ПИРАЗОЛО[1,5-а]ПИРИМИДИНЫ В КАЧЕСТВЕ ПРОТИВОВИРУСНЫХ СОЕДИНЕНИЙ
PYRAZOLO[1,5-A]PYRIMIDINES AS ANTIVIRAL COMPOUNDS

Область техники
Настоящее изобретение в целом касается соединений, пригодных для применения в терапии, в частности, для лечения патологических состояний, вызванных определенными вирусами, таких как диабет, рак, нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера и боковой амиотрофический склероз. В более частном случае, настоящее изобретение касается производных пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амина, предназначенных для применения в терапии.
Предшествующий уровень техники
Пиразоло[1,5-а]пиримидин представляет собой часто используемый фрагмент в медицинской химии, и его производные известны благодаря возможности их применения в качестве анальгетиков, антагонистов рецептора бензодиазепина, антагонистов рецептора ангиотензина II, ингибиторов ангиогенеза, противовоспалительных средств, антагонистов нейропептидного Y рецептора, СОХ2-ингибитора и антагонистов рецептора 1 типа кортикотропин-высвобождающего гормона, и в качестве ингибиторов CHK1 (например, см. работы Mayo et al. (Adv. Synth. Catal. 2003, 345, 620-624; Tellew et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2010, 20, 7259-7264); Chen et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 3669-3673); Labroli et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011, 21, 471-474); Griffith et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011, 21, 2641-2645); Gilligan et al., (J. Med. Chem. 2009, 52, 3073-3083); He et al. (Патент США №6,313,124 B1); и Wren et al. (WO 2010/086040).
Указанный фрагмент также описан в составе ингибиторов фосфатидилинозитол 4-киназы (PI4K).
В работах Bianco et al. (PLoS Pathogens, 2012, 8(3), 1-17) и LaMarche et al. (Antimicr. Agents and Chemother. 2012, 56(10), 5149-5156) показано, что PI4K имеет важное значение в репликации вируса гепатита С (HCV), и в работе Yang et al. (J. Biol. Chem. 2012, 287(11), 8547-8467) показано, что также он имеет важное значение в репликации коронавируса. В работе McLeod et al. (ACS Med. Chem. Lett. 2013, 4(7), 585-589) и van der Schaar et al. (Antimicrobial Agents Chemother. 2013, 57(10), 4971-4981) описаны некоторые ингибирующие PI4K производные имидазопиразина, которые обладают высокой противовирусной активностью против пикорнавируса.
В работе Gudmundsson et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19, 5689-5692) описаны некоторые 3-арилпиразоло[1,5-а]пиримидины, которые обладают высокой активностью против вирусов герпеса.
В работе Hwang et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2012, 22, 7297-7301) описаны 3-арилпиразоло[1,5-а]пиримидины в качестве ингибиторов PI4K, которые обладают анти-HCV активностью.
В работе  et al (Bioorg Med Chem Lett. 2013, 23, 3841-7) также показано, что PI4K играет важную роль в репликации энтеровируса. Однако в указанной работе также показано, что ингибиторы PI4K (не 3-арилпиразоло[1,5-а]пиримидины) и 3-арилпиразоло[1,5-а]пиримидин 3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(2-морфолиноэтил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин (обозначаемый как T-00127-HEV1) при тестировании in-vivo вызывали смертность у мышей, что вызывает сомнения в безопасности ингибирования PI4K.
Краткое описание изобретения
Один аспект представляет собой соединение формулы (I)
или его фармацевтически приемлемую соль, где
W представляет собой
р представляет собой целое число от 0 до 3;
1
R представляет собой Н или С1-С6 алкил;
цикл А представляет собой фенил или 5- или 6-членный гетероарил;
когда цикл А представляет собой фенил, указанный фенил не замещен в орто-положении;
2
5
6
7
9
8
10
11
каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO-, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O- и атома галогена;
5
6
7
8
R, R, R и R независимо выбраны из H и С1-С6 алкила;
9
10
11
R, R и R независимо выбраны из С1-6 алкила;
любой алкил необязательно замещен одним или более атомами F; или
2
два R, присоединенные к соседним атомам углерода, вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал;
3
R представляет собой С1-С6 алкил; и
m представляет собой целое число от 0 до 2;
4
12
13
14
16
15
17
18
19
20
21
22
23
2
2
2
2
каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO, атома галогена, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O-, RS(O)-, RS(O)N(H)-, NHS(O)-, RC(O)-, N(R)(R)- и -O-;
12
13
14
15
22
23
R, R, R, R, R и R независимо выбраны из H и C1-C6 алкила,
16
17
18
19
20
21
R, R, R, R, R и R независимо выбраны из С1-6 алкила;
любой алкил необязательно замещен одним или более атомами F; или
4
два R, присоединенные к соседним атомам цикла В, формируют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное гетероциклическое или карбоциклическое кольцо;
цикл В представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил, 5- или 6-членный гетероарил или фенил;
для применения в терапии,
при условии, что указанное соединение не представляет собой:
3-(4-хлорфенил)-N-(4-метоксифенил)-5-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(циклогексилметил)-2,5-диметал-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
2,5-диметил-N-фенил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-2,5-диметил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин или
2,5-диметил-N-фенетил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин.
Некоторые соединения формулы (I), приведенной выше по тексту, являются новыми. Таким образом, другой аспект представляет собой новое соединение формулы (Id)
или его фармацевтически приемлемую соль, где
W представляет собой
1
R представляет собой Н или С1-С6 алкил;
2
5
6
7
9
8
10
11
каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO-, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O- и атома галогена;
5
6
7
8
R, R, R и R независимо выбраны из H и С1-С6 алкила;
9
10
11
R, R и R независимо выбраны из С1-6 алкила;
любой алкил необязательно замещен одним или более атомами F;
2
или два R вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал;
3
R представляет собой С1-С6 алкил;
m представляет собой целое число от 0 до 2;
4
12
13
14
16
15
17
18
19
20
21
22
23
2
2
2
2
каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO, атома галогена, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O-, RS(O)-, RS(O)N(H)-, NHS(O)-, RC(O)-, N(R)(R)- и -О-;
12
13
14
15
22
23
R, R, R, R, R и R независимо выбраны из H и С1-С6 алкила,
16
17
18
19
20
21
R, R, R, R, R и R независимо выбраны из С1-6 алкила;
любой алкил необязательно замещен одним или более атомами F; или
4
два R, присоединенные к соседним атомам цикла В, формируют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное гетероциклическое или карбоциклическое кольцо;
цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или фенил;
при условии, что указанное соединение не представляет собой:
N-[(4-хлорфенил)метил]-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-метоксифенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-[2-(4-хлорфенил)этил]-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(п-толилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(3-фенилпропил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(1,3-бензодиоксол-5-илметил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-фторфенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(2-фенилпропил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[2-(2,4-диметоксифенил)этил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(2-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(4-бромфенил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(4-хлорфенил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-(4-метоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(м-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(3-хлорфенил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-(3,4-диметилфенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-(4-фторфенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-(4-этоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(3-хлор-4-метил-фенил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-(3,5-диметилфенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-фенил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-[4-[[3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил]амино]фенил]ацетамид,
N-(3,4-дихлорфенил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-(4-изопропилфенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-(3-метоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин
3-(3,4-диметоксифенил)-N-(4-этилфенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(4-бутилфенил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин или
N-(3,5-дихлорфенил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин.
Другой аспект представляет собой новое соединение формулы (Ih)
или его фармацевтически приемлемую соль, где
р представляет собой целое число от 1 до 3;
1
R представляет собой Н или С1-С6 алкил;
2
Z представляет собой N или CR;
2
5
6
7
9
8
10
11
каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO-, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O- и атома галогена;
5
6
7
8
R, R, R и R независимо выбраны из H и С1-С6 алкила;
9
10
11
R, R и R независимо выбраны из С1-6 алкила;
любой алкил необязательно замещен одним или более атомами F; или
2
два R вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал;
2
никакой R не присоединен в орто-положении к фенильному циклу;
3
R представляет собой С1-С6 алкил;
m представляет собой целое число от 0 до 2;
4
12
13
14
16
15
17
18
19
20
21
22
23
2
2
2
2
каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO, атома галогена, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O-, RS(O)-, RS(O)N(H)-, NHS(O)-, RC(O)-, N(R)(R)- и -O-;
12
13
14
15
22
23
R, R, R, R, R и R независимо выбраны из H и C1-C6 алкила,
16
17
18
19
20
21
R, R, R, R, R и R независимо выбраны из С1-6 алкила;
любой алкил необязательно замещен одним или более атомами F; или
4
два R, присоединенные к соседним атомам цикла В, формируют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное гетероциклическое или карбоциклическое кольцо;
цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или фенил;
при условии, что указанное соединение не представляет собой:
N-бензил-2,5-диметил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-метоксифенил)-2,5-диметил-N-(пиридин-3-илметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-метоксифенил)-2,5-диметил-N-(пиридин-4-илметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-[(4-хлорфенил)метил]-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-метоксифенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(п-толилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(1,3-бензодиоксол-5-илметил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-фторфенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-3-(4-фторфенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-3-(4-фторфенил)-5-метил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-3-(4-хлорфенил)-5-метил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
2,5-диметил-3-(п-толил)-N-(2-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
2,5-диметил-3-(п-толил)-N-(3-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(2-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-фторфенил)-2,5-диметил-N-(3-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-фторфенил)-2,5-диметил-N-(2-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-хлорфенил)-2,5-диметил-N-(2-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-хлорфенил)-2,5-диметил-N-(3-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-метоксифенил)-2,5-диметил-N-(3-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин, или
3-(4-метоксифенил)-2,5-диметил-N-(4-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин.
Другой аспект представляет собой соединение формулы (Id) или формулы (Ih) для применения в терапии.
Другой аспект представляет собой соединение формулы (I), приведенной выше по тексту, или соединение формулы (Id), или соединение формулы (Ih), для применения в лечении вирусной инфекции, например, РНК-вирусной инфекции.
Другой аспект представляет собой соединение формулы (I)
или его фармацевтически приемлемую соль, где
W представляет собой
р представляет собой целое число от 0 до 3;
1
R представляет собой Н или С1-С6 алкил,
цикл А представляет собой фенил или 5- или 6-членный гетероарил;
когда цикл А представляет собой фенил, указанный фенил не замещен в орто-положении;
2
5
6
7
9
8
10
11
каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO-, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O- и атома галогена;
5
6
7
8
R, R, R и R независимо выбраны из H и С1-С6 алкила;
9
10
11
R, R и R независимо выбраны из С1-6 алкила;
любой алкил необязательно замещен одним или более атомами F; или
2
два R, присоединенные к соседним атомам углерода, вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал;
3
R представляет собой С1-С6 алкил;
m представляет собой целое число от 0 до 2;
4
12
13
14
16
15
17
18
19
20
21
22
23
2
2
2
2
каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO, атома галогена, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O-, RS(O)-, RS(O)N(H)-, NHS(O)-, RC(O)-, N(R)(R)- и -O-;
12
13
14
15
22
23
R, R, R, R, R и R независимо выбраны из H и C1-C6 алкила;
16
17
18
19
20
21
R, R, R, R, R и R независимо выбраны из С1-6 алкила;
любой алкил необязательно замещен одним или более атомами F; или
4
два R, присоединенные к соседним атомам цикла В, формируют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное гетероциклическое или карбоциклическое кольцо, или бензольное кольцо;
цикл В представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил, 5- или 6-членный гетероарил или фенил;
для применения в лечении вирусной инфекции,
при условии, что указанное соединение не представляет собой:
N-(циклогексилметил)-2,5-диметил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
2,5-диметил-N-фенил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-2,5-диметил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин или
2,5-диметил-N-фенетил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин.
