БЫСТРЫЙ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ

1. Тест-полоска для латеральной проточной иммунохроматографии для определения аналита в ротовой жидкости, состоящая по существу из подушечки для образца, подушечки для конъюгата, подушечки для тестовой зоны и контрольной зоны, изготовленной из, по меньшей мере, одного матриксного материала, характеризующаяся тем, что:
подушечка для конъюгата расположена ниже подушечки для образца и нанесена в виде полосы с конъюгатом;
подушечка для тестовой зоны и контрольной зоны расположена ниже подушечки для конъюгата и содержит тестовую зону и контрольную зону, где
тестовая зона иммобилизована со специфическим связывающим реагентом, который специфически связывается с целевым аналитом; и
контрольная зона иммобилизована со вторым реагентом захвата.
2. Тест-полоска по п.1, отличающаяся тем, что аналит, подлежащий тестированию, выбран из антител против антигенов инфекционного заболевания, гормонов, факторов роста, терапевтических лекарств, лекарств, допускающих злоупотребление, и продуктов метаболизма лекарств, допускающих злоупотребление.
3. Тест-полоска по п.1, отличающаяся тем, что материал матрикса выбран из неорганических порошков, таких как оксид кремния и оксид алюминия; стекловолокнистой фильтровальной бумаги; природного полимерного материала, в частности, материалов на основе целлюлозы, хроматографической бумаги; синтетических или модифицированных природных полимеров, таких как нитроцеллюлоза, ацетат целлюлозы, поливинилхлорид, полиакриламид, поперечно-сшитый декстран, агароза и их комбинации.
4. Тест-полоска по п.3, отличающаяся тем, что материал матрикса для подушечки для образца представляет собой стекловолокнистую фильтровальную бумагу.
5. Тест-полоска по п.3, отличающаяся тем, что материал матрикса для подушечки для конъюгата представляет собой полиэфирный материал.
6. Тест-полоска по п.3, отличающаяся тем, что материал матрикса для тестовой подушечки и для контрольной подушечки представляет собой нитроцеллюлозную мембрану.
7. Тест-полоска по п.1, отличающаяся тем, что конъюгат включает метку, конъюгированную с первым реагентом захвата, который захватывает антитела, эндогенные для ротовой жидкости.
8. Тест-полоска по п.7, отличающаяся тем, что метка выбрана из частиц коллоидного золота; элементарных или металлических зольных частиц, включая селен, серебро, феррит или углерод; других частиц в виде гранул, включая окрашенный латекс, липосомы и частицы красителя.
9. Тест-полоска по п.7 или 8, отличающаяся тем, что метка представляет собой частицы коллоидного золота.
10. Тест-полоска по п.7, отличающаяся тем, что первый реагент захвата выбран из антител против IgG, IgM или IgA, белка А, белка G и конканавалина А.
11. Тест-полоска по п.8, отличающаяся тем, что первый реагент захвата представляет собой белок А.
12. Тест-полоска по п.1, отличающаяся тем, что специфический связывающий реагент выбран из антигенов инфекционного заболевания, гормонов, факторов роста, терапевтических лекарств, лекарств, допускающих злоупотребление, и продуктов метаболизма лекарств, допускающих злоупотребление.
13. Тест-полоска по п.12, отличающаяся тем, что антиген инфекционного заболевания представляет собой рекомбинантный или синтетический пептид, представляющий собой иммунодоминантную область белка ВИЧ.
14. Тест-полоска по п.13, отличающаяся тем, что белок ВИЧ представляет собой оболочечный белок ВИЧ.
15. Тест-полоска по п.14, отличающаяся тем, что оболочечный белок ВИЧ выбран из gp120 и gp41 ВИЧ-1 и gp36 ВИЧ-2.
16. Тест-полоска по п.1, отличающаяся тем, что второй реагент захвата выбран из антител против IgG, IgM или IgA, белка А, белка G и конканавалина А.
17. Тест-полоска по п.16, отличающаяся тем, что антитело против IgG представляет собой антитело козы против IgG человека.
18. Способ изготовления тест-полоски для латеральной проточной иммунохроматографии, как она определена в любом из пп.1-17, включающий:
а) нанесение конъюгата в виде полосы на подушечку для конъюгата;
б) иммобилизацию специфического связывающего реагента в тестовой зоне подушечки для тестовой зоны и контрольной зоны;
в) иммобилизацию второго реагента захвата в контрольной зоне подушечки для тестовой зоны и контрольной зоны;
г) блокирование каждой из подушечек блокирующим агентом; и
е) выравнивание полученных подушечек в канале движения жидкости относительно друг друга.
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что конъюгат стабилизируют в простом или сложном растворе сахара перед нанесением в виде полосы.
