ФЕРМЕНТЫ, ПРИГОДНЫЕ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕРКИСЛОТ

1. Способ получения пероксикарбоновой кислоты, включающий:
(a) обеспечение набора компонентов реакции, содержащего:
(1) по меньшей мере один субстрат, выбранный из группы, состоящей из:
(i) одного или нескольких сложных эфиров, имеющих структуру
m
5
[X]R,
6
где X = сложноэфирная группа формулы R-C(O)O;
6
6
6
R = линейный, разветвленный или циклический гидрокарбильный C1-C7-фрагмент, необязательно замещенный гидроксильными группами или C1-C4-алкоксигруппами, где R необязательно содержит одну или несколько эфирных связей в случае R = C2-C7;
5
5
5
R = линейный, разветвленный или циклический гидрокарбильный C1-C6-фрагмент, или пятичленный циклический гетероароматический фрагмент, или шестичленный циклический ароматический или гетероароматический фрагмент, необязательно замещенный гидроксильными группами; где каждый атом углерода в R в отдельности соединен не более чем с одной гидроксильной группой или не более чем с одной сложноэфирной группой или группой карбоновой кислоты; где R необязательно содержит одну или несколько эфирных связей;
5
m = целое число, варьирующее в диапазоне от 1 до числа атомов углерода в R; и где указанные сложные эфиры имеют растворимость в воде, составляющую по меньшей мере 5 ч/млн при 25°C;
(ii) одного или нескольких глицеридов, имеющих структуру
1
3
4
1
где R = неразветвленный или разветвленный C1-C21-алкил, необязательно замещенный гидроксильной или C1-C4-алкоксигруппой, а R и R в отдельности представляют собой H или RC(O);
(iii) одного или нескольких сложных эфиров формулы:
,
1
2
2
2
n
2
3
n
где R = неразветвленный или разветвленный C1-C7-алкил, необязательно замещенный гидроксильной или C1-C4-алкоксигруппой, а R = неразветвленный или разветвленный C1-C10-алкил, алкенил, алкинил, арил, алкиларил, алкилгетероарил, гетероарил, (CHCHO) или (CHCH(CH)-O)H, и n равно от 1 до 10;
(iv) одного или нескольких ацилированных моносахаридов, ацилированных дисахаридов или ацилированных полисахаридов и
(v) любой комбинации из (i)-(iv);
(2) источник пероксида и
(3) ферментативный катализатор, содержащий полипептид, обладающий пергидролитической активностью и имеющий аминокислотную последовательность, обладающую по меньшей мере 80% идентичностью по отношению к аминокислотной последовательности, приведенной под SEQ ID NO: 4, при условии, что аминокислотный остаток, связанный с C-концевой частью каталитического гистидина, не является глутаминовой кислотой;
(b) объединение набора компонентов реакции при соответствующих условиях реакции, в результате чего получают пероксикарбоновую кислоту; и
(c) необязательно разбавление пероксикарбоновой кислоты, полученной на этапе (b).
2. Способ по п. 1, дополнительно включающий этап d) приведения твердой поверхности или неживого объекта в контакт с пероксикарбоновой кислотой, полученной на этапе (b) или на этапе (c); посредством чего указанную твердую поверхность или неживой объект дезинфицируют, отбеливают, обесцвечивают или подвергают комбинации данных типов воздействия.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что неживым объектом является медицинский инструмент.
4. Способ по п. 1, дополнительно включающий этап d) приведения предмета одежды или текстильного изделия в контакт с пероксикарбоновой кислотой, полученной на этапе (b) или на этапе
(c); посредством чего на предмет одежды или текстильное изделие оказывают положительное воздействие.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что положительное воздействие выбирают из группы, состоящей из дезинфекции, санитарной обработки, отбеливания, обесцвечивания, дезодорации и их комбинаций.
