Сравнительный анализ динамики роста перевиваемой опухоли крыс под действием флавоноидсодержащих экстрактов (Зюзьника европейского, Белокопытника гибридного) в эксперименте in vivo

ID: 2017-06-4017-A-14440 Оригинальная статья

Байтман Т.П., Семьянинова В.В., Гаджиев М.А., Швецов А.В., Долгов А.А., Попков Е.В., Мудрак Д.А.

Сравнительный анализ динамики роста перевиваемой опухоли крыс под действием флавоноидсодержащих экстрактов

в эксперименте in vivo

ФГБОУ ВО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Минздрава России Научные руководители: д.б.н. Полуконова Н.В., д.м.н. Афанасьева Г.А., асс. Наволокин Н.А.

Резюме

Флавоноидсодержащие экстракты, полученные из травы Зюзьника европейского и листьев Белокопытника гибридного, не обладают противоопухолевой активностью в отношении перевиваемого рака печени крыс PC-1.

Ключевые слова: экстракты, противоопухолевая активность

Введение

В терапии онкологических заболеваний чаще других используются алкалоидсодержащие препараты с достаточно хорошо изученными механизмами цитостатического действия (Корман, 2006; Наволокин и др., 2012 г; Boryczka et al., 2012). Подавляющее большинство противоопухолевых препаратов в рекомендуемых для клинического применения дозах не является безопасным, и имеют ограничения для использования (Корсун и др., 2007; Корман, 2014), в связи с чем остается актуальным поиск новых, более безопасных и высокоэффективных лекарственных средств. Особое внимание уделяется созданию лекарственных средств растительного происхождения с минимальными побочными эффектами (Гольдберг и др., 2008). Открытие в 2011 году способности растительного флавоноида вогонина к активации апоптоза в опухолевых клетках (Polier et al., 2011) привлекло внимание к растительному сырью, содержащему флавоноиды, как потенциально перспективному для создания новых противоопухолевых средств. Наряду с противоопухолевой и антиоксидантной активностью, биофлавоноиды способны защищать клеточные мембраны и снижать токсическое действие алкалоидсодержащих соединений (Navolokin et al., 2012). Используемые в совместных исследованиях на кафедре общей биологии, фармакогнозии и ботаники и кафедре патологической анатомии Саратовского государственного медицинского университета им. В.И. Разумовского для анализа биологической активности, растительные флавоноидсодержащие экстракты не только слаботоксичны (Патент на изобретение RUS 2482863; Наволокин, Павлова, 2012; Полуконова и др., 2013; Polukonova et al., 2014; Курчатова и др., 2014), но и обладают целом рядом положительных свойств. Установлена противоопухолевая, антикахексическая (Патент на изобретение RUS 2519769; Navolokin et al., 2012а-в; Байтман, Наволокин, 2013; Наволокин и др., 2013 а-в , 2014, 2015 а-д, 2016 а-г; Полуконова и др., 2015 а, 2016; Маслякова, 2017), противотуберкулезная (Патент на изобретение RUS 2549477; Наволокин и др., 2015 б; Скворцова и др., 2015; Полуконова и др., 2017), противовоспалительная, жаропонижающая и антимикробная активность (Патент на изобретение RUS 2535155; Полуконова и др., 2015б); изучены содержание маркеров оксидативного стресса под действием экстрактов в условиях индуцированного окислительного стресса (Дурнова и др., 2015) и влияние экстрактов на индукцию микроядер диоксидином и циклофосфаном в эритроцитах крови беспородных белых мышей (Курчатова и др., 2014; Дурнова, Курчатова, 2015).

Нами выбраны два лекарственных растения, в составе сырья которых содержатся и алкалоиды, и флавоноиды (Куркин, 2007): Зюзьник европейский (Lycopus europaeus) и Белокопытник гибридный (Petasites hybridus), произрастающие на территории Саратовской области, в пойме р. Медведица и на волжском острове у пос. Чардым, где сотрудниками кафедры общей биологии, фармакогнозии и ботаники проводится анализ ресурсов лекарственных растений (Полуконова и др., 2016 и др.).

