Опыт применения методов микробной индикации в оценке качества среды хронически загрязненных морских акваторий

БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ

УДК 574.21

Т. В. Бойченко

Опыт применения методов микробной индикации в оценке качества среды хронически загрязненных морских акваторий

Дальневосточный федеральный университет, г. Владивосток, Россия

Аннотация. Микроорганизмы являются первичным звеном в цепи питания, а также чувствительными индикаторами антропогенного загрязнения морской среды. Они выступают как мощный биотический фактор, обуславливающий элиминацию органических загрязняющих веществ природного и антропогенного происхождения из морской среды, участвуя, таким образом, в круговороте веществ. Возрастающий антропогенный пресс изменяет структуру морских микробных сообществ и трансформирует структурно-функциональные связи в экосистеме моря. Поэтому чрезвычайно актуальным является изучение изменений структуры микробного сообщества в условиях хронического загрязнения среды. В качестве модельного полигона для исследований была выбрана акватория бухты Золотой Рог, характеризующаяся чрезвычайно высоким уровнем хронического загрязнения, связанного как с процессами развития инфраструктуры, так и с аварийными случаями антропогенного происхождения. Для оценки качества среды были применены стандартные микробиологические методы. Изучены эколого-трофические группы микроорганизмов в поверхностных водах акватории б. Золотой Рог. На основании результатов микробной индикации показано распределение численности бактериопланктона и дана оценка качества среды бухты, находящейся под мощным круглогодичным антропогенным прессом.

Ключевые слова: микробная индикация, морские бактерии, эколо-трофические группы микроорганизмов, морская среда, поллютанты, гетеротрофные микроорганизмы, энтеробактерии, техногенное воздействие, антропогенный пресс, хроническое загрязнение.

DOI 10.25587/SVFU.2019.70.28396

БОЙЧЕНКО Татьяна Валерьевна - к. б. н., доцент кафедры экологии ШЕН, ДВФУ. E-mail: boychenko.tv@dvfu.ru

BOYCHENKO Tatiana Valeryevna - Candidate of Biological Sciences, Associate Professor of the Ecology Department, Schools of Natural Science, Far Eastern Federal University.

T. V. Boychenko

Experience of Microbial Indication Methods Application in Evaluating the Environmental Quality of the Chronically Polluted Marine Aquatories

Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia

Abstract. Microorganisms are the primary link in the food chain, as well as sensitive indicators of anthropogenic pollution of the marine environment. They act as a powerful biotic factor causing the elimination of organic pollutants of natural and anthropogenic origin from the marine environment, thus participating in the circulation of substances. The increasing anthropogenic pressure changes the structure of marine microbial communities and transforms structural and functional relationships in the marine ecosystem. Therefore, it is extremely important to study changes in the structure of the microbial community in conditions of chronic environmental pollution. The water area b was chosen as a model testing ground. The Golden Horn is characterized by an extremely high level of chronic pollution associated with both the processes of infrastructure development and emergency cases of anthropogenic origin. Standard microbiological methods were used to assess the quality of the environment. Ecological-trophic groups of microorganisms in the surface waters of the water area were studied. B. Golden Horn. Based on the results of microbial indication, the distribution of bacterioplankton numbers is shown and the quality of the environment of the bay under a powerful year-round anthropogenic pressure is assessed.

Keywords: microbial indication, sea bacteria, ecologo-trophic groups of microorganisms, marine environment, pollutants, heterotrophic microorganisms, enterobacteria, anthropogenic pressure, anthropogenic press, chronic pollution.

Введение

В настоящее время прибрежные морские акватории испытывают значительные антропогенные нагрузки, обусловленные изъятием сверх нормы на отдельных участках большого количества биологических ресурсов и привносом значительных объёмов различных загрязняющих веществ. В связи с чем необходим постоянный контроль качества морской воды и биоресурсов, в чем неоценимую помощь могут оказать биологические методы индикации.

