Способ отбора и искусственного осеменения овец и коз
METHOD OF SAMPLING AND ARTIFICIAL INSEMINATION OF SHEEP AND GOATS

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности, к отбору и искусственному осеменению овец и коз и может быть использовано в биотехнике репродукции других близкородственных видов сельскохозяйственных и диких животных.
Известны данные по воспроизводству овец, опубликованные в отраслевых журналах «Овцеводство», «Животноводство» и «Зоотехния» и в других изданиях, а также международные журналы по воспроизводству животных Theriogenology, Animal Reproduction Science, Reproduction in Domestic animals, Japanese Journal of Reproduction and Development и другие. Выяснено, что отсутствуют данные об использовании двукратного в сутки отбора овец в состоянии половой охоты (эструса) для их внутриматочного осеменения криоконсервированной спермой при помощи лапароскопического оборудования.
Известно внутриматочное осеменение овец с синхронизированным эструсом свежеполученной спермой. Evans and Maxwell (1987) считают, что уровень оплодотворяемости овец после интрацервикального искусственного осеменения является низким и неприемлем для практики. Результативность осеменения зависит от времени овуляции. Однако точное определение времени начала половой охоты (эструса) в полевых условиях у естественно циклирующих овец очень трудоемко и проблематично. Поэтому для повышения оплодотворяемости овец ими предлагается внутриматочное осеменение с помощью лапароскопического оборудования. Для достижения цели ими предлагается предварительная синхронизация эструса у овец, которая делает предсказуемым время овуляции. Рекомендуется следующая схема гормональной обработки овец для синхронизации половой охоты: введение внутрилагалищных пессариев, содержащих синтетический прогестаген (Chronogest (Intervet) или Repromap (Upjohn) с помощью специального аппликатора (пластиковой трубки и стержня); удаление пессариев через 12-14 дней и одновременно внутримышечная инъекция 400-500 интернациональных единиц (ИЕ) гонадотропина сыворотки жеребых кобыл (ГСЖК), фронтальное лапароскопическое осеменение овец через 60-66 часов (ч) после удаления пессариев. Результативность осеменения составила от 50 до 90%.
В аналогичных экспериментах В.А. Мороз и др. (1992, 1993) проводили внутриматочное осеменение овец при помощи лапароскопического оборудования. Для осеменения применялась свежеполученная сперма от разных баранов. Осеменение проводили после предварительной синхронизации половой охоты, для чего применяли схему гормональной обработки, предложенную Evans and Maxwell (1987) и описанную выше. Результаты оказались следующими. От внутриматочного лапароскопического осеменения свежеполученной спермой из 1013 овец объягнилось в сроки 502 головы, что составляет 49,7%. При этом колебания между разными баранами по показателю оплодотворяемости составили от 16,7% до 66,7%.
Известно внутриматочное осеменение овец с синхронизированным эструсом замороженной спермой. При внутриматочном осеменении овец замороженной спермой после предварительной гормональной синхронизации эструса объягнилось 50,7% овец (Maxwell, 1984). В аналогичном эксперименте Salamon et al. (1985) получили оплодотворяемость 57,8-66,0%. В подобных экспериментах, проведенных на овцах ставропольской породы, В.А. Мороз и др. (1992, 1993) получили следующие результаты. От 868 овец, осемененных внутриматочно замороженной спермой с помощью лапароскопии, было получено 473 ягненка (оплодотворяемость составила 54,5%). При этом колебания между разными баранами по показателю оплодотворяемости составили от 23,4% до 69,2%.
Следует подчеркнуть, что гормональная синхронизация половой охоты (эструса), при некоторых преимуществах в результативности, имеет ряд существенных недостатков, основными из которых являются: высокие экономические затраты, составляющие 480-630 рублей на гормональную обработку одной овцы; требующиеся для обработки гормональные препараты необходимого качества, как правило, импортного производства и их сложно приобрести; высокая трудоемкость процедуры вследствие необходимости трехкратного отбора овец и манипуляций с ними; сильные стрессовые воздействия на животное.
Известно внутриматочное лапароскопическое осеменение замороженной спермой овец с естественным эструсом. Так, в эксперименте Takenaka et al. (1985) из 5-ти овец, эструс у которых выявляли через каждые 6 часов и осеменили через 24 ч после выявления, объягнилось 4 головы, или 80%. Azzarini and Valledor (1985, 1987) провели внутриматочное осеменение овец криоконсервированной спермой, после которого объягнилось 42-53% овцематок, однако авторы не приводят данные по кратности выборки и осеменения. В исследованиях Reinhold et al., (1990) и Bustamante et al., (1990) приводятся сравнительные данные результативности внутриматочного осеменения овец со спонтанным (естественным) и синхронизированным эструсом (48% против 34% и 54% против 82% соответственно), однако эти результаты не могут быть вполне достоверными, т.к. получены по результатам учета перегула осемененных овец, а не по их ягнению.
