Стандартизация нового средства растительного происхождения «Профем»

10. Чеснокова Н.П., Моррисон В.В., Понукалина Е.Ф. и др. О роли активации свободнорадикального окисления в структурной и функциональной дезорганизации биосистем в условиях патологии // Фундаментальные исследования. - 2009. -№5.-С. 122-130.

11. Chen A.-S., Taguchi Т., Sakai К., Kikuchi К., Wang M.-W., Miwa I. Antioxidant activities of chitibiose and chititriose // Biological & Pharmaceutical Bulletin. - 2003. - V. 26. - P. 1326-1330.

12. GovindarajanR., Rastogi S., Vijayakumar M. Studies on the antioxidant activities of Desmodium gagenticum //Biological & Pharmaceutical Bulletin. - 2003. - V. 26. - P. 1424-1427.

13. Nijveldt R.J., van Nood E., van Hoorn D.E.C. et al. Flavonoids: a review of probable mechanisms of action and potential applications. //Am J Clin.Nutr. - 2001. - V. 74 .-P. 418-425.

14. Olennikov D.N., Tankhaeva Г.М. Tamiaceae carbohydrates. I. Pectinic substances and hemicelluloses from Mentha x piperita // Chem. Nat. Comp. - 2007. - V. 43. - №5. - P. 501-507.

15. Review of Astragali RadixlAU Jing, ZHAO Zhong-zhen, CHEN Hu-biao // Chinese Herbal Medicines. - 2011. - V. 3. -№2.-P. 90-105.

16. Seyoum A., Asres K., El-Fiky F.K.Structure-radical scavenging relationships of flavonoids // Phytochemistry. - 2006. - Vol. 67.-№18.-P. 2058-2070.

Батоцыренова Эльвира Токтохоевна, аспирант, лаборатория безопасности биологически активных веществ Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. Тел. (3012)433713.

Торопова Анна Алексеевна, кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. Тел. (3012)433713. E-mail: anvuta-tor@mail.ru.

Шантанова Лариса Николаевна, доктор биологических наук, профессор, зав. лабораторией безопасности биологически активных веществ Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. Тел. (3012)433713. E-mail: shantanova@mail.ru.

Танхаева Лариса Максимовна, кандидат фармацевтических наук, старший научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. Тел. (3012)433713. E-mail: oldaniil@rambler.ru.

Алексеева Эльвира Алексеевна, кандидат медицинских наук, завкафедрой анатомии и физиологии, медицинского факультета Бурятского государственного университета. Тел. 66-20-62. E-mail: alec see vaelvira@mail ,ru.

Batotsyrenova Elvira Toktokhoevna, postgraduate student, laboratory of safety of biologically active substances, Institute of General and Experimental Biology SB RAS. Ph.: (3012) 433713.

Toropova Anna Alexeevna, candidate of biological sciences, scientific researcher, laboratory of safety of biologically active substances, Institute of General and Experimental Biology SB RAS. Ph.: (3012) 433713, fax (3012) 433034. E-mail: anvuta-tor@mail.ru.

Shantanova Larisa Nikolaevna, doctor of biological sciences, professor, head of the laboratory of safety of biologically active substances, Institute of General and Experimental Biology SB RAS. Ph.: 43-37-13. E-mail: shantanova@mail.ru.

Tankhaeva Larisa Maximovna - candidate of pharmaceutical sciences, senior scientific researcher, laboratory of medical and biological research, Institute of General and Experimental Biology SB RAS. Ph.: 43-37-13. E-mail: oldaniil@rambler.ru.

Alekseeva Elvira Alekseevna, candidate of medical sciences, head of the department of anatomy and physiology, medical faculty, Buryat State University. E-mail: alecseevaelvira@mail.ru.

УДК 615.40:54+615.43

© T.B. Корнополъцева, T.A. Асеева Стандартизация нового средства растительного происхождения «Профем»

Разработана методика стандартизации нового средства растительного происхождения, состоящего из надземной части панцерины (Panzerina lanata (Г). Sojak, сем. Tamiaceae), побегов курильского чая (Pentaphylloides fruticosa (Т.) О.Schwarz сем. Rosaceae) и корневищ сабельника болотного (Comarum palustre Т., сем. Rosaceae).

