Способ определения степени выраженности хронического эндометрита у женщин с маточным фактором бесплодия после неудачного экстракорпорального оплодотворения в анамнезе (варианты)
METHOD FOR DETERMINING THE SEVERITY OF CHRONIC ENDOMETRITIS IN WOMEN WITH UTERINE FACTOR OF INFERTILITY AFTER UNSUCCESSFUL EXTRACORPOREAL FERTILIZATION IN THE ANAMNESIS (OPTIONS)

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области медицины, а именно к патоморфологии, гинекологии и репродуктологии и может быть использовано для оценки степени выраженности хронического эндометрита (ХЭ) у женщин с маточным фактором бесплодия после неудач экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) в анамнезе на основании оценки маркеров хронического персистирующего воспаления и плазматических клеток с целью специфической диагностики эндометриального фактора инфертильности при маточной форме бесплодия, ассоциированного с ХЭ.
Распространенность ХЭ в женской популяции доходит до 24,4% [1-4], среди тех, кто находится в репродуктивном периоде жизни показатель варьирует от 8% до 72% случаев. Встречаемость заболевания у бесплодных женщин достигает 55,7% [2, 5]. Следует признать, что ХЭ является наиболее частой причиной имплантационных неудач в программах ЭКО. Об этом свидетельствует высокая распространенность среди пациенток с повторными потерями беременностей и повторными неудачами имплантации (ПНИ), 13 и 30%, соответственно [6]. В исследованиях доказано, что пациентки с сочетанием ПНИ и верифицированным ХЭ в программах ЭКО демонстрировали более низкую частоту удовлетворительных имплантаций в сравнении с группой, где женщины имели ПНИ в анамнезе без ХЭ (11,5 и 32,7%, соответственно) [5]. Справедливости ради, необходимо отметить то, что персистирующее воспаление эндометрия с маточным фактором бесплодия остается неизвестным, а частота встречаемости варьирует в различных публикациях [4].
В мировой литературе представлено множество патогенетических путей развития ХЭ и ассоциированных с ним негативных репродуктивных исходов: изменения в популяциях иммунокомпетентных клеток в эндометрии, выработка провоспалительных цитокинов, негативное влияние на децидуализацию эндометрия [2]. Особое значение отводят изменению рецепции к половым стероидным гормонам, нарушению паттерна паракринных факторов и нарушению адгезии. Таким образом, ХЭ нарушает децидуализацию, инициирует резистентность к прогестерону, в то же время нарушая баланс факторов адгезии [7]. Перечисленные аномалии эндометриальной среды становятся причиной повышенного пролиферативного потенциала при сниженной способности к дифференцировке, асинхронной перистальтики матки, что является доказательством неготовности эндометрия к имплантации [8]. На сегодняшний день методы диагностики ХЭ и рецептивности эндометрия далеки от идеала, поскольку не имеют специфичных маркеров. Все вышеизложенное определяет актуальность выбранной темы, свидетельствует о необходимости разработки новых способов диагностики и прогнозирования стратегий преодоления маточного фактора бесплодия при ХЭ у пациенток после неудач ЭКО в анамнезе.
Уровень техники
Существует способ диагностики ХЭ, описанный в патенте РФ 2236013 от 10.09.2004 года (прототип), сущность которого заключается в том, что с помощью иммуногистохимического (ИГХ) окрашивания срезов эндометриальной ткани определяют показатели местного иммунитета: количество лимфоцитов, экспрессирующих маркеры естественных киллерных клеток, CD56+, CD16+ и маркеры активации HLA-DR(II)+, и тем самым диагностируют различные варианты течения ХЭ.
Недостатком данного метода является отсутствие комплекса ИГХ и гистохимической оценки ХЭ, лежащего в основе имплантационной несостоятельности женщин с маточным фактором бесплодия после неудач ЭКО в анамнезе.
Известен способ диагностики и прогнозирования развития ХЭ у пациенток (патент РФ 2587325 от 20.06.2016 г.). У женщин репродуктивного возраста посредством ИГХ исследования срезов эндометрия, по проценту позитивно окрашенных клеток эндометрия в баллах, определяют показатели локального врожденного иммунитета TLR2, TLR4, TLR9. Полученная ИГХ картина экспрессии TLR2, TLR4, TLR9 совместно с морфологическими данными позволяет диагностировать либо отсутствие ХЭ, либо наличие факторов риска и предрасположенности к его развитию, либо наличие и прогрессирование заболевания, либо стадию ремиссии данного состояния, либо наличие длительно персистирующего воспаления эндометрия, течение которого характеризуется развитием склеротических изменений сосудов и фиброзом стромы эндометрия различной степени выраженности.
