ТРАНЗИТНЫЙ ПЕПТИД ХЛОРОПЛАСТОВ

1. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, содержащая нуклеотидную последовательность, которая кодирует пептид длиной менее 79 аминокислот, где пептид по меньшей мере на 80% идентичен SEQ ID NO: 2, функционально связанную в рамке считывания с представляющей интерес кодирующей нуклеотидной последовательностью.
2. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где пептид имеет длину, составляющую 71 аминокислоту.
3. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где пептид по меньшей мере на 85% идентичен SEQ ID NO: 2.
4. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где пептид по меньшей мере на 90% идентичен SEQ ID NO: 2.
5. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где пептид по меньшей мере на 95% идентичен SEQ ID NO: 2.
6. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где пептид по меньшей мере на 98% идентичен SEQ ID NO: 2.
7. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где пептид представляет собой SEQ ID NO: 2.
8. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где представляющая интерес кодирующая нуклеотидная последовательность представляет собой SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 6.
9. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где нуклеотидная последовательность, которая кодирует пептид, специфически гибридизуется с SEQ ID NO: 1.
10. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1,
где по
меньшей мере часть нуклеотидной последовательности, которая кодирует пептид, происходит из организма, выбранного из группы, состоящей из прокариот, низших фотосинтезирующих эукариот и хлорофитов.
11. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 10, где часть нуклеотидной последовательности, которая кодирует пептид, происходит из Dunaliella salina или Chlamydamonas reinhardtii.
12. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 10, где нуклеотидная последовательность, которая кодирует пептид, происходит из организма, выбранного из группы, состоящей из прокариот, низших фотосинтезирующих эукариот и хлорофитов.
13. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 12, где нуклеотидная последовательность, которая кодирует пептид, происходит из Dunaliella salina или Chlamydamonas reinhardtii.
14. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, содержащая нуклеотидную последовательность, которая кодирует пептид, содержащий непрерывную аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична непрерывной аминокислотной последовательности в SEQ ID NO: 2, где пептид дополнительно содержит вторую непрерывную аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80% идентична непрерывной аминокислотной последовательности из транзитного пептида хлоропластов, отличного от SEQ ID NO: 2, где нуклеотидная последовательность, кодирующая пептид, функционально связана в рамке считывания с представляющей интерес нуклеотидной последовательностью.
15. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 14, где
непрерывная аминокислотная последовательность из транзитного пептида хлоропластов, отличного от SEQ ID NO: 2, происходит из Dunailella, Amaranthus или Chlamydamonas reinhardtii.
16. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 15, где пептид содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 6 и SEQ ID NO: 7.
17. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где нуклеотидная последовательность функционально связана с одной или несколькими регуляторными последовательностями.
18. Полипептид, кодируемый молекулой нуклеиновой кислоты по п. 1.
19. Полипептид по п. 18, где мишенью полипептида является пластида в клетке, содержащей пластиду.
20. Полипептид по п. 19, где полипептид содержит транзитный пептид хлоропластов, который удаляется, когда полипептид нацеливается в пластиду.
21. Полипептид по п. 20, где полипептид содержит нацеленный в хлоропласты пептид, который остается, когда транзитный пептид хлоропластов удаляется, где нацеленный в хлоропласты пептид кодируется представляющей интерес кодирующей нуклеотидной последовательностью.
22. Полипептид по п. 18, где представляющая интерес кодирующая нуклеотидная последовательность кодирует биологически активный пептид.
23. Полипептид по п. 18, где представляющая интерес кодирующая нуклеотидная последовательность кодирует флуоресцентный пептид.
24. Полипептид по п. 22, где биологически активный пептид представляет собой фермент.
25. Полипептид по п. 22, где биологически активный пептид обычно экспрессируется в пластиде клетки, в которой пептид экспрессируется нативным образом.
26. Полипептид по п. 22, где биологически активный пептид вовлечен в процесс, выбранный из группы, состоящей из устойчивости к гербицидам, устойчивости к вирусам, устойчивости к бактериальным патогенам, устойчивости к насекомым, устойчивости к круглым червям, устойчивости к грибам, силы роста растений, урожайности растений, температурной устойчивости, устойчивости к условиям почвы, устойчивости к низкому уровню освещенности, устойчивости к низкому уровню воды, устойчивости к высокому уровню воды, устойчивости химической среде, окраски семян, модификации крахмала, синтеза аминокислот, фотосинтеза, синтеза жирных кислот, синтеза масел, синтеза аротиноидов, синтеза терпеноидов, синтеза крахмала и устойчивости к гербицидам.
27. Полипептид по п. 22, где биологически активный пептид выбран из группы, состоящей из зеаксантинэпоксидазы, холинмонооксигеназы, феррохелатазы, десатуразы омега-3 жирных кислот, глутаминсинтетазы, провитамина A, гормонов, белков Bt-токсина и маркеров, пригодных для идентификации растений, содержащих представляющий интерес признак.
