Аэромоноз карповых рыб в водоёмах с различной техногенной нагрузкой

УДК 639.3.091

АЭРОМОНОЗ КАРПОВЫХ РЫБ В ВОДОЁМАХ С РАЗЛИЧНОЙ

ТЕХНОГЕННОЙ НАГРУЗКОЙ

Померанцев Д.А.

ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная

академия»

Ключевые слова: микробная контаминация, аэромоноз,

микробиологические исследования, уровень заболеваемости, летальность.

Key words: м1егоЫа1 contamination, aeromonas, microbiological studies, the incidence, mortality.

Введение. Эпизоотологический мониторинг и скрининговые исследования биотических и абиотических компонентов водной экосистемы позволяют осуществлять эпизоотологическую диагностику болезней среди рыб и других гидробионтов, определять состояние в ветеринарно-санитарном отношении водной среды конкретной акватории и прогнозировать эпизоотическую ситуацию и возможную эпидемическую угрозу в конкретных условиях места и времени.

Учитывая, что в естественных водоемах и водоемах-охладителях установлен высокий уровень микробной контаминации гидробионтов и среды их обитания, в т.ч. и аэромонадами, в них сохраняется угроза вспышечного проявления болезней рыб с вытекающими из этого эпизоотическими и социальными последствиями.

Целью нашей работы было изучить в сравнительном аспекте и динамике функционирование инфекционной паразитарной системы аэромоноза рыб, особенностей его эпизоотического проявления в условиях индустриального рыбоводства.

Материалы и методы исследований. В основу исследований положен комплексный эпизоотологический подход, микробиологические, патоморфологические, гематологические и клинические исследования, все направления эпизоотологической диагностики, методы современной прогностики и статистические методы повышения качества.

Материалом для исследования служили объекты водной среды водоема-охладителя, пробы карповых рыб, результаты многолетних скрининговых исследований ветеринарных лабораторий субъектов Федерации, а также материал, накопленный за многие годы на кафедре эпизоотологии и инфекционных болезней ФГОУ ВПО НГСХА. Производственные эксперименты и мониторинго-скрининговые

исследования проводили комиссионно в 2-3х повторностях. Моделирование эпизоотической ситуации осуществляли путем построения

линейно-графических и линейно-радианных схем-моделей и их экспертной оценки.

Результаты исследований и обсуждение. В ходе эпизоотологических экспериментов в условиях садков тепловодного рыбоводного хозяйства установили, что в отдельных садках, при высокой плотности посадки карповых рыб, среди годовиков и рыб товарной группы отмечаются случаи поражения боковой поверхности их тела в виде нескольких язв диаметром до 3-х и более см. У отдельных особей рыб отмечено слабое ерошение чешуи в области брюшка, помутнение и покраснение кожных покровов. При патологоанатомическом вскрытии таких рыб устанавливали количество асцидной жидкости желтоватого или розоватого цвета в брюшной полости, кровоизлияния на сердце, печени, незначительную гиперемию заднего отдела кишечника. У отдельных особей кровоизлияния имели место и на поверхности плавательного пузыря. При вскрытии кишечника у отдельных особей обнаружены взрослые цестоды - ботриоцефалы по 3-5 экземпляров.

В садках, где плотность посадки рыб не превышала технологических параметров, вышеописанных случаев заболевания практически не отмечалось.

С целью изучения эпизоотической ситуации по инфекционным болезням рыб в этом рыбоводном хозяйстве провели ретроспективный эпизоотологический анализ за период с 1990 года. При этом проанализировали данные ветеринарной статистики, отчеты о НИР, проведенной Государственным научно-исследовательским институтом озерного и речного хозяйства (ГосНИОРХ), данные ветеринарных лабораторных исследований по подтверждению или исключению инфекционных болезней рыб в этом хозяйстве. Установили, что еще в 1992 году специальными исследованиями и комиссионными экспертными оценками среди карповых рыб в садках был официально зарегистрирован аэромоноз. В тоже время это заболевание было установлено у сеголеток толстолобика, белого амура и карпа. В ейских лотках группой экспертов были обнаружены до нескольких сотен экземпляров рыб, у которых имели место беловато-красноватого цвета концы плавников, некрозы мягких тканей плавников. У отдельных особей наблюдалось отторжение брюшных плавников. В этот период была отмечена массовая гибель личинок и мальков. По заключениям экспертов аэромоноз карповых рыб в водоеме-охладителе данного рыбохозяйства с проявлением некроза плавников был расценен как смешанная инфекция, как ассоциативная болезнь в сочетании с эктопаразитозами.

