ПРИМЕНЕНИЕ ФЛЕКАИНИДА В КАЧЕСТВЕ АНТИКОННЕКСИНОВОГО СРЕДСТВА И СПОСОБ ПОТЕНЦИРОВАНИЯ ЭФФЕКТОВ ПСИХОТРОПНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
APPLICATION OF FLECAINIDE AS ANTICONNEXIN AGENT AND METHOD OF POTENTIATION OF EFFECTS OF PSYCHOTROPIC MEDICINES

Область техники
Настоящее изобретение относится к применению флекаинида в качестве антиконнексинового средства. Это антиконнексиновое средство предпочтительно используется для потенцирования терапевтического эффекта различных психотропных средств. Более конкретно, изобретение относится к комбинированному препарату, содержащему флекаинид и модафинил.
Предшествующий уровень техники
2+
+
Щелевые контакты участвуют в межклеточной коммуникации, которая важна для поддержания гомеостаза тканей и органов. Щелевые контакты соединяют цитоплазму клеток, что позволяет обмен ионами (Са и K), вторичными мессенджерами (АМРс (циклический аденозинмонофосфат), GMPc (циклический гуанозинмонофосфат), IP3 (инозитолтрифосфат)), некоторыми небольшими метаболитами (глюкозой), и обеспечивает электрическую и метаболическую связь между клетками. Щелевые контакты представляют собой межклеточные контакты с избирательной проницаемостью, образованные белковыми каналами, которые находятся в плазматической мембране и состоят из гексамеров коннексина. Гексамеры коннексина также могут формировать полуканалы, связывающие внутриклеточное пространство с внеклеточным.
Коннексины являются интегральными белками плазматической мембраны, которые синтезируются клетками практически любого типа, независимо от ступени филогенеза животного мира, на которой находится многоклеточный организм. У позвоночных единственными не производящими коннексины клетками являются взрослые клетки поперечнополосатых мышц, сперматозоиды и циркулирующие клетки крови. В отличие от многочисленных мембранных белков, коннексины имеют короткий период полужизни (от 3 до 6 часов), не гликозилированы и не обладают ферментативной активностью. В настоящее время у млекопитающих идентифицированы, по меньшей мере, тринадцать различных коннексинов; соответственно, в организме человека идентифицировано до 21 изоформы. На практике во многих тканях могут присутствовать различные типы коннексинов, и большинство клеток синтезируют множество коннексинов. Перед тем, как достигнуть клеточной мембраны, коннексины собираются в группы по шесть молекул с образованием полых трубчатых структур, называемых коннексонами, которые встраиваются в плазматическую мембрану с помощью везикул Гольджи. Для создания клеточного контакта коннексоны одной клетки выстраиваются концом к концу с коннексонами соседней ячейки, образуя непрерывный гидрофильный канал примерно 10 нм длиной. За счет такого соединенного канала устанавливается прямой контакт сквозь межклеточное пространство между цитоплазмами двух клеток, находящихся в этом контакте.
Коннексины участвуют в огромном количестве физиологических процессов, и кроме того, описано несколько направлений применения веществ, блокирующих коннексины (также называемых далее «ингибиторы коннексинов» или «антиконнексиновые средства»).
В частности, антиконнексиновые средства были предложены для лечения и/или профилактики следующих состояний:
- Раковые опухоли (W02006/134494 и W02006/049157),
- Некоторые сердечно-сосудистые заболевания (W02006/134494)
- Раны (W02006/134494 и W02009/097077)
- Боль(W02009/148613)
- Мигрень (Durham and Garrett, 2009)
- Эпилепсия (Juszczak and Swiergiel, 2009)
- Неврологические болезни (W02006/134494) и нейродегенеративные заболевания (Takeuchi et al. 2011)
- Ишемия (Davidson et al, 2013)
- Медикаментозное повреждение печени (Patel et al, 2012)
- Инфекционные заболевания (W02011/067607)
- Цитотоксичность, индуцируемая химиотерапевтическими агентами (Tong X. et al., 2013)
и
- Воспалительные заболевания (W02006/134494).
Кроме того, авторы настоящего изобретения ранее описали способность антиконнексиновых средств усиливать терапевтические эффекты психотропных средств (WO 2010/029131). В частности, они описали, что введение таких антиконнексиновых средств, как меклофенамовая кислота (МКК), усиливает терапевтические эффекты различных психотропных молекул, позволяя уменьшить действующие дозы и, за счет этого, снизить нежелательные эффекты таких психотропных молекул. Эти синергетические эффекты были обнаружены у широкого диапазона психотропных молекул (клозапин, пароксетин, модафинил, диазепам, венлафаксин, эсциталопрам, бупропион и сертралин).
Поэтому идентификация новых антиконнексиновых средств имеет первостепенное значение для выявления новых терапевтических средств, предназначенных для лечения различных заболеваний и расстройств, в частности, в сочетании с психотропными средствами.
В этом контексте авторы изобретения показали, что известный в настоящее время антиаритмический препарат флекаинид обладает широкой антиконнексиновой активностью. Это весьма удивительный результат, поскольку до сих пор было описано, что флекаинид воздействует на натриевые каналы, в частности, в клетках сердечной мышцы, а эти каналы не связаны со щелевыми контактами клеток мозга. Кроме того, было показано, что флекаинид не влияет на сопротивление в области межклеточных контактов у пар миоцитов сердца (Daleau et al, 1998).
Подробное описание изобретения
В контексте настоящего изобретения, «флекаинид» обозначает соединение, имеющее формулу N-(пиперидин-2-ил-метил)-2,5-бис(2,2,2-трифторэтокси)бензамид. В значении, использующемся в настоящем изобретении, этот термин обозначает любую форму данного соединения, например, его соль. Предпочтительно, чтобы эта соль представляла собой флекаинида ацетат. Этот термин может также охватывать предшественники флекаинида, которые могут быть метаболизированы в организме человека, и/или его производные (например, химические производные, полученные в результате одной или нескольких замен на галогены и/или вследствие присоединения защитных групп).
Как показано на Фигурах 5А и 5В, флекаинид обладает хиральным центром, что подразумевает существование R и S энантиомеров (S-(+)-флекаинида и R-(-)-флекаинида). На Фигуре 5 показаны формулы R-флекаинида (Фиг. 5А, (R)-N-(пиперидин-2-ил-метил)-2,5-бис(2,2,2-трифторэтокси)бензамид) и S-флекаинида (Фиг. 5В, (S)-N-(пиперидин-2-ил-метил)-2,5-бис(2,2,2-трифторэтокси)бензамид).
В значении, использующемся в настоящем изобретении, термин «флекаинид» обозначает рацемическую форму N-(пиперидин-2-ил-метил)-2,5-бис(2,2,2-трифторэтокси)бензамида, а также R- и S энантиомеры ((R)-N-(пиперидин-2-ил-метил)-2,5-бис(2,2,2-трифторэтокси)бензамид и (S)-N-(пиперидин-2-ил-метил)-2,5-бис(2,2,2-трифторэтокси)бензамид, соответственно). В предпочтительной форме осуществления настоящего изобретения будет использоваться R энантиомер флекаинида ((R)-N-(пиперидин-2-ил-метил)-2,5-бис(2,2,2-трифторэтокси)бензамид).
В настоящее время флекаинид назначают в виде рацемата ((Kroemer et al, 1989; Lie et al, 1989). Фармакокинетические параметры двух энантиомеров флекаинида были в значительной степени описаны на основании назначения их человеку и грызунам, как описано ниже:
В 1989 году Kroemer et al. опубликовали исследование на 13 пациентах, получавших продолжительную пероральную терапию флекаинидом. Были определены уровни в плазме S-флекаинида и R-флекаинида, причем, концентрации в плазме R-флекаинида были значительно выше, чем его энантиомера S-флекаинида (отношение R/S равно 1,10), из чего можно заключить, что препарат флекаинида подвергается умеренным энантиоселективным фармакокинетическим преобразованиям [Kroemer et al, 1989].
В 1989 году Gross et al. сравнили фармакокинетику обеих энантиомеров в двух человеческих популяциях: у быстрых метаболизаторов (БМ) и в пять раз более медленных метаболизаторов (ММ) спартеина/дебризохина после введения 50 мг рацемического флекаинида ацетата [Gross et al., 1989]. Gross et al., представили данные, свидетельствующие о том, что период полураспада R-флекаинида (12,9 ч) больше (р меньше 0,03); чем период полураспада S-флекаинида (9,8 ч). Однако почечный клиренс двух энантиомеров сопоставим и близок к клиренсу, наблюдавшемуся у пациентов БМ. Выведение с мочой R-флекаинида (15,6±3,7 мг) было больше (Р меньше 0,03), чем S-энантиомера (12,0±3,7 мг). Таким образом, энантиоселективные фармакокинетические преобразования, наблюдаемые у ММ, обусловлены более выраженными нарушениями метаболизма R-флекаинида, чем S-флекаинида.
В 1991 Alessi-Severini et al. обобщили основные выводы по фармакокинетике и, ссылаясь на три доклада о мониторинге стереоселективной терапии, в которых были обнаружены диапазоны соотношения R/S, составляющие от 0,67 до 1,39 (среднее значение 1,03±0,16), от 0,75 до 1,44 (среднее значение 1,04) и от 0,89 до 1,32 (среднее значение 1,10±0,13), пришли к выводу, что какие-либо доказательства энантиоселективных фармакокинетических преобразований флекаинида у человека отсутствуют [Alessi-Severini et al., 1991], и что исследование Grosset al. 1989 не было релевантным при такой общей численности популяции.
В 1998 Hanada et al. продемонстрировали отсутствие энантиоселективного распределения двух энантиомеров флекаинида в некоторых тканях у крыс после внутривенного введения рацемического флекаинида [Hanada et al., 1998].
Как отмечалось в [Mehvar et al., 2002], представляется, что почечные клиренсы энантиомеров флекаинида не являются стереоселективными ни у здоровых добровольцев, ни у больных.
Таким образом, литературные источники полностью единодушны в вопросе отсутствия стереоселективного воздействия флекаинида на фармакокинетику и метаболизм.
Также были описаны физико-химические свойства двух энантиомеров флекаинида. В частности, Turgeon et al. описали метод стереоселективного анализа для определения антиаритмического препарата флекаинида в плазме человека. Разделение энантиомеров достигалось помощью нормально-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на колонке с силикагелем с последующей дериватизацией при помощи оптически активного реагента (-)-метилхлорформиата [Turgeon et al., 1990].
