СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩЕЙ АЛПРАЗОЛАМ
METHOD FOR PREPARING PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING ALPRAZOLAM

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и может быть использовано для получения пролонгированной лекарственной формы алпразолама. Композиция содержит микрокапсулы, состоящие из алпразолама, подходящего фармацевтического носителя и полимерной матрицы.
Известны способы, с помощью которых фармацевтические субстанции в виде микрочастиц можно включить в капсулу. В данных способах соединения для введения в микрокапсулу диспергируют в растворителе, содержащем материал, который способен образовывать оболочку. На последней стадии получения происходит удаление растворителя из микрочастиц с дальнейшим получением капсул с заданными свойствами.
Описан способ получения микрокапсул путем эмульгирования водного раствора действующего вещества в органической фазе (получение первичной эмульсии типа масло-в-воде) с дальнейшим соединением первичной эмульсии и гидрофильной фазы, состоящей из водного раствора стабилизатора эмульсии.
Удаление растворителя из микрочастиц проводят выпариванием с дальнейшим получением целевого продукта. В качестве стабилизатора вторичной эмульсии может использоваться полиглюкин, разрешенный к применению в составе парентерально вводимых лекарственных средств (Патент РФ 2326655).
Удаление растворителя из дисперсии микрочастиц в водной среде можно проводить путем нагревания или при понижении давления (Патент США 3691090, Патент США 3891570).
Известны способы получения микрочастиц путем растворения действующего вещества и биоразлагаемого полимера в органическом растворителе или смеси растворителей с дальнейшим смешением с водной фазой и получением эмульсии типа масло-в-воде.
Удаление растворителя из полученного продукта проводят выпариванием при повышенной температуре или при пониженном давлении (Патент РФ 2178695, Патент РФ 2433818).
Наиболее близким по техническому решению к заявляемому способу получения является получение микрокапсул рисперидона на основе поли-D,L-лактид-ко-гликолида (Патент РФ 2178695).
Согласно данному изобретению микрокапсулы рисперидона получают в несколько этапов: 1) смешивание поливинилового спирта, бензилового спирта и этилацетата (раствор А), 2) растворение поли-D,L-лактид-ко-гликолида в этилацетате и бензиловом спирте (раствор Б), 3) добавление в раствор Б рисперидона с последующим его растворением, 4) смешивание растворов А и Б в присутствии этилацетата, натрия бикарбоната безводного, натрия карбоната безводного в статической мешалке (Патент США 4511258), 5) разделение микрочастиц по размерам с помощью сита и ситчатой колонки, 6) сушка, взвешивание.
На наш взгляд, недостатками данного способа является то, что при получении микрокапсул наблюдается большой разброс в размерах (от 25 до 180 мкм), который создает трудности при приготовлении парентеральных растворов определенной концентрации; использование для осуществления процесса сложного оборудования; многостадийность процесса получения рисперидона.
Технической задачей предлагаемого изобретения является получение пролонгированной парентеральной лекарственной формы алпразолама на основе сополимера молочной и гликолевой кислот.
Технический результат достигается при использовании предложенного способа, который состоит в следующем.
Точные массы активного вещества и полимерного материала растворяют в небольшом объеме хлороформа, затем по каплям вводят полученный раствор в воду очищенную, содержащую ПАВ при постоянном перемешивании при помощи гомогенизатора со скоростью 20000 об/мин В качестве ПАВ используют 3% водный раствор поливинилового спирта (ПВС). После этого из полученной первичной эмульсии полностью удаляют хлороформ в течение 24 часов, образовавшиеся микрокапсулы отмывают и отделяют центрифугированием. В результате получаются микрокапсулы, которые по размерам практически одинаковы (размер частиц от 290-400 нм).
Полимерным материалом оболочки микрочастиц данного изобретения является поли-D,L-лактид-ко-гликолид (сополимер поли-D,L-молочной кислоты и полигликолевой кислоты). Молярное соотношение лактида к гликолиду в таком сополимере должно быть 50:50.
