Содержание TNFa и IL-6 в ткани печени, протоковой желчи и сыворотке крови при механической желтухе доброкачественного генеза

Гаджиев Дж.Н., Тагиев Э.Г., Гаджиев Н.Дж., Гулиев М.Р.

СОДЕРЖАНИЕ TNFа И IL-6 В ТКАНИ ПЕЧЕНИ, ПРОТОКОВОЙ ЖЕЛЧИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОГО ГЕНЕЗА

СОДЕРЖАНИЕ И !Ь-6 В ТКАНИ ПЕЧЕНИ, ПРОТОКОВОЙ ЖЕЛЧИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОГО ГЕНЕЗА

Гаджиев Дж.Н., Тагиев Э.Г., Гаджиев Н.Дж., Гулиев М.Р. УДК: 616.36-008-006

Азербайджанский Медицинский Университет, Баку, Азербайджан

Резюме

При хирургическом лечении 67 больных механической желтухой в ткани печени взятой во время операции, в протоковой желчи и в сыворотке крови динамике в сравнительной оценке изучали концентрацию TNFa и 1-6. Все больные в послеоперационном периоде получали общепринятую базисную интенсивную терапию. Степень печеночной дисфункции оценивали с помощью маркеров холестаза (уровень общего билирубина и активность щелочной фосфотазы) и цитолиза гепатоцитов (активность аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы). Наши исследования показали, что глубина изменений изученных показателей зависит от степени тяжести печеночной дисфункции.

Содержание TNFa было более высоким в протоковой желчи, затем в крови и ткани печени. А для 1-6 являлось характерным более высокая концентрация в желчи, затем в ткани печени и крови. Одновременное повышение содержание цитокинов при механической желтухе в ткани печени, желчи и крови указывает развитие цитокинового дисбаланса на локальном и системном уровне.

В послеоперационном периоде выявленные однотипные по направленности изменения уровня TNFa и 1-6 в желчи и крови отражает особенности течения патологического процесса.

Ключевые слова: механическая желтуха, гнойный холангит, цито-

кины.

THE CONTENT OF TNFa AND IL-6 IN LIVER TISSUE, DUCTAL BILE AND BLOOD SERUM IN PATIENTS WITH BENIGN OBSTRUCTIVE JAUNDICE

Hajiyev J.N., Tagiyev E.G., Hajiyev N.J., Guliyev M.R.

In surgical treatment of 67 patients with obstructive jaundice, liver tissue taken during surgery, bile duct and blood serum in the comparative assessment of the dynamics of studied concentration TNFa and IL-6. All patients postoperatively received conventional basic intensive therapy. The degree of hepatic dysfunction was assessed using markers of cholestasis (total bilirubin level and the activity of alkaline phosphatase) and hepatocyte cytolysis (alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase). Our research has shown that the depth of the changes studied parameters depends on the severity of hepatic dysfunction.

TNFa content was higher in the bile duct, then in the blood and liver tissue. For IL-6 is a characteristic higher concentration in the bile and then into the liver and blood. The simultaneous increase in the content of cytokines in obstructive jaundice in the liver, bile and blood indicates the development of cytokine imbalance at local and systemic level.

In the postoperative period revealed the same type of directional changes in the level TNFa and IL-6 in the bile and the blood reflects the peculiarities of the pathological process.

Keywords: obstructive jaundice, suppurative cholangitis, cytokines.

Лечение желчнокаменной болезни (ЖКБ), осложненной синдромом механической желтухи (МЖ), остается одним из актуальных вопросов хирургии. ЖКБ в 78,6% случаев осложняется холедохолитиазом [2] и при этом у 60-70% больных холедохолитиаз сопровождается МЖ [4], а у 40,5% - развивается гнойный холангит (ГХ) [1].

Развивающееся нарушение иммунного статуса на фоне МЖ оказывает существенное влияние на течение патологического процесса, развитие гнойно-воспалительных осложнений и исход хирургического лечения [3, 5, 6].

