СПОСОБЫ ВЫДЕЛЕНИЯ ОПУХОЛЕСПЕЦИФИЧЕСКИХ ИММУННЫХ КЛЕТОК У СУБЪЕКТА ДЛЯ АДОПТИВНОЙ КЛЕТОЧНОЙ ТЕРАПИИ И ПРОТИВОРАКОВЫХ ВАКЦИН

1. Способ выделения опухолеспецифических иммунных клеток у субъекта, имеющего злокачественную опухоль, включающий
(a) локальное введение в указанную опухоль за одно или более отдельных введений композиции, содержащей частицы таксана, для индукции выработки опухолеспецифических иммунных клеток in vivo; и
(b) выделение опухолеспецифических иммунных клеток из крови указанного субъекта и/или из ткани в месте или окружающей место опухоли у указанного субъекта, с обеспечением тем самым популяции выделенных опухолеспецифических иммунных клеток,
причем указанные опухолеспецифические иммунные клетки обладают специфичностью к указанной злокачественной опухоли.
2. Способ по п. 1, согласно которому стадия выделения 1(b) происходит по меньшей мере через 10 дней или по меньшей мере через 28 дней после стадии введения 1(a).
3. Способ по п. 2, согласно которому стадия выделения 1(b) происходит не позднее, чем через 60 дней после стадии введения 1(a).
4. Способ по любому из пп. 1-3, согласно которому популяция выделенных опухолеспецифических иммунных клеток содержит по меньшей мере одно из следующего: дендритные клетки, CD45+ клетки, лимфоциты, лейкоциты, макрофаги, макрофаги M1, Τ-клетки, CD4+ Τ-клетки, CD8+ Τ-клетки, В-клетки или естественные киллеры (ΝΚ).
5. Способ по любому из пп. 1-4, согласно которому злокачественная опухоль включает саркому, карциному, лимфому, солидную опухоль, опухоль молочной железы, опухоль предстательной железы, опухоль головы и шеи, опухоль внутрибрюшного органа, опухоль головного мозга, глиобластому, опухоль мочевого пузыря, опухоль поджелудочной железы, опухоль печени, опухоль яичника, колоректальную опухоль, опухоль кожи, кожный метастаз, лимфоидную опухоль, желудочно-кишечную опухоль, опухоль легкого, опухоль кости, меланому, ретинобластому или опухоль почки, или их опухолевые метастазы.
6. Способ по любому из пп. 1-5, согласно которому популяцию выделенных опухолеспецифических иммунных клеток выделяют из крови субъекта.
7. Способ по п. 6, согласно которому популяцию выделенных опухолеспецифических иммунных клеток выделяют из крови аферезом или лейкаферезом.
8. Способ по п. 6 или 7, согласно которому популяция выделенных опухолеспецифических иммунных клеток содержит CD4+ Т-клетки и CD8+ Т-клетки.
9. Способ по п. 8, согласно которому CD4+ Т-клетки составляют от приблизительно 4% до приблизительно 15% популяции выделенных опухолеспецифических иммунных клеток.
10. Способ по п. 8 или 9, согласно которому CD8+ Т-клетки составляют от приблизительно 3% до приблизительно 10% популяции выделенных опухолеспецифических иммунных клеток.
11. Способ по любому из пп. 6-10, согласно которому популяция выделенных опухолеспецифических иммунных клеток содержит более крупные популяции клеток CD4+ Т-клеток и CD8+ Т-клеток и менее крупные популяции супрессорных клеток миелоидного происхождения (MDSC), чем в контрольной популяции иммунных клеток.
12. Способ по п. 11, согласно которому контрольная популяция иммунных клеток содержит популяцию иммунных клеток, не являющихся специфичными к данному типу злокачественной опухоли.
13. Способ по п. 11 или 12, согласно которому контрольная популяция иммунных клеток содержит популяцию иммунных клеток, которая была выделена из крови субъекта перед стадией введения 1(a).
14. Способ по п. 11 или 12, согласно которому контрольная популяция иммунных клеток содержит популяцию иммунных клеток, которая была выделена из крови субъекта, имеющего данный тип злокачественной опухоли и получившего внутривенное (в/в) введение композиции таксана.
