Особенности идентификации Burkholderia mallei и Burkholderia pseudomallei с помощью микробиологического анализатора Vitek 2 Compact 30

Пробл. особо опасных инф. 2016; 3:57-61. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-3-57-61

УДК 616.98:579.841.11

Е.В.молчанова, Я.А.лопастейская, А.В.незнамова, ЮА.Еузютина, н.П.Агеева, и.Б.Захарова,

Д.В.Викторов, а.В.Топорков

особенности идентификации BURKHOLDERIA MALLEI

и burkholderia pseudomallei с помощью микробиологического анализатора

VITEK 2 COMPACT 30

ФКУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт», Волгоград,

Российская Федерация

Для идентификации B. pseudomallei и B. mallei в лабораторной практике широко применяется автоматизированная система Vitek 2, основанная на сравнении биохимического профиля исследуемой бактериальной культуры с имеющейся базой данных. цель работы. Проведение расширенной фено-типической характеристики штаммов возбудителей сапа и мелиоидоза, поддерживаемых в коллекции ФКУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» и анализа вариаций их биохимических профилей с использованием системы Vitek 2. материалы и методы. С помощью Vitek 2 (bioMerieux, Франция) проанализированы биохимические свойства 52 коллекционных штаммов B. pseudomallei и B. mallei, выращенных на L-агаре (Difco, США) и триптиказо-соевом агаре -ТСА (HiMedia, Индия). Выводы и результаты. Большинство исследованных штаммов (31 из 40 B. pseudomallei и 8 из 12 B. mallei) идентифицированы с приемлемой для определения видовой принадлежности вероятностью (90-99 %). Процент правильной идентификации B. pseudomallei и B. mallei был выше при культивировании на L-агаре, чем на ТСА. В связи с вариабельностью биохимических признаков, отдельные штаммы показали нетипичные для своего вида результаты по определенным тестам (для штаммов B. pseudomallei - отсутствие активности P-N-ацетилглюкозаминидазы, P-N-ацетилгалактозаминидазы и способность к утилизации D-целлобиозы; для штаммов B. mallei - отсутствие активности L-пролинариламидазы и тирозинариламидазы, наличие активности глицинарилами-дазы, способность к утилизации сахарозы и D-трегалозы), что привело к их неправильной идентификации. Вероятность ошибочной диагностики микроорганизмов рода Burkholderia диктует необходимость дополнения идентификационной базы бактериологического анализатора Vitek 2 данными по биохимическим характеристикам штаммов, имеющих особенности в профиле.

Ключевые слова: идентификация, Burkholderia, B. pseudomallei, B. mallei, B. cepacia, Vitek 2.

Корреспондирующий автор: Молчанова Елена Владимировна, e-mail: vari2@sprint-v.com.ru.

E.V.Molchanova, Ya.A.Lopasteiskaya, A.V.Neznamova, Yu.A.Kuzyutina, N.P.Ageeva, I.B.Zakharova, D.V.Viktorov, A.V.Toporkov

Peculiarities of Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei Identification Using Microbiological Analyzer Vitek 2 Compact 30

