Остаточное количество нитритов в органах и тканях белых крыс

УДК 546.175:599.323.4

© 2011 Д. Д. Хайруллин

ОСТАТОЧНОЕ КОЛИЧЕСТВО НИТРИТОВ В ОРГАНАХ И ТКАНЯХ

БЕЛЫХ КРЫС

Статья посвящена изучению влияния остаточных количеств нитритов на гистологические показатели органов и тканей белых крыс при хроническом отравлении.

Ключевые слова: нитраты и нитриты, белые крысы, гистология.

В настоящее время ассортимент азотных удобрений в нашей стране достаточно широк и разнообразен. К важнейшим, разрешенным для применения в сельском хозяйстве, относятся нитратные, аммонийные, аммиачно-нитратные, амидные удобрения, комбинированные или полные удобрения, включающие азот, фосфор, калий.

В условиях высокого содержания нитратов и нитритов не исключена возможность образования и накопления в почве и растениях нитрозаминов, многие из которых обладают не только высокой токсичностью, но и выраженной мутагенной и канцерогенной активностью [В.Н. Жуленко, 2004].

Хроническое отравление животных нитратами и нитритами приводит к нарушению белкового и углеводного обменов, понижению воспроизводительной функции, снижению резистентности организма молодняка и возникновению дистрофических явлений во внутренних органах [Н.Н. Жестков, М.Я. Тремасов, 2004].

При остром и хроническом отравлении нитратами и нитритами животных иногда вынужденно убивают, поэтому возникает вопрос о наличии остаточных количеств этих токсических соединений в органах и тканях.

Целью нашей работы является изучение остаточных количеств и влияния нитритов на гистологические показатели органов и тканей белых крыс при хроническом отравлении.

Материалы и методы. Исследования проводили на белых крысах разного пола массой тела 95-100 г. При определении хронической токсичности, по принципу аналогов сформировано 4 группы белых крыс, по 12 в каждой. Первая группа служила контролем и получала обычную питьевую воду. Опытным животным задавали внутрь натрия нитрит в виде 0,2-1%-ных растворов ежедневно при помощи зонда в дозах: второй группе - 62,8 (1/5 ЛД50), третьей - 6,28 (1/50 ЛД50), четвертой - 3,14 (1/100 ЛД50) мг/кг. Препарат вводили крысам в течение 60 суток, убой совершали на 30 и 60 сутки. В ходе эксперимента отмечали поведенческие реакции, оценивали общее состояние, определяли остаточные количества нитрит иона в органах и тканях по ГОСТу 29299-92. Гистопрепараты окрашивали гематоксилином и эозином, увеличение х 100.

Результаты исследований. При вскрытии белых крыс на 30 сутки обнаруживали плохо свернувшуюся и нередко гемолизированную темного цвета кровь. В просвете бронхов наблюдается скопление пенистой жидкости с примесью крови, легкие отечны, участками гиперемированы. Сердце увеличено, под эпикардом и эндокардом видны множест-

венные точечные кровоизлияния. Наблюдаются дистрофические изменения в печени и почках, мышцы на вскрытии светло-красной окраски.

Установили, что в органах и тканях павших или вынужденно убитых животных при нитритном токсикозе обнаруживается неравномерность распределения этого токсиканта. Результаты эксперимента представлены в таблице 1.

Таблица 1

Остаточные количества натрия нитрита

Орган и Контроль Доза натрия нитрита, мг/кг

ткань 62,8 6,28 3,14

30 сутки

Почки не обнаружен 1,17***±0,008 0,194***±0,0016 0,027***±0,0016

Печень не обнаружен 0,61***±0,004 0,194***±0,0016 0,013***±0,0004

Селезенка не обнаружен 0,58***±0,005 0,165***±0,0012 0,013***±0,0008

Легкие не обнаружен 0,71***±0,01 0,184***±0,002 0,012***±0,004

Сердце не обнаружен 0,55***±0,003 0,157***±0,0012 0,012***±0,0012

Мышцы не обнаружен 0,510***±0,008 0,145***±0,005 0,011***±0,0016

60 сутки

Почки не обнаружен - 0,0116***±0,0008 не обнаружен

Печень не обнаружен - 0,0100***±0,0004 не обнаружен

Селезенка не обнаружен - не обнаружен не обнаружен

Легкие не обнаружен - 0,0100***±0,0004 не обнаружен

Сердце не обнаружен - не обнаружен не обнаружен

Мышцы не обнаружен - не Обнаружен не обнаружен

Примечание: ***-Р<0,001; На 60 сутки при дозе 62,8 мг/кг натрия нитрита все крысы пали.

Из результатов, приведенных в таблице, видно, что при введении крысам в течение 30 суток натрия нитрита в дозе 62,8 мг/кг наибольшая концентрация яда содержится в почках - 1,17 мг/кг, затем в легких - 0,71 мг/кг и в печени - 0,61 мг/кг массы тела, в селезенке, в сердце и в мышцах - 0,58 мг/кг; 0,55 мг/кг и 0,51 мг/кг соответственно.

