Изучение иммунотропных эффектов рекомбинантного интерлейкина 2 (ронколейкин). Уровень активности клеточного иммунитета при совместном применении интерлейкина 2 и албендазола

ricinus. С целью определения локализации клещей тело животного разделили на 7 областей: спина, подгрудок, шея, голова, нижняя часть брюшной стенки, промежность и вымя. Клещей с крупного рогатого скота собирали в населенных пунктах (частные), на фермах и пастбищах в присутствии хозяина или ответственного лица. Осмотр коров производили во время утренней или вечерней дойки. Клещей с животных снимали руками в тонких резиновых перчатках, предварительно смазав вазелином места прикрепления иксодид.

Результаты и обсуждения. Среди собранных нами клещей преобладал I. persulcatus (в 67% случаев), меньше встречался D. reticulatus (26,3%), редко - I. ricinus (6,7%). Наши исследования показывают, что локализация клещей трех видов на теле крупного рогатого скота неодинакова. Так, в области подгрудка в 94,5% случаев фиксировались имаго I. persulcatus, на других участках тела представители данного вида встречаются по отношению к другим видам от 56,6 до 73,1% случаев. Клещи D. reticulatus часто фиксируется в области головы (75,9% случаев), на остальных участках тела они встречаются в пределах 21,127,4%. Клещи I. ricinus реже других встречаются на теле крупного рогатого скота в области промежности и вымени, плотность заселения их достигает 26,3% и 16,9%, соответственно.

Рассматривая распределение клещей на теле хозяина можно заключить, что имаго клещей D. reticulatus чаще фиксируются в области шеи (41,0%), головы (33,66%), а в остальных участках тела их численность не достигает 10%; I. persulcatus предпочитает область подгрудка (43,85%) и шеи (25,8%), а I. ricinus - промежность (45,28%) и вымя (23,93%).

Общая плотность фиксации иксодид на теле крупного рогатого скота выглядит следующим образом: в области подгрудка фиксируется 31,12%, шеи -28,57%, головы - 11,67%, промежности - 11,4%, вымени - 9,4%, нижней части брюшной стенки - 5,66%, спины - 2,18% клещей.

Литература: 1. Балашов Ю.С. Паразито-хозяинные отношения

членистоногих с наземными позвоночными. - Л.: Наука. -1982. - 318-319 с. 2. Арзамасов И.Т. Иксодовые клещи. - Минск. - 1961. - 132 с. 3. Кербабаев Э.Б., Василевич Ф.И., Катаева Т.С. Клещи. - М.: Арахноэнтомозы

сельскохозяйственных животных. - 2000. - С. 17.

Localization of adut ticks on the body of cattle. Malunov S.N. FSBEE HPE “Ivanovo state Agricultural Academy named after Academican D.K. Belyaev”.

Summary. Considering the distribution of ticks on the host body may conclude that adult ticks Dermacentor reticulatus often fixed in the neck (41,0%), head (33,66%),and in other cases the body numbers were not as high as 10%; Ixodes persulcatus prefers dewlap (43,85%), area and neck (25,8%), and Ixodes ricinus -crotch (45,28%) and udder (23,93%).

ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОТРОПНЫХ ЭФФЕКТОВ РЕКОМБИНАНТНОГО

213

ИНТЕРЛЕЙКИНА 2 (РОНКОЛЕЙКИН). УРОВЕНЬ АКТИВНОСТИ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИМЕНЕНИИ ИНТЕРЛЕЙКИНА 2 И АЛБЕНДАЗОЛА

Мамыкова О.И.

ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И.Скрябина Россельхозакадемии

Введение. Эффективность терапии гельминтозов определяется не только антигельминтной активностью этиотропных средств, а также состоянием иммунной системы на момент фармакологического вмешательства. Сопоставление результатов иммунологических и терапевтических экспериментов показало, что направленность иммунотропной активности иммунокорректирующих средств оказывает влияние на эффективность лечения. /1,2/. Для научно-обоснованного выбора фармакологических средств важно знать не только характер иммунотропной активности препаратов, входящих в комбинацию, но и комбинированное действие, поскольку очевидна возможность изменения иммунотропных эффектов под влиянием дополнительных средств.

Материалы и методы. В работе использованы белые беспородные мыши весом 18-20 г. Животных содержали в одинаковых условиях вивария на обычном пищевом рационе. Животных выводили из опыта методом цервикальной дислокации.

