Прогностическое значение сывороточных белков острой фазы у собак с парвовирусным энтеритом

ОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯ

Прогностическое значение сывороточных белков острой фазы у собак с парвовирусным энтеритом

Цель: оценить образование белков острой фазы у собак с парвовирусным энтеритом как прогностический показатель клинического исхода.

Методы: диагноз парвовирусной инфекции ставили на основании соответствующей клинической картины и подтверждали определением антигена собачьего парвовируса; всего в исследовании участвовало 43 собаки в возрасте менее 6 месяцев. Перед лечением отбирали кровь для полного клинического анализа и определения белков острой фазы (С-реактивный белок, гаптоглобин (Нр), церулоплазмин и альбумин). Во время или после лечения 23 собаки умерли (невыживание), а остальные выздоровели (выживание). Пять здоровых собак использовали в качестве контроля.

Результаты: концентрации С-реактивного белка, церулоплазмина и гап-тоглобина у собак с парвовирусным энтеритом были выше (Р < 0,001, Р < 0,01 и Р < 0,001 соответственно), однако сывороточный альбумин был ниже, чем у контрольных животных (Р < 0,001). Среднее содержание С-реактивного белка и церулоплазмина у невыживших собак было выше (Р < 0,01), чем у выживших. Обнаружено, что С-реактивный белок превосходил церулоплазмин, гаптоглобин и альбумин в качестве показателя выживаемости у невыживших собак. Содержание С-реактивного белка выше 92,4 мг/л является прогностическим показателем гибели с чувствительностью 91 %.

Клиническая значимость: степень повышения концентрации сывороточных белков острой фазы у собак с парвовирусным энтеритом может быть удобным показателем при прогнозе заболевания. Среди белков острой фазы С-реактивный белок является значимым прогностическим показателем смертности у собак с парвовирусным энтеритом.

M. Kocaturk, S. Martinez*, O. Eralp, A. Tvarijonaviciute*, J. Ceron and Z. Yilmaz

Journal of Small Animal Practice (2010) 51, 478-483 DOI: 10.1111/j.1748-5827.2010.00965.x Accepted: 19 April 2010; Published online: 12 July 2010

Department of Internal Medicine, Faculty of Veterinary Medicine, Uludag University, 16059 Bursa, Turkey *Department of Animal Medicine and Surgery, Faculty of Veterinary Medicine, Murcia University, 30100 Murcia, Spain

ВВЕДЕНИЕ

Парвовирус собак 2 типа (СРУ-2) -хорошо известный возбудитель тяжелого геморрагического энтерита у собак во всем мире [5, 17, 23]. Существует несколько вариантов СР^2, дающих сходные клинические проявления, такие как угнетенное состояние, потеря аппетита, лихорадка, рвота и геморрагическая диарея со зловонным запахом [29-31]. Щенки младше 4 месяцев и собаки, не вакцинированные против парвови-русного энтерита, входят в группу повышенного риска заболевания. СР^2 передается при непосредственном контакте животных, а также через зараженные фекалии, среду или людей [12, 27].

После орального заражения вирус реплицируется в лимфоидной ткани глотки, а затем распространяется с кровью, заражая быстро делящиеся клетки и приводя к истощению популяции лимфоцитов в лимфатических узлах, а также некрозу и разрушению крипт кишечника. Повреждение слизистой оболочки кишечника сопровождается геморрагическим энтеритом и создает благоприятные условия для распространения кишечных бактерий в кровь и внутренние органы [12, 25, 26]. Высвобождение эндотоксина (липополисахарида) из грам-отрицательных бактерий, попадающих в периферический кровоток, ведет к общему воспалительному синдрому, сепсису и эндотоксемии [5, 6, 13, 19, 23, 25, 27].

В настоящее время белки острой фазы (БОФ) считаются одним из самых чувствительных маркеров воспаления. Их классифицируют в соответствии со степенью повышения (положительные БОФ, например гаптоглобин (Нр), С-реактивный белок (СРБ), а1-кислый гликопротеин и сывороточный амилоид А) или снижения (отрицательные БОФ, например альбумин и трансферрин) концентрации в течение нескольких часов после инфекции [7, 9, 18, 21]. Большинство исследований БОФ у собак сосредоточены на их применении для ранней диагностики воспалительного процесса и оценки отклика на лечение и его прекращение [4]. Однако было проведено также несколько исследований возможности применения БОФ в качестве прогностических показателей развития определенных болезней. Несмотря на лечение, многие собаки с парвовирусным энтеритом погибают от осложнений. Эффективный прогноз мог бы очень помочь при лечении этой болезни [6, 20, 30]. Хотя исследования БОФ у

