Оценка противоопухолевой активности БАД «Винирестрол» в эксперименте

Результаты морфологического исследования материала не выявили расхождений с интраоперационным диагнозом ни в одном случае. При двусторонней локализации опухоли (папиллярные цистаденомы) использовали интраоперационное срочное гистологическое исследование, подтвердившее доброкачественный характер опухолевого процесса. Пограничный или злокачественный характер опухоли не встречался (табл. 2).

Таблица 2

Результаты морфологического исследования

Группа опухолей Морфология 1 гр n=125 2 гр n=106 3 гр n=35 Всего N=266

Поверхностно- эпителиальные стромальные опухоли Серозная цистаденома 76

Папиллярная цистаденома 19

Муцинозная 11

Эндометриоидная 4

Опухоль Бреннера 1

Светлоклеточная

Стромальные опухоли полового тяжа Текома 3

Фиброма 2

Герминогенно- клеточные опухоли Зрелая тератома 2

Опухолеподобные образования Паровариальная киста 3

Серозоцеле 2

Средняя длительность операции при лапаротомии составила 112,7± 16,6 мин, при лапароскопической гистерэктомии с придатками - 94,6±18,8 мин, при лапароскопической билатеральной аднексэктомии - 37,8±10,2 мин. Резектоскопическое удаление подслизисых миом длилось в среднем 33,2±16,3 мин, аблация эндометрия - 22,2±10,3 мин. Объем интраоперационной кровопо-тери составлял при лапароскопии 82,8±40,3 мл, при лапаротомии - 412,5±132 мл, при резектоскопических вмешательствах -23,2±8,3 мл с объемом интравазации не превышающем 860,0 мл. Анализируя послеоперационные осложнения, отметим у 2 жен-щиин из 1-й группы образование гематомы в подкожно-жировой клетчатке на 4-6 сут, у 2 больных в 1-й и 2-й группах после лапароскопической гистерэктомии - умеренное кровотечение из культи влагалища на 2-3 сут. У 1 пациентки из 3-й группы на 2 сут выявлена серозометра после шаровой аблации эндометрия. Все осложнения устранены комплексом консервативных мероприятий, ни в одном случае не потребовавших гемотрансфузий и повторных операций. Отметим, что чаще после лапаротомии предъявляли жалобы на боли внизу живота и в послеоперационной ране, слабость, диспепсию и повышение температуры тела в течение 4-8 сут послеоперационного периода. Те же жалобы после лапароскопических операций существенно меньше по частоте и интенсивности, по длительности. После вмешательств из гистероскопического доступов подобные жалобы были лишь у 9% женщин в течение <16-48 часов. Сроки нормализации температуры при лапаротомии составили 5,9±1,2 сут, лапароскопии -2.5±0,5 сут, гистерорезектоскопии - 1,6±0,6 сут.

Жалобы при доброкачественных опухолях и опухолевидных образованиях яичника не специфичны, а почти 1/3 больных их не предъявляет вовсе. Наиболее часто встречающиеся доброкачественные опухоли яичника - серозная цистаденома 60,869,7% и папиллярная цистаденома 8,6-15,2%. С возрастом частота выявления доброкачественных опухолей яичников снижается до 13%, что не должно ограничивать проведение скринингового УЗИ малого таза в поликлиниках и КДЦ при возрасте >55-60 лет. Частота выявления внутриматочной патологии при доброкачественных опухолях яичников составляет 39,5%, а в возрасте от 55 до 64 лет - у каждой 2-й пациентки. Анализ методов визуализации опухолей и опухолевидных образований яичников говорит о высокой диагностической ценности их в плане обнаружения и проведения дифференциальной диагностики. Для исключения в доброкачественных овариальных образованиях злокачественного процесса на ранних стадиях развития надо использовать иммунологические методы исследования - онкомаркер СА 125 и РО-тест. Выявление опухоли яичника в любом возрасте должно

расцениваться как показание к операции. Огромная роль в лечении этих больных должна отводиться предоперационному обследованию и предоперационной подготовке, включающей стабилизацию функционирования всех жизненно важных органов и систем организма и их компенсации.

