Определение герминальных мутаций в гене АРС у пациентов юга России

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ТЕЗИСЫ

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В ОНКОЛОГИИ

ние в ГБУЗ «Челябинский областной клинический центр онкологии и ядерной медицины» с октября 2015 года по настоящее время. Критерий включения: возраст больных РМЖ (до 50 лет), либо отягощенный семейный анамнез по РМЖ или раку яичников. Возраст больных составил от 21 до 75 лет (медиана возраста 43 года). Анализ мутаций выполнялся с помощью метода аллель-специфичной ПЦР в режиме реального времени.

Результаты. Частота мутаций в генах BRCA 1, BRCA2, CHEK2 составила 7,2% (15 случаев из 209). У 73,3% пациентов выявлена мутация 5382 insC BRCA1. Мутация 1100delC гена CHEK2 выявлена у 3 пациентов (20%) и только у 1 пациента мутация гена T300G BRCA1. Не выявлено ни одного случая мутаций генов BRCA 1 (185delAG) и BRCA2 (6174delT). Из 14 пациентов только одна женщина не имела диагноза РМЖ, но имела отягощенный семейный анамнез по РМЖ. Из 14 больных РМЖ- 64,3% имели трижды негативный подтип, люминальный подтип опухоли имели 14,3% больных, и эстрогеннезависимый, с экспрессией Her 2+, имели 21,4% пациентов. В исследуемой группе среднее значение экспрессии Ki67 — 52% (диапазон от 5% до 75%). Преобладала II—III степень злокачественности (50%) и (35%) случаях соответственно. Четверо пациентов получали нео-адъювантную химиотерапию (1 случай 4 цикла АС+ 4 цикла Карбоплатин, Паклитаксел, 3 случая — 4 цикла АС) выявлен патоморфоз опухоли 4 степени у 3 больных, которые имели мутацию 5382 insC BRCA1, патоморфоз I степени у больной, имеющей мутацию 1100delC CHEK2. Отягощенный семейный анамнез по РМЖ и РЯ имели 50% больных (родственники I и II линии родства).

Заключение. Мутация 5382 insC BRCA1 является наиболее частой среди обследованных пациентов ГБУЗ «ЧОКЦО и ЯМ». Полученные данные о частоте мутаций в генах BRCA 1, BRCA2, CHEK2, сопоставимы с результатами исследований в других регионах РФ. У больных РМЖ, с мутацией генов выявлено преобладание высокой степени злокачественности и отсутствие гормональной чувствительности опухоли. Преобладал выраженный патоморфоз BRCA ассоциированной опухоли при НАПХТ.

Особенности мутаций у пациентов с первично-множественным процессом

Р. Ф. Еникеев'

Место работы: 'Республиканском клиническом онкологическом диспансере Министерства здравоохранения Республики Татарстан (г. Казань) e-mail: alba352007@yandex.ru

Цель. Анализ встречаемости мутаций в генах системы репарации пациенток татарского происхождения с первично-множественным раком для оценки агрессивности процесса и подбора оптимальной лекарственной терапии. Материалы и методы. Исследование включало в 14 образцов крови от пациенток из татарской популяции с первично множественным раком, проходивших обследование и лечение в Республиканском клиническом онкологическом диспансере Министерства здравоохранения Республики Татарстан (г. Казань) в 2014—2016 гг., Критерием включения был первично-множественный раковый процесс, а также самоидентификация больных к татарскому этносу (не менее чем в двух поколениях в роду все родственники должны принадлежать к татарскому этносу).

Результаты и обсуждение. Полученные результаты секве-нирования 14 образцов пациенток с первично-множествен-

ный раковый процессом можно разделить на три группы: патогенные, предположительно патогенные и мутация не выявлена. В первой группе было выявлено 4 мутаций у 7 пациенток. Ко второй группе были отнесены 3 мутации, присутствующие у 3 пациенток. И третья группа пациенток мутация выявлена не была. В первой группе патогенных мутаций самой частой была BRCA 1, выявлена у 4-х пациентов (28,5%). Также встречались MUTYH, TP 53 и АРС. Вторая группа пациенток у каждой пациентки были различные мутации FANCL, HFLB и GFTR. И у 4-х пациентов (28,5%) не одной из известных мутаций на сегодняшний день выявлено не было. У 12 пациентов был РМЖ в сочетании с раковым процессом в других органах: у 7-х (50%) яичники, у 1 -й пациентки мочевой пузырь, желудок, поджелудочная железа, яичник в сочетании с желудком, двухсторонние поражение молочных желез. У двух пациенток был рак яичников в сочетании с желчным пузырем и эндометрием. Процесс во всех наблюдениях был метохромный. С помощью метода NGS появилась возможность выявить редкие мутации, характерные для различных этносов, что дает возможность назначать оптимальную химиотерапию для пациенток, а также исследовать обнаруженные мутации с помощью секвенирования по Сэнгеру у родственников. Выводы. В результате проведенного NGS-анализа 14 пациенток татарского происхождения с первично-множественный раковый процесс с татарской национальности было выявлено 7 мутаций в генах системы репарации, у половины из которых (42%) детектирована не в генах BRCA1 /BRCA2. Таким образом, в нашем исследовании мы подтверждаем необходимость анализа совокупности генов репарационной системы.

