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растирали с (PE:EtOAc=5:1, 50 мл) с получением указанного в заголовке соединения (1,87 г, выход 51%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,35-7,28 (м, 5H), 5,94 (с, 1H), 4,46-4,44 (м, 2H), 4,03-3,96 (м, 4H), 2,83-2,74 (м, 1H), 2,55-2,42 (м, 2,5H), 2,30-2,21 (м, 1,5H).
Описание D295 и D296
4-((1S,3S)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метоксипиримидин (D295)
4-((1R,3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метоксипиримидин (D296)
3
3
2
4
К раствору 6-(3-(бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ола (1,60 г, 5,59 ммоль) в толуоле (40 мл) добавляли TEA (677 мг, 6,71 ммоль) и POCl (1,03 г, 6,71 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в насыщ. раствор NaHCO (150 мл) и перемешивали в течение 10 минут. Полученную смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=20:1) с получением указанного в заголовке соединения цис-изомера (1,00 г, выход 59%) в виде бесцветного масла и транс-изомера (260 мг, выход 15%) в виде бесцветного масла.
D295 (цис-изомер):
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,35-7,27 (м, 5H), 6,84 (с, 1H), 4,46 (с, 2H), 4,08-4,02 (м, 4H), 3,02-2,97 (м, 1H), 2,67-2,61 (м, 2H), 2,33-2,26 (м, 2H).
D296 (транс-изомер):
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,35-7,26 (м, 5H), 6,82 (с, 1H), 4,47-4,37 (м, 3H), 4,01 (с, 3H), 3,55-3,45 (м, 1H), 2,58-2,43 (м, 4H).
Описание D297
(цис)-
трет-
бутил 4-(1-(6-((1s,3s)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D297)
трет-
3
4
3
3
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (100 мг, 0,300 ммоль) (энантиомер 1) в толуоле (5 мл) добавляли 4-((1S,3S)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метоксипиримидин (182 мг, 0,600 ммоль), CuI (171 мг, 0,900 ммоль), KPO (212 мг, 1,00 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (128 мг, 0,900 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением неочищенного продукта (160 мг). Неочищенный продукт очищали при помощи колонки C18 (от 95% воды и 5% CHCN до 20% воды и 80% CHCN за 60 мин) с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, выход 55%) в виде бесцветного масла.
D297
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,37-7,26 (м, 5H), 4,83-4,54 (м, 2H), 4,49 (с, 2H), 4,29-4,19 (м, 1H), 4,14-4,07 (м, 4H), 3,31-3,19 (м, 1H), 3,14-3,03 (м, 1H), 2,95-2,78 (м, 2H), 2,73-2,63 (м, 2H), 2,51 (с, 3H), 2,44-2,34 (м, 2H), 2,04-1,91 (м, 1H), 1,84-1,74 (м, 1H), 1,53 (с, 9H).
Описание D298
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1s,3s)-3-гидроксициклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D298)
трет-
3
2
К раствору (цис)-бутил 4-(1-(6-((1s,3s)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 100 мг, 0,166 ммоль) в CHOH (5 мл) добавляли Pd/C (10%, 100 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H из баллона в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток растирали с (PE:EtOAc=5:1, 5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (45 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества.
D298
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,13 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 4,64-4,37 (м, 2H), 4,25-4,09 (м, 5H), 3,31-3,06 (м, 2H), 2,91-2,76 (м, 5H), 2,50 (с, 3H), 2,35-2,24 (м, 2H), 1,98-1,87 (м, 2H), 1,52 (с, 9H).
Описание D299
(цис)-3-{6-[6-(3-фтор-пиперидин-4-ил)-5-метил-индазол-1-ил]-2-метокси-пиримидин-4-ил}-циклобутанол
гидрохлорид (энантиомер 1, D299)
трет-
3
3
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1S,3S)-3-гидроксициклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 45 мг, 0,088 ммоль) в CHOH (2,5 мл) добавляли HCl/CHOH (8 моль/л, 2,5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (35 мг, выход 90%) в виде белого твердого вещества.
D299
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=1,80 мин; МС Вычисл.: 411; МС Найдено: 412[M+H].
Описание D300
(цис)-
трет-
бутил 4-(1-(6-((1s,3s)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D300)
трет-
3
4
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 150 мг, 0,450 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-((1S,3S)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метоксипиримидин (273 мг, 0,900 ммоль), CuI (171 мг, 0,900 ммоль), KPO (286 мг, 1,35 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (128 мг, 0,900 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (240 мг, выход 88%) в виде бесцветного масла.
D300
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=2,46 мин; МС Вычисл.: 601; МС Найдено: 602 [M+H].
Описание D301
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1S,3S)-3-гидроксициклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D301)
трет-
3
2
3
К раствору (цис)-бутил 4-(1-(6-((1S,3S)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 240 мг, 0,399 ммоль) в CHOH (5 мл) добавляли Pd/C (10%, 200 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H из баллона в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=20:1) с получением неочищенного продукта (100 мг). Неочищенный продукт растирали с (PE:EtOAc=5:1, 10 мл) с получением указанного в заголовке соединения (70 мг, выход 34%) в виде белого твердого вещества.
D301
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 4,82-4,52 (м, 2H), 4,35-4,05 (м, 5H), 3,310-3,09 (м, 2H), 2,92-2,69 (м, 5H), 2,51 (с, 3H), 2,33-2,25 (м, 2H), 2,00-1,89 (м, 1H), 1,82-1,73 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
Описание D302
(цис)-3-{6-[6-(3-фтор-пиперидин-4-ил)-5-метил-индазол-1-ил]-2-метокси-пиримидин-4-ил}-циклобутанол
гидрохлорид (энантиомер 2, D302)
трет-
3
3
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1s,3s)-3-гидроксициклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 70 мг, 0,14 ммоль) в CHOH (2,5 мл) добавляли HCl/CHOH (8 моль/л, 2,5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (62 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
D302
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 20-95% CHCN за 3 мин]: Rt=1,26 мин; МС Вычисл.: 411; МС Найдено: 412 [M+H].
Описание D303
(цис)-
трет-бутил
4-(1-(6-((1r,3r)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D303)
трет-бутил
3
4
4
3
3
4
3
3
К раствору (цис)- 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата(100 мг, 0,300 ммоль) (энантиомер 1) в толуоле (5 мл) добавляли 4-((1R,3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метоксипиримидин (120 мг, 0,395 ммоль), CuI (171 мг, 0,900 ммоль), KPO (191 мг, 0,900 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (128 мг, 0,900 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением неочищенного продукта (180 мг). Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (препаративная ВЭЖХ: от 40% воды (0,1% NHHCO) и 60% CHCN до 5% воды (0,1% NHHCO) и 95% CHCN за 20 мин) с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 44%) в виде бесцветного масла.
D303
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,36-7,27 (м, 5H), 4,81-4,58 (м, 2H), 4,53-4,43 (м, 3H), 4,30-4,18 (м, 1H), 4,13 (с, 3H), 3,67-3,57 (м, 1H), 3,30-3,19 (м, 1H), 2,93-2,79 (м, 2H), 2,69-2,61 (м, 2H), 2,56-2,47 (м, 5H), 2,01-1,93 (м, 1H), 1,84-1,74 (м, 1H), 1,53 (с, 9H).
Описание D304
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1r,3r)-3-гидроксициклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D304)
трет-
3
2
К раствору (цис)-бутил 4-(1-(6-((1R, 3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 80 мг, 0,13 ммоль) в CHOH (10 мл) добавляли Pd/C (10%, 80 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H из баллона в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (60 мг, выход 90%) в виде белого твердого вещества.
D304
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=2,02 мин; МС Вычисл.: 511; МС Найдено: 512 [M+H].
Описание D305
(цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорид (энантиомер 1, D305)
трет-
3
3
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1R, 3R)-3-гидроксициклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 60 мг, 0,12 ммоль) в CHOH (5 мл) добавляли HCl/CHOH (8 моль/л, 5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (54 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
D305
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 20-95% CHCN за 3 мин]: Rt=1,76 мин; МС Вычисл.: 411; МС Найдено: 412 [M+H].
Описание D306
(цис)-
трет-
бутил 4-(1-(6-((1R,3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D306)
трет-
3
4
4
3
3
4
3
3
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 100 мг, 0,300 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-((1R,3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метоксипиримидин (120 мг, 0,395 ммоль), CuI (171 мг, 0,900 ммоль), KPO (191 мг, 0,900 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (128 мг, 0,900 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением неочищенного продукта (185 мг). Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (препаративная ВЭЖХ: от 40% воды (0,1% NHHCO) и 60% CHCN до 5% воды (0,1% NHHCO) и 95% CHCN за 20 мин) с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 44%) в виде бесцветного масла.
D306
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,46-7,27 (м, 5H), 4,81-4,57 (м, 2H), 4,52-4,43 (м, 3H), 4,28-4,18 (м, 1H), 4,13 (с, 3H), 3,66-3,57 (м, 1H), 3,31-3,19 (м, 1H), 2,94-2,77 (м, 2H), 2,69-2,60(м, 2H), 2,56-2,47 (м, 5H), 2,00-1,90 (м, 1H), 1,83-1,72 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
Описание D307
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1R,3R)-3-гидроксициклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D307)
трет-
3
2
К раствору (цис)-бутил 4-(1-(6-((1R, 3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 60 мг, 0,10 ммоль) в CHOH (10 мл) добавляли Pd/C (10%, 80 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H из баллона в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (45 мг, выход 88%) в виде белого твердого вещества.
D307
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=2,02 мин; МС Вычисл.: 511; МС Найдено: 512 [M+H].
Описание D308
(цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорид (энантиомер 2, D308)
трет-бутил
3
3
К раствору (цис)- 3-фтор-4-(1-(6-((1R,3R)-3-гидроксициклобутил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 60 мг, 0,12 ммоль) в CHOH (5 мл) добавляли HCl/CHOH (8 моль/л, 5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (54 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
D308
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=1,73 мин; МС Вычисл.: 411; МС Найдено: 412 [M+H].
Описание D309
(R)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D309)
2
4
К раствору 4,6-дииод-2-метилпиримидина (600 мг, 1,73 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли (R)-пирролидин-3-ол (151 мг, 1,73 ммоль) и DIPEA (447 мг, 3,46 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в KF раствор воды (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали с получением неочищенного продукта (530 мг) в виде белого твердого вещества.
D309
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=0,66 мин; МС Вычисл.: 305,1; МС Найдено: 305,8 [M+H].
Описание D310
(цис)-
трет-бутил
3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (Диастереоизомер 1, D310)
(
трет-
3
4
2
К раствору R)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (88 мг, 0,29 ммоль) в толуоле (8 мл) добавляли (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, 80 мг, 0,24 ммоль), KPO (102 мг, 0,48 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль) и N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (42 мг, 0,48 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:5~1:1) с получением продукта (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1) (120 мг, 97,9% выход) в виде желтого твердого вещества.
D310
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,61 мин; МС Вычисл.: 510; МС Найдено: 511 [M+H].
Описание D311
(R)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (Диастереоизомер 1, D311)
трет-
3
2
4
Раствор (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1, 120 мг, 0,24 ммоль) в 4 моль/л HCl/EtOAc (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь выливали в насыщ. NaHCO (30 мл) и затем смесь экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта (R)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 1) (110 мг, выход ~100%) в виде желтого неочищенного твердого вещества.
D311
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,06 мин; МС Вычисл.: 410; МС Найдено: 411 [M+H].
Описание D312
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2, D312)
3
4
2
К раствору (R)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (88 мг, 0,29 ммоль) в толуоле (8 мл) добавляли (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (80 мг, 0,24 ммоль), KPO (102 мг, 0,48 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль) и N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (42 мг, 0,48 ммоль). Смесь перемешивали при 130°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc: петролейный эфир=1:5~1:1) с получением продукта (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2) (120 мг, 97,9% выход) в виде желтого твердого вещества.
D312
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,61 мин; МС Вычисл.: 510; МС Найдено: 511 [M+H].
Описание D313
(R)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (энантиомер 2, D313)
трет-
3
2
4
Раствор (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2) (120 мг, 0,24 ммоль) в 4 моль/л HCl/EtOAc (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение в течение ночи. Смесь выливали в насыщ. NaHCO (30 мл) и затем смесь экстрагировали EtOAc (30 мл× 3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), и сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта (R)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 2) (110 мг, выход ~100%) в виде желтого твердого вещества.
D313
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,06 мин; МС Вычисл.: 410; МС Найдено: 411 [M+H].
Описание D314
(S)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D314)
2
4
К раствору 4,6-дииод-2-метилпиримидина (600 мг, 1,73 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли (S)-пирролидин-3-ол (151 мг, 1,73 ммоль) и DIPEA (447 мг, 3,46 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали с получением неочищенного продукта(500 мг, выход=94,7%) в виде белого твердого вещества.
D314
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=0,68 мин; МС Вычисл.: 305,1; МС Найдено: 305,8 [M+H].
Описание D315
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1, D315)
трет-
трет-
3
4
2
К раствору (S)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (150 мг, 0,49 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, 136 мг, 0,41 ммоль), KPO (174 мг, 0,82 ммоль), CuI (78 мг, 0,41 ммоль) и N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (72 мг, 0,82 ммоль). Смесь перемешивали при 100°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:10~1:2) с получением продукта (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1) (90 мг, 43,1% выход) в виде желтого твердого вещества.
D315
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,75 мин; МС Вычисл.: 510; МС Найдено: 511 [M+H].
Описание D316
(S)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 1, D316)
трет-
3
2
4
Раствор (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1) (90 мг, 0,176 ммоль) в 4 моль/л HCl/EtOAc (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в насыщ. NaHCO (50 мл) и затем смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта (S)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 1) (50 мг, выход=69,3%) в виде желтого твердого вещества.
D316
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,03 мин; МС Вычисл.: 410; МС Найдено: 411 [M+H].
Описание D317
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2, D317)
трет-
3
4
2
К раствору (S)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (150 мг, 0,49 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, 136 мг, 0,41 ммоль), KPO (174 мг, 0,82 ммоль), CuI (78 мг, 0,41 ммоль) и N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (72 мг, 0,82 ммоль). Смесь перемешивали при 100°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc: петролейный эфир=1:10~1:2) с получением продукта (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2, 132 мг, 63,5% выход) в виде желтого твердого вещества.
D317
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,74 мин; МС Вычисл.: 510; МС Найдено: 511 [M+H].
Описание D318
(S)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 2, D318)
трет-
3
2
4
Раствор (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2) (132 мг, 0,258 ммоль) в 4 моль/л HCl/EtOAc (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в насыщ. NaHCO (30 мл) и затем смесь экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта (S)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 2, 90 мг, выход= 84,9%) в виде желтого твердого вещества.
D318
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,04 мин; МС Вычисл.: 410; МС Найдено: 411 [M+H].
Описание D319
4-(2,5-Дигидро-1H-пиррол-1-ил)-6-иод-2-метилпиримидин (D319)
2
4
К раствору 4,6-дииод-2-метилпиримидина (1,0 г, 2,89 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли 2,5-дигидро-1H-пиррол (200 мг, 2,89 ммоль) и DIPEA (747 мг, 5,78 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировалидосуха, остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя EtOAc:петролейный эфир =1:10-1:5, с получением продукта 4-(2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-6-иод-2-метилпиримидин(660 мг, 79,5% выход) в виде белого твердого вещества.
D319
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% вода (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% вода (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,28 мин; МС Вычисл.: 287,1; МС Найдено: 287,8 [M+H].
Описание D320
цис-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (D320)
2
4
К раствору 4-(2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-6-иод-2-метилпиримидина (560 мг, 1,95 ммоль) в THF/HO (30/4 мл) добавляли 50% NMO (вод.) (1371 мг, 5,85 ммоль) и OsO (50 мг, 0,19 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь концентрировали досуха, остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир =1:5-1:0) с получением продукта цис-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (500 мг, 79,9% выход) в виде белого твердого вещества.
D320
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,01 мин; МС Вычисл.: 321,1; МС Найдено: 321,8 [M+H].
Описание D321
трет-
бутил 4-(1-(6-(цис-3,4-дигидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1, D321)
трет-
3
4
2
К раствору цис-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диола (58 мг, 0,18 ммоль) в толуоле (8 мл) добавляли (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1- карбоксилат (энантиомер 1, 50 мг, 0,15 ммоль), KPO (64 мг, 0,30 ммоль), CuI (29 мг, 0,15 ммоль) и N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (26 мг, 0,30 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:5-1:0) с получением продукта (цис)-трет-бутил 4-(1-(6-(цис-3,4-дигидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1, 60 мг, 75,9% выход) в виде желтого масла.
D321
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,68 мин; МС Вычисл.: 526,6; МС Найдено: 527,1 [M+H].
Описание D322
цис-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (диастереоизомер 1, D322)
трет-
3
2
4
К раствору (цис)-бутил 4-(1-(6-(цис-3,4-дигидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1) (60 мг, 0,11 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли TFA (1 мл), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Смесь концентрировали досуха, остаток растворяли DCM (100 мл), промывали насыщ. NaHCO (30 мл), насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта цис-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (диастереоизомер 1) (42 мг, выход: 89,6%) в виде желтого твердого вещества.
D322
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,02 мин; МС Вычисл.: 426,5; МС Найдено: 427,0 [M+H].
Описание D323
(цис)-
трет-
бутил 4-(1-(6-(цис-3,4-дигидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2, D323)
трет-
3
4
2
К раствору цис-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диола (116 мг, 0,36 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли(цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, 100 мг, 0,30 ммоль), KPO (127 мг, 0,60 ммоль), CuI (57 мг, 0,30 ммоль) и N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (53 мг, 0,60 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:2-1:0) с получением продукта (цис)-трет-бутил 4-(1-(6-(цис-3,4-дигидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2) (160 мг, выход ~100%) в виде желтого твердого вещества.
D323
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% вода (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% вода (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,66 мин; МС Вычисл.: 526,6; МС Найдено: 527,0 [M+H].
Описание D324
(цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (диастереоизомер 2, D324)
трет-
3
2
4
К раствору (цис)-бутил 4-(1-(6-(цис-3,4-дигидроксипирролидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2) (160 мг, 0,30 ммоль) в 4 моль/л HCl/EtOAc (10 мл), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали досуха, остаток растворяли DCM (100 мл), промывали насыщ. NaHCO (30 мл), насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта цис-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (диастереоизомер 2, D324) (120 мг, выход: 94,1%) в виде желтого твердого вещества.
D324
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,02 мин; МС Вычисл.: 426,5; МС Найдено: 427,0 [M+H].
Описание D325
Этил 2-((1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)ацетат (D325)
2
3
2
2
2
4
К раствору 1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (2,3 г, 8,0 ммоль)в DMF (10 мл) добавляли этил-2-бромацетат (2,0 г, 12 ммоль) и CsCO (5,2 г, 16 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали CHCl (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали колонкой (PE:EtOAc=6:1) с получением указанного в заголовке соединения (2,6 г, выход 87%) в виде белого твердого вещества.
D325
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,48 (с, 1H), 4,55-4,49 (м, 1H), 4,26-4,21 (м, 4H), 4,09 (с, 2H), 4,05-4,01 (м, 2H), 2,45 (с, 3H), 1,31-1,25 (м, 3H).
Описание D326
2-((1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол (D326)
2
2
4
К раствору этил 2-((1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)ацетата (2,6 г, 6,9 ммоль) в THF (15 мл) добавляли DIBAL-H (1 M гексан, 24 мл, 24 ммоль) по каплям в атмосфере N при 0°C. Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 часов и при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь медленно выливали в воду со льдом (50 мл). Твердое вещество удаляли фильтрованием. Фильтрат экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (2,3 г, выход 100%) в виде желтого масла.
D326
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,48 (с, 1H), 4,50-4,453 (м, 1H), 4,26-4,21 (м, 2H), 3,97-3,92 (м, 2H), 3,77 (шир. с, 2H), 3,56-3,53 (м, 2H), 2,45 (с, 3H), 2,12 (шир. с, 1H).
Описание D327
4-иод-2-метил-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин
(D327)
2
2
2
2
2
3
2
4
К раствору 2-((1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанола (2,3 г, 6,9 ммоль)в CHCl (20 мл) добавляли DHP (2,3 г, 28 ммоль) и TsOH (1,2 г, 6,9 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 50°C и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли CHCl (80 мл). Смесь промывали насыщенным раствором NaCO (20 мл×2) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (2,1 г, выход 71%) в виде бесцветного масла.
D327
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,47 (с, 1H), 4,62-4,60 (м, 1H), 4,53-4,45 (м, 1H), 4,24-4,19 (м, 2H), 3,98-3,92 (м, 2H), 3,90-3,82 (м, 2H), 3,65-3,50 (м, 4H), 2,45 (с, 3H), 2,32-2,19 (м, 1H), 1,85-1,71 (м, 2H), 1,62-1,52 (м, 3H).
Описание D328
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (изомер 1, D328)
трет-
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (100 мг, 0,300 ммоль) (энантиомер 1) в толуоле (5 мл) добавляли 4-иод-2-метил-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин (151 мг, 0,360 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (128 мг, 0,900 ммоль), CuI (171 мг, 0,900 ммоль) и KPO (191 мг, 0,900 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NH·HO (30%, 50 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие: от 55% воды (0,1% TFA) и 45% CHCN до 15% воды (0,1% TFA) и 85% CHCN за 12 мин). Элюенты собирали и концентрировали. THP-защищенную группу перемещали во время испарения. Белое твердое вещество собирали с получением указанного в заголовке соединения (120 мг, выход 64%).
D328
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,67 (с, 1H), 8,32 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 4,64-4,52 (м, 3H), 4,27-4,24 (м, 2H), 4,18-4,13 (м, 1H), 3,73-3,70 (м, 2H), 3,62-3,61 (м, 2H), 3,41-3,36 (м, 1H), 3,32-3,30 (м, 2H), 3,04-2,92 (м, 3H), 2,69 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 1,98-1,94 (м, 1H), 1,72-1,61 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
Описание D329
(цис)-2-((1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол гидрохлорид (энантиомер 1, D329)
трет-
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (изомер 1, 120 мг, 0,220 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли HCl/метанол (8 моль/л, 4 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (85 мг, выход 94%) в виде желтого твердого вещества.
D329
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,80 (шир. с, 1H), 9,43 (шир. с, 1H), 8,79 (с, 1H), 8,39 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 6,63 (с, 1H), 5,31-5,10 (м, 1H), 4,50-4,47 (м, 1H), 4,39-4,34 (м, 2H), 4,00-3,93 (м, 2H), 3,75-3,64 (м, 4H), 3,37-3,29 (м, 3H), 3,22-3,04 (м, 3H), 2,65 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,04-1,94 (м, 2H).
Описание D330
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (изомер 2, D330)
трет-
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 100 мг, 0,30 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-иод-2-метил-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин (151 мг, 0,36 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (128 мг, 0,90 ммоль), CuI (171 мг, 0,90 ммоль) и KPO (191 мг, 0,90 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали NH·HO (50 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл) и сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие: от 60% воды (0,1% TFA) и 40% CHCN до 20% воды (0,1% TFA) и 80% CHCN за 12 мин). Элюенты собирали и концентрировали. THP-защищенную группу перемещали во время испарения. Белое твердое вещество собирали с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества.
D330
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 40-95% CHCN в воде (0,1% TFA) за 6,5 мин], Rt=3,398 мин; МС Вычисл.: 624; МС Найдено: 625 [M+H].
Описание D331
(цис)-2-((1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол гидрохлорид (энантиомер 2, D331)
трет-
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (изомер 2, 100 мг, 0,16 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли HCl/метанол (8 моль/л, 4 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (75 мг, выход 98%) в виде желтого твердого вещества.
D331
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,77 (шир. с, 1H), 9,39 (шир. с, 1H), 8,79 (с, 1H), 8,38 (с, 1H), 7,68 (с, 1H), 6,61 (с, 1H), 5,22-5,06 (м, 1H), 4,49-4,47 (м, 1H), 4,37-4,32 (м, 2H), 3,98-3,94 (м, 2H), 3,75-3,68 (м, 4H), 3,47-3,38 (м, 3H), 3,20-3,08 (м, 3H), 2,58 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,05-1,95 (м, 2H).
Описание D332
(R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D332)
К раствору (R)-морфолин-2-илметанола (300 мг, 2,56 ммоль) и DIEA (992 мг, 7,68 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли 4,6-дииод-2-метилпиримидин (885 мг, 2,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=4:1) с получением продукта (470 мг, выход 54,8%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
D332
1
3
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,79 (с, 1H), 4,16~4,06 (м, 2H), 4,06~4,02 (м, 1H), 3,79~3,73 (м, 1H), 3,70~3,57 (м, 3H), 3,04 (тд, =13,2, 3,6 Гц, 1H), 2,91 (дд, =12,8, 10,4 Гц, 1H), 2,47 (с, 3H), 1,94 (т, =6,0 Гц, 1H).
Описание D333
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1, D333)
трет-
3
4
2
2
4
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 150 мг, 0,45 ммоль), (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (180 мг, 0,54 ммоль), CuI (86 мг, 0,45 ммоль) и KPO (201 мг, 0,94 ммоль) в сухом толуоле (10 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (80 мг, 0,90 ммоль). Суспензию дегазировали N и перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Добавляли EtOAc (50 мл) и полученную смесь промывали водой (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=2:1) с получением продукта (185 мг, выход 76,1%) в виде белого твердого вещества.
D333
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,48 мин; МС Вычисл.:540,6 МС Найдено: 541,3 (M+H).
Описание D334
((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, D334)
3
2
4
Смесь (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1) (180 мг, 0,33 ммоль) в HCl/EtOAc (1,0 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли насыщ. NaHCO (20 мл) и полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×30 мл). Объединенный экстракты сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении с получением продукта (130 мг, выход 88,6%) в виде белого твердого вещества.
D334
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=0,96 мин; МС Вычисл.:440,5 МС Найдено: 441,3 (M+H).
Описание D335
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2, D335)
трет-
3
4
2
2
4
2
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 150 мг, 0,45 ммоль), (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (180 мг, 0,54 ммоль), CuI (86 мг, 0,45 ммоль) и KPO (201 мг, 0,94 ммоль) в сухом толуоле (10 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (80 мг, 0,90 ммоль). Суспензию дегазировали N и перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Добавляли EtOAc (50 мл) и полученную смесь промывали водой (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda, Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм, Фаза: MeCN/HO (0,1%TFA):10%~95%, Скорость потока: 20 мл/мин, 214 нм/254 нм) с получением продукта (130 мг, выход 53,4%) в виде белого твердого вещества.
D335
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,49 мин; МС Вычисл.:540,6 МС Найдено: 541,3 (M+H).
Описание D336
((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, D336)
трет-
3
2
4
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2, 125 мг, 0,23 ммоль) в HCl/EtOAc (1,0 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5,0 ч. Добавляли насыщ. NaHCO (25 мл) и полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×30 мл). Объединенный экстракты промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении с получением продукта (104 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
D336
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=0,25 мин; МС Вычисл.:440,5 МС Найдено: 441,3 (M+H).
Описание D337
(S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D337)
К раствору (S)-морфолин-2-илметанола (300 мг, 2,56 ммоль) и DIEA (992 мг, 7,68 ммоль) в EtOH (10 мл) и THF (20 мл) добавляли 4,6-дииод-2-метилпиримидин (885 мг, 2,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=4:1) с получением продукта (420 мг, выход 48,8%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
D337
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=0,25 мин; МС Вычисл.:335,1 МС Найдено: 336,0 (M+H).
Описание D338
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1, D338)
трет-
3
4
2
2
4
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 150 мг, 0,45 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (180 мг, 0,54 ммоль), CuI (86 мг, 0,45 ммоль) и KPO (201 мг, 0,94 ммоль) в сухом толуоле (10 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (80 мг, 0,90 ммоль). Суспензию дегазировали N и перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Добавляли EtOAc (50 мл) и полученную смесь промывали водой (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=2:1) с получением продукта (185 мг, выход 76,1%) в виде белого твердого вещества.
D338
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,69 мин; МС Вычисл.:540,6 МС Найдено: 541,3 (M+H).
Описание D339
((S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (энантиомер 1, D339)
трет-
3
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1, 180 мг, 0,33 ммоль) в HCl/EtOAc (1,0 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5,0 ч. Добавляли воду (30 мл) и водную фазу подщелачивали насыщенным NaHCO до pH≈9. Полученную суспензию фильтровали и осадок на фильтре промывали водой с получением продукта (135 мг, выход 92,0%) в виде белого твердого вещества.
D339
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,13 мин; МС Вычисл.:440,5 МС Найдено: 441,3 (M+H).
Описание D340
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2, D340)
трет-
3
4
2
2
4
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 150 мг, 0,45 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (180 мг, 0,54 ммоль), CuI (86 мг, 0,45 ммоль) и KPO (201 мг, 0,94 ммоль) в сухом толуоле (10 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (80 мг, 0,90 ммоль). Суспензию дегазировали N и перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Добавляли EtOAc (50 мл) и полученную смесь промывали водой (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=2:1) с получением продукта (180 мг, выход 74,0%) в виде белого твердого вещества.
D340
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,26 мин; МС Вычисл.:540,6 МС Найдено: 541,3 (M+H).
Описание D341
((S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, D341)
трет-
3
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2) (178 мг, 0,33 ммоль) в HCl/EtOAc (1,0 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (40 мл) и водный слой подщелачивали насыщ. NaHCO до pH≈9. Полученную суспензию фильтровали и осадок на фильтре промывали водой с получением продукта (120 мг, выход 82,7%) в виде белого твердого вещества.
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=0,95 мин; МС Вычисл.:440,5 МС Найдено: 441,3 (M+H).
Описание D342
(R)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D342)
3
4,6-дииод-2-метоксипиримидин (724 мг, 2,0 ммоль) добавляли к раствору (R)-морфолин-2-илметанола (235 мг, 2,0 ммоль) и EtN (0,4 мл в MeOH (15 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа пока все твердые вещества не растворились. Затем реакционный раствор концентрировали и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=2/1~1/1) с получением продукта (680 мг, выход 97%) в виде белого твердого вещества.
D342
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,65 (с, 1H), 4,15~4,01 (м, 3H), 3,91 (с, 3H), 3,77~3,72 (м, 1H), 3,69~3,57 (м, 3H), 3,10~3,06 (м, 1H), 2,95~2,88 (м, 1H), 1,96~1,92 (м, 1H).
Описание D343
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1, D343)
трет-
3
4
2
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 150 мг, 0,45 ммоль), (R)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (180 мг, 0,52 ммоль), CuI (190 мг, 1,0 ммоль) и KPO(212 мг, 1,0 ммоль) в толуоле (10 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (88 мг, 1,0 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc/PE=1/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (165 мг, 64% выход)
D343
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,75~4,62 (м, 2H), 4,28 (шир, 3H), 4,07~4,05 (м, 1H), 4,07 (с, 3H), 3,81~3,66 (м, 4H), 3,25~3,08 (м, 2H), 3,01~2,804 (м, 3H), 2,50 (с, 4H), 1,98~1,92 (м, 2H), 1,79~1,71 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 40% воды (0,1% FA) и 60% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10,0 мин, Rt=7,10 мин; МС Вычисл.:556,2, МС Найдено: 557,8 [M+H]
Описание D344
((R)-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, D344)
2
3
2
4
TFA (1,0 мл) добавляли к раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1, 165 мг, 0,30 ммоль) в DCM (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем реакционный раствор концентрировали. Остаток разбавляли MeOH (5 мл) и затем добавляли KCO (138 мг, 1,0 ммоль) перед перемешиванием смеси при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем смесь разбавляли насыщенным солевым раствором (10 мл) и экстрагировали DCM/MeOH (10/1, 3×20 мл). Полученный раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали до получения неочищенного продукта в виде не совсем белого твердого вещества. (155 мг, 100% выход). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
D344
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,17 мин; МС Вычисл.:456,2, МС Найдено: 457,3 [M+H]
Описание D345
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2, D345)
трет-
3
4
2
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 150 мг, 0,45 ммоль), (R)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (180 мг, 0,52 ммоль), CuI (190 мг, 1,0 ммоль) и KPO(212 мг, 1,0 ммоль) в толуоле (10 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (88 мг, 1,0 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc/PE=1/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (170 мг, 71% выход)
D345
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 40% воды (0,1% FA) и 60% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10,0 мин, Rt=7,12 мин; МС Вычисл.:556,2, МС Найдено: 557,8 [M+H]
Описание D346
((R)-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, D346)
2
3
2
4
TFA (1,0 мл) добавляли к раствору (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((R)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2, 170 мг, 0,31 ммоль) в DCM (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем реакционный раствор концентрировали. Остаток разбавляли MeOH (5 мл) и затем добавляли KCO (138 мг, 1,0 ммоль) перед перемешиванием смеси при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем смесь разбавляли насыщенным солевым раствором (10 мл) и экстрагировали DCM/MeOH (10/1, 3×20 мл). Полученный раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали до получения неочищенного продукта в виде не совсем белого твердого вещества. (140 мг, 100% выход). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
D346
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,18 мин; МС Вычисл.:456,2, МС Найдено: 457,3 [M+H]
Описание D347
(S)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D347)
3
4,6-дииод-2-метоксипиримидин (680 мг, 1,9 ммоль) добавляли к раствору (S)-морфолин-2-ил-метанола (235 мг, 2,0 ммоль) и EtN (0,4 мл0 в MeOH (15 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа пока все твердые вещества не растворились. Затем реакционный раствор концентрировали и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=2/1~2/1) с получением продукта (680 мг, выход 97%) в виде бесцветного масла.
D347
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,65 (с, 1H), 4,15~4,01 (м, 3H), 3,91 (с, 3H), 3,77~3,72 (м, 1H), 3,69~3,57 (м, 3H), 3,10~3,06 (м, 1H), 2,95~2,88 (м, 1H), 1,96~1,92 (м, 1H).
Описание D348
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1, D348)
трет-
3
4
2
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1,150 мг, 0,45 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (173,7 мг, 0,50 ммоль), CuI (171 мг, 0,90 ммоль) и KPO(191 мг, 0,90 ммоль) в толуоле (20 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (80 мг, 0,90 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 95°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc/PE=1/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (110 мг, 42% выход)
D348
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 40% воды (0,1% FA) и 60% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10,0 мин, Rt=7,07 мин; МС Вычисл.:556,2, МС Найдено: 557,8 [M+H]
Описание D349
((S)-4-(6-(6-((3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, D349)
2
3
2
4
TFA (1,2 мл) добавляли к раствору трет-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-2-(гидроксиlметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1, 110 мг, 0,197 ммоль) в DCM (7 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температурет в течение 2 часов и затем реакционный раствор концентрировали. Остаток разбавляли MeOH (10 мл) и затем добавляли KCO (500 мг, 2,0 ммоль) перед перемешиванием смеси при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем, смесь разбавляли водой (80 мл) и экстрагировали DCM (2×50 мл). Полученный раствор промывали насыщенным солевым раствором (2×100 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали с получением неочищенного продукта в виде желтого твердого вещества. (80 мг, 88%выход). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
D349
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин, Rt=1,123 мин; МС Вычисл.:456,2, МС Найдено: 457,3 [M+H]
Описание D350
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2, D350)
трет-
3
4
2
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2,150 мг, 0,45 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (173,7 мг, 0,50 ммоль), CuI (171 мг, 0,90 ммоль) и KPO(191 мг, 0,90 ммоль) в толуоле (20 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (80 мг, 0,90 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 95°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc/PE=1/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (200 мг, 80% выход).
D350
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 40% воды (0,1% FA) и 60% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10,0 мин, Rt=7,10 мин; МС Вычисл.:556,2, МС Найдено: 557,8 [M+H]
Описание D351
((S)-4-(6-(6-((3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, D351)
трет-
2
3
2
4
TFA (1,2 мл) добавляли к раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((S)-2-(гидроксилметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2, 200 мг, 0,34 ммоль) в DCM (8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем реакционный раствор концентрировали. Остаток разбавляли MeOH (15 мл) и затем добавляли KCO (500 мг, 3,4 ммоль) перед перемешиванием смеси при комнатной температуре в течение ночи. Затем смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали DCM (2×80 мл). Полученный раствор промывали насыщенным солевым раствором (2×100 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали до получения неочищенного продукта в виде не совсем белого твердого вещества (130 мг, 83,8% выход). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
D351
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин, Rt=1,136 мин; МС Вычисл.:456,2, МС Найдено: 457,3 [M+H]
Описание D352
4-(Азетидин-1-ил)-6-иод-2-метилпиримидин (D352)
К раствору 4,6-дииод-2-метилпиримидина(1,38 г, 4,0 ммоль) и азетидина(228 мг, 4,0 ммоль) в THF/EtOH (30 мл/30 мл) добавляли DIEA (1,55 г, 12,0 ммоль). Затем, реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем, реакционную смесь концентрировали и очищали при помощи колонки (PE:EtOAc= 8:1-6:1-4:1-3:1~EtOAc) с получением белого твердого вещества (774 г, выход 70,6%).
D352
1
6
J=
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 6,64 (с, 1H), 4,01-3,97 (т, 7,6 Гц, 4H), 2,35-2,30 (м, 2H), 2,28 (с, 3H).
Описание D353
(цис)-
трет-
бутил 4-(1-(6-(азетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D353)
трет-
3
4
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1,80 мг, 0,24 ммоль), 4-(азетидин-1-ил)-6-иод-2-метилпиримидина (99 мг, 0,36 ммоль), CuI (45 мг, 0,24 ммоль) и KPO (100 мг, 0,48 ммоль) в сухом толуоле (2 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (45 мг, 0,24 ммоль). Суспензию дегазировали Ar и нагревали с обратным холодильником при 90°C в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=5:1) с получением продукта (60 мг, выход 52,1%) в виде белого твердого вещества.
D353
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,54 (с, 1H), 4,79-4,64 (м, 2H), 4,18-4,15 (м, 5H), 3,28-3,19 (м, 1H), 2,88-2,85 (м, 2H), 2,58 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,46-2,38 (м, 2H), 1,96-1,77 (м, 2H), 1,51 (с, 9H).
Описание D354
(цис)-
трет-
бутил 4-(1-(6-(азетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D354)
трет-
3
4
2
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2,80 мг, 0,24 ммоль), 4-(азетидин-1-ил)-6-иод-2-метилпиримидина (99 мг, 0,36 ммоль), CuI (45 мг, 0,24 ммоль) и KPO (100 мг, 0,48 ммоль) в сухом толуоле (2 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (45 мг, 0,24 ммоль). Суспензию дегазировали N и нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=4:1-2:1) с получением продукта (72 мг, выход 62%) в виде белого твердого вещества.
D354
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 50% воды (0,1% FA) и 50% CHCN (0,1% FA) до 50% воды (0,1% FA) и 50% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин, Rt=1,45 мин; МС Вычисл.:480,26, МС Найдено: 481,4 (M+H).
Описание D355
(цис)-
трет-
бутил 4-(1-(6-((1R,3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D355)
трет-
3
4
2
3
2
2
4
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (100 мг, 0,300 ммоль) (энантиомер 1) в толуоле (5 мл) добавляли 4-((1R,3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метилпиримидин (130 мг, 0,450 ммоль), CuI (171 мг, 0,900 ммоль), KPO (191 мг, 0,900 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (128 мг, 0,900 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником под защитой N в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в NH·HO (30%, 100 мл) и экстрагировали EtOAc (100 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EA=15:1) с получением неочищенного соединения (160 мг) в виде белого твердого вещества. Неочищенный продукт разделяли с помощью хиральной ВЭЖХ при условии (Chiralpak ID 5 мкм 20*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 15 мл/мин, 205 нм, T =30°C) с получением указанного в заголовке соединения (97 мг, выход 55%) в виде белого твердого вещества.
D355
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,37-7,26 (м, 5H), 4,84-4,49 (м, 2H), 4,48 (с, 2H), 4,44-4,41 (м, 1H), 4,40-4,26 (м, 1H), 3,68-3,61 (м, 1H), 3,30-3,25 (м, 1H), 2,96-2,79 (м, 2H), 2,77 (с, 3H), 2,64-2,62 (м, 2H), 2,57-2,55 (м, 2H), 2,51 (с, 3H), 1,98-1,94 (м, 1H), 1,86-1,80 (м, 1H), 1,53 (с, 9H).
ЖХ-МС: N/A.
Описание D356
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1r,3r)-3-гидроксициклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D356)
трет-
3
2
3
2
2
2
3
К раствору (цис)-бутил 4-(1-(6-((1R,3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 97 мг, 0,17 ммоль) в CHOH (10 мл) добавляли Pd/C (10%, 60 мг). Смесь перемешивали в атмосфере H (50 фунт/кв. дюйм) при 40°C в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. К остатку добавляли CHOH (10 мл) и Pd/C (10%, 50 мг). И смесь перемешивали в атмосфере H (50 фунт/кв. дюйм) при 40°C в течение 2,5 дней. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=50:1) с получением указанного в заголовке соединения (27 мг, выход 32%) в виде желтого твердого вещества.
D356
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,85 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 4,84-4,54 (м, 3H), 4,29-4,11 (м, 1H), 3,67-3,58 (м, 1H), 3,30-3,21 (м, 1H), 2,97-2,78 (м, 2H), 2,76-2,66 (м, 5H), 2,51-2,40 (м, 5H), 2,03-1,73 (м, 3H), 1,52 (м, 9H).
Описание D357
(цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорид (энантиомер 1, D357)
трет-
3
3
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1r,3r)-3-гидроксициклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 27 мг, 0,05 ммоль) в CHOH (1,5 мл) добавляли HCl/CHOH (8 моль/л, 1,0 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (21 мг, выход 97%) в виде желтого твердого вещества.
D357
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=1,41 мин; МС Вычисл.: 395; МС Найдено: 396 [M+H].
Описание D358
(цис)-
трет-
бутил 4-(1-(6-((1R,3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D358)
трет-
3
4
2
3
2
2
4
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 100 мг, 0,300 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-((1R,3R)-3-(бензилокси)циклобутил)-6-хлор-2-метилпиримидин (100 мг, 0,350 ммоль), CuI (171 мг, 0,900 ммоль), KPO (191 мг, 0,900 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (128 мг, 0,900 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 часов в атмосфере N. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NH·HO (30%, 100 мл). EtOAc (100 мл×2) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EA=15:1) с получением неочищенного соединения (166 мг) в виде желтой жидкости. Неочищенный продукт разделяли с помощью хиральной ВЭЖХ при условии (Chiralpak ID 5 мкм 20*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 15 мл/мин, 205 нм, T =30°C) с получением указанного в заголовке соединения с получением указанного в заголовке соединения (70 мг, выход 40%) в виде белого твердого вещества.
D358
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,86 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,37-7,26 (м, 5H), 4,81-4,49 (м, 2H), 4,48 (с, 2H), 4,45-4,01 (м, 1H), 4,30-4,19 (м, 1H), 3,68-3,62 (м, 1H), 3,30-3,24 (м, 1H), 2,91-2,78 (м, 2H), 2,77 (с, 3H), 2,64-2,52 (м, 4H), 2,51 (с, 3H), 1,97-1,94 (м, 1H), 1,83-1,79 (м, 1H), 1,53 (с, 9H).
Описание D359
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1R,3R)-3-гидроксициклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D359)
трет-
3
2
3
2
2
2
3
К раствору (цис)-бутил 4-(1-(6-((1r,3r)-3-(бензилокси)циклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 70 мг, 0,12 ммоль) в CHOH (4,5 мл) добавляли Pd/C (10%, 50 мг). Смесь перемешивали при H (50 фунт/кв. дюйм) при 40°C в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. К остатку добавляли CHOH (3 мл) и Pd/C (10%, 40 мг). И смесь перемешивали в атмосфере H (50 фунт/кв. дюйм) при 40°C в течение ночи. Затем смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (21 мг, выход 35%) в виде белого твердого вещества.
D359
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,86 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 4,86-4,57 (м, 3H), 4,29-4,17 (м, 1H), 3,68-3,59 (м, 1H), 3,27-3,24 (м, 1H), 2,97-2,83 (м, 2H), 2,77 (с, 3H), 2,74-2,66 (м, 2H), 2,51-2,40 (м, 5H), 2,03-1,79 (м, 3H), 1,53 (м, 9H).
Описание D360
(цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорид (энантиомер 2, D360)
трет-
3
3
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(6-((1r,3r)-3-гидроксициклобутил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 37 мг, 0,075 ммоль) в CHOH (1,5 мл) добавляли HCl/CHOH (8 моль/л, 1,3 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (32 мг, выход 99%) в виде желтого твердого вещества.
D360
3
ЖХМС [подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин]: Rt=1,817 мин; МС Вычисл.: 395; МС Найдено: 397.
Описание D361
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D361)
трет-
3
4
2
2
2
2
4
2
2
К суспензии (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1,100 мг, 0,30 ммоль), 4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (116 мг, 0,36 ммоль), CuI (57 мг, 0,30 ммоль) и KPO (134 мг, 0,63 ммоль) в сухом толуоле (5 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (53 мг, 0,60 ммоль). Суспензию дегазировали N и перемешивали при 80°C в течение 2 ч. Добавляли CHCl (30 мл) и полученную смесь промывали насыщенным солевым раствором (2×30 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (CHCl) с получением продукта (135 мг, выход 85,5%) в виде белого твердого вещества.
D361
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин, Rt=2,11 мин; МС Вычисл.:526,3 МС Найдено: 527,2 (M+H).
Описание D362
4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1, D362)
трет-
2
2
2
2
3
2
4
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1,132 мг, 0,25 ммоль) в CHCl(10 мл) добавляли TFA (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель и большую часть TFA удаляли в вакууме и остаток разбавляли CHCl(30 мл). Полученный раствор промывали насыщенным NaHCO (5 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении с получением продукта (90 мг, выход 84,2%) в виде белого твердого вещества.
D362
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин, Rt=1,07 мин; МС Вычисл.:426,2 МС Найдено: 427,2 (M+H).
Описание D363
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D363)
трет-
3
4
2
2
2
2
4
2
2
К суспензии (цис) бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2,100 мг, 0,30 ммоль), 4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (116 мг, 0,36 ммоль), CuI (57 мг, 0,30 ммоль) и KPO (134 мг, 0,63 ммоль) в сухом толуоле (5 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (53 мг, 0,60 ммоль). Суспензию дегазировали N и перемешивали при 80°C в течение 2 ч. Добавляли CHCl (30 мл) и полученную смесь промывали насыщенным солевым раствором (2×30 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (CHCl) с получением продукта (120 мг, выход 76,0%) в виде белого твердого вещества.
D363
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,84 мин; МС Вычисл.:526,3 МС Найдено: 527,3 (M+H).
Описание D364
4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2, D364)
трет-
2
2
2
2
3
2
4
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2,115 мг, 0,22 ммоль) в CHCl(10 мл) добавляли TFA (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель и большую часть TFA удаляли в вакууме и остаток разбавляли CHCl(30 мл). Полученный раствор промывали насыщенным NaHCO (5 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении с получением продукта (80 мг, выход 83,7%) в виде белого твердого вещества.
D364
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,18 мин; МС Вычисл.:426,2 МС Найдено: 427,3 (M+H).
Описание D365
4-иод-2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин (D365)
2
4
2
2
К раствору N-метилпиперазина (42 мг, 0,41 ммоль) и DIEA (161 мг, 1,24 ммоль) в EtOH (5 мл) добавляли 4,6-дииод-2-метоксипиримидин (150 мг, 0,41 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме и остаток разбавляли EtOAc (25 мл). Полученный раствор промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали CHCl/MeOH=20:1) с получением продукта (132 мг, выход 95,3%) в виде бледно-желтого масла.
D365
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,64 (с, 1H), 3,90 (с, 3H), 3,62 (с, 4H), 2,45 (т, =5,2 Гц, 4H), 2,33 (с, 3H).
Описание D366
(цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D366)
трет-
3
4
2
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 150 мг, 0,45 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидина (174 мг, 0,52 ммоль), CuI (190 мг, 1,0 ммоль) и KPO(212 мг, 1,0 ммоль) в толуоле (10 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (53 мг, 0,60 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (MeOH:DCM=1:15, 15 г силикагеля) с получением целевого продукта (210 мг, 87% выход) в виде не совсем белого твердого вещества. Твердое вещество промывали гексаном с получением чистого продукта в виде не совсем белого твердого вещества. (175 мг, 72% выход)
D366
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 8,76 (шир, 1H), 8,16 (шир, 1H), 7,60 (шир, 1H), 6,91 (шир, 1H), 4,82~4,61 (м, 1H), 4,49~4,45 (м, 1H), 4,17~4,14 9M, 1H), 4,04 (с, 3H), 3,74 (шир, 4H), 3,38 (м, 1H), 2,94 (шир, 2H), 2,60 (шир, 4H), 2,54 (с, 3H), 2,36 (с, 3H), 1,95~1,92 (м, 1H), 1,75~1,72 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10,0 мин, Rt=6,73 мин; МС Вычисл.:539,6, МС Найдено: 540,6 [M+H]
Описание D367
6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол соль TFA (энантиомер 1, D367)
трет-
TFA (1,0 мл) добавляли к раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 175 мг, 0,33 ммоль) в DCM (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем реакционный раствор концентрировали с получением неочищенного продукта в виде бесцветного масла (220 мг, 100% выход). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
D367
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,6 мин, Rt=0,96 мин; МС Вычисл.:439,2, МС Найдено: 440,4 [M+H]
Описание D368
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D368)
трет-
3
4
2
Смесь бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2,150 мг, 0,45 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидина (174 мг, 0,52 ммоль), CuI (190 мг, 1,0 ммоль) и KPO(212 мг, 1,0 ммоль) в толуоле (10 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (53 мг, 0,60 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (MeOH:DCM=1:10, 15 г силикагеля) с получением целевого продукта (280 мг, 100% выход) в виде светло-зеленого твердого вещества.
D368
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин, Rt=1,132 мин; МС Вычисл.:539,6, МС Найдено: 540,6 [M+H]
Описание D369
6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2, D369)
трет-
3
2
4
HCl/EtOAc (6,2M/L, 7,0 мл) добавляли к раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 280 мг, 0,52 ммоль) в EtOAc (8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем, реакционный раствор концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным NaHCO (100 мл). экстрагировали DCM (2×100 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором.сушили над NaSO и концентрировали с получением неочищенного продукта в виде зеленого масла (280 мг, 100% выход). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
D369
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,6 мин, Rt=1,009 мин; МС Вычисл.:439,2, МС Найдено: 440,4 [M+H]
Описание D370
6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1, D370)
3
2
4
К раствору 6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол гидрохлорида (энантиомер 1,2,0 г, 7,0 ммоль) в MeOH (150 мл) добавляли оксетан-3-он (2,1 г, 30 ммоль) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Затем к реакционной смеси добавляли NaBHCN (3,3 г, 52 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и смесь экстрагировали DCM (2×150 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором (2×200 мл) и сушили над безводным NaSO. Сухой раствор концентрировали и остаток очищали при помощи хроматографии (EtOAc/MeOH=12/1) до целевого продукта в виде белого твердого вещества. (1,3 мг, 100 выход).
D370
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ7,98 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 4,94~4,73 (м, 1H), 4,73~4,63 (м, 4H), 3,67~3,63 (м, 1H), 3,25~3,21 (м, 1H), 3,14~3,05 (м, 1H), 2,83 (д, =9,6 Гц, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,10~1,80 (м, 4H).
Описание D371
6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2, D371)
3
2
4
К раствору 6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол гидрохлорида (энантиомер 2,1,02 г, 3,6 ммоль) в DCM/MeOH (1/1, 20 мл) добавляли оксетан-3-он (1,1 г, 15,3 ммоль) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Затем, к реакционной смеси добавляли NaBHCN (1,1 г, 17,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и смесь экстрагировали DCM (2×20 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором (2×20 мл) и сушили над безводным NaSO. Сухой раствор концентрировали и остаток очищали при помощи хроматографии (MeOH/DCM=1/20) до целевого продукта в виде белого твердого вещества. (720 мг, 69% выход).
D371
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 10,09 (шир, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 4,94~4,73 (м, 1H), 4,73~4,63 (м, 4H), 3,67~3,63 (м, 1H), 3,25~3,21 (м, 1H), 3,14~3,05 (м, 1H), 2,83 (д, =9,6 Гц, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,10~1,80 (м, 4H).
Описание D372
(R)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D372)
3
4,6-дииод-2-метоксипиримидин(362 мг,1,0 ммоль) добавляли к раствору (R)-морфолин-2-илметанола 169 мг, 1,1 ммоль) и EtN (404 мг, 4,0 ммоль) в MeOH (15 мл) при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционный раствор концентрировали и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=2/1 ~1/1) с получением продукта (320 мг, выход 91%) в виде светло-желтого масла.
D372
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,65 (с, 1H), 4,15~4,01 (м, 3H), 3,91 (с, 3H), 3,77~3,72 (м, 1H), 3,69~3,57 (м, 3H), 3,10~3,06 (м, 1H), 2,95~2,88 (м, 1H), 2,0~1,96 (м, 1H)
Описание D373
(S)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D373)
3
4,6-дииод-2-метоксипиримидин (362 мг,1,0 ммоль) добавляли к раствору (S)-морфолин-2-илметанола 169 мг, 1,1 ммоль) и EtN (404 мг, 4,0 ммоль) в MeOH (15 мл) при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционный раствор концентрировали и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=2/1 ~1/1) с получением продукта (330 мг, выход 94%) в виде бесцветного масла.
D373
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,65 (с, 1H), 4,15~4,01 (м, 3H), 3,91 (с, 3H), 3,77~3,72 (м, 1H), 3,69~3,57 (м, 3H), 3,10~3,06 (м, 1H), 2,92~2,88 (м, 1H), 2,36 (с, 1H)
Описание D374
(R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (D374)
2
4
К раствору 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (600 мг, 1,66 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли (R)-2-метилморфолин (201 мг, 1,99 ммоль) и DIPEA (429 мг, 3,32 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировалидосуха. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:10~1:5) с получением продукта (R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (520 мг, 93,6% выход) в виде желтого масла.
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt =1,55 мин; МС Вычисл.: 335; МС Найдено: 336 [M+H].
Описание D375
(S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (D375)
2
4
К раствору 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (600 мг, 1,66 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли (S)-2-метилморфолин (201 мг, 1,99 ммоль) и DIPEA (429 мг, 3,32 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировалидосуха. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:10~1:5) с получением продукта (S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (500 мг, 89,9% выход) в виде желтого масла.
D375
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt =1,69 мин; МС Вычисл.: 335; МС Найдено: 336 [M+H].
Описание D376
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-((S)-2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1, D376)
трет-
3
4
2
2
4
К раствору (S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (181 мг, 0,54 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1) (150 мг, 0,45 ммоль), KPO (191 мг, 0,90 ммоль), CuI (86 мг, 0,45 ммоль) и N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (79 мг, 0,90 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировалидосуха. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:10~1:5) с получением продукта (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-((S)-2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 1) (180 мг, 74,1% выход) в виде белого твердого вещества.
D376
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=2,09 мин; МС Вычисл.: 540; МС Найдено: 541 [M+H].
Описание D377
(S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 1, D377)
трет-
3
2
4
Раствор (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-((S)-2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 1, 180 мг, 0,33 ммоль) в 4 моль/л HCl/EtOAc (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в насыщ. NaHCO (100 мл) и затем смесь экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта (S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 1) (140 мг, выход=95,4%) в виде светло-желтого твердого вещества.
D377
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=0,97 мин; МС Вычисл.: 440; МС Найдено: 441 [M+H].
Описание D378
(цис)-
трет-
бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-((S)-2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2, D378)
трет-
трет-
3
4
2
2
4
К раствору (S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (181 мг, 0,54 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2) (150 мг, 0,45 ммоль), KPO (191 мг, 0,90 ммоль), CuI (86 мг, 0,45 ммоль) и N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (79 мг, 0,90 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировалидосуха. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:10~1:5) с получением продукта (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-((S)-2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (диастереоизомер 2) (140 мг, 57,6% выход) в виде белого твердого вещества.
D378
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=2,09 мин; МС Вычисл.: 540; МС Найдено: 541 [M+H].
Описание D379
(S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 2, D379)
трет-
3
2
4
Раствор (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-((S)-2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (диастереоизомер 2) (140 мг, 0,26 ммоль) в 4 моль/л HCl/EtOAc (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в насыщ. NaHCO (100 мл) и затем смесь экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта (S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 2) (95 мг, выход=83,3%) в виде белого твердого вещества.
D379
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин), Rt=1,36 мин; МС Вычисл.: 440; МС Найдено: 441 [M+H].
Описание D380
(2S,6R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолин (D380)
3
4,6-дииод-2-метоксипиримидин(680 мг, 1,88 ммоль) добавляли к раствору (2S,6R)-2,6-диметилморфолина (230 мг, 2,0 ммоль) и EtN (0,6 мл) в MeOH (10 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов пока все твердые вещества не растворились. Затем реакционный раствор концентрировали и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=3/1) с получением продукта (570 мг, выход 87%) в виде белого твердого вещества.
D380
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,62 (с, 1H), 4,09 (шир, 2H), 3,91 (с, 3H), 3,65~3,57 (м, 2H), 2,59 (т, =12,0 Гц, 2H), 1,24 (д, =6,4 Гц, 6H).
Описание D381
(2S,6S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолин (D381)
3
4,6-дииод-2-метоксипиримидин(723,8 мг, 2,0 ммоль) добавляли к раствору (2S,6S)-2,6-диметилморфолина (230 мг, 2,0 ммоль) и EtN (607 мг) в MeOH (10 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционный раствор концентрировали и остаток очищалипри помощи колоночной хроматографии на силикагеле (PE/EtOAc=1:0~3:1) с получением продукта (510 мг, выход 72%) в виде светло-желтой жидкости.
D381
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,60 (с, 1H), 4,09 (шир, 2H), 3,90 (с, 3H), 3,55~3,25 (м, 2H), 2,59~2,50 (м, 2H), 1,22 (д, =6,4 Гц, 6H).
Описание D382
(R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолин (D382)
2
4
Раствор 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (500 мг, 1,38 ммоль), (R)-3-метилморфолина (167,5 мг, 1,65 ммоль), DIEA (534,1 мг, 4,14 ммоль) в DMF(30 мл) нагревали до 60°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду, экстрагировали EtOAc (2×120 мл), промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=1:0~6:1) с получением указанного в заголовке соединения (270 мг, 58% выход, Lot#:FP111303-011A1) в виде бесцветного масла.
D382
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,59 (с, 1H), 4,26 (с, 1H), 3,99 (M, 1H), 3,95~3,90 (м, 5H), 3,78~3,66(м, 2H), 3,56~3,50 (м, 1H), 3,26~3,21 (м, 1H), 1,29 (S, 3H).
Описание D383
(S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолин (D383)
2
4
Раствор 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (500 мг, 1,38 ммоль), (R)-3-метилморфолина (167,5 мг, 1,65 ммоль), DIEA (534,1 мг, 4,14 ммоль) в DMF(30 мл) нагревали до 60°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду, экстрагировали EtOAc (2×120 мл), промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=1:0~6:1) с получением указанного в заголовке соединения (300 мг, 65% выход) в виде бесцветного масла.
D383
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,59 (с, 1H), 4,26 (с, 1H), 3,99 (M, 1H), 3,95~3,90 (м, 5H), 3,78~3,66(м, 2H), 3,56~3,50 (м, 1H), 3,26~3,21 (м, 1H), 1,29 (S, 3H).
Описание D384
6-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октан (D384)
3
Смесь 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (680 мг, 1,88 ммоль) и 2-окса-6-азаспиро[3.4]октана (377 мг, 2,0 ммоль) в EtN (0,6 мл) и MeOH (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE/EtOAc=2/1~2/3) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества (570 мг, 87% выход).
D384
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,45 (с, 1H), 4,70~4,61 (м, 4H), 3,91 (с, 3H), 3,82 (шир, 1H), 3,59 (шир, 2H), 3,40 (шир, 1H), 2,30 (шир, 2H).
Описание D385
(R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D385)
2
4
К раствору (R)-морфолин-2-илметанола (203 мг, 1,73 ммоль) и DIEA (670 мг, 5,19 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли 4,6-дииод-2-метилпиримидин (600 мг, 1,73 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировалидосуха. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:5~1:1) с получением продукта (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил) морфолин-2-ил)метанол (450 мг, 77,6% выход) в виде белого твердого вещества.
D385
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,5 мин, Rt=1,02 мин; МС Вычисл.:335,1 МС Найдено: 335,9 (M+H).
Описание D386
(S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D386)
К раствору (S)-морфолин-2-илметанола (300 мг, 2,56 ммоль) и DIEA (992 мг, 7,68 ммоль) в EtOH (10 мл) и THF (20 мл) добавляли 4,6-дииод-2-метилпиримидин (885 мг, 2,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=4:1) с получением продукта (420 мг, выход 48,8%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
D386
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=0,25 мин; МС Вычисл.:335,1 МС Найдено: 336,0 (M+H).
Описание D387
(2R)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолин (D387)
2
3
2
4
К раствору (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (639 мг, 1,90 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли DHP (639 мг, 7,60 ммоль) и TsOH (327 мг, 1,90 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 55°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли DCM (100 мл). Органический слой промывали насыщ. NaCO (40 мл) и насыщенным солевым раствором (40 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колонки (PE:EA=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (723 мг, выход 91%) в виде светло-желтого масла.
D387
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,79 (с, 1H), 4,63-4,01 (м, 1H), 4,22-4,01 (м, 3H), 3,91-9,79 (м, 2H), 3,65-3,51 (м, 4H), 3,11-2,78 (м, 2H), 2,46 (с, 3H), 1,91-1,65 (м, 3H), 1,57-1,48 (м, 3H).
Описание D388
трет-
бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-((2R)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D388)
трет-
3
4
3
2
2
4
3
3
.
К раствору бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (100 мг, 0,320 ммоль) в толуоле (7 мл) добавляли (2R)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолин (160 мг, 0,380 ммоль), KPO (202 мг, 0,950 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (135 мг, 0,950 ммоль) и CuI (180 мг, 0,950 ммоль). Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение 3 часов. ЖХМС показала, что реакция завершена. К смеси добавляли NHHO (30%, 40 мл) и экстрагировали этилацетатом (40 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (40 мл) и насыщенным солевым раствором (40 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 40% воды (0,1% TFA) и 60% CHCN до 10% воды (0,1% TFA) и 90% CHCN за 18 мин, Скорость потока: 20 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (118 мг, выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl) показал, что 55% THP-группы целевого соединения было удалено.
Описание D389
(R)-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорид (D389)
трет-
3
3
К раствору бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-((2R)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (118 мг, 0,194 ммоль) в CHOH (2 мл) добавляли HCl/CHOH (4 M, 4 мл) и перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. ТСХ показала, что реакция завершена. Реакционную смесь концентрировали до указанного в заголовке продукта (119 мг, выход >100%) в виде желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
D395
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 2,5 мин, Rt=1,41 мин; МС Вычисл.: 422; МС Найдено: 423 (M+H).
Описание D390
(2S)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолин (D390)
2
4
К раствору (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (760 мг, 2,30 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли DHP (774 мг, 9,20 ммоль) и TsOH (396 мг, 2,30 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Смесь промывали водой (20 мл) и экстрагировали DCM (20 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колонки (PE:EA=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (750 мг, выход 78%) в виде светло-желтого масла.
D390
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,79 (с, 1H), 4,63-4,61 (м, 1H), 4,15-4,00 (м, 3H), 3,901-3,77 (м, 2H), 3,73-3,51 (м, 4H), 3,11-2,78 (м, 2H), 2,46 (с, 3H), 1,88-1,48 (м, 6H).
Описание D391
трет-
бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-((2S)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D391)
трет-
3
4
3
2
2
4
3
3
.
К раствору бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (100 мг, 0,320 ммоль) в толуоле (4 мл) добавляли (2S)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолин (160 мг, 0,380 ммоль), CuI (180 мг, 0,950 ммоль), KPO (202 мг, 0,950 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (135 мг, 0,950 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 115°C в течение 3 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли NHHO (30%, 10 мл). Этилацетат (10 мл×2) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 40% воды (0,1% TFA) и 60% CHCN до 10% воды (0,1% TFA) и 90% CHCN в течение 18 мин, Скорость потока: 20 мл/мин) с получением неочищенного указанного в заголовке соединения (120 мг) в виде светло-желтого твердого вещества и его использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
Описание D392
5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол (D392)
3
4
3
2
Смесь 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (130 мг, 0,480 ммоль),4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (105 мг, 0,270 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (136 мг, 0,960 ммоль), CuI (182 мг, 0,960 ммоль) и KPO (204 мг, 0,960 ммоль) в толуоле (8 мл) перемешивали при 115°C в течение 13 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали при помощи колонки C18 с использованием CHCN/HO (10%-80%) с получением целевого продукта (100 мг, выход 40%) в виде белого твердого вещества.
D392
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин, чистота составляет > 95%, Rt=2,804 мин; МС Вычисл.: 518, МС Найдено: 519 (M+H).
Описание D393
трет-
бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D393)
трет-
3
4
К суспензии бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (103 мг, 0,32 ммоль) и 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (123 мг, 0,32 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (91 мг, 0,64 ммоль), CuI (61 мг, 0,32 ммоль) и KPO (136 мг, 0,64 ммоль). Смесь перемешивали при 115°C в атмосфере азота в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (PE:EtOAc=2:1, дважды) и колонки C18 (5-70% ACN в воде) с получением указанного в заголовке соединения (70 мг, выход 38%) в виде серого твердого вещества.
D393
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,59 (с, 1H), 4,75-4,68 (м, 2H), 4,36-4,28 (м, 4H), 4,15-4,04 (м, 2H), 3,93-3,85 (м, 1H), 3,59-3,52 (м, 1H), 3,01-2,84 (м, 3H), 2,61 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 1,90-1,86 (м, 3H), 1,79-1,72 (м, 2H), 1,62-1,54 (м, 5H), 1,50 (с, 9H).
Описание D394
(S)-
трет-
бутил 4-(1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D394)
трет-
3
4
2
2
4
3
3
К раствору бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (80 мг, 0,25 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (102 мг, 0,305 ммоль), KPO (162 мг, 0,762 ммоль) и CuI (145 мг, 0,762 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (108 мг, 0,762 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 2 часов. Затем реакционную смесь охлаждали и выливали в разбавленный аммиак (10%, 30 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 55% воды (0,1% TFA) и 45% CHCN до 25% воды (0,1% TFA) и 75% CHCN) с получением указанного в заголовке соединения (50 мг, выход 38%) в виде бесцветного масла.
D394
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,74 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,35-4,25 (м, 3H), 4,16-4,02 (м, 2H), 3,81-3,65 (м, 4H), 3,20-3,05 (м, 1H), 3,01-2,83 (м, 4H), 2,61 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,07-2,01 (м, 1H), 1,93-1,85 (м, 2H), 1,82-1,70 (м, 2H), 1,51 (с, 9H).
Описание D395
(R)-
трет-
бутил 4-(1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D395)
трет-
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (50 мг, 0,16 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли (2R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолин (69 мг, 0,16 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль), KPO (102 мг, 0,48 ммоль) и CuI (91 мг, 0,48 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение ночи. К реакционной смеси добавляли NH HO (30%, 20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл×2) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 13% воды (0,1% TFA) и 87% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 20 мин, Скорость потока: 15 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (55 мг, выход 56%) в виде белого твердого вещества.
D395
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,71 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,36-4,23 (м, 3H), 4,11-4,04 (м, 4H), 3,80-3,66 (м, 4H), 3,19-2,82 (м, 4H), 2,48 (с, 3H), 1,90-1,77 (м, 3H), 1,67-1,58 (м, 3H), 1,50 (с, 9H).
Описание D396
(R)-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорид (D396)
трет-
К раствору (R)-бутил 4-(1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (55 мг, 0,09 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 6 мл) и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (42 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества.
D396
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,37 (с, 1H), 8,35 (с, 1H), 7,72 (с, 1H), 7,08 (с, 1H), 4,36-4,26 (м, 5H), 4,14-4,10 (м, 1H), 3,80-3,75 (м, 5H), 3,59-3,56 (м, 3H), 3,44-3,35 (м, 1H), 3,26-3,21 (м, 2H), 2,54 (с, 3H), 2,16-2,08 (м, 4H).
Описание D397
(S)-
трет-
бутил 4-(1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D397)
трет-
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (50 мг, 0,16 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли (2S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолин (69 мг, 0,16 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль), KPO (102 мг, 0,48 ммоль) и CuI (91 мг, 0,48 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение ночи. К реакционной смеси добавляли NH HO (30%, 20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл×2) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 13% воды (0,1% TFA) и 87% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 20 мин, Скорость потока: 15 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (47 мг, выход 48%) в виде белого твердого вещества.
D397
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,71 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,34-4,22 (м, 3H), 4,11-4,03 (м, 4H), 3,80-3,66 (м, 4H), 3,18-2,83 (м, 4H), 2,48 (с, 3H), 1,90-1,76 (м, 3H), 1,67-1,62 (м, 3H), 1,50 (с, 9H).
Описание D398
(S)-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорид (D398)
трет-
К раствору (S)-бутил 4-(1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (47 мг, 0,08 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 6 мл) и перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (40 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества.
D398
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,45 (с, 1H), 8,31 (с, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,05 (с, 1H), 4,38-4,26 (м, 5H), 4,12-4,08 (м, 1H), 3,75-3,68 (м, 5H), 3,59-3,53 (м, 3H), 3,39-3,31 (м, 1H), 3,26-3,11 (м, 2H), 2,53 (с, 3H), 2,18-2,00 (м, 4H).
Описание D399
трет-
бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D399)
трет-
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору 4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолина (100 мг, 0,328 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (103 мг, 0,328 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (140 мг, 0,984 ммоль), KPO (208 мг, 0,984 ммоль) и CuI (187 мг, 0,984 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение ночи. К реакционной смеси добавляли NH HO (30%, 20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл×2) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 40% воды (0,1% TFA) и 60% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 12 мин, Скорость потока: 15 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (112 мг, выход 70%) в виде белого твердого вещества.
D399
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,69 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,00 (с, 1H), 4,34-4,30 (м, 2H), 3,83-3,81 (м, 4H), 3,77-3,75 (м, 4H), 3,02-2,84 (м, 3H), 2,69 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 1,90-1,79 (м, 2H), 1,75-1,65 (м, 2H), 1,51 (с, 9H).
Описание D400
4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (D400)
трет-
К раствору бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (112 мг, 0,228 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (91 мг) в виде белого твердого вещества, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Описание D401
трет-
бутил 4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D401)
трет-
3
4
3
2
2
4
3
3
К раствору 4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (90 мг, 0,28 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (89 мг, 0,28 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (120 мг, 0,84 ммоль), KPO (179 мг, 0,84 ммоль) и CuI (160 мг, 0,84 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение ночи. К реакционной смеси добавляли NH HO (30%, 20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (20 мл×2) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 40% воды (0,1% TFA) и 60% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 12 мин, Скорость потока: 15 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (56 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества.
D401
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,71 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,35-4,22 (м, 2H), 4,11 (с, 3H), 3,82-3,77 (м, 4H), 3,75-3,69 (м, 4H), 2,99-2,82 (м, 3H), 2,48 (с, 3H), 1,93-1,87 (м, 2H), 1,75-1,65 (м, 2H), 1,51 (с, 9H).
Описание D402
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (D402)
трет-
К раствору бутил 4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (56 мг, 0,11 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл) и смесь перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (52 мг) в виде белого твердого вещества, который непосредственно использовали на следующей стадии.
D402
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,54 (с, 1H), 8,27 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,02 (с, 1H), 4,21 (с, 3H), 3,83-3,77 (м, 4H), 3,69-3,3,65 (м, 4H), 3,57-3,54 (м, 3H), 3,28-3,22 (м, 2H), 2,53 (с, 3H), 2,16-2,00 (м, 4H).
Описание D403
(R)-
трет-
бутил 4-(1-(2-метокси-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D403)
трет-
3
4
2
2
4
4
3
3
4
3
3
К суспензии (R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (94 мг, 0,28 ммоль), бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (97 мг, 0,31 ммоль), CuI (54 мг, 0,28 ммоль), KPO(119 мг, 0,562 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (80 мг, 0,56 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 4 часов. Полученную смесь выливали в разбавленный аммиак (10%, 60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 35% воды (0,1% NHHCO) и 65% CHCN до 5% воды (0,1% NHHCO) и 95% CHCN за 15 мин) с получением указанного в заголовке соединения (50 мг, выход 38%) в виде бесцветного масла.
