Иммуносупрессия при различных видах гипоксии и механизмы ее развития

наджелудочковой и желудочковой тахикардии часто протекали бессимптомно. При этом нельзя исключить органическую природу выявленных сердечных дизритмий, что должно учитываться в разработке реабилитационных мероприятий данных больных.

Литература

1. Баранова Е.И., Маслова Н.П. Гипертоническая болезнь у женщин. СПб: Изд-во СПбГМУ, 2000.216 с.

2. Кобалава Ж.Д., Толкачева В.В., Морылева ОН. // Обзоры клинической кардиологии. 2006. №5. С.31-40.

3. Подзолков В.И., Можарова Л.Г., Хомицкая Ю.В..// Обзоры клинической кардиологии.2005. №1. С.12-19.

4. Mosca L., Appel L.J., Benjamin E.J., Berra K. et al. // Circulation 2004;109;672-93.

УДК: 612.014.464:616-097

ИММУНОСУПРЕССИЯ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВИДАХ ГИПОКСИИ И МЕХАНИЗМЫ ЕЕ РАЗВИТИЯ

С.Б. НИКОЛАЕВ, Н.А. БЫСТРОВА, А.И. КОНОПЛЯ*

Ключевые слова: гипоксия, иммуносупрессия, легкие эритроциты

Гипоксия представляет собой универсальный патологический процесс, сопровождающий и определяющий развитие самой разнообразной патологии. Причины нарушения продукции энергии в гипоксической клетке могут быть различными. Вместе с тем в основе характерных для всех форм гипоксии нарушений лежит недостаточность ведущей клеточной энергопродуцирующей системы - митохондриального окислительного фосфорили-рования. Непосредственной причиной этой недостаточности в большинстве патологических состояний является снижение поступления кислорода в митохондрии. В результате развивается угнетение митохондриального окисления. В первую очередь подавляется активность НАД-зависимых оксидаз цикла Кребса при начальном сохранении активности ФАД-зависимой сукцина-токсидазы, ингибирующейся при более выраженной гипоксии. Анаэробный гликолиз энергетически неэффективен. Нарушение митохондриального окисления ведет к угнетению сопряженного с ним фосфорилирования и вызывает прогрессирующий дефицит АТФ - универсального источника энергии в клетке [7, 9].

Гипоксия ведет к модификации функций биологических мембран, затрагивающей как липидный бислой, так и мембранные ферменты. Повреждаются или модифицируются главные функции мембран: барьерная, рецепторная, каталитическая. Причинами этого явления служат энергодефицит и активация на его фоне фосфолиполиза и перекисного окисления липидов. Замыкается порочный круг: недостаток кислорода нарушает энергетический обмен и стимулирует свободно-радикальное окисление, а активация последнего, повреждая мембраны митохондрий и лизосом, усугубляет энергодефицит. После кислородного голодания в ранее ишемизированных участках тканей кровоток неизбежно восстанавливается. Реперфузия обуславливает многократное повышение парциального напряжения кислорода, что стимулирует дальнейшую активацию свободно-радикальных процессов (синдром «реперфузионного шока») [7].

Все названные процессы, составляющие основу окислительного стресса, перекрещиваются, повторяются и взаимозависимы. Окислительный стресс протекает однотипно и действует на всех уровнях. Имеется прямая зависимость между накоплением продуктов перекисного окисления и тяжестью патологического процесса. При этом создаются условия для проникновения в сосудистое русло и контакта с клетками иммунной системы экзогенных и эндогенных соединений, что может привести к изменению иммунологической реактивности организма [9]. Модели гипоксии должны наиболее точно и прямо отражать причинно-следственный механизм нарушений, связанный с кислородной недостаточностью, быть достаточно простыми и воспроизводимыми и в тоже время максимально приближенными к патогенезу клинических гипоксических состояний. По этим критериям выделяют три основных формы гипоксических со-

Курский ГМУ, кафедра биологической химии. 305041, Россия, Курск, ул. К.Маркса 3, тел. (4712) 58-81-43

стояний, лежащих в основе других смешанных форм кислородной недостаточности: гипоксическая гипоксия, гемическая гипоксия, гистотоксическая гипоксия [7].

