Клинико-лабораторные маркеры прогрессирования хронических гломерулонефритов у детей

УДК 616.61-002

© Л.Р. Кальметьева, Р.М. Хайруллина, Т.А.Сираева, 2011

Л.Р. Кальметьева, Р.М. Хайруллина, Т.А. Сираева КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫЕ МАРКЕРЫ ПРОГРЕССИРОВАНИЯ ХРОНИЧЕСКИХ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТОВ У ДЕТЕЙ

ГУЗ Республиканская детская клиническая больница, г. Уфа

Работа посвящена изучению особенностей мочевой экскреции МСР-1 у детей с различными клиническими вариантами хронических гломерулонефритов у детей, определению характера взаимодействия и степени взаимосвязей клиниколабораторных показателей при прогрессировании заболеваний почек. Обследованы 25 здоровых детей и 41 ребенок с нефротической и гематурической формами хронического гломерулонефрита. Наряду с традиционными методами проводилось иммунологическое обследование, включавшее определение концентрации сывороточных антител (A,M,G,); уровня циркулирующих иммунных комплексов; комплемента; иммунофенотипирование лимфоцитов. По данным ДНК-цитометрии периферической крови оценивались плоидность и кинетика клеточного цикла. Уровень МСР-1 в моче определялся методом иммуноферментного анализа с использованием моно- и поликлональных антител (ЗАО «Вектор-Бест» г. Новосибирск). Установлено, что в остром периоде при всех нозологических формах патологии почек отмечается повышение уровня МСР-1 в моче. В результате корреляционного анализа выявлены зависимости, раскрывающие этиопатогенетические механизмы прогрессирования заболевания. Выделены критерии, позволяющие мониторировать активность процесса, определять прогноз, тактику лечения и оценивать эффективность проводимой терапии.

Ключевые слова: хронические гломерулонефриты, моноцитарный хемоаттрактивный протеин-1, маркеры активности, дети.

L.R. Kalmetyeva, Я.М. Khairullina, Т.А. Sirayeva CLINICAL-LABORATORY MARKERS OF CHRONIC GLOMERULONEPHRITIS

PROGRESSION IN CHILDREN

The present investigation is dedicated to the study of monocyte chemoattractant protein-1 (МСР-1) urinous excretion peculiarities in pediatric population with various clinical types of chronic glomerulonphritis, as well as determining the character of interaction and the degree of interrelation between the clinical-laboratory measures in cases of renal disease progression. We examined 25 normal children and 41 pediatric patients with nephrotic or hematuric forms of chronic glomerulonephritis. Alongside with the conventional methods, an immunoassay examination was undertaken, which included serum concentrations of A.M.G. antibodies assessment; circulating immune complexes level evaluation; complement amount measurement; leukocyte immunophenotyping count. Peripheral blood DNA-cytometry was employed for ploidy and cell cycle kinetics assessment. The level of urinous monocyte che-moattractant protein-1 (МСР-1) was calculated by means of enzyme multiplied immunoassay with the use of mono- and polyclonal antibodies (CJSC «Vektor-Brest», Novosibirsk). It has been established that the acute phase of nosologic forms of kidney disease presents an increase in the level of ruinous monocyte chemoattractant protein-1 (МСР-1). The correlation analysis enabled the detection of correlations revealing the etiopathogenic mechanisms of disease progression. Criteria has been established to allow the process activity screening, prognosis estimation, treatment strategy estimation and therapy productivity assessment.

Key words: chronic glomerulonephritis, monocyte chemoattractant protein-1, activity markers, pediatric population.