В некоторых вариантах осуществления, вирусная инфекция представляет собой вирусную инфекцию, вызванную не имеющим оболочки вирусом с однонитевой (+) РНК.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 представляет собой диаграмму, демонстрирующую количество выживших животных как функцию от числа дней, прошедших после инфицирования вирусом Коксаки В3, у мышей, которым вводили соединение из Примера 9, в ежедневной однократной дозировке 200 мг/кг перорально, начиная со дня 1 (группа 1) или со дня 3 (группа 2), и у мышей, которым вводили только носитель (0.4% Tween 80, 2% глицерин и 15% β-гидроксипропил циклодекстрин).
Подробное описание изобретения
Термин "фармацевтически приемлемый" означает пригодный для приготовления фармацевтической композиции, которая в целом является безопасной, нетоксичной и не является нежелательной с биологической или какой-либо другой точки зрения, и включает пригодность для ветеринарии, а также для фармацевтического применения для людей.
Термин "лечение" при использовании в настоящем тексте включает профилактику указанного нарушения или состояния, или облегчение или устранение указанного нарушения после его выявления.
Термин "эффективное количество" означает количество соединения, которое обеспечивает терапевтическое воздействие на объект лечения. Терапевтическое воздействие может быть объективным (т.е. измеримым с помощью определенного теста или маркера) или субъективным (т.е. объект описывает ощущения от воздействия).
Если не указано иное, термин "С1-6 алкил" обозначает алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 6 атомов углерода. Примеры указанного С1-6 алкила включают метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил и гексил с прямой или разветвленной цепью.
2
Термин "С1-С6 гидроксиалкил" относится к С1-С6 алкилу, замещенному одной группой ОН. Примером С1-С6 гидроксиалкила является гидроксиметил: -СНОН.
Если не указано иное, термин "атом галогена" (или "галоген") относится к фтору (F), хлору (Cl) или брому (Br).
Фрагмент типа R'R''NC(O)- представляет собой фрагмент формулы
Фрагмент типа R''C(O)N(R')- представляет собой фрагмент формулы
Фрагмент типа R'ОС(О)- представляет собой фрагмент формулы
Фрагмент типа R'C(O)O- представляет собой фрагмент формулы
2
Фрагмент типа R'S(O)- представляет собой фрагмент формулы
2
Фрагмент типа R'S(O)N(H)- представляет собой фрагмент формулы
2
2
Фрагмент типа NHS(O)- представляет собой фрагмент формулы
Фрагмент типа R'С(О)- представляет собой фрагмент формулы
Фрагмент типа N(R')(R'')- представляет собой фрагмент формулы
При использовании в настоящем тексте, термин "карбоциклическое кольцо" касается насыщенного или ненасыщенного (например, мононенасыщенного или диненасыщенного), неароматического циклического фрагмента, содержащего в цикле только атомы углерода, такого как гексил или гексенил.
Термин "гетероциклическое кольцо" касается насыщенного или ненасыщенного, неароматического циклического фрагмента, содержащего в цикле не только атомы углерода, но по меньшей мере еще и один другой атом, например, выбранный из атома азота (N), серы (S) и кислорода (О), в частности, N и О; такого как пиперидинил или 1,2,3,4-тетрагидропиридинил. Другие примеры гетероциклила включают морфолинил, пирролидинил, пиперазинил, тетрагидротиенил и тетрагидрофурил.
Термин "гетероарил" касается ароматического цикла, содержащего по меньшей мере один гетероатом в цикле, такого как фурил, изоксазолил, изотиазолил, имидазолил, пиридил, пирролил, пиразолил, пиримидинил, пиридазинил, пиразинил, оксадиазолил, оксазолил, тиенил, тиадиазолил, тиазолил, триазолил и тетразолил.
Термин "ароматический", при использовании в настоящем тексте, касается ненасыщенного циклического фрагмента, который имеет ароматическую природу, в то время как термин "неароматический", при использовании в настоящем тексте, касается циклического фрагмента, который может быть насыщенным или ненасыщенным, например, полиненасыщенным, но который не имеет ароматической природы.
6
5
Термин "фенил" относится к фрагменту, имеющему формулу СН-, т.е.:
6
5
2
Термин "бензил" относится к фрагменту, имеющему формулу СНСН-, т.е.:
6
5
2
4
Термин "фенилэтил" относится к фрагменту, имеющему формулу СНСН-, т.е.:
2
"Метилендиокси-бирадикал" представляет собой бирадикал, имеющий формулу -OCHO-.
2
2
"Этилендиокси-бирадикал" представляет собой бирадикал, имеющий формулу -OCHCHO-.
Термин "лечение" при использовании в настоящем тексте включает профилактику указанного нарушения или состояния, или облегчение или устранение (т.е. излечение) указанного нарушения после его выявления.
Термин "эффективное количество" означает количество соединения, которое обеспечивает терапевтическое воздействие на объект лечения. Терапевтическое воздействие может быть объективным (т.е. измеримым с помощью какого-либо теста или маркера, например, отсутствие измеримого титра вируса в биологическом образце, взятом у объекта лечения) или субъективным (т.е. объект описывает ощущения от воздействия).
Термин "вирусная инфекция, вызванная не имеющим оболочки вирусом с однонитевой (+) РНК" означает инфицирование не имеющим оболочки вирусом с однонитевой (+) РНК.
"Не имеющий оболочки вирус" представляет собой вирус, не имеющий вирусной оболочки.
"Вирус с однонитевой (+) РНК" представляет собой вирус, генетическим материалом которого является однонитевая РНК, и при этом указанная РНК может немедленно транслироваться в вирусный белок клеткой, инфицированной вирусом.
Термин "млекопитающее" касается человека или любого млекопитающего животного, например, примата, сельскохозяйственного животного, домашнего животного или лабораторного животного. Примеры таких животных представляют собой обезьян, коров, овец, коз, лошадей, свиней, собак, кошек, кроликов, мышей, крыс и т.д. Предпочтительно, указанное млекопитающее представляет собой человека. В некоторых вариантах осуществления, однако, указанное млекопитающее представляет собой животное, например, сельскохозяйственное животное, такое как корова, овца, коза, лошадь или свиньи. В некоторых других вариантах осуществления, указанное животное представляет собой домашнее животное, например, собаку, кошку или кролика.
Термин "вспомогательное вещество" относится к фармацевтически приемлемым химическим веществам, которые известны квалифицированным специалистам в области техники фармакологии как помогающие введению лекарственного средства. Вспомогательное вещество представляет собой соединение, подходящее для приготовления фармацевтической композиции, в целом безопасное, нетоксичное и не являющееся нежелательным с биологической или какой-либо другой точки зрения, и включает вспомогательные вещества, приемлемые для применения в ветеринарии, а также в фармацевтических применениях для людей. Примеры вспомогательных веществ включают связующие средства, поверхностно-активные вещества, растворители, дезинтегрирующие средства, антиадгезивы и смазывающие средства.
Ниже в настоящем тексте любая ссылка на соединение формулы (I) или на соединение по настоящему изобретению должна пониматься как ссылка на соединение для применения по настоящему изобретению, как отражено в Формуле изобретения.
В соединении формулы (I)
приведенной выше в настоящем тексте,
1
1
R выбран из Н и С1-С6 алкила, например из Н и С1-С4 алкила, или из Н и С1-С3 алкила, например из Н, метила и этила, или из Н и метила, например R представляет собой Н.
1
1
1
3
3
3
2
В некоторых вариантах осуществления, R выбран из С1-С6 алкила, например из С1-С4 алкила, или из С1-С3 алкила; например R представляет собой СН. В некоторых вариантах осуществления, R выбран из СН и СНСН.
В соединении формулы (I) цикл А представляет собой фенил или 5- или 6-членный гетероарил.
Когда цикл А представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, он может содержать 1-4 гетероатомов, например 1, 2 или 3 гетероатома; или 1 или 2 гетероатома, в частности 1 гетероатом, независимо выбранных из N, О и S.
В некоторых вариантах осуществления, цикл А представляет собой 5-членный гетероарил, содержащий 1-4 гетероатомов, например 1, 2 или 3 гетероатома; или 1 или 2 гетероатома, в частности 1 гетероатом, независимо выбранных из N, О и S.
В некоторых вариантах осуществления, цикл А представляет собой 6-членный гетероарил, содержащий 1-4 гетероатомов, например 1, 2 или 3 гетероатома; или 1 или 2 гетероатома, в частности 1 гетероатом, независимо выбранных из N, О и S.
В некоторых вариантах осуществления, цикл А представляет собой фенил. В некоторых других вариантах осуществления, цикл А представляет собой фенил или 6-членный гетероарил, например цикл А представляет собой 6-членный гетероарил, такой как пиридил.
В других вариантах осуществления, цикл А представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, например тиенил или пиридил. В некоторых вариантах осуществления, цикл А представляет собой 5-членный гетероарил. В некоторых вариантах осуществления, цикл А представляет собой фенил или 5-членный гетероарил, например цикл А представляет собой фенил или тиенил.
В тех вариантах осуществления, в которых цикл А представляет собой фенил, соединение формулы (I) может быть представлено формулой (Ia)
1
2
3
4
где R, каждый R, R, каждый R, W, m и p такие, как указано в настоящем тексте.
2
В соединении формулы (I), переменная р, обозначающая количество заместителей R в цикле А, представляет собой целое число от 0 до 3, например от 0 до 2. В некоторых вариантах осуществления, цикл А представляет собой фенил, и р равно 0, 1 или 2. В некоторых вариантах осуществления, например, когда цикл А представляет собой 6-членный цикл, например цикл А представляет собой фенил, р представляет собой целое число от 1 до 3, например р равно 1 или 2. В некоторых вариантах осуществления, например, когда цикл А представляет собой 6-членный цикл, например цикл А представляет собой фенил, р равно 2 или 3, например р равно 2. В некоторых других вариантах осуществления, например, когда цикл А представляет собой 5-членный или 6-членный гетероарил, например А представляет собой тиенил или пиридил, р равно 0 или 1, например р равно 0.
Когда цикл А представляет собой пиридил, он, например, может представлять собой 4-пиридил.
