Возрастная динамика энтеробактерий желудочно-кишечного тракта цыплят

9. Таирова, А.Р. Элиминационные свойства фитопрепарата эраконд / А.Р. Таирова // Ветеринарный врач. -2001. - № 2 (6). - С. 50-52.

10. Рахматуллин, Э.К. Динамика гематологических и биохимических показателей крови коров после применения эраконда / Э.К. Рахматуллин, Г.В. Аникина, Ф.Г. Гизатуллина // Вестн. РАСХН. - 2002. - № 3. -С. 75-77.

11. Сунагатуллин, Ф.А. Влияние эраконда на иммунологический статус коров / Ф.А. Сунагатуллин // Ветеринария. - 1996. - №11. - С. 43-45.

12. Жербин, Е.А. Радиационная гематология / Е.А. Жербин, А.Б. Чухловин. - М.: Медицина, 1989. - 176 с.

13. Сафонова, В.Ю. Радиационная экология / В.Ю. Сафонова, В.А. Сафонова. - Оренбург: Изд-во ОГАУ, 2005. - 312 с.

---------♦----------

УДК 636.51:619 О.П. Бахарева, И.М. Саражакова

ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА ЦЫПЛЯТ

Макроорганизм и его микрофлора являются единой экологической системой. Состав микрофлоры относительно постоянен. Однако могут наблюдаться вариации в количественном и качественном составе микроорганизма в результате воздействия, как внешних, так и внутренних факторов. Наибольшее содержание кишечной палочки в содержимом толстого отдела кишечника цыплят наблюдается до 3-недельного возраста. Затем происходит постепенное равномерное снижение. С 56-дневного возраста количество E. в содержимом толстого отдела кишечника у цыплят значительных отличий от взрослых особей не имело.

Эволюция человека и животных протекала при постоянном и непосредственном контакте с миром микробов, в результате чего формировались тесные взаимоотношения между макро- и микроорганизмами, характеризующиеся определенными морфологическими структурами и физиологической необходимостью. Исходя из этого «процесс заселения» определенных частей тела микроорганизмами можно рассматривать как жизненно важное физиологическое явление.

Изучение состава нормальной микрофлоры кишечника привлекает особое внимание исследователей, так как бактерии желудочно-кишечного тракта играют важнейшую роль в различных процессах жизнедеятельности человека, животных и птиц.

Макроорганизм и его микрофлора являются единой экологической системой, находящейся в состоянии динамического равновесия. Микробы кишечника участвуют в метаболических процессах, протекающих в организме хозяина. Состав микрофлоры относительно постоянен, несмотря на влияние различных факторов внешней среды на организм.

Согласно современным представлениям, симбионтная эндоэкосистема организма является одним из стабилизирующих компонентов гомеостаза и включает в себя десятки, сотни разнообразных видов микроорганизмов (Ардатская, Дубинин, Минушикин, 2001; Бондаренко, Боев, Лыкова, 1999).

Известно, что контаминируемые поверхности микробиотопов имеют весьма широкий диапозон вариации: около 60% микрофлоры заселяет различные ниши пищеварительной системы; 15-16% - проксимальные отделы респираторного тракта и ротовую полость; 11% - урогенитальный тракт; остальная часть приходится на кожные покровы.

В физиологических условиях слизистая кишечника покрыта биопленкой (бактериальный гликокаликс), внутри которой имеется экзополисахаридный матрикс микробного происхождения и муцин бокаловидных клеток слизистой оболочки. Несмотря на то что толщина этой пленки составляет всего от долей до десятков микрон, количество микроколоний индигенной (нормальной) микрофлоры в ней может достигать нескольких сотен и даже тысяч, причем, устойчивость бактерий к воздействию неблагоприятных факторов внутри этой биопленки в десятки и сотни раз выше по сравнению с неиммобилизованными клетками. В отличие от сво-бодноживущих (просветных) бактерий, представители мукозной микрофлоры в организме способны фикси-

роваться лишь к строго определенным рецепторам кожи и слизистых оболочек. Число рецепторов на эпителиальных клетках, к которым адгезируются бактерии, ограничено.

