Частицы для ингаляции, содержащие комбинацию антихолинергического, кортикостероидного и бета-адренергического средств
INHALATION PARTICLES CONTAINING COMBINATION OF ANTICHOLINERGIC, CORTICOSTEROID AND BETA-ADRENERGIC AGENTS

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к частицам, содержащим три активных компонента, для введения путем ингаляции.
2
В частности, изобретение относится к частицам, содержащим комбинацию антихолинергического средства, агониста бета-адренорецепторов и ингалируемого кортикостероида, способу их получения и их применения для профилактики и/или лечения заболеваний органов дыхания.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Заболевания органов дыхания являются распространенной и важной причиной заболеваемости и смертности по всему миру. В действительности, многие люди подвержены воздействию воспалительных и/или обструктивных болезней легких, той категории, которая характеризуется воспаленными и легко сужаемыми дыхательными путями, затруднением для прохождения потока воздуха, проблемами при выдохе и частыми визитами в медучреждения и госпитализациями. Типы воспалительных и/или обструктивных болезней легких включают астму, бронхоэктатическую болезнь, бронхит и хроническую обструктивную болезнь легких (ХОБЛ).
В частности, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) представляет собой многокомпонентное заболевание, характеризующееся ограничением потока воздуха и воспалением дыхательных путей. Обострения ХОБЛ имеют существенное влияние на качество жизни, повседневную активность и общее самочувствие пациентов и представляют собой существенное бремя для системы здравоохранения. Таким образом, цели лечения ХОБЛ включают не только облегчение симптомов и предотвращение развития болезни, но также профилактику и лечение обострений.
2
Хотя доступные методы лечения улучшают клинические симптомы и уменьшают воспаление дыхательных путей, они определенно не замедляют развитие болезни в долгосрочной перспективе или не направлены против всех составляющих болезни. В связи с продолжающимся увеличением тяжести ХОБЛ продолжаются исследования новых и усовершенствованных стратегий оптимизации фармакотерапии и, в частности, комбинирующей терапии, с точки зрения режимов комплементарного воздействия комбинирующей терапии, которые позволяют воздействовать на несколько составляющих заболевания. Данные клинических испытаний показывают, что в случае пациентов, страдающих более тяжелыми формами ХОБЛ, тройная терапия, объединяющая антихолинергическое средство с ингалируемым кортикостероидом и агонистом β-адренорецепторов длительного действия, может обеспечить клинические улучшения в дополнение к тем улучшения, которые связаны с каждым средством по отдельности.
2
На данный момент существует несколько рекомендованных типов лечения ХОБЛ, из которых бронхолитические средства, такие как β-агонисты и антихолинергические средства являются основополагающими элементами симптоматического лечения в случае легкой и средней стадий заболевания, которые прописывают в виде приема по необходимости в случае легкой стадии ХОБЛ и в качестве поддерживающей терапии в случае средней стадии ХОБЛ.
Указанные бронхолитические средства эффективно применяют путем ингаляции, тем самым увеличивая широту терапевтического действия и снижая побочное воздействие активного материала.
2
Для лечения более тяжелых стадий ХОБЛ руководства рекомендуют добавление ингалируемых кортикостероидов (ICS) к лечению бронхолитическими средствами длительного действия. Комбинацию терапий исследовали с точки зрения режимов их комплементарного воздействия, позволяющего воздействовать на несколько составляющих заболевания. Данные последних клинических испытаний показывают, что в случае пациентов, страдающих от средней до тяжелой стадий ХОБЛ, тройная терапия, объединяющая антихолинергическое средство с ICS и β-агонистом длительного действия (LABA), может обеспечить клинические улучшения в дополнение к улучшениям, связанным с каждым средством по отдельности.
Кроме того, есть данные, предполагающие синергидное действие LABA и ICS, если оба активных компонента присутствуют в одной и той же области воздействия, например, в малых периферических дыхательных путях респираторного дерева. Не ограничиваясь какой-либо теорией, это может произойти и в том случае, когда в указанную область воздействия доставляют анти-мускариновое лекарственное средство.
Представляющая интерес тройная комбинация, в настоящее время находящаяся в стадии исследования, включает:
i) формотерол, в частности, его соль в виде фумарата дигидрата (здесь и далее обозначен FF), агонист бета-2 адренергических рецепторов длительного действия, в настоящее врем используемый в клинической практике при лечении бронхиальной астмы, ХОБЛ и обусловленных заболеваний;
ii) rac-гликопиррониума бромид (здесь и далее обозначен GB), антимускариновое лекарственное средство, в настоящее время одобренное для поддерживающего лечения ХОБЛ;
iii) беклометазона дипропионат (здесь и далее обозначен BDP) - мощный противовоспалительный кортикостероид, доступный под широким рядом наименований для профилактики и/или лечения астмы и других респираторных заболеваний.
С другой стороны, имеющиеся в уровне техники комбинированные продукты для ингаляции могут быть подвержены сильным колебаниям в доставке дозы каждого активного компонента, что, в свою очередь, можно рассматривать как функцию от условий хранения продукта.
Следовательно, было бы предпочтительно предложить способ, позволяющий получать комбинированные частицы для ингаляции, что позволит доставить все три активных компонента без существенного изменения доз.
Кроме того, все еще существует необходимость усовершенствованного терапевтического контроля пациентов, обнаруживающих респираторные заболевания, затрагивающие малые периферические дыхательные пути.
Следовательно, в высшей степени предпочтительно предложить способ, позволяющий получать комбинированные частицы, в которых все три активных компонента могут одновременно достигать нижних отделов респираторного дерева и, следовательно, улучшать результаты лечения малых дыхательных путей и сопутствующий контроль.
В уровне техники предложены различные подходы получения частиц, включающих комбинацию двух или более активных компонентов. Например, в WO 02/28377, WO 2010/097188 и WO 2013/021199 описаны частицы, включающие, inter alia, LABA и ICS.
Однако ни одна из указанных ссылок не раскрывает частицы, содержащие комбинацию солей формотерола, беклометазона дипропионата и солей гликопиррониума. Кроме того, в них не содержится указаний на проблему доставки в нижние отделы респираторного дерева.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к многокомпонентным микрочастицам для применения в композиции для ингаляции, где каждая микрочастица включает комбинацию беклометазона дипропионата, фармацевтически приемлемой соли формотерола и фармацевтически приемлемой соли гликопиррониума в соотношении, составляющем от 35:10:55 до 94:1:5 по массе, при этом указанные микрочастицы отличаются коэффициентом формы, составляющим от 0,8 до 1,15, предпочтительно от 0,9 до 1,10, более предпочтительно от 0,95 до 1,05.
