Целесообразность проведения KIR-типирования при подборе донора для аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток: обзор литературы

Целесообразность проведения Ш-типирования при подборе донора для аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток: обзор литературы

Для цитирования: Захарова В.В. Целесообразность проведения KIR-типирования при подборе донора для аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток: обзор литературы. Онкогематология 2018;13(4):67—74.

DOI: 10.17650/1818-8346-2018-13-4-67-74

Role of KIR typing in donor selection prior to allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: literature review

V V Zakharova

Dmitry Rogachev National Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology; 1 Samory Mashela St., Moscow 117997, Russia

Natural killer (NK) cells are the first population to recover after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Since the report in 2002 by L. Rugerri et al. .showing the effectiveness of NK cell alloreactivity in haploidentical stem cell transplantation, a lot of conflicting studies have appeared about the role of NK alloreactivity in haploidentical and matched unrelated donor transplantations. Current studies demonstrate that the beneficial effects of donor NK alloreactivity are dependent on the transplant protocol — conditioning regimen, graft processing procedure and graft-versus-host disease.

Key words: killer cell immunoglobulin-like receptors, KIR typing, HLA typing, hematopoietic stem cell transplantation

For citation: Zakharova V. V. Role of KIR typing in donor selection prior to allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: literature review. Onkogematologiya = Oncohematology 2018;13(4):67—74.

cv

4

В.В. Захарова cs

ФГБУ«Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия -J

Рогачева» Минздрава России; Россия, 117997Москва, ул. Саморы Машела, 1 |_

st

Контакты: Виктория Витальевна Захарова hla.dgoi@gmail.com S

ш

Естественные киллерные (natural killer, NK) клетки являются 1-й популяцией лимфоцитов, которая восстанавливается после ^ аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК). После того как в 2002 г. L. Rugerri и соавт. показали 2 роль NK-аллореактивности при гаплоидентичной ТГСК, появилось множество противоречивых исследований о NK-аллореактив- в ности при гаплоидентичной и совместимой неродственной ТГСК. Современные представления говорят о влиянии на NK-аллоре- п активность трансплантационного протокола - вида режима кондиционирования, процессинга трансплантата, а также посттрансплантационной профилактики реакции «трансплантат против хозяина». о

Ключевые слова: иммуноглобулиноподобныерецепторы киллерных клеток, KIR-типирование, HLA-типирование, транспланта- со

ция гемопоэтических стволовых клеток о

сч

4

Введение

Совместимость донора и реципиента по молекулам человеческого лейкоцитарного антигена (Human Leukocyte Antigen, HLA) исторически является важнейшим фактором, определяющим исходы трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК). В то же время результаты ряда исследований показали влияние на исход ТГСК других генов, таких как семейство иммуноглобулиноподобных рецепторов (killer cell immunoglobulin-like receptors, KIR) естественных киллерных (natural killer, NK) клеток и малые антигены гистосовместимости [1, 2].

Впервые L. Rugerri и соавт. продемонстрировали феномен влияния NK-аллореактивности, предсказан-

ной по модели «лиганд—лиганд», на выживаемость реципиентов с острым миетобластным лейкозом (ОМЛ) при аллогенной HLA-гаплоидентичной ТГСК [3]. После опубликования этих результатов было проведено множество аналогичных ретроспективных исследований для разных типов ТГСК по всему миру. Выполненные исследования крайне редко показывали статистически достоверные результаты, но, что удивительно, в большинстве из них были получены полностью противоположные ожидаемым данные — отрицательное влияние NK-аллореактив-ных доноров.

Современные представления объясняют разнообразие результатов влияния NK-аллореактивности

cv

ев

cv

на эффективность ТГСК, главным образом, особенностями трансплантационных протоколов [4].

Развитие представлений об NK-аллореактивности

До начала 1990-х годов считалось, что аллореак-тивность у человека — врожденное свойство Т-лимфо-цитов. В нескольких публикациях A. Moretta и соавт. в начале 1990-х годов впервые показано, что небольшая часть NK-клонов способна лизировать аллоген-ные фитогемагглютининстимулированные бласты [5, 6]. Различные клоны NK-клеток лизировали различные клетки-мишени, определяя таким образом несколько различных аллоспецифичностей [7]. Результаты последующих исследований показали, что специфичности клеток-мишеней определяют молекулы HLA-B и HLA-C на их поверхности [8, 9]. Необычным был тот факт, что аллореактивные NK-клетки лизировали только те клетки-мишени, которые не имели на своей поверхности соответствующего HLA (механизм «отсутствия своего»), что в корне отличалось от Т-клеточной аллореактивности (механизм «измененное свое»). Экспериментально было показано, что аллели HLA-C могут быть разделены на 2 группы в зависимости от присутствия аспарагина (С1-группа) или лизина (С2-группа) в аминокислотной позиции 80 альфа-2 домена тяжелой цепи, т. е. специфичность аллореактивных NK-клонов определяется данными эпитопами на поверхности клетки-мишени [10]. Отсутствие аллеля с соответствующей аминокислотой в позиции 80 на поверхности клетки-мишени приводит к ее лизису. Также в соответствии с хорошо известными серологическими группами Bw4 и Bw6 были идентифицированы NK-клоны, обладающие специфичностью по отношению к аналогичным эпитопам для аллелей HLA-B в зависимости от аминокислотных остатков в позициях 77—80. Однако для аллелей HLA-B были идентифицированы только NK-клоны, способные к лизису клеток-мишеней, у которых отсутствует эпитоп Bw4 [11, 12].

