ПРЕПАРАТЫ МУТЕИНОВ ЛИПОКАЛИНОВ С КОНТРОЛИРУЕМЫМ ВЫСВОБОЖДЕНИЕМ

1. Фармацевтическая композиция для контролируемого высвобождения мутеина липокалина, содержащая мутеин липокалина или его конъюгат в комбинации с полимером, липидом или липосомой.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что мутеин липокалина или его конъюгат капсулирован в липосоме.
3. Фармацевтическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что липосомы являются диспергированными или эмульгированными в водной основной среде.
4. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что полимер представляет собой биоразлагаемый полимер.
5. Фармацевтическая композиция по п.4, отличающаяся тем, что биоразлагаемый полимер выбран из группы, состоящей из полигидроксикислот, полилактидов, полигликолидов, сополимеров полилактида и полигликолида, полимолочных кислот, полигликолевых кислот, сополимеров молочной и гликолевой кислот, поликапролактонов, поликарбонатов, полиамидоэфиров, полиангидридов, полиаминокислот, полиортоэфиров, полиацетилов, полицианакрилатов, полиэфирэфиров, полидиоксанонов, полиалкиленалкилатов, сополимеров полиэтиленгликоля и полилактидов или поли(лактид-гликолидов), биоразлагаемых полиуретанов и некоторых типов протеинов и полисахаридных полимеров, а также их смесей, сополимеров и производных.
6. Фармацевтическая композиция по п.5, отличающаяся тем, что биоразлагаемый полимер выбран из группы, состоящей из полигидроксикислот, полимолочных кислот, полилактидов, полигликолидов, полигликолевых кислот и их сополимеров, а также их производных.
7. Фармацевтическая композиция по п.5 или 6, отличающаяся тем, что биоразлагаемый полимер выбран из группы, состоящей из полиангидридов, полиортоэфиров и полисахаридных полимеров.
8. Фармацевтическая композиция по п.5, отличающаяся тем, что биоразлагаемый полимер представляет собой сополимер D,L-лактида и D,L-гликолида.
9. Фармацевтическая композиция по п.5, отличающаяся тем, что биоразлагаемый полимер представляет собой полимер молочной кислоты или сополимер, включающий лактидные структурные единицы, замещенные алкильными группами.
10. Фармацевтическая композиция по п.9, отличающаяся тем, что биоразлагаемый полимер включает поли(гексил-замещенный лактид) или поли(дигексил-замещенный лактид).
11. Фармацевтическая композиция по п.4, отличающаяся тем, что биоразлагаемый полимер составлен в виде микрочастиц или наночастиц, включающих инкапсулированный мутеин липокалина или его конъюгат.
12. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что включает конъюгат мутеина липокалина и фрагмент, выбранный из группы, состоящей из протеина, протеинового домена, пептида, жирной кислоты, липида, полисахарида и/или органического полимера или их комбинаций.
13. Фармацевтическая композиция по п.12, где мутеин липокалина и фрагмент конъюгированы с образованием ковалентной связи.
14. Фармацевтическая композиция по п.12, отличающаяся тем, что фрагмент облегчает контролируемую доставку мутеина липокалина, продлевает период полужизни мутеина липокалина in vivo, повышает биодоступность мутеина липокалина и/или снижает иммуногенность мутеина липокалина.
15. Фармацевтическая композиция по п.12, отличающаяся тем, что фрагмент выбран из группы, состоящей из гидрофильных полимеров, пальмитиновой кислоты или других молекул жирных кислот, Fc-фрагмента иммуноглобулина, СН3-домена иммуноглобулина, СН4-домена иммуноглобулина, альбумина или фрагмента альбумина, альбумин-связывающего пептида, альбумин-связывающего протеина, убиквитина, пептида, представляющего собой производное убиквитина и трансферрина.
16. Фармацевтическая композиция по п.15, отличающаяся тем, что альбумин-связывающий протеин представляет собой бактериальный альбумин-связывающий белок, антитело или фрагмент антитела против альбумина или мутеин липокалина, обладающий связывающей способностью к альбумину.
17. Фармацевтическая композиция по п.16, отличающаяся тем, что бактериальный домен альбумина представляет собой альбумин-связывающий домен протеина G стрептококков.
1-
2
3
4
1
2
3
4
18. Фармацевтическая композиция по п.17, отличающаяся тем, что альбумин-связывающий пептид обладает формулой Cys-XaaXaa-Xaa-Xaa-Cys, где Xaa представляет собой Asp, Asn, Ser, Thr или Trp; Хаа представляет собой Asn, Gin, His, He, Leu или Lys; Хаа представляет собой Ala, Asp, Phe, Trp или Tyr; a Xaa представляет собой Asp, Gly, Leu, Phe, Ser или Thr.
19. Фармацевтическая композиция по п.14, отличающаяся тем, что фрагмент, продлевающий период полужизни в сыворотке, представляет собой гидрофильный полимер.
