5-ГАЛОГЕНЗАМЕЩЕННЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ОКСИНДОЛА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВАЗОПРЕССИНЗАВИСИМЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
5-HALOGEN-SUBSTITUTED OXINDOLE DERIVATIVES AND USE THEREOF IN TREATING VASOPRESSIN-DEPENDENT DISEASES

Настоящее изобретение относится к новым замещенным производным оксиндола, фармацевтическим композициям, содержащим такие производные, и их применению для лечения вазопрессинзависимых заболеваний.
Вазопрессин представляет собой эндогенный гормон, оказывающий самое разное действие на органы и ткани. Предполагают, что вазопрессиновая система играет роль в случае различных болезненных состояний, таких как, например, сердечная недостаточность и артериальная гипертония. В настоящее время известны три рецептора (V1a, V1b, или V3, и V2), через которые вазопрессин опосредует свои многочисленные воздействия. Поэтому антагонисты данных рецепторов исследуют как возможные новые терапевтически активные исходные вещества для лечения болезней (M. Thibonnier, Exp. Opin. Invest. Drugs, 1998, 7(5), 729-740).
H
В данной заявке описаны новые замещенные оксиндолы, содержащие в положении 1 фенилсульфонильную группу. 1-Фенилсульфонил-1,3-дигидро-2-индол-2-он был описан в качестве лиганда рецепторов вазопрессина. В WO 93/15051, WO 95/18105, WO 98/25901, WO 01/55130, WO 01/55134, WO 01/164668 и WO 01/98295 также описаны производные, которые в положении 1 радикала оксиндола содержат арилсульфонильные группы. Данные соединения отличаются от соединений по настоящему изобретению в основном заместителями в положении 3.
Так, в WO 93/15051 и WO 98/25901 описаны 1-фенилсульфонил-1,3-дигидро-2H-индол-2-оны в качестве лигандов рецепторов вазопрессина, в которых радикал оксиндола в положении 3 содержит в качестве заместителей два алкила, которые совместно могут образовывать также циклоалкил (спиросоединение). В качестве альтернативы спироцикл может содержать гетероатомы, такие как кислород и азот (которые при необходимости связаны с заместителями).
H
В WO 95/18105 описаны 1-фенилсульфонил-1,3-дигидро-2-индол-2-оны в качестве лигандов рецепторов вазопрессина, которые в положении 3 содержат атом азота. Дополнительно в положении 3 присоединены радикалы, которые при необходимости выбирают из замещенных алкилов, циклоалкилов, фенила или бензила.
В WO 03/008407 описаны 1-фенилсульфонилоксиндолы, в которых в положении 3 через мочевинную, карбаматную или 2-оксоэтильную группу к оксиндолу присоединены пиридилпиперазины.
В WO 2005/030755 в качестве примера 105 описан 5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-метоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-иловый сложный эфир 4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты.
В WO 2006/005609 в качестве примера 66 описан дигидрохлорид [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксифенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида 4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты.
Наряду со сродством связывания с V1b-рецептором вазопрессина для лечения и/или профилактики вазопрессинзависимых заболеваний могут быть полезными другие свойства, такие как, например:
1) селективность к V1b-рецептору вазопрессина по сравнению с V1a-рецептором вазопрессина, т.е. отношение сродства связывания с V1a-рецептором (Ki(V1a) (определенного в единицах "наномолярности", нМ)), и сродства связывания с V1b-рецептором (Ki(V1b) (определенного в единицах "наномолярности", нМ)). Чем больше отношение Ki(V1a)/Ki(V1b), тем больше V1b-селективность;
2) селективность к V1b-рецептору вазопрессина по сравнению с V2-рецептором вазопрессина, т.е. отношение сродства связывания с V2-рецептором (Ki(V2) (определенного в единицах "наномолярности", нМ)) и сродства связывания с V1b-рецептором (Ki(V1b) (определенного в единицах "наномолярности", нМ). Чем больше отношение Ki(V2)/Ki(V1b), тем больше V1b-селективность;
3) селективность к V1b-рецептору вазопрессина по сравнению с OT-рецептором окситоцина, т.е. отношение сродства связывания с OT-рецептором окситоцина (Ki(OT) (определенного в единицах "наномолярности", нМ)) и сродства связывания с V1b-рецептором (Ki(V1b) (определенного в единицах "наномолярности", нМ). Чем больше отношение Ki(OT)/Ki(V1b), тем больше V1b-селективность;
in
vitro
4) метаболическая стабильность, например, определенная по измеренному  времени полувыведения в микросомах печени различных видов (например, крысы или человека);
5) отсутствие или только незначительная степень ингибирования ферментов типа цитохром P450 (CYP): цитохром P450 (CYP) представляет собой обозначение суперсемейства гемопротеинов с ферментативной активностью (типа оксидазы). Они имеют особое значение также при разложении (метаболизме) инородных веществ, таких как лекарственные средства или ксенобиотики, в организмах млекопитающих. Важнейшими представителями типов и подтипов CYP в организме человека являются CYP 1A2, CYP 2C9, CYP 2D6 и CYP 3A4. При одновременном применении ингибиторов CYP 3A4 (например, грейпфрутового сока, циметидина, эритромицина) и лекарственных средств, которые данной ферментативной системой разлагаются и, таким образом, конкурируют за тот же сайт связывания с ферментом, их разложение может быть замедлено и вследствие этого может быть нежелательно усилено основное и побочное действие примененного лекарственного средства;
6) приемлемая растворимость в воде (мг/мл);
-1
-1
-1
-1
7) приемлемая фармакокинетика (изменение во времени концентрации соединения по настоящему изобретению в плазме или в тканях, например, головного мозга). Фармакокинетика может быть описана следующими параметрами: время полувыведения (ч), объем распределения (л·кг), клиренс плазмы (л·ч·кг), AUC ("площадь под кривой", т.е. площадь под кривой зависимости "концентрация-время", нг·ч·л), оральная биодоступность (соотношение AUC после перорального введения и AUC после внутривенного введения, нормализующее дозу), так называемое отношение "мозг-плазма" (соотношение AUC в ткани головного мозга и AUC в плазме);
50
8) отсутствие или только незначительная степень блокады hERG-канала: соединения, блокирующие hERG-канал, могут обуславливать удлинение QT-интервала и вследствие этого могут вести к серьезным нарушениям ритма сердца (например, к так называемой аритмии типа "torsade de pointes" ("пируэт")). Посредством испытаний, описанных в литературе, на замещение дофетилидом с радиоактивной меткой (G.J. Diaz et al., Journal of Pharmacological and Toxicological Methods, 50 (2004), 187-199) может быть определен потенциал соединений, блокирующих hERG-канал. Чем меньше IC в данном "испытании с дофетилидом", тем вероятнее мощная hERG-блокада. Кроме того, блокада hERG-канала может быть измерена в электрофизиологических экспериментах с клетками, трансфицированных hERG-каналом, посредством так называемого метода "whole-cell patch clamping" (метод локальной фиксации потенциала в конфигурации "целая клетка") (G.J. Diaz et al., Journal of Pharmacological and Toxicological Methods, 50 (2004), 187-199).
Задачей данного изобретения являлось получение соединений для лечения или профилактики различных вазопрессинзависимых заболеваний. Соединения должны были обладать высокой активностью и селективностью и, прежде всего, высоким сродством и селективностью в отношении V1b-рецептора вазопрессина. Дополнительно соединение по настоящему изобретению должно было обладать одним или несколькими упомянутыми ранее преимуществами по пунктам с 1) по 8).
Задача решена за счет соединений формулы I:
где:
1
R означает водород, метокси- или этоксигруппу;
2
R означает водород или метоксигруппу;
3
R означает водород, метил, этил, н-пропил или изопропил;
4
R означает этокси- или изопропоксигруппу;
5
R означает H или метил;
6
R означает Cl или F;
1
2
X означает O, NH или CH;
2
3
2
3
X и X означают N или CH при условии, что X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемых солей и пролекарств.
В соответствии с этим настоящее изобретение относится к соединениям формулы I (далее называемым также "соединения I"), а также к фармацевтически приемлемым солям соединений I и пролекарствам соединений I.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I, которые обозначаются также, как физиологически приемлемые соли, получают, как правило, по реакции свободного основания соединений I по настоящему изобретению (т.е. соединений I структурной формулы I) с приемлемыми кислотами. Приемлемые кислоты приведены, например, в "Fortschritte der Arzneimittelforschung", 1966, Birkhäuser Verlag, Bd. 10, S. 224-285. В их число входят, например, соляная, лимонная, винная, молочная, фосфорная, метансульфоновая, уксусная, муравьиная, малеиновая и фумаровая кислоты.
1
4
1
4
3
a
b
3
a
b
3
Под термином "пролекарства" понимают такие соединения, которые in vivo метаболизируются до соединений I по настоящему изобретению. Типичные примеры пролекарств описаны в C.G. Wermeth (Hrsg.): The Practice of Medicinal Chemistry, Academic Press, San Diego, 1996, Seiten 671-715. В их число входят, например, фосфаты, карбаматы, аминокислоты, сложные эфиры, амиды, пептиды, мочевины и тому подобное. В данном случае приемлемыми пролекарствами могут быть, например, такие соединения I, в которых внешний атом азота внешнего пиперидин/пиперазинового кольца образует амидную/пептидную группировку благодаря тому‚ что данный атом азота связан с C-C-алкилкарбонилом, например, таким как ацетил, пропионил, н-пропилкарбонил, изопропилкарбонил, н-бутилкарбонил или трет-бутилкарбонил (пивалоил), с бензоилом или с аминокислотным остатком, присоединенным через группу CO, например с глицином, аланином, серином, фенилаланином, присоединенными через группу CO, и т.п., в качестве заместителя в положении R. В качестве пролекарств приемлемыми являются также алкилкарбонилоксиалкилкарбаматы, в которых внешний атом азота внешнего пиперидин/пиперазинового кольца связан с группировкой формулы -C(=O)-O-CHR-O-C(=O)-R в положении R, где R и R независимо друг от друга означают C-C-алкилы. Такие карбаматы описаны, например, в J. Alexander, R. Cargill, S.R. Michelson, H. Schwam, J. Medicinal Chem. 1988, 31(2), 318-322. Затем такие группы вследствие метаболизма могут отщепляться и превращаться в соединения I, в которых R означает H.
1
4
C-C-алкил в рамках данного изобретения представляет собой линейный или разветвленный алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, такой как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил или трет-бутил.
1
3
C-C-алкоксигруппа в рамках данного изобретения представляет собой линейный или разветвленный алкил, содержащий от 1 до 3 атомов углерода и связанный через атом кислорода. Примеры таких групп представляют собой метокси-, этокси-, н-пропокси- и изопропоксигруппы.
Соединения формулы I по настоящему изобретению, их фармакологически приемлемые соли и пролекарства могут существовать также в виде сольватов или гидратов. Под сольватами в рамках данного изобретения понимают кристаллические формы соединений I или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств, в кристаллическую решетку которых встроены молекулы растворителя. Молекулы растворителя встроены предпочтительно в стехиометрическом соотношении. Гидраты представляют собой особую форму сольватов; в данном случае растворителем является вода.
1
2
3
4
5
6
1
2
3
Приведенные далее данные касательно основных и предпочтительных отличительных признаков настоящего изобретения, в частности, относительно R, R, R, R, R, R, X, X и X соединения I, а также касательно отличительных признаков способа по настоящему изобретению и применения по настоящему изобретению, относятся как к непосредственно упомянутым значениям, так и предпочтительно к их любой возможной комбинации.
Соединения I получают предпочтительно в виде свободных оснований (т.е. согласно структурной формуле I) или в виде их кислотно-аддитивных солей.
