Генетический риск развития гиперпластического процесса в эндометрии и в молочных железах, ассоциированный полиморфизмом генов-кандидатов

КОАГУЛЯЦИОННЫЕ НАРУШЕНИЯ ПРИ ОСЛОЖНЕНИЯХ ВТОРОЙ ПОЛОВИНЫ БЕРЕМЕННОСТИ

2. Devine, P.C. Obstetric hemorrhage /P.C. Devine //Semin. Perinat. - 2009. - V. 33. - P. 76-81.

3. Kozek-Langenecker, S.A. Perioperative coagulation monitoring /S.A. Kozek-Langenecker //Best Pract. Res. Clin. Anaesthesiol. - 2010. - V. 24. -P. 27-40.

4. Diagnostic performance and therapeutic consequence of thromboelastometry activated by kaolin versus a panel of specific reagents /O.H. Larsen, C. Fenger-Eriksen, K. Christiansen et al. //Anesthesiology. - 2011. - V. 115. - P. 294-302.

5. McLintock, C. Obstetric hemorrhage /C. McLintock, A.N. James //J. Thromb. Haemost. - 2011. - N 1. - P. 1441-1451.

6. The use of thromboelastography for the peripartum management of a patient with platelet storage pool disorder /G. Rajpal, J.M. Pome-rantz, M.V. Ragni et al. //Int. J. Obstet. Anesth. - 2011. - V. 20. - P. 173-177.

7. Thrombocytopenia affects plasmatic coagulation as measured by thrombelastography /W.W. Roeloffzen, H.C. Kluin-Nelemans, A.B. Mulder et al. //Blood Coagul. Fibrinolysis. - 2010. - V. 21. - P. 389-397.

8. Thromboelastography performed on kaolin-activated citrated samples from critically ill patients provide stable and consistent parameters? /H. White, C. Zollinger, M. Jones et al. //Int. J. Lab. Hematol. - 2010. - V. 32. - P. 167-173.

^ ^ ^

Ордиянц И.М., Аракелов С.Э., Павлова Е.А., Дмитриева Е.В., Куулар А.А.

Российский университет дружбы народов,

г. Москва

ГЕНЕТИЧЕСКИЙ РИСК РАЗВИТИЯ ГИПЕРПЛАСТИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА В ЭНДОМЕТРИИ И В МОЛОЧНЫХ ЖЕЛЕЗАХ, АССОЦИИРОВАННЫЙ ПОЛИМОРФИЗМОМ ГЕНОВ-КАНДИДАТОВ

Цель исследования - улучшить своевременную диагностику гиперпластических заболеваний эндометрия и молочных желез на основании молекулярно-генетического тестирования носительства генов-кандидатов.

Все пациентки были разделены на четыре группы в зависимости от выявленных гиперпластических процессов эндометрия и молочных желез. В I группу вошли 41 пациентка с гиперпластическим процессом, локализованным только в молочных железах и не имеющие ГПЭ (23,3 %); II группа - 37 больных с ГПЭ и неизмененными молочными железами (25,5 %); III группа - 52 женщины с сочетанным гиперпластическим процессом в молочных железах и в эндометрии (35,9 %); IV группа (контроль) - 15женщин (10,3 %), не имеющие гиперпластических заболеваний органов репродуктивной системы.

Комплексное обследование женщин с гиперпластическими процессами в эндометрии и молочных железах, включающее, наряду с анализом клинико-анамнестических данных, исследование генетической предрасположенности к указанным мультифакториальным заболеваниям и рецептивности тканей к стероидным гормонам, демонстрирует возможность ранней диагностики и прогнозирования особенностей их клинического течения, что крайне важно для разработки адекватных лечебно-профилактических мероприятий.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: генетические детерминанты: гиперплазия эндометрия: доброкачественные заболевания молочных желез.

Ordiyants I.M., Aracelov S.E., Pavlova E.A., Dmitrieva E.V., Kuular A.A.