собак с парвовирусом проводились [11, 28, 32], насколько нам известно, прогностическая ценность этих белков при данной болезни еще не изучалась. Таким образом, мы провели исследование для оценки возможности использования сывороточных БОФ (С-реактивного белка, Нр, церулоплазмина и альбумина) в качестве прогностических показателей у собак, больных парвовирозом. Кроме того, мы сравнили значение этих БОФ как прогностических показателей с другими показателями крови, например гематокритом, содержанием лейкоцитов и тромбоцитов, а также клиническими параметрами, например температурой.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

План исследования

В исследование были включены 43 собаки с симптомами парвовирус-ного энтерита, владельцы которых обратились в ветеринарную клинику университета Улудага, Бурса, Турция. Перед обращением в клинику владельцы не показывали собак частным ветеринарным врачам, и результат анализа на парвовирус (экспресс-тест для определения антигена пар-вовируса собак (Animal Genetics, Inc., Сувон, Корея) у всех из них был положительным. Использование контрольных животных было одобрено Университетской этической комиссией. Оценку общего состояния и вероятности наличия системного воспалительного синдрома проводили на основании результатов клинического осмотра (температура тела, частота сердечных сокращений и дыхания) и анализа крови (гематокрит, лейкоциты, тромбоциты). Собак также исследовали на наличие ооцист кокцидий в кале методом флотации в гиперосмолярном растворе сахара, а также исследовали окрашенные мазки периферической крови на кро-вепаразитов (Babesia, Ehrlichia или Hepatozoon); все результаты были отрицательными. Лямблиоз у всех собак исключили на основании отсутствия трофозоитов на предметном стекле с влажным препаратом фекалий при поступлении и на основании двух последовательных отрицатель-

ных результатов флотационного метода с сульфатом цинка в первые два дня нахождения в стационаре.

В соответствии с откликом на лечение собак с парвовирусным энтеритом далее подразделяли на две группы для анализа: выжившие (n = 20) и погибшие (n = 23).

В исследование были также включены пять контрольных собак на основании нормальных результатов клинического осмотра, общеклинического и биохимического анализов крови.

Отбор проб и лабораторные исследования

Венозную кровь для общего клинического анализа и определения БОФ брали при поступлении и перед каждой процедурой в вакуумные пробирки с ЭДТА или без (Becton Dickinson, Темсе, Бельгия); клинический анализ проводили на автоматическом гематологическом анализаторе (Cell Dyne 3500R, Abbott, Висбаден, Германия).

Образцы сыворотки исследовали на содержание БОФ (СРБ, Нр, це-рулоплазмин и альбумин), чтобы определить наличие воспалительной реакции. Концентрацию СРБ измеряли с помощью иммунотурбиди-метрического метода для людей (CRP OSR 6147 Olympus Life and Material Science Europe GmbH, Lis-meehan, O'Callaghan's Mills, Co., Клер, Ирландия), при этом корреляция с результатами определения с помощью специфического собачьего ИФА-метода (набор для определения парвовируса собак, Tridelta Development Ltd, Брей, Ирландия), прошедшего аттестацию для анализа проб от собак, была 98 % [14]. В качестве стандарта использовали обобщенную пробу собачьей сыворотки с высокой концентрацией СРБ, которую исследовали специфическим ИФА-методом для собак. Концентрацию Нр измеряли с помощью готового колориметрического набора (набор для определения гаптогло-бина Тридельта, Tridelta Development Ltd), прошедшего аттестацию для анализа образцов от собак [14]. Концентрацию церулоплазмина измеряли автоматическим р-фенилендиа-

миноксидазным методом, прошедшим аттестацию для анализа образцов от собак [3].

Концентрацию альбумина определяли с помощью готового реактива бромкрезолового зеленого (Альбумин OSR6102, Olympus Life and Material Science Europa, Гамбург, Германия). СРБ, Hp и альбумин в сыворотке измеряли с помощью автоматического биохимического анализатора (автоматический биохимический анализатор Olympus 2700, Olympus Europa GmbH, Гамбург, Германия).

Все биохимические методы, использовавшиеся в данном исследовании, имели коэффициенты вариации результатов одной и разных серий определений менее 10 %.

Стандартное лечение

Всех собак помещали в стационар по отдельности не менее чем на 7 дней; их содержали в обогреваемых клетках в изоляторе для животных, больных вирусными инфекциями. Для оценки обезвоживания каждого животного определяли время наполнения капилляров, периферический пульс и среднее артериальное давление неинвазивным методом (BM3-Vet, Bionet Co. Ltd, Сеул, Корея). Среднее артериальное давление менее 70 мм рт. ст. считали ги-потензией, как описано в нашем предыдущем исследовании [30].

