СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ГЕМОРЕОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ
AGENT EHXIBITING HAEMORHEOLOGIC ACTIVITY

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается средств, обладающих гемореологическими свойствами.
Известны средства, влияющие на реологические свойства крови - пентоксифиллин, диквертин, танакан, гибридные макромолекулярные антиоксиданты [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7].
Основным компонентом диквертина является дигидрокверцетин (ДГКВ) - 2-(3,4-дигидроксифенил)-3,5,7-тригидроксихроман-4-он, его содержание в субстанции составляет не менее 90% [8].
ДГКВ обладает антиоксидантным, противовоспалительным, радиозащитным, ангиопротекторным, гастро- и гепатозащитным, гиполипидемическим и диуретическим действием [8].
Задачей изобретения является расширение арсенала средств, улучшающих реологические свойства крови.
Поставленная задача решается применением гибридного макромолекулярного соединения O-(4-(2-(3,4-дигидроксифенил)-3,5-дигидроксихроман-4-он-7-илокси)-4-оксобутаноил)-(1→6)-α-D-глюкан (Д-ДГКВ) в качестве гемореологического средства.
Д-ДГКВ представляет собой продукт химической модификации декстрана (Д) ((1→6)-α-D-глюкан) с молекулярной массой 40 кДа дигидрокверцетином. Содержание ДГКВ в продукте составляет 7 мас.%.
В отличие от ДГКВ вещества очень малорастворимого в воде [8] Д-ДГКВ обладает хорошей растворимостью.
Фармакологическая активность Д-ДГКВ ранее не изучалась.
Использование Д-ДГКВ в качестве средства, влияющего на реологические свойства крови, в литературе не описано.
Принципиально новым в предлагаемом изобретении является то, что в качестве гемореологического средства используют гибридное макромолекулярное соединение Д-ДГКВ с массовым содержанием ДГКВ 7%.
Данный вид активности соединения явным образом не вытекает для специалиста из уровня техники. Гибридное макромолекулярное соединение Д-ДГКВ можно использовать в комплексной терапии патологий, сопровождающихся гипервязкостью крови.
Таким образом, данное техническое решение соответствует критериям изобретения: "новизна", "изобретательский уровень", "промышленная применимость".
Новые свойства гибридного макромолекулярного соединения были найдены экспериментальным путем.
-5
-6
-7
-6
-1
-1
Эксперименты по изучению гемореологических свойств Д-ДГКВ на модели гипервязкости крови in vitro [9] проведены на 9 крысах-самцах Вистар массой 320-380 г. Забор крови проводили под эфирным наркозом из общей сонной артерии через катетер. Кровь стабилизировали 3,8% цитратом натрия в соотношении 9:1. Активность Д-ДГКВ исследовали в конечных концентрациях 10, 10 и 10 г/мл крови. В контрольные пробы добавляли эквиобъемное количество 0,9% раствора NaCl (контроль 1) или декстран (40 кДа) в конечной концентрации 10 (контроль 2). Д-ДГКВ, 0,9% раствор NaCl, декстран вводили в объеме 0,02 мл на 1 мл крови. Исследуемый показатель (вязкость крови) регистрировали на ротационном вискозиметре АКР-2 в диапазоне скоростей сдвига от 3 с до 300 с [10] до и после инкубации проб крови при температуре 43,0±0,4°C в течение 60 мин.
Статистическую обработку проводили с помощью пакета программ "Statistica for Windows 6.0". Рассчитывали среднее значение, стандартную ошибку среднего значения, для выявления межгрупповых различий использовали непараметрический критерий Mann-Whitney U test.
Результаты исследований представлены в примерах.
-1
-1
-1
-1
Пример 1. Инкубирование проб крови с добавлением 0,9% раствора NaCl (контроль 1) в течение 60 мин при температуре 43,0±0,4°C приводило к повышению вязкости крови при скоростях сдвига 3 с, 10 с, 100 с, 300 с на 62%, 21%, 16% и 14% соответственно (табл.).
-6
-1
-1
-1
-1
-6
Пример 2. Инкубирование проб крови с добавлением декстрана (40 кДа) в конечной концентрации 10 (контроль 2) в течение 60 мин при температуре 43,0±0,4°C приводило к повышению вязкости крови при скоростях сдвига 3 с, 10 с, 100 с, 300 с на 59%, 18%, 13% и 14% соответственно (см. таблицу). Достоверных различий при добавлении в пробы крови 0,9% раствора NaCl и декстрана (40 кДа) в конечной концентрации 10 не выявлено.
-6
Таким образом, на модели гипервязкости крови in vitro декстран в конечной концентрации 10 г/мл не ограничивает возрастание вязкости крови.
-5
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
Пример 3. Инкубирование проб крови в течение 60 мин при температуре 43,0±0,4°C с Д-ДГКВ в конечной концентрации 10 г/мл крови приводило к повышению вязкости крови при скоростях сдвига 3 с, 10 с, 100 с, 300 с на 25%, 7%, 11% и 5% соответственно (см. таблицу) по сравнению с исходными значениями. Однако по сравнению с контролем 2 (Д) значения вязкости крови при скоростях сдвига 3 с, 10 с и 300 с были меньше на 22%, 10% и 7% соответственно.
-5
Таким образом, на модели гипервязкости крови in vitro Д-ДГКВ в конечной концентрации 10 г/мл ограничивает возрастание вязкости крови при низких и высоких скоростях сдвига.