Недостатком известных способов являются высокая стоимость и низкая оплодотворяемость овец и коз.
Технический результат, который может быть получен с помощью предлагаемого изобретения, сводится к снижению стоимости и повышению оплодотворяемости овец и коз.
6
Технический результат достигается тем, что в способе отбора и искусственного осеменения овец и коз, включающем отбор овец и коз, с естественной половой охотой, с помощью самцов-пробников, их внутриматочное осеменение замороженной спермой, дополнительно отбор овец и коз в состоянии эструса с помощью самцов-пробников осуществляют два раза в сутки, с интервалом 12 часов, а внутриматочное осеменение замороженной спермой осуществляют с помощью эндоскопического оборудования в объеме 0,05 миллилитров с содержанием 20×10 подвижных спермиев через 13-16 часов после отбора, при этом местом введения спермы является наружная кривизна рога матки, со стороны овулировавшего яичника, с отступом 3-4 сантиметра от бифуркации.
Основными преимуществами предложенного способа являются исключение синхронизации эструса гормональными препаратами, уменьшение трудоемкости и повышение оплодотворяемости овец и коз.
Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения
Методика исследования.
Был проведен эксперимент по внутриматочному осеменению овец и коз с естественной половой охотой замороженной - оттаянной спермой баранов породы ставропольский и австралийский мериносы и спермой козлов зааненской породы, соответственно.
Сперма была заморожена в гранулах объемом 0,2 миллилитра и хранилась в жидком азоте при Т=-196°С. Перед внутриматочным введением криоконсервированную сперму оттаивали в специальном устройстве. Дефростированную сперму оценивали по подвижности, для чего каплю спермы исследовали под микроскопом при ×400-кратном увеличении в соответствии с действующей «Инструкцией по технологии работы организаций по искусственному осеменению и трансплантации эмбрионов сельскохозяйственных животных, М., 2000). К использованию допускалась сперма, имеющая подвижность не менее 4 баллов (40% спермиев имели прямолинейное поступательное движение).
Выявление овец или коз в состоянии спонтанной (естественной) охоты проводили при помощи вазэктомированных (обеспложенных) самцов-пробников для обеспечения чистоты эксперимента. При этом по времени проведения выборки овцы или козы были разделены на 2 группы.
В первой группе овец или коз в состоянии эструса выявляли один раз в сутки утром с 6-30 до 8-00 часов. Отобранных в охоте животных осеменяли внутриматочно через 2-12 часов после выборки.
Во второй группе овец или коз в охоте выбирали два раза в сутки: утром (с 6-30 до 8-00 часов) и вечером (с 18-30 до 20-00 часов) т.е. с интервалом 12 часов. Отобранных в охоте животных осеменяли внутриматочно через 13-16 часов после выборки.
6
Внутриматочное осеменение проводили с помощью комплекта лапароскопического оборудования (Karl Storz, Germany), используя методику и технику введения, описанную Evans and Maxwell (1987). Для осеменения в каждый рог матки при помощи специального шприца-катетера инъецировали оттаянную сперму в объеме 0,05 миллилитра с содержанием 20×10 подвижных спермиев, при этом местом введения спермы являлась наружная кривизна рога матки, с отступом 3-4 сантиметра от бифуркации.
Были учтены овцы или козы, объягнившиеся через 145-155 дней после осеменения.
Результаты. Данные таблицы показывают, что в эксперименте двукратная в сутки выборка овец или коз в охоте и внутриматочное осеменение через 12-16 ч после выборки имела достоверные преимущества над однократной в сутки утренней выборкой и осеменением через 2-12 часов. Оплодотворяемость животных во второй группе составила 68,8% и 65% соответственно, (окотилось 55 из 80 овец и 26 из 40 коз) при плодовитости 130,9% и 146,2% (получено 72 ягненка от 55 овцематок и 38 козлят от 26 козоматок). В первой группе животных эти показатели составили соответственно 43,7% и 42,5% (32 из 80 овец, 17 из 40 коз), плодовитость составила 125,0% и 147,1% соответственно (40 ягнят от 32 овец и 25 козлят от 17 коз). Разница в пользу второй группы животных, которых отбирали в состоянии эструса 2 раза в сутки, достоверна по показателю оплодотворяемости (Р<0,01).
