Нарушения межсистемных взаимодействий при хроническом воспалительном процессе

Медицинская Иммунология 2007, Т. 9, № 6, стр. 581-588 © 2007, СПб РО РААКИ

Оригинальные статьи

НАРУШЕНИЯ МЕЖСИСТЕМНЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ВОСПАЛИТЕЛЬНОМ ПРОЦЕССЕ

Калинина Е.П., Иванов Е.М., Исаченко Е.Г.

НИИ медицинской климатологии и восстановительного лечения — Владивостокский филиал Государственного учреждения Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН, г. Владивосток

Резюме. Целью данной работы явилось выявление нарушений межсистемных взаимодействий при хроническом заболевании. Обследовано 48 пациентов с хронической обструктивной болезни легких среднего возраста 58±4,2 лет с длительностью заболевания 11,2±5,2 лет. В результате анализа лабораторных показателей выявлена степень влияния иммунокомпетентных клеток, факторов межклеточной регуляции и показателей, характеризующих состояние биомембраны на течение хронического воспалительного процесса. Метод корреляционных плеяд дает возможность выявлять и объективно оценивать взаимосвязи всех количественных показателей резистентности, от которых зависит прогноз течения, исход хронического заболевания и эффективность проводимой терапии.

Ключевые слова: цитокины, иммунокомпетентные клетки, хроническое воспаление, ферменты антиперекисного звена.

Kalinina E.P., Ivanov E.M., Isachenko E.G.

ABNORMALITIES OF INTER-SYSTEMIC INTERACTIONS IN CHRONIC INFLAMMATORY PROCESS

Abstract. A purpose of present work was to detect some abnormal inter-systemic interactions in chronic disease. Forty-eight patients with chronic obstructive pulmonary disease were under examinations. They belonged to middle-aged group

Введение

Иммунные и биохимические процессы являются основой интегративной регуляции и защиты организма, обеспечивающей поддержание системы гомеостаза. Динамическое равновесие между окислительно-восстановительными процессами и адекватное функционирование иммунной системы являются основными факторами, защищающими организм от повреждающего действия разнообразных антигенов и свободных радикалов [4, 9, 13]. Знание механизмов взаимодействия клеток дают возможность представить картину сосуществования и функционирования

Адрес для переписки:

690105, Владивосток, ул. Русская, 73г,

НИИ медицинской климатологии и восстановительного лечения.

Тел./факс: (4232) 34-55-02.

систем в живом организме в условиях постоянного изменяющегося окружения [2, 14, 19, 22]. Нарушение функции какой-либо из гомеостатических систем приводит к изменению общей регуляции, срыву устойчивости организма и усугублению патологических изменений. Несмотря на многочисленные исследования, которые выявили многие важные факторы и механизмы этиологии и патогенеза заболеваний [7, 20, 21, 23], недостаточно изучен вопрос о функциональном сопряжении и взаиморегуляции основных систем, поддерживающих постоянство внутренней среды организма. Это определяет необходимость дальнейшего изучения и уточнения характера межсистемных взаимодействий у пациентов с хроническими заболеваниями, на примере хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), учитывая участие достаточно стереотипных механизмов хронического воспалительного процесса,

независимо от природы повреждающего фактора и органа мишени.

Целью данной работы явилось выявление нарушений межсистемных взаимодействий при хроническом заболевании.

Материалы и методы

Обследовано 48 больных с хронической об-структивной болезнью легких как примером хронического воспалительного заболевания, возникающего в любом возрасте, одним из патофизиологических механизмов которого является депонирование нейтрофилов в слизистой дыхательных путей с ремоделированием бронхов и поражением паренхимы легких [1, 23]. Из групп наблюдения были исключены пациенты с отягощенным по развитию ХОБЛ наследственным анамнезом и работавшие во вредных производственных условиях, воздействующих на органы дыхания. Средняя длительность заболевания была 11,2±7,2 года, средний возраст — 58±4,2 года. У 20 пациентов наблюдалось легкое течение ХОБЛ (I стадия), у 28 человек — среднетяжелое течение заболевания (II стадия). Все пациенты находились в фазе ремиссии заболевания, получали базисную терапию (М-холинолитики). Диагноз выставлялся на основании общеклинических, функциональных и лабораторных методов обследования согласно рекомендациям, изложенным в Федеральной программе по ХОБЛ (2004) [18]. Аллергических заболеваний у обследованных выявлено не было. Группу контроля составили 27 здоровых добровольцев, не имеющих хронической бронхолегочной патологии и аллергических заболеваний, не курящих, с нормальной функцией внешнего дыхания, подтвержденной клиническими, функциональными и лабораторными методами обследования.