Russian Peoples' Friendship University, Moscow

GENETIC RISK OF ENDOMETRIAL HYPERPLASTIC PROCESSES IN THE MAMMARY GLANDS AND ASSOCIATED POLYMORPHISMS OF CANDIDATE GENES

The purpose of research - to improve timely diagnosis of diseases of the endometrium and hyperplastic mammary glands on the basis of molecular genetic testing for carriers of candidate genes.

All patients were divided into four groups according to the identified endometrial hyperplasia and mammary glands. Group I included 41 patients with hyperplastic process, localized only in the mammary glands and without GGE (23,3 %); II group -37 patients with GGE and unaltered breasts (25,5 %); III group - 52 women with sochetannym hyperplastic process and in the mammary glands and the endometrium (35,9 %); IV group (control) - 15 women (10,3 %) having no hyperplastic diseases of the reproductive system.

Comprehensive survey of women with endometrial hyperplastic processes and mammary glands, which includes, along with an analysis of clinical and anamnestic data, the study of genetic predisposition to these multifactorial diseases and tissue receptivity to steroid hormones, demonstrates the possibility of early diagnosis and prediction of the behavior of their clinical course, which is extremely important for the development of adequate therapeutic measures.

KEY WORDS: genetic determinants of endometrial hyperplasia; benign breast disease.

Патогенетические механизмы развития пролиферативных заболеваний органов репродуктивной системы не однозначны: еще с 90-х годов прошлого века ведущую роль в развитии гиперпластических процессов отводят повышенной концентрации эстрогенов [1] — абсолютной [2] или относи-

тельной гиперэстрогении [3], нарушению баланса гид-роксиметаболитов эстрогенов [4], но, в то же время, у пациенток с нормальным, двухфазным менструальным циклом и гормональным профилем в пределах референтных значений, выявляют гиперпластические заболевания матки и молочных желез [5].

№4(59) 2014

с/^пъ и^ггя вс/^узбассе

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Разнообразие результатов, вероятно, объясняется тем, что решающее значение в возникновении заболеваний молочных желез и эндометрия имеет не абсолютная концентрация гормонов в крови, а состояние рецепторов к половым стероидам в ткани [1, 6]. Мнение различных исследователей о содержании рецепторов в измененных тканях эндометрия и молочных желез неоднозначно [7], хотя большинство авторов и отмечают зависимость их содержания от характера гистологической картины [8].

Следующий аспект, требующий рассмотрения — это генетическая составляющая в развитии пролиферативных заболеваний [9]. В настоящее врем большинство работ направлено на оценку генетического риска развития злокачественных заболеваний, данные по генетическим аспектам доброкачественных пролиферативных заболеваний органов репродуктивной системы немногочисленны и разрознены. Таким образом, в настоящее время назрела проблема необходимости углубления и расширения спектра исследований, посвященных поиску информативных молекулярногенетических предикторов формирования гиперплазии; создания адекватных комплексных подходов прогнозирования ее развития и рецидивирования [10, 11]. Эти противоречия явились основанием для данного научного исследования.

Цель исследования — улучшить своевременную диагностику гиперпластических заболеваний эндометрия и молочных желез на основании молекулярно-генетического тестирования носительства генов-кандидатов.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Критерием включения в исследование явилось наличие гиперпластического процесса в эндометрии (ГПЭ), верифицированного, согласно его морфологической форме, по МКБ-Х. Все пациентки были разделены на четыре группы в зависимости от выявленных гиперпластических процессов эндометрия и молочных желез. В I группу вошли 41 пациентка с гиперпластическим процессом, локализованным только в молочных железах и не имеющих ГПЭ (23,3 %); во II группу — 37 больных с ГПЭ и неизмененными молочными железами (25,5 %); в III группу — 52 женщины с сочетанным гиперпластическим процессом и в молочных железах и в эндометрии (35,9 %); в IV группу (контроль) — 15 женщин (10,3 %), не имеющих гиперпластических заболеваний органов репродуктивной системы.