Преимущественно, по меньшей мере 90% всех указанных выше микрочастиц имеют объемный диаметр, который равен или меньше 4,5 микрон, предпочтительно равен или меньше 4,0 микрон, а объемный медианный диаметр указанных микрочастиц составляет от 1,0 до 3,0 микрон, предпочтительно от 1,2 до 2,5 микрон, более предпочтительно от 1,5 до 2,2 микрон.
Во втором аспекте изобретения предложены фармацевтические аэрозольные композиции для дозирующих ингаляторов под давлением (pMDI), содержащие указанные выше микрочастицы в суспензии в сжиженном газе-пропелленте.
В третьем аспекте изобретения предложен дозирующий ингалятор под давлением (pMDI), включающий баллончик, наполненный указанной выше фармацевтической аэрозольной композицией, и дозирующий клапан для доставки ежедневной терапевтически эффективной дозы активного компонента.
В четвертом аспекте изобретение относится к фармацевтической композиции в виде сухого порошка, включающей указанные выше микрочастицы и, при необходимости, носитель.
В пятом аспекте изобретение относится к ингалятору сухого порошка, наполненному указанной выше композицией в виде сухого порошка.
В шестом аспекте изобретение относится к способу получения заявленных микрочастиц, включающему следующие стадии:
a) получение раствора из трех активных компонентов в заранее заданном соотношении в подходящем растворителе;
b) генерация аэрозоля из раствора указанных трех активных компонентов;
c) сушка распыленных капель с получением микрочастиц и
d) выделение полученных микрочастиц.
В седьмом аспекте изобретение относится к заявленным микрочастицам для применения в профилактике и/или лечении воспалительных и/или обструктивных заболеваний дыхательных путей, таких как астма или хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ).
В восьмом аспекте изобретение относится к способу профилактики и/или лечения воспалительных и/или обструктивных заболеваний дыхательных путей, таких как астма или хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), который включает введение путем ингаляции эффективного количества микрочастиц по настоящему изобретению.
В девятом аспекте изобретение относится к применению заявленных микрочастиц в производстве лекарственного средства для профилактики и/или лечения воспалительных и/или обструктивных заболеваний дыхательных путей, таких как астма или хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ).
В десятом аспекте изобретение относится к многокомпонентным микрочастицам для применения в композиции для ингаляции, включающим комбинацию беклометазона дипропионата, фармацевтически приемлемой соли формотерола и фармацевтически приемлемой соли гликопиррониума в соотношении, составляющем от 35:10:55 до 94:1:5 по массе, при этом указанные микрочастицы отличаются коэффициентом формы, составляющим от 0,95 до 1,05, и получаются согласно способу, включающему следующие стадии:
a) получение раствора из трех активных компонентов в заранее заданном соотношении в подходящем растворителе;
b) генерация аэрозоля из раствора из указанных трех активных компонентов и
с) сушка распыленных капель с получением микрочастиц.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Термины "антагонисты мускариновых рецепторов", "антимускариновые лекарственные препараты" и "антихолинергические лекарственные препараты" могут использоваться как синонимы.
Термин "фармацевтически приемлемая соль гликопиррониума" относится к соли соединения 3-[(циклопентилгидроксифенилацетил)окси]-1,1-диметилпирролидиний.
Термин "фармацевтически приемлемая соль формотерола" относится к соли соединения 2'-гидрокси-5'-[(RS)-1-гидрокси-2-{[(RS)-п-метокси-α-метилфенетил]амино}этил]форманилид.
Термин "беклометазона дипропионат" относится к соединению (8S,9R,10S,11S,13S,14S,16S,17R)-9-хлоро-11-гидрокси-10,13,16-триметил-3-оксо-17-[2-(пропионилокси)ацетил]-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-додекагидро-3Н-циклопента[а]фенантрен-17-илпропионат.
Термин "фармацевтически приемлемая соль" включает неорганические и органические соли. Примеры органических солей могут включать формиат, ацетат, трифторацетат, пропионат, бутират, лактат, цитрат, тартрат, малат, малеат, сукцинат, метансульфонат, бензолсульфонат, ксинафоат, памоат и бензоат. Примеры неорганических солей могут включать фторид, хлорид, бромид, иодид, фосфат, нитрат и сульфат.
Термин "растворитель" используют для обозначения среды, в которой растворяют активные компоненты, а термин "анти-растворитель" используют для обозначения среды, в которой происходит кристаллизация.
Термин "многокомпонентная частица" относится к самой мелкой отдельной частице, содержащей комбинацию трех активных компонентов. Указанная отдельная частица создана в сферической форме.
Термин "микронизированный" относится к веществу, имеющему размер в нескольких микрон.
Термин "крупнодисперсный" относится к веществу, имеющему размер в одну или несколько сотен микрон.
Вкратце, размер частиц определяют количественно путем измерения методом лазерной дифракции характеристики, эквивалентной диаметру сферы, которая известна как объемный диаметр.
Размер частиц можно также измерить количественно путем измерения массового диаметра с помощью подходящего известного прибора, такого как, например, ситового анализатора.
Объемный диаметр (VD) соотносится с массовым диаметром (MD) через плотность частиц (при условии, что размер частиц не зависит от плотности).
В настоящей заявке размер частиц активных компонентов и фракции тонкодисперсных частиц выражают через объемный диаметр, а размер крупнодисперсных частиц - через массовый диаметр.
Частицы имеют нормальное (Гауссово) распределение, которое определяют через объемный или массовый медианный диаметр (VMD или MMD), который соответствует объемному или массовому диаметру 50 массовых процентов частиц, и, при необходимости, через объемный или массовый диаметр, соответственно, 10% и 90% частиц.
Другой общий подход к определению распределения по размеру частиц состоит в приведении трех величин: i) медианного диаметра d(0,5), который представляет собой диаметр, относительно которого 50% распределения находится выше и 50% находится ниже указанной величины; ii) d(0,9), относительно которого 90% распределения находится ниже этой величины; iii) d(0,1), относительно которого 10% распределения находится ниже этой величины.
Разброс выборки представляет собой ширину распределения на основании квантилей 10%, 50% и 90% и вычисляется согласно формуле
В целом, частицы, имеющие одинаковые или близкие VMD или MMD, могут иметь разное распределение по размеру частиц и, в частности, разную ширину Гауссова распределения, представленную величинами d(0,1) и d(0,9).
В условиях аэрозолизации размер частиц выражают в виде массового аэродинамического диаметра (MAD), а распределение по размеру частиц выражают через массовый медианный аэродинамический диаметр (MMAD) и геометрическое стандартное отклонение (GSD). MAD указывает на способность частиц переноситься в суспендированном состоянии в потоке воздуха. MMAD соответствует массовому аэродинамическому диаметру для 50 массовых процентов частиц.
