Сравнительный анализ морфологическихудк изменений в плаценте свиней при нормальной и осложненной супоросности

УДК 611.013.85

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ В ПЛАЦЕНТЕ СВИНЕЙ ПРИ НОРМАЛЬНОЙ И ОСЛОЖНЕННОЙ СУПОРОСНОСТИ

Л. И. ДРОЗДОВА,

доктор ветеринарных наук, профессор, заведующая кафедрой,

А. А. ЛАЗАРЕВА,

аспирант,

Уральский государственный аграрный университет

Ключевые слова: плацента, свиньи, гистологическое исследование, тучные клетки, трофобласт, хорион. Получение здорового приплода - одна из первоочередных задач, стоящая перед ветеринарными специалистами свиноводческих комплексов. Для нормального развития плода необходима постоянная координация функций двух организмов - матери и плода, осуществляемая провизорным органом - плацентой. Материал для исследований был отобран в КФХ Дергачевой С. И. (г. Полевской, Свердловская область). Исследования проводились на базе кафедры анатомии и физиологии УрГАУ, ИЭРиЖ УрО РАН. В ходе опыта были исследованы плаценты от 10 свиноматок, у которых на момент родового периода наблюдалась патология мертворождения плодов, мумификация плодов и со-четанная патология. Для гистологического исследования участки плаценты фиксировали в 10-процентном растворе нейтрального формалина, с последующей проводкой в спиртах восходящей крепости и ксилолах с заключением в парафин. Полученные срезы окрашивали по общепринятым методикам - гематоксилином и эозином, толуидиновым синим. При исследовании препаратов послойно описывали структуру плаценты, обращали внимание на клеточный состав каждого слоя плаценты, состояние и структуру сосудов и лакун, различные виды скопления клеток, характеризующих патологический процесс. Результаты гистологического исследования плацент свиноматок с патологией беременности показывают наличие изменений со стороны: эпителия ворсин хориона, цитотрофобласта и сосудистого русла. Специфическим признаком стало проявление активной тучноклеточной реакции на границе с патологическим очагом.

COMPARATIVE ANALYSIS OF MORPHOLOGICAL CHANGES IN THE PLACENTA OF SOWS WITH NORMAL AND PATHOLOGICAL PREGNANCY

L. I. DROZDOVA,

doctor of veterinary sciences, professor, head of the department,

A. A. LAZAREVА,

postgraduate student,

Ural State Agrarian University

Keywords: placenta, sows, histological examination, adipose cells, trophoblast, chorion.

Obtaining healthy offspring is one of the primary challenges standing before the veterinary specialists of pig-breeding complexes. To develop normally, the fetus requires constant coordination of functions of two organisms, the mother and the fetus, that is ensured by a primary organ - placenta. Material for research was selected from the farm enterprise Dergacheva S. I. (Polevskoy, Sverdlovsk region). The research was conducted at the department of anatomy and physiology of the Ural State Agrarian University. The objects of the experiment were placentas from 10 sows, which at the time of the birth period had stillborn fetuses, mummification of fetuses and concomitant pathology. For histological examination the placentas were fixed in 10% neutral formalin solution, with subsequent submerging in alcohols of increasing strength and xylenes with embedding in paraffin. The obtained sections were stained by standard methods with hematoxylin and eosin, toluidine blue. The structure of the placenta was described layer by layer. Special attention was paid to the cellular composition of each layer, the condition and structure of blood vessels and lacunae, and various types of cell clusters that characterize the disease process. The results of the histological analysis of sow placentas during abnormal pregnancy show changes in the epithelium of the chorionic villi, cytotrophoblast and vasculature. The occurrence of active basophilic reaction on the border with the pathological focus was a specific symptom.

Положительная рецензия представлена Н. А. Татарниковой, доктором ветеринарных наук, профессором кафедры инфекционных болезней Пермской государственной сельскохозяйственной академии.

Существующие способы и технологии репродуктивного цикла в свиноводстве требуют повышения эффективности диагностической и лечебно-профилактической работы. Это обусловлено тем, что процент акушерско-гинекологических заболеваний свиноматок остается достаточно высоким. Акушерско-гинекологическая патология ежегодно регистрируется у 50,5-77,2 % опоросившихся свиноматок [1].

Н. И. Шумский (2002) приводит следующие данные по заболеваемости свиноматок послеродовыми болезнями: в условиях промышленных комплексов заболеваемость составляет 46-74 %, в среднем -64,7 %, в том числе метрит-мастит-агалактией -15-38 %, в среднем - 22,1 %, и острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом - 35-54 %, в среднем - 42,6 %. Клинически здоровыми остаются только 25-50 %, в среднем - 35,3 % свиноматок.

