ПРОИЗВОДНОЕ 6-ОКСО-1,6-ДИГИДРОПИРИДАЗИНА ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ЛЕЧЕНИИ ГЕПАТОЦЕЛЛЮЛЯРНОЙ КАРЦИНОМЫ (ГЦК)
6-OXO-1,6-DIHYDRO-PYRIDAZINE DERIVATIVE FOR USE IN TREATMENT OF HEPATOCELLULAR CARCINOMA (HCC)

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрилу или к его фармацевтически приемлемой соли и/или сольвату для применения в лечении гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК).
Предпосылки создания изобретения
Задача изобретения состояла в том, чтобы обнаружить новые фармацевтические композиции, обладающие ценными свойствами, в частности те, которые могут быть использованы для приготовления лекарственных средств.
Кроме того, объектом настоящего изобретения являются новые композиции для профилактики и лечения гепатоцеллюлярной карциномы.
Было обнаружено, что 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрил в соответствии с изобретением или его фармацевтически приемлемая соль и/или сольват обладают весьма ценными фармакологическими свойствами, а также хорошей переносимостью.
ГЦК является 5-м наиболее распространенным по всему миру злокачественным новообразованием, с 667,000 новых случаев в мире и 17,500 в США. На момент постановки диагноза 80% пациентов имеют прогрессирующее или неоперабельное заболевание. В западных странах ок. 40% пациентов имеют право на потенциальное радикальное лечение (резекция, трансплантация, местная абляция), тогда как примерно 20% имеют право на химиоэмболизацию. У хорошо отобранных пациентов резекция и трансплантация обеспечивает 5-летнюю выживаемость 70%, 50% пациентов с рецидивом в пределах 3 лет. В рамках настоящего изобретения демонстрируется, что 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрил или его фармацевтически приемлемая соль и/или сольват являются активными в опухолях ГЦК с признаками активной передачи сигнала c-Met.
До одобрения сорафениба не существовало никакого эффективного системного лечения, которое бы увеличивало выживаемость при ГЦК: обычные цитотоксические средства, установленные в качестве монотерапии или в комбинационных схемах лечения, имели низкий уровень ответной реакции и не приводили к улучшению относительно выживаемости (Thomas MB, O'Beirne JP, Furuse J, Chan AT, Abou-Alfa G, Johnson P; Ann Surg Oncol. 2008 Apr; 15(4): 1008-14).
Тем не менее, несмотря на то, что при помощи сорафениба выживаемость без прогрессирования заболевания была улучшена, выживаемость без прогрессирования и общая выживаемость остается ограниченной. Вторичная резистентность проявляется через несколько недель после воздействия лекарственного средства. После прогрессирования в настоящее время не существует другой терапевтической альтернативы. Из-за высокой неудовлетворенной потребности в медицине существует необходимость в альтернативных эффективных методах лечения ГЦК.
Известный уровень техники
3-(1-{3-[5-(1-Метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрил был описан в WO 2009/006959 А1.
Гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила был описан в WO 2009/007074 А1.
Сущность изобретения
Изобретение относится к 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрилу или к его фармацевтически приемлемой соли и/или сольвату для применения в лечении гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК).
Кроме того, изобретение относится к гидрату гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила для применения в лечении гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК).
Кроме того, изобретение относится к 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрилу или к его фармацевтически приемлемой соли и/или сольвату, причем соединение вводят пациенту в количестве от 100 мг до 800 мг в сутки.
Кроме того, изобретение относится к 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрилу или к его фармацевтически приемлемой соли и/или сольвату, причем соединение вводят перорально.
Кроме того, изобретение относится к применению 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила или его фармацевтически приемлемой соли и/или сольвата для изготовления лекарственного средства для лечения гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК).
Кроме того, изобретение относится к применению гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила для изготовления лекарственного средства для лечения гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК).
Кроме того, изобретение относится к применению, как описано выше,
при котором 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрил или его фармацевтически приемлемую соль и/или сольват или гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила, причем соединение вводят пациенту в количестве от 100 мг до 800 мг в сутки, предпочтительно в количестве от 200 мг до 700 мг в неделю, особенно предпочтительно в количестве от 250 мг до 350 мг в сутки.
Кроме того, изобретение относится к применению, как описано выше,
при котором 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрил или его фармацевтически приемлемую соли и/или сольват или гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила, причем соединение вводят перорально.
Терапия при помощи гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила или его фармацевтически приемлемой соли и/или сольвата или 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила по выбору может включать дополнительное лечение радиоизлучением. Кроме того, изобретение относится к новой форме лечения, включающей начало введения 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила или его фармацевтически приемлемой соли и/или сольвата до момента лучевой терапии для лечения гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК).