6. Способ по п. 1, дополнительно включающий этап d) приведения древесной массы или бумажной массы в контакт с пероксикарбоновой кислотой, полученной на этапе (b) или на этапе (c); посредством чего древесную массу или бумажную массу отбеливают.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что субстрат выбирают из группы, состоящей из моноацетина; диацетина; триацетина; монопропионина; дипропионина; трипропионина; монобутирина; дибутирина; трибутирина; пентаацетата глюкозы; пентаацетата β-D-галактозы; гексаацетата сорбита; октаацетата сахарозы; тетраацетата ксилозы; ацетилированного ксилана; фрагментов ацетилированного ксилана; 1,2,3,5-тетраацетата β-D-рибофуранозы; три-O-ацетил-D-галакталя; три-O-ацетил-D-глюкаля; сложных моноэфиров или сложных диэфиров 1,2-этандиола, 1,2-пропандиола, 1,3-пропандиола, 1,2-бутандиола, 1,3-бутандиола, 2,3-бутандиола, 1,4-бутандиола, 1,2-пентандиола, 2,5-пентандиола, 1,5-пентандиола, 1,2-гександиола, 2,5-гександиола, 1,6-гександиола, 4-ацетоксибензойной кислоты и их смесей.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что субстратом является триацетин.
9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что получаемая пероксикарбоновая кислота представляет собой перуксусную кислоту, перпропионовую кислоту, пермасляную кислоту, пермолочную кислоту, пергликолевую кислоту, перметоксиуксусную кислоту, пер-β-гидроксимасляную кислоту или их смеси.
10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ферментативный катализатор находится в виде микробной клетки, микробной клетки с нарушенной проницаемостью мембраны, экстракта микробных клеток, частично очищенного фермента или очищенного фермента.
11. Способ по п. 1, где аминокислотная последовательность представляет собой последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14 или 16.
12. Композиция, содержащая:
(a) набор компонентов реакции, содержащий:
(1) по меньшей мере один субстрат, выбранный из группы, состоящей из:
(i) одного или нескольких сложных эфиров, имеющих структуру
m
5
[X]R,
6
где X = сложноэфирная группа формулы R-C(O)O;
6
6
6
R = линейный, разветвленный или циклический гидрокарбильный C1-C7-фрагмент, необязательно замещенный гидроксильными группами или C1-C4-алкоксигруппами, где R необязательно содержит одну или несколько эфирных связей в случае R = C2-C7;
5
5
5
R = линейный, разветвленный или циклический гидрокарбильный C1-C6-фрагмент, или пятичленный циклический гетероароматический фрагмент, или шестичленный циклический ароматический или гетероароматический фрагмент, необязательно замещенный гидроксильными группами; где каждый атом углерода в R в отдельности соединен не более чем с одной гидроксильной группой или не более чем с одной сложноэфирной группой или группой карбоновой кислоты; где R необязательно содержит одну или несколько эфирных связей;
5
m = целое число, варьирующее в диапазоне от 1 до числа атомов углерода в R; и
где указанные сложные эфиры имеют растворимость в воде, составляющую по меньшей мере 5 ч/млн при 25°C;
(ii) одного или нескольких глицеридов, имеющих структуру
1
где R = неразветвленный или разветвленный C1-C21-алкил, необязательно замещенный гидроксильной или C1-C4-алкоксигруппой,
3
4
1
а R и R в отдельности представляют собой H или RC(O);
(iii) одного или нескольких сложных эфиров формулы:
1
2
2
2
n
2
3
n
где R = неразветвленный или разветвленный C1-C7-алкил, необязательно замещенный гидроксильной или C1-C4-алкоксигруппой, а R = неразветвленный или разветвленный C1-C10-алкил, алкенил, алкинил, арил, алкиларил, алкилгетероарил, гетероарил, (CHCHO) или (CHCH(CH)-O)H, и n равно от 1 до 10;
(iv) одного или нескольких ацилированных моносахаридов, ацилированных дисахаридов или ацилированных полисахаридов и
(v) любой комбинации из (i)-(iv);
(2) источник пероксида и
(3) ферментативный катализатор, содержащий полипептид, обладающий пергидролитической активностью и имеющий аминокислотную последовательность, обладающую по меньшей мере 80% идентичностью по отношению к аминокислотной последовательности, приведенной под SEQ ID NO: 4, при условии, что аминокислотный остаток, связанный с C-концевой частью каталитического гистидина, не является глутаминовой кислотой; и
(b) по меньшей мере одну пероксикарбоновую кислоту, образованную при объединении набора компонентов реакции (a).