Среди методов контроля качества среды с начала 1990-х гг. широкое распространение получила биоиндикация с использованием микроорганизмов, которые являются надежными индикаторами самых первых «сбоев» в функционировании экосистем и которые позволяют не только оценить качество среды, но и наблюдать за тенденциями её изменения во времени [1-8].

Микробная индикация позволяет оценить степень и характер загрязнения морской среды многими контаминантами [9]. Благодаря высокой скорости размножения, росту численности популяции и широкому спектру энзиматической активности, бактерии способны быстро адаптироваться к изменяющимся условиям окружающей среды и утилизировать практически все известные в природе органические соединения [10]. В связи с этим проведение микробиологического мониторинга в районах с хроническим загрязнением перспективно для оценки состояния среды, а также экологического картирования.

Целью работы являлась оценка экологического состояния акватории б. Золотой Рог и изучение структуры микробных сообществ в условиях постоянного присутствия комплекса поллютантов с помощью методов микробной индикации.

Рис. Карта-схема расположения станций отбора проб

Методы исследования

Материалом для исследования послужили результаты микробиологических наблюдений, выполненных на 15 станциях, расположенных вдоль центрального разреза в б. Золотой Рог и 1 контрольной станции (б. Алексеева, о. Попова) в мае 2017 г. Отбор проб воды производили из поверхностного слоя (10-20 см) с помощью 5-литрового батометра Нискина в стерильные пластиковые ёмкости. Пробы транспортировали для анализа в лабораторию в стерильных термобоксах с аккумуляторами холода при температуре 5±3 °С, согласно ГОСТу 31861-12. Анализ материала производили в день отбора, каждая проба - в трех повторностях с соблюдением сроков хранения по ГОСТу 31861-12 и ГОСТу 31942-12 [11, 12]. Станции отбора проб показаны на рис.

Для оценки экологического состояния вод использовался следующий набор контролируемых эколого-трофических групп микроорганизмов: общая численность колониеобразующих гетеротрофных микроорганизмов (КГМ), которая даёт представление о валовом содержании органических веществ в воде; бактерии группы кишечной палочки (БГКП) - показатель фекального загрязнения; индикаторы нефтяного (Н), фенольного (Ф) загрязнения, загрязнения дизельным топливом (ДТ) и мазутом (М).

Общую численность колониеобразующих гетеротрофных микроорганизмов в поверхностных водах определяли с использованием метода десятикратных разведений и последующего высева аликвоты в трёх повторностях на питательную среду для морских микроорганизмов (СММ) с добавлением 1,5% агара [13, 14]. Подсчитывали число выросших колоний. Данные обрабатывали статистически. Бактерии группы кишечной палочки культивировали с использованием селективной среды Эндо. Определяли каталазоположительные, оксидазоотрицательные, грамотрицательные бактерии [15].

Наиболее вероятное количество бактерий различных эколого-трофических групп (углеводородокисляющих, фенолокисляющих) оценивали методом предельных разведений в трёх повторностях с использованием элективной среды МКД (морская калиево-дрожжевая среда), куда добавляли один из следующих субстратов: нефть, мазут, дизельное топливо, фенол в конечной концентрации 0,1% (по объёму) как единственный

источник углерода для бактерий [16]. Для определения наиболее вероятного числа клеток микроорганизмов использовали таблицу Мак-Креди [15].

Результаты

Результаты наблюдений представлены в табл. 1-2.

На примере б. Золотой Рог показано, что органическое загрязнение оказывает существенное воздействие на структуру бактериального сообщества, которое выражается в изменении количественных и качественных показателей.

