Набор для получения, хранения и транспортировки сухих образцов крови или сыворотки крови птиц для контроля эффективности вакцинации
KIT FOR OBTAINING, STORAGE AND TRANSPORTATION OF DRY BLOOD SAMPLES OR BLOOD SERUM OF BIRDS FOR CONTROL OF VACCINATION EFFICIENCY

Техническое решение относится к области ветеринарной лабораторной диагностики, в частности к устройствам для взятия, хранения и транспортировки проб крови и сыворотки крови птиц преимущественно при их промышленном выращивании с целью контроля эффективности иммунизации птиц против различных инфекционных заболеваний путем последующего проведения анализа инструментальными методами. Большое количество птицы, сосредоточенное на ограниченной территории, требует постоянного соблюдения ветеринарно-санитарного режима и проведения профилактических мероприятий для предотвращения заноса и распространения инфекционных заболеваний различной этиологии, среди которых наиболее опасными являются респираторные заболевания птицы, сопровождающиеся быстрым распространением болезни на значительном поголовье, независимо от условий его содержания. Вакцинопрофилактика является одним из наиболее эффективных мероприятий для предотвращения распространения заболеваний, приводящих к значительному экономическому ущербу. Для контроля напряженности поствакцинального иммунитета широкое распространение получили методы иммуноферментного анализа (ИФА) и реакции торможения гемагглютинации (РТГА), направленные на выявление специфических антител в сыворотке крови.
Ввиду необходимости получения большого количества проб в местах массового содержания птицы актуальной является проблема отбора и транспортировки биологического материала с сохранением функциональных свойств для последующего проведения его анализа. В настоящее время, как правило, такой отбор крови производится в специальные пробирки, транспортировка которых в ветеринарные лаборатории сопряжена с целым рядом трудностей и необходимостью строгого соблюдения регламентированных правил биобезопасности и выполнения определенных условий, например, температурных (холодовая цепь), временных и т.д.
Известен (RU, патент 2300365) контейнер для крови и/или компонентов крови, содержащий емкость, состоящую из корпуса, содержащего лицевую и тыльную стороны, и внутренней полости; и лицевая и/или тыльная сторона корпуса емкости контейнера содержит, по меньшей мере, две области, у которых различны значения пределов прочности при растяжении, лицевая сторона корпуса емкости соединена с тыльной стороной корпуса емкости посредством, по меньшей мере, одного соединительного шва и на корпусе емкости расположен, по меньшей мере, один штуцер для доступа к внутренней полости емкости. В основном разработанное устройство предназначено для хранения донорской крови. Недостатком известного контейнера следует признать отсутствие средств взятия пробы крови, а также необходимость соблюдения низкотемпературных условий в процессе транспортировки жидкой пробы взятой крови или сыворотки.
Одним из возможных путей решения проблемы взятия крови или сыворотки и ее дальнейшей транспортировки является использование способа получения и хранения проб для анализа в виде сухих пятен, полученных на специальных целлюлозных мембранах. В настоящее время технологию сухих пятен крови (от англ. – Dried Blood Spots, DBS) используют, как правило, в медицинских исследованиях, в частности при неонатальном скрининге. Преимуществами данной технологии перед обычными способами получения биообразцов является значительное уменьшение объема отбираемого материала, достаточно высокая стабильность сухих образцов при хранении при нормальных температурах и возможность их пересылки без соблюдения требований «холодовой цепи». В ветеринарной диагностике предлагаемый подход пока не получил широкого распространения и в настоящее время проводятся лишь отдельные исследования по анализу биологических жидкостей птиц или животных в виде сухих пятен.
Известно изобретение (US, патент 8945945 от 03.02.2015), описывающее устройство в виде рабочей карточки с мембранным носителем для получения биообразцов сухих пятен крови от колонии животных и карточку для его осуществления. Заявленная рабочая карточка для получения сухих пятен крови содержит поля для нанесения идентификационной метки животного, у которого произведен забор крови, внутри карточки располагается пористый мембранный бумажный материал для нанесения образцов крови. Каплю крови наносят в центр круговой области, расположенной на пористом бумажном материале карточки, затем карточку высушивают на воздухе, помещают в специальный пакет и транспортируют карточки с мембранами в аналитическую лабораторию. Далее в лаборатории специальным устройством, действующим по принципу обычного дырокола для бумаги, вырезают небольшой круговой участок бумажного носителя (обычно диаметр круга составляет величину 3-6 мм), содержащий часть высушенного пятна крови, элюируют с него образец специальным десорбирующим раствором и затем проводят его анализ, используя стандартное аналитическое оборудование или наборы реагентов. В основном, предложенная в патенте карточка предназначена для получения большого количества однотипных образцов от одной колонии животных.
