ДОБАВКА ДЛЯ МАТЕРИ, ПРЕДНАЗНАЧЕННАЯ ДЛЯ УКРЕПЛЕНИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ РЕБЕНКА
ADDITIVE FOR MOTHER INTENDED FOR REINFORCING THE IMMUNE SYSTEM OF A CHILD

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение в целом относится к композиции, которую вводят матери, вскармливающей ребенка грудью, для укрепления иммунной системы и/или предупреждения заболевания, относящегося к иммунной системе, у ребенка.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
В течение первых недель или месяцев жизни на рост и развитие ребенка может влиять ряд внешних факторов. В частности, при проводимых в настоящее время исследованиях становится все более очевидным, что питание матери во время грудного вскармливания ребенка может влиять на состояние здоровья ребенка как немедленно, так и в последующие периоды его жизни.
Следовательно, желательно разработать пищевые добавки для матери, помогающие матери обеспечить пользу для здоровья ребенка, включающую полезные эффекты, относящиеся к иммунной системе, такие как уменьшение аллергических реакций, включая долгосрочную пользу в последующие периоды жизни ребенка, когда ребенок уже не находится на грудном вскармливании.
КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение основано на открытии, сделанном авторами изобретения и состоящем в том, что добавление к рациону питания матери неперевариваемых олигосахаридов в то время, когда ребенок получает грудное молоко, оказывает благоприятное программирующее воздействие на иммунный ответ у ребенка.
Следовательно, настоящее изобретение относится к композиции для матери, предназначенной для лактирующей самки в послеродовом периоде, где композиция содержит неперевариваемый олигосахарид, для укрепления иммунной системы потомства, вскармливаемого этой самкой. Данную композицию можно с пользой применять для укрепления иммунной системы ребенка, когда данную композицию вводят матери ребенка в послеродовый период грудного вскармливания, и этот полезный эффект у ребенка может наблюдаться в последующие периоды его жизни, например, в детстве и/или в подростковом периоде. Укрепление иммунной системы может включать улучшение (например, уменьшение) в отношении аллергической реакции.
Таким образом, согласно первому аспекту в настоящем изобретении предложена композиция, содержащая неперевариваемый олигосахарид, применяемая при укреплении иммунной системы субъекта, являющегося млекопитающим, где данная композиция предназначена для введения лактирующей самке в послеродовом периоде, вскармливающей указанного субъекта.
Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предложено применение неперевариваемого олигосахарида для получения композиции для укрепления иммунной системы и/или предупреждения заболевания, относящегося к иммунной системе, у субъекта, являющегося млекопитающим, где данная композиция предназначена для введения лактирующей самке в послеродовом периоде, вскармливающей указанного субъекта млекопитающего.
Согласно следующему аспекту в настоящем изобретении предложен способ укрепления иммунной системы и/или предупреждения заболевания, относящегося к иммунной системе, у субъекта, являющегося млекопитающим, где данный способ включает предоставление или введение композиции, содержащей неперевариваемый олигосахарид, лактирующей самке в послеродовом периоде, вскармливающей указанного субъекта.
Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предложен способ предоставления или введения композиции, содержащей неперевариваемый олигосахарид, лактирующей самке в послеродовом периоде, вскармливающей субъекта, являющегося млекопитающим, где композиция укрепляет иммунную систему и/или предупреждает заболевание, относящееся к иммунной системе, у указанного субъекта.
Как очевидно из последующего описания, в подходящих воплощениях настоящего изобретения предложено применение композиции, содержащей неперевариваемый олигосахарид, для предупреждения аллергической реакции у субъекта, являющегося млекопитающим. Полезные эффекты для иммунной системы, такие как предупреждение аллергической реакции, могут включать долгосрочные полезные эффекты, такие как предупреждение аллергической реакции в последующие периоды жизни ребенка, когда он уже не находится на грудном вскармливании.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
Фиг. 1 представляет собой столбчатую диаграмму, показывающую изменение толщины ушной раковины мышей после провокации овальбумином (OVA - ovalbumin) в тесте острой аллергической кожной реакции, как описано в Примере 1. Мышам проводили провокацию 20 мкг/20 мкл OVA внутрикожно, и через час измеряли отек ушной раковины, проявившийся в результате острой аллергической кожной реакции. Номера, пересекающие ось x, представляют собой группу мышей (как показано в таблице 1), основанную на обработке и режиме питания матери, а значения вдоль оси y представляют собой изменение (мкм) толщины ушной раковины, измеренной у потомства (* Р<0,05, ** Р<0,01, **** Р<0,00001).
Фиг. 2 представляет собой столбчатую диаграмму, показывающую шоковый балл, наблюдаемый у мышей после провокации OVA в тесте острой аллергической кожной реакции, как описано в Примере 1. Мышам проводили провокацию 20 мкг/20 мкл OVA внутрикожно, и через 30 минут после провокации оценивали шоковый балл. Номера, пересекающие ось x, представляют собой группу мышей (как показано в таблице 1), основанную на обработке и режиме питания матери, а значения вдоль оси y представляют собой шоковые баллы, измеренные у потомства (1: опухшие глаза, 2: затруднение дыхания, пилоэрекция, 3: нарушенная подвижность, 4: отсутствие подвижности, 5: смерть) (* Р<0,05, ** Р<0,01, *** Р<0,001 = значимое отличие от группы 1 таблицы 1 (т.е. контроля)).
Фиг. 3 представляет собой столбчатую диаграмму, на которой представлена средняя температура мышей после провокации OVA в тесте острой аллергической кожной реакции, как описано в Примере 1. Мышам проводили провокацию 20 мкг/20 мкл OVA внутрикожно и через 30 минут после провокации измеряли температуру. Номера, пересекающие ось x, представляют собой группу мышей (как показано в таблице 1), основанную на обработке и режиме питания матери, а значения вдоль оси y представляют собой температуру мышей через 30 минут после провокации (* Р<0,05, ** Р<0,01, *** Р<0,001 = значимое отличие от группы 1 таблицы 1 (т.е. контроля)).
Фиг. 4 содержит три столбчатых диаграммы, показывающих уровни OVA-специфичного иммуноглобулина (lgE, lgG1, lgG2a) у мышей после провокации OVA в тесте острой аллергической кожной реакции, как описано в Примере 1. Уровни OVA-специфичного lg измеряли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Номера, пересекающие ось x, представляют собой группу мышей (как показано в таблице 1), основанную на обработке и режиме питания матери, а значения вдоль оси y представляют собой уровни lgE (фиг. 4А), lgG1 (фиг. 4В) и lgG2a (фиг. 4С).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Библиографические ссылки, упомянутые в настоящем описании, для удобства представлены в виде перечня ссылок и добавлены в конце раздела Примеры. Полное содержание таких библиографических ссылок включено в настоящее описание посредством ссылки.
Определения
Для удобства некоторые термины и выражения, используемые в описании и прилагаемой формуле изобретения, собраны в данном разделе.
Ссылка на элемент в единственном числе не исключает возможности присутствия более чем одного элемента, если контекст явным образом не требует присутствия одного и только одного из элементов. ′′Один′′, как используют в данном описании, таким образом, обычно означает ′′по меньшей мере один′′.
Термин ′′грудное вскармливание′′ в данном описании определен как вскармливание или обеспечение потомства грудным молоком.
Термин ′′содержащий′′ и его сопряженные формы используют в неограничивающем смысле, что означает, что объекты, следующие за этим словом, включены, но объекты, конкретно не упомянутые, не исключены. Соответственно, термин ′′содержащий′′ включает более ограничивающие термины ′′состоящий по существу из′′ и ′′состоящий из′′.
Выражение ′′степень метоксилирования′′ (также называемая СЭ или ′′степень этерификации′′) предназначено для обозначения степени, до которой свободные карбоново-кислотные группы этерифицированы (например, посредством метилирования). Например, по отношению к пектину выражение ′′степень метоксилирования′′ или ′′СЭ′′ или ′′степень этерификации′′ относится к степени, до которой свободные карбоново-кислотные группы, содержащиеся в цепи полигалактуроновой кислоты, этерифицированы (например, посредством метилирования).
