СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛИКОПЕПТИДА, ИМЕЮЩЕГО СИАЛИРОВАННУЮ САХАРНУЮ ЦЕПЬ, ПРОИЗВОДНОГО АМИНОКИСЛОТЫ С ПРИСОЕДИНЕННОЙ СИАЛИРОВАННОЙ САХАРНОЙ ЦЕПЬЮ, ИСПОЛЬЗУЕМОГО ТАКИМ ЖЕ ОБРАЗОМ, И ГЛИКОПЕПТИДА

1. Способ изготовления гликопептида, имеющего сиалированную сахарную цепь, отличающийся тем, что включает следующие стадии:
(1) связывания смолы, имеющей гидроксильную группу с аминокислотой, у которой азот аминогруппы защищен Boc-группой;
где указанная стадия связывания является стадией связывания гидроксильной группы указанной смолы с карбоксильной группой указанной аминокислоты путем реакции этерификации;
(2) образования свободной аминогруппы путем отсоединения Boc-группы;
(3) повтор, по меньшей мере, однократно следующих стадий (i) и (ii):
(i) элонгации аминокислоты, связанной со смолой, путем дополнительного связывания другой аминокислоты, у которой азот аминогруппы защищен Boc-группой, где указанная стадия элонгации является стадией связывания карбоксильной группы указанной другой аминокислоты с указанной свободной аминогруппой аминокислоты, связанной с указанной смолой.
(ii) образования свободной аминогруппы путем отсоединения указанной Boc-группы в (i); и
(4) гидролиза смолы с помощью кислоты;
где указанная аминокислота в стадии (1) и/или указанная другая аминокислота, по меньшей мере, единожды в (i) стадии (3) является гликозилированной аминокислотой, где указанная гликозилированная аминокислота имеет сиаловую кислоту, по меньшей мере, на одном из невосстанавливающих концов сахарной цепи, а карбоксильная группа указанной сиаловой кислоты защищена с помощью фенацильной группы.
2. Способ изготовления по п.1, в котором указанная гликозилированная аминокислота является аспарагин-связанной сахарной цепью или муцин-связанной сахарной цепью.
3. Способ изготовления по п. 1, в котором указанная кислота в указанной стадии (4) является смешанной кислотой трифторуксусной кислотой/трифторметансульфоновой кислотой/диметилсульфидом/m-крезолом.
4. Способ изготовления по п.1, в котором указанная аминокислота в указанной стадии (1) и/или указанная аминокислота, по меньшей мере, однажды в (i) указанной стадии (3) является лабильной в щелочи неприродной аминокислотой.
5. Способ изготовления по любому из пп1-4, в котором, по меньшей мере, одна из указанных гликозилированных аминокислот является сиалилгликоаспарагином, а указанный сиалилгликоаспарагин имеет 6 или большее количество сахарных остатков.
6. Способ изготовления по любому из пп1-4, в котором, по меньшей мере, одна из указанных гликозилированных аминокислот является сиалилгликоаспарагином, а указанный сиалилгликоаспарагин имеет от 9 до 11 остатков сахаров.
7. Способ изготовления по любому из пп1-4, в котором, по меньшей мере, одна из указанных гликозилированных аминокислот является сиалилгликоаспарагином, а указанный гликоаспарагин имеет 6 или большее количество сахарных остатков и имеет биантенарную сахарную цепь, присоединенную к нему.
8. Способ изготовления по любому из пп1-4, в котором указанная гликозилированная аминокислота представлена следующей формулой (1):
Химическая формула 1
3
4
где один из R и R является следующей формулой (2), а другой является группой, выбранной из группы, состоящей из атома водорода и групп, представленных в представленных ниже формулах (2)-(6).
Химическая формула 2
Химическая формула 3
Химическая формула 4
Химическая формула 5
Химическая формула 6
9. Способ изготовления по любому из пп1-4, дополнительно включающий стадию связывания тиольного соединения со смолой перед указанной стадией (1).
10. Способ изготовления по п.9, дополнительно включающий стадию (5) связывания тиоэфирной формы гликопептида, имеющего сиалированную сахарную цепь, с пептидом или гликопептидным фрагментом, после указанной стадии (4).
11. Способ изготовления по пп1-4, дополнительно включающий стадию, позволяющей метящему агенту вступить в реакцию перед гидролизом смолы с помощью кислоты в указанной стадии (4).
12. Способ изготовления по п.9, дополнительно включающий стадию, позволяющей метящему агенту вступить в реакцию перед гидролизом смолы с помощью кислоты в указанной стадии (4).
13. Способ изготовления по п.11, в котором метящий агент является дансилгалидом.
14. Способ изготовления по пп1-4, в котором воздействие микроволнами осуществляется для реакции конденсации указанной аминокислоты и/или для реакции отщепления Boc-группы, по меньшей мере, в одной из указанных стадий (1)-(3).
15. Способ изготовления по п.9, в котором воздействие микроволнами осуществляется для реакции конденсации указанной аминокислоты и/или для реакции отщепления Boc-группы, по меньшей мере, в одной из указанных стадий (1)-(3).
16. Способ изготовления по п.11, в котором воздействие микроволнами осуществляется для реакции конденсации указанной аминокислоты и/или для реакции отщепления Boc-группы, по меньшей мере, в одной из указанных стадий (1)-(3).
17. Способ изготовления гликопептида, обладающего сиалированной сахарной цепью по пп1-4, дополнительно включающий стадию снятия защиты фенацильной группы, защищающей карбоксильную группу указанно сиаловой кислоты после указанной стадии (4).
18. Способ изготовления гликопептида, обладающего сиалированной сахарной цепью по п.9, дополнительно включающий стадию снятия защиты фенацильной группы, защищающей карбоксильную группу указанно сиаловой кислоты после указанной стадии (4).
19. Способ изготовления гликопептида, обладающего сиалированной сахарной цепью по п.11, дополнительно включающий стадию снятия защиты фенацильной группы, защищающей карбоксильную группу указанно сиаловой кислоты после указанной стадии (4).
20. Способ изготовления гликопептида, обладающего сиалированной сахарной цепью по п.14, дополнительно включающий стадию снятия защиты фенацильной группы, защищающей карбоксильную группу указанно сиаловой кислоты после указанной стадии (4).
21. Гликопептид, обладающий сиалированной сахарной цепью, полученный способом изготовления по пп1-20.
22. Способ изготовления производного сиалилгликоаспарагина, в котором аминогруппа сиалилгликоаспарагина защищена Boc-группой, а карбоксильная группа сиалильной кислоты на невосстанавливающем конце сахарной цепи защищена фенацильной группой, включающий стадии:
введения фенацильной группы в производное сиалилгликоаспарагина, в котором аминогруппа аспарагина защищена липофильной защитной группой,
отсоединения липофильной защитной группы сиалилгликоаспарагина, имеющего введенную фенацильную группу, и
введения Boc-группы в сиалилгликоасаспарагин, от которого отсоединена липофильна защитная группа.
23. Способ изготовления по п.22, в котором указанной липофильной защитной группой является Fmoc.