Исследование крови для выявления аллельного полиморфизма гена GP-IIIa (Leu 33Pro), CYP1A1 (A2455G), GSTP1 (A313G, С341Т) осуществлялось методом ПДРФ-анализа (полиморфизм длин рестрикционных фрагментов). Исследование генетических

Корреспонденцию адресовать:

ОРДИЯНЦ Ирина Михайловна,

117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6, РУДН, Медицинский факультет.

Тел.: +7-926-800-50-36.

E-mail: ordiyantc@mail.ru

полиморфизмов выполнено на базе ЗАО «ПИННИ» г. Москвы («Постгеномные и нанотехнологические инновации», CJSC «PYNNY»).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Гиперплазированные ткани органов репродуктивной системы характеризуются усиленной пролиферацией клеток и нарушением процессов апоптоза. Учитывая особенности рецепторного аппарата в измененных тканях эндометрия и молочных желез, мы сочли необходимым оценить механизмы гормональнорецепторных взаимодействий, влияющих на изменение рецептивности клеток. Основным фактором, стимулирующим клетки к усиленному пролиферативному росту, является баланс гидроксипроизводных эстрогенов; ответственной за этот процесс является мо-нооксигеназная система печени цитохрома Р-450, в частности, ген CYP1A1 — он отвечает за окисление до 2-гидроксиэстрогенов, которые защищают организм от избыточного перекисного окисления липидов и повреждения ДНК. Мутация гена CYP1A1 приводит к избыточной пролиферативной активности клеток-мишеней [12].

В обеспечении резистентности клеток к перекис-ному окислению липидов и предотвращению поломок ДНК задействованы ферменты 2-й фазы детоксикации — глютатион^-трансферазы, кодируемые геном GSTP1, дефект которого приводит к снижению защитных свойств клетки.

Чем выше адгезивная способность клетки, тем сильнее выражены ее пролиферативные свойства. Тем весомее роль интегриновых рецепторов, кодируемых геном GPIIIa, мутантный аллель которого повышает предрасположенность к усиленной пролиферации.

С целью оценки генетической составляющей в патогенезе гиперпластических заболеваний органов репродуктивной системы нами был проведен анализ полиморфизма генов системы детоксикации CYP1A1 и GSTP1, и гена межклеточных взаимодействий — GPIIIa.

Для гена GSTP1 описано 4 аллельных варианта: А - Ile105/Ala114, B - Val105/Ala114, C - Val105/ Val114, D — Ile105/Val114. Согласно приводимым в литературе данным, частоты аллелей в гене GSTP1 для московской популяции распределяются следующим образом: А — 66,2 %, В — 26,2 %, С — 7,7 %, что практически не отличается от показателей для европеоидной расы в целом (А — 68,5 %, В — 26,2 %, С —

6,9 %).

Анализ распределения частот генотипов гена детоксикации GSTP1 показал:

- у пациенток с изолированным гиперпластическим процессом в молочных железах (I группа) генотип А/А встречался в 41,5 % случаев. Частота но-сительства функционально ослабленного гена А/В составила 29,3 %, что было сопоставимо с группой контроля — 26,7 %. Генотип А/С полностью отсутствовал.

- у пациенток с изолированным гиперпластическим процессом эндометрия (II группа) генотипа А/А

с/$(ръ и^ггя в^^узбассе

№4(59) 2014

ГЕНЕТИЧЕСКИЙ РИСК РАЗВИТИЯ ГИПЕРПЛАСТИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА В ЭНДОМЕТРИИ И В МОЛОЧНЫХ ЖЕЛЕЗАХ, АССОЦИИРОВАННЫЙ ПОЛИМОРФИЗМОМ ГЕНОВ-КАНДИДАТОВ

встречался в 67,6 % случаев. Частота носительс-тва функционально ослабленного гена А/В составила 27 %. Генотип А/С выявлен в единичных случаях — 5,4 %. Все полученные данные сопоставимы с группой контроля: 66,7 %, 26,7 % и 6,7 %, соответственно.

