ПАРАЛИТИЧЕСКИЙ ЯД МОЛЛЮСКОВ
PARALYTIC SHELLFISH POISON

Изобретение относится к паралитическому яду моллюсков для применения в способе лечения человека или другого млекопитающего, к фармацевтической композиции, содержащей указанный паралитический яд моллюсков, а также к способу лечения.
Зуд является основным симптомом заболевания кожи и важным кожным проявлением системного заболевания. Техника микронейрографии установила существование специализированных медленно проводящих немиелинизированных С нейронов, передающих только зуд (и изменения температуры) в ответ на действие гистаминов, опровергая таким образом мнение, что зуд является лишь умеренной версией боли.
Было показано, что эти нейроны, представляющие всего лишь около 5% от общего количества нейронов, селективно активируются при хроническом кожном зуде. Микронейрография также установила, что контралатеральные трансмиссионные нейроны, передающие зуд в таламус, состоят из зуд-специфического подкласса ламина 1 нейронов спиноталамический путей, показывая таким образом, что специализированные нейроны передают зуд не только на периферии, но и в центре.
Зуд может быть классифицирован патофизиологически на 4 категории:
- пруритоцептивный, возникает в коже, как правило, при воспалительном или другом видимом патологическом процессе, например чесотка, крапивница,
- нейрогенный, генерируется в центральной нервной системе в ответ на циркулирующие пруритогены, как при холестазе, или в ответ на интраспинальный морфин,
- нейропатический, возникает в связи с анатомическими поражениями центральной или периферической нервной системы, например ущемлением нерва, опухолью, и
- психогенный, в том числе дерматозойный зоопатический бред.
Для лечения зуда антигистаминные препараты, как правило, малоэффективны, если зуд принципиально не опосредован гистамином, например крапивница, хотя седативное действие H1 антигистаминных препаратов первого поколения может быть полезно и в других случаях хронического зуда.
Кортикостероиды не являются по существу противозудным средством и эффективны только для ослабления зуда, возникающего вследствие воспалительных изменений в коже.
Фототерапия узкой полосой ультрафиолета B (311 нм) является полезной при генерализованном зуде, вызванном большинством причин, и, особенно, полезна при зуде на терминальной стадии почечной недостаточности.
Доксепин, трициклическое соединение, является неспецифическим ингибитором постсинаптического обратного захвата адреналина и норадреналина и является мощным противозудным агентом, обладая большей потенцией, сходно с H1 антигистамином, чем любой другой имеющийся H1 антагонист, и также широко используется в качестве антидепрессанта. Его следует назначать изначально в низкой дозировке и использовать с особой осторожностью для лечения пациентов с заболеваниями печени или сердечно-сосудистыми заболеваниями. Его не следует резко отменять или предписывать одновременно с другими антидепрессантами. Он не противопоказан при наличии почечной недостаточности и, таким образом, очень полезен для таких пациентов. Он метаболизируется через систему цитохрома печени P450 3A, и поэтому его не следует назначать одновременно с антибиотиками группы макролидов или противогрибковыми препаратами - имидазолами.
Опиоидные антагонисты, в том числе пероральный налтрексон, являются эффективными для некоторых пациентов, особенно для больных с холестатическим зудом. Этот класс препарата противопоказан пациентам с тяжелыми заболеваниями печени, больным, пристрастившимся к опиоидам, и пациентам, получающим опиоидную анальгезию. Опиоидные антагонисты, по-видимому, вызывают симптомы и признаки отмены у пациентов с холестатическим зудом, и их дозировки следует увеличивать постепенно, чтобы избежать этого осложнения.
Буторфанол, комбинированный антагонист μ-рецептора и агонист k-рецептора, введенный в виде назального спрея, показал значительные перспективы в контроле неразрешимого зуда. Габапентин, структурный аналог γ-аминомасляной кислоты и противосудорожный препарат, был предложен как мощное противозудное средство и получил поддержку, по крайней мере, в 1 двойном слепом плацебо-контролируемом исследовании у пациентов, находящихся на гемодиализе. Другие препараты, которые можно попробовать, включают миртазепин, антагонист рецептора серотонина 3 типа, пароксетин, селективный ингибитор обратного захвата серотонина (SSRI - selective serotonin reuptake inhibitor) и талидомид.