2
2
2
В некоторых вариантах осуществления, когда цикл А является 6-членным, например в тех вариантах осуществления, в которых цикл А представляет собой фенил, R не присоединен к атому в цикле А, соседнему со связью, соединяющей цикл А с пиразолопиримидиновым фрагментом соединения формулы (I), т.е. R не присоединен к атому углерода в орто-положении цикла А. Таким образом, когда цикл А представляет собой фенил, любой R присоединен в мета или пара положении к циклу А.
В некоторых вариантах осуществления, когда цикл А представляет собой фенил, фрагмент
выбран из
например, из
2
где каждый R такой, как указано в настоящем тексте.
В некоторых вариантах осуществления, когда цикл А представляет собой фенил, и р равно 0, 1 или 2, фрагмент
выбран из
2
где каждый R такой, как указано в настоящем тексте.
В некоторых вариантах осуществления, когда цикл А представляет собой фенил, и р равно 1 или 2, фрагмент
выбран из
2
где каждый R такой, как указано в настоящем тексте.
В некоторых частных вариантах осуществления, когда цикл А представляет собой фенил, и р равно 2, фрагмент представляет собой
2
где каждый R такой, как указано в настоящем тексте.
В некоторых вариантах осуществления, когда цикл А представляет собой фенил, и р равно 2 или 3, фрагмент
выбран из
2
где каждый R такой, как указано в настоящем тексте.
2
2
2
2
2
2
2
2
В некоторых вариантах осуществления, цикл А выбран из фенила, при этом указанный фенил замещен 1-3 группами R, например 1 или 2 группами R, в частности 2 группами R; и пиридила, например 4-пиридила, указанный пиридил замещен 0, 1 или 2 группами R, например 0 или 1 группой R, в частности 0 группами R; и тиенила, при этом указанный тиенил замещен 0 или 1 группой R, например 0 группами R.
2
2
2
2
2
В некоторых вариантах осуществления, цикл А выбран из фенила, при этом указанный фенил замещен 1-3 группами R, например 1 или 2 группами R, в частности 2 группами R; и тиенила, при этом указанный тиенил замещен 0 или 1 группой R, например 0 группами R.
2
2
2
2
2
2
В некоторых вариантах осуществления, цикл А выбран из фенила, при этом указанный фенил замещен 1-3 группами R, например 1 или 2 группами R, в частности 2 группами R; и пиридила, например 4-пиридила, при этом указанный пиридил замещен 0, 1 или 2 группами R, например 0 или 1 группой R, в частности 0 группами R.
В некоторых частных вариантах осуществления, фрагмент
может быть представлен формулой
2
2
2
2
где Z представляет собой N или CR, R такой как указано в настоящем тексте, и р равно 1, 2 или 3. В некоторых вариантах осуществления, Z представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления, когда Z представляет собой N, р равно 1 (т.е. р-1 равно 0). В некоторых других вариантах осуществления, Z представляет собой CR. В некоторых вариантах осуществления, когда Z представляет собой CR, р равно 2 или 3, т.е. цикл А является моно- или дизамещенным.
2
5
6
7
9
8
10
11
2
В соединении формулы (I), каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO-, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O- и атома галогена; или два R, присоединенные к соседним атомам углерода, вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал.
2
5
10
2
В некоторых вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO-, ROC(O)- и атома галогена, или два R, присоединенные к соседним атомам углерода, вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал.
2
5
2
В некоторых вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO- и атома галогена; или два R, присоединенные к соседним атомам углерода, вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал.
2
5
2
5
В некоторых вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO- и атома галогена. В некоторых вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из RO- и атома галогена.
2
5
В некоторых других вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из RO- и С1-С6 алкила.
2
5
В других вариантах осуществления, каждый R представляет собой RO-.
2
5
2
В некоторых вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из RO- и атома галогена; или два R, присоединенные к соседним атомам углерода, вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал.
2
5
2
В некоторых вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила и RO-, или два R, присоединенные к соседним атомам углерода, вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал.
2
5
2
В некоторых вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из RO-, или два R, присоединенные к соседним атомам углерода, вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал.
2
Когда R представляет собой С1-С6 алкил, он в частности может представлять собой С1-С4 алкил или С1-С3 алкил, такой как метил и этил, в частности метил.
2
5
6
7
9
8
10
5
6
7
8
10
5
6
7
8
10
Когда R представляет собой RO-, RRNC(O)-, RC(O)N(R)- или ROC(O)-, фрагменты R, R, R, R и R независимо выбраны из H и С1-С6 алкила, например из Н и С1-С4 алкила, например Н и С1-С3 алкила, например Н, метила и этила, в частности Н и метила. В некоторых вариантах осуществления, R, R, R, R и R независимо выбраны из С1-С6 алкила, например из С1-С4 алкила или С1-С3 алкила, такого как метил и этил, в частности метил.
2
9
8
11
9
11
Когда R представляет собой RC(O)N(R)- или RC(O)O-, R и R независимо выбраны из С1-6 алкила; например С1-С4 алкила или С1-С3 алкила, такого как метил и этил, в частности метил.
2
Когда R представляет собой атом галогена, указанный атом галогена, например, может быть выбран из F и Cl.
2
5
2
2
5
2
В некоторых вариантах осуществления, цикл А представляет собой фенил, р равно 2, и каждый R независимо выбран из атома галогена и RO-, или два R присоединены к соседним атомам углерода и вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал, например, цикл А представляет собой фенил, р равно 2, и каждый R представляет собой RO-, или два R присоединены к соседним атомам углерода и вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал.
2
2
В некоторых вариантах осуществления, когда два R присоединены к соседним атомам углерода и вместе образуют метилендиокси- или этилендиокси-бирадикал, указанные два R конкретнее образуют метилендиокси-бирадикал.
В некоторых вариантах осуществления, когда р равно 2, фрагмент
представляет собой фрагмент формулы
5
5
5
5
где каждый R такой, как указано в настоящем тексте, например каждый R представляет собой С1-С6 алкил, или каждый R представляет собой С1-С3 алкил, например каждый R представляет собой метил.
В некоторых вариантах осуществления, когда р равно 2, фрагмент
представляет собой фрагмент формулы
5
5
где каждый R такой, как указано в настоящем тексте, например каждый R представляет собой метил.
В некоторых вариантах осуществления, когда р равно 2, фрагмент
представляет собой фрагмент формулы
5
5
где каждый R такой, как указано в настоящем тексте, например каждый R представляет собой метил.
3
3
3
3
3
3
В соединении формулы (I), R представляет собой С1-С6 алкил, например R выбран из С1-С5 алкила, или R выбран из С1-С4 алкила. В некоторых вариантах осуществления, R выбран из С1-С3 алкила. В некоторых вариантах осуществления, R представляет собой СН.
Фрагмент W представляет собой  В некоторых вариантах осуществления, W представляет собой  В некоторых вариантах осуществления, W представляет собой  В некоторых других вариантах осуществления, W представляет собой  В некоторых вариантах осуществления, W представляет собой  В некоторых других вариантах осуществления, W представляет собой  В некоторых вариантах осуществления, W представляет собой  В некоторых других вариантах осуществления, W представляет собой  В других вариантах осуществления, W представляет собой  В других вариантах осуществления, W представляет собой  В некоторых частных вариантах осуществления, W представляет собой
В соединении формулы (I), цикл В представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил, 5- или 6-членный гетероарил или фенил.
В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил. Любой такой карбоциклил является неароматическим и может быть насыщенным (циклоалкил) или, например, мононенасыщенным (циклоалкенил), например выбран из циклопентила, циклогексила и циклогексенила. В некоторых вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой карбоциклил, указанный карбоциклил является насыщенным. В некоторых вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой карбоциклил, указанный карбоциклил является 5-членным. В некоторых вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой карбоциклил, указанный карбоциклил является 6-членным. В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой циклопентил, циклогексил или циклогексенил. В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой циклопентил или циклогексил, например цикл В представляет собой циклопентил.
В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой 5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил или фенил. В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой 6-членный насыщенный или ненасыщенный карбоциклил или фенил, например цикл В представляет собой фенил, циклогексенил или циклогексил.
В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил. Когда цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, он, например, может содержать 1-4 гетероатомов, например 1, 2 или 3 гетероатома; или 1 или 2 гетероатома, или 1 гетероатом, независимо выбранных из N, О и S.
В некоторых вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, указанный гетероарил выбран из пиридинила и имидазолила, например пиридин-2-ила, пиридин-3-ила, пиридин-4-ила и 1H-имидазол-1-ила. В некоторых других вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, указанный гетероарил выбран из пиридинила, имидазолила, пиримидинила, тиенила, тиазолила, изоксазолила, например пиридин-2-ила, пиридин-3-ила, пиридин-4-ила, 1Н-имидазол-1-ила, пиримидин-4-ила, тиен-2-ила, тиазол-2-ила и изоксазол-3-ила.
В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой 5-членный гетероарил, содержащий один или более, например 1-4 или 1-3, например 1 или 2 гетероатома, выбранных из N, О и S. Когда цикл В представляет собой 5-членный гетероарил, указанный гетероарил, например, может быть выбран из имидазолила, тиенила, тиазолила, изоксазолила, например 1Н-имидазол-1-ила, тиен-2-ила, тиазол-2-ила и изоксазол-3-ила.
В некоторых других частных вариантах осуществления, цикл В представляет собой 6-членный гетероарил, например содержащий один или более, 1-4 или 1-3, например 1 или 2 гетероатома, выбранных из N и О.
Когда цикл В представляет собой 6-членный гетероарил, указанный гетероарил, например, может быть выбран из пиридинила, т.е. пиридин-2-ила, пиридин-3-ила, пиридин-4-ила, в частности может представлять собой пиридин-4-ил. В некоторых других вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой 6-членный гетероарил, указанный гетероарил выбран из пиридинила и пиримидинила, например пиридин-2-ила, пиридин-3-ила, пиридин-4-ила и пиримидин-4-ила.
В некоторых вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой гетероарил, указанный гетероарил не является оксадиазолилом. В некоторых вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой гетероарил, по меньшей мере один гетероатом в цикле представляет собой атом азота, например каждый гетероатом в цикле представляет собой атом азота.
В некоторых вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, указанный гетероарил содержит 1 гетероатом. В некоторых вариантах осуществления, когда цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, указанный гетероарил содержит 2 гетероатома.
В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 1 гетероатом. В некоторых других вариантах осуществления, цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, содержащий 2 гетероатома.
В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил или фенил, например цикл В представляет собой 6-членный гетероарил или фенил. В некоторых других вариантах осуществления, цикл В представляет собой 5-членный гетероарил или фенил.
В некоторых вариантах осуществления, цикл В выбран из
В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой фенил.
Когда цикл В представляет собой фенил, соединение по настоящему изобретению может быть представлено формулой (Ib)
1
2
3
4
где цикл A, R, каждый R, R, каждый R, W, m и р такие, как указано в настоящем тексте.
