Способ замедления старения женщин
METHOD FOR RETARDING AGING OF WOMEN

Изобретение относится к медицине, в частности, к гинекологии, эндокринологии, геронтологии и может применяться для увеличения продолжительности жизни женщин.
Известен способ продления жизни женщин путем назначения препаратов или метаболитов эстрадиола, как компонента менопаузальной гормонотерапии [Gouw AM, Efe G, Barakat R, Preecha A, Roles of estrogen receptor-alpha in mediating life span: the hypothalamic deregulation hypothesis // Physiol Genomics. 2017 Feb 1; 49(2):88-95; Taylor HS, Tal A, Pal L, Li F, Black DM // Effects of Oral vs Transdermal Estrogen Therapy on Sexual Function in Early Postmenopause: Ancillary Study of the Kronos Early Estrogen Prevention Study (KEEPS) // JAMA Intern Med. 2017 Oct 1; 177(10): 1471-1479.].
Недостатком этого способа является то, что при данном варианте лечения физиологическое влияние оказывается только на звено эстрадиола, и не принимаются во внимание биологически активные вещества (а их более 100), продуцируемые в яичниках наряду с эстрадиолом. Именно поэтому эффективность эстрогенотерапии низкая. Кроме того, назначение эстрогенсодержащих препаратов категорически противопоказано при ряде состояний, а также может приводить к развитию таких грозных осложнений, как тромбозы.
Ближайшим к заявляемому является способ продления жизни мышей путем аллогенной трансплантации целых яичников от молодых особей к старым [Mason J.В., Cargill S.L., Anderson GB, Carey JR. // Transplantation of young ovaries to old mice increased life span in transplant recipients // J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009 Dec; 64(12):1207-11].
Недостатком способа, выбранного в качестве прототипа, является то, что ввиду аллогенности трансплантации возникает целый ряд проблем, связанных с реакцией отторжения трансплантата. Более того, производится пересадка яичника целиком, в брюшную полость, что исключает этапность восстановления функции яичников, а также требует выполнения лапаротомии.
Также при таком методе невозможно периодическое обновление трансплантированной ткани, ее дозирование по причине отсутствия этапа консервации.
Задачей настоящего изобретения является обеспечение возможности замедления старения женщин без использования аллотканей.
Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе замедления старения женщин путем забора ткани яичников до наступления менопаузы и реимплантации ткани в организм при наступлении менопаузы, забирают часть кортикального и медуллярного слоев яичника, консервируют, не ранее чем через 3 года размораживают, готовят крупнодисперсную суспензию и раз в 2-4 месяца в перименопаузе вводят ее подкожно вместе с менопаузальной гормональной терапией.
В заявляемом способе осуществляется аутотрансплантация овариальной ткани. Это исключает возможность развития реакции отторжения "трансплантат-реципиент", а также исключает ряд этических и юридических вопросов, связанных с аллогенной трансплантацией тканей и органов.
Получение и консервация аутотрансплантатов до наступления менопаузы дает возможность сохранить еще активно функционирующую яичниковую ткань.
Заготовка и консервация комплекса тканей кортикального и медуллярного слоев обусловлена тем, что именно медуллярный слой отвечает за торможение апоптоза и выживаемость тканей при консервации. Криоконсервация только кортикального слоя, в отличие от комплекса медуллярного-кортикального слоя, характеризуется худшей выживаемостью трансплантатов.
Криоконсервация тканей яичника позволяет проводить реимплантацию ("возврат") через неограниченное время, поскольку срок хранения трансплантатов в жидком азоте исчисляется десятками лет. Между забором тканей и их возвратом период времени должен составлять не менее 3 лет, поскольку возврат осуществляется при наступлении менопаузы (1 год отсутствия менструации), а забор надо осуществлять до описанных в способе появления гормональных маркеров перименопаузы (снижение АМГ, рост ФСГ и ЛГ) Однако, оптимальным является начало поэтапной трансплантации в самом начале менопаузы и с началом менопаузальной гормонотерапии.
Для трансплантации (возврата) после разморозки фрагмента производится его механическое измельчение до образования крупнодисперсной суспензии, которая вводится подкожно через толстую иглу. Данный способ трансплантации исключает необходимость выполнения лапаротомии или другого интраабдоминального вмешательства, прост и не требует общей анестезии.
Крайне важной является периодичность возврата трансплантируемых тканей. Известно, что трансплантаты яичниковой ткани после криоконсервации, разморозки и трансплантации имеют лимитированную продолжительность жизни в организме. Как правило она ограничена 2-6 месяцами. Следовательно, введение трансплантируемых тканей с интервалом 2-4 месяца подкожно позволяет добиться непрерывного функционирования трансплантата для достаточной гормональной продукции.
