НОВОЕ АНТИТЕЛО ПРОТИВ ADAM 17 И ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА

1. Моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с эпитопом ADAM17 и ингибирует отщепление по меньшей мере одного субстрата ADAM17, отличающееся тем, что указанный эпитоп ADAM17 состоит из эпитопа, заключенного в мембранном проксимальном домене (MPD, от англ. membrane proximal domain) последовательности SEQ ID NO 32.
50
2. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что оно ингибирует отщепление по меньшей мере одного субстрата ADAM17 с IC, составляющей 500 пМ или менее, предпочтительно 200 пМ или менее, и более предпочтительно 100 пМ или менее.
3. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один субстрат ADAM17 выбран среди фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α), трансформирующего фактора роста альфа (TGF-α), амфирегулина (AREG) и гепарин-связывающего фактора роста, подобного эпидермальному фактору роста (HB-EGF).
4. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что оно связывается с эпитопом ADAM 17 с константой диссоциации (Kd) составляющей примерно 10 нМ или менее, предпочтительно примерно 5 нМ или менее, что определено с помощью поверхностного плазмонного резонанса (SPR).
5. Моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с эпитопом ADAM17 и отличается тем, что включает:
i) тяжелую цепь, содержащую CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3 участки с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO 1, 2 и 3, соответственно; и
ii) легкую цепь, содержащую CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3 участки с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO 4, 5 и 6, соответственно.
6. Антитело по п. 5, отличающееся тем, что CDR-H1 участок имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO 7.
7. Антитело по п. 5, отличающееся тем, что CDR-H1 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO 8.
8. Антитело по п. 5, отличающееся тем, что оно содержит вариабельный домен тяжелой цепи с последовательностью, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO 9, 11 или 12.
9. Антитело по п. 5, отличающееся тем, что оно содержит вариабельный домен легкой цепи с последовательностью, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO 10.
10. Антитело по п. 5, отличающееся тем, что оно содержит вариабельный домен тяжелой цепи с последовательностью, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO 9, 11 или 12; и вариабельный домен легкой цепи с последовательностью, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO 10.
11. Моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, отличающееся тем, что оно состоит из моноклонального антитела 1022С3, полученного из гибридомы 1-4686, депонированной в CNCM, Институте Пастера, Франция, 18 октября 2012 года.
12. Антитело по п. 5, отличающееся тем, что оно способно связываться с одним эпитопом ADAM17, заключенным в мембранный проксимальный домен (MPD) последовательности SEQ ID NO 32.
50
13. Антитело по п. 12, отличающееся тем, что оно ингибирует отщепление по меньшей мере одного субстрата ADAM17 с IC, составляющей 500 пМ или менее, предпочтительно 200 пМ или менее, и более предпочтительно 100 пМ или менее.
14. Антитело по п. 13, отличающееся тем, что указанный по меньшей мере один субстрат ADAM 17 выбран среди TNF-α, TGF-α, AREG и HB-EGF.
15. Антитело по п. 12, отличающееся тем, что оно связывается с эпитопом ADAM17 с Kd составляющей примерно 10 нМ или менее, предпочтительно примерно 5 нМ или менее, что определено с помощью поверхностного плазмонного резонанса (SPR).
16. Антитело по любому из пп. 1-15 для применения в способе ингибирования роста и/или пролиферации опухолевых клеток.
17. Антитело по п. 16, отличающееся тем, что указанные опухолевые клетки выбраны среди опухолевых клеток, экспрессирующих ADAM17.
18. Мышиная гибридома 1-4686, депонированная в CNCM, Института Пастера, Франция, 18 октября 2012 года.
19. Изолированная нуклеиновая кислота для экспрессии антитела против ADAM17 по п. 1, отличающееся тем, что она выбрана среди следующих нуклеиновых кислот:
а) ДНК или РНК, кодирующей антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп. 1-15; а также
b) ДНК, содержащей по меньшей мере одну последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO с 13 по 28 и с 36 по 38.
20. Вектор для экспрессии антитела против ADAM17 по п. 1, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 19.
21. Клетка-хозяин для экспрессии антитела против ADAM17 по п. 1, содержащая вектор по п. 20.
22. Трансгенное животное, за исключением человека, содержащее по меньшей мере одну клетку, трансформированную вектором по п. 20.
23. Способ получения антитела против ADAM17 или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп. 1-15, отличающийся тем, что он включает следующие этапы:
a) культивирование в среде и в соответствующих условиях для культивирования клеток по п. 21; и
b) выделение указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, полученного таким образом, начиная с культуральной среды или указанных культивируемых клеток.
24. Композиция, содержащая антитело по любому из пп. 1-15.
25. Композиция по п. 24, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит, в качестве комбинированного продукта, цитотоксический агент.
26. Композиция по п. 24, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит, в качестве конъюгированного продукта, цитотоксический агент.
27. Композиция по п. 24, отличающаяся тем, что она представляет собой фармацевтическую композицию, дополнительно содержащую фармацевтически приемлемый носитель.
28. Композиция по любому из пп. 24-27 для применения в способе ингибирования роста и/или пролиферации опухолевых клеток.
29. Применение антитела против ADAM17 по любому из пп. 1-15, или полученного способом по п. 23, или композиции по любому из пп. 24-27 для лечения рака.
30. Применение по п. 29, отличающееся тем, что указанный рак представляет собой рак, выбранный среди раков, экспрессирующих ADAM17.
31. Применение по п. 29 или 30, отличающееся тем, что указанный рак представляет собой рак, выбранный среди рака яичников, рака молочной железы, рака почки, рака печени, рака поджелудочной железы, рака легкого, рака головы и шеи и плоскоклеточной карциномы.