Влияние различных сдвигов рН на свертывание крови, фибринолиз и агрегацию тромбоцитов в опытах in vitro

НАУЧНыЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

УДК 612.11/12 ББК Р 345.1

В. В. Альфонсов, Е. В. Альфонсова, Л. А. Забродина

Влияние различных сдвигов рН на свертывание крови, фибринолиз и агрегацию тромбоцитов в опытах in vitro

В работе представлены экспериментальные данные о влиянии различных концентраций молочной кислоты на показатели гемокоагуляционного и сосудисто-тромбоцитарного гемостаза. Молочная кислота в опытах in vitro оказывает двухфазное влияние на процессы свертывания крови в зависимости от применяемой дозы: малые концентрации (2,4-3,9 ммоль/л) укорачивают, большие (16,6 ммоль/л) удлиняют фибринообразование. Наибольшая активация свертывания крови наблюдается при pH 7,2-7,1. Гиперкоагуляция, возникающая при сдвиге pH в кислую сторону, связана с рядом факторов: инактивацией антитромбинов, выходом прокоагулянтов из эритроцитов и тромбоцитов, нарушением процессов дезагрегации кровяных пластинок, более быстрой полимеризацией фибрина.

Ключевые слова: лактат, pH, гемостаз, агрегация тромбоцитов, фибринолиз.

V. V. Alfonsov, E. V. Alfonsova, L. A. Zabrodyna

Effect of different pH on blood coagulation, fibrinolysis and platelet aggregation in vitro experiments

The article is devoted to the investigation of effect of different concentrations of lactic acid on the performance hemocoagulation and vascular-platelet hemostasis. Lactic acid in vitro experiments has a biphasic effect on blood coagulation, depending on the dose: low concentrations (2,4-3,9 mmol/l) shortened, large (16.6 mmol/l) prolongs the formation of fibrin. The highest activation of blood coagulation is observed at pH 7,2-7,1. Hypercoagulation, occurred when the pH shift in the acid side, connected with a number of factors: the inactivation of antithrombin, exit prokoagulyantov of red cells and platelets, a violation of the processes of disaggregation of platelets, a rapid polymerization of fibrin.

Key words: lactat, pH, hemostasis, aggregation of thrombocytes, fibrinolysis.

В литературе последних лет значительное место занимают вопросы изучения лактат-ацидоза. Впервые он был описан W. E. Huckabee в 1961 г. как синдром, характеризующийся резким увеличением концентрации молочной кислоты в крови (до 26 ммоль/л). С этого времени число исследований, посвященных ЛА постоянно растет. В настоящее время известны обзоры по различным аспектам ЛА [3; 8; 11; 12; 13; 14; 15; 16; 17; 19; 20]. Этот интерес, не угасающий в течение многих лет, объясняется до конца неизученным патогенезом ЛА, его неожиданным развитием и малой эффективностью терапии.

Накопление молочной кислоты, известной в качестве крупного донора протонов, изменяет гемостатические и реологические свойства крови, усиливает гипоксию тканей и уменьшает функцию энергообразования клеток вследствие разобщения гликолиза и цикла Кребса, снижает ресинтез АТФ и ведет к увеличению энтропии в организме [4]. Влияние ацидоза на показатели гемостаза изучалось многими исследователями [1; 2; 5; 6; 7; 9; 10; 18; 21]. Благодаря этому были выявлены основные закономерности изменения функции тромбоцитов, свертывания крови, фибринолиза, антикоагулянтной активности, развития

диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС) и тромбогеморрагического (ТГС) синдромов при ацидотических состояниях. Однако некоторые механизмы остаются не ясными. Наши исследования посвящены изучению влияния различных сдвигов рН на свертывание крови, фибринолиз и агрегацию тромбоцитов в опытах in vitro.

Для исследования роли метаболических факторов в механизмах свертывания крови нами были проведены опыты in vitro. На 20 собаках весом от 15 до 25 кг, использованных в качестве доноров, изучали действие различных концентраций молочной кислоты, приготовленной на физиологическом растворе, на свертываемость плазмы и фибринолиз. Кровь для исследования забиралась силиконированными иглами из бедренной вены и смешивалась с 1,34% раствором оксалата натрия в соотношении 1:9, после чего центрифугировалась для получения плазмы с высоким и низким содержанием тромбоцитов.

