КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ОЖИРЕНИЯ И АССОЦИИРОВАННЫХ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ
COMPOSITION FOR PREVENTION AND TREATMENT OF OBESITY AND ASSOCIATED METABOLIC DISORDERS

Область техники
Настоящее изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и касается композиции, предотвращающей увеличение количества жировой ткани и нарушение метаболического профиля при воздействии высококалорийной диеты. Композиция предназначена для использования в целях профилактики и лечения ожирения и метаболического синдрома.
Предшествующий уровень техники
Ожирение представляет собой сложное нарушение обмена веществ, вызванное гипертрофией жировой ткани в организме вследствие положительного энергетического баланса. Помимо этого, ожирение связано с развитием ряда других патологий, в том числе сахарного диабета, атеросклероза, гипертонической болезни и ряда других заболеваний. Как следствие, ожирение существенно повышает риск смертности, связанной с развитием сердечно-сосудистых заболеваний и рака (Abdelaal, M., le Roux, C. W., & Docherty, N. G. (2017). Morbidity and mortality associated with obesity. Annals of translational medicine, 5(7).). Учитывая широкую распространенность ожирения в современном мире, составляющую более 39% и 19% взрослого населения для избыточного веса и ожирения, соответственно (ВОЗ), поиск средств для профилактики и лечения ожирения представляется актуальной задачей практической медицины.
Используемые в настоящее время фармакологические препараты для лечения ожирения характеризуются высокой частотой побочных эффектов, зачастую не достигая желаемого результата. В частности, применение препарата для длительного контроля веса, орлистата, являющегося ингибитором липазы, сопровождается гастралгией, жирным стулом, нарушением всасывания жирорастворимых витаминов. В то же время, препараты центрального действия, подавляющие аппетит, способствуют появлению бессонницы, тремора, гипертонии, головных болей (Kang, J. G., & Park, C. Y. (2012). Anti-obesity drugs: a review about their effects and safety. Diabetes & metabolism journal, 36(1), 13-25). Значительная часть препаратов для лечения ожирения, особенно центрального действия, были запрещены к применению вследствие большого количества выраженных побочных эффектов (Onakpoya, I. J., Heneghan, C. J., & Aronson, J. K. (2016). Post-marketing withdrawal of anti-obesity medicinal products because of adverse drug reactions: a systematic review. BMC medicine, 14(1), 191.). В этой связи актуальным является вопрос поиска потенциальных средств и композиций для лечения ожирения с большей эффективностью и меньшей токсичностью, причем одним из наиболее перспективных направлений является использование фитохимических соединений или экстрактов, богатых биологически-активными соединениями (Yun, J. W. (2010). Possible anti-obesity therapeutics from nature–A review. Phytochemistry, 71(14-15), 1625-1641.). Так, в частности, широкий спектр фитохимических соединений включающщий полифенолы, терпеноиды, фитостеролы и др., обладает выраженной биологической активностью, позволяющей предположить их эффективность в лечении ожирения (González-Castejón, M., & Rodriguez-Casado, A. (2011). Dietary phytochemicals and their potential effects on obesity: a review. Pharmacological research, 64(5), 438-455.). Эссенциальные микроэлементы также являются важной составляющей лекарственных растительных средств, обусловливающей значительную часть биологических эффектов. Показано, что ряд элементов, в том числе цинк, селен, ванадий, хром, могут быть использованы для лечения и профилактики метаболического синдрома (Panchal, S. K., Wanyonyi, S., & Brown, L. (2017). Selenium, vanadium, and chromium as micronutrients to improve metabolic syndrome. Current hypertension reports, 19(3), 10.). Несмотря на продемонстрированный потенциал влияния фитохимических соединений и микроэлементов на различные звенья патогенеза ожирения, результаты лабораторных и клинических испытаний достаточно противоречивы, в связи с чем предпринимаются попытки дальнейшего поиска эффективных средств и композиций.
Так, известна композиция для лечения ожирения и ассоциированного метаболического синдрома, включающая экстракт зеленого чая, экстракт Coleus forskholii, экстракт Yerba Mate, экстракт Betula alba, а также сходная композиция, включающая экстракт зеленого чая, экстракт Coleus forskholii, экстракт гуараны, экстракт Betula alba (RU2 334 523 C2). Несмотря на значительное снижение массы тела, жировой ткани и повышения интенсивности метаболизма в покое, композиции по данному изобретению обладают эффективностью только в комбинации с низкокалорийной диетой.
