СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ КОЛОСТРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА И НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У ТЕЛЯТ
METHOD FOR INCREASING COLOSTRAL IMMUNITY AND NONSPECIFIC RESISTANCE IN CALVES

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к средствам повышения колострального иммунитета и неспецифической резистентности у новорожденных телят.
Проблема выращивания здорового молодняка сельскохозяйственных животных является весьма актуальной. Перед рождением плод находится в стерильной среде (матке), которая хорошо защищена от большинства источников инфекций, но после рождения организм теленка заселяется множеством бактерий, присутствующих в окружающей среде. Наличие антител в крови новорожденного теленка является жизненно важным для его защиты от многих инфекций (в первую очередь вызывающих диарею). Пассивная передача иммунитета от коровы к новорожденному теленку происходит за счет наличия антител в молозиве. Без адекватного количества антител в крови смертность новорожденных телят бывает, как правило, высокая в возрасте нескольких дней (недель). До приема молозива в крови у теленка отмечается низкое содержание лейкоцитов, общего белка, иммуноглобулинов, а после приема молозива к концу первых суток их количество существенно увеличивается. В последующем эти показатели снижаются. Пассивно приобретенный иммунитет новорожденного направлен, прежде всего, против тех антигенов или возбудителей, с которыми была в контакте мать. В большинстве стад с низкой концентрацией иммуноглобулинов в сыворотке крови телят, наблюдаются серьезные вспышки заболеваний [1].
Увеличить количество иммуноглобулинов в молозиве можно разными способами, в том числе за счет воздействия на организм коров-матерей в последние дни перед отелом. Известно, что иммуноглобулины у коров аккумулируются в молозиве за 3-9 дней до отела. Организм телят нуждается в это время в стимуляции иммунной системы и неспецифической резистентности, и действие иммуномодулирующих препаратов проявляется более отчетливо (Коваленко Я.Р., 1979; Харитонов Л.В., Великанов В.И. и др., 2006). Предполагается, что ряд веществ может способствовать этой аккумуляции и тем самым обеспечивать новорожденного теленка иммуноглобулинами. При этом не исключается поступление через плаценту ряда веществ, регулирующих защитные факторы плода, а также поступление этих регуляторов с молозивом.
Известен способ формирования колострального иммунитета у молодняка сельскохозяйственных животных, предусматривающий двукратное введение беременным самкам инактивированной вакцины, которую вводят с интервалом 3 дня соответственно за 21 и 17 дней до предполагаемых родов (патент RU 2305549, опуб. 10.09.2007).
Недостатком данного способа является низкая сохранность телят в первые двадцать дней жизни и кроме того, у новорожденных телят с пониженной жизнеспособностью затруднен пассивный транспорт колостральных иммуноглобулинов вследствие длительного респираторно-метаболического ацидоза.
Известен способ повышения пассивного иммунитета у новорожденных животных, заключающийся в применении иммунных сывороток [2]. Введение сывороток сопровождается образованием у животного через несколько часов пассивного иммунитета, продолжительность которого 10-14 дней.
Недостатками этого способа являются многократная обработка, трудоемкость, возможное развитие аллергии, низкий терапевтический эффект при вирусных инфекциях.
Известен способ повышения иммунитета у новорожденных телят, заключающийся в вакцинации стельных коров вакциной против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота сухой культуральной ассоциированной, живой, которая вводится подкожно в дозе 2 мл [3]. Вакцинация стельных коров приводит к формированию колострального иммунитета [4].
Недостатком этого способа является то, что использование одной вакцины не позволяет достигнуть высокого уровня иммунитета у коров и, как следствие, высокого колострального (молозивного) иммунитета, который может обеспечить надежную защиту телят от респираторных болезней.
Известно использование препарата «Синэстрол 2%» для повышения колострального иммунитета и неспецифической резистентности у телят.
Действительно «Синэстрол 2%» влияет на образование иммуноглобулинов в организме стельных коров и выделение их в составе молозива, но проявление количества иммуноглобулинов крови и уровня бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови у полученных новорожденных телят недостаточно высокое.
Задачей изобретения является снижение заболеваемости и повышение сохранности новорожденных телят в условиях неблагополучия хозяйств.