4
Целое число m обозначает количество фрагментов R, присоединенных к циклу В, и равно 0, 1 или 2. В некоторых вариантах осуществления, m равно 0 или 1, например m равно 0. В других вариантах осуществления, m равно 1 или два. В некоторых вариантах осуществления, m равно 1. В некоторых вариантах осуществления, m равно 2.
4
Например, в некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой фенил или 5- или 6-членный гетероарил, и цикл В необязательно замещен 1-2 фрагментами R.
4
В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, при этом указанный гетероарил необязательно замещен 1-2 фрагментами R.
4
В некоторых вариантах осуществления, цикл В представляет собой фенил, m равно 1 или два, например m равно 1, и один R расположен в пара-положении в фенильном цикле.
4
12
13
14
16
15
17
18
19
20
21
22
23
2
2
2
2
Когда m равно 1 или 2, каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO, атома галогена, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O-, RS(O)-, RS(O)N(H)-, NHS(O)-, RC(O)-, N(R)(R)- и -O-.
4
12
13
14
16
15
17
18
В некоторых вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO, атома галогена, RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)- и RC(O)O-.
4
12
16
15
12
4
12
4
12
В некоторых вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO, атома галогена и RC(O)N(R)-. В некоторых других вариантах осуществления, каждый R4 независимо выбран из С1-С6 алкила, RO и атома галогена. В других вариантах осуществления, каждый R независимо выбран из атома галогена и RO, например каждый R представляет собой RO.
4
4
4
4
В некоторых вариантах осуществления, два R, присоединенные к соседним атомам в цикле В, формируют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное гетероциклическое или карбоциклическое кольцо или бензольный цикл. В некоторых вариантах осуществления, два R, присоединенные к соседним атомам в цикле В, формируют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо или бензольный цикл. В некоторых вариантах осуществления, два R, присоединенные к соседним атомам в цикле В, формируют вместе с атомами, к которым они присоединены, бензольный цикл. В некоторых вариантах осуществления, два R, присоединенные к соседним атомам в цикле В, формируют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо.
4
Когда R представляет собой С1-С6 алкил, указанный алкил, например, может быть выбран из С1-С4 алкила, например С1-С3 алкила, такого как метил и этил, в частности метил.
4
12
12
12
Когда R представляет собой RO, R выбран из Н и С1-С6 алкила. В некоторых вариантах осуществления, R выбран из С1-С6 алкила, например из С1-С4 алкила, в частности из С1-С3 алкила, такого как метил и этил, в частности метил.
4
4
4
Когда R представляет собой атом галогена, указанный атом галогена, например, может быть выбран из F, Cl и Br. В некоторых вариантах осуществления, когда R представляет собой атом галогена, указанный атом галогена представляет собой Cl или Br, в частности, Cl. В некоторых других вариантах осуществления, когда R представляет собой атом галогена, указанный атом галогена представляет собой F или Cl, в частности указанный атома галогена представляет собой F.
4
13
14
16
15
17
18
19
20
21
22
23
13
14
15
22
23
16
17
18
19
20
21
2
2
Когда R выбран из RRNC(O)-, RC(O)N(R)-, ROC(O)-, RC(O)O-, RS(O)-, RS(O)N(H)-, RC(O)- и N(R)(R)-, каждый R, R, R, R и R независимо выбран из H и С1-С6 алкила, например из Н и С1-С4 алкила, или из Н и С1-С3 алкила, например из Н и метила; и каждый R, R, R, R, R и R независимо выбран из С1-6 алкила, например из С1-С4 алкила, в частности из С1-С3 алкила, такого как метил и этил, в частности метил.
4
Когда R представляет собой алкильный фрагмент или содержит алкильный фрагмент, любой такой алкильный фрагмент может быть замещен одним или более атомами F.
4
4
Когда два R, присоединенные к соседним атомам в цикле В, формируют вместе с атомами, к которым они присоединены, 5- или 6-членное гетероциклическое или карбоциклическое кольцо, указанный цикл, например, может быть 5-членным. Например, два R, присоединенные к соседним атомам в цикле В, могут вместе с атомами, к которым они присоединены, образовывать 1,3-диоксолановый цикл.
В некоторых вариантах осуществления, фрагмент
выбран из
В некоторых вариантах осуществления, фрагмент
выбран из
Необходимо понимать, что признаки разных описанных в настоящем тексте вариантов осуществления можно легко комбинировать в рамках объема настоящего изобретения, при отсутствии взаимной несовместимости или если не указано иное. Например, в некоторых вариантах соединения формулы (Ia), цикл В представляет собой фенил, как изображено на формуле (Ib). В данных вариантах осуществления, соединение может иметь формулу (Ic)
1
2
3
4
где R, каждый R, R, каждый R, W, m и р такие, как указано в настоящем тексте.
В некоторых вариантах соединения формулы (Ia), р равно 2. В некоторых вариантах соединения формулы (Ia), когда р равно 2, соединение представляет собой соединение формулы (Id)
1
2
3
4
где R, каждый R, R, каждый R, W, m и цикл В такие, как указано в настоящем тексте.
В некоторых вариантах соединения формулы (Id), цикл В представляет собой фенил или 5- или 6-членный гетероарил. В некоторых других вариантах соединения формулы (Id), цикл В представляет собой фенил.
2
5
В некоторых вариантах соединения формулы (Ia), например в некоторых вариантах соединения формулы (Id), каждый R независимо выбран из С1-С6 алкила, RO- и атома галогена.
В некоторых частных вариантах соединения формулы (I), например в соединении формулы (Ia), р равно 2, и W представляет собой метиленовую группу. В некоторых вариантах осуществления, когда р равно 2, и W представляет собой метиленовую группу, соединение формулы (Ia) представляет собой соединение, имеющее формулу (Ie)
1
2
3
4
где цикл В, R, каждый R, R, каждый R и m такие, как указано в настоящем тексте.
В некоторых частных вариантах соединения формулы (Ie), цикл В представляет собой фенил, т.е. указанное соединение может иметь формулу (If)
1
2
3
4
где R, каждый R, R, каждый R и m такие, как указано в настоящем тексте.
4
В некоторых вариантах соединения формулы (Ib), например, в некоторых вариантах соединения формулы (Ic), в частности в некоторых вариантах соединения формулы (If), когда m равно 1 или 2, один фрагмент R расположен в пара положении в цикле В. В некоторых из данных вариантов осуществления, m равно 1.
4
В некоторых вариантах соединения формулы (If), m равно 1, и R расположен в пара положении, т.е. указанное соединение может быть представлено формулой (Ig)
1
2
3
4
где R, каждый R, R и R такие, как указано в настоящем тексте.
В некоторых других вариантах осуществления, соединение формулы (I) может быть представлено формулой (Ih)
1
2
3
4
где R, каждый R, R, R, m, цикл В и Z такие, как указано в настоящем тексте, и р представляет собой целое число от 1 до 3.
2
В формуле (Ih), Z представляет собой N или CR. В некоторых вариантах осуществления, Z представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления, когда Z представляет собой N, р равно 1 (т.е. р-1 равно 0).
2
В некоторых вариантах соединения формулы (Ih), Z представляет собой CR, в данном случае соединение может быть представлено формулой (Ij)
1
2
3
4
где R, каждый R, R, каждый R, m и цикл В такие, как указано в настоящем тексте, и р представляет собой целое число от 1 до 3, например р равно 1 или 2, или р равно 2.
В некоторых вариантах соединения формулы (I), например в некоторых вариантах соединения формулы (Ih), или в некоторых вариантах соединения формулы (Ij), р равно 1 или 2. В других вариантах соединения формулы (I), например в вариантах соединения формулы (Ih) или в вариантах соединения формулы (Ij), р равно 1. В некоторых частных вариантах осуществления, соединение может быть представлено формулой (Ik)
1
3
4
где R, R, каждый R, m, Z и цикл В такие, как указано в настоящем тексте.
4
4
В некоторых вариантах соединения формулы (I), например в вариантах соединения формулы (Ia), или формулы (Id), или формулы (Ie), или формулы (Ih), или формулы (Ij), или формулы (Ik), цикл В представляет собой 6-членный гетероарил, при этом указанный гетероарил замещен фрагментом R в пара положении или содержит гетероатом, такой как N, в пара положении, или цикл В представляет собой фенил, при этом указанный фенил замещен фрагментом R в пара положении.
4
В некоторых вариантах соединения формулы (I), например в вариантах соединения формулы (Ia), или формулы (Id), или формулы (Ie), или формулы (Ih), или формулы (Ij), или формулы (Ik), цикл В представляет собой 6-членный гетероарил, при этом указанный гетероарил замещен фрагментом R в пара положении или содержит гетероатом, такой как N, в пара положении.
4
В некоторых вариантах соединения формулы (I), например в некоторых вариантах соединения формулы (Ih), или формулы (Ij) или формулы (Ik), цикл В представляет собой фенил, при этом указанный фенил имеет заместитель R в пара положении. В некоторых вариантах осуществления, соединение может быть представлено формулой (Im)
1
3
4
где R, R, R и Z такие, как указано в настоящем тексте.
2
В некоторых вариантах осуществления, в соединении формулы (Im), Z представляет собой CR, и соединение может быть представлено формулой (In)
1
2
3
4
где R, R, R и R такие, как указано в настоящем тексте.
Необходимо понимать, что, если обратное не очевидно из контекста или не указано, в настоящем тексте любая ссылка на соединение формулы (I) также должна пониматься как ссылка на соединение в любом из его вариантов осуществления, например, соединение по любой из формул (Ia), (Ib), (Ic), (Id), (Ie), (If), (Ig), (Ih), (Ij), (Ik), (Im) и (In).
Как указано в настоящем документе выше, некоторые соединения формулы (I) являются новыми. Таким образом, с учетом перечисленных выше исключений, описаны новые соединения формулы (Id) или формулы (Ih).
В некоторых вариантах осуществления, новое соединение такое, как представлено формулой (Ie), при условии, что указанное соединение не представляет собой
N-[(4-хлорфенил)метил]-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-метоксифенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(п-толилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(1,3-бензодиоксол-5-илметил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-фторфенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(2-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин или
N-бензил-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин.
В некоторых вариантах осуществления, новое соединение такое, как представлено формулой (If), при условии, что указанное соединение не представляет собой
N-[(4-хлорфенил)метил]-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-метоксифенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(п-толилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(1,3-бензодиоксол-5-илметил)-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-фторфенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин или
N-бензил-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин.
В некоторых вариантах осуществления, новое соединение такое, как представлено формулой (Ig), при условии, что указанное соединение не представляет собой
N-[(4-хлорфенил)метил]-3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-метоксифенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(3,4-диметоксифенил)-2,5-диметил-N-(п-толилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин или
3-(3,4-диметоксифенил)-N-[(4-фторфенил)метил]-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин.