Недостатком данного метода является отсутствие комплексной гистохимической и ИГХ оценки ХЭ, ассоциированного с маточным фактором бесплодия и неудачами экстракорпорального оплодотворения в анамнезе у данных женщин.
Существует способ определения стадии клинического течения ХЭ, степени активности воспаления и выраженности фиброза с установлением прогноза имплантации и нарушения рецептивности эндометрия, описанный в патенте РФ 2674155 от 27.09.2017 года. Сущность метода заключается в оценке наличия воспалительной лимфоцитарной инфильтрации и определении выраженности фиброза, по количественной оценке, распространенности и наличию его в основных топографических зонах эндометрия в баллах, по сумме которых определяют индексы активности ХЭ и выраженности фиброза, по величине которых выделяют по три стадии активности и клинического течения ХЭ.
Недостатком данного метода является отсутствие системного определения патогномоничных маркеров, присутствующих при хроническом воспалительном процессе в эндометрии.
Решаемой в настоящем изобретении технической проблемой является устранение указанных недостатков: повышение точности верификации степени выраженности ХЭ у женщин с маточным фактором бесплодия после неудач ЭКО в анамнезе.
Раскрытие сущности изобретения
Вследствие отсутствия высокоспецифичных и чувствительных способов оценки степени выраженности ХЭ при ассоциированной с данным состоянием инфертильности у пациенток с повторными неудачами ЭКО в анамнезе, предлагаемый способ, основанный на анализе комплекса патогномоничных маркеров степени выраженности воспалительных и поствоспалительных (адгезивных) нарушений в эндометриальном паттерне у данной когорты пациенток.
Было проведено собственное исследование, в котором продемонстрирована высокая специфичность предлагаемого нами метода в оценке степени выраженности ХЭ у инфертильных пациенток с неудачами ЭКО в анамнезе. Группы маркеров CD138+ и CD56+, а также CD56+ (при CD138, равным нулю, и наличии фиброза разной степени выраженности в строме эндометрия), в сочетании с гистохимической окраской по Маллори, достоверно отражают степень тяжести ХЭ у пациенток с данным заболеванием и неудачами ЭКО в анамнезе.
Разработанные варианты способа основаны на комплексном патоморфологическом исследовании эндометрия в среднюю стадию фазы пролиферации, включающем в первом варианте гистологическую окраску гематоксилином и эозином, ИГХ исследование с антителами к CD138, CD56, а во втором варианте выполнения способа, гистологическую окраску гематоксилином и эозином, ИГХ исследование с антителами к CD138, CD56 и гистохимическую окраску по Маллори.
Комплекс ИГХ исследований включает анализ уровней экспрессии ключевых белков: CD138+ - маркер плазматической клетки, CD56+ - маркер натуральных киллерных клеток.
Необходимость выполнения второго варианта способа, возникает при наличии длительно текущего хронического воспаления эндометрия, сопровождающегося разрастанием фиброзной ткани. В этом случае CD138+ отсутствуют и есть только  CD56+ клетки. При этом требуется учитывать степень выраженности фиброза эндометрия, для чего необходимо выполнить  гистохимическое исследование посредством окраски по Маллори.
CD138 (так же известный как синдекан-1) - трансмембранный гепарансульфат протеогликан, участвующий в модуляции воспалительных заболеваний, рака и инфекций. Так же он участвует в регуляции цикличных изменений эндометрия и используется для прогнозирования репродуктивных исходов в качестве специфического и чувствительного антигена плазмоцитов. Кроме того, было высказано мнение о том, что подсчет плазмоцитов CD138+ может повысить точность диагностики ХЭ и репродуктивных исходов у бесплодных пациенток с высоким числом CD138+ клеток. Соответствующие исследования показали, что ИГХ окрашивание с данным маркером относится к наиболее чувствительному методу диагностики ХЭ [9, 10].
