ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ВЕТЕРИНАРИИ, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ, ЦИТОПРОТЕКТОРНЫМ ДЕЙСТВИЕМ И СПОСОБСТВУЮЩЕЕ СОХРАНЕНИЮ СТРУКТУРЫ И ФУНКЦИИ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПРИ ОСТРОМ И ХРОНИЧЕСКОМ ПАНКРЕАТИТЕ
VETERINARY MEDICINAL PRODUCT WITH AN ANTI-INFLAMMATORY, CYTOPROTECTIVE EFFECT AND CONTRIBUTING TO PRESERVATION OF PANCREATIC STRUCTURE AND FUNCTION IN ACUTE AND CHRONIC PANCREATITIS

Изобретение относится к лекарственным средствам для ветеринарии, обладающим противовоспалительным, цитопротекторным действием и способствующее сохранению структуры и функции поджелудочной железы при остром и хроническом панкреатите.
Нарушение экзокринной функции поджелудочной железы вследствие воспалительного процесса может послужить причиной эндогенной интоксикации с многокомпонентным системным воспалительным синдромом, нередко приводящим к летальному исходу вследствие развития полиорганной несостоятельности. Смертность у собак при остром осложненном панкреатите колеблется в пределах от 27% до 42% (Рено Н., 2003; Симпсон Дж.У., Элс Р.У., 2003).
Наиболее частой причиной развития недостаточности экзокринной функции поджелудочной железы (НЭФПЖ) у собак является атрофия секреторных ацинусов в поджелудочной железе. В других случаях причиной НЭФПЖ может стать хроническое рецидивирующее воспаление (панкреатит), что обычно наблюдается у кошек, и гипоплазия поджелудочной железы. НЭФПЖ и сахарный диабет часто осложняют течение хронического панкреатита у собак.
Поэтому в настоящее время актуальность поиска эффективных, безопасных в применении, лишенных побочных действий и противопоказаний, лекарственных средств для лечения острого, хронического панкреатита и профилактики последующей экзокринной недостаточности представляется весьма актуальной.
Известно лекарственное RU 2068698 в виде таблеток, покрытых оболочкой, предназначенное для лечения больных с нарушением внешнесекреторной деятельности поджелудочной железы и патологией желудочного пузыря. Однако нет данных о противовоспалительном и цитопротекторном действии данного средства. Кроме того, данное средство выпускается в виде таблеток, покрытых кислотоустойчивой оболочкой, которая растворяется в желудке человека и данные о применении, дозировании и эффективности данного средства в ветеринарии отсутствуют.
Известно лекарственное средство RU 2224536 для лечения сахарного диабета и панкреатита на основе растительного сырья, оказывающее противовоспалительный, спазмолитический и гемогликимический эффект. Однако отсутствуют данные о цитопротекторном действии данного средства и его влиянии на структуру поджелудочной железы, а также метаболизм триглицеридов при остром и хроническом панкреатитах. Кроме того, так же отсутствуют данные по эффективности данного средства в ветеринарии.
Лекарственные средства для лечения острого и хронического панкреатита у животных на данный момент в РФ не зарегистрированы и не производятся.
Задачей настоящего изобретения является создание лекарственного средства для ветеринарии, обладающего противовоспалительным, цитопротекторным действием и способствующее сохранению структуры и функции поджелудочной железы при остром и хроническом панкреатите и лишенного побочных эффектов.
Технический результат заключается в расширении арсенала ветеринарных лекарственных средств безопасных в применении, лишенных побочных действий и противопоказаний, повышающих эффективность лечения при остром и хроническом панкреатите и профилактики последующей экзокринной недостаточности.
Поставленная задача достигается тем, что предложено лекарственное средство для ветеринарии, обладающее противовоспалительным, цитопротекторным действием и способствующее сохранению структуры и функции поджелудочной железы при остром и хроническом панкреатите, характеризующееся тем, что оно содержит компоненты Berberis vulgaris, Lycopodium clavatum, Taraxacum officinale, Matricaria recutita, Belladonna atropa и Calcium carbonicum Hahnemanni, причем компоненты содержатся в микродозах в частях:
Lycopodium clavatum ∅=D1
0,00001
Berberís vulgaris ∅=D1
1
Taraxacum officinale ∅
0,01
Matricaria recutita ∅
0,001
Belladonna atropa ∅
0,1
Calcium carbonicum Hahnemanni
0,000001
Любое изменение качественного состава предложенного средства, а также изменение соотношения компонентов не приводит к достижению заявленного технического результата.