Изучение роли цитокинов в иммунном и воспалительном ответе имеет важное значение не только для современной иммунологии, но и для хирургии. Известно, что цитокины являются важными участниками и связующими звеньями систем иммунитета, гомеостаза и неспецифической резистентности при любой патологии. Поскольку продукция цитокинов в основном индуцируется в патологическом очаге, их уровни целесообразно определить в соответствующих тканях или средах. Однако, до настоящего времени содержание цитокинов в ткани печени (ТП), протоковой желчи и сыворотке крови остается практически не изученным [3].

Целью данного исследования явилось сравнительное изучение содержания провоспалительных цитокинов ТОТа и ^-6 в ТП, протоковой желчи и сыворотке крови у больных МЖ доброкачественного генеза.

Материалы и методы

Под наблюдением находились 67 пациентов (мужчин - 38, женщин - 29) в возрасте 16-84 лет с МЖ. У всех больных причиной МЖ был холедохолитиаз. Длительность желтухи составила от 1 до 17 дней. Все пациенты после адекватной предоперационной подготовки были оперированы спустя 1-3 сутки после госпитализации: холецистэктомия, холедохолитотомия и наружное дренирование холедоха по Керу выполнена у 37 больным, холецистэктомия и наложение билиодигестивного анастомоза - у 15 больным, малоинвазивные вмешательства - у 15 больных (одномоментная эндоскопическая папиллосфинктерото-мия - 10 и механическая литоэкстраксия -5 ).

Степень печеночной дисфункции (ПД) оценивали с помощью маркеров холестаза (уровень общего билирубина и активность щелочной фосфотазы) и цитолиза гепатоцитов (активность аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы): ПД 1 степени (уровень общего билирубина до 50 мкмоль/л) была у 21 больных, ПД 2 степени (уровень общего билирубина от 50 до 100 мкмоль/л) - у 14, ПД 3 степени (уровень общего билирубина от 100 до 200 мкмоль/л) - у 10, ПД 4 степени (уровень общего билирубина свыше 200 мкмоль/л) - у 9 больных. У 13 больных на фоне МЖ был гнойный холангит (ГХ).

Определение концентраций ТОТа и ^-6 в ТП, про-токовой желчи и сыворотке крови выполнено методом

Гаджиев Дж.Н., Тагиев Э.Г., Гаджиев Н.Дж., Гулиев М.Р. СОДЕРЖАНИЕ Т^а И 1Ь-6 В ТКАНИ ПЕЧЕНИ, ПРОТОКОВОЙ ЖЕЛЧИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОГО ГЕНЕЗА

ИФА с использованием реактивов Dender Medsistems (USA).

Концентрацию TNFa и IL-6 определяли в суперна-тантах в ТП, взятых во время операции, в протоковой желчи - в первой порции взятой во время операции, на 3-и, 7-е сутки после наружной билиарной декомпрессии, а в сыворотке крови - до, на 3-и и 7-е сутки после операции. Цитокины в сыворотке крови определяли у 67 больных: у 21 - с ПД 1 степени, у 14 - с ПД 2 степени, у 10 - с ПД 3 степени, у 9 - с ПД 4 степени и у 13 - с МЖ и ГХ. Из них у 42 также исследовали первую порцию прото-ковую желчь взятой во время операции (ПД 1 степени - 6, ПД 2 степени - 7, ПД 3 степени - 7, ПД 4 степени - 9, МЖ и ГХ - 13) и у 42 в также ТП (ПД 1 степени - 6, ПД 2 степени - 7, ПД 3 степени - 7, ПД 4 степени - 9, МЖ и ГХ - 13). После наружной билиарной декомпрессии концентрация TNFa и IL-6 были исследованы в динамике у 37 больных (с каждой степени ПД- у 6 и с ГХ- у 13).

