ДЕРЖАТЕЛЬ ОБРАЗЦА МЯГКОЙ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ТКАНИ К МИКРОТОМУ
HOLDER FOR SOFT BIOLOGICAL TISSUE SAMPLE TO MICROTOME

Предлагаемое изобретение относится к устройствам для микротомов, предназначенных для получения ножом тонких срезов образцов биологической ткани с целью изучения их микроскопического строения.
При подготовке к размещению в микротоме образца мягкой биологической ткани необходимо исключить ее деформацию, которая при микроскопии искажает результат исследования. Так как образец ткани готовят вне микротома, деформация структуры ткани неизбежно возникает в связи с приложением к ней механических усилий при отборе образца, при подготовке к размещению, а также в процессе размещения в микротоме.
Известен держатель препарата мягкой биологической ткани к микротому в виде парафинового блока, закрепленного на деревянном бруске, который размещают в зажиме на микротомном столике. (Микротехнические исследования на базе современного оборудования [Электронный ресурс]: Руководство к практическим занятиям / Бетехтина А.А., Уткина И.А. - Екатеринбург: Уральский государственный университет, 2008, стр.69-71. - Режим доступа: http://elar.su.ru/bitstream/1234.56789/1570/5/1334882.guide.pdf.).
Однако данный держатель препарата биологической ткани к микротому не позволяет предупредить деформацию мягкой биологической ткани в процессе подготовки препарата к микротомии (при отборе кусочка мягкой биологической ткани, заливке мягкой биологической ткани в парафин). Кроме того, невозможно контролировать степень деформации образца мягкой биологической ткани в процессе подготовки и при выполнении микротомии.
Известен держатель образцов, конструкция которого содержится в составе вибрационного микротома для мягкой ткани (а.с. СССР №459686, G01h 1/06, 05.02.1975 г.), содержащего также корпус, вибратор, механизм микроподачи, нож со сменными лезвиями, ванночку для сбора срезов.
Держатель образцов выполнен в виде двух плоских направляющих пластин, расположенных до и после ножа в плоскости резания. Объект помещают на верхнюю направляющую пластину и рукой удерживают на ней с плавным продвижением на выступающее колеблющееся лезвие.
Однако держатель образцов данного вибрационного микротома не позволяет предупредить деформацию мягкой биологической ткани в процессе подготовки препарата к микротомии (при отборе кусочка мягкой биологической ткани, заливке мягкой биологической ткани в парафин). Кроме того, невозможно контролировать степень деформации образца мягкой биологической ткани в процессе подготовки и при выполнении микротомии.
Известен держатель мягких объектов к вибрационному микротому (прототип - патент на изобретение РФ 1283590, G01N 1/06, 15.01.1987 г.), включающий корпус и прижимные губки. Каждая прижимная губка выполнена в виде набора расположенных параллельно в одной плоскости игл с возможностью перемещения губок остриями игл навстречу друг другу в той же плоскости, поверхность корпуса, на котором закреплен объект, выполнена с углублениями.
Недостатком такого устройства является то, что при помощи держателя невозможно сделать отбор образца мягкой биологической ткани от исследуемого объекта. Отбор проводят различными известными способами и вручную помещают в держатель, при этом происходит неконтролируемая деформация ткани. Кроме того, невозможно контролировать степень деформации образца мягкой биологической ткани в процессе подготовки его к микротомии и в момент изготовления тонких срезов из объекта.
Технической задачей является создание устройства, которое позволяет снизить степень деформации мягкой биологической ткани в процессе отбора, при подготовке к микротомии и в момент изготовления тонких срезов и обеспечить возможность контроля деформации образца биологической ткани в процессе отбора, подготовки и проведения микротомии.
