Использование лектинов морских гидробионтов для диагностики ряда социально значимых заболеваний человека

Bестник flBO PAH. 2010. № 5

УДК 577.112:592:616-079.4

И.В.ЧИКАЛОВЕЦ, В.И.МОЛЧАНОВА, А.А.БУЛГАКОВ, О.В.ЧЕРНИКОВ, И.Ю.ПЕТРОВА, П.А.ЛУКЬЯНОВ

Использование

лектинов морских гидробионтов

для диагностики ряда социально значимых

заболеваний человека

Рассмотрены возможности использования лектинов морских гидробионтов для исследования углеводной структуры гликоконъюгатов. Показана перспективность разработанных тест-систем для дифференциальной диагностики ряда заболеваний.

Ключевые слова: диагностические тест-системы, лектины, морские гидробионты, онкофетальные антигены.

Application of lectins from marine hydrobionts for diagnostics of some socially important human diseases.

I.V.CHIKALOVETS, V.I.MOLCHANOVA, A.A.BULGAKOV, O.V.CHERNIKOV (Pacific Institute of Bioorganic Chemistry, FEB RAS, Vladivostok), I.Yu.PETROVA (Institute of Marine Biology, FEB RAS, Vladivostok), P.A.LUKYANOV (Pacific Institute of Bioorganic Chemistry, FEB RAS, Vladivostok).

Availability of lectins from marine hydrobionts for investigation of carbohydrate structure of glycoconjugates

is considered in the paper. Advantages of the developed test systems for differential diagnosis of some diseases are shown.

Key words: diagnostic test systems, lectins, marine hydrobionts, oncofetal antigens.

В настоящее время в различных областях биологических и медицинских исследований, в частности гликобиологии, широко используются лектины. Лектины - это общее название гликопротеинов, а также белков, обладающих свойством избирательно и обратимо связывать углеводы, не вызывая их химического превращения. Лектины обнаружены на всех уровнях развития живых организмов - от вирусов до человека. Они принимают участие в таких биологически важных процессах, как оплодотворение, миграция лейкоцитов к месту воспаления, дифференцировка клеток, а также в процессах малигнизации и метастазирования. Информация об узнавании заключена в углеводных структурах, которые представлены на поверхности клеток в виде гликопротеинов, гликолипидов и полисахаридов. Благодаря способности распознавать углеводные структуры, а также влиять на клеточные процессы лектины нашли широкое применение в биологии и медицине.

На сегодняшний день выделенные и охарактеризованные лектины являются инструментом в исследовании структуры гликоконъюгатов (ГК) клеточной поверхности и в

ЧИKAЛOBEЦ Ирина Bладимировна - кандидат химических наук, старший научный сотрудник, MOЛЧAHOBA Bалентина Ильинична - кандидат химических наук, старший научный сотрудник, БУЛГAKOB Aлександр Aлек-сандрович - кандидат химических наук, старший научный сотрудник, ЧEPHИKOB Oлег Bикторович - кандидат биологических наук, научный сотрудник, ЛУKЬЯHOB Павел Aлександрович - доктор химических наук, заведующий лабораторией (Тихоокеанский институт биоорганической химии ДBO PAH, Bладивосток), ПETPOBA Ирина Юрьевна - кандидат биологических наук, научный сотрудник (Институт биологии моря ДBO PAH, Bла-дивосток). E-mail: ivchik6@mail.ru

Pабота выполнена при поддержке гранта ДBO PAH по программе фундаментальных исследований Президиума PAH «Фундаментальные науки - медицине» № 09-І-П21-05 и гранта PФФИ № 09-04-98535-р-Bосток-а.

