СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РИСКА РАЗВИТИЯ СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ У ЖЕНЩИН С ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ
METHOD FOR EVALUATING RISK OF DEVELOPING CARDIOVASCULAR COMPLICATIONS IN FEMALES SUFFERING FROM HYPERTENSIVE DISEASE

Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии и иммунологии.
Наибольший вклад в преждевременную смертность населения России вносит артериальная гипертензия - 35,5%. При этом женщины живут существенно дольше мужчин - разрыв составляет 12,5 лет, но от сердечно-сосудистых заболеваний их умирает больше - в 2011 смертность у мужчин - 486000, у женщин - 590400 человек [1]. Важнейшим элементом первичной кардиоваскулярной профилактики является раннее выявление лиц с повышенным сердечно-сосудистым риском [2]. При определении вероятности развития сердечно-сосудистых осложнений необходимо учитывать гендерные особенности, определяющие прогрессирование гипертонической болезни (ГБ).
Классический анализ уровня риска осложнений при ГБ проводится на основании суммирования имеющихся известных факторов риска. В мире существует несколько комплексных систем определения суммарного риска развития сердечно-сосудистых осложнений. Большинство из них основывается на данных Фрамингемгского исследования [3], которое соответствует американской популяции. С 2003 года в Европе рекомендуется пользоваться системой оценки риска SCORE [4], разработанной на основании результатов когортных исследований проведенных в 12 европейских странах, включая Россию. При данном способе учитываются уровень холестерина, систолического артериального давления (АД), возраст, курение. При этом отказ от курения понижает риск развития сердечно-сосудистых осложнений, а по нашему исследованию в ближайшие два года он резко возрастает. Фрамингемская модель оценивает риск сердечнососудистых заболеваний и смерти, а по модели SCORE определяется только риск сердечно-сосудистой смерти в течение 10 лет у больных, не имеющих доказанной ишемической болезни сердца. Для расчета вероятности нефатальных осложнений у женщин в данной системе рекомендуется увеличить фатальный риск в 4 раза. При сравнении полученного риска с данными собственного исследования выявлено завышение риска развития сердечно-сосудистых осложнений. В соответствии с Российскими рекомендациями по диагностике и лечению артериальной гипертензии (четвертый пересмотр) рекомендуется система стратификации риска, учитывающая факторы риска, поражение органов-мишеней, сахарный диабет, метаболический синдром и ассоциированные клинические состояния, разработанная также на основе Фрамингемской модели [5]. Данные алгоритмы используют в качестве факторов риска некие пороговые значения основных факторов риска, таких как АД, наследственность, возраст, курение, уровень холестерина, сахарный диабет. Описано более 30 дополнительных факторов риска, имеющих отношение к ближайшему и отдаленному прогнозу больных с ГБ. На основании подсчета числа имеющихся факторов риска у каждого больного производится оценка суммарного риска по таблицам. Положительным является возможность применения данного способа у всех категории пациентов, но снижается индивидуальная диагностическая ценность. При анализе чувствительности классических способов в ряде исследований указывается на заниженную реальную вероятность сердечно-сосудистых осложнений в группах высокого риска, что потенциально может привести к недостаточному вниманию и отсутствию индивидуального подхода при наблюдении данной категории лиц [6]. Показано, что анализ признанных факторов, влияющих на риск развития осложнений при ГБ, оставляет 50% вероятность повышения рассчитанного риска [7], что обосновывает поиск новых маркеров, определяющих прогрессирование заболевания.
Существует исследование Тимашевой Я.Р. [8], рекомендующее для оценки риска развития сердечно-сосудистых осложнений ГБ проводить генотипирование по полиморфным вариантам генов цитокинов IL-1β, IL-6, IL-10 и TNF-α.
Однако генетические анализы, кроме специальных тест-систем, требуют наличия дорогостоящего оборудования, что ограничивает применение метода и может не отражать фенотипическое проявление генотипических особенностей.
