КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ УСИЛЕНИЯ СТАБИЛЬНОСТИ МИКРОБОВ
COMPOSITIONS AND METHODS FOR ENHANCING MICROBIAL STABILITY

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Композиции и способы для усиления стабильности микроорганизмов, в частности при применении микроорганизмов по отношению к семенам.
ПРЕДПОСЫЛКИ К СОЗДАНИЮ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Рост растения зависит по меньшей мере в некоторой степени от взаимодействий между растением и микроорганизмами, которые обитают в окружающей почве. Например, симбиоз между грамотрицательными почвенными бактериями, Rhizobiaceae и Bradyrhizobiaceae, и бобовыми растениями, такими как соя, является убедительно подтвержденным документальными доказательствами. Биохимическая основа этих взаимоотношений предусматривает обмен молекулярными сигналами, при котором сигнальные соединения, передаваемые от растения к бактериям, включают флавоны, изофлавоны и флаваноны, а сигнальные соединения, передаваемые от бактерий к растению, которые включают конечные продукты экспрессии брадиризобиальных и ризобиальных nod-генов, известны как липохитоолигосахариды (LCO). Симбиоз между этими бактериями и бобовыми позволяет бобовым фиксировать атмосферный азот, необходимый для роста растений, таким образом устраняется потребность в азотных удобрениях. Поскольку азотные удобрения могут приводить к значительному увеличению стоимости сельскохозяйственных культур и связаны с рядом загрязняющих эффектов, в сельскохозяйственной промышленности продолжаются попытки использования этого биологического взаимоотношения и разработки новых средств и способов для улучшения урожайности растений без увеличения использования удобрений на основе азота.
Другая известная и хорошо изученная симбиотическая ассоциация между растениями и почвенными микроорганизмами включает арбускулярные микоризные (AM) грибы. Эта группа грибов, недавно переименованная Glomeromycota, широко распространена в царстве растений, включая покрытосеменные, голосеменные, птеридофиты и некоторые бриофиты (Smith and Read, 2008). Среди покрытосеменных по меньшей мере 80% видов могут образовывать симбиозы с AM, единственными главными исключениями являются Brassicaceae и Chenopodiaceae. Арбускулярные микоризные грибы способны к переносу редких или плохо растворимых минеральных питательных веществ, таких как фосфор, цинк и медь, из почвы к растению, которое в свою очередь обеспечивает гриб углеводами. Этот обмен питательных веществ может быть жизненно важным, если плодородность почвы и доступность воды являются низкими, - условия, которые сильно ограничивают сельскохозяйственное производство в большинстве частей мира (Smith, et at., Mycorrhizal symbiosis. 787 pp., Academic Press. (2008)).
В дополнение к симбиотическим взаимоотношениям с микроорганизмами для здорового роста растению нужно извлекать из почвы различные элементы, такие как фосфор и питательные микроэлементы (медь, железо, цинк, и т.д.). В почвах часто может не хватать этих элементов, или в них могут содержаться формы элементов, которые не могут быть легко усваиваемыми растением. Удобрения, как правило, вносят в почвы для увеличения количества фосфора, поглощаемого растением. Однако подавляющая часть внесенного фосфора быстро преобразуется в формы, которые не могут использоваться растением. Различные штаммы грибов Penicillium (например, P. bilaiae) и Rhizobium spp. вносили в почву для облегчения поглощения фосфора растением. См., например, патенты США №5026417 и №5484464 и публикацию заявки на патент США №2010/0099560.
Предпринимаются продолжающиеся усилия для эксплуатации этих типов взаимоотношений между растениями и микроорганизмами с целью повышения роста растения и урожайности. Одна из таких мер в области инокулянтов с особыми усилиями посвящена усовершенствованию технологий "наносимых на семена" инокулянтов и, в частности, увеличению выживаемости инокулянтов при нанесении их на семена. Одна из таких причин, обуславливающих низкую выживаемость инокулянтов, включает, среди прочего, присутствие несовместимых соединений, присутствующих при обработках семян. Такие соединения могут включать консерванты или другие биоциды, используемые в ингредиентах для обработки семян.
В патенте США №4149869 раскрыты семена, покрытые смесью, содержащей соль казеинат и жизнеспоспобные бактерии-ризобии.
В ЕР публикации заявки на патент США №0454291 раскрыт способ производства усовершенствованного инокулянта Rhizobium.
В патенте США №5106648 раскрыт способ нанесения покрытия на семена, однако, в раскрытии утверждается, что необходимо использовать штаммы Rhizobia, которые являются устойчивыми к фунгицидам, что позволяет одновременно покрывать семена фунгицидами.
В публикации заявки на патент США №2008/0132411 раскрыт способ повышения живучести и жизнеспособности инокулянтов микроорганизмов, наносимых на поверхность семян, предусматривающий этап покрытия семян смесью, содержащей углевод, сахарный спирт и микроорганизмы.
В публикации заявки на патент США №2012/0208699 раскрыты способы и композиции для снижения слипания обработанных семян, включая повышающие выживаемость любого полезного микроорганизма, включенного в композицию или ее смеси, и/или повышающие урожайность растений, растущих из семян, к которым применяется обработка.
В публикации заявки на патент США № WO 1994/06732 раскрыт способ получения состава инокулянта в виде смачиваемого порошка для применения к бобовым культурам.
В публикации заявки на патент США № WO 2006/071369 раскрыт способ получения жидкого инокулянта, содержащего высушивающее средство, где способ может повышать живучесть и стабильность бактерий в жидких инокулянтах в упаковке и при нанесении на семена.
Dey, В.P., Engley Jr., F.В., (1994). Neutralization of antimicrobial chemicals by recovery media. J. Microbiol. Methods. 19: 51-58 (раскрыта возможность нейтрализации различных противомикробных средств с применением промывочной среды для извлечения штамма АТСС 6532 Staphylococcus aureus из дренажных поверхностей, подверженных действию коммерческого фенола и соединения четвертичного аммония).
Тем не менее, сохраняется потребность в композициях и способах, которые могут повысить жизнеспособность микроорганизмов в условиях, когда соединения, которые не являются совместимыми с инокулянтами на основе микробов, применяются как часть обработки семян.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В данном документе описаны композиции, которые повышают выживаемость одного или нескольких микроорганизмов, содержащие по меньшей мере одно соединение, включающее одно или несколько стабилизирующих микробов соединений и по меньшей мере один второй ингредиент, выбранный из групп (А)-(Е), где группа (А) представляет собой фунгицид, группа (В) представляет собой инсектицид, группа (С) представляет собой нематоцид, группа (D) представляет собой акарицид, группа (Е) представляет собой гербицид и группа (F) представляет собой удобрение. В одном варианте осуществления одно или несколько стабилизирующих микробов соединений могут включать соединения, выбранные из группы, состоящей из дрожжевого экстракта, казеината кальция, молока, мочевины, гематиновых средств, мясного экстракта, аммиака, аминокислот, солей аммония, солей трехвалентного железа, солей двухвалентного железа, глюконолактона, глутатиона, лецитина, полисорбатов, альбумина, пептонов (например, соевых пептонов) и их комбинаций.
В другом варианте осуществления композиция содержит один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов, таких как один или несколько биологически активных ингредиентов. Биологически активные ингредиенты могут включать одну или несколько сигнальных молекул растения или один или несколько полезных микроорганизмов. В конкретном варианте осуществления один или несколько биологически активных ингредиентов могут включать один или несколько липохитоолигосахаридов (LCO), один или несколько хитоолгигосахаридов (СО), одно или несколько хитиновых соединений, один или несколько флавоноидов, один или несколько нефлавоноидных индукторов nod-гена и их производных, один или несколько каррикинов и их производных или любую их комбинацию сигнальных молекул. В другом варианте осуществления один или несколько полезных микроорганизмов
Далее в данном документе описан способ повышения выживаемости одного или нескольких микроорганизмов. В одном варианте осуществления способ повышения выживаемости одного или нескольких микроорганизмов предусматривает добавление в композицию для обработки семян одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений, которые ингибируют противомикробную активность одного или нескольких противомикробных соединений, и добавление одного или нескольких микроорганизмов в композицию для обработки семян. В одном варианте осуществления одно или несколько стабилизирующих микробов соединений могут включать дрожжевой экстракт, казеинат кальция, молоко, мочевину, гематиновые средства, мясной экстракт, аммиак, аминокислоты, соли аммония, соли трехвалентного железа, соли двухвалентного железа, глюконолактон, глутатион, лецитин, полисорбаты, альбумин, пептоны и их комбинации. В другом варианте осуществления одно или несколько противомикробных соединений могут включать бактериостат, бактерицид или их комбинацию.
Наконец, способ нанесения покрытия на семя описан в данном документе. В одном варианте осуществления способ предусматривает добавление в композицию для обработки семян одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений, которые ингибируют противомикробную активность одного или нескольких противомикробных соединений, с добавлением одного или нескольких микроорганизмов в композицию для обработки семян, и применение обработки семян к семени.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Описанные варианты осуществления относятся к композициям и способам усиления роста растений.
Определения
Подразумевается, что применяемые в настоящем документе формы единственного числа также включают формы множественного числа, если из контекста явно не следует иное.
Используемое в данном документе выражение "стабилизирующее(ие) микробов соединение(я)" означает любое соединение, способное поддерживать и/или увеличивать жизнеспособность, выживаемость, и/или КОЕ одного или нескольких микробов. Используемое в данном документе выражение "стабилизирующее(ие) микробов соединение(я)" дополнительно означает любое соединение, способное предотвращать и/или понижать количество смертей и/или уровень смертности одного или нескольких микробов.
Используемый в данном документе термин "молочный субстрат" означает молоко животного, а также компоненты молока (например, сливки) и комбинации молока и сливок (например, половина на половину). Используемый в данном документе термин "молоко" означает цельное молоко, продуцируемое животным, а также его обработанные формы. В действительности любая подходящая форма молока находит применение в данных вариантах осуществления, включая молоко, которое включает или не включает сыворотку, а также цельное молоко, сырое молоко, обезжиренное молоко, сгущенное молоко, восстановленное молоко, концентрированное молоко, пастеризованное молоко, непастеризованный, гомогенизированный, негомогенизированный или регидратированный молочный порошок.
2
2
Используемый в данном документе термин "мочевина" означает органическое соединение с химической формулой NHCONH, а также ее изомеры, соли, сольваты и производные.
Используемый в данном документе термин "аминокислота" означает природные и синтетические аминокислоты, а также аминокислотные аналоги и аминокислотные миметики, которые функционируют аналогично природным аминокислотам. Природными аминокислотами являются таковые, которые кодируются генетическим кодом, а также те аминокислоты, которые после подвергаются модификации, например, гидроксипролин, y-карбоксиглутамат и О-фосфосерин. Аминокислота также относится к поли(аминокислоте), такой как пептиды, полипептид и белки.
Термин "аминокислотные аналоги" означает соединения, которые характеризуются такой же основной химической структурой, что и природные аминокислоты, т.е., углерод, который связан с водородом, карбоксильной группой, аминогруппой и группой R. Примеры аминокислотных аналогов включают без ограничения гомосерин, норлейцин, метионинсульфоксид, метионин метилсульфоний. Такие аналоги характеризуются модифицированными группами R (например, норлейцин) или модифицированными пептидными остовами, но сохраняют такую же основную химическую структуру, как и природные аминокислоты.
"Неприродные аминокислоты" не кодируются генетическим кодом и могут, но не обязательно, иметь такую же основную структуру, как и природные аминокислоты. Неприродные аминокислоты включают без ограничения азетидин-карбоновую кислоту, 2-аминоадипиновую кислоту, 3-аминоадипиновую кислоту, бета-аланин, аминопропионовую кислоту, 2-аминобутировую кислоту, 4-аминобутировую кислоту, 6-аминокапроновую кислоту, 2-аминогептановую кислоту, 2-аминоизомасляную кислоту, 3-аминоизомасляную кислоту, 2-аминопимелиновую кислоту, третичный бутилглицин, 2,4-диминоизомасляную кислоту, десмозин, 2,2’-диаминопимелиновую кислоту, 2,3-диаминопропионовую кислоту, N-этилглицин, N-этиласпарагин, гомопролин, гидроксилизин, алло-гидроксилизин, 3-гидроксипролин, 4-гидроксипролин, изодесмозин, алло-изолейцин, N-метилаланин, N-метилглицин, N-метилизолейцин, N-метилпентилглицин, N-метилвалин, нафтилаланин, норвалин, орнитин, пентилглицин, пипеколиновую кислоту и тиопролин.
Термин "аминокислотные миметики" означает химические соединения, которые характеризуются структурой, отличной от общей химической структуры аминокислоты, но которые функционируют аналогично природным аминокислотам.
Аминокислоты могут обозначаться в данном документе или общеизвестными трехбуквенными символами, или с помощью однобуквенного символа, рекомендованного Комиссией по биохимической номенклатуре IUPAC-IUB. Нуклеотиды, подобным образом, могут обозначаться их общепринятыми однобуквенными кодами.
6
10
6
Используемый в данном документе термин "глюконолактон" означает молекулы, которые имеют молекулярную формулу СНО, молярную массу приблизительно 178,14 г/моль и структуру
и включает их изомеры, соли и сольваты.
10
17
3
6
-1
Используемый в данном документе термин "глутатион" означает молекулы, которые имеют молекулярную формулу CHNOS, молярную массу приблизительно 307,32 г/моль и структуру
и включает их изомеры, соли, и сольваты.
Используемый в данном документе термин "лецитин" означает смесь фосфатидов. Термин лецитин, используемый в данном документе без модификации прилагательного, может относиться к каждой из или к обеим ацетилированной и неацетилированной формам лецитина.
Используемый в данном документе термин "полисорбат" означает олеатные сложные эфиры сорбитола и ангидриды сорбитола, обычно сополимеризованные с окисью этилена.
Используемый в данном документе термин "альбумин" используется взаимозаменяемо с термином "сывороточный альбумин" и не предназначен для определения источника альбумина. Термин "альбумин", используемый в данном документе, включает любые производные альбумина или модифицированные версии альбумина. Таким образом, термин "альбумин", используемый в данном документе, может относиться или к альбумину, выделенному из натурального источника, такого как кровь или серозные жидкости, или он может относиться к химически синтезированному или рекомбинантно продуцированному альбумину или вариантам альбумина, или производным нативных альбуминов.
Используемое в данном документе выражение "стабильный" является термином, который известен из уровня техники, и в одном аспекте "стабильный" означает способность микроорганизма оставаться в жизнеспособной форме до применения, как раскрыто в данном документе (например, к растению и/или части растения, для усиления роста растения и/или части растения, усиления прорастания семян, усиления всхожести проростков, улучшения фиксации азота, улучшения солюбилизации фосфата и т.д.).
Используемый в данном документе термин "полезный(е) с сельскохозяйственной точки зрения ингредиент(ы)" означает любое средство или комбинацию средств, способных вызывать или обеспечивать полезный и/или применимый эффект в сельском хозяйстве.
Используемое в данном документе выражение "биологически активный(е) ингредиент(ы)" означает биологически активные ингредиенты (например, сигнальные молекулы растения, другие микроорганизмы и т.д.), отличные от стабилизирующих бактерии соединений, описанных в данном документе.
Используемые в данном документе термины "сигнальная(ые) молекула(ы)" или "сигнальная(ые) молекула(ы) растения", которые могут взаимозаменяемо использоваться с выражением "средство(а), усиливающее(ие) рост растения", в широком смысле означают любое средство, встречаемое в природе и у растений, и у микробов, и синтетическое (и которое может быть неприродным), которое прямо или косвенно активирует или инактивирует биохимический путь растения, что приводит к повышению или усилению роста растения по сравнению с необработанными растениями или растениями, полученными из необработанного семени.
Используемые в данном документе термины "эффективное количество", "эффективная концентрация" или "эффективная доза" означают количество, концентрацию или дозу одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений, достаточных для ингибирования противомикробной активности одного или нескольких соединений. Фактическая эффективная доза в абсолютном значении зависит от факторов, включающих без ограничения количество (например, концентрацию, объем противомикробного соединения и т.д.) противомикробного соединения для ингибирования, синергических или антагонистических взаимодействий между другими активными или инертными соединениями, которые могут повышать или понижать противомикробные ингибирующие эффекты/противомикробную активность одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений и стабильность одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений в композиции и/или в качестве обработок растения или части растения. "Эффективное количество", "эффективную концентрацию" или "эффективную дозу" одного или несколько стабилизирующих микробов соединений можно определить, например, с помощью обычного эксперимента доза-эффект.
Используемый в данном документе термин "носитель" означает "агрономически приемлемый носитель". "Агрономически приемлемый носитель" означает любой материал, который можно применять для доставки активных веществ (например, стабилизирующих микробов соединений, описанных в данном документе, полезного(ых) с сельскохозяйственной точки зрения ингредиента(ов), биологически активного(ых) ингредиента(ов) и т.д.) к растению или части растения (например, семени), и предпочтительно этот носитель можно применять (к растению, части растения (например, семени), или почве) без отрицательного воздействия на рост растения, структуру почвы, почвенный дренаж или подобное.
Используемый в данном документе термин "питательное(ые) вещество(а)" означает любое питательное вещество (например, витамины, макроэлементы, питательные микроэлементы, микроэлементы, органические кислоты и т.д.), необходимое для роста растения, здоровья растения и/или развития растения.
Используемый в данном документе термин "биостимулятор(ы)" означает любое средство или комбинацию средств, способных улучшать метаболические или физиологические процессы в растениях и почвах.
Используемый в данном документе термин "гербицид(ы)" означает любое средство или комбинацию средств, способных уничтожать сорняки и/или ингибировать рост сорняков (ингибирование при определенных условиях является обратимым).
Используемый в данном документе термин "фунгицид(ы)" означает любое средство или комбинацию средств, способных уничтожать грибы и/или ингибировать рост грибов.
Используемый в данном документе термин "инсектицид(ы)" означает любое средство или комбинацию средств, способных уничтожать одно или несколько насекомых и/или ингибировать рост одного или нескольких насекомых.
Используемый в данном документе термин "нематоцид(ы)" означает любое средство или комбинацию средств, способных уничтожать одну или несколько нематод и/или ингибироать рост одной или нескольких нематод.
Используемый в данном документе термин "акарицид(ы)" означает любое средство или комбинацию средств, способных уничтожать одного или нескольких из акарид и/или ингибировать рост одного или нескольких из акарид.
Используемый в данном документе термин "усиленный рост растения" означает повышенную урожайность растения (например, увеличение биомассы, увеличение количества плодов, увеличение количества семенных коробочек или или их комбинацию, которые можно измерять в бушелях на акр), увеличение количества корней, увеличение массы корней, увеличение корневого объема, увеличение площади листа, повышение густоты стояния растений, повышение мощности растения, ускоренную всхожесть проростков (т.е., усиленная всхожесть), ускоренное прорастание, (т.е., усиленное прорастание) или их комбинации.
Используемые в данном документе термины "растение(я)" и "часть(и) растения(й)" означают все растения и популяции растений, такие как желаемые и нежелаемые дикие растения или культурные растения (включая природные культурные растения). Культурные растения могут быть растениями, которые могут быть получены традиционной селекцией растений и способами оптимизации, или способами биотехнологии и генной инженерии, или комбинацией этих способов, включая трансгенные растения и включая сорта растений, охраняемые или не охраняемые правами селекционеров. Под частями растения следует понимать все части и органы растений над и под землей, такие как побег, лист, цветок и корень, в качестве примеров которых могут быть упомянуты листья, иголки, стебли, стволы, цветы, плоды, фрукты, семена, корни, клубни и корневища. Также части растения включают в себя собранный материал, вегетативный и генеративный материал для размножения (например, черенки, клубни, корневища, отростки, семена и т.д.).