Дефицит энергии составляет суть любой формы гипоксии и обусловливает качественно однотипные метаболические и структурные сдвиги в органах и тканях, неоднозначность механизмов нарушений, лежащих в основе этих типов гипоксии, обуславливает то, что корригирующие свойства химических соединений, проявляемые на одной какой-либо модели, не обязательно должны воспроизводиться на другой. Имеются сведения об иммунодефиците, возникающем при хронических гипоксических состояниях, однако механизмы развивающихся иммунометаболических расстройств остаются еще не изученными [2].

Цель работы — выявить закономерности реализации иммуносупрессии при различных типах гипоксических состояний.

Материалы и методы. Исследования выполнены на крысах Wistar обоего пола массой 180-220 г с соблюдением принципов, изложенных в Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей (г. Страсбург, Франция, 1986). В контрольные и опытные группы включали по 8-10 животных одного возраста. Острую гемическую гипоксию вызывали по Sapirstein кровопотерей 1,5% массы тела животного [15]. Для воспроизведения интервальной гипоксической гипоксии крыс помещали в гермокамеры объёмом 5000 мл до появления признаков терминальной стадии гипоксии в течение 5 дней с интервалом в 24 часа [2]. Гистотоксическую (тканевую) гипоксию моделировали пятикратным внутрибрю-шинным введением нитропруссида натрия в дозе 1 мг/кг веса с интервалом в 24 часа [2]. Крыс иммунизировали однократным внутрибрюшинным введением эритроцитов барана в первые сутки после моделирования гипоксии. О выраженности гуморального иммунного ответа (ГИО) судили по количеству антителообразующих клеток (АОК) [4] в селезенке на пятые сутки после иммунизации. О выраженности гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) на эритроциты барана судили по разнице масс регионарного и контрлатерального подколенных лимфатических узлов (РМЛ) на пятые сутки после сенсибилизации [10].

Через 120 часов после введения животных в эксперимент у них фотометрически оценивали кислородзависимую активность нейтрофилов периферической крови в реакции восстановления нитросинего тетразолия по показателям оптической плотности (шОЭ) в НСТ сп. (спонтанный НСТ-тест), НСТ стим. нз (стимулированный неопсонизированным зимозаном НСТ-тест), НСТ стим. оз (стимулированный опсонизированным зимозаном НСТ-тест) и вычисляли коэффициенты функционального резерва -КАо (отношение опсонизированного НСТ-теста к спонтанной реакции), КАн (отношение неопсонизированного НСТ-теста к спонтанной реакции) и КО (соотношение опсонизированного и неопсонизированного НСТ-теста) [3]. Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали по величинам фагоцитарного числа (ФЧ), фагоцитарного индекса (ФИ), индекса активности фагоцитов (ИАФ) [4]. О выраженности перекисного окисления липидов судили по содержанию в сыворотке крови малонового диальдегида (МДА) и диеновых конъюгатов (ДК) жирных кислот [12]. Иммуносупрессорный потенциал крови оценивали по концентрации в сыворотке липопротеидов низкой плотности (ЛНП) [8], альфа-1 -антипротеаз (ААП) и альфа-2-макроглобулина (АМГ) [11]. Энергообеспечение эритроцитов оценивали по содержанию в них АТФ и 2,3-бисфосфоглицерата (БФГ) [1]. Определяли сорбционные свойства эритроцитов (ССЭ) и сорбционную емкость их гликокаликса (СЕГ) [13].

Эритроциты крыс фракционировали в градиенте плотности яичного альбумина [6] на две фракции: легкую ^<1,079 г/см3) и тяжелую (ё>1,117 г/см3). Иммуномодулирующие свойства фракций эритроцитов крыс, подвергнутых гипоксии, определяли путем трехкратного (с интервалом в 24 ч.) внутривенного введения (по 108 клеток на 1 кг массы) интактным аллогенным реципиентам. Иммунизацию животных эритроцитами барана проводили в последний день введения аллогенных эритроцитов.

Для исследования влияния сыворотки крови особей, подвергнутых гипоксическому воздействию, на формирование ГИО и ГЗТ, индуцированных эритроцитами барана, у интактных животных ее вводили внутрибрюшинно, одновременно с антигеном из расчета 0,2 г белка на кг массы тела животного.

Достоверность статистических различий средних арифметических величин оценивалась с помощью однофакторного

дисперсионного анализа - ANOVA, критерия Ньюмена - Кейлса и Стьюдента с поправкой Бонферрони, а также коэффициента ранговой корреляции Спирмена в программном комплексе «БИОСTАTИСTИКА для Windows».

