СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА, ПРОФИЛАКТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ И РЕАЛИЗАЦИИ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНЫХ КАЧЕСТВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
METHOD FOR OBTAINING A PREPARATION FOR STIMULATING NON-SPECIFIC RESISTANCE OF THE BODY, PREVENTING DISEASES AND IMPLEMENTING REPRODUCTIVE QUALITIES OF CATTLE

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной медицины, а именно к способам получения препаратов для стимуляции неспецифической резистентности организма, профилактики заболеваний и реализации воспроизводительных качеств крупного рогатого скота.
Известен способ получения биологически активного препарата из дрожжей (SU 1808331 A1 А61К 35/72, 15.04.93) в виде очищенного полисахаридного комплекса, обладающего иммуностимулирующей активностью. Иммобилизация полисахаридов дрожжевых клеток в агаровом геле (ТУ 10.07.236-91 на производство препарата «Достим») или в 10-14%-ном водно-солевом растворе поливинилпирролидона (RU 2137480 C1 А61К 31/79, 35/72, 20.09.99) повышает иммуностимулирующую активность препаратов.
Наиболее близким аналогом (прототипом) по решаемой задаче является способ получения препарата для повышения неспецифической резистентности и иммуногенеза организма животных (PS-2), включающий смешивание 0,2-0,3%-ной суспензии агара и концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляют (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорид и формалин, объем доводят дистиллированной водой до 100 мас. ч. Препарат обладает иммуностимулирующей активностью (RU 2332214 C1 A61K 31/429, 31/115, A61K 36/06, A61K 36/02, А61Р 37/04, 27.08.2008).
К недостаткам препарата можно отнести отсутствие антибактериальной активности к возбудителям болезней крупного рогатого скота.
Изобретение направлено на повышение неспецифической резистентности организма, профилактику заболеваний и реализацию биологического потенциала воспроизводительных качеств крупного рогатого скота, расширяющих ассортимент средств как для повышения активности клеточных и гуморальных факторов неспецифической резистентности и специфического иммуногенеза организма, так и для повышения антибактериальной активности против возбудителей заболеваний крупного рогатого скота.
Технический результат заключается в смешивании 90 мас. ч. 0,2-0,3%-ной суспензии агара и 2,5 мас. ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжевых клеток. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляют 3,5 мас. ч. производного бензимидазола (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 5000000 ME пенициллинового антибиотика с биосинтетическим происхождением - бензилпенициллин натрия (бензилпенициллина натриевая соль) - [2S-(2альфа,5альфа,6бета)]-3,3-диметил-7-оксо-6-[(фенилацетил)амино]-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота (в виде натриевой соли), 5000 мг антибиотика группы фторхинолонов - энрофлоксацина - 1-циклопропил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-(4-этил-1-пиперазинил)-3-хинолинкарбоновая кислота и 0,2 мас. ч. формалина, объем доводят дистиллированной водой до 100 мас. ч. Полученный препарат разливают во флаконы по 50-100 мл, после стерилизации используют для стимуляции неспецифической резистентности организма, профилактики заболеваний и реализации биологического потенциала воспроизводительных качеств крупного рогатого скота.
Отличие заявляемого решения от известного аналога заключается в том, что при введении антибиотиков бензилпенициллин натрия и энрофлоксацина совместно с полисахаридным комплексом и (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлоридом усиливается их действие на факторы неспецифической резистентности организма, активируется фагоцитоз и значительно расширяется спектр бактерицидной активности против возбудителей заболеваний крупного рогатого скота.
Для осуществления способа использовали следующие вещества:
1) агар микробиологический ГОСТ 17206;
2) концентрат очищенного полисахаридного комплекса дрожжей SU 1808331;
3) (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2.1-b]-тиазола гидрохлорид ТУ 9333-024;
4) бензилпенициллин натрия ЛС-000410 от 04.05.2010;
5) энрофлоксацин ПВИ-2-2.8/02363 от 16.04.2009;
6) формалин ГОСТ 1625;
7) вода дистиллированная ГОСТ 6709.
Способ осуществляется следующим образом:
Пример 1. 90 мас. ч. 0,2%-ной суспензии агара смешивали с 2,5 мас. ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжей. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас. ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 5000000 ME антибиотика бензилпенициллин натрия, 5000 мг антибиотика энрофлоксацина и 0,2 мас. ч. формалина, объем доводили дистиллированной водой до 100 мас. ч. Полученный препарат после стерилизации использовали для стимуляции неспецифической резистентности организма, профилактики заболеваний и реализации биологического потенциала воспроизводительных качеств крупного рогатого скота.
Пример 2. 90 мас. ч. 0,3%-ной суспензии агара смешивали с 2,5 мас. ч. концентрата очищенного полисахаридного комплекса дрожжей. К полученной смеси при постоянном перемешивании добавляли 3,5 мас. ч. (-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-[2,1-b]-тиазола гидрохлорида, 50000 ME антибиотика бензилпенициллин натрия, 50 мг антибиотика энрофлоксацина и 0,2 мас. ч. формалина, объем доводили дистиллированной водой до 100 мас. ч. Полученный препарат после стерилизации использовали для стимуляции неспецифической резистентности организма, профилактики заболеваний и реализации биологического потенциала воспроизводительных качеств крупного рогатого скота.
Пример 3. Объектами исследований были сухостойные (за 60 суток до предполагаемого отела), новотельные и дойные коровы. В научно-хозяйственном опыте были подобраны четыре группы сухостойных коров (контрольная, 1-я, 2-я и 3-я опытные) по принципу аналогов с учетом клинико-физиологического состояния, возраста и живой массы по 10 животных в каждой группе.
