Влияние дегельминтизации на показатели свободно-радикального окисления крови лошадей

Вопросы инфекционной патологии: Сборник научных трудов. Санкт-Петербург. 1998. С. 121-126.

3. Волгина И. С. Проблема токсоплазмоза в Воронеже // Вестник Мордовского университета. 2009. № 1. С. 79-80.

4. Гапонов С. П. Значение кошек в циркуляции ан-тропозоонозов на территории г. Воронежа (на примере токсоплазмоза) / С. П. Гапонов, И. С. Меняйлова // Вестник ВГУ, серия: химия, биология, фармация. Воронеж. 2011. №2. С. 134-137.

5. Новак М. Д. Эпизоотическая ситуация по ток-соплазмозу животных в Костромской области / М. Д. Новак, С. Н. Королева, А. И. Новак // Ветеринария Сибири. 2001. № 5. С. 18-20.

6. Равилов Р. Х. Токсоплазмоз домашних плотоядных / Р. Х. Равилов, В. В. Герасимов, М.Н. Воробьева. Казань, 2008. 98 с.

7. Сивкова Т. Н. Сероэпизоотологические исследования при токсоплазмозе собак г. Перми / Т. Н. Сивко-ва, Н. Н. Катаева // Российский паразитологический журнал. 2008. №3. С. 1-3.

8. Сивкова Т. Н. Эпизоотология токсоплазмоза у кошек в городе Перми / Т. Н. Сивкова, А. В. Щукина // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2008. № 2. С. 37-39.

9. Тимофеев Б. А. Токсоплазмоз кошек / Б. А. Тимофеев, С. Н. Олейников // Ветеринария. 2006. № 10. С. 35-38.

10. Шипкова Л. Н. Распространение токсо-плазмоза среди населения Краснодарского края / Л. Н. Шипкова, Е. А. Казакова // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. Материалы докладов научной конференции. М., 2009. Вып. 10. С. 437-439.

DOI: 10.24411/2074-5036-2020-10006 УДК 636.1:619:616.99

Ключевые слова: перекисное окисление липидов, Алезан, Эквисект, лошади, дегельминтизация, церулоплазмин, малоновый диальдегид

Key words: lipid peroxidation, Аlesan, Еquisekt, horses, deworming, ceruloplasmin, malonic dialdegyde

Бякова О. В., Пилип Л. В.

ВЛИЯНИЕ ДЕГЕЛЬМИНТИЗАЦИИ НА ПОКАЗАТЕЛИ СВОБОДНО-РАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ КРОВИ ЛОШАДЕЙ

INFLUENCE OF DEHELMINTIZATION ON INDICATORS OF FREE RADICAL OXIDATION OF BLOOD OF HORSES

ФГБОУ ВО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия» Адес: 610030, Россия, г. Киров, Октябрьский проспект, д. 133 Vyatka State Agricultural Academy, Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education Adress: 610030, Russia, Kirov, Oktyabrsky Prospekt, 133

Бякова Ольга Викторовна, к. б. н., доцент кафедры зоогигиены, физиологии и биохимии.

E-mail: aib05@mail.ru

Byakova Olga V., PhD of Biological Sciences, Associate Professor of the zoohygiene, physiology and biochemistry Dept.

Е-mail: aib05@mail.ru

Пилип Лариса Валентиновна, к. в. н., доцент кафедры зоогигиены, физиологии и биохимии.

E-mail: pilip_larisa@mail.ru

Pilip Larisa V., PhD of Veterinary Sciences, Associate Professor of the zoohygiene, physiology and biochemistry Dept.

