НАПРАВЛЕННОЕ ИНГИБИРОВАНИЕ TGF БETA

1. Белок, содержащий:
a) человеческий TGFβRII или его фрагмент, способный связывать TGFβ; и
b) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связывающий человеческий белок лиганд программируемой смерти 1 (PD-L1, Programmed Death Ligand 1).
2. Полипептид, содержащий:
a) по меньшей мере вариабельный домен тяжелой цепи антитела, который связывает белок лиганд программируемой смерти 1 (PD-L1); и
b) человеческий TGFβRII или его фрагмент, способный связывать TGFβ.
3. Полипептид по п.2, также содержащий аминокислотный линкер, соединяющий С-конец вариабельного домена с N-концом человеческого TGFβRII или его фрагмента.
4. Полипептид по.3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3.
5. Нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид по любому из п.2-4.
6. Нуклеиновая кислота по п.5, также содержащая вторую нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере вариабельный домен легкой цепи антитела, который при комбинировании с полипептидом образует антигенсвязывающий сайт, который связывает PD-L1.
7. Нуклеиновая кислота по п.6, где вторая нуклеотидная последовательность кодирует аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1 (секретируемую легкую цепь лямбда анти-PD-L1).
8. Клетка, содержащая нуклеиновую кислоту по п.5 и вторую нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере вариабельный домен легкой цепи антитела, который при комбинировании с полипептидом образует антигенсвязывающий сайт, который связывает PD-L1.
9. Клетка по п.8, в которой вторая нуклеотидная последовательность кодирует аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1.
10. Клетка, содержащая нуклеиновую кислоту по п.6 или7.
11. Способ получения белка, включающего а) TGFβRII или его фрагмент, способный связывать TGFβ, и b) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связывающий человеческий белок лиганд программируемой смерти 1 (PD-L1, Programmed Death Ligand 1), при этом способ включает поддержание клетки по любому из п.8-10 в условиях, обеспечивающих экспрессию белка.
12. Способ по п.11, также включающий сбор белка.
13. Белок, содержащий:
полипептид по любому из пп. 2-4; и
по меньшей мере вариабельный домен легкой цепи антитела, который при комбинировании с полипептидом образует антигенсвязывающий сайт, который связывает PD-L1.
14. Белок по п.13, содержащий два полипептида, каждый из которых имеет аминокислотную последовательность, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 3, и два дополнительных полипептида, каждый из которых имеет аминокислотную последовательность, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1.
15. Белок по пп.1, 13 или 14 для применения в терапии.
16. Белок по п.15, где терапия включает применение излучения.
17. Белок по п.15 или 16, где терапия включает введение химиотерапевтического средства.
18. Белок по пп.1, 13 или 14 для применения для стимуляции местного истощения TGFβ в опухоли.
19. Белок по пп.1, 13 или 14 для применения для ингибирования фосфорилирования SMAD3 в клетке.
20. Белок по п.19, где клетка является опухолевой клеткой.
21. Белок по пп.1, 13 или 14 для применения для лечения рака.
22. Белок по пп.1, 13 или 14 для применения для ингибирования роста опухоли.
23. Белок по п.21 или 22, где рак или опухоль выбрана из группы, состоящей из колоректального рака, рака молочной железы, яичников, поджелудочной железы, желудка, простаты, почек, шейки матки, миеломы, лимфомы, лейкемии, рака щитовидной железы, эндометрия, матки, мочевого пузыря, нейроэндокринной опухоли, рака головы и шеи, печени, носоглотки, семенников, мелкоклеточного рака легких, немелкоклеточного рака легких, меланомы, базальноклеточного рака кожи, плоскоклеточного рака кожи, выбухающей дерматофибросаркомы, карциномы из клеток Меркеля, глиобластомы, глиомы, саркомы, мезотелиомы и миелодиспластических синдромов.
24. Белок по любому из пп.21-23, где применение включает применение излучения.
25. Белок по любому из пп.21-24, где применение включает введение химиотерапевтического средства.
26. Способ стимуляции местного истощения TGFβ, при этом способ включает введение белка по п.1, 13 или 14, где белок связывает TGFβ в растворе, связывает PD-L1 на поверхности клетки и переносит связанный TGFβ в клетку.
27. Способ ингибирования фосфорилирования SMAD3 в клетке, при этом способ включает обработку клетки белком по пп.1, 13 или 14.
28. Способ по п.26 или 27, где клетка является раковой клеткой.
29. Способ ингибирования роста опухоли, при этом способ включает обработку опухоли белком по пп.1, 13 или 14.
30. Способ по п.29, также включающий обработку опухоли излучением.
31. Способ по п.29 или 30, также включающий обработку опухоли химиотерапевтическим средством.
32. Способ лечения рака, при этом способ включает введение пациенту с раком белка по пп.1, 13 или 14.
33. Способ по п.32, также включающий обработку пациента с раком излучением.
34. Способ по п.32 или 33, также включающий введение химиотерапевтического средства.
35. Способ по любому из пп.29-34, где рак или опухоль выбрана из группы, состоящей из колоректального рака, рака молочной железы, яичников, поджелудочной железы, желудка, простаты, почек, шейки матки, миеломы, лимфомы, лейкемии, рака щитовидной железы, эндометрия, матки, мочевого пузыря, нейроэндокринной опухоли, рака головы и шеи, печени, носоглотки, семенников, мелкоклеточного рака легких, немелкоклеточного рака легких, меланомы, базальноклеточного рака кожи, плоскоклеточного рака кожи, выбухающей дерматофибросаркомы, карциномы из клеток Меркеля, глиобластомы, глиомы, саркомы, мезотелиомы и миелодиспластических синдромов.