20. Фармацевтическая композиция по п.19, отличающаяся тем, что гидрофильный полимер выбран из группы, состоящей из полиалкиленгликолей, полиоксиэтилированных высокомолекулярных спиртов, гидроксиэтилированного крахмала, полигидроксикислот, полимолочных кислот, полигликолевых кислот и их сополимеров, а также их линейных, разветвленных и активированных производных.
21. Фармацевтическая композиция по п.20, отличающаяся тем, что гидрофильный полимер выбран из группы, состоящей из полиэтиленгликоля, полипропилена, сополимеров полиэтиленгликоля и полипропиленгликоля, полиоксиэтилированного глицерина, полиоксиэтилированной глюкозы, полиоксиэтилированного сорбита и их линейных, разветвленных и активированных производных.
22. Фармацевтическая композиция по п.21, отличающаяся тем, что активированное производное представляет собой производное, способное реагировать с аминогруппами, выбранное из группы, состоящей из гидрофильных полимеров, несущих концевую альдегидную, N-гидроксисукцинимидную, сукцинимидную, малеимидную, PNP-карбонатную и бензотриазольную группы или производное, способное реагировать с тиоловыми группами.
23. Фармацевтическая композиция по любому из пп.20-22, отличающаяся тем, что гидрофильный полимер представляет собой полиэтиленгликоль (ПЭГ) или его линейное, разветвленное и активированное производное.
24. Фармацевтическая композиция по п.23, отличающаяся тем, что средняя молекулярная масса полиэтиленгликоля составляет 5, 7, 10, 12, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65 или 70 кДа.
25. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что мутеин липокалина выбран из группы, состоящей из мутеинов ретинолсвязывающего протеина (RBP), протеина, связывающего желчные пигменты (ВВР), аполипопротеина D (АРО D), липокалина, ассоциированного с желатиназой нейтрофилов (NGAL), липокалина слезы (TLPC), α-микроглобулин-родственного протеина (A2m), 24р3/утерокалина (24р3), протеина желез фон Эбнера 1 (VEGP 1), протеина желез фон Эбнера 2 (VEGP 2) и предшественника основного аллергена собак (Major allergen Can fl precursor, ALL-1).
26. Фармацевтическая композиция по п.25, отличающаяся тем, что мутеин липокалина выбран из группы, состоящей из липокалина, ассоциированного с желатиназой нейтрофилов человека (hNGAL), липокалина слезы человека (hTLPC), аполипопротеина D человека (АРО D) и протеина Pieris brassicae, связывающего желчные пигменты.
27. Фармацевтическая композиция по п.25, отличающаяся тем, что указанный мутеин липокалина обладает по меньшей мере 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95% гомологией последовательности или идентичностью последовательности с липокалином слезы человека, липокалином, ассоциированным с желатиназой нейтрофилов человека, аполипопротеином D человека и протеином Pieris brassicae, связывающим желчные пигменты.
28. Фармацевтическая композиция по п.25, отличающаяся тем, что мутеин связывает заданную мишень с прослеживаемой аффинностью.
29. Фармацевтическая композиция по п.28, отличающаяся тем, что мишень представляет собой VEGF, IL-4R альфа, VEGF-R2; CTLA-4 или c-Met.
30. Фармацевтическая композиция по п.25, отличающаяся тем, что мутеин липокалина содержит по меньшей мере один мутированный аминокислотный остаток в любом положении последовательности четырех пептидных петель АВ, CD, EF и GH, составляющих сайт связывания природного липокалина.
31. Фармацевтическая композиция по п.30, отличающаяся тем, что мутеин липокалина содержит по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40 или 41 мутированный аминокислотный остаток по любым положениям последовательности четырех пептидных цепей АВ, CD, EF и GH, составляющих сайт связывания природных липокалинов.
32. Фармацевтическая композиция по п.25, отличающаяся тем, что мутеин липокалина содержит по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40 или 41 мутированный аминокислотный остаток по любым положениям последовательности, соответствующим положениям 24-36, 53-66, 79-84 и 103-110 линейной полипептидной последовательности нативного зрелого липокалина слезы человека (номер доступа в базе данных SWISS-PROT Р31025).
33. Фармацевтическая композиция по п.32, отличающаяся тем, что мутеин липокалина содержит по меньшей мере 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18 мутированных минокислотных остатка по любым положениям последовательности, соответствующим положениям 26-34, 56-58, 80, 83, 104-106 и 108 линейной полипептидной последовательности нативного зрелого липокалина слезы человека.
34. Фармацевтическая композиция по п.25, отличающаяся тем, что мутеин липокалина содержит, главным образом состоит из или состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в любом из SEQ ID Nos. 1-110.
35. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что препарат представлен в форме импланта или имплантируемого устройства.
36. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что приблизительно 40 - приблизительно 70% мутеина липокалина является активным.
37. Способ контролируемой системной или местной доставки мутеина липокалина в организм субъекта, включающий введение фармацевтической композиции по любому из пп.1-36 в организм субъекта.
38. Способ по п.37, отличающийся тем, что контролируемую местную доставку мутеина липокалина облегчают путем введения в ограниченную часть тела или орган субъекта.
