ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ НЕФРОПАТИИ
PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR PREVENTING OR TREATING DIABETIC NEPHROPATHY

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для предупреждения или лечения диабетической нефропатии, которая содержит фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват. Точнее, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, способной предупредить диабетическую нефропатию или подавить прогрессирование диабетической нефропатии и эффективно облегчить различные симптомы, вызванные диабетической нефропатией.
Уровень техники
Диабет является типом метаболического заболевания, при котором секреция инсулина является недостаточной или дисфункциональной. Он характеризуется гипергликемией, при которой содержание сахара в крови повышено. Вследствие гипергликемии возникают различные симптомы и признаки, и глюкоза выделяется с мочой.
Если пациент с диабетом страдает от гипергликемии, то в течение длительного периода времени могут произойти другие хронические осложнения, включая периферическую невропатию, автономную невропатию, макрососудистые осложнения и микрососудистые осложнения.
Диабетическая нефропатия является одним из осложнений, вызванных диабетом. Она является наиболее важной причиной хронической почечной недостаточности и обуславливает значительную часть сопутствующих заболеваний у всех пациентов, проходящих диализ.
Диабетическая нефропатия на начальной стадии обычно является бессимптомной, и нет очевидного симптома кроме протеинурии, обнаруживаемой при анализе мочи по мере ее прогрессирования. Поэтому начало диабетической нефропатии диагностируется по обнаружению микроальбуминурии (выделение альбумина с мочой: 30-299 мг/24 ч).
Однако, поскольку симптом микроальбуминурии, описанный выше, также обнаруживается после значительного прогрессирования диабетической нефропатии, диабетическую нефропатию нелегко рано диагностировать и в большинстве случаев она обнаруживается после значительного прогрессирования.
В случае диабетической нефропатии межсосудистая ткань становится гипертрофированной вследствие аномальной пролиферации мезангиальных клеток, что приводит к утолщению клубочковой базальной мембраны и канальцевой базальной мембраны и уменьшению внутреннего диаметра клубочковых сосудов.
По мере увеличения клубочковых мезангиальных участков и накопления внеклеточных липидов, прогрессирования гломерулярного склероза и тубулоинтерстициального фиброза функция почек постепенно ослабляется, что в конечном счете приводит к хронической почечной недостаточности.
Другой клинической значимостью диабетической нефропатии является значительное увеличение смертности. Смертность у пациентов с диабетом типа 1 с выраженной протеинурией значительно выше, чем у пациентов с диабетом типа 1 с нормальной альбуминурией и здоровых людей. Это означает, что у пациентов с диабетом смертность при вызванном диабетом заболевании почек значительно увеличивается.
При увеличении количества пациентов с диабетом доля такой диабетической нефропатии в заболеваниях почек постепенно увеличивается. В особенности непрерывно увеличивается количество пациентов с заболеванием почек при наличии диабета типа 2.
Однако в настоящее время отсутствуют или имеются в небольшом количестве лекарственные средства, оказывающие предупреждающее или терапевтическое воздействие на диабетическую нефропатию. Кроме того, если лекарственные средства, которые использовались ранее, используются в течение длительного времени, они могут привести ко многим побочным эффектам, таким как гиперкалиемия и даже острая почечная недостаточность вследствие функционального или органического стеноза почечной артерии.
Поэтому важно разработать новое лекарственное средство для безопасного и эффективного предупреждения и лечения диабетической нефропатии.
Документы предшествующего уровня техники
Патентные документы
Korean Patent No. 0354654
Непатентные документы
Cardiovasc Diabetol. 2009 Jan 21; 8:4, Gurney AM;
Metabolism. 1979 Nov; 28(11):1075-7, Somani P et al.
Раскрытие
Техническая задача
Объектом настоящего изобретения является разработка фармацевтической композиции для предупреждения или лечения диабетической нефропатии, которая содержит фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват.
Другим объектом настоящего изобретения является применение фимасартана, его фармацевтически приемлемой соли или его гидрата или сольвата, для предупреждения или лечения диабетической нефропатии.
Еще одним объектом настоящего изобретения является способ предупреждения или лечения диабетической нефропатии путем введения субъекту фармацевтической композиции, содержащей фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват.
