Влияние арглабина на внеклеточные нуклеиновые кислоты и метаболиты пуринового обмена у больных местно-распространенным раком молочной железы

38

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

вводимых растворов не превышали 1,0 мл на животное при сенсибилизации и при разрешении. Интенсивность реакции оценивали по индексу Weigle.

Результаты. После сенсибилизации животных препаратом в 1ТД выявлено слабое аллергизирующее действие Ормустина, которое выражалось понижением температуры тела (> 1 °С) у 5 из 10 морских свинок. После сенсибилизации животных препаратом в 2ТД Ормустин проявил умеренные аллергизирующие свойства, которые выражались снижением температуры тела (> 2,5 °С) у 6 из 7 морских свинок, умыванием, взъерошенностью шерстного покрова. После сенсибилизации животных 5 % раствором глюкозы при разрешении Ормустином в 2ТД также выявлена слабая аллергическая реакция, которая выражалась в понижении температуры тела (> 1 °С) у 4 из 9 морских свинок.

Заключение. Ормустин обладает умеренными аллерги-зирующими свойствами.

Н.В. Ефремова, Е.К. Кречина, О. И. Ефимович, Ф.К. Мустафина, А. В. Рассадина ЭФФЕКТИВНОСТЬ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПАРОДОНТА ФГБУ «ЦНИИстоматологии и челюстно-лицевой хирургии» Минздрава России, Москва

Введение. В связи с высокой распространенностью заболеваний пародонта поиск методов антибактериальной терапии, к которым относится фотодинамическая терапия (ФДТ), является актуальным.

Цель исследования — изучение эффективности ФДТ при лечении воспалительных заболеваний пародонта.

Материалы и методы. Проведено клинико-лаборатор-ное обследование пациентов в возрасте 20—45 лет с воспалительными заболеваниями пародонта, которые были разделены на 2 группы, каждая по 60 человек: 1-я — с генерализованным хроническим пародонтитом (ХП) легкой степени; 2-я — с генерализованным ХП средней степени тяжести. Каждая группа была разделена на 3 подгруппы по 20 человек: в 1-й подгруппе проводили ФДТ с 1 % мети-леновым синим; во 2-й — ФДТ с 0,5 % фотодитазином; в 3-й — ФДТ с 1 % толуидиновым голубым. Результаты лечения оценивали с помощью полимеразной цепной реакции.

Результаты. Лечение не отразилось на частоте выявления A. actinomycetemcomitans у пациентов 3-й подгруппы. Наилучший эффект был достигнут во 2-й подгруппе. ФДТ у больных 1-й подгруппы не повлияла на частоту идентификации P. gingivalis, во 2-й подгруппе она уменьшилась в 6,5 раза, а в 3-й — в 1,5 раза. Частота выявления ДНК P. intermedia у пациентов 1-й группы до и после проведенной терапии была статистически недостоверной. Это было связано с отсутствием разницы у больных 1-й и 3-й подгрупп. Тем не менее во 2-й подгруппе были получены хорошие результаты. Такая же разница в 1,5 раза в частоте выявления ДНК T. forsythia у пациентов 1-й группы до и после лечения была статистически достоверной. Хотя в 1-й и 3-й подгруппах разница была также статистически недостоверной, у больных 2-й подгруппы T. forsythia обнаруживалась в 13 раз реже (р = 0,0001). Подобная тенденция наблюдалась и у пациентов 2-й группы. Снижение частоты

выявления ДНК A. actinomycetemcomitans, P. intermedia, P. gingivalis, T. forsythia, T. denticola после лечения было статистически недостоверным в 1-й и 3-й подгруппах. Во 2-й подгруппе после терапии все микроорганизмы идентифицировались в 2—3 раза реже.

Заключение. Таким образом, лечебные мероприятия, включающие ФДТ с 1 % метиленовым синим, не влияли на частоту выявления пародонтопатогенных видов бактерий у больных ХП легкой и средней степени. ФДТ с 0,5 % фотодитазином привела к значительному снижению бактериальной нагрузки у пациентов всех обследованных групп, в том числе к полной элиминации P. intermedia у больных ХП средней степени. В результате ФДТ с 1 % толуидиновым голубым произошло уменьшение частоты выявления пигментообразующих пародонтопатогенных видов бактерий и T. denticola. У больных ХП легкой и средней степени тяжести ФДТ с 1 % толуидиновым голубым не оказала влияния на элиминацию A. actinomycetemcomitans, P. intermedia и T. forsythia и привела к незначительному снижению частоты идентификации P. gingivalis и T. denticola.

