Пероральная форма гестаген-содержащей композиции для лечения женщин с состояниями гестагенной недостаточности и способ ее получения
ORAL FORM OF GESTAGEN-CONTAINING COMPOSITION FOR TREATING WOMEN WITH CONDITIONS OF GESTAGEN INSUFFICIENCY AND METHOD FOR PREPARING IT

Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности.
Известны фармацевтические композиции для регулирования полового поведения и контрацепции животных. В состав указанных композиций входят два половых гормона - гестаген и эстроген. Это обусловлено тем, что помимо гестагена, вторым компонентом, обязательным для осуществления контрацептивного эффекта, является эстроген. Данные фармацевтические композиции успешно применяются, и доказали свою высокую эффективность на животных в течение последних десятилетий (препараты «Секс-барьер», «Контрсекс-Neo», и т.д.).
Известен препарат Ацетомепрегенол в форме моногормональных гестаген-содержащих таблеток (0,0005 г.) для лечения женщин с состояниями гестагенной недостаточности (см. Машковский М.Д. Лекарственные средства, М., Медицина, 1993, т.1, с. 694-695; патент RU 2091019 С1, опублик. 27.09.1997). С 1991 по 1998 годы препарат Ацетомепрегенол был разрешен к медицинскому применению приказом Минздрава СССР от 13.06.1986 №853, а Постановлением Правительства России от 15.04.1996 №478 был включен в Перечень жизненно необходимых и важнейших лекарственных средств. В настоящее время Ацетомепрегенол или другой моногормональный препарат российского производства содержащий только гестаген, не выпускается.
3
Известно, что Ацетомепрегенол является ближайшим структурным аналогом бутилового эфира 17α-ацетокси-3β-окси-6-метилпрегна-4,6-диен-20-она (далее, АМП-17), так как содержит при углеродном атоме С ацетатную группу, а бутиловый эфир АМП-17 - бутаноилоксигруппу. Однако, при этом более активен (П.В. Сергеев и др. Исследование гестагенной активности 17α-ацетокси-3β-бутаноилокси-6-метил-прегна-4,6-диен-20-она. Хим.-Фарм. Журн, 2005, 39 (7), 20-22). Описано противоопухолевое действие Бутилового эфира АМП-17 на клеточных штаммах опухолей человека (RU 2292209 С2, ВНИХФИ, РГМУ, РОНЦ им. Н.Н. Блохина, ЭНЦ РАМН, 27.01.2007). Бутаноилоксигруппа при С3 дает молекуле новые свойства - способность связываться с SH-группами [Fedotcheva N.I., Teplova V.V., Fedotcheva Т.А., Rzheznikov V.M., Shimanovskii N.L. Effect of progesterone and its synthetic analogues on the activity of mitochondrial permeability transition pore in isolated rat liver mitochondria // Biochemical Pharmacology. 2009. V. 78. No 8. P. 1060-1068]. Этим свойством обусловлена дополнительная химиосенсиблизирующая активность молекулы [Fedotcheva Т.А., Semeykin F.V., Shimanovsky N.L. Butagest is a perspective anticancer drug and chemosensitizer // Сборник материалов Европейского съезда фармакологов. М., 2004. С.84]. Бутиловый эфир АМП-17 обладает не только антипролиферативным, но и химиосенсибилизирующим действием, высокой гестагенной активностью, а также антиметаболической, нейротропной, антипсориатической активностями.
Известны фармацевтические композиции, в состав которых входит субстанция бутиловый эфир АМП-17 (см., например, патент RU 2455006 и др.), однако выпускаются в масляной форме, кроме того, предназначено для ветеринарного применения.
Наиболее близким аналогом препарат Ацетомепрегенол в форме моногормональных гестаген-содержащих таблеток (0,0005 г.) для лечения женщин с состояниями гестагенной недостаточности патент RU 2091019 С1, опублик. 27.09.1997 - прототип).
