Структурно-функциональные изменения почек при моделировании отравления ядом гадюки обыкновенной

ленном действии аргинина на бластогенез лимфоцитов. Соответственно он способствует процессам пролиферации лимфоидной ткани, обладая трофическим свойством [7, 8]. Сходные данные были получены и в представленной экспериментальной работе с аргинином (см. рис. 5). В то же время, изолейцин, лейцин и лизин в отсутствие митогена могут в слабой степени стимулировать пролиферативный ответ мононуклеаров, но при наличии фитогемагглюти-нинаони подавляют включение тритий-тимидина в синтез ДНК в этих клетках (см. рис. 5).

Таким образом, из предварительных результатов проведенной работы следует, что только аргинин обладает выраженным стимулирующим влиянием на пролиферацию лимфоцитов, которое очень похоже на действие ранних лимфоидных элементов Тс1Т+-клеток в процессе физиологической пролиферации (трофический эффект).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

1. Влияние соевого изолята Supro 760 на функциональное состояние иммунной системы может быть как положительным, так и отрицательным.

2. Эффект влияния соевого изолята Supro 760 зависит от общего состояния иммунной системы пациента и дозы применяемой добавки.

3. Необходима разработка иммунологических критериев применения Supro 760.

4. Необходима разработка методов, позволяющих in vitro подбирать адекватную дозу соевого изолята Supro 760.

5. Пациенты, применяющие соевый изолят Supro 760, должны неукоснительно соблюдать рекомендации диетолога.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Григорьева Н.Д., Кучер А.Г., Спиридонов В.Н., Васильев А.Н. Динамика концентрации общего белка и альбумина сыворотки крови у больных, находящихся на хроническом гемодиализе при длительном приеме соевого изолята "Supro 760" // Нефрология. —1999.—Т. 3, № 1.— С. 83-88.

2. Кучер А.Г. Проблемы лечебного питания у больных с хронической почечной недостаточностью // Нефрология. —1997. —Т. 1, № 1. -С. 39— 46.

3. Кучер А.Г., Есаян A.M., Шишкина Л.И. и др. Влияние нагрузок растительными и животными белками на функциональное состояние почек у здоровых людей // Нефрология. — 1997. —Т. 1, № 2. —С.79—84.

4. Ракитянская И.А., Кришталь Т.Ю., Никитина Н.А. Показатели клеточного звена иммунитета больных хроническим гломерулонефритом при развитии и прогресси-ровании хронической почечной недостаточности // Сборник научных трудов СПбМИ. — СПб., 1993. —С. 93.

5. Ракитянская И.А., Кришталь Т.Ю., Никитина Н.А. Изменения иммунологических показателей у больных ХПН при длительном лечении гемодиализом // Сборник научных трудов СПбМИ. — СПб., 1993. —С. 98.

6. Рябов С.И. Современные подходы к лечению гемодиализом больных с хронической почечной недостаточностью//Нефрология. — 1999. —Т. 3, № 1. —С. 8—13.

7. Barbul A., Lazarou S.A., Efron D.T. et al. Arginine enhances wound healing end lymphocyte immune responses in humans// Surgery. -1990. —Vol. 108, № 2. — P. 331—337.

8. Barbul A., Sisto D.A., Wasserkrug H.L., Efron G. Arginine stimulates lymphocyte immune response in healthy human beings // Surgery. —1981. — Vol. 90, № 2. —P. 244—251.

9. Reynolds J. V., Daly J.M., Zhang S. et al. Immunomodulatory mechanisms of arginine // Surgery. — 1988.—Vol. 104, №2.—P. 142-151.

Поступила в редакцию 22.11.99 г.