Выражение ′′укрепление иммунной системы субъекта, являющегося млекопитающим′′ (и подобные выражения) в целом определяют как обеспечение или обусловливание полезного улучшения иммунной системы субъекта, являющегося млекопитающим, включая, но, не ограничиваясь, укрепление, улучшение и/или стимуляцию иммунной системы указанного субъекта. Укрепление, улучшение и/или стимуляция может происходить по отношению к контрольной группе, которая может относиться к субъекту, являющемуся млекопитающим, мать которого не принимает композицию, содержащую неперевариваемый олигосахарид, раскрытый в данном изобретении, в период вскармливания.
Укрепление иммунной системы, как хорошо известно в данной области техники, означает по меньшей мере повышение способности субъекта, являющегося млекопитающим, реагировать на чужеродные антигены или на антигены, обусловленные заболеванием, то есть происходит увеличение числа клеток, подверженных атаке таких антигенов, их активности и умения обнаруживать и разрушать антигены. В некоторых других подходящих воплощениях укрепление иммунной системы относится к предотвращению неблагоприятного иммунного ответа, защите от неблагоприятного иммунного ответа и/или к его уменьшению. Иммунный ответ можно измерить с помощью любого числа стандартных тестов, известных в данной области техники, включая тесты, проводимые in vitro на образце, собранном у субъекта, являющегося млекопитающим. На укрепленный иммунный ответ может также указывать изменение (увеличение или уменьшение) физических манифестаций, таких как лихорадка и воспаление, а также излечение от системных и локальных инфекций, уменьшение симптомов заболевания и тому подобное.
Иллюстративный пример укрепленной иммунной системы включает улучшенную аллергическую реакцию у субъекта, являющегося млекопитающим. Соответственно, в некоторых конкретных воплощениях настоящее изобретение направлено на улучшение аллергической реакции у субъекта, являющегося млекопитающим, или обусловленного ею заболевания, такого как атопический дерматит, астма, профессиональная астма, пищевая аллергия (включая аллергию на коровье молоко и другие), аллергический ринит (например, пыльцевая аллергия), аллергия на пылевого клеща и другие формы гиперчувствительности, такие как системная анафилаксия и острая крапивница.
Выражение ′′заболевание, относящееся к иммунной системе′′, как используют в настоящем описании, относится к неблагоприятным, нежелательным и/или избыточным реакциям иммунной системы, включающим неблагоприятные, нежелательные и/или избыточные аллергические реакции, аутоиммунные состояния и тому подобное. Эти реакции могут быть частично или полностью вызваны гиперстимуляцией иммунной системы, которая может привести к избыточному воспалению и/или деструкции нормальных клеток и/или тканей. Заболевание (заболевания), относящиеся к иммунной системе, могут быть повреждающими, дискомфортными и/или иногда фатальными. Неограничивающие примеры расстройств могут включать аллергию типа 1, аллергию типа 2, аллергию типа 3, аллергию типа 4, экзему, астму, ринит, сенную лихорадку, риноконъюнктивит, бронхолегочную обструкцию, кишечные инфекции, инфекции дыхательных путей, атопический дерматит, аллергический дерматит, пищевую аллергию и тому подобное.
Термин ′′лактирующая′′ относится как к действию секреции молока из молочных желез, так и к периоду времени, когда самка вскармливает свое потомство. У людей термины ′′кормящая грудью′′, ′′кормящая′′ и ′′лактирующая′′ могут быть взаимозаменяемыми.
Термин ′′неперевариваемый′′, как используют в данном описании, относится к сахаридам и/или к олигосахаридам, которые не перевариваются в кишечнике под действием кислот или пищеварительных ферментов, присутствующих в верхнем пищеварительном тракте человека (в тонком кишечнике и желудке), но которые сбраживаются кишечной флорой человека.
Термин ′′послеродовый′′ в данном описании определяют как период, начинающийся сразу после рождения ребенка. Термин ′′послеродовый′′ относится к матери.
Выражение ′′предупреждение заболевания, относящегося к иммунной системе′′ (и тому подобное) в данном описании определяют как профилактическое лечение субъекта, являющегося млекопитающим, нуждающегося в этом, включающее, но не ограниченное, предупреждение, облегчение, изменение, обратное развитие, воздействие, ингибирование развития или прогрессирования, ослабление или излечение следующего: (1) заболевания, относящегося к иммунной системе, или (2) симптома заболевания, относящегося к иммунной системе, или (3) предрасположенности к заболеванию, относящемуся к иммунной системе, включая придание защитного иммунитета субъекту, являющемуся млекопитающим.
Термин ′′растворимый′′, как используют в данном описании по отношению к неперевариваемому олигосахариду, означает, что вещество является растворимым в соответствии с методом, описанным L. Prosky et al, 1988.
Термин ′′субъект, являющийся млекопитающим′′ в данном описании определяют как индивидуума млекопитающего, предпочтительно человека. Для целей исследования субъект может отличаться от человека. Например, субъект может представлять собой животное, подходящее для использования в качестве модели на животных, например, свинью, лошадь, мышь, крысу, корову, собаку, кошку, крупный рогатый скот, примата, отличающегося от человека (например, шимпанзе), и тому подобное.
Композиции для матери
Согласно первому аспекту в настоящем изобретении предложена композиция, содержащая неперевариваемый олигосахарид, состоящая или по существу состоящая из неперевариваемого олигосахарида, применяемая при укреплении иммунной системы субъекта, являющегося млекопитающим, где композиция предназначена для введения лактирующей самке в послеродовом периоде, вскармливающей указанного субъекта.
Согласно следующему аспекту в настоящем изобретении предложено применение неперевариваемого олигосахарида для получения композиции для укрепления иммунной системы и/или предупреждения заболевания, относящегося к иммунной системе, у субъекта, являющегося млекопитающим, где композиция предназначена для введения лактирующей самке в послеродовом периоде, вскармливающей указанного субъекта.
Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предложен способ укрепления иммунной системы и/или предупреждения заболевания, относящегося к иммунной системе, у субъекта, являющегося млекопитающим, включающий предоставление или введение композиции, содержащей неперевариваемый олигосахарид, лактирующей самке в послеродовом периоде, вскармливающей указанного субъекта.
Согласно другому аспекту в настоящем изобретении предложен способ предоставления или введения композиции, содержащей неперевариваемый олигосахарид, лактирующей самке в послеродовом периоде, вскармливающей субъекта, являющегося млекопитающим, где композиция укрепляет иммунную систему и/или предупреждает заболевание, относящееся к иммунной системе, у указанного субъекта.
Для целей настоящего изобретения олигосахарид может быть выбран из группы, состоящей из галактоолигосахаридов, фруктоолигосахаридов и кислых олигосахаридов. Предпочтительно олигосахариды, применяемые согласно любому аспекту настоящего изобретения, могут включать галактоолигосахарид, фруктоолигосахарид и кислый олигосахарид, состоять или по существу состоять из этих олигосахаридов.
Предпочтительно галактоолигосахарид представляет собой короткоцепочечный галактоолигосахарид, и/или фруктоолигосахарид представляет собой длинноцепочечный фруктоолигосахарид. Предпочтительно, субъект, являющийся млекопитающим, мать которого получает неперевариваемые олигосахариды в течение послеродового периода лактации (например, во время грудного вскармливания субъекта млекопитающего), может обладать значительно сниженной аллергической реакцией (например, нежелательной аллергической реакцией) по сравнению с субъектом, мать которого не получает неперевариваемый олигосахарид в течение послеродового периода лактации (например, во время грудного вскармливания указанного субъекта). Предпочтительно субъект, являющийся млекопитающим, представляет собой человека.
Неперевариваемые олигосахариды
Неперевариваемый олигосахарид может представлять собой пребиотический олигосахарид. Эти неперевариваемые олигосахариды могут оказывать благоприятное влияние на хозяина посредством селективного стимулирования роста и/или активности одного или ограниченного числа видов бактерий в ободочной кишке.
Предпочтительно настоящий неперевариваемый олигосахарид может быть растворимым. Растворимый олигосахарид дает возможность легкости применения и легко всасывается в организме женщины.
Олигосахарид может представлять собой нейтральный олигосахарид или кислый олигосахарид.
