Влияние генотипов Helicobacter pylori на морфологические показатели слизистой оболочки желудка у больных дуоденальной язвой и хроническим гастритом

ВЛИЯНИЕ ГЕНОТИПОВ HELICOBACTER PYLORI НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЛИЗИСТОЙ

ОБОЛОЧКИ ЖЕЛУДКА У БОЛЬНЫХ ДУОДЕНАЛЬНОЙ ЯЗВОЙ И ХРОНИЧЕСКИМ ГАСТРИТОМ

МАКАРЕНКО Е.В.*. ВОРОПАЕВА A.B.**. МАТВЕЕНКО М.Е.*

УО «Витебский государственный медицинскийуниверситет»*, РНПЦрадиационной медицины и экологии человека**

Резюме. Целью исследования явилось изучение влияния генотипов Helicobacter pylori (H. pylori) vac A. cagA, ice A. babA, dupA (jhp0917 -jhp0918) на морфологическиме изменения СОЖ у больных дуоденальной язвой и хроническим гастритом. Обследовано 192 больных дуоденальными язвами в фазе обострения и ремиссии и 46 больных хроническим гастритом в возрасте от 20 до 60 лет.

Присутствие гена vacA ml у больных дуоденальной язвой ассоциировано с атрофией желез слизистой оболочки тела желудка. У пациентов, имеющих ген babA, выявлялась более выраженная активность воспаления в антральном отделе желудка. Наличие штаммов H. pylori, содержащих ген cagA, у больных хроническим гастритом ассоциировано c атрофией желез слизистой оболочке антрального отдела желудка и большей степенью плотности колонизации микроорганизма в антруме. Присутствие в генотипе H. pylori субтипа vacA s2, сопровождалось менее выраженной атрофией слизистой оболочки антрума и тела желудка.

Частота встречаемости субтипа vacA ml гена вакуолизирующего цитотоксина у больных дуоденальной язвой превалировала в группе пациентов с более высокой степенью хронического воспаления в слизистой оболочке тела желудка (%2=4,56; р=0,033), а его аллельный ген vacA s2 ассоциирован с менее выраженными признаками воспаления в слизистой оболочке тела желудка (%2=5,87; р=0,015). Ген dapA чаще определялся при наличии выраженной атрофии слизистой оболочки тела желудка у больных дуоденальной язвой (%2=6,44; р=0,011).

Таким образом. инфицирование человека штаммами H. pylori. содержащими патогенные гены. может приводить к развитию патоморфологических изменений слизистой оболочки желудка.

Ключевые слова: Helicobacter pylori. субтипы. слизистая оболочка желудка. дуоденальная язва. хронический гастрит.

Abstract. The aim of the study was to investigate the influence of genes Helicobacter pylori (H. pylori) vacA, cagA, iceA, babA, dupA (jhp0917 -jhp0918) on the morphological changes of gastric mucosa in patients with duodenal ulcer and chronic gastritis.

192 patients with duodenal ulcers and 46 patients with chronic gastritis aged 20-60 years were investigated. The presence of potentially more pathogenic gene vacA m1 in patients with duodenal ulcer was associated with gastric atrophy. In patients with babA gene a higher activity of the inflammation in antrum was observed.

The presence of H. pylori strains. containing cagA gene, in patients with chronic gastritis was associated with gastric atrophy of antrum and a greater degree of density of microorganism colonization in antrum. The presence of vacA s2 in the H. pylori genotype was associated with less marked atrophy of antrum and body. The occurrence frequency of subtype vacA ml gene of vacuolating cytotoxin in patients with duodenal ulcer prevailed in the group with a higher degree of chronic inflammation of the stomach body mucosa (%2=4.56; p=0.033). and the gene vacA s2 was associated with a less marked degree of inflammation of the stomach body mucosa (%2=5.87; p=0.015). The dapA gene was determined more frequently in case of marked atrophy of stomach body mucosa in patients with duodenal ulcer (%2=6.44; p=0.011).

Thus. the contamination of a person by H. pylori strains, containing pathogenic genes. can result in the development of pathomorphological changes in gastric mucosa.

Key words: Helicobacter pylori. subtypes. gastric mucosa. duodenal ulcer. chronic gastritis.

Адрес для корреспонденции: Республика

Беларусь. 210023. г. Витебск. пр. Фрунзе. 27. УО «Витебский государственный медицинский университет» - кафедра терапии № 2 - Макаренко ЕВ.