Кроме того, Alessi-Severini et al. описали стереоспецифический метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения (R,S)-флекаинида ацетата в человеческой плазме и моче. Диастереомеры флекаинида разделяли после i) одностадийной экстракции подщелоченных образцов, проведенной очищенным дистилляцией диэтиловым эфиром, ii) выпаривания органического слоя и дериватизации препарата с использованием 1-[(4-нитрофенил)сульфонил]-L-пропилхлорида при 80°С в течение 2 ч, и iii) проведения высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенно-фазовой колонке С18 с подвижной фазой, состоящей из смеси ацетонитрил:вода:триэтиламин (45:55:0,2) при скорости потока 1 мл/мин [Alessi-Severini et al., 1990].
Рацемический флекаинида ацетат является широко используемым антиаритмическим препаратом класса 1С, который показан для лечения различных типов аритмий. Более конкретно, он используется для регулирования скорости и ритма сердечных сокращений. Насосная функция сердца регулируется при помощи электрических сигналов, которые проходят через сердечную мышцу. Эти электрические сигналы заставляют сжиматься две пары камер сердца (левые и правые предсердия и желудочки), производя обычные регулярные сердечные сокращения. Если электрическая активность сердца по какой-либо причине нарушается, то это может привести к нерегулярным сердечным сокращениям (различным типам аритмии). Флекаинид помогает при лечении аритмии, уменьшая чувствительность клеток сердечной мышцы к электрическим импульсам. За счет этого регулируется электрическая проводимость в сердечной мышце и уменьшаются нарушения сердечного ритма. Как антиаритмический препарат класса I, флекаинид воздействует на натриевые каналы.
Что не менее важно, некоторые исследования показали, что эти сердечно-сосудистые эффекты не опосредуются единственным энантиомером, поскольку они оба вносят свой вклад в сердечно-сосудистые функции:
Антиаритмические эффекты флекаинида и его энантиомеров оценивали в двух различных моделях на животных, хлороформ-индуцированной фибрилляции желудочков у мышей и уабаин-индуцированной желудочковой тахикардии у собак. Два энантиомера были весьма эффективны в подавлении обеих экспериментальных аритмий и оказались по существу равными по эффективности. Никаких существенных различий не было найдено ни между двумя энантиомерами, ни между энантиомерами и рацемическим флекаинидом [Barritt et al., 1986].
Были оценены эффекты энантиомеров в отношении характеристик потенциала действия в волокнах Пуркинье сердечной мышцы собак, и показано, что они обладают сходными электрофизиологическими эффектами [Kroemer et al, 1989].
Были изучены эффекты рацемата флекаинида ацетата и двух его энантиомеров в отношении функции потенциал-зависимых натриевых и калиевых каналов и натриевой помпы безмиелиновых волокон блуждающего нерва морской свинки с помощью метода сахарозного мостика. Никакого существенного различия в эффектах, вызванных каждым отдельным энантиомером, обнаружено не было [Lie et al., 1989].
Эффекты энантиомеров в отношении изолированных волокон Пуркинье сердца собак оценивали с использованием стандартных микроэлектродных методов. Полученные результаты свидетельствуют об отсутствии существенной разницы между воздействием энантиомеров флекаинида на основные электрофизиологические параметры волокон Пуркинье сердца собак [Smallwood et al, 1989].
Итак, все эти исследования не дали никаких свидетельств того, что назначение одного энантиомера будет давать какие-либо преимущества по сравнению с рацемическим лекарственным средством.
Таким образом, согласно своему первому аспекту настоящее изобретение относится к применению флекаинида in vitro и in vivo в качестве антиконнексинового средства. В частности, настоящее изобретение относится к флекаиниду для применения в качестве антиконнексинового средства, или, другими словами, для блокирования щелевых контактов.
У людей имеется 21 ген, кодирующий различные изоформы коннексина, а также описаны различные комбинации мономеров коннексина, входящих в состав щелевых контактов. В частности, коннексины 26 (Сх26), 30 (Сх30), 30.2 (Сх30.2), 32 (Сх32), 36 (Сх36), 37 (Сх37), 40 (Сх40), 43 (Сх43), 45 (Сх45), 46 (Сх46) и 47 (Сх47) экспрессируются у человека в клетках центральной или периферической нервной системы (Nakase & Naus, 2004).
Авторы настоящего изобретения заметили, что флекаинид эффективен для ингибирования щелевых контактов, образованных из всех протестированных ими коннексинов. В частности, и как описано ниже в экспериментальной части, флекаинид является эффективным для ингибирования щелевых контактов, образованных из коннексинов Сх40, Сх26, Сх30, Сх32, и/или Сх43. Важно отметить, что этот антиконнексиновый эффект аналогичен тому, который наблюдается у известных антиконнексиновых средств, таких как мефлохин и меклофенамовая кислота (МКК) (Juszczak & Swiergiel, 2009; Cruikshank et al., 2004; Harks et al., 2001). Для глиальных коннексинов Cx26, Сх30 и Сх43 были достигнуты даже более высокие уровни ингибирования (см. Фигуру 1).
Следовательно, настоящее изобретение относится к применению флекаинида in vitro в качестве антиконнексинового средства. Предпочтительно, чтобы это средство могло быть использовано с целью ингибирования щелевых контактов, образованных из коннексинов, выбранных из группы, состоящей из Сх23 (SEQ ID NO: 1), Сх25 (SEQ ID NO: 2), Сх 26 (SEQ ID NO: 3), Сх30 (SEQ ID NO: 4), Cx30.2 (SEQ ID NO: 5), Сх30.3 (SEQ ID NO: 6), CX31 (SEQ ID NO: 7), Cx31.1 (SEQ ID NO: 8), Cx31.9 (SEQ ID NO: 9), Cx32 (SEQ ID NO: 10), Сх36 (SEQ ID NO: 11), Cx37 (SEQ ID NO: 12), Cx40 (SEQ ID NO: 13), Cx40.1 (SEQ ID NO: 14), Cx43 (SEQ ID NO: 15), Cx45 (SEQ ID NO: 16), Cx46 (SEQ ID NO: 17), Cx47 (SEQ ID NO: 18), Cx50 (SEQ ID NO: 19), Cx59 (SEQ ID NO: 20), и Cx62 (SEQ ID NO: 21).
В предпочтительной форме осуществления настоящего изобретения флекаинид используется для блокировки одного или более коннексинов, экспрессирующихся у человека в клетках центральной или периферической нервной системы, причем, эти коннексины выбраны из группы, состоящей из Сх26 (SEQ ID NO: 3) Сх30 (SEQ ID NO: 4), Cx30,2 (SEQ ID NO: 5), Cx32 (SEQ ID NO: 10), Сх36 (SEQ ID NO: 11), Cx37 (SEQ ID NO: 12), Cx40 (SEQ ID NO: 13), Cx43 (SEQ ID NO: 15), Cx45 (SEQ ID NO: 16), Cx46 (SEQ ID NO: 17) и Cx47 (SEQ ID NO: 18).
В более предпочтительной форме осуществления настоящего изобретения флекаинид используется для блокировки одного или более коннексинов, выбранных из группы, состоящей из Сх40 (SEQ ID NO: 13), Сх26 (SEQ ID NO: 3), Сх30 (SEQ ID NO: 4), Cx32 (SEQ ID NO: 10) и Cx43 (SEQ ID NO: 15).
В еще более предпочтительной форме осуществления настоящего изобретения флекаинид используется для блокировки одного или более коннексинов, выбранных из группы, состоящей из: Сх26 (SEQ ID NO: 3) Сх30 (SEQ ID NO: 4) и Cx43 (SEQ ID NO: 15).
Ввиду своей антиконнексиновой активности флекаинид может применяться для лечения ряда расстройств и состояний, для которых известна польза от лечения с помощью антиконнексиновых молекул.
Эти расстройства и состояния включают, без ограничений: злокачественные опухоли, сердечно-сосудистые заболевания, раны, боль, мирени, эпилепсию, неврологические состояния и нейродегенеративные заболевания, инфекционные заболевания, медикаментозное повреждение печени; цитотоксичность, индуцированную химиотерапевтическими препаратами, ишемию и воспалительные заболевания.
Более предпочтительно, чтобы флекаинид мог быть применен для профилактики и/или лечения злокачественных опухолей, ран, мигреней, эпилепсии, инфекционных заболеваний, медикаментозного поражения печени; цитотоксичности, индуцированной химиотерапевтическими агентами; ишемии и воспалительных заболеваний.
Еще более предпочтительно, чтобы флекаинид мог быть применен для профилактики и/или лечения ран, мигреней, инфекционных заболеваний, медикаментозного поражения печени; цитотоксичности, индуцированной химиотерапевтическими агентами, и ишемии.
Еще более предпочтительно, чтобы флекаинид мог быть применен для профилактики и/или лечения цитотоксичности, индуцированной химиотерапевтическими агентами, и ишемии.
Согласно конкретному аспекту настоящего изобретения, флекаинид применяется в качестве средства для потенцирования эффектов психотропного лекарственного средства. Эти потенцирующие эффекты проиллюстрированы ниже с помощью экспериментов, выполненных с использованием модафинила (см. Фигуры 2-4). В качестве антиконнексинового средства флекаинид может усиливать действие любого психотропного лекарственного средства (как показано в патентах WO 2010/029131 и US 2011/172188, включенных в изобретение путем ссылки).
Термин «потенцировать» в данном случае означает, что флекаинид значительно усиливает терапевтический эффект психотропного лекарственного средства, вводимого тому же пациенту. Таким образом, сочетание психотропного лекарственного средства с флекаинидом позволяет снизить дозы данного психотропного лекарственного средства и, тем самым, ограничить нежелательные эффекты упомянутого психотропного лекарственного средства, и/или получить более сильный терапевтический эффект без увеличения дозы этого психотропного лекарственного средства.
В настоящем тексте, термины «психотропное лекарственное средство» или «психотропный препарат» относятся к любому веществу, которое воздействует прежде всего на состояние центральной нервной системы, изменяя определенные церебральные биохимические и физиологические процессы. Примеры психотропных средств, которые могут быть использованы в контексте настоящего изобретения, включают анестетики; анальгетики, такие как опиоиды, жаропонижающие и антимигренозные препараты; противоэпилептические средства; антипаркинсонические средства, такие как антихолинергические и дофаминергические антипаркинсонические средства; психолептики, такие как антипсихотические препараты, анксиолитики, снотворные и седативные средства; психоаналептики, такие как антидепрессанты, психостимуляторы и средства для лечения деменции; а также парасимпатомиметики, средства, применяемые при лечении зависимостей, препараты для лечения головокружения и т.д. Неограничивающие примеры конкретных молекул, которые предпочтительно могут быть использованы в качестве психотропных средств в соответствии с изобретением, перечислены в Таблице 1 ниже.
