T-КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ

1. Т-клеточный рецептор (TCR), обладающий способностью связываться с GLYDGMEHL (SEQ ID No: 1) в комплексе с HLA-A*02, где константа диссоциации такого связывания составляет приблизительно от 0,05 мкМ до 10,0 мкМ, как было определено методом поверхностного плазмонного резонанса при 25°C и при pH 7,1-7,5 с использованием растворимой формы TCR, где TCR содержит вариабельный домен альфа-цепи TCR и вариабельный домен бета-цепи TCR, и где вариабельные домены TCR контактируют по меньшей мере с остатками Y3 и E7 GLYDGMEHL (SEQ ID No: 1).
2. TCR по п. 1, который представляет собой гетеродимер альфа-бета, имеющий последовательность константного домена альфа-цепи TRAC и последовательность константного домена бета-цепи TRBC1 или TRBC2.
3. TCR по п. 2, где последовательности константных доменов альфа- и бета-цепи модифицированы посредством усечения или замены для удаления нативной дисульфидной связи, находящейся между Cys4 экзона 2 TRAC и Cys2 экзона 2 TRBC1 или TRBC2.
4. TCR по п. 2 или 3, где последовательности константных доменов альфа- и бета-цепи модифицированы путем замены Thr 48 TRAC и Ser 57 TRBC1 или TRBC2 на цистеиновые остатки, где указанные цистеины образуют дисульфидную связь между константными доменами альфа и бета TCR.
5. TCR по п.1, который представляет собой одноцепочечную форму типа Vα-L-Vβ, Vβ-L-Vα, Vα-Cα-L-Vβ или Vα-L-Vβ-Cβ, где Vα и Vβ представляют собой вариабельные области TCR α и β, соответственно, Cα и Cβ представляют собой константные области TCR α и β, соответственно, а L представляет собой линкерную последовательность.
6. TCR по любому из предшествующих пунктов, где указанный TCR связан с детектируемой меткой, с терапевтическим средством или с PK-модифицирующей молекулой.
7. TCR по любому из предшествующих пунктов, где вариабельный домен альфа-цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична последовательности аминокислотных остатков 1-111 SEQ ID No: 4 и имеет следующую мутацию:
в соответствии с нумерацией в SEQ ID No: 4, и/или вариабельный домен бета-цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична последовательности аминокислотных остатков 1-111 SEQ ID No: 5 и имеет по меньшей мере одну из следующих мутаций:
в соответствии с нумерацией в SEQ ID No: 5.
8. TCR по любому из предшествующих пунктов, где вариабельный домен альфа-цепи содержит аминокислотную последовательность из аминокислотных остатков 1-111 SEQ ID No: 6 или 12; или
аминокислотную последовательность, в которой аминокислотные остатки 1-26, 33-49, 55-89 и 94-111 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 1-26, 33-49, 55-89 и 94-111 SEQ ID No: 6 или 12, соответственно, и в которой аминокислотные остатки 27-32, 50-54 и 90-93 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 27-32, 50-54 и 90-93 SEQ ID No: 6 или 12, соответственно.
9. TCR по любому из пп. 1-7, где вариабельный домен альфа-цепи содержит аминокислотную последовательность из аминокислотных остатков 1-111 SEQ ID No: 7 или 13, или
аминокислотную последовательность, в которой аминокислотные остатки 1-26, 33-49, 55-89 и 94-111 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 1-26, 33-49, 55-89 и 94-111 SEQ ID No: 7 или 13, соответственно, и в которой аминокислотные остатки 27-32, 50-54 и 90-93 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 27-32, 50-54 и 90-93 SEQ ID No: 7 или 13, соответственно.
10. TCR по любому из предшествующих пунктов, где в вариабельном домене альфа-цепи:
(i) последовательность аминокислотных остатков 1-26 (a) по меньшей мере на 90% идентична последовательности аминокислотных остатков 1-26 SEQ ID No: 4 или (b) имеет один, два или три аминокислотных остатка, которые, по сравнению с последовательностью (a), были встроены или делетированы;
(ii) аминокислотные остатки 27-32 представляют собой DRGSQS, DRGSAS или DRGSSS;
(iii) последовательность аминокислотных остатков 33-49 (a) по меньшей мере на 90% идентична последовательности аминокислотных остатков 33-49 SEQ ID No: 4 или (b) имеет один, два или три аминокислотных остатка, которые, по сравнению с последовательностью (a), были встроены или делетированы;
(iv) аминокислотные остатки 50-54 представляют собой IYSNG;
(v) последовательность аминокислотных остатков 55-89 по меньшей мере на 90% идентична последовательности аминокислотных остатков 55-89 SEQ ID No: 4 или имеет одну, два или три инсерции, делеции или замены;
(vi) аминокислотные остатки 90-93 представляют собой AVRG; и
(vii) последовательность аминокислотных остатков 94-111 по меньшей мере на 90% идентична последовательности аминокислотных остатков 94-111 SEQ ID No: 4 или имеет одну, два или три инсерции, делеции или замены.