Клинические проявления. вызванные присутствием Helicobacter pylori (H. pylori) в желудке инфицированного человека. зависят от присутствия вирулентных генов в составе микрорганизма и генетических особенностей хозяина. Повышенную вирулентность H. pylori детерминируют гены vacA. cagA. iceA. babA. dupA. С их присутствием связывают развитие наиболее значимых заболеваний желудка: атрофического гастрита. желудочных и дуоденальных язв. рака желудка [14]. Ген vacA (vacuolating cytotoxin gene) присутствует во всех штаммах H.pylori и кодирует образование вакуолизирующего цитотоксина VacA. вызывающего образование вакуолей в эпителиоцитах и их гибель. Ген vacA имеет 2 региона: сигнальный - s (signal) и срединный - m (middle). Установлено. что штамм vacAslml H. pylori продуцирует наибольший уровень цитотоксина VacA и чаще встречается при гастродуоденальных язвах. Штамм vacA s2m2 H. pylori не обладает существенной VacA цитотоксической активностью [8].

Ген cagA. или цитотоксин-ассоциированный ген (cytotoxin associated gene). присутствует не во всех штаммах H. pylori и является маркером островка патогенности PAI (pathogenicity island) и кодирует образование протеина CagA. который ассоциирован с язвенной болезнью. раком желудка и лимфомой [4]. Колонизация желудка штаммами H. pylori cag+ всегда ассоциируется с увеличением пролиферации слизистой желудка. в то время как данные о ее влиянии на апоптоз противоречивы. Имеются сообщения о повышении только пролиферативной активности без стимуляции апоптоза. работы других авторов свидетельствуют об активизации процессов апоптоза в клетках желудочного эпителия. ассоциированного с присутствием cag+ штаммов у грызунов и человека.

Таким образом. cag+ штаммы H. pylori индуцируют интенсивный клеточный ответ: воспаление слизистой. клеточную пролиферацию и клеточную смерть [11. 15]. Ген babA (blood group associated binding gene) кодирует образование белка BabA (the blood group antigen binding adhesin) массой 75-kDa, который является посредником сцепления между Lewis b антигенами группы крови человека на клетках желудочного эпителия и H. pylori. BabA индуцирует продукцию интерлейкина IL-8 и его наличие связано с плотностью колонизации. Идентифицировано три аллеля гена bab: babAl, babA2 и babB. Функционально активным является babA2 ген, который в ряде регионов мира ассоциирован с язвенной болезнью и раком желудка [16, 18]. Ген iceA (induced by contact with epithelium) имеет два аллельных варианта: iceA1 и iceA2. Было установлено, что аллельный ген iceA1 чаще встречается при язвенной болезни, в то время как ген iceA2 ассоциирован с гастритами [2]

В проведенном в Восточной Азии и Южной Америке исследовании был выявлен патогномоничный для дуоденальной язвы ген, названный dupA (duodenal ulcer promoting gene), который включает два гена H. pylori jhp0917 и jhp0918. Этот ген повышает выживаемость микроорганизма в условиях низких значений pH. Наличие dupA гена связано с высоким риском развития дуоденальной язвы: отношение шансов (OR) равнялось 3,1 с 95 % доверительным интервалом равным 1,7-5,7 [7].

Проведенные ранее исследования неоднозначно оценивают взаимосвязь клинических и морфологических признаков гастродуоденальной патологии с определенными генотипами H. pylori. Имеются сообщения, демонстрирующие влияние патогенных штаммов

H. pylori на возникновение гастродуоденальных язв и гистологических признаков воспаления и атрофии желез слизистой оболочки желудка (СОЖ) [2, 8, 16]. Другие авторы не находят четкой ассоциации

клинических исходов и патоморфологии с субтипами H. pylori [5, 12].

В Республике Беларусь не проводилось исследований. посвященных изучению взаимосвязи генетических характеристик H. pylori и морфологических характеристик СОЖ у больных гастродуоденальной патологией. Целью нашего исследования явилось изучение влияния генотипов H. pylori vacA, cagA, iceA, babA, dupA (jhp0917 - jhp0918) на морфологические изменения СОЖ у больных дуоденальной язвой и хроническим гастритом.

Методы

Нами обследовано 192 больных дуоденальными язвами (ДЯ) в фазе обострения и ремиссии и 46 больных хроническим гастритом (ХГ) в возрасте от 20 до 60 лет.

Условия отбора пациентов были следующими: наличие

хеликобактерной инфекции, отсутствие предварительной эрадикационной терапии, а также приема антибиотиков и/или висмутсодержащих препаратов в течение последнего месяца и антисекреторных препаратов в течение двух недель до исследования. Всем обследованным проводилась фиброэзофагогастродуоденоскопия с прицельной гастробиопсией. Для постановки полимеразной цепной реакции брались биопсийные образцы из антрального отдела желудка. Определялись vacA ml, vacA mla, vacA mlb, vacA m2, vacA sl, vacA sla, vacA slb, vacA slc, vacA s2, cagA, iceAl, iceA2, babA и dupA (jhp09l7 - jhp09l8) гены H. pylori с использованием наборов фирмы «Литех» (Россия), «Амплисенс» (Россия), а также праймеров, синтезированных в институте физико-органической химии Национальной академии наук Беларуси и фирмой «Termo Hybaid» (Германия).

