Гистологическое исследование тканевых компонентов cтенки влагалища человека

Морфология. Патология

УДК 616-018

© 2014 О.В. Шурыгина, Н.В. Ямщиков, О.В. Кулакова, К.Ф. Гарифуллина,

А.В. Бормотов, Н.А. Ренц

ГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ТКАНЕВЫХ КОМПОНЕНТОВ СТЕНКИ ВЛАГАЛИЩА ЧЕЛОВЕКА

Результаты проведенного исследования с применением световой микроскопии, метода иммуногистохимии с применением моноклональных антител к различным специфическим маркерам, метода щелочной диссоциации тканей с получением изолированных клеток и морфометрического анализа существенно дополняют сведения об особенностях гистофизиологической структуры тканей стенки влагалища человека. Определен иммуно-гистохимический профиль различных типов коллагена соединительной ткани влагалища, доказано наличие двух типов мышечных тканей в стенке влагалища, а также подтверждена положительная экспрессия к эстроге-новым рецепторам не только эпителиальных клеток, а также лейомиоцитов и стромальных.

Ключевые слова: мышечные ткани, влагалище, эстрогеновые рецепторы, человек

Введение. Фундаментальные исследования определяют прогресс всей медикобиологической науки. К настоящему времени, несмотря на наличие достаточного количества клинических работ, посвященных, в основном, заболеваниям органов нижнего отдела полового тракта, существует дефицит знаний фундаментального характера по организации тканевых компонентов влагалища человека [1, 2, 3].

Цель исследования - гистологический анализ тканей, образующих стенку влагалища человека, с применением современных методов морфологического исследования.

Материалы и методы. Материал для исследования собран в морге 5-ой Муниципальной больницы г. Тольятти. Исследовали морфологию влагалища девочек и женщин, умерших вследствие заболеваний, не связанных с патологией органов малого таза. В работе проведено комплексное гистологическое исследование с применением методов световой микроскопии; иммуногистохимии с применением моноклональных антител фирмы (DACO) к эст-рогеновым рецепторам (ER), коллагену III, VI, VI,VIII типов, ki-67; метода щелочной диссоциации тканей с получением изолированных клеток. Для морфометрического исследования использовали мазки изолированных гладких миоцитов. Измерение линейных размеров лейо-миоцитов и их ядер производили в двух взаимно перпендикулярных направлениях с помощью программы обработки и анализа изображений Image Tool 3.0. В соответствии с полученными цифровыми данными вычисляли объемы гладких миоцитов и их ядер (Хесин Я.Е.) [14]. Расчеты производили, используя формулу эллипсоида: V = 1/6 pa2b, где (а - малый диаметр, b - большой диаметр измеряемого объекта). По вычисленным объемам рассчитывали показатели ядерно-цитоплазменного отношения (ЯЦО) по формуле

ЯЦО Vядра / (Vклетки-Vядра).

Статистическое исследование данных проводили с использованием статистического пакета SPSS одноименной фирмы.

Результаты исследования и их обсуждение. Влагалище взрослой женщины представляет собой утолщенную трубку, имеющую на поперечном разрезе букву Н. Передняя стенка

короче задней, они соприкасаются друг с другом. Длина влагалища, в среднем 7-8 см, ширина 2-3 см. Проксимальный конец влагалища в виде свода окружает вдающуюся в него шейку матки так, что образует передний, задний и два боковых влагалищных свода. Влагалище несколько изогнуто с выпуклостью, обращенной назад. Продольная его ось с осью матки образует угол, открытый кпереди.

В гистологическом отношении стенка органа представлена слизистой, мышечной и адвентициальной оболочками. Слизистая оболочка передней и задней стенок влагалища образует ряд поперечных складок, причем передняя стенка влагалища в своей дистальной части слегка выпячивается в просвет влагалища. Слизистую выстилает многослойный плоский эпителий, в котором насчитывается до 30-40 рядов клеток. В нем выделяют базальный, промежуточный и поверхностный слои. Его морфологическое состояние определяется гормональным фоном женщины и возрастом.

Собственная пластинка слизистой оболочки образована рыхлой волокнистой соединительной тканью с большим количеством эластических волокон. При определении иммуноги-стохимического профиля разных типов коллагена соединительной ткани влагалища было выявлено положительное окрашивание на коллаген IV, VI,VIII типа базальной мембраны кровеносных сосудов, коллаген IV типа также обнаруживался в базальной мембране эпителия. Коллаген III выявил положительное окрашивание всего интерстиция, между волокнами и гладкой и поперечно-полосатой мышечных тканей выявляется положительное иммуноги-стохимическое окрашивание (рис. 1).