Ключевые слова: полиэкстракт, флавоноиды, экстрактивные вещества.

Т. V. Kornopoltseva, Т.A. Aseeva Standardization of a new remedy of plant origin “Profem”

The method of standardization a new remedy ofplant origin has been developed. It consists of above ground part of Panzerina lanata (L). Sojak, family Lamiaceae), sprouts of (Pentaphylloides fruticosa (L.) O.Schwarz family Rosaceae) and roots of (Comarum palustre L., family Rosaceae).

Keywords: poly extract, flavonoids, extractives.

Введение. Во всем мире уделяется большое внимание созданию, изучению и внедрению в клиническую практику препаратов для лечения воспалительных заболеваний женской половой сферы. Несмотря на то, что имеется широкий арсенал противовоспалительных препаратов, проблема изыскания новых высокоэффективных средств остается весьма актуальной.

Сведения об использовании растений в народной и традиционной медицине являются надежным ориентиром для выбора направления поиска новых видов лекарственного сырья. В качестве объекта исследования выбрана композиция из 3-х лекарственных растений: надземной части панцерины шерстистой, побегов курильского чая кустарникового и корневищ сабельника болотного.

Химический состав этих растений достаточно хорошо изучен. Так, панцерина шерстистая содержит органические кислоты, алкалоиды, фе-нолкарбоновые кислоты и их производные, фла-воноидные соединения (3-0-Р-с1-глюкопирано-зил-6-а-1-арабинопиранозида, З-О-Р-Б-глюкопи-ранозил-6»-а-1-рамнопиранозида и З-О-Р-О-галактопиранозида изорамнетина, З-О-Р-О-

галактопиранозида кемпферола, рутина, дубильные вещества, эфирное масло, иридоиды (гарпагид, 8-ацетилгарпагид) [3; 8; 11].

Из курильского чая выделены следующие соединения: флавоноиды, в частности два флаво-ноловых гликозида (З-О-а-Ь-арабинопиранозид кверцетина, З-О-Р-Б-галактопиранозид кверце-тина), два ацилированных флаваноидных гликозида (тернифлорин и трибулозид) и флаван-3-ол ((-)-катехин, соединения тритерпенового типа (эпиурсоловая кислота, гидроксиурсоловая кислота и дигидроксиурсоловая кислота), а также дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты и их производные (хлорогеновая, кофейная, си-наповая, феруловая, п-кумаровая, эллаговая) и витамины [3; 8; 5].

Корневища сабельника болотного содержат дубильные вещества, в частности флобафен, ка-техины (эпигаллокатехин, (+)-галлокатехин), флавоноиды (гликозиды кверцетина и кемпферола), а также госсипитрин. Кроме того, в корнях найдены витамины А и С [4].

Все три вида широко применялись в народной медицине. Так, у народов Сибири панцерина применялась при лечении гинекологических заболеваний, в частности бесплодия [3]. Установлено противовоспалительное, гипотензивное, седативное и кардиотоническое действие настойки и отвара растения [8]. Ю.Ю. Шурыгиной

доказана фармакотерапевтическая эффективность сухого экстракта из надземной части панцерины шерстистой при экспериментальном эндометрите [10].

Отвар курильского чая кустарникового популярен в народе как кровоостанавливающее, противовоспалительное, успокаивающее, обезболивающее средство. Также принимается внутрь при желудочно-кишечных и гинекологических заболеваниях [8]. В настоящее время экспериментально установлено, что сухой экстракт курильского чая обладает выраженным иммуномодулирующим, гипогликемическим, противовоспалительным и мембранопротекторным действием [6].

В народной медицине Сибири отвар сабельника используют для лечения костно-суставных болезней, при лечении желудочно-кишечных и иных внутренних кровотечений, опухолей же-лудочно-кишечного тракта, геморроя, применяют как вяжущее при поносах, мочегонное и желчегонное средство. Наружно применяют как ранозаживляющее и противовоспалительное средство [3]. Фармакологические исследования показали, что извлечения сабельника болотного оказывают ранозаживляющее, болеутоляющее действие, проявляют гипотензивную активность [8; 9].