Решение технической задачи
Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для предупреждения или лечения диабетической нефропатии, которая содержит фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват.
В настоящем изобретении диабетическая нефропатия означает почечное нарушение, которое наблюдается у пациентов с диабетом и является типичным осложнением, вызванным диабетом. Это заболевание обусловлено вызванной диабетом гипергликемией, которая приводит к поражению клубочков почек и нарушению функции почек.
При диабетической нефропатии не обнаруживаются особые симптомы кроме обнаружения микроальбуминурии в моче и поэтому ее лечение часто откладывают, что приводит к хронической почечной недостаточности, которая приводит к состоянию, при котором необходима трансплантация почки, или к смерти.
Поэтому в случае диабетической нефропатии важно предупредить возникновение диабетической нефропатии у субъекта с диабетом или насколько возможно задержать возникновение диабетической нефропатии. Кроме того, при возникновении диабетической нефропатии важно облегчить ее симптомы или предупредить ухудшение симптомов и тем самым подавить прогрессирование диабетической нефропатии или уменьшить скорость прогрессирования заболевания.
Фармацевтическая композиция, содержащая фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват, может эффективно предупредить или лечить вызванное диабетом заболевание почек. В результате она может предупредить или подавить, или задержать начало заболевания почек у субъекта, страдающего диабетом, или может смягчить симптомы диабетического заболевания почек у субъекта с диабетической нефропатией и подавить прогрессирование заболевания почек или уменьшить скорость прогрессирования заболевания и тем самым предупредить ухудшение протекания заболевания.
Поэтому композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, может предупредить возникновение обусловленной диабетической нефропатией хронической почечной недостаточности и тем самым значительно снизить смертность субъектов. Кроме того, если диабетическая нефропатия приводит к хронической почечной недостаточности, она в конечном счете приводит к диализу. В связи с этим фармацевтическая композиция, содержащая фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват, может подавить или задержать прогрессирование диабетической нефропатии и тем самым задержать проведение описанного выше диализа.
В настоящем изобретении предупреждение означает все воздействия, которые предупреждают, подавляют или задерживают начало диабетической нефропатии или ее симптомов путем введения фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении. Например, если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту, у которого развился диабет, но еще не развилась диабетическая нефропатия, она может предупредить или задержать возникновение диабетической нефропатии или ее симптомов.
В настоящем изобретении лечение означает все воздействия, которые облегчают или благоприятно изменяют диабетическую нефропатию или ее симптомы или подавить или задержать диабетическую нефропатию и тем самым предупредить ухудшение диабетической нефропатии путем введения фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении. Например, если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту, у которого развилась диабетическая нефропатия, она может облегчить или благоприятно изменить диабетическую нефропатию или ее симптомы. Альтернативно, если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту, у которого развилась диабетическая нефропатия, она может подавить или задержать прогрессирование диабетической нефропатии или ее симптомов и тем самым предупредить ухудшение диабетической нефропатии. В результате она может предупредить возникновение обусловленной диабетической нефропатией хронической почечной недостаточности и тем самым значительно снизить смертность, вызванную диабетической нефропатией, и задержать начало диализа.
В настоящем изобретении лечение включает снижение смертности, вызванной диабетической нефропатией, и задержку начала диализа.
Если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетом или субъекту с диабетической нефропатией, она может предупредить возникновение альбуминурии или протеинурии, или уменьшить степень альбуминурии или протеинурии, или подавить количественное увеличение.
Если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетом или субъекту с диабетической нефропатией, она может предупредить увеличение содержания креатинина в сыворотке и содержание азота мочевины в крови или уменьшить их содержание, или подавить увеличение содержаний.
Если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетом или субъекту с диабетической нефропатией, она может предупредить поражение нефронов, гломерулярный склероз и фиброз, утолщение внутриклубочковой базальной мембраны, дегенерацию сосудов и некроз, утолщение клубочковой базальной мембраны, поражение клубочков, тубулоинтерстициальный фиброз, гидронефроз и увеличение объема почек или смягчить описанные выше симптомы, или подавить симптомы, или задержать прогрессирование симптомов и тем самым предупредить ухудшение симптомов.
