ВАРИАНТ AAV, КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ, В КОТОРЫХ ОН ИСПОЛЬЗУЕТСЯ, А ТАКЖЕ СПОСОБЫ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ ДЛЯ ПЕРЕНОСА ГЕНОВ В КЛЕТКИ, ОРГАНЫ И ТКАНИ

1. Рекомбинантная частица AAV (rAAV), содержащая последовательность капсида AAV SEQ ID NO:5, где геном указанной частицы rAAV содержит инвертированный концевой повтор AAV (ITR) и гетерологичную полинуклеотидную последовательность, которая кодирует фермент, участвующий в развитии лизосомной болезни накопления, где указанный полинуклеотид функционально связан с элементом, контролирующим экспрессию.
2. Частица rAAV по п. 1, где указанный элемент, контролирующий экспрессию, включает конститутивный или регуляторный контролирующий элемент.
3. Частица rAAV по п. 1, где указанный элемент, контролирующий экспрессию, включает тканесецифический элемент, контролирующий экспрессию, или промотор.
4. Частица rAAV по п. 3, где указанный тканесецифический элемент, контролирующий экспрессию, или промотор является специфическим по отношению к печени.
5. Частица rAAV по п. 1, где указанный элемент, контролирующий экспрессию, включает печень-специфический энхансер и промотор.
6. Частица rAAV по п. 1, где указанный элемент, контролирующий экспрессию, представляет собой ApoE-hAAT энхансер-промотор.
7. Частица rAAV по любому из пп. 1-6, где указанная гетерологичная полинуклеотидная последовательность связана с поли-A последовательностью.
8. Частица rAAV по любому из пп. 1-7, где указанная гетерологичная полинуклеотидная последовательность фланкирована 5' и 3'нетранслированными областями.
9. Частица rAAV по любому из пп. 1-8, где указанная гетерологичная полинуклеотидная последовательность фланкирована 5' и/или 3' AAV ITR.
10. Частица rAAV по любому из пп. 1-9, где указанная AAV ITR происходит из AAV2.
11. Частица rAAV по любому из пп. 1-10, где указанная частица rAAV имеет повышенный топизм к гепатоцитам по сравнению с Rh74, AAV2 или AAV8 серотипам.
12. Рекомбинантная частица AAV (rAAV), содержащая капсидный белок VP1, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5, где геном указанной частицы rAAV содержит в 5'-3' направлении:
первый инвертированный концевой повтор AAV (ITR),
печень-специфический энхансер и промотор,
полинуклеотидную последовательность, которая кодирует фермент, участвующий в развитии лизосомной болезни накопления, функционально связанную с печень-специфическиим энхансером и промотором,
поли-A последовательность; и
вторую AAV ITR.
13. Частица rAAV по п. 14, где указанная первая и вторая AAV ITR происходят из AAV2.
14. Частица rAAV по п.14 или 15, где указанные печень-специфические энхансер и промотор представляют собой ApoE-hAAT энхансер-промотор.
15. Частица rAAV по любому из пп. 12-14, где указанная полинуклеотидная последовательность фланкирована 5' и 3' нетранслированными областями.
16. Фармацевтическая композиция, содержащая указанную частицу rAAV по любому из пп. 1-15.
17. Фармацевтическая композиция, содержащая указанную частицу rAAV по любому из пп. 1-15 и фармацевтически приемлемый носитель.
18. Фармацевтическая композиция по п. 16 или 17, где указанная фармацевтическая композиция дополнительно содержит пустой капсид AAV.
19. Фармацевтическая композиция по п.16 или 17, где указанная фармацевтическая композиция дополнительно содержит пустой капсид AAV-Rh74 или пустой капсид, содержащий последовательность капсида AAV SEQ ID NO:5.
20. Способ получения частицы rAAV по любому из пп. 1-15, включающий культивирование хелперной клетки, содержащей рекомбинантную плазмиду, содержащую геном частицы rAAV по любому из пп. 1-15.