- у пациенток с сочетанным гиперпластическим процессом эндометрия и молочных желез (III группа) отмечено значительное снижение распространения генотипа А/А (21,2 %), что, в свою очередь, привело к увеличению частоты встречаемости мутантных аллелей А/В, А/С, В/В, В/С и С/С. Частота носительства функционально ослабленного гена А/В составила 46,2 %, каждая четвертая женщина являлась носительницей генотипа А/С (21,2 %). Ввиду того, что генотип В/В встречался в единичных случаях у пациенток с сочетанным процессом (7,7 %), аллель В/С — у женщин с сочетанным и локализованным в молочных железах процессом (3,9 % и 14,6 %, соответственно) и генотип С/С — только у пациенток с гиперпластическим процессом, локализованным в молочных железах (14,6 %), было решено объединить мутантные генотипы А/В, А/С, В/В, В/С и С/С в «аллель» GSTP1 D для дальнейшего анализа носительства генов-кандидатов.

После объединения функционально неполноценных аллелей в генотип GSTP1 D, было получено статистически значимое повышение частоты мутантного генотипа у пациенток с сочетанным гиперпластическим процессом (III группа) — 88,5 % (р = 0,0001; OR = 13,7) в сравнении с женщинами, имеющими локализованное пролиферативное заболевание (I и II группы), и с группой контроля. Полученные результаты свидетельствуют об увеличении пролиферации и нарушении процессов апоптоза у пациенток с дисплазией, ограниченной молочными железами, а при вовлечении в гиперпластический процесс и эндометрия эти показатели увеличиваются еще больше.

Среднепопуляционная частота носительства аллелей гена CYP1A1, согласно приводимым в литературе данным, составляет: для аллеля AA — 91,3 %, aG — 8 %, GG — 0,7 %. В отношении гена CYP1A1

во всех исследуемых группах превалировал аллель АА: в группе контроля 73,3 %, в группе локализованного гиперпластического процесса в молочных железах и эндометрии (I и II группы) — 100 %, при сочетанном процессе (III группа) — 94,2 %, но полученные данные статистически не достоверны.

Ген GPIIIa представлен двумя аллельными формами: PL-AI и PL-AII. PL-AII является мутантным, его присутствие в генотипе приводит к замене лейцина на пролин в позиции 33Р3 субъединицы интег-рина. В популяции частота носительства данных аллелей равна, соответственно, 85,5 % для PL-AI и 14,5 % для PL-AII. Статистически значимое повышение частоты аллеля ТТ гена GPIIIa было получено у пациенток с гиперпластическим процессом, локализованным только в молочных железах (I группа) — 100 % (р = 0,0044; OR = 32,5) в сравнении с другими группами и группой контроля.

Проанализировав индивидуальные ассоциации генов-кандидатов с гиперпластическими процессами органов репродуктивной системы, мы приняли решение провести анализ сочетанного полиморфизма сразу нескольких неполноценных генотипов, чтобы оценить их роль в патогенезе пролиферативных заболеваний эндометрия и молочных желез.

Показано, что:

- у пациенток с изолированным гиперпластическим процессом в молочных железах (I группа) имеется сочетание генотипа TT/D/AA (56 %; р = 0,0027; OR = 12,3). Генотипическая комбинация с учетом полиморфизмов гена TC (PL-AII) отсутствует — 0 % (р = 0,02; OR = 0,04).

- у пациенток с изолированным гиперпластическим процессом эндометрия (II группа) статистически достоверна абсолютная комбинация аллелей ТТ/ АС/АG - 100 % (р < 0,001; OR = 2325,00).

- у пациенток с сочетанным гиперпластическим процессом эндометрия и молочных желез (III группа) имеется сочетание генотипа TT/D/AA — 48,1 % (р = 0,009; OR = 8,96).