Volgograd Research Anti-Plague Institute, Volgograd, Russian Federation

Automated Vitek 2 system, based on comparison of a biochemical profile of the studied bacterial cultures with the existing database, is widely used for B. pseudomallei and B. mallei identification in the laboratory practice. Objective of the study is to conduct extended phenotypic characterization of the strains of glanders and melioidosis causative agents, stored in the biobank of the Volgograd Research Anti-Plague Institute and analyze variations in their biochemical profiles, using Vitek 2 system. Materials and methods. Using Vitek 2 device, (bioMerieux, France) analyzed have been biochemical properties of 52 collection strains of B. pseudomallei and B. mallei grown on L-agar (Difco, USA) and trypticase-soy agar - TSA (HiMedia, India). Results and discussion. Most of the investigated strains (31 out of 40 B. pseudomallei and 8 of 12 B. mallei) have been identified with an acceptable probability for determining certain specie appurtenance, amounting to 90-99 %. The percentage of correct identification of B. pseudomallei and B. mallei is higher when strains are cultured on L-agar, than when on TSA. Due to the variability of the biochemical features, some strains have showed non-typical for its species results in certain tests (for B. pseudomallei strains - the absence of enzyme activity of P-N-acetyl-glucosaminidase, P-N-acetyl-galactosaminidase and ability to utilize D-cellobiose; for B. mallei strains - the absence of enzyme activity of L-proline-aryl-amidase and tyrosin-aryl-amidase, existence of glycin-aryl-amidase activity and ability to utilize sucrose, D-trehalose), which has led to their mal-identification. The probability of error diagnostics of microorganisms belonging to Burkholderia species necessitates up-dating of the database built into Vitek 2 analyzer as regards biochemical characteristics of the strains which have peculiar profiles.

Key words: identification, Burkholderia, B. pseudomallei, B. mallei, B. cepacia, Vitek 2 analyzer.

Conflict of interest: The authors declare no conflict of interest.

Corresponding author: Elena V. Molchanova, e-mail: vari2@sprint-v.com.ru.

Citation: Molchanova E.V., Lopasteiskaya Ya.A., Neznamova A.V., Kuzyutina Yu.A., Ageeva N.P., Zakharova I.B., Viktorov D.V., Toporkov A.V. Peculiarities of Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei Identification Using Microbiological Analyzer Vitek 2 Compact 30. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2016; 3:57-61. (In Russ.). DOI: 10.21055/0370-1069-2016-3-57-61

B. mallei и B. pseudomallei относятся ко II группе патогенности (опасности) и являются потенциальными агентами биотерроризма группы В [5]. Сап (возбудитель B. mallei) - зоонозная антропоургиче-ская инфекция, регистрируемая в Монголии, Турции, Иране, Ираке, странах Аравийского полуострова, Китае, Индии, Индонезии, Филиппинах [12]. Случаи заражения человека связаны с профессиональной деятельностью: ветеринары, мясники, сотрудники лабораторий, дрессировщики лошадей. B. pseudomallei (возбудитель мелиоидоза) входит в состав микробио-ты почвы и воды стоячих водоемов. Эндемичными по мелиоидозу странами в настоящее время считаются Индия, Шри-Ланка, Филиппины, Индонезия, Таиланд, Сингапур, Вьетнам, Малайзия, Бирма, Бразилия, Пуэрто-Рико и Австралия. В США, Карибской области, Тихоокеанском регионе, Африке, Иране зарегистрированы спорадические случаи этой болезни у людей, прибывших с эндемичных территорий [2].

Мелиоидоз и сап у людей нередко протекают в тяжелой форме и трудно поддаются лечению. Своеобразие мелиоидоза определяется оппортунистическим характером инфекции, которая может длительное время не проявлять себя и быстро развиться до пневмонии и септицемии (летальность более 90 %) при снижении иммунитета, травмах, диабете, хронической патологии почек, ретровирусной инфекции и при гормональной терапии [3]. Однако даже при активном лечении рекомендованными хи-миотерапевтическими препаратами не исключена возможность рецидивов, которые могут возникать в течение ряда последующих лет [11].

поэтому быстрая и точная идентификация возбудителей этих болезней необходима для определения средств терапии и выбора надлежащего курса специфического лечения.

Последние 10-15 лет в лабораторной практике идентификацию бактерий по биохимической активности (ферментации, ассимиляции, оксидации, деградации и гидролиза) проводят с помощью автоматических и полуавтоматических диагностических систем, одной из которых является Vitek 2 (bioMerieux). Авторы ряда работ указывают, что клинические изо-ляты возбудителя мелиоидоза бактериологический анализатор Vitek 2 в некоторых случаях идентифицирует как виды комплекса Burkholderia cepacia, что связано со спецификой биохимического профиля отдельных штаммов возбудителя мелиоидоза [4, 7, 10, 14]. Ошибочная диагностика приводит к неправильному лечению, что обусловливает высокую вероятность летального исхода.