Как следует из данных табл. 1, общая численность КГМ в поверхностных водах б. Золотой Рог распределялась от станции к станции более или менее равномерно, варьируя в пределах от 104 до 107 КОЕ/мл, составляя в среднем 105 КОЕ/мл и характеризуя воды на большей части акватории как а-В-мезосапробные. В кутовой части бухты на ст. 1, 2 и 3 численность была максимальной и составила (9,9±0,12)107, (2,4±0,11)107, (1,4±0,03) 107 КОЕ/мл характеризуя воды как полисапробные, эвтрофированные, с преобладанием гнилостных процессов анаэробного типа. На контрольной станции (ст. 16, б. Алексеева) была выявлена минимальная численность микроорганизмов, которая составила 102 КОЕ/мл, характеризуя воды как олигосапробные, чистые.

По данным проведённых исследований, количественное распределение БГКП в б. Золотой Рог носило мозаичный характер. Индикаторы биологического загрязнения фиксировались на 8 из 16 станций (табл. 1). Максимальные значения численности БГКП были отмечены в вершине бухты, в устье р. Объяснение (ст. 1 и ст. 2) и в месте выхода канализационных стоков, напротив Торгового порта (ст. 10) и составили (9,3±0,07) 103,

Таблица 1

Общая численность колониеобразующих гетеротрофных микроорганизмов

№ станции Эколого-трофические группы микроорганизмов, КОЕ/мл

КГМ БГКПЖ Сои

1 (9,9±0,12)*107 (3,3±0,11)*104/(8,0±0,22)*102

2 (2,4±0,11)*107 (4,3±0,02)*104/(3,8±0,2)*10

3 (1,4±0,03)*107 (4,5±0,12)*102/0

4 (8,5±0,2)*105 (5,9±0,03)*102/0

5 (6,6±0,31)*105 0/0

6 (8,3±0,07)*105 (1,5±0,06)*10/0

7 (9,8±0,03)*104 0/0

8 (9,1±0,12)*104 0/0

9 (8,7±0,2)*105 (4,3±0,09)*10/0

10 (8,4±0,21)*104 (2,1 ±0,12)*102/(2,0±0,12)*10

11 (1,5±0,11)*105 0/0

12 (7,5±0,2)*105 0/0

13 (4,7±0,31)*104 (4,0±0,1)*10/0

14 (1,8±0,22)*104 0/0

15 (2,8±0,02)*104 0/0

16 (3,5±0,08)*102 0/0

Таблица 2

Распределение численности индикаторных групп микроорганизмов в поверхностных водах б. Золотой Рог и б. Алексеева (май 2017 г.).

№ станции Н Д/Т М Ф

1 25,0*104 6,0*104 13,0*102 110,0*104

2 6,0*105 6,0*104 2,5*102 110,0*104

3 6,0*104 110,0*103 2,5*102 2,5*103

4 2,5*104 2,5*102 6,0*102 6,0*104

5 2,5*104 6,0*102 2,5*102 6,0*104

6 6,0*104 13.0*103 13,0*102 13,0*103

7 25,0*103 6,0*102 6,0*102 6,0*102

8 6,0*103 2,5*103 2,5*102 13,0*102

9 6,0*105 13,0*104 6,0*103 6,0*104

10 2,5*105 13,0*104 2,5*103 2,5*104

11 13,0*103 2,5*102 6,0*101 6,0*103

12 6,0*103 6,0*102 2,5*101 6,0*103

13 13,0*103 13,0*103 13,0*102 13,0*103

14 25,0*102 25,0*102 6,0*101 6,0*102

15 6,0*103 6,0*103 2,5*102 13,0*101

16 0 0 0 0

Примечание: Н - индикаторы нефтяного загрязнения; Д/Т - индикаторы загрязнения среды дизельным топливом; М - индикаторы загрязнения среды мазутом, Ф - индикаторы фенольного загрязнения.

(4,8±0,26)Т03, (2,1±0,12)*102 КОЕ/мл соответственно. В контрольном районе представители данной эколого-трофической группы выявлены не были. На трёх станциях из поверхностного слоя воды была выделена E. coli, численность которой заметно превышала нормативный уровень [17], что напрямую свидетельствовало о загрязнении акватории фекальными стеролами.