Используемый в данном документе термин "инокулюм" означает любую форму микробных клеток или спор, которая способна к распространению на или в почве, когда условия температуры, влажности и т.д. являются пригодными для роста микробов.
2
3
Используемый в данном документе термин "азотфиксирующий(е) организм(ы)" означает любой организм, способный превращать атмосферный азот (N) в аммиак (NH).
Используемый в данном документе термин "фосфат-солюбилизирующий организм" означает любой организм, способный превращать нерастворимый фосфат в растворимую форму фосфата.
Используемый в данном документе термин "спора" имеет свое обычное значение, которое хорошо известно и понятно специалистам в данной области. Используемый в данном документе термин "спора" означает микроорганизм в его состоянии покоя, защищенном состоянии.
Используемый в данном документе термин "источник" конкретного элемента означает соединение этого элемента, которое по меньшей мере в условиях рассматриваемой почвы не делает элемент полностью доступным для поглощения растением.
КОМПОЗИЦИИ
Раскрытые композиции содержат один или несколько стабилизирующих микробов соединений, описанных в данном документе. В некоторых вариантах осуществления композиция может быть в виде жидкости, геля, взвеси, твердого вещества или порошка (смачиваемого порошка или сухого порошка).
В конкретном варианте осуществления одно или несколько стабилизирующих микробов соединений являются соединениями, способными ингибировать одно или несколько противомикробных соединений.
Используемый в данном документе термин "противомикробное(ые) соединение(я)" включает биоцид (т.е. бактериостаты или бактерициды). Неорганичивающие примеры биоцидов включают представленные ниже.
Бактерициды
Используемый в данном документе "бактерицид" является средством, которое уничтожает бактерии. Бактерицид может быть дезинфицирующим средством, антисептическим средством или антибиотиком.
Неорганичивающими примерами бактерицидных дезинфицирующих средств могут быть:
активный хлор (т.е., гипохлориты, хлорамины, дихлоризоцианурат и трихлоризоцианурат, мокрый хлор, диоксид хлора и т.д.),
активный кислород (пероксиды, такие как перуксусная кислота, персульфат калия, перборат натрия, перкарбонат натрия и пергидрат мочевины),
йод (йодповидон (повидон-йод, бетадин)), раствор Люголя, настой йода, йодированные неионогенные поверхностно-активные вещества),
концентрированные спирты (в основном этанол, 1-пропанол, называемый также н-пропанол, и 2-пропанол, называемый изопропанолом, и их смеси; дополнительно 2-феноксиэтанол и 1- и 2-феноксипропанолы),
фенольные вещества (такие, как фенол (также называемая "карболовая кислота"), крезолы (называемый "лизол" в комбинации с жидкими калиевыми мылами), галогенированные (хлорированные, бромированные) фенолы, такие как гексахлорофен, триклозан, трихлорфенол, трибромфенол, пентахлорфенол, Дибромол и их соли),
катионные поверхностно-активные вещества, такие как некоторые катионы четвертичного аммония (такие как бензалконий хлорид, бромид или хлорид цетилтриметиламмония, дидецилдиметиламмония хлорид, цетилпиридиний хлорид.бензетония хлорид) и другие нечетвертичные соединения, такие как хлоргексидин, глюкопротамин, октенидин дегидрохлорид и т.д.,
сильные окислители, такие как озон и растворы перманганата;
тяжелые металы и их соли, такие как коллоидное серебро, нитрат серебра, хлорид ртути, соли фенил ртути, сульфат меди, хлорид оксида меди и т.д. Тяжелые металлы и их соли являются наиболее токсичными и опасными для окружающей среды бактерицидами, и, таким образом, их применение сильно ограничено или исключено; кроме того, также
должным образом концентрированные сильные кислоты (фосфорная, азотная, серная, амидосерная, толуолсульфоновая кислоты) и
щелочи (гидроксиды натрия, калия, кальция) с рН<1 или >13, особенно при повышенной температуре (выше 60°C), уничтожающие бактерий.
Неорганичивающими примерами бактерицидного антисептического средства могут быть:
должным образом разведенные хлорные препараты (например, раствор Дакина, 0,5% раствор гипохлорита натрия или калия, 0,5-1% раствор бензолсульфохлорамида натрия с рН, доведенным до рН 7-8 (хлорамин Б)),
некоторые йодные препараты, такие как йодоповидон в различных галогеновых препаратах (мазь, растворы, пластыри для ран), в прошлом также раствор Люголя,
пероксиды, такие как растворы пергидрата мочевины и забуференные растворы перуксусной кислоты с рН 0,1-0,25%,
спирты с добавками антисептических средств, используемые в основном для обеззараживания кожи,
слабые органические кислоты, такие как сорбиновая кислота, бензойная кислота, молочная кислота и салициловая кислота,
некоторые фенольные соединения, такие как гексахлорофен, триклозан и Дибромол, и
катионоактивные соединения, такие как 0,05-0,5% бензалконий, 0,5-4% хлоргексидин, 0,1-2% растворы октенидина.
Неограничивающими примерами бактерицидного антибиотика могут быть пенициллин, цефалоспорины и аминогликозидные антибиотики.
Другие бактерицидные антибиотики включают фторхинолоны, нитрофураны, ванкомицин, монобактамы, ко-тримоксазол и метронидазол.
Предпочтительные бактерициды;
галогенсодержащие соединения, такие как
бронопол - активный 2-бром-2-нитро-1,3-пропандиол,
довисил 75 - активный 1-(3-хлораллил)-3,5,7-триаза-1-азонийадамантанхлорид,
DBNPA - активный дибромнитрилопропионамид;
органические соединения серы, включая изотиазолоны, такие как
проксел (Nipacide) - активный 1,2-бензизотиазолин-3-он,
катон - активный 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-он, 2-метил-4-изотиазолин-3-он;
азотсодержащие соединения, такие как
гермаль II (диазолинидил мочевина),
трис нитро (трис(гидроксиметил)нитрометан);
фенольные смолы, такие как
довицид (о-фенилфенат натрия),
Preventol D2 (бензилгемиформаль);
неорганические вещества, такие как
арсенаты меди,
оксид меди;
металлоорганические соединения, такие как
соединения мышьяка, меди, ртути;
соединения четвертичного аммония.
Бактериостаты
Используемый в данном документе "бактериостат" представляет собой средство, как правило химическое, которое предотвращает рост бактерий, но не обязательно уничтожает их или их споры. После удаления бактериостата бактерии, как правило, начинают расти снова.
Неограничивающие примеры бактериостатов включают азид натрия и тимеросол.
Стабилизирующие микробов соединения
Описанные в данном документе стабилизирующие микробов соединения могут включать любое соединение, способное увеличивать выживаемость одного или нескольких микроорганизмов. В одном варианте осуществления одно или несколько стабилизирующих микробов соединений ингибируют активность одного или нескольких биоцидов, описанных в данном документе. В другом варианте осуществления одно или несколько стабилизирующих микробов соединений ингибируют активность одного или нескольких бактерицидов, раскрытых в данном документе. В еще другом варианте осуществления одно или несколько стабилизирующих микробов соединений ингибируют активность одного или нескольких бактериостатов, раскрытых в данном документе. В еще другом варианте осуществления один или несколько стабилизирующих микробов соединений ингибируют активность формальдегида, бензилгемиформаля (фенилметоксиметанол), 2-бром-2-нитро-1,3-пропандиола, 1-(3-хлораллил)-3,5,7-триаза-1-азонийадамантанхлорида, дибромнитрилопропионамида, 1,2-бензизотиазолин-3-она, 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-она, 2-метил-4-изотиазолин-3-она, диазолинидила мочевины, трис(гидроксиметил)нитрометана, о-фенилфената натрия, арсенатов меди, оксида меди, соединений мышьяка, меди, ртути, соединений четвертичного аммония, азида натрия, тимеросола или их комбинаций.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является дрожжевой экстракт. Дрожжевые экстракты широко применимы, например, для вкуса и аромата в пищевой промышленности, в сбраживаемых микроорганизмами средах и в качестве диетических пищевых продуктов. Получение дрожжевого экстракта описано в литературе, см., например, Kelly, М. (1982) Yeast Extract (In: Industrial Enzymology, Godfrey, T. ed.) или Chae, H.J. et al. (2001), Bioresource Technology 76, 253-258. Как правило, его производят путем разложения дрожжей с помощью кислотного гидролиза или с помощью механического или химического разрушения клеток с последующим автолизом эндогенными ферментами для распада макромолекулярных структур дрожжей, в частности белков, до максимального количества растворимого материала. По возможности, экзогенные ферменты, включая протеазы, такие как папаин, добавляют для усиления эффекта собственных ферментов дрожжей. После ферментативного гидролиза дрожжевой экстракт отделяют от клеточного дебриса и, зачастую, пастеризуют и концентрируют.
В другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является казеинат кальция.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является молочный субстрат. В конкретном варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является молоко. В действительности предполагается, что молоко в любой форме будет применимо в соответствии с вариантами осуществления, раскрытыми в данном документе. В некоторых вариантах осуществления находят применение сливкам, полученным из любого пригодного молока.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является мочевина, а также ее изомеры, соли, сольваты и производные.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является гематиновое средство.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является мясной экстракт. Мясной экстракт хорошо известен в данной области.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является аммиак, а также его изомеры, соли, сольваты и производные.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является аминокислота, аминокислотный аналог, неприродная аминокислота, аминокислотный миметик или их комбинация. Аминокислоты, определенные в данном документе, могут обозначаться или с помощью общеизвестных трехбуквенных символов, или с помощью однобуквенного символа, рекомендованного Комиссией по биохимической номенклатуре IUPAC-IUB. Нуклеотиды, подобным образом, могут обозначаться их общепринятыми однобуквенными кодами. В конкретном варианте осуществления аминокислотой является триптофан.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является одна или несколько солей аммония.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является одна или несколько солей трехвалентного железа, солей двухвалентного железа или их комбинации.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является глюконолактон а также его изомеры, соли и сольваты.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является глутатион, а также его изомеры, соли и сольваты.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является лецитин. В конкретном варианте осуществления лецитин включает смеси фосфатидов, обычно полученных из яиц, рыбы, пивных дрожжей и растительных источников, в особенности сои; однако, любая смесь фосфатидов может быть применима в настоящем раскрытии независимо от источника. Четырьмя основными компонентами такой смеси фосфатидов являются фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилинозитол и фосфатидная кислота. Лецитины упоминались в некоторых литературных источниках под следующими названиями: РС-55, этаноламин и серии.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является один или несколько полисорбатов. Неограничивающие примеры полисорбатов включают полисорбат 20 (поли(этиленоксид) (20) сорбитанмонолаурат, Tween 20) или полисорбат 80 (поли(этиленоксид) (80) сорбитанмонолаурат, Tween 80).
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является альбумин. В некоторых вариантах осуществления альбумином является альбумин млекопитающего, или его вариант, или производное. Неограничивающие примеры альбуминов млекопитающего, которые могут быть применимы, включают альбумин человека, говяжий альбумин, овечий альбумин, козий альбумин, альбумин кролика, кошачий альбумин, собачий альбумин, альбумин свиньи, альбумин примата или альбумин грызуна.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующим микробов соединением является пептон. Неограничивающие примеры включают триптические или папаиновые пептоны, которые могут включать триптические пептоны животного или растительного происхождения. В конкретном варианте осуществления расщепленный пептон получают из соевой муки. В другом варианте осуществления пептоном является соевый петон (например, пептоны, полученные из соевой муки). В еще другом варианте осуществления соевый пептон является триптическим соевым бульоном.
В еще другом варианте осуществления стабилизирующее микробов соединение выбрано из группы, состоящей из дрожжевого экстракта, казеината кальция, молока, мочевины, гематиновых средств, мясного экстракта, аммиака, аминокислот, солей аммония, солей трехвалентного железа, солей двухвалентного железа, глюконолактона, глутатиона, лецитина, полисорбатов, альбумина, соевых петонов и их комбинаций.
Носители
Композиции, описанные в данном документе, могут дополнительно содержать один или несколько носителей для доставки одного или нескольких активных веществ, описанных в данном документе (например, стабилизирующие микробов соединения или полезный с сельскохозяйственной точки зрения ингредиент, например, полезные микроорганизмы и т.д.). Неограничивающие примеры носителей, описанных в данном документе, включают жидкости, гели, взвеси или твердые вещества (в том числе смачиваемые порошки или сухие порошки). Выбор вещества-носителя будет зависеть от предполагаемого применения. Носитель может, например, быть совместимым с почвой носителем, совместимым с семенем носителем и/или совместимым с некорневым внесением носителем. В конкретном варианте осуществления носителем является совместимый с семенем носитель.
В одном варианте осуществления носитель представляет собой жидкий носитель. Неограничивающие примеры жидкостей, применяемых в качестве носителей для композиций, описанных в настоящем документе, включают в себя воду, водный раствор или неводный раствор. В конкретном варианте осуществления носителем является вода.
При применении жидкого носителя жидкий носитель может дополнительно включать ростовую среду для культивирования одного или нескольких микробных штаммов, применяемых в описанных композициях. Неограничивающие примеры подходящей питательной среды для микробных штаммов включают в себя среду YEM, среду с дрожжевым экстрактом и маннитом, среду с дрожжевым экстрактом и глицерином, среду Чапека-Докса, картофельно-декстрозный бульон или любую среду, известную специалистам в данной области, совместимую с и/или обеспечивающую питательными веществами для роста микробный штамм, который может быть включен в композиции, описанные в данном документе.
Полезные с сельскохозяйственной точки зрения ингредиенты
Композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов. Неограничивающие примеры полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов включают один или несколько биологически активных ингредиентов, питательных веществ, биостимуляторов, консервантов, полимеров, смачивающих средств, поверхностно-активных веществ, гербицидов, фунгицидов, инсектицидов или их композиций.
Биологически активный(е) ингредиент(ы)
Композиции, описанные в данном документе, могут необязательно включать один или несколько биологически активных ингредиентов, описанных в данном документе. Неограничивающие примеры биологически активных ингредиентов включают сигнальные молекулы растения (например, липо-хитоолигосахариды (LCO), хитоолигосахариды (СО), флавоноиды, хитиновые соединения, жасмоновую кислоту или ее производные, линолевую кислоту или ее производные, линоленовую кислоту или ее производные, каррикины и т.д.) и полезные микроорганизмы (например, Rhizobium spp., Bradyrhizobium spp., Sinorhizobium spp., Azorhizobium spp., Glomus spp., Gigaspora spp., Hymenoscyphous spp., Oidiodendron spp., Laccaria spp., Pisolithus spp., Rhizopogon spp., Scleroderma spp., Rhizoctonia spp., Acinetobacter spp., Arthrobacter spp,, Arthrobotrys spp., Aspergillus spp., Azospirillum spp, Bacillus spp, Burkholderia spp., Candida spp., Chryseomonas spp., Enterobacter spp., Eupenicillium spp., Exiguobacterium spp., Klebsiella spp., Kluyvera spp., Microbacterium spp., Mucor spp., Paecilomyces spp., Paenibacillus spp., Penicillium spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Stenotrophomonas spp., Streptomyces spp., Streptosporangium spp., Swaminathania spp., Thiobacillus spp., Torulospora spp., Vibrio spp., Xanthobacter spp., Xanthomonas spp. и т.д.).
Сигнальная(ые) молекула(ы) растения
В варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут необязательно включать одну или несколько сигнальных молекул растения. В одном варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растения представляют собой один или несколько LCO. В другом варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растения представляют собой один или несколько СО. В еще одном варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растения представляют собой одно или несколько хитиновых соединений. В другом варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растения представляют собой один или несколько флавоноидов. В еще другом варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растения представляют собой один или несколько нефлавоноидных индукторов nod-генов (например, жасмоновая кислота, линолевая кислота, линоленовая кислота и их производные). В еще одном варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растения представляют собой один или несколько каррикинов или их производных. В еще другом варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растения представляют собой один или несколько LCO, один или несколько СО, одно или несколько хитиновых соединений, один или несколько флавоноидов, один или несколько нефлавоноидных индукторов nod-генов и их производные, один или несколько каррикинов и их производные либо любую комбинацию их сигнальных молекул.
LCO
Соединения липохитоолигосахаридов (LCO), также известные из уровня техники как симбиотические Nod-сигналы или Nod-факторы, состоят из олигосахаридной основной цепи β-1,4-связанных остатков N-ацетил-D-глюкозамина ("GlcNAc") с N-связанной ацильной цепью жирной кислоты, конденсированной на невосстанавливающем конце. LCO отличаются по количеству остатков GlcNAc в основной цепи, по длине и степени насыщения ацильной цепи жирной кислоты и по замещениям в восстанавливающих и невосстанавливающих остатках сахара. Подразумевается, что LCO включают в себя все LCO, а также их изомеры, соли и сольваты. Пример LCO представлен ниже формулой I
в которой
G представляет собой гексозамин, который может быть замещен, например, ацетильной группой по азоту, сульфатной группой, ацетильной группой и/или эфирной группой по кислороду,
1
2
3
5
6
7
3
x
y
R, R, R, R, R и R, которые могут быть идентичными или различными, представляют собой Н, СН СО-, CHCO-, где x представляет собой целое число от О до 17, и y представляет собой целое число от 1 до 35, или любую другую ацильную группу, такую как, например, карбамил,
4
R представляет собой алифатическую цепь с одной, двумя, тремя и четырьмя ненасыщенными связями, содержащую по меньшей мере 12 атомов углерода, и n представляет собой целое число от 1 до 4.
LCO могут быть получены (выделены и/или очищены) из бактерий, таких как Rhizobia, например, Rhizobium spp., Bradyrhizobium spp., Sinorhizobium spp. и Azorhizobium spp. Структура LCO является характерной для каждого такого вида бактерий, и каждый штамм может продуцировать несколько LCO с различными структурами. Например, конкретные LCO из S. meliloti также были описаны в патенте США №5549718 и характеризуются формулой II
3
в которой R представляет собой Н или СНСО-, и n равняется 2 или 3.
3
Еще более конкретные LCO включают NodRM, NodRM-1, NodRM-3. При ацетилировании (R=CHCO-) они превращаются в AcNodRM-1 и AcNodRM-3, соответственно (патент США №5545718).
18:1
C
18:1
16:1
C
16:0
LCO из Bradyrhizobium japonicum описаны в патентах США №5175149 и №5321011. В общем, они представляют собой пентасахаридные фитогормоны, содержащие метилфукозу. Описан ряд этих LCO, полученных из В. japonicum: BjNod-V (C); BjNod-V (A, C), BjNod-V (C) и BjNod-V (A, C), при этом "V" указывает на присутствие пяти N-ацетилглюкозаминов; "Ас" обозначает ацетилирование; число после "С" указывает на число атомов углерода в боковой цепи жирной кислоты, а число после ":" указывает на число двойных связей.
LCO, применяемые в композициях по настоящему раскрытию могут быть получены (т.е. выделены и/или очищены) из бактериальных штаммов, которые продуцируют LCO, таких как штаммы Azorhizobium, Bradyrhizobium (включая В. japonicum), Mesorhizobium, Rhizobium (включая R. leguminosarum), Sinorhizobium (включая S. meliloti), и бактериальных штаммов, сконструированных при помощи генной инженерии для продуцирования LCO.
Также настоящее раскрытие охватывает композиции с использованием LCO, полученных (т.е. выделенных и/или очищенных) из микоризного гриба, такого как грибы группы Glomerocycota, например, Glomus intraradicus. Структуры типичных LCO, полученных из этих грибов, описаны в патентном документе WO 2010/049751 (LCO, описанные в этих документах, также называются "Мус-факторами").