D403
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,72 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,41-4,19 (м, 4H), 4,11 (с, 3H), 4,04-3,96 (м, 1H), 3,72-3,60 (м, 2H), 3,18-2,71 (м, 5H), 2,48 (с, 3H), 1,92-1,66 (м, 4H), 1,50 (с, 9H), 1,26 (д, 6,0 Гц, 3H).
Описание D404
(R)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолин гидрохлорид (D404)
трет-
К раствору (R)-бутил 4-(1-(2-метокси-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (50 мг, 0,096 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Полученную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, неочищенный) в виде белого твердого вещества.
D404
3
+
ЖХМС: 5-95% CHCN за 3 мин; Rt=1,79 мин; МС Вычисл.: 422, МС Найдено: 423 [M+H].
Описание D405
(S)-
трет-
бутил 4-(1-(2-метокси-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат
(D405)
трет-
3
4
2
2
4
К суспензии (S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (94 мг, 0,28 ммоль), бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (97 мг, 0,31 ммоль), CuI (54 мг, 0,28 ммоль), KPO(119 мг, 0,562 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (80 мг, 0,56 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 4 часов. Полученную смесь выливали в разбавленный аммиак (10%, 60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=3:1) с получением указанного в заголовке соединения (50 мг, выход 38%) в виде бесцветного масла.
D405
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,72 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,39-4,15 (м, 4H), 4,11 (с, 3H), 4,04-3,96 (м, 1H), 3,71-3,60 (м, 2H), 3,15-2,69 (м, 5H), 2,48 (с, 3H), 1,92-1,64 (м, 4H), 1,50 (с, 9H), 1,26 (д, =6,3 Гц, 3H).
Описание D406
(S)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолин гидрохлорид (D406)
трет-
К раствору (S)-бутил 4-(1-(2-метокси-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (50 мг, 0,096 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Полученную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (60 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
D406
3
+
ЖХМС: 5-95% CHCN за 3 мин; Rt=1,80 мин; МС Вычисл.: 422, МС Найдено: 423 [M+H].
Описание D407
(R)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (D407)
2
4
К суспензии 4,6-дииод-2-метилпиримидина (150 мг, 0,434 ммоль) в i-PrOH (2 мл) добавляли (R)-2-метилморфолин (53 мг, 0,52 ммоль) и TEA (131 мг, 1,30 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 65°C в течение 2 часов. Полученную смесь выливали в воду (60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=7:1) с получением указанного в заголовке соединения (110 мг, выход 80%) в виде бесцветного масла.
D407
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,77 (с, 1H), 4,24-3,96 (м, 3H), 3,67-3,54 (м, 2H), 3,07-2,95 (м, 1H), 2,71-2,60 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 1,25 (д, =6,0 Гц, 3H).
Описание D408
(R)-
трет-
бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D408)
трет-
3
4
2
2
4
К суспензии бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (110 мг, 0,345 ммоль), (R)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (119 мг, 0,379 ммоль), CuI (66 мг, 0,35 ммоль), KPO(146 мг, 0,690 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (98 мг, 0,69 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 4 часов. Полученную смесь выливали в разбавленный аммиак (10%, 60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, выход 57%) в виде бесцветного масла.
D408
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,93 (с, 1H), 4,41-4,23 (м, 4H), 4,06-3,98 (м, 1H), 3,76-3,60 (м, 2H), 3,13-2,81 (м, 4H), 2,79-2,67 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 1,94-1,66 (м, 4H), 1,51 (с, 9H), 1,28 (д, =6,3 Гц, 3H).
Описание D409
(R)-2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (D409)
трет-
К раствору (R)-бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (100 мг, 0,198 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Полученную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (140 мг, выход 100%) в виде желтого масла.
D409
3
+
ЖХМС: 5-95% CHCN за 3 мин; Rt=1,68 мин; МС Вычисл.: 406, МС Найдено: 407 [M+H].
Описание D410
(S)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (D410)
2
4
К суспензии 4,6-дииод-2-метилпиримидина (150 мг, 0,434 ммоль) в i-PrOH (2 мл) добавляли (S)-2-метилморфолин (53 мг, 0,52 ммоль) и TEA (131 мг, 1,30 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 65°C в течение 4 часов. Полученную смесь выливали в воду (60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=7:1)) с получением указанного в заголовке соединения (110 мг, выход 80%) в виде бесцветного масла.
D410
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,77 (с, 1H), 4,23-3,96 (м, 3H), 3,65-3,54 (м, 2H), 3,07-2,94 (м, 1H), 2,71-2,60 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 1,26-1,24 (м, 3H).
Описание D411
(S)-
трет-
бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D411)
трет-
3
4
2
2
4
К суспензии бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (110 мг, 0,345 ммоль), (S)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (119 мг, 0,379 ммоль), CuI (66 мг, 0,35 ммоль), KPO(146 мг, 0,690 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (98 мг, 0,69 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 4 часов. Полученную смесь выливали в разбавленный аммиак (10%, 60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (78 мг, выход 45%) в виде бесцветного масла.
D411
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,93 (с, 1H), 4,40-4,24 (м, 4H), 4,05-3,96 (м, 1H), 3,73-3,60 (м, 2H), 3,13-2,82 (м, 4H), 2,76-2,68 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 1,93-1,68 (м, 4H), 1,51 (с, 9H), 1,29-1,27 (м, 3H).
Описание D412
(S)-2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (D412)
трет-
К раствору (S)-бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (78 мг, 0,15 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 5 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Полученную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (120 мг, выход >100%) в виде желтого масла.
D412
3
+
ЖХМС: 5-95% CHCN за 3 мин; Rt=1,63 мин; МС Вычисл.: 406, МС Найдено: 407 [M+H].
Описание D413
4-(1-(2-этил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (изомер 1, D413) и трет-бутил 4-(2-(2-этил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-2H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (изомер 2)
трет-
2
3
2
4
К раствору бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (100 мг, 0,317 ммоль) и 4-(6-хлор-2-этилпиримидин-4-ил)морфолина (108 мг, 0,47 ммоль) в NMP (6 мл) добавляли CsCO (207 мг, 0,634 ммоль). Полученную смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду (200 мл). EtOAc (50 мл×4) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (EtOAc:DCM=10:1) с получением изомера 1 (D431, 27 мг, выход 17%) и изомера 2(12 мг, выход 8%) оба в виде белого твердого вещества.
D413 (изомер 1)
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,40-4,25 (м, 2H), 3,83-3,80 (м, 4H), 3,74-3,71 (м, 4H), 3,02-2,86 (м, 5H), 2,48 (с, 3H), 1,90-1,69 (м, 4H), 1,51 (с, 9H), 1,48-1,43 (м, 3H).
изомер 2
1
3
J
: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,99 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,20 (с, 1H), 4,37-4,21 (м, 2H), 3,80-3,78 (м, 8H), 2,89-2,78 (м, 5H), 2,42 (с, 3H), 1,89-1,64 (м, 4H), 1,50 (с, 9H), 1,36 (т, =7,5 Гц, 3H).
Описание D414
4-(2-этил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (D414)
трет-
К раствору бутил 4-(1-(2-этил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (27 мг, 0,05 ммоль) в диоксане (6 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 6 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (30 мг) в виде белого твердого вещества, который непосредственно использовали на следующей стадии.
Описание D415
(S)-(4-(6-хлор-2-этилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D415)
К раствору 4,6-дихлор-2-этилпиримидина (84 мг, 0,48 ммоль) в i-PrOH (5 мл) добавляли (S)-морфолин-2-илметанол гидрохлорид (120 мг, 0,784 ммоль) и TEA (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при 90°C в течение 1 часа. Смесь концентрировали и очищали при помощи колонки (PE:EtOAc от 5:1 до 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (130 мг, выход >100%) в виде бесцветного масла.
D415
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,34 (с, 1H), 4,22-4,03 (м, 3H), 3,80-3,60 (м, 4H), 3,13-3,03 (м, 1H), 2,96-2,88 (м, 1H), 2,78-2,71 (м, 2H), 1,97-1,93 (м, 1H), 1,33-1,26 (м, 3H).
Описание D416
(S)-
трет-
бутил 4-(1-(2-этил-6-(2-(гидроксиметил)морфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D416)
трет-
2
3
К раствору бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (110 мг, 0,349 ммоль) и (S)-(4-(6-хлор-2-этилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (130 мг, 0,506 ммоль) в NMP (5 мл) добавляли CsCO (210 мг, 0,644 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 120°C в течение ночи. Смесь выливали в воду (10 мл). EtOAc (50 мл) добавляли для экстракции желаемого соединения. Органический слой концентрировали и остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, выход 16%) в виде белого твердого вещества.
D416
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,33-4,29 (м, 4H), 4,08-4,05 (м, 1H), 3,80-3,67 (м, 4H), 3,15-3,11 (м, 1H), 3,06-2,86 (м, 6H), 2,47 (с, 3H), 1,89-1,80 (м, 2H), 1,75-1,62 (м, 2H), 1,51 (с, 9H), 1,48-1,43 (м, 3H).
Описание D417
(S)-(4-(2-этил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорид (D417)
трет-
К раствору (S)-бутил 4-(1-(2-этил-6-(2-(гидроксиметил)морфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (30 мг, 0,056 ммоль) в диоксане (3 мл) добавляли HCl/диоксан (5 M, 5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (40 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества.
D417
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 3 мин), Rt=1,84 мин; МС Вычисл.: 436, МС Найдено: 437 [M+H].
Описание D418
(R)-(4-(6-хлор-2-этилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (D418)
К раствору 4,6-дихлор-2-этилпиримидина (84 мг, 0,46 ммоль)в i-PrOH (8 мл) добавляли (R)-морфолин-2-илметанол гидрохлорид (123 мг, 0,691 ммоль) и TEA (209 мг, 1,38 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 90°C в течение 1 часа. Смесь концентрировали и очищали при помощи колонки (PE:EtOAc от 5:1 до 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (139 мг, выход >100%) в виде слабо-желтого твердого вещества.
D418
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,34 (с, 1H), 4,26-4,03 (м, 3H), 3,80-3,61 (м, 4H), 3,13-3,03 (м, 1H), 2,96-2,89 (м, 1H), 2,75 (кв, =7,5 Гц, 2H), 2,05-1,94 (м, 1H), 1,28 (т,=7,5 Гц, 3H).
Описание D419
(R)-
трет-
бутил 4-(1-(2-этил-6-(2-(гидроксиметил)морфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D419)
трет-
2
3
2
4
4
3
3
4
3
3
К раствору бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (82 мг, 0,26 ммоль) и (R)-(4-(6-хлор-2-этилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (139 мг, 0,461 ммоль) в NMP (5 мл) добавляли CsCO (201 мг, 0,635 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 120°C в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду (200 мл). EtOAc (50 мл) добавляли для экстракции желаемого соединения. Органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 60% воды (0,1% NHHCO) и 40% CHCN до 5% воды (0,1% NHHCO) и 95% CHCN за 20 мин, Скорость потока: 15 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (15 мг, выход 7%) в виде белого твердого вещества.
D419
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,36-4,28 (м, 4H), 4,09-4,05 (м, 1H), 3,82-3,68 (м, 4H), 3,15-3,07 (м, 1H), 2,99-2,86 (м, 6H), 2,48 (с, 3H), 2,02-1,80 (м, 3H), 1,76-1,72 (м, 2H), 1,51 (с, 9H), 1,48-1,42 (м, 3H).
Описание D420
(R)-(4-(2-этил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорид (D420)
трет-
К раствору (R)-бутил 4-(1-(2-этил-6-(2-(гидроксиметил)морфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (15 мг, 0,03 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли HCl/диоксан (5 M, 5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (20 мг) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
Описание D421
5-бром-2-метил-4-нитроанилина (D421)
2
4
3
К раствору 5-бром-2-метиланилина (5,0 г, 27 ммоль) в конц.HSO (40 мл) добавляли KNO (2,7 г, 27 ммоль) по частям и сохраняли внутреннюю температуру ниже 5°C. Полученную смесь перемешивали в течение 2 часов на бане со льдом. Полученную смесь выливали в ледяную воду и перемешивали в течение 10 минут. Смесь фильтровали и осадок промывали водой (100 мл). Осадок очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 20:1 до 10:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,1 г, выход 50%).
D421
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,88 (с, 1H), 6,91 (с, 1H), 4,25 (шир. с, 2H), 2,16 (с, 3H).
Описание D422
1-(6-бром-5-нитро-1H-индазол-1-ил)этанон (D422)
3
2
К раствору 5-бром-2-метил-4-нитроанилина (3,1 г, 13 ммоль) в CHCl (50 мл) добавляли AcO (5,5 г, 54 ммоль) на бане со льдом. Затем, добавляли KOAc (2,6 г, 27 ммоль), 18-краун-6 (1,1 г, 4,1 ммоль) и изоамилнитрит (3,2 г, 27 ммоль). Полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь промывали водой (100 мл) и водный слой экстрагировали DCM (200 мл). Органический слой концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (2,2 г, выход 58%) в виде коричневого твердого вещества.
D422
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,29 (с, 1H), 8,24 (с, 1H), 2,82 (с, 3H).
Описание D423
6-бром-5-нитро-1H-индазол (D423)
2
4
К раствору 1-(6-бром-5-нитро-1H-индазол-1-ил)этанон (2,2 г, 7,8 ммоль) в THF (10 мл) добавляли водный NaOH (5 M, 6 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. DCM (100 мл) добавляли для экстракции желаемого соединения. Органический раствор промывали водой (30 мл) и насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (1,0 г, выход 53%) в виде коричневого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
D423
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 13,74 (с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,35 (с, 1H), 8,07 (с, 1H).
Описание D424
6-бром-5-нитро-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D424)
2
3
4
К суспензии 6-бром-5-нитро-1H-индазола (1,03 г, 4,26 ммоль) и DHP (717 мг, 8,25 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли TsOH (146 мг, 0,825 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре (5°C) в течение 20 мин. Реакционную смесь разбавляли DCM (50 мл) и затем промывали насыщ.NaCO (30 мл) и насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,08 г, выход 78%) в виде оранжевого твердого вещества.
D424
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,35 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 5,75-5,71 (м, 1H), 4,04-3,99 (м 1H), 3,82-3,74 (м, 1H), 2,54-2,41 (м, 1H), 2,21-2,08 (м, 2H), 1,85-1,66 (м, 3H).
Описание D425
трет-
бутил 4-(5-нитро-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (D425)
трет-
2
3
2
2
К суспензии 6-бром-5-нитро-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (1,08 г, 3,31 ммоль), бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (1,08 г, 3,48 ммоль) и NaCO (878 мг, 8,28 ммоль) в диоксане (12 мл) и воде (2,5 мл) добавляли Pd(dppf)Cl (121 мг, 0,166 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 100°C в атмосфере N в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали и неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,2 г, выход 85%) в виде оранжевого твердого вещества.
D425
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,48 (с, 1H), 8,17 (с, 1H), 7,43 (с, 1H), 5,76-5,61 (м, 2H), 4,13-4,01 (м 3H), 3,83-3,74 (м, 1H), 3,72-3,65 (м, 2H), 2,58-2,45 (м, 1H), 2,41-2,28 (м, 2H), 2,22-2,06 (м, 2H), 1,85-1,65 (м, 3H), 1,51 (с, 9H).
Описание D426
трет-
бутил 4-(5-амино-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D426)
трет-
2
К раствору бутил 4-(5-нитро-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (1,0 г, 2,3 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли Pd/C (10%, 100 мг) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 50°C в атмосфере H (1 атм) в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (876 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.
D426
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,82 (с, 1H), 7,28 (с, 1H), 6,98 (с, 1H), 5,66-5,62 (м, 1H), 4,41-4,24 (м, 2H), 4,07-4,01 (м 1H), 3,79-3,71 (м, 1H), 3,57 (с, 2H), 2,92-2,75 (м, 3H), 2,64-2,48 (м, 1H), 2,20-2,10 (м, 1H), 2,07-1,93 (м, 3H), 1,83-1,63 (м, 5H), 1,50 (с, 9H).
Описание D427
5-хлор-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол (D427)
2
2
3
4
трет-
Раствор NaNO (165 мг, 2,39 ммоль) в воде (5 мл) добавляли по каплям к раствору бутил-4-(5-амино-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (870 мг, 2,17 ммоль) в конц. HCl (3 мл) на бане со льдом (0-5°C). Затем, полученную смесь перемешивали в течение дополнительных 15 мин на бане со льдом. Затем, смесь добавляли к суспензии CuCl (387 мг, 3,91 ммоль) в воде (5 мл) при 60°C в одну порцию. Полученную смесь перемешивали в течение 30 мин при 60°C. Реакционную смесь охлаждали и постепенно добавляли к насыщ.NaCO (50 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Затем, аммиак (30%, 5 мл) добавляли к смеси и перемешивали в течение 5 мин. Затем, смесь экстрагировали EtOAc (30 мл×3) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (400 мг, выход 78%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
D427
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 13,15 (шир. с, 1H), 8,01 (с, 1H), 7,86 (с, 1H), 7,43 (с, 1H), 3,10-3,06 (м, 3H), 2,69-2,62 (м, 2H), 1,81-1,77 (м, 2H), 1,62-1,47 (м, 2H).
Описание D428
5-хлор-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол (D428)
3
2
3
2
4
К раствору 5-хлор-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазола (350 мг, 1,48 ммоль) и оксетан-3-она (534 мг, 7,40 ммоль) в DCE (10 мл) и MeOH (2 мл) добавляли HCl/MeOH (8 M, две капли) при комнатной температуре. Затем полученную смесь перемешивали в течение 20 мин, добавляли NaBHCN (279 мг, 4,44 ммоль) по частям и смесь перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в насыщ. NaCO (50 мл) и экстрагировали DCM (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (DCM:MeOH=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (160 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества.
D428
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 10,39 (шир. с, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,78 (с, 1H), 7,43 (с, 1H), 4,77-4,68 (м, 4H), 3,61-3,54 (м, 1H), 3,20-3,10 (м, 1H), 2,96-2,93 (м, 2H), 2,09-1,99 (м, 4H), 1,84-1,74 (м, 2H).
Описание D429
5-хлор-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол (D429)
3
4
2
2
4
4
3
К суспензии 5-хлор-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (50 мг, 0,17 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (64 мг, 0,17 ммоль), CuI (32 мг, 0,17 ммоль) и KPO (72 мг, 0,34 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (48 мг, 0,34 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем реакционную смесь охлаждали и разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Препаративную ВЭЖХ проводили при условиях: Колонка: XBridge C18 5 мкм 19*150 мм; Подвижная фаза: A ацетонитрил; B вода (0,1% NHHCO); Способ: 60-80% A; Скорость потока: 15 мл/мин] с получением указанного в заголовке соединения (34 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества.
D429
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,93 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 4,76-4,65 (м, 6H), 4,43-4,32 (м, 2H), 4,16-4,04 (м, 2H), 3,94-3,84 (м, 1H), 3,61-3,51 (м, 2H), 3,19-3,07 (м, 1H), 2,98-2,94 (м, 2H), 2,64 (с, 3H), 2,12-2,00 (м, 4H), 1,96-1,70 (м, 4H), 1,66-1,51 (м, 4H).
Описание D430
трет-
бутил 4-(5-хлор-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D430)
2
4
К раствору 5-хлор-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазола (500 мг, 2,12 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли BocO (1,39 г, 6,36 ммоль) и DMAP (259 мг, 2,12 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем реакционную смесь концентрировали и остаток растворяли в MeOH (5 мл). KOH (356 мг, 6,36 ммоль) добавляли к системе и раствор перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=2:1) с получением указанного в заголовке соединения (280 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества.
D430
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,30 (шир. с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,79 (с, 1H), 7,36 (с, 1H), 4,40-4,21 (м, 2H), 3,33-3,20 (м, 1H), 2,94-2,85 (м, 2H), 1,98-1,93 (м, 2H), 1,68-1,62 (м, 2H), 1,50 (с, 9H).
Описание D431
(S)-
трет-
бутил 4-(5-хлор-1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D431)
трет-
3
4
2
4
4
К суспензии бутил 4-(5-хлор-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (95 мг, 0,28 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (94 мг, 0,28 ммоль), CuI (53 мг, 0,28 ммоль) и KPO (119 мг, 0,560 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (80 мг, 0,56 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем, реакционную смесь охлаждали и разделяли между NHCl (насыщ., 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Препаративную ВЭЖХ проводили при условиях: Колонка: XBridge C18 5 мкм 19*150 мм; Подвижная фаза: A ацетонитрил; B воды (0,1% TFA); Способ: 83% A; Скорость потока: 15 мл/мин, 254 нм] с получением указанного в заголовке соединения (80 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества.
D431
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,00 (с, 1H), 4,39-4,24 (м, 4H), 4,11-4,07 (м, 1H), 3,82-3,66 (м, 4H), 3,32-3,24 (м, 1H), 3,20-3,13 (м, 1H), 3,05-2,88 (м, 3H), 2,66 (с, 3H), 1,96-1,92 (м, 2H), 1,75-1,62 (м, 2H), 1,51 (с, 9H).
Описание D432
(R)-
трет-
бутил 4-(5-хлор-1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D432)
трет-
3
4
2
4
4
К суспензии бутил 4-(5-хлор-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (95 мг, 0,28 ммоль), (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (94 мг, 0,28 ммоль), CuI (53 мг, 0,28 ммоль) и KPO (119 мг, 0,560 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (80 мг, 0,56 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем, реакционную смесь охлаждали и разделяли между NHCl (насыщ., 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Препаративную ВЭЖХ проводили при условиях: Колонка: XBridge C18 5 мкм 19*150 мм; Подвижная фаза: A ацетонитрил; B вода (0,1% TFA); способ: 83% A; Скорость потока: 15 мл/мин, 254 нм] с получением указанного в заголовке соединения (74 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.
D432
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,00 (с, 1H), 4,40-4,22 (м, 4H), 4,11-4,07 (м, 1H), 3,83-3,67 (м, 4H), 3,31-3,24 (м, 1H), 3,21-3,14 (м, 1H), 3,05-2,88 (м, 3H), 2,67 (с, 3H), 2,04-1,98 (м, 2H), 1,74-1,60 (м, 2H), 1,51 (с, 9H).
Описание D433
трет-
бутил 4-(5-хлор-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D433)
трет-
3
4
2
4
4
К суспензии бутил 4-(5-хлор-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (80 мг, 0,24 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (90 мг, 0,24 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль) и KPO (102 мг, 0,480 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем, реакционную смесь охлаждали и разделяли между NHCl (насыщ., 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Препаративную ВЭЖХ проводили при условиях: Колонка: XBridge C18 5 мкм 19*150 мм; Подвижная фаза: A ацетонитрил; B вода (0,1% TFA); способ: 50-90% A; Скорость потока: 20 мл/мин, 254 нм] с получением указанного в заголовке соединения (70 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества.
D433
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,73 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,78 (с, 1H), 6,69 (с, 1H), 4,78-4,26 (м, 8H), 3,92-3,82 (м, 1H), 3,59-3,51 (м, 1H), 3,34-3,23 (м, 1H), 2,98-2,85 (м, 2H), 2,75 (с, 3H), 2,02-1,94 (м, 2H), 1,87-1,55 (м, 8H), 1,50 (с, 9H).
Описание D434
(S)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D434)
К раствору 4, 6-дииод-2-метилпиримидина(2 г, 5,8 ммоль) и (S)-пирролидин-3-ола (717 мг, 5,8 ммоль) в THF/EtOH (40 мл/40 мл) добавляли DIEA (2,25 г, 17,4 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов. Затем, реакционную смесь концентрировали и очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=10:1-6:1~DCM:MeOH=50:1-40:1-30:1) с получением кремово-белого твердого вещества (2,8 г).
D434
1
6
J
J
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,17 (с, 1H), 6,76 (с, 1H), 5,05-4,96 (д, =35,2 Гц, 1H), 4,38-4,32 (д, =24,4 Гц, 1H), 3,64-3,60 (м, 2H), 3,16-3,13 (м, 2H), 2,30 (с, 3H), 1,99-1,88 (м, 2H).
Описание D435
(R)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D435)
К раствору 4, 6-дииод-2-метилпиримидина(2 г, 5,8 ммоль) и (R)-пирролидин-3-ола (717 мг, 5,8 ммоль) в THF/EtOH (40 мл/40 мл) добавляли DIEA (2,25 г, 17,4 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов. Затем, реакционную смесь концентрировали и очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=6:1-1:1~DCM:MeOH=40:1) с получением желтого твердого вещества (2,64 г).
D435
1
6
J
J
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,16 (с, 1H), 6,76 (с, 1H), 5,04-4,95 (д, =35,2 Гц, 1H), 4,38-4,31 (д, =27,2 Гц, 1H), 3,66-3,58 (м, 2H), 3,18-3,11 (м, 2H), 2,30 (с, 3H), 1,98-1,81 (м, 2H).
Описание D436
(транс)-4-фтор-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D436)
Смесь 4,6-дииод-2-метилпиримидина (692 мг, 2 ммоль), (транс)-4-фторпирролидин-3-ол гидрохлорида (283 мг, 2 ммоль) и DIPEA (774 мг, 6 ммоль) в THF/EtOH (40 мл/40 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. Растворитель удаляли, и остаток очищали при помощи колонки с получением белого твердого вещества.(490 мг, 75% выход).
D436
1
d
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-) δ 6,87 (с, 1H), 5,64-5,56 (м, 1H), 5,15-4,96 (м, 1H), 4,35-4,30 (м, 1H), 3,80-3,51 (м, 3H), 2,33 (с, 3H).
Описание D437
(транс)-4-фтор-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D437)
3
4
2
К суспензии (транс)-4-фтор-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола(200 мг, 0,62 ммоль), 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (138 мг, 0,51 ммоль), CuI (97 мг, 0,51 ммоль) и KPO (216 мг, 1,02 ммоль) в сухом толуоле (20 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (90 мг, 1,02 ммоль). Суспензию дегазировали N и нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали DCM/MeOH=15:1) с получением продукта (80 мг, выход 33,6%) в виде белого твердого вещества. (45 мг, выход: 19%)
D437
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,82 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,75 (с, 1H), 5,01-5,15 (м, 1H), 4,71 (д, =6,8 Гц, 4H), 4,53 (с, 1H), 3,93 (с, 1H), 3,73-3,86 (м, 2H), 3,54-3,57 (м, 1H); 2,97-2,99 (м, 2H); 2,83-2,87 (м, 1H), 2,66 (с, 3H); 2,46 (с, 3H); 2,17 (с, 1H), 1,85-2,11 (м, 7H).
Описание D438
(транс)-4-фтор-1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D438)
Смесь 4,6-дииод-2-метоксипиримидина (600 мг, 2 ммоль), (транс)-4-фторпирролидин-3-ол гидрохлорида (235 мг, 1,66 ммоль) и DIPEA (641 мг, 4,97 ммоль) в THF/EtOH (40 мл/40 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. Растворитель удаляли и остаток очищали при помощи колонки с получением белого твердого вещества (300 мг) и его использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
Описание D439
(транс)-4-фтор-1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D439)
3
4
2
К суспензии (транс)-4-фтор-1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола(300 мг, 0,88 ммоль), 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (286 мг, 0,88 ммоль), CuI (170 мг, 0,88 ммоль) и KPO (373 мг, 1,76 ммоль) в сухом толуоле (30 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (156 мг, 1,76 ммоль). Суспензию дегазировали N и нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали DCM/MeOH=15:1) с получением продукта (220 мг, выход 52%) в виде белого твердого вещества.
D439
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,77 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,64 (с, 1H), 5,10 (д, =6,4 Гц, 1H); 4,65 (д, =6,4 Гц, 4H), 4,53-4,59 (м, 1H), 4,16 (с, 3H), 3,84-3,87 (м, 3H), 3,49-3,56 (м, 1H); 2,94 (м, 2H); 2,92 (м, 1H), 2,46 (с, 3H); 1,86-2,04 (м, 7H).
Описание D440
Метил 1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-карбоксилат (D440)
3
Метил азетидин-3-карбоксилат гидрохлорид (437 мг, 2,89 ммоль) добавляли к раствору 4,6-дииод-2-метилпиримидина (230 мг, 2,0 ммоль) и EtN (5 мл) в iPrOH (100 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 суток. Затем, реакционную смесь концентрировали и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=6/1) с получением продукта в виде желтого масла (680 мг, выход 70,7%).
D440
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,50 (с, 1H), 4,20, 4,23, 4,24, 4,25 (дд, J1=8,4 Гц, J2=5,6 Гц). 3,77(с, 3H), 3,56~3,60(м, 1H), 2,46(с, 3H)
Описание D441
Метил 1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-карбоксилат (D441)
3
4
2
Смесь метил 1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-карбоксилата (300 мг, 0,9 ммоль), 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (245 мг, 0,9 ммоль), CuI (171 мг, 0,9 ммоль) и KPO(383 мг, 1,8 ммоль) в толуоле (15 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (159 мг, 1,8 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали. Остаток очищали при помощи колонки (DCM/MeOH=50/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества (30 мг, выход=7,0%).
D441
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA). Rt=1,07 мин; МС Вычисл.: 476,2; МС Найдено: 477,4 [M+H].
Описание D442
трет-
бутил 3-гидрокси-3-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D442)
2
4
n-BuLi (2,0 мл, 2,5 M, 5,0 ммоль) медленно добавляли к раствору 6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (1,18 г, 4,0 ммоль) в сухом THF (15 мл) при -80°C. Затем к реакционной смеси добавляли раствор трет-бутил 3-оксопиперидин-1-карбоксилата (1,0 г, 5,0 ммоль) в сухом THF (5,0 мл) прежде чем реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 10 минут. Реакционную смесь перемешивали при -75°C в течение 1 часа и затем реакционную смесь гасили водой (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2×20 мл) и органические слои сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc:PE=1:3~1:1) с получением целевого продукта (920 мг, 55% выход) в виде белого твердого вещества.
D442
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,67 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 5,71 (д, =6,4 Гц, 1H), 4,5~4,01 (м, 1H), 3,78~3,75 (м, 1H), 2,71 (с, 3H), 2,61~2,56 (м, 1H), 2,29~2,00 (м, 6H), 1,80~1,58 (4H), 1,50 (с, 9H), 1,50~1,44 (м, 4H).
Описание D443
трет-
бутил 3-фтор-3-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D443)
трет-
3
2
4
DAST (715 мг, 4,42 ммоль) медленно добавляли к раствору бутил 3-гидрокси-3-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (920 мг, 2,21 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°C медленно и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли насыщ. NaHCO (20 мл) к реакционной смеси и смесь экстрагировали DCM (2×20 мл). Органические слои сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc:PE=1:10) с получением целевого продукта (420 мг, 46% выход) в виде светло-коричневого масла.
D443
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,94 (с, 1H), 7,54 (с, 2H), 5,72 (д, =1,6 Гц, 1H), 4,57~4,51 (м, 1H), 4,40~4,30 (м, 1H), 4,04~4,000 (м, 1H), 3,80~3,73 (м, 1H), 3,30~2,73 (м, 2H), 2,65 (с, 3H), 2,65~2,55 (м, 1H), 2,40~2,00 (м, 6H), 1,80~1,58 (4H), 1,50 (с, 9H).
Описание D444
6-(3-фторпиперидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол соль TFA (D444)
трет-
TFA (0,5 мл) добавляли к раствору бутил 3-фтор-3-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (420 мг, 1,0 ммоль) в DCM (5 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционный раствор концентрировали с получением целевого продукта в виде коричневого масла. (400 мг, 100% выход) Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
D444
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,6 мин, Rt=0,779 мин; МС Вычисл.:233,1, МС Найдено: 234,3 [M+H]
Описание D445
6-(3-фтор-1-метилпиперидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол (D445)
2
3
CHO (0,4 мл, 5,0 ммоль) добавляли к раствору 6-(3-фторпиперидин-3-ил)-5-метил-1H-индазола соль TFA (400 мг, 1,0 ммоль) в MeOH (4,0 мл) при комнатной температуре и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли NaBHCN (252 мг, 4,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем реакционный раствор концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (MeOH:DCM=1:5) с получением целевого продукта (210 мг, 85% выход) в виде бесцветного масла.
D445
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 80% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=0,63 мин & 0,86 мин; МС Вычисл.:247,1, МС Найдено: 248,3 [M+H]
Описание D446
6-(3-фтор-1-метилпиперидин-3-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (D446)
3
4
2
2
4
Смесь 6-(3-фтор-1-метилпиперидин-3-ил)-5-метил-1H-индазола (210 мг, 0,8 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (340 мг, 0,87 ммоль), CuI (200 мг, 1,05 ммоль) и KPO(424 мг, 2,0 ммоль) в толуоле (5 мл) и DMF (2 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (176 мг, 2,0 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли EtOAc (50 мл). Смесь промывали насыщенным солевым раствором (3×50 мл) и органический раствор сушили над безводным NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (MeOH/DCM=1/20) с получением не совсем белого твердого вещества (210 мг, 42% выход). Твердое вещество промывали гексаном с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (180 мг, 36% выход)
D446
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,97 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,67 (с, 1H), 4,73~4,67 (м, 2H), 4,40~4,34 (м, 2H), 4,16~4,05 (м, 2H), 4,15 (с, 3H), 3,91~3,86 (м, 1H), 3,56~3,52 (м, 1H), 3,29~3,23 (м, 1H), 2,96 (д, J=10,0 Гц, 1H), 2,85 (с, 3H), 2,66 (д, J=4,4 Гц, 3H), 2,45~1,55 (м, 12H).
Описание D447
(транс)-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол гидрохлорид (D447)
трет-
3
3
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (7,30 г, 17,6 ммоль) в CHOH (60 мл) добавляли HCl/CHOH (8 M, 20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (5,9 г) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
Описание D448
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D448)
2
2
4
К раствору (транс)-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол гидрохлорида (5,90 г неочищенный, 17,6 ммоль) в метаноле (120 мл) добавляли раствор KOH (2,50 г в 50 мл воды, 43,9 ммоль) при комнатной температуре. Затем, медленно добавляли (Boc)O (4,60 г, 21,1 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь экстрагировали DCM (150 мл×2). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле(петролейный эфир:этилацетат от 10:1 до 5:1 до 2:1) с получением указанного в заголовке соединения (4,83 г, выход 83% после двух стадий) в виде белого твердого вещества.
D448
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,17 (шир. с, 1H) 7,94 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,34 (с, 1H), 4,49-4,48 (м, 1H), 4,21-4,11 (м, 1H), 3,92-3,38 (м, 1H), 3,02-2,95 (м, 1H), 2,85-2,69 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 1,87-1,81 (м, 1H), 1,63-1,59 (м, 2H), 1,51 (с, 9H)
Описание D449 и D450
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D449; энантиомер 2, D450)
трет-
(транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (1,24 г, 3,75 ммоль) разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ способом (Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм; Фаза: Hex:EtOH=70:30; F: 15 мл/мин; W:230 нм; T:30°C) с получением энантиомера 1 (440 мг, выход 36%) в виде белого твердого вещества и энантиомера 2 (460 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества.
D449
1
3
(энантиомер 1) H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,11 (м, 1H) 7,96 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,39 (с, 1H), 4,53-4,43 (м, 1H), 4,25-4,17 (м, 1H), 3,91-3,84 (м, 1H), 3,00-2,96 (м, 1H), 2,82-2,69 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 1,82-1,80 (м, 1H), 1,64-1,58 (м, 2H), 1,50 (с, 9H). Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IC, 5 мкм 4,6*250 нм; Фаза: Hex:EtOH=70:30; F=0,5 мл/мин; W: 230 нм; T: 30°C; Rt=6,417 мин, 98,95% э.и.
D450
1
3
(энантиомер 2) H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,23 (м, 1H) 7,93 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,37 (с, 1H), 4,49-4,47 (м, 1H), 4,27-4,15 (м, 1H), 3,92-3,84 (м, 1H), 3,04-2,94 (м, 1H), 2,80-2,69 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 1,83-1,80 (м, 1H), 1,61-1,59 (м, 3H), 1,51 (с, 9H). Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IC, 5 мкм 4,6*250 нм; Фаза: Hex:EtOH=70:30; F=0,5 мл/мин; W: 230 нм; T: 30°C; Rt=7,967 мин, 96,31% э.и.
Описание D451
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D451)
трет-
3
4
2
2
4
3
2
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (80 мг, 0,24 ммоль, энантиомер 1) в толуоле (3 мл) добавляли 4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин (56 мг, 0,29 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль), KPO(102 мг, 0,48 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (69 мг, 0,48 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C под защитой N в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры в смесь добавляли гидрат аммиака (25%, 5 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл×4). Объединенную органическую фазу сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с помощью способа (40-80% CHCN в HO (0,01% TFA)) с получением указанного в заголовке соединения (60 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.
D451
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,68 (с, 1H), 8,20 (с, 1H), 7,62 (с, 1H), 7,08 (с, 1H), 4,40-4,34 (м, 1H), 4,20-4,12 (м, 1H), 3,93-3,84 (м, 1H), 3,80-3,71 (м, 8H), 3,12-3,04 (м, 1H), 2,92-2,69 (м, 2H), 2,59 (с, 3H), 2,52 (с, 3H), 1,90-1,83 (м, 1H), 1,68-1,58 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
Описание D452
(транс)
4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол гидрохлорид (энантиомер 1, D452)
-
трет-бутил
К раствору (транс)- 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1, 60 мг, 0,12 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали с получением неочищенного продукта (70 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
D452
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин], Rt=1,49 мин; МС Вычисл.: 408; МС Найдено: 409 [M+1].
Описание D453
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D453)
трет-
3
4
2
2
4
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (82 мг, 0,25 ммоль) (энантиомер 2) в толуоле (3 мл) добавляли 4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин (57 мг, 0,30 ммоль), CuI (47 мг, 0,25 ммоль), KPO(105 мг, 0,50 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (70 мг, 0,50 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C под защитой N в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры, к смеси добавляли гидрат аммиака (25%, 5 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл×4). Объединенную органическую фазу сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (63 мг, выход 51%) в виде белого твердого вещества.
D453
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,73 (с, 1H), 8,18 (с, 1H), 7,60 (с, 1H), 7,05 (с, 1H), 4,39-4,34 (м, 1H), 4,18-4,13 (м, 1H), 3,92-3,84 (м, 1H), 3,81-3,71 (м, 8H), 3,13-3,04 (м, 1H), 2,94-2,68 (м, 2H), 2,57 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 1,90-1,85 (м, 1H), 1,62-1,58 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
Описание D454
(транс)
4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол гидрохлорид (энантиомер 2, D454)
-
трет-
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2, 63 мг, 0,12 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали с получением неочищенного продукта (75 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества, который использовали непосредственно на следующей стадии.
D454
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил за 2,5 мин], Rt=1,49 мин; МС Вычисл.: 408; МС Найдено: 409 [M+1].
Описание D455
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 1, D455)
трет-
3
4
2
2
4
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (80 мг, 0,24 ммоль) (энантиомер1) в толуоле (2 мл) добавляли 4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (93 мг, 0,29 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль), KPO(102 мг, 0,48 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль). Смесь перемешивали при 115°C под защитой N в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры в смесь добавляли гидрат аммиака (25%, 10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (31 мг, выход 24%) в виде белого твердого вещества.
D455
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,74 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,39-4,31 (м, 1H), 4,17-4,12 (м, 1H), 4,03 (с, 3H), 3,92-3,83 (м, 1H), 3,77-3,75 (м, 4H), 3,67-3,64 (м, 4H), 3,11-3,02 (м, 1H), 2,92-2,66 (м, 2H), 2,50 (с, 3H), 1,88-1,83 (м, 1H), 1,67-1,57 (м, 1H), 1,52 (с, 9H).
Описание D456
(транс)
4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол гидрохлорид (энантиомер 1, D456)
-
трет-бутил
К раствору (транс)- 3-гидрокси-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат(энантиомер 1, 31 мг, 0,06 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали с получением неочищенного продукта (430 мг) в виде белого твердого вещества, который использовали непосредственно на следующей стадии.
Описание D457
(транс)-
трет-
бутил 3-гидрокси-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (энантиомер 2, D457)
трет-
3
4
2
2
4
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (80 мг, 0,24 ммоль) (энантиомер2) в толуоле (2 мл) добавляли 4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин (93 мг, 0,29 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль), KPO(102 мг, 0,48 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (68 мг, 0,48 ммоль). Смесь перемешивали при 115°C под защитой N в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры в смесь добавляли гидрат аммиака (25%, 10 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (68 мг, выход 54%) в виде белого твердого вещества.
D457
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,76 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,59 (с, 1H), 6,89 (с, 1H), 4,38-4,31 (м, 1H), 4,17-4,12 (м, 1H), 4,05 (с, 3H), 3,92-3,82 (м, 1H), 3,79-3,76 (м, 4H), 3,70-3,66 (м, 4H), 3,12-3,01 (м, 1H), 2,97-2,63 (м, 2H), 2,51 (с, 3H), 1,89-1,82 (м, 1H), 1,73-1,57 (м, 1H), 1,51 (с, 9H).
Описание D458
(транс)
4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол (соль HCl) (энантиомер 2, D458)
-
трет-
К раствору (транс)-бутил 3-гидрокси-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (68 мг, 0,13 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали с получением неочищенного продукта (62 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества, который использовали непосредственно на следующей стадии.
D458
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 3 мин], Rt=1,77 мин; МС Вычисл.: 424; МС Найдено: 425 [M+1].
Описание D459
5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-карбальдегид (D459)
2
4
К раствору 6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (6,90 г, 23,5 mmo) в 100 мл сухого THF добавляли по каплям n-BuLi (2,5 M в THF, 18,8 мл, 46,9 ммоль) при -78°C. После добавления реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 часа. Добавляли сухой DMF (34,2 г, 46,8 ммоль) к реакционной смеси и перемешивали при -78°C в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в воду (200 мл) и экстрагировали EtOAc (150 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (200 мл), сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в виде коричневого масла. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:EtOAc=6:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,2 г, выход 56%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
D459
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,37 (с, 1H), 8,08 (с, 1), 8,00 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 5,80-5,76 (м, 1H), 4,05-4,01 (м, 1H), 3,82-3,74 (м, 1H), 2,74 (с, 3H), 2,58-2,50 (м, 1H), 2,18-2,07 (м, 2H), 1,81-1,65 (м, 3H).
Описание D460
5-метил-6-(оксиран-2-ил)-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D460)
К охлажденному льдом раствору NaH (60% в минеральном масле, 74 мг, 3,08 ммоль) в сухом THF (20 мл) добавляли по каплям раствор триметилсульфоксоний йодида (677 мг, 3,08 ммоль) в DMSO (4 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 10 мин. Затем к реакционной смеси добавляли 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-карбальдегид (500 мг, 2,05 ммоль) и перемешивали при 0°C до комнатной температуры в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:EtOAc=6:1) с получением указанного в заголовке соединения (87 мг, выход 16%) в виде желтого твердого вещества.
D460
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,93 (с, 1H), 7,48-7,45 (м, 2H), 5,68 (дд, =9,6, 2,1 Гц, 1H), 4,13-4,03 (м, 2H), 3,78-3,71 (м, 1H), 3,24-3,20 (м, 1H), 2,72-2,54 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,14-2,01 (м, 2H), 1,79-1,69 (м, 3H).
Описание D461
2-((2-Гидроксиэтил)амино)-1-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)этанол (D461)
2
Смесь 5-метил-6-(оксиран-2-ил)-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (560 мг, 2,17 ммоль) и 2-аминоэтанола (2,03 г, 33,3 ммоль) в THF (8 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 18 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением желтого масла. Желтое масло очищали при помощи колонки С18, элюируя ACN/HO (0-60% за 40 мин) с получением указанного в заголовке соединения (370 мг, выход 53%) в виде бесцветного масла.
D461
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 5,72-5,69 (м, 1H), 5,09-5,05 (м, 1H), 4,02-3,99 (м, 1H), 3,76-3,69 (м, 3H), 2,95-2,53 (м, 8H), 2,40 (с, 3H), 2,14-2,00 (м, 2H), 1,78-1,63 (м, 3H).
Описание D462
трет-
бутил (2-гидрокси-2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)этил)(2-гидроксиэтил)карбамат (D462)
2
К смеси 2-((2-гидроксиэтил)амино)-1-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)этанола (2,30 г, 7,21 ммоль) и триэтиламина (1,46 г, 14,42 ммоль) в сухом THF (35 мл) добавляли BocO (1,57 г, 7,21 ммоль) при температуре окружающей среды. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь непосредственно концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:EtOAc от 10:1 до 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (2,2 г, выход 73%) в виде белого твердого вещества.
D462
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,76 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 5,72-5,68 (м, 1H), 5,39-5,28 (м, 1H), 4,04-3,13 (м, 9H), 2,59-2,46 (м, 1H), 2,40 (с, 3H), 2,12-1,99 (м, 2H), 1,79-1,64 (м, 3H), 1,48 (с, 9H).
Описание D463
трет-
бутил 2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилат (D463)
трет-
4
2
4
К раствору бутил (2-гидрокси-2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)этил)(2-гидроксиэтил)карбамата (1,30 г, 3,10 ммоль) в сухом THF (120 мл) добавляли гидрид натрия (60% в минеральном масле, 310 мг, 7,76 ммоль) при 0°C. Полученной смеси давали нагреться до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь охлаждали до 0°C и добавляли 1-(4-толилсульфонил)имидазол (758 мг, 3,41 ммоль). Реакционную смесь нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 2 часов. Затем реакционную смесь выливали в насыщенный раствор NHCl (150 мл) и экстрагировали EtOAc (100 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи флэш-хроматографии (петролейный эфир:EtOAc=4:1) с получением указанного в заголовке соединения (0,93 г, выход 75%) в виде бесцветного масла.
D463
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,95 (с, 1H), 7,70-7,68 (м, 1H), 7,50 (с, 1H), 5,74 (дд,9,3, 2,7 Гц, 1H), 4,67-4,63 (м, 1H), 4,20-4,04 (м, 4H), 3,81-3,74 (м, 2H), 3,17-3,09 (м, 1H), 2,86-2,73 (м, 1H), 2,63-2,55 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,34-2,14 (м, 2H), 2,06-2,01 (м, 1H), 1,78-1,67 (м, 2H), 1,50 (с, 9H).
Описание D464
трет-
бутил 2-(5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилат (D464)
трет-
2
2
4
Смесь бутил 2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилата (930 мг, 2,32 ммоль) в HCl/MeOH (4 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь непосредственно концентрировали при пониженном давлении с получением белого твердого вещества. Твердое вещество растворяли в MeOH (30 мл) и воде (6 мл). Затем, добавляли KOH (390 мг, 6,96 ммоль) и BocO (759 мг, 3,48 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл) и экстрагировали EtOAc (80 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного указанного в заголовке соединения (840 мг, количественное) в виде бледно-желтого геля, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
D464
4
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил +0,02% NHOAc за 3,0 мин], Rt=1,62 мин; МС Вычисл.: 317; МС Найдено: 262 [M-56+1].
Описание D465 и D466
трет-
бутил 2-(5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилат (энантиомер 1, D465; энантиомер 2 D466)
трет-
Рацемический бутил 2-(5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилат (900 мг, 2,84 ммоль) разделяли при помощи колонки для хиральной ВЭЖХ при условиях хирального разделения (chiralpak, IB, 5 мкм, 4,6*250 нм, Фаза:Hex:EtOH=70:30, F:15 мл/мин, W:214 нм, T: 30) с получением энантиомера 1 (320 мг, выход 36%) в виде белого твердого вещества и энантиомера 2 (280 мг, выход 31%) в виде белого твердого вещества.
D465 (энантиомер 1)
1
3
: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,19 (шир. с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 4,65-4,62 (м, 1H), 4,18-3,98 (м, 3H), 3,80-3,72 (м, 1H), 3,13-3,05 (м, 1H), 2,78-2,70 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 1,49 (с, 9H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 нм, Hex:EtOH=70:30; поток: 1,0 мл/мин; W: 230 нм; T=30°C. Rt=4,531 мин, 99,4% э.и.
D466 (энантиомер 2)
1
3
: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,31 (шир. с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 4,65-4,62 (м, 1H), 4,15-3,98 (м, 3H), 3,80-3,72 (м, 1H), 3,12-3,04 (м, 1H), 2,78-2,70 (м, 1H), 2,45 (с, 3H), 1,49 (с, 9H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 нм, ACN: IPA =70:30, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=6,997 мин, 100% э.и.
Описание D467
трет-
бутил 2-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилат (энантиомер 1, D467)
трет-
2
4
Смесь бутил 2-(5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилата (энантиомер 1) (80 мг, 0,25 ммоль) и 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (104 мг, 0,278 ммоль), CuI (48 мг. 0,25 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (72 мг, 0,51 ммоль) и фосфата калия (107 мг, 0,506 ммоль) в толуоле (4 мл) дегазировали азотом и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в раствор аммиака (6%, 60 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (петролейный эфир:EtOAc=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (76 мг, выход 54%) в виде белой пены.
D467
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,00 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), (с, 1H), 6,59 (с, 1H), 4,73-4,62 (м, 3H), 4,41-4,33 (м, 2H), 4,26-3,92 (м, 5H), 3,85-3,73 (м, 2H), 3,56-3,52 (м, 1H), 3,15-3,09 (м, 1H), 2,97-2,90 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 1,86-1,55 (м, 6H), 1,49 (с, 9H).
Описание D468
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(морфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1, D468)
трет-
Смесь бутил 2-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилата (энантиомер 1, 70 мг, 0,12 ммоль) в HCl/диоксане (4 M, 4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь непосредственно концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (58 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
D468
4
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: 2-60% ацетонитрил +0,02% NHOAc за 3,0 мин], Rt=2,20 мин; МС Вычисл.: 380; МС Найдено: 381 [M+1].
Описание D469
трет-
бутил 2-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилат
(энантиомер 2, D469)
трет-
Смесь бутил 2-(5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилата (80 мг, 0,25 ммоль) (энантиомер 2) и 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (113 мг, 0,301 ммоль), CuI (38 мг. 0,20 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (56 мг, 0,40 ммоль) и фосфата калия (85 мг, 0,40 ммоль) в толуоле (4 мл) дегазировали азотом и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в разбавленный раствор аммиака (6%, 50 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (EtOAc:петролейный эфир=2:3) с получением указанного в заголовке соединения (125 мг, выход 87%) в виде белого твердого вещества.
D469
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,00 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,59 (с, 1H), 4,73-4,64 (м, 3H), 4,40-4,33 (м, 2H), 4,23-3,99 (м, 5H), 3,88-3,73 (м, 2H), 3,56-3,52 (м, 1H), 3,12-2,89 (м, 2H), 2,62 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 1,86-1,53 (м, 6H), 1,49 (с, 9H).
Описание D470
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(морфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (соль HCl) (энантиомер 2, D470)
трет-
Смесь бутил 2-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилат (энантиомер 2, 125 мг, 0,222 ммоль) в HCl/диоксане (4 M, 4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь непосредственно концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (110 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
D470
4
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: 2-60% ацетонитрил +0,02% NHOAc за 3,0 мин], Rt=1,35 мин; МС Вычисл.: 380; МС Найдено: 381 [M+1].
Описание D471
трет-
бутил 2-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилат (энантиомер 1, D471)
Смесь 2-(5-метил-1H-индазол-6-ил)-морфолин-4-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (95 мг, 0,30 ммоль) (энантиомер 1) и 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (138 мг, 0,45 ммоль), CuI (57 мг. 0,30 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (85 мг, 0,60 ммоль) и фосфата калия (127 мг, 0,600 ммоль) в толуоле (5 мл) дегазировали азотом и перемешивали при 110°C в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в разбавленный раствор аммиака (10%, 40 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали растиранием в EtOAc (1 мл) и петролейном эфире (5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (130 мг, выход 87%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
D471
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 8,91 (с, 1H), 8,34 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 6,39 (с, 1H), 4,63-4,58 (м, 2H), 4,29-4,24 (м, 2H), 3,98 (с, 3H), 3,90-3,65 (м, 6H), 3,05-2,48 (м, 2H), 2,41 (с, 3H), 1,41 (с, 9H).
Описание D472
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(морфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (соль HCl) (энантиомер 1, D472)
трет-
Смесь бутил 2-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилата (энантиомер 1, 130 мг, 0,262 ммоль) в HCl/диоксане (4 M, 5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь непосредственно концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения (109 мг, выход >100%) в виде желтого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
D472
4
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: 2-60% ацетонитрил +0,02% NHOAc за 3,0 мин], Rt=1,52 мин; МС Вычисл.: 396; МС Найдено: 397 [M+1].
Описание D473
трет-
бутил 2-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилат (энантиомер 2, D473)
трет-
Смесь бутил 2-(5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилата (95 мг, 0,30 ммоль) (энантиомер 2) и 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (138 мг, 0,450 ммоль), CuI (57 мг. 0,30 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (85 мг, 0,60 ммоль) и фосфата калия (127 мг, 0,600 ммоль) в толуоле (5 мл) дегазировали азотом и перемешивали при 110°C в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в разбавленный раствор аммиака (6%, 50 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток растирали в петролейном эфире (4 мл) и EtOAc (0,5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (150 мг, выход 100%) в виде желтого твердого вещества.
D473
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,05 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,45 (с, 1H), 4,84-4,76 (м, 1H), 4,67-4,63 (м, 1H), 4,43-4,37 (м, 2H), 4,14 (с, 3H), 4,05-3,97 (м, 4H), 3,91-3,87 (м, 2H), 3,79-3,07 (м, 1H), 3,08-2,96 (м, 1H), 2,84-2,72 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 1,49 (с, 9H).
Описание D474
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(морфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (соль HCl) (энантиомер 2, D474)
трет-
Смесь бутил 2-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин-4-карбоксилата (энантиомер 2, 150 мг, 0,262 ммоль) в HCl/диоксане (4 M, 5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь непосредственно концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного соединения (150 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
D474
4
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: 2-60% ацетонитрил +0,02% NHOAc за 3,0 мин], Rt=2,39 мин; МС Вычисл.: 396; МС Найдено: 397 [M+1].
Описание D475
6-хлор-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин (D475)
2
3
3
К смеси 6-хлор-1H-пиразоло[3,4-b]пиридина (6,00 г, 39,1 ммоль) и KCO (16,2 г, 117 ммоль) в CHCN (30 мл) добавляли PMB-Cl (10,4 г, 66,5 ммоль). Смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение ночи. Смесь непосредственно концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=15:1) с получением целевого продукта (4,8 г, выход 44%) в виде желтого твердого вещества.
D475
1
3
J
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,99 (с, 1H), 7,97 (д, =8,4 Гц, 1H), 7,33 (д,=8,7 Гц, 2H), 7,13 (д, =8,4 Гц, 1H), 6,84 (д, =8,7 Гц, 2H), 5,59 (с, 2H), 3,76 (с, 3H).
4
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 10-95% Ацетонитрил +0,02% NHOAc за 4 мин] Rt=2,518 мин; МС Вычисл.: 273; МС Найдено: 274 [M+1].
Описание D476
1-(4-Метоксибензил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ол (D476)
2
2
К раствору 6-хлор-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридина (5,20 г, 19,0 ммоль) и TMSOK (3,65 г, 28,5 ммоль) в DMF (30 мл) добавляли NaH (60% в материальном масле, 2,30 г, 57,0 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение ночи. Смесь разбавляли HO (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Водный слой доводили до рН 7 конц. HCl. Суспензию фильтровали. Осадок промывали HO (10 мл×3) и сушили в вакууме с получением целевого продукта (3,2 г, выход 66%) в виде желтого твердого вещества.
D476
1
d
J
J
J
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 11,78 (шир. с, 1H), 7,92 (д, =9,0 Гц, 1H), 7,85 (с, 1H), 7,17 (д,=8,7 Гц, 2H), 6,87 (д, =9,0 Гц, 2H), 6,37-6,34 (м, 1H), 5,40 (с, 2H), 3,70 (с, 3H).
Описание D477
5-бром-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ол (D477)
2
К раствору 1-(4-метоксибензил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ола (3,20 г, 12,5 ммоль) в AcOH (30 мл) добавляли Br (2,11 г, 13,2 mммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа. Суспензию фильтровали. Осадок промывали AcOH (5 мл×3) и затем сушили в вакууме с получением целевого продукта (4,54 г, выход >100%) в виде желтого твердого вещества.
D477
1
d
J
J
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 8,33 (с, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,18 (д,=8,4 Гц, 2H), 6,88 (д, =8,4 Гц, 2H), 5,39 (с, 2H), 3,71 (с, 3H).
Описание D478
5-бром-1-(4-метоксибензил)-6-(метоксиметокси)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин (D478)
2
2
4
К суспензии 5-бром-1-(4-метоксибензил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ола (4,34 г, 13,0 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли DIPEA (5,03 г, 39,0 ммоль). Затем, добавляли MOMCl (2,08 г, 26,0 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Раствор разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали DCM (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и выпаривали. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=8:1) с получением целевого продукта (3,70 г, выход 73%) в виде желтого твердого вещества.
D478
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,14 (с, 1H), 7,82 (с, 1H), 7,30 (д,=8,7 Гц, 2H), 6,82 (д,=8,4 Гц, 2H), 5,70 (с, 2H), 5,48 (с, 2H), 3,76 (с, 3H), 3,60 (с, 3H).
Описание D479
1-(4-Метоксибензил)-6-(метоксиметокси)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин (D479)
2
3
2
2
2
К смеси 5-бром-1-(4-метоксибензил)-6-(метоксиметокси)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридина (3,70 г, 9,79 ммоль), метилбороновой кислоты (5,87 г, 97,9 ммоль) и NaCO (4,16 г, 39,2 ммоль) в диоксане/HO (50/5 мл) добавляли Pd(dppf)Cl (1,60 г, 1,96 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение ночи в атмосфере N. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=15:1) с получением целевого продукта (2,20 г, выход 73%) в виде желтого масла.
D479
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,78 (с, 1H), 7,70 (с, 1H), 7,30 (д,=8,7 Гц, 2H), 6,81 (д,=8,7 Гц, 2H), 5,69 (с, 2H), 5,49 (с, 2H), 3,75 (с, 3H), 3,58 (с, 3H), 2,29 (с, 3H).
4
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 10-95% ацетонитрил +0,02% NHOAc за 4 мин] Rt=2,549 мин; МС Вычисл.:313; МС Найдено: 314 [M+1].
Описание D480
1-(4-Метоксибензил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ол (D480)
Раствор 1-(4-метоксибензил)-6-(метоксиметокси)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридина (2,20 г, 7,03 ммоль) в диоксане (30 мл) добавляли конц. HCl (0,5 мл). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Суспензию фильтровали. Отфильтрованный осадок промывали диоксаном (5 мл×3) и сушили в вакууме с получением целевого продукта (1,89 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.
D480
1
d
J
J
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 10,90 (шир. с, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,16 (д,=8,4 Гц, 2H), 6,87 (д,=8,7 Гц, 2H), 5,38 (с, 2H), 3,70 (с, 3H), 2,05 (с, 3H).
4
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 10-95% ацетонитрил +0,02% NHOAc за 4 мин] Rt=1,948 мин; МС Вычисл.:269; МС Найдено: 270 [M+1].
Описание D481
1-(4-метоксибензил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил трифторметансульфонат (D481)
2
2
2
2
4
К раствору 1-(4-метоксибензил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ола (1,89 г, 7,03 ммоль) в DCM (20 мл) добавляли пиридин (1,67 г, 21,1 ммоль). Затем, добавляли по каплям TfO (3,96 г, 14,1 ммоль) при 0°C в атмосфере N. Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Раствор разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали DCM (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и выпаривали с получением целевого продукта (2,47 г, выход 87%) в виде желтого твердого вещества.
D481
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,99 (с, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,37 (д,=8,7 Гц, 2H), 6,83 (д,=8,4 Гц, 2H), 5,52 (с, 2H), 3,76 (с, 3H), 2,44 (с, 3H).
4
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 10-95% ацетонитрил +0,02% NHOAc за 5 мин] Rt=2,751 мин; МС Вычисл.: 401; МС Найдено: 402 [M+1].
Описание D482
4-[1-(4-метоксибензил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил]-3,6-дигидро-2H-пиридин-1-карбоновая кислота трет-бутиловый эфир (D482)
2
3
2
2
2
К смеси 1-(4-метоксибензил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил трифторметансульфоната (2,47 г, 6,16 ммоль), трет-бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6 -дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (3,81 г, 12,3 ммоль) и NaCO (2,62 г, 24,6 ммоль) в диоксане/HO (50/5 мл) добавляли Pd(dppf)Cl (1,01 г, 1,23 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в атмосфере N в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем (PE:EtOAc=8:1) с получением целевого продукта (2,71 г, выход >100%) в виде желтого масла.
D482
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,88 (с, 1H), 7,82 (с, 1H), 7,30 (д,=9,0 Гц, 2H), 6,81 (д,=9,0 Гц, 2H), 5,88-5,86 (м, 1H), 5,60 (с, 2H), 4,14-4,13 (м, 2H), 3,76 (с, 3H), 3,71 (т, =8,7 Гц, 2H), 2,64-2,60 (м, 2H), 2,44 (с, 3H), 1,52 (с, 9H).
4
+
ЖХМС [подвижная фаза: 10-95% ацетонитрил +0,02% NHOAc за 5 мин] Rt=2,767 мин; МС Вычисл.: 434, МС Найдено: 435 [M+1].
Описание D483
трет-
бутил 4-(1-(4-метоксибензил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D483)
трет-
2.
К раствору бутил 4-(1-(4-метоксибензил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (2,71 г, 6,24 ммоль) в EtOH (30 мл) добавляли Pd/C (0,27 г). Смесь перемешивали в течение 2 суток в атмосфере H Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением целевого продукта (2,37 г, выход 87%) в виде желтого масла.
D483
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,84 (с, 1H), 7,73 (с, 1H), 7,35 (д,=8,4 Гц, 2H), 6,81 (д,=8,7 Гц, 2H), 5,58 (с, 2H), 4,33-4,26 (м, 2H), 3,76 (с, 3H), 3,13-3,06 (м, 1H), 2,94-2,86 (м, 2H), 2,44 (с, 3H), 2,07-1,93 (м, 2H), 1,82-1,77 (м, 2H), 1,52 (с, 9H).
Описание D484
5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин соль TFA (D484)
трет-
2
2
К раствору бутил 4-(1-(4-метоксибензил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (2,15 г, 4,93 ммоль) в CHCl (15 мл) добавляли TFA (50 мл) при °C. Затем, смесь нагревали до 45°C и перемешивали в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме с получением неочищенного соединения (2,8 г, выход > 100%) в виде черного масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
D484
3
3
+
ЖХ-МС: (подвижная фаза: от 95% воды и 5% CHCN до 5% воды и 95% CHCN за 4 мин, Rt=1,561 мин; МС Вычисл.: 216; МС Найдено: 217 (M+H).
Описание D485
трет-
бутил 4-(5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D485)
2
2
2
2
4
К раствору 5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридина соли TFA (2,60 г неочищенного продукта, 4,93 ммоль) в метаноле (100 мл) добавляли раствор KOH (4,65 г, 83,1 ммоль) в воде (40 мл). Затем, добавляли BocO (2,72 г, 12,5 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли CHCl (200 мл) и водой (50 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором (100 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колонки (PE:этилацетат=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (620 мг, выход 40% в две стадии) в виде белого твердого вещества.
D485
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,96 (с, 1H), 7,84 (с, 1H), 4,40-4,23 (м, 2H), 3,15-3,09 (м, 1H), 2,94-2,80 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,01-1,87 (м, 2H), 1,81-1,78 (м, 2H).
Описание D486
трет-
бутил 3-гидроксиазетидин-1-карбоксилат (D486)
2
2
2
2
4
К раствору азетидин-3-ол гидрохлорида (2,00 г, 18,3 ммоль) в CHCl (20 мл) добавляли TEA (5 мл) и (Boc)O (4,80 г, 22,0 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc (20 мл). Смесь промывали водой (20 мл×2) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (2,80 г, выход 88%) в виде желтого масла.
D486
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 4,58-4,56 (м, 1H), 4,17-4,11 (м, 2H), 3,82-3,77 (м, 2H), 2,51-2,49 (м, 1H), 1,43 (с, 9H).
Описание D487
трет-
бутил 3-(бензилокси)азетидин-1-карбоксилат (D487)
трет-
2
4
К смеси NaH (60% в материальном масле, 464 мг, 11,6 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли бутил 3-гидроксиазетидин-1-карбоксилат (1,00 г, 5,78 ммоль) при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 20 мин, добавляли (хлорметил)бензол (874 мг, 6,94 ммоль) при 0°C. Затем, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К смеси добавляли воду со льдом (70 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл) и насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (600 мг, выход 39%) в виде бесцветного масла.
D487
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,41-7,31 (м, 5H), 4,45 (с, 2H), 4,35-4,27 (м, 1H), 4,08-4,02 (м, 2H), 3,88-3,83 (м, 2H), 1,43 (с, 9H).
Описание D488
3-(Бензилокси)азетидин (D488)
трет-
2
2
2
3
2
4
К раствору бутил 3-(бензилокси)азетидин-1-карбоксилата (600 мг, 2,28 ммоль) в CHCl (10 мл) добавляли TFA (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали. Остаток растворяли в воде (5 мл) и добавляли насыщ. раствор NaCO (10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (200 мг, выход 54%) в виде желтого масла.
D488
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,38-7,30 (м, 5H), 4,50-4,42 (м, 3H), 3,88-3,75 (м, 4H).
Описание D489
2-хлор-6-метоксипиридин-4-амин (D489)
3
2
4
К раствору 2,6-дихлорпиридин-4-амина (2,80 г, 17,2 ммоль) в NMP (25 мл) добавляли CHONa (3,72 г, 68,8 ммоль). Смесь перемешивали при 140°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду (150 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл) и насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (2,0 г, выход 74%) в виде белого твердого вещества.
D489
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,23 (с, 1H), 5,83 (с, 1H), 4,16 (шир. с, 2H), 3,86 (с, 3H).
Описание D490
2-хлор-4-иод-6-метоксипиридин (D490)
3
2
2
2
3
2
4
К раствору 2-хлор-6-метоксипиридин-4-амина(790 мг, 5,00 ммоль) в CHCN (5 мл) добавляли воду (5 мл) и конц. HCl (5 мл). Затем добавляли по каплям раствор NaNO(690 мг, 10,0 ммоль) в воде (5 мл) при 0°C. После перемешивания при 0°C в течение 10 минут добавляли раствор KI (1,66 г, 10,0 ммоль) в воде (5 мл) по каплям при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 20 мин. Затем, реакцию гасили насыщ. раствором NaSO (50 мл). EtOAc (20 мл×3) добавляли для извлечения желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE) с получением указанного в заголовке соединения (1,1 г, выход 82%) в виде белого твердого вещества.
D490
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,26 (с, 1H), 7,07 (с, 1H), 3,91 (с, 3H).
Описание D491
трет-
бутил 4-(1-(2-хлор-6-метоксипиридин-4-ил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D491)
трет-
3
4
К раствору бутил 4-(5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (160 мг, 0,506 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 2-хлор-4-иод-6-метоксипиридин (204 мг, 0,759 ммоль), CuI (95 мг, 0,51 ммоль), KPO (424 мг, 2,00 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (71,0 мг, 0,506 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (150 мг, выход 65%) в виде белого твердого вещества.
D491
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,12 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,84 (с, 1H), 4,38-4,26 (м, 2H), 4,00 (с, 3H), 3,19-3,10 (м, 1H), 2,95-2,83 (м, 2H), 2,50 (с, 3H), 2,01-1,80 (м, 4H), 1,52 (с, 9H).
Описание D492
трет-
бутил 4-(1-(2-(3-(бензилокси)азетидин-1-ил)-6-метоксипиридин-4-ил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D492)
трет-
2
3
2
3
2
К раствору бутил 4-(1-(2-хлор-6-метоксипиридин-4-ил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (150 мг, 0,328 ммоль) в толуоле (8 мл) добавляли 3-(бензилокси)азетидин (107 мг, 0,656 ммоль), Pd(dba) (30 мг, 0,033 ммоль), xphos (62 мг, 0,13 ммоль) и CsCO (426 мг, 1,31 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере N. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (90 мг, выход 47%) в виде желтого масла.
D492
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,04 (с, 1H), 7,81 (с, 1H), 7,41-7,31 (м, 6H), 7,19 (с, 1H), 4,53 (с, 3H), 4,37-4,25 (м, 4H), 4,04-3,97 (м, 2H), 3,93 (с, 3H), 3,20-3,08 (м, 1H), 2,97-2,84 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,02-1,80 (м, 4H), 1,49 (с, 9H).
Описание D493
1-(2-(3-(Бензилокси)азетидин-1-ил)-6-метоксипиридин-4-ил)-5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин 2,2,2-трифторацетат (D493)
трет-
2
2
К раствору бутил 4-(1-(2-(3-(бензилокси)азетидин-1-ил)-6-метоксипиридин-4-ил)-5-метил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (90 мг, 0,15 ммоль) в CHCl (5 мл) добавляли TFA (1 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, выход >100%) в виде желтого твердого вещества.
D493
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: 30-95% CHCN за 2,5 мин]: Rt=1,28 мин; МС Вычисл.: 484; МС Найдено: 485 [M+H].
Описание D494
1-(2-(3-(Бензилокси)азетидин-1-ил)-6-метоксипиридин-4-ил)-5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин (D494)
3
3
2
3
2
2
2
4
3
К раствору 1-(2-(3-(бензилокси)азетидин-1-ил)-6-метоксипиридин-4-ил)-5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин 2,2,2-трифторацетата (100 мг, 0,15 ммоль) в DCE (5 мл) добавляли оксетан-3-он (0,5 мл) и CHOH (1 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли NaBHCN(62 мг, 1,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли насыщ. раствор NaCO(15 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Смесь экстрагировали CHCl (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (50 мг, выход 62%) в виде белого твердого вещества.
D494
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,04 (с, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,37-7,26 (м, 6H), 7,23 (с, 1H), 4,69-4,67 (м, 4H), 4,60-4,53 (м, 3H), 4,33-4,80 (м, 2H), 4,05-4,01 (м, 2H), 3,96 (с, 3H), 3,58-3,53 (м, 1H), 3,03-2,88 (м, 3H), 2,46 (с, 3H), 2,21-2,09 (м, 2H), 2,04-1,96 (м, 2H), 1,91-1,85 (м, 2H).
Описание D495
6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (изомер 1, D495)
3
4
3
2
2
4
2
2
3
.
К раствору 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (50 мг, 0,16 ммоль) (энантиомер 1) в толуоле (10 мл) добавляли 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (73 мг, 0,19 ммоль), KPO (103 мг, 0,490 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (69 мг, 0,49 ммоль) и CuI (93 мг, 0,49 ммоль). Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение 3 часов. К смеси добавляли NHHO (30%, 40 мл) и экстрагировали этилацетатом (40 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (40 мл) и насыщенным солевым раствором (40 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (68 мг, выход 76%) в виде белого твердого вещества.
D495
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,01 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,59 (с, 1H), 4,78-4,65 (м, 8H), 4,41-4,33 (м, 2H ), 4,14-4,03 (м, 2H), 3,93-3,85 (м, 1H), 3,78-3,69 (м, 1H), 3,58-3,45 (м, 1H), 3,40-3,30 (м, 1H), 3,19-3,10 (м, 1H), 3,05-3,01 (м, 1H), 2,64 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,43-2,16 (м, 4H), 2,04-1,71 (м, 4H).
Описание D496
6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (изомер 2, D496)
3
4
3
2
2
4
2
2
.
К раствору 6-(3,3-дифтор-1-оксетан-3-yl-пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (50 мг, 0,16 ммоль) (энантиомер2) в толуоле (10 мл) добавляли 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (73 мг, 0,19 ммоль), KPO (103 мг, 0,49 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (69 мг, 0,49 ммоль) и CuI (93 мг, 0,49 ммоль). Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение 3 часов. К смеси добавляли NHHO (30%, 40 мл) и экстрагировали этилацетатом (40 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (40 мл) и насыщенным солевым раствором (40 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CH3OH=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (93 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества.
D496
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,01 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,59 (с, 1H), 4,76-4,68 (м, 8H), 4,43-4,33 (м, 2H ), 4,14-4,04 (м, 2H), 3,92-3,84 (м, 1H), 3,79-3,70 (м, 1H), 3,59-3,51 (м, 1H), 3,45-3,29 (м, 1H), 3,19-3,10 (м, 1H), 3,06-3,01 (м, 1H), 2,64 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,43-2,28 (м, 4H), 2,24-2,15 (м, 4H), 2,02-1,71 (м, 4H).
