ТРИТЕРПЕНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ЛУПЕОЛЬНОГО ТИПА КАК ПРОТИВОВИРУСНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
TRITERPENE DERIVATIVES OF LUPEOL TYPE AS ANTIVIRAL PREPARATIONS

Заявитель притязает на установление конвенционного приоритета по настоящей заявке по дате подачи предварительных заявок на патент Индии 1670/СНЕ/2009 (подана 14 июля 2009 года), и 587/СНЕ/2010 (подана 8 марта 2010 года), а также по дате подачи предварительной заявки на патент США US 61/251,933 (подана 15 октября 2009 года). Все эти заявки во всей своей полноте включены в настоящую заявку посредством ссылки.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым тритерпеновым производным лупеольного типа и родственным соединениям, к композициям, предназначенным для терапевтического лечения вирусных заболеваний, и в особенности заболеваний, вызванных ВИЧ.
Уровень техники
На протяжении уже более 20 лет, (Science 1983, 220,868-871; N.Eng.J.Med.1984, 311, 1292-1297) вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) считается этиологическим фактором синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). СПИД характеризуется разрушением иммунной системы, в частности CD4+Т-клеток. ВИЧ является ретровирусом, и его жизненный цикл включает несколько важных этапов, начиная от прикрепления вируса к мембране клетки-хозяина, и заканчивая высвобождением из клетки вирион-потомства.
Как оказалось, природная бетулиновая кислота, выделенная из Syzygium clavifolium и некоторых других видов растений, оказывает действие, направленное против ВИЧ. Несколькими исследовательскими группами были предприняты модификации химической структуры в попытке выявить действенные средства для борьбы с ВИЧ путем производства полусинтетических аналогов бетулиновой кислоты, что привело к открытию бевиримата как соединения с принципиально новым механизмом действия (J.Nat.Prod. 199457(2): 243-7; J.Med.Chem. 1996, 39(5), 1016). Дальнейшие исследования показали, что бевиримат действует путем прерывания Gag-процессинга (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2003, 100(23): 13555-60; Antimicrob. Agents. Chemother. 2001, 45(4), 1225-30; J.Virol. 2004, 78(2): 922-9; J.Biol.Chem. 2005, 280(51): 42149-55; J.Virol. 2006, 80(12); 5716-22) и станет первым в своем классе ингибитором созревания с мощным противодействием ВИЧ-1.
Вдохновленные этими достижениями, фармацевты-медики приступили к интенсивному изучению производных бетулиновой кислоты и родственных соединений на предмет их терапевтического воздействия. Например, патентная заявка WO 2008057420 описывает тритерпеновые производные как антиретровирусные средства; WO 2007141391 описывает бетулин-производные соединения как антипротозойные средства; WO 2007141390 описывает препарат бетулин-производных соединений как противовирусное средство; WO 2008127364 описывает препарат производных бетулиновой кислоты как предназначенный для использования в противовирусных и противораковых фармацевтических композициях; US 20080207573 описывает препарат тритерпеновых производных для терапевтического использования при лечении вирусных инфекций; WO 2007141389 описывает препараты бетулин-производных соединений как антибактериальные средства; US 20040204389 описывает средства против ВИЧ с двойным механизмом действия; WO 2007/002411 описывает противовирусные соединения; CN 1861627 описывает противоопухолевые препараты; WO 2006053255 описывает новые бетулин-производные, препараты из них и их применение; WO 2009/082818 описывает новые С-21 кето люпиновые производные, препараты из них и их применение, и, WO 2006105356 описывает способы получения биологически активных 3-сложных эфиров бетулинового альдегида и бетулиновой кислоты.
Подобным же образом, WO 2009/082819, WO 2009/100532 сообщали о 17 β люпин производных как об анти-ВИЧ препаратах.
Другие источники описывают родственные бетулиновой кислоте соединения. Например, WO 2007141383 описывает бетулин-производные как антифидинги для вредителей растений; US 6670345 описывает применение бетулиновой кислоты и ее производных в целях ингибирования развития рака, а также способ получения бетулиновой кислоты; WO 2002091858 описывает седативные составы Marcgraviaceae, содержащие бетулиновую кислоту, производные бетулиновой кислоты, а также способы их получения применения; WO 2000046235 описывает препараты новых производных бетулиновой кислоты для применения в качестве ингибиторов развития рака, а WO 2007141392 описывает косметические и фармацевтические композиции, в состав которых входят бетулоновая кислота и производные бетулина.
Учитывая тот факт, что СПИД принял характер эпидемии мирового уровня, существует острая и постоянная нужда в новых эффективных лекарствах для лечения ВИЧ-инфицированных пациентов, а также заболеваний и/или расстройств, опосредованных ВИЧ, путем обнаружения новых соединений с принципиально новой структурой и/или механизмом действия.
Раскрытие изобретения
Настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I):
,
в которых
a
R может быть Н, замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным арилом, замещенным или незамещенным циклоалкилом либо замещенным или незамещенным гетероциклилом, и предпочтительно R может быть замещен R;
a
R' может быть Н, замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным арилом, замещенным или незамещенным циклоалкилом, замещенным или незамещенным циклоалкенилом, замещенным или незамещенным гетероциклилом, замещенным или незамещенным алкилокси, либо замещенным или незамещенным арилокси, и предпочтительно R' может быть замещен R;
1
2
2
n
Х и X могут быть независимо выбраны из связи, -O-, -NR"-, -С(O)-, -С(O)-,-(CH)-, или -C(O)NR"-;
1
2
n
2
Z и Z могут быть независимо выбраны из связи, -С(O)-, -(CH)-, -O-, -S-, -SO-, или -NR"-;
Z' может быть Н, замещенным или незамещенным алкилом, либо Z и Z' могут вместе с присоединенным к ним углеродом образовывать оксо (С=O), и тогда Х и R отсутствуют;
n может быть целым числом 0-2;
m может быть целым числом 0-2;
"" может быть одинарной связью или двойной связью;
1
2
R может быть Н, C(O)R", либо замещенным или незамещенным алкилом;
2
R может быть Н, замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным алкенилом, замещенным или незамещенным алкинилом либо замещенным или незамещенным циклоалкилом;
3
3
3
3
R' и R" могут быть независимо выбраны из Н, либо замещенного или незамещенного алкила, и когда "" является одинарной связью, один из R' или R" отсутствует;
a
2
2
R может быть Н, ОН, галогеном, NR", C(O)R", CHOR", C(O)NR" либо замещенным или незамещенным алкилом; и
каждый R" может быть независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного алкила, замещенного или незамещенного амино, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного циклоалкила, либо замещенного или незамещенного гетероциклила; с условием, что один из R или R' является замещенной или незамещенной 4 или 5-членной циклоалкильной группой, и если R или R' является 4-членной циклоалкильной группой, то по крайней мере один из атомов углерода 4-членной циклоалкильной группы должен быть замещен двумя идентичными группами, которые выбраны из алкила или галогена, где наиболее предпочтительно алкильной группой является метальная, а гало группой является фтор.
Рассматриваются также фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (1). Аналогичным образом, рассматриваются фармацевтически приемлемые сольваты соединений формулы (1), в том числе гидраты.
Следует понимать, что формула (1) содержит в своей структуре все стереоизомеры, в том числе энантиомеры, диастереомеры, рацематы и их комбинации, которые могут рассматриваться в химической структуре описанного типа соединений.
Рассматриваются также пролекарства соединений формулы (1), в том числе сложноэфирные пролекарства.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором Х является -С(O)-.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором Х является -C(O)NR"-.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором Х является связью.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором Z является О.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором Z' является Н.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R является Н.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R является замещенным или незамещенным циклобутилом.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R является замещенным или незамещенным циклопентилом.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R является замещенным или незамещенным алкилом.
3
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
3
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R является Н, -С((СН))-COH, -С((СН))-СН-COH, -СН-СН-COH, -CH-COH и СН.
1
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором Z является связью.
1
2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором X является -C(O)NR"- и -С(O)-.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R' является Н.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R' является замещенным или незамещенным алкилом.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R' является замещенным или незамещенным циклобутилом.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R' является замещенным или незамещенным циклопентилом.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R" является Н.
1
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R является Н.
2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором R является пропеном.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором "" является одинарной связью.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором n является 0.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1), в котором m является 0 и 1.
Соответственно, один из аспектов настоящего изобретения описывает соединения формулы (1А):
.
в которой
A
A
1
4
b
2
b
b
b
2
R может быть замещенным или незамещенным алкилом либо замещенным или незамещенным циклоалкилом; в которой циклоалкил является 4 или 5-членным кольцом и заместители в каждом случае независимо выбраны из Н, гало, C-C алкила, CO-O-R, -СН-О-R, CO-NHR, или CON(R); и предпочтительно замещенный или незамещенный алкил, из определения R, может быть выбран из:
, , , , ,
, , , , ,
, , или ;
A
A
a
R' может являться Н, замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным арилом, замещенным или незамещенным циклоалкилом и предпочтительно R' может быть замещен R;
1A
2
X может являться связью, -O-, -NR"-, -С(O)-, -С(O)-, или -C(O)NR"-;
1A
2
Z может являться связью, -С(O)-, -O-, -S-, -SO-, или -NR"-;
a
2
2
R может являться Н, ОН, галогеном, NR", C(O)R", CHOR", C(O)NR" либо замещенным или незамещенным алкилом;
b
R может являться Н либо замещенным или незамещенным алкилом; и
A
A
A
A
каждый R" может быть независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного алкила, замещенного или незамещенного амино, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного циклоалкила либо замещенного или незамещенного гетероциклила; с условием, что один из R или R' является замещенной или незамещенной 4 или 5-членной циклоалкильной группой, и если R или R' является 4-членной циклоалкильной группой, то по крайней мере один из атомов углерода 4-членной циклоалкильной группы должен быть замещен двумя идентичными группами, причем теми, которые выбраны из алкила или галогена, где наиболее предпочтительно алкильная является метильной, а гало группа является фтором.
Рассматриваются также фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (1А). Аналогичным образом, рассматриваются фармацевтически приемлемые сольваты соединений формулы (1А), в том числе гидраты.
Следует понимать, что формула (1А) содержит в своей структуре все стереоизомеры, в том числе энантиомеры и диастереомеры, которые могут рассматриваться в химической структуре описанного типа соединений.
Рассматриваются также пролекарства соединений формулы (1А), в том числе сложноэфирные пролекарства.
A
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1А), в котором R является замещенным или незамещенным циклобутилом.
A
2
3
2
2
3
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1А), в котором R является СН-С((СН))-СОН, и СН.
A
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1А), в котором R' является замещенным или незамещенным циклобутилом.
A
2
3
2
2
3
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (1А), в котором R' является Н, СН-С((СН))-COH, и СН.
Настоящее изобретение также относится к соединениям формулы (2):
,
в которой
2
2
3
R может являться Н, замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным арилом либо замещенным или незамещенным циклоалкилом, и предпочтительно R может быть замещен R;
2
2
a
R' может являться Н, замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным арилом, замещенным или незамещенным циклоалкилом, замещенным или незамещенным гетероциклилом, замещенным или незамещенным алкилокси либо замещенным или незамещенным арилокси, и предпочтительно R' может быть замещен R;
2
2
2
2
n
X и X' независимо могут быть выбраны из связи, -O-, -NR"-, -С(O)-, -С(O)-,-(СН)-, или -C(O)NR"-;
n может являться 0-3;
2
2
Z и Z' независимо могут быть выбраны из связи, -С(O)-, -O-, или -NR"-;
a
2
2
2
2
R может являться Н, ОН, галогеном, N(R"), C(O)R", C(O)R", CHOR", C(O)N(R") либо замещенным или незамещенным алкилом;
p
2
каждый R" может быть независимо выбран из Н, -[CH(R''')]C(O)R''', замещенного или незамещенного алкила, замещенного или незамещенного амино, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного циклоалкила либо замещенного или незамещенного гетероциклила;
р может являться 0-3; и
2
2
2
2
каждый R''' может быть независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного алкила либо замещенного или незамещенного циклоалкила; с условием, что один из R или R' является замещенной или незамещенной 4 или 5-членной циклоалкильной группой, и если R или R' является 4-членной циклоалкильной группой, то по крайней мере один из атомов углерода 4-членной циклоалкильной группы должен быть замещен двумя идентичными группами, причем теми, которые выбраны из алкила или галогена, где наиболее предпочтительно алкильная является метальной, а гало группа является фтором.
Рассматриваются также фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (2). Аналогичным образом, рассматриваются фармацевтически приемлемые сольваты соединений формулы (2), в том числе гидраты.
Следует понимать, что формула (2) содержит в своей структуре все стереоизомеры, в том числе энантиомеры и диастереомеры, которые могут рассматриваться в химической структуре описанного типа соединений.
Рассматриваются также пролекарства соединений формулы (2), в том числе сложноэфирные пролекарства.
2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором Z является О.
2
2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором X является связью, -С(O)- и -С(O)-СН-.
2
3
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
3
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором R является Н, -С((СН))-COH, -С((СН))-СН-COH, -CH-CH-COH, -CH-COH и СН.
2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором R является замещенным или незамещенным циклобутилом.
2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором Z' является связью.
2
2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором Х' является связью, -С(O)- и -C(O)NR"-.
2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором R' является Н, замещенным или незамещенным циклобутилом, и этил пиперидин-4-карбоксилатом.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором R" является Н.
a
p
2
p
2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором R является замещенным или незамещенным алкилом и C(O)R". В данном варианте воплощения предпочтительно R" является ОН, -[CH(R''')]C(O)Me, -[CH(R''')]C(O)H, бензилом, морфолином, пиперидином, этил пиперидин-4-карбоксилатом, N-этил пиперазином и пирролидином.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором R''' является Н, метилом, изопропилом и изобутилом.
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2), в котором р является 1 и 2.
Соответственно, еще один аспект настоящего изобретения приводит соединения формулы (2А):
,
A1
в которой X может являться связью или -С(O)-;
A2
X может являться связью, О или NH;
A1
R может являться Н, замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным арилом, , , , , , , , , , , , , , или ;
A2
A2
R может быть Н, замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным амино, замещенным или незамещенным циклоалкилом, замещенным или незамещенным циклоалкенилом, замещенным или незамещенным гетероциклилом либо замещенным или незамещенным арилом, и предпочтительно R может быть замещен R'''; и
каждый R''' может быть замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным гетероциклилом, в котором гетероцикл является азотсодержащим гетероциклом и присоединен через атом азота, замещенным или незамещенным N содержащим гетероциклилалкилом (в котором алкил присоединен к атому азота в гетероцикле), замещенным или незамещенным аралкилом либо замещенным или незамещенным фенилом.
Рассматриваются также фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (2А). Аналогичным образом, рассматриваются фармацевтически приемлемые сольваты соединений формулы (2А), в том числе гидраты.
Следует понимать, что формула (2А) содержит в своей структуре все стереоизомеры, в том числе энантиомеры, диастереомеры, рацематы и их комбинации, которые могут рассматриваться в химической структуре описанного типа соединений.
Рассматриваются также пролекарства соединений формулы (2А), в том числе -сложноэфирные пролекарства.
A1
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2А), в котором X является связью и -С(O)-.
A1
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2А), в котором R является Н и замещенным или незамещенным алкилом.
A1
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2А), в котором R является Н и замещенным или незамещенным циклоалкилом.
A1
3
2
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
3
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2А), в котором R является Н, -С((СН))-COH, -С((СН))-СН-COH, -СН-СН-COH, -CH-COH и СН.
A2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2А), в котором X является связью и NH.
A2
В одном из вариантов осуществления приводится соединение формулы (2А), в котором R является , , , , , , , , , , , , , ,  и .
Настоящее изобретение также относится к промежуточным соединениям формулы (3):
,
в которой
3a
3a
a
R может являться Н, замещенным или незамещенным алкилом, замещенным или незамещенным арилом, замещенным или незамещенным циклоалкилом, замещенным или незамещенным циклоалкенилом, замещенным или незамещенным гетероциклилом, замещенным или незамещенным алкилокси либо замещенным или незамещенным арилокси, и предпочтительно R может быть замещен R;
3
2
2
n
Х может быть выбран из связи, -O-, -NR"-, -С(O)-, -С(O)-,-(СН)-, или -C(O)NR"-;
n может являться 0-3;
3
Z может быть выбран из связи, -O-, или -NR"-;
a
2
2
2
2
R может являться Н, ОН, галогеном, N(R"), C(O)R", C(O)R", CHOR", C(O)N(R") либо замещенным или незамещенным алкилом;
p
2
каждый R" может быть независимо выбран из Н, -[CH(R''')]C(O)R''', замещенного или незамещенного алкила, замещенного или незамещенного амино, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного циклоалкила либо замещенного или незамещенного гетероциклила;
р может являться 0-3; и
3a
3a
каждый R''' может быть независимо выбран из Н, замещенного или незамещенного алкила либо замещенного или незамещенного циклоалкила, с условием, что R является замещенной или незамещенной 4 или 5-членной циклоалкильной группой, и если R является 4-членной циклоалкильной группой, то по крайней мере один из атомов углерода 4-членной циклоалкильной группы должен быть замещен двумя идентичными группами, причем теми, которые выбраны из алкила или галогена, где наиболее предпочтительно алкильная является метальной, а гало группа является фтором.
Рассматриваются также фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (3). Аналогичным образом, рассматриваются фармацевтически приемлемые сольваты соединений формулы (3), в том числе гидраты.
Следует понимать, что формула (3) содержит в своей структуре все стереоизомеры, в том числе энантиомеры, диастереомеры, рацематы и их комбинации, которые могут рассматриваться в химической структуре описанного типа соединений.
Рассматриваются также пролекарства соединений формулы (3), в том числе сложноэфирные пролекарства.