Другим средством, основанным на использовании фитохимических соединений для лечения ожирения является композиция, основанная на экстракте фукуса, также включающая в состав аспарагус, ацидум муратикум, миллефолиум, цистус, силицею, а также иохимбин или аристохолия для мужчин и женщин соответственно (RU 2 026 683 C1). Несмотря на заявленную эффективность, предложенное средство является гомеопатическим, в связи с чем не может быть стандартизовано.
Имеется ряд фитотерапевтических средств и/или композиций с заявленным потенциалом применения при ожирении, однако непосредственная эффективность не продемонстрирована (RU 2 345 572 C2; RU 2 627 450 C1).
Lysimachiae foenum-graeci
Обогащение фитоэкстрактов эссенциальными элементами, в том числе цинком и магнием, для повышения эффективности при лечении и профилактике ожирения и метаболического синдрома ранее не использовалось. В частности, в ряде известных композиций для лечения магний присутствует в составе магния стеарата в качестве формообразующего средства при изготовлении твердых лекарственных форм (RU 2 646 459 C2), не являясь источником пищевого биологически доступного магния. В качестве примера применения лекарственного травяного экстракта, обладающего эффектом против ожирения (RU2475256C2), указывается продукт лечебного питания, содержащий помимо экстракта травы вербейника сенного (herba) оксид цинка (0,82 мг). Указанное количество цинка составляет менее 10% от суточной потребления цинка (8-11 мг для взрослых мужчин и женщин) и не может быть рассмотрено в качестве действующего компонента.
Plantago maxima
Непосредственным прототипом предлагаемой композиции явилось средство на основе экстракта  Juss. et Jacq, используемое для лечения и профилактики неалкогольной жировой болезни печени, являющейся печеночным проявлением метаболического синдрома, часто осложняющим ожирение (RU2644282C2). Данное средство предотвращало развитие стеатоза, индуцированного высокожировой высокоуглеводной диетой, сопровождаясь снижением количества и размеров липидных капель в перипортальных и центролобулярных гепатоцитах, а также увеличением площади ядер гепатоцитов в обеих зонах, что свидетельствует об активации синтетических процессов и уменьшении дегенеративных изменений (RU 2 644 282 C2). Несмотря на высокую эффективность в отношении неалкогольной жировой болезни печени, данный прототип имеет ряд недостатков. С одной стороны, указанное средство не обладало способностью к снижению массы тела. С другой стороны, использование жидкого водного экстракта в эксперименте согласно описанию изобретения предполагало постоянное употребление лабораторными животными указанного средства в составе питьевой воды, в то время как подобный подход не может быть реализован в реальной жизни человека.
Таким образом, приведенные аналоги не решают проблему поиска новых средств для лечения и профилактики ожирения и метаболического синдрома, характеризующихся достаточной эффективностью на фоне низкой токсичности и отсутствия или незначительного количества побочных эффектов.
Существо изобретения
Заявляемое средство решает задачу расширения арсенала средств для профилактики и лечения ожирения и метаболического синдрома.
В основу настоящего изобретения поставлена задача создания композиции, основанной на сочетании фармакопейного сырья с эссенциальными химическими элементами, предотвращающей увеличение жировой ткани в организме и нормализующей метаболический профиль при алиментарном ожирении.
Отличительным признаком настоящего изобретения является использование сухого экстракта листьев подорожника большого (Plantago major L.) в комбинации с аспарагинатами магния и цинка цинка, предотвращающей увеличение количества жировой ткани и нарушение метаболизма при употреблении высококалорийной диеты.
Выполнение настоящей композиции целесообразно в виде твердых (капсулы, таблетки) и жидких лекарственных форм (раствор, сироп, гель), а также сырья для производства продуктов функционального питания или биологически-активных добавок к пище.