Нейтральные неперевариваемые олигосахариды
Выражение ′′нейтральные олигосахариды′′, как используют в настоящем изобретении, относится к сахаридам, имеющим степень полимеризации (СП) монозных звеньев, превышающую 2, более предпочтительно превышающую 3, еще более предпочтительно превышающую 4, наиболее предпочтительно превышающую 10, которые не перевариваются или лишь частично перевариваются в кишечнике под действием кислот или пищеварительных ферментов, присутствующих в верхнем пищеварительном тракте человека (тонком кишечнике и желудке), но сбраживаются кишечной флорой человека и предпочтительно не содержат кислотные группы. Нейтральный олигосахарид может структурно (химически) отличаться от кислого олигосахарида.
Термин нейтральные олигосахариды, как используют в настоящем изобретении, относится к сахаридам, имеющим степень полимеризации олигосахарида менее 100 монозных звеньев, предпочтительно менее 50, еще более предпочтительно менее 25, наиболее предпочтительно менее 10.
Термин ′′монозные звенья′′ относится к звеньям, имеющим замкнутую кольцевую структуру, предпочтительно к гексозным, например, пиранозным или фуранозным формам.
Нейтральный олигосахарид может содержать по меньшей мере 90%, более предпочтительно по меньшей мере 95% монозных звеньев, выбранных из группы, состоящей из маннозы, арабинозы, фруктозы, фукозы, рамнозы, галактозы, β-D-галактопиранозы, рибозы, глюкозы, ксилозы и их производных, где их содержание вычислено на основе суммарного числа монозных звеньев, содержащихся в олигосахариде.
n
n
n
n
n
Подходящие нейтральные олигосахариды могут сбраживаться кишечной флорой. Предпочтительно олигосахарид выбран из группы, состоящей из следующих олигосахаридов: целлобиозы (4-О-β-D-глюкопиранозил-D-глюкозы), целлодекстринов ((4-O-β-D-глюкопиранозил)-D-глюкозы), В-циклодекстринов (циклических молекул, состоящих из α-1-4-связанной D-глюкозы; гексамера α-циклодекстрина, гептамера β-циклодекстрина и октамера γ-циклодекстрина), неперевариваемого декстрина, геритиоолигосахаридов (смеси β-1-6-связанных остатков глюкозы с несколькими 1-4 связями), глюкоолигосахаридов (смеси α-D-глюкозы), изомальтоолигосахаридов (линейных α-1-6-связанных остатков глюкозы с несколькими 1-4 связями), изомальтозы (6-О-α-D-глюкопиранозил-D-глюкозы); изомальтриозы (6-O-α-D-глюкопиранозил-(1-6)-α-D-глюкопиранозил-D-глюкозы), панозы (6-O-α-D-глюкопиранозил-(1-6)-α-D-глюкопиранозил-(1-4)-D-глюкозы), лейкрозы (5-О-α-D-глюкопиранозил-D-фруктопиранозида), палатинозы или изомальтулозы (6-О-α-D-глюкопиранозил-D-фруктозы), теандерозы (O-α-D-глюкопиранозил-(1-6)-O-α-D-глюкопиранозил-(1-2)-B-D-фруктофуранозида), D-агатозы, D-ликсогексулозы, лактосахарозы (O-β-D-галактопиранозил-(1-4)-О-α-D-глюкопиранозил-(1-2)-β-D-фруктофуранозида), α-галактоолигосахаридов, включающих рафинозу, стахиозу и другие олигосахариды сои (О-α-D-галактопиранозил-(1-6)-α-D-глюкопиранозил-β-D-фруктофуранозид), β-галактоолигосахариды или транс-галакто-олигосахариды (β-D-галактопиранозил-(1-6)-[β-D-глюкопиранозил]-(1-4)-α-D-глюкозы), лактулозы (4-O-β-D-галактопиранозил-D-фруктозы), 4′-галактозиллактозы (O-D-галактопиранозил-(1-4)-O-β-D-глюкопиранозил-(1-4)-D-глюкопиранозы), синтетического галактоолигосахарида (неогалактобиозы, изогалактобиозы, галсахарозы, изолактозы I, II и III), фруктанов леванового типа (β-D-(2→6)-фруктофуранозил)-α-D-глюкопиранозид), фруктанов инулинового типа (β-D-((2→1)-фруктофуранозил)n-α-D-глюкопиранозида), 1f-β-фруктофуранозилнистозы (β-D-((2→1)-фруктофуранозил)β-D-фруктофуранозида), ксилоолигосахаридов (β-D-((1→4)-ксилозы), лафинозы, лактосахарозы и арабиноолигосахаридов.
Неперевариваемый олигосахарид согласно любому аспекту настоящего изобретения может быть выбран из неограничивающей группы, состоящей из галактоолигосахаридов (включающих, но не ограниченных ими, короткоцепочечные и длинноцепочечные галактоолигосахариды), неперевариваемых декстринов (например, неперевариваемых полидекстринов), ксилоолигосахаридов, арабиноолигосахаридов, глюкоолигосахаридов (включающих, но не ограниченных ими, геритиоолигосахариды и циклодекстрины), хитоолигосахаридов, фукоолигосахаридов, манноолигосахаридов, изомальтоолигосахаридов, глюкоманноолигосахаридов, галактоманноолигосахаридов, арабиногалактоолигосахаридов, фруктоолигосахаридов (включающих, но не ограниченных ими, длинноцепочечные фруктоолигосахариды и короткоцепочечные фруктоолигосахариды) и тому подобного.
В воплощениях, приведенных в качестве примера, композиции, раскрытые в данном изобретении, включают, состоят или по существу состоят из короткоцепочечного галактоолигосахарида, длинноцепочечного фруктоолигосахарида и кислого олигосахарида. Выражение ′′по существу состоят из′′ означает, что композиция включает короткоцепочечный галактоолигосахарид, длинноцепочечный фруктоолигосахарид и кислый олигосахарид, и может также включать один или более других элементов, при условии, что эти элементы не препятствуют активности или действию короткоцепочечного галактоолигосахарида, длинноцепочечного фруктоолигосахарида и кислого олигосахарида или не вносят вклад в их активность или действие. Таким образом, короткоцепочечный галактоолигосахарид, длинноцепочечный фруктоолигосахарид и кислый олигосахарид являются обязательными элементами, а другие элементы являются необязательными и могут присутствовать или не присутствовать. Выражение ′′состоит из′′ означает, что композиция включает короткоцепочечный галактоолигосахарид, длинноцепочечный фруктоолигосахарид и кислый олигосахарид и ограничена ими. Таким образом, выражение ′′состоит из′′ указывает на то, что короткоцепочечный галактоолигосахарид, длинноцепочечный фруктоолигосахарид и кислый олигосахарид являются обязательными элементами, и что другие элементы (такие как другие олигосахариды) не могут присутствовать.
Галактоолигосахарид может представлять собой неперевариваемый олигосахарид, где по меньшей мере 30% сахаридных звеньев представляет собой галактозные звенья, предпочтительно по меньшей мере 50%, более предпочтительно по меньшей мере 60%. Галактоолигосахарид может иметь СП от 2 до 100 или СП от 2 до 10. В одном неограничивающем примере сахариды галактоолигосахарида могут быть β-связанными, как в случае структур женского молока с олигосахаридной сердцевиной.
n
Предпочтительно галактоолигосахарид может быть выбран из неограничивающей группы, состоящей из трансгалактоолигосахаридов, лакто-N-тетраозы (LNT) и лакто-N-неотетраозы (нео-LNT). Например, галактоолигосахарид может включать трансгалактоолигосахарид ([галактоза]-глюкозу; где n может представлять собой целое число от 1 до 60, то есть 2, 3, 4, 5, 6, 10, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 43, 50, 56, 59, 60; наиболее предпочтительно n может быть равно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10). Трансгалактоолигосахариды (ТОС) имеются в продаже, например, под торговой маркой Vivinal™ (Borculo Domo Ingredients, Netherlands). Сахариды из галактоолигосахаридов могут быть β-связанными.