CD56 - большие гранулярные лимфоциты - маркер натуральных киллерных клеток. В фазу пролиферации доля CD56+ клеток составляет 8% от всех клеток эндометрия, а в секреторную фазу - 60-70%. В норме натуральные киллеры под воздействием прогестерона мигрируют в эндометрий и конститутивно в нем присутствуют. Увеличение числа CD56+ клеток в эндометрии женщин с нарушением репродуктивной функции характеризует интенсивность персистирующего процесса воспаления в ткани и является неблагоприятным фактором, препятствующим нормальной адгезии и имплантации бластоцисты [11].
Окраска по Маллори - гистохимическая техника полихромной окраски препаратов, позволяющая выявлять структуры соединительной ткани: коллагена, ретикулярных волокон, хряща, кости, амилоида. Данный метод включает последовательную обработку фуксином, фосфорномолибденовой кислотой и смесью анилинового синего, оранжевого и щавелевой кислотой.
Таким образом, предлагаемый способ оценки степени выраженности ХЭ у женщин с маточным фактором бесплодия и неудачными попытками ЭКО в анамнезе, основанный на определении патогномоничных маркеров, обусловливающих патогенетические особенности заболевания эндометрия, следует рассматривать как дополненный вариант оценки выраженности ХЭ у данной группы пациенток.
Технический результат, достигаемый с помощью группы изобретений, точное определение  степени выраженности ХЭ у женщин с маточным фактором бесплодия и неудачными попытками ЭКО в анамнезе.
Указанный технический результат достигается за счет следующей совокупности существенных признаков:
Вариант выполнения способа 1
для определения степени выраженности хронического эндометрита (ХЭ) у женщин с маточным фактором бесплодия после неудачного экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) в анамнезе, выполняют пайпель-биопсию эндометрия в среднюю стадию фазы пролиферации,
в полученном материале определяют уровни экспрессии CD138 и CD56,
если число CD138+ клеток равно нулю, то присваивают «0 баллов»; если число CD138+ клеток равно 1, то «1 балл»; если 2-3 - «2 балла»; если 4 и более - «3 балла»;
если экспрессия CD56+ составляет до 10 клеток, то присваивают «0 баллов»; если экспрессия CD56+ превышает нормальное количество клеток в 2 раза - «1 балл»; если превышает в 3 раза - «2 балла»; если превышает в 4 раз и более - «3 балла»;
определяют сумму полученных баллов уровней экспрессии CD138 и CD56,
при сумме «5-6 баллов» определяют наличие выраженной степени хронического эндометрита; при «3-4 баллах» - умеренно выраженной; при «2 баллах» - слабо выраженной.
Вариант выполнения способа 2
для определения степени выраженности хронического эндометрита (ХЭ) у женщин с маточным фактором бесплодия после неудачного экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) в анамнезе, выполняют пайпель-биопсию эндометрия в среднюю стадию фазы пролиферации,  при иммуногистохимическом определении уровня CD138, равным нулю, но при наличии разной степени выраженности фиброза в строме,
в полученном материале определяют уровень экспрессии CD56 и определяют степень выраженности фиброза эндометрия, для чего проводят гистохимическое исследование посредством окраски по Маллори,
если число CD56+ составляет до 10 клеток, то присваивают «0 баллов»; если экспрессия CD56+ превышает нормальное количество клеток в 2 раза - «1 балл»; если превышает в 3 раза - «2 балла»; если превышает в 4 раз и более - «3 балла»;
если степень выраженности фиброза эндометрия составляет 0%, то присваивают «0 баллов»; 1-15% - «1 балл»; 16-49% - «2 балла»; 50% и более - «3 балла»;
определяют сумму полученных баллов уровня экспрессии CD138, равным нулю,   CD56+  (0-3 балла) и степени выраженности фиброза эндометрия,
при сумме «5-6 баллов» определяют наличие выраженной степени хронического эндометрита; при «3-4 баллах» - умеренно выраженной; при «2 баллах» - слабо выраженной.
Разработанные методы оценки степени выраженности ХЭ заключаются в том, что в среднюю стадию фазы пролиферации (на 7-11 дни менструального цикла) производят пайпель-биопсию эндометрия. Полученные гистологические срезы окрашивают гематоксилином и эозином, после чего материал исследуют методом ИГХ с применением наборов моноклональных антител к следующим маркерам: позитивно-окрашенные плазмоциты CD138; клетки натуральных киллеров CD56 в эндометрии.