Техническим результатом изобретения является расширение арсенала средств для повышения колострального иммунитета и неспецифической резистентности у телят, за счет повышения иммунореактивности у стельных коров в период максимально приближенный к родам.
Для достижения названного технического результата, в способе повышения колострального иммунитета и неспецифической резистентности у телят, включающем введение стельным коровамдо отела препарат «Риботан» в дозе 5 мл на животное, внутримышечно и однократно.
В ветеринарной медицине используют «Риботан» - комплексный иммуномодулирующий препарат, состоящий из смеси низкомолекулярных полипептидов (0,5-1 кД) и низкомолекулярных фрагментов РНК. Оказывает иммуномодулирующее действие на Т- и В- системы иммунитета животных и функциональную активность макрофагов, субпопуляций Т- и В- лимфоцитов, а также синтез интерферонов и лимфокинов, повышает содержание лизоцима, пропер дина, β-лизина, уровень нормальных антител, предупреждает развитие стрессовых состояний. Введение риботана поддерживает баланс иммунокорректирующих клеток, нормальный гомеостаз при ряде вирусных (грипп, парагрипп и др.), бактериальных и паразитарных болезнях [5].
Риботан применяют в комплексной терапии в качестве иммуномодулирующего средства при заболеваниях, сопровождающихся развитием иммунодефицита, в том числе при агранулоцитозе и лейкопениях, как неспецифическое средство, способствующее профилактике и лечению вирусов, бактериальных, грибковых и паразитарных болезней, а также для усиления эффекта вакцинации при заблаговременном или одновременном с вакциной применении. Риботан содержит в 1,0 мл в качестве действующего вещества смесь низкомолекулярных полипептидов 10 мкг/мл и фрагментов дрожжевой РНК 105 мкг/мл, а в качестве вспомогательных веществ натрия хлорид и воду для инъекций.
Риботан по степени воздействия на организм относится к 4 классу опасности - веществам малоопасным согласно ГОСТ 12.1.007 [5].
Установлено воздействие препарата «Риботан» на образование и накопление в молочной железе коров перед отелом иммуноглобулинов и других факторов иммунитета, выделение их в составе молозива, а также влияние этих факторов на состояние колострального иммунитета и становление неспецифической резистентности у телят при инъекции его стельным коровам в период максимально приближенный к родам.
Объектами исследования были 10 глубокостельных коров черно-пестрой породы в возрасте 3-4 года и полученные от них новорожденные телята, которые были разделены на 2 группы по принципу парных аналогов.
I группа - контрольная, глубокостельные коровы (№1636, 2025, 2029, 2028, 2123) и полученные от них новорожденные телята. Глубокостельным коровам I группы вводили внутримышечно физиологический раствор хлорида натрия - 0,9% в дозе 5 мл за 3-9 дней до отела, однократно.
II группа - опытная, глубокостельные коровы (№1885, 1971, 2220, 1980, 1985) и полученные от них новорожденные телята. Глубокостельным коровам II группы внутримышечно вводили препарат «Риботан» в дозе 5 мл на животное за 3-9 дней до отела, однократно.
Время введения препаратов выбрано не случайно. Считается, что основная часть иммуноглобулинов поступает в секрет молочной железы из крови в неизмененном состоянии, аккумулируясь в молозиве за 3-9 дней до отела (Карпуть И.М., Пивовар Л.М., 1983).
Теленок рожденный от коровы контрольной группы становится контрольным теленком, а теленок рожденный от опытной коровы - соответственно опытным. В итоге народилось кратное коровам-матерям количество новорожденных телят, т.е в каждой группе по 5 телят, номера коров-матерей и полученных от них телят были одинаковыми. Формирование групп проводилось методом парных аналогов. Новорожденному теленку, сразу после появления сосательного рефлекса, выпаивали молозиво собранное от его коровы-матери.
Телята с 2-дневного возраста содержались вне помещений в боксах-домиках (т.н. «холодный метод» выращивания). Вели клиническое наблюдение за подопытными животными. Взвешивание телят проводили в день рождения телят, в конце первого, второго, третьего и четвертого месяца жизни. Телята имели свободный доступ к сену и воде.
Пробы крови у телят из яремной вены брали на 2 и 10 сутки жизни. У телят проводили общий осмотр, исследовали температуру, частоту пульса, фиксировали время появления сосательного рефлекса и уверенной позы стояния.