На клетках, полученных из мононуклеаров периферической крови доноров, исследовали уровень экспрессии молекул CD3+, CD4+, CD8+, CD22+, CD16+, CD25+ и HLA-DR+ (Беларусь). Определение TNFa и IL-8 проводилось имму-ноферментным методом с использованием наборов Duoset (Genzyme diagnostics, Cambridge, MA, USA). При определении цитокиновой реактивности иммунокомпетентных клеток (ИКК) использовалась модификация метода с определением индуцированного липополисахаридом (ЛПС) E. coli синтеза цитокинов и подсчетом индекса активности цитокиновой регуляции (ИАЦР = ЛПС(+)/ ЛПС(-) [6]. Фагоцитарную активность нейтро-филов (ФАН) определяли по методу Д.Н. Маян ского с соавт. (1988), оценивали фагоцитарный резерв (ФР) — отношение числа фагоцитов, стимулированных продигиозаном к нестимулиро-ванным, фагоцитарное число (ФЧ) — среднее число поглощенных одним фагоцитом частиц

латекса; процент нейтрофилов на каждой стадии фагоцитоза для определения завершенности процесса [10]. Для оценки кислородзависимых механизмов бактерицидности нейтрофилов использовали тест восстановления нитросинего тетразолия (НСТ), определяли НСТ резерв, индекс активации нейтрофилов (ИАН) и резерв индекса активации нейтрофилов (ИАНР), в качестве стимулятора использовался продигиозан [15]. Основные классы (А, М, G) иммуноглобулинов (^) в сыворотке крови оценивали имму-ноферментным методом («Вектор-Бест», Новосибирск). Антиоксидантную активность (АОА) изучали в плазме крови, малоновый диальдегид (МДА) определяли в эритроцитах крови [10]. Количество восстановленного глутатиона определяли в цельной крови по методу Эллмана [16]. Ферментативное звено АОА, представленое глутатиоредуктазой (ГР), глутатионпероксида-зой (ГП) и каталазой (К), определяли в цельной крови. Активность ГР оценивали по скорости окисления НАДФ-Н в присутствии окисленного глутатиона [12]. Активность ГП анализировалась по изменению поглощения восстановленного глутатиона после инкубации в присутствии перекиси водорода [12], активность К — по скорости утилизации перекиси водорода [10].

Полученные данные обрабатывали статистически с использованием пакета прикладных программ Statistica 6.1. Для обработки полученной информации использовались стандартные статистические процедуры, для углубленного анализа полученного материала применялся метод корреляционных плеяд Терентьева [15]. Анализу были подвергнуты только статистически достоверные связи. Плеяды первого уровня характеризовали пороговыми значениями г — 0,99-0,9; второго уровня — 0,89-0,8; третьего уровня — 0,79-0,7. Определялись следующие показатели: G — мощность плеяды (число признаков), G/k — относительная мощность плеяды (число признаков/ общее количество участников), D — крепость плеяды (средняя арифметическая внутриплеядных коэффициентов), П — показатель полноты взаимо связей. Чем выше (в %) показатель П, тем мощнее связаны между собой факторы в плеяде [15].

Результаты

В результате анализа лабораторных показателей, у всех обследованных с ХОБЛ наблюдались однонаправленные изменения иммунной системы в независимости от степени тяжести основного заболевания. Выявлено снижение содержания уровня клеток, несущих маркеры зрелых Т-лимфоцитов CD3 и CD4 на 35%, CD8 на 14%, что приводит к нарушению процессов регуляции через факторы межклеточной кооперации и, как следствие, к угнетению ответа