3a
4
Известно, что у больных с ГБ для оценки динамики течения гипертонической болезни и прогнозирования исхода в дополнение к стандартным лабораторным и инструментальным методикам проводят исследование в крови концентрации IL-1α, IL-8, неоптерина, C, C, в мембране эритроцитов - уровень β-спектрина. Проводится забор крови у больных с ГБ, отдельно анализируются больные со II стадией ГБ, в числе прочих цитокинов определяется IL-1α, IL-1ra, при этом используется метод иммуноферментного анализа [9], [10].
Данные о связи количества CD34 клеток крови и полом, уровнем АД представлены в исследовании Руды М.М. [11]. В данном исследовании проводится забор крови, выделение CD34 клеток методом проточной цитометрии, анализ связи CD34 со степенью повышения АД.
В основу современных способов прогнозирования риска развития сердечно-сосудистых осложнений у больных ГБ должен быть положен персонализированный подход для оптимизации диагностических и лечебных стратегий путем адаптации их к особенностям конкретного пациента [12].
Технический результат заключается в повышении точности определения индивидуального риска развития фатальных и нефатальных сердечно-сосудистых событий у женщин с эссенциальной артериальной гипертензией.
6
6
6
6
Сущность изобретения заключается в том, что в способе определения риска развития сердечно-сосудистых осложнений у женщин с гипертонической болезнью путем забора крови у больных, определения в крови уровня интерлейкина-1α, рецепторного антагониста интерлейкина-1 иммуноферментным методом определяют показатель, равный отношению рецепторного антагониста интерлейкина-1 к интерлейкину-1α, фактор ингибирования лейкозных клеток в крови и количество CD34 клеток с последующим диагностированием развития сердечно-сосудистых осложнений в течение 5 лет. Высокий риск развития сердечно-сосудистых осложнений устанавливают при уровне показателя, равного отношению рецепторного антагониста интерлейкина-1 к интерлейкину-1α менее 18,2, уровне фактора ингибирования лейкозных клеток более 6 пг/мл, количестве CD34 клеток менее 250/10 лейкоцитов. Средний риск развития сердечно-сосудистых осложнений устанавливают при уровне показателя, равного отношению рецепторного антагониста интерлейкина-1 к интерлейкину-1α менее 18,2, совместно с одним или двумя факторами: уровне фактора ингибирования лейкозных клеток менее 6 пг/мл и/или количестве CD34 клеток более 250/10 лейкоцитов, также средний риск при уровне показателя, равного отношению рецепторного антагониста интерлейкина-1 к интерлейкину-1α в интервале от 18,2 до 30, вне зависимости от уровня фактора ингибирования лейкозных клеток и количества CD34 клеток или при уровне показателя, равного отношению рецепторного антагониста интерлейкина-1 к интерлейкину-1α более 30, совместно с одним или двумя факторами: фактор ингибирования лейкозных клеток более 6 пг/мл и/или количество CD34 клеток менее 450/10 лейкоцитов. Низкий риск сердечно-сосудистых осложнений устанавливают при уровне показателя, равного отношению рецепторного антагониста интерлейкина-1 к интерлейкину-1α более 30, уровне фактора ингибирования лейкозных клеток менее 6 пг/мл, количестве CD34 клеток более 450/10 лейкоцитов.