Е-mail: pilip_larisa@mail.ru

Аннотация. Препараты «Алезан» и «Эквисект» применяются в виде паст при параскаридозе, оксиуро-зе и стронгилятозе лошадей. Гельминты активизируют свободно-радикальное окисление, что способствует накоплению продуктов перекисного окисления липидов и нарушению антиоксидантной защиты организма лошади. Длительная паразитарная инвазия в организме лошадей нарушает равновесие в системе «перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита». В крови незараженных лошадей весь период эксперимента уровень МДА находился в пределах от 3,04±0,45 до 4,08±0,38 мкмоль/л при концентрации церулоплазмина от 14,98±0,12 до 15,42±0,31 мг%. У спонтанно-зараженных лошадей на протяжении всего эксперимента регистрировалась максимальная концентрация МДА при низком уровне церулоплазмина. Полная элиминация от гельминтов привела к активизации АОЗ организма, что проявилось увеличением концентрации церулоплазмина в сыворотке крови. При использовании «Алезана» кон-

центрация церулоплазмина в крови на протяжении всего эксперимента была выше за счёт присутствия антиоксиданта с максимальным значением 14,99±1,05 мг%. Эффективная дегельминтизация животных снизила интенсивность процессов ПОЛ до значения 3, 88±0,11 мкмоль/л после использования «Алезана» и 4,07±0,21 мкмоль/л после применения «Эквисекта». Антиоксиданты в составе антигельминтиков усиливают антиоксидантную активность сыворотки крови, что способствует более быстрому достижению равновесия «ПОЛ-АОЗ».

Summary. «Alezan» and «equisekt» pastes are used for parascaridosis, oxyurosis and strongylitis of horses. Helminths activate free radical oxidation. This leads to the accumulation of lipid peroxidation products and the violation of the antioxidant defense. Chronic parasitic invasion of horses upsets the balance in the system of «lipid peroxidation - antioxidant protection». In the blood of uninfected horses of the experiment the level of malondialdehyde was in the range from 3,04±0,45 to 4,08±0,38 mkmol/l with a concentration of ceruloplasmin from 14,98±0,12 to 15,42±0,31 mg%. The maximum concentration of MDA with a low level of ceruloplasmin was observed in helminth-infected horses throughout the experiment. Complete elimination from helminths has led to the activation of antioxidant protection. This is confirmed by an increase in the concentration of ceruloplasmin in serum. When using «alesan» the concentration of ceruloplasmin in the blood throughout the experiment was higher due to the presence of an antioxidant with a maximum value of 14,99±1,05 mg%. Effective deworming of animals reduced the intensity of LPO processes to 3,88±0,11 mkmol/l after using «alesan» and 4,07±0,21 mkmol/l after using «equisekt». Antioxidants in the composition of anthelmintics increase the antioxidant activity of serum, which contributes to a more rapid establishment of the «POL-AOP» equilibrium.

Введение

На сегодняшний день для лошадей представлено огромное количество как отечественных, так и импортных антигельминт-ных препаратов [1, 2, 5, 8]. Такая активная тенденция к увеличению количества антигельминтиков объясняется быстрым развитием резистентности к препаратам одной фармакологической группы и экономической составляющей. Эффективность оздоровительных мероприятий зависит как от вида возбудителя и действующего вещества в антигельминтике, сроков и длительности его применения, так и от адекватности защитных реакций организма. Исследователями доказано наличие свободно-радикальных процессов в организме лошадей при заражении гельминтами [3, 4, 6]. Комплексная оценка интенсивности процессов перекис-ного окисления липидов

в организме, а дегельминтизация на этом фоне усиливает процессы ПОЛ, необходимо использовать антигельминтики в сочетании с иммуностимуляторами, антиоксид антами и пробиотиками [3, 4, 7, 9].

Целью наших исследований явилось изучение терапевтической эффективности двух противопаразитарных препаратов в форме пасты, а также их влияние на показатели свободно-радикального окисления (СРО) крови лошадей.