Одной из основных проблем теоретиче- мулируется продукция моноцитарного хемо-

ской и практической нефрологии является аттрактантного протеина 1 (monocyte

прогрессирование хронических заболеваний chemoattractant protein-1, MCP-1), который

почек, которое сопровождается нарастанием обеспечивает приток лейкоцитов и моноцитов

почечной недостаточности, требующей замес- в область повреждения и формирует воспали-

тительной почечной терапии на терминальной тельный инфильтрат. Основными источника-

стадии [2]. ми MCP-1 в моче считаются клетки тубуляр-

Патоморфологической основой про- ного эпителия. Этот хемокин экспрессируется

грессирования почечной недостаточности яв- также мононуклеарами и эндотелиальными

ляется тубулоинтерстициальное поражение. клетками сосудов [1].

При этом выраженность и длительность изме- MCP-1 является не только хемоаттрак-

нений определяет неблагоприятный прогноз у тантом, обеспечивающим миграцию монопациентов с различными формами гломеру- нуклеарных клеток в очаг воспаления, но и

лонефрита [2, 4]. медиатором воспаления [3,6]. Установлено

Согласно современным представлениям вовлечение MCP-1 в процессы интерстици-

патогенез развития тубулоинтестициальных ального фиброза и гломерулосклероза. Этот

изменений в почках складывается из целого протеин вызывает повышение выработки ту-

ряда механизмов, таких как протеинурия, ту- булярными эпителиальными клетками основ-

булярная ишемия, гипоксия, влияние белко- ного профиброгенного цитокина - трансфор-

вых и ферментных факторов, цитокинов, рос- мирующего фактора роста бета-1 [2].

товых факторов и др. [1, 2]. Установлено, что В последние годы появилась возмож-

любое повреждение клеток паренхимы почек ность определения отдельных медиаторов

приводит к секреции ими медиаторов воспа- воспаления в моче методом ELISA, в том числения. Под воздействием провоспалительных ле и исследования мочевой экскреции MCP-1

цитокинов, таких как ИЛ-ф и ФНО - а, сти- у больных с хроническими гломерулонефри-

тами (ХГН). В настоящее время имеются единичные клинические работы, в которых определялись корреляции МСР-1 с маркерами активности процесса. В частности, при исследовании мочи больных гломерулонефритами группой японских авторов (Т. Wada й а1.) было выявлено повышение уровня МСР-1, коррелирующее со степенью активности тубуло-интерстициального повреждения и фиброза [2, 8]. Однако недостаточно изученной остается система взаимосвязей между различными клинико-лабораторными показателями при прогрессировании заболеваний почек у детей.

Целью настоящей работы явилось исследование уровня МСР-1 в моче для оценки активности и стадии почечного процесса, установление взаимосвязей между различными маркерами активности воспалительного процесса и показателями функционального состояния почек у детей с ХГН.

Материал и методы

Обследовано 25 здоровых и 41 больной ребенок с различными формами хронического гломерулонефрита (ХГН) в возрасте от 6 до 17 лет.

Критериями отбора в контрольную группу, которую составили здоровые дети, явились отсутствие жалоб, указывающих на наличие острых и хронических заболеваний; имеющих нормальные общегематологические и мочевые показатели.

Для определения роли тубулоинтерсти-циальных поражений в прогрессировании гломерулонефритов, значимости выявления критериев активности процесса нами обследованы дети с различными формами хронического гломерулонефрита. Группы сравнения формировали на основании определения клинических вариантов ХГН. Нозологическую структуру составили 22 ребенка с нефротическим синдромом (НС) и 19 пациентов с гема-турической формой (ГФ) ХГН. При этом в группе с НС отдельно рассматривались пациенты со стероидчувствительным и стероидза-висимым вариантами.

Так, в I группу сравнения вошли 15 детей со стероидзависимым НС. Длительность заболевания у этих детей составила от года до 3 лет. Все пациенты этой группы на момент обследования получали гормональную, 3 пациента - цитостатическую терапию. Три пациента поступили с обострением основного заболевания.

Вторую группу составили 7 пациентов, у которых был установлен стероидрезистент-ный НС. При этом течение заболевания отличалось непрерывно-рецидивирующим харак-

тером и отсутствием эффекта от проводимой гормональной терапии. Длительность заболевания составила от 2 до 6 лет. Все пациенты на момент обследования получали гормональные и цитостатические препараты (циклоспорин А, хлорбутин).