изучении углеводзависимых процессов, в частности при канцерогенезе и метастазирова-нии. Так, целый ряд лектинов используется в качестве цито- и гистохимических маркеров нормальных и патологических клеток и тканей, они надежно вошли в клиническую практику для определения групп крови. Лектины используются для очистки крови и удаления незрелых форм лимфоидных клеток при остром лейкозе. Выделено несколько сотен лектинов из различных источников, наиболее полно изучены лектины из растений и микроорганизмов, на основе которых изготавливаются наборы для практического применения. Например, компания Wako Diagnostics производит AFP-L3% тест для обнаружения и прогноза гепатоцеллюлярной карциномы. GP Biosciences Ltd. продает микрочипы, включающие панель из 41 лектина для скрининга биомаркеров. Несколько производителей (Invitrogen, EY Laboratories Inc., Vector Laboratories) выпускают конъюгаты лектинов с разными метками для последующего их использования в гистохимии, проточной цитометрии, вестерн-блоттинге, иммуноферментном анализе. Лектины же из морских организмов менее изучены, и в последнее время им уделяется пристальное внимание в связи с тем, что большинство из них обладает узкой специфичностью по отношению к углеводам. Высокоспецифичные лектины подобны моноклональным антителам, однако в некоторых случаях они могут обладать рядом преимуществ. Кроме того, показано, что лектины из морских беспозвоночных обладают антибактериальной, цитотоксической, противоопухолевой, митогенной, анти-ВИЧ активностями [14, 15, 22, 23, 26].

В лаборатории химии неинфекционного иммунитета ТИБОХ ДВО РАН проводятся исследования, связанные с поиском, выделением, детальной характеристикой новых лек-тинов из морских гидробионтов и с разработкой подходов для их практического применения.

К настоящему времени нами выделено 8 лектинов, установлены основные физикохимические характеристики и определены некоторые виды биологической активности (см. таблицу).

Углеводная специфичность и биологическая активность лектинов морских гидробионтов

Лектин Источник Специфичность Активность Ссылка

CGL Мидия СгепотуШш grayanus Gal/GalNAc Антивирусная, антибактериальная, цитокин-индуцирующая [4, 5, 7, 9]

DTL Асцидия Didemnum !ета!апит GlcNAc Антивирусная, антибактериальная, цитокин-индуцирующая, антипролиферативная, адгезивная [5, 7, 10, 20]

DTL-A Асцидия Didemnum !ета!апит GlcNAc/GalNAc, гепарин Антивирусная, цитокин-индуцирующая [5, 7, 18]

SVL Морской червь Serpula vermicularis GlcNAc Антивирусная, цитокин-индуцирующая [5, 7, 17]

TCL Красная водоросль ТгсЫсагрш сппкш Гликопротеины PSM и фетуин Цитокин-индуцирующая, митогенная [7, 19]

MBL-AJ Дальневосточный трепанг АровйсЫрш japonicus Низкоразветвленные а-1,2 и а-1,6 D-маннаны Участие в иммунных реакциях (опсонизация, фагоцитоз), морфогенез (регенерация) [12, 13]

MBL-C Кукумария Сиситапа japonica Низкоразветвленные а-1,2 и а-1,6 D-маннаны Н.о. [11]

MBL-SN Морской еж Strongylocentrotus nudus Низкоразветвленные а-1,2 D-маннаны Участие в иммунных реакциях (опсонизация, фагоцитоз), эмбриональном развитии [13]

Примечание. Н.о. - не определяли.

Некоторые из этих лектинов проявляют специфичность к углеводным цепям, характерным для злокачественного роста, таким как Т антиген (Galpl^3GalNAc-O-Ser/Thr). Тп антиген ^аШАс-О^егЛЪг), биссектный GlcNAc, высокоманнозные цепи [9, 12, 18. 19]. Известно, что развитие ряда патологических состояний, включая появление опухоли в организме, сопровождается сбоем многих внутренних систем, при этом часто наблюдается не только количественное изменение уровня некоторых ГК, секретируемых клеткой, но и их перегликозилирование. В связи с этим изучение структуры, биосинтеза, регуляции и функции углеводных цепей ГК является новым и перспективным направлением в онкологии, позволяющим расшифровать механизмы возникновения злокачественных новообразований и, следовательно, наметить пути их диагностики и лечения [21]. Ряд гликопротеинов, названных онкофетальными антигенами (ОФА), используется в качестве маркеров различного типа патологий. Однако высокий уровень этих ОФА не всегда однозначно связан со злокачественной трансформацией. К настоящему времени известно, что структура углеводных цепей в значительной степени зависит от типа и тяжести патологического процесса [21]. В связи с этим возникли принципиально новые подходы к дифференциальной диагностике заболеваний, которые основаны на выявлении изменений в углеводных структурах ГК. Наметилось два пути для определения их углеводного профиля: это использование моноклональных антител к углеводным детерминантам (1-й путь) и лектинов (2-й путь), которые могут быть полезным инструментом для изучения строения, свойств и функций ГК [16]. Было показано, что использование лектинов в сочетании с возможностями ранее разработанных методов, основанных на выявлении антигенных детерминант антителами, может существенно повысить чувствительность и специфичность диагностики злокачественных опухолей, а также помочь в дифференцировке онкологических патологий от каких-либо других, сопровождающихся появлением этих же антигенов [25].