В некоторых вариантах осуществления, новое соединение такое, как представлено формулой (Ik), при условии, что указанное соединение не представляет собой
N-бензил-3-(4-фторфенил)-2,5-диметил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-3-(4-фторфенил)-5-метил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-3-(4-хлорфенил)-5-метил-пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
2,5-диметил-3-(п-толил)-N-(2-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
2,5-диметил-3-(п-толил)-N-(3-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-фторфенил)-2,5-диметил-N-(3-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-фторфенил)-2,5-диметил-N-(2-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-хлорфенил)-2,5-диметил-N-(2-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-хлорфенил)-2,5-диметил-N-(3-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-метоксифенил)-2,5-диметил-N-(3-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-метоксифенил)-2,5-диметил-N-(4-пиридилметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-(циклогексилметил)-2,5-диметил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
N-бензил-2,5-диметил-3-(п-толил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин,
3-(4-метоксифенил)-2,5-диметил-N-(пиридин-3-илметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин или
3-(4-метоксифенил)-2,5-диметил-N-(пиридин-4-илметил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-амин.
В некоторых вариантах осуществления, новое соединение такое, как представлено формулой (Im).
В некоторых вариантах осуществления, новое соединение такое, как представлено формулой (In).
3
Ниже на Схеме 1 проиллюстрированы подходящие методы синтеза соединений формулы (I). Например, соединения формулы (I) можно получать из соединений формулы (III) путем обработки POCl при кипячении, получая соединения формулы (II), с последующим введением в реакцию с аминами хорошо известными квалифицированным специалистам в данной области техники способами. Примеры, илллюстрирующие данные методы синтеза, описаны в работах Griffith et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011, 21, 2641-2645); Hwang et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2012, 22, 7297-7301); Gilligan et al., (J. Med. Chem. 2009, 52, 3073-3083); Chen et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 3669-3673); Tellew et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2010, 20, 7259-7264); и Yu et al. (Med. Chem. Lett. 2013, 4, 230-234).
Соединения формулы (I) также можно получать из соединений формулы (IV) палладий-катализируемыми методами синтеза, такими как реакции Сузуки, Стилле или Негиши, в зависимости от атома галогена, как, например, описано в работах Gudmundsson et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19, 5689-5692); Mayo et al. (Adv. Synth. Catal. 2003, 345, 620-624); и US 2006/0135526. Соединения формулы (I) также можно получать из соединений формулы (V) путем N-алкилирования, как описано в работе Saito et al. (Bioorg. Med. Chem. 2011, 19, 5432-5445).
3
Как проиллюстрировано ниже на схеме 2, соединения формулы (IV) можно получать из коммерчески доступных исходных веществ (соединения формулы XIII и XIV) с последующим алкилированием амина формулы (VI) способом, описанным в работе Majo et al., 2003, и в ссылках, приведенных в ней. Соединения формулы (IV) также можно получать из соединений формулы (X) реакцией с POCl, с получением соединений формулы (IX) ранее описанным способом, с последующим аминированием, как описано в US 2006/0135526 или в работе Novinson et al. (J. Med. Chem. 1977, 20(2), 296-299), получая соединения формулы (VIII). Соединения формулы (VIII) затем можно галогенировать с помощью NIS или NBr, получая соединения формулы (IV), применяя способы, описанные в работе Labroli et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011, 21, 471-474), US 20050187224 или US 2006135526.
2
3
3
3
Как проиллюстрировано ниже на схеме 3, соединения формулы (IV) также можно получать из соединений формулы (X) реакцией с галогенирующим агентом (например, SOCl, POCl, PCl, PBr и т.д.), как было описано ранее, с получением соединений формулы (IX), которые затем можно обработать NBS или NIS, получая соединения формулы (VII). Способы, пригодные для синтеза соединений формулы (VII) из соединений формулы (X), также описаны в WO 2005103052, WO 2012033753 и в работе Gudmundsson et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19, 5689-5692). Соединения формулы (VII) можно вводить в реакцию с аминами, получая соединения формулы (IV), способами, описанными в работах Gudmundsson et al (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19, 5689-5692) или Bel Abed (Teтpahedron Lett. 2013, 54(21) 2612-2614).
Как проиллюстрировано ниже на схеме 4, соединения формулы (III) и формулы (X) можно получать из коммерчески доступного исходного вещества (соединение формулы XV), путем взаимодействия с соединениями формулы (XI) или (XII) в условиях, описанных, например, в работах Griffith et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011, 21, 2641-2645); Hwang et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2012, 22, 7297-7301); Chen et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004, 14, 3669-3673); Yu et al (Med. Chem. Lett. 2013, 4, 230-234) или US 2006/0135526.
Как проиллюстрировано ниже на схеме 5, соединения формулы (XI), формулы (XII) и формулы (XIII) можно получать из коммерчески доступного исходного вещества (соединения формулы XVI), путем реакции с гидразином в условиях, описанных в нескольких из вышеуказанных публикаций (Labroli, Chen, Hwang, Griffith, Yu, Bel Abed и т.д.).
Термин "фармацевтически приемлемая соль соединения" означает соль, которая фармацевтически приемлема, как указано в настоящем тексте, и которая обладает желаемой фармакологической активностью исходного соединения. Фармацевтически приемлемые соли включают кислотно-аддитивные соли, образующиеся при добавлении неорганических кислот, например соляной кислоты, бромистоводородной кислоты, серной кислоты, азотной кислоты, фосфорной кислоты; или образующиеся при добавлении органических кислот, например уксусной кислоты, бензолсульфокислоты, бензойной кислоты, камфорсульфокислоты, лимонной кислоты, этансульфокислоты, фумаровой кислоты, глюкогептоновой кислоты, глюконовой кислоты, глютаминовой кислоты, гликолевой кислоты, гидроксинафтойной кислоты, 2-гидроксиэтансульфокислоты, молочной кислоты, малеиновой кислоты, яблочной кислоты, малоновой кислоты, миндальной кислоты, метансульфокислоты, муконовой кислоты, 2-нафталинсульфокислоты, пропионовой кислоты, салициловой кислоты, янтарной кислоты, винной кислоты, п-толуолсульфокислоты, триметилуксусной кислоты и т.д.
При получении кислотно-аддитивных солей предпочтительно применяют такую кислоту, которая образует подходящие терапевтически приемлемые соли. Примерами таких кислот являются галогеноводородные кислоты, серная кислота, фосфорная кислота, азотная кислота, алифатические, алициклические, ароматические или гетероциклические карбоновые или сульфокислоты, такие как муравьиная кислота, уксусная кислота, пропионовая кислота, янтарная кислота, гликолевая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, аскорбиновая кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, пировиноградная кислота, п-гидроксибензойная кислота, эмбоновая кислота, метансульфокислота, этансульфокислота, гидроксиэтансульфокислота, галогенбензолсульфокислота, толуолсульфокислота или нафталинсульфокислота.
При наличии в химической структуре хирального атома углерода, подразумевается, что все стереоизомеры, образующиеся в связи с наличием данного хирального атома углерода, охватываются данной структурой, если не указано иное. Пользуясь терминологией RS-номенклатуры Кана-Ингольда-Прелога, любой асимметричный атом углерода может иметь (R)- или (S)-конфигурацию, и соединение может присутствовать в виде смеси его стереоизомеров, например рацемической смеси, или только одного стереоизомера.
Настоящее изобретение включает фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение формулы (I), или его отдельный изомер, рацемическую или нерацемическую смесь его изомеров или его фармацевтически приемлемую соль, вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, например носителем, и необязательно с другими терапевтическими и/или профилактическими компонентами.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может предназначаться для местного (локального) или системного введения, например для энтерального введения, такого как ректальное или пероральное введение, или для парентерального введения млекопитающему (особенно человеку), и содержит терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли в качестве действующего вещества, совместно с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, например фармацевтически приемлемым носителем. Терапевтически эффективное количество действующего вещества соответствует указанному в настоящем тексте выше и зависит, например, от вида млекопитающего, массы тела, возраста, индивидуального состояния, индивидуальных фармакокинетических данных, заболевания, которое необходимо вылечить, и способа введения.
Для энтерального, например перорального, введения, соединения по настоящему изобретению могут выпускаться в широком многообразии дозированных форм. Фармацевтические композиции и дозированные формы могут содержать соединение или соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемую соль (соли) в качестве действующего вещества. Фармацевтически приемлемые носители могут быть твердыми или жидкими. Твердые готовые формы включают порошки, таблетки, пилюли, пастилки, капсулы, саше, суппозитории и диспергируемые гранулы. Твердый носитель может представлять собой одно или более веществ, которые могут также работать как растворители, ароматизаторы, солюбилизаторы, смазывающие средства, суспендирующие средства, связующие средства, консерванты, разрыхлители для таблеток или инкапсулирующее вещество. Для порошков, носитель обычно представляет собой мелкоизмельченное твердое вещество, которое представляет собой смесь с мелкоизмельченным действующим веществом. Для таблеток, действующее вещество обычно смешивают с носителем, имеющим необходимую связующую способность, в подходящих пропорциях, и придают требуемую форму и размер. Подходящие носители включают (но не ограничиваются только ими) карбонат магния, стеарат магния, сахар, лактозу, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлозу, натрий карбоксиметилцеллюлозу, легкоплавкий воск, масло какао и тому подобные. Препарат действующего вещества может содержать инкапсулирующее вещество в качестве носителя, образующее капсулу, в которой действующее вещество, с носителями или без них, окружено связанным с ним носителем.
Другие подходящие для перорального введения формы включают жидкие препараты, включая эмульсии, сиропы, эликсиры, водные растворы, водные суспензии, или твердые препараты, которые необходимо превратить в жидкие препараты непосредственно перед применением. Эмульсии могут выпускаться в растворах, например, в водно-пропиленгликолевых растворах, или могут содержать эмульгаторы, например такие как лецитин, сорбитан моноолеат или камедь. Водные растворы можно получать растворением действующего вещества в воде и добавлением подходящих красителей, ароматизаторов, стабилизаторов и загустителей. Водные суспензии можно получать диспергированием мелкоизмельченного действующего вещества в воде с вязким веществом, таким как природные или синтетические камеди, смолы, метилцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза и другие хорошо известные суспендирующие средства. Твердые препараты включают растворы, суспензии и эмульсии, и могут содержать, помимо действующего вещества, красители, ароматизаторы, стабилизаторы, буферные средства, искусственные и натуральные подсластители, диспергирующие средства, загустители, солюбилизаторы и так далее.
Примеры композиций для ректального введения включают суппозитории, которые могут содержать, например, подходящее нераздражающее вспомогательное вещество, такое как масло какао, синтетические глицеридные сложные эфиры или полиэтиленгликоли, которые являются твердыми при обычных температурах, но превращаются в жидкость и/или растворяются в ректальной полости и высвобождают лекарственное средство.
Соединения по настоящему изобретению также можно вводить парентерально, например посредством ингаляции, инъекции или инфузии, например посредством внутривенной, внутриартериальной, внутрикостной, внутримышечной, внутрицеребральной, интрацеребровентрикулярной, внутрисуставной, интрастернальной, интратекальной, внутриочаговой, внутричерепной, внтурикожной и подкожной инъекции или инфузии.