Предпочтительно, чтобы психотропное лекарственное средство было выбрано из группы, состоящей из дофаминергических, ГАМК-ергических, адренергических, ацетилхолинергических, серотонинергических, опиоидергических, аденозинергических, ионотропных, гистаминергических психотропных эффекторов; эффекторов моноаминооксидазы (ИМАО), катехол-О-метилтрансферазы, ДОФА-декарбоксилазы; норадренергических и глутаматергических психотропных эффекторов, а также молекул, оказывающих воздействие на систему гипокретинов/орексинов (включая гипокретин-1 и гипокретин-2).
Термин «эффектор» в данном описании относится к любому веществу, активирующему или ингибирующему, прямо или косвенно, один или более нейрорецепторов, а также к любому веществу, которое изменяет концентрацию нейротрансмиттера; таким образом, эффектор в соответствии с настоящим изобретением может быть агонистом или антагонистом указанного рецептора.
Как показано в приведенных ниже примерах, упомянутое психотропное средство предпочтительно представляет собой модафинил.
Действительно, авторы настоящего изобретения показали, что флекаинид потенцирует промнестический эффект и/или эффект пробуждении модафинила (см. Фигуры 2 и 3), и что комбинация модафинил/флекаинид дает многообещающие эффекты типа снижения катаплексикоподобных приступов у мышей. Точный механизм действия модафинила до конца не выяснен. По существу, известно, что модафинил действует на некоторые молекулярные рецепторы, в частности, на дофаминовые, норэпинефриновые, серотониновые, глутаматные, орексиновые, гистаминовые рецепторы и ГАМК-рецепторы (Ishizuka et al., 2012; Minzenberg et al, 2008). Вследствие этого модафинил действует как ГАМК-ергический, дофаминергический, норэпинефринергический, серотонинергический, гистаминергический и глутаматергический эффектор, а также оказывает влияние на систему гипокретин/орексин (включая ипокретин-1 и гипокретин-2).
Любое соединение, модулирующее те же молекулярные рецепторы, что и модафинил, может предпочтительно сочетаться с флекаинидом.
Таким образом, в предпочтительной форме осуществления изобретения психотропное лекарственное средство, которое сочетается с флекаинидом, действует на те же самые рецепторы, что и модафинил. Поэтому психотропное средство, сочетающееся с флекаинидом, предпочтительно выбрано из группы, состоящей из ГАМК-ергических, дофаминергических, норэпинефринергических, серотонинергических, гистаминергических и глутаматергических эффекторов. Кроме того, оно может оказывать воздействие на систему гипокретин/орексин (включая ипокретин-1 и гипокретин-2).
В соответствии с конкретной формой осуществления изобретения это психотропное лекарственное средство представляет собой дофаминергический эффектор, выбранный из группы, состоящей из ADX-N05 (ранее называвшегося «YKP10A», имеющего формулу (R)-(бета-амино-бензопропил)карбамата моногидрохлорид), амфетамина, локсапина, ацепромазина, метилфенидата, перголида, лизурида, бромокриптина, дофамина, ропинирола, апоморфина, арипипразола, сульпирида, амисульприда, сультоприда, тиаприда, пимозида, рисперидона, галоперидола, пенфлуридола, зуклопентиксола или бупропиона.
В соответствии с другой конкретной формой осуществления изобретения данное психотропное лекарственное средство представляет собой ГАМК-ергической эффектор, выбранный из группы, состоящей из тиагабина, топирамата, клоразепата, диазепама, клоназепама, оксазепама, лоразепама, бромазепама, лорметазепама, нитразепама, клотиазепама, алпрозолама, эстазолама, триазолама, лопразолама, этифоксина, мепробамата, зопиклона, золпидема, прегабалина, габапентина, фенобарбитала, фелбамата и вигабатрина.
Согласно другой конкретной форме осуществления изобретения, это психотропное лекарственное средство представляет собой серотонинергический эффектор, выбранный из группы, состоящей из хлорпромазина, тримипрамина, клозапина, оланзапина, циамемазина, флупентиксола, нефопама, флувоксамина, кломипрамина, сертралина, флуоксетина, циталопрама, эсциталопрама, пароксетина, амитриптилина, дулоксетина, венлафаксина, буспирона, карпипрамина, золмитриптана, суматриптана, наратриптана, индорамина, эрготамина, эрготамина тартрата, пизотифена, пипамперона, метисергида, пизотилина, милнаципрана, вилоксазина, тианептина, зверобоя и лития.
Согласно еще одной конкретной форме осуществления изобретения, психотропное лекарственное средство представляет собой гистаминергический эффектор, выбранный из группы, состоящей из акривастина, алимемазина, антазолина, астемизола, азатадина, азеластина, бромфенирамина, буклицина, карбиноксамина, каребастина, цетиризина, хлорциклизина, хлорфенирамина, циннаризина, клемастина, клемизола, клоцинизина, клонидина, циклизина, ципрогептадина, дескарбоэтоксилоратидина, дексхлорфенирамина, дименгидрината, диметиндена, диметотиазина, дифенгидрамина, дифенилпиралина, доксиламина, эбастина, эфлетиризина, эпинастина, фексофенадина, гидроксизина, кетотифена, левокабастина, лоратидина, меклизина, меквитазина, метдилазина, миансерина, мизоластина, ниапразина, ноберастина, норастемизола, оксатомида, оксомемазина, фенбензамина, фенирамина, пикумаста, прометазина, пириламина, темеластина, терфенадина, тримепразина, трипеленамина, трипролидина, ранитидина, циметидина, фамотидина, низатидина, тиотидина, золантадина, ципроксифана, питолисанта и ритансерина.
В соответствии с другой конкретной формой осуществления изобретения, психотропное лекарственное средство представляет собой модулятор гипокретина/орексина, выбранный из группы, состоящей из: EMPA, SB-334867, SB-674042, SB-408124, GSK1059865, алморексанта, суворексанта, МК-6096, DORA-I, DORA-22, DORA-12, SB-649868, JNJ-1037049 (описанных в Gotter et al., 2012)).
Согласно еще одной конкретной форме осуществления изобретения, психотропное лекарственное средство представляет собой норадреналинергический эффектор, выбранный из группы, состоящей из: (R)-3-нитробифенилина, 2-фторнорэпинефрина, 4-NEMD, 5-фторнорэпинефрина, 6-фторнорэпинефрина, абедитерола, альбутерола, амибегрона, амидефрина, амитраза, анизодамина, анизодина, апраклонидина, арбутамина, арформотерола, аротинолола, бамбутерола, бефунолол, битолтерола, бримонидина, бромацетилалпренололментана, броксатерола, буфенина, каннабиварина, карбутерола, циматерола, циразолина, кленбутерола, денопамина, детеренола, детомидина, дексмедетомидина, дигидроэрготамина, дипивефрина, добутамина, допексамина, эфедрина, эпинефрина, эспроксина, этафедрина, этилнорэпинефрина, этилефрина, фенотерола, формотерола, гуанабенза, гуанфацина, гуаноксабенза, гексопреналина, гигенамина, индакатерола, инданидина, изоэтарина, изопреналина, изопротеренола, изоксуприна, лабеталола, левонордефрина, левосальбутамола, лофексидина, мабутерола, медетомидина, метараминола, метоксамина, метоксифенамина, метилдопа, мидодрина, мивазерола, н-изопропилоктопамина, нафазолина, норэпинефрина, октопамина, орципреналина, оксифедрина, оксиметазолина, фенилэфрина, фенилпропаноламина, пипероксана, пирбутерола, преналтерола, прокатерола, псевдоэфедрина, рактопамина, репротерола, рилменидина, римитерола, ритодрина, ромифидина, сальбутамола, сальметерола, солабегрона, синефрина, талипексола, тербуталина, тетрагидрозолина, тизанидина, толонидина, третохинола, тулобутерола, урапидила, ксамотерола, ксилазина, ксилометазолина, зилпатерола и зинтерола.
Согласно другой конкретной форме осуществления изобретения, психотропное лекарственное средство представляет собой глутаматергический эффектор, выбиранный из группы, состоящей из мемантина, амантадина, МК-801, кетамина, норкетамина, декстрометорфана, левометрофана, декстрорфана, леворфанола, фенциклидина, РСА, CNS-1102, ремацемида, пентамидина, и 9-аминоакридина (описанных в Traynelis et al., 2010).
Предпочтительно, чтобы психотропный препарат не являлся флупиртином.
Потенцирующие эффекты флекаинида могут быть достигнуты путем введения его пациенту либо до введения психотропного средства этому пациенту, либо одновременно с этим средством, либо после него.
Следовательно, настоящее изобретение описывает способ лечения пациента с психиатрическими и/или нейродегенеративными заболеваниями, включающий введение этому пациенту а) флекаинида и б) по меньшей мере, одного психотропного средства, как упоминалось выше, причем упомянутые в пунктах а) и б) соединения вводят одновременно, раздельно или разнесенным во времени способом.
Пациенты, нуждающиеся в таком лечении могут иметь психиатрические, неврологические и/или нейродегенеративные заболевания, включенные в группу, состоящую из повышенной дневной сонливости (ПДС), расстройств сна, недостаточной продолжительности сна, синдрома центрального апноэ сна, нарколепсии (с катаплексией или без нее), синдрома обструктивного апноэ/гипопноэ сна (СОАГС), идиопатической гиперсомнии, синдрома Клейна-Левина, расстройств циркадного ритма; расстройства сна, вызванного сменным режимом работы; синдрома смены часовых поясов, нарушений, вызванных ограничением или депривацией сна (расстройств внимания, нарушений бдительности, сонливости), синдрома беспокойных ног (СБН) и синдрома периодических движений конечностей (СПДК), бессонницы, парасомнии, синдрома дефицита внимания с гиперактивностью (СДВГ), посттравматического стрессового расстройства (ПТСР), расстройств, обычно сопровождающихся дремотой или сонливостью (таких как болезнь Паркинсона, рассеянный склероз, инсульт, нервно-мышечные расстройства или структурные нарушения мозга, расстройства дыхания, хроническая почечная недостаточность, печеночная недостаточность, ревматологические расстройства); сонливости, индуцированной приемом лекарств (бензодиазепинов, барбитуратов, снотворных таблеток, антидепрессантов, антипсихотических средств …); расстройств настроения, тревожных расстройств, шизофрении, шума в ушах, депрессии, чувства общего недомогания, деменции, биполярного расстройства, ожирения, булимии, маниакального эпизода, обсессивно-компульсивного расстройства, старческого маразма, зависимости или пристрастия (к играм, наркотикам, алкоголю, табаку и т.д.), недержания мочи или кала, преждевременной эякуляции; затруднения дыхания и усталости, особенно вследствие заболевания раком, нейродегенеративных расстройств, менопаузы, черепно-мозговых травм, вирусной инфекции или постмиелитического синдрома, или фибромиалгии.