P. major L.
P. major L.
Впервые установлено, что композиция, включающая экстракт подорожника большого (), аспарагинат цинка и аспарагинат магния, является эффективным средством для предотвращения увеличения жировой ткани и нарушения метаболизма, вызванного употреблением высококалорийной высокожировой высокоуглеводной диеты. Введение в состав композиции органических соединений цинка и магния обусловлено экспериментально установленным низким содержанием и биодоступностью данных элементов в фитосырье (экстракт ).  Предположительно, выявленный протективный антиадипогенный эффект композиции обусловлен взаимным потенцированием эффектов активных компонентов композиции, в частности, полифенолов, иридоидов, таннинов и других фитохимических соединений в составе экстракта подорожника большого, а также непосредственно цинка и магния. Предполагается, что эффективность достигается за счет воздействия данных активных компонентов на метаболизм жировой ткани, а также другие звенья патогенеза ожирения, такие как воспаление и окислительный стресс.
Описание изобретения
Plantago major
Отличительным признаком настоящего изобретения является использование комбинации сухого экстракта листьев подорожника большого ( L.) с аспарагинатами цинка и магния.
Plantago major
50
Подорожник большой представляет собой многолетнее травянистое растение, содержащее широкий спектр биологически-активных веществ, в том числе флавоноиды, алкалоиды, иридоиды, полисахариды и витамины (Adom, M. B., Taher, M., Mutalabisin, M. F., Amri, M. S., Kudos, M. B. A., Sulaiman, M. W. A. W., ... & Susanti, D. (2017). Chemical constituents and medical benefits of Plantago major. Biomedicine & Pharmacotherapy, 96, 348-360.). Являясь ценным источником фитохимических соединений P. major включён в государственную фармакопею. Сбор фитосырья осуществлялся в соответствии с анатомо-морфологическими характеристиками вида ( L.) на территории Алтайского края с последующим водным экстрагированием (растворитель – вода), выпариванием и высушиванием в вакууме до получения сухого порошка. Экстракт подорожника большого обладает широким терапевтическим коридором при LD составляющем 182.54 мг/кг и средней эффективной дозе равной 7.507 мг/кг (Najafian et al., 2018). В этой связи, в качестве суточной дозы выбрано количество 250 мг/кг/сут, вводимое однократно внутрижелудочно в составе испытываемого средства.
Экспериментальным путем установлено содержание цинка и магния в экстракте листьев подорожника, составляющее 15,2±1,8 и 9648,0±141,0 мкг/г, соответственно. С учетом низкого абсолютного и относительного (по сравнению с суточным потреблением) содержания металлов в растительном сырье, на этапе разработки предполагается, что дополнительное введение в экстракт подорожника большого соединений цинка и магния может повысить эффективность средства. При этом для повышения биодоступности металлов из композиции использованы органические соединения (аспарагинаты) магния и цинка.
4
4
6
2
2
8
14
4
6
В частности, аспарагинат цинка (Zn(CNOH)∙Zn(OH), M = 428,5 г/моль) содержит 130 г/моль цинка, в связи с чем, 15 мг/кг/сут аспарагината цинка соответствуют 4,5 мг/кг/сут цинка. Аспарагинат магния (CHMgNO, PubChem CID: 56842661, М = 286,53 г/моль) в свою очередь содержит 24,305 г/моль магния. Таким образом, 0,1 г/кг/сут аспарагината магния соответствует 8,48 мг/кг/сут магния. Данный подход в использовании дозы магния согласуется с данными ранее опубликованных исследований, в которых доза магния варьирует от 200 мкг/кг в составе магниевой воды (Nagai et al., 2012) до 0,2 г/кг/сут (Eshraghi et al., 2015).
Таким образом, рецептура композиции для лечения и профилактики ожирения и метаболического синдрома для разового введения в пересчете на массу тела лабораторных животных включает (в % от сухой массы активных компонентов):
• сухой водный экстракт листьев подорожника большого (P. major L.) – 250 мг/кг/сут (69% от сухой массы),
• аспарагинат цинка – 15 мг/кг/сут (4% от сухой массы),
• аспарагинат магния – 100 мг/кг/сут (27% от сухой массы).
Средство может применяться в виде твердых (капсулы, таблетки) и жидких лекарственных форм (раствор, сироп, гель), а также сырья для производства продуктов функционального питания или биологически-активных добавок к пище.
Предлагаемая композиция была испытана на 70 крысах-самцах линии Wistar в возрасте 2 месяцев и массой 250 г в 2 сериях опытов. Содержание лабораторных животных осуществлялось в условиях приточно-вытяжной вентиляции и 12-часового светового дня (8.00-20.00). Животные всех групп имели свободный доступ (ad libitum) к питьевой воде (питьевому раствору) и пище (гранулированный комбикорм 270 ккал/100 г (20% белков; 70% углеводов; 10% жиров от общего калоража). В качестве питьевой воды и для изготовления питьевых растворов использовалась бутилированная вода с общей минерализацией менее 250 мг/л.
