Применение метода ВЭЖХ для анализа соединений платины в лекарственных препаратах

Биомедицина • № 5, 2010, С. 107-109

Результаты и обсуждение

Результаты исследования противовоспалительной активности синтезированных соединений представлены в таблице.

Из представленных данных видно, что все синтезированные вещества по проявляемой антиэкссудативной активности превышают препарат сравнения - кето-нал, тогда как индометацин - все за исключением NcQPhoAB, NcQPhmAB и NcQPhGAB. Нужно отметить, что ациклические формы проявляют меньшую активность по сравнению с циклическими, что еще раз доказывает эффективность использования производных хина-золинона-4 для поиска новых НПВС.

Выводы

Полученные результаты свидетельствуют о том, что соединение QPhGT

обладает максимальной антиэкссудативной активностью, что соответствует ранее проведенному прогнозу.

Список литературы

1. Сернов, Л.Н. Элементы экспериментальной фармакологии. /Л.Н. Сернов, В.В. Гацура. - М., 2000. - 352 с.

2. Хёльтье Х.-Д. Молекулярное

моделирование: теория и практика/Х.-Д. Хёльтье, В. Зиппль, Д. Роньян, Г. Фоль-керс. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2010 - 318 с.: ил. - (Медицинская химия).

3. Acta Poloniae Pharmaceutica -Drug Research, Vol. 65 No. 1 pp. 11-20, 2008.

4. E-Journal of Chemistry, 6(4),

1055-1062, 2009.

5. European Journal of Medicinal

Chemistry, Volume 44, Issue 1, January, Pages 83-90, 2009.

Применение метода ВЭЖХ для анализа соединений платины в лекарственных препаратах

А.С.Осипов, П.В.Бобылев, А.А.Новак, Е.Б.Нечаева

Научный центр экспертизы средств медицинского применения, Москва

Координационные соединения платины II длительное время применяют в медицинской практике для лечения онкологических заболеваний [2]. Циспла-тин (цис-изомер диаминодихлорплати-ны; цис-ДДП) и карбоплатин описаны в Британской и Американской Фармако-пеях [3, 4]. За последние десятилетия в Российской Федерации зарегистрированы десятки лекарственных препаратов из данной фармакологической группы. Зарегистрированные лекарственные препараты производятся фармацевтическими фирмами России, Чехии, Румы-

нии, Аргентины, Индии, Германии и ряда других стран.

В нормативных документах на эти препараты, особенно регистрации конца 80-90-х годов, приведены различные методики контроля качества препаратов платины по показателям «количественное содержание» и «однородность дозирования». Однако, необходимо отметить, что в нормативных документах на эти препараты последних лет регистрации приведена унифицированная методика количественного определения, описанная в Европейской и Бри-

танской Фармакопеях. Методика основана на хроматографировании соединений платины в условиях нормально-фазовой хроматографии; сорбент колонок - ами-нопропилсилил силикагель, подвижная фаза - смесь ацетонитрила и воды в соотношении 87:13.

Начиная с 2000 г. в Российской Федерации регистрируются препараты окса-липлатина [4, 5]. Для определения количественного содержания оксалиплатина в лекарственных препаратах применяют различные варианты обращено-фазовой и ион-парной хроматографии. Следует отметить, что методики хроматографирования оксалиплатина на колонках с аминопропилсилил силикагелем в нормативных документах на эти препараты не приведены.

Цель. Исследование возможности применения нормально-фазовой хроматографии на колонках с аминопропилси-лил силикагелем для анализа препаратов оксалиплатина, а также доказательство возможности применение этих колонок для определения примеси транс-изомера диаминодихлорплатины (транс-ДДП), поскольку содержание транс-ДДП нормируется в препаратах цисплатина.

Материалы и методы

Работа проводилась с использованием хроматографа «Agilent», серия 1100 с диодно-матричным детектором; производство Agilent Technologies (США).

Хроматографирование осуществляли на колонках: Zorbax NH2 250 х 4,6 мм (5 мкм) производства Agilent Technologies (США), Luna NH2 250 х 4,6 мм (5 мкм) производства Phenomenex (США) и Equisil APS-2 150 х 4,6 мм (3 мкм) производства Dr. Maisch GmbH (Германия). Тип сорбента всех тестируемых колонок

- аминопропилсилил силикагель.

Применяли подвижную фазу: ацетонитрил-вода (9:1), скорость потока - 1,5 мл/мин. Температура 25°С. Образцы вводили в объёме 5 мкл. Детектирование осуществляли при 220 нм и 250 нм (селективное детектирование оксали-платина). Запись спектров поглощения от 200 до 400 нм. В работе использовали стандартные образцы цисплатина, окса-липлатина и карбоплатина Европейской Фармакопеи.

Результаты и их обсуждение

Хроматографирование на колонках Zorbax NH2 и Luna NH2 применяли для разделения транс-ДДП и цис-ДДП. Коэффициенты емкости (К'), полученные на колонке Zorbax NH2, составили: транс-ДДП - 0,47; цис-ДДП - 1,67; селективность колонки - 3,55. Значение К' анализируемых соединений на колонке Luna NH2: транс-ДДП - 0,76; цис-ДДП

- 4,14; селективность сорбента колонки Luna NH2 существенно выше - 5,45. Величина К' цисплатина (цис-ДДП) на колонке Equisil APS-2 - 0,77. Значения К' для оксалиплатина составили: 3,72 - на колонке Zorbax NH2, 4,57 - на колонке Luna NH2 и 1,61 - на колонке Equisil APS-2. Величены К' для карбоплати-на составили: 14,97 - на колонке Luna NH2 и 4,81 - на колонке Equisil APS-2. На основании особенностей структурной формулы карбоплатина можно предположить, что при анализе данного соединения на колонке Luna NH2 имеет место смешанный нормально-фазовый и обращено-фазовый механизм разделения. Наилучшая форма пиков анализируемых соединений была получена при хроматографировании на колонке Equisil APS-2 (рис.).

Рис.1. Хроматограмма разделения смеси стандартных образцов координационных соединений платины на колонке Equisil APS-2 150 х 4,6 мм (3 мкм). Условия анализа: подвижная фаза - ацетонитрил - вода (9:1); скорость потока - 1,5 мл/мин; детектирование при 220 нм.

1 - цисплатин, 2 - оксалиплатин, 3 - карбоплатин.

В процессе хроматографирования были записаны спектры поглощения анализируемых соединений. Цисплатин имеет максимумы поглощения 207 нм и 310 нм (существенно меньшей интенсивности). Оксалиплатин имеет два максимума поглощения 207 нм и 250 нм. При хроматографировании кар-боплатина с использованием диодноматричного детектора у соединения не было обнаружено выраженных максимумов поглощения.

Выводы

1. Хроматографические колонки на основе аминопропилсилил силикагеля

могут быть использованы для анализа всех лекарственных препаратов (в том числе оксалипла-тина) из группы координационных соединений платины. В ходе исследования было выявлено, что колонки весьма существенно отличаются по свойствам при анализе этих соединений.

2. Установлено, что колонка Luna NH2 обладает наибольшей селективностью к паре транс-ДДП / цис-ДДП, поэтому обладает преимуществом при анализе препаратов цисплатина.

3. Для анализа препаратов карбопла-тина наиболее рационально применение колонки Equisil APS-2, поскольку позволяет значительно сократить время анализа.

Список литературы

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Новая волна. Т.2. С 427429, 2000.

2. The United States Pharmacopoeia XXX ed.

3. British Pharmacopoeia 2007.

4. European Pharmacopoeia ver. 6.8.

2

4

6

8