39. Способ по п.38, отличающийся тем, что ограниченная часть тела или орган представляют собой глаз, сустав или полость тела.
40. Способ по п.37, отличающийся тем, что конъюгат или препарат вводят перорально, путем ингаляции, доставки через слизистые, подкожной инъекции, внутримышечной инъекции, внутривенной инъекции, инъекции в стекловидное тело, внутрисуставной инъекции, внутричерепной инъекции, инъекции в спинномозговой канал, внутриопухолевой инъекции или имплантации.
41. Способ по п.37, отличающийся тем, что субъект является млекопитающим.
42. Способ по п.41, отличающийся тем, что млекопитающее является человеком.
43. Способ изготовления композиции с контролируемым высвобождением, включающий: объединение органической фазы, содержащей мутеин липокалина, с водной фазой; и выделение указанной композиции.
44. Способ по п.43, отличающийся тем, что дополнительно включает по меньшей мере один сорастворитель в указанной органической фазе.
45. Способ по п.44, отличающийся тем, что указанный по меньшей мере один сорастворитель выбирают из группы, состоящей из диметилсульфоксида, диметилформамида, N-метилпирролидинона, ПЭГ 200, ПЭГ 400, метилового спирта, этилового спирта, изопропилового спирта, бензилового спирта, воды и их смесей.
46. Способ по п.40 или 43, дополнительно включающий эмульгирующий агент в указанной водной фазе.
47. Способ по п.46, отличающийся тем, что указанный эмульгирующий агент выбирают из группы, состоящей из поливинилового спирта, альбумина, лецитина, витамина E-TPGS и полисорбатов.
48. Способ по п.46, отличающийся тем, что указанный эмульгирующий агент присутствует в диапазоне конечных концентраций от приблизительно 0,1 до приблизительно 10% (масс/масс).
49. Способ по п.43, отличающийся тем, что указанная органическая фаза содержит растворитель, выбранный из группы, состоящей из дихлорметана, этилацетата, бензилового спирта, ацетона, уксусной кислоты и пропиленкарбоната.
50. Способ по п.43, отличающийся тем, что водная фаза содержит органический ион, который присутствует в водной фазе для ослабления разложения указанного мутеина липокалина.
51. Способ по п.50, отличающийся тем, что указанный органический ион присутствует в диапазоне конечных концентраций от приблизительно 0,1 до 1000 мМ.
52. Способ по п.50, отличающийся тем, что указанный органический ион выбирают из группы, состоящей из карбоксилата, сульфата, фосфата, додецилсульфата, трифторметил-р-толуата, 2-нафталинсульфоната, 2,3-нафталиндикарбоксилата, 1-гидрокси-2-нафтоата, 3-гидрокси-2-нафтоата, 2-нафтоата и салицилсалицилата.
53. Способ по п.43, отличающийся тем, что указанную композицию с контролируемым высвобождением выбирают из группы, состоящей из микрочастиц и наночастиц.
54. Способ по п.53, отличающийся тем, что указанные микрочастицы и наночастицы являются биоразлагаемыми.
55. Способ по п.44, отличающийся тем, что указанный полимер выбирают из группы, состоящей из полилактидов, полигликолидов, сополимеров полилактида и полигликолида, полимолочных кислот, полигликолевых кислот, сополимеров молочной и гликолевой кислот, поликапролактонов, поликарбонатов, полиамидоэфиров, полиангидридов, полиаминокислот, полиортоэфиров, полиацетила, полицианакрилатов, полиэфирэфиров, полидиоксанонов, полиалкиленалкилатов, сополимеров полиэтиленгликоля и полиортоэфира, биоразлагаемых полиуретанов, а также их смесей и сополимеров.
56. Способ по п.44, отличающийся тем, что органическую фазу и водную фазу объединяют в процессе эмульгирования.
57. Способ по п.56, отличающийся тем, что процесс эмульгирования выбирают из группы, состоящей из получения эмульсий "масло в воде" и "вода-масло-вода".
58. Композиция с контролируемым высвобождением, изготовленная согласно способу в соответствии с определением по любому из пп.44-57.
59. Использование фармацевтической композиции по любому из пп.1-36 или композиции с контролируемым высвобождением по п.58 для контролируемой доставки мутеина липокалина, продления периода полужизни мутеина липокалина in vivo, повышения биодоступности мутеина липокалина или снижения иммуногенности мутеина липокалина при его введении субъекту.
60. Способ лечения заболевания или расстройства, включающий введение фармацевтической композиции по любому из пп.1-36 или композиции с контролируемым высвобождением по п.58 субъекту, нуждающемуся в этом.
61. Способ по п.60, отличающийся тем, что заболевание или расстройство связано с повышенной васкуляризацией.
62. Способ по п.60 или 61, отличающийся тем, что заболевание или расстройство выбирают из группы, состоящей из рака, астмы, артрита, воспаления, хронического обструктивного заболевания легких (ХОЗЛ), легочной гипертензии, неоваскулярной влажной возрастной макулодистрофии (AMD), диабетической ретинопатии, отека желтого пятна, ретинопатии недоношенных и окклюзии вены сетчатки.