В конечной композиции размер частиц микрочастиц по изобретению может быть определен при помощи сканирующей электронной микроскопии в соответствии со способами, известными специалистам в данной области техники.
Термин «синергидный» означает, что активность активных компонентов больше, чем можно было бы ожидать при сложении их соответствующих активностей в выбранном испытании.
Термин «взаимосвязанная или упорядоченная смесь» относится к порошкообразной композиции для ингаляции, включающей фармакологически инертный физиологически приемлемый носитель, к которому путем адгезии присоединены микронизированные частицы активного соединения для того, чтоб таким образом получить и сохранить подходящим образом смешанный материал, т.е. гомогенность смеси.
Термин «поверхность с относительно высоким количеством трещин» означает поверхность, на которой присутствуют углубления и впадины и другие утопленные области, в целом названные здесь как трещины. Такую поверхность крупнодисперсных частиц носителя можно выразить через индекс трещин или коэффициент шероховатости, как описано в WO 01/78695 и WO 01/78693, и охарактеризовать согласно представленному там описанию.
Термин «твердые пеллеты» относится к сферическим или полусферическим частицам, ядро которых сделано из крупнодисперсных частиц вспомогательного вещества.
Термин «хорошая текучесть» относится к композиции, с которой легко обращаться в процессе производства, и которая позволяет обеспечить точную и воспроизводимую доставку терапевтически эффективной дозы.
Характеристики текучести можно оценить путем различных испытаний, таких как угол внутреннего трения, индекс Карра, отношение Хауснера или скорость потока через отверстие.
е
В настоящей заявке свойства текучести измеряли с помощью скорости потока через отверстие в соответствии со способом, описанным в Европейской Фармакопее (Eur. Ph.) 7.3, 7 издание.
Выражение «хорошая гомогенность» относится к порошку, в котором при смешивании равномерность распределения компонента, выраженная в виде коэффициента вариации (CV), также известного как относительное стандартное отклонение (RSD), составляет менее 5,0%. Ее обычно определяют в соответствии с известными способами, например, путем отбора образцов из различных частей порошка и определения компонента методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) или других эквивалентных способов, таких как ультра-ВЭЖХ.
Выражение «вдыхаемая фракция» относится к значению процентной доли частиц активного компонента, которые должны достичь легких пациента.
е
Вдыхаемую фракцию оценивают с помощью подходящего in vitro прибора, такого как каскадный импактор Андерсена (ACI), многостадийный жидкостной импинджер (MLSI) или импактор нового поколения (NGI), в соответствии с методиками, приведенными в обычных фармакопеях, в частности, в Европейской Фармакопее (Eur. Ph.) 7.3, 7 издание.
Ее рассчитывают в соответствии с процентным отношением массы тонкодисперсных частиц (вышеупомянутой дозы тонкодисперсных частиц) к доставляемой дозе.
Доставляемую дозу рассчитывают на основе совокупного распределения с накоплением в приборе, а массу тонкодисперсных частиц рассчитывают на основе распределения частиц с диаметром менее 5,0 микрон.
В контексте настоящей заявки композицию определяют как сверхтонкодисперсную композицию, когда она способна доставлять фракцию частиц с размером частиц, который равен или меньше 2,0 микрон, равную или превосходящую 20%, предпочтительно равную или превосходящую 25%, более предпочтительно равную или превосходящую 30%, и/или она способна доставлять фракцию частиц с размером частиц, который равен или меньше 1,0 микрон, равную или превосходящую 10%, предпочтительно равную или превосходящую 20%.
Выражение «химически стабильный» относится к активному компоненту, который при хранении микрочастиц соответствует требованиям Европейского Агентства по оценке лекарственных средств (ЕМЕА Guideline) CPMP/QWP/122/02, определенным в "Stability Testing of Existing Active Substances and Related Finished Products" ("Тестировании стабильности существующих активных веществ и соответствующих конечных продуктов").
Выражение «физически стабильный» относится к микрочастицам, которые по существу не демонстрируют изменений в морфологии, перехода из аморфного состояния в кристаллическое или vice versa, роста размера частиц во время хранения в течение по меньшей мере одного месяца при комнатной температуре и относительной влажности 60%, как определяют в соответствии со способами, известными специалистам в данной области техники.
Выражение «хорошее постоянство соотношения активных компонентов» означает, что три активных компонента после доставки единичной терапевтической дозы сохраняют по существу то же соотношение, что и заранее заданное соотношение указанных двух активных компонентов в композиции, т.е. относительное стандартное отклонение (RSD) соотношения количеств лекарственных веществ, измеренное в in vitro приборе, таком как NGI, меньше 15%, предпочтительно меньше 10%.
Термин «профилактика» обозначает подход к снижению риска проявления заболевания.
Термин «лечение» обозначает подход к достижению благоприятных или желательных результатов, включая клинические результаты. Благоприятные или желательные клинические результаты могут включать, не ограничиваются указанным, облегчение или улучшение одного или более симптомов или состояний, уменьшение степени заболевания, стабилизированное (т.е. не ухудшающееся) состояние заболевания, предотвращение распространения заболевания, задержку или замедление прогрессирования заболевания, улучшение или временное облегчение состояния заболевания, а также ремиссию (частичную или полную), как выявляемую, так и не выявляемую. Этот термин может также означать увеличение продолжительности жизни в сравнении с ожидаемой продолжительностью в случае, когда лечение не проводится.
1
В соответствии с Глобальной инициативой по бронхиальной астме (GINA) "тяжелую трудноизлечимую астму" определяют как форму, характеризующуюся ежедневными симптомами, частыми обострениями, частыми ночными проявлениями астмы, ограничением физической активности, объемом воздуха при форсированном выдохе в секунду (FEV), равным или составляющим менее 60% от нормы с вариабельностью более 30%.
1
1
В соответствии с указаниями Глобальной инициативы по хронической обструктивной болезни легких (GOLD), «тяжелая стадия ХОБЛ» - это форма, характеризующаяся отношением FEV к форсированной жизненной емкости легких (FVC) менее 0,7 и FEV от 30% до 50% от нормы. Очень тяжелая форма дополнительно характеризуется хронической дыхательной недостаточностью.
Выражение «единичная терапевтически эффективная доза» обозначает количество активного компонента, вводимого единовременно путем ингаляции после нажатия на ингалятор. Указанную дозу можно доставлять в одно или более нажатий, предпочтительно в одно (короткое) нажатие на ингалятор.
«Нажатие» относится к выделению активных компонентов из устройства при единичном активировании (например, механическом или дыхательном).
