СПОСОБ И КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ СОСУДОВ
METHOD AND COMPOSITION FOR TREATING DISEASES OF PERIPHERAL VESSELS

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение имеет отношение к способу лечения заболеваний периферических сосудов у субъекта-млекопитающего с помощью специфического простагландинового соединения. Изобретение также имеет отношение к композиции, полезной для этого способа.
Уровень техники
Сосудистые заболевания часто являются результатом сниженной перфузии в сосудистой системе или физического или биохимического повреждения кровеносных сосудов.
Под заболеванием периферических сосудов (PVD) понимают заболевание кровеносных сосудов, часто встречающееся в виде сужения сосудов конечностей. Существует два основных типа этих заболеваний, функциональное заболевание, которое не включает дефекты кровеносных сосудов, но скорее происходит из-за стимулирующих воздействий, таких как холод, стресс или курение, и органическое заболевание, которое происходит из-за структурных дефектов сосудистой системы, таких как атеросклеротические поражения, локальное воспаление или травматическое повреждение. Это может приводить к окклюзии сосуда, нарушению тока крови и, в конечном итоге, к ишемии ткани.
Одной из наиболее клинически значимых форм является заболевание периферических артерий (PAD). PAD часто лечат с помощью ангиопластики и имплантации стента или с помощью операции шунтирования артерии. Клиническое проявление зависит от локализации окклюдированного сосуда. Например, сужение артерии, которая поставляет кровь в кишечник, может приводить к тяжелой боли, возникающей после приема пищи в нижней части живота, что происходит из-за неспособности окклюдированного сосуда обеспечивать потребность тканей в повышенных концентрациях кислорода, которая необходима для процессов переваривания и поглощения. Тяжелые формы ишемии могут приводить к некрозу кишечника. Точно так же, PAD в ногах может приводить к периодической боли, обычно в икре, которая появляется при активном движении и сопровождает его. Это нарушение известно как перемежающаяся хромота (IC) и может прогрессировать в постоянную боль даже во время отдыха, ишемическую язву и даже ампутацию.
Заболевание периферических сосудов также проявляется в атеросклеротическом стенозе почечной артерии, который может привести к почечной ишемии и дисфункции почек.
Одним из заболеваний, при которых очень распространены сосудистые заболевания и их осложнения, является сахарный диабет.
Сахарный диабет вызывает множество физиологических и анатомических нарушений, наиболее заметным из которых является неспособность организма нормально утилизировать глюкозу, что приводит к гипергликемии. Хронический диабет может приводить к осложнениям сосудистой системы, которые включают атеросклероз, аномалии, включающие кровеносные сосуды больших и средних размеров (макроангиопатия), и аномалии, включающие кровеносные сосуды небольшого размера (микроангиопатия), такие как артериолы и капилляры.
Пациенты с диабетом относятся к группе повышенного риска развития одной или нескольких язв, что является результатом установленных долгосрочных осложнений заболевания, которые включают ослабленную нервную деятельность (нейропатию) и/или ишемию.
Локальная тканевая ишемия является ключевым фактором, который вносит вклад в развитие диабетического изъязвления на ногах. В дополнение к заболеванию крупных сосудов пациенты, больные диабетом, кроме того, страдают от возможного осложнения в кровоснабжении кожи, которое происходит, по меньшей мере, двумя путями. Во-первых, путем включения немагистральных артерий, на которых пагубно сказывается процесс атеросклероза. Второй и наиболее важный способ включает нарушение механизмов, контролирующих микрокровообращение (заболевание небольших сосудов). Обычно, если какая-либо часть тела страдает некоторой формой повреждения, то в рамках механизма заживления организма она будет подвергаться усиленному кровообращению. В случае заболевания небольших сосудов и ишемии, а также у многих больных диабетом этот естественный ответ в виде усиленного кровообращения значительно снижен. Считают, что этот факт вместе с тенденцией у больных диабетом к образованию сгустков крови (тромбозу) в микроциркуляторной системе при пониженном уровне кровотока является важным фактором в механизме развития язвенного поражения.
Нейропатия представляет собой общий термин, который описывает процесс заболевания, ведущий к дисфункции нервной системы, и является одним из основных осложнений при сахарном диабете, для которого отсутствует надежная терапия, как в случае симптоматического лечения, так и для предупреждения прогрессирующего ухудшения нервной функции.
Утолщение и подтекание капилляров, вызываемые диабетом, в первую очередь затрагивает глаза (ретинопатия) и почки (нефропатия). Утолщение и подтекание капилляров, вызываемые диабетом, также ассоциированы с повреждениями кожи и нарушениями в нервной системе (нейропатия). К заболеваниям глаз, ассоциированных с диабетом, относятся непролиферативная диабетическая ретинопатия, пролиферативная диабетическая ретинопатия, диабетическая макулопатия, глаукома, катаракта и т.п.
Другие заболевания, для которых хотя и не показана связь с диабетом, сходны в своих физиологических эффектах на систему периферических сосудов. Эти заболевания включают синдром Рейно, CREST-синдром, аутоиммунные заболевания, такие как эритематоз, ревматоидное заболевание и т.п.
Простагландины (далее в тексте PG(s)) являются представителями класса органических карбоновых кислот, которые содержатся в тканях и органах человека или других млекопитающих и которые демонстрируют широкий спектр физиологической активности. PGs, обнаруженные в природе (первичные PGs), обычно содержат скелет, состоящий из простаноевой кислоты, как показано в формуле (А):
С другой стороны, некоторые синтетические аналоги первичных PGs имеют модифицированные скелеты. Первичные PGs подразделяют на классы PGAs, PGBs, PGCs, PGDs, PGEs, PGFs, PGGs, PGHs, PGIs и PGJs в соответствии со структурой пятичленной кольцевой части молекулы и, кроме того, подразделяют на следующие три типа в соответствии с количеством и положением ненасыщенной связи в углеводородной части молекулы:
Нижний индекс 1: 13,14-ненасыщенный-15-ОН.
Нижний индекс 2: 5,6- и 13,14-диненасыщенный-15-ОН.
Нижний индекс 3: 5,6-, 13,14- и 17,18-триненасыщенный-15-ОН.
Кроме того, PGFs классифицируют в соответствии с конфигурацией гидроксильной группы в 9-м положении на α-тип (гидроксильная группа находится в α-конфигурации) и β-тип (гидроксильная группа находится в β-конфигурации).
1
2
3
1α
2α
3α
Известно, что PGE и PGE и PGE обладают вазодилатационной, гипотензивной активностями, снижают желудочную секрецию, усиливают моторику кишечника, сократительную деятельность матки, обладают диуретической, бронходилатационной и противоязвенной активностями. Известно, что PGF, PGF и PGF обладают гипертензивной, сосудосуживающей активностями, усиливают моторику кишечника, сократительную деятельность матки, атрофию желтого тела и обладают бронхоконстрикционной активностью.
Некоторые 15-кето-PGs (например, те, которые в 15-м положении вместо гидроксильной группы имеют оксо-группу) и 13,14-дигидро-15-кето-PGs (например, те, у которых есть одинарная связь между положениями 13 и 14) известны как соединения, образующиеся в природе под действием ферментов в процессе метаболизма первичных PGs.
Патент US Patent No.6197821 на имя Ueno et al. описывает некоторые соединения 15-кето-PGE, которые являются антагонистом эндотелина, который, как предполагают, имеет отношение к гипертонии, болезни Бюргера, астме, заболеваниям глазного дна и т.п. (цитируемые источники включены сюда путем отсылки).
Патент US Patent No.6197821 свидетельствует о том, что если связь между 13-м и 14-м положениями насыщена, иногда может наступать кето-полуацетальное равновесие путем образования полуацетали между гидроксильной группой в 11-м положении и кето-группой в 15-м положении (цитируемый источник включен сюда путем отсылки).
Патент US Patent No.5317032 на имя Ueno et al. описывает слабительные средства простагландиновой природы, включающие существующие бициклические таутомеры, и патент US Patent No.6414016 на имя Ueno описывает бициклические таутомеры, обладающие выраженной активностью в качестве средств, применяемых против запора (цитируемые источники включены сюда путем отсылки). Бициклические таутомеры, замещенные одним или несколькими атомами галогенов, могут применяться в небольших дозах для облегчения запора. В частности, для облегчения запора в небольших дозах можно применять соединения с атомами фтора в положении С-16.
Применяемые в настоящее время пероральные лекарственные средства для лечения заболеваний периферических сосудов включают цилостазол (коммерческое название: Pletaal) и простагландиновые препараты (PG) (коммерческое название: Dorner, Opalmon и т.д.), обладающие вазодилатационным эффектом, а также антиагрегантным эффектом, тиклопидин, в основном обладающий антиагрегантным эффектом (коммерческое название: Panaldine), сарпогрелат (коммерческое название: Anplag) и этиловый эфир эйкозапентаеноевой кислоты (коммерческое название: Epadel), который также адаптирован к гиперлипемии. Они обладают различными механизмами действия, поэтому в зависимости от патологии может быть необходимым применять в комбинации два или три препарата. В частности, при заболевании средней тяжести более вероятно применение мультилекарственных средств. Инъецируемые препараты включают препараты простагландина Е1, антитромбиновые препараты (коммерческое название: Argatroban). Их в принципе применяют при заболевании средней тяжести или при более тяжелых заболеваниях, требующих госпитализации.