Изучали время рекальцификации, активность фактора VIII, протромбиновое время, тромбиновое время обычной и гепаринизированной плазмы, фибринолиз, агрегацию тромбоцитов. В экспериментах применялись пять концентраций лактата 2,4; 3,9; 5,8; 7,8 и 16,6 ммоль/л. Во всех исследуемых тестах производили регистрацию рН.

Агрегацию тромбоцитов изучали в течение первого часа после взятия кро-плазму, богатую тромбоцитами получали с помощью цен-крови в центрифуге ЦЛК-1 при 1000 об/мин в течение

ви. Цитратную трифугирования

%

20

30

40

50

60

80

0 3

В ре м я

6 9

м н н у т а х

12

15

10 мин. Плазму, богатую тромбоцитами, в количестве 1 мл помещали в кювету ФЭК-М против кюветы с дистиллированной водой, добавляли 0,5 мл физиологического раствора хлорида натрия, при этом конечное количество тромбоцитов в 1 мм3 в пробе составляло 250000-300000 клеток. Для создания турбулентных потоков в суспензию кровяных пластинок погружали поливиниловый стержень, вращающийся со скоростью 360 об/мин. Наличие или отсутствие спонтанной агрегации тромбоцитов (СА) фиксировали в течение 2 мин. Затем вносили 0,2 мл АДФ в конечной концентрации 0,0005 мкмоль/мл плазмы. После записи агрегатограммы проводили анализ кривой по девяти параметрам, описанным в материалах и методах исследования (рис. 1). Запись агрегации производили при различных значениях рН (7,50; 7,4; 7,34; 7,2; 7,18; 6,92; 6,8; 6,50; 6,11). Необходимые значения концентрации водородных ионов создавали заранее приготовленными растворами молочной кислоты, которые добавляли в количестве 0,5 мл к 1 мл плазмы.

Результаты исследований свидетельствуют о том, что молочная кислота оказывает выраженное действие на систему свертываемости крови и фибринолиз (табл. 1). Время рекальцификации бестромбоцитной плазмы под влиянием различных концентраций молочной кислоты изменялось двухфазно. Малые дозы лактата (2,4-5,8 ммоль/л) приводили к укорочению, а большие (7,77-16,6) удлиняли время образования фибринового сгустка. Наибольшая скорость свертывания плазмы наблюдалась при рН около 7,2.

Рис. 1. Методика анализа кривой агрегации тромбоцитов: СА - спонтанная агрегация, наличие или отсутствие (градусы);

ВН - время начала агрегации (с); УА - а, угол наклона агрегации (градусы); ВА - время агрегации (с); АА - агрегации (мм); ВА2 - величина агрегатов (мм); УД - р, угол наклона дезагрегации (градусы); ВД - время дезагрегации (с);

АД - амплитуда дезагрегации

Таблица 1

Влияние различных концентраций молочной кислоты на свертывание плазмы и фибринолиз

Изучаемые показатели Конт- роль Концентрация вносимой кислоты в плазму, в моль /л

2,4 3,9 5,8 7,8 16,6

Время рекальцификации п=8 130,0 ± 3,5 127 ± 3,2 120 ± 3,6 р < 0,05 124 ± 4,8 154 ± 10,0 р < 0,05 Нет сгустка

Протромбиновое время п=8 14,0 ± 0,9 14 ± 0,95 14 ± 0,9 15 ± 1,05 17 ± 1,5 28 ± 5,0 р < 0,05

Фактор VII п=8 30,0 ± 1,5 30 ± 1,8 30 ± 1,9 37 ± 2,5 р < 0,05 48 ± 3,1 р < 0,01 -

Тромбиновое время п=8 19 ± 1,2 15 ± 0,8 р < 0,01 13 ± 0,72 р < 0,001 13 ± 0,82 р < 0,001 14 ± 1,0 р < 0,01 30 ± 3,1 р < 0,05

Тромбиновое время гепаринизированной плазмы п=8 98 ± 16 26 ± 16 р < 0,01 18 ± 12 р < 0,001 15 ± 13 р < 0,001 15 ± 13 р < 0,001 28 ± 22 р < 0,05

Фибринолиз п=8 38 ± 1,8 41 ± 2,0 43 ± 2,0 р < 0,05 47 ± 1,8 р < 0,01 52 ± 2,1 р < 0,001 78 ± 4,5 р < 0,001

Концентрация водородных ионов (рН) п=8 7,85 7,4 ± 0,08 р < 0,01 7,22 ± 0,10 р < 0,001 7,10 ± 0,15 р < 0,01 6,85 ± 0,20 р < 0,01 5,9 ± 0,31 р < 0,001

Примечание: р - достоверность различий между контролем и опытом; п - количество исследований.