е
Выражение «нерастворимый в воде или плохо растворимый в воде» используют в отношении растворимости в воде, как определено в Европейской Фармакопее, изд. 4, 2003, с. 2891.
Термин 'ультра-ВЭЖХ-ФДМД' относится к прибору для ультравысокоэффективной жидкостной хроматографии, соединенному с фотодиодным матричным детектором.
ЧЕРТЕЖИ
Фиг. 1 - СЭМ фотографии микрочастиц согласно изобретению, полученные методом распыления-сушки с помощью сканирующего электронного микроскопа (СЭМ).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к многокомпонентным микрочастицам для применения в композиции для ингаляции, где каждая микрочастица содержит комбинацию беклометазона дипропионата, фармацевтически приемлемой соли формотерола и фармацевтически приемлемой соли гликопиррониума.
Формотерол может присутствовать в форме любых фармацевтически приемлемых солей и/или их сольватных форм, предпочтительно в форме фумарата дигидрата.
Гликопиррониум можно применять в процессе настоящего изобретения в форме любого из чистых энантиомеров или диастереомеров или любой их комбинации. В предпочтительном воплощении применяют рацемическую смесь 1:1 из (3S,2'R), (3R,2'S), известную также как rac-гликопиррониум.
Указанный активный компонент может присутствовать в форме любых фармацевтически приемлемых солей и/или их сольватных форм, предпочтительно в форме бромида или хлорида моногидрата, более предпочтительно в форме бромида.
Беклометазон дипропионат может быть безводным или присутствовать в форме моногидрата.
В предпочтительном воплощении изобретения каждая микрочастица состоит из комбинации формотерола фумарата или его дигидратной формы, гликопиррониума бромида и беклометазона дипропионата.
Массовое соотношение, в котором три активных компонента, например, беклометазона дипропионат, фармацевтически приемлемая соль формотерола и фармацевтически приемлемая соль гликопиррониума, присутствуют в микрочастицах, заранее задано таким образом, чтобы доставить необходимую единичную терапевтически эффективную дозу каждого активного компонента.
Как показано ниже, массовое соотношение между тремя активными компонентами задают для безводной формы беклометазона дипропионата (BDP), дигидрата фумарата формотерола (FF) и бромида гликопиррониума (GB).
Преимущественно указанное соотношение может составлять от 35:10:55 до 94:1:5 по массе. В предпочтительном воплощении соотношение может составлять от 70:10:20 до 92:2:6.
Примеры соотношений согласно изобретению следующие: 84,4:5,1:10,5 по массе для доставки 100 мкг BDP, 6 мкг FF и 12,5 мкг GB; 91,5:2,7:5,7 по массе для доставки 200 мкг BDP, 6 мкг FF и 12,5 GB; 73,0:8,8:18,2 по массе для доставки 50 мкг BDP, 6 мкг FF и 12,5 GB; 80.3:9,6:10,1 по массе для доставки 100 мкг BDP, 12 мкг FF и 12,5 мкг GB; 89,1:5,3:5,6 по массе для доставки 200 мкг BDP, 12 мкг FF и 12,5 мкг GB; 72,7:4,4:22,9 для доставки 200 мкг BDP, 12 мкг FF и 63 мкг GB; 59,2:3,5:37,3 по массе для доставки 100 мкг BDP, 6 мкг FF и 63 мкг GB, 76,3:4,6:19,1 по массе для доставки 100 мкг BDP, 6 мкг FF и 25 мкг GB и 84,4:5,1:10,5 по массе для доставки 200 мкг BDP, 12 мкг FF и 25 мкг GB.
В предпочтительном воплощении три активных компонента могут присутствовать в соотношении 84,4:5,1:10,5, или 91,5:2,7:5,7, или 73,0:8,8:18,2 по массе, более предпочтительно 84,4:5,1:10,5 по массе.
В процессе получения микрочастицы по изобретению становятся химически стабильными.
В процессе доставки они демонстрируют хорошее постоянство соотношения активных компонентов и вызывают увеличение фракции сверхтонкодисперсных частиц, показывая, что они могут подходить для профилактики и/или лечения заболеваний, затрагивающих нижний отдел респираторного дерева.
Кроме того, микрочастицы по изобретению имеют однородную и правильную сферическую форму, проявляя более гомогенные силы адгезии по всему порошку, которые, в свою очередь, связаны с улучшенными свойствами ингалятора сухого порошка (DPI).
Коэффициент формы используют для характеристики формы микрочастиц.
Соответственно, микрочастицы по изобретению характеризуются коэффициентом формы, составляющим от 0,8 до 1,15, предпочтительно от 0,9 до 1,10, более предпочтительно от 0,95 до 1,05.
Коэффициент формы можно определить согласно следующему уравнению, представленному в Kumar S et al Curr Appl. Phys. Influence of metal powder shape on drag coefficient in a spray jet, 2009, 9, 678-682:
SF=1/RN,
где:
RN обозначает округлость частицы и вычисляется по следующей формуле:
2
RN=p/4πA,
где p и А - значения средних периметра и площади, соответственно, вычисленные из по меньшей мере десяти сферических частиц, определенных с помощью фотографий, полученных методом сканирующей электронной спектроскопии (СЭМ).
Альтернативно, средние значения периметра и площади можно определить методом оптической микроскопии.
В Kumar S et al указано, что коэффициент формы (SF) круга составляет 1,00. Указано также, что отклонение от однородности приводит к неправильной форме частицы, но частицу со значением SF выше 0,8 можно считать имеющей сферическую форму.
Сканирующую электронную микроскопию (СЭМ) или оптическую микроскопию можно также использовать для оценки на качественном уровне характеристик порошкообразных частиц по изобретению, таких как форма частиц и морфология их поверхности.
Поскольку микрочастицы по изобретению нужно вводить в легкие путем ингаляции, по меньшей мере 90% из них должны иметь объемный диаметр, который равен или меньше 6 микрон.
С другой стороны, хорошо известно, что большая часть доступных терапевтических подходов, как правило, связана со слабым терапевтическим контролем пациентов, имеющих респираторные заболевания, затрагивающие малые дыхательные пути, такие как малые дыхательные пути астматического фенотипа.
С помощью микрочастиц по изобретению, все три активных компонента одновременно достигают нижнего отдела респираторного дерева, поэтому могут действовать синергидно и улучшать результат лечения малых дыхательных путей и связанный с ним контроль.
В действительности, указанные микрочастицы характеризуются подобранным, узким и хорошо определенным распределением по размеру частиц, где по меньшей мере 90% из них имеют объемный диаметр меньше 4,5 микрон, предпочтительно равный или составляющий менее 4,0 микрон, а их объемный медианный диаметр находится в диапазоне от 1,0 до 3,0 микрон, преимущественно от 1,2 до 2,5 микрон, предпочтительно от 1,5 до 2,2 микрон.