В случае негативной ИГХ реакции с маркером CD138, но при выявленном нарушении местного иммунитета на основании аномального количества клеток CD56, необходимо провести гистохимическую окраску по Маллори с целью выявления степени выраженности фиброза эндометрия, что может свидетельствовать о длительности хронического воспалительного процесса в нем. Трактовка полученных данных основывается на сравнении с референсными значениями.
В данное исследование были включены 74 пациентки в возрасте от 24 до 40 лет (средний возраст составил 32±4,1 год).
Основную группу (n=53) составили пациентки с маточной формой бесплодия (код по МКБ10 N 97.2), имеющие de facto одну и более неудачу ЭКО в анамнезе и подозрением на наличие ХЭ. Средняя продолжительность бесплодия составляла 2,9±0,9 лет.
Группу сравнения (n=21) составили фертильные женщины перед плановой лапароскопической миомэктомией, имеющие в анамнезе 1 и более родов доношенными здоровыми детьми, давшие добровольное информированное согласие на участие в исследовании.
Гистологические срезы, полученные методом пайпель-биопсии в среднюю стадию фазы пролиферации менструального цикла (на 7-11 дни), были изучены под световым бинокулярным микроскопом DLMB с цифровой камерой и анализатором изображения Leica (Германия). Морфометрический анализ проводили с помощью окулярной измерительной тест-сетки Г.Г. Автандилова [12, 13] и с помощью цифрового анализатора изображения Leica Quin и морфометрической программы Sima Scan.
Полученные при морфометрическом исследовании результаты обрабатывали стандартными статистическими методами и использованием программы Statistica 10 for Windows (Stat Soft, США). Статистическую обработку результатов проводили с оценкой вида распределения, определением среднего М, стандартной ошибки ±se (на диаграммах ± доверительный интервал). Достоверность различий между независимыми выборками с нормальным распределением определяли по t-критерию Стьюдента. Выявление корреляционных связей проводили по коэффициенту Спирмена (Rs). Критический уровень значимости принимался равным 0,05.
ИГХ исследование биоптатов эндометрия, взятых методом пайпель-биопсии в среднюю стадию фазы пролиферации менструального цикла (на 7-11 дни), проводилось с использованием двухэтапного стрептавидин-биотин-пероксидазного метода с демаскировкой антигена и применением стандартных наборов поликлональных антител фирмы «Ventana», «Cell Marque» и «Diagnostic BioSystems» США. ИГХ окрашивание производилось в иммуностейнере Ventana BenchMark ULTRA IHC/ISH (США) на парафиновых срезах по стандартной методике с предварительной демаскировкой антигенов в СВЧ-печи с использованием соответствующих стандартных антител выявляли маркеры (таблица 1).
Таблица 1.
Переченьмоноклональных антитела, использованных для ИГХ исследования
<b>Антитела</b>
<b>Характеристика</b>
CD138, моноклональный
Маркер плазматических клеток
CD56, моноклональный
Маркер натуральный киллеров
Был проведен анализ экспрессии маркеров CD138, CD56 и степень выраженности фиброза эндометрия степени распространенности фиброза в эндометрии у женщин с маточным фактором инфертильности и неудачами ЭКО в анамнезе, и у пациенток с сохранной репродуктивной функцией перед плановой лапароскопической миомэктомией, последние составили группу сравнения (Таблица 2).
Таблица 2.
Уровень экспрессии CD138, CD58, а также распространенности фиброза в эндометрии у пациенток с маточным фактором бесплодия и неудачами ЭКО в анамнезе (основная группа), и фертильных женщин перед плановой лапароскопической миомэктомией (группа сравнения)
<b>Маркер</b>
<b>Основная группа, n=53</b>
<b>Группа сравнения, n=21</b>
CD138
1,8±1,26 кл/п.з.
0,1±0,3 кл/п.з.
CD56
26±9 кл/п.з.
0 кл/п.з.