Фруктоолигосахарид представляет собой углевод, содержащий цепь из по меньшей мере 3 β-связанных фруктозных звеньев, имеющий СП от 2 до 250, предпочтительно от 7 до 100, более предпочтительно от 20 до 60. Например, можно применять инулин. Инулин имеется в продаже под торговым названием ′′Raftilin HP′′ (Orafti). Средняя СП фруктоолигосахарида может составлять по меньшей мере 7, по меньшей мере 10 или ниже 100. Применяемый инулин может иметь фруктозные звенья, связанные β(2→1) связью. Фруктоолигосахариды могут включать такие неограничивающие соединения, как инулин, фруктополисахарид, полифруктоза, фруктаны, олигофруктоза и тому подобное. Фруктоолигосахариды могут иметь СП, составляющую от 2 до 100.
Неперевариваемые полидекстрины могут относиться к устойчивым к перевариванию мальтодекстринам или к устойчивой к перевариванию мальтодекстрозе, которые могут иметь СП от 10 до 50, предпочтительно от 10 до 20. Неперевариваемые полидекстрины могут содержать α(1→4), α(1→6) глюкозидные связи и 1→2 и 1→3 связи. Неперевариваемые полидекстрины могут продаваться, например, под торговым названием Fibersol 2 от фирмы Matsutami Industries или Litesse от фирмы Danisco.
Предпочтительно неперевариваемые олигосахариды могут включать олигосахарид, имеющий степень полимеризации (СП) от 2 до 250. Более предпочтительно СП от 2 до 100, еще более предпочтительно СП от 2 до 60 или СП от 2 до 10.
Нейтральный олигосахарид можно вводить в количестве, составляющем от 10 мг до 100 граммов в сутки, предпочтительно от 100 мг до 50 граммов в сутки, еще более предпочтительно от 0,5 до 20 граммов в сутки.
Предпочтительно композиции, раскрытые в данном изобретении, могут включать нейтральные неперевариваемые олигосахариды, где неперевариваемые олигосахариды представляют собой только короткоцепочечные галактоолигосахариды и длинноцепочечные фруктоолигосахариды. Массовое соотношение короткоцепочечных галактоолигосахаридов и длинноцепочечных фруктоолигосахаридов может составлять приблизительно (от 20 до 2):1, например, 20:1, 19:1, 18:1, 17:1, 16:1, 15:1, 14:1, 13:1, 12:1, 11:1, 10:1, 9:1, 8:1, 7:1, 6:1, 5:1, 4:1, 3:1 и 2:1.
Кислые неперевариваемые олигосахариды
Композиции, раскрытые в данном изобретении, могут содержать неперевариваемый кислый олигосахарид. Термин ′′кислый олигосахарид′′ относится к олигосахариду, содержащему по меньшей мере одну кислотную группу, выбранную из группы, состоящей из N-ацетилнейраминовой кислоты, N-гликолоилнейраминовой кислоты, свободной или этерифицированной карбоновой кислоты, группы серной кислоты и группы фосфорной кислоты. Кислый олигосахарид предпочтительно представляет собой полигексозу. В некоторых воплощениях по меньшей мере одна из вышеупомянутых групп расположена на концевом гексозном звене кислого олигосахарида.
В воплощениях, приведенных в качестве примера, кислый олигосахарид имеет следующую структуру:
где концевая гексоза (левая) предпочтительно содержит двойную связь. Кислый олигосахарид может содержать карбоново-кислотную группу на концевом гексозном звене, где данная карбоново-кислотная группа может быть свободной или этерифицированной. Гексозные звенья, отличающиеся от концевого гексозного звена (звеньев), предпочтительно представляют собой звенья уроновой кислоты, более предпочтительно звенья галактуроновой кислоты. Карбоново-кислотные группы на этих звеньях могут быть свободными или (частично) этерифицированными, и предпочтительно по меньшей мере 10% звеньев метилировано (см. ниже).
В некоторых воплощениях, приведенных в качестве примера, кислый олигосахарид, применяемый в настоящем изобретении, включает полимерный кислый олигосахарид, показанный в приведенной выше структуре, где:
R выбран из группы, состоящей из атома водорода, гидрокси- или кислотной группы, наиболее предпочтительно гидрокси; и
2
3
4
5
2
3
4
5
2
3
4
5
2
3
4
5
по меньшей мере один радикал, выбранный из группы, состоящей из R, R, R и R, представляет собой N-ацетилнейраминовую кислоту, N-гликолоилнейраминовую кислоту, свободную или этерифицированную карбоновую кислоту, группу серной кислоты и группу фосфорной кислоты, а остальные из R, R, R и R представляют собой гидрокси и/или атом водорода. В некоторых воплощениях один из R, R, R и R представляет собой свободную или этерифицированную карбоновую кислоту, а остальные из R, R, R и R представляют собой гидрокси и/или атом водорода; и
n представляет собой целое число и относится к числу гексозных звеньев (см. также раздел Степень полимеризации ниже), которые могут представлять собой любое гексозное звено. Предпочтительно n представляет собой целое число от 1 до 5000.
В некоторых воплощениях гексозное звено (звенья) представляет собой звено уроновой кислоты.
1
2
3
4
5
В одном воплощении R, R и R представляют собой гидрокси, R представляет собой атом водорода, R представляет собой карбоновую кислоту, n представляет собой любое целое число от 1 до 250, предпочтительно от 1 до 10, а гексозное звено представляет собой галактуроновую кислоту.
4
5
В некоторых воплощениях кислый олигосахарид имеет одно или два концевых звена уроновой кислоты, которая может быть свободной или этерифицированной. Концевое уроново-кислотное звено может быть выбрано из группы, состоящей из галактуроновой кислоты, глюкуроновой кислоты, гулуроновой кислоты, идуроновой кислоты, маннуроновой кислоты, рибуроновой кислоты и алтуроновой кислоты. Эти звенья могут быть свободными или этерифицированными. В воплощениях, приведенных в качестве примера, концевое гексозное звено имеет двойную связь, которая может быть расположена между С и С положениями концевого гексозного звена. Предпочтительно одно из концевых гексозных звеньев содержит двойную связь. Концевое звено (например, уроновая кислота) предпочтительно имеет следующую структуру:
где;
R может быть выбран из группы, состоящей из атома водорода, гидрокси- или кислотной группы, предпочтительно гидрокси (см. выше); и
2
3
4
5
2
3
4
5
2
3
4
5
2
3
4
5
по меньшей мере один радикал, выбранный из группы, состоящей из R, R, R и RN-ацетилнейраминовую кислоту, N-гликолоилнейраминовую кислоту, свободную или этерифицированную карбоновую кислоту, группу серной кислоты и группу фосфорной кислоты, а остальные из R, R, R и R представляют собой гидрокси и/или атом водорода. В некоторых воплощениях один из R, R, R и R представляет собой свободную или этерифицированную карбоновую кислоту, а остальные из R, R. R и R представляют собой гидрокси и/или атом водорода; и
n представляет собой целое число и относится к числу гексозных звеньев (см. также раздел Степень полимеризации ниже), которые могут представлять собой любое гексозное звено. Предпочтительно n представляет собой целое число от 1 до 5000. В некоторых воплощениях гексозное звено (звенья) представляет собой звено уроновой кислоты, предпочтительно звено галактуроновой кислоты. Карбоново-кислотные группы на этих звеньях могут быть свободными или (частично) этерифицированными, и могут быть по меньшей мере частично метилированы.
2
3
4
5
В одном воплощении R и R представляют собой гидрокси, R представляет собой атом водорода, R представляют собой свободную или этерифицированную карбоновую кислоту.
Композиции, раскрытые в данном изобретении, могут содержать более чем один кислый олигосахарид, где каждый кислый олигосахарид имеет различную СП. Необязательно эти композиции содержат кислый олигосахарид, содержащий ненасыщенное концевое гексозное звено, и кислый олигосахарид, содержащий насыщенное концевое гексозное звено. В некоторых воплощениях по меньшей мере 5%, более предпочтительно по меньшей мере 10%, еще более предпочтительно по меньшей мере 25% концевых гексозных звеньев кислых олигосахаридов содержит ненасыщенные гексозные звенья. Поскольку каждый отдельный кислый олигосахарид предпочтительно содержит только одно ненасыщенное концевое гексозное звено, предпочтительно не более 50% концевых гексозных звеньев представляет собой ненасыщенное гексозное звено (то есть содержит двойную связь). В некоторых воплощениях композиции, раскрытые в данном изобретении, содержат более чем один кислый олигосахарид, содержащий от 2 до 50% ненасыщенных гексозных звеньев, на основе суммарного количества гексозных звеньев, предпочтительно от 10 до 40%.