Изобретение также относится к оптически активным формам (стереоизомерам), энантиомерам, рацематам, диастереомерам и гидратам и сольватам соединения.
Изобретение также относится к сольватам солей соединения, например, моно- или дигидрату гидрохлорида.
Термин сольваты соединений обозначает аддукции молекул инертного растворителя на соединениях, которые образуются вследствие их взаимной силы притяжения. Сольваты представляют собой, например, моно- или дигидраты или алкоголяты.
Выражение "эффективное количество" обозначает количество лекарственного средства или фармацевтического действующего вещества, которое в ткани, системе, животном или человеке вызывает биологическую или медицинскую ответную реакцию, которую стремится или желает получить, например, исследователь или лечащий врач.
Помимо этого выражение "терапевтически эффективное количество" обозначает количество, которое по сравнению с соответствующим субъектом, который не получал этого количества, имеет следующие последствия:
улучшение лечения, исцеление, профилактика или элиминация заболевания, синдрома, состояния, жалобы, расстройства или побочных эффектов, или также уменьшение прогрессирования заболевания, жалобы или расстройства.
Термин "терапевтически эффективное количество" также охватывает количества, эффективные для повышения нормальной физиологической функции.
Фармацевтические соли и другие формы
Указанные соединения в соответствии с изобретением могут применяться в их конечной несолевой форме. С другой стороны, настоящее изобретение также охватывает применение таких соединений в форме их фармацевтически приемлемых солей, которые могут быть получены из различных органических и неорганических кислот и оснований в соответствии со способами, известными в данной области техники. Фармацевтически приемлемые солевые формы 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила и N-((S)-2,3-дигидрокси-пропил)-3-(2-фтор-4-йод-фениламино)-изоникотинамида получают, главным образом, общепринятыми способами.
В случае если соединение содержит карбоксильную группу, то его приемлемые соли могут быть образованы с помощью реакции соединения с приемлемым основанием, чтобы получить соответствующую соль присоединения основания. Такими основаниями являются, например, гидроксиды щелочных металлов, включая гидроксид калия, гидроксид натрия и гидроксид лития; гидроксиды щелочноземельных металлов, такие как гидроксид бария и гидроксид кальция; алкоксиды щелочных металлов, например, этилат калия и пропилат натрия; а также различные органические основания, такие, как пиперидин, диэтаноламин и N-метилглутамин. Равным образом также включены соли алюминия соединений. Для некоторых соединений соли присоединения кислоты могут быть образованы путем обработки указанных соединений фармацевтически приемлемыми органическими и неорганическими кислотами, например, галогенидами водорода, такими как гидрохлорид, гидробромид или гидройодид, другими минеральными кислотами, и их соответствующими солями, такими как сульфат, нитрат или фосфат и т.п., и алкил- и моноарилсульфонатами, такими как этансульфонат, толуолсульфонат и бензолсульфонат; и другими органическими кислотами и их соответствующими солями, такими, как ацетат, трифторацетат, тартрат, малеат, сукцинат, цитрат, бензоат, салицилат, аскорбат и т.п. Таким образом, фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты соединений включают следующие: ацетат, адипат, альгинат, аргинат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат (безилат), бисульфат, бисульфит, бромид, бутират, камфорат, камфорсульфонат, каприлат, хлорид, хлорбензоат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, дигидрофосфат, динитробензоат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, галактерат (из муциновой кислоты), галактуронат, глюкогептаноат, глюконат, глутамат, глицерофосфат, гемисукцинат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, йодид, изетионат, изобутират, лактат, лактобионат, малат, малеат, малонат, манделат, метафосфат, метансульфонат, метилбензоат, моногидрофосфат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, оксалат, олеат, пальмоат, пектинат, персульфат, фенилацетат, 3-фенилпропионат, фосфат, фосфонат, фталат, но не ограничиваются только ними.
Кроме того, основные соли соединений в соответствии с изобретением включают соли алюминия, аммония, кальция, меди, железа(III), железа(II), лития, магния, марганца(III), марганца(II), калия, натрия и цинка, но это не следует рассматривать в качестве ограничения. Из перечисленных выше солей предпочтение отдается являются аммониевым; соли щелочных металлов - натрия и калия; и соли щелочноземельных металлов - кальция и магния. Соли соединений, которые являются производными от фармацевтически приемлемых органических нетоксических оснований, включают, но не ограничиваются только ими, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, также включая природные замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, например, аргинин, бетаин, кофеин, хлорпрокаин, холин, N,N'-дибензилэтилендиамин (бензатин), дициклогексиламин, диэтаноламин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, N-этилморфолин, N-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, гидрабамин, изопропиламин, лидокаин, лизин, меглумин, N-метил-D-глюкамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминные смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтаноламин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин и трис-(гидроксиметил)метиламин (трометамин).