С. С. Жумакаева1, Л.Е. Муравлева1, И.М. Омарова2,

Н.А. Кабилдина1, О.А. Пономарева1, Ю.М. Фоменко1

ВЛИЯНИЕ АРГЛАБИНА НА ВНЕКЛЕТОЧНЫЕ

НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ И МЕТАБОЛИТЫ

ПУРИНОВОГО ОБМЕНА У БОЛЬНЫХ

МЕСТНО-РАСПРОСТРАНЕННЫМ РАКОМ

МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

1КГМУ, Караганда, Республика Казахстан;

2КГП «Областной онкологический диспансер», Караганда,

Республика Казахстан

Цель исследования — изучение биохимических показателей крови больных местно-распространенным раком молочной железы (МРРМЖ) при применении арглабина.

Материалы и методы. Объектом исследования являлась кровь 27 больных с узловой формой МРРМЖ (T2N1—3M0, T3—4N0—3M0) с гистологической и иммуногистохимиче-ской верификацией в возрасте 30—75 лет. В группу контроля вошли 32 практически здоровые женщины. Больным МРРМЖ проводили 4 курса неоадъювантной монохимиотерапии арглабином (370 мг/м2, 7 дней) каждые 21 день, радикальную мастэктомию, 4 курса адъювантной химиотерапии арглабином, лучевую терапию и гормонотерапию по показаниям. Всем больным МРРМЖ проведены исследования метаболитов пуринового обмена, внеклеточных нуклеиновых кислот, кислоторастворимой фракции (КРФ).

Результаты. У больных МРРМЖ в плазме крови зафиксировано повышение выше контрольных величин всех пуриновых интермедиатов, кроме мочевой кислоты. Наиболее значимые изменения зарегистрированы в отношении содержания гуанина в крови больных: при 11В стадии - на 31 %, 111А - на 72 %, 111В - в 1,97 раза, ШС — на 24 %. У больных II стадии, получавших арглабин, содержание интермедиатов пуринового обмена уменьшилось и приблизилось к значениям контроля. У больных МРРМЖ зафиксировано достоверное снижение уровня внеклеточных нуклеиновых кислот и КРФ в плазме крови. После применения арглабина при II стадии все показатели имели выраженную тенденцию к снижению, при III стадии

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

39

в плазме крови отмечен рост уровня КРФ на 80 %. Содержание внеклеточной РНК в эритроцитах больных РМЖ имеет незначительно выраженную тенденцию к снижению, а уровень внеклеточной ДНК в эритроцитах крови больных сравним с показателем контроля. Монотерапия арглабином способствует более отчетливой нормализации содержания внеклеточных РНК и ДНК в эритроцитах крови больных.

Заключение. У больных МРРМЖ II—III стадии до начала химиотерапии отмечено резкое снижение внеклеточных нуклеиновых кислот и КРФ; монотерапия арглабином сопровождается ростом изучаемых показателей по сравнению с величинами до лечения.

Т.Н. Заботина, О.В. Короткова, А.А. Борунова, Д.В. Табаков, Ш.Г. Хакимова, М.В. Савостикова, И.К. Воротников, З.Г. Кадагидзе ИММУНОФЕНОТИП ЛИНЕЙНЫХ И МИНОРНЫХ СУБПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОЦИТОВ, ИНФИЛЬТРИРУЮЩИХ ОПУХОЛЬ, У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ФГБУ«РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва

Введение. Степень инфильтрации опухоли лимфоцитами сегодня рассматривается как благоприятный прогностический фактор эффективного ответа на проводимое лечение и общей выживаемости больных раком молочной железы (РМЖ), однако их роль в патогенезе рака до сих пор неизвестна.

Цель исследования — провести исследование иммуно-фенотипа лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, у первично-операбельных больных РМЖ.

Материалы и методы. Исследованы образцы опухолевой ткани 59 первично-операбельных больных РМЖ. Клеточные суспензии получали путем фрагментации ткани опухолей с использованием Medimachine (BD Biosciences), конгломераты удаляли фильтрацией Filcons, диаметр пор не превышал 50 мкм. Все полученные образцы подвергали цитоморфологическому контролю (цитопрепарат Cytospin, окраска по Лейшману, х 400), оценивали количество и качество опухолевых клеток, наличие лимфоидных элементов. Структуру субпопуляций клеток оценивали по связыванию с моноклональными антителами различной специфичности методом многопараметровой проточной цитометрии.