Так, для парентерального введения фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут иметь форму стерильного препарата для инъекции или инфузии, например стерильной водной или масляной суспензии. Суспензию можно получать известными в данной области техники методами с помощью подходящих диспергирующих или смачивающих средств (например, Tween 80) и суспендирующих средств. Стерильный препарат для инъекции или инфузии также может представлять собой стерильный раствор или суспензию для инъекции или инфузии в нетоксичном приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе. Например, фармацевтическая композиция может представлять собой раствор в 1,3-бутандиоле. Другие примеры подходящих носителей и растворителей, которые можно применять в композициях по настоящему изобретению, включают (но не ограничиваются только ими) маннит, воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные, жирные масла часто используют в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для данной цели можно применять любой бленд жирного масла, включая синтетические моно- или диглицериды. Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные, пригодны для приготовления инъецируемых составов, как и природные фармацевтически приемлемые масла, такие как оливковое масло или касторовое масло, особенно их полиоксиэтилированные версии. Эти масляные растворы или суспензии могут также содержать разбавитель или диспергирующее средство на основе длинноцепочечных спиртов.
Растворы для парентерального применения также могут содержать подходящие стабилизаторы и, при необходимости, буферные средства. Подходящие стабилизаторы включают антиоксиданты, такие как бисульфат натрия, сульфит натрия или аскорбиновая кислота, отдельно или в комбинации, лимонная кислота и ее соли и натрий-EDTA. Растворы для парентерального применения могут также содержать консерванты, такие как бензалконий хлорид, метил- или пропил-парабен и хлорбутанол.
Для ингаляции или назального введения, подходящие фармацевтические препараты имеют форму частиц, аэрозолей, порошков, туманов или капель, например, со средним размером около 10 мкм в диаметре или менее. Например, композиции для ингаляций можно готовить в форме растворов в насыщенном растворе хлорида натрия, применяя бензиловый спирт или другие подходящие консерванты, стимуляторы абсорбции для улучшения биодоступности, фторуглероды и/или другие известные в данной области техники солюбилизаторы или диспергирующие средства.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению также можно вводить местно, на кожу или на слизистую оболочку. Для местного нанесения, фармацевтическая композиция может представлять собой, например, лосьон, гель, пасту, настойку, трансдермальный пластырь, гель для чрезслизистой доставки.
Композиция может выпускаться в форме подходящей мази, содержащей действующие вещества, суспендированные или растворенные в носителе. Носители для местного введения соединений по настоящему изобретению включают (но не ограничиваются только ими) минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтилен-полиоксипропиленовое соединение, эмульсионный воск и воду.
Альтернативно, фармацевтическая композиция может выпускаться в форме подходящего лосьона или крема, содержащего действующее вещество, суспендированное или растворенное в носителе. Подходящие носители включают (но не ограничиваются только ими) минеральное масло, сорбитан моностеарат, полисорбат 60, воск цетиловых эфиров, цетариловый спирт, 2-октилдодеканол, бензиловый спирт и воду.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению также можно вводить местно в нижние отделы желудочно-кишечного тракта посредством ректальных суппозиториев или в форме препарата для клизмы.
Подходящие фармацевтические наполнители, например носители и способы приготовления фармацевтических готовых форм, описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, представляющем собой стандартное справочное пособие в области производства лекарственных средств.
Фармацевтические композиции могут содержать от приблизительно 1% до приблизительно 95%, предпочтительно от приблизительно 20% до приблизительно 90% соединения формулы (I), вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом.
В целом, соединения по настоящему изобретению вводят в терапевтически эффективном количестве любым из способов введения, принятых для средств, которые обладают сходным воздействием. Подходящие дневные дозировки обычно варьируются от 1 до 1000 мг, например 1-500 мг в день или 1-50 мг в день, в зависимости от различных факторов, таких как тяжесть заболевания, которое необходимо вылечить, возраст и относительное состояние здоровья пациента, активность применяемого соединения, способ и форма введения и симптом, на который направлено введение препарата, и т.д. Квалифицированный специалист в области лечения подобных заболеваний сможет, без лишних исследований и, полагаясь на собственные знания и текст настоящего изобретения, определить терапевтически эффективное количество соединений по настоящему изобретению для заданного заболевания. Соединения по настоящему изобретению можно вводить в форме фармацевтических препаратов, включая подходящие для энтерального или парентерального введения. Предпочтительным способом введения в целом является пероральный, с применением традиционного дневного режима дозирования, который можно регулировать в соответствии со степенью выраженности заболевания.
Соединение по настоящему изобретению рассматривают как пригодное для лечения заболеваний, вызванных РНК-вирусной инфекцией, у млекопитающего, например вирусной инфекцией, вызванной не имеющим оболочки вирусом с однонитевой (+) РНК, в частности заболеваний, вызванных пикорнавирусом, у человека или у животного, но предпочтительно у человека. Пикорнавирус может, например, представлять собой парэховирус (например, Ljungan или Parecho), кардиовирус (например, вирус ЭМК или вирус Тейлера), энтеровирус (например, вирус EV, Коксаки, полиомиелита, риновирус) или гепатовирус. В ветеринарии, пикорнавирус может представлять собой, например, афтовирус или тешовирус.
Заболевания, которые считают связанными, вызванными или иным образом ассоциированными с вирусной инфекцией, например с пикорнавирусами, представляют собой, например, нейродегенеративные заболевания, такие как рассеянный склероз, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, болезнь Альцгеймера, болезнь Хантингтона, полиомиелит, энцефалит, менингит, сепсис, рак, паралич, миокардит, диабет, простуда, синдром «рука-нога-рот», герпангина, плевралгия, диарея, слизисто-кожное поражение, заболевание дыхательных путей, конъюнктивит, миозит и синдром хронической усталости.
Следовательно, настоящее изобретение также включает соединение формулы (I) для применения в лечении любого из вышеуказанных состояний, а также применение соединения формулы (I) для получения лекарственного средства для лечения любого из вышеуказанных состояний.
Настоящее изобретение также включает способ лечения любого из вышеуказанных состояний, посредством введения животному или человеку, нуждающемуся в таком лечении, соединения формулы (I).
Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано несколькими неограничивающими примерами.
Примеры
В таблице 1 представлены химические наименования некоторых иллюстративных соединений для применения по настоящему изобретению (Пример 1-71) и некоторых иллюстративных новых соединений по настоящему изобретению (Пример 72-112).
В таблице 2 приведены структурные формулы соединений из Примеров 1-112.
Примеры 72-98
Соединения из Примеров 72-98 синтезировали по общей методике А, описанной в настоящем тексте ниже.
Общая методика А
Стадия-1
В раствор соединения 1 (10.0 г, 56.4 ммоль) в этилацетате (200 мл) порциями добавляли металлический натрий (2.6 г, 112.8 ммоль) при 0-5°С в атмосфере азота. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении, реакционную смесь охлаждали до 0-5°С, гасили метанолом (50 мл), и растворитель упаривали под давлением. Полученное твердое вещество растворяли в воде (100 мл) и промывали толуолом (2×100 мл). Водный раствор подкисляли уксусной кислотой (рН: 4-5) и экстрагировали дихлорметаном (3×100 мл). Объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали перекристаллизацией из смеси этилацетата и гексана, получая соединение 2 (9.5 г, 76.8%) в виде бледно-коричневого твердого вещества.
Стадия-2
В раствор соединения 2 (9.0 г, 41.05 ммоль) в этаноле (90 мл) добавляли гидразина моногидрохлорид (4.218 г, 61.57 ммоль) и уксусную кислоту (2.7 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали до 85°С и перемешивали в течение 5-6 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении реакции, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Реакцию гасили водой (90 мл) и упаривали при пониженном давлении. Образовавшийся водный слой промывали толуолом (3×45 мл) и подщелачивали 10%-ным водным раствором бикарбоната натрия (рН: 8-9). Водный слой экстрагировали дихлорметаном (4×50 мл). Объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении, получая соединение 3 (7.6 г, 79.36%) в виде не совсем белого твердого вещества. Полученный продукт использовали без дальнейшей очистки.
Стадия-3
В раствор соединения 3 (8.0 г, 21.4 ммоль) в уксусной кислоте (80 мл) при комнатной температуре добавляли этилацетоацетат (9 мл, 42.8 ммоль) и нагревали до 105°С в течение 6 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении, реакционную смесь упаривали в высоком вакууме при 50°С. Полученное твердое вещество разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (3×10 мл). Объединенный органический экстракт промывали 10%-ным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический экстракт сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали в вакууме при 50°С. Полученный остаток растирали в дихлорметане (25 мл). Твердое вещество отфильтровывали и сушили в вакууме, получая чистое соединение 4 (9.5 г, 92.54%) в виде бесцветного твердого вещества.
Стадия-4
В суспензию соединения 4 (2.0 г, 6.68 ммоль) в сухом толуоле (30 мл) добавляли фосфорилхлорид (6.24 мл, 6.68 ммоль) и N,N-диэтиланилин (2.14 мл, 13.36 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали до 105°С в течение 16 ч. Через 16 ч реакционную смесь упаривали в высоком вакууме при 50-55°С и упаривали с толуолом в высоком вакууме при 50-55°С. В остаток добавляли воду (40 мл), затем экстрагировали дихлорметаном (3×40 мл), и объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Органический слой упаривали в вакууме при 45-50°С, получая сырой продукт. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией, применяя в качестве элюента смесь этилацетата и гексана, получая соединение 5 (2.1 г, 98.9%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия-5
2
3
t
В раствор соединения 5 (1.0 экв.) в толуоле или ацетонитриле или ДМФА (10-20 объемов) последовательно добавляли соответствующие амины (1.3 экв.) и основание [DIPEA (5 объемов)/KCO/KOBu/NaH (2.0 экв.)]. Реакционную смесь затем нагревали до 90°С и тщательно перемешивали в течение 16 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали при пониженном давлении. Осадок разбавляли водой (20 объемов) и экстрагировали дихлорметаном (3×10 объемов). Объединенный органический экстракт промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая целевое соединение с чистотой по ВЭЖХ >95%.
Примеры 99-101
Соединения из Примеров 99-101 синтезировали по Общей методике В.
Общая методика В
Стадия-1
В суспензию соединения 6 (5.0 г, 28.22 ммоль) и метоксида натрия (3.81 г, 70.5 ммоль) в диэтиловом эфире (75 мл) медленно добавляли раствор этилформиата (2.6 мл, 2.4 г, 32.32 ммоль) в диэтиловом эфире (25 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Полученную суспензию перемешивали в течение еще 16 ч при комнатной температуре. Образовавшееся твердое вещество фильтровали и промывали диэтиловым эфиром (25 мл). Твердое вещество затем растворяли в минимальном количестве воды и подкисляли уксусной кислотой. Образовавшееся твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили в вакууме, получая чистое соединение 7 (4.8 г, 83%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
Стадия-2
В раствор соединения 7 (4.5 г, 21.95 ммоль) в этаноле (90 мл) добавляли гидразина моногидрохлорид (2.25 г, 32.92 ммоль) и уксусную кислоту (12 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали до 85°С и перемешивали в течение 3-4 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении реакции, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь гасили водой (45 мл), упаривали при пониженном давлении. Образовавшийся водный слой промывали толуолом (3×45 мл) и подщелачивали 10%-ным водным раствором бикарбоната натрия (рН: 8-9). Водный слой экстрагировали дихлорметаном (4×50 мл). Объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении, получая соединение 8 (3.5 г, 75%) в виде не совсем белого твердого вещества. Полученный продукт использовали без дальнейшей очистки.
