ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО, СТИМУЛИРУЮЩЕЕ ЗАЩИТНЫЕ СИЛЫ ОРГАНИЗМА, И СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ВТОРИЧНЫХ ИММУНОДЕФИЦИТОВ С ЕГО ПРИМЕНЕНИЕМ
MEDICINE STIMULATING PROTECTIVE POWERS OF ORGANISM, AND METHOD OF CORRECTION OF SECONDARY IMMUNODEFICIENCIES WITH ITS APPLICATION

Изобретение относится к ветеринарии, касается сбора лекарственных растений, стимулирующего защитные силы организма, и может быть использовано в фармакологических целях для коррекции вторичных иммунодефицитов у молодняка сельскохозяйственных животных, преимущественно телят, и стимуляции сопротивляемости их организма вредным воздействиям внешней среды, инфекциям и другим неблагоприятным факторам.
В основе пониженной сопротивляемости организма животных лежат иммунодефициты, на фоне которых животные заражаются бактериальными и вирусными патогенами, а воспалительные процессы чаще протекают с необратимыми морфологическими нарушениями в клетках органов и тканей.
1
12
Из биологически активных веществ, разнообразных по своему происхождению, физико-химическим, физиологическим свойствам и влиянию на организм животных, в частности на состояние обмена веществ и на факторы неспецифической резистентности, широкое применение нашли препараты синтетических аминокислот (лизин, метионин, триптофан), жирорастворимые витамины (каротин, A, D, E, K), водорастворимые витамины (группы B…B, C, H, F, U), соли дефицитных микроэлементов [1]. Повышение общей сопротивляемости организма наблюдается под влиянием препаратов на основе растительного сырья: группы адаптогенов (женьшень, элеутерококк, родиола розовая, эхинацея пурпурная, заманиха и др.); группы фитонцидов (лук, чеснок, хрен, почки сосны и др.); группы лекарственных растений, содержащей витамин C (дягиль лекарственный, календула лекарственная, крапива двудомная, мать-и-мачеха, мята перечная, одуванчик лекарственный и др.) [2]. Препараты из растительного сырья являются более предпочтительными, поскольку биохимические процессы, происходящие в растительном и животном организмах, сходны, сходны промежуточные и конечные продукты обмена. Однако большая часть этих препаратов избирательно действует на отдельные показатели иммунитета. Этот недостаток частично устраняется комплексными лекарственными препаратами на основе лекарственных растений, например, препаратом растительного происхождения тетраиммунофитом - фито-экстракционным препаратом из травы зверобоя, листа сены, плодов шиповника и корнеплодов свеклы, обладающим иммуностимулирующим действием на гуморальный иммунный ответ [3], препаратом «Реглидис» (лекарственным сбором, содержащим плоды шиповника, корень и корневище солодки и траву копеечника) [4] и средством, обладающим иммуностимулирующим действием, представляющим собой водный экстракт из трав зверобоя продырявленного, тимьяна ползучего, мяты перечной и мать-и-мачехи, взятых в равных количествах [5].
Технический результат заключается в создании нового лекарственного средства с расширенным спектром действия, обладающего иммуномодулирующим, противовоспалительным и антимикробным действием, что обеспечивает стимуляцию защитных сил организма, на основе фармакологически активных веществ из растений.
Получение указанного результата достигается использованием настойки из измельченной растительной смеси равных количеств травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, которую заливают этиловым спиртом 70% концентрации при соотношении 1:10, выдерживают в темном месте при температуре 15-20°С в течение 7 суток, процеживают, отжимая сырье, и фильтруют.
Используемые ингредиенты лекарственного средства широко применяются в фитотерапии. Обоснованием для выбора компонентов композиции послужили данные о фармакологических свойствах и химическом составе лекарственного растительного сырья. Каждый компонент содержит биологически активные вещества, одновременно активизирующие внутриклеточный метаболизм и обмен веществ, а также обладающие выраженным антимикробным действием на патогенную и условно патогенную микрофлору.
Трава и соцветия эхинацеи пурпурной обладают иммуномодулирующей активностью, подавляют активность гиалуронидазы - фермента, способствующего повышению проницаемости для вирусов и микробов, увеличивают противомикробную активность лейкоцитов, макрофагов и нейтрофилов крови и повышают синтез защитных антител и эндогенного интерферона.
Трава гармалы обыкновенной обладает выраженной антимикробной активностью, подтвержденной фармакологическими исследованиями.