Аналогичные данные были получены в опытах с гепаринизированной плазмой, однако максимум активности свертывания крови обнаруживался при добавлении молочной кислоты в концентрации 7,77 ммоль/л, что соответствовало сдвигу рН до 6,85. Удлинение времени рекальцификации обычной плазмы так же наблюдалось при увеличении концентрации лактата до 7,77 моль/л, а при дозе 16,6 ммоль/л образование сгустка вообще не наступало. Если в опытах применялась гепаринизированная плазма, то свертываемость сохранялась при использовании самых больших концентраций молочной кислоты. Предположительно, гепарин в кислой среде может восстанавливать коагуляционные свойства плазмы. Протромбиновое время под влиянием молочной кислоты в концентрациях 2,4-7,7 ммоль/л практически не изменялось. При этом образование сгустка регистрировалось и при рН 5,9, между тем время рекальцификации при данном рН составляло бесконечность. Это свидетельствует об устойчивости факторов, входящих в протромбиновый комплекс, к действию повышенных концентраций водородных ионов.

Оптимальная активность фактора VIII наблюдалась при рН 7,4-7,22. Дальнейшее подкисление среды приводило к быстрой его инактивации. Очевидно, этим фактом, отчасти, можно объяснить снижение коагуляционной способности плазмы в диапазоне рН 7,1-6,85.

Результаты исследования показали, что переход фибриногена в фибрин в присутствии молочной кислоты претерпевает фазные изменения. Малые концентрации лактата 7,7 ммоль/л укорачивали тромбиновое время, большие - удлиняли его. По мере нарастания концентрации водородных ионов фибринолическая активность крови прогрессивно снижалась.

Итак, молочная кислота оказывает выраженное влияние на свертывание крови и фиб-ринолиз. Однако в организме она взаимодействует не только с плазменными факторами, но и с соединениями, содержащимися в форменных элементах крови. Поэтому во второй серии экспериментов было изучено влияние различных концентраций молочной кислоты на свертывание цельной крови собак, стабилизированной 1,34% оксалатом натрия.

Всего было проведено 9 опытов, результаты которых отличаются от данных, полученных в предыдущей серии (табл. 2). Время рекальцификации максимально сокращалось при добавлении молочной кислоты в концентрации 7,7 ммоль/л, что соответствовало

сдвигу рН до 7,2. Замедление свертываемости крови наблюдалось при добавлении кислоты в концентрации 16,6 ммоль/л. В связи с этим, не исключено участие специфических факторов форменных элементов крови в регуляции свертываемости крови при сдвигах реакции среды в кислую сторону.

Таблица 2

влияние различных концентраций молочной кислоты на свертывание крови

Изучаемые показатели Конт- роль Концентрация вносимой молочной кислоты в плазму, в ммоль/л

2,4 3,9 5,8 7,8 16,6

Время рекальци- 66 ± 2,2 60 ± 2,2 58 ± 2,0 55 ± 2,1 61 ± 2,5 80 ± 3,1

фикации п=8 p < 0,05 p < 0,05 p < 0,01 - p < 0,01

Протромбиновое 12 ± 0,7 12 ± 0,7 12 ± 0,8 12 ± 0,8 14 ± 1,2 26 ± 4,2

время п=8 - - - - 0,05

Тромбиновое 24 ± 1,5 20 ± 1,3 21 ± 1,1 23 ± 1,5 25 ± 1,6 45 ± 8,2

время п=8 p < 0,05 p < 0,05 - - p < 0,05

Тромбиновое 89 ± 15 35 ± 15 32 ± 3,2 27 ± 12,8 33 ± 21 40 ± 20

время гепарини-зированной плазмы п=8 p < 0,05 p < 0,05 p < 0,05 p < 0,05

Концентрация 7,6 ± 0,08 7,48 ± 0,03 7,40 ± 0,04 7,20 ± 0,05 7,08 ± 0,07 6,4 ± 0,22

водородных ионов (рН) п=8 p < 0,05 p < 0,01 p < 0,001 p < 0,001 p < 0,01

Примечание: р - достоверность различий между контролем и опытом; п - количество исследований.

Полученные данные отличаются от результатов исследования предыдущей серии. Но для окончательного ясности было проведено сравнение свертывания крови и плазмы при одинаковых сдвигах рН среды, для чего кровь и плазму подвергали титрованию растворами молочной кислоты.