15. Способ по п. 11 или 12, согласно которому контрольная популяция иммунных клеток содержит популяцию иммунных клеток, которая была выделена из крови субъекта, не имеющего данный тип злокачественной опухоли.
16. Способ по любому из пп. 1-15, согласно которому локальное введение композиции на стадии 1(a) включает два или более отдельных введения.
17. Способ по п. 16, согласно которому локальное введение композиции на стадии 1(a) включает два или более отдельных введения раз в неделю в течение по меньшей мере двух недель.
18. Способ по п. 16, согласно которому локальное введение композиции на стадии 1(a) включает два или более отдельных введения два раза в неделю в течение по меньшей мере одной недели, причем два или более отдельных введения осуществляют с интервалом в по меньшей мере один день.
19. Способ по любому из пп. 1-18, согласно которому стадию выделения 1(b) повторяют после каждого отдельного введения на стадии 1(a), и популяции выделенных опухолеспецифических иммунных клеток, полученных на каждой повторной стадии выделения, объединяют.
20. Способ по любому из пп. 1-19, согласно которому популяцию выделенных опухолеспецифических иммунных клеток концентрируют ex vivo с получением популяции концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток, и/или размножают ex vivo с получением популяции размноженных опухолеспецифических иммунных клеток и/или популяции размноженных концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток.
21. Способ по любому из пп. 1-20, согласно которому популяцию выделенных опухолеспецифических иммунных клеток, популяцию концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток, популяцию размноженных опухолеспецифических иммунных клеток и/или популяцию размноженных концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток замораживают.
22. Способ по любому из пп. 1-21, согласно которому популяцию выделенных опухолеспецифических иммунных клеток, популяцию концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток, популяцию размноженных опухолеспецифических иммунных клеток и/или популяцию размноженных концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток подвергают хранению.
23. Способ по любому из пп. 1-22, согласно которому популяцию выделенных опухолеспецифических иммунных клеток концентрируют, причем клетки популяции концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток выбраны из группы, состоящей из CD4+ Т- клеток, CD8+ Т-клеток, CD45+ клеток и макрофагов M1, и их смесей.
24. Способ по любому из пп. 1-23, согласно которому популяцию выделенных опухолеспецифических иммунных клеток, популяцию концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток, популяцию размноженных опухолеспецифических иммунных клеток и/или популяцию размноженных концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток модифицируют ех vivo.
25. Способ по п. 24, согласно которому популяцию выделенных опухолеспецифических иммунных клеток, популяцию концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток, популяцию размноженных опухолеспецифических иммунных клеток и/или популяцию размноженных концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток модифицируют с получением популяции модифицированных опухолеспецифических иммунных клеток, причем модификация включает подвергание клеток воздействию антител, подвергание клеток воздействию пептидов, подвергание клеток воздействию модификаторов биологической реакции, подвергание клеток воздействию цитокинов или их аналогов, подвергание клеток воздействию факторов роста или их аналогов, подвергание клеток воздействию антигенов, подвергание клеток воздействию РНК или малой интерферирующей РНК, совместное культивирование клеток с цельноклеточным лизатом, совместное культивирование клеток с искусственными антигенпрезентирующими клетками, совместное культивирование клеток с другими типами клеток, модификацию клеток методами генной инженерии, активацию транскрипции гена клеток, подавление транскрипции гена клеток, трансфекцию лентивирусных векторов в клетки, трансфекцию плазмидной ДНК в клетки, нуклеофекцию мРНК в клетки, трансдукцию клеток геном, кодирующим сконструированный химерный антигенный рецептор (CAR), посредством ретровярусного вектора, и/или генетическую инактивацию гена клеток с помощью генетического нокаута или методов CRISPR.
26. Способ по п. 24 или 25, согласно которому популяцию модифицированных опухолеспецифических иммунных клеток замораживают.
27. Способ по любому из пп. 24-26, согласно которому популяцию модифицированных опухолеспецифических иммунных клеток подвергают хранению.
