Сравнительное изучение показателей лизосомальных катионных белков у больных с мочекаменной болезнью

УДК: 616.62-003.7:576.311.344

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ЛИЗОСОМАЛЬНЫХ КАТИОННЫХ БЕЛКОВ У БОЛЬНЫХ С МОЧЕКАМЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ

Д.Э.БОЛТАЕВ, А.С.МАДАМИНОВ

A comporative study of indicators of lysosomal cationic proteins in patients with urolithiasis

D.E.BOLTAEV, A.S.MADAMINOV

Хорезмский филиал РНЦЭМП_

Изучено лейкоцитарно-клеточное звено неспецифической резистентности организма у больных с мочекаменной болезнью (МКБ), сочетанной с хроническим пиелонефритом. Установлено, что у здоровых людей -жителей Южного Приаралья — средний цитохимический коэффициент лизосомальных катионных белков (СЦК ЛКБ) и миелопероксидазы (СЦК МПО) были достоверно снижены по сравнению аналогичными показателями популяции, проживающей в других регионах, что свидетельствовало об ослаблении неспецифической резистентности организма. У больных с МКБ показатели СЦК ЛКБ и СЦК МПО были достоверно ниже, чем у здоровых лиц того же региона. Достоверные различия имели также показатели функциональной активности нейтрофилов.

Ключевые слова: мочекаменная болезнь, неспецифическая резистентность, лизосомальные катионные белки, миелопероксидаза, функциональная активность нейтрофилов.

The leukocyte-cellular link of nonspecific resistance of an organism at patients with an urolithiasis, associated with a chronic pyelonephritis is studied. It is established, that at healthy people — Southern Aral inhabitants — average cytochemical factor lizosomal cationic fibers and myeloperoxidase have been authentically lowered in comparison by similar indicators of the population living in other regions that testified to weakening of nonspecific resistance of an organism. At patients with urolithiasis indicators cytochemical factor lizosomal cationic fibers and myeloperoxidase were authentically more low, than at healthy faces of the same region. Authentic differences had also indicators of functional activity of neutrophils.

Key words: urolithiasis, nonspecific resistance, lizosomal cationic fibers, myeloperoxidase, functional activity of neu-trophils.

Неспецифическая резистентность организма является частью иммунной системы человека, основу которой составляет фагоцитарная активность нейтрофилов [3,8,10]. В нейтрофилах существуут два бактерицидных механизма — кислород зависимый и кислород независимый. Первый связан с функционированием миелопероксидазной системы; второй полностью определяется потенциалом антимикробных катионных белков. Его действие на микроорганизмы и роль, которую он играет в осуществлении функции нейтрофилов, являются более эффективными [4,7].

Снижение неспецифической резистентности приводит к развитию различных воспалительных заболеваний. Установлено, что ослабление неспецифической резистентности способствует длительному поддержанию очага воспаления в мочеполовой системе и хро-низации воспалительного процесса в различных органах [2,5,9]. Воспалительный процесс, который развивается в почках, увеличивает риск развития мочекаменной болезни (МКБ), являясь своего рода активатором конкрементогенеза [1].

Цель работы — изучение состояния неспецифической резистентности организма и ее лейкоцитарно -клеточного звена у больных с МКБ, сочетающейся с хроническим пиелонефритом, проживающих в условиях экологического неблагополучия.

Материал и методы

Исследование факторов неспецифической резистентности проводилось в отделении урологии Хорезмского филиала РНЦЭМП в 2003-2008 гг. Обследованы 85 больных с мочекаменной болезнью и 42 практически здоровых человека, проживающих в ре-

гионе Южного Приаралья. Мужчин было 77, женщин — 50. Возраст обследованных варьировал от 19 до 76 лет.

Все обследованные больные были разделены на 2 группы: 1-я группа — 53 больных с МКБ, осложненной хроническим пиелонефритом, 2-я группа — 32 больных, у которых МКБ развивалась на фоне хронического пиелонефрита.

Исследование факторов неспецифической резистентности организма включало изучение состояния ее лейкоцитарно-клеточного звена (ЛКЗ). Определяли средний цитохимический коэффициент лизосомальных катионных белков (СЦК ЛКБ) нейтрофилов крови, активность миелопероксидазы (МПО), функциональную активность нейтрофилов: низкоактивных (1-й класс), среднеактивных (2-й класс) и высокоактивных клеток (3-й класс).