1
В предпочтительном варианте осуществления R означает водород или метоксигруппу.
1
2
В более предпочтительном варианте осуществления R и R означают метоксигруппу.
3
В предпочтительном варианте осуществления R означает водород, метил или этил, предпочтительно водород или метил и более предпочтительно метил.
4
5
В предпочтительном варианте осуществления R означает этоксигруппу, а R означает H.
4
5
В альтернативном предпочтительном варианте осуществления R означает этоксигруппу, а R означает метил.
4
5
В альтернативном предпочтительном варианте осуществления R означает изопропоксигруппу, а R означает H.
4
5
Более предпочтительно R означает этоксигруппу, а R означает H.
6
В предпочтительном варианте осуществления R означает Cl.
6
В альтернативном предпочтительном варианте осуществления R означает F.
6
Более предпочтительно R означает Cl.
1
В предпочтительном варианте осуществления X означает NH.
1
В альтернативном предпочтительном варианте осуществления X означает O.
1
2
В альтернативном предпочтительном варианте осуществления X означает CH.
1
2
Более предпочтительно X означает NH или CH и предпочтительно NH.
2
3
В предпочтительном варианте осуществления один из радикалов X и X означает N, а другой означает CH.
2
3
В более предпочтительном варианте осуществления X означает N, а X означает CH.
2
3
В альтернативном более предпочтительном варианте осуществления X означает CH, а X означает N.
2
3
В альтернативном предпочтительном варианте осуществления X и X означают CH.
Предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает водород или метоксигруппу;
2
R означает водород или метоксигруппу;
3
R означает водород, метил, этил, н-пропил или изопропил и предпочтительно водород, метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает водород;
6
R означает Cl;
1
2
X означает NH, O или CH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Более предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает водород или метоксигруппу;
2
R означает водород или метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает водород;
6
R означает Cl;
1
2
X означает NH, O или CH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Значительно более предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
1
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает водород;
6
R означает Cl;
1
2
X означает NH, O или CH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Наиболее предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает водород;
6
R означает Cl;
1
X означает NH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Альтернативно наиболее предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает водород;
6
R означает Cl;
1
2
X означает CH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает водород;
6
R означает Cl;
1
X означает NH;
2
X означает N;
3
X означает CH;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Предпочтительными объектами настоящего изобретения являются также соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает водород;
6
R означает Cl;
1
X означает NH;
2
X означает CH;
3
X означает N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Предпочтительными объектами настоящего изобретения являются также соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает водород;
6
R означает Cl;
1
X означает NH;
2
X означает CH;
3
X означает CH;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Альтернативно предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает водород или метоксигруппу;
2
R означает водород или метоксигруппу;
3
R означает водород, метил, этил, н-пропил или изопропил и предпочтительно водород, метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает метил;
6
R означает Cl;
1
2
X означает NH, O или CH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Альтернативно более предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает водород или метоксигруппу;
2
R означает водород или метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает метил;
6
R означает Cl;
1
2
X означает NH, O или CH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Альтернативно значительно более предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает метил;
6
R означает Cl;
1
2
X означает NH, O или CH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Альтернативно наиболее предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает метил;
6
R означает Cl;
1
X означает NH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Альтернативно наиболее предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает метил;
6
R означает Cl;
1
2
X означает CH;
2
X означает N или CH;
3
X означает N или CH;
2
3
причем X и X одновременно не представляют собой N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Предпочтительными объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает метил;
6
R означает Cl;
1
X означает NH;
2
X означает N;
3
X означает CH;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Предпочтительными объектами настоящего изобретения являются также соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает метил;
6
R означает Cl;
1
X означает NH;
2
X означает CH;
3
X означает N;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Предпочтительными объектами настоящего изобретения являются также соединения формулы I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил или этил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает метил;
6
R означает Cl;
1
X означает NH;
2
X означает CH;
3
X означает CH;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Особенно предпочтительными являются соединения I, где:
1
R означает метоксигруппу;
2
R означает метоксигруппу;
3
R означает метил;
4
R означает этоксигруппу;
5
R означает водород;
6
R означает Cl;
1
X означает NH;
2
X означает N;
3
X означает CH;
а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
2
3
1
2
3
Примеры предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения представляют собой соединения формул с I.1 по I.18, а также их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства, в которых X, X, R, R и R имеют значения, указанные в соответствующих строках таблицы 1.
Таблица 1
№ примера
X<sup>2</sup>
X<sup>3</sup>
R<sup>1</sup>
R<sup>2</sup>
R<sup>3</sup>
A-1
N
CH
метокси
метокси
метил
A-2
N
CH
метокси
H
метил
A-3
N
CH
этокси
H
метил
A-4
N
CH
H
H
метил
A-5
N
CH
H
метокси
метил
A-6
N
CH
этокси
метокси
метил
A-7
N
CH
метокси
метокси
этил
A-8
N
CH
метокси
H
этил
A-9
N
CH
этокси
H
этил
A-10
N
CH
H
H
этил
A-11
N
CH
H
метокси
этил
A-12
N
CH
этокси
метокси
этил
A-13
N
CH
метокси
метокси
н-пропил
A-14
N
CH
метокси
H
н-пропил
A-15
N
CH
этокси
H
н-пропил
A-16
N
CH
H
H
н-пропил
A-17
N
CH
H
метокси
н-пропил
A-18
N
CH
этокси
метокси
н-пропил
A-19
N
CH
метокси
метокси
изопропил
A-20
N
CH
метокси
H
изопропил
A-21
N
CH
этокси
H
изопропил
A-22
N
CH
H
H
изопропил
A-23
N
CH
H
метокси
изопропил
A-24
N
CH
этокси
метокси
изопропил
A-25
N
CH
метокси
метокси
H
A-26
N
CH
метокси
H
H
A-27
N
CH
этокси
H
H
A-28
N
CH
H
H
H
A-29
N
CH
H
метокси
H
A-30
N
CH
этокси
метокси
H
A-31
CH
N
метокси
метокси
метил
A-32
CH
N
метокси
H
метил
A-33
CH
N
этокси
H
метил
A-34
CH
N
H
H
метил
A-35
CH
N
H
метокси
метил
A-36
CH
N
этокси
метокси
метил
A-37
CH
N
метокси
метокси
этил
A-38
CH
N
метокси
H
этил
A-39
CH
N
этокси
H
этил
A-40
CH
N
H
H
этил
A-41
CH
N
H
метокси
этил
A-42
CH
N
этокси
метокси
этил
A-43
CH
N
метокси
метокси
н-пропил
A-44
CH
N
метокси
H
н-пропил
A-45
CH
N
этокси
H
н-пропил
A-46
CH
N
H
H
н-пропил
A-47
CH
N
H
метокси
н-пропил
A-48
CH
N
этокси
метокси
н-пропил
A-49
CH
N
метокси
метокси
изопропил
A-50
CH
N
метокси
H
изопропил
A-51
CH
N
этокси
H
изопропил
A-52
CH
N
H
H
изопропил
A-53
CH
N
H
метокси
изопропил
A-54
CH
N
этокси
метокси
изопропил
A-55
CH
N
метокси
метокси
H
A-56
CH
N
метокси
H
H
A-57
CH
N
этокси
H
H
A-58
CH
N
H
H
H
A-59
CH
N
H
метокси
H
A-60
CH
N
этокси
метокси
H
A-61
CH
CH
метокси
метокси
метил
A-62
CH
CH
метокси
H
метил
A-63
CH
CH
этокси
H
метил
A-64
CH
CH
H
H
метил
A-65
CH
CH
H
метокси
метил
A-66
CH
CH
этокси
метокси
метил
A-67
CH
CH
метокси
метокси
этил
A-68
CH
CH
метокси
H
этил
A-69
CH
CH
этокси
H
этил
A-70
CH
CH
H
H
этил
A-71
CH
CH
H
метокси
этил
A-72
CH
CH
этокси
метокси
этил
A-73
CH
CH
метокси
метокси
н-пропил
A-74
CH
CH
метокси
H
н-пропил
A-75
CH
CH
этокси
H
н-пропил
A-76
CH
CH
H
H
н-пропил
A-77
CH
CH
H
метокси
н-пропил
A-78
CH
CH
этокси
метокси
н-пропил
A-79
CH
CH
метокси
метокси
изопропил
A-80
CH
CH
метокси
H
изопропил
A-81
CH
CH
этокси
H
изопропил
A-82
CH
CH
H
H
изопропил
A-83
CH
CH
H
метокси
изопропил
A-84
CH
CH
этокси
метокси
изопропил
A-85
CH
CH
метокси
метокси
H
A-86
CH
CH
метокси
H
H
A-87
CH
CH
этокси
H
H
A-88
CH
CH
H
H
H
A-89
CH
CH
H
метокси
H
A-90
CH
CH
этокси
метокси
H
2
3
1
2
3
2
3
1
2
3
Среди упомянутых ранее соединений с I.1 по I.18 предпочтительными являются соединения формул I.1, I.3, I.5, I.7, I.9, I.11, I.13, I.15 и I.17, в которых X, X, R, R и R имеют значения, указанные в соответствующих строках таблицы 1. Среди последних упомянутых соединений в свою очередь предпочтительными являются соединения формул I.1, I.3, I.5, I.7 и I.13, в которых X, X, R, R и R имеют значения, указанные в соответствующих строках таблицы 1.
2
3
1
2
3
Более предпочтительными являются соединения формулы I.1, в которой X, X, R, R и R имеют значения, указанные в таблице 1 в строках A-1, A-2, A-4, A-7, A-31, A-32, A-34, A-37, A-38, A-40, A-61, A-67 и A-85, предпочтительно в строках A-1, A-2, A-4, A-7, A-31, A-37, A-38, A-61 и A-67, и более предпочтительно в строках A-1, A-4, A-7, A-31, A-37, A-61 и A-67.
2
3
1
2
3
Более предпочтительными являются также соединения формулы I.3, в которой X, X, R, R и R имеют значения, указанные в таблице 1 в строках A-1, A-7, A-31 и A-37 и предпочтительно в строках A-1 и A-7.
2
3
1
2
3
Более предпочтительными являются также соединения формулы I.5, в которой X, X, R, R и R имеют значения, указанные в таблице 1 в строках A-1, A-7, A-31 и A-37 и предпочтительно в строках A-1 и A-7.
2
3
1
2
3
Более предпочтительными являются также соединения формулы I.7, в которой X, X, R, R и R имеют значения, указанные в таблице 1 в строках A-1, A-4, A-31, A-34, A-37 и A-40 и предпочтительно в строке A-1.
2
3
1
2
3
Более предпочтительными являются также соединения формулы I.13, в которой X, X, R, R и R имеют значения, указанные в таблице 1 в строках A-1, A-2, A-4, A-31, A-32 и A-34 и предпочтительно в строке A-2.
2
3
1
2
3
Среди упомянутых более предпочтительных соединений в свою очередь предпочтительными являются соединения I.1, I.3, I.5 и I.7, причем X, X, R, R и R имеют значения, указанные для соответствующих соединений. Среди последних упомянутых соединений более предпочтительными являются соединения формул I.1, I.3 и I.5 и предпочтительно формул I.1 и I.3, причем соединения формулы I.1 являются наиболее предпочтительными.