© Коллектив авторов, 2000 УДК 616.61-018-08:616-099.598.126

О.Е.Амелехина, Р.В.Бабахапян, А.Е.Сафрай, О.Д.Ягмуров

CTPYKWPHO-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ изменения почек при МОДЕЛИРОВАНИИ ОТРАВЛЕНИЯ ЯДОМ ГАДЮКИ ОБЫКНОВЕННОЙ

O.E.Amelekhina, R.V.Babakhanyan, A.E.Safray, O.D.Yagmourov

STRUCTURAL-FUNCTIONAL ALTERATIONS IN KIDNEYS IN MODELING VIPERA BERUS VENOM POISONING

Кафедры судебной медицины и правоведения, патологической анатомии Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П.Павлова, Россия

РЕФЕРАТ

Проведено комплексное гистологическое и гистохимическое исследование почек при моделировании отравлений ядом гадюки обыкновенной в эксперименте. Доказано наличие морфологических признаков нефротоксического эффекта яда гадюки. Изменения активности ферментативных процессов (ЛДГ, СДГ, ЩФ) свидетельствуют об изменении тканевого дыхания в клетках эпителия проксимальных и дистальных канальцев. Сделан вывод о диагностической значимости установленных изменений и необходимости их учета при лечении отравления.

Ключевые слова: гадюка обыкновенная, нефротоксический эффект. ABSTRACT

A combines histological and histochemical study of the kidneys was carried out as part of an experimental model of Vipera berus venom poisoning. The nephrotoxic effect of Vipera berus venom was found to have morphological signs. Changes in the enzyme activity (LDG, SDG, AF) evidence changed tissue respiration In the epithelial cells of proximal and distal tubules. A conclusion is made of a diagnostic significance of the above changes. They should be taken into account during treatment of the venomous snake's bites.

Key words: Vipera berus, nephrotoxic effect.

ВВЕДЕНИЕ

Ядовитые змеи, укусы которых могут вызвать отравления, в том числе и смертельные, широко распространены в различных странах мира. Одной из наиболее часто встречающихся на территории России, в частности, в Ленинградской области является гадюка обыкновенная (Vipera berus) [1,3,6].

Отличительной особенностью отравлений ядами гадюк является преобладание в клинической картине интоксикации явлений геморрагического отека с появлением пузырей и некроза тканей в зоне инокуляции яда. Местные изменения в области укуса резко выражены, быстро прогрессируют и во многом определяют степень общей интоксикации, которая может сопровождаться явлениями сердечно-сосудистой недостаточности, в тяжелых случаях и шока. При тяжелых формах отравлений возможно появление клинических признаков острой почечной недостаточности, с олигурией, иногда переходящей в анурию [1—5, 7].

Следует отметить, что в литературных источниках отсутствуют данные, объясняющие клини-ко-морфологическую картину при отравлениях

ядом гадюки обыкновенной, что послужило поводом для настоящего исследования.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Клиническая часть работы основана на анализе 215 карт стационарных больных, находившихся на специализированном лечении по поводу отравлений, возникших вследствие укусов гадюкой обыкновенной.

Материалом для эксперимента явились 20 половозрелых беспородных крыс-самцов массой 100-120 г. Яд гадюки обыкновенной вводили подкожно в дозе 2LD50 из расчета 1 мг на 100 г массы. Контрольной группе животных вводили аналогичный объем физиологического раствора.

Для гистологического исследования кусочки почек забирали непосредственно после наступления летального исхода и фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Парафиновые срезы толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, эритрозином, оранжевым-красным-голубым (по Зербино); замороженные срезы окрашивали смесью суданов III и IV.

Рис. 1. Полнокровие капиллярных петель клубочка, очаговое кровоизлияние и зернистая дистрофия эпителия канальцев.

Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 400.

Количественные гистохимические исследования проводили на 10 мкм криостатных срезах. Проводили реакции на сукцинатдегидрогеназу (СДГ), лактатдегидрогеназу (ЛДГ) по Нахласу и Зелигману, а также на щелочную фосфатазу (ЩФ) методом азосочетания. Количественное определение активности ферментов производили методом прямой цитофотометрии в апикальных и базальных отделах цитоплазмы клеток эпителия проксимальных и дистальных канальцев.

Статистическую обработку проводили на персональном ЕВМ-совместимом компьютере с использованием профилированного пакета "вВ БТАГСКАРтС".

