СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ АДОПТИВНОЙ Т-КЛЕТОЧНОЙ ТЕРАПИИ, ВКЛЮЧАЮЩЕЙ ИНДУЦИРОВАННУЮ ПЕРЕДАЧУ СИГНАЛА NOTCH

N
N
1. Способ культивирования «необученной» T(T)-клетки in vitro, включающий воздействие на «необученную» T(T)-клетку среды, содержащей агонист рецептора Notch, в течение периода времени, достаточного для индуцирования передачи сигнала рецептора Notch в клетке.
N
N
2. Способ культивирования «необученных» T(T)-клеток in vitro, включающий воздействие на популяцию «необученных» T(T)-клеток среды, содержащей агонист рецептора Notch, в течение периода времени, достаточного для индуцирования передачи сигнала рецептора Notch в клетке.
N
N
3. Способ по п. 2, где популяция T-клеток составляет по меньшей мере приблизительно 40%, по меньшей мере приблизительно 50%, по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере, приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% T-клеток.
N
4. Способ по п. 2, где популяция составляет приблизительно от 40% до приблизительно 90%, приблизительно от 50% до приблизительно 90%, приблизительно от 60% до приблизительно 90%, приблизительно от 70% до приблизительно 90%, приблизительно от 80% до приблизительно 90%, приблизительно от 40% до приблизительно 80%, приблизительно от 50% до приблизительно 80%, приблизительно от 60% до приблизительно 80%, приблизительно от 70% до приблизительно 80%, приблизительно от 40% до приблизительно 70%, приблизительно от 50% до приблизительно 70%, приблизительно от 60% до приблизительно 70%, приблизительно от 40% до приблизительно 60%, приблизительно от 50% до приблизительно 60% или приблизительно от 40% до приблизительно 50% T-клеток.
5. Способ по любому из пп. 1-4, где Т-клетка дополнительно характеризуется как CD62L+, CD45RA+, CD45RO-, CD95- и/или CCR7+.
6. Способ по любому из пп. 2-5, где воздействие продолжается в течение периода времени («времени воздействия») по меньшей мере приблизительно 12 часов, по меньшей мере приблизительно один день, по меньшей мере приблизительно два дня, по меньшей мере приблизительно три дня, по меньшей мере приблизительно четыре дня, по меньшей мере приблизительно пять дней, по меньшей мере приблизительно шесть дней, по меньшей мере приблизительно одну неделю, по меньшей мере приблизительно восемь дней, по меньшей мере приблизительно девять дней, по меньшей мере приблизительно десять дней, по меньшей мере приблизительно 11 дней, по меньшей мере приблизительно 12 дней, по меньшей мере приблизительно 13 дней, по меньшей мере, приблизительно 14 дней, по меньшей мере, приблизительно 15 дней, по меньшей мере, приблизительно 16 дней, по меньшей мере, приблизительно 17 дней, по меньшей мере, приблизительно 18 дней, по меньшей мере, приблизительно 19 дней, по меньшей мере, приблизительно 20 дней, по меньшей мере, приблизительно 21 день, по меньшей мере приблизительно 22 дня, по меньшей мере приблизительно 23 дня, по меньшей мере приблизительно 24 дня, по меньшей мере приблизительно 25 дней, по меньшей мере приблизительно 26 дней, по меньшей мере приблизительно 27 дней, по меньшей мере приблизительно 28 дней, по меньшей мере приблизительно 29 дней, по меньшей мере приблизительно 30 дней или по меньшей мере приблизительно один месяц.
7. Способ по п. 6, где время воздействия составляет от одного дня до 15 дней или от двух дней до 10 дней.
N
8. Способ по любому из пп. 2-7, где процентное содержание T-клеток в популяции не изменяется после воздействия.
N
9. Способ по любому из пп. 2-7, где процентное содержание T-клеток в популяции изменяется после воздействия менее, чем приблизительно на 1%, менее, чем приблизительно на 2%, менее, чем приблизительно на 5%, менее, чем приблизительно на 10%, менее, чем приблизительно на 15%, менее, чем приблизительно на 20%, менее, чем приблизительно на 25%, менее, чем приблизительно на 30%, менее, чем приблизительно на 35%, менее, чем приблизительно на 40%, менее, чем приблизительно на 45% или менее, чем приблизительно на 50%.