Рис. 1. Иммуноцитохимическая реакция к коллагену III типа, влагалище женщины, 22 года. Об.ІОО, ок. 10

Мышечная оболочка представлена в нижней трети поперечно-полосатой мышечной тканью, которая постепенно заменяется на расположенную в три слоя (ближе к шейке матки) гладкую мышечную ткань. Пучки гладких миоцитов и волокна поперечно-полосатой мышечной ткани отделены друг от друга тонким эндомизием (рис. 2).

Рис.2. Мышечная оболочка влагалища человека (пучки гладких миоцитов и волокна поперечно-полосатой мышечной ткани), 22 года. Окраска гематоксилин и эозин. Об. 40, ок.10

Гладкомышечные волокна расположены в три слоя: внутренний (продольный), средний (циркулярный), наружный (продольный). Нужно отметить, что пролиферативной активности в дефинитивной гладкой мышечной ткани при проведении иммуногистохимической реакции на кь67 не отмечалось. Методом щелочной диссоциации тканей с получением изолированных клеток удалось выявить лейомиоциты влагалища, которые имеют веретеновидную форму с центрально расположенным ядром (рис. 3.) Средний размер лейомиоцитов достигает 2658,61±114,32 мкм3.

Рис. 3. Изолированный лейомиоцит влагалища человека, 22 года.

Окраска гематоксилин и эозин. Об. 40, ок.10

Снаружи орган покрыт рыхлой волокнистой соединительной тканью с кровеносными сосудами и нервными окончаниями. Кровоснабжение влагалища осуществляется за счет ветвей внутренней подвздошной артерии. Наибольшая из них - влагалищная артерия (нисходящая ветвь маточной артерии), проходя по боковым стенкам влагалища, кровоснабжает его верхнюю треть, нижняя пузырная артерия - среднюю треть, а средняя прямокишечная и внутренняя половая - нижнюю треть влагалища. Вены образуют сплетения, ветви которых способствуют оттоку крови во внутреннюю подвздошную вену. Венозные сплетения связаны

со сплетениями матки, мочевого пузыря и прямой кишки. Лимфатические щели из верхней половины влагалища осуществляют дренаж во внутренние подвздошные узлы, преимущественно обтураторные, гипогастральные, иногда в ректальные узлы; из нижней половины влагалища - в паховые лимфатические сосуды, отчасти в наружные подвздошные узлы. Существуют анастамозы между правой и левой половинами и нижней и верхней частями влагалища.

Иннервируется влагалище ветвями маточно-влагалищного сплетения, чувствительная иннервация осуществляется за счет крестцовых спинальных узлов.

У женщин репродуктивного возраста при проведении иммуногистохимического исследования с применением моноклональных антител определяется положительная экспрессия к ЕЯ в тканях влагалища: ядра базального и парабазального слоев эпителия, лейомиоцитов, стро-мальных клеток, что еще раз подтверждает данные других исследователей (рис. 4 а, б) [4-11].

0 ф Ф # 9 Ф

4 * * 9 * / • ,

Ф _ • • ф< 2 |

% -4 • ^ * »% * щ У

> / ' /

* 0 гу ^ # ф # # ! # % ♦ 4 в* V* / • 1 . / •

* Л , _ ^ 1 Ь _ — ш • % ф

/ " й Ш 4 ^ • С# 4§

1 * •

# % 2^! * ^Р , * * А

р

' / *

л $ ' . **Ь‘>у • /{ 9 / а Ш 1 « члР *Ллг Л Н

а)

ч • • . I; '

4 ' > • V' V.

^3 ^ С ? ' ’ I I

V \ \

* ' \ » * I

ъ V^ У" (

♦ * \\ I

«?• Л. I

б)

Рис. 4. а) Иммуноцитохимическая реакция к ЕЯ эпителиальных клеток слизистой оболочки влагалища человека, 22 года. Об.40, ок. 16; б) Иммуноцитохимическая реакция к ЕЯ гладких миоцитов мышечной оболочки влагалища человека,

22 года. Об.40, ок. 16

Таким образом, результаты проведенного исследования коррелируют с данными, полученными раннее, а также существенно дополняют сведения об особенностях гистофизиоло-гической структуры тканей стенки влагалища человека. Определен иммуногистохимический

профиль различных типов коллагена соединительной ткани влагалища, доказано наличие двух типов мышечных тканей в стенке влагалища, а также подтверждена положительная экспрессия к эстрогеновым рецепторам не только эпителиальных клеток, но и лейомиоцитов и стромальных клеток.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Бодяжина В.И. Неоперативная гинекология: руководство для врачей / В.И. Бодяжина, В.П. Сметник, Л.Г. Тумилович. - М.: Медицина, 1990. - 544 с.