Оценка действия рекомбинантного интерлейкина 2 человека и его комбинации с антигельминтным препаратом предполагала использование модельной системы - реакции гиперчувствительности замедленного типа, которая дает представление о способности лекарственных средств влиять на продукцию сенсибилизированными лимфоцитами медиаторов клеточного иммунитета разнонаправленного действия. Реакцию гиперчувствительности замедленного типа воспроизводили по методу Kitamura /4/.

В работе использовали ронколейкин инъекционный (50 000 МЕ/мл), активной субстанцией которого является рекомбинантный интерлейкин 2 человека. Синтезированный ИЛ 2 воздействует на Т-лимфоциты, усиливая пролиферацию и последующий синтез ИЛ 2, увеличивает выработку а, в и у-интерферонов. Иммуномодулятор применяли в дозе 10 тыс. МЕ/кг двукратно подкожно в область шейной кожной складки с интервалом 24 часа.

В качестве антигельминтного средства использовали албен 20 % -гранулированную лекарственную форму албендазола (5-(пропил-тио)-1-п-бензимидазол-2-ил-карбамат) с содержанием 200 мг албендазола в 1 г гранулята. Албендазол применяли в дозе 75 мг/кг двукратно.

Результаты и обсуждение. Результаты тестирования клеток эффекторов гиперчувствительности замедленного типа после введения испытуемых препаратов и их комбинации представлены в таблице. Из приведенных данных видно, что интерлейкина 2 человека и антигельминтное средство албендазол при изолированном назначении показали одинаковую направленность иммунобиологического действия на иммунокомпетентные клетки,

214

ответственные за развитие реакций клеточного иммунитета. Однако, интенсивность формирования клеточной реакции ГЗТ имела несущественные различия.

Таблица

Уровень активности клеточной реакции гиперчувствительности замедленного типа при введении интерлейкина 2 человека (ронколейкин) изолированно и совместно с албендазолом

Группа обследованных Препарат Доза препарата Кратность введения Индекс РГЗТ, %

I группа албендазол 75 мг/кг двукратно 13,94+2,52

II группа интерлейкин 2 10 000 МЕ/кг двукратно 10,9+0,94

III группа интерлейкин 2 албендазол 10 000 МЕ/кг 75 мг/кг двукратно двукратно 4,51+0,45*

контроль 8,26+0,66

• - достоверность различий с соответствующим показателем контрольной группы

Антигельминтное средство албендазол при двукратном пероральном применении в дозе 75 мг/кг с интервалом 24 часа (суммарно - 150 мг/кг) вызывал усиление клеточной реакции формирования гиперчувствительности замедленного типа. Индекс реакции ГЗТ превышал показатель контроля на 68,1 %. Эффект усиления клеточной реакции формирования ГЗТ статистически недостоверен при уровне значимости а= 0,05.

Менее значительную активизацию эффекторных клеток гиперчувствительности замедленного типа вызывали двукратные подкожные инъекции интерлейкина 2 человека в суммарной дозе 20 тыс. МЕ/кг. Иммуномодулятор, введенный интактным мышам, вызывал усиление клеточной реакции ГЗТ на 31,9 %. Эффект усиления клеточной реакции статистически недостоверен при уровне значимости а = 0,05. По-видимому, рекомбинантный интерлейкин 2 человека проявляет иммуномодулирующее действие преимущественно в условиях иммуносупрессивного состояния иммунной системы.

При изолированном применении испытуемых препаратов выявлена тенденция к усилению клеточной реакции гиперчувствительности замедленного типа. Изолированное двукратное применение интерлейкина 2 человека и албендазола вызывало сдвиг индекса РГЗТ, что указывает на иммунотропную активность препаратов в испытанных дозах и режиме введения. Таким образом, иммунобиологическое действие двух препаратов, отличающихся химической структурой, механизмом основного действия, однонаправлено.

Подсчет индексов реакции гиперчувствительности замедленного типа у

215

животных, получивших комбинацию препаратов, состоящую из интерлейкина 2 и албендазола, введенных двукратно с интервалом 24 часа в дозах 10 тыс. МЕ/кг и 75 мг/кг соответственно, выявил подавление клеточной реакции формирования гиперчувствительности замедленного типа на 45,3 %. Эффект подавления клеточной реакции под влиянием комбинации препаратов статистически достоверен (р < 0,05 относительно контроля). Таким образом, уровень активности реакций клеточного иммунитета при введении интерлейкина 2 человека и албендазола снижается, что указывает на подавление функциональной активности эффекторных клеток гиперчувствительности замедленного типа, секретирующих медиаторы клеточного иммунитета (IL2 и IFNy). Результаты наблюдений показывают, что препараты, примененные изолированно, и обладающие однонаправленным иммунобиологическим действием, проявляют противоположное влияние на иммунокомпетентные клетки при совместном назначении.

