ВИЧ ВАКЦИНА, ОСНОВАННАЯ НА НАПРАВЛЕННОСТИ МАКСИМИЗИРОВАННЫХ GAG И NEF НА ДЕНДРИТНЫЕ КЛЕТКИ

1. Способ повышения эффективности презентации антигена антигенпрезентирующей клеткой, включающий этапы, на которых:
выделяют и очищают специфическое для дендритной клетки (ДК) антитело или его фрагмент, к которому сконструированный Gag антиген прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Gag антиген является менее чувствительным к протеолитическому распаду путем отщепления одного или более протеолитических сайтов; и приводят в контакт антигенпрезентирующую клетку при условиях, где комплекс антитело-антиген обрабатывают и представляют для Т клеточного распознавания.
2. Способ по п.1, где антигенпрезентирующая клетка включает дендритную клетку.
3. Способ по п.1, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент связывается с одной половиной когерин-докериновой пары.
4. Способ по п.1, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент связывается с одной половиной когерин-докериновой пары и сконструированный Gag антиген связывается с комплементарной половиной когерин-докериновой пары для образования комплекса.
5. Способ по п.1, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном.
6. Способ по п.1, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает один или более новых сайтов гликозилирования.
7. Способ по п.1, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, что обеспечивает повышенную гибкость между антителом и антигеном, пониженный протеолиз на линкере и повышенную секрецию.
8. Способ по п.1, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном.
9. Способ по п.1, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, выбранных из линкерной последовательности, полученной из организма, разлагающего целлюлозу.
10. Способ по п.1, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент является гуманизированным.
11. Способ по п.1, где комплекс антитело-антиген выбран из SEQ ID NOS: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 31 или 32.
12. Способ по п.1, где ДК-специфическое антитело или связи фрагмента выбрано из антитела, которое специфически связывается с МНС класса I, MHC класса II, CD1, CD2, CD3, CD4, CD8, CD11b, CD14, CD15, CD16, CD19, CD20, CD29, CD31, CD40, CD43, CD44, CD45, CD54, CD56, CD57, CD58, CD83, CD86, CMRF-44, CMRF-56, DCIR, DC-ASPGR, CLEC-6, CD40, BDCA-2, MARCO, DEC-205, рецептором маннозы, Лангерином, DECTIN-1, B7-1, В7-2, IFN-γ рецептором и IL-2 рецептором, ICAM-1, Fcγ рецептором, LOX-1 и ASPGR.
13. Способ повышения эффективности презентации антигена антигенпрезентирующей клеткой, включающий этапы, на которых:
выделяют и очищают ДК-специфическое антитело или его фрагмент, к которому сконструированный Nef антиген прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Nef антиген включает оптимизацию частоты использования одного или более кодонов, что повышает секрецию комплекса антитело-антиген; и
приводят в контакт антигенпрезентирующую клетку при условиях, где комплекс антитело-антиген обрабатывают и представляют для Т клеточного распознавания.
14. Способ по п.13, где антигенпрезентирующая клетка включает дендритную клетку.
15. Способ по п.13, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент связывается с одной половиной когерин-докериновой пары и сконструированный Nef антиген связывается с комплементарной половиной когерин-докериновой пары для образования комплекса.
16. Способ по п.13, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Nef антигеном.
17. Способ по п.13, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Nef антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, что обеспечивает повышенную гибкость между антителом и антигеном, пониженный протеолиз на линкере и повышенную секрецию.
18. Способ по п.13, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Nef антигеном.
19. Способ по п.13, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, выбранных из линкерной последовательности, полученной из организма, разлагающего целлюлозу.
20. Способ по п.13, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент является гуманизированным.
21. Способ по п.13, где комплекс антитело-антиген выбран из SEQ ID NOS: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 31 или 32.
22. Способ по п.13, где ДК-специфическое антитело или связи фрагмента выбрано из антитела, которое специфически связывается с МНС класса I, MHC класса II, CD1, CD2, CD3, CD4, CD8, CD11b, CD14, CD15, CD16, CD19, CD20, CD29, CD31, CD40, CD43, CD44, CD45, CD54, CD56, CD57, CD58, CD83, CD86, CMRF-44, CMRF-56, DCIR, DC-ASPGR, CLEC-6, CD40, BDCA-2, MARCO, DEC-205, рецептором маннозы, Лангерином, DECTIN-1, B7-1, В7-2, IFN-γ рецептором и IL-2 рецептором, ICAM-1, Fcγ рецептором, LOX-1 и ASPGR.