на митоген. У всех обследованных наблюдалось снижение суммарного процента завершающих стадий фагоцитоза в среднем на 39% в сочетании с низким показателем фагоцитарного числа (ФЧ — 3,23±0,14), что свидетельствует о недостаточности поглотительной активности нейтрофилов и отсутствии достаточного киллинга и расщепления антигена. Бактери-цидность нейтрофилов меньше связана с экспрессией поверхностных рецепторов и определяется активностью кислородзависимых и кислороднезависимых окислительных ферментативных систем, лизосомальных ферментов и антимикробных белков, высвобождаемых в процессе дегрануляции нейтрофилов. С помощью теста восстановления нитросинего те-тразолия (НСТ) определяли процесс активации фагоцитоза и выявили увеличение этого показателя на 38,5% у пациентов с легким течением и на74,6% — сосреднимтечениемХОБЛ. При этом наблюдалось снижение резерва НСТ до 1,29± 0,14 в независимости от степени тяжести ХОБЛ, что указывает на истощение резервных метаболических возможностей нейтрофильных гранулоцитов. У пациентов сохранялись компенсаторно высокими реакции окислительно-

го метаболизма (ИАН увеличен на 141%) и сочетались с низким резервом ИАН (1,34±0,3). О высокой антигенной нагрузке на организм пациента свидетельствовало увеличение числа клеток с рецепторами к CD25 (рецептор к ^-2) и HLA-DR на 81% и 41,9% соответственно. Остальные показатели звеньев иммунной системы находились в пределах нормы (табл. 1).

Ведущими нарушениями в системе ПОЛ-АОЗ у пациентов с ХОБЛ явились: снижение общей антиоксидантной активности, более выраженное у пациентов со средним течением ХОБЛ (45,3±2,18% против 47,7±2,3%), уменьшение активности энзимного звена антиокси-дантной защиты, более выраженное у пациентов с легким течением основного заболевания (ГП — 84,01±11,64 мкмоль/1 г НЬ) по сравнению с уровнем этого показателя у больных среднетяжелым заболеванием (107,3±13,9 мкмоль/1 г НЬ). Увеличение свободного глутатиона на 23% отмечалось у всех обследованных больных в независимости от степени тяжести ХОБЛ. Увеличение интегрального показателя интенсивности ПОЛ (МДА/АОА — 0,16±0,02) наблюдалось только у пациентов со среднетяжелым течением заболевания (табл. 2).

ТАБЛИЦА 1. ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПАЦИЕНТОВ С ХОБЛ

Показатели Больные ХОБЛ, п = 48 Здоровые, п = 27

Лейкоциты, г/л 5,3±0,36 5±1,41

Лимфоциты, % 25,9±2,1 28,2±1,2

CD3, % 33,25±2,01* 45±4,9

CD4, % 28,81±1,94* 40±3,13

CD8, % 19,8±1,07 22±1,21

CD4/CD8 1,52±0,09** 2,2±0,08

ФАН, % 60,61±3,5 62,4±1,41

ФЧ 3,31±0,21* 4±2,83

ФР 1,01±0,003* 1,04±0,001

Завершенность ФАН, % 31,04±2,3 ** 50,9±3,4

НСТ спонтанный, % (легкое/среднее течение ХОБ) 17,4±3,66**/22,7±3,40*** 13±2,07

НСТР 1,32±0,17* 2,5±0,74

ИАН, % 0,27±0,05* 0,12±0,03

ИАНР 1,42±0,24* 2,8±0,92

CD22, % 19,4±1,06 24,5±1,3

CD16, % 16,7±1,6 17,5±1,06

CD25, % 19,2±1,7** 9±0,8

HLA-DR, % 17,5±1,03* 11,2±0,5

^, г/л 1,73±0,12 2±0,12

^№1, г/л 1,25±0,07 1,1±0,21

^, г/л 9,93±0,3 9,17±0,48

Примечание: * - достоверно в сравнении с показателями у здоровых (*** - р < 0,001; ** - р < 0,01; * - р < 0,05).