В траве Зюзника европейского, кроме других компонентов, содержится 0,24 % алкалоидов, 1,0-3,97%флавоноидов - 7-глюкозид лютеолина, 7-глюкозид апигенина, антоцианы - цианин. Действие зюзьника аналогично алкалоиду хинидину из коры хинного дерева. В Германии из зюзника производят несколько лекарственных препаратов: препарат Тиреогутт-моно (Thyreoguttmono) назначают при нарушениях работы сердца (сердечных неврозах), вызванных гиперфункцией щитовидной железы. Кроме этого, зюзьник применяют в гинекологии при гормональных нарушениях, связанных с гипертиреозом (нарушениях менструального цикла, мастопатии, мастодинии), а также используют при нервно-вегетативных расстройствах, протекающие без нарушений функций щитовидной железы, но с симптомами гипертиреоза (http://nmedic.info/story/zyuznik; Георгиянц, Владимирова, 2013).

Листья Белокопытника гибридного, кроме других компонентов, содержат флавоноиды (астрагалин, кверцетин, изокверцитрин) и до 0,5%, алкалоидов. В медицине Белокопытник используют при лечении папилломатоза мочевого пузыря и анацидных гастритов (Мазнев, 2007). Белокопытник также входит с состав противоопухолевого сбора Здренко (№99 по прописи Здренко М.Н.) №2.

Ранее исследована активность экстрактов Зюзьника европейского и Белокопытника гибридного на культуру клеток SPEV-2, зараженную онковирусом (Байтман и др., 2016). В эксперименте in vivo ранее флавоноидсодержашие экстракты этих растений не исследовались.

Цель исследования: исследовать динамику роста перевиваемой опухоли крыс Р01 под действием флавоноидсодержащих экстрактов Зюзьника европейского и Белокопытника гибридного в эксперименте in vivo.

Материал и методы

Использованы водные растворы отдельно сухих спиртовых экстрактов травы Зюзьника европейского и листьев Белокопытника гибридного, собранных в экологически чистом районе, на острове Волгоградского водохранилища выше г. Саратова.

Экстракты были получены нами определенным способом (Патент на изобретение RUS 2482863), позволяющим существенно повысить выход биофлавоноидов и предусматривающим минимальный выход токсичных соединений (алкалоидов, гликозидов и

Бюллетень медицинских Интернет-конференций

2017. Том 7. № 6 1265

др.), что особенно актуально для получения нетоксичных экстрактов ядовитых растений, к которым относится Белокопытник гибридного.

В эксперименте, проводимом в соответствии с руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (Хабриев, 2005), использовано 24 самцов белых лабораторных крыс массой 150±50 гр, которым имплантировали подкожно в области лопатки по 0,5 мл 25% опухолевой взвеси в растворе Хэнкса штамма альвеолярного рака печени - РС-1, полученного из банка опухолевых штаммов ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН. Животные с перевиваемым раком методом случайной выборки были разделены на четыре группы по 6 крыс - первую, опытную, получавшую экстракт Зюзьника, вторую, опытную, получавшую экстракт Белокопытника и третью, контрольную, не получавшую никакого экстракта. В опытных группах крысам раствор вводили внутримышечно в дозировке 100 мг/кг, один раз в сутки в течение 16 дней с момента трансплантации опухоли. После отмены введения экстракта наблюдения за животными продолжались еще неделю.

Динамику роста опухоли оценивали по изменению ее объема по формуле: V=АхВхС, где А- ширина, В - толщина, С - высота опухоли. Измерения проводили электронным штангенциркулем каждые два дня от начала эксперимента. На 23-е сутки крыс выводили из эксперимента и производили забор образцов ткани органов, опухоли, крови для дополнительных исследований.

