Снижение эмбриональной смертности у коров методом акупунктуры

7. Rabiee A.R., Lean I.J., Gooden J.M., Miller B.G. Relationships among metabolites influencing ovarian function in the dairy cow // J. Dairy Sci. - 1999. - Vol. 82. - P. 39-44

8. Herdt T.H. Ruminant adaptation to negative energy balance, influences on the etiology of ketosis and fatty liver// Vet. Clin. North Am. Food Anim. Pract. - 2000. - Vol. 16. - P. 215-230.

9. Галочкина В.П., Галочкин В.А. Физиолого-биохимическая характеристика метаболического типа жвачных животных // С.-х. биология. - 2010. - № 6. - С. 9-15.

10. Zulu V.C., Sawamukai Y., Nakada K. [et al.] Relationship among insulin-like growth factor-1, blood metabolites and postpartum ovarian function in dairy cow//. J. Vet. Med. Sci. - 2002. - Vol. 64. - P. 879-885.

AcTIVITY of METABouc ENZYMEs DuRING THE DRY PERioD iN THE BLooD of high-producing dairy cows with different reproductive potentials

V.B. Leybova, I.Yu. Lebedeva

summary. The reproductive capacity of high-yield dairy cows may depend on the metabolic intensity and trend during precalving period. In the present work, a comparative investigation of activities of some metabolic enzymes involving in protein and carbohydrate metabolism - aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), lactate dehydrogenase and alkaline phosphatase - in the blood of dry cows of the Black Pied breed with a fraction of the Holstein blood in relation to the subsequent reproductive parameters has been performed. It has been established that, in cows with length of the calving to conception interval less than 150 days, the level of the ALT activity during the preceding dry period was 1.3 times higher than in the animals with a longer calving to conception interval and 1.5 times higher than in the infertile animals. Concurrently, a negative correlation (r = -0.38) between the ALT activity and length of the following calving to conception interval has been found. Furthermore, one month before calving, 1.6-2.1-fold rise in the AST/ALT ratio in the blood of high-producing dairy cows with a reduced fertility compared to the animals with the normal reproductive capacity has been observed. No significant differences in activities of alkaline phosphatase and lactate dehydrogenase before calving of cows with different lengths of the following calving to conception interval have been revealed. The results of the present research indicate that the ALT activity and AST/ALT ratio characterize the metabolic state of dry cows, which affects their subsequent reproductive capacity. Therefore, these biochemical blood indexes during the dry period may be used as additional criteria for diagnostics of the reproductive potential of high-producing dairy cows.

Key words: high-producing dairy cows, aminotransferases, metabolism, reproductive capacity.

УДК636.2: 615.814

СНИЖЕНИЕ ЭМБРИОНАЛЬНОЙ СМЕРТНОСТИ У КОРОВ МЕТОДОМ АКУПУНКТУРЫ

Т.Е. ТАРАДАЙНИК, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник

Г.Н. СИНГИНА, кандидат биологических наук, зав. лабораторией

Н.А. ЗИНОВЬЕВА, член-корреспондентРоссельхо-закадемии, зам. директора

Н.П. ТАРАДАЙНИК, кандидат биологических наук, научный сотрудник

ВНИИ животноводства Россельхозакадемии А.В. ТИТОВ аспирант

Российская академия менеджмента в животноводстве

E-mail: almaatinka25@rambler.ru

Резюме. Представлены результаты эффективной профилактики эмбриональной смертности у коров посредством инъекции в биологически активную точку кондиционной среды, полученной при культивировании эмбрионов крупного рогатого скота in vitro, и биологически активных веществ (сурфагон, оварин) в микродозах. Цель исследований состояла в поиске методов профилактики эмбриональной смертности у крупного рогатого скота при искусственном осеменении.