Наряду с биологическим загрязнением, которое обеспечивается хозяйственно-бытовыми и канализационными стоками, к веществам, загрязняющим бухту, можно отнести нефтеуглеводороды и фенолы. В связи с этим были изучены эколого-трофические группы микроорганизмов, устойчивые к этим поллютантам.

Отметить участки, наиболее подверженные загрязнению углеводородами, довольно сложно, так как численность микроорганизмов, окисляющих эти вещества, была распределена относительно равномерно и фиксировалась практически на всех исследуемых станциях, характеризуя воды как грязные. Поскольку в микробиологических исследованиях отсутствуют ПДК (в отличие от гидрохимических), принято сравнивать полученные данные с контрольной станцией, фоновым районом или литературными сведениями для чистых и незагрязненных районов. В результате исследований было установлено, что по сравнению с контрольным районом содержание микроорганизмов, устойчивых к нефтеуглеводородам (нефть, дизельное топливо, мазут), в б. Золотой Рог значительно выше. Из общей картины выделялась вершина бухты (ст. 1, ст. 2) и район Торгового порта (ст. 9, ст. 10) с максимальным «букетом» контаминантов.

Наибольшей вариабельностью из нефтеуглеводородустойчивых микроорганизмов отличалась микрофлора, растущая на среде с сырой нефтью, количественно варьируя в пределах от 102 до 105 кл/мл (табл. 2). Средние показатели для индикаторов нефти составляли 103-104 КОЕ/мл. Их максимум (105) зафиксирован на двух станциях - 2-й и 9-й. Численность мазут-резистентных микроорганизмов была распределена равномерно (табл. 2). Средние показатели составили 102 кл/мл, что на несколько порядков меньше, чем нефтеустойчивых. Кроме того, в поверхностных водах была выявлена высокая численность (102 до 104 кл/мл) микроорганизмов - деструкторов дизельного топлива, с максимальными значениями в кутовой части залива (табл. 2).

В структуре микробного сообщества бухты также были выявлены индикаторы фенольного загрязнения (табл. 2) в достаточно больших количествах. На 14 из 16 ст. были определены значения численности фенол-резистентных микроорганизмов, которые вызывают тревогу и характеризуют среду как высокотоксичную. Максимальные значения численности индикаторов загрязнения среды фенолами выявлены на ст. 1 и ст. 2 (110,0104 кл/мл), на ст. 4, 5 (6,0104 кл/мл) и ст. 9, 10 (6,0*104, 2,5*104 кл/мл.

На контрольной станции индикаторы нефтяного и фенольного загрязнения обнаружены не были.

Обсуждение

Морские гетеротрофные микроорганизмы чрезвычайно активны и являются важной составной частью морских экосистем, участвуют в процессах трансформации и минерализации органического материала в морской среде, и по их количеству судят о сапробности вод [18]. По принятым микробиологическим критериям показатели до 103 кл/мл соответствуют чистым или олигосапробным водам, 104-105 кл/мл -мезосапробным водам, обогащенным биологическими соединениями, что зачастую имеет место в прибрежных водах; 106 кл/мл и выше - показатель высокого загрязнения и соответствует полисапробным водам [19].

Результаты микробиологического исследования поверхностных вод б. Золотой Рог свидетельствуют о хроническом загрязнении данной акватории органическими веществами.

Высокие количественные значения гетеротрофных бактерий объясняются привнесением в акваторию большого количества аллохтонной микрофлоры, поступающей вместе с городскими бытовыми и промышленными стоками, объём которых составляет 53,5% от всего объема сбрасываемых неочищенных сточных вод залива Петра Великого [20].

Низкий водообмен и относительно высокий температурный режим бухты создают благоприятные условия для существования и активного развития привнесенной микрофлоры, поддерживающей продукцию бактериопланктона.

