Способ лечения травматических разрывов печени с использованием пленочного покрытия на основе бактериальной целлюлозы
METHOD OF TREATING TRAUMATIC LIVER FRACTURES USING A FILM COATING BASED ON BACTERIAL CELLULOSE

Изобретение относится к способу лечения травматических разрывов печени с использованием пленки бактериальной целлюлозы, содержащей в качестве активного вещества ресвератрол, и может быть использовано в медицине для восстановления поврежденного органа.
По данным статистических исследований, механическое повреждение печени составляет 3-4 % всех травм, а среди повреждений органов живота занимает второе-третье место. Причинами повреждений печени является автодорожная травма, падение с высоты и бытовая травма. Основным методом лечения механических повреждений печени является экстренная операция, которая включает первичную обработку раны печени, остановку кровотечения, ушивание раны и дренирование поддиафрагмального и подпеченочного пространства. Применяются гемостатические швы и тампонада сальником на ножке.
Известны композиции позволяющие ускорять заживление ран и регенерации тканей (RU 2582394, МПК A61K 38/17, A61K 47/48, A61P 17/02, опубл. 27.04.2016), состоящие из полипептидов, нуклеиновых кислот и подходящего носителя. Существующие композиции предназначены для использования главным образом для лечения поверхностных ран. Так, известно  биополимерное волокно, состав формовочного раствора для его получения, способ приготовления формовочного раствора, полотно биомедицинского назначения, способ его модификации, биологическая повязка и способ лечения ран (RU 2468129, МПК D01F 4/00, A61L 15/22, A61L 15/28, опубл. 27.11.2012), губка гемостатическая и способ ее получения. Недостатками данных решений является возможность отторжения материалов вследствие не утраченной антигенности, особенно при использовании биоматериалов животного происхождения (RU 2562569, МПК A61L 15/22, A61L 15/42, A61L 15/58 и др., опубл. 10.09.2015).
Известен гель на основе целлюлозы микробного происхождения, в котором поверхность целлюлозы модифицируется с помощью белков животного происхождения (US 5558861, МПК A01N 63/00, A61F 13/00, A61F 2/10, опубл. 24.09.1996).
Наиболее близким решением, взятым в качестве прототипа, является биологически активное раневое покрытие, заключающееся в комплексном использовании для заживления ран разной площади и объема гидратированной микробной целлюлозы с наслоенным на нее коллагеновым гелем, причем в слоях или на их границе присутствует, по крайней мере, один источник ростовых факторов, в качестве которых применяют клетки мезодермального и/или эктодермального типа и/или тромбоциты крови (RU 2430743, МПК А61L 15/28, A61F 13/02, A61L 15/44, опубл. 10.10.2011).
Недостатками известных решений является возможность их применения лишь для лечения поверхностных ран.
Технический результат заявленного изобретения заключается возможности лечения травматических разрывов печени с использованием пленочного покрытия на основе бактериальной целлюлозы, являющегося биологически совместимым с тканями организма человека и обладающего способностью к регенерации поврежденной ткани.
Сущность изобретения заключается в том, что в способе лечения травматических разрывов печени с использованием пленочного покрытия на основе бактериальной целлюлозы получают бактериальную целлюлозу культивированием штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans Н-110 в статических условиях культивирования в течение 3-5 сут при температуре 28 °C, с последующей ее очисткой, введением в нее активного вещества раствора ресвератрола с концентрацией 15 мкг/мл на 5 ч. Используют полученный материал в качестве раневого пленочного покрытия.
Способ лечения травматических разрывов печени с использованием пленочного покрытия на основе бактериальной целлюлозы осуществляют следующим образом.