Повышенная дневная сонливость (ПДС) возникает ежедневно, обычно повторяясь через каждые 2 ч, хотя может варьироваться в широких пределах. Сонливость усиливается, когда пациент физически неактивен. Эпизоды сна имеют несколько характеристик (Dauvilliers I. et al., 2007 и Boulos et al., 2010):
- они часто непреодолимым, несмотря на то, что индивидуум прикладывает отчаянные усилия, чтобы побороть желание спать;
- они обычно короткие, хотя их длина может варьироваться в зависимости от факторов окружающей среды (например, продолжительность может увеличиться при пассивной деятельности, такой как просмотр телевизора);
- они часто связаны со сновидениями;
- как правило, они восстанавливают нормальное бодрствование в течение нескольких часов.
Наличием ПДС характеризуются некоторые состояния или заболевания: недостаточная продолжительность сна, синдром центрального апноэ сна, нарколепсия (с катаплексией или без нее), синдром обструктивного апноэ/гипопноэ сна (СОАГС), идиопатическая гиперсомния, рецидивирующая идиопатическая гиперсомния (синдром Клейна-Левина), расстройства циркадного ритма (синдром смены часовых поясов); расстройства сна, вызванные ограничением или депривацией сна (расстройства внимания, нарушения бдительности, сонливость), синдром беспокойных ног (СБН) и синдром периодических движений конечностей (СПДК), неврологические расстройства, обычно сопровождающихся сонливостью (такие как болезнь Паркинсона, рассеянный склероз, инсульт, нервно-мышечные расстройства или структурные нарушения мозга); медицинские состояния, обычно связанные с сонливостью (респираторные болезни, хроническая почечная недостаточность, печеночная недостаточность, ревматологические расстройства), расстройства настроения, тревожные расстройства, шизофрения или сонливость, вызванная приемом лекарств (бензодиазепинов, барбитуратов, снотворных таблеток, антидепрессантов, противосудорожных, антипсихотических средств …).
Катаплексия характеризуется внезапным падением мышечного тонуса, вызываемым эмоциональными факторами, чаще всего положительными эмоциями, такими как смех, реплики, приятный сюрприз (например, встречи с друзьями на улице или забитый гол), или гневом, но почти никогда не вызываемым стрессом, страхом или физическим усилием. Многие фармацевтические и нейрофизиологические исследования указывают на то, что катаплексию и атонию «парадоксальной фазы» сна объединяют общие нейрофизиологические механизмы (Dauvilliers I. et al., 2007).
В случае одновременного использования, два компонента лечения вводят пациенту одновременно. Согласно этой форме осуществления настоящего изобретения, оба компонента могут быть упакованы вместе в виде смеси или упакованы по отдельности, а затем произвольно смешаны вместе перед тем, как вводить пациенту. В противном случае, два компонента вводят одновременно, но раздельно. В частности, пути введения двух компонентов могут быть различными. Введение также может быть осуществлено в различные места. В другой форме осуществления изобретения, два компонента вводят последовательно или при помощи разнесенного во времени введения, например, в тот же день или с интервалом от нескольких минут до нескольких дней.
Поскольку флекаинид потенцирует эффекты психотропных препаратов, он может быть предпочтительно использован для уменьшения доз данного психотропного препарата, ограничивая таким образом нежелательные эффекты этого психотропного препарата и/или снижая риск неэффективности лечения и синдрома отмены.
Эффективная эквивалентная доза психотропного средства, то есть, такая доза психотропного средства, которая при введении в комбинации с флекаинидом индуцирует физиологический эффект или фармакологические отличительные свойства, аналогичные или идентичные этим эффектам и свойствам психотропного препарата, введенного в единственном числе в той же действующей фармакологической дозе, может быть определена способами, описанными в W02010/029131 и US 2011/172188.
Согласно другому своему аспекту, настоящее изобретение относится к композиции, главным образом к фармацевтической композиции, включающей флекаинид и, по меньшей мере, один психотропный препарат.
Эта композиция предпочтительно приготавливается в виде лекарственной формы для пациентов с психическими и/или нейродегенеративными расстройствами, как описано выше. Кроме флекаинида и упомянутых психотропных препаратов композиция может содержать любой фармацевтический носитель, стабилизатор, адъювант и т.п., которые часто применяются в данной области.
Примеры приемлемых с фармацевтической точки зрения носителей включают, без ограничений, воду; водные носители, такие как, без ограничений, раствор хлорида натрия, раствор Рингера, раствор декстрозы, раствор декстрозы и хлорида натрия, и раствор Рингера с лактатом; смешивающиеся с водой носители, такие как, без ограничений, этиловый спирт, полиэтиленгликоль и полипропиленгликоль; и неводные носители, такие как, без ограничений, кукурузное масло, хлопковое масло, арахисовое масло, кунжутное масло, этилолеат, изопропилмиристат и бензилбензоат.
В соответствии с предпочтительной формой осуществления настоящего изобретения эта композиция изготовлена в виде лекарственной формы для перорального введения (в том числе в полость рта или сублингвально). Другие вызывающие интерес лекарственные формы включают препараты для интраперитонеального (и/п), внутривенного (в/в), подкожного (п/к), внутримышечного (в/м), чрескожного, трансдермального, интратекального и интракраниального введения. Кроме того, другие лекарственные формы включают формы с эпидуральным, интраназальным и ректальным способом введения, с введением под подслизистую и в конъюнктивальный мешок, а также путем легочной ингаляции.
Для изготовления в виде лекарственной формы описанных выше композиций могут применяться разнообразные средства введения, включая, без ограничений, капсулы, таблетки, сиропы, кремы и мази, суппозитории, пластыри или любой резервуар, способный содержать и распределять флекаинид и психотропные препараты.
В композициях по настоящему изобретению психотропное средство содержится так, как описано выше.
В предпочтительной форме осуществления изобретения это психотропное лекарственное средство применяется для лечения нарколепсии и поэтому выбирается из группы, состоящей из кофеина, мазиндола, натрия оксибата, питолисанта, амфетамина, метилфенидата, (R)-(бета-аминобензопропил)карбамата моногидрохлорида, модафинила и армодафинила
В предпочтительной форме осуществления настоящего изобретения композиция по настоящему изобретению содержит от 1 до 1000 мг, предпочтительно от 5 до 800 мг психотропного препарата, в зависимости от его природы. Предпочтительной дозировкой будет являться введение пациенту от 1 до 1000 мг в день, более предпочтительно от 5 до 800 мг в день психотропного средства.
Согласно другой предпочтительной форме осуществления изобретения, композиция по настоящему изобретению содержит от 1 до 200 мг, предпочтительно от 1 до 100 мг флекаинида. Предпочтительной дозировкой будет являться введение пациенту от 1 до 200 мг в день, предпочтительно от 1 до 100 мг в день флекаинида.
Более предпочтительно, чтобы флекаинид представлял собой R энантиомер, описанный на Фигуре 5А.
В более предпочтительной форме осуществления настоящего изобретения флекаинид сочетается с психотропным средством модафинилом.
Под термином «модафинил» в настоящем изобретении подразумевается 2-[(дифенилметил)сульфинил]ацетамид (провигил, см. Фигуру 5С), а также его предшественники или пролекарства, такие как адрафинил (Dubey et al., 2009), которые могут метаболизироваться в организме человека, и его активные производные. Более точно, термин «модафинил» в данном изобретении обозначает любую форму модафинила (рацемат, R-модафинил, S-модафинил и т.д.), а также его предшественники, которые могут метаболизироваться в организме человека, и его производные. На Фигуре 5 показаны формулы R-модафинила (Фиг. 5С) и S-модафинила (Фиг. 5D).
Модафинил является аналептическим средством, назначаемым, главным образом, для лечения нарколепсии; нарушений сна, вызванных сменной работой, и повышенной дневной сонливости, связанной с обструктивным апноэ сна. Помимо свойств усиления бодрствования, модафинил также улучшает рабочую и эпизодическую память и другие процессы, зависящие от префронтальной коры, а также когнитивный контроль (Minzenberg MJ et al., 2008).
Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что, флекаинид сильно потенцирует in vivo эффекты усиления бодрствования модафинила, в то время как на продолжительность самопроизвольного пробуждения не оказывает никакого влияния (Пример 2). Кроме того, флекаинид сильно потенцирует in vivo активность модафинила в отношении когнитивной функции, тогда как сам по себе флекаинид не оказывает никакого промнестического эффекта (Пример 3). Эту синергическую активность можно объяснить тем фактом, что флекаинид сильно увеличивает продолжительность лечения модафинилом (Пример 4). С другой стороны, авторы настоящего изобретения в данном описании указывают, что комбинация флекаинид/модафинил обладает синергическим воздействием на катаплексикоподобный фенотип у мышей с нарколепсией (Пример 5), и это еще более удивительно с учетом того, что ни флекаинид, ни модафинил не оказывают никакого влияния на этот фенотип (Фигура 6В). Таким образом, в предпочтительной форме своего осуществления настоящее изобретение относится к флекаиниду для применения с целью потенцирования промнестического эффекта и/или эффекта пробуждения модафинила, и/или для увеличения его безопасности, и/или для увеличения продолжительности действия модафинила у пациентов, нуждающихся в этом, особенно у пациентов, страдающих повышенной дневной сонливостью (ПДС), нарушениями сна, недостаточной продолжительностью сна, синдромом центрального апноэ сна, нарколепсией (с катаплексией или без нее), синдромом обструктивного апноэ/гипопноэ сна (СОАГС), идиопатической гиперсомнией, синдромом Клейна-Левина, расстройством циркадного ритма; расстройствами сна, вызванными ограничением или депривацией сна (расстройством внимания, нарушением бдительности, сонливостью), синдромом беспокойных ног (СБН) и синдромом периодических движений конечностей (СПДК), бессонницей, парсомнией, синдромом дефицита внимания с гиперактивностью (СДВГ), посттравматическим стрессовым расстройством (ПТСР), расстройствами, обычно сопровождающимися дремотой или сонливостью (такими как болезнь Паркинсона, рассеянный склероз, инсульт, нервно-мышечные расстройства или структурные нарушения мозга, респираторные расстройства, хроническая почечная недостаточность, печеночная недостаточность, ревматологические расстройства); сонливостью, вызванной приемом лекарств (бензодиазепинов, барбитуратов, снотворных таблеток, антидепрессантов, антипсихотических средств …); расстройствами настроения, тревожными расстройствами, шизофренией, шумом в ушах, депрессией, чувством общего недомогания, деменцией, биполярным расстройством, ожирением, булимией, маниакальными эпизодами, обсессивно-компульсивным расстройством, старческим маразмом, зависимостью или пристрастием (к играм, наркотикам, алкоголю, табаку и т.д.), недержанием мочи или кала, преждевременной эякуляцией; затруднением дыхания и усталостью, особенно вследствие заболевания раком; нейродегенеративными расстройствами, менопаузой, черепно-мозговыми травмами, вирусной инфекцией или постмиелитическим синдромом, или фибромиалгией, которые было предложено лечить модафинилом.