Работу с лабораторными животными осуществляли согласно протоколу исследований, не противоречащих Женевской Конвенции 1985 г. о «Международных принципах биомедицинских исследований с использованием животных». Тема и описания экспериментов одобрены этической комиссией ГБОУ ВПО СГМУ им. В.И. Разумовского Минздравсоцразвития РФ (протокол №13 от 3 мая 2011 г.).

Статистическую обработку результатов проводили в программе «SPSS 13.0» методами медико-биологической статистики с вычислением средней и стандартной ошибки средней, значимость различий при параметрическом распределении определяли при помощи Т - критерия Стьюдента для независимых выборок при Р<0,05.

Результаты и обсуждение

В контроле значимый рост опухоли выявлен на 11 сутки (рис. 1), плавное повышение роста продолжалось до конца эксперимента.

Во всех опытных группах рост опухоли до 16 дня наблюдений слабо отличался от контроля, а, начиная с 17-го дня, стал выше, чем в контроле, из чего следует, что исследованные нами экстракты в выбранной дозировке не обладают противоопухолевой активностью. Заметное увеличение размеров опухоли с 17-го дня по сравнению с контролем может быть также обусловлено прекращением введения экстракта (рис. 1), но, в любом случае, очевидно, что действие экстрактов только стимулирует рост опухоли.

В опытной группе крыс, получавших экстракт Зюзьника, с 22 дня эксперимента обозначается тенденция к незначительной регрессии опухоли. В то время, как в группе крыс, получавших экстракт Белокопытника, такой тенденции не наблюдается (рис. 1).

Результаты анализа массы опухоли на конец эксперимента полностью соответствуют динамике ее роста: действие экстрактов Зюзьника и Белокопытника привело к существенному повышению как динамики роста опухоли, так и ее массы (рис. 2).

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что флавоноидсодержащие экстракты Зюзьника и Белокопытника усиливают рост перевиваемой опухоли РС-1.

Возникающее противоречие с уже известными в литературе данными по противоопухолевой активности исследуемых растений (Балицкий, Воронцова, 1982;) могут быть связаны с разным химическим составом исследуемых нами и другими авторами экстрактов. Так, известно, что выход компонентов напрямую зависит от экстрагента.

10000

зюзыник белокопы шик контроль

I I-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1

11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23

Рисунок 1. Динамика роста перевиваемой опухоли крыс РО-1 под действием флавоноидсодержащих экстрактов Таволги вязолистной, Кипрея узколистного и Кирказона ломоносовидного. По вертикали - объем опухоли в мм3, по горизонтали - дни измерений

10

Рисунок 2. Масса перевиваемой опухоли крыс РС-1 к окончанию эксперимента в контроле и под действием флавоноидсодержащих экстрактов Зюзьника европейского и Белокопытника гибридного. По вертикали - масса опухоли в граммах, по горизонтали - экстракты

Например, нетоксичный экстракта аврана, содержащий флавоноиды, был получен 95% этиловым спиртом (Патент на изобретение RUS 2482863 ), в то время, как в подкисленный HCl раствор выходят алкалоидные фракции, вызывающие наркотический эффект (Полуконова и др., 2010). В противоопухолевом препарате Ханерол, разработанном на базе онкологического Центра Российской Академии Наук (Балицкий, Воронцова, 1982) действующие вещества относились к олигомерным соединениям класса гидролизуемых танинов, а не биофлавоноидов, как в настоящем исследовании.

Заключение

Таким образом, флавоноидсодержащие экстракты из травы Зюзьника европейского и листьев Белокопытника гибридного не обладают противоопухолевой активностью в отношении перевиваемого рака печени крыс PC-1 и, вероятно, окажутся бесперспективными для дальнейшего исследования на данном типе опухоли.

Литература

1. Балицкий К. П., Воронцова А. Л. Лекарственные растения и рак. — Киев: Наукова думка, 1982. 348 с.