Цветы липы мелколистой обладают иммуномодулирующими эффектами, которые проявляются в действии на гуморальные и клеточные механизмы иммунитета, миграцию лимфоцитов, синтез интерферона и систему комплемента.
Корни солодки голой обладают антиоксидантной активностью, гепатозащитным действием, способствуют восстановлению угнетенного иммунного статуса.
Химический состав лекарственного средства представлен комплексом биологически активных веществ, обеспечивающих его высокий фармакотерапевтический эффект. Доминирующими биологически активными веществами являются: фенольные соединения, флавоноиды, полисахариды, алкалоиды, дубильные вещества, витамины, микроэлементы, главными из которых можно считать цинк, селен и железо.
Флавоноиды (содержат все компоненты) ингибируют фермент катехол-орто-метилтрансферазу и обеспечивают адаптационно-трофическую функцию организма за счет адренопролонгирующего эффекта. Флавоноиды обладают P-витаминной (капилляроукрепляющей) активностью. В суммарном противовоспалительном эффекте флавоноидов имеет значение их непосредственное действие на клеточные и тканевые мембраны - снижение их проницаемости, уплотнение мембран лизосом, ингибирование гиалуронидазы, антагонистическое действие по отношению к медиаторам воспаления [8].
Полисахариды (содержат все компоненты) оказывают противовоспалительное, иммунокорригирующее действие. Они стимулируют неспецифический иммунитет и фагоцитоз, деятельность макрофагов и нейтрофилов, а также бактерицидную функцию клеток.
Фенольные соединения (содержат все компоненты) оказывают противомикробное действие, механизм которого обусловлен их способностью сорбироваться компонентами цитоплазматической мембраны бактерий, образовывать прочные водородные связи с белками и повреждать мембрану, в частности повышая ее проницаемость для ионов (прежде всего, калия) и важных метаболитов, теряемых клеткой, а также для воды, поступающей извне и способствующей лизису.
78% от общего количества алкалоидов, содержащихся в траве гармалы обыкновенной, составляет пеганин. Фармакологические исследования показали, что 1%-ный и 10%-ный настои травы гармалы обыкновенной обладают высокой противостафилококковой активностью, а 0,25%-ный раствор пеганина - высокой антимикробной активностью.
Дубильные вещества (солодка голая - до 9,46%, липа мелколистная - не менее 8,0%), проявляя мембраностабилизирующий эффект, восстанавливают процессы репарации в гепатоцитах и улучшают работу антиоксидантной системы печени.
Витамины (витамин C - цветы липы мелколистной, эхинацея пурпурная; витамин E - солодка голая, витамин A - эхинацея пурпурная) участвуют во всех процессах обмена веществ, повышают устойчивость организма к заболеваниям, оказывают противовоспалительное действие, способствуют дезинтоксикации организма.
Микроэлемент цинк (липа мелколистная - 29 мкг/г, солодка голая - 0,33 мкг/г, гармала обыкновенная - 0,78 мкг/г) участвует в организме в иммунных процессах, селен (солодка голая - 12,14 мкг/г, гармала обыкновенная - 1,0 мкг/г, липа мелколистная - 0,13 мкг/г) является мощным антиоксидантом, а железо (эхинацея пурпурная - 48 мг/100 г, липа мелколистная - 0,2 мг/г, гармала обыкновенная - 0,14 мг/г, солодка голая - 0,7 мг/г) - основным структурным компонентом гемоглобина крови и гемсодержащих ферментов.
Высокая эффективность лекарственного средства достигается благодаря сочетанию целого комплекса биологически активных веществ, вследствие чего наблюдается взаимное усиление полезных фармакологических свойств каждого отдельного компонента. Так, комбинация витаминов A, C и цинка стимулирует синтез антител, сочетание флавоноидов и дубильных веществ обеспечивает гепатозащитное действие, а сочетание флавоноидов и фенологликозидов усиливает детоксикационную функцию печени.
Настойка из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой готовится фармакопейным способом в соотношении сырья к извлекателю 1:10. В качестве извлекателя используют этиловый спирт концентрацией 70%. Лекарственное сырье измельчают до частиц размером 1-3 мм, смешивают в равных количествах, навеску сырья помещают в стеклянный сосуд, добавляют расчетное количество этилового спирта концентрацией 70%, выдерживают 7 суток в темном месте при температуре 15-20°C. Затем спиртовую настойку процеживают через холст или два слоя марли, отжимая сырье, фильтруют.