В более предпочтительной форме своего осуществления настоящее изобретение, в частности, относится к флекаиниду для применения с целью потенцирования промнестического эффекта и/или эффекта пробуждения модафинила, и/или для увеличения его безопасности, и/или для увеличения продолжительности действия модафинила у пациентов, нуждающихся в этом, особенно у пациентов, страдающих повышенной дневной сонливостью (ПДС), нарушениями сна, недостаточной продолжительностью сна, синдромом центрального апноэ сна, нарколепсией (с катаплексией или без нее), синдромом обструктивного апноэ/гипопноэ сна (СОАГС), идиопатической гиперсомнией, синдромом Клейна-Левина, расстройством циркадного ритма; расстройствами сна, вызванными ограничением или депривацией сна (расстройством внимания, нарушением бдительности, сонливостью); синдромом беспокойных ног (СБН) и синдромом периодических движений конечностей (СПДК), бессонницей, парсомнией, синдромом дефицита внимания с гиперактивностью (СДВГ), посттравматическим стрессовым расстройством (ПТСР); расстройствами, обычно сопровождающимися дремотой или сонливостью (такими как болезнь Паркинсона, рассеянный склероз, инсульт, нервно-мышечные расстройства или структурные нарушения мозга, респираторные расстройства, хроническая почечная недостаточность, печеночная недостаточность, ревматологические расстройства); сонливостью, вызванной приемом лекарств (бензодиазепинов, барбитуратов, снотворных таблеток, антидепрессантов, антипсихотических средств …); расстройствами настроения, тревожными расстройствами, шизофренией, шумом в ушах, депрессией, чувством общего недомогания, деменцией, биполярным расстройством, ожирением, булимией, маниакальными эпизодами, обсессивно-компульсивным расстройством, старческим маразмом, зависимостью или пристрастием (к играм, наркотикам, алкоголю, табаку и т.д.), недержанием мочи или кала, преждевременной эякуляцией; затруднением дыхания и усталостью, особенно вследствие заболевания раком; нейродегенеративными расстройствами, менопаузой, черепно-мозговыми травмами, вирусной инфекцией или постмиелитическим синдромом, или фибромиалгией, для лечения которых модафинил был предложен или разрешен к применению.
В предпочтительной форме своего осуществления настоящее изобретение, в частности, относится к флекаиниду для применения с целью потенцирования эффекта пробуждения модафинила и/или для увеличения его безопасности, и/или для увеличения продолжительности действия модафинила у пациентов, страдающих повышенной дневной сонливостью (ПДС).
В другой предпочтительной форме своего осуществления настоящее изобретение относится к флекаиниду для применения с целью потенцирования эффекта пробуждения модафинила и/или для увеличения его безопасности, и/или для увеличения продолжительности действия модафинила у пациентов, страдающих состояниями или заболеваниями, включающими повышенную дневную сонливость (ПДС), например, недостаточной продолжительностью сна, синдромом центрального апноэ сна, нарколепсией (с катаплексией или без нее), синдромом обструктивного апноэ/гипопноэ сна (СОАГС), идиопатической гиперсомнией, рецидивирующей идиопатической гиперсомнией (синдромом Клейна-Левина), расстройством циркадного ритма; расстройствами сна, вызванными ограничением или депривацией сна (расстройством внимания, нарушением бдительности, сонливостью); синдромом беспокойных ног (СБН) и синдромом периодических движений конечностей (СПДК); неврологическими расстройствами, обычно сопровождающимися сонливостью (такими как болезнь Паркинсона, рассеянный склероз, инсульт, нервно-мышечные расстройства или структурные нарушения мозга); медицинскими состояниями, обычно сопровождающимися сонливостью (респираторными расстройствами, хронической почечной недостаточностью, печеночной недостаточностью, ревматологическими расстройствами); расстройствами настроения, тревожными расстройствами, шизофренией или сонливостью, вызванной приемом лекарств (бензодиазепинов, барбитуратов, снотворных таблеток, антидепрессантов, антипсихотических средств …).
В другой предпочтительной форме своего осуществления настоящее изобретение относится к комбинированному препарату модафинил/флекаинид для применения с целью лечении катаплексии у больных нарколепсией.
Следует отметить, что потенцирование эффектов модафинила флекаинидом позволяет уменьшить дозы модафинила, и за счет этого снизить его побочные эффекты. Как следствие, теперь могут быть предусмотрены некоторые направления применения модафинила, для которых этот препарат не был одобрен из-за его побочных эффектов и связанных с ними возможных рисков, например, его применение в качестве средства, повышающего работоспособность и/или улучшающего работу мозга. Таким образом, в соответствии с конкретной формой своего осуществления настоящее изобретение относится к повышающему работоспособность продукту, который содержит флекаинид и модафинил.
В другой предпочтительной форме осуществления настоящее изобретение, в частности, относится к применению флекаинида и модафинила для улучшения памяти здоровых пациентов и/или поддержания их бодрствования в течение длительных периодов времени, и/или для лечения катаплексии у больных нарколепсией. Эти пациенты могут быть, например, индивидуумами, которые должны запоминать много информации и/или бодрствовать в течение продолжительных периодов. В предпочтительной форме осуществления изобретения упомянутые пациенты представляют собой людей (например, агентов безопасности, студентов и т.д.).
В конкретной форме своего осуществления настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей флекаинид и модафинил, которая может быть предпочтительно использована для лечения заболеваний и состояний, включая, без ограничений, повышенную дневную сонливость (ПДС), нарколепсию (с катаплексией или без нее), обструктивное апноэ/гипопноэ сна (СОАГС), расстройство сна при посменной работе, расстройства сна, вызванные ограничением или депривацией сна (расстройство внимания, нарушение бдительности, сонливость), синдром беспокойных ног (СБН), сонливость, идиопатическая гиперсомния и усталость, особенно вследствие заболевания раком; синдром смены часовых поясов, нейродегенеративные расстройства, менопаузу, черепно-мозговые травмы, вирусную инфекцию или постмиелитический синдром, или фибромиалгию. В частности, эта композиция может применяться для лечения катаплексии у больных нарколепсией.
Эта композиция также может быть использована для улучшения памяти здоровых пациентов и/или для поддержания их бодрствования в течение длительных периодов времени. Типичные периоды времени составляют, например, 6 часов, предпочтительно 12 часов.
Также, настоящее изобретение относится, в частности, к использованию флекаинида и модафинила при изготовлении лекарственного средства, предназначенного для применения с целью лечения заболеваний и состояний, таких как повышенная дневная сонливость (ПДС), нарколепсия (с катаплексией или без нее), синдром обструктивного апноэ/гипопноэ сна (СОАГС), расстройство сна при посменной работе, синдром беспокойных ног, сонливость, идиопатическая гиперсомния и усталость, особенно вследствие заболевания раком; нейродегенеративные расстройства, менопауза, черепно-мозговые травмы, вирусная инфекция или постмиелитический синдром, или фибромиалгия.
В предпочтительной форме своего осуществления настоящее изобретение относится к применению флекаинида и модафинила при изготовлении лекарственного средства, предназначенного для применения с целью лечения катаплексии у больных нарколепсией.
Кроме модафинила и флекаинида композиция/лекарственное средство по изобретению может содержать другие вещества, такие как витамин С, витамин В6, магний, L-аргинин, L-глютамин, L-цитруллин, таурин, кофеин и т.д. В соответствии с конкретной формой осуществления настоящего изобретения этот продукт может отпускаться без рецепта. Например, он может быть изготовлен в качестве лекарственной формы для безрецептурного отпуска или в качестве пищевой добавки.
В предпочтительной форме осуществления изобретения композиция по настоящему изобретению содержит от 1 до 1000 мг, предпочтительно от 5 до 800 мг, и более предпочтительно от 5 до 600 мг модафинила. Согласно другой предпочтительной форме осуществления изобретения, композиция по настоящему изобретению изготавливается в виде лекарственной формы так, что от 5 до 800 мг в день, предпочтительно от 5 до 600 мг в день модафинила вводят нуждающемуся в этом пациенту за один, два или более приемов.
Согласно другой предпочтительной форме осуществления изобретения, композиция по настоящему изобретению содержит от 1 до 200 мг, предпочтительно от 1 до 100 мг флекаинида. Согласно другой предпочтительной форме осуществления изобретения, композиция по настоящему изобретению изготавливается в виде лекарственной формы так, что от 1 до 200 мг в день, предпочтительно от 1 до 100 мг в день флекаинида вводят нуждающемуся в этом пациенту в один, два или более приемов. В более предпочтительной форме осуществления изобретения флекаинид представляет собой R-энантиомер, показанный на Фигуре 5А.
В последнем аспекте настоящее изобретение относится к комбинированному препарату, содержащему флекаинид и модафинил, для одновременного, раздельного или разнесенного во времени применения с целью профилактики и/или лечения повышенной дневной сонливости (ПДС), нарколепсии (с катаплексией или без нее), обструктивного апноэ/гипопноэ сна (СОАГС), расстройства сна при посменной работе, синдрома беспокойных ног, сонливости; идиопатической гиперсомнии и усталости, особенно вследствие заболевания раком; синдрома смены часовых поясов, нейродегенеративных расстройств, менопаузы, черепно-мозговых травм, вирусной инфекции или постмиелитического синдрома, или фибромиалгии. Этот комбинированный препарат предпочтительно применяется для профилактики и/или лечения катаплексии у больных нарколепсией.
Другие отличительные признаки настоящего изобретения также станут очевидными в ходе следующего ниже описания биологических анализов, которые были проведены в рамках изобретения и которые обеспечивают его требующейся экспериментальной поддержкой, не ограничивая его объем.
Краткое описание фигур
Фигура 1. Ингибирование функции коннексинов человека флекаинидом. Клетки Rin-Cx26, клетки Rin-Сх3О, клетки Rin-Cx32, клетки Rin-Cx40 и клетки Rin-Сх43 культивировали в присутствии флекаинида (280 мкМ), мефлохина (10 мкМ) и МКК (100 мкМ) в течение 4 часов. Перенос флуорохрома через щелевые контакты (состоящие из коннексинов) оценивали с помощью проточной цитометрии (1А и 1В). Жизнеспособность клеток, обработанных флекаинидом, показана на Фигуре 1 В.
