КОМПОЗИЦИИ VCAR И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Химерный антигенный рецептор (CAR), включающий:
(a) эктодомен, включающий область распознавания антигена, где область распознавания антигена включает по меньшей мере один VH, который специфично связывается с антигеном созревания B-клеток (BCMA);
(b) трансмембранный домен, и
(c) эндодомен, включающий по меньшей мере один костимулирующий домен.
2. CAR по п.1, где VH включает или состоит из рекомбинантной или химерной последовательности.
3. CAR по п.1, где VH включает или состоит из человеческой или гуманизированной последовательности.
4. CAR по п.1, где эктодомен (a) дополнительно включает сигнальный пептид.
5. CAR по п.1, где эктодомен (a) дополнительно включает шарнирную область между областью распознавания антигена и трансмембранным доменом.
6. CAR по п.1, где сигнальный пептид включает последовательность, кодирующую сигнальный пептид человеческого CD2, CD3δ, CD3ε, CD3γ, CD3ζ, CD4, CD8α, CD19, CD28, 4-1BB или GM-CSFR.
7. CAR по п.6, где сигнальный пептид включает последовательность, кодирующую сигнальный пептид человеческого CD8α.
8. CAR по п.7, где сигнальный пептид человеческого CD8α включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18012.
9. CAR по п.1, где трансмембранный домен включает последовательность, кодирующую трансмембранный домен человеческого CD2, CD3δ, CD3ε, CD3γ, CD3ζ, CD4, CD8α, CD19, CD28, 4-1BB или GM-CSFR.
10. CAR по п.9, где трансмембранный домен включает последовательность, кодирующую трансмембранный домен человеческого CD8α.
11. CAR по п.10, где трансмембранный домен CD8α человека включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18014.
12. CAR по п.1, где эндодомен включает эндодомен человеческого CD3ζ.
13. CAR по п.1, где по меньшей мере один костимулирующий домен включает внутриклеточный сегмент человеческого 4-1BB, CD28, CD40, ICOS, MyD88, OX-40 или их любую комбинацию.
14. CAR по п.13, где по меньшей мере один костимулирующий домен включает костимулирующий домен человеческого 4-1BB.
15. CAR по п.12, где эндодомен человеческого CD3ζ включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18016.
16. CAR по п.14, где костимулирующий домен человеческого 4-1BB включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18018.
17. CAR по п.5, где шарнирная область включает последовательность, полученную из человеческого CD8α, IgG4, CD4 или их любой комбинации.
18. CAR по п.17, где шарнирная область включает последовательность, полученную из человеческого CD8α.
19. CAR по п.18, где последовательность, полученная из человеческого CD8α, включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18020.
20. Композиция, включающая CAR по п.1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
21. Транспозон, включающий последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую CAR по п.1.
22. Композиция, включающая транспозон по п.21.
23. Вектор, включающий последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую CAR по п.1.
24. Композиция, включающая вектор по п.23.
25. Клетка, включающая CAR по п.1.
26. Клетка, включающая транспозон по п.21.
27. Клетка, включающая вектор по п.23.
28. Клетка по п.25, где клетка является иммунной клеткой.
29. Клетка по п.28, где иммунная клетка является T-клеткой, естественной киллерной клеткой (NK), подобной естественным киллерам (NK) клеткой, цитокин-индуцированной киллерной (CIK) клеткой, гемопоэтической клеткой-предшественником, T-клеткой из периферической крови (PB) или T-клеткой из пуповинной крови (UCB).
30. Клетка по п.25, где клетка является аутологичной.
31. Клетка по п.25, где клетка является аллогенной.
32. Композиция, содержащая клетку по п.25.
33. Композиция, содержащая популяцию клеток, где множество клеток популяции клеток включает по меньшей мере одну клетку по п.25.
34. Композиция по п.33, где множество клеток популяции включает по меньшей мере 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 97%, 99% или любой промежуточный процент клетки по п.25.
35. Способ получения популяции модифицированных T-клеток, включающий:
(a) введение в множество T-клеток композиции, включающей последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую CAR по п.1, с получением, таким образом, модифицированной популяции T-клеток;
(b) культивирование модифицированной популяции T-клеток при условиях, подходящих для интеграции последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей CAR;
(c) экспансию и/или отбор по меньшей мере одной клетки из модифицированной популяции T-клеток, которые экспрессируют CAR на клеточной поверхности.
36. CAR по п.1, где VH включает:
определяющую комплементарность область 1 (CDR1), включающую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:18056, 18057 и 18058;
определяющую комплементарность область 2 (CDR2), включающую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:18059, 18060, 18061, 18062 и 18063; и
определяющую комплементарность область 3 (CDR3), включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18064.
37. CAR по п.1, где VH включает:
CDR1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18056; CDR2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18059; и CDR3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18064.
38. CAR по п.1, где VH включает:
CDR1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18056; CDR2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18060; и CDR3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18064.
39. CAR по п.1, где VH включает:
CDR1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18057; CDR2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18061; и CDR3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18064.
40. CAR по п.1, где VH включает:
CDR1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18057; CDR2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18061; и CDR3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18064.
41. CAR по п.1, где VH включает:
CDR1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18058; CDR2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18062; и CDR3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18064.
42. CAR по п.1, где VH включает:
CDR1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18056; CDR2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18063; и CDR3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18064.
43. CAR по п.1, где VH включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:18050, 18051, 18052, 18053, 18054 и 18055.
44. CAR по п.1, где VH включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18050.
45. CAR по п.1, где VH включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18051.
46. CAR по п.1, где VH включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18052.
47. CAR по п.1, где VH включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18053.
48. CAR по п.1, где VH включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18054.
49. CAR по п.1, где VH включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18055.
50. CAR по п.1, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18000.
51. CAR по п.1, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18002.
52. CAR по п.1, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18004.
53. CAR по п.1, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18006.
54. CAR по п.1, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18008.
55. CAR по п.1, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18010.
56. Химерный антигенный рецептор (CAR), включающий:
(a) эктодомен, включающий сигнальный пептид человеческого CD8α и область распознавания антигена, где область распознавания антигена включает по меньшей мере один VH, который специфично связывается с BCMA;
(b) шарнирный домен, включающий шарнирный домен человеческого CD8α;
(c) трансмембранный домен, включающий трансмембранный домен человеческого CD8α; и
(d) эндодомен, включающий костимулирующий домен человеческого 4-1BB и эндодомен человеческого CD3ζ.
57. CAR по п.56, где VH включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:18050, 18051, 18052, 18053, 18054 и 18055, где сигнальный пептид человеческого CD8α включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18012, где шарнирный домен человеческого CD8α включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18020, где трансмембранный домен человеческого CD8α включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17505, где костимулирующий домен человеческого 4-1BB включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17509, и где эндодомен человеческого CD3ζ включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17507.
58. CAR по п.57, где VH включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18051, где сигнальный пептид человеческого CD8α включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18012, где шарнирный домен человеческого CD8α включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18020, где трансмембранный домен человеческого CD8α включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17505, где костимулирующий домен человеческого 4-1BB включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17509, и где эндодомен человеческого CD3ζ включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17507.