Точный механизм, объясняющий данный феномен, когда отсутствие лиганда (эпитопа) приводило к лизису NK-клеткой клетки-мишени, стал понятен с открытием семейства иммуноглобулиноподобных рецепторов NK-клеток — KIR. Каждая NK-клетка экспрессирует набор, состоящий из нескольких инги-бирующих и активирующих KIR. Эпитопы С1, С2 и Bw4 распознаются различными ингибирующими KIR. Толерантность NK-клеток к собственным неповрежденным тканям организма приобретается в процессе так называемого «обучения» и «лицензирования», при котором в ходе созревания NK-клетки, ее KIR взаимодействуют с молекулами HLA I класса и впоследствии развитие аутореактивности исключается («функционально молчащие» рецепторы). Как правило, сигналы от ингибирующих и активирующих KIR сбалансированы и здоровые клетки не уничтожаются. Однако при вирусной инфекции или опухолевой

трансформации клетки экспрессия молекул HLA I класса нарушается, что приводит к преобладанию сигналов от активирующих KIR, и клетка уничтожается. Это уникальное свойство NK-клеток было описано как гипотеза «missing self», или «отсутствия своего» [12].

Впервые роль NK-аллореактивности в ТГСК была показана в 2002 г. L. Rugerri и соавт. Реципиенты с ОМЛ, получившие HLA-гаплоидентичную ТГСК от потенциально аллореактивного донора, имели 60 % 5-летнюю выживаемость по сравнению с 5 % у реципиентов с донором без потенциальной NK-аллореактивности. В случае потенциальной аллореактивности донора у реципиента существенно снижался риск развития рецидива, отторжения трансплантата и развития реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ). Донор в данном исследовании считался потенциально алло-реактивным в случае отсутствия у реципиента 1 из 3 лигандов для ингибирующих KIR (С1, С2, Bw4), присутствующих у донора. В экспериментах на мышах было показано, что отторжению трансплантата препятствуют донорские аллореактивные NK-клетки, уничтожающие Т-лимфоциты реципиента. Одновременно с этим аллореактивные NK-клетки донора уничтожали антигенпредставляющие клетки (АПК) реципиента и остаточные лейкемические клетки, тем самым препятствуя развитию острой РТПХ и снижая риск развития рецидива соответственно [3]. Интересно, что аналогичного эффекта не получено для реципиентов с острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ), что объяснялось предположением о неспособности NK-клеток уничтожать клетки ОЛЛ из-за отсутствия экспрессии молекул, обеспечивающих межклеточное взаимодействие, таких как ICAM-1 [13]. Уникальной особенностью клинических и лабораторных экспериментов L. Rugerri и соавт. являлось использование чистой популяции клеток CD34+ для трансплантации и отсутствие фармакологической иммуносупрессии после ТГСК. В этих условиях NK-клетки донора интенсивно восстанавливаются в первые недели после трансплантации в отсутствие Т-лимфоцитов [3].

Модели аллореактивности

NK-клетки являются 1-й популяцией лимфоцитов, которая восстанавливается после аллогенной ТГСК, и могут оказывать сильный эффект «трансплантат против лейкоза», основанный на их аллореактивности.

Для характеристики влияния взаимодействия NK-клеток и их лигандов на исходы аллогенной ТГСК используют 3 модели.