Блокатор натриевых каналов лидокаин и другие местные анестетики, как сообщалось, вызывают побочные эффекты, включая зуд и/или реакцию местной гиперчувствительности. Также сообщалось, что другие блокаторы Na каналов, такие как местный новокаин, вызывают аллергические реакции, включая зуд.
Из документа Villamil, A.G. et al., The American Journal of Medicine (2005) 118, pages 1160-1163 известно, что лидокаин используют для лечения зуда у больных с хроническими холестатическими заболеваниями печени. Для лечения лидокаин вводят внутривенно.
Из документа США 2011/0086899 A1 известно применение соединения спиро-оксиндол для лечения зуда путем перорального введения.
В документе Roberson, D.P. et al., Society for Neuroscience, Abstract Viewer and Itinerary Planner, vol. 39, 2009, 39th Annual Meeting of the Society for Neuroscience, Chicago, IL, USA, October 17 to 21, 2009, раскрыто, что опосредованная TRPV1 доставка неспособного к проникновению блокатора натриевых каналов QX-314 в прурицептор блокирует зуд. Однако это требует совместного применения агониста TRPV1 и QX-314.
Из патентной заявки WO 2011/098539 A1 известно использование блокатора натриевого канала сакситоксина и его производных в способе лечения снижения или потери поверхностной чувствительности или осязания. Эта заявка раскрывает, что поверхностная чувствительность настолько усиливается при лечении, что сниженная или утраченная поверхностная чувствительность, или осязание, по меньшей мере частично, восстанавливаются.
Из документа WO 2010/111777 A1 известно использование тетродотоксин галактопиранозидов для лечения зуда.
В документе CN 1680382 A раскрыто использование тетродотоксина, в качестве противозудного препарата.
Задача, решаемая настоящим изобретением, заключается в предложении дополнительного вещества и дополнительной фармацевтической композиции, а также дополнительного способа лечения зуда без потери чувствительности, в зоне, иннервируемой нервами, пострадавшими от лечения, у человека или другого млекопитающего.
Задачу решают с помощью объекта, представленного в пп. 1, 11 и 18. Варианты осуществления изобретения являются предметом пп. 2-10, 12-17 и 19-21.
По изобретению представлен паралитический яд моллюсков (PSP - paralytic shellfish poison) для применения в способе лечения зуда у человека или другого млекопитающего. PSP представляет собой сакситоксин или трициклический 3,4-пропинопергидропурин, представленный следующей формулой (I)
1
5
2
3
3
4
2
3
где R и R независимо выбраны из группы, состоящей из -H и -OH; R и R независимо выбраны из группы, состоящей из -H,  и -SO; и R выбран из группы, состоящей из -Н, -ОН, -OC(=O)NH,  и -OC(=O)CH. PSP может также быть солью сакситоксина или трициклического 3,4-пропинопергидропурина.
Паралитический яд моллюсков можно применять один раз в течение периода времени от одного до семи дней, в ходе нескольких циклов лечения и/или в длительном лечении.
Авторы настоящего изобретения установили, что PSP по изобретению обладает противозудным действием, которое отличается от действия других блокаторов натриевых каналов, таких как лидокаин. До сих пор ни один из побочных эффектов лидокаина и других местных анестетиков, не относящихся к PSP, не был найден для PSP. Если зуд лечат лидокаином, то в области, иннервируемой нервами, пострадавшими от лечения, теряется чувствительность. Этого не происходит, если зуд лечат PSP по изобретению в концентрации и количестве, необходимом только для сокращения или устранения зуда, но не достаточном, чтобы вызвать потерю чувствительности.
Такие концентрация и количество могут быть легко определены путем проверки различных концентраций и количеств, например путем нанесения на кожу. Противозудное действие PSP по изобретению представляет собой совершенно новый эффект.