Чем меньше инвазивность операции, тем меньшие сдвиги происходят в показателях периферической крови, и тем более благоприятно протекает послеоперационный период (по данным купирования болевого симптома, изменений общего самочувствия, нормализации температурной реакции). Отдаленные результаты хирургического лечения (от 6 мес. до 7 лет) геронтологических больных с высокими хирургическим и анестезиологическим рисками дают основание утверждать, что у подавляющего их числа малоинвазивные эндохирургические технологии позволяют выполнять адекватный объём операции, в т.ч. при сочетании доброкачественных опухолей яичников с внутриматочной патологией. Резектоскопические технологии (шаровая аблация, вапоризация эндометрия) и билатеральная аднексэктомия из лапароскопического доступа - оптимальный объем операции при доброкачественных опухолях яичника у таких больных. Даже этапное и последовательное их выполнение оправдывает средства и затраты на лечение и составляет альтернативу традиционной, часто неоправданно радикальной хирургии, особенно в свете короткого послеоперационного периода и выздоровления.

Литература

1. Андреасян Г.О. Патогенетическое и диагностическое значение изменений сфинголипидов при эпителиальных опухолях яичников: Автореф. дис. .. .канд. мед. наук.- М., 1997.- 27 с.

2. Козаченко В.! В кн. Проблемы здоровья женщин позднего репродуктивного и старшего возраста.- М., 1995.- С. 16-19.

3. Кулаков В.И. и др. Изменения репродуктивной системы и их коррекция у женщин с доброкачественными опухолями и опухолевидными образованиями яичников .-М.: Триада-Х, 2005.256 с.

4. Кулаков В.И., Адамян Л.В. Лапароскопия и гистероскопия в гинекологии и акушерстве.- М.: ПАНТОРИ, 2002.- 633 с.

5. Макаров О.В., Борисенко С.АЛ РМЖ.- 1996.- №3.- С.36.

6. Макаров О.В. !! РМЖ.-1996.-№6.-С.26-27.

7. Харитонова Т.В. !! РМЖ.- 1997.- Т.6.- №10.- С.669-676.

8. Брискин Б.С. и др. Хирургические болезни в гериатрии: избранные лекции.- М.: Бином, 2006.- 336 с.

9. Benjamin I., Rubin S.C. !! Obstet Gynecol Clin North Am.-1995.- Vol. 21, №1.- P. 107-119.

10. Carry R. I! Gynaecol Endoscopy.- 1999.- Vol. 8.- P. 315.

11. Narod S.A!!Br Med Bull.- 1994.- Vol.50, №3.- P. 656-676.

12. Tekay A., Jouppila P. !! Ultrasound obstet. Gynecol.-1995.- Vol. 5, Suppl. 1.- P. 26.

MODERN VIEW ON WOMEN BENIGN OVARIAL TUMOR SURGERY

TREATMENT IN SENILE AGE WITH USING LAPAROSCOPY

R.E. KUZNETSOV Summary

Applyig the modern endosurgery technology allous to make effective treatment for senile age women with combination of ovarial nonmalignant tumor and intrautery pathology. The article based on 266 cases of patients with large innocent ovarial tumors.

Step-by-step fulfield technology with presurgery patient’s preparing and preliminary examination guarantee more hopeful postsurgery period and the better outcomes of surgery treatment in time.

Key words: surgery treatment, ovarial tumor

УДК 615.615.277.3

ОЦЕНКА ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ БАД «ВИНИРЕСТРОЛ» В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

А.Р. ЧОЧИЕВА*

Интерес к проблеме зависимости возникновения рака от питания возник с 70-80-х г.г. ХХ столетия. Потребление овощей и фруктов снижает риск развития злокачественных новообразований. В ряде стран были даны рекомендации по коррекции

* Северо-Осетинская ГМА, 362019, г. Владикавказ, ул. Пушкинская, 40

питания [3-5]. Данные о защитной роли средств растительного происхождения в отношении рака подтверждаются в [6, 7, 9]. В связи с широким спектром биологической и фармакологической активности интересны соединения полифенольной природы.

Цель работы - изучение влияния БАД «Винирестрол», содержащей экстракт виноградных косточек, на возникновение индуцированных опухолей молочной железы (ОМЖ) у крыс и выявление механизмов его онко-супрессивного действия.

Материалы и методы.