1. Модель «лиганд—лиганд» основана на особенностях функционирования NK-клеток и предполагает, что если у реципиента отсутствуют как минимум 1 или более KIR лигандов (C1, C2 или Bw4), которые имеются у донора, донорские NK-клетки могут быть алло-реактивны по отношению к реципиенту (потенциальная аллореактивность в направлении «трансплантат против лейкоза»). Данная модель была подтверждена

результатами экспериментальных исследовании на мышах в университете Перужди [3]. Согласно этоИ модели отсутствие лигандов у реципиента необходимо, но недостаточно для формирования потенциально аллореактивных клонов NK-клеток. Необходимо также присутствие у донора гена, кодирующего ингиби-рующии рецептор к отсутствующему у реципиента лиганду. Поскольку результаты популяционного исследования показали, что ингибирующие KIR гены присутствуют у 95 % людеИ, предположение о наличии соответствующего KIR у донора будет корректно на 95 % [14, 15]. Соответственно, определение KIR-генотипа донора повысит точность исследования. Данная модель не применима для трансплантации, в которых донор и реципиент являются HLA-идентич-ными. Однако для неродственных с несовпадением по HLA-B или HLA-C и гаплоидентичных аллогенных ТГСК данная модель применима [4].

2. Модель «рецептор—лиганд» не принимает во внимание донорские KIR лиганды, поэтому применима для любого вида аллогеннои ТГСК. По этои модели аллореактивность достигается в случае наличия у донора KIR, к которому нет лиганда у реципиента. Эта модель основана на предположении, подтвержденном исследованием экспрессии KIR на поверхности NK-клеток методом проточноИ цитометрии в ранний посттрансплантационный период. В первые 90 дней после ТГСК вновь развивающиеся NK-клетки, экс-прессирующие ингибирующие KIR, временно могут быть аллореактивными к клеткам реципиента без соответствующих лигандов. В этот период такие аллоре-активные клоны NK-клеток могут оказывать такой же эффект, как и в предыдущей модели. В последующем, когда костный мозг восстанавливается и NK-клетки проходят «обучение» и «лицензирование», аллореактив-ные клоны больше не образуются [14]. Частный случай данной модели — "missing ligand" («отсутствие лиганда»). Это менее точная модель, в которой на основании популяционного исследования предполагается, что у большинства доноров есть все ингибирующие KIR гены, поэтому при отсутствии хотя бы одного из лигандов у реципиента (C1, C2 или Bw4) считается, что донор потенциально аллореактивен [4].

3. Модель, анализирующая влияние отдельных KIR генов, а также общего количества KIR генов донора без учета HLA реципиента и донора. Эта модель наименее изучена, и предполагается, что чем больше количество KIR на NK-клетке донора, тем выше вероятность того, что различие между KIR лигандами донора и реципиента будет определяться NK-клетка-ми [16].

Также, можно выделить 4-ю модель NK-аллореак-тивности. Данная модель основана на том, что инги-бирующий KIR2DL1 и активирующий KIR2DS1 имеют общую лиганд-специфичность и взаимодействуют с HLA-C, относящимися к группе С2 [17]. Так, было показано, что NK-клетки доноров, гомозиготные по

лиганду С1 и имеющие в своем генотипе KIR2DS1, активируются in vitro клетками B-лимфобластоидной клеточной линии, экспрессирующими на своей поверхности лиганд С2. Такая активация происходит, в частности, благодаря отсутствию распознавания лиганда С1 ингибирующими KIR2DL2/3. При этом, помимо присутствия KIR2DS1, гомозиготность донора по лиганду С1 является главным условием, поскольку при наличии у донора аллеля из группы С2 его NK-аллореактивность существенно снижается in vitro [18]. Тем не менее вклад активирующих KIR в иммунный ответ остается до конца неизученным.

Три основных модели аллореактивности схематично представлены на рисунке.

Роль NK-аллореактивности в трансплантации гемопоэтических стволовых клеток

Как уже было сказано, после опубликования результатов L. Rugerri и соавт. множество трансплантационных центров провели свои собственные ретроспективные исследования, изучающие влияние NK-аллореактивности по модели «лиганд—лиганд» на исходы различных типов ТГСК. В небольшой части этих исследований обнаружен благоприятный эффект потенциальной NK-аллореактивности донора, в то время как результаты подавляющего большинства исследований продемонстрировали отрицательный эффект [4]. Такие неоднозначные данные могут быть объяснены результатами исследований NK-аллореак-тивности на мышах, которые показывают противоположные эффекты [19]. Помимо положительного эффекта относительно предотвращения РТПХ, в этих исследованиях было продемонстрировано, что NK-клетки могут выполнять эффекторную функцию в развитии РТПХ [20]. Возможность взаимодействия АПК реципиента с Т-лимфоцитами донора определяется соотношением количества Т-клеток и NK-клеток в трансплантате. Низкое значение соотношения T/NK (мало Т-клеток) будет способствовать NK-опосредо-ванному уничтожению АПК у реципиента, тем самым препятствуя взаимодействию с донорскими Т-лимфо-цитами, в то время как высокое значение соотношения T/NK (много Т-клеток) будет способствовать взаимодействию Т-лимфоцитов с АПК и тем самым развитию РТПХ.

