ПОЛУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИ СКОРРЕКТИРОВАННЫХ, ЗДОРОВЫХ ИНДУЦИРОВАННЫХ ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

1. Способ получения генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки, включающий:
(i) трансфекцию генетически поврежденной неплюрипотентной клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует ген, корректирующий заболевание, с образованием генетически скорректированной неплюрипотентной клетки;
(ii) трансфекцию указанной генетически скорректированной неплюрипотентной клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок ОСТ4, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок SOX2, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок KLF4, и нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок cMYC, с образованием генетически скорректированной трансфецированной неплюрипотентной клетки; и
(iii) предоставление указанной генетически скорректированной трансфецированной неплюрипотентной клетке возможности делиться, с образованием посредством этого генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
2. Способ по п.1, где указанная генетически поврежденная неплюрипотентная клетка является человеческой клеткой.
3. Способ по п.1, где указанная генетически поврежденная неплюрипотентная клетка является мышиной клеткой.
4. Способ по п.1, где указанный корректирующий заболевание ген кодирует белок FANCA.
5. Способ по п.1, где указанный корректирующий заболевание ген кодирует белок FANCD2.
6. Способ по п.1, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную генетически скорректированную трансфецированную неплюрипотентную клетку стадии (iii), по меньшей мере, одного ингибитора киназ.
7. Способ по п.1, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную генетически скорректированную трансфецированную неплюрипотентную клетку стадии (iii), по меньшей мере, одного ингибитора киназ МЕК1 и GSK3.
8. Способ получения генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки, включающий:
(i) трансфекцию генетически поврежденной неплюрипотентной клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок ОСТ4, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок SOX2, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок KLF4, и нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок cMYC, с образованием трансфецированной генетически поврежденной неплюрипотентной клетки;
(ii) предоставление указанной трансфецированной генетически поврежденной неплюрипотентной клетке возможности делиться с образованием посредством этого генетически поврежденной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки; и
(iii) трансфекцию указанной генетически поврежденной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует ген, корректирующий заболевание, с образованием указанной генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
9. Способ по п.8, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную трансфецированную генетически поврежденную неплюрипотентную клетку стадии (ii), по меньшей мере, одного ингибитора киназ.
10. Способ по п.8, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную трансфецированную генетически поврежденную неплюрипотентную клетку стадии (ii), по меньшей мере, одного ингибитора киназ МЕК1 и GSK3.
11. Генетически скорректированная индуцированная плюрипотентная стволовая клетка, полученная согласно способу по любому из пп.1 или 8.
12. Способ получения генетически скорректированной соматической клетки из генетически поврежденной клетки млекопитающего, включающий: (а) контакт генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки с клеточными факторами роста; и (b) предоставление указанной генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетке возможности делиться с образованием посредством этого указанной генетически скорректированной соматической клетки.
13. Способ по п.12, где указанную генетически скорректированную индуцированную плюрипотентную стволовую клетку получают согласно способу, включающему:
(i) трансфекцию генетически поврежденной неплюрипотентной клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует ген, корректирующий заболевание, с образованием генетически скорректированной неплюрипотентной клетки;
(ii) трансфекцию указанной генетически скорректированной неплюрипотентной клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок ОСТ4, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок SOX2, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок KLF4, и нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок cMYC, с образованием генетически скорректированной трансфецированной неплюрипотентной клетки; и
(iii) предоставление указанной генетически скорректированной трансфецированной неплюрипотентной клетке возможности делиться, с образованием посредством этого генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
14. Способ по п.13, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную генетически скорректированную трансфецированную неплюрипотентную клетку стадии (iii), по меньшей мере, одного ингибитора киназ.
15. Способ по п.13, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную генетически скорректированную трансфецированную неплюрипотентную клетку стадии (iii), ингибитора киназ МЕК1 и GSK3.
