Антитела против эотаксина 2, которые распознают дополнительные связывающие CCR3 хемокины

1. Выделенное полиспецифическое антитело или любой его антигенсвязывающий фрагмент, которые связываются с по меньшей мере двумя связывающими CCR3 хемокинами, для применения в лечении фиброзных заболеваний, аутоиммунных воспалительных расстройств, расстройств, связанных с моноцитами, или аллергических атопических расстройств.
2. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по п. 1, где указанное антитело представляет собой моноклональное антитело.
3. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по п. 2, где указанное моноклональное антитело представляет собой химерное антитело, человеческое антитело, гуманизированное антитело или полностью гуманизированное антитело.
2
4. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по любому из пп. 1-3, где указанный его антигенсвязывающий фрагмент выбран из группы, состоящей из Fv, одноцепочечного Fv (scFv), вариабельной области тяжелой цепи, способной связываться с антигеном, вариабельной области легкой цепи, способной связываться с антигеном, Fab, F(ab)' и любой их комбинации.
5. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по любому из пп. 1-4, где указанное фиброзное заболевание выбрано из группы, состоящей из склеродермии, идиопатического легочного фиброза (IPF), неалкогольного стеатогепатита (NASH), гломерулосклероза, цирроза и метаболических синдромов.
6. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по любому из пп. 1-5, где указанное аутоиммунное воспалительное расстройство выбрано из группы, состоящей из системной красной волчанки (SLE), ревматоидного артрита, псориаза, колита, увеита, рассеянного склероза и сахарного диабета I типа.
7. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по любому из пп. 1-4, где указанное расстройство, связанное с моноцитами, представляет собой атеросклероз.
8. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по любому из пп. 1-4, где указанное аллергическое атопическое расстройство выбрано из группы, состоящей из астмы, атопического дерматита, крапивницы и реакций гиперчувствительности.
9. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по любому из пп. 1-8, где указанные по меньшей мере два связывающие CCR3 хемокина выбраны из группы, состоящей из эотаксина 1, эотаксина 2, Rantes и МСР-3.
10. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по п. 9, где указанное антитело связывается с эотаксином 1, эотаксином 2, Rantes и МСР-3.
11. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по любому из пп. 1-10, где указанное антитело ослабляет мигрирующие свойства клеток, экспрессирующих CCR3, CCR1, CCR2 и CCR5.
12. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по п. 1, где указанное антитело представляет собой полностью гуманизированное антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, включающую:
а) область, определяющую комплементарность, VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 5, или ее вариант;
б) область, определяющую комплементарность, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 6, или ее вариант; и
в) область, определяющую комплементарность, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 7, или ее вариант; и
вариабельную область легкой цепи, включающую
г) область, определяющую комплементарность, VK CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 8, или ее вариант;
д) область, определяющую комплементарность, VK CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 9, или ее вариант; и
е) область, определяющую комплементарность, VK CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 10, или ее вариант.
13. Выделенное полиспецифическое антитело для применения по п. 1, где указанное антитело представляет собой полностью гуманизированное антитело, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, обозначенную как SEQ ID NO: 3, или ее вариант и вариабельную область легкой цепи, обозначенную как SEQ ID NO: 4, или ее вариант.
14. Выделенное антитело, которое связывается с конформационным эпитопом в N-петлевой области связывающего CCR3 хемокина, где указанный конформационный эпитоп характеризуется относительно высокой концентрацией положительно заряженных аминокислотных остатков, локализованных между положениями аминокислот 14 и 24 в аминокислотной последовательности указанного связывающего CCR3 хемокина.
15. Выделенное антитело по п. 14, где указанный конформационный эпитоп содержит по меньшей мере три положительно заряженных аминокислотных остатка между положениями аминокислот 14 и 24 в аминокислотной последовательности указанного связывающего CCR3 хемокина.
16. Выделенное антитело по п. 14 или 15, где указанные положительно заряженные аминокислотные остатки выбраны из группы, состоящей из Arg, Lys и His.
