Изучение антигенной структуры вируса лейкоз крупного рогатого скота

виды декоративных птиц плохо их переносят. После антибиотикотерапии возникают побочные эффекты: резко снижается аппетит с последующим расстройством пищеварения, общего состояния; возможна быстрая гибель.

Среди заболеваний, приносящих значительный экономический ущерб в условиях зоопарков, особое место отводится гельминтозам, как достаточно широко распространенным инвазиям. Необходимо помнить не только о возможности гибели животных от гельминтозов, но и о патогенном влиянии гельминтов на организм, которое способствует снижению иммунитета и предрасположенности к различным заболеваниям. Кроме того, как показывают исследования некоторых авторов, возбудители многих

гельминтозов могут быть опасны не только для животных, но и для человека.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Актуальные ветеринарные проблемы в зоопарках. / Мат. Международ. семинара. Москва: 20-26 октября 2008 г. // Межвед. сб. науч. и науч.- метод. тр. - М.: Московский зоопарк, 2009.

2. Грекова О., Маетная Е., Кафанов Д. Дикий ужас // Москов. Комсомолец. -2003.

3. Блохин Г.И. Зоотехнические, зоогигиенические и ветеринарные аспекты зоокультуры// Вет. патология. -2006. - №2.

4. Брандт Х.П. и др. Болезни диких (зоопарковых) животных. Перевод. -Берлин, 1976.

ОРГАНИЗАЦИЯ ВЕТЕРИНАРНОГО ОБСЛУЖИВАНИЯ ДИКИХ ЖИВОТНЫХ

Юсупов С. А. Резюме

В статье изложен обзор исследований ветеринарного обслуживания диких животных. Сохранение здоровья диких животных при их содержании и разведении в зоопарках.

ORGANIZATION OF VETERINARY CARE OF WILD ANIMALS

Yusupov S.A. Summary

The article presents a review of studies of veterinary care of wild animals. Maintaining the health of wild animals during their keeping and breeding in zoos.

УДК 619:616-006.446:636.2

ИЗУЧЕНИЕ АНТИГЕННОЙ СТРУКТУРЫ ВИРУСА ЛЕЙКОЗ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Якупов Т.Р. - д.в.н, доцент; Джакаит Д.А. - аспирант; *Хаертынов К.С. - к.б.н., зав. лабораторией Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана *Научно-исследовательская лаборатория ГБОУ ДПО КГМА e-mail: jakait.akamuran@yahoo.co.uk

Ключевые слова: ВЛКРС, циркулирующий иммунный комплекс, белковые фракции, элекрофорез, иммуноблот анализ

Key words: BLV, circulating immune complex, protein fractions, electrophoresis, immunoblot analysis.

Основным сдерживающим фактором при разработке иммунохимических методов диагностики инфекционных болезней является качество используемого антигена. Существующие в настоящее время методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота не учитывают генетическое многообразие возбудителя болезни. Результаты научных исследований последних лет свидетельствуют о необходимости комплексного подхода при определении, как антигенов вируса, так и антител к ним в серологической диагностике лейкоза крупного рогатого скота. В статье описываются способ получения и изучения антигенных свойства белковых фракций ВЛКРС, выделенных из сыворотки крови инфицированных и больных лейкозом коров. На разработанный способ получен патент РФ на изобретение (№ 2564007) [3].

Материалы и методы. Сыворотки крови коров из неблагополучных по лейкозу хозяйств РТ; набор для выявления антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота в сыворотке крови и молоке методом ИФА производства ФГУП «Курская биофабрика»; циркулирующие иммунные комплексы

[9].

Результаты и обсуждение. При

выделении антигена ВЛКРС из сывороток крови больных лейкозом коров исходили из того, что вирусные частицы главным образом содержатся в составе ЦИК [1,8,10]. Технологию разрабатывали с учетом необходимости диссоциации ЦИК и избавления от сывороточных антител и всех остальных белков.

Получение антигена ВЛКРС из сывороток крови. Условно можно выделить 3 основные стадии:

1. Выделение ЦИК. Сыворотку крови

от больных лейкозом коров в объеме не менее 500мл смешивают раствором ПЭГ-6000 в 0,1М боратном буфере (рН-8,8) до 3% конечной концентрации. Перемешивают и оставляют на 24 часа при +4 °С, по истечении этого времени центрифугируют 10 мин при 3000 об./мин. Супернатант сливают, а осадок растворяют в 5-ти кратном объеме 3% раствора ПЭГ-6000 в боратном буфере и вновь центрифугируют в тех же условиях (промывка).