Фигура 2. Эффективность флекаинида для потенцирования эффекта пробуждения модафинила. Мышам (n равно 8 в каждой партии) вводили перорально либо модафинил (32 мг/кг), либо модафинил (32 мг/кг) и флекаинид (1 мг/кг) (Фигура 2А), либо только флекаинид (1 мг/кг) (Фигура 2В) и возвращали в их собственную клетку. Продолжительность пробуждения была измерена с помощью полиграфического анализа.
Фигура 3. Эффективность флекаинида для потенцирования промнестического эффекта модафинила. Мышей (n равно от 6 до 23 в партии) тестировали в Т-образном лабиринте. Им вводили внутрибрюшинно либо модафинил (64 мг/кг или 128 мг/кг), либо модафинил (64 мг/кг) и флекаинид (1 мг/кг), либо только флекаинид (1 мг/кг). На графике представлена оценка чередования в процентах после 6 испытаний, 50% соответствует случайному чередованию.
Фигура 4. Эффективность флекаинида для потенцирования локомоторного эффекта модафинила. Мышам (n равно 8 в каждой партии) вводили перорально либо модафинил (64 мг/кг), либо модафинил (64 мг/кг) и флекаинид (1 мг/кг), либо только флекаинид (1 мг/кг) и возвращали в их собственную клетку. Двигательную активность измеряли с использованием устройства для видеозаписи.
Фигура 5. Молекулярная структура А) R-флекаинида; В) S-флекаинида; С) R-модафинила, D) S-модафинила.
Фигура 6. Количество эпизодов фаз SOREM/DREM (SOREM, от англ. sleep-onset rapid eye movement - наступление сна с быстрыми движениями глаз или DREM, от англ. direct rapid eye movement sleep onset - непосредственное наступление сна с быстрыми движениями глаз) у мышей (Ох-/-) с нарколепсией, получавших модафинил/флекаинид (А) или только флекаинид (В). (А). Пероральное введение мышам самцам (Ох-/-) 64 мг/кг модафинила и 1 мг/кг флекаинида сравнивали с введением 64 мг/кг модафинила и носителя. ** Р меньше 0,01; ***: Р меньше 0,005, двухфакторный дисперсионный анализ (ANOVA). (Б) Пероральное введение мышам самцам (Ох-/-) 1 мг/кг флекаинида сравнивали с введением носителя.
Фигура 7. Количество эпизодов фаз SOREM/DREM у мышей (Ох-/-) с нарколепсией, получавших комбинацию модафинила и одного из двух энантиомеров флекаинида (R-флекаинид и S-флекаинид). Пероральное введение 64 мг/кг модафинила и 1 мг/кг R-флекаинида или 1 мг/кг S-флекаинида сравнивали с введением носителя.
Примеры
Пример 1. Воздействие флекаинида на щелевые контакты
1.1. Материалы и методы
Клеточные культуры
GJIC-дефицитную (GJIC - от англ. gap junctional intercellular communication -межклеточные взаимодействия через щелевые контакты) клеточную линию RIN инсулиномы крыс (del Corsso et al., 2006) выращивали в среде OptiMem, дополненной 10% фетальной телячьей сыворотки. Открытые рамки считывания GJB6 (Сх30), GJB1 (Сх32), GJB2 (Сх26), GJA5 (Сх40) и GJA1 (Сх43) амплифицировали из человеческой кДНК. Открытые рамки считывания клонировали в pcDNA3.1/V5-His-TOPO (Invitrogen). Клетки трансфицировали с использованием липофектамина и затем селектировали с использованием генетицина.
Эксперименты по переносу красителя
Клетки высевали и нагружали их двумя флуорохромами: ацетоксиметиловым эфиром кальцеина, проникающим в щелевые контакты красителем, и мембранным липофильным красителем Vybrant Dil. На следующий день клетки диссоциировали и инкубировали в течение четырех часов в присутствии ранее посеянных ненагруженных красителем клеток и в присутствии 70, 140 или 280 мкМ рацемата флекаинида, 10 мкМ мефлохина или 100 мкМ меклофенамовой кислоты (МКК). Проточную цитометрию проводили на проточном цитометре FACScan.
Ингибирование выражали количественно как относительное число воспринимающих краситель клеток, которые приобрели флуоресценцию, к общему количеству воспринимающих краситель клеток (затем вычитают из этого соотношения перенос красителя, не опосредованный щелевыми контактами, основываясь на количестве не экспрессирующих коннексин RIN клеток, определяемом по степени фонового переноса красителя). Затем, после каждой обработки, это соотношение взаимосвязи клеток нормализовали к одному носителю.
Анализ токсичности
Двадцать тысяч клеток RIN высевали в 100 мкл культуральной среды на 96-луночные планшеты. Через 48 часов культивирования клетки обрабатывали в течение 4 часов ранее идентифицированными химическими соединениями при нескольких концентрациях. Клетки промывали в фосфатно-солевом буфере (ФСБ) и культивировали 24 часа в свежей среде. Жизнеспособность клеток определяли, используя реактив WST-1 (Roche).
1.2. Экспериментальные результаты
Клеточные модели валидизировали с помощью двух классических ингибиторов, описанных в литературе, 100 мкМ меклофенамовой кислоты (МКК) (Dhein, 2004) и 10 мкМ мефлохина (Cruikshank et al, 2004). Результаты показаны на Фигуре 1А. Флекаинид так же эффективно блокирует коннексин, как и другие антиконнексиновые средства.
Тестирование жизнеспособности клеток (с использованием WST-1, пунктирная кривая на Фигуре 1В) после одного дня обработки показывает, что флекаинид не обладает клеточной токсичностью в дозе, ингибирующей коннексины головного мозга.
Также, при использовании метода оценки переноса красителя с помощью клеток-парашютов (от англ. cell-parachute assay или parachute assay) флекаинид ингибирует все исследуемые изоформы (Сх30, Сх32, Сх26, Сх40, Сх43) коннексинов головного мозга (при оценке достоверное снижение количества клеточных щелевых контактов более, чем на 10% считали физиологически значимым). Кроме того, для глиальных коннексинов Сх26, Сх30 и Сх43 были достигнуты более высокие уровни ингибирования.
Пример 2. Флекаинид потенцирует эффекты усиления бодрствования модафинила
Доклинические и клинические данные свидетельствуют о том, что модафинил изменяет ритм цикла сна и способствует фазам бодрствования (Lin et al, 2008). В настоящем изобретении авторы протестировали на грызунах, потенцируется ли такая активность флекаинидом после пероральной стимуляции модафинилом, применяя полисомнографический анализ на мышах, подвергнутых имплантации. Используя субэффективную дозу модафинида (32 мг/кг), авторы изобретения показали новую функцию комбинации модафинила и флекаинида, поскольку она значительно увеличивает общую продолжительность эпизодов бодрствования.
2.1. Материалы и методы
Мышам самцам C57bl/6 дикого типа (n равно 9 в каждой группе) имплантировали ЭЭГ/ЭМГ/ЭОГ электроды для полисомнографических анализов. После двухнедельного восстановительного периода мышам перорально вводили носитель, 32 мг/кг модафинила и 32 мг/кг модафинила плюс 1 мг/кг рацемата флекаинида, и периоды бодрствования количественно выражали с помощью сценариев Spike2. При этом авторы представляли продолжительность бодрствования в течение первых трех часов (через одночасовой период после введения). ** Р меньше 0,01 в однофакторном дисперсионном анализе (ANOVA).
2.2. Результаты
Модафинил представляет собой молекулу, способствующую бодрствованию у человека и мышей, активность которой увеличивается в зависимости от дозы у мышей (Simonet al., 1994). Активность мышей, получавших 32 мг/кг модафинила, сравнивали с активностью мышей, которые получали комбинацию 32 мг/кг модафинила плюс 1 мг/кг флекаинида или носитель.
Фигура 2А показывает, что флекаинид значительно увеличивает эффекты усиления бодрствования модафинила. Фигура 2В демонстрирует, что этот эффект не опосредован самим флекаинидом.
Таким образом, флекаинид значительно потенцирует эффект усиления бодрствования модафинила у мышей дикого типа, в то же время будучи лишен самостоятельного воздействия на продолжительность бодрствования.
Пример 3. Флекаинид значительно повышает активность модафинила в отношении когнитивной функции
Модафинил индуцирует эффект усиления когнитивной функции (Beracochea et al., 2003); такое свойство можно оценить с помощью теста последовательного чередования, широко применяющегося способа оценки пространственной рабочей памяти у мышей (Beracochea & Jaffard, 1987). Спонтанное чередование представляет собой врожденную тенденцию грызунов чередовать их выбор при входе в компартменты прибытия внутри Т-образного лабиринта при последовательных испытаниях. Чтобы произвести чередование во время данного испытания N, животное должно запомнить выбор, сделанный избирательно в тесте N-1, а его ответ при чередовании представляет собой меру эффективности этой деятельности. Однократное введение модафинила перед входом в лабиринт может улучшить эффективность деятельности мышей в этом тесте (Beracochea et al., 2001). Результаты авторов изобретения показали, что флекаинид значительно усиливает промнестический эффект субэффективной дозы модафинила, тогда как флекаинид сам по себе лишен какого-либо собственного промнестического эффекта.
3.1. Материалы и методы
Тест последовательного чередования широко используется для оценки пространственной рабочей память у мышей (Beracochea & Jaffard, 1987). Спонтанное чередование представляет собой врожденную тенденцию грызунов чередовать их выбор при входе в компартменты прибытия внутри Т-образного лабиринта при последовательных испытаниях. Чтобы произвести чередование во время данного испытания N, животное должно запомнить выбор, сделанный избирательно в тесте N-1, поэтому ухудшение чередования будет отражать явление забывания. Ответ при чередовании представляет собой меру эффективности этой деятельности. Тест последовательного чередования более конкретно оценивает чувствительность к помехам, основной фактор забывания.
Эксперимент проходил в Т-образном лабиринте (50 см × 10 см × 25 см). Со всеми животными проводили семь последовательных испытаний, разделенных между собой 120-секундным интервалом. Перед началом испытания мышь помещали в стартовый бокс на 120 с перед тем, как открыть дверцу в основание лабиринта. Когда животное входило в один из целевых рукавов, дверцу в этот рукав закрывали. Выбранный рукав и время, которое прошло между открыванием дверцы и прибытием в конец выбранного рукава (время выполнения задачи) регистрировали. После 30-секундного периода удержания (фиксированного и неизменяемого) в выбранном рукаве, животное извлекали и помещали в стартовый бокс для нового испытания. Перед каждым тестом устройство очищали ветошью, смоченной в воде и спирте для того, чтобы избежать обонятельного обнаружения. Индекс памяти выражали при помощи среднего процента чередований ((число выборов чередования / общее число испытаний) × 100). (n равно от 6 до 23 для каждой группы). Мышам внутрибрюшинно вводили или модафинил (64 мг/кг или 128 мг/кг), или модафинил (64 мг/кг) и рацемат флекаинида (1 мг/кг), или только рацемат флекаинида (1 мг/кг), или носитель.