В основу предлагаемого способа положено следующее обоснование. Система цитокинов, к которой относится IL-1α, определяет прогрессирование эндотелиальной дисфункции у больных ГБ. При этом практическое применение результатов уровней IL-1α имеет ряд ограничений, в частности из-за индивидуальности референтных значений. Выявлено, что IL-1α у женщин на фоне гидродинамического стресса при повышенном АД и сниженном уровне эстрадиола (возраст обследуемых соответствует климактерическому периоду) определяется в сыворотке в большей концентрации, чем у мужчин с гипертонической болезнью (p<0,001) и женщин сопоставимого возраста и стадии климактерия без ГБ (p<0,001). В экспериментальных работах сотрудников кафедры физиологии Колумбийского университета (1992) показано, что гипоксия, гидродинамический стресс являются стимулами, которые индуцируют эндотелиальные клетки в первую очередь к синтезу и высвобождению IL-1α [13]. Есть данные, подтверждающие наибольшее патогенетическое значение IL-1α именно у женщин, так как лютеинизирующий гормон и прогестерон [14] оказывают скоординированное действие на трансактивацию гена ADAMTS-1 аналогично IL-1α. Учитывая рецепторные особенности клеток организма, повышается экспрессия мРНК данного гена избирательно в эндотелиальных клетках сосудов, сердца, почек, надпочечников. ADAMTS-1 подавляет ангиогенез, способствует пролиферации гладкомышечных клеток сосудистой стенки, определяя прогрессирование ГБ. Важно отметить, что в предлагаемом способе учитывается уровень IL-1ra, который способен нивелировать действие IL-1α, являясь рецепторным конкурентом. Выявлена и проанализирована связь изменения уровня IL-1α, LIF с количеством CD34 клеток крови, которые по данным литературы включают в себя пул циркулирующих предшественников эндотелиальных клеток сосудов [15]. Учитывая, что уровень предшественников эндотелиальных клеток сосудов отражает компенсаторные возможности организма восстанавливать поврежденный эндотелий сосудов и способствовать ангиогенезу при инфарктах и инсультах, обнаруженная закономерность влияет на риск развития сердечно-сосудистых осложнений у женщин с ГБ. Кроме этого, под воздействием IL-1α гладкомышечные клетки сосудистой стенки, миофибробласты миокарда синтезируют более высокие дозы LIF, который также стимулирует переход стволовых клеток в предшественники эндотелиальных [16], что объясняет выявленные диагностически ценные связи IL-1α/IL-1ra, уровня LIF, количества CD34 клеток с риском развития сердечно-сосудистых осложнений у женщин с ГБ. При разработке способа прогнозирования риска развития сердечно-сосудистых осложнений у женщин с ГБ оценивают степень согласия между наблюдаемыми и прогнозируемыми событиями в течение 5 лет. С этой целью использовали кривую Каплана-Мейера для оценки наблюдаемого количества сердечно-сосудистых событий, которое затем сравнивали с риском сердечно-сосудистых заболеваний предложенным способом. Рассчитывали долю сердечно-сосудистых событий, которые произошли в верхнем квартиле предсказанного риска (т.е. чувствительность верхнего квартиля предсказанного риска для выявления сердечно-сосудистых событий), и долю лиц без событий (то есть специфика верхнего квартиля для сердечно-сосудистых событий). Анализировали 95% доверительные интервалы разности рисков между квартилями, доказывая достоверность выявленных отличий (p<0,05). Определены 4 интервала изменения уровней IL-1α, IL-1ra, LIF, CD34 клеток, соответствующие разной степени риска развития сердечно-сосудистых осложнений за 5 лет наблюдения. Проанализирована прогностическая ценность отдельно взятых показателей IL-1α, IL-1ra, LIF, CD34 клеток, соотношение с абсолютным риском развития сердечно-сосудистых осложнений у женщин с ГБ (табл.1). Выявлено повышение чувствительности и специфичности с 47-60% при работе с изолированными показателями до 87% при системном подходе в соответствии с предлагаемым способом.
Получены критерии: показатель, равный отношению IL-1ra к IL-1α, уровень LIF и количество CD34 клеток при совместном анализе, выделяющие женщин с различным риском развития сердечно-сосудистых осложнений в виде инфаркта миокарда и нарушения мозгового кровообращения, транзиторных ишемических атак, стенокардии за 5 лет наблюдения на фоне ГБ. Способ апробировался в группе женщин пре- и постменопаузального периодов, данные сопоставлялись с результатами у мужчин с ГБ и женщин без данной патологии. Доказана эффективность способа у женщин с ГБ, вне зависимости от применяемой терапии, за время наблюдения перенесенного инфаркта, нарушения мозгового кровообращения, так как показатели проявили себя и как индикаторы эффективности терапии.