Если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетом или субъекту с диабетической нефропатией, она может предупредить возникновение местного воспаления клеток почек, или уменьшить воспаление клеток почек, или подавить воспаление, или задержать прогрессирование воспаления и тем самым предупредить усиление воспаления.
Если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетом или субъекту с диабетической нефропатией, она может предупредить накопление белка в просветах клубочков или облегчить симптом накопления белка в просветах клубочков, или задержать накопление белка в просветах клубочков.
Если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетом или субъекту с диабетической нефропатией, она может предупредить увеличение количества мезангиальных клеток или накопление внеклеточного матриксного белка, или облегчить, подавить или задержать эти симптомы.
Если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетом или субъекту с диабетической нефропатией, она может предупредить возникновение отека, зуда и уремических симптомов, вызванных заболеванием почек, или уменьшить отек, зуд и уремические симптомы, или задержать ухудшение отека, зуда и уремических симптомов.
Если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетом или субъекту с диабетической нефропатией, она может уменьшить и облегчить анорексию и усталость, вызванные заболевание почек, и задержать ухудшение анорексии и усталости, вызванных заболевание почек.
Если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетической нефропатией, она может предупредить прогрессирование диабетической нефропатии или уменьшить скорость прогрессирования диабетической нефропатии и тем самым предупредить или задержать хроническую почечную недостаточность, что может привести к значительному снижению смертности субъектов или задержке начала диализа.
Композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, может достаточно эффективно предупредить или лечить диабетическую нефропатию, даже если она содержит в качестве активного ингредиента только фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват.
Композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, обладает достаточной безопасностью, так что ее можно вводить субъекту в течение длительного периода времени. Например, даже если композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, вводят субъекту с диабетом или субъекту с диабетической нефропатией, она не приводит к гиперкалиемии и нерегулярному сердцебиению или остановке сердца, обусловленным гиперкалиемией, и не приводят к нарушениям почек, таким как острая почечная недостаточность вследствие функционального или органического стеноза почечной артерии, и она нетоксична или обладает низкой токсичностью, включая другие побочные эффекты.
Поэтому фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват, предлагаемые в настоящем изобретении, также можно безопасно вводить субъектам с диабетом или диабетической нефропатией в течение длительного периода времени.
В настоящем изобретении субъекты означают животных, включая людей. Например, субъектами могут быть млекопитающие, включая мышей, крыс, других грызунов, кроликов, собак, свиней, кошек, крупный рогатый скот, овец, лошадей, приматов и людей. Предпочтительно, если субъектами могут быть приматы, более предпочтительно люди.
В настоящем изобретении диабет может быть инсулинозависимый диабет типа 1 или инсулиннезависимый диабет типа 2.
В настоящем изобретении фимасартан может представлять собой соединение, описывающееся приведенной ниже формулой 1:
Формула 1
В настоящем изобретении фармацевтически приемлемая соль означает соль неорганической кислоты, соль органической кислоты или соль металла, которые фармацевт обычно использует для приготовления фармацевтических препаратов. Неорганической кислотой, которую можно использовать, является хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и т. п.; органической кислотой, которую можно использовать, является лимонная кислота, уксусная кислота, молочная кислота, винная кислота, фумаровая кислота, муравьиная кислота, пропионовая кислота, щавелевая кислота, трифторуксусная кислота, метансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, малеиновая кислота, бензойная кислота, глюконовая кислота, гликолевая кислота, янтарная кислота, 4-морфолинэтансульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, 4- нитробензолсульфоновая кислота, гидрокси-O-сульфоновая кислота, 4- толуолсульфоновая кислота, галактуроновая кислота, эмбоновая кислота, глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота, адипиновая кислота, камзиловая кислота и т. п.; и металлом, который можно использовать является натрий, калий, кальций, магний и т. п.
В настоящем изобретении солью фимасартана предпочтительно может быть калиевая соль фимасартана, гидрохлорид, кальциевая соль, сульфат, адипат, камзилат или безилат. Более предпочтительно, если ей может быть калиевая соль фимасартана. Эти соли могут иметься в продаже или их можно получить по известной методике (например, см. патент Кореи № 0354654).