ТАБЛИЦА 2. ПОКАЗАТЕЛИ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ ПАЦИЕНТОВ ХОБЛ

Показатели ХОБЛ, легкое течение п = 20 ХОБЛ, среднее течение п = 28 Здоровые п = 27

МДА, мкмоль/г Hb 6,63±0,21* 6,69±0,39 7,62±0,34

АОА, % 47,7±2,32** 45,34±2,18*** 61,86±3,52

МДА/АОА 0,138±0,008 0,16±0,02** 0,135±0,002

Глутатион, мкмоль/1г Hb 6,68±1,59* 6,85±1,27* 5,59±0,12

Глутатионпероксидаза, мкмоль/1г Hb 84,01±11,64* 107,34±11,53 128,56±12,27

Глутатионредуктаза, мкмоль/1г Hb 152,1±10,83 156,2±12,1 172,5±21,62

Каталаза, % 46,05±1,42** 40,57±1,21*** 75,6±1,81

Примечание: * - достоверно в сравнении с показателями I здоровых (*** - р < 0,001; ** - р < 0,01; * - р < 0,05).

У всех обследованных с ХОБЛ выявлена сниженная спонтанная и индуцированная ЛПС концентрация сывороточных цитокинов TNFa и ^-8 по сравнению с контрольной группой (табл. 3). У пациентов с легким течением заболевания при стимуляции ИКК ЛПС синтез ^-8 возрастал в 2 раза, TNFa — в 4 раза, по сравнению с группой здоровых доноров, в которой стимулированный синтез вышеуказанных цитокинов увеличивался в 6 и 14 раз соответственно (р < 0,001). При сти-

муляции ИКК пациентов со среднетяжелым течением заболевания уровни TNFa и ^-8 не менялись. Таким образом, иммунокомпетентные клетки больных ХОБЛ в фазу ремиссии не способны отвечать на дополнительную стимуляцию увеличением концентрации цитокинов, что свидетельствует о снижении их потенциальных резервов.

Таким образом, после проведенного клинического и иммунобиологического обследований

I плеяда G - 10; G/k - 0,3; D - 0,65; П - 68%

III плеяда G - 10; G/k - 0,3; D - 0,59; П - 38%

IV плеяда G - 7; G/k - 0,2; D - 0,59; П - 42%

II плеяда G - 3; G/k - 0,1; D - 0,62; П - 100%

Схема 1 внутри- и межсистемных корреляционных плеяд в группе здоровых

Показатели: 1 - МДА; 2 - АОА; 3 - МДА/ АОА; 4 - глутатион; 5 - глутатион-пероксидаза; 6 - глутатион-редуктаза; 7 - каталаза; 8 -Т^а; 9 - TNFa (+) ЛПС; 10 - ИАЦР TNFa; 11 - П.-8; 12 - ^-8 (+) ЛПС; 13 - ИАЦР П.-8; 14 - лейкоциты; 15 - лимфоциты; 16 - CD3+;

17 - CD4+; 18 - CD8+; 19 - CD4+/CD8+; 20 - CD22+; 21 - CD16+; 22 - R к ^-3; 23 - ^А^; 24 - фагоцитоз; 25 - фагоцитарный резерв;

26 - фагоцитарное число; 27 - НСТ; 28 - НСТ резерв; 29 - индекс активности нейтрофилов; 30 - индекс активности нейтрофилов резерв; 31 - 1дА; 32 - 1дМ; 33 - ДО. Связь (—>-) - положительная; (- »-) - отрицательная.

ТАБЛИЦА 3. УРОВЕНЬ И РЕАКТИВНОСТЬ ЦИТОКИНОВ TNFa И IL-8 У ОБСЛЕДУЕМЫХ В ГРУППАХ НАБЛЮДЕНИЯ

Цитокины (пг/мл) Контрольная группа (здоровые), n = 27 Группа ХОБЛ

легкое течение, n = 20 среднее течение, n = 28

TNFa Нестимулированные ИКК 50,0±0,04 25,0±0,08** 31,0±0,08**

Стимулированные ИККЛПС 720,0±9,0 101,0±5,04*** 41,0±0,01***

ИАЦР 14,40±0,49 4,0±0,09*** 1,04±0,02***

IL-8 Нестимулированные ИКК 115,0±2,0 124,0±1,6 46,0±0,07**

Стимулированные ИККЛПС 980,0±8,0 214,0±1,21*** 54,0±0,08***

ИАЦР 8,52±0,05 2,04±0,06*** 1,00±0,02***

Примечания: * - достоверное отличие (р < O,O5) по сравнению с группой контроля, ** - p < O,O1; *** - p < O,OO1.