Настоящее изобретение направлено на решение проблемы разработки высокоактивного гестагена для перорального применения для лечения женщин с состояниями гестагенной недостаточности с усвоением в желудочно-кишечном тракте, в чем и состоит технический результат изобретения.
Патентуемая пероральная форма гестаген-содержащей композиции для лечения женщин с состояниями гестагенной недостаточности, включает в качестве активной фармацевтической субстанции бутиловый эфир 17α-ацетокси-3β-окси-6-метилпрегна-4,6-диен-20-она (АМП-17), поливиниловый спирт и наполнитель PROSOLV EASYTab SP, при следующем содержании компонентов, мас. %:
бутиловый эфир АМП-17
1,98-2,1;
поливиниловый спирт
3,6-4,4;
наполнитель PROSOLV EASYTab SP
до 100.
Способ изготовления пероральной формы гестаген-содержащей композиции для лечения женщин с состояниями гестагенной недостаточности по п. 1, состоит в том, что бутиловый эфир АМП-17 просеивают на вибросите с размером ячеек 1,5 мм, заданные количества которого и поливинилового спирта совместно перемешивают и растирают до однородного состояния в течение 15-20 минут, затем тритурационным методом вводят наполнитель «PROSOLV EASYTab SP» при смешивании и растирании в фарфоровой ступке каждой порции смеси не менее чем в течение 30 минут, полученную смесь просеивают через сито с размером ячеек 0,5 мм, после чего производят таблетирование таблеток массой 0,100 г. по технологии прямого прессования на гидравлическом однопуансоновом прессе при давлении 80-160 МПа.
Отличием от прототипа является выбор другого активного фармацевтического вещества в подобранном количестве - бутилового эфира АМП-17. В составе гестаген-содержащей композиции в форме таблеток в качестве вспомогательных веществ используют всего два компонента. Первый - это физиологически инертное и нетоксичное вещество - поливиниловый спирт, использован для повышения растворимости водонерастворимой субстанции АМП-17.

Второй компонент - высокофункциональный наполнитель «Все-в-одном» для высокоскоростного таблетирования PROSOLVEASYtab SP (фирма JRS PHARMA GmbH & Co. KG, Holzmuhle l,D-73494 Rosenberg, Germany), выбран в результате проведенных экспериментов из числа используемых в технологии прямого прессования (микрокристаллическая целлюлоза Avicel 302, Parteck М, Маннит для прямого прессования Лудипресс, Коллоидный диоксид кремния, Kollidon 25 (повидон) и магния стеарат). Наполнитель PROSOLVEASYtab SP характеризуется хорошей текучестью, низким прилипанием частиц, однородностью, прочностью, отличной адгезией пленки, улучшенными свойствами тиснения и однородности содержимого препаратов с низкой дозой. Следует отметить, что заявителю неизвестно использование указанного наполнителя как вспомогательного вещества для повышения сыпучести, прессуемости и распадаемости водонерастворимых стероидов при разработке таблеток.