2. Диссоциация ЦИК и удаление глобулинов. Полученный осадок, содержащий ЦИК с компонентами вируса, растворяют в 3-х кратном объеме дистиллированной воды и выдерживают, периодически перемешивая, 1 час при 600С. По истечении этого времени пробу смешивают равным объемом насыщенного раствора сульфата аммония, осторожно перемешивают в течение 2-3 минуты и центрифугируют.

3. Выделение и очищение антигенного препарата. Надосадочную жидкость осторожно отделяют и диализируют при комнатной температуре в течение 48 часов против дистиллированной воды. Фильтруют через бумажный фильтр и концентрируют (не менее в 10 раз) против силикагеля L 100/250 для хроматографии.

Изучали электрофоретическую

подвижность полученных антигенных фракций в 12,5% полиакриламидном геле, а также проводили иммуноблот анализ полученных фракций с сывороткой крови инфицированных и больных лейкозом коров.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что исследуемый антиген является комплексным, содержащим различные белковые фракции вируса лейкоза. Как видно из электрофореграммы

молекулярные массы фракций составляет от 14 до 160 и более кД. В зависимости от стадии инфекционного процесса против каждой из них образуются антитела (рис.2 и рис.3). Следовательно, из-за того, что спектр свободно циркулирующих в крови антител меняется с развитием инфекционного процесса, полученный антиген позволит более полное обнаружение антител к возбудителю и способствует повышению эффективности диагностических мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота.

1гэ1гз1гз1гз и

МНМк;

и н

14.5

е.;

Рис.1 - Электрофореграмма белковых компонентов ВЛКРС окрашенных азотнокислым

серебром

Проводили иммуноблот анализ полученных фракций антигенов ВЛКРС с

сывороткой кров инфицированных и больных лейкозом коров.

14 24 31

А

Б

45 51

ШЩ I *

60 97

Рис.2 - Иммуноблотинг белковых компонентов ВЛКРС с сывороткой крови от гематологически больной лейкозом коровы.

В

Г

Рис.3 - Денситограммы иммунноблотаграмм сероактивных полипептидов ВЛКРС с сыворотками крови от инфицированных коров на разной стадии развития инфекции.

Обозначения:

А - сыворотка крови коровы в начальной степени инфекции, впервые реагировавшей на РИД

положительно;

Б, В - сыворотка крови коров, больных лейкозом на более поздних сроках болезни; Г - сыворотка крови гематологически больной коровы;

Антигенные свойства выделенных изучали в ИФА с использованием

белковых фракций вирусных частиц сывороток крови инфицированных ВЛКРС

и больных лейкозом коров

Заключение. В сыворотке крови, в циркулирующих иммунных комплексах инфицированных ВЛКРС коров

присутствуют различные белковые фракции вирионов [2,5,6]. Разработанный способ позволяет их экстрагировать и использовать в качестве антигена в иммунохимических реакциях для диагностики лейкоза крупного рогатого скота. Выделенный антиген по специфичности не уступает антигену gp51 применяемому в коммерческих наборах для ИФА, а по чувствительности даже превосходит.

Полученный антиген является комплексным, содержащим различные белковые фракции вируса лейкоза. Следовательно, из-за того, что спектр свободно циркулирующих в крови антител меняется с развитием инфекционного процесса, полученный антиген

поспособствует более полному

обнаружению антител к возбудителю и повышению эффективности

диагностических мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота.

Следует отметить, что наиболее перспективным, в исключении недостатков существующих методов диагностики лейкоза крупного рогатого скота, может являться применение методов иммуноблот анализа [4].

ЛИТЕРАТУРА:

1. Логинов С. И. Иммунные комплексы при лейкозе крупного рогатого скота/ С.И. Логинов// Ветеринарная патология/ Современные достижения и проблемы клеточной биотехнологии и иммунологии в ветеринарной медицине -2003- №1.- с.85-87.

2. Сергеев В.А и др.Структура и

биология вирусов животных.М, 1983.

3. Якупов Т.Р., Джакаит Д.А., Хаертынов К.С. Способ получения антигена ВЛКРС/ Патент РФ на изобретение №2564007, 2015.

4. Bicka L., J. Kuzmak, B. Kozaczynska, A. Plucianniczak and A. Skorupsa, 2001. Expression of bovine leukemia virus p24 in Escherichia coli and its use in immunoblotting assay. Acta. Biochemical Polonica, 48: 227—232.

5. lorins A, Gillet N, Asquith B et al (2007). Cell dynamics and immune response to BLV infection: a unifying model. Front BIOSCI 1(12):129-139.

6. Gillet N, Florins A, Boxus M, Burteau C et al (2007). Mechanism of leukemogenesis induced by bovine leukemia virus: prospects for novel anti-retroviral therapies in humans.Retrovirology 4:18-49.

7. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // U.K.Laemmli // Nature. -London, 1970. - V.227. - P.680-685.

8. Terukazu Odawara, Misao Onuma, Hiroyasu Yochikawa et.al. Circulating Immune Complexes Levels in Cows with Enzootic Bovine Leukemia // Jpn. J. Vet.Sci., 1987.-v.49.-p657-661.

9. Towbin H. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some application/ H. Towbin, T. Staechelin, J.Gordon // Proc. Natl. Sci. USA. 1979.-V.76.-P.4350-4354.

10. Ungar-Waron H. Circulating immune complexes in bovine leukemia virus (BLV)-infected cattle/ H.Ungar-Waron, J.Brenner, R.Paz, Z.Trainin// Vet.Immunol.Immunopathol. 1992 Oct: 34 (12): 173-9; 5.

ИЗУЧЕНИЕ АНТИГЕННОЙ СТРУКТУРЫ ВИРУСА ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО

СКОТА

Якупов Т.Р., Джакаит Д.А., Хаертынов К.С. Резюме

В статье описаны способ получения антигена ВЛКРС из крови больных лейкозом коров и результаты исследований по изучению его качества. Разработанный способ позволяет их экстрагировать и использовать в качестве антигена в иммунохимических реакциях для диагностики лейкоза крупного рогатого скота. Полученный антиген является комплексным, содержащим различные белковые фракции ВЛКРС с молекулярной массой от 14 до 160 и более кД. По специфичности не уступает антигену gp51 применяемому в коммерческих наборах для ИФА, а по чувствительности превосходит.

THE STUDY OF ANTIGENIC STRUCTURE OF BOVINE LEUKEMIA VIRUS

Yakupov T.R., Jakait J.A., Khaertinov K.S.

Summary

In this article, the method of obtaining bovine leukemia virus antigen from the blood of cows infected with leucosis and the research results to explore its quality have been outlined. The developed method allows extraction and the use of these proteins as an antigen in immunochemical reactions for diagnosing bovine leucosis. The obtained antigen is complex, containing different protein fractions of bovine leukemia virus with molecular mass of 14 to 160 kJ. The specificity of extracted antigen corresponds to that of antigen gp51 used in the commercial kits for ELISA, and its sensitivity predominates that of the commercial kits antigen gp51.

УДК 378.661.9:378.1:378.180.6

УРОВЕНЬ ОРГАНИЗАЦИОННОЙ КУЛЬТУРЫ КАЗАНСКОЙ ГАВМ ИМЕНИ Н.Э. БАУМАНА ГЛАЗАМИ СТУДЕНТОВ

Зарипов Р.Ф. - помощник проректора по учебно-воспитательной работе; Галиуллина Г.Ш. - секретарь Студенческого совета Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана " " тел.: (843) 273-97-75 "

Ключевые слова: организационная культура, восприятие студентов, корпоративные взаимоотношения, управление коллективом, репутация.

Key word: organizational culture, the perception of students, corporate relations, team management, reputation.

Организационная культура -неотъемлемая часть любой организации. Это совокупность элементов культуры, выработанная в конкретной организации, выступающая средством объединения членов одной организации. При правильном подходе, организационная культура становится эффективным инструментом управления коллективом. Но для того, чтобы начать использовать этот инструмент, сначала необходимо провести первичную оценку сложившейся ситуации.

Следует заметить, что

организационная культура вуза определятся как система определенных ценностей, обычаев, традиций и убеждений, разделяемых сотрудниками и студентами вуза, которые выражены в нормах, образцах, стандартах и стереотипах поведения и мышления, а также ожиданий друг от друга руководителей, сотрудников и студентов вуза.

Для определения состояния организационной культуры организации существуют разработанные и

апробированные опросники, анкеты и

методики. Однако в них не учитывается специфика высшего учебного заведения, его многогранность и многофакторность. Мы подготовили анкету, состоящую из 18 самых насущных вопросов, обозначенных студентами всех пяти лет обучения. Эту анкету заполнили 146 студентов первого года обучения. Она не предполагает в своей основе математической модели. Данные, получаемые в результате работы с ней, предназначены для аналитической обработки.

Проанализировав эти анкеты, можно выявить какие конкретные мероприятия нужно провести для формирования организационной культуры и управления ею, какие документы разработать и внедрить. Практическая значимость исследования состоит в том, что полученные результаты способствуют повышению эффективности управления организационно культурой вуза, качества образования студентов высшей школы и, как следствие, росту репутации и конкурентоспособности вуза.

Анализ результатов.