Кислый олигосахарид, который можно применять в композициях, раскрытых в данном изобретении, может иметь СП, составляющую от 1 до 5000, от 1 до 1000, от 2 до 250, от 2 до 50 или от 2 до 10. При применении смеси кислых олигосахаридов, имеющих различные степени полимеризации, средняя СП смеси кислых олигосахаридов может составлять от 2 до 1000, от 3 до 250 или от 3 до 50. Самая низкая СП олигосахаридов может улучшить вкусовые качества и приводит в результате к сниженной вязкости продукта, если кислый олигосахарид вводят в жидкой форме. Кислый олигосахарид может включать гомогенный или гетерогенный углевод.
Кислые олигосахариды, применяемые в композициях, раскрытых в данном изобретении, могут быть получены из пектина, пектата, альгината, хондроитина, гиалуроновых кислот, гепарина, гепарана, бактериальных углеводов, полигалактуроновой кислоты и/или сиалогликанов. Предпочтительно кислый олигосахарид может представлять собой продукт разложения пектина и/или продукт разложения альгината. Способы получения этерифицированных гидролизатов пектина, которые можно предпочтительно использовать для получения кислого олигосахарида, применяемого в настоящем изобретении, приведены в документах WO 2001/60378 и/или WO 2002/42484, каждый из которых включен в данное описание посредством ссылки. Обнаружение, измерения и анализы кислого олигосахарида, подходящие для применения в настоящем изобретении, приведены в документе WO 2001/60378, содержание которого полностью включено в настоящее описание посредством ссылки.
Альгинаты представляют собой линейные неразветвленные полимеры, содержащие β-(1→4)-связанные остатки D-маннуроновой кислоты и α-(1→4)-связанные остатки L-гулуроновой кислоты, имеющие широкий диапазон средних молекулярных масс (100-100000 остатков). Подходящие источники альгинатов включают альгинаты морских водорослей и бактериальные альгинаты.
Пектин можно разделить на две основные категории: высокометоксилированный пектин, характеризующийся степенью метоксилирования выше 50%, и низкометоксилированный пектин, имеющий степень метоксилирования ниже 50%. Кислый олигосахарид, раскрытый в данном изобретении, может быть получен из высокометоксилированного пектина или гидролизованного пектина. В некоторых воплощениях кислые олигосахариды, применяемые в композициях по настоящему изобретению, могут характеризоваться степенью метоксилирования выше 20%, более предпочтительно выше 50%, еще более предпочтительно выше 70%.
Предпочтительно продукт разложения пектина может представлять собой гидролизат пектина и/или гидролизованный пектин (полученный путем гидролиза) и/или лизат пектина (полученный путем бета-элиминирования). Продукт разложения пектина может быть получен из фруктов или овощей, например, из яблочного пектина, цитрусового пектина, пектина сахарной свеклы и тому подобного. Продукт разложения пектина может быть получен с помощью лиаз и/или изменений температуры и/или давления.
Кислый олигосахарид можно вводить в количестве, составляющем от 10 мг до 100 граммов в сутки, от 100 мг до 50 граммов в сутки или от 0,5 до 20 граммов в сутки.
Кислый олигосахарид можно включать в композиции, раскрытые в настоящем изобретении, в количестве, превышающем 0,1 масс. %, превышающем 0,2 масс. %, превышающем 0,5 масс. % или превышающем 1 масс. %, на основе общей сухой массы композиции. Хотя введение значительных количеств олигосахаридов, как правило, не приведет к нежелательным побочным эффектам, композиции, раскрытые в настоящем изобретении, предпочтительно имеют содержание олигосахарида ниже 20 масс. %, более предпочтительно ниже 10 масс. %, наиболее предпочтительно ниже 5 масс. %.
Питательные композиции
Композиции, раскрытые в настоящем изобретении, могут подходить для обеспечения частичной или полной суточной потребности в питательных веществах лактирующей самки в послеродовом периоде. Таким образом, эту композицию можно применять для питания лактирующей самки в послеродовом периоде, и она может представлять собой питательную композицию. Таким образом, эту композицию можно включать в препарат для энтерального введения, включающего пероральное введение. Эта композиция предпочтительно не представляет собой женское грудное молоко.
Композиции, раскрытые в настоящем изобретении, могут содержать короткоцепочечный галакто-олигосахарид, длинноцепочечный фрукто-олигосахарид и кислый олигосахарид, состоять или по существу состоять из этих олигосахаридов. Кислые и нейтральные олигосахариды могут обладать синергетическим иммуностимулирующим эффектом.
Отношение короткоцепочечного галакто-олигосахарида, длинноцепочечного фрукто-олигосахарида и кислого олигосахарида может составлять приблизительно (от 20 до 2):1:(от 1 до 3), например, 20:1:1, 19:1:1, 18:1:1, 17:1:1, 16:1:1, 15:1:1, 14:1:1, 13:1:1, 12:1:1, 11:1:1, 10:1:1, 9:1:1, 8:1:1, 7:1:1, 6:1:1, 5:1:1, 4:1:1, 3:1:1, 2:1:1, 20:1:2, 19:1:2, 18:1:2, 17:1:2, 16:1:2, 15:1:2, 14:1:2, 13:1:2, 12:1:2, 11:1:2, 10:1:2, 9:1:2, 8:1:2, 7:1:2, 6:1:2, 5:1:2, 4:1:2, 3:1:2, 2:1:2, 20:1:3, 19:1:3, 18:1:3, 17:1:3, 16:1:3, 15:1:3, 14:1:3, 13:1:3, 12:1:3, 11:1:3, 10:1:3, 9:1:3, 8:1:3, 7:1:3, 6:1:3, 5:1:3, 4:1:3, 3:1:3 и 2:1:3.
Композиции, раскрытые в настоящем изобретении, можно готовить с получением от 0,1 до 500 граммов неперевариваемых олигосахаридов (например, в сутки), предпочтительно от 0,5 до 100 граммов дополнительных неперевариваемых олигосахаридов (например, в сутки). Композиции можно готовить с получением этой суточной дозы в одной порции в сутки, либо данная суточная доза может быть разделена на 2, или 3, или 4 части, предназначенные для приема 2, 3 или 4 раза в сутки.
Неперевариваемый олигосахарид может быть включен в композиции, раскрытые в настоящем изобретении, в количестве, превышающем 0,1 масс. %, превышающем 0,2 масс. %, превышающем 0,5 масс. % или превышающем 1 масс. %, на основе суммарной сухой массы композиции. Хотя введение значительных количеств неперевариваемых олигосахаридов, как правило, не приведет к нежелательным побочным эффектам, композиции могут иметь содержание дополнительных неперевариваемых олигосахаридов ниже 30 масс. %, предпочтительно ниже 20 масс. % или более предпочтительно 10 масс. %. В некоторых воплощениях дополнительный неперевариваемый олигосахарид можно включать в композицию в диапазоне, составляющем от 0,1 масс. % до 30 масс. %, от 0,1 масс. % до 20 масс. % или от 0,1 до 10 масс. %.
Композиции, раскрытые в настоящем изобретении, могут содержать липидный компонент, белковый компонент и перевариваемый углеводный компонент.