Определение герминальных мутаций в гене АРС у пациентов юга россии

О.И. Кит1, Д.И. Водолажский', И.Ю. Ефимова', Ю.А. Геворкян1, Н. В. Солдаткина', А.Г. Милакин' Место работы: 'ФБГУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России e-mail: rnioi@list.ru

Актуальность. Рак толстой кишки (РТК) относится к наиболее распространенным онкологическим заболеваниям. Генетические факторы оказываются значимыми в 15—30% случаев. Одной из основных наследственных причин РТК является семейный аденоматозный полипоз (САП). Без лечения к 40 годам обычно развивается РТК. САП — аутосомно — доминантный синдром, развивающийся вследствие герминальных мутаций в гене АРС. Ген АРС является геном-супрессором опухолевого роста и играет существенную роль в контроле клеточного цикла, межклеточной адгезии и регуляции клеточной миграции. Мутации, инакти-вирующие функции АРС, индуцируют усиление клеточного роста и подавление клеточной адгезии, что вызывает появление и рост полипов. Как правило, мутация в гене APC наследуется, но в 30% случаев она возникают de novo, и человек становится родоначальником заболевания в семье. Цель. Целью настоящего исследования стало определение спектра мутаций гена АРС у пациентов, проживающих на Юге России и проходивших диагностику и лечение на базе ФГБУ «РНИОИ». Материалы и методы. В исследование вошли 9 пациентов с клинической картиной аденоматозного полипоза. Два пациента не имели семейного отягощенного анамнеза по САП. Молекулярно-генетическое исследование включало выделение ДНК из лейкоцитов периферической крови пациентов, амплификацию экзонов гена АРС, электрофорез амплифицирован-

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ТЕЗИСЫ

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В ОНКОЛОГИИ

ных фрагментов и прямое секвенирование по методу Сэнгера. Результаты. Средний возраст постановки диагноза составил 31,3 года. Диагноз САП был подтвержден гистологически у всех пробандов.

В исследуемой группе больных было выявлено пять пациентов с герминальной мутацией в гене АРС, что составило 56%. Обнаружены следующие мутации: три вида нонсенс-мутаций - 847C>T (p. Arg283Term), c. 2362A>T (p. Lys788Term) и c. 2365C>T (p. Gln789Term), мутация сайта сплайсинга — с. 1744-2A>G, делеция — 1309del5 (c. 3927_3931delAAAGA). Повторяющихся вариантов обнаружено не было. Отметим, что в других популяциях мутация 1309del5 (c. 3927_3931delAAAGA) наиболее часто встречается у пациентов с диагнозом САП. Проведено медико-генетическое консультирование родственников пациентов с установленным диагнозом САП, даны рекомендации. Молекулярно-генетиче-ское исследование выполнили у семи кровных родственников пациентов с семейным аденоматозным полипозом. Наследственные мутации обнаружены у трех обследованных лиц. Выводы. Молекулярно-генетическое исследование наследственных форм колоректального рака необходимо как для самих пациентов в целях индивидуализации лечения, так и для их кровных родственников для формирования групп риска развития рака толстой кишки.

Больные синдромом Линча с клиническими проявлениями наследственного рака молочной железы и яичников. Собственные данные

Л. Х. Шигапова, О. И. Бровкина, Р. Ф. Еникеев, М. О. Дружков, Е. И. Шагимарданова, Х. Эгучи, О. А. Гусев, А. Г. Никитин, М. Г. Гордиев

Место работы:1ФГАОУ ВО КФУ, ФГБУ ФНКЦ ФМБА России, 2ГАУЗ РКОД, Университет Джунтендо e-mail: shi-leyla@yandex.ru

Синдром Линча — наследственное заболевание, обусловленное мутациями в генах системы MMR (ML1, MS2, MS6, PMS2,

EPCAM). Клиническим проявлением синдрома Линча является, как правило, колоректальный рак, рак эндометрия, рак мочеточника или рак почки.

Цель. Анализ частоты встречаемости мутаций системы MMR в группе пациентов с наследственным раком молочной железы (далее — РМЖ) и раком яичников (далее — РЯ). Материалы и методы. Исследовали наличие терминальных мутаций системы MMR у 228 больных с наследственными РМЖ и РЯ в ГАУЗ «РКОД МЗ РТ (Казань). Критериями включения было соответствие, как минимум, 1 из 3 критериев: молодой возраст манифестации (до 50 лет РМЖ, до 55 лет РЯ), отягощенный семейный онкологический анамнез у родственников 1-й или 2-й линии родства, первично-множественные РМЖ и РЯ.

ДНК выделяли из крови пациентов колоночным методом. Подготовка библиотек для секвенирования осуществлялась с помощью NimblGen SepCapEZ Choice (Roche). Секвенирование проводилось на MiSeq (Illumina) в режиме парноконце-вого чтения с длиной рида 250 п. о.

Результаты. Из 228 больных с наследственным РМЖ и РЯ у 13 (6%) были обнаружены мутации в генах системы MMR. Из 101 больных с наследственным РЯ обнаружилось 8 (8%) носителей мутаций в системе MMR, из 127 больных с наследственным РМЖ, соответственно 5 (4%).

Средний возраст манифестации больных наследственным РМЖ и РЯ с синдромом Линча составлял 54 года: в группе РЯ — 56 лет, в группе РМЖ — 50 лет.

Выводы. В настоящее время стандартом скрининга синдрома Линча являются амстердамские критерии (вторая версия), которые не ориентируются на наличие у больных РЯ и/или РМЖ, а также на наличие данных патологий в наследственном анамнезе у больных колоректальном раком. Полученные данные показывают, что больные наследственными РЯ и РМЖ также могут быть носителями мутаций в генах системы MMR, обусловливающие синдром Линча. Необходимы дальнейшие исследования для более эффективного скрининга синдрома Линча.

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org