Включение пентоксифиллина в липосомы усиливает его влияние на реологические свойства крови в условиях старения in vitro

группе  соответственно 23,34±0,01 мкг/мл. При сопоставлении полученных результатов по группам выявило различия титра антител к ОБМ у больных с СГМ и УГМЛС (рис.2). У пациентов 1-й группы концентрация антител к ОБМ в сыворотке крови достоверно (р<0,001) превышала значения контрольной группы и составляла 58,5±0,01 мкг/мл. В группе детей с УГМЛС также отмечалось достоверно (р<0,001) повышение титра антител к ОБМ в сыворотке крови  110±0,01 мкг/мл. Различия между группами также были достоверными.

1-я группа 2-я группа контроль

Рис. 2. Содержание антител к ОБМ в разных группах (мкг/мл).

Известно, что у организма отсутствует иммунологическая толерантность к мозговой ткани, которую гематоэнцефалтескии барьер (ГЭБ) защищает от иммунного конфликта. Мозг может рассматривать системой защиты свои белки как чужеродные, стоит только повредиться гематоэнцефалический барьер за счет разрушения эндотелия и астроцитарной дисфункции. Результаты нашего исследования позволили выявить повышенные титра антител к ОБМ, что может говорить об острой мозговой катастрофе, повреждения белого вещества, развития деструктивных процессов мозга и указывают на активацию аутоиммунного процесса уже с первых часов травмы. Такая же направленность была выявлена и в других исследованиях [4].

Для уточнения выраженности аутоиммунного процесса, 5 больным были проведены исследования с выявлением титра антител к ОБМ при ЗЧМТ средней степени тяжести, сопровождающиеся субарахноидалъным кровоизлиянием (САК). Результаты нашего исследования позволили выявить достоверное (р<0,001) повышение титра антител к ОБМ у больных с САК, которое составило 119мкг/мл. Специфичность процесса в данном случае определялось не только повреждением нервной ткани и нарушением проницаемости ГЭБ, но и попаданием белков крови, а также возможным всасыванием мозговых антигенов в кровяное русло. Образуются фрагменты уже поврежденных нервных клеток, выделяется большое количество внутриклеточного содержимого, лизосомальных ферментов, что ведет к вторичной альтернации ранее здоровой нервной ткани и к дальнейшему ее повреждению, стимулируя развитие аутоиммунной реакции с вторичным иммунным ответом [4,5,6]. Данные патологические процессы приводят к процессам демиелинизации. Известно, что демиелиниза-ция  это универсальная форма реакции нервной системы на патологическое воздействие. В основе данного процесса лежит разрушение миелина. Проведённое исследование показало, что в остром периоде ЧМТ происходит увеличение титра антител к ОБМ, что указывает на процесс демиелинизации. Следует отметить, что уровень повышения титра нарастает в зависимости от степени тяжести ЗЧМТ. Кроме того, ОБМ выполняет трофическую функцию. Повышенное содержание антител к ОБМ у детей при нейротравме свидетельствует о недостаточном трофическом обеспечении нейронов.

Заключение. Таким образом, проведенное исследование подтвердило важнейшую роль аутоиммунных нарушений в развитии ЧМТ у детей. Отмечено достоверное повышение титра антител к ОБМ в сыворотке крови, причем концентрация их значительно преобладала у больных с ушибом головного мозга лёгкой степени. Результаты исследования позволяют утверждать, что антитела к ОБМ могут служить уникальными маркерами аутоиммунного процесса демиелинизации в ЦНС и быть дифференциально-диагностическим критерием тяжести ЧМТ у детей.

Литература

1. Агаева, К.Ф. Процесс накопления и распространения последствий травмы головы среди населения / К.Ф. Агаева// Журн. неврологии и психиатрии.П 2001.П №5.П С.46-48

2. Естественные нейротропные аутоантитела в сыворотках

больных с ишемическим инсультом, эпилепсией и болезнью Паркинсона / А. А. Абросимова [и др.] // Нейроиммунология.- 2003.-Т I.- №2.- С. 9Q0.

