КЛЕТКИ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИЕ РЕЦЕПТОР ПАРАТИРЕОИДНОГО ГОРМОНА 1, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Плюрипотентная стволовая клетка, характеризующуюся тем, что указанная клетка экспрессирует рецептор паратиреоидного гормона типа 1 (RTH1R), имеет диаметр от 2,5 до 4,5 мкм, формирует эмбриоидоподобные тельца при культивировании и обладает способностью дифференцироваться в эктодерму, мезодерму и энтодерму при культивировании.
2. Плюрипотентная стволовая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что популяцию клеток культивируют с одним или более пептидами.
3. Популяция плюрипотентных стволовых клеток по п. 2, отличающаяся тем, что указанный пептид представляет собой белок внеклеточного матрикса (ВКМ), цитокин, фактор роста или антиген.
4. Плюрипотентная стволовая клетка по любому из пп. 1-3, отличающаяся тем, что указанную плюрипотентную стволовую клетку культивируют с ретиноевой кислотой и/или с одним или более производным ретиноевой кислоты.
5. Плюрипотентная стволовая клетка по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что указанная плюрипотентная стволовая клетка трансфицирована гетерологичным геном, кодирующим пептид.
6. Плюрипотентная стволовая клетка по п. 5, отличающаяся тем, что указанный пептид представляет собой белок внеклеточного матрикса (ВКМ), цитокин, фактор роста или антиген.
7. Плюрипотентная стволовая клетка по любому из пп. 1-6, отличающаяся тем, что указанная плюрипотентная стволовая клетка выделена из периферической крови, семенной жидкости и/или фолликулярной жидкости яичника.
8. Выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток, присутствующих в периферической крови, семенной жидкости и фолликулярной жидкости яичника, которые:
экспрессируют рецептор паратиреоидного гормона типа 1 (RTH1R);
имеют диаметр от 2,5 до 4,5 мкм;
образуют эмбриоидоподобные тельца при культивировании; и
способны к дифференцировке в эктодерму, мезодерму и энтодерму при культивировании.
9. Выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток по п. 8, отличающаяся тем, что указанная популяция клеток является:
положительной по CD90 и CD 133;
положительной/отрицательной по CD29, CD34, CD105 и CD106; и
отрицательной по SSEA-3, CD200 и CD45.
10. Выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток по пп. 8-9, отличающаяся тем, что указанная популяция клеток экспрессирует Sox2 и Oct4.
11. Выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 8-10, отличающаяся тем, что указанная выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток происходит от человека, лошади, собаки или верблюда.
12. Выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 8-11, отличающаяся тем, что указанную популяцию клеток культивируют с пептидом.
13. Выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток по п. 12, отличающаяся тем, что указанный пептид представляет собой белок внеклеточного матрикса (ВКМ), цитокин, фактор роста или антиген.
14. Выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 8-13, отличающаяся тем, что указанную популяцию клеток культивируют с ретиноевой кислотой и/или с одним или более производным ретиноевой кислоты.
15. Выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 8-14, отличающаяся тем, что плюрипотентная стволовая клетка трансфицирована гетерологичным геном, кодирующим пептид.
16. Выделенная популяция плюрипотентных стволовых клеток по п. 15, отличающаяся тем, что указанный пептид представляет собой белок внеклеточного матрикса (ВКМ), цитокин, фактор роста или антиген.
17. Антитело или его связывающий фрагмент, специфичные к рецептору паратиреоидного гормона типа 1 (RTH1R) на стволовой клетке.
18. Антитело по пп. 17, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой моноклональное антитело.
19. Антитело по любому из пп. 17-18, отличающееся тем, что указанное антитело представляет собой гуманизированное антитело.
20. Способ выделения популяции стволовых клеток согласно любому из пп. 1-16, указанный способ включает:
приведение в контакт образца, содержащего популяцию стволовых клеток, с антителом, специфичным к RTH1R, с образованием популяции связанных с антителом стволовых клеток;
выделение указанной популяции связанных с антителом стволовых клеток; и
высвобождение стволовых клеток от указанного антитела.
21. Способ по п. 20, дополнительно включающий:
приведение в контакт образца, содержащего популяцию связанных с антителом стволовых клеток, с магнитными гранулами; и
применение магнитного поля, за счет которого обеспечивают выделение указанной популяции связанных с антителом стволовых клеток.