23. Вакцина, включающая ДК-специфическое антитело или его фрагмент, к которому сконструированный Gag антиген, прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Gag антиген является менее чувствительным к протеолитическому распаду путем отщепления одного или более протеолитических сайтов.
24. Вакцина по п.23, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном.
25. Вакцина по п.23, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает один или более новых сайтов гликозилирования.
26. Вакцина по п.23, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, что обеспечивает повышенную гибкость между антителом и антигеном, пониженный протеолиз на линкере и повышенную секрецию.
27. Вакцина по п.23, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном.
28. Вакцина по п.23, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, выбранных из линкерной последовательности, полученной из организма, разлагающего целлюлозу.
29. Вакцина по п.23, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент является гуманизированным.
30. Вакцина по п.23, где комплекс антитело-антиген выбран из SEQ ID NOS: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 31 или 32.
31. Вакцина по п.23, где ДК-специфическое антитело или связи фрагмента выбрано из антитела, которое специфически связывается с МНС класса I, MHC класса II, CD1, CD2, CD3, CD4, CD8, CD11b, CD14, CD15, CD16, CD19, CD20, CD29, CD31, CD40, CD43, CD44, CD45, CD54, CD56, CD57, CD58, CD83, CD86, CMRF-44, CMRF-56, DCIR, DC-ASPGR, CLEC-6, CD40, BDCA-2, MARCO, DEC-205, рецептором маннозы, Лангерином, DECTIN-1, B7-1, В7-2, IFN-γ рецептором и IL-2 рецептором, ICAM-1, Fcγ рецептором, LOX-1 и ASPGR.
32. Вакцина, включающая ДК-специфическое антитело или его фрагмент, к которому сконструированный Nef антиген прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Nef антиген включает оптимизацию частоты использования одного или более кодонов, что повышает секрецию комплекса антитело-антиген.
33. Вакцина по п.32, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Nef антигеном.
34. Вакцина по п.32, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает один или более новых сайтов гликозилирования.
35. Вакцина по п.32, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Nef антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, что обеспечивает повышенную гибкость между антителом и антигеном, пониженный протеолиз на линкере и повышенную секрецию.
36. Вакцина по п.32, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Nef антигеном.
37. Вакцина по п.32, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, выбранных из линкерной последовательности, полученной из организма, разлагающего целлюлозу.
38. Вакцина по п.32, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент является гуманизированным.
39. Вакцина по п.32, где комплекс антитело-антиген выбран из SEQ ID NOS: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 31 или 32.
40. Вакцина по п.32, где ДК-специфическое антитело или связи фрагмента выбрано из антитела, которое специфически связывается с МНС класса I, MHC класса II, CD1, CD2, CD3, CD4, CD8, CD11b, CD14, CD15, CD16, CD19, CD20, CD29, CD31, CD40, CD43, CD44, CD45, CD54, CD56, CD57, CD58, CD83, CD86, CMRF-44, CMRF-56, DCIR, DC-ASPGR, CLEC-6, CD40, BDCA-2, MARCO, DEC-205, рецептором маннозы, Лангерином, DECTIN-1, B7-1, В7-2, IFN-γ рецептором и IL-2 рецептором, ICAM-1, Fcγ рецептором, LOX-1 и ASPGR.
41. Вакцина, включающая:
ДК-специфическое антитело или его фрагмент, к которому сконструированный Gag антиген прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Gag антиген является менее чувствительным к протеолитическому распаду путем отщепления одного или более протеолитических сайтов; и
ДК-специфическое антитело или его фрагмент, к которому сконструированный Nef антиген прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Nef антиген включает оптимизацию частоты использования одного или более кодонов, что повышает секрецию комплекса антитело-антиген, где вакцина способна вызвать ВИЧ-специфический Т-клеточный иммунный ответ на Gag p17, Gag p24 и Nef.
42. Вакцина по п.41, где Gag и Nef антигены включают слитый белок.
43. Вакцина по п.41, где Gag и Nef антигены включают слитый белок, отделенный одним или более гибкими линкерами.