Материалы и методы

Исследования проводили в летний период на лошадях рысистых, верховых пород, а также помесных пород. Материалом для наших исследований явились фекалии и сыворотка крови лошадей. Объектом исследования послужили противопаразитарные препараты «Алезан» и «Эквисект». Паста «Алезан» выпускается ООО НВЦ «Агроветзащита» (г. Москва). В ее составе два действующих вещества - 2% ивермектин и 10% празик-вантел. Кроме того, в состав пасты входит сильный антиоксидант - сантохин, который обладает антиоксидантными свойствами, ингибирует процессы СРО липидов, повышает ценность кормов. Ориентировочная стоимость препарата составляет 700 рублей. «Эквисект» паста выпускается ООО НБЦ «Фармбиомед» (г. Москва). Действующим веществом является 0,2% аверсектин С.

31

Шприц предназначен для обработки лошади массой 700 кг. Ориентировочная стоимость составляет 400 рублей.

Изучение зараженности лошадей проводили путем исследования фекалий методом флотации по Фюллеборну. Подсчет количества яиц проводили в счетной камере ВИГИС, разработанной Л. Д. Мигачевой и Г. А. Котельниковым (1987).

С учетом зараженности лошадей были сформированы три группы животных. Для дегельминтизации лошадей первой опытной группы (n=6) использовали «Алезан» пасту. Лошадям второй опытной группы (n=6) задавали «Эквисект» пасту. Контрольная группа (n=6) состояла из незараженных, клинически здоровых животных.

Определение продуктов ПОЛ проводили по общепринятым методикам: малоновый диальдегид (МДА) определяли методом с ти-обарбитуровой кислотой, сульфгидрильные группы белка (SH-группы) фотоколориметрическим ультраметодом по В. Ф. Фоломе-еву (1981). Церулоплазмин (ЦП) в сыворотке крови определяли модифицированным методом Равина (2000).

Цифровой материал подвергался статистической обработке с вычислением критерия Стьюдента на персональном компьютере с использованием стандартной программы вариационной статистики Microsoft Excel.

Результаты исследований и обсуждение

В результате копроовоскопических исследований у лошадей первой опытной группы интенсивность инвазии по параскаридозу составила 176,8± 25,4 яиц в 1 г фекалий, по оксиурозу - 51,8±6,41 яиц, по стронгилятозу - 605,8±80,1 в 1 г фекалий. Интенсивность

инвазии во второй опытной группе составила по параскаридозу 116,5±15,6 яиц в 1 г фекалий, по оксиурозу - 67,5±9,64 яиц, по стронгилятозу - 578,5±75,6 в 1 г фекалий.

Ивермектин и аверсектин, входящие в состав «Алезана» и «Эквисекта», относятся к макроциклическим лактонам, которые являются продуктами ферментации гриба Str. аvermitШs. Макроциклические лактоны эффективны в отношении личинок нематод, а также многих эктопаразитов. В литературе описаны сведения об эффективности применения этих препаратов при более чем 300 паразитарных заболеваниях [8]. Празиквантел относится к группе пиразинизохинолинов, активен в отношении желудочно-кишечных цестод на всех фазах развития.

Препараты «Алезан» и «Эквисект» в терапевтической дозе обеспечивали полную элиминацию гельминтов из организма хозяина к 10-м суткам исследований. На 30-е сутки в фекалиях лошадей яйца гельминтов также не обнаруживали. Единичные яйца параскари-сов и оксиурисов обнаружены на 60-й день опыта у лошадей, дегельминтизированных «Алезаном». Яйца кишечных стронгилят были обнаружены в этой группе лошадей на 70-й день опыта. У лошадей 2 опытной группы единичные яйца параскарисов обнаружены на 50-й день опыта, яйца оксиурисов и кишечных стронгилят выделены на 60-й день эксперимента.