не были выявлены четкие отличительные особенности в антиоксидантной и иммунной системах у пациентов с ХОБЛ в зависимости от тяжести течения заболевания, не всегда степень тяжести коррелирует с нарушениями в этих системах, поэтому был выбран метод системного анализа всей совокупности признаков. С помощью метода корреляционных плеяд стало возможным охарактеризовать степень влияния иммуноком-

петентных клеток, факторов межклеточной регуляции и показателей, характеризующих состояние биомембраны на течение хронического воспалительного процесса.

В группе здоровых добровольцев выявлено четыре плеяды. Признаком-индикатором первой плеяды (G-10, G/k-0,3, D-0,65, П-68%) являлся показатель окислительного метаболизма нейтро-филов, положительно коррелирующий с МДА,

I плеяда G - 15; G/k - 0,4; D - 0,61; П - 32%

II плеяда G - 18; G/k - 0,5; D - 0,59; П - 16%

Схема 2 внутри- и межсистемных корреляционных плеяд у больных ХОБЛ легкой степени

Показатели: 1 - МДА; 2 - АОА; 3 - МДА/ АОА; 4 - глуатион; б - глyтатион-пероксидаза; 6 - глyтатион-редyктаза; 7 - каталаза; B -TNFa; 9 - TNFa (+) ЛПС; 10 - ИАЦР TNFa; 11 - IL-B; 12 - IL-B (+) ЛПС; 13 - ИАЦР IL-B; 14 - лейкоциты; 15 - лимфоциты; 16 - CD3+;

17 - CD4+; 1B - CDB+; 19 - CD4+/CDB+; 20 - CD22+; 21 - CD16+; 22 - R к IL-3; 23 - HLA-DR; 24 - фагоцитоз; 25 - фагоцитарный резерв;

26 - фагоцитарное число; 27 - НСТ; 2B - НСТ резерв; 29 - индекс активности нейтрофилов; 30 - индекс активности нейтрофилов резерв; 31 - IgA; 32 - IgM; 33 - IgG. Связь: (^-) - положительная; (- ->-) - отрицательная.

I плеяда G - 17; G/k - 0,5; D - 0,6; П - 16%

Схема 3 внутри- и межсистемных корреляционных плеяд у больных ХОБЛ средней степени

Показатели: 1 - МДА; 2 - АОА; 3 - МДА/ АОА; 4 - глутатион; 5 - глутатион-пероксидаза; 6 - глутатион-редукгаза; 7 - каталаза; 8 -Т^а; 9 - TNFа (+) ЛПС; 10 - ИАЦР TNFa; 11 - 1Ь-8; 12 - IL-8 (+) ЛПС; 13 - ИАЦР 1-8; 14 - лейкоциты; 15 - лимфоциты; 16 - CD3+;

17 - CD4+; 18 - CD8+; 19 - CD4+/CD8+; 20 - CD22+; 21 - CD16+; 22 - R к IL-3; 23 - ^А^; 24 - фагоцитоз; 25 - фагоцитарный резерв;

26 - фагоцитарное число; 27 - НСТ; 28 - НСТ резерв; 29 - индекс активности нейтрофилов; 30 - индекс активности нейтрофилов резерв; 31 - 1дА; 32 - 1дМ; 33 - ДО. Связь: (—>) - положительная.

МДА/АОА, CD4+, CD4+/CD8+ и ^М. Межси-стемные связи между компонентами иммунной и оксидантной систем являются обязательными для адекватного ответа на экстрацеллюлярный антиген, так как одним из механизмов внутриклеточного лизиса фагоцитированных антигенов являются окисление и протеолиз (схема 1) [16].

Во второй по значимости плеяде ^-3, G/k-0,1,

D-0,62, П-100%) признаком-индикатором являлся уровень секреции TNFa, с которым имел положительную связь показатель НСТ и ^-8. Это свидетельствует о том, что стимуляция иммунного ответа на начальных и ограничение на поздних этапах воспалительного процесса является обязательным условием поддерживания постоянства внутренней среды организма и обеспечивается цитокиновой секрецией, представленной во второй плеяде.

