НОВАЯ ПРОТЕАЗА ГРИБОВ И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Фермент сериновая протеаза грибов, характеризующийся тем, что он обладает активностью сериновой протеазы и включает аминокислотную последовательность зрелого фермента Fe_RF6318, определенного в SEQ ID №15, или аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 86% идентичную аминокислотной последовательности зрелого фермента Fe_RF6318, определенного в SEQ ID №15.
2. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что его можно получить из Fusarium equiseti.
3. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он обладает активностью сериновой протеазы и включает аминокислотную последовательность SEQ ID №15.
4. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что зрелая форма указанного фермента имеет молекулярную массу от 20 до 35 кДа.
5. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что оптимальная температура указанного фермента при рН 9 в 15-минутной реакции с казеином в качестве субстрата составляет от 30°С до 70°С.
6. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что при 50°С в 15-минутной реакции с казеином в качестве субстрата он имеет рН-оптимум в диапазоне по меньшей мере от рН 6 до рН 11.
7. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он способен разрушать и удалять белковые загрязнители в присутствии моющего средства в диапазоне от 10°С до 60°С.
8. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он кодируется выделенной полинуклеотидной последовательностью, которая гибридизуется в жестких условиях с полинуклеотидной последовательностью, включенной в плазмиду pALK2521, содержащую нуклеотидную последовательность SEQ ID №9, которая сохранена в Eischerichia coli RF7664 под регистрационным номером DSM 22171.
9. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он кодируется выделенной полинуклеотидной последовательностью, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность зрелого фермента Fe_RF6318, определенного в SEQ ID №15, или аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 86% идентичную аминокислотной последовательности зрелого Fe_RF6318, определенного в SEQ ID №15.
10. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он кодируется выделенной нуклеиновокислотной молекулой, которая кодирует полипептид, включающий аминокислотную последовательность, охарактеризованную в SEQ ID №15.
11. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он кодируется выделенной нуклеиновокислотной молекулой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID №14.
12. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он кодируется полинуклеотидной последовательностью, включенной в плазмиду pALK2529, сохраненную в Eischerichia coli RF7800 под регистрационным номером DSM 22172.
13. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он продуцируется из рекомбинантного экспрессионного вектора, содержащего нуклеиновокислотную молекулу, кодирующую сериновую протеазу грибов по любому из пп.1-12, функционально связанную с регуляторными последовательностями, способными направлять экспрессию гена, кодирующего сериновую протеазу, в подходящем хозяине.
14. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он продуцируется в гетерологичном хозяине.
15. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он продуцируется в микробном хозяине.
16. Фермент сериновая протеаза грибов по п.1, характеризующийся тем, что он продуцируется в хозяине рода Trichoderma, Aspergillus, Fusarium, Humicola, Chrysosporium, Neurospora, Rhizopus, Penicillium и Mortiriella.
17. Фермент сериновая протеаза грибов по п.16, характеризующийся тем, что он продуцируется в Trichoderma или Aspergillus.
18. Фермент сериновая протеаза грибов по п.17, характеризующийся тем, что он продуцируется в Т. reesei.
19. Выделенная нуклеиновокислотная молекула, кодирующая фермент сериновую протеазу грибов, выбранная из группы, включающей:
(а) нуклеиновокислотную молекулу, кодирующую полипептид, имеющий активность сериновой протеазы и включающий аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID №15;
(б) нуклеиновокислотную молекулу, кодирующую полипептид, имеющий активность сериновой протеазы и по меньшей мере на 86% идентичный аминокислотной последовательности SEQ ID №15;
(в) нуклеиновокислотную молекулу, содержащую кодирующую последовательность нуклеотидной последовательности, показанной в SEQ ID №10;
(г) нуклеиновокислотную молекулу, содержащую кодирующую последовательность полинуклеотидной последовательности, содержащейся в DSM 22171 или DSM 22172;
(д) нуклеиновокислотную молекулу, кодирующая последовательность которой отличается от кодирующей последовательности нуклеиновокислотной молекулы любого из пп. от (в) до (г) из-за вырожденности генетического кода; а также
(е) нуклеиновокислотную молекулу, гибридизирующуюся в жестких условиях с нуклеиновокислотной молекулой, содержащейся в DSM 22171, и кодирующую полипептид, имеющий активность сериновой протеазы и аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 86% идентичную аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID №15.