В соединениях I по настоящему изобретению в положении 3 2-оксиндольного кольца находится центр хиральности. Поэтому соединения по настоящему изобретению могут существовать в виде смеси 1:1 энантиомеров (рацемата) или в виде нерацемической смеси энантиомеров, которая обогащена одним из энантиомеров, т.е. энантиомером, вращающим плоскость колебаний линейно-поляризованного света влево (т.е. вращающим против часовой стрелки) (далее обозначается как (-)-энантиомер), или энантиомером, вращающим плоскость колебаний линейно-поляризованного света вправо (т.е. вращающим по часовой стрелке) (далее обозначается как (+)-энантиомер), или в виде по существу энантиомерно чистых соединений, т.е. в виде по существу энантиомерно чистых (-)-энантиомеров или (+)-энантиомеров. Так как в случае соединений по настоящему изобретению имеется только один центр асимметрии и отсутствует ось/плоскость хиральности, то нерацемическую смесь можно охарактеризовать также как смесь энантиомеров, в которой преобладает или R- или S-энантиомер. В соответствии с этим по существу энантиомерно чистые соединения могут быть охарактеризованы также, как по существу энантиомерно чистый R-энантиомер или по существу энантиомерно чистый S-энантиомер.
Под выражением "по существу энантиомерно чистые соединения" в рамках данного изобретения понимают такие соединения, в которых энантиомерный избыток (enantiomeric excess, ee; % ee=(R-S)/(R+S)×100 или (S-R)/(S+R)×100) составляет по меньшей мере 80% ee, предпочтительно по меньшей мере 85% ee, более предпочтительно по меньшей мере 90% ee, наиболее предпочтительно по меньшей мере 95% ee и, в частности, по меньшей мере 98% ee.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения соединения по настоящему изобретению находятся в виде по существу энантиомерно чистых соединений. Более предпочтительными являются соединения, в которых энантиомерный избыток составляет по меньшей мере 85% ee, более предпочтительно по меньшей мере 90% ee, наиболее предпочтительно по меньшей мере 95% ee и, в частности, по меньшей мере 98% ee.
Таким образом, объектами настоящего изобретения являются как чистые энантиомеры, так и их смеси, например смеси, в которых один из энантиомеров содержится в преобладающем количестве, а также рацематы. Объектом настоящего изобретения являются также фармацевтически приемлемые соли и пролекарства чистых энантиомеров соединений I, а также смеси энантиомеров в виде фармацевтически приемлемых солей и пролекарств соединений I.
Предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения относятся к упомянутым ранее соединениям формулы I, отличающимся тем, что они существуют в оптически активной форме и представляют собой вращающие вправо (т.е. вращающие по часовой стрелке) плоскость колебаний поляризованного света энантиомеры соответствующих соединений формулы I в виде свободного основания или их фармацевтически приемлемой соли или пролекарства. Правовращающие или вращающие по часовой стрелке энантиомеры соединений I далее обозначаются как (+)-энантиомеры.
Более предпочтительными являются соединения общей формулы I, их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства, упомянутые ранее и содержащие соответствующий (+)-энантиомер по оптической чистоте (enantiomeric excess (энантиомерный избыток)), ee) в количестве больше 50% ee, преимущественно по меньшей мере 80% ee, более предпочтительно по меньшей мере 90% ee, наиболее предпочтительно по меньшей мере 95% ee и, в частности, по меньшей мере 98% ee.
Предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения относятся также к упомянутым ранее соединениям общей формулы I, отличающимся тем, что они существуют в оптически неактивной форме, т.е. в виде рацематов или в виде фармацевтически приемлемых солей или пролекарств рацематов.
В рамках данного изобретения указания по направлению вращения поляризованного света преимущественно даны в виде знака (+) или (-) соответственно результату определения в хлороформе в качестве растворителя или в хлороформсодержащих смесях растворителей и предпочтительно в хлороформе.
Далее описаны примерные пути синтеза для получения производных оксиндола по настоящему изобретению.
Получение соединений по настоящему изобретению может быть осуществлено согласно методикам синтеза аналогичных соединений, описанным в WO 2005/030755 и WO 2006/005609, и в качестве примера отображено в общих чертах на схемах синтеза 1-3. На данных схемах синтеза приняты обозначения соответственно формуле I.
3-Гидрокси-1,3-дигидроиндол-2-оны IV могут быть получены присоединением металлсодержащего гетероцикла III к кетогруппе в положении 3 изатинов II. Металлсодержащие гетероциклы, такие как, например, соответствующий реактив Гриньяра (Mg) или литийорганическое соединение, могут быть получены традиционным способом из галогенсодержащих или углеводородных соединений. Примерные методики представлены в Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Bd. 13, 1-2, Kap. Mg- bzw. Li-Verbindungen. Изатины II имеются в продаже или могут быть получены аналогично способам, описанным в литературе (Advances in Heterocyclic Chemistry, A.R. Katritzky and A.J. Boulton, Academic Press, New York, 1975, 18, 2-58; J. Brazil. Chem. Soc. 12, 273-324, 2001).
3-Гидроксиоксиндолы IV могут быть превращены в соединения V, содержащие в положении 3 уходящую группу LG', причем уходящая группа LG' представляет собой традиционную уходящую группу, такую как, например, хлорид- или бромид-ион. Промежуточное соединение V, в котором, например, LG'=хлор, может быть получено обработкой спирта IV тионилхлоридом в присутствии основания, такого как, например, пиридин, в приемлемом растворителе, таком как, например, дихлорметан.
трет
Затем соединения V могут быть превращены в амины VI по реакции замещения с амином, таким как, например, аммиак. Далее соединения VI могут быть превращены обработкой сульфонилхлоридом VII после депротонирования сильным основанием, таким как, например, -бутилат калия или гидрид натрия в ДМФА, в сульфонилированное соединение VIII. Применяемые сульфонилхлориды VII могут быть приобретены в торговой сети или получены известными способами (см., например, J. Med. Chem. 40, 1149 (1997)).
Получение соединений общей формулы I по настоящему изобретению, в которых в положении 3 находится мочевинная группа, может быть осуществлено двухстадийным способом, описанным в WO 2005/030755 и WO 2006/005609 и показанным на схеме синтеза 1. Сначала соединение VIII взаимодействием с фениловым эфиром хлормуравьиной кислоты в присутствии основания, такого как, например, пиридин, превращают в соответствующий фенилкарбамат IX.
1
3
3
Последующее взаимодействие с амином X при необходимости при повышенной температуре и с добавкой вспомогательного основания, такого как, например, триэтиламин или диизопропилэтиламин, приводит к соединениям общей формулы (I) по настоящему изобретению с мочевинным мостиком (X=NH). Амины X могут быть приобретены в торговой сети или получены способами, известными из литературы. Получение соединений I по настоящему изобретению с R=H может быть осуществлено при использовании соответствующих аминов X, защищенных группой Boc (R=Boc). Затем защитная группа Boc может быть удалена, например, обработкой трифторуксусной кислотой в дихлорметане.
СХЕМА СИНТЕЗА 1
Ph=фенил
1
трет
Получение соединений общей формулы I по настоящему изобретению, в которых в положении 3 находится карбаматная группа (X=O), может быть осуществлено способом, описанным в WO 2006/005609 и показанным на схеме синтеза 2. Сначала 3-гидроксисоединение IV взаимодействием с фениловым эфиром хлормуравьиной кислоты превращают в производные фенилкарбонатов XIa и/или XIb. Затем с избытком амина X получают карбаматпроизводные XII, которые далее в традиционных условиях (депротонирование сильным основанием, таким, как, например, гидрид натрия или -бутилат калия, в приемлемом растворителе, таком как, например, ДМФА, с последующей обработкой сульфонилхлоридом VII) могут быть превращены в соединения I по настоящему изобретению с карбаматным мостиком.
СХЕМА СИНТЕЗА 2
1
2
трет
Получение соединений общей формулы I по настоящему изобретению, в которых в положении 3 находится 2-оксоэтильная группа (X=CH), может быть осуществлено согласно схеме синтеза 3. Введение группировки уксусной кислоты может быть осуществлено соответственно 4-стадийной последовательности, описанной в WO 2006/005609 (1 - замещение уходящей группы LG' в соединение V солью диметилмалоната натрия, 2 - гидролиз первой сложноэфирной группы, 3 - термическое декарбоксилирование, 4 - гидролиз второй сложноэфирной группы). Аминная боковая цепь X может быть присоединена к карбоновой кислоте XV с использованием стандартных связывающих реагентов, известных из химии пептидов, таких как, например, EDC (гидрохлорид N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида) и HOBT (1-гидроксибензотриазол), в растворителе, таком как, например, N,N-диметилформамид. Сульфонилирование может быть осуществлено депротонированием продукта присоединения XVI сильным основанием, таким как, например, гидрид натрия или -бутилат калия, с последующей обработкой сульфонилхлоридом VII в растворителе, таком как, например, ДМФА, что приводит к соединениям I по настоящему изобретению с амидным мостиком.
СХЕМА СИНТЕЗА 3
Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно соединение общей формулы I и/или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, упомянутые ранее, и фармацевтически приемлемый эксципиент. Приемлемые эксципиенты выбирают в зависимости от формы применения композиции и принципиально известны специалистам в данной области техники. Некоторые приемлемые эксципиенты описаны далее.
Другим объектом настоящего изобретения является применение соединений формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения и/или профилактики вазопрессинзависимых заболеваний.
Вазопрессинзависимые заболевания представляют собой заболевания, при которых течение болезни по меньшей мере частично зависит от вазопрессина, т.е. заболевания, при которых наблюдается повышенный уровень вазопрессина, который прямо или косвенно может влиять на картину болезни. Иначе говоря, вазопрессинзависимые заболевания представляют собой заболевания, на которые можно влиять модуляцией рецептора вазопрессина, например, посредством введения лигандов рецептора вазопрессина (агонистов, антагонистов, парциальных антагонистов/агонистов, инверсных агонистов и т.д.).
В предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения и/или профилактики заболеваний, выбранных из таких заболеваний, как диабет, инсулинорезистентность, ночной энурез, недержание и болезни, при которых наблюдаются нарушения свертывания крови, и/или для задерживания мочеиспускания. Под термином "диабет" следует понимать любые формы диабета, прежде всего сахарный диабет (включая тип I и, в частности, тип II), почечный диабет и, в частности, несахарный диабет. Формы диабета предпочтительно представляют собой сахарный диабет типа II (с инсулинорезистентностью) или несахарный диабет.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения и/или профилактики заболеваний, выбранных из таких заболеваний, как гипертония, пульмональная гипертония, сердечная недостаточность, инфаркт миокарда, спазм коронарных сосудов, нестабильная стенокардия, PTCA (чрескожная транслюминальная коронарная ангиопластика), ишемическая болезнь сердца, нарушения почечной системы, отеки, спазм почечных сосудов, некроз коры надпочечников, гипонатриемия, гипокалиемия, синдром Шварца-Бартера, нарушения желудочно-кишечного тракта, спазм желудочных сосудов, цирроз печени, язва желудка и кишечника, рвота, рвота, обусловленная химиотерапией, и транспортная болезнь.
Соединения формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства или фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть использованы также для лечения различных вазопрессинзависимых болезненных состояний, связанных с центральной нервной системой или изменениями в системе HPA (гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система), например, при аффективных расстройствах, таких как депрессивные расстройства и биполярные расстройства. К ним относятся дистимические расстройства, фобии, посттравматические нарушения восприятия нагрузок, генерализованные фобии, приступы паники, сезонные депрессии и расстройства сна.
Соединения формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства или фармацевтические композиции по настоящему изобретению также могут быть использованы для лечения фобий и фобических расстройств, зависящих от стресса, таких как, например, генерализованные фобические расстройства, фобии, посттравматические фобии, панические фобические расстройства, навязчивые фобии, острые фобические расстройства, зависящие от стресса, и социофобия.
Соединения по настоящему изобретению также могут быть использованы для лечения расстройств памяти, болезни Альцгеймера, психозов, психотических расстройств, расстройств сна и/или синдрома Кушинга, а также любых заболеваний, зависящих от стресса.
