СРЕДСТВО И СПОСОБЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И КРИОКОНСЕРВАЦИИ СТВОЛОВЫХ И ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ

1. Средство для культивирования, хранения и криоконсервации стволовых и дифференцированных клеток человека и животных, характеризующееся тем, что оно представляет собой гель, содержащий эмульсию перфторорганических соединений (ПФОС) при стабилизации их в эмульгированном состоянии водным раствором неионогенных поверхностно-активных соединений (ПАВ) на основе блок-сополимера полиэтиленоксида (ПЭО) и полипропиленоксида (ППО) при соотношении ПЭО/ППО от 9:1 до 7:3, с концентрацией ПАВ от 20 до 90% и средней молекулярной массе ПАВ от 5000 Да до 21000 Да, при этом содержание ПФОС в эмульсии составляет от 5 до 70 об.%, размер частиц эмульсии ПФОС находится в интервале от 15 нм до 2000 нм, а осмотическое давление водной фазы находится в диапазоне от 250 до 350 мОсм
2. Средство по п.1, отличающееся тем, что ПФОС представляет собой моносоединение или смесь двух и более ПФОС.
3. Средство по п.1, отличающееся тем, что водная фаза геля дополнительно содержит осмолиты органической и/или неорганической природы.
4. Средство по п.1, отличающееся тем, что водная фаза геля дополнительно содержит культуральную среду.
5. Средство по п.1, отличающееся тем, что в качестве эмульсии ПФОС использована эмульсия смесей перфтордекалина (ПФД) с перфторметилциклогексилпиперидинома (ПМЦП).
6. Средство по п.5, отличающееся тем, что эмульсия смесей дополнительно содержит перфтортрибутиламин (ПФТБА).
7. Средство по п.1, отличающееся тем, что водный ПАВ на основе блок-сополимера ПЭО и ППО дополнительно содержит полиэтиленоксидный производный токоферола.
8. Способ получения средства для культивирования, хранения и криоконсервации стволовых и дифференцированных клеток человека и животных, характеризующееся тем, что осуществляют экструзию под высоким давлением грубой смеси водного раствора неионогенных поверхностно-активных соединений (ПАВ), представляющего блок-сополимер ПЭО и ППО, и жидких ПФОС или смеси ПФОС до получения эмульсии, которую затем смешивают в горячем виде с концентрированным водным раствором неорганических солей или добавляют в него осмолиты до достижения полученной смесью осмотического давления в диапазоне от 250 до 350 мОсм, после чего полученный состав охлаждают.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что после охлаждения дополнительно производят частичную лиофильную сушку или центрифугирование геля при соблюдении температурного градиента и осаждающем ускорении от 15000g до 35000g, после чего надосадочную жидкость удаляют.
10. Способ по любому из пп.8 и 9, отличающийся тем, что полученное средство перед использованием смешивают с культуральной средой.
2
11. Способ хранения стволовых и дифференцированных клеток человека и животных, характеризующийся тем, что к культуральной среде добавляют средство по п.1 с содержанием ПФОС от 15 до 59 об.% при контролируемой величине рН 7,0-7,4, температуре 37°С в атмосфере инкубатора СО или при низком рН≤6,0, температуре 20°С, в воздушной атмосфере.
12. Способ по п.11, отличающийся тем, что используют комбинации средства по п.1 с различным содержанием ПФОС.
13. Способ криоконсервации стволовых и дифференцированных клеток человека и животных, характеризующийся тем, что производят отмывание клеток от старой культуральной среды, ресуспендирование клеток в свежей культуральной среде, ресуспендированные клетки помещают в среду, содержащую средство по п.1 с содержанием ПФОС 59-70 об.%, после чего производят охлаждение в два этапа: сначала со скоростью 1°С в мин до - 80°С, а затем с максимально возможной скоростью до температуры -196°С.
14. Способ по п.13, отличающийся тем, что используют комбинации средства по п.1 с различным содержанием ПФОС.
15. Способ культивирования стволовых и дифференцированных клеток человека и животных, характеризующийся тем, что в качестве компонента среды используют средство по п.1 с содержанием ПФОС от 15 до 70 об.%.
16. Способ по п.15, отличающийся тем, что при культивировании суспензионных и распластывающихся на подложке клеток дополнительно к стандартным культуральным средам добавляют гели по п.1 с содержанием ПФОС не менее 61 об.%.
17. Способ по любому из пп.15 и 16, отличающийся тем, что используют комбинации средства по п.1 с различным содержанием ПФОС.