В построении третьей плеяды ^-10, G/k-0,3,

D-0,59, П-38%) важную роль сыграл фермент ГП, являющийся важным показателем ферментативного звена антиоксидантной системы (АОС), который имел положительную связь с глутатио-ном, лимфоцитами, фагоцитарным числом и отрицательную — с ГР. Уровень глутатиона прямо пропорционально связан с активностью ГП и обратно пропорционально — с ГР. Это объясняет за-

кономерно протекающие реакции по восстановлению и обратной биорегенерации окисленного глутатиона. Система глутатиона — одна из мощных универсальных антирадикальных систем, только достаточное содержание ГП защищает организм от накопления высокотоксичных липо-перекисных соединений и дает возможность фагоцитам полноценно перерабатывать патогены без ущерба собственным тканям [11]. Моно-цитарно-макрофагальные клетки представлены в каждой плеяде, так как именно это звено находится на первой линии защиты организма от чужеродных патогенов и дает сигнал об активации специфического иммунного ответа [3].

В состав четвертой плеяды ^-7, G/k-0,2, D-0,59, П-42%) с предиктором CD25+ включены показатели клеточного звена иммунной системы, имеющие положительные внутрисистемные связи.

В результате анализа межсистемных взаимодействий у пациентов с легким течением хронического воспалительного заболевания — I стадией ХОБЛ — были выявлены всего две корреляционные плеяды (схема 2). Отмечалось нарастание силы связи, увеличение количества взаимосвязей между изучаемыми показателями, увеличение мощности плеяд по сравнению с группой здоровых обследованных. Первая плеяда ^-15,

G/k-0,4, D-0,61, П-32%) в своем составе имела предиктор НСТР и показатели клеточного, гуморального звеньев и неспецифической резистентности, положительно связанные друг с другом: НСТР и ИАН (г = 0,77), НСТР и CD3+ (г = 0,76), НСТР и CD3/CD4 (г = 0,73), НСТР и ФАН (г = 0,72), НСТР и CD16+ (г = 0,65). Обнаружена умеренная степень корреляции между бактерицидной активностью нейтрофилов и показателями гуморального звена иммунной системы: НСТР и ^М (г = 0,69), ИАНР и ^М (г = 0,74). Именно с наличием хронического очага инфекции и необходимостью элиминации антигенов связано появление корреляционных связей между показателями моноцитарно-макрофагальной системы и гуморального звена иммунитета в отличие от группы здоровых обследуемых. Признаком-индикатором второй плеяды ^-18, G/k-0,5, D-0,59, П-16%) являлся показатель ГП, с которым установилась положительные связи уровня секреции цитоки-нов и показателей гуморального звена иммунной системы. Глутатион прямо пропорционально связан с К (г = 0,8), но не имеет связей с ГР и ГП, в отличие от здоровых лиц. Были обнаружены межсистемные связи между показателями свободнорадикального окисления (СРО) липидов и сывороточными уровнями цитокинов: АОА и ^-8 (г = 0,78), МДА/АОА и ^-8 (г = 0,66), МДА и Т№а (г = -0,61). При анализе корреляционных связей Спирмена у больных с легким течением ХОБЛ выявлено увеличение мощности связи между показателями иммунной и ПОЛ-АОС, снижение удельного веса параметров, характеризующих звено неспецифической резистентности, необходимых для связанной работы всех иммунных клеток. Обнаружено полное отсутствие положительных связей ЛПС стимулированного синтеза цитокинов и других иммуноцитов, что является показателем нарушения паракринной и ауто-кринной регуляции гомеостаза [17].

При среднетяжелом течении заболевания выделены три плеяды (схема 3), в которых отмечается уменьшение количества взаимосвязей между изучаемыми показателями по сравнению с полученными результатами у пациентов с легким течением заболевания. Наиболее многочисленная плеяда первого уровня ^-17; G/k-0,5; D-0,6; П-16%). Предиктором первой плеяды явился ^-8, положительно коррелирующий с TNFа, МДА/АОА, МДА, АОА, глутатионом, лейкоцитами, CD25+, гуморальными факторами — ^М, IgA. Одним из факторов развития хронического заболевания и прогрессирования болезни является интенсификация ПОЛ. Именно этим можно объяснить выявленную у данной категории больных высокую степень корреляции между показателями системы ПОЛ-АОЗ (самый высокий коэффициент ранговой корреляции Спирмена г = 0,99) и составляющими иммунного ответа. Подтверждается влияние этого блока показателей