В серии 1 проводилась оценка эффективности применяемого средства на развитие ожирения и ассоциированных метаболических нарушений в краткосрочной перспективе (2 недели), тогда как в серии 2 оценивалась эффективность в более длительный период (2 месяца).
В серии 1 (длительность – 2 недели) животные были распределены на следующие группы:
1 – контроль – содержание на стандартной диете (СТД)
2 – моделирование ожирения – содержание на высокожировой высокоуглеводной диете (ВЖВУД), содержащей 60% калорий за счет жира (429 ккал/100 г), а также 10% раствор сахарозы в качестве питьевого раствора (40 ккал/100 мл)
3 – применение на фоне моделирования ожирения (ВЖВУД) сухого водного экстракта листьев подорожника большого (P. major L.) в дозе 250 мг/кг/сут (прототип, фармакопейное сырье)
4 – применение на фоне моделирования ожирения (ВЖВУД) сухого водного экстракта листьев подорожника большого (P. major L.) в дозе 250 мг/кг/сут, в комбинации с аспарагинатом цинка (15 мг/кг/сут)
5 – применение на фоне моделирования ожирения (ВЖВУД) сухого водного экстракта листьев подорожника большого (P. major L.) в дозе 250 мг/кг/сут, в комбинации с аспарагинатами цинка (15 мг/кг/сут) и магния (100 мг/кг/сут).
В серии 2 (длительность – 2 месяца) животные были распределены на 3 группы:
1 – контроль – содержание на стандартной диете (СТД)
2 – моделирование ожирения – содержание на высокожировой высокоуглеводной диете (ВЖВУД), содержащей 60% калорий за счет жира (429 ккал/100 г), а также 10% раствор сахарозы в качестве питьевого раствора (40 ккал/100 мл)
3 – применение на фоне моделирования ожирения (ВЖВУД) сухого водного экстракта листьев подорожника большого (P. major L.) в дозе 250 мг/кг/сут, в комбинации с аспарагинатами цинка (15 мг/кг/сут) и магния (100 мг/кг/сут).
Масса тела животных регистрировалась до начала и по окончании эксперимента. Помимо этого, производился забор двух основных депо висцеральной жировой ткани, эпидидимальной и ретроперитонеальной. На основании полученных данных оценивалось процентное содержание жировой ткани от массы тела. Сыворотка крови использовалась для проведения химического анализа на содержание магния и цинка методом масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (NexION 300D, Perkin Elmer Inc., USA), а также для определения метаболических параметров. В частности, определение концентрации общего холестерола, триглицеридов, глюкозы, а также активности аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) осуществлялось спектрофотометрическим методом на автоматическом биохимическом анализаторе Sapphire 400 (Tokyo Boeki, Tokyo, Japan) и наборов реактивов Randox (Crumlin, UK). Определение концентрации лептина (SEA084Ra) и инсулина (CEA448Ra) проводилось методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием коммерческих наборов Cloud-Clone Corp (USA) на планшетном ридере. Сертификаты качества наборов ИФА ISO 13485, ISO 9001.
Статистический анализ данных производился с использованием программного обеспечения Statistika 10.0 (Statsoft, USA). Погрупповое сравнение проводилось с использованием U-теста Манна-Уитни и однофакторного дисперсионного анализа (one-way ANOVA) и поправкой Bonferroni. Результаты считались достоверными при уровне достоверности p < 0,05.
В 1 серии опытов (длительность – 2 недели) содержание животных на адипогенном рационе приводило к достоверному 77% и 44% увеличению массы эпидидимальной и ретроперитонеальной жировой ткани, соответственно, что свидетельствует об успешном моделировании гипертрофии жировой ткани уже по окончании 2 недель воздействия. При этом введение в организм лабораторных животных экстракта подорожника, а также предлагаемой композиции (группа 5), предотвращало достоверное увеличение массы эпидидимальной и ретроперитонеальной жировой ткани под влиянием высококалорийного рациона. Так, содержание эпидидимальной и ретроперитонеальной жировой ткани у животных, получающих предлагаемую композицию, было ниже такового в группе животных с ожирением на 25% и 19%, соответственно.  В то же время, отдельные компоненты композиции, экстракт подорожника большого или экстракт в сочетании с цинком, не обладали подобным эффектом. Аналогичные различия были выявлены при оценке суммарного содержания жировой ткани. В частности, содержание животных на высокожировой высокоуглеводной диете приводило к увеличению относительного суммарного содержания жировой ткани на 54%, в то время как применение предлагаемой композиции, но не ее отдельных компонентов, предотвращало сколько-нибудь значимое увеличение данного параметра, вызванное высококалорийным питанием.