Опыты проведены на 45 крысах-самках линии Вистар массой 100120 г, полученных из вивария Пятигорской государственной фармацевтической академии. Животные содержались в стандартных условиях, получали гранулированный корм и воду без ограничения. ОМЖ индуцировали с помощью химического канцерогена К-метил-N-

нитрозомочевины (МНМ), синтезированного в НИИ онкологии им. Н. Н. Петрова МЗ РФ. Животные были разделены на две группы: 25 крыс в контрольной группе и 20 крыс в опытной. Всем подкожно в область молочной железы у основания левой передней лапки вводили МНМ в дозе 2,5 мг на особь в 0,2 мл воды для инъекций 1 раз в неделю в течение 5 недель [1]. Опытная группа получала наряду с канцерогеном в качестве пищевой добавки БАД «Винирестрол» (Arkopfarma, Франция) в дозе 10 мг/кг массы тела. Основанием для выбора дозы явились данные [8]. Срок опыта составил 36 недель. Для обнаружения ОМЖ каждые две недели пальпировали область введения канцерогена. Учитывали время появления ОМЖ и их размеры, объем опухоли рассчитывали путем перемножения трех размеров.

Крыс, доживших до окончания эксперимента, забивали парами фторотана. Всех павших и забитых животных подвергали полной аутопсии. Гистологическую обработку опухолевого материала проводили по стандартной методике с окраской гематоксилином и эозином. При морфологическом анализе ОМЖ основывались на классификации опухолей лабораторных животных, предложенной Международным агентством по изучению рака. Противоопухолевую активность «Винирестрола» оценивали по изменению частоты возникновения опухолей, латентного периода их развития, проценту торможения роста опухоли, (ТРО% =Ук-Уо/У, где Ук - средний объем опухолей крыс контрольной группы, Уо - средний объем опухолей крыс опытной группы), а также срок жизни и выживаемости крыс по сравнению с контролем. Результаты обрабатывали статистически. Для оценки степени достоверности различий в сравниваемых группах пользовались критериями t Стьюдента, Манна-Уитни и %2.

У 6 крыс из каждой группы забирали крови для биохимического анализа. Концентрацию гормонов в сыворотке крови определяли радиоиммунным методом, используя реагенты наборов: эстрадиола («Orion Diagnostica», Финляндия), фолликулостимулирующего и лютеинизирующего гормонов («Immunotech», Чехия). О состоянии системы перекисное окисление липидов -антиоксидантная защита (ПОЛ-АОЗ) судили по накоплению малонового диальдегида (МДА) в эритроцитах и активности одного из основных ферментов АОЗ - супероксидисмутазы (СОД). Уровень МДА в плазме крови оценивали методом, основанным на образовании окрашенного комплекса при взаимодействии МДА с тиобарбитуровой кислотой [2]. Активность СОД оценивали методом, основанным на способности аутоокисления адреналина по ранее появляющимся продуктам окисления.

Результаты. Физиологическое состояние и поведенческие реакции крыс в условиях опыта не имели различий. Нарастание массы тела шло равномерно в обеих группах. У крыс развивались ОМЖ (аденокарциномы). Метастазирования не было.

Первая ОМЖ на месте введения канцерогена появилась на 15 неделе опытта в контрол и на 17 неделе - у крыс опытной группы (табл.). На 36 неделе опыта ОМЖ были зарегистрированы у 90,9% крыс контрольной группы и у 47,4% получавших вини-рестрол (p<0,05). Средний латентный период возникновения ОМЖ в опытной группе был равен 196,8±13,9 дням против 154±8,9 дней в контроле (p<0,05). Индекс Айбела, характеризующий отношение числа ОМЖ к величине латентного периода, в опытной группе был на 40,7% ниже, чем в контроле (p<0,05),

также более длительным был срок жизни крыс-опухоленосителей (47,4±9,18 дня против 31,8±2,5 дней в контроле, р<0,05). В опытной группе нами отмечено торможение роста ОМЖ (с 44,6% через 2 недели от появления до 64,7% через 8 недель) (р<0,05).