В первый день поступления проводили инфузионную терапию лак-татным раствором Рингера на протяжении 6 часов (Eczacibas i-Baxter Ltd, Стамбул, Турция) с добавлением 5 % декстрозы и хлорида калия (Eczacibas i-Baxter Ltd, Стамбул, Турция) (20 мэкв/л). Путь и частота введения лекарств при первичной терапии варьировали у разных животных. Если парвовирусная инфекция сопровождалась гиповолемическим шоком, для восстановления кровообращения применяли быструю ин-фузию жидкости (до 90 мл/кг/ч). У собак с бледными или тусклыми слизистыми оболочками и медленным наполнением капилляров ин-фузию проводили в довольно быстром темпе (до 150 мл/кг/ч), пока слизистые оболочки не становились

розовыми, а время наполнения капилляров не сокращалось до 1-2 сек. Собакам с парвовирусной инфекцией, но без обезвоживания жидкостную инфузию проводили в течение 4 часов. Во время инфузионной терапии учитывали также потребность в поддерживающей инфузии (2-3 мл/кг/ч) и восполнении потерь жидкости при рвоте и диарее. Дальнейшую потребность в жидкости определяли на основании результатов клинического и лабораторного исследования (тургор кожи, скорость наполнения капилляров, периферический пульс, гематокрит, общий белок, мочевина и креати-нин в сыворотке). Если с помощью солевых растворов не удавалось устранить гиповолемию, вводили гидроксиэтилкрахмал (Eczac1bas1-Baxter Ltd, Стамбул, Турция) бо-люсно (10 мл/кг, в/в). Если инфузии (кристаллоидных или коллоидных растворов) оказывались неэффективными для восстановления кровообращения, применяли добутамин (Lilly, Стамбул, Турция), синтетический симпатомиметик в 5 % растворе декстрозы в дозе 1-10 мкг/кг/мин. в форме непрерывной инфузии. После нормализации времени наполнения капилляров, цвета слизистых оболочек, частоты сердечных сокращений и пульса на периферических артериях инфузию добутамина прекращали.

Антибиотикотерапия включала 22 мг/кг ампициллина (каждые 48 часов, в/в, до прекращения рвоты на 24 часа; Mustafa Nevzat, Стамбул, Турция, а затем 30 мг/кг каждые 12 часов орально в течение 10 дней), 4 мг/кг гентамицина (каждые 24 часа, в/в, 5 дней, у собак с лейкопенией введение начинали после восстановления нормальной гидратации во избежание возможных нефротоксических осложнений; Fako, Стамбул, Турция) и 25 мг/кг метронидазола (каждые 12 часов, внутрь, в течение 5 дней; I.E. Ulu-agay, Стамбул, Турция).

Метоклопрамид в концентрации 0,4 мг/кг (каждые 8-12 часов п/к; Yeni, Стамбул, Турция) вводили в качестве противорвотного средства до прекращения рвоты. Прото-

кол лечения парвовирусного энтерита собак был взят из работ Mac-intire and Smith-Carr (1997), Cohn and Langdon (2003) и Prittie (2004).

Статистический анализ

Влияние пола исследовали с помощью критерия хи-квадрат. Для результатов клинического осмотра вычисляли соотношение шансов и 95 % доверительный интервал. Различие клинических признаков, гематологических параметров и концентраций БОФ между выжившими и невыжившими животными анализировали с помощью t-кри-терия Стьюдента. Кроме того, критерий Стьюдента использовали для сравнения различий в сывороточной концентрации БОФ, а также возраста и массы тела между двумя группами, здоровыми контрольными животными и собаками с парвови-русным энтеритом. Строили график концентрации БОФ как вертикальную диаграмму со столбцами погрешности с помощью программы Sigma Plot 2000 для Windows, версия 6.10 (SPSS, Inc., Чикаго, Иллинойс, США). Концентрацию БОФ и избранных клинико-гематологи-ческих данных (температура, содержание лейкоцитов, тромбоцитов и гематокрит) анализировали с помощью характеристических кривых, площадь под которыми вычисляли. Анализ характеристических кривых использовали для определения предельного прогностического значения для лучшей дифференциации между выжившими и невыживши-ми животными. Также вычисляли изменения концентрации БОФ в процентах. При всех сравнениях значимым считали значение Р < 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Общие переменные

У всех собак с парвовирусным энтеритом наблюдались такие симптомы, как водянистая кровавая диарея, сильное угнетение, отсутствие интереса к корму и частая рвота (от 4 раз и более за 12 часов). Участвовавшие в исследовании собаки имели разную массу тела (5,1 ± 0,6 кг), принадлежали к разным породам

(16 метисов, 11 немецких овчарок, 10 анатолийских овчарок, 5 ротвейлеров, 1 пойнтер), полу (20 кобелей и 23 суки) и были разного возраста -от 2 до 6 месяцев (3,3 ± 0,4 мес.). Возраст контрольных собак был от 2 до