В документе WO 2011/098539 A1 раскрыты те же блокаторы натриевых каналов, которые были признаны изобретателями полезным для лечения зуда. Тем не менее, блокаторы натриевых каналов, раскрытые в WO 2011/098539 A1, повышают чувствительность кожи таким образом, что сниженная или утраченная поверхностная чувствительность или осязание являются, по меньшей мере частично, восстановленными. Можно было бы ожидать, что повышенная чувствительность усилит зуд. Таким образом, весьма удивительно, что эти вещества, усиливающие чувствительность, могут быть использованы для уменьшения зуда.
2
3
4
В одном варианте осуществления настоящего изобретения один из R или R представляет собой , или R представляет собой . Трициклический 3,4-пропинопергидропурин может быть одним из производных сакситоксина или гониаутоксина (GTX - gonyautoxin) по формуле I, как указано в таблице ниже.
В одном варианте осуществления PSP в соответствии с изобретением представлен в виде его рацемата, чистого стереоизомера, в частности энантиомера или диастереомера, или в виде смеси стереоизомеров, в частности энантиомеров или диастереомеров, в нейтральной форме, в форме кислоты или основания, или в форме соли, в частности физиологически приемлемой соли, или в форме сольвата, в частности гидрата.
В одном варианте осуществления изобретения PSP по изобретению представляет собой сакситоксин, неосакситоксин, дескарбамоилсакситоксин или GTX, в частности GTX-1, GTX-2, GTX-3, GTX-4 или GTX-5, при этом сакситоксин, неосакситоксин, дескарбамоилсакситоксин или GTX, в частности GTX-1, GTX-2, GTX-3, GTX-4 или GTX-5, синтетически синтезированы или выделены из биологического источника, в частности из цианобактерий, из динофлагеллят или зараженных моллюсков, в частности моллюсков, зараженных A. catenella.
Сакситоксин, неосакситоксин, дескарбамоилсакситоксин или GTX, в частности GTX-1, GTX-2, GTX-3, GTX-4 или GTX-5, могут быть применены в количестве от 0,1 мкг/день до 1000 мкг/день, предпочтительно от 0,1 мкг/день до 100 мкг/день, более предпочтительно от 1 до 10 мкг/день.
PSP по изобретению может представлять собой также трициклический 3,4-пропинпергидропурин, при этом трициклический 3,4-пропинпергидропурин синтезируют синтетически или выделяют из биологического источника.
Зуд, подлежащий лечению, является пруритоцептивным, нейрогенным, невропатическим, психогенным, возникает вследствие укуса насекомого, воспалительного процесса, в частности воспалительного процесса, связанного с операцией или лечением, вследствие инфекционного процесса, в частности, вызванного вирусом, бактериями, грибком или прионами, вследствие воздействия циркулирующих пруритогенов (соединения, вызывающие зуд), в результате системной патологии, в частности холелитиаза (желчекаменная болезнь) или острой или хронической почечной недостаточности, любого воздействия аллергена, табака, в частности воздействия бездымного табака, вследствие химического воздействия или воздействия на дыхательные пути. Воспалительный процесс может быть любым воспалительным процессом, независимо от внутренней причины этого процесса.
PSP по изобретению применяют путем перорального введения, путем инъекции, в частности внутримышечной, внутривенной, внутрикожной или подкожной инъекции, путем местного применения, в частности с использованием трансдермального пластыря, крема, мази или спрея и/или с использованием физического способа трансдермальной доставки, в частности путем ионофореза, фонофореза, сономакропорации, тепловой модуляции или магнитной модуляции, или путем использования физического устройства, в частности респираторного устройства, предпочтительно ингалятора.
Кроме того, изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей, по меньшей мере, один паралитический яд моллюсков по изобретению и фармацевтически приемлемый носитель для применения в способе лечения зуда у человека или другого млекопитающего. Носителем может быть любой материал, подходящий для местного, в частности поверхностного, применения лекарственного препарата. Носители включают любые такие материалы, известные в данной области техники, которые являются нетоксичными в применяемых объемах и не взаимодействуют с другими компонентами композиции вредным образом.