Преимущественно, не более 10% указанных микрочастиц имеют объемный диаметр меньше 0,2 микрон, предпочтительно равный или составляющий менее 0,5 микрон, более предпочтительно равный или составляющий менее 0,6 микрон.
Следовательно, ширина распределения по размеру частиц для частиц каждого активного компонента, выраженная в виде разброса, должна преимущественно находиться в диапазоне от 1,0 до 4,0, преимущественно от 1,2 до 3,5, предпочтительно от 1,5 до 2,0. Согласно Chew et al J Pharm Pharmaceut Sci 2002, 5, 162-168, разброс соответствует [d(v, 0,9) - d(v, 0,1)]/d(v, 0,5).
Размер активных частиц определяют путем измерения характеристики, эквивалентной диаметру сферы, известной как объемный диаметр, методом лазерной дифракции. В представленных примерах объемный диаметр определяли с помощью прибора компании Malvern. Однако специалисты в данной области техники могут использовать другие эквивалентные приборы.
2
2
2
Если удельную площадь поверхности микрочастиц по изобретению определяют методом адсорбции азота БЭТ (Брунауэра-Эммета-Тейлора) в соответствии с известной методикой, удельная площадь поверхности микрочастиц должна находиться в диапазоне от 1,5 до 3,5 м/г, предпочтительно от 2,0 до 3,0 м/г, предпочтительно от 2,2 до 2,8 м/г.
Силы когезии и адгезии микрочастиц по изобретению также оценивали методом атомно-силовой микроскопии (АСМ) в соответствии с экспериментальной методикой, описанной в Примере 2. Для проведения измерений использовали слой порошка моногидрата альфа-лактозы. Этот слой порошка представляет собой гетерогенную поверхность, в которой поверхность контакта для адгезии очень изменчива. В свою очередь, площадь поверхности является основным фактором при определении сил взаимодействия. Сравнение полученных сил адгезии и когезии предполагает отсутствие статистически значимого различия в силе взаимодействия микрочастиц по изобретению друг с другом или с порошком лактозы. Напротив, обычные микронизированные активные компоненты либо сильно адгезивные, либо когезивные. С точки зрения этих свойств, микрочастицы по изобретению могут демонстрировать улучшенную дисперсию, если находятся в составе композиции в виде взаимосвязанных упорядоченных смесей частицами эксципиента лактозы в качестве носителя. В действительности, они в меньшей степени склонны увеличивать образование стабильных агломератов, подобных обычным микронизированным активным компонентам.
В другом аспекте изобретения предложен способ получения микрочастиц по изобретению, включающий следующие стадии:
a) получение раствора из трех активных компонентов в заранее заданном соотношении в подходящем растворителе;
b) генерация аэрозоля из раствора указанных трех активных компонентов;
c) сушка распыленных капель с получением микрочастиц и
d) выделение полученных микрочастиц.
В результате указанного способа получают микрочастицы в виде полностью аморфного порошка, в котором каждый из активных компонентов присутствует в аморфной форме.
Что касается стадии а), выбор растворителя является важным, поскольку, кроме высокой растворяющей способности в отношении трех активных компонентов, он должен иметь приемлемую степень летучести и характеристик диффузии внутри распыляемых капель. Эти свойства, действительно, значительно влияют на распределение по размеру частиц для полученных микрочастиц.
Специалист в данной области техники способен выбрать растворитель в соответствии с необходимым распределением по размеру частиц.
Преимущественно, можно выбрать из группы, состоящей из метанола, этанола, воды, ДМСО, ацетонитрила и их смесей.
В предпочтительном воплощении по изобретению растворитель представляет собой смесь этанол: вода в соотношении от 85:15 до 95:5 по объему, предпочтительно 90:10 по объему.
На стадии b) для генерации аэрозоля можно использовать любую систему распыления на основе аэрозоля. Хорошо известны различные системы для генерации аэрозолей. Например, аэрозоль можно генерировать из целевого вещества, растворенного в подходящем растворителе, путем электрогидродинамического распыления, атомизатора с высоким давлением воздуха или других генераторов аэрозоля, включая пневматические системы, вращающиеся (с вращающимся волчком) системы, пульверизаторы, небулайзеры, испарительные системы с пропеллентом, пьезоэлектрические преобразователи и ультразвуковые преобразователи.
В предпочтительном воплощении микрочастицы получают путем сушки распылением. В этом случае раствор со стадии а) вводят в сушильную камеру аппарата для сушки распылением через распыляющее устройство для образования капель и сушат распыленные капли путем ввода потока предварительно нагретого сушильного газа в указанную сушильную камеру.
Преимущественно можно использовать любой коммерчески доступный аппарат для сушки распылением.
Специалист в данной области техники способен регулировать условия генерации аэрозоля таким образом, чтобы температура раствора, скорость потока раствора и давление газа-носителя соответствовали необходимому распределению по размеру частиц для микрочастиц и размеру партии.
В конкретном воплощении изобретения предпочтительно получать частично аморфные или кристаллические микрочастицы, в которых по меньшей мере по меньшей мере один из активных компонентов находится в кристаллической форме.
В этом случае на стадии d) вышеуказанного способа получения микрочастицы собирают в резервуар, содержащий анти-растворитель для всех трех активных компонентов, затем прикладывают ультразвук высокой интенсивности для изменения морфологии микрочастиц и инициирования кристаллизации по меньшей мере одного из трех активных компонентов, присутствующих в микрочастице. Наконец, микрочастицы выделяют согласно способам, известным специалистам в данной области техники.
Анти-растворитель можно преимущественно выбрать из группы, состоящей из н-нептана, циклогексана и фторированных углеводородов, таких как перфтордекалин.
Дополнительные подробности относительно условий инициирования кристаллизации раскрыты в WO 2010/007447 и WO 2010/097188, основные принципы которых включены в данное описание посредством ссылки.
Частично аморфные или кристаллические микрочастицы можно в дальнейшем выделить и собрать.
Когда микрочастицы по изобретению, включающие формотерола фумарат, беклометазона дипропионат и гликопиррониума бромид, выделяют в виде аморфного порошка, они содержат все три активных компонента безводной форме.
В противоположность этому, когда указанные микрочастицы выделяют в виде частично аморфного или кристаллического порошка, они могут содержать формотерола фумарат в форме дигидрата и беклометазона дипропионат в форме моногидрата.
В конкретном воплощении все три активных компонента в микрочастицах существуют в кристаллической форме.