22. Способ по любому из пп. 20-21, отличающийся тем, что указанный образец получен из образца, выбранного из группы, состоящей из жировой ткани, костного мозга, периферической крови, семенной жидкости, фолликулярной жидкости яичника и их комбинаций.
23. Способ по любому из пп. 20-22, отличающийся тем, что указанная выделенная популяция стволовых клеток содержит стволовые клетки, которые имеют диаметр 2,5 мкм и экспрессируют классические CD-маркеры.
24. Способ по любому из пп. 20-23, отличающийся тем, что указанная выделенная популяция стволовых клеток содержит стволовые клетки, которые выделены в количестве приблизительно 10000, 50000, 100000, 500000, 1000000, 5000000 или 10000000 клеток/мл образца ткани, или в количестве в пределах диапазона, заданного любыми двумя из вышеуказанных значений.
25. Способ выделения популяции плюрипотентных стволовых клеток согласно любому из пп. 1-16, указанный способ включает:
получение периферической крови от индивидуума, такого как млекопитающее, в частности, человек;
приведение в контакт указанной периферической крови с экстракорпоральной пористой мембраной, выполненной с возможностью захвата популяции плюрипотентных стволовых клеток согласно любому из пп. 1-16;
применение к периферической крови и указанной мембране центробежной силы или силы тяжести или давления;
захват указанной популяции плюрипотентных стволовых клеток;
сбор прошедшей через мембрану крови; и
реинфузию прошедшей через мембрану крови указанному индивидууму.
26. Способ по п. 25, отличающийся тем, что захваченную популяцию плюрипотентных стволовых клеток готовят для последующей реинфузии указанному индивидууму.
27. Способ выделения популяции стволовых клеток согласно любому из пп. 1-16, указанный способ включает:
приведение в контакт образца, содержащего указанную популяцию стволовых клеток, с антителом к CD45; и
удаление клеток, не связанных с антителом к CD45.
28. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанный образец представляет собой периферическую кровь, плазму или лизат тромбоцитов.
29. Способ по любому из пп. 27-28, отличающийся тем, что указанная выделенная популяция стволовых клеток содержит стволовые клетки, которые выделены в количестве приблизительно 10000, 50000, 100000, 500000, 1000000, 5000000 или 10000000 клеток/мл образца ткани, или в количестве в пределах диапазона, заданного любыми двумя из вышеуказанных значений.
30. Способ улучшения фертильности у субъекта, включающий:
выбор субъекта, нуждающегося в улучшенной фертильности, такого как млекопитающее, в частности, человек; и
введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества выделенной популяции плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-26, или выделенной популяции плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16.
31. Способ по п. 30, отличающийся тем, что указанные плюрипотентные стволовые клетки являются аутологичными.
32. Способ по любому из пп. 30-31, отличающийся тем, что указанное терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для того, чтобы вызвать детектируемое улучшение функции яичника, качества ооцитов, толщины эндометрия, рецептивности эндометрия или комбинации вышеуказанного.
33. Способ по любому из пп. 30-31, отличающийся тем, что указанное терапевтически эффективное количество выделенной популяции плюрипотентных стволовых клеток вводят с помощью инъекции в тестикулы или матку.
34. Способ по любому из пп. 30-31, отличающийся тем, что указанное терапевтически эффективное количество выделенной популяции плюрипотентных стволовых клеток вводят указанному субъекту внутривенно в маточную артерию, чтобы способствовать утолщению и рецептивности стенки эндометрия.
35. Способ по п. 34, отличающийся тем, что толщина стенки эндометрия увеличивается по меньшей мере приблизительно на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% или более.
36. Способ по любому из пп. 30-31, отличающийся тем, что указанное терапевтически эффективное количество выделенной популяции плюрипотентных стволовых клеток вводят указанному субъекту внутривенно в яичниковую артерию, чтобы увеличить количество и качество яйцеклеток.
37. Способ по любому из пп. 30-36, отличающийся тем, что указанные плюрипотентные стволовые клетки выделены из образца, выбранного из группы, состоящей из жировой ткани, костного мозга, периферической крови, плазмы семенной жидкости, и фолликулярной жидкости яичника и/или их комбинаций.