Способ осуществляют следующим образом:
1. Женщинам с диагнозом гипертоническая болезнь, без сахарного диабета I типа, аутоиммунной патологии (ревматоидный артрит, системная красная волчанка и др.), вне обострения инфекционных заболеваний проводится забор крови в две пробирки:
I - для цитофлюориметрического анализа: в вакуумную пробирку для венозной крови объемом 2-5 мл с ЭДТА (рекомендуется проведение анализа в течение 1-4 часов). После заполнения пробирки кровью до указанного на ней объема пробу необходимо осторожно перемешать плавным переворачиванием и вращением пробирки в течение не менее 2 минут (переворачивание 8-10 раз). Транспортировку и хранение производить при температуре 18-23°C в вертикальном положении. Затем подготовить образцы для цитофлюориметрического анализа: поместить раствор моноклональных или поликлональных антител, меченных флуорохромом, в количестве, рекомендованном фирмой производителем, в пробирку для цитофлюориметрического анализа (12×75 мм), добавить 100 мкл периферической крови. Аккуратно перемешивать при помощи вихревого встряхивателя 1-3 секунд и инкубировать в защищенном от света месте в течение времени, рекомендованного фирмой-производителем. Провести лизис эритроцитов при помощи лизирующих растворов согласно инструкции фирмы-производителя. Как правило, лизис производится без отмывки с последующим анализом. В тех случаях, когда фирмой-производителем антител рекомендована отмывка образца, необходимо осадить окрашенные клетки центрифугированием (1000 g, 5 мин), а затем ресуспендировать в 1 мл фиксирующего раствора. И только затем в пробу добавляют антитела, меченные флуоресцентной меткой, специфичные к антигенам человека: к CD45 и CD34. Далее из популяции клеток CD45 low/- по экспрессии «CD34» выделяли субпопуляции CD34 клеток с пересчетом на один миллион лейкоцитов.
II - для определения IL-1α, IL-1ra, LIF иммуноферментным методом проводят забор крови в вакуумную пробирку для сыворотки с индуктором свертывания. Необходимо дождаться завершения процесса свертывания (30 мин) и центрифугировать пробирку со свернувшейся кровью не менее 10 минут с ускорением 1500 G (примерно 3000 об/мин). Отделить сыворотку от сгустка и хранить при температуре -20°C. Рекомендуется выделить и заморозить сыворотку в течение 120 минут с момента забора крови во избежание разрушения IL-1α, IL-1ra, LIF и искажения полученных результатов. Затем с помощью иммунферментного набора для количественного определения человеческого IL-1α, IL-1ra, LIF в сыворотке крови в соответствии с инструкциями производителя определяется уровень IL-1α, IL-1ra, LIF. Рассчитывается показатель, равный отношению IL-1ra к IL-1α (IL-1ra/IL-1α).
6
6
6
6
2. Определяют индивидуальный риск развития сердечно-сосудистых осложнений в ближайшие 5 лет у женщин с ГБ. Высокий риск - 87% - прогнозируется при уровне показателя, равного отношению IL-1ra к IL-1α менее 18,2, уровне LIF более 6 пг/мл, количестве CD34 менее 250/10 лейкоцитов. Средний риск - 28% - прогнозируется: а) при уровне показателя, равного отношению IL-1ra к IL-1α менее 18,2, совместно с одним или двумя факторами: уровне LIF менее 6 пг/мл и/или количестве CD34 клеток более 250/10 лейкоцитов; б) при уровне показателя, равного отношению IL-1ra к IL-1α на момент определения риска в интервале от 18,2 до 30, вне зависимости от уровня LIF и количества CD34 клеток; в) при уровне показателя, равного отношению IL-1ra к IL-1α более 30, совместно с одним или двумя факторами: уровнем LIF более 6 пг/мл и/или количеством CD34 клеток менее 450/10 лейкоцитов. Низкий риск - менее 3% - при уровне показателя, равного отношению IL-1ra к IL-1α более 30, уровне LIF менее 6 пг/мл, количестве CD34 клеток более 450/10 лейкоцитов.
Способ разрабатывался на основании исследования, в которое было включено 208 женщин с ГБ II стадии (на момент начала наблюдения), группу сравнения составили 100 мужчин с ГБ II стадии и 100 женщин, сопоставимых по возрасту без ГБ. После определения IL-1ra/IL-1α, уровня LIF, CD34 клеток проводилось наблюдение с ежегодным обследованием в течение 5 лет. Критерии включения в исследование (на момент начала наблюдения): гипертоническая болезнь II стадии, не получавшие (2007-2008 г.) гипотензивную терапию или не достигшие на фоне приема препаратов целевых уровней АД, трудоспособный возраст (женщины до 55 лет, мужчины до 60), сопоставимые схемы базовой терапии после начала исследования (монотерапии или комбинации и-АПФ, β-адреноблокаторы, диуретики), подписание пациентом информированного согласия. Критерии исключения пациента из исследования: наличие ассоциированных клинических состояний (на момент начала наблюдения), сахарного диабета, аутоиммунной патологии, проявление симптоматической АГ, перенесенные за месяц до начала исследования инфекционные заболевания, психические заболевания, в том числе вследствие злоупотребления алкоголя или наркотиков; отказ пациента от долгосрочного участия в исследовании.