В результате моделирования технологии таблетирования были выявлены и устранены следующие отрицательные с точки зрения воспроизведения технологического процесса прямого прессования физико-химические и технологические характеристики выбранной активно действующей субстанции: субстанция бутиловый эфир АМП17 относится ко второму классу веществ по биофармацевтической классификации лекарственных средств (БКС, прогнозированию биодоступности при пероральном приеме) - высокая проницаемость (более 90% попадает в кровоток при пероральном приеме) и низкая растворимость, плохая диспергируемость, кристаллизуется в виде объемных палочек, обладает небольшой прессуемостью и не имеет сыпучести, низкий показатель прочности модельных прессовок - 30-38 Н, время распадаемости прессовок неудовлетворительное - более 15 минут, большая сила выталкивания стандартных прессовок даже при смазке ацетоновым растворов стеариновой кислоты (более 1000 Н). Для приведения технологических характеристик исследуемой субстанции бутилового эфира АМП 17 к регламентируемым для веществ, которые могут быть использованы в технологии прямого прессования исследованы приготовлены и изучены твердые дисперсии (ТД) БУТИЛОВЫЙ ЭФИР АМП-17 с поливиниловым спиртом (ПВС), полвинилпирролидоном (ПВП) К12, сахаринатом натрия и привитым полимером Soluplus в соотношение 1:2. Показано, что получение ТД механическим способом БУТИЛОВЫЙ ЭФИР АМП-17 с ПВП К12, ПВС и привитым полимером Soluplus позволяет значительно приблизить показатель формы и размер частиц к оптимальным для прямого прессования (>95% менее 20 мкм и более 3-5 мкм) и исключить ТД с сахаринатом натрия, в случае которой доля частиц более 25 мкм резко возрастает. На основании исследованных технологических характеристик бутилового эфира АМП-17 в форме ТД на трех сериях субстанции далее из разработки по показателю «угла естественного откоса» и «растворимость» была исключена ТД с привитым полимером Soluplus и по показателю «растворимость» ТД с ПВП. С целью улучшения технологических параметром и реологических свойств таблетируемой массы и на основании анализа современных вспомогательных веществ было разработано 7 модельных составов с использованием преформации бутилового эфира АМП 17 в качестве ТД с ПВС в соотношении 1:2. Экспериментальные составы включали: I - Бутиловый эфир АМП-17 (2%) + МКЦ Avicel 302 (45%) + Лудипресс (40%) + коллоидный диоксид кремния (4%) + маннит для прямого прессования Parteck М (2%) + повидон (Kollidon 25, 2%) + магния стеарат (1%); II - Бутиловый эфир АМП-17 (2%) + PROSOLV EASYTab SP (98%); III - ТД Бутиловый эфир АМП-17 : ПВС 1:2 (2%+4%=6%) + PROSOLV EASYTab SP (94%); IV - ТД Бутиловый эфир АМП-17 : ПВС 1:2 (2%+4%=6%) + PROSOLV EASYTab SP (92,5%) + повидон (Kollidon 25, 1,5%); V - Бутиловый эфир АМП-17 (2%) + МКЦ Avicel 302 (65%) + Лудипресс (22%) + коллоидный диоксид кремния (4%) + маннит для прямого прессования Parteck М (2%) + повидон (Kollidon 25, 4%) + магния стеарат (1%); VI - ТД Бутиловый эфир АМП-17 : ПВС 1:2 (2%+4%=6%) + МКЦ Avicel 302 (42%) + Лудипресс (40%) + коллоидный диоксид кремния (4%) + маннит для прямого прессования Parteck М (2%) + повидон (Kollidon 25, 4%) + магния стеарат (1%); VII - ТД Бутиловый эфир АМП-17 : ПВС 1:2 (2%+4%=6%) + МКЦ Avicel 302 (61%) + Лудипресс (22%) + коллоидный диоксид кремния (4%) + маннит для прямого прессования Parteck М (2%) + повидон (Kollidon 25, 4%) + магния стеарат (1%). Далее по показателю «однородность дозирования» и «угол естественного откоса» таблетируемой массы были исключены составы I, IV и VII. Оптимальный состав из оставшихся 4 прописей - II, III, V и VI был выбран на основании проведенного математического планирования эксперимента по построению функции желательности на основании градации технологических свойств (прочности, распадаемости модельных таблеток и сыпучести таблетируемой массы) по уровням желательности значений отклика. Получено, что оптимальным составом с самой высокой обобщенной функцией желательности (D=0,788) является состав III - ТД Бутиловый эфир АМП-17 : ПВС 1:2 (2%+4%=6%) + PROSOLV EASYTab SP  (94%), который и был предложен в качестве состав таблеток, массой 0,100 г лекарственного средства на основе стероидной субстанции бутилового эфира АМП-17 для гормональной заместительной терапии гестагенной недостаточности. Исследование воспроизводимости технологических показателей таблеток и количественного содержания бутилового эфира АМП-17 в таблетках с разработанным составом, полученных с использованием технологии прямого прессования с оптимальным давлением прессования 100 МПа на 3 контрольных сериях позволило утвердить данный разработанный состав для проведения дальнейшей фармацевтической разработки. Таблетированная лекарственная форма отечественной субстанции гестагена пролонгированного действия с усвоением в желудочно-кишечном тракте предложена впервые и является оригинальной, подобные лекарственные формы для гестагенов в настоящее время на фармацевтическом рынке отсутствуют.
