СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ГРУППЫ ВАСТАТИНОВ
METHOD FOR QUANTITATIVE DETERMINATION OF DRUG SUBSTANCES OF A GROUP OF VASTATINES

Изобретение относится к фармацевтическому анализу, а именно к анализу материалов с помощью оптических средств, и может быть использовано для количественного определения лекарственных средств группы вастативов, а именно, флувастатина, розувастатина, ловастатина, правастатина, симвастатина и аторвастатина в субстанциях.
Количественно ловастатин и симвастатин определяют методом ВЭЖХ в пределах 98,5-101%. В качестве растворителя применяют ацетонитрил [Беликов, В. Г. Фармацевтическая химия: В 2 ч. Ч. 1: Общая фармацевтическая химия. Ч. 2: Специальная фармацевтическая химия: Учебник по фармацевт. химии для студ. фармацевт, вузов и фак. / В.Г. Беликов. - 3-е изд., перераб. и доп. - Пятигорск: Пятигорская гос. фармацевт. акад., 2003. - 713 с.]
Известно также количественное определение аторвастатина методом ВЭЖХ на хроматографе с диодно-матричным детектором [Количественное определение аторвастатина для проведения терапевтического лекарственного мониторинга, установления фенотипирования по активности CYP450 и межлекарственного взаимодействия у больных ИБС В.И. Петров, Л.А. Смирнова, О.В. Магницкая, А.Ф. Рябуха, К.А. Кузнецов, Е.А. Сучков / Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоград/ Биомедицина №3, 2G1G, С. 111-112], при содержании в мобильной фазе 52% ацетонитрила для ВЭЖХ (УФ 210 нм) и 48% буферной системы, состоящей из однозамещенного фосфата натрия 50 мМ, рН 4,0.
В таблетках содержание ловастатина определяют спектрофотометрически с максимумом поглощения 246 нм [Беликов, В.Г. Фармацевтическая химия: В 2 ч. Ч. 1: Общая фармацевтическая химия. Ч. 2: Специальная фармацевтическая химия: Учебник по фармацевт. химии для студ. фармацевт, вузов и фак. / В.Г. Беликов. - 3-е изд., перераб. и доп. - Пятигорск: Пятигорская гос. фармацевт. акад., 2003. - 713 с.].
Количественное содержание остатков гептеновой в флувастатине и розувастатине и гептаповой кислот в соединениях ловастатина, правастатина, симвастатина и аторвастатина устанавливают методом нейтрализации действием щелочей потенциометрически или в присутствии индикаторов [Максютина, Н.П. Методы анализа лекарств / Н.П. Максютина и др. - К.: Здоровья. - 1984. - 224 с.].
Однако, приведенные выше методики идентификации и количественного определения группы вастатинов являются малочувствительными и неспецифичными.
Цель изобретения заключалась в разработке чувствительной методики количественного определения группы вастатинов.
Из патент РФ 2589845 (МПК G01N 33/15, G01N 31/22, G01N 21/78, опубл. 20.05.2016) известен способ количественного определения метилкарбаматных производных бензимидазола (группа бендазола) в фармакопейных препаратах путем растворения анализируемой пробы в воде очищенной, выдерживания на нагретой водяной бане до полного растворения при перемешивании, охлаждения и обработки аликвотной части приготовленного раствора последовательно каплями 0,1 Н спиртового раствора КОН (выдерживают 5 мин) и 0,5%-ным раствором вератрового альдегида в серной кислоте (выдерживают еще 3 мин) и фотоэлектроколориметрирования окрашенного раствора при длине волны 364 нм.
Технический результат заключается в количественном определении флувастатина, розувастатина, ловастатина, правастатина, симвастатина и аторвастатина в субстанции с относительной ошибкой не более ±0,50%.
