Новые питательные среды для культивирования возбудителей чумы и холеры

Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.

Инфекция и иммунитет

НОВЫЕ ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ

ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ЧУМЫ

И ХОЛЕРЫ

А.К. Никифоров, М.В. Антонычева, И.М. Жулидов, О.А. Лобовикова, И.В. Шульгина, С.А. Еремин, Т.В. Аленкина, Н.И. Вахрушина, С.В. Астафьева, А.Д. Белоусов, Л.В. Зайцева, О.С. Пуденкова, Е.Г. Абрамова

ФКУЗ «РосНИПЧИ «Микроб» Роспотребнадзора, г. Саратов

По усовершенствованной технологии получены в сухой форме экспериментально-производственные основы микробиологических сред: автолизат пекарских дрожжей (5 серий) и ферментативный гидроли-зат фибрина (3 серии). Физико-химический состав основ соответствует требованиям МУК 4.2.2316, 2008. Экспериментальные основы были использованы в составе питательных сред для культивирования чумного микроба и холерного вибриона. Разработаны среды, в которых эти основы являются моно-источниками питательных компонентов и предложены комбинированные среды, в которых автолизат пекарских дрожжей использован как стимулятор роста. Испытания плотных и жидких питательных сред для культивирования возбудителей чумы и холеры проведены в соответствии с требованиями МУ 3.3.2.2124, 2006. В качестве контрольных были питательные среды на основе гидролизата по Хоттингеру.

На основе автолизата пекарских дрожжей для культивирования чумного микроба и холерного вибриона сконструированы плотная и жидкая среды, по биологическим показателям соответствующие требованиям МУ и позволяющие накапливать антиген аналогично результату на контрольной среде. Запатентован «Способ получения питательной основы и среда для культивирования микроорганизмов рода Yersinia и Vibrio» № 2360962 РФ, МПК C12N1/20.

Из сухой основы ферментативного гидролизата фибрина предложены жидкая и плотная среды, обеспечивающие типичный рост тест-штаммов чумного микроба, однако несколько уступающие контрольной среде по показателям чувствительность и эффективность. Среды, приготовленные из ферментативного гидролизата фибрина с использованием в виде добавки автолизата пекарских дрожжей, обеспечивают типичный рост тест-штаммов и не уступают по эффективности контрольной среде по Хоттингеру. Для культивирования холерного вибриона являются оптимальными жидкая и плотная среды, приготовленные из моноосновы — ферментативного гидролизата фибрина. Они обеспечивают типичный рост тест-штаммов, не уступая по всем показателям контрольной среде. Экспериментальные жидкие среды на основе ферментативного гидролизата фибрина испытаны при масштабированном культивировании производственных штаммов холерного вибриона: Vibrio cholerae Ol M-41, используемого для изготовления холерной бивалентной химической вакцины, и V. cholerae не O1 105, применяемого в качестве адсорбента при производстве холерной диагностической агглютинирующей сыворотки О1. По результатам проведенных исследований получен патент «Питательная среда для глубинного культивирования холерного вибриона», № 2425866 РФ, МПК C12N1/20, C12R1/63.

ВЫЯВЛЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА ЛЕГИОНЕЛЛ, ЦИРКУЛИРУЮЩИХ В ВОДНЫХ СИСТЕМАХ ОХЛАЖДЕНИЯ ПРОМЫШЛЕННЫХ ПРЕДПРИЯТИЙ

И.В. Новокшонова1, И.С. Тартаковский2

ФБУЗ Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва; 2НИИэпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва

Эпидемические вспышки легионеллеза часто связаны с контаминацией возбудителем градирен (водных систем охлаждения) промышленных предприятий. Данные объекты являются предметом регулярного профилактического мониторинга. Нами проведено скрининговое исследование образцов воды и биопленок из 20 градирен промышленных предприятий в Москве и Московской области с целью выявления Legionella pneumophila.

Контаминация Legionella pneumophila выявлена на 5 из 8 промышленных предприятий, в 14 из 20 обследованных градирен (70%). Концентрация возбудителя в контаминированных системах колебалась в диапазоне от 1,2 х 102 до 9,6 х 104 КОЕ (геномных копий) на литр воды. Среди выделенных изолятов 52% принадлежали к 1-й серогруппе L. pneumophila, 48% к другим серогруппам возбудителя. В 14% положительных образцов были выделены изоляты нескольких серогрупп L. pneumophila, в том числе первой. По уровню контаминации все обследованные объекты можно разделить на 3 группы: 1) на объекте отсутствуют легионеллы, при визуальном осмотре не обнаружены биопленки; 2) на объекте выявлены легионеллы в низкой концентрации (менее 103 КОЕ на литр), биопленки не обнаружены; 3) на объекте выявлены легионеллы в концентрации превышающий уровень 103 КОЕ на литр; обнаружены биопленки, содержащие Legionella pneumophila, на орошаемой поверхности чаши градирен.

В странах ЕЭС, США, Японии, а с 2010 г. и в Российской Федерации, введены допустимые концентрации Legionella pneumophila для различного типа водных систем или объектов. Так для градирен допускается эксплуатация при концентрации возбудителя не превышающей 104К0Е/л. В данном исследовании превышение допустимого уровня контаминации Legionella pneumophila выявлено на 1 из 8 промышленных предприятий (12,5%).

Проведенные исследования позволили впервые охарактеризовать частоту и уровень контаминации Legionella pneumophila потенциально опасных водных систем в Российской Федерации. Частота контаминации водных систем охлаждения промышленных предприятий (70%) соответствовала частоте контаминации аналогичных объектов за рубежом — 50-75%.

ПРИМЕНЕНИЕ АДЪЮВАНТОВ В ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ СЫВОРОТОК К ЭНТЕРОТОКСИНУ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА

М.В. Овчинникова, Т.В. Аленкина, М.Н. Киреев, Н.И. Белякова, А.К. Никифоров

ФКУЗ Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Роспотребнадзора, г. Саратов

Одним из основных компонентов, входящих в состав препарата «Вакцина холерная химическая бивалентная таблетированная» (ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб»), является холероген-анатоксин. В технологии производства для определения содержания