ПИРИД-2-ОНЫ, ПРИМЕНИМЫЕ КАК ИНГИБИТОРЫ ПРОТЕИНКИНАЗ СЕМЕЙСТВА ТЕС ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ, ПРОЛИФЕРАТИВНЫХ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИ-ОПОСРЕДОВАННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
PYRID-2-ONES APPLICABLE AS PROTEIN KINASE INHIBITORS OF TEC FAMILY FOR TREATING INFLAMMATORY, PROLIFERATIVE AND IMMUNOLOGICALLY MEDIATED DISEASES

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к соединениям, применимым в качестве ингибиторов протеинкиназ. Изобретение также обеспечивает фармацевтически приемлемые композиции, содержащие соединения изобретения и способы использования композиций при лечении различных расстройств. Изобретение также обеспечивает способы получения соединений изобретения и промежуточных соединений, применимых в указанных способах.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Поиску новых терапевтических агентов в последние годы очень помогло лучшее понимание структуры ферментов и других биомолекул, связанных с заболеваниями. Одним из важных классов ферментов, которые были предметом обширного исследования, являются протеинкиназы.
The Protein Kinase Facts Book, I and II,
FASEB J.
Science
Cell
Cell
EMBO J
Протеинкиназы составляют большое семейство структурно родственных ферментов, которые являются ответственными за контроль множества процессов передачи сигнала внутри клетки (См., Hardie, G. and Hanks, S.  Academic Press, San Diego, CA: 1995). Протеинкиназы, как считается, произошли от общего анцестрального гена из-за консервативности своей структуры и каталитической функции. Почти все киназы содержат сходный каталитический домен размером 250-300 аминокислот. Киназы могут быть категоризированы в семейства в зависимости от субстрата, который они фосфорилируют (например, протеин-тирозин, протеин-серин/треонин, липиды, и т.д.). Были идентифицированы мотивы последовательности, которые, в общем, соответствуют каждому из указанных семейств киназ (См., например, Hanks, S.K., Hunter, T.,  1995, 9, 576-596; Knighton et al., 1991, 253, 407-414; Hiles et al.,  1992, 70, 419-429; Kunz et al.,  1993, 73, 585-596; Garcia-Bustos et al., . 1994, 13, 2352-2361).
2
2
Вообще, протеинкиназы опосредуют внутриклеточную передачу сигналов, оказывая воздействие на передачу фосфорила от нуклеозидтрифосфата к белку-акцептору, который вовлечен в сигнальный путь. Указанные акты фосфорилирования выступают в качестве молекулярных переключателей, которые могут вызывать или регулировать биологическую функцию целевого белка. Эти акты фосфорилирования в конечном счете инициированы в ответ на разнообразие внеклеточных и других стимулов. Примеры таких стимулов включают внешние и химические сигналы стресса (например, осмотический шок, тепловой шок, ультрафиолетовое излучение, бактериальный эндотоксин, и HO), цитокины (например, интерлeйкин 1 (IL-1) и фактор некроза опухоли α (TNF-α)), и факторы роста (например, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), и фибробластный фактор роста (FGF)). Внеклеточный стимул может затронуть один или более клеточных ответов, связанных с ростом клеток, миграцией, дифференцировкой, секретированием гормонов, активацией факторов транскрипции, сокращением мышц, метаболизмом глюкозы, контролем синтеза белка, и регуляцией клеточного цикла.
Многие заболевания связаны с неправильными клеточными ответами, вызванными протеинкиназ-опосредованными событиями, как описано выше. Указанные заболевания включают, помимо прочего: аутоиммунные заболевания, воспалительные заболевания, заболевания костей, нарушения обмена веществ, неврологические и нейродегенеративные болезни, рак, сердечно-сосудистые заболевания, аллергии и астму, болезнь Альцгеймера и гормональные заболевания. Таким образом, в области лекарственной химии было предпринято существенное усилие с целью найти ингибиторы протеинкиназ, которые являются эффективными в качестве терапевтических агентов.
Тес семейство нерецепторных тирозинакиназ играет центральную роль в передаче сигналов через антигенные рецепторы, такие как TCR, BCR и Fcε рецепторы (рассмотрено в Miller A, et al., Current Opinion in Immunology 14;331-340 (2002)). Киназы Тес семейства необходимы для активации T-клеток. Три члена Тес семейства, Itk, Rlk и Тес, активируются по ходу транскрипции в результате взаимодействия антигенного рецептора в T-клетках и передают сигналы по ходу транскрипции эффекторам, включая PLC-γ. Удаление Itk у мышей приводит к снижению пролиферации, индуцированной T-клеточным рецептором (TCR), и к секреции цитокинов IL-2, IL-4, IL-5, IL-10 и IFN-γ (Schaeffer et al, Science 284; 638-641 (1999), Fowell et al., Immunity 11;399-409 (1999), Schaeffer et al Nature Immunology 2,12; 1183-1188 (2001)). Иммунологические симптомы аллергической астмы снижены у мышей Itk-/-. Воспаление легких, эозинофильная инфильтрация и образование слизи существенно снижены у Itk-/- мышей в ответ на провокацию OVA аллергеном (Mueller et al., Journal of Immunology 170: 5056-5063 (2003)). Itk был также вовлечен в атопический дерматит. Сообщалось, что указанный ген имел более высокий уровень экспрессии в T-клетках периферической крови у пациентов с умеренным и/или тяжелым атопическим дерматитом, чем у контрольных пациентов или у пациентов с мягким атопическим дерматитом (Matsumoto et al, International archives of Allergy and Immunology 129; 327-340 (2002)).
Спленоциты мышей Rlk-/- секретируют половину IL-2, вырабатываемого животными дикого типа в ответ на включение TCR (Schaeffer et al, Science 284; 638-641 (1999)), тогда как комбинированное удаление Itk и Rlk у мышей приводит к полному ингибированию TCR-индуцированных ответов, включая пролиферацию и продукцию цитокинов IL-2, IL-4, IL-5 и IFN-γ (Schaeffer et al Nature Immunology 2,12; 1183-1188 (2001)), Schaeffer et al, Science 284; 638-641 (1999)). В T-клетках, дефицитных по Itk/Rlk, оказывается воздействие на внутриклеточную передачу сигналов после включения TCR; продукция инозит трифосфата, мобилизация кальция, активация МАР киназы, и активация факторов транскрипции NFAT и АР-1 все являются сниженными (Schaeffer et al., Science 284; 638-641 (1999), Schaeffer et al. Nature Immunology 2,12; 1183-1188 (2001)).
Киназы Тес семейства также необходимы для развития и активации B-клеток. Пациенты с мутациями в Btk имеют сильную блокировку развития B-клеток, что приводит к почти полному отсутствию B-лимфоцитов и клеток плазмы, сильно сниженным уровням Ig и полному ингибированию гуморального ответа к вторичным антигенам (рассмотрено в Vihinen et al. Frontiers in Bioscience 5:d917-928). Мыши, дефицитные по Btk также имеют уменьшенное число периферических В-клеток и сильно сниженные уровни IgM и IgG3. Делеция Btk у мышей оказывает сильный эффект на пролиферацию В-клеток, индуцированную анти-IgM, и ингибирует иммунные ответы к тимус-независимым антигенам типа II (Ellmeier et al., J Exp Med 192:1611-1623 (2000)).
Tec киназы также играют роль в активации тучных клеток через высокоаффинный рецептор IgE (FcεRI). Itk и Btk экспрессируются в тучных клетках и активируются поперечным связыванием с FcεRI (Kawakami et al, Journal of Immunology; 3556-3562 (1995)). Мышиные тучные клетки, дефицитные по Btk, имеют пониженную дегрануляцию и сниженную выработку провоспалительных цитокинов после поперечного связывания с FcεRI (Kawakami et al. Journal of leukocyte biology 65:286-290). Дефицит Btk также приводит к снижению эффекторных функций макрофага (Mukhopadhyay et al, Journal of Immunology; 168, 2914-2921 (2002)).
Соответственно, существует высокая потребность в разработке соединений, применимых в качестве ингибиторов протеинкиназ. В частности, было бы желательно разработать соединения, которые являются применимыми в качестве ингибиторов Тес семейства (например, Tec, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) протеинкиназ, особенно учитывая неадекватные способы терапии, доступные в настоящее время для большинства расстройств, связанных с их активацией.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Было установлено, что соединения и фармацевтически приемлемые композиции настоящего изобретения являются эффективными в качестве ингибиторов протеинкиназ. В определенных вариантах осуществления указанные соединения эффективны в качестве ингибиторов Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) протеинкиназ. Указанные соединения имеют формулу I, как определено здесь, или являются их фармацевтически приемлемой солью.
Указанные соединения и их фармацевтически приемлемые композиции применимы для лечения или профилактики разнообразных заболеваний, расстройств или состояний, включая, в том числе, аутоиммунные, воспалительные, пролиферативные или гиперпролиферативные заболевания или иммунологически-опосредованные заболевания. Композиции также применимы в способах профилактики тромбин-индуцированной агрегации тромбоцитов. Соединения, представленные в соответствии с настоящим изобретением, также применимы для исследования киназ в биологических и патологических явлениях; для исследования внутриклеточных путей передачи сигналов, опосредованных такими киназами; и для сравнительной оценки новых ингибиторов киназ.
Также настоящим изобретением обеспечиваются способы получения соединений настоящего изобретения и промежуточных соединений, применимых в указанных способах.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение описывает соединения Формулы I:
или их фармацевтически приемлемую соль, где
3
4
1-4
1-2
3
2
2
3
3
2
каждый R и R независимо является H, галогеном или C-алифатической группой, необязательно замещенной галогеном, C-алифатической группой, OCH, NO, NH, CN, NHCH, SCH или N(CH);
2
2
R
R представляет собой 3-8-членное насыщенное, частично ненасыщенное или полностью ненасыщенное моноциклическое кольцо, имеющее 0-3 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы или 8-12-членную насыщенную, частично ненасыщенную или полностью ненасыщенную кольцевую бициклическую систему, имеющую 0-5 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы; R необязательно замещена J;
1
2
1
2
1
2
2
2
каждый X и X независимо является -C(O)-, -NR- или -SO-, где один из X или X является -NR- и другой из X или X является -C(O)- или -SO-;
1-6
R представляет собой H, незамещенную C-алифатическую группу;
1
R представляет собой -T-Q;
1-6
2
5
т
T представляет собой связь или C-алифатическую группу, в которой до трех метиленовых звеньев цепи необязательно и независимо заменены на G или G', где G является -NR-, -O-, -S-, -SO-, SO-, -CS- или -СО-; G' является циклопропилом, C≡C или C=C; T необязательно замещен J;
1-6
Q
Q независимо является водородом, C-алифатической группой, 3-8-членным насыщенным, частично ненасыщенным или полностью ненасыщенным моноциклическим кольцом, имеющим 0-3 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы или 8-12-членной насыщенной, частично ненасыщенной или полностью ненасыщенной кольцевой бициклической системой, имеющей 0-5 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы; Q необязательно замещен J;
5
5
6-10
3-10
R является необязательно замещенным R, C-арилом, C-циклоалифатической группой, 5-14-членным гетероарилом или 5-14-членной гетероциклической группой; или две группы R, вместе с атомом(ами), с которым они связаны, образуют необязательно замещенное 3-7-членное моноциклическое или 8-14-членное бициклическое кольцо;
R
T
Q
необязательные заместители J, J и J определены здесь.
В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения при условии, что
2
3
1
2
когда R представляет собой 4-пиридил или 3-пиридил, R представляет собой H, X представляет собой -NR-, R представляет собой H, и X представляет собой -C(O)-; тогда
1
3
3
2
3
2
3
a) R не является CH(CH)OC(=O)CH; CHOC(=O)CH; или CHC(=O)CH;
1
1-6
1-6
b) R не является C-алкилом или O(C-алкилом);
2
3
4
1
2
когда R является 4-пиридилом, R и R являются H, X является -NR-, R является H, а X является -C(O)-, тогда
3
a) когда T является связью, Q не является метилом, имидазолом, OCH или H;
2
2
3
3
b) когда T является -CH-, Q не является 3-OH-фенилом, 4-OH-фенилом, 4-пиридилом, 3-NO-фенилом, ОН, -О(C=O)CH или -C(=O)CH;
3
3
c) когда T является -CH(CH)-, Q не является - ОС(=O)CH;
2
2
d) когда T является -CHCH-, Q не является 2-пиридилом или -СООН;
3
3
e) когда T является CH(CH)СО(=O)-, Q не является CH;
2
3
4
1
2
когда R является 4-пиридилом, R является H, R не является H, X является -NR-, R является H, и X является -C(O)-, тогда
3
a) когда T является связью, Q не является CH;
1
3
3
b) R не является CH(CH)СО(=O)CH;
2
3
4
1
2
когда R является 2,4-пиримидилом, R и R являются H, X является -NR-, R является H, и X является -C(O)-, тогда
1
3
2
a) R не является метилом, NHCH или -NHC(=O)NH;
2
3
4
1
2
2
когда R является 4-пиридилом, Rи R являются H, X является -NR-, R является H, и X является -SO-, тогда
6-10
5-10
а) когда T является связью, Q не является необязательно замещенным C-арилом или C-гетероарилом;
2
3
4
1
2
3
когда R является 4-тиазолилом, R является H, R является CH, X является -C(O)-, X является -NR-, R является H, тогда
2
2
3
2
а) когда T является -CHCH-, Q не является N(CH);
2
3
4
1
2
когда R является незамещенным фенилом, Rи R являются H, X является -NR-, R является H, и X является -C(O)-,
1
5
5
тогда, когда T является C-алифатической группой, где 1 звено метиленовой цепи заменено на G; G является -NR-; а R является H; тогда Q не является 2,6-ди-изопропилфенилом;
2
3
4
1
2
3
когда R является незамещенным фенилом, R является H, R является CH, X является -C(O)-, X является -NR-, R является H, тогда
3
2
3
a) когда T является связью, Q не является CH или CHCH;
2
2
2
3
2
b) когда T является -CHCH-, Q не является незамещенным фенилом или N(CHCH);
2
2
2
2
3
2
c) когда T является -CHCHCH-, Q не является N(CHCH);
1
2
d) R не является NH;
2
3
4
1
2
3
когда R является незамещенным фенилом, R является H, R является CH, X является -NR-, R является H, X является -C(O)-, тогда
2
a) когда T является -О-CH-, Q не является незамещенным фенилом,
2
3
4
1
2
3
3
когда R является 4-OCH-фенилом, R является H, R является CH, X является -NR-, R является H, X является -C(O)-, тогда
3
a) когда T является связью, Q не является CH;
2
3
4
1
2
когда R является 6-членным гетероарилом с 2 азотами; R является H, метилом или этилом; R является метилом или этилом; X является -NR-, R является H, X является -C(O)-, тогда
1
3
a) R не является CH;
1
2
1
когда X является -C(O)-, X является -NR-, и R является H, тогда Rне является H или метилом;
2
3
4
1
2
1
3
когда R является , R и R являются H, X является -NR-, R является H, и X является -C(O)-, тогда R не является CH;
2
3
4
1
2
когда R является незамещенным фенилом, R и R являются H, X является -C(O)-, X является -NR-, R является H, тогда
1
R не является.
Другие варианты осуществления настоящего изобретения при условии, что
2
3
1
2
когда R является 4-пиридилом, 3-пиридилом или ; R является H, X является -NR-, R является H, и X является -C(O)-; тогда
1
1-6
1-6
3
3
a) R не является H, C-алкилом, O(C-алкилом), CH(CH)ОС(=O)CH или имидазолом;
2
2
3
3
b) когда T является -CH-, Q не является 3-OH-фенилом, 4-OH-фенилом, 4-пиридилом, 3-NO-фенилом, ОН, ОС(=O)CH или -C(=О)CH;
2
2
c) когда T является -CHCH-, Q не является 2-пиридилом или -COOH;
2
3
4
1
2
когда R является 2,4-пиримидилом, R и R являются H, X является -NR-, R является H, и X является -C(O)-, тогда
1
3
2
a) R не является метилом, NHCH или -NHC(=O)NH;
2
3
4
1
2
2
когда R является 4-пиридилом, R и R являются H, X является -NR-, R является H, и X является -SO-, тогда
6-10
5-10
a) когда T является связью, Q не является необязательно замещенным C-арилом или C-гетероарилом;
2
3
4
1
2
3
когда R является 4-тиазолилом, R является H, R является CH, X является -C(O)-, X является -NR-, R является H, тогда
2
2
3
2
2
3
1
2
a) когда T является -CHCH-, Q не является N(CH); когда R является необязательно замещенным фенилом, R является H, X является -NR-, R является H, и X является -C(O)-, тогда
1
5
5
a) когда T является C-алифатической группой, где 1 единица метиленовой цепи заменена на G; G является -NR-; и R является H; тогда Q не является 2,6-ди-изопропилфенилом;
2
b) когда T является -О-CH-, Q не является незамещенным фенилом;
3
c) когда T является связью, Q не является CH;
2
3
1
2
когда R является незамещенным фенилом, R является H, X является -C(O)-, X является -NR-, R является H, тогда
3
2
3
a) когда T является связью, Q не является CH или CHCH;
2
2
2
3
2
b) когда T является -CHCH-, Q не является незамещенным фенилом или N(CHCH);
2
2
2
2
3
2
c) когда T является -CHCHCH-, Q не является N(CHCH);
1
2
d) R не является NH или ,
2
3
4
1
2
1
3
когда R является 6-членным гетероарилом с 2 азотами; R является H, метилом или этилом; R является метилом или этилом; X является -NR-, R является H, X является -C(O)-, тогда R не является CH;
1
2
1
когда X является -C(O)-, X является -NR-, и R является H, тогда R не является H или метилом.
Соединения настоящего изобретения включают соединения, описанные в общем выше и далее иллюстрированные по классам, подклассам, и разновидностям, раскрытым здесь. Следующие определения, используемые здесь, должны применяться, если не указано иначе. В соответствии с целями настоящего изобретения химические элементы идентифицированы в соответствии с Периодической таблицей Элементов, версии CAS, Руководства по Химии и Физике, 75-ой редакции. Дополнительно, общие принципы органической химии описаны в "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, и "March's Advanced Organic Chemistry", 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001, все содержание которого тем самым включено ссылкой.
Как описано здесь, соединения изобретения могут быть необязательно замещены одним или более заместителями, такими как показано в общем выше или как показано специфическими классами, подклассами, и разновидностями изобретения. Следует понимать, что фраза "необязательно замещенный" используется попеременно с фразой "замещенный или незамещенный". В общем, термин "замещенный", предшествовавший ли термину "необязательно" или нет, относится к замене водородных радикалов в данной структуре на радикал указанного заместителя. Если не обозначено иначе, группа, которая необязательно замещена, может иметь заместитель в каждом замещаемом положении группы, и когда более чем одно положение в любой приведенной структуре можно заменить более чем одним заместителем, выбранным из указанной группы, заместитель может быть или одинаковым или различным в каждом положении. Комбинации заместителей, предполагаемых в соответствии с настоящим изобретением, являются предпочтительно такими, которые приводят к образованию стабильного или химически вероятного соединения. Термин "стабильный", используемый здесь, относится к соединениям, которые существенно не изменяются, когда подвергаются условиям, необходимым для их производства, детекции, и предпочтительно их выделения, очистки, и использования для одной или более целей, раскрытых здесь. В некоторых вариантах осуществления, стабильное соединение или химически вероятное соединение являются такими соединениями, которые существенно не изменяются при хранении при температуре 40°C или меньше, в отсутствие влажности или других химически реактивных условий, в течение, по крайней мере, недели.
1-3
2
3
2
3
2
2
Термин "необязательно прерванный" относится к замене одного атома в пределах алкилиденовой цепи другим атомом. Если иначе не определено, второй атом может заменить первый атом в любом положении, включая концевые атомы. Например, C-алкильная цепь, необязательно прерванная -O-, может образовать -OCHCH, -CH-OCH или CHCHOH. Если иначе не определено, концевые группы связаны с водородом на концевой стороне.
3
8
8
12
Используемый здесь термин "алифатический" или "алифатическая группа" означает прямую цепь (то есть, неразветвленную) или разветвленную, замещенную или незамещенную углеводородную цепь, которая полностью насыщена или которая содержит одну или более единиц ненасыщенности или моноциклический углеводород или бициклический углеводород, который полностью насыщен или который содержит одну или более единиц ненасыщенности, но который не является ароматическим (также упомянут здесь как "карбоциклический", "циклоалифатический" или "циклоалкильный"), который имеет единственную точку присоединения к остальной части молекулы. Если иначе не определено, алифатические группы содержат 1-20 алифатических атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-10 алифатических атомов углерода. В других вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-8 алифатических атомов углерода. В опять же других вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-6 алифатических атомов углерода, и во все же других вариантах осуществления алифатические группы содержат 1-4 алифатических атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления "циклоалифатический" (или "карбоциклический" или "циклоалкильный") относятся к моноциклическому C-C углеводороду или бициклическому C-C углеводороду, который полностью насыщен или который содержит одну или более единиц ненасыщенности, но который не является ароматическим, который имеет единственную точку присоединения к остальной части молекулы, где любое индивидуальное кольцо в указанной кольцевой бициклической системе имеет 3-7 членов. Подходящие алифатические группы включают, помимо прочего, линейные или разветвленные, замещенные или незамещенные алкильные, алкенильные, алкинильные группы и их гибриды, такие как (циклоалкил)алкильные, (циклоалкенил)алкильные или (циклоалкил)алкенильные.
Должно быть понятно, что кольцевые системы здесь могут быть линейно конденсированными, мостиковыми или спироциклическими.
Используемый здесь термин "гетероалифатические" означает алифатические группы, в которых один или два атома углерода независимо заменены на один или более атомов кислорода, серы, азота, фосфора или кремния. Гетероалифатические группы могут быть замещенными или незамещенными, разветвленными или неразветвленными, циклическими или ациклическими, а также включать "гетероциклы", "гетероциклильные", "гетероциклоалифатические" или "гетероциклические" группы.
Используемый здесь термин "гетероцикл", "гетероциклильные", "гетероциклоалифатические" или "гетероциклические" означает неароматические, моноциклические, бициклические или трициклические кольцевые системы, в которых один или более атомов кольца являются независимо выбранным гетероатомом. В некоторых вариантах осуществления, "гетероцикл", "гетероциклильная", "гетероциклоалифатическая" или "гетероциклическая" группа имеет от трех до четырнадцати членов в кольце, из которых один или более членов кольца являются гетероатомами, независимо выбранными из кислорода, серы, азота или фосфора, причем каждое кольцо в системе содержит 3-7 членов.
+
Термин "гетероатом" означает один или более атомов кислорода, серы, азота, фосфора или кремния (включая любую окисленную форму азота, серы, фосфора или кремния; четвертичную форму любого основного азота; или замещаемый азот гетероциклического кольца, например, N (как в 3,4-дигидро-2H-пирролиле), NH (как в пирролидиниле) или NR (как в N-замещенном пирролидиниле)).
Используемый здесь термин "ненасыщенный" означает, что группа имеет одну или более единиц ненасыщенности.
Также используемый здесь термин "алкоксильный" или "тиоалкильный" относится к алкильной группе, как было определено предварительно, присоединенной к основной углеродной цепи через атом кислорода ("алкоксильный") или серы ("тиоалкильный").
Термины "галоалкильный", "галоалкенильный" и "галоалкоксильный" означает алкил, алкенил или алкоксил, в зависимости от обстоятельств, замещенный одним или более атомами галогена. Термин "галоген" означает F, Cl, Br или I.
Термин "арильный", используемый самостоятельно или как часть большей молекулы, как в "аралкиле", "аралкокси" или "арилоксиалкиле", относится к моноциклическим, бициклическим и трициклическим кольцевым системам, имеющим в общей сложности от пяти до четырнадцати членов в кольце, где, по крайней мере, одно кольцо в системе является ароматическим и где каждое кольцо в системе содержит 3-7 членов. Термин "арил" может использоваться попеременно с термином "арильное кольцо".
Термин "гетероарильный", используемый самостоятельно или как часть большей молекулы, как в "гетероаралкиле" или "гетероарилалкокси", относится к моноциклическим, бициклическим и трициклическим кольцевым системам, имеющим в общей сложности от пяти до четырнадцати членов в кольце, где, по крайней мере, одно кольцо в системе является ароматическим, по крайней мере, одно кольцо в системе содержит один или более гетероатомов, и где каждое кольцо в системе содержит 3-7 членов. Термин "гетероарильный" может использоваться попеременно с термином "гетероарильное кольцо" или термином "гетероароматический".
R
Т
Q
1-6
2
3
2
1-4
2
6-10
1-6
1-6
6-10
1-6
3-10
1-6
3-10
1-6
1-6
2
1-6
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
0-2
Арильная (включая аралкильную, аралкокси, арилоксиалкильную и т.п.) или гетероарильная (включая гетероаралкильную и гетероарилалкокси и т.п.) группа может содержать один или более заместителей. Подходящие заместители (например J, J и J) на ненасыщенном атоме углерода арильной или гетероарильной группы выбраны из галогена; -R°; C-алкила, необязательно замещенного R°, в котором до трех метиленовых звеньев цепи необязательно и независимо заменены -NR°-, -O-, -S-, -SO-, SO- или -CО- в химически стабильном окружении; -OCF; -SCF; C-галоалкила; -CH-галогена; C-арила, который необязательно замещен R°; 5-12-членного гетероарила, необязательно замещенного R°; 3-12-членного гетероциклического кольца, необязательно замещенного R°; -O(Ph), необязательно замещенного R°; -CH=CH(Ph), необязательно замещенного R°; -CH≡CH(Ph), необязательно замещенного R°, -C-алкил-(5-12-членного гетероциклила), необязательно замещенного R°; -C-алкил-(C-арила), необязательно замещенного R°, -C-алкил-(5-10-членного гетероарила), необязательно замещенного R°; C-циклоалифатической группы, необязательно замещенной R°; -C-алкил-(C-циклоалифатической) группы, необязательно замещенной R°; -(C-алкил)-OR°, необязательно замещенного R°; -(C-алкил)-N(R°), необязательно замещенного R°; -(C-алкил)-SR°, необязательно замещенного R°; -NO; -CN; -OR°; -SR°; -N(R°); -NR°C(O)R°; -NR°C(S)R°; -NR°C(O)N(R°); -NR°C(S)N(R°); -NR°COR°; -NR°NR°C(O)R°; -NR°NR°C(O)N(R°); -NR°NR°COR°; -C(O)C(O)R°; -C(O)CHC(O)R°; -COR°; -C(O)R°; -C(S)R°; -C(О)N(R°); -C(S)N(R°); -OC(O)N(R°); -OC(O)R°; -C(O)N(OR°)R°; -C(NОR°)R°; -S(O)R°; -S(O)R°; -SON(R°); -S(O)R°; -NR°SON(R°); -NR°SOR°; -N(ОR°)R°; -C(=NH)-N(R°); -P(O)R°; -PO(R°); -OPO(R°); и -(CH)NHC(O)R°.
2
1-4
1-4
2
1-4
2
2
2
1-4
1-4
1-4
1-6
2
2
2
Каждый R° независимо выбран из водорода, NH, NH(C-алифатической) группы, N(C-алифатической) группы, галогена, ОН, O(C-алифатической) группы, NO, CN, COH, CO(C-алифатической) группы, O(гало-C-алифатической) группы, гало-C-алифатической группы, необязательно замещенной C-алифатической группы, в которой до 2 метиленовых звеньев необязательно заменены O, N или S, необязательно замещенного 5-8-членного гетероциклила, незамещенного 5-6-членного гетероарила, незамещенной 3-6-членной циклоалифатической группы, незамещенного фенила, незамещенного -O(Ph), незамещенного -CH(Ph), незамещенного -CH(5-7-членного гетероциклила) или незамещенного -CH(5-6-членного гетероарила); или, несмотря на определение выше, два независимых R°, на том же самом заместителе или различных заместителях, взятые вместе с атомом(ами), с которым связана каждая R° группа, образует необязательно замещенное 3-12-членное насыщенное, частично ненасыщенное или полностью ненасыщенное моноциклическое или бициклическое кольцо, имеющее 0-4 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы.
