Штамм лактобактерий Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841, используемый для производства кисломолочных продуктов
LACTOBACILLUS STRAIN LACTICASEIBACILLUS PARACASEI 14-2020 VKPM - B-13841 USED FOR THE PRODUCTION OF FERMENTED MILK PRODUCTS

Изобретение относится к биотехнологии, в частности может быть использовано в пищевой промышленности.
Lactobacillus paracasei
Известен штамм  LK-26 выделен от здорового ребенка грудного возраста, депонирован в ВКПМ, ФГУП ГосНИИгенетика, коллекционный № В10985 (патент №2453594 от 20.06.2012 г.); применяемый для приготовления кисломолочных, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, гигиенических и косметических средств, биологически активных добавок и бактерийных препаратов, характеризуемый достаточной антагонистической активностью.
Однако данный штамм обладает более низкой скоростью сквашивания молока, по сравнению с предлагаемым штаммом.
Техническая задача - выделение высокопродуктивного нового местного штамма лактобактерий путем селекции.
Lacticaseibacillus paracasei
Техническим результатом заявленного изобретения является  получение чистой культуры молочнокислого микроорганизма , обладающего высокими технологическими и антагонистическими свойствами.
Lacticaseibacillus paracasei
Для достижения данной цели использован штамм лактобактерий  14-2020 ВКПМ - В-13841, выделенный с поверхности листьев черной смородиныпутем многократных пересевов.
Идентификацию штамма проводили по методике Банниковой Л.А. Он депонирован в ВКПМ под номером В-13841.
Lacticaseibacillus paracasei
14-2020 ВКПМ - В-13841:
1. Культурально-морфологические особенности:
- палочковидная форма клеток, расположенные в виде коротких цепочках;
- грамположительные;
- неподвижные;
- эндоспор не образующие.
На поверхности агаризованной среды (из гидролизованного молока и MRS) через 24 часа при температуре 37°С образуют мелкие колонии.
2. Технологические свойства:
- скорость сквашивания молока - 7,5 часов.
- предел кислотообразования - 290°Т.
Продукт, синтезируемый штаммом - молочная кислота, антибиотические вещества.
3. Антибиотическая активность:
- диаметр зоны подавления роста по отношению к представителю патогенной микрофлоры Staphylococcus aureus составил - 20 мм;
- диаметр зоны подавления роста по отношению к представителю условно-патогенной микрофлоры Escherichia coli составил - 22 мм.
Lacticaseibacillus paracasei
Определение антибиотической активности штамма  14-2020 ВКПМ - В-13841 проводили на плотной питательной среде (МПА) методом диффузии в агар.
3
Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма - лиофилизация; хранение при температуре 4-6°С; питательные среды: MRS-агар; Rogosa et.al.; молоко с мелом; молоко с дрожжевым автолизатом, глюкозой, лакмусом, печеночным экстрактом и СаСО.
Способ, условия и состав сред для размножения штамма - при температуре 37°С; среды: MRS-агар; обезжиренное молоко,несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара.
Оптимальные условия и состав среды для ферментации - температура 37°С; среды: MRS-агар; несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара; молоко коровье.
Lacticaseibacillus paracasei
Пример. Использование штамма  14-2020 ВКПМ - В-13841, для приготовления кисломолочного продукта.
9
1 пассаж: лиофилизированный штамм вносят в среду культивирования и титруют методом десятикратных разведений. Инкубируют при 37±2 градусах по Цельсию до образования видимого роста в последних разведениях. Или сухую лиофилизированную биомассу лактобактерий вносят в количестве 1-2 дозы в пробирку с 30 мл питательной среды. Культивируют при температуре 37±2 градусов по Цельсию до получения биомассы с содержанием живых лактобактерий не менее 10 КОЕ/мл.
Lacticaseibacillus paracasei
9
2 пассаж: выросшую культуру штамма  14-2020 ВКПМ - В-13841 из последних разведений или из пробирки с выросшей биомассой вносят в среду накопления объемом до 5% и культивируют при температуре 37±2 градусов по Цельсию до получения биомассы с содержанием лактобактерий не менее 10 КОЕ/мл.
Lacticaseibacillus paracasei
3 пассаж: полученную биомассу штамма  14-2020 ВКПМ - В-13841 в объеме до 5% вносят в стерильное молоко, культивируют до образования сгустка (кисломолочный продукт). Количество пассажей №2 может быть увеличено в зависимости от объема производства.
Предлагаемый новый штамм Lacticaseibacillus paracasei 14-2020 ВКПМ - В-13841 выделенный с поверхности листьев черной смородины, хорошо приспособлен к местным условиям. Неприхотлив в культивировании и хранении, обладает высокой предельной кислотностью и скоростью свертывания молока, что позволяет повысить экономическую эффективность при производстве (за счет ускорения свертывания молока).
Штамм проявляет высокую антагонистическую способность по отношению к условно-патогенной и патогенной микрофлоре.
Lacticaseibacillus paracasei
Предлагаемый новый штамм лактобактерий  14-2020 ВКПМ - В-13841 обладает высокой биологической активностью и является основой для получения пробиотической закваски.