СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ПАНКРЕАТИТА
METHOD FOR SIMULATING CHRONIC HEPATITIS

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования хронического панкреатита.
Заболеваемость патологией поджелудочной железы (ПЖ) находится на весьма высоком уровне и имеет выраженную тенденцию к росту, что наряду с успехами в лечении острого панкреатита обусловило рост числа больных осложненными формами хронического панкреатита (ХП), требующих оперативного лечения.
В настоящее время арсенал вмешательств, выполняемых по поводу хронического панкреатита, включает в себя большое количество операций как непосредственно на ПЖ, так и на смежных с ней органах. Резекции измененного патологическим процессом сектора ПЖ с последующим наложением вирсунгодигестивных анастомозов, предусматривающие сохранение двенадцатиперстной кишки (ДПК), представляются наиболее приемлемыми из существующих на сегодняшний день способов хирургического лечения ХП, однако современные способы хирургического лечения заболевания не могут обеспечить восстановления нормальной функции органа, что делает актуальной проблему поиска путей его хирургического лечения. Одним из существенных препятствий для разработки новых способов оперативного лечения ХП является отсутствие адекватных экспериментальных моделей заболевания, отражающих как механизмы развития заболевания, так и морфофункциональную картину поражения паренхимы органа и его протоковой системы.
В качестве аналога принят способ индукции хронического панкреатита путем внутрибрюшинного введения аргинина. Способ осуществляют следующим образом: интрапериотеально вводят 20% раствор L-аргинина гидрохлорида в дозе 250 мг/100 г массы тела животного, введение повторяют на 4 и 10 дни после первого введения [Gonzalez A.M., Garcia Т., Samper Е. et al. Assessment of the protective effects of oral tocotrienols in arginin chronic-like pancreatitis // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. - 2011. - Vol.301. - N5. - P.846-855].
Способ имеет следующие недостатки:
- способ вызывает жировую дистрофию панкреатической паренхимы без выраженного поражения протоковой системы поджелудочной железы;
- способ вызывает первичное поражение значительной части ацинарных клеток, что затрудняет изучение патогенеза прогрессирования ХП.
В качестве ближайшего аналога принят способ индукции хронического панкреатита путем создания длительной гипертензии в билиопанкреатическом протоке. Способ осуществляют следующим образом: анестезированным крысам выполняют лапаротомию, общий желчный проток лирируют проксимальнее поджелудочной железы вблизи печени и каннюлируют последний проксимальнее лигатуры для сбора чистой желчи, билиопанкреатический проток каннюлируют через фатерову ампулу для сбора панкреатического секрета. Каннюлируют ДПК для возврата билиопанкреатического секрета. Канюли выводят на кожу у основания шеи через подкожный канал. Панкреатический секрет и желчь возвращают в двенадцатиперстную кишку при помощи сервомеханизма. Начиная с четвертого дня после установки канюль, создают повышенное гидростатическое давление в билиопанкреатическом протоке путем придания канюле, установленной в последнем, вертикального положения. Все время после выполнения вмешательства двигательную активность крыс ограничивают путем помещения их в клетку, ограничивающую движения [Yamamoto M., Otani M., Otsuki M. A new model of chronic pancreatitis in rats // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. - 2006. - Vol 291. - N. 4. - P. 700-708].
Способ имеет следующие недостатки:
- осуществление способа требует ограничения двигательной активности животных;
- для осуществления способа требуется использование дополнительного сложного оборудования;
- способ предусматривает создание постоянного повышенного давления в протоковой системе поджелудочной железы, независящего от фазы ее секреторной активности, что не отражает динамики внутрипротокового давления в нормальных условиях и в процессе развития хронического панкреатита.
Техническим результатом предлагаемого способа моделирования хронического панкреатита является разработка индукции хронического панкреатита путем повышения гидростатического давления в протоковой системе поджелудочной железы, обеспечивающего сохранение колебаний внутрипротокового давления в зависимости от напряженности экзосекреторной активности поджелудочной железы. Повышение гидростатического давления в билиопанкреатическом протоке происходит в период повышенной экзосекреторной активности поджелудочной железы. Осуществление способа не требует ограничения двигательной активности лабораторных животных и не требует использования сложного оборудования.
Указанный технический результат достигается сужением просвета билиопанкреатического протока в 1,5 раза путем его внешнего сдавления с его стенозированием обернутым вокруг протока и фиксированным к нему лоскутом из вытянутого политетрафторэтилена (e-PTFE).
Описание способа.
Способ осуществляют следующим образом: после лапаротомии в рану выводят двенадцатиперстную кишку с поджелудочной железой, выделяют терминальный отдел билиопанкреатического протока, который окутывают лоскутом из вытянутого политетрафторэтилена (e-PTFE) шириной 1 мм, таким образом, чтобы просвет протока был сужен в 1,5 раза. Необходимую степень сужения протока обеспечивают следующим образом: измеряют диаметр билиопанкреатического протока и выкраивают лоскут из e-PTFE необходимой длины, которую рассчитывают по формуле: Дл=((D+2T)/1.5)*3.14, где Дл - необходимая длин а лоскута, D - диаметр билиопанкреатического протока, Т - толщина e-PTFE лоскута. Полученный лоскут проводят под билиопанкреатическим протоком и окутывают его. Концы лоскута соединяют двумя узловыми швами, которые затягивают до сопоставления краев лоскута.
Заявляемая степень сужения протока является необходимой и достаточной для развития хронического панкреатита. Меньшая степень сужения не вызывает достаточного повышения протокового давления в ПЖ, а более значительное сужение вызывает развитие острого панкреатита.
Эффективность заявляемого способа индукции хронического панкреатита была изучена в эксперименте на 24 крысах линии Wistar. Животные были разделены на 3 группы по 8 животных. Всем животным выполнялось стенозирование билиопанкреатического протока путем его внешнего сдавления лоскутом из e-PTFE. Животным первой группы билиопанкреатический проток сужался в 1,2 раза, животным второй группы в 1,5 раза, животным 3 группы в 2 раза. После стенозирования протока изучались концентрация амилазы в плазме крови на 1, 3 и 7 сутки после выполнения вмешательства, а также производился забор ткани поджелудочной железы на 3 и 90 сутки после вмешательства.
У животных 1 группы не было выявлено морфологических или биохимических признаков острого или хронического панкреатита после стенозирования протока. У двух (28,5%) животных второй группы на 1 и 3 сутки после вмешательства были обнаружены признаки легкого острого панкреатита, на 7 сутки биохимические признаки острого панкреатита не обнаруживались, на 90 сутки у всех животных обнаружены морфологические признаки хронического панкреатита. В 3 группе животных на 1 сутки наблюдалось повышение плазменной концентрации амилазы более чем в 3 раза от исходного уровня на 1 и 3 сутки после вмешательства, у 7 животных (87,5%) концентрация амилазы в плазме крови превышала исходную на 7 сутки после вмешательства. На 1 сутки после вмешательства у всех животных обнаружены морфологические признаки острого панкреатита.
Применение способа позволит получить новые данные о патогенезе осложненного хронического панкреатита, способ может быть использован для разработки новых способов лечения хронического панкреатита.