АНТИТЕЛА ПРОТИВ EphB4 И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Выделенное антитело против EphB4, включающее
(а) по крайней мере, одну, две, три, четыре или пять последовательностей гипервариабельных участков (HVR), выбираемых из группы, состоящей из
(i) HVR-L1, включающего последовательность А1-А11, где А1-А11 представляет собой RASQDVSTAVA (SEQ ID NO:9),
(ii) HVR-L2, включающего последовательность B1-B7, где B1-B7 представляет собой SASFLYS (SEQ ID NO:11),
(iii) HVR-L3, включающего последовательность C1-C9, где C1-C9 представляет собой QESTTTPPT (SEQ ID NO:15),
(iv) HVR-H1, включающего последовательность D1-D10, где D1-D10 представляет собой GFSISNYYLH (SEQ ID NO:2),
(v) HVR-H2, включающего последовательность E1-E18, где E1-E18 представляет собой GGIYLYGSSSEYADSVKG (SEQ ID NO:4), и
(vi) HVR-H3, включающего последовательность F1-F17, где F1-F17 представляет собой ARGSGLRLGGLDYAMDY (SEQ ID NO:7), и
(b) по крайней мере, один вариант HVR, где последовательность варианта HVR включает модификацию, по крайней мере, одного остатка последовательности, изображенной в SEQ ID NO:1-17.
2. Антитело по п.1, в котором вариант HVR-L1 включает 1-5 (1, 2, 3, 4 или 5) замен в любой комбинации из следующих положений: А6 (V или S), А7 (S или E), А8 (T или I), А9 (A или F) и А10 (V или L).
3. Антитело по п.1, в котором вариант HVR-L2 включает 1-2 (1 или 2) замены в любой комбинации из следующих положений: В4 (F или N) и В6 (Y или E).
4. Антитело по п.1, в котором вариант HVR-L3 включает 1-7 (1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7) замен в любой комбинации из следующих положений: C2 (Q, E или K), C3 (S или T), C4 (Y, N, T, E или A), C5 (T, A или Q), C6 (T, V или I), C8 (P, L или E) и C9 (T или S).
5. Антитело по п.1, в котором HVR-Н1 включает 1-3 (1, 2 или 3) замены в любой комбинации из следующих положений: D3 (T или S), D6 (G или N) и D9 (I или L).
6. Антитело по п.1, в котором вариант HVR-H2 включает 1-5 (1, 2, 3, 4 или 5) замены в любой комбинации из следующих положений: E5 (P или L), E7 (S или G), E8 (G или S), E10 (T, S или R) и E11 (D, E или G).
7. Антитело по п.1, в котором вариант HVR-H3 включает 1 замену в следующем положении: F3 (G или S).
8. Выделенное антитело против EphB4, включающее один, два, три, четыре, пять или шесть HVR, где каждый HVR включает, состоит или, по существу, состоит из последовательности, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-17, и где SEQ ID NO:9 или 10 соответствуют HVR-L1, SEQ ID NO:11 или 12 соответствуют HVR-L2, SEQ ID NO:13, 14, 15, 16 или 17 соответствуют HVR-L3, SEQ ID NO:1 или 2 соответствуют HVR-Н1, SEQ ID NO:3, 4, 5 или 6 соответствуют HVR-Н2, и SEQ ID NO:7 или 8 соответствуют HVR-Н3.
9. Антитело по п.8, где антитело включает HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3, HVR-Н1, HVR-Н2 и HVR-Н3, где каждый по порядку включает SEQ ID NO:9, 11, 13, 1, 3 и 7.
10. Антитело по п.8, где антитело включает HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3, HVR-Н1, HVR-Н2 и HVR-Н3, где каждый по порядку включает SEQ ID NO:10, 12, 14, 1, 3 и 8.
11. Антитело по п.8, где антитело включает HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3, HVR-Н1, HVR-Н2 и HVR-Н3, где каждый по порядку включает SEQ ID NO:9, 11, 15, 2, 4 и 7.
12. Антитело по п.8, где антитело включает HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3, HVR-Н1, HVR-Н2 и HVR-Н3, где каждый по порядку включает SEQ ID NO:9, 11, 16, 1, 5 и 7.