В настоящем изобретении гидрат может включать стехиометрическое или нестехиометрическое количество воды, связанной нековалентными межмолекулярными силами.
В настоящем изобретении сольват может включать стехиометрическое или нестехиометрическое количество растворителя, связанного нековалентными межмолекулярными силами. Растворитель означает обычный растворитель, который используют для получения органических соединений, и его примеры включают метанол, этанол, 1-пропанол, 2-пропанол, 1-бутанол, 2-бутанол, 1-ацетат, ацетон, уксусную кислоту, анизол, тетрагидрофуран, метилацетат, этилацетат, пропилацетат, изопропилацетат, изобутилацетат, н-бутилацетат, диметилсульфоксид, пентан, гептан и т. п., но сольват, предлагаемый в настоящем изобретении, не ограничивается этими примерами.
В настоящем изобретении гидрат и сольват может содержать воду или растворитель в количестве, равном от 0,25 до 10 молей, например, 0,5 моля, 1 моль, 1,5 моля, 2 моля, 2,5 моля, 3 моля, 5 молей и т. п. на 1 моль калиевой соли фимасартана. Предпочтительно, если они могут содержать воду в количестве, равном 1 моль или 3 моля на 1 моль калиевой соли фимасартана. Например, фармацевтическую композицию можно приготовить с использованием моногидрата калиевой соли фимасартана или тригидрата калиевой соли фимасартана.
В настоящем изобретении фармацевтическая композиция может содержать фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват в количестве, равном от 5 мас.% до 60 мас.%, предпочтительно от 10 мас.% до 50 мас.%, в пересчете на полную массу композиции.
В настоящем изобретении фармацевтическая композиция может дополнительно содержать фармацевтически приемлемые добавки. Термин "фармацевтически приемлемое" относится к веществам, которые являются физиологически переносимыми и обычно не вызывают аллергическую реакцию или аналогичную неблагоприятную реакцию, такую как желудочный дискомфорт, головокружение и т. п., если их вводят человеку, и которые специалисты в данной области техники обычно используют для приготовления фармацевтических композиций. Описание этих веществ приведено в публикации Remington's Pharmaceutical Science (последнее издание), Mack Publishing Company, Easton PA.
Добавки могут включать носители, инертные наполнители, средства, увеличивающие объем, антиоксиданты, буферы, наполнители, антиадгезивы, смазывающие вещества, смачивающие агенты, вкусовые агенты, эмульгаторы, суспендирующие агенты, поверхностно-активные вещества, консерванты и т. п. Например, добавки включают лактозу, декстрозу, силикат кальция, кукурузный крахмал, сахарозу, сорбит, маннит, ксилит, эритрит, мальтит, крахмал, камедь акации, альгинат, желатин, фосфат кальция, силикат кальция, целлюлозу, метилцеллюлозу, поливинилпирролидон, воду, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеариновую кислоту, стеарат магния, стеарат кальция, минеральное масло, физиологический раствор, раствор глюкозы, раствор сахароподобного вещества, спирт, гликоль, простой эфир (например, полиэтиленгликоль 400), масло, жирную кислоту, эфир жирной кислоты, глицерид или их смеси. Однако добавки, которые могут содержаться в композиции, предлагаемой в настоящем изобретении, не ограничиваются указанными выше веществами, которые являются только иллюстративными.
Фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, можно приготовить по обычной методике и можно приготовить в виде препарата для перорального введения или препарата для парентерального введения. Предпочтительно, если ее можно приготовить в виде препарата для перорального введения.
В настоящем изобретении препарат для перорального введения может быть твердым препаратом, таким как таблетка, пилюля, порошок, гранула или капсула, или может быть жидким препаратом, таким как суспензия, раствор, эмульсия или сироп. Он предпочтительно может быть твердым препаратом, более предпочтительно таблеткой.
Если фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, готовят в виде перорального твердого препарата, примеры добавок, которые можно использовать, включают целлюлозу, силикат кальция, кукурузный крахмал, лактозу, сахарозу, декстрозу, фосфат кальция, стеариновую кислоту, стеарат магния, стеарат кальция, желатин, тальк и т. п.