Таким образом, у пациенток с ДДМЖ в генотипе статистически достоверно превалирует аллель А/А ге-

Сведения об авторах:

ОРДИЯНЦ Ирина Михайловна, доктор мед. наук, профессор, кафедра акушерства и гинекологии, Медицинский факультет, РУДН, г. Москва, Россия. E-mail: ordiyantc@mail.ru

АРАКЕЛОВ С.Э., докторант, кафедра акушерства и гинекологии, Медицинский факультет, РУДН, г. Москва, Россия.

ПАВЛОВА Е.А., аспирант, кафедра акушерства и гинекологии, Медицинский факультет, РУДН, г. Москва, Россия.

ДМИТРИЕВА Е.В., аспирант, кафедра акушерства и гинекологии, Медицинский факультет, РУДН, г. Москва, Россия.

КУУЛАР А.А., аспирант, кафедра акушерства и гинекологии, Медицинский факультет, РУДН, г. Москва, Россия.

Information about authors:

ORDIYANC Irina Michailovna, doctor of medical sciences, professor, department of obstetrics and gynecology, Faculty of Medicine, Peoples' Friendship University of Russia, Moscow, Russia. E-mail: ordiyantc@mail.ru

ARAKELOV S.E., doctoral, department of obstetrics and gynecology, Faculty of Medicine, Peoples' Friendship University of Russia, Moscow, Russia. PAVLOVA E.A., postgraduate student, department of obstetrics and gynecology, Faculty of Medicine, Peoples' Friendship University of Russia, Moscow, Russia.

DMITRIEVA E.V., postgraduate student, department of obstetrics and gynecology, Faculty of Medicine, Peoples' Friendship University of Russia, Moscow, Russia.

KUULAR A.A., postgraduate student, department of obstetrics and gynecology, Faculty of Medicine, Peoples' Friendship University of Russia, Moscow, Russia.

№4(59) 2014 с/^ть h^Stm вс7|узбассе

УКАЗАТЕЛИ

на GSTP1 (41,5 %) и аллель Т/Т гена GPIIIa (100 %), с позиции прогнозирования развития такого изолированного процесса наиболее информативна комбинация аллелей генов системы детоксикации CYP1A1 и GSTР1, а также гена межклеточных взаимодействий GPШa-ТТ/D/АА (56 %). Комбинация аллелей ТТ/АС/АG со 100 % точностью свидетельствует о

риске развития изолированного гиперпластического процесса в эндометрии. У пациенток с сочетанным гиперпластическим процессом в эндометрии и в молочных железах статистически значимо присутствие аллеля D гена GSTP1 (88,5 %) и комбинация аллелей исследуемых генов — ТТ/АА/АА (5 %) и ТТ/D/ АА (48 %).

ЛИТЕРАТУРА:

1. Молочные железы и гинекологические болезни /под ред. В.Е. Радзинского. - М., 2010.

2. Breast tissue composition and susceptibility to breast cancer /Boyd N.F., Martin L.J., Bronskill M.J. et al. //J. Nat. Cancer Inst. - 2010. -N 102. - Р. 1224-1237.

3. Mammographic density and breast cancer risk: the role of the fat surrounding the fibroglandular tissue /Lokate et al. //Breast Cancer Research. - 2011. - N 13. - Р. 103-111.

4. Эстрогены: от синтеза до клинического применения /под ред. В.П. Сметник. - М., 2012. - 176 с.

5. Зубкин, В.И. Патогенез, диагностика, комплексное лечение и профилактика рецидивов доброкачественных дисплазий молочных желез: Автореф. дис. ... канд. мед. наук /Зубкин В.И. - М., 2004.

6. Нерешенные проблемы терапии сочетанных доброкачественных новообразований гормонально зависимых органов /Манухин И.Б., Тихомиров А.Л., Крамар В.А. и др. //Русский медицинский журнал. - 2010. - Т. 8, № 4. - С. 176-179.

7. Лечение гиперпластических процессов эндометрия в периоде постменопаузы /Бреусенко В.Г., Савельева Г.М., Голова Ю.А. и др. //Акушерство и гинекология. - 2009. - № 4. - С. 19-23.