В соответствии с этим другой предпочтительный вариант осуществления предлагаемого изобретения относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения аффективных расстройств.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения фобий и/или фобических расстройств, зависящих от стресса.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения расстройств памяти и/или болезни Альцгеймера.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения психозов и/или психотических расстройств.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения синдрома Кушинга или иных заболеваний, зависящих от стресса.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения расстройств сна.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения депрессивных заболеваний. Особой формой депрессивных заболеваний являются так называемые расстройства настроения детского возраста, т.е. депрессивные дисфории, которые встречаются уже в детском возрасте.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения вазомоторных симптомов и/или терморегуляторных дисфункций, таких как, например, симптом прилива крови.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения и/или профилактики зависимостей, вызываемых наркотическими веществами, лекарственными средствами и/или иными факторами, для лечения и/или профилактики стресса, обусловленного депривацией одного или нескольких факторов, вызывающих зависимость, и/или для лечения и/или профилактики индуцированных стрессом рецидивов зависимостей, вызываемых наркотическими веществами, лекарственными средствами и/или иными факторами.
В другом предпочтительном варианте осуществления предлагаемое изобретение относится к применению соединений формулы I по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей или пролекарств для получения лекарственного средства для лечения шизофрении и/или психозов.
Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения и/или профилактики вазопрессинзависимых заболеваний, при котором больным вводят эффективное количество по меньшей мере одного соединения формулы I по настоящему изобретению или по меньшей мере одной его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства или фармацевтической композиции по настоящему изобретению.
Касательно дефиниции вазопрессинзависимых заболеваний действительна ссылка на изложенные ранее пояснения.
В предпочтительном варианте осуществления предлагаемого изобретения способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики заболеваний, выбранных из таких заболеваний, как диабет, инсулинорезистентность, ночной энурез, недержание и болезни, при которых наблюдаются нарушения свертывания крови, и/или для задерживания мочеиспускания.
Касательно дефиниции диабета действительна ссылка на изложенные ранее пояснения.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики заболеваний, выбранных из таких заболеваний, как гипертония, пульмональная гипертония, сердечная недостаточность, инфаркт миокарда, спазм коронарных сосудов, нестабильная стенокардия, PTCA (чрескожная транслюминальная коронарная ангиопластика), ишемическая болезнь сердца, нарушения почечной системы, отеки, спазм почечных сосудов, некроз коры надпочечников, гипонатриемия, гипокалиемия, синдром Шварца-Барттера, нарушения желудочно-кишечного тракта, спазм желудочных сосудов, цирроз печени, язва желудка и кишечника, рвота, рвота, обусловленная химиотерапией, и транспортная болезнь.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики аффективных расстройств.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики фобий и/или фобических расстройств, зависящих от стресса.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики расстройств памяти и/или болезни Альцгеймера.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики психозов и/или психотических расстройств.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики синдрома Кушинга.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики расстройств сна.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики депрессивных заболеваний. Среди депрессивных заболеваний предпочтительными являются расстройства настроения детского возраста, т.е. депрессивные дисфории, которые встречаются уже в детском возрасте.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики вазомоторных симптомов и/или терморегуляторных дисфункций, таких как, например, симптом прилива крови.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики зависимостей, вызываемых наркотическими веществами, лекарственными средствами и/или иными факторами, для лечения и/или профилактики стресса, обусловленного депривацией одного или нескольких факторов, вызывающих зависимость, и/или для лечения и/или профилактики индуцированных стрессом рецидивов зависимостей, вызываемых наркотическими веществами, лекарственными средствами и/или иными факторами.
В другом предпочтительном варианте осуществления способ по настоящему изобретению предназначен для лечения и/или профилактики шизофрении и/или психозов.
Больные, в отношении которых осуществляют профилактику или лечение способом по настоящему изобретению, представляют собой предпочтительно млекопитающих, например человека или млекопитающих, отличающихся от человека, или трансгенных млекопитающих, отличающихся от человека. Более предпочтительным субъектом является человек.
Соединения общей формулы I, их фармацевтически приемлемые соли и пролекарства, упомянутые ранее, могут быть получены специалистами в данной области техники соответственно сведениям, изложенным в описании настоящего изобретения, путем осуществления и/или аналогичного осуществления известных по существу технологических стадий.
Соединения I или их пролекарства и/или их фармацевтически приемлемые соли отличаются тем, что они обладают селективностью к подтипу V1b-рецепторов вазопрессина по сравнению с селективностью по меньшей мере к одному из близкородственных подтипов рецепторов вазопрессина/окситоцина (например, V1a-рецептора вазопрессина, V2-рецептора вазопрессина и/или рецептора окситоцина).
Альтернативно или предпочтительно соединения I или их пролекарства и/или их фармацевтически приемлемые соли дополнительно отличаются тем, что они обладают повышенной метаболической стабильностью.
Метаболическая стабильность соединения может быть определена, например, способом, в котором раствор данного соединения инкубируют с микросомами печени определенного вида (например, крысы, собаки или человека) и определяют время полувыведения соединения в данных условиях (R.S. Obach, Curr. Opin. Drug Discov. Devel. 2001, 4, 36-44). При этом исходя из наблюдаемого более значительного времени полувыведения можно сделать заключение о повышенной метаболической стабильности соединения. Стабильность в присутствии микросом печени человека представляет особенный интерес, так как она позволяет прогнозировать метаболическое разложение соединения в печени человека. Поэтому соединения с повышенной метаболической стабильностью (определенной в испытании с микросомами печени), вероятно, также медленно будут разлагаться в печени. Более медленное метаболическое разложение в печени может обеспечивать более высокие и/или сохраняющиеся в течение более длительного времени концентрации (эффективные уровни) соединения в организме, поэтому время полувыведения соединений по настоящему изобретению является повышенным. Повышенные и/или сохраняющиеся в течение более длительного времени эффективные уровни могут обеспечивать более высокую эффективность соединений при лечении или профилактике различных вазопрессинзависимых заболеваний. Кроме того, повышенная метаболическая стабильность может обеспечивать повышенную биодоступность при пероральном введении, так как соединение после всасывания в кишечнике подвергается незначительному метаболическому разложению в печени (так называемый "first pass effect" (эффект первого прохождения)). Повышенная оральная биодоступность вследствие повышенной концентрации (эффективного уровня) соединения может обеспечивать более высокую эффективность соединений при пероральном введении.
Соединения по настоящему изобретению являются эффективными при введении различными путями. Введение может быть осуществлено, например, внутривенно, внутримышечно, подкожно, местно, интратрахеально, интраназально, чрескожно, вагинально, ректально, сублингвально, трансбуккально или перорально, и его предпочтительно осуществляют внутривенно, внутримышечно или более предпочтительно перорально.
Настоящее изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим эффективную дозу соединения I по настоящему изобретению, его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и соответствующего фармацевтически приемлемого носителя (эксципиента).
Такие эксципиенты выбирают соответственно требуемой фармацевтической форме и способу введения и являются известными специалистам в данной области техники.
Соединения формулы I по настоящему изобретению или при необходимости приемлемые соли данных соединений могут быть использованы для получения фармацевтических композиций для введения перорально, сублингвально, трансбуккально, подкожно, внутримышечно, внутривенно, местно, интратрахеально, интраназально, чрескожно, вагинально или ректально и могут быть введены животным или человеку в стандартных вводимых формах в смеси с традиционными фармацевтически приемлемыми эксципиентами для профилактики или лечения упомянутых ранее расстройств или заболеваний.
Приемлемые применяемые формы (дозированные лекарственные формы) представляют собой формы для введения перорально, такие как таблетки, желатиновые капсулы, порошки, гранулы, растворы или суспензии для приема внутрь, формы для введения сублингвально, трансбуккально, интратрахеально или интраназально, аерозоли, имплантаты, формы для введения подкожно, внутримышечно или внутривенно и формы для введения ректально.
Для местного применения соединения по настоящему изобретению могут быть использованы в виде кремов, мазей или лосьонов.
Для достижения требуемого профилактического или терапевтического эффекта доза активного вещества может варьировать в интервале от 0,01 до 50 мг на 1 кг массы тела в сутки.
Стандартная доза может содержать от 0,05 до 5000 мг, предпочтительно от 1 до 1000 мг активного вещества в комбинации с фармацевтически приемлемым эксципиентом. Такая стандартная доза может быть введена от 1 до 5 раз в сутки, так что суточная доза может составлять от 0,5 до 25000 мг и предпочтительно от 1 до 5000 мг.
В случае изготовления твердой композиции в виде таблеток активное вещество смешивают с твердым фармацевтически приемлемым эксципиентом, таким как желатин, крахмал, лактоза, стеарат магния, тальк, диоксид кремния или тому подобное.
Таблетки могут быть покрыты сахарозой, производным целлюлозы или другим приемлемым веществом или могут быть обработаны иным образом с целью проявления долговременной или замедленной активности и высвобождения заданного количества активного вещества в непрерывном режиме.
Композицию в виде желатиновых капсул получают смешиванием активного вещества с наполнителем и заполнением полученной смесью мягких или твердых желатиновых капсул.
Композиция в виде сиропа или эликсира или для введения в виде капель может содержать активные вещества вместе с предпочтительно низкокалорийным подсластителем, метилпарабеном или пропилпарабеном в качестве антисептического средства, ароматизатором и приемлемым красителем.
Порошки или гранулы, диспергируемые в воде, могут содержать активные вещества, смешанные с диспергаторами, смачивающими агентами или суспендирующими агентами, такими как поливинилпирролидон, а также с подсластителями или агентами, корректирующими вкус.
Введение ректально или вагинально осуществляют в виде суппозиториев, которые изготавливают смешиванием со связующими веществами, плавящимися при ректальной температуре, например, с маслом какао или полиэтиленгликолями. Парентеральное введение осуществляют в виде водных суспензий, изотонических солевых растворов или стерильных и предназначенных для инъекций растворов, содержащих фармакологически приемлемый диспергатор и/или смачивающий агент, например, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль.
Активное вещество может быть введено в состав микрокапсул или центросом, в случае их приемлемости, с одним или несколькими эксципиентами или добавками.
Дополнительно к соединениям по настоящему изобретению композиции по настоящему изобретению могут содержать другие активные вещества, которые могут быть полезными для лечения упомянутых ранее расстройств или заболеваний.
Таким образом, настоящее изобретение относится также к фармацевтическим композициям, которые содержат сочетание нескольких активных веществ, причем по меньшей мере одно из них представляет собой соединение I по настоящему изобретению, его соль или пролекарство.
Далее настоящее изобретение более подробно поясняется примерами, причем примеры следует понимать как неограничительные.
Получение соединений по настоящему изобретению может быть осуществлено по различным вариантам синтеза. Упомянутые методики, показанные на схемах синтеза 1, 2 и 3 соответственно, более подробно поясняются иллюстративным образом посредством упомянутых примеров без ограничения только упомянутыми вариантами синтеза 1, 2 или 3 или аналогичными методиками.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Используемые сокращения:
ТГФ (THF): тетрагидрофуран;
ДМСО (DMSO): диметилсульфоксид;
ТФУ (TFA): трифторуксусная кислота;
п (p): псевдо (например, пт означает псевдотриплет);
ушир. (b): уширенный (например, с ушир. означает уширенный синглет);
с (s): синглет;
д (d): дуплет;
т (t): триплет;
м (m): мультиплет;
дд (dd): дуплет дуплетов;
дт (dt): дуплет триплетов;
тт (tt): триплет триплетов.
