КОНТРОЛЬ ВРЕДИТЕЛЕЙ РАСТЕНИЙ С ПРИМЕНЕНИЕМ МОЛЕКУЛ РНК

1. Молекула двухнитевой РНК (dsRNA), содержащая смысловую нить и антисмысловую нить, где нуклеотидная последовательность антисмысловой нити комплементарна части полинуклеотида mRNA, транскрибируемого с гена бета-коатомера (бета-СОР) жесткокрылого насекомого, который содержит последовательность, кодирующую бета-СОР, i) характеризующуюся идентичностью с любой из SEQ ID NO:1-9, составляющей от по меньшей мере приблизительно 90% до по меньшей мере приблизительно 99%; или ii) содержащую любую из SEQ ID NO:1-9, и где молекула dsRNA является токсичной по отношению к по меньшей мере жесткокрылому насекомому-вредителю.
2. Молекула dsRNA по п. 1, где часть полинуклеотида mRNA содержит i) по меньшей мере 19 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO:29-37; ii) от по меньшей мере 20 или 21 последовательного нуклеотида до по меньшей мере 600 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO:29-37 или iii) содержит любую из SEQ ID NO:20-28.
3. Молекула dsRNA по п. 2, где антисмысловая нить содержит последовательность, комплементарную i) по меньшей мере 19 последовательным нуклеотидам из любой из SEQ ID NO:29-37; ii) от по меньшей мере 20 или 21 последовательному нуклеотиду до по меньшей мере 600 последовательным нуклеотидам из любой из SEQ ID NO:29-37 или iii) любой из SEQ ID NO:20-28.
4. Молекула dsRNA по п. 1, где нуклеотидная последовательность смысловой нити в значительной степени или полностью комплементарна нуклеотидной последовательности антисмысловой нити.
5. Молекула dsRNA по п. 1, где dsRNA представляет собой молекулу короткой шпилечной РНК (shRNA).
6. Молекула dsRNA по любому из пп. 1-5, где жесткокрылое насекомое-вредитель выбрано из группы, состоящей из Melighethes aeneus, Sitophilus oryzae, Sitophilus granaries, Ceutorhynchus assimilis, Rhyzopertha dominica, Phyllotreta nemorum, Phyllotreta striolata, Psylliodes chrysocephala и Leptinotarsa decemlineata.
7. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая по меньшей мере одну нить молекулы dsRNA по любому из пп. 1-5.
8. Рекомбинантный вектор, содержащий регуляторную последовательность, функционально связанную с молекулой нуклеиновой кислоты по п. 7.
9. Бактерия, содержащая рекомбинантный вектор по п. 8.
10. Инсектицидная композиция, содержащая dsRNA по любому из пп. 1-5 и приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель.
11. Инсектицидная композиция по п. 10, содержащая по меньшей мере второе инсектицидное средство.
12. Инсектицидная композиция по п. 11, где второе инсектицидное средство представляет собой биологическое средство или химическое средство.
13. Инсектицидная композиция по п. 12, где i) биологическое средство представляет собой инсектицидный белок Bacillus thuringiensis, инсектицидный белок Bacillus cereus, инсектицидный белок Xenorhabdus spp., инсектицидный белок Ρhotorhabdus spp., инсектицидный белок Brevibacillus laterosporous, инсектицидный белок Lysinibacillus sphearicus, инсектицидный белок Chromobacterium spp., инсектицидный белок Yersinia entomophaga, инсектицидный белок Paenibacillus popiliae или инсектицидный белок Clostridium spp., пататин, протеазу, ингибитор протеазы, уреазу, ингибитор альфа-амилазы, порообразующий белок, лектин, сконструированное антитело или фрагмент антитела или хитиназу; или ii) химическое средство представляет собой карбамат, пиретроид, фосфорорганическое соединение, фрипрол, неоникотиноид, хлорорганическое соединение, нереистоксин или их комбинацию.
14. Способ контроля по меньшей мере жесткокрылого насекомого-вредителя, включающий приведение указанного насекомого-вредителя в контакт с dsRNA, содержащей смысловую нить и антисмысловую нить, где нуклеотидная последовательность антисмысловой нити комплементарна части полинуклеотида mRNA, транскрибируемого с гена бета-коатомера (бета-СОР) жесткокрылого насекомого, который содержит последовательность, кодирующую бета-СОР, i) характеризующуюся идентичностью с любой из SEQ ID NO:1-9, составляющей от по меньшей мере приблизительно 90% до по меньшей мере приблизительно 99%; или ii) содержащую любую из SEQ ID NO:1-9, и где молекула dsRNA является токсичной по отношению к по меньшей мере жесткокрылому насекомому-вредителю.