Биопсийные образцы до проведения исследования хранились при температуре -20°C. Затем их помещали в лизирующий буфер при температуре 56°C на два часа в твёрдофазном термостате ТЕРМО-48, фирмы БИОКОМ (Россия). Концентрация биоматериала составляла 100200 mg/ml. Далее проводили выделение ДНК по стандартной методике [17].

Для морфологического исследования во время ФЭГДС получали 2 биоптата из середины антрального отдела желудка и 2 - из середины тела желудка. Окраска препаратов осуществлялась гематоксилин-эозином. по Гимзе, ШИК-реакцией и альциановым синим. Описание гистологических препаратов проводилось в соответствии с Хьюстонской модификацией Сиднейской системы [3] с использованием визуально-аналоговой шкалы. градации оценок включали: 0. 1. 2 и 3 балла.

Проведен анализ влияния генотипов H. pylori на следущие морфологические показатели СОЖ: атрофию желез, активность

воспаления (нейтрофильная инфильтрация), хроническое воспаление (мононуклеарная инфильтрация), наличие лимфодных фолликулов и плотность колонизации H. pylori в слизистой оболочке (СО) антрального отдела и тела желудка. Все обследованные нами пациенты с ДЯ и ХГ распределялись на две группы в зависимости от степени выраженности изучаемого гистологического признака.

К первой группе относили пациентов с минимальной выраженностью гистологического показателя или его отсутствием (0-1 балл), ко второй группе относили пациентов с умеренной или выраженной степенью признака (2-3 балла). В каждой группе проанализирована частота встречаемости всех исследованных генов H. pylori: vac A ml, vac A ml a, vacA mlb, vacA m2, vacA sl, vacA sla, vacA slb, vacA slc, vacA s2, cagA, iceAl, iceA2, babA и dupA (jhp09l7 - jhp09l8).

Статистическая обработка производилась методом

непараметрической статистики с использованием U-теста mann-Whitney для анализа морфологических показателей слизистой оболочки желудка и по критерию %2 Пирсона для определения частоты генов H. pylori с помощью пакета программ Statistica 6,0 (StatSoft Inc., Okla., USA). Отличия считали статистически значимыми при p<0,05. Для оценки факторов риска вычислялось отношение шансов (OR) и 95%-й доверительный интервал (95% ДИ) [l].

Результаты и обсуждение

Полученные нами результаты свидетельствуют об отсутствии статистически значимых взаимосвязей большинства морфологических характеристик СОЖ с генным составом H. pylori (табл. 1-4).

Таблица 1

Морфологические показатели слизистой оболочки желудка (в баллах), связанные с генотипами Helicobacter pylori vacAs1, и vacAs2, и vacAm1, и vacAm2

у больных дуоденальной язвой

Показатели vacA s1+ n=148 vacAs1- n=44 vacA s2+ n=77 vacA s2-n=115 vacA m1 +n=138 vacA m1 - n=54 vacA m2+ n=109 vacA m2-n=83

Атрофия Антрум M±G 1.08±0.6 5 1,05±0,7 5 1,04±0,6 6 1,09±0,6 8 1,08±0,6 7 1,04±0,6 8 1,03±0,6 7 1,13±0,6 7

р 0.948 0,621 0,773 0,303

Тело M±G 0,43±0,6 2 0,57±0,7 0 0,50±0,6 7 0,44±0,6 2 0,55±0,6 8 0,24±0,4 5 0,39±0,6 3 0,56±0,6 5

р 0,273 0,607 0,004 0,033

Воспале- ние Антрум M±G 1,78±0,5 1 1,94±0,5 6 1,81±0,5 1 1,83±0,5 3 1,81±0,5 3 1,85±0,5 0 1,83±0,5 2 1,81±0,5 2

р 0,129 0,781 0,683 0,997

Тело M±G 1,39±0,5 7 1,57±0,6 1 1,39±0,6 0 1,46±0,5 8 1,98±0,5 9 1,13±0,5 5 1,37±0,5 8 1,51±0,5 9

р 0,101 0,304 0,088 0,075

Актив- ность Антрум M±o 1,52±0,6 6 1,55±0,7 0 1,46±0,6 2 1,58±0,7 0 1,52±0,7 0 1,55±0,5 9 1,61±0,6 9 1,43±0,6 3