В некоторых воплощениях липидный компонент, применяемый в композициях, раскрытых в настоящем изобретении, может содержать омега-3 (называемые ω-3, n3 или n-3) жирные кислоты. В некоторых воплощениях липидный компонент может содержать омега-6 (называемые ω-6, n6 или n-6) жирные кислоты. Важные в пищевом отношении омега-3 жирные кислоты включают альфа-линоленовую кислоту (АЛК, 18:3n3), эйкозапентаеновую кислоту (ЭПК, 20:5n3) и докозагексаеновую кислоту (ДГК, 22:6n3). Важные в пищевом отношении омега-6 жирные кислоты включают линолевую кислоту (ПК, 18:2n6). Линолевая кислота и альфа-линоленовая кислота представляют собой незаменимые полиненасыщенные жирные кислоты (НПЖК), поскольку они не могут синтезироваться в организме человека, их источником должен быть пищевой рацион. Эти кислоты образуют стартовую точку для образования более длинных жирных кислот, обладающих большей ненасыщенностью, которые также называют длинноцепочечными полиненасыщенными жирными кислотами (ДЦ-НПЖК), содержащих по меньшей мере 20 атомов углерода в жирно-кислотной цепи и 2 или более ненасыщенных связей. Омега-3 АЛК может быть преобразована в ЭПК (20:5n3), которая может быть далее преобразована в ДПК (докозапентаеновую кислоту, 22:5n3), и далее в ДГК 30 (22:6n3). Омега-6 ЛК может быть преобразована в арахидоновую кислоту (АК, 20:4n6, омега-6 жирную кислоту). Липидный компонент может включать НПЖК и/или ДЦ-НПЖК в виде свободных жирных кислоты, в форме триглицеридов, в форме диглицеридов, в форме моноглицеридов, в форме фосфолипидов или в виде вмеси одного или более из перечисленных выше веществ.
В некоторых воплощениях липидный компонент включает по меньшей мере один, предпочтительно по меньшей мере два источника липидов, выбранных из группы, состоящей из льняного масла, рапсового масла (включающего сурепное масло, рапсовое масло с низким содержанием эруковой кислоты и каноловое масло), масла шалфея, периллового масла, масла портулака, брусничного масла, облепихового масла, конопляного масла, высокоолеинового подсолнечного масла, высокоолеинового сафлорового масла, оливкового масла, масел из морских продуктов, микробных масел, масла из семян черной смородины, масла эхиума, жира коровьего масла, топленого масла, кокосового масла и масла пальмового ореха.
В некоторых воплощениях белковый компонент, применяемый в композициях, раскрытых в настоящем изобретении, может быть выбран из группы, состоящей из интактных белков, включающих белки, полученные из животных источников (например, белки молока) и растительных источников (например, соевый белок, гороховый белок и/или рисовый белок), гидролизаты этих белков, пептидов, свободных аминокислот и их смесей.
Белковый компонент может включать казеин, молочную сыворотку, гидролизованный казеин и/или гидролизованный белок сыворотки. Белковый компонент может включать сладкую сыворотку с пониженной концентрацией гликомакропептида и/или кислую сыворотку. В некоторых воплощениях белковый компонент включает белок, полученный из β-казеина и/или α-лактальбумина. Предпочтительно белковый компонент включает казеин и белки сыворотки в массовом соотношении казеин:сыворотка, составляющем от 10:90 до 90:10, более предпочтительно от 20:80 до 80:20.
В некоторых воплощениях перевариваемый углеводный компонент, применяемый в композициях, раскрытых в настоящем изобретении, может предпочтительно включать лактозу, глюкозу, сахарозу, фруктозу, галактозу, мальтозу, крахмал или мальтодекстрин. Лактоза является основным перевариваемым углеводом, присутствующим в женском молоке. Питательная композиция предпочтительно содержит лактозу.
Композиции, раскрытые в настоящем изобретении, могут дополнительно включать такие компоненты, как витамины, минералы, микроэлементы и другие микронутриенты, подходящие для введения беременной и/или лактирующей женщине. Беременные или кормящие женщины часто принимают витамины и минералы для собственной пользы или для пользы ребенка. Включение этих витаминов и минералов в данные композиции удобно, поскольку уменьшает число композиций (например, пищевых добавок), которые нужно принимать беременной и/или кормящей женщине. Предпочтительно композиция, таким образом, содержит по меньшей мере один витаминный или минеральный компонент, более предпочтительно по меньшей мере три витаминных и/или минеральных компонента, еще более предпочтительно по меньшей мере шесть витаминных и/или минеральных компонентов, выбранных из группы, состоящей из фолиевой кислоты, витамина В1, витамина В2, витамина В6, витамина А, витамина D, железа, цинка и йода. В некоторых воплощениях эти компоненты присутствуют в дозе, обеспечивающей от 25 до 100% рекомендуемой суточной нормы (РСН), еще более предпочтительно от 45% до 100% РСН. Витамин А может быть добавлен в виде В-каротина.
В некоторых воплощениях композиции, раскрытые в настоящем изобретении, содержат неперевариваемый олигосахаридный компонент, и композиция дополнительно содержит липидный компонент, белковый компонент и перевариваемый углеводный компонент, причем, неперевариваемый олигосахаридный компонент обеспечивает от 0 до 10% суммарных калорий, липидный компонент обеспечивает от 10 до 70% суммарных калорий, белковый компонент обеспечивает от 10 до 70% суммарных калорий, и перевариваемый углеводный компонент обеспечивает от 30 до 60% суммарных калорий. В воплощениях, приведенных в качестве примера, композиция содержит неперевариваемый олигосахаридный компонент, при этом этот неперевариваемый олигосахаридный компонент обеспечивает от 0 до 5% суммарных калорий, и при этом композиция дополнительно содержит липидный компонент, обеспечивающий от 20 до 60% суммарных калорий, белковый компонент, обеспечивающий от 10 до 50% суммарных калорий, и перевариваемый углеводный компонент, обеспечивающий от 30 до 70% суммарных калорий. Количество суммарных калорий может быть определено по сумме калорий, полученных из неперевариваемых олигосахаридов, белка, липидов и перевариваемых углеводов.
В воплощениях, приведенных в качестве примера, неперевариваемый олигосахаридный компонент может обеспечить от 1 до 4%, предпочтительно от 2 до 4% суммарных калорий, липидный компонент может обеспечить от 20 до 45%, предпочтительно от 30 до 40% суммарных калорий, белковый компонент может обеспечить от 15 до 45%, предпочтительно от 20 до 35% суммарных калорий, и перевариваемый углеводный компонент может обеспечить от 40 до 60%, предпочтительно от 45 до 55% суммарных калорий.
В некоторых других воплощениях композиция может содержать от 50 до 200 ккал/100 мл жидкости, более предпочтительно от 60 до 90 ккал/100 мл жидкости, еще более предпочтительно от 60 до 75 ккал/100 мл жидкости. Калорическая плотность композиции может быть разработана таким образом, чтобы обеспечить оптимальное отношение между потреблением воды и калорий. Осмолярность настоящей композиции предпочтительно составляет от 150 до 420 мОсмоль/л, более предпочтительно от 260 до 320 мОсмоль/л. Низкую осмолярность можно использовать с целью снижения желудочно-кишечной нагрузки.
Композиция может находиться в форме жидкости (включая жидкость на молочной основе), порошок, плитку, капсулу или таблетку.
-1
В некоторых воплощениях композиция находится в жидкой форме. Предпочтительно жидкая композиция имеет вязкость ниже 35 мПа·с, еще более предпочтительно от 6 мПа·с, измеренную в вискозиметре Брукфильда при 20°C при скорости сдвига 100 с. Когда композиция находится в жидкой форме, ее можно готовить для введения на ежесуточной основе в диапазоне от приблизительно 80 до приблизительно 2500 мл, более предпочтительно от приблизительно 200 до приблизительно 1200 мл в сутки. Предпочтительно число приемов в сутки составляет от 1 до 10, более предпочтительно от 3 до 8.
Композиция может представлять собой порошок, подходящий для получения жидкой композиции после восстановления водным раствором, таким как вода. Предпочтительно композиция может представлять собой порошок для восстановления водой. Например, порошок может быть упакован в пакет-саше, содержащий от 1 до 10 г, более предпочтительно от 1,5 до 7 г, наиболее предпочтительно от 2 до 5 г.
В другом примере питательная композиция может представлять собой жидкость на молочной основе, где липидный компонент составляет менее 2 г/л с целью поддержания низкого количества потребляемых калорий. Жидкость на молочной основе может быть упакована в бутылку или тетрапак объемом от 50 до 1000 мл, предпочтительно от 60 до 500 мл, более предпочтительно от 75 до 125 мл.
В другом примере композиция может представлять собой плитку, например, твердую жевательную композицию, имеющую водную активность ниже 0,8, предпочтительно ниже 0,65.