N
10. Способ по любому из пп. 2-9, где процент T-клеток в популяции составляет: (i) по меньшей мере приблизительно 40% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 40% после воздействия; (ii) по меньшей мере приблизительно 50% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 40% после воздействия; (iii) по меньшей мере приблизительно 50% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 50% после воздействия; (iv) по меньшей мере приблизительно 50% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 60% после воздействия; (v) по меньшей мере приблизительно 60% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 50% после воздействия; (vi) мо меньшей мере приблизительно 60% до воздействия и мо меньшей мере приблизительно 60% после воздействия; (vii) по меньшей мере приблизительно 60% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 70% после воздействия; (viii) по меньшей мере приблизительно 70% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 60% после воздействия; (ix) по меньшей мере приблизительно 70% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 70% после воздействия; (x) по меньшей мере приблизительно 70% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 80% после воздействия; (xi) по меньшей мере приблизительно 80% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 70% после воздействия; (xii) по меньшей мере приблизительно 80% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 80% после воздействия; (xiii) не менее 80% до воздействия и не менее 90% послеразоблачение; (xiv) по меньшей мере приблизительно 90% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 80% после воздействия; (xv) по меньшей мере приблизительно 90% до воздействия и по меньшей мере приблизительно 90% после воздействия; или (xvi) мо меньшей мере приблизительно 90% до воздействия и приблизительно 100% после воздействия.
N
N
N
11. Способ по любому из пп. 1-10, где T-клетка, популяция T-клеток или одна или более их дочерных клеток сохраняют свое менее дифференцированное состояние in vivo по меньшей мере в 1,2 раза, по меньшей мере в 1,3 раза, по меньшей мере в 1,4 раза, по меньшей мере в 1,5 раза, по меньшей мере в 1,6 раза, по меньшей мере в 1,7 раза, по меньшей мере в 1,8 раза, по меньшей мере в 1,9 раза, по меньшей мере в 2,0 раза, по меньшей мере в 2,2 раза, по меньшей мере в 2,3 раза, по меньшей мере в 2,4 раза, по меньшей мере в 2,5 раза, по меньшей мере в 2,6 раза, по меньшей мере в 2,7 раза, по меньшей мере в 2,8 раза, по меньшей мере в 2,9 раза, по меньшей мере в 3 раза, по меньшей мере в 3,5 раз, по меньшей мере в 4,0 раза, по меньшей мере в 4,5 раза, по меньшей мере в 5,0 раза, по меньшей мере в 5,5 раза, по меньшей мере в 6,0 раза, по меньшей мере в 6,5 раза или, по меньшей мере в 7,0 раз по сравнению с T-клеткой, в которую не вводили агонист рецептора Notch.
12. Способ по любому из пп. 1-11, где агонист рецептора Notch включает домен лиганда рецептора Notch млекопитающего, который связывается с рецептором Notch1, Notch2, Notch3 или Notch4 млекопитающего.
13. Способ по любому из пп. 1-12, где агонист рецептора Notch представляет собой или включает белок Delta, белок Jagged, антитело против Notch или его фрагмент или производное, которые связываются с рецептором Notch млекопитающих, или любую их комбинацию.
14. Способ по любому из пп. 1-13, где агонист рецептора Notch при связывании с рецептором Notch способен индуцировать конформационное изменение рецептора Notch.
15. Способ по любому из пп. 1-14, где агонист рецептора Notch при связывании с рецептором Notch способен презентировать сайт расщепления S2 в негативной регуляторной области (NRR) рецептора Notch.
16. Способ по любому из пп. 13-15, где агонист рецептора Notch включает внеклеточный домен белка Delta или белка Jagged.
17. Способ по п. 13, где агонист рецептора Notch представляет собой или содержит Delta-подобный лиганд 1 (DLL1), Delta-подобный лиганд 3 (DLL3), Delta-подобный лиганд 4 (DLL4), Jagged1, Jagged2, Dlk1, Dlk2, DNER, EGFL 7, F3/контактин, его фрагмент, его производное или любую их комбинацию.
18. Способ по п. 17, где агонист рецептора Notch представляет собой или включает DLL1, DLL3 и/или DLL4.
19. Способ по п. 17, где агонист рецептора Notch представляет собой или включает Jaggedl и/или Jagged2.
20. Способ по п. 13, где агонист рецептора Notch представляет собой или включает антитело против Notch или его антигенсвязывающий фрагмент.
21. Способ по п. 20, где антитело против Notch или его антигенсвязывающий фрагмент связывается с эпитопом во внеклеточном домене Notch (NECD), который не находится в негативной регуляторной области (NRR) рецептора Notch.
22. Способ по п. 20, где антитело против Notch связывается с Notch1, Notch2, Notch3 и/или Notch4.
23. Способ по любому из пп. 1-22, где агонист рецептора Notch присутствует в концентрации приблизительно от 0,01 мкг/мл до приблизительно 100 мкг/мл.
24. Способ по любому из пп. 1-23, где агонист рецептора Notch иммобилизован на поверхности или остове.