3. Воробьева, Н.А. Антитела изотопов Ig G и Ig Е к основному белку миелина при демиелинизирующих заболеваниях. дис.к. м. н. / Н.А. воробьева.- 1998.- С. 192.

4. Ганнушкина, И.В. Иммунологические аспекты травмы и сосудистых поражений головного мозга / И.В. Ганнушкина.- М., 1974.  С. 200.

5. Нейротрофический факторы и антитела к ним: участие в развитии нейроиммунных реакций при различных нарушениях нервной системы / М.А. Грудень [и др.] // Материалы X конференции СНейроиммунологияй- С-Пб., 2001.- С. 57.

6. К вопросу о механизмах развития воспалительной реакции в ткани мозга / Е.И. Гусев [и др.] // Неврология-иммунология. Материалы X конференции СНейроиммунологияй- С-Пб, 2001.  С. 63-64.

7. Ильина, Н.И. Воспаление и иммунитет в общеклинической практике. Общая концепция / Н.И. Ильина, Г.Щ. Гудима // Цитокины и воспаление.- 2005.- Т. 4.- №3.- С. 42-44.

8. Козырь, А.В. Исследование функциональных свойств аутоантител к ДНК / А.В. Козырь //Автореф. дисс. к., б. н.- М., 1999.  С. 34.

9. Крыжановский, Г.Н. Патология нервной регуляции в ге-незе иммунных расстройств при заболеваниях центральной нервной системы / Г.Н. Крыжановский, С.В. Магаева // Журнал неврологии и психиатрии.- 1998.- № 5.- С. 60-64.

10. Малашхия, Ю.А. Концепция иммунного барьера мозга / Ю.А. Малашхия, М.Г. Геладзе // Журн. невропатол. и психиатр.-1988.-№ 2.-С. 3^.

11. Поверенный, AM. Почему антитела к ДНК являются показателем аутоиммунного процесса (гипотеза) / A.M. Поверенный // Иммунология. - 1986. - №6.- С. 86-88.

12. Столяров, И.Д. Взаимодействие нервной и иммунной систем при органических поражениях структур головного мозга / И. Д. Столяров // Автореф. дисс. д. м. н.- СПб., 1996.- С. 43.

13. Нейрохимия / С.Г. Морозов [и др.].- 1996.- Т. 13.- №

2.-С. 98Q02.

14. Гервазиева, В.Б. Иммуноферментный метод количественного определения IgG антител к основному белку миелина / В.Б. Гервазиева, Н.Л. Воробьева // Иммунология. - №2. - 2000. - С. 5256.

15. Белогуров, А.А. Каталитическое расщепление основного белка миелина антителами диссертация канд.хим.наук / А. А. Белогуров.- М., 2008.- 32 с.

CLINICO- IMUNOLOGY FEATURES OF THE ACUTE PERIOD OF THE CHILDREN'S CRANIOCEREBERAL TRAUMA

A.YE. LUBENETS, S.M. KARPOV

Petrovo Central District Hospital, Stavropol Territory Stavropol State Medical Academy

The percentage of antibodies to the basic fiber myelin in blood serum at children with craniocerebral trauma was studied. The authentic increase of the antibodies level in the acute period of trauma with prevalence at patients with average severity trauma is noted. The received results emphasize their differential and diagnostic importance, which can be used by neurologists in complex examination of children with craniocerebral traumas.

Key words: immunology, craniocerebral trauma, demyeliniza-

tion.

УДК 611.018.5

ВКЛЮЧЕНИЕ ПЕНТОКСИФИЛЛИНА В ЛИПОСОМЫ УСИЛИВАЕТ ЕГО ВЛИЯНИЕ НА РЕОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА КРОВИ В УСЛОВИЯХ СТАРЕНИЯ IN VITRO

Т.Н. ОПАКОВА*

Установлено положительное влияние пентоксифиллина на реологические свойства крови при использовании модели старения крови in vitro. Включение пентоксифиллина в липосомы способствует усилению его терапевтического эффекта на показатели вязкости крови.