Недостатком известного контейнера следует признать неэкономный расход мембранного носителя для получения образца крови, необходимость точного позиционирования карточки при нанесении образца и сложной процедуре идентификации пятна крови и наличии стадии высушивания карточки на воздухе, что иногда трудновыполнимо в полевых условиях или в условиях промышленного содержания животных.
Известно, что при промышленном выращивании птицы в процессе ее роста проводится ряд вакцинаций, после которых необходимо постоянно контролировать напряженность иммунитета или, говоря другими словами, содержание в крови специфических антител против конкретных возбудителей инфекционных заболеваний. Для контроля специфического иммунитета из птичника, в котором была проведена вакцинация поголовья, кровь и сыворотка отбирается не у всех особей, а у репрезентативной группы, причем идентификация каждой особи в конкретной группе не производится.
Наиболее близким аналогом предлагаемого технического решения можно считать устройство для получения, хранения и транспортировки сухих образцов жидкостных объектов, предназначенных для последующего проведения лабораторного анализа (Патент РФ № RU 2519030 от 10.06.2014), в котором мембранные носители для получения, транспортировки и хранения биологических жидкостей в сухом виде используются в формате узких стрипов, закрепленных в специальной карточке, изготовленной из плотной бумаги. После нанесения индивидуального образца биологической жидкости на каждый из стрипов карточку с заполненными идентификационными сведениями оставляют сушиться на воздухе до полного высыхания образца (примерно на 2 часа), затем вкладывают в конверт и отсылают в лабораторию для проведения анализа. Преимуществами такого подхода по сравнению с обычными целлюлозными карточками для пробоотбора являются равномерное распределение образца на носителе, более эффективный смыв вещества в раствор с носителя и, как следствие, возможность проведения количественного анализа. Однако существенным недостатком указанного устройства для целей контроля вакцинации в птицеводческих хозяйствах является сложность получения сухих образцов в реальных условиях ввиду отсутствия условий для высушивания на воздухе большого количества карточек с индивидуальными пробами.
Целью настоящего изобретения является устройство, обеспечивающее проведение процедуры получения, хранения и транспортировки сухих образцов крови и сыворотки крови без выполнения отдельной стадии предварительного высушивания биологического материала и возможности забора большого количества биопроб, без конкретной идентификации отдельных особей для последующего проведения лабораторного анализа.
Для достижения указанной цели предложено использовать набор разработанного состава.
Разработанный набор для получения, хранения и транспортировки сухих образцов крови птицы при ее промышленном выращивании для последующего проведения лабораторного анализа с целью контроля вакцинации включает, по меньшей мере, часть элементов, выбранных из группы, содержащей: упаковочную коробку или почтовый конверт с нанесенной на ее внешней стороне необходимой для изделий ветеринарного назначения идентификационной информацией, по меньшей мере, одно устройство для прокалывания кожных покровов и получения капель крови, по меньшей мере, одну упаковку антисептического средства для подготовки поверхности кожи к проколу для отбора крови и обработки кожи после прокола, по меньшей мере, одну упаковку, содержащую фиксированное количество мембранных носителей в виде узких стрипов, предназначенных для нанесения крови или сыворотки крови и получения высушенных образцов, и осушитель, по меньшей мере, один бланк заказа для информации о получаемых образцах для проведения лабораторных анализов необходимого числа образцов, по меньшей мере, один полимерный контейнер, обеспечивающий герметичную внешнюю оболочку стрипов с полученными жидкими образцами, содержащими осушитель в количестве достаточном для поглощения влаги соответствующей общему объему взятой крови или сыворотки крови, а также инструкцию к набору.
