СПОСОБ ОЧИСТКИ БЕЛКА

1. Способ получения антитела или его фрагмента, включающий:
- экспрессию указанного антитела или его фрагмента в клетке-хозяине;
- выделение смеси, содержащей антитело или его фрагмент, обломки клеток-хозяев и примеси; и
- очистку указанного антитела или его фрагмента от смеси, при этом указанная очистка включает:
- фильтрацию через активированный уголь, за которой следует
- хроматография на белке А.
2. Способ по п.1, в котором указанная очистка включает по меньшей мере одну дополнительную стадию хроматографии.
3. Способ по п.2, в котором указанные дополнительные стадии хроматографии включают катионообменную хроматографию и/или анионообменную хроматографию.
4. Способ по любому из пп. 1-3, в котором выделенное антитело или его фрагмент содержит нативные дисульфидные связи.
5. Способ по любому из пп. 1-4, в котором выделенное антитело или его фрагмент содержит нативные межцепочечные дисульфидные связи.
6. Способ по любому из пп. 1-5, в котором указанная клетка-хозяин является клеткой-хозяином млекопитающего, и смесь, содержащая антитело, является супернатантом клеточной культуры.
7. Способ по п.6, в котором указанный процесс очистки дополнительно включает глубинную фильтрацию супернатанта клеточной культуры перед фильтрацией через активированный уголь.
8. Способ по п.7, в котором глубинную фильтрацию и фильтрацию через активированный уголь осуществляют однопоточно.
9. Способ предотвращения восстановления дисульфидной связи во время очистки антитела или его фрагмента, экспрессированного в клетке-хозяине, включающий:
- стадию фильтрации через активированный уголь, за которой следует
- хроматография на белке А.
10. Способ очистки антитела или его фрагмента от жидкой смеси, содержащей загрязнители, включающий:
- фильтрацию указанной жидкой смеси через фильтр с активированным углем, за которой следует
- хроматография на белке А.
11. Способ по п.10, в котором указанное выделенное антитело или его фрагмент содержит нативные дисульфидные связи.
12. Способ по п.11, в котором выделенный белок содержит нативные межцепочечные дисульфидные связи.
13. Способ по любому из пп. 1-12, в котором антитело или фрагмент, выделенные в результате хроматографии на белке A, содержат менее 10%, менее 5%, менее 4%, менее 3%, менее 2% или менее 1% связанных с восстановлением антитела примесей.
14. Способ по любому из пп. 1-13, в котором антитело или фрагмент, выделенные в результате хроматографии на белке A, содержит меньше связанных с восстановлением антитела примесей, чем антитело или фрагмент, выделенные в результате этого же процесса без использования стадии фильтрации через активированный уголь.
15. Способ уменьшения количества восстанавливающих агентов во время очистки антитела или его фрагмента, включающий:
фильтрацию через активированный уголь, за которой следует
хроматография на белке А.