2. Байтман Т.П., Наволокин Н.А.Влияние экстракта аврана лекарственного на лабораторных животных с перевитой саркомой S-45 // Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2013. Т. 3. № 2. С. 374.

3. Байтман Т.П., Полуконова А.В., Прилепский А.Ю. Исследование действия растительных экстрактов на морфологические изменения в культуре клеток SPEV-2 // Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2016. Т. 6. 5. С. 891.

4. Георгиянц В. А., Владимирова И. Н. Масс-спектрометрическое определение биологически активных соединений зюзника европейского // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Медицина. Фармация. 2013. Выпуск № 25 (168). Т. 24. С. 213-215.

5. Гольдберг Е.Д., Разина Т.Г., Зуева Е.П. и др. Растения в комплексной терапии опухолей. Москва: Издательство РАМН, 2008. 229 с.

6. Дурнова Н.А., Афанасьева Г.А., Курчатова М.Н., Зараева Н.В., Голиков А.Г., Бучарская А.Б., Пластун В.О., Андреева Н.В.Содержание маркеров оксидативного стресса в плазме крови под действием экстрактов аврана лекарственного, бессмертника песчаного, антоциановой формы кукурузы обыкновенной в условиях индуцированного окислительного стресса // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2015. Т. 78. № 7. С. 36-40.

7. Дурнова Н.А., Курчатова М.Н. Влияние растительных экстрактов на индукцию микроядер циклофосфаном в эритроцитах крови беспородных белых мышей // Цитология. 2015. Т. 57. № 6. С. 452-458.

8. Корман Д.Б. Основы противоопухолевой химиотерапии. Москва: Практическая медицина, 2014. 459 с.

9. Корсун В.Ф., Корсун Е.В., Лахтин В.М., Фитолектины: руководство по клинической фитотерапии. Москва: Практическая медицина, 2007. 380 с.

10. Куркин В.А. Фармакогнозия: учебник для фармацевтических вузов (факультетов) / В.А. Куркин. / 2 - е изд., перераб. и доп. Самара, 2007. - С. 1122-1123.

11. Курчатова М.Н., Дурнова Н.А., Полуконова Н.В.Влияние экстрактов, содержащих биофлавоноиды, на индукцию микроядер диоксидином в эритроцитах крови беспородных белых мышей // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2014. № 2. С. 58-65.

12. Курчатова М.Н., Полуконова Н.В., Дурнова Н.А.Определение класса токсичности экстракта Gratiola officinalis L., с использованием нового тест-объекта - личинок Chironomus riparius // Токсикологический вестник. 2014. № 6. С. 40-43.

13. Мазнев Н.И. Высокоэффективные лекарственные растения. Большая энциклопедия 2007. 608 с.

14. Маслякова Г.Н., Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Мудрак Д.А., Бучарская А.Б., Тычина С.А., Корчаков Н.В. Морфологические изменения перевитого рака почки у крыс при введении флавоноидсодержащего экстракта аврана лекарственного // Бюллетень медицинских Интернет-конференций. 2017. Том 7. № 2. С. 577-580.

15. Наволокин Н.А., Павлова А.В.Морфологические изменения в мышцах у лабораторных крыс и определение токсичности при введении экстракта аврана // Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2012. Т. 2. № 2. С. 82.

16. Navolokin N.A., Polukonova N.V., Bucharskaya A.B., Maslyakova G.N.Morphofunctional changes in laboratory rats with transplanted liver cancer PC-1 after prolongated per-oral administration of flavonoid containing extracts // Вестник Российского государственного медицинского университета. 2012 а. № 1. С. 277.

17. Наволокин Н.А., Полуконова Н.В., Маслякова Г.Н., Бучарская А.Б., Тырнов В.С.Морфологические изменения в органах и опухоли крыс с перевитым раком печени рс-1 при пероральном введении экстракта пурпурной кукурузы (Zea mays L.) // Российский биотерапевтический журнал. 2012 б. Т. 11. № 2. С. 37.