28. Способ по любому из пп. 1-27, согласно которому частицы таксана имеют средний размер частиц (по количеству) от 0,1 мкм до 5 мкм, или от 0,1 мкм до 1,5 мкм, или от 0,4 мкм до 1,2 мкм.
29. Способ по любому из пп. 1-28, согласно которому частицы таксана содержат по меньшей мере 95% таксана.
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
30. Способ по любому из пп. 1-29, согласно которому частицы таксана имеют удельную площадь поверхности (SSA) по меньшей мере 18 м/г, 20 м/г, 25 м/г, 30 м/г, 32 м/г, 34 м/г или 35 м/г; или от приблизительно 18 м/г до приблизительно 60 м/г, или от приблизительно 18 м/г до приблизительно 50 м/г.
3
3
31. Способ по любому из пп. 1-30, согласно которому частицы таксана имеют объемную плотность (без утряски) от 0,05 г/см до 0,15 г/см.
32. Способ по любому из пп. 1-31, согласно которому частицы таксана не связаны с одним или более из мономера, полимера (или биосовместимого полимера), белка, поверхностно-активного вещества или альбумина, не инкапсулированы в него или не покрыты им.
33. Способ по любому из пп. 1-32, согласно которому частицы таксана находятся в кристаллической форме.
34. Способ по любому из пп. 1-33, согласно которому частицы таксана содержат частицы паклитаксела, частицы доцетаксела, частицы кабазитаксела или их комбинации.
35. Способ по п. 34, согласно которому частицы таксана содержат частицы паклитаксела.
36. Способ по п. 34, согласно которому частицы таксана содержат частицы доцетаксела.
37. Способ по любому из пп. 1-36, согласно которому локальное введение композиции осуществляют путем местного введения, введения в легкие, введения с помощью внутриопухолевой инъекции, введения с помощью внутрибрюшинной инъекции, введения с помощью внутрипузырной инсталляции (в мочевой пузырь) или непосредственной инъекции в ткани, окружающие опухоль, или их комбинаций.
38. Способ по п. 37, согласно которому локальное введение композиции представляет собой местное введение, при котором композицию местно наносят на пораженный участок тела субъекта, и при этом опухоль представляет собой злокачественное новообразование кожи.
39. Способ по п. 38, согласно которому злокачественное новообразование кожи включает рак кожи.
40. Способ по п. 39, согласно которому рак кожи представляет собой меланому, базальноклеточную карциному, плоскоклеточную карциному или саркому Капоши.
41. Способ по п. 39, согласно которому злокачественное новообразование кожи включает кожный метастаз.
42. Способ по п. 41, согласно которому кожный метастаз происходит от рака легкого, рака молочной железы, рака толстой кишки, рака полости рта, рака яичника, рака почки, рака пищевода, рака желудка, рака печени и/или саркомы Капоши.
43. Способ по любому из пп. 38-42, согласно которому композиция дополнительно содержит жидкий или полутвердый носитель, и при этом частицы таксана диспергированы в указанном носителе.
44. Способ по п. 43, согласно которому композиция является безводной и гидрофобной.
45. Способ по п. 44, согласно которому композиция содержит углеводород.
46. Способ по п. 45, согласно которому углеводород представляет собой вазелин, минеральное масло или парафиновый воск, или их смеси.
47. Способ по любому из пп. 44-46, согласно которому композиция дополнительно содержит одну или более летучих силиконовых жидкостей.
48. Способ по п. 47, согласно которому концентрация одной или более летучих силиконовых жидкостей составляет от 5 до 24 мас.% относительно массы композиции.
49. Способ по п. 4 или 48, согласно которому летучая силиконовая жидкость представляет собой циклометикон.
50. Способ по п. 49, согласно которому циклометикон представляет собой циклопентасилоксан.
1
4
51. Способ по любому из пп. 43-50, согласно которому композиция не содержит летучих C-С алифатических спиртов, не содержит дополнительных усилителей проникновения, не содержит дополнительных летучих растворителей, не содержит поверхностно-активных веществ, не содержит белок и/или не содержит альбумин.