В ходе опыта исследовали уровень общих иммуноглобулинов, титруемую кислотность молозива коров контрольной и опытной групп. Образцы молозива отбирались из 1, 2, 3, 4, 5-го удоя. Отбиралась средняя проба объемом 100 мл.
Исследования крови и молозива проводили с применением следующих методов:
- подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов; гематокрит, гемоглобин на гематологическом анализаторе крови HTI Micro-СС-20 Plus, USA;
- выведение лейкоцитарной формулы путем подсчета в мазках крови лейкоцитов разных видов, окрашенных по Романовскому-Гимза;
- изучение содержания общего белка на анализаторе AU480 Olympus, Япония;
- изучение белковых фракций крови (альбумины, альфа-, бета-, гамма-глобулины) на анализаторе Minicap, Sebia;
- определение бактерицидной активности сыворотки крови -фотонефелометрическим методом в модификации О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966) с применением тест-культуры Escherichia coli (штамм 0111) (В.Я. Саруханов, Н.Н. Исамбо, В.Н. Кудрявцев, 2006; Малев А.А., Гильмутдинов Р.Я., 2009); лизоцимной активности сыворотки крови - фотоэлектроколориметрическим методом в модификации отдела зоогигиены УНИИЭВ с использованием тесткультуры Micrococcus lysodeikticus; фагоцитарной активности нейтрофилов с использованием тест-культуры Staph, albus;
- содержание Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) и В-лимфоцитов - методом розеткообразования с эритроцитами быка в системе ЕАС-РОК (Скопичев В.Г., Максимюк Н.Н., 2009) [6];
- содержание иммунных глобулинов (Ig) в молозиве (молоке) с натрия сульфитом; определение титруемой кислотности молозива по Тернеру (Кондрахин И.П. и соавт., 1985) [7];
- активность γ-глутамилтрансферазы (γ-ГТ) и глюкозы на биохимическом анализаторе «Hitachi-902»;
- титр антител к антигенам Е. coli, вирусам ПГ-3 и ИРТ;
- содержание молочной и пировиноградной кислот [7];
- малонового диальдегида (МДА), активность супероксиддисмутазы (СОД), глутатион пероксидазы (ГПО) и каталазы [7];
- полученный экспериментальный материал обработан методом вариационной статистики по Стентону Гланцу (1999) [8], с помощью сервисных программ и статистических функций программы Microsoft Excel операционной системы Windows 7. Для выявления статистически значимых различий использован критерий Стьюдента. Результаты рассматривались как достоверные, начиная со значения Р≤0,05.
Анализы выполнялись на кафедре «Анатомия, хирургия и внутренние незаразные болезни» и в межкафедральной лаборатории ФГБОУ ВО Нижегородская ГСХА, лаборатории «Гемохелп» г. Нижний Новгород.
Изучался уровень общих иммуноглобулинов и титруемая кислотность молозива коров подопытных групп с 1-го по 5-й удой включительно (Таблица 1-2).
Молозиво - особый секрет молочной железы, отличающийся по физико-химическому составу и свойствам от нормального молока. Молозиво образуется за несколько дней перед отелом и некоторое время, около 4-6 суток, после родов [9, 10]. В период его образования происходит гормональная перестройка организма, которая вызывает функциональные и структурные изменения молочной железы, включающие развитие альвеолярно-дольчатого аппарата, пролиферацию клеток. Дифференциация связана с образованием на их поверхности специфических рецепторов к различным гормонам, обеспечивающих возможность синтеза молекул определенных информационных РНК, необходимых для биосинтеза молозивных белков, в первую очередь иммуноглобулинов. Наряду с индукцией локального синтеза белков, других биологически активных веществ существенно возрастает проницаемость альвеол и всех отделов емкостной системы вымени, что способствует селективному переходу из плазмы крови в секрет молочной железы многих биологически активных веществ (иммуноглобулинов, некоторых сывороточных белков, фосфолипидов, микроэлементов, гормонов, витаминов) [10, 11, 12].
В ходе эксперимента от клинически-здоровых коров подопытных групп нами было получено молозиво хорошего качества.
