АНТИТЕЛО ПРОТИВ SIRPα

1. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело содержит:
(а) CDRL1 легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1;
(b) CDRL2 легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2;
(c) CDRL3 легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:3;
(d) CDRH1 тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:4;
(e) CDRH2 тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:5; и
(f) CDRH3 тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:6.
2. Антитело по п.1, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4 и имеет мутацию, которая снижает активность ADCC и/или ADCP.
3. Антитело по п.1 или 2, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4, а фенилаланин в положении 234 согласно нумерации в соответствии с индексом EU, как у Kabat et al., заменен аланином, лейцин в положении 235 заменен аланином, а серин в положении 228 заменен пролином.
4. Антитело по п.3, где аминокислотная последовательность константной области тяжелой цепи представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из аминокислотных остатков 140-466 в SEQ ID NO:25.
5. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело содержит:
(ai) вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 21-126 в SEQ ID NO:23; или
(aii) вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 21-126 в SEQ ID NO:23, и обладающей активностью связывания с SIRPα человека; и
(bi) вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 20-139 в SEQ ID NO:25; или
(bii) вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 20-139 в SEQ ID NO:25, и обладающей активностью связывания с SIRPα человека,
где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4 и имеет мутацию, которая снижает активность ADCC и/или ADCP.
6. Антитело по п.1 или 2, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4, а фенилаланин в положении 234 согласно нумерации в соответствии с индексом EU, как у Kabat et al., заменен аланином, лейцин в положении 235 заменен аланином, а серин в положении 228 заменен пролином.
7. Антитело по п.6, где аминокислотная последовательность константной области тяжелой цепи представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из аминокислотных остатков 140-466 в SEQ ID NO:25.
8. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело содержит:
(а) CDRL1 легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:7;
(b) CDRL2 легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:8;
(c) CDRL3 легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:9;
(d) CDRH1 тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:10;
(e) CDRH2 тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:11; и
(f) CDRH3 тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:12.
9. Антитело по п.8, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4 и имеет мутацию, которая снижает активность ADCC и/или ADCP.
10. Антитело по п.8 или 9, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4, а фенилаланин в положении 234 согласно нумерации в соответствии с индексом EU, как у Kabat et al., заменен аланином, лейцин в положении 235 заменен аланином, а серин в положении 228 заменен пролином.
11. Антитело по п.10, где аминокислотная последовательность константной области тяжелой цепи представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из аминокислотных остатков 139-465 в SEQ ID NO:29.
12. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело содержит:
(ai) вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 21-127 в SEQ ID NO:27; или
(aii) вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 21-127 в SEQ ID NO:27, и обладающей активностью связывания с SIRPα человека; и
(bi) вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 20-138 в SEQ ID NO:29; или
(bii) вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 20-138 в SEQ ID NO:29 и обладающей активностью связывания с SIRPα человека, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4 и имеет мутацию, которая снижает активность ADCC и/или ADCP.
13. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47 по п.12, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4, и фенилаланин в положении 234 согласно нумерации в соответствии с индексом EU, как у Kabat et al., заменен аланином, лейцин в положении 235 заменен аланином, а серин в положении 228 заменен пролином.
14. Антитело по п.13, где аминокислотная последовательность константной области тяжелой цепи представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из аминокислотных остатков 139-465 в SEQ ID NO:29.
15. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело содержит:
(а) CDRL1 легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:13;
(b) CDRL2 легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:14;
(c) CDRL3 легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:15;
(d) CDRH1 тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:16;
(e) CDRH2 тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:17; и
(f) CDRH3 тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:18.
16. Антитело по п.15, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4 и имеет мутацию, которая снижает активность ADCC и/или ADCP.
17. Антитело по п.15 или 16, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4, а фенилаланин в положении 234 согласно нумерации в соответствии с индексом EU, как у Kabat et al., заменен аланином, лейцин в положении 235 заменен аланином, а серин в положении 228 заменен пролином.