Наличие скрытых форм аэромоноза диагностировали путем применения витальных красителей. В те годы были установлены случаи заболевания аэромонозом канального сомика в форме дермального некроза, возникшего на фоне переуплотнения и кормовых токсикозов, а

среди карповых рыб были установлены воспаление плавательного пузыря, с практически тотальным поражением популяции этого вида рыб. Диагностировались ботриоцефалез, сфероспороз, миксоболез, криптобиоз, амфибиоз.

Провели ретроспективный эпизоотологический анализ результатов исследований, проведенных специалистами ГосНИОРХ и ветлаборатории (табл. 1) и установили, что среди мальков карпа в садках водохранилища диагностировались инфекционные и инвазионные болезни, вызываемые различными возбудителями. Аэромоноз среди других видов патологий занимает особое место. В форме жаберной и плавниковой гнили эта нозоединица регистрировалась от 46,6 до 80% у мелких и от 53,3 до 80% у крупных мальков карпа в различных садках.

На основании результатов анализа функционирования паразитарных систем разработали их линейно-графические схемы-модели (рис. 1) и подтвердили, что в условиях садкового хозяйства в тепловодном водохранилище функционируют с различной степенью активности 18 паразитарных систем с вовлечением самых ранних субпопуляций (мальков) карпа. Схема-модель разработана впервые.

Методами современной прогностики (фактографии, экспертных оценок, прямой, косвенной и инверсивной верификации) установили, что функционирование паразитарной системы дифилоботриоза и аэромоноза происходит фактически в одних и тех же границах в субпопуляции более крупных мальков карпа. Все это косвенно подтверждает их ассоциативное функционирование.

Это подтверждается и результатами анализа вовлеченности карпов-годовиков в функционирование этих паразитарных систем.

С целью изучения характера эпизоотического процесса аэромоноза карпов в базовых хозяйствах провели производственный эпизоотологический эксперимент, задачами которого были уточнить главный этиологический фактор этой инфекции в конкретных условиях места и времени. А также изучить региональный механизм передачи возбудителя в популяции карповых рыб и определить факторы, активизирующие этот механизм.

С этой целью были сформированы на принципах аналогов подопытные (заболевшие) и контрольные (клинически здоровые) группы рыб одного возраста, одинаковых по массе. С участием специалистов ветеринарной лаборатории изучили у них микробный пейзаж кишечника, а также среды их обитания. Провели серию бактериологических исследований проб из органов и тканей рыб обеих групп. Результаты исследований сгруппировали в специальные таблицы и провели статистическую обработку с использованием приемов современной прогностики и статистических методов повышения качества по Хитоси Кумэ.

1. Анализ и экспертная оценка зараженности мальков карпа в садках Черепетского водохранилища