18. Navolokin N.A., Polukonova N.V., Maslyakova G.N., Bucharskaya A.B., Durnova N.A.Effect of extracts of Gratiola officinalis and Zea mays on the tumor and the morphology of the internal organs of rats with trasplanted liver cancer // Russian Open Medical Journal. 2012 в. Т. 1. № 2. С. 0203.

Бюллетень медицинских Интернет-конференций (ISSN 2224-6150) 2017. Том 7. № 6

19. Наволокин Н.А., Андреева А., Рыкалина Е.Б., Байтман Т.П., Полуконова Н.В. К вопросу о механизмах противоопухолевого действия растительных экстрактов // Тез. II Междун. науч.-практ. конф. «Современная медицина и фармацевтика: анализ и перспективы развития», г. Москва, янв., 2012 г. С. 21-23

20. Наволокин Н.А., Полуконова Н.В., Маслякова Г.Н., Скворцова В.В., Байтман Т.П., Бучарская А.Б., Дурнова Н.А.Противоопухолевая активность растительных экстрактов, содержащих биофлавоноиды // Российский биотерапевтический журнал. 2013 а. Т. 12. № 2. С. 59-59a.

21. Наволокин Н.А., Полуконова Н.В., Маслякова Г.Н., Бучарская А.Б., Дурнова Н.А. Морфология внутренних органов и опухоли лабораторных крыс с перевитым раком печени РС-1 при пероральном введении флавоноидсодержащих экстрактов аврана лекарственного (Gratiola officinalis l.) и кукурузы антоциановой (Zea mays L.) // Саратовский научно-медицинский журнал. 2013 б. Т. 9. № 2. С. 213-220.

22. Наволокин Н.А., Полуконова Н.В., Маслякова Г.Н., Скворцова В.В., Байтман Т.П., Бучарская А.Б., Дурнова Н.А. Противоопухолевая активность растительных экстрактов, содержащих биофлавоноиды // Российский биотерапевтический журнал. 2013 в. Т. 12. № 2. С. 59-59a.

23. Наволокин Н.А., Полуконова А.В., Бибикова О.А., Полуконова Н.В., Маслякова Г.Н., Бучарская А.Б.Цитоморфологические изменения в культуре клеток почки эмбриона свиньи при воздействии экстракта аврана лекарственного (Gratiola officinalis L.) // Фундаментальные исследования. 2014. № 10-7. С. 1369-1374.

24. Наволокин Н.А., Мудрак Д.А., Матвеева О.В., Тычина С.А., Бучарская А.Б., Полуконова Н.В., Маслякова Г.Н.Влияние растительных экстрактов, содержащих флавоноиды, на лейкоцитарную формулу и красный костный мозг лабораторных крыс с перевитой саркомой 45 // Успехи современного естествознания. 2015 а. № 4. С. 134-140.

25. Наволокин Н.А., Скворцова В.В., Полуконова Н.В., Манаенкова Е.В., Панкратова Л.Э., Курчатова М.Н., Маслякова Г.Н., Дурнова Н.А.Противотуберкулезная активность экстракта аврана лекарственного (Gratiola officinalis l.) in vitro // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2015 б. Т. 78. № 4. С. 10-13.

26. Наволокин Н.А., Мудрак Д.А., Матвеева О.В., Тычина С.А., Бучарская А.Б., Полуконова Н.В., Маслякова Г.Н.Влияние растительных экстрактов, содержащих флавоноиды, на лейкоцитарную формулу и красный костный мозг лабораторных крыс с перевитой саркомой - 45 // Успехи современного естествознания. 2015 в. № 4. С. 134-140.