На базе ФКУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» функционирует «референс-центр по мониторингу за возбудителями сапа и мелиоидоза» - координирующий, консультативно-методический, учебный, диагностический и экспертный орган по вопросам индикации и экспресс-диагностики B. pseudomallei и B. mallei на территории российской Федерации, одной из задач

которого является совершенствование схем лабораторной диагностики данных инфекций и апробация современных диагностических тестов, используемых в системах полу- и автоматической идентификации микроорганизмов.

Целью работы было проведение расширенной фенотипической характеристики штаммов возбудителей сапа и мелиоидоза, поддерживаемых в коллекции ФКУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт», и анализ вариаций их биохимических профилей с использованием системы Vitek 2.

Материалы и методы

В работе использованы 52 коллекционных штамма B. pseudomallei и B. mallei (табл. 1, 2). Штаммы микроорганизмов выращивали на L-агаре (Difco, США) и триптиказо-соевом агаре - ТСА (HiMedia, Индия) при температуре 37 °С.

Из 18-часовых культур готовили суспензию 0,5-0,63 плотности по МакФарланду согласно инструкции производителя bioMerieux для заполнения NG карт, предназначенных для автоматической идентификации клинически значимых ферментирующих и неферментирующих грамотрицательных палочек. Карты содержали 47 биохимических тестов с лио-филизированными биохимическими субстратами и необходимыми реагентами, позволяющими оценить утилизацию углеводов, ферментативную активность и устойчивость к ингибиторам. Лабораторный отчет содержал четкий окончательный ответ (единственный выбор) при степени соответствия биохимической активности идентифицируемой культуры профилю штамма-эталона на 85-99 %. Если биохимический профиль исследуемого образца не соответствовал ни одному из имеющихся в базе данных, лабораторный отчет системы содержал сообщение о невозможности идентификации. Время идентификации микроорганизмов не превышало 4-6 ч.

Результаты и обсуждение

Большинство из исследованных штаммов возбудителя мелиоидоза (31 из 40) имели типичный биохимический профиль и были идентифицированы анализатором как B. pseudomallei с вероятностью 90-99 %. Оставшиеся 9 штаммов (B. pseudomallei 99, 100, 102, 103, 107, 130, 135, 138, 60839) отличались нехарактерными для данного вида микроорганизма биохимическими свойствами, такими как отсутствие активности P-N-ацетилглюкозаминидазы (BNAG) и P-N-ацетилгалактозаминидазы (NAGA) и способность к утилизации D-целлобиозы. Перечисленные биохимические особенности отразились в неправильной идентификации ряда штаммов, которые были отнесены системой Vitek 2 либо к Burkholderia cepacia group (4 штамма), либо к роду Burkholderia (5 штаммов) с возможностью определения видовой

Таблица 1

Результаты идентификация коллекционных штаммов B. pseudomallei

Международный номер или авторское обозначение штамма Место выделения Источник выделения Система Vitek 2

Вероятность идентификации, %, вид Тесты с нетипичным результатом

dCEL NAGA BNAG

1 Вьетнам Больной человек 98 B. pseudomallei + + +

2 Вьетнам « 97 B. pseudomallei + - +

Tchad 97 Нет данных Нет данных 99 B. pseudomallei - + +

Iran Terre 98 « « 93 B. pseudomallei + - -

Niamay 99 « « <85 B. cepacia / B. pseudomallei + - +

Dalat 100 « « <85 B .cepacia / B. pseudomallei + + -

Shigan 102 « « <85 B. cepacia / B. pseudomallei + - -

Cheval du. jardin 103 « « <85 B. cepacia / B. pseudomallei + - -

PJ 54 107 « « <85 B. cepacia - - +

Ward 108, Roos 109, Pearce 110, Mahen 111, Coopek 112, Skanmandri 113, Snider 114 Австралия Больной человек 90-99 B. pseudomallei -/+ -/+ +