18. Антитело по п.17, где аминокислотная последовательность константной области тяжелой цепи представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из аминокислотных остатков 144-470 в SEQ ID NO:33.
19. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело содержит:
(ai) вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 21-130 в SEQ ID NO:31; или
(aii) вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, имеющей, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 21-130 в SEQ ID NO:31, и обладающей активностью связывания с SIRPα человека; и
(bi) вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 20-143 в SEQ ID NO:33; или
(bii) вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 20-143 в SEQ ID NO:33, и обладающей активностью связывания с SIRPα человека,
где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4 и имеет мутацию, которая снижает активность ADCC и/или ADCP.
20. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47 по п.19, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4, а фенилаланин в положении 234 согласно нумерации в соответствии с индексом EU, как у Kabat et al., заменен аланином, лейцин в положении 235 заменен аланином, а серин в положении 228 заменен пролином.
21. Антитело по п.20, где аминокислотная последовательность константной области тяжелой цепи представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из аминокислотных остатков 144-470 в SEQ ID NO:33.
22. Антитело по любому из пп.1-4, которое представляет собой любое из следующих (1)-(8):
(1) антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело состоит из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 20-466 в SEQ ID NO:41; и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 21-234 в SEQ ID NO:37;
(2) антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело состоит из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 20-466 в SEQ ID NO:41 и обладающей активностью связывания с SIRPα человека; и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичности последовательности с аминокислотными остатками 21-234 в SEQ ID NO:37 и обладающей активностью связывания с SIRPα человека;
(3) антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывание человеческого SIRPα с CD47, где антитело состоит из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 20-466 в SEQ ID NO:41; и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 21-234 в SEQ ID NO:39;
(4) антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело состоит из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 20-466 в SEQ ID NO:41 и обладающей активностью связывания с SIRPα человека; и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, имеющей, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 21-234 в SEQ ID NO:39 и обладающей активностью связывания с SIRPα человека;
(5) антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело состоит из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 20-466 в SEQ ID NO:43; и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 21-234 в SEQ ID NO:35;
(6) антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело состоит из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислот остатки 20-466 в SEQ ID NO:43 и обладающей активностью связывания с SIRPα человека; и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, имеющей, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 21-234 в SEQ ID NO:35, и обладающей активностью связывания с SIRPα человека;
(7) антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело состоит из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 20-466 в SEQ ID NO:43; и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков 21-234 в SEQ ID NO:37; и
(8) антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα человека с CD47, где антитело состоит из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, имеющей по меньшей мере 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 20-466 в SEQ ID NO:43 и обладающей активностью связывания с SIRPα человека; и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, имеющей, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, состоящей из аминокислотных остатков 21-234 в SEQ ID NO:37, и обладающей активностью связывания с SIRPα человека.
23. Антитело по п.22, где активность ADCC и/или ADCP снижена.
24. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPαчеловека с CD47, где антитело получено с помощью эпитопа, содержащего Gln в положении 82, Lys в положении 83, Glu в положении 84 и Gly в положении 85 SIRPα человека с последовательностью SEQ ID NO:57.
25. Антитело по п.24, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4 и имеет мутацию, которая снижает активность ADCC и/или ADCP.
26. Антитело по п.24 или 25, где константная область тяжелой цепи представляет собой константную область тяжелой цепи человеческого IgG4, а фенилаланин в положении 234 согласно нумерации в соответствии с индексом EU, как у Kabat et al., заменен аланином, лейцин в положении 235 заменен аланином, а серин в положении 228 заменен пролином.
27. Антитело по п.26, где аминокислотная последовательность константной области тяжелой цепи представляет собой аминокислотную последовательность, состоящую из аминокислотных остатков 140-466 в SEQ ID NO:25.
28. Антитело по любому из пп.1-27, которое усиливает фагоцитарную активность макрофага.
29. Антитело по любому из пп.1-28, где остаток лизина на карбоксильном конце тяжелой цепи удален.
30. Антигенсвязывающий фрагмент антитела по любому из пп.1-29.