У лошадей, спонтанно-зараженных желудочно-кишечными нематодами (опытная 1 и опытная 2), количество МДА выше по сравнению с незараженными животными, причём у животных 2 опытной группы данный показатель был достоверно выше на 31,4% (Р<0,05). У лошадей опытных групп

Таблица 1

Показатели ПОЛ и АОЗ при кишечных нематодозах лошадей

Группа животных Показатели

МДА, мкмоль/л SH-группы, ммоль/л ЦП, мг%

Опытная 1 4,03±0,23 1,81±0,11 12,32±0,39***

Опытная 2 4,52±0,21* 2,21±0,09 13,05±0,16

Контрольная 3,44±0,09 2,02±0,06 15,11±0,31

Примечание: *Р < 0,05; **Р < 0,01; ***Р < 0,001 - в сравнении с показателями, полученными у незараженных лошадей.

Таблица 2

Показатели ПОЛ и АОЗ после дегельминтизации лошадей

Срок наблюдений (сутки) Показатели

МДА, мкмоль/л БН-группы, ммоль/л ЦП, мг%

опытная группа 1

0 4,03±0,23 1,81±0,11 12,32±0,39

7 11,08±0,12* 1,93±0,07 11,85±0,86

14 10,05±1,02 2,01±0,16 9,89±0,73

30 3, 88±0,11 1,89±0,21 14,99±1,05

опытная группа 2

0 4,52±0,21 2,21±0,09 13,05±0,16

7 13,43±1,55** 2,16±0,22 8,16±0,92*

14 12,89±0,84 1,84±0,13 8,08±0,66

30 4,07±0,21 1,99±0,09 13,86±1,01

контрольная группа

0 3,44±0,090 2,02±0,06 15,11±0,31

7 3,04±0,45 2,24±0,12 14,98±0,12

14 4,08±0,38 2,18±0,18 15,32±1,01

20 3,99±0,24 2,14±0,10 15,42±0,3100

Примечание: * Р < 0,05; ** Р < 0,01; *** Р < 0,001 - в сравнении с показателями, полученными до лечения; 0 Р < 0,05; 00 Р < 0,01; 000 Р < 0,001 - в сравнении с показателями, полученными у незараженных лошадей

отмечались следующие изменения в АОЗ: уменьшалось количество БН-групп белка на 10,5% и церулоплазмина на 22,7% (Р<0,001) у животных первой опытной группы, у лошадей второй опытной группы показатели изменялись недостоверно и имели аналогичную закономерность.

При изучении ферментативного звена АОЗ были получены референсные значения у незараженных, клинически здоровых лошадей: количество церулоплазмина составило 15,11±0,31 мг%, количество сульфги-дрильных групп белка находилось в пределах 2,02±0,06 ммоль/л.

Длительная хроническая инвазия способствовала накоплению МДА при одновременном истощении АОЗ организма. В крови клинически здоровых животных система «ПОЛ -АОЗ» находилась в равновесии.

Анализируя данные таблицы 2, можно отметить, что после применения «Алезана» к 7-м суткам опыта в крови у лошадей достоверно возрастает концентрация МДА в 2,7 раза (Р<0,05). Аналогичная зависимость прослеживается после дегельминтизации лошадей «Эквисектом», так концентрация МДА

возрастает с 4,52 до 13,43 мкмоль/л (Р<0,01). Полученные результаты можно объяснить гибелью гельминтов после противопарази-тарной терапии и интоксикацией организма продуктами этих метаболитов.

При накоплении МДА в крови лошадей, концентрация церулоплазмина к 7-м суткам опыта достоверно снизилась в опытной группе 2, где применяли «Эквисект», с 13,05±0,16 мг% на 37%. В опытной группе 1, где в состав «Алезана» входил сантохин, не отмечено достоверного снижения церулоплазмина.

По результатам терапевтической эффективности установлена полная элиминация гельминтов к 10-м суткам эксперимента, также через месяц после дегельминтизации, яйца гельминтов не обнаруживались. Так, к 30-м суткам эксперимента количество МДА у лошадей опытных групп соответствовало референсным значениям данного показателя клинически здоровых лошадей. Концентрация медь-содержащего фермента церулоплазмина в опытной группе 1 приближалась к значениям, полученным у клинически здоровых лошадей. Однако в опытной группе 2 содержание церулоплазмина к 30-м

33

суткам опыта не достигало значений, зарегистрированных у незараженных лошадей.

