ВЕКТОРЫ, КОДИРУЮЩИЕ ФАКТОР ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ КОЛБОЧЕК, ПОЛУЧЕННЫЙ ИЗ ПАЛОЧЕК

1. Нуклеиновая кислота, содержащая последовательность нуклеотидов, которая кодирует кодирующую последовательность для белка RdCVF, где последовательность, кодирующая RdCVF, содержит перекодированную последовательность нуклеотидов.
2. Нуклеиновая кислота по п. 1, где белок RdCVF представляет собой белок RdCVF1.
3. Нуклеиновая кислота по п. 1, где белок RdCVF представляет собой белок RdCVF2.
4. Нуклеиновая кислота по п. 1, где белок RdCVF представляет собой короткую версию белка RdCVF.
5. Нуклеиновая кислота по п. 1, где белок RdCVF представляет собой длинную версию белка RdCVF.
6. Нуклеиновая кислота по п. 1, где белок RdCVF представляет собой белок RdCVF человека.
7. Нуклеиновая кислота по п. 1, где в перекодированной последовательности нуклеотидов отсутствует начальный метиониновый кодон.
8. Нуклеиновая кислота по п. 1, где кодирующая последовательность для белка RdCVF содержит нуклеотиды 106-741 из SEQ ID NO:1, нуклеотиды 106-429 из SEQ ID NO:1, нуклеотиды 106-432 из SEQ ID NO:3 или нуклеотиды 106-744 из SEQ ID NO:3.
9. Нуклеиновая кислота по п. 1, дополнительно содержащая вторую область кодирования для N-концевой сигнальной последовательности, функционально связанной с кодирующей последовательностью для белка RdCVF.
10. Нуклеиновая кислота по п. 9, где сигнальную последовательность выбирают из группы, состоящей из сигнальной последовательности Igk, гормона роста человека (HGH), нейротрофического фактора, полученного из головного мозга (BDNF), инсулинового фактора роста 1 (IGF-1) и β-глюкоронидазы (GUSB).
11. Нуклеиновая кислота по п. 9, где сигнальная последовательность содержит нуклеотиды 1-105 из SEQ ID NO:1.
12. Нуклеиновая кислота по п. 9, где сигнальная последовательность кодирует последовательность аминокислот, содержащую SEQ ID NO:15, аминокислоты 2-34 из SEQ ID NO:2 или аминокислоты 7-21 из SEQ ID NO:2.
13. Нуклеиновая кислота по п. 1, где последовательность нуклеотидов содержит SEQ ID NO:1 или 3.
14. Нуклеиновая кислота по п. 1, где перекодированная последовательность нуклеотидов имеет по меньшей мере 40% перекодированных кодонов.
15. Нуклеиновая кислота по п. 1, где перекодированная последовательность нуклеотидов имеет по меньшей мере 15% отличающихся нуклеотидов по сравнению с соответствующей нативной последовательностью нуклеотидов.
16. Нуклеиновая кислота по п. 1, где перекодированная последовательность нуклеотидов является менее чем на 90% идентичной соответствующей нативной последовательности нуклеотидов.
17. Нуклеиновая кислота по п. 1, где перекодированная последовательность нуклеотидов имеет одну или несколько из характеристик, выбранных из группы, состоящей из отсутствия ингибиторных мотивов прокариотов, отсутствия консенсусных сайтов доноров сплайсированного фрагмента, отсутствия сайтов скрытых доноров сплайсированного фрагмента и содержания GC, находящегося в пределах между 60 и 65%.
18. Нуклеиновая кислота по п. 1, где промоторная последовательность является функционально связанной с кодирующей последовательностью для белка RdCVF.
19. Нуклеиновая кислота по п. 18, где промотор представляет собой промотор цитомегаловируса (CMV).
20. Нуклеиновая кислота по п. 19, где промотор CMV содержит 150-812 из SEQ ID NO:11.
21. Нуклеиновая кислота по п. 1, где последовательность интрона является функционально связанной с кодирующей последовательностью для белка RdCVF.
22. Нуклеиновая кислота по п. 21, где последовательность интрона представляет собой последовательность интрона бета-глобина.
23. Нуклеиновая кислота по п. 21, где последовательность интрона содержит нуклеотиды 820-1312 из SEQ ID NO:11.
24. Нуклеиновая кислота по п. 1, где нуклеиновая кислота содержит SEQ ID NO:11, последовательность нуклеотидов 150-2080 из SEQ ID NO:11 или последовательности нуклеотидов 150-812, 820-1312 и 1340-2080 из SEQ ID NO:11.
25. Вирусный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из указанных выше пунктов.
26. Вирусный вектор по п. 25, где вирусный вектор представляет собой адено-ассоциированный вирусный вектор (AAV).
27. Вирусный вектор по п. 26, где вектор AAV основывается на серотипе 2 AAV.
28. Вирусный вектор по п. 26, где вектор AAV основывается на серотипе 8 AAV.
29. Вирусный вектор по п. 25, где вирусный вектор не представляет собой вирусный вектор бычьего иммунодефицита.
30. Вирусный вектор по п. 25, где вирусный вектор не является вирусным вектором.
31. Вирусный вектор по п. 25, где вирусный вектор выбирают из группы, состоящей из вирусного вектора ДНК, безоболочечного вирусного вектора и аденовирусного вектора.