6 месяцев (4,4 ± 0,5 мес.), они были разного веса (4,2 ± 0,8 кг), пород и пола (три кобеля и две суки). Статистически значимых различий по возрасту, массе тела и полу между группами не было. Все здоровые собаки и 11 из 43 собак с парвовирус-ным энтеритом были вакцинированы по крайней мере однократно имеющейся на рынке вакциной против парвовируса. Шесть собак с пар-вовирусом вакцинировали дважды через трехнедельные интервалы поливалентной вакциной против пар-вовироза, чумы плотоядных, инфекционного гепатита и лептоспироза. Пять собак с парвовирусной инфекцией вакцинировали только один раз моновалентной вакциной. От вакцинации до определения антигена в кале прошло от 5 до 20 дней (11,9 ± 4,7 дня). Из 11 ранее вакцинированных собак с парвовирозом

7 выжили, а 4 - нет. Оставшихся заболевших собак (п = 32) ранее не вакцинировали.

Исследование образцов кала от 43 собак с геморрагической диареей с помощью готовой тест-системы для определения антигена парвовируса дало положительный результат. Ни у одной из собак не были обнаружены ооцисты кокцидий или лямблии, а также кровепаразиты.

Среднее время выживания составило 3,3 ±1,4 суток (среди не-выживших собак) (п = 23, 53,4 %), в то время как оставшиеся собаки (п = 20, 46,6 %) выжили.

Результаты клинического и гематологического исследования

Наиболее распространенные клинические признаки у всех собак включали подавленное состояние (97,6 %), кровавую диарею (97,6 %), гиперемированные слизистые обол очки (87,3 %), рвоту (81,3 %), умеренное или тяжелое обезвоживание (81,3 %), слабый периферический пульс (72,0 %), учащенное

Таблица 1. Клинические признаки при поступлении у собак двух групп

Клинические признаки / результаты клинического осмотра Выжившие % (n) Невыжившие % (n) Относит. риск ДИ 95 % P

Лихорадка (> 39,3 °С) 20,0 (4-20) 30,4 (7-23) 0,57 0,13-2,34 0,43

Гипотермия (< 37,0 °С) 0,0 (0-20) 13,0 (3-23) 0,14 0,00-2,94 0,20

Тахикардия (> 160 мин.-1) 40,0 (8-20) 60,8 (14-23) 0,42 0,12-1,45 0,17

Тахипноэ (> 40 мин.-1) 30,5 (7-20) 86,9 (20-23) 0,08 0,01-0,37 0,001*

Удлиненное время заполнения капилляров (> 2 сек.) 45,0 (9-20) 52,1 (12-23) 0,75 0,22-2,49 0,63

Гиперемия слизистых оболочек 85,0 (17-20) 82,6 (19-23) 1,19 0,23-6,11 0,83

Гипотензия (САД < 70 мм рт. ст.) 20,0 (4-20) 30,4 (7-23) 0,57 0,13-2,34 0,43

Подавленное состояние 95,0 (19-20) 100 (23-23) 0,27 0,01-7,18 0,43

Кровавая диарея 100 (20-20) 95,6 (22-23) 2,73 0,10-70,9 0,54

Рвота 80,0 (16-20) 82,6 (19-23) 0,63 0,12-3,24 0,58

Обезвоживание (6-8 %) 75,0 (15-20) 86,9 (20-23) 0,45 0,09-2,18 0,32

Слабый пульс 40,0 (8-20) 100 (23-23) 0,00 0,01-0,27 0,004*

ДИ - доверительный интервал; САД - среднее артериальное давление (измеренное неинвазивным методом с помощью прибора BM3-Vet, Bionet Co. Ltd, Сеул, Корея); *значимый результат (Р < 0,05).

Таблица 2. Результаты анализа крови при поступлении у собак двух групп

Параметры

Лейкоциты (6-17 х 103 мкл-1) 6,49 ± 6,33 3,3 ± 2,46*

Эритроциты (5,0-6,5 х 106 мкл-1) 5,76 ± 0,87 5,67 ± 0,95

НЬ (11-15 г/дл) 12,4 ± 1,8 12,0 ± 2,2

Гематокрит (30-42 %) 39,0 ± 5,5 39,7 ± 5,2

Сред. объем эритроцита (60-77 фл) 69,1 ± 4,6 72,0 ± 4,7**

Средняя концентрация НЬ (19,5-24,5 %) 21,8 ± 1,1 21,7 ± 1,7

Средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах (32-36 г/дл) 31,7 ± 1,7 29,7 ± 2,7***

Тромбоциты (300-500 х 103 мкл-1) 370±169 331 ± 253

Hb - гемоглобин; значимые результаты сравнения с выжившими собаками * ***P < 0,001. P < 0,01, **P < 0,05 и

дыхание (> 40/мин.; 62,7 %), тахикардию (> 160/мин.; 51,1 %) и замедленное время заполнения капилляров (> 2 сек.; 48,8 %). Реже встречались гипотензия (среднее АД < 70 мм рт. ст.), лихорадка (> 39,3; 25,5 %) и гипотермия (< 37,0 °С; 6,9 %). Сравнительная частота клинических признаков в двух группах - выживших и невыживших собак - кратко представлена в табл. 1. У невыживших собак преобладали такие признаки, как учащенное дыхание и слабый периферический пульс.