Животные были разделены на 4 группы по 29 гол. в каждой: коровам I опытной группы не позднее 10-го дня после осеменения инъецировали 0,2 мл кондиционной среды, полученной при культивировании эмбрионов крупного рогатого скота in vitro, в биологически активную точку 30 (атлас Казеева Г.В., 2000); II опытной группы вводили в эту же точку 0,2 мл Гн-Рг (сурфагон); III опытной группы - гомеопатический препарат оварин. В контрольной группе инъекций не проводили. Эффективность использования препарата определяли методом ректальной пальпации через 2 мес. после осеменения. Количество стельных коров в I опытной группе составило 20 гол. (P>0,95), во II и III - по 18 гол., в контроле - 12гол. (69, 62, 62 и 41 % соответственно).

Инъекция среды, кондиционированной эмбрионами, в точку акупунктуры 30, достоверно повышает уровень стельности

осемененных коров, по сравнению с контролем, на 27,5 %. Использование аналогичным способом сурфагона и оварина в дозе 0,2 мл оказывает эмбриопротекторное действие. Ключевые слова: крупный рогатый скот, воспроизводство, эмбриональная смертность, Гн-Рг, акупунктура, биологически активные точки.

Эмбриональная смертность у крупного рогатого скота обусловлена рядом факторов и происходит, как правило, в период от оплодотворения до завершения дифференцирования систем органов [1, 2]. Около 80 % всех эмбриональных потерь происходит до 17 дня после оплодотворения, 10...15 % - между 17 и 42 днями и 5 %

- после 42 дня [3].

Один из методов профилактики эмбриональной смертности у крупного рогатого скота - введение аналогов гонадотропин-рилизинг-гормона (Гн-Рг) на 8.12 день после осеменения. Известно, что такие препараты, как сурфагон, фертагил и др., индуцируют высвобождение гипофизарных гонадотропинов, в частности лютеи-низирующего гормона, способствуя сохранению желтого тела яичника в активном прогестеронпродуцирующем состоянии достаточное время для стабилизации «эмбрионального сигнала» [4, 5]. Сурфагон, согласно инструкции, вводят внутримышечно в дозе 10.50 мкг/гол.

Кроме того, имеются сведения, доказывающие, что эмбрион способен корректировать несоответствие материнской среды, изменяя секрецию эндометриальных белков [6].

При оплодотворении in vitro для улучшения условий развития эмбрионов млекопитающих успешно используют кондиционные клеточные и эмбриональные среды [7, 8].

Экспериментально установлено, что эмбрионы крупного рогатого скота продуцируют интерфероны,

обладающие лютеотропным эффектом [9, 10]. На основании этого были предприняты попытки парентерального введения альфа-интерферона после искусственного осеменения [11] для коррекции функции желтого тела. Однако достижение положительного эффекта обеспечивают большие количества названных веществ.

B этой связи весьма интересны результаты экспериментов, свидетельствующие об эффективности воздействия на организм сверхмалых доз различных препаратов и биологически активных соединений [12]. Например, установлено, что вызывающую эффект дозу лекарственного вещества можно значительно снизить при введении в точки акупунктуры (ТА) или биологически активные точки (БАТ) [13, 14].

Однако имеющихся сведений не достаточно для обоснования новых подходов и методов снижения уровня эмбриональной смертности.

Цель наших исследований состояла в поиске наиболее эффективных методов профилактики эмбриональной смертности у крупного рогатого скота при искусственном осеменении.

Ранее мы экспериментально доказали эмбриотропный эффект кондиционных эмбриональных сред при инъецировании их в точки акупунктуры осемененных коров [15, 16].

Далее была поставлена задача изучить в сравнительном аспекте эмбриотропный эффект введения через биологически активные точки кондиционированных эмбрионами сред и биологически активных препаратов, обладающих лютеотропным действием, в частности аналога гонадотропин-рилизинг-гормона сурфагона и гомеопатического препарата оварин, в котором лютео-тропные факторы содержатся в микродозах.

Условия, материалы и методы. Кондиционированные среды получали посредством культивирования оплодотворенных ооцитов коров in vitro. Полученные на каждом этапе культивирования эмбрионов среды (Talp, CR1-3, CR1-5) замораживали и хранили при температуре -70 оС до использования. Подготовку и введение сред в точки акупунктуры проводили по методике, изложенной ранее [16].