В одном из вариантов PSP по изобретению содержится в фармацевтической композиции в количестве, подходящем для применения, от 0,01 до 1000 мкг, предпочтительно от 0,1 до 100 мкг, более предпочтительно от 1 до 10 мкг PSP в день. PSP по изобретению может содержаться в фармацевтической композиции в концентрации от 0,01 до 1000 мкг/мл, предпочтительно от 0,1 до 100 мкг/мл, более предпочтительно от 1 до 10 мкг/мл.
Фармацевтической композицией по изобретению может быть фармацевтическая композиция, которую получают для инъекций, в частности внутримышечной, внутривенной, внутрикожной, подкожной инъекции, или для местного применения, в частности поверхностного введения, или получают для систематического введения, в частности перорального.
Фармацевтическая композиция, полученная для поверхностного применения, может представлять собой трансдермальный пластырь, крем, мазь или спрей.
По одному из вариантов осуществления изобретения фармацевтическая композиция дополнительно содержит, по меньшей мере, одно противозудное соединение. Противозудным соединением может быть, но не ограничивается им, антигистаминное соединение, предпочтительно хлорфенамин, лоратадин или деслоратадин, кортикостероид, предпочтительно бетаметазон, клобетазол или мометазон или нестероидный противовоспалительный препарат, предпочтительно ибупрофен, кетопрофен или диклофенак.
PSP в фармацевтической композиции по изобретению включают в липосомы или микроэмульсии. Микроэмульсия представляет собой стабильную, изотропную жидкую смесь масла, воды и поверхностно-активного вещества, часто в сочетании со вторичным поверхностно-активным веществом (косурфактантом). Смесь представляет собой эмульсию, причем масло диспергировано в воде или вода диспергирована в масле, дисперсная фаза которого формирует такие малые области, что видимый свет не рассеивается дисперсной фазой. Таким образом, микроэмульсия является прозрачной.
В качестве альтернативы или дополнительно, фармацевтическая композиция, содержащая PSP, может дополнительно содержать по меньшей мере одно вещество, облегчающее транспортировку PSP через кожу.
Такие вещества хорошо известны в данной области техники как усилители проницаемости. Это вещество может быть веществом, выбранным из группы, включающей: спирты, амины, амиды, аминокислоты, сложные эфиры аминокислот, 1-замещенные азациклогептан-2-оны, пирролидоны, терпены, жирные кислоты, сложные эфиры жирных кислот, макроциклические соединения, поверхностно-активные вещества, сульфоксиды, липосомы, трансферомы, везикулы лецитина, этосомы, анионные, катионные и неионогенные поверхностно-активные вещества, полиолы, эфирные масла, диметилсульфоксид, децилметилсульфоксид, моноэтиловый эфир диэтиленгликоля, монометиловый эфир диэтиленгликоля, лаурат натрия, лаурилсульфат натрия, бромид цетилтриметиламмония, бензалкония хлорида, полоксамер, полисорбат 20 (Tween 20, полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат), полисорбат 40 (Tween 40, полиоксиэтиленсорбитанамонопальмитат), полисорбат 60 (Tween 60, полиоксиэтиленсорбитанамоностеарат), полисорбат 80 (Tween 80, полиоксиэтиленсорбитанамоноолеат), лецитин, 1-н-додецилциклазациклогептан-2-он, этанол, пропанол, октанол, бензиловый спирт, лауриновую кислоту, олеиновую кислоту, валериановую кислоту, изопропилмиристат, изопропилпальмитат, метилпропионовую кислоту, этилолеат, сорбитансесквиолеат, пропиленгликоль, этиленгликоль, глицерин, бутандиол, полиэтиленгликоль, полиэтиленгликоль монолаурат, мочевину, диметилацетамид, диметилформамид, 2-пирролидон, 1-метил-2-пирролидон, этанол амин, диэтаноламин, триэтаноламин, алканоны, салициловую кислоту, салицилаты, лимонную кислоту и янтарную кислоту.