Результаты. Все виды гипоксических состояний сопровождались развитием супрессии гуморального и клеточного иммунного ответа. При этом при гипоксической гипоксии шло умеренное снижение как показателей характеризующих гуморальное, так и клеточное звено, гемическая гипоксия характеризовалась значительным снижением всех исследуемых показателей, а при тканевой гипоксии более выраженной супрессии подвергался клеточный иммунитет (табл. 1).

При гипоксических состояниях также достоверно уменьшается метаболическая активность нейтрофилов, как спонтанная, так и стимулированная. При этом оказалось, что при гипоксиче-ской гипоксии НСТ стим. оз снижается на 12% больше, чем НСТ стим. нз, достоверно уменьшается КАо и не изменяется КАн. Tаким образом, менее энергоемкий для клетки процесс поглощения опсонизированного зимозана происходит с меньшей скоростью, чем поглощение неопсонизированного зимозана, что может свидетельствовать о конкурентном ингибировании рецепторного аппарата нейтрофилов на фоне гипоксической гипоксии иммуно-супрессирующими субстанциями, появляющимися в крови. При тканевой гипоксии, наоборот, максимально по отношению к контролю снижается показатель НСT стим. нз (на 36%) по сравнению с НСТ стим. оз (на 21%), достоверно уменьшается КАн и не изменяется КАо, что свидетельствует о преобладании энергетической составляющей в нарушении функции нейтрофилов, что объясняется специфическим действием нитропруссида натрия на терминальное звено цепи переноса электронов в митохондриях клеток, в том числе и иммунокомпетентных. Соответственно, при гипоксической гипоксии КО уменьшается, а при тканевой возрастает. Гемическая гипоксия характеризуется сбалансированным снижением показателей НСТ стим. нз и оз и соответствующих коэффициентов функционального резерва нейтрофилов, за исключением КО, который значимо не изменяется (табл. 1).

Угнетение фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови было наиболее выраженным при тканевой гипоксии и менее выраженным при гемической и гипоксической гипоксии (табл. 1).

Таблица 1

Иммунные нарушения при гипоксии

Показатели Контроль Гипоксич. гипоксия

АОК, 103 на орган 25,7±2,1 13,1±1,2 9,6±0,8І'1’2 15,8±1,3І13

РМЛ, мг 5,3±0,4 3,4±0,2І1 2,7±0,242 2,8±0,25І1,2

НСТ сп., mOD 0,84±0,03 0,74±0,03J1 0,71±0,02І1 0,68±0,02І1

НСТ стим. нз, mOD 1,35±0,05 1,19±0,04І1 1,01±0,03І12 0,87±0,02І1-3

НСТ стим. оз, mOD 1,66±0,06 1,26±0,04І1 1,19±0,04І1 1,31±0,05І13

КАн 1,63±0,06 1,62±0,07 1,42±0,0511,2 1,29±0,041-3

КАо 1,99±0,08 1,71±0,06І1 1,68±0,06І 1,92±0,06І23

КО 1,23±0,05 1,07±0,035 1 1,19±0,045 1,51±0,0751-3

ФИ, % 43,4±3,8 28,7±2,4І1 20,9±1,7І1,2 18,2±1,5І12

ФЧ 1,7±0,2 1,0±0,1І1 0,8±0,1І1 0,7±0,07І1

ИАФ 71,9±6,6 27,6±2,2’1’1 15,7±1,142 12,2±0,9І1-3

Примечание: здесь и далее: 1. средние арифметические величины получены в опытах на 8-10 экспериментальных животных; 2. * - достоверность различий средних арифметических величин, р<0,05, цифры рядом со звездочкой обозначают, по отношению к показателю какой группы эти различия достоверны

Известно, что при различных формах стресса и в условиях патологии (голодание, охлаждение, гепатиты, панкреатиты, ожоги и т.д.) развивается метаболическая иммуносупрессия, связанная с нарушением структуры и проницаемости клеточных мембран и обусловленная совокупностью реакций организма, часто обозначаемых термином «окислительный стресс» [9,14]. В связи с этим нами исследован оксидантный статус сыворотки крови и ее иммуносупрессорный потенциал.