Всем больным была проведена стандартная общепринятая консервативная терапия. Концентрацию TNFa и IL-6 в сыворотке крови у 15 практически здоровых лиц приняли в качестве контроля. Локальное содержание обеих цитокинов изучали в гепатобиоптатов, взятых у 10 здоровых добровольцев с помощью пункционной биопсии.

Математическая обработка результатов проведена с использованием методов вариацинной статистики и непараметрической критерии Уилкоксона-Манна-Уитни.

Результаты и обсуждения

В целом по группе установлено, что концентрация обоих провоспалительных цитокинов в ТП и протоко-вой желчи отличалась от таковой в сыворотке крови (табл. 1).

В целом по группе концентрация ТОТа в ТП превышал показателя у здоровых лиц в 12,0 раза (р < 0,001), а в крови - в 2,3 раза (р < 0,001). Содержание ^-6 у этих больных в ТП превышал контроля в 12,5 раза (р < 0,001), а в крови в 2,1 раза (р < 0,001).

Как видно из таблицы 1, в целом по группе в желчи концентрация ТОТа в значительной степени превышала его содержание в ТП и в сыворотке крови. В то же время концентрация ^-6 в желчи и ТП была больше, чем в крови.

Как видно из таблицы 1, с увеличением степени ПД параллельно повышается содержание обоих цитокинов во всех 3-х биосредах. Однако, при всех степенях тяжести ПД содержание ТОТа было больше в желчи, чем в крови и ТП. А у больных МЖ и ГХ концентрация данного цито-кина в крови соответствовала её значению в протоковой желчи, но в обеих биосредах была больше, чем в ТП.

У больных с различными степенями ПД отмечалось превышение уровня ^-6 в желчи такового в ТП и крови, а при МЖ с ГХ в ТП- было больше чем желчи и крови.

Таким образом, содержание ТОТа было более высоким в протоковой желчи, затем в крови и ТП. А для ^-6 являлось характерным более высокая концентрация в желчи, затем в ТП и крови.

Сравнительная динамика показателей ТОТа и ^-6 в послеоперационном периоде представлена в табл. 2. В протоковой желчи на 3-и сутки после операции наблюдалось статистически недостоверное повышение концентрации обеих провоспалительных цитокинов по сравнению с показателями до наружной декомпрессии. На 7-е сутки после операции отмечалось в значительной степени снижение содержания ТОТа и ^-6 в желчи по сравнению с предыдущим сроком. После операции в динамике изменений обеих цитокинов в крови тоже

Табл. 1. Содержание цитокинов в ТП, протоковой желчи и в крови больных с МЖ

Цитокины, пкг/мл Биосреда В целом по группе Больные с МЖ 1 степени Больные с МЖ 2 степени Больные с МЖ 3 степени Больные с МЖ 4 степени Больные с МЖ и ГХ Здоровые люди

TNFa ТП 63,4 ± 3,4 26,8-120 46,4 ± 6,2 26,8-68,1 58,8 ± 6,5 36,7-86,3 66,7 ± 8,1 40,1-98,6 69,5 ± 6,4 41,5-103,1 72,2 ± 9,1 51,8-120 5,3 ± 0,5 1,6-7,2

Желчь 109,2 ± 3,5 75-148 82,4 ± 3,0 75-94,2 99,2 ± 6,3 76,1-122 115,8 ± 9,3 76,5-142 118,3 ± 9,2 78,1-148 118,5 ± 3,8 98,2-136 -

Сыворотка крови 94,8 ± 3,4 56,2-166 78,4 ± 3,2 56,2-96,1 87,2 ± 6,5 56,2-121 105,6 ± 8,9 59,5-136 110,7 ± 9,6 61,5-141 109,9 ± 8,7 66,2-166 40,5 ± 1,7 28,6-51,2

IL-6 ТП 55,5 ± 5,0 16,3-125 30,8 ± 8,5 16,3-71,5 49,6 ± 7,1 18,6-76,4 60,3 ± 12,1 21,8-115,8 63,8 ± 10,4 23,1-121 67,7 ± 13,7 26,1-125 4,4 ± 0,6 0,9-6,9

