АНТИТЕЛА ПРОТИВ CD40 И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое связывается с CD40 (член 5 суперсемейства рецепторов TNF), содержащий:
вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую области, определяющие комплементарность, (CDR) 1, 2 и 3, где область VH CDR1 содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична выбранной аминокислотной последовательности VH CDR1, область VH CDR2 содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична выбранной аминокислотной последовательности VH CDR2, и область VH CDR3 содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична выбранной аминокислотной последовательности VH CDR3; и
вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую CDR 1, 2 и 3, где область VL CDR1 содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична выбранной аминокислотной последовательности VL CDR1, область VL CDR2 содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична выбранной аминокислотной последовательности VL CDR2, и область VL CDR3 содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична выбранной аминокислотной последовательности VL CDR3,
где выбранные аминокислотные последовательности VH CDR 1, 2 и 3 и выбранные аминокислотные последовательности VL CDR 1, 2 и 3 представляют собой одно из следующих:
(1) выбранные аминокислотные последовательности VH CDR 1, 2, 3 представляют SEQ ID NO:1, 2, 3, соответственно, и выбранные аминокислотные последовательности VL CDR 1, 2, 3 представляют SEQ ID NO:4, 5, 6, соответственно;
(2) выбранные аминокислотные последовательности VH CDR 1, 2, 3 представляют SEQ ID NO:7, 8, 9, соответственно, и выбранные аминокислотные последовательности VL CDR 1, 2, 3 представляют SEQ ID NO:10, 11, 12, соответственно;
(3) выбранные аминокислотные последовательности VH CDR 1, 2, 3 представляют SEQ ID NO:13, 14, 15, соответственно, и выбранные аминокислотные последовательности VL CDR 1, 2, 3 представляют SEQ ID NO:16, 17, 18, соответственно.
2. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где VH содержит CDR 1, 2, 3 с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:1, 2 и 3, соответственно, и VL содержит CDR 1, 2, 3 с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:4, 5 и 6, соответственно.
3. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где VH содержит CDR 1, 2, 3 с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:7, 8 и 9, соответственно, и VL содержит CDR 1, 2, 3 с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:10, 11 и 12, соответственно.
4. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где VH содержит CDR 1, 2, 3 с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:13, 14 и 15, соответственно, и VL содержит CDR 1, 2, 3 с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:16, 17 и 18, соответственно.
5. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-4, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с человеческим CD40.
6. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-5, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент представляет собой гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
7. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-6, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент представляет собой одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFV).
8. Нуклеиновая кислота, содержащая полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий:
(1) тяжелую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую области, определяющие комплементарность, (CDR) 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:1, 2, и 3, соответственно, и где VH в паре с вариабельной областью легкой цепи (VL), содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:33, 34, 35, 36 или 53, связываются с CD40;
(2) легкую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащие VL, содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:4, 5 и 6, соответственно, и где VL в паре с VH, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:30, 31, 32 или 52, связывается с CD40;
(3) тяжелую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:7, 8 и 9, соответственно, и где VH в паре с вариабельной областью легкой цепи (VL), содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:41, 42, 43 или 55, связываются с CD40;
(4) легкую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащие VL, содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:10, 11 и 12, соответственно, и где VL в паре с VH, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:37, 38, 39, 40 или 54, связываются с CD40;
(5) тяжелую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:13, 14, 15 соответственно, и где VH в паре с вариабельной областью легкой цепи (VL), содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:48, 49, 50, 51 или 57, связываются с CD40;
(6) легкую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащие VL, содержащий CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:16, 17 и 18, соответственно, и где VL в паре с VH, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO:44, 45, 46, 47 или 56, связываются с CD40.
9. Нуклеиновая кислота по п.8, где нуклеиновая кислота содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий тяжелую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащий VH, содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:1, 2 и 3, соответственно.
10. Нуклеиновая кислота по п.8, где нуклеиновая кислота содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий легкую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащий VL, содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:4, 5 и 6, соответственно.
11. Нуклеиновая кислота по п.8, где нуклеиновая кислота содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий тяжелую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащий VH, содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:7, 8 и 9, соответственно.
12. Нуклеиновая кислота по п.8, где нуклеиновая кислота содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий легкую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащий VL, содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:10, 11 и 12, соответственно.
13. Нуклеиновая кислота по п.8, где нуклеиновая кислота содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий тяжелую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащий VH, содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:13, 14 и 15, соответственно.
14. Нуклеиновая кислота по п.8, где нуклеиновая кислота содержит полинуклеотид, кодирующий полипептид, содержащий легкую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, содержащий VL, содержащую CDR 1, 2 и 3, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO:16, 17 и 18, соответственно.