Стадия-3
В раствор соединения 8 (4.0 г, 18.25 ммоль) в уксусной кислоте (40 мл) добавляли этилацетоацетат (2.55 мл, 18.253 ммоль) при комнатной температуре, затем нагревали до 105°С в течение 6 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении, реакционную смесь упаривали в высоком вакууме при 50°С. Полученное твердое вещество разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (3×10 мл). Объединенный органический экстракт промывали 10%-ным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический экстракт сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали в вакууме при 50°С. Полученный осадок растирали дихлорметаном (25 мл), получая чистое соединение 9 (5 г, 96%) в виде не совсем белого твердого вещества.
Стадия-4
В суспензию соединения 9 (5.0 г, 17.525 ммоль) в сухом толуоле (75 мл) добавляли фосфорилхлорид (16.38 мл, 175.2 ммоль) и N,N-диэтиланилин (5.62 мл, 35.05 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали до 105°С в течение 16 ч. Через 16 ч реакционную смесь упаривали в высоком вакууме при 50-55°С и упаривали с толуолом в высоком вакууме при 50-55°С. В остаток добавляли воду (40 мл), экстрагировали дихлорметаном (3×40 мл), объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Органический слой упаривали в вакууме при 45-50°С, получая сырой продукт. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией, применяя в качестве элюента смесь этилацетата и гексана, получая соединение 11 (4.5 г, 84.58%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия-5
2
3
t
В раствор соединения 11 (1.0 экв.) в толуоле или ацетонитриле или ДМФА (10-20 объемов) последовательно добавляли соответствующие амины (1.3 экв.) и основание [DIPEA (5 объемов)/KCO/KOBu/NaH (2.0 экв.)]. Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре или при 90°С в течение 16 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали при пониженном давлении. Осадок разбавляли водой (20 объемов), экстрагировали дихлорметаном (3×10 объемов). Объединенный органический экстракт промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, EtOAc в гексане в качестве элюента), получая целевое соединение с чистотой по ВЭЖХ >95%.
Примеры 102-108
Соединения из Примеров 102-108 синтезировали по Общей методике Е, описанной ниже.
Общая методика Е
Стадия-1
В раствор нитрила 12a-g (1.0 экв.) в этилацетате (20 объемов) порциями добавляли металлический натрий (2.0 экв.) при 0-5°С в атмосфере азота. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении, реакционную смесь охлаждали до 0-5°С, затем гасили метанолом (5 объемов), и растворитель упаривали при пониженном давлении. Полученное твердое вещество растворяли в воде (10 объемов) и промывали толуолом (2×10 объемов). Водный раствор подкисляли уксусной кислотой (рН: 4-5) и экстрагировали дихлорметаном (3×10 объемов). Объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали перекристаллизацией из смеси этилацетата и гексана, получая соединения 13a-g.
Стадия-2
В раствор соединения 13a-g (1.0 экв.) в этаноле (10 объемов) добавляли гидразина моногидрохлорид (1.5 экв.) и уксусную кислоту (1.2 экв.) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали до 85°С и перемешивали в течение 5-6 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении реакции, смесь охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь гасили водой (10 объемов) и упаривали при пониженном давлении. Образовавшийся водный слой промывали толуолом (3×5 объемов) и подщелачивали 10%-ным водным раствором бикарбоната натрия (рН: 8-9). Водный слой экстрагировали дихлорметаном (4×5 объемов). Объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении, получая соединения 14a-g. Полученный продукт использовали без дальнейшей очистки.
Стадия-3
В раствор соединения 14a-g (1.0 экв.) в уксусной кислоте (10 объемов) при комнатной температуре добавляли этилацетоацетат (2.0 экв.) и нагревали до 105°С в течение 6 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении, реакционную смесь упаривали в высоком вакууме при 50°С. Полученное твердое вещество разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (3×2 объемов). Объединенный органический экстракт промывали 10%-ным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический экстракт сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали в вакууме при 50°С. Полученный остаток растирали в дихлорметане (25 мл). Твердое вещество отфильтровывали и сушили в вакууме, получая чистое соединение 15a-g.
Стадия-4
В суспензию соединения 15a-g (1.0 экв.) в сухом толуоле (15 объемов) добавляли фосфорилхлорид (1.0 экв.) и N,N-диэтиланилин (2.0 экв.) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали до 105°С в течение 16 ч. Через 16 ч реакционную смесь упаривали в высоком вакууме при 50-55°С и упаривали с толуолом в высоком вакууме при 50-55°С. В остаток добавляли воду (20 объемов), затем экстрагировали дихлорметаном (3×20 объемов), и объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Органический слой упаривали в вакууме при 45-50°С, получая сырой продукт. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией, получая соединение 16a-g.
Стадия-5
В раствор соединения 16a-g (1.0 экв.) в толуоле (20 объемов) последовательно добавляли 4-фторбензиламин (1.3 экв.) и DIPEA (5 объемов). Реакционную смесь затем нагревали до 90°С и тщательно перемешивали в течение 16 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (20 объемов) и экстрагировали дихлорметаном (3×10 объемов). Объединенный органический экстракт промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, этилацетат в гексане), получая целевое соединение с чистотой по ВЭЖХ >95%.
Пример 109
Стадия-1
3
2
2
2
2
В раствор соединения из Примера 9 (2.0 г, 4.926 ммоль) в дихлорметане (50 мл) медленно добавляли BBr (1М раствор в CHCl, 25 мл, 25 ммоль) при 0-5°С. По окончании добавления, реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры при перемешивании. Через 4 ч реакцию гасили метанолом (40 мл). Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали CHCl (3×20 мл). Объединенный органический экстракт промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали перекристаллизацией из дихлорметана, получая соединение 17 (1.8 г, 96.77%) в виде коричневого твердого вещества.
Стадия-2
В раствор соединения 17 (1.8 г, 4.762 ммоль) в ДМФА (36 мл) при комнатной температуре добавляли карбонат цезия (3.099 г, 9.51 ммоль). В полученную смесь добавляли йодэтан (7.427 г, 3.83 мл, 47.62 ммоль) при той же температуре и тщательно перемешивали. Через 16 ч реакцию гасили ледяной водой (180 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенный органический экстракт промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, этилацетат в гексане в качестве элюента), с последующей перекристаллизацией из этилацетата, получая соединение из Примера 109 (0.9 г, 43.06%) в виде не совсем белого твердого вещества.
Пример 110
3
2
2
2
2
В раствор соединения 18, полученного как описано в Общей методике А (500 мг, 1.242 ммоль), в дихлорметане (12.5 мл) медленно добавляли BBr (1М раствор в CHCl, 7.86 мл, 7.86 ммоль) при 0-5°С. По окончании добавления реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры при перемешивании. Через 4 ч реакцию гасили метанолом (10 мл). Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали CHCl (3×10 мл). Объединенный органический экстракт промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, этилацетат в гексане), с последующей перекристаллизацией из дихлорметана, получая соединение из Примера 110 (110 мг, 23.65%) в виде не совсем белого твердого вещества.
Пример 111
Стадия-1
В раствор соединения 3 (500 мг, 4.28 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл) при комнатной температуре добавляли метилизобутилацетат (0.87 мл, 8.57 ммоль) и перемешивали при 105°С в течение 16 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении, реакционную смесь упаривали в высоком вакууме при 50°С. Полученное твердое вещество разбавляли водой и экстрагировали дихлорметаном (3×10 мл). Объединенный органический экстракт промывали 10%-ным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический экстракт сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали в вакууме, получая соединение 19 (600 мг, 85.71%) в виде коричневого твердого вещества.
Стадия-2
В суспензию соединения 19 (1.0 г, 3.05 ммоль) в сухом толуоле (15 мл) добавляли фосфорилхлорид (7.14 мл, 76.36 ммоль) и N,N-диэтиланилин (0.98 мл, 6.11 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали до 105°С в течение 16 ч. Через 16 ч реакционную смесь упаривали при пониженном давлении при 50-55°С и упаривали с толуолом при пониженном давлении. В полученное твердое вещество добавляли воду (40 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×40 мл). Объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении, получая сырой продукт. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, применяя этилацетат и гексан в качестве элюента), получая соединение 20 (550 мг, 52.08%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия-3
В раствор соединения 20 (500 мг, 1.445 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли 4-фтор-бензиламин (0.215 мл, 1.88 ммоль) и DIPEA (4 мл, 22.965 ммоль), затем нагревали до 90°С в течение 16 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×10 мл). Объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали в высоком вакууме при 45-50°С. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, применяя в качестве элюента этилацетат в гексане), получая соединение из Примера 111 (280 мг, 15.92%) в виде желтого твердого вещества.
Пример 112
Стадия-1
3
В раствор соединения 21 (10 г, 102.97 ммоль) в ацетонитриле (250 мл) добавляли AIBN (1.65 г, 10.29 ммоль) при 0-5°С. В полученную реакционную смесь медленно добавляли N-бромсукцинимид (18.33 г, 102.97 ммоль), поддерживая температуру 0-5°С. По окончании добавления, реакционную смесь оставляли постепенно нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. Исходный амин был полностью израсходован. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (100 мл), и нерастворимое вещество отфильтровывали. Фильтрат обрабатывали 10%-ным раствором NaHCO (100 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×100 мл). Объединенный органический экстракт промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Органический слой фильтровали и сушили при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, 30% этилацетат в гексане), получая соединение 22 (14.0 г, 77.25%) в виде коричневого твердого вещества.
Стадия-2
2
2
В раствор соединения 22 (14.0 г, 79.54 ммоль) в этаноле (280 мл) добавляли этилацетоацетат (15.15 мл, 15.59 г, 119.79 ммоль) и уксусную кислоту (4.55 мл, 79.54 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь затем нагревали до 85°С и перемешивали в течение 16 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. Через 16 ч реакционную смесь полностью упаривали при пониженном давлении. Полученное твердое вещество обрабатывали CHCl (30 мл), и твердое вещество отфильтровывали. Отфильтрованное твердое вещество сушили в высоком вакууме при 45-55°С, получая соединение 23 (10.7 г, 55.57%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
Стадия-3
В суспензию соединения 23 (10.5 г, 43.38 ммоль) в толуоле (157.5 мл) добавляли N,N-диэтиланилин (20.63 мл, 130.16 ммоль) и оксихлорид фосфора (10.14 мл, 108.47 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали до 105°С в течение 16 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. Через 16 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, гасили реакцию насыщенным раствором хлорида натрия и фильтровали через слой целита. Слои разделяли, и толуольный слой промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, получая сырой продукт. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, 5-10% этилацетат в гексане), получая соединение 24 (10.0 г, 88.49%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
Стадия-4
В раствор соединения 24 (10.0 г, 38.38 ммоль) в ацетонитриле (100 мл) при комнатной температуре добавляли 4-фторбензиламин (5.27 мл, 46.06 ммоль) и DEPEA (32.85 мл, 191.9 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 16 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. Через 16 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали при пониженном давлении. Полученное твердое вещество разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенный органический слой промывали водой, насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия. Органический слой фильтровали и упаривали при пониженном давлении, получая сырой продукт. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (силикагель, 5-10% этилацетат в гексане), получая соединение 25 (12.0 г, 89.55%) в виде бесцветного твердого вещества.