При анализе крови самыми распространенными признаками были лейкопения (62,7 %, 23 из 43 собак, лейкоциты < 5 тыс./мкл), сгущение крови (41,8 %, 18 из 43 собак, гема-токрит > 4 2 %) и тромбоцитопения (41,8 %, 18 из 43 собак, тромбоциты <180 тыс./мкл), реже встречалась анемия (4,6 %, 2 из 43 собак,

гематокрит < 32 %) и лейкоцитоз (2,3 %, 1 из 43 собак, лейкоциты > 17 тыс./мкл). Результаты анализов крови при поступлении кратко представлены в табл. 2. Среднее содержание лейкоцитов у погибших собак было значительно ниже, чем у выживших.

Определение БОФ в сыворотке

Результаты определения БОФ у здоровых и больных парвовирусным энтеритом собак представлены на рисунке. Содержание С-реактивно-го белка, Нр и церулоплазмина у собак с парвовирусным энтеритом было значительно выше (Р < 0,001 и Р < 0,01 соответственно), а сывороточного альбумина- ниже (Р < 0,001), чем у контрольных. При парвовирус-ном энтерите степень повышения концентрации С-реактивного белка в сыворотке в 72 раза была боль-

ше, чем у Нр (в 3 раза) и церулоп-лазмина (0,3 раза). Концентрация альбумина у собак с парвовирусным энтеритом была ниже (в 0,4 раза), чем у здоровых контрольных.

Изменения концентрации БОФ в сыворотке у выживших и погибших собак показаны в табл. 3.

Средние концентрации СРБ и це-рулоплазмина у погибших собак были выше (Р < 0,01), чем у выживших. Статистически значимых различий в повышении средней сывороточной концентрации Нр и снижении сывороточного альбумина у выживших и погибших собак не обнаружено.

Результаты анализа характеристических кривых показаны в табл. 4. Из всех исследованных параметров наибольшей чувствительностью и специфичностью обладал С-реак-тивный белок - при дифференциации выживших и невыживших животных эти параметры составили 91 и 61 % соответственно при оптимальной предельной концентрации для дифференциации 92,4 мг/л.

ОБСУЖДЕНИЕ

Это исследование показало, что образование белков острой фазы при парвовирусной инфекции собак может повышаться (С-реактивный белок, Нр и церулоплазмин) или снижаться (альбумин). Степень увеличения концентрации С-реактивного белка у собак с парвовирусным энтеритом в нашем исследовании по сравнению с контрольными собаками была сходной с ранее Yamamo and others (1993). Обнаружено, что повышение концентрации Нр и церулоп-лазмина у собак с парвовирусным энтеритом по сравнению с контрольными собаками не превышает 10 раз. Сходное незначительное повышение концентрации Нр и церулоплазмина у собак с парвовирусным энтеритом описано ранее Kogika and others (2003), что подтверждает умеренную значимость обоих БОФ как прогностических показателей [4].

В настоящем исследовании основаниями для подозрения на парво-вирусную инфекцию были классические клинические признаки и результаты анализа крови, а также

случае вакцинация не могла исказить его результаты. Хотя кровепа-разиты не были обнаружены в мазках крови, в идеале следует использовать более чувствительные методы, например серологические или на основе полимеразной цепной реакции, для исключения сопутствующей инвазии видами родов Babesia, Ehrlichia или Hepazoon.

У большинства собак с парвови-русной инфекцией было более двух критериев системного воспалительного синдрома, что согласуется с результатами предыдущих исследований [6, 17, 25, 26, 30]. Кроме того, хотя микробиологического исследования крови не проводили, можно заподозрить высокую распространенность сепсиса среди наших собак, как описано в работах Turk and others (1990, 1992), Macintire and Smith-Carr (1997), Mohr and others (2003), de Laforcade and others (2003) и Prittie (2004). Наши предыдущие результаты [5, 6, 20, 23, 27, 30] показывают, что парвовирусная инфекция собак способна привести к системному воспалительному синдрому и сепсису вследствие вторичных

эпизоотологические данные (возрастная предрасположенность и вакцинация), как описано в наших предыдущих работах [29-31], а затем диагноз подтверждался результатами определения антигена вируса [5, 23, 27]. Тест-система, использовавшаяся в настоящем исследовании, определяла поверхностный антиген парвовируса собак в образцах фекалий с высокой чувствительностью (100 %) и специфичностью (98,8 %) по сравнению с результатами определения CPV-2 и его антигенных вариантов CPV-2a и CPV-2b методом гемагглютинации (Animal Genetics, Inc. 2005). Кроме того, набор для определения антигена парвовиру-са не мог дать ложноположитель-ный результат у собак, вакцинированных модифицированной живой вакциной против парвовирусной инфекции [24], что позволяет предположить, что положительный результат исследования данным методом указывает на инфекцию диким типом CPV-2, таким образом, в нашем

3,0

л

S 1.5 öl О

S.