Наибольшую долю органического загрязнения в бухту вносит р. Объяснение, которая во многом обуславливает особенности гидрологического и экологического режимов, так как принимает сточные воды большого количества объектов, и воды которой используются в системе оборотного водоснабжения ТЭЦ-2. Река устанавливает более интенсивный режим циркуляции вод, благоприятствующий распространению загрязняющих веществ по акватории бухты. Кроме того, с речными водами в морскую среду поступает большое количество биогенных элементов и взвешенных веществ - органического и неорганического происхождения, на которых, как правило, адсорбируется большое количество бактерий, что существенно влияет на увеличение численности микробного сообщества.

Высокая численность КГМ в б. Золотой Рог поддерживается за счет аллохтонных микроорганизмов, в основном БГКП, поступающих вместе со сточными водами. Представители данной эколого-трофической группы являются анаэробами с ферментативным типом метаболизма, что позволяет им активно расти и размножаться при минимальных концентрациях растворённого в воде кислорода.

Канализационный сток в районе Торгового порта является одним из основных поставщиков БГКП, позволяющих оценить уровень специализированного пресса на прибрежные воды. Под общим понятием БГКП объединяются бактерии семейства Enterobacteriaceae, родов Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Klebsiella [21, 22], значительная доля которых в бактериальных сообществах может указывать на происходящую замену автохтонной на опасную для здоровья человека условно-патогенную и патогенную бактериальную микрофлору.

Причиной регистрации в бухте столь высокого количества микроорганизмов,

способных расти на средах с сырой нефтью, дизельным топливом и мазутом, является большое скопление крупнотоннажных судов и судов маломерного флота в районах крупнейших городских портов и причалов, а также их регулярное передвижение по бухте.

Фенолы относятся к высокотоксичным веществам, и даже при численности бактерий, достигающей 102 кл/мл, они являются опасными поллютантами среды [9, 23]. Присутствие значительного количества фенол-резистентных микроорганизмов в среде может иметь несколько причин, основной из которых является деятельность предприятий целлюлозно-бумажной, деревообрабатывающей и нефтеперерабатывающей промышленности. Кроме того, фенолы могут отражать загрязнение среды хлорорганическими пестицидами, а также иметь фекальную природу [24, 25].

Высокая численность данной индикаторной группы, определенная на ст. 1 и ст. 2, обусловлена наличием микроорганизмов, деструкторов фекальных стиролов (входят в состав фенольных соединений), основным поставщиком которых являются воды р. Объяснение. На станциях 4 и 5 высокая численность является следствием опосредованного нефтяного загрязнения, а на ст. 9 и 10 (район Торгового порта) -следствием смешанного комплексного хозяйственно-бытового и техногенного воздействия.

Сравнительный анализ данных микробной индикации качества поверхностных морских вод б. Золотой Рог и контрольного района, расположенного в б. Алексеева (о. Попова), в ещё большей степени подчёркивает напряженное экологическое состояние бухты. Данные, полученные в контрольном районе, выглядят контрастно. Здесь не обнаружено индикаторов фекального и техногенного загрязнения, а полученные значения численности КГМ позволяют классифицировать воды как олигосапробные, чистые.

Заключение

Таким образом, применяя микробиологический подход, мы смогли увидеть, что микробоценозы загрязненных акваторий характеризуются высоким уровнем адаптации к разнообразным поллютантам, а хроническое загрязнение вызывает изменения структуры микробного сообщества, которые проявляются в увеличении численности специфических эколого-трофических групп бактерий (нефтеокисляющих, фенолокисляющих, энтеробактерий и т. д.) в зависимости от характера загрязнения (техногенное и хозяйственно-бытовое). Сравнение с контрольным районом, сходным по гидрологическому режиму, но отличающимся типом и степенью антропогенного воздействия, еще раз подчеркнуло напряженность экологического состояния вод бухты Золотой Рог.

Л и т е р а т у р а

1. Безвербная И. П. Отклик микроорганизмов прибрежных акваторий Приморья на присутствие в среде тяжелых металлов. Дисс. соиск. уч. степ. канд. биол. наук. Владивосток: ДВГУ, 2002 - 177 с.