2
4
а
3
6
b
2
4
а
Полоксамер (полиэтиленполипропиленгликоль, молекулярная формула HO(CHO)(CHO)(CHO)Н, где a и b являются целыми числами), представляет собой синтетический неионогенный триблок-сополимер, состоящий из центральной гидрофобной цепи полиоксипропилена (поли(пропиленоксида)), фланкированной двумя гидрофильными цепями полиоксиэтилена (поли(этиленоксида)). Полоксамер доступен в нескольких вариантах, таких как полоксамер 231, полоксамер 182 или полоксамер 184.
Дополнительно, изобретение относится к способу лечения зуда у человека или другого млекопитающего, где PSP или фармацевтическую композицию по изобретению, применяют на человеке или другом млекопитающем.
PSP или фармацевтическую композицию вводят путем инъекции, в частности путем внутримышечной, внутривенной, внутрикожной, подкожной инъекции, или путем местного применения, в частности поверхностного применения, или путем систематического введения, в частности перорального.
Применение может быть поддержано физически, в частности, путем ионофореза, фонофореза, сономакропорации, тепловой модуляции или магнитной модуляции.
PSP или фармацевтическую композицию применяют в течение от одного до семи дней и/или в ходе нескольких циклов лечения.
Варианты осуществления изобретения
Чтобы разработать исследование, в котором можно оценить действие PSP-токсина на зуд, сравнивали две наиболее часто используемые модели зуда у крыс; подкожные инъекции серотонина или гистамина. Такие инъекции, как сообщалось, стимулируют увеличение расчесов (царапин) в зоне инъекции.
Следующие препараты были использованы для испытаний на животных:
a) раствор серотонина: серотонина гидрохлорид 2,5 мг/кг (Enzo Life Sciences), растворенный в физиологическом растворе (0,9% NaCl);
b) гель-тест препарат v1 234: GTX 2/3 (Цетиол SB-45, Panalene L-14-E, цетилстеариловый эфир Ceteareth 20, глукамат SS, глукамат SSE 20, пропилпарабен, метилпарабен, карбопол 2020, глицерин, вода, триэтаноламин, силикон DC 345, Microcare РМ5, сепигель 305;
c) 110214 PB GTX: GTX 2/3 в физиологическом растворе (0,9% NaCl);
d) Три GTX токсин препарата: GTX 2/3 + липосомы (вода, масло Persea Gratissima, пропиленгликоль, сквалан, вазелин, диметикон, ПЭГ(полиэтиленгликоль)-20 метил глюкозы сесквистеарат, цетиловый ацетат (у) ацетилированный ланолиновый спирт, диазолинидил мочевина (у) метилпарабен (у), пропилпарабен (у) пропиленгликоль, глицерил стеарат, метил глюкоза, сесквистеарат, триэтаноламин, озокерит, карбомер акрилаты/С 10-30 алкил акрилат кроссполимер, токоферол (у) аскорбилпальмитат (г) лецитин, (у) глицерил стеарат (у) глицерил олеат (у) лимонная кислота). Композиция, как описано выше, с GTX 2/3 5, 10 и 20 мкг/г крема;
e) Плацебо: как описано в d), но без GTX 2/3 (плацебо);
f) 4% гель лидокаина: 4% гель лидокаина хлоргидрат LCH + наполнители.
1. Действие токсина на зуд, вызванный подкожно введенным серотонином
Обоснование: Цель заключалась в проверке действия токсина на зуд, вызванным подкожным серотонином (5-НТ), который является наиболее распространенным и эффективным методом получения зуда у крыс. Поскольку препарат токсина в виде крема показывает только кожные эффекты, мы решили проверить действие препарата в виде крема на коже и одновременную подкожную инъекцию серотонина и токсина.
Методы: После акклиматизации и выстригания шерсти самцов крыс делили на 3 группы. Первой группе вводили подкожно серотонин (50 мкл 5НТ (2,5 мг/кг)). Вторую группу обрабатывали гель-тест препаратом v1 234, накладываемом (от 80 до 100 мг) на выстриженную область за 1 час до подкожной инъекции серотонина (та же доза, что указана выше). Третью группу инъецировали одновременно смесью токсина (10 мкг/кг 110214 PB GTX) и серотонина (2,5 мг/кг в 50 мкл). Поведение животных регистрировали в течение 30 минут после подкожных инъекций.