Результаты 2 современных исследований демонстрируют, что присутствие донорских Т-лимфоцитов в трансплантате препятствует проявлению NK-кле-точной аллореактивности [21, 22]. T. Yabe и соавт. исследовали NK-аллореактивность по модели «лиганд— лиганд» в группе 1395 реципиентов, получивших неродственную ТГСК. Из них в группе реципиентов (n = 91), получавших антитимоцитарный глобулин в рамках транплантационного протокола, в случае потенциально NK-аллореактивного донора риск развития РТПХ был достоверно ниже, чем в группе реципиентов, не получавших антитимоцитарный глобулин [22]. Эти

CV 4

ев

сч

Модель «лиганд-лиганд» / Model «ligand-ligand»

cv

4

CS

Донорская NK-клетка / Donor NK cell

Модель, анализирующая влияние KIR генов донора / Model analyzing the effect of donor KIR genes

Клетка-мишень реципиента / Recipient target cell

ЛоКУс KIR генов / Донор / ;

, gggo^gj В !

Модель «рецептор-лиганд» / Model «receptor-ligand»

«V

Донорская NK-клетка / Donor NK cell

Клетка-мишень реципиента / Recipient target cell

Модели аллореактивности естественных киллерных клеток (NK) Natural killer (NK) cell alloreactivity models

результаты существенно подкрепляют наблюдения, что NK-аллореактивность может иметь полностью противоположные эффекты в зависимости от количества донорских Т-лимфоцитов. Однако это не означает, что антитимоцитарный глобулин — единственный фактор, благоприятно влияющий на исход ТГСК. Так, S. Соо1еу и соавт. показали, что присутствие донорских Т-клеток может влиять на развитие NK-аллореактив-ности у вновь образующихся NK-клеток в посттрансплантационный период. Было продемонстрировано, что Т-клетки в трансплантате, не влияя на абсолютное количество NK-клеток, способствуют отсроченному формированию КЖ на вновь формирующихся NK-клетках у реципиента [21].

Еще один момент, вызывающий вопросы, — это источник происхождения и время жизни аллореактив-ных донорских NK-клеток в Т-деплетированных трансплантатах. Современная методика Т-деплеции включает селекцию CD34-клеток, что эффективно удаляет NK- и Т-клетки из трансплантата. Возникает вопрос, может ли оставшееся небольшое количество NK-клеток оказаться достаточным, чтобы способствовать лизису АПК, остаточных лейкемических клеток

и Т-лимфоцитов реципиента. В то же время не до конца понятно, могут ли NK-клетки, вновь развивающиеся из стволовых клеток донора, оказывать положительный аллореактивный эффект у реципиента. Для того чтобы предотвратить РТПХ, которая обычно развивается не позднее 100-го дня после ТГСК, аллореактивные NK-клетки должны уничтожить АПК реципиента до того, как они начнут взаимодействовать с донорскими Т-лимфоцитами. Очевидно, это должно произойти практически сразу после ТГСК, и кажется совершенно невероятным, что за такой короткий срок вновь развивающиеся NK-клетки достигнут достаточного для этого количества [4]. Уничтожение остаточных лейкемических клеток может происходить в течение более длительного периода и может, соответственно, быть функцией вновь образующихся NK-клеток. Для этого требуется, чтобы вновь развивающиеся NK-клетки были аллореактивны по отношению к реципиенту, т. е. «обучены» распознавать лиганды, отсутствующие у донора (если они развивались в доноре), и, соответственно, для этого необходимо взаимодействие с HLA донора при «обучении». Однако происхождение клеток, чьи HLA влияют на «обучение»

NK-клеток, до конца неизвестно. Если источник таких клеток не гемопоэтического происхождения, вновь развивающиеся NK-клетки в клеточном окружении реципиента будут толерантны к HLA реципиента и, соответственно, не аллореактивны. Если же источник — донорские клетки гемопоэтического происхождения, такие вновь развивающиеся NK-клетки будут аллореактивными, возможно, всю жизнь реципиента. Таким образом образуется очень эффективный, долгосрочный антилейкемический механизм. Однако возникает вопрос, почему такие аллореактивные NK-клетки не атакуют другие ткани реципиента, на поверхности клеток которых отсутствует соответствующий ингибирующий HLA-лиганд, с учетом того, что NK-клетки играют роль эффекторов для развития РТПХ [23, 24].