15. Способ по п. 14, где i) часть полинуклеотида mRNA содержит а) по меньшей мере 19 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO:29-37; b) от по меньшей мере 20 или 21 последовательного нуклеотида до по меньшей мере 600 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO:29-37 или с) содержит любую из SEQ ID NO:20-28; или ii) антисмысловая нить содержит последовательность, комплементарную а) по меньшей мере 19 последовательным нуклеотидам из любой из SEQ ID NO:29-37; b) от по меньшей мере 20 или 21 последовательному нуклеотиду до по меньшей мере 600 последовательным нуклеотидам из любой из SEQ ID NO:29-37 или с) любой из SEQ ID NO:20-28.
16. Способ по п. 14 или  15, где приведение в контакт включает а) применение композиции, содержащей молекулу dsRNA или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую молекулу dsRNA, или бактерии, содержащей молекулу dsRNA или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую молекулу dsRNA, в отношении семени или растения или их части, где насекомое-вредитель питается семенем, растением или их частью; или b) посев трансгенного семени, из которого можно получить трансгенное растение, которое экспрессирует молекулу dsRNA или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую dsRNA, где насекомое-вредитель питается трансгенным растением или его частью.
17. Способ по п. 16, где жесткокрылое насекомое-вредитель выбрано из группы, состоящей из Melighethes aeneus, Sitophilus oryzae, Sitophilus granaries, Ceutorhynchus assimilis, Rhyzopertha dominica, Phyllotreta nemorum, Phyllotreta striolata, Psylliodes chrysocephala и Leptinotarsa decemlineata.
18. Способ контроля по меньшей мере жесткокрылого насекомого-вредителя, включающий приведение жесткокрылого насекомого-вредителя в контакт с молекулой нуклеиновой кислоты, которая представляет собой молекулу dsRNA по любому из пп. 1-5 или способна обеспечивать ее продуцирование для подавления экспрессии целевого гена бета-СОР у жесткокрылого насекомого-вредителя, и приведение жесткокрылого насекомого-вредителя в контакт с по меньшей мере вторым инсектицидным средством для контроля жесткокрылого насекомого-вредителя.
19. Способ по п. 18, где второе инсектицидное средство представляет собой биологическое средство или химическое средство.
20. Способ по п. 19, где i) биологическое средство представляет собой инсектицидный белок Bacillus thuringiensis, инсектицидный белок Bacillus cereus, инсектицидный белок Xenorhabdus spp., инсектицидный белок Ρhotorhabdus spp., инсектицидный белок Brevibacillus laterosporous, инсектицидный белок Lysinibacillus sphearicus, инсектицидный белок Chromobacterium spp., инсектицидный белок Yersinia entomophaga, инсектицидный белок Paenibacillus popiliae или инсектицидный белок Clostridium spp., пататин, протеазу, ингибитор протеазы, уреазу, ингибитор альфа-амилазы, порообразующий белок, лектин, сконструированное антитело или фрагмент антитела или хитиназу; или ii) химическое средство представляет собой карбамат, пиретроид, фосфорорганическое соединение, фрипрол, неоникотиноид, хлорорганическое соединение, нереистоксин или их комбинацию.
21. Способ идентификации гена бета-СОР у насекомого-вредителя для нацеливания интерферирующей РНК, при этом указанный способ включает стадии: а) выделения нуклеиновой кислоты из насекомого-вредителя; b) амплификации ортологичного целевого гена бета-СОР из нуклеиновой кислоты с помощью пары праймеров, содержащих нуклеотидные последовательности, выбранные из SEQ ID NO:38-55; с) идентификации последовательности ортологичного целевого гена бета-СОР; d) получения молекулы dsRNA, где молекула dsRNA содержит смысловую нить и антисмысловую нить, где нуклеотидная последовательность антисмысловой нити комплементарна части полинуклеотида mRNA, транскрибируемого с гена бета-СОР насекомого-вредителя, который содержит последовательность, кодирующую бета-СОР, и е) тестирования молекулы dsRNA из стадии d) в отношении инсектицидной активности против насекомого-вредителя.