21. Способ лечения млекопитающего, нуждающегося в лечении болезни Помпе, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп. 16-19.
22. Способ доставки или переноса гетерологичной полинуклеотидной последовательности млекопитающему, включающий введение указанному млекопитающему рекомбинантной частицы AAV (rAAV), содержащей рекомбинантный векторный геном, содержащий гетерологичную полинуклеотидную последовательность, где гетерологичная полинуклеотидная последовательность кодирует фермент, участвующий в развитии лизосомной болезни накопления, таким образом доставляя или перенося гетерологичную полинуклеотидную последовательность млекопитающему, где рекомбинантная частица AAV содержит последовательность капсида AAV, указанную в п. 1.
23. Способ по п. 22, где указанная гетерологичная полинуклеотидная последовательность функционально связана с элементом, контролирующим экспрессию, предоставляющую транскрипцию указанной гетерологичной полинуклеотидной последовательности.
24. Способ лечения млекопитающего с дефицитом фермента, участвующего в развитии лизосомной болезни накопления, включающий: (a) предоставление рекомбинантной частицы AAV (rAAV), содержащей последовательность AAV капсида SEQ ID NO:5, где векторный геном содержит гетерологичную полинуклеотидную последовательность, кодирующую фермент, который может корректировать недостаточную экспрессию или функцию белка, где гетерологичная полинуклеотидная последовательность функционально связана с элементом, контролирующим экспрессию, предоставляющую транскрипцию указанной гетерологичной полинуклеотидной последовательности; и (b) введение количества рекомбинантной частицы AAV в млекопитающее, где указанный фермент экспрессируется у млеуопитающего.
25. Способ по п. 22 или 24, где указанная гетерологичная полинуклеотидная последовательность или указанный фермент, участвующего в развитии лизосомной болезни накопления, экспрессируется в количестве, имеющим терапевтический эффект на млекопитающее.
26. Способ по п. 22 или 24, где указанной лизосомной болезнью является болезнь Помпе.
27. Способ по п. 22 или 24, где указанное млекопитающее страдает от болезни Помпе.
28. Способ по п. 22 или 24, где фермент, участвующего в развитии лизосомной болезни накопления, экспрессируется в клетке, ткани или органе указанного млекопитающего.
29. Способ по п. 28, где указанная клетка включает секреторную клетку.
30. Способ по п. 28, где указанная клетка включает эндокринную клетку.
31. Способ по п. 28, где указанная клетка включает гепатоцит, эпителиальную клетку или тотипотетную, плюрипотентную или мультипотентную стволовую клетку.
32. Способ по п. 28, где указанная ткань или орган указанного млекопитающего включает печень.
33. Способ по любому из пп. 21-32, где указанное млекопитающее продуцирует недостаточное количество фермента, участвующего в развитии лизосомной болезни накопления, или дефектный или аберрантный фермент, участвующий в развитии лизосомной болезни накопления.
34. Способ по любому из пп. 21-33, где указанный вектор AAV доставляют внутривенно, внутриартериальное, внутримышечное, подкожно, путем интубации, через катетер, или внутрь полости.
35. Способ по любому из пп. 21-34, где указанное млекопитающее представляет собой человека.
36. Способ по любому из пп. 21-35, где указанное млекопитающее является сероположительными по AAV серотипу иному, чем AAV-Rh74.
37. Способ по любому из пп. 21-36, где указанное млекопитающее является сероположительными по AAV серотипу AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 или AAV11.
38. Способ по любому из пп. 21-35, где указанное млекопитающее является сероотрицательным или сероположительными по AAV-Rh74.
39. Способ по любому из пп. 21-38, дополнительно включающий введение пустого капсида AAV.
40. Способ по любому из пп. 21-39, дополнительно включающий введение пустого капсида AAV-Rh74 или пустого капсида, содержащего последовательность капсида AAV SEQ ID NO:5.