Посттрансплантационный мониторинг за NK-клетками внес некоторую ясность в эти моменты, но данные противоречивы. Несколько групп исследователей проводили наблюдение за посттрансплантационной экспрессией KIR на NK-клетках и их алло-реактивностью. Было показано, что после проведения аллогенных ТГСК, в ранний посттрансплантационный период, NK-клетка характеризуется относительно незрелым фенотипом, а именно имеет высокую экспрессию NKG2A и совсем незначительную KIR, что, вероятно, говорит о низком потенциале аллоре-активности [25, 26]. В другом исследовании L. Vago и соавт. подсчитали количество NK-клеток в ранний посттрансплантационный период, имеющих на своей поверхности только один KIR (single KIR positive) для HLA-гаплоидентичных с Т-деплецией ТГСК. И на 30-й, и на 60-й день после ТГСК NK-клетки экспрессировали только NKG2A, а single KIR positive не образовывались в значительных количествах до 75-го дня после ТГСК. Вполне возможно, что трансплантационный протокол, который включал инфузию донорских Т-лимфоцитов на 30-й день после ТГСК, затруднял генерацию аллореактивных NK-клеток [27]. В то же время L. Rugerri и соавт. обнаружили аллореактивные NK-клетки в ранний посттрансплантационный период после HLA-гаплоидентичной ТГСК в выборке из 24 реципиентов. Такие аллореактивные клоны определялись у большинства реципиентов до 3-го месяца после ТГСК в количестве, аналогичном таковому у донора до проведения ТГСК. К 4-7-му месяцам после ТГСК количество таких аллореактив-ных (донорских) NK-клеток снижалось, а по прошествии года и вовсе не определялось ни у одного из реципиентов. Эти данные говорят о возможности того, что в первые несколько месяцев после ТГСК формирующиеся NK-клетки «обучаются» под влиянием HLA донора, но в конечном итоге приобретают фенотип под влиянием HLA реципиента [28]. В других исследованиях также обнаруживались аллореактивные NK-клетки, которые циркулировали иногда до 5 лет [26, 29, 30]. Таким образом, вопрос, как скоро формиру-

ются аллореактивные NK-клетки донорского происхождения и как долго они остаются циркулировать, требует дальнейшего изучения.

Результаты исследований NK-аллореактивности при гаплоидентичной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток

С тех пор как группа исследователей из университета Перуджи в 2002 г. впервые обнаружила благоприятную роль NK-аллореактивности донора в гаплоидентичной ТГСК у пациентов с ОМЛ, ни один трансплантационный центр не смог подтвердить эти результаты [28]. Невозможность других исследовательских групп, использующих различные трансплантационные протоколы, воспроизвести опыт группы Перуджи усилила идею того, что NK-аллореактивность существенно зависит от самого трансплантационного протокола.

Так, в исследование W Leung и соавт. были включены 17 детей с ОМЛ и 19 детей с ОЛЛ. W. Leung и со-авт. не смогли обнаружить положительный эффект NK-аллореактивности, предсказанной по модели «ли-ганд—лиганд», но выявили существенное преимущество в выживаемости у пациентов при предсказании NK-аллореактивности донора по модели «рецептор— лиганд». Однако небольшое число пациентов, включенных в исследование, не позволило показать существенную разницу между моделями [31]. Полученные результаты сподвигли группу исследователей из Пе-руджи переанализировать свои данные, сравнив 2 модели аллореактивности [28]. Результаты повторного исследования подтвердили, что модель «лиганд-ли-ганд» лучше предсказывает исход ТГСК, и не выявили положительного эффекта от предсказания потенциальной аллореактивности донора по модели «рецеп-тор-лиганд».

L. Vago и соавт. проанализировали 44 гаплоиден-тичных ТГСК, проведенных по протоколу, очень близкому к Перуджи, но не обнаружили преимуществ при применении модели «лиганд-лиганд». Отличие от протокола Перуджи заключалось в том, что, во-первых, тотальное облучение тела не использовалось у 70 % пациентов и, во-вторых, для профилактики инфекционных осложнений в ранний посттрансплантационный период в большинстве случаев на 30-й день после ТГСК проводили инфузию донорских Т-лим-фоцитов. Вполне вероятно, что эти 2 фактора, особенно инфузия донорских Т-лимфоцитов, не позволили повторить результаты группы Перуджи [27].

A. Bishara и соавт. исследовали 62 в основном взрослых пациента, 28 из которых с диагнозом ОМЛ, и не обнаружили благоприятный эффект потенциальной донорской NK-аллореактивности. Наоборот, в группе пациентов с предположительно аллореактивными донорами были существенно выше риск развития острой РТПХ и ниже выживаемость. Трансплантационный протокол был очень похож на протокол

CV 4

ев

сч

4

сч

4

CS

CV 4

Перуджи, однако используемый метод Т-деплеции оставлял в 3 раза больше Т-лимфоцитов и, возможно, этого оказалось достаточно для существенного увеличения риска острой РТПХ (50 % по сравнению с 9 % в группе Перуджи) [32].