16. Способ по п.12, где указанную генетически скорректированную индуцированную плюрипотентную стволовую клетку получают согласно способу, включающему:
(i) трансфекцию генетически поврежденной неплюрипотентной клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок ОСТ4, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок SOX2, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок KLF4, и нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок cMYC, с образованием трансфецированной генетически поврежденной неплюрипотентной клетки;
(ii) предоставление указанной трансфецированной генетически поврежденной неплюрипотентной клетке возможности делиться с образованием посредством этого генетически поврежденной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки; и
(iii) трансфекцию указанной генетически поврежденной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует ген, корректирующий заболевание, с образованием указанной генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
17. Способ по п.16, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную трансфецированную генетически поврежденную неплюрипотентную клетку стадии (ii), по меньшей мере, одного ингибитора киназ.
18. Способ по п.16, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную трансфецированную генетически поврежденную неплюрипотентную клетку стадии (ii), по меньшей мере, одного ингибитора киназ МЕК1 и GSK3.
19. Способ лечения млекопитающего, нуждающегося в восстановлении ткани, включающий:
(i) введение указанному млекопитающему генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки,
(ii) предоставление указанной генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки возможности делиться и дифференцироваться в соматические клетки в указанном млекопитающем с обеспечением посредством этого восстановления ткани у указанного млекопитающего.
20. Способ по п.19, где указанную генетически скорректированную индуцированную плюрипотентную стволовую клетку получают согласно способу, включающему:
(i) трансфекцию генетически поврежденной неплюрипотентной клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует ген, корректирующий заболевание, с образованием генетически скорректированной неплюрипотентной клетки;
(ii) трансфекцию указанной генетически скорректированной неплюрипотентной клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок ОСТ4, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок SOX2, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок KLF4, и нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок cMYC, с образованием генетически скорректированной трансфецированной неплюрипотентной клетки; и
(iii) предоставление указанной генетически скорректированной трансфецированной неплюрипотентной клетке возможности делиться, с образованием посредством этого генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
21. Способ по п.20, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную генетически скорректированную трансфецированную неплюрипотентную клетку стадии (iii) ингибитора киназ.
22. Способ по п.20, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную трансфецированную генетически скорректированную неплюрипотентную клетку стадии (iii) ингибитора киназ МЕК1 и GSK3.
23. Способ по п.19, где указанную генетически скорректированную индуцированную плюрипотентную стволовую клетку получают согласно способу, включающему:
(i) трансфекцию генетически поврежденной неплюрипотентной клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок ОСТ4, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок SOX2, нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок KLF4, и нуклеиновой кислотой, которая кодирует белок cMYC, с образованием трансфецированной генетически поврежденной неплюрипотентной клетки;
(ii) предоставление указанной трансфецированной генетически поврежденной неплюрипотентной клетке возможности делиться с образованием посредством этого генетически поврежденной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки; и
(iii) трансфекцию указанной генетически поврежденной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки нуклеиновой кислотой, которая кодирует ген, корректирующий заболевание, с образованием указанной генетически скорректированной индуцированной плюрипотентной стволовой клетки.
24. Способ по п.23, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную трансфецированную генетически поврежденную неплюрипотентную клетку стадии (ii), по меньшей мере, одного ингибитора киназ.
25. Способ по п.23, где указанный способ дополнительно включает введение в указанную трансфецированную генетически поврежденную неплюрипотентную клетку стадии (ii), по меньшей мере, одного ингибитора киназ МЕК1 и GSK3.
26. Генетически поврежденная неплюрипотентная клетка, содержащая нуклеиновую кислоту, кодирующую ген, корректирующий заболевание, нуклеиновую кислоту, кодирующую белок ОСТ4, нуклеиновую кислоту, кодирующую белок SOX2, нуклеиновую кислоту, кодирующую белок KLF4, и нуклеиновую кислоту, кодирующую белок cMYC.
27. Генетически поврежденная неплюрипотентная клетка по п.26, дополнительно содержащая, по меньшей мере, один ингибитор киназ.
28. Генетически поврежденная неплюрипотентная клетка по п.26, дополнительно содержащая ингибитор Mek1 и GSK3.
29. Генетически поврежденная неплюрипотентная клетка по п.26, где указанный ген, корректирующий заболевание, кодирует белок FANCA.
30. Генетически поврежденная неплюрипотентная клетка по п.26, где указанный ген, корректирующий заболевание, кодирует белок FANC2D.