17. Выделенное антитело по любому из пп. 14-16, где конформационный эпитоп содержит аминокислотные последовательности, выбранные из: аминокислотных последовательностей, обозначенных как SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18 или SEQ ID NO: 19.
18. Выделенное полиспецифическое антитело или любой его антигенсвязывающий фрагмент, которые связываются с по меньшей мере двумя связывающими CCR3 хемокинами, где указанное антитело представляет собой полностью гуманизированное антитело и содержит вариабельную область тяжелой цепи, включающую:
а) область, определяющую комплементарность, VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 5, или ее вариант;
б) область, определяющую комплементарность, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 6, или ее вариант; и
в) область, определяющую комплементарность, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 7, или ее вариант; и
вариабельную область легкой цепи, включающую
г) область, определяющую комплементарность, VK CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 8, или ее вариант;
д) область, определяющую комплементарность, VK CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 9, или ее вариант; и
е) область, определяющую комплементарность, VK CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 10, или ее вариант.
19. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело по любому из пп. 1-18.
20. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая гуманизированное антитело, которое связывается с по меньшей мере двумя связывающими CCR3 хемокинами, где указанная молекула нуклеиновой кислоты содержит последовательность, обозначенную как SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2.
21. Экспрессионный вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп. 19 или 20.
22. Клетка-хозяин, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп. 19 или 20.
23. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по любому из пп. 1-18 и фармацевтически приемлемый носитель.
24. Фармацевтическая композиция по п. 23 для применения в лечении фиброзных заболеваний, аутоиммунных воспалительных расстройств, расстройств, связанных с моноцитами, или аллергических атопических расстройств.
25. Способ лечения фиброзных заболеваний, аутоиммунных воспалительных расстройств, расстройств, связанных с моноцитами, или аллергических атопических расстройств, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически приемлемого количества антитела по любому из пп. 1-18 или фармацевтической композиции по п. 23.
26. Способ ослабления мигрирующих свойств клеток, экспрессирующих CCR3, CCR1, CCR2 и CCR5, при фиброзных заболеваниях, аутоиммунных воспалительных расстройствах, расстройствах, связанных с моноцитами, или аллергических атопических расстройствах, включающий введение пациенту, страдающему одним из указанных заболеваний, терапевтически приемлемого количества антитела по любому из пп. 1-18 или фармацевтической композиции по п. 23.
27. Способ скрининга и идентификации антител, способных ослаблять мигрирующие свойства по меньшей мере одной из клеток, экспрессирующих CCR3, CCR1, CCR2 или CCR5, включающий:
а) получение антител против связывающего CCR3 хемокина; и
б) оценку связывания указанных антител с конформационным эпитопом в N-петлевой области связывающего CCR3 хемокина, где указанный конформационный эпитоп характеризуется относительно высокой концентрацией положительно заряженных аминокислотных остатков, локализованных между положениями аминокислот 14 и 24 в аминокислотной последовательности указанного связывающего CCR3 хемокина;
в) отбор антител, которые связываются с указанным конформационным эпитопом;
где антитела, которые связываются специфически с указанным конформационным эпитопом, способны эффективно ослаблять мигрирующие свойства клеток, экспрессирующих CCR3, CCR1, CCR2 и CCR5.
28. Способ по п. 27, где указанный конформационный эпитоп содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, обозначенных как SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18 и SEQ ID NO: 19.
29. Выделенная N-петлевая область связывающего CCR3 хемокина, содержащая конформационный эпитоп, характеризующийся относительно высокой концентрацией положительно заряженных аминокислотных остатков, локализованных между положениями аминокислот 14 и 24 в аминокислотной последовательности указанного связывающего CCR3 хемокина, для образования антител против указанного связывающего CCR3 хемокина.
30. Выделенная N-петлевая область по п. 29, содержащая аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, обозначенных как SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18 и SEQ ID NO: 19.