Ниже приведены репрезентативные соединения, являющиеся по сути лишь иллюстративными и не призванными ограничить объем притязаний изобретения (обозначения даны по Chem. Draw Ultra 11.0 version):
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота (Соединение 1),
(1S,3R)-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксилат (Соединение 2),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота (Соединение 3),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1R,3S)-3-карбокси-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота (Соединение 4),
(1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота (Соединение 5),
(1R,2S,3aR,5aR,5bR,7aS,10R,12aR,12bR)-2-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-3,3,5a,5b,12b-пентаметил-10-(проп-1-ен-2-ил)икосагидродициклопента[а,i]фенантрен-1,7а-дикарбоновая кислота (Соединение 6),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(тетрагидрооксазин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 7),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(тетрагидрооксазин-4-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 8),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(тетрагадрооксазин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 9),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 10),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 11),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 12),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 13),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 14),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 15),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(тетрагидрооксазин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 16),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(тетрагидрооксазин-4-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 17),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1S,3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота (Соединение 18),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1S,3R)-3-карбокси-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота (Соединение 19),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-морфолинометил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 20),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3a-((1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)-икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 21),
((1R,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-ил)(3-(3-изопропил-5-метил-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)метанон (Соединение 22),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-N-((1R,3S)-3-(морфолинометил)циклопентил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 23),
2,2-диметил-4-оксо-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-(морфолинометил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)бутановая кислота (Соединение 24),
((1R,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-ил)(3-(3-изопропил-5-метил-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)метанон (Соединение 25),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-N-((1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 26),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-(4-(гидроксиметил)циклопент-2-енилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 27),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-N-(4-(гидроксиметил)циклопент-2-енил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 28),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2S,3R)-4-((3S,4aS,8aS)-3-(трет-бутилкарбамоил)октагидроизохинолин-2(1Н)-ил)-3-гидрокси-1-фенилбутан-2-илкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 29),
(3S,4aS,8aS)-N-трет-бутил-2-((2R,3S)-2-гидрокси-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-4-фенилбутил)декагидроизохинолин-3-карбоксамид (Соединение 30),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 31),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 32),
5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-5-левулиновая кислота (Соединение 33),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 34),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 35),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 36),
Метил 3-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)пропаноат (Соединение 37),
3-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)пропановая кислота (Соединение 38),
(S)-метил 2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-3-метилбутаноат (Соединение 39),
(S)-2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-3-метилбутановая кислота (Соединение 40),
(S)-метил 2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-4-метилпентаноат (Соединение 41),
(S)-2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-4-метилпентановая кислота (Соединение 42),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 43),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 44),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 45),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 46),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-2,2-диметил-(пиперидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 47),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 48),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 49),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-N-((1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 50),
2,2-диметил-4-оксо-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)бутановая кислота (Соединение 51),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-5a,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 52),
4-этилпиперазин-1-ил)((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-ил)метанон (Соединение 53),
3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота (Соединение 54),
Этил 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-1-бензилциклогексанкарбоксилат (Соединение 55),
Этил 1-бензил-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гадрокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)циклогексанкарбоксилат (Соединение 56),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-бензил-4-(этоксикарбонил)пиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 57),
(1S,3R)-1-трет-бутил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилат (Соединение 58),
(1S,3R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота (Соединение 59),
(1S,3R)-1-трет-бутил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(тетрагидрооксазин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилат (Соединение 60),
(1S,3R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(тетрагидрооксазин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота (Соединение 61),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-4-оксобутановая кислота (Соединение 62),
(1S,3R)-1-трет-бутил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилат (Соединение 63),
(1S,3R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота (Соединение 64),
5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-5-левулиновая кислота (Соединение 65),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 66),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 67),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-3-(4-этилпиперазил-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 68),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 69),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутил)-9-гадрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 70),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 71),
Этил 1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоксилат (Соединение 72),
Этил 4-этил-1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)пиперидин-4-карбоксилат (Соединение 73),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-(этоксикарбонил)-4-этилпиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 74),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-(4-циано-4-фенилпиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Соединение 75),
1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-фенилпиперидин-4-карбонитрил (Соединение 76),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-(4-циано-4-фенилпиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 77),
Трет-бутил 2-(6-(2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)этил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-ил)ацетат (Соединение 78),
Трет-бутил 2-(6-(2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)этил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-ил)ацетат (Соединение 79),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-(2-(6-(2-трет-бутокси-2-оксоэтил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-ил)этилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 80),
7-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-3,5-дигидроксиэнантовая кислота (Соединение 81),
5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-3,3-диметил-5-левулиновая кислота (Соединение 82),
((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоновая кислота (Соединение 83),
4-этил-1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)пиперидин-4-карбоновая кислота (Соединение 84),
1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоновая кислота (Соединение 85),
1-(((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)циклопентил)метил)пиперидин-4-карбоновая кислота (Соединение 86),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 87),
(1S,3R)-3-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметиликосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота (Соединение 88),
(1R,3S)-1-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-3-(4-(этоксикарбонил)пиперидин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилат (Соединение 89),
(1R,3S)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-3-(4-(этоксикарбонил)пиперидин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота (Соединение 90),
(1R,3S)-1-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилат (Соединение 91),
(1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1S,3R)-3-карбокси-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота (Соединение 92),
(1R,3S)-1-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-(этоксикарбонил)пиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилат (Соединение 93),
5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-3,3-диметил-5-левулиновая кислота (Соединение 94),
2,2-диметил-4-оксо-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)бутановая кислота (Соединение 95),
4-оксо-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3a-(3-(пиперидин-1-илметил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)бутановая кислота (Соединение 96),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-(2,2-диметил-3-(3-морфолино-3-оксопропилкарбамоил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 97),
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-(2,2-диметил-3-(3-оксо-3-(пирролидин-1-ил)пропилкарбамоил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Соединение 98),
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота (Соединение 99), или
также рассматриваются фармацевтически приемлемые соли, сольваты, в том числе гидраты и пролекарства соединений.
Ниже приведены некоторые репрезентативные соединения (Таблица 1), являющиеся по сути лишь иллюстративными и не призванными ограничить объем притязаний изобретения:
Таблица 1
Структура
Название IUPAC(обозначения даны по Chem. Draw Ultra 11.0 version)
<img file="00000038.tif" he="36" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-9-((3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота
<img file="00000039.tif" he="36" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-9-((3R)-3-(трет-бутилкарбамоил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота
<img file="00000040.tif" he="38" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-9-((3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота
<img file="00000041.tif" he="38" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-9-((3R)-3-(этоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота
<img file="00000042.tif" he="33" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-3a-(карбоксиметилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота
<img file="00000043.tif" he="31" wi="63" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-3a-(1-карбокси-3-метилбутилкарбамоил)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота
<img file="00000044.tif" he="29" wi="51" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-9-((3R)-3-(1,1-дифтороэтил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновая кислота
<img file="00000045.tif" he="33" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-3a-(1-карбоксиэтилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота
<img file="00000046.tif" he="33" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-3a-(1-карбокси-2,2-диметилпропилкарбамоил)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота
<img file="00000047.tif" he="26" wi="59" img-content="undefined" img-format="tif" />
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-9-(3-карбокси-2,2-диметилпропаноилокси)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-3,3-дифтороциклопентанкарбоновая кислота
<img file="00000048.tif" he="28" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-3a-(4-(2-карбоксиэтил)пиперидин-1-карбонил)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновая кислота
<img file="00000049.tif" he="27" wi="56" img-content="undefined" img-format="tif" />
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR)-9-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-3,3-дифтороциклопентанкарбоновая кислота
<img file="00000050.tif" he="32" wi="60" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R,2S,3aR,5aR,5bR,7aS,10R,12aR,12bR)-7a-(1-карбокси-2,2-диметилпропилкарбамоил)-2-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-3,3,5a,5b,12b-пентаметил-10-(проп-1-ен-2-ил)икосагидродициклопента[а,i]фенантрен-1-карбоновая кислота
<img file="00000051.tif" he="36" wi="69" img-content="undefined" img-format="tif" />
(1R,2S,3aR,5aR,5bR,7aS,10R,12aR,12bR)-2-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-7а-(1-карбоксиэтилкарбамоил)-3,3,5а,5b,12b-пентаметил-10-(проп-1-ен-2-ил)икосагидродициклопента[а,i]фенантрен-1-карбоновая кислота
также рассматриваются фармацевтически приемлемые соли, сольваты, в том числе гидраты и пролекарства соединений.
Настоящее изобретение описывает фармацевтическую композицию, включающую по крайней мере одно из описанных здесь соединений и по крайней мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (такое как фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель). Предпочтительно, фармацевтическая композиция включает терапевтически эффективное количество по крайней мере одного из описанных здесь соединений. Соединение(я), присутствующее(ие) в композиции, может(ут) ассоциироваться с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом (таким как носитель или разбавитель), либо может быть разбавлено носителем, либо входить в состав носителя, который может иметь вид капсулы, пакетика, бумаги или другого контейнера.
Описанные здесь соединения и фармацевтические композиции, применяются при лечении заболеваний, патологических состояний и/или расстройств, возникающих при посредстве вирусных инфекций.
В настоящем изобретении также предложен способ лечения заболевания, патологического состояния и/или расстройства, возникающего при посредстве вирусных инфекций, у нуждающегося в таком лечении пациента, включающий введение пациенту одного или более описанных здесь соединений в количестве, необходимом для того, чтобы вызвать это инфицирование.
В настоящем документе также предложены способы получения описанных в нем соединений.
Данное изобретение предлагает способ предотвращения, улучшения или лечения заболеваний, расстройств или синдромов, возникающих при посредстве ВИЧ, у нуждающихся в этом пациентов, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению. Данное изобретение также предлагает такой способ, в котором заболевание, расстройство или синдром, возникающий при посредстве ВИЧ, подобны СПИДу, СПИД-ассоциированному комплексу или синдрому, охарактеризованному такими симптомами как персистирующая генерализованная лимфаденопатия, повышение температуры и потеря веса или ретро вирусная инфекция, обычно связываемая со СПИДом.
Анти-ВИЧ потенциал соединений по настоящему изобретению может быть продемонстрирован с помощью какой-либо одной или более из известных в данной области методологий, например, путем использования тестов, описанных у Mosmann Т, декабрь 1983, Journal of immunological methods, 65 (1-2), 55-63 и SPC Cole, Cancer Chemotherapy and Pharmacology, 1986, 17, 259-263.
Осуществление изобретения
В настоящем изобретении предложены тритерпеновые производные лупеольного типа и родственные соединения, которые могут применяться как противовирусные соединения, в частности, направленные против ВИЧ, а также способы получения этих соединений. Также предложены фармацевтически приемлемые соли, фармацевтически приемлемые сольваты, энантиомеры, диастереомеры, вместе с фармацевтически приемлемыми носителями, вспомогательными веществами или разбавителями, которые могут быть использованы для лечения заболеваний, патологических состояний и/или расстройств, возникающих при посредстве вирусных инфекций.
Определения, применяемые в настоящей заявке
Термины «галоген» или «гало» включают фтор, хлор, бром или йод.
Термин «алкил» относится к радикалу неразветвленной или разветвленной углеводородной цепи, состоящей только из углерода и атомов водорода, не содержащей ненасыщенности, имеющей от одного до восьми атомов углерода и прикрепляющейся к остальной части молекулы с помощью одинарной связи, например, метил, этил, n-пропил, 1-метилэтил (изопропил), n-бутил, n-пентил и 1,1-диметилэтил (t-бутил).
Термин «алкенил» относится к группе алифатического углеводорода, содержащего двойную связь углерод-углерод, которая может быть неразветвленной или разветвленной цепью, содержащей от 2 до порядка 10 атомов углерода, например, этенил, 1-пропенил, 2-пропенил (аллил), изо-пропенил, 2-метил-1-пропенил, 1-бутенил и 2-бутенил.
Термин «гало алкил» используется для обозначения группы, составленной из алкильной группы, замещенной атомом галогена, где алкильная группа подпадает под определение, данное выше, а галоген используется для обозначения фтора, хлора, брома или йода. Примером такой группы является трифторметильная, дифторметильная.
2-6
Термин «ацильная группа» используется для обозначения линейной или разветвленной алифатической ацильной группы (предпочтительно С алканоильной группы) или ароматической ацильной группы, содержащей от 2 до 10 атомов углерода. В качестве примера можно привести ацетильную группу, пропионильную группу, пивалоильную группу, бутиральную группу, изобутиральную группу, валерильную группу и бензоильную группу, где преимущество отдается ацетильной группе.
1-4
Термин «алкокси-группа» используется для обозначения линейной или разветвленной алкокси-группы, содержащей от 1 до 6 атомов углерода. Предпочтительно это С алкокси-группы, включающие метоксильную группу, этоксильную группу, пропокси-группу, изопропокси-группу, n-бутокси-группу, изобутокси-группу и трет-бутокси-группу.
1-5
2-5
Термин «алкоксикарбонильная группа» используется для обозначения структуры, состоящей из линейной или разветвленной С алкокси-группы и карбонильной группы. Предпочтительно это С алкоксикарбонильные группы, включающие метоксикарбонильную группу, этоксикарбонильную группу, пропоксикарбонильную группу, изопропоксикарбонильную группу и бутоксикарбонильную группу. Среди них предпочтительной является метоксикарбонильная группа.
Термин «циклоалкил» обозначает неароматическую моно или полициклическую кольцевую систему, включающую от 3 до порядка 12 атомов углерода, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Примерами (не исчерпывающими) полициклических циклоалкиловых групп являются пергидронафтиловая, адамантиловая и норборниловая группы, мостиковые циклические группы и спиробициклические группы, такие как спиро (4,4) нон-2-ил.
Термин «циклоалкенил» относится к циклическому радикалу, содержащему цикл и имеющему от 3 до порядка 8 атомов углерода, с по крайней мере одной двойной связью углерод-углерод, например, циклопропенил, циклобутенил и циклопентенил.
Термин «циклоалкилалкил» относится к циклическому радикалу, содержащему цикл и имеющему от 3 до порядка 8 атомов углерода, присоединенных непосредственно к алкильной группе. Циклоалкилалкильная группа может быть присоединена к основной структуре в месте нахождения любого атома углерода в алкильной группе, что приводит к образованию стабильной структуры. Не исчерпывающие примеры подобных групп включают циклопропилметил, циклобутилэтил и циклопентилэтил.
Термин «арил» относится к ароматическому радикалу, содержащему от 6 до 14 атомов углерода, например, фенилу, нафтилу, тетрагидронафтилу, инданилу и бифенилу.
2
6
5
2
5
6
5
Термин «арилалкил» относится к арильной группе, как она определена выше, которая напрямую связана с алкильной группой, как она в свою очередь определена выше, например, -СНСН и -СНСН.
«Замещенный» относится к 1-3 заместителям в одних и тех же или различных положениях, одинаковыми или различными группами.
«Алкинил» относится к алкинильным группам, содержащим от 2 до 6 атомов углерода и имеющим по крайней мере одно алкинильное насыщение. Примеры таких групп: ацетиленил, пропаргил.
Термины «гетероциклил» и «гетероциклическое кольцо» относятся к стабильному радикалу 3-15-членного кольца, состоящего из атомов углерода и от одного до пяти гетероатомов, выбранных из азота, фосфора, кислорода и серы. В рамках данного изобретения, радикал гетероциклического кольца может быть моноциклической, бициклической или трициклической кольцевой системой, которая может включать систему с конденсированными кольцами, мостиковую систему колец или спиро-кольцевую систему, а атомы азота, фосфора, углерода, кислорода или серы в радикале гетероциклического кольца могут быть необязательно в различной степени окислены. К тому же, атом азота может быть необязательно кватернизирован, а радикал в кольце может быть частично или полностью насыщен (т.е. гетероциклическое соединение или гетероарил). Неполный список примеров подобных радикалов гетероциклического кольца включает: тетразоил, тетрагидроизоуинолил, пиперидинил, пиперазинил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролидинил, 2-оксоазепинил, азепинил, пирролил, 4-пиперидонил, пирролидинил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, оксазолил, оксазолинил, оксазолидинил, триазолил, изоксазолил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолил, тиазолинил, тиазолидинил, изотиазолил, хинуклидинил, изотиазолидинил, индолил, изоиндолил, индолинил, изоиндолинил, октагидроиндолил, октагидроизоиндолил, хинолил, изохинолил, декагидроизохинолил, бензимидазолил, тиадиазолил, бензотиазолил, бензооксазолил, фурил, тетрагидрофурил, тетрагидропиранил, тиенил, бензотиенил, тиаморфолинил, тиаморфолинил сульфоксид, тиаморфолинил сульфон, диоксафосфоланил, оксадиазолил. Радикал гетероциклического кольца может быть присоединен к основной структуре в месте нахождения любого гетероатома или атома углерода, что приводит к созданию стабильной структуры.
Термин «гетероциклилалкил» относится к радикалу гетероциклического кольца, напрямую связанному с алкильной группой. Гетероциклилалкильный радикал может быть присоединен к основной структуре в месте нахождения любого атома углерода в алкильной группе, что приводит к созданию стабильной структуры.
Термин «гетероарил» относится к ароматическому радикалу гетероциклического кольца. Радикал гетероарильного кольца может быть присоединен к основной структуре в месте нахождения любого гетероатома или атома углерода, что приводит к созданию стабильной структуры.
Термин «гетероарилалкил» относится к радикалу гетероарильного кольца, напрямую связанному с алкильной группой. Гетероарилалкильный радикал может быть присоединен к основной структуре, в месте нахождения любого атома углерода в алкильной группе, что приводит к созданию стабильной структуры.
За исключением особо указанных случаев термин «замещенный» используется здесь для обозначения замещения любой из комбинаций нижеприведенных заместителей:
x
x
x
x
y
x
y
x
y
z
x
y
x
y
x
y
x
y
x
y
x
y
x
y
x
y
z
x
y
x
y
x
x
y
z
x
y
x
x
y
x
y
z
x
y
x
y
x
y
z
x
y
x
y
x
x
x
x
y
z
2
2
2
2
гидрокси, галоген, карбоксил, циано, нитро, оксо (=O), тио (=S), замещенный или незамещенный алкил, галоалкил, замещенный или незамещенный алкокси, замещенный или незамещенный алкенил, замещенный или незамещенный алкинил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный арилалкил, замещенный или незамещенный циклоалкил, замещенный или незамещенный циклоалкенилалкил, замещенный или незамещенный циклоалкенил, замещенный или незамещенный амино, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный гетероарил, замещенное или незамещенное гетероциклилалкильное кольцо, замещенный или незамещенный гетероарилалкил, замещенное или незамещенное гетероциклическое кольцо, замещенный или незамещенный гуанидин, -COOR, -C(O)R, -C(S)R, -C(O)NRR, -C(О)ONRR, -NRCOONRR, -N(R)SOR, -N(R)SOR, -(=N-N(R)R), -NRC(O)OR, -NRR, -NRC(O)R, -NRC(S)R, -NRC(S)NRR, -SONRR, -SONRR, -OR, -ORC(O)NRR, -ORC(O)OR, -OC(O)R, -OC(O)NRR, -RNRC(O)R, -ROR, -RC(O)OR, -RC(O)NRR, -RC(O)R, -ROC(O)R, -SR, -SOR, -SOR, и -ONO, в которых R, R и R независимо выбраны из водорода, замещенного или незамещенного алкила, галоалкила, замещенного или незамещенного алкокси, замещенного или незамещенного алкенила, замещенного или незамещенного алкинила, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного арилалкила, замещенного или незамещенного циклоалкила, замещенного или незамещенного циклоалкенила, замещенного или незамещенного амино, замещенного или незамещенного арила, замещенного или незамещенного гетероарила, замещенного гетероциклилалкильного кольца, замещенного или незамещенного гетероарилалкила либо замещенного или незамещенного гетероциклического кольца. Заместители в упомянутых «замещенных» группах не могут быть снова замещены. Например, когда заместителем «замещенного алкила» является «замещенный арил», заместителем «замещенного арила» не может быть «замещенный алкенил».
Термин «пролекарство» означает соединение, преобразуемое in vivo с получением соединения Формулы (I), (IA), (2), (2А) или фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата, либо метаболита этого соединения. Это преобразование может происходить с помощью различных механизмов, таких как гидролиз в крови. Обсуждение вопроса использования пролекарств представлено в публикациях Т.Higuchi and W.Stella, «Пролекарства как новые системы доставки,» том.14 серии A.C.S. Symposium Series и Био-обратимые носители в разработке лекарств, Edward В. Roche, изд. Американская фармацевтическая ассоциация и Pergamon Press, 1987.
Термин «лечить» или «лечение» состояния, заболевания, расстройства или патологического состояния включает:
(1) Предотвращение или задержку появления клинических симптомов состояния, заболевания, расстройства или развития патологического состояния у пациента, который может страдать или быть предрасположенным к состоянию, заболеванию расстройству или патологическому состоянию, но пока еще не испытывает или не проявляет клинических или субклинических симптомов состояния, заболевания, расстройства или патологического состояния;
(2) Сдерживание состояния, заболевания, расстройства или патологического состояния, т.е. прерывание или снижение темпов развития состояния, заболевания, расстройства или патологического состояния или по крайней мере одного из его клинических или субклинических симптомов; или
(3) Облегчение состояния, заболевания, расстройства или патологического состояния, т.е. вызывание регрессии состояния, заболевания, расстройства или патологического состояния или по крайней мере одного из его клинических или субклинических симптомов.