Ранее на лабораторных животных с экспериментальной инвазией Trichinella spiralis показано, что введение рекомбинантного интерлейкина 2 человека в комплексную терапию трихинеллеза не оказывало заметного влияния на антигельминтную эффективность албендазола в дозе 75 мг/кг введенного двукратно. Несмотря на высокий протективный эффект, интерлейкина 2 человека на кишечной стадии T. spiralis (51,4 %), установлено незначительное повышение эффективности лечения менее чем на 4 % /3/. В одном случае из пяти применение интерлейкина 2 отменяло антигельминтное действие албендазола, более того интенсивность инвазии у леченых животных превосходила таковую у контрольных нелеченых мышей.

Сопоставив результаты терапевтического и иммунологического экспериментов можно утверждать, что снижение уровня активности клеточной реакции формирования гиперчувствительности замедленного типа может явиться одной из причин неудачного терапевтического вмешательства. Доклиническая оценка направленности иммунотропной активности комбинации препаратов является обязательным условием при разработке подходов к комплексной терапии гельминтозов животных.

Заключение. Комбинированное действие иммуномодулятора интерлейкина 2 человека и антигельминтного средства албендазол, введенных последовательно, определяется подавлением функциональной активности эффекторных клеток гиперчувствительности замедленного типа, реализующих реакции клеточного иммунитета. Принимая во внимание значение клеточных факторов иммунитета в создании протективного иммунитета при гельминтозах, полученный результат ставит под сомнение возможность совместного применения интерлейкина 2 человека и албендазола в испытанных дозах и кратности введения в комбинированной терапии гельминтозов животных.

Литература. 1. Мамыкова О.И. //Тр. Всерос. ин-та гельминтол. - М., 2000. - Т. 36. - С. 102-117. 2. Мамыкова О. И. //Доклады российской академии сельскохозяйственных наук. - 2008. - № 3. - С. 52-55. 3. Мамыкова О.И., Написанова Л.А. //Доклады российской академии сельскохозяйственных наук.

216

- 2012. - № 2. - С. 51-54. 4. Kitamura K. //Immunol. Methods. - 1980. - V.39, N 3.

- P. 277-283.

Investigation of immunotropic effects of recombinant interleukin 2 (ronkoleukin). The level of cell immunity activity at combined application of interleukin and albendazole. Mamikova O.I. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Helminthology.

Summary. One revealed the negative immunotropic effects of recombinant human interleukin 2 given at the dose level of 10000 IE/kg of body weight on mice at twice administration and albendazole given twice at dose level of 75 mg/kg perorally on cell immunity. The combined effects of human interleukin 2 and anthelmintic were determined by suppression of effectors cells functional activity of delayed hypersensitivity provided cell immunity reactions. One noted the reduction of cell reaction of delayed hypersensitivity by 45,3% compared with control index. Taking into consideration the role of cell immunity factors in formation of protective immunity at helminthoses the obtained data make doubtful the possibility to apply human interleukin 2 and albendazole in combination at the tested doses and frequency in combined therapy of helminthoses.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ПОБОЧНЫХ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ АНТИГЕЛЬМИНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ АЛБЕНДАЗОЛА И МЕБЕНДАЗОЛА - ПРОИЗВОДНЫХ

БЕНЗИМИДАЗОЛА

Мамыкова О.И.

ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина Россельхозакадемии

Введение. Для разработки схем комбинированной терапии гельминтозов животных и повышения эффективности лечения посредством применения иммуностимулирующих препаратов с антигельминтиками важно знать направленность иммунобиологических эффектов фармакологических средств, входящих в комбинацию, поскольку цель терапии гельминтозов состоит в коррекции нарушений иммуномодулирующей функции иммунной системы. Кроме того, знание иммунобиологических эффектов антигельминтных препаратов может явиться прогностическим признаком при выборе иммуномодулирующих препаратов для комбинированной терапии. В связи с этим целью настоящих исследований явилось изучение возможных иммунотропных эффектов антигельминтных препаратов - производных бензимидазола, нашедших широкое применение в практике терапии гельминтозов.

Материалы и методы. Сравнительная оценка побочных иммубиологических эффектов албендазола и мебендазола проведена в 2-х опытах на белых беспородных мышах, содержащихся в одинаковых условиях

217