Степень выраженности фиброза эндометрия
26,5±15,4%
0%
При ИГХ исследовании биоптатов эндометрия женщин из основной группы (бесплодие и неудачи ЭКО), полученных в среднюю стадию фазы пролиферации менструального цикла (на 7-11 дни), CD138+ клетки были обнаружены у 44 (83%) из 53 пациенток, CD56+ - у 51 (96,2%) из 53. При этом у каждой из 9 пациенток основной группы с отсутствием CD138+ клеток выявлялось повышение CD56+, в среднем, в 2,2 раза, а также в ходе последующего гистохимического исследования (окраска по Маллори) отмечался фиброз стромы. Среди биоптатов женщин из группы сравнения единичные CD138+ клетки наблюдались лишь у 2-х (9,5%) пациенток из 21, в то время как, экспрессия маркера натуральных киллерных клеток CD56 не превышала референсных значений ни у одной из них (Таблица 3).
Таблица 3.
Результаты ИГХ и гистохимического исследований в среднюю стадию фазы пролиферации эндометрия женщин с маточным фактором бесплодия и неудачами ЭКО в анамнезе, и фертильных женщин перед плановой лапароскопической миомэктомией
<b>Маркеры</b>
<b>Основная группа, n=53</b>
<b>Группа сравнения, n=21</b>
Полученные значения
Число пациенток
Число пациенток
<b>CD138, </b>число клеток на поле зрения
0
9 (17%)
19 (90,5%)
1
15 (28,3%)
2 (9,5%)
2-3
23 (43,4%)
0 (0%)
4
6 (11,3%)
0 (0%)
<b>CD56, </b>число клеток на поле зрения
До 10 клеток
2 (3,8%)
21 (100%)
Превышение в 2 раза
26 (49%)
0 (0%)
Превышение в 3 раза
17 (32,1%)
0 (0%)
Превышение в 4-5 раз
8 (15,1%)
0 (0%)
<b>Степень выраженности фиброза эндометрия, </b>%
0
0 (0%)
21 (100%)
1-15
3 (33,3%)
0 (0%)
16-49
5 (55,6%)
0 (0%)
≥50
1 (11,1%)
0 (0%)
Таким образом, по результатам проведенных морфометрических исследований в среднюю стадию фазы пролиферации менструального цикла ХЭ был верифицирован у пациенток основной группы по совокупности наличия плазматических клеток, натуральных киллеров, а также фиброза эндометрия.
В то же время в образцах эндометрия женщин из группы сравнения наблюдалась противоположная картина: единичные CD138+ клетки встречались у 2-х пациенток, при отсутствии ИГХ реакции к маркеру CD56 и фиброза эндометрия; у оставшихся женщин данной группы морфометрические исследования не выявили никаких отклонений.
В эндометрии в среднюю стадию фазы пролиферации у пациенток с маточным фактором бесплодия и неудачами ЭКО в анамнезе (основная группа) в сравнении с биоптатами фертильных женщин перед плановой лапароскопической миомэктомией (группа сравнения) установлены достоверные ИГХ и гистохимические детерминанты.
При ИГХ исследовании биоптатов эутопического эндометрия у женщин с неудачами ЭКО в анамнезе, были установлены патогномоничные пределы чувствительности для маркера плазматических клеток (CD138), натуральных киллерных клеток (CD56) и обнаружения фиброза эндометрия (окраска по Маллори) (таблицы 4, 5).
