СПОСОБ ХАРАКТЕРИЗАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЯИЦ ГЕЛЬМИНТОВ, ПРЕЖДЕ ВСЕГО ЯИЦ ГЕЛЬМИНТОВ Р. TRICHURIS

1. Способ оценки биологической активности эмбрионированных яиц Trichuris, заключающийся в том, что осуществляют по меньшей мере 3 из следующих анализов:
а) оценку и/или подтверждение стадии эмбрионального развития яиц гельминтов с помощью метода количественной ПЦР с использованием пригодных маркерных последовательностей для определения количества копий геномной ДНК,
б) оценку метаболической активности эмбрионированных яиц гельминтов с помощью биохимических и/или молекулярно-биологических методов,
в) оценку индуцибельности генной экспрессии в эмбрионированных яйцах гельминтов,
г) оценку с помощью микроскопа подвижности личинок гельминтов, находящихся в яйце, в течение продолжительных периодов наблюдения после предварительной инкубации при повышенных температурах и/или
д) оценку коэффициента вылупляемости личинок Trichuris в организме лабораторного животного, при этом осуществляют количественное сравнение интактных эмбрионированных яиц, выделенных из содержимого кишечника, с внутренним стандартом.
2. Способ по п.1а), в котором с помощью метода количественной ПЦР с использованием пригодных специфических для Trichuris suis последовательностей оценивают количество копий геномной ДНК.
3. Способ по п.1б), отличающийся тем, что для оценки метаболической активности эмбрионированных яиц Trichuris измеряют содержание АТФ.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что перед осуществлением измерений люминесценции осуществляют предварительную инкубацию яиц Trichuris в следующих условиях:
аа) при температуре от 36 до 42°С,
бб) в течение промежутка времени, составляющего от 2 до 30 ч,
вв) в суспензионной среде, имеющей значение рН от 0,1 до 3.
5. Способ по п.1б), отличающийся тем, что яйца Trichuris сначала обрабатывают средством для предварительной обработки, выбранным из хлорноватистой кислоты, хитиназы и/или протеазы, и затем окрашивают солями тетразолия.
6. Способ по п.1в), отличающийся тем, что оценивают индуцибельность белка теплового шока.
7. Способ по п.1в), отличающийся тем, что обнаружение экспрессии осуществляют на основе гибридизации с флуоресцентномеченным нуклеотидным зондом.
8. Способ по п.1в), отличающийся тем, что гибридизацию обнаруживают с помощью проточной цитометрии.
9. Способ по п.1г), отличающийся тем, что подвижность личинок гельминтов, находящихся в яйце, оценивают с помощью микроскопа в течение периодов времени, составляющих от 2 мин до 8 ч, с использованием замедленной киносъемки.
10. Способ по п.1д), отличающийся тем, что подлежащие анализу яйца гельминтов маркируют флуоресцентными зондами и внутренние стандарты маркируют имеющими другую окраску флуоресцентными зондами.
11. Способ по п.1д), отличающийся тем, что в качестве системы для анализа применяют содержимое кишечников кроликов и/или свиней.
12. Способ по п.1д), отличающийся тем, что в качестве внутреннего стандарта для определения коэффициента вылупляемости применяют неэмбрионированные или инактивированные яйца Trichuris.
13. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что осуществляют по меньшей мере четыре анализа, выбранные из анализов, указанных в 1а), 1б), 1в), 1г) и/или 1д).
14. Способ по одному из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что перед осуществлением оценки яйца Trichuris подвергают предварительной инкубации в течение периода времени, составляющего от по меньшей мере 30 мин до 24 ч, в строго стандартизованных условиях, причем предварительная инкубация при необходимости включает также регулирование имеющих существенное значение параметров, прежде всего температуры.
15. Яйца Trichuris, отличающиеся тем, что среди них по меньшей мере 50% являются биологически активными при оценке согласно способу по одному из пп.1-14.
16. Применение яиц Trichuris по п.15 для получения фармацевтического продукта, предназначенного для лечения аутоиммунного заболевания.