Эффект от лечения пациента либо отражается в статистических показателях, либо по меньшей мере является ощутимым для самого пациента или врача.
Термин «пациент» включает в себя млекопитающих (особенно человека) и других животных, таких как домашние животные (напр., домашние питомцы, в том числе коты и собаки) и неодомашненные животные (дикие).
«Терапевтически эффективное количество» означает такое количество соединения, которое при введении пациенту для лечения состояния, заболевания, расстройства или патологического состояния является достаточным для проведения такого лечения. «Терапевтически эффективное количество» варьируется в зависимости от соединения, состояния, заболевания, расстройства или степени тяжести патологического состояния, а также от возраста, веса, физической формы и восприимчивости пациента, проходящего лечение.
Соединения по настоящему изобретению могут образовывать соли. Не исчерпывающие примеры фармацевтически приемлемых солей, составляющих часть данного изобретения, включают соли, полученные из неорганических оснований, соли органических оснований, соли хиральных оснований, соли природных аминокислот и соли неприродных аминокислот. Некоторые соединения по настоящему изобретению способны существовать в форме стереоизомеров (напр., диастереомеров, энантиомеров, рацематов и их комбинаций). В отношении всей совокупности соединений, описанных Формулой (1), (1А), (2) или (2А), настоящее изобретение распространяется на эти стереоизомерные формы и их смеси. В той мере, в которой уровень техники учит синтезу или разделению тех или иных стереоизомеров, различные стереоизомерные формы настоящего изобретения могут отделяться друг от друга посредством способов, известных в данной области знаний, либо же данный изомер может быть получен посредством стереоспецифического или асимметрического синтеза. Рассматриваются также таутомерные формы и смеси описанных здесь соединений.
Фармацевтически приемлемые сольваты включают гидраты и другие кристаллизационные растворители (такие как спирты). Соединения настоящего изобретения могут образовывать сольваты с растворителями низкой молекулярной массы с помощью известных в данной области знаний способов.
Фармацевтические композиции
Фармацевтические композиции, приведенные в настоящем изобретении, включают по крайней мере одно из описанных в нем соединений и по крайней мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (такое как фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель). Предпочтительно, рассматриваемые фармацевтические композиции включают описанное здесь соединение(ия) в количестве, достаточном для лечения у пациента вирусной инфекции.
Под рассматриваемыми здесь пациентами понимаются, например, живая клетка и млекопитающее, в том числе человек. Соединение данного изобретение может ассоциироваться с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом (таким как носитель или разбавитель), либо может быть разбавлено носителем, либо входить в состав носителя, который может иметь вид капсулы, пакетика, бумаги или другого контейнера.
Не исчерпывающие примеры подходящих носителей включают воду, рассолы, спирты, полиэтиленгликоли, полигидроксиэтоксилат касторового масла, арахисовое масло, оливковое масло, желатин, лактозу, сульфат кальция, сахарозу, декстрин, карбонат магния, сахар, циклодекстрин, амилозу, стеарат магния, тальк, желатин, агар, пектин, камедь, стеариновую кислоту или низшие алкильные эфиры целлюлозы, кремниевую кислоту, жирные кислоты, амины жирных кислот, моноглицериды и диглицериды жирных кислот, пентаэритритоловые эфиры жирных кислот, полиоксиэтилен, гидроксиметилцеллюлозу и поливинилпирролидон.
Носитель или разбавитель могут включать в себя материал замедленного высвобождения, как, например, глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, как таковой либо в смеси с воском.
Фармацевтическая композиция также может включать один или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных препаратов, увлажняющих средств, эмульгирующих веществ, суспендирующих веществ, консервантов, солей для воздействия на осмотическое давление, буферных веществ, подсластителей, ароматизаторов, красящих веществ или любых комбинаций вышеупомянутого. Фармацевтическая композиция по данному изобретению может быть составлена таким образом, чтобы обеспечивать быстрое, замедленное или отсроченное высвобождение активного ингредиента после введения его пациенту с помощью методов, известных в данной области знаний.
th
Описанные здесь фармацевтические композиции могут быть приготовлены, напр., как описано у Remington: The Science and Practice of Pharmacy. 20 Ed., 2003 (Lippincott Williams & Wilkins). Например, активное соединение может быть смешано с носителем либо разбавлено носителем, либо включено в носитель, который может иметь вид ампулы, капсулы, пакетика или другого контейнера. Когда носитель выступает в качестве разбавителя, он может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, действующим как основа, вспомогательное вещество или среда для активного соединения. Активное соединение может адсорбироваться на гранулированном твердом контейнере, например, в пакетике.
Фармацевтические композиции могут быть, например, капсулами, таблетками, аэрозолями, растворами, суспензиями, жидкостями, гелями или препаратами для местного применения.
Способ введения может быть любым, обеспечивающим эффективную доставку активного соединения к нужному или желательному месту воздействия. Не исчерпывающий список подходящих способов введения включает оральный, назальный, пульмональный, трансбуккальный, подкожный, внутрикожный, трансдермальный, парентеральный, ректальный, депо, подкожный, внутривенный, внутриуретральный, внутримышечный, интраназальный, офтальмический (как в случае с глазными каплями) или местный (как в случае с мазью местного применения). Предпочтительным является оральный способ.
Не исчерпывающий список твердых оральных форм лекарственных препаратов включает таблетки, капсулы (мягкие или твердые желатиновые), драже (содержащие активный ингредиент в виде порошка или пеллетов), пастилки и лекарственные леденцы. Особо подходящими для орального употребления являются таблетки, драже или капсулы, имеющие тальковые и/или углеводные и им подобные носители или связующие вещества.
Предпочтительные носители для таблеток, драже или капсул включают лактозу, кукурузный крахмал и/или картофельный крахмал. Сироп или эликсир могут применяться в тех случаях, когда может быть использована подслащивающая среда.
Типичная таблетка, которую можно изготовить с помощью обычных технологий таблетирования, может содержать: (1) сердцевина: активное соединение (как свободное соединение или его соль), 250 мг коллоидного диоксида кремния (Aerosil), 1.5 мг микрокристаллической целлюлозы (Avicel), 70 мг модифицированной гуммицеллюлозы (Ac-Di-Sol) и 7.5 мг стеарата магния; (2) оболочка: гипромеллоза, приблиз. 9 мг Mywacett 9-40 Т и приблиз. 0.9 мг ацилированного моноглицерида.
Не исчерпывающий список жидких форм включает сиропы, эмульсии, мягкий желатин и стерильные инъекционные жидкости, такие как водные или неводные жидкие суспензии или растворы.
Для парентерального применения особо подходят инъекционные растворы или суспензии, предпочтительно водные растворы, где активное соединение растворено в полигидроксильном касторовом масле.
Способы скрининга
Противовирусное действие, направленное против ВИЧ, и цитотоксичность соединений по настоящему изобретению могут быть измерены параллельно с помощью способов, изложенных в литературе.
3
Цитотоксический эффект соединений может быть проанализирован путем измерения разрастания клеток с помощью 3-(4,5-Диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил тетразол бромистого (МТТ) окрашивания. Клетки (5×10 клеток на лунку) будут инкубированы в 96-луночных планшетах в присутствии или в отсутствии соединений. В конце лечения 20 µl МТТ (5 мг/мл в фосфатно-солевом буферном растворе) будет добавлено в каждую лунку и инкубировано на протяжении еще 4 часов при температуре 37°С. Пурпурово-синий осадок МТТ формазана будет растворен в триплекс-реагенте, содержащем 10% додецилсульфата натрия, 5% изобутанола и 10 ммоль/литр HCl. Отражающая рост и жизнеспособность клеток активность митохондрий будет оценена путем измерения оптической плотности при 570 нм на микро титровальном планшете.
Воздействие соединений на репликацию ВИЧ в клетках Sup-Tl можно определить с помощью способа, опубликованного Roda Rani и др., 2006 (Archives of Biochemistry and Biophysics, vol.456, no.1, pp.79-92 от 1 декабря 2006).
6
93 in 101
2
Вкратце, 1×10 клеток Sup-Tl со 100% жизнеспособностью будут посеяны в среде RPMI 1640, 0.1% FBS в четырех 12-луночных планшетах. Повышающиеся концентрации Ерар-1 пептидов будут добавлены к клеткам, каждая из которых будет заражена HIV1при конечной концентрации вируса, эквивалентной 2 нг р24 на мл. Зараженные клетки будут содержаться в 5% CO инкубаторе при 37°С в течение 2 часов. После 2 часов клетки будут осаждаться центрифугированием при 350 g на протяжении 10 минут, затем надосадочная жидкость будет удалена, а клетки будут содержаться в среде RPMI 1640 с 10% FBS. Клетки будут ресуспендированы в этой же среде с повышающимися концентрациями Ерар-1 пептидов и инкубированы на протяжении 96 часов. Каждые 24 часа к клеткам будут добавляться пептиды. По истечении 96 часов супернатанты будут собраны и проанализированы с помощью набора реактивов для улавливания антигенов Р24 (SAIC Fredrick). Инфекция и отсутствие Ерар-1 будет считаться 0% ингибированием. Азидотимидин (АЗТ) будет принят как положительный контроль.
Воздействие соединения на вхождение вируса и количественный анализ вошедшего вируса могут быть сделаны в терминах экспрессии GFP с использованием способов, опубликованных J.Virol. 72, 6988 (1998) by in Cecilia и др., и Analytical Biochemistry, vol.360, no.2, pp.315-317 от 15 января 2007 (Dyavar S.Ravi and Debashis Mitra).
50
Вкратце, клетки будут посеяны в лунках 24-луночных планшетов за 1 день до эксперимента. Клетки будут трансфицированы Tat-репортером. Вирусный инокулят будет подобран таким образом, чтобы обеспечивать 1,000-4,000 TCID / мл в среде для количественного определения (смесь DMEM,10%FCS, глутамин и антибиотики); 50 µl аликвоты будут инкубированы с последовательными разведениями соединений (50 µ1) на протяжении 1 часа при 37°С. Экспрессия репортера будет количественно оценена в через необходимый промежуток времени; рассчитанные ингибирующие дозы относятся к концентрации этих препаратов в этой преинкубационной смеси.
Другие источники по теме скрининга противовирусной ВИЧ-активности: Averett, D.R. 1989. Anti-HIV compond assessment by two novel high capacity assays. J.Virol. Methods 23: 263-276; Schwartz, О., и др., 1998; A rapid and simple colorimetric test for the study ofanti HIV agents. AIDS Res. And Human Retroviruses, 4(6): 441-447; Daluge, S.M., и др., 1994. 5-Chloro-2',3'-deoxy-3'fluorouidine (935U83), a selctive anti human immunodeficiency vims agent with an improved metabolic and toxicological profile; Antimicro. Agents and Chemotherapy, 38(7); 1590-1603; H.Mitsuya and S.Border, Inhibition of the in vitro infectivity and cytopathic effect of human T-lymphotropic virus type lymphodenopathy-associated virus (HLTV-III/LAV) by 2,3'-dideoxynucleosides, Proc. Natl. Acad. Sci. USA.83.1911-15(1986); Pennington и др., Peptides 1990; Meek T.D и др., Inhibition of HIV-1 protease in infected T-lymphocytes by synthetic peptide analogues, Nature, 343, p90 (1990); Weislow и др., J.Natl. Cancer Inst. 81, 577-586,1989; Т.Mimoto и др., J.Med.Chem., 42, 1789-1802, 1999; Uckun и др., 1998, Antimicrobial Agents and Chemotherapy 42:383; for P24 antigen assay Erice et al., 1993, Antimicrob. Ag. Chemotherapy 37: 385-383; Koyanagi и др. Int. J.Cancer, 36, 445-451, 1985; Balzarini и др., СПИД (1991), 5, 21-28; Connor и др., Journal of Virology, 1996, 70, 5306-5311; Popik и др., Journal of Virology, 2002, 76, 4709-4722; Hamgton и др., Journal of Virology Methods, 2000, 88, 111-115; Roos и др. Virology 2000,273, 307-315; Fedyuk N.V. и др. Problems of Virology 1992, (3)P135; Mosmann Т, декабрь 1983, Journal of immunological methods, 65 (1-2), 55-63; SPC Cole, Cancer Chemotherapy and Pharmacology, 1986, 17, 259-263.
Способы лечения
Настоящее изобретение предлагает соединения и их фармацевтические препараты, подходящие для лечения заболеваний, патологических состояний и/или расстройств, возникающих при посредстве вирусных инфекций. Связь между терапевтическим эффектом и антивирусным препаратом проиллюстрирована. Например, РСТ публикации WO 01//07646, WO 01/65957, или WO 03/037908; US публикации US 4,598,095 или US 2002/0068757; ЕР публикации ЕР0989862 или ЕР 0724650; Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 16, (6), 1712-1715, 2006; а также цитируемые там ссылки, все из которых включены в настоящую заявку посредством ссылки в своей полноте и с указанными целями.
Настоящее изобретение также предлагает способ лечения заболевания, патологического состояния и/или расстройства возникающего при посредстве вирусных инфекций у пациента, нуждающегося в этом лечении, путем введения пациенту терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции по настоящему изобретению.
Считается, что заболевания, патологические состояния и/расстройства, возникающие при посредстве вирусных инфекций, включают (данный список не является исчерпывающим): ВИЧ инфекцию, вирус гепатита В, вирус гепатита С, ретровирусную инфекцию, генетически связанную с ВИЧ, СПИД, воспалительные заболевания, респираторные расстройства (в том числе респираторный дистресс-синдром взрослых (РДСВ), бронхит, хронический бронхит, хроническое обструктивное заболевание легких, кистозный фиброз, астму, эмфизему, ринит и хронический синусит), воспалительные заболевания кишечника (в том числе болезнь Крона и язвенный колит), рассеянный склероз, ревматоидный артрит, отторжение трансплантата (в особенности, но не исключительно почечных и легочных аллотрансплантатов), эндометриоз, диабет 1 типа, почечную недостаточность, хронический панкреатит, воспаления легких, хроническую сердечную недостаточность и, бактериальные инфекции (в особенности, но не исключительно туберкулез).
Полезный эффект соединений по настоящему изобретению, если их должным образом сочетать с вышеупомянутыми лекарствами, может оказаться большим, чем просто аддитивный эффект в предотвращении или лечении вышеперечисленных болезней. Лекарственная доза тоже может быть уменьшена в сравнении с дозами каждого отдельно взятого лекарства, а негативные последствия от одновременного употребления препаратов, не считая противовирусных препаратов, могут быть сглажены или вообще отсутствовать.
Способы получения
Описанные здесь соединения могут быть получены с помощью известных в данной области техники методик. Кроме того, описанные здесь соединения могут быть получены путем последовательности реакций, показанной на Схемах 1-6. В приведенных далее схемах, в которых упоминаются конкретные щелочи, кислоты, реагенты, растворители, связующие вещества и т.д., предполагается, что и другие щелочи, кислоты, реагенты, растворители, связующие вещества, и т.д., известные в этой области знаний, также могут быть использованы, и, следовательно, включены в настоящее изобретение. Изменения условий реакции, например, температуры и/или продолжительности реакции, которые следуют из уровня техники, также находятся в рамках настоящего изобретения. Все стереоизомеры в соединениях, изображенных на схемах, если не указано особо, также охвачены данным изобретением.
Соединения по настоящему изобретению могут быть синтезированы из встречающихся в природе бетулиновой кислоты, цеанотовой кислоты, мороновой кислоты или олеанолевой кислоты. Ключевые промежуточные вещества, требующиеся для синтезирования аналогов, либо выпускаются серийно, либо могут быть получены способами, описанными в литературе. К примеру, ключевые промежуточные вещества в настоящем изобретении были приготовлены с помощью доработанных методик, опубликованных в Journal of Organic Chemistry 2000. 65, 3934-3940; Tetrahedron: Assymetry 2008, 19, 302-308; или Tetrahedron: Assymetry 2003, 14, 217-223.
Схема 1
4
2
Соединение Формулы (7), (в котором Р является защитной группой, например, алкилом или аралкилилом, защитным метилом, этилом, пропилом, изопропилом, бензилом или трет-бутилом) может быть приготовлено, как показано на Схеме 1. Имеющийся в продаже Вербеной был окислен с помощью такого окисляющего вещества как хлорид рутения/перйодат натрия, в такой системе растворителей как CCl-ACN-HO, для получения карбоновой кислоты формулы 1. Карбоновую кислоту формулы 1 защищают с помощью защитного реагента для получения соединений формулы 2 с защищенной кислотной группой. Защитная группа вводится посредством реакции галоидных алкилов в присутствии основания, такого как карбонат калия или карбонат цезия, или посредством реакции между соединением формулы 1 и спиртами в присутствии дегидратирующего средства, такого как DCC/DMAP, или нагревания с обратным холодильником в присутствии кислотного катализатора. Для проведения этой реакции может быть использован широкий спектр растворителей, в том числе диметилформамид, тетрагидрофуран, дихлорметан, толуол или им подобные. Соединение формулы 2 посредством перегруппировки Шмидта при обработке азидом натрия и метансульфокислотой или подобным дает защищенные аминокислотные соединения формулы 3. N-ацильное соединение формулы 3 гидрогенолизируется в присутствии палладия на угле/этил ацетата или тому подобного с получением N-ацилированной аминокислоты формулы 4. N-ацилированная аминокислота формулы 4 может быть гидролизована в присутствии хлороводорода или ему подобного и обработана ВОС ангидридом в подходящем реагенте для получения соответствующего карбамата, а именно, трет-бутил карбамата формулы 5. Трет-бутил карбамат формулы 5 может быть бензилирован в присутствии карбоната цезия или ему подобных, в таких растворителях как диметилформамид и ему подобных для получения трет-бутил карбамата бензилированных соединений формулы 6. Трет-бутил карбамат бензилированных соединений формулы 6 может быть обработан с целью удаления ВОС-группы в присутствии трифторуксусной кислоты в таких растворителях как дихлорметан и ему подобных для получения соли бензилированного соединения формулы 7.
Разложение Либена функциональной метилкетонной группы соединения формулы 2 с использованием водного гипобромита натрия в таком растворителе как диоксан и ему подобных, дает соединение формулы 8. 2,4,6-трихлоро бензоил сложноэфирное соединение формулы 9 было получено путем реакции бензоилхлорида в присутствии диизопропилэтиламина или ему подобных в растворителях типа тетрагидрофурана или ему подобных.
Схема 2.