В наших исследованиях мы установили, что молозиво 1-го и 2-го удоя коров опытной группы содержало большее количество иммуноглобулинов соответственно на 30,9 и 15,9%, что говорит о повышении образования этих белков в организме, вследствие усиления иммунореактивности под действием риботана.
Титруемая кислотность была достаточно высокой, значения находились в пределах физиологической нормы. Титруемая кислотность молозива 1-го и 2-го удоя коров опытной группы была выше соответственно на 13,8 и 10%. Этот показатель обусловлен в основном кислотным характером казеина, которого в молозиве коров опытной группы, видимо, было больше.
Анализируя таблицы 3-5, у телят опытной группы на 2-е и 10-е сутки жизни отмечено повышение количества лейкоцитов соответственно на 69 и 42% по сравнению с контрольной группой. При этом в лейкограмме на 2-е сутки жизни у телят опытной группы количество сегментоядерных нейтрофилов было выше на 15%. Выявленные изменения в лейкоцитарной формуле свидетельствуют об активизации клеточных факторов неспецифической защиты организма новорожденных телят после применения риботана стельным коровам за 3-9 суток перед отелом.
Адаптация организма к условиям внешней среды быстрее происходила у телят опытной группы, о чем говорит повышение индекса лимфоциты/сегментоядерные нейтрофилы на 12% на 10-е сутки жизни.
Абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов на 2-е сутки жизни повысилось у телят опытной группы соответственно на 72,8 и 11,4%. Таким образом, применение препарата «Риботан» глубокостельным коровам за 3-9 дней до отела оказывает влияние на клеточный иммунитет и ускоряет пролиферацию Т-лимфоцитов у полученных новорожденных телят.
Относительное количество В-лимфоцитов в крови опытных телят было ниже чем у контрольных на 11,4% через сутки после рождения, а абсолютное количество было более высоким.
Через 10 суток мы наблюдаем увеличение общего количества лимфоцитов подопытных животных, выравнивание количества Т- и В-лимфоцитов (Таблица 3-6).
Начиная с рождения и в конце каждого месяца проводилось взвешивание телят, 4 месяца подряд.
Таким образом, в течение 4 месяцев проведения опыта, телята II группы имели более высокий среднесуточный прирост массы тела, особенно в первые три месяца жизни. Через месяц прирост массы тела телят II группы был на 19,6% выше контроля. В конце второго месяца прирост телят II группы был выше контрольных животных на 26,9%. В конце третьего месяца жизни прирост телят II группы был выше привеса прироста контрольных животных на 19,0%. В конце 4 месяца среднесуточный прирост телят II группы был выше прироста контрольных животных на 21,1%. Стимуляция колострального иммунитета и становление общей резистентности телят парентеральным введением препарата «Риботан» их коровам-матерям за 3-9 дней до отела способствует повышению прироста живой массы телят на 21,9% в сравнении с контрольной группой за 4 месяца выращивания, начиная с рождения (531,5 г/сут.; 648,2 г/сут. соответственно в контрольной и опытной группе).
Проводился общий клинический осмотр, измерение температуры, частоты пульса у новорожденных телят на 2 и 3 сутки после рождения, измерялось время появления уверенной позы стояния и появления сосательного рефлекса в минутах (Таблица 8; Таблица 9).
Телята подопытных групп имели среднее телосложение. Волосяной покров животных опытной группы более густой, блестящий, отличался от контрольных животных. Из таблиц 8 и 9 видно, что инъецированный стельным коровам за 3-9 дней до отела препарат «Риботан» оказывает благоприятный эффект на физиологический статус новорожденных телят. Температура тела у телят II группы на 2-е сутки жизни была выше температуры тела контрольных животных на 1,0°С, а частота пульса была ниже на 12,4 уд./мин. На 3-й сутки жизни температура тела телят II группы была выше на 0,5°С по сравнению с контролем. Частота пульса была меньше на 10,0 уд./мин по сравнению с показателем контрольной группы. Появление уверенной позы стояния и сосательного рефлекса у животных II группы реализовались на 11,2 и 13,6 минуты раньше. На протяжении эксперимента такие животные были более активными и подвижными.
Изучался уровень колострального иммунитета и такие показатели как титр антител к эширихиозному антигену, к антигенам вируса парагриппа-3 (ПГ-3) и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота (ИРТ) (Таблица 10; Таблица 11).