Для определения СЦК ЛКБ использовали лизосо-мальный катионный тест В.Е. Пигаревского [6]. Метод цитохимического выявления ЛКБ основан на их способности избирательно взаимодействовать с диа-хромными анионными красителями (прочный зеленый) при рН 8,1-8,2, образуя анионные связи. ЛКБ определяли методом полуколичественной оценки внутриклеточного содержания катионных белков в виде СЦК по формуле Астальди-Верга.

Отсутствие окраски принимается за 0 степень; наличие единичных окрашенных гранул или слабое диффузное окрашивание цитоплазмы указывает на I степень реакции (0,5); половина цитоплазмы заполнена слабо-окрашенными гранулами, а другая окрашена или содержит бледно-зеленые гранулы — II степень

Сравнительное изучение показателей лизосомальных катионных белков у больных с мочекаменной болезнью

(1,0); цитоплазма равномерно заполнена светло-зелеными гранулами, встречаются отдельные темно-зеленые гранулы — III степень (1,5); цитоплазма содержит 1/3 темно-зеленых и 2/3 светло-зеленых гранул — IV степень (2); более 2/3 гранул окрашено в темно-зеленый цвет — V степень (3).

Кроме того, клетки с интенсивностью окрашивания 0-0,5 считали низкооактивными (1-й класс), 1,0-1,5 — среднеактивными (2-й класс), 2-3 — высокоактивными (3-й класс) [4].

Для определения активности МПО использовали 0 -дианизидин (3,3-диметоксибензидин) по В.Е.Пига-ревскому [6]. Миелопероксидазные гранулы окрашивались в ярко-красный цвет. Средний цитохимический коэффициент МПО также подсчитывали по формуле Астальди-Верга.

Наличие в цитоплазме единичных бледно-коричневых гранул — 0 баллов; все гранулы бледно-коричневого цвета и имеются отдельные темно-коричневые гранулы — 1 балл; половину клетки занимают темные гранулы — 2 балла; окрашенные гранулы занимают 2/3 клетки — 3 балла.

При статистической обработке полученных данных для определения различия между показателями здоровых людей и больных использовали t-критерий Стьюдента.

Результаты и обсуждение

У здоровых лиц - жителей Южного Приаралья СЦК ЛКБ и СЦК МПО были равны 1,44±0,013 и 2,62±0,014 ед., что достоверно ниже (р<0,01), чем у здоровых людей, проживающих в других регионах, что свидетельствовало об ослаблении неспецифической резистентности организма.

У больных с МКБ обеих групп СЦК ЛКБ был достоверно ниже, чем у здоровых людей — соответственно 1,37±0,014 и 1,35±0,010 против 1,44±0,013 ед. (р<0,01). Это указывает на более глубокое снижение ЛКЗ неспецифической резистентности у больных, что, по-видимому, свидетельствует о возникновении и развитии воспалительного процесса в чашечно-лоханочной системе почек.

Значение МПО для защиты макроорганизма обусловлено не только высоким содержанием его в ней-трофилах, но и высокой неспецифической активностью в реакциях с различными биологическими соединениями. В ходе окислительного взрыва реакционные интермедиаторы кислорода не только выделяются в область фаголизосомы нейтрофилов, но и попадают в ближайшее микроокружение, где способны вызывать необратимое повреждение тканей, клеток и макромолекул. Участвуя в окислительных процессах, МПО отщепляет от Н2О2 образовавшейся в процессе жизнедеятельности клеток атомарный кислород. Он является сильным окислителем и используется клеткой в окислительно-восстановительных процессах. Кроме того, МПО, содержащийся в азурофильных гранулах нейтрофилов, катализирует реакцию между ионом галогена (обычно хлора) и Н202, что приводит к образованию гипохлоридного аниона ОСГ. Гипохлорид оказывает выраженное бактерицидное влияние [4, 8].