р 0,692 0,268 0,482 0,117

Тело M±G 0,99±0,6 2 1,20±0,7 4 1,01±0,6 0 1,06±0,6 9 1,08±0,7 0 О 9 5 1,01±0,6 6 1,08±0,6 4

р 0,160 0,735 0,307 0,340

Лимфоид- ные фолликул ы Антрум M±o 0,70±1,0 6 0,80±1,1 4 0,64±1,0 5 0,77±1,1 0 0,75±1,1 3 0,64±0,9 6 0,60±1,0 0 0,89±1,1 7

р 0,727 0,480 0,308 0,145

Тело M±G 0,35±0,7 8 0,51±0,9 1 0,40±0,8 6 0,38±0,7 8 0,42±0,8 4 0,30±0,7 3 0,34±0,7 9 0,44±0,8 4

р 0,412 0,938 0,469 0,520

Метапла- зия Антрум M±o 0,11±0,3 6 0,29±0,5 3 0,19±0,4 2 0,13±0,4 0 0,14±0,3 8 0,19±0,4 6 0,15±0,3 7 0,15±0,4 5

р 0,069 0,313 0,499 0,665

Тело M±G 0,03±0,2 0 0,17±0,5 6 0,12±0,4 7 0,02±0,1 5 0,08±0,3 8 0,01±0,0 7 0,10±0,4 2 0,01±0,0 8

р 0,274 0,443 0,606 0,552

Helicobacter pylori Антрум M±o ,9 0, Со ^ ,0 2,13±0,8 2 2,07±0,9 3 2,08±0,9 3 2,12±0,9 3 1,98±0,9 2 2,17±0,8 6 1,95±0,9 9

р 0,801 0,999 0,234 0,151

Тело M±G 1,33±1,8 0 1,45±0,9 1 1,50±1,0 4 1,27±0,9 3 1,44±1,0 1 1,48±0,8 5 1,46±1,0 0 1,23±0,9 3

р 0,387 0,144 0,074 0,125

Таблица 2

Морфологические показатели слизистой оболочки желудка (в баллах), связанные с генотипами Helicobacter pylori cag, bab, iceAl и iceA2 у больных дуоденальной язвой

Показатели cagA+ n=164 cagA- n=39 babA+ n=89 -5 A0 ab = bn iceA 1+ n=92 iceA 1-n=53 iceA2+ n=49 iceAm2- n=96

Атрофия Антрум М±а 1.08±0.68 1.06±0.6 9 1.11±0.6 5 1.06±0.6 9 1.14±0.7 2 0.97±0.6 5 0.93±0.6 6 1.16±0.7 0

Р 0.963 0.713 0.173 0.102

Тело М±а 0.47±0.67 0.45±0.6 0 0.49±0.6 9 0.46±0.6 4 0.54±0.7 2 0.44±0.5 7 0.46±0.5 5 0.52±0.7 3

Р 0.931 0.962 0.720 0.995

Воспаление Антрум М±а 1.86±0.52 1.73±0.5 1 1.88±0.5 4 1.79±0.4 9 1.79±0.5 4 1.85±0.5 5 1.87±0.6 0 1.78±0.5 1

Р 0.321 0.244 0.586 0.427

Тело М±а 1.46±0.59 1.40±0.5 8 1.45±0.5 9 1.43±0.5 8 1.39±0.5 8 1.41±0.5 2 1.40±0.5 3 1.39±0.5 7

Р 0.656 0.910 0.796 0.913

Активность Антрум М±а 1.55±0.70 1.46±0.6 0 1.66±0.7 1 1.45±0.6 2 1.57±0.6 9 1.53±0.6 8 1.46±0.6 5 1.60±0.7 0

Р 0.903 0.049 0.689 0.253

Тело М±а 1.05±0.67 1.05±0.6 4 1.08±0.7 5 1.03±0.5 9 1.09±0.6 9 0.95±0.4 9 1.00±0.4 4 1.05±0.7 1

0.313 0.992 0.423 0.861

Лимфоидные фолликулы Антрум М±а 0.74±1.13 0.76±0.9 5 0.78±1.1 3 0.70±1.0 6 0.69±1.0 8 0.58±0.9 6 0.66±1.0 3 0.64±1.0 4

Р 0.621 0.786 0.677 0.895

Тело М±а 0.33±0.77 0.54±0.8 8 0.34±0.7 8 0.44±0.8 6 0.34±0.7 4 0.43±0.8 7 0.46±0.8 8 0.33±0.7 4

Р 0.062 0.432 0.754 0.584

Метаплазия Антрум М±а 0.13±0.39 0.21±0.4 2 0.15±0.4 4 0.15±0.3 8 0.17±0.4 3 0.09±0.3 3 0.10±0.3 4 0.16±0.4 2