Пример: в стеклянный сосуд поместили 500 г лекарственного сырья (равные количества из травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки), добавили 5,0 л этилового спирта концентрацией 70%, поставили в темное место и выдерживали при температуре 15-20°C в течение 7 суток, после чего процедили через холст, отжимая сырье, и профильтровали.
По нашим данным, в условиях хозяйств, неблагополучных по болезням телят, у клинически здорового молодняка 3-5-дневного возраста выявляются иммунодефицитные состояния, характеризующиеся снижением относительного содержания B-лимфоцитов на 56%, уровней иммуноглобулинов G и M на 13 и 64% соответственно, функциональной активности нейтрофилов крови (в спонтанном тесте - на 22%, в индуцированном тесте - на 39%), лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови на 28 и 33% соответственно, а у клинически здорового молодняка 20-дневного возраста - иммунодефицитные состояния, характеризующиеся снижением относительного содержания B-лимфоцитов на 69%, популяций и субпопуляций T-лимфоцитов на 46% с нарушением их соотношения, уровня иммуноглобулинов G и М на 46 и 44% соответственно, функциональной активности нейтрофилов крови (в спонтанном тесте - на 56%, в индуцированном тесте на 110%), бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови на 32 и 49% соответственно.
Для коррекции вторичных иммунодефицитов у телят на фоне неспецифической иммунизации применяют лекарственное средство, представляющее собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах.
Способ коррекции вторичных иммунодефицитов у телят с применением лекарственного средства, представляющего собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, на фоне неспецифической иммунизации осуществляется следующим образом.
70% спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой в виде 7-8% водного раствора, приготовленного на кипяченой охлажденной воде, применяют внутрь в дозе 1,5-2,5 мл /кг живой массы животного с интервалом в 24 часа в течение 15 дней в дополнение к подкожной инъекции неспецифического иммуноглобулина в дозе 1,0 мл/кг живой массы животного трехкратно с интервалом в 5 дней.
Сущность способа поясняется примерами.
Пример 1. Изменение иммунобиологических показателей в зависимости от параметров предлагаемого способа определяли в эксперименте на клинически здоровых телятах 5-7-дневного возраста. Отобранных методом аналогов телят распределяли на шесть групп. Телятам первых пяти групп подкожно инъецировали неспецифический иммуноглобулин в дозе 1,0 мл/кг живой массы животного трехкратно с интервалом в 5 дней, телятам первых четырех групп дополнительно применяли внутрь лекарственное средство, представляющее собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, в виде водного раствора 7% концентрации в течение 15 дней с интервалом в 24 часа в дозах 1,0, 1,5 и 2,5 и 3,0 мл/кг живой массы животного. Телята шестой группы препаратов не получали. Естественную резистентность оценивали по показателям бактерицидной активности сыворотки крови (определяли по методу О. В. Смирновой и Т. А. Кузьминой, 1966), лизоцимной активности сыворотки крови (определяли по методу В.Г.Дорофейчук, 1968) и функциональной активности нейтрофилов крови (определяли в реакции восстановления нитросинего тетразолия по А.Н.Маянскому и др., 1979), иммунный статус - по количеству Т- и В-лимфоцитов (определяли по методу Пирса, 1962) и по содержанию основных классов иммуноглобулинов IgG, IgM (определяли по методу Манчини и др., 1965). Результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1: Влияние комплексного лекарственного средства на иммунобиологические показатели и показатели общей неспецифической резистентности в зависимости от дозы
Показатели
Группы животных
Опыт
Контроль
1-я - n=14
2-я - n=15
3-я - n=15
4-я - n=14
Доза лекарственного средства, мл/кг живой массы животного
Подкожно неспецифический иммуноглобулинn=14
Препаратов не применяли n=14
1,0
1,5
2,5
3,0
в дополнение к подкожной инъекции неспецифического иммуноглобулина
T-лимфоциты, %
<img file="00000001.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000002.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000003.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000004.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000005.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000006.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
B-лимфоциты, %
<img file="00000007.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000008.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000009.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000010.tif" he="13" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000011.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000012.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Функциональная активность нейтрофилов крови, %
-спонтанный тест
<img file="00000013.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000014.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000015.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000016.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000017.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000018.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
-индуцированный тест
<img file="00000019.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000020.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000021.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000022.tif" he="13" wi="21" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000023.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000024.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Иммуноглобулины, мг/мл
G
<img file="00000025.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000026.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000027.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000028.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000029.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000030.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
M
<img file="00000031.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000032.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000033.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000034.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000035.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000036.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Лизоцимная активность сыворотки крови, %
<img file="00000037.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000038.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000039.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000040.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000041.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000042.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Бактерицидная активность сыворотки крови, %
<img file="00000043.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000044.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000045.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000046.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000047.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000048.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
Примечание: в числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - показатели через 5 дней после окончания опыта
Полученные результаты подтвердили обоснованность параметров предлагаемого способа.