Композиция может быть представлена в виде упакованного порошка или в виде упакованной, готовой к употреблению смеси. Чтобы предотвратить порчу продукта, размер упаковки готовой к употреблению смеси предпочтительно не превышает одного употребления, например, не превышает 500 мл; и размер упаковки композиции, которая может находиться в форме порошка, не превышает 250 употреблений. Подходящие размеры упаковки для порошка предназначены для 2000 граммов или менее, более предпочтительно для 1000 граммов или менее.
Композицию можно готовить для введения на регулярной основе (например, ежесуточно) в течение периода, составляющего по меньшей мере 4 недели, более предпочтительно в течение периода по меньшей мере 8 недель, наиболее предпочтительно в течение периода по меньшей мере 12 недель, где суммарный объем, вводимый в сутки, может составлять от 200 мл до 1200 мл, если композиция находится в жидкой форме, и где число введений в сутки может составлять от 1 до 10.
В некоторых воплощениях композиция предназначена для введения женщине в послеродовом периоде, вскармливающей ребенка грудью. Предпочтительно композицию готовят для введения в первые 4 недели после родов (то есть в первые 4 недели жизни ребенка), в первые 8 недель после родов, в первые 12 недель после родов, в первые 16 недель после родов, в первые 20 недель после родов, в первые 24 недели после родов или в течение любого периода между ними. Например, композицию можно готовить для введения женщине в течение периодов, составляющих от 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 16, 20, 24, 28, 32 или 36 недель после родов (или любого целого числа между ними) до 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 16, 20, 24, 28, 32 или 36 недель после родов (или любого целого числа между ними). В некоторых воплощениях композицию готовят для введения женщине, где субъект, являющийся млекопитающим, находится в возрасте менее 36 месяцев, менее 24 месяцев, менее 12 месяцев, менее 6 месяцев или в течение любого периода между ними. Женщина может кормить ребенка исключительно грудным молоком, либо может кормить ребенка грудным молоком, а также кормить ребенка детской смесью, поскольку признано, что для женщины могут существовать медицинские или личные причины, чтобы выбрать кормление ребенка, используя комбинацию грудного молока и детской смеси.
В настоящем изобретении также рассмотрены упаковки, содержащие композиции, раскрытые в настоящем изобретении, параллельно с текстом (например, этикеткой), где указано, что употребление композиции лактирующей женщиной в послеродовом периоде обеспечит ребенку укрепленную иммунную систему, предпочтительно включающую укрепленную иммунную систему в последующие периоды жизни, как описано в данном изобретении далее. Например, этикетка может содержать такие выражения, как ′′стимулирует созревание иммунной системы′′, ′′уменьшает аллергическую реакцию′′, ′′уменьшает нагрузку′′, ′′снижает чувствительность′′ или подобные выражения.
Применение
Настоящую композицию можно предпочтительно применять для укрепления иммунной системы, включая улучшенную аллергическую реакцию.
В некоторых воплощениях укрепленная иммунная система включает улучшенную аллергическую реакцию у субъекта, являющегося млекопитающим. В воплощениях, приведенных в качестве примера, заболевание, относящееся к иммунной системе, представляет собой заболевание или заболевание, относящееся к аллергической реакции, включающее, но не ограниченное ими, атопический дерматит, астму, профессиональную астму, пищевую аллергию (включающую аллергию на куриное яйцо, аллергию на коровье молоко и другие), аллергический ринит (например, пыльцевую аллергию), аллергию на пылевого клеща и другие формы гиперчувствительности, такие как системная анафилаксия и острая крапивница.
В некоторых воплощениях композиции, раскрытые в настоящем изобретении, можно применять для укрепления иммунного ответа и/или предупреждения заболевания, относящегося к иммунной системе, у субъекта, являющегося млекопитающим, где по меньшей мере мать такого субъекта страдает заболеванием, относящимся к иммунной системе. Таким образом, в некоторых воплощениях женщина страдает заболеванием, относящимся к иммунной системе, или страдала заболеванием, относящимся к иммунной системе, ранее в своей жизни (например, в младенчестве или в детстве).
Настоящее изобретение основано на открытии, что введение композиции, содержащей неперевариваемый кислый олигосахарид, как раскрыто в настоящем изобретении, женщине, кормящей ребенка грудью, обладает долгосрочным воздействием на развитие и укрепление иммунной системы у ребенка.
Авторы изобретения обнаружили этот неожиданный долгосрочный эффект на иммунный ответ. Соответственно, в некоторых воплощениях настоящее изобретение направлено на укрепление иммунной системы (или иммунного ответа) и/или предупреждение заболевания, относящегося к иммунной системе, у субъекта, являющегося млекопитающим (например, у ребенка), где такой укрепляющий или предупреждающий эффект встречается у указанного субъекта в тот период, когда композицию уже не вводят матери субъекта (например, субъект, являющийся млекопитающим, родился или уже не находится на грудном вскармливании, например, ребенок, отлученный от груди, или представляет собой подростка), предпочтительно в возрасте, превышающем этот возраст по меньшей мере на один год, предпочтительно на 2 года, предпочтительно на 3 года, более предпочтительно на 5 лет, наиболее предпочтительно на 8 лет.
Таким образом, в некоторых воплощениях, приведенных в качестве примера, композиции, раскрытые в настоящем изобретении, могут укреплять иммунный ответ и/или предупреждать заболевание, относящееся к иммунной системе, в последующий период жизни субъекта, являющегося млекопитающим (например, человека). Под ′′последующим периодом жизни′′ подразумевают возраст, превышающий возраст грудного вскармливания субъекта млекопитающего, предпочтительно превышающий этот возраст по меньшей мере на 12 месяцев, более предпочтительно на 24 месяца, на 36 месяца, на 5 лет, наиболее предпочтительно на 8 лет.
Теперь, после общего описания изобретения, это описание станет более понятным посредством ссылки на приведенные ниже примеры, предложенные в качестве иллюстрации и не предназначенные для ограничения настоящего изобретения.
Специалисту в данной области техники понятно, что настоящее изобретение может быть выполнено на практике без ненужного экспериментирования согласно способу, предложенному в настоящем изобретении. Способы, методы и химические вещества являются такими, как описано в приведенных ссылках или в стандартных протоколах.
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Пищевая добавка для матери с неперевариваемыми олигосахаридами
Материалы и методы
Химические вещества
Овальбумин (марка V) был получен от фирмы Sigma (St. Louis, USA). Холерный токсин был приобретен у фирмы Quadratech Diagnostics. Фосфатно-солевой буферный раствор (PBS) был получен от фирмы BioWhittaker (Verviers, Belgium).
Животные
Самок мышей линии С3Н/HeOuJ 3-недельного возраста получали от Charles River (France) и держали при постоянной температуре (20°C) и влажности (40-60%) при 12:12 часовом цикле света/темноты в виварии Утрехтского университета. Уход за животными и их использование осуществляли в соответствии с руководствами Нидерландского Комитета по проведению экспериментов над животными и этического комитета местного университета.
Постановка эксперимента
Самок мышей сенсибилизировали внутрижелудочно (i.g.) один раз в неделю в течение пяти недель овальбумином куриного яйца (OVA) (20 мкг/500 мкл PBS), используя холерный токсин (СТ) (10 мкг/500 мкл PBS) в качестве адъюванта. Контрольные группы получали либо фосфатно-солевой буферный раствор (PBS), либо PBS+СТ. Через две недели после последней сенсибилизации мышей спаривали и кормили либо контрольным рационом (AlN93), либо рационом AlN93 с добавлением определенной смеси неперевариваемых олигосахаридов, содержащей короткоцепочечные галактоолигосахариды, длинноцепочечные фруктоолигосахариды и кислые олигосахариды пектинового происхождения (1%, соотношение 9:1:2) (GFA) во время беременности и лактации (таблица 1).