Техническая задача достигается тем, что держатель образца мягкой биологической ткани к микротому, включающий корпус с поверхностью, на которой размещают исследуемый объект, и прижимную губку, содержащую набор параллельно расположенных между собой игл, отличающийся тем, что корпус выполнен так, что поверхность, на которой размещают исследуемый объект, выполнена в виде плоского основания с отверстиями, по периметру которого со стороны, противоположной исследуемому объекту, прикреплена направляющая, внутри которой размещена выходящая за пределы направляющей прижимная губка, которая копирует внутреннюю форму направляющей с возможностью соосного перемещения прижимной губки внутри направляющей, при этом прижимная губка выполнена в виде верхней части, монолитно соединенной с нижней частью, при этом в толще верхней части жестко закреплены иглы, выступающие за пределы верхней части в сторону корпуса с возможностью размещения игл в отверстиях корпуса, при этом иглы расположены по периметру верхней части прижимной губки на равном расстоянии между собой, кроме того, отверстия корпуса совпадают с осью игл, выступающие заостренные концы которых выполнены со скосом против направления хода ножа микротома, в нижней части прижимной губки со стороны хода ножа микротома выполнены продольный паз и сообщающееся с ним поперечное углубление, при этом в продольном пазу установлен подпружиненный стопор, выполненный в виде пластины с рифлением, выполненным в верхней части этой пластины и равным длине направляющей, при этом рифление выполнено на стороне пластины, обращенной к внутренней стороне направляющей корпуса с возможностью взаимодействия этого рифления с рифлением, также выполненным на поверхности направляющей, сопряженной с пластиной подпружиненного стопора, при этом пластина имеет отогнутый конец, размещенный в поперечном углублении, кроме того, длина монолитно соединенных верхней и нижней частей прижимной губки равна сумме длины направляющей при том положении верхней части, когда она совмещена с плоским основанием корпуса, и выходящей за пределы направляющей длины прижимной губки, достаточной для возможности размещения рукояток на боковых поверхностях прижимной губки, кроме того, на уровне размещения рукояток на наружной поверхности пластины подпружиненного стопора прикреплена кнопка, выполненная с возможностью скольжения в проточке штанги микротома.
Предложенное изобретение отличается тем, что корпус выполнен так, что поверхность, на которой размещают исследуемый объект, выполнена в виде плоского основания с отверстиями, по периметру которого со стороны, противоположной исследуемому объекту, прикреплена направляющая, внутри которой размещена выходящая за пределы направляющей прижимная губка, которая копирует внутреннюю форму направляющей с возможностью соосного перемещения прижимной губки внутри направляющей, при этом прижимная губка выполнена в виде верхней части, монолитно соединенной с нижней частью, при этом в толще верхней части жестко закреплены иглы, выступающие за пределы верхней части в сторону корпуса с возможностью размещения игл в отверстиях корпуса, при этом иглы расположены по периметру верхней части прижимной губки на равном расстоянии между собой, кроме того, отверстия корпуса совпадают с осью игл, выступающие заостренные концы которых выполнены со скосом против направления хода ножа микротома, в нижней части прижимной губки со стороны хода ножа микротома выполнены продольный паз и сообщающееся с ним поперечное углубление, при этом в продольном пазу установлен подпружиненный стопор, выполненный в виде пластины с рифлением, выполненным в верхней части этой пластины и равным длине направляющей, при этом рифление выполнено на стороне пластины, обращенной к внутренней стороне направляющей корпуса с возможностью взаимодействия этого рифления с рифлением, также выполненным на поверхности направляющей, сопряженной с пластиной подпружиненного стопора, при этом пластина имеет отогнутый конец, размещенный в поперечном углублении, кроме того, длина монолитно соединенных верхней и нижней частей прижимной губки равна сумме длины направляющей при том положении верхней части, когда она совмещена с плоским основанием корпуса, и выходящей за пределы направляющей длины прижимной губки, достаточной для возможности размещения рукояток на боковых поверхностях прижимной губки, кроме того, на уровне размещения рукояток на наружной поверхности пластины подпружиненного стопора прикреплена кнопка, выполненная с возможностью скольжения в проточке штанги микротома.
На фигуре 1 показан общий вид держателя образца мягкой биологической ткани.