32. Выделенная клетка, содержащая нуклеиновую кислоту по любому из пп. 1-4, где клетка секретирует белок RdCVF.
33. Белок RdCVF, продуцируемый клеткой по п. 32, где белок не является белком природного происхождения.
34. Фармацевтическое средство, содержащее (i) фармацевтически приемлемый носитель и (ii) нуклеиновую кислоту по любому из пп. 1-24, вирусный вектор по любому из пп. 25-31, белок RdCVF по п. 33 или их сочетание.
35. Способ получения белка RdCVF, включающий культивирование клеток по п. 32 при условиях, которые делают возможным экспрессирование и секретирование белка RdCVF и выделение белка RdCVF из культуры клеток.
36. Способ по п. 35, дополнительно включающий очистку белка RdCVF из супернатанта культуры клеток.
37. Белок RdCVF, получаемый с помощью способа по п. 35 или 36, где белок не является белком природного происхождения.
38. Способ сохранения палочковидных зрительных клеток в глазу млекопитающего, включающий введение в глаз млекопитающего нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-24, вирусного вектора по любому из пп. 25-31, белка RdCVF по п. 33 или 37, фармацевтического средства по п. 34 или их сочетания в количестве, эффективном для сохранения палочковидных зрительных клеток.
39. Способ по п. 38, в котором вирусный вектор или нуклеиновую кислоту вводят посредством субретинальной инъекции.
40. Способ по п. 39, в котором вирусный вектор или нуклеиновую кислоту вводят посредством интравитреальной инъекции, инъекции в переднюю камеру глаза, подконъюктивальной инъекции или субтеноновой инъекции.
41. Способ по любому из пп. 38-40, в котором млекопитающее представляет собой человека.
42. Способ по любому из пп. 38-40, в котором млекопитающее страдает от глазного заболевания, выбранного из группы, состоящей из дистрофии сетчатки, дегенерации желтого пятна Штаргардта, пигментной дистрофии сетчатки, сухой возрастной макулярной дегенерации (сухой AMD), географической атрофии (поздней стадии сухой AMD), влажной возрастной макулярной дегенерации (влажной AMD), глаукомы/глазной гипертензии, диабетической ретинопатии, синдрома Барде-Бидля, синдрома Бессена-Корнцвейга, болезни Беста, хороидеремии, гиратной атрофии, врожденного амавроза, синдрома Рефсума, синдрома Уше, глазного заболевания, связанного со щитовидной железой, базедовой болезни, заболевания, связанного с пигментированными эпителиальными клетками сетчатки, заболевания переднего сегмента, заболевания/катаракты хрусталика, расстройства глазной чаши или увеита.
43. Способ по любому из пп. 38-40, в котором перед введением сохраняемая палочковидная зрительная клетка не содержит нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-24 и не является трансдуцированной вирусным вектором.
44. Способ сохранения палочковидных зрительных клеток в глазу млекопитающего, включающий введение в глаз млекопитающего нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-24 или вирусного вектора по любому из пп. 25-30, в котором нуклеиновую кислоту или вирусный вектор вводят посредством субретинальной инъекции и палочковидные зрительные клетки сохраняют в области, по меньшей мере на расстоянии 1 мм от места субретинальной инъекции.
45. Способ по п. 44, в котором палочковидные зрительные клетки сохраняют в области, по меньшей мере на расстоянии 2 мм от места субретинальной инъекции.
46. Способ секретирования белка RdCVF из клетки, включающий введение в клетку нуклеиновой кислоты по любому из пп. 9-13 и 24 или вирусного вектора по любому из пп. 25-31 при условиях, делающих возможным экспрессирование и секретирование RdCVF, кодируемого нуклеиновой кислотой или вирусным вектором.
47. Способ по п. 46, в котором клетка представляет собой клетку млекопитающего.
48. Способ по п. 46, в котором клетка представляет собой клетку человека.
49. Способ по п. 46, в котором клетка представляет собой клетку глаза.
50. Способ по п. 49, где клетку выбирают из группы, состоящей из эпителиальных клеток пигмента сетчатки (RPE), палочковидных зрительных клеток, колбочковидных зрительных клеток, биполярных клеток, горизонтальных клеток, клеток сетчатки, лишенных аксона, ганглиозных клеток и клеток ARPE-19.
51. Способ по любому из пп. 46-50, в котором клетка находится in vitro.
52. Способ по любому из пп. 46-50, в котором клетка находится in vivo.
53. Способ по любому из пп. 46-50, где клетка находится ex vivo.
54. Способ по любому из пп. 46-50, в котором клетки выбирают из группы, состоящей из клеток 293, клеток CHO, клеток PerC6, клеток Vero, клеток BHK, клеток HeLa, клеток COS, клеток MDCK, клеток 3T3 и WI38.
55. Способ по любому из пп. 46-50, в котором клетки являются инкапсулированными.
56. Способ лечения заболевания, включающий введение млекопитающему нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-24, вирусного вектора по любому из пп. 25-31, белка RdCVF по п. 33, фармацевтического средства по п. 34 или их сочетания, где заболевание выбирают из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, болезни Хантингтона, болезни Паркинсона и болезни органов обоняния.
57. Способ по п. 56, в котором млекопитающее представляет собой человека.