2
1-4
1-4
2
1-4
1-4
2
2
2
1-4
1-4
1-4
1-4
Необязательные заместители на алифатической группе R° или на кольце, образованном 2 R° группами, выбраны из NH, NH(C-алифатической) группы, N(C-алифатической) группы, галогена, С-алифатической группы, ОН, O(C-алифатической) группы, NO, CN, COH, CO(C-алифатической) группы, O(гало-C-алифатической) группы и гало-C-алифатической группы, где каждая из предшествующих C-алифатических групп R° является незамещенной.
R
T
Q
*
*
*
*
*
*
*
2
2
2
1-6
2
1-4
1-4
2
1-4
1-4
2
2
2
1-4
1-4
1-4
1-4
Алифатическая или гетероалифатическая группа или неароматическое гетероциклическое кольцо может включать один или более заместителей. Подходящие заместители (например J, J и J) на насыщенном углероде алифатической или гетероалифатической группы или неароматического гетероциклического кольца выбраны из упомянутых выше для ненасыщенного углерода арильной или гетероарильной группы и дополнительно включают следующие: =O, =S, =NNHR, =NN(R), =NNHC(О)R, =NNHCO(алкил), =NNHSO (алкил), =NОH и =NR, где каждый R независимо выбран из водорода и необязательно замещенной C-алифатической группы. Необязательные заместители на алифатической группе R выбраны из NH, NH(C-алифатической) группы, N(C-алифатической) группы, галогена, C-алифатической группы, ОН, O(C-алифатической) группы, NO, CN, COH, CO(C-алифатической) группы, O(гало-C-алифатической) группы и гало-(C-алифатической) группы, где каждая из предшествующих C-алифатических групп R является незамещенной.
R
T
Q
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
2
2
2
2
2
2
2
2
2
1-6
2
2
2
2
1-4
1-4
2
1-4
1-4
2
2
2
1-4
1-4
1-4
1-4
Необязательные заместители (например J, J и J) на азоте неароматического гетероциклического кольца или на азоте гетероарильного кольца выбраны из -R, -N(R), -C(O)R, -COR, -C(O)C(O)R, -C(O)CHC(O)R, -SOR, -SON(R), -C(=S)N(R), -C(=NH)-N(R), и -NRSOR; где R представляет собой водород, необязательно замещенную C-алифатическую группу, необязательно замещенный фенил, необязательно замещенный -O(Ph), необязательно замещенный -CH(Ph), необязательно замещенный -(CH)(Ph); необязательно замещенный -CH=CH(Ph); или незамещенное 5-6-членное гетероарильное или гетероциклическое кольцо, имеющее от одного до четырех гетероатомов, независимо выбранных из кислорода, азота и серы или, несмотря на определение выше, два независимых R, на том же самом заместителе или различных заместителях, взятые вместе с атомом(ами), с которым связана каждая R группа, образуют 5-8-членное гетероциклильное, арильное или гетероарильное кольцо или 3-8-членное циклоалифатическое кольцо, включающее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы. Необязательные заместители на алифатической группе или фенильном кольце R выбраны из NH, NH(C-алифатической) группы, N(C-алифатической) группы, галогена, C-алифатической группы, ОН, O(C-алифатической) группы, NO, CN, COH, CO(C-алифатической) группы, O(гало-C-алифатической) группы, и гало-(C-алифатической) группы, где каждая из предшествующих C-алифатических групп R является незамещенной.
2
2
2
2
2
2
Термин "алкилиденовая цепь" относится к прямой или разветвленной углеродной цепи, которая может быть полностью насыщенной или иметь одну или более единиц ненасыщенности, и имеет две точки присоединения к остальной части молекулы, в которой одно или более метиленовых звеньев могут быть необязательно и независимо заменены группой, включая, в том числе, CO, CO, СОСО, CONR, OCONR, NRNR, NRNRCO, NRCO, NRCO, NRCONR, SO, SO, NRSO, SONR, NRSONR, O, S; или NR.
+
+
+
+
+
2
Как описано выше, в некоторых вариантах осуществления, два независимых R° (или R или любой другой переменной, подобно определенной здесь), взятые вместе с атомом(ами), с которым связана каждая переменная, образуют 5-8-членное гетероциклильное, арильное или гетероарильное кольцо или 3-8-членное циклоалкильное кольцо, имеющее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы. Типичные кольца, которые образуются, когда два независимых R° (или R или любая другая переменная, подобно определенная здесь) взяты вместе с атомом(ами), с которым связана каждая переменная, включают, помимо прочего: a) два независимых R° (или R или любой другой переменной, подобно определенной здесь), которые связаны с тем же самым атомом и взяты вместе с тем атомом, чтобы образовать кольцо, например, N(R°), где оба R° взяты вместе с атомом азота, чтобы образовать пиперидин-1-иловую, пиперазин-1-иловую или морфолин-4-иловую группу; и b) два независимых R° (или R или любой другой переменной, подобно определенной здесь), которые связаны с различными атомами и взяты вместе с этими обоими атомами, чтобы образовать кольцо, например, где фенильная группа замещена в двух положениях OR°, эти два положения R° взяты вместе с атомами кислорода, с которыми они связаны, чтобы образовать конденсированное 6-членное кислородсодержащее кольцо:. Будет понятно, что другие разнообразные кольца могут быть образованы, когда два независимых R° (или R или любой другой переменной, подобно определенной здесь) взяты вместе с атомом(ами), с которыми связана каждая переменная, и что примеры, описанные выше, не предназначены, чтобы ограничивать изобретение.
13
14
Если иначе не указано, структуры, изображенные здесь, также предназначены, чтобы включить все изомерные (например, энантиомерные, диастереомерные, и геометрические (или конформационные)) формы структуры; например, R и S конфигурации для каждого асимметричного центра, (Z) и (E) изомеры по двойной связи, и (Z) и (E) конформационные изомеры. Поэтому отдельные стереохимические изомеры, а также энантиомерные, диастереомерные, и геометрические (или конформационные) смеси настоящих соединений входят в объем изобретения. Если иначе не указано, все таутомерные формы соединений изобретения включены в объем изобретения. Дополнительно, если иначе не указано, структуры, изображенные здесь, также предназначены, чтобы включать соединения, которые отличаются только присутствием одного или более изотопно обогащенных атомов. Например, соединения, имеющие настоящие структуры, за исключением замены водорода дейтерием или тритием или замены углерода C- или C-обогащенным углеродом, включены в объем настоящего изобретения. Такие соединения применимы, например, в качестве аналитических инструментов или зондов в биологических тестах.
Если иначе не указано, структуры, изображенные здесь, также предназначены, чтобы включать N-оксидное производное или фармацевтически приемлемую соль каждого из соединений формулы I.
1-3
5
Согласно одному из вариантов исполнения изобретения, T представляет собой C-алифатическую группу, необязательно прерванную нулем или одной группой G, где G выбрана из O, NR и S.
1-2
1-3
5
2
В некоторых вариантах осуществления T представляет собой -C-алифатическую-G группу, где G является O или NR, причем G связана с Q в химически стабильном окружении. В других вариантах осуществления G связана с X в химически стабильном окружении. В еще одних вариантах осуществления Т представляет собой C-алифатическую группу, необязательно прерванную нулем групп G.
1-3
1-3
В некоторых вариантах осуществления T представляет собой C-алифатическую группу, необязательно прерванную нулем или одной группой G'. В других вариантах осуществления T представляет собой C-алифатическую группу, необязательно прерванную нулем или одной группой G или G'.
2
В некоторых вариантах осуществления T представляет собой -CH-; в других вариантах осуществления T представляет собой связь.
3
4
3
4
Согласно одному варианту осуществления изобретения, каждый R и R независимо является H. В некоторых вариантах осуществления и R и R представляют собой H.
2
R
2
R
2
R
2
2
R
Согласно некоторым вариантам осуществления R является 5-8-членным моноциклилом, необязательно замещенным 5 группами J. В определенных вариантах осуществления R представляет собой 5-6-членный арил или гетероарил, необязательно замещенный 5 J группами. В других вариантах осуществления R является 5-6-членным гетероарилом, необязательно замещенным 5 группами J, предпочтительно R представляет собой 6-членный гетероарил, имеющий 1 или 2 атома азота, где R необязательно замещен 5 группами J.
2
R
2
R
2
R
2
R
3-8
3-8
3-8
В некоторых вариантах осуществления R представляет собой C-циклоалифатическую группу, необязательно замещенную пятью J группами. В других вариантах осуществления R представляет собой C-циклоалкил, необязательно замещенный группами J, в количестве до пяти групп. В определенных вариантах осуществления R представляет собой C-циклоалкенил, необязательно замещенный группами J, в количестве до пяти групп. В других вариантах осуществления R представляет собой циклопентил, циклопентенил, циклогексил, циклогексенил, циклогептил или циклогептенил, необязательно замещенный группами J, в количестве до пяти групп.
2
R
2
R
2
R
2
2
R
2
R
2
R
В некоторых вариантах осуществления Rявляется пиридиновым кольцом, необязательно замещенным 5 группами J. В некоторых вариантах осуществления R является 2-пиридинилом, 3-пиридилом или 4-пиридилом, необязательно замещенным группами J, в количестве до пяти групп. В определенных вариантах осуществления R представляет собой пиримидиновое кольцо, необязательно замещенное группами J, в количестве до пяти групп. В некоторых вариантах осуществления Rявляется 2,4-пиримидинилом. В других вариантах осуществления R представляет собой 5-членное гетероарильное кольцо, необязательно замещенное группами J, в количестве до пяти групп. В некоторых вариантах осуществления Rявляется тиофеном или пиразолом, необязательно замещенным группами J, в количестве до пяти групп. В еще одних вариантах осуществления R представляет собой фенил, необязательно замещенный 5 группами J.
2
R
R
R
В некоторых вариантах осуществления Rнеобязательно замещен 5 группами J; в других вариантах осуществления 3 группами J; в еще одних вариантах осуществления 0 или 1 группой J.
R
1-6
6-10
1-6
6-10
1-4
2
1-6
1-6
2
1-6
2
2
2
2
1-6
2
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения J выбран из C-алкила, C-арила, -C-алкил-C-арила, C-галоалкила, -OR°, -N(R°), -SR°, 3-12-членного гетероциклила, -(C-алкил)-OR°, -(C-алкил)-N(R°), -(C-алкил)-SR°, -C(O)OR°, -NR°COR°, -COR°, -CON(R°), -SOR°, -SON(R°), и C-алкила, в котором до трех метиленовых звеньев цепи независимо заменены на -NR°-, -O-, -S-, -SO-, SO- или -СО- в химически стабильном окружении.
R
В определенных вариантах осуществления J выбран из оксо- или =NОH.
R
2
2
1-6
1-6
2
1-6
В других вариантах осуществления J представляет собой -OR°, -N(R°), -SR°, NO, CN, -(C-алкил)-OR°, -(C-алкил)-N(R°) или -(C-алкил)-SR°.
R
R
R
1-4
2
1-4
2
1-4
2
1-4
1-4
2
2
2
2
3
2
2
2
В некоторых вариантах осуществления каждый J независимо выбран из 5-8-членного, необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного -NR(C-алкил)N(R°), необязательно замещенного -NR(C-алкил)OR°, -N(R°) или необязательно замещенного -NH(5-6-членного гетероциклила). В определенных вариантах осуществления J представляет собой -NH(C-алкил)N(R°); в других вариантах осуществления - -NH(C-алкил)NHR° или -NH(C-алкил)NH; В некоторых вариантах осуществления - -NR(CHCH)N(R°); В других вариантах осуществления J представляет собой -N(CH)CHCHN(R°);
R
В других вариантах осуществления каждый J независимо выбран из необязательно замещенного -NH(5-6-членного гетероциклила).
R
В определенных вариантах осуществления каждый J является 5-6-членным гетероциклилом, включающим 1-2 атома азота. В некоторых вариантах осуществления 5-6-членный гетероциклил выбран из пирролидина, пиперидина или пиперазина.
R
В некоторых вариантах осуществления J необязательно и независимо замещен R°.
1
2
1
2
1
2
В одном варианте осуществления настоящего изобретения, каждый X и X независимо является -C(O)- или -NR-, где один из X или X предсталяет собой -NR-, а другой из X или X является -C(O)-.
1
2
В некоторых вариантах осуществления X является -C(O)-, а X является -NR-.
1
2
В других вариантах осуществления X является -NR-, а X - -C(O)-.
В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения Q представляет собой 3-8-членное насыщенное, частично ненасыщенное или полностью ненасыщенное моноциклическое кольцо, имеющее 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы или 8-12-членную насыщенную, частично ненасыщенную или полностью ненасыщенную кольцевую бициклическую систему, имеющую 0-5 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы.
6-10
3-10
6-10
В определенных вариантах осуществления Q является C-арилом, C-циклоалифатической группой, 5-14-членным гетероарилом или 5-14-членным гетероциклилом. В других вариантах осуществления Q является C-арилом или 5-14-членным гетероарилом. В еще одних вариантах осуществления Q является 5-6-членным арилом или гетероарилом. В некоторых вариантах осуществления Q является 5-8-членным гетероциклилом; в определенных вариантах осуществления - 5-6-членным гетероциклилом; в определенных вариантах осуществления Q является фенилом.
Q
Q
1-6
6-10
1-6
6-10
1-4
2
1-6
1-6
2
1-6
1-6
3-10
2
2
2
2
1-6
2
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения Q замещен группами J, в количестве до 5 групп, где J представляет собой CN, C-алкил, C-арил, -C-алкил-C-арил, C-галоалкил, -OR°, -N(R°), -SR°, -(C-алкил)-OR°, -(C-алкил)-N(R°), -(C-алкил)-SR°, -C-алкил-(C-гетероциклил), -C(O)OR°, -NR°COR°, -COR°, -CON(R°), -SOR°, -SON(R°) или C-алкил, в котором до трех метиленовых звеньев необязательно и независимо заменены на -NR°-, -O-, -S-, -SO-, SO- или -CО- в химически стабильном окружении.
Q
Q
1-6
1-4
2
1-6
1-6
2
1-6
6-10
1-6
6-10
3-10
1-6
3-10
3-10
1-6
3-10
2
2
2
2
1-6
2
В некоторых вариантах осуществления J выбран из C-алкила, CN, C-галоалкила, -OR°, -N(R°), - SR°, -(C-алкил)-OR°, -(C-алкил)-N(R°), -(C-алкил)-SR°, C-арила, -C-алкил-C-арила, C-циклоалифатической группы, -C-алкил-(C-циклоалифатической) группы, C-гетероциклила, -C-алкил-(C-гетероциклила), -C(O)OR°, -NR°COR°, -COR°, -CON(R°), -SOR°, -SON(R°) или C-алкила, в котором до трех метиленовых звеньев необязательно и независимо заменены на -NR°-, -O-, -S-, -SO-, SO-, -CО-, циклопропил, C≡C или C=C в химически стабильном окружении; каждый J необязательно и независимо замещен R°.
Q
2
2
2
2
5-6
3-7
3-7
В некоторых вариантах осуществления, J является -SON(R°), -SOR°, -NR°C(O)OR°, -C≡C-R°, -C=C-R°, фенилом, -O-Ph, -O-CHPh, C-гетероарилом, C-гетероциклилом или C-циклоалифатической группой.
Q
1-6
3
3
2
2
2
1-6
2
6
5-6
2
В определенных вариантах осуществления J представляет собой CN, C-алкил, -CF, -OCF, -OR°, -N(R°), -SR°, -CH-галоген, -SCF, -(C-алкил)-N(R°), C-арил, C-гетероарил, -C(O)OR°, -NR°COR°, -COR° или - CON(R°).
2
Q
Q
Q
В некоторых вариантах осуществления R необязательно замещен группами J, в количестве до пяти групп; в других вариантах осуществления - группами J, в количестве до трех групп; в еще одних вариантах осуществления 0 или 1 группой J.
2
3
1-4
0-1
1-4
1-4
0-1
1-4
1-4
0-1
1-4
1-4
0-1
1-4
2
1-4
0-1
2
В некоторых вариантах осуществления R° выбран из метила, этила, н-пропила, изопропила, циклопропила, втор-бутила, н-бутила, трет-бутила, ОН, галогена, -CH-пирролидина, COCH, -(C-алкил)-О(C-алкила), -(C-алкил)-О(C-алкил)ОН, -(C-алкил)-NH(C-алкила), -(C-алкил)-N(C-алкила) или -(C-алкил)-NH.
В некоторых вариантах осуществления переменные соответствуют изображенным в Таблице I соединениям.
Соответственно, типовые примеры соединений формулы I представлены в Таблице I.
Таблица I
Соединения настоящего изобретения могут быть получены стандартными методами, известными специалистам в данной области техники для аналогичных соединений, как показано в соответствии с общей схемой ниже, и примерами получения, которые приведены далее.
Схема I
Реактивы и условия
: (a) Пиридин, КТ, 16 часов.
1
На Схеме I выше показан общий путь синтеза, который используется для получения соединений 3a настоящего изобретения, когда R соответствует описанию, приведенному здесь. Соединения формулы 3a могут быть получены реакцией амринона 1 с хлорангидридом в пиридине согласно стадии (a) Схемы I. В реакции могут использоваться разнообразные хлорангидриды.
Соединения I-1-I-67 и I-82-I-85 были получены согласно стандартным методам, описанным на Схеме I.
Схема II
Реактивы и условия
2
: (a) NMP, xs(R°)NH, 160°C, 2 часа, микроволновое излучение.
Схема II выше показывает общий путь синтеза, который используется для получения соединений 3b настоящего изобретения, когда R° соответствует описанию, приведенному здесь. Соединения формулы 3b могут быть получены реакцией I-20 с избытком амина в NMP согласно стадии (a) Схемы II. В реакции могут использоваться разнообразные амины.
Соединения I-68-I-81 были получены согласно стандартным методам, описанным на Схеме II.
Схема III
Реактивы и условия
2
3
3
2
3
4
2
3
2
: (a) MeI, AgCO, CHCl, КТ, 48 часов; (b) бис(пинаколато)диборон, Pd(OAc), KOAc, ДМФА, 85°C, 3 часа; (c) R-Hal, Pd(Pph), водн. NaCO, толуол, EtOH, кипячение с обратным холодильником, 4 часа.
2
2
2
Схема III выше показывает общий путь синтеза, который использован для получения соединений 7 настоящего изобретения, когда R соответствует описанию, приведенному здесь. Исходное соединение 4, которое может быть получено по методике, описанной Warner, et al., J. Med. Chem. 1994, 37, 3090, является метилированным согласно стадии (a) Схемы II. Соединение формулы 6 образуется в реакции йодида 5 с бис(пинаколато)дибороном в присутствии палладия как катализатора. Образование производных 7 происходит в результате обработки производных боронового эфира 6 галогенидом R-Hal в присутствии палладия как катализатора при использовании способов сочетания Сузуки, хорошо известных в уровне техники. В реакции могут использоваться разнообразные замещенные галогениды R-Hal.
Схема IV
Реактивы и условия
2
: (a) водн. HCl, 1,4-диоксан, кипячение с обратным холодильником, 30 минут; (b) H, 10% Pd/C, MeOH, EtOAc, 2 часа; (c) Пиридин, КТ, 16 часов.
1
2
Схема IV выше показывает общий путь синтеза, который использован для получения соединений 10 настоящего изобретения, когда R и R соответствуют описанию, приведенному здесь. Деметилирование 7 в кислой среде приводит к образованию 8, с которого снята защита согласно стадии (b). Наконец, соединения формулы 10 могут быть получены взаимодействием производных 9 с хлорангидридом 2 в пиридине. В реакции могут использоваться разнообразные хлорангидриды 2.
Схема V
Реактивы и условия
2
: (a) H, 10% Pd/C, MeOH, EtOAc, 2 часа; (b) Пиридин, КТ, 16 часов; (c) водн. HCl, 1,4-диоксан, кипячение с обратным холодильником, 30 минут.
1
2
Схема V выше показывает другой общий путь синтеза, который использован для получения соединений 10 настоящего изобретения, когда R и R соответствуют описанию, приведенному здесь. Промежуточные соединения 11, полученные в результате снятия защиты с аминов 7, реагируют с хлорангидридом 2 в пиридине. В реакции могут использоваться разнообразные хлорангидриды 2. После деметилирования промежуточных соединений 12 в кислой среде, образуются пиридоны 10.
Схема VI
Реактивы и условия
2
2
3
3
4
2
3
2
: (a) H, Pd(ОН)/C, MeOH, КТ, 5 часов; (b) EtN, DCM, КТ, 10 минут; (c) R-Hal, Pd(Pph), водн. NaCO, толуол, EtOH, кипячение с обратным холодильником, 4 часа; (d) водн. HCl, 1,4-диоксан, кипячение с обратным холодильником, 30 минут.
1
2
2
2
Схема VI выше показывает другой общий путь синтеза, который использован для получения соединений 10 настоящего изобретения, когда R и R соответствуют описанию, приведенному здесь. Промежуточное соединение 13, полученное в результате снятия защиты с амина 6, реагирует с хлорангидридом 2, в результате чего образуются соединения формулы 14. В реакции могут использоваться разнообразные хлорангидриды 2. Образование производных 12 достигается в результате обработки бороновых эфирных производных 14 галогенидом R-Hal в присутствии палладия как катализатора, при использовании способов сочетания Сузуки, хорошо известных в уровне техники. В реакции могут использоваться разнообразные замещенные галогениды R-Hal. После деметилирования промежуточных соединений 12 в кислой среде, образуются пиридоны 10.
Схема VII
Реактивы и условия
2
: (a) NMP, xs(R°)NH, 160°C, 2 часа, микроволновое излучение.
2
Схема VII выше показывает общий путь синтеза, который используется для получения соединений 16 настоящего изобретения, когда R и R° соответствуют описанию, приведенному здесь. Соединения формулы 16 могут быть получены реакцией соединения 15 с избытком амина в NMP согласно стадии (a) Схемы VII. В реакции могут использоваться разнообразные амины.
Соединения II-1-II-182 были получены согласно стандартным методам, описанным на Схемах III, IV, V, VI и VII.
Схема VIII
Реактивы и условия
: (a) HOBt, DMAP, EDC, ТГФ, КТ, 16 часов.
1
2
et al.
J. Org. Chem
60
Схема VIII выше показывает общий путь синтеза, который используется для получения соединений 19 настоящего изобретения, когда R, R и R соответствуют описанию, приведенному здесь. Исходные соединения 17 могут быть получены методами, в значительной мере схожими с описанными в литературе (Church . 1995, , 3750). Соединения формулы 19 получены согласно стадии (a) схемы VIII.
Соединения III-1-III-54 были получены согласно стандартному методу, описанному на Схеме VIII.
Схема IX
Реактивы и условия
: (a) Пиридин, 0°C, 2 ч.
1
2
Схема IX выше показывает общий путь синтеза, который используется для получения соединений 21 настоящего изобретения, когда R и R соответствуют описанию, приведенному здесь. Соединения формулы 21 могут быть получены реакцией производных 9 с сульфонилхлоридом 20 в пиридине. В реакции могут использоваться разнообразные сульфонилхлориды 20.
Соединение IV-1 было получено согласно стандартному методу, описанному на Схеме IX.
Настоящее изобретение также обеспечивает соединения, которые могут использоваться как промежуточные в синтезе соединений настоящего изобретения. Дополнительно, настоящее изобретение обеспечивает способы для применения указанных промежуточных соединений при получении соединений настоящего изобретения.
Конкретно, соединение 22 может использоваться как промежуточное соединение в способе получения соединения 23. Соединение 23 может быть затем превращено в соединение формулы I.
Схема X
где:
10
R представляет собой амино-защитную группу;
11
10
11
1-6
R представляет собой H или C-алкильную группу или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют амино-защитную группу;
12
R является гидроксилзащитной группой; а
2
R соответствует приведенному здесь описанию.
2
2
2
2
В одном варианте осуществления соединение 22 реагирует с соответствующим соединением, включающим R при соответствующих условиях реакции, в результате чего образуется соединение 23. Примером соответствующего соединения, включающего R, является R-X, где X представляет собой соответствующую уходящую группу, такую как группа галогена. Соответствующими условиями реакции являются условия сочетания, которые позволяют образовать связь между бороновым эфиром (или бороновой кислотой) и R-X. Соответствующие уходящие группы и соответствующие условия сочетания известны специалистам в данной области техники (см., например, March, выше).
2
Соединение 23 может быть получено путем обработки производного боронового эфира 22 галогенидом R-Hal в присутствии палладия как катализатора при использовании способов сочетания, которые являются известными в уровне техники, например, при использовании сочетания Сузуки.
10
11
12
На Схеме XI изображен пример использования условий сочетания Сузуки в способе настоящего изобретения. На Схеме XI R представляет собой группу Cbz, R - водород, а R - метильную группу. Однако нужно понимать, что в реакции, изображенной на Схеме XI, может использоваться соединение 22 вместо соединения 6 и соединение 23 вместо соединения 7.
Схема XI
2
3
4
2
3
(a) R-Hal, Pd(Pph), водн. NaCO, толуол, EtOH, кипячение с обратным холодильником.
2
2
2
R
10
11
12
J. Org. Chem
Соединение 23 может быть также получено в результате обработки производного боронового эфира 22 азотсодержащим насыщенным, частично ненасыщенным или полностью ненасыщенным моноциклическим или бициклическим кольцом (как описано в определении R), путем реакции через атом азота в кольце, в присутствии меди как катализатора, например, при использовании способов сочетания, которые являются известными в уровне техники (см., Chernick et al. . 2005, 1486), что приводит к соединению 23 (в котором R является 3-8-членным насыщенным, частично ненасыщенным или полностью ненасыщенным моноциклическим кольцом, имеющим, по крайней мере, один гетероатом - азот; или 8-12-членной насыщенной, частично ненасыщенной или полностью ненасыщенной бициклической кольцевой системой, имеющей, по крайней мере, один гетероатом - азот, причем R необязательно замещен J). На Схеме XII представлен пример медь-опосредованных условий сочетания в способе настоящего изобретения. На Схеме XII R представляет собой группу Cbz, R - водород, и R - метильную группу. Однако нужно понимать, что в реакции, представленной на Схеме XII, может использоваться соединение 22 вместо соединения 6 и соединение 23 вместо соединения 7.
Схема XII
2
3
2
2
2
(a) Cu(OAc), EtN, O, CHCl, комн.т., 20 ч.
1
10
11
12
В способе настоящего изобретения соединение 23 (и схожие соединения, такие как соединение 7) преобразуются в соединение формулы I способами, известными специалистам в данной области, включая, помимо прочего, описанные здесь. В конкретных вариантах осуществления, удаляется гидроксил-защитная группа в соединении 23, а затем удаляется и амино-защитная группа. Образованный амин реагирует с соответствующим R-содержащим промежуточным соединением, в результате чего образуется соединение формулы I. С целью ознакомления с конкретными примерами указанного варианта осуществления, см. Схему IV и Схему IX. На Схеме IV R представляет собой группу Cbz, R является водородом, а R - метильной группой. Однако нужно понимать, что в реакции, изображенной на Схеме IV, может использоваться соединение 23 вместо соединения 7.