Все вышеперечисленные элементы желательно использовать при проведении процедуры взятия, хранения и транспортировки сухих образцов крови птиц для проведения лабораторного анализа с целью контроля проводимой вакцинации. Но в некоторых случаях использования, в частности, когда взятие пробы производят вблизи места проведения анализа, набор может не включать в себя почтовый конверт, обеспечивающий внешнюю оболочку полимерного контейнера с образцами крови. Возможны и другие варианты взятия пробы, ее хранение и транспортировку, когда набор может включать не все указанные элементы.
В основе набора лежит технология получения сухих пятен крови или сыворотки крови на пористом носителе. Каждый из образцов из репрезентативной выборки птиц наносят на отдельный мембранный носитель в виде узкой полоски из пористого мембранного материала, входящей в состав набора, погружая полоску одним концом в исследуемый образец, выдерживают в течение нескольких секунд, пока жидкость не заполнит под действием капиллярных сил большую часть полоски по ее длине и затем полоски, относящиеся к данной репрезентативной выборке, помещают в отдельный полимерный контейнер с осушителем и в таком виде транспортируют в лабораторию, где в дальнейшем проводят десорбцию анализируемого вещества и анализ путем определения в образцах титра специфических антител, вырабатываемых в процессе вакцинации против возбудителя определенного заболевания одним из известных стандартизованных методов.
2
Каждый используемый элемент набора использован по своему прямому назначению. Сорбирующие жидкий биологический образец полоски (стрипы) выполнены из высокопористого адсорбционного мембранного материала на основе стекловолокна, обеспечивающие механическую прочность и жесткость полосок при намокании. Высокопористый мембранный материал обладает адсорбционной емкостью не менее 40 мг воды на см и способен к обратимой десорбции сухих компонентов при погружении высушенного жидкостного объекта в водный растворитель. При этом все стрипы имеют одинаковые размеры, шириной от 0,2 см до 2 см, а длину от 3 до 10 см, причем на свободном конце внешней стороны полоски на ней нанесены линии на расстоянии от 0,2 см до 2 см, ограничивающие одинаковую площадь в виде прямоугольных участков.
Предпочтительно закрываемый полимерный контейнер, содержащий осушитель, выполнен в виде герметичной пластиковой емкости с держателем стрипов, либо пластикового пакета с осушителем с застежкой типа «зип-лок», предотвращающих попадание внутрь пакета влаги при ее транспортировке в лабораторию, и обеспечивающих дополнительную сохранность сухих образцов.
В предпочтительном варианте комплектации при взятии пробы крови или сыворотки крови у выращиваемой птицы набор используют следующим образом. На полимерном контейнере для приема образцов, содержащего внутри осушитель, заполняют необходимую идентификационную информацию о времени, месте и причине забора биоматериала. Надевают на руки входящие в состав набора пластиковые или резиновые перчатки. Согласно руководства по забору биоматериала у птицы для проведения контрольных анализов после вакцинации производят отбор биоматериала от требуемого количества особей птицы, обеспечивающих репрезентативную выборку. Для этого из упаковки со стрипами берут полоску, наносят на неё требуемое количество крови или сыворотки крови и без высушивания помещают в контейнер с осушителем, контейнер плотно закрывают. Повторяют операции с необходимым числом особей птицы.
По окончании процедур забора требуемого количества биоматериала закрытый контейнер с осушителем и полученными образцами, а также заполненным бланком заказа помещают в почтовый пакет с адресом лаборатории или упаковочную коробку с нанесенной на внешней стороне необходимой для изделий ветеринарного назначения идентификационной информацией и адресом лаборатории. По почте или с курьером отсылают полученные образцы с сопроводительными документами в лабораторию для последующего выполнения необходимого анализа. Таким образом, высушивание биоматериала происходит в процессе пересылки его в лабораторию, а также отсутствует отдельная стадия высушивания на воздухе в условиях птицеводческого хозяйства.
Технический результат, получаемый при реализации разработанного устройства, состоит в создании набора, обеспечивающего проведение процедуры получения, хранения и транспортировки сухих образцов крови и сыворотки крови без предварительного высушивания биологического материала и возможности забора большого количества биопроб без конкретной идентификации индивидуальных особей для последующего проведения лабораторного анализа, что приводит к упрощению процедуры пробоподготовки, снижению конечной стоимости анализа, повышению производительности труда и достоверности анализа.