Таблица 4
. Патогномоничные пределы чувствительности для маркеров CD138, CD56 и окраски по Маллори в диагностике ХЭ
<b>Маркер</b>
<b>Выраженный ХЭ</b>
<b>Умеренно выраженный ХЭ</b>
<b>Слабо выраженный ХЭ</b>
<b>Предел чувствительности</b>
CD138+
≥4 - 3 балла
2-3 клетки -2 балла
Единичные клетки - 1 балл
0 клеток
CD56+
Число клеток превышено в 4-5 раз - 3
Число клеток превышено в 3 раза - 2
Число клеток превышено в 2 раза - 1 балл
≤10 клеток
Окраска по Маллори
≥50% - 3 балла
16-49% - 2 балла
1-15% - 1 балл
Отсутствие фиброза
Осуществление изобретения
Проводится биопсия эндометрия в среднюю стадию фазы пролиферации (на 7-11 дни менструального цикла) в спонтанном цикле, либо в цикле, предшествующем проведению ЭКО, с помощью аспирационной кюретки. Полученный материал после гистологической проводки в автоматическом гистопроцессоре Leica ASP 30, заливают в парафин на станции Leica EG 1150 (Германия). ИГХ окрашивание производят в иммуностейнере Ventana BenchMark ULTRA IHC/ISH (США) на депарафинизированных и дегидратированных срезах толщиной 4-6 мкм с использованием авидин-биотинового иммунопероксидазного метода. Сначала оценивают уровни экспрессии CD138 и CD56 в эндометрии определяют в соответствие с описанными выше методиками с применением соответствующих моноклональных антител. Производится подсчет процента позитивно-окрашенных клеток. Трактовка ИГХ реакции для описанных маркеров проводится путем сравнения полученных данных со следующими параметрами:
• если число CD138+ клеток равно нулю, то вероятность наличия ХЭ минимальна - 0 баллов, если встречаются единичные позитивно-окрашенные клетки, то ХЭ слабо выражен - 1 балл, если 2-3 - умеренно выражен - 2 балла, если ≥4 - выражен - 3 балла;
• если обнаруживается до 10 CD56+ клеток, то вероятность наличия ХЭ минимальна - 0 баллов, если число клеток повышено в 2 раза по сравнению с нормой, то ХЭ слабо выражен - 1 балл, если в 3 раза - умеренно выражен - 2 балла, если в 4-5 раз и более - выражен - 3 балла.
В том случае, если не обнаруживаются позитивно окрашенные клетки CD138, но существует нарушение местного иммунитета на основании аномального количества клеток CD56, проводится гистохимическое исследование (окраска по Маллори), трактуемое следующим образом: соединительная ткань окрашивается в голубой цвет, фибрин от темно-красного до синего цвета (”молодой и зрелый“ фибрин в красный цвет, ”старый”- в синий цвет).
Распространенность фиброза эндометрия: отсутствие (0%) - вероятность наличия ХЭ минимальна - 0 баллов, 1-15% - ХЭ слабо выражен - 1 балл, 16-49% - умеренно выражен - 2 балла, ≥50% - выражен - 3 балла.
Таким образом, для определения выраженности ХЭ проводят подсчет полученных баллов CD138 и CD56 в эндометрии, либо CD56 + (при CD138, равным нулю,  и наличии фиброза разной степени выраженности в строме эндометрия),  окраска по Маллори и делаются следующие заключения:
• 5-6 баллов - выраженный ХЭ;
• 3-4 балла - умеренно выраженный ХЭ;
• 2 балла - слабо выраженный ХЭ;
• 0-1 балл - ХЭ маловероятен.
Клинический пример 1
Пациентка А., 33 лет, страдает вторичным бесплодием в течение 4-х лет, в анамнезе 2 попытки ЭКО без эффекта. Диагноз: Бесплодие вторичное. Отягощенный гинекологический анамнез (1 искусственный аборт с выскабливанием полости матки, 2 попытки ЭКО, 1 операционная лапаро/гистероскопия, диагностическая гистероскопия). С целью преодоления бесплодия было проведено ЭКО и криоконсервация полученных эмбрионов. В анамнезе 2 неудачные попытки переноса эмбрионов высокого качества. По данным гистероскопии после 2-х неудачных попыток и прицельной биопсии эндометрия - признаки ХЭ отсутствуют. Перед проведением следующей попытки переноса эмбрионов была произведена контрольная пайпель-биопсия эндометрия на 8 день менструального цикла.
На основании проведенного комплексного патоморфологического исследования, включавшего гистологическую окраску гематоксилином и эозином, ИГХ и окраску по Маллори, были получены следующие данные: CD138+ = 3 клетки (2 балла); CD56+ = превышен в 4 раза (3 балла).
Сумма баллов составила «5», что свидетельствует о выраженном ХЭ.
Клинический пример 2
Пациентка М., 39 лет, обратилась к репродуктологу в апреле 2019 года с жалобами на отсутствие беременности в течение 4 лет, отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом: в 2008 году - самопроизвольный выкидыш на сроке 3-4 недели, в 2014 году - самопроизвольный выкидыш в 8 недель беременности. Гинекологические заболевания: эктопия шейки матки, РВ-коагуляция 2009 г. Хламидиоз - пролечен в 2006 г. Операции - лапароскопическая левостороння аднексэктомия по поводу тубовариального абсцесса, в 2006 г. В анамнезе 3 неудачные попытки ЭКО с переносом эмбрионов высокого качества (4АВ). Первый перенос произведен в стимулированном цикле, второй - в криоцикле. Диагностическая гистероскопия на 9 день менструального цикла после 2-х неудачных попыток переноса эмбрионов - без признаков ХЭ. С целью оценки имплантационных возможностей эндометрия перед проведением следующей попытки переноса эмбрионов была произведена контрольная пайпель-биопсия эндометрия на 7 день менструального цикла.