Если фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, готовят в виде жидкого препарата для перорального введения, фармацевтическую композицию можно приготовить с использованием различных добавок, включая простые разбавители, такие как вода или жидкий парафин, смачивающие агенты, подсластители, вкусовые агенты, консерванты, окрашивающие агенты и т. п.
Если фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, готовят в виде препарата для инъекций, можно использовать добавки, включая воду, физиологический раствор, водный раствор глюкозы, водный раствор сахароподобного вещества, спирт, гликоль, простой эфир (например, полиэтиленгликоль 400), масло, жирную кислоту, эфир жирной кислоты, глицерид и т. п.
В настоящем изобретении на содержание добавок в фармацевтической композиции не налагают особые ограничения и его можно менять в диапазонах значений, которые используют в обычном препарате.
В настоящем изобретении фармацевтическая композиция может содержать фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват, так чтобы содержание фимасартана равнялось от 1 мг до 240 мг, предпочтительно примерно от 30 до 180 мг.
В настоящем изобретении фармацевтическую композицию можно вводить перорально или парентерально (например, внутривенно, подкожно, внутрикожно или местно) и ее доза может меняться в зависимости от массы пациента, возраста, пола, состояния здоровья, диеты, времени введения, пути введения, продолжительности введения или промежутков времени между введениями, скорости выведения, особенностей телосложения, характеристик препарата, тяжести заболевания и т. п. Например, взрослому массой примерно 60 кг фимасартан можно вводить перорально один или несколько раз в сутки в дозе, равной примерно от 1 до 240 мг/сутки, предпочтительно от 30 до 180 мг/сутки.
В настоящем изобретении фармацевтическая композиция в дополнение к фимасартану может дополнительно содержать его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват, другой активный ингредиент, обладающий фармакологической активностью.
Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, в дополнение к фимасартану может дополнительно содержать его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват, гипотензивное средство, диуретик, средство для лечения гиперлипидемии, средство для борьбы с ожирением или средство для лечения диабета. Например, в дополнение к фимасартану его фармацевтически приемлемой соли или его гидрату или сольвату в качестве активного ингредиента композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, может дополнительно содержать амлодипин, нифедипин, верапамил, дилтиазем, никардипин, леркадипин, аторвастатин, церивастатин, флувастатин, ловастатин, питавастатин, симвастатин, розувастатин, никотиновую кислоту, теофиллин, кофеин, теобромин, аминофиллин, гидрохлоротиазид, бендрофлуметиазид, алоглиптин, саксаглиптин, ситаглиптин, метформин, эксенатид, росиглитазон, пиоглитазон, толбутамид, троглитазон, лептин, эфедрин, фенфлурамин, флуоксетин и т. п.
Для улучшения протекания, облегчения, лечения или предупреждения диабетической нефропатии, фармацевтическую композицию, предлагаемую в настоящем изобретении, можно использовать по отдельности или в комбинации с хирургическим вмешательством, гормональной терапией, медикаментозным лечением и методиками, использующими регуляторы биологического ответа.
Настоящее изобретение относится к применению фимасартана, его фармацевтически приемлемой соли или его гидрата или сольвата, для предупреждения или лечения диабетической нефропатии.
Настоящее изобретение относится к способу предупреждения или лечения диабетической нефропатии путем введения субъекту фармацевтической композиции, содержащей фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват.
При применении и в способе, предлагаемом в настоящем изобретении, фармацевтическая композиция и фимасартан, его фармацевтически приемлемая соль или его гидрат или сольват, которые содержатся в композиции, являются такими, как описано выше.
Благоприятные характеристики
Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, которая содержит фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват, может эффективно предупредить или лечить диабетическую нефропатию. Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, может предупредить или подавить начало диабетической нефропатии и также может облегчить диабетическую нефропатию или подавить прогрессирование или ухудшение диабетической нефропатии.
Описание чертежей
На фиг. 1 и 2 представлено уменьшение выделения альбумина с мочой у крыс при введении фармацевтической композиции, предлагаемой в настоящем изобретении.