2. Безвербная И. П., Димитриева Г. Ю., Тазаки К., Ватанабе Х. Опыт оценки качества прибрежных морских вод Приморья на основе микробной индикации // Водные ресурсы. - 2003.

- Т. 30, №2. - С. 222-231.

3. Бузолева Л. С., Безвербная И. П., Журавель Е. В., Калитина Е. Г. Микробиологический анализ загрязнения окраинных морей северо-западной части Тихого океана // Океанология. - 2006. - Т. 46, № 1. - С. 55-62.

4. Бузолева Л. С., Калитина Е. Г., Безвербная И. П., Кривошеева А. М. Микробные сообщества поверхностных прибрежных вод бухты Золотой Рог в условиях высокого антропогенного загрязнения // Океанология. - 2008. - Т. 48, № 6. - С. 882-888.

5. Димитриева Г. Ю., Безвербная И. П. Микробная индикация - эффективный инструмент для мониторинга загрязнения прибрежных морских вод тяжёлыми металлами // Океанология. - 2002.

- Т. 42, №3. - С. 408-415.

6. Журавель Е. В., Безвербная И. П., Бузолева Л. С. Микробная индикация загрязнения прибрежных вод Охотского моря и Авачинской бухты // Биология моря. - 2004. - Т. 30, № 2. - С. 138-142.

7. Калитина Е. Г., Михайлик Т. А., Семкин П. Ю., Барабанщиков Ю. А., Зорин С. А. Особенности микробиологического состава вод реки Раздольной (южное Приморье) // Изв. ТИНРО. - 2015.

- Т. 180. - С. 187-197.

8. Janase H., Zuzan K., Kita K. Degradation of phenol by thermophilic and halophilic bacteria isolated from marine brine sample // J. Ferm. Biol. 1992. V. 74. № 5. P. 297-300.

9. Димитриева Г. Ю. Планктонные и эпифитные микроорганизмы: индикация и стабилизация состояния прибрежных морских экосистем: дис. ... докт. биол. наук / Димитриева Галина Юрьевна. ДВГУ. Владивосток, 1999. - 408 с.

10. Цыбань А. В., Панов Т. В., Баринова С. П. Индикаторная микрофлора в Балтийском море // Исследование экосистем Балтийского моря. - Л.: Гидрометеоиздат, 1990. - Вып. 3. - С. 69-83.

11. ГОСТ 31861-12. Вода. Общие требования к отбору проб. - М.: Стандартинформ. - 2013.

12. ГОСТ 31942-12. Вода. Отбор проб для микробиологического анализа. - М.: Стандартинформ.

- 2013.

13. Наливайко Н. Г. Микробиология воды: учеб. пособие. - Томск: Изд-во Томск. политехн. ун-та, 2006. - 139 с.

14. Youchimizu M., Kimura T. Study of intestinal microflora of Salmonids // Fish. Pathol. - 1976. - Vol. 10, № 2. - P. 243-259.

15. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / под ред. Н. С. Егорова. - М.: МГУ, 1983. - 186 с.

16. Руководство по методам биологического анализа морской воды и донных отложений / под ред. А. В. Цыбань. - Л.: Гидрометеоиздат, 1980. - 193 с.

17. СанПиН 2.1.5.2582-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к охране прибрежных вод морей от загрязнения в местах водопользования населения: Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы». - М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010. - 19 с.

18. Михайлов В. В. Морские гетеротрофные микроорганизмы - продуценты физиологически активных веществ: автореф. дис. ... д-ра биол. наук. - Владивосток: ДВО РАН, 1995. - 46 с.

19. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований: учеб. пособие / под ред. А. С. Лабинской, Л. П. Блинковой, А. С. Ещиной. - М.: Медицина, 2004. - 576 с.