Получение здорового приплода - одна из первоочередных задач, стоящая перед ветеринарными специалистами свиноводческих комплексов. Одновременно проблемы эмбриогенеза, решаемые учеными-исследователями, занимают центральное место в охране здоровья потомства. Для нормального развития плода необходима постоянная координация функций двух организмов - матери и плода, формирующих единую морфофункциональную систему «мать - плод». Главным координирующим звеном этой системы служит плацента. Плацента, являясь провизорным органом, обеспечивает развитие от эмбриона до жизнеспособного приплода. Функции плаценты направлены на поддержание полноценных материнско-плодных взаимоотношений, заключающихся не только в доставке плоду питательных веществ и выведения продуктов метаболизма, но и охране его от вредных влияний материнского организма и окружающей среды. Плацентой осуществляются газообмен, синтез белков, продукция и транспорт гормонов, депонирование биологически активных веществ и токсинов, а также выделительная функция, наряду с коррекцией свертывающей системы крови и иммунной регуляцией в системе «мать - плод» [4]. Плацента свиньи по характеру расположения ворсинок и крипт относится к диффузной, по характеру питания - к эмбриотрофной [9]. Традиционно в плаценте принято различать детскую и материнскую части. Детская представлена хориальными ворсинами, а материнская - слизистой оболочкой матки с ее многочисленными сосудами [2]. По характеру связи материнской и детской частей плацента свиньи относится к эпителиохориаль-ному виду. Процесс плацентации происходит без нарушения целостности эпителия слизистой оболочки матки. Эпителиальный слой матки свиньи является однослойным и однорядным (Ю. Т. Техвер, 1968). При субмикроскопическом исследовании эпителия

матки у свиней Х. В. Стробанд и др. (1986) выявили, что на протяжении эстрального цикла и в начальные сроки беременности покровный и железистый эпителий эндометрия состоял из мерцательных и секреторных клеток, с преобладанием последних. Ворсины хориальной оболочки состоят из эпителиального покрова, представленными двумя слоями трофобла-ста - симпластическим и клеточным, и соединительнотканной стромы с плодовыми сосудами [3].

Было доказано, что в трофобласте плаценты человека (П. А. Ясинский, 1867; Т. Ланганс, 1870, 1877; Ф. Н. Кащенко, 1885) и плаценты грызунов (С. С. Ми-нот, 1889; К. П. Улезко-Строганова, 1895; А. А. Максимов, 1897) имеется два слоя: наружный (синци-тиотрофобласт, плазмодиотрофобласт, симпласт) и внутренний (цитотрофобласт, или слой Ланганса) [2]. Однако, по данным работы М. Я. Субботина (1954), трофобласт эпителиохориальной плаценты свиньи представлен только цитотрофобластом, состоящим из однослойного призматического эпителия с неровной свободной поверхностью и четко выраженными межклеточными границами.

При анализе данных литературы по нормальной и патологической морфологии плаценты свиньи становится видно, что превалируют работы, описывающие изменения в плаценте при конкретных заболеваниях: пастереллезе (Л. И. Чекасина, 2009; Г. Д. Веревкин, 2011), цирковирусной инфекции (М. Р. Хамитов, 2012), хламидиозе (Н. А. Татарни-кова, 2003), гиподинамии (В. М. Елин, 1984) и др. В этой связи тщательному изучению подвергнуты механизмы повышения проницаемости плацентарного барьер и патологические изменения морфологического субстрата данного гисто-гематического барьера в целом.

Так, в плаценте свиней при цирковирусной инфекции развивается комплекс изменений, характерных для дистрофических и воспалительных процессов. Активная макрофагальная реакция является патогномоничной для патологии плаценты при цирковирусной инфекции [7]. Хламидийный плацентит сопровождался хронической недостаточностью плаценты, обусловленной наличием большого количества фибриноида, тромбозом интервиллезного пространства, массивным кальцинозом. При исследовании тканей плацентарного барьера абортировавших свиноматок обнаружены единичные плазмобласты и довольно значительное количество эозинофилов и макрофагов. У этих животных зарегистрировано резкое изменение стенки кровеносных сосудов в виде мукоидного и фибриноидного набухания и пролиферации эндотелиоцитов, отложение гликозо-аминогликанов как в самой стенке, так и в разрыхленной соединительной ткани [6].

В ходе исследований комплекса патологических изменений в системе «мать - плацента - плод» при хламидийной инфекции одним из признаков иммунобиологической реакции было наличие в матке пе-риваскулярно расположенных плазматических клеток, ответственных за образование антител [8].