Моделирование алиментарного ожирения посредством содержания животных на высокожировой высокоуглеводной диете приводило к достоверному двукратному повышению уровня лептина в сыворотке крови. При этом применение на фоне адипогенного рациона отдельных компонентов композиции не приводило к достоверному снижению концентрации лептина. В то же время, комбинация экстракта P. major, цинка и магния, применяемая на фоне высококалорийного рациона предотвращала развитие гиперлептинемии, индуцированной адипогенной диетой, снижая значения данного показателя на 24%. Таким образом, результаты проведенного исследования свидетельствуют о снижении количества жировой ткани и, как следствие, гиперлептинемии, под влиянием предлагаемой композиции, что обусловлено биологическими эффектами его компонентов.
Таблица 1. Морфометрические параметры лабораторных животных при моделировании ожирения и испытании эффективности разрабатываемой композиции в течение 2 недель (серия 1)
Параметр
Группа 1
Группа 2
Группа 3
Группа 4
Группа 5
Диета
СТД
ВЖВУД
ВЖВУД
ВЖВУД
ВЖВУД
Средство
-
-
P. major
P. major+ Zn
P. major+ Zn + Mg
Вес, г
251,9± 35,6
254,3± 50,1
272,1± 41,8
267,4± 50,04
251,6± 20,6
ЭДЖТ, г
2,285± 0,378
4,034± 2,443 *
3,523± 1,67
3,341± 1,009
3,05± 1,011
РПЖТ, г
2,513± 0,943
3,628 *± 1,045
3,814± 1,071*
4,019± 1,381 *
2,94± 1,257
ЖТ%
1,901± 0,307
2,934 *± 0,734
2,649 *± 0,673
2,714 *± 0,469
2,364± 0,591
Лептин, нг/мл
134,4± 42,9
247,4 *± 67,1
218,3 *± 71,2
270,5 *± 51,9
185,3 †± 48,2
Данные представлены в виде средней и среднеквадратического отклонения, *, † - достоверность отличий от групп контроля (1) и моделирования ожирения (2) при p < 0,05, соответственно. СТД – стандартная диета, ВЖВУД – высокожировая высокоуглеводная диета, ЭДЖТ – эпидидимальная жировая ткань, РПЖТ – ретроперитонеальная жировая ткань
Также изучено влияние разрабатываемой композиции на маркеры метаболического риска при ожирении (Таблица 2). Установлено, что моделирование ожирения посредством содержания животных на высококалорийной диете с избытком жиров и углеводов сопровождается 28% повышением активности АЛТ по сравнению с контрольной группой животных, потребляющих стандартную диету. При этом применение как разрабатываемой композиции (группа 6), так и его отдельных экстракта подорожника предотвращало достоверное повышение активности АЛТ в сыворотке. В свою очередь, значимого влияния ожирения и композиции на активность АСТ в сыворотке не выявлено. Выявленное влияние разрабатываемой композиции на уровень АЛТ в сыворотке животных, подверженных воздействию адипогенной диеты, свидетельствует о гепатопротекторном эффекте композиции.
Несмотря на отсутствие влияния моделирования ожирения и применения компонентов композиции на сывороточную концентрацию глюкозы, уровень инсулина в сыворотке характеризовался выраженными изменениями. Так, концентрация инсулина в сыворотке крови животных, содержащихся на адипогенной диете (группа 2) достоверно превышала контрольные значения на 15%. При этом значения данного параметра в 3 и 4 группе животных также достоверно не отличались от контрольных. Наконец, использование композиции экстракта P. major с аспарагинатами цинка и магния не только предотвращало диета-индуцированное повышение уровня инсулина, но и сопровождалось достоверным снижением концентрации гормона относительно группы 2 (модель ожирения) на 21%. Использование предлагаемой композиции также предотвращало достоверное повышение концентрации общего холестерола в сыворотке крови, снижая данный показатель практически до достижения нормальных значений.