В III группу вошли 19 пациентов с ГФ ХГН. Длительность заболевания у детей этой группы в среднем колебалась от 2 до 6 лет. Семь пациентов на момент обследования получали глюкокортикоиды, а 2 ребенка - двухкомпонентную иммуносупрессивную терапию (азатиоприн и гормоны).

Обследование детей с ренальными заболеваниями включало тщательный сбор соматического анамнеза; проведение общеклинических лабораторных и инструментальных исследований. Особенности иммунологической реактивности оценивались в процессе иммунологического мониторинга (обследование от 2 до 5 раз) на основании характеристики гуморальных факторов (определения концентрации сывороточных иммуноглобулинов (Ig) классов М, G, А; уровня циркулирующих иммунных комплексов; общего уровня комплемента); показателей Т-клеточного звена (иммунофенотипирование лимфоцитов методом проточной цитометрии). Для определения плоидности и кинетики клеточного цикла проводилась ДНК-цитометрия периферической крови, при этом учитывался процент клеток, находящихся в S-фазе - фазе пролиферации. Бактериологическое исследование включало исследование посевов материала из зева и мочи с определение чувствительности к антибиотикам. Полученные данные были использованы для анализа корреляционных взаимосвязей, в том числе с МСР-1.

Определение мочевой экскреции MСР-1 проводилось у практически здоровых детей и у пациентов с заболеваниями почек методом твердофазного «сендвич»- варианта иммуно-ферментного анализа с использованием моно-и поликлональных антител к МСР-1 человека (МСР-1-ИФА-БЕСТ) производства ЗАО «Век-тор-Бест» (г.Новосибирск). Концентрацию

МСР-1 измеряли в утренней средней порции мочи, взятой с 9 до 11 ч. Диапозон измеряемых концентраций составил 0-2000пг/мл, чувствительность анализа - 15 пг/мл. Содержание МСР-1 (пг/мл) в моче оценено по соотношению уровней указанного цитокина.

Статистический анализ проводился с использованием пакета компьютерных программ «Statistica-7», «Excel 8,0». Исследования проводились выборочным методом. Для установления взаимосвязей между изучаемы-

ми параметрами полученные данные подвергались корреляционно-регрессионному анализу. При значительных отклонениях закона распределения от нормального использовались непараметрические методы анализа взаимосвязи показателей и достоверности различий (ранговый коэффициент корреляции Спирмена и Mann Whitney Test). В ходе исследования нами было установлено ненормальное внутригрупповое распределение признака у больных с заболеваниями почек, поэтому для описания групп мы использовали медиану и перцентили (25 - 75).

Результаты и обсуждение Для определения контрольных показателей МСР-1 в моче обследовано 25 практически здоровых детей. В контрольной группе установлено нормальное распределение признака. Уровень мочевой экскреции изучаемого цитокина у здоровых детей составил 184,5 ± 34,7 пг/мл. Для проведения корректного сравнительного анализа данный показатель был оценен также с помощью непараметрических методов статистики. При этом были определены медиана и, которые составили 178 пг/мл и 150 - 210 пг/мл соответственно (см. рисунок).

I 800

= 700

1 600

и

2 500

! 400

н 300

I 200

“ 100

i о

I контроль СЗНС ХГН ГФ СРНС

Рис. Уровень МСР-1 в моче у здоровых детей и детей с хроническими гломерулонефритами (пг/мл) : *различия достоверны по сравнению с контрольной группой, р<0,005

В остром периоде у всех обследованных детей с заболеваниями почек выявлено достоверное повышение экскреции МСР-1 с мочой (р<0,005).