Описание D497
2-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пиперазин-1-ил)этанол (D497)
3
К суспензии 4,6-дииод-2-метилпиримидина (150 мг, 0,434 ммоль) и EtN (220 мг, 2,17 ммоль) в i-PrOH (5 мл) добавляли 2-(пиперазин-1-ил)этанол (85 мг, 0,65 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 1 часа. Смесь концентрировали и остаток очищали при помощи C18 с получением указанного в заголовке соединения (150 мг, выход 99%) в виде белого твердого вещества.
D497
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,78 (с, 1H), 3,68-3,61 (м, 6H), 2,60-2,54 (м, 6H), 2,45 (с, 3H).
Описание D498
(3S,4S)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (D498)
3
2
Смесь (3S,4S)-пирролидин-3,4-диола (96 мг, 0,95 ммоль) и 4,6-дииод-2-метилпиримидина (300 мг, 0,867 ммоль) в MeOH (10 мл) перемешивали при 70°C в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колонкой С18, используя CHCN/HO (5%-95%) с получением целевого продукта (170 мг, выход 61%) в виде белого твердого вещества.
D498
1
d
6
H ЯМР (300 Гц, DMSO-): δ 6,75 (с, 1H), 5,19-5,11 (м, 2H), 4,02-3,96 (м, 2H), 3,48-3,42 (м, 3H), 3,15-3,12 (м, 1H), 2,28 (с, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 4 мин, чистота составляет > 95%, Rt=1,478 мин; МС Вычисл.: 321, МС Найдено: 322 (M+H).
Описание D499
трет-
бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (D499)
трет-
3
4
3
2
2
4
4
3
4
3
.
К раствору 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (500 мг, 1,98 ммоль) в толуоле (30 мл) добавляли бутил 4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (998 мг, 2,78 ммоль), KPO (1,26 г, 5,94 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (1,12 г, 7,92 ммоль) и CuI (1,13 мг, 5,94 ммоль). Полученную смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение ночи. К смеси добавляли NHHO (30%, 80 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 15% воды (0,1% NHOAc) и 85% CHCN до 15% воды (0,1% NHOAc) и 85% CHCN за 20 мин, Скорость потока: 50 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (693 мг, выход 69%) в виде белого твердого вещества.
D499
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,14-4,09 (м, 5H), 3,76-3,69 (м, 4H), 3,64-3,59 (м, 1H), 3,56-3,49 (м, 5H), 3,14-3,05 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 1,92-1,78 (м, 4H), 1,49 (с, 9H).
Описание D500
1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол гидрохлорид (D500)
трет-
К раствору бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (696 мг, 1,37 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 10 мл). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (732 мг, выход >100%) в виде белого твердого вещества.
D500
1
d
6
H ЯМР (300 МГц,DMSO-): δ 9,40 (шир. с, 2H), 8,65 (с, 1H), 8,33 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 6,93 (с, 1H), 4,02 (с, 3H), 3,98-3,87 (м, 6H), 3,63-3,62 (м, 1H), 3,55-3,47 (м, 2H), 3,38-3,37 (1H), 3,33-3,27 (м, 2H), 3,18-3,06 (м, 1H), 2,43 (с, 3H), 1,89-1,62 (м, 4H).
Описание D501
(2S)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолин (D501)
3
4
2
К раствору 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (100 мг, 0,463 ммоль), (2S)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолина (194 мг, 0,463 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (131 мг, 0,923 ммоль) и KPO (195 мг, 0,920 ммоль) в сухом толуоле (5 мл) добавляли CuI (175 мг, 0,920 ммоль) в атмосфере N. Затем, смесь перемешивали 110°C в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали и неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM) с получением целевого продукта (180 мг, выход 77%) в виде желтого масла.
D501
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ8,82 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,70-4,62 (м, 1H), 4,41-4,01 (м, 5H), 3,95-3,46 (м, 8H), 3,21-2,81 (м, 3H), 2,63 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,05-1,58 (м, 10H).
Описание D502
(2R)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолин (D502)
3
4
2
К раствору 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (100 мг, 0,463 ммоль), (2R)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолина (194 мг, 0,463 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (131 мг, 0,923 ммоль) и KPO (195 мг, 0,920 ммоль) в сухом толуоле (5 мл) добавляли CuI (175 мг, 0,920 ммоль) в атмосфере N. Затем, смесь перемешивали 110°C в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали и неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM) с получением целевого продукта (165 мг, выход 71%) в виде желтого масла.
D502
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,96 (с, 1H),4,69-4,63 (м, 1H), 4,42-4,01 (м, 5H), 3,95-3,48 (м, 8H), 3,21-2,82 (м, 3H), 2,63 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,08-1,60 (м, 10H).
Описание D503
Метил 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-карбоксилат (D503)
3
2
2
4
К раствору 6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (5,00 г, 16,9 ммоль) в CHOH (100 мл) добавляли Pd(OAc) (757 мг, 3,38 ммоль), DPPF (1,87 г, 3,38 ммоль) и NaOAc (4,60 г, 33,8 ммоль). Смесь перемешивали при 100°C в атмосфере СО (5 МПа) в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток диспергировали в воде (100 мл). EtOAc (100 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии (PE:EtOAc=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (4,20 г, выход 91%) в виде желтого твердого вещества.
D503
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,18 (с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 5,75 (дд, 9,3, 2,7 Гц, 1H), 4,05-4,00 (м, 1H), 3,5 (с, 3H), 3,81-3,73 (м, 1H), 2,65 (с, 3H), 2,61-2,51 (м, 1H), 2,21-2,05 (м, 2H), 1,81-1,63 (м, 3H).
Описание D504
(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)метанол (D504)
2
4
2
4
К раствору метил 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-карбоксилата (4,20 г, 15,3 ммоль) в THF (40 мл) добавляли DIBAl-H (1 M в толуоле, 31 мл, 31 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. К смеси добавляли насыщ. раствор NaSO (10 мл). Смесь фильтровали. Фильтраты растворяли в EtOAc (100 мл). Смесь промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (3,60 г, выход 96%) в виде желтого масла.
D504
1
3
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,93 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 5,71 (дд, 9,9, 2,7 Гц, 1H), 4,81 (д, 5,1 Гц, 2H), 4,06-4,01 (м, 1H), 4,79-3,71 (м, 1H), 2,65-2,52 (м, 1H), 2,40 (с, 3H), 2,21-2,07 (м, 2H), 1,81-1,73 (м, 3H).
Описание D505
(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)метил метансульфонат (D505)
3
К раствору (5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)метанола (3,60 г, 14,6 ммоль) в THF (30 мл) добавляли NEt (2,95 г, 29,2 ммоль) и метансульфонилхлорид (1,99 г, 17,5 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (5,80 г, выход >100%) в виде желтого масла.
D505
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,95 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 5,71(дд, 9,3, 2,7 Гц, 1H), 5,39 (с, 2H), 4,04-4,00 (м, 1H), 3,80-3,76 (м, 1H), 2,92 (с, 3H), 2,60-2,51 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,17-2,04 (м, 2H), 1,76-1,62 (м, 3H).
Описание D506
2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)ацетонитрил (D506)
2
4
К раствору (5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)метил метансульфоната (5,80 г, неочищенный, 14,6 ммоль) в DMSO (30 мл) добавляли NaCN (1,43 г, 29,2 ммоль). Смесь перемешивали при 60°C в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду (150 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл×2) и насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии (PE:EtOAc от 10:1 до 2:1) с получением указанного в заголовке соединения (680 мг, выход 18%) в виде желтого масла.
D506
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,95 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 5,72 (дд, 9,6, 2,7 Гц, 1H), 4,07-4,02 (м, 1H), 3,80-3,72 (м, 3H), 2,61-2,50 (м, 1H), 2,41 (с, 3H), 2,19-2,03 (м, 2H), 1,80-1,64 (м, 3H).
Описание D507
2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)уксусная кислота (D507)
2
4
К раствору 2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)ацетонитрила (7,80 г, 30,6 ммоль) в этаноле (240 мл) добавляли раствор KOH (10,3 г, 184 ммоль) в воде (100 мл). Реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение ночи. Затем, смесь выпаривали для удаления этанола. Добавляли этилацетат (100 мл) и разделяли. Водному слою добавляли HCl (4 М) для установления рН=5. Этилацетат (200 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (7,6 г, выход 91%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
D507
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц,CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 5,67 (дд, 9,3, 2,4 Гц, 1H), 4,03-3,99 (м, 1H), 3,80 (с, 2H), 3,77-3,69 (м, 1H), 2,60-2,49 (м, 1H), 2,40 (с, 3H), 2,16-2,02 (м, 2H), 1,78-1,64 (м, 3H).
Описание D508
Метил 2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)ацетат (D508)
К смеси 2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)уксусной кислоты (1,15 г, 4,20 ммоль) и карбоната калия (1,16 г, 8,40 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли MeI (1,19 г, 8,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл×2). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл×2), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:EtOAc от 15:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,20 г, выход 99%) в виде бледно-желтого масла.
D508
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц,CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,43 (с, 1H), 5,68 (дд, 9,6, 2,4 Гц, 1H), 4,05-4,01 (м, 1H), 3,78-3,70 (м, 6H), 2,59-2,54 (м, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,17-2,02 (м, 2H), 1,79-1,63 (м, 3H).
Описание D509
Диметил 2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пентандиоат (D509)
К перемешиваемому раствору метил 2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)ацетата (1,50 г, 5,21 ммоль) и калий трет-бутилоксида (1,17 г, 10,4 ммоль) в толуоле (30 мл) добавляли метилакрилат (0,900 г, 10,4 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 часов. Затем смесь выливали в насыщенный раствор хлорида аммония (100 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии (петролейный эфир:EtOAc от 10:1 до 5:1) с получением указанного в заголовке соединения (0,65 г, выход 33%) в виде бледно-желтого масла.
D509
1
3
H ЯМР (300 МГц,CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 5,66 (дд, J=9,6, 2,1 Гц, 1H), 4,05-4,02 (м, 2H), 3,79-3,71 (м, 1H), 3,65 (с, 6H), 2,59-2,49 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,39-2,29 (м, 3H), 2,19-2,08 (м, 2H), 2,04-2,00 (м, 1H), 1,79-1,62 (м, 3H).
Описание D510
2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пентан-1,5-диол (D510)
4
2
4
К охлажденному водой со льдом раствору диметил 2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пентандиоата (1,63 г, 4,36 ммоль) в сухом THF (20 мл) добавляли LiAlH (0,550 г, 13,1 ммоль). После того, как реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа, осторожно добавляли воду (50 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:EtOAc от 1:1 до 0:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,10 г, выход 79%) в виде бесцветного масла.
D510
1
3
H ЯМР (300 МГц,CDCl): δ 7,91 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 7,37 (с, 1H), 5,69-5,66 (м, 1H), 4,03-3,99 (м, 1H), 3,81-3,70 (м, 3H), 3,62-3,56 (м, 2H), 3,29-3,25 (м, 1H), 2,59-2,53 (м, 1H), 2,43 (с, 3H), 2,18-2,04 (м, 2H), 1,95-1,90 (м, 1H), 1,76-1,48 (м, 6H).
Описание D511
5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол (D511)
К раствору 2-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пентан-1,5-диола (1,10 г, 3,46 ммоль) в сухом THF (60 мл) добавляли гидрид натрия (60% в минеральном масле, 415 мг, 10,4 ммоль) при 0°C. После того, как смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин, добавляли 1-тозил-1H-имидазол (0,850 г, 3,81 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 18 часов. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:EtOAc=5:1) с получением указанного в заголовке соединения (0,31 г, выход 30%) в виде желтого геля.
D511
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,90 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 7,37 (с, 1H), 5,69 (дд,=9,0, 3,0 Гц, 1H), 4,08-3,97 (м, 3H), 3,81-3,72 (м, 1H), 3,58-3,39 (м, 2H), 3,21-3,16 (м, 1H), 2,61-2,57 (м, 1H), 2,45 (с, 3H), 2,17-2,04 (м, 3H), 1,87-1,74 (м, 6H).
Описание D512 и D513
5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол (энантиомер 1, D512) и 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол (энантиомер 2, D513)
3
Смесь 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазола (0,310 г, 1,03 ммоль) в HCl/метаноле (4 M, 5 мл) перемешивали при 0°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом. Остаток разделяли между EtOAc (20 мл) и NaHCO (насыщ., 20 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили и концентрировали под вакуумом. Остаток разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ (IC, CAN: IPA=90: 10, 18 мл/ мин, 254 нм) с получением энантиомера 1 (65 мг, выход 21%) и энантиомера 2 (83 мг, выход 27%) оба в виде желтого геля.
D512 (энантиомер 1)
1
3
: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,95(с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,36 (с, 1H), 4,05-3,97 (м, 2H), 3,56-3,38 (м, 2H), 3,20-3,13 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,07-2,04 (м, 1H), 1,87-1,72 (м, 3H). Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH= 85:15, поток: 0,5 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=6,753 мин, 100% э.и.
D513 (энантиомер 2)
1
3
:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,96 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,36 (с, 1H), 4,06-3,97 (м, 2H), 3,58-3,38 (м, 2H), 3,20-3,13 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,06-2,01 (м, 1H), 1,87-1,73 (м, 3H). Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, Hex: EtOH= 85:15, поток: 0,5 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=8,997 мин, 98,77% э.и.
Описание D514
(Бут-3-ин-1-илокси)(
трет-
бутил)дифенилсилан (D514)
2
4
К охлажденному раствору бут-3-ин-1-ола (2,10 г, 30,0 ммоль) и имидазола (4,08 г, 60,0 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли раствор TBDPSCl (9,9 г, 36,0 ммоль) в дихлорметане (20 мл). Полученную смесь перемешивали при 0°C до комнатной температуры в атмосфере азота в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали дихлорметаном (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAC=50:1) с получением указанного в заголовке соединения (8,5 г, выход 92%) в виде желтого масла.
D514
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,69 (дд, =7,5, 1,8 Гц, 4H), 7,44-7,37 (м, 6H), 3,80 (т, =6,9 Гц, 2H), 2,49-2,43 (м, 2H), 1,97-1,95 (м, 1H), 1,07 (с, 9H).
Описание D515
5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-карбальдегид (D515)
2
4
К раствору 6-бром-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (6,90 г, 23,5 mmo) в 100 мл сухого THF добавляли по каплям n-BuLi (2,5 M в THF, 18,8 мл, 46,9 ммоль) при -78°C. После добавления реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 часа. Добавляли сухой DMF (34,2 г, 46,8 ммоль) к реакционной смеси и перемешивали при -78°C в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в воду (200 мл) и экстрагировали EtOAc (150 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (200 мл), сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в виде коричневого масла. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир:EtOAc=6:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,2 г, выход 56%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
D515
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,37 (с, 1H), 8,08 (с, 1), 8,00 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 5,80-5,76 (м, 1H), 4,05-4,01 (м, 1H), 3,82-3,74 (м, 1H), 2,74 (с, 3H), 2,58-2,50 (м, 1H), 2,18-2,07 (м, 2H), 1,81-1,65 (м, 3H).
Описание D516
5-((
трет-
бутилдифенилсилил)окси)-1-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пент-2-ин-1-ол (D516)
трет-
4
2
4
Раствор (бут-3-ин-1-илокси)(бутил)дифенилсилана (308 мг, 1,0 ммоль) в сухом THF ( 10 мл) обрабатывали n-BuLi (2,5 моль/л в гексане, 0,5 мл) при -78°C в течение 5 мин. После того, как реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин, добавляли раствор 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-карбальдегида (122 мг, 0,50 ммоль) в THF (2 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NHCl (30 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAC от 10:1 до 5:1) и препаративной ТСХ (PE:EtOAc=3:1) с получением указанного в заголовке соединения (143 мг, выход 51%) в виде серого твердого вещества.
D516
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,93 (с, 1H), 7,86 (с, 1H), 7,68-7,65 (м, 4H), 7,48 (с, 1H), 7,42-7,33 (м, 6H), 5,69-5,66 (м, 2H), 4,02-3,97 (м, 1H), 3,81 (т, =6,9 Гц, 2H), 3,72-3,63 (м, 1H), 2,57-2,52 (м, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,15-2,05 (м, 2H), 2,05-1,99 (м, 1H), 1,76-1,69 (м, 3H), 1,04 (с, 9H).
Описание D517
5-((
трет-
бутилдифенилсилил)окси)-1-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пентан-1-ол (D517)
трет-
2
Смесь 5-((бутилдифенилсилил)окси)-1-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пент-2-ин-1-ола (680 мг, 1,23 ммоль) и диоксид платины (68 мг) в EtOAc (40 мл) гидрогенизировали в атмосфере H при комнатной температуре в течение ночи. Смесь фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (720 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.
D517
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,93 (с, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,67-7,61 (м, 4H), 7,46 (с, 1H), 7,41-7,34 (м, 6H), 5,72-5,68 (м, 1H), 5,02-5,00 (м, 1H), 4,07-4,04 (м, 1H), 3,78-3,75 (м, 1H), 3,74-3,66 (м, 2H), 2,62-2,54 (м, 1H), 2,39 (с, 3H), 2,19-2,12 (м, 1H), 2,05-2,04 (м, 1H), 2,01-1,93 (м, 1H), 1,79-1,70 (м, 8H), 1,64-1,60 (м, 1H), 1,03 (с, 9H).
Описание D518
1-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пентан-1,5-диол (D518)
К раствору 5-((трет-бутилдифенилсилил)окси)-1-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пентан-1-ола (5,34 г, 9,60 ммоль) в THF (50 мл) добавляли тетрабутиламмоний фторид (9,50 г, 36,3 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом и очищали при помощи колонки C18 (5-60% ACN в воде) с получением указанного в заголовке соединения (2,34 г, выход 76%) в виде бесцветного масла.
D518
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,91 (с, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 5,72-5,68 (м, 1H), 5,04-5,00 (м, 1H), 4,10-4,02 (м, 1H), 3,75-3,66 (м, 3H), 2,61-2,51 (м, 1H), 2,39 (с, 3H), 2,22-2,14 (м, 1H), 2,14-2,12 (м, 1H), 2,03-1,93 (м, 1H), 1,77-1,71 (м, 4H), 1,68-1,52 (м, 4H).
Описание D519
5-метил-1,6-бис(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D519)
2
4
К раствору 1-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)пентан-1,5-диола (2,34 г, 7,35 ммоль) в сухом THF (100 мл) добавляли NaH (60% в материальном масле, 1,18 г, 29,4 ммоль,) при 0-5°C в атмосфере азота. После того, как смесь перемешивали при этой температуре в течение 30 мин, добавляли 1-тозил-1H-имидазол (1,96 г, 8,82 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционную смесь постепенно выливали в воду (100 мл) и экстрагировали EtOAc (100 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAC=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (965 мг, выход 43%) в виде белого твердого вещества.
D519
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,65 (д, =7,8 Гц, 1H), 7,45 (с, 1H), 5,75-5,71 (м, 1H), 4,59-4,55 (м, 1H), 4,23-4,20 (м, 1H), 4,08-4,00 (м, 1H), 3,81-3,64 (м, 2H), 2,61-2,54 (м, 1H), 2,40 (с, 3H), 2,19-2,12 (м, 1H), 2,04-1,99 (м, 2H), 1,97-1,92 (м, 1H), 1,87-1,76 (м, 4H), 1,76-1,68 (м, 3H).
Описание D520
5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D520)
3
2
4
К раствору 5-метил-1,6-бис(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (960 мг, 3,20 ммоль) в диоксане (30 мл) и метаноле (10 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 8 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем концентрировали. Добавляли 50% EtOAc в PE (30 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением белого твердого вещества (700 мг). Добавляли насыщ. NaHCO (30 мл) и перемешивали в течение 10 минут, водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (570 мг, выход 82%) в виде белого твердого вещества.
D520
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,41 (шир. с, 1H), 7,96 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 4,59-4,56 (м, 1H), 4,24-4,20 (м, 1H), 3,73-3,65 (м, 1H), 2,42 (с, 3H), 1,99-1,96 (м, 1H), 1,92-1,87 (м, 1H), 1,79-1,61 (м, 3H), 1,54-1,50 (м, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], Rt=3,398 мин; МС Вычисл.: 216, МС Найдено: 217 [M+H].
Описание D521 и D522
5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (энантиомер 1, D521) и 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (энантиомер 2, D522)
Рацемический 5-метил-6-(тетрагидро-пиран-2-ил)-1H-индазол (639 мг, 2,95 ммоль) разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ с получением энантиомера 1 (290 мг) и энантиомера 2 (298 мг) оба в виде желтого твердого вещества.
D521 (энантиомер 1):
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,95 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 4,57 (д, =10,8 Гц, 1H), 4,22 (д, =11,4 Гц, 1H), 3,73-3,66 (м, 1H), 2,42 (с, 3H), 1,99-1,96 (м, 1H), 1,92-1,87 (м, 1H), 1,79-1,61 (м, 3H), 1,54-1,50 (м, 1H).
2
2
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak OD-H, Фаза: CO/MeOH=70/30, скорость потока (CO: 2,1 мл/мин; MeOH: 0,899 мл/мин), T=40°C], Rt=2,70 мин, 99,33% э.и.
D522 (энантиомер 2):
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,96 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 4,57 (д, =10,8 Гц, 1H), 4,22 (д, =13,8 Гц, 1H), 3,69 (т, =11,4 Гц, 1H), 2,42 (с, 3H), 1,99-1,96 (м, 1H), 1,92-1,87 (м, 1H), 1,79-1,61 (м, 3H), 1,54-1,50 (м, 1H).
2
2
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak OD-H, Фаза: CO/MeOH=70/30, скорость потока (CO: 2,1 мл/мин; MeOH: 0,899 мл/мин), T=40°C], Rt=5,63 мин, 99,23% э.и.
Описание D523
4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)тетрагидро-2H-пиран-3-ол и 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)тетрагидро-2H-пиран-4-ол (изомер) (D523)
3
2
2
2
2
2
3
2
4
К раствору 6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (2,0 г, 6,7 ммоль) в сухом THF (20 мл) добавляли BH.THF (1 M, 20 мл, 20 ммоль) по каплям на бане со льдом и в атмосфере N. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем смесь охлаждали до 0°C и осторожно добавляли по каплям MeOH (4 мл). После того, как полученную смесь перемешивали в течение 30 мин на бане со льдом, затем добавляли NaOH (4 M, 5,0 мл, 20 ммоль) и HO (30%, 2,3 г, 20 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь постепенно выливали в NaSO (10%, 100 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Затем органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc=2:1). Неочищенный продукт растирали с PE/EtOAc (5/1, 5 мл) и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (1,0 с с 9% изомера, выход 31%) в виде белого твердого вещества.
D523
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,90 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 5,68-5,65 (м, 1H), 4,21-4,14 (м, 1H), 4,10-3,97 (м, 3H), 3,80-3,70 (м, 1H), 3,58-3,46 (м, 1H), 3,34-3,27 (м, 1H), 3,14-3,00 (м, 1H), 2,64-2,51 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,20-1,99 (м, 2H), 1,91-1,70 (м, 6H).
Описание D524
6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол и 6-(4-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (изомер) (D524)
2
2
3
2
4
К раствору 4-(5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)тетрагидро-2H-пиран-3-ола (1,0 г с 9% изомера, 3,2 ммоль) в сухом DCM (150 мл) добавляли DAST (2,06 г, 12,8 ммоль) при -60°C в атмосфере N. После перемешивания при -60°C в течение 20 мин, реакционную смесь нагревали до комнатной температуры в течение 30 минут. Реакционную смесь постепенно выливали в NaCO (10%, 150 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (1,0 г с 9% изомера, выход 99%) в виде слегка коричневого масла.
D524
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7,92 (с, 1H), 7,53-7,51 (м, 2H), 5,74-5,70 (м, 1H), 5,10-4,84 (м, 1H), 4,19-4,10 (м, 1H), 4,06-3,94 (м, 2H), 3,80-3,72 (м, 1H), 3,69-3,62 (м, 1H), 3,55-3,34 (м, 2H), 2,59-2,52 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,28-1,93 (м, 4H),1,86-1,63 (м, 3H).
Описание D525
6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол и 6-(4-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол (изомер) (D525)
2
3
2
4
К раствору 6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (1,0 г с 9% изомера, 3,1 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли конц. HCl (5 мл) по каплям при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем к смеси добавляли по каплям NaCO (насыщ.) для установления pH=11. Затем водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 2:1 до 1:1) с получением указанного в заголовке соединения (650 мг с 8% изомера, выход 88%) в виде белого полутвердого вещества.
D525
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,01 (шир. с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 5,05-4,81 (м, 1H), 4,18-3,95 (м, 2H), 3,68-3,59 (м, 1H), 3,52-3,33 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,29-2,14 (м, 1H), 2,06-1,90 (м, 1H).
Описание D526 и D527
6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1) с 6-(4-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазолом (изомер) (D526) и 6-(3-фтортетрагидро-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2, D527)
6-(3-Фтортетрагидро-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол (650 мг с 8% изомера, 2,77 ммоль) разделяли хиральной препаративной ВЭЖХ [Колонка: Chiralpak OJ (20 мм×250 мм, 5 мкм); длина волны (W): 214 нм; Подвижная фаза: гексан/этанол=60/40 (об/об); Скорость потока: 13 мл/мин] с получением указанного в заголовке соединения энантиомера 1 (280 мг с 18% изомера, выход 35%) и энантиомера 2 (210 мг, выход 32%) оба в виде белого твердого вещества.
D526
1
3
: H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,10 (шир. с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 5,06-4,80 (м, 1H), 4,18-3,95 (м, 2H), 3,67-3,59 (м, 1H), 3,52-3,32 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,29-2,15 (м, 1H), 2,09-1,89 (м, 1H).
D527
1
3
:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,00 (шир. с, 1H), 7,98 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 5,06-4,79 (м, 1H), 4,20-3,98 (м, 2H), 3,68-3,60 (м, 1H), 3,52-3,32 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,29-2,15 (м, 1H), 2,09-1,89 (м, 1H).
Описание D528 и D529
6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (изомер 1, D528) и 6-(4-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (изомер, D529)
3
4
2
2
4
К суспензии 6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (70 мг с 18% изомера, 0,30 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (113 мг, 0,300 ммоль), CuI (57 мг, 0,30 ммоль) и KPO (127 мг, 0,60 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (85 мг, 0,60 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем реакционную смесь охлаждали и разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=2:1) с получением указанного в заголовке соединения (60 мг, выход 42%) в виде белого твердого вещества и изомера (30 мг).
D528
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,94 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,59 (с, 1H), 5,11-4,86 (м, 1H), 4,75-4,68 (м, 2H), 4,41-4,33 (м, 2H), 4,22-4,01 (м, 4H), 3,92-3,85 (м, 1H), 3,69-3,61 (м, 1H), 3,58-3,50 (м, 2H), 3,46-3,36 (м, 1H), 2,61 (с, 3H), 2,50 (с, 3H), 2,35-2,22 (м, 1H), 2,10-1,95 (м, 1H), 1,89-1,55 (м, 6H).
D529 (изомер):
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,00 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 4,77-4,69 (м, 2H), 4,42-4,34 (м, 2H), 4,16-3,86 (м, 7H), 3,56-3,49 (м, 1H), 2,65-2,61 (м, 6H), 2,52-2,18 (м, 4H), 1,90-1,60 (м, 6H).
Описание D530
6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол
(изомер 2, D530)
3
4
2
2
4
К суспензии 6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазола(энантиомер 2) (60 мг, 0,26 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (98 мг, 0,26 ммоль), CuI (50 мг, 0,26 ммоль) и KPO (110 мг, 0,52 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (74 мг, 0,52 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем реакционную смесь охлаждали и разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (100 мг, выход 81%) в виде белого твердого вещества.
D530
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,94 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 5,12-4,86 (м, 1H), 4,76-4,65 (м, 2H), 4,42-4,33 (м, 2H), 4,22-4,01 (м, 4H), 3,93-3,85 (м, 1H), 3,69-3,60 (м, 1H), 3,57-3,50 (м, 2H), 3,47-3,36 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,34-2,23 (м, 1H), 2,09-1,95 (м, 1H), 1,91-1,71 (м, 2H), 1,66-1,58 (м, 4H).
Описание D531
6-изопропокси-5-метил-1H-индазол (D531)
Стадия 1:
4
К раствору 5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ола (463 мг, 1,993 ммоль) в DMF (4 мл) добавляли суспензию гидрида натрия (159 мг, 3,99 ммоль) в DMF (4,00 мл) при 0°C и реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Добавляли 2-бромпропан (0,225 мл, 2,392 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, гасили насыщ. раствором NHCl и смесь выпаривали в вакууме и очищали при помощи колоночной хроматографии с нормальной фазой (EA/PE: 0%-100%) с образованием 6-изопропокси-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (368 мг, 1,341 ммоль, 67,3% выход).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=3,942 мин; МС Вычисл.:275,1 МС Найдено: 275,1 (M+H).
Стадия 2:
В 25 мл круглодонный сосуд, наполненный 6-изопропокси-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазолом (203 мг, 0,740 ммоль), добавляли этанол (2 мл) и хлористоводородную кислоту (конц.) (1 мл, 32,9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем смесь выпаривали в вакууме и полученный 6-изопропокси-5-метил-1H-индазол непосредственно использовали на следующей стадии без очистки.
D531
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=3,068 мин; МС Вычисл.:191,1 МС Найдено: 191,1 (M+H).
Описание D532
6-изопропокси-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (D532)
2
4
В 50 мл круглодонный сосуд, наполненный 6-изопропокси-5-метил-1H-индазолом (114 мг, 0,601 ммоль), добавляли иодид меди(I) (114 мг, 0,601 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (235 мг, 0,601 ммоль), фосфат калия (128 мг, 0,601 ммоль) и толуол (6 мл). Затем, добавляли в атмосфере азота N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (0,095 мл, 0,601 ммоль). Смесь затем перемешивали при 120°C в течение 2 часов в атмосфере азота. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли EtOAc (40 мл) и воду (20 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (40 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (30 мл), сушили над безводным NaSO.Затем смесь выпаривали в вакууме и очищали при помощи колоночной хроматографии с нормальной фазой (EA/PE: 0%-60%) с получением 6-изопропокси-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (59 мг, 0,130 ммоль, 21,65% выход).
D532
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=4,599 мин; МС Вычисл.:454,2 МС Найдено: 454,1 (M+H).
Описание D533
1-бром-2-хлор-4-метил-5-нитробензол (D533)
3
2
4
Конц. HNO (15 мл) медленно добавляли к раствору 1-бром-2-хлор-4-метилбензола (20 г, 100 ммоль) в конц. HSO (65 мл) при -20°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 5 минут и затем выливали в воду со льдом (500 г). Затем, смесь фильтровали и твердое вещество промывали водой и сушили с получением неочищенного продукта в виде желтого твердого вещества. (23 г, 95% выход).
D533
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,27 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 2,56 (с, 3H).
Описание D534
5-бром-4-хлор-2-метиланилин (D534)
2
3
3
Конц.HCl медленно добавляли к перемешиваемой смеси Fe (22,4 г, 400 ммоль) и 1-бром-2-хлор-4-метил-5-нитробензола(20 г, 80 ммоль) в THF (100 мл) при комнатной температуре пока реакция не завершится (Температура реакции повышалась до ~60°C). Затем реакционную смесь выливали в KCO (200 г) и EtOAc (500 мл) и смесь перемешивали в течение 0,5 часа. Смесь фильтровали и раствор промывали насыщ. NaHCO (2×200 мл). Затем раствор сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии (EtOAc/PE=1/10) с получением 5-бром-4-хлор-2-метиланилина в виде желтого твердого вещества (11 г, 62% выход).
D534
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 7,10 (с, 1H), 6,90 (с, 1H), 3,63 (шир, 2H), 2,09 (с,3H)
Описание D535
6-бром-5-хлор-1H-индазол (D535)
2
3
Раствор NaNO (3,04 г, 44 ммоль) в воде (10 мл) добавляли к раствору 5-бром-4-хлор-2-метиланилина (9,3 г, 40 ммоль) в HOAc (50 мл) при комнатной температуре и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Затем реакционную смесь концентрировали и остаток разбавляли EtOAc (200 мл). Смесь промывали насыщ. NaHCO (2×100 мл) и сушили. Затем раствор фильтровали и концентрировали с получением неочищенного продукта в виде коричневого твердого вещества (4,7 г, 50% выход).
Описание D536
6-бром-5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D536)
3
Раствор 6-бром-5-хлор-1H-индазола (4,7 г, 20 ммоль), DHP (4,7 мл) и p-TsOH (30 мг) в THF (50 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали насыщ. NaHCO (2×100 мл). Затем раствор сушили и концентрировали. Остаток очищали колонкой с силикагелем (PE/EtOAc=10/1) с получением 6-бром-5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола в виде желтого твердого вещества (2,5 г, 40% выход).
D536
1
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 7,95 (с, 2H), 7,83 (с, 1H), 5,66 (дд, 9,6 2,8 Гц, 1H), 4,02-4,00 (м,1H), 3,78-3,73 (м, 1H), 2,50-2,48 (м, 1H), 2,16-2,05 (м, 1H), 1,80-1,66 (м, 1H).
Описание D537
5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-индазол (D537)
экв.
экв.
экв.
2
2
2
Раствор 6-бром-5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола(400 мг, 1,26 ммоль, 1,0 ), бис(пинаколато)диборона (481 мг, 1,89 ммоль, 1,5 экв.) и KOAc(483 мг, 5,04 ммоль, 4,0 ) в диоксане (15 мл) дегазировали и повторно наполняли Ar 3 раза водяным насосом. Pd(dppf)Cl (96 мг, 0,126 ммоль, 0,1 ) добавляли быстро в одной части под Ar. После дегазации еще 3 раза с водяным насосом, реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 5 ч. Добавляли 30 мл HO и экстрагировали DCM три раза. Органическую фазу объединяли и сушили над NaSO4. Флэш-хроматография с PE:EtOAc=10:1 давала соединение 5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-индазол в виде желтого твердого вещества (220 мг, выход 48%).
D537
1
3
J=
J
J=
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 7,96 (с, 1H), 7,89 (с, 1H), 7,71 (с, 1H), 5,75 (д,9,1 Гц, 1H), 4,01 (м, 1H), 3,77 (т,=10,6 Гц, 1H), 2,57 (д, 11,1 Гц, 1H), 2,16 (с, 1H), 2,03 (д, 11,6 Гц, 1H), 1,88-1,54 (м, 3H), 1,41 (с, 12H).
Описание D538
5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ол (D538)
2
2
2
2
4
К раствору 5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-индазола (220 мг, 0,6 ммоль) в THF (2 мл) и 1 н раствора NaOH (1 мл) добавляли 30% HO(0,2 г) при 0°C. После нескольких минут смесь разбавляли HO и экстрагировали DCM три раза. Объединенный органический слой сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=2:1) с получением продукта (141 мг, выход 91,0%) в виде белого твердого вещества.
D538
1
3
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 7,89 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,20 (с, 1H), 5,80 (с, 1H), 5,60 (дд, =9,3, 2,1 Гц, 1H), 4,03 (д, =11,8 Гц, 1H), 3,73 (т, =9,5 Гц, 1H), 2,66-2,41 (м, 1H), 2,18-1,91 (м, 2H), 1,93-1,45 (м, 4H).
Описание D539
5-хлор-6-изопропокси-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол (D539)
2
3
2
2
4
К раствору 5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ола(141 мг, 0,56 ммоль) и KCO (154 мг, 1,12 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли 2-бромпропан (103 мг, 0,84 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли 10 мл HO и экстрагировали EtOAc три раза. Объединенный органический слой сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=6:1) с получением продукта (140 мг, выход 95,7%) в виде желтого масла.
D539
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 2,0 мин, Rt=1,31 мин; МС Вычисл.:294,1, МС Найдено: 295,1 [M+H].
Описание D540
5-хлор-6-изопропокси-1H-индазол (D540)
2
2
3
2
4
К раствору 5-хлор-6-изопропокси-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола(140 мг, 0,47 ммоль) в MeOH (1,0 мл) добавляли HCl/MeOH (3M, 2 мл) по каплям при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель и большую часть TFA удаляли в вакууме и остаток разбавляли CHCl (20 мл). Полученный раствор промывали насыщенным NaHCO (10 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта 5-хлор-6-изопропокси-1H-индазола(90 мг, выход 89,9%) в виде белого твердого вещества.
D540
1
J
J=
H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 7,99 (с, 1H), 7,89 (с, 1H), 7,18 (с, 1H), 4,78 (дт, =11,9, 6,0 Гц, 2H), 4,53 (шир, 1H), 1,40 (д,6,0 Гц, 6H).
Описание D541
5-хлор-6-изопропокси-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (D541)
3
4
2
К суспензии 5-хлор-6-изопропокси-1H-индазола (90 мг, 0,428 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (160 мг, 0,428 ммоль), CuI (81 мг, 0,43 ммоль) и KPO (181 мг, 0,856 ммоль) в сухом толуоле (2 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (46 мг, 0,856 ммоль). Суспензию дегазировали N и нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали PE/EtOAc=3:1) с получением продукта (72 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества.
D541
1
3
J=
J=
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,60 (с, 1H), 8,02 (с, 1H), 7,70 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 4,89-4,52 (м, 3H), 4,37 (дд, 15,7, 8,1 Гц, 2H), 4,09 (м, 2H), 3,89 (т, 9,5 Гц, 1H), 3,62-3,36 (м, 1H), 2,58 (с, 3H), 1,92-1,70 (м, 2H), 1,68-1,53 (м, 5H), 1,50 (д,6,0 Гц, 6H).
Описание D542
6-Бром-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (D542)
2
4
В 100 мл круглодонный сосуд, наполненный 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидином (1,778 г, 4,74 ммоль), добавляли 6-бром-5-метил-1H-индазол (1 г, 4,74 ммоль), N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (0,747 мл, 4,74 ммоль) и иодид меди(I) (0,902 г, 4,74 ммоль). Затем, фосфат калия (1,006 г, 4,74 ммоль) и толуол (20 мл) добавляли в атмосфере азота. Смесь затем перемешивали при 120°C в течение ночи в атмосфере азота. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли EtOAc (20 мл) и воду (10 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (PE: EtOAc=100:0→50:50) с получением 6-бром-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (1,29 г, 1,689 ммоль, 35,6% выход) в виде желтого твердого вещества.
D542
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=3,805 мин; МС Вычисл.: 458,1 МС Найдено: 458,0 (M+H).
Описание D543
(3R)-1-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-ол (D543)
2
4
2
К раствору (R)-пирролидин-3-ола (0,013 мл, 0,159 ммоль) в THF (10 мл) добавляли дициклогексил(2',6'-диизопропокси- [1,1'диизопропокси-[1,1'осфин (RuPhos) (29,7 мг, 0,064 ммоль), 6-бром-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (73 мг, 0,159 ммоль), диацетоксипалладий (7,15 мг, 0,032 ммоль) и натрий 2-метилпропан-2-олат (0,159 мл, 0,319 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в атмосфере азота в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем к смеси добавляли воду (20 мл) и EtOAc (50 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (40 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (40 мл), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с обращенной фазой (KP-C18-HS 60 г колонка, ACN:HO=5:95→95:5) с получением желаемого продукта (3R)-1-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-ол (20 мг, 0,043 ммоль, 27,0% выход) в виде бесцветного геля.
D543
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=2,666 мин; МС Вычисл.: 465,2 МС Найдено: 465,0 (M+H).
Описание D544
(3S)-1-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-ол (D544)
2
4
К раствору (S)-пирролидин-3-ола (0,053 мл, 0,655 ммоль) в THF (10 мл) добавляли дициклогексил(2',6'-диизопропокси-[1,1'-бифенил]-2-ил)фосфин (RuPhos) (122 мг, 0,262 ммоль), 6-бром-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (300 мг, 0,655 ммоль), диацетоксипалладий (29,4 мг, 0,131 ммоль) и натрий 2-метилпропан-2-олат (0,655 мл, 1,309 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в атмосфере азота в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем к смеси добавляли воду (40 мл) и EtOAc (100 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (60 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (40 мл), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (EA:PE=5:95→95:5) с получением желаемого продукта (3S)-1-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-ол (124 мг, 0,267 ммоль, 40,8% выход) в виде бесцветного геля.
D544
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=2,773 мин; МС Вычисл.: 465,2 МС Найдено: 465,1 (M+H).
Описание D545
8-(5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декан (D545)
t
2
3
2
К раствору 6-бром-5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (900 мг, 2,85 ммоль) и1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декана (1,21 г, 8,56 ммоль) в толуоле (30 мл) добавляли BuONa (1,28 г, 13,3 ммоль), XPhos (270 мг, 0,56 ммоль) и Pd(dba) (270 мг, 0,29 ммоль) в атмосфере N. Смесь перемешивали при 45°C в течение 6 часов. Реакционный раствор разбавляли EtOAc (60 мл) и фильтровали через слой целита. Фильтрат концентрировали и очищали хроматографией на силикагеле с получением 8-(5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декана в виде светло-желтого твердого вещества (390 мг, 36%).
D545
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,87 (с, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,18 (с, 1H), 5,63-5,61 (д, 1H), 4,03 (с, 4H), 3,75-3,71 (т, 1H), 3,19 (с, 4H), 2,54-2,51 (кв, 1H), 2,17-2,14 (м, 1H), 2,07-2,04 (д, 1H), 1,97-1,95(т, 3H), 1,78-1,75 (м, 4H), 1,73-1,70 (м, 1H), 1,16-1,14 (м, 1H).
Описание D546
1-(5-хлор-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-он (D546)
2
3
2
4
К раствору 8-(5-хлор-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-6-ил)-1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декана(390 мг, 1,03 ммоль) в диоксане(5 мл) добавляли раствор HCl (3M, в воде, 5 мл). Смесь перемешивали при 50°C в течение 4 ч. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и затем гасили насыщенным раствором NaCO. Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои сушили над NaSO, концентрировали и очищали препаративной ТСХ (DCM/MeOH, 10/1) с получением указанного в заголовке продукта, 1-(5-хлор-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-она в виде светло-желтого твердого вещества(100 мг, 38,8%).
D546
+
МС Вычисл.:249,0, МС Найдено: 250,0 (M+H).
Описание D547
1-(5-хлор-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-он (D547)
3
4
К раствору 1-(5-хлор-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-она (100 мг, 0,40 ммоль) (100 мг, 0,40 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина(165,3 мг, 0,44 ммоль), CuI (114 мг, 0,60 ммоль), KPO (170,4 мг, 0,80 ммоль), N1,N2-диметилэтан-1,2-диамина (70,0 мг, 0,80 ммоль) в толуоле (5 мл) перемешивали при 100°C в течение 4 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры. Органическую фазу разбавляли EtOAc (20 мл) и фильтровали через слой целита. Фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт повторно растворяли в DCM (5 мл) и далее очищали препаративной ТСХ (DCM/MeOH, 20/1) с получением 1-(5-хлор-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-онав виде белого твердого вещества (130 мг) и использовали непосредственно на следующей стадии.
Описание D548
1-(5-хлор-1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-он (D548)
2
3
2
4
К раствору 1-(5-хлор-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-она(130 мг, 0,26 ммоль) в THF (5 мл) добавляли 2M HCl (5 мл, водный раствор). Смесь перемешивали при 50°C в течение 4 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и гасили насыщенным NaCO. Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенный органический слой сушили над NaSO, концентрировали и затем очищали препаративной ТСХ (DCM/MeOH, 10/1) с получением указанного в заголовке продукта 1-(5-хлор-1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-онв виде белого твердого вещества (95 мг, выход 88%)
D548
1
H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 8,70 (с, 1H),8,09 (с, 1H), 7,78 (с, 1H), 6,61 (с, 1H), 4,85-4,84 (с, 1H), 4,44-4,40 (т, 2H), 4,03-4,00 (т, 2H), 3,49-3,46 (т, 2H), 2,73-2,70 (т, 2H), 2,59-2,56 (с, 3H).
Описание D549
6-(3,6-Дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол (D549)
К раствору 6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазола (400 мг, 1,341 ммоль) в метаноле (30 мл) добавляли HCl (0,335 мл, 4,02 ммоль) и раствор перемешивали при 40°C в течение 1 часа. Растворитель удаляли и остаток использовали на следующих стадиях без дополнительной очистки.
D549
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,735 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 214; МС Найдено: 215,1 (M+1).
Описание D550
1-(6-хлор-2-метилпиримидин-4-ил)-6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол (D550)
2
3
К раствору 6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазола (287 мг, 1,339 ммоль) и 4,6-дихлор-2-метилпиримидина (240 мг, 1,473 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли KCO (370 мг, 2,68 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 1 часа при микроволновом излучении. К реакционной смеси добавляли воду (100 мл) и EtOAc (100 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл×3 раза). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 раза), сушили над безводным Na2SO4 и затем концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (Biotage, колонка 120 г, EtOAc:PE=5:95→60:40) с получением 1-(6-хлор-2-метилпиримидин-4-ил)-6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазола (100 мг, 0,264 ммоль, 19,72% выход) в виде белого твердого вещества.
D550
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=4,352 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 340; МС Найдено: 341,0 (M+1).
Описание D551
трет-
бутил 4-(6-(6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилат (D551)
2
2
3
2
4
К раствору трет-бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (91 мг, 0,293 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл)/воде (1,0 мл) добавляли 1-(6-хлор-2-метилпиримидин-4-ил)-6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол (100 мг, 0,293 ммоль), PdCl(dppf) (21,47 мг, 0,029 ммоль) и KCO (81 мг, 0,587 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов в атмосфере азота. К реакционной смеси добавляли воду (200 мл) и EtOAc (200 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 раза), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (Biotage, колонка 120 г, EtOAc:PE=5:95→60:40) с получением продукта (53 мг).
D551
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,720 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 487; МС Найдено: 488,0 (M+1).
Описание D552
6-(3,6-Дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (D552)
К раствору трет-бутил 4-(6-(6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (53 мг, 0,109 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли TFA (100 мкл, 1,298 ммоль). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток (42,1 мг) использовали на следующих стадиях без дополнительной очистки.
D552
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,800 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 387; МС Найдено: 388,1 (M+1).
Описание D553
6-(3,6-Дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол (D553)
3
2
4
К раствору 6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (42 мг, 0,108 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли оксетан-3-он (15,62 мг, 0,217 ммоль) и NaBH(OAc) (45,9 мг, 0,217 ммоль). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли воду (100 мл) и EtOAc (100 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×3 раза), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали. Остаток (42 мг) использовали на следующих стадиях без дополнительной очистки.
D553
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,794 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 443; МС Найдено: 444,0 (M+1).
Описание D554
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-он (D554)
К смеси (S)-1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (220 мг, 0,47 ммоль) в DCM (30 мл) добавляли DMP (402 мг, 0,94 ммоль), затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Растворитель удаляли и остаток очищали при помощи колонки с получением твердого вещества. (106 мг; 49% выход).
D554
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 30% воды (0,1% FA) и 70% CHCN (0,1% FA) до 30% воды (0,1% FA) и 70% CHCN (0,1% FA) за 2 мин]. МС Вычисл.: 462,24, МС Найдено: 463,4[M+H], Rt=1,52 мин
Описание D555
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-3-метилпирролидин-3-ол (D555)
К суспензии 1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-она (106 мг, 0,23 ммоль) в THF (20 мл) добавляли MeMgBr (0,345 ммоль) при 0°C. Затем нагревали до комнатной температуры в течение 4 часов. Добавляли воду и экстрагировали EtOAc. Органические вещества промывали насыщенным солевым раствором, концентрировали и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле с получением белого твердого вещества (65 мг, выход 59%)
D555
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,78 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 4,69 (д, =6,0 Гц, 4H), 4,15 (с, 3H), 3,48-3,77 (м, 5H), 2,92-2,95 (м, 3H); 2,45 (с, 3H); 1,91-2,03 (м, 8H), 1,51 (с, 3H).
Описание D556
трет-
бутил 2-(метокси(метил)карбамоил)морфолин-4-карбоксилат (D556)
трет-
2
4
К раствору добавляли DIEA (2,79 г, 21,6 ммоль) 4-(бутоксикарбонил)морфолин-2-карбоновую кислоту (1,0 г, 4,3 ммоль), N,O-диметилгидроксиламин гидрохлорид (1,26 г, 13,0 ммоль) и HATU(1,81 г, 4,8 ммоль) в DMF(10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часа. Смесь добавляли в воду (10 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные слои промывали 1 н HCl (10 мл), 1 н NaOH (10 мл×3), водой (10 мл×2) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO, и затем выпаривали с получением светло-желтого масла (1,03 г, выход:86,8%).
D556
1
J
J
J
J
1
2
H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 4,34(с, 1H), 4,15-4,00 (м, 2H), 3,87, 3,87 (д, =2 Гц, 1H), 3,76 (с, 3H), 3,62, 3,59, 3,59, 3,57 (дд, =10 Гц, =1,6 Гц, 1H), 3,22 (с, 3H), 3,06, 3,06 (д, =1,2 Гц, 2H), 1,47 (с, 9H).
Описание D557
трет-
бутил 2-ацетилморфолин-4-карбоксилат (D557)
трет-
4
2
4
К раствору добавляли EtMgBr (1,79 мл, 5,36 ммоль) бутил 2-(метокси(метил)карбамоил)морфолин-4-карбоксилат(980 мг, 3,57 ммоль) в THF (20 мл) в атмосфере Ar при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь добавляли в водный раствор NHCl (2 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл), промывали водой и насыщенным солевым раствором, и сушили над NaSO. Очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=10:1-2:1) с получением бесцветного масла (528 мг, выход:64,5%)
D557
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 4,15 (с, 1H), 3,97 (д, =10,9 Гц, 1H), 3,85 (с, 2H), 3,57 (с, 1H), 2,96 (с, 1H), 2,80 (т, =11,7 Гц, 1H), 2,24 (с, 3H), 1,47 (с, 9H).
Описание D558
1-(Морфолин-2-ил)этанон гидрохлорид (D558)
трет-
HCl/EtOAc (3M, 10 мл) добавляли к раствору бутил 2-ацетилморфолин-4-карбоксилата (1,5 г, 6,5 ммоль) в EtOAc (40 мл) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Удалили растворитель, с получением неочищенного желтого твердого вещества (0,9 г, выход: 95%).
D558
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,1% FA) и 30% CHCN (0,1% FA), Rt=0,28 мин; МС Вычисл.: 129,08; МС Найдено: 130,0 [M+H].
Описание D559
1-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанон (D559)
2
DIEA (469 мг, 3,6 ммоль) добавляли к раствору 1-(морфолин-2-ил)этанон гидрохлорида (200 мг, 1,2 ммоль) и 4,6-дииод-2-метилпиримидина (628 мг, 1,82 ммоль) в EtOH/THF (20 мл/20 мл). Реакционную смесь перемешивали при 40°C под Ar в течение 4 часов. Растворитель удаляли и к смеси добавляли воду (20 мл). Экстрагировали EtOAc (100 мл), промывали HO (20 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл). Очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=6:1-2:1) с получением белого твердого вещества (260 мг, выход: 62,1%)
D559
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,1% FA) и 40% CHCN (0,1% FA), Rt=0,47 мин; МС Вычисл.: 347,01; МС Найдено: 348,0 [M+H].
Описание D560
1-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанон (D560)
3
4
N,N'-диметилэтилендиамин (145 мг, 1,65 ммоль) добавляли К раствору 1-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанона (287 мг, 0,83 ммоль), 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (224 мг, 0,83 ммоль), CuI (157 мг, 0,83 ммоль) и KPO(350 мг, 1,65 ммоль) в толуоле (10 мл). Смесь перемешивали при 100°C в течение 4 часа. Растворитель удаляли и очищали при помощи колонки (DCM:MeOH=50:1) для получения продукта в виде белого твердого вещества (187 мг, выход:46,1%).
D560
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=1,20 мин; МС Вычисл.: 490,6; МС Найдено: 491,5 [M+H].
Описание D561
1-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанол (D561)
4
2
4
NaBH(36 мг, 0,57 ммоль) добавляли к раствору 1-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанона (187 мг, 0,38 ммоль) в MeOH (5 мл). Смесь добавляли в воду (10 мл) и экстрагировали DCM (20 мл×2). Затем реакционную смесь промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл). Смесь затем сушили над NaSO. Очищали при помощи колонки (DCM:MeOH=50:1) с получением продукта в виде белого твердого вещества (122 мг, выход:65%).
D561
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=4,97 мин, Rt=5,12 мин; МС Вычисл.: 492,6; МС Найдено: 493,4 [M+H].
Описание D562
1-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанон (D562)
DIEA (1,2 г, 9,06 ммоль) добавляли к раствору 1-(морфолин-2-ил)этанон гидрохлорид (500 мг, 3,02 ммоль), 4,6-дииод-2-метоксипиримидин (1,3 г, 3,63 ммоль) в EtOH/THF (10 мл/10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 36 ч. After the solvent is removed, смесь очищали при помощи колонки (PE:EtOAC=5:1) с получением продукта в виде белого твердого вещества (990 mg, выход:90,3%).
D562
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,1% FA) и 40% CHCN (0,1% FA), Rt=0,58 мин; МС Вычисл.: 363,2; МС Найдено: 364,1 [M+H].
Описание D563
1-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанон (D563)
3
4
DMEDA (456 мг, 5,17 ммоль) добавляли к раствору 1-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанона (6990 мг, 2,59 ммоль), 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (701 мг, 2,59 ммоль), CuI (492 мг, 2,59 ммоль) и KPO(1097 мг, 5,17 ммоль) в толуоле (10 мл). Смесь перемешивали при 100°C в течение 5 часов. Растворитель удаляли и очищали при помощи колонки (DCM: MeOH=50:1) с получением продукта в виде белого твердого вещества (250 мг, выход: 19,1%).
D563
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=1,12 мин; МС Вычисл.: 506,6; МС Найдено: 507,4 [M+H].
Описание D564
1-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанол (D564)
4
2
4
NaBH (47 мг, 0,74 ммоль) добавляли к раствору 1-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанола (250 мг, 0,49 ммоль) в MeOH (10 мл). Смесь добавляли в воду (10 мл) и экстрагировали DCM (20 мл×2). Реакционную смесь промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл). Смесь затем сушили над NaSO. Реакционную смесь очищали с помощью препаративной пластины с получением продукта в виде белого твердого вещества (150 mg, выход: 59,8%).
D564
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=99 мин; МС Вычисл.: 508,6; МС Найдено: 509,5 [M+H].
Описание D565
трет-
бутил 4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (D565)
3
2
2
2
4
К раствору 5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол гидрохлорида (600 мг, 2,39 ммоль) в CHOH (10 мл) и HO (2 мл) добавляли KOH (268 мг, 4,78 ммоль) и (Boc)O (781 мг, 3,58 ммоль) на бане со льдом. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (PE:EtOAc от 10:1 до 4:1) с получением указанного в заголовке соединения (353 мг, выход 47%) в виде желтого масла.
D565
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 10,15 (шир. с, 1H), 7,95 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,29 (с, 1H), 4,34 (шир. с, 2H), 2,95-2,81 (м, 3H), 2,45 (с, 3H), 1,86-1,81 (м, 2H), 1,69-1,61 (м, 2H), 1,51 (с, 9H).
Примеры
Пример 1
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1)
(E1)
2
3
2
4
E1
E1
Суспензию 6-(3, 3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (120 мг, 0,450 ммоль), 4-(6-хлор-пиримидин-4-ил)-морфолина (180 мг, 0,900 ммоль) и CsCO (293 мг, 0,900 ммоль) в DMF (8 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=2:3) с получением  (16,3 мг, выход 8%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J
J
E1:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,00 (с, 1H), 8,56 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,11 (с, 1H), 3,81-3,76 (м, 4H), 3,75-3,71 (м, 4H), 3,43-3,22 (м, 2H), 3,13-3,09 (м, 1H), 2,61-2,33 (м, 8H), 2,27-2,19 (м, 1H), 1,98-1,91 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,85 (д, =243,3 Гц, 1F), -111,76 (д, =244,0 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), Rt=4,103 мин; МС Вычисл.: 428, МС Найдено: 429 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=85/15, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=10,897 мин, 99,5% э.и.
Пример 2
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2)
(E2)
2
3
2
4
E2
E2
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (110 мг, 0,415 ммоль), 4-(6-хлор-пиримидин-4-ил)-морфолина (164 мг, 0,820 ммоль) и CsCO (267 мг, 0,822 ммоль) в DMF (8 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=2:3) и каждый растирали с Hex/EtOAc (3/1, 5 мл) с получением  (26,6 мг, выход 15%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E2:
1
19
3
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,00 (с, 1H), 8,56 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,11 (с, 1H), 3,84-3,76 (м, 4H), 3,76-3,64 (м, 4H), 3,41-3,21 (м, 2H), 3,13-3,09 (м, 1H), 2,60-2,33 (м, 8H), 2,27-2,19 (м, 1H), 1,96-1,91 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,85 (д, =243,3 Гц, 1F), -111,77 (д, =243,3 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота >95%, Rt=4,077 мин; МС Вычисл.: 428, МС Найдено: 429 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=85/15, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=9,901 мин, 95,3% э.и.
Пример 3
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1) (E3)
2
3
2
4
E3
E3
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,30 ммоль), 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (138 мг, 0,600 ммоль) и CsCO (195 мг, 0,600 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:2) и растирали с Hex/EtOAc (3/1, 10 мл) с получением  (16,8 мг, выход 12%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E3:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,97 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,13 (с, 3H), 3,79-3,77 (м, 4H), 3,72-3,70 (м, 4H), 3,38-3,26 (м, 1H), 3,24-3,18 (м, 1H), 3,06-3,03 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,39-2,28 (м, 2H), 2,23-2,17 (м,1H), 1,92-1,89 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,98 (д, =243,3 Гц, 1F), -112,51 (д, =241,0 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота >95%, Rt=3,466 мин; МС Вычисл.: 458, МС Найдено: 459 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=7,681 мин, 96,7% э.и.
Пример 4
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2) (E4)
2
3
2
4
E4
E4
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,30 ммоль), 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (138 мг, 0,600 ммоль) и CsCO (195 мг, 0,600 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:2) и растирали с Hex/EtOAc (3/1, 10 мл) с получением  (22,5 мг, выход 16%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E4:
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,97 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,13 (с, 3H), 3,79-3,77 (м, 4H), 3,72-3,70 (м, 4H), 3,38-3,26 (м, 1H), 3,24-3,18 (м, 1H), 3,07-3,05 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,39-2,28 (м, 2H), 2,25-2,16 (м, 1H), 1,93-1,88 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,98 (д, =241,4 Гц, 1F), -112,50 (д, =242,9 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота >95%, Rt=3,500 мин; МС Вычисл.: 458, МС Найдено: 459 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=6,244 мин, 98,3% э.и.
Пример 5
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1) (E5)
2
3
2
4
E5
E5
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,30 ммоль), 4-(6-хлор-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолина (146 мг, 0,600 ммоль) и CsCO (195 мг, 0,600 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 110°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (18,8 мг, выход 13%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E5:
3
J=
J
1H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,92 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,58 (кв, 7,2 Гц, 2H), 3,80-3,77 (м, 4H), 3,72-3,70 (м, 4H), 3,39-3,27 (м, 1H), 3,25-3,18 (м, 1H), 3,06-3,03 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,40-2,29 (м, 2H), 2,25-2,19 (м, 1H), 1,92-1,89 (м, 1H), 1,51 (т, =7,2 Гц, 3H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -103,00 (д, =241,8 Гц, 1F), -112,11 (д, =241,4 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=4,380 мин, чистота > 95%; МС Вычисл.: 472, МС Найдено: 473 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=6,353 мин, 97,3% э.и.
Пример 6
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2) (E6)
2
3
2
4
E6
E6
Смесь 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,30 ммоль), 4-(6-хлор-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолина (146 мг, 0,600 ммоль) и CsCO (195 мг, 0,600 ммоль) в DMF (10 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду (20 мл) и EtOAc (20 мл) и смесь разделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл) и водой (20 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (40,9 мг, выход 29%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E6:
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,92 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,58 (кв, =7,2 Гц, 2H), 3,79-3,69 (м, 8H), 3,36-3,19 (м, 2H), 3,05-3,02 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,41-2,29 (м, 5H), 2,24-2,18 (м, 1H), 1,91-1,84 (м, 1H), 1,52 (т, =7,2 Гц, 3H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,78 (д, =242,1 Гц, 1F), -112,09 (д, =242,1 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота > 95%, Rt=4,189 мин; МС Вычисл.: 472, МС Найдено: 473 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=5,515 мин, 97,1% э.и.
Пример 7
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1) (E7)
2
3
2
4
E7
E7
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (100 мг, 0,377 ммоль), 4-(6-хлор-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолина (196 мг, 0,760 ммоль) и CsCO (248 мг, 0,763 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (36,4 мг, выход 20%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E7:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,86 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 5,55-5,45 (м, 1H), 3,79-3,77 (м, 4H), 3,72-3,70 (м, 4H), 3,39-3,27 (м, 1H), 3,23-3,16 (м, 1H), 3,04-3,00 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,39-2,32 (м, 2H), 2,24-2,18 (м, 1H), 1,91-1,87 (м, 1H), 1,51-1,49 (м, 6H).
19
3
J=
J=
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,58 (д, 242,1 Гц, 1F), -111,66 (д, 242,1 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин]: Rt=4,234 мин, чистота > 95%; МС Вычисл.: 486, МС Найдено: 487 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/IPA/DEA= 80/20/0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C]: Rt=7,372 мин, 95,4% э.и.
Пример 8
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2) (E8)
2
3
2
4
2
4
3
3
E8
E8
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (70 мг, 0,26 ммоль), 4-(6-хлор-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолина (134 мг, 0,52 ммоль) и CsCO (169 мг, 0,52 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. ТСХ показала, что исходный материал израсходован. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [XBridge, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 50-95% B; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением  (13,2 мг, выход 10%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E8:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,86 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 5,55-5,46 (м, 1H), 3,79-3,77 (м, 4H), 3,72-3,70 (м, 4H), 3,39-3,26 (м, 1H), 3,23-3,17 (м, 1H), 3,03-3,01 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,39-2,32 (м, 2H), 2,24-2,18 (м, 1H), 1,91-1,87 (м, 1H), 1,51-1,49 (м, 6H).
19
3
J=
J=
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,58 (д, 242,1 Гц, 1F), -111,66 (д, 241,8 Гц, 1F)
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин]: Rt=4,235 мин, чистота > 95%; МС Вычисл.: 486, МС Найдено: 487 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/IPA/DEA= 80/20/0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C]: Rt=6,502 мин, э.и. 97,1%.
Пример 9
4-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-6-морфолинопиримидин-2-карбонитрил (энантиомер 1) (E9)
2
3
2
4
2
4
3
3
E9
E9
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,30 ммоль), 4-хлор-6-морфолинопиримидин-2-карбонитрила (101 мг, 0,450 ммоль) и CsCO (196 мг, 0,602 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 45-95% B; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением указанного в заголовке соединения  (40,4 мг, выход 30%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E9:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,79 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,19 (с, 1H), 3,82-3,74 (м, 8H), 3,41-3,29 (м, 1H), 3,26-3,20 (м, 1H), 3,13-3,10 (м, 1H), 2,56-2,36 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,26-2,21 (м, 1H), 1,96-1,92 (м, 1H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,53 (д, J=241,4 Гц, 1F), -112,12 (д, J=243,3 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,933 мин; МС Вычисл.: 453, МС Найдено: 454 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм, CO/MeOH=70/30, сорастворитель: IPA, CO Скорость потока: 2,1 мл/мин, Скорость потока сорастворителя: 0,9 мл/мин, 254 нм, T=39°C), Rt=3,58 мин, 97,5% э.и.
Пример 10
4-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-6-морфолинопиримидин-2-карбонитрил (энантиомер 2) (E10)
2
3
2
4
2
4
3
3
E10
E10
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,30 ммоль), 4-хлор-6-морфолинопиримидин-2-карбонитрила (101 мг, 0,450 ммоль) и CsCO (196 мг, 0,602 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 45-95% B; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением указанного в заголовке соединения  (22,4 мг, выход 16%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E10:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,79 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,19 (с, 1H), 3,82-3,73 (м, 8H), 3,41-3,29 (м, 1H), 3,26-3,20 (м, 1H), 3,13-3,10 (м, 1H), 2,56-2,36 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,26-2,21 (м, 1H), 1,96-1,92 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,52 (д, =242,1 Гц, 1F), -112,11 (д, =241,0 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,913 мин; МС Вычисл.: 453, МС Найдено: 454 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм, CO/MeOH=70/30, сорастворитель: IPA, CO Скорость потока: 2,1 мл/мин, Скорость потока сорастворителя: 0,9 мл/мин, 254 нм, T=40°C), Rt=3,99 мин, 98,5% э.и.
Пример 11
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-этилпиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1) (E11)
2
3
2
4
E11
E11
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,30 ммоль), 4-(6-хлор-2-этилпиримидин-4-ил)морфолина (103 мг, 0,450 ммоль) и CsCO (196 мг, 0,603 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения  (25,8 мг, выход 19%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E11:
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 9,04 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 3,82-3,79 (м, 4H), 3,73-3,70 (м, 4H), 3,43-3,21 (м, 2H), 3,10-3,07 (м, 1H), 2,89 (кв, =7,6 Гц, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,44-2,38 (м, 2H), 2,26-2,21 (м, 1H), 1,96-1,92 (м, 1H), 1,43 (т, =7,6 Гц, 3H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,94 (д, =241,0 Гц, 1F), -112,73 (д, =241,0 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота>95%, Rt=4,178 мин; МС Вычисл.: 456, МС Найдено: 457 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/IPA=90/10, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=14,155 мин, 100% э.и.
Пример 12
4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-этилпиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2)
(E12)
2
3
2
4
E12
E12
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,30 ммоль), 4-(6-хлор-2-этилпиримидин-4-ил)морфолина (103 мг, 0,450 ммоль) и CsCO (196 мг, 0,600 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения  (35,8 мг, выход 26%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E12:
3
J
J
1H ЯМР (400 МГц, CDCl): 9,04 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 3,84-3,81 (м, 4H), 3,73-3,68 (м, 4H), 3,37-3,19 (м, 2H), 3,12-3,07 (м, 1H), 2,89 (кв, =7,6 Гц, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,44-2,35 (м, 2H), 2,26-2,20 (м, 1H), 1,95-1,90 (м, 1H), 1,43 (т, =7,6 Гц, 3H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,93 (д, =242,9 Гц, 1F), -112,73 (д, =242,9 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота> 95%, Rt=4,154 мин; МС Вычисл.: 456, МС Найдено: 457 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/IPA=90/10, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=12,122 мин, 100% э.и.
Пример 13
6-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октан (энантиомер 1
(E13)
)
2
3
2
4
2
4
3
3
E13
E13
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,30 ммоль), 6-(6-хлорпиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октана (135 мг, 0,60 ммоль) и CsCO (195 мг, 0,60 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 20-95% B; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением  (32,2 мг, выход 24%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E13:
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 9,01 (с, 1H), 8,55 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,87 (с, 1H), 4,74 (д, =6,0 Гц, 2H), 4,65 (д, J=6,0 Гц, 2H), 3,83 (шир. с, 2H), 3,60 (шир. с, 2H), 3,41-3,22 (м, 2H), 3,13-3,10 (м, 1H), 2,64-2,42 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,46 (с, 3H), 2,38-2,34 (м, 2H), 2,26-2,20 (м, 1H), 1,98-1,91 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,86 (д, =243,3 Гц, 1F), -111,79 (д, =243,6 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,498 мин; МС Вычисл.: 454, МС Найдено: 455 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, MeOH/EtOH=50/50, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C), Rt=14,710 мин, 98,7% э.и.
Пример 14
6-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октан (энантиомер 2)
(E14)
H
2
3
2
4
2
4
3
3
E14
E14
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,30 ммоль), 6-(6-хлорпиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октана (135 мг, 0,60 ммоль) и CsCO (195 мг, 0,60 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 20-95% B; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением  (25,2 мг, выход 18%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E14:
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 9,01 (с, 1H), 8,55 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,87 (с, 1H), 4,74 (д, =6,4 Гц, 2H), 4,66 (д, =6,0 Гц, 2H), 3,83 (шир. с, 2H), 3,60 (шир. с, 2H), 3,41-3,22 (м, 2H), 3,13-3,09 (м, 1H), 2,64-2,42 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,46 (с, 3H), 2,38-2,34 (м, 2H), 2,26-2,20 (м, 1H), 1,97-1,93 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,87 (д, =243,6 Гц, 1F), -111,79 (д, =243,3 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,567 мин; МС Вычисл.: 454, МС Найдено: 455 [M+H] .
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, MeOH/EtOH=50/50, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C), Rt=13,072 мин, 100% э.и.
Пример 15
(2
R
)-4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 1)(E15)
R
N
2
3
2
4
2
4
3
3
E15
E15
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,30 ммоль), ()-4-(6-хлорпиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамида (116 мг, 0,452 ммоль) и CsCO (195 мг, 0,599 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 30-60% B; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением  (48,3 мг, выход 33%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E15:
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,99 (с, 1H), 8,57 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,23 (с, 1H), 6,62-6,61 (м, 1H), 4,66-4,63 (м, 1H), 4,49-4,50 (м, 1H), 4,12-4,05 (м, 2H), 3,76-3,69 (м, 1H), 3,41-3,21 (м, 2H), 3,14-3,03 (м, 2H), 2,99-2,93 (м, 1H), 2,88 (д, =4,8 Гц, 3H), 2,59-2,35 (м, 8H), 2,26-2,21 (м, 1H), 1,96-1,92 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,85 (д, =243,3 Гц, 1F), -111,78 (д, =243,6 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,784 мин; МС Вычисл.: 485, МС Найдено: 486 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-3 3 мкм 4,6*150 мм, Hex/IPA=70/30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C), Rt=6,360 мин, 75,7% de.
Пример 16
(2
R
)-4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 2) (E16)
2
3
2
4
2
4
3
3
E16
E16
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,30 ммоль), (R)-4-(6-хлорпиримидин-4-ил)-N-метилморфолин-2-карбоксамида (116 мг, 0,452 ммоль) и CsCO (195 мг, 0,599 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 30-60% B; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением  (35,1 мг, выход 24%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E16:
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,99 (с, 1H), 8,57 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,23 (с, 1H), 6,65-6,60 (м, 1H), 4,67-4,64 (м, 1H), 4,47-4,44 (м, 1H), 4,11-4,05 (м, 2H), 3,76-3,69 (м, 1H), 3,41-3,22 (м, 2H), 3,13-3,04 (м, 2H), 2,96 (дд, =13,2, 10,8 Гц, 1H), 2,88 (д, =5,2 Гц, 3H), 2,59-2,35 (м, 8H), 2,26-2,20 (м, 1H), 1,96-1,92 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,84 (д, =243,6 Гц, 1F), -111,77 (д, =242,9 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,791 мин; МС Вычисл.: 485, МС Найдено: 486 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-3 3 мкм 4,6*150 мм, Hex/IPA=70/30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C), Rt=9,425 мин, 76,9% de.
Пример 17
(2R)-4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-N-метилморфолин-2-карбоксамид (E17)
R
N
2
3
2
4
E17
E17
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,30 ммоль), ()-4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамида (129 мг, 0,451 ммоль) и CsCO (196 мг, 0,603 ммоль) в 3 мл DMF нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в 40 мл воды и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (27,1 мг, выход 18%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
E17: H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,95 (с, 1Н), 8,08 (с, 1Н), 7,54 (с, 1Н), 6,95 (с, 1Н), 6,61 (шир.с, 1Н), 4,66-4,59 (м, 1Н), 4,53-4,45 (м, 1Н), 4,12 (с, 3Н), 4,06-4,00 (м, 2Н), 3,75-3,64 (м, 1Н), 3,37-3,19 (м, 2Н), 3,10-3,00 (м, 2Н), 3,00-2,91 (м, 1Н), 2,87 (д, J=4,8 Гц, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,42-2,32 (м, 2H), 2,28-2,17 (м, 1H), 1,96-1,87 (м, 1H).
19
3
J=
J=
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -103,02 (д, 244,4 Гц, 1F),-112,53 (д, 244,4 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 65% воды (0,02% NHOAc) и 35% CHCN до 35% воды (0,02% NHOAc) и 65% CHCN за 6 мин, чистота составляет >95%, Rt=3,915 мин; МС Вычисл.: 515, МС Найдено: 516 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=80:20, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=19,26 мин, 72,8% de.