В этом случае, степень кристалличности, выраженная в виде массовой процентной доли кристаллической микрочастицы в пересчете на общую массу микрочастицы, преимущественно составляет более 90%, предпочтительно более 95%.
Аморфность и/или кристалличность и их степень можно определить с помощью порошковой рентгеновской дифракции или других методов, известных специалисту, таких как дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК) или микрокалориметрия.
13
Присутствие всех активных компонентов в микрочастицах можно зарегистрировать с помощью способов, известных специалисту, таких как Рамановская спектроскопия и твердотельная спектроскопия ЯМР С CP-MAS (с кросс-поляризацией и вращением образца под магическим углом).
Микрочастицы по изобретению физически стабильны при хранении в течение по меньшей мере одного месяца.
Однако, в случае аморфных или частично аморфных микрочастиц, с помощью подходящих вспомогательных веществ в соответствующей фармацевтической композиции для ингаляции, например, маннитола, лейцина или трегалозы, можно добиться дополнительной стабилизации аморфного состояния.
Соответственно, в другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для введения путем ингаляции, включающая микрочастицы по изобретению. Указанные микрочастицы можно ввести в состав композиции с одним или более фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами, добавками, разбавителями или носителями.
Например, композицию можно получить в форме суспензии в пропелленте в качестве газа-носителя аэрозоля, предназначенного для введения с помощью дозирующих ингаляторов под давлением (pMDI).
Дозирующий ингалятор под давлением pMDI содержит баллончик, наполненный композицией, и дозирующий клапан для доставки ежедневной терапевтически эффективной дозы этой композиции.
В некоторых воплощениях газ-носитель аэрозоля может состоять из пропеллента на основе нехлорированных фторуглеводородов, таких как гидрофторалкан (HFA). В частности, преимущественно можно использовать пропелленты HFA 134а и HFA 227 или их смеси.
Композиция в виде суспензии может содержать дополнительные вспомогательные вещества, такие как поверхностно-активные вещества и смачивающие агенты.
В предпочтительном воплощении композиция получена в форме сухого порошка для ингаляции, более предпочтительно в форме взаимосвязанной или упорядоченной смеси, путем растворения частиц по изобретению в фармакологически инертном физиологически приемлемом вспомогательном веществе, состоящем из более крупнодисперсных частиц.
Преимущественно, указанная порошкообразная композиция для ингаляции может содержать частицы по изобретению и крупнодисперсные частицы физиологически приемлемого вспомогательного вещества, например, частицы с MMD выше 90 микрон и предпочтительно MD в диапазоне от 50 микрон до 500 микрон, более предпочтительно от 150 до 400 микрон, еще более предпочтительно от 210 до 355 микрон. В другом воплощении крупнодисперсные частицы имеют MD в диапазоне от 90 до 150 микрон.
В одном из предпочтительных воплощений, когда их MD находится в диапазоне от 210 до 355 микрон, крупнодисперсные частицы вспомогательного вещества предпочтительно имеют поверхность с относительно высоким количеством трещин.
Предпочтительно вышеуказанная порошкообразная композиция может дополнительно содержать фракцию частиц с MMD менее 35 микрон, предпочтительно менее 15 микрон, более предпочтительно менее 10 микрон, состоящую из частиц физиологически приемлемого вспомогательного вещества и частиц дополнительного материала, выбранного из класса антиадгезивов, таких как аминокислоты лейцин и изолейцин, или скользящих веществ, таких как магния стеарат, натрия стеарилфумарат, стеариловый спирт, стеариловая кислота и сахарозы монопальмитат (здесь и далее в виде предварительно смешанной фракции).
Физиологически приемлемое вспомогательное вещество может состоять из любого аморфного или кристаллического физиологически приемлемого фармакологически инертного материала из животного или растительного источника или их комбинации. Предпочтительные материалы представляют собой кристаллические сахара и, например, являются моносахаридами, такими как глюкоза или арабиноза, или дисахаридами, такими как мальтоза, трегалоза, сахароза, декстроза или лактоза. Можно использовать многоатомные спирты, такие как маннитол, сорбитол, мальтитол, лактитол. Наиболее предпочтительный материал представляет собой α-лактозы моногидрат.
Примеры коммерчески доступной лактозы представляют собой Capsulac™, Inhalac™ и Pharmatose™. Пример коммерчески доступного маннитола представляет собой Pearlitol™.
В предпочтительном воплощении предварительно смешанная фракция состоит из 98% масс. α-лактозы моногидрата и 2% масс. магния стеарата, причем соотношение между фракцией микрочастиц и фракцией крупнодисперсных частиц, сделанных из частиц α-лактозы моногидрата, составляет 10:90% масс., соответственно.
Количество стеарата магния в конечной композиции преимущественно находится в диапазоне от 0,02% до 1,0% масс. от общей массы композиции, предпочтительно от 0,05 до 0,5% масс., более предпочтительно от 0,1 до 0,4% масс., еще более предпочтительно от 0,2 до 0,3% масс.
Порошкообразная композиция для ингаляции, содержащая микрочастицы по изобретению, обладает хорошими свойствами текучести и характеризуется высокой степенью гомогенности. На практике после смешивания однородность состава активного компонента, выраженная в виде относительного стандартного отклонения (RSD), составляет менее 5%.
Указанную порошкообразную композицию можно вводить путем ингаляции с любым типом ингаляторов сухого порошка (DPIs), известным в области техники.
Ингаляторы сухого порошка (DPIs) можно разделить на два основных типа: i) ингаляторы с единичной дозой для введения заранее разделенных единичных доз активного вещества; ii) многодозовые ингаляторы сухого порошка (MDPIs) с заранее разделенными единичными дозами или с заранее загруженными количествами активного компонента, достаточными для многократного приема единичных доз. Исходя из необходимых скоростей инспиративного потока (л/мин), которые, в свою очередь, сильно зависят от конструкции устройств и механических особенностей, ингаляторы сухого порошка DPIs подразделяют на: i) устройства с низким сопротивлением (более 90 л/мин); ii) устройства со средним сопротивлением (около 60 л/мин); iii) устройства с высоким сопротивлением (около 30 л/мин).
Композиции в виде сухого порошка, включающие микрочастицы по изобретению, особенно подходят для многодозовых DPIs, содержащих баллончик, из которого по необходимости можно извлекать индивидуальные терапевтические дозы путем нажатия устройства, например, как описано в WO 2004/012801.
Другие многодозовые устройства, которые можно применять, представляют собой, например, DISKUS™ производства GlaxoSmithKline, TURBOHALER™ производства AstraZeneca, TWISTHALER™ производства Schering и CLICKHALER™ производства Innovata.