20. Способ по п.19, отличающийся тем, что раствор сахара содержит сахарозу, трегалозу, станнат калия и перекись водорода.
21. Способ по п.18, отличающийся тем, что специфический связывающий реагент иммобилизован в тестовой зоне с использованием биотин/стрептавидинового линкера.
22. Способ по п.18, отличающийся тем, что специфический связывающий реагент иммобилизован в контрольной зоне с использованием биотин/стрептавидинового линкера.
23. Способ по п.18, отличающийся тем, что блокирующий агент содержит детергенты в неионной, катионной, анионной и амфотерной формах; сахара, включая сахарозу, фруктозу; или белки, включая бычий сывороточный альбумин, цельную животную сыворотку, казеин и сухое обезжиренное молоко.
24. Способ по п.19, отличающийся тем, что цельная животная сыворотка представляет собой фетальную телячью сыворотку.
25. Способ по п.19, отличающийся тем, что цельная животная сыворотка представляет собой сыворотку птиц.
26. Способ по п.21, отличающийся тем, что сыворотка птиц выбрана из сыворотки гусей, сыворотки индеек и сыворотки кур.
27. Способ латеральной проточной иммунохроматографии для определения аналита в ротовой жидкости, включающий:
(а) сбор ротовой жидкости коллектором, отделенным от тест-полоски для латеральной проточной иммунохроматографии, как она определена в любом из п.п.1-17;
(б) погружение коллектора в объем буфера для образцов с целью высвобождения ротовой жидкости в буфер для получения смеси;
(в) помещение тест-полоски для латеральной проточной иммунохроматографии, как она определена в любом из предшествующих пунктов, в указанную смесь; и
(г) определение действительности теста путем наблюдения присутствия сигнала в контрольной зоне, и определение присутствия аналита путем наблюдения присутствия сигнала в тестовой зоне в течение от 15 до 60 мин от начала теста.
28. Способ по п.27, отличающийся тем, что коллектор на стадии (а) представляет собой необработанный полиэфирный тампон.
29. Способ по п.28, отличающийся тем, что тампон представляет собой Texwipe Large Alpha Swab TX714A.
30. Способ по п.27, отличающийся тем, что буфер для образцов представляет собой буферный раствор фосфата калия с рН 7,2+/-0,2.
31. Способ по п.30, отличающийся тем, что указанный раствор дополнительно содержит 0,15 М хлорид натрия, 0,1% Тритон Х-100, 15% инактивированной нагреванием куриной сыворотки, 30 мкг/мл авидина, 0,2% Твина 80, 0,2% Tetronic T-904 и 0,0285% (активный ингредиент) ProClin 950.
32. Способ по п.27, отличающийся тем, что объем буфера для образцов составляет 1000 мкл.
33. Способ по п.27, отличающийся тем, что он дополнительно включает стадию взятия аликвоты смеси между стадией (б) и стадией (в).
34. Способ по п.33, отличающийся тем, что объем аликвоты составляет 200 мкл.
35. Способ по п.27, отличающийся тем, что сигнал представляет собой окрашенную линию.
36. Способ по п.35, отличающийся тем, что окрашенная линия представляет собой красноватую линию.
37. Способ по п.27, отличающийся тем, что сигнал наблюдается в течение 20-45 минут.
38. Набор для определения аналита в ротовой жидкости, включающий, по меньшей мере, одну тест-полоску для латеральной проточной иммунохроматографии, как она определена в любом из пп.1-17.
39. Набор по п.38, отличающийся тем, что тест-полоска заключена в обезвоживающем контейнере.
40. Набор по п.38, отличающийся тем, что он дополнительно включает буфер для образцов и, по меньшей мере, один коллектор для сбора ротовой жидкости.
41. Набор по п.40, отличающийся тем, что буфер для образцов представляет собой буферный раствор фосфата калия с рН 7,2+/-0,2.
42. Набор по п.41, отличающийся тем, что указанный раствор дополнительно содержит 0,15 М хлорид натрия, 0,1% Тритон Х-100, 15% инактивированной нагреванием куриной сыворотки, 30 мкг/мл авидина, 0,2% Твина 80, 0,2% Tetronic T-904 и 0,0285% (активный ингредиент) ProClin 950.
43. Набор по п.40, отличающийся тем, что коллектор представляет собой необработанный полиэфирный тампон.
44. Набор по п.43, отличающийся тем, что указанный тампон представляет собой Texwipe Large Alpha Swab TX714A.
45. Набор по любому из пп.38-44, отличающийся тем, что он дополнительно включает флаконы, содержащие положительный и отрицательный контроль для качественного тестирования тест-полоски.