-6
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
Пример 4. Инкубирование проб крови в течение 60 мин при температуре 43,0±0,4°C с Д-ДГКВ в конечной концентрации 10 г/мл крови приводило к повышению вязкости крови при скоростях сдвига 3 с, 10 с, 100 с, 300 с на 36%, 10%, 8% и 5% соответственно (см.таблицу) по сравнению с исходными значениями. Однако по сравнению с контролем 2 (Д) значения вязкости крови при скоростях сдвига 3 с, 10 с, 100 с и 300 с были меньше на 14%, 7%, 5% и 7% соответственно.
-6
Таким образом, на модели гипервязкости крови in vitro Д-ДГКВ в конечной концентрации 10 г/мл ограничивает возрастание вязкости крови в широком диапазоне скоростей сдвига.
-7
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
-1
Пример 5. Инкубирование проб крови в течение 60 мин при температуре 43,0±0,4°C с Д-ДГКВ в конечной концентрации 10 г/мл крови приводило к повышению вязкости крови при скоростях сдвига 3 с, 10 с, 100 с, 300 с на 28%, 7%, 8% и 5% соответственно (см. таблицу) по сравнению с исходными значениями. Однако по сравнению с контролем 2 (Д) значения вязкости крови при скоростях сдвига 3 с, 10 с, 100 с, 300 с были меньше на 19%, 10%, 5% и 7% соответственно.
-7
Таким образом, на модели гипервязкости крови in vitro Д-ДГКВ в конечной концентрации 10 г/мл ограничивает возрастание вязкости крови в широком диапазоне скоростей сдвига.
Исходя из приведенных выше фактов следует, что Д-ДГКВ ограничивает возрастание вязкости крови.
Таблица
Влияние Д-ДГКВ на вязкость крови (мПа·с) через 60 минут после инкубации проб при 43,0±0,4°C (т=6)
Препарат
Концентрация, г/мл крови
Вязкость крови
3 с<sup>-1</sup>
10 с<sup>-1</sup>
100 с<sup>-1</sup>
300 с<sup>-1</sup>
Исходная
-
10,2±0,01
6,1±0,1
3,8±0,1
3,7±0,1
Контроль (0,9% NaCl)
-
16,5±0,1<sup>*</sup>
7,4±0,1<sup>*</sup>
4,4±0,1<sup>*</sup>
4,2±0,1<sup>*</sup>
Контроль (Д)
10<sup>-6</sup>
16,2±0,1<sup>*</sup>
7,2±0,1<sup>*</sup>
4,3±0,1<sup>*</sup>
4,2±0,1<sup>*</sup>
Д-ДГКВ
10<sup>-5</sup>
12,7±0,2<sup>*@#</sup>
6,5±0,2<sup>*@#</sup>
4,3±0,1<sup>*@</sup>
3,9±0,1<sup>*@#</sup>
Д-ДГКВ
10<sup>-6</sup>
13,9±0,3<sup>*@#</sup>
6,7±0,2<sup>*@#</sup>
4,1±0,1<sup>*@#</sup>
3,9±0,1<sup>*@#</sup>
Д-ДГКВ
10<sup>-7</sup>
13,1±0,1<sup>*@#</sup>
6,5±0,1<sup>*#</sup>
4,1±0,1<sup>*@#</sup>
3,9±0,1<sup>*@#</sup>
Примечание: <sup>*</sup> - различия достоверны в сравнении с исходными значениями; <sup>@</sup> - с контролем (0,9% NaCl); <sup>#</sup> - с контролем (Д) (Р<0,05).
Источники литературы
1. Дроздов С.А. Пентоксифиллин в лечении нарушений мозгового кровообращения // Журн. неврол. и психиатрии им. С.С.Корсакова. - 1997. - №9. - С.62-67.
2. Машковский М.Д. Лекарственные средства: Пособие для врачей. - М.: Новая волна, 2000. - T.1 и 2.
3. Плотников М.Б., Алиев О.И., Маслов М.Ю. и др. Коррекция синдрома повышенной вязкости крови в условиях ишемии мозга у крыс комплексом диквертина и аскорбиновой кислоты // Эксперим. и клинич. фармакология. - 1999. - №6. - С.45-47.
4. Koltringer P., Eber O., Lind P. et al. Microzirkulationund Viscoelastizitat des Vullblutes unter Gingko biloba extrakt. Eine placebocontrollierte randomisierte Doppelblind-Studie // Perfusion. - 1989. - Bd.1. - S.28-30.
5. Плотников М.Б., Колтунов А.А., Алиев О.И. Метод отбора лекарственных веществ, влияющих на реологические свойства крови in vitro // Эксперим. и клинич. фармакология. - 1996. - №6. - С.57-58.
6. Патент РФ №2425683. Средства, обладающие гемореологической активностью. Плотников М.Б., Алиев О.И., Попова Е.В., Домнина Н.С. - Бюлл. №22, 10.08.2011.
7. Патент РФ №2141320. Гемореологическое средство. Плотников М.Б., Алиев О.И., Васильев А.С., Тюкавкина Н.А.- Бюлл. №32, 20.11.1999.
8. Плотников М.Б., Тюкавкина Н.А., Плотникова Т.М. Лекарственные препараты на основе диквертина. - Томск: Изд-во Томского ун-та, 2005. - С.20.
9. Плотников М.Б., Колтунов А.А., Алиев О.И. Метод отбора лекарственных веществ, влияющих на реологические свойства крови in vitro // Эксперим. и клинич. фармакология. - 1996. - №6. - С.57-58.
10. Парфенов А.С., Пешков А.В., Добровольский Н.А. Определение реологических свойств крови: Методические рекомендации. - М., 1994. - 15 с.