Пример 18
(2
R
)-4-(6-(6-(3,3-Дифтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамида (диастереоизомер 2) (E18)
H
R
N
2
3
2
4
E18
E18
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-метил-пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,30 ммоль), ()-4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамида (129 мг, 0,451 ммоль) и CsCO (196 мг, 0,603 ммоль) в 3 мл DMF нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в 40 мл воды и экстрагировали EtOAc (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения  (29,1 мг, выход 19%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E18:
1
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl):δ 8,95 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 6,65-6,56 (м, 1H), 4,68-4,59 (м, 1H), 4,51-4,45 (м, 1H), 4,12 (с, 3H), 4,07-4,02 (м, 2H), 3,73-3,66 (м, 1H), 3,37-3,26 (м, 2H), 3,20-3,01 (м, 2H), 3,00-2,91 (м, 1H), 2,87 (д, 4,8 Гц, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,42-2,32 (м, 2H), 2,28-2,17 (м, 1H), 1,94-1,85 (м, 1H).
19
3
J=
J=
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -103,02 (д, 242,5 Гц, 1F),-112,54 (д, 242,5 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 65% воды (0,02% NHOAc) и 35% CHCN до 35% воды (0,02% NHOAc) и 65% CHCN за 6 мин, чистота составляет >95%, Rt=3,940 мин; МС Вычисл.: 515, МС Найдено: 516 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=80:20, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=16,508 мин, 100% de.
Пример 19
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1)
(E19)
2
3
2
4
E19
E19
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,26 ммоль), 4-(6-хлор-пиримидин-4-ил)-морфолина (104 мг, 0,52 ммоль) и CsCO (169 мг, 0,520 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=2:3) с получением  (19,6 мг, выход 16%) и в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E19:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,98 (с, 1H), 8,61 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,12 (с, 1H), 4,78-4,68 (м, 4H), 3,82-3,80 (м, 4H), 3,74-3,70 (м, 5H), 3,45-3,34 (м, 1H), 3,20-3,14 (м, 1H), 3,06-3,03 (м, 1H), 2,59-2,48 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,40-2,31 (м, 1H), 2,20-2,15 (м, 1H), 1,99-1,96 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,34 (д, =244,0 Гц, 1F), -111,54 (д, =242,5 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота > 95%, Rt=4,407 мин; МС Вычисл.:470, МС Найдено: 471 [M+H].
2
2
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 нм, CO/MeOH/DEA=60/40/0,2, CO Скорость потока: 1,8 мл/мин, Скорость потока сорастворителя: 1,2 мл/мин, 230 нм, T=40°C. Rt=6,67 мин, 100% э.и.
Пример 20
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2)
(E20)
2
3
2
4
E20
E20
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (90 мг, 0,29 ммоль), 4-(6-хлор-пиримидин-4-ил)-морфолина (116 мг, 0,580 ммоль) и CsCO (189 мг, 0,582 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=2:3) с получением  (38,1 мг, выход 28%) и в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E20:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,97 (с, 1H), 8,61 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,12 (с, 1H), 4,77-4,70 (м, 4H), 3,82-3,80 (м, 4H), 3,74-3,70 (м, 5H), 3,45-3,33 (м, 1H), 3,20-3,14 (м, 1H), 3,06-3,03 (м, 1H), 2,58-2,47 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,41-2,31 (м, 1H), 2,21-2,15 (м, 1H), 1,97-1,95 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,33 (д, =242,9 Гц, 1F), -111,54 (д, =243,3 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота > 95%, Rt=4,406 мин; МС Вычисл.:470, МС Найдено: 471 [M+H].
2
2
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6×250 нм, CO/MeOH/ DEA=60/40/0,2, CO скорость потока: 1,8 мл/мин, скорость потока сорастворителя: 1,2 мл/мин, 230 нм, T=40°C. Rt=5,97 мин, 100% э.и.
Пример 21
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1)
(E21)
2
3
2
4
3
E21
E21
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (100 мг, 0,325 ммоль), 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (152 мг, 0,662 ммоль) и CsCO (215 мг, 0,660 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 35-80% B; A: H2O (0,1%NH4HCO3), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением  (46,9 мг, выход 29%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E21:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,99 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,74-4,67 (м, 4H), 4,15 (с, 3H), 3,80-3,78 (м, 4H), 3,75-3,72 (м, 5H), 3,44-3,31 (м, 1H), 3,16-3,10 (м, 1H), 2,99-2,97 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,40-2,27 (м, 2H), 2,21-2,15 (м, 1H), 1,97-1,93 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,51 (д, =242,1 Гц, 1F), -112,10 (д, =241,8 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин]: чистота > 95%, Rt=4,177 мин; МС Вычисл.:500, МС Найдено: 501 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 нм, MeOH/EtOH=50/50, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C]: Rt=13,548 мин, 100% э.и.
Пример 22
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2)
(E22)
H
2
3
2
4
2
4
3
E22
E22
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (100 мг, 0,325 ммоль), 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (152 мг, 0,662 ммоль) и CsCO (215 мг, 0,660 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 35-80% B; A: HO (0,1%NHHCO), B: CAN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением  (32,8 мг, выход 20%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E22:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,99 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,72-4,68 (м, 4H), 4,15 (с, 3H), 3,80-3,78 (м, 4H), 3,74-3,72 (м, 5H), 3,44-3,32 (м, 1H), 3,16-3,10 (м, 1H), 2,99-2,96 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,40-2,27 (м, 2H), 2,21-2,15 (м, 1H), 1,97-1,93 (м, 1H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,52 (д, =241,4 Гц, 1F), -112,10 (д, =242,5 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин]: чистота > 95%, Rt=4,174 мин; МС Вычисл.:500, МС Найдено: 501 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 нм, MeOH/EtOH=50/50, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C): Rt=12,047 мин, 100% э.и.
Пример 23
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1)
(E23)
2
3
2
4
E23
E23
Смесь 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,26 ммоль), 4-(6-хлор-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолина (127 мг, 0,52 ммоль) и CsCO (169 мг, 0,520 ммоль) в DMF (6 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (26 мг, выход 19%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E23:
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,98 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,74-4,58 (м, 6H), 3,80-3,70 (м, 9H), 3,46-3,30 (м, 1H), 3,15-3,06 (м, 1H), 2,97-2,93 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,41-2,13 (м, 3H), 1,97-1,91 (м, 1H), 1,56 (т, J=7,2 Гц, 3H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,29 (д, =243,3 Гц, 1F), -111,52 (д, =243,3 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота > 95%, Rt=4,134 мин; МС Вычисл.: 514, МС Найдено: 515[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=50/50, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=7,860 мин, 100% э.и.
Пример 24
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2)
(E24)
H
2
3
2
4
E24
E24
Смесь 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,26 ммоль), 4-(6-хлор-2-этоксипиримидин-4-ил)морфолина (127 мг, 0,520 ммоль) и CsCO (169 мг, 0,520 ммоль) в DMF (8 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл) и водой (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением (33 мг, выход 24%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E24:
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,98 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,74-4,58 (м, 6H), 3,83-3,70 (м, 9H), 3,46-3,30 (м, 1H), 3,15-3,07 (м, 1H), 2,97-2,93 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,35-2,12 (м, 3H), 1,98-1,92 (м, 1H), 1,59-1,54 (м, 3H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,29 (д, =242,1 Гц, 1F), -111,52 (д, =242,1 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота > 95%, Rt=4,142 мин; МС Вычисл.: 514, МС Найдено: 515[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=50/50, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=6,996 мин, 100% э.и.
Пример 25
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1) (E25)
H
2
3
2
4
E25
E25
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 1) (100 мг, 0,325 ммоль), 4-(6-хлор-2-изопропокси-пиримидин-4-ил)-морфолина (127 мг, 0,500 ммоль) и CsCO (215 мг, 0,660 ммоль) в DMF (8 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (35 мг, выход 20%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E25:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,93 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 5,60-5,53 (м, 1H), 4,73-4,68 (м, 2H), 4,66-4,63 (м, 2H), 3,79-3,70 (м, 9H), 3,44-3,33 (м, 1H), 3,13-3,07 (м, 1H), 2,95-2,91 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,38-2,27 (м, 2H), 2,19-2,13 (м, 1H), 1,95-1,91 (м, 1H), 1,58-1,53 (м, 6H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,05 (д, =238,4 Гц, 1F), -111,73 (д, =242,1 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин]: чистота > 95%, Rt=4,316 мин; МС Вычисл.: 528, МС Найдено: 529 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, CO/MeOH=70/30, сорастворитель: MeOH, CO скорость потока: 2,1 мл/мин, Скорость потока сорастворителя: 0,899 мл/мин, 254 нм, T=40,1°C): Rt=10,87 мин, 100% э.и.
Пример 26
4-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолин (E26)
H
2
3
2
4
E26
E26
Суспензию 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (100 мг, 0,325 ммоль), 4-(6-хлор-2-изопропоксипиримидин-4-ил)морфолина (127 мг, 0,500 ммоль) и CsCO (215 мг, 0,660 ммоль) в DMF (8 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (36 мг, выход 21%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E26:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,93 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 5,61-5,52 (м, 1H), 4,74-4,63 (м, 4H), 3,79-3,70 (м, 9H), 3,45-3,33 (м, 1H), 3,13-3,07 (м, 1H), 2,94-2,91 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,40-2,28 (м, 2H), 2,19-2,13 (м, 1H), 1,95-1,92 (м, 1H), 1,56-1,53 (м, 6H).
19
3
J
J
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -102,05 (д, =242,1 Гц, 1F), -110,73 (д, =242,1 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин]: чистота > 95%, Rt=4,340 мин; МС Вычисл.: 528, МС Найдено: 529 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, CO/MeOH=70/30, сорастворитель: MeOH, CO Скорость потока: 2,1 мл/мин, Скорость потока сорастворителя: 0,899 мл/мин, 254 нм, T=40°C): Rt=9,42 мин, 100% э.и.
Пример 27
(цис)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1)
(E27)
H
2
3
2
4
E27
E27
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,27 ммоль), 4-(6-хлор-пиримидин-4-ил)-морфолина (108 мг, 0,540 ммоль) и CsCO (176 мг, 0,540 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (30 мл). Добавляли EtOAc (20 мл×3) для экстракции желаемого. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (24,2 мг, выход 20%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E27:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,62 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,12 (с, 1H), 5,12-4,94 (м, 1H), 3,83-3,80 (м, 4H), 3,73-3,71 (м, 4H), 3,58-3,53 (м, 2H), 3,49-3,47 (м, 1H), 3,41 (с, 3H), 3,14-3,05 (м, 2H), 2,78-2,68 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,23-2,01 (м, 3H), 1,94-1,88 (м, 1H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,95 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота >95%, Rt=4,331 мин; МС Вычисл.: 454, МС Найдено: 455 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=80/20, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=11,215 мин, 94,3% э.и.
Пример 28
(цис)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2)
(E28)
H
2
3
2
4
E28
E28
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,27 ммоль), 4-(6-хлорпиримидин-4-ил)морфолина (108 мг, 0,540 ммоль) и CsCO (176 мг, 0,540 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (30 мл). Добавляли EtOAc (20 мл×3) для экстракции желаемого. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (23,4 мг, выход 19%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E28:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,62 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,12 (с, 1H), 5,13-4,94 (м, 1H), 3,83-3,80 (м, 4H), 3,73-3,71 (м, 4H), 3,59-3,57 (м, 2H), 3,52-3,47 (м, 1H), 3,41 (с, 3H), 3,14-3,05 (м, 2H), 2,78-2,68 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,26-2,00 (м, 3H), 1,94-1,87 (м, 1H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,95 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота >95%, Rt=4,335 мин; МС Вычисл.: 454, МС Найдено: 455 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=80/20, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=10,692 мин, 100% э.и.
Пример 29
(цис)-(2
R
)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 2) (E29)
H
R
N
2
3
2
4
E29
E29
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,27 ммоль), ()-4-(6-хлорпиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамида (105 мг, 0,41 ммоль) и CsCO (134 мг, 0,412 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (30 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением неочищенного продукта (27 мг). Неочищенный продукт разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (20 мг, выход 14%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E29:
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,24 (с, 1H), 6,63 (с, 1H), 5,11-4,94 (м, 1H), 4,68-4,65 (м, 1H), 4,48-4,45 (м, 1H), 4,12-4,06 (м, 2H), 3,77-3,70 (м, 1H), 3,59-3,57 (м, 2H), 3,53-3,46 (м, 1H), 3,41 (с, 3H), 3,11-3,05 (м, 3H), 3,00-2,93 (м, 1H), 2,88 (д, =4,8 Гц, 3H), 2,78-2,69 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,24-2,01 (м, 3H), 1,95-1,88 (м, 1H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,95 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота >95%, Rt=4,348 мин; МС Вычисл.: 511, МС Найдено: 512 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak OD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=80/20, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=12,855 мин, 100% de.
Пример 30
(цис)-(2
S
)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 2) (E30)
H
S
N
2
3
2
4
E30
E30
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (100 мг, 0,334 ммоль), ()-4-(6-хлорпиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамида (132 мг, 0,516 ммоль) и CsCO (168 мг, 0,516 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (30 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением неочищенного продукта (45 мг). Неочищенный продукт далее разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (26 мг, выход 15%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E30:
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,23 (с, 1H), 6,63 (с, 1H), 5,12-4,94 (м, 1H), 4,68-4,64 (м, 1H), 4,49-4,45 (м, 1H), 4,12-4,05 (м, 2H), 3,76-3,71 (м, 1H), 3,59-3,57 (м, 2H), 3,51-3,47 (м, 1H), 3,41 (с, 3H), 3,10-3,08 (м, 3H), 2,99-2,93 (м, 1H), 2,88 (д, =4,8 Гц, 3H), 2,78-2,71 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,26-2,01 (м, 3H), 1,94-1,83 (м, 1H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,934 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота >95%, Rt=4,351 мин; МС Вычисл.: 511, МС Найдено: 512 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak OD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=80/20, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=9,907 мин, 98,9% de.
Пример 31
(цис)-(2
S
)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 1')
(E31)
H
S
2
3
2
4
2
2
3
E31
E31
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 1') (60 мг, 0,21 ммоль), ()-4-(6-хлор-пиримидин-4-ил)-морфолин-2-карбоновая кислота метиламида (79 мг, 0,31 ммоль) и CsCO (101 мг, 0,309 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (30 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=15:1) с получением неочищенного продукта (40 мг). Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной хиральной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения  (29,3 мг, выход 28%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E31:
1
19
3
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,64 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,24 (с, 1H), 6,64 (шир. с, 1H), 5,13-4,94 (м, 1H), 4,69-4,65 (м, 1H), 4,48-4,45 (м, 1H), 4,12-4,06 (м, 2H), 3,76-3,71 (м, 1H), 3,59-3,57 (м, 2H), 3,51-3,48 (м, 1H), 3,41 (с, 3H), 3,11-3,08 (м, 3H), 3,00-2,94 (м, 1H), 2,88 (д, 4,4 Гц, 3H), 2,79-2,68 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,24-2,01 (м, 3H), 1,94-1,88 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,9 (с, 1F).
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: 20-95% CHCN в воде за 6,5 мин), чистота >95%, Rt=3,899 мин; МС Вычисл.: 511, МС Найдено: 512 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak OD-H, 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=80/20, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=окружающая среда. Rt=10,346 мин, 100% de.
Пример 32
(цис)-(2
R
)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 1) (E32)
H
R
N
2
3
2
4
E32
E32
Раствор (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,27 ммоль), ()-4-(6-хлорпиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамида (105 мг, 0,410 ммоль) и CsCO (134 мг, 0,412 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (30 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением неочищенного продукта (40 мг). Неочищенный продукт разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения  (25,6 мг, выход 18%) в виде белого твердого вещества. представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E30
1
3
J=
: H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,64 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,24 (с, 1H), 6,62 (шир. с, 1H), 5,10-4,93 (м, 1H), 4,68-4,64 (м, 1H), 4,49-4,45 (м, 1H), 4,12-4,06 (м, 2H), 3,76-3,70 (м, 1H), 3,60-3,57 (м, 2H), 3,51-3,48 (м, 1H), 3,41 (с, 3H), 3,11-3,08 (м, 3H), 3,00-2,93 (м, 1H), 2,88 (д, 4,4 Гц, 3H), 2,79-2,69 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,25-2,01 (м, 3H), 1,95-1,88 (м, 1H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,95 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота >95%, Rt=4,350 мин; МС Вычисл.: 511, МС Найдено: 512 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak OD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=80/20, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=окружающая среда. Rt=15,399 мин, 100% de.
Пример 33
(цис)-1-(2-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-5-метоксипиридин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2)
(E33)
Стадия 1:
2
3
Реакционную смесь 6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (38,0 мг, 0,131 ммоль), 2-хлор-5-метокси-4-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиридина (30 мг, 0,100 ммоль), трет-бутоксида натрия (38,6 мг, 0,402 ммоль), Pddba (9,20 мг, 10,04 мкмоль), ди-трет-бутил(2',4',6'-триизопропил-[1,1'-бифенил]-2-ил)фосфина (8,53 мг, 0,020 ммоль) и толуола (2 мл) нагревали до 100°C в течение 16 часов. После охлаждения и разбавления этилацетатом, смесь фильтровали и фильтрат концентрировали и остаток очищали при помощи колонки C18 (0,5% TFA в воде, вода/ацетонитрил) с получением 6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1-(5-метокси-4-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиридин-2-ил)-5-метил-1H-индазола (26 мг, 0,047 ммоль, 46,8% выход).
+
MS: 554,0 [M+H].
Стадия 2:
E33
К раствору rel-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1-(5-метокси-4-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиридин-2-ил)-5-метил-1H-индазола (26 мг, 0,047 ммоль) и метанола (3 мл) добавляли HCl (0,094 мл, 0,470 ммоль, 5M в изопропаноле). Реакционный раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 3 часов. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали MDAP с получением цис-1-(2-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-5-метоксипиридин-4-ил)азетидин-3-ола (2 мг, 4,26 мкмоль, 9,07% выход). представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
+
MS: 470,1 [M+H].
1
d
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-): δ 8,70 (1 H, с) 8,20 (1 H, с) 7,99 (1 H, с) 7,62 (1 H, с) 6,83 (1 H, с) 5,69 (1 H, д) 4,77 (1 H, м) 4,56 (1 H, м) 4,33 (2 H, т) 3,81 (5 H, м) 3,50 (2 H, т) 3,41 (1 H, м) 3,27 (3 H, с) 3,06 (1 H, м) 2,94 (1 H, д) 2,65 (2 H, м) 2,42 (3 H, с) 2,21 (2 H, м) 1,86 (1 H, шир. с.) 1,63 (1 H, м).
Пример 34
(цис)-(2S)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-N-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 1) (E34)
H
S
N
2
3
2
4
2
4
3
3
E34
E34
К раствору (цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 1) (145 мг, 0,500 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли CsCO (327 мг, 1,00 ммоль) и ()-4-(6-хлорпиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамид (192 мг, 0,750 ммоль). Смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Waters XBridge, C18, 5 мкм, 19*200 мм, 15-60%; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением белого твердого вещества. Твердое вещество далее очищали с помощью хиральной ВЭЖХ (ID, 5 мкм, 4,6*250 мм, Фаза: MeOH: EtOH=50:50; скорость потока: 1 мл/мин) с получением белого твердого вещества  (54,4 мг, выход 21%). представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E34:
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,65 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,25 (с, 1H), 6,62 (шир. с, 1H), 5,08-4,90 (м, 1H), 4,75-4,64 (м, 5H), 4,50-4,46 (м, 1H), 4,12-4,07 (м, 2H), 3,77-3,71 (м, 1H), 3,70-3,64 (м, 1H), 3,30-3,26 (м, 1H), 3,15-3,08 (м, 2H), 3,00-2,94 (м, 1H), 2,89-2,88 (м, 4H), 2,48 (м, 3H), 2,13-2,10 (м, 1H), 2,07-1,97 (м, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,04 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,111 мин; МС Вычисл.: 509, МС Найдено: 510 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID-5 мкм 4,6*250 мм, MeOH/EtOH=50/50, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C), Rt=14,45 мин, 99,2% de.
Пример 35
(цис)
-(2
R
)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-
N
-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 1) (E35)
H
R
N
2
3
2
4
2
4
3
3
E35
E35
К раствору (цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 1) (145 мг, 0,500 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли CsCO (327 мг, 1,00 ммоль) и ()-4-(6-хлорпиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамид (192 мг, 0,750 ммоль). Смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Waters XBridge, C18, 5 мкм, 19*200 мм, 15-60%; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением белого твердого вещества. Твердое вещество далее очищали с помощью хиральной ВЭЖХ (ID, 5 мкм, 4,6*250 мм, Фаза: MeOH: EtOH=50:50; скорость потока: 1 мл/мин) с получением белого твердого вещества (37,2 мг, выход 15%).  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E35:
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,65 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,25 (с, 1H), 6,62 (шир. с, 1H), 5,08-4,90 (м, 1H), 4,75-4,64 (м, 5H), 4,50-4,43 (м, 1H), 4,14-4,04 (м, 2H), 3,75-3,71 (м, 1H), 3,66-3,61 (м, 1H), 3,29-3,23 (м, 1H), 3,15-3,07 (м, 2H), 3,00-2,93 (м, 1H), 2,89-2,88 (м, 4H), 2,48 (с, 3H), 2,13-2,07 (м, 1H), 2,07-1,97 (м, 3H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,04 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,104 мин; МС Вычисл.: 509, МС Найдено: 510 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID-5мкм 4,6*250 мм, MeOH/EtOH=50/50, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C), Rt=10,43 мин, 100% de.
Пример 36
(цис)-(2S)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-N-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 2) (E36)
H
S
N
2
3
2
4
2
4
3
3
E36
E36
К раствору (цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (145 мг, 0,502 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли CsCO (327 мг, 1,00 ммоль) и ()-4-(6-хлорпиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамид (192 мг, 0,750 ммоль). Смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Waters XBridge, C18, 5 мкм, 19*200 мм, 15-60%; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением белого твердого вещества. Твердое вещество далее очищали с помощью хиральной ВЭЖХ (ID, 5 мкм, 4,6*250 мм, Фаза: MeOH:EtOH=50:50; скорость потока: 1 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения  (31 мг, выход 12%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E36:
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,65 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,25 (с, 1H), 6,64-6,62 (м, 1H), 5,08-4,90 (м, 1H), 4,75-4,64 (м, 5H), 4,50-4,46 (м, 1H), 4,12-4,07 (м, 2H), 3,77-3,71 (м, 1H), 3,67-3,64 (м, 1H), 3,30-3,26 (м, 1H), 3,15-3,08 (м, 2H), 3,00-2,94 (м, 1H), 2,89-2,88 (м, 4H), 2,48 (м, 3H), 2,13-2,10 (м, 1H), 2,07-1,97 (м, 3H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,04 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,112 мин; МС Вычисл.: 509, МС Найдено: 510 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID-5 мкм 4,6*250 мм, MeOH/EtOH=50/50, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C), Rt=17,857 мин, 99,1% de.
Пример 37
(цис)-(2R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-N-метилморфолин-2-карбоксамид (диастереоизомер 2) (E37)
H
R
N
2
3
2
4
2
4
3
3
E37
E37
К раствору (цис)-6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-индазола (энантиомер 2) (145 мг, 0,502 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли CsCO (327 мг, 1,00 ммоль) и ()-4-(6-хлорпиримидин-4-ил)--метилморфолин-2-карбоксамид (192 мг, 0,750 ммоль). Смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Waters XBridge, C18, 5 мкм, 19*200 мм, 15-60%; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением белого твердого вещества. Твердое вещество далее очищали с помощью хиральной ВЭЖХ (ID, 5 мкм, 4,6*250 мм, Фаза: MeOH:EtOH=50:50; скорость потока: 1 мл/мин) с получением желаемого соединения  (43,2 мг, выход 17%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
E37:
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,65 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,25 (с, 1H), 6,64-6,62 (м, 1H), 5,08-4,88 (м, 1H), 4,75-4,64 (м, 5H), 4,50-4,46 (м, 1H), 4,12-4,07 (м, 2H), 3,77-3,71 (м, 1H), 3,67-3,64 (м, 1H), 3,30-3,26 (м, 1H), 3,15-3,08 (м, 2H), 3,00-2,94 (м, 1H), 2,89-2,88 (м, 4H), 2,48 (м, 3H), 2,13-2,10 (м, 1H), 2,07-1,97 (м, 3H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,04 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,113 мин; МС Вычисл.: 509, МС Найдено: 510 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID-5 мкм 4,6*250 мм, MeOH/EtOH=50/50, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C), Rt=11,541 мин, 100% de.
Пример 38
(цис)-
1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2)
(E38)
Стадия 1:
2
3
2
4
2
4
3
3
H
Суспензию (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (80 мг, 0,32 ммоль), 4-хлор-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (144 мг, 0,480 ммоль) и CsCO (209 мг, 0,641 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [XUnion, C18, 5 мкм, 20*150 мм, 50-85% B; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (60 мг, выход 36%) и (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-2-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-2-индазола (изомер 2)(48 мг, выход 29%) оба в виде белого твердого вещества.
1
3
(цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (изомер 1): H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,44 (с, 1H), 5,04-4,77 (м, 1H), 4,74-4,67 (м, 2H), 4,41-4,29 (м, 2H), 4,13 (с, 3H), 4,12-4,00 (м, 2H), 3,92-3,85 (м, 1H), 3,58-3,50 (м, 1H), 3,43-3,37 (м, 1H), 3,14-2,96 (м, 2H), 2,47 (с, 6H), 2,32-2,13 (м, 2H), 2,00-1,71 (м, 5H), 1,66-1,51 (м, 3H).
H
:
1
3
(цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-2-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-2-индазол (энантиомер 2)H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,91 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 6,71 (с, 1H), 5,00-4,77 (м, 1H), 4,74-4,65 (м, 2H), 4,45-4,36 (м, 2H), 4,19-4,07 (м, 2H), 4,02 (с, 3H), 3,92-3,84 (м, 1H), 3,59-3,51 (м, 1H), 3,43-3,33 (м, 1H), 3,00-2,94 (м, 2H), 2,45 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,26-2,07 (м, 2H), 1,94-1,64 (м, 8H).
Стадия 2:
(цис)-
2
3
2
4
E38
E38
К суспензии 6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (50 мг, 0,098 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли TsOH (3 мг, 0,02 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в водный раствор NaCO (10%, 30 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали EtOAc (15 мл×3) и объединенные органические слои промывали водой, насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (22,1 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E38:
1
19
3
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,85 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,46 (с, 1H), 4,95-4,76 (м, 2H), 4,41 (т, =7,6 Гц, 2H), 4,12 (с, 3H), 4,02-4,00 (м, 2H), 3,35-3,32 (м, 1H), 3,12-3,02 (м, 1H), 2,94-2,91 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,24-2,17 (м, 1H), 2,16-2,09 (м, 1H), 1,97-1,83 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,29 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% TFA) и 10% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=2,969 мин; МС Вычисл.: 426, МС Найдено: 427 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм, CO-MeOH=70/30, сорастворитель: IPA (0,2DEA), CO Скорость потока: 2,1 мл/мин, Скорость потока сорастворителя: 0,9 мл/мин, 230 нм, T=40°C], Rt=7,37 мин, 97,2% э.и.
Пример 39
(цис)-
1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1)
(E39)
Стадия 1:
2
3
2
4
2
4
3
3
(цис)-
(цис)
H
Суспензию (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (80 мг, 0,32 ммоль), 4-хлор-2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (144 мг, 0,480 ммоль) и CsCO (209 мг, 0,641 ммоль) в DMF (3 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [XUnion, C18, 5 мкм, 20*150 мм, 50-85% B; A: HO (0,1% NHHCO), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] с получением 6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (44 мг, выход 27%) и -6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-2-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-2H-индазола (изомер 1) (46 мг, выход 28%) оба в виде белого твердого вещества.
(цис)-
6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1): 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 8,83 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,42 (с, 1H), 5,05-4,78 (м, 1H), 4,73-4,66 (м, 2H), 4,40-4,28 (м, 2H), 4,13 (с, 3H), 4,12-4,00 (м, 2H), 3,93-3,84 (м, 1H), 3,58-3,51 (м, 1H), 3,44-3,38 (м, 1H), 3,13-2,99 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,32-2,14 (м, 2H), 2,00-1,71 (м, 5H), 1,66-1,52 (м, 3H).
(цис)
H
1
-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-2-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-2H-индазол (изомер 1): H ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 8,91 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 6,72 (с, 1H), 4,97-4,66 (м, 3H), 4,45-4,35 (м, 2H), 4,20-4,07 (м, 2H), 4,02 (с, 3H), 3,93-3,84 (м, 1H), 3,59-3,51 (м, 1H), 3,36-3,28 (м, 1H), 3,02-2,87 (м, 2H), 2,42 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,22-2,04 (м, 2H), 1,94-1,71 (м, 4H), 1,67-1,51 (м, 4H).
Стадия 2:
(цис)-
E39
E39
2
3
2
4
К суспензии 6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола(энантиомер 1)(44 мг, 0,086 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли TsOH (3 мг, 0,02 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в водный раствор NaCO (10%, 30 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали EtOAc (15 мл×3) и объединенные органические слои промывали водой, насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения  (33,2 мг, выход 90%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E39:
1
19
3
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,85 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,46 (с, 1H), 4,94-4,74 (м, 2H), 4,40 (т, 7,6 Гц, 2H), 4,10 (с, 3H), 4,02-3,99 (м, 2H), 3,34-3,30 (м, 1H), 3,11-3,01 (м, 1H), 2,92-2,89 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,39 (с, 3H), 2,22-2,15 (м, 1H), 2,15-2,13 (м, 1H), 1,98-1,90 (м, 1H), 1,88-1,81 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,24 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=4,192 мин; МС Вычисл.: 426, МС Найдено: 427 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм, CO-MeOH=70/30, сорастворитель: IPA (0,2DEA), CO Скорость потока: 2,1 мл/мин, Скорость потока сорастворителя: 0,9 мл/мин, 230 нм, T=41°C], Rt=6,77 мин, 97,5% э.и.
Пример 40
(цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1)
(E40)
E40
3
3
2
4
К раствору (цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида(энантиомер 1) (80 мг, 0,18 ммоль)в метаноле (5 мл) и добавляли HCHO (14%, 1 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Медленно добавляли NaBHCN (80 мг, 1,3 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 часов. К смеси добавляли насыщ. водный раствор NaHCO(20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (40 мг, выход 54%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,90 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,58 (с, 1H), 5,02-4,82 (м, 2H), 4,41-4,38 (м, 2H), 4,02-3,98 (м, 2H), 3,39-3,35 (м, 1H), 3,12-3,04 (м, 1H), 3,00-2,94 (м, 1H), 2,61 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,29-2,14 (м, 2H), 1,99-1,93 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,23 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,053 мин; МС Вычисл.: 410, МС Найдено: 411 [M+H].
2
3
2
Условие хиральной ВЭЖХ: Сверхкритическая жидкостная хроматография (SFC), IE, CO/CHOH=70/30, CO Скорость потока: 2,1, 254 нм, T =41,8°C, Rt=7,46 мин, 100% э.и.
Пример 41
(цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2)
(E41)
E41
3
3
2
4
К раствору (цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 2) (80 мг, 0,18 ммоль)в метаноле (5 мл) и добавляли HCHO (14%, 1 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Медленно добавляли NaBHCN (80 мг, 1,3 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 часов. К смеси добавляли насыщ. NaHCOводный раствор (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, выход 41%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,90 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,58 (с, 1H), 5,04-4,79 (м, 2H), 4,42-4,38 (м, 2H), 4,02-3,98 (м, 2H), 3,41-3,35 (м, 1H), 3,13-3,04 (м, 1H), 3,01-2,94 (м, 1H), 2,61 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,29-2,13 (м, 2H), 2,00-1,94 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,16 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% NHAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=4,053 мин; МС Вычисл.: 410, МС Найдено: 411 [M+H].
2
3
2
Условие хиральной ВЭЖХ: Сверхкритическая жидкостная хроматография (SFC), IE, CO/CHOH=70/30, COСкорость потока: 2,1 мл/мин, 254 нм, T =41,8°C, Rt=6,12 мин, 100% э.и.
Пример 42
(цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1) (E42)
3
2
4
3
2
E42
К раствору (цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорид (энантиомер 1) (50 мг, 0,12 ммоль) и оксетан-3-она (334 мг, 4,64 ммоль) в метаноле (2 мл) и 1,2-дихлорэтане (8 мл) добавляли NaBHCN (72 мг, 1,1 ммоль). Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и EtOAc (30 мл). Водную фазу экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали при помощи колонки С18, элюируя CHCN/HO (от 5/95 до 95/5) с получением указанного в заголовке соединения (35 мг, выход 67%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,91 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 5,01-4,81 (м, 2H), 4,76-4,66 (м 4H), 4,46-4,39 (м, 2H), 4,05-3,98 (м, 2H), 3,70-3,63 (м, 1H), 3,30-3,24 (м, 1H), 3,16-3,09 (м, 1H), 2,90-2,84 (м, 1H), 2,66 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,37-2,32 (м, 1H), 2,17-1,87 (м, 4H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ183,98 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,0 мин, чистота составляет > 95%, Rt=3,871 мин; МС Вычисл.: 452; МС Найдено: 453 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE-5 мкм 4,6*250 мм, Hex/IPA/DEA=60/40/0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 254 нм, T=30°C), Rt=10,527 мин, 100% э.и.
Пример 43
(цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2) (E43)
3
2
4
3
2
E43
К раствору (цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 2) (66 мг, 0,15 ммоль) и оксетан-3-она (440 мг, 6,11 ммоль) в метаноле (4 мл) и 1,2-дихлорэтане (16 мл) добавляли NaBHCN (96 мг, 1,5 ммоль). Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой собирали и водную фазу экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали, концентрировали в вакууме и очищали при помощи колонки С18, элюируя CHCN/HO (от 5/95 до 100/0) с получением указанного в заголовке соединения (55 мг, выход 80%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,91 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 5,01-4,81 (м, 2H), 4,76-4,67 (м 4H), 4,46-4,40 (м, 2H), 4,04-3,99 (м, 2H), 3,70-3,63 (м, 1H), 3,31-3,24 (м, 1H), 3,16-3,08 (м, 1H), 2,90-2,83 (м, 1H), 2,66 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,43-2,38 (м, 1H), 2,15-2,07 (м, 1H), 2,07-1,88 (м, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ 183,98 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 30% воды (0,02% NHOAc) и 70% CHCN за 6,0 мин, чистота составляет > 95%, Rt=3,425 мин; МС Вычисл.: 452; МС Найдено: 453 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE- 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/IPA/DEA=60/40/0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 254 нм, T=30°C), Rt=9,043 мин, 100% э.и.
Пример 44
(цис)-(1s,3s)-3-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол (энантиомер 1) (E44)
E44
3
2
3
2
4
3
К раствору (цис)-(1s,3s)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорида(энантиомер 1) (35 мг, 0,081 ммоль) в метаноле (0,5 мл) добавляли 1,2-дихлорэтан (2,5 мл) и оксетан-3-он (0,2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли NaBHCN(25 мг, 0,40 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли раствор насыщ. раствора NaCO(10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Смесь экстрагировали DCM (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,6 мг, выход 10%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,90 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 5,02-4,83 (м, 1H), 4,76-4,64 (м, 4H), 4,38-4,29 (м, 1H), 3,71-3,55 (м, 2H), 3,32-3,22 (м, 2H), 3,18-3,09 (м, 1H), 2,90-2,81 (м, 6H), 2,49 (с, 3H), 2,28-2,21 (м, 2H), 2,15-1,89 (м, 4H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,01 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,026 мин; МС Вычисл.: 451, МС Найдено: 452 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=90/10, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=34,514 мин, 100% э.и.
Пример 45
(цис)-(1s,3s)-3-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол (энантиомер 2) (E45)
3
2
3
2
4
3
E45
К раствору (цис)-(1s,3s)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорида (энантиомер 2) (35 мг, 0,81 ммоль) в метаноле (0,5 мл) добавляли 1,2-дихлорэтан (2,5 мл) и оксетан-3-он (0,2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли NaBHCN(25 мг, 0,40 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли раствор насыщ. раствора NaCO(10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Смесь экстрагировали DCM (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (12 мг, выход 33%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,91 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 5,03-4,84 (м, 1H), 4,78-4,67 (м, 4H), 4,39-4,30 (м, 1H), 3,73-3,62 (м, 2H), 3,33-3,22 (м, 2H), 3,17-3,09 (м, 1H), 2,90-2,82 (м, 6H), 2,49 (с, 3H), 2,28-2,20 (м, 2H), 2,15-1,88 (м, 4H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,00 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,020 мин; МС Вычисл.: 451, МС Найдено: 452 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=90/10, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T =30°C, Rt=31,842 мин, 100% э.и.
Пример 46
(цис)-1-(2-циклопропил-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1) (E46)
Смесь (цис)-трет-бутил 4-(1-(2-циклопропил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (120 мг, 0,198 ммоль) в HCl/MeOH (4 M, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил за 3 мин), Rt=1,78 мин; МС Вычисл.: 422; МС Найдено: 423 [M+1].
3
3
3
2
4
E46
Остаток растворяли в метаноле (10 мл). Затем добавляли формальдегид (37%, 2 мл) и CHCOOH (катал.). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем добавляли NaBHCN (37 мг, 0,59 ммоль) при комнатной температуре. Затем смесь перемешивали при 35°C в течение ночи. В реакционную смесь добавляли насыщенный водный NaHCO (15 мл). После перемешивания в течение 20 мин, водный слой экстрагировали DCM (15 мл×2). Объединенные органические слои сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт дополнительно очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (10,7 мг, выход 12%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,55 (с, 1H), 5,02-4,77 (м, 2H), 4,41-4,36 (м, 2H), 4,00-3,95 (м, 2H), 3,39-3,32 (м, 1H), 3,12-3,01 (м, 1H), 2,94-2,89 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,23-2,07 (м, 3H), 1,98-1,84 (м, 2H), 1,25-1,22 (м, 2H), 1,08-1,05 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,22 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=4,168 мин; МС Вычисл.: 436, МС Найдено: 437 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID-3 3 мкм 4,6*150 мм, Фаза: HEX:IPA:DEA=90:10:0,2, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=3,992 мин, 100% э.и.
Пример 47
(цис)-1-(2-циклопропил-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2) (E47)
3
3
3
3
2
4
+
E47
Смесь (цис)-трет-бутил 4-(1-(2-циклопропил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (110 мг, 0,180 ммоль) в HCl/MeOH (4 M, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали. ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN за 3 мин), Rt=1,32 мин; МС Вычисл.: 422; МС Найдено: 423 [M+1]. Остаток разбавляли метанол (10 мл). Затем, добавляли формальдегид (37%, 2 мл) и CHCOOH (кат.) и перемешивали в течение 1 часа. Затем добавляли NaBHCN (34 мг, 0,54 ммоль) при комнатной температуре. Затем смесь перемешивали при 35°C в течение ночи. Реакционную смесь добавляли к насыщенному водному NaHCO (15 мл). После перемешивания в течение 20 мин, водный слой экстрагировали DCM (15 мл×2). Объединенные органические слои сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением светло-желтого твердого вещества. Твердое вещество дополнительно очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (10,7 мг, выход 13%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,56 (с, 1H), 5,02-4,79 (м, 2H), 4,43-4,36 (м, 2H), 4,02-3,95 (м, 2H), 3,37-3,34 (м, 1H), 3,10-3,02 (м, 1H), 2,95-2,93 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,27-2,08 (м, 4H), 1,94-1,87 (м, 2H), 1,28-1,25 (м, 2H), 1,08-1,05 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,23 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=3,804 мин; МС Вычисл.: 436, МС Найдено: 437 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID-3 3 мкм 4,6*150 мм, Фаза: HEX:IPA:DEA=90:10:0,2, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=4,881 мин, 100% э.и.
Пример 48
(цис)-1-(2-(Дифторметокси)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2) (E48)
1
2
3
4
2
2
4
E48
Смесь раствора 1-(2-(дифторметокси)-6-иодпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (50 мг, 0,14 ммоль), (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (36 мг, 0,14 ммоль), N,N-диметилциклогексан-1,2-диамина (21 мг, 0,14 ммоль), CuI (27 мг, 0,14 ммоль), KPO (31 мг, 0,14 ммоль) в толуоле (5 мл) перемешивали при 115°C в атмосфере N в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли EtOAc (20 мл) и промывали водой (10 мл×2). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ с получением указанного в заголовке соединения (14 мг, выход 21%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J=
J=
J=
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,64 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,41 (т, 72,6 Гц, 1H), 6,55 (с, 1H), 5,08-4,83 (м, 2H), 4,42 (т, 8,7 Гц, 2H), 4,03 (дд, 10,2, 3,9 Гц, 2H), 3,43-3,36 (м, 1H), 3,14-2,96 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,29-2,12 (м, 2H), 1,96-1,87 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -88,47 (дд, =410,6, 174,1 Гц, 2F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,813 мин; МС Вычисл.:462, МС Найдено: 463 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: (Chiralpak AD-3 3 мкм 4,6×150 мм, Фаза: Hex/EtOH=70/30, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C, 230 нм), Rt= 6,562 мин, 100% э.и.
Пример 49
(цис)-1-(2-(Дифторметокси)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1) (E49)
3
4
2
2
4
E49
Смесь раствора 1-(2-(дифторметокси)-6-иодпиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (50 мг, 0,14 ммоль), (цис)-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (36 мг, 0,14 ммоль), N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамина (21 мг, 0,14 ммоль), CuI (27 мг, 0,14 ммоль), KPO (31 мг, 0,14 ммоль) в толуоле (5 мл) перемешивали при 115°C в атмосфере N в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли EtOAc (20 мл) и промывали водой (10 мл×2). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ с получением указанного в заголовке соединения (12 мг, выход 18%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J=
J=
J=
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,64 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 7,39 (т, 72,9 Гц, 1H), 6,65 (с, 1H), 5,04-4,79 (м, 2H), 4,42 (т, 8,4 Гц, 2H), 4,03 (дд, 10,2, 3,9 Гц, 2H), 3,40-3,33 (м, 1H), 3,12-3,00 (м, 1H), 2,95-2,92 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,24-2,07 (м, 2H), 1,96-1,84 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -88,46 (дд, =424,5, 175,6 Гц, 2F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,823 мин; МС Вычисл.:462, МС Найдено: 463 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: (Chiralpak AD-3 3 мкм 4,6×150 мм, Фаза: Hex/EtOH=70/30, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C, 230 нм), Rt= 4,453 мин, 97,7% э.и.
Пример 50
(цис)-2-((1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол (энантиомер 1) (E50)
3
3
2
4
E50
К раствору (цис)-2-((1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол гидрохлорида (энантиомер 1) (60 мг, 0,13 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли HCHO (35% в воде, 0,5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. К реакционной смеси добавляли NaBHCN(31 мг, 0,50 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. К реакционной смеси добавляли раствор насыщ. раствора NaHCO(10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc (5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (38 мг, выход 65%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): 8,85 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 4,94-4,73 (м, 1H), 4,54-4,48 (м, 1H), 4,38-4,32 (м, 2H), 4,12 (с, 3H), 4,09-4,04 (м, 2H), 3,82-3,77 (м, 2H), 3,59-3,56 (м, 2H), 3,36-3,28 (м, 1H), 3,11-3,01 (м, 1H), 2,94-2,88 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,39 (с, 3H), 2,22-2,04 (м, 2H), 1,97-1,80 (м, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,26 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,144 мин; МС Вычисл.: 470, МС Найдено: 471 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=40/50, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T =30°C, Rt=9,711 мин, 98,3% э.и.
Пример 51
(цис)-2-((1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол (энантиомер 2) (E51)
3
3
2
4
E51
К раствору (цис)-2-((1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол гидрохлорида (энантиомер 2) (60 мг, 0,13 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли HCHO (35% в воде, 0,5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. К реакционной смеси добавляли NaBHCN(31 мг, 0,50 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли раствор насыщ. раствора NaHCO(10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc (5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, выход 51%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): 8,85 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 4,97-4,72 (м, 1H), 4,54-4,47 (м, 1H), 4,39-4,32 (м, 2H), 4,12 (с, 3H), 4,09-4,04 (м, 2H), 3,82-3,77 (м, 2H), 3,59-3,56 (м, 2H), 3,36-3,28 (м, 1H), 3,11-3,00 (м, 1H), 2,95-2,86 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,39 (с, 3H), 2,22-2,06 (м, 2H), 1,99-1,80 (м, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,25 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=4,143 мин; МС Вычисл.: 470, МС Найдено: 471 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=40/60, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T =30°C, Rt=11,938 мин, 99,7% э.и.
Пример 52
(цис)-(3S)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 1) (E52)
E52
2
3
4
К раствору (цис)-(3S)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол гидрохлорида(диастереоизомер 1)(140 мг неочищенный, 0,24 ммоль) в метаноле (8 мл) добавляли CHO (37%, 2 мл) и NaBHCN (30 мг, 0,48 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь разделяли между водой (50 мл) и EtOAc (50 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (32,8 мг, выход 31% за 3 стадии) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 8,79 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,59 (с, 1H), 6,62 (с, 1H), 4,93-4,73 (м, 1H), 4,52 (шир. с, 1H), 4,09 (с, 3H), 3,80-3,457 (м, 4H), 3,41-3,32 (м, 2H), 3,21-3,10 (м, 1H), 2,98-2,95 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,31-2,21 (м, 2H), 2,18-2,93 (м, 3H), 1,88-1,77 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDOD): δ -185,71 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,211 мин; МС Вычисл.: 440, МС Найдено: 441 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH=40/60, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=7,436 мин, 100% de.
Пример 53
(цис)-(3S)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 2) (E53)
E53
2
3
4
К раствору (цис)-(3S)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол гидрохлорида(диастереоизомер 2)(140 мг неочищенный, 0,24 ммоль) в метаноле (8 мл) добавляли CHO (37%, 2 мл) и NaBHCN (30 мг, 0,48 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь разделяли между водой (50 мл) и EtOAc (50 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM/MeOH=10/1) с получением указанного в заголовке соединения (44,5 мг, выход 42% за 3 стадии) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 8,78 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 6,62 (с, 1H), 4,92-4,73 (м, 1H), 4,52 (шир. с, 1H), 4,09 (с, 3H), 3,78-3,48 (м, 4H), 3,41-3,33 (м, 2H), 3,20-3,11 (м, 1H), 3,00-2,96 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,45 (с, 3H), 2,33-2,18 (м, 2H), 2,18-1,93 (м, 3H), 1,88-1,78 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDOD): δ -185,73 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота 96,74% (214 nm), Rt=4,214 мин; МС Вычисл.: 440, МС Найдено: 441 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH=40/60, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=10,803 мин, 100% de.
Пример 54
(цис)-(3R)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 1) (E54)
2
3
4
E54
К раствору (цис)-(3R)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол гидрохлорида (диастереоизомер 1) (200 мг неочищенный, 0,24 ммоль) в метаноле (8 мл) добавляли CHO (37%, 2 мл) и NaBHCN (30 мг, 0,48 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 1,5 часов. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM/MeOH=10/1) с получением указанного в заголовке соединения (24,4 мг, выход 23% за 3 стадии) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,62 (с, 1H), 5,01-4,78 (м, 1H), 4,67 (с, 1H), 4,13 (с, 3H), 3,96-3,49 (м, 4H), 3,40-3,31 (м, 1H), 3,13-3,02 (м, 1H), 3,02-2,90 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 2,29-2,05 (м, 4H), 2,02-1,86 (м, 2H), 1,74-1,68 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,32 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02%NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02%NHAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота 98,88% (214 нм), Rt: 4,216 мин; МС Вычисл.: 440, МС Найдено: 441 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH=40/60, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=7,588 мин, 100% de.
Пример 55
(цис)-(3R)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 2) (E55)
2
3
4
E55
К раствору (цис)-(3R)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол гидрохлорида (диастереоизомер 2) (180 мг неочищенный, 0,240 ммоль) в метаноле (8 мл) добавляли CHO (37%, 2 мл) и NaBHCN (30 мг, 0,48 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 1,5 часов. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM/MeOH=10/1) с получением указанного в заголовке соединения (27,5 мг, выход 26% за 3 стадии) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный диастереоизомер.
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,62 (с, 1H), 4,97-4,76 (м, 1H), 4,64 (с, 1H), 4,13 (с, 3H), 3,93-3,52 (м, 4H), 3,36-3,30 (м, 1H), 3,11-3,02 (м, 1H), 2,94-2,88 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,23-2,05 (м, 4H), 1,99-1,83 (м, 2H), 1,66-1,60 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,24 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02%NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02%NHAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота 97,29% (214 нм), Rt: 4,247 мин; МС Вычисл.: 440, МС Найдено: 441 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH=40/60, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=8,508 мин, 100% de.
Пример 56
(цис)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метокси-N-метилпиримидин-4-карбоксамид (энантиомер 2) (E56)
2
E56
(цис)-Метил-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-карбоксилат (энантиомер 2) (40 мг, 0,097 ммоль) растворяли в растворе метиламинового спирта (27%, 5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали и неочищенный продукт растирали с EtO и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (29,4 мг, выход 74%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,41 (с, 1H), 8,18 (с, 1H), 7,92-7,84 (м, 1H), 7,58 (с, 1H), 4,97-4,79 (м, 1H), 4,22 (с, 3H), 3,38-3,33 (м, 1H), 3,14-3,07 (м, 1H), 3,05 (д, =5,2 Гц, 3H), 2,95-2,92 (м, 1H), 2,50 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,25-2,10 (м, 2H), 1,99-1,91 (с, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,28 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95% (214 нм), Rt=4,373 мин; МС Вычисл.: 412, МС Найдено: 413 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH/DEA=50/50/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,880 мин, 100% э.и.
Пример 57
(цис)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метокси-N-метилпиримидин-4-карбоксамид (энантиомер 1) (E57)
-
-
E57
2
(цис)Метил6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-карбоксилат (энантиомер 1) (40 мг, 0,097 ммоль) растворяли в растворе метиламинового спирта (27%, 5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали и неочищенный продукт растирали с EtO и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (35,7 мг, выход 89%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,41 (с, 1H), 8,18 (с, 1H), 7,92-7,84 (м, 1H), 7,58 (с, 1H), 4,97-4,79 (м, 1H), 4,22 (с, 3H), 3,38-3,33 (м, 1H), 3,14-3,07 (м, 1H), 3,05 (д, =4,8 Гц, 3H), 2,95-2,92 (м, 1H), 2,50 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,25-2,10 (м, 2H), 1,99-1,87 (с, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,29 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95% (214 нм), Rt=4,385 мин; МС Вычисл.: 412, МС Найдено: 413 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH/DEA=50/50/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=5,423 мин, 100% э.и.
Пример 58
(цис)-N-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)ацетамид (энантиомер 2) (E58)
2
2
E58
Смесь (цис)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-амина (энантиомер 2) (80 мг, 0,216 ммоль) и DMAP (кат.) в AcO (10 мл) нагревали до 110°C в течение 1 часа. Смесь концентрировали и остаток растворяли в DCM (5 мл). Раствор промывали HO (10 мл). Водный слой экстрагировали DCM/MeOH (DCM/MeOH=10/1, 5 мл×4). Объединенные органические растворы концентрировали с получением коричневого масла. Масло очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (37,5 мг, выход 42%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,80 (с, 2H), 8,37 (с, 1H), 8,13 (с, 1H), 7,91 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 4,99-4,75 (м, 1H), 4,14 (с, 3H), 3,37-3,29 (м, 1H), 3,11-3,02 (м, 1H), 2,96-2,89 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,41(с, 3H), 2,25 (с, 3H), 2,22-2,10 (м, 2H), 1,96-1,82 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,24 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,211 мин; МС Вычисл.: 412, МС Найдено: 413 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-3 3 мкм 4,6*150 мм, HEX/EtOH/DEA=70/30/0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=5,360 мин, 88,3% э.и.
Пример 59
(цис)-N-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)ацетамид (энантиомер 1) (E59)
2
2
E59
Смесь (цис)-6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-амина (энантиомер 1) (37 мг, 0,10 ммоль) и DMAP (кат.) в AcO (6 мл) нагревали до 110°C в течение 1 часа. Смесь концентрировали и растворяли в DCM (5 мл). Раствор промывали HO (10 мл). Водный слой экстрагировали DCM/MeOH (DCM/MeOH=10/1, 5 мл×4). Объединенные органические растворы концентрировали с получением коричневого масла. Масло очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (11,1 мг, выход 27%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,80 (с, 1H), 8,37 (с, 1H), 8,13 (с, 1H), 7,85 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 4,95-4,75 (м, 1H), 4,13 (с, 3H), 3,36-3,30 (м, 1H), 3,12-3,02 (м, 1H), 2,93-2,87 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,25 (с, 3H), 2,19-2,06 (м, 2H), 1,99-1,82 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,25 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота > 95%, Rt=3,573 мин; МС Вычисл.: 412, МС Найдено: 413 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-3 3 мкм 4,6*150 мм, Hex/EtOH/DEA=70/30/0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T =30°C, Rt=4,130 мин, 81,9% э.и.
Пример 60
(цис)-4-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксид (энантиомер 1) (E60)
3
2
3
2
4
E60
Раствор (цис)-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксид гидрохлорида (энантиомер 1) (37 мг неочищенного продукта, 0,066 ммоль) и раствор формальдегида (14%, 1 мл) в метаноле (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем добавляли NaBHCN (21 мг, 0,33 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в насыщ. NaCO (5 мл) и перемешивали в течение 10 минут. Затем смесь экстрагировали дихлорметаном (10 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (15,5 мг, выход 48%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
6
d
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,97-4,74 (м, 1H), 4,29-4,22 (м, 4H), 4,15 (с, 3H), 3,36-3,30 (м, 1H), 3,11-3,01 (м, 5H), 2,96-2,86 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 2,31-2,13 (м, 2H), 2,01-1,85 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, DMSO-): δ -182,36 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=3,462 мин; МС Вычисл.: 488, МС Найдено: 489 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: HEX:EtOH:DEA=70:30:0,2, Скорость потока: 1 мл/мин, 254 нм, T=30°C, Rt=16,979 мин, 100% э.и.
Пример 61
(цис)-4-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксид (энантиомер 2) (E61)
3
2
3
2
4
E61
Раствор (цис)-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)тиоморфолин 1,1-диоксид гидрохлорида (энантиомер 2) (45 мг неочищенного продукта, 0,088 ммоль) и раствор формальдегида (14%, 1 мл) в метаноле (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем добавляли NaBHCN (28 мг, 0,44 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в насыщ. NaCO (10 мл) и перемешивали в течение 10 минут. Затем смесь экстрагировали дихлорметаном (10 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (24,7 мг, выход 58%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 5,02-4,77 (м, 1H), 4,34-4,27 (м, 4H), 4,16 (с, 3H), 3,50-3,36 (м, 1H), 3,26-3,11 (м, 5H), 3,05-2,86 (м, 1H), 2,49-2,33 (м, 6H), 2,31-2,10 (м, 2H), 2,01-1,85 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,30 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=3,710 мин; МС Вычисл.: 488, МС Найдено: 489 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: HEX:EtOH:DEA=70:30:0,2, Скорость потока: 1 мл/мин, 254 нм, T=30°C, Rt=19,420 мин, 100% э.и.
Пример 62
(цис)-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (энантиомер 2) (E62)
E62
.
Смесь (цис)-трет-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (35 мг, 0,067 ммоль)в HCl/диоксане (2,5 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали. Остаток растирали с EtOAc (5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (12 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,69 (с, 2H), 8,68 (с, 1H), 8,36 (с, 1H), 7,68 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 5,20-4,96 (м, 1H), 4,01 (с, 3H), 3,66-3,51 (м, 10H), 3,34-3,30 (м, 1H), 3,21-3,04 (м, 2H), 2,44 (с, 3H), 2,09-2,01 (м, 1H), 1,96-1,87(м, 1H).
19
d
6
F ЯМР (376 МГц, DMSO-): δ -185,58 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,154 мин; МС Вычисл.: 426, МС Найдено: 427 [M+H].
3
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, CHOH/EtOH/DEA=50/50/0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T =30°C. Rt=9,310 мин, 100% э.и.
Пример 63
(цис)-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (энантиомер 1) (E63)
трет-
E63
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (35 мг, 0,067 ммоль)в HCl/диоксане (2,5 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали. Остаток растирали с EtOAc (5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (12 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,57 (шир. с, 2H), 8,68 (с, 1H), 8,36 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,17-4,94 (м, 1H), 4,01 (с, 3H), 3,66-3,51 (м, 10H), 3,36-3,30 (м, 1H), 3,22-3,06 (м, 2H), 2,44 (с, 3H), 2,11-2,02 (м, 1H), 1,93-1,85(м, 1H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -185,58 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,141 мин; МС Вычисл.: 426, МС Найдено: 427 [M+H].
3
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, CHOH/EtOH/DEA=50/50/0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T =30°C. Rt=8,228 мин, 100% э.и.
Пример 64
(цис)-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (энантиомер 1) (E64)
трет-
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (60 мг, смесь с 60% de-Boc соединения) в HCl/метаноле (4 моль/л, 4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (38,4 мг, выход 68%) в виде светло-желтого твердого вещества.
1
19
d
d
6
6
E64
H ЯМР (400 МГц, DMSO-): δ 10,13 (шир. с, 1H), 9,63 (шир. с, 1H), 8,84 (с, 1H), 8,38 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,01 (с, 1H), 5,31-5,12 (м, 1H), 3,69-3,67 (м, 9H), 3,58-3,49 (м, 1H), 3,39-3,37 (м, 1H), 3,31-3,08 (м, 2H), 2,64 (с, 3H), 2,46 (с, 3H), 2,10-2,02 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, DMSO-): δ -185,55 (с, 1F).  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=3,142 мин; МС Вычисл.: 410, МС Найдено: 411 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: HEX:IPA=50/50, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=8,342 мин, 100% э.и.
Пример 65
(цис)-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (энантиомер 2) (E65)
трет-
E65
Смесь (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (60 мг, смесь с 60% de-Boc соединения) в HCl/метаноле (4 моль/л, 4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (48,5 мг, выход 87%) в виде светло-желтого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
d
d
6
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-): δ 10,13 (шир. с, 1H), 9,63 (шир. с, 1H), 8,84 (с, 1H), 8,38 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,01 (с, 1H), 5,33-5,12 (м, 1H), 3,69-3,67 (м, 9H), 3,57-3,51 (м, 1H), 3,38-3,33 (м, 1H), 3,22-3,06 (м, 2H), 2,63 (с, 3H), 2,46 (с, 3H), 2,10-2,02 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, DMSO-): δ -185,54 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=3,960 мин; МС Вычисл.: 410, МС Найдено: 411 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: HEX:IPA=50/50, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=6,798 мин, 100% э.и.
Пример 66
1-(6-(6-(3,3-Дифторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-карбонитрил (энантиомер 1) (E66)
трет-
2
3
2
4
2
E66
К раствору бутил 4-(1-(6-(3-цианоазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3,3-дифторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (65 мг, 0,12 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли TFA (1 мл) по каплям при 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали при пониженном давлении при комнатной температуре. Остаток растворяли в EtOAc (25 мл), подщелачивали водным CsCO (2 м) до pH=12. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток промывали 1 мл EtO с получением указанного в заголовке соединения (36 мг, выход 68%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J=
J=
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,98 (с, 1H), 8,10 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 6,51 (с, 1H), 4,49-4,44 (м, 2H), 4,41-4,37 (м, 2H), 4,15 (м, 3H), 3,68-3,60 (м, 1H), 3,57-3,47 (м, 1H), 3,37-3,31 (м, 1H), 3,27-3,23 (м, 1H), 3,04-2,93 (м, 1H), 2,81 (т,13,2 Гц, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,14-2,10 (м, 1H), 1,98-1,95 (м, 1H).F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -105,64 (д,241,39 Гц, 1F), -117,23 (д,241,77 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота > 95%, Rt=3,318 мин; МС Вычисл.: 439, МС Найдено: 440 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: MeOH/EtOH/DEA=50/50/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,612 мин, 100% э.и.
Пример 67
1-(6-(6-(3,3-Дифторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-карбонитрил (энантиомер 2) (E67)
трет-
2
3
2
4
E67
К раствору бутил 4-(1-(6-(3-цианоазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3,3-дифторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (80 мг, 0,15 ммоль) в DCM (2 мл) добавляли TFA (0,5 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в EtOAc (40 мл), и подщелачивали CsCO (2 м) до pH=12. Органические слои разделяли и промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (42 мг, выход 64%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J=
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,97 (с, 1H), 8,10 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 6,51 (с, 1H), 4,50-4,35 (м, 4H), 4,15 (с, 3H), 3,70-3,45 (м, 2H), 3,38-3,21 (м, 2H), 2,98 (дд, 30,6, 13,2 Гц, 1H), 2,86-2,76 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,20-2,10 (м, 1H), 2,00-1,92 (м, 1H).F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -105,66 (д,243,27 Гц, 1F), -117,28 (д,241,02 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота > 95%, Rt=3,282 мин; МС Вычисл.: 439, МС Найдено: 440 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: MeOH/EtOH/DEA=50/50/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=8,160 мин, 100% э.и.
Пример 68
(цис)-1-(6-(5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1) (E68)
E68
2
3
4
К суспензии (цис)-5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (энантиомер 1)(50 мг, 0,097 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли TsOH (85 мг, 0,49 ммоль). Смесь нагревали до 65°C и перемешивали при 65°C в течение 30 мин. Реакционную смесь выливали в NaCO (насыщ., 20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (38,2 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J
J=
J=
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (д, =6,4 Гц, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,37 (д, 10,0 Гц, 1H), 6,47 (с, 1H), 4,98-4,80 (м, 2H), 4,41 (т, 8,0 Гц, 2H), 4,09 (с, 3H), 4,01 (дд, =9,6, 4,0 Гц, 2H), 3,33-3,29 (м, 1H), 3,17-3,09 (м, 1H), 2,91-2,88 (м, 1H), 2,52 (шир. с, 1H), 2,39 (с, 3H), 2,21-2,07 (м, 2H), 2,04-1,94 (м, 1H), 1,91-1,85 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -124,00 (с, 1F), -184,18 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=3,940 мин; МС Вычисл.: 430, МС Найдено: 431 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: MeOH/EtOH/DEA=50/50/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,852 мин, 96,7% э.и.
Пример 69
(цис)-1-(6-(5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2) (E69)
E69
2
3
4
К суспензии (цис)-5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола(энантиомер 2)(40 мг, 0,078 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли TsOH (67 мг, 0,39 ммоль). Смесь нагревали до 65°C и перемешивали при 65°C в течение 30 мин. Реакционную смесь выливали в NaCO (насыщ., 20 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (22,5 мг, выход 67%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J
J=
J=
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (д, =6,4 Гц, 1Hz), 8,11 (с, 1H), 7,36 (д, 9,6 Гц, 1H), 6,47 (с, 1H), 4,98-4,79 (м, 2H), 4,41 (т, 8,0 Гц, 2H), 4,09 (с, 3H), 4,01 (дд, =9,2, 4,0 Гц, 2H), 3,33-3,29 (м, 1H), 3,17-3,09 (м, 1H), 2,90-2,87 (м, 1H), 2,46 (шир. с, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,21-2,08 (м, 2H), 2,03-1,98 (м, 1H), 1,93-1,83 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -123,99 (с, 1F), -184,19 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=3,989 мин; МС Вычисл.: 430, МС Найдено: 431 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: MeOH/EtOH/DEA=50/50/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=5,011 мин, 100% э.и.
Пример 70
(цис)-1-(6-(5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1) (E70)
2
2
3
4
E70
К суспензии (цис)-5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (энантиомер 1) (70 мг, 0,14 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли TsOH ·HO (8 мг, 0,04 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь выливали в NaCO (насыщ., 50 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (38,2 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,94 (д, =6,3 Гц, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,36 (д, =9,6 Гц, 1H), 6,60 (с, 1H), 5,10-4,80 (м, 2H), 4,44-4,39 (м, 2H), 4,03-3,99 (м, 2H), 3,41-3,31 (м, 1H), 3,22-3,09 (м, 1H), 2,99-2,89 (м, 1H), 2,61 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 2,28-2,11 (м, 2H), 2,06-1,97 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -124,21 (с, 1F), -184,16 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота 95,38% (214 nm), Rt=2,786 мин; МС Вычисл.: 414, МС Найдено: 415 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH/DEA=60/40/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,693 мин, 100% э.и.
Пример 71
(цис)-1-(6-(5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2) (E71)
2
2
3
4
E71
К суспензии (цис)-5-фтор-6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (энантиомер 2) (68 мг, 0,14 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли TsOH ·HO (8 мг, 0,04 ммоль). Полученный раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливали в NaCO (насыщ., 50 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (38,2 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,95 (д, =6,3 Гц, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,36 (д, =9,6 Гц, 1H), 6,59 (с, 1H), 5,08-4,80 (м, 2H), 4,44-4,39 (м, 2H), 4,03-3,99 (м, 2H), 3,41-3,31 (м, 1H), 3,22-3,09 (м, 1H), 2,99-2,89 (м, 1H), 2,61 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 2,28-2,11 (м, 2H), 2,06-1,97 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -124,21 (с, 1F), -184,16 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=2,786 мин, МС Вычисл.: 414, МС Найдено: 415 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH/DEA=60/40/0,2, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,693 мин, 100% э.и.
Пример 72 и 73
(цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1) (E72) и
(цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2) (E73)
(E72)
(E73)
E73
E73
E72
E73
(цис)-1-(6-(6-(3-Фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол(210 мг, 0,509 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ способом (Chiralpak IC 5 мкм 20*250 мм, Фаза: Hex/EtOH=70/30, скорость потока: 18 мл/мин, 205 нм, T=30°C) с получением указанных в заголовке соединений (цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1)  (44,8 мг, выход 21%) и неочищенный (цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2)  (80 мг, 75% чистота) оба в виде белого твердого вещества. Неочищенный  далее очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM/MeOH=15/1) с получением желаемого соединения  (49,9 мг, выход 24%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
E72:
1
19
3
3
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,70 (д, =6,3 Гц, 1H), 7,22 (д, =7,2 Гц, 1H), 6,48 (с, 1H), 4,86-4,68 (м, 2H), 4,43-4,39 (м, 2H), 4,10 (с, 3H), 4,01 (дд, =7,2, 4,0 Гц, 2H), 3,32-3,28 (м, 1H), 2,92-2,78 (м, 2H), 2,40 (с, 3H), 2,19-1,91 (м, 4H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,28 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=2,871 мин; МС Вычисл.: 412, МС Найдено: 413 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH=70/30, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=12,017 мин, 100% э.и.
E73:
1
19
3
3
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,70 (д, =6,3 Гц, 1H), 7,22 (д, =6,3 Гц, 1H), 6,48 (с, 1H),4,93-4,72 (м, 2H), 4,43-4,39 (м, 2H), 4,10 (с, 3H), 4,01 (дд, =7,5, 4,0 Гц, 2H), 3,38-3,31 (м, 1H), 2,98-2,79 (м, 2H), 2,43 (с, 3H), 2,25-2,00 (м, 4H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,42 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,887 мин; МС Вычисл.: 412, МС Найдено: 413 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH=70/30, скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=13,746 мин, 100% э.и.
Пример 74
(цис)-1-(6-(6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2) (E74)
E74
2
3
2
4
К суспензии (цис)-6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола(энантиомер 2)(23 мг, 0,046 ммоль) в метаноле (1 мл) добавляли TsOH (кат.). Полученный раствор перемешивали при 30°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали и разделяли между NaCO (10%, 20 мл) и EtOAc (20 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (20 мл×2) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (7,1 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,77 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,49 (с, 1H), 5,22-5,07 (м, 1H), 4,84 (шир.с, 1H), 4,42 (т, 8,4 Гц, 2H), 4,13 (с, 3H), 4,04-4,00 (м, 2H), 3,97-3,85 (м, 1H), 3,34-3,30 (м, 1H), 3,11-3,02 (м, 1H), 2,91-2,79 (м, 1H), 2,64-2,60 (м, 1H), 2,51 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,24 (шир.с, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -163,70 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=4,051 мин; МС Вычисл.: 412, МС Найдено: 413 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: HEX:EtOH=60/40, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=9,261 мин, 95,4% э.и.
Пример 75
(цис)-1-(6-(6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1) (E75)
2
3
2
4
E75
К суспензии 6-(4-фтор-1-метилпирролидин-3-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (83 мг, 0,17 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли TsOH (кат.). Полученный раствор перемешивали при 30°C в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали и разделяли между NaCO (10%, 40 мл) и EtOAc (40 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (34,1 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,77 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,49 (с, 1H), 5,22-5,07 (м, 1H), 4,84 (шир. с, 1H), 4,42-4,40 (м, 2H), 4,13 (с, 3H), 4,03-4,00 (м, 2H), 3,98-3,85 (м, 1H), 3,34-3,28 (м, 1H), 3,11-3,02 (м, 1H), 2,91-2,79 (м, 1H), 2,63-2,60 (м, 1H), 2,51 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,26 (шир. с, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -163,70 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=4,048 мин; МС Вычисл.: 412, МС Найдено: 413 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: HEX:EtOH=60/40, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=5,811 мин, 97,7% э.и.
Пример 76
(цис)-4-(4-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1
H
-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пиридин-2-ил)морфолин (энантиомер 2) (E76)
H
3
4
2
E76
Суспензию (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1-пиразоло[3,4-d]пиримидина (энантиомер 2) (30 мг, 0,11 ммоль), 4-(4-иод-2-пиридил)морфолина (62 мг, 0,21 ммоль), метил[2-(метиламино)циклогексил]амина (30 мг, 0,21 ммоль), CuI (61 мг, 0,32 ммоль) и KPO (68 мг, 0,32 ммоль) в сухом толуоле (6 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере N в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в MeOH (2 мл), фильтровали и очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (15,4 мг, выход 33%) в виде зеленого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 9,30 (с, 1Н), 8,47 (с, 1Н), 8,24 (д, =5,7 Гц, 1H), 7,94 (д, =0,9 Гц, 1H), 7,83 (дд, =5,7, 0,9 Гц, 1H), 5,41-5,15 (м, 1H), 3,86-3,83 (м, 4H), 3,60-3,56 (м, 6H), 3,44-3,35 (м, 4H), 3,27-3,18 (м, 1H), 3,07-3,00 (м, 1H), 2,74-2,70 (м, 2H), 2,40-2,25 (м, 2H), 2,19-2,06 (м, 1H), 2,06-1,92 (м, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин, чистота составляет > 98%, Rt=3,994 мин; МС Вычисл.: 441; МС Найдено: 442 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF-5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=60/40, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=окружающая среда), Rt=20,178 мин, 100% э.и.
Пример 77
(цис)-4-(4-(6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1
H
-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил)пиридин-2-ил)морфолин (энантиомер 1) (E77)
H
3
4
2
3
2
E77
Суспензию (цис)-6-(3-фтор-1-(2-метоксиэтил)пиперидин-4-ил)-1-пиразоло[3,4-d]пиримидина (энантиомер 1) (30 мг, 0,11 ммоль), 4-(4-йодпиридин-2-ил)морфолина (37 мг, 0,13 ммоль), метил[2-(метиламино)циклогексил]амина (15 мг, 0,11 ммоль), CuI (21 мг, 0,11 ммоль) и KPO (46 мг, 0,22 ммоль) в сухом толуоле (6 мл) нагревали до 115°C в атмосфере N в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в MeOH (2 мл), фильтровали, и очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт далее очищали при помощи колонки С18, элюируя CHCN/HO (от 0/100 до 100/0) с получением указанного в заголовке соединения (3,1 мг, выход 6,6%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 9,32 (с, 1Н), 8,49 (с, 1Н), 8,26 (д, =6,0 Гц, 1H), 7,95 (с, 1H), 7,85 (дд, =5,7, 1,2 Гц, 1H), 5,42-5,16 (м, 1H), 3,87-3,83 (м, 4H), 3,61-3,57 (м, 6H), 3,43-3,37 (м, 5H), 3,06-2,99 (м, 1H), 2,74-2,71 (м, 2H), 2,33-2,28 (м, 2H), 2,16-2,06 (м, 1H), 2,05-1,91 (м, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,0 мин, чистота составляет > 95%, Rt=3,995 мин; МС Вычисл.: 441; МС Найдено: 442, [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF-5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=60/40, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=окружающая среда), Rt=14,429 мин, 100% э.и.