38. Способ нацеливания популяции плюрипотентных стволовых клеток, выделенных способом по любому из пп. 20-29, или выделенной популяции плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16 на представляющую интерес область, включающий экспрессию в указанной области связанного с паратиреоидным гормоном белка.
39. Способ увеличения выработки кожного коллагена и/или эластина в области кожи у субъекта, такого как млекопитающее, в частности, человек, включающий введение терапевтически эффективного количества композиции, содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-29, или содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16.
40. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанную композицию вводят путем одной или более подкожной инъекции.
41. Способ по любому из пп. 39-40, отличающийся тем, что указанная повышенная выработка кожного коллагена и/или эластина уменьшает мелкие морщины, уменьшает морщины, увеличивает сияние, увеличивает упругость кожи и/или обеспечивает комбинацию вышеуказанного.
42. Способ подавления выпадения волос или стимуляции роста волос, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту, такому как млекопитающее, в частности, человек, эффективного количества композиции, содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-29, или содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16.
43. Способ по п. 42, отличающийся тем, что указанную композицию вводят указанному субъекту чрескожно.
44. Способ по п. 42, отличающийся тем, что указанную композицию вводят указанному субъекту подкожно с помощью инъекции.
45. Способ улучшения, облегчения, обеспечения регрессии или лечения заболевания кости, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту, такому как млекопитающее, в частности, человек, эффективного количества композиции, содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-29, или содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16.
46. Способ по п. 45, отличающийся тем, что указанное заболевание кости представляет собой повреждение кости.
47. Способ по п. 46, отличающийся тем, что указанное повреждение кости представляет собой перелом кости.
48. Способ по п. 47, отличающийся тем, что указанный перелом кости представляет собой перелом остистого отростка.
49. Способ по п. 45, отличающийся тем, что указанное заболевание кости представляет собой остеопороз.
50. Способ по п. 45, отличающийся тем, что указанное заболевание кости представляет собой остеопению.
51. Способ по любому из пп. 45-50, отличающийся тем, что указанную композицию вводят указанному субъекту подкожно с помощью инъекции.
52. Способ по любому из пп. 45-50, отличающийся тем, что указанную композицию вводят указанному субъекту внутривенно.
53. Способ по любому из пп. 45-50, отличающийся тем, что указанную композицию вводят указанному субъекту внутриартериально.
54. Способ по п. 53, отличающийся тем, что указанную композицию вводят в одну или более из маточной, панкреатической или яичниковой артерий.
55. Способ улучшения, облегчения, обеспечения регрессии, подавления или лечения неврологического заболевания, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту, такому как млекопитающее, в частности, человек, эффективного количества композиции, содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-29, или содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16.
56. Способ улучшения, облегчения, обеспечения регрессии, подавления или лечения метастазирующей карциномы, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту, такому как млекопитающее, в частности, человек, эффективного количества композиции, содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-29, или содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16.
57. Способ профилактики, лечения, подавления, предотвращения или облегчения аутоиммунного заболевания, включающий идентификацию нуждающегося в этом субъекта, такого как млекопитающее, в частности, человек, и введение указанному субъекту эффективного количества композиции, содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-29, или содержащей выделенную популяцию клеток, содержащую стволовые клетки по любому из пп. 1-16.
58. Происходящие из периферической крови плюрипотентные стволовые клетки PBD-PSC для применения в качестве лекарственного средства.
59. Способ улучшения, облегчения, обеспечения регрессии, подавления или лечения диабета, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту, такому как млекопитающее, в частности, человек, эффективного количества композиции, содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-29, или содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16.
60. Способ по пп. 59, отличающийся тем, что диабет представляет собой диабет 1 типа.
61. Способ по любому из пп. 59-60, отличающийся тем, что указанную композицию вводят субъекту внутриартериально в панкреатическую артерию.
62. Способ по любому из пп. 59-61, отличающийся тем, что указанную композицию вводят один раз каждые 12 недель.
63. Способ по любому из пп. 59-62, отличающийся тем, что введение указанной композиции снижает количество среднесуточного применения инсулина указанным субъектом.