Эффективность существующих лекарственных средств не является полностью удовлетворительной. В частности, антиагрегантные средства, такие как тиклопидин или этиловый эфир эйкозапентаеноевой кислоты, менее эффективны, так как непонятно, в каком объеме в каждую патологию вовлечены тромбоциты, или достаточен ли вазодилатационный эффект, если лекарственное средство обладает таким эффектом, или может ли кровообращение в участках ишемии быть селективно и достаточно обеспеченным.
Раскрытие изобретения
Автор настоящего изобретения провел интенсивное исследование и обнаружил, что при заболеваниях периферических сосудов 11-дезокси-простагландиновые соединения обладают значительными селективными эффектами, что привело к созданию настоящего изобретения.
А именно, настоящее изобретение имеет отношение к способу лечения заболевания периферических сосудов у субъекта-млекопитающего, который включает введение эффективного количества 11-дезокси-простагландинового соединения субъекту, нуждающемуся в этом.
Настоящее изобретение, кроме того, имеет отношение к композиции для лечения заболевания периферических сосудов у субъекта-млекопитающего, которая включает эффективное количество 11-дезокси-простагландинового соединения.
Кроме того, настоящее изобретение имеет отношение к применению 11-дезокси-простагландинового соединения для изготовления композиции для лечения заболевания периферических сосудов у субъекта-млекопитающего, где композиция включает эффективное количество 11-дезокси-простагландинового соединения.
Другое воплощение настоящего изобретения имеет отношение к способу лечения поврежденной стенки периферических сосудов и/или эндотелиальных клеток периферических сосудов субъекта-млекопитающего, который включает введение эффективного количества 11-дезокси-простагландинового соединения субъекту, нуждающемуся в этом.
Краткое описание фигур
1
Фиг.1А представляет собой график, показывающий эффект соединения А (11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE) на сниженную периферическую микроциркуляцию у крыс, индуцированную ЕТ-1. На графике данные представлены в виде среднего значения ± станд. ош., *p<0,05 в сравнении с контролем, обработанным растворителем. CTBF: кровоток в кожных тканях.
1
Фиг.1В представляет собой график, показывающий эффект соединения В (изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE) на сниженную периферическую микроциркуляцию у крыс, индуцированную ЕТ-1. Данные представлены в виде среднего значения ± станд. ош., *p<0,05 в сравнении с контролем, обработанным растворителем. CTBF: кровоток в кожных тканях.
Фиг.2А представляет собой график, показывающий эффект соединения А на восстановление трансэндотелиального электрического сопротивления (TEER). Культуры эндотелиальных клеток сосудов человека выращивали до получения конфлюэнтности, как было измерено с помощью трансэндотелиального электрического сопротивления (TEER). Культуры клеток затем были в течение 30 минут лишены кислорода путем инкубации в атмосфере азота. Затем клетки обрабатывали или 0,1-процентным DMSO, или 5 нМ соединением А и 0,1-процентным DMSO. Во всех измеряемых после приема лекарственного средства временных точках указана статистическая значимость. N=10 клеток.
Фиг.2В представляет собой график, показывающий эффект соединения А на восстановление уровня АТР. Человеческие эндотелиальные клетки капилляров (взрослый человек) (HMVEC-AD) выращивали до получения конфлюэнтности. Затем клетки содержали в течение 30 минут в атмосфере азота и возвращали в нормальную атмосферу воздуха. В указанных временных точках контролировали уровень АТР с помощью люциферин-люциферазной системы измерения (ATPlite, Perkin Elmer). Уровень АТР представлен в виде относительной люминесценции. N=6 клеток в каждой точке.
1
3
Фиг.3 представляет собой спектр Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) соединения (6), полученного в примере синтеза 2, представленного ниже.
13
3
Фиг.4 представляет собой спектр С-ЯМР (50 МГц, CDCl) соединения (6), полученного в примере синтеза 2, представленного ниже.
1
3
Фиг.5 представляет собой спектр H-ЯМР (200 МГц, CDCl) соединения (9), полученного в примере синтеза 3, представленного ниже.
13
3
Фиг.6 представляет собой спектр С-ЯМР (50 МГц, CDCl) соединения (9), полученного в примере синтеза 3, представленного ниже.
1
3
Фиг.7 представляет собой спектр Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) соединения (12), полученного в примере синтеза 4, представленного ниже.
13
3
Фиг.8 представляет собой спектр С-ЯМР (50 МГц, CDCl) соединения (12), полученного в примере синтеза 4, представленного ниже.
1
3
Фиг.9 представляет собой спектр Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) соединения (15), полученного в примере синтеза 5, представленного ниже.
13
3
Фиг.10 представляет собой спектр С-ЯМР (50 МГц, CDCl) соединения (15), полученного в примере синтеза 5, представленного ниже.
1
3
Фиг.11 представляет собой спектр Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) соединения (18), полученного в примере синтеза 6, представленного ниже.
13
3
Фиг.12 представляет собой спектр С-ЯМР (50 МГц, CDCl) соединения (18), полученного в примере синтеза 6, представленного ниже.
1
3
Фиг.13 представляет собой спектр Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) соединения (21), полученного в примере синтеза 7, представленного ниже.
13
3
Фиг.14 представляет собой спектр С-ЯМР (50 МГц, CDCl) соединения (21), полученного в примере синтеза 7, представленного ниже.
1
3
Фиг.15 представляет собой спектр Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) соединения (23), полученного в примере синтеза 8, представленного ниже.
13
3
Фиг.16 представляет собой спектр С-ЯМР (50 МГц, CDCl) соединения (23), полученного в примере синтеза 8, представленного ниже.
1
3
Фиг.17 представляет собой спектр Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) соединения (25), полученного в примере синтеза 9, представленного ниже.
13
3
Фиг.18 представляет собой спектр С-ЯМР (50 МГц, CDCl) соединения (25), полученного в примере синтеза 9, представленного ниже.
1
3
Фиг.19 представляет собой спектр Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) соединения (34), полученного в примере синтеза 10, представленного ниже.
13
3
Фиг.20 представляет собой спектр С-ЯМР (50 МГц, CDCl) соединения (34), полученного в примере синтеза 10, представленного ниже.
Осуществление изобретения
В настоящем изобретении «11-дезокси-простагландиновое соединение» (в дальнейшем, «11-дезокси-PG-соединение») может включать любое из производных или аналогов (включая замещенные производные) соединения, не имеющего заместителя в 11-м положении скелета простаноевой кислоты, независимо от конфигурации пятичленного кольца, числа двойных связей, присутствия или отсутствия заместителя или любых других модификаций в α- или ω-цепи.
Формула (А) показывает скелет, состоящий из С-20 углеродных атомов, но настоящее изобретение не ограничено вышеупомянутым числом углеродных атомов. В формуле (А), нумерация атомов углерода, составляющих основной скелет PG-соединений, начинается с карбоновой кислоты (пронумерованной цифрой 1) и атомы углерода в α-цепи пронумерованы от 2 до 7 по направлению к пятичленному кольцу, атомы в кольце пронумерованы от 8 до 12, а атомы в ω-цепи - от 13 до 20. Если количество атомов углерода в α-цепи уменьшается, номер исключают в порядке, начиная с положения 2; а если число атомов углерода в α-цепи увеличивается, соединения называют замещенными соединениями, имеющими соответствующие заместители в положении 2 вместо карбоксильной группы (С-1). Сходным образом, если число атомов углерода в ω-цепи уменьшается, номер исключают в порядке, начиная с положения 20; а если количество атомов углерода в ω-цепи увеличивается, атомы углерода свыше положения 20 называют заместителями. Стереохимия соединений та же, что и в приведенной выше формуле (А), если это не указано особо.
Как было указано выше, номенклатура 11-дезокси-PG-соединений основывается на скелете простаноевой кислоты. Однако в случае, когда соединения имеют сходную частичную структуру как у простагландина, может быть использовано сокращение «PG». Так, 11-дезокси-PG-соединение, у которого α-цепь удлиняется на два атома углерода, то есть имеет 9 атомов углерода в α-цепи, называется 2-декарбокси-2-(2-карбоксиэтил)-11-дезокси-PG-соединением. Сходным образом, 11-дезокси-PG-соединение, имеющее 11 атомов углерода в α-цепи, называется 2-декарбокси-2-(4-карбоксибутил)-11-дезокси-PG-соединение. Кроме того, 11-дезокси-PG-соединение, у которого ω-цепь удлинена на два атома углерода, то есть, которая имеет 10 атомов углерода в ω-цепи, называется 11-дезокси-20-этил-PG-соединением. Эти соединения, однако, могут также называться в соответствии с номенклатурами IUPAC.
Примеры аналогов (включая замещенные производные) или производных включают 11-дезокси-PG-соединение, у которого карбоксигруппа в конце цепи эстерифицирована; соединение, у которого удлинена α-цепь; их физиологически приемлемую соль; соединение, имеющее двойную связь в положении 2-3 или тройную связь в положении 5-6, соединение, имеющее заместитель (заместители) в положении 3, 5, 6, 16, 17, 18, 19 и/или 20; и соединение, имеющее низшую алкильную или гидрокси (низшую) алкильную группу в положении 9 вместо гидроксигруппы.