# р меньше 0,05 в одном образце Т-теста по сравнению с 50% случайным чередованием; * р меньше 0,05 в однофакторном дисперсионном анализе (ANOVA) с последующим многоуровневым сравнением Тьюки с группой, получавшей модафинил.
3.2. Результаты
Т-лабиринт представляет собой устройство для оценки рабочей памяти у мышей. Однократное введение модафинила перед входом в лабиринт может улучшить эффективность деятельности мышей в этом тесте (Beracochea et al, 2001).
Валидизацию теста проводили путем сравнения ответов мышей, получавших внутрибрюшинно эффективную дозу только одного модафинила (128 мг/кг), дозу только одного флекаинида (1 мг/кг) и субэффективную дозу модафинила (64 мг/кг) с флекаинидом (1 мг/кг) или без него. Результаты показаны на Фигуре 3.
Эти результаты показывают, что флекаинид значительно потенцирует промнестическую активность модафинила, тогда как флекаинид сам по себе не проявляет собственной активности в отношении когнитивной деятельности.
Пример 4. Флекаинид значительно пролонгирует активность модафинила
Модафинил представляет собой молекулу, способствующую бодрствованию у человека и мышей, активность которой увеличивается в зависимости от дозы у мышей (Simonet al., 1994). Результаты авторов изобретения показали, что флекаинид значительно усиливает локомоторный эффект субэффективной дозы модафинила, тогда как флекаинид сам по себе лишен какого-либо собственного локомоторного эффекта у грызунов.
4.1. Материалы и методы
Мышам (n равно 8 в каждой партии) вводили перорально или модафинил (64 мг/кг), или модафинил (64 мг/кг) и рацемат флекаинида (1 мг/кг), или только один рацемат флекаинида (1 мг/кг) или носитель, и возвращали в их собственную клетку. Локомоторную активность оценивали путем видеотелевизионного сопровождения. Видеоматериалы анализировали с помощью программного обеспечения Ethovision XT (Noldus). * р меньше 0,01 в двухфакторном дисперсионном анализе (ANOVA)
4.2. Результаты
Активность мышей, получавших 64 мг/кг модафинила сравнивали с активностью мышей, которые получали комбинацию 64 мг/кг модафинила плюс 1 мг/кг флекаинида. Фигура 4 показывает, что флекаинид значительно увеличивает продолжительность воздействия модафинила на активность мышей.
Итак, приведенные выше результаты показывают, что флекаинид значительно ингибирует функциональность щелевых контактов, не вызывая клеточной токсичности. Кроме того, это соединение усиливает эффективность и продолжительность воздействия модафинила, в частности, его промнестический эффект и эффект усиления бодрствования.
Пример 5. Комбинация модафинил/флекаинид имеет неожиданный профиль эффективности при воздействии на катаплексикоподобный фенотип DREM у мышей с нарколепсией.
5.1. Материалы и методы
Животные
От линии мышей, полученной Chemelli et al. [1999] и сохраняющей генотипический фон C57BL/6J, получали потомство мышей нокаутных по препроорексину (МНП). После обратного скрещивания мышей самцов орексин-/- и мышей самок дикого типа (ДТ) в течение девяти поколений, полученных мышей орексин+/- скрещивали с получением гомозиготных и гетерозиготных МНП и ДТ однопометников. Чтобы определить их генотипы по отношению к гену орексина, проводили биопсию хвоста в возрасте 4 недель для обнаружения ДНК с применением ПЦР.
Хирургия
Мышам в возрасте 12 недель и с массой тела 30±2 г, используемым для хронического исследования ЭЭГ и фазы пробуждения, имплантировали под глубоким газовым наркозом с помощью изофлурана (2%, 200 мл/мин) и системы для анестезии ТЕМ (Bordeaux, France) шесть кортикальных электродов (из позолоченный луженой медной проволоки, ∅ равно 0,4 мм, Filotex, Draveil, France) и три мышечных электрода (из позолоченный нержавеющей стальной проволоки с фторуглеродным покрытием, ∅ равно 0,03 мм, Cooner Wire Chatworth, СА, USA), для записи электроэнцефалограммы (ЭЭГ) и электромиограммы (ЭМГ) и для наблюдения за циклом сон-бодрствование. Все электроды предварительно припаяли к многоканальному электрическому коннектору и каждый отдельно изолировали при помощи покрытия термоусадочной полиолефиновой/полиэфирной трубкой. Кортикальные электроды вводили в твердую мозговую оболочку через 3 пары отверстий, сделанных в черепе, и располагали соответственно в лобной (на 1 мм латеральнее и кпереди от темени), теменной (на 1 мм латеральнее от средней линии в средней точке между теменем и лямбдой) и затылочной (на 2 мм латеральнее средней линии и на 1 мм кпереди от лямбды) коре головного мозга. Мышечные электроды были введены в мышцы шеи. И наконец, комплект электродов фиксировали и прикрепили к черепу с помощью клея Super-Bond (Sun Medical Co., Shiga, Japan) и стоматологического цемента. Такая имплантация позволяет проводить стабильные и длительные полиграфические записи [Parmentier et al, 2002].
Полиграфическая запись у мышей и сбор и анализ данных
После хирургического вмешательства животных помещали отдельно, располагая в изолированной звуконепроницаемой комнате для записи, в которой поддерживали температуру окружающей среды равную 23±1°С и 12-часовой цикл свет/темнота (свет включали в 7 часов утра). После 7-дневного восстановительного периода мышей приучали к записывающему кабелю в течение 7 дней, прежде чем были начаты полиграфические записи. Эпизоды непосредственного наступления парадоксального сна (DREM, от англ. direct REM sleep onset - непосредственное наступление парадоксального сна), также называемые некоторыми авторами [Chemelli et al., 1999; Mignot et al., 2005; Fujiki et al., 2006] эпизодами нарколепсии или периодами наступления сна с быстрыми движениями глаз (REM-сон, от англ. rapid eye movements (RAM) - быстрые движения глаз), определяются как наступление парадоксального сна непосредственно после бодрствования, а именно как эпизод парадоксального сна длительностью более 60 секунд, который следует непосредственно за эпизодом бодрствования при отсутствии любой предшествующей медленной корковой активности, составляющей более 5 с за упомянутые 60 с.
Применение препаратов и экспериментальные процедуры у мышей
После восстановления от операции и приучения к записи через кабели, каждая мышь была подвергнута сессии записи в течение двух непрерывных дней, начиная с 7 утра. Введение препаратов было выполнено в 6:45 вечера непосредственно перед отбоем (7:00 вечера), поскольку приступы нарколепсии у орексин-/- мышей обнаруживаются только в фазе отбоя [Chemelli et al., 1999]. Порядок введения препаратов был рандомизирован. Полиграфические записи производили сразу после введения и продолжали в течение всего периода отбоя (12 ч). Два введения препаратов были разделены периодом 7 дней (выведение препарата). Мышам (n равно 8 в каждой партии) вводили перорально или модафинил (64 мг/кг), или модафинил (64 мг/кг) и рацемат флекаинида (1 мг/кг), или только рацемат флекаинида (1 мг/кг), или носитель.
5.2. Результаты
Орексины (также известные как гипокретины) представляют собой два нейропептида гипоталамуса, идентифицированные в 1998 году [Sakurai et al., 1998; De Lecea L. et al., 1998]. Нейроны, содержащие орексины, были определены в дорсолатеральной и перифорникальной областях гипоталамуса; эти нейроны играют ключевую роль в поведенческой активации. Многочисленные данные свидетельствуют о том, что дефицит орексина отвечает за патогенез нарколепсии у человека и животных [Lin et al, 1999; Chemelli et al, 1999]. Недавно было показано, что самые основные фенотипы нокаутных по орексину мышей имеют поведенческие/двигательные дефекты во время бодрствования, а в темное время суток у них бывают эпизоды наступления парадоксального сна (DREM, также известные, как SOREM), определяющиеся на ЭЭГ, ЭМГ и видеозаписи, как внезапный приступ парадоксального сна, которому непосредственно предшествует бодрствование [Anaclet et al, 2009]. Таким образом, SOREM/DREM представляет собой основной фенотип нарколепсии мышей, который часто наблюдается у больных нарколепсией [Lin et al., 20011]. При использовании этой модели было показано, что модафинил позволяет эпизодам DREM сохраняться [Lin et al., 2008]; такая ситуация аналогична клинической картине, при которой модафинил улучшает состояние повышенной дневной сонливости без явного воздействия на катаплексию.
Кроме того, как показано на Фигуре 6В, сам по себе рацемат флекаинида в дозе 1 мг/кг не оказывает никакого эффекта на катаплексикоподобный фенотип DREM у Ох-/- мышей с нарколепсией.
Тем не менее, и что важно, результаты, описанные на Фигуре 6А, показывают, что комбинация модафинил/флекаинид уменьшает возможность возникновения эпизода DREM.
Следовательно, флекаинид и модафинил не оказывали существенного воздействия на катаплексикоподобный фенотип DREM при использовании их по отдельности, тогда как их сочетание существенно снижает катаплексикоподобный фенотип DREM.
Эти результаты демонстрируют синергизм, существующий между флекаинидом и модафинилом; этот синергизм существует ввиду потенцирования эффективности модафинила флекаинидом, поскольку ни модафинил, ни флекаинид сами по себе не показывают никакого эффекта у мышей с нарколепсией.
Пример 6. Модафинил/R-флекаинид неожиданно оказывается более эффективным, чем модафинил/S-флекаинид при воздействии на катаплексикоподобный фенотип DREM у мышей с нарколепсией
Были использованы те же материалы и способы, что и в Примере 5, за исключением того, что рацемат флекаинида был заменен на R-энантиомер флекаинида.
Как показано на Фигуре 7, R-энантиомер флекаинида в комбинации с модафинилом, более эффективен при воздействии на катаплексикоподобный фенотип DREM у Ох-/- мышей с нарколепсией, чем S-энантиомер флекаинида в комбинации с модафинилом.
Ссылки
S. Alessi-Severini, F. Jamali, F.M. Pasutto, R.T. Coutts, S. Gulamhusein, High-performance liquid chromatographic determination of the enantiomers of flecainide in human plasma and urine, J Pharm Sci 79 (1990) 257-260.
S. Alessi-Severini, D.F. LeGatt, F.M. Pasutto, F. Jamali, R.T. Coutts, HPLC analysis of flecainide enantiomers in plasma: comparison with fluorescence polarization immunoassay, Clin Chem 37 (1991) 111-112.