Таким образом, в микробиоценозе желудочно-кишечного тракта различают мукозную и просветную флору. Состав их различен. Мукозная микрофлора исключительна по своей значимости, более стабильна и представлена, главным образом, бифидобактериями и лактобактериями, которые обуславливают колонизационную резистентность кишки, образуя слой так называемого «бактериального дерна». Последний препятствует заселению слизистой оболочки патогенными, условно-патогенными микроорганизмами, конкурируя с ними за взаимодействие с рецепторами эпителиальных клеток. Просветная микрофлора наряду с бифидо- и лактобактериями включает и других постоянных обитателей кишечника (Гасанов М.С., 1992).

На сегодняшний день известно, что видовой, численный состав и инфраструктура микробиота значительно отличаются в отдельных частях пищеварительного тракта и зависят от величины рН и концентрации кислорода. Иными словами, по мере продвижения содержимого внутри кишечной трубки снижается парциальное давление кислорода и повышается значение рН среды, в связи с этим появляется «этажность» расселения различных видов бактерий по вертикали: выше всего располагаются аэробы, ниже - факультативные анаэробы и еще ниже - строгие анаэробы. Соотношение анаэробов и аэробов в толстой кишке -1000:1 (Бондаренко, Грачева, Мацулевич, 2003).

Справедливо считается, что толстая кишка является важным органом и не только потому, что ей присущи специфические функции, но и потому, что она представляет собой биотоп с высокой степенью микробной обсемененности (более четырехсот видов микроорганизмов). Наибольшее количество микроорганизмов присутствует в испражнениях и составляет до 30% фекальных масс, или 1010-1013 клеток в 1 г испражнений. В качественном отношении микрофлора испражнений сходна с микрофлорой полости толстого кишечника. Животные одного вида имеют одинаковую микрофлору испражнений, а у животных разных видов она различается (Сорокин В.В., Тимошко М.А., Николаева А.В., 1983).

Качественный состав просветной микрофлоры представлен бактеройдами, бифидобактериями, молочнокислыми бактериями, вейлонеллами, клостридиями, пептострептококками, пептококками, энтеробактериями, аэробными бацилами, дрожжами, энтерококками ^Маеса^, Str.faecium), стафилококками, микрококками, плесневыми грибами.

К преобладающим бактериям в испражнениях животных и человека относятся бифидобактерии, лактобактерии, пептококки, извитые анаэробы. В испражнениях кур, свиней, собак, мышей, крыс, хомячков присутствуют бифидобактерии, но в значительно меньших количествах, чем лактобактерии. У лошадей и кроликов бифидобактерии выявляются эпизодически, а у кошек и норок не обнаруживаются никогда. У цыплят в количественном отношении превалируют бифидобактерии; на втором месте - молочнокислые бактерии; на третьем - бактеройды; на четвертом - эубактерии; на пятом - энтеробактерии; на шестом стрептококки, в том числе энтерококки; а у взрослых особей, то есть у кур, по численности указанные группы микроорганизмов распределяются в следующем порядке: бактеройды, эубактерии, пептококки, молочнокислые бактерии, бифидобактерии, стрептококки, энтеробактерии, стафилококки, бацилы, дрожжи, при этом их численность составляет в среднем соответственно 10,6; 10,2; 9,9; 9,5; 9,1; 7,1; 7,0; 6,8; 6,4; 4,2 десятичного 1д в 1 г (Сорокин В.В., Тимошко М.А., Николаева А.В., 1983).

Обобщение существующей информации о состоянии количественных и качественных показателей микрофлоры пищеварительного тракта отдельных видов животных, в том числе лабораторных, сельскохозяйственных птиц представилось возможным лишь с учетом фекальных или содержащихся в толстом отделе кишечника микроорганизмов. Весьма важно также проследить численность микрофлоры в кишечнике животных и птиц с учетом возрастных особенностей.