В соответствии с настоящим изобретением предпочтительные заместители в положении 3, 17, 18 и/или 19 включают алкил, имеющий 1-4 атомов углерода, в частности метил и этил. Предпочтительные заместители в положении 16 включают низший алкил, такой как метил и этил, гидрокси, атомы галогена, такие как хлор и фтор, и арилокси, такой как трифторметилфенокси. Предпочтительные заместители в положении 17 включают низший алкил, такой как метил и этил, гидрокси, атомы галогена, такие как хлор и фтор, и арилокси, такой как трифторметилфенокси. Предпочтительные заместители в положении 20 включают насыщенный или ненасыщенный низший алкил, такой как C1-4-алкил, низший алкокси, такой как C1-4-алкокси, и низший алкокси-алкил, такой как С1-4-алкокси-С1-4-алкил. Предпочтительные заместители в положении 5 включают атомы галогенов, такие как хлор и фтор. Предпочтительные заместители в положении 6 включают оксогруппу, образующую карбонильную группу. Стереохимия PGs, имеющих гидрокси, низший алкильный или гидрокси(низший)алкильный заместитель в положении 9, может относиться к α-, β-типу или их смеси.
Кроме того, указанные выше аналоги или производные могут быть соединениями, имеющими алкокси-, циклоалкильную, циклоалкилокси-, фенокси или фенильную группу на конце ω-цепи, где цепь короче, чем у первичных PGs.
Номенклатура 11-дезокси-PG-соединений, применяемая здесь, основана на системе нумерации простаноевой кислоты, представленной выше формулой (А).
Предпочтительное соединение, применяемое в настоящем изобретении, представлено формулой (I):
,
где L и N являются водородом, гидрокси, галогеном, низшим алкилом, гидрокси(низшим)алкилом, низшим алканоилокси или оксо, где пятичленное кольцо необязательно может иметь, по меньшей мере, одну двойную связь;
3
2
2
А является -СН, -СНОН, -COCHOH, -СООН или их функциональным производным;
1
R является насыщенным или ненасыщенным бивалентным низшим или средним алифатическим углеводородом, который является незамещенным или замещенным галогеном, алкилом, гидрокси, оксо, арилом или гетероциклической группой, и, по меньшей мере, один из атомов углерода в алифатическом углеводороде необязательно замещен кислородом, азотом или серой; и
0
R является насыщенным или ненасыщенным низшим или средним алифатическим углеводородным остатком, который является незамещенным или замещенным галогеном, оксо, гидрокси, низшим алкилом, низшим алкокси, низшим алканоилокси, цикло(низшим)алкилом, цикло(низшим)алкилокси, арилом, арилокси, гетероциклической группой или гетероциклической оксигруппой; низшим алкокси; низшим алканоилокси; цикло(низшим)алкилом; цикло(низшим)алкилокси; арилом; арилокси; гетероциклической группой; гетероциклической оксигруппой, и, по меньшей мере, один из атомов углерода в алифатическом углеводороде необязательно замещен кислородом, азотом или серой.
Более предпочтительное соединение, применяемое в настоящем изобретении, представлено формулой (II):
,
где L и N являются водородом, гидрокси, галогеном, низшим алкилом, гидрокси(низшим)алкилом, низшим алканоилокси или оксо, где пятичленное кольцо необязательно может иметь, по меньшей мере, одну двойную связь, где пятичленное кольцо необязательно может иметь, по меньшей мере, одну двойную связь;
3
2
2
А является -СН, -CHOH, -COCHOH, -COOH или их функциональным производным;
2
2
2
2
2
2
2
2
2
В является одинарной связью, -СН-СН-, -СН=СН-, -С≡С-, -СН-СН-СН-, -СН=СН-СН-, -СН-СН=СН-, -С≡С-СН- или -СН-С≡С-;
Z является
,  или ,
4
5
4
5
где R и R являются водородом, гидрокси, галогеном, низшим алкилом, низшим алкокси или гидрокси(низшим)алкилом, где R и R одновременно не являются гидрокси и низшим алкокси;
1
R является насыщенным или ненасыщенным бивалентным низшим или средним алифатическим углеводородом, который является незамещенным или замещенным галогеном, алкилом, гидрокси, оксо, арилом или гетероциклической группой, и, по меньшей мере, один из атомов углерода в алифатическом углеводороде необязательно замещен кислородом, азотом или серой; и
Ra является насыщенным или ненасыщенным низшим или средним алифатическим углеводородным остатком, который является незамещенным или замещенным галогеном, оксо, гидрокси, низшим алкилом, низшим алкокси, низшим алканоилокси, цикло(низшим)алкилом, цикло(низшим)алкилокси, арилом, арилокси, гетероциклической группой или гетероциклической оксигруппой; низшим алкокси; низшим алканоилокси; цикло(низшим)алкилом; цикло(низшим)алкилокси; арилом; арилокси; гетероциклической группой; гетероциклической оксигруппой, и, по меньшей мере, один из атомов углерода в алифатическом углеводороде необязательно замещен кислородом, азотом или серой.
Группа соединений, особенно предпочтительных среди описанных выше веществ, представлена формулой (III):
,
где L является водородом, гидрокси, галогеном, низшим алкилом, гидрокси(низшим)алкилом, низшим алканоилокси или оксо, и где пятичленное кольцо необязательно может иметь одну двойную связь;
3
2
2
А является -СН, -СНОН, -COCHOH, -COOH или их функциональным производным;
2
2
2
2
2
2
2
2
2
В является одинарной связью, -СН-СН; -CH=CH-, -С≡С-, -СН-СН-CH-, -СН=СН-СН-, -СН-СН=СН-, -С≡С-СН- или -СН-С≡С-;
Z является
,  или ,
4
5
4
5
где R и R являются водородом, гидрокси, галогеном, низшим алкилом, низшим алкокси или гидрокси(низшим)алкилом, где R и R одновременно не являются гидрокси и низшим алкокси;
1
2
X и X являются водородом, низшим алкилом, или галогеном;
1
R является насыщенным или ненасыщенным бивалентным низшим или средним алифатическим углеводородом, который является незамещенным или замещенным галогеном, алкилом, гидрокси, оксо, арилом или гетероциклической группой, и, по меньшей мере, один из атомов углерода в алифатическом углеводороде необязательно замещен кислородом, азотом или серой; и
2
R является одинарной связью или низшим алкиленом; и
3
R является низшим алкилом, низшим алкокси, низшим алканоилокси, цикло(низшим)алкилом, цикло(низшим)алкилокси, арилом, арилокси, гетероциклической группой или гетероциклической оксигруппой, и, по меньшей мере, один из атомов углерода в алифатическом углеводороде необязательно замещен кислородом, азотом или серой.
1
В приведенной выше формуле обозначение «ненасыщенный» в определениях R и Ra предназначено для того, чтобы включать, по меньшей мере, одну или несколько двойных и/или тройных связей, которые изолированно, раздельно или последовательно расположены между атомами углерода основной и/или боковой цепи. В соответствии с традиционной номенклатурой ненасыщенную связь между двумя последовательными положениями представляют с помощью указания номера низшего из двух положений, а ненасыщенную связь между двумя дистальными положениями представляют, указывая оба положения.
1
Термин «низший или средний алифатический углеводород» относится к линейной или разветвленной цепи углеводородной группы, имеющей от 1 до 14 атомов углеводорода (для боковой цепи предпочтительно от 1 до 3 атомов углерода) и предпочтительно от 1 до 10, в частности, от 6 до 10 атомов углерода для R, и от 1 до 10, в частности, от 1 до 8 атомов углерода для Ra.
Термин «галоген» охватывает фтор, хлор, бром и йод.
Термин «низший» по всему тексту предназначен для включения группы, имеющей от 1 до 6 атомов углерода, если это не оговорено особо.
Термин «низший алкил» относится к линейной или разветвленной цепи насыщенной углеводородной группы, имеющей от 1 до 6 атомов углерода, и включает, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил и гексил.
Термин «низший алкилен» относится к линейной или разветвленной цепи бивалентной насыщенной углеводородной группы, содержащей от 1 до 6 атомов углерода, и включает, например, метилен, этилен, пропилен, изопропилен, бутилен, изобутилен, трет-бутален, пентилен и гексилен.
Термин «низший алкокси» относится к группе низших алкил-O-, где низший алкил определен выше.
Термин «гидрокси(низший)алкил» относится к низшему алкилу, определенному выше, который замещен, по меньшей мере, одной гидроксигруппой, такой как гидроксиметил, 1-гидроксиэтил, 2-гидроксиэтил и 1-метил-1-гидроксиэтил.
Термин «низший алканоилокси» относится к группе, представленной формулой RCO-O-, где RCO- является ацильной группой, образованной путем окисления низшей алкильной группы, определенной выше, такой как ацетил.
Термин «цикло(низший)алкил» относится к циклической группе, образованной путем циклизации низшей алкильной группы, которая была определена выше, но которая содержит три или более атомов углерода и включает, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.
Термин «цикло(низший)алкилокси» относится к группе цикло(низший)алкил-O-, где цикло(низший)алкил определен выше.
Термин «арил» может включать незамещенные или замещенные ароматические углеводородные циклы (предпочтительно моноциклические группы), например, фенил, толил, ксилил. Примерами заместителей являются атом галогена и гало(низший)алкил, где атом галогена и низший алкил определены выше.
Термин «арилокси» относится к группе, представленной формулой ArO-, где Ar является арилом, определение которому было дано выше.