У пациентов со стероидзависимым НС колебания изучаемого показателя составили от 15 до 385 пг/мл, медиана 95 пг/мл, 25-75-й перцентили - 56-158 пг/мл. В целом же при сравнении со здоровыми детьми у пациентов этой группы отмечается достоверно более низкая экскреция МСР-1 (см. рисунок). Однако при более детальном анализе были выявлены следующие особенности. У 60% обследованных со стероидзависимым НС установлена очень низкая концентрация МСР-1 в моче (от 15 до 95 пг/мл), что является характерной особенностью данной группы и обусловливает снижение усредненных показателей.

Наиболее высокие значения исследуемого показателя (более 300 пг/мл) обнаружены у 3 детей, поступивших с обострением ХГН, характеризовавшимся массивной протеинурией, гипопротеинемией, гипоальбуминемией, ги-перхолестеринемией.

В результате корреляционного анализа у детей данной группы выявлены прямые взаимосвязи МСР-1 с СОЭ, протеинурией и микрогематурией, являющихся маркерами активности процесса (табл.1). Полученные данные подтверждают результаты других исследователей о повреждающем действии выраженной протеинурии на тубулярные клетки, приводящей к повышению продукции хемо-кина. Выявленная корреляция является, по нашему мнению, свидетельством того, что именно протеинурия - основной этиопатоге-нетический механизм формирования тубуло-интерстициального компонента при стероид-зависимом НС.

Таблица 1

Корреляционная матрица у пациентов со стероидзависимым

нефротическим синдромом

Коэффициент ко рреляции

Положительный Отрицательный

МСР-1 - протеинурия

1§Д - п/я нейтрофилы

Микрогематурия - протеинурия

Эозинофилы - билирубин общий

Общий белок - альбумины

Кроме того, у детей со стероидзависи-мым НС установлены логически обусловленные связи, свойственные основному заболеванию (см. табл. 1). Так, гипопротеинемия, характерная для обострения НС, была вызвана снижением прежде всего альбуминовой фракции (общий белок - альбумины) и иммуноглобулинов класса О (общий белок - ^О). Ги-перхолестеринемия коррелировала с гипоаль-буминемией. При высокой активности процесса появлялась зависимость между повышением СОЭ и степенью протеинурии (СОЭ -концентрация белка в моче), нарастанием ги-попротеинемии и появлением маркера активного воспалительного процесса (общий белок - 1§М).

Наряду с этим у пациентов этой группы установлено угнетения элиминационных за-

щитных механизмов, что свидетельствует об иммуносупрессивном действии длительной гормональной терапии (см. табл.1).

При стероидрезистентном НС колебания уровня МСР-1 в моче составили от 327 до 1876 пг/мл (см. рис.1), причем выявлено существенное по сравнению с контрольной группой повышение медианы МСР-1 - 671 (530-1320) пг/мл, р< 0,005.

Так же, как и у больных со стероидза-висимым НС, у детей данной группы установлены корреляции, характерные для НС (табл.2). Обращает на себя внимание наличие большого количества связей между содержанием палочкоядерных нейтрофилов и биохимическими показателями, характерными для обострения НС (гипопротеинемия, гиперхоле-стеринемия, гиперазотемия).

Таблица 2

Корреляционная матрица у пациентов со стероидрезистентным нефротическим синдромом

Корреляционный анализ выявил также положительную взаимосвязь МСР-1 с билирубином (0,785). При этом повышение уровня билирубина коррелировало с иммунологическими маркерами гепатобилиарной дисфункции (гипоиммуноглобулинемией М). Установленные взаимосвязи, очевидно, указывают на развитие печеночной недостаточности у пациентов со стероидрезистентным НС в результате длительного приема цитостатиков и глюкокортикоидов.

Для ранней диагностики нарушения функции почек при длительном течении ХГН обязательным является мониторирование функциональной активности. Особого внимания заслуживает появление у больных со сте-роидрезистентным НС системы взаимосвязей, свидетельствующей о снижении функциональной активности почек при нарастании маркеров активности процесса (см. табл. 2),

что в целом было расценено нами как неблагоприятный прогностический признак.

