Количественное определение гормона прогестерона у молочных коз зааненской породы

УДК 636.39 : 612.018

Количественное определение гормона прогестерона у молочных коз зааненской породы

Л.С.Малахова, А.Н.Черкесова,

К.К. Ашурбегов, ГНУ СНИИЖК В эндокринных механизмах реализации репродуктивной функции важное место принадлежит временной железе внутренней секреции -желтому телу. Гормональная активность желтого тела оказывает существенное влияние на процесс оплодотворения, имплантации и прогрессирования беременности. Количественная оценка этой активности на разных этапах цикла воспроизводства может быть высокоинформативным показателем функционального состояния репродуктивной системы в период формирования беременности.

Возможность использования показателя функциональной активности желтого тела в качестве диагностического критерия стала более доступной в связи с применением иммуноферментного метода количественного определения прогестерона в биологических жидкостях. В основе определения данного гормона по методу иммуноферментного анализа (ИФА) лежит вариант твердофазного иммуноферментного анализа, при котором между адсорбированным на поверхности лунок планшета прогестероном и свободным прогестероном происходит конкурентная реакция за активные центры связывания аффинных антител к прогестерону. Метод ИФА считается достаточно информативным и безвредным.

Все это создает благоприятные предпосылки для более детального изучения функциональной активности желтого тела в течение эстрального цикла и в период становления беременности.

Исходя из вышеизложенного ставились задачи:

-изучить динамику концентрации прогестерона в крови у коз зааненской породы в течение эстрального цикла с целью уточнения физиологических параметров функциональной активности желтого тела;

-определить возможность использования показателя функциональной активности желтого тела в целях контроля за процессом формирования беременности у коз.

Исследования проводились на опытной станции ГНУ СНИИЖК. Подопытная группа животных была сформирована с учетом фазы полового цикла. Для изучения динамики концентрации прогестерона в сыворотке крови коз с естественным половым циклом и в период перехода от полового цикла к беременности от 18 половозрелых коз ежедневно, в течение двух половых циклов получали пробы крови из яремной вены в одно и то же время суток. Всего получено и исследовано 720 проб крови. Определение концентрации прогестерона проводили методом ИФА на спектрофотометре «Униплан» фирмы ЗАО «Пикон» с помощью стандартных наборов фирмы «Вектор-Бест», Россия. Полученные результаты по концентрации прогестерона выражаются в молярных единицах - нано моль на литр (нмоль/л).

В результате проведенных исследований было установлено, что гормональная активность желтого тела в течение полового цикла у коз проявляется в строгой закономерности, которая характеризуется ритмичной сменой периодов низкой концентрации прогестерона в крови в первые 4-5 дней после охоты (0,535-0,824 нмоль/литр) и прогрессивным нарастанием его уровня в течение последующих 10 дней, с достижением максимума к 15-16 дню - 8,196 нмоль/л, а к 19 дню уровень прогестерона в крови у коз снижался до 0,819 нмоль/л. Подопытные животные, на которых изучали гормональную активность желтого тела в течение естественного полового цикла, были искусственно осеменены по прихождении в охоту свежеполученной спермой высокого качества, и ежедневно на протяжении 20 дней от них продолжали получать кровь и исследовать на содержание прогестерона.

Данные, полученные в результате проведенных исследований, свидетельствуют о том, что уровень прогестерона до 15 дня после осеменения был практически одинаковым (8,066-8,045 нмоль/л) у всех коз, независимо от того, оплодотворились они или нет. Начиная с 15-16 дня, в уровне прогестерона у оплодотворившихся и неоплодотворившихся коз наблюдались различия. На 19-20 день после осеменения различия в содержании прогестерона между оплодотворившимися (8,054 нмоль/л) и неоплодотворившимися козами (0,785 нмоль/л) были более существенными и достоверными (Р<0,001). По-видимому, это обусловлено тем, что у оплодотворившихся коз продукция прогестерона желтым телом поддерживалась на таком же высоком уровне, что и на пике его активности в лютеиновую фазу естественного полового цикла, а у неоплодотворившихся коз концентрация прогестерона в крови к этому периоду резко снизилась. Содержание прогестерона в крови на 19-20 день у оплодотворившихся коз превышало его концентрацию у неоплодотворившихся более чем в 10 раз.

Полученные данные еще не позволяют окончательно судить о механизме формирования беременности, однако они представляют основу для проведения дальнейших исследований в этой области.

Выявленная нами разница в динамике уровня прогестерона в крови плодотворно осемененных коз и коз, оставшихся неоплодотворенными после осеменения, может служить основой для теоретического обоснования возможности использования показателя концентрации прогестерона в крови коз (на 19-20 день после осеменения) в качестве критерия ранней диагностики беременности.