31. Антигенсвязывающий фрагмент антитела по п.30, отличающийся тем, что антигенсвязывающий фрагмент выбран из группы, состоящей из Fab, F(ab')2, Fab' и scFv.
32. Фармацевтическая противоопухолевая композиция, содержащая эффективное количество антитела по любому из пп.1-29 или антигенсвязывающего фрагмента антитела по п.30 или 31 в качестве активного ингредиента.
33. Фармацевтическая композиция по п.32, дополнительно содержащая ингибитор иммунной контрольной точки и/или антитело как лекарственное средство, которое специфически реагирует на опухолевый антиген с получением активности ADCC и/или ADCP, в качестве активного ингредиента противоопухолевого агента.
34. Применение фармацевтической композиции в комбинации с ингибитором иммунной контрольной точки и/или антителом как лекарственным средством, которое специфически реагирует на опухолевый антиген с получением активности ADCC и/или ADCP, где фармацевтическая композиция содержит антитело по любому из пп.1-29 или антигенсвязывающий фрагмент антитела по п.30 или 31 в качестве активного ингредиента.
35. Фармацевтическая композиция по п.33 или применение по п.34, где ингибитор иммунной контрольной точки представляет собой ингибитор связывания PD-L1 с PD-1 или ингибитор CTLA4.
36. Фармацевтическая композиция по п.33 или применение по п.34, где антитело как лекарственное средство, которое специфически реагирует на опухолевый антиген с получением активности ADCC и/или ADCP, выбрано из группы, состоящей из антитела против CD20, антитела против HER2 и антитела против EGFR.
37. Фармацевтическая композиция по п.34 или применение по любому из пп.34-36, где опухоль представляет собой опухоль одного или двух или более типов, выбранных из группы, состоящей из карциномы, саркомы, лимфомы, лейкоза, миеломы, герминомы, опухоли головного мозга, карциноида, нейробластомы, ретинобластомы и нефробластомы.
38. Фармацевтическая композиция по п.34 или применение по любому из пп.34-37, где опухоль представляет собой опухоль одного типа или двух или более типов, выбранных из группы, состоящей из рака почки, меланомы, плоскоклеточного рака, базальноклеточного рака, рака конъюнктивы, рака полости рта, фарингеального рака, рака щитовидной железы, рака легкого, рака молочной железы, рака пищевода, рака желудка, рака двенадцатиперстной кишки, рака тонкого кишечника, рака толстой кишки, рака прямой кишки, рака аппендикса, рака анального канала, рака печени, рака желчного пузыря, рака желчных протоков, рака поджелудочной железы, рака надпочечников, рака мочевого пузыря, рака предстательной железы, рака матки, рака влагалища, липосаркомы, ангиосаркомы, хондросаркомы, рабдомиосаркомы, саркомы Юинга, остеосаркомы, недифференцированной плеоморфной саркомы, миксофибросаркомы, злокачественной периферической шванномы, ретроперитонеальной саркомы, синовиосаркомы, саркомы матки, желудочно-кишечной стромальной опухоли, лейомиосаркомы, эпителиоидной саркомы, B-клеточной лимфомы, NK/T-клеточной лимфомы, лимфомы Ходжкина, миелоидного лейкоза, лимфолейкоза, миелопролиферативного заболевания, миелодиспластического синдрома, множественной миеломы, рака яичек, рака яичников, нейроглиомы и менингиомы.
39. Полинуклеотид, состоящий из нуклеотидных последовательностей, кодирующих аминокислотные последовательности тяжелой цепи и легкой цепи антитела по любому из пп.1-29.
40. Вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид по п.39.
41. Клетка-хозяин для получения антитела по любому из пп.1-29, содержащая полинуклеотид по п.39 или вектор по п.40.
42. Способ получения антитела по любому из пп.1-29, включающий культивирование клетки-хозяина по п.41 и очистку антитела из культуры.
43. Антитело, которое специфически связывается с SIRPα человека для ингибирования связывания SIRPα c СВ47, полученное способом по п.42.