28. Полипептид по п. 26, где биологически активный пептид вовлечен в устойчивость к гербицидам.
29. Полипептид по п. 28, где биологически активный пептид
выбран из группы, состоящей из: ацетолактазсинтазы (ALS), мутантной ALS, предшественников ALS, 3-енолпирувилшикимат-5-фосфатсинтетазы (EPSPS), CP4 EPSPS и EPSPS класса III.
30. Экспрессирующий вектор растений, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п. 17.
31. Растительный материал, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п. 1.
32. Растительный материал по п. 31, где растительный материал выбран из группы, состоящей из клетки растения, ткани растения, культуры ткани растения, культуры каллюса, части растения и целого растения.
33. Растительный материал по п. 32, дополнительно содержащий полипептид, содержащий пептид.
34. Растительный материал по п. 33, где представляющая интерес нуклеотидная последовательность кодирует часть полипептида, мишенью которого является пластида в клетке растительного материала.
35. Растительный материал по п. 31, где молекула нуклеиновой кислоты стабильно встроена в геном клетки из растительного материала.
36. Растительный материал по п. 31, где растительным материалом является целое растение.
37. Растительный материал по п. 31, где растительный материал происходит из растения, выбранного из группы, состоящей из Arabidopsis, люцерны, Brassica, боба, брокколи, капусты, моркови, цветной капусты, сельдерея, китайской капусты, хлопка, огурца, баклажана, салата-латука, дыни, гороха, перца, арахиса,
картофеля, тыквы обыкновенной, хрена, рапса, шпината, сои, тыквы крупноплодной, сахарной свеклы, подсолнечника, табака, томата, арбуза, кукурузы, лука, риса, сорго, пшеницы, ржи, проса культурного, сахарного тростника, овса, тритикале, проса прутьевидного и травы рулонного газона.
38. Способ получения трансгенного растительного материала, причем способ включает:
получение выделенной молекулы нуклеиновой кислоты по п. 1; и
трансформацию растительного материала молекулой нуклеиновой кислоты.
39. Способ по п. 38, где растительный материал выбран из группы, состоящей из клетки растения, ткани растения, культуры ткани растения, культуры каллюса, части растения и целого растения.
40. Способ по п. 39, где растительный материал не является целым растением.
41. Трансгенный растительный материал, полученный способом по п. 38.
42. Трансгенный растительный материал, полученный способом способ по п. 40.
43. Трансгенное растение, регенерировавшее из трансгенного растительного материала по п. 42.
44. Товарный продукт трансгенного растения, изготовленный из растительного материала по п. 38.
45. Трансгенный растительный материал по п. 41, где представляющая интерес кодирующая нуклеотидная последовательность кодирует биологически активный пептид.
46. Трансгенный растительный материал по п. 45, где биологически активный пептид вовлечен в процесс, выбранный из группы, состоящей из устойчивости к гербицидам, устойчивости к вирусам, устойчивости к бактериальным патогенам, устойчивости к насекомым, устойчивости к круглым червям, устойчивости к грибам, силы роста растений, урожайности растений, температурной устойчивости, устойчивости к условиям почвы, устойчивости к низкому уровню освещенности, устойчивости к низкому уровню воды, устойчивости к высокому уровню воды, устойчивости химической среде, окраски семян, модификации крахмала, синтеза аминокислот, фотосинтеза, синтеза жирных кислот, синтеза масел, синтеза аротиноидов, синтеза терпеноидов, синтеза крахмала и устойчивости к гербицидам.
47. Трансгенный растительный материал по п. 45, где биологически активный пептид выбран из группы, состоящей из зеаксантинэпоксидазы, холинмонооксигеназы, феррохелатазы, десатуразы омега-3 жирных кислот, глутаминсинтетазы, провитамина A, гормонов, белков Bt-токсина и маркеров, пригодных для идентификации растений, содержащих представляющий интерес признак.
48. Трансгенный растительный материал по п. 46, где биологически активный пептид вовлечен в устойчивость к гербицидам.
49. Трансгенный растительный материал по п. 48, где биологически активный пептид выбран из группы, состоящей из: ацетолактазсинтазы (ALS), мутантной ALS, предшественников ALS, 3-енолпирувилшикимат-5-фосфатсинтетазы (EPSPS), CP4 EPSPS и
EPSPS класса III.
50. Трансгенный растительный материал по п. 48, где растительный материал обладает увеличенной резистентностью к гербицидам или устойчивостью к гербицидам по сравнению с растительным материалом дикого типа того же вида.
51. Растительный материал по п. 32, где растительный материал представляет собой клетку растения, которая неспособна регенерировать с образованием растения.
52. Способ по п. 39, где растительный материал представляет собой клетку растения, которая неспособна регенерировать с образованием растения.