1
1
1
2
3
3
1
1
1
2
a
Соединения 13 и 14 общей формулы (1) (в которой Р, R, R', Х и X, Z и Z, Z', n, m, "----", R, R, R' и R", R, и R" соответствуют данным выше определениям) могут быть приготовлены согласно Схеме 2. Стадии получения тритерпеновой бетулиновой кислоты или цеанотовой кислоты, включая С-3 спирт, С-28 и/или С2- карбоксильную кислоту соединения 13 или 14, таковы: реакция С-3 спирта с подходящими эфирообразующими реагентами типа ангидридов, галоидангидридов или смешанных ангидридов в присутствии такого основания как триэтил амин, диизопропил этил амин или пиридин в инертном растворителе типа дихлорметана, толуола, тетрагидрофурана или в основном растворителе типа пиридина, с добавлением или без добавления катализатора типа диметиламинопиридина. Например, С-3 спирт формулы 10 может быть защищен ацетильной группой в присутствии ангидрида уксусной кислоты в таких растворителях как пиридин или ему подобных, для получения С-3 ацетила формулы 11. Превращение С-3 ацетильного соединения формулы 11 в С-28 карбоксильный галид формулы 12 в присутствии таких галоидангидридов как тионилхлорид, оксалил хлорид, фосфорный бромид, фосфорный окси бромид или им подобных происходит в инертном растворителе типа бензола или дихлорметана и тому подобных. Реакция С-28 карбоксильного галида формулы 12 с соединением формулы 7 в присутствии триэтил амина или ему подобного происходит в таком инертном растворителе как дихлорметан или ему подобном, с получением соединений формулы 13 [Формула (1), когда пит равны 0, "****" не является связью, Z означает О, X означает NH, Z' и R означают Н, Х и Z означает СО, R означает изо-пропилен, R означает метил, a R' означает замещенный циклобутил].
1A
1A
A
A
Этерификация С-3 спирта формулы 10 путем реакции с соединением формулы 9 в присутствии такой основы как триэтиламин в растворителях типа дихлорметана или тетрагидрофурана дает соединение формулы 14 [Формула (1А), когда Z означает СО, X означает О, R' означает Н, а R означает замещенный циклобутил].
Схема 3
4
2
2
3
Соединения Формулы (21) (в которой R" подпадает под данное выше определение) могут быть получены согласно опубликованным методикам, как показано на Схеме 3. Имеющийся в продаже вербенон может быть окислен с помощью такого окислителя как хлорид рутения/перйодат натрия в такой системе растворителей как CCl-ACN-HO для получения карбоновой кислоты формулы 15. Перегруппировка Курциуса с азидом натрия или (PhO)P(O)N с последующей N-защитой дает N-защищенный аминокетон формулы 17. Галоформная реакция с использованием субстрата 17 под действием NaOBr; в диоксане в присутствии воды дает соединения формулы 18. Кислотные соединения формулы 18 могут вступать в реакцию с соединениями формулы 19 с образованием N-защищенных соединений формулы 20 в присутствии таких связующих реагентов как 1-Этил-3-(3-Диметиламинопропил)карбодиимид (EDCI), 1-гидроксибензотриазолгидрат (НОВТ), O-бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'-тетраметилуронийгексафторфосфат (HBTU) или им подобных, и основания, например, триэтиламина, диизопропилэтиламина, карбоната натрия, карбоната калия или им подобного, в таких растворителях как, например, этилацетат, дихлорметан, ацетонитрил, тетрагидрофуран, диоксан и их смеси. Защитная группа с N-защищенных соединений формулы 20 может быть снята в присутствии таких гидрирующих агентов как, например, палладий на угле/этил ацетат и тому подобных, с получением незащищенных амино-соединений формулы 21.
Схема 4
Соединения формулы (G), (в которой R" соответствует данному выше определению) могут быть получены согласно опубликованным методикам, как показано на Схеме 4. Кислотные соединения формулы Е могут вступать в реакцию с соединениями формулы 19 с образованием N-защищенных соединений формулы F в присутствии таких связующих реагентов как 1-Этил-3-(3-Диметиламинопропил)карбодиимид (EDCI), 1-гидроксибензотриазолгидрат (НОВТ), О-бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'-тетраметилуронийгексафторфосфат (HBTU) или им подобных, и основания, например, диметиламинопиридина, триэтиламина, диизопропилэтиламина, карбоната натрия, карбоната калия или им подобных, в таких растворителях как, например, этилацетат, дихлорметан, ацетонитрил, тетрагидрофуран, диоксан или их смеси. Защита может быть снята с N-защищенных соединений формулы F могут в присутствии таких кислот как, например, трифторуксусная кислота, HCl и им подобных, с получением незащищенных амино-соединений формулы G.
Схема 5
2
2
2
2
Соединения Формулы (28) (Формула (2), когда Z означает О) могут быть приготовлены как показано на Схеме 5. С-3 гидрокси-защищенные соединения формулы 22 могут быть преобразованы в С-28 карбоксильно галидные соединения формулы 23 в присутствии таких галоидангидридов как тионил хлорид, оксалил хлорид, фосфорный бромид, фосфорный окси бромид и им подобных, в таком инертном растворителе как бензол или дихлорметан или им подобном, без добавления растворителя. С-28 карбоксильный галид С-3 окси-защищенных соединений формулы 23 может вступать в реакцию с амино-соединениями формулы 24 в присутствии триэтил амина или ему подобного, в таких инертных растворителях как дихлорметан и ему подобных, с получением O-защищенных соединений формулы 25. O-защищенные соединения формулы 25 могут быть подвергнуты гидролизу с получением гидроксильных соединений формулы 26 в присутствии такого основания как, например, гидроксиды металлов, карбонаты или бикарбонаты металлов в метаноле, этаноле или смеси метанола и тетрагидрофурана или в подобных им растворителях. Гидрокси соединения формулы 26 могут вступать в реакцию с кислотными ангидридами, полузащищенными двухосновными кислотами или их смешанными ангидридами или хлорангидридами формулы 27 с получением конечного соединения формулы 28 [Формула (2), когда Zозначает О и Z' и Х' означают С(O)], в присутствии такого основания как триэтиламин, 4-Диметиламинопиридин, диизопропил этил амин или пиридин или им подобных, в таких растворителях как, например, дихлорметан, толуол, тетрагидрофуран и им подобных.
Схема 6
A1
Соединения Формулы (35) (Формула (2А), когда Х означает С(O)) могут быть получены с помощью методики, показанной выше на Схеме 6. С-3 гидрокси-защищенные соединения формулы 29 могут быть превращены в С-28 карбоксильный галид С-3 окси-защищенных соединений формулы 30 в присутствии галогенангидридов, таких как тионил хлорид, оксалил хлорид, фосфорный бромид, фосфорный окси бромид и им подобных, в таком инертном растворителе как бензол или дихлорметан или им подобном, без добавления растворителя. С-28 карбоксильный галид С-3 окси-защищенных соединений формулы 30 может вступать в реакцию с амино-соединениями формулы 31 в присутствии триэтил амина или ему подобного, в таких инертных растворителях как дихлорметан и ему подобных, для получения O-защищенных соединений формулы 32. O-защищенные соединения формулы 32 могут быть подвергнуты гидролизу для получения гидроксильных соединений формулы 33. Гидролиз проводят в присутствии такого основания как гидроксиды металлов, карбонаты или бикарбонаты металлов и им подобных, в таком протонном растворителе как спирт или комбинации растворителей как, например, смесь метанола и тетрагидрофурана и им подобные. Гидрокси соединения формулы 33 могут вступать в реакцию с кислотными ангидридами формулы 34 или частично-защищенными двухосновными кислотами или смешанными ангидридами, галогенангидридами с получением конечного соединения формулы (35) (Формула (2А), когда X означает С(O)) в присутствии такого основания как триэтиламин, 4-Диметиламинопиридин, диизопропил этил амин или пиридин или им подобных, в таких растворителях как, например, дихлорметан, толуол, тетрагидрофуран и им подобных.
Экспериментальная часть
Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано нижеприведенными примерами, которые ни в коем случае не следует истолковывать как налагающие ограничения на объем настоящего раскрытия, но которые скорее призваны служить чисто иллюстративным целям. Напротив, нужно ясно понимать, что данное изобретение включает в себя и другие варианты, модификации и эквиваленты представленных примеров, которые после прочтения настоящего описания станут очевидны среднему специалисту в данной области техники без отклонения от духа настоящего изобретения. Таким образом, опытный специалист оценит то, что эти эксперименты и Примеры могут быть в воплощены в жизнь с самыми разнообразными изменениями нижеследующих примеров, заместителей, реагентов или условий.
Интермедиаты
Интермедиат 1: синтез (1S,3R)-3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
4
2
4
3
2
2
4
3
1
+
+
-1
Перемешиваемый раствор вербенона (около 10 г, 66.57 ммоль) в CCl:ACN:HO (140 мл) NaIO (56.9 г, 266.3 ммоль), а затем RuCl.HO (каталитическое количество) были добавлены при 0°С и перемешивались при комнатной температуре на протяжении около 12 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом (около 200 мл), отфильтрована через слой целита, и органический слой был отделен. Водной слой экстрагировали этилацетатом (100 мл × 2), органические слои объединяли, сушили с помощью NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт было перемешано в гексане. Твердая часть была отфильтрована и высушена в условиях вакуума (8.56 g). H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 2.91-2.77 (m, 2H), 2.63 (q, 1H, J=9 Гц), 2.07 (s, 3Н), 1.86-1.95 (m, 1H), 1.40 (s, 3Н), 0.97 (s, 3Н). Масса: [М+1] 171 (10%), [M+Na] 193 (72%). ИК (KBr, см): 3218, 1737, 1694, 1467, 1368, 1283, 1174, 1080, 836, 703. Интервал плавления: 109.5°С-120.7°С.
Интермедиат 2: синтез (1S,3R)-бензил 3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата:
2
3
2
4
3
1
+
+
-1
Перемешиваемый раствор (1S,3R)-3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (6.0 г, 35.29 ммоль) в диметилформамиде (20 мл) при 0°С, медленно и порционно добавляли CsCO (13.8 г, 42.34 ммоль), а затем BnBr (5.06 мл, 42.34 ммоль). Реакционную смесь перемешивали на протяжении около 2 часов в условиях комнатной температуры. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом (100 мл) и промыта водой (50 мл), рассолом (50 мл) и высушена с помощью NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (60-120, элюент - 4% этил ацетата в гексане) для получения целевого соединения в виде бледно-желтого сиропа. Вес: 5.6 г; Выход по веществу: 61.5%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.42-7.31 (m, 5Н), 5.13 (s, 2H), 2.93-2.81 (m, 2H), 2.68 (q, m,J=10.5 Гц,), 2.05 (s, 3Н), 1.97-1.88 (m, 1H), 1.43 (s, 3Н). 0.87 (s, 3Н); Масс: [M+1]261 (20%), [M+Na] 283 (87%); ИК (KBr, см): 2889, 1732, 1708, 1498, 1456, 1329, 1279, 1183, 1027, 954, 752, 698.
Интермедиат 3: синтез (1S,3R)-бензил 3-ацетамидо-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата:
3
3
2
4
3
1
+
+
-1
Раствор (1S,3R)-бензил 3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата (1.5 г, 5.76 ммоль) в моноглиме (18.75 мл) при -45°С, NaN (1.12 г, 17.30 ммоль), MeSOH (10.5 мл), был медленно и покапельно добавлен при перемешивании. Реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 48 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была нейтрализована водным раствором аммиака. Растворитель выпаривали и разбавлен дихлорметаном. Органический слой промывали водой, рассолом и сушили с помощью NaSO. Растворитель выпаривали при сниженном давлении, и полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (60/120 меш, элюент: 30% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 1.3 г; Выход по веществу: 82.2%; Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 7.42-7.31 (m, 5Н), 5.59 (d, 1H, J=5.7 Гц), 5.12 (s, 2H), 4.13 (q, 1H, J=9.3 Гц), 2.69-2.63 (m, 1H), 2.38-2.34 (m, 1H), 2.13-2.06 (m, 1H), 2.05 (s, 3Н), 1.30 (s, 3Н), 0.86 (s, 3Н). Масс.: [М+1]276 (100%), [M+Na] 298 (66%); ИК (KBr, см): 3270, 2963, 2866, 1728, 1647, 1571, 1455, 1303, 1151, 1071, 1019, 961, 755, 742; Интервал плавления: 85.6°С-97.5°С.
Интермедиат 4: синтез (1S,3R)-3-ацетамидо-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
1
+
+
-1
3
В перемешиваемый раствор (1S,3R)-бензил 3-ацетамидо-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата (0.650 г, 2.36 ммоль) в этил ацетате (10 мл) при комнатной температуре был добавлен 10% палладий на угле (каталитическое количество), и реакционная смесь перемешивалась на протяжении около 1 часа в среде газообразного Hz при комнатной температуре. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была отфильтрована через слой целита. Полученный фильтрат был сконцентрирован при пониженном давлении для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.240 г; Выход по веществу: 54.9%; Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.09 (d, J=3.0 Гц, 1Н), 4.08-3.96 (m, 1H), 2.62-2.58 (m, 1H), 2.20-2.15 (m, 2H), 1.93 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 0.92 (s, 3Н); Масс.: [М+1]186 (70%), [M+Na] 208 (93%). ИК (KBr, см): 3349, 2962, 1697, 1624, 1557, 1428, 1377, 1257, 1075, 988, 920, 736; Интервал плавления: 194.7°С -216.2°С.
Интермедиат 5: синтез (1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
2
2
4
3
1
+
-1
Суспензию (1S,3R)-3-ацетамидо-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (0.5 г, 2.702 ммоль) в 3N HCl (около 8 мл) нагревали с обратным холодильником при перемешивании на протяжении около 2 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали, а смесь подщелачивали 2N NaOH (pH 8-9). При температуре около 0°С добавляли сначала диоксан (3 мл), а затем (Вос)O (1.24 мл, 5.405 ммоль). Реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь подкисляли с помощью 1N HCl и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали водой, рассолом и сушили с помощью NaSO. Органический слой концентрировали при пониженном давлении, а затем полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент: 30% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.500 г; Выход по веществу: 72.6%; Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 3.75-3.704 (m, 1H), 2.55-2.52 (m, 1H), 2.19-2.06 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.25 (s, 3H), 0.92 (s, 3H); Масс.: [M+Na] 266 (100%); ИК (KBr, см): 3300, 3249, 2967, 1701, 1643, 1479, 1403, 1265, 1159, 1109, 1029, 858, 778; Интервал плавления: 142.8°С-149.0°С.
Интермедиат 6: синтез (1S,3R)-бензил 3-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата:
2
3
2
4
3
1
1
В перемешиваемый раствор (1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (0.5 г, 2.05 ммоль) в диметилформамиде (около 5 мл), медленно и порционно при температуре 0°С были добавлены CsCO (0.804 г, 2.47 ммоль) и BnBr (0.3 мл, 2.47 ммоль). Затем реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 2 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом, промыта водой и рассолом и высушена с помощью NaSO. Растворитель выпаривали, и вещество очищали на колонке с силикагелем (60-120 меш, элюент 4% этил ацетата в гексане) для получения целевого соединения в виде бледно-желтого сиропа. Вес: 0.35 г; Выход по веществу: 51%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.39-7.28 (m, 5H), 5.12 (Brs, 2H), 4.60 (Brs, 1H), 3.88-3.79 (m, 1H), 2.65-2.53 (m, 1H), 2.38-2.27 (m, 1H), 2.01-1.99 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.28 (s, 3H), 0.86 (s, 3Н); ИК (KBr, см): 3387, 2962, 1710, 1523, 1456, 1366, 1253, 1173, 1079, 1009, 979, 746, 698.
Интермедиат 7: синтез (1S,3R)-бензил 3-амино-2,2-диметилциклобутанкарбоксилат трифторуксусной кислоты:
3
(1S,3R)-бензил-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоксилат (около 0.210 г, 0.63 ммоль) перемешивали в смеси трифторуксусная кислота:дихлорметан (1:4) (3 мл) при 0°С и оставляли для нагрева до комнатной температуры на 30 минут. По завершении реакции растворитель выпаривали, а сырой продукт растворяли в дихлорметане и подщелачивали с помощью EtN (около 0.26 мл, 1.89 ммоль). Полученный раствор был затем использован непосредственно, как есть, для следующей реакции.
Интермедиат 8: синтез (1S,3R)-трет-бутил 3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата:
3
2
4
3
1
+
К перемешиваемому, охлаждаемому льдом раствору (1S,3R)-3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (3.0 г, 17.65 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) были добавлены t-BuOH (5.1 мл, 52.94 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (0.036 г, 0.176 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл), а после этого медленно добавлен N,N'-дициклогексилкарбодиимид (DCC, 4.4 г, 21.2 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (2 мл). Затем реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 36 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была отфильтрована через слой целита и промыта дихлорметаном. Фильтрат был промыт 5% HCl, водой, водным раствором NaHCO и высушен с помощью NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (60-120, элюент 10% этил ацетата в гексане) для получения целевого соединения в виде бледно-желтого сиропа. Вес: 2.4 г; Выход по веществу: 60%; Н ЯМР (300 МГц. CDCl): δ 2.84 (m, 1H), 2.70-2.51 (m, 2H), 2.06 (s, 3H), 1.89-1.80 (m, 1H), 1.41 (s, 12H), 0.93 (s, 3Н); Масс.: [M+Na] 249 (100%).
Интермедиат 9: синтез (1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты
2
4
3
1
-1
+
В перемешиваемый раствор (1S,3R)-трет-бутил 3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата (2.4 г, 10.62 ммоль) в диоксане (270 мл) при 0°С медленно добавляли водный раствор NaOBr (около 180 мл) и перемывали при этой же температуре на протяжении около 3 часов, а затем перемешивание продолжили уже при комнатной температуре на протяжении около 4 часов (раствор желтого цвета приобрел белый цвет). По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была промыта метил t-бутил эфиром (3×150 мл), водный слой был доведен до рН (2-3) с помощью 1N HCl; водный слой экстрагировали этилацетатом и сушили с помощью NaSO. Растворитель выпаривали для получения целевого соединения в виде жидкости грязно белого цвета. Вес: 1.9 г; Выход по веществу: 78%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 2.82-2.67 (m, 2H), 2.57-2.50 (m, 1H), 2.04-1.98 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.34 (s, 3Н), 1.05 (s, 3Н); ИК (KBr, см): 3205, 1731, 1694, 1460, 1371, 1236, 1157, 1108, 846, 721; Масс.: [M+Na] 251 (40%).
Интермедиат 10: синтез (1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонового 2,4,6-трихлорбензойного ангидрида
К перемешиваемому раствору (1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (около 0.450 г, 1.97 ммоль) и диизопропилэтиламина (около 1.01 мл, 5.92 ммоль) в тетрагидрофуране (около 4 мл) при температуре 0°С добавляли 2,4,6-трихлоро бензоил хлорид (0.35 мл, 2.17 ммоль). Затем реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали, а сырой продукт использован как есть для следующей реакции.
Интермедиат 11: синтез ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(морфолино)метанона:
Стадия 1: синтез (1S,3R)-3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбонил азида:
3
3
2
4
К перемешиваемому раствору (1S,3R)-3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (1.0 г, 5.88 ммоль) в ацетоне (20 мл) при температуре 0°С медленно и порционно добавляли EtN (1.6 мл, 11.76 ммоль) и этил хлорформат (1.12 мл, 11.76 ммоль), и перемешивали на протяжении около 3 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) NaN, растворенный в минимальном количестве воды (0.84 g, 12.93 mmol), добавляли к реакционной смеси при температуре 0°С. Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре на протяжении около 1.5 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь экстрагировали дихлорметаном и промывали водой, рассолом, после чего сушили с помощью NaSO и бензилового спирта (0.95 мл, 8.82 ммоль). Затем растворитель выпаривали, а сырой продукт был сразу же без исследований употреблен для следующей реакции (считается 100% выходом по веществу для использования в следующей реакции). Вес сырого продукта: 1.147 г (100% выход по веществу).