Кроме того, настоящее раскрытие охватывает композиции, в которых применяют синтетические соединения LCO, такие, которые описаны в WO 2005/063784, и рекомбинантные LCO, полученные с помощью генной инженерии. Базовая структура встречающихся в природе LCO, может содержать модификации или замещения, обнаруживаемые во встречающихся в природе LCO, таких как описанные в Spaink, Crit. Rev. Plant Sci. 54:257-288 (2000) и D’Haeze, et al., Glycobiology 12:79R-105R (2002). Олигосахаридные молекулы (CO, которые описаны ниже, также являются пригодными в качестве сигнальных молекул растений по настоящему раскрытию) для конструирования LCO, относящиеся к предшественникам, также могут быть синтезированы организмами, сконструированными при помощи генной инженерии, например, как в Samain, et al., Carb. Res. 302:35-42 (1997); Samain, et al., J. Biotechnol. 72:33-47 (1999).
LCO можно использовать при различных формах чистоты и можно применять отдельно или в форме культуры LCO-продуцирующих бактерий или грибов. Способы для обеспечения практически чистых LCO предусматривают просто удаление микробных клеток из смеси LCO и микроба или продолжение выделения и очистки молекул LCO посредством разделения фаз LCO-растворитель с последующей HPLC, как описано, например, в патенте США №5549718. Очистка может быть улучшена посредством повторной HPLC, и очищенные молекулы LCO можно лиофилизировать для длительного хранения.
СО
8
13
5
5
11
4
Хитоолигосахариды (СО) известны из уровня техники как структуры на основе N-ацетилглюкозаминов, связанных β-1-4-связями, определенные как олигомеры хитина, а также как N-ацетилхитоолигосахариды. СО имеют уникальные и различные фрагменты боковой цепи, которые отличают их от молекул хитина [(CHNO)n, № согласно CAS 1398-61-4] и молекул хитозана [(CHNO)n, № согласно CAS 9012-76-4]. Далее представлена типичная литература, в которой описаны структура и получение CO. Van der Hoist, et al., Current Opinion in Structural Biology, 77:608-616 (2001); Robina, et al., Tetrahedron 58:521-530 (2002); Hanel, et al., Planta 232:787-806 (2010); Rouge, et al. Chapter 27, "The Molecular Immunology of Complex Carbohydrates" in Advances in Experimental Medicine and Biology, Springer Science; Wan, et al., Plant Cell 211053-69 (2009); PCT/F 100/00803 (9/21/2000) и Demont-Caulet, et al., Plant Physiol. 120(1).83-92 (1999). CO могут быть синтетическими или рекомбинантными. Способы получения рекомбинантных СО известны из уровня техники. См., например, Samain, et al. (выше); Cottaz, et al., Meth. Eng. 7(4):3M-7 (2005) и Samain, et al., J. Biotechnol. 72:33-47 (1999). Подразумевается, что CO включают в себя их изомеры, соли и сольваты.
Хитиновые соединения
Хитины и хитозаны, которые являются основными компонентами клеточных стенок грибов и экзоскелетов насекомых и ракообразных, также состоят из остатков GlcNAc. Хитиновые соединения включают хитин (IUPAC: N-[5-[[3-ацетиламино-4,5-дигидрокси-6-(гидроксиметил)оксан-2-ил]метоксиметил]-2-[[5-ацетиламино-4,6-дигидрокси-2-(гидроксиметил)оксан-3-ил]метоксиметил]-4-гидрокси-6-(гидроксиметил)оксан-3-ис]этанамид), хитозан (IUPAC: 5-амино-6-[5-амино-6-[5-амино-4,6-дигидрокси-2(гидроксиметил)оксан-3-ил]окси-4-гидрокси-2-(гидроксиметил)оксан-3-ил]окси-2(гидроксиметил)оксан-3,4-диол) и их изомеры, соли и сольваты.
Эти соединения можно получать коммерчески, например, от Sigma-Aldrich, или получать из насекомых, панцирей ракообразных или клеточных стенок грибов. Способы получения хитина и хитозана известны из уровня техники и были описаны, например, в патенте США №4536207 (получение из панцирей ракообразных), Pochanavanich, et al., Lett. Appl. Microbiol. 35: 17-21 (2002) (получение из клеточных стенок грибов) и в патенте США №5965545 (получение из панцирей крабов и гидролиз коммерческого хитозана). Деацетилированные хитины и хитозаны могут быть получены со степенью деацетилирования от менее 35% до более 90% и охватывают широкий спектр молекулярных масс, например, олигомеры низкомолекулярного хитозана с менее 15 кДа и олигомеры хитина с от 0,5 до 2 кДа; хитозан "практической степени чистоты" с молекулярной массой приблизительно 15 кДа и высокомолекулярный хитозан со значением веса вплоть до 70 кДа. Композиции на основе хитина и хитозана, составленные для обработки семян, также являются коммерчески доступными. Коммерческие продукты включают в себя, например, ELEXA (Plant Defense Boosters, Inc.) и BEYOND™ (Agrihouse, Inc.).
Флавоноиды
Флавоноиды представляют собой фенольные соединения, характеризующиеся общей структурой из двух ароматических колец, соединенных трехуглеродным мостиком. Флавоноиды продуцируются растениями и характеризуются множеством функций, например, в качестве полезных сигнальных молекул и в качестве защиты от насекомых, животных, грибов и бактерий. Классы флавоноидов включают известные из уровня техники. См. Jain, er al., J. Plant Biochem. & Biotechnol. 77:1-10 (2002); Shaw, er al., Environmental Microbiol. 77:1867-80 (2006). Флавоноидные соединения являются коммерчески доступными, например, от Novozymes BioAg, Саскачеван, Канада; Natland International Corp., Ресерч Траенгл Парк, Северная Каролина; MP Biomedicals, Ирвин, Калифорния; LC Laboratories, Вобурн, Массачусетс. Флавоноидные соединения могут быть выделены из растений или семян, например, как описано в патентах США №№5702752, 5990291 и №6146668. Флавоноидные соединения также могут продуцироваться организмами, сконструированными при помощи методик генной инженерии, такими как дрожжи, как описано в Ralston, et al., Plant Physiology 737:1375-88 (2005). Подразумевается, что флавоноидные соединения включают в себя все флавоноидные соединения, а также их изомеры, соли и сольваты.
Один или несколько флавоноидов могут быть природным флавоноидом (т.е. полученным не синтетическим путем), синтетическим флавоноидом (например, химически синтезированным флавоноидом) или их комбинацией. В конкретном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, содержат флаванол, флавон, антоцианидин, изофлавоноид, неофлавоноид и их комбинации, включая все их изомерные, сольватные, гидратные, полиморфные, кристаллические формы, некристаллические формы и вариации солей.
В одном из вариантов осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько флаванолов. В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько флаванолов, выбранных из группы, состоящей из флаван-3-олов (например, катехина (С), галлокатехина (GC), катехин-3-галлата (Cg), галлокатехин-3-галлата (GCg), эпикатехинов (ЕС), эпигаллокатехинов (EGC) эпикатехин-3-галлата (ECg), эпигаллокатехин-3-галлата (EGCg) и т.д.), флаван-4-олов, флаван-3,4-диолов (например, лейкоантоцианидина), проантоцианидинов (например, включая димеры, тример, олигомеры или полимеры флаванолов) и их комбинаций. В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько флаванолов, выбранных из группы, состоящей из катехина (С), галлокатехина (GC), катехин-3-галлата (Cg), галлокатехин-3-галлата (GCg), эпикатехинов (ЕС), эпигаллокатехина (EGC) эпикатехин-3-галлата (ECg), эпигаллокатехин-3-галлата (EGCg), флаван-4-ола, лейкоантоцианидина и их димеров, тримеров, олигомеров или полимеров.
В другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько флавонов. В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько флавонов, выбранных из группы, состоящей из флавонов (например, лютеолина, апигенина, тангеритина и т.д.), флавонолов (например, кверцетина, кверцитрина, рутина, кемпферола, кемпферитрина, астрагалина, флавонолозида софоры, мирицетина, физетина, изорамнетина, пахиподола, рамназина и т.д.), флаванонов (например, гесперетина, гесперидина, нарингенина, эриодиктиола, гомоэриодиктиола и т.д.) и флаванонолов (например, дигидрокверцетина, дигидрокемпферола и т.д.). В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько флавонов, выбранных из группы, состоящей из лютеолина, апигенина, тангеритина, кверцетина, кверцитрина, рутина, кемпферола, кемпферитрина, астрагалина, флавонолозида софоры, мирицетина, физетина, изорамнетина, пахиподола, рамназина, гесперетина, гесперидина, нарингенина, эриодиктиола, гомоэриодиктиола, дигидрокверцетина, дигидрокемпферола и их комбинаций.
В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько антоцианидинов. В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько антоцианидинов, выбранных из группы, состоящей из цианидинов, дельфинидинов, мальвидинов, пеларгонидинов, пеонидинов, петунидинов и их комбинаций.
В другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько изофлавоноидов. В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, содержат один или несколько изофлавоноидов, выбранных из группы, состоящей из фитоэстрогенов, изофлавонов (например, генистеина, даидзеина, глицитеина и т.д.) и изофлаванов (например, эквола, лонхокапрана, лаксифлорана и т.д.) и их комбинаций. В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько изофлавоноидов, выбранных из группы, состоящей из генистеина, даидзеина, глицитеина, эквола, лонхокапрана, лаксифлорана и их комбинаций.
В другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько неофлавоноидов. В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько неофлавоноидов, выбранных из группы, состоящей из неофлавонов (например, калофиллолида), неофлавенов (например, далбергихромен), коутареагенинов, далбергинов, ниветинов и их комбинаций. В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько неофлавоноидов, выбранных из группы, состоящей из калофиллолида, далбергихромена, коутареагенина, далбергина, ниветина и их комбинаций.
В другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько флавоноидов, выбранных из группы, состоящей из катехина (С), галлокатехина (GC), катехин-3-галлата (Cg), галлокатехин-3-галлата (GCg), эпикатехинов (ЕС), эпигаллокатехина (EGC), эпикатехин-3-галлата (ECg), эпигаллокатехин-3-галлата (EGCg), флаван-4-ола, лейкоантоцианидина, проантоцианидинов, лютеолина, апигенина, тангеритина, кверцетина, кверцитрина, рутина, кемпферола, кемпферитрина, астрагалина, флавонолозида софоры, мирицетина, физетина, изорамнетина, пахиподола, рамназина, гесперетина, гесперидина, нарингенина, эриодиктиола, гомоэриодиктиола, дигидрокверцетина, дигидрокемпферола, цианидинов, дельфинидинов, мальвидинов, пеларгонидинов, пеонидинов, петунидинов, генистеина, даидзеина, глицитеина, эквола, лонхокарпана, лаксифлорана, калофиллолида, далбергихромена, коутареагенина, далбергина, ниветина и их комбинаций. В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько флавоноидов, выбранных из группы, состоящей из гесперетина, гесперидина, нарингенина, генистеина, даидзеина и их комбинаций. В конкретном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать флавоноид гесперетин. В другом конкретном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать флавоноид гесперидин. В еще другом конкретном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать флавоноид нарингенин. В еще другом конкретном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать флавоноид генистеин. В еще другом конкретном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать флавоноид даидзеин.
Нефлавоноидный(е) индуктор(ы) Nod-генов
Жасмоновую кислоту (JA, [1R-[1α,2β(Z)]]-3-оксо-2-(пентенил)циклопентануксусную кислоту) и ее производные, линолевую кислоту ((Z,Z)-9,12-октадекадиеноевую кислоту) и ее производные, а также линоленовую кислоту ((Z,Z,Z)-9,12,15-октадекатриеновую кислоту) и ее производные можно применять в композициях, описанных в данном документе. Подразумевается, что нефлавоноидные индукторы nod-генов включают в себя не только нефлавоноидные индукторы nod-генов, описанные в данном документе, но также их изомеры, соли и сольваты.
Жасмоновая кислота и ее метиловый сложный эфир, метилжасмонат (MeJA), в совокупности известные как жасмонаты, представляют собой октадеканоидные соединения, которые в естественных условиях встречаются у растений. Жасмоновая кислота продуцируется корнями проростков пшеницы и микроорганизмами, относящимися к грибам, такими как Botryodiplodia theobromae и Gibbrella fujikuroi, дрожжами (Saccharomyces cerevisiae), а также патогенными и непатогенными штаммами Escherichia coli. Линолевая кислота и линоленовая кислота образуются в ходе биосинтеза жасмоновой кислоты. Как сообщается, жасмонаты, линолевая кислота и линоленовая кислота (и их производные) являются индукторами экспрессии nod-гена или образования LCO ризобактериями. См., например, Mabood, Fazli, Jasmonates induce the expression of nod genes in Bradyrhizobium japonicum, May 17, 2001 и Mabood, Fazli, "Linoleic and linolenic acid induce the expression of nod genes in Bradyrhizobium japonicum," USDA 3, May 17, 2001.
1
1
2
3
2
3
1
8
2
8
2
8
2
8
2
8
2
8
Полезные производные линолевой кислоты, линоленовой кислоты и жасмоновой кислоты, которые можно применять в композициях по настоящему раскрытию, включают сложные эфиры, амиды, гликозиды и соли. Типичные сложные эфиры представляют собой соединения, в которых карбоксильная группа линолевой кислоты, линоленовой кислоты или жасмоновой кислоты была заменена группой -COR, где R представляет собой группу -OR, в которой R представляет собой алкильную группу, например, C-C неразветвленную или разветвленную алкильную группу, например, метильную, этильную или пропильную группу; алкенильную группу, например, С-С неразветвленную или разветвленную алкенильную группу; алкинильную группу, например, С-С неразветвленную или разветвленную алкинильную группу; арильную группу, содержащую, например, 6-10 атомов углерода; или гетероарильную группу, содержащую, например, 4-9 атомов углерода, где гетероатомы в гетероарильной группе могут представлять собой, например, N, О, Р или S. Типичные амиды представляют собой соединения, в которых карбоксильная группа линолевой кислоты, линоленовой кислоты или жасмоновой кислоты была заменена группой -COR, где R представляет собой группу NRR, в которой R и R независимо представляют собой водород; алкильную группу, например, С-С неразветвленную или разветвленную алкильную группу, например, метильную, этильную или пропильную группу; алкенильную группу, например, С-С неразветвленную или разветвленную алкенильную группу; алкинильную группу, например, С-С неразветвленную или разветвленную алкинильную группу; арильную группу, содержащую, например, 6-10 атомов углерода; или гетероарильную группу, содержащую, например, 4-9 атомов углерода, где гетероатомы в гетероарильной группе могут представлять собой, например, N, О, Р или S. Сложные эфиры можно получать при помощи известных способов, например, катализируемого кислотой нуклеофильного присоединения, где осуществляют реакцию карбоновой кислоты со спиртом в присутствии каталитического количества минеральной кислоты. Амиды также можно получать при помощи известных способов, например, путем реакции карбоновой кислоты с соответствующим амином в присутствии связующего вещества, такого как дициклогексилкарбодиимид (DCC), при нейтральных условиях. Подходящие соли линолевой кислоты, линоленовой кислоты и жасмоновой кислоты включают, например, соли присоединения основания. Основания, которые могут быть применены в качестве реагентов для получения метаболически приемлемых основных солей этих соединений, включают те, которые получены с катионами, такими как катионы щелочных металлов (например, калия и натрия) и катионы щелочно-земельных металлов (например, кальция и магния). Эти соли можно легко получать при помощи смешивания раствора линолевой кислоты, линоленовой кислоты или жасмоновой кислоты с раствором основания. Эту соль можно осаждать из раствора и собирать при помощи фильтрации или можно извлекать при помощи других средств, например, при помощи выпаривания растворителя.
Каррикин(ы)
Каррикины представляют собой виниловые 4Н-пироны, например, 2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-оны, в том числе их производные и аналоги. Подразумевается, что каррикины включают включают в себя их изомеры, соли и сольваты. Примеры этих соединений представлены следующей структурой:
5
2
3
4
6
6
7
2
5
6
7
1
3
2
3
4
1
2
3
1
2
4
3
3
1
2
3
4
3
1
3
3
2
4
1
4
3
2
3
1
3
4
3
2
1
3
2
3
4
2
3
1
3
3
2
4
1
3
2
3
4
3
1
3
2
3
4
где Z представляет собой О, S или NR; каждый из R, R и R независимо представляет собой Н, алкил, алкенил, алкинил, фенил, бензил, гидрокси, гидроксиалкил, алкокси, фенилокси, бензилокси, CN, COR, COOR=, галоген, NRR или NO; и каждый из R, R и R независимо представляет собой Н, алкил или алкенил, или их биологически приемлемой солью. Примеры биологически приемлемых солей этих соединений могут включать в себя соли присоединения кислоты, образованные биологически приемлемыми кислотами, примеры которых включают гидрохлорид, гидробромид, сульфат или бисульфат, фосфат или гидрофосфат, ацетат, бензоат, сукцинат, фумарат, малеат, лактат, цитрат, тартрат, глюконат; метансульфонат, бензолсульфонат и п-толуолсульфоновую кислоту. Дополнительные биологически приемлемые соли металлов могут включать соли щелочных металлов, полученные с основаниями, примеры которых включают натриевые и калиевые соли. Примеры соединений, которые охвачены структурой и которые могут быть подходящими для применения согласно настоящему раскрытию, включают следующие: 3-метил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R=CH, R, R, R=H), 2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R, R, R, R4=H), 7-метил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R, R, R=H, R=CH), 5-метил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R, R, R=H, R=CH), 3,7-диметил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R, R=CH, R, R=H), 3,5-диметил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R, R=CH, R, R=H), 3,5,7-триметил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R, R, R=CH, R=H), 5-метоксиметил-3-метил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R=CH, R, R=H, R=CHOCH), 4-бром-3,7-диметил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R, R=CH, R=Br, R=H), 3-метилфуро[2,3-с]пиридин-2(3H)-он (где Z=NH, R=CH, R, R, R=H), 3,6-диметилфуро[2,3-с]пиридин-2(6Н)-он (где Z=N-CH, R=CH, R, R, R=H). См. патент США №7576213. Эти молекулы также известны как каррикины. См. Halford, "Smoke Signals," в Chem. Eng. News (12 апреля 2010 г.), на страницах 37-38, сообщающих, что каррикины или бутенолиды, которые содержатся в дыме, действуют как стимуляторы роста и способствуют прорастанию семян после лесного пожара, и могут активировать семена, например, кукурузы, разновидностей томата, латука и разновидностей лука, которые подвергаются хранению. Эти молекулы являются объектом патента США №7576213.
Полезный(е) микроорганизм(ы)
В одном из вариантов осуществления композиции, описанные в данном документе, могут необязательно включать один или несколько полезных микроорганизмов. Один или несколько полезных микроорганизмов могут находиться в форме спор, в вегетативной форме или их комбинации. Один или несколько полезных микроорганизмов могут включать любое количество микроорганизмов, обладающих одним или несколькими полезными свойствами (например, продуцировать одну или несколько сигнальных молекул растения, описанных в данном документе, увеличивать поглощение питательных веществ и воды, стимулировать и/или увеличивать фиксацию азота, усиливать рост, улучшать прорастание семян, улучшать всхожесть проростков, прерывать диапаузу или состояние покоя растения, обеспечивать противогрибную активность и т.д.).