Степень включения лекарственного вещества в микрочастицы обычно колеблется от 32-42%.
Полученная первичная эмульсия является стабильной, и поэтому растворитель после первой стадии можно частично удалить из органической фазы. Растворитель удаляют при температуре 20°C, что позволяет поддерживать скорость удаления растворителя оптимальной. На первой стадии растворитель удаляется от 10 до 90%.
Первичную эмульсию получают механическим взбалтыванием. Для этого используют методику капсулирования активного агента для получения микрочастиц с контролируемым высвобождением лекарственного средства с помощью гомогенизатора.
Полученная эмульсия содержит микрочастицы, включающие активное лекарственное вещество, капсулированное в полимерном материале.
Микрочастицы, полученные предлагаемым способом, имеют, как правило, сферическую форму, хотя могут быть и неправильной формы. Размер полученных микрочастиц составляет от 290 до 400 мкм. Можно смешивать разные размеры или типы частиц с тем, чтобы вводить пациенту активный агент по многофазной схеме и/или схеме, которая обеспечивает введение разных агентов в разное время, или смесь агентов одновременно.
Предлагаемый способ получения фармацевтической композиции с алпразоламом характеризуется следующими примерами.
Пример 1. Точную навеску алпразолама (0,025 г) растворят в 2 мл хлороформа и перемешивают до полного его растворения. Отдельно готовят раствор поли-D,L-лактид-ко-гликолида, для чего в 2 мл хлороформа растворяют 0,0375 г поли-D,L-лактид-ко-гликолида и тщательно перемешивают до полного растворения. Кроме того, готовят 3% раствор ПВС, для чего 1,5 г ПВС растворяют в 50 мл воды очищенной. После этого его подвергают гомогенизации при скорости 20000 об/мин гомогенизатором Ultra-Turrax Т-18 (IKA, ФРГ) в течение 5 минут и вводят через шприц емкостью 3 мл с иглой 0,36×12 мм сначала раствор, содержащий алпразолам, а затем раствор, содержащий поли-D,L-лактид-ко-гликолид, в течение 20-25 минут. С целью уменьшения потери алпразолама и поли-D,L-лактид-ко-гликолида емкость, содержащую данные растворы, промывают 1 мл хлороформа и вводят в конечный раствор. Полученную первичную эмульсию взбалтывают в течение 24 часов до полного удаления хлороформа. Для подтверждения отсутствия хлороформа в полученной эмульсии к 0,1 мл полученного раствора прибавляют 4 капли бромтимолового синего. При наличии хлороформа в полученном растворе должно наблюдаться сине-фиолетовое окрашивание. В полученном растворе хлороформ отсутствует.
Полученные микрочастицы центрифугируют со скоростью 6000 об/мин в течение 10 минут в центрифуге ОПН-8 (Россия), после чего микрочастицы промывают водой очищенной и повторно центрифугируют (4 раза). Полученные микрочастицы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 2 мл 1% раствора маннита и доводят объем раствора в колбе водой очищенной до метки - итоговая суспензия. Технологический выход пролонгированной лекарственной формы алпразолама составляет 41,3%.
Пример 2. Точную навеску алпразолама (0,025 г) и D,L-лактид-ко-гликолида (0,0375 г) помещают в колбу, добавляют 2 мл хлороформа и перемешивают до полного растворения. Отдельно готовят 3% раствор ПВС, для чего 1,5 г ПВС растворяют в 50 мл воды очищенной. После этого его подвергают гомогенизации при скорости 20000 об/мин гомогенизатором Ultra-Turrax Т-18 (IKA, ФРГ) в течение 5 минут и вводят через шприц емкостью 3 мл с иглой 0,36×12 мм раствор, содержащий растворенный алпразолам и поли-D,L-лактид-ко-гликолид, в течение 20-25 минут. С целью уменьшения потери алпразолама и поли-D,L-лактид-ко-гликолида емкость, содержащую данные растворы, промывают 1 мл хлороформа и вводят в конечный раствор. Полученную первичную эмульсию взбалтывают в течение 24 часов до полного удаления хлороформа. Для подтверждения отсутствия хлороформа в полученной эмульсии к 0,1 мл полученного раствора прибавляют 4 капли бромтимолового синего. При наличии хлороформа в полученном растворе должно наблюдаться сине-фиолетовое окрашивание. В полученном растворе хлороформ отсутствует.