X.J. Huang и соавт. исследовали 111 пациентов, 71 из которых с диагнозом ОМЛ, получивших Т-репле-тированный трансплантат, а также мобилизованные гранулоцитарным колониестимулирующим фактором периферические стволовые клетки крови, что в итоге составило довольно высокое количество Т-лимфоци-тов в трансплантате. Также отличием от протокола Перуджи был отказ от проведения тотального облучения тела и профилактики РТПХ. Авторы исследования не смогли обнаружить благоприятный эффект потенциально аллореактивных NK-клеток донора. Наоборот, донорская NK-аллореактивность была ассоциирована с более высоким риском развития рецидива, РТПХ и худшей выживаемостью. Интересно, что связь между NK-аллореактивностью по модели «ли-ганд—лиганд» и высоким риском РТПХ была только у пациентов, получивших высокие дозы Т-лимфоци-тов (р <0,000001), что подтверждает факт увеличения риска развития РТПХ в присутствии донорских Т-лим-фоцитов [33].

X.Y. Zhao и соавт. исследовали 64 пациента, из которых 47 с диагнозом ОМЛ, и использовали трансплантационный протокол, аналогичный X.J. Huang и соавт. Авторы получили полностью аналогичный отрицательный результат [34].

B. Triplett и соавт. показали применимость гапло-идентичного подхода к пациентам с ОЛЛ. У пациентов с диагнозом ОЛЛ, получивших аллогенную ТГСК от HLA-идентичного сиблинга, развилось множество посттрансплантационных осложнений, включая РТПХ и рецидив лейкоза. Последующая аллогенная ТГСК с Т-деплецией от HLA-гаплоидентичного отца прошла без осложнений с приживлением нейтрофилов на 10-й день и молекулярной ремиссией на 16-й день. NK-клетки, полученные от пациента на 3-й неделе, после ТГСК экспрессировали донорские KIR и были способны уничтожать бластные клетки пациента [30].

Заключение

Таким образом, результаты множества опубликованных ранее исследований демонстрируют абсолютно противоположное влияние каждой из моделей NK-аллореактивности на исходы ТГСК. Необходимо продолжение исследований в данной области, однако уже ясно, что присутствие донорских Т-лимфоцитов в трансплантате отрицательно влияет на проявление NK-аллореактивности. В то же время очевидно, что потенциальная NK-аллореактивность может приводить к более тяжелой форме РТПХ и увеличению риска развития рецидива при использовании определенных трансплантационных протоколов. Проведение профилактики РТПХ способствует снижению эффекта «трансплантат против лейкемии» NK-клеток вследствие им-мунносупрессивного влияния используемых препаратов на активность NK-клеток и экспрессию KIR [35—37].

ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES

1. Cooley S., Trachtenberg E., Bergemann T. L. et al. Donor with group B KIR haplotypes improve relapse-free survival after unrelated hematopoietic cell transplantation for acute myelogenous leukemia. Blood 2009;113(3):726-32. DOI: 10.1182/blood-2008-07-171926. PMID: 18945962.

2. Spierings E., Kim Y., Hendriks M. et al. Multicenter analyses demonstrate significant clinical effects of Minor Histocompatibility Antigens on GvHD and GvL after HLA-matched related and unrelated hematopoietic stem cell transplantation. Biol Blood Marrow Transplant 2013;19(8):1244-53.

DOI: 10.1016/j.bbmt.2013.06.001. PMID: 23756210.

3. Rugerri L., Capanni M., Casucci M. et al. Role of natural killer cell alloreactivity

in HLA-mismatched hematopoietic stem cell transplantation. Blood 1999;94(1):333-9. PMID: 10381530.

4. The HLA complex in Biology and Medicine: A Resource Book. Eds.:

N.K. Mehra, G. Kaur, J. McCluskey et al.

New Delhi: Jaypee Brothers Medical Publishers LTD, 2010.

5. Ciccone E., Viale O., Pende D. et al. Specific lysis of allogeneic cells after activation of CD3-lymphocytes in mixed lymphocyte culture. J Exp Med 1988;168(6):2403-8. PMID: 2974067.

6. Moretta A., Bottino C., Pende D. et al. Identification of four subsets of human CD3 - CD16+ natural killer (NK) cells by the expression of clonally distributed functional surface molecules: Correlation between subset assignment of NK clones and ability to mediate specific alloantigen recognition. J Exp Med 1990;172(6):1589-98. PMID: 2147946.