Было выявлено ингибирующее влияние БАД «Винирестрол» на канцерогенез молочной железы, которое проявилось в достоверном снижении частоты и среднего латентного периода возникновения ОМЖ, торможении роста опухолей, увеличении срока жизни животных опытной группы по сравнению с контролем. Одним из механизмов реализации этого эффекта исследуемого вещества может быть его ингибирующее влияние на уровень эстрогенов в плазме крови, характерное для полифенольных соединений с фитоэстрогенной активностью (изофлавонов, лиг-нанов, стильбенов). Анализ влияния винирестрола на уровень эстрадиола обнаружил, что в опытной группе уровень данного гормона был равен 33,6±5,8 нмоль/л, что было на 36,4% ниже контроля - 80,1±7,9 нмоль/л (р< 0,001). В группе, получавшей «Винирестрол», были выше уровни гонадотропных гормонов гипофиза относительно соответствующих показателей в контроле: уровень ФСГ в опытной группе составил 6,4±1,6 нг/мл, ЛГ -0,51±0,06 нг/мл против уровней ФСГ и ЛГ в контроле 5,3±1,3и 0,39±0,04 нг/мл соответственно.

Еще один возможный механизм химиопрофилактической активности связан с антиоксидантным действием, присущим полифенольным соединениям. Уровень МДА в сыворотке крови крыс, подвергшихся канцерогенному воздействию, было выше данного показателя у интактных крыс, и составило 54,5±3,7 мкмоль/л против 20,2±3,7 мкмоль/л (p<0,001). В опытной группе показатель был снижен в 1,8 раза по сравнению с контролем и составил 30,4±1,9 мкмоль/л (p<0,005). Активность СОД в сыворотке крови у интактных крыс составила 62,0±2,0 ед. ак., в сыворотке крови животных контроля - 23,8±5,1 ед. ак. (p<0,05), при этом в группе, получавшей «Винирестрол», уровень фермента был в 3 раза выше, чем в контроле (71,4±5 ед. ак., p<0,05).

Возможными механизмами противоопухолевого действия «Винирестрола» являются также ингибирование метаболизма арахидоновой кислоты, модуляция активности некоторых онкогенов и онко-супрессорных генов, стимулирующих угнетение процессов пролиферации и активацию процессов апоптоза.

Выводы. Результаты исследования и анализ данных литературы свидетельствуют о перспективности использования «Ви-нирестрола» в качестве химиопрофилактического средства. Несомненным преимуществом данного соединения является отсутствие значимой токсичности при длительном применении, что особенно важно, учитывая необходимость длительного использования химиопрофилактических средств в группах повышенного риска развития злокачественных новообразований.

Литература

1. Джиоев Ф.К. // Сборник научных трудов СОГМИ под ред. проф. Р.Д. Хубецовой. Краснодар. 1989.- С. 112-114.

2. Камышников В.С. // Клинико-биохимическая лабораторная диагностика.- 2003.- Т. II.- C. 207.

3. Миллер А.Б. // Вопр. Онкологии.- 1988.- .№2.- С. 131.

4. Byers T. // Cancer.- 1988.- Vol. 6, Suppl.- P. 1713-1724.

5. Holm L.-E., Callmer E., Eriksson C.— G. et al. // J. Natl. Cancer Inst.- 1989.- Vol. 81.- P. 103-106.

6. Kim H, Hall P, Smith M, et al. // J. Nutr.- 2004.- Vol. 134 (12 Suppl).- P. 3445S-3452S.

7. Kim H. // J Nutr.- 2005.- Vol. 135 (11).- P. 2715-2718.

8. Sanjeev Banerjee, Carlos Bueso-Ramos, Bharat

B.Aggarwal // Cancer Research.- 2002.- Vol. 62.- P. 4945-4954.

9. Singletary KW, Meline B. // Nutr. Cancer.- 2001.- Vol. 39 (2).- P. 252-258.

Таблица

Влияние винирестрола на возникновение опухолей молочной железы, индуцированных у крыс МНМ

n Число животных с опухолями, абс./% на день наблюдения

105 119 133 147 161 175 189 203 217 231 245

МНМ (контроль) 22 4/18 6/27 8/36 9/40 13/59 16/72 18/81 18/81 19/86 19\86 20/90,9

MHM+Винирестрол 19 1/5,2' 1/5,2' 1/5,2' 2/10,5' 2/10,5' 4/21' 6/31,5' 6/31,5' 8/42,1' 9/47,4'

* - различия с контрольной группой статистически достоверны, р<0,05