Результаты: Подкожная инъекция серотонина в область шеи вызывала увеличение расчесов (5НТ), которые слегка уменьшались после совместного введения токсина и серотонина (5НТ-токсина). Применение токсин-геля вызывало незначительное увеличение расчесов.
Выводы: Полученные данные свидетельствуют о том, что одновременная подкожная инъекция токсина и серотонина оказывает влияние на зуд.
2. Действие токсина на зуд, вызванный наружно примененным серотонином.
Обоснование: Цель заключалась в тестировании действия токсина на зуд, вызванным серотонином, нанесенным на кожу (5-НТ).
Методы: После акклиматизации и выстригания шерсти (см. выше) самцов крыс обрабатывали гель-тест препаратом v1 234, накладываемым (80-100 мг) на выстриженную область за 1 час до наружного применения серотонина (в той же дозе, что и выше).
Результаты: значительное снижение расчесывания у животных наблюдали после наружного применения токсина.
Выводы: GTX в геле приводит к снижению зуда, вызванного нанесенным на кожу серотонином, у крыс более чем на 60%.
3. Сравнение с лидокаином
Методы: самцов крыс Sprague Dawley весом от 250 до 300 г обрабатывали один раз в день в течение 5 дней. В день тестирования крысам выстригали область 2×2 см на правой стороне шеи. Животных делили на 6 групп (N=8 каждая группа). Первые 4 группы обрабатывали путем втирания от 80 до 100 мг в голый участок кожи или препарата GTX токсина, или плацебо за час до применения серотонина. Одну группу крыс обрабатывали на поверхности кожи 4% гелем лидокаина (от 80 до 100 мг) за 5 минут до применения серотонина.
Последняя группа не получала никакой кожной обработки. Серотонин (100 мкл, 2,5 мг/кг) применяли на поверхности кожи всем животным. Крыс затем помещали в индивидуальные клетки и поведение животных регистрировали как количество почесываний в течение 30 минут после применения серотонина. Два последовательных почесывания считались разными, если между ними присутствовал интервал 1 секунда.
Результаты: Как видно на фигуре, три концентрации GTX (5, 10 и 20 мкг/г крема) значительно ослабляли расчесывание, вызванное серотонином (более 50% снижения на 20 мкг/г крема, p<0,01). Ни плацебо, ни гель лидокаина не оказывали существенного воздействия на зуд, вызванный серотонином.
4. Терапевтическое применение
Для всех терапевтических применений, описанных ниже, использовали следующую композицию крема:
Акрилатом(ами) может быть С 10-30 алкил акрилат кроссполимер(ы).
Представлен шестидесятилетний мужчина с укусом комара в шею. В течение 10-15 минут после местного применения композиции крема он испытал снижение зуда и сказал, что не нуждается в дальнейшем применении крема.
Представлен семидесятилетний мужчина с аллергической кожной реакцией на обеих ногах с интенсивным зудом и отеком легкой/умеренной степени. В течение получаса после местного применения композиции крема симптомы значительно уменьшились. Он сказал, что применил препарат GTX два-три раза в течение 24 часов и полностью избавился от симптомов.
Семидесятидевятилетняя женщина с сильным зудом вследствие пруриго Гайда почувствовала немедленное облегчение зуда, по визуальной аналоговой шкале от 8 до 2, после применения композиции крема.
Пятидесятисемилетний пожилой мужчина с дисгидротической экземой рук с сильным зудом, имеющий 5 по визуальной аналоговой шкале. После однократного нанесения композиции крема зуд уменьшился до нуля. Действие крема продолжалось почти ровно 24 часа.
Сорокалетняя женщина имела сильно зудящее покрасневшее коричневое пятно на спине. После первого применения композиции зуд исчез. При обработке один раз в день этот эффект сохранялся в течение 24 ч. Зуд возобновлялся после прекращения применения крема.