Термин «гетероциклическая группа» может включать от моно- до трициклической группы, предпочтительно моноциклическую гетероциклическую группу, представленную 5-14, предпочтительно 5-10-членным кольцом, имеющим необязательно замещенный атом углерода и от 1 до 4, предпочтительно от 1 до 3 гетероатомов одного или двух типов, выбираемых из атома азота, атома кислорода и атома серы. Примеры гетероциклической группы включают фурил, тиенил, пирролил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, имидазолил, пиразолил, фуразанил, пиранил, пиридил, пиридазинил, пиримидил, пиразинил, 2-пирролинил, пирролидинил, 2-имидазолинил, имидазолидинил, 2-пиразолинил, пиразолидинил, пиперидино, пиперазинил, морфолино, индолил, бензотиенил, хинолил, изохинолил, пуринил, хиназолинил, карбазолил, акридинил, фенантридинил, бензимидазолил, бензимидазолинил, бензотиазолил, фенотиазинил. Примеры заместителя в этом случае включают галоген и низшую алкильную группу, замещенную галогеном, и, где атом галогена и низшая алкильная группа были описаны выше.
Термин «гетероциклическая оксигруппа» означает группу, представленную формулой НсО-, где Hc является гетероциклической группой, которая была описана выше.
Термин «функциональное производное» группы А включает соли (предпочтительно фармацевтически приемлемые соли), простые эфиры, сложные эфиры и амиды.
Подходящие «фармацевтически приемлемые соли» включают традиционно применяемые нетоксичные соли, например, соль неорганического основания, такую как соль щелочного металла (например, натриевую соль и калиевую соль), соль щелочноземельного металла (например, кальциевую соль и магниевую соль), аммониевая соль; или соль органического основания, например, соль амина (например, соль метиламина, соль диметиламина, соль циклогексиламина, соль бензиламина, соль пиперидина, соль этилендиамина, соль этаноламина, соль диэтаноламина, соль триэтаноламина, соль три(гидроксиметиламино)этана, соль монометилмоноэтаноламина, соль прокаина и соль кофеина), соль основной аминокислоты (например, соль аргинина и соль лизина), соль тетраалкиламмония и т.п. Эти соли могут быть получены с помощью общепринятых методов, например, из соответствующей кислоты и основания или с помощью солевого обмена.
Примеры простых эфиров включают простые алкильные эфиры, например, простые низшие алкильные эфиры, такие как простой метиловый эфир, простой этиловый эфир, простой пропиловый эфир, простой изопропиловый эфир, простой бутиловый эфир, простой изобутиловый эфир, простой трет-бутиловый эфир, простой пентиловый эфир и простой 1-циклопропилэтиловый эфир; и средние или высшие алкильные простые эфиры, такие как простой октиловый эфир, простой диэтилгексиловый эфир, простой лауриловый эфир и простой цетиловый эфир; ненасыщенные простые эфиры, такие как простой олеиловый эфир и простой линолениловый эфир; низшие алкениловые простые эфиры, такие как простой виниловый эфир, простой аллиловый эфир; низшие алкиниловые простые эфиры, такие как простой этиниловый эфир и простой пропиниловый эфир; гидрокси(низшие)алкильные простые эфиры, такие как простой гидроксиэтиловый эфир и простой гидроксиизопропиловый эфир; низшие алкокси(низшие)алкильные простые эфиры, такие как простой метоксиметиловый эфир и простой 1-метоксиэтиловый эфир; необязательно замещенные простые ариловые эфиры, такие как простой фениловый эфир, простой тозиловый эфир, простой трет-бутилфениловый эфир, простой салициловый эфир, простой 3,4-диметоксифениловый эфир и простой бензамидофениловый эфир; и арил(низшие)алкильные простые эфиры, такие как простой бензиловый эфир, простой тритиловый эфир и простой бензгидриловый эфир.
Примеры сложных эфиров включают алифатические сложные эфиры, например, низшие алкильные сложные эфиры, такие как сложный метиловый эфир, сложный этиловый эфир, сложный пропиловый эфир, сложный изопропиловый эфир, сложный бутиловый эфир, сложный изобутиловый эфир, сложный трет-бутиловый эфир, сложный пентиловый эфир и сложный 1-циклопропилэтиловый эфир; низшие алкениловые сложные эфиры, такие как сложный виниловый эфир и сложный аллиловый эфир; низшие алкиниловые сложные эфиры, такие как сложный этиниловый эфир и сложный пропиниловый эфир; гидрокси(низшие)алкильные сложные эфиры, такие как сложный гидроксиэтиловый эфир; низшие алкокси(низшие)алкильные сложные эфиры, такие как сложный метоксиметиловый эфир и сложный 1-метоксиэтиловый эфир; и необязательно замещенные сложные ариловые эфиры, такие как, например, сложный фениловый эфир, сложный толиловый эфир, сложный трет-бутилфениловый эфир, сложный салициловый эфир, сложный 3,4-диметоксифениловый эфир и сложный бензамидофениловый эфир; и арил(низший)алкильный сложный эфир, такой как сложный бензиловый эфир, сложный тритиловый эфир и сложный бензгидриловый эфир.
Амид группы А обозначает группу, представленную формулой -CONR'R'', где каждый из R' и R'' является атомом водорода, низшим алкилом, арилом, алкил- или арил-сульфонилом, низшим алкенилом и низшим алкинилом, и включают, например, амиды низших алкилов, такие как метиламид, этиламид, диметиламид и диэтиламид; ариламиды, такие как анилид и толуидид; и алкил- или арил-сульфониламиды, такие как метилсульфониламид, этилсульфониламид и толилсульфониламид.
Предпочтительные примеры группы L включают гидрокси или оксо, которые имеют 5-членную кольцевую структуру в особенности так называемого PGF- или PGE-типа.
Предпочтительным примером группы А является -СООН, ее фармацевтически приемлемая соль, их сложный эфир или амид.
2
2
Предпочтительным примером группы В является -СН-СН-, который предоставляет структуру так называемого 13,14-дигидро-типа.
1
2
Предпочтительным примером групп X и Х является водород или, по меньшей мере, одна из них является галогеном, более предпочтительно обе из них являются галогеном, в частности, фтором, который предоставляет структуру так называемого 16,16-дифтор-типа.
1
Предпочтительный R является углеводородом, содержащим 1-10 атомов углерода, предпочтительно 6-10 атомов углерода. Кроме того, по меньшей мере, один из атомов углерода в алифатическом углеводороде необязательно замещен кислородом, азотом или серой.
1
Примеры R включают, например, следующие группы:
2
2
2
2
2
2
-СН-СН-СН-СН-СН-СН-,
2
2
2
2
-СН-СН=СН-СН-СН-СН-,
2
2
2
2
-СН-СН-СН-СН-СН=СН-,
2
2
2
2
-СН-С≡С-СН-СН-СН-,
2
2
2
2
3
2
-СН-СН-СН-СН-СН(СН)-СН-,
2
2
2
2
2
-СН-СН-СН-СН-O-СН-,
2
2
2
-СН-СН=СН-СН-O-СН-,
2
2
2
-СН-С≡С-СН-O-СН-,
2
2
2
2
2
2
2
-СН-СН-СН-СН-СН-СН-СН-,
2
2
2
2
2
-СН-СН=СН-СН-СН-СН-СН-,
2
2
2
2
2
-СН-СН-СН-СН-СН-СН=СН-.
2
2
2
2
2
-СН-С≡С-СН-СН-СН-СН-.
2
2
2
2
2
3
2
-СН-СН-СН-СН-СН-СН(СН)-СН-,
2
2
2
2
2
2
2
2
-СН-СН-СН-СН-СН-СН-СН-СН-,
2
2
2
2
2
2
-СН-СН=СН-СН-СН-СН-СН-СН-,
2
2
2
2
2
2
-СН-СН-СН-СН-СН-СН-СН=СН-,
2
2
2
2
2
2
-СН-С≡С-СН-СН-СН-СН-СН-,
2
2
2
2
2
2
3
2
-СН-СН-СН-СН-СН-СН-СН(СН)-СН-
Предпочтительная группа Ra является углеводородом, содержащим 1-10 атомов углерода, более предпочтительно 1-8 атомов углерода. Ra может быть одной или двумя боковыми цепями, имеющими один атом углерода.
2
3
3
Предпочтительная группа R является одинарной связью, и предпочтительная группа R является низшим алкилом. R может быть одной или двумя боковыми цепями, имеющими один атом углерода.
Конфигурация кольца и α- и/или ω-цепей в указанных выше формулах (I), (II) и (III) могут быть такой же или отличаться от конфигурации в первичных PGs. Однако настоящее изобретение также включает смесь соединения, имеющего конфигурацию первичного типа, и соединения с конфигурацией, не относящейся к первичному типу.
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1α
Типичным примером настоящего соединения является соединение 11-дезокси-13,14-дигидро-16,16-дифтор-PGE или -PGF, соединение 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE или -PGF, соединение 2-декарбокси-2-(2-карбоксиэтил)-11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE или -PGF, или соединение 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-20-этил-PGE или -PGF и их производные или аналоги. Предпочтительным примером настоящего соединения является 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE, 11-дезокси-13,14-дигидро-16,16-дифтор-PGE, сложный изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE, сложный изопропиловый эфир 2-декарбокси-2-(2-карбоксиэтил)-11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE, 2-декарбокси-2-(2-карбоксиэтил)-11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE, сложный изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-20-метил-PGE, 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-20-метил-PGE, 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-20-этил-PGE, сложный метиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE, сложный изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-20-этил-PGE или сложный изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGF.
В настоящем изобретении в тех же целях могут быть использованы любые изомеры, такие как индивидуальные таутомерные изомеры, их смесь или оптические изомеры, их смесь, рацемическая смесь и другие стерические изомеры.