Коровам 1-й опытной группы внутримышечно инъецировали PS-2 (прототип) в дозе 10,0 мл на голову трехкратно за 35-30, 15-10 и 10-5 суток до предполагаемого отела, 2-й опытной группы - препарат по изобретению (пример 1), 3-й опытной группы - препарат по изобретению (пример 2) в указанной дозе и сроки (опытные варианты), четвертая группа была контрольной.
Показатели неспецифической резистентности организма коров определяли за 15-10, 10-5 суток до отела и 3-5 суток после отела. Результаты этих исследований приведены в табл. 1.
Установлено, что предлагаемый препарат по примерам 1 и 2 повышает показатели неспецифической резистентности организма коров за 15-10 сут. до отела: фагоцитарную активность - на 4,2 и 2,2%, лизоцимную активность - на 4,2 и 2,3%, бактерицидную активность - на 3,9 и 3,3%; за 10-5 сут. до отела - на 4,2 и 2,7%, 4,4 и 3,8%, 4,0 и 3,7%, на 3-5 сут. после отела - на 4,0 и 2,8%, 4,6 и 3,5%, 5,8 и 5,6% (Р<0,05-0,001).
Показатели заболеваемости и воспроизводительные качества коров представлены в табл. 2.
Сроки наступления первой половой охоты оказались короче во 2-й опытной группе коров (по примеру 1 - 28,8±0,56 сут.) на 14,4 сут., в 1-й опытной (прототип - 31,6±0,93) - на 11,6 сут., в 3-й опытной (по примеру 2 - 34,6±0,93) - на 8,6 сут. по сравнению с контролем.
На фоне применения биопрепаратов установлено достоверное снижение индекса осеменения: в 1-й опытной группе до 2,0±0,43, во 2-й опытной - 1,4±0,36, в 3-й опытной - 1,8±0,24, что соответственно на 0,4, 1,0 и 0,6 меньше, чем в контрольной группе (2,4±0,26).
Оплодотворяемость коров в 1 половую охоту в контрольной группе составила 20%, в 1-й опытной - 30%, во 2-й опытной - 60%, в 3-й опытной - 40%.
Таким образом, под влиянием разработанного биопрепарата на основе полисахаридного комплекса дрожжевых клеток и антибиотиков бензилпенициллин натрия и энрофлоксацина у коров активизировались клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности организма, уменьшились риски возникновения акушерско-гинекологических заболеваний в послеродовом периоде и сократились сроки восстановления половых путей, что способствовало более раннему и плодотворному их осеменению и повысило воспроизводительные качества.
Пример 4. Испытание препарата для изучения иммуностимулирующих свойств и профилактической эффективности проводили на телятах, подобранных по принципу групп-аналогов в 1-суточном возрасте. Были подобраны четыре группы телят (контрольная, 1-я, 2-я и 3-я опытные) по 10 животных в каждой. Телятам 1-й опытной группы внутримышечно инъецировали PS-2 (прототип) в дозе 0,1 мл/кг живой массы трехкратно в 1-, 4- и 7-суточном возрасте, 2-й опытной группы - препарат по изобретению (пример 1), 3-й опытной группы - препарат по изобретению (пример 2) в указанной дозе и сроки (опытные варианты), четвертая группа была контрольной.
Показатели неспецифической резистентности организма телят определяли в возрасте 10, 30, 60 и 90 суток. Результаты этих исследований представлены в табл. 3.
Установлено, что предлагаемый препарат по примерам 1 и 2 улучшает гематологические показатели неспецифической резистентности организма телят в возрасте 15 суток: фагоцитарную активность - на 5,2 и 3,4%, лизоцимную активность - на 4,0 и 2,4%, бактерицидную активность - на 7,3 и 6,0%; в возрасте 30 суток - на 5,6 и 4,0%, 4,5 и 2,8%, 6,5 и 5,4%; в возрасте 60 суток - на 7,9 и 6,4%, 5,2 и 4,4%, 7,6 и 7,0%; в возрасте 90 суток - на 7,9 и 6,8%, 5,9 и 4,6%, 6,9 и 6,1% (Р<0,05-0,001).
В период выращивания телят до 180 суток вели учет их заболеваемости и сохранности, результаты исследований приведены в табл. 4.
В контрольной группе заболело 5 телят или 50,0%. У телят регистрировались признаки острого воспаления желудочно-кишечного тракта (диарея), признаки заболевания органов дыхания (бронхит). Средняя продолжительность болезней составила 8,2±0,94 суток. Возникновение болезней у телят было вызвано снижением неспецифических защитных свойств организма, в результате чего значительно снижается адаптивная способность организма, и усиливается активность условно патогенной микрофлоры, что приводит к повышению риска развития заболеваний.
Заболеваемость телят в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах составила 30,0%, 20,0 и 10,0% соответственно, что в 1,6, 2,5 и 5,0 раза меньше, чем в контроле. Болезни у телят протекали с признаками воспаления желудочно-кишечного тракта, органов дыхания, но степень проявления клинических признаков и продолжительность болезней была меньше в 1,15, 2,21 и 2,05 раза, чем в контроле. Сохранность телят в опытных группах составила 100%.
Таким образом, под влиянием разработанного препарата на основе полисахаридного комплекса дрожжевых клеток и антибиотиков бензилпенициллин натрия и энрофлоксацина, как у коров, так и у телят активизируются клеточные и гуморальные факторы неспецифической резистентности организма, уменьшаются риски возникновения акушерско-гинекологических заболеваний в послеродовом периоде и повышаются воспроизводительные качества коров, снижается количество заболеваний органов дыхания и пищеварения и сокращаются сроки выздоровления телят.