Пример 78
4-(6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E78)
2
3
2
4
Суспензию 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (100 мг, 0,37 ммоль), 4-(6-хлор-пиримидин-4-ил)-морфолина (110 мг, 0,55 ммоль) и CsCO (240 мг, 0,74 ммоль) в DMF (5 мл) нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором и сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAC=1:20) с получением указанного в заголовке соединения (13,1 мг, выход 8%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,84(с, 1H), 8,62 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 7,12 (с, 1H), 4,72-4,70 (м, 4H), 3,82 (шир.с, 4H), 3,72 (шир.с, 4H), 3,57-3,54 (м, 1H), 2,98-2,96 (м, 2H), 2,87-2,82 (м, 1H), 2,46(с, 3H), 2,00-1,98 (м, 4H), 1,96-1,88 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин), чистота> 95%, Rt=4,41 мин; МС Вычисл.: 434, МС Найдено: 435 [M+H].
Пример 79
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (E79)
2
3
2
2
2
4
К смеси 1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (70 мг, 0,13 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли TsOH (22 мг, 0,13 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в насыщ. раствор NaCO (20 мл). Реакционную смесь экстрагировали CHCl (3×20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2×20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток растирали с EtOAc (5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (35 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,75 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 6,45 (с, 1H), 4,87-4,80 (м, 1H), 4,70-4,67 (м, 4H), 4,43-4,38 (м, 2H), 4,13 (с, 3H), 4,02-3,98 (м, 2H), 3,59-3,50 (м, 1H), 2,94-2,75 (м, 4H), 2,44 (с, 3H), 2,05-1,83 (м, 6H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,019 мин; МС Вычисл.: 450; МС Найдено: 451 [M+H].
Пример 80
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ол (E80)
3
4
3
2
2
4,
2
2
.
Суспензию 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (50 мг, 0,18 ммоль),1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ола (70 мг, 0,22 ммоль), KPO (76 мг, 0,36 ммоль), CuI (34 мг, 0,18 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (51 мг, 0,34 ммоль) в толуоле (10 мл) перемешивали при 110°C в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали и остаток разделяли с EtOAc (30 мл) и NHHO (30%, 20 мл). Органический слой отделяли, сушили над NaSO фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:метанол=15:1) с получением неочищенного продукта в виде бесцветного масла. Неочищенный продукт далее очищали препаративной хиральной ВЭЖХ способом (Chiralpak IB; Фаза: Hex:EtOH=80:20; F:15 мл/мин; W:254 нм) с получением указанного в заголовке соединения (17 мг, выход 20%) в виде белого твердого вещества.
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 4,68 (д, 6,6 Гц, 4H), 4,15-4,05 (м, 7H), 3,59-3,50 (м, 1H), 2,94-2,77 (м, 3H), 2,45 (с, 3H), 2,25-2,13 (м, 1H), 2,09-1,78 (м, 7H), 1,74-1,61 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота > 95%, Rt=4,232 мин; МС Вычисл.: 464, МС Найдено: 465 [M+H].
Пример 81
3-метил-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (E81)
3
4
2
4
К суспензии 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (50 мг, 0,18 ммоль), 1 1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ола (61 мг, 0,20 ммоль), CuI (34 мг, 0,18 ммоль) и KPO (76 мг, 0,36 ммоль) в сухом толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (51 мг, 0,36 ммоль). Полученную смесь дегазировали N и перемешивали при 110°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали и затем разделяли между разбавленным аммиаком (30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (19 мг, выход 23%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 4,73-4,71 (м, 4H), 4,11-4,04 (м, 4H), 3,63-3,51 (м, 1H), 3,02-2,93 (м, 2H), 2,89-2,78 (м, 1H), 2,66 (с, 3H), 2,45 (с, 3H), 2,15-1,94 (м, 7H), 1,63 (с,3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота > 95%, Rt=4,060 мин; МС Вычисл.: 448, МС Найдено: 449 [M+H].
Пример 82
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (E82)
К смеси 1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (70 мг, 0,13 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли TsOH (5 мг, 0,03 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь фильтровали. Твердое вещество собирали с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества.
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 8,64 (с, 1H), 8,31 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 6,40 (с, 1H), 5,81 (шир. с, 1H), 4,60 (шир. с, 1H), 4,30-4,24 (м, 2H), 3,98 (с, 3H), 3,82-3,77 (м, 2H), 3,72-3,68 (м, 2H), 3,00-2,86 (м, 6H), 2,42 (с, 3H), 1,95-1,89 (м, 2H), 1,69-1,57 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,995 мин; МС Вычисл.: 472, МС Найдено: 473 [M+H].
Пример 83
1-(4-(1-(6-(3-Гидроксиазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-ил)этанон (E83)
3
4
3
2
2
4
.
К раствору 1-(4-(5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-ил)этанона (51 мг, 0,20 ммоль)в толуоле (10 мл) добавляли 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (92 мг, 0,30 ммоль), KPO (127 мг, 0,600 ммоль), CuI (114 мг, 0,600 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (85 мг, 0,60 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в насыщ. NHHO (10 мл). Желаемое соединение экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (15 мг, выход 17%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,66 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 6,44 (с, 1H), 4,72-4,68 (м, 2H), 4,35-4,30 (м, 2H), 4,10-4,05 (м, 4H), 3,91-3,88 (м, 2H), 3,39-3,35 (м, 1H), 3,26-3,16 (м, 1H), 2,82-2,73 (м, 1H), 2,49 (с, 3H), 2,15 (с, 3H), 2,00-1,90 (м, 2H), 1,72-1,60 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,799 мин; МС Вычисл.: 436; МС Найдено: 437 [M+H].
Пример 84
4-(6-(6-(1-Метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин
Смесь 4-(6-(6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (88,0 мг, 0,241 ммоль), раствора формальдегида (390 мг, 5,20 ммоль) и Pd-C (25,7 мг, 0,0240 ммоль) в метаноле (40 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи в атмосфере водорода. Затем реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Очистка посредством управляемой по массе автоматизированной препаративной хроматографии давало указанный в заголовке продукт.
3
3
+
ЖХ-МС (ESI) [подвижная фаза: от 95% воды (0,05% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 5,0 мин]: m/z 379 [M+H]; Rt=2,18 мин.
1
3
J=
J
H ЯМР (400 МГц, CDOD): 8,82 (с, 1H), 8,54 (с, 1H), 8,29 (с, 1H), 7,83 (д, 8,0 Hz 1H), 7,29 (д, =8,0 Гц, 1H), 7,28 (с, 1H), 3,82~3,67 (м, 11H), 3,27~3,13 (м, 2H), 2,97 (с, 3H), 2,28~2,24 (м, 2H), 2,11~2,08 (м, 2H).
Пример 85
4-(6-(5-метил-6-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин
Смесь бензил 4-(5-метил-1-(6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)-5,6-дигидропиридин-1(2H)-карбоксилата (1,8 г, 3,53 ммоль) и Pd-C (0,375 г, 0,353 ммоль) в THF (40 мл) и метаноле (40,0 мл) перемешивали при 60°C в атмосфере водорода (50 фунт/кв. дюйм) в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Очистка посредством управляемой по массе автоматизированной препаративной хроматографии только давало указанный в заголовке продукт.
3
3
+
ЖХ-МС (ESI) [подвижная фаза: от 95% воды (0,05% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 5,0 мин]: m/z 377 [M+H]; Rt=2,49 мин.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): 8,64 (с, 1H), 8,49 (с, 1H), 8,25 (с, 1H), 7,69 (с, 1H), 7,26 (с, 1H), 5,79 (м, 1H), 3,91~3,53 (м, 12H), 2,18 (м, 2H), 3,34 (с, 3 H).
Пример 86
4-(6-(5-метил-6-(1-метил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E86)
Смесь 4-(6-(5-метил-6-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (387 мг, 1,028 ммоль), Pd-C (109 мг, 0,103 ммоль) и HCHO (772 мг, 10,28 ммоль) в THF (20 мл) и метаноле (20,00 мл) перемешивали при 60°C в атмосфере водорода (50 фунт/кв. дюйм) в течение ночи. Затем реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Непосредственная очистка с помощью MDAP давала указанный в заголовке продукт в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц,CDOD) d: 8,40 (с, 1H), 8,56 (с, 1H), 8,51 (с, 1H), 8,20 (с, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,22 (с, 1H), 5,67 (с, 1H), 3,81, 3,73 (м, 8H), 2,23 (м, 2 H), 2,80 (м, 2H), 2,53-2,40 (м, 8 H)
3
3
+
ЖХ-МС (ESI) [подвижная фаза: от 95% воды (0,05% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 5,0 мин]: m/z 391 [M+H]; Rt 2,49 мин.
Пример 87
4-(1-(6-(3-Гидроксиазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-1-метилпиперидин-2-он (энантиомер 2) (E87)
2
3
E87
К смеси 4-(1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-1-метилпиперидин-2-она (энантиомер 2) (50 мг, 0,099 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли TsOH (50 мг, 0,29 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в насыщ. раствор NaCO (15 мл). Смесь фильтровали. Твердое вещество собирали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,70 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,47 (с, 1H), 4,87-4,79 (м, 1H), 4,44-4,38 (м, 2H), 4,09 (с, 3H), 4,03-3,98 (м, 2H), 3,52-3,33 (м, 3H), 3,02 (с, 3H), 2,81-2,73 (м, 1H), 2,56-2,53 (м, 1H), 2,52-2,46 (м, 4H), 2,19-2,04 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,661 мин; МС Вычисл.: 422, МС Найдено: 423 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6×150 мм, Фаза: Hex:EtOH=30:70, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C, 230 нм, Rt=6,378 мин, 100% э.и.
Пример 88
4-(1-(6-(3-Гидроксиазетидин-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-1-метилпиперидин-2-он (энантиомер 1) (E88)
2
3
E88
К смеси 4-(1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-1-метилпиперидин-2-она (энантиомер 1) (52 мг, 0,10 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли TsOH (50 мг, 0,29 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в насыщ. раствор NaCO (20 мл). Смесь фильтровали. Твердое вещество собирали. Твердое вещество промывали водой (20 мл) и сушили с получением указанного в заголовке соединения (23 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,72 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,48 (с, 1H), 4,87-4,79 (м, 1H), 4,45-4,39 (м, 2H), 4,11 (с, 3H), 4,05-4,00 (м, 2H), 3,53-3,32 (м, 3H), 3,04 (с, 3H), 2,82-2,76 (м, 1H), 2,50-2,39 (м, 4H), 2,23-2,04 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,678 мин; МС Вычисл.: 422, МС Найдено: 423 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6×250 мм, Фаза: Hex:EtOH=30:70, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C, 230 нм, 100% э.и.
Пример 89
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (E89)
В круглодонную колбу добавляли трикалийфосфат (182 мг, 0,859 ммоль), 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол (78 мг, 0,361 ммоль), иодид меди(I) (26,2 мг, 0,137 ммоль), и магнитный мешальник. Реакционный сосуд оборудовали резиновой перегородкой, откачивали и заполняли аргоном и эту последовательность повторяли еще один раз. 1-(6-Иод-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (100 мг, 0,344 ммоль), N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (78 мг, 0,550 ммоль) и толуол (5 мл) затем последовательно добавляли в потоке аргона. Смесь перемешивали при 120°C в течение 16 часов. После фильтрации, фильтрат концентрировали и очищали MDAP с получением 1-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ола (4 мг, 10,54 мкмоль, 3,07% выход).
+
MS: 380,2 [M+H].
d
6
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-) d ppm 8,75 (1 H, с) 8,31 (1 H, с) 7,63 (1 H, с) 6,55 (1 H, с) 5,82 (1 H, д) 4,63 (1 H, м) 4,30 (2 H, т) 4,01 (2 H, д) 3,82 (2 H, дд) 3,54 (2 H, т) 3,11 (1 H, т) 2,52 (3 H, м) 2,45 (3 H, с) 1,71 (4 H, м).
Пример 90
5-метил-1-(2-метил-6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1
H
-индазол
Раствор 5-метил-1-(2-метил-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (71 мг, 0,181 ммоль), оксетан-3-она (130 мг, 1,809 ммоль) и DMF (2 мл) перемешивали в течение 30 мин, перед добавлением триацетоксиборгидрида натрия (115 мг, 0,543 ммоль) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После фильтрации, фильтрат концентрировали и очищали при помощи MDAP с получением 5-метил-1-(2-метил-6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (5 мг, 0,011 ммоль, 6,16% выход).
+
MS: 449,1 [M+H].
d
6
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-) d ppm 8,74 (1 H, с) 8,32 (1 H, с) 7,63 (1 H, с) 6,99 (1 H, с) 4,53 (4 H, м) 4,01 (2 H, д) 3,70 (4 H, шир. с.) 3,49 (3 H, м) 3,11 (1 H, т) 2,54 (3 H, с) 2,45 (3 H, с) 2,35 (4 H, д) 1,71 (4 H, м).
Пример 91
1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол гидрохлорид (энантиомер 1) (E91)
трет-
3
E91
Смесь бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (80 мг, 0,162 ммоль) в.HCl/CHOH (5M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (42 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,41 (с, 2H), 8,71 (с, 1H), 8,33 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 6,92 (с, 1H), 4,00-3,66 (м, 12H), 3,15 (шир. с, 4H), 2,48-2,34 (м, 4H), 1,89-1,79 (м, 1H).
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 10-95% CHCN в воде (0,1% TFA) за 6 мин], чистота >95%, Rt=3,250 мин; МС Вычисл.: 394, МС Найдено: 395 (M+1).
Хиральная ВЭЖХ: (Chiralpak AD-3 3 мкм 4,6×150 мм, Фаза: Hex/EtOH=70/30, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C), Rt= 13,570 мин, 100% э.и.
Пример 92
1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол гидрохлорид (энантиомер 2) (E92)
3
E92
Смесь трет-бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидрофуран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (80 мг, 0,162 ммоль) в HCl/CHOH(5M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (42 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,41 (с, 2H), 8,71 (с, 1H), 8,33 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 6,92 (с, 1H), 4,06-4,00 (м, 4H), 3,91-3,66 (м, 8H), 3,15 (шир. с, 4H), 2,48-2,34 (м, 4H), 1,89-1,78 (м, 1H).
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: 10-95% CHCN (0,1% TFA) за 6 мин], чистота >95%, Rt=3,255 мин; МС Вычисл.: 394, МС Найдено: 395 (M+1).
Хиральная ВЭЖХ: (Chiralpak AD-3 3 мкм 4,6×150 мм, Фаза: Hex/EtOH=70/30, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C), Rt= 17,043 мин, 95,7% э.и.
Пример 93
3-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)-4-метилморфолин (энантиомер 2) (E93)
3
4
2
2
4
E93
Суспензию 3-(1H-индазол-6-ил)-4-метилморфолина (110 мг, 0,507 ммоль) (энантиомер 2), 4-иод-2-метокси-6-(пиперидин-1-ил)пиримидина (324 мг, 1,01 ммоль), метил[2-(метиламино)циклогексил]амина (216 мг, 1,52 ммоль), CuI (290 мг, 1,52 ммоль) и KPO (322 мг, 1,52 ммоль) в сухом толуоле (16 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере N в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли EtOAc (50 мл), и промывали водой (100 мл×3). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (105 мг, выход 50,5%) в виде белого твердого вещества. Белое твердое вещество далее очищали с помощью хиральной ВЭЖХ с помощью способа (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC- 5 мкм 20 мм*250 мм, Hex/IPA=60/40, Скорость потока: 14 мл/мин, 205 нм, T=окружающая среда) с получением указанного в заголовке соединения (52,0 мг, выход 25%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,86 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,70 (д, =8,4 Гц, 1H), 7,34 (д, =8,1 Гц, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,12 (с, 3H), 3,97-3,93 (м, 1H), 3,81-3,71 (м, 10H), 3,50-3,43 (м, 1H), 3,29-3,24 (м, 1H), 2,87 (д, =11,7 Гц, 1H), 2,53-2,43 (м, 1H), 2,11 (с, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHAc) и 95% CHCN за 6,0 мин, чистота составляет > 95%, Rt=4,461 мин; МС Вычисл.: 410; МС Найдено: 411 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC- 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/IPA=60/40, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=окружающая среда), Rt=11,266 мин, 100% э.и.
Пример 94
3-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)-4-метилморфолин (энантиомер 1) (E94)
3
4
2
2
4
E94
Суспензию 3-(1H-индазол-6-ил)-4-метилморфолина (энантиомер 1) (95 мг, 0,44 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(пиперидин-1-ил)пиримидина (280 мг, 0,876 ммоль), N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамина (186 мг, 1,31 ммоль), CuI (251 мг, 1,31 ммоль) и KPO (278 мг, 1,31 ммоль) в сухом толуоле (16 мл) нагревали с обратным холодильником в атмосфере N в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали водой (100 мл×3). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (101 мг, выход 56%) в виде белого твердого вещества.  представляет собой единственный неизвестный энантиомер.
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,86 (с, 1H), 8,15 (с, 1H), 7,70 (д, =8,1 Гц, 1H), 7,34 (д, =7,8 Гц, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,12 (с, 3H), 3,96-3,93 (м, 1H), 3,82-3,71 (м, 10H), 3,50-3,43 (м, 1H), 3,29-3,25 (м, 1H), 2,87 (д, =12,3 Гц, 1H), 2,53-2,43 (м, 1H), 2,11 (с, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHAc) и 30% CHCN до 10% воды (0,02% NHAc) и 90% CHCN за 6,0 мин, чистота составляет > 95%, Rt=3,647 мин; МС Вычисл.: 410; МС Найдено: 411 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ (Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC-5 мкм 4,6*250 мм, Hex/IPA=60/40, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=окружающая среда), Rt=15,445 мин, 99,2% э.и.
Пример 95
4-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E95)
Стадия 1:
2
4
1-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)этанон (140 мг, 0,6 ммоль) растворяли в MeOH (10 мл). Добавляли HCl (12 н, 1 мл) и смесь перемешивали при 40°C в течение 1 часа. Затем растворитель удаляли и остаток повторно растворяли в EtOAc (20 мл). Добавляли воду (10 мл) и значение рН водного слоя доводили до 8 с использованием 1 н NaOH. Органический слой отделяли, сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (PE:EtOAc=100:0-50:50) с получением 6-изопропокси-5-метил-1H-индазола (120 мг, 104% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=3,09 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 190; МС Найдено: 191 [M+1].
Стадия 2:
2
3
К раствору 6-изопропокси-5-метил-1H-индазола (60 мг, 0,31 ммоль) добавляли 4-(6-хлорпиримидин-4-ил)морфолин (94 мг, 0,47 ммоль) и CsCO (205 мг, 0,63 ммоль). Смесь перемешивали при 120°C в течение 1 ч при микроволновом излучении. Неочищенный продукт очищали колонкой с обращенной фазой (MDAP) с получением 4-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (12 мг, 10,8% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=4,26 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 353; МС Найдено: 354 [M+1].
1
3
H ЯМР (400M, CDOD): 8,53 (с, 1H), 8,29 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 7,19 (с, 1H), 4,77 (дт, J=12,1, 6,1 Гц, 1H), 3,81 (т, J=4,8 Гц, 4H), 3,68-3,74 (м, 4H), 2,28 (с, 3H), 1,44 (д, J=6,2 Гц, 6H).
Пример 96
4-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (E96)
2
3
К раствору 6-изопропокси-5-метил-1H-индазола (60 мг, 0,31 ммоль) добавляли 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (108 мг, 0,47 ммоль) и CsCO (205 мг, 0,63 ммоль). Смесь перемешивали при 120°C в течение 1 ч при микроволновом излучении. Неочищенный продукт очищали колонкой с обращенной фазой (MDAP) с получением 4-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (8 мг, 6,6% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=4,45 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 383; МС Найдено: 384 [M+1].
1
3
H ЯМР (400M, CDCl): 8,33 (шир. с., 1H), 8,01 (шир. с., 1H), 7,45 (шир. с., 1H), 6,87 (шир. с., 1H), 4,70 (шир. с., 1H), 4,11 (шир. с., 3H), 3,80 (шир. с., 4H), 3,73 (шир. с., 4H), 2,31 (шир. с., 3H), 1,44 (д, J=4,4 Гц, 6H).
Пример 97
4-(6-(5-метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E97)
Стадия 1:
1-(5-метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)этанон (90 мг, 368 мкмоль) растворяли в MeOH (5 мл). Добавляли HCl (12 н, 0,5 мл) и смесь перемешивали при 40°C в течение 1 ч. Затем растворитель удаляли и остаток 5-метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазола использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=1,89 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 245; МС Найдено: 246 (M+1)+.
Стадия 2:
2
3
К раствору 5-метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазола (полученному на последней стадии) добавляли 4-(6-хлорпиримидин-4-ил)морфолин (73 мг, 0,36 ммоль) и CsCO (239 мг, 0,73 ммоль). Смесь перемешивали при 120°C в течение 1 ч при микроволновом излучении. Неочищенный продукт очищали колонкой с обращенной фазой (MDAP) с получением 4-(6-(5-метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (6,8 мг, 5,3% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,65 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 408; МС Найдено: 409 [M+1].
1
3
H ЯМР (400M, CDOD): 8,53 (шир. с., 1H), 8,32-8,44 (м, 1H), 8,15 (шир. с., 1H), 7,61 (шир. с., 1H), 7,23 (шир. с., 1H), 5,00 (шир. с., 1H), 3,66-3,92 (м, 10H), 3,50 (д, J=10,8 Гц, 2H), 2,98 (шир. с., 3H), 1,88-2,65 (м, 7H)
Пример 98
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E98)
Стадия 1:
1-(5-метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)этанон (90 мг, 368 мкмоль) растворяли в MeOH (5 мл). Добавляли HCl (12 н, 0,5 мл) и смесь перемешивали при 40°C в течение 1 ч. Затем растворитель удаляли и остаток 5-метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазол использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза:5-95% CHCN), Rt=1,89 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 245; МС Найдено: 246 [M+1].
Стадия 2:
2
3
К раствору 5-метил-6-((1-метилпиперидин-4-ил)окси)-1H-индазола (полученный на стадии 1) добавляли 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (84 мг, 0,36 ммоль) и CsCO (239 мг, 0,73 ммоль). Смесь перемешивали при 120°C в течение 1 ч при микроволновом излучении.
Продукт очищали колонкой с обращенной фазой с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт (40 мг, 0,09 ммоль) разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ с DEA с получением целевого продукта. Целевой продукт очищали при помощи колонки C18 для удаления DEA с получением указанного в заголовке соединения (2 мг, выход 5%) в виде белого твердого вещества.
1
3
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD+CDCl): δ 8,30 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,88 (с, 1H), 4,70-4,65 (м, 1H), 4,09 (с, 3H), 3,82-3,80 (м, 4H), 3,73-3,70 (м, 4H), 2,84 (шир. с, 2H), 2,63 (шир. с, 2H), 2,46 (с, 3H), 2,33 (с, 3H), 2,15-2,01 (м, 4H);
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6 мин, чистота составляет 93,78%, Rt=4,253 мин; МС Вычисл.:438, МС Найдено: 439 [M+H].
Пример 99
(R)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((1-метилпиперидин-3-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E99)
2
3
2
2
4
E99
К смеси (R)-5-метил-6-((1-метилпиперидин-3-ил)окси)-1H-индазола (75 мг, 0,31 ммоль) и CsCO (298 мг, 0,918 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (105 мг, 0,459 ммоль). Смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разделяли с HO (10 мл) и EtOAc (15 мл). Органический слой промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (33 мг, выход 25%) в виде слабо-желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,38 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,53-4,47 (м, 1H), 4,10 (с, 3H), 3,80-3,77 (м, 4H), 3,72-3,70 (м, 4H), 3,13-3,10 (м, 1H), 2,73-2,69 (м, 1H), 2,31 (с, 3H), 2,29 (с, 3H), 2,23-2,15 (м, 2H), 2,09-2,04 (м, 1H), 1,87-1,81 (м, 1H), 1,65-1,56 (м, 1H), 1,51-1,42 (м, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,091 мин, МС Вычисл.: 438, МС Найдено: 439 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=70:30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=7,566 мин, 96,9% э.и.
Пример 100
(S)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((1-метилпиперидин-3-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E100)
2
3
2
2
4
E100
К смеси (S)-5-метил-6-((1-метилпиперидин-3-ил)окси)-1H-индазола (95 мг, 0,39 ммоль) и CsCO (314 мг, 0,968 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (133 мг, 0,582 ммоль). Смесь нагревали до 110°C и перемешивали в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разделяли с HO (10 мл) и EtOAc (15 мл). Органический слой промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (15 мг, выход 9%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,38 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,53-4,48 (м, 1H), 4,10 (с, 3H), 3,80-3,77 (м, 4H), 3,72-3,70 (м, 4H), 3,15-3,09 (м, 1H), 2,76-2,66 (м, 1H), 2,32 (с, 3H), 2,29 (с, 3H), 2,23-2,17 (м, 2H), 2,11-2,02 (м, 1H), 1,89-1,81 (м, 1H), 1,60-1,41 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,092 мин, МС Вычисл.:438, МС Найдено: 439 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=70:30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=9,138 мин, 97,7% э.и.
Пример 101
(S)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((1-метилпирролидин-3-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E101)
2
3
2
2
4
E101
К смеси (S)-5-метил-6-((1-метилпирролидин-3-ил)окси)-1H-индазола (230 мг, 1,00 ммоль) и CsCO (652 мг, 2,00 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (253 мг, 1,10 ммоль). Смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение ночи. Смесь разбавляли HO (30 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=20:1) и дополнительно очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (30 мг, выход 14%) в виде желтого твердого вещества.
E101:
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,20 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 5,00-4,96 (м, 1H), 4,08 (с, 3H), 3,80-3,71 (м, 8H), 3,03-2,98 (м, 1H), 2,85-2,75 (м, 2H), 2,61-2,53 (м, 1H), 2,42-2,35 (м, 4H), 2,30 (с, 3H), 2,16-2,05 (м, 1H).
3
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% TFA) и 10% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,226 мин МС Вычисл.: 424, МС Найдено: 425 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH:DEA=70:30:0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=7,026 мин, 100% э.и.
Пример 102
(R)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((1-метилпирролидин-3-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E102)
2
3
2
2
4
E102
К смеси (R)-5-метил-6-((1-метилпирролидин-3-ил)окси)-1H-индазола (70 мг, 0,31 ммоль) и CsCO (202 мг, 0,622 ммоль) в DMF (3 мл) добавляли 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (142 мг, 0,618 ммоль). Смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=20:1) и далее очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением  (12 мг, выход 9%) в виде желтого твердого вещества.
E102
1
3
:H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,20 (с, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,99-4,95 (м, 1H), 4,08 (с, 3H), 3,79-3,71 (м, 8H), 3,03-2,98 (м, 1H), 2,85-2,75 (м, 2H), 2,60-2,53 (м, 1H), 2,42 (с, 3H), 2,39-2,35 (м, 1H), 2,30 (с, 3H), 2,15-2,07 (м, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,026 мин МС Вычисл.: 424, МС Найдено: 425 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH:DEA=70:30:0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=8,303 мин, 100% э.и.
Пример 103
(R)-1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол гидрохлорид (E103)
трет-
2
3
Смесь (R)-бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (210 мг, 0,410 ммоль) в HCl/1,4-диоксане (6 M, 20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, и остаток промывали 10 мл EtOAc для получения указанного в заголовке соединения (160 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества. 50 мг неочищенного продукта дополнительно очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 20-65% B; A: HO (0,1% HCl), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] для получения указанного в заголовке соединения (10 мг, выход 20%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,26 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,03 (с, 1H), 5,16-5,15 (м, 1H), 4,08 (с, 3H), 4,05-3,92 (м, 8H), 3,36-3,31 (м, 4H), 2,34-2,23 (м, 5H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=3,798 мин, МС Вычисл.: 410, МС Найдено: 411 [M+H].
Пример 104
(
S
)-1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1
H
-индазол гидрохлорид (E104)
S
трет-
H
2
3
Смесь ()-бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (40 мг, 0,08 ммоль) в HCl/1,4-диоксане (6 M, 20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Sunfire, C18, 5 мкм, 19*150 мм, 20-65% B; A: HO (0,1% HCl), B: CHCN; УФ: 214 нм; скорость потока: 20 мл/мин] для получения указанного в заголовке соединения (19 мг, выход 54%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,24 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 7,02 (с, 1H), 5,18-5,12 (м, 1H), 4,08-3,92 (м, 11H), 3,36-3,32 (м, 4H), 2,35-2,21(м, 5H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], Rt=3,807 мин, МС Вычисл.:410, МС Найдено: 411 [M+H].
Пример 105
(R)-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол (E105)
3
4
К смеси (R)-1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол гидрохлорида (66 мг, 0,15 ммоль) и формальдегида (37%, 2 мл) в метаноле (10 мл) добавляли и NaBHCN (18 мг, 0,29 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли водой (30 мл), и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением продукта (63 мг, выход 92%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,25 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,10-5,05 (м, 1H), 4,08-3,92 (м, 7H), 3,77 (шир. с, 4H), 2,53-2,51 (м, 4H), 2,36 (с, 3H), 2,30-2,22 (м, 5H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет > 95%, Rt=4,760 мин, МС Вычисл.: 424, МС Найдено: 425 [M].
Chiral-HPLC (Chiralpak IF 5 мкм 4,6×250 мм, Фаза: MeOH /EtOH=50/50, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C), Rt=14,544 мин, 98,4% э.и.
Пример 106
(
S
)-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1
H
-индазол (E106)
S
H
3
4
К раствору ()-1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1-индазол гидрохлорида (55 мг, 0,13 ммоль) и формальдегида (37%, 2 мл) в метаноле (10 мл) добавляли и NaBHCN (17 мг, 0,26 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли водой (30 мл), и экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением продукта (30 мг, выход 52%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,25 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,10-5,08 (м, 1H), 4,09-3,93 (м, 7H), 3,78 (шир. с, 4H), 2,53 (шир. с, 4H), 2,37 (с, 3H), 2,33-2,23 (м, 5H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], Rt=3,245 мин, МС Вычисл.:424, МС Найдено: 425 [M].
Chiral-HPLC (Chiralpak IF 5 мкм 4,6×250 мм, Фаза: MeOH /EtOH=50/50, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C), Rt=16,145 мин, 99,5% э.и.
Пример 107
(R)-1-(2-метокси-6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол (E107)
3
4
К раствору (R)-1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1H-индазол гидрохлорида (44 мг, 0,11 ммоль) и оксетан-3-она (38 мг, 0,54 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (6 мл) и метаноле (1 мл) добавляли NaBHCN (20 мг, 0,32 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли водой (40 мл) и экстрагировали DCM (10 мл×3). Объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в 2 мл DCM и 2 мл DMF, и затем удаляли DCM при пониженном давлении. Смесь фильтровали, и твердое вещество промывали 10 мл MeOH с получением продукта (39 мг, выход 78%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,23 (с, 1H), 8,01 (с, 1H), 7,45 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,06 (шир. с, 1H), 4,71-4,68 (м, 4H), 4,07-3,93 (м, 7H), 3,80 (шир.с, 4H), 3,58-3,53 (м, 1H), 2,44 (шир. с, 4H), 2,29-2,22 (м, 5H).
4
3
4
3
+
ЖХМС: [подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота > 95%, Rt=3,130 мин, МС Вычисл.: 466, МС Найдено: 467 [M].
Chiral-HPLC (Chiralpak IA 5 мкм 4,6×250 мм, Фаза: MeOH/EtOH=50/50, скорость потока: 1 мл/мин, волна: 230 нм, температура: 30°C), Rt=13,295 мин, 100% э.и.
Пример 108
(
S
)-1-(2-метокси-6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1
H
-индазол (E108)
S
H
3
4
К раствору ()-1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)-1-индазол гидрохлорида (55 мг, 0,13 ммоль) и оксетан-3-она (44 мг, 0,61 ммоль) в 1,2-дихлор-этане (6 мл) и метаноле (1 мл) добавляли NaBHCN (22 мг, 0,36 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали DCM (10 мл×3). Объединенные органические слои сушили над MgSO, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением продукта (36 мг, выход 63%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,21 (с, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,44 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 5,04 (шир. с, 1H), 4,72-4,70 (м, 4H), 4,06-3,95 (м, 7H), 3,81 (шир. с, 4H), 3,60 (шир. с, 1H), 2,48 (шир. с, 4H), 2,28-2,21 (м, 5H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], Rt=3,151 мин, МС Вычисл.:466, МС Найдено: 467 [M].
Chiral-HPLC (Chiralpak IA 5 мкм 4,6×250 мм, Фаза: MeOH/EtOH=50/50, скорость потока: 1 мл/мин, температура: 30°C), Rt=14,649 мин, 100% э.и.
Пример 109
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-((1-метилазетидин-3-ил)окси)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E109)
2
3
2
2
4
К смеси 5-метил-6-((1-метилазетидин-3-ил)окси)-1H-индазола(270 мг, 1,24 ммоль) и CsCO (808 мг, 2,48 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (343 мг, 1,49 ммоль). Смесь нагревали до 100°C и перемешивали в течение 4 часов. Смесь разбавляли HO (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали в вакууме. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=20:1) и далее очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением целевого продукта (20,7 мг, выход 4%) в виде желтого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,05 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,97-4,94 (м, 1H), 4,11-4,03 (м, 5H), 3,81-3,78 (м, 4H), 3,73-3,71 (м, 4H), 3,34-3,28 (м, 2H), 2,52 (с, 3H), 2,33 (с, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHOAc) и 40% CHCN до 30% воды (0,02% NHOAc) и 70% CHCN за 6,5 мин], чистота=91,7%, Rt=2,330 мин МС Вычисл.:410, МС Найдено: 411 [M+H].
Пример 110
6-изопропокси-5-метил-1-(2-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин (E110)
3
4
2
2
4
3
4
3
3
4
1
+
J=
J=
К раствору 6-изопропокси-5-метил-2H-пиразоло[3,4-b]пиридина (40 мг, 0,21 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 1-(4-иод-пиридин-2-ил)-4-метил-пиперазин (127 мг, 0,420 ммоль), CuI (40 мг, 0,21 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (30 мг, 0,21 ммоль) и KPO (89 мг, 0,42 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 120°C и перемешивали в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли HO (10 мл) и EtOAc (10 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (10 мл×3). Объединенные органические слои сушили над NaSO и очищали при помощи препаративной ТСХ (элюент:EtOAc) с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (8,1 мг, выход:11%) в виде желтого твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,25 (д, 5,4 Гц, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,89 (с, 1H), 7,73-7,71 (м, 2H), 5,49-5,44 (м, 1H), 3,69-3,66 (м, 4H), 2,58-2,55 (м, 4H), 2,37 (с, 3H), 2,26 (с, 3H), 1,46 (д, 6,3 Гц, 6H). ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,02% NHAc) и 40% CHCN до 95% CHCN и 5% воды (0,02% NHAc) за 6 мин, чистота составляет >95%, Rt=3,742 мин; МС Вычисл.:366, МС Найдено: 367 [M+H].
Пример 111
6-изопропокси-1-(2-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин (E111)
3
4
2
2
3
2
2
4
.
.
К раствору 6-изопропокси-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидина (90 мг, 0,51 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли 1-(4-йодпиридин-2-ил)-4-метилпиперазин (307 мг, 1,05 ммоль), KPO3HO (214 мг, 1,05 ммоль), CuI (96 мг, 0,51 ммоль) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (72 мг, 0,51 ммоль) в атмосфере N. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в NHHO (20 мл). Добавляли EtOAc (2×20 мл) для экстракции желаемого. Объединенные органические слои промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт растирали с гексаном (20 мл) с получением указанного в заголовке соединения (13 мг, 7%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
3
3
J=
J=
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,99 (с, 1H), 8,28 (д, 5,6 Гц, 1H), 8,16 (с, 1H), 7,71 (с, 1H), 7,66 (д, 5,6 Гц, 1H), 5,43-5,37 (м, 1H), 3,68-3,65 (м, 4H), 2,57-2,54 (м, 4H), 2,36 (с, 3H), 1,49 (д, 6,0 Гц, 6H). ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин, чистота составляет >95%, Rt=2,791 мин; МС Вычисл.: 353, МС Найдено: 354 [M+H].
Пример 112
4-(6-(5-метил-6-(пиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E112)
Трет-бутил 4-(5-метил-1-(6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилат (210 мг, 0,438 ммоль) растворяли в DCM (20 мл). Добавляли TFA (2 мл) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем растворитель удаляли и остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=2,342 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 379; МС Найдено: 380 [M+1].
Позже провели очистку для некоторой части остатка (неочищенного продукта), и это было описано ниже:
TM
3
Остаток далее растворяли в MeOH (10 мл) и трех каплях TFA. Затем раствор добавляли в колонку Rxn CX 6 cc column (PoraPak). Затем колонку элюировали MeOH (20 мл). После этого колонку элюировали MeOH 5% раствором аммиака (30 мл). После удаления растворителя остаток сушили в вакууме с получением твердого вещества. FЯМР показал, что имеется остаток TFA. Твердое вещество растворяли в DCM (20 мл) и затем раствор промывали водным раствором NaHCO (1 н) и водой. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрации и концентрирования, остаток растворяли в MeOH и затем MeOH удаляли роторным испарителем. Повторяли этот процесс три раза. Затем остаток растворяли в ACN/воде и сушили в лиофилизаторе с получением 4-(6-(5-метил-6-(пиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (21,3 мг, 0,056 ммоль,).
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=2,35 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 379; МС Найдено: 380 [M+1].
1
4
H ЯМР (метанол-d): δ 8,51 (с, 1H), 8,45 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,19 (с, 1H), 3,80-3,78 (м, 4H), 3,72-3,68 (м, 4H), 3,07-3,03 (м, 4H), 3,06-3,00 (м, 4H), 2,42 (с, 3H).
Пример 113
4-(6-(5-метил-6-(4-метилпиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E113)
3
2
4
2
4-(6-(5-Метил-6-(пиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин растворяли в DMF (5,00 мл). Добавляли формальдегид (26,3 мг, 0,876 ммоль), уксусную кислоту (26,3 мг, 0,438 ммоль) и NaBH(OAc) (93 мг, 0,438 ммоль) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли воду (20 мл) и EtOAc (30 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем суспендировали в EtO (5 мл) и затем фильтровали и твердое вещество собирали, и сушили с получением 4-(6-(5-метил-6-(4-метилпиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (74 мг, 0,188 ммоль, 42,9% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% Ацетонитрил), Rt=2,45 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 393; МС Найдено: 394 [M+1].
1
6
H ЯМР (DMSO-d): δ 8,59 (с, 1H), 8,41 (с, 1H), 8,30 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 7,15 (с, 1H), 3,68 (д, J=11,0 Гц, 8H), 2,88-3,04 (м, 4H), 2,53-2,50 (м, 4H), 2,36 (с, 3H), 2,27 (с, 3H)
Пример 114
4-(6-(5-метил-6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E114)
3
2
4
2
4-(6-(5-Метил-6-(пиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (полученный на вышеуказанной стадии) растворяли в DMF (5,00 мл). Добавляли циклобутанон (61,4 мг, 0,876 ммоль), уксусную кислоту (26,3 мг, 0,438 ммоль) и NaBH(OAc) (93 мг, 0,438 ммоль) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси добавляли воду (20 мл) и EtOAc (30 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем суспендировали в EtO (5 мл) и затем фильтровали. Твердое вещество собирали, и сушили с получением 4-(6-(5-метил-6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (9 мг, 0,021 ммоль, 4,72% выход) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,44 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 435; МС Найдено: 436 [M+1].
1
6
H ЯМР (DMSO-d): δ 8,60 (с, 1H), 8,44 (с, 1H), 8,31 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,16 (с, 1H), 4,45-4,65 (м, 4H), 3,62-3,77 (м, 8H), 3,52 (шир. с., 1H), 2,98 (шир. с., 4H),2,44-2,53 (шир,s, 4H), 2,36 (с, 3H).
Пример 115
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(4-метилпиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E115)
2
3
3
2
E115
К раствору 5-метил-6-(4-метилпиперазин-1-ил)-1H-индазола (60 мг, 0,31 ммоль) добавляли 4-(6-хлор-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (94 мг, 0,47 ммоль) и CsCO (205 мг, 0,63 ммоль). Смесь перемешивали при 120°C в течение 1 ч при микроволновом излучении. Неочищенный продукт очищали колонкой с обращенной фазой (MDAP) с получением E115 в виде белого твердого вещества. Смесь разделяли при помощи хиральной препаративной ВЭЖХ способом: chiralpal IB 5 мкм 4,6* 250 мм, Фаза: Hex:EtOH= 70:30, F: 1,0 мл/мин, W: 230 нм, T=30°C с получением пика 1 и пика 2. Два соединения дополнительно очищали при помощи колонки С18, элюируя CHCN/HO (от 05/95 до 100/0) с получением (8,6 мг, выход 17%, Rt=6,827 мин, 100% э.и.) в виде белого твердого вещества в виде белого твердого вещества.
E115
1
+
3
3
3
: H ЯМР (400 МГц,CDOD): δ 8,51 (с, 1Н), 8,12 (с, 1Н), 7,60 (с, 1Н), 6,91 (с, 1Н), 4,11 (с, 3Н), 3,82-3,79 (м, 4Н), 3,72-3,69 (м, 4Н), 3,08 (с, 4Н), 2,72 (шир.с, 4Н), 2,43 (с, 3Н), 2,41 (с, 3Н); ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6 мин, чистота составляет > 95%, Rt=3,396 мин; МС Вычисл.:423, МС Найдено: 424 [M+H].
Пример 116
4-(2-этил-6-(5-метил-6-(4-метилпиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E116)
2
3
2
3
К раствору 4-(6-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-этилпиримидин-4-ил)морфолина (260 мг, 0,646 ммоль) в толуоле (20 мл) добавляли Pd(dba) (59,2 мг, 0,065 ммоль), BINAP (80 мг, 0,129 ммоль), 1-метилпиперазин (129 мг, 1,293 ммоль) и CsCO(421 мг, 1,293 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 120°C в течение ночи в атмосфере азота.
2
4
Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли этилацетат (50 мл) и воду (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 раза), сушили над безводным NaSOи затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с обращенной фазой (Biotage, Isolera One, колонка 50 г, вода:ацетонитрил =95:5→30:70) с получением 4-(2-этил-6-(5-метил-6-(4-метилпиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолина (60 мг, 0,128 ммоль, 19,82% выход) в виде бледно-желтого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,54 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 421; МС Найдено: 422 (M+1).
1
6
H ЯМР (DMSO-d): δ 8,52 (с, 1H), 8,27 (с, 1H), 7,62 (с, 1H), 6,98 (с, 1H), 3,57-3,78 (м, 8H), 3,35 (шир. с., 4H), 3,02 (шир. с., 3H), 2,62-2,88 (м, 5H), 2,31-2,44 (м, 4H), 1,39 (т, J=7,5 Гц, 3H).
Пример 117
4-(1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолин (E117)
Стадия 1:
2
3
2
3
2
4
К раствору трет-бутил 4-(6-(6-бром-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата (52 мг, 0,103 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли Pd(dba) (18,92 мг, 0,021 ммоль), xantphos (23,91 мг, 0,041 ммоль), морфолин (0,045 мл, 0,516 ммоль) и CsCO (67,3 мг, 0,207 ммоль). Смесь перемешивали при 120°C в атмосфере азота в течение 3 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли EtOAc (100 мл) и воду (50 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой (ISCO, колонка 40 г, PE:EtOAc=100:0-40:60) с плучением трет-бутил 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-морфолино-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилата в виде бледно-желтого твердого вещества.
3
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=4,35 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 509; МС Найдено: 510 [M+1]+.
Стадия 2:
3
2
4
Промежуточное соединение (полученное на стадии 1) растворяли в DCM (5,00 мл), добавляли TFA (0,5 мл) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли и остаток повторно растворяли в EtOAc (20 мл), добавляли воду (10 мл) и значение рН водного слоя доводили до 8 с использованием насыщенного водного раствора NaHCO. Органический слой отделяли, сушили над безводным NaSO и затем концентрировали с получением 4-(1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)морфолина (5 мг, 0,012 ммоль, 11,82% выход) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,8 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 409; МС Найдено: 410 [M+1].
1
6
H ЯМР (DMSO-d): δ 8,42 (с, 1H), 8,29 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 6,82 (с, 1H), 4,01 (с, 3H), 3,79 (шир. с., 4H), 3,59 (шир. с., 4H), 2,94 (шир. с., 4H), 2,78 (шир. с., 4H), 2,39 (с, 3H).
Пример 118
4-(5-метил-1-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолин (E118)
Стадия 1:
трет-
Бутил-4-(6-(5-метил-6-морфолино-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (100 мг, 0,209 ммоль) растворяли в DCM (10 мл), добавляли TFA (1 мл) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Растворитель удаляли и остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,66 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 379; МС Найдено: 380 [M+1].
Стадия 2
3
2
3
2
4
2
Промежуточное соединение (полученное на стадии 1) растворяли в DMF (6,00 мл). Добавляли формальдегид (0,078 мл, 1,043 ммоль), AcOH (0,020 мл, 0,349 ммоль) и NaBH(OAc) (133 мг, 0,626 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли HO (30 мл) и EtOAc (50 мл) и значение рН водного слоя доводили до приблизительно 8 с использованием насыщенного водного раствора NaHCO. Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (20 мл). Органические слои объединяли, промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2 раза), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем суспендировали в EtO (5 мл) и затем фильтровали. Твердое вещество собирали и сушили с получением 4-(5-метил-1-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолина (35,9 мг, 0,091 ммоль, 43,8% выход) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,60 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 393; МС Найдено: 394 [M+1].
1
d
6
H ЯМР (DMSO-) d: 8,57 (с, 1H), 8,41 (с, 1H), 8,30 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,15 (с, 1H), 3,75-3,83 (м, 4H), 3,68 (шир. с., 4H), 2,87-3,03 (м, 4H), 2,36-2,44 (м, 7H), 2,23 (с, 3H).
Пример 119
4-(5-метил-1-(6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолин (E119)
Стадия 1:
трет-
Бутил-4-(6-(5-метил-6-морфолино-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-карбоксилат (100 мг, 0,209 ммоль) растворяли в DCM (10 мл), добавляли TFA (1 мл) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Растворитель удаляли и остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,66 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 379; МС Найдено: 380 [M+1].
Стадия 2
3
2
3
2
4
2
Промежуточное соединение (полученное на стадии 1) растворяли в DMF (6,00 мл). Добавляли оксетан-3-он (75 мг, 1,043 ммоль), AcOH (0,020 мл, 0,349 ммоль), NaBH(OAc) (133 мг, 0,626 ммоль) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси добавляли HO (30 мл) и EtOAc (50 мл) и значение рН водного слоя доводили до 8 с использованием насыщенного водного раствора NaHCO. Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (20 мл). Органические слои объединяли, промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем суспендировали в EtO (5 мл) и затем фильтровали. Твердое вещество собирали, сушили с получением 4-(5-метил-1-(6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)морфолина (51 мг, 0,117 ммоль, 56,2% выход) в виде белого твердого вещества.
3
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% CHCN), Rt=2,60 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 435; МС Найдено: 436 [M+1].
1
6
H ЯМР (DMSO-d) d: 8,58 (с, 1H), 8,41 (с, 1H), 8,31 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 7,16 (с, 1H), 4,54-4,61 (м, 2H), 4,45-4,52 (м, 2H), 3,76-3,83 (м, 4H), 3,71 (шир. с., 4H), 3,43-3,50 (м, 1H), 2,95 (д, J=4,2 Гц, 4H), 2,34-2,44 (м, 7H).
Пример 120
4-(2-метокси-6-(6-(пиперазин-1-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорид (E120)
трет-
К раствору бутил 4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-карбоксилата (60 мг, 0,12 ммоль) добавляли HCl/MeOH (5 M, 5 мл) в MeOH (5 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Раствор непосредственно концентрировали в вакууме с получением целевого продукта (46 мг, выход 90%) в виде желтого твердого вещества.
1
d
J
J
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,37 (шир. с, 2H), 8,30-8,26 (м, 2H), 7,73 (д, =9,0 Гц, 1H), 7,17 (д, =8,1, 1H), 6,86 (с, 1H), 3,99 (с, 3H), 3,70-3,63 (м, 8H), 3,50-3,48 (м, 4H), 3,30-3,24 (м, 4H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHAC) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHAC) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,618 мин МС Вычисл.: 395, МС Найдено: 396 [M+H].
Пример 121
1-(1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1
H
-индазол-6-ил)пиперидин-4-ол (E121)
2
2
4
К раствору 6-бром-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (50 мг, 0,120 ммоль) в THF (20 мл) добавляли Pd(OAc) (5,38 мг, 0,024 ммоль), 2'-(дициклогексилфосфино)-N,N-диметил-[1,1'-бифенил]-2-амин (18,86 мг, 0,048 ммоль), пиперидин-4-ол (36,4 мг, 0,359 ммоль) и натрий 2-метилпропан-2-олат (23,03 мг, 0,240 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в атмосфере азота в течение 3 часов. К смеси добавляли воду (20 мл) и EtOAc (70 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (50 мл×2), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с обращенной фазой с получением 1-(1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-ол, соли трифторуксусной кислоты (9,8 мг, 0,018 ммоль, 14,83% выход) в виде белого твердого вещества.
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,29 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 437; МС Найдено: 438,3 [M+1].
1
d
6
H ЯМР (DMSO-): δ 9,76 (шир. с., 1H), 8,40 (с, 1H), 8,30 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 6,99 (с, 1H), 4,59 (д, J=11,7 Гц, 2H), 4,03 (с, 3H), 3,53-3,74 (м, 3H), 3,27 (т, J=13,0 Гц, 2H), 3,02-3,18 (м, 4H), 2,85 (шир. с., 3H), 2,71 (т, J=10,9 Гц, 2H), 2,36 (с, 3H), 1,89 (шир. с., 2H), 1,55-1,68 (м, 2H).
Пример 122
(цис)-(1S,3S)-3-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорид (энантиомер 1) (E122)
3
3
2
4
3
К раствору (цис)-(1S, 3S)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорида (энантиомер 1) (35 мг, 0,078 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли HCHO (35% в воде, 0,5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли NaBHCN (35 мг, 0,55 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли насыщ. раствор NaHCO(10 мл). После перемешивания в течение 10 мин смесь экстрагировали EtOAc (10 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (11 мг, выход 33%) в виде белого твердого вещества.
E122
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): 8,84 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 4,99-4,75 (м, 1H), 4,36-4,27 (м, 1H), 4,19 (с, 3H), 3,37-3,31 (м, 1H), 3,19-3,04 (м, 2H), 2,95-2,91 (м, 1H), 2,85-2,74 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,34-2,08 (м, 4H), 1,95-1,82 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,31 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,335 мин; МС Вычисл.: 425, МС Найдено: 426 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=5,427 мин, 100% э.и.
Пример 123
(цис)-(1S,3S)-3-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорид (энантиомер 2) (E123)
3
3
2
4
3
К раствору (цис)-(1S, 3S)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорида (энантиомер 2, 62 мг, 0,14 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли HCHO (35% в воде, 0,5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли NaBHCN(63 мг, 1,0 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли насыщ. раствор NaHCO (20 мл). После перемешивания в течение 10 мин смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (23 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества.
E123
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,84 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 4,97-4,79 (м, 1H), 4,35-4,28 (м, 1H), 4,19 (с, 3H), 3,37-3,31 (м, 1H), 3,18-3,05 (м, 2H), 2,95-2,91 (м, 1H), 2,84-2,77 (м, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,33-2,08 (м, 4H), 1,97-1,85 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,28 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,347 мин; МС Вычисл.: 425, МС Найдено: 426 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T =30°C, Rt=6,699 мин, 100% э.и.
Пример 124
(цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол (энантиомер 1, E124)
3
3
2
4
3
К раствору (цис)-(1R, 3R)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорида (54 мг, 0,12 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли HCHO (35% в воде, 0,5 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 минут добавляли NaBHCN(50 мг, 0,79 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли насыщ. раствор NaHCO(10 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (15 мг, выход 29%) в виде белого твердого вещества.
E124
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,85 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 4,96-4,74 (м, 2H), 4,18 (с, 3H), 3,63-3,56 (м, 1H), 3,37-3,32 (м, 1H), 3,12-3,03 (м, 1H), 2,95-2,90 (м, 1H), 2,75-2,68 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,44-2,37 (м, 5H), 2,23-2,09 (м, 2H), 1,97-1,83 (м, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,26 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,331 мин; МС Вычисл.: 425, МС Найдено: 426 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C, Rt=5,090 мин, 99,5% э.и.
Пример 125
(цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол (энантиомер 2, E125)
3
3
2
4
3
К раствору (цис)-(1R, 3R)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорида (54 мг, 0,12 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли HCHO (35% в воде, 0,5 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 минут, добавляли NaBHCN(50 мг, 0,79 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли насыщ. раствор NaHCO(10 мл). EtOAc (20 мл×2) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (22 мг, выход 43%) в виде белого твердого вещества.
E125
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,85 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 4,96-4,73 (м, 2H), 4,18 (с, 3H), 3,63-3,56 (м, 1H), 3,37-3,31 (м, 1H), 3,12-3,04 (м, 1H), 2,95-2,89 (м, 1H), 2,74-2,68 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,44-2,37 (м, 5H), 2,24-2,09 (м, 2H), 1,96-1,82 (м, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,26 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=4,338 мин; МС Вычисл.: 425, МС Найдено: 426 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T =30°C, Rt=6,419 мин, 96,5% э.и.
Пример 126
(R)-1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 1, E126)
3
3
2
4
2
К раствору (R)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (диастереоизомер 1, 110 мг, 0,268 ммоль, неочищенный) в метаноле (10 мл) добавляли 37% водный раствор HCHO (1 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN(60 мг, 0,13 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(30 мл), и экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Sepax C18-H 21,2*100 мм 5 мкм, Фаза: HO (0,1%TFA):ACN=90:10 до 10:90, 15 мл/мин, 254/214 нм) с получением указанного в заголовке продукта (R)-1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 1) (40 мг, выход 35,2%) в виде белого твердого вещества.
E126
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,71 (с, 1H), 4,97-4,84 (м, 1H), 4,63 (с, 1H), 3,70 (с, 4H), 3,37-3,34 (м, 1H), 3,09-2,93 (м, 2H), 2,62 (с, 3H), 2,48(д, = 22,4, 6H), 2,24-2,09 (м, 4H), 1,94 (с, 2H), 1,71 (с, 1H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,08 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 97,9%; Rt=4,86 мин; МС Вычисл.: 424, МС Найдено: 425 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, гексан/IPA=85/15, Скорость потока: 1 мл/мин, 214 нм, T =30°C, Rt=7,64 мин, 99% э.и.
Пример 127
(R)-1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 2, E127)
3
3
2
4
2
К раствору (R)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (диастереоизомер 2, 110 мг, 0,268 ммоль, неочищенный) в метаноле (15 мл) добавляли 37% водный HCHO (1 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN(60 мг, 0,13 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(30 мл) и экстрагировали DCM (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Sepax C18-H 21,2*100 мм 5 мкм, Фаза: HO (0,1%TFA):ACN=90:10 до 10:90, 15 мл/мин, 254/214 нм) с получением указанного в заголовке продукта (R)-1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 2) (40 мг, выход 38,2%) в виде белого твердого вещества.
E127
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,71 (с, 1H), 4,97-4,84 (м, 1H), 4,63 (с, 1H), 3,70 (с, 4H), 3,37-3,34 (м, 1H), 3,09-2,93 (м, 2H), 2,62 (с, 3H), 2,48(д, = 22,4, 6H), 2,24-2,09 (м, 4H), 1,94 (с, 2H), 1,71 (с, 1H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,08 (с, 1F).
Пример 128
(S)-1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 1, E128)
3
3
2
4
2
К раствору (S)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (диастереоизомер 1) (50 мг, 0,122 ммоль, неочищенный) в метаноле (10 мл) добавляли 37% водный HCHO (1 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN(16 мг, 0,244 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(30 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Sepax C18-H 21,2*100 мм 5 мкм, Фаза: HO (0,1%TFA):ACN=90:10 до 10:90, 15 мл/мин, 254/214 нм) с получением указанного в заголовке продукта (S)-1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 1) (32 мг, выход=61,9%) в виде белого твердого вещества.
E128
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,71 (с, 1H), 5,00-4,82 (м, 1H), 4,62 (с, 1H), 3,69 (с, 4H), 3,37-3,34 (м, 1H), 3,09-2,93 (м, 2H), 2,62 (с, 3H), 2,47(с, 3H), 2,42(с, 3H), 2,24-2,09 (м, 4H), 1,93 (с, 2H), 1,79 (с, 1H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,07 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 98,9%; Rt=4,87 мин; МС Вычисл.: 424, МС Найдено: 425[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, гексан/IPA=85/15, Скорость потока: 1 мл/мин, 214 нм, T =30°C, Rt=10,73 мин, 99% э.и.
Пример 129
(S)-1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 2, E129)
3
3
2
4
2
К раствору (S)-1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (диастереоизомер 2) (90 мг, 0,219 ммоль, неочищенный) в метаноле (10 мл) добавляли 37% водный HCHO (1 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN(28 мг, 0,438 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(50 мл), экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Sepax C18-H 21,2*100 мм 5 мкм, Фаза: HO (0,1%TFA):ACN=90:10 до 10:90, 15 мл/мин, 254/214 нм) с получением указанного в заголовке продукта (S)-1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (диастереоизомер 2) (43 мг, выход 46,3%) в виде светло-желтого твердого вещества.
E129
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,71 (с, 1H), 5,00-4,82 (м, 1H), 4,63 (с, 1H), 3,70 (с, 4H), 3,37-3,33 (м, 1H), 3,11-2,93 (м, 2H), 2,62 (с, 3H), 2,47(с, 3H), 2,42(с, 3H), 2,24-2,12 (м, 4H), 1,94 (с, 2H), 1,71 (с, 1H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,08 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 96,7%; Rt=4,92 мин; МС Вычисл.: 424, МС Найдено: 425[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, гексан/IPA=85/15, Скорость потока: 1 мл/мин, 214 нм, T =30°C, Rt=12,99 мин, 99% э.и.
Пример 130
1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (диастереоизомер 1, E130)
3
3
2
4
2
К раствору 1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диола (диастереоизомер 1) (42 мг, 0,098 ммоль, неочищенный) в метаноле (10 мл) добавляли 37% водный раствор HCHO (1 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN(12 мг, 0,196 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(20 мл), экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Sepax C18-H 21,2*100 мм 5 мкм, Фаза: HO (0,1%TFA):ACN=90:10-10:90, 15 мл/мин, 254/214 нм) с получением указанного в заголовке продукта 1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (диастереоизомер 1) (9 мг, выход 20,9%) в виде белого твердого вещества.
E130
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,69 (с, 1H), 4,97-4,84 (м, 1H), 4,42 (с, 2H), 3,84 (с, 2H), 3,61 (с, 2H), 3,36 (с, 1H), 3,11-2,93 (м, 2H), 2,61 (с, 3H), 2,48(с, 3H), 2,42(с, 3H), 2,21-2,12 (м, 2H), 1,94 (с, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,09 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 97,9%; Rt=4,77 мин; МС Вычисл.: 440,5, МС Найдено: 441,8[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, гексан:EtOH=75/25, Скорость потока: 1 мл/мин, 214nm, T =30°C, Rt=5,12 мин, 99% э.и.
Пример 131
1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (диастереоизомер 2, E131)
3
3
2
4
2
К раствору 1-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диола (диастереоизомер 2) (120 мг, 0,28 ммоль, неочищенный) в метаноле (10 мл) добавляли 37% водный раствор HCHO (1 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN(35 мг, 0,56 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(50 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм, Фаза: HO (0,1%TFA):ACN=90:10-10:90, 20 мл/мин, 254/214 нм) с получением указанного в заголовке продукта 1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (диастереоизомер 2) (38 мг, выход 30,8%) в виде белого твердого вещества.
E131
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,69 (с, 1H), 4,98-4,84 (м, 1H), 4,42 (с, 2H), 3,82 (с, 2H), 3,60 (с, 2H), 3,37 (с, 1H), 3,09-2,94 (м, 2H), 2,61 (с, 3H), 2,48(с, 3H), 2,42(с, 3H), 2,23-2,10 (м, 2H), 1,94 (с, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,09 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 98,8%; Rt=4,72 мин; МС Вычисл.: 440,5, МС Найдено: 441,7[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, гексан:EtOH=75/25, Скорость потока: 1 мл/мин, 214 нм, T =30°C, Rt=6,32 мин, 99% э.и.
Пример 132
(цис)-2-((1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол (энантиомер 1, D132)
3
3
2
4
2
2
3
4
3
3
4
3
3
К раствору (цис)-2-((1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол гидрохлорида(энантиомер 1, 85 мг, 0,18 ммоль)в метаноле (5 мл) добавляли HCHO (14%, 1 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Медленно добавляли NaBHCN (23 мг, 0,36 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 часов. К смеси добавляли насыщ. NaHCO(20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=10:1) с получением неочищенного продукта (55 мг). Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие: от 80% воды (0,1% NHHCO) и 20% CHCN до 20% воды (0,1% NHHCO) и 80% CHCN за 12 мин) с получением указанного в заголовке соединения (41 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества.
E132
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,89 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 4,97-4,84 (м, 1H), 4,53-4,50 (м, 1H), 4,36-4,32 (м, 2H), 4,07-4,04 (м, 2H), 3,80-3,78 (м, 2H), 3,59-3,57 (м, 2H), 3,37-3,35 (м, 1H), 3,09-3,05 (м, 1H), 2,96-2,93 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,23-2,11 (м, 2H), 1,95-1,91 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,13 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,897 мин; МС Вычисл.: 454, МС Найдено: 455 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: AD-H, Hex/IPA/DEA=70/30/0,2, Скорость потока: 1,0, 230 нм, T =30°C, Rt=5,688 мин, 100% э.и.
Пример 133
(цис)-2-((1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол (энантиомер 2, E133)
3
3
2
4
2
2
3
4
3
3
4
3
3
К раствору (цис)-2-((1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол гидрохлорида(энантиомер 2, 75 мг, 0,16 ммоль)в метаноле (5 мл) добавляли HCHO (14%, 1 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Медленно добавляли NaBHCN (20 мг, 0,32 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 часов. К смеси добавляли насыщ. NaHCO(20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH= 10:1) с получением неочищенного продукта (55 мг). Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие: от 80% воды (0,1% NHHCO) и 20% CHCN до 20% воды (0,1% NHHCO) и 80% CHCN за 12 мин) с получением указанного в заголовке соединения (47 мг, выход 65%) в виде белого твердого вещества.
E133
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): 8,89 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 4,97-4,85 (м, 1H), 4,52-4,49 (м, 1H), 4,36-4,32 (м, 2H), 4,07-4,04 (м, 2H), 3,80-3,78 (м, 2H), 3,59-3,56 (м, 2H), 3,37-3,34 (м, 1H), 3,09-3,05 (м, 1H), 2,95-2,93 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,23-2,12 (м, 2H), 1,95-1,94 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,12 (с, 1F).
4
3
3
4
3
3
+
ЖХ-МС: [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHHCO) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHHCO) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,898 мин; МС Вычисл.: 454, МС Найдено: 455 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: AD H, Hex/IPA/DEA=70/30/0,2, Скорость потока: 1,0, 230 нм, T =30°C, Rt=7,222 мин, 100% э.и.
Пример 134
((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E134)
3
3
2
4
2
К раствору ((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (диастереоизомер 1, 100 мг, 0,23 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли водн. HCHO (37%, 1,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли NaBHCN (28 мг, 0,46 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли насыщ. NaHCO (10 мл) и полученную смесь экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные экстракты промывали водой (30 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda, Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм, Фаза: MeCN/HO (0,1%TFA):10%~95%, Скорость потока: 20 мл/мин, 214 нм/254 нм) с получением продукта (49 мг, выход 47,6%) в виде белого твердого вещества.
E134
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 5,00~4,83 (м, 1H), 4,30 (т, =12,0 Гц, 2H), 4,08 (дд, =11,6, 2,4 Гц, 1H), 3,80~3,67 (м, 4H), 3,38~3,33 (м, 1H), 3,15~3,03 (м, 2H), 2,98~2,92 (м, 2H), 2,62 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,24~2,04 (м, 3H), 1,95 ~1,90 (м,2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): -184,12 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 99,2%, Rt=5,30 мин; МС Вычисл.:454,5, МС Найдено: 455,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=6,549 мин; э.и.%=99,82%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=70/30, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 135
((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E135)
3
3
2
4
К раствору ((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (диастереоизомер 2, 100 мг, 0,23 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли водн. HCHO (37%, 1,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляи NaBHCN (29 мг, 0,45 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли насыщ. NaHCO (20 мл) и полученную смесь экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенный экстракты промывали насыщенным солевым раствором (2×15 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda, Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм, Фаза: MeCN/H2O (0,1%TFA):10%~95%, Скорость потока: 20 мл/мин, 214 нм/254 нм) с получением продукта (49 мг, выход 47,6%) в виде белого.
E135
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 5,00~4,81 (м, 1H), 4,30 (т, =12,0 Гц, 2H), 4,08 (дд, =11,6, 2,4 Гц, 1H), 3,80~3,65 (м, 4H), 3,38~3,35 (м, 1H), 3,14~3,03 (м, 2H), 2,98~2,91 (м, 2H), 2,62 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 2,24~2,04 (м, 3H), 1,95 ~1,90 (м,2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): -184,13 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 99,2%, Rt=4,17 мин; МС Вычисл.:454,5, МС Найдено: 455,6 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=5,569 мин; э.и.%=99,35%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=70/30, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 136
((S)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E136)
3
3
2
4
К раствору ((S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (диастереоизомер 1, 130 мг, 0,303 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли водн. HCHO (37%, 1,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли NaBHCN (38 мг, 0,60 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли насыщ. NaHCO (20 мл) и полученную смесь экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенный экстракты промывали насыщенным солевым раствором (2×20 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767, Sepax C18-H 21,2*100 мм 5 мкм, Фаза: MeCN/H2O (0,1%TFA):10%~95%, Скорость потока: 15 мл/мин, 214 нм/254 нм) с получением продукта (58 мг, выход 43,2%) в виде белого твердого вещества.
E136
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 5,00~4,81 (м, 1H), 4,30 (т, =12,0 Гц, 2H), 4,08 (дд, =11,6, 2,4 Гц, 1H), 3,80~3,67 (м, 4H), 3,38~3,35 (м, 1H), 3,14~3,03 (м, 2H), 2,98~2,92 (м, 2H), 2,62 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,24~2,06 (м, 3H), 1,95 ~1,91 (м,2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): -184,12 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 99,2%, Rt=5,38 мин; МС Вычисл.:454,5, МС Найдено: 455,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=6,875 мин; э.и.%=99,97%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=70/30, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 137
((S)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, D137)
3
3
2
4
К раствору ((S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (диастереоизомер 2, 115 мг, 0,26 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли водн. HCHO (37%, 1,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли NaBHCN (33 мг, 0,52 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли насыщ. NaHCO (10 мл) и полученную смесь экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенный экстракты промывали насыщенным солевым раствором (2×30 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda, Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм, Фаза: MeCN/H2O (0,1%TFA):10%~95%, Скорость потока: 20 мл/мин, 214 нм/254 нм) с получением продукта (36 мг, выход 30,3%) в виде белого твердого вещества.
E137
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 5,00~4,82 (м, 1H), 4,30 (т, =12,0 Гц, 2H), 4,08 (дд, =11,6, 2,4 Гц, 1H), 3,80~3,67 (м, 4H), 3,37~3,33 (м, 1H), 3,15~3,03 (м, 2H), 2,98~2,92 (м, 2H), 2,62 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,24~2,04 (м, 3H), 1,95 ~1,90 (м,2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): -184,12 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 99,2%, Rt=4,15 мин; МС Вычисл.:454,5, МС Найдено: 455,6 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=7,953 мин; э.и.%=99,94%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=70/30, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 138
((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, D138)
2
3
3
2
4
2
3
CHO (0,2 мл, 2,5 ммоль) добавляли к раствору ((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (диастереоизомер 1, 135 мг, 0,30 ммоль) в MeOH (10 мл) при комнатной температуре и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли NaBHCN (63 мг, 1,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Реакцию гасили насыщ. NaHCO (20 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Полученный органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением чистого раствора. Раствор концентрировали для удаления ацетонитрила и полученный водный раствор доводили до pH=9~10 добавлением KCO. Образованное твердое вещество фильтровали и полученное твердое вещество сушили с получением целевого продукта (95 мг, 67% выход) в виде белого твердого вещества.
D138
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,84 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,95~4,76 (м, 1H), 4,32~4,24 (м, 2H), 4,12 (с, 3H), 4,08~4,03 (м, 1H), 3,80~3,65 (м, 2H), 3,35~3,30 (м, 1H), 3,18~2,89 (м, 4H), 2,48 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,22~1,79 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,2 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 98,7%, Rt=4,42 мин; МС Вычисл.:470,2, МС Найдено: 471,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=7,645 мин; э.и.%=99,7%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex: EtOH=75/25, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 139
((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, D139)
2
3
3
2
4
2
3
CHO (0,2 мл, 2,5 ммоль) добавляли к раствору ((R)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (диастереоизомер 2, 140 мг, 0,30 ммоль) в MeOH (10 мл) при комнатной температуре и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли NaBHCN (63 мг, 1,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Реакцию гасили насыщ. NaHCO (20 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Полученный органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением чистого раствора. Раствор концентрировали для удаления ацетонитрила и полученный водный раствор доводили до pH~9 добавлением KCO. Образованное твердое вещество фильтровали и полученное твердое вещество сушили с получением целевого продукта (73 мг, 50% выход) в виде белого твердого вещества.
D139
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,84 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,95~4,76 (м, 1H), 4,32~4,24 (м, 2H), 4,12 (с, 3H), 4,08~4,03 (м, 1H), 3,80~3,65 (м, 2H), 3,35~3,30 (м, 1H), 3,18~2,89 (м, 4H), 2,48 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,22~1,79 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,2 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 95,8%, Rt=4,44 мин; МС Вычисл.:470,2, МС Найдено: 471,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=11,123 мин; э.и.%=98,9%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=75/25, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 140
((S)-4-(6-(6-(((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, D140)
2
3
3
2
4
2
3
CHO (1,0 мл) добавляли к раствору ((S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (диастереоизомер 1, 80 мг, 0,175 ммоль) в MeOH (8 мл) при комнатной температуре и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли NaBHCN (30 мг, 0,35 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакцию гасили насыщ. NaHCO (100 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2×70 мл). Полученный органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением раствора. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением чистого раствора. Раствор концентрировали для удаления ацетонитрила и полученный водный раствор доводили до pH=9~10 добавлением NaCO. Образованное твердое вещество фильтровали и полученное твердое вещество сушили с получением целевого продукта (40 мг, 48% выход) в виде белого твердого вещества.
D140
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,84 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,95~4,76 (м, 1H), 4,32~4,24 (м, 2H), 4,12 (с, 3H), 4,08~4,03 (м, 1H), 3,80~3,65 (м, 2H), 3,35~3,30 (м, 1H), 3,18~2,89 (м, 4H), 2,48 (с, 3H), 239 (с, 3H), 2,22~1,80 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,242 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 97%, Rt=4,46 мин; МС Вычисл.:470,2, МС Найдено: 471,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=6,960 мин; э.и.%=99,23%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex: EtOH=75/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 141
((S)-4-(6-(6-(((цис)-3-фтор-1-метилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, D141)
2
3
3
2
4
2
3
CHO (1,0 мл) добавляли к раствору ((S)-4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (диастереоизомер 2, 130 мг, 0,285 ммоль) в MeOH (10 мл) при комнатной температуре и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли NaBHCN (36 мг, 0,57 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакцию гасили насыщ. NaHCO (100 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2×80 мл). Полученный органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением чистого раствора. Раствор концентрировали для удаления ацетонитрила и полученный водный раствор доводили до pH=9~10 добавлением NaCO. Образованное твердое вещество фильтровали и полученное твердое вещество сушили с получением целевого продукта (95 мг, 71% выход) в виде белого твердого вещества.
