ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ИНДУЦИРУЕМОГО ПРОМОТОРА ДЛЯ РЕГУЛИРУЕМОЙ ЭКСПРЕССИИ И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Выделенный полинуклеотид, содержащий:
a) нуклеотидную последовательность, содержащую последовательность SEQ ID NO:9 или SEQ ID NO:10, или полноразмерную комплементарную ей цепь;
b) нуклеотидную последовательность, содержащую функциональный фрагмент SEQ ID NO:10, или полноразмерную комплементарную ей цепь;
c) нуклеотидную последовательность, содержащую последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична последовательности, на основании способа выравнивания BLASTN, при сравнении с нуклеотидной последовательностью (a) или (b);
d) нуклеотидную последовательность, которая гибридизируется с SEQ ID NO:9 (при очень жестких условиях) отмывки 0,1 SSC, 0,1% (вес./об.) SDS при 65°C;
e) нуклеотидную последовательность, содержащую всю или фрагмент 5'-некодирующей последовательности маннитдегидрогеназы размером 1,7 т.о.; или
f) производное одной из нуклеотидных последовательностей, указанных в (a), (b), (c), (d) или (e), полученное путем замены, добавления и/или делеции одного или нескольких нуклеотидов; и
где указанная нуклеотидная последовательность представляет собой индуцируемый промотор.
2. Выделенный полинуклеотид по п. 1, где нуклеотидная последовательность c) по меньшей мере на 90% идентична, на основании способа выравнивания BLASTN, при сравнении с последовательностью SEQ ID NO:1.
3. Выделенный полинуклеотид по п. 1, где нуклеотидная последовательность c) по меньшей мере на 95% идентична, на основании выравнивания BLASTN, при сравнении с последовательностью SEQ ID NO:1.
4. Выделенный полинуклеотид по п. 1, где нуклеотидная последовательность c), которая по меньшей мере на 98% идентична, на основании выравнивания BLASTN, при сравнении с последовательностью SEQ ID NO:1.
5. Выделенный полинуклеотид по п. 1, где указанный индуцируемый промотор индуцируется обработкой химическим веществом или стрессовым фактором.
6. Выделенный полинуклеотид по п. 1, где указанный индуцируемый промотор индуцируется обработкой антидотом или тепловой обработкой.
7. Выделенный полинуклеотид по п. 6, где антидот представляет собой N-(аминокарбонил)-2-хлорбензолсульфонамид.
8. Выделенный полинуклеотид по п. 6, где указанная тепловая обработка предусматривает температуру свыше 26°C.
9. Рекомбинантный ДНК-конструкт, содержащий выделенный полинуклеотид по п. 1, функционально связанный по меньшей мере с одной гетерологичной последовательностью нуклеиновой кислоты.
10. Рекомбинантный ДНК-конструкт по п. 9, где гетерологичная последовательность нуклеиновой кислоты кодирует ген, выбранный из группы, состоящей из гена белка, индуцирующего двухцепочечные разрывы, гена рекомбиназы, репортерного гена, селективного маркера, гена, придающего устойчивость к заболеваниям, гена, придающего устойчивость к гербицидам, гена, придающего устойчивость к насекомым; гена, связанного с метаболизмом углеводов, гена, связанного с метаболизмом жирных кислот, гена, связанного с метаболизмом аминокислот, гена, связанного с развитием растений, гена, связанного с регуляцией роста растений, гена, связанного с улучшением урожайности, гена, связанного с устойчивостью к засухе, гена, связанного с устойчивостью к холоду, гена, связанного с устойчивостью к теплу и солям у растений.
11. Рекомбинантный ДНК-конструкт по п. 9, где гетерологичная последовательность нуклеиновой кислоты кодирует белок, выбранный из группы, состоящей из белка, индуцирующего двухцепочечные разрывы, белка рекомбиназы, репортерного белка, селективного маркера, белка, придающего устойчивость к заболеваниям, белка, придающего устойчивость к гербицидам, белка, придающего устойчивость к насекомым; белка, связанного с метаболизмом углеводов, белка, связанного с метаболизмом жирных кислот, белка, связанного с метаболизмом аминокислот, белка, связанного с развитием растений, белка, связанного с регуляцией роста растений, белка, связанного с улучшением урожайности, белка, связанного с устойчивостью к засухе, белка, связанного с устойчивостью к холоду, белка, связанного с устойчивостью к теплу и устойчивостью к солям у растений.
12. Вектор, содержащий рекомбинантный ДНК-конструкт по п. 9.
13. Клетка, содержащая рекомбинантный ДНК-конструкт по п. 9.
14. Клетка по п. 13, где клетка представляет собой растительную клетку.
15. Растительная клетка по п. 14, в геном которой стабильно встроен рекомбинантный ДНК-конструкт по п. 9.
16. Трансгенное растение, в геном которого стабильно встроен рекомбинантный ДНК-конструкт по п. 9.