В группе детей с ГФ ХГН при сравнении с контрольной группой также было выявлено значительное повышение концентрации МСР-1 в моче, при этом медиана исследуемого показателя в этой группе составила 626 (209 - 707) пг/мл (рис.1), уровень МСР-1 в моче колебался от 125 до 2048 пг/мл. Считаем необходимым отметить, что при сравнении с другими группами у детей с обострением ГФ ХГН были установлены самые высокие значения МСР-1 в моче.

Особого внимания заслуживают взаимосвязи, выявленные в данной группе (табл.3). Высокую активность воспалительного процесса, по нашему мнению, характеризуют следующие положительные взаимосвязи: МСР-1 - ^ М (0,53), МСР-1 - 8-фаза (0,61), ЦИК - 8-фаза (0,73), протеинурия -СОЭ (0,56), ^ М - холестерин (0,51). При этом повышение мочевой экскреции хемокина сопровождалось активацией первичного иммунного ответа (^ М), элиминационных механизмов защиты (ЦИК), повышением пролиферативной активности клеток (8-фаза). Характерной особенностью у пациентов с ГФ ХГН явилось наличие множества связей лабораторных показателей с высевом микробов в моче (табл.3), что свидетельствует, очевидно, о роли инфекционного фактора в патогенезе заболевания.

Таблица 3

Корреляционная матрица у пациентов с гематурической фор-

Об эффективности проводимой гормональной терапии в виде снижения уровня мочевой экскреции МСР-1 свидетельствует отрицательная связь МСР-1 - гормоны (- 0,47). Кроме того, установлено уменьшение степени

Коэффициент корреляции

Положительный Отрицательный

МСР-1 - билирубин

П/я нейтрофилы - холестерин

СОЭ - протеинурия

Креатинин - СОЭ

Мочевина - цитостатики

Общий белок - с/я нейтро-филы

мой хронического гломерулонефрита

Коэффициент корреляции

Положительный Отрицательный

МСР-1 - ^ М

ЦИК - 8-фаза

Протеинурия - СОЭ

Лейкоциты ОАК - доза гормонов

Посев мочи - СОЭ

Альбумины - СОЭ

протеинурии под влиянием цитостатиков (см. табл. 3).

Заключение

В настоящее время не вызывает сомнений этиопатогенетическая роль тубулоинтер-стициальных изменений в прогрессировании заболеваний почек. При этом ключевым медиатором тубулоинтерстициальных повреждений считается МСР-1 [1, 2]. Одной из задач нашей работы, наряду с определением уровня МСР-1 в моче, было установление взаимосвязей мочевой экскреции МСР-1 с другими лабораторными показателями, характеризующими активность воспалительного процесса и функциональное состояние почек.

В результате исследования было показано, что в остром периоде при всех нозологических формах патологии почек, включенных в исследование, отмечается повышение экскреции МСР-1 с мочой. Статистическим анализом установлена различная степень вовлеченности тубулоинтерстициального компонента в патологический процесс. В частности, самые высокие значения исследуемого хемокина в моче, а следовательно, наиболее выраженные тубулоинтерстициальные повреждения были установлены у пациентов с ГФ ХГН. Полученные данные были подтверждены в ходе корреляционного анализа. В частности, нами установлены взаимосвязи МСР-1 с другими лабораторными маркерами активности воспалительного процесса (^ М, ЦИК), сопровождающимися повышением пролиферативной активности клеток по данным ДНК-цитометрии. Полученные данные, в целом согласуются с результатами других исследователей, которые также показали наличие корреляций между уровнем МСР-1 в моче и выраженностью мезангиальной пролиферации, количеством полулуний и макрофагов в клубочках, степенью интерстициального повреждения [7, 9].