В эксперименте было задействовано 116 осемененных коров черно-пестрой породы с продуктивностью 5,5...6,5 тыс. кг молока. Группы были подобраны по принципу аналогов, по 29 гол. в каждой. Животным I опытной группы в ТА №30 (атлас Казеева Г.В., 2000) вводили по 0,2 мл среды, конциционированной эмбрионами in vitro; особям II опытной группы в эту же точку

- 0,2 мл сурфагона; III опытной группы - 0,2 мл гомеопатического препарата оварин. Контролем служили интактные осемененные коровы. Оценку проводили по фактической стельности, определяемой через 2 месяца после осеменения методом ректальной пальпации.

Для статистического анализа изменчивости по качественным признакам и определения достоверности разности между выборочными долями или процентами использовали критерий Стьюдента [17].

Результаты и обсуждение. Введение кондиционной эмбриональной среды в ТА № 30 позволило повысить показатель стельности, по сравнению с его величиной в контрольной группе, на 27,5 % (см. табл.) При использовании аналога Гн-Рг сурфагона и гомеопатического препарата оварин в дозе 0,2 мл она выросла на 20,7 %.

Таблица. Влияние кондиционной эмбриональной среды, сурфагона и оварина через точки акупунктуры на стельность__________________________

Показатель Гоуппа

I II III IV

Число стельных коров, гол. Доля стельных коров, % 20 68,9±7,3* 18 62,1±9,0 18 62,1±9,0 12 41,4±9,0

*Р>0,95

Введение кондиционнированной эмбрионами среда в биологически активную точку №30 обеспечило повышение уровня стельности относительно сурфагона и оварина на 6,8 %. Поскольку препараты применяли после искусственного осеменения, можно предположить, что эмбриональная смертность в исследуемом стаде составляла более 24 %, что согласуется с данными других авторов [3, 9].

Механизм эмбриотропного эффекта кондиционированной эмбриональной среды, введенной в точки акупунктуры, на наш взгляд, можно объяснить с нескольких позиций. Во-первых, специфическим строением биологически активных точек и наличием в них клеток, продуцирующих при раздражении (активизации) биологически активные вещества; во-вторых, свойством факторов, вырабатываемых эмбрионами в среду культивирования, корректировать репродуктивную функцию через точки акупунктуры. Механизм этого воздействия нуждается в тщательном и всестороннем изучении. Кроме того, вполне очевидно повышение результативности искусственного осеменения путем введения значительно меньших доз уже известных и применяемых препаратов (сурфагон, оварин).

Выводы. Таким образом, среда, кондиционированная эмбрионами, введенная в точку акупунктуры № 30 в дозе 0,2 мл, повышает уровень стельности осемененных коров, по сравнению с контролем, на 27,5 %.

Использование анлогичным образом препаратов сурфагон и оварин в таких же дозах оказывает эмбри-опротекторное действие.

Применение этого метода в практике животноводства позволит значительно сократить расход препаратов при достаточно заметной эффективности и исключить возможность побочных явлений.

Полученные результаты представляют интерес для практического применения в плане нового подхода к решению проблем, связанных с воспроизводством стада, в частности - эмбриональной смертностью.

Литература.

1. Lamming, G.E., Darwash A.O. The use of milk progesterone profils to characterise components of subfertility in milked dairy cows. - Anim. Reprod Sci. - 1998, V 52. - P. 175-190.

2. Stevenson, J.S. Reproductive management of dairy cows in high milk-producing herds // J. Dairy Sci. - 2001. - 84. - Р. 128-143.

3. БахмутЛ.Н., ВагенлейтнерА.В., КононовГ.А., РимароваЛ.Д., СтолбовВ.М., Харитошин О.Л., ШалявинаЛ.М. Диагностика и профилактика эмбриональной смертности у коров // Сельскохозяйственная биология. - 1994. - № 4. - С.83-87.