Предлагаемое средство может быть выполнено в виде инъекционного раствора, таблеток, раствора для перорального применения, микрокапсул.
Изобретение иллюстрируется следующим примером:
Пример
Состав на 1 л раствора для инъекций:
Lycopodium clavatum ∅=D1
0,00001 мл
Berberis vulgaris ∅=D1
1 мл
Taraxacum officinale ∅
0,01 мл
Matricaria recutita ∅
0,001 мл
Belladonna atropa ∅
0,1 мл
Calcium carbonicum Hahnemanni
0,000001 г
Натрия хлорид
9,0 г
Вода для инъекций
до 1000 мл
Заявляемое средство в виде раствора для инъекций получают следующим образом (расчет на 100 л готового препарата): готовят точную навеску 900,0 г натрия хлорида, которую через воронку пересыпают в 10 л мерную колбу. Добавляют 7 л воды для инъекций, и, поместив колбу на механический встряхиватель, добиваются полного растворения кристаллов соли. Высокоточным автоматическим объемным дозирующим устройством, выходной капилляр которого размещают над мерной колбой вместимостью 10,0 л, отмеривают Lycopodium clavatum ∅=D1 0,001 мл, Berberis vulgaris ∅=D1 100 мл, Taraxacum officinale ∅ 1 мл, Matricaria recutita ∅ 0,1 мл, Belladonna atropa ∅ 10 мл, Calcium carbonicum Hahnemanni ∅ 0,0001 г. Концентрат доводится до метки водой для инъекций и тщательно перемешивается на механическом устройстве не менее 30 мин. Полученный концентрат препарата переливают в емкость для выполнения финального разведения. После количественного переноса концентрата в емкость для финального разведения, начинают дозирование в нее воды для инъекций, контролируя ее количество по показаниям тензорных весов. По достижении массы раствора 99,97 кг закачку воды инъекционной в емкость прекращают и начинают перемешивание, которое проводят в течение 6 часов. Все выполняемые операции фиксируют в маршрутной карте.
Характеристика конечного продукта
По внешнему виду препарат представляет собой прозрачную жидкость светло-желтого цвета со слабым специфическим запахом.
Характеристика конечного продукта: отвечает требованиям ГФ XI, М, «Медицина», 1990. Т. 2, с. 140, статья «Инъекционные лекарственные формы».
Изучение безопасности и эффективности заявленного средства проводилось в ветеринарных клиниках и профильных научно-исследовательских учреждениях России.
Пример 1.
Исследование влияния заявленного средства на течение острого панкреатита проводилось на модели острого панкреатита у крыс.
Острый панкреатит у лабораторных животных моделировали двукратным внутрибрюшинным введением аргинина. В опытной группе вводили заявленное средство подкожно, в дозе 350 мг/100 г два раза в день, ежедневно, в течение 6 суток. Вторая группа являлась негативным контролем. Результаты лечения сравнивались с показателями третьей группы, в которой находились здоровые интактные животные.
Критериями оценки были динамика биохимических показателей крови и результаты гистологических исследований поджелудочной железы.