20. Огородникова А. А. Эколого-экономическая оценка воздействия береговых источников загрязнения на природную среду и биоресурсы залива Петра Великого. - Владивосток: ТИНРО, 2001. - 193 с.

21. Lipp E. K., Farrah S. A., Rose J. B. Assessment and impact of microbial fecal pollution and human enteric pathogens in a coastal community // Mar. Poll. Bull. 2001. Vol. 42, № 4. P. 286-293.

22. Noble R. T., Moore D. F., Leecaster M. K. et al. Comparison of total coliform, fecal coliform, and enterococcus bacterial indicator response for ocean recreational water quality testing // Water Res. - 2003. -Vol. 37, № 7. - P. 1637-1643.

23. Димитриева Г. Ю., Христофорова Н. К. и др. Детоксикация фенола микроорганизмами прибрежной зоны моря // Микробиология, 1999. - Т. 68, № 1. - С. 107-113.

24. Димитриева Г. Ю. Микроорганизмы - биоиндикаторы фенольного загрязнения прибрежной морской среды // Биология моря. - 1995. - Т. 21. - № 6. С. 407-411.

25. Дроздовская О. А. Поиск микроорганизмов - индикаторов и деструкторов фенолов в прибрежных водах дальневосточных морей: Дис. ... канд. биол. наук / ДВГУ. - Владивосток, 2000. - 156 с.

R e f e r e n c e s

1. Bezverbnaya I. P. Otklik mikroorganizmov pribrezhnyh akvatorij Primor'ya na prisutstvie v srede tyazhelyh metallov. Diss. soisk. uch. step. kand. biol. nauk. Vladivostok: DVGU, 2002 - 177 s.

2. Bezverbnaya I. P., Dimitrieva G. YU., Tazaki K., Vatanabe H. Opyt ocenki kachestva pribrezhnyh morskih vod Primor'ya na osnove mikrobnoj indikacii // Vodnye resursy. - 2003. - T. 30, №2. - S. 222-231.

3. Buzoleva L. S., Bezverbnaya I. P., ZHuravel' E. V., Kalitina E. G. Mikrobiologicheskij analiz zagryazneniya okrainnyh morej severo-zapadnoj chasti Tihogo okeana // Okeanologiya. - 2006. - T. 46, № 1.

- S. 55-62.

4. Buzoleva L. S., Kalitina E. G., Bezverbnaya I. P., Krivosheeva A. M. Mikrobnye soobshchestva 12 -

poverhnostnyh pribrezhnyh vod buhty Zolotoj Rog v usloviyah vysokogo antropogennogo zagryazneniya // Okeanologiya. - 2008. - T. 48, № 6. - S. 882-888.

5. Dimitrieva G. YU., Bezverbnaya I. P. Mikrobnaya indikaciya - ehffektivnyj instrument dlya monitoringa zagryazneniya pribrezhnyh morskih vod tyazhyolymi metallami // Okeanologiya. - 2002. - T. 42, №3. - S. 408-415.

6. ZHuravel' E. V., Bezverbnaya I. P., Buzoleva L. S. Mikrobnaya indikaciya zagryazneniya pribrezhnyh vod Ohotskogo morya i Avachinskoj buhty // Biologiya morya. - 2004. - T. 30, № 2. - S. 138-142.

7. Kalitina E. G., Mihajlik T. A., Semkin P. YU., Barabanshchikov YU. A., Zorin S. A. Osobennosti mikrobiologicheskogo sostava vod reki Razdol'noj (yuzhnoe Primor'e) // Izv. TINRO. - 2015. - T. 180. - S. 187-197.

8. Janase H., Zuzan K., Kita K. Degradation of phenol by thermophilic and halophilic bacteria isolated from marine brine sample // J. Ferm. Biol. 1992. V. 74. № 5. P. 297-300.