Anaclet C, Parmentier R, Ouk K, Guidon G, Buda C, Sastre JP, Akaoka H, Sergeeva OA, Yanagisawa M, Ohtsu H, Franco P, Haas HL, Lin JS (2009) Orexinlhypocretin and histamine: distinct roles in the control of wakefulness demonstrated using knock-out mouse models. The Journal of neuroscience: the official journal of the Society for Neuroscience 29: 14423-14438.
E.H. Barritt, J.R. Schmid, R.A. Newmark, Resolution of flecainide acetate, N-(2-piperidylmethyl)-2,5-bis(2,2,2-trifluoroethoxy)benzam ide acetate, and antiarrhythmic properties of the enantiomers, J Med Chem 29 (1986) 299-302.
Beracochea D, Cagnard B, Celerier A, le Merrer J, Peres M, Pierard С (2001) First evidence of a delay-dependent working memory-enhancing effect of modafinil in mice. Neuroreport 12: 375-378/
Beracochea D, Celerier A, Peres M, Pierard С (2003) Enhancement of learning processes following an acute modafinil injection in mice. Pharmacology, biochemistry, and behavior 76: 473-479.
Beracochea DJ, Jaffard R (1987) Impairment of spontaneous alternation behavior in sequential test procedures following mammillary body lesions in mice: evidence for time-dependent interference-related memory deficits. Behav Neurosci 101: 187-197.
M.I. Boulos M.I., B.J. Murray, Current evaluation and management of excessive daytime sleepiness, Can J Neural Sci 37 (2010) 167-176.
Chemelli RM, Willie JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Lee C, Richardson JA, Williams SC, Xiong Y, Kisanuki Y, Fitch ТЕ, Nakazato M, Hammer RE, Saper CB, Yanagisawa M (1999) Narcolepsy in orexin knockout mice: molecular genetics of sleep regulation. Cell 98: 437-451.
Cruikshank SJ, Hopperstad M, Younger M, Connors BW, Spray DC, Srinivas M (2004) Potent block of Сх36 and Cx50 gap junction channels by mefloquine. Proc Natl Acad Sci USA 101: 12364-12369.
Daleau P (1998) Effects of antiarrhythmic agents on junctional resistance of guinea pig ventricular cell pairs. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics 284: 1174-1179.
Dauvilliers, YI. Arnulf, E. Mignot, Narcolepsy with cataplexy, Lancet 369 (2007) 499-511.
Davidson JO, Green CR, Nicholson LF, Bennet L, Gunn AJ (2013) Connexin hemichannel blockade is neuroprotective after, but not during, global cerebral ischemia in near-term fetal sheep.Experimental neurology.
de Lecea L, Kilduff TS, Peyron C, Gao X, Foye PE, Danielson PE, Fukuhara C, Battenberg EL, Gautvik VT, Bartlett FS, 2nd, Frankel WN, van den Pol AN, Bloom FE, Gautvik KM, Sutcliffe JG (1998) The hypocretins: hypothalamus-specific peptides with neuroexcitatory activity. Proc Natl Acad Sci USA 95: 322-327.
del Corsso C, Srinivas M, Urban-Maldonado M, Moreno AP, Fort AG, Fishman GI, Spray DC (2006) Transfection of mammalian cells with connexins and measurement of voltage sensitivity of their gap junctions. Nat Protoc 1: 1799-1809.
Dhein S (2004) Pharmacology of gap junctions in the cardiovascular system. Cardiovasc Res 62: 287-298.
Dubey S, Ahi S, Reddy IM, Kaur T, Beotra A, Jain S (2009) A novel study of screening and confirmation of modafinil, adrafinil and their metabolite modafinilic acid under El- GC-MS and ESI-LC-MS-MS ionization. Indian journal of pharmacology 41: 278-283.
Durham PL, Garrett FG (2009) Neurological mechanisms of migraine: potential of the gap-junction modulator tonabersat in prevention of migraine. Cephalalgia 29 Suppl 2: 1-6 N. Fujiki, Y. Yoshida, S. Zhang, T. Sakurai, M. Yanagisawa, S. Nishino, Sex difference in body weight gain and leptin signaling in hypocretin/orexin deficient mouse models, Peptides 27 (2006) 2326-2331.
Gotter AL, Webber AL, Coleman PJ, Renger JJ, Winrow CJ (2012) International Union of Basic and Clinical Pharmacology. LXXXVI. Orexin receptor function, nomenclature and pharmacology. Pharmacological reviews 64: 389-420.
A.S. Gross, G. Mikus, C. Fischer, R. Hertrampf, U. Gundert-Remy, M. Eichelbaum, Stereoselective disposition of flecainide in relation to the sparteine/debrisoquine metaboliser phenotype, Br J Clin Pharmacol 28 (1989) 555-566.
K. Hanada, S. Akimoto, K. Mitsui, M. Hashiguchi, H. Ogata, Quantitative determination of disopyramide, verapamil and flecainide enantiomers in rat plasma and tissues by high-performance liquid chromatography, J Chromatogr В Biomed Sci Appl 710 (1998) 129-135.
Harks EG, de Roos AD, Peters PH, de Haan LH, Brouwer A, Ypey DL, van Zoelen EJ, Theuvenet AP (2001) Fenamates: a novel class of reversible gap junction blockers. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics 298: 1033-1041.
Ishizuka T, Murotani T, Yamatodani A (2012) Action ofmodafinil through histaminergic and orexinergic neurons. Vitamins and hormones 89: 259-278.
Juszczak GR, Swiergiel AH (2009) Properties of gap junction blockers and their behavioural, cognitive and electrophysiological effects: animal and human studies. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry 33: 181-198
H.K. Kroemer, J. Turgeon, R.A. Parker, D.M. Roden, Flecainide enantiomers: disposition in human subjects and electrophysiologic actions in vitro, Clin Pharmacal Ther 46(1989) 584-590.
Laird DW (2006) Life cycle of connexins in health and disease. Biochem J 394: 527-543.
A.H.L. Lie, R.M. Stuurman, F.N. Ijdenberg, J.H. Kingma, D.K. Meijer, High-performance liquid chromatographic assay of flecainide and its enantiomers in serum, Ther Drug Monit 11 (1989) 708-711.
A.H.L. Lie, J. van den Akker, A. den Hertog, D.K. Meijer, The action of flecainide acetate and its enantiomers on mammalian non-myelinated nerve fibres, Pharm Weekbl Sci 11 (1989)92-94.
J.S. Lin, C. Anaclet, O.A. Sergeeva, H.L. Haas, The waking brain: an update, Cell Mot Life Sci 68 (2011) 2499-2512.
Lin JS, Dauvilliers Y, Amulfl, Bastuji H, Anaclet C, Parmentier R, Kocher L, Yanagisawa M, Lehert P, Ligneau X, Perrin D, Robert P, Roux M, Lecomte JM, Schwartz JC (2008) An inverse agonist of the histamine H(3) receptor improves wakefulness in narcolepsy: studies in orexin-/- mice and patients. Neurobiology of disease 30: 74-83.
Lin JS, Sergeeva OA, Haas HL (2011) Histamine H3 receptors and sleep-wake regulation. The Journal of pharmacology and experimental therapeutics 336: 17-23.
Lin L, Faraco J, Li R, Kadotani H, Rogers W, Lin X, Qiu X, de Jong PJ, Nishino S, Mignot E (1999) The sleep disorder canine narcolepsy is caused by a mutation in the hypocretin (orexin) receptor 2 gene. Cell 98: 365-376.
R. Mehvar, D.R. Brocks, M. Vakily, Impact of stereoselectivity on the pharmacokinetics and pharmacodynamics of antiarrhythmic drugs, Clin Pharmacokinet 41 (2002) 533-558.
E. Mignot, S. Nishino, Emerging therapies in narcolepsy-cataplexy, Sleep 28 (2005) 754-763.
Minzenberg MJ, Carter CS (2008) Modafinil: a review of neurochemical actions and effects on cognition. Neuropsychopharmacology 33: 1477-1502.
Nakase T, Naus CC (2004) Gap junctions and neurological disorders of the central nervous system. Biochim Biophys Acta 1662: 149-158.
R. Parmentier, H. Ohtsu, Z. Djebbara-Hannas, J.L. Valatx, T. Watanabe, J.S. Lin, Anatomical, physiological, and pharmacological characteristics of histidine decarboxylase knock-out mice: evidence for the role of brain histamine in behavioral and sleep-wake control, J Neurosci 22 (2002) 7695-7711.
Patel SJ, Milwid JM, King KR, Bohr S, Iracheta-Velle A, LiM, Vitalo A, Parekkadan B, Jindal R, Yarmush ML (2012) Gap junction inhibition prevents drug-induced liver toxicity and fulminant hepatic failure. Nature biotechnology 30: 179-183.
Sakurai T, Amemiya A, Ishii M, Matsuzaki I, Chemelli RM, Tanaka H, Williams SC, Richarson JA, Kozlowski GP, WilsonS, Arch JR, Buckingham RE, Haynes AC, Carr SA, Annan RS, McNulty DE, Liu WS, Terrett JA, Elshourbagy NA, Bergsma DJ, Yanagisawa M (1998) Orexins and orexin receptors: a family of hypothalamic neuropeptides and G protein-coupled receptors that regulate feeding behavior. Cell 92: 1 page following 696.
Simon P, Panissaud C, Costentin J (1994) The stimulant effect of modafinil on wakefulness is not associated with an increase in anxiety in mice. A comparison with dexamphetamine. Psychopharmacology (Berl) 114: 597-600.
J.K. Smallwood, D.W. Robertson, M.I. Steinberg, Electrophysiological effects of flecainide enantiomers in canine Purkinje fibres, Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacal 339(1989) 625-629.
Takeuchi H, Mizoguchi H, Doi Y, Jin S, Noda M, Liang J, Li H, Zhou Y, Mori R, Yasuoka S, LiE, Parajuli B, Kawanokuchi J, Sonobe Y, Sato J, Yamanaka K, Sobue G, Mizuno T, Suzumura A (2011) Blockade of gap junction hemichannel suppresses disease progression in mouse models of amyotrophic lateral sclerosis and Alzheimer's disease. PLoS One 6: e21108.
Tong X, DongS, Yu M, Wang Q, Tao L (2013) Role of heteromeric gap junctions in the cytotoxicity of cisplatin. Toxicology 310C: 53-60.
Traynelis SF, Wollmuth LP, McBain CJ, Menniti FS, Vance KM, Ogden KK, Hansen KB, Yuan H, Myers SJ, Dingledine R (2010) Glutamate receptor ion channels: structure, regulation, and function. Pharmacological reviews 62: 405-496.
J. Turgeon, H.K. Kroemer, C. Prakash, I.A. Blair, D.M. Roden, Stereoselective determination of flecainide in human plasma by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection, J Pharm Sci 79 (1990) 91-95.