Применение 70% спиртовой настойки измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, в виде 7% водного раствора в дозе 1,5-2,5 мл/кг живой массы животного обеспечивало стабильное повышение иммунобиологических показателей у телят относительно животных группы с применением неспецифического иммуноглобулина и группы без применения препаратов. Изменение значений данного параметра способа нецелесообразно, так как при их понижении иммунобиологические показатели выше, чем в группе без применения препаратов, но ниже, чем в группе с применением неспецифического иммуноглобулина, а при их повышении - сохранялись на уровне предлагаемых значений.
Пример 2. Динамику изменения иммунобиологических показателей изучали на 2 группах (опытной и контрольной) клинически здоровых телят хозяйства, длительно неблагополучного по желудочно-кишечным болезням. Телятам опытной группы подкожно инъецировали неспецифический иммуноглобулин в дозе 1,0 мл/кг живой массы животного трехкратно с интервалом в 5 дней и дополнительно применяли внутрь лекарственное средство, представляющее собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, в виде водного раствора 8% концентрации в дозе 1,5 мл/кг массы животного в течение 15 дней с интервалом в 24 часа. Телята контрольной группы препаратов не получали. Иммунобиологические показатели определяли в различные возрастные периоды и оценивали, как в примере 1. Результаты представлены в таблице 2.
Таблица 2Возрастная динамика изменения иммунобиологических показателей у клинически здоровых телят
Показатели
Возраст, сут
3
10
20
30
T-лимфоциты, %
<img file="00000049.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000050.tif" he="13" wi="21" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000051.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000052.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
B-лимфоциты, %
<img file="00000053.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000054.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000055.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000056.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
Функциональная активность нейтрофилов крови, %
спонтанный тест
<img file="00000057.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000058.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000059.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000060.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
индуцированный тест
<img file="00000061.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000062.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000063.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000064.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
Бактерицидная активность, %
<img file="00000065.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000066.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000067.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000068.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
Лизоцимная активность, %
<img file="00000069.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000070.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000071.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000072.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
Иммуноглобулины, %
IgG
<img file="00000073.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000074.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000075.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000076.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
IgM
<img file="00000077.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000078.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000079.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000080.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
Примечание: в числителе - показатели опытных, в знаменателе - показатели контрольных животных
Как видно из таблицы 2, в 3-дневном возрасте различия практически отсутствовали. У животных опытной группы к 10-дневному возрасту происходило повышение основных показателей клеточного и гуморального иммунитета, которое продолжилось до 20-дневного возраста, и в отличие от животных контрольной группы положительная тенденция сохранялась до 30-дневного возраста. Важное практическое значение имело увеличение количества В-лимфоцитов крови (на 51,0% в 10-, на 55,0% в 20- и на 51,0% в 30-дневном возрасте по сравнению с контролем) и иммуноглобулинов в сыворотке крови подопытных телят (IgG - на 25,0% в 10-, на 31,0% в 20- и на 36,0% в 30-дневном возрасте по сравнению с контролем; IgM - на 50,0% в 10-, на 17,0% в 20- и на 36,0% в 30-дневном возрасте по сравнению с контролем), что свидетельствовало о лучшей усвояемости новорожденными молозивных иммуноглобулинов и более раннем начале синтеза собственных иммуноглобулинов.