Осуществляют получение бактериальной целлюлозы культивированием штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans Н-110 на жидкой среде в статических условиях культивирования в течение 3-5 сут при температуре 28 °C. Способ получения бактериальной целлюлозы описан в изобретениях заявителя (RU 2536973, МПК C12N 1/20, опубл. 27.12.2014, RU 2536257, МПК C12N 1/20, опубл. 20.12.2014). Полученную гель-пленку бактериальной целлюлозы обрабатывают в два этапа 0,1 н. раствором NaOH при температуре 80 °C в течение 60 мин для удаления клеток и компонентов культуральной среды и 0,5 %-ным водным раствором уксусной кислоты при температуре 80 °C в течение 60 мин с тщательной отмывкой дистиллированной водой после каждого этапа. Полученную очищенную гель-пленку бактериальной целлюлозы помещают в раствор ресвератрола с концентрацией 15 мкг/мл на 5 ч для получения раневого пленочного покрытия.
Полученное раневое пленочное покрытие использовалось для лечения моделированного разрыва печени с использованием системы лабораторных мышей в соответствии с требованиями Хельсинкской декларации о гуманном отношении к животным (2000), «Рекомендациями комитета по этике, проводящего экспертизу биомедицинских исследований» (ВОЗ, 2000), «Правилами проведения научных исследований с использованием экспериментальных животных» (распоряжение Президиума АН СССР от 02.04.1980 г.).
Полученное раневое пленочное покрытие апробировано для лечения травматических печеночных разрывов с использованием модельной системы лабораторных мышей. Животные были разделены на 4 группы – интактные животные (контрольная группа); животные, у которых моделировалась травма печени без применения пленочных покрытий; животные с моделированной травмой печени, у которых в лечении применялись пленочные покрытия на основе бактериальной целлюлозы; животные с моделированной травмой печени, у которых в лечении применялись пленочные покрытия на основе бактериальной целлюлозы с адсорбированным на ней ресвератролом. Для оценки эффективности применения созданного раневого покрытия контролировали уровни активности аспартатаминотранферазы, аланинаминотрансферазы, а также содержание билирубина. Наблюдение за изменениями содержания маркеров показало, что использование раневого пленочного покрытия на основе бактериальной целлюлозы и ресвератрола приводило к снижению активности аспартатаминотранферазы, аланинаминотрансферазы, а также содержание билирубина на 15-е сут с 1,4 мкмоль г/л до 0,3 мкмоль г/л, с 2,8 мкмоль г/л до 1 мкмоль г/л и с 46 мкмоль/л до 20 мкмоль/л, соответственно.
Пример 1. Моделирование разрыва печени приводило к увеличению маркеров повреждения печени. Активность аспартатаминотранферазы, аланинаминотрансферазы, и содержание билирубина на 15-е сут выросло с 0,1 мкмоль г/л до 1,4 мкмоль г/л, с 0,3 мкмоль г/л до 2,8 мкмоль г/л и с 5 мкмоль/л до 46 мкмоль/л. Использование в качестве раневого пленочного покрытия очищенной бактериальной целлюлозы приводило к снижению уровня маркеров повреждения печени. Активность аспартатаминотранферазы, аланинаминотрансферазы, и содержание билирубина на 15-е сут снизилось с 1,4 мкмоль г/л до 1,0 мкмоль г/л, с 2,8 мкмоль г/л до 2,0 мкмоль г/л и с 46 мкмоль/л до 40 мкмоль/л, соответственно.
Пример 2. Использование в качестве раневого пленочного покрытия очищенной бактериальной целлюлозы, содержащей ресвератрол приводило к снижению уровня маркеров повреждения печени. Активность аспартатаминотранферазы, аланинаминотрансферазы, и содержание билирубина на 15-е сут снизилось с 1,4 мкмоль г/л до 0,3 мкмоль г/л, с 2,8 мкмоль г/л до 1,0 мкмоль г/л и с 46 мкмоль/л до 20 мкмоль/л, соответственно.
По сравнению с известным решением заявленное позволяет осуществлять лечение травматических разрывов печени с использованием пленочного покрытия на основе бактериальной целлюлозы, являющегося биологически совместимым с тканями организма человека и обладающего способностью к регенерации поврежденной ткани. Изобретение обеспечивает расширение ассортимента препаратов обеспечивающих быстрое восстановление поврежденного органа.