Так как стероиды являются липофильными водонерастворимыми соединениями, ProsolvEasyTab является оптимальным вспомогательным компонентом таблеток со стероидами, способствующим равномерному высвобождению субстанции стероида за счет своих физико-химических свойств. В качестве промышленной технологии получения таблеток была выбрана технология прямого прессования.
Состав таблетки приведен в таблице 1.
Пример 1. Получение лекарственной формы гестаген-содержащей композиции в форме таблеток Гестобутаноил (непатентованное название) следующим образом.
Субстанцию бутилового эфира АМП-17 (полученную, в частности по патенту RU 2653507, оп. 10.05.2018, формула которого приведена на фиг. 1), просеивают на вибросите через сетку с размером отверстий 1,5 мм.
Для получения твердых дисперсий отвешивали рассчитанные количества бутилового эфира АМП-17) и ПВС (40,0 г и 80,0 г соответственно) и производят совместное перемешивание и растирание компонентов пестиком до однородного состояния в течение 15 минут.

Полученную тверд одисперсную форму 17α-ацетокси-3β-окси-6-метилпрегна-4,6-диен-20-она (бутиловый эфир АМП-17): ПВС, 120,0 г смешивают с подготовленным количеством PROSOLV EASYtab SP (1880,0 г), добавляя его по частям (тритурационный способ введения АФС) при тщательном смешивании и растирании в фарфоровой ступке каждой порции смеси. Тщательное смешивание и растирание продолжают не менее, чем в течение 30 минут. Смешанные порошки по всем прописям просеивают через экран в 0,5 мм. Образцы полученной массы для таблетирования отбирают и производят таблетирование на гидравлическом однопуансоновом лабораторном прессе при давлении пресса 100 МПа с рабочей частью пресс-инструмента 8 мм, средняя масса 0,100 г с периодическим контролем внешнего вида, средней массы, диаметра, высоты, прочность на сжатие и истирание получаемых таблеток.
В тесте растворения по ОФС 1.4.2.2.0014.15 согласно стандартной методике, описанной в [Научно-практические руководство для фармацевтической отрасли под редакцией Шохина И.Е. ISBN 978-5-00086-525-5, Москва, 2015] показано, что в раствор за 15 минут переходит 97% заявленного количества субстанции - таблица 2. Спектры растворов таблеток Гестобутаноила и стандартного образца субстанции, приготовленных для количественного определения, имеют максимумы при длине волны 240+2 нм. По показателям однородности по массе, распадаемости и потере в массе при высушивании удовлетворяет требованиям Государственной фармакопеи XIII (ГФ 13).
Исследование воспроизводимости технологических показателей таблеток и количественного содержания бутилового эфира АМП-17 в таблетках с разработанным составом, полученных с использованием технологии прямого прессования с оптимальным давлением прессования 100 МПа на 3 контрольных сериях, позволило утвердить данный разработанный состав для проведения дальнейшей фармацевтической
Пример 2. Гестагенная активность композиции Гестобутаноил.
В тесте Клауберга-МакФейла на самках крыс патентуемая гестаген-содержащая композиция при пероральном введении крысам-самкам в течение 5 дней снижала количество митозов в эндометрии, а у самок-кроликов вызывал дифференцировку эндометрия и переход из пролиферативной фазы в фазу секреции. На фиг. 2 показаны микрофотографии эндометрия самок крыс - контроль, фаза пролиферации; фиг. 3 - доза бутилового эфира АМП-17 2,5 мг/кг - фаза секреции. Увеличение 10×90, окраска гематоксилин-эозин.