Цель работы - проведение микробиологического мониторинга и изучение возрастной динамики колонизации толстого отдела кишечника цыплят энтеробактериями вида Е. СоУ.

Материалы и методы. Объектом исследования служили цыплята кур яичных пород, в возрасте от 1 до 56 дней. Еженедельно исследовали содержимое слепых кишок. Количественные показатели отдельных видов облигатной микрофлоры указанной полости были учтены в возрастной динамике. Это позволило четко дифференцировать данные, полученные в первые дни после вывода цыплят и в более поздние сроки.

Бактериологические исследования осуществляли по общепринятым методикам на базе Красноярской ветеринарной лаборатории КГУ «Краевая ветеринарная лаборатория».

Из отобранных проб готовили серийные десятикратные разведения в стерильном изотоническом растворе NaCl . Для количественного определения числа энтеробактерий посевы из соответствующих разведений производили при помощи микропипетки, а растирание его по поверхности питательной среды - при помощи шпателя. Посевы производили на среды Эндо из разведений 105. Через 24 часа производили учет выросших колоний. Если на среде Эндо выросли колонии лактозоположительные (малиновые, с металличе-

ским блеском), то подсчитывали общее количество бактерий кишечной палочки с учетом разведения и посевной дозы.

Если на чашке со средой Эндо выросли лактозоположительные колонии, лактозонегативные колонии, слабоферментирующие лактозу колонии, то подсчитывали число каждого вида выросших колоний. В дальнейшем все эти колонии отвивали на среду Клиглера (Ресселя) для расшифровки.

Для дальнейшей идентификации использовали ряд тестов: Цитрат Симмонса, ацетатный агар для определения источника углерода, тест на индол, полужидкий агар для определения подвижности. Определение отношения к источникам углеродного и азотного питания проводили на средах с арабинозой, рамнозой, сорбитом и лизином соответственно. Тесты по идентификации приведены в табл. 1.

Таблица 1

Тесты идентификации микроорганизмов вида Escherichia coli.

Название теста

Вид микроорганизма а с го § тр мм ии ЦС Й і тце рт < Ї ь т с о н и в д о П о д н И Глюкоза Лактоза а з о X и б а р А Рамноза Сорбит Лизин

Escherichia coli - + + - + К,Г + - + + - - +

Если после идентификации выделенные колонии относили к роду Е. СоН, то их количество вносили в «общее количество кишечной палочки» и производили перерасчет. Если же лактозонегативные и слабоферментирующие колонии не относились к роду Е. СоУ, то они не входили в общее число кишечной палочки, а идентифицировались самостоятельно до вида.

Кроме того, подсчитывали процент лактозоотрицательной Е. СоН от общего числа кишечной палочки.

Результаты исследований и обсуждение. Проведенные нами микробиологические исследования в возрастной динамике показали, что эшерихии являются неотъемлемыми представителями нормальной микрофлоры дистальных отделов кишечного тракта птиц. Нахождение в содержимом слепых отростках цыплят Е. СоУ наблюдалось во всем опытном периоде, лишь с той разницей, что количество кишечной палочки изменялось с возрастом цыплят. Также было установлено, что эшерихии в числе первых заселяют организм после рождения и их количество было достоверно наивысшим в первые две недели жизни с последующим понижением содержания Е. СоН в слепых отростках желудочно-кишечного тракта цыплят (табл. 2).

Таблица 2

Возрастная динамика E. ОоП содержимого толстого отдела кишечника у цыплят

Возраст цыплят, дн. Общее количество E. Coli на среде Эндо, Lg Количество лактозоотрицательной E. Coli, %

7 8,24±0,02 37,8

14 8,49±0,03 -

21 7,57±0,02 34

28 7,27±0,02 -

35 7,03±0,04 -

42 6,89±0,02 -

49 6,88±0,02 41

56 6,85±0,02 -

* P<0,001.