44. Вакцина по п.41, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag или Nef антигеном.
45. Вакцина по п.41, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Gag антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, выбранных из линкерной последовательности, полученной из организма, разлагающего целлюлозу.
46. Вакцина по п.41, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент является гуманизированным.
47. Вакцина по п.41, где вакцина выбрана из SEQ ID NOS: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 31 или 32.
48. Вакцина, включающая:
ДК-специфическое антитело или его фрагмент, к которому сконструированный Gag антиген прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Gag антиген является менее чувствительным к протеолитическому распаду путем отщепления одного или более протеолитических сайтов; и
сконструированный Nef антиген, который прикреплен к ДК-специфическому антителу или его фрагменту или к сконструированному Gag антигену, образует комплекс антитело-антиген, где Nef антиген включает оптимизацию частоты использования одного или более кодонов, что повышает секрецию комплекса антитело-антиген, где вакцина способна вызвать ВИЧ-специфический Т-клеточный иммунный ответ на Gag p17, Gag p24 и Nef.
49. Вакцина по п.48, где Gag и Nef антигены к ДК-специфическому антителу или его фрагменту включают слитый белок.
50. Вакцина по п.48, где Gag и Nef антигены включают слитый белок, отделенные одним или более гибкими линкерами.
51. Вакцина по п.48, где белок выбран из SEQ ID NOS.: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 31 или 32.
52. Способ повышения эффективности дендритных клеток, включающий этапы, на которых:
выделяют дендритные клетки пациента;
экспонируют дендритные клетки с активирующими количествами вакцины, включающей:
ДК-специфическое антитело или его фрагмент, к которому сконструированный Gag антиген прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Gag антиген является менее чувствительным к протеолитическому распаду путем отщепления одного или более протеолитических сайтов; и
сконструированный Nef антиген, который прикреплен к ДК-специфическому антителу или его фрагменту или к сконструированному Gag антигену, образует комплекс антитело-антиген, где Nef антиген включает оптимизацию частоты использования одного или более кодонов, что повышает секрецию комплекса антитело-антиген, где вакцина способна вызвать ВИЧ-специфический Т-клеточный иммунный ответ на Gag p17, Gag p24 и Nef; и
вводят вновь нагруженные антигеном, активированные дендритные клетки пациенту.
53. Вакцина, включающая ДК-специфическое антитело или его фрагмент, к которому сконструированный антиген, включающий Циклин D1 или фрагменты, прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Циклин D1 антиген является менее чувствительным к протеолитическому распаду путем отщепления одного или более протеолитических сайтов.
54. Вакцина по п.53, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Циклин D1 антигеном.
55. Вакцина по п.53, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает один или более новых сайтов гликозилирования.
56. Вакцина по п.53, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Циклин D1 антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, что обеспечивает повышенную гибкость между антителом и антигеном, пониженный протеолиз на линкере и повышенную секрецию.
57. Вакцина по п.53, где комплекс антитело-антиген дополнительно включает гибкий линкер между ДК-специфическим антителом или его фрагментом и Циклин D1 антигеном, который включает один или более сайтов гликозилирования, выбранных из линкерной последовательности, полученной из организма, разлагающего целлюлозу.
58. Вакцина по п.53, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент является гуманизированным.
59. Вакцина по п.53, где ДК-специфическое антитело или его фрагмент связывается с одной половиной когерин-докериновой пары и сконструированный Циклин D1 антиген связывается с комплементарной половиной когерин-докериновой пары для образования комплекса.
60. Способ повышения эффективности дендритных клеток, включающий этапы, на которых:
выделяют дендритные клетки пациента;
экспонируют дендритные клетки с активирующими количествами вакцины, включающей:
ДК-специфическое антитело или его фрагмент, к которому сконструированный антиген, включающий Циклин D1 или его фрагмент(ы), прикреплен для образования комплекса антитело-антиген, где Циклин D1 антиген является менее чувствительным к протеолитическому распаду путем отщепления одного или более протеолитических сайтов; и
вводят вновь нагруженные антигеном, активированные дендритные клетки пациенту.
61. Изолированная и очищенная нуклеиновая кислота, которая кодирует полипептид, выбранный из SEQ ID NO.: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 31 или 32.
62. Изолированный и очищенный полипептид, выбранный из SEQ ID NO.: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 31 или 32.