11. TCR по любому из предшествующих пунктов, где вариабельный домен бета-цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID No: 8 или 14; или
аминокислотную последовательность, в которой аминокислотные остатки 1-26, 32-48, 54-90 и 96-111 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 1-26, 32-48, 54-90 и 96-111 SEQ ID No: 8 или 14, соответственно, и в которой аминокислотные остатки 27-31, 49-53 и 91-95 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 27-31, 49-53 и 91-95 SEQ ID No: 8 или 14, соответственно.
12. TCR по любому из пп. 1-10, где вариабельный домен бета-цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID No: 9 или 15, или
аминокислотную последовательность, в которой аминокислотные остатки 1-26, 32-48, 54-90 и 96-111 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 1-26, 32-48, 54-90 и 96-111 SEQ ID No: 9 или 15, соответственно, и в которой аминокислотные остатки 27-31, 49-53 и 91-95 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 27-31, 49-53 и 91-95 SEQ ID No: 9 или 15, соответственно.
13. TCR по любому из пп. 1-10, где вариабельный домен бета-цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID No: 10 или 16, или
аминокислотную последовательность, в которой аминокислотные остатки 1-26, 32-48, 54-90 и 96-111 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 1-26, 32-48, 54-90 и 96-111 SEQ ID No: 10 или 16, соответственно, и в которой аминокислотные остатки 27-31, 49-53 и 91-95 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 27-31, 49-53 и 91-95 SEQ ID No: 10 или 16, соответственно.
14. TCR по любому из пп. 1-10, где вариабельный домен бета-цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID No: 11 или 17, или
аминокислотную последовательность, в которой аминокислотные остатки 1-26, 32-48, 54-90 и 96-111 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 1-26, 32-48, 54-90 и 96-111 SEQ ID No: 11 или 17, соответственно, и в которой аминокислотные остатки 27-31, 49-53 и 91-95 по меньшей мере на 90% или 95% идентичны аминокислотным остаткам 27-31, 49-53 и 91-95 SEQ ID No: 11 или 17, соответственно.
15. TCR по любому из предшествующих пунктов, где в вариабельном домене бета-цепи:
(i) последовательность аминокислотных остатков 1-26 (a) по меньшей мере на 90% идентична последовательности аминокислотных остатков 1-26 SEQ ID No: 5 или (b) имеет один, два или три аминокислотных остатка, которые, по сравнению с последовательностью (a), были встроены или делетированы;
(ii) аминокислотные остатки 27-31 представляют собой MNHEY или MNHDY;
(iii) последовательность аминокислотных остатков 32-48 (a) по меньшей мере на 90% идентична последовательности аминокислотных остатков 32-48 SEQ ID No: 5 или (b) имеет один, два или три аминокислотных остатка, которые, по сравнению с последовательностью (a), были встроены или делетированы;
(iv) аминокислотные остатки 49-53 представляют собой SVGEG, SVSEG, SVAEG или SVFEG;
(v) последовательность аминокислотных остатков 54-90 (а) по меньшей мере на 90% идентична последовательности аминокислотных остатков 54-90 SEQ ID No: 5 или (b) имеет один, два или три аминокислотных остатка, которые, по сравнению с последовательностью (a), были встроены или делетированы;
(vi) аминокислотные остатки 91-95 представляют собой CASSF; и
(vii) последовательность аминокислотных остатков 96-111 по меньшей мере на 90% идентична последовательности аминокислотных остатков 96-111 SEQ ID No: 5 или имеет одну, два или три инсерции, делеции или замены.
16. Нуклеиновая кислота, кодирующая TCR по любому из предшествующих пунктов.
17. Выделенная или неприродная клетка, а в частности, Т-клетка, презентирующая TCR по любому из пп. 1-15.
18. Клетка, содержащая:
(а) TCR-экспрессирующий вектор, который содержит нуклеиновую кислоту по п. 16, кодирующую, в одной открытой рамке считывания или в двух различных открытых рамках считывания, альфа-цепь и бета-цепь, соответственно; или
(b) первый экспрессионный вектор, включающий нуклеиновую кислоту, кодирующую альфа-цепь TCR по любому из пп. 1-15, и второй экспрессионный вектор, включающий нуклеиновую кислоту, кодирующую бета-цепь TCR по любому из пп. 1-15.
19. Фармацевтическая композиция, содержащая TCR по любому из пп. 1-15, нуклеиновую кислоту по п.16 или клетку по п. 17 или 18, в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями или наполнителями.
20. TCR по любому из пп. 1-15, нуклеиновая кислота по п.16 или клетка по п. 17 или 18, для применения в медицине.
21. TCR, НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА ИЛИ КЛЕТКА ПО П. 20, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В СПОСОБЕ ЛЕЧЕНИЯ РАКА.