№ п/п Название паразитов Садок № 56 Садок № 62 Садок № 74 Садок № 64 М ±

мелкие крупные мелкие крупные мелкие крупные мелкие крупные мелкие крупные

ЭИ % ИИ ЭИ % ИИ ЭИ % ИИ ЭИ % ИИ ЭИ % ИИ ЭИ % ИИ ЭИ % ИИ ЭИ % ИИ ЭИ в % ИИ в %

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

1 Criptobia branchialis 6,3 1 - - - - - - 13,3 3 - - - - - - 4,9±0,2 -

2 Apiosoma piscicola 13,3 2 46,6 7 - - - - 13,3 3 - - - - - - 6,7±0,3 11,7±0,5

3 A. campanulata 6,3 1 33,3 5 53,3 8 20 3 46,6 7 40 6 13,8 13 13,3 2 29,9±1,4 26,7±1,3

4 Haemiophiris branchiarum - - 6,3 1 - - - - - - - - - - - - - 1,6±0,08

5 Trichodinella epizootica 13,3 2 13,3 2 6,3 1 40 6 26,6 4 40 6 20 3 - - 16,6±0,8 23,3±1,1

6 Trichodinia acuta 33,3 5 6,3 1 6,3 1 13,3 2 40 6 6,3 1 13,3 1 40 6 23,2±1,2 16,5±0,8

7 T. pediculus 6,3 1 - - 13,3 2 26,6 4 26,6 4 26,6 4 13,3 2 46 6 14,9±0,7 24,8±1,2

8 T. mutabilis 33,3 5 13,3 2 20 5 - - - - - - - - - - 13,3±0,6 3,3±0,1

9 Ichthyophthyri us multifiliis - - 6,3 1 - - - - - - - - - - - - - 1,6±0,08

10 Eimerriae sp. 6,3 1 - - - - - - - - - - - - - - 1,6±0,07 -

11 Sphaerospora carassii 33,3 2 6,3 1 13,3 5 20 3 26,6 4 40 6 - - - - 13,3±0,6 16,6±0,8

12 Gyrodactylus katharineri - - - - - - - - - - - - 6,3 1 13,3 1 1,6±0,06 3,3±0,1

13 Diplostomum sp. - - 6,3 1 - - - - - - - - 6,3 1 - - 1,6±0,06 1,6±0,07

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

14 01осЫ&а 8р. - - 6,3 1 - - - - - - 13,3 2 - - - - - 4,9±0,2

15 Заболевания: Плавниковая гниль (аэромоноз) 20,0 3 3,3 2 - - 40,0 6 - - 53,3 8 20,0 3 26,6 8 10,0±0,5 33,3±1,6

16 Жаберный некроз (аэромоноз) 26,6 4 40,0 6 20,0 3 40,0 6 53,3 8 20,0 3 60,0 9 26,0 8 40,0±2,0 31,5±1,6

17 «Белый рот» 6,3 1 26,0 4 - - 40,0 6 - - 46,6 7 - - 40,0 6 1,6±0,07 38,15±1,9

18 ВоШпо- серЬа1ш opsariichtydis - - 38,0 23 - - 40,0 13 - - 37,0 26 - - 41,0 24 4,9±0,2 39,0±1,8

ЭИ в %

Рис. 1. Линейно-графическая схема-модель экспертной оценки зараженности мальков карпа различными паразитами в условиях садков в водоеме-охладителе (по данным представленным ГосНИОРХ и ветлаборатории).

ВоШшосерЬа^

ор8ашсЫу&8

В таблице 2 представлена сравнительная оценка микробного пейзажа кишечника здоровых и больных рыб.

Установили, что микробный пейзаж кишечника здоровых и больных рыб хотя и представлен в основном одинаковыми родами

микроорганизмов, но в количественном отношении разница весьма

значительна. Общее количество микроорганизмов в кишечнике больных в 27,8 раза превосходит аналогичный показатель у клинически здоровых рыб такого же возраста. Микроорганизмов из рода Аэромонада в кишечнике больных рыб в 23,5 раза больше, чем у клинически здоровых рыб; в 11,7 раза больше у больных рыб и псевдомонад и в 181 раз больше «прочих» микроорганизмов.

Следует отметить, что эти же группы микроорганизмов выделены и из проб среды обитания (воды водоема), при этом на долю аэромонад в количественном отношении приходилось 57,9% всей присутствующей в водной среде микрофлоры. На основании полученных результатов

исследований в 2002-2005 гг. провели углубленное изучение

возможностей микробной контаминации органов и тканей больных и клинически здоровых рыб (табл. 3) и установили, что от больных рыб получено изолятов микроорганизмов в 1,9 раз больше, а в расчете на 1 особь рыб - в 2,4 раза больше, чем в контрольной группе. Наибольшее относительное количество изолятов получено из кишечника как больных, так и клинически здоровых рыб (соответственно 57,8 и 83,7%).

От больных рыб изоляты микроорганизмов в 13,3% случаев получены из печени, в 9,6% - из почек, в 13,3% - из селезенки, в 6% случаев из крови, что значительно превышает уровень изоляции от клинически здоровых рыб (соответственно в 1,9; 1,37; 5,78 раза больше, а из крови клинически здоровых рыб изолятов микроорганизмов вообще не получено).

Только от больных рыб из органов и тканей выделены микроорганизмы вида Aeromonas hydrophila, в то время как в контрольной группе рыб - они выделены только из кишечника. В целом от рыб подопытной группы возбудитель этого вида выделен в 2,5 раза чаще, чем от рыб контрольной группы.

От рыб подопытной группы значительно чаще (в 1,9 раза), чем от контрольных из органов и тканей выделены микроорганизмы рода Aeromonas punctata. Из печени в 12,9% случаев, почек и селезенки в 19,4%, из крови в 9,8% случаев, 38,5% изолятов этого вида аэромонад получено из кишечника.

