СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ УСТАЛОСТИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
METHOD OF MODELLING CHRONIC FATIGUE IN EXPERIMENT

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной ее части, позволяет получить экспериментальную модель хронической усталости с возможностью восстановления функций организма и может быть использовано при исследовании терапевтического эффекта фармакологических средств, патофизиологии и патоморфологии органов при данной патологии.
Известен способ моделирования «синдрома хронической усталости» путем однократного внутрибрюшинного введения животным синтетической двуцепочечной РНК - Поли И:Ц (Рыбакина Е.Г., Шанин С.Н., Фомичева Е.Е., Корнева Б.А. Клеточные и молекулярные механизмы взаимодействия иммунной и нейроэндокринной систем при синдроме хронической усталости в эксперименте // Росс. физиол. журнал. - 2009. - №12. - Т.95. - С.1324-1335; Katafuchi Т., Kondo Т., Yasaka Т., Kubo К., Take S. Prolonged effects of polyriboinosinic: polyribocytidylic acid on spontaneous running wheel activity and brain interferon alfa mRNA in rats: a model for immunologically induced fatigue // Neuroscience. - 2003. - Vol.120. - P.837-845), который может быть принят за прототип.
Недостатком вышеуказанного способа является тот факт, что он не является полноценной моделью патологии, так как не учитывает многих патогенетических звеньев реальной клинической ситуации. Кроме того, индукция хронической усталости введением синтетической РНК затрудняет проведение патофизиологических и патоморфологических исследований в результате неоднозначного подхода к анализу развивающихся нарушений с позиций «что является причиной нейроиммунных нарушений - инъекция РНК или формирующийся синдром хронической усталости». Таким образом, указанный способ моделирования не позволяет комплексно проанализировать специфику развития патологии.
Сущность изобретения заключается в создании модели «синдрома хронической усталости», при которой индуктором патологии является комплекс хронических истощающих воздействий на психоэмоциональное и физическое состояние, а также когнитивные функции организма.
В предлагаемом способе для моделирования «синдрома хронической усталости» используется сочетание информационного, физического и социального воздействий. В отличие от прототипа данный способ позволит воздействовать на различные патогенетические звенья «синдрома хронической усталости» путем сочетания хронических истощающих воздействий на психоэмоциональное и физическое состояние, а также на когнитивные функции организма и получить объективную информацию о нарушениях функционирования различных систем и органов, развивающихся при «синдроме хронической усталости». Предлагаемый способ может найти применение в экспериментальной патофизиологии, патоморфологии и фармакотерапии «синдрома хронической усталости».
Для исследования использовали белых нелинейных крыс-самцов или крыс-самцов линии Wistar в возрасте 5-7 мес.
Предложенное изобретение осуществляется следующим образом: информационное воздействие основано на формировании пищедобывательного поведения в многоальтернативном лабиринте, структура которого меняется каждые 2 дня (Никольская К.А., 2005), физическое воздействие (Усик С.В., 1981) заключается в плавании с грузом 10% от массы тела (температура воды 30°С, время - до «предела»). Социальные взаимодействия формируются у крыс-самцов в результате повторного опыта побед и поражений в ежедневных конфронтациях (Kudryavtseva N.N., 1991). Для этого животных помещают в экспериментальные клетки, разделенные пополам прозрачной перегородкой с отверстиями, по одному животному на отсек. Ежедневно во второй половине дня (15.00-17.00 часов) перегородку убирают на 10-15 мин, что приводит к конфронтациям. После каждой конфронтации побежденного самца помещают в незнакомую клетку с другим агрессивным самцом за перегородкой. Ежедневно на фоне конфронтации лабораторные животные подвергаются информационному и физическому «испытанию» (интервал между проведением поведенческого моделирования 1 ч). Продолжительность воздействия 20 дней.
Пример конкретного осуществления изобретения
Животные были разделены на 2 группы: 1 - интактные особи, 2 - крысы с моделью «синдрома хронической усталости». Иммунный статус лабораторных животных оценивали на основе реакций гиперчувствительности замедленного типа с определением индекса реакции (ИР ГЗТ), пассивной гемагглютинации с определением титра антител в сыворотке крови (РПГА), латексного теста по изучению фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови с определением фагоцитарного индекса (ФИ) и фагоцитарного числа (ФЧ), а также изучали уровень различных классов иммуноглобулинов. Психоэмоциональный статус и двигательную активность животных изучали в поведенческих тестах «Приподнятый крестообразный лабиринт», «Открытое поле» и «Порсолт».
Применение представляемого в изобретении способа моделирования позволило выявить, что на фоне экспериментального «синдрома хронической усталости» формируется иммунный дисбаланс, сопровождающийся снижением индекса реакции гиперчувствительности замедленного типа, нарушением процесса антителообразования (снижение IgM и увеличение IgG) и активацией фагоцитоза (табл.1). Изучение психоэмоционального статуса животных в поведенческих тестах показало, что в условиях моделирования «синдрома хронической усталости» отмечается формирование депрессивноподобного состояния, сопровождающееся снижением горизонтальной и вертикальной двигательной активности, а также ориентировочно-исследовательской реакции, уменьшением времени пребывания в аверсивном отсеке лабиринта, увеличением числа актов кратковременного груминга, что свидетельствует о повышенном уровне тревожности (табл.2, 3, 4).
Таким образом предлагаемый способ позволяет получить экспериментальную модель «синдрома хронической усталости», при которой отмечаются нарушения функциональной активности нервной и иммунной систем, что является ведущим признаком при формировании данного патологического состояния. Способ может найти применение в экспериментальной патофизиологии, патоморфологии и фармакотерапии «синдрома хронической усталости».
Таблица №2
Изменение поведения крыс с синдромом хронической усталости в тесте «Приподнятый крестообразный лабиринт»
Поведенческие показатели
Контроль, n=10
«Синдром хронической усталости», n=10
Время, проведенное на открытых рукавах, М±m, сек
9,8±1,4
3,8±0,6*
Стойки, М±m
8,1±0,5
4,4±0,1*
Кратковременные акты груминга, М±m
0,9±0,1
2,6±0,3*
* - р<0,05 в сравнении с контролем
Таблица №3
Изменение поведения крыс с синдромом хронической усталости в тесте «Порсолт»
Поведенческие показатели
Контроль, n=10
«Синдром хронической усталости», n=10
Иммобильность, М±m, сек
53,7±4,6
88,1±7,3*
Латентный период до первой иммобильности, М±m сек
74,9±2,1
58,3±4,4*
*- р<0,05 в сравнении с контролем
Таблица №4
Изменение поведения крыс с синдромом хронической усталости в тесте «Открытое поле»
Поведенческие показатели
Контроль, n=10
«Синдром хронической усталости», n=10
Горизонтальная двигательная активность, М±m
30±3,0
77±1,7*
Вертикальная двигательная активность, М±m
6,1±0,5
3,4±0,1*
Исследовательские «заглядывания» в «норки», М±m
9,1±0,1
3,3±0,3*
*- р<0,05 в сравнении с контролем