1
4
1
4
10
18
1
4
Соединения в соответствии с настоящим изобретением, которые содержат основные азотсодержащие группы, могут быть кватернизированы с помощью таких агентов, как (С-С)-алкилгалогениды, например, метил-, этил-, изопропил- и трет-бутилхлорид, бромид и йодид; ди(С-С)-алкилсульфаты, например, диметил-, диэтил- и диамилсульфат; (С-С)-алкилгалогениды, например, децил-, додецил-, лаурил-, миристил- и стеарилхлорид, бромид и йодид; и арил(С-С)-алкилгалогениды, например, бензилхлорид и фенетилбромид. Применение подобных солей позволяет получать как растворимые в воде, так и растворимые в масле соединения в соответствии с изобретением.
Указанные выше предпочтительные фармацевтические соли включают ацетат, трифторацетат, безилат, цитрат, фумарат, глюконат, гемисукцинат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, изетионат, манделат, меглумин, нитрат, олеат, фосфонат, пивалат, фосфат натрия, стеарат, сульфат, сульфосалицилат, тартрат, тиомалат, тозилат и трометамин, но их не следует рассматривать в качестве ограничения.
Особое предпочтение отдают гидрохлориду, дигидрохлориду, гидробромиду, малеату, мезилату, фосфату, сульфату и сукцинату.
Соли присоединения кислоты основных соединений получают путем введения в контакт формы свободного основания с достаточным количеством желаемой кислоты с получением соли традиционным способом. Свободное основание можно регенерировать путем введения в контакт солевой формы с основанием и выделения свободного основания общепринятым способом. Формы свободного основания в некоторой степени отличаются от своих соответствующих солевых форм своими определенными физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях, однако во всем остальном соли являются эквивалентными своим соответствующим формам свободных оснований для целей настоящего изобретения.
Как было указано, фармацевтически приемлемые соли присоединения основания соединений образованы с металлами или аминами, такими как щелочные металлы и щелочноземельные металлы или органические амины. Предпочтительные металлы представляют собой натрий, калий, магний и кальций. Предпочтительные органические амины представляют собой N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, N-метил-D-глюкамин и прокаин.
Соли присоединения основания кислотных соединений в соответствии с изобретением получают путем ведения в контакт формы свободной кислоты с достаточным количеством желаемого основания для получения соли традиционным способом. Форма свободной кислоты может быть регенерирована путем введения в контакт солевой формы с кислотой и выделения формы свободной кислоты известным способом. Формы свободной кислоты в некоторой степени отличаются от своих соответствующих солевых форм определенными физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях, однако во всем остальном соли являются эквивалентными своим соответствующим формам свободных кислот для целей настоящего изобретения.
Принимая во внимание описанное выше, можно увидеть, что выражение "фармацевтически приемлемая соль" в контексте данной заявки предназначено для обозначения действующего вещества, которое содержит соединение в форме одной из его солей, особенно в том случае, если указанная солевая форма придает указанному действующему веществу улучшенные фармакокинетические свойства по сравнению со свободной формой указанного действующего вещества или любой другой солевой формой указанного действующего вещества, которые использовались ранее. Фармацевтически приемлемая солевая форма действующего вещества также может впервые придавать желаемое фармакокинетическое свойство указанному действующему веществу, которым оно ранее не обладало, а также может даже оказывать положительное влияние на фармакодинамику указанного действующего вещества в отношении его терапевтической активности в организме.
Кроме того, изобретение относится к лекарственным средствам, содержащим по меньшей мере одно соединение и/или его фармацевтически приемлемые соли, сольваты, таутомеры и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях, и необязательно наполнители и/или вспомогательные вещества.
Фармацевтические составы могут быть введены в виде дозированных единиц, которые содержат заранее установленное количество действующего вещества на дозированную единицу. Такая единица может содержать, например, от 0.5 мг до 1 г, предпочтительно от 1 мг до 700 мг, более предпочтительно от 5 мг до 100 мг, соединения в соответствии с изобретением, в зависимости от состояния, подвергаемого лечению, способа введения, а также возраста, веса тела и состояния пациента, или фармацевтические составы могут быть введены в виде дозированных единиц, которые содержат заранее установленное количество действующего вещества на дозированную единицу. Предпочтительными составами дозированных единиц являются те, которые содержат суточную дозу или часть суточной дозы, как указано выше, или соответствующую ей порцию действующего вещества. Фармацевтические составы этого типа также могут быть получены способом, который хорошо известен в области фармацевтики.