Результаты. При оценке степени инфильтрации опухолевых образцов лимфоцитами установлено, что лимфо-идные CD45+-клетки выявлялись в 100 % случаев методом проточной цитометрии, в то время как при морфологическом исследовании в ряде случаев лимфоидные элементы не были обнаружены. Содержание CD45+-лимфоцитов в полученных суспензиях сильно варьировало — от 0,1 до 28 %, среднее значение составило 3,9 ± 0,7 % (М ± m). Анализ частоты встречаемости образцов опухоли РМЖ с различной степенью инфильтрации показал, что в 50 % случаев содержание CD45+-клеток составило 1,1—9,0 %, в 36,3 % случаев оно оказалось менее 1 %, а в 13,7 % образцов ткани РМЖ количество CD45+-клеток было 10—28 %. Следует заметить, что линейная структура лимфоцитов

(Т-В-NK) не зависела от общего содержания лимфоидных клеток в ткани опухоли и составила в среднем по группе 86,8 ± 1,8 % Т-клеток с фенотипом CD45+CD3+CD19 - ; 3,29 ± 0,7 % В-клеток с фенотипом CD45+CD3 - CD19+ и 1,2 ± 0,2 % NK-клеток с фенотипом CD45+CD3 -CD16+CD56+. В структуре CD45+CD3+ Т-клеток соотношение CD4+ и CD8+ составило 1,3 ± 0,1. Эффекторное звено представлено специфическими CD3+CD8+ цитотоксически-ми Т-лимфоцитами (41,6 ± 1,8 %). При 4-цветном анализе фенотипа функционально значимых минорных субпопуляций оказалось, что более половины (54,0 ± 3,5 %) CD8 клеток имеют регуляторный фенотип CD45+CD8+CD11b - CD28 - , в то время как регуляторные СD4-лимфоциты (CD45+CD4+ CD25+highCD127+low/neg) составляют только 12,8 ± 1,5 %.

Заключение. Иммунофенотип лимфоцитов, инфильтрирующих ткань РМЖ, не зависит от степени инфильтрации опухоли. В структуре лимфоцитов, инфильтрирующих опухоль, преобладают CD3+ Т-лимфоциты, соотношение CD4/CD8 составляет 1,3 ± 0,1, фенотип эффекторных клеток соответствует цитотоксическим Т-лимфоцитам, регуляторные клетки представлены CD45+CD8+CD11b - CD28 - -лимфоцитами, но не CD45+CD4+CD25+hihCD127+low/neg.

М.П. Завелевич1, А.А. Фильченков1, С.Д. Завгородняя2, О.А. Ковалева1, Т.С. Иванивская1 НОВАЯ ПЕРЕВИВАЕМАЯ ЛИНИЯ CAR-1 ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА И ЕЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К ЦИТОТОКСИЧЕСКОМУ ДЕЙСТВИЮ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ ИЭПОР им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, Киев, Украина; 2Институт микробиологии и вирусологии им. Д.К. Заболот-ного НАН Украины, Киев, Украина

Введение. Исследование чувствительности к цитоток-сическому действию противоопухолевых препаратов перевиваемых линий лимфоидных клеток человека и ее связи с характеристиками этих клеток представляет значительный интерес для разработки новых моделей скрининга химиотерапевтических средств.

Материалы и методы. Перевиваемую линию лимфоидных клеток Car-1 получали пассированием первичной культуры мононуклеаров периферической крови больного с хроническим лимфопролиферативным заболеванием в кондиционированной среде. Иммунофенотипирование клеток проводили с использованием авидин-биотинового комплекса со щелочной фосфатазой в качестве ферментной метки и панели моноклональных антител к дифферен-цировочным антигенам В-лимфоцитов. Кариотип клеток исследовали с помощью стандартных методик. ДНК из клеток выделяли с использованием набора innuPREP Virus DNA Kit (Analityk Jena AC, Германия). Детекцию ДНК вируса Эпштейна — Барр (ВЭБ) проводили методом полиме-разной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени с использованием набора «ЭБАРПОЛ» (НПФ «Литех», Россия) на амплификаторе qTOWER 2.2 (Analityk Jena, Германия). В качестве контроля использовали стандартные линии В-лимфобластоидных клеток Raji и Namalwa, происходящие из лимфомы Беркитта и содержащие ДНК ВЭБ. Исследовали кинетику роста и гибели