В одном варианте осуществления одним или несколькими полезными микроорганизмами являются диазотрофы (т.е. бактерии, которые представляют собой азотфиксирующие бактерии). В еще другом варианте осуществления один или несколько полезных микроорганизмов являются бактерииями-диазотрофами, выбранными из родов Rhizobium spp., Bradyrhizobium spp., Azorhizobium spp., Sinorhizobium spp., Mesorhizobium spp., Azospirillum spp. и их комбинаций. В еще другом варианте осуществления, одним или несколькими полезными микроорганизмами являются бактерии, выбранные из группы, состоящей из Rhizobium cellulosilyticum, Rhizobium daejeonense, Rhizobium etli, Rhizobium galegae, Rhizobium gallicum, Rhizobium giardinii, Rhizobium hainanense, Rhizobium huautlense, Rhizobium indigoferae, Rhizobium leguminosarum, Rhizobium loessense, Rhizobium lupini, Rhizobium lusitanum, Rhizobium meliloti, Rhizobium mongolense, Rhizobium miluonense, Rhizobium sullae, Rhizobium tropici, Rhizobium undicola, Rhizobium yanglingense, Bradyrhizobium bete, Bradyrhizobium canariense, Bradyrhizobium elkanii, Bradyrhizobium iriomotense, Bradyrhizobium japonicum, Bradyrhizobium jicamae, Bradyrhizobium liaoningense, Bradyrhizobium pachyrhizi, Bradyrhizobium yuanmingense, Azorhizobium caulinodans, Azorhizobium doebereinerae, Sinorhizobium abri, Sinorhizobium adhaerens, Sinorhizobium americanum, Sinorhizobium aborts Sinorhizobium fredii, Sinorhizobium indiaense, Sinorhizobium kostiense, Sinorhizobium kummerowiae, Sinorhizobium medicae, Sinorhizobium meliloti, Sinorhizobium mexicanus, Sinorhizobium morelense, Sinorhizobium saheli, Sinorhizobium terangae, Sinorhizobium xinjiangense, Mesorhizobium albiziae, Mesorhizobium amorphae, Mesorhizobium chacoense, Mesorhizobium ciceri, Mesorhizobium huakuii, Mesorhizobium loti, Mesorhizobium mediterraneum, Mesorhizobium pluifarium, Mesorhizobium septentrionale, Mesorhizobium temperatum, Mesorhizobium tianshanense, Azospirillum amazonense, Azospirillum brasilense, Azospirillum canadense, Azospirillum doebereinerae, Azospirillum formosense, Azospirillum halopraeferans, Azospirillum irakense, Azospirillum largimobile, Azospirillum lipoferum, Azospirillum melinis, Azospirillum oryzae, Azospirillum picis, Azospirillum rugosum, Azospirillum thiophilum, Azospirillum zeae и их комбинаций.
В конкретном варианте осуществления полезным микроорганизмом является бактерия-диазотроф, выбранная из группы, состоящей из Bradyrhizobium japonicum, Rhizobium leguminosarum, Rhizobium meliloti, Sinorhizobium meliloti, Azospirillum brasilense и их комбинаций. В другом варианте осуществления полезным микроорганизмом является бактерия-диазотроф Bradyrhizobium japonicum. В другом варианте осуществления полезным микроорганизмом является бактерия-диазотроф Rhizobium leguminosarum. В другом варианте осуществления полезным микроорганизмом является бактерия-диазотроф Rhizobium meliloti. В другом варианте осуществления полезным микроорганизмом является бактерия-диазотроф Sinorhizobium meliloti. В другом варианте осуществления полезным микроорганизмом является бактерия-диазотроф Azospirillum brasilense.
В конкретном варианте осуществления один или несколько диазотрофов включают один или несколько штаммов Rhizobium leguminosarum. В другом конкретном варианте осуществления штамм R. leguminosarum включает штамм SO12A-2-(IDAC 080305-01). В другом конкретном варианте осуществления один или несколько диазотрофов включают штамм Bradyrhizobium japonicum. В еще другом конкретном варианте осуществления штамм Bradyrhizobium japonicum включает штамм В. japonicum USDA 532С, B. japonicum USDA 110, В. japonicum USDA 123, В. japonicum USDA 127, В. japonicum USDA 129, В. japonicum NRRL B-50608, В. japonicum NRRL B-50609, В. japonicum NRRL B-50610, В. japonicum NRRL B-50611, В. japonicum NRRL B-50612, В. japonicum NRRL B-50592 (также депонированный под номером NRRL В-59571), В. japonicum NRRL В-50593 (также депонированный под номером NRRL В-59572), В. japonicum NRRL В-50586 (также депонированный под номером NRRL В-59565), В. japonicum NRRL В-50588 (также депонированный под номером NRRL В-59567), В. japonicum NRRL В-50587 (также депонированный под номером NRRL В-59566), B. japonicum NRRL В-50589 (также депонированный под номером NRRL В-59568), В. japonicum NRRL В-50591 (также депонированный под номером NRRL В-59570), В. japonicum NRRL В-50590 (также депонированный под номером NRRL В-59569), NRRL В-50594 (также депонированный под номером NRRL В-50493), В. japonicum NRRL В-50726, В. japonicum NRRL В-50727, В. japonicum NRRL В-50728, В. japonicum NRRL В-50729, В. japonicum NRRL В-50730 и их комбинации.
В еще более конкретном варианте осуществления один или несколько диазотрофов включают один или несколько штаммов R. leguminosarum, включая штамм SO12A-2-(IDAC 080305-01), В. japonicum USDA 532С, В. japonicum USDA 110, В. japonicum USDA 123, В. japonicum USDA 127, S. japonicum USDA 129, B. japonicum NRRL B-50608, B. japonicum NRRL B-50609, S. japonicum NRRL B-50610, B. japonicum NRRL B-50611, B. japonicum NRRL B-50612, B. japonicum NRRL B-50592 (также депонированный под номером NRRL В-59571), В. japonicum NRRL В-50593 (также депонированный под номером NRRL В-59572), В. japonicum NRRL В-50586 (также депонированный под номером NRRL В-59565), В. japonicum NRRL В-50588 (также депонированный под номером NRRL В-59567), В. japonicum NRRL В-50587 (также депонированный под номером NRRL В-59566), В. japonicum NRRL В-50589 (также депонированный под номером NRRL В-59568), В. japonicum NRRL В-50591 (также депонированный под номером NRRL В-59570), В. japonicum NRRL В-50590 (также депонированный под номером NRRL В-59569), NRRL В-50594 (также депонированный под номером NRRL В-50493), B. japonicum NRRL В-50726, B. japonicum NRRL В-50727, В. japonicum NRRL В-50728, В. japonicum NRRL В-50729, В. japonicum NRRL В-50730, и их комбинации.
В другом варианте осуществления один или несколько полезных микроорганизмов включают в себя один или несколько фосфат-солюбилизирующих микроорганизмов. Фосфат-солюбилизирующие микроорганизмы включают включают в себя грибковые и бактериальные штаммы. В одном из вариантов осуществления фосфат-солюбилизирующим микроорганизмом являются микроорганизмы, выбранные из родов, включающих Acinetobacter spp., Arthrobacter spp, Arthrobotrys spp., Aspergillus spp., Azospirillum spp., Bacillus spp., Burkholderia spp., Candida spp., Chryseomonas spp., Enterobacter spp., Eupenicillium spp., Exiguobacterium spp., Klebsiella spp., Kluyvera spp., Microbacterium spp., Mucor spp., Paecilomyces spp., Paenibacillus spp., Penicillium spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Stenotrophomonas spp., Streptomyces spp., Streptosporangium spp., Swaminathania spp., Thiobacillus spp., Torulospora spp., Vibrio spp., Xanthobacter spp., Xanthomonas spp., и их комбинаций. В еще другом варианте осуществления фосфат-солюбилизирующий микроорганизм представляет собой микроорганизм, выбранный из группы, состоящей из Acinetobacter calcoaceticus, Arthrobotrys oligospora, Aspergillus niger, Azospirillum amazonense, Azospirillum brasilense, Azospirillum canadense, Azospirillum doebereinerae, Azospirillum formosense, Azospirillum halopraeferans, Azospirillum irakense, Azospirillum largimobile, Azospirillum Hpoferum, Azospirillum melinis, Azospirillum oryzae, Azospirillum picis, Azospirillum rugosum, Azospirillum thiophilum, Azospirillum zeae, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus atrophaeus, Bacillus circulans, Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis, Burkholderia cepacia, Burkholderia vietnamiensis, Candida krissii, Chryseomonas luteola, Enterobacter aerogenes, Enterobacter asburiae, Enterobacter taylorae, Eupenicillium parvum, Kluyvera cryocrescens, Mucor ramosissimus, Paecilomyces hepialid, Paecilomyces marquandii, Paenibacillus macerans, Paenibacillus mucilaginosus, Penicillium bilaiae (formerly known as Penicillium bilaii), Penicillium albidum, Penicillium aurantiogriseum, Penicillium chrysogenum, Penicillium citreonigrum, Penicillium citrinum, Penicillium digitatum, Penicillium frequentas, Penicillium fuscum, Penicillium gaestrivorus, Penicillium glabrum, Penicillium griseofulvum, Penicillium implicatum, Penicillium janthinellum, Penicillium lilacinum, Penicillium minioluteum, Penicillium montanense, Penicillium nigricans, Penicillium oxalicum, Penicillium pinetorum, Penicillium pinophilum, Penicillium purpurogenum, Penicillium radicans, Penicillium radicum, Penicillium raistrickii, Penicillium rugulosum, Penicillium simplicissimum, Penicillium solitum, Penicillium variabile, Penicillium velutinum, Penicillium viridicatum, Penicillium glaucum, Penicillium fussiporus, и Penicillium expansum, Pseudomonas corrugate, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas lurea, Pseudomonas poae, Pseudomonas putida, Pseudomonas stutzeri, Pseudomonas trivialis, Serratia marcescens, Stenotrophomonas maltophilia, Swaminathania salitolerans, Thiobacillus ferrooxidans, Torulospora globosa, Vibrio proteolytics, Xanthobacter agilis, Xanthomonas campesmpuc и их комбинаций.
В конкретном варианте осуществления один или несколько фосфат-солюбилизирующих микроорганизмов представляют собой штамм гриба Penicillium. В другом варианте осуществления один или несколько видов Penicillium представляют собой P. bilaiae, P. gaestrivorus или их комбинации.
В конкретном варианте осуществления один или несколько фосфат-солюбилизирующих микроорганизмов представляют собой штамм гриба Penicillium. В другом варианте осуществления один или несколько видов Penicillium представляют собой P. bilaiae, P. gaestrivorus или их комбинации. В конкретном варианте осуществления штамм Penicillium включает P. bilaiae NRRL 50169, P. bilaiae АТСС 20851, P. bilaiae АТСС 22348, P. bilaiae ATCC 18309, P. bilaiae NRRL 50162 и их комбинации. В другом конкретном варианте осуществления штамм Penicillium включает штамм P. gaestrivorus NRRL 50170. В еще другом конкретном варианте осуществления штамм Penicillium включает NRRL 50169 P. bilaiae, АТСС 20851 Р. bilaiae, АТСС 22348 P. bilaiae, АТСС 18309 P. bilaiae, NRRL 50162 P. bilaiae, NRRL 50170 P. gaestrivorus и их комбинации.
В другом варианте осуществления полезный микроорганизм представляет собой одну или несколько микориз. В частности, одна или несколько микориз представляют собой эндомикоризу (также называемую везикулярно-арбускулярными микоризами, VAM, арбускулярными микоризами или AM), эктомикоризу или их комбинации.
В одном варианте осуществления одна или несколько микориз представляют собой эндомикоризу из отдела Glomeromycota и родов Glomus и Gigaspora. В еще одном варианте осуществления эндомикориза представляет собой штамм Glomus aggregatum, Glomus brasilianum, Glomus clarum, Glomus deserticola, Glomus etunicatum, Glomus fasciculatum, Glomus intraradices, Glomus monosporum или Glomus mosseae, Gigaspora margarita или их комбинацию.
В другом варианте осуществления одна или несколько микориз представляют собой эктомикоризу из отдела Basidiomycota, Ascomycota и Zygomycota. В еще одном варианте осуществления эктомикориза представляет собой штамм Laccaria bicolor, Laccaria laccata, Pisolithus tinctorius, Rhizopogon amylopogon, Rhizopogon fulvigleba, Rhizopogon luteolus, Rhizopogon villosuli, Scleroderma сера, Scleroderma citrinum или их комбинацию.
В еще одном варианте осуществления одна или несколько микориз представляют собой микоризу эрикоид, микоризу арбутоид или микоризу монотропоид. Микориза арбускулярного типа и эктомикориза образуют микоризу эрикоид со многими растениями, принадлежащими к порядку Ericales, при этом некоторые представители Ericales образуют микоризы арбутоид и монотропоид. Все орхидеи являются микогетеротрофами на определенной стадии их жизненного цикла и образуют орхидные микоризы с отделом базидиальных грибов. В одном варианте осуществления микориза может представлять собой микоризу эрикоид, предпочтительно из отдела Ascomycota, например, Hymenoscyphous ericae или Oidiodendron sp. В другом варианте осуществления микориза также может представлять собой микоризу арбутоид, предпочтительно из отдела Basidiomycota. В еще одном варианте осуществления микориза может представлять собой микоризу монотропоид, предпочтительно из отдела Basidiomycota. В еще одном варианте осуществления микориза может представлять собой микоризу орхидеи, предпочтительно из рода Rhizoctonia.
В еще другом варианте осуществления один или несколько полезных микроорганизмов представляют собой фунгициды, т.е. обладают фунгицидной активностью (например, биофунгициды). Неограничивающие примеры биофунгицидов представлены ниже в разделе "Фунгициды".
Фунгицид(ы)
В одном варианте осуществления композиции, описанные в настоящем документе, могут дополнительно содержать один или несколько фунгицидов. Фунгициды, пригодные для композиций, описанных в данном документе, могут представлять собой биологические фунгициды, химические фунгициды или их комбинации. Можно производить отбор фунгицидов, таким образом обеспечивая эффективный контроль за широким спектром фитопатогенных грибов, включая передающихся через почву грибов, происходящих главным образом из классов Plasmodiophoromycetes, Peronosporomycetes (син. Oomycetes), Chytridiomycetes, Zygomycetes, Ascomycetes, Basidiomycetes и Deuteromycetes (син. Fungi imperfecti). Более распространенные грибные патогены, которые могут подвергаться эффективному целевому воздействию, включают Pytophthora, Rhizoctonia, Fusarium, Pythium, Phomopsis или Selerotinia и Phakopsora и их комбинации.
В конкретных вариантах осуществления биологический фунгицид может представлять собой бактерию из рода Actinomycetes, Agrobacterium, Arthrobacter, Alcaligenes, Aureobacterium, Azobacter, Bacillus, Beijerinckia, Brevibacillus, Burkholderia, Chromobacterium, Clostridium, Clavibacter, Comomonas, Corynebacterium, Curtobacterium, Enterobacter, Flavobacterium, Gluconobacter, Hydrogenophage, Klebsiella, Methylobacterium, Paenibacillus, Pasteuria, Phingobacterium, Photorhabdus, Phyllobacterium, Pseudomonas, Rhizobium, Serratia, Stenotrophomonas, Variovorax и Xenorhadbus. В конкретных вариантах осуществления бактерии выбраны из группы, состоящей из Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus cereus, Bacillus firmus, Bacillus, lichenformis, Bacillus pumilus, Bacillus sphaericus, Bacillus subtilis, Bacillus thuringiensis, Chromobacterium suttsuga, Pasteuria penetrans, Pasteuria usage и Pseudomona fluorescens.
В конкретных вариантах осуществления биологический фунгицид может представлять собой гриб из рода Alternaria, Ampelomyces, Aspergillus, Aureobasidium, Beauveria, Colletotrichum, Coniothyrium, Gliocladium, Metarhizium, Muscodor, Paecilonyces, Trichoderma, Typhula, Ulocladium и Verticilium. В конкретных вариантах осуществления грибом является Beauveria bassiana, Coniothyrium minitans, Gliocladium virens, Metarhizium anisopliae, Muscodor albus, Paecilomyces lilacinus или Trichoderma polysporum.
Неограничивающие примеры биологических фунгицидов, которые могут быть пригодными для использования в соответствии с настоящим раскрытием, включают Ampelomyces quisqualis (например, AQ 10 от Intrachem Bio GmbH & Co. KG, Германия), Aspergillus flavus (например, AFLAGUARD от Syngenta, CH), Aureobasidium pullulans (например, BOTECTOR от bio-ferm GmbH, Германия), Bacillus pumilus (например, изолят NRRL-Nr. B-21661 в RHAPSODY, SERENADE MAX и SERENADE ASO от Fa. AgraQuest Inc., США), Bacillus amyloliquefaciens, FZB24 Bacillus amyloliquefaciens (например, TAEGRO от Novozymes Biologicals, Inc., CUJA), TJ1000 Bacillus amyloliquefaciens (например, также известен как 1ВЕ, изолят АТСС ВАА-390), Candida oleophila, I-82 Candida oleophila (например, ASPIRE от Ecogen Inc., США), Candida saitoana (например, BIOCURE (в смеси с лизоцимом) и BIOCOAT от Micro Flo Company, США (BASF SE) и Arysta), Clonostachys rosea f. catenulata, также называемый Gliocladium catenulatum (например, изолят J1446: PRESTOP от Verdera, Финляндия), Coniothyrium minitans (например, CONTANS от Prophyta, Германия), Cryphonectria parasitica (например, Endothia parasitica от CNICM, Франция), Cryptococcus albidus (например, YIELD PLUS от Anchor Bio-Technologies, Южная Африка), Fusarium oxysporum (например, BIOFOX от S.I.A.P.A., Италия, FUSACLEAN от Natural Plant Protection, Франция), Metschnikowia fructicola (например, SHEMER от Agrogreen, Израиль), Microdochium dimerum (например, ANTIBOT от Agrauxine, Франция), Phlebiopsis gigantea (например, ROTSOP от Verdera, Финляндия), Pseudozyma flocculosa (например, SPORODEX от Plant Products Co. Ltd., Канада), Pythium oligandrum, Pythium oligandrum DV74 (например, POLYVERSUM от Remeslo SSRO, Biopreparaty, Чехия), Reynoutria sachlinensis (например, REGALIA от Marrone Biolnnovations, США), Talaromyces flavus, V117b Talaromyces flavus (например, PROTUS от Prophyta, Германия), Trichoderma asperellum, SKT-1 Trichoderma asperellum (например, ECO-HOPE от Kumiai Chemical Industry Co., Ltd., Япония), Trichoderma atroviride, LC52 Trichoderma atroviride (например, SENTINEL от Agrimm Technologies Ltd, Новая Зеландия), Trichoderma harzianum, T-22 Trichoderma harzianum (например, PLANTSHIELD der Firma BioWorks Inc., США), TH 35 Trichoderma harzianum (например, ROOT PRO от Mycontrol Ltd., Израиль), T-39 Trichoderma harzianum (например, TRICHODEX и TRICHODERMA 2000 от Mycontrol Ltd., Израиль и Makhteshim Ltd., Израиль), ICC012 Т. harzianum, T harzianum и Т. viride (например, TRICHOPEL от Agrimm Technologies Ltd, Новая Зеландия), ICC012 Т. harzianum и ICC080 T. viride (например, REMEDIER от Isagro Ricerca, Италия), Т. polysporum и Т. harzianum (например, BINAB от BINAB Bio-Innovation АВ, Швеция), Trichoderma stromaticum (например, TRICOVAB от C.E.P.L.A.C., Бразилия), Trichoderma virens, GL-21 Т. virens (например, SOILGARD от Certis LLC, США), G1-3 Т. virens (например, АТСС 58678 от Novozymes BioAg, Inc.), G1-21 T. virens (например, коммерчески доступный от Thermo Trilogy Corporation) Trichoderma viride (например, TRIECO от Ecosense Labs. (Индия) Pvt. Ltd., Indien, BIO-CURE F от Т. Stanes & Co. Ltd., Indien), TV1 T. viride (например, TV1 T viride от Agribiotec srl, Италия), ICC080 T viride, Streptomyces lydicus, WYEC 108 Streptomyces lydicus (например, изолят АТСС 55445 в ACTINOVATE, ACTINOVATE AG, ACTINOVATE STP, ACTINO-IRON, ACTINOVATE L&G, и ACTINOGROW от Idaho Research Foundation, США), Streptomyces violaceusniger, YCED 9 Streptomyces violaceusniger (например, изолят АТСС 55660 в DE-THATCH-9, DECOMP-9 и THATCH CONTROL от Idaho Research Foundation, США), WYE 53 Streptomyces (например, изолят АТСС 55750 в DE-THATCH-9, DECOMP-9 и THATCH CONTROL от Idaho Research Foundation, США) и Ulocladium oudemansii, HRU3 Ulocladium oudemansii (например, BOTRY-ZEN от Botry-Zen Ltd, Новая Зеландия).