1
10
11
12
В другом варианте осуществления удалена амино-защитная группа в соединении 23, а затем образовавшийся амин реагирует с соответствующим R-содержащим промежуточным соединением, в результате чего обрауется соединение X. Соединение формулы I получают в результате удаления защитной гидроксильной группы в соединении X. С целью ознакомления с конкретным примером указанного варианта осуществления см. Схему V. На Схеме V R представляет собой группу Cbz, R является водородом, а R - метильной группой. Однако нужно понимать, что в реакции, изображенной на Схеме V, может использоваться соединение X вместо соединения 11 и соединение XX вместо соединения 12.
1
11
1
2
1-
1
10
1
10
1
11
12
В вариантах осуществления, где X представляет собой -NR-, амино-защитная группа R может быть группой R-X-. Как можно было бы догадаться, в таких вариантах осуществления необязательно удалять амино-защитную группу и заменять ее Rсодержащей группой. Соответственно, чтобы получить соединение формулы I, соединение 23 должно было бы реагировать при условиях, подходящих для удаления гидроксил-защитной группы (в результате чего образуется соединение формулы I). В вариантах осуществления, где RC(=O)-группа несовместима с образованием боронового эфира, бороновый эфир мог бы быть образован группой R, являющейся Cbz, а затем группа Cbz могла бы быть заменена R-содержащей группой после образования боронового эфира. С целью ознакомления с конкретным примером указанного варианта осуществления см. Схему VI. На Схеме VI R (в соединении 14) представляет собой RC(=O)-, R является водородом, а R - метильной группой. Однако нужно понимать, что в реакции, изображенной на Схеме VI, может использоваться соединение 22 вместо соединения 6.
10
1
2
10
1
Альтернативно, R в 23 может быть преобразован в R-X-. Таким образом, функциональная группа в R могла быть преобразована в требуемую R-содержащую группу. Затем гидроксил-защитная группа была бы удалена, в результате чего было бы получено соединение формулы I. С целью ознакомления с конкретными примерами указанного варианта осуществления, см. Схему II и Схему VII.
10
11
12
Соединение 22 может быть получено способами, известными специалистам в данной области, включая, помимо прочего, способы, раскрытые здесь. В одном варианте осуществления, иодпроизводное 24 реагирует при условиях, требуемых для образования боронового эфира 22 (Схема XIII). С целью ознакомления с конкретными примерами указанных условий, см. Схему III. На Схеме III R представляет собой группу Cbz, R является водородом, а R - метильной группой. Однако нужно понимать, что в реакции, изображенной на Схеме XII, может использоваться соединение 22 вместо соединения 6 и соединение 23 вместо соединения 7.
Схема XIII
Нужно понимать, что вместо использования боронового эфира 22 в процессе настоящего изобретения может использоваться соответствующая бороновая кислота (Схема XIV). Бороновая кислота могла бы использоваться в качестве исходного вещества или образовываться на месте. Соединение 25 может быть получено стандартными методами, включая, помимо прочего, преобразование боронового эфира 22 в бороновую кислоту 25.
Схема XIV
2
Защитные группы защищают функциональные амино и гидроксильные группы от взаимодействия при условиях преобразования боронового эфира или кислоты в группу R. Специалистам в данной области техники известно много амино-защитных групп и гидроксил-защитных групп. Примеры таких защитных групп могут быть найдены в T.W. Greene and P.G.M. Wutz, "Protective Groups in Organic Synthesis", 3rd Edition, John Wiley & Sons, Inc. (1999) и в болеее ранних изданиях этой книги, а также в J.W.F. McOmie, "Protective Groups in Organic Synthesis", Plenum Press (1973).
10
13
13
В определенных вариантах осуществления R представляет собой -C(O)R или -C(O)OR, где:
13
R является:
1-6
незамещенным C-алкилом,
1-6
6
10
C-алкилом, замещенным C-C-арилом или
6
10
6
10
2
2
1-6
3
14
C-C-арилом, где каждый C-C-арил необязательно замещен галогеном, -CN, -NO, -N(R), незамещенным C-алкилом или-CF; и
14
1-6
R является H или незамещенным C-алкилом.
10
Предпочтительно, R представляет собой Cbz (карбобензилокси) или Boc (трет-бутоксикарбонил).
11
В определенных вариантах осуществления R является водородом.
12
12
1-6
В определенных вариантах осуществления R является C-алкилом. Предпочтительно, R является метилом или этилом.
10
11
12
В предпочтительном варианте осуществления R представляет собой Cbz (карбобензилокси) или Вос (трет-бутоксикарбонил); Rявляется водородом; а R является метилом.
Хотя определенные типовые варианты осуществления представлены и описаны здесь выше, следует понимать, что соединения изобретения могут быть получены согласно способам, в общем описываемым выше, с использованием соответствующих исходных соединений, способами, обычно доступными специалисту в данной области техники.
Как было раскрыто здесь, настоящее изобретение обеспечивает соединения, которые являются ингибиторами протеинкиназ, и таким образом настоящие соединения применимы для лечения заболеваний, нарушений и состояний, включая, помимо прочего, аутоиммунное, воспалительное, пролиферативное или гиперпролиферативное заболевание или иммунологически-опосредованное заболевание. Соответственно, в другом аспекте настоящего изобретения, обеспечиваются фармацевтически приемлемые композиции, где указанные композиции содержат любое из соединений, описанных здесь, и необязательно содержат фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательное вещество или основу. В определенных вариантах осуществления указанные композиции далее необязательно содержат один или более дополнительный терапевтический агент. Такие дополнительные терапевтические агенты включают, помимо прочего, агент для лечения аутоиммунного, воспалительного, пролиферативного, гиперпролиферативного заболевания или иммунологически-опосредованного заболевания, включая отторжение трансплантированных органов или тканей, а также Синдрома Приобретенного Иммунодефицита (СПИД).
Следует также понимать, что некоторые из соединений настоящего изобретения могут существовать в свободной форме для лечения или, где необходимо, в виде их фармацевтически приемлемого производного. Согласно настоящему изобретению, фармацевтически приемлемое производное включает, помимо прочего, фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры, соли таких эфиров или любой другой аддукт или производное, которые при введении нуждающемуся пациенту являются способными преобразовываться, прямо или косвенно, в соединение как здесь иначе описано или в его метаболит или остаток.
Используемый здесь термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к тем солям, которые, в объеме тщательного медицинского обследования, подходят для использования в контакте с тканями людей и низших животных без повышенной токсичности, раздражения, аллергического ответа и т.п., и соизмеримы с разумным соотношением выгоды/риска. "Фармацевтически приемлемая соль" означает любую нетоксичную соль или соль сложного эфира соединения настоящего изобретения, которое, при введении реципиенту является способным к преобразованию, либо прямо либо косвенно, в соединение настоящего изобретения или ингибиторно активный метаболит или его остаток. Используемый здесь термин "ингибиторно активный метаболит или его остаток" означает, что метаболит или его остаток также является ингибитором киназы Тес семейства протеинкиназ (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk).
+
1-4
4
Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в уровне техники. Например, S. M. Berge et al подробно описывает фармацевтически приемлемые соли в J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, использованной здесь в качестве ссылки. Фармацевтически приемлемые соли соединений настоящего изобретения включают указанные соли, полученные из подходящих неорганических и органических кислот и оснований. Примерами фармацевтически приемлемых, нетоксичных солей присоединения кислот являются соли аминогруппы, образованные с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлорная кислота, или органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота или образованные при использовании других способов, используемых в уровне техники, например ионного обмена. Другие фармацевтически приемлемые соли включают адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентапропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептаноат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидройодид, 2-гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и т.п. Соли, полученные из соответствующих оснований, включают соли щелочных металлов, щелочноземельных металлов, аммония и N(C-алкил). Настоящее изобретение также предполагает кватернизацию любых основных азотсодержащих групп соединений, раскрытых здесь. Водо- или маслорастворимые или диспергируемые продукты могут быть получены такой кватернизацией. Типичные соли щелочных или щелочноземельных металлов включают натриевые, литиевые, калиевые, кальциевые, магниевые и т.п. Далее фармацевтически приемлемые соли включают, когда целесообразно, нетоксичные катионы аммония, четвертичного аммония, и аминов, образованные с использованием таких противоионов, как, например, галогенид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, низший алкилсульфонат и арилсульфонат.
Как описано выше, фармацевтически приемлемые композиции настоящего изобретения дополнительно содержат фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательное вещество или основу, которые, при использовании здесь, включают все без исключения растворители, разбавители или другую жидкую основу, диспергирующие или суспендирующие добавки, поверхностно-активные агенты, изотонические агенты, загустители или эмульгаторы, консерванты, твердые носители, лубриканты и т.п., подходящие для определенной дозированной формы. Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980) раскрывает различные носители, используемые в составлении фармацевтически приемлемых композиций, а также известные способы получения носителей. Исключая то, что среда любого обычного носителя является несовместимой с соединениями изобретения, в частности вызывая любой нежелательный биологический эффект или иначе взаимодействуя неблагоприятным способом с любым другим компонентом(ами) фармацевтически приемлемой композиции, предполагается, что его применение включено в объем настоящего изобретения. Некоторые примеры материалов, которые могут выступать в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают, помимо прочего, ионообменные смолы, окись алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточные белки, например, сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновую кислоту или сорбат калия, смеси неполных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как протамин сульфат, гидрофосфат динатрия, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный кварц, трисиликат магния, поливинилпирролидон, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропилен-сополимеры, жир шерсти, сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как зерновой крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошкообразный трагакант; солод; желатин; тальк; эксципиенты, такие как масло какао и суппозиторные воска; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло; подсолнечное масло; кунжутное масло; оливковое масло; кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль; эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные агенты, такие как гидроокись магния и гидроокись алюминия; альгиновую кислоту; апирогенную воду; изотонический раствор; раствор Рингера; этиловый спирт и фосфатные буферные растворы, также такие нетоксичные совместимые лубриканты, как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, при чем в композиции могут также присутствовать красители, высвобождающие агенты, покрывающие агенты, подсластители, вкусовые и ароматические агенты, консерванты и антиокислители, в зависимости от решения разработчика композиций.
В определенных вариантах осуществления композиция содержит эффективное количество соединения по пункту 1 формулы изобретения, и фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательное вещество или основу. В определенном варианте осуществления соединение присутствует в количестве, необходимом для измеримого ингибирования протеинкиназ Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk).
Настоящее изобретение также обеспечивает фармацевтическую композицию, полученную в результате смешивания соединения настоящего изобретения и фармацевтически приемлемого носителя, вспомогательного вещества или основы, а также способ получения фармацевтической композиции, включающий смешивание соединения настоящего изобретения и фармацевтически приемлемого носителя, вспомогательного вещества или основы.
В еще одном аспекте, сособ лечения или снижения тяжести заболеваний, обусловленных Тес семейством (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) обеспечивается введением эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой композиции, содержащей соединение, пациенту, нуждающемуся в этом. В способах может использоваться соединение Формулы I или любое другое соединение настоящего изобретения:
или их фармацевтически приемлемая соль, где
3
4
1-4
1-2
3
2
2
3
3
2
каждый R и R независимо является H, галогеном или C-алифатической группой, необязательно замещенной галогеном, C-алифатической группой, OCH, NO, NH, CN, NHCH, SCH или N(CH);
2
2
R
R является 3-8-членным насыщенным, частично ненасыщенным или полностью ненасыщенным моноциклическим кольцом, содержащим 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы или 8-12-членной насыщенной, частично ненасыщенной или полностью ненасыщенной кольцевой бициклической системой, содержащей 0-5 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы; причем R необязательно замещен группой J;
1
2
1
2
1
2
2
2
каждый X и X независимо являются -C(O)-, -NR- или -SO-, где один из X или X представляет собой -NR-, а другой из X или X является -C(O)- или -SO-;
1-6
R представляет собой H, незамещенную C-алифатическую группу;
1
R является -T-Q;
1-6
2
5
Т
T представляет собой связь или C-алифатическую группу, в которой до трех метиленовых звеньев цепи необязательно и независимо заменены на G или G', где G является -NR-, -О-, -S-, -SO-, SO-, -CS- или -СО-; G' является циклопропилом, C≡C или C=C; T необязательно замещен группой J;
1-6
Q
Q независимо является водородом, C-алифатической группой, 3-8-членным насыщенным, частично ненасыщенным или полностью ненасыщенным моноциклическим кольцом, содержащим 0-3 гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы или 8-12-членной насыщенной, частично ненасыщенной или полностью ненасыщенной кольцевой бициклической системой, содержащей 0-5 гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода или серы; Q необязательно замещен группой J; и
5
5
6-I0
3-10
R является необязательно замещенным R, C-арилом, C-циклоалифатической группой, 5-14-членным гетероарилом или 5-14-членным гетероциклилом; или две группы R, вместе с атомом(ами), к которому они присоединены, образуют необязательно замещенное 3-7-членное моноциклическое или 8-14-членное бициклическое кольцо;
R
Т
Q
где необязательные заместители J, J и J определены здесь.
В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения "эффективное количество" соединения или фармацевтически приемлемой композиции является количеством, эффективным в отношении заболевания, опосредованного Тес семейством (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk). Соединения и композиции, согласно способу настоящего изобретения, можно вводить, используя любое количество и любой путь введения, эффективные для лечения или снижения тяжести заболевания, опосредованного Тес семейством (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk). Точное необходимое количество будет варьировать в зависимости от пациента, расы, возраста и общего состояния пациента, тяжести инфекции, конкретного вещества, его способа введения и т.п. Соединения изобретения предпочтительно составляются в композицию в единичной дозированной форме для простоты введения и стандартности дозировки. Выражение "единичная дозированная форма", используемое здесь, относится к физически дискретной единице вещества, подходящей для лечения пациента. Однако необходимо понимать, что полное ежедневное применение соединений и композиций настоящего изобретения будет определяться лечащим врачом в объеме тщательного медицинского обследования. Определенный уровень эффективной дозы для любого конкретного пациента или организма будет зависеть от разнообразных факторов, включая расстройство, которое лечат и тяжесть расстройства; активность определенного используемого соединения; определенную используемую композицию; возраст, массу тела, общее здоровье, пол и диету пациента; время введения, путь введения, и скорость выведения определенного используемого соединения; продолжительность лечения; лекарственные препараты, используемые в комбинации или совпадающие с определенным используемым соединением, а также факторы, известные в медицинском уровне техники. Используемый здесь термин "пациент" означает животное, предпочтительно млекопитающее, а наиболее предпочтительно человека.
Фармацевтически приемлемые композиции настоящего изобретения можно вволить людям и другим животным орально, ректально, парентерально, интрацистернально, интравагинально, интраперитонеально, местно (в виде порошков, мазей или капель), буккально, в виде оральных или назальных спреев или подобного, в зависимости от тяжести инфекции, которую лечат. В определенных вариантах осуществления соединения изобретения можно вводить орально или парентерально при уровнях дозировки от приблизительно 0,01 мг/кг до приблизительно 50 мг/кг, а предпочтительно, приблизительно от 1 мг/кг до приблизительно 25 мг/кг массы тела пациента в день, один или более раз в день, чтобы получить желательный терапевтический эффект.
Жидкие дозированные формы для орального введения содержат, помимо прочего, фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активному соединению, жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в уровне техники, такие как, например, воду или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, масло из пророщенных семян, оливковое, касторовое и кунжутное), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и жирнокислотные эфиры сорбитана, а также их смеси. Помимо инертных разбавителей, оральные композиции могут также включать вспомогательные вещества, такие как смачивающие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, вкусовые и ароматизирующие добавки.
Инъекционные препараты, например, стерильные инъекционные водные или масляные суспензии могут быть произведены в соответствии с уровнем техники, используя подходящие диспергирующие или смачивающие агенты и суспендирующие агенты. Стерильный инъекционный препарат может также быть стерильным инъекционным раствором, суспензией или эмульсией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, таким как раствор в 1,3-бутандиол. Из приемлемых основ и растворителей могут использоваться вода, раствор Рингера, U.S.P. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используются в качестве растворителя или суспендирующей среды. С этой целью может использоваться любое мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, в подготовке инъекционных препаратов используются жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.
Инъекционные композиции могут быть простерилизованы, например, фильтрацией через фильтр, удерживающий бактерии или с помощью добавления стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены или диспергированы в стерильной воде или другой стерильной инъекционной среде перед применением.
Чтобы продлить действие соединения настоящего изобретения, часто желательно замедлить абсорбцию соединения из места подкожной или внутримышечной инъекции. Это может быть достигнуто при использовании жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала с плохой растворимостью в воде. Скорость абсорбции соединения зависит от его скорости растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристаллов и кристаллической формы. Альтернативно, отсроченная абсорбция парентерально вводимой формы соединения достигается путем растворения или суспендирования соединения в масляной основе. Инъекционные формы депо производят путем получения микроинкапсулированных матриц соединения в биодеградируемых полимерах, таких как полилактид-полигликолид. В зависимости от соотношения соединения к полимеру и природы конкретного используемого полимера можно контролировать скорость высвобождения соединения. Примеры других биодеградируемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Инъекционные формы депо также получают, заключая соединение в липосомы или микроэмульсии, которые являются совместимыми с тканями организма.
Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно представляют собой суппозитории, которые могут быть получены путем смешивания соединений настоящего изобретения с подходящими, не раздражающими экципиентами или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или суппозиторный воск, которые являются твердыми при температуре окружающей среды, но жидкими при температуре тела, и поэтому тают в прямой кишке или вагинальной полости и высвобождают активное соединение.
Твердые дозированные формы для орального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах активное соединение смешано с, по крайней мере, одним инертным, фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, таким как цитрат натрия или фосфат дикальция и/или a) наполнителями или сухими разбавителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота, b) связующими веществами, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и камедь, c) влагоудерживающими добавками, такие как глицерин, d) дезинтегрирующими агентами, такими как агар-агар, карбонат кальция, крахмал картофеля или тапиоки, альгиновая кислота, определенные силикаты и карбонат натрия, e) замедлителями растворения, такими как парафин, f) ускорителями абсорбции, например, соединения четвертичного аммония, g) смачивающими агентами, такими как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина, h) абсорбентами, такими как каолин и бентонитовая глина, и i) лубрикантами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, а также их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль дозированная форма может также включить буферные вещества.
Твердые композиции подобного типа могут также использоваться как эксципиенты в мягких и твердых наполненных желатиновых капсулах, используя такие эксципиенты, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п. Твердые дозированные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть получены с покрытиями и оболочками, такими как энтеральные покрытия и другие покрытия, известные в области фармацевтических препаратов. Они могут необязательно включать глушители и могут также представлять композицию, так что только активный компонент(ы) будет высвобождаться, или предпочтительно, в определенной части кишечного тракта, необязательно отсроченным образом. Примеры пропитывающих составов, которые могут использоваться, включают полимерные вещества и воски. Твердые композиции подобного типа могут также использоваться как эксципиенты в мягких и твердых наполненных желатиновых капсулах, используя такие эксципиенты, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п.
Активные соединения могут быть также в микроинкапсулированной форме с одним или более эксципиентами, как отмечено выше. Твердые дозированные формы в виде таблеток, драже, капсул, пилюль и гранул могут быть получены с покрытиями и оболочками, такими как энтеральные покрытия и другие покрытия, известные в области фармацевтических препаратов. В таких твердых дозированных формах к активному соединению может быть добавлен, по крайней мере, один инертный разбавитель, такой как сахароза, лактоза или крахмал. Такие дозированные формы могут также включать, что является обычным, дополнительные вещества, кроме инертных разбавителей, например, таблетирующие лубриканты и другие таблетирующие вспомогательные добавки, такие как стеарат магния и микрокристаллическую целлюлозу. В случае капсул, таблеток и пилюль, дозированные формы могут также включать буферные вещества. Они могут необязательно включать глушители и могут также представлять композицию, так что только активный компонент(ы) будет высвобождаться, или предпочтительно, в определенной части кишечного тракта, необязательно отсроченным образом. Примеры пропитывающих составов, которые могут использоваться, включают полимерные вещества и воски.
Дозированные формы для местного или трансдермального введения соединения настоящего изобретения включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, ингаляторы или пластыри. Активный компонент смешивают в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами или буферами, которые могут потребоваться. Глазная композиция, ушные капли и глазные капли также рассматриваются как входящие в объем настоящего изобретения. Дополнительно, настоящее изобретение рассматривает применение трансдермальных пластырей, которые имеют дополнительное преимущество, обеспечивая контролируемое поступление соединения в организм. Такие дозированные формы могут быть приготовлены путем растворения или распределения соединения в подходящей среде. Для увеличения поступления соединения через кожу могут также использоваться усилители абсорбции. Скорость можно контролировать либо с применением регулирующей скорость мембраны, либо распределяя соединение в полимерной матрице или геле.
Как в целом описано выше, соединения изобретения применимы как ингибиторы протеинкиназ. В одном варианте осуществления соединения и композиции изобретения являются ингибиторами одной или более киназ Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk), и таким образом, не желая быть связанными какой-либо конкретной теорией, соединения и композиции в частности применимы для лечения или снижения тяжести заболевания, состояния или растройства, при которых в заболевание, состояние или растройство вовлечена активация одной или более киназ Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk). Когда активация Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) вовлечена в конкретное заболевание, состояние или растройство, заболевание, состояние или растройство могут также упоминаться как "заболевание, опосредованное Тес семейством (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk)" или симптом заболевания. Соответственно, в другом аспекте, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения или снижения тяжести заболевания, состояния или растройства, где активация одной или более киназ Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) вовлечена в болезненное состояние.
Также, не желая быть связанным какой-либо конкретной теорией, соединения и композиции, в частности, применимы для лечения или снижения тяжести заболевания, состояния или растройства, при которых в заболевание, состояние или растройство вовлечена активация Itk киназы, и являются, в частности, применимы для селективного ингибирования Itk относительно Btk и Rlk (см., Примеры 14-16 и 18).
in vitro
in vivo
in vitro
in vitro
Активность соединения, используемого в настоящем изобретении в качестве ингибитора киназы Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk), может быть оценена ,  или в линии клеток. Тесты  включают анализы для определения ингибирования фосфорилирующей активности или АТФазной активности активированной киназы Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk). Дополнительные анализы  количественно оценивают способность ингибитора связывать киназу Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk). Связывание ингибитора может быть измерено путем мечения ингибитора радиоактивной меткой перед связыванием, выделения комплекса Ингибитор/Тес семейство (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) и определения количества связанной радиоактивной метки. Альтернативно, связывание ингибитора может быть определено с помощью проведения конкурентного эксперимента, в котором новые ингибиторы инкубируют с киназой Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk), связанной с известными радиолигандами.
Используемый здесь термин "измеримо ингибируют" означает измеримое изменение активности киназы Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) между пробой, включающей указанную композицию и киназу Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk), и эквивалентной пробой, включающей киназу Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) в отсутствие указанной композиции.
Используемый здесь термин "состояние, опосредованное тирозинкиназами Тес семейства" означает любое заболевание или другое болезненное состояние, в котором киназы Тес семейства, как известно, играют роль. Такие состояния включают, без ограничения, аутоиммунные, воспалительные, пролиферативные и гиперпролиферативные заболевания, а также иммунологически опосредованные заболевания, включая отторжение имплантированных органов или тканей и Приобретенный Синдром Иммуннодефицита (СПИД).
Например, состояния, опосредованные тирозинкиназами Тес семейства, включают заболевания дыхательных путей, включая, без ограничения, хронические обструктивные заболевания дыхательных путей, включая астму, такую как бронхиальную, аллергическую, наследственную, приобретенную и пылевую, в особенности хроническую или запущенную астму (например, гиперреактивность дыхательных путей на поздней стадии астмы) и бронхит. Дополнительно, заболевания, опосредованные тирозинкиназами Тес семейства, включают, без ограничения, такие состояния, как воспаление слизистой оболочки носа, включая острый ринит, аллергический, атрофирующий ринит и хронический ринит, включая казеозный ринит, гипертрофический ринит, гнойный ринит, сухой ринит и медикаментозный ринит; мембранозный ринит, включая крупозный, фибринозный и псевдомембранозный ринит и скрофулезный ринит, сезонный ринит, включая нервозный ринит (сенная лихорадка) и вазомоторный ринит, саркоидоз, легкое фермера и сходные заболевания, пневмофиброз и идиопатическая интерстициальная пневмония.
Состояния, опосредованные тирозинкиназами Тес семейства, также включают заболевания костей и суставов, включая, без ограничения, ревматоидный артрит (формирование паннуса), серонегативная спондилоартропатия (включая анкилозирующий спондилит, псориатический артрит и болезнь Райтера), болезнь Бехчета, синдром Шегрена и системный склероз.
Состояния, опосредованные киназами Тес семейства, также включают кожные заболевания и расстройства, включая, без ограничения, псориаз, системный склероз, атопический дерматит, контактный дерматит и другие экзематозные дерматиты, себорейный дерматит, плоский лишай, пузырчатку, буллезную пузырчатку, буллезный эпидермолиз, крапивницу, ангионевротический отек, васкулит, эритемы, кожную эозинофилию, увеит, гнездную алопецию и весенний конъюнктивит.
Состояния, опосредованные тирозинкиназами Тес семейства, также включают заболевания и расстройства желудочно-кишечного тракта, включая, без ограничения, брюшнополостную болезнь, проктит, эозинофильный гастроэнтерит, мастоцитоз, панкреатит, болезнь Крона, язвенный колит, пищевые аллергии, которые вызывают эффекты, не касающиеся кишечника, например, мигрени, ринит и экземы.
Состояния, опосредованные тирозинкиназами Тес семейства, также включают заболевания и расстройства других тканей и системные заболевания, включая, без ограничения, рассеянный склероз, атеросклероз, синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), красную волчанку, системную красную волчанку, тиреоидит Хашимото, злокачественную миастению, диабет типа I, нефротический синдром, эозинофильный фасцит, гипер-IgE синдром, лепроматозную лепру, синдром Сезари и идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, рестеноз после ангиопластики, опухоли (например, лейкемии, лимфомы), артросклероз и системную красную волчанку.
Состояния, опосредованные тирозинкиназами Тес семейства, также включают отторжение аллотрансплантата, включая, без ограничения, острое и хроническое отторжение аллотрансплантата после, например, трансплантации почки, сердца, печени, легкого, костного мозга, кожи и роговицы, а также хроническое заболевание «трансплантат против хозяина».
Следует также понимать, что соединения и фармацевтически приемлемые композиции настоящего изобретения могут использоваться в комбинационных терапиях, то есть, соединения и фармацевтически приемлемые композиции можно вводить одновременно, до или после одной или более, другой предпочтительной терапии или медицинской операции. Специфическая комбинация терапий (терапии или операции) для использования в режиме комбинации, будет принимать во внимание совместимость желательной терапии и/или операций и желательного терапевтического эффекта, который будет достигнут. Следует также понимать, что применяемые терапии могут достигнуть желательного эффекта для одного и того же растройства (например, соединение изобретения можно вводить одновременно с другим агентом, используемым для лечения того же самого растройства) или они могут достигнуть различных эффектов (например, контроль любых побочных эффектов). Используемые здесь дополнительные терапевтические агенты, которые обычно вводят с целью лечения или профилактики специфического заболевания или состояния, известны как "соответствующие заболеванию или состоянию, подвергнутому лечению".
Дополнительные терапевтические агенты, которые могут использоваться в способах настоящего изобретения, включают, помимо прочего, агенты для лечения аутоиммунного, воспалительного, пролиферативного, гиперпролиферативного заболевания или иммунологически-опосредованного заболевания, включая отторжение трансплантированных органов или тканей и Синдром Приобретенного Иммунодефицита (СПИД), где дополнительный терапевтический агент является соответствующим заболеванию, подвергнутому лечению; и дополнительный терапевтический агент вводят вместе с указанной композицией в виде одной дозированной формы или отдельно от указанной композиции в виде части сложной дозированной формы.
