СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АДГЕЗИВНОЙ АКТИВНОСТИ ШТАММОВ ДРОЖЖЕПОДОБНЫХ ГРИБОВ CANDIDA ALBICANS

2
Способ определения адгезивной активности штаммов дрожжеподобных грибов Candida albicans, заключающийся в том, что из двух суточной культуры грибов готовят 3 мл рабочей суспензии клеток в фосфатном буфере с pH 5.6±0.1 точно до 0,5 по стандарту мутности Мак-Фарланда, проводят измерения оптической плотности рабочей суспензии клеток, параллельно с этим готовят нитроцеллюлозную пленку с иммобилизованным гемоглобином, для приготовления которой к коллоксилину (нитроцеллюлоза) в количестве 0,06 г добавляют 1,25 мл бутилацетата, 0,75 мл толуола и 0,06 мл глутарового альдегида и 1-3 капли гексана, все перемешивают, полученный раствор выливают в чашку Петри и сушат под вентилятором до образования сухой пленки, нитроцеллюлозную пленку помещают в раствор гемоглобина, приготовленного из 0,05 г гемоглобина, разведенного в 5 мл фосфатного буферного раствора с pH 7, и инкубируют 2 часа при комнатной температуре, полученную пленку высушивают, нитроцеллюлозную пленку с иммобилизованным гемоглобином площадью 7 см помещают в пробирку с рабочей суспензией клеток после предварительного измерения ее оптической плотности и инкубируют в течение 120 мин при температуре 35°C, встряхнув несколько раз пробирку, для получения однородной взвеси клеток, снова измеряют оптическую плотность суспензии клеток, количество адгезировавшихся клеток на гемоглобин, иммобилизованный на нитроцеллюлозную пленку, определяют по разнице начальной и конечной оптической плотности суспензии клеток.