52. Способ по любому из пп. 38-51, согласно которому концентрация частиц таксана в композиции составляет от приблизительно 0,1 до приблизительно 5 мас.%.
53. Способ по п. 37, согласно которому локальное введение осуществляют путем введения в легкие, при котором композицию вводят путем ингаляции, и при этом опухоль представляет собой опухоль легкого.
54. Способ по п. 53, согласно которому введение в легкие включает распыление, и при этом распыление приводит к доставке в легкие аэрозольных капель композиции.
55. Способ по п. 54, согласно которому аэрозольные капли имеют массовый медианный аэродинамический диаметр (MMAD) от приблизительно 0,5 мкм до приблизительно 6 мкм в диаметре, или от приблизительно 1 мкм до приблизительно 3 мкм в диаметре, или от приблизительно 2 мкм до приблизительно 3 мкм в диаметре.
56. Способ по п. 37, согласно которому локальное введение осуществляют путем введения посредством внутриопухолевой инъекции, при которой композицию вводят непосредственно в опухоль.
57. Способ по п. 56, согласно которому опухоль представляет собой саркому, карциному, лимфому, опухоль молочной железы, опухоль предстательной железы, опухоль головы и шеи, опухоль головного мозга, глиобластому, опухоль мочевого пузыря, опухоль поджелудочной железы, опухоль печени, опухоль яичника, колоректальную опухоль, опухоль кожи, кожный метастаз, лимфоидную опухоль, желудочно-кишечную опухоль и/или опухоль почки.
58. Способ по п. 37, согласно которому локальное введение осуществляют путем внутрибрюшинной инъекции, при которой композицию вводят в брюшную полость, и при этом опухоль представляет собой опухоль внутрибрюшного органа.
59. Способ по п. 58, согласно которому опухоль внутрибрюшного органа представляет собой опухоль яичника.
60. Способ по п. 37, согласно которому локальное введение осуществляют путем внутрипузырной инсталляции (в мочевой пузырь), при которой композицию по каплям вводят в мочевой пузырь.
61. Способ по любому из пп. 53-60, согласно которому композиция дополнительно содержит жидкий носитель, и при этом частицы таксана диспергированы в указанном носителе.
62. Способ по п. 61, согласно которому жидкий носитель представляет собой водный носитель.
63. Способ по п. 62, согласно которому водный носитель содержит 0,9% физиологический раствор.
64. Способ по п. 62 или 63, согласно которому водный носитель содержит поверхностно-активное вещество.
65. Способ по п. 64, согласно которому поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат.
66. Способ по п. 65, согласно которому полисорбат представляет собой полисорбат 80, и при этом полисорбат 80 присутствует в водном носителе в концентрации от приблизительно 0,01 об.% до приблизительно 1 об.%.
67. Способ по любому из пп. 53-66, согласно которому концентрация частиц таксана в композиции составляет от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 40 мг/мл, или от приблизительно 6 мг/мл до приблизительно 20 мг/мл.
68. Клеточная композиция, содержащая носитель и популяцию выделенных опухолеспецифических иммунных клеток, концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток, размноженных опухолеспецифических иммунных клеток, размноженных концентрированных опухолеспецифических иммунных клеток и/или модифицированных опухолеспецифических иммунных клеток, полученных способом по любому из пп. 1-67.
69. Клеточная композиция, содержащая популяцию опухолеспецифических иммунных клеток, выделенную у субъекта, имеющего злокачественную опухоль и получившего локальное введение композиции, содержащей частицы таксана, в указанную злокачественную опухоль, причем указанная популяция выделенных опухолеспецифических иммунных клеток в том виде, как она получена от субъекта, является специфичной к данному типу злокачественной опухоли.
70. Клеточная композиция по п. 69, отличающаяся тем, что в выделенной популяции опухолеспецифических иммунных клеток повышена концентрация CD4+ Т-клеток и/или CD8+ Т-клеток по сравнению с контрольной популяцией иммунных клеток.
71. Клеточная композиция по п. 70, отличающаяся тем, что контрольная популяция иммунных клеток содержит популяцию иммунных клеток, не являющихся специфичными к данному типу злокачественной опухоли.