Полученные микрочастицы центрифугируют со скоростью 6000 об/мин в течение 10 минут в центрифуге ОПН-8 (Россия), после чего микрочастицы промывают водой очищенной и повторно центрифугируют (4 раза). Полученные микрочастицы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 2 мл 1% раствора маннита и доводят объем раствора в колбе водой очищенной до метки - итоговая суспензия. Технологический выход пролонгированной лекарственной формы алпразолама составляет 42%.
Пример 3. Точную навеску алпразолама (0,025 г) и поли-D,L-лактид-ко-гликолида (0,025 г) помещают в колбу, добавляют 2 мл хлороформа и перемешивают до полного растворения. Отдельно готовят 3% раствор ПВС, для чего 1,5 г ПВС растворяют в 50 мл воды очищенной. После этого его подвергают гомогенизации при скорости 20000 об/мин гомогенизатором Ultra-Turrax Т-18 (IKA, ФРГ) в течение 5 минут и вводят через шприц емкостью 3 мл с иглой 0,36×12 мм раствор, содержащий растворенный алпразолам и поли-D,L-лактид-ко-гликолид, в течение 20-25 минут. С целью уменьшения потери алпразолама и поли-D,L-лактид-ко-гликолида емкость, содержащую данные растворы, промывают 1 мл хлороформа и вводят в конечный раствор. Полученную первичную эмульсию взбалтывают в течение 24 часов до полного удаления хлороформа. Для подтверждения отсутствия хлороформа в полученной эмульсии к 0,1 мл полученного раствора прибавляют 4 капли бромтимолового синего. При наличии хлороформа в полученном растворе должно наблюдаться сине-фиолетовое окрашивание. В полученном растворе хлороформ отсутствует.
Полученные микрочастицы центрифугируют со скоростью 6000 об/мин в течение 10 минут в центрифуге ОПН-8 (Россия), после чего микрочастицы промывают водой очищенной и повторно центрифугируют (4 раза). Полученные микрочастицы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 2 мл 1% раствора маннита и доводят объем раствора в колбе водой очищенной до метки - итоговая суспензия. Технологический выход пролонгированной лекарственной формы алпразолама составляет 32,2%.
Пример 4.Точную навеску алпразолама (0,025 г) и поли-D,L-лактид-ко-гликолида (0,05 г) помещают в колбу, добавляют 2 мл хлороформа и перемешивают до полного растворения. Отдельно готовят 3% раствор ПВС, для чего 1,5 г ПВС растворяют в 50 мл воды очищенной. После этого его подвергают гомогенизации при скорости 20000 об/мин гомогенизатором Ultra-Turrax Т-18 (IKA, ФРГ) в течение 5 минут и вводят через шприц емкостью 3 мл с иглой 0,36×12 мм раствор, содержащий растворенный алпразолам и поли-D,L-лактид-ко-гликолид, в течение 20-25 минут. С целью уменьшения потери алпразолама и поли-D,L-лактид-ко-гликолида емкость, содержащую данные растворы, промывают 1 мл хлороформа и вводят в конечный раствор. Полученную первичную эмульсию взбалтывают в течение 24 часов до полного удаления хлороформа. Для подтверждения отсутствия хлороформа в полученной эмульсии к 0,1 мл полученного раствора прибавляют 4 капли бромтимолового синего. При наличии хлороформа в полученном растворе должно наблюдаться сине-фиолетовое окрашивание. В полученном растворе хлороформ отсутствует.