При гипоксической гипоксии происходило увеличение уровня МДА и ДК в 2,2 и 2,1 раза соответственно, при гемиче-ской гипоксии - в 1,5 раза (табл. 2). При тканевой гипоксии ожидаемого увеличения уровня перекисного окисления липидов не наблюдалось. Этот парадокс может быть связан с особенностями метаболизма нитропруссида натрия в организме и, в частности, с образованием свободного оксида азота (N0), который в зависимости от концентрации может проявлять прооксидантные, антиоксидантные свойства, последними, и объясняется, по-видимому, отсутствие изменений в оксидантном статусе при

тканевой гипоксии, вызываемой нитропруссидом натрия [5]. Иммуносупрессорный потенциал сыворотки крови при разных видах гипоксии характеризовался: при гемической гипоксии происходило достоверное увеличение концентрации ЛНП, АМГ и ААП, гипоксическая гипоксия сопровождалась ростом уровня ЛНП, а тканевая гипоксия только АМГ и ААП.

Таблица 2

Интенсивность перекисного окисления липидов и иммуносупрессорный потенциал сыворотки крови при различных видах гипоксии

Показатели Контроль Гипоксич. гипоксия

МДА, мкмоль/л 2,4±0,14 5,3±0,31І1 3,6±0,23І1,2 2,2±0,12 2,3

ДК, ДD9зз/мл 3,9±0,24 8,5±0,55І1 5,8±0,39І1,2 3,6±0,22І2,3

ЛНП, у.е. 23,9±1,8 37,4±2,7І1 53,1±3,811,2 28,1±2,011-3

ААП, мкмоль/л 25,3±1,8 27,3±2,1 39,1±2,6І1,2 32,8±2,3"1-3

АМГ, мкмоль/л 1,7±0,13 1,9±0,14 3,5±0,25І1,2 2,6±0,1811-3

При исследовании иммуномодулирующих свойств сыворотки крови крыс при различных видах гипоксии установлено, что она проявляла выраженный иммуносупрессирующий эффект. При введении сыворотки крыс, подвергнутых гипоксической, гемической или тканевой гипоксии, здоровым животным количество АОК в селезенке уменьшалось в 1,6; 1,9; 1,5; а РМЛ - в 1,4;

1,5; 1,3 раза соответственно по сравнению с контрольной группой животных. При этом наибольший иммуносупрессирующий эффект вызывала сыворотка крыс, подвергнутых гемической гипоксии, а наименьший - крыс, подвергнутых тканевой гипоксии (табл. 3).

Таблица 3

Иммуномодулирующие свойства сыворотки крови крыс при различных видах гипоксии

Условия опыта АОК, 103 на орган РМЛ, мг

Контроль (иммунизация эритроцитами барана) 25,7±2,1 5,3±0,4

Введение сыворотки интактных крыс 24,8±2,0 5,2±0,4

Введение сыворотки крыс, гипоксич. гипоксия 15,8±1,1І12 3,9±0,3‘1,2

Введение сыворотки крыс, гемическ. гипоксия 13,5±1,0І12 3,6±0,25 42

Введение сыворотки крыс, тканевая гипоксия 18,4±1,3І1,24 4,0±0,342

Принципиально важным для понимания механизма имму-носупрессирующего влияния различных стресс-индуцирующих агентов является выявление клеточных элементов микроокружения иммуноцитов в регуляции функции последних.

В литературе имеются сведения о важной роли эритроцитов в сопряжении метаболических эффектов, вызываемых различными внешними агентами, и функцией иммуноцитов. Взаимодействие эритроцитов с различными клетками в значительной степени определяется наличием на их поверхности молекул адгезии, а также энергетическим статусом эритроцитов. В связи с этим нами изучены сорбционные свойства эритроцитов и их энергетический статус. При гипоксической гипоксии и в еще большей степени при гемической происходило увеличение показателей ССЭ и СЕГ. При тканевой гипоксии исследуемые показатели существенно не менялись. Только лишь при гемической гипоксии происходило нарушение энергообеспечения эритроцитов, выражавшееся в уменьшении в них концентрации АТФ и БФГ (табл. 4).

Таблица 4

Энергетический статус и сорбционные свойства эритроцитов при гипоксии

Показатели Контроль Гипоксическая гипоксия

АTФ, мкмоль/мл эритроцитов 1,8±0,2 1,7±0,2 0,6±0,1’1,2 1,6±0,15’3

БФГ, мкмоль/мл эритроцитов 5,6±0,3 5,4±0,3 3,3±0,2І1,2 5,2±0,25’3

ССЭ, % 15,6±1,1 21,2±1,5+1 39,4±2,942 10,1±0,7І1-3

СЕГ, x10-12 г/эритроцит 0,95±0,07 1,24±0,08’1 1,56±0,11‘12 0,75±0,05’1-3

Учитывая, выявленные изменения сорбционных свойств эритроцитов и их энергетического статуса нами изучены иммуномодулирующие свойств их легкой и тяжелой фракций. При этом установлено, что гипоксическая и гемическая гипоксия индуцирует появление имунносупрессирующих свойств у легких эритроцитов и не влияет на иммуномодулирующие свойства тяжелых. Эритроциты крыс, подвергнутых тканевой гипоксии, не обладают иммуномодулирующей активностью (табл. 5).