Наряду с этим немаловажным, по нашему мнению, является длительное сохранение стабильно высокого уровня МСР-1 в мо-

че, несмотря на проводимую противовоспалительную и иммуносупрессивную терапию. Подобную картину мы наблюдали, например у больных при стероидрезистентных формах ХГН. Отсутствие положительной динамики указывает на высокий риск быстрого прогрессирования заболевания с развитием терминальной почечной недостаточности и также согласуется с результатами других исследователей [2, 5]. Выявленные в ходе исследований критерии - степень и длительность повышения МСР-1 - мы считаем основополагающими для определения прогноза заболевания и риска неблагоприятных исходов.

Поскольку изменение тубулоинтерсти-циальной ткани является одним из существенных факторов прогрессирования хронического гломерулонефрита, патогенетически обоснованным является проведение противовоспалительной и иммуносупрессивной терапии у больных с высоким уровнем МСР-1. На сегодняшний день доказано антихемокиновое действие многих препаратов, традиционно применяемых в нефрологии, таких как кортикостероидные гормоны, циклоспорин, ингибиторы АПФ, блокаторы рецепторов к ангиотензину, статины, антиоксиданты [1]. В результате проведенного нами корреляционного анализа также была подтверждена эффективность проводимой гормональной и цитоста-тической терапии.

Таким образом, анализ проведенного исследования позволяет сделать заключение о перспективности определения уровня мочевой экскреции МСР-1 как для мониторирова-ния активности процесса, так и для определения прогноза, тактики лечения и оценки эффективности проводимой терапии при различных заболеваниях почек. Неоспоримыми преимуществами метода определения МСР-1 в моче указанного исследования являются неинвазивность, воспроизводимость и доступность материала (мочи), что позволяет рекомендовать его для широкого применения в клинической практике.

Сведения об авторах статьи:

Кальметьева Л.Р. - к.м.н., врач клинический иммунолог иммунологической лаборатории с отделением клинической иммунологии ГУЗ РДКБ, адрес: г. Уфа, ул. Степана Кувыкина 98, тел. (347) 255 73 44,

Хайруллина Р.М. - д.м.н., профессор кафедры лабораторной диагностики ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава», заведующий иммунологической лаборатории с отделением клинической иммунологии ГУЗ РДКБ, адрес: г. Уфа, ул. Степана Кувыкина 98, тел. (347) 255 73 44,

Сираева Т.А. - врач-нефролог нефрологического отделения ГУЗ РДКБ адрес: г. Уфа, ул. Степана Кувыкина 98, тел.

255 73 21.

ЛИТЕРАТУРА

1. Картамышева, Н.Н. Некоторые механизмы формирования тубулоинтерстициального компонента при хронических заболеваниях почек (обзор литературы) / Н.Н.Картамышева, О.В.Чумакова, А.Г. Кучеренко // Медицинский научный и учебно-методический журнал. - 2002,- № 6, - С. 176-187.

2. Чеботарева, Н. В. Молекулярные механизмы интерстициального фиброза при прогрессирующих заболеваниях почек (обзор литературы) / Н.В. Чеботарева, И. Н. Бобкова, Л. В. Козловская // Нефрология и диализ: Т. 8, - 2006, - №1, - С. 26-35.

3. Border W.A. Transforming growth factor-p in tissue fibrosis / W.A. Border, N.A. // Noble N. Eng. J. Med. - 1994. - №. 331 - P. 12861292.

4. Guseppe D. Amiko.Tubulointerstitium as prediktor of progression of Glomerular Diseases / Guseppe D. Amiko // Nefron. - 1999. -Vol. 83. - № 4. - P. 289-295.

5. Urinary monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) is a marker of active renal vasculitis / F.W.K.Tam, J.-S. Sanders, A.George et al // Nephrol. Dial. Transplant. - 2004. - №19. - P. 2761-2768.

6. Viedt C. Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in the kidney: does it more than simply attract monocytes? / C. Viedt, S. Orth // Nephrol. Dial. Transplant. - 2002. - № 17. - P. 2043-2047.