Полученные микрочастицы центрифугируют со скоростью 6000 об/мин в течение 10 минут в центрифуге ОПН-8 (Россия), после чего микрочастицы промывают водой очищенной и повторно центрифугируют (4 раза). Полученные микрочастицы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 2 мл 1% раствора маннита и доводят объем раствора в колбе водой очищенной до метки - итоговая суспензия. Технологический выход пролонгированной лекарственной формы алпразолама составляет 37,4%.
Изучение длительности высвобождения алпразолама из пролонгированных парентеральных лекарственных форм проводилось invivo на модели наркотического сна.
В работе были использованы 24 крысы-самца весом 300,0±10,0 г. Животные были разделены на 4 группы. Первая группа - контрольная. Животным этой группы вводили 0,0035 мкг/кг алпразолама, что соответствует суточной дозе для человека с использованием коэффициента пересчета на данный вид животных. Контрольный раствор алпразолама готовили экстемпорально в связи с его нестабильностью.
Вторая и третья группы животных получали исследуемые растворы №1 и №2 пролонгированной формы алпразолама в дозе 0,035 мкг/кг, что соответствует семикратной суточной дозе для человека с использованием коэффициента пересчета на данный вид животных. Четвертая группа - биологический контроль. Животные этой группы получали изотонический раствор в эквивалентном объеме.
Вещества вводили внутрибрюшинно за 15 минут до наркотического сна, вызываемого введением хлоралгидрата в дозе 350 мг/кг. Фиксировали длительность сна. Животных вводили в наркотический сон один раз в неделю на протяжении 4 недель. За 15 минут до наркотического сна каждый раз вводили первой группе контрольный раствор алпразолама, а четвертой группе физиологический раствор. Пролонгированные растворы вводили только 1 раз в начале эксперимента.
Полученные результаты были статистически обработаны и представлены в таблице 1.
В контрольной группе продолжительность сна была достоверно выше на протяжении всего эксперимента по сравнению с показателями интактных животных.
Длительность сна во второй группе была достоверно выше, чем в контроле весь период наблюдения; так на первой неделе на 62,24%, а на четвертой на 4,8%.
Показатели третьей группы были выше контрольных значений во всех точках измерений со статистической достоверностью. На первой неделе выше на 79% и в конце эксперимента - на 14,21%.
Настоящее изобретение предлагает применение микрокапсулированного алпразолама в смеси с фармацевтическим носителем для применения в медицинской практике.
Предлагаемый способ получения микрокапсул имеет преимущества в сравнении с прототипом: 1) разброс размеров полученных частиц минимален (290-400 нм), 2) полученная первичная эмульсия является устойчивой, 3) быстрое удаление растворителя.
Продукт данного изобретения имеет длительность действия от 7 до 14 дней. Длительность действия может варьировать в зависимости от соотношения полимер: лекарство, композиции полимера и размера микрочастиц. Важным преимуществом данного изобретения является то, что практически весь лекарственный препарат попадает в организм пациента вследствие биологического распада полимера.
Таблица 1
Влияние пролонгированных форм алпразолама на длительность наркотического сна
Группы
Продолжительность сна (мин)
(N=6)
1 неделя
2 неделя
3 неделя
4 неделя
Группа №1
Контроль(контрольный раствор алпразолама)
109,17±7,14
128,67±13,34
123±6,07
117,33±4,58
Группа №2
171,16±5,81
162±5,98
140,66±3,17
123±5,91
(исследуемый раствор алпразолама №1)
Рк<0,001
Рк<0,05
Рк<0,05
Рк<0,001
Группа №3
196±5,05
201,5±5,05
148±3,15
134±2,96
(исследуемый раствор алпразолама №2)
Рк<0,001
Рк<0,001
Рк<0,02
Рк<0,05
Группа №4
40,17±1,49
90±9,97
92,67±11,33
102,5±1,69
(изотонический раствор)
Рк<0,001
Рк<0,05
Рк<0,05
Рк<0,05