Результаты исследования, приведенные на рисунках 2-4, позволили вскрыть некоторые закономерности. Так, в диапазоне рН от 7,59 до 7,2 время свертывания крови укорачивается в среднем на 20%, а плазмы на 7%, Выраженное замедление свертывания крови наступает при рН 6,55, плазмы - при рН 6,75. Протромбиновое время крови и плазмы, начиная с рН 6,75, удлиняется. При более низких рН среды (6,55) скорость перехода протромбина в тромбин в цельной крови падает значительней, чем в плазме. По мере сдвига рН среды тромбиновое время плазмы укорачивается, достигая максимума при рН 7,2-7,0. При таком значении рН антикоагулянтная активность плазмы становится минимальной. Несколько иные данные получены в опытах с цельной кровью, в которой период минимального перехода фибриногена в фибрин под влиянием тромбина наступал при рН 7,45. Дальнейшее подкисление среды несколько снижало скорость образования фибрина и при рН 7,08 соответствовало контролю. Следовательно, исчезновение антикоагулянтов при незначительных сдвигах рН может быть связано с образованием комплексов с белками или адсорбции их на форменных элементах крови и, в частности, на эритроцитах.

Таким образом, молочная кислота в опытах in vitro оказывает двухфазное влияние на процессысвертываниякровивзависимостиотприменяемойдозы:малыеконцентрации(2,4-3,9 ммоль/л) укорачивают, большие (16,6 ммоль/л) удлиняют фибринообразование. Наибольшая активация свертывания крови наблюдается при рН 7,2-7,1. Дальнейший сдвиг среды в кислую сторону приводит к замедлению этого процесса. Эритроциты в условиях ацидоза препятствуют действию лактата на гемокоагуляцию.

s

Рис. 2. Изменение времени рекальцификации плазмы и крови при различных рН среды Примечание: * - достоверные различия между кровью и плазмой, где р < 0,01.

Рис. 3. Изменение протромбинового времени плазмы и крови при различных рН среды Примечание: * - достоверные различия между кровью и плазмой, где р < 0,01.

** - достоверные различия между показателями крови при различных рН, где р < 0,01.

Рис. 4. Изменение тромбинового времени плазмы и крови при различных рН среды

Примечание: * - достоверные различия между кровью и плазмой, где р < 0,01.

** - достоверные различия между показателями крови при различных рН, где р < 0,01.

В следующей серии опытов изучали агрегацию тромбоцитов при различных сдвигах рН (7,50; 7,4; 7,34; 7,2; 7,18; 6,92; 6,8; 6,50; 6,11). В первой контрольной пробе рН равнялся по средним данным 7,4-7,5 (табл. 3).

Таблица 3

влияние АДФ на агрегацию тромбоцитов при различных сдвигах рН

Изучаемые показатели Конт- роль 7,5 Величина рН

7,34 7,28 6,92 6,5 6,11

Угол наклона спонтанной агрегации (градусы) п=8 0 2,5 10,0 11,3 ± 6,4 р < 0,2 16,0 ± 5,3 р < 0,05 21,8 ± 8,0 р < 0,05

Время начала агрегации (с) п=8 9 15 3 5 0 0

Угол наклона агрегации (градусы) п=8 65,7 59,0 ± 9,9 42,0 ± 9,4 Р < 0,1 28,3 ± 10,7 р < 0,01 9,3 ± 12,6 р < 0,01 17,3 ± 13,8 р < 0,02

Время агрегации (с) п=8 112,7 369 ± 5,9 900 ± 4,4 р < 0,004 Более 900 Более 900 Более 900

Амплитуда агрегации (пропускание сердца в %) п=8 35,7 25,6 ± 4,9 33,5 ± 5,8 19,6 ± 5,6 р < 0,01 10,6 ± 7,3 р < 0,02 21,5 ± 8,4 р < 0,2

Величина агрегатов (мм) п=8 1,7 2,1 2 1 1 1

Угол дезагрегации (градусы) п=8 27,2 12,5 - - - -

Время дезагрегации (с) п=8 450 328 - - - -

Степень дезагрегации (мм) п=8 19 12,5 - - - -

Примечание: р - достоверность различий между контролем и опытом; п - количество исследований.

