ЦЕЛЬНОКЛЕТОЧНЫЕ БИОКАТАЛИЗАТОРЫ В ДЕГРАДАЦИИ ЦЕЛЛЮЛОЗНОЙ БИОМАССЫ

1. Молекула нуклеиновой кислоты, содержащая следующие компоненты:
(1) участок, кодирующий сигнальный пептид,
(2) участок, кодирующий гетерологичную целлюлазу,
(3) необязательный участок, кодирующий сайт распознаваемый протеазой,
(4) участок, кодирующий трансмембранный линкер, и
(5) участок, кодирующий транспортный домен белка-автотранспортера или его вариант.
2. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, отличающаяся тем, что целюлаза является бета-глюкозидазой или эндо- либо экзоцеллюлазой, предпочтительно выбираемой из группы, содержащей эндоцеллюлазу Bacillus subtilis, экзоцеллюлазу Clostridium thermocellum и бета-глюкозидазу Clostridium thermocellum.
3. Молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, отличающаяся тем, что транспортный домен белка-автотранспортера выбирают из группы, содержащей Ssp, Ssp-h1, Ssp-h2, PspA, PspB, Ssa1, SphB1, AspA/NalP, VacA, AIDA-I, IcsA, MisL, TibA, Ag43, ShdA, AutA, Tsh, SepA, EspC, EspP, Pet, Pic, SigA, Sat, Vat, EpeA, EatA, EspI, EaaA, EaaC, Pertactin, BrkA, Tef, Vag8, PmpD, Pmp20, Pmp21, AgA1-протеазу, App, Hap, rOmpA, rOmpB, ApeE, EstA, Lip-1, McaP, BabA, SabA, AlpA, Aae, NanB или их варианты.
4. Молекула нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что содержит последовательность, контролирующую экспрессию и функционально связанную с молекулой нуклеиновой кислоты, которая предпочтительно может быть активирована добавлением изопропилтиоглюкопиранозида (ИПТГ) или арабинозы.
5. Полипептид, кодируемый нуклеиновой кислотой по любому из пп. 1-4 формулы изобретения.
6. Микроорганизм, экспрессирующий на поверхности полипептид по п. 5 или трансформированный с использованием молекулы нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-4.
7. Микроорганизм по п. 6, отличающийся тем, что он основан на грамотрицательном микроорганизме, предпочтительно Escherichia coli.
8. Мембранная фракция, получаемая из клеток по п. 6 или 7.
9. Способ получения продуктов реакции, при котором используется по крайней мере один вид целлюлазы и который включает следующие этапы:
(i) приготовление микроорганизма по п. 6 или 7 или мембранного препарата по п. 8 и
(ii) взаимодействие микроорганизма и/или мембранного препарата с одним или более субстратом целлюлазы при условиях, совместимых с активностью целлюлазы.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что продукт реакции, катализируемой целлюлазой, является моно-, ди- или олигосахаридом и что по меньшей мере один субстрат целлюлазы является источником полисахаридов, предпочтительно источником целлюлозы.
11. Способ по п. 9, отличающийся тем, что этап (ii) проводится при рН в диапазоне 4,5-6,5, предпочтительно в диапазоне 5,5-6,5.
12. Способ по п. 9, отличающийся тем, что этап (ii) проводится при температуре в диапазоне 30-80°С, предпочтительно в диапазоне 50-65°С.
13. Способ по п. 9, отличающийся тем, что на этапе (ii) добавляют глюкозидазу.
14. Способ по одному из пп. 9-13, отличающийся тем, что включает дополнительный (iii) этап для извлечения микроорганизма, использованного на (ii) этапе.
15. Способ получения микроорганизма, презентирующего рекомбинантную целлюлазу на своей поверхности, который включает
(a) встраивание в микроорганизм последовательности нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-4 и
(b) при необходимости обработку микроорганизма веществом, которое активирует последовательность, контролирующую экспрессию.