В конкретном варианте осуществления биофунгицидом является FZB24 Bacillus amyloliquefaciens. В другом конкретном варианте осуществления биофунгицидом является TJ1000 Bacillus amyloliquefaciens. В еще другом конкретном варианте осуществления биофунгицидом является WYEC 108 Streptomyces lydicus. В еще другом конкретном варианте осуществления биофунгицидом является YCED 9 Streptomyces violaceusniger. В другом конкретном варианте осуществления биофунгицидом является WYE 53 Streptomyces. В еще другом конкретном варианте осуществления биофунгицидом является G1-3 Trichoderma virens. В другом конкретном варианте осуществления биофунгицидом является G1-21 Trichoderma virens.
В еще другом конкретном варианте осуществления биофунгицидом является комбинация FZB24 Bacillus amyloliquefaciens, TJ1000 Bacillus amyloliquefaciens, WYEC 108 Streptomyces lydicus, YCED 9 Streptomyces violaceusniger, WYE 53 Streptomyces, G1-3 Trichoderma virens, G1-21 Trichoderma virens или их комбинации (например, до по меньшей мере одного, по меньшей мере двух, по меньшей мере трех, по меньшей мере четырех, по меньшей мере пяти, по меньшей мере шести, по меньшей мере семи и включая все штаммы в комбинации).
В дополнительных вариантах осуществления биологический фунгицид может представлять собой активаторы роста растений или средства для защиты растений, включая без ограничения гарпин, Reynoutria sachalinensis и т.д.
Типичные примеры подходящих химических фунгицидов, которые могут быть пригодными для применения по настоящему раскрытию, включают ароматические углеводороды, бензимидазолы, бензтиадиазол, карбоксамиды, амиды карбоновых кислот, морфолины, фениламиды, фосфонаты, хиноновые внешние ингибиторы (например стробилурины), тиазолидины, тиофанаты, тиофенкарбоксамиды и триазолы:
A) стробилурины:
азоксистробин, куметоксистробин, кумоксистробин, димоксистробин, энестробурин, флуоксастробин, крезоксим-метил, метоминостробин, орисастробин, пикоксистробин, пираклостробин, пираметостробин, пираоксистробин, пирибенкарб, трифлоксистробин, метиловый сложный эфир 2-[2-(2,5-диметил-феноксиметил)-фенил]-3-метокси-акриловой кислоты и 2-(2-(3-(2,6-дихлорфенил)-1-метил-аллилиденаминооксиметил)-фенил)-2-метоксиимино-N-метил-ацетамид;
B) карбоксамиды:
карбоксанилиды: беналаксил, беналаксил-М, беноданил, биксафен, боскалид, карбоксин, фенфурам, фенгексамид, флутоланил, флуксапироксад, фураметпир, изопиразам, изотианил, киралаксил, мепронил, металаксил, металаксил-М (мефеноксам), офурас, оксадиксил, оксикарбоксин, пенфлуфен, пентиопирад, седаксан, теклофталам, тифлузамид, тиадинил, 2-амино-4-метил-тиазол-5-карбоксанилид, N-(4’-трифторометилтиобифенил-2-ил-3-дифторометил-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид и N-(2-(1,3,3-триметилбутил)-фенил)-1,3-диметил-5-фтор-1Н-пиразол-4-карбоксамид;
морфолиды карбоновой кислоты: диметоморф, флуморф, пириморф; амиды бензойной кислоты: флуметовер, флуопиколид, флуопирам, зоксамид;
другие карбоксамиды: карпропамид, дицикломет, мандипроамид, окситетрациклин, силтиофам и N-(6-метокси-пиридин-3-ил) амид циклопропанкарбоновой кислоты;
C) азолы:
триазолы: азаконазол, битертанол, бромуконазол, ципроконазол, дифеноконазол, диниконазол, диниконазол-М, эпоксиконазол, фенбуконазол, флухинконазол, флузилазол, флутриафол, гексаконазол, имибенконазол, ипконазол, метконазол, миклобутанил, окспоконазол, паклобутразол, пенконазол, пропиконазол, протиоконазол, симеконазол, тебуконазол, тетраконазол, триадимефон, триадименол, тритиконазол,униконазол;
имидазолы: циазофамид, имазалил, пефуразоат, прохлораз, трифлумизол;
D) гетероциклические соединения:
пиридины: флуазинам, пирифенокс, 3-[5-(4-хлор-фенил)-2,3-диметил-изоксазолидин-3-ил]-пиридин, 3-[5-(4-метил-фенил)-2,3-диметил-изоксазолидин-3-ил]-пиридин;
пиримидины: бупиримат, ципродинил, дифлуметорим, фенаримол, феримзон, мепанипирим, нитрапирин, нуаримол, пириметанил;
пиперазины: трифорин;
пирролы:фенпиклонил, флудиоксонил;
морфолины: альдиморф, додеморф, додеморф-ацетат, фенпропиморф, тридеморф;
пиперидины: фенпропидин;
дикарбоксимиды: флуоромид, ипродион, процимидон, винклозолин;
неароматические 5-членные гетероциклы: фамоксадон, фенамидон, флутианил, октилинон, пробеназол, S-аллиловый сложный эфир 5-амино-2-изопропил-3-оксо-4-орто-толил-2,3-дигидро-пиразол-1-тиокарбоновой кислоты;
другие: ацибензолар-S-метил, аметоктрадин, амисульбром, анилазин, бластицидин-S, каптафол, каптан, хинометионат, дазомет, дебакарб, дикломезин, дифензокват, дифензокват-метилсульфат, феноксанил, фолпет, оксолиновая кислота, пипералин, прохиназид, пироквилон, квиноксифен, триазоксид, трициклазол, 2-бутокси-6-йод-3-пропилхромен-4-он, 5-хлор-1-(4,6-диметокси-пиримидин-2-ил)-2-метил-1 Н-бензоимидазол и 5-хлор-7-(4-метилпиперидин-1-ил)-6-(2,4,6-трифторфенил)-[1,2,4]триазол-[1,5-а]пиримидин;
E) бензаимидазолы:
карбендазим;
F) другие активные вещества:
гуанидины: гуанидин, додин, свободное основание додина, гуазатин, гуазатин-ацетат, иминоктадин, иминоктадин-триацетат, иминоктадин-трис(албезилат);
антибиотики: касугамицин, касугамицин гидрохлорид-гидрат, стрептомицин, полиоксин, валидамицин А;
производные нитрофенила: бинапакрил, дихлоран, динобутон, динокап, нитротал-изопропил, текназен,
органометаллические соединения: соли фентина, такие как фентин ацетат, фентин хлорид или фентин гидроксид;
серосодержащие гетероциклильные соединения: дитианон, изопротиолан;
органофосфорные соединения: эдифенфос, фозетил, фозетил-алюминий, ипробенфос, фосфорная кислота и ее соли, пиразофос, толклофос-метил;
органохлорные соединения: хлорталонил, дихлофлуанид, дихлорофен, флусульфамид, гексахлорбензол, пенцикурон, пентахлорфенол и его соли, фталид, квинтозен, тиофтанат-метил, тиофтанат, толилфлуанид, N-(4-хлор-2-нитро-фенил)-N-этил-4-метил-бензолсульфонамид;
неорганические активные вещества: бордосская смесь, ацетат меди, гидроксид меди, оксихлорид меди, основный сульфат меди и сера.
Коммерческие фунгициды в наиболее подходящем случае применяют согласно инструкциям производителя в рекомендуемых концентрациях.
Гербицид(ы)
В одном варианте осуществления композиции, описанные в настоящем документе, могут дополнительно содержать один или несколько гербицидов. Неограничивающие примеры гербицидов включают ингибиторы ацетил-КоА карбоксилазы, ацетанилиды, ингибиторы синтетазы ацетогидроксикислот, ингибиторы биосинтеза каротиноидов, ингибиторы возбуждающих постсинаптических потенциалов, ингибиторы глутаминсинтетазы, ингибиторы полифенолоксидазы, ингибиторы фотосистемы II и синтетические ауксины. В конкретном варианте осуществления гербицид может быть довсходовым гербицидом, послевсходовым гербицидом или их комбинацией.
Подходящие гербициды включают в себя химические гербициды, природные гербициды (например, биогербициды, органические гербициды и т.д.) или их комбинации. Неограничивающие примеры подходящих гербицидов включают ацетохлор, дикамбу, бентазон, ацифлуорфен, хлоримурон, лактофен, кломазон, флуазифоп, флумиоксазин, глуфосинат, глифосат, сетоксидим, имазетапир, имазамокс, фомесаф, фомесафен, флумиклорак, имазаквин, мезотрион, квизалофоп, сафлуфенацил, сулькотрион, 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту (2,4-D), 2,4,5-трихлорфеноксиуксусную кислоту (2,4,5-Т), такстомин (например, такстомины, описанные в патенте США №7989393) и клетодим. Коммерческие продукты, содержащие каждое из этих соединений, являются легкодоступными. Концентрация гербицида в композиции, как правило, будет соответствовать обозначенной норме применения для определенного гербицида.
Инсектииид(ы), акарицид(ы), нематоцид(ы)
В одном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут дополнительно содержать один или несколько инсектицидов, акарицидов, нематоцидов или их комбинаций. Инсектициды, пригодные для композиций, описанных в настоящем документе, соответственно обладают активностью в отношении широкого спектра насекомых, в том числе без ограничения проволочников, совок, червовидных личинок, кукурузного жука, личинок мухи ростковой, земляных блошек, клопов-наземников, тли, листоедов, щитников и их комбинаций. Инсектициды, акарициды и нематоциды, описанные в данном документе, могут быть химическими или природными (например, биологические растворы, такие как грибные пестициды и т.д.).
Неограничивающие примеры инсектицидов, акарицидов и нематоцидов, которые могут быть пригодными для композиций, раскрытых в данном документе, включают карбаматы, диамиды, макроциклические лактоны, неокотиноиды, органофосфаты, фенилпиразолы, пиретрины, спинозины, синтетические пиретроиды, тетроновую и тетрамовую кислоты.
В конкретных вариантах осуществления инсектициды, акарициды и нематоциды включают акринатрин, альфа-циперметрин, бета-цифлутрин, цигалотрин, циперметрин, дельтаметрин, фенвалерат, этофенпрокс, фенпропатрин, фенвалерат, флуцитринат, фостиазат, лямбда-цигалотрин, гамма-цигалотрин, перметрин, тау-флювалинат, трансфлутрин, зета-циперметрин, цифлутрин, бифентрин, тефлутрин, эфлусиланат, фубфенпрокс, пиретрин, ресметрин, имидаклоприд, ацетамиприд, тиаметоксам, нитенпирам, тиаклоприд, динотефуран, клотианидин, имидаклотиз, хлорфлуазурон, дифлубензурон, люфенурон, тефлубензурон, трифлумурон, новалурон, флуфеноксурон, гексафлумурон, бистрифлуорон, новифлумурон, бупрофезин, циромазин, метоксифенозид, тебуфенозид, гелофенозид, кромафенозид, эндосульфан, фипронил, этипрол, пирафлупрол, пирипрол, флубендиамид, хлорантранилипрол (Rynaxypyr), хлотианидин, циазипир, эмамектин, эмамектин бензоат, абамектин, ивермектин, милбемектин, лепимектин, тебуфенпирад, фенпероксимат, пиридабен, феназаквин, пиримидифен, толфенпирад, дикофол, циенопирафен, цифлуметофен, ацеквиноцил, флуакрипирин, бифеназат, диафентиурон, этоксазол, клофентезин, спиносад, триаратен, тетрадифон, пропаргит, гекситиазокс, бромопропилат, хинметионат, амитраз, пирифлуквиназон, пиметрозин, флоникамид, пирипроксифен, диофенолан, хлорфенапир, метафлумизон, индоксакарб, хлорпирифос, спиродиклофен, спиромесифен, спиротетрамат, пиридалил, спинкторам, ацефат, триазофос, профенофос, оксамил, спинеторам, фенамифос, фенамипклотиахос, 4-{[(6-хлоропирид-3-ил)метил](2,2-дифторэтил)амино}фуран-2(5Н)-он, кадусафос, карбарил, кабофуран, этопрофос, тиодикарб, альдикарб, альдоксикарб, метамидофос, метиокарб, сульфоксафлор, циантранилипрол, а также продукты на основе Bacillus firmus (1-1582, BioNeem, Votivo) и их комбинации.
В конкретном варианте осуществления инсектицидом является микробный инсектицид. В более конкретном варианте осуществления микробным инсектицидом является грибной инсектицид. Неограничивающие примеры грибных инсектицидов, которые можно применять в композициях, раскрытых в данном документе, описаны в McCoy, С.W., Samson, R.A., and Coucias, D.G. "Entomogenous fungi. In "CRC Handbook of Natural Pesticides. Microbial Pesticides, Part A. Entomogenous Protozoa and Fungi." (C.M. Inoffo, ed.), (1988): Vol. 5, 151-236; Samson, R.A., Evans, H.C., and Latge’, J.P. "Atlas of Entomopathogenic Fungi." (Springer-Verlag, Berlin) (1988) and deFaria, M.R. и Wraight, S.P. "Mycoinsecticides and Mycoacaricides: A comprehensive list with worldwide coverage and international classification of formulation types." Biol. Control (2007), doi: 10.1016/j.biocontrol.2007.08.001.
В одном варианте осуществления неограничивающие примеры грибных инсектицидов, которые можно применять в композициях, раскрытых в данном документе, включают виды Coelomycidium, Myiophagus, Coelemomyces, Lagenidium, Leptolegnia, Couchia, Sporodiniella, Conidiobolus, Entomophaga, Entomophthora, Erynia, Massospora, Meristacrum, Neozygites, Pandora, Zoophthora, Blastodendrion, Metschnikowia, Mycoderma, Ascophaera, Cordyceps, Torrubiella, Nectria, Hypocrella, Calonectria, Filariomyces, Hesperomyces, Trenomyces, Myriangium, Podonectria, Akanthomyces, Aschersonia, Aspergillus, Beauveria, Culicinomyces, Engyodontium, Fusarium, Gibellula, Hirsutella, Hymenostilbe, Isaria, Metarhizium, Nomuraea, Paecilomyces, Paraisaria, Pleurodesmospora, nonucephalomyces, Pseudogibellula, Sorosporella, Stillbella, Tetranacrium, Tilachlidium, Tolypocladium, Verticillium, Aegerita, Filobasidiella, Septobasidium, Uredinella и их комбинации.
Неограничивающие примеры конкретных видов, которые можно применять в качестве грибного инсектицида в композициях, описанных в данном документе, включают Trichoderma hamatum, Trichoderma hazarium, Alternaria cassiae, Fusarium lateritum, Fusarium solani, Lecanicillium lecanii, Aspergillus parasiticus, Verticillium lecanii, Metarhizium anisopliae и Beauveria bassiana. В одном из вариантов осуществления композиции, раскрытые в данном документе, могут включать любой из грибных инсектицидов, приведенных выше, включая любую их комбинацию.
В одном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид из рода Metarhizium spp., такой как Metarhizium anisopliae (также может указываться в уровне техники как Metarrhizium anisopliae, Metarhizium brunneum или "зеленая мускардина"). В по меньшей мере одном варианте осуществления грибной инсектицид содержит штамм Metarhizium anisopliae. В другом варианте осуществления композиция содержит споры штамма Metarhizium anisopliae.
В конкретном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной пестицид, содержащий штамм F52 Metarhizium anisopliae (также известен как штамм 52 Metarhizium anisopliae, штамм 7 Metarhizium anisopliae, штамм 43 Metarhizium anisopliae, BI О-1020, TAE-001 Metarhizium anisopliae и депонированный под номерами DSM 3884, DSM 3885, АТСС 90448, SD 170 и ARSEF 7711) (доступней от Novozymes Biologicals, Inc., США). В еще другом конкретном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, содержащий споры штамма F52 Metarhizium anisopliae.
В еще другом варианте осуществления композиция может дополнительно содержать по меньшей мере один грибной инсектицид из рода Beauveria spp., такой как, например, Beauveria bassiana. В по меньшей мере одном варианте осуществления грибной инсектицид дополнительно содержит штамм Beauveria bassiana. В другом варианте осуществления композиция дополнительно содержит споры штамма Beauveria bassiana.
В конкретном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, содержащий штамм АТСС-74040 Beauveria bassiana. В другом варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, содержащий споры штамма АТСС-74040 Beauveria bassiana. В другом конкретном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, содержащий штамм АТСС-74250 Beauveria bassiana. В еще другом конкретном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, содержащий споры штамма АТСС-74250 Beauveria bassiana. В еще другом конкретном варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, содержащий смесь штамма АТСС-74040 Beauveria bassiana и штамма ATCC-74250Beauven’a bassiana. В еще другом варианте осуществления композиция дополнительно содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, содержащий смесь спор штамма АТСС-74040 Beauveria bassiana и штамма АТСС-74250 Beauveria bassiana.
В еще другом конкретном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут содержать комбинацию грибов. В одном варианте осуществления композиция может содержать два или несколько грибных инсектицидов, которые являются различными штаммами одного и того же вида. В другом варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере два разных грибных инсектицида, которые являются штаммами разных видов. В одном из вариантов осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид из рода Metarhizium spp. и по меньшей мере один грибной инсектицид из рода Beauveria spp.. В другом варианте осуществления композиция содержит споры Metarhizium spp. и Beauveria spp.
В конкретном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм Metarhizium anisopliae и по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм Beauveria bassiana. В другом варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где грибной инсектицид содержит споры Metarhizium anisopliae и Beauveria bassiana.
В более конкретном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм F52 Metarhizium anisopliae и по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм штамма АТСС-74040 Beauveria bassiana. В еще другом варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где грибной инсектицид содержит споры штамма F52 Metarhizium anisopliae и штамма АТСС-74040 Beauveria bassiana.
В еще другом конкретном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм F52 Metarhizium anisopliae и по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм штамма АТСС-74250 Beauveria bassiana. В еще другом варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где грибной инсектицид содержит споры штамма F52 Metarhizium anisopliae и штамма АТСС-74250 Beauveria bassiana.
В еще другом конкретном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм F52 Metarhizium anisopliae, по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм штамма АТСС-74040 Beauveria bassiana и по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм штамма АТСС-74250 Beauveria bassiana. В еще другом варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где грибной инсектицид содержит споры штамма F52 Metarhizium anisopliae, штамма АТСС-74040 Beauveria bassiana и штамма АТСС-74250 Beauveria bassiana.