Стадия 2: синтез бензил (1S,3R)-3-ацетил-2,2-диметилциклобутилкарбамата:
1
+
+
-1
3
В перемешиваемый раствор (1S,3R)-3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбонил азида (Стадия 1, 1.147 г, 5.88 моль) в толуоле (20 мл) был добавлен при комнатной температуре бензиловый спирт (0.95 мл ммоль, 8.82 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником на протяжении около 4 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали при пониженном давлении, а полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (60/120 меш, элюент: 5% этил ацетата в гексане) для получения жидкого титульного соединения. Вес: 1.3 г; Выход по веществу: 81.2%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.38-7.29 (m, 5H), 5.08 (q, 2H, J=12 Гц), 4.80 (d, 1H, J=8.0 Гц), 3.92 (q, 1H, J=9.3 Гц), 2.77-2.71 (m, 1H), 2.16-2.08 (m, 1H), 2.07 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 0.82 (s, 3Н); Масс.: [M+1] 276 (10%), [M+Na] 298 (100%); ИК (KBr, см): 3338, 2956, 2927, 1703, 1648, 1530, 1460, 1370, 1282, 1254, 1183, 1042, 944.
Стадия 3: синтез (1R,3S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
2
4
3
1
-1
+
В перемешиваемый раствор бензил (1S,3R)-3-ацетил-2,2-диметилциклобутилкарбамата (Стадия 2, 1.3 г, 4.72 ммоль) в смеси диоксана (90 мл) и воды (30 мл) медленно добавляли водный раствор NaOBr (80 мл) при температуре около -5°С. Перемешивание происходило при этой же температуре на протяжении около 5 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была промыта метил t-бутил эфиром, водный слой был доведен до рН (2-3) с помощью 1N HCl, экстрагирован этилацетатом и высушен с помощью NaSO. Растворитель выпаривали, после чего полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент: 20% этил ацетата в гексане) для получения полутвердого титульного соединения. Вес: 1.2 г: Выход по веществу: 92%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.38-7.31 (m, 5H), 5.09 (q, 2H, J=10.8 Гц), 4.89 (d, m,J=8.4 Гц), 3.98-3.89 (m, 1H), 2.64-2.53 (m, 1H), 2.51-2.26 (m, 2H), 1.32 (s, 3H), 0.98 (s, 3H). ИК (KBr, см): 3411, 3351, 2961, 1705, 1532, 1456, 1412, 1343, 1256, 1044, 1003, 776, 697; Масс: [M+Na] 300 (100%).
2
2
Раствор NaOBr: В раствор NaOH (9.4 г, 233.6 ммоль) в HO (180 мл) был медленно добавлен BR (3.3 мл, 63.72 ммоль) при 0°С. Был получен раствор NaOBr желтого цвета, который тут же был использован для реакции.
Стадия 4: синтез бензил (1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамата:
3
3
3
1
+
+
В перемешиваемый раствор (1R,3S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (Стадия 3, 0.9 г, 3.25 ммоль) в дихлорметане (5 мл) были добавлены при температуре около 0°С 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (0.747 г, 3.89 ммоль) и гидроксибензотриазол (0.527 г, 3.89 ммоль), а через 10 минут покапельно добавили морфолин (0.6 мл, 6.5 ммоль) и EtN (2.3 мл, 16.26 ммоль). Реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении 8 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном, промыта водой, насыщенным раствором NaHCO, водой, 1N HCl, водой и насыщенным рассолом. Органический слой концентрировали при пониженном давлении, полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 90% этил ацетата в гексане) для получения целевого соединения в виде сиропа. Вес: 0.6 г; Выход по веществу: 53.4%; H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 7.40-7.22 (m, 5H), 5.19 (d, 1H, J=8.7 Гц), 5.08 (q, 2H, J=12.0 Гц), 3.95 (q, 1H, J=9.0 Гц), 3.79-3.38 (m, 8H), 2.80 (t, 1H, J=8.4 Гц), 2.49-2.35 (m, 1H), 2.34-2.20 (m, 1H), 1.33 (s, 3Н), 0.89 (s, 3H); Масс.: [М+1] 347 (10%), [М+Na] 346 (100%).
Стадия 5: синтез ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(морфолино)метанона:
2
В перемешиваемый раствор бензил (1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамата (Стадия 4, 0.60 г, 1.73 ммоль) в этил ацетате (10 мл) был добавлен 10% палладий на угле (каталитическое количество) при комнатной температуре. Реакционная смесь перемешивалась в среде газообразного Н при комнатной температуре на протяжении около 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была отфильтрована через слой целита, полученный фильтрат был сконцентрирован при пониженном давлении для получения свободного амина в форме жидкости, который как есть, без исследования, был использован для следующей реакции. Вес: 0.331 г: Выход по веществу: 90%.
Интермедиат 12: синтез ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пиперидин-1-ил)метанона:
Стадия 1: синтез бензил (1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамата:
3
3
3
1
+
+
-1
В перемешиваемый раствор (1R,3S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (Интермедиат 1 - Стадия 3, 0.650 г, 2.346 ммоль) в дихлорметане (5 мл) были добавлены 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (0.674 г, 3.519 ммоль) и гидроксибензотриазол (0.475 г, 3.519 ммоль) при температуре 0°С. Спустя 10 минут были покапельно добавлены пиперидин (0.46 мл, 4.692 ммоль) и EtN (0.65 мл, 4.692 ммоль), и реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении около 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, насыщенным раствором NaHCO, водой, 1N HCl, водой и насыщенным рассолом. Органический слой был сконцентрирован при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 20% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.393 г; Выход по веществу: 48.6%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.40-7.28 (m, 5H), 5.18-4.99 (m, 3H), 3.97-3.87 (m, 1H), 3.77-3.67 (m, 1H), 3.49-3.28 (m, 3H), 2.83 (t, 1H, J=8.4 Гц), 2.47-2.20 (m, 2H), 3.65-3.41 (m, 6H), 1.35 (s, 3H), 0.87 (s, 3H); Масс.: [М+1] 345 (10%), [M+Na]367 (100%); ИК (KBr, см ): 3315, 3013, 2931, 2855, 1719, 1622, 1534, 1443, 1369, 1255, 1236, 1219, 1125, 1040, 853, 746, 697; Интервал плавления: 145.2°С-150.8°С.
Стадия 2: синтез ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пиперидин-1-ил)метанона:
2
10% палладий на угле (каталитическое количество) был добавлен к перемешиваемому раствору бензил (1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамата (Стадия 1, 0.393 г, 1.14 ммоль) в этил ацетате (10 мл) при комнатной температуре. Реакционная смесь перемешивалась в среде газообразного Н при комнатной температуре на протяжении около 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была отфильтрована через слой целита, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении для получения свободного амина в форме жидкости, который как есть, без исследования, был использован для следующей реакции. Вес: 0.230 г: Выход по веществу: 95%.
Интермедиат 13: синтез ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пирролидин-1-ил)метанона:
Стадия 1: синтез бензил (1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамата:
3
3
3
1
+
+
-1
В перемешиваемый раствор (1R,3S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (Интермедиат 1 - Стадия 3, 0.650 г, 2.346 ммоль) в дихлорметане (5 мл) были добавлены 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (0.674 г, 3.519 ммоль) и гидроксибензотриазол (0.475 г, 3.519 ммоль) при температуре около 0°С. 10 минут спустя были покапельно добавлены пирролидин (0.40 мл, 4.692 ммоль) и EtN (0.65 мл, 4.692 ммоль), и реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении около 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, насыщенным раствором NaHCO, водой, 1N HCl, водой и насыщенным рассолом. Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 20% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.600 г; Выход по веществу: 77.5%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.40-7.28 (m, 5H), 5.18-4.99 (m, 3Н), 3.97-3.87 (m, 1H), 3.77-3.67 (m, 1H), 3.49-3.28 (m, 3H), 2.83 (t, 1H, J=8.4 Гц), 2.47-2.20 (m, 2H), 3.65-3.41 (m, 6H), 1.35 (s, 3Н), 0.87 (s, 3H); Масс.: [М+1] 331 (20%), [М+Na] 353 (100%); ИК (KBr, см): 3304, 3035, 2954, 1716, 1618, 1529, 1497, 1439, 1387, 1368, 1311, 1253, 1222, 1159, 1041, 912, 753.
Стадия 2: синтез ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пирролидин-1-ил)метанона:
2
В перемешиваемый раствор бензил (1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамата (Стадия 1, 0.600 г, 1.818 ммоль) в этил ацетате (10 ml) был добавлен 10% палладий на угле (каталитическое количество) при комнатной температуре. Реакционная смесь перемешивалась в среде газообразного Н при комнатной температуре на протяжении около 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была отфильтрована через слой целита, полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении для получения свободного амина в форме жидкости, который как есть, без исследования, был использован для следующей реакции. Вес: 0.282 г: Выход по веществу: 80%.
Интермедиат 14: синтез ((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(морфолино)метанона:
Стадия 1: синтез трет-бутил (1R,3S)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамата:
3
3
3
1
В перемешиваемый раствор (1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (Интермедиат 1 - Стадия 3, 0.3 г, 1.23 ммоль) в дихлорметане (5 мл) были добавлены 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (0.237 g, 1.23 ммоль) и гидроксибензотриазол (0.167 г, 1.23 ммоль) при температуре около 0°С. 10 минут спустя были покапельно добавлены морфолин (0.2 мл, 2.469 ммоль) и EtN (0.9 мл, 6.2 ммоль). Реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, насыщенным раствором NaHCO, водой, 1N HCl, водой и насыщенным рассолом. Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 90% этил ацетата в гексане) для получения целевого соединения в виде сиропа. Вес: 0.205 г; Выход по веществу: 53.1%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 4.75 (d, 1H, J=8.4 Гц), 3.90-3.40 (m, 8H), 2.83-2.74 (m, 1H), 2.40-2.21 (m; 2H), 1.43 (s, 9H), 1.32 (s, 3Н), 0.89 (s. 3H).
Стадия 2: синтез ((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(морфолино)метанона:
3
Трет-бутил (1R,3S)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамат (Стадия 1, 0.260 г, 0.833 ммоль) был помещен в смесь трифторуксусная кислота: дихлорметан (1:4) (3 мл) при 0°С-комнатной температуре и перемешивался на протяжении 1 часа. По завершении реакции растворитель выпаривали, а сырой продукт растворяли в дихлорметане и подщелачивали с помощью EtN (0.7 мл, 5.0 ммоль). Полученный раствор как есть, без исследования, был немедленно использован для следующей реакции. Вес: 0.176 г.
Интермедиат 15: синтез (1S,3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
Стадия 1: синтез (1S,3R)-трет-бутил 3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата:
1
+
3
К перемешиваемому, охлаждаемому льдом раствору (1S,3R)-3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (16.0 г, 94.117 ммоль) в тетрагидрофуране (160 мл) были добавлены 4-диметиламинопиридин (1.148 г, 9.409 ммоль) и N,N'-дициклогексилкарбодиимид (23.265 г, 112.93 ммоль), а затем покапельно добавлен t-бутиловый спирт (27.63 мл, 282.34 ммоль). Реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре на протяжении 36 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом, отфильтрована через слой целита и промыта этил ацетатом. Фильтрат, как он есть, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 10% этил ацетата в гексане) для получения твердого титульного соединения. Вес: 15.0 г: Выход по веществу: 70%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 2.86-2.74 (m, 1Н), 2.70-2.50 (m, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.89-1.78 (m, 1H), 1.42, 1.40 (2s, 12H), 0.91 (s, 3H); Масс.: [M+Na] 249 (100%).
Стадия 2: синтез (1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
2
4
3
1
-1
+
К перемешиваемому раствору (1S,3R)-трет-бутил 3-ацетил-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата (Стадия 1, 15.0 г, 66.371 ммоль) в диоксане (1450 мл) был медленно и покапельно добавлен водный раствор NaOBr (920 мл) при температуре около 0°С. Затем раствор перемешивали при температуре около 0°С на протяжении около 3 часов и потом при комнатной температуре на протяжении еще около 4 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была промыта метил t-бутил эфиром. рН водного слоя был доведен 2-3 с помощью 1N HCl, и водный слой затем экстрагировали при помощи этил ацетата. Органический слой был промыт водой и рассолом и высушен при помощи NaSO. Растворитель выпаривали для получения твердой титульной кислоты грязно-белого цвета. Вес: 7.2 г: Выход по веществу: 47.5%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 2.83-2.68 (m, 2H), 2.59-2.48 (m, 1H), 2.08-1.97 (m, 1H). 1.44 (s, 9H), 1.34 (s, 3H), 1.06 (s, 3H); ИК (KBr, см): 3207, 2873, 1731, 1694, 1472, 1462, 1371, 1312, 1286, 1251, 1179, 1157, 1108, 1090, 1017, 904, 846, 742, 721, 620; Масс.: [M+Na] 251 (100%); Интервал плавления: 119.1-123.0°С.
2
2
Раствор NaOBr: В раствор NaOH (57.0 г, 1426.9 ммоль) в HO (910 мл) был медленно добавлен BR (19 мл, 371.6 ммоль) при 0°С. Был получен раствор NaOBr желтого цвета, который тут же был использован для реакции.
Стадия 3: синтез (1R,3S)-1-бензил 3-трет-бутил 2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата:
2
3
4
3
1
+
К перемешиваемому раствору (1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (Стадия 2, 0.200 г) в диметилформамиде (5 мл) был добавлен CsCO (0.371 г) при температуре около 0°С в атмосфере азота. 30 минут спустя к реакционной смеси был покапельно добавлен BnBr (0.11 мл), и перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 2 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этилацетатом и промыта водой. Органический слой был промыт рассолом, высушен с помощью MgSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения сырого продукта, который после колоночной хроматографии дал титульное соединение (150 мг, 53.9% Выход по веществу). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.37-7.34 (5Н, m), 5.12 (2H, d, J=3.9 Гц), 2.80 (1Н, t, J=8.1 Гц), 2.768-2.52 (2H, m), 2.0 (1Н, m), 1.44 (9H, m), 1.32 (3H, s), 0.953 (3H, s); Масс.: [M+Na] 341.2 (100%).
Стадия 4: синтез (1S,3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
2
4
3
1
+
+
К раствору (1R,3S)-1-бензил 3-трет-бутил 2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата (Стадия 3, 1.0 г) был добавлен диоксан-HCl (10 мл) при температуре около 0°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали на протяжении около 12 часов при комнатной температуре. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этилацетатом и промыта водой. Органический слой был промыт рассолом, высушен с помощью NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения сырого продукта, который после колоночной хроматографии даст титульное соединение (800 мг, 97.2% выход по веществу). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.35 (5Н, s), 5.12 (2H, d, J=2.7 Гц), 2.84 (2H, m), 2.63 (1Н, m), 2.0 (1Н, m), 1.35 (3H, s), 0.99 (3H, s); Масс.: [M+H] 263.1 (20%), 285.1 [M+Na].
Интермедиат 16: синтез 3-(морфолинометил)циклопентанамина:
Стадия 1: синтез трет-бутил (1S,4R)-4-(гидроксиметил)циклопент-2-енилкарбамата:
2
4
К перемешиваемому раствору ((1S,4R)-4-аминоциклопент-2-енил)метанол 2,3-дигидроксиянтарнокислой соли (около 10.0 г, 38.02 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) при комнатной температуре был добавлен карбонат натрия (около 6.38 г, 76.04 ммоль) и затем раствор был охлажден до около 0°С. 10 минут спустя был добавлен ди-трет-бутил дикарбонат (около 9.1 г, 41.82). Далее реакция протекала при перемешивании, в условиях комнатной температуры на протяжении около 12 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была разбавлена водой и экстрагирована дихлорметаном, органический слой был высушен с помощью NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения целевого соединения (11.5 г) в. виде светло-желтой жидкости. ES Масс.: 213 [М+1] 214(100%).
Стадия 2: синтез трет-бутил (1R,3S)-3-(гидроксиметил)циклопентилкарбамата:
К перемешиваемому раствору трет-бутил (1S,4R)-4-(гидроксиметил)циклопент-2-енилкарбамата (Стадия 1, около 10.0 г) в этаноле (150 мл) был в атмосфере водорода добавлен 10% палладиевый катализатор на углеродном носителе (около 1.0 г). Реакционная масса перемешивалась на протяжении около 16 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. По завершении реакции реакционная смесь была отфильтрована через фильтрующий элемент интенсивного потока и промыта этанолом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении для получения целевого соединения (7.5 г) в виде светло-желтой жидкости. ES Масс.: 215 [М+1] 216(100%).
Стадия 3: синтез ((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)циклопентил)метил 4-метилбензолсулъфоната:
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору трет-бутил (1R,3S)-3-(гидроксиметил)циклопентилкарбамата (Стадия 2, около 4.5 г, 21.12 ммоль) в дихлорметане (50 мл), был добавлен триэтил амин (около 9.5 мл, 68.1 ммоль) при комнатной температуре, а затем смесь охлаждали до примерно 0°С. 10 минут спустя был добавлен 4-метилбензол-1-сульфонил хлорид (около 6.0 г). Далее реакция протекала при перемешивании при комнатной температуре на протяжении около 6 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована с помощью насыщенного NaHCO и экстрагирована дихлорметаном. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения целевого соединения (5.5 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 1.45 (s, 9Н); 246-2.55 (m, 4Н); 2.90-2.91 (m, 1H); 3.95-3.98 (m, 2H); 4.59-4.70 (m, 2H); 5.66-5.77 (m, 2H); 7.34-7.37 (d, J=9 Гц, 2H); 7.77-7.80 (d, J=9 Гц, 2H); ES Масс.: 369 [M+1] 370 (100%).
Стадия 4: синтез трет-бутил (1R,3S)-3-(морфолинометил) циклопентилкарбамата:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору, ((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)циклопентил)метил 4-метилбензолсулъфоната (Стадия 3, около 0.5 г) в дихлорметане (50 мл) при комнатной температуре был добавлен карбонат калия (около 0.3 г), и затем смесь охлаждали до примерно 0°С. Десять минут спустя был добавлен морфолин (1 мл), и реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована и экстрагирована с помощью дихлорметана, органический слой был высушен с помощью NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения целевого соединения (0.60 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 1.24-1.29 (m, 1H); 1.39-1.40 (s, 9Н); 2.29-2.60 (m, 7H); 2.79-2.80 (m, 1H); 3.70-3.73 (m, 4Н); 4.63 (S, 1H); 5.37-5.39 (d, J=6 Гц, 1H); 5.72-5.81 (m, 2H); ES Macc.:283 (100%) [M+1].
Стадия 5: синтез (1R,3S)-3-(морфолинометил)цикпопентанамина:
Трет-бутил (1R,3S)-3-(морфолинометил)цикпопентилкарбамат (Стадия 4, 0.6) был обработан трифторуксусной кислотой (2 мл) и полученный 3-(морфолинометил)циклопентанамин был непосредственно, без дальнейшей очистки, использован для синтеза конечных соединений, данных в разделе «Примеры».
Интермедиат 17: синтез (1S,4R)-4-(морфолинометил)ииклопент-2-енамина:
Стадия 1: синтез ((1R,4S)-4-(трет-бутоксикарбониламино)циклопент-2-енил)метил4-метилбензолсулъфоната:
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору трет-бутил (1S,4R)-4-(гидроксиметил)циклопент-2-енилкарбамата (Интермедиат 6-Стадия 2, около 4.5 г, 21.12 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при комнатной температуре был добавлен триэтиламин (около 9.5 мл, 68.1 ммоль), и смесь охлаждали до примерно 0°С. Десять минут спустя был добавлен 4-метилбензол-1-сульфохлорид (около 6.0 г). Далее реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов, и ее окончание контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения целевого соединения (5.5 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 1.45 (s, 9H); 246-2.55 (m, 4H); 2.90-2.91 (m, 1H); 3.95-3.98 (m, 2H); 4.59-4.70 (m, 2H); 5.66-5.77 (m, 2H); 7.34-7.37 (d, J=9 Гц, 2H); 7.77-7.80 (d, J=9 Гц, 2Н).