на клеточный иммунитет связями: CD3+ с АОА (г = -0,85), CD3+ с МДА/АОА (г = 0,73). Цитокино-вый блок в данной плеяде имеет положительные крепкие внутрисистемные связи (в среднем г =

0,7). Не обнаружены связи между уровнями секреции цитокинов и показателями моноцитарно-макрофагальной системы, что может быть связано с низкой способностью мононуклеаров крови продуцировать цитокины в ответ на стимуляцию ЛПС и является показателем формирования иммунной дисфункции. Вторая плеяда сформировалась из показателей, определяющих потенциал иммуноком-петентной клетки ^-6; G/k-0,18; D-0,63; П-4%). Предиктором данной плеяды выступает НСТР, имеющий прямо пропорциональную зависимость с ИАН (г = 0,86), ГП (г = 0,56) и К (г = 0,76). Третья плеяда по мощности и силе равноценна второй плеяде ^-6; G/k-0,18; D-0,57; П-4%). В третью плеяду вошли показатели клеточного, гуморального иммунитета и цитокиновые показатели. Центром данной плеяды являлся CD8+. Обращает на себя внимание, что только у пациентов со средней степенью тяжести ХОБЛ одними из центральных клеток стали цитотоксические Т-лимфоциты с условно супрес-сирующей активностью. Активация наивных CD8+ лимфоцитов завершается их превращением в клетки с биоагрессивным потенциалом — Т-киллеры, которые при реализации экстрацеллюлярной цитотоксичности могут участвовать в повреждении мембран нормальных клеток и межклеточного вещества тканей [5, 8]. Это является одним из механизмов, поддерживающих рост и агрессивность очага хронического воспаления, что приводит к патоморфологической перестройке структуры ткани, т.е. формированию хронической гранулемы и способствует прогрессированию заболевания.

Заключение

1) Межклеточные взаимодействия влияют на адекватность и реализацию механизмов иммунореактивности, от которых зависит степень тяжести, прогноз течения и исход хронического заболевания, а также эффективность проводимой терапии.

2) Метод корреляционных плеяд дает возможность выявлять и объективно оценивать взаимосвязи всех количественных показателей резистентности, что в свою очередь, позволяет находить новые объективные закономерности развития иммунодепрессии.

3) При легком течении хронического воспалительного заболевания отсутствует физиологическая стадийная активация клеток. Имеется гипореактивность гранулоцитарных фагоцитов, а неадекватность реализации этого этапа иммунного ответа является предпосылкой формирования иммунной дисфункции в процессе осуществления адаптивного иммунного ответа. Обнаружено нарушение синтеза цитокиновых регуляторных

факторов, что является причиной альтерации, переходящей в хроническую форму.

4) При среднетяжелом течении хронического заболевания отмечается общая иммунодепрессия, выражающаяся нарастанием субпопуляционно-го дисбаланса супрессорных клеток, ареактив-ностью клеток за счет нарушения регуляторных механизмов, истощением активности ферментов АОЗ в общей системе межклеточных взаимодействий, что является одним из механизмов разрушения мембран клеток и патологического изменения в органах.

5) Выявлены маркеры прогрессирования хронического заболевания, утяжеляющие исходную иммунокомпроментацию: снижение удельного веса показателей, характеризующих звено неспецифической резистентности, отсутствие ЛПС индуцированной секреции цитокинов, увеличение удельного веса цитотоксических Т-лимфоцитов с условно супрессирующей активностью.

Список литературы

1. Айсанов З.Р., Кокосов А.Н., Овчарен-ко С.И. и др. Хронические обструктивные болезни легких. Федеральная программа // Рус. мед. журн. - 2001.- Т. 9, № 1.- С. 9-33.

2. Гельцер Б.И., Маркелова Е.В., Просеко-ва Е.В., Кочеткова Е.А. Система цитокинов и болезни органов дыхания // Терапевт. арх. — 2002. — № 11. - С. 94-99.