В таблице приведены результаты влияния частоты и времени выявления половой охоты на результаты ягнения овец и коз после лапароскопического осеменения замороженной спермой.
Таким образом, из экспериментов следует, что заявляемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями обладает рядом преимуществ:
1. Предлагаемый способ достоверно по сравнению с прототипом повышает результативность внутриматочного осеменения овец и коз замороженной-оттаянной спермой.
2. Предлагаемый способ в отличие от прототипа не требует специальной гормональной обработки животных.
3. Предлагаемый способ не предусматривает необходимости трехкратного отбора мелкого рогатого скота и манипуляций с ними, исключая сильные стрессовые воздействия на животное.
4. Предлагаемый способ не требует использования дорогостоящих препаратов, исключая высокие экономические затраты.
5. Предлагаемый способ в 3-5 раз позволяет уменьшить расход спермы на одно результативное осеменение.
Список использованной литературы
1. Желтобрюх Н.А., Ивахненко В.К., Тутова Л.А. Необходимо совершенствовать методы замораживания семени барана. Овцеводство 1977, №9, с. 37-38.
2. Логинова Н.В., Желтобрюх Н.А. Оценка различных способов замораживания семени. Овцеводство 1968, №9, с. 22-25.
3. Лопырин А.И. Повышение плодовитости овец и коз. М. Сельхозгиз 1953, 232 с.
4. Малмаков Н.И., Сейтпан К., Хамзин К.П., Спиваков В.А., Айбазов М.М. Результаты ягнения после внутриматочного осеменения овец замороженной спермой, импортированной из Новой Зеландии и США. Сб. науч. трудов. Животноводство и кормопроизводство. Ставрополь, изд. СНИИЖК, 2012, вып. 5, с. 59-62.
5. Малмаков Н.И., Хамзин К.П., Сейтпан К.М., Спиваков В.А. Результаты ягнения овец после внутриматочного осеменения замороженной спермой. Новости науки Казахстана 2013, №4, с. 106-117.
6. Мороз В.А., Бурдуковская Т.К., Айбазов М.М. и др. Результаты австрало-российского эксперимента по использованию замороженной и свежеполученной спермы мериносовых баранов австралийской и ставропольской пород методом лапароскопии / Генетика, селекция и качество продукции овец и коз // Сб. науч тр. / ВНИИОК. - Ставрополь, 1992. - С. 93-109.
7. Мороз В.А., Бурдуковская Т.К., Айбазов М.М. и др. Результаты первого этапа австрало-российского эксперимента / Овцеводство. - 1993. - №3. - С. 10-14.
8. Azzarini М, Valledor F. Insemination intrauterina con semen congelado en ovejas. Bol Tec Ovinos Lanas 1987, vol. 16, p. 7-14.
9. Azzarini M, Valledor F. Inseminacion intrauterina о cervical con semen congelado о fresco en ovejas en celo natural. Prod Ovina 1988, vol. 1, p. 1-8.
10. Bustamante G., Garcia D., Sanchez L.G. Evalucion de la fertilidad de semen ovinodescongelado у depositado intrauterinementeporlaparoscopia. In: Memoria - III CongresoNaciocal de ProduccionOvina. Universidad Autonoma de Tlaxcala, Mexico, 1990, pp. 153-155.
11. Evans G., Maxwell W.M.C. Salamon's artificial insemination of sheep and goats. Butterworths, Sydney, 1987:194 p.
12. Maxwell W.M.C. Current problems and future potential of artificial insemination programmes. In: D.R. Lindsay and D.T. Pearce (Editors), Reproduction in Sheep. Australian Academy of Science and Australian Wool Corporation, Canberra 1984, p. 291-298.
13. Reinhold G., Richter A., Schulz J., Menger H. Ergebnisse der Besamung von Schafen mit gefrierkonserviertem Sperma unter Anwendung der Laparoskopie. Monatsh. Veterinaermed., 1990, vol. 45, p. 43-456.
14. Salamon S., Maxwell W.M.C., Evans G. Fertility of ram semen frozen-stored for 16 years. Proc. Aust. Soc. Reprod. Biol. 1985, vol. 17, p. 62, abstract.
15. Salamon S, Maxwell WMC. Frozen storage of ram semen. II. Causes of low fertility after cervical insemination and methods of improvement. AnimReprodSci 1995, vol. 38, p. 1-36.
16. Sheep Production Handbook, C&M Press, Denver, Colorado, 1996.
17. Takenaka S, Fukui Y, Ono H. Intrauterine insemination with frozen semen in the ewe using a laparoscope. Jpn. J Anim Reprod 1985, vol. 31, p. 25-27.