Из плацентарных компонентов ворсинчатый хорион наиболее активен в реализации метаболизма между кровью матери и плода и представляет особый интерес в качестве объекта для иммуноморфо-логических исследований.

В гуманитарной медицине исследования доказали, что тучные клетки стромы ворсин хориона играют важную роль в защите плода от чужеродных агентов (М. Васиела, 2005). Работы Н. С. Линьковой, А. В. Костылева свидетельствуют о повышении числа тучных клеток в плаценте и пуповине при переношенной беременности по сравнению с нормой. В ветеринарной медицине подобные исследования крайне редки.

Цель и методика исследований. Цель - проведение сравнительного анализа морфологических изменений в плаценте свиньи при патологической и нормальной беременности для выявления тучнокле-точной реакции.

Материал был отобран в КФХ Дергачевой С. И. (г. Полевской, Свердловская область). Исследования проводились на базе кафедры анатомии и физиологии УрГАУ, ИЭРиЖ Уро РАН.

В ходе опыта были исследованы плаценты от 10 свиноматок, у которых на момент родового периода наблюдались мертворожденные плоды, мумификация плодов и сочетанная патология. Из них у 4-х голов патологии в родовом периоде не наблюдалось. У 2-х отмечалась мумификация плодов на раннем сроке беременности. У 3-х наблюдались мертворожденные плоды в количестве от 1 до 3-х. У 1-ой свиноматки наблюдались как мертворожденные, так и мумифицированные плоды.

Отобранные участки плаценты подвергали фиксации в 10-процентном водном растворе нейтрального формалина. Из отобранного материала вырезали фрагменты тканей размером 1 х 0,5 х 0,5, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации, с последующей заливкой в парафин. Срезы толщиной 5-7 мкм готовили на санном микротоме МС-3.

Препараты окрашивали по общепринятым стандартным методикам. Обзорное окрашивание гематоксилином и эозином использовали для общей оценки развития и состояния эпителия ворсин, синцитиотрофобласта и сосудов. Окрашивание то-луидиновым синим использовали для выявления специфической тучноклеточной реакции. Изучение морфологической картины проводили на микроскопе Leica DM 2500.

Результаты исследований. Оценку морфологических изменений проводили по трем компонентам плаценты: синцитиотрофобласта, сосудистого звена и эпителия ворсин хориона.

В ходе гистологического исследования плаценты свиноматок с явлениями мертворождения и мумификации отмечалось укорочение ворсин хориона по сравнению с плацентами свиноматок без патологии. Со стороны эпителия ворсин наблюдалась пролиферативная активность эпителиального слоя, гиперплазия клеток, некротическое слущивание и, как следствие, локальный некроз участков ворсин (рис. 1). В некоторых случаях наблюдалась одновременная вакуолизация компонентов цитотрофо-бласта и эпителиальных клеток (рис. 2). Отложения фибриноида (маркера иммунного конфликта) в межворсинчатом пространстве в большом количестве наблюдались у свиноматок с патологией мумификации (рис. 3). Были отмечены незначительные отложения фибриноида у свиноматок без патологии беременности. Со стороны синцитиотрофобласта и цитотрофоласта регистрировался массовый некроз данных компонентов. Вблизи некротических участков отмечались очаги кровоизлияний.

Рис. 1. Укорочение ворсин хориона. Гиперплазия эпителия

Fig. 1. Shortening of chorionic villi. Hyperplasia of epitelium

Рис. 2. Вакуолизация эпителия, цитотрофобласта

Fig. 2. Vacuolation of epithelium and cytotrophoblast (hematoxylin

and eosin staining, vol. х 40) www.avu.usaca.ru

Рис. 3. Отложение фибриноида эпителия (окр. г.-э., об. х 20) Fig. 3. Precipitation of epithelium fibrinoid (hematoxylin and eosin

staining, vol. х 20)

Рис. 4. Слущивание клеток эндотелия

Рис. 5. Формирование внутрисосудистых тромбов Рис. 6. Активная тучноклеточнаяреакция на границе с

Fig. 5. Formation of intravascular thrombs (hematoxylin and eosin Fig. 6. Active basophilic reaction on the border with the haemorrhage

staining, vol. Х 10) focus

В просвете сосудов наблюдалось слущивание тивность клеток эпителия, некротическое слущива-

клеток эндотелия (рис. 4), внутрисосудистый гемо- ние, вакуолизация цитоплазмы. лиз эритроцитов, формирование внутрисосудистых 2. Со стороны синцитио- и цитотрофобласта:

тромбов (рис. 5), массовый диапедез эритроцитов. некроз, вакуолизация компонентов, отложение

Активная тучноклеточная реакция при окра- фибриноида.