Анализ данных табл. 2 показал, что общее количество Е. СоН в содержимом кишечника цыплят в возрасте 7 дней составило 8,24 Lg, а в возрасте 14 дней - 8,49 Lg, что на 3,05% выше 7-дневного возраста. В последующий период жизни наблюдается постепенное снижение содержания кишечной палочки в содержимом желудочно-кишечного тракта цыплят. Так, в возрасте 21 день общее количество Е. СоУ снизилось на 10,8% по сравнению с 14-дневным возрастом. С 28- до 56-дневного возраста также наблюдалось постепен-

ное снижение количества кишечной палочки в содержимом слепых кишок цыплят. В 28-дневном возрасте этот показатель был достоверно ниже, чем в 14-дневном возрасте на 14,34%, в 35-дневном - на 17,13%, в 42-, 49- и 56-дневном возрасте на 18,81, 18,93 и 19,3% соответственно. С 56-дневного возраста количество Е.СоН в содержимом толстого отдела кишечника у цыплят находилось на одном уровне и соответствовало содержанию у взрослых особей.

В составе энтеробактерий лактозоотрицательная кишечная палочка была выделена в содержимом кишечника цыплят в 7-, 21- и 49-дневном возрасте. Количество лактозоотрицательной кишечной палочки в содержимом толстого отдела кишечника у цыплят в 7-дневном возрасте составило 37,8%, в 21-дневном возрасте - 34% от общего количества кишечной палочки. Наибольшее количество лактозоотрицательной кишечной палочки выделено от цыплят в возрасте 49 дней. Данный показатель в этот период составил 41% от общего количества Е. СоИ.

Из всего вышесказанного можно заключить, что в содержимом толстого отдела кишечника цыплят наибольшее количество кишечной палочки наблюдается до 3-недельного возраста, затем четко наблюдается постепенное равномерное снижение ее содержания.

Количество Е.СоН в содержимом толстого отдела кишечника у цыплят по достижении 56-дневного возраста не имело значительных отличий от взрослых особей.

Литература

1. Ардатская, М.Д. Дисбактериоз кишечника: современные аспекты изучения проблемы, принципы диагностики и лечения / М.Д. Ардатская, А.В. Дубинин, О.Н. Минушкин // Терапевтический архив. - 2001. -№ 2. - С. 67-72.

2. Дисбактериозы кишечника у взрослых / В.М. Бондаренко, Б.В. Боев, Е.А. Лыкова [и др.]. - М., 2003. - 206 с.

3. Гасанов, М.С. Влияние различных факторов на количество микроорганизмов желудочно-кишечного тракта животных / М.С. Гасанов // Тематический сб. тр. Азиатского НИИ ветеринарии. - 1982. - Т. 28. -С.106-108

4. Сорокин, В.В. Микрофлора кишечника животных / В.В. Сорокин, М.А. Тимошко, А.В. Николаева. - Кишинев, 1983. - 55 с.

---------♦'----------

УДК 612.34:636.294 Н.И. Рядинская

ФОРМИРОВАНИЕ КРОВЕНОСНОГО РУСЛА ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ МАРАЛОВ В ПРЕНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ

В статье даны результаты исследований по кровоснабжению поджелудочной железы у маралов. Выявлено, что закладка кровеносного русла начинается с образования широких капилляроподобных трубок, кровяных островков и соответствует зародышевому периоду.

Изменяется диаметр экстраорганного артериального русла с максимальными показателями в ранний плодный период, снижением в позднем плодном периоде и резким увеличением к рождению. Исключением является печеночная артерия, абсолютный прирост диаметра которой остается на высоком уровне в обеих половинах плодного периода. Увеличивается плотность микроциркуля-торного русла в 1 мм3, как экзокринной, так и эндокринной ткани поджелудочной железы у предплодов за счет равномерной капиллярной сети синусоидного расширения. У ранних плодов маралов плотность микроциркуляторного русла снижается в связи с появлением ацинарных капилляров меньшего диаметра, а затем увеличивается к моменту рождения.

Формирование кровеносного русла поджелудочной железы происходит соответственно росту и развитию, как самого органа, так и его структурных компонентов. Наиболее пластичным звеном является микро-