На фигуре 2 показан установленный в микротоме держатель мягкой биологической ткани в разрезе, вид сбоку.
На фигуре 3 показан разрез А-А на фигуре 2.
На фигуре 4 показан установленный в микротоме держатель мягкой биологической ткани, вид сверху.
На фигуре 5 показан держатель с размещенным на нем образцом мягкой биологической ткани.
На фигуре 6 показан держатель с размещенным на нем образцом мягкой биологической ткани, залитым в парафиновый блок.
Держатель образца мягкой биологической ткани к микротому включает корпус 1 с поверхностью 2, на которой размещают образец мягкой биологической ткани 28, в частности, залитый в парафиновый блок 29. Прижимная губка содержит набор параллельно расположенных между собой игл 3. Корпус 1 выполнен так, что поверхность 2, на которой размещают исследуемый объект, выполнена в виде плоского основания с отверстиями 4 по его периметру. С противоположной исследуемому образцу 28 стороны корпуса 1 прикреплена направляющая 5. Внутри направляющей 5 и выходя за ее пределы размещена прижимная губка. Прижимная губка копирует внутреннюю форму направляющей 5 с возможностью соосного перемещения прижимной губки внутри направляющей 5. Прижимная губка выполнена в виде верхней части 6, монолитно соединенной с нижней частью 7. При этом в толще верхней части 6 жестко закреплены иглы 3, выступающие за пределы верхней части 6 в сторону корпуса 1 с возможностью размещения игл 3 в отверстиях 4 корпуса 1. Иглы 3 расположены по периметру верхней части 6 на равном расстоянии между собой. Оси отверстий 4 корпуса 1 совпадают с соответствующими осями игл 3. Выступающие заостренные концы 8 игл 3 выполнены со скосом, расположенным против направления хода ножа 27 микротома. В нижней части 7 прижимной губки со стороны хода ножа 27 микротома выполнены продольный паз 9 и сообщающееся с ним поперечное углубление 10. В продольном пазу 9 установлен подпружиненный стопор 11, который выполнен в виде пластины с рифлением 12, равным длине направляющей 5. Рифление 12 выполнено на стороне пластины подпружиненного стопора 11, обращенной к внутренней стороне направляющей 5 корпуса 1 с возможностью взаимодействия этого рифления 12 с рифлением (на фигуре не показано), также выполненным на поверхности направляющей 5, сопряженной с пластиной подпружиненного стопора 11. Пластина подпружиненного стопора 11 имеет отогнутый конец 13, который размещен в поперечном углублении 10. Длина монолитно соединенных верхней части 6 и нижней части 7 прижимной губки равна сумме длины направляющей 5 при положении верхней части 6, когда она совмещена с корпусом 1, и длины прижимной губки, выходящей за пределы направляющей 5, достаточной для возможности размещения рукояток 14 на боковых поверхностях прижимной губки. По уровню размещения рукояток 14 на наружной поверхности пластины подпружиненного стопора прикреплена кнопка 15. Кнопка 15 имеет овальную форму с возможностью скольжения в проточке 16 штанги 17 микротома.
Кроме того, на фигурах изображены конструктивные элементы микротома, на которые устанавливают предлагаемое устройство: выемка 18 штанги 17, станина 19, ниша 20 штанги 17, проем 21 столика 22, механизм микроподачи 23, винт 24, окно 25 столика 22, суппорт 26.
Устройство работает следующим образом. Удерживая рукоятки 14 подготовленного к работе держателя образца мягкой биологической ткани (Фиг.1), нажимают на кнопку 15, погружая в продольном пазу 9 пластину подпружиненного стопора 11 частью, имеющей рифление 12. При этом рифление 12 разъединяется с рифлением внутренней поверхности направляющей 5. Перемещая свободной рукой направляющую 5 относительно прижимной губки, выдвигают иглы 3 относительно поверхности 2 корпуса 1 на требуемую длину соответственно толщине отбираемой для исследования мягкой биологической ткани 28. Иглы 3 выдвигают через отверстия 4 корпуса 1. Освобождают кнопку 15. При этом подпружиненный стопор 11, закрепленный своим отогнутым концом 13 в поперечном углублении 10, выходит из продольного паза 9 и совмещается рифлением 12 с соответствующим рифлением на внутренней стороне направляющей 5, неподвижно фиксируя направляющую 5 относительно прижимной губки.