В другом варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм Paecilomyces fumosoroseus. В еще другом варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм FE991 Paecilomyces fumosoroseus (в NOFLY от FuturEco Bioscience S.L., Барселона, Испания). В еще другом варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один грибной инсектицид, где по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм FE991 Paecilomyces fumosoroseus, по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм F52 Metarhizium anisopliae, по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм штамма АТСС-74040 Beauveria bassiana и по меньшей мере одним грибным инсектицидом является штамм штамма АТСС-74250 Beauveria bassiana и их комбинации.
В другом варианте осуществления композиции, раскрытые в данном документе, содержат нематоцид. В более конкретном варианте осуществления нематоцидом является микробный нематоцид, более предпочтительно нематофаговый гриб и/или нематофаговые бактерии. В конкретном варианте осуществления микробным нематоцидом является нематофаговый гриб, выбранный из группы, состоящей из Arthrobotrys spp., Dactylaria spp., Harposporium spp., Hirsutella spp., Monacrosporium spp., Nematoctonus spp., Meristacrum spp., Myrothecium spp., Paecilomyces spp., Pasteuria spp., Pochonia spp., Trichoderma spp., Verticillium spp.и их комбинаций. В еще более конкретном варианте осуществления нематофаговый гриб выбран из группы, состоящей из Arthrobotrys dactyloides, Arthrobotrys oligospora, Arthrobotrys superb, Arthrobotrys dactyloides, Dactylaria Candida, Harposporium anguillulae, Hirsutella rhossiliensis, Hirsutella minnesotensis, Monacrosporium cionopagum, Nematoctonus geogenius, Nematoctonus leiosporus, Meristacrum asterospermum, Myrothecium verrucaria, Paecilomyces lilacinus, Paecilomyces fumosoroseus, Pasteuria penetrans, Pasteuria usgae, Pochonia chlamydopora, Trichoderma harzianum, Trichoderma virens, Verticillium chlamydosporum и их комбинаций.
В более конкретном варианте осуществления микробным нематоцидом являются нематофаговые бактерии, выбранные из группы, состоящей из Actinomycetes spp., Agrobacterium spp., Arthrobacter spp., Alcaligenes spp., Aureobacterium spp., Azobacter spp., Beijerinckia spp., Burkholderia spp., Chromobacterium spp., Clavibacter spp., Clostridium spp., Comomonas spp., Corynebacterium spp., Curtobacterium spp., Desulforibtio spp., Enterobacter spp., Flavobacterium spp., Gluconobacter spp., Hydrogenophage spp., Klebsiella spp., Memunobacterium spp., Phyllobacterium spp., Phingobacterium spp., Photorhabdus spp., Serratia spp.Stenotrotrophomonas spp., Xenorhadbus spp.Variovorax spp., Streptomyces spp., Pseudomonas spp., Paenibacillus spp., и их комбинации.
В еще более конкретном варианте осуществления микробным нематоцидом являются нематофаговые бактерии, выбранные из группы, состоящей из Chromobacterium subtsugae, Chromobacterium violaceum, Streptomyces lydicus, Streptomyces violaceusniger, и их комбинации. В конкретном варианте осуществления штамм Chromobacterium subtsugae более предпочтительно является штаммом Chromobacterium subtsugae sp. nov., штамм Chromobacterium subtsugae sp.nov. имет учетный номер в депозитарии NRRL В-30655. В еще другом конкретном варианте осуществления штамм Streptomyces является штаммом WYEC 108 Streptomyces lydicus, штаммом YCED 9 Streptomyces violaceusniger, WYE53 Streptomyces или их комбинацией.
Питательное(ые) вещество(а)
1
2
3
5
6
7
8
9
12
В еще другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут дополнительно содержать один или несколько полезных питательных веществ. Неограничивающие примеры питательных веществ для применения в композициях, описанных в данном документе, включают витамины (например, витамин А, комплекс витаминов В (т.е., витамин В, витамин В, витамин В, витамин В, витамин В, витамин В, витамин В, витамин В, витамин В, холин) витамин С, витамин D, витамин Е, витамин К, каротиноиды (α-каротин, β-каротин, криптоксантин, лютеин, ликопен, зеаксантин и т.д.), макроэлементы (например, фосфор, кальций, магний, калий, натрий, железо и т.д.), микроэлементы (например, бор, кобальт, хлор, хром, медь, фтор, йод, железо, марганец, молибден, селен, цинк и т.д.), органические кислоты (например, уксусную кислоту, лимонную кислоту, молочную кислоту, яблочную кислоту, таурин и т.д.) и их комбинации. В конкретном варианте осуществления композиции могут содержать фосфор, бор, хлор, медь, железо, марганец, молибден, цинк или их комбинации.
В другом варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут дополнительно содержать фосфор. В одном варианте осуществления фосфор может быть получен из источника. В другом варианте осуществления подходящие источники фосфора включают источники фосфора, способные подвергаться солюбилизации под воздействием одного или нескольких микроорганизмов (например, Penicillium bilaiae и т.д.).
В одном варианте осуществления фосфор может быть получен из фосфатной руды. В другом варианте осуществления фосфор может быть получен из удобрений, содержащих один или несколько источников фосфора. Коммерчески доступные готовые фосфатные удобрения подразделяются на множество видов. Некоторые распространенные виды содержат фосфорит, моноаммонийфосфат, диаммонийфосфат, монокальцийфосфат, суперфосфат, тройной суперфосфат и/или полифосфат аммония. Все из этих удобрений получают путем химической обработки нерастворимых природных фосфоритов на оборудовании для производства удобрений в промышленном масштабе, и этот продукт является дорогостоящим. Посредством настоящего раскрытия возможно уменьшение количества этих удобрений, вносимых в почву, при сохранении такого же количества фосфора, поглощаемого из почвы.
В еще другом варианте осуществления фосфор может быть получен из органического источника фосфора. В другом конкретном варианте осуществления источник фосфора может включать в себя органическое удобрение. Органическое удобрение относится к почвоулучшителю, полученному из природных источников, что обеспечивает по меньшей мере минимальное процентное содержание азота, фосфата и карбоната калия. Неограничивающие примеры органических удобрений включают в себя растительные продукты и продукты жизнедеятельности животных, каменную пыль, морские водоросли, инокулянты и кондиционеры. Эти удобрения зачастую являются доступными в садовых центрах и от садоводческих компаний-поставщиков. В частности, органический источник фосфора доступен в виде костной муки, мясной муки, навоза, компоста, осадка сточных вод или гуано, или их комбинаций.
В еще другом варианте осуществления фосфор может быть получен из комбинации источников фосфора, включая без ограничения, фосфорит, удобрения, содержащие один или несколько источников фосфора (например, моноаммонийфосфат, диаммонийфосфат, монокальцийфосфат, суперфосфат, тройной суперфосфат, полифосфат аммония и т.д.), один или несколько органических источников фосфора и их комбинации.
Биостимулятор(ы)
В одном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут дополнительно содержать один или несколько полезных биостимуляторов. Биостимуляторы могут улучшить метаболические или физиологические процессы, такие как дыхание, фотосинтез, усвоение нуклеиновой кислоты, потребление ионов, доставку питательных веществ или их комбинации. Неограничивающие примеры биостимуляторов включают экстракты морских водорослей (например, Ascophyllum nodosum), гуминовые кислоты (например, гумат калия), фульвокислоты, мио-инозитол, глицин и их комбинации. В другом варианте осуществления композиции включают экстракты морских водорослей, гуминовые кислоты, фульвокислоты, мио-инозитол, глицин и их комбинации.
Полимер(ы)
В одном варианте осуществления композиции, описанные в настоящем документе, могут дополнительно содержать один или несколько полимеров. Неограничивающие применения полимеров в сельскохозяйственной отрасли включают агрохимическую доставку, удаление тяжелых металлов, удержание воды и/или подачу воды и их комбинации. Pouci, er al., Am. J. Agri. & Biol. Sci., 3(7):299-314 (2008). В одном варианте осуществления один или несколько полимеров представляют собой природный полимер (например, агар, крахмал, альгинат, пектин, целлюлозу и т.д.), синтетический полимер, биоразлагаемый полимер (например, поликапролактон, полилактид, поливиниловый спирт) и т.д.) или их комбинации.
Неограничивающий список полимеров, применяемых для композиций, описанных в настоящем документе, представлен в Pouci, et al., Am. J. Agri. & Biol. Sci., 3(7):299-314 (2008). В одном из вариантов осуществления композиции, описанные в настоящем документе, включают в себя целлюлозу, производные целлюлозы, метилцеллюлозу, производные метилцеллюлозы, крахмал, агар, альгинат, пектин, поливинилпирролидон и их комбинации.
Увлажняющее средство(а)
В одном варианте осуществления композиции, описанные в настоящем документе, могут дополнительно содержать один или несколько увлажняющих средств. Увлажняющие средства обычно используются на почвах, в частности гидрофобных почвах, для улучшения инфильтрации и/или проникновения воды в почву. Увлажняющим средством могут быть вспомогательное средство, масло, поверхностно-активное вещество, буфер, подкислитель или их комбинация. В варианте осуществления увлажняющим средством является поверхностно-активное вещество. В варианте осуществления увлажняющим средством является один или несколько неионных поверхностно-активных веществ, одно или несколько анионных поверхностно-активных веществ или их комбинация. В следующем варианте осуществления увлажняющим средством является одно или несколько неионных поверхностно-активных веществ.
Поверхностно-активные вещества, приемлемые для композиций, раскрываемых в настоящем документе, представлены в разделе "Поверхностно-активные вещества".
Поверхностно-активное(ые) вещество(а)
Поверхностно-активные вещества, подходящие для композиций, описанных в настоящем документе, могут быть неионными поверхностно-активными веществами (например, полуполярными, и/или анионными, и/или катионными, и/или цвиттерионными). С помощью поверхностно-активных веществ возможны увлажнение и эмульгация почвы(почв) и/или грунта(грунтов). Предполагается, что поверхностно-активные вещества, применяемые в описанной композиции, обладают низкой токсичностью в отношении любых микроорганизмов, содержащихся в композиции. Кроме того, предполагается, что поверхностно-активные вещества, применяемые в описываемой композиции, характеризуются низкой фитотоксичностью (т.е. степенью токсичности вещества или комбинации веществ по отношению к растению). Можно применять одно поверхностно-активное вещество или смесь из нескольких поверхностно-активных веществ.
Анионные поверхностно-активные вещества
Анионные поверхностно-активные вещества или смеси анионных и неионогенных поверхностно-активных веществ также могут применяться в композициях. Анионные поверхностно-активные вещества представляют собой поверхностно-активные вещества, у которых гидрофильная часть в водном растворе находится в анионном или отрицательно заряженном состоянии. Композиции, описанные в настоящем документе, могут содержать одно или несколько анионных поверхностно-активных веществ. Анионное(ые) поверхностно-активное(ые) вещество(а) может(могут) быть либо водорастворимыми анионными поверхностно-активными веществами, водонерастворимыми анионными поверхностно-активными веществами, либо комбинацией водорастворимых анионных поверхностно-активных веществ и водонерастворимых анионных поверхностно-активных веществ. Неограничивающие примеры анионных поверхностно-активных веществ включают в себя сульфоновые кислоты, сложные эфиры серной кислоты, карбоновые кислоты и их соли. Неограничивающие примеры водорастворимых анионных поверхностно-активных веществ включают алкилсульфаты, алкилэфирсульфаты, алкиламидэфирсульфаты, алкиларилполиэфирсульфаты, алкиларилсульфаты, алкиларилсульфонаты, моноглицеридсульфаты, алкилсульфонаты, алкиламидсульфонаты, алкиларилсульфонаты, бензолсульфонаты, толуолсульфонаты, ксилолсульфонаты, кумолсульфонаты, алкилбензолсульфонаты, алкилдифенилоксидсульфонат, альфа-олефинсульфонаты, алкилнафталинсульфонаты, сульфонаты парафинов, сульфонаты лигнина, алкилсульфосукцинаты, этоксилированные сульфосукцинаты, алкил эфир сульфосукцинаты, алкиламид сульфосукцинаты, алкилсульфосукцинамат, алкилсульфоацетаты, алкилфосфаты, фосфатный эфир, алкиловые простые эфиры фосфатов, ацилсаркозинаты, ацилизетионаты, N-ацилтаураты, N-ацил-N-алкилтаураты, алкилкарбоксилаты или их комбинации.
Неионогенные поверхностно-активные вещества
Неионогенные поверхностно-активные вещества представляют собой поверхностно-активные вещества, характеризующиеся отсутствием электрического заряда при растворении или диспергировании в водной среде. По меньшей мере в одном варианте осуществления в композиции, описанной в настоящем документе, применяют одно или несколько неионогенных поверхностно-активных веществ, поскольку они обеспечивают желаемые смачивающие и эмульгирующие эффекты и существенно не ингибируют стабильность и активность споры. Неионогенное(ые) поверхностно-активное(ые) вещество(а) может(могут) быть либо водорастворимыми неионогенными поверхностно-активными веществами, водонерастворимыми неионогенными поверхностно-активными веществами, либо комбинацией водорастворимых неионогенных поверхностно-активных веществ и водонерастворимых неионогенных поверхностно-активных веществ.
Водонерастворимые неионогенные поверхностно-активные вещества
Неограничивающие примеры водонерастворимых неионогенных поверхностно-активных веществ включают алкильные и арильные эфиры глицерина, гликолевые эфиры, этаноламиды, сульфоаниламиды, спирты, амиды, этоксилаты спирта, сложные эфиры глицерина, сложные гликолевые эфиры, этоксилаты сложного эфира глицерина и сложных гликолевых эфиров, сахарные алкилполигликозиды, поли-оксиэтилированные жирные кислоты, конденсаты алканоламина, алканоламиды, третичные ацетиленовые гликоли, полиоксиэтилированные меркаптаны, сложные эфиры карбоновых кислот, полиоксиэтилированные полиоксипропиленгликоли, сложные эфиры сорбитана и жирных кислот или их комбинации. Также включены блок-сополимеры ЕО/РО (ЕО представляет собой окись этилена, РО представляет собой окись пропилена), полимеры и сополимеры ЕО, полиамины и поливинилпирролидоны.
Водорастворимые неионогенные поверхностно-активные вещества
Неограничивающие примеры водорастворимых неионогенных поверхностно-активных веществ включают этоксилаты спирта сорбитана и жирной кислоты и этоксилаты эфира сорбитана и жирной кислоты.
Комбинация неионогенных поверхностно-активных веществ
В одном варианте осуществления композиции, описанные в настоящем документе, содержат по меньшей мере одно или несколько неионогенных поверхностно-активных веществ. В одном варианте осуществления композиции содержат по меньшей мере одно нерастворимое в воде неионогенное поверхностно-активное вещество и по меньшей мере одно растворимое в воде неионогенное поверхностно-активное вещество. В следующем варианте осуществления композиции содержат комбинацию неионогенных поверхностно-активных веществ, содержащих углеводородные цепи практически одинаковой длины.
Другие поверхностно-активные вещества
В другом варианте осуществления композиции, описанные в настоящем документе, также могут содержать кремнийорганические поверхностно-активные вещества, противовспениватели на основе силикона, применяемые в качестве поверхностно-активных веществ в противовспенивателях на основе силикона и минеральных масел. В еще одном варианте осуществления композиции, описанные в настоящем документе, также могут включать соли щелочных металлов и жирных кислот (например, растворимые в воде соли щелочных металлов и жирных кислот и/или не растворимые в воде соли щелочных металлов и жирных кислот).
Предотвращающее(ие) замерзание средство(а)
В одном варианте осуществления композиции, описанные в данном документе, могут дополнительно содержать одно или несколько предотвращающих замерзание средств. Неограничивающие примеры предотвращающих замерзание средств включают этиленгликоль, пропиленгликоль, мочевину, глицерин и их комбинации.
СПОСОБЫ
В другом аспекте раскрыты способы применения одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений для повышения выживаемости одного или нескольких микроорганизмов. В конкретном варианте осуществления способ включает добавление одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений, описанных в данном документе, в смесь, содержащую одно или несколько противомикробных соединений, для ингибирования противомикробной активности противомикробного соединения. В еще другом варианте осуществления способ включает этап добавления одного или нескольких микроорганизмов в смесь. В еще другом варианте осуществления один или несколько микроорганизмов, добаляемых в смесь, являются одним или несколькими полезными микроорганизмами. В конкретном варианте осуществления смесью является композиция для обработки семян.
Более того, способ применения одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений для повышения выживаемости одного или нескольких микроорганизмов дополнительно включает этап добавления одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов, описанных в данном документе. В одном варианте осуществления этап добавления одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов можно осуществлять перед, после или одновременно с этапом добавления одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений в смесь. В еще другом варианте осуществления этап добавления одного нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов можно осуществлять перед, после или одновременно с этапом добавления одного или нескольких микробов в смесь.
НАНЕСЕНИЕ ПОКРЫТИЙ НА СЕМЯ
В другом аспекте семена покрывают одной или несколькими композициями, описанными в данном документе.
В другом варианте осуществления способ дополнительно включает способ нанесения покрытия на семя, предусматривающий добавление одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений, описанных в данном документе, в смесь, содержащую одно или несколько противомикробных соединений для ингибирования противомикробной активности противомикробного соединения, добавление одного или нескольких микроорганизмов в смесь и применение смеси по отношению к семени. В еще другом варианте осуществления один или несколько микроорганизмов, добаляемых в смесь, являются одним или несколькими полезными микроорганизмами. В конкретном варианте осуществления смесью является композиция для обработки семян.
Этап применения можно выполнять с помощью любого способа, известного из уровня техники. Неорганичивающие примеры применения по отношению к семени включают без ограничения опрыскивание семени, вымачивание семени, капельную обработку семени, посыпание семени, заливание семени и/или нанесение покрытия на семя. В более конкретном варианте осуществления этапом применения является этап нанесения покрытия на семя. В дополнительном варианте осуществления этап применения повторяют (например, более одного раза, то есть этап обеспечения контакта повторяют дважды, три раза, четыре раза, пять раз, шесть раз, семь раз, восемь раз, девять раз, десять раз и т.д.).
Более того, способ нанесения покрытия на семя дополнительно включает этап добавления одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов, описанных в данном документе. В одном варианте осуществления, этап добавления одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов можно осуществлять перед, после или одновременно с этапом добавления смеси одного или нескольких противомикробных соединений для ингибирования противомикробной активности противомикробного соединения. В еще другом варианте осуществления этап добавления одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов можно осуществлять перед, после или одновременно с этапом добавления одного или нескольких микроорганизмов в смесь. В еще другом варианте осуществления этап добавления одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов можно осуществлять перед, после или одновременно с этапом применения смеси по отношению к семени.
В одном варианте осуществления семена могут быть обработаны композицией(ями), описанной(ыми) в настоящем документе, несколькими способами, но предпочтительно путем опрыскивания или капельной обработки. Опрыскивание и капельная обработка могут быть проведены путем составления композиций, описанных в настоящем документе, и опрыскивания или капельной обработки композицией(иями) по отношению к семени(семенам) посредством непрерывной системы подачи (которую калибруют для проведения обработки на предварительно определенной скорости пропорционально непрерывному потоку семени), такой как установка барабанного типа. Также могут применяться системы для работы с партиями, в которых предварительно определенный объем партии семян и композиции(ий), описанной(ых) в настоящем документе, подают в смеситель. Системы и аппараты для осуществления этих способов являются коммерчески доступными от многочисленных поставщиков, например, Bayer CropScience (Gustafson).
