АНТИТЕЛА, СПЕЦИФИЧНЫЕ К ММР9

1. Выделенное антитело, специфичное к ММР9, либо его антиген-связывающий фрагмент, причем данное антитело или его фрагмент связывается с ММР9 путем взаимодействия с эпитопом, включающим по меньшей мере одну аминокислоту в пределах участка, состоящего из SEQ ID NO: 41, по меньшей мере одну аминокислоту в пределах участка, состоящего из SEQ ID NO: 42, и по меньшей мере одну аминокислоту в пределах участка, состоящего из SEQ ID NO: 43, при этом данные участки находятся в пределах каталитического домена ММР9 человека.
2. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 1, содержащие вариабельную область тяжелой цепи, включающую:
(i) CDR1 тяжелой цепи по SEQ ID NO: 2 или его вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты данного CDR1 тяжелой цепи заменены другими аминокислотами;
(ii) CDR2 тяжелой цепи по SEQ ID NO: 3 или его вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты данного CDR2 тяжелой цепи заменены другими аминокислотами;
(iii) CDR3 тяжелой цепи по SEQ ID NO: 4 или его вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты данного CDR3 тяжелой цепи заменены другими аминокислотами.
3. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 2, при этом вариабельная область тяжелой цепи включает SEQ ID NO: 11 или ее вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты по меньшей мере одного из CDR1, CDR2 и/или CDR3 тяжелой цепи и/или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислот каркасных участков вариабельной области тяжелой цепи заменены другими аминокислотами.
4. Выделенное антитело или его фрагмент по любому из пп. 2-3, при этом вариабельная область тяжелой цепи включает аминокислотную последовательность, выбранную из:
(i) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 12,
(ii) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 13,
(iii) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 14,
(iv) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 15,
(v) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16,
(vi) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 17,
(vii) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 18,
(viii) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 19,
(ix) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 20,
(x) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 11.
5. Выделенное антитело или его фрагмент по любому из пп. 2-4, дополнительно
содержащие вариабельную область легкой цепи, выбранную из:
a) вариабельной области легкой цепи, включающей:
(i) CDR1 легкой цепи по SEQ ID NO: 21 или его вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты данного CDR1 легкой цепи заменены другими аминокислотами;
(ii) CDR2 легкой цепи по SEQ ID NO: 22 или его вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты данного CDR2 легкой цепи заменены другими аминокислотами;
(iii) CDR3 легкой цепи по SEQ ID NO: 23 или его вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты данного CDR3 легкой цепи заменены другими аминокислотами, или
b) вариабельной области легкой цепи, включающей:
(i) CDR1 легкой цепи по SEQ ID NO: 26 или его вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты данного CDR1 легкой цепи заменены другими аминокислотами;
(ii) CDR2 легкой цепи по SEQ ID NO: 27 или его вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты данного CDR2 легкой цепи заменены другими аминокислотами;
(iii) CDR3 легкой цепи по SEQ ID NO: 28 или его вариант, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты данного CDR3 легкой цепи заменены другими аминокислотами.
6. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 5, при этом вариабельная область легкой цепи включает аминокислотную последовательность, выбранную из:
(1) SEQ ID NO: 24 или ее варианта, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты по меньшей мере одного из CDR1, CDR2 и/или CDR3 легкой цепи и/или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислот каркасных участков вариабельной области легкой цепи заменены другими аминокислотами, и
(2) SEQ ID NO: 29 или ее варианта, у которого 1, 2 или 3 аминокислоты по меньшей мере одного из CDR1, CDR2 и/или CDR3 легкой цепи и/или 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислот каркасных участков вариабельной области легкой цепи заменены другими аминокислотами.
7. Выделенное антитело или его фрагмент по п. 5 или 6, при этом вариабельная область легкой цепи включает аминокислотную последовательность, выбранную из:
(i) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 67,
(ii) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 68,
(iii) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 69,
(iv) аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 70.
8. Выделенное антитело или его фрагмент по любому из пп. 1-7, которое ингибирует каталитическую активность ММР9.
9. Выделенное антитело по любому из пп. 1-8, которое представляет собой моноклональное антитело человека.