13. Антитело по п.8, где антитело включает HVR-L1, HVR-L2, HVR-L3, HVR-Н1, HVR-Н2 и HVR-Н3, где каждый по порядку включает SEQ ID NO:9, 11, 17, 1, 6 и 7.
14. Антитело по п.1, в котором, по крайней мере, часть последовательности каркасной области является консенсусной последовательностью каркасной области человека.
15. Антитело по п.1, в котором модификация представляет собой замену, вставку или делецию.
16. Антитело по любому из пп.1-15, где антитело включает консенсусную последовательность каркасной области подгруппы κ человека.
17. Антитело по любому из пп.1-15, где антитело включает консенсусную последовательность каркасной области тяжелой цепи подгруппы III человека.
18. Антитело по п.17, где антитело включает замену в одном или более из положений 71, 73 или 78.
19. Антитело по п.18, в котором замена представляет собой одну или более из следующих замен: R71А, N73Т или N78А.
20. Полинуклеотид, кодирующий антитело по любому из пп.1-19.
21. Вектор, включающий полинуклеотид по п.20.
22. Вектор по п.21, где вектор является экспрессирующим вектором.
23. Клетка-хозяин, включающая вектор по п.21 или 22.
24. Клетка-хозяин по п.23, где клетка-хозяин является прокариотической клеткой.
25. Клетка-хозяин по п.23, где клетка-хозяин является эукариотической клеткой.
26. Клетка-хозяин по п.25, где клетка-хозяин является клеткой млекопитающего.
27. Способ получения антитела против EphB4, причем указанный метод включает (а) экспрессирование вектора по п.22 в подходящей клетке-хозяине и (b) извлечение указанного антитела.
28. Способ получения иммуноконъюгата с антителом против EphB4, причем указанный метод включает (а) экспрессирование вектора по п.22 в подходящей клетке-хозяине и (b) извлечение указанного антитела.
29. Способ по п.27 или 28, в котором клетка-хозяин является прокариотической клеткой.
30. Способ по п.27 или 28, в котором клетка-хозяин является эукариотической клеткой.
31. Способ обнаружения EphB4, причем способ включает обнаружение комплекса EphB4 - антитело против EphB4 в биологическом образце, где антитело против EphB4 в комплексе является антителом против EphB4 по любому из пп.1-19.
32. Способ диагностирования нарушения, ассоциированного с экспрессией EphB4, причем способ включает обнаружение комплекса EphB4 - антитело против EphB4 в биологическом образце от пациента, у которого имеется указанное нарушение или подозревается его наличие, где антитело против EphB4 в комплексе является антителом против EphB4 по любому из пп.1-19.
33. Способ по п.31 или 32, в котором антитело против EphB4 является меченным обнаруживаемой меткой.
34. Композиция, содержащая антитело против EphB4 по любому из пп.1-19.
35. Композиция, содержащая полинуклеотид по любому из пп.20-22.
36. Композиция по п.34 или 35, где композиция дополнительно содержит носитель.
37. Применение антитела против EphB4 по любому из пп.1-19 для приготовления лекарственного средства для ингибирования ангиогенеза у субъекта, нуждающегося в таком лечении.
38. Применение по п.37, где лекарственное средство предназначено для применения в сочетании с антиангиогенным агентом.
39. Применение по п.38, где антиангиогенный агент предназначен для введения до или после введения антитела против EphB4.
40. Применение по п.38, где антиангиогенный агент предназначен для одновременного введения с антителом против EphB4.
41. Применение по п.38, где антиангиогенный агент представляет собой антагонист фактора роста эндотелия сосудов (VEGF).
42. Применение по п.41, в котором антагонист VEGF представляет собой антитело против VEGF.
43. Применение по п.42, в котором антителом против VEGF является бевацизумаб.
44. Применение по любому из пп.37-43, где лекарственное средство предназначено для применения в сочетании с химиотерапевтическим агентом.
45. Применение антитела против EphB4 по любому из пп.1-19 для приготовления лекарственного средства для терапевтического и/или профилактического лечения нарушения.
46. Применение по п.45, где нарушение представляет собой рак, опухоль и/или нарушение пролиферации клеток.