В другом варианте осуществления обработка предусматривает нанесение покрытия на семена. Один такой способ предусматривает покрытие внутренней стенки сферического контейнера композицией(иями), описанной(ыми) в настоящем документе, добавление семян, затем вращение контейнера для обеспечения контакта семян со стенкой и композицией(ями), причем способ известен из уровня техники как "нанесение покрытия при помощи контейнера". На семена можно наносить покрытие при помощи комбинаций способов нанесения покрытия. Замачивание обычно влечет за собой применение жидких форм описываемых композиций. Например, семена могут быть замочены в течение от приблизительно 1 минуты до приблизительно 24 часов (например, по меньшей мере 1 мин., 5 мин., 10 мин., 20 мин., 40 мин., 80 мин., 3 ч., 6 ч., 12 ч., 24 ч.).
Варианты осуществления настоящего раскрытия дополнительно определены следующими пронумерованными параграфами:
1. Способ увеличения выживаемости одного или нескольких полезных микроорганизмов, включающий добавление в композицию для обработки семян одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений, которые ингибируют противомикробную активность одного или нескольких противомикробных соединений.
2. Способ по параграфу 1, где способ дополнительно включает этап добавления одного или нескольких полезных микроорганизмов в композицию для обработки семян.
3. Способ по параграфам 1 или 2, где одним или несколькими полезными микроорганизмами является азотфиксирующий микроорганизм, фосфат-солюбилизирующий микроорганизм или их комбинация.
4. Способ по параграфу 1 или 2, где одним или несколькими полезными микроорганизмами является азотфиксирующий микроорганизм.
5. Способ по параграфу 1 или 2, где одним или несколькими полезными микроорганизмами является фосфат-солюбилизирующий микроорганизм.
6. Способ по параграфам 3-4, где азотфиксирующий микроорганизм представляет собой вид, принадлежащий к Rhizobia, выбранный из группы, состоящей из Rhizobium spp., Bradyrhizobium spp., Azorhizobium spp., Sinorhizobium spp., Mesorhizobium spp., Azospirillum spp. и их комбинаций.
7. Способ по параграфу 6, где азотфиксирующий микроорганизм представляет собой вид бактерий, выбранный из группы, состоящей из Rhizobium cellulosilyticum, Rhizobium daejeonense, Rhizobium etli, Rhizobium galegae, Rhizobium gallicum, Rhizobium giardinii, Rhizobium hainanense, Rhizobium huautlense, Rhizobium indigoferae, Rhizobium leguminosarum, Rhizobium loessense, Rhizobium lupini, Rhizobium lusitanum, Rhizobium meliloti, Rhizobium mongolense, Rhizobium miluonense, Rhizobium sullae, Rhizobium tropici, Rhizobium undicola, Rhizobium yanglingense, Bradyrhizobium bete, Bradyrhizobium canariense, Bradyrhizobium elkanii, Bradyrhizobium iriomotense, Bradyrhizobium japonicum, Bradyrhizobium jicamae, Bradyrhizobium liaoningense, Bradyrhizobium pachyrhizi, Bradyrhizobium yuanmingense, Azorhizobium caulinodans, Azorhizobium doebereinerae, Sinorhizobium abri, Sinorhizobium adhaerens, Sinorhizobium americanum, Sinorhizobium aborts Sinorhizobium fredii, Sinorhizobium indiaense, Sinorhizobium kostiense, Sinorhizobium kummerowiae, Sinorhizobium medicae, Sinorhizobium meliloti, Sinorhizobium mexicanus, Sinorhizobium morelense, Sinorhizobium saheli, Sinorhizobium terangae, Sinorhizobium xinjiangense, Mesorhizobium albiziae, Mesorhizobium amorphae, Mesorhizobium chacoense, Mesorhizobium ciceri, Mesorhizobium huakuii, Mesorhizobium loti, Mesorhizobium mediterraneum, Mesorhizobium pluifarium, Mesorhizobium septentrionale, Mesorhizobium temperatum, Mesorhizobium tianshanense, Azospirillum amazonense, Azospirillum brasilense, Azospirillum canadense, Azospirillum doebereinerae, Azospirillum formosense, Azospirillum halopraeferans, Azospirillum irakense, Azospirillum largimobile, Azospirillum lipoferum, Azospirillum melinis, Azospirillum oryzae, Azospirillum picis, Azospirillum rugosum, Azospirillum thiophilum, Azospirillum zeae и их комбинаций.
8. Способ по параграфам 3 или 5, где фосфат-солюбилизирующий микроорганизм представляет собой вид, выбранный из группы, состоящей из Acinetobacter spp., Arthrobacter spp, Arthrobotrys spp., Aspergillus spp., Azospirillum spp., Bacillus spp., Burkholderia spp., Candida spp., Chryseomonas spp., Enterobacter spp., Eupenicillium spp., Exiguobacterium spp., Klebsiella spp., Kluyvera spp., Microbacterium spp., Mucor spp., Paecilomyces spp., Paenibacillus spp., Penicillium spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Stenotrophomonas spp., Streptomyces spp., Streptosporangium spp., Swaminathania spp., Thiobacillus spp., Torulospora spp., Vibrio spp., Xanthobacter spp., Xanthomonas spp.и их комбинаций.
9. Способ по параграфу 8, где фосфат-солюбилизирующий микроорганизм представляет собой вид Penicillium spp., выбранный из группы, состоящей из Penicillium bilaiae, Penicillium albidum, Penicillium aurantiogriseum, Penicillium chrysogenum, Penicillium citreonigrum, Penicillium citrinum, Penicillium digitatum, Penicillium frequentas, Penicillium fuscum, Penicillium gaestrivorus, Penicillium glabrum, Penicillium griseofulvum, Penicillium implicatum, Penicillium janthinellum, Penicillium lilacinum, Penicillium minioluteum, Penicillium montanense, Penicillium nigricans, Penicillium oxalicum, Penicillium pinetorum, Penicillium pinophilum, Penicillium purpurogenum, Penicillium radicans, Penicillium radicum, Penicillium raistrickii, Penicillium rugulosum, Penicillium simplicissimum, Penicillium solitum, Penicillium variabile, Penicillium velutinum, Penicillium viridicatum, Penicillium glaucum, Penicillium fussiporus, Penicillium expansum и их комбинаций.
10. Способ по параграфу 1, где одно или несколько стабилизирующих микробов соединений представляют собой соединение, выбранное из группы, состоящей из дрожжевого экстракта, казеината кальция, молока, мочевины, гематиновых средств, мясного экстракта, аммиака, аминокислот, солей аммония, солей трехвалентного железа, солей двухвалентного железа, глюконолактона, глутатиона, лецитина, полисорбатов, альбумина, пептонов и их комбинаций.
11. Способ по параграфу 1, где одно или несколько противомикробных соединений представляют собой бактериостат, бактерицид или их комбинацию.
12. Способ по параграфу 11, где бактерицид представляет собой дезинфицирующее средство, антисептическое средство или антибиотик.
13. Способ по параграфу 12, где дезинфицирующее средство выбрано из группы, состоящей из активного хлора, активного кислорода, йода, спиртов, фенольных веществ, катионных поверхностно-активных веществ, сильных окислителей, тяжелых металлов и их солей, кислот и щелочей.
14. Способ по параграфу 12, где антисептическое средство выбрано из группы, состоящей из хлорных препаратов, йодных препаратов, пероксидов, спиртов, органических кислот, фенольных соединений, катионоактивных соединений.
15. Способ по параграфу 12, где антибиотик выбран из группы, состоящей из пенициллина, цефалоспоринов, аминогликозидных антибиотиков, фторхинолонов, нитрофуранов, ванкомицина, монобактамов, ко-тримоксазола и метронидазола.
16. Способ по параграфу 11, где бактериостат представляет собой азид натрия или тимеросол.
17. Способ по параграфу 1, где одно или несколько противомикробных соединений выбраны из группы, состоящей из формальдегида, бензилгемиформаля (фенилметоксиметанола), 2-бром-2-нитро-1,3-пропандиола, 1-(3-хлораллил)-3,5,7-триаза-1-азонийадамантанхлорида, дибромнитрилопропионамида, 1,2-бензизотиазолин-3-она, 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-она, 2-метил-4-изотиазолин-3-она, диазолинидила мочевины, трис(гидроксиметил)нитрометана, о-фенилфената натрия, арсенатов меди, оксида меди, соединений мышьяка, меди, ртути, соединений четвертичного аммония, азида натрия, тимеросола или их комбинаций.
18. Способ по параграфу 1, где способ дополнительно включает этап добавления одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов.
19. Способ по параграфу 18, где добавление одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов осуществляют после этапа добавления в композицию для обработки семян одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений, которые ингибируют противомикробную активность одного или нескольких противомикробных соединений.
20. Способ по параграфу 2, где добавление одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов осуществляют после этапа добавления одного или нескольких полезных микроорганизмов в композицию для обработки семян.
21. Способ по параграфу 18, где добавление одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов осуществляют одновременно с этапом добавления в композицию для обработки семян одного или нескольких стабилизирующих микробов соединений, которые ингибируют противомикробную активность одного или нескольких противомикробных соединений.
22. Способ по параграфу 20, где добавление одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов осуществляют одновременно с этапом добавления в композицию для обработки семян одного или нескольких полезных микроорганизмов.
23. Способ по параграфам 18-22, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов представляют собой одну или несколько сигнальных молекул растения, выбранных из группы, состоящей из липохитоолигосахаридов, (LCO), хитоолгигосахаридов (СО), хитиновых соединений, флавоноидов, жасмоновой кислоты, метилжасмоната, линолевой кислоты, линоленовой кислоты, каррикинов и их комбинаций.
24. Способ по п. 23, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов содержат один или несколько СО.
25. Способ по п. 23, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов содержат один или несколько LCO.
26. Способ по п. 23, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов содержат один или несколько флавоноидов.
27. Способ нанесения покрытия на семя, включающий применение композиции для обработки семян по отношению к семени, где композиция для обработки семян содержит один или несколько полезных микроорганизмов и одно или несколько стабилизирующих микробов соединений, которые ингибируют противомикробную активность одного или нескольких противомикробных соединений.
28. Способ по параграфу 27, где один или несколько полезных микроорганизмов представляют собой азотфиксирующий микроорганизм, фосфат-солюбилизирующий микроорганизм или их комбинацию.
29. Способ по параграфу 27, где один или несколько полезных микроорганизмов представляют собой азотфиксирующий микроорганизм.
30. Способ по параграфу 27, где один или несколько полезных микроорганизмов представляют собой фосфат-солюбилизирующий микроорганизм.
31. Способ по параграфу 29, где азотфиксирующий микроорганизм представляет собой вид, принадлежащий к Rhizobia, выбранный из группы, состоящей из Rhizobium spp., Bradyrhizobium spp., Azorhizobium spp., Sinorhizobium spp., Mesorhizobium spp., Azospirillum spp. и их комбинаций.
32. Способ по параграфу 31, где азотфиксирующий микроорганизм представляет собой вид бактерий, выбранный из группы, состоящей из Rhizobium cellulosilyticum, Rhizobium daejeonense, Rhizobium etli, Rhizobium galegae, Rhizobium gallicum, Rhizobium giardinii, Rhizobium hainanense, Rhizobium huautlense, Rhizobium indigoferae, Rhizobium leguminosarum, Rhizobium loessense, Rhizobium lupini, Rhizobium lusitanum, Rhizobium meliloti, Rhizobium mongolense, Rhizobium miluonense, Rhizobium sullae, Rhizobium tropici, Rhizobium undicola, Rhizobium yanglingense, Bradyrhizobium bete, Bradyrhizobium canariense, Bradyrhizobium elkanii, Bradyrhizobium iriomotense, Bradyrhizobium japonicum, Bradyrhizobium jicamae, Bradyrhizobium liaoningense, Bradyrhizobium pachyrhizi, Bradyrhizobium yuanmingense, Azorhizobium caulinodans, Azorhizobium doebereinerae, Sinorhizobium abri, Sinorhizobium adhaerens, Sinorhizobium americanum, Sinorhizobium aboris Sinorhizobium fredii, Sinorhizobium indiaense, Sinorhizobium kostiense, Sinorhizobium kummerowiae, Sinorhizobium medicae, Sinorhizobium meliloti, Sinorhizobium mexicanus, Sinorhizobium morelense, Sinorhizobium saheli, Sinorhizobium terangae, Sinorhizobium xinjiangense, Mesorhizobium albiziae, Mesorhizobium amorphae, Mesorhizobium chacoense, Mesorhizobium ciceri, Mesorhizobium huakuii, Mesorhizobium loti, Mesorhizobium mediterraneum, Mesorhizobium pluifarium, Mesorhizobium septentrionale, Mesorhizobium temperatum, Mesorhizobium tianshanense, Azospirillum amazonense, Azospirillum brasilense, Azospirillum canadense, Azospirillum doebereinerae, Azospirillum formosense, Azospirillum halopraeferans, Azospirillum irakense, Azospirillum largimobile, Azospirillum lipoferum, Azospirillum melinis, Azospirillum oryzae, Azospirillum picis, Azospirillum rugosum, Azospirillum thiophilum, Azospirillum zeae и их комбинаций.
33. Способ по параграфу 30, где фосфат-солюбилизирующий микроорганизм представляет собой вид, выбранный из группы, состоящей из Acinetobacter spp., Arthrobacter spp, Arthrobotrys spp., Aspergillus spp., Azospirillum spp., Bacillus spp., Burkholderia spp., Candida spp., Chryseomonas spp., Enterobacter spp., Eupenicillium spp., Exiguobacterium spp., Klebsiella spp., Kluyvera spp., Microbacterium spp., Mucor spp., Paecilomyces spp., Paenibacillus spp., Penicillium spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Stenotrophomonas spp., Streptomyces spp., Streptosporangium spp., Swaminathania spp., Thiobacillus spp., Torulospora spp., Vibrio spp., Xanthobacter spp., Xanthomonas spp.и их комбинаций.
34. Способ по параграфу 33, где фосфат-солюбилизирующий микроорганизм представляет собой вид Penicillium spp., выбранный из группы, состоящей из Penicillium bilaiae, Penicillium albidum, Penicillium aurantiogriseum, Penicillium chrysogenum, Penicillium citreonigrum, Penicillium citrinum, Penicillium digitatum, Penicillium frequentas, Penicillium fuscum, Penicillium gaestrivorus, Penicillium glabrum, Penicillium griseofulvum, Penicillium implicatum, Penicillium janthinellum, Penicillium lilacinum, Penicillium minioluteum, Penicillium montanense, Penicillium nigricans, Penicillium oxalicum, Penicillium pinetorum, Penicillium pinophilum, Penicillium purpurogenum, Penicillium radicans, Penicillium radicum, Penicillium raistrickii, Penicillium rugulosum, Penicillium simplicissimum, Penicillium solitum, Penicillium variabile, Penicillium velutinum, Penicillium viridicatum, Penicillium glaucum, Penicillium fussiporus, Penicillium expansum и их комбинаций.
35. Способ по параграфу 27, где одно или несколько стабилизирующих микробов соединений представляют собой соединение, выбранное из группы, состоящей из дрожжевого экстракта, казеината кальция, молока, мочевины, гематиновых средств, мясного экстракта, аммиака, аминокислот, солей аммония, солей трехвалентного железа, солей двухвалентного железа, глюконолактона, глутатиона, лецитина, полисорбатов, альбумина, пептонов и их комбинаций.
36. Способ по параграфу 27, где одно или несколько противомикробных соединений представляют собой бактериостат, бактерицид или их комбинацию.
37. Способ по параграфу 36, где бактерицид представляет собой дезинфицирующее средство, антисептическое средство или антибиотик.
38. Способ по параграфу 37, где дезинфицирующее средство выбрано из группы, состоящей из активного хлора, активного кислорода, йода, спиртов, фенольных веществ, катионных поверхностно-активных веществ, сильных окислителей, тяжелых металлов и их солей, кислот и щелочей.
39. Способ по параграфу 37, где антисептическое средство выбрано из группы, состоящей из хлорных препаратов, йодных препаратов, пероксидов, спиртов, органических кислот, фенольных соединений, катионоактивных соединений.
40. Способ по параграфу 37, где антибиотик выбран из группы, состоящей из пенициллина, цефалоспоринов, аминогликозидных антибиотиков, фторхинолонов, нитрофуранов, ванкомицина, монобактамов, ко-тримоксазола и метронидазола.
41. Способ по параграфу 36, где бактериостат представляет собой азид натрия или тимеросол.
42. Способ по параграфу 27, где одно или несколько противомикробных соединений выбраны из группы, состоящей из формальдегида, бензилгемиформаля (фенилметоксиметанола), 2-бром-2-нитро-1,3-пропандиола, 1-(3-хлораллил)-3,5,7-триаза-1-азонийадамантанхлорида, дибромнитрилопропионамида, 1,2-бензизотиазолин-3-она, 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-она, 2-метил-4-изотиазолин-3-она, диазолинидила мочевины, трис(гидроксиметил)нитрометана, о-фенилфената натрия, арсенатов меди, оксида меди, соединений мышьяка, меди, ртути, соединений четвертичного аммония, азида натрия, тимеросола или их комбинаций.
43. Способ по параграфу 27, где способ дополнительно включает этап добавления одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов.
44. Способ по параграфу 43, где добавление одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов осуществляют после этапа применения композиции для обработки семян по отношению к семени, где композиция для обработки семян содержит один или несколько полезных микроорганизмов и одно или несколько стабилизирующих микробов соединений, которые ингибируют противомикробную активность одного или нескольких противомикробных соединений.
45. Способ по параграфу 43, где добавление одного или нескольких полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов осуществляют одновременно с этапом применения композиции для обработки семян по отношению к семени, где композиция для обработки семян содержит один или несколько полезных микроорганизмов и одно или несколько стабилизирующих микробов соединений, которые ингибируют противомикробную активность одного или нескольких противомикробных соединений.
46. Способ по параграфам 43-45, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов представляют собой одну или несколько сигнальных молекул растения, выбранных из группы, состоящей из LCO, СО, хитиновых соединений, флавоноидов, жасмоновой кислоты, метилжасмоната, линолевой кислоты, линоленовой кислоты, каррикинов и их комбинаций.
47. Способ по п. 46, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов содержат один или несколько СО.
48. Способ по п. 46, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов содержат один или несколько LCO.
49. Способ по п. 46, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов содержат один или несколько флавоноидов.
50. Композиция, содержащая
1) по меньшей мере одно соединение, включающее одно или несколько стабилизирующих микробов соединений; и
2) по меньшей мере один второй ингредиент, выбранный из групп (А)-(F):
(A) фунгицида;
(B) инсектицида;
(C) нематоцида;
(D) акарицида;
(E) гербицида и
(F) удобрения.
51. Композиция по параграфу 50, где одно или несколько стабилизирующих микробов соединений представляют собой соединение, выбранное из группы, состоящей из дрожжевого экстракта, казеината кальция, молока, мочевины, гематиновых средств, мясного экстракта, аммиака, аминокислот, солей аммония, солей трехвалентного железа, солей двухвалентного железа, глюконолактона, глутатиона, лецитина, полисорбатов, альбумина, пептонов и их комбинаций.
52. Композиция по параграфу 50, где по меньшей мере один второй ингредиент, выбранный из групп (А)-(F), содержит одно или несколько противомикробных соединений.
53. Композиция по параграфу 52, где одно или несколько противомикробных соединений представляют собой бактериостат, бактерицид или их комбинацию.
54. Композиция по параграфу 53, где бактерицид представляет собой дезинфицирующее средство, антисептическое средство или антибиотик.