При введении натрия нитрита животным в дозе 6,28 мг/кг, содержание токсиканта на 30 сутки составило в почках и печени 0,194 мг/кг, в других органах в эти же сроки было

выявлено убывание концентрации нитрита, и составило: в легких - 0,184 мг/кг; в селезенке - 0,165 мг/кг; в сердце - 0,157 мг/кг, в мышцах - 0,145 мг/кг.

При введении животным натрия нитрита в дозе 3,14 мг/кг в течение 30 суток максимальная его концентрация была обнаружена в почках (0,027 мг/кг). В печени и селезенке было выявлено одинаковое количество нитрита (по 0,013 мг/кг), меньше токсиканта содержалось в легких и сердечных мышцах по 0,012 мг/кг, в мышцах 0,0016 мг/кг.

У контрольной группы крыс в органах и тканях следовых количеств натрия нитрита обнаружено не было.

При введении дозы 62,8 мг/кг крысы второй группы до 60 суток не доживали. У животных, получавших натрия нитрит в дозе 6,28 мг/кг, содержание его в почках и печени составляло 0,0116 и 0,01 мг/кг, в остальных органах следов нитрит иона обнаружено не было.

Из результатов приведенных исследований видно, что в органах и тканях крыс, получавших в течение 60 суток натрия нитрит, обнаруживался он в следовых количествах.

Внутрижелудочное введение натрий нитрита белым крысам в дозе 62,8 мг/кг вызывает выраженные изменения гистоструктуры внутренних органов, которые представлены в виде рисунков (рис. 1-5).

Рис. 1. Изменения гистоструктуры печени

В печени наблюдается белковая дистрофия, кариопикноз, кариорексис, очаговый некробиоз гепатоцитов, лимфоцитарная инфильтрация вокруг сосудов, многочисленные микрофаги в синусоидах.

Рис. 2. Изменения гистоструктуры легких

В легких утолщение межальвеолярных перегородок, инфильтрация лимфоцитами, отек, очаговая эмфизема.

Рис. 3. Изменения гистоструктуры стенки желудка

Стенка желудка, все слои инфильтрированы лейкоцитами, лимфоцитами, дистрофические изменения клеток слизистой.

Рис. 4. Изменения гистоструктуры сердца

Сердце, сократительные нарушения, фрагментация кардиомиоцитов, исчезновение поперечной исчерченности.

Рис. 5. Изменения гистоструктуры селезенки Полнокровие и кровоизлияния в красной пульпе, фолликулы многочисленные, мелкие, в центре содержат разрушающиеся лимфоциты.

Выводы

1. Наибольшее количество натрия нитрита обнаружено при дозе 62,8 мг/кг на 30 сутки исследования в органах выделения 1,17 мг/кг, легких 0,71 мг/кг и печени 0,61 мг/кг соответственно. В остальных органах и тканях содержание натрия нитрита было значительно ниже.

2. При введение натрия нитрита в дозе 6,28 мг/кг на 60 сутки менее обнаруживается остаточное количество нитритов во внутренних органах, по-видимому, происходит привыкание организма к ядам и приобретается нечувствительность к данному токсиканту.

3. Введение натрия нитрита в дозе 62,8 мг/кг на 30 сутки вызывает выраженные изменения гистоструктуры внутренних органов. Наблюдается белковая дистрофия печени с нарушением структуры печеночных балок, кариопикнозом, кариорексисом, лимфогистиоцитарной инфильтрацией портальных трактов, имеют место лимфоцитарная инфильтрация вокруг сосудов, многочисленные микрофаги в синусойдах. В почках белковая дистрофия, деформация клубочков. В легких утолщение межальвеолярных перегородок, межуточный отек и лимфоцитарная инфильтрация. В стенке желудка все слои инфильтрированы лейкоцитами, лимфоцитами, клетки слизистой дистрофически изменены. В сердце наблюдались выраженные сократительные нарушения, фрагментация кардиомиоцитов, исчезновение поперечной исчерченности, очаговые некробиозы. В селезенке полнокровие и кровоизлияния в красной пульпе, многочисленные мелкие фолликулы, в центре которых содержатся разрушающиеся лимфоциты.

Следовательно, хроническое поступление натрия нитрита в организм белых крыс приводит не только к изменениям клинических, гематологических, биохимических показателей крови, но и сопровождается изменением гистоструктуры тканей внутренних органов.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. ГОСТ 29299-92. Мясо и мясные продукты. Метод определения нитрита. Взамен ГОСТ 8558.1-78; введ.

01.01.1994. М.:Изд-во стандартов, 1992. 6 с.

2. ГОСТ 29300-92. Мясо и мясные продукты. Метод определения нитрата. Взамен ГОСТ 8558.2-78; введ.

01.01.1994. М.:Изд-во стандартов, 1992. 9 с.

3. Жестков Н.Н. Отдаленные последствия нитрито-нитратов на организм / Н.Н.Жестков, М.Я.Тремасов // Материалы Всероссийской научно практической конференции по актуальным вопросам Агропромышленного комплекса. Казань, 2004. С. 125-127.

4. Жуленко В.Н. Ветеринарная токсикология / В.Н.Жуленко, М.И.Рабинович, Г.А.Таланов / Под ред. В.Н. Жуленко. М.: Колос, 2004. 384 с.