Выделенное биспецифическое антитело, которое специфически связывается с CD47 и PD-L1

1. Выделенное биспецифическое антитело, которое специфически связывается с CD47 и PD-L1, и включает:
1) первый антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с CD47, и включает:
(a) вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий:
(i) CDR1 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 1,
(ii) CDR2 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 2,
(iii) CDR3 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 3; и
(b) вариабельный домен общей легкой цепи, содержащий:
(i) CDR1 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 4,
(ii) CDR2 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 5,
(iii) CDR3 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6;
2) второй антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с PD-L1 и включает:
(a) вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий:
(i) CDR1 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 7,
(ii) CDR2 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 8,
(iii) CDR3 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 9; и
(b) вариабельный домен общей легкой цепи, содержащий:
(i) CDR1 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 4,
(ii) CDR2 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 5,
(iii) CDR3 с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6.
2. Выделенное биспецифическое антитело по п. 1, характеризующееся тем, что первый антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с CD47, представляет собой Fab, связанный с мономером Fc-фрагмента.
3. Выделенное биспецифическое антитело по п. 1, характеризующееся тем, что второй антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с PD-L1, представляет собой Fab, связанный с мономером Fc-фрагмента.
4. Выделенное биспецифическое антитело по п. 1, характеризующееся тем, что антитело представляет собой полноразмерное антитело IgG.
5. Выделенное биспецифическое антитело по п. 4, где полноразмерное антитело IgG относится к изотипу IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 человека.
6. Выделенное биспецифическое антитело по п. 5, где полноразмерное антитело IgG относится к изотипу IgG1 человека.
7. Выделенное биспецифическое антитело по п. 1, где вариабельный домен тяжелой цепи первого антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывается с CD47, содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22.
8. Выделенное биспецифическое антитело по п. 1, где вариабельный домен тяжелой цепи второго антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывается с PD-L1, содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24.
9. Выделенное биспецифическое антитело по п. 1, где вариабельный домен общей легкой цепи для первого и второго антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23.
10. Выделенное биспецифическое антитело по п.1,
где первый антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с CD47, включает:
(a) вариабельный домен тяжелой цепи с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 22,
(b) вариабельный домен общей легкой цепи с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 23;
где второй антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с PD-L1, включает:
(a) вариабельный домен тяжелой цепи с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 24,
(b) вариабельный домен общей легкой цепи с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 23.
11. Выделенное биспецифическое антитело по п. 1, где тяжелая цепь первого антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывается с CD47, содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25.
12. Выделенное биспецифическое антитело по п. 1, где тяжелая цепь второго антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывается с PD-L1, содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27.
13. Выделенное биспецифическое антитело по п. 1, где общая легкая цепь для первого и второго антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.
14. Выделенное биспецифическое антитело по п.1,
где первый антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с CD47, включает:
(a) тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 25,
(b) общую легкую цепь с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 26;
где второй антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с PD-L1, включает:
(a) тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 27,
(b) общую легкую цепь с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 26.
15. Выделенное биспецифическое антитело по п.1, которое представляет собой бивалентное антитело.
16. Выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует биспецифическое антитело по любому из пп. 1-15.
17. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 16, где нуклеиновая кислота представляет собой ДНК.
18. Экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из пп. 16-17.
19. Способ получения клетки-хозяина для получения биспецифического антитела по любому из пп. 1-15, включающий трансформирование клетки экспрессионным вектором по п. 18.
20. Клетка-хозяин для получения биспецифического антитела по любому из пп. 1-15, содержащая нуклеиновую кислоту по любому из пп. 16-17.
21. Способ получения биспецифического антитела по любому из пп. 1-15, заключающийся в культивировании клетки-хозяина по п. 20 в культуральной среде в условиях, достаточных для получения указанного антитела, при необходимости, с последующим выделением и очисткой полученного антитела.
22. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или нарушения, опосредованного PD-L1 и CD47, содержащая биспецифическое антитело по любому из пп. 1-15 в терапевтически эффективном количестве в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами.
23. Фармацевтическая композиция по п. 22, где заболевание или нарушение, опосредованное PD-L1 и CD47, выбрано из группы: тройной негативный рак молочной железы (ТНРМЖ), рак головы и шеи (РГШ), рак желудка (РЖ), рак пищеводно-желудочного перехода, аденокарцинома легкого, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, острый миелоидный лейкоз, миелодиспластический синдром, злокачественные новообразования с высоким уровнем микросателлитной нестабильности, множественная миелома, рак яичника, почечно-клеточный рак, рак мочевого пузыря, рак шейки матки.
24. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или нарушения, опосредованного PD-L1 и CD47, содержащая биспецифическое антитело по любому из пп. 1-15 и по меньшей мере одно другое терапевтически активное соединение.
25. Фармацевтическая композиция по п. 24, где заболевание или нарушение, опосредованное PD-L1 и CD47, выбрано из группы: тройной негативный рак молочной железы (ТНРМЖ), рак головы и шеи (РГШ), рак желудка (РЖ), рак пищеводно-желудочного перехода, аденокарцинома легкого, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, острый миелоидный лейкоз, миелодиспластический синдром, злокачественные новообразования с высоким уровнем микросателлитной нестабильности, множественная миелома, рак яичника, почечно-клеточный рак, рак мочевого пузыря, рак шейки матки.
26. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 24-25, где другое терапевтически активное соединение представляет собой антитело, химиотерапевтическое средство, средство для гормональной терапии или любую их комбинацию.
27. Фармацевтическая композиция по п. 24, где химиотерапевтическое средство выбирают из группы, которая включает: доцетаксел, паклитаксел, доксорубицин, препараты платины, карбоплатин, 5-фторурацил, ингибиторы тирозинкиназы, акситиниб, липосомальный доксорубицин, липосомальный паклитаксел или любая их комбинация.
27. Фармацевтическая композиция по п. 24, где антитело представляет собой трастузумаб.
28. Фармацевтическая композиция по п. 24, где комбинация представляет трастузумаб и химиотерапевтическое средство, которое выбирают из группы, включающей доцетаксел, паклитаксел, доксорубицин, препараты платины, карбоплатин, 5-фторурацил, ингибиторы тирозинкиназы, акситиниб, липосомальный доксорубицин, липосомальный паклитаксел или любая их комбинация.
29. Способ ингибирования биологической активности PD-L1 и CD47 у субъекта, нуждающегося в таком ингибировании, включающий введение субъекту эффективного количества биспецифического антитела по любому из пп. 1-15.
30. Способ лечения заболевания или нарушения, опосредованного PD-L1 и CD47, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, биспецифического антитела по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по любому из пп. 22-28 в терапевтически эффективном количестве.
31. Способ лечения заболевания или нарушения по п. 30, где заболевание или нарушение, опосредованное PD-L1 и CD47, выбрано из группы: тройной негативный рак молочной железы (ТНРМЖ), рак головы и шеи (РГШ), рак желудка (РЖ), рак пищеводно-желудочного перехода, аденокарцинома легкого, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, острый миелоидный лейкоз, миелодиспластический синдром, злокачественные новообразования с высоким уровнем микросателлитной нестабильности, множественная миелома, рак яичника, почечно-клеточный рак, рак мочевого пузыря, рак шейки матки.
32. Способ лечения заболевания или нарушения, опосредованного PD-L1 и CD47, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таком лечении, биспецифического антитела по любому из пп. 1-15 и по меньшей мере одного другого терапевтически активного соединения.