4. Клинский, Ю.Д.. Чомаев А.М., Огулов А.О. Использование сурфагона для повышения оплодотворяемости коров //Животноводство. - 1987. - №1. - С. 47-48.

5. Tefera M., Chaffaux S., Thibier M., Humblot P. Lack of effect of post-AI hCG or GnRH treatment on embrionic mortality in dairy cattle // Livestock Production Science. - 2001. - Vol. 71. - № 2-3. - P. 277-281.

6. Ashworth C.J. and Bazer F.W. Changes in ovine conceptus and endometrial function following asynchronous embryo transfer or administration of progesterone. //Biol Reprod. - 1989. - 40. - Р. 425-433.

7. Vanroose G., Van Soon A. and de Kruif A. From co-culture to defined medium: state of the art and practical considerations // Reprod. in Domestic Animals. - 2004. - 36. - P.25-28.

8. Fujita T, Umeki H, Shimura H, Kugumiya K, Shiga K. 2006. Effect of group culture and embryo-culture conditioned medium on development of bovine embryos. //J Reprod. Dev. - 52(1) . - 137-42.

9. Hansen P. J. Embryonic mortality in cattle from the embryo's perspective// J. Anim. Sci. - 2002. - 80(2) . - Р.33-44.

10. Michael, D.D. Fibroblast Growth Factor-2 Is Expressed by the Bovine Uterus and Stimulates Interferon-{tau} Production in Bovine Trophectoderm - Endocrinology. - 2006. - 147. - № 7. - P. 3571-3579.

11. Barros C.M., Betts J.G., Thatcher W.W., Hansen PJ. Possible mechanisms forreduction of circulating concentration by interferon-a in cows: Effects on hyperthermia, luteal cells, metabolism of progesterone andsecretion of luteinizing hormone/J. Endocrinol. - 1992. - № 133. - P. 175-182.

12. Бурлакова Е.Б. Особенность действия сверхмалых доз биологически активных веществ и физических факторов низкой интенсивности - Российский химический журнал. - 1999. - Т. 43. - № 5. - С. 3-11.

13. Казеев Г.В. Ветеринарная акупунктура. - М., 2000. - 399 с.

14. Казеев Г.В, Казеева А.В, Ильина Г.В. Информационная терапия заболеваний животных по точкам акупунктуры.//Мате-риалыдевятого Московского Междунар. ветеринарного конгресса. - М., 2001. - С. 251-252.

15. Тарадайник Т.Е., Сингина Г.Н., Казеева А.В., ТарадайникН.П. Влияние факторов, продуцируемыхпредимплантацион-ными эмбрионами, на создание оптимальных условий для эмбрионального развития //Международный вестник ветеринарии, Тематический вестник: "Новые аспекты в биотехнологии репродукции животных" - 2008.- №3. - с.53.

16. ТарадайникТ.Е., Сингина Г.Н., Смирнова М.Л. Изучениеэмбриопротекторныхсвойств кондиционированной среды, полученной при культивировании in vitro эмбрионов крупного рогатого скота - Проблемы биологии продуктивных животных. - Боровск, С. 19-22

17. Петухов В.Л. и др. Ветеринарная генетика с основами вариационной статистики. - М., 1985. - С.150-153

decrease of embryonic mortality at the cows by acupuncture

T.E. Taradaynik, G.N. singina, N.A. Zinovieva, N.P. Taradaynik, A.V. Titov

summary. The results of effective preventive maintenance the embryonic mortality at the cows by means of injection in a biologically active point of conditioned medium obtained by cultivation of bovine embryos in vitro and biologically active substances in microdozes are submitted. The purpose of researches consist in search of the most effective methods of preventive maintenance embryonic mortality at the cows cattle after artificial insemination.

