СПОСОБ ОДНОВРЕМЕННОГО АВТОМАТИЗИРОВАННОГО ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ ИЗ НЕСКОЛЬКИХ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБРАЗЦОВ

1. Способ одновременного автоматизированного выделения и очистки нуклеиновых кислот из нескольких биологических образцов, характеризующийся тем, что выделение и очистка нуклеиновых кислот осуществляется в одноразовых модулях, содержащих все реагенты, необходимые для разрушения клеток, микроорганизмов и вирусных частиц, очистки и элюции нуклеиновых кислот, и расположенных на вращающейся платформе, причем перемещение жидкостей внутри модулей осуществляется либо под действием сил, возникающих при вращении платформы, либо при создании разницы давлений в соответствующих резервуарах модулей, а выделение и очистка нуклеиновых кислот включает следующие стадии:
а) первая стадия лизиса клеток, микроорганизмов и вирусных частиц с использованием первого лизирующего буфера, содержащего лизоцим или его аналоги;
б) вторая стадия лизиса клеток, микроорганизмов и вирусных частиц с использованием второго лизирующего буфера, содержащего хаотропный агент, протеолитический фермент, детергент;
в) добавление спирта к полученному лизату биологического образца для создания оптимальных условий связывания нуклеиновых кислот с твердофазным сорбентом;
г) связывание нуклеиновых кислот на твердофазном сорбенте;
д) отмывка нуклеиновых кислот, связанных с твердофазным сорбентом, от примесей последовательным пропусканием промывочного буфера, содержащего хаотропный агент, и водно-спиртовой смеси;
е) элюция нуклеиновых кислот с твердофазного сорбента пропусканием элюирующего раствора.
2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что выделение и очистка нуклеиновых кислот производится одновременно из двух и более биологических образцов.
3. Способ по п.1, характеризующийся тем, что одноразовые модули представляют собой отдельные элементы, закрепленные на вращающейся платформе, либо модули скомпонованы в виде сплошного блока, вращающегося вокруг центральной оси.
4. Способ по п.2, характеризующийся тем, что выделение и очистка нуклеиновых кислот из каждого биологического образца происходит в отдельном модуле.
5. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве биологических образцов используют цельную кровь, сыворотку крови, плазму крови, слюну или культуральные жидкости, содержащие клетки, микроорганизмы и/или вирусные частицы.
6. Способ по п.1, характеризующийся тем, что все стадии обработки биологических образцов осуществляются в одноразовых модулях, изолированных от внешней среды.
7. Способ по п.1, характеризующийся тем, что каждый модуль содержит резервуар с сухой реакционной смесью первого лизирующего буфера, содержащего лизоцим или его аналоги, резервуар с сухой реакционной смесью второго лизирующего буфера, содержащего хаотропный агент, протеолитический фермент и детергент, резервуар с сухой реакционной смесью промывочного буфера, содержащего хаотропный агент, резервуар, содержащий твердофазный сорбент, резервуары, содержащие воду, спирт и водно-спиртовые смеси, резервуар для сбора отходов, резервуар для сбора очищенных продуктов, каналы и полости-разделители жидкостных потоков.
8. Способ по п.1, характеризующийся тем, что на стадии (а) при попадании биологического образца в резервуар с сухой реакционной смесью первого лизирующего буфера, содержащего лизоцим или его аналоги, одновременно происходит растворение сухой реакционной смеси буфера и осуществляется первая стадия лизиса.
9. Способ по п.1, характеризующийся тем, что на стадии (б) после поступления образца после первой стадии лизиса в резервуар с сухой реакционной смесью второго лизирующего буфера, содержащего хаотропный агент, протеолитический фермент и детергент, одновременно происходит растворение сухой реакционной смеси буфера, и осуществляется вторая стадия лизиса.
10. Способ по п.1, характеризующийся тем, что растворение сухой реакционной смеси промывочного буфера, содержащего хаотропный агент, происходит при поступлении водно-спиртовой смеси в соответствующий резервуар.
11. Способ по п.8, характеризующийся тем, что первая стадия лизиса клеток, микроорганизмов и вирусных частиц с использованием первого лизирующего буфера, содержащего лизоцим или его аналоги (стадия (а)), проводится при перемешивании и нагревании.
12. Способ по п.9, характеризующийся тем, что вторая стадия лизиса клеток, микроорганизмов и вирусных частиц с использованием второго лизирующего буфера (стадия (б)), проводится при перемешивании и нагревании.
13. Способ по п.10, характеризующийся тем, что растворение сухой реакционной смеси промывочного буфера проводится при перемешивании.
14. Способ по п.1, характеризующийся тем, что на стадиях (д) и (е) растворы после прохождения через твердофазный сорбент попадают в полость-разделитель жидкостных потоков, из которого растворы после промывки твердофазного сорбента направляются в резервуар для сбора отходов, а очищенный препарат нуклеиновых кислот после элюции с твердофазного сорбента - в резервуар для сбора очищенных продуктов.
15. Способ по п.14, характеризующийся тем, разделение потоков в полости-разделителе осуществляется при вращении платформы с одноразовыми модулями.
16. Способ по п.15, характеризующийся тем, что разделение потоков в полости-разделителе осуществляется под действием центробежной силы и силы Кориолиса при вращении платформы с одноразовыми модулями в разных направлениях, и на стадии (е) направление вращения платформы меняется на противоположное по сравнению со стадией (д), что обеспечивает разделение потоков, при котором растворы после промывки твердофазного сорбента направляются в резервуар для сбора отходов, а очищенный препарат нуклеиновых кислот после элюции с твердофазного сорбента - в резервуар для сбора очищенных продуктов.
17. Способ по п.1, характеризующийся тем, что в качестве хаотропного агента, входящего в состав лизирующего буфера и буфера для промывки, используют гуанидинтиоцианат или гуанидингидрохлорид.
18. Способ по п.1, характеризующийся тем, что твердофазный сорбент для связывания нуклеиновых кислот выбирают из группы сорбентов, включающей силикагели, стекловолоконные фильтры, химически модифицированное стекло.