Также показано, что гестагенная активность заявляемой гестаген-содержащей композиции на самках-кроликах составила 0,0015 мг/кг.
50
Пример. 3. Исследование острой токсичности композиции Гестобутаноил. Лекарственную форму (ЛФ) заявляемой гестаген-содержащей композиции в виде приготовленной из таблеток суспензии соответствующей концентрации вводили внутрижелудочно мышам в объеме 0,5-1,0 мл, крысам - 1,0-2,0 мл на животное. Для определения DL животные получали препарат в дозах 1250, 2500 и 5000 мг/кг.
Суспензию препарата вводили 3 группам мышей и крыс обоего пола по 10 животных (5 самок и 5 самцов в каждой группе) соответственно применяемым дозам. Контрольная группа получала внутрижелудочно в эквивалентном объеме дисперсную среду. Перед введением суспензии животных лишали на ночь пищи, но не воды. Длительность периода наблюдения за животными после введения препарата составляла 2 недели, в течение которых проводился клинический осмотр экспериментальных животных, еженедельное взвешивание и регистрация потребления пищи и воды. Клинический осмотр каждого животного проводился через 1, 3, 24 часа, 7 и 14 дней после введения препарата.
Как показали результаты исследования, введение заявляемой гестаген-содержащей композиции во всех исследуемых дозах не вызывало гибели мышей и крыс. Данные клинического осмотра не выявили каких-либо отклонений в состоянии здоровья животных опытных групп по сравнению с животными контрольной группы. Результаты также свидетельствуют о том, что заявляемая гестаген-содержащая композиция в исследованных дозах не влияла на прирост массы животных и количество потребляемого корма и воды.
50
Таким образом, внутрижелудочное введение заявляемой гестаген-содержащей композиции в дозах 1250, 2500 и 5000 мг/кг, значительно превышающих терапевтическую дозу, не приводило к гибели животных, не влияло на массу тела, а также потребление корма и воды. Полученные результаты свидетельствуют о том, что средне смертельная доза (DL) препарата превышает 5000 мг/кг (5.0 г/кг). В связи с этим заявляемая гестаген-содержащая композиция относится к 4 группе веществ (малотоксичное вещество) согласно гармонизированной системе классификации токсичности и опасности (GHS), Межгосударственного стандарта (ГОСТ 32644-2014) и классификации OECD (Test №423:2001.IDT).
Пример. 4. Исследование токсичности композиции Гестобутаноил при хроническом введении самкам крыс, а также антистрессового действия на ЦНС.
В токсикологическом исследовании на самках крыс таблетки Гестобутаноила при пероральном введении в течение 4 недель в дозах 2,5 мг/кг и 25 мг/кг не вызывали повреждающего действия на органы и ткани, и оказывали успокаивающее, антистрессовое влияние на центральную нервную систему крыс.
После 1-месячного внутрижелудочного введения суспензии таблеток Гестабутаноила в дозах 2,5 и 25 мг/кг в целом не отмечалось достоверных изменений показателей поведенческой активности в тесте «открытое поле» (табл. 3). Анализ данных свидетельствует о тенденции к снижению двигательной, ориентировочно-исследовательской активности и эмоционального поведения. У животных при введении препарата в дозе 2,5 мг/кг было выявлено значимое снижение вертикальной активности на 35% (Р<0,05).
Примечание: КПК - количество пересеченных квадратов; КПЗЛ - количество подъемов на задние лапы; КЗО - количество заглядываний в отверстия; КФБ - количество фекальных болюсов.
Патентуемый способ получения гестаген-содержащего препарата - таблеток для перорального применения Гестабутаноил 0,002 г характеризуется относительной простотой и воспроизводимостью, не требует больших энергозатрат. В исследованиях на животных таблетки Гестабутаноил 0,002 г показали высокую гестагенную активность, антистрессовое действие и отсутствие токсичности как в остром, так и в хроническом эксперименте.