« 1,0

I Contrai, n = 5 I PVE, n = 43

p< 0,001

Control, n = 5 40 n PVE, n = 43

Ë 20 -3

n <

p< 0,001

Ъ

E

M

S a. о

S

I Control, n = 5 I PVE, n = 43

p < 0,01

_[_

180 -| 160 -

i 140 с 120

Ш

О 100 -Q.

0 80 -

1 • Ö 4020 -

0

I Control, n = 5 I PVE, n = 43

p< 0,001

_L

Рисунок. Сывороточные концентрации положительных (C-реактивный белок, гаптоглобин и церулоплазмин) и отрицательных (альбумин) белков острой фазы у собак с парвовирусным энтеритом (PVE) и у здоровых контрольных собак

Таблица 3. Сывороточные белки острой фазы (БОФ) у выживших и погибших собак

БОФ Собаки

Выжившие, n = 20

Гаптоглобин (г/л) 2,1 ± 0,2 2,5 ± 0,6

Церулоплазмин (D погл./мин. х 10-3) 5,9 ± 0,5 7,0 ± 0,5*

С-реактивный белок (мг/л) 130 ± 0,02 180 ± 0,07*

Альбумин (г/л) 21 ± 1,0 20 ± 1,0

*Р < 0,01 - значимое различие по сравнению с выжившими собаками (критерий Стьюдента).

Таблица 4. Оптимальные пороговые концентрации сывороточных белков острой фазы и избранные гематологические и клинические параметры, а также соответствующие чувствительность, специфичность, площадь под кривой (ППК) и среднеквадратичная ошибка прогностических показателей смертности у собак с парвовирусной инфекцией

Параметр Чувствительность (%) Специфичность (%) Оптим. пороговое значение ППК Средне-квадратич. ошибка

Гаптоглобин (г/л) 52 63 1,71 0,52 0,09

С-реактивный белок (мг/л) 91 61 92,4 0,68 0,09

Церулоплазмин ф погл./мин. х 10-3) 57 63 6,35 0,61 0,08

Альбумин (г/л) 68 47 20 0,52 0,09

Гематокрит (%) 52 70 42,0 0,55 0,09

Лейкоциты х 103/мкл 52 65 3,02 0,65 0,08

Тромбоциты х 103/мкл 65 85 188 0,63 0,09

Температура (°С) 74 70 38,8 0,65 0,08

бактериальных инфекций и эндоток-семии за счет высвобождения эндотоксинов из кишечных грамотрица-тельных бактерий. Таким образом, высокая смертность (53,4 %) и малое время выживания (3,3 ±1,4 суток) в настоящем исследовании можно приписать этим осложнениям пар-вовироза. Имеются некоторые доказательства, подтверждающие наличие сепсиса у собак с парвовирусной инфекцией в нашем исследовании. В частности, обычно желудочно-кишечные заболевания сопровождаются очень легким повышением концентрации С-реактивного белка, не выше 21,5 мг/л [15], следовательно, наблюдавшееся в нашем исследовании сильное повышение у собак с парвовирозом должно быть обусловлено осложнениями. Кроме того, средняя концентрация С-реактивно-го белка и ее пределы в группе собак с парвовирусным энтеритом была сходной с описанной при сепсисе [2].

Сепсис объясняет высокую концентрацию СРБ у большинства животных, как и тот факт, что бактериальные инфекции обычно сопровождаются сильной системной реакцией острой фазы, в то время как при вирусных инфекциях эта реакция мягче [9]. Например, у людей при вирусных инфекциях концентрация СРБ не превышает 10 мг/л [10].

Оценка чувствительности и специфичности разных биомаркеров для дифференциации выживших и погибших собак в настоящем исследовании показала, что СРБ при пороговой концентрации 92,4 мг/л дает более достоверное значение ППК и имеет чувствительность 91 %. Это можно использовать на практике, поскольку, по нашим данным, 91 % животных с концентрацией СРБ выше 92,4 мг/л погибли. Однако специфичность при таком пороговом значении низкая (61 %), т. е. всего 61 % выживших животных имели концентрацию СРБ ниже 92,4 мг/л. Согласно двум недавним медицинским публикациям, описывающим 370 и 879 больных, поступивших в отделение внутренних болезней с разными заболеваниями, описана высокая корреляция более высокой концентрации

СРБ со смертностью и более длительной госпитализацией [10, 22].

