ВЕТО-КЛЕТКИ, ПОЛУЧЕННЫЕ ИЗ Т-КЛЕТОК ПАМЯТИ

1. Способ получения выделенной популяции не индуцирующих реакцию «трансплантат против хозяина» (GvHD) клеток, обладающих фенотипом центральных Т-лимфоцитов памяти (Tcm), причем указанные клетки являются индуцирующими толерантность клетками и/или наделены активностью в отношении заболевания и способны к хомингу в лимфатические узлы после трансплантации, причем способ предусматривает:
(a) обеспечение популяции по меньшей мере из 70% Т-клеток памяти;
(b) приведение указанной популяции Т-клеток памяти в контакт с антигеном или антигенами с целью обеспечения обогащения ее антигенреактивными клетками; и
(c) культивирование указанных полученных на стадии (b) клеток в присутствии цитокинов с целью обеспечения пролиферации клеток, обладающих указанным фенотипом Tcm, с получением тем самым выделенной популяции не индуцирующих GvHD клеток.
2. Способ по п. 1, в котором указанные Т-клетки памяти:
+
истощены в отношении CD45RA клеток; и/или
+
+
истощены в отношении CD4 и/или CD56 клеток.
3. Способ по п. 1, в котором:
указанное приведение указанной популяции Т-клеток памяти в контакт с антигеном или антигенами осуществляют в присутствии IL-21; и/или
указанное культивирование указанных полученных на стадии (b) клеток в присутствии цитокинов предусматривает культивирование указанных клеток в присутствии любого из IL-21, IL-15 и/или IL-7; и/или
указанная популяция по меньшей мере из 70% Т-клеток памяти обогащена в отношении антигена или антигенов.
4. Способ по п. 1, дополнительно предусматривающий проведение в отношении донора клеток обработки антигеном или антигенами до указанного обеспечения указанной популяции по меньшей мере из 70% Т-клеток памяти.
5. Способ получения выделенной популяции не индуцирующих GvHD клеток, обладающих фенотипом центральных Т-лимфоцитов памяти (Tcm), причем указанные клетки являются индуцирующими толерантность клетками и/или наделены активностью в отношении заболевания и способны к хомингу в лимфатические узлы после трансплантации, причем способ предусматривает:
+
+
+
-
+
(a) обработку неадгезивных мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) средством, способным обеспечивать истощение CD4, CD56 и CD45RA клеток с целью получения популяции Т-клеток памяти, обладающих фенотипом CD45RACD8;
(b) приведение указанной популяции Т-клеток памяти в контакт с антигеном или антигенами в присутствии IL-21 с целью обеспечения обогащения ее антигенреактивными клетками; и
(c) культивирование указанных полученных на стадии (b) клеток в присутствии IL-21, IL-15 и/или IL-7 с целью обеспечения пролиферации клеток, обладающих указанным фенотипом Tcm, с получением тем самым выделенной популяции не индуцирующих GvHD клеток.
6. Способ по п. 1 или 5, в котором указанные антиген или антигены:
выбраны из группы, состоящей из вирусного антигена, бактериального антигена, опухолевого антигена, антигена, связанного с аутоиммунным заболеванием, белкового экстракта, очищенного белка и синтетического пептида; и/или
представлены аутологичными антиген-представляющими клетками, не являющимися аутологичными антиген-представляющими клетками, искусственными носителями или искусственными антиген-представляющими клетками; и/или
представлены антиген-представляющими клетками того же происхождения, что и указанные Т-клетки памяти.
7. Способ получения выделенной популяции не индуцирующих GvHD клеток, обладающих фенотипом центральных Т-лимфоцитов памяти (Tcm), причем указанные клетки являются индуцирующими толерантность клетками и/или наделены активностью в отношении заболевания и способны к хомингу в лимфатические узлы после трансплантации, причем способ предусматривает:
+
+
+
-
+
(a) обработку неадгезивных мононукле арных клеток периферической крови (РВМС) средством, способным обеспечивать истощение CD4, CD56 и CD45RA клеток с целью получения популяции Т-клеток памяти, обладающих фенотипом CD45RACD8;
(b) приведение указанной популяции Т-клеток памяти в контакт с вирусными антигеном или антигенами в присутствии IL-21 с целью обеспечения обогащения ее антигенреактивными клетками; и
(с) культивирование указанных полученных на стадии (b) клеток в присутствии IL-21, IL-15 и/или IL-7 с целью обеспечения пролиферации клеток, обладающих указанным фенотипом Tcm, с получением тем самым выделенной популяции не индуцирующих GvHD клеток.
8. Способ по п. 7, в котором указанные вирусные антиген или антигены:
представлены аутологичными антиген-представляющими клетками, не являющимися аутологичными антиген-представляющими клетками, искусственными носителями или искусственными антиген-представляющими клетками; и/или
представлены антиген-представляющими клетками того же происхождения, что и РВМС; и/или
включают два или более вирусных пептида; и/или
включают пептид EBV, пептид CMV, пептид аденовируса (Adv) и/или пептид вируса ВК; и/или
включают три пептида EBV, два пептида CMV и два пептида аденовируса (Adv); и/или
выбраны из группы, состоящей из EBV-LMP2, EBV-BZLF1, EBV-EBNA1, CMV-рр65, CMV-IE-1, Adv-пентона и Adv-гексона; и/или
включают два или более из EBV-LMP2, EBV-BZLF1, EBV-EBNA1, CMV-pp65, CMV-IE-1, Adv-пентона и Adv-гексона; и/или
дополнительно включают бактериальный антиген.