Осуществление настоящего изобретения
Ниже настоящее изобретение подробно описано со ссылкой на примеры, чтобы содействовать пониманию настоящего изобретения. Однако эти примеры приведены только для иллюстрации настоящего изобретения и объем настоящего изобретения не ограничивается этими примерами. Эти примеры настоящего изобретения приведены для более полного разъяснения настоящего изобретения специалистам в данной области техники. Экспериментальные результаты каждого примера подвергали статистической обработке по схеме ANOVA (односторонний дисперсионный анализ). Если подтверждали статистическую значимость, то ее исследовали с помощью критерия множественного сравнения Даннетта при p <0,05 (* или †) или p <0,01 (**).
1. Подготовка экспериментальных животных
(1) Выбор экспериментальных животных
Приобретали 8-недельных спонтанно гипертензивных крыс (SHRs; массой от 245 до 260 г) и их выдерживали в течение 2 недель в помещении при температуре, равной 22±3°C, влажности, равной 55±15%, от при вентиляции с заменой воздуха от 10 до 20 раз/ч, в цикле освещение 12ч освещение/12 ч затемнение (освещение включали в 8 ч утра и выключали в 20 ч) и при освещенности от 150 до 300 лк. Во время выдерживания в помещении у крыс был неограниченный доступ к экспериментальному корму для животных (изготовитель Cargill Agri Purina, Inc. и поставщик Dreambio, Co., Ltd.). Кроме того, у крыс был неограниченный доступ к (очищенная вода, находящаяся в бутылке питьевой воды, изготовленной из поликарбоната). Затем для использования в эксперименте отбирали здоровых крыс и разделяли на группу 1 (6 крыс), группу 2 (6 крыс) и группу 3 (7 крыс).
(2) Вызывание диабетической нефропатии
Для вызывания диабетической нефропатии у крыс использовали стрептозотоцин (STZ) (Gurney AM, Cardiovasc Diabetol. 2009 Jan 21;8:4; Somani P et al., Metabolism. 1979 Nov;28(11):1075-7). Если стрептозотоцин вводят внутрибрюшинно или внутривенно, он вызывает диабетическое патологическое состояние путем разрушения бета-клеток поджелудочной железы.
Стрептозотоцин вводили крысам группы 2 и группы 3. За день до введения стрептозотоцина крысы голодали в течение одного дня by fasting plates. Композицию, содержащую стрептозотоцин, растворенный в 0,1M буфере из цитрата натрия (pH 4,5), вводили крысам натощак в дозе 1 мл/кг, так что содержание стрептозотоцина у каждой крысы сразу после определения содержания глюкозы в крови натощак было равно 50 мг/кг. Через 48 ч после введения стрептозотоцина, измеряли содержания в крови натощак. Если измеренное содержание глюкозы в крови составляли 250 мг/дл или более, считали, что вызван диабет. Крыс с вызванным диабетом использовали в эксперименте.
2. Введение лекарственных средств
Через 48 ч после введения стрептозотоцина подтверждалось вызывание диабета вводили и лекарственные средства.
Крысам группы 3 раствор, полученный растворением тригидрата калиевой соли фимасартана в 0,5% (об./об.) водном растворе карбоксиметилцеллюлозы (SAMCHUN PURE CHEMICAL CO., LTD.), вводили один раз в сутки в течение 24 недель в дозе, равной 4 мл/кг, так что количество фимасартана составляло 10 мг/кг/сутки.
Крысам группы 1 и группы 2, 0,5% (об./об.) вводили карбоксиметилцеллюлозу (SAMCHUN PURE CHEMICAL CO., LTD.) в дозе, равной 4 мл/кг/сутки.
Крысам каждой группы перорально вводили водный раствор карбоксиметилцеллюлозы и фимасартан один раз в сутки до 18 часов. Для перорального введения животных фиксировали по методике фиксирования за кожу спины и лекарственное средство вводили непосредственно в желудок с помощью перорального зонда.
Пример 1. Исследование 1 предупреждающего и терапевтического воздействия фимасартана на диабетическую нефропатию
Для каждой группы крыс, которым вводили водный раствор карбоксиметилцеллюлозы или фимасартан в течение 24 недель, с 2-недельными промежутками проводили анализ мочи. Крыс каждой группы помещали в клетки для исследования метаболизма и в течение 24 ч собирали мочу, после чего выведение креатинина с мочой (CRE) и выведение альбумина с мочой (UAE) определяли с помощью биохимического анализатора крови (7020 Hitachi, Japan). Результаты определения выведения альбумина с мочой (UAE) приведены на фиг. 1, и результаты определения отношения (выведение альбумина с мочой)/(выведение креатинина с мочой) (UACR) приведены на фиг. 2.
