ПАРТЕНОГЕНЕТИЧЕСКАЯ АКТИВАЦИЯ ЧЕЛОВЕЧЕСКИХ ООЦИТОВ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЧЕЛОВЕЧЕСКИХ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

1. Партеногенетически активированный ооцит, полученный способом, включающим в себя
а) инкубацию человеческого ооцита на стадии метафазы II в среде для оплодотворения в условиях in vitro (IVF);
b) инкубацию клетки со стадии а) в среде (IVF), содержащей ионофор;
с) инкубацию клетки со стадии b) в среде (IVF), содержащей ингибитор серин-треониновой киназы; и
d) инкубацию клетки со стадии с) в свежей среде IVF до формирования бластоцисты,
2
где стадии инкубации а) и b) проводят при высоком давлении О и где клеточная масса внутренней области (ICM), полученная из бластоцисты со стадии d), продуцирует культивируемые стволовые клетки.
2. Выделенная клеточная масса внутренней области, полученная из ооцита по п.1.
3. Аутологичная стволовая клетка, полученная из партеногенетически активированного ооцита по п.1.
4. Стволовая клетка по п.3, обладающая, по существу, гаплотипом, идентичным гаплотипу ооцита донора.
5. Стволовая клетка по п.3, где стволовая клетка i) будет пролиферировать при культивировании в условиях in vitro в течение 1 года, ii) сохраняет способность к дифференцировке в производные эндодермальной, мезодермальной и эктодермальной тканей при культивировании, и iii) дифференцировка которой подавляется при культивировании на питающем слое из фибробластов.
6. Стволовая клетка по п.5, сохраняющая кариотип, в котором хромосомы являются эуплоидными и не изменяются при длительном культивировании.
7. Стволовая клетка по п.3, где стволовая клетка является, по существу, генетически идентичной донорному ооциту.
8. Стволовая клетка по п.7, где стволовая клетка имеет кариотип 46, ХХ.
9. Стволовая клетка по п.7, где стволовая клетка идентифицирована как полный «двойник» донора по данным определения маркеров однонуклеотидного полиморфизма (SNP).
10. Стволовая клетка по п.7, где стволовая клетка является гистосовместимой с донором.
11. Стволовая клетка по п.3, где стволовая клетка геномно импринтирована соответственно природе донора.
12. Стволовая клетка по п.11, где стволовая клетка экспрессирует один или более генов, выбранных из группы, состоящей из SNRPN, Peg1_2, Peg_1A, XIST и Н19.
13. Стволовая клетка по п.3, где стволовая клетка экспрессирует один или более маркеров, выбранных из группы, состоящей из SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60, TRA-1-81 и ОСТ-4.
14. Стволовая клетка по п.3, где стволовая клетка содержит гомоплазматическую митохондриальную ДНК (мтДНК).
15. Дифференцированная клетка, происходящая из стволовой клетки, полученной из партеногенетически активированного ооцита по п.1.
16. Дифференцированная клетка по п.15, являющаяся гистосовместимой с донором ооцита.
17. Дифференцированная клетка по п.15, выбранная из группы, состоящей из нейрона, кардиоцита, клетки гладкой мускулатуры, клетки поперечно-полосатой мускулатуры, эндотелиальной клетки, остеобласта, олигодендроцита, гематопоэтической клетки, жировой клетки, стромальной клетки, хондроцита, астроцита, дендритной клетки, кератиноцита, клетки островков поджелудочной железы, клетки-предшественника лимфоидной ткани, тучной клетки, мезодермальной клетки и эндодермальной клетки.
18. Дифференцированная клетка по п.17, где клетка экспрессирует нейрофилимент 68, NCAM бета-III-тубулин, GFAP или их комбинации.
19. Дифференцированная клетка по п.17, где клетка экспрессирует альфа-актинин, десмин или их комбинации.
20. Дифференцированная клетка по п.17, где клетка экспрессирует PECAM-1, VE-кадгерин или их комбинации.
21. Дифференцированная клетка по п.17, где клетка экспрессирует альфа-фетопротеин.
22. Дифференцированная клетка по п.17, где клетка содержит гомоплазматическую митохондриальную ДНК (мтДНК).
23. Клеточная линия, содержащая аутологичные стволовые клетки, где стволовые клетки получены из партеногенетически активированных ооцитов по п.1.
24. Клеточная линия по п.23, где каждая клетка имеет кариотип 46, ХХ.
25. Клеточная линия по п.23, где каждая клетка является по существу генетически идентичной ооциту донора.
26. Клеточная линия по п.23, где каждая клетка генетически импринтирована соответственно природе донора.
27. Клеточная линия по п.23, где клетки не экспрессируют SSEA-1.
28. Клеточная линия по п.23, где клетки дают начало эктодермальной, мезодермальной и эндодермальной зародышевым линиям.
29. Клеточная линия по п.23, где клетки каждой отдельной клеточной линии содержат гомоплазматическую митохондриальную ДНК (мтДНК).
30. Библиотека стволовых клеток, содержащая аутологичные стволовые клетки, где стволовые клетки получены из партеногенетически активированных ооцитов по п.1.
31. Библиотека по п.30, в которой каждый член библиотеки идентифицирован как полный «двойник», «полудвойник» или «неродственный» донору по данным определения маркеров однонуклеотидного полиморфизма (SNP).
32. Библиотека по п.30, в которой донор ооцитов является гистосовместимым с членом библиотеки.
33. Библиотека по п.30, в которой член библиотеки геномно импринтирован соответственно природе донора ооцитов.
34. Библиотека по п.30, в которой каждый член библиотеки является гомозиготным, по меньшей мере, по одной аллели МНС, имеющейся в популяции.
35. Библиотека по п.30, в которой каждый член библиотеки является гомозиготным по различным аллелям МНС по сравнению с другими членами библиотеки.
36. Библиотека по п.30, в которой каждый член библиотеки является, по меньшей мере, гомозиготным по одному или более генов HLA класса I и класса II.
37. Библиотека по п.36, в которой гены HLA класса I выбраны из комбинаций гаплотипа HLA A*, HLA B*, HLA и Cw*.
38. Библиотека по п.36, в которой гены HLA класса II выбраны из комбинаций гаплотипа DRBI*, DRB3*, DRB4*, DRB5*, DQAI* и DQB1*.
39. Библиотека по п.30, в которой каждый член i) будет пролиферировать при культивировании в условиях in vitro в течение 1 года, ii) сохраняет способность к дифференцировке в одно или все производные эндодермальной, мезодермальной и эктодермальной тканей при культивировании, и iii) дифференцировка которой подавляется при культивировании на питающем слое из фибробластов.
40. Библиотека по п.39, в которой каждый член сохраняет кариотип, в котором хромосомы являются эуплоидными и не изменяются при длительном культивировании.
41. Библиотека по п.30, в которой каждый член может дифференцироваться в эктодермальную, мезодермальную и эндодермальную зародышевые линии.
42. Банк клеток, содержащий криоконсервированные партеноты, где партеноты получены из партеногенетически активированных ооцитов по п.1.
2
43. Банк клеток по п.42, в котором партеноты культивируют при низком давлении О до формирования бластоцисты.
44. Банк клеток, содержащий криоконсервированные аутологичные стволовые клетки, где стволовые клетки получены из партеногенетически активированных ооцитов по п.1.