За время наблюдения среди женщин с ГБ были зарегистрированы следующие осложнения: 3 фатальных сердечно-сосудистых осложнений (1 ишемический инсульт, 2 инфаркта миокарда), нефатальные - 20 нарушений мозгового кровообращения, 17 инфарктов миокарда, транзиторная ишемическая атака - 18 случаев, у 20 женщин выставлен диагноз: стенокардия напряжения. Таким образом, сердечно-сосудистые осложнения развились у 78 больных.
Согласно предлагаемому способу низкий риск был определен у 40 пациенток (в 97,5 случаев подтвердился, у одной пациентки выставлен диагноз: «Стенокардия напряжения»), средний - у 110 человек (осложнения развились в 28%: у 16 женщин в виде стенокардии напряжения, 11 случая транзиторной ишемической атаки, 4 инфаркта миокарда, т.е. осложнения в 32%) и высокий - у 57 женщин (у 84% прогноз подтвердился в виде 3 фатальных осложнений, 11 транзиторных ишемических атак, 3 случая манифестации ИБС - стенокардия напряжения, 13 случаев инфаркта миокарда и 20 - нарушение мозгового кровообращения). Чувствительность способа - 75%, специфичность при «очень высоком» риске 84%, «низком» - 97,5%. При определении риска по Российским рекомендациям на основе Фрамингемской модели у всех пациентов был определен высокий риск развития сердечно-сосудистых осложнений (20-30%), при этом осложнения развились в 37% случаев, что подчеркивает отсутствие персонализированного подхода и низкую специфичность. По шкале SCORE при переводе вероятности фатальных в суммарные данные фатальных и нефатальных осложнений за счет увеличения риска, указанного в таблице, в 3,5-4 раза в зависимости от возраста - 128 пациентов соответствовали риску от 16 до 30% (у 38 больных развились сердечно-сосудистые осложнения, что соответствует 30%), 80 человек - от 40 до 60% (у 50% развились осложнения в виде 3 фатальных случаев, у 15 пациентов - стенокардия напряжения, 22 зарегистрированных инфаркта миокарда и нарушения мозгового кровообращения). Тем самым система SCORE с высокой вероятностью определила риск фатальных осложнений, но при переводе в суммарный анализ фатальных и нефатальных случаев проявила меньшую чувствительность и специфичность, чем предлагаемый способ для женщин с ГБ II стадии.
Таким образом, при внедрении данного изобретения повысится точность оценки отдаленного прогноза женщин с ГБ. Способ имеет наибольшую клинико-диагностическую ценность при определении первичного прогноза у женщин со II стадией ГБ, дифференцировки лиц с «высоким» и «низким» рисками (наиболее высокая чувствительность способа). При определении риска как «средний» прогноз считается сомнительным, что показано в исследовании. Пациенткам с «высоким» риском развития сердечно-сосудистых осложнений показана коррекция медикаментозной терапии, подбор индивидуальных схем наблюдения, дополнительные инструментальные методы исследования, направленные на снижение вероятности развития повреждения органов-мишеней в виде инфаркта миокарда и нарушения мозгового кровообращения. Это приведет к уменьшению числа фатальный осложнений и снижению инвалидизации и смертности женщин с ГБ, что имеет не только медицинский, но и социально-экономический эффект. Больным с низким уровнем риска может быть уменьшена терапия, что снизит затраты на лечение и риск побочных эффектов терапии, частоту госпитализаций.