Моделирование ожирения посредством содержания животных на высокожировой высокоуглеводной диете сопровождалось достоверным увеличением концентрации С-реактивного белка в сыворотке крови на 62% по сравнению с контрольными значениями. Применение на фоне адипогенной диеты экстракта P. major (группа 3) или экстракта в комбинации с аспарагинатом цинка (группа 4), хотя и сопровождалось некоторым снижением значений параметра, достоверно превышало контрольные значения на 49%. В то же время, использование для коррекции предлагаемой композиции (группа 5), предотвращало диета-индуцированное увеличение данного параметра. Более того, в последнем случае концентрация C-реактивного белка характеризовалась достоверным 31% снижением по сравнению с группой моделирования ожирения (группа 2).
Таблица 2. Метаболические параметры лабораторных животных при моделировании ожирения и испытании эффективности предлагаемой композиции в течение 2 недель (серия 1)
Группа
Группа 1
Группа 2
Группа 3
Группа 4
Группа 5
Диета
СТД
ВЖВУД
ВЖВУД
ВЖВУД
ВЖВУД
Средство
-
-
P. major
P. major+ Zn
P. major+ Zn + Mg
АЛТ, ЕД/л
75,04± 21,15
96,39± 22,78 *
84,16± 14,67
67,09± 7,08 †
81,6± 19,77
АСТ, ЕД/л
231,9± 98,8
230,6± 56,9
198,6± 32,9
202,4± 26,6
211,6± 37,9
Глюкоза, ммоль/л
10,136± 1,225
9,933± 0,867
10,807± 1,542
10,579± 1,705
10,439± 1,998
Инсулин, мМЕ/л
3,141± 0,455
3,855 *± 0,692
3,236± 0,876
3,314± 0,628
3,059 †± 0,480
ОХС, ммоль/л
1,543± 0,184
1,924± 0,391
1,754± 0,483
1,723± 0,439
1,713± 0,299
СРБ, мкмоль/л
1,638± 0,202
2,652 *± 0,856
2,447 *± 0,765
2,193 *± 0,916
1,844 †± 0,499
Данные представлены в виде средней и среднеквадратического отклонения, *, † - достоверность отличий от групп контроля (1) и моделирования ожирения (2) при p < 0,05, соответственно. СТД – стандартная диета, ВЖВУД – высокожировая высокоуглеводная диета, ОХС – общий холестерол, СРБ – С-реактивный белок
Методом ИСП-МС установлено, что применение предлагаемой композиции приводило к достоверному повышению сывороточной концентрации как цинка, так и магния, на 17% (1,144 ± 0,164 vs 1,344 ± 0,176 мкг/мл, p = 0.042) и 15% (19,801 ± 0,766 vs 22,769 ± 3,345 мкг/мл, p = 0,029), соответственно, что свидетельствует об эффективном поступлении данных элементов в организм в составе композиции.
В 2 серии экспериментов проведено изучение применения предлагаемой композиции для профилактики и лечения ожирения и метаболического синдрома в течение 2 месяцев.
Установлено, что содержание животных на ВЖВУД приводило к достоверному повышению массы тела и прироста массы в течение в 2 месяцев на 15% и 41% по сравнению с контролем, соответственно. В то же время, применение композиции предотвращало достоверное повышение данных параметров, снижая их значения на 9% и 20% по сравнению с группой животных, содержащихся на высококалорийном рационе, соответственно.
Более выраженные различия были выявлены в случае жировой ткани. В частности, масса ретроперитонеального и эпидидимального депо, а также общее абсолютное и относительное количество жировой ткани в группе моделирования ожирения превышало контрольные значения более чем в 3 раза. При этом употребление на фоне высокожировой высокоуглеводной диеты предлагаемой композиции предотвращало данные изменения, при этом значения содержания жировой ткани у животных 3 группы были более чем в 2 раза ниже по сравнению с группой моделирования ожирения.