7. Ciccone E., Pende D., Moretta A. et al. Evidence of natural killer (NK) cell repertoire for (Allo) antigen recognition: definition of five distinct NK-determined allospecificities in humans. J Exp Med 1992;175(3):709-18. PMID: 1371301.

8. Ciccone E., Pende D., Viale O. et al. Involvement of HLA Class 1 alleles in natural killer (NK) cell-specific functions: expression of HLA-Cw3 confers

selective protection from lysis by alloreactive NK clones dysplaing a defined specificity. J Exp Med 1992;176(4):963-71. PMID: 1328466. 9. Colonna M., Brooks E.G., Falco M. et al. Generation of allospecific natural killer cells by stimulation across a polymorphism of HLA-C. Science 1993;260(5111):1121-4. PMID: 8493555.

10. Cella M., Longo A., Ferrara G.B. et al. NK3-specific natural killer cells are selectively inhibited by Bw4-positive HLA alleles with isoleucine 80. J Exp Med 1994;180(4):1235-42. PMID: 7931060.

11. Foley B.A., De Santis D.D., Van Beelen E. et al. The reactivity of Bw4+ HLA-B and HLA-A alleles with KIR3DL1: implications for patient and donor suitability for haploidentical stem cell transplantations. Blood 2008;112(2):435-43.

DOI: 10.1182/blood-2008-01-132902. PMID: 18385451.

12. Ljunggren H.G., Karre K. In search

of the "missing self": MHC molecules and NK cell recognition. Immunol Today 1990;11(7):237-44. PMID: 2201309.

13. Oevermann L., Michaelis S.U., Mezger M. et al. KIR B haplotype donors confer a reduced risk for relapse after haploidentical transplantation in children with ALL. Blood 2014;124(17):2744-7. DOI: 10.1182/blood-2014-03-565069. PMID: 25115891.

14. Uhrberg M., Valiante N.M., Shum B.P. et al. Human diversity in killer cell inhibitory receptor genes. Immunity 1997;7(6):753-63. PMID: 9430221.

15. Witt C.S., Dewing C.B., Sayer D.C. et al. Population frequencies and putative haplotypes of the killer cell immuno-globulin-like receptor sequences and evidence for recombination. Transplantation 1999;68(11):1784-9. PMID: 10609957.

16. Savani B.N., Mielke S., Adams S. et al. Rapid natural killer cell recovery determines outcome after T-cell-depleted HLA-identical stem cell transplantation in patients with myeloid leukemias but not with acute lymphoblastic leukemia. Leukemia 2007;21(10):2145-52.

DOI: 10.1038/sj.leu.2404892. PMID: 17673900.

17. Stewart C.A., Laugier-Anfossi F., Vely F. et al. Recognition of peptide-MHC class 1 complexes by activating killer immunoglobulin-like receptors. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102(37):13224-9. DOI: 10.1073/pnas.0503594102. PMID: 16141329.

18. Chewning J.H., Gudme C.N., Hsu K.C. et al. KIR2DS1-positive NK cells mediate alloresponse against the C2 HLA-KIR ligand group in vitro. J Immunol 2007;179(2):854-68. PMID: 17617576.

19. Rugerri L., Capanni M., Urbani E. et al. Effectiveness of donor natural killer cell alloreactivity in mismatched hematopoietic transplants. Science 2002;295(5562):2097-100.

DOI: 10.1126/science.1068440. PMID: 11896281.

20. Ghayur T., Seemayer T.A., Kongshavn P.A. et al. Graft-versus-host reactions

in the beige mouse: an investigation of the role of host and donor natural killer cells in the pathogenesis of graft-versus-host disease. Transplantation 1987;44(2):261-7. PMID: 3307050.

21. Cooley S., McCullar V., Wangen R. et al. KIR reconstitution is altered by T cells in the graft and correlates with clinical outcomes after unrelated donor transplantation. Blood 2005;106(13): 4370-6. DOI: 10.1182/ blood-2005-04-1644. PMID: 16131567.

22. Yabe T., Matsuo K., Hirayasu K. et al. Donor killer immunoglobulin-like receptor (KIR) genotype-patient cognate KIR ligand combination and antithymocyte globulin preadministration are critical factors in outcome of HLA-C-KIR ligand-mismatched T cellreplete unrelated bone marrow transplantation. Biol Blood Marrow Transplant 2008;14(1):75-87.

DOI: 10.1016/j.bbmt.2007.09.012. PMID: 18158964.

23. Rhoades J.L., Cibull M.L., Thompson J.S. et al. Role of natural killer cells

in the pathogenesis of human acute graft-versus-host disease. Transplantation 1993;56(1):113-20. PMID: 8333033.