В крови незараженных лошадей весь период эксперимента уровень малонового ди-альдегида находился в пределах от 3,04±0,45 до 4,08±0,38 мкмоль/л, при концентрации ЦП от 14,98±0,12 до 15,42±0,31 мг%.

Выводы

При изучении терапевтической эффективности противопаразитарные пасты «Алезан» и «Эквисект» показали 100%-ную эффективность при кишечных нематодозах лошадей и могут быть рекомендованы в коневодческих хозяйствах.

Длительная паразитарная инвазия в организме лошадей нарушает равновесие в системе «перекисное окисление липидов -антиоксидантная защита», что подтверждено более высокой концентрацией МДА при низком уровне церулоплазмина у спонтанно-зараженных лошадей на протяжении всего эксперимента.

Полная элиминация от гельминтов организма лошадей привела к активизации АОЗ организма, что проявилось увеличением концентрации церулоплазмина в сыворотке. Причем, в группе животных, где использовался антигельминтик с сантохином, концентрация церулоплазмина в крови на протяжении всего эксперимента была выше в сравнении с опытной группой 2, где в составе препарата отсутствовал антиоксидант. После эффективной дегельминтизации животных установлено снижение интенсивности процессов ПОЛ. Антиоксидант сантохин в составе «Алезана» усиливал антиокси-дантную активность сыворотки крови, в результате концентрация церулоплазмина достигала значений незараженных лошадей, что привело к более быстрому достижению

равновесия в реакциях свободно-радикального окисления и антиоксидантной активности.

Применение антиоксидантов в составе противопаразитарных препаратов является перспективным направлением в ветеринарии, что позволяет обеспечивать коррекцию метаболических процессов в организме животных.

Список литературы

1. Архипов И. А. Выбор антгельминтиков для лечения животных / И. А. Архипов, М. Б. Мусаев // Ветеринария. 2004. № 2. С. 28-33.

2. Багаутдинов А. М. Механизмы коррекции сво-боднорадикального окисления антиоксидантами: монография / А. М. Багаутдинов, В. Н. Байматов, Н. В. Байматов // Уфа: РИЦ БашГУ, 2008. 312 с.

3. Бякова О. В. Перекисное окисление липидов и естественная резистентность при гельминтозах лошадей: монография / О. В. Бякова, Л. В. Пилип // Киров: ООО Издательство «Радуга-ПРЕСС», 2018. 149 с.

4. Бякова О. В. Перекисное окисление липидов лошадей при кишечных нематодозах / О. В. Бякова, Л. В. Пилип // Вестник ветеринарии. 2012. № 4 (63). С. 28-30.

5. Бякова О. В. Иммунологическая оценка пасты «Алезан» при гельминтозах лошадей / О. В. Бякова, Л. В. Пилип, С. Н. Белозеров // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. 2008. № 6(186). С. 99-101.

6. Бякова О. В. Перекисное окисление липидов как фактор эндогенной интоксикации при гельмин-тозах / О. В. Бякова, Л. В. Пилип, С. Н. Белозеров// Российский паразитологический журнал. 2008. № 2. С. 52-55.

7. Латко М. Д. Эффективность Алезана при смешанных гельминтозах молодняка лошадей / М. Д. Латко, Р. Т. Сафиуллин, С. В. Енгашев // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: материалы докл. науч. конф. М., 2006. Вып. 7. С.214-216.

8. Сафиуллин Р. Т. Авермектины на российском ветеринарном рынке. Российский ветеринарный журнал. 2006. № 2. С. 6-8.

9. Трифанова Д. В. Паразитарные заболевания лошадей / Трифанова Д. В., Бякова О. В., Пилип Л. В. // Молодежная наука 2014: технологии, инновации. 2014. С. 233-235.

Подписной индекс журнала «Актуальные вопросы ветеринарной биологии»:

Агентство «Роспечать» - 33184