Среди имеющихся на рынке однодозовых устройств можно назвать ROTOHALER™ производства GlaxoSmithKline, HANDIHALER™ производства Boehringer Ingelheim, Breezehaler™ производства Novartis и Monodose RS01 производства Plastiape.
В предпочтительном воплощении композиция в виде сухого порошка заполняется в DPI устройство, раскрытое в WO 2004/012801, которое особенно подходит для доставки сверхтонкодисперсной композиции.
Для защиты DPIs от проникновения влаги в композицию может понадобиться обматывание устройства в гибкую упаковку, способную выдержать проникновение влаги, такую, как раскрыта в ЕР 1760008.
Микрочастицы по изобретению предназначены для профилактики и/или лечения воспалительных или обструктивных заболеваний дыхательных путей, таких как, например, астма и хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ).
Другие респираторные нарушения, характеризующиеся обструкцией периферических дыхательных путей, возникшей в результате воспаления и/или присутствия мокроты, такие как, хронический обструктивный бронхит, бронхоэктаз и муковисцидоз, могут улучшаться при их применении.
В некоторых воплощениях микрочастицы по изобретению особенно подходят для профилактики и/или лечения тяжелых и/или очень тяжелых форм респираторных заболеваний, в частности тяжелой и/или очень тяжелой ХОБЛ и тяжелой персистирующей астмы.
Далее изобретение проиллюстрировано с помощью примеров.
ПРИМЕРЫ
Пример 1 - получение микрочастиц по изобретению
15 г смеси формотерола фумарата дигидрата (FF), беклометазона дипропионата (BDP) и гликопиррониума бромида (GB) в соотношении 84,4:10,5:5,1 по массе растворяли в 1500 мл смеси этанол : вода в соотношении 90:10 по объему.
-1
Исходный раствор сушили распылением с помощью настольной сушилки распылением В290 (Buchi) с форсункой с 2 текучими средами при скорости подачи 5 г мин.
Параметры сушки распылением представлены в Таблице 1.
После завершения сушки распылением, циклон и собирающий резервуар отсоединяли от В290 сушилки распылением и хранили в течение 24 часов при температуре 25°С и относительной влажности 20%.
Текучий порошок выделяли с выходом 77% (11,7 г).
Пример 2 - характеристика микрочастиц по изобретению
Микрочастицы, полученные в Примере 1, были охарактеризованы в отношении содержания лекарственного вещества, размера частиц, морфологических свойств, физического состояния, сил когезии/адгезии и удельной площади поверхности.
Содержание лекарственного вещества
Содержание лекарственного вещества определяли методом количественной Ультра-ВЭЖХ с фотодиодным матричным детектором (среднее значение ±СТО; n=5).
Результаты, представленные в Таблице 2, показывают, что содержание каждого активного компонента (API) в высушенном распылением порошке находится в пределах ±3% от целевой концентрации.
Размер частиц
Размер частиц определяли методом лазерной дифракции с помощью R1 линз (Sympatec HELOS). Образец порошка диспергировали для двух условий измерения с помощью давления воздуха в 0,05 и 0,3 МПа (0,5 и 3 бар), соответственно (Sympatec RODOS) и испытывали при скорости 5 м/с из дозирующего устройства с регулируемыми температурой и влажностью (Sympatec ASPIROS). Средние значения d[v, 10], d[v, 50], d[v, 90] вычисляли по трем измерениям.
Разброс вычисляли в соответствии со следующим уравнением:
Разброс = [d(v, 0.9) - d(v, 0.1)]/d(v, 0.5)
Значения, полученные для размера частиц, которые представлены в Таблице 3, не находились под воздействием дисперсионного давления, что является указанием на свободно текучий порошок без образования твердых агломератов.
Морфология
Морфологические свойства микрочастиц исследовали методом сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) с помощью прибора Jeol JSM-6480LV.
Образцы наносили на углеродную ленту и для предотвращения выделения газов выдерживали в вакууме в течение 12 часов перед анализом. Каждый образец перед получением изображения покрывали золотом путем напыления.
Анализ коэффициента формы проводили следующим образом. Образец высушенного распылением порошка диспергировали на круглом лабораторном стекле размером 10 мм и покрывали золотом с помощью устройства для ионного напыления агара. Микрофотографии методом СЭМ получали с помощью прибора LEO1430VP при увеличивающемся напряжении 10 кВ и рабочем расстоянии 10 мм. 120 СЭМ микрофотографий получали при отклонении 0° и анализировали с помощью Image Pro Analyser Version 7.0. Параметры измерения устанавливали для получения индивидуальных частиц для анализа формы и любых отклонений процесса образования образца, т.е. отбор набора частиц осуществляли вручную. Фактор крутости (RN) определяли с помощью уравнения RN=p2/4πA, где p - периметр, а A - площадь. Коэффициент формы частиц (PSF) рассчитывали из фактора крутости с помощью уравнения PSF=1/RN. Статистический анализ проводили на основании данных RN и PSF для установления того, достаточное ли количество частиц было проанализировано для получения логически взаимосвязанных данных. Как показано на СЭМ изображениях (Фиг. 1), порошок обладал равномерной сферической морфологией. Круглость (RN) и коэффициент формы частиц определяли путем анализа 3953 отдельных изображений, подтверждающих сферическую морфологию частиц (см. Таблицу 4).
Физическое состояние
Физическое состояние исследовали методом рентгеновской порошковой дифракции (XRPD) и дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК).
XRPD проводили на приборе Bruker AXS D8 Advance, снабженном детектором Vantec-1 с помощью Cu K-альфа излучения (0,154 нм (1,54 А)).
-1
-1
Что касается ДСК, поток тепла (Вт г) в зависимости от роста температуры (°С) определяли с помощью калориметра ТА Instruments Q2000. Образцы взвешивали в негерметичной алюминиевой ДСК кювете. Образцы уравновешивали при 20°С перед тем, как температура начинала расти на 5°С мин до 220°С. Анализ проводили трижды и полученные данные интерпретировали с помощью программного обеспечения Universal Analysis.
Результаты, полученные методами ДСК и XRPD показывают, что материал является аморфным. На практике, в сравнении со стандартными образцами, высушенные распылением микрочастицы не имеют пиков, соответствующих ближнему порядку кристаллической структуры, а видно типичное аморфное плато.
Определить точку плавления по ДСК диаграмме невозможно.
Силы когезии/адгезии
Возможности измерения атомно-силовой микроскопии (АСМ) использовали для прямого измерения сил адгезии между двумя поверхностями.