Р 0.318 0.857 0.570 0.687

Тело М±а 0.07±0.03 0.03±0.1 1 0.10±0.4 1 0.03±0.2 1 0.08±0.3 8 0.05±0.2 2 0.04±0.2 2 0.08±0.3 8

Р 0.998 0.718 0.918 0.747

Helicobacter pylori Антрум М±а 2.08±0.92 2.02±0.8 7 2.05±0.9 3 2.10±0.9 3 2.08±0.9 3 2.13±0.9 0 2.12±0.9 0 2.09±0.9 3

Р 0.739 0.713 0.669 0.928

Тело М±а 1.38±0.96 1.29±1.0 3 1.35±1.0 0 1.38±0.9 6 1.48±1.0 0 1.30±0.9 7 1.21±0.9 3 1.52±1.0 1

Р 0.552 0.743 0.321 0.090

%

100

80

60

40

20

0

0-1 балл 2-3 балла vacA ml

%

70

60

50

40

30

20

10

0

0-1 балл

2-3 балла

vacA m2

Рис. 1. Частота субтипов гена вакуолизирующего цитотоксина уасЛ т1 и уасЛ т2 Н.ру1оп при различной степени выраженности хронического воспаления (мононуклеарной инфильтрации) в слизистой оболочке тела желудка у больных

дуоденальной язвой.

В то же время у больных ДЯ присутствие потенциально более патогенного гена vac A ml ассоциировано с атрофией желез СО тела желудка Наличие менее патогенного гена vacA m2. по-видимому. уменьшает вероятность ее развития. У пациентов с ДЯ. имеющих ген babA, выявлялась более выраженная активность воспаления в антральном отделе желудка

Таблица 3

Морфологические показатели слизистой оболочки желудка (в баллах), связанные с генотипами Helicobacter pylori vacAsl, и vacAs2, и vacAml, и vacAm2 ____________________у больных хроническим гастритом_____________________

Показатели vacA s1+ n=26 vacAs1- n=17 vacA s2+ n=22 vacA s2-n=21 vacAm1+ n=26 vacAm1- n=29 vacAm2+ n=28 vacAm2- n=16

Атрофия Антрум М±а 1,15±0,6 3 0,81±0,6 3 0,76±0,5 9 1,29±0,6 0 1,08±0,5 7 0,98±0,7 0 0,95±0,7 1 1,17±0,4 9

Р 0,133 0,013 0,723 0,341

Тело М±а 0,66±0,7 7 0,65±1,0 4 0,41±0,7 8 0,92±0,9 1 0,69±0,9 2 0,70±0,9 0 0,72±0,9 1 0,63±0,8 9

Р 0,576 0,038 0,919 0,733

Воспаление Антрум М±а 1,73±0,4 3 1,74±0,4 4 1,66±0,4 7 1,81±0,3 7 1,69±0,4 5 1,71±0,4 3 1,66±0,4 5 1,84±0,3 5

Р 0,960 0,402 0,946 0,252

Тело М±а 1,41±0,6 4 1,40±0,8 2 1,31±0,6 8 1,51±0,7 3 1,41±0,6 7 1,36±0,6 8 1,36±0,7 1 1,53±0,6 9

Р 0,980 0,319 0,807 0,472

Активность Антрум М±а 1,45±0,5 4 1,21±0,6 4 1,43±0,5 8 1,27±0,5 9 1,52±0,5 9 1,25±0,5 3 1,28±0,5 2 1,50±0,6 6

Р 0,210 0,451 0,127 0,367

Тело М±а 1,04±0,5 8 1,06±0,7 3 1,01±0,7 3 1,08±0,5 2 1,01±0,6 1 1,09±0,5 9 1,05±0,6 4 1,09±0,6 6

Р 0,960 0,489 0,768 0,669

Лимфоидные фолликулы Антрум М±а 0,87±1,1 8 0,85±1,2 5 0,95±1,2 8 0,76±1,1 1 0,54±1,0 0 1,05±1,2 9 1,02±1,2 9 0,53±0,9 4

Р 0,862 0,689 0,189 0,341

Тело М±а 0,67±1,0 6 0,47±0,9 3 0,61±1,0 6 0,57±0,9 7 0,69±0,9 9 0,50±0,9 7 0,55±1,0 2 0,63±0,9 7

Р 0,646 0,990 0,390 0,714

Метаплазия Антрум М±а 0,15±0,6 0 0,15±0,4 9 0 0,31±0,7 7 0,15±0,6 0 0,10±0,3 9 0,04±0,1 3 0,34±0,8 7