55. Композиция по параграфу 54, где дезинфицирующее средство выбрано из группы, состоящей из активного хлора, активного кислорода, йода, спиртов, фенольных веществ, катионных поверхностно-активных веществ, сильных окислителей, тяжелых металлов и их солей, кислот и щелочей.
56. Композиция по параграфу 54, где антисептическое средство выбрано из группы, состоящей из хлорных препаратов, йодных препаратов, пероксидов, спиртов, органических кислот, фенольных соединений, катионоактивных соединений.
57. Композиция по параграфу 54, где антибиотик выбран из группы, состоящей из пенициллина, цефалоспоринов, аминогликозидных антибиотиков, фторхинолонов, нитрофуранов, ванкомицина, монобактамов, ко-тримоксазола и метронидазола.
58. Композиция по параграфу 53, где бактериостат представляет собой азид натрия или тимеросол.
59. Композиция по параграфу 52, где одно или несколько противомикробных соединений выбрано из группы, состоящей из формальдегида, бензилгемиформаля (фенилметоксиметанола), 2-бром-2-нитро-1,3-пропандиола, 1-(3-хлораллил)-3,5,7-триаза-1-азонийадамантанхлорида, дибромнитрилопропионамида, 1,2-бензизотиазолин-3-она, 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-она, 2-метил-4-изотиазолин-3-она, диазолинидила мочевины, трис(гидроксиметил)нитрометана, о-фенилфената натрия, арсенатов меди, оксида меди, соединений мышьяка, меди, ртути, соединений четвертичного аммония, азида натрия, тимеросола или их комбинаций.
60. Композиция по параграфу 50, где композиция дополнительно содержит один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов.
61. Композиция по параграфу 60, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов представляют собой одну или несколько сигнальных молекул растения, выбранных из группы, состоящей из LCO, СО, хитиновых соединений, флавоноидов, жасмоновой кислоты, метилжасмоната, линолевой кислоты, линоленовой кислоты, каррикинов и их комбинаций.
62. Композиция по параграфу 61, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов содержат один или несколько СО.
63. Композиция по параграфу 61, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов содержат один или несколько LCO.
64. Композиция по параграфу 61, где один или несколько полезных с сельскохозяйственной точки зрения ингредиентов содержат один или несколько флавоноидов.
65. Композиция по параграфу 61, где композиция дополнительно содержит один или несколько полезных микроорганизмов.
66. Композиция по параграфу 65, где один или несколько полезных микроорганизмов представляют собой азотфиксирующий микроорганизм, фосфат-солюбилизирующий микроорганизм или их комбинацию.
67. Композиция по параграфу 66, где один или несколько полезных микроорганизмов представляют собой азотфиксирующий микроорганизм.
68. Композиция по параграфу 66, где один или несколько полезных микроорганизмов представляют собой фосфат-солюбилизирующий микроорганизм.
69. Композиция по параграфам 66-67, где азотфиксирующий микроорганизм представляет собой вид, принадлежащий к Rhizobia, выбранный из группы, состоящей из Rhizobium spp., Bradyrhizobium spp., Azorhizobium spp., Sinorhizobium spp., Mesorhizobium spp., Azospirillum spp. и их комбинаций.
70. Композиция по параграфу 69, где азотфиксирующий микроорганизм представляет собой вид бактерий, выбранный из группы, состоящей из Rhizobium cellulosilyticum, Rhizobium daejeonense, Rhizobium etli, Rhizobium galegae, Rhizobium gallicum, Rhizobium giardinii, Rhizobium hainanense, Rhizobium huautlense, Rhizobium indigoferae, Rhizobium leguminosarum, Rhizobium loessense, Rhizobium lupini, Rhizobium lusitanum, Rhizobium meliloti, Rhizobium mongolense, Rhizobium miluonense, Rhizobium sullae, Rhizobium tropici, Rhizobium undicola, Rhizobium yanglingense, Bradyrhizobium bete, Bradyrhizobium canariense, Bradyrhizobium elkanii, Bradyrhizobium iriomotense, Bradyrhizobium japonicum, Bradyrhizobium jicamae, Bradyrhizobium liaoningense, Bradyrhizobium pachyrhizi, Bradyrhizobium yuanmingense, Azorhizobium caulinodans, Azorhizobium doebereinerae, Sinorhizobium abri, Sinorhizobium adhaerens, Sinorhizobium americanum, Sinorhizobium aboris Sinorhizobium fredii, Sinorhizobium indiaense, Sinorhizobium kostiense, Sinorhizobium kummerowiae, Sinorhizobium medicae, Sinorhizobium meliloti, Sinorhizobium mexicanus, Sinorhizobium morelense, Sinorhizobium saheli, Sinorhizobium terangae, Sinorhizobium xinjiangense, Mesorhizobium albiziae, Mesorhizobium amorphae, Mesorhizobium chacoense, Mesorhizobium ciceri, Mesorhizobium huakuii, Mesorhizobium loti, Mesorhizobium mediterraneum, Mesorhizobium pluifarium, Mesorhizobium septentrionale, Mesorhizobium temperatum, Mesorhizobium tianshanense, Azospirillum amazonense, Azospirillum brasilense, Azospirillum canadense, Azospirillum doebereinerae, Azospirillum formosense, Azospirillum halopraeferans, Azospirillum irakense, Azospirillum largimobile, Azospirillum lipoferum, Azospirillum melinis, Azospirillum oryzae, Azospirillum picis, Azospirillum rugosum, Azospirillum thiophilum, Azospirillum zeae и их комбинаций.
71. Композиция по параграфам 66 или 68, где фосфат-солюбилизирующий микроорганизм представляет собой вид, выбранный из группы, состоящей из Acinetobacter spp., Arthrobacter spp, Arthrobotrys spp., Aspergillus spp., Azospirillum spp., Bacillus spp., Burkholderia spp., Candida spp., Chryseomonas spp., Enterobacter spp., Eupenicillium spp., Exiguobacterium spp., Klebsiella spp., Kluyvera spp., Microbacterium spp., Mucor spp., Paecilomyces spp., Paenibacillus spp., Penicillium spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Stenotrophomonas spp., Streptomyces spp., Streptosporangium spp., Swaminathania spp., Thiobacillus spp., Torulospora spp., Vibrio spp., Xanthobacter spp., Xanthomonas spp. и их комбинаций.
72. Композиция по параграфу 71, где фосфат-солюбилизирующий микроорганизм представляет собой вид, принадлежащий к Penicillium spp., выбранный из группы, состоящей из Penicillium bilaiae, Penicillium albidum, Penicillium aurantiogriseum, Penicillium chrysogenum, Penicillium citreonigrum, Penicillium citrinum, Penicillium digitatum, Penicillium frequentas, Penicillium fuscum, Penicillium gaestrivorus, Penicillium glabrum, Penicillium griseofulvum, Penicillium implicatum, Penicillium janthinellum, Penicillium lilacinum, Penicillium minioluteum, Penicillium montanense, Penicillium nigricans, Penicillium oxalicum, Penicillium pinetorum, Penicillium pinophilum, Penicillium purpurogenum, Penicillium radicans, Penicillium radicum, Penicillium raistrickii, Penicillium rugulosum, Penicillium simplicissimum, Penicillium solitum, Penicillium variabile, Penicillium velutinum, Penicillium viridicatum, Penicillium glaucum, Penicillium fussiporus, Penicillium expansum и их комбинаций.
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры приведены в иллюстративных целях и не предназначены для ограничения объема вариантов осуществления, заявленных в данном документе. Любые вариации в иллюстрируемых примерах, которые приходят на ум специалистам в данной области, предназначены для включения в объем настоящего раскрытия.
Материалы
Пример 1.
Активность двух стабилизирующих микробов соединений, дрожжевого экстракта и альбумина тестировали в отношении снижения эффектов консерванта бензилгемиформаля (при концентрации, отражающей предусмотренную действующей рекомендацией для коммерческого инсектицида, который включает этот консервант).
С применением асептических методик 10 мл коммерческого жидкого инокулянта, содержащего SEMIA 587 В. elkani и SEMIA 5019 B. elkani (Nitragin Optimize II, коммерчески доступен от Novozymes), переносили в комплект стерильных пробирок, в которые добавляли 0,7 мл 2% раствора, содержащего бензилгемиформаль, и в соответствующие пробирки вносили 0,3 г дрожжевого экстракта (коммерчески доступен от Merck) или 0,3 г альбумина (коммерчески доступен от SIGMA). Контроль бактериальной живучести, состоящий из инокулянтов без стабилизирующего микробов соединения, тестировали для сравнения. Обработки представлены в таблице 1.
-5
-6
-7
Пробирки перемешивали с применением вихревой мешалки, переносили в орбитальный встряхиватель при 30°C. После 20 минут инкубирования (момент времени 0) 0,1 мл образцов отбирали и обычным способом разводили 1/10 в комплекте пробирок, содержащих 0,9 мл стерильного соляного раствора (0,85% NaCl в дистилированной воде). 0,1 мл разведений 10, 10 и 10 высевали в трех повторностях на агар с дрожжевым экстрактом и маннитом (YEM). Планшеты инкубировали при 30°C. Колонии подсчитывали после семи дней инкубирования. Количество колониеобразующих единиц на мл (КОЕ/мл) подсчитывали с учетом разведений при высевании и объема при высевании. Образцы получали и обрабатывали, как указано выше, с интервалами в два часа. Результаты указаны в таблице 2.
Как показано в таблице 2, дрожжевой экстракт и альбумин снижают вредные воздействия, индуцированные присутствием бензилгемиформаля при тестируемой концентрации.
Пример 2.
Общий протокол, описанный в примере 1, модифицировали для обработки образцов большего размера. Коммерческий инсектицид, содержащий бензилгемиформаль, тестировали при концентрациях, которые способны были имитировать рекомендованные дозы и для инокулянтов, и для инсектицида.
Стерильные 250 мл колбы Эрленмейера, содержащие стерильный магнитные мешалки, использовали вместо тестируемых пробирок. Объемы каждого раствора представлены в таблице 3. Коммерческий инсектицид переносили в комплект колб Эрленмейера и устанвленные количества стабилизирующих микробов соединений (дрожжевой экстракт и пептон из соевой муки от Merck и триптофан от Ajinomoto) предварительно перемешивали при 250 об./мин. в течение 6 часов.
В каждую из соответствующих колб Эрленмейера добавляли 30 мл инокулянтов (описанных в примере 1), перемешивали и получали образцы, сразу и с интервалами в 2 часа. Образцы обрабатывали, как описано в примере 1. Результаты приведены в таблице 4.
Как показано в таблице 4, дрожжевой экстракт, пептон из соевой муки и триптофан снижают вредные воздействия на микробную популяцию, индуцированные присутствием агрохимиката, содержащего бензилгемиформаль.
Пример 3.
Дрожжевой экстракт и казеинат кальция применяли в прединокуляционной системе на основе торфа, содержащей SEMIA 587 В. elkani и SEMIA 5019 В. elkani (Nitragin CTS200, доступный от Novozymes), и тестировали на совместимость с агрохимикатом, содержащим бензилгемиформаль, для стабильности на поверхности семян. Обработку семян осуществляли, следуя протоколу, описанному в данном документе.
Дрожжевой экстракт или казеинат кальция (от Merck) предварительно перемешивали с применением магнитных мешалок в течение 6 часов с агрохимикатом, содержащим бензилгемиформаль. Через 6 часов семена обрабатывали. В таблице 5 описаны обработки семян, в расчете на 1 кг семян.
В случае обработок, объединяющих жидкие инокулянты и другие продукты (фунгициды, инсектициды и т.д.), обработку подготавливали в соответствии с инструкциями и давали отстояться при комнатной температуре в течение получаса перед инокуляцией семян.
Семена помещали в полиэтиленовый пакет и добавляли средства для обработки. Семена должны были занимать 1/3 от общего объема пакета (наполненного воздухом и закрытого). Содержимое пакета энергично перемешивали вращающими движениями для надлежащего распределения продуктов внутри.
0
-1
-2
-3
-4
Пакет с инокулированными семенами открывали, давали осесть при комнатной температуре в течение 4 часов и осуществляли подсчеты ризобий на семенах. Для этого 100 семян помещали в 250 мл колбу Эрленмейера со 100 мл соляного раствора и подвергали встряхиванию в течение15 мин с применением магнитной мешалки при приблизительно 300 об./мин. Супернатант обозначали "разведение 10". Отбирали 1 мл образцов и обычным способом разводили 1/10 в комплекте пробирок, содержащих 9 мл стерильного соляного раствора (0,85% NaCl в дистилированной воде). 0,1 мл разведений 10, 10, 10 и 10 высевали в трех повторностях на агар с дрожжевым экстрактом и маннитом (YEM).
Семена затем помещали в бумажные пакеты и держали в камере при 30°C до конца теста. Определения повторяли через 24 и 48 часов после инокуляции. Планшеты считывали через семь дней и проверяли на день 10. На планшетах подсчитывали от 30 до 300 колоний и проверяли соотношение между разведениями. КОЕ/семя подсчитывали в соотетствии с формулой (I). Результаты приведены в таблице 6.
Формула (I):
Как показано в таблице 6, присутствие дрожжевого экстракта и казеината кальция улучшают восстановление микробов на семенах, обработанных агрохимикатами, содержащими бензилгемиформаль.
Пример 4.
Активность двух стабилизирующих микробов соединений, дрожжевого экстракта и альбумина тестировали в отношении снижения эффектов консерванта бензилгемиформаля (при концентрации, отражающей предусмотренную действующей рекомендацией для коммерческого инсектицида, который включает этот консервант).
С применением асептических методик 10 мл коммерческого жидкого инокулянта, содержащего SEMIA 5079 В. japonicum и SEMIA 5080 В. japonicum (Nitragin CellTech НС, коммерчески доступен от Novozymes), переносили в комплект стерильных пробирок, в которые добавляли 0,7 мл 2% раствора, содержащего бензилгемиформаль, и в соответствующие пробирки вносили 0,3 г дрожжевого экстракта (коммерчески доступен от Merck) или 0,3 г альбумина (коммерчески доступен от SIGMA). Контроль бактериальной живучести, состоящий из инокулянтов без стабилизирующего микробов соединения, тестировали для сравнения. Обработки представлены в таблице 7.
-5
-6
-7
Пробирки перемешивали с применением вихревой мешалки, переносили в орбитальный встряхиватель при 30°C. После 20 минут инкубирования (момент времени 0) 0,1 мл образцов отбирали и обычным способом разводили 1/10 в комплекте пробирок, содержащих 0,9 мл стерильного соляного раствора (0,85% NaCl в дистилированной воде). 0,1 мл разведений 10, 10 и 10 высевали в трех повторностях на агар с дрожжевым экстрактом и маннитом (YEM). Планшеты инкубировали при 30°C. Колонии подсчитывали после семи дней инкубирования. Количество колониеобразующих единиц на мл (КОЕ/ мл) подсчитывали с учетом разведений при высевании и объема при высевании. Образцы получали и обрабатывали, как указано выше, с интервалами в два часа. Результаты указаны в таблице 8.
Как показано в таблице 8, дрожжевой экстракт и альбумин снижают вредные воздействия, индуцированные присутствием бензилгемиформаля при тестируемой концентрации.
Пример 5.
Общий протокол, описанный в примере 4, модифицировали для обработки образцов болшего размера. Коммерческий инсектицид, содержащий бензилгемиформаль, тестировали при концентрациях, которые способны были имитировать рекомендованные дозы и для инокулянтов, и для инсектицида.
Стерильные 250 мл колбы Эрленмейера, содержащие стерильный магнитные мешалки, использовали вместо тестируемых пробирок. Объемы каждого раствора представлены в таблице 9. Коммерческий инсектицид переносили в комплект колб Эрленмейера и устанвленные количества стабилизирующих микробов соединений (дрожжевой экстракт и пептон из соевой муки от Merck и триптофан от Ajinomoto) предварительно перемешивали при 250 об./мин. в течение 6 часов.
В каждую из соответствующих колб Эрленмейера добавляли 30 мл инокулянта (описанного в примере 4), перемешивали и получали образцы сразу и с интервалами в 2 часа. Образцы обрабатывали, как описано в примере 4. Результаты приведены в таблице 10.
Как показано в таблице 10, дрожжевой экстракт, пептон из соевой муки и триптофан снижают вредные воздействия на микробную популяцию, индуцированные присутствием агрохимиката, содержащего бензилгемиформаль.
Пример 6
Дрожжевой экстракт и казеинат кальция применяли в прединокуляционной системе на основе торфа, содержащей SEMIA 5079 В. japonicum и SEMIA 5080 В. japonicum (доступные от Novozymes), и тестировали на совместимость с агрохимикатами, содержащими бензилгемиформаль для стабильности семян. Обработку семян осуществляли, следуя протоколу, описанному в данном документе.
Дрожжевой экстракт или казеинат кальция (от Merck) предварительно перемешивали с применением магнитных мешалок в течение 6 часов с агрохимикатом, содержащим бензилгемиформаль. Через 6 часов семена обрабатывали. В таблице 11 описаны обработки семян, в расчете на 1 кг семян.
В случае обработок, объединяющих жидкие инокулянты и другие продукты (фунгициды, инсектициды и т.д.), обработку подготавливали в соответствии с инструкциями и давали отстояться при комнатной температуре в течение получаса перед инокуляцией семян.
Семена помещали в полиэтиленовый пакет и добавляли средства для обработки. Семена должны были занимать 1/3 от общего объема пакета (наполненного воздухом и закрытого). Содержимое пакета энергично перемешивали вращающими движениями для надлежащего распределения продуктов внутри.
0
-1
-2
-3
-4
Пакет с инокулированными семенами открывали, давали осесть при комнатной температуре в течение 4 часов и осуществляли подсчеты ризобий на семенах. Для этого 100 семян помещали в 250 мл колбу Эрленмейера со 100 мл соляного раствора и подвергали встряхиванию в течение15 мин с применением магнитной мешалки при приблизительно 300 об./мин. Супернатант обозначали "разведение 10". Отбирали 1 мл образцов и обычным способом разводили 1/10 в комплекте пробирок, содержащих 9 мл стерильного соляного раствора (0,85% NaCl в дистилированной воде). 0,1 мл разведений 10, 10, 10 и 10 высевали в трех повторностях на агар с дрожжевым экстрактом и маннитом (YEM).
Семена затем помещали в бумажные пакеты и держали в камере при 30°C до конца теста. Определения повторяли через 24 и 48 часов после инокуляции. Планшеты считывали через семь дней и проверяли на день 10. На планшетах подсчитывали от 30 до 300 колоний и проверяли соотношение между разведениями. КОЕ/семя подсчитывали в соответствии с формулой (I), представленной выше. Результаты приведены в таблице 12.
Как показано в таблице 12, присутствие дрожжевого экстракта и казеината кальция улучшают восстановление микробов на семенах, обработанных агрохимикатами, содержащими бензилгемиформаль.
Следует понимать, что описание и примеры являются иллюстративными вариантами осуществления настоящего изобретения, и что другие варианты осуществления в пределах сути и объема заявленных вариантов осуществления будут очевидными для специалистов в данной области техники. Хотя настоящее раскрытие было описано по отношению к конкретным формам и их вариантам осуществления, будет понятно, что различные модификации, отличные от описанных выше, могут быть применены без отступления от сути или объема вариантов осуществления, определенных в прилагаемой формуле изобретения. Например, могут быть заменены конкретно описанные эквиваленты, а в некоторых случаях конкретная последовательность стадий может быть обратной или прерванной без отступления от сути или объема вариантов осуществления, описанных в прилагаемой формуле изобретения.