2. Патология влагалища и шейки матки / Под ред. В.И.Краснопольского. - М.: Медицина, 1999. - 272 с.

3. Гинекологические нарушения. Дифференциальная диагностика и терапия: пер. с англ. / Под ред. К.Дж. Пау-эрстейна. - М.: Медицина, 1985. - 592 с.

4. Fu X., Rezapour M., Wu X., Li L. et all./ Expression of estrogen receptor - a and -P in anterior vaginal walls genuine stress incontinent women // Int. Urogynecol. J. Pelvic Floor Dysfunct. 2003 Oct.; 14 (4):276-81; discussion 281. Epub.2003 Aug. 2.

5. MacLean A.B., Nicol L.A., Hodgins M.B./ Immunohistochemical localization of estrogen receptors in the vulva and vagina// J. Reprod.Med. 1990 Nov; 35 (11):1015-6.

6. Miyagawa S., Katsu Y., Ohta Y et all./ Estrogen receptor - a indispensable for the induction of persistent vaginal change by neonatal 5 alpha-dehydrotestosterone exposure in mice // Biol. Reprod. 2009 Oct. 28.

7. Pelletier G. Localisation of androgen and estrogen receptor in rat end primate tissues // Histol. Histopathol. 2000 Oct.; 15 (4):1261-70.

8. Pelletier G., El-Alfy M./ Immunocitochemical localization of estrogen receptors alpha and beta in the human reproductive organs // J. Clin. Endocrinol. Metabol. 2000 Dec.; 85 (12):4835-40.

9. Presl J. et al. Sexual maturation in girls and the development of estrogen-induced gonadodropic hormone release // Ann. Biol. Anim. Biochim. Biophys. - 1976. - Vol. 16. - P. 3777-383.

10. Winter J.S.D. et al. Gonadotrophins end steroids hormones in the blood and urine of prepubertal girls or other primates // Clin. Endocrinol. Metab. - 1978. - №7. - Р. 512-521.

11. Xie Z., Shi H., Zhou C. Alteration of estrogen receptor-a and -P in the anterior vagina of women / Eur. J. Obstet. Gynecol. Reproduct. Biol. 2007 Oct; 134 (2): 254-8

REFERENCES

1. Non-immediate gynecology: a guide for physicians / Bodyazhina V.I., Smetnik V.P. Tumilovich L.G. / / Moscow, Medicine, 1990. 544 р.

2. Pathology of the vagina and cervix / edited V.I. Krasnopolskogo // Moscow, Medicine, 1999. 272 р.

3. Gynecological disorders. Differential diagnosis and therapy: Per. with Engl. / Edited by C.J. Pauersteyna / / Moscow, Medicine, 1985. - 592 p.

4. Fu X., Rezapour M., Wu X., Li L. et all./ Expression of estrogen receptor - a and -P in anterior vaginal walls genuine stress incontinent women // Int. Urogynecol. J. Pelvic Floor Dysfunct. 2003 Oct.; 14 (4):276-81; discussion 281. Epub.2003 Aug. 2.

5. MacLean A.B., Nicol L.A., Hodgins M.B./ Immunohistochemical localization of estrogen receptors in the vulva and vagina// J. Reprod.Med. 1990 Nov; 35 (11):1015-6.

6. Miyagawa S., Katsu Y., Ohta Y et all./ Estrogen receptor - a indispensable for the induction of persistent vaginal change by neonatal 5 alpha-dehydrotestosterone exposure in mice // Biol. Reprod. 2009 Oct. 28.

7. Pelletier G. Localisation of androgen and estrogen receptor in rat end primate tissues // Histol. Histopathol. 2000 Oct.; 15 (4):1261-70.

8. Pelletier G., El-Alfy M./ Immunocitochemical localization of estrogen receptors alpha and beta in the human reproductive organs // J. Clin. Endocrinol. Metabol. 2000 Dec.; 85 (12):4835-40.

9. Presl J. et al. Sexual maturation in girls and the development of estrogen-induced gonadodropic hormone release // Ann. Biol. Anim. Biochim. Biophys. - 1976. - Vol. 16. - P. 3777-383.

10. Winter J.S.D. et al. Gonadotrophins end steroids hormones in the blood and urine of prepubertal girls or other primates // Clin. Endocrinol. Metab. - 1978. - №7. - Р. 512-521.

11. Xie Z., Shi H., Zhou C. Alteration of estrogen receptor-a and -p in the anterior vagina of women / Eur. J. Obstet. Gynecol. Reproduct. Biol. 2007 Oct; 134 (2): 254-8

Статья принята в печать 5 марта 2014 г.

Рецензент Гелашвили П.А. доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой морфологии и патологии НОУ ВПО «Медицинский институт «РЕАВИЗ».