Пример 3. Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением лекарственного средства, представляющего собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, на фоне неспецифической иммунизации подкожной инъекцией неспецифического иммуноглобулина в сравнении с известными изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по желудочно-кишечным болезням телят, обусловленным воздействием на организм ассоциаций вирусов, патогенной и условно патогенной микрофлоры на фоне нарушения условий содержания и кормления стельных коров и телят. Острые желудочно-кишечные расстройства у молодняка выявляли в 2-3-дневном возрасте. У больных отмечали урежение частоты пульса и дыхания, понижение температуры тела, западение орбиты глаз, синюшность видимых слизистных оболочек, взъерошенность и тусклость шерсти, профузный понос. Заболеваемость - 50-80%, смертность - 20-30%. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 1-3-дневного возраста, которых распределяли на четыре группы по 15 голов в каждой. Телятам первой группы подкожно инъецировали неспецифический иммуноглобулин в дозе 1,0 мл/кг живой массы животного трехкратно с интервалом в 5 дней и дополнительно применяли внутрь лекарственное средство, представляющее собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, в виде 8% водного раствора в дозе 2,5 мл/кг массы животного в течение 15 дней с интервалом в 24 часа (предлагаемый способ). Телятам второй группы подкожно инъецировали неспецифический иммуноглобулин в дозе 1,0 мл/кг живой массы животного трехкратно с интервалом в 5 дней (способ-прототип). Телятам третьей группы подкожно инъецировали сыворотку реконвалесцентов в дозе 10,0 мл в течение 9 дней с интервалом в 48 часов (базовый способ). Телята четвертой группы препаратов не получали. За всеми животными наблюдали в течение 30 суток, регистрируя все случаи заболевания, характер их течения и эффективность лечения. Естественную резистентность и иммунный статус оценивали, как в примере 1.
Результаты представлены в таблицах 3 и 4.
Таблица 3Иммунобиологические показатели у телят после курса лечебно-профилактического воздействия для коррекции вторичных иммунодефицитов
Показатели
Способ лечебно-профилактического воздействия
Подкожно неспецифический иммуноглобулин и внутрь настойкаn=15
Подкожно неспецифический иммуноглобулинn=15
Подкожно сыворотка реконвалесцентовn=15
Без применения препаратовn=15
T-лимфоциты, %
<img file="00000081.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000082.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000083.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000084.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
B-лимфоциты, %
<img file="00000085.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000086.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000087.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000088.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Функциональная активность нейтрофилов крови по HCT-тесту, %:
спонтанному
<img file="00000089.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000090.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000091.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000092.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
индуцированному
<img file="00000093.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000094.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000095.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000096.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Бактерицидная активность, %
<img file="00000097.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000098.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000099.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000100.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
Лизоцимная активность, %
<img file="00000101.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000102.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000103.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000104.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Иммуноглобулины, мг/мл: IgG
<img file="00000105.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000106.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000107.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000108.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
IgM
<img file="00000109.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000110.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000111.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000112.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
Примечание: в числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - через 5 дней после окончания опыта
Таблица 4: Сравнительная эффективность предлагаемого и известных способов коррекции вторичных иммунодефицитов
Показатели
Способ коррекции
Подкожно неспецифический иммуноглобулин и внутрь настойка n=15
Подкожно неспецифический иммуноглобулин n=15
Подкожно сыворотка реконвалесцентов n=15
Без применения препаратов n=15
Заболело, голов
1
2
2
3
Форма переболевания
легкая
1
2
2
2
тяжелая
1
Профилактическая эффективность, %
93,3
86,7
86,7
80,0
Продолжительность болезни, дней
4
5-6
6-6,5
7
Установлено, что телята первой группы (предлагаемый способ) имели более высокие иммунобиологические показатели по сравнению с телятами других групп (таблица 3). Из 15 телят первой группы заболел один теленок, причем заболевание протекало в легкой форме (клиническая картина: угнетение, пониженный аппетит, кал жидкий, бежевого цвета, частота дефекаций до 5 раз в сутки) и легко поддалось лечению (на 2-й день лечения отмечено улучшение общего состояния: аппетит пришел в норму, кал приобрел более густую консистенцию; выздоровление наступало на 4-й день). Во второй и третьей группах из 15 телят заболело по 2 теленка. В обеих группах по одному теленку переболевало в тяжелой форме (клиническая картина: угнетение, отсутствие аппетита, боли на почве спазма кишечника, кал жидкий, бежевого цвета, частота дефекаций от 5 до 7 раз в сутки). У телят второй и третьей группы с легкой формой переболевания улучшение общего состояния отмечали на 4,5 и 5,5 сутки, а клиническое выздоровление - на 5 и 6 сутки соответственно, при тяжелой форме переболевания незначительное улучшение общего состояния (аппетит улучшился, кал приобрел кашицеобразную консистенцию, частота дефекаций - 5 раз в сутки) наблюдали на 5,5 и 6 сутки, а клиническое выздоровление - на 6 и 6,5 сутки соответственно (таблица 4).