Стадия-5
2
2
2
2
В раствор соединения 25 (2.0 г, 5.727 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляли DMAP (34.98 мг, 0.286 ммоль), Вос-ангидрид (1.44 мл, 6.30 ммоль) при 10-15°С в атмосфере азота. Реакционную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 6 ч. Протекание реакции отслеживали методом ТСХ. По завершении, реакционную смесь охлаждали до 0-5°С и гасили водой. Полученную смесь экстрагировали CHCl (3×20 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали перекристаллизацией, применяя комбинацию CHCl и гексана, получая соединение 26 (2.12 г, 82.38%) в виде не совсем белого твердого вещества.
Стадия-6
3
4
В раствор соединения 26 (500 мг, 1.113 ммоль) в смеси ДМЭ : вода (5:1, 10 мл) добавляли 4-пиридинбориновую кислоту (205.23 мг, 1.66 ммоль) и карбонат цезия (1.088 мг, 3.339 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере аргона. Реакционную смесь тщательно дегазировали аргоном. В реакционную смесь добавляли Pd(PPh) (258 мг, 0.0445 ммоль) в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при 100°С в микроволновой печи. Протекание реакции отслеживали методом LCMS. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом натрия. Органический слой упаривали при пониженном давлении, получая сырой продукт. Полученный сырой продукт очищали колоночной флэш-хроматографией, получая соединение 27 (0.2 г, 40%) в виде полутвердого коричневого вещества.
Стадия-7
В раствор соединения 27 (200 мг) в 1,4-диоксане (2 мл) добавляли раствор HCl (15 мл, 4М в диоксане) при 10-15°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Полученное твердое вещество отфильтровывали. Твердое вещество снова растворяли в воде (4 мл), и нерастворимое вещество отфильтровывали. Фильтрат упаривали при пониженном давлении, получая соединение из Примера 112 в форме соли (60 мг, 35%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
Аналитические данные соединений из Примеров 72-112 приведены в таблице 3.
Биологические тесты
In vitro тест на культуре клеток млекопитающего
50
2
Противовирусную активность соединений по настоящему изобретению оценивали, исходя из способности соединений предотвращать вызванные вирусом цитопатические воздействия (СРЕ) на культуру клеток млекопитающего. Время инкубации, клеточная линия, плотность клеток и титр вируса различались в разных тестах, но общая методика была следующей: клетки выращивали на 96-луночных планшетах с плоским дном приблизительно до 90% конфлюэнтности (20000-90000 клеток/лунка) в подходящей среде. Титр вируса определяли стандартным методом дозы заражения 50% культуры ткани (TCID) в клетках. Кратко, клетки инфицировали добавлением 50 мкл содержащей вирус суспензии и разбавляли средой в 10 раз. Планшеты инкубировали при 37°С при 5% СО в течение 3-7 дней, и клетки ежедневно оценивали на предмет СРЕ. После определения СРЕ планшеты окрашивали раствором кристаллического фиолетового по Граму и измеряли оптическую плотность при 540 нм. Для анализа использовали самое высокое разбавление вируса, дающее >95% СРЕ. К клеткам добавляли вещества в финальной концентрации 2.5-20 мкМ и вирус, и инкубировали в течение 3-7 дней, в зависимости от применяемого вируса и клеточных линий. В качестве контрольных образцов, в каждый планшет включали неинфицированные клетки и клетки, инфицированные вирусом (без добавления действующего вещества). Клетки окрашивали кристаллическим фиолетовым после определения СРЕ на инфицированных контрольных образцах, и измеряли оптическую плотность при 540 нм. Ингибирующую способность вычисляли в процентах сравнением неинфицированных и инфицированных контрольных образцов.
В таблице 4 представлена ингибирующая способность соединений по настоящему изобретению для разных пикорнавирусов в разных концентрациях. LV012: Ljungan вирус линия 012; LV145: Ljungan вирус линия 145; EMCV: вирус энцефаломиокардита; HPeV-1: парэховирус человека линия 1; HPeV-2: парэховирус человека линия 2; PTV: тешовирус свиней; EV6: энтеровирус линия 6; EV30: энтеровирус линия 30; EV71: энтеровирус линия 71; Cox-B1: вирус Коксаки В линия 1; Сох-В2: вирус Коксаки В линия 2; Сох-В3: вирус Коксаки В линия 3; Сох-В4: вирус Коксаки В линия 4; Сох-В5: вирус Коксаки В линия 5; Polio1: вирус полиомиелита линия 1.
В таблицах 5 и 6 показано противовирусное действие некоторых соединений по настоящему изобретению в разных концентрациях на панель разных пикорнавирусов. LV012: вирус Ljungan линия 012; LV145: вирус Ljungan линия 145; EMCV: вирус энцефаломиокардита; HPeV-1: парэховирус человека линия 1; HPeV-2: парэховирус человека линия 2; PTV: тешовирус свиней; EV6: энтеровирус линия 6; EV30: энтеровирус линия 30; EV71: энтеровирус линия 71; В1: вирус Коксаки В линия 1; В2: вирус Коксаки В линия 2; В3: вирус Коксаки В линия 3; В4: вирус Коксаки В линия 4; В5: вирус Коксаки В линия 5; Polio1: вирус полиомиелита линия 1.
Исследование противовирусного действия на вирус Коксаки в мышиной модели нейтропении
Тестовая система
Самцов мышей BALB/c весом 22-26 грамм использовали группами по 4 мыши.
Индуцирование нейтропении: Циклофосфамид
Тестовый микроорганизм: Коксаки (человеческого происхождения) вирус CVB3
Способ инфицирования: интраперитонеально
Способ введения: перорально
Конечная точка: суммарная выживаемость
Все тестовые процедуры на животных осуществляли в соответствии с протоколами, одобренными Комитетом по формированию этики в отношении животных компании Anthem Biosciences. Самцов мышей BALB/c разделяли на группы по 4 животных в клетке и обеспечивали неограниченный доступ к корму и воде в контролируемых условиях. Мышей акклиматизировали в течение 7 дней перед началом исследования. За общим состоянием здоровья животных наблюдали ежедневно в течение данного периода.
Индуцирование нейтропении
Группам из 4 мышей делали интраперитонеальную инъекцию циклофосфамида (150 мг/кг) за 2 дня до и в день "0" за 4 часа до инфицирования, чтобы вызвать нейтропению.
Инфицирование и лечение
3
Животных инфицировали посредством интраперитонеальной инъекции 0.2 мл насыщенного раствора хлорида натрия, содержащего 10 БОЕ Коксаки вируса В3 "Нэнси", в день 0. Затем животным вводили соединение из Примера 9, 200 мг/кг один раз в день перорально, начиная со дня 1 (группа 1) или со дня 3 (группа 2). Контрольной группе вводили только носитель (0.4% Tween 80, 2% глицерин и 15% β-гидроксипропил циклодекстрин).
Клинические наблюдения
На протяжении периода исследования за животными наблюдали ежедневно на предмет признаков летальности, болезненности (паралич) и признаков острой токсичности. Нестандартные клинические проявления регистрировали по возникновении.
Результаты
Результаты вышеописанного теста показывают, что соединение из Примера 9 обладает противовирусным действием in vivo и способно продлять жизнь животных, см. фиг. 1.
Исследование токсичности
Мыши
Введение соединения из Примера 9 в дозировке 200 и 400 мг/кг массы тела/день в течение 7 дней у BALB/C мышей не вызвало никаких побочных клинических симптомов или смертности у обоих полов. Введение не оказало побочного воздействия на массу тела, потребление еды, гематологию, клиническую биохимию и гистопатологию основных рассматриваемых органов.
В свете вышеуказанных открытий настоящего исследования, дозу без наблюдаемых нежелательных эффектов (NOAEL) соединения из Примера 9 можно определить как 400 мг/кг массы тела/день, при пероральном введении BALB/c мышам в течение 7 дней непрерывно с применением тестируемых уровней дозирования и тестовых условий.
Крысы
Определение максимальной переносимой дозы
Введение однократной дозы соединения из Примера 9 в дозировках до 2000 мг/кг не вызывало побочных воздействий на клинические симптомы, смертность, массу тела, набор веса, потребление еды, абсолютный и относительный вес органов. При макроскопическом исследовании не наблюдали значимых патологических эффектов, связанных с введением.
В свете вышеуказанных открытий, обнаружили, что максимальная переносимая доза соединения из Примера 9 у самок крыс Sprague Dawley составляет >2000 мг/кг массы тела в применявшихся условиях эксперимента.
7-дневный тест на токсичность
Введение тестируемого образца соединения из Примера 9 в дозировке 250 и 750 мг/кг массы тела/день в течение 7 дней не вызвало у крыс Sprague Dawley никаких побочных клинических симптомов у особей обоих полов при дозировке 750 мг/кг, и летальный исход одной самки при дозировке 750 мг/кг. Лечение оказало побочное действие на массу тела, потребление еды, гематологию, клиническую биохимию и гистопатологию основных рассматриваемых органов при уровне дозирования 759 мг/кг.
В свете вышеуказанных открытий в рамках проведенного исследования, дозу без наблюдаемых нежелательных эффектов (NOAEL) соединения из Примера 9 можно определить как 250 мг/кг массы тела/день, при пероральном введении крысам Sprague Dawley в течение 7 последовательных дней, с применявшимися уровнями дозирования и в применявшихся условиях эксперимента.
28-дневный тест на токсичность
Введение тестируемого образца соединения из Примера 9 в дозировке 100 и 200 мг/кг массы тела/день в течение 28 дней у особей обоего пола не оказало побочного воздействия на клинические симптомы, массу тела, потребление еды, гематологию, клиническую биохимию, анализ мочи, неврологическое исследование, на результаты некропсии и гистопатологического исследования определенных тканей. Все животные дожили до запланированного итогового вскрытия в день 29. Исследование биохимии сыворотки крови показало повышение уровня холестерина, которое коррелирует с обнаруженными крупнокапельными жировыми изменениями в печени при дозировке 200 мг/кг массы тела у особей обоих полов.
В свете вышеуказанных открытий в рамках проведенного исследования, дозу без наблюдаемых нежелательных эффектов (NOAEL) соединения из Примера 9 можно определить как 200 мг/кг массы тела, при пероральном введении крысам Sprague Dawley в течение 28 последовательных дней, с применявшимися уровнями дозирования и в применявшихся условиях эксперимента.