Например, химиотерапевтические агенты или другие антипролиферативные агенты могут быть объединены с соединениями настоящего изобретения с целью лечения пролиферативных заболеваний и рака. Примеры известных химиотерапевтических агентов включают, помимо прочего, например, другие терапии или противоопухолевые агенты, которые могут использоваться в комбинации с противоопухолевыми агентами настоящего изобретения, включают хирургию, радиотерапию (всего в нескольких примерах, гамма-излучение, нейтронно-лучевая радиотерапия, электронно-лучевая радиотерапия, протонная терапия, близкофокусная лучевая терапия, и системные радиоактивные изотопы, чтобы назвать немногие), эндокринную терапию, модификаторы биологического ответа (интерфероны, интерлeйкины, и фактор некроза опухолей (TNF), чтобы назвать немногие), гипертермия и криотерапия, агенты для снижения любых побочных эффектов (например, противорвотные средства), и другие одобренные химиотерапевтические препараты, включая, помимо прочего, алкилирующие препараты (мехлоретамин, хлорамбуцил, циклофосфамид, мелфалан, ифосфамид), антиметаболиты (метотрексат), антагонисты пурина и антагонисты пиримидина (6-еркаптопурин, 5-фторурацил, цитарабил, гемцитабин), веретенные яды (винбластин, винкристин, винорельбин, паклитаксел), подофилотоксины (этопозид, иринотекан, топотекан), антибиотики (доксорубицин, блеомицин, митомицин), нитрозомочевины (кармустин, ломустин), неорганические ионы (цисплатин, карбоплатин), ферменты (аспарагиназа), и гормоны (тамоксифен, левопролид, флутамид и мегестрол), Gleevec™, адриамицин, дексаметазон и циклофосфамид. В целях ознакомления с более всесторонними обсуждениями обновленных противораковых терапий, см. http://www.nci.nih.gov/, список FDA-одобренных онкологических препаратов в http://www.fda.gov/cder/cancer/ druglistframe.htm, и The Merck Manual, Семнадцатое изд. 1999, все содержание которого включено здесь ссылкой.
Другие примеры агентов, с которыми ингибиторы настоящего изобретения могут быть также объединены, включают, без ограничения: препараты для лечения болезни Альцгеймера, например, Арицепт и Экселон; препараты для лечения болезни Паркинсона, такие как L-ДОПА/карбидопа, энтакапон, ропинрол, прамипексол, бромокриптин, перголид, тригексефендил и амантадин; агенты для лечения рассеянного склероза (MS), такие как бета-интерферон (например, Авонекс и Ребиф), Копаксон, и митоксантрон; препараты для лечения астмы, такие как альбутерол и Сингуляр; агенты для лечения шизофрении, такие как ципрекса, риспердал, сероквель и галоперидол; противовоспалительные агенты, такие как кортикостероиды, блокаторы TNF, IL-1 РА, азатиоприн, циклофосфамид, и сульфасалазин; иммуномодулирующие и иммунодепрессивные агенты, такие как циклоспорин, такролимус, рапамицин, микофенолат мофетил, интерфероны, кортикостероиды, циклофосфамид, азатиоприн и сульфасалазин; нейротрофные факторы, такие как ингибиторы ацетилхолинэстеразы, ингибиторы MAO, интерфероны, антиконвульсанты, блокаторы ионных каналов, рилузол и противопаркинсонические агенты; агенты для лечения сердечно-сосудистого заболевания, такие как бета-блокаторы, АСЕ ингибиторы, мочегонные средства, нитраты, блокаторы кальциевых каналов и статины; агенты для лечения заболеваний печени, такие как кортикостероиды, холестирамин, интерфероны и противовирусные агенты; агенты для лечения расстройств крови, такие как кортикостероиды, противолейкемические агенты и факторы роста; и агенты для лечения иммунодефицитных расстройств, такие как гамма-глобулин.
Количество дополнительного терапевтического агента, присутствующего в композициях настоящего изобретения, будет не выше, чем количество, которое обычно вводили бы в композицию, включающую указанный терапевтический агент как единственный активный агент. Предпочтительно количество дополнительного терапевтического агента в раскрытых теперь композициях находится в интервале приблизительно от 50% до 100% количества, обычно присутствующего в композиции, включающей указанный агент как единственный терапевтически активный агент.
Соединения или фармацевтически приемлемые композиции настоящего изобретения могут быть также включены в композиции для покрытия имплантируемых медицинских устройств, таких как протезы, искусственные клапаны, сосудистые имплантанты, стенты и катетеры. Соответственно, настоящее изобретение в другом аспекте включает композицию для покрытия имплантируемого устройства, содержащую соединение настоящего изобретения, как описано в общем выше, и в классах и подклассах здесь, и носитель, подходящий для покрытия указанного имплантируемого устройства. В еще одном аспекте, настоящее изобретение включает имплантируемое устройство, покрытое композицией, содержащей соединение настоящего изобретения, как описано в общем выше, и в классах и подклассах здесь, и носитель, подходящий для покрытия указанного имплантируемого устройства.
Сосудистые стенты, например, использовались для преодоления рестеноза (повторное сужение стенки сосуда после повреждения). Однако пациенты, использующие стенты или другие имплантируемые устройства, рискуют образованием тромба или активацией тромбоцитов. Эти нежелательные эффекты могут быть предотвращены или смягчены предварительным покрытием устройства фармацевтически приемлемой композицией, включающей ингибитор киназ. Подходящие покрытия и общая подготовка покрытых имплантируемых устройств описаны в Патентах US 6099562; 5886026 и 5304121. Покрытия обычно представляют собой биосовместимые полимерные материалы, такие как гидрогелевый полимер, полиметилдисилоксан, поликапролактон, полиэтиленгликоль, полимолочную кислоту, этиленвинилацетат и их смеси. Покрытия необязательно могут быть далее покрыты подходящим верхним слоем фторосиликона, полисахаридов, полиэтиленгликоля, фосфолипидов или их комбинаций, чтобы придать композициям свойства контролируемого высвобождения.
Другой аспект изобретения относится к ингибированию активности Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) в биологическом образце или у пациента, причем указанный способ включает введение пациенту или контактирование указанного биологического образца с соединением формулы I или композицией, содержащей указанное соединение. Используемый здесь термин "биологический образец" включает, без ограничения, культуры клеток или их экстракты; биопсийный материал, полученный от млекопитающего или его экстрактов; а также кровь, слюну, мочу, фекалии, сперму, слезы или другие жидкости тела или их экстракты.
Ингибирование активности киназ Тес семейства (например, Тес, Btk, Itk/Emt/Tsk, Bmx, Txk/Rlk) в биологическом образце применимо для разнообразных целей, которые известны специалисту в данной области техники. Примеры указанных целей включают, помимо прочего, переливание крови, трансплантацию органов, хранение биологических препаратов и биологические анализы.
ПРИМЕРЫ
Используемый здесь термин "Rt(мин)" относится ко времени удерживания ВЭЖХ, в минутах, связанным с соединением. Если иначе не обозначено, метод ВЭЖХ, используемый для получения указанного времени удерживания, является следующим:
Колонка: Асе 5 C8, 15 см × 4,6 мм внутр.диам.
Градиент: 0-100% ацетонитрил+метанол (50:50) (20 мМ Трис-фосфат, pH 7,0).
Расход: 1,5 мл/мин.
Детекция: 225 нм.
Пример 1
4-трет-Бутил-N-(6-оксо-1,6-дигидро-[3,4']бипиридинил-5-ил)-бензамид I-11
+
1
6
Амринон (200 мг, 1,07 ммоль) был суспендирован в пиридине (5 мл), затем был добавлен 4-трет-бутилбензоилхлорид (209 мкл, 1,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Твердый осадок был отфильтрован и промыт MeOH, в результате чего было получено целевое соединение в виде розового твердого вещества (33 мг, выход 9%). МС (ES) m/e=348. H ЯМР (ДМСО-d) δH 1,43 (9H, с), 7,57-7,62 (4H, м), 7,81 (1H, с), 7,88 (2H, д), 8,59 (2H, д), 8,78 (1H, д), 9,32 (1H, с), 12,61 (1H, с).
Пример 2
N-(1,2-дигидро-2-оксо-5-(пиридин-4-ил)пиридин-3-ил)-4-(пиперидин-1-ил)бензамид I-68
+
1
6
4-Бром-N-(1,2-дигидро-2-оксо-5-(пиридин-4-ил)пиридин-3-ил) бензамид (30 мг, 0,081 ммоль) I-20 был помещен в пробирку для микроволновой печи, оснащенную мешалкой. Был добавлен NMP (0,75 мл), а затем добавили пиперидин (1,5 мл). Реакционный сосуд нагревали при 160°C в течение 2 часов в микроволновой печи. После охлаждения раствор и лишний пиперидин были удалены в вакууме. Неочищенное соединение было перекристаллизовано из метанола, в результате чего было получено целевое соединение в виде белого твердого вещества (13 мг, выход 43%). МС (ES) m/e=375. H ЯМР (ДМСО-d) δH 1,54-1,65 (6H, м), 3,30-3,38 (4H, м), 7,02 (2H, д), 7,61 (2H, д), 7,72-7,80 (1H, м), 7,78 (2H, д), 8,59 (2H, д), 8,77 (1H, д), 9,13 (1H, с), 12,58 (1H, ушир.с).
1
Ряд других соединений Формулы I был получен способами, в целом подобным описанным здесь. Характеристические данные для этих соединений приведены в Таблице I-А ниже и включают ВЭЖХ, ЖХ/МС (наблюдаемые) и данные H ЯМР.
1
1
Данные H ЯМР приведены в Таблице I-А ниже, в которой данные H ЯМР были получены при 400 МГц в дейтерированном ДМСО, если иначе не обозначено, и как установлено, соответствовали структуре. Номера Соединений соответствуют номерам соединений, перечисленных в Таблице 1.
Таблица 1-А
Характеристические данные Выбранных Соединений Формулы I
Соединение № I-
М+1 (набл)
Rт (мин)
<sup>1</sup>H-ЯМР
1
292
7,5
(CDCl<sub>3</sub>) 7,02-7,65 (6H, м), 7,95-7,99 (2H, м), 8,69-8,70 (2H, м), 9,11 (1H, ушир.с), 9,16 (1H, ушир.с), 11,43 (1H, ушир.с)
2
322
7,7
3,85 (3H, с), 7,10 (2H, д), 7,61 (2H, д), 7,80 (1H, с), 7,93 (2H, д), 8,58 (2H, д), 8,75 (1H, м), 9,28 (1H, с), 12,60 (1H, с)
3
306
7,5
3,85 (2H, с), 7,19-7,34 (5H, м), 7,52 (2H, д), 7,70 (1H, с), 8,54 (1H, д), 8,72 (1H, с), 9,58 (1H, с), 12,45 (1H, с)
4
298
8,1
1,25-1,40 (5H, м), 1,64 (1H, ушир.д), 1,72 (2H, ушир.д), 1,80 (2H, ушир.д), 2,60-2,67 (1Н, м), 7,55 (2H, д), 7,71 (1Н, с), 8,55 (2H, д), 8,72 (1Н, с), 9,18 (1Н, с), 12,40 (1Н, ушир.с)
5
340
8,2
4,86 (2H, с), 7,58-7,65 (4H, м), 7,83 (1Н, с), 7,97 (2H, м), 8,59 (2H, м), 8,76 (1Н, с), 9,44 (1Н, с), 12,63 (1Н, ушир.с)
6
320
8,7
1,22 (3H, т), 2,70 (2H, кв), 7,41 (2H, д), 7,61 (2H, д), 7,81 (1Н, д), 7,87 (2H, д), 8,58 (2H, д), 8,77 (1Н, д), 9,33 (1Н, с), 12,62 (1Н, ушир.с)
7
342
8,7
7,62-7,69 (4H, м), 7,84 (1Н, с), 8,02 (2H, т), 8,10 (1Н, д), 8,16 (1Н, д), 8,59-8,62 (3H, м), 8,82 (1Н, с), 9,59 (1Н, с), 12,65 (1Н, с)
8
306
8,0
2,40 (3H, с), 7,37 (2H, д), 7,86 (2H, д), 8,01 (2H, д), 8,09 (1Н, с), 8,75 (2H, д), 8,83 (1Н, д), 9,39 (1Н, с), 12,88 (1Н, с)
9
317
7,4
7,62 (2H, д), 7,87 (1Н, с), 8,04 (2H, д), 8,11 (2H, д), 8,59 (2H, д), 8,72 (1Н, с), 9,72 (1Н, с), 12,63 (1Н, с)
10
334
9,2
0,91 (3H, т), 1,62 (2H, м), 2,64 (2H, т), 7,38 (2H, д), 7,61 (2H, д), 7,81 (1Н, с), 7,87 (2H, д), 8,59 (2H, д), 8,77 (1Н, д), 9,33 (1Н, с), 12,61 (1Н, с)
12
368
9,3
7,44 (1Н, т), 7,53 (2H, т), 7,63 (2H, д), 7,77 (2H, д), 7,84 (1Н, д), 7,88 (2H, д), 8,05 (2H, д), 8,60 (2H, д), 8,79 (1Н, д), 9,47 (1Н, д), 12,64 (1Н, ушир.с)
13
306
8,2
2,41 (3H, с), 7,44-7,48 (2H, м), 7,74-7,78 (2H, м), 8,21-8,25 (3H, м), 8,82-8,86 (3H, м), 9,41 (1Н, с), 13,02 (1Н, с)
14
336
8,3
1,37 (3H, т), 4,12 (2H, кв), 7,19 (1Н, д), 7,44-7,51 (3H, м), 7,61 (2H, д), 7,83 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,74 (1Н, д), 9,37 (1Н, с), 12,61 (1Н, с)
15
374
8,6
7,60-7,84 (3H, м), 8,05-8,26 (5H, м), 8,76-8,84 (3H, м), 9,73 (1Н, с), 13,00 (1H, с)
16
376
9,0
7,66 (1Н, д), 7,72 (1Н, т), 7,93 (1Н, с), 8,02 (1Н, д), 8,20 (2H, д), 8,26 (1Н, с), 8,81-8,83 (3H, м), 9,78 1Н, с), 12,99 (1Н, с)
17
390
8,8
4,00 (3H, с), 7,43 (1H, д), 8,14-8,28 (5H, м), 8,74-8,82 (3H, м), 9,75 (1H, с), 12,93 (1Н, ушир.с)
18
376
9,0
7,55-7,57 (2H, м), 8,09-8,11 (2H, м), 8,18-8,19 (2H, м), 8,23 (1H, м), 8,81-8,83 (3H, м), 9,66 (1H, с), 12,97 (1H, с)
19
320
8,0
2,79-2,92 (4H, м), 7,18 (1H, м), 7,28-7,30 (4H, м), 8,13-8,14 (3H, м), 8,75-8,79 (2H, м), 8,87 (1H, с), 9,64 (1H, с), 12,82 (1H, с)
20
372
8,6
7,61 (2H, дд), 7,77 (2H, д), 7,84 (1H, д), 7,90 (2H, д), 8,58 (2H, дд), 8,73 (1H, д), 9,52 (1H, с), 12,61 (1Н, ушир.с)
21
350
8,7
1,30 (6H,с), 4,75 (1H, м), 7,07 (2H, д), 7,91 (2H, д), 8,20-8,21 (3H, м), 8,82-8,86 (3H, м), 9,32 (1H, с), 12,98 (1H, с)
22
384
9,3
7,11-7,15 (4H, м), 7,25 (1H, м), 7,45-7,49 (2H, м), 7,94-8,02 (4H, м), 8,09 (1H, с), 8,70-8,82 (2H, м), 8,82 (1H, м), 9,40 (1H, с), 12,86 (1H, с)
23
332
8,5
1,31 (1Н, м), 1,48 (1Н, м), 2,37 (1H, м), 2,79 (1H, м), 7,16-7,22 (3H, м), 7,28-7,32 (2H, м), 8,12-8,14 (3H, м), 8,80 (2H, д), 8,87 (1H, м), 9,99 (1H, с), 12,81 (1H, с)
24
374
10,3
1,27 (1H, м), 1,40-1,49 (4H, м), 1,72 (1H, м), 1,80-1,82 (4H, м), 2,60 (1H, м), 7,41-7,44 (3H, м), 7,86-7,92 (6H, м), 8,79 (1H, с), 9,33 (1H, с), 12,70 (1H, с)
25
326
7,7
7,40-7,67 (6H, м), 7,83 (1H, с), 8,59 (2H, д), 8,80 (1H, д), 9,67 (1H, с), 12,6(1H, с)
26
293
6,1
7,58-7,63 (3H, м), 7,86 (1H, с), 8,31 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,74 (1H, д), 8,78 (1H, д), 9,10 (1H, с), 9,74 (1H, с), 12,6 (1H, с)
27
326
8,4
7,61-7,65 (4H, м), 7,84 (1H, д), 7,98 (2H, д), 8,58 (2H, д), 8,73 (1H, д), 9,52 (1H, с), 12,62 (1H, ушир.с)
28
426
6,7
2,93 (3H, с), 3,17 (3H, с), 7,62 (2H, д), 7,77 (1H, д), 7,85 (2H, д), 7,93 (2H, д), 8,27 (1H, с), 8,59 (2H, д), 8,75 (1H, д), 9,60 (1H, с), 12,61 (1H, ушир.с)
29
293
7,4
7,62 (2H, д), 7,74 (1H, м), 7,83 (1H, м), 8,13 (1Н, м), 8,20 (1Н, м), 8,60 (2H, д), 8,78 (1Н, д), 8,92 (1Н, д), 10,76 (1Н, с), 12,68 (1Н, с)
30
327
7,1
7,61 (2H, дд), 7,70 (1Н, д), 7,86 (1Н, д), 8,34 (1Н, дд), 8,58 (2H, д), 8,71 (1Н, д), 8,93 (1Н, д), 9,87 (1Н, с), 12,60 (1Н, ушир.с)
31
327
-
7,35 (1Н, м), 7,70 (2H, м), 7,80 (2H, м), 8,00 (1Н, с), 8,68 (2H, м), 8,90 (1Н, с), 9,80 (1Н, м)
32
327
-
7,55 (2H, м), 7,70 (1Н, м), 7,90 (2H, ушир.с), 8,05 (1Н, ушир.с), 8,70 (2H, м), 8,90 (1Н, с), 9,80 (1Н, м)
33
327
-
7,55 (1Н, м), 7,65 (2H, м), 7,90 (2H, м), 8,09 (1Н, с), 8,74 (3H, м), 9,7 (1Н, с)
34
297
-
7,23 (1Н, м), 7,90 (1Н, с), 8,05 (1Н, с), 8,20 (3H, м), 8,75 (1Н, с), 8,80 (2H, м), 9,57 (1Н, с)
35
281
-
6,75 (1Н, м), 7,35 (1Н, м), 7,90 (2H, м), 8,05 (2H, м), 8,70 (2H, м), 8,75 (1Н, с), 9,23 (1Н, с)
36
377
-
7,65 (1Н, м), 8,15 (2H, м), 8,20 (1Н, м), 8,80 (2H, м), 8,85 (1Н, с), 10,00 (1Н, с) 7,75 (2H, м)
37
316
-
7,60 (2H, с), 7,76 (1Н, м), 7,85 (1Н, с), 8,10 (1Н, м), 8,25 (1Н, м), 8,41 (1Н, <i>с), </i>8,58 (2H, м), 8,75 (1Н, с), 9,85 (1Н, с)
38
369
-
(CD<sub>3</sub>OD) 3,20 (3H, с), 7,20 (1Н, с), 7,70 (1Н, с), 8,20-8,40 (6H, м), 8,70 (2H, д), 8,80 (1Н, д)
39
310
-
7,40 (2H, м), 8,10 (2H, м), 8,20 (3H, м), 8,80 (3H, м), 9,60 (1Н, с)
40
372
8,6
7,54 (1Н, т), 7,58-7,65 (2H, м), 7,80-7,88 (2H, м), 794 (1Н, д), 8,13 (1Н, с), 8,57-8,63 (2H, м), 8,73 (1Н, с), 9,62 (1Н, с)
41
335
-
-
42
359
-
-
43
360
-
7,80 (1Н, м), 8,00 (1Н, м), 3,18 (2H, м), 8,25 (3H, м), 8,80 (3H, м), 9,85 (1H, с)
44
309
-
7,42 (2H, м), 7,55 (2H, м), 7,65 (1Н, м), 7,80 (1Н, с), 8,00 (1Н, м), 8,60 (2H, м), 8,90 (1Н, с), 9,70 (1Н, м)
45
335
8,0
3,02 (6H, с), 6,80 (2H, д), 7,60 (2H, дд), 7,75-7,80 (3H, м), 8,58 (2H, д), 8,77 (1Н, д), 9,11 (1Н, с), 12,57 (1Н, ушир.с)
46
398
-
(CDCl<sub>3</sub>) 5,20 (2H, с), 7,10 (3H, д), 7,50 (5H, м), 8,00 (3H, м), 8,70 (2H, д), 9,10 (2H, д)
47
307
-
6,70 (2H, д), 7,40 (2H, д), 7,60 (2H, м), 8,00 (1Н, с), 8,40 (2H, д), 8,50 (1Н, с), 9,50 (1Н, с)
48
348
-
2,10 (3H, с), 7,60 (2H, д), 7,70 (3H, м), 7,90 (2H, д), 8,60 (2H, д), 8,80 (1Н, с), 9,30 (1Н, с), 10,30 (1Н, с)
49
348
-
2,10 (3H, с), 7,50 (1Н, м), 7,60 (3H, с), 7,80 (1Н, с), 7,90 (2H, д), 8,20 (1Н, с), 8,60 (2H, д), 8,80 (1Н, с), 9,30 (1Н, с), 10,20 (1Н, с)
50
372
-
9,00 (1Н, с), 8,70 (1Н, с), 8,60 (2H, д), 7,80 (2H, д), 7,75 (2H, д), 7,60 (2H, д), 7,40-7,50 (3H, м), 7,30 (1Н, т), 2,70 (3H, с)
51
382
-
7,10 (1Н, д), 7,45 (2H, д), 7,50 (3H, м), 7,60 (2H, м), 7,70 (2H, д), 7,80 (1Н, д), 8,60 (2H, д), 8,70 (1Н, д), 9,30 (1Н, с)
52
376
-
-
53
358
-
-
54
373
-
-
55
-
-
-
56
256
-
0,80 (4H, м), 2,20 (1Н, м), 7,90 (2H, м), 7,95 (1Н, с), 8,70 (2H, м), 8,78 (1Н, с), 9,75 (1Н, с)
57
311
-
7,55 (1Н, м), 7,90 (2H, м), 8,10 (1Н, м), 8,40 (2H, м), 8,70 (2H, м), 9,90 (1Н, с), 10,0 (1Н, с)
58
359
-
7,43 (1Н, м), 7,65 (1Н, м), 7,85 (3H, м), 8,05 (1Н, м), 8,25 (1Н, м), 8,70 (4H, м), 8,95 (1Н, ушир.с), 10,20 (1Н, с)
59
311
-
7,65 (1Н, с), 7,80 (1Н, м), 7,92 (2H, м), 8,10 (1Н, ушир.с), 8,45 (1Н, м), 8,75 (3H, м), 9,90 (1Н, с)
60
324
-
1,35 (3H, т), 2,20 (3H, с), 4,45 (2H, кв), 6,80 (1Н, с), 7,95 (2H, м), 8,05 (1Н, ушир.с), 8,70 (3H, м), 9,20 (1Н, с)
61
409
-
-
62
-
-
3,90 (3H, с), 6,90 (1Н, д), 7,40 (2H, д), 7,50 (1Н, с), 7,90 (2H, д), 8,00 (1Н, с), 8,70 (2Н, д), 8,80 (1Н, с), 9,20 (1Н, с), 9,80 (1Н, с)
63
327
-
2,60 (2H, с), 6,70 (1Н, с), 8,00 (1Н, с), 8,10 (2H, д), 8,60 (1Н, с), 8,80 (2H, д)
64
254
-
3,00 (3H, с), 7,80 (1Н, с), 7,95 (1Н, с), 8,00 (2H, д), 8,50 (1Н, с), 8,70 (2H, д)
65
359
-
1,30 (3H, т), 2,80 (2H, кв), 6,80 (1Н, с), 7,10 (1Н, м), 7,40 (2H, д), 7,50 (1Н, с), 7,60 (2H, д), 7,80 (1Н, м), 8,60 (2H, д), 11,40 (1Н, с)
66
407
-
1,50 (9H, с), 7,40 (1Н, м), 7,50 (1Н, д), 7,60 (2H, д), 7,70 (1Н, м), 7,80 (1Н, с), 8,10 (1Н, с), 8,60 (2H, д), 8,80 (1Н, с), 9,30 (1Н, с), 9,60 (1Н, с)
67
412
-
3,80 (2H, с), 5,20 (2H, с), 6,90 (1Н, м), 7,10 (1Н, д), 7,20-7,30 (5H, м), 7,40 (2H, д), 7,50 (2H, д), 7,70 (1Н, с), 8,60 (2H, д), 8,70 (1Н, с), 9,25 (1Н, с)
69
361
8,8
1,96-2,00 (4H, м), 3,29-3,35 (4H, м), 6,63 (2H, д), 7,60 (2H, д), 7,75-7,79 (3H, м), 8,58 (2H, д), 8,77 (1Н, д), 9,08 (1Н, с), 12,45 (1Н, ушир.с)
70
390
7,4
2,23 (3H, с), 2,43-2,48 (4H, м), 3,28-3,34 (4H, м), 7,05 (2H, д), 7,60 (2H, д), 7,76-7,84 (3H, м), 8,58 (2H, д), 8,77 (1Н, д), 9,16 (1Н, с), 12,58 (1Н, ушир.с)
71
376
6,3
2,81-2,86 (4H, м), 3,20-3,26 (4H, м), 7,02 (2H, д), 7,60 (2H, д), 7,75-7,82 (3H, м), 8,58 (2H, д), 8,77 (1Н, д), 9,14 (1Н, с)
72
391
7,1
1,38-1,48 (2H, м), 1,76-1,84 (2H, м), 3,00-3,07 (2H, м), 3,66-3,76 (3H, м), 4,73 (1Н, ушир.с), 7,03 (2H, д), 7,54 (2H, д), 7,75 (2H, д), 7,85 (1Н, д), 8,52 (2H, д), 8,68 (1Н, д), 9,28 (1Н, ушир.с)
73
377
7,5
3,25-3,29 (4H, м), 3,72-3,77 (4H, м), 7,06 (2H, д), 7,60 (2H, дд), 7,78 (1Н, д), 7,82 (2H, д), 8,58 (2H, дд), 8,76 (1Н, д), 9,18 (1Н, с), 12,56 (1Н, ушир.с)
74
476
7,0
0,95 (6H, т), 2,39-2,56 (12H, м), 3,26-3,39 (4H, м), 7,03 (2H, д), 7,60 (2H, д), 7,75-7,82 (3H, м), 8,58 (2H, д), 8,77 (1Н, д), 9,15 (1Н, с)
75
444
6,8
1,47-1,59 (2H, м), 1,63-1,86 (4H, м), 1,92-2,06 (2H, м), 2,89 (2H, т), 3,26-3,39 (5H, м), 3,82-3,98 (2H, м), 7,06 (2H, д), 7,60 (2H, д), 7,76-7,82 (3H, м), 8,59 (2H, д), 8,77 (1Н, д), 9,15 (1Н, с), 12,58 (1Н, ушир.с)
76
389
9,5
1,44-1,49 (4H, м), 1,70-1,77 (4H, м), 3,50-3,56 (4H, м), 6,79 (2H, д), 7,59 (2H, д), 7,73-7,77 (3H, м), 8,57 (2H, д), 8,76 (1Н, д), 9,08 (1Н, с)
77
449
7,8
1,69 (2H, квинтет), 2,36 (2H, т), 3,22 (3H, с), 3,27-3,38 (10H, м), 7,04 (2H, д), 7,60 (2H, д), 7,76-7,82 (3H, м), 8,58 (2H, д), 8,76 (1Н, д), 9,16 (1Н, с), 12,42 (1Н, оч. ушир.с)
78
390
6,4
1,74-1,81 (2H, м), 2,62 (2H, т), 2,85 (2H, т), 3,29-3,37 (2H, м), 3,53 (2H, т), 3,61 (2H, т), 6,81 (2H, д), 7,59 (2H, д), 7,72-7,76 (3H, м), 8,58 (2H, д), 8,77 (1Н, д), 9,07 (1Н, с)
79
392
6,5
1,68 (2H, м), 2,14 (6H, с), 2,29 (2H, т), 3,09 (2H, дт), 6,41-6,48 (1Н, м), 6,63 (2H, д), 7,50-7,54 (2H, м), 7,66 (2H, д), 7,82-7,86 (1Н, м), 8,46-8,51 (2H, м), 8,63-8,68 (1Н, м), 9,21 (1Н, ушир.с)
80
364
6,0
1,63 (2H, м), 2,65 (2H, т), 3,13 (2H, дт), 6,50 (1Н, т), 6,65 (2H, д), 7,58 (2H, д), 7,68 (2H, д), 7,76 (1Н, д), 8,57 (2H, д), 8,75 (1Н, д), 9,05 (1Н, с)
81
464
7,0
2,50-2,58 (6H, м), 3,25-3,29 (4H, м), 3,42 (2H, т), 3,46-3,52 (2H, м), 3,56 (2H, т), 4,62 (1Н, ушир.с), 7,04 (2H, д), 7,60 (2H, д), 7,77-7,82 (3H, м), 8,58 (2H, д), 8,76 (1Н, д), 9,17 (1Н, с)
82
391
7,4
3,19 (4H, м), 3,5-4,0 (скрытые протоны), 4,43 (2H, с), 7,67-7,71 (2H, м), 7,97 (2H, м), 8,04-8,10 (3H, м), 8,74-8,82 (3H, м), 9,51 (1Н, с), 12,87 (1Н, ушир.с)
83
390
6,4
(ДМСО+D<sub>2</sub>О) 3,00 (4H, м), 3,22 (4H, м), 4,03 (2H, с), 7,58 (2H, д), 7,96 (2H, д), 8,09-8,12 (3H, м), 8,69 (2H, д), 8,79 (1Н, с)
84
392
6,7
(D<sub>2</sub>O) 2,68 (3H, с), 2,77 (3H, с), 3,43-3,51 (4H, м), 4,41 (2H, с), 7,58 (2H, д), 7,90 (2H, д), 8,04 (1Н, м), 8,09 (2H, м), 8,60 (2H, м), 8,70 (1Н, м)
85
406
6,7
(D<sub>2</sub>O) 2,08 (2H, м), 2,60 (3H, с), 2,73 (3H, с), 2,98 (2H, м), 3,19 (2H, м), 4,35 (2H, м), 7,55 (2H, м), 7,88 (2H, м), 8,01-8,10 (3H, м), 8,59-8,69 (3H, м)
Пример 3
Бензиловый эфир (5-иод-2-метоксипиридин-3-ил)карбаминовой кислоты
+
1
3
Бензиловый эфир (5-иод-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)карбаминовой кислоты (3,68 г, 9,94 ммоль) был растворен в хлороформе (50 мл) при комнатной температуре под азотом в темноте (обернутый фольгой). Затем был добавлен карбонат серебра (3,70 г, 13,2 ммоль) и иодметан (6,2 мл, 99,4 ммоль). Реакционую смесь оставили перемешиваться при комнатной температуре в течение 48 часов. Соли серебра были удалены фильтрацией через целитовую подложку, промыты большим количеством хлороформа, а фильтрат сконцентрировали в вакууме. Остаток был очищен колоночной хроматографией, в результате чего было получено целевое соединение в виде белого твердого вещества (3,14 г, выход 82%). МС (ES) m/e=385. H ЯМР (CDCl) δH 3,97 (3H, с), 5,23 (2H, с), 7,15 (1Н, ушир.с), 7,35-7,47 (5H, м), 8,00 (1Н, с), 8,64 (1Н, ушир.с).