Таблица 5

Иммуномодулирующие свойства эритроцитов крыс при различных видах гипоксии

Условия опыта Показатели

АОК, 103 на орган РМЛ, мг

Контроль 25,7±2,1 5,3±0,4

Эритроциты крыс, подвергнутых гипоксической гипоксии

Легкие эритроциты 16,7±1,2'"‘ 4,0±0,3"1

Тяжелые эритроциты 25,9±2,0 5,4±0,45

Эритроциты крыс, подвергнутых гемической гипоксии

Легкие эритроциты 11,2±0,9 1,2 3,2±0,2'1,2

Тяжелые эритроциты 24,5±2,1 5,1±0,4

Эритроциты крыс, подвергнутых тканевой гипоксии

Легкие эритроциты 23,2±1,9"2,4 5,0±0,35"2,4

Тяжелые эритроциты 25,1±2,2 5,2±0,4

Для выяснения вклада энергетической и сорбционной составляющей в приобретении легкими эритроцитами иммуносу-прессирующих свойств при различных видах гипоксических состояний легкие эритроциты интактных крыс инкубировали с сывороткой крыс, подвергнутых гипоксической, гемической или тканевой гипоксии (107 клеток на 1 мл сыворотки в течение 1 часа при 37°С), и вводили аллогенным реципиентам, у которых индуцировали развитие ГИО и ГЗТ. Только в сыворотке крыс, подвергнутых гипоксической и гемической гипоксии, содержатся субстанции, способные сорбироваться на легких эритроцитах и индуцировать у них появление иммуносупрессирующей активности. Этими субстанциями, по-видимому, являются ЛНП (табл. 6).

Таблица 6

Иммуномодулирующие свойства эритроцитов интактных крыс, обработанных сывороткой крови крыс, подвергнутых различным видам гипоксии

Условия опыта АОК, тыс. на орган РМЛ, мг

Контроль (иммунизация эритроцитами барана) 25,7±2,1 5,3±0,4

Введение легких эритроцитов интактных крыс 25,1±2,1 5,2±0,35

Легкие эритроциты интактных крыс + сыворотка крыс, гипоксич.й гипоксия 17,8±1,3*1,2 4,1±0,3*12

Легкие эритроциты интактных крыс + сыворотка крыс, гемическ. гипоксия 15,6±1,1*1,2 3,9±0,25*1,2

Легкие эритроциты интактных крыс + сыворотка крыс, тканевая гипоксия 24,8±2,0*3,4 5,1±0,35*34

При исследовании уровня корреляционной взаимосвязи между сорбционными свойствами и энергообеспечением эритроцитов при различных видах гипоксий, установлены достоверно высокие уровни корреляции между ССЭ, СЕГ и иммуносупрес-сорной активностью легких эритроцитов при гипоксической и гемической гипоксии, между уровнем АТФ, БФГ и иммуносупрессией, вызываемой легкими эритроцитами при гемической гипоксии. При тканевой гипоксии достоверно значимых корреляционных взаимосвязей не выявлено (табл. 7).

Таблица 7

Уровень корреляции (г) между сорбционными свойствами эритроцитов, их энергообеспечением и выраженностью иммуносупрессирую-щих эффектов легких эритроцитов при различных видах гипоксии