Фармацевтические составы могут быть адаптированы для введения посредством любого подходящего способа, например, путем перорального (включая буккальное или подъязычное), ректального, назального, местного (включая буккальное, подъязычное или трансдермальное), вагинального или парентерального (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное или внутрикожное) введения. Такие составы могут быть приготовлены с помощью любого способа, известного в области фармацевтики, например, путем соединения действующего вещества с наполнителем(ями) или вспомогательным(ыми) веществом(ами).
Фармацевтические составы, приспособленные для перорального введения, могут быть введены в виде отдельных единиц, таких как, например, капсулы или таблетки; порошки или гранулы; растворы или суспензии в водных или неводных жидкостях; пищевых пен или пенистых пищевых продуктов; или жидких эмульсий масло-в-воде или жидких эмульсий вода-в-масле.
Так, например, в случае перорального введения в виде таблетки или капсулы, действующее вещество может быть соединено с пероральным, нетоксичным и фармацевтически приемлемым инертным наполнителем, таким как, например, этанол, глицерин, вода и т.п. Порошки получают путем измельчения соединения до подходящего мелкого размера и смешивания его с фармацевтическим наполнителем, измельченным аналогичным способом, таким как, например, пищевой углевод, такой как, например, крахмал или маннит. Равным образом можно добавлять ароматизатор, консервант, диспергирующее вещество и краситель.
Капсулы получают путем приготовления порошковой смеси, как описано выше, и заполнения ею желатиновых оболочек. Вещества, способствующие скольжению и смазывающие вещества, такие как, например, высокодисперсная кремниевая кислота, тальк, стеарат магния, стеарат кальция или полиэтиленгликоль в твердой форме, могут быть добавлены к порошковой смеси перед процессом наполнения. В целях улучшения доступности лекарственного средства после того, как капсула была принята, также может быть добавлен разрыхлитель или солюбилизатор, такой как, например, агар-агар, карбонат кальция или карбонат натрия.
К тому же, при желании или необходимости, в смесь также могут быть добавлены пригодные связующие вещества, смазывающие средства и дезинтеграторы, а также красители. Пригодные связующие вещества охватывают крахмал, желатин, природные сахара, такие как, например, глюкоза или бета-лактоза, подсластители, полученные из кукурузы, природных и синтетических смол, такие как, например, аравийская камедь, трагакантовая камедь или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, воски и т.п. Смазывающие средства, которые могут быть применены в таких дозированных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Дезинтеграторы включают, но не ограничиваются только ими, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и т.п. Таблетки изготавливают, например, путем приготовления порошковой смеси, гранулирования или сухого прессования смеси, добавления смазывающего вещества и дезинтегратора и прессования полученной смеси в таблетки. Порошковую смесь готовят путем смешивания соединения, измельченного пригодным образом, с разбавителем или основанием, как описано выше, и необязательно со связующим веществом, таким как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желатин или поливинилпирролидон, замедлителем растворения, таким как, например, парафин, усилителем поглощения, таким как, например, четвертичная соль, и/или абсорбентом, таким как, например, бентонит, каолин или дикальцийфосфат. Порошковую смесь можно гранулировать путем ее смачивания связующим веществом, таким как, например, сироп, крахмальная паста, клейкое вещество акации или растворы целлюлозы или полимерных веществ, и ее прессования через сито. В качестве альтернативы грануляции, порошковую смесь можно пропускать через таблетировочную машину, получая крупные куски неправильной формы, которые разрушаются, образуя гранулы. Гранулы можно замасливать путем добавления стеариновой кислоты, стеарата, талька или минерального масла для предотвращения слипания в таблетировочной литейной форме. После этого смазанную смесь спрессовывают, получая таблетки. Соединения в соответствии с изобретением также можно объединять с сыпучим инертным наполнителем и затем подвергать прямому прессованию, получая таблетки без осуществления стадий грануляции или сухого прессования. Таблетки также можно покрывать прозрачным или светонепроницаемым защитным слоем, состоящим из шеллакового герметизирующего слоя, слоя сахара или полимерного вещества и глянцевого слоя воска. К этим покрытиям также можно добавлять красители для возможности различения между разными дозируемыми единицами.
Жидкости для перорального введения, такие как, например, раствор, сиропы и эликсиры, могут быть приготовлены в виде дозируемых единиц таким образом, чтобы они содержали заранее установленное количество соединения. Сиропы могут быть получены путем растворения соединения в водном растворе с пригодным ароматизатором, тогда как эликсиры готовят с применением нетоксичного спиртового наполнителя. Суспензии могут быть приготовлены путем диспергирования соединения в нетоксичном наполнителе. Равным образом можно добавлять солюбилизаторы и эмульгирующие вещества, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты и полиоксиэтиленовые эфиры сорбита, консерванты, ароматические добавки, такие как, например, масло мяты перечной, или натуральные заменители сахара или сахарин, или другие искусственные заменители сахара и т.п.