Пример 4
Бензиловый эфир [2-Метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксоборолан-2-ил)пиридин-3-ил]карбаминовой кислоты
2
4
6
+
1
Бензиловый эфир (5-иод-2-метоксипиридин-3-ил)карбаминовой кислоты (1 г, 2,6 ммоль), бис(пинаколато)диборон (727 мг, 2,86 ммоль), KOAc (766 мг, 7,81 ммоль) и Pd(OAc) (18 мг, 3 мол.%) были суспендированы в безводном ДМФА (20 мл). Смесь дегазировали медленным потоком пузырьков азота, пропускаемого через систему в течение 30 минут, а затем нагревали при 85°C в течение 3 часов. Реакция была охлаждена до комнатной температуры и разбавлена водой. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc (×3), высушили над MgSO, отфильтровали и сконцентрировали в вакууме. Очистка колоночной хроматографией дала целевое соединение в виде белого твердого вещества (501 мг, 50% выход). МС(ES) m/e=385. H ЯМР (ДМСО-d) δH 1,34 (12H, с), 4,03 (3H, с), 5,24 (2H, с), 7,15 (1Н, ушир.с), 7,34-7,46 (5H, м), 8,21 (1Н, с), 8,63 (1Н, ушир.с).
Пример 5
Бензиловый эфир [2-метокси-5-(2-метилсульфанилпиримидин-4-ил)пиридин-3-ил]карбаминовой кислоты
3
4
2
3
4
6
+
1
Бензиловый эфир [2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксоборолан-2-ил)пиридин-3-ил]карбаминовой кислоты (377 мг, 0,98 ммоль), 4-хлор-2-тиометилпиримидин (171 мкл, 1,47 ммоль) и Pd(Pph) (113 мг, 10 мол.%) были растворены в смеси толуола (15 мл) и EtOH (3 мл). Затем был добавлен NaCO (717 мг, 6,77 ммоль) в воде (6 мл), после чего реакционную смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь разбавили водой и экстрагировали EtOAc (×3). Объединенные органические экстракты были высушены над MgSO, отфильтрованы и сконцентрированы в вакууме. Остаток был абсорбирован силикагелем и очищен колоночной хроматографией, в результате чего было получено целевое соединение в виде желтовато-белого твердого вещества (261 мг, 70% выход). МС(ES) m/e=383. H ЯМР (ДМСО-d) δH 2,67 (3H, с), 4,09 (3H, с), 5,27 (2H, с), 7,30-7,47 (7H, м), 8,54 (1Н, д), 8,67 (1Н, с), 9,01 (1Н, ушир.с).
Пример 6
Бензиловый эфир [5-(2-метилсульфанилпиримидин-4-ил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил]карбаминовой кислоты II-3
+
1
6
Бензиловый эфир [2-метокси-5-(2-метилсульфанилпиримидин-4-ил)пиридин-3-ил]карбаминовой кислоты (20 мг, 0,05 ммоль), был растворен в смеси 1,4-диоксана (1 мл) и воды (300 мкл). Затем добавили концентрированную HCl (100 мкл), после чего реакционную смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 30 минут. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и добавили воду. Полученный осадок выделили фильтрацией и высушили под вакуумом, в результате чего было получено целевое соединение в виде желтого твердого вещества (12,9 мг, выход 67%). МС (ES) m/e=369. H ЯМР (ДМСО-d) δH 2,56 (3H, с), 5,20 (2H, с), 7,38-7,46 (5H, м), 7,60 (1Н, д), 8,10 (1Н, ушир.д), 8,56 (1Н, д), 8,61 (1Н, с), 8,69 (1Н, с), 12,52 (1Н, ушир.д).
Пример 7
2-Метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксоборолан-2-ил)пиридин-3-иламин
2
6
+
1
Бензиловый эфир [2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксоборолан-2-ил)пиридин-3-ил]карбаминовой кислоты (506 мг, 1,32 ммоль) был растворен в метаноле (10 мл). Далее был добавлен Pd(ОН) на угле (51 мг, 10 мол.%), после чего реакционную массу дегазировали азотом. Затем атмосфера азота была заменена водородом, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Остаток палладия был удален фильтрацией через целитовую подложку и промыт большим количеством метанола. Фильтрат сконцентрировали в вакууме, в результате чего было получено целевое соединение в виде желтовато-белого твердого вещества (319 мг, выход 97%). МС (ES) m/e=251. H ЯМР (ДМСО-d) δH 1,27 (12Н, с), 3,88 (3H, с), 4,89 (2H, ушир.с), 7,13 (1Н, с), 7,64 (1Н, с).
Пример 8
трет
N
4--Бутил--[2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксоборолан-2-ил)пиридин-3-ил]бензамид
+
1
3
2-Метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[l,3,2]диоксоборолан-2-ил)пиридин-3-иламин (319 мг, 1,28 ммоль) был растворен в дихлорметане (5 мл). Затем добавили триэтиламин (117 мкл, 1,40 ммоль) и 4-трет-бутилбензоилхлорид (274 мкл, 1,40 ммоль), и реакционную массу перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Неочищенная смесь была абсорбирована на силикагеле и очищена колоночной хроматографией, в результате чего было получено целевое соединение в виде желтовато-белого твердого вещества (274 мг, выход 52%). МС (ES) m/e=411. H ЯМР (CDCl) δH 1,36 (12H, с), 1,39 (9H, с), 4,10 (3H, с), 7,55 (2H, д), 7,86 (2H, д), 8,28 (1Н, с), 8,36 (1Н, ушир.с), 9,07 (1Н, с).
Пример 9
4-трет-Бутил-N-[2-метокси-5-(2-метилсульфанилпиримидин-4-ил)пиридин-3-ил]бензамид
3
4
2
3
4
3
+
1
4-трет-Бутил-N-[2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксоборолан-2-ил)пиридин-3-ил]бензамид (274 мг, 0,67 ммоль), 4-хлор-2-тиометилпиримидин (116 мкл, 1,00 ммоль) и Pd(Pph) (77 мг, 10 мол.%) растворили в смеси толуола (10 мл) и EtOH (2 мл). Затем был добавлен NaCO (488 мг, 4,61 ммоль) в воде (4 мл), после чего реакционную смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры, реакционная смесь была разбавлена водой и экстрагирована EtOAc (×3). Объединенные органические экстракты были высушены над MgSO, отфильтрованы и сконцентрированы в вакууме. Остаток был абсорбирован на силикагеле и очищен колоночной хроматографией, в результате чего было получено целевое соединение в виде желтого твердого вещества (120 мг, выход 44%). MS (ES) m/e=409. H ЯМР (CDCl) δH 1,40 (9H, с), 2,69 (3H, с), 4,17 (3H, с), 7,41 (1Н, д), 7,57 (2H, д), 7,87 (2H, д), 8,45 (1Н, ушир.с), 8,56 (1Н, д), 8,76 (1Н, д), 9,46 (1Н, д).
Пример 10
4-трет-Бутил-N-[5-(2-метилсульфанилпиримидин-4-ил)-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил]бензамид II-4
+
1
6
4-трет-Бутил-N-[2-метокси-5-(2-метилсульфанилпиримидин-4-ил)пиридин-3-ил]бензамид (120 мг, 0,29 ммоль) растворили в смеси 1,4-диоксана (6 мл) и воды (1,2 мл). Добавили концентрированную HCl (600 мкл), после чего реакционную смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 30 минут. Затем реакционную смесь охладили до комнатной температуры и добавили воду. Полученный осадок выделили фильтрацией и высушили под вакуумом. Неочищенное твердое вещество было очищено флэш-хроматографией, в результате чего было получено целевое соединение в виде желтовато-коричневого твердого вещества (29 мг, выход 25%). МС (ES) m/e=395. H ЯМР (ДМСО-d) δH 1,33 (9H, с), 2,58 (3H, с), 7,59 (2H, д), 7,64 (1Н, д), 7,88 (2H, д), 8,21 (1Н, с), 8,58 (1Н, д), 9,11 (1Н, с), 9,30 (1Н, с), 12,72 (1Н, ушир.с).
Пример 11
N
-(1,2-дигидро-5-(2-(метиламино)пиримидин-4-ил)-2-оксопиридин-3-ил)-4-(пиперидин-1-ил)бензамид II-40
+
1
6
4-Бром-N-(2-метокси-5-(2-(метиламино)пиримидин-4-ил)пиридин-3-ил)бензамид (50 мг, 0,121 ммоль) был помещен в пробирку для микроволновой печи, оборудованную мешалкой. Затем был добавлен NMP (1,5 мл) и пиперидин (1,5 мл). Реакционный сосуд нагревали при 160°C в течение 2 часов в микроволновой печи. После охлаждения, растворитель и лишний пиперидин были удалены в вакууме. Неочищенное соединение было перекристаллизовано из метанола, в результате чего было получено целевое соединение в виде белого твердого вещества (22 мг, выход 45%). МС (ES) m/e=405. H ЯМР (ДМСО-d) δH 1,54-1,61 (6H, м), 2,85 (3H, ушир.с), 3,28-3,36 (4H, м), 6,95-7,12 (4H, м), 7,77 (2H, д), 8,00 (1Н, с), 8,27 (1Н, д), 9,02 (1Н, ушир.с), 9,09 (1Н, с), 12,53 (1Н, ушир.с).
1
Ряд других соединений Формулы II был получен способами, в целом подобными описанным здесь. Характеристические данные для этих соединений приведены в Таблице II-A ниже и включают ВЭЖХ, LC/MS (наблюдаемые) и данныеH ЯМР.
1
1
ДанныеH ЯМР приведены в Таблице II-A ниже, в которой данные H ЯМР были получены при 400 МГц в дейтерированном ДМСО, если иначе не указано, и как установили, соответствовали структуре. Номера Соединений соответствуют номерам соединений, перечисленных в Таблице 1.
Таблица II-А
Характеристические данные Выбранных Соединений Формулы II
Соединение № II-
М+1 (набл)
Rт (мин)
<sup>1</sup>H-ЯМР
1
321
9,5
5,26 (2H, с), 7,28-7,51 (11H, м), 7,85 (1H, с), 8,56 (1H, с), 12,49 (1H ушир.с)
2
291
8,9
7,33-7,62 (9H, м), 7,95 (2H, м), 8,71 (1H, с), 9,36 (1H, с), 12,34 (1H, ушир.с)
3
См. Пример 6
4
См. Пример 10
5
432
9,8
1,38 (9H, с), 3,80-4,14 (8H, ушир.м), 6,85 (1H, д), 7,16 (1H, д), 7,54 (2H, д), 7,60 (1H, т), 7,88 (2H, д), 7,94 (1H, ушир.с), 8,94 (2H, ушир.с), 9,01 (1Н, с), 9,28 (1H, с), 12,47 (1H, ушир.д)
6
391
10,4
1,33 (9H, с), 3,11 (6H, с), 6,62 (1H, ушир.д), 7,00 (1H, д), 7,58 (3H, д), 7,88 (3H, д), 9,05 (1H, ушир.с), 9,27 (1H, ушир.с), 12,45 (1H, ушир.с)
7
377
9,8
1,33 (9H, с), 2,91 (3H, с), 6,94 (1H, ушир.д), 7,36-7,46 (1H, м), 7,53-7,69 (3H, м), 7,88 (3H, д), 8,90 (1H, ушир.с), 9,36 (1H, ушир.с), 12,56 (1H, ушир.с)
8
365
-
(CDCl<sub>3</sub>) 1,25 (9H, с), 7,05 (2H, м), 7,25 (1H, с), 7,45 (2H, д), 7,50 (2H, д), 7,85 (2H, д), 8,95 (1H, с), 9,05 (1H ушир., с)
9
391
-
(МeOH-d<sub>4</sub>) 1,35 (1H, м), 1,47 (4H, м), 1,80 (1H, м), 1,90 (4H, м), 2,62 (1H, м), 7,15 (2H, м), 7,40 (3H, м), 7,55 (2H, м), 7,90 (2H, д), 8,85 (1H, с)
10
362
-
1,31 (9H, с), 6,80 (2H, м), 7,30 (3H, м), 7,55 (3H, м), 7,85, (2H, м), 6,65 (1H, м), 9,30 (1H, ушир.с)
11
372
-
1,33 (9H, с), 7,58 (2H, м), 7,75 (2H, м), 7,80 (1H, д), 7,85 (4H, м), 8,70 (1H, с), 9,40 (1H,ушир.с)
12
353
-
1,33 (9H, с), 7,05 (2H, м), 7,18 (1H, м), 7,30 (1H, м), 7,55 (2H, м), 7,60 (1H, с), 7,83 (2H, м), 8,50 (1H, м), 9,45 (1H,ушир.с)
13
392
-
1,30 (9H, с), 7,55 (3H, м), 7,80 (1H, ушир.с), 7,90 (4H, м), 8,30 (2H, м), 8,80 (1H, с), 9,30 (1H, с)
14
378
9,5
1,33 (9H, с), 2,91 (3H, ушир.с), 7,14 (1H, ушир.с), 7,59 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,17 (1H, ушир.с), 8,29 (1H, д), 9,07 (1H, ушир.с), 9,30 (1H, с), 12,70 (1H, ушир.с)
15
351
-
1,33 (9H, с), 3,85 (3H, с), 7,40 (1H, с), 7,60 (2H, д), 7,65 (1H, с), 7,85 (2H, д), 8,00 (1H, с), 8,50 (1H, с), 9,30 (1H, ушир.с)
16
426
-
1,32 (9H, с), 7,33 (1H, с), 7,57 (2H, д), 7,65 (1H, м), 7,78 (2H, д), 7,90 (4H, м), 8,75 (1H, с), 9,30 (1H, с)
17
378
9,2
(80єC) 3,01 (3H, с), 6,90 (1H, с), 7,60 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,04 (1H, д), 8,34 (1H, с), 8,81 (1H, с), 9,22 (1H, с), 12,58 (1H, ушир.с)
18
392
9,6
1,32 (9H, с), 3,30 (6H, с), 7,16 (1H, с), 7,59 (2H, д), 7,90 (2H, д), 8,18 (1H, д), 8,73 (1H, с), 8,80 (1H, с), 9,40 (1H, с), 12,99 (1H, ушир.с)
19
520
10,1
1,19 (3H, т), 1,32 (9H, с), 1,46 (2H, м), 1,96 (2H, м), 2,85-3,10 (2H, м), 3,92-4,10 (6H, м), 7,33 (1H, ушир.с), 7,58 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,32 (3H, м), 9,06-9,16 (1H, м), 9,29 (1H, с), 12,87 (1H, с)
20
421
9,4
1,32 (9H, с), 2,62 (3H, м), 3,19 (2H, м), 3,74 (2H, м), 7,32 (1H, ушир.с), 7,59 (2H, д), 7,89 (2H, д), 8,17 (1H, оч. ушир.с), 8,37 (1H, ушир.с), 8,87 (2H, оч. ушир.с), 9,08 (1H, с), 9,33 (1H, с), 12,87 (1H, ушир.с)
21
392
10,0
1,33 (9H, с), 3,23 (6H, с), 7,16 (1H, ушир.с), 7,58 (2H, д), 7,88 (2Н, д), 8,19 (1Н, ушир.с), 8,34 (1Н, д), 9,12 (1Н, с), 9,29 (1Н, с), 12,70 (1Н, ушир.с)
22
392
9,8
1,21 (3H, т), 1,32 (9H, с), 3,50 (3H, ушир.м), 7,31 (1H, ушир.д), 7,58 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,30 (1H, с), 8,31 (1H, ушир.с), 9,08 (1H, с), 9,31 (1H, с), 12,86 (1H, ушир.с)
23
406
10,1
1,24 (6H, д), 1,33 (9H, с), 4,12 (2H, ушир.м), 7,24 (1H, ушир.с), 7,58 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,26 (1H, ушир.с), 8,29 (1H, д), 9,06 (1H, с), 9,31 (1H, с), 12,82 (1H, ушир.с)
24
454
10,3
1,32 (9H, с), 4,66 (2H, ушир.с), 7,22-7,35 (4H, м), 7,49 (1H, ушир.с), 7,59 (2H, д), 7,89 (2H, д), 8,28 (1H, ушир.с), 8,32 (1H, ушир.с), 9,10 (1H, ушир.с), 9,31 (1H, с), 12,84 (1H, ушир.с)
25
433
9,7
1,33 (9H, с), 3,22 (4H, ушир.м), 4,04 (4H, ушир.м), 7,19 (1H, д), 7,59 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,14 (1H, ушир.д), 8,43 (1H, д), 8,93 (1H, ушир.с), 9,04 (1H, с), 9,31 (1H, с), 12,71 (1Н, ушир.д)
26
348
9,6
7,45 (1H, т), 7,58 (2H, д), 7,85 (2H, д), 7,94-8,04 (3H, м), 8,65 (1H, д), 9,04 (1H, с), 9,31 (1H, с),
27
519
10,4
1,20 (3H, т), 1,32 (9H, с), 1,96-2,05 (2H, м), 2,95-3,12 (2H, м), 3,30-3,36 (2H, м), 3,90-4,06 (5H, м+кв), 6,37 (1H, д), 6,52-6,58 (1H, м), 6,85 (1H, д), 7,40 (1H, т), 7,57 (2H, д), 7,76-7,84 (1H, м), 7,84 (1H, д), 9,07 (1H, с), 9,20 (1H, с)
28
448
9,5
1,32 (9H, с), 1,76-7,82 (2H, м), 2,07-2,20 (2H, м), 3,07 (2H, ушир.м), 3,33-3,39 (2H, м), 4,10 (1H, м), 7,29 (1H, ушир.с), 7,49 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,27 (1H, ушир.с), 8,34 (1H, с), 9,01-9,23 (1H, ушир.м), 12,82 (1H, ушир.с)
29
448
9,5
1,32 (9H, с), 1,61-2,07 (4H, м), 2,82-2,99 (2H, ушир.м), 3,19 (1H, м), 3,39 (1H, м), 4,21 (1H, м), 7,23 (1H, ушир.с), 7,59 (2H, д), 7,89 (2H, д), 8,08-8,28 (2H, ушир.м), 8,35 (1H, с), 9,06 (1H, с), 12,79 (1H, ушир.с)
30
433
9,5
1,32 (9H, с), 2,07 (1H, м), 2,25 (1H, м), 3,28 (2H, м), 3,37 (1H, м), 3,47 (1H, м), 4,55 (1H, м), 7,25 (1H, с), 7,59 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,16 (1H, с), 8,35 (1H, д), 9,08 (1H, с), 9,14-9,26 (1H, ушир.м), 12,76 (1H, ушир.с)
31
433
9,5
1,32 (9H, с), 2,09 (1H, м), 2,27 (1H, м), 3,27 (2H, м), 3,39 (1H, м), 3,45 (1H, м), 4,49 (1H, м), 7,28 (1H, с), 7,61 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,19 (1H, с), 8,36 (1H, д), 9,12 (1H, с), 9,14-9,35 (1H, ушир.м), 12,80 (1H, ушир.с)
32
447
9,8
1,22-1,30 (2H, м), 1,33 (9H, с), 1,86-1,95 (2H, м), 2,51-2,60 (2H, м), 2,91-2,97 (2H, м), 3,75-3,85 (1H, м), 6,35 (1H, д), 6,47 (1H, д), 6,83 (1H, д), 7,36 (1H, т), 7,59 (2H, д), 7,80 (1H, с), 7,85 (2H, д), 9,02 (1H, с), 9,22 (1H, с),
33
433
9,5
1,32 (9H, с), 3,23 (4H, с), 4,05 (4H, с), 7,36 (1H, с), 7,59 (2H, д), 7,89 (2H, д), 8,22 (1H, с), 8,71 (1H, с), 8,96 (1H, с), 9,35 (1H, с), 9,38 (1H, ушир.с), 12,86 (1H, ушир.с)
34
349
9,4
1,32 (9H, с), 7,59 (2H, д), 7,88 (2H, д), 7,98 (1H, д), 8,22 (1H, с), 8,76 (1H, д), 9,17 (2H, д), 9,30 (1H, с), 12,71 (1H, ушир.с)
35
420
9,1
1,35 (9H, с), 2,65 (3H, с), 3,16-3,25 (2H, м), 3,63-3,70 (2H, м), 7,03 (1H, д), 7,60 (2H, д), 7,90 (2H, д), 8,80-8,95 (2H, м), 9,00 (1H, с), 9,32 (1H, с)
36
409
10,1