Soil isolate 12 115 « Почва 96 B. pseudomallei - - +

Soilisolate 13 116 « « 98 B. pseudomallei + + +

Goat isolate17 117 « Коза 98 B. pseudomallei + + +

128 « Нет данных 99 B. pseudomallei - + +

130 « « <85 B. cepacia + - +

131, 132, 133, 134, 136, 137 Таиланд Больной человек 97-99 B. pseudomallei -/+ + +

135 « « <85 B. cepacia / B. pseudomallei + - +

138 « « <85 B. cepacia + - -

139 « « 96 B. pseudomallei + + -

C-141(CIP6068),56770, 56812, 57582, 59437, 60631, 60806, 611083 Вьетнам, Сайгон Больной человек 95-99 B. pseudomallei -/+ -/+ +

56830 « « 98 B. pseudomallei - - -

60839 « « <85 B. cepacia + - +

Примечания: dCEL - D-целлобиоза, NAGA - p-N-ацетилгалактозоминидаза, BNAG - p-N-ацетилглюкозоминидаза; серый цвет ячеек - нетипичный результат теста; «—» - отрицательная реакция, «+» - положительная реакция.

принадлежности микроорганизма с помощью дополнительных дифференциальных тестов (табл. 1).

Из 12 штаммов возбудителя сапа 8 обладали стандартными биохимическими свойствами и идентифицированы как вид B. mallei с вероятностью 90-99 % (табл. 2). Оставшиеся четыре штамма из-за наличия в биохимическом профиле нетипичных результатов пяти тестов (способность к утилизации сахарозы и D-трегалозы, отсутствие активности L-пролинариламидазы и тирозинариламидазы, нали-

чие глицинариламидазной активности) система Vitek 2 отнесла одновременно к двум микроорганизмам -Sphingomonas paucimobilis и B. mallei - с предложением использования дополнительных тестов для их дифференциации.

В нашем исследовании использование автоматического анализатора Vitek 2 позволило правильно идентифицировать две трети штаммов возбудителей сапа и мелиоидоза, хранящихся в коллекции ФКУЗ «Волгоградский научно-исследовательский

Таблица 2

Результаты идентификации коллекционных штаммов B. mallei

Международный номер или авторское обозначение штамма Место выделения Система Vitek 2

Вероятность идентификации, %, вид Тесты с нетипичным результатом

SAC dTRE ProA TyrA GlyA

Ц-5 Монголия <85 S. paucimobilis /B. mallei + + + + +

«Иванович» Югославия 99 B. mallei - - + + -

«Будапешт» Венгрия 99 B. mallei - - - - -

Р-1 Югославия 99 B. mallei - - - + -

11 Польша 95 B. mallei - - - + -

Z-12 Югославия <85 S. paucimobilis / B. mallei + - + + -

8 Нет данных 96 B. mallei - - - + -

В-120 Улан-Удэ <85 S. paucimobilis + - - - -

Bogor-37 Индонезия 90 B. mallei + + + + +

Muksuwar-11 Индия 91 B. mallei + + + + +

5584 Нет данных 99 B. mallei - - - + -

«Zagreb» Югославия <85 S. paucimobilis / B. mallei + + - - -

Примечания: SAC - сахароза, dTRE - D-трегалоза, ProA - L-пролинариламидаза, TyrA - тирозинариламидаза, GlyA - глицинариламидаза; серый цвет ячеек - нетипичный результат; «—» - отрицательная реакция, «+» - положительная реакция.