Гипоксич. гипоксия Г емическая гипоксия Тканевая гипоксия

АОК РМЛ АОК РМЛ АОК РМЛ

ССЭ -0,94* о" -0,92* -0,85* -0,06 -0,16

СЕГ -0,89* -0,78* -0,89* -0,82* -0,13 -0,06

АТФ 0,12 0,05 0,89* 0,85* 0,14 0,09

БФГ 0,06 0,08 0,86* 0,92* 0,17 0,09

* - р<0,05

Гипоксическая, гемическая и гистотоксическая гипоксия сопровождаются развитием супрессии гуморального и клеточного иммунитета индуцированного эритроцитами барана. При этом степень угнетения гуморального и клеточного звена при каждом виде гипоксии различается. Клеточное звено иммунитета оказывается более чувствительными к тому виду гипоксии (гистоток-сическая и в меньшей степени гемическая), в котором более значимую роль играет нарушение энергетики иммунокомпетент-ной клетки, а не воздействие на ее рецепторный аппарат иммуномодулирующих субстанций. Это связано с неоднозначностью механизмов нарушений, лежащих в основе этих типов гипоксии при одинаковом конечном результате стрессорного воздействия -дефиците продукции АТФ [2,7]. Дифференцированная супрессия метаболической активности нейтрофилов при различных видах гипоксических состояний, проявляющаяся при использовании

опсонизированного или неопсонизированного стимулятора, также свидетельствует о том, что среди механизмов выявленных нарушений важную роль играют дефицит энергообеспечения иммунокомпетентных клеток и конкурентное ингибирование их рецепторного аппарата иммуносупрессирующими субстанциями. При этом вклад каждого из этих двух компонентов в развитие иммуносупрессии при гипоксической, гемической и тканевой гипоксии различен. Энергетическая составляющая доминирует в супрессии метаболической активности нейтрофилов при гисто-токсической гипоксии, а рецепторная при гипоксической, геми-ческая гипоксия занимает промежуточное положение. Резкое угнетение кислородзависимой бактерицидной активности ней-трофилов в модели тканевой гипоксии с нитропруссидом натрия, может объясняться также антиоксидантными эффектами последнего, связанными с модуляцией синтеза N0 [5].

Нейтрофильные гранулоциты - особые клетки. В отличие от других, реакции респираторного взрыва не являются системой их жизнеобеспечения. Этим путем они осуществляют свои эф-фекторные функции. При стимуляции нейтрофилов они быстро проявляют свои потенциальные возможности, реализуемые клеткой без выраженной морфологической перестройки, свойственной лимфоцитам и макрофагам. Нейтрофилы могут хорошо переносить определенную глубину и продолжительность гипоксии. Однако чрезмерное и длительное стрессовое воздействие приводит к истощению резервных возможностей и угнетает их функционально-метаболическую активность [5,9], что подтверждается, в том числе и нашими исследованиями.

Г ітокспчесш Гптчесш Г истотоксическяя

гнлоши гипоксия гипоксия

Гипоксігосскля [ см 1 Госс кая Гисююксігосская

гипоксия гипоксия гипоксия

11|шч»чаия* .\ї - якрюпрол'шт  кі*ік* ССЭ - (вр4шюті» (Млн «ркгроито»

Рис. Механизмы развития иммуносупрессии при гипоксии

При различных формах стресса и патологии в крови накапливаются соединения, обладающие иммуносупрессорными свойствами, в первую очередь продукты перекисного окисления липидов, окислительно-модифицированные липопротеиды низкой плотности, гликозаминогликаны и продукты их фрагментации, антипротеолитические белки [9,14]. Нами установлено, что каждый вид гипоксии характеризуется своим иммуносупрессор-ным профилем сыворотки крови, влияющим на ее иммуномодулирующие свойства, при этом наибольшей иммуносупрессорной активностью обладает сыворотка крови крыс, подвергнутых гемической гипоксии. Изменение биохимического состава сыворотки проецируется на состояние мембран и метаболизма клеток всех физиологических систем, однако основной мишенью действия химических соединений накапливающихся в сосудистом русле, являются эритроциты. Это объясняется превалирующим содержанием эритроцитов по сравнению с другими клетками в крови и лабильностью биохимимического состава их мембран, обусловленной выходом зрелых эритроцитов из-под генетического контроля и, в силу этого, подверженных сильному влиянию средовых факторов. В сыворотке крови при гипоксической и гемической гипоксии появляются субстанции способные модифицировать мембрану легких эритроцитов интактных животных и индуцировать у них появление иммуносупрессорных свойств. Этими веществами являются, по-видимому, ЛНП [14].