Технический результат достигается тем, что в способе количественного определения производных вастатинов в субстанциях растворяют анализируемую пробу в метиловом спирте, выдерживают до полного растворения при перемешивании и комнатной температуре, обрабатывают аликвотную часть приготовленного раствора метанольным раствором химического реактива в конц. соляной кислоте при комнатной температуре, экстрагируют выделившийся окрашенный осадок хлороформом, сушат органический слой безводным сульфатом натрия и фотоэлектроколориметрируют при длине волны 590 нм. В качестве химического реактива используют сульфат никеля.
Предлагаемый способ количественного определения группы вастатинов основан во взаимодействии спиртового раствора исследуемых препаратов с метанольным раствором никеля сульфата в конц. соляной кислоте при комнатной температуре, приводящий к образованию окрашенных продуктов реакции, нерастворимых в воде и экстрагируемых хлороформом. Хлороформный слой после высушивания над безводным сульфатом натрия фотоэлектроколориметрируют.
2
4
Для приготовления метанольного раствора никеля сульфата в конической колбе емкостью 200 мл растворяют 9,07 г NiSO4*7HO (что соответствует 5 г безводного NiSO) в 100 мл смеси метанола (82 мл) и конц. соляной кислоты (18 мл) при перемешивании и комнатной температуре до полного растворения. Срок хранения - месяц.
Пример.
Точные навески флувастатина (около 0,01 г), розувастатина (около 0,01 г), ловастатина (около 0,10 г), правастатина (около 0,10 г), симвастатина (около 0,01 г) и аторвастатина (около 0,01 г) помещают в мерные колбы емкостью 50 мл (для флувастатина, розувастатина, симвастатина и аторвастатина) и 100 мл (для ловастатина и правастатина) и растворяют сначала в 25 мл спирта мл (для флувастатина, розувастатина, симвастатина и аторвастатина) и 50 мл метанола (для ловастатина и правастатина) и затем доводят объемы колб тем же растворителем до метки.
С помощью пипетки отбирают точные объемы растворов от 60; 6,5; 7,0; 7,5 и до 8,0 мл флувастатина, розувастатина, симвастатина и аторвастатина и объемы растворов от 2,0; 3,0; 4,0; 5,0 и до 6,0 мл ловастатина и правастатина /в мерные колбы емкостью 20 мл для всех препаратов, прибавляют 5.5 мл метанольного раствора сульфата никеля в конц. соляной кислоте. Через 2-3 мин выпадает голубой осадок, нерастворимый в воде. Объемы растворов доводят метанолом до метки. Затем содержимое колб переносят в делительные воронки и приливают 15 мл хлороформа. Хлороформный слой осаживается в синий цвет, сушат над безводным сульфатом натрия (основной раствор). Измеряют интенсивность поглощения окрашенных растворов при. длине волны 590 нм с толщиной поглощающего слоя 10,0 мм. Раствор сравнения - метанол.
Количественное определение исследуемых лекарственных средств группы вастатинов в субстанциях проводят методом наименьших квадратов после статической отработки калибровочных графиков. Подчинения интенсивности окрашивания растворов закону Бугера - Лаберта - Бера находятся в пределах концентраций флувастатина, розувастатина, симвастатина, аторвастатина от 0,060 мг до 0,080 мг в 6-8 мл раствора, для субстанции правастатина и ловастатина от 0,100 мг до 0,300 мг в 2-6 мл раствора. Коэффициенты а и b исследуемых лекарственных средств группы вастатинов в субстанциях вычислены после статической обработки калибровочных графиков с использованием метода наименьших квадратов и представлены в фиг. 1-6.
Сравнительные данные, подтверждающие преимущества предлагаемого способа количественного определения лекарственных средств группы вастатинов в субстанциях перед методом неводного титрования представлены на фиг. 7.
Относительная ошибка определения группы вастатинов в субстанциях не превышает ±0,50%. Разработанный способ количественного определения этой группы является простым в выполнении и дает воспроизводимые результаты.