33. Способ лечения заболевания или нарушения по п. 32, где заболевание или нарушение, опосредованное PD-L1 и CD47, выбрано из группы: тройной негативный рак молочной железы (ТНРМЖ), рак головы и шеи (РГШ), рак желудка (РЖ), рак пищеводно-желудочного перехода, аденокарцинома легкого, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, острый миелоидный лейкоз, миелодиспластический синдром, злокачественные новообразования с высоким уровнем микросателлитной нестабильности, множественная миелома, рак яичника, почечно-клеточный рак, рак мочевого пузыря, рак шейки матки.
34. Способ лечения заболевания или нарушения по любому из пп. 32, 33, где другое терапевтически активное соединение представляет собой антитело, химиотерапевтическое средство, средство для гормональной терапии или любую их комбинацию.
35. Способ лечения заболевания или нарушения по п. 34, где химиотерапевтическое средство выбирают из группы, которая включает: доцетаксел, паклитаксел, доксорубицин, препараты платины, карбоплатин, 5-фторурацил, ингибиторы тирозинкиназы, акситиниб, липосомальный доксорубицин, липосомальный паклитаксел или любая их комбинация.
36. Способ лечения заболевания или нарушения по п. 34, где антитело представляет собой трастузумаб.
37. Способ лечения заболевания или нарушения по п. 34, где комбинация представляет трастузумаб и химиотерапевтическое средство, которое выбирают из группы, включающей доцетаксел, паклитаксел, доксорубицин, препараты платины, карбоплатин, 5-фторурацил, ингибиторы тирозинкиназы, акситиниб, липосомальный доксорубицин, липосомальный паклитаксел или любая их комбинация.
38. Применение биспецифического антитела по любому из пп. 1-15 или фармацевтической композиции по любому из пп. 22-28 для лечения у субъекта, нуждающегося в таком лечении, заболевания или нарушения, опосредованного PD-L1 и CD47.
39. Применение по п. 38, где заболевание или нарушение, опосредованное PD-L1 и CD47, выбрано из группы: тройной негативный рак молочной железы (ТНРМЖ), рак головы и шеи (РГШ), рак желудка (РЖ), рак пищеводно-желудочного перехода, аденокарцинома легкого, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, острый миелоидный лейкоз, миелодиспластический синдром, злокачественные новообразования с высоким уровнем микросателлитной нестабильности, множественная миелома, рак яичника, почечно-клеточный рак, рак мочевого пузыря, рак шейки матки.
40. Применение биспецифического антитела по любому из пп. 1-15 и по меньшей мере одного другого терапевтически активного соединения для лечения у субъекта, нуждающегося в таком лечении, заболевания или нарушения, опосредованного PD-L1 и CD47.
41. Применение по п. 40, где заболевание или нарушение, опосредованное PD-L1 и CD47, выбрано из группы: тройной негативный рак молочной железы (ТНРМЖ), рак головы и шеи (РГШ), рак желудка (РЖ), рак пищеводно-желудочного перехода, аденокарцинома легкого, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, острый миелоидный лейкоз, миелодиспластический синдром, злокачественные новообразования с высоким уровнем микросателлитной нестабильности, множественная миелома, рак яичника, почечно-клеточный рак, рак мочевого пузыря, рак шейки матки.
42. Применение по любому из пп. 40, 41, где другое терапевтически активное соединение представляет собой антитело, химиотерапевтическое средство, средство для гормональной терапии или любую их комбинацию.
43. Применение по п. 42, где химиотерапевтическое средство выбирают из группы, которая включает: доцетаксел, паклитаксел, доксорубицин, препараты платины, карбоплатин, 5-фторурацил, ингибиторы тирозинкиназы, акситиниб, липосомальный доксорубицин, липосомальный паклитаксел или любая их комбинация.
44. Применение по п. 42, где антитело представляет собой трастузумаб.
45. Применение по п. 42, где комбинация представляет трастузумаб и химиотерапевтическое средство, которое выбирают из группы, включающей доцетаксел, паклитаксел, доксорубицин, препараты платины, карбоплатин, 5-фторурацил, ингибиторы тирозинкиназы, акситиниб, липосомальный доксорубицин, липосомальный паклитаксел или любая их комбинация.