Из таблиц 10 и 11 видно, что инъецированный стельным коровам за 3-9 дней до отела препарат «Риботан» способствует повышению уровня колострального иммунитета телят опытной группы. Содержание общих иммуноглобулинов на 2-е сутки жизни было выше на 9,6 г/л у телят II группы, также можно отметить увеличение титра антител к антигену вируса ПГ-3 во II группе в 2,5 раза и инфекционного ринотрахеита соответственно в 2,6 раза по сравнению с I группой животных. На 10-е сутки жизни содержание общих иммуноглобулинов во II группе превышало контроль на 7,1 г/л. Титр антител к антигенам вируса ПГ-3 во II группе был выше в 2,0 раза, титр антител к вирусу ИРТ был выше в 1,91 раза показателя контрольной группы телят соответственно.
Были проведены биохимические и иммунологические исследования крови новорожденных телят.
Анализируя таблицы 12-14, нами установлено, что на 2-е сутки жизни у телят опытной группы был выше уровень общего белка крови на 20,4%, в большей степени за счет гамма-глобулинов и бета-глобулинов, их уровень был выше соответственно на 66,7 и 30,3%.
Фракция гамма-глобулинов включает в себя иммуноглобулины различных классов. Основными в сыворотке крови телят являются иммуноглобулины классов А, М, G. Это полифункциональные белки, которые специфически распознают разнообразные антигены и гаптены, взаимодействуют с другими иммунокомпетентными клетками, имеющими к ним рецепторы, активируют систему комплемента, обезвреживают антигены. Повышение количества гамма-глобулинов в сыворотке крови телят опытной группы связано с их большим поступлением с молозивом. Поэтому, инъецированный стельным коровам за 3-9 дней до отела препарат «Риботан» способствует повышению уровня колострального иммунитета у полученных от них телят.
На 10-е сутки жизни уровень общего белка у телят подопытных групп снизился за счет фракции альфа- и гамма-глобулинов, уровень бета-глобулинов с возрастом незначительно повысился. При этом уровень общего белка, альбуминов и гамма-глобулинов был выше у телят опытной группы соответственно на 18,2; 9,5 и 58,3%.
Бактерицидная активность сыворотки крови, отражающая суммарное действие клеточного и гуморального факторов защиты была выше у телят опытной группы на 2-е и 10-е сутки жизни на 24,7 и 21,4% по сравнению с контрольной группой.
Важным показателем неспецифической резистентности является активность лизоцима - фермента, способного лизировать живые и мертвые клетки. Лизоцимная активность повысилась у телят опытной группы на 2-е и 10-е сутки жизни на 25,0 и 19,1% в сравнении с контрольной группой. Лизоцим образуется активированными макрофагами либо выделяется после дегрануляции полиморфноядерных нейтрофилов.
Неспецифическая форма клеточного иммунитета, проявляется фагоцитарной активностью сегментоядерных нейтрофилов. Нарастание этого показателя у телят опытной группы связано с активацией внутриклеточных систем фагоцитов, повышением опсонических способностей иммуноглобулинов и нарастанием активности системы комплемента. На 2-е и 10-е сутки жизни показатель этой активности у телят опытной группы превышал величину в контроле соответственно на 17,6 и 14,7%. Фагоцитарный индекс также был выше у телят опытной группы на 2-е и 10-е сутки жизни соответственно на 44,6 и 25%
Показатели бактерицидной, лизоцимной активности сыворотки крови, фагоцитарной активности нейтрофилов, а также фагоцитарный индекс, у телят опытной группы были выше, чем в контроле. Таким образом, инъецированный стельным коровам за 3-9 дней до отела препарат «Риботан» оказывает благоприятное влияние на становление неспецифической резистентности у полученных от них телят.
Вели учет заболеваемости телят болезнями желудочно-кишечного тракта и омфалитом.
Из таблицы 15 видно, что инъецированный стельным коровам за 3-9 дней до отела препарат «Риботан» позволяет снизить заболеваемость новорожденных телят энтеритной формой эшерихиоза в 2 раза во II группе соответственно. Телята опытной группы заболели на 3 суток позже и болели на 2,5 суток меньше по сравнению с контрольной группой.