В нашей работе чувствительность подсчета лейкоцитов была 52 %, а специфичность - 65 % при оптимальном пороговом значении 3,02 х 103/мкл-1.

Эти результаты меньше, чем полученные при предыдущем исследовании, в котором положительная прогностическая ценность подсчета лейкоцитов при результате выше 4,5 х 103 мкл-1 для оценки выживания при поступлении достигала 90 % [8], что согласуется с результатами McCaw and others (1996), обнаружившими, что нейтропения, даже очень сильная, не может служить достоверным прогностическим показателем исхода парвовирусной инфекции у собак. Такое различие результатов может быть обусловлено разными штаммами вирусов, по-разному влияющими на лейкоциты.

В заключение можно сказать, что типичная реакция в форме образования БОФ при парвовирусном энтерите у собак характеризуется значительным повышением концентрации СРБ и умеренным повышением концентраций гаптоглобина и церулоплазмина, а также снижением концентрации альбумина. Кроме того, определение концентрации СРБ может служить прогностическим показателем смертности при парвовирозе. Однако данные результаты следует интерпретировать с осторожностью, так как они были получены в специфических клинических условиях, которые могут варьировать в зависимости от штамма вируса; для адекватного клинического заключения необходимо учитывать результат определения СРБ только в сочетании с другими данными клинического осмотра и лабораторных исследований.

Конфликт интересов

Ни один из авторов этой статьи не состоит в финансовых или личных взаимоотношениях с другими лицами или организациями, которые могли бы привести к недостоверности представленной здесь информации или повлиять на содержание работы.

Литература

1. Animal genetics, INC. http://www.lifebioscience.com.au/ Life_bio/documents/CPVbrochure_000. pdf. Accessed September 2, 2005.

2. Caldin M., Tasca S., Carli E., bianchini S., Furlanel-lo T, Martinez-Subiela S. & Cerón J.J. Serum acute phase protein concentrations in dogs with hypera-drenocorticism with and without concurrent inflammatory conditions // Veterinary Clinic Pathology, 2009, 38, 63-68.

3. Ceron J.J. & Martinez-Subiela S. An automated spec-trophotometric method for measuring canine ceru-loplasmin in serum // Veterinary Researches, 2004, 35, 671-679.

4. Ceron J.J., Eckersall PD. & Marfnez-Subiela S. Acute phase proteins in dogs and cats: current knowledge and future perspectives // Veterinary Clinic Pathology, 2005, 34, 85-99.

5. Cohn L.A. & Langdon P. Infectious disease. In: Handbook of Small Animal Practice. 2003, 4th edn. Eds R.V. Morgan, R.M. Bright and M.S. Swartout. W.B. Saunders, Philadelphia, PA, pp 1094-1095.

6. De Laforcade A.M., Freeman L.M., Shaw S.P., Brooks M.B., Rozanski E.A. & Rush J.E. Hemostatic changes in dogs with naturally occurring sepsis // Journal of Veterinary Internal Medicine, 2003, 17, 674-679.

7. Eckersall P. D. Acute phase proteins as markers of inflammatory lesions // Comparative Haematology International, 1995, 5, 93-97.

8. Goddard A., Leisewitz A.L., Christopher M.M., Duncan N.M. & Becker P.J. Prognostic usefulness of blood leukocyte changes in canine parvoviral enteritis // Journal of Veterinary Internal Medicine, 2008, 22, 309-316.

9. Gruys E., Toussaint M.J., Niewold TA. & KoopmansS.J. Acute phase reaction and acute phase proteins // Journal of Zhejiang University Science B, 2005, 6, 1045-1056.

10. Keshet R., Boursi B., Maoz R., Shnell M. & Guzn-ergur H. Diagnostic and prognostic significance of serum C-reactive protein levels in patients admitted to the department of medicine // American Journal of Medical Science, 2009, 337, 248-255.

11. Kogika M.M., Pereira D.A., Elias F., Notomi M.K., Delayte D.E., Kawahara R. & Hagiwara M.K. Determination of serum haptoglobin, ceruloplasmin and acid-alpha-glycoprotein in dogs with haemorrhag-ic gastroenteritis // CiPncia Rural Santa Maria 2003, 33, 513-517.

12. Macintire D.K. & Smith-Carr S. Canine parvovirus. Part II. Clinical signs, diagnosis, and treatment // Compendium on Continuing Veterinary Education and Practice, 1997, 19, 291-302.