Составы для перорального введения в виде дозированных единиц, при желании, могут быть инкапсулированы в микрокапсулы. Также состав может быть приготовлен таким образом, чтобы пролонгировать или замедлить высвобождение, например, путем применения покрытий или заделывания требуемого вещества в полимеры, воск и т.п.
Соединения и их соли, сольваты, таутомеры и стереоизомеры также могут быть введены в виде липосомных систем доставки, таких как, например, небольшие однослойные пузырьки, большие однослойные пузырьки и многослойные пузырьки. Липосомы могут быть образованы с помощью различных фосфолипидов, таких как, например, холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.
Соединения и их соли, сольваты, таутомеры и стереоизомеры также могут быть доставлены с применением моноклональных антител в качестве индивидуальных носителей, с которым соединены молекулы соединения. Соединения также могут быть соединены с растворимыми полимерами в качестве нацеливающих носителей лекарственных средств. Такие полимеры могут охватывать поливинилпирролидон, сополимер пирана, полигидроксипропилметакриламидофенол, полигидроксиэтиласпартамидофенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоиловыми радикалами. Кроме того, соединения могут быть соединены с классом способных к биологическому разложению полимеров, которые пригодны для обеспечения контролируемого высвобождения лекарственного средства, например полимолочной кислотой, поли-эпсилон-капролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидроксипиранами, полицианоакрилатами и перекрестно-сшитыми или амфипатическими блок-сополимерами гидрогелей.
Фармацевтические составы, приспособленные для трансдермального введения, могут быть введены в виде независимых пластырей для продленного, тесного контакта с эпидермисом реципиента. Таким образом, например, действующее вещество может быть доставлено из пластыря посредством ионофореза, как в общем описано в Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).
Фармацевтические соединения, приспособленные для местного введения, могут быть приготовлены в виде мазей, кремов, суспензий, лосьонов, порошков, растворов, паст, гелей, спреев, аэрозолей или масел.
Фармацевтические составы, приспособленные для ректального введения, могут быть введены в виде суппозиториев или клизм.
Фармацевтические составы, приспособленные для назального введения, в которых носитель представляет собой твердое вещество, включают крупный порошок, имеющий размер частичек, например, в диапазоне 20-500 микрон, который вводится путем вдыхания, то есть путем быстрого вдоха через нос из контейнера, содержащего порошок, который придерживают возле носа. Пригодные составы для введения в виде назального спрея или носовых капель с жидкостью в качестве носителя включают растворы активного вещества в воде или в масле.
Фармацевтические составы, приспособленные для введения путем ингаляции, включают тонкоизмельченные частички в виде пыли или аэрозоля, которые могут быть получены с помощью различных диспергирующих устройств под давлением с аэрозолями, распылителей или инсуффляторов.
Фармацевтические составы, приспособленные для парентерального введения, включают водные или неводные стерильные растворы для инъекций, содержащие антиоксиданты, буферы, бактериостатические вещества и растворенные вещества, с помощью которых состав поддерживается изотоническим по отношению к крови реципиента, подвергаемого лечению; и водные или неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспензионную среду и загустители. Составы могут быть введены с помощью емкостей для однократного или многократного введения, например, запечатанных ампул и флаконов, и храниться в лиофилизированном состоянии, при этом непосредственно перед введением необходимо только добавить стерильную жидкость-носитель, например, воду для инъекций. Растворы и суспензии для инъекций, приготовленные согласно рецептуре, могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток.
Само собой разумеется, что дополнительно к предпочтительным вышеописанным составляющим, составы также могут содержать другие вещества, которые используются в данной области для конкретных типов составов; например, составы, пригодные для перорального введения, могут содержать ароматизаторы.
Терапевтически эффективное количество соединения зависит от многих факторов, включая, например, возраст и вес животного, определенное состояние, которое необходимо лечить, и его тяжесть, природу лекарственного средства и способ введения, и в конечном счете оно может быть определено лечащим врачом или ветеринаром. Тем не менее, эффективное количество соединения в соответствии с изобретением, как правило, находится в диапазоне от 0.1 до 100 мг/кг веса тела реципиента (млекопитающего) в сутки и предпочтительно обычно находится в диапазоне от 1 до 10 мг/кг веса тела в сутки. Таким образом, действующее суточное количество для взрослого млекопитающего весом 70 кг обычно может составлять от 70 до 700 мг, причем это количество может быть введено в виде отдельной дозы один раз в день или обычно в виде циклов частичных доз (таких как, например, два, три, четыре, пять или шесть раз) в сутки, таким образом, что общая суточная доза является одинаковой. Эффективное количество его соли, сольвата, таутомера и стереоизомера может быть определено в виде доли эффективного количества соединения в соответствии с изобретением как таковое. Также можно предположить, что аналогичные дозы пригодны для лечения других состояний, описанных выше.