По месту отбора образца прокалывают заостренными концами 8 игл 3 мягкую биологическую ткань 28 на установленную глубину до совмещения поверхности 2 корпуса 1 с поверхностью биологической ткани 28. Скальпелем отсекают образец мягкой биологической ткани 28 по контуру корпуса 1 и по длине выступающих из корпуса 1 игл 3 (Фиг.5). При этом в направлениях, параллельных поверхности 2 корпуса 1, предупреждается деформация мягкой биологической ткани 28, находящейся между иглами 3. Образец мягкой биологической ткани 28, размещенный в держателе, фиксируют, помещая в емкость, например, с 10% раствором формалина. Далее образец мягкой биологической ткани 28, размещенный в держателе, промывают в проточной воде, обезвоживают в спиртах нарастающей концентрации, также поочередно размещая в емкостях с соответствующими реактивами. После экспозиции в емкости с ксилолом образец мягкой биологической ткани 28, размещенный в держателе, заливают в парафиновый блок 29 по общепринятой методике. При этом парафиновый блок 29 окружает образец мягкой биологической ткани 28 вместе с корпусом 1 держателя (Фиг.6).
Держатель образца мягкой биологической ткани 28 при установке на микротоме размещают таким образом, что скосы на выступающих заостренных концах 8 игл 3 располагаются против направления хода ножа 27 микротома. При этом рукоятку 14, направленную к неподвижно установленной на станине 1 микротома штанге 17, размещают в выемке 18 штанги 17, выступающую за пределы направляющей 5. Нижнюю часть 7 прижимной губки совмещают с нишей 20 штанги 17. Заостренные концы 8 игл 3 располагаются вблизи плоскости перемещения кромки ножа 27, не соприкасаясь с ним. Направляющая 5 располагается в проеме 21 столика 22, который взаимодействует с механизмом микроподачи 23 микротома. Винтом 24 неподвижно фиксируют направляющую 5 в проеме 21 столика 22. При этом столик 22 может перемещаться относительно штанги 17, расположенной в окне 25 столика 22.
Кнопка 15, имея овальную форму, скользит в проточке 16 штанги 17 микротома при размещении нижней части 7 прижимной губки в нише 20 штанги 17. При этом пластина подпружиненного стопора 11 погружается в продольном пазу 9 частью, имеющей рифление 12. Рифление 12 разъединяется с рифлением внутренней поверхности направляющей 5, разблокировав ее относительно прижимной губки. Винтом 24 фиксируют направляющую 5 в проеме 21 столика 22.
Суппорт 26 перемещают вдоль станины 19 микротома таким образом, что нож 27 движется в плоскости среза образца мягкой биологической ткани 28. При этом суппорт 26 взаимодействует с механизмом микроподачи 23. Каждое новое перемещение суппорта 26 вдоль станины 19 микротома посредством механизма микроподачи 23 сопровождается подъемом на толщину среза столика 22 вместе с направляющей 5, зафиксированной винтом 24 в проеме 21. На толщину среза выдвигается относительно игл 3 образец мягкой биологической ткани 28, окруженный парафиновым блоком 29 на корпусе 1 с направляющей 5.
Таким образом, на этапах отбора образца мягкой биологической ткани, ее подготовки к проведению и в процессе выполнения срезов на микротоме предупреждается возможность деформации образца мягкой биологической ткани под действием внешних сил в плоскости, параллельной поверхности корпуса держателя. При микроскопии срезов образца мягкой биологической ткани возможно осуществление контроля деформации относительно исходного состояния ткани по взаимному расположению и величине отверстий, образованных в ткани иглами держателя.