Приобретение легкими эритроцитами иммуносупресси-рующих свойств при гипоксической и гемической гипоксии связано с увеличением их адгезивных свойств и появлением в сыворотке соединений способных сорбироваться на их мембране; а при гемической гипоксии еще и нарушением их энергообеспечения. Полученные результаты согласуются с литературными данными, свидетельствующими о том, что эритроциты участвуют в регуляции иммунологических функций при различных формах патологии и стресса, являются звеном сопряжения метаболиче-

ских сдвигов, возникающих в печени, и реализацией функций макрофагальных элементов, направленных на ограничение выраженности этих сдвигов [5,9]. При этом наряду с принципиально общими изменениями метаболического статуса эритроцитов, сыворотки крови и функций иммуноцитов при различных видах гипоксических состояний имеют место специфические для каждого из них особенности, обусловленные природой индуцирующего агента и первичным звеном его воздействия на клетки и организм в целом. Поэтому общность направленности и выраженность сдвигов наблюдающихся при стрессе и патологии, может сочетаться с неодинаковой эффективностью действия различных фармакологических препаратов. Обобщенные механизмы развития иммуносупрессии при различных типах гипоксии резюмированы в схеме (рис.).

Многокомпонентность иммунных нарушений при различных видах гипоксии диктует поиск препаратов для коррекции возникающих расстройств с различными механизмами действия и точками приложения на системном и клеточном уровнях.

Выводы. При всех видах гипоксических состояний сыворотка крови приобретает иммуносупрессирующие свойства. Гипоксическая и гемическая гипоксия индуцирует появление иммуносупрессирующих свойств у легких эритроцитов, а тканевая - не влияет на иммуномодулирующую активность последних. Иммуносупрессирующие свойства легких эритроцитов при гипоксической гипоксии обусловлены изменением сорбционных свойств их мембраны и фиксацией на ней иммуносупрессирую-щих субстанций, а при гемической гипоксии - также нарушением энергообеспечения эритроцита. В нарушении метаболической активности нейтрофилов при различных видах гипоксических состояний важную роль играют дефицит энергообеспечения иммунокомпетентных клеток и конкурентное ингибирование их рецепторного аппарата иммуносупрессирующими субстанциями.

Литература

I.Виноградова И.Л. и др. // Лаб. дело. 1980. №7. С.424-426.

2.Зеленская К.Л., Поветьева Т. Н., Пашинский В. Г. // Бюлл.

эксперим. биол. и медицины. 2005. Т.139,№4. С.406-409.

З.Зинкин В.Ю., Годков М.А. // Клинич. лаб. диагностика. 2004. №8. С.26-29.

4.Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля. М.,

1987.

5.Иммунометаболические эффекты регуляторов энергетического обмена при нарушении гомеостаза / Лазарева Г.А. и др. Курск, 2006.

6.Кобзев Т.В. и др. // Патол. системы крови и кровообращения: сб. ст. Симферополь, 1978. С.49-51.

7.Лукьянова Л.Д. // Патол. физиология и эксперим. терапия. 2004. №2. С.2-11.

8.Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. М.: Медицина, 1987.

9.Окислительный, энергетический и иммунный гомеостаз (нарушение и коррекция) / Прокопенко Л.Г. и др. Курск, 2003.

10.Руководство по иммунологическим и аллергологическим методам в гигиенических исследованиях / Федосеева В.Н., Порядин Г.В., Ковальчук Л.В. и др.- М., 1993.

II.Русаков С.В., Кубышкин А.В. // Лаб. Дело. 1995. №1. С.8.

12.Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Орехо-вича. М.: Медицина, 1977.

13.Тогайбаев А.А., и др. // Лаб. дело. 1988. №9. С.22-24.

14.Юнатов Г.И. и др. // Иммунопатол. 1999. № 1. С. 38-43.

15.Sapirstein L.A., Sapirstein E.H., Bredemeyer A. // Circ. Res.

1960. Vol. 8. P.135-148.

УДК [616.12-008.318:616.24-002.2-053.9]615.23-085

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ НЕБИВОЛОЛА ПРИ НАРУШЕНИЯХ РИТМА СЕРДЦА У БОЛЬНЫХ ХОБЛ В ПОЖИЛОМ И СТАРЧЕСКОМ ВОЗРАСТЕ

Д.А. КАДАЕВА, К.А. МАСУЕВ., М.И. ИБРАГИМОВА* Ключевые слова: хроническая обструктивная болезнь легких

В повседневной работе врачу-терапевту постоянно приходится решать лечебно-диагностические вопросы наиболее распространенной сочетанной легочной и сердечной патологии, к которым можно отнести хроническую обструктивную болезнь

* Кафедра госпитальной терапии №2, Дагестанская ГМА

легких (ХОБЛ) и ишемическую болезнь сердца (ИБС) [1]. В структуре заболеваемости больных старших возрастных групп такое сочетание составляет 62% [2]. ХОБЛ является одной из ведущих причин заболеваемости и смертности в современном обществе и представляет собой экономическую и социальную проблему, которая пока не имеет тенденции к улучшению [3]. По мере прогрессирования ХОБЛ у больного развивается ряд патологических состояний, ведущих к электрической нестабильности миокарда и развитию нарушений сердечного ритма, нередко с фатальным исходом [4,5]. При длительной регистрации ЭКГ выявляется высокая частота (89-92%) нарушений ритма сердца. Супра- и вентрикулярные формы нарушения ритма сердца являются частой клинической проблемой у больных ХОБЛ [6].