I. Получение исходных соединений
a) 3-Гидроксииндолы общей формулы IV
a.1 5-Хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-гидрокси-1,3-дигидроиндол-2-он
Получение натриевой соли изатина: К 13,9 г (76,5 ммоль) 5-хлоризатина в 300 мл ТГФ порциями прибавляли при 0°C 3,21 г (80,3 ммоль) гидрида натрия (60%-ная суспензия в минеральном масле) и перемешивали в течение часа при 0°C.
Получение реактива Гриньяра: К раствору 2-этокси-3-иодпиридина (20,0 г, 80,3 ммоль) в 250 мл ТГФ по каплям прибавляли этилмагнийбромид (95,6 ммоль, 95,6 мл 1 M раствора в ТГФ), при этом температуру поддерживали в интервале от 15 до 22°C. Затем реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре.
Реакция присоединения Гриньяра: Насосом подавали раствор реактива Гриньяра к раствору натриевой соли изатина, охлажденному льдом, и затем реакционную смесь перемешивали в течение трех часов при комнатной температуре. Реакционную смесь вылили в 10%-ный раствор хлорида аммония и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические фракции промыли водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и сгустили при пониженном давлении. Кристаллический осадок, образовавшийся после выдерживания в течение ночи при комнатной температуре, отделили фильтрованием под вакуумом и промыли этилацетатом. Было получено 13,3 г соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества красноватого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=305 (эталон изотопа Cl).
a.2 5-Хлор-3-(2-этокси-5-метилпиридин-3-ил)-3-гидрокси-1,3-дигидроиндол-2-он
Получение натриевой соли изатина: К 5,0 г (27,5 ммоль) 5-хлоризатина в 100 мл ТГФ порциями прибавляли при 0°C 1,01 г (27,5 ммоль) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в минеральном масле) и перемешивали в течение часа при 0°C.
Получение литиевого реактива: К охлажденному до -78°C раствору 3-бром-2-этокси-5-метилпиридина (7,74 г, 35,8 ммоль) в 100 мл ТГФ по каплям прибавляли н-бутиллитий (37,2 ммоль, 23,2 мл 1,6 M раствор в гексане), при этом поддерживали температуру -60°C, и затем реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин на бане со смесью "ацетон/сухой лед".
Реакция присоединения: Охлажденный до -78°C раствор обработанного литием пиридина через игольчатый штуцер подачи насосом подавали в раствор натриевой соли изатина, охлажденный льдом, и затем реакционную смесь перемешивали в течение трех часов при комнатной температуре. Реакционную смесь вылили в 10%-ный раствор хлорида аммония и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические фракции промыли водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и сгустили при пониженном давлении. После обработки остатка дихлорметаном образовался осадок бежевого цвета, который отделили фильтрованием под вакуумом и промыли дихлорметаном. Было получено 2,61 г соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества красноватого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=319 (эталон изотопа Cl).
a.3 5-Хлор-3-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-3-гидрокси-1,3-дигидроиндол-2-он
Соединение, указанное в заголовке, получали аналогично способу примера a.1 с использованием 3-иод-2-изопропоксипиридина.
b) Амины общей формулы X
b.1 1-Этил-4-пиперидин-4-илпиперазин
b.1.1 Трет-бутил-4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат
N
трет
трет
29,2 г (256 ммоль) -этилпиперазина и 50,0 г (256 ммоль) -бутил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (соответствует 1-Boc-4-пиперидону) внесли при охлаждении льдом в 800 мл этанола. Прибавили 15,4 г (256 ммоль) ледяной уксусной кислоты. Затем 16,1 г (256 ммоль) ацетоксиборогидрида натрия порциями прибавляли к охлажденной реакционной смеси. Сначала наблюдалось легкое выделение газа, а после прибавления 2/3 частей восстановителя наблюдалось пенообразование. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Для обработки реакционного раствора при охлаждении прибавили 200 мл 2 н. раствора гидроксида натрия, этанол, использованный как растворитель, отогнали и остаточную реакционную смесь разбавили водой. Экстрагировали диэтиловым эфиром (2 раза), промыли насыщенным раствором хлорида натрия (1 раз), объединенные органические фракции высушили над сульфатом магния, профильтровали, а растворитель удалили в вакууме. Затем неочищенное соединение, указанное в заголовке и полученное в виде маслоподобного вещества желтого цвета, хроматографировали на 4 картриджах, заполненных силикагелем, используя в качестве элюента смесь дихлорметана с 10% метанола. В целом было получено 40 г (135 ммоль, 53%) -бутил-4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата.
b.1.2 1-Этил-4-пиперидин-4-илпиперазин в виде хлористой соли
трет
Для удаления защитных групп 40 г (135 ммоль) -бутил-4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата по примеру b.1.1 внесли в 200 мл метанола и 1,8 л дихлорметана и прибавили 100 мл 5-6 M раствора HCl в изопропаноле. Образовалась суспензия, при этом также наблюдалось легкое выделение газа. Реакционную смесь перемешивали при 40°C (температура водяной бани) и затем перемешивали в течение 48 ч при комнатной температуре. Для полного удаления защиты прибавили еще 50 мл 5-6 M раствора HCl в изопропаноле и реакционную смесь перемешивали при 40°C. Дихлорметан отогнали в роторном испарителе. Затем прибавили еще 200 мл метанола и 30 мл 5-6 M раствора HCl в изопропаноле. Реакционную смесь перемешивали в течение часа с обратным холодильником, при этом образовалась суспензия белого цвета, что сопровождалось сильным выделением газа. Образовавшуюся маловязкую суспензию охладили до комнатной температуры. Кристаллический осадок отделили фильтрованием под вакуумом и промыли метанолом и диэтиловым эфиром. После высушивания было получено 36 г (117 ммоль, 87%) 1-этил-4-пиперидин-4-илпиперазина в виде хлористой соли.
1
2
ЯМР H (DO, 400 МГц) δ [м.д.]=3,74-3,47 (м, 11H), 3,28 (кв, 2H, J=7,3 Гц), 3,06 (дт, 2H, J=2,2 Гц, J=13,2 Гц), 2,38 (м, 2H, J=13,6 Гц), 1,89 (дкв, 2H, J=4,1 Гц, J=13,3 Гц), 1,30 (т, 3H, J=7,3 Гц).
II. Получение рацемических соединений формулы I
Соединения I по настоящему изобретению в некоторых случаях очищали препаративной ВЭЖХ, например, на колонке с Prontosil Prep 2012, C18, 125 × 20 мм, 5 мкм, с градиентом элюента от 10 до 100% ацетонитрила в воде с добавкой 0,1% трифторуксусной кислоты в качестве модулятора. Соединения I выделяли в виде солей трифторуксусной кислоты.
1
II.1 Получение рацемических соединений формулы I, в которых X означает NH (примеры 1-21)
ПРИМЕР 1
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (±)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
1.1 3,5-Дихлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1,3-дигидроиндол-2-он
К суспензии 13,3 г (43,6 ммоль) 5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-гидрокси-1,3-дигидроиндол-2-она по примеру a.1 в 50 мл дихлорметан прибавили 4,4 мл (54,3 ммоль) пиридина. После охлаждения реакционной смеси до 0°C по каплям прибавляли 3,8 мл (52,3 ммоль) тионилхлорида. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение часа и затем вылили в ледяную воду. После перемешивания в течение 15 минут отделили органический слой. Водный слой несколько раз экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические фракции высушили над сульфатом магния, профильтровали и удалили растворитель в вакууме. Было получено 15,6 г соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества желтоватого цвета, которое без дополнительной очистки использовали на следующей стадии.
1.2 3-Амино-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1,3-дигидроиндол-2-он
К охлажденному раствору 47 г (145 ммоль) 3,5-дихлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1,3-дигидроиндол-2-она в 250 мл дихлорметана по каплям прибавляли в атмосфере азота 104 мл (728 ммоль) 7 н. метанольного раствора аммиака и затем реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной смеси прибавили 250 мл воды и 250 мл дихлорметана. После перемешивания в течение 5 мин выпало твердое вещество белого цвета, которое отделили фильтрованием и промыли водой и дихлорметаном. После высушивания в вакуумируемом сушильном шкафу было получено 26 г соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=304 (эталон изотопа Cl)
1.3 3-Амино-5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1,3-дигидроиндол-2-он
К раствору 20 г (66 ммоль) 3-амино-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1,3-дигидроиндол-2-она в 50 мл безводного диметилформамида в атмосфере азота и при охлаждении на бане со льдом порциями прибавляли 3,2 г (79 ммоль) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в минеральном масле). После перемешивания в течение 10 мин при 0°C прибавили 18,7 г (79 ммоль) 2,4-диметоксибензолсульфонилхлорида и затем перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь вылили в ледяную воду и затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промыли насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и выпарили растворитель. Остаток очищали хроматографированием на силикагеле (картриджи Redisep, 120 г, градиент элюента от 2 до 25% дихлорметана в этилацетате). Было получено 34 г соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=504 (эталон изотопа Cl)
1.4 Фениловый эфир [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]карбаминовой кислоты
К охлажденному до 0°C раствору 2,57 г (5,1 ммоль) 3-амино-5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1,3-дигидроиндол-2-она в 10 мл дихлорметана и 4,1 мл пиридина медленно прибавляли по каплям 0,83 мл (6,6 ммоль) фенилового эфира хлормуравьиной кислоты. Затем реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавили дихлорметаном и экстрагировали водой. Органический слой промыли водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и сгустили при пониженном давлении. Остаток растворили в малом количестве дихлорметана и прибавили шестикратный объем диизопропилового эфира. Образовавшийся осадок отделили фильтрованием, промыли диизопропиловым эфиром и высушили в вакууме. Было получено 3,01 г соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=624 (эталон изотопа Cl)
1.5 [5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид 4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
Смесь 800 мг (1,28 ммоль) фенилового эфира [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]карбаминовой кислоты, 470 мг (2,56 ммоль) 1-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазина и 5 мл безводного ТГФ перемешивали в течение 24 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавили дихлорметаном, промыли водой и насыщенным раствором хлорида натрия, органический слой высушили над сульфатом магния и сгустили при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографированием на силикагеле (картриджи Redisep, 12 г, градиент элюента от 2 до 12% метанола в дихлорметане). Было получено 790 мг соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=713 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,85 (1H), 7,70 (1H), 7,55 (2H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,20 (2H), 3,85 (3H), 3,45 (3H), 3,20 (4H), 2,75 (2H), 2,35 (4H), 2,10 (4H), 1,80 (2H), 1,65 (2H), 1,35 (2H), 1,15 (3H).
1
Соединения формулы I, в которых X означает NH, примеров 2-21 могут быть получены с использованием соответствующих 3-гидроксиоксиндолов формулы IV, сульфонилхлоридов формулы VII, а также аминов формулы X аналогично способу получения по примеру 1.
ПРИМЕР 2
Трифторуксуснокислая соль [5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1-(2-метоксифенилсульфонил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=683 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 3
Трифторуксуснокислая соль [1-фенилсульфонил-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты A-977409
+
ИЭР-МС [M+H]=653 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 4
(±)-4-(1-Этилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбокси[5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид
+
ИЭР-МС [M+H]=727 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,85 (1H), 7,70 (1H), 7,55 (2H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,20 (2H), 3,85 (3H), 3,45 (3H), 3,20 (4H), 2,85 (2H), 2,35 (4H), 2,30 (2H), 2,10 (1H), 1,80 (2H), 1,65 (2H), 1,35 (2H), 1,10 (3H), 0,95 (3H).
ПРИМЕР 5
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (±)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=713 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,90 (1H), 7,70 (1H), 7,60 (1H), 7,55 (1H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,25 (2H), 3,85 (3H), 3,80 (2H), 3,45 (3H), 2,65 (2H), 2,40 (4H), 2,30 (4H), 2,15 (3H), 1,60 (2H), 1,15 (5H).