противочумный институт». Однако четыре штамма B. pseudomallei и один B. mallei определены ложно как микроорганизмы комплекса B. cepacia и S. pauci-mobilis соответственно. Именно эти штаммы характеризовались нетипичными результатами тестов BNAG(-), NAGA(-) и dCEL(+) - для штаммов возбудителя мелиоидоза и SAC(+), dTRE(+), ProA(-), TyrA(-), GlyA(+) - для B. mallei. Результаты нашего исследования согласуются с литературными данными о случаях ошибочной идентификации изолятов B. pseudomallei и B. mallei при использовании автоматической системы Vitek 2 в различных клинических лабораториях [4, 7, 14]. Так, Y.Podin et al. отмечали аналогичную закономерность: отрицательные результаты тестов ß-N-ацетилглюкозаминидазы (BNAG) и ß-N-ацетилгалактозаминидазы (NAGA) у изолятов B. pseudomallei, как правило, приводили к их ложной идентификации как микроорганизмов комплекса B. cepacia [10]. Также описаны случаи ложной лабораторной диагностики с помощью Vitek 2 возбудителя сапа как видов Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas putida [6].

ß-N-ацетилглюкозаминидаза и ß-N-ацетилгалак-тозаминидаза - ферменты, субстратами для которых являются структурные компоненты экзополисахарида бактерий: поли^-(1-6)-К-ацетилглюкозамин (PNAG) и N-ацетилгалактозамин [13]. При этом PNAG, как известно, является важным элементом в формировании биопленок у многих видов Burkholderia и играет

определенную роль в образовании множественной лекарственной резистентности микроорганизмов [9]. N-ацетилгалактозамин также входит в состав экзополисахарида B. pseudomallei в качестве одного из основных компонентов [9].

Ранее нами показано наличие фитопатогенных свойств различной степени выраженности у коллекционных штаммов B. pseudomallei: инфицирование листовых пластинок Pereskia aculeata приводило к их быстрой мацерации и изъязвлению, что косвенно указывало на наличие целлобиазной активности [1]. Анализ активности фермента целлобиазы (ß-глюкозидазы), катализирующей гидролиз глико-зидной связи между двумя остатками глюкозы в молекуле целлобиозы показал, что этот биохимический показатель у штаммов B. pseudomallei является вариабельным. Интересно, что данная активность присуща, в первую очередь, фитопатогенным бактериям, так как целлобиаза в синергизме с целлюлазой выполняют существенную роль в ферментативном разрушении оболочек растительных клеток. Возможно, что нестабильность данного признака также может влиять на достоверность идентификации возбудителя мелиоидоза.

Производители системы Vitek 2 рекомендуют в качестве среды выращивания для идентификации грам-отрицательных микроорганизмов триптиказо-соевый агар (ТСА). Однако, по нашим данным, процент правильной идентификации штам-

мов B. pseudomallei и B. mallei был выше при выращивании на L-агаре, чем на ТСА. Зависимость результатов идентификации клинических изолятов B. pseudomallei с помощью Vitek 2 от среды культивирования ранее показана P.Lowe et al.: наиболее высокий процент правильной идентификации наблюдался при использовании кровяного агара (Colambia horse blood agar), а наименьший - агара Мак-Конки. Авторы отмечают, что при диагностике микроорганизмов, выросших на тсА, процент их корректного видового определения был средним [8].

за последнее десятилетие информационная база системы Vitek 2 расширена внесением в нее биохимических профилей штаммов B. pseudomallei, отличных от классического [6]. Это существенно повысило точность идентификации клинических изолятов с помощью данного прибора, однако вероятность ошибок не исключена, о чем говорят литературные данные и полученные нами результаты. Так, часть исследованных штаммов B. pseudomallei и B. mallei коллекции ФкУз «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» обладала довольно вариабельным спектром биохимических признаков и характеризовалась нетипичными результатами тестов BNAG(-), NAGA(-) и dCEL(+) - для штаммов возбудителя мелиоидоза и SAC(+), dTRE(+), ProA(-), TyrA(-), GlyA(+) - для штаммов B. mallei.

таким образом, при автоматизированной идентификации клинического грамотрицательно-го неферментирующего изолята как B. cepacia или S. paucimobilis необходимо принимать во внимание возможность ошибки определения видовой принадлежности. Поэтому, для идентификации возбудителя следует учитывать данные эпидемиологического анамнеза и верифицировать результат молекулярно-генетическими и иммунологическими методами.