Анализ результатов биохимических анализов крови на 6-й день лечения выявил следующую закономерность (таблица 1): в группе негативного контроля уровень липазы постепенно снижался в течение всего периода наблюдений и на 6 сутки после введения аргинина был значимо ниже, чем в опытной группе (10,60±2,34 u/L против 23,98+5,69 u/L, соответственно, р<0,05). Уровень амилазы так же в группе негативного контроля был значительно ниже значения данного показателя в опытной (555,5±43,5 и 450,8±52,7). Анализ динамики изменений уровня липазы в группах животных после моделирования острого панкреатита выявил следующую закономерность: в группе негативного контроля уровень липазы постепенно снижался в течение всего периода наблюдений и на 6 сутки после введения аргинина был значимо ниже, чем в контроле (10,60±2,34 u/L против 22,05±2,53, u/L соответственно, р<0,05). Это может свидетельствовать о повреждении ацинарных клеток поджелудочной железы и развитии внешнесекреторной недостаточности. В опытной группе при применении заявленного средства уровень липазы на 2-е сутки после введения аргинина значимо не отличался от уровня липазы в группе негативного контрольня. На 6 сутки после моделирования острого панкреатита (после введения аргинина) уровень липазы в крови животных, получавших лечение заявленным средством был значимо выше, чем в группе негативного контроля (23,98+5,69 u/L против 10,60±2,34 u/L соответственно, р<0,05) и соответствовал значению в интактной группе. Это может свидетельствовать о протекторном действии заявленного средства.
На рисунке 1 представлена гистоструктура поджелудочной железы опытной группы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение в 100 раз. Отмечается сохранение структуры поджелудочной железы, среди общей массы сохранившихся ацинусов наблюдаются отдельные островки дистрофических изменений в виде фокальной вакуольной дистрофии и некробиоза панкреацитов, островки Лангерганса не затронуты, гранулоцитарная реакция (инфильтрация) не обнаружена.
На рисунке 2 представлена гистоструктура поджелудочной железы опытной группы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение в 200 раз. Отмечается сохранение структуры поджелудочной железы, среди общей массы сохранившихся ацинусов единичные островки некротических изменений. Основная часть островков Лангерганса нормального размера и формы, без признаков дистрофии. В единичных случаях отмечают некоторое разрежение ткани островка Лангерганса. Пространства между дольками железы выглядят умеренно расширенными. Гранулоцитарная реакция (инфильтрация) не обнаружена.
На рисунке 3 представлена гистоструктура поджелудочной железы контрольной группы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение в 100 раз. Большая часть ткани поджелудочной железы подвергнута некробиотическим изменениям. В дольках железы, сохранившей ацинарное строение, панкреоциты с явлениями дистрофии и некробиоза. Кровеносные сосуды и капилляры как внутри дольки, так и междольковые, расширены и полнокровны.
На рисунке 4 представлена гистоструктура поджелудочной железы контрольной группы, окраска гематоксилин-эозином, увеличение в 200 раз. Архитектоника поджелудочной железы нарушена, панкреоциты с явлениями дистрофии и некробиоза: уменьшены в размерах. Повышена базофилия цитоплазмы, уменьшена в размерах зимогенная зона, встречаются очаги ацинусов с вакуолизированной цитоплазмой и пикнотичными ядрами. Единичные вакуоли наблюдаются в отдельных островках Лангерганса. Кровеносные сосуды и капилляры как внутри дольки, так и междольковые, расширены, полнокровны, стенки сосудов утолщены, отечны.
Масса поджелудочной железы в группе негативного контроля была достоверно ниже на 6-е сутки после введения аргинина (р<0,05) (таблица 2). Поскольку использовался зафиксированный в формалине материал, снижение массы поджелудочной железы косвенно отражает некротические процессы, прошедшие в ней. В то же время, в группе животных, получавших заявленное средство, снижение веса данного органа не наблюдалось.
Результаты проведенного исследования подтвердили, что заявленное средство обладает противовоспалительным, цитопротекторным действием и способствует сохранению структуры и функции поджелудочной железы при остром панкреатите.
Пример 2.
Заявленное средство применялось в ветеринарной клинике «ВетЛига» (г. Воронеж). Для оценки эффективности заявленного средства были сформированы контрольная и опытная группы собак разных пород в возрасте от 5 мес. до 5 лет с признаками воспалительных заболеваний поджелудочной железы. На момент обращения в клинику у животных наблюдались следующие характерные симптомы: рвота, диарея, боль в краниальной области живота, отказ от корма, угнетенное состояние. В хронических случаях основными симптомами были рвота и диарея. При биохимическом исследовании крови у большинства животных отмечены повышенные значения α-амилазы и панкреатической амилазы. В большинстве случаев наблюдалось повышение общего билирубина, АЛТ, ГГТП.