Сочетание методики трансплантации и менопаузальной гормонотерапии является оптимальным, поскольку наличие функционирующих фрагментов медуллярного вещества увеличивает биодоступность экзогенных производных эстрадиола.
Сочетание указанных отличий позволяет добиться длительной овариальной функции у женщин в менопаузе, а значит и увеличить продолжительность жизни.
Способ осуществляется следующим образом. У женщин до перехода в менопаузу в возрасте 40-45 лет хирургическим путем получают фрагменты яичников (примерно по 25-30% объема каждого) (например, путем лапароскопии). Иссечение фрагментов яичника должно сопровождаться равным удалением кортикального и медуллярного слоев. Предпочтительно клиновидное иссечение.
Критерием адекватности сроков получения являются ненарушенный регулярный менструальный цикл, уровень антимюллеровского гормона не ниже 1,2 нг/мл, уровень ФСГ не выше 25 мЕд/л.
Сразу после извлечения фрагментов они делятся на страйпы (полоски) сечением не более 2×2 мм на всю длину препарата (8-10 мм) в стерильных условиях. Данные страйпы помещаются в герметичные капсулы, наполняемые ксеноном до давления 1,5 атм, и подвергаются постепенному охлаждению до 0 градусов Цельсия с темпом 1 градус в минуту, затем после экспозиции при нулевой температуре в течение 60 минут продолжают охлаждение темпом 1 градус в минуту до -20 градусов цельсия. Затем сразу переносят капсулы в жидкий азот, в котором они хранятся неограниченное время.
При наступлении у пациентки периода перименопаузы, когда речь идет о начале менопаузальной гормональной терапии (через 3-5 лет после забора и консервации тканей), наряду с назначение эстрадиол содержащих препаратов, производится периодическое введение пациентке мелкофрагментарной суспензии, приготовленной из размороженных фрагментов яичника, содержащих медуллярное и кортикальное вещества.
После разморозки при комнатной температуре, при ее достижении одна или несколько капсул открываются, немедленно в стерильных условиях производится измельчение тканей яичников механическим путем до получения мелкофрагментарной массы, которую можно продавить через иглу шприца с диаметром просвета около 2 мм. Для однократного введения достаточно объема 3-4 кубических миллиметров ткани.
Такие введения рекомендуется осуществлять раз в 60-120 суток вместе в проводимой фармакологической менопаузальной гормонотерапией.
Пример. Пациентка Ф. 45 л. обратилась в клинику НИИ скорой помощи в ноябре 2013 г. для консервации тканей яичника. Отмечала регулярный менструальный цикл, уровень антимюллеровского гормона 1,4 нг/мл, уровень ФСГ 18 мЕд/л. В соответствии с заявляемым способом были выполнены лапароскопия, забор около 20% объема каждого яичника (комплекс медуллярная и кортикальная ткани) и криоконсервация. Через 2,5 года женщина отметила исчезновение менструаций, изменение гормонального фона АМГ 0,4 нг/мл, ФСГ 65 МЕд/л. В ноябре 2016 г. (через 3 года после забора) начата менопаузальная гормонотерапия, а также введение суспензии размораживаемых овариальных тканей в соответствии с заявляемым способом каждые 60-65 суток подкожно. В анализах - через полгода нормализация цифр ФСГ до уровня пременопаузальных (до 20 мЕд/л). Наблюдается 3 года, при дерматологическом и эндокринологическом обследовании отсутствуют признаки старения, связанного с менопаузой (изменения структуры и плотности дермы, сосудистые нарушения, климактерический синдром).
Заявляемый способ является максимально приближенным к физиологическому. Отсутствие необходимости использования аллотканей сразу исключает большое количество осложнений, связанных с развитием реакции отторжения трансплантатов (неэффективность, воспаление, нагноение), а также необходимость иммуносупрессивной терапии после возврата тканей. Отсутствие необходимости пересадки "чужих тканей" также устраняет этические аспекты и юридические вопросы, поскольку такая технология не попадает под законодательные нормы закона о трансплантации тканей. При данном способе нет необходимости HLA типирования тканей и подбора донора. Использование аутотканей и консервация их в том периоде жизни, когда частичный их забор не приводит к развитию физиологических изменений, и возврат в организм в менопаузе, когда введение этих веществ крайне важно для замедления старения является основным преимуществом изобретения.