27. Наволокин Н.А., Полуконова Н.В., Мудрак Д.А., Тычина С.А., Воронков М.О., Корчаков Н.В., Бучарская А.Б., Маслякова Г.Н.Сравнение противоопухолевой активности экстракта аврана лекарственного и входящего в его состав кверцетина при интротуморальном введении // Российский биотерапевтический журнал. 2015 г. Т. 14. № 1. С. 111.

28. Наволокин Н.А., Мудрак Д.А., Тычина С.А., Корчаков Н.В.Изменения лейкоцитарной формулы, красного костного мозга и опухоли лабораторных крыс с перевитой саркомой-45 при введении экстрактов аврана лекарственного, бессмертника песчаного, кукурузы антациановой || Саратовский научно-медицинский журнал. 2015 д. Т. 11. № 3. С. 328-332.

29. Наволокин Н.А., Мудрак Д.А., Полуконова Н.В., Тычина С.А., Корчаков Н.В., Бучарская А.Б., Маслякова Г.Н.Оценка противоопухолевой и антикахексической активности экстракта аврана лекарственного (Gratiola officinalis L.) у крыс с перевитой саркомой // Сибирский онкологический журнал. 2016 а. Т. 15. № 1. С. 37-43.

30. Наволокин Н.А., Мудрак Д.А., Тычина С.А., Полуконова Н.В., Корчаков Н.В., Бучарская А.Б. Антикахексическая и противоопухолевая активности флавоноидсодержащего экстракта аврана лекарственного (Gratiola officinalis L.) на крысах с перевитой саркомой 45 // Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2016 б. Т. 6. № 2. С. 291-295.

31. Наволокин Н.А., Мудрак Д.А., Полуконова Н.В., Тычина С.А., Байтман Т.П., Корчаков Н.В., Воронков М.О., Бучарская А.Б., Маслякова Г.Н.Сравнение противоопухолевой и антикахексической активности флавоноидсодержащих экстрактов в эксперименте на животных с перевитой саркомой 45 // Российский биотерапевтический журнал. 2016 в. Т. 15. № 1. С. 72-73.

32. Наволокин Н.А., Мудрак Д.А., Тычина С.А., Корчаков Н.В., Маслякова Г.Н., Полуконова Н.В.Патоморфоз перевиваемой саркомы -45 при внутримышечном введении лабораторным крысам экстракта кукурузы антоциановой // Саратовский научно-медицинский журнал. 2016 г. Т. 12. № 2. С. 234.

33. Полуконова А.В., Кузнецова И.А., Докало В.Е., Хасаханова Э.С., Полуконова Н.В.Условные рефлексы в разных группах животных и модификации экспериментальных установок в зоопсихологических и доклинических испытаниях // В мире научных открытий. 2010. № 4-10. С. 63-65.

34. Полуконова А.В., Наволокин Н.А., Бибикова О.А.Цитотоксическая активность in vitro экстракта врана на культуре клеток почек эмбрионов свиньи, зараженных онковирусом // Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2013. Т. 3. № 2. С. 375.

35. Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Дурнова Н.А., Маслякова Г.Н., Бучарская А.Б.Способ получения сухого экстракта из растительного сырья, обладающего биологической активностью // Патент на изобретение RUS 2482863 15.02.2012

36. Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Дурнова Н.А., Маслякова Г.Н., Бучарская А.Б. Средство, обладающее противоопухолевым и иммуномодулирующим действием// Патент на изобретение RUS 2519769 21.03.2013

37. Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Райкова С.В., Юртаева А.В., Дурнова Н.А., Маслякова Г.Н., Бучарская А.Б., Шуб Г.М. Средство, обладающее противовоспалительным, жаропонижающим и антимикробным действием // Патент на изобретение RUS 2535155 21.05.2013

38. Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Скворцова В.В., Манаенкова Е.В., Панкратова Л.И., Маслякова Г.Н., Дурнова Н.А. Средство, обладающее противотуберкулезным действием // Патент на изобретение RUS 2549477 05.03.2014

39. Полуконова Н.В., Дурнова Н.А., Хахулина Н.Н. Фитоценозы и запасы сырья аврана лекарственного (Gratíola officinális L.) на территории острова Чардымского р. Волги Саратовской области // Бюллетень Ботанического сада Саратовского государственного университета. 2016. Т. 14. № 2. С. 56-61.