В контрольной группе животных (6 собак) проводили традиционное лечение. В опытной группе (12 собак) назначали заявленное средство.
В контрольной группе животным проводилась стандартная терапия, которая включала комбинации следующих препаратов: но-шпа в/м, церукал в/м, контрикал в/в, гордокс в/в, метрогил, эссенциале, преднизолон, дексаметозон, смекта, панкреатических ферментов, а также диету.
Животным опытной группы дополнительно назначалось заявленное средство внутримышечно в дозе 0,1 мл/кг веса 1-2 раза в сутки до исчезновения клинических признаков, после устранения клинических симптомов дополнительно 3-4 инъекции 1 раз в 1-3 дня. Противорвортные препараты (церукал) не использовали в 82% случаев, спазмолитики (но-шпа, баралгин, атропин) в 75% случаев.
При хроническом течении заболевания заявленное средство в опытной группе назначалось в составе комплексной терапии в той же дозировке в течение первых 7 дней 1-2 раза в день, далее 2-3 раза в неделю.
В контрольной группе при проведении стандартной терапии клиническое улучшение отмечалось на 3-5 день. Полностью рвота прекращалась на 3-7 день. Диарея прекращалась на 4-7 день. Полное восстановление аппетита и нормализация работы желудочно-кишечного тракта отмечались через 7-14 дней. В трех случаях (50%) наблюдались рецидивы заболевания в течение первых двух месяцев наблюдений.
В опытной группе большинстве случаев клиническое улучшение отмечалось на 3-5 день после начала курса заявленного средства. Полностью рвота прекращалась на 2-3 день. Диарея прекращалась в среднем на 2-4 день. Изменение характера каловых масс с водянистой консистенции до оформленной происходило в среднем в течение 5 суток. Полное восстановление аппетита и нормализация работы желудочно-кишечного тракта отмечались к 5 дню в случаях острого панкреатита и к 10 дню в случаях хронического панкреатита. Рецидивов заболевания в течение восьми месяцев наблюдений после лечения заявленным средством не отмечали.
Результаты биохимического исследования крови до и после лечения в группах представлены в таблице 3.
При повторном биохимическом исследовании сыворотки крови в контрольной группе уровень α-амилазы и панкреатической амилазы снизился на 11,4% и 21,2%, соответственно, однако значительно превышал физиологическую норму. В опытной группе снижение данных показателей было более значительным: уровень α-амилазы снизился на 16,5%, а панкреатической амилазы - на 46,2%.
При анализе динамики ГГТП отмечено, что использование стандартной схемы терапии в контрольной группе не оказывало влияние на уровень ГГТП (до лечения 414,6±69,1 ммоль/сл, после лечения 456,7±39,3 ммоль/сл), тогда как в опытной группе при применении заявленного средства наблюдалось снижение данного показателя на 45,1%.
Коэффициент де Ритиса у животных контрольной группы в ходе лечения не изменялся и оставался ниже физиологически нормальных значений: 0,70. У животных опытной группы коэффициент де Ритиса после проведенного курса составлял 0,97 (р<0,05 по сравнению с контрольной группой).
Уровень билирубина (общего, связанного и свободного) у собак обеих групп колебался в пределах физиологически нормальных значений, однако у большинства животных контрольной группы была отмечена тенденция к повышению этих показателей, тогда как в опытной группе после проведенного курса лечения отмечено их понижение.
У одного пациента опытной группы до начала лечения была зарегистрирована гипергликемия (8,4 ммоль/л). При этом средний уровень глюкозы в опытной группе составил 5,4±0,5 ммоль/л. В результате лечения при применении заявленного средства уровень глюкозы снизился до нормальных значений (4,4±0,3 ммоль/л).
Проведенные исследования подтверждают, что при остром и хроническом панкреатите заявленное средство оказывает выраженное противовоспалительное действие, быстро устраняет симптомы заболевания (рвота, диарея), нормализует работу ЖКТ и биохимические показатели крови. Применение заявленного средства позволяет сократить время до появления первоначального улучшения состояния и добиться более стойкой, продолжительной ремиссии. Применение заявленного средства достоверно снижает риск развития рецидивов заболевания (р<0,05).