ПОЛУЧЕНИЕ НЕРВНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК И ДОФАМИНЕРГИЧЕСКИХ НЕЙРОНОВ ИЗ ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА

1. Способ получения нервных стволовых клеток (НСК), включающий:
(a) обработку плюрипотентных стволовых клеток человека (чПСК) ингибитором чекпойнт киназы 1 (CK1) и ингибитором костного морфогенетического белка (КМБ); и
(b) проведение анализа клеток на маркеры нервных стволовых клеток.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ингибитор КМБ выбран из группы, состоящей из: дорсоморфина, LD-193189 и DMH-1.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078, а ингибитор КМБ представляет собой дорсоморфин.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078, а ингибитор КМБ представляет собой LD-193189.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078, а ингибитор КМБ представляет собой DMH-1.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что маркеры нервных стволовых клеток выбраны из группы, состоящей из: BRN2, CD113, CD15, CXCR4, DCX, FABP7, FOXA2, FOXO4, GFAP, LMX1A, мусаши-1, MAP2, нестина, OTX2, PAX6, TUBB3, SOX1, SOX2, SOX3 и ST6GALNAC5 или любой их комбинации.
8. Нервная стволовая клетка, полученная согласно способу по п. 1.
9. Нервная стволовая клетка по п. 8, отличающаяся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078.
10. Нервная стволовая клетка по п. 8, отличающаяся тем, что ингибитор КМБ выбран из группы, состоящей из: дорсоморфина, LD-193189 и DMH-1.
11. Нервная стволовая клетка по п. 8, отличающаяся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078, а ингибитор КМБ представляет собой дорсоморфин.
12. Нервная стволовая клетка по п. 8, отличающаяся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078, а ингибитор КМБ представляет собой LD-193189.
13. Нервная стволовая клетка по п 8, отличающаяся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078, а ингибитор КМБ представляет собой DMH-1.
14. Нервная стволовая клетка по п 8, отличающаяся тем, что клетка экспрессирует маркеры нервных стволовых клеток, выбранные из группы, которая состоит из: BRN2, CD113, CD15, CXCR4, DCX, FABP7, FOXA2, FOXO4, GFAP, LMX1A, мусаши-1, MAP2, нестина, OTX2, PAX6, TUBB3, SOX1, SOX2, SOX3 и ST6GALNAC5 или любой их комбинации.
15. Способ получения дофаминергических нейронов из плюрипотентных стволовых клеток человека, включающий:
(a) обработку плюрипотентных стволовых клеток человека (чПСК) ингибитором чекпойнт киназы 1 (CK1) и ингибитором костного морфогенетического белка (КМБ);
(b) идентификацию нервных стволовых клеток посредством идентификации маркеров нервных стволовых клеток;
(c) обработку НСК по меньшей мере одним соединением для индуцирования дофаминергических нейронов; и
(d) проведение анализа клеток на клеточные маркеры дофаминергических нейронов.
16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078, а ингибитор КМБ выбран из группы, состоящей из: дорсоморфина, LD-193189 и DMH-1.
17. Способ по п. 15, отличающийся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078, а ингибитор КМБ представляет собой DMH-1.
18. Способ по п. 15, отличающийся тем, что маркеры нервных стволовых клеток выбраны из группы, состоящей из: BRN2, CD113, CD15, CXCR4, DCX, FABP7, FOXA2, FOXO4, GFAP, LMX1A, мусаши-1, MAP2, нестина, OTX2, PAX6, TUBB3, SOX1, SOX2, SOX3 и ST6GALNAC5 или любой их комбинации.
19. Способ по п. 15, отличающийся тем, что соединение для индуцирования дофаминергических нейронов выбрано из группы, состоящей из: гомохинолиновой кислоты, L-цистеинсульфиновой кислоты, кинуреновой кислоты, (R)-(+)-HA-966, м-хлорфенилбигуанида гидрохлорида, калпептина, димаприта дигидрохлорида, 8-гидрокси-DPAT гидробромида, транс-4-гидроксикротоновой кислоты, фазудила гидрохлорида, тиоперамида, ретиноевой кислоты, AM580, TTNPB, ремоксиприда гидрохлорида, ICI 215001 гидрохлорида, имилоксана гидрохлорида, спиперона гидрохлорида, кенпауллона, CL 218872, CV 1808, Ro 15-4513, линопирдина дигидрохлорида, гуггулстерона, Ch 55, 3-MATIDA, SEW 2871, имметридина дигидробромида, LY 364947, транилципромина гидрохлорида, (-)-цитизина и нилутамида или любой их комбинации.