Конфликт интересов. Авторы подтверждают отсутствие конфликта финансовых/нефинансовых интересов, связанных с написанием статьи.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Молчанова Е.В., Агеева Н.П. Использование фитопато-генного эффекта для изучения вирулентности Burkholderia. Бюл. эксп. биол. мед. 2014; 158(10):522-5.

2. Currie B.J., Dance D.A., Cheng A.C. The global distribution of Burkholderia pseudomallei and melioidosis: an update. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 2008; 102(1):S1-4. DOI: 10.1016/S0035-9203(08)70002-6.

3. Dance D.A.B. Melioidosis as an emerging global problem. Acta Tropica. 2000; 74:115-9. DOI: I0.1016/SÖ001-706X(99)00059-5.

4. Deepak R.N., Crawley B., Phang E. Burkholderia pseudomallei identification: a comparison between the API 20NE and Vitek 2 GN systems. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 2008; 102(1):S42-4. DOI: 10.1016/S0035-9203(08)70012-9.

5. Gilad J., Harary I., Dushnitsky T., Schwartz D., Amsalem Y. Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei as bioterrorism agents: national aspects of emergency preparedness. Isr. Med. Assoc. J. 2007; 9:499-503.

6. Gilad J., Schwartz D., Amsalem Y. Clinical features and laboratory diagnosis of infection with the potential bioterrorism agents Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei. Int. J. Biomed. Sci. 2007; 3(3):144-52.

7. Kiratisin P., Santanirand P., Chantratita N., Kaewdaeng S. Accuracy of commercial systems for identification of Burkholderia pseudomallei versus Burkholderia cepacia. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2007; 59:277-81. DOI: 10.1016/j.diagmicrobio.2007.06.013.

8. Lowe P., Haswell H., Lewis K. Use of various common isolation media to evaluate the new Vitek 2 colorimetric GN card for identification of Burkholderia pseudomallei. J. Clin. Microbiol. 2006; 44:854-6. DOI: 10.1128/JCM.44.3.854-856.2006.

9. Masoud H., Ho M., Schollaardt T., Perry M.B. Characterization of the capsular polysaccharide of Burkholderia (Pseudomonas) pseudomallei 304b. J. Bacteriol. 1997; 179(18):5663-9.

10. Podin Y., Kaestli M., McMahon N., Hennessy J., Ngian H.U., Wong J.S., Mohana A., Wong S.C., William T., Mayo M., Baird R.W., Currie B.J. Reliability of automated biochemical identification of Burkholderia pseudomallei is regionally dependent. J. Clin. Microbiol. 2013; 51(9):3076. DOI: 10.1128/JCM.01290-13.

11. PuthucheaTy S.D., Vadivelu J. Human melioidosis. Singapore: Singapore University Press; 2002. 58 р.

12. Van Zandt K.E., Greer M.T., Gelhaus H.C. Glanders: an overview of infection in humans. Orphanet. J. Rare Dis. 2013; 8:131. DOI: 10.1186/1750-1172-8-131.

13. Yakandawala N., Gawande P.V., LoVetri K., Cardona S.T., Romeo T., Nitz M., Madhyastha S. Characterization of the poly-1,6-Nacetylglucosamine polysaccharide component of Burkholderia biofilms. Appl. Environ. Microbiol. 2011; 77(23):8303-9. DOI: 10.1128/ AEM.05814-11.

14. Zong Z., Wang X., Deng Y., Zhou T. Misidentification of Burkholderia pseudomallei as Burkholderia cepacia by the Vitek 2 system. J. Med. Microbiol. 2012; 61:1483-4. DOI: 10.1099/ jmm.0.041525-0.

References

1. Molchanova E.V., Ageeva N.P. [Utilization of phyto-pathogenic effect for studies of Burkholderia virulence]. Byul. Eksper. Biol. Med. 2014; 158(10):522-5.