3. Заславская М.И., Маянский А.Н. Нейтро-филзависимое воспаление на фоне дестабилизации внутрисосудистого гомеостаза // Цитокины и воспаление. - 2005. - № 1, Т. 5. - С. 50-52.

4. Земсков А.М., Земсков В.М., Воронов-ский В.А., Новикова Л.А. Биохимическая составляющая дифференцированной иммунокоррекции // Иммунопатология, аллергология, инфек-тология. - 2000. - № 4. - С. 15-22.

5. Ильина Н.И., Латышева Т.В., Пинегин Б.В., Сетдикова Н.Х. Синдром вторичной иммунной недостаточности (протоколы диагностики и лечения) // Иммунология. - № 5. - С. 8-9.

6. Исаченко Е.Г., Виткина Т.И., Герони-на С.А., Бердышев Е.В. Спонтанный и липопо-лисахаридиндуцированный синтез цитокинов клетками крови человека в норме и при аллергопатологиях // Иммунология. - 1999. - № 5. -С. 37-39.

7. Калинина Е.П., Журавская Н.С., Исаченко Е.Г. Способ диагностики степени тяжести хронического обструктивного бронхита. ПАТ. 2231789 от 27.06.2004 // Бюл. № 18.

8. Козлов В.К. Дисфункция иммунной системы в патогенезе сепсиса: возможности диагностики // Цитокины и воспаление. - 2006. - № 21, Т. 5. - С. 15-28.

9. Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н. Свободнорадикальные процессы при заболеваниях сердечно-сосудистой системы // Кардиология. - 2000. - № 7. - С. 48-60.

10. Медицинские лабораторные технологии и диагностика / Под ред. А.И. Карпищенко. — СПб: Интермедика, 1999. — 656 с.

11. Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Зен-ков Н.К., Бондарь И.А., Круговых Н.Ф., Труфа-кин В.А. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. — М.: Слово, 2006. — 556 с.

12. Новгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Янь-кова В.И. Руководство по методам исследования параметров системы «перекисное окисление липидов—антиоксидантная защита» в биологических жидкостях. — Владивосток.: Изд-во Даль-невост. ун-та, 2003. — 80 с.

13. Новиков Д.К. Патология системы иммунитета. — М.: Нац. акад. микологии, 2003. — 368 с.

14. Полетаев А.Б., Морозов С.Г., Ковалев И.Е. Регуляторная метасистема (иммунонейроэндо-кринная регуляция гомеостаза). — М.: Медицина, 2002. — 168 с.

15. Терентьев П.В., Ростова Н.С. Практикум по биометрии. — Л.: Изд-во ЛГУ, 1977. — 22 с.

16. Тотолян А.А., Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы. — СПб: Наука, 2000. — Т 1, 2. — 231 с.

17. Фрейдлин И.С. Паракринные и аутокринные механизмы цитокиновой иммунорегуляции // Иммунология. — 2001. — № 5. — С. 4-7.

18.Хроническая обструктивная болезнь легких: Практическое руководство для врачей. — М.: Медицина, 2004. — 61 с.

19. Эндакова Э.А. Биомедицинские аспекты доклинического и послеклинического периодов болезни // Бюл. Сиб. отд-ния РАМН. — 1998. — № 1. — С. 10-15.

20.Agacdiken A., Basyigit I., Ozden M., Yildiz F., Ural D., Maral H., Boyaci H., Ilgazli A., Komsuoglu B. The effects of antioxidants on exercise-induced lipid peroxidation in patients with COPD // Respirology. — 2004. — Vol. 9. — P. 38-42.

21. Casagrande S., Bonetto V., Fratelli M., Gianazza E., Eberini I., Massignan T, Salmona M., Chang G., Holmgren A., Ghezzi P. Glutathionylation of human thioredoxin: a possible crosstalk between the glutathione and thioredoxin systems. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2002. — P. 9745-9749.

22.Decramer M., Roussos C.S, Rodriguez-Roisin R. Cytokines and obstructive lung disease: introduction // Eur. Respir. — 2001. — Vol. 18. — Р 1-2.

23. Rennard S. Pathophysiological mechanisms of COLD // Eur. Resp. Rev. — 1997. — Vol. 91. — P. 2-8.

поступила в редакцию 25.12.2006 отправлена на доработку 07.01.2007 принята к печати 25.01.2007