СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO СПЕЦИФИЧЕСКОЙ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ОРГАНИЗМА К БАКТЕРИАЛЬНЫМ АЛЛЕРГЕНАМ

1. Способ дифференциальной диагностики in vitro специфической сенсибилизации пациента к бактериальным аллергенам, состоящий в отборе и подготовке венозной крови, введении тестируемого препарата, содержащего бактериальные антигены и сравнении показателей люминол-зависимой хемилюминесценции (ХЛ) с одноименными показателями, полученными для здорового организма,
отличающийся тем, что
6
в отобранную кровь пациента вводят антикоагулянт, формируют образцы, содержащие (0,95-1,05)×10 лейкоцитов, и доводят их раствором Хенкса до объема 0,69 мл с получением проб крови,
тестируемый препарат бактериальных антигенов или смесь тестируемого препарата бактериальных антигенов с противоаллергическим препаратом тавегил, и контрольный препарат в количестве 0,01 мл вводят в полученные пробы крови, и их инкубируют при постоянном перемешивании при температуре 37°C в течение 45 минут, затем
в инкубированные пробы вводят активатор люминол в количестве 2 мМ и хемилюминометром измеряют уровень спонтанной ХЛ для указанного активатора, после чего в те же пробы вводят стимулятор свечения - сульфат бария в количестве 2 мг/мл, и регистрируют уровень стимулированной ХЛ также для указанного активатора, причем измерения ХЛ проводят при постоянном перемешивании при температуре 37°C в течение 45 минут с получением временных зависимостей уровня ХЛ, далее
вычисляют индексы ИП по выражению ИП=Sба/Sк, где Sба; Sк - площадь под кривыми временной зависимости уровня спонтанной и стимулированной ХЛ для тестируемого и контрольного препаратов, соответственно, по которым диагностируют специфическую сенсибилизацию к бактериальным антигенам.
4
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что тестируемый препарат антигенов Staphylococcus aureus разводят в физиологическом растворе и вводят в пробы крови в количестве 5×10 микр. кл/мл, и при индексе ИП выше 3,25 относительно индекса ИП для контрольного препарата в виде физиологического раствора, диагностируют наличие сенсибилизации организма к антигенам Staphylococcus aureus.
4
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что тестируемый препарат антигенов Klebsiella pneumonia разводят в физиологическом растворе и вводят в пробы крови в количестве 5×10 микр. кл/мл, и при индексе ИП выше 3,78 относительно индекса ИП для контрольного препарата в виде физиологического раствора, диагностируют наличие сенсибилизации организма к антигенам Klebsiella pneumonia.
-4
4. Способ по любому пп. 1-3, отличающийся тем, что при тестировании смеси препарата бактериальных антигенов с противоаллергическим препаратом тавегил сначала в пробы крови вводят упомянутый препарат, растворенный в растворе Хенкса в конечной концентрации 1,1×10 M, после чего пробы инкубируют при постоянном перемешивании при температуре 37°C в течение 10 минут, затем одну часть полученных проб используют в качестве контрольных, а другую часть - в качестве тестируемых, для чего в пробы вводят тестируемый препарат бактериальных антигенов и осуществляют повторное инкубирование при том же режиме, а
Т
Т
специфическую сенсибилизацию организма к бактериальным антигенам Staphylococcus aureus и Klebsiella pneumonia диагностируют при значении отношения (ИП : ИП), меньшем или равном 0,8, где ИП - индекс, вычисленный для пробы бактериальных антигеном в смеси с тавегилом; ИП - индекс, вычисленный для пробы бактериальных антигенов.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что хемилюминометр представляет собой биохемилюминесцентный автоматический анализатор БЛМ 3606М-01 с компьютерной программой BLM- Obrab, производства СКТБ «Наука» КНЦ СО РАН, Россия.