Данные виды растений произрастают на территории Бурятии и являются доступными для промышленных заготовок лекарственного сырья.

Таким образом, предлагаемые виды растений по данным научной и народной медицины обладают выраженным противовоспалительным и кровоостанавливающим действием, что указывает на целесообразность применения данной композиции в качестве средства для лечения гинекологических заболеваний.

Цель работы: стандартизация полиэкстракта «Профем» по действующим веществам.

Материалы и методы

Растительный материал собран в Баргузин-ском районе Республики Бурятия в 2007 г. Методом мацерации с учетом оптимальных параметров экстракции получена субстанция - сухой экстракт. Наличие основных биологически активных веществ определяли по общепринятым методикам [2]. Определение потери в массе при высушивании проводили на дериватографе 8ТА 449 С (Германия). Спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре Agilent-8453E (США) в кварцевых кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм. Статистическую обработку результатов проводили с по-

мощью стандартного пакета статистических программ. Значимость различий между изучаемыми величинами определяли по критерию Стьюдента.

Результаты и обсуждение

Получение субстанции. Методом мацерации с учетом оптимальных параметров экстракции получена субстанция - полиэкстракт сухой, представляющий собой аморфный порошок коричневого цвета с приятным запахом и горьковатым вяжущим вкусом [7]. Гигроскопичен, комкуется. Полиэкстракт растворим в 50%-ном этаноле, хорошо растворим в воде. На пяти опытных образцах установлено, что потеря в массе варьирует от 2,05 до 4,23%. Данная величина соответствует ГФ XI и не превышает 5%. Определено, что основное удаление влаги начинается при температуре 50°С, а при температуре 150°С происходит разложение экстракта.

На основании качественного фитохимического анализа в полученном сухом экстракте установлено наличие дубильных веществ, фе-нолкарбоновых кислот (кофейная и хлорогено-вая кислоты), иридоидов (гарпагид), флавоноидов (доказано наличие рутина, кверцетина, изорамне-тина, кемпферола и их гликозидов). Идентификацию проводили в соответствии со стандартными образцами.

Для стандартизации фитоэкстракта разработали методику с использованием спектрофотометрического метода [1].

При исследовании УФ-спектров спиртового извлечения из данного сырья было обнаружено, что максимумы УФ-спектров спиртовых извлечений полиэкстракта «Профем» близки к максимумам УФ-спектров поглощения ГСО цина-розида. Далее, при добавлении к спиртовому извлечению полиэкстракта раствора алюминия хлорида 2-й максимум поглощения УФ-спектра смещался к 405 нм и совпадал с максимумами поглощения стандартного образца лютеолина, снятого в аналогичных условиях.

Методика количественного определения суммы флавоноидов в полиэкстракте сухом «Профем».

Около 0,05 г (точная навеска) экстракта растворяют в мерной колбе вместимостью 25 мл в

10 мл теплой воды (40-60 °С), прибавляют 5,2 мл 96%-го спирта, доводят объем раствора до метки водой (раствор А). 3 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 2 мл 2%-го раствора алюминия хлорида в 96%-ном спирте, доводят объем раствора 20%-ным спиртом до метки. Через 40 мин измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 405 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 3-х мл раствора А, 1-й капли разведенной уксусной кислоты, доведенный 20%-ным спиртом до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл. Параллельно измеряют оптическую плотность государственного стандартного образца (ГСО) цинарозида. 1 мл приготовленного раствора ГСО цинарозида помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл 2%-го раствора алюминия хлорида в 95%-ном спирте и доводят объем раствора 20%-ным спиртом до метки. Раствором сравнения является раствор, состоящий из 1-го мл ГСО цинарозида, 1-й капли разведенной уксусной кислоты, доведенный 20%-ным спиртом до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид абсолютно сухого экстракта в процентах (X) рассчитывают по формуле:

В ' т0' 25 ' 100

Х=-----------------------,

Бо'т-Г (100 - Ж), где Б - оптическая плотность испытуемого раствора;

Ц _ оптическая плотность раствора ГСО цинарозида;

т - масса экстракта в граммах;

т0 _ масса ГСО цинарозида в граммах;

\¥ - потеря в массе при высушивании экстракта в процентах.