Для определения уровня ОФА в сыворотке крови пациентов нами были получены мо-носпецифические антитела и разработаны методы иммуноферментного анализа (ИФА), не уступающие по чувствительности и специфичности коммерческим тест-системам. Для выявления различий в гликозилировании ОФА на основе выделенных нами лектинов были разработаны методы твердофазного лектин-ферментного анализа (ТЛФА).

Известно, что трофобласт-специфический р-1-гликопротеин (ТБГ), который относится к классу ОФА, секретируется как при нормально протекающей беременности, так и при злокачественных заболеваниях трофобласта - пузырном заносе и хорионэпителиоме [24]. Поскольку высокий уровень ТБГ наблюдается в обоих случаях, не представляется возможным провести четкие различия между злокачественным заболеванием и беременностью, что затрудняет своевременную диагностику. С помощью сконструированной тест-системы с использованием CGL были протестированы сыворотки беременных женщин (в том числе с угрозой невынашивания) и сыворотки женщин с онкопатологией. Выявлены достоверные различия у женщин с нормально протекающей беременностью и с угрозой невынашивания, с одной стороны, и у женщин с угрозой невынашивания и онкозаболеванием, с другой стороны. При появлении первых признаков патологического процесса можно на ранних стадиях дифференцировать угрозу невынашивания беременности, обусловленную плацентарной недостаточностью, от начинающегося опухолевого процесса, что является крайне важным при постановке первичного диагноза.

Для выявления различий в гликозилировании еще одного ОФА - раково-эмбрионального антигена (РЭА) - также разработан метод ТЛФА на основе CGL. Методами ИФА и ТЛФА проанализированы сыворотки онкологических больных и здоровых доноров. Результаты эксперимента показали существенную разницу в связывании CGL с РЭА/РЭА-подобными антигенами из сывороток онкологических больных и здоровых доноров. Средний уровень лектин-реактивных гликоформ РЭА в образцах со всеми видами онкопатологий был в 2-3 раза выше по сравнению со средним уровнем, определенным для здоровых людей.

На основании результатов исследования взаимодействия маннансвязывающего лекти-на трепанга (MBL-AJ) с опухолевыми маркерами нами разработан высокочувствительный и специфичный лектин-иммуноферментный метод определения лектинсвязанных РЭА/РЭА-подобных антигенов в вагинальных секретах при злокачественных и доброкачественных патологиях шейки матки. В основе разработанного метода заложена способность MBL-AJ выявлять биохимические изменения в структурах углеводных цепей, сопровождающих злокачественную трансформацию. Метод основан на выявлении двух типов антигенных детерминант. Первый тип - белковых детерминант - специфически распознается антителами, сорбирующими молекулы РЭА/РЭА-подобных антигенов из экстрактов вагинальных секретов. Второй тип имеет углеводную природу и распознается MBL-AJ в образованном комплексе. В экспериментах, проведенных с вагинальными секретами 3 групп женщин (здоровых, с доброкачественными поражениями шейки матки, с раком шейки матки), выявлены существенные различия в связывании MBL-AJ с углеводными цепями РЭА/РЭА-подобных антигенов, содержащихся в секретах всех групп. При этом концентрации лектинсвязанных антигенов в вагинальном секрете здоровых женщин и женщин с доброкачественными изменениями были близки по своим значениям и в среднем составили 20,3 ± 1,3 и 19,7 ± 1,6 у.е./мл, соответственно. Среднее значение концентраций лектинсвязанных антигенов в секретах женщин с диагностированным раком шейки матки составило 5,2 ± 0,8 у.е./мл. Нами установлены статистически достоверные различия значений лектинсвязанных антигенов у здоровых женщин и у пациенток с диагнозом рака шейки матки (р < 0,001), а также у пациенток с доброкачественными и злокачественными новообразованиями (р < 0,001).

Оценку диагностической значимости метода проводили определением статистических показателей таких параметров, как чувствительность, специфичностъ, процент положительных и отрицательных предсказаний. В условиях математической модели при специфичности 93,6% чувствительность метода определения лектинсвязанных антигенов в вагинальных секретах у женщин с раком шейки матки составила 87,8%.