После отъема все потомство самок переводили на контрольный рацион и сенсибилизировали перорально один раз в неделю в течение четырех недель OVA+СТ. Через неделю после последней сенсибилизации проводили внутрикожную провокацию потомства 20 мкг OVA/20 мкл PBS в ухо, за исключением животных в группе 1, которые получали PBS внутрикожно. Индивидуальные шоковые баллы оценивали через 30 минут после внутрикожной провокации. Кроме того, измеряли температуру мышей за 1 минуту до внутрикожной провокации и каждые 15 минут после провокации до появления отека уха (в качестве меры активной аллергической кожной реакции на OVA) и измеряли через один час. Толщину уха измеряли в двух повторах перед провокацией антигеном и через 1 час после нее, используя микрометр с цифровой индикацией (Mitutoyo Digimatic 293561; Veenendaal, The Netherlands). Острую аллергическую кожную реакцию вычисляли путем вычитания базовой толщины уха из значения через 1 час после провокации (Δ толщины уха), и значения приводили в виде Δ мкМ. Приблизительно через 6 часов после внутрикожной провокации проводили провокацию мышей перорально OVA (100 мг/500 мкл). Через 18 часов после пероральной провокации мышей умерщвляли и собирали образцы для анализа ex-vivo.
Концентрации антител в плазме
OVA-специфичные иммуноглобулины измеряли, как описано ранее (Deurloo et al.). Значения приведены в виде произвольных единиц (A.U.) по мере построения стандартной кривой от объединенных образцов всех животных в эксперименте.
Результаты
Острая аллергическая кожная реакция
Острая аллергическая кожная реакция у потомства OVA-сенсибилизированных самок, которым добавляли в рацион неперевариваемые олигосахариды (scGOS/lcFOS/pAOS) в период беременности или лактации, была значимо (р<0,05) снижена по сравнению с потомством OVA-сенсибилизированных мышей, которых кормили контрольным рационом в период беременности или лактации (фиг. 1). Этот эффект наблюдали для потомства OVA-сенсибилизированных самок, получавших добавку как в период беременности, так и в период лактации. В противоположность этим результатам, добавка значимо не ослабляла острую аллергическую кожную реакцию у потомства не сенсибилизированных самок (то есть самок, получавших PBS или PBS+СТ перед спариванием) (фиг. 1).
Шоковые баллы и температура
Шоковые баллы в результате внутрикожной провокации OVA были значительно выше в группах 2-7 по сравнению с мышами, провоцируемыми плацебо, в группе 1. Шоковые баллы мышей из групп 8 и 9 значимо не отличались от мышей, провоцируемых плацебо (фиг. 2). Данное наблюдение находится в соответствии с результатами острой аллергической кожной реакции. Тем не менее, поскольку оценка шоковых симптомов может быть несколько субъективной, также измеряли температуру мышей (фиг. 3). Снижение температуры после внутрикожной провокации является количественным симптомом шока в результате острой аллергической реакции на OVA. По сравнению с мышами, провоцируемыми плацебо, в первой группе происходило значимое снижение температуры через 30 минут после внутрикожной провокации OVA в группах 2, 3, 4 и 5. В группах 6-9 отсутствовало значимое снижение температуры по сравнению с животными, провоцируемыми плацебо.
OVA-специфичные иммуноглобулины
При сравнении уровней OVA-специфичных lgE у потомства OVA-сенсибилизированных самок, получающих пищевую добавку (группа 8 и 9), с сенсибилизированными самками, не получающими пищевую добавку (группа 7), снижение уровней OVA-специфичных lgE наблюдали только у потомства самок, получающих добавку в период лактации (фиг. 4А). Значимого различия в уровнях OVA-специфичных lgE также не наблюдали между потомством самок, обработанных PBS, не получающих добавку (группа 2), и самок, получающих добавку в период беременности (группа 3) (фиг. 4А). В противоположность этому, значимое снижение OVA-специфичных lgE наблюдали как у потомства самок, обработанных СТ, получающих добавку в период беременности (группа 5), и самок, получающих добавку в период лактации (группа 6), по сравнению с потомством самок, не получающих добавку (группа 4) (фиг. 4А). Уровни OVA-специфичных lgE в группе 1 значимо отличались только по сравнению с группой 4, тем не менее, поскольку этих мышей не провоцировали OVA в конце эксперимента, их невозможно было сравнивать с другими группами (данные не представлены).
2
Уровни OVA-специфичного lgG1 значимо различались между группой 4 и 6 и группой 7 и 9, что указывает на то, что добавка в период лактации может влиять на продуцирование данного Th-связанного иммуноглобулина у потомства независимо от обработки самок (фиг. 4В)
Уровни OVA-специфичного lgG2a были значимо выше у потомства самок, обработанных СТ и OVA+CT, получающих добавку в период беременности или лактации, по сравнению с потомством самок, не получающих добавку. Этот эффект не наблюдали у потомства самок, обработанных PBS (фиг. 4С).
Результаты в Примере 1 позволяют предположить, что добавление к рациону матери неперевариваемых углеводов обладает благоприятным программирующим эффектом на иммунный ответ потомства.
Пример 2: Жидкая композиция
Жидкую композицию на молочной основе, упакованную в бутылку на 100 мл, 230 мл или 250 мл, готовят на основе обезжиренного молока, полуобезжиренного молока или цельного молока, где композиция содержит (на 100 мл) 100, 120, 140, 149 или 160 кДж, включая неперевариваемый олигосахаридный компонент (0,5-30 г неперевариваемого олигосахаридного компонента), белковый компонент (в характерном случае 8-30 г белка), перевариваемый углевод (в характерном случае 20-80 г перевариваемого углевода) и липидный компонент (в характерном случае 0,2-20 г жира), полиненасыщенную жирную кислоту, минералы, микроэлементы и витамины. В данной композиции неперевариваемый олигосахарид включает галактоолигосахарид (например, 8-10 г, имеющий происхождение от Vivinal GOS) и фруктоолигосахарид (например, 0,5-1 г фруктополисахарида, имеющего происхождение от RaftilinelHP) и необязательно кислый олигосахарид, в характерном случае олигосахарид уроновой кислоты.
На этикетке упаковки для данной композиции указано, что композиция предназначена для матери в период беременности и/или в период грудного вскармливания ребенка, и может быть также указано, что композиция укрепляет иммунную систему ребенка в последующие периоды его жизни, например, этикетка, может содержать такие выражения, как ′′стимулирует созревание иммунной системы′′, ′′уменьшает аллергическую реакцию′′, ′′уменьшает нагрузку′′, ′′снижает чувствительность′′ или подобные выражения.
Пример 3: Жидкая композиция
Порошкообразную композицию готовят на основе обезжиренного молока, полуобезжиренного молока или цельного молока, где композиция содержит (на 100 г) 300, 350, 365 или 400 кДж, включая неперевариваемый олигосахаридный компонент (0,5-60 г неперевариваемого олигосахаридного компонента), белковый компонент (в характерном случае 8-30 г белка), перевариваемый углевод (в характерном случае 20-80 г перевариваемого углевода) и липидный компонент (в характерном случае 0,2-20 г жира), полиненасыщенную жирную кислоту, минералы, микроэлементы и витамины. В данной композиции неперевариваемый олигосахарид включает галакто-олигосахарид (например, 8-10 г, имеющий происхождение от Vivinal GOS) и фрукто-олигосахарид (например, 0,5-1 г фруктополисахарида, имеющего происхождение от RaftilinelHP) и необязательно кислый олигосахарид, в характерном случае олигосахарид уроновой кислоты.
На этикетке упаковки для данной композиции указано, что композиция предназначена для матери в период беременности и/или в период грудного вскармливания ребенка, и может быть также указано, что композиция укрепляет иммунную систему ребенка в последующие периоды его жизни, например, этикетка может содержать такие выражения, как ′′стимулирует созревание иммунной системы′′, ′′уменьшает аллергическую реакцию′′, ′′уменьшает нагрузку′′, ′′снижает чувствительность′′ или подобные выражения.
ССЫЛКИ
1. Deurloo DT, van Esch ВС, Hofstra CL, Nijkamp FP, van Oosterhout AJ. CTLA4-lgG reverses asthma manifestations in a mild but not in a more ′′severe′′ ongoing murine model. Am J Respir Cell Mol Biol. 2001; 25: 751-60.
2. L. Prosky et al., J. Assoc. Off. Anal. Chem. 71, 1017-1023 (1988).
3. Lucas, A. 2000, ′′Programming not metabolic imprinting′′, Am. J. Clin. Nutr., 71:602.
4. WO 2002/42484.
5. WO 2001/60378.