СПЕЦИФИЧНЫЕ К MUC16 ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая химерный антигенный рецептор (CAR), причем указанный CAR содержит
(a) домен, связывающий антиген MUC16;
(b) домен стебля;
(c) трансмембранный домен;
(d) костимулирующий сигнальный домен, содержащий 4-1BB или CD28, или и то, и другое; и
(e) сигнальный домен CD3-дзета.
2. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 1, отличающаяся тем, что указанный домен, связывающий антиген MUC16, содержит по меньшей мере один из:
(a) полипептида, идентичного по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% по меньшей мере одной из последовательностей аминокислот, представленных в SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 12 и 14;
(b) полипептида, идентичного по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% по меньшей мере одной из последовательностей аминокислот, представленных в SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 11, 13 и 15; и
(c) полипептида, идентичного по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% по меньшей мере одной из последовательностей аминокислот, представленных в SEQ ID NO: 27 - 57.
3. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 1, отличающаяся тем, что указанный домен стебля представляет собой полипептид, идентичный по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% последовательности аминокислот SEQ ID NO: 16.
4. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 1, отличающаяся тем, что указанный костимулирующий сигнальный домен 4-1BB содержит полипептид, идентичный по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% последовательности аминокислот SEQ ID NO: 22.
5. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 1, отличающаяся тем, что указанный костимулирующий сигнальный домен CD28 содержит полипептид, идентичный по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% последовательности аминокислот SEQ ID NO: 23.
6. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 1, отличающаяся тем, что указанный сигнальный домен CD3-дзета содержит полипептид, идентичный по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% последовательности аминокислот SEQ ID NO: 26.
7. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 1, дополнительно содержащая укороченный рецептор эпидермального фактора роста.
8. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 7, отличающаяся тем, что указанный укороченный рецептор эпидермального фактора роста представляет собой HER1t и содержит полипептид, идентичный по меньшей мере на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% последовательности аминокислот SEQ ID NO: 65 или SEQ ID NO: 66.
9. Вектор, содержащий остов и последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую:
(1) укороченный рецептор эпидермального фактора роста, содержащий по меньшей мере один из HER1t, HER1t-1 или их функционального варианта;
(2) цитокин; и
(3) химерный антигенный рецептор (CAR), причем указанный CAR содержит
(a) домен, связывающий антиген MUC16;
(b) домен стебля;
(c) трансмембранный домен;
(d) костимулирующий сигнальный домен, содержащий 4-1BB или CD28, или и то, и другое; и
(e) сигнальный домен CD3-дзета.
10. Вектор по п. 9, отличающийся тем, что указанный цитокин представляет собой IL-15 или IL-12.
11. Вектор по п. 9, отличающийся тем, что указанный вектор представляет собой лентивирусный вектор, ретровирусный вектор или невирусный вектор.
12. Вектор по п. 10, отличающийся тем, что указанный IL-15 представляет собой связанный с мембраной IL-15.
13. Вектор по п. 12, отличающийся тем, что связанный с мембраной IL-15 содержит последовательность нуклеотидов, кодирующую SEQ ID NO: 161.
14. Вектор по п. 9, дополнительно содержащий последовательность нуклеотидов, кодирующую саморасщепляющийся пептид вируса Thosea asigna (T2A).
15. Эффекторная иммунная клетка, содержащая вектор по п. 9.
16. Эффекторная иммунная клетка по п. 15, отличающаяся тем, что указанная клетка представляет собой T-клетку, естественную клетку-киллера (NK), цитотоксический T-лимфоцит (CTL) или регуляторную T-клетку.
17. Способ стимуляции пролиферации и/или выживания сконструированных T-клеток, включающий:
(a) обеспечение образца клеток от субъекта, указанный образец содержит T-клетки или предшественники T-клеток;
(b) трансфекцию указанных клеток одним или более векторами, кодирующими выделенную нуклеиновую кислоту согласно п. 1, и вектором, кодирующим транспозазу, с получением популяции сконструированных T-клеток, экспрессирующих MUC16-CAR;
ex vivo
(c) и необязательно культивирование указанной популяции MUC16-CAR-T-клеток  в течение 2 дней или менее.
18. Способ лечения рака у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение указанному субъекту одной или более доз эффективного количества сконструированных T-клеток, причем указанные сконструированные T-клетки содержат MUC16-CAR и связанный с мембраной IL-15.
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что первую дозу эффективного количества сконструированных T-клеток вводят интраперитонеально или внутривенно.
2
20. Способ по п. 18, отличающийся тем, что эффективное количество сконструированных T-клеток составляет по меньшей мере 10 клеток/кг.