Предсказательная ценность положительного диагноза составила 87%, что указывает на вероятность наличия опухоли у конкретной пациентки. Предсказательная ценность отрицательного диагноза - 95,2%, что позволяет говорить о вероятности отсутствия опухоли при отрицательном результате исследования. По своим основным параметрам (чувствительность и специфичность) разработанный метод превосходит используемые в мировой практике методы определения опухолевых маркеров в сыворотке крови при этой патологии и позволяет с высокой точностью дифференцировать злокачественные образования от доброкачественных, проводить мониторинг эффективности лечения, выявлять рецидивы опухолевого роста.

Определение концентрации лектинсвязанных структур в вагинальном секрете является принципиально новым подходом при выявлении злокачественных новообразований у женщин. Метод не является инвазивным, и результаты его не зависят от возраста женщин и их физиологического состояния. Выбор источника исследуемого материала оказал существенное влияние на достоверность полученных результатов. Взятие его в месте биосинтеза исследуемого маркерного антигена позволяет избежать ситуации, когда определяется суммарный антиген, синтезируемый как опухолью, так и нераковыми клетками других органов [1].

Известно, что при онкогенезе происходит изменение структуры углеводной части ГК не только секретируемых, но и экспрессируемых на поверхности клеточной мембраны [3]. Предполагается, что перегликозилирование белков, находящихся на поверхности мембран лимфоцитов крови, может привести к резкой антигенной перестройке белковой молекулы, что, в свою очередь, обусловит появление у них новых биологических свойств и может явиться биохимической базой для блокирования иммунных реакций на рост опухоли [6]. Кроме того, исследование структуры углеводных цепей ГК лимфоцитов может быть использовано для прогноза течения хронической лимфоидной лейкемии [8]. Гликопротеины

нормальных человеческих лейкоцитов имеют низкий уровень сиаловых кислот, который резко возрастает при злокачественном перерождении клетки. Для исследования углеводного профиля гликоконъюгатов, экспрессируемых клетками при неопластической трансформации, было изучено взаимодействие коммерческого сиалоспецифичного лектина из Maackia amurensis (MAL) и GlcNAc-специфичного лектина DTL с поверхностными гликопротеинами нормальных и лейкозных лейкоцитов. Оказалось, что DTL на 50% сильнее связывался с клетками здоровых доноров по сравнению с клетками больных людей, в то время как взаимодействие MAL с патологическими лейкоцитами увеличивалось только на 25%. Сиалоспецифичный MAL, который часто используется в клинической практике для выявления клеток с повышенным уровнем сиалилирования, оказался менее чувствительным по сравнению с лектином из асцидии - DTL. В связи с этим представляется перспективным использование этого лектина для ранней диагностики заболеваний крови.

Перегликозилирование выявлено не только для ОФА, но и для ряда других сывороточных ГК. Характер таких изменений зависит от типа и стадии конкретного заболевания. Оценка уровня перегликозилирования ГК цельной сыворотки может не только дать сведения об общем состоянии организма, но, возможно, и выявить группы риска для онкологических заболеваний. На основе TCL был разработан метод ТЛФА, позволяющий анализировать образцы цельных сывороток. Благодаря уникальной углеводной специфичности этот лектин способен связываться с гликопротеинами муцинового типа, которые, как известно, в больших количествах начинают синтезироваться при онкотрансформации клетки [25]. Установлено, что взаимодействие TCL и ГК сывороток онкопациентов в 2,6 раза выше по сравнению с взаимодействием TCL и ГК сывороток доноров. Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о перспективности использования разработанной тест-системы на основе лектина из красной водоросли Tichocarpus crinitus для дальнейших исследований.

Изучение перегликозилирования отдельных сывороточных гликопротеинов представляет несомненный интерес в исследовании механизмов онкогенеза. Наиболее информативными маркерами являются белки острой фазы, например С-реактивный белок (СРБ), который быстро реагирует на любые патологические изменения, происходящие в организме. Для определения уровня СРБ разработан метод ИФА, на основе DTL-A сконструирована тест-система ТЛФА и проведен анализ содержания СРБ в сыворотках крови онкопациентов и доноров. Оказалось, что уровень лектин-реактивных гликоформ в группе онкопациентов в 2,5 раза ниже, чем в группе здоровых доноров. Данные результаты могут существенно повысить значимость СРБ как потенциального клинического маркера.