13. Система для образования и доставки перкислот, содержащая:
(a) первый отдел, содержащий
(1) ферментативный катализатор, содержащий полипептид, обладающий пергидролитической активностью и имеющий аминокислотную последовательность, обладающую по меньшей мере 80% идентичностью по отношению к аминокислотной последовательности, приведенной под SEQ ID NO: 4, при условии, что аминокислотный остаток, связанный с C-концевой частью каталитического гистидина, не является глутаминовой кислотой;
(2) по меньшей мере один субстрат, выбранный из группы, состоящей из:
(i) одного или нескольких сложных эфиров, имеющих структуру
m
5
[X]R,
6
где X = сложноэфирная группа формулы R-C(O)O;
6
6
6
R = линейный, разветвленный или циклический гидрокарбильный C1-C7-фрагмент, необязательно замещенный гидроксильными группами или C1-C4-алкоксигруппами, где R необязательно содержит одну или несколько эфирных связей в случае R = C2-C7;
5
5
5
R = линейный, разветвленный или циклический гидрокарбильный C1-C6-фрагмент, или пятичленный циклический гетероароматический фрагмент, или шестичленный циклический ароматический или гетероароматический фрагмент, необязательно замещенный гидроксильными группами; где каждый атом углерода в R в отдельности соединен не более чем с одной гидроксильной группой или не более чем с одной сложноэфирной группой или группой карбоновой кислоты; где R необязательно содержит одну или несколько эфирных связей;
5
m = целое число, варьирующее в диапазоне от 1 до числа атомов углерода в R; и
где указанные сложные эфиры имеют растворимость в воде, составляющую по меньшей мере 5 ч/млн при 25°C;
(ii) одного или нескольких глицеридов, имеющих структуру
1
3
4
1
где R = неразветвленный или разветвленный C1-C21-алкил, необязательно замещенный гидроксильной или C1-C4-алкоксигруппой, а R и R в отдельности представляют собой H или RC(O);
(iii) одного или нескольких сложных эфиров формулы:
1
2
2
2
n
2
3
n
где R = неразветвленный или разветвленный C1-C7-алкил, необязательно замещенный гидроксильной или C1-C4-алкоксигруппой, а R = неразветвленный или разветвленный C1-C10-алкил, алкенил, алкинил, арил, алкиларил, алкилгетероарил, гетероарил, (CHCHO) или (CHCH(CH)-O)H, и n равно от 1 до 10;
(iv) одного или нескольких ацилированных моносахаридов, ацилированных дисахаридов или ацилированных полисахаридов и
(v) любой комбинации из (i)-(iv); и
(3) необязательный буфер; и
(b) второй отдел, содержащий
(1) источник пероксида;
(2) стабилизатор пероксида и
(3) необязательный буфер.
14. Система для образования и доставки перкислот по п. 13, отличающаяся тем, что субстрат включает в себя триацетин.
15. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, выбранная из группы, состоящей из:
(а) полинуклеотида, кодирующего полипептид, обладающего пергидролитической активностью, причем указанный полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14 или в SEQ ID NO: 16;
(b) полинуклеотида, содержащего последовательность нуклеиновой кислоты, приведенную в SEQ ID NO: 13 или в SEQ ID NO: 15; и
(с) полинуклеотида, полностью комплементарного нуклеотиду из (а) или (b).