8. Коган, И.Ю. Гиперпластические процессы в молочных железах у женщин (патогенез, диагностика, прогнозирование течения): Авто-реф. дис. . докт. мед. наук /Коган И.Ю. - СПб., 2008. - 28 с.

9. Ашрафян, Л.А. Современные возможности профилактики и ранней диагностики предрака и рака репродуктивных органов /Ашра-фян Л.А., Киселев В.И. //Акушерство и гинекология. - 2009. - № 4. - С. 24-29.

10. Артымук, Н.В. Особенности метаболизма и рецепция эстрогенов при гиперпластических процессах эндометрия и эндометриозе /Ар-тымук Н.В., Гуляева Л.Ф., Зотова О.А. //Мать и Дитя в Кузбассе. - 2012. - № 1. - С. 8-12.

11. Чернуха, Г.Е. Гиперплазия эндометрия: перспективы развития проблемы /Чернуха Г.Е. //Акушерство и гинекология. - 2009. - № 4. -С. 11-15.

12. Mamographic density, estrogen receptor status and other breast cancer tumor characteristics / Ding J., Warren R., Girling A. et al. //Breast. -2010. - V. 16. - Р. 279-289.

УКАЗАТЕЛЬ СТАТЕЙ, ОПУБЛИКОВАННЫХ В ЖУРНАЛЕ «МАТЬ И ДИТЯ В КУЗБАССЕ» ЗА 2014 ГОД

ОРГАНИЗАЦИЯ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ_____________

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ СИМУЛЯЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ С ЦЕЛЬЮ ПОВЫШЕНИЯ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЙ КОМПЕТЕНЦИИ ВРАЧЕЙ АКУШЕРОВ-ГИНЕКОЛОГОВ В РАМКАХ ОКАЗАНИЯ НЕОТЛОЖНОЙ ПОМОЩИ

ПРИ ЭКТОПИЧЕСКОЙ БЕРЕМЕННОСТИ /Колесникова Е.А., Махмутходжаев А.Ш., Рипп Е.Г..............2

ОРГАНИЗАЦИЯ ПРЕНАТАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ В ЦЕНТРАЛЬНОМ ФЕДЕРАЛЬНОМ ОКРУГЕ

РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ /Малышкина А.И., Песикин О.Н., Кулигина М.В...........................2

ОСНОВНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ОКАЗАНИЯ ПОМОЩИ ПРИ АКУШЕРСКИХ КРОВОТЕЧЕНИЯХ

В КЕМЕРОВСКОЙ ОБЛАСТИ /Сурина М.Н., Артымук Н.В., Зеленина Е.М.............................1

ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ_______________________________________

ДИСПЛАЗИЯ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ - АКТУАЛЬНАЯ ПРОБЛЕМА СОВРЕМЕННОГО АКУШЕРСТВА.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ /Тышкевич О.С., Кравченко Е.Н......................................3

ОНКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ СОВРЕМЕННОЙ

ГОРМОНАЛЬНОЙ КОНТРАЦЕПЦИИ /Керемецкая Е.В...........................................4

ПАТОМОРФОЛОГИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ СЕРДЦА

У НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ /Сарыева О.П., Каменская М.В., Кулида Л.В., Перетятко Л.П.....2

РОЛЬ МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ В РАЗВИТИИ

ПАТОЛОГИИ ПЛАЦЕНТЫ /Кулида Л.В., Майсина А.И., Перетятко Л.П........................2

СОСТОЯНИЕ МОЛОЧНЫХ ЖЕЛЕЗ ПРИ ГИНЕКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

ТРИГГЕРНЫЕ ФАКТОРЫ АПОПТОЗА КАРДИОМИОЦИТОВ

У НОВОРОЖДЕННЫХ /Заднипряный И.В., Третьякова О.С., Сатаева Т.П.....................2

с/$(ръ и^ггя в^^узбассе

№4(59) 2014