D141
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,84 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,95~4,76 (м, 1H), 4,32~4,24 (м, 2H), 4,12 (с, 3H), 4,08~4,03 (м, 1H), 3,80~3,65 (м, 2H), 3,35~3,30 (м, 1H), 3,18~2,89 (м, 4H), 2,48 (с, 3H), 239 (с, 3H), 2,22~1,80 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,246 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 96,8%, Rt=4,42 мин; МС Вычисл.:470,2, МС Найдено: 471,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=9,335 мин; э.и.%=99,6%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex: EtOH=75/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 142
(цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорид (энантиомер 1, E142)
трет-бутил
К раствору (цис)- 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1) (25 мг, 0,043 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли HCl/метанол (8 моль/л, 2 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (18 мг, выход 97%) в виде желтого твердого вещества.
E142
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 8,75 (с, 1H), 8,36 (с, 1H), 7,70 (с, 1H), 6,87 (с, 1H), 5,33-5,20 (м, 1H), 4,92-4,85 (м,2H), 4,66-4,62 (м, 2H), 4,22-4,20 (м, 2H), 3,84-3,82 (м, 1H), 3,63-3,54 (м, 2H), 3,29-3,25 (м, 1H), 2,86 (с, 3H), 2,53 (с, 3H), 2,30-2,17 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDOD): δ -188,03 (с, 1F).
3
3
+
ЖХМС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота > 95%, Rt=2,883 мин; МС Вычисл.: 396; МС Найдено: 397[M+H].
Пример 143
(цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорид (энантиомер 2, E143)
трет-
К раствору (цис)-бутил 3-фтор-4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2) (25 мг, 0,04 ммоль) в метаноле (2 мл) добавляли HCl/метанол (8 моль/л, 2 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (15 мг, выход >100%) в виде желтого твердого вещества.
E143
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 8,76 (с, 1H), 8,36 (с, 1H), 7,70 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 5,33-5,22 (м, 1H), 4,94-4,91 (м, 2H), 4,66-4,62 (м, 2H), 4,21-4,18 (м, 2H), 3,84-3,81 (м, 1H), 3,63-3,53(м, 2H), 3,31-3,27 (м, 1H), 2,87 (с, 3H), 2,53 (с, 3H), 2,30-2,20 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDOD): δ -188,07 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота > 95%, Rt=2,876 мин; МС Вычисл.: 396, МС Найдено: 397 [M+H].
Пример 144
1-(6-(Азетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1, E144)
3
2
2
2
.
К раствору 4-(1-(6-(азетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 1,60 мг, 0,12 ммоль), в DCM (3 мл) добавляли TFA (0,5 мл) при 0°C. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Растворитель и TFA удаляли в вакууме и добавляли 0,5 мл NHHO. Белое твердое вещество выделяли из раствора и собирали с помощью фильтрации. Твердое вещество промывали HO и EtO с получением продукта (22,2 мг, выход 68%) в виде белого твердого вещества.
E144
1
6
J=
J
J
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,78 (с, 1H), 8,25 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 6,45 (с, 1H), 4,72-4,53 (м, 1H), 4,04-4,00 (т, 7,6 Гц, 4H), 3,16-3,06 (м, 1H), 2,89-2,86 (д, =12,0 Гц, 1H), 2,59-2,53 (м, 2H), 2,45 (с, 3H), 2,36 (с, 3H), 2,33-2,27 (м, 2H), 1,80-1,77 (д, =12 Гц, 1H), 1,55-1,47 (м, 1H).
19
F ЯМР (400 МГц, DMSO): δ -180,3 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 99%, Rt=5,09 мин; МС Вычисл.:380,21, МС Найдено: 381,2 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=6,01 мин; э.и.%=99,4%.
Пример 145
1-(6-(Азетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2, E145)
3
2
2
2
К раствору 4-(1-(6-(азетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-3-фторпиперидин-1-карбоксилата (энантиомер 2,38 мг, 0,08 ммоль) в DCM (3 мл) добавляли TFA (0,5 мл) при 0°C. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Растворитель и TFA удаляли в вакууме и добавляли 0,5 мл NH.HO. Белое твердое вещество выделяли из раствора и собирали с помощью фильтрации. Твердое вещество промывали HO и EtO с получением продукта (21 мг, выход 69,8%) в виде белого твердого вещества.
E145
1
J
J
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,85 (с, 1H), 8,32 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 6,53 (д, =14,4 Гц, 1H), 4,69 (м, 1H), 4,09 (т, =7,4 Гц, 4H), 3,16 (дд, =18,1, 8,8 Гц, 1H), 2,94 (д, =11,8 Гц, 1H), 2,69-2,55 (м, 2H), 2,52 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 2,41-2,27 (м, 2H), 1,85 (д, =12,8 Гц, 1H), 1,57 (дд, =21,9, 11,9 Гц, 1H).
19
F ЯМР (400 МГц, DMSO): δ -180,2 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 100%, Rt=5,06 мин; МС Вычисл.:380,21, МС Найдено: 381,3 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=12,93 мин; э.и.%=99,4%.
Пример 146
(цис)-1-(6-(6-(1-этил-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1, E146)
2
3
3
2
4
К раствору (цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 1, 147 мг, 0,340 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли CHO (37%, 1 мл) и NaBHCN (108 мг, 1,71 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в насыщ. NaHCO (20 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM/MeOH=10/1) с получением указанного в заголовке соединения (27 мг, выход 19%) в виде белого твердого вещества.
E146
1
19
3
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,91 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,58 (с, 1H), 5,04-4,79 (м, 2H), 4,43-4,37 (м, 2H), 4,03-3,98 (м, 2H), 3,50-3,42 (м, 1H), 3,17-2,97 (м, 3H), 2,66-2,56 (м, 5H), 2,48 (с, 3H), 2,26-2,10 (м, 2H), 2,00-1,89 (м, 2H), 1,18 (т, 7,2 Гц, 3H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,72 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% TFA) и 10% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота> 95%, Rt=2,737 мин; МС Вычисл.: 424, МС Найдено: 425 [M+H].
Пример 147
(цис)-1-(6-(6-(1-этил-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2, E147)
2
3
3
2
4
К раствору (цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 2, 147 мг, 0,340 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли CHO (37%, 1 мл) и NaBHCN (108 мг, 1,71 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь выливали в насыщ. NaHCO (20 мл) и перемешивали в течение 20 мин. Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM/MeOH=10/1) с получением указанного в заголовке соединения (28 мг, выход 19%) в виде белого твердого вещества.
E147
1
19
3
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,91 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,58 (с, 1H), 5,02-4,79 (м, 2H), 4,43-4,37 (м, 2H), 4,03-3,98 (м, 2H), 3,50-3,42 (м, 1H), 3,16-3,00 (м, 3H), 2,66-2,56 (м, 5H), 2,48 (с, 3H), 2,23-2,10 (м, 2H), 2,00-1,89 (м, 2H), 1,17 (т, 7,2 Гц, 3H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,69 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота> 95%, Rt=4,282 мин; МС Вычисл.: 424, МС Найдено: 425 [M+H].
Пример 148
(цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-изопропилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1, E148)
3
2
3
2
2
4
3
К раствору (цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 1, 108 мг, 0,250 ммоль) в CHCN (1 мл) и DMF (0,2 мл) добавляли 2-йодпропан (148 мг, 0,900 ммоль) и KCO(160 мг, 1,20 ммоль). Смесь перемешивали при 80°C в течение ночи. Смесь разделяли с HO (20 мл) и DCM (20 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Смесь очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=12:1) с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение растирали с DMF (2 мл) с получением указанного в заголовке соединения (18 мг, выход 14%).
E148
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,91 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,59 (с, 1H), 4,96-4,82 (м, 2H), 4,42-4,39 (м, 2H), 4,02-3,99 (м, 2H), 3,40-3,34 (м, 1H), 3,11-3,04 (м, 1H), 2,95-2,88 (м, 2H), 2,62 (с, 4H), 2,49 (с, 3H), 2,40-2,31 (м, 2H), 1,98-1,84 (м, 2H), 1,13-1,11 (м, 6H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -182,85 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 20% CHCN до 20% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет 98,38%, Rt=2,348 мин; МС Вычисл.: 438, МС Найдено: 439 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=4,617 мин, 100% э.и.
Пример 149
(цис)-1-(6-(6-(3-фтор-1-изопропилпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2, E149)
3
2
3
2
3
2
4
3
К раствору (цис)-1-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 2, 108 мг, 0,250 ммоль) в CHCN (1 мл) и DMF (0,2 мл) добавляли 2-йодпропан (128 мг, 0,75 ммоль) и KCO(138 мг, 1,00 ммоль). Смесь перемешивали при 80°C в течение ночи. Смесь промывали NaCO(10 мл) и экстрагировали DCM (20 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Смесь очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=12:1) с получением неочищенного соединения. Неочищенное соединение растирали с Hex/EtOAc (4/1, 5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (25 мг, выход 23%) в виде белого твердого вещества.
E149
1
19
3
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,91 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,59 (с, 1H), 4,97-4,79 (м, 2H), 4,42-4,38 (м, 2H), 4,02-3,99 (м, 2H), 3,39-3,35 (м, 1H), 3,12-3,03 (м, 1H), 2,95-2,86 (м, 2H), 2,62 (с, 4H), 2,48 (с, 3H), 2,40-2,31 (м, 2H), 1,98-1,80 (м, 2H), 1,14-1,11 (м, 6H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -182,83 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 10% CHCN до 10% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет 97,56%, Rt=2,831 мин; МС Вычисл.: 438, МС Найдено: 439 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=70/30, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=6,510 мин, 99,5% э.и.
Пример 150
(цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол (энантиомер 1, E150)
3
2
3
2
4
3
К раствору (цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорида (энантиомер 1, 21 мг, 0,05 ммоль) в метаноле (0,3 мл) добавляли 1,2-дихлор-этан (2 мл) и оксетан-3-он (0,13 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 мин в реакционную смесь добавляли NaBHCN(20 мг, 0,30 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляли раствор насыщ. раствора NaCO(10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин и DCM (20 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Смесь очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (12 мг, выход 54%) в виде белого твердого вещества.
E150
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,91 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 5,01-4,84 (м, 1H), 4,76-4,67 (м, 5H), 3,71-3,63 (м, 2H), 3,31-3,26 (м, 1H), 3,18-3,09 (м, 1H), 2,89-2,81 (м, 4H), 2,73-2,68 (м, 2H), 2,49-2,42 (м, 5H), 2,17-1,85 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,00 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,992 мин; МС Вычисл.: 451, МС Найдено: 452 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=80/20, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T =30°C, Rt=13,538 мин, 99,3% э.и.
Пример 151
(цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол (энантиомер 2, E151)
3
2
3
2
4
3
К раствору (цис)-(1R,3R)-3-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)циклобутанол гидрохлорида (энантиомер 2, 32 мг, 0,07 ммоль) в метаноле (0,3 мл) добавляли 1,2-дихлор-этан (2 мл) и оксетан-3-он (0,2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли NaBHCN(30 мг, 0,48 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем в реакционную смесь добавляли раствор насыщ. раствора NaCO(10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Смесь экстрагировали DCM (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Смесь очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (18 мг, выход 57%) в виде белого твердого вещества.
E151
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,91 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 4,98-4,86 (м, 1H), 4,72-4,69 (м, 5H), 3,69-3,66 (м, 2H), 3,30-3,28 (м, 1H), 3,14-3,12 (м, 1H), 2,89-2,83 (м, 4H), 2,71-2,70 (м, 2H), 2,49-2,44 (м, 5H), 2,16-1,90 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -184,00 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет 99,21%, Rt=3,990 мин; МС Вычисл.: 451, МС Найдено: 452 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IF 5 мкм 4,6*250 мм, Hex/EtOH=80/20, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T =30°C, Rt=13,427 мин, 100% э.и.
Пример 152
4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 1, E152)
2
2
3
3
2
2
2
4
К раствору 4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (энантиомер 1, 88 мг, 0,21 ммоль) в CHCl (5 мл) добавляли оксетан-3-он (45 мг, 0,62 ммоль) и HAc (27 мг, 0,62 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли NaBHCN (39 мг, 0,62 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию гасили насыщ. NaHCO. Добавляли CHCl (15 мл) и полученную суспензию промывали насыщенным солевым раствором (20 мл). Органический слой собирали и сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Gilson GX-281, Sepax C18-H 21,2*100 мм 5 мкм, Фаза: MeCN/H2O (0,1%TFA):10%~95%, Скорость потока: 15 мл/мин, 214 нм/254 нм) с получением продукта (50 мг, выход 50,2%), соль TFA, в виде белого твердого вещества.
E152
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 5,25~5,07 (м, 1H), 5,01~4,97 (м, 2H), 4,85~4,81 (м, 2H), 4,27~4,19 (м, 1H), 4,09 (с, 3H), 3,81~3,72 (м, 9H), 3,53 (д, =10,8 Гц, 1H), 3,36~3,27 (м, 1H), 2,77~2,67 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,25~2,20 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ-75,7 (с, 3F), -184,3 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 96,2%, Rt=7,76 мин; МС Вычисл.:482,2, МС Найдено: 483,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=12,60 мин; э.и.%=99,9%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex: EtOH=70/30, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 153
4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин (энантиомер 2, E153)
2
2
3
3
2
2
2
4
2
К раствору 4-(6-(6-(3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолина (энантиомер 2,78 мг, 0,18 ммоль) в CHCl (5 мл) добавляли оксетан-3-он (40 мг, 0,55 ммоль) и HAc (24 мг, 0,55 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли NaBHCN (34 мг, 0,55 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию гасили насыщ. NaHCO. Добавляли CHCl (15 мл) и полученную суспензию промывали насыщенным солевым раствором (20 мл). Органический слой собирали и сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda, Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм, Фаза: MeCN/HO (0,1%TFA):10%~95%, Скорость потока (F): 20 мл/мин, 214 нм/254 нм) с получением продукта (47 мг, выход 53,0%), соль TFA, в виде бледно-желтого твердого вещества.
E153
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,10 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 5,28~5,10 (м, 1H), 5,04~5,00 (м, 2H), 4,87~4,82 (м, 2H), 4,33~4,27 (м, 1H), 4,09 (с, 3H), 3,86~3,73 (м, 9H), 3,60 (д, =10,4 Гц, 1H), 3,39~3,29 (м, 1H), 2,85~2,74 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,29~2,25 (м, 2H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ-75,7 (с, 3F), -184,5 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 96,2%, Rt=7,76 мин; МС Вычисл.:482,2, МС Найдено: 483,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=19,29 мин; э.и.%=99,7%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=70/30, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 154
6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1, E154)
3
2
4
К раствору 6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол соли TFA (энантиомер 1, 220 мг, 0,33 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли оксетан-3-он (72 мг, 1,0 ммоль) и MeOH (1,0 мл). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли NaBHCN (63 мг, 1,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Реакционный раствор концентрировали и остаток разбавляли EtOAc (20 мл). Полученный раствор промывали насыщенным солевым раствором (20 мл). Органический слой собирали и сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (MeOH:EtOAc=0:100~10:100, 5 г силикагеля) с получением целевого продукта (80 мг, 49% выход) в виде белого твердого вещества.
D154
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,73~4,63 (м, 4H), 4,13 (с, 3H), 3,77 (шир, 4H), 3,68~3,64 (м, 1H), 3,25~3,21 (м, 1H), 3,13~3,10 (м, 1H), 2,84~2,81 (м, 1H), 2,51 (т, =4,8 Гц, 4H), 2,48 (с, 3H), 2,35 (с, 3H), 2,12~1,88 (м, 4H).
3
19F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 97,9%, Rt=5,07 мин; МС Вычисл.:495,3, МС Найдено: 496,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=10,89 мин; э.и.%=99,6%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=70/30, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 155
6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2, E155)
3
3
2
4
К раствору 6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-1-(2-метокси-6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2, 280 мг, 0,58 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли оксетан-3-он (300 мг, 6,0 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли NaBHCN (300 мг, 7,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи до расходования материала. Реакционный раствор разбавляли насыщ. NaHCO (80 мл). Раствор экстрагировали DCM (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2×100 мл) и сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (MeOH:EtOAc=0:100~10:100, 4 г силикагеля) с получением целевого продукта (50 мг, 22,5% выход) в виде белого твердого вещества.
E155
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,73~4,63 (м, 4H), 4,14 (с, 3H), 3,77 (шир, 4H), 3,68~3,64 (м, 1H), 3,25~3,21 (м, 1H), 3,13~3,10 (м, 1H), 2,84~2,81 (м, 1H), 2,57 (т, =4,8 Гц, 4H), 2,47 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,12~1,88 (м, 4H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -183,982 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 97%, Rt=5,11 мин; МС Вычисл.:495,3, МС Найдено: 496,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=10,89 мин; э.и.%=99,53%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=70/30, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 30°C.
Пример 156
(R)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 1, E156)
3
4
2
2
4
1
2
К раствору (R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (139 мг, 0,42 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли 6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 1) (100 мг, 0,35 ммоль), KPO (149 мг, 0,70 ммоль), CuI (67 мг, 0,35 ммоль) и N,N-диметилэтан-1,2-диамин (62 мг, 0,70 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировалидосуха. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:5~1:0) с получением продукта (R)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 1) (40 мг, 23,0% выход,) в виде белого твердого вещества.
E156
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,72~4,63 (м, 4H), 4,32~4,21 (м, 2H), 4,14 (с, 3H), 4,00 (д, =9,6 Гц, 1H), 3,70~3,64 (м, 3H), 3,25~3,08 (м, 3H), 2,85~2,72 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,14~1,85 (м, 4H), 1,27 (д, =6,0 Гц, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,97 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 98,9%; Rt=4,51 мин; МС Вычисл.: 496, МС Найдено: 497[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, гексан:IPA(0,2%DEA)=65/35, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 214 нм, T =25°C, Rt=10,67 мин, 99% э.и.
Пример 157
(R)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 2, E157)
3
4
2
2
4
К раствору (R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (111 мг, 0,33 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли 6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол (энантиомер 2) (80 мг, 0,28 ммоль), KPO (119 мг, 0,56 ммоль), CuI (54 мг, 0,28 ммоль) и N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (50 мг, 0,56 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировалидосуха. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:5~1:0) с получением продукта (R)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 2) (30 мг, 21,6% выход) в виде белого твердого вещества.
E157
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,72~4,63 (м, 4H), 4,32~4,21 (м, 2H), 4,14 (с, 3H), 4,00 (д, =9,6 Гц, 1H), 3,70~3,64 (м, 3H), 3,25~3,08 (м, 3H), 2,85~2,72 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,14~1,85 (м, 4H), 1,27 (д, =6,0 Гц, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,97 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 98,9%; Rt=3,75 мин; МС Вычисл.: 496, МС Найдено: 497[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, гексан:IPA (0,2%DEA)=65/35, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 214 нм, T =25°C, Rt=14,740 мин, 99% э.и.
Пример 158
(S)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 1, E158)
3
3
2
4
2
К раствору (S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (диастереоизомер 1) (140 мг, 0,32 ммоль, неочищенный) и оксетан-3-она (46 мг, 0,64 ммоль) в DCE (10 мл) добавляли AcOH (19 мг, 0,32 ммоль) и NaBHCN(40 мг, 0,64 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение в течение ночи. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(100 мл), и экстрагировали DCM (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO, фильтровали, концентрировали досуха. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Sepax C18-H 21,2*100 мм 5 мкм, Фаза: HO (0,1%TFA):ACN=90:10 до 10:90, 15 мл/мин, 254/214 нм) с получением указанного в заголовке продукта (S)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (единственный неизвестный изомер 1) (22 мг, выход=13,8%) в виде белого твердого вещества.
E158
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,72~4,63 (м, 4H), 4,32~4,21 (м, 2H), 4,14 (с, 3H), 4,00 (д, =9,6 Гц, 1H), 3,70~3,64 (м, 3H), 3,25~3,08 (м, 3H), 2,85~2,72 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,14~1,85 (м, 4H), 1,26 (д, =6,0 Гц, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,97 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 98,9%; Rt=5,34 мин; МС Вычисл.: 496, МС Найдено: 497[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, гексан:IPA (0,2%DEA)=65/35, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 214 нм, T =25°C, Rt=14,74 мин 99% э.и.
Пример 159
(S)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 2, E159)
3
3
2
4
2
К раствору (S)-4-(6-(6-((цис)-3-фторпиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолина (диастереоизомер 2) (95 мг, 0,22 ммоль, неочищенный) и оксетан-3-она (32 мг, 0,44 ммоль) в DCE (10 мл) добавляли AcOH (13 мг, 0,22 ммоль) и NaBHCN(28 мг, 0,44 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение в течение ночи. ЖХМС показала, что реакция завершена. Реакционную смесь выливали в насыщ. раствор NaHCO(100 мл), экстрагировали DCM (30 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над безводным NaSO, фильтровали, концентрировали досуха. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Sepax C18-H 21,2*100 мм 5 мкм, Фаза: HO (0,1%TFA):ACN=90:10-10:90, 15 мл/мин, 254/214 нм) с получением указанного в заголовке продукта (S)-4-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (диастереоизомер 2) (16 мг, выход=14,6%) в виде белого твердого вещества.
E159
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,72~4,63 (м, 4H), 4,32~4,21 (м, 2H), 4,14 (с, 3H), 4,00 (д, =9,6 Гц, 1H), 3,70~3,64 (м, 3H), 3,25~3,08 (м, 3H), 2,85~2,72 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,14~1,85 (м, 4H), 1,27 (д, =6,0 Гц, 3H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,98 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 98,9%; Rt=5,37 мин; МС Вычисл.: 496, МС Найдено: 497[M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, гексан:IPA (0,2%DEA)=65/35, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 214 нм, T =25°C, Rt=16,60 мин, 99% э.и.
Пример 160
(2S, 6R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолин (диастереоизомер 1, E160)
3
4
2
2
4
2
3
2
;
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 70 мг, 0,24 ммоль), (2S,6R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолина (100 мг, 0,28 ммоль), CuI (95 мг, 0,5 ммоль) и KPO(106 мг, 0,5 ммоль) в толуоле (10 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (44 мг, 0,5 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (20 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (2×20 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Waters 2767/Qda; Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм; 20 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: HO (0,1%NH-HO)/ACN) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (90 мг, 73% выход)
E160
1
3
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,72~4,62 (м, 4H), 4,33~4,26 (шир, 2H), 4,15 (с, 3H), 3,68~3,63 (м, 3H), 3,25~3,10 (м, 2H), 2,83 (д, =10,4 Гц, 1H), 2,67 (т, =12,0 Гц, 2H), 2,14~1,85 (м, 4H), 1,27 (д, =6,0 Гц, 6H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,1% FA) и 40% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 97,4%, Rt=6,52 мин; МС Вычисл.:510,3, МС Найдено: 511,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=10,825 мин; э.и.%=99,6%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 161
(2S, 6R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолин (диастереоизомер 2, E161)
3
4
2
2
4
2
;
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2, 70 мг, 0,24 ммоль), (2S,6R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолина (100 мг, 0,28 ммоль), CuI (95 мг, 0,5 ммоль) и KPO(106 мг, 0,5 ммоль) в толуоле (10 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамин (44 мг, 0,5 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (20 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (2×20 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Waters 2767; Sepax Amethyst 21,2*100 мм 5 мкм; 15 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: HO (0,1%TFA)/ACN) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (70 мг, 57% выход)
E161
1
3
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,72~4,62 (м, 4H), 4,33~4,26 (шир, 2H), 4,15 (с, 3H), 3,68~3,63 (м, 3H), 3,25~3,10 (м, 2H), 2,83 (д, =10,4 Гц, 1H), 2,67 (т, =12,0 Гц, 2H), 2,14~1,85 (м, 4H), 1,27 (д, =6,0 Гц, 6H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 50% воды (0,1% FA) и 50% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 96,8%, Rt=4,83 мин; МС Вычисл.:510,3, МС Найдено: 511,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=14,684 мин; э.и.%=99,6%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 162
(2S, 6S)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолин (диастереоизомер 1, E162)
3
4
2
2
4
2
3
2
;
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 80 мг, 0,27 ммоль), (2S,6S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолина (106 мг, 0,304 ммоль), CuI (105 мг, 0,55 ммоль) и KPO(117 мг, 0,55 ммоль) в толуоле (15 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (50 мг, 0,5 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (120 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (2×100 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Waters 2767/Qda; Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм; 20 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: HO (0,1%NH-HO)/ACN) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (86 мг, 71% выход)
E162
1
3
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,72~4,62 (м, 4H), 4,33~4,26 (шир, 2H), 4,15 (с, 3H), 3,68~3,63 (м, 3H), 3,25~3,10 (м, 2H), 2,83 (д, =10,4 Гц, 1H), 2,67 (т, =12,0 Гц, 2H), 2,14~1,85 (м, 4H), 1,27 (д, =6,0 Гц, 6H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 50% воды (0,1% FA) и 50% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 96,8%, Rt=4,83 мин; МС Вычисл.:510,3, МС Найдено: 511,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=11,791 мин; э.и.%=99,7%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 163
(2S, 6S)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолин (энантиомер 2, E163)
3
4
2
2
4
2
3
2
;
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (диастереоизомер 2, 80 мг, 0,27 ммоль), (2S,6S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-2,6-диметилморфолина (106 мг, 0,304 ммоль), CuI (105 мг, 0,55 ммоль) и KPO(117 мг, 0,55 ммоль) в толуоле (15 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (50 мг, 0,5 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (120 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (2×100 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (способ: Waters 2767/Qda; Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм; 20 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: HO (0,1%NH-HO)/ACN) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (84 мг, 69% выход).
E163
1
3
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,93~4,79 (м, 1H), 4,72~4,62 (м, 4H), 4,33~4,26 (шир, 2H), 4,15 (с, 3H), 3,68~3,63 (м, 3H), 3,25~3,10 (м, 2H), 2,83 (д, =10,4 Гц, 1H), 2,67 (т, =12,0 Гц, 2H), 2,14~1,85 (м, 4H), 1,27 (д, =6,0 Гц, 6H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 50% воды (0,1% FA) и 50% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 96,8%, Rt=4,21 мин; МС Вычисл.:510,3, МС Найдено: 511,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=16,608 мин; э.и.%=99,5%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 164
(R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолин (диастереоизомер 1, E164)
3
4
2
2
4
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 80 мг, 0,27 ммоль), (R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолина (102 мг, 0,30 ммоль), CuI (103 мг, 0,54 ммоль) и KPO(115 мг, 0,54 ммоль) в толуоле (18 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (48 мг, 0,54 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (2×100 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (150 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии (EtOAc/PE=1/2~2/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (80 мг, 58% выход)
E164
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,81 (с, 1H), 4,92~4,79 (м, 1H), 4,72~4,63 (м, 4H), 4,48 (шир, 1H), 4,14 (с, 3H), 4,14~3,99 (м, 2H), 3,81~3,58 (м, 4H), 3,34~3,08 (м, 3H), 2,81 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,11~1,85 (м, 4H), 1,35 (д, =6,8 Гц, 3H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,1% FA) и 40% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 99,4%, Rt=5,29 мин; МС Вычисл.:496,3, МС Найдено: 497,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=7,637 мин; э.и.%=99,7%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 165
(R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолин (диастереоизомер 2, E165)
3
4
2
2
4
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2, 70 мг, 0,24 ммоль), (R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолина (100 мг, 0,30 ммоль), CuI (95 мг, 0,5 ммоль) и KPO(106 мг, 0,5 ммоль) в толуоле (10 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (44 мг, 0,5 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (50 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии (EtOAc/PE=1/2~2/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (65 мг, 55% выход).
E165
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,81 (с, 1H), 4,92~4,79 (м, 1H), 4,72~4,63 (м, 4H), 4,48 (шир, 1H), 4,14 (с, 3H), 4,14~3,99 (м, 2H), 3,81~3,58 (м, 4H), 3,34~3,08 (м, 3H), 2,81 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,11~1,85 (м, 4H), 1,35 (д, =6,8 Гц, 3H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,1% FA) и 40% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 98,0%, Rt=5,46 мин; МС Вычисл.:496,3, МС Найдено: 497,9 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=11,471 мин; э.и.%=98,8%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2%диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 166
(S)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолин (диастереоизомер 1, E166)
3
4
2
2
4
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 80 мг, 0,27 ммоль), (S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолина (102 мг, 0,30 ммоль), CuI (103 мг, 0,54 ммоль) и KPO(115 мг, 0,54 ммоль) в толуоле (18 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (48 мг, 0,54 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (2×100 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (150 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии (EtOAc/PE=1/2~2/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (75 мг, 55% выход).
E166
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,81 (с, 1H), 4,92~4,79 (м, 1H), 4,72~4,63 (м, 4H), 4,48 (шир, 1H), 4,14 (с, 3H), 4,14~3,99 (м, 2H), 3,81~3,58 (м, 4H), 3,34~3,08 (м, 3H), 2,81 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,11~1,85 (м, 4H), 1,35 (д, =6,8 Гц, 3H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,1% FA) и 40% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 99,2%, Rt=5,19 мин; МС Вычисл.:496,3, МС Найдено: 497,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=7,349 мин; э.и.%=99,8%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2%диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 167
(S)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолин (диастереоизомер 2, E167)
3
4
2
2
4
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2, 70 мг, 0,24 ммоль), (S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолина (100 мг, 0,30 ммоль), CuI (95 мг, 0,5 ммоль) и KPO(106 мг, 0,5 ммоль) в толуоле (10 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (44 мг, 0,5 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (50 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии (EtOAc/PE=1/2~2/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (60 мг, 50% выход).
E167
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,88 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,81 (с, 1H), 4,92~4,79 (м, 1H), 4,72~4,63 (м, 4H), 4,48 (шир, 1H), 4,14 (с, 3H), 4,14~3,99 (м, 2H), 3,81~3,58 (м, 4H), 3,34~3,08 (м, 3H), 2,81 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,11~1,85 (м, 4H), 1,35 (д, =6,8 Гц, 3H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,1% FA) и 40% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 98,5%, Rt=5,30 мин; МС Вычисл.:496,3, МС Найдено: 497,9 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=10,125 мин; э.и.%=99,1%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2%диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 168
6-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октан (энантиомер 1, E168)
3
4
2
2
4
2
;
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 90 мг, 0,311 ммоль), (R)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилморфолина (118 мг, 0,342 ммоль), CuI (118 мг, 0,622 ммоль) и KPO(132 мг, 0,622 ммоль) в толуоле (20 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (55 мг, 0,622 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (2×100 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (150 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали хроматографией (EtOAc/MeOH=10/1) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества (110 мг, 69% выход). Затем дополнительно очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda; Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм; 20 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: ACN/HO (0,1% TFA)) с получением целевого продукта (72 мг) в виде белого твердого вещества.
E168
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,61 (с, 1H), 4,95~4,81 (м, 1H), 4,80~4,62 (м, 8H), 4,15 (с, 3H), 3,88~3,62 (м, 5H), 3,24~3,11 (м, 2H), 2,84~2,81 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,34 (шир, 2H), 2,11~1,87 (м, 4H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,1% FA) и 30% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 99,7%, Rt=5,61 мин; МС Вычисл.:508,3, МС Найдено: 509,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=28,440 мин; э.и.%=99,9%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=45/55, F: 0,6 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 169
6-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-2-окса-6-азаспиро[3.4]октан (энантиомер 2, E169)
;
3
4
2
2
4
2
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2,75 мг, 0,26 ммоль), (S)-4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метил морфолина (107 мг, 0,31 ммоль), CuI (100 мг, 0,52 ммоль) и KPO(110 мг, 0,52 ммоль) в толуоле (20 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (46 мг, 0,52 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (2×100 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (150 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи хроматографии (EtOAc/MeOH=10/1) с получением целевого продукта (80 мг, 60% выход). Затем дополнительно очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda; Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм; 20 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: ACN/HO (0,1% TFA)) с получением целевого продукта (29 мг) в виде белого твердого вещества.
E169
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,89 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,61 (с, 1H), 4,95~4,81 (м, 1H), 4,80~4,62 (м, 8H), 4,15 (с, 3H), 3,88~3,62 (м, 5H), 3,24~3,11 (м, 2H), 2,84~2,81 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,34 (шир, 2H), 2,11~1,87 (м, 4H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 60% воды (0,1% FA) и 40% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 98,8%, Rt=3,45 мин; МС Вычисл.:508,3, МС Найдено: 509,7 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=39,822 мин; э.и.%=99,5%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=45/55, F: 0,6 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 170
((R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E170)
3
4
2
2
4
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 80 мг, 0,27 ммоль), (R)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (126 мг, 0,36 ммоль), CuI (105 мг, 0,54 ммоль) и KPO(117 мг, 0,54 ммоль) в толуоле (15 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (50 мг, 0,54 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (2×100 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (150 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (42 мг, 71% выход).
;
2
Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda; Sepax Amethyst 21,2*100 мм 5 мкм; 15 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: ACN/HO (0,1% TFA)) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (42 мг, 71% выход)
E170
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 4,95~4,80 (м, 1H), 4,80~4,60 (м, 4H), 4,31~4,25 (шир, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,08~4,05 (м, 1H), 3,78~3,74 (м, 2H), 3,71~3,66 (м, 3H), 3,23~3,12 (м, 3H), 2,96~2,94 (м, 1H), 2,84~2,82 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,13~1,83 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,1% FA) и 30% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 97,6%, Rt=4,47 мин; МС Вычисл.:512, МС Найдено: 513,9 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=9,12 мин; э.и.%=99,8%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 171
((R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E171)
3
4
2
2
4
2
;
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2; 80 мг, 0,27 ммоль), (R)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (150 мг, 0,45 ммоль), CuI (105 мг, 0,54 ммоль) и KPO(117 мг, 0,54 ммоль) в толуоле (15 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамин (50 мг, 0,54 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (2×100 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (150 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda; Sepax Amethyst 21,2*100 мм 5 мкм; 15 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: ACN/HO (0,1% TFA)) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (55 мг, 71% выход)
E171
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 4,95~4,80 (м, 1H), 4,80~4,60 (м, 4H), 4,31~4,25 (шир, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,08~4,05 (м, 1H), 3,78~3,74 (м, 2H), 3,71~3,66 (м, 3H), 3,23~3,12 (м, 3H), 2,96~2,94 (м,1H), 2,84~2,82 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,13~1,83 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,1% FA) и 30% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 95%, Rt=4,62 мин; МС Вычисл.:512, МС Найдено: 513,9 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=12,15 мин; э.и.%=99,5%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 172
((S)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E172)
3
4
2
2
4
2
;
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 80 мг, 0,27 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (150 мг, 0,45 ммоль), CuI (105 мг, 0,54 ммоль) и KPO(117 мг, 0,54 ммоль) в толуоле (15 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (50 мг, 0,54 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (2×100 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (150 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda; Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм; 20 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: ACN/HO (0,1% TFA)) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (57 мг, 75% выход).
E172
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 4,95~4,80 (м, 1H), 4,80~4,60 (м, 4H), 4,31~4,25 (шир, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,08~4,05 (м, 1H), 3,78~3,74 (м, 2H), 3,71~3,66 (м, 3H), 3,23~3,12 (м, 3H), 2,96~2,94 (м,1H), 2,84~2,82 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,13~1,83 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,1% FA) и 30% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 95%, Rt=4,52 мин; МС Вычисл.:512, МС Найдено: 513,9 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=10,09 мин; э.и.%=99,8%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2%диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 173
((S)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E173)
3
4
2
2
4
Смесь 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2; 50 мг, 0,17 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (120 мг, 0,34 ммоль), CuI (66 мг, 0,35 ммоль) и KPO(73 мг, 0,35 ммоль) в толуоле (15 мл) дегазировали и защищали N до добавления N,N-диметил-1,2-этандиамина (31 мг, 0,35 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (2×100 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (150 мл). Органический раствор сушили над безводным NaSO и концентрировали.
;
2
Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda; Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм; 20 мл/мин; 214 нм/254 нмФаза: ACN/HO (0,1% TFA)) с получением целевого продукта в виде белого твердого вещества. (26 мг, 50% выход).
E173
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,87 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 4,95~4,80 (м, 1H), 4,80~4,60 (м, 4H), 4,31~4,25 (шир, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,08~4,05 (м, 1H), 3,78~3,74 (м, 2H), 3,71~3,66 (м, 3H), 3,23~3,12 (м, 3H), 2,96~2,94 (м,1H), 2,84~2,82 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,13~1,83 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -184,0 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,1% FA) и 30% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 95%, Rt=4,48 мин; МС Вычисл.:512, МС Найдено: 513,9 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=12,80 мин; э.и.%=99,3%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 174
((R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E174)
3
4
2
2
4
К суспензии 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 80 мг, 0,28 ммоль),(R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (111 мг, 0,33 ммоль), CuI (54 мг, 0,28 ммоль) и KPO (119 мг, 0,56 ммоль) в сухом толуоле (10 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (50 мг, 0,56 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали досуха. Остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:5~1:0) с получением целевого продукта ((R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1) (50 мг, 36,5% выход) в виде белого твердого вещества.
E174
1
3
J=
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 4,97~4,82 (м, 1H), 4,75~4,67 (м, 4H), 4,31 (т, 11,2 Гц, 2H), 4,09 (д, 9,2, 2,0 Гц, 1H), 3,81~3,60 (м, 5H), 3,30~3,23 (м, 1H), 3,16~3,06 (м, 2H), 2,98~ 2,85 (м, 2H), 2,66 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,15~2,19 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,96 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 98,6%, Rt=5,62 мин; МС Вычисл.:496,6, МС Найдено: 497,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=6,170 мин; э.и.%=99,7%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 175
((R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E175)
3
4
2
2
4
К суспензии 6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2,80 мг, 0,28 ммоль),(R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (111 мг, 0,33 ммоль), CuI (54 мг, 0,28 ммоль) и KPO (119 мг, 0,56 ммоль) в сухом толуоле (10 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (50 мг, 0,56 ммоль). Смесь перемешивали при 90°C в течение 2 часов в атмосфере N. Реакционную смесь выливали в воду (100 мл), экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали досуха. Неочищенный продукт очищали при помощи хроматографии на силикагеле, элюируя (EtOAc:петролейный эфир=1:5~1:0) с получением целевого продукта ((R)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2) (65 мг, 47,3% выход) в виде белого твердого вещества.
E175
1
3
J=
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 4,97~4,82 (м, 1H), 4,75~4,67 (м, 4H), 4,31 (т, 11,2 Гц, 2H), 4,09 (д, 9,2, 2,0 Гц, 1H), 3,81~3,60 (м, 5H), 3,30~3,23 (м, 1H), 3,16~3,06 (м, 2H), 2,98~ 2,85 (м, 2H), 2,66 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,15~2,19 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,96 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 98,6%, Rt=5,47 мин; МС Вычисл.:496,6, МС Найдено: 497,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=7,247 мин; э.и.%=99,3%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2%диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 176
((S)-4-(6-(6-(3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E176)
3
4
2
2
4
2
3
К суспензии 6-((3S,4R)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 70 мг, 0,24 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (97 мг, 0,29 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль) и KPO (108 мг, 0,51 ммоль) в сухом толуоле (5 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (43 мг, 0,48 ммоль). Суспензию дегазировали N и перемешивали при 90°C в течение 2 ч. Добавляли EtOAc (50 мл) и полученную смесь промывали насыщенным солевым раствором (2×40 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda, Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм, Фаза: MeCN/HO (0,1%0NH):10%~95%, Скорость потока: 20 мл/мин, 214 нм/254 нм) с получением продукта (74 мг, выход 61,6%) в виде белого твердого вещества.
E176
1
3
J=
J=
J=
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 5,00~4,82 (м, 1H), 4,75~4,67 (м, 4H), 4,31 (т, 11,2 Гц, 2H), 4,09 (дд, 11,2, 2,0 Гц, 1H), 3,81~3,60 (м, 5H), 3,30~3,23 (м, 1H), 3,16~3,06 (м, 2H), 2,99 (дд, 13,2, 10,8 Гц, 1H), 2,88 (д, 10,4 Гц, 1H), 2,66 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,15~2,19 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,96 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 98,6%, Rt=5,56 мин; МС Вычисл.:496,6, МС Найдено: 497,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=8,071 мин; э.и.%=99,7%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2% диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 177
((S)-4-(6-(6-((3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E177)
3
4
2
2
4
2
3
К суспензии 6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2, 70 мг, 0,24 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (97 мг, 0,29 ммоль), CuI (46 мг, 0,24 ммоль) и KPO (108 мг, 0,51 ммоль) в сухом толуоле (5 мл) добавляли N,N-диметил-1,2-этандиамин (43 мг, 0,48 ммоль). Суспензию дегазировали N и перемешивали при 90°C в течение 2 ч. Добавляли EtOAc (50 мл) и полученную смесь промывали насыщенным солевым раствором (2×50 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (Waters 2767/Qda, Waters XBridge 30*150 мм 5 мкм, Фаза: MeCN/HO (0,1%NH): 10%~95%, Скорость потока: 20 мл/мин, 214 нм/254 нм) с получением продукта (80 мг, выход 66,6%) в виде белого твердого вещества.
E177
1
3
J=
J=
J=
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 5,00~4,82 (м, 1H), 4,73~4,66 (м, 4H), 4,31 (т, 12,0 Гц, 2H), 4,09 (дд, 12,0, 2,0 Гц, 1H), 3,81~3,63 (м, 5H), 3,30~3,25 (м, 1H), 3,16~3,09 (м, 2H), 2,99 (дд, 12,8, 10,0 Гц, 1H), 2,88 (д, 10,4 Гц, 1H), 2,66 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,15~2,18 (м, 5H).
19
3
F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -183,96 (с, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 98,6%, Rt=5,57 мин; МС Вычисл.:496,6, МС Найдено: 497,8 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=8,963 мин; э.и.%=99,3%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak AD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: гексан:изопропанол (0,2%диэтиламин)=65/35, F: 1,0 мл/мин, W: 214 нм, T: 25°C.
Пример 178
1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ол (энантиомер 1, E178)
1
2
3
4
N,N-диметилэтан-1,2-диамин (31 мг, 0,35 ммоль) добавляли к раствору 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ола (53 мг, 0,17 ммоль), 6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1,50 мг, 0,17 ммоль), CuI (32 мг, 0,17 ммоль) и KPO(74 мг, 0,35 ммоль) в толуоле (5 мл) под Ar. Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 3 часов. Смесь фильтровали, концентрировали и очищали при помощи колонки (DCM:MeOH=50:1) с получением продукта в виде белого твердого вещества (20 мг, выход 27,3%).
E178
1
6
J=
J
J
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,83 (с, 1H), 8,34 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 6,57 (с, 1H), 5,74 (с, 1H), 4,88-4,75 (мд, 48,0 Гц, 1H), 4,59-4,50 (м, 4H), 3,99-3,96 (д,=8,8 Гц, 2H), 3,92-3,90 (д, =8,4 Гц, 2H), 3,61-3,60 (м, 1H), 3,26-3,25 (м, 1H), 3,14-3,12 (м, 1H), 2,82-2,79 (м, 1H), 2,53 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 2,09-1,91 (м, 3H), 1,71-1,62 (кв, 1H), 1,45 (с, 3H).
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=4,49 мин; МС Вычисл.:466,6; МС Найдено: 467,6[M+H].
Пример 179
1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ол (диастереоизомер 2, E179)
1
2
3
4
N,N-диметилэтан-1,2-диамин (31 мг, 0,35 ммоль) добавляли к раствору 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ола (53 мг, 0,17 ммоль), 6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2,50 мг, 0,17 ммоль), CuI (32 мг, 0,17 ммоль) и KPO(74 мг, 0,35 ммоль) в толуоле (5 мл) под Ar. Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 3 часов. Смесь фильтровали и концентрировали. Очищали при помощи колонки (DCM:MeOH=50:1) с получением продукта в виде белого твердого вещества (30 мг, выход 37,2%).
E179
1
6
J=
J
J
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,83 (с, 1H), 8,34 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 6,57 (с, 1H), 5,74 (с, 1H), 4,88-4,75 (мд, 48 Гц, 1H), 4,59-4,50 (м, 4H), 3,99-3,97 (д,=8,4 Гц, 2H), 3,92-3,90 (д, =8,4 Гц, 2H), 3,61-3,60 (м, 1H), 3,27-3,26 (м, 1H), 3,14-3,12 (м, 1H), 2,82-2,79 (м, 1H), 2,53 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 2,09-1,92 (м, 3H), 1,71-1,62 (кв, 1H), 1,45 (с, 3H).
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=4,91 мин; МС Вычисл.:466,6; МС Найдено: 467,5[M+H].
Пример 180
1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ол (энантиомер 1, E180)
1
2
3
4
N,N-диметилэтан-1,2-диамин (18 мг, 0,2 ммоль) добавляли к раствору 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ола (33 мг, 0,1 ммоль), 6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1, 30 мг, 0,1 ммоль), CuI (19 мг, 0,1 ммоль) и KPO(44 мг, 0,2 ммоль) в толуоле (2 мл) под Ar. Реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 3 часов. Смесь фильтровали, концентрировали и затем очищали при помощи колонки (DCM:MeOH=50:1) с получением продукта в виде белого твердого вещества (21 мг, выход 42%).
E180
1
3
1
2
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,40 (с, 1H), 7,72 (с, 1H), 6,49 (с, 1H), 5,82 (с, 1H), 4,76, 4,77, 4,88, 4,89(дд, J=4 Гц, J=3,6 Гц, 1H), 4,52~4,65 (м, 4H), 4,96~4,06(м, 6H), 3,63, 3,65, 3,66 (т, J=6 Гц, 1H), 3,16~3,28 (м, 2H), 2,84, 3,16 (д, J=9,6 Гц, 1H), 2,48 (с, 3H), 1,96~2,14 (м, 3H), 1,68, 1,71 (д, J=7,2 Гц, 1H), 1,50 (с, 3H).
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=4,25 мин; МС Вычисл.:482,2; МС Найдено: 483,3 [M+H].
Пример 181
1-(6-(6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ол (диастереоизомер 2, E181)
3
4
N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (31 мг, 0,35 ммоль) добавляли к раствору 1-(6-иод-2-метоксипиримидин-4-ил)-3-метилазетидин-3-ола (53 мг, 0,17 ммоль), 6-((цис)-3-фтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2, 50 мг, 0,17 ммоль), CuI (32 мг, 0,17 ммоль) и KPO(74 мг, 0,35 ммоль) в толуоле (5 мл) под Ar. Реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 3 часов. Смесь фильтровали и концентрировали. Очищали при помощи колонки (DCM:MeOH=50:1) с получением продукта в виде белого твердого вещества (21 мг, выход 42%).
E181
1
3
1
2
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,40 (с, 1H), 7,72 (с, 1H), 6,49 (с, 1H), 5,82 (с, 1H), 4,76, 4,77, 4,88, 4,89(дд, J=4 Гц, J=3,6 Гц, 1H), 4,52~4,65 (м, 4H), 4,96~4,06(м, 6H), 3,63, 3,65, 3,66 (т, J=6 Гц, 1H), 3,16~3,28 (м, 2H), 2,84, 3,16 (д, J=9,6 Гц, 1H), 2,48 (с, 3H), 1,96~2,14 (м, 3H), 1,68, 1,71 (д, J=7,2 Гц, 1H), 1,50 (с, 3H).
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=5,93 мин; МС Вычисл.:482,2; МС Найдено: 483,5 [M+H].
Пример 182
(R)-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E182)
3
2
3
2
4
2
2
3
К раствору (R)-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорида (119 мг неочищенный, 0,194 ммоль) в метаноле (1 мл) добавляли 1,2-дихлор-этан (15 мл) и оксетан-3-он (0,5 мл) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 30 мин добавляли NaBHCN (82 мг, 1,30 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К смеси добавляли насыщ. NaCO(20 мл) и перемешивали в течение 10 минут. Смесь экстрагировали DCM (50 мл×3) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (39 мг, выход 31%) в виде белого твердого вещества.
E182
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,80 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,73-4,71 (м, 4H), 4,33-4,27 (м, 2H), 4,10-4,04 (м, 1H), 3,78-3,60 (м, 4H), 3,60-3,55 (м, 1H), 3,17-3,07 (м, 1H), 3,00-2,94 (м, 3H), 2,87-2,81 (м, 1H), 2,65 (с,3H), 2,45 (с, 3H), 2,05-1,91 (м, 7H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02%NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=4,057 мин; МС Вычисл.: 478; МС Найдено: 479(M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AS-H 5 мкм 4,6*250 мм; Фаза: Hex:EtOH=80:20:0,2; F: 1 мл/мин, W: 230 нм; T: 30°C; Rt=7,732 мин, 100% э.и.
Пример 183
(S)-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E183)
трет-
3
3
2
3
2
4
К раствору бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-((2S)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (118 мг, 0,194 ммоль) в диоксане (4 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M, 4 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в CHOH (0,2 мл) и затем добавляли оксетан-3-он (1 мл) и 1,2-дихлорэтан (3 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 мин к смеси добавляли NaBHCN (90 мг, 1,4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь промывали NaCO(20 мл) и экстрагировали DCM (50 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (21,4 мг, выход 22%) в виде белого твердого вещества.
E183
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,80 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,72-4,70 (м, 4H), 4,33-4,29 (м, 2H), 4,08-4,04 (м, 1H), 3,80-3,65 (м, 4H), 3,58-3,54 (м, 1H), 3,16-3,08 (м, 1H), 2,98-2,91 (м, 3H), 2,86-2,81 (м, 1H), 2,65 (с,3H), 2,45 (с, 3H), 2,07-1,93 (м, 7H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02%NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=4,056 мин; МС Вычисл.: 478; МС Найдено: 479(M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AS-H 5 мкм 4,6*250 мм; Фаза: Hex:EtOH=80:20; F: 1 мл/мин, W: 230 нм; T: 30°C; Rt=8,662 мин, 100% э.и.
Пример 184
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (E184)
2
3
2
4
3
2
К раствору 5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (100 мг, 0,193 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли TsOH (17 мг, 0,097 ммоль) при комнатной температуре. Затем, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до 0°C. К смеси добавляли насыщ. водный NaCO (16 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали при помощи колонки С18 с использованием CHCN/HO (10%-60%) с получением целевого продукта (39 мг, выход 47%) в виде белого твердого вещества.
E184
1
d
J
J
J
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 8,72 (с, 1H), 8,27 (с, 1H), 7,59 (с, 1H), 6,52 (с, 1H), 5,77 (д, =6,6 Гц, 1H), 4,63-4,45 (м, 5H), 4,27 (т, =8,4 Гц, 2H), 3,82-3,77 (м, 2H), 3,48-3,39 (м, 1H), 2,87-2,76 (м, 3H), 2,50 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 1,94 (т, =10,2 Гц, 2H), 1,83-1,79 (м, 2H), 1,73-1,60 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,918 мин; МС Вычисл.: 434; МС Найдено: 435 [M+H].
Пример 185
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорид (E185)
трет-
К раствору бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (68 мг, 0,12 ммоль) в диоксане (7 мл) добавляли HCl/диоксан (4 M,1 мл) при 0°C. Полученную смесь нагревали до комнатной температуре и перемешивали в течение ночи. Затем, смесь концентрировали. Добавляли EtOAc (5 мл) и затем перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 30 мин. Смесь фильтровали и твердое вещество собирали с получением указанного в заголовке соединения (46 мг, выход 92%) в виде розового твердого вещества.
E185
1
d
6
H ЯМР (300 МГц, DMSO-): δ 9,64 (шир. с, 1H), 9,24 (шир. с, 1H), 8,64 (с, 1H), 8,44 (с, 1H), 7,66 (с, 1H), 6,63 (с, 1H), 4,65 (с, 1H), 4,49-4,46 (м, 2H), 4,05-3,95 (м, 2H), 3,39-3,37 (м, 2H), 3,24-3,06 (м, 3H), 2,74 (с, 3H), 2,45 (с, 3H), 2,13-2,05 (м, 2H), 1,98-1,88 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,001 мин; МС Вычисл.: 378, МС Найдено: 379 [M+H].
Пример 186
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-метилпиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (E186)
3
2
3
2
в
К смеси 1-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (90 мг, 0,24 ммоль) и HCHO (37%, 0,5 мл) в метаноле (10 мл) добавляли NaBH(OAc)(151 мг, 0,714 ммоль). Затем, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов в атмосфере N. Смесь концентрировали вакууме. Остаток очищали при помощи колонки С18 с использованием CHCN/HO (30%-60%) с получением целевого продукта (25,7 мг, выход 28%) в виде белого твердого вещества.
E186
1
3
H ЯМР (300 Гц, CDOD): δ 8,78 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,58 (с, 1H), 4,77-4,65 (м, 1H), 4,42-4,29 (м, 2H), 4,01-3,84 (м, 2H), 3,16-2,99 (м, 2H), 2,94-2,83 (м, 1H), 2,57 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 2,35 (с, 3H), 2,29-2,14 (м, 2H), 1,99-1,81 (м, 4H).
3
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин, чистота составляет >95%, Rt=2,898 мин; МС Вычисл.: 392, МС Найдено: 393 (M+H).
Пример 187
(S)-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E187)
трет-
2
3
4
В раствор (S)-бутил 4-(1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (50 мг, 0,096 ммоль) в MeOH (5 мл) добавляли конц. HCl (2 мл) по каплям при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в NaCO (насыщ., 50 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Соединение лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения (25 мг, выход 63%) в виде белого твердого вещества.
E187
1
3
H ЯМР (CDCl, 300 МГц): δ 8,78 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,34-4,27 (м, 2H), 4,09-4,04 (с, 1H), 3,82-3,63 (м, 4H), 3,31-3,26 (м, 2H), 3,16-3,07 (м, 1H), 3,01-2,80 (м, 4H), 2,64 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 1,95-1,80 (м, 4H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,078 мин; МС Вычисл.: 422, МС Найдено: 423 [M+H].
Пример 188
(R)-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E188)
трет-
2
3
4
Раствор бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-((2R)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилат (52 мг, 0,086 ммоль) в MeOH (5 мл) добавляли конц. HCl (1 мл) по каплям при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в NaCO (насыщ., 50 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали. Соединение лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения (23 мг, выход 64%) в виде белого твердого вещества.
E188
1
3
H ЯМР (CDCl, 300 МГц): δ 8,78 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,34-4,26 (м, 2H), 4,09-4,03 (с, 1H), 3,81-3,64 (м, 4H), 3,32-3,28 (м, 2H), 3,16-3,07 (м, 1H), 3,02-2,81 (м, 4H), 2,64 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 1,94-1,84 (м, 4H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,081 мин; МС Вычисл.: 422, МС Найдено: 423 [M+H].
Пример 189
(R)-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E189)
3
3
2
4
2
2
3
К раствору (R)-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорида (42 мг, 0,09 ммоль) в метаноле (0,5 мл) и 1,2-дихлорэтане (8 мл) добавляли оксетан-3-он (0,2 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN (28 мг, 0,44 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К смеси добавляли насыщ. NaHCO(15 мл) и перемешивали в течение 10 минут. DCM (20 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=40:1) с получением указанного в заголовке соединения (10,4 мг, выход 24%) в виде белого твердого вещества.
E189
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,70-4,68 (м, 4H), 4,32-4,22 (м, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,08-4,04 (м, 1H), 3,79-3,73 (м, 1H), 3,70-3,66 (м, 3H), 3,60-3,53 (м, 1H), 3,19-3,09 (м, 1H), 3,01-2,82 (м, 4H), 2,45 (с, 3H), 2,07-1,83 (с, 7H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=3,631 мин; МС Вычисл.: 494; МС Найдено: 495 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH:DEA=50:50:0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=13,077 мин, 99,05% э.и.
Пример 190
(S)-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E190)
3
3
2
4
2
2
3
К раствору (S)-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорида (40 мг, 0,08 ммоль) в метаноле (0,5 мл) и 1,2-дихлорэтане (8 мл) добавляли оксетан-3-он (0,2 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN (27 мг, 0,42 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. К смеси добавляли насыщ. NaHCO(15 мл) и перемешивали в течение 10 минут. DCM (20 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:CHOH=40:1) с получением указанного в заголовке соединения (25,3 мг, выход 61%) в виде белого твердого вещества.
E190
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,70-4,68 (м, 4H), 4,32-4,23 (м, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,09-4,03 (м, 1H), 3,79-3,74 (м, 1H), 3,71-3,66 (м, 3H), 3,58-3,54 (м, 1H), 3,18-3,10 (м, 1H), 3,01-2,81 (м, 4H), 2,45 (с, 3H), 2,06-1,85 (с, 7H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=3,619 мин; МС Вычисл.: 494; МС Найдено: 495 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH:DEA=50:50:0,2, Скорость потока: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=11,534 мин, 100% э.и.
Пример 191
(R)-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E191)
трет-
3
2
3
3
Смесь (R)-бутил 4-(1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (40 мг, 0,074 ммоль) в HCl/CHOH (2 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь разделяли с NaCO (насыщ., 20 мл) и EtOAc (50 мл). Органический раствор концентрировали и очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (12,6 мг, выход 41%) в виде белого твердого вещества.
E191
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,72 (с, 1H), 8,17 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 6,93 (с, 1H), 4,40-4,24 (м, 2H), 4,07-4,00 (м, 4H), 3,70-3,52 (м, 7H), 3,26-3,07 (м, 3H), 2,94-2,85 (м, 1H), 2,51 (с, 3H), 2,17-1,98 (м, 4H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=3,073 мин; МС Вычисл.: 438, МС Найдено: 439 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH:DEA=50:50:0,2, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=14,945 мин, 100% э.и.
Пример 192
(S)-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E192)
трет-
3
2
3
3
Смесь (S)-бутил 4-(1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метоксипиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (60 мг, 0,11 ммоль) в HCl/CHOH (2 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь разделяли с NaCO (насыщ., 20 мл) и EtOAc (50 мл). Органический раствор концентрировали и очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (15,5 мг, выход 32%) в виде белого твердого вещества.
E192
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,71 (с, 1H), 8,16 (с, 1H), 7,62 (с, 1H), 6,91 (с, 1H), 4,38-4,23 (м, 2H), 4,07-4,01 (м, 4H), 3,70-3,54 (м, 7H), 3,25-3,06 (м, 3H), 2,93-2,84 (м, 1H), 2,51 (с, 3H), 2,16-1,93 (м, 4H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=3,074 мин; МС Вычисл.: 438, МС Найдено: 439 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH:DEA=50:50:0,2, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=18,530 мин, 100% э.и.
Пример 193
4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E193)
3
3
2
4
К раствору 4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорида (91 мг, 0,21 ммоль) в метаноле (0,5 мл) добавляли 1,2-дихлорэтан (8 мл) и оксетан-3-он (0,5 мл) при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN (68 мг, 1,1 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли насыщ.NaHCO(20 мл) и перемешивали в течение 10 минут. DCM (20 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EA=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (33,1 мг, выход 35%) в виде белого твердого вещества.
E193
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,73-4,71 (м, 4H), 3,82-3,80 (м, 4H), 3,73-3,70 (м, 4H), 3,58-3,55 (м, 1H), 2,99-2,96 (м, 2H), 2,88-2,80 (м, 1H), 2,65 (с, 3H), 2,45 (с, 3H), 2,07-1,94 (м, 6H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=4,297 мин; МС Вычисл.: 448; МС Найдено: 449 (M+H).
Пример 194
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E194)
3
3
2
4
2
2
К раствору 4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорида (52 мг, 0,11 ммоль) в метаноле (0,5 мл) добавляли 1,2-дихлорэтан (8 мл) и оксетан-3-он (0,5 мл) при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN (35 мг, 0,55 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли насыщ. NaHCO(20 мл) и перемешивали в течение 10 минут. DCM (20 мл×3) добавляли для экстракции желаемого соединения. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:EtOAc=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (25,5 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества.
E194
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,77 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,70-4,69 (м, 4H), 4,15 (с, 3H), 3,81-3,79 (м, 4H), 3,73-3,71 (м, 4H), 3,57-3,54 (м, 1H), 2,95-2,92 (м, 2H), 2,87-2,82 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,05-1,86 (м, 6H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=4,287 мин; МС Вычисл.: 464; МС Найдено: 465 (M+H).
Пример 195
(R)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (E195)
2
2
3
2
3
2
4
К раствору (R)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолин гидрохлорида (100 мг неочищенного продукта, 0,096 ммоль) в ClCHCHCl (4 мл) и MeOH (0,5 мл) добавляли оксетан-3-он (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем добавляли NaBHCN (18 мг, 0,23 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Полученную смесь выливали в насыщ. NaCO (60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (32 мг, выход 70%) в виде белого твердого вещества.
E195
1
3
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,77 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,70-4,68 (м, 4H), 4,40-4,20 (м, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,05-3,96 (м, 1H), 3,73-3,51 (м, 1H), 3,18-3,04 (м, 1H), 2,98-2,70 (м, 4H), 2,46 (с, 3H), 2,10-1,82 (м, 6H), 1,26 (д, 6,3 Гц, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,793 мин; МС Вычисл.: 478, МС Найдено: 479 [M+H].
Пример 196
(S)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолин
(E196)
2
2
3
2
3
2
4
К раствору (S)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолин гидрохлорида (60 мг, 0,096 ммоль) в ClCHCHCl (4 мл) и MeOH (0,5 мл) добавляли оксетан-3-он (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN (18 мг, 0,23 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Полученную смесь выливали в насыщ. NaCO (60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (23 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества.
E196
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,77 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,83 (с, 1H), 4,70-4,68 (м, 4H), 4,47-4,19 (м, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,04-3,96 (м, 1H), 3,73-3,48 (м, 3H), 3,17-2,69 (м, 5H), 2,46 (с, 3H), 2,08-1,80 (м, 6H), 1,26 (д, =6,0 Гц, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,798 мин; МС Вычисл.: 478, МС Найдено: 479 [M+H].
Пример 197
(R)-2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E197)
2
2
3
2
3
2
4
К раствору (R)-2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорида (140 мг, 0,198 ммоль) в ClCHCHCl (5 мл) и MeOH (0,6 мл) добавляли оксетан-3-он (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN (38 мг, 0,59 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Полученную смесь выливали в насыщ. NaCO (60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (EtOAc) с получением указанного в заголовке соединения (43 мг, выход 47%) в виде белого твердого вещества.
E197
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,94 (с, 1H), 4,73-4,71 (м, 4H), 4,37-4,24 (м, 2H), 4,06-3,97 (м, 1H), 3,73-3,52 (м, 3H), 3,13-2,69 (м, 5H), 2,65 (с, 3H), 2,46 (с, 3H), 2,08-1,90 (м, 6H), 1,28 (д, =6,0 Гц, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,195 мин; МС Вычисл.: 462, МС Найдено: 463 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=70:30, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=12,265 мин, 99,1% э.и.
Пример 198
(S)-2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E198)
2
2
3
2
3
2
4
К раствору (S)-2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорида (120 мг неочищенного продукта, 0,154 ммоль) в ClCHCHCl (5 мл) и MeOH (0,6 мл) добавляли оксетан-3-он (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN (29 мг, 0,46 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Полученную смесь выливали в насыщ. NaCO (60 мл) и экстрагировали EtOAc (60 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (EtOAc) с получением указанного в заголовке соединения (51 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества.
E198
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,93 (с, 1H), 4,73-4,71 (м, 4H), 4,36-4,24 (м, 2H), 4,06-3,96 (м, 1H), 3,74-3,51 (м, 3H), 3,13-2,68 (м, 5H), 2,65 (с, 3H), 2,45 (с, 3H), 2,10-1,90 (м, 6H), 1,28 (д, =6,3 Гц, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,194 мин; МС Вычисл.: 462, МС Найдено: 463 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IE 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex:EtOH=70:30, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=11,245 мин, 99,3% э.и.
Пример 199
4-(2-этил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (E199)
3
2
2
3
2
3
2
4
К раствору 4-(2-этил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин гидрохлорида (30 мг, 0,05 ммоль) в CHOH (0,5 мл) добавляли ClCHCHCl (8 мл) и оксетан-3-он (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем добавляли NaBHCN (17 мг, 0,27 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси добавляли насыщ. NaCO (15 мл) и экстрагировали DCM (20 мл×3). Органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:EtOAc=4:1) с получением указанного в заголовке соединения (14,2 мг, выход 58%) в виде белого твердого вещества.
E199
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,86 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,73-4,71 (м, 4H), 3,83-3,79 (м, 4H), 3,76-3,69 (м, 4H), 3,61-3,56 (м, 1H), 3,00-2,82 (м, 5H), 2,46 (с, 3H), 2,07-1,90 (м, 6H), 1,47 (т, =7,2 Гц, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,847 мин, чистота составляет 97,30%; МС Вычисл.: 462, МС Найдено: 463 [M+H].
Пример 200
(S)-(4-(2-этил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E200)
2
2
3
3
К раствору (S)-(4-(2-этил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорида (40 мг, 0,085 ммоль) в ClCHCHCl (5 мл) и CHOH (0,3 мл) добавляли оксетан-3-он (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляли NaBHCN (22 мг, 0,34 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в воду (10 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл). Органический слой очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=13:1) с получением указанного в заголовке соединения (16,6 мг, выход 40%) в виде белого твердого вещества.
E200
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,85 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 4,72-4,70 (м, 4H), 4,34-4,30 (м, 2H), 4,09-4,05 (м, 1H), 3,81-3,70 (м, 4H), 3,59-3,55 (м, 1H), 3,16-3,07 (м, 1H), 2,99-2,82 (м, 6H), 2,45 (с, 3H), 2,07-1,93 (м, 7H), 1,49-1,45 (м, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,976 мин, чистота составляет >95%, МС Вычисл.: 492, МС Найдено: 493 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:IPA=55:45, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T =30°C. Rt=19,492 мин, 100% э.и.
Пример 201
(R)-(4-(2-этил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E201)
2
2
3
3
2
3
2
4
К раствору (R)-(4-(2-этил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол гидрохлорида (20 мг, 0,04 ммоль) в ClCHCHCl (6 мл) и CHOH (0,5 мл) добавляли оксетан-3-он (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN (11 мг, 0,17 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси добавляли насыщ.NaCO(20 мл) и экстрагировали DCM (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:MeOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (9,6 мг, выход 65%) в виде белого твердого вещества.
E201
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,85 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 4,72-4,70 (м, 4H), 4,35-4,30 (м, 2H), 4,10-4,05 (м, 1H), 3,81-3,67 (м, 4H), 3,61-3,54 (м, 1H), 3,16-3,07 (м, 1H), 2,99-2,82 (м, 6H), 2,46 (с, 3H), 2,08-1,93 (м, 7H), 1,47 (т,=7,5 Гц, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,971 мин, чистота составляет >95%; МС Вычисл.: 492, МС Найдено: 493 [M+H].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:IPA=55:45, Скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T =30°C. Rt=16,800 мин, 100% э.и.
Пример 202
(R)-2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (HCl соль) (E202)
трет-
К раствору (R)-бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (96 мг, 0,19 ммоль) в диоксане (6 мл) добавляли HCl/диоксан (5 M, 6 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Полученную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (38,6 мг, выход 46%) в виде желтого твердого вещества.
E202
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,50 (с, 1H), 8,34 (с, 1H), 7,72 (с, 1H), 7,35 (с, 1H), 4,39-4,24 (м, 2H), 4,12-4,07 (м, 1H), 3,80-3,72 (м, 2H), 3,60-3,56 (м, 2H), 3,43-3,35 (м, 2H), 3,27-3,22 (м, 2H), 3,09-3,01 (м, 1H), 2,84 (с, 3H), 2,54 (с, 3H), 2,22-2,10 (м, 4H), 1,29 (д, =6,0 Гц,3H).
3
3
+
ЖХ-МС: подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,340 мин, чистота составляет >95%; МС Вычисл.: 406, МС Найдено: 407 [M+H].
Пример 203
(S)-2-метил-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (соль HCl) (E203)
трет-
К раствору (S)-бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (73 мг, 0,14 ммоль) в диоксане (6 мл) добавляли HCl/диоксан (5 M, 6 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Полученную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (14,6 мг, выход 23%) в виде желтого твердого вещества.
E203
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,51 (с, 1H), 8,38 (с, 1H), 7,72 (с, 1H), 7,35 (с, 1H), 4,39-4,24 (м, 2H), 4,12-4,06 (м, 1H), 3,78-3,71 (м, 2H), 3,60-3,56 (м, 2H), 3,43-3,34 (м, 2H), 3,27-3,21 (м, 2H), 3,07-2,99 (м, 1H), 2,83 (с, 3H), 2,54 (с, 3H), 2,17-2,10 (м, 4H), 1,29 (д, =6,0 Гц,3H).
3
3
+
ЖХ-МС: подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,341 мин, чистота составляет >95%; МС Вычисл.: 406, МС Найдено: 407 [M+H].
Пример 204
4-(2-метил-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (HCl salt) (E204)
трет-
Смесь бутил 4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (80 мг, 0,16 ммоль) в HCl/диоксане (5 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (68 мг, выход 97%) в виде белого твердого вещества.
E204
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,45 (с, 1H), 8,39 (с, 1H), 7,72 (с, 1H), 7,32 (с, 1H), 3,89 (с, 8H), 3,60-3,56 (м, 2H), 3,40-3,21 (м, 3H), 2,84 (с, 3H), 2,54 (с, 3H), 2,21-2,06 (м, 4H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,140 мин, чистота составляет >95%; МС Вычисл.: 392; МС Найдено: 393 [M+H].
Пример 205
4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин (соль HCl) (E205)
трет-
Смесь бутил 4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (80 мг, 0,14 ммоль)в HCl/диоксане (5 M, 10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (58 мг, выход 94%) в виде белого твердого вещества.
E205
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,49 (с, 1H), 8,29 (с, 1H), 7,68 (с, 1H), 7,01 (с, 1H), 4,24 (с, 3H), 3,82-3,80 (м, 8H), 3,60-3,55 (м, 2H), 3,33-3,21 (м, 3H), 2,53 (с, 3H), 2,15-2,03 (м, 4H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,413 мин, чистота составляет >95%; МС Вычисл.: 408, МС Найдено: 409 [M+H].
Пример 206
(R)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолин (соль TFA) (E205)
трет-
2
2
К раствору (R)-бутил 4-(1-(2-метокси-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (80 мг, 0,15 ммоль) в CHCl(2 мл) добавляли TFA (0,5 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 30°C в течение 2 часов. Полученную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (95 мг, выход 100%) в виде желтого твердого вещества.
E206
1
19
d
J
d
6
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-): δ 8,70 (шир. с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,48 (шир. с, 1H), 8,36 (с, 1H), 7,68 (с, 1H), 6,89 (с, 1H), 4,34-4,19 (м, 2H), 4,01 (с, 3H), 3,96-3,90 (м, 1H), 3,61-3,39 (м, 4H), 3,24-2,94 (м, 4H), 2,76-2,64 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,04-1,94 (м, 2H), 1,90-1,75 (м, 2H), 1,18 (д, =6,0 Гц, 3H). F ЯМР (376 МГц, DMSO-): δ -74,52 (с, 3F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], Rt=3,595 мин, чистота составляет >95%; МС Вычисл.: 422, МС Найдено: 423 [M+H].
Пример 207
(S)-4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-метилморфолин 2,2,2-трифторацетат (E207)
трет-
2
2
К раствору (S)-бутил 4-(1-(2-метокси-6-(2-метилморфолино)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (100 мг, 0,192 ммоль) в CHCl (2 мл) добавляли TFA (0,5 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь нагревали до 30°C и перемешивали в течение 2 часов. Полученную смесь концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (106 мг, выход 100%) в виде желтого твердого вещества.
E207
1
19
3
6
J
d
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,68 (шир. с, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,45 (шир. с, 1H), 8,36 (с, 1H), 7,68 (с, 1H), 6,89 (с, 1H), 4,34-4,18 (м, 2H), 4,01 (с, 3H), 3,97-3,87 (м, 1H), 3,60-3,38 (м, 4H), 3,25-2,95 (м, 4H), 2,76-2,63 (м, 1H), 2,46 (с, 3H), 2,04-1,93 (м, 2H), 1,88-1,74 (м, 2H), 1,18 (д, =6,4 Гц, 3H). F ЯМР (376 МГц, DMSO-): δ -74,45 (с, 3F).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], Rt=3,596 мин, чистота составляет >95%; МС Вычисл.: 422, МС Найдено: 423 [M+H].
Пример 208
(S)-(4-(6-(5-хлор-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E208)
3
4
2
4
2
4
К суспензии 5-хлор-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (50 мг, 0,17 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (57 мг, 0,17 ммоль), CuI (32 мг, 0,17 ммоль) и KPO (72 мг, 0,34 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (48 мг, 0,34 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем реакционную смесь охлаждали и разделяли между NHCl (насыщ., 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (EtOAc:MeOH=25:1) с получением указанного в заголовке соединения (42 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.