Из таблицы 16 видно, что инъецированный стельным коровам за 3-9 дней до отела препарат «Риботан» способствует формированию у новорожденных телят полученных от этих коров более выраженного колострального иммунитета, что обеспечило снижение заболеваемости телят омфалитом в 3 раза в опытной группе по сравнению с контролем.
У подопытных новорожденных телят изучали уровень метаболического статуса.
Из таблиц 17, 18 и 19 видно, что применение препарата «Риботан» инъецированного стельным коровам-матерям в период максимально приближенный к родам способствует снижению такого процесса, как ацидоз. Это можно объяснить снижением показателя лактат/пируват на 2-е сутки жизни во II группе телят, на 17,9% по сравнению с телятами I группы, при снижении уровня молочной кислоты на 45% во II группе по сравнению с контролем. Также, следует отметить, что у телят II группы регистрировался более низкий уровень МДА на 2-е и 10-е сутки жизни соответственно на 25,9 и 18,3% по сравнению с животными I группы, что характеризует замедление процесса пероксидации липидов и сохранение функциональной активности антиоксидантной защиты (АОЗ). У телят опытной группы явление эндогенной интоксикации (ЭИ) было ниже как на 2-е так и на 10-е сутки жизни.
Исследования проводили в осенний период 2020 года на молочнотоварной ферме сельскохозяйственного производственного кооператива «Нижегородец» Нижегородской области. Были задействованы в эксперименте 50 глубокостельных коров (n=50) черно-пестрой породы, исследуемые показатели которых полностью совпадают с представленными в таблицах данными.
Таким образом, введение препарата «Риботан», инъецированного стельным коровам за 3-9 дней до отела, способствует не только нормализации метаболического статуса и кислотно-основного состояния коров-матерей, которое определяет КОС новорожденных телят, но также способствует накоплению в молочной железе коров перед отелом иммуноглобулинов и других иммуногенных факторов, выделению их в составе молозива, приводящего к повышению этологических и физиологических показателей у новорожденных телят и созданию у них высокого уровня колострального иммунитета и неспецифической резистентности, а также к приросту живой массы телят и снижению заболеваемости.
Источники информации
1. Плященко, С.И. Естественная резистентность организма животных / С.И. Плященко, В.Т. Сидоров. - Л.: Колос, 1979. - 184 с.
2. Ефанова, Л.И. Защитные механизмы организма, иммунодиагностика и иммунопрофилактика инфекционных болезней животных / Л.И. Ефанова, Е.Т. Сайдулин. - Воронеж: ВГАУ. - 2004. - С. 188.
3. Наставление по применению вакцины против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота сухой культуральной ассоциированной (ВИЭВ), живой. // Утверждена Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 10.06.1996 г.
4. Хитрова, А.Е. Новые препараты для специфической профилактики смешанных инфекционных болезней телят / А.Е. Хитрова, Г.Л. Соболева, Т.И. Алипер // Ветеринарная жизнь. - №1-2, 2005. - С.12.
5. Инструкция по применению Риботана - www.vetlek.ru.
6. Скопичев, В.Г. Физиолого-биохимические основы резистентности животных. - СПб.: Издательство «Лань», 2009. - 352 с.
7. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: Справочник / И.П. Кондрахин. - М.: Колос. - 2004. - 520 с.
8. Гланц, С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. - М., Практика, 1998. - 459 с.
9. Самбуров, Н.В. Молозиво коров его состав и биологические свойства / Н.В. Самбуров, И.Л. Палаус // Вестник Курской ГСХА. - 2014. - С. 59-61.
10. Тараненко, А.Г. Регуляция молокообразования / А.Г. Тараненко. - Л. // Агропромиздат. - 1987. - С.32.
11. Larson, B.L. Immunoglobulin production and transport by the mammary gland / B.L. Larson, H.L. Hearly, J.E. Devery // J. Dai. Sci. - 1980. - V. 63. - №4. - P. 665-671.
12. Mielke, H. Geschichtliches und Grundlagen der immunobiologisehen Bezichungen zwischen Muttertier und Frucht beim Rind / H. Mielke // Mh. Vet. Med. - 1979. - Bd. 34. - №6. - S. 217-223.