Анализ кривых агрегации в контрольных наблюдениях показывает, что тромбоциты без добавления агрегирующего агента не склеиваются (рис. 1). Через 9 с после внесения АДФ в кювету с плазмой начинается интенсивная агрегация пластинок, о скорости процесса можно судить по углу наклона агрегации. В контроле этот показатель равен 65,7°. По данным исходных кривых видно, что агрегация заканчивается в среднем через 132,7 с, а затем начинается процесс дезагрегации тромбоцитов. В момент максимальной агрегации просветление плазмы увеличивается и составляет 35,7%, при этом величина агрегатов равна 1,7 мм. Дезагрегация, возникающая вслед за склеиванием кровяных пластинок, возможна лишь в том случае, когда концентрация АДФ в плазме, богатой тромбоцитами, соответствует строго определенной величине в пределах от 0,0005 до 0,0015 мк/мл плазмы. В контрольных опытах во всех случаях исследо-вана именно такая концентрация агрегирующего агента. Угол дезагрегации при рН 7,5 равнялся 27,2° и свидетельствовал о ресус-пензировании кровяных пластинок. Дезагрегация тромбоцитов продолжалась около 450 с и никогда не заканчивалась полным восстановлением исходной плотности плазмы. Это значит, что определенная часть тромбоцитов была соединена в агрегаты. Кривые агрегации, записанные при рН 7,4-7,5, характеризуют нормальную реакцию тромбоцитов на дозу АДФ, равную 0,0005 мк/мл плазмы.

Замена в изучаемых пробах физиологического раствора на различные концентрации молочной кислоты приводила к изменению характера агрегации тромбоцитов (рис. 5). При уменьшении рН до 7,34 в отдельных случаях появлялась спонтанная агрегация тромбоцитов, которая составляла по средним данным 2,5°, при этом время начала агрегации после внесения АДФ увеличивается не достоверно. Угол агрегации снижался до 59,0°. Процесс становился более растянутым, он удлинялся до 369 с, однако ввиду большой ва-

риабильности результатов эти изменения не достоверны. Амплитуда агрегации пластинок уменьшалась, величина агрегатов оставалась практически неизменной. Сдвиг реакции среды в кислую сторону приводит также к снижению интенсивности дезагрегации. Более выраженные изменения агрегации наблюдались, если рН пробы равнялся 7,2. При такой концентрации водородных ионов во всех опытах обнаружена спонтанная агрегация тромбоцитов. Внесение в кювету калориметра агрегирующего агента усиливало склеивание кровяных пластинок, однако средняя величина угла агрегации падала до 42°, процесс агрегации становился бесконечным и через 900 с плотность плазмы достигала 33,5%. Величина агрегатов при рН 7,13 оставалась такой же, как в контроле, дезагрегация отсутствовала во всех экспериментах. Дальнейшее подкисление среды приводило к более выраженным изменениям агрегации, основной особенностью которых являлось увеличение угла спонтанной агрегации в присутствии лактата и блокирование специфического действия АДФ. При рН 6,92 угол спонтанной агрегации тромбоцитов возрастал до 11,3° (р<0,2), при 6,50 до 16° (р<0,05), при 6,11 до 21,8° (р < 0,05). Угол наклона агрегации под влиянием АДФ в пробе с рН 6,92 несколько увеличивался, при рН 6,5 и 6,11 внесение АДФ уже не приводило к дальнейшему изменению угла агрегации. «Спонтанное» склеивание кровяных пластинок в кислой среде всегда было необратимым, амплитуда агрегации со временем увеличивалась.

• 9 • * Н И І * б * 11 19

Н-ргч-я я <л ніс} га я ЗРрс-ын я ммму **.

Рис. 5. Агрегация тромбоцитов кошки под влиянием различных концентраций молочной кислоты: А - кривая агрегации тромбоцитов при рН крови 7,0; Б - кривая агрегации

тромбоцитов при рН крови 7,2

Подводя итог проделанной серии экспериментов, можно сказать, что изменение реакции среды играет важную роль не только в процессах свертывания крови и фибрино-лиза, но также оказывает выраженное влияние на одно из важнейших звеньев системы гемостаза - агрегацию кровяных пластинок. Нарастание сдвига рН в кислую сторону нарушает естественную, обратимую под влиянием АДФ, агрегацию тромбоцитов. Процесс склеивания тромбоцитов в присутствии молочной кислоты тормозится, а следовательно, гемостаз в этих условиях должен быть менее эффективным. Но с другой стороны, обратимость процесса агрегации тромбоцитов при подкислении среды нарушается и ведет к образованию стабильных конгломератов кровяных пластинок. Замедление или нарушение дезагрегации тромбоцитов при сдвиге рН в кислую сторону может заканчиваться вязким метаморфозом тромбоцитов и приводить к повышению свертываемости крови благодаря высвобождению пластиночных факторов.