Некоторые соединения, применяемые в настоящем изобретении, можно получить с помощью способа, раскрытого в патентах USP Nos. 5073569, 5166174, 5221763, 5212324 и 5739161 и 6242485 (эти цитируемые источники включены сюда путем отсылки).
В соответствии с настоящим изобретением субъекта-млекопитающего можно лечить с помощью настоящего изобретения путем введения соединения, описанного выше. Субъект может быть любым млекопитающим, включая человека. Соединение можно применять системно или местно. Обычно соединение можно вводить с помощью перорального введения, интраназального введения, введения с помощью ингаляции, внутривенной инъекции (включая инфузию), подкожной инъекции, интраректального введения, интравагинального введения, трансдермального введения, местного введения в глаза (например, периокулярного (например, в субтеноново пространство), субконъюнктивального, внутриглазного, интравитреального, интракамерального, субретинального, супрахороидального и ретробульбарного способов введения) и т.п.
Доза может различаться в зависимости от породы животного, возраста, массы тела, симптома, на который направлено лечение, желаемого терапевтического эффекта, способа введения, срока лечения и т.п. Удовлетворительный эффект можно получить с помощью системного введения 1-4 раза в день или продолжительного введения в количестве 0,000001-500 мг/кг, более предпочтительно - 0,00001-100 мг/кг в день.
Соединение можно предпочтительно вводить в состав фармацевтической композиции, подходящей для введения подходящим способом. Композиция может в форме, подходящей для перорального введения, инъекции или перфузии, а также она может быть наружным средством, суппозиторием или пессарием.
Композиция настоящего изобретения может, кроме того, содержать физиологически приемлемые добавки. Указанные добавки могут включать ингредиенты, применяемые с соединениями настоящего изобретения, такие как эксципиент, разбавитель, наполнитель, растворитель, смазывающее средство, вспомогательное средство, связующее средство, дезинтегрирующее средство, глазировочное средство, капсулирующее средство, основа для мази, основа для суппозитория, аэрозольное средство, эмульгатор, диспергирующее средство, суспендирующее средство, загуститель, средство, обеспечивающее тоничность среды, забуферивающее средство, болеутоляющее средство, консервант, антиоксидант, корригент, ароматизатор, краситель, функциональное вещество, такое как циклодекстрин и биодеградируемый полимер, стабилизатор. Добавки хорошо известны в этой области техники и могут быть выбраны из тех, которые описаны в общепринятых справочниках по фармацевтике.
Количество указанного выше соединения в композиции настоящего изобретения может варьировать в зависимости от состава композиции и обычно может составлять 0,000001-10,0%, более предпочтительно - 0,00001-5,0%, наиболее предпочтительно - 0,0001-1%.
Примеры твердых композиций для перорального введения включают таблетки, пастилки, сублингвальные таблетки, капсулы, пилюли, порошки, гранулы и т.п. Твердые композиции могут быть получены путем смешивания одного или нескольких активных ингредиентов, по меньшей мере, с одним инертным разбавителем. Композиция, кроме того, может содержать добавки, не являющиеся инертным разбавителем, например, смазывающее средство, дезинтегрирующее средство и стабилизатор. Таблетки и пилюли при необходимости могут быть покрыты кишечно-растворимой пленкой или пленкой, растворимой в желудочно-кишечном тракте.
Они могут быть покрыты двумя или более слоями. Они также могут быть адсорбированы на материале замедленного высвобождения или микрокапсулированы. Кроме того, композиции могут быть капсулированы с помощью легко разрушающегося материала, такого как желатин. Они, кроме того, могут быть растворены в подходящем растворителе, таком как жирная кислота или ее моно-, ди- или триглицерид, для получения мягкой капсулы. Если есть необходимость в быстродействующих свойствах, можно применять сублингвальную таблетку.
Примеры жидких композиций для перорального введения включают эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры и т.п. Указанная композиция, кроме того, содержит традиционно используемые инертные разбавители, например, очищенную воду или этиловый спирт. Композиция может содержать добавки, не являющиеся инертными разбавителями, такие как вспомогательное средство, например, увлажняющие средства и суспендирующие средства, подсластители, ароматизаторы, отдушку и консерванты.
Композиция настоящего изобретения может быть в форме распыляемой композиции, которая содержит один или несколько активных ингредиентов и может быть приготовлена в соответствии с известным способом.
Примеры для инъецируемых композиций настоящего изобретения для парентерального введения включают стерильные водные и неводные растворы, суспензии и эмульсии.
Разбавители для водного раствора или суспензии могут включать, например, дистиллированную воду для инъекции, физиологический раствор и раствор Рингера.
Неводные разбавители для раствора и суспензии могут включать, например, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, спирты, такие как этанол и полисорбат. Композиция, кроме того, может включать добавки, такие как консерванты, увлажняющие средства, эмульгирующие средства, диспергирующие средства и т.п. Они могут быть простерилизованы с помощью фильтрования, например, через фильтр, задерживающий бактерии, смешивания с автоклавированием или с помощью газовой стерилизации или стерилизации с облучением радиоизотопом.
Инъецируемая композиция может также быть предоставлена в виде стерильной порошкообразной композиции, которую перед использованием растворяют в стерильном растворителе.
Примеры наружного средства включают наружные препараты, известные в области дерматологии и отоларингологии, которые включают мазь, крем, лосьон и аэрозоль.
Настоящее соединение также применяют с помощью офтальмологического раствора, глазных капель, глазной мази и т.п. Форма включает все составы для местного введения в глаза, известные в области офтальмологии.
Офтальмологический раствор или глазные капли получают с помощью растворения активных ингредиентов в стерильном водном растворе, таком как физиологический и буферный раствор, или путем объединения порошкообразных композиций, которые перед использованием растворяют. Глазные мази получают путем смешивания активного ингредиента с основой мази. Композиции можно получать в соответствии с любыми традиционными способами.
Модификаторы, регулирующие осмолярность, могут быть любыми из тех, которые традиционно используют в области офтальмологии. Примеры модификаторов, регулирующих осмолярность, включают, но не ограничиваются только ими, хлорид натрия, хлорид калия, хлорид кальция, бикарбонат натрия, карбонат натрия, сульфат магния, гидрофосфат натрия, дигидрофосфат натрия, гидрофосфат калия, борную кислоту, буру, гидроксид натрия, соляную кислоту, маннит, изосорбит, пропиленгликоль, глюкозу и глицерины.
Кроме того, при желании к настоящей композиции могут быть добавлены дополнительные средства, обычно применяемые в области офтальмологии. Такие добавки включают, например, буферное средство (например, борную кислоту, моногидрофосфат натрия и дигидрофосфат натрия), консерванты (например, бензалкония хлорид, бензетония хлорид и хлорбутанол), загустители (например, сахарид, такой как лактоза и маннит, мальтозу; например, гиалуроновую кислоту или ее соли, такие как гиалуронат натрия и гиалуронат калия; например, мукополисахарид, такой как хондроитинсульфат; например, полиакрилат натрия, карбоксивиниловый полимер и поперечносшитый полиакрилат), все они включены сюда путем отсылки.
При получении настоящей композиции в виде глазной мази, композиция может содержать обычно применяемую основу мази, отличающуюся от указанных выше дополнительных средств. Такая основа глазной мази включает, но не ограничивается только ими, масляную основу, например, вазелин, жидкий парафин, полиэтилен, селен 50, диспергированный полиэтилен (Plastibase), макрогол или их комбинацию; эмульсионную основу, имеющую масляную фазу и водную фазу, эмульгированную с помощью поверхностно-активного средства; и водорастворимую основу, такую как гидроксипропилметилцеллюлоза, карбоксипропилметилцеллюлоза и полиэтиленгликоль.
Настоящую композицию можно составлять в форме стерильной единичной лекарственной формы, не содержащей консервантов.
Другая форма настоящего изобретения представляет собой суппозиторий или пессарий, которые можно получить с помощью смешивания активного ингредиента с обычной основой, такой как масло какао, которое размягчается при температуре тела, а для улучшения впитываемости можно применять неионные поверхностно-активные средства, имеющие подходящие температуры размягчения.
Термин «лечение», используемый здесь, включает любые способы контроля заболевания или состояния, такие как предупреждение, уход, облегчение состояния, смягчение состояния и приостановка прогрессирования.
Соединения, используемые в настоящем изобретении, оказывают значительный эффект на восстановление недостаточного периферического кровообращения, поврежденной стенки периферических сосудов и/или эндотелиальных клеток периферических сосудов.
Таким образом, соединения полезны для лечения заболеваний периферических сосудов, в частности, для лечения заболеваний периферических сосудов и заболеваний капилляров. Заболевания сосудов и капилляров в этом описании изобретения и формуле изобретения могут включать заболевания сетчатки, кожи, общего кровообращения, почек или периферической или вегетативной нервной системы. Все эти заболевания часто ассоциированы с сахарным диабетом и могут возникать в виде симптомов, ассоциированных с острыми или хроническими осложнениями сахарного диабета. Кроме того, другие заболевания, о которых хотя и не известно, что они имеют отношение к диабету, обладают сходными физиологическими воздействиями на систему периферических сосудов, и такие заболевания также можно эффективно лечить с помощью способа настоящего изобретения.
Настоящее изобретение было бы полезным при периферической и вегетативной нейропатиях или любых других заболеваниях, которые приводят к заболеванию небольших сосудов и заболеванию непосредственно крупных сосудов. Полагают, что этот полезный эффект происходит из-за усиления кровотока в небольших сосудах и защиты эндотелиальных клеток сосудов.