2. Currie B.J., Dance D.A., Cheng A.C. The global distribution of

Burkholderia pseudomallei and melioidosis: an update. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 2008; 102(1):S1-4. DOI: 10.1016/S0035-9203(08)70002-6.

3. Dance D.A.B. Melioidosis as an emerging global problem. Acta Tropica. 2000; 74:115-9. DOI: 10.1016/S0001-706X(99)00059-5.

4. Deepak R.N., Crawley B., Phang E. Burkholderia pseudomallei identification: a comparison between the API 20NE and Vitek 2 GN systems. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 2008; 102(1):S42-4. DOI: 10.1016/S0035-9203(08)70012-9.

5. Gilad J., Harary I., Dushnitsky T., Schwartz D., Amsalem Y. Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei as bioterrorism agents: national aspects of emergency preparedness. Isr. Med. Assoc. J. 2007; 9:499-503.

6. Gilad J., Schwartz D., Amsalem Y. Clinical features and laboratory diagnosis of infection with the potential bioterrorism agents Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei. Int. J. Biomed. Sci. 2007; 3(3):144-52.

7. Kiratisin P., Santanirand P., Chantratita N., Kaewdaeng S. Accuracy of commercial systems for identification of Burkholderia pseudomallei versus Burkholderia cepacia. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2007; 59:277-81. DOI: 10.1016/j.diagmicrobio.2007.06.013.

8. Lowe P., Haswell H., Lewis K. Use of various common isolation media to evaluate the new Vitek 2 colorimetric GN card for identification of Burkholderia pseudomallei. J. Clin. Microbiol. 2006; 44:854-6. DOI: 10.1128/JCM.44.3.854-856.2006.

9. Masoud H., Ho M., Schollaardt T., Perry M.B. Characterization of the capsular polysaccharide of Burkholderia (Pseudomonas) pseudomallei 304b. J. Bacteriol. 1997; 179(18):5663-9.

10. Podin Y., Kaestli M., McMahon N., Hennessy J., Ngian H.U., Wong J.S., Mohana A., Wong S.C., William T., Mayo M., Baird R.W., Currie B.J. Reliability of automated biochemical identification of Burkholderia pseudo-mallei is regionally dependent. J. Clin. Microbiol. 2013; 51(9):3076. DOI: 10.1128/JCM.01290-13.

11. Puthucheary S.D., Vadivelu J. Human melioidosis. Singapore: Singapore University Press; 2002. 58 р.

12. Van Zandt K.E., Greer M.T., Gelhaus H.C. Glanders: an overview of infection in humans. Orphanet. J. Rare Dis. 2013; 8:131. DOI: 10.1186/17501172-8-131.

13. Yakandawala N., Gawande P.V., LoVetri K., Cardona S.T., Romeo T., Nitz M., Madhyastha S. Characterization of the poly-1,6-Nacetylglu-cosamine polysaccharide component of Burkholderia biofilms. Appl. Environ. Microbiol. 2011; 77(23):8303-9. DOI: 10.1128/AEM.05814-11.

14. Zong Z., Wang X., Deng Y., Zhou T. Misidentification of Burkholderia pseudomallei as Burkholderia cepacia by the Vitek 2 system. J. Med. Microbiol. 2012; 61:1483-4. DOI: 10.1099/jmm.0.041525-0.

Authors:

Molchanova E.V., Lopasteiskaya YaA, Neznamova A.V., Kuzyutina Yu.A., AgeevaN.P., ZakharovaI.B., ViktorovD.V., ToporkovA.V. Volgograd Research Anti-Plague Institute. 7, Golubinskaya St., Volgograd, 400131, Russian Federation. E-mail: vari2@sprint-v.com.ru

Об авторах:

Молчанова Е.В., Лопастейская Я.А., Незнамова А.В., Кузютина Ю.А., Агеева Н.П., Захарова И.Б., Викторов Д.В., Топорков А.В. Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт. Российская Федерация, 400131, Волгоград, ул. Голубинская, 7. E-mail: vari2@sprint-v.com.ru

Поступила 04.07.16.