Выбор оптимальной тактики лечения нередко вызывает определенные трудности. Одними из ключевых препаратов, позволяющих снижать летальность при наличии аритмии, ИБС, артериальной гипертонии (АГ) являются р-адреноблокаторы [7,8]. В то же время наличие ХОБЛ резко ограничивает применение бета-блокаторов в терапевтической практике в связи с их неблагоприятным влиянием на параметры функции внешнего дыхания (ФВД). Однако, полученные данные в последние годы позволяют утверждать, что это верно лишь для неселективных или малоселективных р-адреноблокаторов [9,10]. В последние годы идет непрерывное совершенствование свойств р-адреноблокаторов. Появление более эффективных и безопасных блокаторов р-адренорецепторов, отличающихся высокой селективностью к р1-рецепторам и, следовательно, меньшим риском развития побочных реакций, может быть перспективным направлением лечения больных с сочетанной патологией [2]. Перспективным представителем 3-го поколения р-адреноблокаторов является суперсе-лективный р-адреноблокатор с вазодилатирующими свойствами небиволол (небилет). В связи с вышеизложенным целью нашего исследования явилось оценка эффективности и безопасности применения небиволола у больных ХОБЛ пожилого и старческого возраста с сопутствующими нарушениями ритма сердца.

Исследование выполнено на кафедре госпитальной терапии №2 ДГМА на базе Медицинского центра «Госпиталь ветеранов ВОВ» МЗ Республики Дагестан. В открытое рандомизированное исследование, в параллельных группах включены 50 амбулаторных и стационарных больных мужского и женского пола, в возрасте от 65 до 85 лет с подтвержденным на момент начала исследования диагнозом ХОБЛ (по классификации Европейского респираторного общества) и нарушениями ритма сердца (что явилось обязательным условием включения). Среди пациентов было 38 мужчин и 12 женщин. 32 больных курили, из них стаж курения более 40 лет имели 16 человек. Рандомизация групп обследованных больных проводилось методом случайной выборки. У обследованных больных средняя продолжительность заболевания по анамнестическим данным составила 28,7 лет. 4(8%) больных выбыли на этапе вводного периода, из них 2 по причине неявки на второй визит (не связанной с изменением состояния здоровья), 1 вследствие индивидуальной непереносимости бета-блокаторов. Остальные больные (46 человек) в связи с задачами исследования были разделены на 2 группы: 1 группа применения небилета - 32 человека, 2-я группа контроля - не получавших бета-адреноблокаторы - 14 больных. Средний возраст больных в 1 группе составил 72,7±2,97 лет, во 2 - 74,7±2,45. Давность ХОБЛ в анамнезе больных в 1 группе составила 3-32 лет (в среднем 8,5±1,6 лет), во 2 группе от 3 до 29 лет (в среднем - 8,1±3,1 лет).

Критериями исключения из исследования были: заболевания в стадии декомпенсации, которые могут повлиять на проведение исследования; индивидуальная непереносимость намеченных для терапии препаратов; брадикардия (ЧСС < 55 уд/мин).; АВ-блокада П-Ш степени, синоатриальная блокада, синдром слабости синусового узла; сопутствующие тяжелые заболевания печени и почек; отрицательный опыт применения р-адреноблокаторов (ухудшение бронхиальной проходимости).

Все пациенты дали информированное согласие на участие в исследовании. В исследование не включались пациенты с орга-ничес кими пораже ниями пече ни, поче к, системны ми коллаге но -зами, онкопатологией, сахарным диабетом, мерцательной аритмией, бронхиальной астмой.

У всех обследованных больных диагноз был подтвержден данными клинико-инструментального, лабораторного обследования. Наряду с общепринятыми методиками были проведены суточное мониторирование ЭКГ по Холтеру «Инкарт», эхокар-