20. Рекомбинантный вектор экспрессии, включающий нуклеотидную последовательность по п.19, функционально связанную с регуляторными последовательностями, способными направлять экспрессию указанного гена, кодирующего сериновую протеазу, в подходящем хозяине.
21. Клетка-хозяин, содержащая рекомбинантный экспрессионный вектор по п.20.
22. Клетка-хозяин по п.21, характеризующаяся тем, что она является микробным хозяином.
23. Клетка-хозяин по п.21 или 22, характеризующаяся тем, что она является нитчатым грибом.
24. Клетка-хозяин по п.21 или 22, характеризующаяся тем, что она принадлежит роду Trichoderma, Aspergillus, Fusarium, Humicola, Chrysosporium, Neurospora, Rhizopus, Penicillium и Mortiriella.
25. Клетка-хозяин по п.24, характеризующаяся тем, что она является Trichoderma или Aspergillus.
26. Клетка-хозяин по п.25, характеризующаяся тем, что она является Т. reesei.
27. Способ производства полипептида, обладающего активностью сериновой протеазы, включающий этап культивирования клетки-хозяина по любому из пп.21-26 и этап восстановления полипептида.
28. Полипептид, обладающий активностью сериновой протеазы, который кодируется нуклеиновой кислотой по п.19 и может быть получен в соответствии со способом по п.27.
29. Способ получения ферментного препарата, содержащего полипептид, обладающий активностью сериновой протеазы, при этом указанный способ включает этап культивирования клетки-хозяина по любому из пп.21-26 и либо этап восстановления полипептида из клетки, либо этап выделения клетки из культуральной среды и получения супернатанта.
30. Ферментный препарат, получаемый в соответствии со способом по п.29.
31. Ферментный препарат, который включает фермент сериновую протеазу по любому из пп.1-18.
32. Ферментный препарат по п.30 или 31, характеризующийся тем, что он включает другие ферменты, выбранные из группы протеазы, амилазы, целлюлазы, липазы, ксиланазы, маннаназы, кутиназы, пектиназы или оксидазы с или без посредника.
33. Ферментный препарат по п.30 или 31, характеризующийся тем, что он включает подходящую добавку, выбранную из группы стабилизаторов, буферов, поверхностно-активных веществ, структурообразователей, отбеливающих агентов, посредников, антикоррозионных агентов, средств, препятствующих распространению грязи по ткани после стирки, каустиков, абразивов, оптических отбеливателей, красителей, пигментов и консервантов.
34. Ферментный препарат по п.30 или 31, характеризующийся тем, что он находится в форме жидкости, порошка или гранулята.
35. Фермент сериновая протеаза по любому из пп.1-18 для применения в моющих средствах, для обработки волокон, для обработки шерсти, для обработки волос, для обработки кожи, для обработки продуктов питания или кормов или для любых применений, связанных с модификацией, разрушением или удалением белкового материала.
36. Ферментный препарат по любому из пп.30-31 для применения в моющих средствах, для обработки волокон, для обработки шерсти, для обработки волос, для обработки кожи, для обработки продуктов питания или кормов или для любых применений, связанных с модификацией, разрушением или удалением белкового материала.
37. Фермент сериновая протеаза по любому из пп.1-18 для применения в виде добавки к моющему средству, в частности жидких моющих средствах или стиральных порошках.
38. Ферментный препарат по любому из пп.30-31 для применения в виде добавки к моющему средству, в частности жидких моющих средствах или стиральных порошках.