40. Полуконова Н.В., Дурнова Н.А., Курчатова М.Н., Наволокин Н.А., Голиков А.Г.Химический анализ и способ получения новой билогически активной композиции из травы аврана лекарственного (Gratiola officinalis L.) // Химия растительного сырья. 2013. № 4. С. 165-173.

41. Polukonova N.V., Kurchatova M.N., Navolokin N.A., Bucharskaya A.B., Durnova N.A., Maslyakova G.N.A new extraction method of bioflavanoids from poisonous plant (Gratiola officinalis L.) // Russian Open Medical Journal. 2014. Т. 3. № 3. С. 304.

42. Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Полуконова А.В., Бучарская А.Б., Маслякова Г.Н.Культура клеток почки эмбриона свиньи, инфицированных онковирусом (Spev-2) как модельный объект для исследования цитотоксического действия противоопухолевых средств на примере экстракта аврана (Gratiola officinalis L.) // Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2015 а. Т. 5. № 6. С. 926-928.

43. Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Райкова С.В., Маслякова Г.Н., Бучарская А.Б., Дурнова Н.А., Шуб Г.М.Противовоспалительная, жаропонижающая и антимикробная активность флаваноидсодержащего экстракта аврана лекарственного (Gratiola officinalis L.) // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2015 б. Т. 78. № 1. С. 34-38.

44. Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Мудрак Д.А., Прилепский А.И., Широков А.А., Бучарская А.Б., Маслякова Г.Н.Исследование цитотоксической активности экстракта аврана лекарственного и кверцетина на клеточной культуре рака шейки матки // Российский биотерапевтический журнал. 2016. Т. 15. № 1. С. 88-89.

45. Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Маслякова Г.Н., Бучарская А.Б., Панкратова Л.Э., Манаенкова Е.В., Курчатова М.Н., Скворцова В.В., Дурнова Н.А. Активность экстракта аврана лекарственного (Gratiola оfficinalis L.) в отношении M. tuberculosis // Бюллетень медицинских Интернет-конференций 2017. Том 7. № 2. С. 581- 584.

46. Скворцова В.В., Наволокин Н.А., Полуконова Н.В., Манаенкова Е.В., Панкратова Л.Э., Курчатова М.А., Маслякова Г.Н., Дурнова Н.А.Противотуберкулезная активность экстракта бессмертника песчаного (Helichrysum arenarium) in vitro // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2015. Т. 78. № 2. С. 30-33.

47. Растительные ресурсы СССР. Т. 1 Цветковые растения, их химический состав, использование // отв. ред. А.А. Федоров. Л.: Наука, 1984. 464 с.

48. Хабриев Р.У. Руководство по экспериметнальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: ОАО «Изд-во «Медицина». 2005. 832 с.

49. Polier G., Ding J., Konkimalla B. V., Eick D., Ribeiro N., Köhler R., Giaisi M., Efferth T., Desaubry L., Krammer P. H., LiWeber M... Wogonin and related natural flavones are inhibitors of CDK9 that induce apoptosis in cancer cells by transcriptional suppression of Mcl-1.//Cell Death Dis. 2011. №2. P. e182

50. Stanislaw Boryczka, Ewa Bebenek, Maria Jastrzebska, Joachim Kusz, and Maciej Zubko. Crystal structure of betulinic acid-DMSO solvate // Zeitschrift für Kristallographie - Crystalline Materials. - 2012 -V. 227, No. 6. -P. 379-384. doi: 10.1524/zkri.2012.1527

51. http://nmedic.info/story/zyuznik