Желчь 57,5 ± 5,1 12,1-133 48,3 ± 7,2 17,7-69,1 57,2 ± 9,4 19,8-89,4 65,1 ± 13,7 23,6-121 67,5 ± 11,9 23,8-123 50,4 ± 11,9 12,1-133 -

Сыворотка крови 38,8 ± 2,5 12,6-101 26,8 ± 1,3 19,6-39,7 33,4 ± 1,7 21,1-40,3 49,4 ± 4,4 21,1-61,5 53,1 ± 6,1 25,7-71,6 46,0 ± 10,0 12,6-101 18,3 ± 1,2 12,2-26,6

Примечание: достоверность с показателями контрольной группы: * - p < 0,05; ** - p < 0,01; *** - p < 0,001.

Гаджиев Дж.Н., Тагиев Э.Г., Гаджиев Н.Дж., Гулиев М.Р.

СОДЕРЖАНИЕ TNFa И IL-6 В ТКАНИ ПЕЧЕНИ, ПРОТОКОВОЙ ЖЕЛЧИ И СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПРИ МЕХАНИЧЕСКОЙ ЖЕЛТУХЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОГО ГЕНЕЗА

Табл. 2. Сравнительная динамика TNFa и IL-6 в разных средах в зависимости от степени ПД

Цито-кины, пкг/ мл

TNFa

IL-6

Биосреда

Желчь

Кровь

Желчь

Кровь

Степень ПД

ПД 1 ст

ПД 2 ст

ПД 3 ст

ПД 4 ст

МЖ и ГХ

ПД 1 ст

ПД 2 ст

ПД 3 ст

ПД 4 ст

МЖ и ГХ

ПД 1 ст

ПД 2 ст

ПД 3 ст

ПД 4 ст

МЖ и ГХ

ПД 1 ст

ПД 2 ст

ПД 3 ст

ПД 4 ст

МЖ и ГХ

До операции

82,4 ± 3,0 75-94,2

99,2 ± 6,3 76,1-122

115,8 ± 9,3 76,5-142

118,3 ± 9,2 78,1-148

118,5 ± 3,8 98,2-136

78,4 ± 3,2 56,2-96,1

87,2 ± 6,5 56,2-121

105,6 ± 8,9 59,5-136

110,7 ± 9,6 61,5-141

109,9 ± 8,7 66,2-166

48,3 ± 7,2 17,7-69,1

57,2 ± 9,4 19,8-89,4

65,1 ± 13,7 23,6-121

67,5 ± 11,9 23,8-123

50,4 ± 11,9 12,1-133

26,8 ± 1,3 19,6-39,7

33,4 ± 1,7 21,1-40,3

49,4 ± 4,4 21,1-61,5

53,1 ± 6,1 25,7-71,6

46,0 ± 10,0 12,6-101

На 3-и сутки по-слеопер.

90,1 ± 3,1 85-105

117,9 ± 5,4 95,1-133

131,7 ± 10,3 89,3-163

135,6 ± 9,1 90,5-167

138,9 ± 8,9 102-195

95,1 ± 3,1 74,6-121

115,8 ± 6,3 69,4-141

130,0 ± 9,7 69,7-161

138,0 ± 10,5 76,1-171

130,5 ± 11,1 74,9-193

60,8 ± 8,7 39,6-95,3

68,8 ± 9,0 41,7-112

80,5 ± 11,8 40,3-135

83,3 ± 9,8 40,1-135

62,1 ± 11,8 14,6-138

62,2 ± 3,2 43,4-91,6

69,8 ± 6,7 41,7-116

81,6 ± 11,3 39,3-131

83,5 ± 11,9 38,3-135

64,4 ± 9,8 29,9-136

На 7-е сутки после опер.

