СТАБИЛЬНЫЕ И РАСТВОРИМЫЕ АНТИТЕЛА

1. Антитело, которое специфически связывается с TNFα человека, содержащее:
a. вариабельный домен легкой цепи, содержащий последовательность SEQ ID NO:2 или SEQ ID NO:14, и
b. вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий последовательность SEQ ID NO:5.
2. Антитело по п. 1, в котором вариабельный домен легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO:2.
3. Антитело по п. 1, в котором вариабельный домен легкой цепи содержит последовательность SEQ ID NO:14.
4. Антитело по п. 1, дополнительно имеющее линкер, содержащий последовательность SEQ ID NO:7.
5. Антитело по п. 1, которое содержит последовательность SEQ ID NO: 10.
6. Антитело по п. 1, которое содержит последовательность SEQ ID NO:17.
7. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество антитела по п. 1 и фармацевтически приемлемый носитель.
8. Способ лечения TNFα-опосредуемого заболевания, включающий введение индивиду, при необходимости, фармацевтической композиции по п. 7.
9. Способ по п. 8, в котором TNF-альфа-опосредуемым заболеванием является глазная болезнь, выбранная из группы, состоящей из увеита, болезни Бехчета, ретинита, сухости глаз, глаукомы, синдрома Шегрена, диабетической невропатии, склерита,
возрастной дегенерации желтого пятна и кератита.
10. Способ по п. 8, в котором фармацевтическую композицию вводят с использованием глазного, интраназального, ушного, сублингвального, чрескожного, местного, перорального, назального, ректального или парентерального введения.
11. Способ по п. 10, в котором фармацевтическую композицию вводят однократно или разделяют на курс лечения в общей дозе, составляющей от 0,1 до 100 мг антитела.
12. Способ по п. 8, в котором TNF-альфа-опосредуемым заболеванием является увеит, а фармацевтическую композицию применяют место в глаз индивида.
13. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело по п. 1.
14. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п. 13.
15. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п. 14.
2
16. Антитело по п. 1, которое представляет собой Fab, Fab', F(ab)', одноцепочечный Fv (scFv), Fv-фрагмент или линейное антитело.
17. Двухвалентная или биспецифическая молекула, содержащая антитело по п. 1.
18. Способ уменьшения способности антитела к агрегации, включающий введение одной или более замен аминокислот в области контакта вариабельного домена легкой цепи (VL) и вариабельного домена тяжелой цепи (VH) антитела, причем одна или более замен находятся в положениях остатков, выбранных для уменьшения свободной энергии между VL и VH по крайней мере на 0,5 ккал/моль, в связи с чем уменьшается способность к агрегации антитела по сравнению с исходным антителом.
2
19. Способ по п. 18, в котором антитело представляет собой Fab, Fab', F(ab)', одноцепочечный Fv (scFv), Fv-фрагмент, диатело, одноцепочечное диатело, тандемное антитело или линейное антитело.
20. Способ по п. 18, в котором последовательность вариабельного домена легкой цепи антитела по крайней мере на 65% идентична последовательности SEQ ID NO:1.
21. Способ по п. 20, в котором модификация включает замену в положении 50 в соответствии с системой нумерации AHo и/или в положении 47 в соответствии с системой нумерации AHo вариабельного домена легкой цепи.
22. Способ по п. 21, в котором заменой является аргинин (R) в положении 50 в соответствии с системой нумерации AHo и/или аргинин (R) в положении 47 в соответствии с системой нумерации AHo вариабельного домена легкой цепи.
23. Способ по п. 22, в котором лизин (К) заменен на аргинин (R) в положении 47 и/или 50 в соответствии с системой нумерации AHo вариабельного домена легкой цепи.
24. Способ по п. 18, в котором антитело содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи, по крайней мере на 85% идентичную последовательности SEQ ID NO:1.
25. Способ по п. 18, в котором антитело содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи, которая по крайней мере на 85% идентична последовательности SEQ ID NO:3 или последовательности SEQ ID NO:4.
26. Способ по п. 18, включающий, кроме того, замены аминокислот в положениях 12, 103 и 144 в соответствии с системой нумерации AHo вариабельного домена тяжелой цепи.
27. Антитело, полученное способом по п. 18.