ПРИМЕР 6
Трифторуксуснокислая соль [5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1-(2-метоксифенилсульфонил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=683 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 7
Трифторуксуснокислая соль [1-фенилсульфонил-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=653 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 8
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (±)-4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=727 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,90 (1H), 7,70 (1H), 7,60 (1H), 7,55 (1H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,20 (2H), 3,85 (3H), 3,80 (2H), 3,45 (3H), 2,65 (2H), 2,25-2,50 (11H), 1,65 (2H), 1,15 (5H), 0,95 (3H).
ПРИМЕР 9
Трифторуксуснокислая соль [5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1-(2-метоксифенилсульфонил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=697 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 10
Трифторуксуснокислая соль [1-фенилсульфонил-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=667 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 11
Трифторуксуснокислая соль [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-[4,4']бипиперидинил-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=698 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 12
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (±)-1'-этил-[4,4']бипиперидинил-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=726 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 13
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (±)-1'-метил-[4,4']бипиперидинил-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=712 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,90 (1H), 7,70 (1H), 7,60 (1H), 7,55 (1H), 7,40 (1H), 7,35 (1H), 7,00 (1H), 6,65 (2H), 4,20 (2H), 3,90 (2H), 3,85 (3H), 3,45 (3H), 2,90 (2H), 2,55 (2H), 2,25 (3H), 2,05 (2H), 1,55 (4H), 1,25 (3H), 1,15 (3H), 0,95 (3H).
ПРИМЕР 14
Трифторуксуснокислая соль [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этокси-5-метилпиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=727 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=9,64 (1H), 7,98 (1H), 7,93 (1H), 7,89 (1H), 7,74 (1H), 7,40 (2H), 7,32 (1H), 6,75 (1H), 6,70 (1H), 4,20 (2H), 3,88 (3H), 3,60 (2H), 3,48 (3H), 2,85-3,40 (9H), 2,80 (3H), 2,30 (2H), 2,17 (3H), 1,80 (2H), 1,15 (3H).
ПРИМЕР 15
Трифторуксуснокислая соль [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этокси-5-метил-пиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(1-этилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=741 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 16
Трифторуксуснокислая соль [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этокси-5-метилпиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=727 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 17
Трифторуксуснокислая соль [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этокси-5-метилпиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=741 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 18
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (±)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=727 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,85 (1H), 7,70 (1H), 7,60 (1H), 7,50 (1H), 7,40 (1H), 7,35 (1H), 6,95 (1H), 6,70 (1H), 6,65 (1H), 5,20 (1H), 3,85 (3H), 3,45 (3H), 3,20 (4H), 2,75 (2H), 2,35 (4H), 2,10 (4H), 1,80 (2H), 1,65 (2H), 1,35 (2H), 1,20 (3H), 1,05 (3H).
ПРИМЕР 19
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (±)-4-(1-этилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=741 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 20
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (±)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=727 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 21
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (±)-4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=741 (эталон изотопа Cl)
1
II.2 Получение рацемических соединений формулы I, в которых X означает O (примеры 22-27)
ПРИМЕР 22
Трифторуксуснокислая соль 5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-илового эфира (±)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
22.1 Фениловый эфир 5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-3-феноксикарбонилокси-2,3-дигидроиндол-1-карбоновой кислоты
К охлажденному до 0°C раствору 3,00 г (9,8 ммоль) 5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-гидрокси-1,3-дигидроиндол-2-она по примеру a.1 в 10 мл пиридина медленно прибавляли по каплям 2,6 мл (21 ммоль) фенилового эфира хлормуравьиной кислоты и затем реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавили дихлорметаном и экстрагировали водой. Объединенные органические фракции промыли водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и сгустили при пониженном давлении. Остаток растирали с диэтиловым эфиром. Было получено 2,58 г соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=545 (эталон изотопа Cl)
22.2 5-Хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-иловый эфир 4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
Смесь 1,29 г (2,37 ммоль) фенилового эфира 5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-3-феноксикарбонилокси-2,3-дигидроиндол-1-карбоновой кислоты, 1,73 г (9,46 ммоль) 1-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазина и 10 мл безводного ТГФ перемешивали в течение 72 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавили дихлорметаном и экстрагировали водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой высушили над сульфатом магния и сгустили при пониженном давлении. Остаток растирали с диэтиловым эфиром. Было получено 963 мг соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=514 (эталон изотопа Cl)
22.3 Трифторуксуснокислая соль 5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-илового эфира 4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
К раствору 80 мг (0,16 ммоль) 5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-илового эфира 4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты в 2 мл безводного диметилформамида в атмосфере азота и при охлаждении на бане со льдом прибавили 7,5 мг (0,19 ммоль) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в минеральном масле). После перемешивания в течение 10 мин при 0°C прибавили 44 мг (0,19 ммоль) 2,4-диметоксибензолсульфонилхлорида и затем перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь вылили в ледяную воду и затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промыли насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и выпарили растворитель. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (Prontosil Prep 2012, C18, 125×20 мм, 5 мкм, градиент от 10% до 100% ацетонитрила в воде с добавкой 0,1% трифторуксусной кислоты). Было получено 78 мг соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=714 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=9,60 (1H), 8,20 (1H), 8,15 (1H), 7,85 (1H), 7,80 (1H), 7,50 (1H), 7,20 (1H), 7,10 (1H), 6,70 (2H), 4,10 (2H), 3,85 (3H), 3,55 (3H), 2,90-3,50 (11H), 2,75 (3H), 2,15 (2H), 1,75 (2H), 1,00 (3H).
1
Соединения формулы I, в которых X означает O, примеров 23-27 могут быть получены с использованием соответствующих 3-гидроксиоксиндолов формулы IV, сульфонилхлоридов формулы VII, а также аминов формулы X аналогично способу получения по примеру 22.
ПРИМЕР 23
Трифторуксуснокислая соль 5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1-(2-метоксифенилсульфонил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-илового эфира (±)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=684 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 24
Трифторуксуснокислая соль 1-фенилсульфонил-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-илового эфира (±)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=654 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 25
Трифторуксуснокислая соль 5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-илового эфира (±)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=714 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 26
Трифторуксуснокислая соль 5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1-(2-метоксифенилсульфонил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-илового эфира (±)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=684 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 27
Трифторуксуснокислая соль 1-фенилсульфонил-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-илового эфира (±)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=654 (эталон изотопа Cl)
1
2
II.3 Получение рацемических соединений формулы I, в которых X означает CH (примеры 28-33)
ПРИМЕР 28
Трифторуксуснокислая соль (±)-5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-{2-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}-1,3-дигидроиндол-2-она
28.1 Диметиловый эфир 2-[5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]малоновой кислоты
К охлажденной до 10°C суспензии 3,56 г (89 ммоль) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в минеральном масле) в 150 мл диметилформамида медленно прибавляли по каплям 11,2 мл (98 ммоль) диметилмалоната и затем перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре. После этого порциями прибавляли 9,6 г (30 ммоль) 3,5-дихлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-1,3-дигидроиндол-2-она по примеру 1.1 и затем перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали для обработки в холодном 1 н. растворе HCl и затем прибавили дихлорметан. Слои разделили и водный слой экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические фракции промыли водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и растворитель удалили в вакууме. Остаток перекристаллизовали из смеси дихлорметан/пентан. Было получено 9,01 г соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества желтоватого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=419 (эталон изотопа Cl)
28.2 Метиловый эфир [5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]уксусной кислоты
Гидролиз: К раствору 9,00 г (21,5 ммоль) диметилового эфира 2-[5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]малоновой кислоты в 9 мл этанола прибавили 90 мл 2 н. раствора гидроксида натрия и перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Реакционную смесь при перемешивании вылили в охлажденный льдом 1 н. раствор соляной кислоты и несколько раз экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические фракции промыли водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и растворитель удалили в вакууме. Полученное таким образом твердое вещество желтоватого цвета (8,41 г смеси диастереоизомеров) высушили в вакуумируемом сушильном шкафу при 40°C.
2
Декарбоксилирование: Полученный ранее продукт гидролиза (8,41 г) нагревали в продутой азотом одногорлой колбе при 150°C. По окончании выделения CO реакционной смеси дали охладиться до комнатной температуры и остаток растерли с метанолом. Образовавшееся кристаллическое вещество держали в течение ночи в холодильнике. Было получено 5,25 г соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества желтоватого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=361 (эталон изотопа Cl)
28.3 [5-Хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]уксусная кислота
К раствору 1,96 г (5,43 ммоль) метилового эфира [5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]уксусной кислоты в 10 мл этанола прибавили 20 мл воды, а также 10 мл 2 н. раствора гидроксида натрия. Затем реакционную смесь перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре. Для обработки к реакционной смеси прибавили 1 н. раствор соляной кислоты до pH=5 и затем сгустили в роторном испарителе. Остаток растворили в толуоле, сгустили досуха и высушили в вакуумируемом сушильном шкафу. Было получено 3,75 г неочищенного соединения, которое без дополнительной очистки использовали на следующей стадии.
+
ИЭР-МС [M+H]=347 (эталон изотопа Cl)
28.4 5-Хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-{2-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}-1,3-дигидроиндол-2-он
К раствору 1,00 г [5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]уксусной кислоты в 10 мл диметилформамида прибавили 195 мг (1,44 ммоль) 1-гидроксибензотриазола, а также 276 мг (1,44 ммоль) гидрохлорида N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида, перемешивали в течение 15 минут и затем прибавили 277 мг (1,51 ммоль) 1-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазина и 1,00 мл (7,41 ммоль) триэтиламина. Затем реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной смеси прибавили воду и несколько раз экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фракции экстрагировали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и растворитель выпарили в вакууме. Остаток очищали хроматографированием на силикагеле (картриджи Redisep, 12 г, градиент элюента от 10 до 70% метанола в дихлорметане). Было получено 311 мг соединения, указанного в заголовке, в виде пены белого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=512 (эталон изотопа Cl)
28.5 Трифторуксуснокислая соль 5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-{2-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}-1,3-дигидроиндол-2-она
К раствору 70 мг (0,14 ммоль) 5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-{2-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}-1,3-дигидроиндол-2-она в 2 мл диметилформамида в атмосфере азота и при охлаждении на бане со льдом прибавили 6,6 мг (0,16 ммоль) гидрида натрия (60%-ная дисперсия в минеральном масле). После перемешивания реакционной смеси в течение 10 мин при 0°C прибавили 39 мг (0,16 ммоль) 2,4-диметоксибензолсульфонилхлорида и затем перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь вылили в ледяную воду и затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промыли насыщенным раствором хлорида натрия, высушили над сульфатом магния и выпарили растворитель. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (Prontosil Prep 2012, C18, 125×20 мм, 5 мкм, градиент от 10% до 100% ацетонитрила в воде с добавкой 0,1% трифторуксусной кислоты). Было получено 45 мг соединения, указанного в заголовке, в виде твердого вещества белого цвета.
+
ИЭР-МС [M+H]=712 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=10,25 (1H), 8,10 (1H), 7,90 (2H), 7,80 (1H), 7,35 (1H), 7,20 (1H), 7,00 (1H), 6,65 (2H), 4,10 (2H), 3,95 (2H), 3,85 (3H), 3,60 (3H), 3,55 (2H), 2,90-3,50 (11H), 2,75 (3H), 2,25 (2H), 1,90 (2H), 1,00 (3H).
1
2
Соединения формулы I, в которых X означает CH, примеров 29-33 могут быть получены с использованием соответствующих сульфонилхлоридов формулы VII, а также аминов формулы X аналогично способу получения по примеру 28.