6
Пример 1. Больная А., 60 лет. Уровень АД - 150 и 100 мм рт.ст., курит по 10 сигарет в день, гипертрофия левого желудочка, холестерин - 8 ммоль/л. Диагноз: Гипертоническая болезнь, II стадия, высокий дополнительный риск (по Российским рекомендациям). По шкале SCORE - при переводе риска фатальных осложнений в суммарный фатального и нефатального (6·4=24%) соответствовал также высокому. По предложенному способу риск соответствовал низкому (уровень IL-1α - 10 пг/мл, IL-1ra - 500 пг/мл (IL-1ra/IL-1α=500/10=50), уровень LIF - 2 пг/мл, CD34 клетки - 470/10 Le). За 8 лет наблюдения несмотря на низкую приверженность к гипотензивной терапии осложнений не зафиксировано.
6
Пример 2. Больная Б., 55 лет, уровень АД - 150 и 95 мм рт.ст., бросила курить 8 месяцев назад, гипертрофия левого желудочка, холестерин - 7 ммоль/л. Диагноз: Гипертоническая болезнь, II стадия, высокий дополнительный риск (по Российским рекомендациям). По шкале SCORE - при переводе риска фатальных осложнений в суммарный фатальных и нефатальных (2·4=8%) - соответствовал среднему. По предложенному способу риск соответствовал высокому: уровень IL-1α - 26 пг/мл, IL-1ra - 160 пг/мл (IL-1ra/IL-1α=160/26=6,1), уровень LIF - 8 пг/мл, CD34 клетки - 200/10 Le. Через 8 месяцев диагностирована транзиторная ишемическая атака на фоне приверженности к гипотензивной терапии, с последующим летальным ишемическим инсультом.
6
Пример 3. Больная В., 60 лет, уровень АД - 160 и 100 мм рт.ст., не курит, гипертрофия левого желудочка, холестерин - 5 ммоль/л. Диагноз: Гипертоническая болезнь, II стадия, высокий дополнительный риск (по Российским рекомендациям). По шкале SCOR - при переводе риска фатальных осложнений в суммарный фатальных и нефатальных (8%) - соответствовал среднему. По предложенному способу риск также соответствовал среднему: уровень IL-1α - 18 пг/мл, IL-1ra - 200 пг/мл (IL-1ra/IL-1α=200/19=11), уровень LIF - 0,8 пг/мл, CD34 клетки - 280/10 Le. Через 5 лет наблюдения - выставлен диагноз: «Стенокардия напряжения», за все время наблюдения повреждений органов-мишеней не выявлено.
Таким образом, примеры 1 и 2 иллюстрируют случаи определения риска развития сердечно-сосудистых осложнений у женщин, страдающих ГБ, с более высокой точностью предлагаемым способом в сравнении с классическими, подходящими как для мужчин, так и для женщин со слабой гендерной коррекцией, не учитывающими индивидуальные референтные значения и динамику показателей за год. Пример 3 демонстрирует совпадение по качественному определению степени риска - «средний», который совпал с реальными событиями.
Таблица 1
Уровни IL-1α, IL-1ra, CD34 клеток у женщин с ГБ и риск развития сердечно-сосудистых осложнений
Показатель
Уровни
IL-1α, пг/мл
менее 6
6-13,9
14-22
более 22,0
Абсолютный риск развития сердечно-сосудистых осложнений [95% ДИ]
2%
14%
35%
60%
[0-4%]
[8-28%]*
[25-44%]
[57-64%]*
IL-1ra, пг/мл
Менее 150
150-273
274-399
Более 400
Абсолютный риск осложнений [95% ДИ]
47%
33%
13%
2%
[42-52%]*
[27-39%]*
[7-18%]*
[0-3%]
CD34 клетки/10<sup>6</sup> Le
Менее 100
100-250
251-400
Более 400
Абсолютный риск осложнений [95% ДИ]
57%
32%
15%
2%
[50-63%]*
[28-36%]*
[9-20%]*
[0-3%]*
LIF, пг/мл
Менее 2
2-7,9
Более 8
Абсолютный риск осложнений [95% ДИ]
2%
24%
57%
[0-4%]
[18-31%]*
[47-70%]*
Примечание: * - при расчете отношений рисков 95% ДИ не включали 1 (p<0,5)
Список литературы
1. Женщины и мужчины России. 2012: Стат.сб. / Росстат. - М., 2012. - 299 с.