Термин «заболевания периферических сосудов», используемый здесь, включает любое заболевание периферических сосудов, включая периферическую и вегетативную нейропатии. Примеры «заболеваний периферических сосудов» включают заболевание периферических артерий, такое как хроническая окклюзия артериальных сосудов, включая артериосклероз, облитерирующий артериосклероз и облитерирующий тромбангиит (болезнь Бюргера), макроангиопатию, микроангиопатию, сахарный диабет, тромбофлебит, флеботромбоз, болезнь Рейно, синдром Рейно, синдром CREST, опасность для здоровья из-за вибрации, синдром Зудека, перемежающуюся хромоту, чувство холода в конечностях, атипичное ощущение в конечностях, чувствительность к холоду, болезнь Меньера, синдром Меньера, онемение, потерю чувствительности, отсутствие чувствительности, боль в состоянии покоя, каузалгию (жгучую боль), нарушение функции периферического кровообращения, нарушение функции нервов, нарушение моторной функции, двигательный паралич, нарушение периферического кровообращения при диабете, поясничный стеноз спинномозгового канала, диабетическую нейропатию, шок, аутоиммунное заболевание, такое как эритематоз, ревматоидное заболевание и ревматоидный артрит, аутоиммунную нейропатию, диабетическую вегетативную нейропатию, расстройство вегетативной регуляции, ортостатическую гипотензию, эректильную дисфункцию, женскую половую дисфункцию, ретроградную эякуляцию, цистопатию, нейрогенный мочевой пузырь, нарушение смазывания влагалища, отсутствие выносливости при физических нагрузках, сердечную денервацию, непереносимость высокой температуры, синдром ушно-височного нерва, осложнение диабета, гипергликемию, отсутствие восприятия симптомов гипогликемии, гипогликемическую невосприимчивость; глаукому, неоваскулярную глаукому, катаракту, ретинопатию, диабетическую ретинопатию, диабетическую макулопатию, окклюзию ретинальных артерий, окклюзию центральной артерии сетчатки, окклюзию вены сетчатки, макулярный отек, возрастную макулярную дегенерацию, возрастную дисковидную дегенерацию желтого пятна, кистозный макулярный отек, пальпебральный отек, ретинальный отек, хориоретинопатию, неоваскулярную макулопатию, увеит, ирит, ретинальный васкулит, эндофтальмит, панофтальмит, метастатическую офтальмию, хориоидит, ретинальный пигментный эпителиит, конъюнктивит, циклит, склерит, эписклерит, неврит зрительного нерва, ретробульбарный неврит зрительного нерва, кератит, блефарит, экссудативное отслоение сетчатки, язву роговицы, конъюнктивальную язву, хронический монетовидный кератит, кератит Тайджесона, прогрессирующую разъедающую язву роговицы, повреждение кожи, язву кожи, включающую язву ступни, диабетическую язву, ожоговую язву, язву голени, постоперационную язву, травматическую язву, язву после опоясывающего герпеса, лучевую язву, лекарственную язву, охлаждение (холодовую травму), обморожение, гангрену и внезапную гангрену, бронхиальную язву, вариантный ангиит, коронарный артериосклероз (хроническую ишемическую болезнь сердца, асимптоматическую ишемическую болезнь сердца, артериосклеротическое сердечно-сосудистое заболевание), инфаркт миокарда, сердечную недостаточность, застойную сердечную недостаточность и безболевую форму ишемической болезни сердца, отек легких, гипертонию, легочную гипертонию; портальную гипертензию; диабетическую нефропатию; пролежень, почечную недостаточность.
Настоящая композиция может содержать единственный активный ингредиент или комбинацию двух или более активных ингредиентов. В комбинации множественных активных ингредиентов соответствующая им доля может быть подходяще увеличена или уменьшена с учетом их терапевтического эффекта и безопасности.
Фармацевтическая композиция настоящего изобретения, кроме того, может содержать другие фармакологические ингредиенты, если они не противоречат цели настоящего изобретения.
Настоящее изобретение будет описано в деталях с отсылкой к соответствующим примерам, которые, однако, не ограничивают объем настоящего изобретения.
Пример 1
1
Тестируемое соединение А: 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE
1
Тестируемое соединение В: сложный изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE
В этом исследовании использовали самцов крыс линии Wistar (в возрасте 7 недель). Животных анестезировали с помощью внутрибрюшинной инъекции тиобутабарбитала натрия (80 мг/кг). Во время эксперимента температуру тела (ректальную температуру) животных, приблизительно равную 37°С, поддерживали с помощью грелки-подушки. После удаления шерсти с подъема стопы правой задней конечности с помощью крема-депилятора, непрерывно измеряли кровоток в кожных тканях, используя лазерный допплеровский флоуметр (FLO-N1, Omegawave Inc., Japan) бесконтактного типа. Для измерения усредненного артериального кровяного давления полиэтиленовый катетер, помещенный в левую бедренную артерию, присоединяли к датчику кровяного давления (ТР-400Т, Nihon Koden Inc., Japan), сопряженного с усилителем (АР-641G, Nihon Koden Inc., Japan). Кровоток в кожных тканях и кровяное давление записывали и анализировали с помощью компьютерной системы (НЕМ Ver. 3.5, Notocord Systems, France). Эндотелин-1 (ET-1) вводили в бедренную артерию в течение 15 минут со скоростью 200 пмоль/кг/мин с помощью шприцевого насоса через полиэтиленовый катетер, ретроградно вставленный в каудальную надчревную артерию, ответвляющуюся от правой бедренной артерии. После окончания инфузии при 200 пмоль/кг/мин скорость инфузии ET-1 снижали до 20 пмоль/кг/мин и инфузию сниженного количества ET-1 сохраняли до конца исследования. Кровоток кожных тканей уменьшали с помощью инфузии ET-1 в бедренную артерию. Когда кровоток в кожных тканях достигал нового стационарного уровня (от 25 до 50 минут после начала инфузии ET-1), животным вводили растворитель или каждое тестируемое соединение в течение 2 минут в объеме 1 мл/кг через полиэтиленовый катетер, помещенный в левую бедренную вену. Количество вводимого тестируемого соединения составляло 100 мкг/кг. Кровоток в кожных тканях и кровяное давление постоянно измеряли и записывали каждые 5 минут в течение 60 минут после введения растворителя или каждого тестируемого соединения.
Как показано на фиг.1А и 1В, с помощью инфузии ET-1 в бедренную артерию кровоток в кожных тканях снижался приблизительно до 37% от базовой линии между 25 и 50 минутами после начала инфузии ET-1. Различия в кровотоке в кожных тканях после обработки растворителем обнаружено не было (фиг.1А и 1В).
1
В группе, которой вводили 100 мкг/кг соединения А (11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE), кровоток в кожных тканях, который снижался приблизительно до 35% от базовой линии после инфузии ЕТ-1, значительно увеличивался после введения соединения А (фиг.1А).
1
В группе, которой вводили 100 мкг/кг соединения В (сложный изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE), кровоток в кожных тканях, который снижался приблизительно до 38% от базовой линии после инфузии ЕТ-1, значительно увеличивался после введения соединения В (фиг.1В).
Инфузия ЕТ-1 не влияла на кровяное давление. Соединение А и соединение В в количестве 100 мкг/кг не оказывали значительного влияния на кровяное давление.
Пример 2
1
Тестируемое соединение А: 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE В этом исследовании использовали восемь самцов белых японских кроликов (Std:JW/CSK), весивших примерно 2,5-3,5 кг. В процессе исследования один глаз у каждого животного обрабатывали тестируемым соединением, а другой глаз постоянно обрабатывали растворителем с периодом промывания между каждой обработкой. Используя микропипетку (Pipetman, Gilson, Inc., France), на один глаз каждого животного местно наносили тридцать микролитров раствора каждого тестируемого соединения. Противоположный глаз обрабатывали равным объемом растворителя. Животных обрабатывали препаратами приблизительно в одно и то же время каждое утро. После того, как животных фиксировали на подставке, в каждый глаз вводили одну каплю локального анестетика (0,4-процентный оксибупрокаина гидрохлорид) и измеряли IOP с помощью апланационного пневмотонометра (модель 30 Classic™, Mentor О & О, Inc., USA) до введения препарата и на 1, 2, 4, 6 и 8 час после введения.
Как показано в таблице 1, соединение А значительно снижало внутриглазное давление.
Таблица 1
Внутриглазное давление (IOP) после обработки тестируемым соединением
Обработка
Концентрация, %
n
IOP (мм Hg)
Время после введения (час)
До введения
1
2
4
6
8
Растворитель
-
8
16,4±0,9
18,3±1,6
18,9±1,6
18,4±1,3
19,5±1,7
19,0±1,1
Соединение А
0,0016
8
17,0±0,8
13.1±0,6**
14,5±0,6*
13,8±0,8*
15,1±1,0*
17,5±1,3
Результаты представлены в виде среднего значения ± станд. ош., *p<0.05, **p<0.01 по сравнению с контрольными глазами, обработанными растворителем (парный t-критерий Стьюдента).
1
Соединение А: 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE.