72. Клеточная композиция по п. 70 или 71, отличающаяся тем, что контрольная популяция иммунных клеток содержит популяцию иммунных клеток, которая была выделена у указанного субъекта до локального введения композиции, содержащей частицы таксана, в опухоль.
73. Клеточная композиция по п. 70 или 71, отличающаяся тем, что контрольная популяция иммунных клеток содержит популяцию иммунных клеток, выделенную у субъекта, имеющего данный тип злокачественной опухоли и получившего внутривенное (в/в) введение композиции таксана.
74. Клеточная композиция по п. 70 или 71, отличающаяся тем, что контрольная популяция иммунных клеток содержит популяцию иммунных клеток, которая была выделена у субъекта, не имеющего данный тип злокачественной опухоли.
75. Клеточная композиция по любому из пп. 69-74, отличающаяся тем, что популяция опухолеспецифических иммунных клеток содержит от приблизительно 4% до приблизительно 15% CD4+ Т-клеток.
76. Клеточная композиция по любому из пп. 69-75, отличающаяся тем, что популяция опухолеспецифических иммунных клеток содержит от приблизительно 3% до приблизительно 10% CD8+ Т-клеток.
77. Клеточная композиция по любому из пп. 69-76, дополнительно содержащая носитель.
78. Клеточная композиция по любому из пп. 69-77, дополнительно содержащая один или более терапевтических агентов.
79. Клеточная композиция по п. 78, отличающаяся тем, что терапевтический агент представляет собой иммунотерапевтический агент или ингибитор контрольной точки.
80. Клеточная композиция по любому из пп. 69-79, отличающаяся тем, что указанная клеточная композиция явялется замораженной.
81. Способ лечения рака или метастатического рака у субъекта, имеющего рак или метастатический рак, где указанный способ включает введение указанному субъекту клеточной композиции по любому из пп. 68-80.
82. Способ по п. 81, согласно которому лечение представляет собой аутологичное лечение.
83. Способ по п. 81, согласно которому лечение представляет собой аллогенное лечение.
84. Способ по любому из пп. 81-83, согласно которому введение клеточной композиции осуществляют путем внутривенного введения, внутривенной инъекции, внутривенной инфузии/перфузии/болюса, внутриартериальной инъекции, внутриартериальной инфузии/перфузии, болюса, внутрилимфатической инфузии, внутриузловой инфузии, внутрибрюшинной инъекции, внутримышечной инъекции, подкожной инъекции, внутрипузырной инсталляции, внутриопухолевой инъекции, перитуморальной инъекции, введения в легкие, местного введения или их комбинации.
85. Способ по любому из пп. 81-84, согласно которому рак или метастатический рак представляет собой злокачественную опухоль того же типа, что и злокачественная опухоль, в которую локально вводили композицию, содержащую частицы таксана.
86. Вакцина для предупреждения рака или предупреждения рецидива рака, содержащая клеточную композицию по любому из пп. 68-80.
87. Способ предупреждения рака или предупреждения рецидива рака у субъекта, включающий введение указанному субъекту вакцины по п. 86.
88. Способ по п. 87, согласно которому вакцина представляет собой аутологичную вакцину.
89. Способ по п. 87, согласно которому вакцина представляет собой аллогенную вакцину.
90. Способ по любому из пп. 86-89, согласно которому введение вакцины осуществляют путем внутривенного введения, внутривенной инъекции, внутривенной инфузии/перфузии/болюса, внутриартериальной инъекции, внутриартериальной инфузии/перфузии/болюса, внутрилимфатической инфузии, внутриузловой инфузии, внутрибрюшинной инъекции, внутримышечной инъекции, подкожной инъекции, внутрипузырной инсталляции, внутриопухолевой инъекции, перитуморальной инъекции, введения в легкие, местного введения или их комбинаций.
91. Способ по любому из пп. 87-90, согласно которому рак представляет собой злокачественную опухоль того же типа, что и злокачественная опухоль, в которую локально вводили композицию, содержащую частицы таксана.