13. Mantione N.L. & Otto C.M. Characterization of the use of antiemetic agents in dogs with parvoviral enteritis treated at a veterinary teaching hospital: 77 cases (1997-2000) // Journal of the American Veterinary Medical Association, 2005, 227, 1787-1793.

14. Martinez-Subiela S. & Ceron J.J. Validation of commercial assays for the determination of haptoglobin, C-reactive protein and serum amyloid A in dogs // Archivos de Medicina Veterinaria, 2005, 37, 61-66.

15. McCann T., Ridyard A.E. & Simpson J.W. Evaluation of the utility of C-reactive protein in the diagnosis of chronic gastrointestinal disease in dogs // Proceedings of the World Small Animal Veterinary Association Congress, 2002, October 3 to 6, Granada, Spain.

16. McCaw D.L., Harrington D.P. & Jones B.D. A retrospective study of canine parvovirus gastroenteritis: 89 cases // Journal of Veterinary Internal Medicine, 1996, 10, 157.

17. Mohr A.J., Leisewitz A.L., Jacobson L.S., Steiner J.M., Ruaux C.G. & Williams D.A. Effect of early enteral nutrition on intestinal permeability, intestinal protein loss, and outcome in dogs with severe parvoviral enteritis // Journal of Veterinary Internal Medicine, 2003, 17,791-798.

18. Murata H., Shimada N. &Yoshioka M. Current research on acute phase proteins in veterinary diagnosis: an overview // Veterinary Journal, 2004, 168, 28-40.

19. Nappert G., Dunphy E., Ruben D. & Mann FA. Determination of serum organic acids in puppies with naturally acquired parvoviral enteritis // Canadian Journal Veterinary Researches, 2002, 66, 15-1.

20. Otto C.M., Drobatz K.J. & Soter C. Endotoxemia and

tumor necrosis factor activity in dogs with naturally occurring parvoviral enteritis // Journal of Veterinary Internal Medicine, 1997, 11, 65-70.

21. Petersen H.H., Nielsen J.P. & Heegaard PM.H. Application of acute phase protein measurements in veterinary clinical chemistry // Veterinary Researches, 2004, 35, 163-187.

22. Prieto M.F., Kilstein J., Bagilet D. & Pezzotto S.M. C-reactive protein as a marker of mortality in intensive care unit // Medicina Intensiva, 2008, 32, 424-430 (in Spanish).

23. Prittie J. Canine parvoviral enteritis: a review of diagnosis, management, and prevention // Journal of Veterinary Emergency and Critical Care, 2004, 14, 167-176.

24. Schultz R.D., Larson L.J. & Lorentzen L.P. Effects of modified live canine parvovirus vaccine on the SNAP ELISA antigen assay // Journal of Veterinary Emergency and Critical Care, 2008, 18, 409-431.

25. Turk J., Fales W., Miller M., Pace L., Fischer J., Johnson G., Kreeger J., Turnquist S., Pittman L. & Rottinghaus A. Enteric clostridium perfringens infection associated with parvoviral enteritis in dogs: 74 cases (1987-1990) // Journal of the American Veterinary Medical Association, 1992, 200, 991-994.

26. Turk J., Miller M., Brown T, Fales W., Fischer J., Gosser H., Nelson S., Shaw D. & Solorzano R. Coliform septicemia and pulmonary disease associated with

canine parvoviral enteritis: 88 cases (1987-1988) // Journal of the American Veterinary Medical Association, 1990, 196, 771-773.

27. Willard M.D. Canine parvoviral enteritis. In: Small Animal Internal Medicine. 2003, 3rd edn. Eds R.W. Nelson and C.G. Couto. Mosby Comp., Philadelphia, PA, pp 433-435.

28. Yamamoto S., Shida T., Miyaji S., Santsuka H., Fujise H., Mukawa K., Furukawa E., Nagae T. & Naiki M. Changes in serum C-reactive protein levels in dogs with various disorders and surgical traumas // Veterinary Researches Communication, 1993, 17, 85-93.

29. Yesilbag K., Yilmaz Z., Ozkul A. & Pratelli A. Aetio-logical role of viruses in puppies with diarrhea // The Veterinary Record, 2007, 161, 169-170.

30. Yilmaz Z. & Senturk S. Characterisation of lipid profiles in dogs with parvoviral enteritis // Journal of Small Animal Practice, 2007, 48, 643-650.

31. Yilmaz Z., Pratelli A. & Torun S. Distribution of antigen types of canine parvovirus type 2 in dogs with hemorrhagic enteritis in Turkey // Turkish Journal of Veterinary & Animal Science, 2005, 29, 1073-1076.

32. Yule TD., Roth M.B., Dreier K., Johnson A.F, Palmer-densmore M., Simmons K. & Fanton R. Canine parvovirus vaccine elicits protection from the inflammatory and clinical consequences of the disease // Vaccine, 1997, 15, 720-729.