N
N
25. Способ по п. 23, где T-клетку или популяцию T-клеток подвергают воздействию среды в концентрации, достаточной для контактирования, в основном, с целым иммобилизованным агонистом рецептора Notch.
N
26. Способ по любому из пп. 1-25, где среда дополнительно содержит один или более цитокинов или их биологически активный фрагмент, которые модулируют дифференцировку T-клеток.
27. Способ по п. 26, где один или более цитокинов включают IL-1, IL-1b, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-10, IL-12, IL-15, IL-17, IL-21, IL-23, IL-27, IFN-γ, TNF-α, TGFβ или любую их комбинацию в эффективной концентрации.
N
N
28. Способ по любому из пп. 1-27, где T-клетку или популяцию T-клеток получают от одного или более индивидуумов-источников перед воздействием среды.
N
29. Способ по любому из пп. 1-28, дополнительно включающий выделение T-клетки, популяции TN-клеток или одной или более их дочерних клеток из среды после воздействия.
N
30. Способ по п. 29, где по меньшей мере приблизительно 40%, по меньшей мере приблизительно 50%, по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере, приблизительно 95% или по меньшей мере приблизительно 99% популяции T-клеток или одной или более их дочерних клеток после воздействия составляют T-клетки, охарактеризованные как CD62L+ и CD45RO-.
N
N
31. Способ по любому из пп. 1-30, дополнительно включающий трансдукцию T-клетки, популяции T-клеток или одной или более их дочерних клеток гетерологичной молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, кодирующую иммунный рецептор.
32. Способ по п. 31, где иммунный рецептор представляет собой рецептор антигена, который содержит внеклеточный домен, специфически связывающийся с представляющим интерес антигеном, где внеклеточный домен функционально связан с внутриклеточным доменом, который активирует T-клетки при связывании внеклеточного домена с представляющим интерес антигеном.
33. Способ по п. 31, где иммунный рецептор представляет собой Т-клеточный рецептор (TCR), который специфически связывается с представляющим интерес пептидом, связанным с молекулой главного комплекса гистосовместимости (MHC).
N
N
34. Способ по любому из пп. 29-33, дополнительно включающий введение T-клетки, популяции T-клеток или одной или более их дочерних клеток индивидууму, нуждающемуся в этом.
N
35. Способ in vitro создания T-клетки, экспрессирующей гетерологичный иммунный рецептор, где указанный способ включает:
осуществление способа по любому из пп. 1-30; и
N
во время стадии воздействия, трансдукцию T-клетки гетерологичной молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность, кодирующую иммунный рецептор.
36. Способ по п. 35, где иммунный рецептор содержит внеклеточный домен, который специфически связывается с представляющим интерес антигеном, где внеклеточный домен функционально связан с внутриклеточным доменом, который активирует T-клетки после связывания внеклеточного домена с представляющим интерес антигеном.
37. Способ по п. 35, где иммунный рецептор представляет собой Т-клеточный рецептор (TCR), который специфически связывается с представляющим интерес пептидом, связанным с молекулой главного комплекса гистосовместимости (MHC).
38. Способ по одному из пп. 35-37, дополнительно включающий введение Т-клетки или одной или более дочерних Т-клеток индивидууму, нуждающемуся в этом.
39. Способ адоптивной клеточной терапии, включающий введение терапевтически эффективного количества клеток, продуцируемых способом по любому из пп. 1-30 и 32-37, индивидууму, нуждающемуся в этом.
40. Способ по п. 39, где индивидуум имеет заболевание, выбранное из рака, инфекционного заболевания и аутоиммунного заболевания.
41. Т-клетка, полученная любым из способов по пп. 1-33 и 35-37.
42. Терапевтическая композиция, содержащая множество клеток по п. 41 и эффективный носитель.
N
N
43. Способ по любому из пп. 1-40, где T-клетка или популяция T-клеток экспрессируют химерный антигенный рецептор.
N
N
N
N
44. Способ уменьшения или предотвращения истощения T-клетки, экспрессирующей химерный антигенный рецептор, или популяции T-клеток, экспрессирующих химерный антигенный рецептор, где указанный способ включает воздействие на T-клетку или популяцию T-клеток среды, содержащей агонист рецептора Notch, в течение периода времени, достаточного для индуцирования передачи сигнала рецептора Notch в клетке.
N
N
N
N
N
45. Способ получения T-клетки или популяции T-клеток, экспрессирующих химерный антигенный рецептор, где указанный способ включает модификацию T-клетки или популяции T-клеток для экспрессии химерного антигенного рецептора в среде, содержащей агонист рецептора Notch, где агонист рецептора Notch уменьшает или предотвращает истощение T-клетки.
46. Способ по любому из пп. 1-40 и 43-45, где агонист рецептора Notch представляет собой антитело против Notch.