ске толуидиновым синим отмечалась на границе 3. Со стороны сосудистого звена: диапедез эри-

с очагами кровоизлияний, в препаратах плаценты троцитов, образование внутрисосудистых тромбов,

свиноматки с сочетанной патологией беременно- появление очагов кровоизлияний.

сти (рис. 6). Единичные мастоциты наблюдались Специфическим признаком стало проявление ак-преимущественно периваскулярно у всех групп тивной тучноклеточной реакции на границе с пато-

свиноматок. логическим очагом и периваскулярно.

Заключение. В ходе проведенного нами гисто- Таким образом, комплекс обнаруженных нами

логического исследования плаценты свиноматок с изменений в плаценте свиноматок с различной пато-

различной патологией беременности были установ- логией беременности характеризуется хронически-

лены следующие изменения: ми, дистрофическими, некробиотическими и сосу-

1. Со стороны эпителиального слоя хориона: уко- дисто-стромальными процессами. рочение ворсин, гиперплазия, пролиферативная ак-

Литература

1. Ботяновский А. Р. Послеродовые эндометриты у свиноматок // Ученые записки Витебской государственной академии ветеринарной медицины. 2007. Т. 43. Вып. 2. С. 126-129.

2. Гороховский Н. Л. Материалы к сравнительному морфогенезу плаценты : автореф. дис. ... д-ра вет. наук. Семипалатинск, 1971.

18 www.avu.usaca.ru

3. Дроздова Л. И. Патоморфология плацентарного барьера животных. Екатеринбург : УрГСХА, 2010. С. 10-25.

4. Золотухина И. А. Функциональная морфология эпителия ворсин плаценты в разные сроки неосложнен-ной беременности : дис. ... канд. мед. наук. М., 2011.

5. Линькова Н. С. Сравнительная характеристика резидентных иммунных клеток плаценты у женщин различного возраста : автореф. дис. ... канд. биол. наук. СПб., 2010. 19 с.

6. Дроздова Л. И., Татарникова Н. А. Морфология гистогематических барьеров при хламидиозе свиней : учебное пособие. Пермь : ПГСХА, 2003. 205 с.

7. Хамитов М. Р. Морфологические изменения в системе «мать - плацента - новорожденный» при цирко-вирусной инфекции свиней : автореф. дис. . канд. вет. наук. Екатеринбург, 2012.

8. Чекасина Л. И. Патоморфогенез пастереллеза свиней в системе «мать - плацента - плод» : автореф. дис. . канд. вет. наук. Екатеринбург, 2009.

9. Furukawa S., Kuroda Y., Sugiyama A. Comparison of the histological structure of placenta in experimental animals // Journal of Toxicological Pathology. 2014. № 27. P. 11-18.

References

1. Botyanovski A. R. Postpartum endometritis in sows // Scholarly articles of Vitebsk veterinary academy. 2007. Vol. 43. Issue 2. P. 126-129.

2. Gorokhovsky N. L. Materials for the comparative morphogenesis of the placenta : abstract of dis. ... dr. of vet. sciences. Semipalatinsk, 1971.

3. Drozdova L. I. Pathomorphology of the placental barrier of animals. Ekaterinburg : UrSAU, 2010. P. 10-25.

4. Zolotukhina I. A. Functional morphology of epithelium of the placental villi at different times of uncomplicated pregnancy : dis. ... cand. of med. sciences. Moscow, 2011.

5. Linkova N. S. Comparative characteristics of the resident immune cells of the placenta in women of various age : abstract of dis. ... cand. of biol. sciences. Saint-Petersburg, 2010. 19 p.

6. Drozdova L. I., Tatarnikova N. A. Clinical and morphological manifestation of chlamydia in sows : guideline manual. Perm : PSAU, 2003. 205 p.

7. Khamitov M. R. Morphological changes in the system "mother - placenta - newborn" under circovirus infection in pigs : abstract of dis. ... cand. of vet. sciences. Ekaterinburg, 2012.

8. Chekasina L. I. Pathomorphogenesis of pasteurellosis of sows in the system "mother - placenta - fetus" : abstract of dis. ... cand. of vet. sciences. Ekaterinburg, 2009.

9. Furukawa S., Kuroda Y., Sugiyama A. Comparison of the histological structure of the placenta in experimental animals // Journal of Toxicological Pathology. 2014. № 27. P. 11-18.