E208
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,92 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,75 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,73-4,70 (м, 4H), 4,34-4,27 (м, 2H), 4,10-4,05 (м, 1H), 3,84-3,65 (м, 4H), 3,61-3,51 (м, 1H), 3,18-3,07 (м, 2H), 3,02-2,91 (м, 3H), 2,65 (с, 3H), 2,13-2,00 (м, 5H), 1,96-1,82 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,967 мин; МС Вычисл.: 498, МС Найдено: 499 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak OD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH =70/30, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=7,740 мин, 100% э.и.
Пример 209
(R)-(4-(6-(5-хлор-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол
(E209)
3
4
2
4
2
4
К суспензии 5-хлор-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (50 мг, 0,17 ммоль), (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (57 мг, 0,17 ммоль), CuI (32 мг, 0,17 ммоль) и KPO (72 мг, 0,34 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (48 мг, 0,34 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем, реакционную смесь охлаждали и разделяли между NHCl (насыщ., 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (EtOAc:MeOH=25:1) с получением указанного в заголовке соединения (28 мг, выход 33%) в виде белого твердого вещества.
E209
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,92 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,75 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,73-4,70 (м, 4H), 4,35-4,27 (м, 2H), 4,11-4,06 (м, 1H), 3,82-3,65 (м, 4H), 3,61-3,52 (м, 1H), 3,18-3,08 (м, 2H), 3,00-2,92 (м, 3H), 2,65 (с, 3H), 2,12-2,00 (м, 5H), 1,96-1,81 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,970 мин; МС Вычисл.: 498, МС Найдено: 499 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak OD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH =70/30, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=8,621 мин, 99,24% э.и.
Пример 210
1-(6-(5-хлор-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (E210)
2
3
2
4
К суспензии 5-хлор-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола (34 мг, 0,063 ммоль) в MeOH (5 мл) добавляли TsOH (16 мг, 0,095 ммоль) при комнатной температуре. Полученный раствор перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в насыщ.NaCO (50 мл) и экстрагировали EtOAc (100 мл×2). Органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (26 мг, выход 90%) в виде белого твердого вещества.
E210
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,94 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,75 (с, 1H), 6,61 (с, 1H), 4,90-4,82 (м, 1H), 4,73-4,71 (м, 4H), 4,46-4,40 (м, 2H), 4,06-4,00 (м, 2H), 3,63-3,52 (м, 1H), 3,19-3,09 (м, 1H), 3,02-2,93 (м, 2H), 2,65 (с, 3H), 2,12-2,01 (м, 5H), 1,97-1,83 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,785 мин; МС Вычисл.: 454, МС Найдено: 455[M+H].
Пример 211
(S)-(4-(6-(5-хлор-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E211)
трет-
2
3
4
К раствору (S)-бутил 4-(5-хлор-1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (80 мг, 0,15 ммоль) в MeOH (3 мл) добавляли конц. HCl (1 мл) при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение 7 часов. Затем, добавляли NaCO (насыщ., 20 мл) и смесь перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали EtOAc (20 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (23 мг, выход 35%) в виде белого твердого вещества.
E211
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,92 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,36-4,24 (м, 2H), 4,10-4,03 (м, 1H), 3,82-3,63 (м, 4H), 3,30-3,20 (м, 3H), 3,16-3,06 (м, 1H), 2,99-2,80 (м, 3H), 2,62 (с, 3H), 2,04-1,97 (м, 2H), 1,74-1,63 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], Rt: 3,178 мин, чистота составляет >95%; МС Вычисл.: 442, МС Найдено: 443 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak OD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH/DEA =70/30/0,2, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,433 мин, 100% э.и.
Пример 212
(R)-(4-(6-(5-хлор-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E212)
трет-
2
3
4
К раствору (R)-бутил 4-(5-хлор-1-(6-(2-(гидроксиметил)морфолино)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (74 мг, 0,14 ммоль) в MeOH (3 мл) добавляли конц. HCl (1 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение 7 часов. Затем, добавляли NaCO (насыщ., 20 мл) и смесь перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали EtOAc (20 мл×3). И объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (18 мг, выход 30%) в виде белого твердого вещества.
E212
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,90 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,37-4,24 (м, 2H), 4,11-4,03 (м, 1H), 3,82-3,63 (м, 4H), 3,30-3,20 (м, 3H), 3,17-3,07 (м, 1H), 3,00-2,81 (м, 3H), 2,63 (с, 3H), 2,04-2,00 (м, 2H), 1,73-1,64 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], Rt: 3,179 мин, чистота составляет >95%;; МС Вычисл.: 442, МС Найдено: 443 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak OD-H 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH/DEA =70/30/0,2, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=7,028 мин, 100% э.и.
Пример 213
1-(6-(5-хлор-6-(пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (E213)
трет-
2
3
4
К раствору бутил 4-(5-хлор-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (70 мг, 0,14 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли TFA (1 мл) при комнатной температуре и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и остаток растворяли в DCM (20 мл). Затем, NaCO (насыщ., 10 мл) добавляли к раствору и перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделяли и водный экстрагировали DCM/MeOH=10/1 (20 мл×2). Объединенные органические слои сушили над MgSO и концентрировали. Неочищенный продукт растирали с PE/EtOAc (5 мл, 1/1) и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (15 мг, выход 27%) в виде белого твердого вещества.
E213
1
d
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-): δ 8,87 (с, 1H), 8,38 (с, 1H), 7,98 (с, 1H), 6,55 (с, 1H), 4,65-4,59 (м, 1H), 4,32-4,28 (м, 2H), 3,84-3,80 (м, 2H), 3,16-3,06 (м, 3H), 2,75-2,62 (м, 2H), 2,51 (с, 3H), 1,86-1,83 (м, 2H), 1,60-1,51 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], Rt=3,142 мин, чистота 94,25% (254 нм); МС Вычисл.: 398, МС Найдено: 399 [M+H].
Пример 214
(S)-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D214)
3
4
К раствору 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола(100 мг, 0,37 ммоль) и (S)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (113 мг, 0,37 ммоль), KPO (157 мг, 0,74 ммоль), CuI (70 мг, 0,37 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (65 мг, 0,74 ммоль) под Ar. Затем, реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 3 часов. Затем смесь фильтровали и промывали DCM. Фильтрат концентрировали и очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=1:1~EtOAc~DCM:MeOH= 30:1) с получением желтого твердого вещества. Остаток промывали эфиром и концентрировали, сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (59 мг, выход: 35,7%).
D214
1
6
J
J=
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,75 (с, 1H), 8,29 (с, 1H), 7,61(с, 1H), 6,65 (с, 1H), 5,07-5,00 (д, =27,2 Гц, 1H), 4,56-4,50 (м, 4H), 4,45-4,38 (м, 1H), 3,55-3,46 (м, 4H), 2,89-2,81 (м, 3H), 2,53 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 1,96 (с, 4H), 1,85-1,82 (д, 11,6 Гц, 2H), 1,74-1,65 (м, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 96,3%; Rt=4,85 мин; МС Вычисл.: 448, МС Найдено: 449 [M+H].
Пример 215
(R)-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (D215)
3
4
К раствору 5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазола(200 мг, 0,74 ммоль) и (R)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (338 мг, 1,11 ммоль), KPO (314 мг, 1,48 ммоль), CuI(140 мг, 0,74 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляли N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (130 мг, 1,48 ммоль) под Ar. Затем реакционную смесь перемешивали при 100°C в течение 3 часов. Затем смесь фильтровали и промывали DCM. Фильтрат концентрировали и очищали при помощи колонки (PE:EtOAc=1:1~EtOAc~DCM:MeOH= 30:1-25:1) с получением желтого твердого вещества. (56 мг, выход: 17%).
E215
1
6
J
J=
J
J
J=
J
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,76 (с, 1H), 8,30 (с, 1H), 7,61 (с, 1H), 6,66 (с, 1H), 5,09-5,02 (д, =28 Гц, 1H), 4,58-4,55 (т, 6,4 Гц, 2H), 4,51-4,48 (т, =6,0 Гц, 2H), 4,44-4,38 (д,=24 Гц, 1H), 3,63-3,38 (м, 4H), 2,89-2,79 (м, 2H), 2,54 (с, 3H), 2,42 (м, 3H), 2,05-1,93 (м, 4H), 1,85-1,82 (д, 11,6 Гц, 2H), 1,74-1,65 (кв, =11,2 Гц, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин], чистота: 96,3%; Rt=4,85 мин; МС Вычисл.: 448, МС Найдено: 449 [M+H].
Пример 216 и 217
(транс)-4-фтор-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (энантиомер 1, E216) и (транс)-4-фтор-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (энантиомер 2, E217)
Рацемат (транс)-4-фтор-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол(80 мг, 0,12 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ (Chiralpak IC 5 мкм 4,6×150 мм, Фаза: HEP:ETOH (0,1%DEA)=60:40, скорость потока: 0,5 мл/мин, температура: 25°C) с получением (транс)-4-фтор-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (энантиомер 1)(Rt: 2,597 мин, 30 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества и (транс)-4-фтор-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (энантиомер 2) (30 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества.
E216
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,84 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,70 (с, 1H), 5,02-5,15 (д, =10,8 Гц, 1H), 4,72 (д, =6,4 Гц, 4H), 4,56 (с, 1H), 3,93 (с, 1H), 3,78-3,84 (м, 4H), 3,55-3,58 (м, 1H); 2,96-2,99 (м, 2H); 2,83-2,86 (м, 1H), 2,62 (с, 3H); 2,45 (м, 3H); 1,94-2,03 (м, 7H).
E217
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,83 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,70 (с, 1H), 5,02-5,15 (м, 1H), 4,73 (д, =6,0 Гц, 4H), 4,56 (с, 1H), 3,78-3,94 (м, 4H), 3,59 (с, 1H); 2,99-3,01 (м, 2H); 2,85 (с, 1H), 2,63 (с, 3H); 2,45 (с, 3H); 2,17 (с, 1H), 1,95-2,06 (м, 7H).
Пример 218 и 219
(транс)-4-фтор-1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (энантиомер 1, E218) и (транс)-4-фтор-1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (энантиомер 2, E219)
Рацемат (транс)-4-фтор-1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ол (210 мг, 0,43 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ (Chiralpak IC 5 мкм 4,6×150 мм, Фаза: HEP:ETOH (0,1%DEA)=60:40, скорость потока: 0,5 мл/мин, температура: 25°C) с получением (транс)-4-фтор-1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (энантиомер 1, E218)(100 мг, выход 47%) в виде белого твердого вещества и (транс)-4-фтор-1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3-ола (энантиомер 2, E219) (Rt: 6,795 мин, 95 мг, выход 45%) в виде белого твердого вещества.
E218
1
3
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,77 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,63 (с, 1H), 5,04 (д, =50,4 Гц, 1H), 4,69 (д, =6,4 Гц, 4H); 4,65 (д, =6,4 Гц, 4H), 4,57-4,58 (м, 1H), 4,15 (с, 3H), 3,83-3,95 (м, 3H), 3,52-3,56 (м, 1H); 2,92-2,95 (м, 3H); 2,45 (с, 3H); 1,91-3,02 (м, 7H).
E219
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,77 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,64 (с, 1H), 5,03-5,16 (д, =50,4 Гц, 1H), 4,69 (д, =6,4 Гц, 1H); 4,58 (с, 1H), 4,16 (с, 3H), 3,84-3,87 (м, 4H), 3,54-3,57 (м, 1H); 2,94 (м, 2H); 2,92 (м, 1H), 2,46 (с, 3H); 1,86-2,04 (м, 7H).
Пример 220
N-метил-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-карбоксамида (E220)
Метиламин (2 мл) добавляли к раствору 1-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-карбоксилата(30 мг, 0,06 ммоль) в MeOH (3 мл). Смесь перемешивали при 60°С в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали и очищали при помощи колонки (DCM/MeOH=50/1) с получением продукта в виде белого твердого вещества (5,1 мг, 6,5%).
E220
1
3
1
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,75 (с, 1H), 8,31 (с, 1H), 8,04, 8,05 (д, J=4,4 Гц, 1H), 7,63 (с, 1H), 6,56 (с, 1H), 4,50~4,59 (м, 4H), 4,06~4,23 (м, 4H), 3,45~3,54 (м, 4H), 2,80~2,90 (м, 3H), 2,67 (с, 3H), 2,54 (с, 3H), 2,43 (с, 3H), 2,38 (м, 1H), 1,68~1,99 (м, 6H).
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA), Rt=1,29 мин; МС Вычисл.: 475,3; МС Найдено: 476,3 [M+H].
Пример 221 и 222
1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1, E221) и 1-(6-(6-(3-фтор-1-метилпиперидин-3-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2, E222)
2
2
2
2
3
2
4
К раствору 6-(3-фтор-1-метилпиперидин-3-ил)-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазола (180 мг, 0,35 ммоль) в CHCl (3,0 мл) добавляли TFA (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,0 ч. Растворитель и большую часть TFA удаляли в вакууме и остаток разбавляли CHCl (10 мл). Полученный раствор промывали насыщенным NaHCO (2 мл) и насыщенным солевым раствором (5 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (MeOH/DCM=1/20) с получения не совсем белого твердого вещества (135 мг, 70% выход). Твердое вещество промывали EtOAc/гексан=1/2 (2×5 мл) с получением чистого продукта в виде не совсем белого твердого вещества (91 мг). Твердое вещество подвергали хиральному разделению при помощи Daicel с получением двух твердых веществ:
E221 (энантиомер 1) (37 мг, 39% выход)
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,96 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,49 (с, 1H), 4,85~4,82 (м, 1H), 4,45~4,40 (м, 2H), 4,11 (с, 3H), 4,04~4,00 (м, 2H), 3,29 (м, 1H), 3,01~2,99 (м, 1H), 2,66 (д, J=4,4 Гц, 3H), 2,50 (м, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,32~2,26 (м, 2H), 2,16~2,05 (м, 4H), 1,77~1,61 (м, 1H).
19
3
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -75,59 (с, CFCOOH), -153,69 (м, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 96,4%, Rt=5,27 мин; МС Вычисл.:426,2, МС Найдено: 427,6 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=3,009 мин; э.и.%=98,6%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak IA, 0,46 см в.д.× 15 см длина, Фаза: MeOH:DEA=100/0,1, F: 1,0 мл/мин, W: 254 нм, T: 25°C.
E222
(энантиомер 2): (41 мг, 43% выход)
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,96 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,49 (с, 1H), 4,85~4,82 (м, 1H), 4,45~4,40 (м, 2H), 4,11 (с, 3H), 4,04~4,00 (м, 2H), 3,29 (м, 1H), 3,01~2,99 (м, 1H), 2,66 (д, J=4,4 Гц, 3H), 2,50 (м, 1H), 2,38 (с, 3H), 2,32~2,26 (м, 2H), 2,16~2,05 (м, 4H), 1,77~1,61 (м, 1H).
19
3
3
F ЯМР (400 МГц, CDCl): δ -75,59 (с, CFCOOH), -153,69 (м, 1F).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 95,0%, Rt=5,28 мин; МС Вычисл.:426,2, МС Найдено: 427,6 (M+H).
Хиральная чистота: Rt=3,490 мин; э.и.%=97,1%.
Метод хиральной хроматографии: Chiralpak IA, 0,46 см в.д.×15 см длина, Фаза: MeOH: DEA=100/0,1, F: 1,0 мл/мин, W: 254 нм, T: 25°C.
Пример 223
(транс)-1-метил-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол (энантиомер 1, E223)
3
2
2
2
2
2
4
2
2
К раствору (транс)-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 1, 70 мг неочищенный, 0,12 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли водный HCHO (37%, 1,2 мл). После того, как смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, добавляли NaBHCN (15 мг, 0,24 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. Смесь концентрировали и остаток разделяли с CHCl (20 мл) и водой (10 мл). Органическую фазу отделяли и водную фазу экстрагировали CHCl (20 мл×2). Объединенную органическую фазу сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:метанол=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (28 мг, выход 54%) в виде белого твердого вещества.
E223
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,02 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,91 (с, 1H), 4,25-4,17 (м, 1H), 3,81-3,78 (м, 4H), 3,70-3,67 (м, 4H), 3,29-3,24 (м, 1H), 2,98-2,95 (м, 1H), 2,87-2,82 (м, 1H), 2,60 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,19-2,01 (м, 3H), 1,88-1,86 (м, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин, Rt=2,817 мин; МС Вычисл.: 422; МС Найдено: 423 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak OD-H 5 мкм 4,6*250 нм, Hex: EtOH: DEA=80: 20: 0,2; поток: 1,0 мл/мин; 230 нм, T=30°C. Rt=5,472 мин, 99,3% э.и.
Пример 224
(транс)-1-метил-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол (энантиомер 2, E224)
3
2
2
2
2
2
4
2
2
К раствору (транс)-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 2, 75 мг неочищенный, 0,12 ммоль) в метаноле (5 мл) добавляли водный HCHO (37%, 1,2 мл). После того, как смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, добавляли NaBHCN (15 мг, 0,24 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. Смесь концентрировали и остаток разделяли с CHCl (20 мл) и водой (10 мл). Органическую фазу отделяли и водную фазу экстрагировали CHCl (20 мл×2). Объединенную органическую фазу сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:метанол=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, выход 57%) в виде белого твердого вещества.
E224
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,02 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,92 (с, 1H), 4,26-4,17 (м, 1H), 3,81-3,78 (м, 4H), 3,70-3,67 (м, 4H), 3,30-3,25 (м, 1H), 2,99-2,96 (м, 1H), 2,88-2,82 (м, 1H), 2,60 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,42 (с, 3H), 2,14-2,00 (м, 3H), 1,89-1,87 (м, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин, Rt=2,814 мин; МС Вычисл.: 422; МС Найдено: 423 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak OD-H 5 мкм 4,6*250 нм, Hex:EtOH:DEA=80:20:0,2; поток: 1,0 мл/мин; 230 нм, T=30°C. Rt=6,777 мин, 99,5% э.и.
Пример 225
(транс)-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)-1-метилпиперидин-3-ол (энантиомер 1, E225)
3
2
4
2
2
К раствору (транс)-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 1, 43 мг, 0,09 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли водный HCHO (37%, 1,2 мл). После того, как смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин добавляли NaBHCN (20 мг, 0,32 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (10 мл×2). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:метанол=9:1) с получением указанного в заголовке соединения (21 мг, выход 51%) в виде белого твердого вещества.
E225
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,79 (с, 1H), 8,01 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,79 (с, 1H), 4,20-4,09 (м, 4H), 3,78-3,69 (м, 8H), 3,26-3,22 (м, 1H), 2,97-2,82 (м, 2H), 2,49 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,16-2,05 (м, 2H), 1,89-1,85 (м, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин, Rt=3,122 мин; МС Вычисл.: 438; МС Найдено: 439 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH:DEA=50:50:0,2; поток: 1,0 мл/мин; 230 нм, T=30°C. Rt=7,547 мин, 99,3% э.и.
Пример 226
(транс)-1-метил-4-(5-метил-1-(2-метил-6-морфолинопиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол (энантиомер 2, E226)
3
2
4
2
2
К раствору (транс)-4-(1-(2-метокси-6-морфолинопиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 2, 62 мг, 0,14 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли водный HCHO (37%, 1,2 мл). После того, как смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, добавляли NaBHCN (20 мг, 0,32 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (10 мл×2). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:метанол=9:1) с получением указанного в заголовке соединения (33 мг, выход 55%) в виде белого твердого вещества.
E226
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,79 (с, 1H), 8,02 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 6,80 (с, 1H), 4,21-4,09 (м, 4H), 3,80-3,77 (м, 4H), 3,71-3,68 (м, 4H), 3,27-3,21 (м, 1H), 2,97-2,81 (м, 2H), 2,48 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 2,16-2,04 (м, 3H), 1,90-1,80 (м, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин, Rt=3,122 мин; МС Вычисл.: 438; МС Найдено: 439 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH:DEA=50:50:0,2; поток: 1,0 мл/мин; 230 нм, T=30°C. Rt=8,986 мин, 95,1% э.и.
Пример 227
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(4-метилморфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1, E227)
2
4
2
Смесь 1-(2-метил-6-(5-метил-6-(морфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 1, 58 мг, 0,12 ммоль), раствора формальдегида (37%, 1 мл) и цианоборгидрида натрия (16 мг, 0,25 ммоль) в метаноле (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением белого твердого вещества. Твердое вещество очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (ACN/HO, 10-95%) с получением указанного в заголовке соединения (25 мг, выход 51%) в виде белого твердого вещества.
E227
1
3
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl+1 drop of CDOD): δ 8,88 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 6,52 (с, 1H), 5,10-5,07 (м, 1H), 4,70-4,67 (м, 1H), 4,35-4,30 (м, 2H), 4,18-4,09 (м, 2H), 3,94-3,91 (м, 2H), 3,26-3,12 (м, 2H), 2,77-2,46 (м, 11H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 90% воды (0,02% NHOAc) и 10% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин, Rt=3,618 мин; МС Вычисл.: 394; МС Найдено: 395 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:IPA:DEA=60:40:0,2, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=4,320 мин, 93,3% э.и.
Пример 228
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(4-метилморфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2, E228)
2
4
2
Смесь 1-(2-метил-6-(5-метил-6-(морфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 2, 110 мг, 0,222 ммоль), раствора формальдегида (37%, 1 мл) и цианоборгидрида натрия (28 мг, 0,44 ммоль) в метаноле (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (50 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (ACN/HO, 10-95%) с получением указанного в заголовке соединения (34 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества.
E228
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,99 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 6,57 (с, 1H), 4,83-4,79 (м, 2H), 4,42-4,36 (м, 2H), 4,13-4,08 (м, 1H), 4,00-3,87 (м, 3H), 2,99-2,96 (м, 1H), 2,82-2,78 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,37 (с, 3H), 2,36-2,18 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN за 6,5 мин), Rt=3,606 мин; МС Вычисл.: 394; МС Найдено: 395 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak IA 5 мкм 4,6*250 нм, Hex:IPA:DEA=60:40:0,2, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=7,182 мин, 99,3% э.и.
Пример 229
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(4-метилморфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1, E229)
2
Смесь 1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(морфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 1, 109 мг, 0,262 ммоль), раствора формальдегида (37%, 1 мл) и цианоборгидрида натрия (33 мг, 0,53 ммоль) в метаноле (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (ACN/HO, 10-95%) с получением указанного в заголовке соединения (33 мг, выход 31%) бледно-желтого твердого вещества.
E229
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 9,05 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 6,45 (с, 1H), 4,86-4,80 (м, 2H), 4,42-4,38 (м, 2H), 4,16 (с, 3H), 4,06-3,90 (м, 4H), 2,99-2,96 (м, 1H), 2,81-2,78 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,33 (с, 3H), 2,20-2,03 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN за 6,5 мин, Rt=3,704 мин; МС Вычисл.: 410; МС Найдено: 411 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak IA 5 мкм 4,6*250 нм, Hex:IPA:DEA=60:40:0,2; поток: 1,0 мл/мин; 230 нм, T=30°C. Rt=4,720 мин, 93,7% э.и.
Пример 230
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(4-метилморфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2, E230)
2
Смесь 1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(морфолин-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол гидрохлорида (энантиомер 2, 150 мг неочищенный, 0,262 ммоль), раствора формальдегида (37%, 1 мл) и цианоборгидрида натрия (33 мг, 0,52 ммоль) в метаноле (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (ACN/HO, 10-95%) с получением указанного в заголовке соединения (56 мг, выход 52%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
E230
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 9,05 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 6,45 (с, 1H), 4,86-4,80 (м, 2H), 4,42-4,38 (м, 2H), 4,16 (с, 3H), 4,06-3,87 (м, 4H), 2,98-2,96 (м, 1H), 2,81-2,78 (м, 1H), 2,47 (с, 3H), 2,33 (с, 3H), 2,23-2,16 (м, 1H), 2,08-2,02 (м, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN за 6,5 мин, Rt=3,695 мин; МС Вычисл.: 410; МС Найдено: 411 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak IA 5 мкм 4,6*250 нм, Hex:IPA:DEA=60:40:0,2; поток: 1,0 мл/мин; 230 нм, T=30°C. Rt=6,565 мин, 99,2% э.и.
Пример 231
1-(6-метокси-4-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-1-ил)пиридин-2-ил)азетидин-3-ол (E231)
3
2
3
К раствору 1-(2-(3-(бензилокси)азетидин-1-ил)-6-метоксипиридин-4-ил)-5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридина (50 мг, 0,093 ммоль) в EtOAc (50 мл) добавляли CHOH (10 мл) и Pd/C (10%, 100 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H из баллона в течение 2 суток. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (DCM:CHOH=15:1) с получением указанного в заголовке соединения (9 мг, выход 22%) в виде белого твердого вещества.
E231
1
3
J=
J=
J
J=
J=
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,04 (с, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,59 (д, 1,2 Гц, 1H), 7,15 (д, 1,5 Гц, 1H), 4,86-4,80 (м, 1H), 4,75 (т, =6,6 Гц, 2H), 4,63 (т, 6,0 Гц, 2H), 4,43-4,38 (м, 2H), 4,03 (дд, 9,0, 4,5 Гц, 2H), 3,95 (с, 3H), 3,53-3,45 (м, 1H), 3,10-3,00 (м, 2H), 2,93-2,90 (м, 2H), 2,47 (с, 3H), 2,31-2,18 (м, 2H), 2,03-1,95 (м, 2H), 1,89-1,84 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота >95%, Rt=3,396 мин; МС Вычисл.: 450, МС Найдено: 451 [M+H].
Пример 232
1-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1, E232)
3
2
3
2
4
4
3
3
4
3
3
К раствору 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (изомер 1, 68 мг, 0,12 ммоль) в CHOH (5 мл) добавляли TsOH (63 мг, 0,37 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли насыщ. KCO (10 мл) и экстрагировали DCM (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 95% воды (0,1% NHHCO) и 5% CHCN до 50% воды (0,1% NHHCO) и 50% CHCN за 20 мин, скорость потока: 20 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (29 мг, выход 50%) в виде белого твердого вещества.
E232
1
19
3
3
J
J=
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 9,01 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,62 (с, 1H), 4,84-4,79 (м, 1H), 4,77-4,71 (м, 4H), 4,42-4,38 (м, 2H), 4,01-3,98 (м, 2H), 3,76-3,73 (м, 1H), 3,43-3,32 (дд,=27,2, 12,8 Гц, 1H), 3,15-3,13 (м, 1H), 3,05-3,02 (м, 1H), 2,64 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,44-2,30 (м, 3H), 2,20 (т, 12,0 Гц, 1H), 2,00-1,96 (м, 1H). F ЯМР (376МГц, CDCl): δ -102,42 (д, =241,8 Гц, 1F), -112,23 (д, =241,8 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02%NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин, чистота составляет >95%, Rt=3,874 мин; МС Вычисл.: 470, МС Найдено: 471 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм; Фаза: Hex:IPA=40:60; F: 1 мл/мин, W: 230 нм; T: 30°C; Rt=6,274 мин, 100% э.и.
Пример 233
1-(6-(6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2, E233)
3
2
3
4
4
3
3
4
3
3
К раствору 6-(3,3-дифтор-1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (изомер 2, 93 мг, 0,16 ммоль) в CHOH (5 мл) добавляли TsOH (85 мг, 0,49 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли насыщ. KCO (10 мл) и экстрагировали DCM (15 мл×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 95% воды (0,1% NHHCO) и 5% CHCN до 50% воды (0,1% NHHCO) и 50% CHCN за 20 мин, Скорость потока: 20 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (32 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества.
E233
1
19
3
3
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 9,01 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,62 (с, 1H), 4,85-4,80 (м, 1H), 4,77-4,71 (м, 4H), 4,44-4,39 (м, 2H), 4,02-3,98 (м, 2H), 3,78-3,73 (м, 1H), 3,43-3,32 (дд, =27,2, 12,8 Гц, 1H), 3,18-3,12 (м, 1H), 3,05-3,02 (м, 1H), 2,64 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,42-2,31 (м, 3H), 2,20 (т, =12,0 Гц, 1H), 1,99-1,95 (м, 1H). F ЯМР (376МГц, CDCl): δ -102,42 (д, =242,5 Гц, 1F), -112,24 (д, =244,0 Гц, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02%NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин, чистота составляет >95%, Rt=3,877 мин; МС Вычисл.: 470, МС Найдено: 471 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak ID 5 мкм 4,6*250 мм; Фаза: Hex:IPA=40:60; F: 1 мл/мин, W: 230 нм; T: 30°C; Rt=11,719 мин, 99,09% э.и.
Пример 234
2-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пиперазин-1-ил)этанол (E234)
3
4
2
2
4
2
3
2
4
К смеси 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (60 мг, 0,28 ммоль), 2-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пиперазин-1-ил)этанола (116 мг, 0,333 ммоль), CuI (53 мг, 0,28 ммоль) и KPO (177 мг, 0,834 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (40 мг, 0,28 ммоль) в атмосфере N. Полученную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 5 часов. После охлаждения смесь разделяли с этилацетатом (20 мл) и водой (20 мл). Затем добавляли гидрат аммиака (30%, 3 мл) и смесь перемешивали в течение 10 минут. Органический слой отделяли и промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над NaSO и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (HCl) с получением указанного в заголовке соединения (45 мг) в виде соли HCl. Соль растворяли в насыщ. растворе KCO (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (5 мл×2). Объединенные органические слои промывали водой (5 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (34 мг, выход 28%) в виде белого твердого вещества.
E234
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,18-4,13 (м, 2H), 3,77-3,74 (м, 4H), 3,69-3,58 (м, 4H), 3,13-3,05 (м, 1H), 2,62-2,56 (м, 9H), 2,47 (с, 3H), 2,04-1,89 (м, 3H), 1,84-1,79 (м, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 30% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота >95%, Rt=3,490 мин; МС Вычисл.: 436, МС Найдено: 437 [M+H].
Пример 235
(3S,4S)-1-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диол (E235)
3
4
2
3
2
в вакууме
Смесь 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (60 мг, 0,28 ммоль), (3S,4S)-1-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)пирролидин-3,4-диола (89 мг, 0,28 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (79 мг, 0,56 ммоль), CuI (106 мг, 0,566 ммоль) и KPO (118 мг, 0,566 ммоль) в толуоле (5 мл) перемешивали при 115°C в течение 3 часов в атмосфере N. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали . Остаток очищали при помощи колонки C18 с использованием CHCN/HO (30%-60%) с получением целевого продукта (20 мг, выход 30%) в виде желтого твердого вещества.
E235
1
3
J
H ЯМР (300 Гц, CDOD): δ 8,61 (с, 1H), 8,35 (с, 1H), 7,67 (с, 1H), 7,13 (с, 1H), 4,35 (д, =3,0 Гц, 2H), 4,14-4,11 (м, 2H), 3,98-3,95 (м, 2H), 3,76-3,64 (м, 4H), 3,33-3,29 (м, 1H), 2,82 (с, 3H), 2,52 (с, 3H), 1,91-1,82 (м, 4H).
3
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин, чистота составляет >95%, Rt=3,353 мин; МС Вычисл.: 409, МС Найдено: 410 (M+H).
Пример 236
1-(2-метокси-6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол (E236)
2
2
3
2
3
2
4
2
2
4
3
3
4
3
3
К раствору 1-(2-метокси-6-(пиперазин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол гидрохлорида (50 мг, 0,11 ммоль) в ClCHCHCl (4 мл) и MeOH (0,5 мл) добавляли оксетан-3-он (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем, добавляли NaBHCN (35 мг, 0,56 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Полученную смесь выливали в насыщ. NaCO(30 мл) и экстрагировали EtOAc (20 мл×2). Объединенные органические растворы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и затем концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (CHCl:MeOH=20:1) и дополнительно очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 65% воды (0,1% NHHCO) и 35% CHCN до 20% воды (0,1% NHHCO) и 80% CHCN за 12 мин, скорость потока: 15 мл/мин) с получением указанного в заголовке соединения (18 мг, выход 35%) в виде белого твердого вещества.
E236
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 4,71-4,64 (м, 4H), 4,15-4,10 (м, 5H), 3,86-3,71 (м, 4H), 3,64-3,57 (м, 2H), 3,55-3,49 (м, 1H), 3,15-3,06 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 2,42-2,40 (м, 4H), 1,95-1,79 (м, 4H).
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,580 мин; МС Вычисл.: 464, МС Найдено: 465 [M+H].
Пример 237
2-((1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ил)окси)этанол (E237)
3
4
2
4
3
3
2
2
2
3
2
4
К раствору 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола (50 мг, 0,23 ммоль), 4-иод-2-метокси-6-(3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)азетидин-1-ил)пиримидина (100 мг, 0,23 ммоль), CuI (44 мг, 0,23 ммоль) и KPO (98 мг, 0,46 ммоль) в сухом толуоле (2 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (65 мг, 0,46 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в течение 3 часов. ТСХ показала, что реакция завершена. Полученную смесь выливали в разбавленный аммиак (10%, 50 мл) и экстрагировали EtOAc (40 мл). Органический раствор промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSOи концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (от 50% воды (0,1% TFA) и 50% CHCN до 15% воды (0,1% TFA) и 85% CHCN в течение 12 мин, скорость потока: 15 мл/мин). Фракции концентрировали и продукт растворяли в CHCl (20 мл). Органический раствор промывали насыщ. CsCO (5 мл×2), сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (15 мг, выход 15%) в виде белого твердого вещества.
E237
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,07 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 6,49 (с, 1H), 4,55-4,46 (м, 1H), 4,38-4,32 (м, 2H), 4,15-4,04 (м, 7H), 3,83-3,74 (м, 2H), 3,66-3,53 (м, 4H), 3,16-3,03 (м, 1H), 2,48 (с, 3H), 1,98-1,59 (м, 5H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,930 мин; МС Вычисл.: 438, МС Найдено: 439 [M+H].
Пример 238
(S)-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E238)
2
3
2
4
К раствору (2S)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолина (180 мг, 0,355 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли TsOH (31 мг, 0,18 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и неочищенный продукт растворяли в DCM (20 мл). Органический раствор промывали насыщ. NaCO(20 мл) и водой (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением желаемого продукта (78 мг, выход 51%) в виде белого твердого вещества.
E238
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,96 (с, 1H),4,37-4,02 (м, 5H), 3,86-3,56 (м, 6H), 3,17-3,02 (м, 2H), 3,01-2,89 (м, 1H), 2,63 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,06-1,88 (м, 2H), 1,87-1,75 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 30% воды (0,02% NHOAc) и 70% CHCN за 6,5 мин), чистота >95%, Rt=4,352 мин; МС Вычисл.: 423, МС Найдено: 424 [M+1].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 нм, Hex:EtOH=60:40, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=6,190 мин, 100% э.и.
Пример 239
(R)-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (E239)
2
3
2
4
К раствору (2R)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолина (165 мг, 0,325 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли TsOH (28 мг, 0,17 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали и неочищенный продукт растворяли в DCM (20 мл). Органический раствор промывали насыщ. NaCO(20 мл) и водой (20 мл), сушили над NaSO и концентрировали с получением желаемого продукта (83 мг, выход 59%) в виде белого твердого вещества.
E239
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,36-4,02 (м, 5H), 3,83-3,57 (м, 6H), 3,19-3,04 (м, 2H), 3,00-2,89 (м, 1H), 2,63 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,05-1,88 (м, 3H), 1,87-1,76 (м, 2H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 30% воды (0,02% NHOAc) и 70% CHCN за 6,5 мин, чистота >95%, Rt=4,346 мин; МС Вычисл.: 423, МС Найдено: 424 [M+1].
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 нм, Hex:EtOH=60:40, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=7,856 мин, 100% э.и.
Пример 240
((2R)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E240)
Смесь 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазола (энантиомер 1, 22 мг, 0,10 ммоль), (2R)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолина (50 мг, 0,12 ммоль), CuI (15 мг. 0,08 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (23 мг, 0,16 ммоль) и фосфата калия (34 мг, 0,16 ммоль) в толуоле (2 мл) дегазировали азотом и перемешивали при 110°C в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в разбавленный раствор аммиака (10%, 30 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (петролейный эфир:EtOAc=4:1) с получением THP-защищенного продукта в виде желтого геля. Гель растворяли в HCl/диоксан (4 M, 2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь непосредственно концентрировали и неочищенный продукт растирали с EtOAc (5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (15 мг, выход 35%) в виде желтого твердого вещества.
E240
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,55 (с, 1H), 8,28 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 7,16 (с, 1H), 4,41-4,28 (м, 2H), 4,11-3,96 (м, 3H), 3,75-3,53 (м, 6H), 3,25-3,09 (м, 3H), 2,69 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,11-2,08 (м, 1H), 1,90-1,81 (м, 3H).
3
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1%TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота >95%, Rt=4,115 мин; МС Вычисл.: 423; МС Найдено: 424 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=70:30, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=7,621 мин, 99,13% э.и.
Пример 241
((2R)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (энантиомер 2, E241)
Смесь 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазола (энантиомер 2, 40 мг, 0,19 ммоль) (энантиомер 2), (2R)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолина (93 мг, 0,22 ммоль), CuI (28 мг. 0,15 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (42 мг, 0,30 ммоль) и фосфата калия (63 мг, 0,30 ммоль) в толуоле (2 мл) дегазировали азотом и затем перемешивали при 110°C в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в разбавленный раствор аммиака (10%, 30 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (петролейный эфир:EtOAc=4:1) с получением THP-защищенного продукта в виде желтого твердого вещества. Твердое вещество растворяли в HCl/диоксан (4 M, 2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь непосредственно концентрировали и неочищенный продукт растирали с EtOAc (5 мл) с получением указанного в заголовке соединения (12 мг, выход 15%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
E241
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,50 (с, 1H), 8,33 (с, 1H), 7,68 (с, 1H), 7,23 (с, 1H), 4,42-4,32 (м, 2H), 4,14-4,08 (м, 1H), 4,00-3,96 (м, 2H), 3,78-3,56 (м, 6H), 3,40-3,36 (м, 1H), 3,25-3,17 (м, 2H), 2,74 (с, 3H), 2,50 (с, 3H), 2,13-2,08 (м, 1H), 1,91-1,77 (м, 3H).
3
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN до 5% воды (0,1%TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота >95%, Rt=4,119 мин; МС Вычисл.: 423; МС Найдено: 424 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=70:30, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=6,797 мин, 97,51% э.и.
Пример 242
((2S)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (энантиомер 1, E242)
Смесь 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазола (22 мг, 0,10 ммоль) (энантиомер 1), (2S)-4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)-2-(((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)метил)морфолина (40 мг, 0,12 ммоль), CuI (15 мг. 0,08 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (23 мг, 0,16 ммоль) и фосфата калия (34 мг, 0,16 ммоль) в толуоле (2 мл) дегазировали азотом и затем перемешивали при 110°C в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выливали в разбавленный раствор аммиака (10%, 30 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (петролейный эфир:EtOAc=3:1) с получением указанного в заголовке соединения (10 мг, выход 24%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
E242
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,77 (с, 1H), 8,11 (с, 1H), 7,56 (с, 1H), 7,00 (с, 1H), 4,42-4,24 (м, 2H), 4,04-3,97 (м, 3H), 3,69-3,44 (м, 6H), 3,24-3,01 (м, 2H), 2,87-2,79 (м, 1H), 2,57 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,18-2,00 (м, 1H), 1,92-1,80 (м, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 80% воды (0,02% NHOAc) и 20% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=4,110 мин; МС Вычисл.: 423; МС Найдено: 424 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=80:20, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=8,950 мин, 99,15% э.и.
Пример 243
((2S)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E243)
Смесь 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазола (22 мг, 0,10 ммоль) (энантиомер 2), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (40 мг, 0,12 ммоль), CuI (15 мг. 0,08 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (23 мг, 0,16 ммоль) и фосфата калия (34 мг, 0,16 ммоль) в толуоле (2 мл) дегазировали азотом и затем перемешивали при 110°C в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь выливали в разбавленный раствор аммиака (10%, 30 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл×2). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (петролейный эфир:EtOAc=2:1) с получением указанного в заголовке соединения (9 мг, выход 21%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
E243
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,77 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,57 (с, 1H), 7,01 (с, 1H), 4,42-4,25 (м, 2H), 4,05-3,97 (м, 3H), 3,70-3,44 (м, 6H), 3,21-3,07 (м, 2H), 2,88-2,79 ((м, 1H), 2,57 (с, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,11-2,00 (м, 2H), 1,92-1,80 (м, 2H).
3
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм*5 мкм; подвижная фаза: от 70% воды (0,1% TFA) и 30% CHCN до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота составляет >95%, Rt=3,320 мин; МС Вычисл.: 423; МС Найдено: 424 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=80:20, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=8,308 мин, 99,01% э.и.
Пример 244
((2R)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E244)
3
4
К раствору 5-метил-6-(тетрагидро-пиран-2-ил)-1H-индазола (61 мг, 0,28 ммоль) (энантиомер 1) и (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (104 мг, 0,311 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (80 мг, 0,56 ммоль), CuI (54 мг, 0,28 ммоль) и KPO (120 мг, 0,564 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C в атмосфере азота в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:1, дважды) и перекристаллизовывали из этанола (8 мл) с получением указанного в заголовке соединения (45 мг, выход 37%) в виде белого твердого вещества.
E244
1
3
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 9,00 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,60 (д, =9,9 Гц, 1H), 4,35-4,20 (м, 3H), 4,11-4,06 (м, 1H), 3,82-3,68 (м, 5H), 3,18-3,08 (м, 1H), 3,00-2,93 (м, 1H), 2,65 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,07-1,88 (м, 3H), 1,83-1,60 (м, 4H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,876 мин; МС Вычисл.: 423, МС Найдено: 424 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IC, Фаза: CO/MeOH=60/40, MeOH (0,2 DEA), скорость потока (CO: 1,799 мл/мин; MeOH (0,2 DEA): 1,2 мл/мин), T=40,1°C], Rt=5,12 мин, 100% э.и.
Пример 245
((2R)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E245)
3
4
К раствору 5-метил-6-(тетрагидро-пиран-2-ил)-1H-индазола (64 мг, 0,30 ммоль) (энантиомер2) и (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (109 мг, 0,326 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (84 мг, 0,592 ммоль), CuI (56 мг, 0,296 ммоль) и KPO (126 мг, 0,592 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C в атмосфере азота в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:1, 4 раза) и перекристаллизовывали из этанола с получением указанного в заголовке соединения (49 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества.
E245
1
3
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,98 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,59 (д, =8,7 Гц, 1H), 4,33-4,26 (м, 2H), 4,20 (д, =11,7 Гц, 1H), 4,09-4,05 (м, 1H), 3,81-3,67 (м, 5H), 3,16-3,07 (м, 1H), 2,98-2,91 (м, 1H), 2,63 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,05-1,76 (м, 4H), 1,72-1,61 (м, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,836 мин; МС Вычисл.: 423, МС Найдено: 424 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IC, Фаза: CO/MeOH=60/40, MeOH (0,2 DEA), скорость потока (CO: 1,799 мл/мин; MeOH (0,2 DEA): 1,2 мл/мин), T=39,9°C], Rt=6,28 мин, 99,53% э.и.
Пример 246
1-(6-(6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1, E246)
2
3
2
4
К суспензии 6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (изомер 1, 60 мг, 0,12 ммоль) в MeOH (6 мл) добавляли TsOH (31 мг, 0,18 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали в течение 3 часов. Добавляли NaCO (насыщ. 50 мл) и смесь перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл×2) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (20 мг, выход 41%) в виде белого твердого вещества.
E246
1
19
3
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,94 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 5,12-4,79 (м, 2H), 4,45-4,39 (м, 2H), 4,23-4,12 (м, 1H), 4,11-3,97 (м, 3H), 3,69-3,36 (м, 3H), 2,62 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,34-2,20 (м, 2H), 2,07-1,97 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -174,96 (с, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,850 мин; МС Вычисл.: 397, МС Найдено: 398 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH =70/30, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=8,224 мин, 100% э.и.
Пример 247
1-(6-(6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2, E247)
2
3
2
4
К суспензии 6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (изомер 2, 100 мг, 0,208 ммоль) в MeOH (8 мл) добавляли TsOH (54 мг, 0,31 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали в течение 3 часов. Добавляли NaCO (насыщ., 50 мл) и смесь перемешивали в течение 15 мин. Водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл×2) и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения (46 мг, выход 56%) в виде белого твердого вещества.
E247
1
19
3
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,94 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,54 (с, 1H), 6,60 (с, 1H), 5,12-4,78 (м, 2H), 4,44-4,39 (м, 2H), 4,24-4,13 (м, 1H), 4,10-3,97 (м, 3H), 3,69-3,37 (м, 3H), 2,62 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,35-2,19 (м, 2H), 2,11-1,96 (м, 1H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -174,97 (с, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,846 мин; МС Вычисл.: 397, МС Найдено: 398 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IC 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH =70/30, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=7,305 мин, 100% э.и.
Пример 248
((2S)-4-(6-(6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E248)
3
4
2
2
4
4
3
К суспензии 6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 1) (60 мг, 0,26 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (87 мг, 0,26 ммоль), CuI (50 мг, 0,26 ммоль) и KPO (110 мг, 0,52 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (74 мг, 0,52 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем реакционную смесь охлаждали и разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Препаративную ВЭЖХ проводили в условиях: Колонка: XBridge C18 5 мкм 19*150 мм; Подвижная фаза: A ацетонитрил; B вода (0,1% NHHCO); способ: 40%-60% A; Скорость потока: 15 мл/мин] и затем лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения (35 мг, выход 30%) в виде белого твердого вещества.
E248
1
19
3
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,93 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 5,09-4,90 (м, 1H), 4,35-4,26 (м, 2H), 4,23-4,15 (м, 1H), 4,09-4,02 (м, 2H), 3,83-3,63 (м, 5H), 3,54 (т, =10,8 Гц, 1H), 3,46-3,38 (м, 1H), 3,15-3,08 (м, 1H), 2,98-2,92 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,34-2,24 (м, 1H), 2,10-1,96 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -174,97 (с, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,066 мин; МС Вычисл.: 441, МС Найдено: 442 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH =70/30, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=5,628 мин, 98,70% э.и.
Пример 249
((2S)-4-(6-(6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E249)
3
4
2
2
4
4
3
К суспензии 6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазола (энантиомер 2) (50 мг, 0,21 ммоль), (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (70 мг, 0,21 ммоль), CuI (40 мг, 0,21 ммоль) и KPO (89 мг, 0,42 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (60 мг, 0,42 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем реакционную смесь охлаждали и разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:1) и затем дополнительно очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Препаративную ВЭЖХ проводили при условиях: Колонка: XBridge C18 5 мкм 19*150 мм; Подвижная фаза: A ацетонитрил; B вода (0,1% NHHCO); Способ: 25-80% A; Скорость потока: 15 мл/мин] и лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения (27 мг, выход 29%) в виде белого твердого вещества.
E249
1
19
3
3
J=
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,93 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 5,08-4,90 (м, 1H), 4,34-4,27 (м, 2H), 4,22-4,15 (м, 1H), 4,09-4,02 (м, 2H), 3,83-3,62 (м, 5H), 3,54 (т, 10,8 Гц, 1H), 3,46-3,38 (м, 1H), 3,15-3,08 (м, 1H), 2,98-2,92 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,33-2,24 (м, 1H), 2,11-1,96 (м, 2H). F ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -174,97 (с, 1H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,068 мин; МС Вычисл.: 441, МС Найдено: 442 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH =70/30, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,660 мин, 100% э.и.
Пример 250
((2R)-4-(6-(6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E250)
3
4
2
2
4
4
3
К суспензии 6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазола (60 мг, 0,26 ммоль) (энантиомер 1) с 18% 6-(4-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол), (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (87 мг, 0,26 ммоль), CuI (50 мг, 0,26 ммоль) и KPO (110 мг, 0,520 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (74 мг, 0,52 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем реакционную смесь охлаждали и разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ [Препаративную ВЭЖХ проводили при условиях: Колонка: XBridge C18 5 мкм 19*150 мм; Подвижная фаза: A ацетонитрил; B вода (0,1% NHHCO); способ: 35-75% A; Скорость потока: 15 мл/мин] и лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения указанного в заголовке соединения (30 мг, выход 26%) в виде белого твердого вещества.
E250
1
19
3
3
J
: H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,93 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 5,08-4,90 (м, 1H), 4,33-4,26 (м, 2H), 4,21-4,16 (м, 1H), 4,10-4,02 (м, 2H), 3,82-3,63 (м, 5H), 3,54 (т, =11,2 Гц, 1H), 3,46-3,38 (м, 1H), 3,15-3,08 (м, 1H), 2,98-2,92 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,32-2,24 (м, 1H), 2,09-1,96 (м, 2H). H ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -174,97 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,068 мин; МС Вычисл.: 441, МС Найдено: 442 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH =70/30, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=5,767 мин, 97,28% э.и.
Пример 251
((2R)-4-(6-(6-(3-Фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E251)
3
4
2
2
4
4
3
К суспензии 6-(3-фтортетрагидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1H-индазола (50 мг, 0,21 ммоль) (энантиомер 2), (R)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (70 мг, 0,21 ммоль), CuI (40 мг, 0,21 ммоль) и KPO (89 мг, 0,42 ммоль) в толуоле (3 мл) добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (60 мг, 0,42 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при 110°C в атмосфере N в течение 3 часов. Затем реакционную смесь охлаждали и разделяли между разбавленным аммиаком (10%, 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над NaSO и концентрировали. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (Препаративную ВЭЖХ проводили в условиях: Колонка: XBridge C18 5 мкм 19*150 мм; Подвижная фаза: A ацетонитрил; B вода (0,1% NHHCO); способ: 40-70% A; Скорость потока: 15 мл/мин) и лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения (24 мг, выход 26%) в виде белого твердого вещества.
E251
1
19
3
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,93 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 5,08-4,90 (м, 1H), 4,32-4,27 (м, 2H), 4,21-4,17 (м, 1H), 4,09-4,02 (м, 2H), 3,81-3,63 (м, 5H), 3,54 (т, =10,8 Гц, 1H), 3,46-3,38 (м, 1H), 3,15-3,08 (м, 1H), 2,98-2,92 (м, 1H), 2,62 (с, 3H), 2,51 (с, 3H), 2,33-2,24 (м, 1H), 2,11-1,96 (м, 2H). H ЯМР (376 МГц, CDCl): δ -174,97 (с, 1F).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=4,066 мин; МС Вычисл.: 441, МС Найдено: 442 [M+H].
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IB 5 мкм 4,6*250 мм, Фаза: Hex/EtOH =70/30, скорость потока: 1 мл/мин, 230 нм, T=30°C], Rt=6,662 мин, 100% э.и.
Пример 252
1-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (соль HCl) (E252)
Стадия 1:
2
4
В 50 мл круглодонный сосуд, наполненный 6-изопропокси-5-метил-1H-индазолом (141 мг, 0,74 ммоль), добавляли иодид меди(I) (141 мг, 0,740 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин (278 мг, 0,740 ммоль), фосфат калия (157 мг, 0,740 ммоль) и толуол (6 мл). Затем, N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (0,117 мл, 0,740 ммоль) добавляли в атмосфере азота. Смесь затем перемешивали при 120°C в течение 2 часов в атмосфере азота. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли EtOAc (40 мл) и воду (20 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (40 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным NaCl (30 мл), сушили над безводным NaSO.Затем смесь выпаривали в вакууме и очищали при помощи колоночной хроматографии с нормальной фазой (EA/PE: 0%-60%) с получением 6-изопропокси-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (50 мг, 0,114 ммоль, 15,44% выход)
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=3,832 мин; МС Вычисл.:438,2 МС Найдено: 438,1 (M+H).
Стадия 2:
В 25 мл круглодонный сосуд, наполненный 6-изопропокси-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазолом (50 мг, 0,114 ммоль), добавляли этанол (2 мл) и концентрированную соляную кислоту (конц.) (1 мл, 32,9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре. Смесь изменилась на мутную. Затем смесь фильтровали и получали 1-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол, гидрохлорид (29 мг, 0,071 ммоль, 61,8% выход) в виде белого порошка.
E252
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=3,051 мин; МС Вычисл.:354,1 МС Найдено: 354,0 (M+H).
1
3
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDOD) ppm 1,46 (д, =5,99 Гц, 6 H) 2,28 (с, 3 H) 2,73 (с, 3 H) 4,19 (д, =7,58 Гц, 2 H) 4,54-4,66 (м, 2 H) 4,70-4,79 (м, 1 H) 4,83 (шир. с., 1 H) 6,88 (с, 1 H) 7,56 (с, 1 H) 8,24 (шир. с., 2 H).
Пример 253
1-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метоксипиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (соль TFA) (E253)
В 25 мл круглодонный сосуд, наполненный 6-изопропокси-1-(2-метокси-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазолом (59 мг, 0,130 ммоль), добавляли этанол (2 мл) и концентрированную соляную кислоту (конц.) (1 мл, 32,9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре. Затем, смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии с обращенной фазой (колонка KP-C18-HS, ACN:H2O(0,5% TFA)=5:95→95:5) с получением желаемого продукта 1-(6-(6-изопропокси-5-метил-1H-индазол-1-ил)-2-метокси-пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол, соль трифторуксусной кислоты (13 мг, 0,026 ммоль, 19,64% выход) в виде белого порошка.
E253
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=3,552 мин; МС Вычисл.:370,2 МС Найдено: 370,1 (M+H).
1
d
J
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-) ppm 1,37 (д, =5,99 Гц, 6 H) 2,22 (с, 3 H) 3,71-3,86 (м, 2 H) 3,99 (с, 3 H) 4,28 (шир.с., 2 H) 4,55-4,73 (м, 2 H) 5,74-5,90 (м, 1 H) 6,42 (с, 1 H) 7,59 (с, 1 H) 8,24 (с, 1 H) 8,28 (с, 1 H).
Пример 254
1-(6-(5-хлор-6-изопропокси-1H-индазол-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (E254)
2
2
2
3
2
4
К раствору 5-хлор-6-изопропокси-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола(32 мг, 0,07 ммоль) в DCM (5 мл) добавляли TFA (0,5 мл) по каплям при 0°C. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Растворитель и большую часть TFA удаляли в вакууме и остаток разбавляли CHCl (20 мл). Полученный раствор промывали насыщенным NaCO (5 мл) и насыщенным солевым раствором (5 мл), сушили над безводным NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Растворитель удаляли в вакууме и остаток очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюировали DCM/MeOH=30:1) с получением продукта с получением продукта (22 мг, выход 84%) в виде белого твердого вещества.
E254
1
J
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, DMSO) δ 8,57 (с, 1H), 8,30 (с, 1H), 7,96 (с, 1H), 6,54 (с, 1H), 5,82 (д, =6,4 Гц, 1H), 4,74 (дт, =12,1, 6,1 Гц, 1H), 4,63 (д, =6,2 Гц, 1H), 4,55-4,12 (м, 2H), 3,82 (дд, =9,1, 4,1 Гц, 2H), 1,43 (д, =6,0 Гц, 6H).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 10 мин, чистота 99,24%, Rt=5,91 мин; МС Вычисл.:373,1, МС Найдено: 374,5 (M+H).
Пример 255
1-(1-(6-(3-Гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-ол (E255)
Стадия 1:
2
4
2
К раствору 6-бром-5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (100 мг, 0,218 ммоль) в THF (10 мл) добавляли пиперидин-4-ол (66,2 мг, 0,655 ммоль), диацетоксипалладий (9,80 мг, 0,044 ммоль), дициклогексил (2',6'-диизопропокси-[1,1'-бифенил]-2-ил)фосфин (RuPhos) (40,7 мг, 0,087 ммоль) и натрий 2-метилпропан-2-олат (0,218 мл, 0,436 ммоль). Смесь перемешивали при 70°C в атмосфере азота в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем к смеси добавляли воду (20 мл) и EtOAc (70 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл×2 раза), сушили над безводным NaSO и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи хроматографии с обращенной фазой (колонка KP-C18-HS 50 г, ACN:HO=5:95→95:5) с получением желаемого продукта 1-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-ол (25 мг, 0,052 ммоль, 23,94% выход) в виде бесцветного геля.
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=2,946 мин; МС Вычисл.: 479,2 МС Найдено: 479,0 (M+H).
Стадия 2:
В 50 мл круглодонный сосуд, наполненный 1-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-олом, (25 мг, 0,052 ммоль) добавляли этанол (2 мл) и концентрированную соляную кислоту (конц.) (0,5 мл, 16,46 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем смесь выпаривали в вакууме и очищали колоночной хроматографией с обращенной фазой (ACN/вода: 0%-95%) с получением 1-(1-(6-(3-гидрокси-азетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-ола (12 мг, 0,027 ммоль, 52,4% выход).
E255
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=2,232 мин; МС Вычисл.: 395,2 МС Найдено: 395,0 (M+H).
1
d
J
J
J
J
J
J
J
J
J
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-) ppm 1,55 (кв, =9,33 Гц, 2 H) 1,84 (д, =10,27 Гц, 2 H) 2,28 (с, 3 H) 2,42 (шир. с., 3 H) 2,67 (т, =10,03 Гц, 2 H) 3,07 (д, =11,98 Гц, 2 H) 3,62 (шир. с., 1 H) 3,74 (дд, =9,05, 4,16 Гц, 2 H) 4,22 (т, =7,89 Гц, 2 H) 4,55 (д, =5,50 Гц, 1 H) 4,66 (д, =3,30 Гц, 1 H) 5,74 (д, =6,36 Гц, 1 H) 6,46 (с, 1 H) 7,52 (с, 1 H) 8,17 (с, 1 H) 8,40 (с, 1 H).
Пример 256
(R)-1-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-ол (соль HCl) (E256)
В 25 мл круглодонный сосуд, наполненный (3R)-1-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-олом (20 мг, 0,043 ммоль), добавляли этанол (2 мл) и концентрированную соляную кислоту (конц.) (1,000 мл, 32,9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре. Смесь изменилась на мутную. Затем смесь фильтровали и получали (R)-1-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-ол, гидрохлорид (16 мг, 0,036 ммоль, 85% выход) в виде желтого порошка.
E256
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=2,065 мин; МС Вычисл.: 381,2 МС Найдено: 381,0 (M+H).
1
d
J
J
4
H ЯМР (400 МГц, Метанол-) ppm 2,29 (шир. с., 1 H) 2,37 (шир. с., 1 H) 2,64 (с, 3 H) 2,77 (с, 3 H) 3,68 (шир. с., 1 H) 3,81 (д, =7,21 Гц, 1 H) 3,94-4,13 (м, 2 H) 4,21 (д, =9,54 Гц, 2 H) 4,54-4,69 (м, 2 H) 4,72-4,86 (м, 2 H) 6,93 (с, 1 H) 7,79 (шир. с., 1 H) 8,41 (с, 1 H) 8,87-9,26 (м, 1 H).
Пример 257
(S)-1-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-ол (соль HCl) (E257)
В 25 мл круглодонный сосуд, наполненный (3S)-1-(5-метил-1-(2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-олом (124 мг, 0,267 ммоль), добавляли этанол (5 мл) и концентрированную соляную кислоту (конц.) (1,000 мл, 32,9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре. Смесь изменилась на мутную. Затем, смесь фильтровали и получали (S)-1-(1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-5-метил-1H-индазол-6-ил)пирролидин-3-ол, гидрохлорид (54 мг, 0,117 ммоль, 43,7% выход) в виде желтого порошка.
E257
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 95% воды (0,1% TFA) и 5% CHCN (0,1% TFA) до 5% воды (0,1% TFA) и 95% CHCN (0,1% TFA) за 5 мин, Rt=2,024 мин; МС Вычисл.: 381,2 МС Найдено: 381,0 (M+H).
1
d
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-) ppm 1,94 (шир. с., 1 H) 2,11 (шир. с., 1 H) 2,45 (шир. с., 3 H) 2,66 (с, 3 H) 3,19 (шир. с., 1 H) 3,41 (шир. с., 1 H) 3,48-3,60 (м, 1 H) 3,71 (шир. с., 1 H) 4,05 (шир. с., 2 H) 4,36-4,55 (м, 3 H) 4,65 (шир. с., 1 H) 6,65 (с, 1 H) 7,58 (шир. с., 1 H) 8,15-8,51 (м, 2 H).
Пример 258
1-(5-хлор-1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-ол (E258)
4
2
4
К раствору 1-(5-хлор-1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-она (95 мг, 0,23 ммоль) в MeOH(10 мл) добавляли NaBH( 17,4 мг, 0,46 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель выпаривали и добавляли воду (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл×3). Объединенный органический слой сушили над NaSO, концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ. Элюент лиофилизировали в течение ночи с получением конечного соединения 1-(5-хлор-1-(6-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2-метилпиримидин-4-ил)-1H-индазол-6-ил)пиперидин-4-ол в TFA форме в виде белого твердого вещества (50 мг, выход 52%).
E258
1
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): δ 8,57 (с, 1H),8,32 (с, 1H), 7,94 (с, 1H), 6,57 (с, 1H), 4,63 (с, 1H), 4,34-4,30 (т, 2H), 3,85-3,83 (т, 2H), 3,70 (с, 1H), 3,30-3,28 (т, 2H),2,86-2,81 (т, 2H), 2,40 (с, 3H), 1,92-1,90 (с, 2H), 1,66-1,61 (т,2H).
19
F ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 74,74(с).
3
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 70% воды (0,1% TFA) и 30% CHCN (0,1% TFA) до 30% воды (0,1% TFA) и 70% CHCN (0,1% TFA) за 10 мин, чистота 99,2%, Rt=4,72 мин. МС Вычисл.:414,8, МС Найдено: 415,6 (M+H).
Пример 259
5-метил-1-(2-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)пиримидин-4-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазол (E259)
2
К раствору 6-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-5-метил-1-(2-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)пиримидин-4-ил)-1H-индазола (42 мг, 0,095 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли палладий (25,2 мг, 0,024 ммоль) на угле (10% масс/масс) и смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Остаток непосредственно очищали с помощью хроматографии с обращенной фазой (ACN:HO =5:95→95:5) с получением 5-метил-1-(2-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)пиримидин-4-ил)-6-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)-1H-индазола, соли трифторуксусной кислоты (4,8 мг, 7,69 мкмоль, 8,12% выход).
E259
+
ЖХМС: (подвижная фаза: 5-95% ацетонитрил), Rt=2,835 мин через 5 мин; МС Вычисл.: 447. МС Найдено: 448,3 (M+1).
1
6
H ЯМР (DMSO-d) d: 8,73 (с, 1H), 8,44 (с, 1H), 7,69 (с, 2H), 4,72-4,85 (м, 4H), 4,44 (шир. с., 1H), 4,02 (д, J=10,5 Гц, 2H), 3,49-3,60 (м, 4H), 3,05-3,20 (м, 2H), 2,98 (шир. с., 2H), 2,70-2,79 (м, 3H), 2,48 (с, 3H), 2,14-2,25 (м, 2H), 1,95-2,13 (м, 2H), 1,66-1,88 (м, 4H).
Пример 260 и 261
1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-3-метилпирролидин-3-ол (энантиомер 1, E260; энантиомер 2, E261)
Рацемат 1-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)-3-метилпирролидин-3-ол (56 мг, 0,12 ммоль) разделяли при помощи хиральной ВЭЖХ (Chiralpak IC 5 мкм 4,6×150 мм, Фаза: HEP:ETOH (0,1%DEA)=60:40, скорость потока: 0,5 мл/мин, температура: 25°C) с получением единственного неизвестного изомера 1 (Rt: 3,062 мин, 23,4 мг, выход 41,7%) в виде белого твердого вещества и единственного неизвестного изомера 2 (Rt: 4,071 мин, 23,6 мг, выход 42,1%) в виде белого твердого вещества.
E260 (энантиомер 1)
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,77 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 6,59 (с, 1H), 4,69 (д, =6,4 Гц, 4H), 4,14 (с, 3H), 3,50-3,76 (м, 5H), 2,92-2,95 (м, 3H); 2,44 (с, 3H); 1,86-2,05 (м, 8H), 1,51 (с, 3H).
3
3
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA) до 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA) за 1 мин, от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA) 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 9 мин]. МС Вычисл.: 478, МС Найдено: 479,3[M+H], Rt=4,832 мин
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 0,46 см в.д.×15 см длина, HEP:ETOH (0,1%DEA)=60:40 (об/об), Скорость потока: 0,5 мл/мин, 254 нм, T=25°C, Rt=3,058 мин, 100% э.и.
E261 (энантиомер 2)
1
3
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,77 (с, 1H), 8,05 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 6,58 (с, 1H), 4,69 (д, =6,0 Гц, 4H), 4,14 (с, 3H), 3,49-3,73 (м, 5H), 2,92-2,95 (м, 3H); 2,45 (с, 3H); 1,86-2,05 (м, 8H), 1,50 (с, 3H).
3
3
3
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) за 1 мин, от 90% воды (0,1% FA) и 10% CHCN (0,1% FA) до 5% воды (0,1% FA) и 95% CHCN (0,1% FA) за 9 мин]. МС Вычисл.: 478, МС Найдено: 479,3[M+H], Rt=5,816 мин
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiralpak AD-H 0,46 см в.д.×15 см длина, HEP:ETOH (0,1%DEA)=60:40 (об/об), Скорость потока: 0,5 мл/мин, 254 нм, T=25°C, Rt=4,001 мин, 100% э.и.
Пример 262, 263, 264 и 265
1-(4-(2-метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанол (диастереоизомер 1, E262; диастереоизомер 2, E263; диастереоизомер 3, E264 и диастереоизомер 4, E265)
1-(4-(2-Метокси-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанол (150 мг, 0,30 ммоль, 98% чистота ЖХМС) разделяли хиральной препаративной ВЭЖХ способом (Колонка:AD-H, размер колонки: 0,46 см в.д.× 15 см длина, вводимый объем: 2 мкл, Подвижная фаза: Hep:EtOH (0,05%DEA)=60:40, Скорость потока: 0,5 мл, длина волны: УФ 205 нм, T=25°C, раствор образца: X мг/мл в ETOH) с получением диастереоизомера 1 в виде белого твердого вещества (12,28 мг, выход 6,6%), диастереоизомера 2 в виде белого твердого вещества (12,88 мг, выход 3,6%), диастереоизомера 3 в виде белого твердого вещества (24,81 г, выход 16,6%), диастереоизомера 4 в виде белого твердого вещества (24,23 мг, выход 16,6%).
E262
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=4,849 мин; МС Вычисл.:508,6; МС Найдено: 509,8 [M+H].
1
3
J
J
J
J
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,75 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,70-4,68 (д, =6,4 Гц, 4H), 4,36-4,26 (м, 2H), 4,14 (с, 3H), 4,05-4,02 (д, =10,8 Гц, 1H), 3,96-3,93 (м, 1H), 3,71-3,66 (т, =10,8 Гц, 1H), 3,57-3,53 (м, 1H), 3,46-3,43 (д, =10,0 Гц, 1H), 3,16-3,10 (м, 1H), 3,07-3,01 (т, =12,0 Гц, 1H), 2,94-2,92 (д, =10,4 Гц, 2H), 2,86-2,82 (м, 1H), 2,45 (с, 3H), 2,11 (с, 1H), 2,04-1,99 (т, =10,4 Гц, 1H), 1,91-1,86 (м, 4H), 1,30-1,28 (д, =6,4 Гц, 3H).
E263
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=4,883 мин; МС Вычисл.: 508,6; МС Найдено: 509,8 [M+H].
1
3
J
J
J
J
J
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,75 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,85 (с, 1H), 4,70-4,68 (д, =6,4 Гц, 4H), 4,36-4,26 (м, 2H), 4,14 (с, 3H), 4,05-4,02 (д, =11,2 Гц, 1H), 3,96-3,93 (м, 1H), 3,71-3,66 (т, =10,8 Гц, 1H), 3,58-3,53 (м, 1H), 3,45-3,43 (д, =9,2 Гц, 1H), 3,16-3,10 (т, =11,6 Гц, 1H), 3,07-3,01 (т, =12,0 Гц, 1H), 2,94-2,92 (д, =10,0 Гц, 2H), 2,86-2,81 (м, 1H), 2,45 (с, 3H), 2,11 (с, 1H), 2,04-1,99 (т, =10,4 Гц, 1H), 1,91-1,86 (м, 4H), 1,30-1,28 (д, =6,4 Гц, 3H).
E264
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=4,682 мин; МС Вычисл.:508,6; МС Найдено: 509,8 [M+H].
1
3
J
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,69-4,68 (д, =6,0 Гц, 4H), 4,31-4,23 (м, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,09-4,06 (д, =10,4 Гц, 1H), 3,79- 3,76 (м, 1H), 3,70-3,65 (т, =11,2 Гц, 1H), 3,56-3,53 (м, 1H), 3,35-3,31 (м, 1H), 3,15-3,09 (т, =11,6 Гц, 1H), 2,94-2,81 (м, 4H), 2,45 (с, 4H), 2,04-1,86 (м, 6H), 129-1,28 (д, =6,4 Гц, 3H).
E265
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt =5,217 мин; МС Вычисл.: 508,6; МС Найдено: 509,8 [M+H].
1
3
J
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,76 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 4,70-4,68 (д, =6,4 Гц, 4H), 4,33-4,22 (м, 2H), 4,15 (с, 3H), 4,09-4,06 (д, =11,2 Гц, 1H), 3,78-3,77 (м, 1H), 3,71-3,65 (т, =11,6 Гц, 1H), 3,57- 3,53 (м, 1H), 3,35-3,31 (м, 1H), 3,15-3,09 (т, =11,6 Гц, 1H), 2,94-2,81 (м, 4H), 2,45 (с, 4H), 2,04-1,83 (м, 6H), 1,29-1,28 (д, =6,0 Гц, 3H).
Пример 266, 267, 268 и 269
1-(4-(2-метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанол (диастереоизомер 1, E266; диастереоизомер 2, E267; диастереоизомер 3, E268; диастереоизомер 4, E269)
1-(4-(2-Метил-6-(5-метил-6-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)этанол (122 мг, 0,25 ммоль, 100% чистота ЖХМС) разделяли хиральной препаративной ВЭЖХ способом (Колонка:AD-H, размер колонки: 0,46 см в.д.× 15 см длина, вводимый объем: 2 мкл, Подвижная фаза: Hep:EtOH(0,05%DEA)=60:40, Скорость потока: 0,5 мл, длина волны: УФ 205 нм, T=25°C, раствор образца: X мг/мл в ETOH) с получением диастереоизомера 1 в виде белого твердого вещества (24,21 мг, выход 25%), диастереоизомера 2 в виде белого твердого вещества (24,48 мг, выход 25%), диастереоизомера 3 в виде белого твердого вещества (24,85 мг, выход 25%), диастереоизомера 4 в виде белого твердого вещества (25,56 мг, выход 25%).
E266
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=6,019 мин; МС Вычисл.: 492,6; МС Найдено: 493,8 [M+H].
1
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 8,80 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,72 (с, 4H), 4,36-4,27 (м, 2H), 4,05-4,02 (д, =11,2 Гц,1H）, 3,94 (м,1H), 3,72-3,67 (т, =10,4 Гц, 1H), 3,61 (с, 1H), 3,46-3,42 (м, 1H), 3,16-2,83 (м, 5H), 2,66 (с, 3H), 2,45 (с, 3H), 2,09-1,97 (м, 7H), 1,31-1,29 (д, =6,0 Гц, 3H).
E267
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=6,052 мин; МС Вычисл.: 492,6; МС Найдено: 493,8 [M+H].
1
J
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 8,79 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,96 (с, 1H), 4,73-4,72 (д, =5,6 Гц, 4H), 4,36-4,33 (д, =13,6 Гц, 1H), 4,30-4,27 (д, =12,8 Гц, 1H), 4,05-4,02 (д, =11,6 Гц, 1H), 3,96-3,94 (м,1H), 3,73-3,67 (м, 1H), 3,59 (с, 1H), 3,46-3,44 (м, 1H), 3,15-2,97 (м, 4H), 2,85 (с, 1H), 2,65 (с, 3H), 2,45 (с, 3H), 2,08-1,96 (м, 7H), 1,31-1,29 (д, =6,0 Гц, 3H).
E268
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt=6,019 мин; МС Вычисл.: 492,6; МС Найдено: 493,7 [M+H].
1
3
J
J
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,82 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,73 (с, 4H), 4,37-4,34 (д, =11,6 Гц, 1H), 4,28-4,25(д, =12,8 Гц, 1H), 4,10-4,07 (д, =11,6 Гц, 1H, 3,82-3,77 (м,1H), 3,71-3,66 (т, =11,6 Гц, 1H), 3,62-3,57 (м, 1H), 3,36-3,34 (м, 1H), 3,11-2,97 (м, 3H), 2,90-2,84 (т, =11,2 Гц, 2H), 2,66 (с, 3H), 2,50 (с, 1H), 2,45 (с, 3H), 2,07-1,91 (м, 6H), 1,30-1,29 (д, =6,0 Гц, 3H).