17. Трансгенное растение по п. 16, где указанное растение представляет собой однодольное растение.
18. Трансгенное растение по п. 17, где указанное однодольное выбрано из группы, включающей маис, пшеницу, рис, ячмень, сорго, просо, сахарный тростник и рожь.
19. Трансгенное растение по п. 16, где указанное растение представляет собой двудольное растение.
20. Трансгенное растение по п. 19, где указанное двудольное выбрано из группы, включающей сою, Brassica sp., хлопчатник, сафлор, табак, люцерну и подсолнечник.
21. Трансгенное семя, образованное трансгенным растением по п. 16.
22. Растение, стабильно трансформированное рекомбинантным конструктом экспрессии, содержащим растительный промотор и гетерологичный фрагмент нуклеиновой кислоты, функционально связанный с указанным промотором, где указанный промотор представляет собой индуцируемый промотор и способен управлять экспрессией указанного гетерологичного фрагмента нуклеиновой кислоты в растительной клетке, а также где указанный промотор содержит фрагмент с SEQ ID NO:10.
23. Способ экспрессии кодирующей последовательности или функциональной РНК в растительной клетке, включающий:
a) введение рекомбинантного ДНК-конструкта по п. 9 в растительную клетку, где по меньшей мере одна гетерологичная последовательность содержит кодирующую последовательность или функциональную РНК;
b) рост растительной клетки стадии a);
c) индукцию индуцируемого промотора путем обработки растительной клетки из (b) химическим веществом или стрессовым фактором; и
d) отбор растительной клетки, проявляющей экспрессию кодирующей последовательности или функциональной РНК рекомбинантного ДНК-конструкта.
24. Способ по п. 23, отличающийся тем, что химическое вещество представляет собой антидот.
25. Способ по п. 23, отличающийся тем, что обработка стрессовым фактором представляет собой тепловую обработку.
26. Способ по п. 23, дополнительно включающий культивирование растительной клетки из d) с получением растения.
27. Способ экспрессии кодирующей последовательности или функциональной РНК в клетках пыльников, причем способ включает:
a) введение рекомбинантного ДНК-конструкта по п. 9 в растительную клетку, где по меньшей мере одна гетерологичная последовательность содержит кодирующую последовательность или функциональную РНК;
b) рост растительной клетки стадии a);
c) индукцию индуцируемого промотора путем обработки растительной клетки из (b) химическим веществом или стрессовым фактором и
d) выявление клеток пыльников, проявляющих экспрессию кодирующей последовательности или функциональной РНК рекомбинантного ДНК-конструкта.
28. Способ по п. 23 или 27, отличающийся тем, что происходит транзиторная экспрессия по меньшей мере одной гетерологичной последовательности.
29. Способ по п. 23 или по 27, отличающийся тем, что в растительную клетку стабильно встраивают по меньшей мере одну гетерологичную последовательность.
30. Способ изменения экспрессии по меньшей мере одного гетерологичного фрагмента нуклеиновой кислоты в растении, включающий:
(a) трансформацию растительной клетки рекомбинантным конструктом экспрессии по п. 9;
(b) индукцию индуцируемого промотора путем обработки клетки из (a) химическим веществом или стрессовым фактором;
(c) рост фертильных зрелых растений из трансформированной растительной клетки стадии (a); и
(d) отбор растений, содержащих трансформированную растительную клетку, где экспрессия гетерологичного фрагмента нуклеиновой кислоты увеличена или уменьшена.
31. Способ изменения ценного признака растения путем трансгенеза, включающий:
a) введение рекомбинантного ДНК-конструкта по п. 9 в растение;
b) индукцию индуцируемого промотора путем обработки растения из (a) химическим веществом или стрессовым фактором;
c) рост фертильного зрелого растения, полученного в результате этапа b); и
d) отбор растения, экспрессирующего по меньшей мере одну гетерологичную нуклеотидную последовательность по меньшей мере в одной ткани растения, исходя из измененного ценного признака.
32. Способ по п. 31, отличающийся тем, что ценный признак выбран из группы, состоящей из устойчивости к заболеваниям, устойчивости к гербицидам, устойчивости к насекомым, метаболизма углеводов, метаболизма жирных кислот, метаболизма аминокислот, развития растений, регуляции роста растений, улучшения урожайности, устойчивости к засухе, устойчивости к холоду, устойчивости к теплу и устойчивости к солям.
33. Выделенный полинуклеотид, содержащий:
a) нуклеотидную последовательность, содержащую последовательность SEQ ID NO:19 или SEQ ID NO:22 или их функциональный фрагмент;
b) нуклеотидную последовательность, содержащую полноразмерную цепь, комплементарную нуклеотидной последовательности (a); или
c) нуклеотидную последовательность, содержащую последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичность последовательности, исходя из способа выравнивания BLASTN, при сравнении с нуклеотидной последовательностью из (a) или (b); и
причем указанная нуклеотидная последовательность представляет собой промотор.