КОМПОЗИЦИИ, СПОСОБНЫЕ СИНЕРГИЧНО ВЫЗЫВАТЬ ПОСТТРАНСКРИПЦИОННЫЙ САЙЛЕНСИНГ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Композиция, включающая один или несколько контейнеров, которые включают:
(i) первый компонент, представляющий собой по меньшей мере одну мяРНК U1 или полинуклеотид, кодирующий мяРНК U1, в которой модифицирована последовательность, связывающаяся с консенсусной последовательностью GU 5'-конца интрона, благодаря чему мяРНК U1 специфически связывается с заранее выбранной областью 3'-концевого экзона пре-мРНК-мишени и может ингибировать процессинг указанной пре-мРНК-мишени; и
(ii) второй компонент, представляющий собой по меньшей мере один агент, вызывающий сайленсинг экспрессии гена, который специфически воздействует на заранее выбранную область мРНК, образованную в результате процессинга пре-мРНК, которая является мишенью мяРНК U1, указанной в пункте (i), и может вызывать сайленсинг указанной мРНК-мишени in vivo, при этом агент, вызывающий сайленсинг, является shРНК, полинуклеотидом, кодирующим shРНК, или их комбинацией.
2. Композиция по п.1, где компонент (ii) является полинуклеотидом, включающим последовательность, кодирующую по меньшей мере одну shРНК.
3. Композиция по п.2, где компонент (i) включает несколько полинуклеотидов, кодирующих мяРНК U1, в которых модифицированы последовательности, связывающиеся с консенсусной последовательностью GU 5'-конца интрона, благодаря чему мяРНК U1 специфически связываются с разными заранее выбранными областями одной пре-мРНК-мишени, и/или компонент (ii) включает несколько агентов, вызывающих сайленсинг экспрессии гена, которые специфически воздействуют на разные заранее выбранные области мРНК, образованные в результате процессинга пре-мРНК, которая является мишенью мяРНК U1, указанной в пункте (i), и могут вызывать сайленсинг указанной мРНК-мишени in vivo.
4. Композиция по п.3, где второй компонент является полинуклеотидом, кодирующим агент, вызывающий сайленсинг гена, и указанный полинуклеотид и полинуклеотид, образующий первый компонент, являются частью единичного вектора.
5. Композиция по п.4, где указанный единичный вектор является вирусным вектором.
6. Композиция по п.5, где вирусный вектор выбран из группы, состоящей из аденовирусов, аденоассоциированных вирусов, ретровирусов, лентивирусов, вирусов герпеса, SV40 и альфавирусов.
7. Набор из нескольких частей, включающий
(i) первый компонент, представляющий собой по меньшей мере одну мяРНК U1 или полинуклеотид, кодирующий мяРНК U1, в которой модифицирована последовательность, связывающаяся с консенсусной последовательностью GU 5'-конца интрона, благодаря чему мяРНК U1 специфически связывается с заранее выбранной областью 3'-концевого экзона пре-мРНК-мишени и может ингибировать процессинг указанной пре-мРНК-мишени; и
(ii) второй компонент, представляющий собой по меньшей мере один агент, вызывающий сайленсинг экспрессии гена, который специфически воздействует на заранее выбранную область мРНК, образованную в результате процессинга пре-мРНК, которая является мишенью мяРНК U1, указанной в пункте (i), и может вызывать сайленсинг указанной мРНК-мишени in vivo, при этом агент, вызывающий сайленсинг, является shРНК, полинуклеотидом, кодирующим shРНК, или их комбинацией.
8. Набор из нескольких частей по п.7, где компонент (ii) является полинуклеотидом, включающим последовательность, кодирующую по меньшей мере одну shРНК.
9. Набор из нескольких частей по п.7 или 8, где компонент (i) включает несколько полинуклеотидов, кодирующих мяРНК U1, в которых модифицированы последовательности, связывающиеся с консенсусной последовательностью GU 5'-конца интрона, благодаря чему мяРНК U1 специфически связываются с разными заранее выбранными областями одной пре-мРНК-мишени, и/или компонент (ii) включает несколько агентов, вызывающих сайленсинг экспрессии гена, которые специфически воздействуют на разные заранее выбранные области мРНК, образованные в результате процессинга пре-мРНК, которая является мишенью мяРНК U1, указанной в пункте (i), и могут вызывать сайленсинг указанной мРНК-мишени in vivo.
10. Полинуклеотид, включающий:
(i) последовательность, кодирующую по меньшей мере одну мяРНК U1, в которой модифицирована последовательность, связывающаяся с консенсусной последовательностью GU 5'-конца интрона, благодаря чему мяРНК U1 специфически связывается с заранее выбранной областью 3'-концевого экзона пре-мРНК-мишени и может ингибировать процессинг пре-мРНК мишени; и
(ii) последовательность, кодирующую вызывающий сайленсинг агент, который специфически воздействует на заранее выбранную область мРНК, образованную в результате процессинга пре-мРНК, которая является мишенью мяРНК U1, кодированной полинуклеотидом, указанным в пункте (i), и может вызывать сайленсинг указанной мРНК-мишени in vivo, при этом последовательность, кодирующая агент, вызывающий сайленсинг, кодирует по меньшей мере одну shРНК.
11. Полинуклеотид по п.10, в котором последовательности (i) и (ii) функционально связаны с регулирующими экспрессию областями.
12. Полинуклеотид по п.11, в котором регулирующие экспрессию последовательности в последовательностях (i) и (ii) являются различными.
13. Экспрессирующий вектор, включающий полинуклеотид по любому из пп.10-12.
14. Вектор по п.13, в котором экспрессирующий вектор является вирусным вектором.
15. Вектор по п.14, в котором вирусный вектор выбран из группы, состоящей из аденовирусов, аденоассоциированных вирусов, ретровирусов, лентивирусов, вирусов герпеса, SV40 и альфавирусов.
16. Клетка, включающая вектор по пп.13-15.
17. Трансгенное животное, отличное от человека, которое содержит полинуклеотид по пп.10-12, встроенный в его геном.
18. Трансгенное животное, отличное от человека, которое содержит клетку по п.16.
19. Композиция по любому из пп.1-6 для применения в качестве лекарственного средства.
20. Полинуклеотид по любому из пп.10-12 для применения в качестве лекарственного средства.
21. Вектор по любому из пп.13-15 для применения в качестве лекарственного средства.
22. Клетка по п.16 для применения в качестве лекарственного средства.
23. Композиция по любому из пп.1-6 для применения при лечении или профилактики инфекционных, опухолевых, неопластических или нейродегенеративных заболеваний.
24. Полинуклеотид по любому из пп.10-12 для применения при лечении или профилактики инфекционных, опухолевых, неопластических или нейродегенеративных заболеваний.
25. Вектор по любому из пп.13-15 для применения при лечении или профилактики инфекционных, опухолевых, неопластических или нейродегенеративных заболеваний.
26. Клетка по п.16 для применения при лечении или профилактики инфекционных, опухолевых, неопластических или нейродегенеративных заболеваний.
27. Композиция по п.23, где инфекционное заболевание является инфекционным заболеванием, вызванным вирусом.
28. Фармацевтическая композиция, включающая композицию по любому из пп.1-6 и фармацевтически приемлемый носитель.
29. Нетерапевтический способ посттрансляционного ингибирования in vitro или in vivo экспрессии гена-мишени в биологической системе, который включает контактирование указанной системы с композицией по любому из пп.1-6, полинуклеотидом по любому из пп.10-12, вектором по любому из пп.13-15 или клеткой по п.16.