СРБ - мультифункциональный белок острой фазы, играющий важную роль не только при онкопатологии, но и при воспалениях, защите от чужеродных агентов и в аутоиммунных процессах. Большое прогностическое значение имеет уровень СРБ при сердечно-сосудистых заболеваниях и атеросклерозе [2]. Методом ТЛФА нами проанализированы сыворотки больных с ишемической болезнью сердца и атеросклерозом. Полученные результаты показали, что в зависимости от патологического процесса СРБ связывается с DTL-A с разной степенью аффинности: с увеличением тяжести сердечно-сосудистого заболевания наблюдается как увеличение общего содержания этого белка, так и возрастание индекса реактивности (отношение уровня СРБ, определенного ТЛФА, к уровню СРБ, определенного ИФА). Не исключено, что разные модифицированные формы СРБ удастся соотнести с конкретными формами патологий и/или с их количественными проявлениями, что позволит повысить прогностическую значимость тест-систем определения СРБ.

Таким образом, лектины, выделенные нами из морских гидробионтов, обладающие разнообразной биологической активностью, могут быть использованы не только как инструменты для исследования углеводной структуры ГК, но и служить основой для создания диагностических тест-систем, внедрение которых в клиническую практику лечебных учреждений обеспечит качественно новый уровень диагностики различных патологических процессов.

1. Булгаков А.А., Родионова О.М., Апанасевич В.И., Петрова И.Ю., Елисейкина М.Г Способ диагностики рака шейки матки. Пат. 2343485 РФ. № 2007123039/15; заявл. 14.06.07; опубл. 10.01.09, Бюл. № 1.

2. Вельков В.В. С-реактивный белок - структура, функция, методы определения, клиническая значимость // Лаб. мед. 2006. № 8. С. 1-7.

3. Галич И.П., Евтушенко Н.В. Изменение гликозилирования при онкогенезе и развитии других патологических процессов // Онкология. 2003. Т. 5, № 1. С. 4-9.

4. Какарека Н.Н., Черников О.В., Чикаловец И.В., Молчанова В.И., Курика А.В., Волков Ю.Г, Козловская З.Н. Изучение взаимодействия лектинов, выделенных из морских беспозвоночных, с вирусами растений и человека // Успехи соврем. биол. 2007. Т. 127, № 5. С. 452-457.

5. Лукьянов П.А., Черников О.В., Кобелев С.С., Чикаловец И.В., Молчанова В.И., Ли В. Углеводсвязывающие белки морских беспозвоночных // Биоорг. химия. 2007. Т. 33, № 1. С. 172-181.

6. Ситдикова С.М., Аманджолов Б.С., Киселевский М.В., Доненко Ф.В. Особенности связывания лектинов с лимфоцитами крови мышей на фоне роста опухоли // Бюл. эксперимент. биологии и медицины. 2005. Т. 140, № 10. С. 446-449.

7. Черников О.В., Чикаловец И.В., Молчанова В.И., Лукьянов П.А. Биологическая активность лектинов морских гидробионтов // Вестн. ДВО РАН. 2007. № 6. С. 131-135.

8. Шалай О.О., Логшский В.Э. Глiкановi структури мембрани лiмфоцитiв у хворих на хрошчну лiмфоiдну лейкем^ // Онкология. 2005. Т. 7, № 1. С. 19-22.

9. Belogortseva N.I., Molchanova V.I., Kurika A.V., Skobun A.S., Glazkova V.E. Isolation and characterization of new GalNAc/Gal-specific lectin from the sea mussel Crenomytilus grayanus // Comp. Biochem. Physiol. 1998. Vol. 119C, N 1. P 45-50.

10. Belogortseva N., Molchanova V., Glazunov V., Evtushenko E., Lukyanov P. N-Acetyl-D-glucosamine-specific lectin from the ascidian Didemnum ternatanum // Biochim. Biophys. Acta. 1998. Vol. 1380. P. 249-256.

11. Bulgakov A.A., Nazarenko E.L., Petrova I.Yu., Eliseikina M.G., Vakhrusheva N.M., Zubkov V.A. Isolation and properties of a mannan-binding lectin from the coelomic fluid of the Holothurian Cucumaria japonica // Biochemistry. 2000. Vol. 65, N 8. P. 1099-1106.