20. Способ по п. 15, отличающийся тем, что соединение для индуцирования дофаминергических нейронов представляет собой гуггулстерон.
21. Способ по п. 15, отличающийся тем, что клеточные маркеры дофаминергических нейронов выбраны из группы, состоящей из: TUJ1, TH, Dat, Foxa2, Nurr-1, Girk2, MAPT, SYT4, FOXA1, DDC, ASCL1, PINK1, PAX5, LMX1B, PITX3, NURR-1, LMX1A, EN1, PAX2, TFF3, PITX2, DCX, MAP2, PITX1 и VMAT2.
22. Дофаминергический нейрон, полученный согласно способу по п. 15.
23. Дофаминергический нейрон по п. 22, отличающийся тем, что ингибитор CK1 представляет собой SB218078, а ингибитор КМБ представляет собой DMH-1.
24. Дофаминергический нейрон по п. 22, отличающийся тем, что НСК экспрессируют маркеры нервных стволовых клеток, выбранные из группы, которая состоит из: BRN2, CD113, CD15, CXCR4, DCX, FABP7, FOXA2, FOXO4, GFAP, LMX1A, мусаши-1, MAP2, нестина, OTX2, PAX6, TUBB3, SOX1, SOX2, SOX3 и ST6GALNAC5 или любой их комбинации.
25. Дофаминергический нейрон по п. 22, отличающийся тем, что соединение для индуцирования дофаминергических нейронов выбрано из группы, состоящей из: гомохинолиновой кислоты, L-цистеинсульфиновой кислоты, кинуреновой кислоты, (R)-(+)-HA-966, м-хлорфенилбигуанида гидрохлорида, калпептина, димаприта дигидрохлорида, 8-гидрокси-DPAT гидробромида, транс-4-гидроксикротоновой кислоты, фазудила гидрохлорида, тиоперамида, ретиноевой кислоты, AM580, TTNPB, ремоксиприда гидрохлорида, ICI 215001 гидрохлорида, имилоксана гидрохлорида, спиперона гидрохлорида, кенпауллона, CL 218872, CV 1808, Ro 15-4513, линопирдина дигидрохлорида, гуггулстерона, Ch 55, 3-MATIDA, SEW 2871, имметридина дигидробромида, LY 364947, транилципромина гидрохлорида, (-)-цитизина и нилутамида.
26. Дофаминергический нейрон по п. 25, отличающийся тем, что соединение для индуцирования дофаминергических нейронов представляет собой гуггулстерон.
27. Дофаминергический нейрон по п. 22, отличающийся тем, что клеточные маркеры дофаминергических нейронов выбраны из группы, состоящей из: TUJ1, TH, Dat, Foxa2, Nurr-1, Girk2, MAPT, SYT4, FOXA1, DDC, ASCL1, PINK1, PAX5, LMX1B, PITX3, NURR-1, LMX1A, EN1, PAX2, TFF3, PITX2, DCX, MAP2, PITX1 и VMAT2.
28. Набор для получения НСК, содержащий:
(a) ингибитор чекпойнт киназы (CK1) и ингибитор костного морфогенетического белка (КМБ);
(b) реагенты для анализа маркеров нервных стволовых клеток; и
(c) указания для получения НСК из чПСК.
29. Набор для получения дофаминергических нейронов, содержащий:
(a) ингибитор чекпойнт киназы (CK1) и ингибитор костного морфогенетического белка (КМБ);
(b) реагенты для анализа маркеров нервных стволовых клеток;
(c) по меньшей мере одно соединение для индуцирования дофаминергических нейронов;
(d) реагенты для анализа маркеров стволовых клеток дофаминергических нейронов;
(e) указания для получения дофаминергических нейронов из чПСК.