* ГОУ ВПО ИвГМА Минздравсоцразвития России, 153012, Иваново, пр. Ф. Энгельса, 8

Ключевые слова: пентоксифиллин, реологические свойства крови,

старение крови in vitro.

Материалы и методы исследования. Для исследования использовалась периферическая венозная кровь 24 здоровых добровольцев  женщин в возрасте от 18 до 30 лет на основе информированного согласия (выписка из протокола № 8 заседания Этического комитета Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Ивановская государственная медицинская академияП Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 05.11.2008 г.). В качестве антикоагулянта применялся гепарин (5000 Ед/мл).

В качестве контроля, в течение 4 часов после забора крови, в лаборатории гемореологии и микроциркуляции крови Ивановской медицинской академии определялись исходные реологические характеристики крови. Регистрировалась вязкость цельной крови при скоростях сдвига 10-200 сШ на ротационном вискозиметре АКР-2 (Россия). Показатель гематокрита определяли при помощи гематокритной центрифуги СМ-70 (Латвия). Концентрацию гемоглобина измеряли унифицированным цианметгемигло-биновым методом. Индекс ригидности эритроцитов рассчитывали при прохождении раствора буфера и 1% суспензии эритроцитов через мембранные фильтры с диаметром пор 3 мкм («Nuc-leopore» США) [1]. Агрегацию эритроцитов измеряли на агрего-метре МА-1 Myrenne (Германия). Поверхностная цитоархитектоника эритроцитов определялась в образцах крови, фиксированных 1% раствором глютарового альдегида в растворе Хэнкса (рН - 7,4) [2,3].

В качестве источника фосфолипидов для приготовления липосом использовался препарат СМослецетинП (производство ГУ НИИ Биомедицинской химии РАМН, Россия). Липосомы получали методом инжекции с последующей ультазвуковой обработкой взвеси [4]. Для этого растворяли фосфолипиды в абсолютном спирте с целью получения 1% суспензии, которую струйно вводили в раствор 0,9% хлорида натрия на магнитной мешалке при 500 об/мин. Перемешивание проводили в течение 1 часа (до исчезновения запаха спирта). Полученная суспензия подвергалась ультразвуковому воздействию на ультразвуковом диспергаторе УЗДН-А (Россия) с частотой колебаний 22±1,65 кГц и амплитудой колебаний 20 мкм. Озвучивание раствора проводилось в условиях водяной бани, 3 раза, в течение 30 сек с интервалами в 30 сек на максимальной мощности.

Для включения в липосомы использовался 20% пентокси-филлин (препарат СГрентал» производство «Aventis Farma Ltd» Индия). Пентоксифиллин добавляли в 0,9% раствор хлорида натрия на магнитной мешалке до внесения суспензии фосфолипидов.

Для моделирования старения in vitro стабилизированная кровь помещалась в термостат на 24 часа при температуре 37,2°С. В кровь предварительно, в соотношении 1:10, вносился: 0,9% раствор хлорида натрия (0,9% NaCl) в качестве группы сравнения или пентоксифиллин, или пентоксифиллин, включенный в липо-сомы. Конечная концентрация пентоксифиллина в крови составляла 2 мг/мл. После инкубирования крови проводилось повторное исследование реологических характеристик.

Статистическая обработка полученных данных осуществлялась с помощью программ Microsoft Exel 2003 и Statistica версии 6.0 под Windows XP. В данном исследовании распределение признака в выборке было близко к нормальному и количественные значения представлялись в виде средней арифметической и ее стандартной ошибки (M±m). Для оценки различий между группами использовался t-критерий Стьюдента. Критический уровень значимости при проверке статистических гепотез принимали p<0,05. При оценке непараметрического распределения признака пользовались тестом Вилкоксона, где уровень статистической достоверности р=0,02.