9. Способ по любому из пп. 3, . 5 или 7, в котором указанное контактирование указанной популяции Т-клеток памяти с указанными антигеном или антигенами в присутствии указанного IL-21:
осуществляют в течение от 12 часов до 5 дней; или
осуществляют в течение 3 дней.
10. Способ по любому из пп. 3, 5 или 7, в котором указанное культивирование указанных полученных на стадии (b) клеток в присутствии IL-21, IL-15 и/или IL-7:
осуществляют в течение от 12 часов до 10 дней; или
осуществляют в течение от 4 дней до 8 дней; или
осуществляют в течение 6 дней.
11. Способ по любому из пп. 1, 5 или 7,
в котором указанная общая продолжительность получения не индуцирующих GvHD клеток составляет 10 дней; и/или
где указанный способ осуществляют ex-vivo; и/или
дополнительно предусматривающий истощение аллореактивных клеток после осуществления стадии (с), и причем необязательно указанное истощение указанных аллоре активных клеток осуществляют за счет истощения CD137+ и/или CD25+ клеток после приведения указанных клеток, обладающих указанным фенотипом Tcm, в контакт с антиген-представляющими клетками (АРС) хозяина.
12. Способ по любому из п. 5 или 7, в котором указанные РВМС не являются изогенными по отношению к субъекту.
+
+
+
-
+
13. Способ по любому из пп. 1, 5 или 7, в котором указанные клетки с указанным фенотипом Tcm обладают антигенным профилем CD3, CD8, CD62L, CD45RA, CD45RO.
14. Выделенная популяция не индуцирующих GvHD клеток, содержащая клетки с фенотипом центральных Т-лимфоцитов памяти (Тст), причем указанные клетки являются индуцирующими толерантность клетками и/или наделены активностью в отношении заболевания и способны к хомингу в лимфатические узлы после трансплантации, полученная в соответствии со способом по любому из пп. 1-13.
15. Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента выделенную популяцию не индуцирующих GvHD клеток по п. 14 и фармацевтически приемлемый носитель.
16. Способ лечения заболевания у нуждающегося в этом субъекта, причем способ предусматривает введение субъекту терапевтически эффективного количества выделенной популяции не индуцирующих GvHD клеток по п. 14, за счет чего обеспечивается лечение заболевания у субъекта.
17. Способ лечения заболевания у нуждающегося в этом субъекта, причем способ предусматривает:
(а) анализ биологического образца от субъекта на присутствие ассоциированных с заболеванием антигена или антигенов;
(b) получение выделенной популяции не индуцирующих GvHD клеток в соответствии со способом по любому из пп. 1-13, направленных на ассоциированные с заболеванием антиген или антигены, с целью обеспечения обогащения ее антигенре активными клетками; и
(c) введение субъекту терапевтически эффективного количества выделенной популяции не индуцирующих GvHD клеток из (b), за счет чего обеспечивается лечение заболевания у субъекта.
18. Способ по п. 17, в котором указанные антиген или антигены выбраны из группы, состоящей из вирусного антигена, бактериального антигена, опухолевого антигена и антигена, связанного с аутоиммунным заболеванием.
19. Способ по любому из пп. 16 или 17, дополнительно предусматривающий пересадку трансплантата клеток или тканей субъекту.
20. Способ лечения субъекта, нуждающегося в трансплантации клеток или тканей, причем способ предусматривает:
(a) пересадку трансплантата клеток или тканей субъекту; и
(b) введение субъекту терапевтически эффективного количества выделенной популяции не индуцирующих GvHD клеток по п. 14, за счет чего обеспечивается лечение субъекта, нуждающегося в трансплантации клеток или тканей.
21. Способ по п. 20, в котором:
(b) осуществляют до (а) или
(а) и (b) осуществляют одновременно.
22. Способ по п. 20, дополнительно предусматривающий кондиционирование субъекта в сублетальных, летальных или сверхлетальных условиях перед указанной пересадкой.
23. Способ по п. 20, в котором указанный трансплантат клеток или тканей не является изогенным по отношению к субъекту.
24. Способ по п. 20, в котором указанный трансплантат клеток или тканей и указанная выделенная популяция не индуцирующих GvHD клеток получены от одного и того же донора.
25. Способ по п. 20, в котором указанный трансплантат клеток или тканей:
выбран из группы, состоящей из клетки или ткани печени, поджелудочной железы, селезенки, почки, сердца, легкого, кожи, кишечника, головного мозга, яичника и лимфоидной/гемопоэтической клетки или ткани; или
предусматривает котрансплантацию нескольких органов, и причем необязательно указанная котрансплантация предусматривает трансплантацию незрелых гемопоэтических клеток и паренхиматозного органа.