2. Чазова И.Е., Ратова Л.Г. Гипертоническая болезнь: от А.Л. Мясникова до наших дней // Кардиологический вестник. - 2010. - №1. - С.5-12.
3. D′Agostino R.B., Vasan R.S.,. Pencina M.J, Wolf P.A., Cobai М., Massaro J.M.,. Kannel W.B. General Cardiovascular Risk Profile for Use in Primary Care: The Framingham Heart Study // Circulation. - 2008. - Vol. 117. - P. 743-753.
4. Conroya R.M., Pyorala K., Fitzgeralda A.P., Sansc S., Menottid A., Backere G., Ducimetieref P., Jousilahtig P., Keilh U., Njistadi I., Oganovj R.G., Thomsenk Т., Tunstall-Pedoel H., Tverdalm A., Wedeln H., Whincupo P., Wilhelmsenn L., Grahama I.M. Estimation of ten-year risk of fatal cardiovascular disease in Europe: the SCORE project, on behalf of the SCORE project group 1 // European Heart Journal. - 2003. - Vol.24. - №11. - P. 987-1003.
5. Диагностика и лечение артериальной гипертензии. Российские рекомендации (четвертый пресмотр) // Системные гипертензии. - 2010. - №3. - С. 5-26.
6. Brindle P., Beswick A., Fahey Т., Ebrahim S. Accuracy and impact of risk assessment in the primary prevention of cardiovascular disease: a systematic review // Heart. - 2006. - Vol. 92. - №12. - P. 1752-1759.
7. Struthers A.D. A New Approach to Residual Risk in Treated Hypertension-3P // Screening Hypertension. - 2013. - Vol. 62. - P. 236-239.
8. Тимашева Я.Р. Роль полиморфизма и уровня экспрессии генов цитокиновой сети в формировании молекулярно-генетических основ предрасположенности к эссенциальной гипертензии: Автореф. дис. канд. мед. наук. - Москва. - 2008. - 27 с.
9. Гаврилюк Е.В., Пехова К.А., Михин В.П., Конопля А.И. Иммунометаболические нарушения при гипертонической болезни различной степени тяжести // Вест. новых медицинских технологий. - 2012. - Т. XIX, №1. - С. 172-174.
10. Пехова К.А. Иммунометаболические нарушения и структурно-функциональные свойства эритроцитов у больных гипертонической болезнью: Автореф. дис. канд. мед. наук., 2012. - Курск. - 2012. - 24 с.
11. Руда М.М. Циркулирующие предшественники эндотелиальных клеток у больных с ишемической болезнью: Автореф. дис. канд. мед. наук., 2009. - Москва. - 2009. - 25 с.
12. Volzke H, Schmidt С.О., Baumeister S.E., Ittermann Т., Fung G., Krafczyk-Kort J., Hoffmann W., Schwab M., Meyer zu Schwabedissen H.E., Dorr M., Felix S.B., Lieb W., Kroemer H.K. Personalized cardiovascular medicine: concepts and methodological considerations // Nature Reviews Cardiology. - №10. - P. 308-316.
13. Shreeniwas R., Koga S., Karakurum M., Pinsky D., Kaiser E., Brett J., Wolitzky B.A., Norton C., Plocinski J., Benjamin W., Kurns D.K., Goldestein A., Stern D. // Hypoxia-mediated induction of endothelial cell interleukin-1a: an autocrine mechanism promoting expression of leukocyte adhesion molecules on the vessel surface. J Clin Invest. - 1992. - Vol. 90 - P. 2333-2339.
14. Doyle K.M., Russell D.L., Sriraman V., Richards J.S. Coordinate transcription of the ADAMTS-1 gene by luteinizing hormone and progesterone receptor // Mol. Endocrinol. - 2004. - Vol. 18. - №10. - P. 2463-2478.
15. Hirschi K.K., Ingram D.A., Yoder M.C. Assessing identity, phenotype, and fate of endothelial progenitor cells // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2008. - 28. - P. 1548-1595.
16. Zouein F.A., Kurdi M., Booz G.W. LIF and the heart: just another brick in the wall? // European Cytokine Network. - 2013. - Vol. 24. - №1. - P. 11-19.