Противораковое лечение, определенное в данном описании, может быть применено в виде монотерапии или вдобавок к композиции в соответствии с изобретением, может включать в себя обычную хирургии или лучевой терапии.
"Лечение", как используется в настоящей заявке, обозначает облегчение, полностью или частично, симптомов, связанных с нарушением или заболеванием, или замедление, или остановку дальнейшего прогрессирования или ухудшения этих симптомов, или предотвращение или профилактику заболевания или нарушения у субъекта, имеющего риск развития такого заболевания или нарушения.
Термин "эффективное количество" применительно к соединению может обозначать количество, способное облегчать, полностью или частично, симптомы, связанные с нарушением или заболеванием, или замедлять или останавливать дальнейшее прогрессирование или ухудшение этих симптомов, или предотвращать или обеспечивать профилактику заболевания или нарушения у субъекта, имеющего заболевание или с риском развития заболевания, описанного в настоящей заявке, такого как рак.
Термин "терапевтически эффективное" или "терапевтически эффективное количество" относится к количеству лекарственного средства, эффективного для лечения заболевания или нарушения у млекопитающего. В случае рака, терапевтически эффективное количество лекарственного средства может уменьшать количество раковых клеток; уменьшать размер опухоли; ингибировать (т.е., в определенной степени замедлять и предпочтительно останавливать) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; ингибировать (т.е., в определенной степени замедлять и предпочтительно останавливать) метастазирование опухоли; ингибировать, в определенной степени замедлять, рост опухоли; и/или в некоторой степени облегчить один или более симптомов, связанных с раком.
В той степени, насколько лекарственное средство может предотвратить рост и/или уничтожить существующие раковые клетки, оно может быть цитостатическим и/или цитотоксическим. Для терапии рака эффективность может быть измерена, например, посредством оценки времени до прогрессирования заболевания (ТТР) и/или определения частоты ответной реакции (RR).
Применение
Гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила пригоден в качестве фармацевтического действующего вещества для млекопитающих, в особенности для людей, в лечении гепатоцеллюлярной карциномы.
Экспериментальная часть
Оценивание гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила в ГЦК ксенотрансплантатной модели МНСС97Н
Обобщение: гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила проявляет большую активность, чем сорафениб в ксенотрансплантатной модели гепатокарциномы и в ГЦК первичных эксплантатах, все из которых характеризуются высокой экспрессией c-Met и/или HGF. При том, что сорафениб привел к существенной потере веса тела у большинства моделей ГЦК эксплантатов (8/9) при всех испытанных дозах (50 мг/кг/5 из 7 дней в 60 мг/кг/каждый день), гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила хорошо переносился у всех мышей, на что указывает отсутствие существенной потери веса животных.
Данные из доклинических внутренних исследований подчеркивают роль с-Met в поддержании и прогрессировании ГЦК и указывают, что ингибирование с-Met может быть перспективным вариантом для лечения ГЦК. Клеточная линия МНСС97Н была установлена из подкожного ксенотрансплантата метастатической модели человеческой ГЦК у бестимусной мыши (LCI-D20) имеет тенденцию к метастазированию в легкие (Wu FS, Zheng SS, Wu LJ, Teng LS, Ma ZM, Zhao WH, Wu W; Liver Int. 2007 Jun; 27(5):700-7).
Клетки MHCC97H коэкспрессируют c-Met и HGF и также выделяют альфа-фетопротеин (АФП), эмбрионально-специфический гликопротеиновый антиген, который используют в качестве опухолевого маркера в тактике ведения пациентов с ГЦК.
Лечение установленных быстро растущих подкожных МНСС97Н опухолей при помощи гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила полностью ингибировало рост и вызывало регрессии. По сравнению с лечением гидратом гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила подкожных МНСС97Н ксенотрансплантатов, введение сорафениба приводило только к предельной противоопухолевой активности без каких-либо опухолевых регрессий. Для того, чтобы оценить эффект ингибирования c-Met при более физиологических условиях, МНСС97Н клетки вживляли ортотопически в печень мышей.