1,33 (9H, с), 2,37 (3H, с), 2,55 (3H, с), 7,55 (2H, д), 7,69 (1H, с), 7,85 (2H, д), 8,48 (1H, с), 8,78 (1H, с), 9,25 (1H, с),
37
311
-
5,17 (2H, с), 7,35 (7H, м), 7,85 (2H, ушир.с), 8,10 (1H, с), 8,37 (1H,ушир.с)
38
421
8,7
1,32 (9H, с), 2,58-2,60 (3H, м), 3,13-3,15 (2H, м), 3,75-3,76 (2H, м), 6,94 (1H, ушир.с), 7,59 (2H, д), 7,89 (2H, д), 8,11 (1H,ушир.с), 8,69 (1H, с), 8,84 (1H, с), 8,93 (2H, ушир.с), 9,36 (1H, с), 12,85 (1H, ушир.с)
39
433
8,7
1,32 (9H, с), 1,99 (1H, м), 2,38 (1H, м), 3,16 (1H, м), 3,30 (1H, м), 3,37 (1H, м), 3,52 (1H, м), 4,64 (1H, м), 6,93 (1H, с), 7,61 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,09 (1H, ушир.с), 8,69 (1H, с), 8,85 (1H, с), 9,33 (2H, ушир.с), 9,36 (1H, с), 12,82 (1H, ушир.с)
41
424
10,1
1,31 (9H, с), 2,83 (3H, с), 6,49 (1H, с), 7,46-7,61 (3H, м), 7,81-7,98 (3H, м), 8,90 (1H, ушир.с), 9,27 (1Н, с), 12,48 (1H, ушир.с)
42
376
9,7
1,31 (9H, с), 2,11 (3H, с), 4,95 (2H), 6,41-6,51 (2H, м), 6,89 (1H, м), 7,05 (1H, с), 7,58 (2H, м) 7,85 (2H, м), 8,32 (1H, с), 9,25 (1H)
43
390
10,2
1,36 (9H, с), 2,15 (3H, с), 2,67 (3H, м), 5,55 (1H, м), 6,36-6,51 (2H, м), 6,97 (1H, м), 7,08 (1H, с), 7,58 (2H, м) 7,85 (2H, м), 8,35 (1H, с), 9,25 (1H)
44
391
10,5
1,31 (9H, с), 2,22 (3H, с), 3,75 (3H, с), 6,78-6,89 (2H, м), 7,18-7,22 (2H, м, 7,58 (2H, м), 7,85 (2H, м), 8,35 (1H, с), 9,29 (1H)
45
460
8,6
1,55-1,65 (6H, м), 1,94 (1H, м), 2,24 (1H, м), 3,11 (1H, м), 3,27-3,29 (2H, м), 3,29-3,35 (4H, м), 3,44 (1H, м), 4,53 (1H, м), 6,82 (1H, с), 7,02 (2H, д), 7,77 (2H, д), 7,86-7,94 (2H, м), 8,50 (1H, с), 8,96-8,99 (2H, м), 9,10 (1H, с), 12,51 (1H, ушир.с)
46
405
8,9
1,50-1,60 (6H, м), 2,84 (3H, ушир.с), 3,31-3,34 (4H, м), 6,75 (1H, с), 7,02 (2H, д), 7,39 (1H, ушир.с), 7,77 (2H, д), 7,92 (1H,ушир.с), 8,42 (1 H, с), 8,95 (1H, с), 9,09 (1H, с), 12,44 (1H, ушир.с)
47
404
9,5
1,55-1,65 (6H, м), 3,30-3,37 (4H, м), 2,83 (3H, с), 6,33 (1H, д), 6,48-6,59 (1H, ушир.с), 6,84 (1H, д), 7,00 (2H, д), 7,43 (1H, т), 7,72-7,80 (3H, м), 9,00 (1H, с), 9,06 (1H, с),
48
432
10,1
1,21 (6H, д), 1,55-1,63 (6H, м), 3,30-3,38 (4H, м), 3,99-4,09 (1H, м), 6,33 (1H, д), 6,38 (1H, д), 6,76 (1H, д), 6,99 (2H, д), 7,36 (1H, т), 7,72-7,78 (3H, м), 8,93 (1H, с), 9,05 (1H, с)
49
430
10,1
0,40-0,46 (2H, м), 0,67-0,75 (2H, м), 1,55-1,64 (6H, м), 2,49-2,57 (1H, м), 3,30-3,38 (4H, м), 6,50 (1H, д), 6,80 (1H, с), 6,91 (1H, д), 7,00 (1H, д), 7,49 (1H, т), 7,71-7,79 (3H, м), 8,97 (1H, с), 9,05 (1H, с)
50
480
10,3
1,55-1,64 (6H, м), 3,30-3,38 (4H, м), 4,53 (2H, д), 6,37 (1H, д), 7,83 (1H, д), 7,00 (2H, д), 7,15-7,22 (2H, м), 7,25-7,33 (2H, м), 7,35-7,44 (3H, м), 7,70-7,77 (3H, м), 8,96 (1H, с), 9,05 (1H, с)
51
447
8,7
1,53-1,64 (6H, м), 2,30 (3H, с), 2,63-2,70 (2H, м), 3,30-3,44 (6H, м), 6,35 (1H, д), 6,45-6,52 (1H, м), 6,80 (1H, д), 7,00 (2H, д), 7,38 (1H, т), 7,70-7,78 (3H, м), 8,95 (1H, с), 9,05 (1H, с)
52
422
9,8
1,59 (6H, ушир.с), 2,54 (3H, с), 3,23 (4H, ушир.с), 7,01 (2H, д), 7,36 (1H, ушир.с), 7,71 (2H, д), 8,33 (1H, ушир.с), 8,39 (1H, ушир.с), 8,84 (1H, ушир.с), 9,39 (1H, ушир.с)
53
432
10,2
1,30 (6H, д), 1,60 (6H, ушир.с), 2,46 (4H, ушир.с), 3,10 (1H, м), 3,31 (3H, с), 7,02 (2H, д), 7,60 (1H, с), 7,77 (2H, д), 8,10 (1H, ушир.д), 9,11 (2H, ушир.с д), 12,61 (1Н, ушир.д)
54
377
10,3
1,34 (9H, с), 3,85 (3H, с), 6,91 (1H, м), 7,10-7,16 (2H, м), 7,36 (1H, м), 7,58 (3H, м), 7,89 (2H, м), 8,71 (1H, с), 9,30 (1H)
55
362
9,7
1,31 (9H, с), 2,55 (3H, с), 7,41 (1H, с), 7,56 (2H, м), 7,89 (3H, м), 8,40 (1H, с), 8,70-8,78 (2H, м), 9,35 (1H)
56
405
9,1
1,62 (6H, м), 2,90 (3H, м), 6,34 (1H, д), 7,04 (2H, д), 7,38 (1H, ушир.м), 7,75 (2H, д), 8,09 (2H, м), 9,08 (1H, с), 9,22 (1H, с), 12,35 (1H, с)
57
420
9,7
1,79 (3H, т), 2,01 (6H, ушир.с), 3,70 (4H, ушир.с), 4,82 (2H, м), 7,43 (2H, д), 7,96 (1H, м), 8,19 (2H, д), 8,56 (1H, ушир.с), 8,96 (1H, м), 9,50 (2H, д), 13,06 (1H, ушир.с)
58
462
9,4
1,53 (6H, м), 2,77 (6H, м), 4,20-4,50 (6H, м), 4,60-4,80 (2H, м), 7,05 (2H, м), 7,35 (1H, м), 7,73 (1H, м), 7,99 (1H, м), 8,27 (1H, м), 9,05 (2H, м), 9,32 (1H, ушир.с), 9,93 (1H, ушир.с), 12,91 (1H, ушир.с)
59
435
8,6
1,55-1,65 (6H, м), 3,33-3,40 (6H, м), 3,54 (2H, м), 4,58 (1H, ушир.с), 6,90-7,02 (4H, м), 7,76 (2H, д), 7,98 (1H, с), 8,26 (1H, с), 8,99 (1H, с), 9,08 (1H, с), 12,50 (1H, ушир.с)
60
448
8,9
1,50-1,65 (6H, м), 2,34 (3H, с), 2,77-2,90 (2H, м), 3,24-3,40 (4H, м), 4,30-4,40 (2H, м), 6,60 (1H, м), 6,93-7,05 (2H, м), 7,26-7,35 (1H, м), 7,64-7,80 (3H, м), 7,89 (1H, с), 8,97 (1H, с), 9,10 (1H, с)
61
476
9,7
1,56 (6H, м), 2,46 (3H, скрытый сигнал), 2,85 (6H, м), 3,20-3,60 (6H, м), 3,97 (2H, м), 6,98-7,11 (2H, м), 7,73 (2H, ушир.с), 8,04 (1H, ушир.с), 8,34 (1H, ушир.с), 9,07 (2H, ушир.с), 9,26 (1H, ушир.с), 12,6 (ушир.с)
62
392
9,6
1,30 (9H, с), 2,20 (3H, с), 2,80 (3H, д), 6,91 (1H, ушир.д), 7,55-7,61 (3H, м), 7,85 (2H, д), 8,16 (1H, с), 8,75 (1H, с), 9,26 (1H, с)
63
448
8,7
1,60 (6H, м), 2,62 (3H, с), 3,16 (2H, м), 3,33 (4H, м), 3,62 (2H, м), 7,01 (1H, д), 7,10 (1H, д), 7,16 (1H, т), 7,77 (2H, д), 8,04 (1H, м), 8,33 (1H, д), 8,58 (2H, м), 9,06-9,09 (2H, м), 12,6 (1H, д)
64
322
7,6
2,82-2,89 (3H, м), 6,99 (1H, д), 7,11 (1H, д), 7,53-7,67 (3H, м), 7,94 (2H,д), 8,05 (1H, с), 8,27 (1H, д), 9,04 (1H,с), 9,35 (1H, с), 12,58 (1H, д),
65
462
9,1
1,59 (6H, м), 2,32 (3H, с), 2,67 (3H, с), 3,18 (2H, м), 3,35-3,60 (4H, м), 3,78 (2H, м), 7,00-7,10 (3H, м), 7,76 (2H, д), 8,03 (1H, с), 8,33 (1H, д), 9,07 (2H, м)
66
433
9,8
1,21 (3H, т), 1,59 (6H, м), 2,54 (2H, м), 2,85 (3H, с), 3,39 (4H, ушир.м), 6,82 (1H, с), 7,01 (2H, д), 7,75 (2H, д), 8,09 (1H, с), 8,95 (1H, с)
67
426
8,8
2,86 (3H, ушир.сс), 7,01 (1H, д), 7,12 (1H, д), 7,60 (2H, дд), 7,66-7,76 (1H, м), 7,79 (2H, д), 7,88 (2H, д), 8,06-8,12 (3H, м), 8,28 (1H, д), 9,05 (1H, с), 9,55 (1H, с), 12,60 (1H, с)
68
376
10,0
1,35 (9H, с), 2,86 (3H, с), 6,95 (1H, м), 7,18 (2H, м), 7,39 (1H, м), 7,54 (1H, с), 7,61 (2H, д), 7,92 (2H, д), 8,72 (1H, с), 9,31 (1H, с)
69
403
9,7
1,58 (6H, с), 2,71 (3H, с), 3,36 (4H, м), 6,45 (1 H, м), 6,65-6,72 (2H, м), 6,98 (2H, д), 7,11 (1H, т), 7,37 (1H, с), 7,75 (2H,д), 8,67 (1Н, с)
70
434
9,0
1,53-1,62 (6H, м), 3,30-3,42 (4+2H, 2×м), 3,51-3,60 (2H, м), 4,72 (1H, т), 6,38 (1H, д), 6,53 (1H, т), 6,80 (1H, д), 6,99 (2H, д), 7,37 (1H, т), 7,72-7,78 (3H, м), 8,92 (1H, с), 9,06 (1H, с)
71
448
9,6
1,54-1,65 (6H, м), 3,27 (3H, с), 3,30-3,37 (4H, м), 4,46-4,55 (4H, м), 6,2 (1H, д), 6,63 (1H,т), 6,85 (1H, д), 7,01 (2H, д), 7,41 (1H, т), 7,72-7,82 (3H, м), 8,99 (1H, с), 9,06 (1H, с)
72
403
-
(CDCl<sub>3</sub>) 1,7-1,2 (6H, м), 1,85 (4H, м), 2,55 (1H, м), 3,80 (3H, с), 6,90 (2H, д), 7,15 (2H, м), 7,30 (2H, д), 7,40 (2H, д), 7,85 (2H, д), 8,95 (1H, ушир.с), 9,05 (1H, ушир.с)
73
396
10,2
1,3 (9H, с), 2,3 (3H, с), 7,3 (1H, д), 7,4 (1H, с), 7,6 (2H, д), 7,8 (1H, д), 7,9 (2H,д), 8,6 (1Н, с)
74
389
9,1
1,6 (6H, с), 3,4 (4H, м), 7,0 (2H, ушир.м), 7,2 (1H, ушир.м), 7,4-7,6 (4H, м), 7,8 (2H, д), 8,7 (1H, с)
75
446
9,1
1,6 (6H, с), 2,6 (3H, с), 3,1 (2H, м), 3,3 (4H, м), 3,4 (2H, м), 6,6 (1H, м), 6,8 (2H, м), 7,0 (2H, м), 7,2 (1H, т), 7,4 (1H, с), 7,8 (2H, м), 8,6 (1H, с), 9,1 (1H, с)
76
449
8,6
1,59 (6H, ушир.с), 2,49 (5H, ушир.с), 3,33 (4H, ушир.с), 4,53 (2H, ушир.с), 7,00 (2H, ушир.д), 7,63 (1H, ушир.с), 7,75 (2H, ушир.с), 8,17 (1H, ушир.с), 8,57 (1H, ушир.с), 9,08 (2H, ушир.д)
77
406
6,3
2,85 (3H, с), 3,17-3,20 (4H, м), 3,44-3,50 (4H, м), 6,97 (1H, д), 7,05-7,12 (3H, м), 7,85 (2H, д), 8,01 (1H, с), 8,27 (1H, д), 9,02 (1H, ушир.с), 9,15 (1H, с),
78
448
7,7
1,01 (6H, д), 2,53-2,59 (4H, м), 2,66-2,69 (1H, м), 2,85 (3H, ушир.с), 3,26-3,36 (4H, м), 6,97 (1H, д), 7,03 (2H, д), 7,09 (1H, д), 7,78 (2H, д), 8,00 (1H, с), 8,27 (1H, д), 9,03 (1H, с), 9,10 (1H, с), 12,51 (1H, ушир.с)
79
478
7,8
1,63-1,75 (2H, м), 2,30-2,41 (2H, м), 2,82-2,90 (4H, м), 3,22 (3H, с), 3,28-3,39 (6H, м), 6,94-7,12 (4H, м), 7,79 (2H, д), 8,00 (1H, с), 8,27 (1H, д), 9,03 (1H, с), 9,11 (1H, с), 12,53 (1H, д)
80
474
7,9
1,66-1,73 (4H, м), 1,89-2,09 (4H, м), 2,31-2,54 (4H, м), 2,57-2,68 (2H, м), 2,88 (3H, ушир.с), 3,11-3,19 (1H, м), 3,39-3,48 (1H, м), 3,91-3,99 (1H, м), 6,66 (2H, д), 6,97 (1H, д), 7,10 (1H, д), 7,77 (2H, д), 7,99 (1H, с), 8,27 (1H, д), 9,03 (2H,с), 12,49 (1Н, ушир.с)
81
448
7,1
2,05 (3H, с), 2,85 (3H, с), 3,28-3,40 (4H, м), 3,56-3,61 (4H, м), 6,97 (1H, д), 7,02-7,11 (3H, м), 7,81 (2H, д), 8,01 (1H, с), 8,26 (1H, д), 9,02 (1H, с), 9,12 (1H, с), 12,52 (1H, ушир.с)
82
386
6,5
1,02 (9H, с), 2,82 (3H, с), 3,35-3,39 (8H, м), 6,90 (1H, м), 7,05 (1H, м), 7,86 (2H, м), 8,24 (1H, м), 8,68 (1H, м), 12,38 (1H, ушир.с)
83
379
-
1,31 (9H, с), 2,05 (2H, м), 2,35 (2H, м), 2,72 (2H, м), 6,17 (1H, с), 7,55 (2H, м), 7,60 (1H, м), 7,88 (2H, м), 8,65 (1H, с), 9,25 (1H, ушир.с)
84
382
-
-
85
392
-
(CDCl<sub>3</sub>) 1,70-1,50 (6H, м), 2,05 (2H, м), 2,40 (2H, м), 2,60 (2H, м), 3,25 (4H, м), 6,35 (1H, с), 6,90 (2H, м), 7,30 (1H, с), 7,80 (2H, м), 8,90 (2H, д)
86
407
-
1,60 (6H, с), 1,80 (4H, м), 2,45 (4H, м), 3,35 (4H, м), 6,35 (1H, с), 7,00 (2H, м), 7,25 (1H, м), 7,75 (2H, м), 8,70 (1H, с), 9,10 (1H, с)
87
378
-
(CDCl<sub>3</sub>) 1,50-1,70 (6H, м), 2,50 (2H, м), 2,90 (2H, м), 3,30 (4H, м), 6,43 (с, 1H), 6,85 (2H, м), 7,35 (1H, с), 7,80 (2H, м), 8,90 (2H, д)
88
365
-
(CDCl<sub>3</sub>) 1,25 (9H, с), 7,05 (2H, м), 7,25 (1H, с), 7,45 (2H, д), 7,50 (2H, д), 7,85 (2H, д), 8,95 (1H, с), 9,05 (1H, ушир.с)
89
394
-
1,60 (8H, м), 1,85 (3H, м), 2,20 (2H, м), 3,25 (4H, м), 4,30 (1H, ушир.с), 6,05 (1H, с), 6,85 (2H, м), 7,00 (1H, с), 7,75 (2H, м), 8,80 (1H, м), 8,90 (1H, м)
90
364
-
-
91
496
-
-
92
406
-
-
93
433
9,6
1,21 (3H, т), 1,60 (6H, м), 2,54 (2H, кв), 2,87 (3H, с), 3,3 (4 скрытых протона), 6,17 (1H, с), 7,02 (2H, д), 7,77 (2Н, д), 8,07 (1H, с), 9,21 (1H, с)
94
400
9,5
1,60 (6H, м), 3,3 (4 скрытых протона), 7,02 (2H, д), 7,70 (1H, д), 7,77 (2H, д), 8,09 (1H, д), 8,39 (1H, с), 8,84 (1H, д), 9,13 (1H, д)
95
461
9,4
1,52-1,62 (6H, м), 2,30 (3H, с), 2,70 (2H, т), 3,05 (3H, с), 3,24-3,36 (4H, м), 3,61 (2H, т), 6,51 (1H, д), 6,90 (1H, д), 6,97 (2H, д), 7,47 (1H, т), 7,70 (2H, д), 7,85 (1Н, с), 9,03 (1H, с), 9,05 (1H, с)
96
503
9,3
0,93 (6H, т), 1,55-1,60 (6H, м), 1,62-1,71 (2H, м), 2,38-2,54 (6H, м), 3,25-3,37 (6H, м), 6,32 (1H, д), 6,57-6,63 (1H, м), 6,80 (1H, д), 7,00 (2H, д), 7,37 (1H, т), 7,71-7,80 (3H, м), 8,95 (1H, с), 9,03 (1H, с)
97
428
9,2
2,88 (3H, ушир.с), 5,21 (2H, с), 7,09 (1H, д), 7,17 (2H, д), 7,30-7,48 (5H, м), 7,92 (2H, д), 8,12 (1H, ушир.с), 8,28 (1H, д), 9,03 (1H, ушир.с), 9,25 (1H, с), 12,65 (1H, ушир.с)
98
412
9,4
2,85 (3H, ушир.с), 4,04 (2H, с), 6,97 (1H, д), 7,09 (1H, д), 7,16-7,34 (5H, м), 7,42 (2H, д), 7,86 (2H, д), 8,04 (1H, с), 8,25 (1H, д), 9,02 (1H, ушир.с), 9,28 (1H, ушир.с)
99
400
9,2
1,59 (6H, м), 3,3 (4 скрытых протона), 7,02 (2H, д), 7,76-7,78 (3Н, м), 8,54 (1H, с), 8,70 (1H, д), 8,94 (1H, с), 9,07 (1H, д)
100
377
6,1
2,77 (4H, т), 3,57 (4H, т), 6,88 (1H, д), 7,60 (2H, д), 7,78 (1H, д), 8,00 (1H, дд), 8,57 (2H, д), 8,68 (1H, д), 8,73 (1Н, д)
101
475
9,1
1,56-1,63 (6H, м), 1,82 (3H, с), 3,22-3,29 (2H, м), 3,30-3,37 (6H, м), 6,36 (1H, д), 6,63 (1H, т), 6,99 (2H, д), 7,41 (1H, т), 7,73 (2H, д), 7,81 (1H, с), 7,95 (1H, т), 9,00 (1H, с), 9,07 (1H, с)
102
413
9,5
1,60 (6H, ушир.с), 3,34 (4H, ушир.с), 6,60 (1H, д), 7,03 (3H, т), 7,08 (1H, т), 7,14 (1H, д), 7,16 (1H, д), 7,36 (1H, д), 7,77 (2H, д), 8,79 (1H, д)
103
503
9,7
0,91 (6H, м), 1,59 (6H, м), 2,40-2,60 (6H, м), 3,04 (3H, с), 3,30-3,45 (4H, м), 3,65 (2H, м), 6,48 (1H, м), 6,91 (1H, м), 7,01 (2H, д), 7,44 (1H, м), 7,75-7,781 (3H, м), 9,03 (2H, д), 12,30 (1H, ушир.с)
104
487
9,7
1,60 (6H, м), 1,87-1,91 (2H, м), 2,02 (2H, м), 3,15 (2H, м), 3,28-3,30 (4H, м), 3,43-3,46 (2H, м), 3,53-3,56 (4H, м), 6,45 (1H, д), 6,91 (1H, ушир.с), 6,97-7,10 (2H, м), 7,49 (1H, м), 7,75-7,81 (3H, м), 9,07-9,12 (2H, м), 9,51 (1H, ушир.с), 12,35 (1H, м)
105
487
9,2
1,29-1,38 (2H, м), 1,60 (6H, м), 1,91-2,03 (4H, м), 2,90-2,93 (2H, м), 3,24-3,25 (2H, м), 3,30-3,34 (5H, м), 6,43 (1H, д), 6,901 (1H, д), 6,97-7,03 (2H, м), 7,44 (1H, м), 7,75-7,78 (3H, м), 8,15 (1H, д), 8,49 (1H, д), 9,06-9,08 (2H, м), 12,48 (1H, ушир.с)
106
443
9,3
1,60 (6H, м), 2,84-2,87 (2H, м), 3,30-3,50 (4H, м), 3,56-3,60 (2H, м), 6,45 (1H, д), 6,92 (1H, д), 7,01-7,05 (3H, м), 7,48 (1H, м), 7,76 (2H, м), 7,81 (1H, д), 9,00 (1H, д), 9,07 (1H, с), 12,30 (1H, с)
107
394
6,0
1,78-1,86 (2H, м), 2,65-2,70 (2H, м), 2,85-2,91 (3H, м), 3,18 (1,4H, т), 3,30 (0,6H, т), 6,67 (2H, д), 7,06 (1H, д), 7,72 (2H, д), 8,03-8,09 (1H, м), 8,28 (1H, д), 9,01 (1H, с), 9,02-9,06 (1H, м)
108
476
9,6
0,85-0,95 (6H, м), 1,51-1,62 (6H, м), 1,65-1,77 (1H, м), 2,82-2,90 (1H, м), 3,24-3,35 (4H, м), 4,06-4,15 (1H, м), 4,25-4,33 (1H, м), 6,68 (1H, д), 7,00 (2H, д), 7,31 (1H, д), 7,66-7,76 (3H, м), 7,87 (1H, с), 9,02 (1H, с), 9,06 (1H, с)
109
413
10,0
1,60 (6H, ушир.с), 3,25 (4H, ушир.с), 6,52 (1H, д), 7,01-7,10 (4H, м), 7,36 (2H, д), 7,64 (1H, д), 7,75 (2H, д), 8,65 (1H, д)
110
482
9,9
1,60 (6H, ушир.с), 3,35 (4H, ушир.с), 7,02 (2H, д), 7,50 (1H, с), 7,78 (2H, д), 7,83 (1H, с), 8,41 (1H, с), 8,47 (1H, ушир.с), 9,01 (1H, ушир.с)
111
433
9,9
1,65-1,77 (6H, м), 2,65 (6H, с), 3,40-3,50 (4H, м), 6,84 (1H, д), 7,06 (1H, д), 7,14 (2H, д), 7,36 (1H, с), 7,66 (1H, т), 7,85-7,90 (3H, м), 9,07 (1H, с), 9,18 (1H, с)
112
461
9,1
1,07 (6H, с), 1,53-1,62 (6H, м), 3,23-3,37 (6H, 2×м), 6,43 (1H, д), 6,47 (1H, т), 6,80 (1H, д), 6,99 (2H, д), 7,37 (1Н, т), 7,72 (2H, д), 7,76 (1H, с), 8,98 (1H,с), 9,04 (1Н, с)
113
390
8,6
1,60 (6H, ушир.с), 3,34 (4H, ушир.с), 6,08 (1H, ушир.д), 6,38 (1H, д), 6,84 (1H, с), 7,02 (2H, д), 7,72-7,77 (3H, м), 8,01 (1H, д), 8,95 (1H, с)
114
405
9,1
1,60 (6H, м), 2,87 (3H, с), 3,3 (4 скрытых протона), 7,02 (2H, д), 7,76 (2H, д), 7,78 (1H, с), 7,90 (1H, д), 8,08 (1H, с), 8,98 (1H, д)
115
404
9,2
1,60 (6H, с), 2,47 (3H, с), 3,34 (4H, с), 6,57 (1H, с), 6,68 (1H, д), 7,02 (2H, д), 7,59 (1H, с), 7,75 (2H, д), 7,97 (1H, д), 8,66 (1H, с)
116
389
9,7
1,60 (6H, с), 2,37 (3H, с), 3,35 (4H, с), 7,02 (2H, д), 7,12 (1H, д), 7,66 (1H, с), 7,76 (2H, д), 7,89 (1H, д), 8,85 (1H, д), 9,12 (1H, с)
117
458
10,5