10. Выделенное антитело по любому из пп. 1-9, при этом данное антитело включает вариабельную область тяжелой цепи по SEQ ID NO: 19 и вариабельную область легкой цепи по SEQ ID NO: 70.
11. Антитело или его фрагмент по любому из пп. 1-10 для применения в качестве лекарственного средства.
12. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело либо его антиген-связывающий фрагмент по любому из пп. 1-10.
13. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 12, включающая одно или несколько из следующего:
(1) последовательность нуклеиновой кислоты, включающую SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32 и SEQ ID NO: 33 или их варианты, идентичные по меньшей мере на 80%, на 90%, на 95%, на 96%, на 97%, на 98% или по меньшей мере на 99% одной из данных последовательностей, и/или
(2) последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из:
a) последовательности нуклеиновой кислоты, включающей SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35 и SEQ ID NO: 36 или их варианты, идентичные по меньшей мере на 80%, на 90%, на 95%, на 96%, на 97%, на 98% или по меньшей мере на 99% одной из данных последовательностей,
b) последовательности нуклеиновой кислоты, включающей SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 38 и SEQ ID NO: 39 или их варианты, идентичные по меньшей мере на 80%, на 90%, на 95%, на 96%, на 97%, на 98% или по меньшей мере на 99% одной из данных последовательностей.
14. Рекомбинантный экспрессирующий вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п. 12 или 13.
15. Клетка хозяина, содержащая рекомбинантный вектор по п. 14.
16. Способ получения антител или их фрагментов по любому из пп. 1-10, включающий культивирование клеток хозяина, трансформированных экспрессирующим вектором, содержащим последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей данные антитела или их фрагменты, в условиях, достаточных для экспрессирования данных антител или их фрагментов.
17. Фармацевтическая композиция, включающая одно или несколько из следующего: (i) антитело, специфичное к ММР9, либо его антиген-связывающий фрагмент по любому из пп. 1-10, (ii) нуклеиновую кислоту по п. 12 или 13, (iii) вектор по п. 14 и/или (iv) клетку хозяина по п. 15, а также по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
18. Антитело или его фрагмент по любому из пп. 1-10 для применения при профилактике и/или лечении связанного с ММР9 заболевания.
19. Антитело для применения по п. 18, при этом связанное с ММР9 заболевание выбрано из группы, состоящей из воспалительных и аутоиммунных заболеваний, воспалительных заболеваний кишечника, раковых заболеваний, фиброзных заболеваний, сердечнососудистых заболеваний, неврологических заболеваний, глазных заболеваний или любых других связанных с ММР9 заболеваний.
20. Способ выявления присутствия и/или концентрации белка ММР9 ex vivo в биологическом образце, включающий стадии:
(i) получение биологического образца от субъекта;
(ii) проведение реакции данного биологического образца по меньшей мере с одним антителом или его антигенсвязывающим фрагментом по любому из пп. 1-10 в условиях, достаточных для связывания белка ММР9, присутствующего в данном биологическом образце, с данным по меньшей мере одним антителом или его фрагментом посредством взаимодействия антиген-антитело; и
(iii) детектирование сигнала, пропорционального уровню комплекса антиген-антитело, образовавшегося на стадии (ii),
причем интенсивность сигнала коррелирует с концентрацией белка ММР9 в биологическом образце.
21. Способ ex vivo по п. 20 для выявления присутствия и/или концентрации активного белка ММР9 в биологическом образце.
22. Способ ex vivo по п. 21, при этом по меньшей мере одно антитело либо его антиген-связывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи по SEQ ID NO: 19 и вариабельную область легкой цепи по SEQ ID NO: 70.
23. Способ профилактики и/или лечения связанного с ММР9 заболевания у нуждающегося в этом лица, включающий введение данному лицу антитела по любому из п.п. 1-10 или фармацевтической композиции по п. 17.
24. Способ по п. 23, при этом связанное с ММР9 заболевание выбрано из числа воспалительных и аутоиммунных заболеваний, воспалительных заболеваний кишечника, раковых заболеваний, фиброзных заболеваний, сердечнососудистых заболеваний, неврологических заболеваний или глазных заболеваний.
25. Способ по п. 23, при этом антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи по SEQ ID NO: 19 и вариабельную область легкой цепи по SEQ ID NO: 70.