При исследовании МПО мы получены несколько иные результаты, чем при изучении ЛКБ. СЦК МПО у больных с МКБ обеих групп был достоверно ниже,

чем у здоровых лиц — 2,59±0,014 и 2,56±0,014 ед. против 2,62±0,014 ед. (р<0,01), что также свидетельствует о достоверном снижении у больных неспецифической резистентности. Однако между группами больных с МКБ особых различий не установлено (р>0,05). Следовательно, и по СЦК МПО можно было видеть значительное снижение неспецифической резистентности организма у больных обеих групп, что также создавало, по-видимому, определенные условия для возникновения и развития воспалительных процессов как активатора образования камней в почках.

Результаты исследования функциональной активности нейтрофилов у больных с МКБ представлены в таблице 1.

Таблица 1. Функциональная активность (классы клеток) нейтрофилов по ЛКБ и МПО у здоровых и больных с мочекаменной болезнью, %

Группа Класс клеток нейтрофилов I II III

Здоровые 3,7±0,3 28,5±1,1 67,8±1,1

1-я 5,1±0,6* 30,9±1,1* 64,0±1,3*

2-я 4,6±0,5* 32,5±1,4* 62,9±1,5*

* — достоверно по сравнению со здоровыми.

Как видно из таблицы, у больных с МКБ наблюдалось увеличение количества среднеактивных клеток II класса (р<0,05) при достоверном снижении содержания высокоактивных клеток III класса (р<0,05) и фактически неизмененном количестве низкоактивных нейтрофилов I класса (р>0,05). Следовательно, у больных 1-й группы заболевание развивалась при функционировании в организме слабых и дефектных нейтрофилов, что, возможно, явилось причиной осложнения мочекаменной болезни пиелонефритом с последующей хронизацией воспалительного процесса в чашеч-но-лоханочной системе почек.

Полученные результаты позволяют сделать вывод, что развитие МКБ и ее осложнений в виде хронического пиелонефрита у больных 1-й группы обусловлено подавлением неспецифической резистентности и функционированием при этом слабых и дефектных нейтрофилов (I класс) в организме. При хронизации воспалительного процесса утрачивается их способность к уничтожению из организма различних внеш-ных факторов.

Следующим этапом исследований было определение СЦК ЛКБ и СЦК МПО у здоровых людей и больных с МКБ, осложненной хроническим пиелонефритом (1-я гр.) до и после оперативного удаления камней из почки (табл. 2).

Изучена также функциональная активность нейтрофилов по ЛКБ у здоровых людей и больных с МКБ,

Таблица 2. СЦК ЛКБ и СЦК МПО у здоровых и больных 1-й группы до и после оперативного удаления камней, ед.

Показа- Больные МКБ

Здоровые

после

тель до операции

операции

СЦК ЛКБ 1,44±0,013 1,37±0,014 1,39±0,020

СЦК МПО 2,62±0,014 2,59±0,014 2,63±0,018

30

Вестник экстренной медицины, 2011, № 2

www.sta.uz

Д.Э.Болтаев, А.С.Мадаминов

осложненной хроническим пиелонефритом (1-я гр.), до и после оперативного удаления камней (рис.).

100 г -

80 tЩ 1

60

40  >v

20 0 J- В::: i ft^Ji mJ

I класс

II класс

III класс

I здоровые 0 до операции Н после операции

Рис. Функциональная активность нейтрофилов по ЛКБ у здоровых и больных 1-й группы до и после удаления камней, %.

У больных количество клеток II класса было больше, чем у здоровых людей, а клеток III класса - меньше (р<0,02). Преобладание низкоактивных клеток I класса, особенно на фоне уменьшения числа высокоактивных клеток III класса, может свидетельствовать о подавлении функциональной активности нейтрофилов у больных 1-й группы. Оперативное удаление конкрементов явилось своего рода фактором, способствующим повышению неспецифической резистентности, о чем может говорить увеличение количества клеток III класса.

Исследование функциональной активности нейтрофилов по МПО у больных 1-й группы до и после оперативного удаления камней показало, что до операции количество клеток I и II классов было увеличено (табл. 3). После оперативного удаления камней из мочевого тракта наблюдалось тенденция к повышению уровня высокоактивных клеток III класса, что может свидетельствовать о повышении неспецифической резистентности организма.

Таблица 3. Функциональная активность нейтрофилов по МПО у здоровых и больных 1-й группы, до и после удаления камней, %.