E269
3
+
ЖХ-МС (подвижная фаза: от 80% воды (0,1% FA) и 20% CHCN (0,1% FA), Rt =5,952 мин; МС Вычисл.: 492,6; МС Найдено: 493,8 [M+H].
1
3
J
J
J
J
J
J
J
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,81 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,72-4,71 (д, =6,4 Гц, 4H), 4,37-4,34 (д, =12,4 Гц, 1H), 4,28-4,25 (д, =12,4 Гц, 1H), 4,10-4,07 (д, =11,6 Гц, 1H), 3,80-3,76 (м,1H), 3,71-3,66 (т, =11,6 Гц, 1H), 3,57-3,56 (м, 1H), 3,36-3,33 (м, 1H), 3,11-3,06 (м, 1H), 2,99-2,97 (д, =7,2 Гц, 2H), 2,90-2,82 (м, 2H), 2,65 (с, 3H), 2,45 (с, 1H), 2,45 (с, 3H), 2,03-1,94 (м, 7H), 1,30-1,29 (д, =6,0 Гц, 3H).
Пример 270
((2S)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 1, E270)
3
4
К раствору 5-метил-6-(тетрагидро-пиран-2-ил)-1H-индазола (энантиомер 1, 66 мг, 0,30 ммоль) и (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (102 мг, 0,30 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (85 мг, 0,60 ммоль), CuI (57 мг, 0,30 ммоль) и KPO (127 мг, 0,60 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C в атмосфере азота в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:1, дважды) и колонки C18 (5-70% ACN в воде) с получением указанного в заголовке соединения (33 мг, выход 39%) в виде коричневого твердого вещества.
E270
1
3
J
J
J
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,98 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 6,95 (с, 1H), 4,58 (д, =11,7 Гц, 1H), 4,29 (т, =12,3 Гц, 2H), 4,20 (д, =12,0 Гц, 1H), 4,07 (д, =13,2 Гц, 1H), 3,80-3,67 (м, 5H), 3,11 (т, =12,3 Гц, 1H), 2,95 (т, =12,6 Гц, 1H), 2,63 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,04-1,84 (м, 3H), 1,82-1,57 (м, 4H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,804 мин; МС Вычисл.: 423, МС Найдено: 424 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IC, Фаза: CO/MeOH=60/40, MeOH (0,2DEA), скорость потока (CO: 1,799 мл/мин; MeOH (0,2DEA): 1,2 мл/мин), T=38,6°C], Rt=5,35 мин, 100% э.и.
Пример 271
((2S)-4-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-2-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанол (диастереоизомер 2, E271)
3
4
К раствору 5-метил-6-(тетрагидро-пиран-2-ил)-1H-индазола (диастереоизомер 2, 66 мг, 0,30 ммоль) и (S)-(4-(6-иод-2-метилпиримидин-4-ил)морфолин-2-ил)метанола (100 мг, 0,33 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (85 мг, 0,60 ммоль), CuI (57 мг, 0,30 ммоль) и KPO (127 мг, 0,60 ммоль). Смесь перемешивали при 110°C в атмосфере азота в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (PE:EtOAc=1:1, 4 раза) и перекристаллизовывали из этанола с получением указанного в заголовке соединения (24 мг, выход 19%) в виде белого твердого вещества.
E271
1
3
J
J
J
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,98 (с, 1H), 8,06 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 6,94 (с, 1H), 4,58 (д, =11,7 Гц, 1H), 4,29-4,17 (м, 3H), 4,05 (д, =12,3 Гц, 1H), 3,75-3,69 (м, 5H), 3,14-3,06 (м, 1H), 2,93 (т, =12,3 Гц, 1H), 2,63 (с, 3H), 2,47 (с, 3H), 2,06-1,76 (м, 4H), 1,74-1,64 (м, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС [подвижная фаза: от 70% воды (0,02% NHOAc) и 30% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин], чистота составляет >95%, Rt=3,838 мин; МС Вычисл.: 423, МС Найдено: 424 [M+H].
2
2
Хиральная ВЭЖХ [Chiralpak IC, Фаза: CO/MeOH=60/40, MeOH (0,2DEA), скорость потока (CO: 1,799 мл/мин; MeOH (0,2DEA): 1,2 мл/мин), T=39,2°C], Rt=7,08 мин, 99,35% э.и.
Пример 272
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 1, E272)
Смесь 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазола (энантиомер 1, 22 мг, 0,10 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (45 мг, 0,12 ммоль), CuI (15 мг. 0,08 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (23 мг, 0,16 ммоль) и фосфата калия (34 мг, 0,16 ммоль) в толуоле (2 мл) дегазировали азотом и затем перемешивали при 110°C в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь выливали в разбавленный раствор аммиака (10%, 50 мл) и EtOAc (50 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (петролейный эфир:EtOAc=4:1) с получением бледно-желтого твердого вещества. Твердое вещество растворяли в HCl/диоксане (4 M, 2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь непосредственно концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (12 мг, выход 32%) в виде белого твердого вещества.
E272
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,68 (с, 1H), 8,31 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 6,87 (с, 1H), 4,94-4,85 (м, 1H), 4,65-4,60 (м, 2H), 4,21-4,17 (м, 2H), 4,02-3,95 (м, 2H), 3,65-3,48 (м, 2H), 3,24-3,21 (м, 1H), 2,76 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,11-2,08 (м, 1H), 1,88-1,79 (м, 3H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм*5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота >95%, Rt=4,163 мин; МС Вычисл.: 379; МС Найдено: 380 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=70:30, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=5,792 мин, 100% э.и.
Пример 273
1-(2-метил-6-(5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазол-1-ил)пиримидин-4-ил)азетидин-3-ол (энантиомер 2, E273)
Смесь 5-метил-6-(тетрагидро-2H-пиран-3-ил)-1H-индазола (энантиомер 2, 22 мг, 0,10 ммоль), 4-иод-2-метил-6-(3-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)азетидин-1-ил)пиримидина (45 мг, 0,12 ммоль), CuI (15 мг. 0,08 ммоль), N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамина (23 мг, 0,16 ммоль) и фосфата калия (34 мг, 0,16 ммоль) в толуоле (2 мл) дегазировали азотом и затем перемешивали при 110°C в течение 3 часов. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь выливали в разбавленный раствор аммиака (10%, 30 мл) и EtOAc (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили и концентрировали. Остаток очищали при помощи препаративной ТСХ (петролейный эфир:EtOAc=4:1) с получением THP-защищенного продукта в виде желтого геля. Гель растворяли в HCl/диоксане (4 M, 2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь непосредственно концентрировали и неочищенный продукт растирали с EtOAc (10 мл) с получением указанного в заголовке соединения (11 мг, выход 29%) в виде белого твердого вещества.
E273
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8,68 (с, 1H), 8,31 (с, 1H), 7,64 (с, 1H), 6,86 (с, 1H), 4,93-4,91 (м, 1H), 4,65-4,58 (м, 2H), 4,20-4,16 (м, 2H), 4,04-3,96 (м, 2H), 3,22-3,19 (м, 1H), 2,76 (с, 3H), 2,49 (с, 3H), 2,08-1,78 (м, 4H).
4
3
4
3
+
ЖХ-МС (XB-C18, ¢4,6*50 мм* 5 мкм; подвижная фаза: от 95% воды (0,02% NHOAc) и 5% CHCN до 5% воды (0,02% NHOAc) и 95% CHCN за 6,5 мин), чистота >95%, Rt=4,164 мин; МС Вычисл.: 379; МС Найдено: 380 (M+H).
Условие хиральной ВЭЖХ: Chiral pak IA 5 мкм 4,6*250 мм, Hex:EtOH=70:30, поток: 1,0 мл/мин, 230 нм, T=30°C. Rt=7,300 мин, 98,28% э.и.
F. Биологические данные
Как указано выше, соединения по настоящему изобретению являются ингибиторами киназы LRRK2 и являются пригодными для лечения заболеваний, опосредованных LRRK2. Биологическую активность соединений по настоящему изобретению можно определить с использованием любого подходящего анализа для определения активности соединения-кандидата в качестве ингибитора киназы LRRK2, а также тканей и моделей in vivo.
1) Масс-спектрометрический анализ ингибирования усеченного G2019 LRRK2 человека (1326-2527)
Получение 6His-Tev-LRRK2 (1326-2527)
Spodoptera frugiperda
LRRK2 кДНК кодирующие остатки 1326-2527 были получены от Университета Данди (Dundee University) (описанный в M. Jaleel et al., 2007, Biochem J, 405: 407-417). Этот фрагмент гена субклонировали в pFB-HTb (Invitrogen) с использованием сайтов рестрикции BamHI и NotI. Плазмиду LRRK2 рекомбинировали в бакуловирусный геном в соответствии с протоколом BAC-to-BAC, описанным Invitrogen. Трансфекцию в клетки насекомых  (Sf9) проводили с использованием Cellfectin (Invitrogen) в соответствии с протоколом производителя для создания бакуловирусов P1 и P2.
Клетки Sf9 выращивали в среде для роста HyClone SFX (Thermo Scientific) при 27°C, 80 об/мин в колбе для встряхивания до достаточного объема для инокуляции биореактора. Клетки выращивали в 20-литровом рабочем объеме биореактора Wave (GE Healthcare) при 27°С, 50% растворенного кислорода и скорости перемешивания 22 качания в минуту, 10-градусный угол качания, 200 мкл/мин воздуха с концентрацией клеток приблизительно 6xe6 клеток/мл. Клетки инфицировали P2 Бакуловирусом при множественности инфекции (MOI) 3. Культивирование продолжали в течение 48-часовой фазы экспрессии. Зараженные клетки удаляли из среды роста центрифугированием при 2500 g с использованием центрифуги Sorvall RC 3C Plus при 2500 g в течение 20 мин. Клеточный осадок немедленно замораживали и затем поставляли для очистки.
260 г клеточного осадка оставляли для оттаивания на водяной бане при 27°С с 800 мл буфера для лизиса/буфера A (50 мм Tris-HCl, рН 8,5, 300 мМ NaCl, 1 мм DTT, 10% глицерина, 1 мл/л Calbiochem полный коктейль ингибитора протеазы и бензоназа (50 мкл/800 мл)) до того, как он подвергся гомогенизации на льду, используя 20 ударов на 100 мл. Суспензию помещали на лед и обрабатывали ультразвуком при 50% амплитуде в течение 3 мин 10 сек вкл/выкл с помощью ¾ʺ датчика. Затем суспензию центрифугировали при 100000 g в течение 90 мин при 4°С.
Лизат (700 мл) декантировали из нерастворимого осадка и подвергали взаимодействию в течение 3 часов при 4°С с 10 мл His связующего Ni-NTA смолы путем концевого смешивания. Смолу извлекали центрифугированием, 3000g, 5 мин при 4°С и упаковывали в колонку XK16. Затем колонку промывали 10 объемами колонки буфера A, 10 объемами колонки буфера B (буфер A+1M NaCl) и 10 объемами колонки буфера C (буфер A+20 мМ имидазол). Затем колонку элюировали 15 объемами колонки буфера D (буфер A+300 мМ имидазол), собирали 2 мл фракции. Все промывки и элюирование проводили при 4 мл/мин.
Фракции, идентифицированные SDS-PAGE как содержащие интересующий белок, были объединены и загружены непосредственно на колонку размером 320 мл SEC Superdex 200pg, которая была предварительно уравновешена буфером E (50 мм Tris-HCl pH 8,5, 300 мM NaCl, 10% глицерин, 1 мM DTT). Колонку загружали и элюировали 1,2 объемами колонки E при 2 мл/мин, собирая 2 мл фракции.
Фракции, идентифицированные SDS-PAGE как содержащие интересующий белок, были испытаны на активность.
Получение LRRKtide для масс-спектрометрического анализа ингибирования LRRK2
Пептид 'LRRKtide' (SEQ ID NO:10) синтезировали следующим образом. Защищенный пептид собирали на твердофазном синтезаторе с использованием предварительно загруженной смолы Ванга и использовали стандартные протоколы Fmoc-синтеза. Неочищенный пептид получали после расщепления из смолы смесью трифторуксусной кислоты (TFA), триизопропилсилана и воды (95:2,5:2,5) в течение 3 ч при комнатной температуре и затем очищали с использованием колонки с обращенной фазой С18 с использованием градиента 0,1%TFA-буферированная вода/ацетонитрил. Полученные фракции анализировали и фракции, которые были >95% чистыми при помощи аналитической ВЭЖХ и давали правильную молекулярную массу (mw) (при помощи масс-спектроскопии MALDiTOF), объединяли и сушили вымораживанием. Конечный материал анализировали с помощью ВЭЖХ и MALDiTOF масс-спектрометрии.
Масс-спектрометрический анализ ингибирования усеченного G2019 LRRK2 человека (1326-2527)
Этот анализ ингибирования богатой лейцином повторной киназы 2 (LRRK2) основан на прямом измерении пептида 'LRRKtide' (LRRKtide: RLGRDKYKT*LRQIRQ и «*» относится к участку фосфорилирования) и фосфорилированного «LRRKtide» с использованием масс-спектрометрического анализа с высокой пропускной способностью RapidFire. Ингибиторы определяли как соединения, которые уменьшают превращение LRRKtide в фосфо-LRRKtide.
Протокол анализа
1. 10 мM тестируемого соединения растворяли в 100% DMSO и серийно разводили 1 к 4. Затем 100 нл этой серии разведений добавляли в 384-луночный, с v-образным дном полипропиленовый планшет, за исключением столбцов 6 и 18. 100 нл DMSO добавляли в колонки 6 и 18 в качестве контрольных лунок. Аналитические разведения дали верхнюю конечную аналитическую концентрацию испытуемого соединения 100 мкМ.
2. 5 мкл «ферментного раствора», содержащего 120 нМ очищенного рекомбинантного 6HIS-Tev-LRRK2 (1326-2527) в аналитическом буфере (50 мм Hepes (pH 7,2), 10 мМ MgCl2, 150 мм NaCl, 5% глицерин, 0,0025% тритон X-100 и 1 мМ DTT) добавляли во все лунки, кроме колонки 18, с использованием диспенсера multidrop combi, получая конечную аналитическую концентрацию 60 нМ фермента LRRK2. 5 мкл аналитического буфера добавляли только в колонку 18 с использованием диспенсера multidrop combi в качестве контроля 100% ингибирование, колонка 6 (фермент плюс DMSO) давала 0% ингибирование. Затем исследуемые планшеты инкубировали в течение 30 минут при комнатной температуре.
3. 5 мкл 'субстратного раствора', содержащего 50 мкМ пептидного субстрата LRRKtide и 40 мкМ ATP, добавляли во все лунки планшета с использованием диспенсера multidrop combi, получая конечную аналитическую концентрацию 25 мкМ LRRKtide и 20 мкМ ATP. Затем исследуемые планшеты инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. (Инкубация может варьироваться в зависимости от скорости и линейности реакции с различными партиями ферментов).
4. 50 мкл 1% муравьиной кислоты в воде лабораторного качества добавляли ко всем лункам для гашения реакции и планшеты центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 минут. Затем исследуемые планшеты анализировали на системе твердофазной экстракции Agilent RapidFire с высокой пропускной способностью, связанной с трехкомпонентным квадрупольным масс-спектрометром AB Sciex API 4000 со следующим режимом:
Режимы RapidFire:
• Высота Sip=2 мм, всасывание=500 мс, время загрузки=3000 мс, время элюирования=3000 мс, уравновешивание =500 мс,
• Скорость потоков: насос 1=1,5 мл/мин, насос 2 1,25 мл/мин насос 3 =0,8 мл/мин
Режимы масс-спектрометра
• Режимы детектирования LRRKtide: Q1 масса 644,8 Да, Q3 масса 638,8, напряжение разделения 76 вольт, энергия столкновения 37 вольт, CXP 34 вольт
• Режимы детектирования фосфо-LRRKtide: Q1 масса 671,4 Да, Q3 масса 638,8, напряжение разделения 76 вольт, энергия столкновения 37 вольт, CXP 34 вольт.
• Использовали картридж C4 и подвижные буферы представляли собой: A (водный) 0,1% муравьиной кислоты в воде B (органический) 0,1% муравьиной кислоты, 80% ацетонитрил, 20% вода
5. Данные анализировали с использованием программного обеспечения ActivityBase (IDBS). Процентное превращение из LRRKtide в фосфо-LRRKtide рассчитывали, используя следующую формулу:
%преобразования=(площадь пика продукта фосфо-LRRKtide/(площадь пика продукта фосфо-LRRKtide+площадь пика субстрата LRRKtide))*100
2) Масс-спектрометрический анализ ингибирования полноразмерного G2019 LRRK2 человека
Культуры клеток насекомых
Клетки насекомых Sf9 (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA) поддерживались при 27°С в SF 900 II SFM в 500-мл стационарных колбах. Клетки поддерживали в фазе экспоненциального роста и субкультивировали дважды в неделю. Для больших объемов клетки выращивали в 2-литровых смесительных колбах (Erlenmeyer, Corning) при перемешивании со скоростью 120 об/мин при 27°С шейка-инкубатора.
Получение плазмид G2019 LRRK2 человека
Праймеры, используемые для ПЦР клонирования:
pHTBV-F:SEQ ID NO:1
LRRK2 wt-F1:SEQ ID NO:2
LRRK2 wt-R1: SEQ ID NO:3
LRRK2 wt-F2: SEQ ID NO:4
LRRK2 wt-R2: SEQ ID NO:5
LRRK2 wt-F3:SEQ ID NO:6
pHTBV-R: SEQ ID NO:7
Праймеры, описанные выше, использовали для амплификации полноразмерного человеческого LRRK2 (аминокислоты от 1-2527) с N-концевым Flag-маркером от BioCat 116313 с использованием высокоточной ПЦР полимеразы KOD-Plus в соответствии с инструкциями производителя (KOD-211, TOYOBO). Продукт ПЦР расщепляли BamHI и KpnI и лигировали в BamHI и KpnI, расщепленные pHTBV1mcs3(BioCat 127555). Последовательность целевого фрагмента была подтверждена секвенированием ДНК. Конструкция BioCat141351 была создана Novoprotein.
Кодирующая последовательность G2019 полноразмерного Flag-LRRK2 представляет собой SEQ ID NО:8.
Транслированная последовательность белка для человеческого G2019 полноразмерного LRRK2 flag-меченного белка представляет собой SEQ ID NО:9.
Получение вируса BacMam
5
Для получения рекомбинантного вируса BacMam клетки SF9 высевали в 6-луночные планшеты для культивирования ткани в количестве 9×10клеток/лунку и оставляли для прикрепления в течение 20 мин. Процедуру трансфекции проводили с использованием AESOP AP5911v2. Вкратце, компетентные клетки DH10Bac (10361-012, Invitrogen) трансформировали с помощью генотипически нормальной плазмиды LRRK2 BacMam человека для получения рекомбинантной бакуловирусной ДНК. Клетки насекомых Sf9 котрансфецировали смесью рекомбинантной бакуловирусной ДНК и целфектина (10362-100, Invitrogen). Через 4 часа инкубации при 27°С трансфекционную среду заменяли средой Sf-900 III SFM, содержащей 5% HI FBS (10100147, Invitrogen). Клетки дополнительно инкубировали в течение 4 дней. Культуральную среду инфицированных клеток, содержащую бакуловирус (вирусный штамм P0), собирали и амплифицировали путем дальнейшего заражения клеток Sf9 при множественности инфекции (MOI) (pfu/клетку) 0,1.
Количественное определение титра вируса BacMam с помощью титра BacPAKRapid Titer
5
Титр вируса, измеренный как бляшкообразующая единица (pfu)/мл, определяли с использованием титровального набора BacPAK Papid Titer Kit (631406, Clontech) в соответствии с протоколом производителя. Клетки Sf9 высевали в 96-луночный планшет с 3×10 клетками на лунку, инкубировали с серийным разведением вирусных штаммов в течение 1 часа при 27°С, в каждую лунку добавляли 50 мкл слой метилцеллюлозы с последующей инкубацией 43-47 ч. Затем клетки фиксировали в 4% параформальдегиде (PFA). После блокирования клеток разбавленной нормальной сывороткой козы, к клеткам добавляли антитело против gp64 мыши. После 30 минут инкубации клетки промывали забуференным фосфатом физиологическим раствором, содержащим 0,1% Triton-X100 (PBST), и инкубировали еще 30 мин с конъюгатом козьи антимышиные антитела/HRP. За этим следовал синий субстрат пероксидазы, который обнаруживает одиночные инфицированные клетки и очаги инфицированных клеток по их темно-синему цвету.
Экспрессия белка
Экспрессия Flag-меченного полноразмерного G2019 LRRK2 человека
2
6
6
Клетки HEK293 6E (BioCat: 120363) инкубировали в инкубаторе с температурой 37°С с увлажненной атмосферой 5% СО на орбитальном шейкере, вращающемся со скоростью 110 об/мин. В день трансдукции жизнеспособность клеток была выше 98%, а плотность клеток находилась в интервале 1×10~1,5×10 клеток/ мл.
6
Клетки HEK293 6E центрифугировали при 1000 об/мин в течение 10 мин и затем клетки ресуспендировали в свежей экспрессирующей среде Freestyle 293 (Invitrogen:12338) с 0,1% F-68 (Invitrogen:24040-032), но без антибиотиков (G418) при плотности 1×10 клеток/ мл.
2
Вирус BacMam с геном Flag-hu LRRK2 (генотипически нормальный) центрифугировали при 40000 g в течение 2 часов, затем ресуспендировали в свежей экспрессирующей среде Freestyle 293. Ресуспендированный вирус добавляли в клетки при MOI 10. Клетки инкубировали в инкубаторе с температурой 37°С с увлажненной атмосферой 5% СО в воздухе на орбитальном шейкере, вращающемся со скоростью 110 об/мин. Культуры собирали приблизительно через 48 часов после трансдукции центрифугированием при 4000 об/мин в течение 20 мин и осадки культуры замораживали для очистки.
Очистка белков
Очистка Flag меченного полноразмерного G2019 LRRK2 человека
Осадок клеток ресуспендировали в 20 мл лизирующего буфера (50 мМ TrisHCl pH 7,5 при 4°С, 500 мМ NaCl, 0,5 мM EDTA, 0,1% TritonX-100, 10% глицерина, свеже добавленный 2 мМ DTT), с ингибиторами протеазы (Roche: 04693132001) и бензоназы (Merck Millipore: 70746-3CN) в рекомендуемой концентрации, предлагаемой поставщиками. Суспензированные клетки лизировали ультразвуком на льду в течение 30 мин (2 сек вкл./4 сек выкл., 20% амплитуды) и центрифугировали при 10000 об/мин в течение 30 минут при 4°C. Супернатант инкубировали с 1 мл на литр клеточной культуры анти-Flag магнитных шариков (Sigma-Aldrich: M8823) при 4°C в течение 3 часов, затем гранулы промывали 5 мл на литр буфера для связывания культуры клеток (50 мм Tris pH7,5@ 4C, 500 мM NaCl, 0,5 мM EDTA, 0,1% TritonX-100, 10% глицерина, свеже добавленный 2 мМ DTT) три раза. Flag-меченные белки LRRK2 элюировали элюирующим буфером (50 мМ Tris pH 7,5 4C, 500 мМ NaCl, 0,5 мМ ЭДТА, 0,1% TritonX-100, 10% глицерина, свеже добавленный 2 мМ DTT, 250 мкг/мл пептида Flag (Sigma-Aldrich:F3290)) при 4°С в течение 2 часов. Пептид Flag удаляли колонками Zeba Spin Desalting Columns, 7K MWCO (Thermo-Fisher:89893) и буфер элюированных белков LRRK2 заменяли на буфер хранения (50 мм Tris pH7,5@4C, 150 мM NaCl, 0,5 мM EDTA, 0,02% Triton X-100, 2 мM DTT и 50% глицерина) с использованием центрифужных ультрафильтров Amicon Ultra Centrifugal Filter Units (100 кД) (Merck: UFC910096). Фракции, содержащие белки LRRK2, объединяли, аликвотировали и хранили при -80°C. Концентрацию белка определяли с помощью анализа белка методом Бредфорда, и чистоту белка анализировали при помощи белковых гелей NuPAG Novex 4-12% Bis-Tris (Invitrogen: NP0322BOX).
Масс-спектрометрический анализ ингибирования полноразмерного G2019 LRRK2 человека
Этот анализ ингибирования богатой лейцином повторной киназы 2 (LRRK2) основан на прямом измерении пептида 'LRRKtide' (LRRKtide: RLGRDKYKT*LRQIRQ и «*» относится к участку фосфорилирования) и фосфорилированного «LRRKtide» с использованием масс-спектрометрического анализа с высокой пропускной способностью RapidFire. Ингибиторы определяли как соединения, которые уменьшают превращение LRRKtide в фосфо-LRRKtide.
Протокол анализа
1. 10 мM тестируемого соединения растворяли в 100% DMSO и серийно разводили 1 к 4. Затем 100 нл этой серии разведений добавляли в 384-луночный, с v-образным дном полипропиленовый планшет, за исключением столбцов 6 и 18. 100 нл DMSO добавляли в колонки 6 и 18 в качестве контрольных лунок. Аналитические разведения дали верхнюю конечную аналитическую концентрацию испытуемого соединения 100 мкМ.
2. 50 мкл 1% муравьиной кислоты в воде лабораторного качества добавляли в колонку 18 с использованием диспенсера multidrop combi, чтобы служить в качестве предварительно фиксированного контроля анализа.
3. 5 мкл 'субстратного раствора', содержащего 50 нM очищенного рекомбинантного полноразмерного Flag-LRRK2 в буфере для анализа (50 мм Hepes (pH 7,2), 10 мM MgCl2, 150 мм NaCl, 5% глицерина, 0,0025% triton X-100 и 1 мM DTT) добавляли во все лунки с использованием диспенсера multidrop combi, получая конечную аналитическую концентрацию 25 нM фермента LRRK2. В результате в колонке 6 (фермент плюс DMSO) дала 0% ингибирования и колонка 18 дала 100% ингибирование (предварительно фиксированный контроль). Затем тестируемые планшеты инкубировали в течение 30 минут при комнатной температуре.
4. 5 мкл 'субстратного раствора', содержащего 50 мкМ пептидного субстрата LRRKtide и 4 мМ ATP, добавляли во все лунки планшета с использованием диспенсера multidrop combi, получая конечную аналитическую концентрацию 25 мкМ LRRKtide и 2 мМ ATP. Затем тестируемые планшеты инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. (Инкубация может варьироваться в зависимости от скорости и линейности реакции с различными партиями ферментов).
5. 50 мкл 1% муравьиной кислоты в воде лабораторного качества добавляли во все лунки (минус колонка 18) для гашения реакции и пластины центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 минут. Затем тестируемые планшеты анализировали на системе твердофазной экстракции Agilent RapidFire с высокой пропускной способностью, связанной с трехкомпонентным квадрупольным масс-спектрометром AB Sciex API 4000 со следующим режимом:
Режимы RapidFire:
• Высота Sip=2 мм, всасывание=500 мс, время загрузки=3000 мс, время элюирования=3000 мс, уравновешивание =500 мс,
• Скорость потоков: насос 1=1,5 мл/мин, насос 2 1,25 мл/мин насос 3 =0,8 мл/мин
Режимы масс-спектрометра
• Режимы детектирования LRRKtide: Q1 масса 644,8 Да, Q3 масса 638,8, напряжение разделения 76 вольт, энергия столкновения 37 вольт, CXP 34 вольт
• Режимы детектирования фосфо-LRRKtide: Q1 масса 671,4 Да, Q3 масса 638,8, напряжение разделения 76 вольт, энергия столкновения 37 вольт, CXP 34 вольт.
• Использовали картридж C4 и подвижные буферы представляли собой: A (водный) 0,1% муравьиной кислоты в воде B (органический) 0,1% муравьиной кислоты, 80% ацетонитрил, 20% вода.
6. Данные анализировали с использованием программного обеспечения ActivityBase software (IDBS). Процентное превращение из LRRKtide в фосфо-LRRKtide рассчитывали, используя следующую формулу:
%преобразования=(площадь пика продукта фосфо-LRRKtide/(площадь пика продукта фосфо-LRRKtide+площадь пика субстрата LRRKtide))*100
3) AlphaScreen анализ рекомбинантной клеточной LRRK2
et al
Для определения активности соединений против активности LRRK2-киназы в клетках использовали наблюдаемую LRRK2-киназа-зависимую модуляцию фосфорилирования LRRK2 Ser 935 (Dzamko ., 2010, Biochem. J. 430:405-413), для разработки количественного иммуноанализа на основе 384-луночного планшета фосфорилирования LRRK2 Ser935 в клеточной линии нейробластомы человека SH-SY5Y, сконструированный для сверхэкспрессии рекомбинантного полноразмерного белка LRRK2.
Вирус BacMam, экспрессирующий полноразмерный рекомбинантный LRRK2, был приобретен у Invitrogen и амплифицирован путем инокуляции клеток SF-9 при MOI 0,3 в течение 4-5 дней в среде SFM Sf-900 III, дополненной 3% фетальной бычьей сывороткой. Зараженные клеточные культуры затем центрифугировали при 2000g в течение 20 минут, титр вируса супернатанта определяли с помощью анализа бляшкообразования анти-gp64 и хранили при 4°С.
et al
Аффинно очищенное поликлональное антитело овцы против фосфо-LRRK2 Ser935 (Dzamko ., 2010, Biochem. J. 430: 405-413) биотинилировали стандартными методами (PerkinElmer). Поликлональное антитело кролика против LRRK2 было приобретено у Novus Biologicals. Набор AlphaScreen Protein A IgG (включая акцепторные и донорные гранулы) был приобретен у Perkin Elmer.
2
Клетки SH-SY5Y выращивали в среде DMEM/F12 с 10% диализованной фетальной бычьей сывороткой и собирали путем обработки 0,5% трипсин-EDTA в течение 5 минут при 37°C с последующим центрифугированием при 1000 об/мин в течение 4 минут. Клеточный осадок ресуспендировали в восстановленной сывороточной среде Opti-MEM (Invitrogen) при 200000 клеток/мл и смешивали с вирусом BacMam LRRK2 при MOI=50. 50 мкл клеточных растворов затем распределяли в каждую лунку 384-луночного планшета и инкубировали при 37°С, 5% СО в течение 24 часов.
2
Серийные разведения тестируемых соединений были получены в восстановленной сывороточной среде Opti-MEM (Invitrogen) и 5,6 мкл переносили из планшета с соединением на планшет с клеточным анализом для достижения максимальной конечной аналитической концентрации 10 мкМ. DMSO использовали в некоторых лунках в качестве контролей. Клетки инкубировали при 37°C, 5% CO в течение 60 минут. Затем среду удаляли и клетки лизировали путем добавления 20 мкл буфера для лизиса клеток (Cell Signaling Technology) и инкубировали при 4°C в течение 20 минут. 10 мкл смеси антитело/акцепторная гранула [(1/1000 биотинилированного- pS935 LRRK2-антитела, 1/1000 общего-LRRK2 антитела, 1/100 акцепторных гранул в буфере для детекции AlphaScreen (25 мМ Hepes (pH 7,4), 0,5% Triton X-100, 1 мг/мл декстрана 500 и 0,1% BSA)] добавляли в каждую лунку и планшеты инкубировали в течение 2 часов при температуре окружающей среды в темноте. Затем в каждую лунку добавляли 10 мкл раствора донорных гранул (1/33,3 донорных гранул в буфере для детекции AlphaScreen). После инкубации в течение еще 2 часов при температуре окружающей среды в темноте планшеты считывали на планшетном ридере EnVision™ при эмиссии 520-620 нм с возбуждением 680 нм. Данные кривой дозовой зависимости были основаны на сигмоидальной модели доза-эффект.
Фармакологические данные
Соединения примеров E1-E273 тестировали в масс-спектрометрическом анализе ингибированияусеченногоG2019 LRRK2 человека, масс-спектрометрическом анализе ингибирования полноразмерного G2019 LRRK2 человека и/или AlphaScreen анализе рекомбинантной клеточной LRRK2. Было обнаружено, что соединения E1-E273 ингибируют активность LRRK2-киназы в одном или двух анализах, описанных выше.
50
Значение pIC для каждого соединения отмечены, по меньшей мере, в одном эксперименте или в среднем по нескольким экспериментам. Понятно, что данные, описанные здесь, могут иметь разумные вариации в зависимости от конкретных условий и способов, используемых человеком, проводящим эксперименты.
50
Соединения Примеров E1-E19, E21-E41, E48, E49, E56-E60, E62-E79, E81-E83, E85-E88, E91-E114, и E116-E121 тестировали в масс-спектрометрическом анализе ингибирования усеченного G2019 LRRK2 человека, и показали pIC ≥ 5,0. Соединения примеров E2-E4, E6, E14, E21-E24, E28-E30, E34-E36, E38, E39, E48, E56-E58, E62, E72, E73, E82, E92, E96, E104-E108, E110, E114 и E121 показали ≥8,0
50
Соединения Примеров E42, E43, E45, E50-E55, E80, E122-E185, E187-E192, E195-E201, E205-E209, E211-E235, E237-E242, E244-E252, E254-E260, E264-E266 и E268-E273 тестировали в масс-спектрометрическом анализе ингибирования полноразмерного G2019 LRRK2 человека и показали pIC ≥ 5,0. Соединения Примеров E50-E55, E80, E123-125, E136, E138-E140, E142, E146, E152-E156, E158, E160-E163, E166, E169-E171, E173, E180-E181, E211, E212, E237, E248, E252 и E265 показали ≥8,0.
50
50
Соединения Примеров E1-E273 тестировали в AlphaScreen анализе рекомбинантной клеточной LRRK2. Все тестируемые соединения, за исключением примеров E7, E9, E11, E25, E74, E76, E77, E87, E221, E228, E229, E240, E245, E271 и E272, показали pIC≥ 5,0. Соединения Примеров E4, E18, E22, E24, E29, E30, E34, E35, E38, E39, E40, E42, E44, E45, E46, E49-E55, E62-E64, E79, E80, E89, E122-E126, E128, E132, E134-E142, E146, E152-E177, E180-E183, E188-E192, E195-E196, E205, E207-E209, E211-E213, E219, E237, E246, E250, E258, E260-E266 и E268 показали pIC ≥ 7,0.
Например, значения pIC50 для alphaScreen анализа рекомбинантной клеточной LRRK2 и масс-спектрометрического анализа ингибирования LRRK2 для следующих примеров являются:
Пример No
AlphaScreen анализ рекомбинантной клеточной LRRK2(pIC50)
масс-спектрометрический анализ ингибирования усеченного LRRK2 G2019 человека (pIC50)
масс-спектрометрический анализ ингибирования полноразмерного LRRK2 G2019 человека (pIC50)
E4
7,6
8,1
E18
7,9
7,9
E22
7,9
8,1
E38
7,5
8
E39
8,3
8,0
E40
7,3
7,9
E41
6,9
7,9
E62
7,3
8,1
E66
6,9
7,5
E79
8,0
7,9
E117
6,2
7,6
E170
8,3
8,1
E183
7,2
7,9
E188
7,1
7,6
E205
7,3
7,7
E208
7,4
7,7
E230
6,2
6,6
E239
6,8
7,9
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110>  GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited
<120>  Соединения
<130>  PC65923 WO
<160>  10
<170>  PatentIn version 3.5
<210>  1
<211>  48
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  1
gatctcgacg ggcgcggatc caccatggat tacaaggatg acgacgat                    48
<210>  2
<211>  49
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  2
catggattac aaggatgacg acgataagat ggctagtggc agctgtcag                   49
<210>  3
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  3
gttcacgaga tccactattc agtaagagtt ccaccaattt gggact                      46
<210>  4
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  4
gaatagtgga tctcgtgaac aag                                               23
<210>  5
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  5
gtcagacaaa ctgcttggaa ccagc                                             25
<210>  6
<211>  40
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  6
ctggttccaa gcagtttgtc tgaccacagg cctgtgatag                             40
<210>  7
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  7
gttctagcca agcttggtac cctattactc aacagatgtt cgtctc                      46
<210>  8
<211>  7611
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Кодирующая последовательность полноразмерного Flag-LRRK2 дикого типа
<400>  8
atggattaca aggatgacga cgataagatg gctagtggca gctgtcaggg gtgcgaagag       60
gacgaggaaa ctctgaagaa gttgatagtc aggctgaaca atgtccagga aggaaaacag      120
atagaaacgc tggtccaaat cctggaggat ctgctggtgt tcacgtactc cgagcacgcc      180
tccaagttat ttcaaggcaa aaatatccat gtgcctctgt tgatcgtctt ggactcctat      240
atgagagtcg cgagtgtgca gcaggtgggt tggtcacttc tgtgcaaatt aatagaagtc      300
tgtccaggta caatgcaaag cttaatggga ccccaggatg ttggaaatga ttgggaagtc      360
cttggtgttc accaattgat tcttaaaatg ctaacagttc ataatgccag tgtaaacttg      420
tcagtgattg gactgaagac cttagatctc ctcctaactt caggtaaaat caccttgctg      480
atactggatg aagaaagtga tattttcatg ttaatttttg atgccatgca ctcatttcca      540
gccaatgatg aagtccagaa acttggatgc aaagctttac atgtgctgtt tgagagagtc      600
tcagaggagc aactgactga atttgttgag aacaaagatt atatgatatt gttaagtgcg      660
ttaacaaatt ttaaagatga agaggaaatt gtgcttcatg tgctgcattg tttacattcc      720
ctagcgattc cttgcaataa tgtggaagtc ctcatgagtg gcaatgtcag gtgttataat      780
attgtggtgg aagctatgaa agcattccct atgagtgaaa gaattcaaga agtgagttgc      840
tgtttgctcc ataggcttac attaggtaat tttttcaata tcctggtatt aaacgaagtc      900
catgagtttg tggtgaaagc tgtgcagcag tacccagaga atgcagcatt gcagatctca      960
gcgctcagct gtttggccct cctcactgag actattttct taaatcaaga tttagaggaa     1020
aagaatgaga atcaagagaa tgatgatgag ggggaagaag ataaattgtt ttggctggaa     1080
gcctgttaca aagcattaac gtggcataga aagaacaagc acgtgcagga ggccgcatgc     1140
tgggcactaa ataatctcct tatgtaccaa aacagtttac atgagaagat tggagatgaa     1200
gatggccatt tcccagctca tagggaagtg atgctctcca tgctgatgca ttcttcatca     1260
aaggaagttt tccaggcatc tgcgaatgca ttgtcaactc tcttagaaca aaatgttaat     1320
ttcagaaaaa tactgttatc aaaaggaata cacctgaatg ttttggagtt aatgcagaag     1380
catatacatt ctcctgaagt ggctgaaagt ggctgtaaaa tgctaaatca tctttttgaa     1440
ggaagcaaca cttccctgga tataatggca gcagtggtcc ccaaaatact aacagttatg     1500
aaacgtcatg agacatcatt accagtgcag ctggaggcgc ttcgagctat tttacatttt     1560
atagtgcctg gcatgccaga agaatccagg gaggatacag aatttcatca taagctaaat     1620
atggttaaaa aacagtgttt caagaatgat attcacaaac tggtcctagc agctttgaac     1680
aggttcattg gaaatcctgg gattcagaaa tgtggattaa aagtaatttc ttctattgta     1740
cattttcctg atgcattaga gatgttatcc ctggaaggtg ctatggattc agtgcttcac     1800
acactgcaga tgtatccaga tgaccaagaa attcagtgtc tgggtttaag tcttatagga     1860
tacttgatta caaagaagaa tgtgttcata ggaactggac atctgctggc aaaaattctg     1920
gtttccagct tataccgatt taaggatgtt gctgaaatac agactaaagg atttcagaca     1980
atcttagcaa tcctcaaatt gtcagcatct ttttctaagc tgctggtgca tcattcattt     2040
gacttagtaa tattccatca aatgtcttcc aatatcatgg aacaaaagga tcaacagttt     2100
ctaaacctct gttgcaagtg ttttgcaaaa gtagctatgg atgattactt aaaaaatgtg     2160
atgctagaga gagcgtgtga tcagaataac agcatcatgg ttgaatgctt gcttctattg     2220
ggagcagatg ccaatcaagc aaaggaggga tcttctttaa tttgtcaggt atgtgagaaa     2280
gagagcagtc ccaaattggt ggaactctta ctgaatagtg gatctcgtga acaagatgta     2340
cgaaaagcgt tgacgataag cattgggaaa ggtgacagcc agatcatcag cttgctctta     2400
aggaggctgg ccctggatgt ggccaacaat agcatttgcc ttggaggatt ttgtatagga     2460
aaagttgaac cttcttggct tggtccttta tttccagata agacttctaa tttaaggaaa     2520
caaacaaata tagcatctac actagcaaga atggtgatca gatatcagat gaaaagtgct     2580
gtggaagaag gaacagcctc aggcagcgat ggaaattttt ctgaagatgt gctgtctaaa     2640
tttgatgaat ggacctttat tcctgactct tctatggaca gtgtgtttgc tcaaagtgat     2700
gacctggata gtgaaggaag tgaaggctca tttcttgtga aaaagaaatc taattcaatt     2760
agtgtaggag aattttaccg agatgccgta ttacagcgtt gctcaccaaa tttgcaaaga     2820
cattccaatt ccttggggcc catttttgat catgaagatt tactgaagcg aaaaagaaaa     2880
atattatctt cagatgattc actcaggtca tcaaaacttc aatcccatat gaggcattca     2940
gacagcattt cttctctggc ttctgagaga gaatatatta catcactaga cctttcagca     3000
aatgaactaa gagatattga tgccctaagc cagaaatgct gtataagtgt tcatttggag     3060
catcttgaaa agctggagct tcaccagaat gcactcacga gctttccaca acagctatgt     3120
gaaactctga agagtttgac acatttggac ttgcacagta ataaatttac atcatttcct     3180
tcttatttgt tgaaaatgag ttgtattgct aatcttgatg tctctcgaaa tgacattgga     3240
ccctcagtgg ttttagatcc tacagtgaaa tgtccaactc tgaaacagtt taacctgtca     3300
tataaccagc tgtcttttgt acctgagaac ctcactgatg tggtagagaa actggagcag     3360
ctcattttag aaggaaataa aatatcaggg atatgctccc ccttgagact gaaggaactg     3420
aagattttaa accttagtaa gaaccacatt tcatccctat cagagaactt tcttgaggct     3480
tgtcctaaag tggagagttt cagtgccaga atgaattttc ttgctgctat gcctttcttg     3540
cctccttcta tgacaatcct aaaattatct cagaacaaat tttcctgtat tccagaagca     3600
attttaaatc ttccacactt gcggtcttta gatatgagca gcaatgatat tcagtaccta     3660
ccaggtcccg cacactggaa atctttgaac ttaagggaac tcttatttag ccataatcag     3720
atcagcatct tggacttgag tgaaaaagca tatttatggt ctagagtaga gaaactgcat     3780
ctttctcaca ataaactgaa agagattcct cctgagattg gctgtcttga aaatctgaca     3840
tctctggatg tcagttacaa cttggaacta agatcctttc ccaatgaaat ggggaaatta     3900
agcaaaatat gggatcttcc tttggatgaa ctgcatctta actttgattt taaacatata     3960
ggatgtaaag ccaaagacat cataaggttt cttcaacagc gattaaaaaa ggctgtgcct     4020
tataaccgaa tgaaacttat gattgtggga aatactggga gtggtaaaac caccttattg     4080
cagcaattaa tgaaaaccaa gaaatcagat cttggaatgc aaagtgccac agttggcata     4140
gatgtgaaag actggcctat ccaaataaga gacaaaagaa agagagatct cgtcctaaat     4200
gtgtgggatt ttgcaggtcg tgaggaattc tatagtactc atccccattt tatgacgcag     4260
cgagcattgt accttgctgt ctatgacctc agcaagggac aggctgaagt tgatgccatg     4320
aagccttggc tcttcaatat aaaggctcgc gcttcttctt cccctgtgat tctcgttggc     4380
acacatttgg atgtttctga tgagaagcaa cgcaaagcct gcatgagtaa aatcaccaag     4440
gaactcctga ataagcgagg gttccctgcc atacgagatt accactttgt gaatgccacc     4500
gaggaatctg atgctttggc aaaacttcgg aaaaccatca taaacgagag ccttaatttc     4560
aagatccgag atcagcttgt tgttggacag ctgattccag actgctatgt agaacttgaa     4620
aaaatcattt tatcggagcg taaaaatgtg ccaattgaat ttcccgtaat tgaccggaaa     4680
cgattattac aactagtgag agaaaatcag ctgcagttag atgaaaatga gcttcctcac     4740
gcagttcact ttctaaatga atcaggagtc cttcttcatt ttcaagaccc agcactgcag     4800
ttaagtgact tgtactttgt ggaacccaag tggctttgta aaatcatggc acagattttg     4860
acagtgaaag tggaaggttg tccaaaacac cctaagggaa ttatttcgcg tagagatgtg     4920
gaaaaatttc tttcaaagaa aaggaaattt ccaaagaact acatgtcaca gtattttaag     4980
ctcctagaaa aattccagat tgctttgcca ataggagaag aatatttgct ggttccaagc     5040
agtttgtctg accacaggcc tgtgatagag cttccccatt gtgagaactc tgaaattatc     5100
atccgactat atgaaatgcc ttattttcca atgggatttt ggtcaagatt aatcaatcga     5160
ttacttgaga tttcacctta catgctttca gggagagaac gagcacttcg cccaaacaga     5220
atgtattggc gacaaggcat ttacttaaat tggtctcctg aagcttattg tctggtagga     5280
tctgaagtct tagacaatca tccagagagt ttcttaaaaa ttacagttcc ttcttgtaga     5340
aaaggctgta ttcttttggg ccaagttgtg gaccacattg attctctcat ggaagaatgg     5400
tttcctgggt tgctggagat tgatatttgt ggtgaaggag aaactctgtt gaagaaatgg     5460
gcattatata gttttaatga tggtgaagaa catcaaaaaa tcttacttga tgacttgatg     5520
aagaaagcag aggaaggaga tctcttagta aatccagatc aaccaaggct caccattcca     5580
atatctcaga ttgcccctga cttgattttg gctgacctgc ctagaaatat tatgttgaat     5640
aatgatgagt tggaatttga acaagctcca gagtttctcc taggtgatgg cagttttgga     5700
tcagtttacc gagcagccta tgaaggagaa gaagtggctg tgaagatttt taataaacat     5760
acatcactca ggctgttaag acaagagctt gtggtgcttt gccacctcca ccaccccagt     5820
ttgatatctt tgctggcagc tgggattcgt ccccggatgt tggtgatgga gttagcctcc     5880
aagggttcct tggatcgcct gcttcagcag gacaaagcca gcctcactag aaccctacag     5940
cacaggattg cactccacgt agctgatggt ttgagatacc tccactcagc catgattata     6000
taccgagacc tgaaacccca caatgtgctg cttttcacac tgtatcccaa tgctgccatc     6060
attgcaaaga ttgctgacta cggcattgct cagtactgct gtagaatggg gataaaaaca     6120
tcagagggca caccagggtt tcgtgcacct gaagttgcca gaggaaatgt catttataac     6180
caacaggctg atgtttattc atttggttta ctactctatg acattttgac aactggaggt     6240
agaatagtag agggtttgaa gtttccaaat gagtttgatg aattagaaat acaaggaaaa     6300
ttacctgatc cagttaaaga atatggttgt gccccatggc ctatggttga gaaattaatt     6360
aaacagtgtt tgaaagaaaa tcctcaagaa aggcctactt ctgcccaggt ctttgacatt     6420
ttgaattcag ctgaattagt ctgtctgacg agacgcattt tattacctaa aaacgtaatt     6480
gttgaatgca tggttgctac acatcacaac agcaggaatg caagcatttg gctgggctgt     6540
gggcacaccg acagaggaca gctctcattt cttgacttaa atactgaagg atacacttct     6600
gaggaagttg ctgatagtag aatattgtgc ttagccttgg tgcatcttcc tgttgaaaag     6660
gaaagctgga ttgtgtctgg gacacagtct ggtactctcc tggtcatcaa taccgaagat     6720
gggaaaaaga gacataccct agaaaagatg actgattctg tcacttgttt gtattgcaat     6780
tccttttcca agcaaagcaa acaaaaaaat tttcttttgg ttggaaccgc tgatggcaag     6840
ttagcaattt ttgaagataa gactgttaag cttaaaggag ctgctccttt gaagatacta     6900
aatataggaa atgtcagtac tccattgatg tgtttgagtg aatccacaaa ttcaacggaa     6960
agaaatgtaa tgtggggagg atgtggcaca aagattttct ccttttctaa tgatttcacc     7020
attcagaaac tcattgagac aagaacaagc caactgtttt cttatgcagc tttcagtgat     7080
tccaacatca taacagtggt ggtagacact gctctctata ttgctaagca aaatagccct     7140
gttgtggaag tgtgggataa gaaaactgaa aaactctgtg gactaataga ctgcgtgcac     7200
tttttaaggg aggtaatggt aaaagaaaac aaggaatcaa aacacaaaat gtcttattct     7260
gggagagtga aaaccctctg ccttcagaag aacactgctc tttggatagg aactggagga     7320
ggccatattt tactcctgga tctttcaact cgtcgactta tacgtgtaat ttacaacttt     7380
tgtaattcgg tcagagtcat gatgacagca cagctaggaa gccttaaaaa tgtcatgctg     7440
gtattgggct acaaccggaa aaatactgaa ggtacacaaa agcagaaaga gatacaatct     7500
tgcttgaccg tttgggacat caatcttcca catgaagtgc aaaatttaga aaaacacatt     7560
gaagtgagaa aagaattagc tgaaaaaatg agacgaacat ctgttgagta a              7611
<210>  9
<211>  2536
<212>  Белок
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Транслированная последовательность белка для полноразмерного Flag-LRRK2 дикого типа
<400>  9
Met Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Met Ala Ser Gly Ser Cys Gln
1               5                   10                  15
Gly Cys Glu Glu Asp Glu Glu Thr Leu Lys Lys Leu Ile Val Arg Leu
20                  25                  30
Asn Asn Val Gln Glu Gly Lys Gln Ile Glu Thr Leu Val Gln Ile Leu
35                  40                  45
Glu Asp Leu Leu Val Phe Thr Tyr Ser Glu His Ala Ser Lys Leu Phe
50                  55                  60
Gln Gly Lys Asn Ile His Val Pro Leu Leu Ile Val Leu Asp Ser Tyr
65                  70                  75                  80
Met Arg Val Ala Ser Val Gln Gln Val Gly Trp Ser Leu Leu Cys Lys
85                  90                  95
Leu Ile Glu Val Cys Pro Gly Thr Met Gln Ser Leu Met Gly Pro Gln
100                 105                 110
Asp Val Gly Asn Asp Trp Glu Val Leu Gly Val His Gln Leu Ile Leu
115                 120                 125
Lys Met Leu Thr Val His Asn Ala Ser Val Asn Leu Ser Val Ile Gly
130                 135                 140
Leu Lys Thr Leu Asp Leu Leu Leu Thr Ser Gly Lys Ile Thr Leu Leu
145                 150                 155                 160
Ile Leu Asp Glu Glu Ser Asp Ile Phe Met Leu Ile Phe Asp Ala Met
165                 170                 175
His Ser Phe Pro Ala Asn Asp Glu Val Gln Lys Leu Gly Cys Lys Ala
180                 185                 190
Leu His Val Leu Phe Glu Arg Val Ser Glu Glu Gln Leu Thr Glu Phe
195                 200                 205
Val Glu Asn Lys Asp Tyr Met Ile Leu Leu Ser Ala Leu Thr Asn Phe
210                 215                 220
Lys Asp Glu Glu Glu Ile Val Leu His Val Leu His Cys Leu His Ser
225                 230                 235                 240
Leu Ala Ile Pro Cys Asn Asn Val Glu Val Leu Met Ser Gly Asn Val
245                 250                 255
Arg Cys Tyr Asn Ile Val Val Glu Ala Met Lys Ala Phe Pro Met Ser
260                 265                 270
Glu Arg Ile Gln Glu Val Ser Cys Cys Leu Leu His Arg Leu Thr Leu
275                 280                 285
Gly Asn Phe Phe Asn Ile Leu Val Leu Asn Glu Val His Glu Phe Val
290                 295                 300
Val Lys Ala Val Gln Gln Tyr Pro Glu Asn Ala Ala Leu Gln Ile Ser
305                 310                 315                 320
Ala Leu Ser Cys Leu Ala Leu Leu Thr Glu Thr Ile Phe Leu Asn Gln
325                 330                 335
Asp Leu Glu Glu Lys Asn Glu Asn Gln Glu Asn Asp Asp Glu Gly Glu
340                 345                 350
Glu Asp Lys Leu Phe Trp Leu Glu Ala Cys Tyr Lys Ala Leu Thr Trp
355                 360                 365
His Arg Lys Asn Lys His Val Gln Glu Ala Ala Cys Trp Ala Leu Asn
370                 375                 380
Asn Leu Leu Met Tyr Gln Asn Ser Leu His Glu Lys Ile Gly Asp Glu
385                 390                 395                 400
Asp Gly His Phe Pro Ala His Arg Glu Val Met Leu Ser Met Leu Met
405                 410                 415
His Ser Ser Ser Lys Glu Val Phe Gln Ala Ser Ala Asn Ala Leu Ser
420                 425                 430
Thr Leu Leu Glu Gln Asn Val Asn Phe Arg Lys Ile Leu Leu Ser Lys
435                 440                 445
Gly Ile His Leu Asn Val Leu Glu Leu Met Gln Lys His Ile His Ser
450                 455                 460
Pro Glu Val Ala Glu Ser Gly Cys Lys Met Leu Asn His Leu Phe Glu
465                 470                 475                 480
Gly Ser Asn Thr Ser Leu Asp Ile Met Ala Ala Val Val Pro Lys Ile
485                 490                 495
Leu Thr Val Met Lys Arg His Glu Thr Ser Leu Pro Val Gln Leu Glu
500                 505                 510
Ala Leu Arg Ala Ile Leu His Phe Ile Val Pro Gly Met Pro Glu Glu
515                 520                 525
Ser Arg Glu Asp Thr Glu Phe His His Lys Leu Asn Met Val Lys Lys
530                 535                 540
Gln Cys Phe Lys Asn Asp Ile His Lys Leu Val Leu Ala Ala Leu Asn
545                 550                 555                 560
Arg Phe Ile Gly Asn Pro Gly Ile Gln Lys Cys Gly Leu Lys Val Ile
565                 570                 575
Ser Ser Ile Val His Phe Pro Asp Ala Leu Glu Met Leu Ser Leu Glu
580                 585                 590
Gly Ala Met Asp Ser Val Leu His Thr Leu Gln Met Tyr Pro Asp Asp
595                 600                 605
Gln Glu Ile Gln Cys Leu Gly Leu Ser Leu Ile Gly Tyr Leu Ile Thr
610                 615                 620
Lys Lys Asn Val Phe Ile Gly Thr Gly His Leu Leu Ala Lys Ile Leu
625                 630                 635                 640
Val Ser Ser Leu Tyr Arg Phe Lys Asp Val Ala Glu Ile Gln Thr Lys
645                 650                 655
Gly Phe Gln Thr Ile Leu Ala Ile Leu Lys Leu Ser Ala Ser Phe Ser
660                 665                 670
Lys Leu Leu Val His His Ser Phe Asp Leu Val Ile Phe His Gln Met
675                 680                 685
Ser Ser Asn Ile Met Glu Gln Lys Asp Gln Gln Phe Leu Asn Leu Cys
690                 695                 700
Cys Lys Cys Phe Ala Lys Val Ala Met Asp Asp Tyr Leu Lys Asn Val
705                 710                 715                 720
Met Leu Glu Arg Ala Cys Asp Gln Asn Asn Ser Ile Met Val Glu Cys
725                 730                 735
Leu Leu Leu Leu Gly Ala Asp Ala Asn Gln Ala Lys Glu Gly Ser Ser
740                 745                 750
Leu Ile Cys Gln Val Cys Glu Lys Glu Ser Ser Pro Lys Leu Val Glu
755                 760                 765
Leu Leu Leu Asn Ser Gly Ser Arg Glu Gln Asp Val Arg Lys Ala Leu
770                 775                 780
Thr Ile Ser Ile Gly Lys Gly Asp Ser Gln Ile Ile Ser Leu Leu Leu
785                 790                 795                 800
Arg Arg Leu Ala Leu Asp Val Ala Asn Asn Ser Ile Cys Leu Gly Gly
805                 810                 815
Phe Cys Ile Gly Lys Val Glu Pro Ser Trp Leu Gly Pro Leu Phe Pro
820                 825                 830
Asp Lys Thr Ser Asn Leu Arg Lys Gln Thr Asn Ile Ala Ser Thr Leu
835                 840                 845
Ala Arg Met Val Ile Arg Tyr Gln Met Lys Ser Ala Val Glu Glu Gly
850                 855                 860
Thr Ala Ser Gly Ser Asp Gly Asn Phe Ser Glu Asp Val Leu Ser Lys
865                 870                 875                 880
Phe Asp Glu Trp Thr Phe Ile Pro Asp Ser Ser Met Asp Ser Val Phe
885                 890                 895
Ala Gln Ser Asp Asp Leu Asp Ser Glu Gly Ser Glu Gly Ser Phe Leu
900                 905                 910
Val Lys Lys Lys Ser Asn Ser Ile Ser Val Gly Glu Phe Tyr Arg Asp
915                 920                 925
Ala Val Leu Gln Arg Cys Ser Pro Asn Leu Gln Arg His Ser Asn Ser
930                 935                 940
Leu Gly Pro Ile Phe Asp His Glu Asp Leu Leu Lys Arg Lys Arg Lys
945                 950                 955                 960
Ile Leu Ser Ser Asp Asp Ser Leu Arg Ser Ser Lys Leu Gln Ser His
965                 970                 975
Met Arg His Ser Asp Ser Ile Ser Ser Leu Ala Ser Glu Arg Glu Tyr
980                 985                 990
Ile Thr Ser Leu Asp Leu Ser Ala  Asn Glu Leu Arg Asp  Ile Asp Ala
995                 1000                 1005
Leu Ser  Gln Lys Cys Cys Ile  Ser Val His Leu Glu  His Leu Glu
1010                 1015                 1020
Lys Leu  Glu Leu His Gln Asn  Ala Leu Thr Ser Phe  Pro Gln Gln
1025                 1030                 1035
Leu Cys  Glu Thr Leu Lys Ser  Leu Thr His Leu Asp  Leu His Ser
1040                 1045                 1050
Asn Lys  Phe Thr Ser Phe Pro  Ser Tyr Leu Leu Lys  Met Ser Cys
1055                 1060                 1065
Ile Ala  Asn Leu Asp Val Ser  Arg Asn Asp Ile Gly  Pro Ser Val
1070                 1075                 1080
Val Leu  Asp Pro Thr Val Lys  Cys Pro Thr Leu Lys  Gln Phe Asn
1085                 1090                 1095
Leu Ser  Tyr Asn Gln Leu Ser  Phe Val Pro Glu Asn  Leu Thr Asp
1100                 1105                 1110
Val Val  Glu Lys Leu Glu Gln  Leu Ile Leu Glu Gly  Asn Lys Ile
1115                 1120                 1125
Ser Gly  Ile Cys Ser Pro Leu  Arg Leu Lys Glu Leu  Lys Ile Leu
1130                 1135                 1140
Asn Leu  Ser Lys Asn His Ile  Ser Ser Leu Ser Glu  Asn Phe Leu
1145                 1150                 1155
Glu Ala  Cys Pro Lys Val Glu  Ser Phe Ser Ala Arg  Met Asn Phe
1160                 1165                 1170
Leu Ala  Ala Met Pro Phe Leu  Pro Pro Ser Met Thr  Ile Leu Lys
1175                 1180                 1185
Leu Ser  Gln Asn Lys Phe Ser  Cys Ile Pro Glu Ala  Ile Leu Asn
1190                 1195                 1200
Leu Pro  His Leu Arg Ser Leu  Asp Met Ser Ser Asn  Asp Ile Gln
1205                 1210                 1215
Tyr Leu  Pro Gly Pro Ala His  Trp Lys Ser Leu Asn  Leu Arg Glu
1220                 1225                 1230
Leu Leu  Phe Ser His Asn Gln  Ile Ser Ile Leu Asp  Leu Ser Glu
1235                 1240                 1245
Lys Ala  Tyr Leu Trp Ser Arg  Val Glu Lys Leu His  Leu Ser His
1250                 1255                 1260
Asn Lys  Leu Lys Glu Ile Pro  Pro Glu Ile Gly Cys  Leu Glu Asn
1265                 1270                 1275
Leu Thr  Ser Leu Asp Val Ser  Tyr Asn Leu Glu Leu  Arg Ser Phe
1280                 1285                 1290
Pro Asn  Glu Met Gly Lys Leu  Ser Lys Ile Trp Asp  Leu Pro Leu
1295                 1300                 1305
Asp Glu  Leu His Leu Asn Phe  Asp Phe Lys His Ile  Gly Cys Lys
1310                 1315                 1320
Ala Lys  Asp Ile Ile Arg Phe  Leu Gln Gln Arg Leu  Lys Lys Ala
1325                 1330                 1335
Val Pro  Tyr Asn Arg Met Lys  Leu Met Ile Val Gly  Asn Thr Gly
1340                 1345                 1350
Ser Gly  Lys Thr Thr Leu Leu  Gln Gln Leu Met Lys  Thr Lys Lys
1355                 1360                 1365
Ser Asp  Leu Gly Met Gln Ser  Ala Thr Val Gly Ile  Asp Val Lys
1370                 1375                 1380
Asp Trp  Pro Ile Gln Ile Arg  Asp Lys Arg Lys Arg  Asp Leu Val
1385                 1390                 1395
Leu Asn  Val Trp Asp Phe Ala  Gly Arg Glu Glu Phe  Tyr Ser Thr
1400                 1405                 1410
His Pro  His Phe Met Thr Gln  Arg Ala Leu Tyr Leu  Ala Val Tyr
1415                 1420                 1425
Asp Leu  Ser Lys Gly Gln Ala  Glu Val Asp Ala Met  Lys Pro Trp
1430                 1435                 1440
Leu Phe  Asn Ile Lys Ala Arg  Ala Ser Ser Ser Pro  Val Ile Leu
1445                 1450                 1455
Val Gly  Thr His Leu Asp Val  Ser Asp Glu Lys Gln  Arg Lys Ala
1460                 1465                 1470
Cys Met  Ser Lys Ile Thr Lys  Glu Leu Leu Asn Lys  Arg Gly Phe
1475                 1480                 1485
Pro Ala  Ile Arg Asp Tyr His  Phe Val Asn Ala Thr  Glu Glu Ser
1490                 1495                 1500
Asp Ala  Leu Ala Lys Leu Arg  Lys Thr Ile Ile Asn  Glu Ser Leu
1505                 1510                 1515
Asn Phe  Lys Ile Arg Asp Gln  Leu Val Val Gly Gln  Leu Ile Pro
1520                 1525                 1530
Asp Cys  Tyr Val Glu Leu Glu  Lys Ile Ile Leu Ser  Glu Arg Lys
1535                 1540                 1545
Asn Val  Pro Ile Glu Phe Pro  Val Ile Asp Arg Lys  Arg Leu Leu
1550                 1555                 1560
Gln Leu  Val Arg Glu Asn Gln  Leu Gln Leu Asp Glu  Asn Glu Leu
1565                 1570                 1575
Pro His  Ala Val His Phe Leu  Asn Glu Ser Gly Val  Leu Leu His
1580                 1585                 1590
Phe Gln  Asp Pro Ala Leu Gln  Leu Ser Asp Leu Tyr  Phe Val Glu
1595                 1600                 1605
Pro Lys  Trp Leu Cys Lys Ile  Met Ala Gln Ile Leu  Thr Val Lys
1610                 1615                 1620
Val Glu  Gly Cys Pro Lys His  Pro Lys Gly Ile Ile  Ser Arg Arg
1625                 1630                 1635
Asp Val  Glu Lys Phe Leu Ser  Lys Lys Arg Lys Phe  Pro Lys Asn
1640                 1645                 1650
Tyr Met  Ser Gln Tyr Phe Lys  Leu Leu Glu Lys Phe  Gln Ile Ala
1655                 1660                 1665
Leu Pro  Ile Gly Glu Glu Tyr  Leu Leu Val Pro Ser  Ser Leu Ser
1670                 1675                 1680
Asp His  Arg Pro Val Ile Glu  Leu Pro His Cys Glu  Asn Ser Glu
1685                 1690                 1695
Ile Ile  Ile Arg Leu Tyr Glu  Met Pro Tyr Phe Pro  Met Gly Phe
1700                 1705                 1710
Trp Ser  Arg Leu Ile Asn Arg  Leu Leu Glu Ile Ser  Pro Tyr Met
1715                 1720                 1725
Leu Ser  Gly Arg Glu Arg Ala  Leu Arg Pro Asn Arg  Met Tyr Trp
1730                 1735                 1740
Arg Gln  Gly Ile Tyr Leu Asn  Trp Ser Pro Glu Ala  Tyr Cys Leu
1745                 1750                 1755
Val Gly  Ser Glu Val Leu Asp  Asn His Pro Glu Ser  Phe Leu Lys
1760                 1765                 1770
Ile Thr  Val Pro Ser Cys Arg  Lys Gly Cys Ile Leu  Leu Gly Gln
1775                 1780                 1785
Val Val  Asp His Ile Asp Ser  Leu Met Glu Glu Trp  Phe Pro Gly
1790                 1795                 1800
Leu Leu  Glu Ile Asp Ile Cys  Gly Glu Gly Glu Thr  Leu Leu Lys
1805                 1810                 1815
Lys Trp  Ala Leu Tyr Ser Phe  Asn Asp Gly Glu Glu  His Gln Lys
1820                 1825                 1830
Ile Leu  Leu Asp Asp Leu Met  Lys Lys Ala Glu Glu  Gly Asp Leu
1835                 1840                 1845
Leu Val  Asn Pro Asp Gln Pro  Arg Leu Thr Ile Pro  Ile Ser Gln
1850                 1855                 1860
Ile Ala  Pro Asp Leu Ile Leu  Ala Asp Leu Pro Arg  Asn Ile Met
1865                 1870                 1875
Leu Asn  Asn Asp Glu Leu Glu  Phe Glu Gln Ala Pro  Glu Phe Leu
1880                 1885                 1890
Leu Gly  Asp Gly Ser Phe Gly  Ser Val Tyr Arg Ala  Ala Tyr Glu
1895                 1900                 1905
Gly Glu  Glu Val Ala Val Lys  Ile Phe Asn Lys His  Thr Ser Leu
1910                 1915                 1920
Arg Leu  Leu Arg Gln Glu Leu  Val Val Leu Cys His  Leu His His
1925                 1930                 1935
Pro Ser  Leu Ile Ser Leu Leu  Ala Ala Gly Ile Arg  Pro Arg Met
1940                 1945                 1950
Leu Val  Met Glu Leu Ala Ser  Lys Gly Ser Leu Asp  Arg Leu Leu
1955                 1960                 1965
Gln Gln  Asp Lys Ala Ser Leu  Thr Arg Thr Leu Gln  His Arg Ile
1970                 1975                 1980
Ala Leu  His Val Ala Asp Gly  Leu Arg Tyr Leu His  Ser Ala Met
1985                 1990                 1995
Ile Ile  Tyr Arg Asp Leu Lys  Pro His Asn Val Leu  Leu Phe Thr
2000                 2005                 2010
Leu Tyr  Pro Asn Ala Ala Ile  Ile Ala Lys Ile Ala  Asp Tyr Gly
2015                 2020                 2025
Ile Ala  Gln Tyr Cys Cys Arg  Met Gly Ile Lys Thr  Ser Glu Gly
2030                 2035                 2040
Thr Pro  Gly Phe Arg Ala Pro  Glu Val Ala Arg Gly  Asn Val Ile
2045                 2050                 2055
Tyr Asn  Gln Gln Ala Asp Val  Tyr Ser Phe Gly Leu  Leu Leu Tyr
2060                 2065                 2070
Asp Ile  Leu Thr Thr Gly Gly  Arg Ile Val Glu Gly  Leu Lys Phe
2075                 2080                 2085
Pro Asn  Glu Phe Asp Glu Leu  Glu Ile Gln Gly Lys  Leu Pro Asp
2090                 2095                 2100
Pro Val  Lys Glu Tyr Gly Cys  Ala Pro Trp Pro Met  Val Glu Lys
2105                 2110                 2115
Leu Ile  Lys Gln Cys Leu Lys  Glu Asn Pro Gln Glu  Arg Pro Thr
2120                 2125                 2130
Ser Ala  Gln Val Phe Asp Ile  Leu Asn Ser Ala Glu  Leu Val Cys
2135                 2140                 2145
Leu Thr  Arg Arg Ile Leu Leu  Pro Lys Asn Val Ile  Val Glu Cys
2150                 2155                 2160
Met Val  Ala Thr His His Asn  Ser Arg Asn Ala Ser  Ile Trp Leu
2165                 2170                 2175
Gly Cys  Gly His Thr Asp Arg  Gly Gln Leu Ser Phe  Leu Asp Leu
2180                 2185                 2190
Asn Thr  Glu Gly Tyr Thr Ser  Glu Glu Val Ala Asp  Ser Arg Ile
2195                 2200                 2205
Leu Cys  Leu Ala Leu Val His  Leu Pro Val Glu Lys  Glu Ser Trp
2210                 2215                 2220
Ile Val  Ser Gly Thr Gln Ser  Gly Thr Leu Leu Val  Ile Asn Thr
2225                 2230                 2235
Glu Asp  Gly Lys Lys Arg His  Thr Leu Glu Lys Met  Thr Asp Ser
2240                 2245                 2250
Val Thr  Cys Leu Tyr Cys Asn  Ser Phe Ser Lys Gln  Ser Lys Gln
2255                 2260                 2265
Lys Asn  Phe Leu Leu Val Gly  Thr Ala Asp Gly Lys  Leu Ala Ile
2270                 2275                 2280
Phe Glu  Asp Lys Thr Val Lys  Leu Lys Gly Ala Ala  Pro Leu Lys
2285                 2290                 2295
Ile Leu  Asn Ile Gly Asn Val  Ser Thr Pro Leu Met  Cys Leu Ser
2300                 2305                 2310
Glu Ser  Thr Asn Ser Thr Glu  Arg Asn Val Met Trp  Gly Gly Cys
2315                 2320                 2325
Gly Thr  Lys Ile Phe Ser Phe  Ser Asn Asp Phe Thr  Ile Gln Lys
2330                 2335                 2340
Leu Ile  Glu Thr Arg Thr Ser  Gln Leu Phe Ser Tyr  Ala Ala Phe
2345                 2350                 2355
Ser Asp  Ser Asn Ile Ile Thr  Val Val Val Asp Thr  Ala Leu Tyr
2360                 2365                 2370
Ile Ala  Lys Gln Asn Ser Pro  Val Val Glu Val Trp  Asp Lys Lys
2375                 2380                 2385
Thr Glu  Lys Leu Cys Gly Leu  Ile Asp Cys Val His  Phe Leu Arg
2390                 2395                 2400
Glu Val  Met Val Lys Glu Asn  Lys Glu Ser Lys His  Lys Met Ser
2405                 2410                 2415
Tyr Ser  Gly Arg Val Lys Thr  Leu Cys Leu Gln Lys  Asn Thr Ala
2420                 2425                 2430
Leu Trp  Ile Gly Thr Gly Gly  Gly His Ile Leu Leu  Leu Asp Leu
2435                 2440                 2445
Ser Thr  Arg Arg Leu Ile Arg  Val Ile Tyr Asn Phe  Cys Asn Ser
2450                 2455                 2460
Val Arg  Val Met Met Thr Ala  Gln Leu Gly Ser Leu  Lys Asn Val
2465                 2470                 2475
Met Leu  Val Leu Gly Tyr Asn  Arg Lys Asn Thr Glu  Gly Thr Gln
2480                 2485                 2490
Lys Gln  Lys Glu Ile Gln Ser  Cys Leu Thr Val Trp  Asp Ile Asn
2495                 2500                 2505
Leu Pro  His Glu Val Gln Asn  Leu Glu Lys His Ile  Glu Val Arg
2510                 2515                 2520
Lys Glu  Leu Ala Glu Lys Met  Arg Arg Thr Ser Val  Glu
2525                 2530                 2535
<210>  10
<211>  15
<212>  Белок
<213>  Human
<400>  10
Arg Leu Gly Arg Asp Lys Tyr Lys Thr Leu Arg Gln Ile Arg Gln
1               5                   10                  15
<---