Таким образом, гиперкоагуляция, возникающая при сдвиге рН в кислую сторону, связана с рядом факторов: инактивацией антитромбинов, выходом прокоагулянтов из эритроцитов и тромбоцитов, нарушением процессов дезагрегации кровяных пластинок, более быстрой полимеризацией фибрина.

Исследования поддержаны грантом ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России 2009-2013 гг.», ГК П 1080.

Список литературы

1. Альфонсов В. В., Иванов В. И., Кузник Б. И. Роль адрено- и холинорецепторных структур в механизмах развития гиперкоагуляции при сдвигах рH в кислую сторону // Физиология. 1985. Т. LXI. № 12. С. 1844-1851.

2. Ацидоз, гемостаз и морфология органов пищеварительной системы / В. В. Альфонсов [и др.]. Чита: Изд-во ЗабГПу, 2005. 120 с.

3. Байрамов А. А., Богданова А. А., Солдатенков П. А. Метаболическая коррекция состояний сердечно-сосудистой системы // РМЖ. 1999. № б. С. 53.

4. Горизонтов П. Д. Гомеостаз. М.: Медицина, 1981. 57б с.

5. Мозаичность гемостатических потенциалов и патология системы РАСК / под ред. О. К. Гаврилова // Проблемы и гипотезы в учении о свертывании крови. М.: Медицина, 1981. С. 11-24.

6. Мозаичность системы гемостаза в норме и при экспериментальном ацидозе /

B. В. Альфонсов [и др.] // Система регуляции агрегатного состояния крови в норме и патологии. М., 1982. С. 152-15б.

7. Попова H. H. Влияние реакции среды на феномен свертывания крови: сб. науч. тр. / Сталинградский медицинский институт. Сталинград, 1947. 37 c.

8. Тверской А. Л. Лактат-ацидоз // МРЖ. Анестезиология и реаниматология. 1981. № 3.

C. 50-57.

9. Фибринолиз и гемостаз при сахарном диабете 2-го типа / H. А. Алексеева [и др.] // Материалы V Всероссийской конференции, посвященной актуальным вопросам свертывания крови. М., 2000. С. 23-24.

10. Шестаков В. А. Влияние H и OH ионов на свертываемость крови в онтогенезе: автореф. дис. ... канд. мед. наук. М., 19б8. 2б с.

11. De Backer D. Lactic acidosis // Intensive Care Med. 2003. Vol. 29. P. б99-702.

12. Duell T., Mittermuller J., Hiddemann W. Unclear lactate acidosis in a patient with heart failure under long-term diuretic therapy // Dtsch. Med. Wochenschr. 2000. V. 125. N 41. P. 1232-1234.

13. Duell T., Mittermuller J., Hiddemann W. Unclear lactate acidosis in a patient with heart failure under long-term diuretic therapy // Dtsch. Med. Wochenschr. 2000. V. 125. N 41. P. 1235-1237.

14. Dunn R. J. Massive sulfasalazine and paracetamol ingestion causing acidosis, hyperglycemia,coagulopathy, and methemoglobinemia // J. Toxicol. Clin. Toxicol. 1998. V. 3б. N 3. P. 239-242.

15. Eriksson M., Nelson D., Nordgren A., Larsson A. Increased platelet microvesicle formation is associated with mortality in a porcine model of endotoxemia // Acta Anaesthesiol. Scand. 1998. V. 42. N 5. P. 551-557.

16. Gennari F.J. Acid-base balance in dialysis patients / / Semin. Dial. 2000. V. 13. N 4. P. 235-239.

17. Hucabee W. E. Laktik - acidosis // Am. I. Med. 19б1. V. 30. P. 833-839.

18. Mikhail J. The trauma triad of death: hypothermia, acidosis, and coagulopathy // AACN Clin Issues. 1999. V. 10. N 1. P. 85-94.

19. Otsuka M., Shinozuka K., Hirata G., Kunitomo M. Influences of a shiitake (Lentinus edodes)-fructo-oligosaccharide mixture (SK-204) on experimental pulmonary thrombosis in rats // Yakugaku Zasshi. 199б. V. 11б. N 2. P. 1б9-175

20. Shahryar S., Carlson R.W. Type A lactic acidosis in cardiogenic shock // Crit. Care Med. 2000. V. 28. N 12. P. 3932.

21. Zacharias S. R., Offner P., Moore E. E., Burch J. Damage control surgery // AACN Clin. Issues. 1999. V. 10. N 1. P. 95-103.