Стадия 2: синтез трет-бутил (1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енилкарбамата:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору ((1R,4S)-4-(трет-бутоксикарбониламино)циклопент-2-енил)метил 4-метилбензолсульфоната (Стадия 1, около 0.5 г) в дихлорметане (50 мл) при комнатной температуре был добавлен карбонат калия (около 0.3 г), а затем смесь охлаждали до примерно 0°С. Десять минут спустя был добавлен морфолин (3 мл). Далее реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения целевого соединения (0.5 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl: 1.24-1.29 (m, 1Н); 1.39-1.40 (s, 9H); 2.29-2.60 (m, 7H); 2.79-2.80 (m, 1H); 3.70-3.73 (m, 4H); 4.63 (S, 1H); 5.37-5.39 (d, J=6 Гц, 1H); 5.72-5.81 (m, 2H); ES Macc.: 283 (100%), [M+1].
Стадия 3: синтез (1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енамина:
Трет-бутил (1R,3S)(морфолинометил)циклопентилкарбамат (Стадия 2) был обработан трифторуксусной кислотой, и полученный (1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енамин был использован непосредственно, без последующей очистки, для синтеза конечных соединений из раздела «Примеры».
Интермедиат 18: синтез (1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-илокси)метил)циклопентанамина:
Стадия 1: синтез ((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)циклопентил)метил 4-метилбензолсульфоната:
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору N-((1R,3S)-3-(гидроксиметил)циклопентил)-3,3-диметилбутанамид (Интермедиат 16-Стадия 2,4.5 г, 21.12. ммоль) в дихлорметане (50 мл) при комнатной температуре был добавлен триэтил амин (около 9.5 мл, 68.1 ммоль), а затем смесь охлаждали до примерно 0°С. Десять минут спустя был добавлен 4-метилбензол-1-сульфохлорид (около 6.0 г). Далее реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения целевого соединения (5.5 g) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 1.45 (s, 9Н); 2.46-2.55 (m, 4Н); 2.90-2.91 (m, 1H); 3.95-3.98 (m, 2H); 4.59-4.70 (m, 2H); 5.66-5.77 (m, 2H); 7.34-7.37 (d, J=9 Гц, 2H); 7.77-7.80 (d, J=9 Гц, 2H).
Стадия 2: синтез трет-бутил (1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамата
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору ((1R,4S)-4-(трет-бутоксикарбониламино)циклопент-2-енил)метил 4-метилбензолсульфоната (Стадия 1, около 0.5 г) в дихлорметане (50 мл), при комнатной температуре был добавлен карбонат калия (около 0.3 г), а затем смесь охлаждали до примерно 0°С. Десять минут спустя был добавлен 4-бензилпиперидин (0.17 г), и реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения целевого соединения (0.45 g) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl: 1.24-1.29 (m, 1Н); 1.39-1.40 (s, 9H); 2.29-2.60 (m, 7H); 2.79-2.80 (m, 1Н); 3.70-3.73 (m, 4H); 4.63 (S, 1Н); 5.37-5.39 (d, J=6 Гц, 1Н); 5.72-5.81 (m, 2H).
Стадия 3: синтез (1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-илокси)метил)циклопентанамина:
N-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-илокси)метил)циклопентил)-3,3-диметилбутанамид (Стадия 2, 0.5 г) был обработан трифторуксусной кислотой (3 мл), и полученный (1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-илокси)метил)циклопентанамин (0.25 г) был непосредственно, без дальнейшей очистки, использован для синтеза конечных соединений из раздела «Примеры».
Интермедиат 19: синтез (1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентанамина:
Стадия 1: синтез трет-бутил (1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентилкарбамата:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору ((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)циклопентил)метил 4-метилбензолсульфоната (Интермедиат 18-Стадия 2, около 0.5 г) в дихлорметане (50 мл) при комнатной температуре был добавлен карбонат калия (около 0.3 г), а затем смесь охлаждали до примерно 0°С. Десять минут спустя был добавлен 1-этил пиперазин (0.23 г), и реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения целевого соединения (0.3 г) в виде бледно-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl: 1.09-1.24 (m, 3Н); 1.39 (s, 9H); 2.29-2.60 (m, 4H); 2.79-2.80 (m, 10Н); 3.06-3.18 (m, 6H); 3.70-3.73 (m, 1Н); ES Масс.: 312 (100%) [M+1].
Стадия 2: синтез (1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентанамина:
N-((1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентил)-3,3-диметилбутанамид (Стадия 1, 0.5 г) был обработан трифторуксусной кислотой, и полученный (1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентанамин был непосредственно, без последующей очистки, использован для синтеза конечных соединений из раздела «Примеры».
Интермедиат 20: синтез (1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентанамина:
Стадия 1: синтез трет-бутил (1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамата:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору ((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)циклопентил)метил 4-метилбензолсульфоната (Интермедиат 18 - Стадия 2, около 0.5 г) в дихлорметане (50 мл) при комнатной температуре был добавлен карбонат калия (около 0.3 г), а затем смесь охлаждали до примерно 0°С. Десять минут спустя был добавлен 3-метилпиперидин (0.21 г), и реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения твердого целевого соединения (0.29 г) бледно-желтого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl: 1.08-1.09(m, 3Н); 1.24-1.29 (m, 1H); 1.39-1.40 (s, 9H); 2.29-2.60 (m, 6H); 2.79-2.80 (m, 8H); 3.70-3.73 (m, 4H); ES Масс.: 297 (100%), [M+1].
Стадия 2: синтез (1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентанамина:
Трет-бутил (1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамат (Стадия 1, 0.2 г) был обработан трифторуксусной кислотой, и полученный (1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентанамин был непосредственно и без дальнейшей очистки использовано для синтеза конечных соединений из раздела «Примеры».
Интермедиат 21: синтез этил 4-этилпиперидин-4-карбоксилата:
Стадия 1: синтез 1-трет-бутил 4-этил пиперидин-1, 4-дикарбоксилата:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору этил пиперидин-4-карбоксилата (10.0 г, 63.69 ммоль) в 50 мл тетрагидрофурана при комнатной температуре был добавлен бикарбонат натрия (8.0 г, 95.5 ммоль), а затем смесь охлаждали до 0°С. Десять минут спустя был добавлен ди-трет-бутил дикарбонат (15.27 г, 70.05 ммоль), и реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении 14 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена водой и экстрагирована при помощи дихлорметана. Органический слой был высушен с помощью NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения целевого соединения (11.4 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 1.23-1.28 (t, 3Н); 1.45 (s, 9H); 1.60-1.68 (m, 3Н); 1.85-1.90 (d, J=15 Гц, 2H); 2.41-2.46 (m, 1H); 2.83-2.87 (m, 2H); 4.04-4.17 (m, 3Н); ES Масс.: 258 (100%), [M+1].
Стадия 2: синтез 1-трет-бутил 4-этил 4-бензилпиперидин-1,4-дикарбоксилата:
3
2
4
3
1
Диизопропил этиламин (6.5 мл) в сухом тетрагидрофуране (25 мл) был охлажден до -10°С, затем покапельно был добавлен N-бутил литий (1.6 молярно, 23 мл) в атмосфере азота. Реакция проходила при -10°С на протяжении 45 минут, а затем смесь была охлаждена до - 75°С, и реакция протекала при этой температуре на протяжении 15 минут. Затем был добавлен 1-трет-бутил 4-этил пиперидин-1,4-дикарбоксилат (указанная выше стадия 1,5 г в 30 мл тетрагидрофурана). Реакция протекала при той же температуре на протяжении 30 минут, после чего температура реакции снова была повышена до -35°С. Далее реакция протекала при перемешивании на протяжении 45 минут, а затем температура была снова снижена до - 75°С. После этого покапельно был добавлен йодистый этил (3.5 г в 20 мл тетрагидрофурана), и температура реакции была медленно доведена до комнатной. Далее реакция протекала при комнатной температуре на протяжении около 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была быстро охлаждена насыщенным хлоридом аммония и экстрагирована этилацетатом. Органический слой был промыт насыщенным раствором NaHCO, а затем рассолом, высушен с помощью NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке с силикагелем при использовании 3% этилацетата в гексане в качестве подвижной фазы для получения целевого соединения в виде жидкости светло-желтого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 1.16-1.18 (t, 3Н); 1.44 (s, 9H); 2.07-2.11 (m, 2H); 2.28 (s, 1H); 2.82 (s, 2H); 2.92-2.95 (m, 1H); 3.46-3.52 (m, 3Н); 4.09-4.11 (m, 2H); ES Масс.: 308 (100%) [M+Na].
Стадия 3: синтез этил 4-этилпиперидин-4-карбоксилата:
3
2
4
3
1
Перемешиваемый раствор 1-трет-бутил 4-этил 4-этилпиперидин-1,4-дикарбоксилата (предыдущая стадия 2, 4.5 г, 12.96 ммоль) в 50 мл дихлорметана был охлажден до 0°С. Десять минут спустя была добавлена трифтороуксусная кислота (6.0 г), и реакция протекала при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения титульного вещества (2.3 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 1.19-1.24 (t, 3Н); 1.48-1.58 (m, 2H); 2.14-2.18 (m, 2H); 2.64-2.73 (m, 2H); 2.86 (s, 2H); 3.01-3.07 (m, 4H); 4.10-4.17 (m, 2H); 7.07-7.10 (m, 2H); 7.24-7.30 (m, 3Н); ES Масс.: 186 (100%), [M+1].
Интермедиат 22: синтез 4-этилпиперидин-4-карбоновой кислоты:
Стадия 1: синтез 1-(трет-бутоксикарбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоновой кислоты:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору 1-трет-бутил 4-этил 4-этилпиперидин-1,4-дикарбоксилата (Интермедиат 21 - Стадия 2,10.0 г, 63.69. ммоль) в 50 мл этилового спирта был добавлен гидроксид калия (8.0 г, 95.5 ммоль), и содержимое нагревали с обратным холодильником на протяжении 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена водой, окислена с помощью 5% HCl и экстрагирована при помощи дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения титульного вещества (8.2 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 1.44 (s, 9H); 2.07-2.11 (m, 2H); 2.28 (s, 1H); 2.82 (s, 2H); 2.92-2.95 (m, 1H); 3.46-3.52 (m, 3H); ES Масс.: 280 (100%), [M+Na].
Стадия 2: синтез 4-этилпиперидин-4-карбоновой кислоты:
3
2
4
3
1
Перемешиваемый раствор 1-(трет-бутоксикарбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоновой кислоты (предыдущая стадия 1, 4.5 г, 12.96 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был охлажден до 0°С. Десять минут спустя была добавлена трифторуксусная кислота (6.0 г), и реакция продолжалась при перемешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 6 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении для получения титульного вещества (2.3 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 1.48-1.58 (m, 2H); 2.14-2.18 (m, 2H); 2.64-2.73 (m, 2H); 2.86 (s, 2H); 3.01-3.07 (m, 4H); ES Масс.: 158 (100%), [М+1].
Интермедиат 23: синтез ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(4-этилпиперазин-1-ил)метанона:
Стадия 1: синтез бензил (1S,3R)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамата:
3
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (1.0 г) в дихлорметане (30 мл) при 0°С были добавлены 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (800 мг) и гидроксибензотриазол (700 мг). 10 минут спустя были покапельно добавлены N-Этилпиперазин (800 мг) и EtN (3 мл), реакционная масса перемешивалась при комнатной температуре на протяжении 8 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, насыщенным раствором NaHCO, водой, 1N HCl, водой и насыщенным рассолом. Органический слой концентрировали при пониженном давлении, а затем полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 90% этил ацетата в гексане) для получения целевого соединения в виде сиропа. Вес: 780 мг; Выход по веществу: 57.9%. Н ЯМР и масса согласуются с требуемым продуктом.
Стадия 2: синтез ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(4-этилпиперазин-1-ил)метанона:
2
К перемешиваемому раствору бензил (1S,3R)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамата (предыдущая стадия 1, 780 мг) в этил ацетате (20 мл) при комнатной температуре был добавлен 10% палладий на угле (каталитическое количество), и реакция протекала при перемешивании реакционной смеси в атмосфере газообразного Н на протяжении 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была отфильтрована через слой целита, а полученный фильтрат сконцентрирован при пониженном давлении для получения жидкого титульного соединения, которое как таковое, без исследования, было использовано для следующей реакции. Выход по веществу был высчитан как 100%.
Интермедиат 24: синтез ((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(4-этилпиперазин-1-ил)метанон трифторуксусной кислоты:
Стадия 1: синтез трет-бутил (1R,3S)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамата:
3
3
3
1
+
+
К перемешиваемому раствору (1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (2 г, 8.23 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при 0°С были добавлены 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (946 мг, 9.876 ммоль) и гидроксибензотриазол (756 мг, 9.876 ммоль). 10 минут спустя были, покапельно добавлены N-Этил пиперазин (939 мг, 16.46 ммоль) и EtN (3 мл, 41.15 ммоль), и реакционная масса перемешивалась при комнатной температуре на протяжении 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, насыщенным раствором NaHCO, водой, 1N HCl, водой и насыщенным рассолом, а органический слой сконцентрирован при пониженном давлении. Образовавшийся неочищенный остаток был размешан в гексане, и полученное твердое вещество было отфильтровано. Вес: 1.6 г; Выход по веществу: 70%. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 4.77 (d, 1H, J=8.4 Гц), 3.89-3.78 (m, 1H), 3.6-3.46 (m, 3H), 2.80 (m, 1H), 2.60-2.40 (m, 8H), 1.80 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.12 (s, 3H), 1.2 (t, 3H), 0.87 (s, 3H); Масс.: [M+1]340 (25%), [M+Na]362 (100%).
Стадия 2: синтез ((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(4-этилпиперазин-1-ил)метанон трифторуксусной кислоты:
3
Раствор трет-бутил (1R,3S)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамата (1.6 г, 4.7 ммоль) в смеси трифторуксусная кислота:дихлорметан (1:2) (50 мл) перемешивали при комнатной температуре на протяжении 1 часа. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали, сырой продукт растворяли в дихлорметане и подщелачивали с помощью EtN (20 мл). Затем полученный раствор, как есть, был использован для следующей реакции.
Интермедиат 25: синтез этил 1-((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутанкарбонил)пиперидин-4-карбоксилата:
Стадия 1: синтез этил 1-((1R,3S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбонил)пиперидин-4-карбоксилата:
3
3
3
1
+
+
К перемешиваемому раствору (1R,3S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (1.5 г, 5.415 ммоль) в дихлорметане (20 мл) при 0°С были добавлены 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид (1.55 г, 8.122 ммоль) и гидроксибензотриазол (1.24 г, 8.122 ммоль). 10 минут спустя были покапельно добавлены 4-этилпиперидинкарбоксилат (1.0 г, 6.498 ммоль) и EtN (3.75 мл, 27.075 ммоль), и реакционную массу перемешивали при комнатной температуре на протяжении 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, насыщенным раствором NaHCO, водой, 1N HCl, водой и насыщенным рассолом. Органический слой концентрировали при пониженном давлении, образовавшийся неочищенный остаток перемешивали в гексане, и полученное твердое вещество было отфильтровано и высушено в вакууме. Вес: 1.3 г; Выход по веществу: 57.7%. H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.35 (5Н, s), 5.194-5.058 (3Н, m), 4.506-4.3 (1H, m), 4.19-4.11 (2H, m), 3.98-3.78 (2H, m), 3.15-3.00 (1H, m), 2.9-2.7 (2H, m), 2.6-2.2 (3Н, m), 2.0-1.8 (2H, m), 1.741.5 (2H, m), 1.26 (3Н, s), 1.2 (3Н, m), 0.85 (3Н, s); Масс.: [M+1]417 (10%), [M+Na]439 (100%).
Стадия 2: синтез этил 1-((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутанкарбонил)пиперидин-4-карбоксилата:
К раствору этил 1-((1R,3S)-3-(бензилоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбонил)пиперидин-4-карбоксилата (Стадия 1, 1.30 г) в этилацетате (50 мл) был осторожно добавлен палладий на угле (100 мг) в атмосфере аргона. Затем реакционная смесь перемешивалась всю ночь в присутствии водорода. По завершении реакции (по данным ТСХ) была разбавлена этилацетатом, отфильтрована на целите, и промыта этилацетатом. Объединенные органические экстракты были сконцентрированы при пониженном давлении для получения сырого продукта, который без дальнейшей очистки и анализа был использован для следующей стадии.
Примеры
Пример 1: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты:
2
2
4
3
1
-
-1
АсО (около 0.93 мл, 9.87 ммоль) был добавлен к перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (бетулиновой кислоты, около 0.3 г, 0.657 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (около 0.167 г, 1.32 ммоль) в пиридине (около 15 мл) при температуре около 0°С. Затем реакционную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и кипятили с обратным холодильником на протяжении около 24 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была налита в ледяную воду, экстрагирована с помощью этил ацетата, промыта водой, рассолом и высушена при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200, элюент 10% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.196 г; Выход по веществу: 59.8%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 4.74 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.50-4.44 (m, 1H), 3.02-2.97 (m, 1H), 3.01-2.12 (m, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.99-1.92 (m, 2H), 1.69 (s, 3H), 1.68-1.57 (m, 6H), 1.56-1.32 (m, 10H), 1.31-1.01 (m, 5H), 0.97, 0.93 (2s, 6H), 0.85 (Brs, 9H); Масс.: [М-1]497 (100%); ИК (KBr, см): 3296, 2945, 1736. 1694, 1464, 1368, 1247, 1196, 1161, 1024, 980, 884,777,543; Интервал плавления: 283.7°С-290.1°С; ВЭЖХ: 97.17%.
Пример 2: получение (1S,3R)-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксилат:
2
3
2
4
3
1
+
-1
2М раствор (COCl) в дихлорметане был добавлен к (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоте (Пример 1, около 0.150 г, 0.301 ммоль) при температуре около 0°С. Реакционную смесь перемешивали при температуре около 15-20°С на протяжении примерно 2 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали в атмосфере азота, смесь растворяли в дихлорметане (3 мл). К этому раствору был медленно добавлен раствор Интермедиата 7 (около 0.140 г, 0.602 ммоль) в дихлорметане и EtN (около 0.2 мл, 0.904 ммоль) при температуре около -5°С. Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном, промыта водой, рассолом и высушена при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 10% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.110 г; Выход по веществу: 51.4%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.38-7.32 (m, 5H), 5.65 (d, 1H, J=10.5 Гц), 5.13 (dd, 2H, J=12.3, 19.2 Гц), 4.72 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.51-4.42 (m, 1H), 4.12 (q, 1H, J=9.0 Гц), 3.16-3.13 (m, 1H), 2.72-2.68 (m, 1H), 2.52-2.41 (m, 1H), 2.38-2.29 (m, 1H), 2.04 (s, 3H), 1.95-1.88 (m, 2H), 1.77-1.48 (m, 14H), 1.46-1.32 (m, 7H), 1.31 (s, 3H), 1.29-1.22 (m, 3H), 1.18-1.13 (m, 1H), 0.95 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.85-0.82 (m, 12H); Масс.: [М+1]714 (100%); ИК (KBr, см): 3406, 2950, 1734, 1664, 1456, 1369, 1247, 1172, 1079, 1023, 979, 884, 750, 698; Интервал плавления: 113.3°С-119.8°С; ВЭЖХ: 93.86%.