РЕЗУЛЬТАТЫ

Анализ 215 карт стационарных больных показал, что клиническая картина отравления при укусах гадюкой обыкновенной складывалась из общих и местных признаков интоксикации.

Степень тяжести интоксикации в 165 случаях (77,7%) оценивали как легкую, клиническая картина в этих случаях ограничивалась местны-

Рис. 2. Десквамация клеток эпителия проксимальных канальцев и очаговый тубулорексис.

Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 400.

ми проявлениями. В 46 случаях (21,4%) отмечали среднюю степень отравления, характеризующуюся как местными, так и общими признаками отравления. У 4 пациентов (1,86%) наблюдали тяжелую степень отравления. У этой категории больных общие проявления интоксикации выходили на первый план.

Местные симптомы отравления проявлялись болями, отеком и гиперемией в местах укусов, а также ограничением движений в близлежащих суставах, синюшностыо, уплотнением и припухлостью мягких тканей, увеличением регионарных лимфатических узлов, общие симптомы — слабостью, тошнотой, головокружением, иногда головной болью и рвотой.

Среди лабораторных исследований обращало на себя внимание появление следов белка в общих анализах мочи, которое встречалось в 15 случаях (7%).

Гистологическое исследование почек экспериментальных животных выявило значительные структурные изменения, среди которых доминировали расстройства микроциркуляции в виде резкого полнокровия артерий и капилляров.

о.з -

0.25

0,2-

0.15 •

0.1

0,05

0  а

Е

3.35 у 0.3 -0,25 • 0,2  0.15 -0.1  0.05 0 4-в

лдг

Прюксимагы«^« канап>цы

Дисхагышв

КАНВГЪЦЫ

ЩФ

Рис. 3. Изменения активности гистохимических реакций в эпителии проксимальных и дистальных канальцев экспериментальных животных при моделировании отравлений ядом гадюки обыкновенной.

а — лаюгатдегидрогеназа (ЛДГ); б — сукцинатдегидрогеназа (СДГ); в — щелочная фосфатаза (ЩФ); по оси абсцисс — темные столбики — контроль; светлые — опыт; по оси ординат — Е — условная единица оптической плотности.

Прокемдагьные канагъцы

Дистагъныв икагьиы

В некоторых случаях отмечались признаки слад-жа. В отдельных капиллярах стромы отмечались стазы и агрегация эритроцитов с формированием фигур "монетных столбиков". Изменений клу-бочкового аппарата выявлено не было.

В канальцах выявляли набухание цитоплазмы клеток эпителия проксимальных канальцев и ее зернистость, особенно в апикальных отделах, где наблюдались немногочисленные мелкие вакуоли. Клеточные каемки представляются подчеркнутыми. Просветы части проксимальных канальцев имели звездчатую форму. Отмечались дес-квамация клеток эпителия проксимальных канальцев и очаговый тубулорексис (рис. 1,2).

Гистохимическое исследование активности ферментативных процессов показало почти двукратное снижение активности всех исследуемых ферментов в нефротелии как проксимальных, так и дистальных канальцев. Чувствительными к действию яда гадюки обыкновенной оказались ферменты аэробного (СДГ), анаэробного (ЛДГ) гликолиза и маркер транспортных процессов — ЩФ (рис. 3).

ОБСУЖДЕНИЕ

Проведенное исследование показало, что острое отравление ядом гадюки обыкновенной вызывает дисциркуляторно-дистрофические изменения в эпителии проксимальных канальцев и значительное снижение активности изученных ферментов проксимальных и дистальных канальцев. Указанные изменения свидетельствуют о повреждении ферментных систем функционально активных клеток, наиболее чувствительных к воздействию яда.

Характер и выраженность дистрофических изменений проксимальных канальцев, а также десквамация клеток эпителия, свидетельствуют о значительных структурных нарушениях в зоне базальных отростков. Это коррелирует с гистохимическими изменениями, указывающими на нарушения процессов окислительного фосфори-лирования на внутренней мембране митохондрий (снижение активности СДГ и ЛДГ), располагающихся в базальных отделах клеток и энергетически обеспечивающих процессы реабсорбции белка и ионные насосы.