In the trial 116 cows were assign to 4 groups, the treatment 1 (n=29) was injection (not later than 10 d after artificial insemination) into biologically active point 30 (Kazeev G.V., 2000) by 0.2 ml of conditioned medium obtained by cultivation of bovine embryos in vitro after artificial insemination (AI), treatment 2 (n=29) of a GnRH injection (Surfagon, 0,2 ml) after AI into the same point; and treatment 3 (n=29) of a Ovarin injection (0,2 ml) after Ai into the same point; control group (n-29) was intact. The embryo protective effect was estimated at 2 mo after insemination by rectal palpation. The number of pregnant cows in 1, 2, 3 treated and control groups was 20 (P<0.05), 18, 18 and 12 (69%, 62%, 62% and 41%) respectively.

The received data show, that conditioned medium obtained by cultivation of bovine embryos in vitro, entered in acupoint 30, raises a level of pregnant c>f the cows on 27,5 %, in comparison with the control.

Surfagon and Ovarin in 0,2 ml render embryoprotective action at introduction in acupoint 30.

Key words: cattle, reproduction, ombryonic mortality, GnRH, acupuncture, biologically active points.

УДК 636.2.082.451

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФИТОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ У КОРОВ

Ю.А. ПРЫТКОВ, кандидат биологических наук М.В. ВАРЕНИКОВ, кандидат биологических наук, зав. отделом

ВНИИ животноводства Россельхозакадемии E-mail: prytkov_y@mail.ru

Резюме. Рассмотрена актуальность использования фитопрепаратов в рамках профилактических и лечебных мероприятий, проводимых в отечественном сельском хозяйстве, в качестве альтернативы традиционным способам лечения и профилактики (терапия антибиотиками, использование комплексных препаратов и др.). Большая часть растительных средств по своей химической природе близка организму животных. Они легко усваиваются и включаются в биохимические процессы. Обзор ряда публикаций по рассматриваемой тематике показал значительное влияние препаратов, полученных из растений, на скорость клинического выздоровления коров, страдающих различными формами гинекологических заболеваний. Так, использование фитопрепарата «Эра-h» с активированной щелочной водой и фуразолидоном уменьшают сервис-период у коров на 17 дн., фитопрепараты крапивы и пастушьей сумки активизируют сокращение мышечных структур рогов матки коров после отела, а также уменьшают сроки инволюции половых органов коров на 9,46 и 6,18 дн. соответственно. 80 % коров, которым вводили внутриматочно масляные вытяжки зверобоя обыкновенного клинически выздоровело на 4...6 день, плодотворное осеменение отмечено у 87,5 % животных, число дней бесплодия в среднем по группе фиксировали на уровне 50,6 ± 2,3, что превосходит аналогичные показатели в контроле. Исследователи использовали фитопрепараты в различных формах: в виде настоев, спиртовых настоек, отваров, масляных вытяжек. Применение препаратов растительного происхождения эффективно и оправдано, однако многие аспекты их клинического использования требуют дальнейшей

разработки, расширения спектра лекарственных растений, обоснования и внедрения в ветеринарную практику. Ключевые слова: фитопрепараты, препараты растительного происхождения, воспроизводительная функция, коровы, инволюция матки, эндометрит.

На сегодняшний день заболевания органов репродуктивной системы коров наносят значительный экономический вред и в ряде случаев ограничивают рост продуктивности и поголовья дойного стада [1]. В связи с этим существует необходимость использования профилактических средств с целью предупреждения заболеваний и нормализации воспроизводительной функции коров. Освоение эффективных приемов фармакопрофилактики клинических заболеваний, ранней диагностики их скрытых форм, а также эффективных и экономически безопасных методов лечения патологии репродуктивной функции даст возможность успешнее бороться с бесплодием коров и продлить сроки их продуктивного использования [2].

Наряду с уже известными и применяемыми лекарственными препаратами, необходимо изыскание новых, безвредных для организма и имеющих физиологическую направленность действия. В последнее годы ученые широко апробируют различные фитопрепараты [3]. Во многом это связано с требованиями [4], которые предъявляют к качеству молока, что ограничивает использование антибиотических и гормональных средств синтетического происхождения.