Результаты и их обсуждение. В условиях старения крови in vitro наблюдалось повышение гематокрита и показателей вязкости, снижение количества дискоцитов и образование множественных выростов на их поверхностной мембране, увеличение индекса ригидности эритроцитов и снижение их агрегации.

Проведенное исследование липосом, не содержащих лекарственный препарат, не выявило значимого положительного эффекта на реологические характеристики крови.

Установлено достоверное снижение Кессоновской вязкости

крови на 2,4 % при старении in vitro с пентоксифиллином относительно группы сравнения (рис. 1).

При включении пентоксифиллина в липосомы регистрировалось форсирование снижения данного показателя на 4,3% (p<0,01).

Рис. Изменение ^ссоновской вязкости крови под влиянием пентоксифиллина и пентоксифиллина, включенного в липосомы в условиях старения in vitro.

Примечание: *  p<0,05 [-достоверность различий по сравнению с группой 0,9% раствора хлорида натрия; p<0,005  достоверность межгрупповых различий пентоксифиллина и пентоксифиллина, включенного в липосомы

Вывод: включение пентоксифиллина в липосомы способствует усилению его терапевтического эффекта на реологические свойства крови, исследуемые на модели старения in vitro.

Литература

1. Гермины, понятия и подходы к исследованиям реологии крови в клинике / Ройтман Е.В. [и др.] // Громбоз, гемостаз и реология.^ 2000.D № 3. C. 5Q2.

2. Козинец, Г.И. Поверхностная цитоархотектоника клеток периферической крови в норме и при заболеваниях системы крови / Г.И. ^зинец, ù.A. ^моварт.П Галлин: Валгус, 1984.D 116 с.

3. Назаров, С.Б. Динамика становления эритроидного ростка кроветворных органов белых крыс в онтогенезе /СБ. Назаров// Физиологический журнал.^ 1993.D Г. 79.D № 3.D C. 54-59.

4. Марголис, Л.Б. Липосомы и их взаимодействие с клетками / Л.Б. Марголис, Л.Д. Бергельсон.П М.: Наука, 1986.D 240 с.

INCLUDING OF PENTOXIFYLLINE IN LIPOSOMS INTENSIFIES IT INFLUENCE ON RHEOLOGICAL CHARACTERISTICS OF BLOOD AT CONDITIONS OF AGING SIMULATED IN VITRO

T.N. OPAKOVA Ivanovo State Medical Academy

Positive effect of pentoxifylline on rheological characteristics of blood properties with using the mechanism of blood aging in vitro is established. Including of pentoxifylline in liposoms intensifies its therapeutic effect on viscosity indices of blood.

Key words: pentoxifylline, rheological characteristics of blood properties, blood aging in vitro.

УДК 616.8-616.89

ЦЕРЕБРАЛЬНЫЕ ИШЕМИЧЕСКИЕ ИНСУЛЬТЫ У БОЛЬНЫХ ТРУДОСПОСОБНОГО ВОЗРАСТА НА ФОНЕ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ

О.П. ВОЗНЮК, Н.И. ГАЛАХОВА, В.Г. ПОМНИКОВ, А.Н. ЮСУПОВА*

В данной статье представлены клинические особенности церебральных ишемических инсультов у 100 больных с алкогольной интоксикацией. Показано, что при алкогольной интоксикации даже относительно незначительное повышение артериального давления способно привести к возникновению церебрального инсульта. Выявлены некоторые клинические особенности церебральных инсультов у данной категории больных. Целесообразны дальнейшие исследования в данном направлении.

Институт усовершенствования врачей-экспертов Федерального медикобиологического агентства России, 1944, Санкт-Петербург, Большой Сампсо-ниевский проспект, д. 11 HAQ (812) 542-14-45, e-mail Dspbipde@mail.ru