24. Ferrara J.L., Guillen F.J., Dijken P.J. et al. Evidence that large granular lymphocytes of donor origin mediate acute graft-versus-host disease. Transplantation 1989;47(1):50-4. PMID: 2643231.

25. Shilling H.G., McQueen K.L., Cheng N.W. et al. Reconstitution of NK cell receptor repertoire following HLA-matched hematopoietic stem cell transplantation. Blood 2003;101(9):3730-40. DOI: 10.1182/blood-2002-08-2568. PMID: 12511415.

26. Pende D., Marcenaro S., Falco M. et al. Anti-leukemia activity of alloreactive NK cells in KIR ligand-mismatched haploidentical HSCT for pediatric patients: Evaluation of the functional role of activating KIR and redefinition

of inhibitory KIR specificity. Blood 2009;113(13):3119-29. DOI: 10.1182/blood-2008-06-164103. PMID: 18945967.

27. Vago L., Forno B., Sormani M.P. et al. Temporal, quantitative, and functional characteristics of single KIR positive alloreactive natural killer cell recovery account for impaired graft-versus-leukemia activity after haploidentical hematopoietic stem cell transplantation. Blood 2008;112(8):3488-99.

DOI: 10.1182/blood-2007-07-103325. PMID: 18645039.

28. Rugerri L., Mancusi A., Capanni M. et al. Donor natural killer cell allorecognition of "missing self" in haploidentical hemat-poietic stem cell transplantation for acute myeloid leukemia: challenging its predictive value. Blood 2007;110(1):433-40. DOI: 10.1182/blood-2006-07-038687. PMID: 17371948.

29. Locatelli F., Pende D., Maccario R. et al. Haploidentical hematopoietic stem cell transplantation for the treatment of high-

risk leukemias: how NK cells make the difference. Clin Immunol 2009;133(2):171-8. DOI: 10.1016/j.clim. 2009.04.009. PMID: 19481979.

30. Triplett B., Handgretinger R., Pui C.H., Leung W. KIR-incompatible hematopoietic-cell transplantation for poor prognosis infant acute lymphoblastic leukemia. Blood 2006;107(3):1238-9. DOI: 10.1182/blood-2005-07-2809. PMID: 16434496.

31. Leung W., Iyengar R., Turner V. et al. Determinants of antileukemia effect of allogenic NK cells. J Immunol 2004;172(1):644-50.

PMID: 14688377.

32. Bishara A., Santis D.D., Witt C.C. et al. The beneficial role of inhibitory KIR genes of HLA class I NK epitopes

in haploidentically mismatched stem cell allografts may be masked by residual donor-alloreactive T cells causing GVHD. Tissue Antigens 2004;63(3):204-11. DOI: 10.1111/j.0001-2815.2004.00182.x. PMID: 14989709.

33. Huang X.J., Zhao X.Y., Liu D.H. et al. Deleterious effect of KIR ligand incompatibility on clinical outcomes

in haploidentical hematopoietic stem cell transplantation without in vitro T-cell depletion. Leukemi 2007;21(4):848-51. DOI: 10.1038/sj.leu.2404566. PMID: 17268518.

34. Zhao X.Y., Huang K.Y., Liu K.Y. et al. Prognosis after unmanipulated HLA-haploidentical blood and marrow transplantation is correlated to the numbers of KIR ligands in recipients.

Eur J Haematol 2007;78(4):338-46. DOI: 10.1111/j.1600-0609.2007.00822.x. PMID: 17378893.

35. Giebel S., Dziaczkowska J., Wojnar J. et al. The impact of immunosuppressive therapy on an early quantitative NK cell reconstitution after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Ann Transplant 2005;10(2):29-33. PMID: 16218030.

36. Muller C., Schernthaner G., Kovarik J. et al. Natural killer cell activity and antibody-dependent cellular cytotoxicity in patients under various immuno-suppressive regimens. Clin Immunol Immunopathol 1987;44(1):12-9. PMID: 3297437.

37. Wang H., Grzywacz B., Sukovich D. et al. The unexpected effect of cyclosporine

A on CD56+. Blood 2007;110(5):1530-9. DOI: 10.1182/blood-2006-10-048173. PMID: 17495133.

cv

4

CS

cv

4

сч

ев

сч

ORCID автора/ORCID of author

В.В. Захарова/V.V. Zakharova: https://orcid.org/0000-0001-5949-5317

Конфликт интересов. Автор заявляет об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The author declares no conflict of interest.

Финансирование. Исследование проведено без спонсорской поддержки. Financing. The study was performed without external funding.

Статья поступила: 16.08.2018. Принята к публикации: 05.10.2018. Article received: 16.08.2018. Accepted for publication: 05.10.2018.