1,46-1,54 (2H, м), 1,57-1,60 (8H, м), 1,68-1,70 (2H, м), 1,96-2,02 (2H, м), 3,35 (4H, м), 4,15 (1H, м), 6,37 (1H, м), 6,56 (1H, м), 6,82 (1H, д), 7,02 (2H, д), 7,41 (1H, м), 7,75-7,80 (3H, м), 8,98 (1H, с), 9,07 (1H, с), 12,3 (1H, с)
118
378
8,6
1,60 (6H, с), 3,35 (4H, с),3,64 (3H, с), 7,01 (3H, м), 7,28 (1H, с), 7,75 (3H, м), 8,38 (1H, д)
119
517
10,0
0,86 (3H, д), 0,94 (3H, д), 1,45-1,55 (2H, м), 1,52-1,64 (6H, м), 1,65-1,75 (1H, м), 2,57 (3H, д), 3,32-3,42 (4H, м), 4,29-4,38 (1H, м), 6,45 (1H, д), 6,65-6,74 (1H, м), 6,81 (1H, д), 7,00 (2H, д), 7,40 (1H, т), 7,72-,82 (4H, м), 8,89 (1H, с), 9,08 (1H, с)
120
501
9,7
0,95-1,10 (3H, м), 1,53-1,75 (9H, м), 1,78-2,65 (4H, м), 2,85-3,18 (3H, м), 3,30-3,37 (4H, м), 3,55-3,68 (1H, м), 6,38 (1H, д), 6,5-6,85 (1H, м), 7,00 (2H, д), 7,37 (1H, т), 7,69-7,78 (3H, м), 8,93 (1H, с), 9,04 (1H, с)
121
405
8,9
1,60 (6H, с), 3,34 (4H, с), 4,60 (2H, с), 7,02 (2H, д), 7,34 (1H, д), 7,63 (1H, д), 7,76 (2H, д), 7,82 (1H, т), 7,93 (1H, д), 9,02 (1H, с)
122
348
8,3
2,87 (3H, ушир.с), 6,98 (1H, д), 7,35-7,47 (4H, м), 7,57 (1H, д), 7,65 (2H, д), 8,02 (1H, с), 8,27 (1H, д), 9,20 (1H, ушир.с), 9,62 (1H, с)
123
434
9,3
1,60 (6H, м), 2,80 (6H, 2с), 3,3 (4 скрытых протона), 6,05 (1H, с), 6,41 (1H, ушир.с), 6,89 (1H, ушир.с), 7,02 (2H, д), 7,77 (2Н, д), 7,85 (1H, с), 8,88 (1H, с)
124
432
9,2
1,54-1,63 (6H, м), 2,85 (3H, с), 3,25-3,40 (4H, м), 7,00 (2H, д), 7,70-7,82 (4H, м), 7,91 (1H, т), 8,40 (1H, с), 8,89 (1H, с)
125
418
8,9
1,60 (6H, с), 2,38 (3H, с), 3,35 (4H, с), 3,86 (2H, с), 7,02 (2H, д), 7,32 (1H, д), 7,66 (1H, д), 7,79 (2H, д), 7,82 (1H, т), 7,96 (1H, д), 9,06 (1H, д)
126
406
6,2
2,78-2,86 (7H, м), 3,19-3,24 (4H, м), 6,73 (1H, с), 7,02 (2H, д), 7,34 (1H, ушир.с), 7,77 (2H, д), 7,98 (1H, ушир.с), 8,41 (1H, с), 8,92 (1H, ушир.с), 9,16 (1H, с)
127
501
10,1
1,55-1,60 (10H, м), 1,70 (3H, с), 1,99 (2H, м), 2,32 (4H, м), 3,15 (1H, м), 3,34 (4H, м), 6,35 (1H, д), 6,63 (1H, с), 6,84 (1H, д), 7,02 (2H, д), 7,40 (1H, м), 7,76-7,78 (3H, м), 8,99 (1H, с), 9,08 (1H, с), 12,30 (1H, с)
128
488
9,9
1,19-1,28 (2H, м), 1,60 (6H, м), 1,67-1,70 (4H, м), 1,88-1,91 (2H, м), 3,23-3,37 (5H, м), 3,86-3,88 (2H, м), 6,48 (1H, с), 6,88 (1H, м), 7,03 (2H, д), 7,49 (1H, м), 7,60-7,80 (4H, м), 8,96 (1H, с), 9,09 (1H, с), 12,40 (1H, с)
129
447
9,1
1,16 (3H, д), 1,53-1,63 (6H, м), 2,55-2,73 (2H, м), 3,25-3,40 (4H, м), 3,85-3,96 (1H, м), 6,35 (1H, д), 6,82 (1H, д), 7,01 (2H, д), 7,39 (1H, т), 7,70-7,80 (3H, м), 8,97 (1H, с)
130
419
9,4
-
131
478
7,3
-
132
476
9,8
0,93-0,98 (6H, м), 1,60 (6H, м), 1,78 (1H, м), 2,94 (1H, м), 3,34 (4H, м), 4,18 (1H, м), 4,36 (1H, м), 6,70 (1H, д), 7,02 (2H, д), 7,36 (1H, д), 7,73-7,89 (3H, м), 7,90 (1H, с), 9,04 (1H, с), 9,09 (1H, с)
133
490
10,1
0,96-0,99 (9H, м), 1,60 (6H, м), 2,96 (1H, м), 3,32-3,34 (4H, м), 4,13 (1H, м), 4,64 (1H, м), 6,75 (1H, м), 7,02 (2H, д), 7,38 (1H, д), 7,71-7,78 (3H, м), 7,90 (1H, д), 9,06-9,08 (2H, м)
134
448
7,7
1,10 (2H, м), 1,48-1,78 (5H, м), 2,40-2,47 (2H, м), 2,85 (3H, м), 2,89 (2H, м), 4,10 (2H, м), 6,31 (1H, м), 6,52 (NH), 6,85 (1H, м), 7,09 (2H, м), 7,42 (1H, т), 7,81-7,91 (3H, м), 9,00 (1H, с), 9,12 (1H, с)
135
434
6,3
1,28 (6H, д), 2,76 (2H, т), 2,93 (3H, с), 3,34-3,52 (2H, м), 4,08 (2H, д), 6,85 (1H, с), 7,15 (2H, д), 7,85 (2H, д), 7,94 (1H, ушир.с), 8,59 (1H, ушир.с), 8,85 (1H, ушир.с), 9,21 (1H, с), 12,69 (1H, ушир.с)
136
474
7,6
1,84-2,20 (8H, м), 2,93 (3H, с), 3,06-3,52 (6H, м), 3,57-3,68 (1H, м), 3,78-3,86 (1H, м), 4,18-4,28 (1H, м), 6,77 (2H, д), 6,84 (1H, ушир.с), 7,83 (2H, д), 7,93 (1H, ушир.с), 8,58 (1H, ушир.с), 8,87 (1H, ушир.с), 9,11 (1H, с)
137
403
6,2
2,34-2,39 (2H, м), 2,84 (3H, с), 2,92 (2H, т), 3,30-3,42 (2H, м), 6,40 (1H, с), 6,74 (1H, с), 7,60 (2H, д), 7,89 (2H, д), 7,96-8,08 (1H, м), 8,41 (1H, с), 8,92 (1H, ушир.с), 9,38 (1H, с)
138
449
7,4
2,38-2,42 (4H, м), 2,67 (6H, м), 2,81 (3H, м), 4,14 (2H, м), 6,35 (1H, м), 6,51 (NH), 6,89 (1H, м), 7,10 (2H, м), 7,45 (1H, т), 7,85-7,92 (3H, м), 8,98 (1H, с), 9,11 (1H, с)
139
406
6,5
(МeOD) 3,02 (3H, с), 3,37 (4H, т), 3,60 (4H, т), 7,16 (2H, д), 7,78 (1H, с), 7,95 (2H, д), 7,97 (1H, д), 8,05 (1H, с),9,21 (1 H,д)
140
375
9,3
1,55-1,62 (6H, м), 3,25-3,40 (4H, м), 6,98 (2H, д), 7,16-7,22 (1H, м), 7,71-7,80 (4H, м), 7,95 (1H, с), 8,54-8,57 (1H, м), 9,00 (1H, с)
141
462
9,0
1,1 (6H, м), 1,6 (6H, с), 3,2-3,4 (6H, м), 7,0 (3H, м), 7,7-7,8 (2H, м), 7,8-7,9 (2H, м), 8,0-8,1 (1H, с), 9,0 (1H, м), 9,1 (1Н, с)
142
449
6,8
1,21-1,36 (2H, м), 1,72 (3H, м), 1,83 (2H, м), 2,71-2,85 (5H, м), 3,10 (2H, м), 4,11 (2H, м), 6,75 (1H, с), 7,10 (2H, м), 7,39 (NH), 7,91 (2H, м), 8,45 (1H, с), 8,95 (1H, ушир.с), 9,22 (1H, с)
143
449
7,2
1,18-1,30 (2H,м), 1,69-1,85 (5H, м), 2,68 (2H, м), 2,86 (3H, м), 3,11 (2H, м), 4,13 (2H, м), 7,09 (2H, м), 7,12 (NH), 7,80 (1H, м), 7,90 (3H, м), 8,10 (1H, м), 9,00 (1H, с), 9,21 (1H, с)
144
379
5,8
2,81-2,82 (4H, м), 3,19-3,21 (4H, м), 3,61 (3H, с), 6,89 (1H, с), 7,02 (2H, д), 7,33 (1H, с), 7,64 (1H, с), 7,75 (2H, д), 8,31 (1H, с), 9,26 (1H, с)
145
474
8,0
-
146
420
6,7,
1,74-1,82 (2H, м), 2,63 (2H, т), 2,82-2,90 (5H, м), 3,53 (2H, т), 3,61 (2H, т), 6,81 (2H, д), 7,08-7,16 (1H, м), 7,73 (2H, д), 7,80 (1H, с), 7,86 (1H, д), 8,09 (1H, с), 9,00 (1H, д)
147
421
7,6
1,85-2,08 (4H, м), 2,88 (3H, д), 3,09-3,18 (1H, м), 3,20-3,28 (1H, м), 3,40-3,52 (2H, м), 3,78-3,84 (1H, м), 6,70 (2H, д), 7,07-7,15 (1H, м), 7,76 (2H, д), 7,80 (1H, с), 7,87 (1H, д), 8,09 (1H, с), 9,00 (1H, д)
148
450
6,7
2,44 (2H, т), 2,55 (4H, т), 2,88 (3H, д), 3,26-3,37 (4H, м), 3,54 (2H, т), 7,04 (2H, д), 7,08-7,14 (1H, м), 7,78 (2H, д), 7,80 (1H, с), 7,88 (1H, д), 8,10 (1H, с), 9,00 (1H, д), 9,12 (1H, с), 12,42 (1H, ушир.с)
149
478
9,1
1,04-1,13 (3H, м), 1,50-1,62 (6H, м), 3,78-3,85 (1H, м), 3,63-3,83 (1H, м), 4,10-4,34 (2H, 2×м), 6,54-6,61 (1H, м), 7,01 (2H, д), 7,21 (1H, т), 7,66 (1H, т), 7,71 (2H,д), 8,01+8,11 (1H, 2×с), 8,90 (1Н,с)
150
488
9,8
1,37-1,43 (2H,м), 1,50-1,66 (12H,м), 1,70-1,80 (2H, м), 3,22-3,36 (4H, м), 4,18 (2H, с), 6,60 (1H, д), 7,01 (2H, д), 7,20 (1H, д), 7,65 (1H, т), 7,73 (2H, д), 8,02 (1H, с), 8,85 (1H, с)
151
462
9,6
0,96 (3H,т), 1,30-1,40 (1H, м), 1,55-1,60 (6H, м), 2,95-3,02 (1H, м), 3,30-3,36 (4H, м), 4,10-4,27 (2H, м), 6,70 (1H, д), 7,01 (2H,д), 7,32 (1Н, д), 7,70-7,78 (4H, м), 7,86 (1H, с), 9,01 (1H, с)
152
490
10,1
0,86 (3H, т), 0,95 (3H, д), 1,13-1,25 (1H, м), 1,47-1,60 (8H, м), 2,95-3,01 (1H, м), 3,30-3,40 (4H, м), 4,10-4,20 (1H, м), 3,38-3,45 (1H, м), 6,70 (1H, д), 7,00 (2H, д), 7,33 (1H, д), 7,70-7,85 (3H, м), 7,90 (1H, с), 9,05 (1H, с)
153
435
7,0
1,41-1,52 (2H, м), 1,96 (2H, м), 2,13 (1H, м), 2,89 (3H, м), 3,01 (4H, м), 3,97 (2H, м), 7,09 (2H, м), 7,11 (1H, с), 7,81 (1H, с), 7,94 (3H, м), 8,16 (1H, с), 9,00 (1H, с), 9,24 (1H, с)
154
469
8,2
1,65-1,75 (4H, м), 1,94-2,09 (4H, м), 2,41-2,51 (4H, м), 2,61-2,62 (2H, м), 3,16 (1H, м), 3,42 (1H, м), 3,93 (1H, м), 6,67 (2H, д), 7,72 (2H, д), 7,88 (1H, д), 8,35 (1H, м), 8,54 (1H, д), 8,76 (1H, д), 8,97 (1H, д), 9,42, (1H, д)
155
420
7,5
2,35-2,52 (4H, м), 2,62-2,86 (3H, м), 2,87 (3H, с), 3,28-3,48 (4H, м), 7,07 (2H, д), 7,80 (1H, с), 7,82 (2H, д), 7,89 (1H, д), 8,10 (1H, с), 9,00 (1H, д), 9,14 (1H, с), 12,45 (1H, д)
156
449
7,8
1,12-1,24 (2H, м), 1,38 (2H, кв), 1,56-1,69 (1H, м), 1,74 (2H, д), 2,80 (2H, т), 2,87 (3H, с), 3,46 (2H, т), 3,91 (2H, д), 7,02 (2H, д), 7,08-7,14 (1H, м), 7,76 (2H, д), 7,80 (1H, с), 7,88 (1H, д), 8,09 (1H, с), 9,00 (1H, д)
157
434
7,7
1,15-1,26 (2H, м), 1,75 (2H, м), 1,78 (1H, м), 2,85 (3H, м), 2,98 (2H, м), 3,40 (2H, м), 3,89 (2H, м), 6,32 (1H, м), 6,55 (NH), 6,89 (1H, м), 7,09 (2H, м), 7,42 (1H, м), 7,85 (1H, с), 7,91 (2H, м), 9,00 (1H, с), 9,21 (1H, с)
158
450
6,8
2,45 (4H, м), 2,71 (2H, м), 2,81 (4H, м), 2,89 (3H, м), 4,18 (2H, м), 7,08-7,12 (3H, м), 7,80 (1H, с), 7,91 (3H, м), 8,10 (1H, с), 8,97 (1H, с), 9,25 (1H, с)
159
404
9,0
1,55-1,63 (6H, м), 2,72 (3H, с), 3,25-3,40 (4H, м), 6,97 (1H, с), 7,01 (2H, д), 7,51 (1H, с), 7,75 (2H, д), 7,86 (1H, с), 7,95 (1H, с), 8,51 (1H, с)
160
430
7,9
2,8-3,0 (7H, м), 3,1 (4H, м), 6,7 (1H, с), 7,0 (2H, м), 7,1-7,2 (1H, м), 7,2-7,3 (1H, с), 7,7-7,8 (2H, м), 7,9 (1H, м), 9,0 (1H, м), 9,1 (1H, с)
161
401
7,2
2,8-2,9 (4H, м), 3,2-3,3 (4H, м), 7,0 (2H, м), 7,7 (1H, м), 7,8 (2H, м), 8,0-8,1 (1H, м), 8,4 (1H, с), 8,8 (1H, м), 9,1 (2H, м)
162
434
6,7
1,84-1,94 (2H, м), 1,98-2,07 (2H, м), 2,88 (3H, с), 3,02-3,10 (2H, м), 3,30-3,42 (2H, м), 3,48-3,54 (2H, м), 3,56-3,64 (2H, м), 6,75 (2H, д), 7,76 (2H, д), 7,81 (1H, с), 7,88 (1H, д), 8,10 (1H, с), 9,00 (1H, д)
163
420
6,4
1,47-1,58 (2H, м), 1,90-1,98 (2H, м), 2,88 (3H, с), 2,90-3,00 (2H, м), 3,24-3,40 (1H, м), 3,95-4,02 (2H, м), 7,08 (2H, д), 7,81 (2H, д), 7,82 (1H, с), 7,90 (1H, д), 8,11 (1H, с), 9,02 (1H, д)
164
422
7,6
2,87 (6H, с), 2,88 (3H, с), 3,03 (3H, с), 3,24-3,30 (2H, м), 3,75-3,81 (2H, м), 6,90 (2H, д), 7,81 (1H, с), 7,82 (2H, д), 7,89 (1H, д), 8,10 (1H, с), 9,00 (1H, д)
165
431
6,8
2,87 (3H, с), 2,92 (2H, т), 3,43 (2H, т), 6,70 (2H, д), 7,50 (1H, с), 7,72 (2H, д), 7,81 (1H, с), 7,87 (1H, д), 8,09 (1H, с), 8,97-9,01 (2H, м), 9,03 (1H, с), 12,43 (1H, д)
166
434
7,9
2,14-2,26 (2H, м), 2,88 (6H, с), 2,90 (3H, с), 3,30-3,64 (3H, м), 3,72-3,78 (1H, м), 3,98-4,08 (1H, м), 6,73 (2H, д), 7,81 (1H, с),7,84 (2H, д), 7,89 (1H, д), 8,10 (1H, с), 9,01 (1H, д)
167
436
7,4
1,86-1,96 (2H, м), 2,78 (6H, с), 2,88 (3H, с), 3,01 (3H, с), 3,07-3,14 (2H, м), 3,49 (2H, т), 6,84 (2H, д), 7,79 (2H, д), 7,81 (1H, с), 7,88 (1H, д), 8,10 (1H, с), 9,00 (1H, д)
168
445
7,1
2,04 (2H, квинтет), 2,87 (3Н, с), 3,06 (2H, т), 4,14 (2Н, т), 6,64 (2Н, д), 7,15 (1H, с), 7,40 (1H,с), 7,71 (2H, д),7,81 (1H, с), 7,86 (1H, д), 8,09 (2H, с), 9,00 (1H, д), 9,02 (1H, с)
169
405
6,9
2,79-2,84 (7H, м), 3,16-3,24 (4H, м), 6,41 (1H, м), 6,54 (1H, с), 6,66 (1H, д), 7,02-7,03 (2H, м), 7,74 (2H, д), 7,91 (1H, д), 8,56 (1H, д), 9,39 (1H, д)
170
435
6,5
1,51 (2H, м), 1,88 (2H, м), 2,09 (1H, м), 2,78-2,86 (5H, м), 3,21 (2H, м), 3,95 (2H, м), 6,78 (1H, с), 7,11 (2H, м), 7,45 (1H, ушир.с), 7,93 (2H, м), 8,45 (1H, с), 8,96 (1H, с), 9,23 (1H, с)
171
490
9,2
1,68-1,75 (4H,м), 1,90-2,12 (4H, м), 2,35-2,65 (6H, м), 2,70 (3H, с), 3,10-3,20 (1H, м), 3,40-3,50 (1H, м), 3,90-3,99 (1H, м), 6,27 (1H, д), 6,45-6,55 (2H, м), 6,70 (2H, д), 7,43-7,61 (2H, м), 7,75 (2H, д), 8,68 (1H, с)
172
473
7,9
1,70-1,80 (4H, м), 1,98-2,07 (4H, м), 2,401-2,49 (2H, м), 2,61-2,62 (2H, м), 2,80 (3H, с), 3,16-3,17 (2H, м), 3,42-3,44 (2H, м), 3,95 (1H, м), 6,52 (1H, д), 6,58 (1H, с), 6,66-6,70 (3H, м), 7,62 (1H, д), 7,76 (2H, д), 7,97 (1H, д), 8,67 (1H, д), 9,16 (1H, с)
173
416
6,3
3,00-3,05 (4H, м), 3,29-3,39 (4H, м), 6,69 (1H, д), 7,08 (2H, д), 7,84 (2H, д), 7,86-7,90 (1H, м), 7,96 (1H, д), 8,75 (1H, с), 9,14-9,18 (2H, м), 12,08 (1H, ушир.с)
174
464
8,8
1,55-1,70 (6H, м), 3,30-3,53 (4+2H, м), 4,13-4,25 (2H, м), 4,62-4,72 (1H, м), 6,71 (1H, д), 7,03 (2H, д), 7,33 (1H, д), 7,70-7,80 (3H, м), 7,88 (1H, с), 9,00 (1H, с), 9,07 (1H, с)
175
488
8,4
1,21 (3H, т), 1,71 (4H, ушир.с), 1,91-2,07 (4H, м), 2,33-2,40 (1H, м), 2,61-2,68 (4H, м), 3,12-3,19 (1H, м), 3,35 (3H, с), 3,38-3,46 (1H, м), 3,93-3,97 (1H, м), 6,67 (2H, д), 7,11-7,14 (1H, м), 7,76 (1H, с), 7,78 (2H, д), 7,85 (1H, д), 8,07 (1H, с), 8,97 (1H, д)
176
500
8,6
0,41 (2H, ушир.с), 0,78 (2H, ушир.д), 1,71 (3H, ушир.с), 1,81-2,19 (7H, ушир.м), 2,65 (2H,ушир.с), 3,16 (1H,ушир.с), 3,36 (3H,с),3,45 (1H, ушир.с), 3,87-3,97 (1H, м), 6,68 (2H, ушир.д), 7,78 (2H, ушир.с), 7,88 (1H, с), 7,92 (1H, с), 8,21 (1H, с), 9,00 (1H, с), 9,06 (1H, с)
177
463
7,1
1,41-1,58 (6H, ушир.м), 1,91 (2H, ушир.м), 2,38 (4H, м) 2,90 (3H, м), 3,35 (4H,м), 4,11 (2H,м), 7,07-7,15 (NH и 2H, м), 7,82 (1H, с), 7,96 (3H, м), 8,13 (1H, с), 9,01 (1H, с), 9,27 (1H, с)
178
473
7,5
1,91 (4H, м), 2,04 (4H, м), 2,50-2,51 (2H, м), 2,76 (3H, с), 3,15-3,22 (2H, м), 3,45-3,49 (2H, м), 3,65 (1H, м), 3,80 (1H, м), 4,24 (1H, м), 6,06 (1H, м), 6,78 (2H, д), 6,97 (1H, м), 7,50 (1H, м), 7,81 (2H, д), 7,93 (1H, м), 7,97 (1H, м), 8,67 (1H, м), 9,12 (1H, с), 10,02 (1H, ушир.с)
179
497
9,0
1,65-1,75 (4H, м), 1,85-2,05 (6H, м), 2,50-2,60 (3H, м), 2,75 (3H, д), 3,08-3,19 (1H, м), 3,35-3,45 (2H, м), 3,85-3,92 (1H, м), 6,27-6,34 (1H, м), 6,63 (2H, д), 6,75 (1H, с), 6,94 (1H, с), 7,09 (1H, с), 7,48 (1H, с), 7,75 (2H, д), 8,63 (1H, с), 9,04 (1H, с)
180
542
8,8
1,71 (4H, ушир.с), 1,94-2,19 (4H, м), 2,38-2,51 (4H, м), 2,61-2,68 (2H, м), 3,16-3,18 (1H, м), 3,44-3,47 (1H, м), 3,92-3,95 (1H, м), 4,20-4,32 (2H, м), 6,67 (2H, д), 7,71 (1H, ушир.т), 7,76 (2H, д), 7,83 (1H, с), 7,98 (1H, с), 8,21 (1H, с), 8,92 (1H, с), 9,15 (1H, с)
181
421
6,6
1,45 (2H, м), 1,98 (2H, м), 2,61 (2H, м) 2,95 (3H, м), 3,00 (2H, м), 4,55 (2H, м), 7,10-7,15 (NH и 2H, м), 7,86 (1H, с), 7,95 (3H, м), 8,15 (1H, с), 9,02 (1H, с), 9,28 (1H, с)
182
465
7,7
1,95 (2H, м), 2,39 (4H, м), 2,89 (3H, м) 3,35 (2H, м), 3,59 (4H, м), 4,12 (2H, м), 7,08-7,14 (3H, м), 7,80 (1H, с), 7,89 (3H, м), 8,10 (1H, с), 8,99 (1H, с), 9,24 (1H, с)
Пример 12
Фениламид 2-оксо-5-фенил-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты III-1
+
6
К раствору 2-оксо-5-фенил-1,2-дигидропиридин-3-карбоновой кислоты (44 г, 0,20 ммоль) в тетрагидрофуран (5 мл) были последовательно добавлены анилин (20 мкл, 0,23 ммоль), гидроксибензотриазол (30 мг, 0,23 ммоль), диметиламинопиридин (27 мг, 0,23 ммоль) и EDC (43 мг, 0,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Растворитель удалили в вакууме, а остаток очистили хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента DCM, содержащий 10% MeOH, в результате чего целевое соединение было получено в виде белого твердого вещества (20 мг, выход 34%). МС (ES) 291. δH (ДМСО-d) 7,2 (3H, м), 7,9 (1Н, т), 8,5 (1Н, д), 8,6 (2H, м), 9,3 (1Н, с).
1
Ряд других соединений Формулы III был получен способами, в целом подобными описанным здесь в Примере 12. Характеристические данные этих соединений приведены в Таблице III-A ниже и включают ВЭЖХ, LC/MS (наблюдаемый) и данные H ЯМР.
1
1
Данные H ЯМР приведены в Таблице III-A ниже, в которой данные H ЯМР были получены при 400 МГц в дейтерированном ДМСО, если иначе не указано, и как установили, соответствовали структуре. Номера Соединений соответствуют номерам соединений, перечисленным в Таблице 1.