Значительно выше у рыб подопытной группы, чем у контрольных оказалась и контаминация органов и тканей микроорганизмами других видов и в частности Pseudomonas fluorescens - на 33,5%, а Vibrio anguillarum вообще выделены только от больных особей карповых рыб.

№ п/п Группы рыб в эксперименте Характеристика групп рыб по эпизоотическим показателям Количество экз. Возраст Масса, г. Результаты исследований, количество микроорганизмов, млн.м.к./г.

Всего Аэромонады Псевдомонады Прочие м/о

Всего % выдел. Всего % выдел. Всего % выдел.

1 Подопытная Больные аэромонозом 17 годовики 78,6±5,5 591,2±24,18 359,8 63,6 60,7 10,7 45,0 25,7

Отношение 1-й группы ко 2-й в % 64,3% > в 27,8 р. > в 23,5 р. - 7,3% > в 4,7 р. - 13,7% > в 181,25 р. +22%

2 Контрольная Клинически здоровые 17 годовики 122,6±28,9 21,3±1,05 15,3 71,9 5,2 24,4 0,8 3,7

Пробы воды, м.к./мл (среда обитания рыб) 2 38000 22000 57,9 7000 18,4 9000 23,4

Группа иссл рыб Кол- во иссл. экз. Объект иссл. Результаты исследования

Идентиф. культур Aeromonas hydrophila A eromonas punctata Pseudomonas fluorescens Vibrio anquillarum Прочие

всего % к общ. кол-ву всего % выдел. всего % выдел. всего % выдел. всего % выдел. всег о % выдел.

1 2 1 2 1 2 1 2 1 2

Клинически больные 8 Печень 11 13,3 4 1б Зб,4 4 12,9 16 - - - 2 40 18,2 1 20 9,1

Почки 8 9,б 2 8 25 б 19,4 75 - - - - - - - - -

Селезенка 11 13,3 3 12 27,2 б 19,4 54,5 2 11,1 18,2 - - - - - -

Кровь 5 б,0 - - - 3 9,8 60 3 16,7 60,0 - - - - - -

Кишечник 48 57,8 1б б4 33,3 12 38,5 25,0 13 81,2 27,1 3 60 6,3 4 80 83

n=8 3 8 = n 100 25 100 30,1 n=31 100 37,3 n=18 100 21,7 n=5 100 6,0 n=5 100 6,0

Клинически здоровые 10 Печень 3 7,0 - - - 1 6,25 33,3 2 14,3 66,7 - - - - - -

Почки 3 7,0 - - - 2 12,5 66,7 1 7,1 33,3 - - - - - -

Селезенка 1 2,3 - - - 1 б,25 100 - - - - - - - - -

Кровь - - - - - - - - - - - - - - - - -

Кишечник Зб 23,7 10 100 27,8 12 75 33,3 11 78,б 30,6 - - - 3 100 2,8

п=10 n=43 100 20 100 23,3 п=16 100 37,2 n=14 100 32,6 n=3 100 214,3

Отношение в % первой группы ко второй 193 250 129,2 193,8 100,2 128 66,5 166,7

Примечание: первый столбец в графе % выделения - доля в % от общего количества изолятов данного вида микроорганизмов, полученных из органов и тканей данной группы рыб, второй столбец этой же графы - доля в % от количества изолятов микроорганизмов всех видов, выделенных из конкретного органа, системы

На основании полученных результатов бактериологических исследований разработали линейно-графические и линейно-радианные схемы-модели микробной контаминации органов и тканей больных рыб в условиях водоема-охладителя (рис. 2 и 3) и подтвердили, что главным этиологическим фактором возникшего заболевания карповых рыб в условиях рыбохозяйства являются Aeromonas hydrophila и Aeromonas punctata, обитавшие в водной среде водоема и кишечнике клинически здоровых карповых рыб.

Развитию инфекционного, а в последующем и эпизоотического процесса этой патологии явились стрессовые воздействия на рыб -переуплотненная посадка, резкие колебания гидрохимических условий обитания рыбопосадочного материала.

Биологическими исследованиями (биологическим моделированием), проведенным специалистами государственной ветеринарной службы подтверждена патогенность полученных изолятов А. hydrophila и A. рunctata.

Изучая спектр патогенности при аэромонозе карповых рыб в условиях данного водохранилища, установили, что в эпизоотический процесс этой инфекции оказались вовлеченными сеголетки и годовики карпов разных породных групп (наиболее поражаемыми оказались триплодный и хозяйственный гибриды), толстолобик, белый амур и канальный сомик.