На основании проведенного комплексного патоморфологического исследования, включавшего гистологическую окраску гематоксилином и эозином, ИГХ и окраску по Маллори, были получены следующие данные: CD138+ = 0 клеток (0 баллов); CD56+ = превышен в 3 раза (2 балла). Материал дополнительно окрасили по методике Маллори с целью выявления фиброза эндометрия. Распространенность фиброза эндометрия составила -36% (2 балла).
Сумма баллов составила «4», что свидетельствует об умеренно выраженном ХЭ.
Список литературы
1. Толибова Г.Х., Траль Т.Г., Клещев М.А. и др. Эндометриальная дисфункция: алгоритм гистологического и иммуногистохимического исследования. Журн. акушерства и женских болезней. 2015; 64 (4): 69-77.
2. Оразов М.Р., Михалева Л.М, Семенов П.А. Хронический эндометрит: патогенез, диагностика, лечение и его связь с бесплодием. Клиническая и экспериментальная морфология. 2020; 9 (2): 16-25. DOI: 10.31088/CEM2020.9.2.16-25.
3. Толибова Г.Х., Траль Т.Г., Айламазян Э.К., Коган И.Ю. Молекулярные механизмы циклической трансформации эндометрия. Журн. акушерства и женских болезней. 2019; 68 (1): 5-12.
4. Song D, Feng X, Zhang Q, et al. Prevalence and confounders of chronic endometritis in premenopausal women with abnormal bleeding or reproductive failure. Reprod Biomed Online 2018;36:78-83. DOI: 10.1016/j.rbmo.2017.09.008.
5. Kimura F, Takebayashi A, Ishida M, et al. Review: Chronic endometritis and its effect on reproduction. J Obstet Gynaecol Res. 2019 May; 45(5):951-960. doi: 10.1111/jog.13937. Epub 2019 Mar 6.
6. Zargar M, Ghafourian M Nikbakht R, et al. Evaluating Chronic Endometritis in Women with Recurrent Implantation Failure and Recurrent Pregnancy Loss by Hysteroscopy and Immunohistochemistry. J Minim Invasive Gynecol. 2020;27(1):116-121. DOI: 10.1016/j.jmig.2019.02.016.
7. Kitaya K, Matsubayashi H, Yamaguchi K, Nishiyama R, Takaya Y, Ishikawa T et al. Chronic endometritis: potential cause of infertility and obstetric and neonatal complications. Am J Reprod Immunol. 2016; 75(1): 13-22. DOI: 10.1111/aji.12438.
8. Wu D, Kimura F, Zheng L et al. Chronic endometritis modifies decidualization in human endometrial stromal cells. Reprod Biol Endocrinol 2017; 15: 16.
9. Fan X, Li X, Li Y, Liao J, Chen H, Li Y, Lu GX, Lin G, Gong F. Endometrial CD138 count appears to be a negative prognostic indicator for patients who have experienced previous embryo transfer failure. Fertil Steril. 2019 Dec;112(6):1103-1111. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2019.08.006.
10. Xu Y, Mei J, Diao L, Li Y, Ding L. Chronic endometritis and reproductive failure: Role of syndecan-1. Am J Reprod Immunol. 2020 Sep;84(3):e13255. DOI: 10.1111/aji.13255. Epub 2020 Jun 26.
11. Серебренникова К.Г., Арутюнян Н.А., Алехин А.И. Диагностика и клинические критерии хронического эндометрита. Гинекология. 2018; 20 (6):53-59. DOI: 10.26442/20795696.2018.6.180070.
12. Автандилов Г.Г., Морфометрия в патологии / Г.Г. Автандилов. - М.: «Медицина», 1973. - 248 с.
13. Автандилов Г.Г., Медицинская морфометрия: Руководство / Г.Г. Автандилов. - М.: Медицина, 1990. - 384с.