40,6 ± 9,2 22,6-85,1

ДА

79,8 ± 7,6 58,3-120

101,3 ± 10,8 65,6-148

106,1 ± 10,8 68,3-151

111,7 ± 4,1 95,5-144

88,0 ± 3,9 66,2-115

101,3 ± 6,2 56,1-125

124,1 ± 8,0 58,1-143

129,9 ± 10,6 58,5-156

123,0 ± 10,6 72,6-187

24,4 ± 4,2 14,6-41,3

33,6 ± 2,2 28,6-46,7

60,7 ± 11,7 35,4-116

62,1 ± 8,8 31,6-115

57,1 ± 8,5 28,2-124

57,5 ± 3,8 34,1-86,3

60,5 ± 4,8 39,3-96,1

74,3 ± 10,1 39,3-126

78,8 ± 10,3 35,6-125

55,5 ± 10,9 16,1-131

Здоровые люди

40,5 ± 1,7 28,6-51,2

18,3 ± 1,2 12,2-26,6

Примечание: достоверность относительно к исходной: Д - p0 < 0,05;

аа - p0 < 0,01; ААА - p0 < 0,001.

наблюдалось аналогичная закономерность. При этом следует отметить, что на 7-е сутки при всех степенях ПД и МЖ с ГХ содержание обеих цитокинов в крови было больше, чем в желчи.

Выводы

1. Одновременное повышение содержание цитокинов при механической желтухе в ткани печени, желчи и крови указывает на развитие цитокинового дисбаланса на локальном и системном уровне.

2. Локальная продукция TNFa и IL-6 при механической желтухе взаимосвязана с тяжестью степени печеночной дисфункции и гнойным воспалением желчевы-водящих путей.

3. Концентрация TNFa и IL-6 в желчи превышает такого в ткани печени и крови.

4. В послеоперационном периоде выявленные однотипные по направленности изменения уровня TNFa и IL-6 в желчи и крови отражают особенности течения патологического процесса.

Литература

1. Агаев Б.А. Методика дренирования желчных протоков у больных с билио-дигестивными анастомозами при механической желтухе и остром холангите / Б.А. Агаев, Р.М. Агаев, Р.И. Гасымов // Хирургия. - 2011. - № 1. - С. 18-22.

2. Байрамов Н.Ю. Сравнительная характеристика предоперационной магнито-резонансной и интраоперационной холангиографии в диагностике поражения общего желчного протока / Н.Ю. Байрамов, А.С. Гюрарас, В.А. Пашазаде // Клш. xipyp™. - 2013. - № 4. - С. 20-23.

3. Гаджиев Дж.Н. Профиль цитокинов у больных при остром калькулезном холецистите и коррекция его нарушений / Дж.Н. Гаджиев, Э.Г. Тагиев, А.Г. Гусейна-лиев и др. // Клш. xipypra. - 2013. - № 4. - С. 17-19.

4. Ермаков Е.А. Диагностика стеноза большого сосочка двенадцатиперстной кишки у больных с холедохолитиазом / Е.А. Ермаков, А.Н. Лищенко // Вестник хирургии. - 2007. - № 4. - С. 80-83.

5. Ступин В.А. Показатели иммунной системы при механической желтухе доброкачественного генеза / В.А. Ступин, В.В. Лаптев, А.Ю. Цкаев, Н.Е. Гивировская // Анналы хирургической гепатологии. - 2008. - Т. 13, № 2. - С. 69 - 75.

6. Treglia-Dal Lago M. Phagocytosis and production of H202 by human peripheral blood mononuclear cells from patients with obstructive jaundice / M. Treglia-

Dal Lago, J. Jukemura, M.C. Machado // Pancreatology. - 2006. - Vol. 6 (4). - P. 273-278.

КОНТАКТНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

105203, г. Москва, ул. Нижняя Первомайская, 70 e-mail: nmhc@mail.ru

А

АЛА

АЛ

Л

Л

AAA

Л

Л

Л