12. Bulgakov A.A., Eliseikina M.G., Petrova I.Yu., Nazarenko E.L., Kovalchuk S.N., Kogemyako V.B., Rasskazov V.A. Molecular and biological characterization of a mannan-binding lectin from the holothurian Apostichopus japonicus // Glycobiology. 2007. Vol. 17, N 12. P. 1284-1298.

13. Eliseikina M.G., Petrova I.Yu., Magarlamov T.Yu., Dolmatov I.Yu., Bulgakov A.A. Mannan-binding lectins of echinoderms are components of humoral defense // Echinoderms. Munchen; London: Taylor & Francis, 2004. P. 119-125.

14. Hatakeyama T., Suenaga T., Eto S., Niidome T., Aoyagi H. Antibacterial activity of peptides derived from the C-terminal region of a hemolytic lectin, CEL-III, from the marine invertebrate Cucumaria echinata // J. Biochem. 2004. Vol. 135. P. 65-70.

15. Kuramoto T., Uzuyama H., Hatakeyama T., Tamura T., Nakashima T., Yamaguchi K., Oda T. Cytotoxicity of a GalNAc-specific C-type lectin CEL-I toward various cell lines // J. Biochem. 2005. Vol. 137. P. 41-50.

16. Lis H., Sharon N. Lectins: Carbohydrate-specific proteins that mediate cellular recognition // Chem. Rev. 1998. Vol. 98. P. 637-674.

17. Molchanova V., Chikalovets I., Chernikov O., Belogortseva N., Li W., Wang J.-H., Yang D.Y., Zheng Y.-T., Lukyanov P. A new lectin from the sea worm Serpula vermicularis: isolation, characterization and anti-HIV activity // Comp. Biochem. Physiol. 2007. Vol. 145C, N 2. P. 184-193.

18. Molchanova V., Chikalovets I., Li W., Kobelev S., Kozyrevskaya S., Bogdanovich R., Howard E., Belogortse-va N. New GlcNAc/GalNAc-specific lectin from the ascidian Didemnum ternatanum // Biochim. Biophys. Acta. 2005. Vol. 1723. P 82-90.

19. Molchanova V., Chernikov O., Chikalovets I., Lukyanov P. Purification and partial characterization of the lectin from the marine red alga Tichocarpus crinitus (Gmel.) Rupr. (Rhodophyta) // Bot. Mar. 2010. Vol. 53. P. 69-78.

20. Odintsova N.A., Belogortseva N.I., Khomenko A.V., Chikalovets I.V., Lukyanov PA. Effect of lectin from the ascidian on the growth and the adhesion of HeLa cells // Mol. Cell. Biochem. 2001. Vol. 221. P. 133-138.

21. Ohtsubo K., Marth J.D. Glycosylation in cellular mechanisms of health and disease // Cell. 2006. Vol. 126, N 5. P. 855-867.

22. Opric M., Poznanovic S., Kljajic Z., Sladic D., Pupic G., Perunovic B., Gasic M.J. Labelling of breast carcinoma, thyroid carcinoma and melanoma with manno- and galacto-specific lectins from marine invertebrates // Eur. J. Histochem. 1996. Vol. 40. P. 211-218.

23. Pajic I., Kljajic Z., Dogovic N., Sladic D., Juranic Z., Gasic M.J. A novel lectin from the sponge Haliclona cra-tera: isolation, characterization and biological activity // Comp. Biochem. Physiol. 2002. Vol. 132C. P. 213-221.

24. Searle F., Leake B.A., Bagshawe K.D., Dent J. Serum SP-1-pregnancy specific pj glycoprotein - in choriocarcinoma and other neoplastic diseases // Lancet. 1978. Vol. 1. P. 579-580.

25. Singhal A., Hakomori S.-I. Molecular changes carbohydrate antigens associated with cancer // BioEssays. 1990. Vol. 12, N 5. P. 223-230.

26. Wang J.H., Kong J., Li W., Molchanova V., Chikalovets I., Belogortseva N., Lukyanov P., Zheng Y.T. A р-galactose-specific lectin isolated from the marine worm Chaetopterus variopedatus possesses anti-HIV activity // Comp. Biochem. Physiol. 2006. Vol. 142C. P. 111-117.