Таблица 3. Морфометрические параметры лабораторных животных (серия 2) при моделировании ожирения и испытании эффективности предлагаемой композиции в течение 2 месяцев
Группа
Группа 1
Группа 2
Группа 3
Диета
СТД
ВЖВУД
ВЖВУД
Средство
-
-
P. major+ Zn + Mg
Вес (итог), г
286,9±14,4
330,6±16,8 *
303,9±9 †
Прирост, г
104,9±15,3
147,1±21,8 *
117,7±15,4 †
РПЖТ, г
2,373±0,433
8,395±0,955 *
3,378±0,69 *†
ЭДЖТ, г
2,48±0,337
7,587±0,825 *
3,148±0,579 †
ЖТ, %
1,69±0,218
4,849±0,522 *
2,154±0,361 †
Данные представлены в виде средней и среднеквадратического отклонения, *, † - достоверность отличий от групп контроля (1) и моделирования ожирения (2) при p < 0,05, соответственно. СТД – стандартная диета, ВЖВУД – высокожировая высокоуглеводная диета, ЭДЖТ – эпидидимальная жировая ткань, РПЖТ – ретроперитонеальная жировая ткань
Таким образом, результаты экспериментального исследования свидетельствуют о том, что лишь предлагаемая композиция предотвращала достоверное повышение содержания ретроперитонеальной жировой ткани, а также процентного содержания жировой ткани в организме животных, являющегося основным критерием ожирения. Напротив, отдельные компоненты (прототипы) композиции не обладали подобным эффектом. Аналогично, применение предлагаемой композиции не только предотвращало достоверное повышение концентрации лептина в сыворотке крови, но и статистически значимо снижало его уровень по сравнению с группой моделирования ожирения, тогда как ни один из эффектов не отмечался при применении отдельных компонентов композиции. В отличие от отдельных компонентов композиции (прототипов), лишь применение предлагаемой композиции достоверно снижало концентрацию инсулина в сыворотке крови по сравнению с группой моделирования ожирения, достигая контрольных значений. Аналогично, применение композиции не только предотвращало статистически значимое повышение циркулирующего уровня С-реактивного белка, но и достоверно снижало его уровень относительно группы животных с ожирением. Полученные данные позволяют утверждать, что композиция, основанная на комбинации экстракта листьев подорожника большого (P. major L.), а также аспарагинатов цинка и магния, эффективно снижает степень гипертрофии жировой ткани в краткосрочном и долгосрочном периоде воздействия, также обладая противовоспалительным эффектом и достоверно снижая выраженность инсулинорезистентности при содержании на высококалорийном рационе.
Таким образом, предлагаемая композиция может быть использовано в качестве композиции для профилактики и лечения ожирения и ассоциированных метаболических нарушений. Учитывая выраженный протективный эффект композиции на фоне высоко жировой диеты, эффективность может быть повышена посредством сочетания с низкокалорийной диетой. Достижение критерия «изобретательский уровень» в предлагаемом решении достигается не только использованием потенциально богатого биорегуляторами сырья подорожника большого, который самостоятельно не обладал необходимыми эффектами (продемонстрировано экспериментально), но и комбинацией экстракта органическими соединениями цинка и магния. При этом результаты экспериментального исследования свидетельствуют не только об эффективности предлагаемой композиции, но и о неожиданном взаимно потенцирующем эффекте компонентов. Предполагается, что в последнем случае эффективность композиции достигается за счет комбинации биологически-активных веществ, обладающих различным механизмом биологического действия.
Композиция, согласно настоящему изобретению, может быть использовано как в виде сырья (порошок) для включения в продукты функционального питания и биологически активные пищевые добавки, так и в составе жидких и твердых лекарственных форм.
Технический результат
Композиция, имеющая в основе водный экстракт листьев подорожника большого, аспарагинат цинка и аспарагинат магния, снижает степень гипертрофии жировой ткани, обладает противовоспалительным эффектом и достоверно снижает выраженность инсулинорезистентности при содержании на высококалорийном рационе, расширяя арсенал средств для профилактики и лечения ожирения и метаболического синдрома.
Промышленная применимость
P. major L.
Полученные данные свидетельствуют о возможности и перспективах использования предложенной композиции, содержащего экстракт листьев подорожника большого (), аспарагинатов цинка и магния, для профилактики и лечения ожирения и ассоциированных метаболических нарушений при использовании в форме твердых (капсулы, таблетки) или жидких (гели, сиропы) лекарственных форм для индивидуального применения, а также порошков для изготовления продуктов функционального питания, напитков, и биологически активных добавок к пище.