64. Способ по п. 63, отличающийся тем, что указанное среднесуточное применение инсулина снижается на приблизительно 2-10%, 5-20%, 10-30%, 20-40%, 30-50%, 40-60%, 50-70%, 60-80%, 70-90% или 80-100% или в пределах диапазона, определенного любыми двумя из вышеуказанных процентов.
65. Способ снижения среднесуточной дозы инсулина у субъекта, страдающего диабетом, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту, такому как млекопитающее, в частности, человек, эффективного количества композиции, содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-26, или включающий выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16.
66. Способ по пп. 65, отличающийся тем, что указанный диабет представляет собой диабет 1 типа.
67. Способ по любому из пп. 65-66, отличающийся тем, что указанную композицию вводят субъекту внутриартериально в панкреатическую артерию.
68. Способ по любому из пп. 65-67, отличающийся тем, что указанную композицию вводят один раз каждые 12 недель.
69. Способ по любому из пп. 65-68, отличающийся тем, что введение указанной композиции снижает среднесуточное применение инсулина указанным субъектом на приблизительно 2-10%, 5-20%, 10-30%, 20-40%, 30-50%, 40-60%, 50-70%, 60-80%, 70-90% или 80-100%)или в пределах диапазона, определенного любыми двумя из вышеуказанных процентов.
70. Способ выращивания выделенной популяции плюрипотентных стволовых клеток на матрице, включающий:
выделение популяции плюрипотентных стволовых клеток из образца способом по любому из пп. 20-29;
приведение в контакт матрицы из нановолокон с указанными выделенными плюрипотентными стволовыми клетками; и
выращивание указанных выделенных плюрипотентных стволовых клеток на указанной матрице из нановолокон;
при этом получают матрицу, содержащую плюрипотентные стволовые клетки.
71. Способ по п. 70, отличающийся тем, что указанная матрица из нановолокон содержит полимерные волокна, включая, например, полидиметилсилоксан, полиглицерин себацат, поликапролактон, полимолочную кислоту, полигликолевую кислоту, целлюлозу, альгинат, агар, агарозу, коллаген I, коллаген IV, гиалуроновую кислоту, фибрин, поли-L-лактид и/или сополимер молочной и гликолевой кислот.
72. Способ по п. 71, отличающийся тем, что указанные полимерные волокна получены путем электроспиннинга.
73. Способ по любому из пп. 71-72, отличающийся тем, что толщина указанных полимерных волокон находится в диапазоне от 200 до 700 мкм, например 200, 300, 400, 500, 600 или 700 мкм, или находится в пределах диапазона, определенного любыми двумя из вышеуказанных значений толщины.
74. Способ по любому из пп. 70-73, отличающийся тем, что указанные плюрипотентные стволовые клетки связаны с матрицей и находятся в ней в течение 2-40 минут, например 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35 или 40 минут.
75. Способ по любому из пп. 70-74, отличающийся тем, что указанную матрицу, содержащую плюрипотентные стволовые клетки, применяют для инъекции в суставы или кости.
76. Способ по любому из пп. 70-74, отличающийся тем, что указанную матрицу, содержащую плюрипотентные стволовые клетки, применяют для покрытия раны.
77. Способ улучшения, облегчения, обеспечения регрессии, подавления или лечения дегенерации желтого пятна, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту, такому как млекопитающее, в частности, человек, эффективного количества композиции, содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток, которая выделена способом по любому из пп. 20-29, или содержащей выделенную популяцию плюрипотентных стволовых клеток по любому из пп. 1-16.
78. Способ по пп. 77, отличающийся тем, что указанная дегенерация желтого пятна представляет собой сухую или влажную дегенерацию желтого пятна.
79. Способ по любому из пп. 77-78, отличающийся тем, что указанную композицию вводят путем внутривенной, интравитреальной, интраокулярной, субконъюнктивальной, ретробульбарной или суборбитальной инъекции.
80. Способ по любому из пп. 77-79, отличающийся тем, что указанную композицию вводят один раз каждые 12 недель.
81. Способ по любому из пп. 77-80, отличающийся тем, что введение указанной композиции улучшает остроту зрения у субъекта.
82. Способ по п. 81, отличающийся тем, что остроту зрения улучшают до приблизительно 20/20, 20/30, 20/40, 20/50, 20/60, 20/70, 20/80, 20/90, или 20/100, или в пределах диапазона, определенного любыми двумя из вышеуказанных значений.