Как можно видеть на фиг. 1 и 2, выведение альбумина с мочой в группе 2 и группе 3, крысам, которым вводили стрептозотоцин усилено по сравнению с крысами группы 1, которым не вводили стрептозотоцин, и это показывало, что в группах 2 и 3 возникла диабетическая нефропатия. Однако можно видеть, что выведение альбумина с мочой в группе 3, крысам, которым вводили фимасартан значительно уменьшено по сравнению с крысами группы 2, у которых имеется вызванный стрептозотоцином диабет.
Обычно самым распространенным симптомом диабетической нефропатии является альбумин, обнаруженный в моче. Если фимасартан вводили субъектам с диабетической нефропатией, он уменьшал выведение альбумина с мочой у субъектов, и это показывало, что фимасартан может предупредить или значительно облегчить диабетическую нефропатию.
Пример 2. Исследование 2 предупреждающего и терапевтического воздействия фимасартана на диабетическую нефропатию
???После введения лекарственных средств крысам групп 1-3 в течение 24 недель, для крыс каждой группы проводили гистопатологическое исследование.
Для гистопатологического исследования ткань левой почки и ткань правой почки отдельно готовили в виде образцов ткани. Ткань правой почки отрезали перпендикулярно продольной оси и ткань левой почки отрезали параллельно продольной оси. Каждый отрезанный образец ткани фиксировали в 10% нейтральном растворе формалина в течение 24 ч и затем нарезали на кусочки толщиной 3 мм. Нарезанные образцы ткани толщиной 3 мм погружали в парафин и нарезали с помощью микротома и таким образом получали срезы ткани толщиной 4 мкм. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином (H&E) и затем с помощью оптического микроскопа (Olympus, BX41, Japan) проводили гистопатологическое исследование.
Получали 6 образцов ткани для группы 1, 8 образцов ткани для группы 2 и 8 образцов ткани для группы 3 и затем проводили гистопатологическое исследование, и изучали степень вакуольного перерождения трубочек и некроз.
При гистопатологическом исследовании степень поражения оценивали по следующей шкале: (0) отсутствует; (1) наименьшая; (2) небольшая; (3) умеренная; и (4) выраженная. Результаты приведены ниже в таблицах 1-3.
Таблица 1: Группа 1
Гистопатология
1R
1L
2R
2L
3R
3L
Среднее значение
Вакуольное перерождение/некроз
0
0
0
0
0
0
0,0±0,00
(R: правая почка, L: левая почка)
Таблица 2: Группа 2
Гистопатология
1R
1L
2R
2L
3R
3L
4R
4L
Среднее значение
Вакуольное перерождение/некроз
2
1
2
1
2
2
3
3
2,0±0,76
(R: правая почка, L: левая почка)
Таблица 3: Группа 3
Гистопатология
1R
1L
2R
2L
3R
3L
4R
4L
Среднее значение
Вакуольное перерождение/некроз
2
1
0
0
1
1
1
1
0,9±0,64
(R: правая почка, L: левая почка)
Как можно видеть выше в таблицах 1-3, при сопоставлении крыс группы 2 и группы 3, которым всем вводили стрептозотоцин (STZ), поражения, такие как вакуольное перерождение трубочек у крыс группы 3, которым вводили фимасартан, значительно меньше, чем у крыс группы 2.
Это показывает, что фимасартан может значительно уменьшить степень поражения клеток почек, вызванного диабетической нефропатией, и что фимасартан может значительно облегчить диабетическую нефропатию и задержать прогрессирование диабетической нефропатии.
Промышленное применение
Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, содержит фимасартан, его фармацевтически приемлемую соль или его гидрат или сольват, и может эффективно предупредить или лечить диабетическую нефропатию. Фармацевтическая композиция, предлагаемая в настоящем изобретении, может предупредить или подавить начало диабетической нефропатии, и также может облегчить диабетическую нефропатию или подавить прогрессирование или ухудшение диабетической нефропатии.