-1
АСМ кантилеверы с контактными модами с небольшим острием (Bruker) с откалиброванной постоянной пружины (обычно 0,2-0,4 Нм) применяли для измерений сил адгезии/когезии. Образцы готовили путем прикрепления микрочастиц к острию кантилевера, что подтверждали оптически и изменением давления СЭМ перед использованием. Слой высушенных распылением микрочастиц или Inhalac 50 лактозы фиксировали на силиконовой подложке с помощью тонкого слоя клея. Кривые сила-расстояние записывали путем отслеживания отклонений кантилевера, когда проба и образец приходили в контакт (линия сближения) и затем удалялись (линия расхождения). Данные когезии/адгезии получали последовательно на образцах микрочастиц и лактозы на одном и том же острие. Данные получали в решетке 5×5 с шагом 500 нм. Каждая решетка генерирует 25 силовых кривых на площади 2×2 мкм. Эксперимент повторяли для разных проб частиц или на разных участках поверхности. Все эксперименты были выполнены при одинаковых условиях. В целом было накоплено и обработано 153 кривых когезии и 144 кривых адгезии для выявления сил взаимодействия (нН).
Сравнение полученных сил когезии и адгезии предполагает, что не существует статистически значимого различия в силе взаимодействия микрочастиц по изобретению друг с другом или с порошком лактозы. Напротив, обычные микронизированные активные компоненты либо сильно адгезивные, либо когезивные. С точки зрения этих свойств, микрочастицы по изобретению могут демонстрировать улучшенную дисперсию, если находятся в составе композиции в виде взаимосвязанных упорядоченных смесей частицами эксципиента лактозы в качестве носителя. В действительности, они в меньшей степени склонны увеличивать образование стабильных агломератов, подобных обычным микронизированным активным компонентам.
Удельная площадь поверхности
Удельную площадь поверхности определяли с помощью метода адсорбции азота БЭТ (Брунауэра-Эммета-Тейлора) на приборе TriStar II 3020.
Полученные значения приведены в Таблице 5.
Пример 3 - Композиция в виде сухого порошка, содержащая микрочастицы по изобретению
Твердый гранулированный носитель, содержащий крупнодисперсную лактозу (ситовая фракция 212-355 мкм) и совместно микронизированную смесь в соотношении 9:1, получали перед производством композиции согласно WO 01/78693. Вкратце, частицы альфа-лактозы моногидрата (ситовая фракция 212-355 мкм) и фракцию смеси альфа-лактозы моногидрата и стеарата магния смешивали в соотношении 9:1.
Порошкообразную композицию (партия размером 50 г), содержащую 1,22% масс./масс. микрочастиц из Примера 1, эквивалентную 100 мкг BDP, 12,5 мкг GB и 6,0 мкг FF в 10 мг дозы, получали в смесителе Turbula. Ее получали путем отдельного взвешивания твердого гранулированного носителя и микрочастиц. Половину носителя добавляли в сосуд из нержавеющей стали с последующим добавлением микрочастиц. Оставшийся носитель добавляли и содержимое перемешивали при 32 об./мин в течение 90 минут. Затем композицию просеивали с помощью сита размером 500 мкм и смешивали в течение еще 30 минут при 32 об./мин. Перед последующим проведением анализа композицию выдерживали в емкости коричневого стекла в течение минимум 24 часов при 20°С и относительной влажности 40%.
Пример 4

Порошкообразную композицию из Примера 3 характеризовали в отношении равномерности распределения активных компонентов и свойств аэрозоля после его загрузки в многодозовый ингалятор сухого порошка, описанный в WO 2004/012801 и указанный в данной заявке как NEXThaler.
Равномерность распределения
2
Около 10 мг композиции непосредственно взвешивали в мерной колбе объемом 25 мл. Готовили 10 образцов. Колбу заполняли до указанного объема с помощью смеси 60:40% об./об. МеОН:НО и подвергали действию ультразвука в течение 2 минут. Образцы анализировали на содержание каждого активного компонента методом ультра-ВЭЖХ-ФМДМ количественного анализа.
Результаты (среднее значение ±СТО) представлены в Таблице 6.
Свойства аэрозоля
2
3
2
Свойства аэрозоля определяли с помощью импактора следующего поколения (NGI) с входным отверстием USP (Американской фармакопеи) и пре-сепаратором, содержащим 15 мл смеси 60:40% об./об. МеОН:НO. Критический поток (соотношение Р/Р) составляло менее 0,5 при скорости потока образца 60 л/мин. Распределение по аэродинамическому размеру частиц основано на 5 нажатиях NEXThaler, причем каждое нажатие отбирается в 4 литра воздуха (что эквивалентно времени ингаляции 4 с). Устройство взвешивали до и после нажатия для определения дозы впрыска (мг). Между последовательными нажатиями делали задержку минимум в 1 минуту для того, чтобы рассеять статический заряд.
2
Образцы отбирали из NGI с помощью техники фиксированного выходного уровня. МеОН:НО (60:40% об./об.) распределяли во впускное отверстие (включающее мундштук); пре-сепаратор; причем каждую стадию с помощью электронного измерительного дозирующего устройства. Впускное отверстие (30 мл) и пре-сепаратор (50 мл) герметично запечатывали с помощью силиконовых заклепок и встряхивали вручную в течение 2 минут перед тем, как отбирать образцы. NGI стадии (10 мл стадии 1-2; 15 мл стадия 3-МОС) встряхивали на качалке NGI в течение 3 минут. Все образцы отфильтровывали с помощью 0,2 мкм фильтра-шприца перед анализом методом ультра-ВЭЖХ-ФМДМ.
Вычисляли следующие параметры: i) доставляемая доза (DD), которая представляет собой количество лекарственного средства, доставляемого из устройства, выделяемое из всех частей импактора; ii) масса тонкодисперсных частиц (FPM), которая представляет собой количество доставляемой дозы, имеющей размер частиц, который равен или меньше 5,0 микрон iii) фракция тонкодисперсных частиц (FPF), которая представляет собой процентную долю дозы тонкодисперсных частиц; iv) MMAD и v) сверхтонкодисперсную FPP, которая представляет собой процентную долю дозы тонкодисперсных частиц, имеющей размер частиц, который равен или меньше 2,0 микрон.
Результаты (среднее значение ±СТО, n=6) представлены в Таблице 7.
Из данных Таблиц 6 и 7 можно предположить, что полученная композиция демонстрирует прекрасную гомогенность с СТО менее 2% и высокую доставляемую дозу и вдыхаемую фракцию (FPF) для всех трех активных компонентов.
Они также увеличивают высокую фракцию частиц, имеющую диаметр, который равен или меньше 2 микрон (по меньшей мере более 35% для всех активных компонентов), демонстрируя, что они подходят для профилактики и/или лечения заболеваний, затрагивающих нижний отдел респираторного дерева.