Р 0,990 0,181 0,933 0,495

Тело М±а 0,15±0,3 7 0,21±0,7 3 0,09±0,2 5 0,26±0,7 2 0,15±0,3 7 0,22±0,6 4 0,23±0,6 5 0,06±0,1 7

Р 0,709 0,725 0,946 0,714

Helicobacter pylori Антрум М±а 2,08±0,7 6 1,71±1,0 3 1,95±0,9 4 1,90±0,8 5 2,02±0,8 2 1,71±0,9 2 1,80±0,9 7 2,03±0,8 5

Р 0,243 0,680 0,203 0,479

Тело М±а 0,92±0,8 8 1,01±0,7 8 1,05±0,7 4 0,87±0,9 3 1,10±0,8 7 0,77±0,7 8 0,79±0,7 8 1,19±0,8 9

Р 0,551 0,265 0,167 0,161

Частота встречаемости субтипа vac A ml гена вакуолизирующего цитотоксина (рис. 1.) у больных ДЯ превалировала в группе пациентов с более высокой степенью хронического воспаления в СО тела желудка (Х2=4,56; р=0,033).

%

0-1 балл 2-3 балла dapA

Рис. 2. Частота гена dapA H.pylori при различной степени выраженности атрофии желез в слизистой оболочке тела желудка у больных дуоденальной язвой.

В то же время у пациентов с ДЯ, имеющих менее выраженные признаки воспаления в СО тела желудка, достоверно чаще определялся ген vacA s2 (%2=5,87; р=0,015). Ген dapA (рис. 2.) ассоциирован с выраженной атрофией СО тела желудка (%2=6,44; р=0,011).

Присутствие этого гена существенно повышает риск развития атрофии желез СО: отношение шансов (OR) равнялось 7,0, а 95% ДИ составлял 1,72-29,32. Статистически значимых взаимосвязей между другими морфологическими показателями у больных ДЯ и изученными генами не было получено (р>0,1).

В группе больных ХГ отсутствовали достоверные отличия по частоте встречаемости генов H. pylori при различной степени выраженности гистологических показателей.

Наличие штаммов H. pylori, содержащих ген cagA, у больных ХГ ассоциировано c атрофией желез CO антрального отдела желудка и большей степенью плотности колонизации микроорганизма в антруме

Таблица 4

Морфологические показатели слизистой оболочки желудка (в баллах), связанные с генотипами Helicobacter pylori cag, bab, iceAl и iceA2 у больных хроническим гастритом

Показатели cagA+ n=33 cagA- n=13 babA+ n=14 babA- n=28 iceA 1+ n=22 iceA 1-n=20 iceA2+ n=16 iceAm2- n=26

Атрофия Антрум М±а 1.16±0.58 0.65±0.63 1.18±0.45 1.01±0.70 1.06±0.66 1.10±0.58 1.00±0.66 1.13±0.59

Р 0.030 0.548 0.743 0.660

Тело М±а 0.55±0.73 0.92±1.17 0.73±0.89 0.61±0.81 0.70±0.87 0.49±0.74 0.39±0.60 0.73±0.90

Р 0.472 0.750 0.358 0.265

Воспаление Антрум М±а 1,73±0,43 1.77±0.39 1.75±0.43 1.73±0.42 1.61±0.46 1.83±0.37 1.91±0.27 1.67±0.45

Р 0.903 0.883 0.166 0.147

Тело М±а 1.47±0.69 1.46±0.85 1.57±0.71 1.39±0.75 1.28±0.72 1.64±0.72 1.64±0.72 1.34±0.73

Р 1.000 0.439 0.158 0.260

Активность Антрум М±а 1.37±0.51 5 .7 0. -н 4 .3 1.41±0.50 1.36±0.64 1.23±0.51 1.49±0.64 1.30±0.53 1.38±0.62

Р 0.884 0.759 0.338 0.551

Тело М±а 1.06±0.64 1.23±0.81 1.23±0.65 1.03±0.75 8 .5 0. -Н 4 .9 0. 1.26±0.81 1.20±0.70 1.03±0.72

0.575 0.337 0.314 0.543

Лимфоидные фолликулы Антрум М±а 0.89±1.18 0.96±1.33 8 .2 5 .7 0° 0.95±1.17 0.61±0.99 1.28±1.34 8 .3 5 .2 0.73±1.06

Р 0.981 0.513 0.110 0.294

Тело М±а 0.45±0.83 0.81±1.28 О 6 4 7 4 0.50±1.07 0.57±0.84 0.38±0.96 0.47±1.06 0.48±0.79

Р 0.714 0.230 0.232 0.543

Метаплазия Антрум М±а 0.20±0.62 0 0.21±0.54 0.13±0.57 0.18±0.65 0.13±0.46 0.19±0.75 0.13±0.41