Пример 3
Диабет индуцировали однократной внутривенной инъекцией 50 мг/кг стрептозотоцина (STZ) 7-недельным самцам крыс Crl: CD(SD). В этом исследовании использовали животных с уровнем глюкозы в плазме, равным 400 мг/дл или более, на 19-й день после обработки STZ. Через три недели после инъекции STZ животных анестезировали с помощью внутрибрюшинной инъекции тиобутабарбитала натрия. Во время эксперимента температуру тела (ректальную температуру) животных, приблизительно равную 37°С, поддерживали с помощью грелки-подушки. После удаления шерсти с подъема стопы правой задней конечности с помощью крема-депилятора, непрерывно измеряли кровоток в кожных тканях (CTBF), используя лазерный допплеровский флоуметр (FLO-N1, Omegawave Inc., Japan) бесконтактного типа. Одновременно следили за кровяным давлением и частотой сердечных сокращений. Соединение А или растворитель вводили животным внутривенно в течение 10 мин.
Как показано в таблице 2, соединение А значительно усиливало кровоток в кожных тканях по сравнению с растворителем. Соединение А не влияло на кровяное давление (ВР) и частоту сердечных сокращений.
Результаты представлены в виде среднего значения ± станд. ош., *р<0,05, **р<0,01 по сравнению с контрольной группой, обработанной растворителем.
1
Соединение А: 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE.
Пример 4
Четырехмесячных самцов кроликов Kbs: J.W. размещали в алюминиевых клетках в виварии с контролируемой комнатной температурой (23-24°С), относительной влажностью (55-74%), скоростью вентиляции (10-20 раз/час) и 12-часовым циклом свет/темнота (освещение: 7:00 утра - 7:00 вечера). Животных кормили сухим кормом для кроликов (120 г/животное/день) и неограниченно подавали воду из автоматической системы кормления. Животных подвергали, по меньшей мере, 6 дням карантина и акклиматизации. В этот период проводили измерения массы их тела и наблюдения по главным признакам, и животных, признанных здоровыми, использовали в исследовании.
4
Канюлю вставляли в общую сонную артерию кролика под ингаляционной анестезией изофлураном. Девять частей образцов крови, полученных через канюлю, смешивали с одной частью 3,8-процентного (мас./об.) цитрата натрия. После центрифугирования образцов крови в течение 10 минут при 1000 об/мин, с верхнего слоя собирали обогащенную тромбоцитами плазму (PRP). Затем нижний слой центрифугировали в течение 15 мин при 3000 об/мин и с верхнего слоя собирали плазму, обедненную тромбоцитами (РРР). Подсчет тромбоцитов во фракциях PRP и РРР проводили с помощью системы ADVIA120 Hematology system (ADVIA120, Bayer Medical Ltd.). Фракцию PRP разводили фракцией РРР таким образом, чтобы количество тромбоцитов было бы доведено приблизительно до 30×10 клеток/мкл. Полученную таким образом фракцию PRP (0,178 мл) помещали в кювету и проинкубировали в теплой бане при 37°С в течение примерно 5 минут. К PRP добавляли тестируемый раствор (0,022 мл), содержащий простагландин Е1 или соединение А. Через одну минуту добавляли 25 мкМ раствор ADP (0,022 мл) и с помощью устройства для измерения агрегации тромбоцитов (NBS hematolaser, Nikko Bioscience Inc.) измеряли степень агрегации тромбоцитов. На образцах крови, взятых у трех животных, для каждого тестируемого раствора проводили двойной анализ. Скорость ингибирования (в %) оценивали путем сравнения агрегации в группе, которой вводили тестируемое вещество, с контрольной группой, которой вводили растворитель (100%).
1
1
-8
-7
-6
-5
Как показано в таблице 3, простагландин E (PGE) ингибировали агрегацию тромбоцитов на 20,9%, 91,2% и 89,0% при концентрации 1×10, 1×10 и 1×10 г/мл, соответственно. С другой стороны, соединение А не оказывало влияния на агрегацию тромбоцитов вплоть до самых высоких исследованных концентраций (1×10 г/мл). Результаты показывают, что соединение А не влияет на агрегацию тромбоцитов.
Таблица 3
Группа
Концентрация (г/мл)
n
Максимум агрегации (%)
Ингибирование (%)
Контроль (физиологический раствор)
-
3
37,5+3,1
-
Контроль (растворитель)
-
3
36,3±2,8
-
Соединение А
1×10<sup>-7</sup>
3
35,2±3,9
3,0
1×10<sup>-6</sup>
3
36,2±4,0
0,3
1×10<sup>-5</sup>
3
36,8±3,1
-1,4
PGE<sub>1</sub>
1×10<sup>-8</sup>
3
28,7±3,6
20,9
1×10<sup>-7</sup>
3
3,2±0,6**
91,2
1×10<sup>-6</sup>
3
4,0±0,7**
89,0
Максимум агрегации (в %) представляет собой среднее значение ± станд. ош. для 3 кроликов.
**Р<0,01; Значимое отличие от контроля (растворитель) (множественный сравнительный тест Даннета).
Пример 5
1
Самцов крыс Crl: CD(SD) анестезировали путем внутрибрюшинной инъекции тиобутабарбитала натрия. Во время эксперимента температуру тела (ректальную температуру) животных, приблизительно равную 37°С, поддерживали с помощью грелки-подушки. После удаления шерсти с подъема стопы правой задней конечности с помощью крема-депилятора, непрерывно измеряли кровоток в кожных тканях (CTBF) до введения и через 30 минут после внутривенного введения соединения С (11-дезокси-13,14-дигидро-16,16-дифтор-PGE) или растворителя, используя лазерный допплеровский флоуметр (FLO-N1, Omegawave Inc., Japan) бесконтактного типа. Одновременно следили за кровяным давлением и частотой сердечных сокращений.
Как показано в таблице 4, в отличие от растворителя соединение В значительно повышало кровоток в кожных тканях. Соединение В не оказывало влияния на кровяное давление и частоту сердечных сокращений.
Таблица 4
Влияние соединения В на кровоток в кожных тканях у крыс
Группа
Доза мкг/кг, i.v.
n
Кровоток в кожных тканях (мл/мин/100 г ткани)
До введения
После введения
Растворитель (контроль)
0
5
11,4±1,1
10,4±0,8
Соединение В
10
5
11,6±0,3
13,0±0,2*
Данные представлены в виде среднего значения ± станд. ош., *р<0,05; по сравнению с контрольной группой (обработка растворителем).
Пример 6
Культуры эндотелиальных клеток сосудов человека выращивали до получения конфлюэнтности, как было измерено с помощью трансэндотелиального электрического сопротивления (TEER). Культуры клеток затем были в течение 30 минут лишены кислорода путем инкубации в атмосфере азота. Затем клетки обрабатывали или 0,1-процентным DMSO, или 5 нМ соединением А и 0,1-процентным DMSO. Плотность клеток в указанных временных точках определяли с помощью TEER.
Как показано на фиг.2А, клетки, обработанные DMSO, демонстрировали очень небольшое восстановление TEER. Клетки, обработанные соединением А, демонстрировали немедленное восстановление TEER.
Результаты показывают, что нарушенное TEER, измеряющее барьерную функцию эндотелиальных клеток, быстро восстанавливается после обработки соединением А.
Пример 7
Человеческие эндотелиальные клетки капилляров (взрослый человек) (HMVEC-AD) выращивали до получения конфлюэнтности. Затем клетки содержали в течение 30 минут в атмосфере азота и возвращали в нормальную атмосферу воздуха. В указанных временных точках контролировали уровень АТР с помощью люциферин-люциферазной системы измерения (ATPlite, Perkin Elmer).
Как показано на фиг.2В, уровень АТР снижался, если клетки подвергали воздействию атмосферы азота. Уровень АТР возвращался к исходному значению более быстро в клетках, обработанных 5 нМ соединением А, чем в клетках, обработанных только 0,01-процентным DMSO.
Пример 8
Самцов крыс GK/Jcl, спонтанную модель неинсулинзависимого диабета, анестезировали путем внутрибрюшинной инъекции тиобутабарбитала натрия. Во время эксперимента температуру тела (ректальную температуру) животных, приблизительно равную 37°С, поддерживали с помощью грелки-подушки. После удаления шерсти с подъема стопы правой задней конечности с помощью крема-депилятора, непрерывно измеряли кровоток в кожных тканях (CTBF) до введения (базовая линия) и через 20 минут после внутривенного введения соединения А или растворителя, используя лазерный допплеровский флоуметр (FLO-N1, Omegawave Inc., Japan) бесконтактного типа. Результаты выражали в процентах по сравнению с базовой линией кровотока в кожных тканях.
Как показано в таблице 5, в отличие от растворителя соединение А значительно повышало кровоток в кожных тканях у крыс со спонтанным диабетом.
Таблица 5
Влияние соединения А на кровоток в кожных тканях у крыс со спонтанным диабетом
Группа
Доза, мкг/кг, i.v.
n
Кровоток в кожных тканях по сравнению с базовой линией (%)
Растворитель (Контроль)
0
5
103±2
Соединение А
20
5
122±1*
Данные представлены в виде среднего значения ± станд. ош., *р<0,05; по сравнению с контрольной группой (обработка растворителем).
Пример синтеза 1
1
Синтез сложного бензилового эфира 16,16-дифтор-PGA (2)
1
Сложный бензиловый эфир 16,16-дифтор-PGE (1) (457,8 мг, 0,95 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (13,7 мл, 0,24 моль) и раствор перемешивали при 80°С в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. К раствору добавляли 10 мл толуола и концентрировали при пониженном давлении. Эту операцию повторяли пять раз для удаления уксусной кислоты. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель: FL60D (70 г), Fuji Silysia, гексан/этилацетат (2:1)), чтобы получить соединение (2) в виде желтого масла. Выход: 391,6 мг (88,9%).