Пероральное введение гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила, начатое через одну неделю после имплантации фрагмента опухоли показало значительную противоопухолевую активность, которая привела к полной регрессии у всех мышей в конце лечения на 35-й день. В качестве суррогатной точки клинической эффективности, на всем протяжении исследования отслеживали вес тела. Снижение веса тела в группе, получающей носитель, можно было наблюдать, начиная с 18 дня, вероятно, оно было вызвано увеличением опухолевой массы в печени и/или метастазами в легких. В то же время, у мышей, обработанных ингибитором c-Met, потеря веса тела не обнаруживалась. В конце периода лечения подвергали анализу уровни АФП в кровотоке. В то время как в контрольной группе были обнаружены высокие уровни АФП, АФП не поддавался измерению у мышей, обработанных при помощи гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила.
Подкожная МНСС97Н модель опухоли - сравнение гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила и сорафениба в монотерапии:
3
Способ: Самцам бестимусных мышей BalB/с (в возрасте 6-8 недель) подкожно впрыскивали человеческие МНСС97Н клетки опухоли печени и подразделяли на группы лечения (десять животных в одной группе) после чего были установлены опухоли (прибл. 500 мм). Соответствующим группам перорально вводили гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила в различных дозах (10, 30 и 100 мг/кг) в течение 5 рабочих дней и 2 рабочих дней или ежедневно вводили сорафениб (50 мг/кг). В конце лечения подсчитывали значения Т/С и наблюдали возобновление роста опухоли.
3
Результаты: Все дозы гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила показывали значительную противоопухолевую активность, включая регрессию опухоли с соотношениями Т/С в -57%, -93% и -93%, соответственно и замедление роста опухоли (TGD, время до достижения объема опухоли в 1000 мм) в 24, 53 и более чем 53 дня, соответственно. Лечение сорафенибом показало меньшую противоопухолевую активность по сравнению с MSC2156119J со значением Т/С в 27%.
Ортотопическая МНСС97Н модель опухоли - гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила в монотерапии:
Способ: Самцам бестимусных мышей BalB/с (в возрасте 7-8 недель) МНСС97Н ортотопически имплантировали фрагменты опухоли (2-3 мм) в левую долю печени. Через 1 неделю животных с внутрипеченочной имплантацией подразделяли на группы лечения (десять животных в одной группе). Соответствующим группам перорально вводили гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила в дозе 100 мг/кг/5 дней рабочих и 2 дня выходных в течение 5 недель. В конце лечения измеряли размер опухоли и вес опухоли, уровни АФП в плазме крови и анализировали метастазы в легкие.
Результаты: Лечение при помощи гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила вызвало значительную противоопухолевую активность, которая привела к первичной регрессии опухоли (р<0.001) и уменьшению метастазов в легкие (р<0.01). Уровни АФП в плазме крови мышей, проанализированные в конце лечения, также были значительно снижены (р<0.001). Лечение при помощи гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила переносилось хорошо.
Оценивание гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила в первичных ГЦК эксплантатах:
Обобщение: Для исследования терапевтических потенциальных возможностей гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила у пациентов с ГЦК, активность гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила была оценена в преклинической фазе II типа испытания (РР2Т испытание) с человеческими первичными ГЦК эксплантатами. Лечение девяти подкожных, установленных первичных эксплантатов в результате давало 1/9 полных ответов (CR), 2/9 стабильных заболеваний (SD) и предельную активность в одной дополнительной модели. Активность гидрата гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила положительно коррелировала с активационным статусом c-Met рецептора, экспрессированного в этих моделях, как указывали уровни экспрессии c-Met и HGF. Ни одна из моделей, которая не имела или имела только низкие признаки обнаруживаемой c-Met передачи сигналов (c-Met, фосфо c-Met и HGF уровни) не ответила на гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила в монотерапии и не наблюдали усиление активности в комбинации с сорафенибом.
Способ: Самцам бестимусных мышей BalB/с (в возрасте 6-8 недель) подкожно трансплантировали первичный ГЦК опухолевый фрагмент. Животных подразделяли на группы лечения (12 животных в одной группе) после чего были установлены опухоли. Соответствующим группам перорально вводили гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила в дозе 100 мг/кг в течение 5 из 7 дней. В конце лечения подсчитывали Т/С значения и наблюдали возобновление роста опухоли.