ПРИМЕР 29
Трифторуксуснокислая соль (±)-1-фенилсульфонил-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-{2-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-ил]-2-оксоэтил}-1,3-дигидроиндол-2-она
+
ИЭР-МС [M+H]=652 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 30
Трифторуксуснокислая соль (±)-5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-{2-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-2-оксоэтил}-1,3-дигидроиндол-2-она
+
ИЭР-МС [M+H]=712 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 31
Трифторуксуснокислая соль (±)-1-фенилсульфонил-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-{2-[4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-2-оксоэтил}-1,3-дигидроиндол-2-она
+
ИЭР-МС [M+H]=652 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 32
Трифторуксуснокислая соль (±)-5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-{2-[4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-2-оксоэтил}-1,3-дигидроиндол-2-она
+
ИЭР-МС [M+H]=726 (эталон изотопа Cl)
ПРИМЕР 33
Трифторуксуснокислая соль (±)-1-фенилсульфонил-5-хлор-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-3-{2-[4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил]-2-оксоэтил}-1,3-дигидроиндол-2-она
+
ИЭР-МС [M+H]=666 (эталон изотопа Cl)
III. Получение хиральных соединений формулы I
Разделение рацемических соединений формулы I может быть осуществлено, например, путем разделения на препаративной колонке с хиральной фазой.
ПРИМЕР 1A и ПРИМЕР 1B
Разделение рацемата [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида (±)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
100 мг рацемата [5-хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амида 4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты по примеру 1 разделяли на препаративной колонке с хиральной фазой (Chiralcell OD, подача 55 мл/мин), используя смесь н-гептан/этанол (7:3) в качестве элюента. Выход: 33 мг левовращающего энантиомера (пример 1A) и 27 мг правовращающего энантиомера (пример 1B).
ПРИМЕР 1A
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (-)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=713 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,85 (1H), 7,70 (1H), 7,55 (2H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,20 (2H), 3,85 (3H), 3,45 (3H), 3,20 (4H), 2,75 (2H), 2,35 (4H), 2,10 (4H), 1,80 (2H), 1,65 (2H), 1,35 (2H), 1,15 (3H).
f
ВЭЖХ (Chiralcel OD, 0,46 см × 25 см; н-гептан/этанол, 7:3) R=7,4 мин
20
D
3
[α] =-16 (c=0,1, CHCl)
ПРИМЕР 1B
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (+)-4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=713 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,85 (1H), 7,70 (1H), 7,55 (2H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,20 (2H), 3,85 (3H), 3,45 (3H), 3,20 (4H), 2,75 (2H), 2,35 (4H), 2,10 (4H), 1,80 (2H), 1,65 (2H), 1,35 (2H), 1,15 (3H).
f
ВЭЖХ (Chiralcel OD, 0,46 см × 25 см; н-гептан/этанол, 7:3) R=20,0 мин
20
D
3
[α] =+12 (c=0,1, CHCl)
Аналогичным способом можно разделять рацематы примеров 4, 5 и 8 с получением соответствующих энантиомеров.
Пример 4B
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (+)-4-(1-этилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=727 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,85 (1H), 7,70 (1H), 7,55 (2H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,20 (2H), 3,85 (3H), 3,45 (3H), 3,20 (4H), 2,85 (2H), 2,35 (4H), 2,30 (2H), 2,10 (1H), 1,80 (2H), 1,65 (2H), 1,35 (2H), 1,10 (3H), 0,95 (3H).
f
ВЭЖХ (Chiralcel OD, 0,46 см × 25 см; н-гептан/этанол, 7:3) R=17,9 мин
20
3
[α]D=+12 (c=0,1, CHCl)
ПРИМЕР 5A
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (-)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=713 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,90 (1H), 7,70 (1H), 7,60 (1H), 7,55 (1H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,25 (2H), 3,85 (3H), 3,80 (2H), 3,45 (3H), 2,65 (2H), 2,40 (4H), 2,30 (4H), 2,15 (3H), 1,60 (2H), 1,15 (5H).
f
ВЭЖХ (Chiralcel OD, 0,46 см × 25 см; н-гептан/этанол, 7:3) R=7,6 мин
20
3
[α]D=-14 (c=0,1, CHCl)
ПРИМЕР 5B
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (+)-4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=713 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,90 (1H), 7,70 (1H), 7,60 (1H), 7,55 (1H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,25 (2H), 3,85 (3H), 3,80 (2H), 3,45 (3H), 2,65 (2H), 2,40 (4H), 2,30 (4H), 2,15 (3H), 1,60 (2H), 1,15 (5H).
f
ВЭЖХ (Chiralcel OD, 0,46 см × 25 см; н-гептан/этанол, 7:3) R=12,2 мин
20
D
3
[α] =+9 (c=0,1, CHCl)
ПРИМЕР 8B
[5-Хлор-1-(2,4-диметоксифенилсульфонил)-3-(2-этоксипиридин-3-ил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-индол-3-ил]амид (+)-4-(4-этилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты
+
ИЭР-МС [M+H]=727 (эталон изотопа Cl)
1
6
ЯМР H ([d]-ДМСО, 500 МГц) δ [м.д.]=8,10 (1H), 7,90 (1H), 7,70 (1H), 7,60 (1H), 7,55 (1H), 7,35 (2H), 6,95 (1H), 6,65 (2H), 4,20 (2H), 3,85 (3H), 3,80 (2H), 3,45 (3H), 2,65 (2H), 2,25-2,50 (11H), 1,65 (2H), 1,15 (5H), 0,95 (3H).
f
ВЭЖХ (Chiralcel OD, 0,46 см × 25 см; н-гептан/этанол, 7:3) R=11,5 мин
20
3
[α]D=+20 (c=0,1, CHCl)
IV. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
1. Испытание на связывание с V1b-рецептором вазопрессина
Соединения
-2
-4
-9
Испытуемые соединения растворяли в ДМСО с концентрацией 10 M и затем разбавляли ДМСО до концентраций от 5×10 до 5×10 M. Данный ряд предварительных разведений в ДМСО разбавляли тестовым буферным раствором в соотношении 1:10. В испытуемой смеси концентрацию соединения еще раз снижали в соотношении 1:5 (2% ДМСО в конечной смеси).
Подготовка мембранных препаратов
Отбирали клетки CHO-K1, стабильно экспрессирующие человеческий V1b-рецептор вазопрессина (клон 3H2), и гомогенизировали в 50 мМ растворе Tris-HCl с добавкой ингибиторов протеазы (Roche complete Mini # 1836170) с помощью гомогенизатора Polytron в среднем положении 2 раза по 10 секунд и затем центрифугировали в течение 1 ч при 40000 g. Частицы мембраны еще раз согласно ранее описанному гомогенизировали и центрифугировали и затем вносили в 50 мМ раствор Tris-HCl, pH=7,4, гомогенизировали и хранили в аликвотах в замороженном виде при -190°C в жидком азоте.
Испытание на связывание
Испытание на связывание осуществляли аналогично способу Tahara и соавт. (Tahara A. et al., Brit. J. Pharmacol. 125, 1463-1470 (1998)).
2
Культуральный буферный раствор включал в себя 50 мМ Tris, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, pH=7,4.
3
2
В испытуемом растворе (250 мкл) инкубировали мембраны (50 мкг/мл белка в культуральном буферном растворе) клеток CHO-K1, стабильно экспрессирующих человеческие V1b-рецепторы (линия клеток hV1b_3H2_CHO), с 1,5 нМ раствором H-AVP (8-аргинин-вазопрессин, PerkinElmer # 18479) в культуральном буферном растворе (50 мМ Tris, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, pH=7,4) (общее связывание) или дополнительно с возрастающими концентрациями испытуемого соединения (опыт на замещение). Неспецифическое связывание определяли с 1 M раствором AVP (Bachern, # H1780). Все определения осуществляли в трех параллельных пробах. После инкубации (в течение 60 минут при комнатной температуре) свободный радиоактивный лиганд отделяли фильтрованием под вакуумом (с помощью устройства Skatron cell harvester 7000) через стекловолокнистый фильтр Wathman GF/B и фильтр помещали в сцинтилляционную камеру. Измерение осуществляли жидкостным сцинтилляционным счетчиком Tricarb модели 2000 или 2200CA (Packard). Пересчет измеренных значений из cpm в dpm (из импульс/мин в распад/мин) осуществляли по стандартному ряду гашения.
Оценка
3
Параметр связывания рассчитывали по нелинейной регрессии с помощью программы SAS. Алгоритмы программы работают аналогично программе обработки результатов LIGAND (Munson P.J. und Rodbard D., Analytical Biochem., 107, 220-239 (1980)). Значение Kd для H-AVP к рекомбинантным человеческим V1b-рецепторам составило 0,4 нМ и было принято для определения значения Ki.
2. Испытание на связывание с V1a-рецептором вазопрессина
Соединения
-2
2
Испытуемые соединения растворяли в ДМСО с концентрацией 10 M. Последующие разбавления данных растворов в ДМСО осуществляли культуральным буферным раствором (50 мМ Tris, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, pH=7,4).
Подготовка мембранных препаратов
Отбирали клетки CHO-K1, стабильно экспрессирующие человеческий V1a-рецептор вазопрессина (клон 5), и гомогенизировали в 50 мМ растворе Tris-HCl с добавкой ингибиторов протеазы (Roche complete Mini # 1836170) с помощью гомогенизатора Polytron в среднем положении 2 раза по 10 секунд и затем центрифугировали в течение 1 ч при 40 000 g. Частицы мембраны еще раз согласно ранее описанному гомогенизировали и центрифугировали и затем вносили в 50 мМ раствор Tris-HCl, pH=7,4, гомогенизировали и хранили в аликвотах в замороженном виде при -190°C в жидком азоте.
Испытание на связывание
Испытание на связывание осуществляли аналогично способу Tahara и соавт. (Tahara A. et al., Brit. J. Pharmacol. 125, 1463-1470 (1998)).
2
Культуральный буферный раствор включал в себя 50 мМ Tris, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, pH=7,4.
125
2
В испытуемом растворе (250 мкл) инкубировали мембраны (20 мкг/мл белка в культуральном буферном растворе) клеток CHO-K1, стабильно экспрессирующих человеческие V1a-рецепторы (линия клеток hV1a_5_CHO), с 0,04 нМ раствором I-AVP (8-аргинин-вазопрессин, NEX 128) в культуральном буферном растворе (50 мМ Tris, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, pH=7,4) (общее связывание) или дополнительно с возрастающими концентрациями испытуемого соединения (опыт на замещение). Неспецифическое связывание определяли с 1 мкМ раствором AVP (Bachern, # H1780). Определения осуществляли в трех параллельных пробах.
После инкубации (в течение 60 минут при комнатной температуре) свободный радиоактивный лиганд отделяли фильтрованием под вакуумом (с помощью устройства Skatron cell harvester 7000) через стекловолокнистый фильтр Wathman GF/B и фильтр помещали в сцинтилляционную камеру.
Измерение осуществляли жидкостным сцинтилляционным счетчиком Tricarb модели 2000 или 2200CA (Packard). Пересчет измеренных значений из cpm в dpm (из импульс/мин в распад/мин) осуществляли по стандартному ряду гашения.
Оценка
125
Параметр связывания рассчитывали по нелинейной регрессии с помощью программы SAS. Алгоритмы программы работают аналогично программе обработки результатов LIGAND (Munson P.J. und Rodbard D., Analytical Biochem., 107, 220-239 (1980)). Было определено значение Kd для I-AVP к рекомбинантным hV1a-рецепторам в испытаниях на насыщение. Значение Kd, равное 1,33 нМ, было принято для определения значения Ki.
3. Испытание на связывание с V2-рецептором вазопрессина
Соединения
-2
2
Испытуемые соединения растворяли в ДМСО с концентрацией 10 M. Последующие разбавления данных растворов в ДМСО осуществляли культуральным буферным раствором (50 мМ Tris, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, pH=7,4).