1
Синтез 11-дезокси-13,14-дигидро-16,16-дифтор-PGE (3)
1
Сложный бензиловый эфир 16,16-дифтор-PGA (соединение (2)) (382,5 мг, 0,83 ммоль) гидрировали в этилацетате (10 мл) в присутствии 10-процентного палладированного угля (57,4 мг, увлажненный 50% мас./мас. воды) при комнатной температуре, при атмосферном давлении в течение 2 часов. Реакционную смесь фильтровали через целит, осадок на фильтре промывали этилацетатом и затем фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель BW-300SP (50 г, увлажненный 15% мас./мас. воды), Fuji Silysia, гексан/этилацетат (1:1)) для получения неочищенного соединения (3) (298,5 мг, 95,7%).
Неочищенное соединение (3) объединяли с другой порцией неочищенного соединения. И затем суммарно около 350 мг неочищенного соединения очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (YMC-Pack D-SIL-5-06 20×250 мм, гексан/2-пропанол/уксусная кислота (250:5:1), 20 мл/мин) для получения соединения (3) в виде бесцветного масла. Выход: 297,3 мг (извлечение при очистке с помощью ВЭЖХ: 83,5%).
1
3
Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) δ
0,94 (3Н, t, J=7,1 Гц), 1,22-2,29 (28Н, m), 2,34 (2H, t, J=7,3 Гц), 3,65-3,81 (1H, m)
13
3
С-ЯМР (50 МГц, CDCl) δ
13,70, 22,40, 23,25, 24,32, 26,28, 26,63, 27,18, 27,58, 28,49, 29,09, 30,39, 31,77 (t, J=24,4 Гц), 33,67, 37,63, 41,05, 54,76, 72,73 (t, J=29,0 Гц), 124,09 (t, J=244,3 Гц), 179,07, 220,79.
Пример синтеза 2
1
3
3
1
13
В соответствии со способом, описанным для примера синтеза 1, сложный изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE (соединение (6)) получали в виде бесцветного масла с помощью указанной выше двухстадийной реакции. Выход: 0,285 г (1-я стадия: 96,2%, 2-я стадия: 97,6%, очистка ВЭЖХ: извлечение: 81,0%). Спектры Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) и С-ЯМР (50 МГц, CDCl) для соединения (6) показаны на фигурах 3 и 4, соответственно.
Пример синтеза 3
1
3
3
1
13
В соответствии со способом, описанным для примера синтеза 1, сложный изопропиловый эфир 2-декарбокси-2-(2-карбоксиэтил)-11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE (соединение (9)) получали в виде бесцветного масла. Выход: 0,402 г (1-я стадия: 94,9%, 2-я стадия: 92,2%, очистка ВЭЖХ: извлечение 83,1%). Спектры Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) и С-ЯМР (50 МГц, CDCl) для соединения (9) показаны на фигурах 5 и 6, соответственно.
Пример синтеза 4
1
3
3
1
13
В соответствии со способом, описанным для примера синтеза 1, 2-декарбокси-2-(2-карбоксиэтил)-11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE (соединение (12)) получали в виде бесцветного масла. Выход: 0,696 г (1-я стадия: 95,6%, 2-я стадия: 99,3%, очистка ВЭЖХ: извлечение 87,4%). Спектры Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) и С-ЯМР (50 МГц, CDCl) для соединения (12) показаны на фигурах 7 и 8, соответственно.
Пример синтеза 5
1
3
3
1
13
В соответствии со способом, описанным для примера синтеза 1, сложный изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-20-метил-PGE (соединение (15)) получали в виде бесцветного масла. Выход: 0,271 г (1-я стадия: 91,4%, 2-я стадия: 97,3%, очистка ВЭЖХ: извлечение: 79,0%) Спектры Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) и С-ЯМР (50 МГц, CDCl) для соединения (15) показаны на фигурах 9 и 10, соответственно.
Пример синтеза 6
1
3
3
1
13
В соответствии со способом, описанным для примера синтеза 1, 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-20-метил-PGE(соединение (18)) получали в виде бесцветного масла. Выход: 0,637 г (1-я стадия: 93,3%, 2-я стадия: 96,6%, Очистка ВЭЖХ: извлечение: 73,9%). Спектры Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) и С-ЯМР (50 МГц, CDCl) для соединения (18) показаны на фигурах 11 и 12, соответственно.
Пример синтеза 7
1
3
3
1
13
В соответствии со способом, описанным для примера синтеза 1, 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-20-этил-PGE (соединение (21)) получали в виде бесцветного масла. Выход: 0,401 г (1-я стадия 90,6%, 2-я стадия: 92,7%, Очистка ВЭЖХ: извлечение: 29,2%). Спектры Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) и С-ЯМР (50 МГц, CDCl) для соединения (21) показаны на фигурах 13 и 14, соответственно.
Пример синтеза 8
1
3
3
1
13
Сложный метиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGE (соединение (23)) получали в виде бесцветного масла с помощью этерификации соединения (22) диазометаном. Выход: 0,860 г (72,9%, после очистки с помощью колоночной хроматографии на силикагеле). Спектры Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) и С-ЯМР (50 МГц, CDCl) для соединения (23) показаны на фигурах 15 и 16.
Пример синтеза 9
2
3
1
3
3
1
13
Соединение (24) (0,67 г, 1,66 ммоль) растворяли в DMF (13 мл) и добавляли КСО (460,1 мг, 3,33 ммоля) и изопропилиодид (831 мкл, 8,32 ммоля). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали с помощью льда, добавляли воду (10 мл) и солевой раствор и экстрагировали этилацетатом (30 мл). Органический слой промывали солевым раствором (10 мл), высушивали с помощью безводного сульфата магния и затем концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель FL60D (50 г), Fuji Silysia, гексан/этилацетат (5:1)) для получения сложного неочищенного изопропилового эфира 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-20-этил-PGE (соединение (25)) (0,70 г, 94,6%). Неочищенное соединение (25) очищали с помощью препаративной ВЭЖХ для получения соединения (25) в виде бесцветного масла. Выход 245,8 мг (35,1%). Спектры Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) и С-ЯМР (50 МГц, CDCl) для соединения (25) показаны на фигурах 17 и 18, соответственно.
Пример синтеза 10
Соединение (26) (8,71 г, 20,2 ммоля) растворяли в 1,2-дихлорэтане (70 мл) и добавляли 1,1'-тиокарбонилдиимидазол (5,41 г, 30,3 ммоля). Раствор перемешивали при 70°С в течение часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель BW-300SP (650 г), Fuji Silysia, гексан/этилацетат (1:1)) для получения соединения (27) в виде светло-желтого масла (10,61 г, 97,0%).
3
BuSnH (11,21 г, 38,5 ммоля) растворяли в толуоле (224 мл) и нагревали в колбе с обратным холодильником. Раствор соединения (27) (10,41 г, 19,2 ммоля) в толуле (208 мл) добавляли по каплям в реакционную смесь при температуре флегмы в течение 70 минут. И затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали при пониженном давлении для получения неочищенного соединения (28) в виде светло-желтого масла.
Неочищенное соединение (28) (19,2 ммоля) растворяли в THF (52 мл) и в течение 10 минут по каплям добавляли раствор TBAF (1,0 М в THF, 38,5 мл, 38,5 ммоля). Через час к раствору по каплям добавляли раствор TBAF (1,0 М в THF, 19,2 мл, 19,2 ммоля). После перемешивания в общей сложности в течение 3,5 часов, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель BW-300SP (1000 г), Fuji Silysia, гексан/этилацетат (1:1)) для получения соединения (29) в виде светло-желтого масла (4,01 г, 69,3%).
Соединение (31) получали из соединения (29) с помощью окисления Шверна и введения ω-цепи.
Соединение (31) (807,4 мг, 1,88 ммоля) гидрировали в этилацетате (8 мл) в присутствии 10% палладированного угля при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь фильтровали через целит и фильтрат концентрировали при пониженном давлении для получения неочищенного соединения (32) в виде светло-коричневого масла.
Неочищенное соединение (32) (1,88 ммоля) растворяли в EtOН (8 мл). К раствору по каплям добавляли 1 N раствор NaOH (7,4 мл, 7,4 моля) при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов и затем охлаждали с помощью льда. К реакционной смеси по каплям добавляли 1 N HCl (7,1 мл), чтобы довести рН среды приблизительно до 3-4. Затем реакционную смесь экстрагировали ТВМЕ (30 мл). Органический слой промывали водой (10 мл) и солевым раствором (10 мл), высушивали с помощью безводного сульфата магния и затем концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, включающий 15% воды, FL-60D (80 г), Fuji Silysia, гексан/этилацетат (2:1)) для получения соединения (33) в виде светло-желтого масла (481,4 мг, 68,8%).
1α
3
3
1
13
В соответствии со способом, описанным в примере синтеза 9, сложный изопропиловый эфир 11-дезокси-13,14-дигидро-15-кето-16,16-дифтор-PGF (соединение (34)) получали из соединения (33) в виде бесцветного масла. Выход: 166,6 мг (реакционная стадия 91,9%: очистка ВЭЖХ: извлечение: 55,4%). Спектры Н-ЯМР (200 МГц, CDCl) и С-ЯМР (50 МГц, CDCl) для соединения (34) показаны на фигурах 19 и 20, соответственно.