Количественная оценка фитоэкстракта проводилась по выходу экстрактивных веществ [2] и суммы флавоноидов. Метрологические характеристики представлены в таблице 1. Количество флавоноидов в полиэкстракте сухом «Профем» составило 10,7%, экстрактивных веществ -28%.

Таблица 1

Метрологические характеристики определения экстрактивных веществ и суммы флавоноидов

в полиэкстракте сухом «Профем»

Показатель f X S Р t А х є,%

Содержание экстрактивных веществ 9 27.9 0.9447 95 2.26 0.6752 2.42

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид-стандарт 9 10.72 0.0783 95 2.26 0.0559 4.27

Таким образом, разработана методика коли- тракте «Профем», которая может использовать-

чественного определения флавоноидов в пере- ся при определении его подлинности,

счете на цинарозид-стандарт в сухом полиэкс-

Jlumepamypa

1. Беликов В.В., Точкова Т.В. Реакция комплексообразования в анализе флавоноидов // Материалы 2-го Всесоюзн. симп. по фен. соед. - Алма-Ата: Наука, 1973. - С. 168-172.

2. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа /М3 СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1987.-336 с.

3. Минаева В.Г. Лекарственные растения Сибири. - Новосибирск: Наука, 1991.-431 с.

4. Наумчик Г.Н., Розенцвейг П.Э. Фитохимическое изучение сабельника болотного // Материалы науч. конф., посвящ. итогам работы за 1961-1962 гг. — JI., 1963. - С. 101-102.

5. Николаева И.Г. Фармакогностическая характеристика Pentaphylloides fruticosa (P.)O.Schwarz и разработка лекарственного препарата на его основе: автореф. ... канд. фарм. наук. - Улан-Удэ, 1997. - 18 с.

6. Николаева И.Г., Хобракова В.Б., Арьяева М.М. Пятилистник кустарниковый. - Новосибирск, 2001. - 120 с.

7. Способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью Патент РФ № 2372934: Корнополь-цева Т.В., Чехирова Г.В., Асеева Т.А., Николаев С.М., Мондодоев А.Г., Бураева Л.Б., Бардымова С.Д. - Опубл. 20.11.2009. -Бюлл. № 32.-11 с.

8. Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям (Фитотерапия). 2-е изд., стереот. - М., 1988.

9. Трутнева Е.А., Алешкина Я.А., Алешинская Э.А., Никитина С.С., Николаев А.Б. Результаты фармакологического исследования растений, применяющихся в народной медицине // Лекарственные растения: фармакология и химиотерапия. -М., 1971.-С. 140-150.

10. Шурыгина Ю.Ю. Корнопольцева Т.В. Противовоспалительные свойства сухого экстракта из надземной части Panzerina lanata при экспериментальном эндометрите // Растительные ресурсы. - 2007. - Т. 42. - Вып. 3. - С. 122-126.

П.Яценко Т.В. Фармакогностическая характеристика панцерии шерстистой и разработка лекарственной формы на ее основе: автореф. ... канд. фарм. наук. - Улан-Удэ, 1999. - 19 с.

Корнопольцева Татьяна Владимировна, кандидат фармацевтических наук, научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. Тел. (3012) 434743. E-mail: tv-komopol@mail.ru

Асеева Тамара Анатольевна, доктор фармацевтических наук, профессор, зав. лабораторией медико-биологических исследований Института общей и экспериментальной биологии СО РАН, профессор кафедры фармации медицинского факультета Бурятского государственного университета. Тел. (3012) 434743. E-mail: ta-aseeva@mail.ru.

Kornopoltseva Tatyana Vladimirovna, candidate of pharmaceutical sciences, senior research fellow, laboratory of medical and biological research, Institute of General and Experimental Biology, SB RAS. Ph. (3012) 434743. E-mail: : tv-komopol@mail.ru

Aseeva Tamara Anatolievna, doctor of pharmaceutical sciences, professor, head of the laboratory of medical and biological research, Institute of General and Experimental Biology, SB RAS; professor, department of pharmacy, medical faculty, Buryat State University. Ph. (3012) 434743. E-mail: ta-aseeva@mail.ru.