Таблица III-A
Характеристические Данные Выбранных Соединений Формулы III
Соединение № III-
М+1 (набл)
Rт (мин)
<sup>1</sup>H-ЯМР
2
305
8,6
4,56 (2H, д), 7,28 (1Н, м), 7,34-7,37 (5H, м), 7,46 (2H, т), 7,62 (2H, д), 8,06 (1Н, с), 8,66 (1Н, д), 10,20 (1Н, ушир.т), 12,86 (1Н, ушир.с)
3
306
7,4
4,51 (2H, д), 7,20-7,40 (5H, м), 7,60 (2H, д), 8,40 (1Н, м), 8,50-8,70 (3H, м), 11,10 (1Н, ушир.с)
4
334
9,2
<sup>1</sup>Н ЯМР (ДМСО) 1,19-1,25 (6H, м), 2,80-2,92 (1Н, м), 7,19-7,29 (2H, м), 7,58-7,66 (2H, м), 7,70-7,76 (2H, м), 8,35-8,40 (1Н, м), 8,58-8,65 (2H, м), 8,78-8,83 (1Н, м), 12,08 (1Н, ушир.с), 13,22 (1Н, ушир.с),
5
348
9,6
1,29 (9H, с), 7,39 (2H, д), 7,63 (2H, д), 7,73 (2H, д), 8,39 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,81 (1Н, д), 12,10 (1Н, ушир.с), 13,24 (1Н, ушир.с),
6
320
7,6
2,84 (2H, т), 3,58 (2H, кв), 7,18-7,34 (5H, м), 7,65-7,69 (2H, м), 8,29 (1Н, д), 8,57-8,61 (2H, м), 8,70 (1Н, д), 9,78 (1Н, ушир.т), 13,0 (1Н, ушир.с),
7
320
8,8
1,18 (3H, т), 2,59 (2H, кв), 7,21 (2H, д), 7,62 (2H, д), 7,73 (2H, д), 8,39 (1Н, д), 8,61 (2H,д), 8,80 (1Н, д), 12,10 (1H, ушир.с), 13,20 (1Н, ушир.с),
8
371
8,9
7,57 (2H, д), 7,68-7,75 (4H, м), 8,41 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,81 (1Н, д), 12,20 (1Н, с), 13,30 (1Н, ушир.с),
9
384
9,3
6,96-7,18 (5H, м), 7,32-7,46 (2H, м), 7,62-7,81 (4H,м), 8,35-8,45 (1Н, м), 8,56-8,66 (2H, м), 8,77-8,84 (1Н, м), 12,19 (1Н, ушир.с),
10
334
9,2
1,22 (6H, д), 2,83-2,96 (1Н, м), 6,98-7,04 (1Н, м), 7,24-7,33 (1Н, м), 7,51-7,61 (2H, м), 7,68-7,78 (2H, м), 8,35-8,40 (1Н, м), 8,59-8,64 (2H, м), 8,78-8,84 (1Н, м), 12,02 (1Н, ушир.с)
11
322
-
(300 МГц) 3,75 (3H, с), 6,95 (2H, д), 7,64 (2H, д), 7,72 (21H, д), 8,36 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 11,92 (1Н, с)
12
322
-
(300 МГц) 3,77 (3H, с), 6,7 (1Н, д), 7,16 (1Н, д), 7,27 (1Н, т), 7,47 (1Н, с), 7,72 (2H, д), 8,39 (1Н, с), 8,60 (2H, д), 8,79 (1Н, д), 12,20 (1Н, с), 13,0 (1Н, ушир.с)
13
336
-
(300 МГц) 1,33 (3H, д), 4,7 (1Н, кв), 5,2 (1Н, ушир.с), 7,13 (1Н, д), 7,36 (1Н, т), 7,62 (1Н, д), 7,64 (1Н, с), 7,71 (2H, д), 8,40 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 12,23 (1Н, с), 13,2 (1Н, ушир.с)
14
336
-
(300 МГц) 3,85 (3H, с), 4,50 (2H, д), 6,91 (1Н, т), 7,02 (1Н, д), 7,30-7,22 (2H, м), 7,67 (2H, дд), 8,29 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,71 (1Н, д), 10,09 (1Н, т)
15
384
-
(300 МГц) 6,83-6,79 (1Н, м), 7,08-7,05 (2H, м), 7,28-7,18 (2H, м), 7,47-7,39 (3H, м), 7,59 (1Н, т), 7,70 (2H, дд), 8,33 (1Н, д), 8,60 (2H, дд), 8,78 (1Н, д), 12,11 (1Н, ушир.с), 13,24 (1Н, ушир.с)
16
352
-
(300 МГц) 3,76 (3H, с), 3,79 (3H, с), 6,95 (1H, д), 7,20 (1H, дд), 7,45 (1H, д), 7,72 (2H, дд), 8,37 (1H, д), 8,61 (2H, д), 8,81 (1H, д), 11,95 (1H, ушир.с)
17
334
-
(300 МГц) 1,84 (2H, квинтет), 2,64 (2H, т), 3,34 (2H, кв), 7,31-7,15 (5H, м), 7,94 (2H, д), 8,39 (1H, д), 8,68 (2H, д), 8,78 (1H, д), 9,70 (1H, т), 13,16 (1H, ушир.с)
18
410
-
(300 МГц) 2,31 (2H, кв), 3,25 (2H, т), 4,03 (1Н, т), 7,17 (2H, т), 7,35-7,28 (8H, м), 7,67 (2H, дд), 8,28 (1Н, д), 8,58 (2H, дд), 8,67 (1Н, д), 9,77 (1Н, т), 12,90 (1Н, ушир.с)
19
396
-
(300 МГц) 7,48 (1Н, д), 7,79-7,55 (8H, м), 7,89 (1Н, д), 8,23 (1Н, с), 8,40 (1Н, д), 8,60 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 12,40 (1Н, ушир.с), 13,0 (1Н, ушир.с)
20
350
-
(300 МГц) 2,82 (2H, кв), 3,53 (2H, кв), 3,79 (3H, с), 6,87 (1Н, т), 6,96 (1Н, д), 7,23-7,16 (2H, м), 7,67 (2H, д), 8,27 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,69 (1Н, д), 9,70 (1Н, т),12,90 (1Н, ушир.с)
21
334
-
(300 МГц) 1,25 (3H, д), 3,0 (1Н, секст,), 3,55-3,49 (2H, м), 7,34-7,18 (5H, м), 7,66 (2H, д), 8,26 (1Н, д), 8,58 (2H, д), 8,68 (1Н, д), 9,74 (1Н, т), 12,86 (1Н, ушир.с)
22
286
-
(300 МГц) 0,92-0,88 (6H, м), 1,10 (3H, д), 1,76 (1Н, секст,), 3,90 (1Н, секст,), 7,67 (2H, д), 8,27 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,70 (1Н, д), 9,73 (1Н, д), 12,94 (1Н, ушир.с)
23
382
-
(300 МГц) 3,95 (2H, с), 7,0 (1Н, д), 7,32-7,19 (5H, м), 7,56 (1Н, с), 7,58 (2H, д), 7,71 (2H, д), 8,38 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,79 (1Н, д), 12,10 (1Н, ушир.с), 13,20 (1Н, ушир.с)
24
256
-
(300 МГц) 0,55-0,49 (2H, м), 0,79-0,70 (2H, м), 2,90-2,84 (1Н, м), 7,67 (2H, дд), 8,27 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,68 (1Н, д), 9,68 (1Н, с), 12,98 (1Н, ушир.с)
25
313
-
(300 МГц) 9,79 (1Н, с), 8,70 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,28 (1Н, д), 7,67 (2H, д), 3,48 (2H, т), 2,79-2,69 (6H, м), 1,80-1,60 (4H, м)
26
328
-
(300 МГц) 1,58-1,24 (10H, м), 3,30 (2H, с), 4,39 (1Н, с), 7,68 (2H, д), 8,28 (1Н, д), 8,59 (2H, дд), 8,71 (1Н, д), 9,84 (1Н, т), 12,89 (1Н, ушир.с)
27
312
-
(300 МГц) 1,57-1,43 (10H, м), 1,91-1,85 (2H, м), 4,04-3,99 (1Н, м), 7,66 (2H, дд), 8,28 (1Н, д), 8,59 (2H, дд), 8,68 (1Н, д), 9,82 (1Н, д), 12,40 (1Н, ушир.с)
28
350
-
(300 МГц) 2,79 (1Н, дд), 2,94 (1Н, дд), 3,45-3,32 (2H, м), 4,17 (1Н, д), 4,95 (1Н, ушир.с), 7,26-7,19 (5H, м), 7,66 (2H, дд), 8,28 (1Н, д), 8,58 (2H, д), 8,68 (1Н, д), 9,82 (1Н, д), 12,20 (1Н, ушир.с)
29
348
-
(300 МГц) 1,24 (9H, с), 7,17 (1Н, д), 7,30 (1Н, т), 7,53 (1Н, д), 7,73 (2H, д), 7,74 (1Н, с), 8,38 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,82 (1Н, д), 12,07 (1Н, ушир.с), 13,19 (1Н, ушир.с)
30
272
-
(300 МГц) 0,82 (3H, т), 1,10 (3H, д), 1,52-1,40 (2H, м), 3,89-3,83 (1Н, м), 7,65 (2H, д), 8,30 (1Н, д), 8,57 (2H, д), 8,65 (1Н, д), 9,91 (1Н, д)
31
332
-
(300 МГц) 1,30-1,25 (2H,м), 2,11-2,05 (1Н, м), 3,05-2,99 (1Н, м), 7,33-7,17 (5H, м), 7,67 (2H, дд), 8,30 (1Н, д), 8,59 (2H, дд), 8,69 (1Н, д), 9,91 (1Н, д), 13,01 (1Н, ушир.с)
32
336
-
(300 МГц) 3,44 (1Н, дд), 3,66 (1Н, дд), 4,76 (1Н, дд), 5,63 (1Н, ушир.с), 7,41-7,22 (5H, м), 7,63 (2H, д), 8,32 (1Н, д), 8,55 (2H, д), 8,62 (1Н, д), 10,29 (1Н, с), 12,80 (1Н, ушир.с)
33
336
-
(300 МГц) 3,45 (1Н, дд), 3,66 (1Н, дд), 4,76 (1Н, дд), 5,62 (1Н, ушир.с), 7,41-7,22 (5H, м), 7,65 (2H, д), 8,30 (1Н, д), 8,57 (2H, д), 8,65 (1Н, д), 10,12 (1Н, с), 12,80 (1Н, ушир.с)
34
348
-
(300 МГц) 1,20 (3H, д), 1,84-1,77 (2H, м), 2,66-2,61 (2H, м), 4,03-3,98 (1Н, м), 7,30-7,16 (5H, м), 7,67 (2H, дд), 8,29 (1Н, д), 8,58 (2H, дд), 8,70 (1Н, д), 9,76 (1Н, д), 12,8 (1Н, ушир.с)
35
348
-
(300 МГц) 1,20 (3H, д), 1,84-1,77 (2H, м), 2,66-2,60 (2H, м), 4,05-3,96 (1Н, м), 7,30-7,14 (5H, м), 7,68 (2H, дд), 8,30 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,71 (1Н, д), 9,70 (1Н, д), 13,0 (1Н, ушир.с)
36
270
-
(300 МГц) 0,23-0,18 (2H, м), 0,48-0,42 (2H, м), 1,04-0,95 (2H, м), 3,19 (2H, д), 7,67 (2H, дд), 8,28 (1Н, д), 8,59 (2H, дд), 8,70 (1Н, д), 9,79 (1Н, т), 12,96 (1Н, ушир.с)
37
310
-
(300 МГц) 1,51-1,10 (7H,м), 1,80-1,74 (1Н, м), 2,29-2,19 (2H, м), 3,81-3,70 (1Н, м), 7,66 (2H, д), 8,27 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,67 (1Н, д), 9,75 (1Н, д)
38
400
-
(300 МГц) 7,43-7,24 (7H, м), 7,79-7,71 (4H, м), 8,40 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 12,24 (1Н, с), 13,25 (1Н, ушир.с)
39
350
-
(300 МГц) 1,46 (3H, д), 3,74 (3H, с), 5,10 (1Н, квинт,), 6,91 (2H, д), 7,30 (2H, д), 7,67 (2H, д), 8,27 (1Н, д), 8,59 (2H, д), 8,70 (1Н, д), 10,10 (1Н, д)
40
327
-
(300 МГц) 1,52-1,24 (6H, м), 2,47-2,40 (6H, м), 3,43 (2H, т), 7,68 (2H, д), 8,30 (1Н, д), 8,59 (2H, дд), 8,70 (1Н, д), 9,81 (1Н, т)
41
336
-
(300 МГц) 3,41-3,34 (1Н, м), 3,72-3,61 (1Н, м), 4,72-4,70 (1Н, дд), 5,63 (1Н, д), 7,41-7,22 (5H, м), 7,65 (2H, д), 8,30 (1Н, д), 8,57 (2H, д), 8,65 (1Н, д), 10,11 (1Н, ушир.с)
42
377
7,2
3,04-3,14(4H, м), 3,70-3,79 (4H, м), 6,98 (2H, д), 7,59 (2H, д), 7,71 (2H, д), 8,37 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 11,91 (1Н, ушир.с), 13,20 (1Н, ушир.с)
43
374
7,2
1,10-1,90 (10H, м), 2,40-2,56 (1Н, м), 7,22 (2H, д), 7,62 (2H, д), 7,72 (2H, д), 8,39 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 12,10 (1Н, ушир.с)
44
375
8,8
1,48-1,68 (6H, м), 3,05-3,15 (4H, м), 6,93 (2H, д), 7,56 (2H, д), 7,72 (2H, д), 8,36 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 11,90 (1Н, с), 13,20 (1Н, ушир.с)
45
336
8,1
1,31 (3H, т), 4,01 (2H, кв), 6,94 (2H, д), 7,62 (2H, д), 7,72 (2H, д), 8,39 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 11,99, 13,25 (1Н, 2ушир.с)
46
390
7,1
2,23 (3H,с), 2,43-2,50 (4H, м), 3,08-3,14 (4H, м), 6,95 (2H, д), 7,59 (2H, д),7,72 (2H, д), 8,37 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 11,92 (0,5H, с)
47
404
7,1
1,03 (3H, т), 2,38 (2H, кв), 2,45-2,54 (4H, м), 3,06-3,14 (4H, м), 6,95 (2H, д), 7,58 (2H, д), 7,72 (2H, д), 8,38 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 12,00 (0,4H, с)
48
306
6,3
3,39 (3H, с), 7,10-7,39 (5H, м), 7,46-7,60 (2H, м), 7,80-8,02 (2H, м), 8,48-8,56 (2H,м), 12,10 (0,1Н, ушир.с)
49
320
6,9
2,20 (3H, с), 3,30 (3H, с), 7,00-7,20 (4H, м), 7,50-7,62 (2H, м), 7,85-8,02 (2H, м), 8,49-8,60 (2H, м), 12,10 (0,2H, ушир.с)
50
320
8,8
1,20 (3H, т), 2,61 (2H, кв), 6,98 (1Н, ушир.д), 7,25-7,32 (1Н, м), 7,51-7,60 (2H, м), 7,72 (2H, д), 8,39 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,81 (1Н, д), 12,02 (1Н, с), 13,26 (0,8H, ушир.с)
51
306
8,3
2,31 (3H, с), 6,94 (1Н, д), 7,23-7,29 (1Н, м), 7,48-7,59 (2H, м), 7,72 (2H, д), 8,39 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,81 (1Н, д), 12,02 (0,5H, с)
52
391
6,7
1,40-1,57 (2H, м), 1,76-1,87 (2H, м), 2,75-2,86 (2H, м), 3,43-3,68 (3H, м), 4,70 (1Н, д), 6,95 (2H, д), 7,56 (2H, д), 7,73 (2H, д), 8,37 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д), 11,90 (1Н, с), 13,20 (0,6H, ушир.с)
53
476
9,1
1,42 (9H, с), 3,02-3,10 (4H, м), 3,41-3,50 (4H, м), 6,98 (2H, д), 7,60 (2H, д), 7,71 (2H, д), 8,38 (1Н, д), 8,61 (2H, д), 8,80 (1Н, д11,93 (0,6H, с)
54
376
6,2
2,81-2,97 (4H, м), 3,00-3,12 (4H, м), 6,89-6,99 (2H, м), 7,52-7,62 (2H, м), 7,65-7,75 (2H, м), 8,38 (1Н, ушир.с), 8,55-8,62 (2H, м), 8,75 (1Н, ушир.с), 12,15 (0,6H, ушир.с)
Пример 13
N-(6-Оксо-l,6-дигидро-[3,4']бипиридинил-5-ил)бензолсульфонамид-IV-1
+
1
6
Амринон (100 мг, 0,53 ммоль) был суспендирован в пиридине (2 мл), после чего по каплям при 0°C добавили бензолсульфонилхлорид (75 мкл, 0,59 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов. Затем пиридин был удален в вакууме. К неочищенной смеси добавили MeOH, после чего твердое вещество отфильтровали и промыли большим количеством MeOH, в результате чего целевое соединение было получено в виде светло-желтого твердого вещества (100 мг, выход 57%). МС (ES) m/e=328. H ЯМР (ДМСО-d) δH 7,51 (2H, дд), 7,54-7,58 (2H, м), 7,61-7,65 (1Н, м), 7,75 (2H, дд), 7,90 (2H, дд), 8,56 (2H, дд), 9,78 (1Н, ушир.с), 12,33 (1Н, ушир.с).
Пример 14: Анализ Ингибирования ITK:
2
33
33
33
Соединения были протестированы на их способность ингибировать Itk с использованием анализа на включение радиоактивного фосфата. Анализ был выполнен в смеси 100 мМ HEPES (pH 7,5), 10 мМ MgCl, 25 мМ NaCl, 0,01% BSA и 1 мМ DTT. Конечные концентрации субстрата составляли 15 мкМ [γ-P]ATФ (400 мКи P ATФ/ммоль ATФ, Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals) и 2 мкM пептида (белок SAM68 D332-443). Анализ был выполнен при 25°C в присутствии 30 нМ Itk. Исходный аналитический буферный раствор был приготовлен с использованием всех вышеупомянутых реактивов, за исключением ATФ и тестируемого целевого соединения. 50 мкл исходного раствора добавили в 96-луночный планшет, а затем добавили 1,5 мкл исходного раствора ДМСО, содержащего серийные разведения тестируемого соединения (обычно начиная с конечной концентрации 15 мкМ с 2-кратными серийными разведениями) в двухкратном повторении (конечная концентрация ДМСО 1,5%). Планшет предварительно инкубировали в течение 10 минут при 25°C, после чего реакция была инициирована добавлением 50 мкл [γ-P] ATФ (конечная концентрация 15 мкМ).
Реакция была остановлена через 10 минут добавлением 50 мкл смеси ТХУ/АТФ (20%-ая ТХУ, 0,4 мМ ATФ). 96-луночный планшет Unifilter GF/C (Perkin Elmer Life Sciences, Cat no. 6005174) предварительно обработали 50 мкл воды Milli Q перед добавлением всей реакционной смеси (150 мкл). Планшет промыли 200 мкл воды Milli Q, а затем 200 мл смеси ТХУ/ATФ (5%-ая ТХУ, 1 мМ ATФ). Затем цикл отмывки повторили еще 2 раза. После высушивания, в лунку было добавлено по 30 мкл жидкой сцинтилляционной смеси Optiphase 'SuperMix' (Perkin Elmer) для сцинтилляционного подсчета (жидкостный сцинтилляционный счетчик 1450 Microbeta, Wallac).
Данные IC50 были вычислены с помощью нелинейного регрессионного анализа данных начальных скоростей, используя пакет программ Prism (GraphPad Prism версия 3.0cx для Macintosh, GraphPad Software, Сан-Диего Калифорния, США).
2
33
33
33
Анализ был выполнен в смеси 20 мМ MOPS (pH 7,0), 10 мМ MgCl, 0,1% BSA и 1 мМ DTT. Конечные концентрации субстрата в анализе составляли 7,5 мкМ [γ-P] АТФ (400 мКи P АТФ/ммоль АТФ, Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals) и 3 мкM пептида (белок SAM68 D332-443). Анализ был выполнен при 25°C в присутствии 50 нМ Itk. Исходный аналитический буферный раствор был приготовлен с использованием всех вышеупомянутых реактивов, за исключением ATФ и тестируемого целевого соединения. 50 мкл исходного раствора добавили в 96-луночный планшет, а затем добавили 2 мкл исходного раствора ДМСО, содержащего серийные разведения тестируемого соединения (обычно начиная с конечной концентрации 50 мкM с 2-кратными серийными разведениями) в двухкратном повторении (конечная концентрация ДМСО 2%). Планшет предварительно инкубировали в течение 10 минут при 25°C, после чего реакция была инициирована добавлением 50 мкл [γ-P] АТФ (конечная концентрация 7,5 мкМ).
Реакция была остановлена через 10 минут добавлением 100 мл 0,2M фосфорной кислоты+0,01% TWEEN 20. Многолуночный 96-уночный плашет для скринирования с фосфоцеллюлозным фильтром (Millipore, Cat no. MAPHN0B50) предварительно обработали 100 мкл 0,2M фосфорной кислоты+0,01% TWEEN 20 перед добавлением 170 мкл смеси для остановки анализа. Планшет был промыт 4×200 мкл 0,2M фосфорной кислоты+0,01% TWEEN 20. После высыхания в лунку было добавлено по 30 мкл жидкой сцинтилляционной смеси Optiphase 'SuperMix' (Perkin Elmer) для сцинтилляционного подсчета (жидкостный сцинтилляционный счетчик 1450 Microbeta, Wallac).
Данные Ki(прибл) были вычислены с помощью нелинейного регрессионного анализа данных начальных скоростей, используя пакет программ Prism (GraphPad Prism версия 3.0cx для Macintosh, GraphPad Software, Сан-Диего Калифорния, США).
В общем, соединения изобретения эффективны для ингибирования ITK. Предпочтительные соединения показали Ki ниже 0,1 мкМ в анализе включения радиоактивной метки (I-68, I-71, I-4, 1-77, I-81, II-14, II-17, II-20, II-22, II-23, II-28, II-9, II-30, II-31, II-35, II-40, II-46, II-51, II-58, II-63, II-64, II-65, II-66, II-77, II-78, II-79, II-80, II-81, II-97, II-107, II-112, II-114, II-115, II-126, II-129, II-130, II-131, II-134, II-135, II-136, II-138, II-139, II-142, II-143, II-145, II-146, II-147, II-148, II-153, II-155, II-156, II-157, II-158, II-159, II-160, II-162, II-163, II-164, II-165, II-166, II-167, II-168, II-169, II-170, II-171, II-172, II-177, II-178, II-179, II-181, II-182, III-42, III-44, III-46, III-47, III-52, III-54). Предпочтительные соединения показали Ki между 0,1 мкM и 1 мкM в анализе включения радиоактивной метки (I-5, I-10, I-11, I-20, I-1, I-22, I-27, I-45, I-46, I-47, I-69, I-72, I-73, I-75, I-2, I-83, I-84, I-85, II-4, II-7, II-15, II-21, II-32, II-34, II-38, II-39, II-41, II-43, II-45, II-47, II-52, II-56, II-57, II-59, II-60, II-61, II-62, II-69, II-70, II-71, II-75, II-76, II-83, II-85, II-87, II-95, II-98, II-99, II-100, II-101, II-104, II-105, II-108, II-120, II-121, II-123, II-124, II-132, II-133, II-137, II-140, II-144, II-149, II-150, II-151, II-152, II-154, II-161, II-174, II-175, II-176, III-4, III-5, III-7, III-8, III-11, III-16, III-43, III-45).
Пример 15: Анализ Ингибирования ITK (УФ):
Соединения были протестированы на их способность к ингибированию Itk с использованием стандартного анализа ферментного связывания (Fox et al., Protein Sci., (1998) 7, 2249).
2
Анализы проводили в смеси 20 мМ MOPS (pH 7,0), 10 мМ MgCl, 0,1% BSA, 1 мМ DTT, 2,5 мМ фосфоенолпирувата, 300 мкМ NADH, 30 мкг/мл пируваткиназы и 10 мкг/мл лактатдегидрогеназы. Конечные концентрации субстрата в анализе составили 100 мкМ ATФ (Sigma Chemicals) и 3 мкМ пептида (биотинилированный SAM68 D332-443). Анализы были выполнены при 25°C и в присутствии 100 нM Itk.
Исходный аналитический буферный раствор был приготовлен с использованием всех вышеупомянутых реактивов, за исключением ATФ и тестируемого целевого соединения. 60 мкл исходного раствора добавили в 96-луночный планшет, а затем добавили 2 мкл исходного раствора ДМСО, содержащего серийные разведения тестируемого соединения (обычно начиная с конечной концентрации 15 мкМ). Планшет предварительно инкубировали в течение 10 минут при 25°C, после чего реакция была инициирована добавлением 5 мкл ATФ. Начальные скорости реакции были определены с помощью планшет-ридера Molecular Devices SpectraMax Plus через 10 минут. Данные IC50 и Ki были вычислены с помощью нелинейного регрессионного анализа, используя пакет программ Prism (GraphPad Prism версия 3.0cx для Macintosh, GraphPad Software, Сан-Диего Калифорния, США).
В целом, соединения изобретения эффективны для ингибирования ITK. Предпочтительные соединения показали Ki ниже 0,1 мкM в анализе ферментного связывания (I-70, I-76, I-78, I-79, I-80). Предпочтительные соединения показали Ki между 0,1 мкM и 1 мкM в сопряженном ферментном анализе (I-5, I-10, I-11, I-69, I-82, I-83, I-84, II-4, II-7, II-41).
Пример 16: Анализ Ингибирования BTK:
2
33
33
Соединения были протестированы по их способности ингибировать Btk с использованием анализа на включение радиоактивного фосфата в Vertex Pharmaceuticals. Анализы были выполнены в смеси 20 мM MOPS (pH 7,0), 10 мM MgCl, 0,1% BSA и 1 мM DTT. Конечные концентрации субстрата составляли 15 мкМ [γ-P]АТФ (200 мКи P ATФ/ммоль ATФ, Amersham Pharmacia Biotech, Amersham, UK/Sigma Chemicals) и 2 мкM пептида (белок SAM68 D332-443). Анализ был выполнен при 25°C в присутствии 25 нM Btk. Исходный аналитический буферный раствор был приготовлен с использованием всех вышеупомянутых реактивов, за исключением пептида и тестируемого целевого соединения. 75 мкл исходного раствора добавили в 96-луночный планшет, а затем добавили 2 мкл исходного раствора ДМСО, содержащего серийные разведения тестируемого соединения (обычно начиная с конечной концентрации 15 мкМ) в двухкратном повторении (конечная концентрация ДМСО 2%). Планшет предварительно инкубировали в течение 15 минут при 25°C, после чего реакция была инициирована добавлением 25 мкл пептида (до конечной концентрации 2 мкM). Показатель фона был определен добавлением 100 мл 0,2M фосфорной кислоты+0,01% TWEEN, чтобы контролировать лунки, содержащие исходный аналитический буфер и ДМСО до инициирования пептидом.
Реакция была остановлена через 10 минут добавлением 100 мл 0,2M фосфорной кислоты+0,01% TWEEN 20. Многолуночный 96-луночный плашет для скринирования с фосфоцеллюлозным фильтром (Millipore, Cat no. MAPHN0B50) предварительно обработали 100 мкл 0,2M фосфорной кислоты+0,01% TWEEN 20 перед добавлением 170 мл смеси для остановки анализа. Плашет был промыт 4×200 мкл 0,2M фосфорной кислоты+0,01% TWEEN 20. После высушивания в лунку было добавлено по 30 мкл жидкой сцинтилляционной смеси Optiphase 'SuperMix' (Perkin Elmer) для сцинтилляционного подсчета (жидкостный сцинтилляционный счетчик 1450 Microbeta, Wallac).
После исключения средних фоновых значений для всех точек данных, данные Ki (прибл) были вычислены с помощью нелинейного регрессионного анализа, используя пакет программ Prism (GraphPad Prism версия 3.0cx для Macintosh, GraphPad Software, Сан-Диего Калифорния, США).
В целом, соединения изобретения, включая соединения в Таблице 1, являются эффективными для ингибирования Btk. Предпочтительные соединения показали Ki выше 0,5 мкM в анализе включения радиоактивной метки (II-43, II-61, II-114, II-149). Предпочтительные соединения показали Ki ниже 0,5 мкM в анализе включения радиоактивной метки (II-51, II-58, II-61, II-63, II-77, II-78, II-80, II-112).
Пример 17: Анализ Ингибирования BTK (AlphaScreen™):
TM
2
Соединения были протестированы на их способность ингибировать Btk с использованием фосфотирозинового анализа AlphaScreen в Vertex Pharmaceuticals. Испытание было выполнено в смеси 20 мм MOPS (pH 7,0), 10 мМ MgCl, 0,1% BSA и 1 мМ DTT. Конечные концентрации субстрата в анализе составили 50 мкM ATФ (Sigma Chemicals) и 2 мкM пептида (биотинилированный SAM68 D332-443). Анализ был выполнен при 25°C в присутствии 25 нM Btk. Исходный аналитический буферный раствор был приготовлен с использованием всех вышеупомянутых реактивов, за исключением пептида и тестируемого целевого соединения. 37,5 мкл исходного раствора добавили в 96-луночный планшет, а затем добавили 1 мкл исходного раствора ДМСО, содержащего серийные разведения тестируемого соединения (обычно начиная с конечной концентрации 15 мкМ) в двухкратном повторении (конечная концентрация ДМСО 2%). Планшет предварительно инкубировали в течение 15 минут при 25°C, после чего реакция была инициирована добавлением 12,5 мкл пептида (до конечной концентрации 2 мкM). Показатель фона был определен добавлением 5 мкл 500 мМ EDTA, чтобы контролировать лунки, содержащие исходный аналитический буфер и ДМСО до инициирования с помощью Биотин-SAM68.
2
Реакция была остановлена через 30 минут путем 225-кратного разведения реакции в MOPS буфере (20 мМ MOPS (pH 7,0), 1 мМ DTT, 10 мМ MgCl, 0,1% BSA), содержащим 50 мМ EDTA, чтобы довести конечную концентрацию пептида до 9 нM.
TM
TM
TM
Реагенты AlphaScreen были приготовлены согласно инструкциям производителей (AlphaScreen набор для фосфотирозинового анализа (P-Tyr-100), PerkinElmer номер по каталогу 6760620C). При приглушенном освещении 20 мкл реагентов AlphaScreen были добавлены в каждую лунку белой половины 96-луночного планшета (Corning Inc. - COSTAR 3693) вместе с 30 мкл остановленных, разбавленных киназных реакций. Планшеты инкубировали в темноте в течение 60 минут перед считыванием на планшет-ридере Fusion Alpha (PerkinElmer).
После исключения средних фоновых значений для всех точек данных, данные Ki (прибл) были вычислены с помощью нелинейного регрессионного анализа, используя пакет программ Prism (GraphPad Prism версия 3.0cx для Macintosh, GraphPad Software, Сан-Диего Калифорния, США).
Пример 18: Анализ Ингибирования RLK:
2
Соединения были протестированы на их способность к ингибированию Rlk с использованием стандартного анализа ферментного связывания (Fox et al., Protein Sci., (1998) 7, 2249). Анализы проводили в смеси 20 мМ MOPS (pH 7,0), 10 мМ MgCl, 0,1% BSA и 1 мМ DTT. Конечные концентрации субстрата в анализе составили 100 мкМ ATФ (Sigma Chemicals) и 10 мкМ пептида (Поли Glu:Tyr 4:1). Анализ был выполнен при 30°C и в присутствии 40 нМ Rlk. Конечные концентрации компонентов системы ферментного связывания составили 2,5 мМ фосфоенолпирувата, 300 мкМ NADH, 30 мкг/мл пируваткиназы и 10 мкг/мл лактатдегидрогеназы.
Исходный аналитический буферный раствор был приготовлен с использованием всех вышеупомянутых реактивов, за исключением ATФ и тестируемого целевого соединения. 60 мкл исходного раствора добавили в 96-луночный планшет, а затем добавили 2 мкл исходного раствора ДМСО, содержащего серийные разведения тестируемого соединения (обычно начиная с конечной концентрации 7,5 мкМ). Планшет предварительно инкубировали в течение 10 минут при 30°C, после чего реакция была инициирована добавлением 5 мкл ATФ. Начальные скорости реакции были определены с помощью планшет-ридера Molecular Devices SpectraMax Plus через 10 минут. Данные IC50 и Ki были вычислены с помощью нелинейного регрессионного анализа, используя пакет программ Prism (GraphPad Prism версия 3,0cx для Macintosh, GraphPad Software, Сан-Диего Калифорния, США).
В целом, соединения изобретения эффективны для ингибирования RLK. Предпочтительные соединения показали Ki выше 1 мкМ в анализе ферментного связывания (I-5, I-11, I-71, I-74, II-7, II-15, II-17, II-38, II-41, II-46, II-47, II-65, II-75, II-83, II-85, II-87, II-114, II-115, II-143, II-148, II-149, II-159, II-160, II-163, II-164, II-166, II-168, II-171, II-178, II-179, III-4, III-5). Предпочтительные соединения показали Ki ниже 1 мкМ в анализе ферментного связывания (II-14, II-28, II-29, II-30, II-31, II-35, II-40, II-77, II-78, II-79, II-80, II-81, II-112).
В то время как был описан ряд вариантов осуществления настоящего изобретения, очевидно, что представленные основные примеры могут быть изменены с целью обеспечения других вариантов осуществления, в которых используются соединения и способы настоящего изобретения. Таким образом, следует понимать, что объем настоящего изобретения должен определяться прилагаемой формулой изобретения, а не конкретными вариантами осуществления, которые были представлены в качестве примеров.