16. Вектор, включающий в себя молекулу нуклеиновой кислоты по п. 15.
17. Конструкция рекомбинантной ДНК, включающая в себя молекулу нуклеиновой кислоты по п. 15, функционально связанную с подходящей регуляторной последовательностью.
18. Рекомбинантная клетка-хозяин, содержащая в себе конструкцию рекомбинантной ДНК по п. 17.
19. Способ экспрессии полипептида, включающий трансформацию клетки-хозяина с помощью конструкции рекомбинантной ДНК по п. 17.
20. Выделенный полипептид, обладающий пергидролитической активностью, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14 или в SEQ ID NO: 16.
21. Композиция для ухода за бельем, содержащая
а) полипептид, обладающий пергидролитической активностью и имеющий аминокислотную последовательность, обладающую по меньшей мере 80% идентичностью по отношению к аминокислотной последовательности, приведенной под SEQ ID NO: 4, при условии, что аминокислотный остаток, связанный с C-концевой частью каталитического гистидина, не является глутаминовой кислотой;
b) по меньшей мере один субстрат, выбранный из группы, состоящей из:
(i) одного или нескольких сложных эфиров, имеющих структуру
m
5
[X]R,
6
где X = сложноэфирная группа формулы R-C(O)O;
6
6
6
R = линейный, разветвленный или циклический гидрокарбильный C1-C7-фрагмент, необязательно замещенный гидроксильными группами или C1-C4-алкоксигруппами, где R необязательно содержит одну или несколько эфирных связей в случае R = C2-C7;
5
5
5
R = линейный, разветвленный или циклический гидрокарбильный C1-C6-фрагмент, или пятичленный циклический гетероароматический фрагмент, или шестичленный циклический ароматический или гетероароматический фрагмент, необязательно замещенный гидроксильными группами; где каждый атом углерода в R в отдельности соединен не более чем с одной гидроксильной группой или не более чем с одной сложноэфирной группой или группой карбоновой кислоты; где R необязательно содержит одну или несколько эфирных связей;
5
m = целое число, варьирующее в диапазоне от 1 до числа атомов углерода в R; и
где указанные сложные эфиры имеют растворимость в воде, составляющую по меньшей мере 5 ч/млн при 25°C;
(ii) одного или нескольких глицеридов, имеющих структуру
1
3
4
1
где R = неразветвленный или разветвленный C1-C21-алкил, необязательно замещенный гидроксильной или C1-C4-алкоксигруппой, а R и R в отдельности представляют собой H или RC(O);
(iii) одного или нескольких сложных эфиров формулы:
1
2
2
2
n
2
3
n
где R = неразветвленный или разветвленный C1-C7-алкил, необязательно замещенный гидроксильной или C1-C4-алкоксигруппой, а R = неразветвленный или разветвленный C1-C10-алкил, алкенил, алкинил, арил, алкиларил, алкилгетероарил, гетероарил, (CHCHO) или (CHCH(CH)-O)H, и n равно от 1 до 10;
(iv) одного или нескольких ацилированных моносахаридов, ацилированных дисахаридов или ацилированных полисахаридов и
(v) любой комбинации из (i)-(iv); и
с) источник пероксида; и
d) по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество.
22. Средство личной гигиены, содержащее полипептид, обладающий пергидролитической активностью, при этом указанный полипептид имеет аминокислотную последовательность, обладающую по меньшей мере 80% идентичностью по отношению к аминокислотной последовательности, приведенной под SEQ ID NO: 4, при условии, что аминокислотный остаток, связанный с C-концевой частью каталитического гистидина, не является глутаминовой кислотой.
23. Средство личной гигиены по п. 22, отличающееся тем, что средство представляет собой шампунь, лосьон для тела, гель для душа, увлажняющее средство для местного применения, зубную пасту, гель для чистки зубов, ополаскиватель для рта, средство для полоскания рта, ополаскиватель против зубного налета или очищающее средство для местного применения.