Установили, что в конкретном водохранилище сформировался региональный механизм передачи возбудителя через среду обитания, в которой постоянно и в значительном количестве переживают практически все виды аэромонад, несколько видов псевдомонад и другие виды микроорганизмов, составляющих энтеробиоз карповых рыб. Под воздействием неблагоприятных факторов, воздействующих на гидробионтов в условиях водохранилища, естественная резистентность организма рыб резко снижается, возникают сдвиги в их лейкограмме, а микроорганизмы, обитающие в кишечнике или попадающие в организм из среды обитания, проникают в отдельные органы и системы и нередко у рыб развивается инфекционный процесс, такие особи становятся не только микробоносителями, но и микробовыделителями, контаминируя среду обитания возбудителем аэромоноза и других инфекций. Нередко аэромоноз у карповых рыб развивается как эндогенная инфекция, без заноса возбудителя из вне хозяйства.

В ходе эпизоотологических исследований совместно со специалистами экспертных групп установлено, что, как правило, экземпляры рыб с выраженным проявлением аэромонозной инфекции одновременно поражены и ботриоцефалюсами. Эти особенности проявления аэромоноза в условиях Черепетского водохранилища устанавливались и другими исследователями.

Усл. обознач. Показатели

$$$$$$$$$$$$$ Микробный пейзаж здор. рыб условно за100%

-//- больных аэромонозом

Колич-ые отношения микт. пейз. здор.и больн. аэромонозом рыб

Колич. отношения аэромонад в кишечнике здор. и больн. рыб

-//- псевдомонад -//-

-//- прочей микрофлоры

2. Линейно-графическая и линейно-радианная схемы-модели экспертной оценки микробного пейзажа кишечника рыб и его отдельных составляющих при аэромонозе в условиях водоема-охладителя, 2002 - 2005 гг.

Усл. обознач. Показатели

Уровень в контроле

Уровень в опытной группе

— 1 в т.ч. доля изолятов, выд-х из печени

\ 2 в т.ч. доля изолятов, выд-х из почек

\ 3 -//- селезенки

\ 4 -//- крови

\ 5 -//- кишечника

Рис. 3. Линейно-графические и линейно-радианные схемы-модели и экспертная оценка контаминации органов и тканей рыб, больных аэромонозом, микроорганизмами видов A. hydrophila, A. punctata, Ps. Fluorescens в условиях водоема-охладителя, 2002-2005 гг.

Заключение. В конкретном водоеме-охладителе сформировалась инфекционная паразитарная система аэромоноза, соактантами которой оказались микроорганизмы Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata, сеголетки и годовики карповых рыб (триплодный и хозяйственный гибриды карпа, толстолобик, белый амур, канальный сомик), здесь сформировался региональный механизм передачи возбудителя через среду обитания рыб. Нередко аэромоноз у карповых рыб развивается как эндогенная инфекция.

ЛИТЕРАТУРА: 1. Ярошевич, К.О. Ассоциативные проявления ботриоцефалеза и аэромоноза в индустриальном рыбоводстве (эпизоотология и меры борьбы): автореф. дис...канд. вет. наук. -Н.Новгород, 2003. - 22 с. 2. Юхименко, Л.Н. Современное состояние проблемы аэромоноза рыб / Л.Н. Юхименко, Г.С. Койдан // ЭН ВНИЭРХ, 1997. - вып. 2. - С. 1-5. 3. Кротенков, В.П. Эпизоотологические особенности ботриоцефалеза карпа при садковом выращивании в водоемах-охладителях ТЭС // В.П. Кротенков // Бюлл. ВИГИС, 1986. -№43. - С. 76

АЭРОМОНОЗ КАРПОВЫХ РЫБ В ВОДОЁМАХ С РАЗЛИЧНОЙ ТЕХНОГЕННОЙ

НАГРУЗКОЙ

Померанцев Д.А.

Резюме

Мы изучили Aeromonas инфекции паразитарной системы и ее членов (Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata, различные виды рыб и разных возрастов). Основные особенности системы были установлены.

AEROMONAS CARP FISH IN RESERVOIRS WITH DIFFERENT ANTHROPOGENIC

LOAD

Pomerancev D.A.

Summary

We studied Aeromonas infection parasitic system and its members (Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata, different kinds of fish and different ages). The main particularities of the systems were installed.