Пример 4. Эффективность способа коррекции вторичных иммунодефицитов с применением лекарственного средства, представляющего собой спиртовую настойку из измельченной растительной смеси травы и соцветий эхинацеи пурпурной, травы гармалы обыкновенной, цветов липы мелколистной и корней солодки голой, взятых в равных количествах, на фоне неспецифической иммунизации подкожной инъекцией неспецифического иммуноглобулина в сравнении с известными изучали в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по респираторным болезням телят вирусно-бактериальной этиологии с заболеваемостью до 60% при летальности 15-17%. Этиологическую роль вирусов инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3 подтвердили их выявлением в сыворотке крови телят вируснейтрализующих антител к этим вирусам в 83,0 и 85,0% случаев соответственно. Бактериальная микрофлора была представлена стрептококками, сальмонеллами и стафилококками. По принципу аналогов подбирали клинически здоровых телят 10-15-дневного возраста, которых распределяли на 4 группы. Схема опыта и учет результатов, как в примере 3. Результаты представлены в таблицах 5 и 6.
Таблица 5: Иммунобиологические показатели у телят после курса лечебно-профилактического воздействия для коррекции вторичных иммунодефицитов
Показатели
Способ лечебно-профилактического воздействия
Подкожно неспецифический иммуноглобулин и внутрь настойкаn=12
Подкожно неспецифический иммуноглобулинn=12
Подкожно сыворотка реконвалесцентовn=12
Без применения препаратовn=12
Т-лимфоциты, %
<img file="00000113.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000114.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000115.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000116.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
В-лимфоциты, %
<img file="00000117.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000118.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000119.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000120.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Функциональная активность нейтрофилов крови по HCT-тесту, %:
спонтанному
<img file="00000121.tif" he="11" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000122.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000123.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000124.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
индуцированному
<img file="00000125.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000126.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000127.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000128.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Бактерицидная активность, %
<img file="00000129.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000130.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000131.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000132.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
Лизоцимная активность, %
<img file="00000133.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000134.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000135.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000136.tif" he="11" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" />
Иммуноглобулины,
мг/мл: IgG
<img file="00000137.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000138.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000139.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000140.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
IgM
<img file="00000141.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000142.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000143.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000144.tif" he="11" wi="22" img-content="undefined" img-format="tif" />
Примечание: в числителе - показатели до начала опыта, в знаменателе - через 5 дней после окончания опыта
Таблица 6: Сравнительная эффективность предлагаемого и известных способов коррекции иммунодефицитов
Показатели
Способ коррекции
Подкожно неспецифический иммуноглобулин и внутрь настойка n=16
Подкожно неспецифический иммуноглобулин n=15
Подкожно сыворотка реконвалесцентов n=16
Без применения препаратов n=15
Заболело, гол.
1
2
2
3
Форма переболевания,
легкая
1
2
2
2
тяжелая
1
Эффективность, %
93,8
86,7
87,5
80,0
Продолжительность болезни, дней
3-4
5-6
6-7
7-8
Коррекция иммунодефицитных состояний до уровня физиологической нормы (таблица 4) профилактировала развитие респираторной патологии у телят (таблица 5).
Проведенные исследования подтвердили, что предложен лекарственный препарат полифункционального действия, оказывающий благоприятное воздействие на все органы и системы организма животных. Лекарственный препарат регулирует обменные процессы и повышает резистентность организма (активация B- и T-систем, фагоцитоза), что обеспечивает коррекцию вторичных иммунодефицитов до уровня физиологической нормы. Основные свойства препарата: естественное происхождение, способность легко метаболизироваться и выводиться из организма, высокую совместимость с другими лекарственными средствами, отсутствие сенсибилизации и индуцирования иммунопатологических реакций.
Источники информации
1. Субботин В.М., Субботина С.Г., Александров И.Д. Современные лекарственные средства в ветеринарии. Ростов-на-Дону: Феникс, 2001. 600 с.
2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - Вильнюс, 1994. - 2 т.
3. Л.А.Маладзе // Ветеринария. - 1999 - №3.
4. RU 2029557 C1, 1995.
5. RU 22501101 C1, 2005.