Подготовка мембранных препаратов
Отбирали клетки CHO-K1, стабильно экспрессирующие человеческий V2-рецептор вазопрессина (клон 23), и гомогенизировали в 50 мМ растворе Tris-HCl с добавкой ингибиторов протеазы (Roche complete Mini # 1836170) с помощью гомогенизатора Polytron в среднем положении 2 раза по 10 секунд и затем центрифугировали в течение 1 ч при 40000 g. Частицы мембраны еще раз согласно ранее описанному гомогенизировали и центрифугировали и затем вносили в 50 мМ раствор Tris-HCl, pH=7,4, гомогенизировали и хранили в аликвотах в замороженном виде при -190°C в жидком азоте.
Испытание на связывание
Испытание на связывание осуществляли аналогично способу Tahara и соавт. (Tahara A. et al., Brit. J. Pharmacol. 125, 1463-1470 (1998)).
2
Культуральный буферный раствор включал в себя 50 мМ Tris, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, pH=7,4.
3
2
В испытуемом растворе (250 мкл) инкубировали мембраны (50 мкг/мл белка в культуральном буферном растворе) клеток CHO-K1, стабильно экспрессирующих человеческие V2-рецепторы (линия клеток hV2_23_CHO), с 1 нМ раствором H-AVP (8-аргинин-вазопрессин, PerkinElmer # 18479) в культуральном буферном растворе (50 мМ Tris, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, pH=7,4) (общее связывание) или дополнительно с возрастающими концентрациями испытуемого соединения (опыт на замещение). Неспецифическое связывание определяли с 1 мкМ раствором AVP (Bachern, # H1780). Определения осуществляли в трех параллельных пробах.
После инкубации (в течение 60 минут при комнатной температуре) свободный радиоактивный лиганд отделяли фильтрованием под вакуумом (с помощью устройства Skatron cell harvester 7000) через стекловолокнистый фильтр Wathman GF/B и фильтр помещали в сцинтилляционную камеру.
Измерение осуществляли жидкостным сцинтилляционным счетчиком Tricarb модели 2000 или 2200CA (Packard). Пересчет измеренных значений из cpm в dpm (из импульс/мин в распад/мин) осуществляли по стандартному ряду гашения.
Оценка
3
Параметр связывания рассчитывали по нелинейной регрессии с помощью программы SAS. Алгоритмы программы работают аналогично программе обработки результатов LIGAND (Munson P.J. und Rodbard D., Analytical Biochem., 107, 220-239 (1980)). Значение Kd для H-AVP к рекомбинантным hV2-рецепторам составило 2,4 нМ и было принято для определения значения Ki.
4. Испытание на связывание с рецептором окситоцина
Соединения
-2
2
Соединения растворяли в ДМСО с концентрацией с 10 M и разбавляли культуральным буферным раствором (50 мМ Tris, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, pH=7,4).
Подготовка клеточных препаратов
7
Конфлюэнтные клетки HEK-293, транзиторно экспрессирующие рекомбинантные человеческие рецепторы окситоцина, центрифугировали при 750 g в течение 5 минут при комнатной температуре. Остаток вносили в охлажденный льдом лизирующий буферный раствор (50 мМ Tris-HCl, 10% глицерина, pH=7,4 и ингибитор протеазы Roche Complete) и подвергали в течение 20 минут при 4°C действию осмотического шока. После этого клетки, подвергнутые лизису, центрифугировали при 750 g в течение 20 минут при 4°C, остаток вносили в культуральный буферный раствор и готовили аликвоты с содержанием 10 клетка/мл. Аликвоты до применения хранили в замороженном виде при -80°C.
Испытание на связывание
4
3
-6
В день осуществления опыта клетки размораживали, разбавляли культуральным буферным раствором и гомогенизировали с помощью гомогенизатора Multipette Combitip (Eppendorf, Гамбург). Реакционную смесь объемом 0,250 мл смешивали с рекомбинантными клетками в количестве от 2 до 5×10, 3-4 нМ раствором H-окситоцина (PerkinElmer, NET 858) с добавкой испытуемого соединения (кривая ингибирования) или только культурального буферного раствора (общее связывание). Неспецифическое связывание определяли с 10 M раствором окситоцина (Bachern AG, # H1780). Определения осуществляли в трех параллельных пробах. Связанный и свободный радиоактивный лиганд отделяли фильтрованием под вакуумом через стекловолокнистый фильтр Wathman GF/B с помощью устройства Skatron Cell Harvester 7000. Связанную радиоактивность измеряли жидкостным сцинтилляционным счетчиком с помощью счетчика бета-частиц Tricarb модели 2000 или 2200CA (Packard).
Оценка
3
Параметр связывания рассчитывали нелинейным регрессионным анализом (программа SAS) аналогично программе LIGAND Munson и Rodbard (Analytical Biochem., 1980; 107: 220-239). Значение Kd для H-окситоцина к рекомбинантным hOT-рецепторам составило 7,6 нМ и было принято для определения значения Ki.
5. Определение микросомального времени полувыведения
Метаболическую стабильность соединений по настоящему изобретению определяли в следующем далее испытании.
Испытуемые соединения инкубируют при концентрации 0,5 мкМ.
1/2
1/2
В микропланшетах предварительно инкубируют 0,5 мкМ испытуемого соединения вместе с микросомами печени различных видов (крысы, человека или иного вида) (0,25 мг/мл микросомального белка) в 0,05 M фосфатнокалиевом буферном растворе, pH=7,4, при 37°C в течение 5 мин. Инициирование реакции осуществляют прибавлением NADPH (1 мг/мл). Через 0, 5, 10, 15, 20 и 30 мин отбирают 50 мкл аликвоты, сразу останавливают реакцию прибавлением равного объема ацетонитрила и охлаждают. Пробы замораживают до проведения анализа. Способом МС/МС определяют остаточную концентрацию неразложившегося испытуемого соединения. Время полувыведения (T) находят по изменению роста кривой "сигнал испытуемого соединения/время", при этом время полувыведения испытуемого соединения может быть рассчитано исходя из кинетики реакции первого порядка по уменьшению концентрации соединения в единицу времени. Микросомальный клиренс (mCl) рассчитывают по уравнению mCl=ln 2/T/(содержание микросомального белка, мг/мл)×1000 [мл/мин/мг] (модифицировано на основе литературных источников: Di, The Society for Biomoleculaur Screening, 2003, 453-462; Obach, DMD, 1999, vol. 27. N 11, 1350-1359).
in
vitro
6. Способы определения  ингибирования цитохрома P450 (CYP)
Люминесцентные субстраты для 2C9 и 3A4
0,4 мг/мл микросом печени человека предварительно инкубируют в течение 10 мин с испытуемыми соединениями (0-20 мкМ) и CYP-специфическими субстратами в 0,05 M фосфатнокалиевом буферном растворе, pH=7,4, при 37°C. CYP-специфическим субстратом для CYP 2C9 является люциферин H, а для CYP 3A4 - люциферин BE. Реакцию инициируют прибавлением NADPH. После инкубации в течение 30 мин при комнатной температуре прибавляют индикатор люциферин и измеряют возникающий люминесцентный сигнал (модифицировано на основе литературного источника: Promega, Technical Bulletin P450-GLO™ Assays).
Времязависимое ингибирование CYP 3A4 мидазоламом
Испытание состоит из 2 частей. Сначала предварительно инкубируют испытуемое соединение с микросомами печени (с NADPH=предварительная инкубация), после этого прибавляют субстрат, во 2-й части субстрат и испытуемое соединение прибавляют одновременно (= совместная инкубация).
Предварительная инкубация
Предварительно инкубируют 0,05 мг/мл микросомального белка (микросомы печени человека) с 0-10 мкМ (или 50 мкМ) испытуемого соединения в 50 мМ фосфатнокалиевом буферном растворе в течение 5 мин. Реакцию инициируют прибавлением NADPH. Через 30 мин прибавляют 4 мкМ мидазолама (конечная концентрация) и инкубируют еще в течение 10 мин. Через 10 мин отбирают 75 мкл реакционного раствора и останавливают реакцию прибавлением 150 мкл раствора ацетонитрила.
Совместная инкубация
Предварительно инкубируют 0,05 мг/мл микросомального белка (микросомы печени человека) с 4 мкМ мидазолама и 0-10 мкМ (или 50 мкМ) испытуемого соединения в 50 мМ фосфатнокалиевом буферном растворе в течение 5 мин. Реакцию инициируют прибавлением NADPH. Через 10 мин отбирают 75 мкл реакционного раствора и останавливают реакцию прибавлением 150 мкл раствора ацетонитрила. Пробы замораживают до проведения анализа способом МС/МС (модифицировано на основе литературных источников: Obdach, Journal of Pharmacology & Experimental Therapeutics, Vol. 316, 1, 336-348, 2006; Walsky, Drug Metabolism and Disposition, Vol. 32, 6, 647-660, 2004).
7. Способ определения растворимости в воде (мг/мл)
ASTM International: E 1148
0
, Standard test methods for measurement of aqueous solubility, Book of Standards Volume 11.05.
Растворимость соединений по настоящему изобретению в воде может быть определена, например, так называемым способом "shake flask" (встряхивание колбы) (согласно -2). При этом избыток соединения в виде твердого вещества вносят в буферный раствор с определенным значением pH (например, в фосфатный буферный раствор с pH=7,4) и образовавшуюся смесь встряхивают или перемешивают до установления равновесия (как правило, в течение 24 или 48 часов, иногда даже до 7 суток). Затем нерастворившееся твердое вещество отделяют фильтрованием или центрифугированием и определяют концентрацию растворенного соединения УФ-спектроскопией или высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ), используя соответствующую градуировочную кривую.
8. Результаты
i
i
i
Результаты испытаний на связывание с рецепторами выражены в виде констант связывания рецептора [K(V1b)] или селективности [K(V1a)/K(V1b)]. Результаты определения метаболической стабильности выражены в виде микросомального клиренса (mCl).
В данных испытаниях соединения по настоящему изобретению показывают очень высокое сродство к V1b-рецептору (не более 100 нМ или не более 10 нМ и часто <1 нМ). Кроме того, соединения показывают также высокую селективность по сравнению с V1a-рецепторами и хорошую метаболическую стабильность, определенную как микросомальный клиренс.
Результаты приведены в таблице 2. Номера соединений соответствуют номерам примеров синтезов.
Таблица 2
Пример
K<sub>i</sub>(h-V1b)<sup>*</sup> [нМ]
K<sub>i</sub>(h-V1a)/K<sub>i</sub>(h-V1b)<sup>*</sup>
Микросомальный клиренс человека [мкл·мин<sup>-1</sup>·мг<sup>-1</sup>]
1
+++
+++
+
3
++
++
+++
13
+++
++
+
14
+++
+++
++
15
+++
++
+
16
+++
+
+
17
+++
+
+
24
++
++
++
28
+++
++
+
29
++
+
+++
32
+++
+
++
1B
+++
+++
+++
4B
+++
+++
++
5B
+++
+++
+++
8B
+++
+++
+
<sup>*</sup>h=человеческий
Пояснения
K<sub>i</sub>(V1b)
K<sub>i</sub>(h-V1a)/K<sub>i</sub>(h-V1b)
Микросомальный клиренс человека
+
>10-100 нМ
10-<25
>75-100 мкл·мин<sup>-1</sup>·мг<sup>-1</sup>
++
1-10 нМ
25-75
50-75 мкл·мин<sup>-1</sup>·мг<sup>-1</sup>
+++
<1 нМ
>75
<50 мкл·мин<sup>-1</sup>·мг<sup>-1</sup>