Р 0.428 0.471 0.840 0.660

Тело М±а 0.09±0.29 0.35±0.85 0.11±0.40 0.20±0.60 0.25±0.71 0.03±0.11 0.03±0.13 0.21±0.65

Р 0.526 0.603 0.450 0.604

Helicobacter pylori Антрум М±а 2.14±0.80 1.42±1.06 2.11±0.92 1.77±0.95 1.89±1.00 4 .9 0. -Н 3 .9 1.69±1.00 2.04±0.93

Р 0.034 0.251 0.990 0.254

Тело М±а 1.08±0.80 0.60±0.79 8 .9 0. -н 5 .2 0.83±0.72 0.91±0.83 0.99±0.81 0.80±0.75 1.04±0.85

Р 0.055 0.210 0.743 0.379

Штаммы H. pylori, содержащие в своем составе патогенные гены, могут оказывать влияние на риск развития патологических изменений в СОЖ больных ДЯ. Ген iceA2 может определять развитие атрофии СО антрального отдела (OR=2,14; 95% ДИ - 0,97-4,70), ген vacA ml связан с риском атрофии (OR=2,74; 95% ДИ - 0,78-9,66), активностью воспаления (OR=2,44; 95% ДИ - 0,96-6,22) и хроническим воспалением (OR=2,12; 95% ДИ - 1,11-4,04) в СО тела желудка.

Его субтип vacAm1a может увеличивать вероятность появления лимфоидных фолликулов в СО тела желудка (OR=2,01; 95% ДИ - 0,824,97), так же как и ген iceA2 (OR=2,00; 95% ДИ - 0,81-4,94).

Важная роль патогенных субтипов H. pylori в развитии гастродуоденальной патологии патоморфологических изменений СОЖ отмечена рядом исследователей.

Во многих странах мира vacAs1/cagA+ генотип достоверно чаще определялся у больных гастродуоденальной язвой, чем у пациентов с другой патологией [9]. Имеются данные о том, что генотипы vacAs1m1, cagA+ H. pylori в значительной степени связаны с большей плотностью заселения желудка H. pylori, высокими степенями лимфоцитарной и нейтрофильной инфильтрации, атрофией, интестинальной метаплазией и наличием повреждения эпителия [13]. Ген babA2 в ряде стран чаще выявлялся при язвенной болезни и раке желудка [16]. Штаммы H. pylori, содержащие babA2 или тройной набор патогенных генов -babA2/cagA+/vacAs1m1, ассоциировались с атрофическим гастритом, кишечной метаплазией, усилением пролиферации желудочного эпителия в антральной части желудка и предрасположенностью к развитию рака желудка [10, 18].

У пациентов, колонизированных cagA-штаммом, в 12 раз увеличивается риск развития кишечной метаплазии. В то же время эрадикация H. pylori приводит к уменьшению кишечной метаплазии и атрофии. Следовательно, уменьшается риск развития рака желудка [6]. Нейтрофильная инфильтрация в теле и антральной части желудка меньше у пациентов, инфицированных штаммами с частично или полностью утраченными PAI-типами в сравнении с интактными PAI-типами.

Таким образом, штаммы с частично или полностью утраченными PAI обладают меньшей способностью вызывать прогрессию болезни, чем микроорганизмы с интактными PAI. [4]. Штаммы H. pylori, содержащие гены vacA s1, vac A m1, cagA1 у португальских пациентов были существенно ассоциированы с высокой плотностью заселения микроорганизма, высокой степенью лимфоцитарной, нейтрофильной

инфильтрации, атрофией, интестинальной метаплазией и наличием повреждения эпителия [13].

Гены jhp0917 и jhp0918, особенно их сочетание, ген dupA, в значительной степени ассоциированы с высоким риском возникновения ДЯ и низким риском атрофии СОЖ и рака желудка. Ген dupA определялся у 42% больных ДЯ и у 21% больных гастритом. Его присутствие было связано с более значительной нейтрофильной инфильтрацией в слизистой оболочке антрального отдела желудка и повышенным уровнем интерлейкина IL-8 [7].

Таким образом, проведенные нами исследования и имеющиеся литературные данные, свидетельствуют о том, что инфицирование человека штаммами H. pylori, содержащими патогенные гены, может приводить к развитию патоморфологических изменений СОЖ.

Заключение

Ген vacA m1 у больных дуоденальной язвой ассоциирован с атрофией желез слизистой оболочки тела желудка. У пациентов с дуоденальной язвой, имеющих ген babA, выявлялась более выраженная активность воспаления в антральном отделе желудка.