15. Нуклеиновая кислота по любому из пп.8-14, где VH в паре с VL специфически связывается с человеческим CD40, или VL в паре с VH специфически связывается с человеческим CD40.
16. Нуклеиновая кислота по любому из пп.8-15, где тяжелая цепь иммуноглобулина или ее фрагмент представляют собой тяжелую цепь гуманизированного иммуноглобулина или ее фрагмент, а легкая цепь иммуноглобулина или ее фрагмент представляют собой легкую цепь гуманизированного иммуноглобулина или ее фрагмент.
17. Нуклеиновая кислота по любому из пп.8-16, где нуклеиновая кислота кодирует одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFV).
18. Нуклеиновая кислота по любому из пп.8-17, где нуклеиновая кислота представляет собой кДНК.
19. Вектор, содержащий одну или более нуклеиновых кислот по любому из пп.8-18.
20. Вектор, содержащий две нуклеиновые кислоты по любому из пп.8-18, где вектор кодирует область VL и область VH, которые вместе связываются с CD40.
21. Пара векторов, где каждый вектор содержит одну из нуклеиновых кислот по любому из пп.8-18, где вместе пара векторов кодирует область VL и область VH, которые вместе связываются с CD40.
22. Клетка, содержащая вектор по п.19 или 20 или пару векторов по п.21.
23. Клетка по п.22, где клетка представляет собой клетку СНО.
24. Клетка, содержащая одну или более нуклеиновых кислот по любому из пп.8-18.
25. Клетка, содержащая две нуклеиновые кислоты по любому из пп.8-18.
26. Клетка по п.25, где две нуклеиновые кислоты вместе кодируют область VL и область VH, которые вместе связываются с CD40.
27. Способ получения антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, включающий
(a) культивирование клетки по любому из пп.22-26 в условиях, достаточных для того, чтобы клетка продуцировала антитело или антигенсвязывающий фрагмент; и
(b) сбор антитела или антигенсвязывающего фрагмента, продуцируемых клеткой.
28. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое связывается с CD40, содержащие
вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична выбранной последовательности VH, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична выбранной последовательности VL, где выбранная последовательность VH и выбранная последовательность VL представляют собой одну из следующих:
(1) выбранная последовательность VH представляет собой SEQ ID NO:30, 31, 32 или 52, и выбранная последовательность VL представляет собой SEQ ID NO:33, 34, 35, 36 или 53;
(2) выбранная последовательность VH представляет собой SEQ ID NO:37, 38, 39, 40 или 54, и выбранная последовательность VL представляет собой SEQ ID NO:41, 42, 43 или 55;
(3) выбранная последовательность VH представляет собой SEQ ID NO:44, 45, 46, 47 или 56, и выбранная последовательность VL представляет собой SEQ ID NO:48, 49, 50, 51 или 57.
29. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.28, где VH содержит последовательность SEQ ID NO:40, и VL содержит последовательность SEQ ID NO:42.
30. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.28, где VH содержит последовательность SEQ ID NO:39, и VL содержит последовательность SEQ ID NO:43.
31. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.28-31, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент специфически связывается с CD40 человека.
32. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.28-32, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент представляет собой гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
33. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.28-30, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент представляет собой одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFV).
34. Конъюгат антитело-лекарственное средство, содержащий антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-7 и 28-33, ковалентно связанные с терапевтическим агентом.
35. Конъюгат антитело - лекарственное средство по п.34, где терапевтический агент представляет собой цитотоксический или цитостатический агент.
36. Способ лечения онкологического пациента, где способ включает введение пациенту терапевтически эффективного количества композиции, содержащей антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-7 и 28-33, или конъюгат антитело - лекарственное средство по п.34 или 35.
37. Способ по п.36, где у пациента имеется солидная опухоль.
38. Способ по п.36, где онкологическое заболевание представляет собой меланому, карциному поджелудочной железы, мезотелиому или гемобластоз.
39. Способ по п.36, где онкологическое заболевание представляет собой неходжкинскую лимфому, лимфому или хронический лимфоцитарный лейкоз.
40. Способ уменьшения скорости роста опухоли, где способ включает
контакт опухолевой клетки с эффективным количеством композиции, содержащей антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-7 и 28-33 или конъюгат антитело - лекарственное средство по п.34 или 35.
41. Способ уничтожения опухолевой клетки, где способ включает
контакт опухолевой клетки с эффективным количеством композиции, содержащей антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-7 и 28-33 или конъюгат антитело - лекарственное средство по п.34 или 35.
42. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-7 и 28-33 и фармацевтически приемлемый носитель.
43. Фармацевтическая композиция, содержащая конъюгат антитело - лекарственное средство по п.34 или 35 и фармацевтически приемлемый носитель.