СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ БЕЛКОВ В АМИЛОИДНОМ СОСТОЯНИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ (ВАРИАНТЫ) И НАБОР ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ БЕЛКОВ В АМИЛОИДНОМ СОСТОЯНИИ

1. Способ детекции белков в амилоидном состоянии, включающий следующие стадии:
- получение образца лизата культуры дрожжей или ткани млекопитающего, или биологической жидкости млекопитающего;
- добавление к полученному образцу раствора аптамера, специфичного к белку в амилоидном состоянии;
- выделение комплекса белка в амилоидном состоянии с аптамером;
- детекцию аптамера посредством полимеразной цепной реакции с использованием пары праймеров, пригодных для амплификации указанного аптамера.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что биологической жидкостью является кровь, лимфа, слюна или моча млекопитающего.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что выделение комплекса белка в амилоидном состоянии с аптамером осуществляют пропусканием полученного раствора через мембрану или с использованием антител, специфичных к белкам в амилоидном состоянии.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что используют ацетатцеллюлозную, мембрану из регенирированной целлюлозы или гидрофильную поливинилиденфторидную мембрану. 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что используют мембрану с размером пор 0,1-0,4 мкм.
6. Способ по п.4, отличающийся тем, что перед пропусканием раствора через мембрану к нему дополнительно добавляют ионный детергент и полученный раствор инкубируют при температуре от 10 до 40°С в течение как минимум 5 мин.
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что указанным детергентом является натрий лауроилсаркозин (саркозил).
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что используют аптамер, специфичный к белку в амилоидном состоянии, выбранный из группы, состоящей из последовательностей, приведенных в Перечне последовательностей под номерами SEQ ID NO: 1-16.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что в качестве указанных праймеров используют праймеры, приведенные в Перечне последовательностей под номерами SEQ ID NO: 17 и 18.
10. Способ детекции белков в амилоидном состоянии, включающий следующие стадии:
- получение образца лизата культуры дрожжей или ткани млекопитающего, или биологической жидкости млекопитающего;
- выделение белка в амилоидном состоянии;
- добавление к полученному образцу раствора аптамера, специфичного к белку в амилоидном состоянии;
- выделение комплекса белка в амилоидном состоянии с аптамером; - детекцию указанного аптамера посредством полимеразной цепной реакции с использованием пары праймеров, пригодных для амплификации указанного аптамера.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что биологической жидкостью является кровь, лимфа, слюна или моча млекопитающего.
12. Способ по п.10, отличающийся тем, что выделение белка в амилоидном состоянии или комплекса белка в амилоидном состоянии с аптамером осуществляют пропусканием раствора через мембрану или с использованием антител, специфичных к белкам в амилоидном состоянии.
13. Способ по п.12, отличающийся тем, что используют ацетатцеллюлозную, мембрану из регенирированной целлюлозы или гидрофильную поливинилиденфторидную мембрану.
14. Способ по п.12, отличающийся тем, что используют мембрану с размером пор 0,1-0,4 мкм.
15. Способ по п.13, отличающийся тем, что перед пропусканием раствора через мембрану к нему дополнительно добавляют ионный детергент и полученный раствор инкубируют при температуре от 10 до 40°С в течение как минимум 5 мин.
16. Способ по п.15, отличающийся тем, что указанным детергентом является натрий лауроилсаркозин (саркозил).
17. Способ по п.10, отличающийся тем, что используют аптамер, специфичный к белку в амилоидном состоянии, выбранный из группы, состоящей из последовательностей, приведенных в Перечне последовательностей под номерами SEQ ID NO: 1-15.
18. Способ по п.17, отличающийся тем, что в качестве указанных праймеров используют праймеры, приведенные в Перечне последовательностей под номерами SEQ ID NO: 18 и 19.
19. Набор для детекции белков в амилоидном состоянии, содержащий: аптамер, специфичный к белку в амилоидном состоянии; праймеры, пригодные для амплификации указанного аптамера; средство для выделения комплекса белка в амилоидном состоянии с аптамером; и инструкцию по применению набора в соответствии со способом по п.1 или 10.
20. Набор по п.19, отличающийся тем, что в качестве средства для выделения комплекса белка в амилоидном состоянии с аптамером используют ацетатцеллюлозную мембрану, мембрану из регенирированной целлюлозы или гидрофильную поливинилиденфторидную мембрану.
21. Набор по п.19, отличающийся тем, что ацетатцеллюлозная мембрана имеет размер пор 0,1-0,4 мкм.
22. Набор по п.20, отличающийся тем, что указанный набор дополнительно содержит ионный детергент.
23. Набор по п.22, отличающийся тем, что указанным детергентом является натрий лауроилсаркозин (саркозил).
24. Набор по п.19, отличающийся тем, что в качестве средства для выделения комплекса белка в амилоидном состоянии с аптамером используют антитела, специфичные к белкам в амилоидном состоянии.