Результаты: гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила (100 мг/кг/5 дней из 7 дней) значительно ингибировал рост у 4 из 9 моделей (LIM612, LIM801, LIM1098, LIM941; значения Т/С от 49% до -97%). Сорафениб (50 мг/кг/5 дней из 7 дней) показывал противоопухолевую активность у 7 из 9 моделей (LIM348, LIM612, LIM941, LIM752, LIM1098, LIM801, LIM1081 со значениями Т/С от 45% до -8%). Гидрат гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила показывал лучшую противоопухолевую активность, чем монотерапия сорафенибом в LIM801 и LIM612, две модели с явными признаками передачи сигнала c-Met. Комбинация сорафениба с гидратом гидрохлорида 3-(1-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)-пиримидин-2-ил]-бензил}-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-бензонитрила усилила противоопухолевую активность лучшей монотерапии у 2 из 9 моделей (LIM1098 и LIM752 со значениями Т/С в -32% и 4% соответственно).
Определение c-Met фосфо, c-Met и HGF уровней белка в первичных эксплантатах:
Способ: c-Met, фосфо c-Met, и HGFalpha экспрессию изучали при помощи IHC на спутниковых животных человеческих первичных опухолевых эксплантатах и ксенотрансплантатах. Ксенотрансплантаты вырезали, разделяли на несколько частей, фиксировали в 4% буферном растворе формальдегида в течение 48 часов при комнатной температуре и погружали в парафин. Срезы в 3 мкм зафиксированной формальдегидом и заделанной в парафин (FFPE) ткани закрепляли на положительно заряженных SuperFrostPlus предметных стеклах (Menzel-Glaser, Braunschweig, Германия). Процедуру иммуногистохимического окрашивания, начиная с депарафинизации срезов, осуществляли при помощи окрашивающего инструмента Discovery™ или Discovery XT (Ventana Medical Systems, Inc., Tucson, США). После этого депарафинизированные срезы нагревали для восстановления эпитопов в Tris-EDTA буфере рН 8. Эндогенную пероксидазу блокировали инкубированием в 3% перекиси водорода (часть из OmniMap™ Kit, Ventana Medical Systems). Срезы инкубировали с разбавленными в PBS антителами и после этого с вторичным антителом, конъюгированные с HRP полимеры из OmniMap Kit, в течение 16 мин. при 37°С. Пероксидаза из хрена (HRP) катализирует реакцию 3,3'-диаминобензидин тетрагидрохлорида (DAB)/H2O2, с получением нерастворимого темно-коричневого осадка, который может быть визуализирован. Срезы подвергали контрастному окрашиванию гематоксилином. Предметные стекла промывали в водопроводной воде, обезвоживали, и закрепляли при помощи покровных стекол в постоянных закрепляющих средах Entellanr Neu (VWR, Германия). Подробные рабочие протоколы, сгенерированные окрашивающими инструментами, хранятся у Merck Serono, Darmstadt, Германия. Иммуногистохимические окрашивания были отсканированы с помощью MiraxSCAN (Zeiss) с разрешением х/у: 1 пиксель = 0.23×0.23 мкм2. Сканирования были проанализированы с помощью программного обеспечения для анализа изображений Visiopharm Integrator System (VIS; V 4.0.3.0; Visiopharm A/S, Дания). Площадь жизнеспособной ткани была обведена, избегая очевидных некротических участков и соединительную ткань. Для определения присутствующего количества антигена положительную, окрашенную коричневым цветом площадь, рассчитывали как относительную площадь области жизнеспособной ткани. Окрашивание антителами (в произвольных единицах) рассчитывают как окрашивание антителами (AU) = положительная область (%) * (255-Intensity)/100 коричневого цвета.
Результаты: В эксплантатах гепатоцеллюлярной карциномы человека (ГЦК) высокая c-Met, фосфо-Met и умеренная HGFальфа экспрессия может быть обнаружена в одиночных эксплантатах при помощи иммуногистохимии (IHC). Из 9 ГЦК эксплантатов, 8 были положительными для c-Met. Два из эксплантатов (LIM1098 и LIM612) показали высокую pTyr 1234/1235 Met и pTyr 1349 Met экспрессию. Дополнительные 3 эксплантата опухолей показали pTyr1349-Met экспрессию от низкой до умеренной. Из-за высокого фонового окрашивания при помощи системы обнаружения для HGF клона антитела В-3 (мышь IgG) в нескольких эксплантатах ксенотрансплантатов, опухоли не могут быть проанализированы с помощью анализа изображений. Полуколичественный подсчет осуществляли (С. Wilm) путем сравнения специфического окрашивания анти-HGF с контрольным окрашиванием изотипа мыши IgG.
Результаты являются следующими:
0 = негативный
1 = низкий
2 = средний
3 = высокий
Два из 9 ГЦК эксплантатов показывали от низкой до умеренной HGF альфа-экспрессии. LIM612 с низкой HGF экспрессией был очень позитивным для фосфо-Met. LIM801 с умеренной HGF экспрессией был негативным для фосфо-Met.