Пример 3: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты:
2
4
3
1
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (бетулиновой кислоты, около 0.1 г, 0.22 ммоль) в смеси тетрагидрофуран:толуол (около 6 мл) были добавлены (1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновый 2,4,6-трихлорбензойный ангидрид (Интермедиат 10, около 0.955 г, 2.20 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (0.054 г, 0.44 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником на протяжении около 12 часов. Растворитель выпаривали, после чего было добавлен сухой пиридин (около 6 мл), и смесь нагревали с обратным холодильником на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном, промыта водой, высушена с помощью NaSO и сконцентрирована при пониженном давлении. Полученный сырой продукт был очищен хроматографической колонкой с силикагелем (100-200 меш, элюент: 5% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения белого цвета. Вес: 0.050 г; Выход по веществу: 34.2%; Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 4.74 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.47-4.43 (m, 1H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.77-2.64 (m, 2H), 2.58-2.54 (m, 1H), 2.29-2.24 (m, 2H), 2.03-1.94 (m, 3H), 1.69 (s, 5H), 1.64-1.50 (m, 9H), 1.44 (s, 12 H), 1.38-1.21 (m, 8H), 1.00 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.84, 0.83 (2s, 9H), 0.80-0.77 (m, 1H); Масс.: [M+Na]689 (100%); ИК (KBr, см): 2937, 2344, 1733, 1698, 1464, 1376, 1237,1153, 1107,982, 882; Интервал плавления: 222.7-223.6°С; ВЭЖХ: 95.04% при комнатной температуре 17.45 минут.
Пример 4: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1R,3S)-3-карбокси-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты:
2
4
3
1
+
-1
Раствор (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (Пример 3, около 0.160 г, 0.239 ммоль) в 2М HCl в диоксане (10 мл) перемешивали при комнатной температуре на протяжении около 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом и промыта водой. Органический слой высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Полученный сырой продукт был очищен хроматографической колонкой с силикагелем (100-200 меш, элюент: 20% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения белого цвета. Вес: 0.086 г; Выход по веществу: 59.0%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 4.74 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.47-4.43 (m, 1H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.87-2.74 (m, 2H), 2.63-2.51 (m, 1H), 2.31-2.24 (m, 2H), 2.19-1.90 (m, 3Н), 1.69 (s, 3H), 1.78-1.68 (m, 5H), 1.52-1.41 (m, 12H), 1.29-1.02 (m, 9H), 0.97 (s, 3Н), 0.93 (s, 3Н), 0.85 (s, 9H); Масс.: [M+Na]633 (100%); ИК (KBr, см): 3427, 2951, 1730, 1706, 1698, 1456, 1376, 1242, 1190, 1107, 1020, 885; Интервал плавления: 282.5-289.3°С; ВЭЖХ: 92.2% при комнатной температуре 8.76 минут.
Пример 5: получение (1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
2
4
3
1
+
+
-1
К раствору (1S,3R)-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата (Пример 2, около 0.140 г, 0.196 ммоль) в смеси метанол: тетрагидрофуран (2:1) (6 мл) при 0°С был добавлен 2N NaOH (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении 6 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали, и смесь подкисляли с помощью 2N HCl, водный слой был экстрагирован с помощью этил ацетата и высушен при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 50% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения белого цвета. Вес: 0.105 г: Выход по веществу: 92%. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.64 (d, 1H, J=7.8 Гц), 4.72 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.15 (q, 1H, J=9.3 Гц), 3.18 (dd, 1H, J=5.1, 10.8 Гц), 3.14-3.08 (m, 1H), 2.71-2.64 (m, 1H), 2.52-2.41 (m, 1H), 2.40-2.28 (m, 1H), 2.10-1.88 (m, 4H), 1.78-1.64 (m, 9H), 1.62-1.51 (m, 3Н), 1.49-1.41 (m, 4H), 1.39-1.32 (m, 7H), 1.28-1.22 (m, 4H), 0.98 (s, 3Н), 0.97 (s, 3Н), 0.96 (s, 3Н), 0.93 (s, 3Н), 0.81 (s, 3Н), 0.75 (s, 3Н); Масс.: [М+1]582 (10%), [M+Na]604 (100%); ИК (KBr, см): 3454, 3407, 2949, 2869, 1716, 1709, 1642, 1459, 1243, 1191, 1009, 885, 787; Интервал плавления: 174.6°С-187.0°С; ВЭЖХ: 90.33%.
Пример 6: получение (1R,2S,3aR,5aR,5bR,7aS,10R,12aR,12bR)-2-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-3,3,5а,5b,12b-пентаметил-10-(проп-1-ен-2-ил)икосагидродициклопента[а,i]фенантрен-1,7а-дикарбоновой кислоты:
2
4
3
1
+
К перемешиваемому раствору цеанотовой кислоты (около 0.22 ммоль) в сухом пиридине (около 6 мл) были добавлены диметилянтарный ангидрид (около 3.30 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (0.44 ммоль), и содержимое нагревали с обратным холодильником на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой. Органический слой был высушен с помощью NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Полученный сырой продукт был очищен хроматографической колонкой с силикагелем (100-200 меш, элюент: 5% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения белого цвета. Вес: 0.050 г: Выход по веществу: 34.2%. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.08 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.48 (s, 1H), 2.92-2.87 (m, 1H), 0.9-1.9 (m, 44H); [М+Na]637.40 (100%).
Пример 7: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
3
2
4
3
1
+
К (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоте (0.4 г, 0.803 ммоль) в дихлорметане (1 мл) был добавлен 2М раствор (COCl) в дихлорметане (4 мл, 8.03 ммоль) при температуре около 0°С, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении около 3 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали в атмосфере азота, и смесь растворяли в дихлорметане (4 мл), который добавляли к раствору ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(морфолино)метанона (Интермедиат 11, 0.306 г, 1.45 ммоль) в дихлорметане (5 мл) и EtN (0.22 мл, 1.61 ммоль) при температуре около 0°С, и смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, 1N HCl, водой, рассолом и высушена с помощью NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 10% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.380 г: Выход по веществу: 68.4%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.88 (d, 1Н), 4.73 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.51-4.42 (m, 1H), 4.17-4.06 (m, 1H), 3.80-3.41 (m, 7H), 3.17-3.08 (m, 1H), 2.93-2.84 (m, 1H), 2.50-2.29 (m, 2H), 2.05 (s, 3Н), 1.99-1.86 (m, 3H), 1.80-1.02 (m, 22 H), 0.95,0.92 (s, 9H), 0.83 (s, 15H); Масс.: [М+Na]693 (100%); Интервал плавления: 144.8°С -156.2°С.
Пример 8: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
+
+
-1
К раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (Пример 7, 0.380 г, 0.55 ммоль) в смеси метанол: тетрагидрофуран (2:1) (6 мл) был добавлен NaOH (2N, 2 мл) при температуре около 0°С. Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) летучие компоненты были испарены, а водный слой был экстрагирован с помощью этил ацетата и высушен при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 15% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.320 г: Выход по веществу: 89.6%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.88 (d, 1H, J=8.1 Гц), 4.73 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.18-4.07 (m, 1H), 3.80-3.41 (m, 7H), 3.21-3.08 (m, 2H), 2.91-2.83 (m, 1H), 2.50-2.29 (m, 3Н), 1.98-1.87 (m, 2H), 1.80-1.10 (m, 26 H), 0.95-0.92 (s, 12H), 0.99-0.68 (s, 9H); Масс.: [М+1]651 (100%), [M+Na]673 (70%); ИК (KBr, см): 3367, 2856, 2926, 1714, 1634, 1493, 1463, 1375, 1270, 1241, 1115, 1040, 983, 884, 756, 665; Интервал плавления: 262.5°С-2б7.8°С; ВЭЖХ: 90.7%.
Пример 9: получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 8, 0.250 г, 0.385 ммоль) при комнатной температуре были добавлены 2,2-диметилянтарный ангидрид (0.26 мл, 2.31 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (0.094 г, 0.77 ммоль) в пиридине (10 мл). Затем реакционную смесь нагревали с обратным холодильником на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом, органический слой был промыт водой, 1N HCl, водой, рассолом и высушен с помощью NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200, элюент 35% этил ацетат в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.140 г: Выход по веществу: 46.8%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.95 (d, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.52-4.43 (m, 1H), 4.19-4.09 (m, 1H), 3.82-3.40 (m, 8H), 3.17-3.04 (m, 1H), 2.92-1.82 (m, 1H), 2.71-2.29 (m, 6H), 2.00-1.91 (m, 3H), 1.80-1.09 (m, 28H), 1.00-0.77 (m, 21H); Масс.: [M+1]779 (100%), [M+Na]801 (15%); ИК (KBr, см): 3419, 2952, 2867, 1757, 1733, 1729, 1638, 1631, 1460, 1452, 1376, 1243, 1180, 1117, 1067, 978, 879, 775; Интервал плавления: 248.7°С-252.6°С; ВЭЖХ: 87.7%
Пример 10: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
3
2
4
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.4 г, 0.803 ммоль) в дихлорметане (1 мл) был добавлен (COCl) (0.69 мл, 8.03 ммоль) в дихлорметане (4 мл) при температуре около 0°С, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении около 3 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали в атмосфере азота, и смесь растворяли в дихлорметане (4 мл), который добавляли к перемешиваемому раствору ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пиперидин-1-ил)метанона (Интермедиат 12, 0.306 г, 1.45 ммоль) в дихлорметане (5 мл) и EtN (0.22 мл, 1.61 ммоль) при температуре около 0°С. Перемешивание протекало при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, 1N HCl, водой, рассолом и высушена при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 10% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.380 г: Выход по веществу: 68.4%; δ 5.94 (d, 1H, J=7.8 Гц), 4.74 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.54-4.41 (m, 1H), 4.17-4.05 (m, 1H), 3.74-3.62 (m, 1H), 3.37 (brs, 2H), 3.18-3.07 (m, 1H), 2.89 (t, 1H, 7.8 Гц), 2.51-2.40 (m, 1H), 2.39-2.28 (m, 2H), 2.04 (s, 3Н), 2.01-1.84 (m, 2H), 1.81-1.75 (m, 1H), 1.74-1.45 (m, 7H), 1.44-1.21 (m, 15H), 1.21-1.09 (m, 2H), 0.95, 0.93 (s, 9H), 0.83-0.82 (m, 12H); Масс.: [M+Na]714 (100%); ИК (KBr, см): 3372, 2943, 2864, 1736, 1730, 1652, 1636, 1623, 1501, 1459, 1444, 1369, 1248, 1192, 1024, 979, 881, 853.
Пример 11: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (Пример 10, 0.340 г, 0.492 ммоль) в метаноле: тетрагидрофуране (2:1) (6 мл) был добавлен NaOH (2N, 2 мл) при температуре около 0°С.Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) летучие компоненты были испарены, а водный слой был экстрагирован с помощью этил ацетата. Органический слой был промыт водой, рассолом и высушен при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 15% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.190 г: Выход по веществу: 59%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.94 (d, 1H, J=7.8 Гц), 4.73 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.17-4.13 (m, 1H), 3.73-3.59 (m, 1H), 3.54-3.41 (m, 1H), 3.40-3.30 (m, 2H), 3.22-3.04 (m, 2H), 2.93-2.83 (m, 1H), 2.52-2.23 (m, 3Н), 2.00-1.82 (m, 2H), 1.79-1.42 (m, 15H), 1.41-1.11 (m, 17H), 0.96, 0.93 (s, 10Н), 0.82, 0.80 (s, 6H), 0.75 (s, 3H).0.71-0.62 (m, 1H); Масс.: [М+1]649 (100%), [M+Na]671 (60%); ИК (KBr, см): 3450, 2937, 2862. 2587, 2126, 1622, 1459. 1373, 1251, 1192, 1049, 1024, 882, 853; Интервал плавления: 110.0°С-116.3°С; ВЭЖХ: 97.2%.
Пример 12: получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 11, 0.110 г, 1.697 ммоль) были добавлены 2,2-диметилянтарный ангидрид (0.2 мл, 1.697 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (0.044 г, 0.338 ммоль) в пиридине (5 мл) при комнатной температуре. Затем реакционную смесь нагревали с обратным холодильником на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом, промыта водой, 1N HCl, водой, рассолом и высушена с помощью NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 15% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.080 г: Выход по веществу: 61%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6.01 (d, 1H, J=8.4 Гц), 4.72 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.53-4.43 (m, 1H), 4.16-4.08 (m, 1H), 3.71-3.62 (m, 2H), 3.54-3.35 (m, 3H), 3.18-3.06 (m, 1H), 2.93-2.87 (m, 1H), 2.66 (d, m,J=15.9 Гц), 2.56 (d, 1H,J=15.9 Гц), 2.50-2.27 (m, 2H), 1.99-1.88 (m, 2H), 1.80-1.00 (m, 46H), 0.94, 0.92, 0.83 (s, 12H); Масс.: [М+1]777 (100%), [M+Na]799 (80%); ИК (KBr, см): 3411, 2944, 2867, 1733, 1730, 1625, 1467, 1445, 1368, 1253, 1220, 1192, 1022, 977, 884, 767; Интервал плавления: 139.5°С-141.5°С; ВЭЖХ: 96.7%.
Пример 13: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
3
2
4
3
1
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.3 г, 0.602 ммоль) в дихлорметане (1 мл) был добавлен раствор (COCl) (0.52 мл, 6.02 ммоль) в дихлорметане (4 мл) при температуре около 0°С, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении около 3 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали в атмосфере азота, и смесь растворяли в дихлорметане (4 мл), который добавляли к перемешиваемому раствору ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пирролидин-1-ил)метанона (Интермедиат 13, 0.288 г, 1.023 ммоль) в дихлорметане (5 мл) и EtN (0.16 мл, 1.204 ммоль) при температуре около 0°С. Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, 1N HCl, водой, рассолом и высушена при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 20% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.230 г; Выход по веществу: 56.5%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6.38 (d, 1H, J=8.4 Гц), 4.73 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.50-4.42 (m, 1H), 4.13-4.02 (m, 1H), 3.56-3.28 (m, 5H), 3.18-3.07 (m, 1H), 2.79 (t, 1H, J=7.2 Гц), 2.55-2.33 (m, 2H), 2.27-2.18 (m, 1H), 2.04 (s, 3H), 2.00-1.74 (m, 8H), 1.72-1.10 (m, 20H), 0.95, 0.92, 0.88, 0.83 (s, 22H); Масс.: [M+Na]714 (100%); ИК (KBr, см): 3372, 2943. 2864, 1736, 1730, 1652, 1636, 1623, 1501, 1459, 1444, 1369, 1248, 1192, 1024, 979, 881, 853; Интервал плавления: 125.4°С-135.5°С.
Пример 14: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (Пример 13, 0.230 г, 0.340 ммоль) в смеси метанол: тетрагидрофуран (2:1) (9 мл) был добавлен NaOH (2N, 3 мл) при температуре около 0°С, и смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) летучие компоненты были испарены, а водный слой был экстрагирован с помощью этил ацетата. Органический слой был промыт водой, рассолом и высушен при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 15% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.150 г: Выход по веществу: 69.5%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6.39 (d, 1H, J=8.4 Гц), 4.73 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.13-4.03 (m, 1H), 3.58-3.28 (m, 4H), 3.21-3.07 (m, 2H), 2.79 (t, 1H, J=7.2 Гц), 2.57-2.33 (m, 2H), 2.27-2.18 (m, 1H), 2.04-1.72 (m, 8H), 1.70-1.10 (m, 23H), 0.95, 0.92, 0.88. 0.83, 0.80, 0.75 (s, 21H); Масс.: [М+1]635 (100%), [M+Na]657 (90%); ИК (KBr, см): 3489, 2947, 2869, 1637, 1615, 1441, 1376, 1357, 1250, 1194, 1050, 881, 717; Интервал плавления: 172.4°С-173.8°С; ВЭЖХ: 96.79%.
Пример 15: получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
-1
+
+
К перемешиваемому, раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 14, 0.15 г) в сухом пиридине (5 мл) был добавлен диметил амид янтарной кислоты (0,302 г), а затем 4-диметиламинопиридин (0.057 г). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение около 20 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой и рассолом. Объединенные органические слои сушили при помощи NaSO и концентрировали при пониженном давлении для получения сырого полутвердого титульного соединения. Сырое соединение было очищено хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 100-200 меш и смесей гексана и этил ацетата в качестве подвижной фазы. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6.42 (1H, d, J=8.1 Гц), 4.72 (1Н, s), 4.5787 (1H, s), 4.51 (1H, m), 4.1 (1H, m), 3.42-3.5 (3H, m), 3.3-3.4 (1H, m), 3.08-3.15 (1H, m), 2.8 (1H, m), 2.2-2.7 (7H, m), 1.8-2.0 (11H, m), 1.2-1.78 (24H, m), 0.95 (6H, m), 0.8 (10Н, m); ИК (KBr, см): 3246, 2950, 2873, 2381, 1725, 1620, 1459, 1193, 1154, 909, 722; Масс.: [M+H]763 (10%), 785 [M+Na]; Интервал плавления: 110-114°С.
Пример 16: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
2
4
3
1
+
+
-1
К раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.270 г, 0.542 ммоль) в дихлорметане (1 мл) был добавлен 2М раствор (COCl) в дихлорметане (2.71 мл, 5.42 ммоль) при температуре около 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении около 3 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали в атмосфере азота, и смесь растворяли в дихлорметане (4 мл), который добавляли к раствору ((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(морфолино)метанона (Интермедиат 14, 0.172 г, 0.0813 ммоль) в дихлорметане при 0°С. Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, 1N HCl, водой, рассолом и высушена при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 15% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.310 г: Выход по веществу: 82%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.83 (d, 1H, J=7.8 Гц), 4.72 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.51-4.40 (m, 1H), 4.19-4.08 (m, 1H), 3.81-3.40 (m, 8H), 3.18-3.05 (m, 1H), 2.90-2.82 (m, 1H), 2.54-2.21 (m, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.99-1.83 (m, 2H), 1.80-1.12 (m, 27H), 1.08-1.70 (s, 18H); Масс.: [M+1]693 (15%), [M+Na]715 (28%); ИК (KBr, см): 3388, 2954, 2867, 1716, 1659, 1633, 1524, 1449, 1366, 1271, 1235, 1119, 1038, 980, 892; Интервал плавления: 71.6°С-78.9°С.
Пример 17: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (Пример 16, 0.300 г, 0.43 ммоль) в смеси метанол: тетрагидрофуран (2:1) (15 мл) был добавлен 2N NaOH (5 мл) при температуре около 0°С. Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) летучие компоненты были испарены, а водный слой был экстрагирован с помощью этил ацетата и высушен при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 15% этил ацетата в гексане) для получения твердого целевого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.230 г: Выход по веществу: 81.8%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.83 (d, 1H, J=7.8 Гц), 4.72 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.18-4.07 (m, 1H), 3.80-3.41 (m, 8H), 3.22-3.05 (m, 2H), 2.86 (t, 1H, J=8.1 Гц), 2.52-2.23 (m, 3Н), 1.99-1.87 (m, 2H), 1.79-1.11 (m, 28H), 0.93, 0.89, 0.81, 0.74 (s, 18H); Масс.: [М+1]673 (100); ИК (KBr, см): 3419, 2951, 2864, 1624, 1527, 1459, 1374, 1271, 1249, 1112, 1068, 1044, 875, 861; Интервал плавления: 213.5°С-216.5°С; ВЭЖХ: 95.6%.
