СПОСОБ СОЗДАНИЯ НАБОРОВ МИКРОСФЕР, ОПТИЧЕСКИ КОДИРОВАННЫХ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫМИ НАНОКРИСТАЛЛАМИ И НЕСУЩИХ НА СВОЕЙ ПОВЕРХНОСТИ РАСПОЗНАЮЩИЕ БИОЛОГИЧЕСКИЕ МОЛЕКУЛЫ

1. Способ создания наборов микросфер, оптически кодированных за счет нанесения на их поверхность слоев противоположно заряженных полиэлектролитов и слоев водорастворимых флуоресцентных нанокристаллов и несущих на своей поверхности распознающие биологические молекулы, отличающийся тем, что оптическое кодирование осуществляют за счет нанесения нескольких слоев флуоресцентных нанокристаллов, причем слой флуоресцентных нанокристаллов одного цвета пространственно отделяют от соседнего слоя нанокристаллов другого цвета несколькими слоями полиэлектролитов, при этом для формирования внешнего слоя полиэлектролита используют полимер, включающий в себя функциональные группы, с помощью которых осуществляют химические реакции связывания с функциональными группами распознающих биологических молекул.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве микросфер используют полимерные микросферы размером от 2 до 10 мкм.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что полимерные микросферы представляют собой меламиновые, полистирольные, полиметилметакрилатные или силикагелевые частицы, поверхность которых предварительно функционализируют.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что функционализация поверхности микросфер проводится введением амино- или карбоксильных групп.
5. Способ по п. 1 или 4, отличающийся тем, что для оптического кодирования микросфер используют полупроводниковые нанокристаллы типа «ядро-оболочка», состоящие из атомов элементов II-VI или III-V групп Периодической таблицы Менделеева и имеющие размер меньше радиуса экситона Бора для данного материала.
6. Способ по п. 1 или 4, отличающийся тем, что в качестве полупроводниковых нанокристаллов используют нанокристаллы с максимумами флуоресценции от 450 до 800 нм.
7. Способ по п. 1 или 4, отличающийся тем, что полупроводниковые нанокристаллы предварительно переводят в водную фазу и стабилизируют обработкой тиолсодержащими соединениями.
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве отрицательно заряженных полиэлектролитов используют поликислоты - поливинилсульфоновая кислота, полистиролсульфоновая кислота, полиакриловая кислота, полиметакриловая кислота, полиглутаминовая кислота, полифосфорная кислота и др. и/или соли этих поликислот.
9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве положительно заряженных полиэлектролитов используют полиоснования - полиаллиламин, поливиниламин, политриметиламмонийэтилметакриалат, полилизин, поли-4-винилпиридин, гидроксид поли-N-триметилвиниламмония и др., и/или соли этих полиоснований.
10. Способ по п. 1, или 4, или 9, отличающийся тем, что между слоями флуоресцентных нанокристаллов разных цветов наносят 3 и более слоев полиэлектролитов разных зарядов, обеспечивая пространственное разделение нанокристаллов разных цветов на расстояния свыше 10 нм.
11. Способ по п. 10, отличающийся тем, что внешним полиэлектролитным слоем служит поликислота или соль этой поликислоты, содержащие одну или несколько карбоксильных групп.
12. Способ по п. 10, отличающийся тем, что одну или несколько карбоксильных групп поликислоты внешнего полиэлектролитного слоя химически связывают с аминогруппами распознающих биологических молекул.
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что для химического связывания карбоксильных групп поликислоты внешнего полиэлектролитного слоя микросферы и аминогрупп распознающих биологических молекул используют карбодиимиды.
14. Способ по п.п. 1 или 12, отличающийся тем, что в качестве распознающих биологических молекул используют нативные или модифицированные белки, антитела, пептиды, нуклеиновые кислоты, олигонуклеотиды или аптамеры.
15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что распознающие биологические молекулы модифицируют химически путем введения дополнительных аминогрупп.