ФОТОАКТИВИРУЕМОЕ ХИМИЧЕСКОЕ ОБЕСЦВЕЧИВАНИЕ КРАСИТЕЛЕЙ

1. Способ зондирования множественных мишеней в биологическом образце, включающий:
(а) связывание по меньшей мере одного зонда с одной или более чем одной мишенью, присутствующей в биологическом образце, содержащем множественные мишени;
(б) обнаружение сигнала от по меньшей мере одного зонда, связанного на стадии (а);
(в) приведение образца, содержащего связанный зонд со стадии (а), в контакт с реагентом переноса электрона;
(г) облучение образца со стадии (в);
(д) связывание по меньшей мере одного зонда с одной или более чем одной мишенью, присутствующей в образце со стадии (г); и
(е) обнаружение сигнала от зонда, связанного на стадии (д).
2. Способ по п. 1, где зонд на стадии (а) содержит генератор оптического сигнала, и сигнал, наблюдаемый на стадии (б), представляет собой оптический сигнал.
3. Способ по п. 2, где зонд на стадии (а) содержит генератор флуоресцентного сигнала, и сигнал, наблюдаемый на стадии (б), представляет собой флуоресцентный сигнал.
4. Способ по п. 1, где облучение образца на стадии (г) осуществляют в присутствии буфера при рН 5-9.
5. Способ по п. 1, где облучение образца на стадии (г) осуществляют посредством воздействия на образец светом с длиной волны от 350 нм до 1,3 мкм.
6. Способ по п. 5, где облучение образца на стадии (г) осуществляют посредством воздействия на образец светом с длиной волны 400-700 нм.
7. Способ по п. 1, где реагент переноса электрона представляет собой боратную соль, представленную следующей структурной формулой:
1
2
3
1
4
1
4
1
4
где каждый из R, R и R независимо представляет собой алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил, где указанный алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил возможно замещен одним или более чем одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из (С-С)алкила, (C-C)алкокси, (C-C)алкиламино, амино, гидроксила, циано, галогена или нитро;
4
1
4
1
4
1
4
R представляет собой алкил, алкенил или алкинил, где указанный алкил, алкенил или алкинил возможно замещен одним или более чем одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из (С-С)алкила, (C-C)алкокси, (C-C)алкиламино, амино, гидроксила, циано, галогена или нитро; и
+
M выбран из группы, состоящей из органических и неорганических катионов.
1
2
3
4
8. Способ по п. 7, где каждый из R, R и R представляет собой возможно замещенный арил, и R представляет собой возможно замещенный алкил.
1
2
3
4
9. Способ по п. 8, где каждый из R, R и R представляет собой незамещенный фенил, R представляет собой незамещенный бутил, и боратная соль представляет собой трифенилбутилборатную соль.
+
+
+
+
10. Способ по п. 7, где M представляет собой неорганический катион, выбранный из группы, состоящей из Li, Na или K.
11. Способ по п. 1, где стадии (в)-(е) повторяют один или более чем один раз.
12. Способ по п. 1, где и зонд на стадии (а) и зонд на стадии (д) содержат генератор сигнала, где генератор сигнала на стадии (а) отличается от генератора сигнала на стадии (д).
13. Способ зондирования множественных мишеней в биологическом образце, включающий:
(а) связывание множественных зондов с множественными мишенями, присутствующими в биологическом образце, где множественные зонды включают первый набор зондов и второй набор зондов;
(б) обнаружение первого набора сигналов от первого набора зондов, связанных на стадии (а);
(в) приведение образца, содержащего связанный зонд со стадии (а), в контакт с реагентом переноса электрона;
(г) облучение образца со стадии (в);
(д) генерирование второго набора сигналов от второго набора зондов, связанных на стадии (а);
(е) обнаружение второго набора сигналов.
14. Способ по п. 1, где облучение образца на стадии (г) инициирует фотореакцию, по существу инактивирующую генератор сигнала путем фотоактивируемого химического обесцвечивания.
15. Способ по п. 1, где после стадии (г) не наблюдается обнаружимый сигнал.
16. Способ высокопроизводительного мультиплексного анализа биологического образца, включающий:
процесс циклирования сигнала, где в каждом цикле за окрашиванием и визуализацией следует нанесение реагента переноса электрона и облучение биологического образца.
17. Способ по п. 16, дающий возможность быстрого циклирования сигнала без значительного модифицирования компонентов биологического образца, отличных от зонда.
18. Серия из по меньшей мере двух изображений, показывающих оптически меченные биологические мишени, где:
изображения получены в процессе зондирования множественных мишеней в биологическом образце, включающем:
(а) связывание по меньшей мере одного оптического зонда с одной или более чем одной мишенью, присутствующей в биологическом образце, содержащем множественные мишени;
(б) наблюдение сигнала от оптического зонда, связанного на стадии (а);
(в) приведение образца, содержащего связанный оптический зонд со стадии (а), в контакт с реагентом переноса электрона;
(г) облучение образца со стадии (в);
(д) связывание по меньшей мере одного оптического зонда с одной или более чем одной мишенью, присутствующей в образце со стадии (г); и
(е) наблюдение сигнала от оптического зонда, связанного на стадии (д).