Наличие штаммов H. pylori, содержащих ген cagA, у больных хроническим гастритом ассоциировано c атрофией желез слизистой оболочки антрального отдела желудка и большей степенью плотности колонизации микроорганизма в антруме. Штаммы H. pylori, имеющие в генотипе субтип vacA s2 вакуолизирующего цитотоксина, у пациентов с дуоденальной язвой вызывают менее выраженную атрофию слизистой оболочки антрума и тела желудка.

Частота встречаемости субтипа vacA m1 гена вакуолизирующего цитотоксина у больных дуоденальной язвой превалировала в группе пациентов с более высокой степенью хронического воспаления в слизистой оболочке тела желудка, а у пациентов, имеющих менее выраженные признаки воспаления в слизистой оболочке тела желудка,

достоверно чаще определялся ген vacA s2XeH dap A у больных дуоденальной язвой ассоциирован с выраженной атрофией слизистой оболочки тела желудка.

Литература

1. Власов, В.В. Эффективность диагностических исследований /

В. В. Власов. - М.: Медицина, 1988. - 256 с.

2. Adherence to gastric epithelial cells induces expression of a Helicobacter pylori gene, iceA, that is associated with clinical outcome / R. M. Peek [et al.] // Proc. Assoc. Am. Physicians. - 1998. - Vol. 110, N 6. - P. 531-544.

3. Classification and grading of gastritis. The Updated Sydney System / M. F. Dixon [et al.] // Amer. J. Surg. Pathol. - 1996. - Vol. 20, N 10 - P. 11611181.

4. Determination of Helicobacter pylori Virulence by Simple Gene Analysis of the cag Pathogenicity Island / T. Ikenoue [et al.] // Clin. Diag. Lab. immunol.

- 2001. - Vol. 8, N 1. - P. 181-186.

5. Discrimination between Cases of Duodenal Ulcer and Gastritis on the Basis of Putative Virulence Factor of Helicobacter pylori / Y. Yamaoka [et al.] // J. Clin. Microbiol. - 2002. - Vol. 40, N 6. - P. 2244-2246.

6. Do we need to treat asymptomatic H. pylori positive blood donors? / D. Vaira [et al.] // Gut. - 2001. - Vol. 40. - Suppl. 11. - Abstr.A39.

7. Duodenal ulcer promoting gene of Helicobacter pylori / H. Lu [et al.] // Gastroenterology. - 2005 - Vol. 128. - P. 833-848.

8. Expanding allelic diversity of Helicobacter pylori vacA / L. J. van Doorn [et al.] // J. Clin. Microbiol. - 1998. - Vol. 36. - P. 2597-2603.

9. Geographic distribution of vacA allelic types of Helicobacter pylori / L.J van Doorn. [et al.] // Gastroenterology. - 1999. - Vol. 116, N 4. - P. 823-830.

10. Helicobacter pylori babA2, cagA, and s1 vacA genes work synergistically in causing intestinal metaplasia / C.-F. Zambon [et al.] // J. Clin. Pathol. - 2003. - Vol. 56. - P. 287-291.

11. Helicobacter pylori cagA+ strains and dissociation of gastric epithelial cells proliferation from apoptosis / R. M. J. Peek [et al.] // J. Natl. Cancer Inst.

- 1997. - Vol. 89. - P. 863-868.

12. Helicobacter pylori Genotypes in Children from a Population at High Gastric Cancer Risk: No Association with Gastroduodenal Histopathology / A. I. Costa Lopes [et al.] // Am. J. Gastroenterol. - 2006. - Vol. 101. - P. 21132122.

13. Helicobacter pylori Genotypes May Determine Gastric Histopathology /

C. Nogueira [et al.] // Am. J. Pathol. - 2001. - Vol. 158. N 2. - P. 647-654.

14. Lu. H. Helicobacter pylori virulence factors: facts and fantasies / H. Lu. Y. Yamaoka. D. Y. Graham// Curr. Opin. Gastroenterol. - 2005 - Vol. 21. - P. 653-659.

15. Increased gastric epithelial cell apoptosis associated with colonization with cagA Helicobacter pylori strains / S. F. Moss [et al.] // Cancer Res. -2001. - Vol. 61. - P.1406-1411.

16. Key importance of the Helicobacter pylori adherence factor blood group antigen binding adhesin during chronic gastric inflammation / C. Prinz [et al.] // Cancer Res. - 2001. - Vol. 61. - P. 1903-1909.

17. Rapic and Simple method for purification of nucleic acids / R. Boom [et al.] // J. Clinical Microb. - 1990. - Vol. 28. N 3. - P. 495-503.

18. Relationship between Helicobacter pylori babA2 status with gastric epithelial cell turnover and premalignant gastric lesions / J. Yu [et al.] // Gut. -2002 - Vol. 51. - P. 480-484.