Класс Здоро- Больные МКБ

клеток вые до операции после операции

I 3,7±0,3 4,6±0,52 4,8±0,58

II 28,5±1,1 32,5±1,43 25,0±1,71

III 67,8±1,1 62,9±1,46 70,2±1,64

Выводы:

1. Установлено, что у здоровых людей, проживающих в экологически неблагоприятных условиях, СЦК ЛКБ и СЦК МПО были достоверно ниже, чем у здоровых людей, проживающих в других регионах (р<0,01).

2. У больных с МКБ обеих групп показатели СЦК ЛКБ и СЦК МПО были достоверно ниже, чем у здоровых (р<0,01).

3. У больных с МКБ увеличилось количество сред-неактивных клеток II класса, снижалось содержание

высокоактивных клеток III класса, сохранялось количество низкоактивных клеток I класса.

Литература

1. Аль-Шукри С.Х., Ткачук В.Н., Дубинский В.Я. Дистанционная ударно-волновая литотрипсия при различных клинических формах нефролитиаза. СПб 1997; 190.

2. Арустамов Д.Л., Юлдашев Ф.Ю., Клёпов Ю.Ю. Распространенность мочекаменной болезни в Узбекистане по данным эпидемиологических исследований. Мед журн Узбекистана 1997; 3: 26-29.

3. Галанкин В.Н., Спрыгин В.П. Невоспалительная форма антибактериального реагирования нейтрофиль-ных лейкоцитов. Арх пат 1997; 59 (4): 8-13.

4. Маянская Н.Н., Симонова Т.П., Шургая А.М. Применение лизосомального катионного теста при оценке тяжести состояния у больных ИБС. Вопр мед химии 1994; 3: 28-30.

5. Нуруллаев Р.Б. Эпидемиологические аспекты, лечение и профилактика наиболее значимых урологических заболеваний. Дис....д-ра мед. наук. Ташкент 2004; 246.

6. Пигаревский В.Е., Мазинг Ю.А. К методике применения лизосомального катионного теста в лабораторной диагностической практике. Лаб дело 1981; 10: 579-582.

7. Шкапова Е.А., Курсатова Л.М., Савченко А.А. и др. Сравнительный анализ функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов крови больных почечно-клеточным раком до и после оперативного лечения. Клин лаб диагностика 2004; 1: 39-43.

8. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Современные представления о защите организма от инфекции. Иммунология 2000; 1: 61-64.

9. Jchida-Okawara A., Ito-Ihara T., Muso E. et al. Neutrophil contribution to the erescentio glomerulonephritis in SCC/KI. Nephol Dial Tronsplant 2004; 19 (7): 1708-1715.

10.Jaune D. The clinical features and pathology of vasculitis associated with antimyeloperoxidase autoantibodies. Jpn J Infect Dis 2002; 57 (5): 16-17.

СИЙДИК ТОШ КАСАЛЛИГИ БУЛГАН БЕМОРЛАРДА ЛИЗОСОМАЛ КАТИОН ОКСИЛЛАР КУРСАТКИЧЛАРИНИ СОЛИШТИРМА УРГАНИШ

Д.Э.Болтаев, А.С.Мадаминов РШТЁИМ Хоразм филиали

Маколада сурункали пиелонефрит билан асорат-ланган сийдик тош касаллиги (СТК) булган беморлар-да организмнинг носпецифик химоя омилларининг лейкоцитар-хужайравий бугини урганилган. Куйи Оролбуйи худудида яшовчи соглом одамларда лизосо-мал катион оксилларнинг (ЛКО) ва миелопероксидаза-нинг (МПО) уртача цитокимёвий коэффициенти (УЦК) бошка худудда яшовчиларга нисбатан ишонарли паст эканлиги аникланди. СТК булган беморларда ЛКО УЦК ва МПО УЦК курсаткичлари соглом инсонлардагиларга нисбатан ишонарли паст булди. Нейтрофиллар фагоцитар фаоллиги курсаткичларининг хам ишонарли фарк килиши кузатилди.

Контакт: Болтаев Давлатёр Эгамбердиевич. 140000, Ургенч, ул. К.Атаниязова, 1. Тел.: 8362-227-35-96.