9. Dimitrieva G. YU. Planktonnye i ehpifitnye mikroorganizmy: indikaciya i stabilizaciya sostoyaniya pribrezhnyh morskih ehkosistem: dis. ... dokt. biol. nauk / Dimitrieva Galina YUr'evna. DVGU. Vladivostok, 1999. - 408 s.

10. Cyban' A. V., Panov T. V., Barinova S. P. Indikatornaya mikroflora v Baltijskom more // Issledovanie ehkosistem Baltijskogo morya. - L.: Gidrometeoizdat, 1990. - Vyp. 3. - S. 69-83.

11. GOST 31861-12. Voda. Obshchie trebovaniya k otboru prob. - M.: Standartinform. - 2013.

12. GOST 31942-12. Voda. Otbor prob dlya mikrobiologicheskogo analiza. - M.: Standartinform. - 2013.

13. Nalivajko N. G. Mikrobiologiya vody: ucheb. posobie. - Tomsk: Izd-vo Tomsk. politekhn. un-ta, 2006. - 139 s.

14. Youchimizu M., Kimura T. Study of intestinal microflora of Salmonids // Fish. Pathol. - 1976. - Vol. 10, № 2. - P. 243-259.

15. Rukovodstvo k prakticheskim zanyatiyam po mikrobiologii / pod red. N. S. Egorova. - M.: MGU, 1983. - 186 s.

16. Rukovodstvo po metodam biologicheskogo analiza morskoj vody i donnyh otlozhenij / pod red. A. V. Cyban'. - L.: Gidrometeoizdat, 1980. - 193 s.

17. SanPiN 2.1.5.2582-10 «Sanitarno-ehpidemiologicheskie trebovaniya k ohrane pribrezhnyh vod morej ot zagryazneniya v mestah vodopol'zovaniya naseleniya: Sanitarno-ehpidemiologicheskie pravila i normativy». - M.: Federal'nyj centr gigieny i ehpidemiologii Rospotrebnadzora, 2010. - 19 s.

18. Mihajlov V. V. Morskie geterotrofnye mikroorganizmy - producenty fiziologicheski aktivnyh veshchestv: avtoref. dis. ... d-ra biol. nauk. - Vladivostok: DVO RAN, 1995. - 46 s.

19. Obshchaya i sanitarnaya mikrobiologiya s tekhnikoj mikrobiologicheskih issledovanij: ucheb. posobie / pod red. A. S. Labinskoj, L. P. Blinkovoj, A. S. Eshchinoj. - M.: Medicina, 2004. - 576 s.

20. Ogorodnikova A. A. EHkologo-ehkonomicheskaya ocenka vozdejstviya beregovyh istochnikov zagryazneniya na prirodnuyu sredu i bioresursy zaliva Petra Velikogo. - Vladivostok: TINRO, 2001. - 193 s.

21. Lipp E. K., Farrah S. A., Rose J. B. Assessment and impact of microbial fecal pollution and human enteric pathogens in a coastal community // Mar. Poll. Bull. 2001. Vol. 42, № 4. P. 286-293.

22. Noble R. T., Moore D. F., Leecaster M. K. et al. Comparison of total coliform, fecal coliform, and enterococcus bacterial indicator response for ocean recreational water quality testing // Water Res. - 2003. -Vol. 37, № 7. - P. 1637-1643.

23. Dimitrieva G. YU., Hristoforova N. K. i dr. Detoksikaciya fenola mikroorganizmami pribrezhnoj zony morya // Mikrobiologiya, 1999. - T. 68, № 1. - S. 107-113.

24. Dimitrieva G. YU. Mikroorganizmy - bioindikatory fenol'nogo zagryazneniya pribrezhnoj morskoj sredy // Biologiya morya. - 1995. - T. 21. - № 6. S. 407-411.

25. Drozdovskaya O. A. Poisk mikroorganizmov - indikatorov i destruktorov fenolov v pribrezhnyh vodah dal'nevostochnyh morej: Dis. ... kand. biol. nauk / DVGU. - Vladivostok, 2000. - 156 s.