7. MIP-1a and MCP-1 contribute crescents and interstitial lesions in human crescentic glomerulonephritis / T.Wada, K.Furuichi, C.Segawa et al. // Kidney Int. - 1999. - № 56. - P. 995-1003.

8. Monitoring urinary levels of Monocyte chemotactic and activating factor reflects disease activity of lupus nephritis / T.Wada, H.Yokoyama, S.Su et al. // Kidney Int. - 1996. - № 49. - P. 761-767.

9. Urinary levels chemokines (MCAF/MCP-1, IL-8) reflect distinct disease activities and phases of human IgA nephropathy / H.Yokoyama, T.Wada, K.Furuichi et al. // J. Leukocyte Biol. - 1998. - № 63. - P. 493-499.

ТРЕБОВАНИЯ К РУКОПИСЯМ, НАПРАВЛЯЕМЫМ В ЖУРНАЛ «МЕДИЦИНСКИЙ ВЕСТНИК БАШКОРТОСТАНА»

«Медицинский вестник Башкортостана» - регулярное рецензируемое научно-практическое медицинское издание, в котором публикуются оригинальные исследования, описания клинических случаев, научные обзоры, лекции, дискуссии, нормативные документы. Тематика всех указанных разделов отражает медицинскую специфику.

Редакция будет руководствоваться положениями «Единых требований к рукописям, представляемым в биомедицинские журналы» — так называемым Ванкуверским стилем. В связи с этим к печати будут приниматься статьи, оформленные в соответствии только с этими требованиями.

В редакцию должен быть направлен пакет следующих документов:

1.Официальное направление от учреждения;

2.Статья (три экземпляра);

3.Резюме и ключевые слова;

4.Сведения об авторах;

5.Иллюстрации (при их наличии в статье);

6.CD-R(W) с информацией, указанной в пунктах 2-5.

Требования к оформлению документов

1. Статья должна сопровождаться направлением на имя главного редактора журнала на бланке учреждения, в котором выполнена работа.

2. Оформление статьи.

• Один экземпляр статьи на первой странице в верхнем левом углу визирует руководитель подразделения («в печать»), на последней странице основного текста должны стоять подписи всех авторов. Подписи авторов под статьей означают согласие на публикацию на условиях редакции, гарантию авторами прав на оригинальность информации, соблюдение общепринятых правовых норм в исследовательском процессе и согласие на передачу всех прав на издание и переводы статьи редакции журнала «Медицинский Вестник Башкортостана».

• Объем оригинальной статьи не должен превышать 8 страниц машинописи. Статья, набранная в текстовом редакторе Word, шрифт Times New Roman, 14, междустрочный интервал 1,5 пт (в таблицах междустрочный интервал 1 пт), форматирование по ширине, без переносов и нумерации страниц, должна быть напечатана на одной стороне листа бумаги размером А4, левое поле 30 мм, остальные - 20 мм.

• Рукопись оригинальной статьи должна включать: 1) УДК; 2) инициалы и фамилию автора(ов); 3) название статьи (заглавными буквами); 4) наименование учреждения, где выполнена работа, город; 5) резюме (рус/англ.); 6) ключевые слова (рус/англ.); 7) введение; 8) материал и методы; 9) результаты и обсуждение (возможно разделение на «Результаты» и «Обсуждение»); 10) заключение (выводы); 11) список литературы. Пункты 2-5 помещаются через пробел между ними.

• Другие типы статей, такие как описание клинических наблюдений, обзоры и лекции, могут оформляться иначе.

• Статья должна быть тщательно отредактирована и выверена авторами. Исправления и пометки от руки не допускаются. Должна использоваться международная система единиц СИ.

• Сокращения слов не допускаются, кроме общепринятых. Аббревиатуры включаются в текст лишь после их первого упоминания с полной расшифровкой: например - ишемическая болезнь сердца (ИБС). В аббревиатурах использовать заглавные буквы.