Пример 18: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1S,3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты:
К перемешиваемому раствору (1S,3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (Интермедиат 15, 1.5 г) в тетрагидрофуране (10 мл) был добавлен диизопропилэтиламин (2.215 г) в атмосфере азота при температуре около 0°С. Затем был добавлен 2,4,6-трихлорбензоил хлорид (1.346 г). Реакция протекала при перемешивании на протяжении около 3 часов. По завершении реакции (образования ангидрида), проходившей под контролем методом ТСХ, реакционная смесь была сконцентрирована при пониженном давлении и использована непосредственно для следующей реакции.
2
4
3
1
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (1.3 г) в пиридине (10 мл) был добавлен 4-диметиламинопиридин (0.57 г), а затем сырая реакционная смесь (образования ангидрида). Реакционную смесь перемешивали нагревании с обратным холодильником на протяжении около 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) смесь была охлаждена до комнатной температуры, разбавлена этил ацетатом, промыта разбавленным HCl, водой, а затем рассолом, высушена при помощи NaSO и сконцентрирована при пониженном давлении. Сырая реакционная смесь была очищена хроматографической колонкой с использованием смесей гексана и этил ацетата в качестве подвижной фазы для получения целевого соединения (300 мг, 15% выход по веществу). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.37-7.33 (5Н, m), 5.16 (2Н, m), 4.73 (1H, s), 4.61 (1H, s), 4.45-4.36 (1H, m), 3.65-3.6 (1H, m), 3.1-2.90 (1H, m), 2.85-2.6 (3H, m), 2.4 (1H, m), 2.3-1.9 (5Н, m), 1.8 -1.3 (17H, m), 1.26 (4H, m), 1.24 (3H, s), 1.22 (2Н, m), 1.16 (3H, s), 1.14 (3H, s), 1.00 (2Н, m). 0.8 (6H, s); Масс.: [M+Na]723 (15%); ИК (KBr, см): 3427, 2953, 17330, 1730, 1459, 1376, 1277, 1236, 1187, 1107, 1034, 940, 882.
Пример 19: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1S,3R)-3-карбокси-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты:
3
3
2
3
1
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1S,3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (Пример 18, 0.25 г) в сухом дихлорметане (10 мл) были добавлены EtN (5.77 мл) и EtSiH (0.057 г) при температуре около 0°С. Затем был добавлен Pd(OAc) (0.005 г) в атмосфере азота, и реакционную смесь всю ночь перемешивали при нагревании с обратным холодильником. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном, сконцентрирована при пониженном давлении и очищена хроматографической колонкой для получения целевого соединения (80 мг, 36.86% Выход по веществу). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 4.73 (1H, s), 4.54 (1H, s), 4.4-4.36 (1H, m), 3.0-2.90 (1H, m), 2.80-2.65 (2Н, m), 2.6 (2Н, m), 2.3-2.1 (3H, m), 2.0-1.88 (4H, m), 1.64 (5Н, m), 1.61 (2Н, m), 1.6-1.4 (4H, m), 1.39-1.3 (4H, m), 1.32 (6H, s), 1.3-1.02 (4H, m), 1.00 (3H, s), 0.91 (3H, s), 0.89 (3H, s), 0.809 (3H, s), 0.790 (3H, s), 0.751 (3H, s); Масс.: [M+Na]633 (75%); ИК (KBr, см): 3400, 2949, 1732, 1703, 1459, 1389, 1364, 1264, 1211, 1139, 1126, 1106, 1020, 942, 889. Интервал плавления: 308-310°С.
Пример 20: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-морфолинометил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.8 г, 1.6 ммоль) (приготовлен по описанию в J.Med.Chem. 2009. 52, 3248-3258) в 50 мл дихлорметана был добавлен оксалилхлорид (2 мл, 15.87 ммоль). Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 6 часов, завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была сконцентрирована при пониженном давлении, а остаток помещен в дихлорметан (15 мл), после чего содержался в атмосфере N.
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3S)-3-(морфолинометил)циклопентанамина (0.3 г, 19.8 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен триэтил амин (2 мл, 19.8 ммоль) при температуре около 0°С. Перемешивание длилось около 15 минут, после чего был добавлен вышеприготовленный хлорангидрид. Перемешивание происходило без перерыва при комнатной температуре на протяжении около 8 часов, завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток было очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.5 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.88-0.96 (m, 9H); 1.25-1.39 (m, 11H); 1.43-1.88 (m, 24H); 2.07 (s, 3H); 2.21-2.47 (m, 8H); 2.86-3.10 (m, 3H); 3.15-3.72 (m, 7H); 4.60 (s, 1H); 4.74 (s, 1H); ES Масс.: 665 [М+1] (100%).
Пример 21: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-пентаметил-3а-((1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)-икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.8 г, 1.6 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен оксалилхлорид (2 мл, 15.87 ммоль) при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была сконцентрирована при пониженном давлении, а остаток был помещен в дихлорметан (15 мл), после чего содержался в атмосфере N.
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енамина (0.3 г, 19.8 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен триэтил амин (2 мл, 19.8 ммоль) при температуре около 0°С. Перемешивание происходило на протяжении около 15 минут, после чего был добавлен вышеприготовленный хлорангидрид при непрерывном помешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 8 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.5 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.88-0.96 (m, 9H); 1.25-1.39 (m, 11H); 1.43-1.88 (m, 24H); 2.07 (s, 3H); 2.21-2.47 (m, 8H); 2.86-3.10 (m, 3H); 3.15-3.72 (m, 7H); 4.60 (s, 1H); 4.74 (s, 1H); 5.52-5.55 (m, 1H); 5.69-5.70 (m, 1H); 5.72-5.91 (m, 1H); ES Масс.: 622 [M+Na] 645 (100%).
Пример 22: получение ((1R,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-ил)(3-(3-изопропил-5-метил-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)метанона:
2
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.8 г, 1.6 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен оксалилхлорид (2 мл, 15.87 ммоль) при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была сконцентрирована при пониженном давлении, остаток был помещен в дихлорметан (15 мл), после чего содержался в атмосфере N.
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору 3-(3-изопропил-5-метил-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)-8-азабицикло[3.2.1]октана (0.3 г, 19.8 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен триэтил амин (2 мл, 19.8 ммоль) при температуре около 0°С. Перемешивание происходило на протяжении около 15 минут, после чего был добавлен вышеприготовленный хлорангидрид при непрерывном помешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 8 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.5 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.76-0.99 (m, 16H); 1.25-1.85 (m, 35H); 2.03-2.28 (m, 6H); 2.47 (s, 3Н); 2.86-3.10 (m, 3Н); 3.18 (s, 1H); 4.60 (s, 1H); 4.74 (s, 1H); ES Масс.: 715 (100%), [M+1].
Пример 23: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-N-((1R,3S)-3-(морфолинометил)циклопентил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-(морфолинометил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Пример 20, 0.22 г) в метаноле:тетрагидрофуране (8:8 мл), и содержимое охлаждено до 0°С. Затем был добавлен едкий натр (0.05 г в 4 мл воды), и содержимое перемешивали на протяжении около 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была выпарена при пониженном давлении, остаток был помещен в воду и экстрагирован с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.14 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.88-0.96 (m, 9Н); 1.25-1.39 (m, 11H); 1.43-1.88 (m, 24H) 2.21-2.47 (m, 8H); 2.86-3.10 (m, 3Н); 3.15-3.72 (m, 7H); 4.60 (s, 1H); 4.74 (s, 1H); ES Масс.: 622 (100%), [M+Na] 645; ВЭЖХ: 98.6%.
Пример 24: получение 2,2-диметил-4-оксо-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-(морфолинометил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)бутановой кислоты:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-(морфолинометил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (Пример 23, 0.15 г, 0.24 ммоль) в пиридине (5 мл) были добавлены диметил амино пиридин (0.32 г, 0.48 ммоль) и 3,3-диметилдигидрофуран-2,5-дион (1.3 мл). Содержимое нагревали с обратным холодильником на протяжении около 16 часов, завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом (30 мл). Органический слой был промыт 5% водным раствором HCl, водой, а затем рассолом, высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.1 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.95-1.16 (m, 19H); 1.23-1.78 (m, 23H); 2.15-2.59 (m, 1H); 2.77-3.58 (m, 11H); 4.33-4.70 (m, 4H); 5.58-5.60 (s, 1H); 5.78-5.80 (s, 1H); 7.44-7.47 (s, 1H); ES Масс.: [М+1] 750 (100%); ВЭЖХ: 98.08%.
Пример 25: получение ((1R,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-ил)(3-(3-изопропил-5-метил-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)метанона:
2
4
3
1
(1R,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-(3-(3-изопропил-5-метил-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Пример 22, 0.2 г) в смеси метанол: тетрагидрофуран (8:8 мл), и содержимое' было охлаждено до 0°С. Затем был добавлен едкий натр (0.05 г в 4 мл воды), и содержимое перемешивали на протяжении около 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была выпарена при пониженном давлении, остаток был помещен в воду и экстрагирован дихлорметаном. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.14 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.76-0.99 (m, 16H); 1.25-1.85 (m, 35H); 2.03-2.28 (m, 6H); 2.47 (s, 3H); 2.86-3.10 (m, 3H); 3.18 (s, 1H); 4.60 (s, 1H); 4.74 (s, 1H); ES Масс.: [М+] 672 (100%), [М+1] 673; ВЭЖХ: 95.5%.
Пример 26: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-N-((1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-енилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Пример 21,0.22 г) в смеси метанол: тетрагидрофуран (8:8 мл), и содержимое было охлаждено до 0°С. Затем был добавлен едкий натр (0.05 г в 4 мл воды), и содержимое перемешивали на протяжении около 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была выпарена при пониженном давлении, остаток помещен в воду и экстрагирован дихлорметаном. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.14 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.88-0.96 (m, 9H); 1.25-1.39 (m, 11H); 1.43-1.88 (m, 24H); 2.21-2.47 (m, 8H); 2.86-3.10 (m, 3Н); 3.15-3.72 (m, 7H); 4.60 (s, 1H); 4.74 (s, 1H); 5.52-5.55 (m, 1H); 5.69-5.70 (m, 1H); 5.72-5.91 (m, 1H); ES Масс.: 620 (100%), [M+1] 621; ВЭЖХ: 96.98%.
Пример 27: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-(гидроксиметил)циклопент-2-енилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.8 г, 1.6 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен оксалилхлорид (1.02 мл, 8.02 ммоль) при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была сконцентрирована при пониженном давлении, остаток был помещен в дихлорметан (15 мл), после чего содержался в атмосфере N.
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору ((1R,4S)-4-аминоциклопент-2-енил)метанола (0.22 г, 1.92 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен триэтил амин (2 мл, 19.8 ммоль) при температуре около 0°С. Перемешивание происходило на протяжении около 15 минут, после чего был добавлен вышеприготовленный хлорангидрид при непрерывном помешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 8 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.56 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.88-0.96 (m, 9H); 1.25-1.39 (m, 11H); 1.43-1.88 (m, 14H); 2.07 (s, 3H); 2.21-2.47 (m, 8H); 2.86-3.10 (m, 3H); 3.15-3.72 (m, 7H); 4.60 (s, 1H); 4.74 (s, 1H); 5.52-5.55 (m, 1H); 5.69-5.70 (m, 1H); 5.72-5.91 (m. 1H); ES Масс.: 593 [M+Na] 616 (100%).
Пример 28: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-N-(4-(гидроксиметил)циклопент-2-енил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-(гидроксиметил)циклопент-2-енилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Пример 27, 0.22 г) в метаноле: тетрагидрофуране (8:8 мл), и содержимое было охлаждено до 0°С. Затем был добавлен едкий натр (0.05 г в 4 мл воды), и содержимое перемешивали на протяжении около 6 hours при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была выпарена при пониженном давлении, остаток помещен в воду и экстрагирован дихлорметаном. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.14 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.76-0.99 (m, 16H); 1.25-1.85 (m, 35H); 2.03-2.28 (m, 6H); 2.47 (s, 3H); 2.86-3.10 (m, 3H); 3.18 (s, 1H); 4.60 (s, 1H); 4.74 (s, 1H); ES Масс.: 551 (100%), [M+1] 551; ВЭЖХ: 96.94%.
Пример 29: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2S,3R)-4-((3S,4aS,8aS)-3-(трет-бутилкарбамоил)октагидроизохинолин-2(1Н)-ил)-3-гидрокси-1-фенилбутан-2-илкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.5 г, 1.0 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен оксалилхлорид (1 мл, 7.93 ммоль) при комнатной температуре, завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была сконцентрирована при пониженном давлении, остаток помещен в дихлорметан (15 мл), после чего содержался в атмосфере N.
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (3S,4aS,8aS)-2-((2R,3S)-3-амино-2-гидрокси-4-фенилбутил)-N-трет-бутилдекагидроизохинолин-3-карбоксамида (0.44 г, 1.1 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен триэтил амин (0.4 мл, 3.01 ммоль) при температуре около 0°С. Перемешивание проходило на протяжении около 15 минут, после чего был добавлен вышеприготовленный хлорангидрид при непрерывном помешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 8 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.68 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19H); 1.18-1.21 (m, 8H); 1.25-1.41 (m, 12H); 1.49-1.62 (m, 8H); 1.65-1.82 (m, 10Н); 1.85-1.98 (m, 4H); 2.01 (s, 3H); 2.56-2.69 (m, 2H); 2.88-3.06 (m, 3H); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.25-4.70 (m, 4H); 5.78 (s, 1H); 6.12-6.15 (d, J=9 Гц, 1H); 7.19-7.29 (m, 6H); ES Масс.: 881 (100%), [M+1] 882.
Пример 30: получение (3S,4aS,8aS)-N-трет-бутил-2-((2R,3S)-2-гидрокси-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-4-фенилбутил)декагидроизохинолин-3-карбоксамида:
2
4
3
1
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2S,3R)-4-((3S,4aS,8aS)-3-(трет-бутилкарбамоил)октагидроизохинолин-2(1Н)-ил)-3-гидрокси-1-фенилбутан-2-илкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Пример 29, 0.5 г) в смеси метанол:тетрагидрофуран (8:8 мл), и содержимое было охлаждено до 0°С. Затем был добавлен едкий натр (0.12 г в 4 мл воды), и содержимое перемешивали на протяжении около 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была выпарена при пониженном давлении, остаток был помещен в воду и экстрагирован дихлорметаном. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения, (0.34 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19H); 1.18-1.21 (m, 8H); 1.25-1.41 (m, 12H); 1.49-1.62 (m, 8H); 1.65-1.82 (m, 10Н); 1.85-1.98 (m, 4H); 2.56-2.69 (m. 2H); 2.88-3.06 (m, 3H); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.25-4.70 (m, 4H); 5.78 (s, 1H); 6.12-6.15 (d, J=9 Гц, 1H); 7.19-7.29 (m, 6H); ES Масс.: 839 (100%), [M+1] 840.
Пример 31: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.5 г, 1.04 ммоль) (приготовлен согласно описанию в J.Med.Chem. 2009. 52, 3248-3258) в 50 мл дихлорметана был добавлен оксалилхлорид (2 мл, 15.87 ммоль). Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 6 часов, завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была сконцентрирована при пониженном давлении, остаток был помещен в дихлорметан (15 мл), после чего содержался в атмосфере N.
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-илокси)метил)циклопентанамина (0.43 г, 1.5 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен триэтил амин (0.3 мл, 3.12 ммоль) при температуре около 0°С. Перемешивание происходило на протяжении около 15 минут, после чего был добавлен вышеприготовленный хлорангидрид при непрерывном помешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 8 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.4 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19H); 1.18-1.21 (m, 8H); 1.25-1.41 (m, 12H); 1.49-1.62 (m, 8H); 1.65-1.82 (m, 10H); 1.85-1.98 (m, 4H); 2.56-2.69 (m, 2H); 2.88-3.06 (m, 3H); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.25-4.70 (m, 4H); 5.78 (s, 1H); 6.12-6.15 (d, J=9 Гц, 1H); 7.19-7.29 (m, 6H); ES Масс.: 753 (100%).
Пример 32: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
(2S,4aR,4bR,6aR,7R,8S,10aR,10bR,12aR)-8-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-1,1,4а,8,10а,10b-гексаметил-7-(2-метилаллил)октадекагидрохризен-2-ил ацетат (Пример 31, 0.5 г) в смеси метанол:тетрагидрофуран (8: 8 мл), и содержимое было охлаждено до 0°С. Затем был добавлен едкий натр (0.12 г в 4 мл воды), и содержимое перемешивали на протяжении около 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была выпарена при пониженном давлении, остаток был помещен в воду и экстрагирован дихлорметаном. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.34 г) белого цвета. Н NMR (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19H); 1.18-1.21 (m, 8H); 1.25-1.41 (m, 12H); 1.49-1.62 (m, 8H); 1.65-1.82 (m, 10Н); 1.85-1.98 (m, 4H); 2.56-2.69 (m, 2Н); 2.88-3.06 (m, 3H); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.25-4.70 (m, 4H); 5.78 (s, 1H); МАСС.: 711(100%).
Пример 33: получение 5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-5-левулиновой кислоты:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 32, 0.24 ммоль) в пиридине (5 мл) были добавлены диметил амино пиридин (0.32 г, 0.48 ммоль) и глутаровый ангидрид (1.3 мл), и содержимое нагревали с обратным холодильником на протяжении около 16 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом (30 мл). Органический слой был промыт 5% водным раствором HCl, водой, а затем концентрированным рассолом, высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.1 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.82-0.95 (m, 17H) 1.13-3.01 (m, 48H); 3.05-3.12 (m, 4H), 3.13-3.54 (m, 2H), 4.18-4.21 (m, 1H), 4.45-4.17 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.72 (s, 1H); 6.28-6.30 (m, 1H), 7.11-7.13 (m, 2H), 7.14-7.22 (m, 1H), 7.24-7.29 (m, 2H); ES Масс.: [М+] 825 (100%); ВЭЖХ: 90%.
Пример 34: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.5 г, 1.04 ммоль) (приготовлен согласно описанию в J.Med.Chem. 2009, 52, 3248-3258) в 50 мл дихлорметана был добавлен оксалилхлорид (2 мл, 15.87 ммоль). Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 6 часов, завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была сконцентрирована при пониженном давлении, остаток был помещен в дихлорметан (15 мл), после чего содержался в атмосфере N.
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентанамина (0.43 г, 1.5 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен триэтил амин (0.3 мл, 3.12 ммоль) при температуре около 0°С. Перемешивание происходило на протяжении около 15 минут, после чего был добавлен вышеприготовленный хлорангидрид при непрерывном помешивании в условиях комнатной температуры на протяжении около 8 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована насыщенным раствором NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.56 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19H); 1.18-1.21 (m, 8H); 1.25-1.41 (m, 12H); 1.49-1.62 (m, 8H); 1.65-1.82 (m, 10Н); 1.85-1.98 (m, 4H); 2.56-2.69 (m, 2H); 2.88-3.06 (m, 3Н); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.25-4.70 (m, 4H); 5.78 (s, 1H); 6.12-6.15 (d, J=9 Гц, 1H); 7.19-7.29 (m, 6H); Масс.: 692 (100%).
Пример 35: получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Пример 34, 0.5 г) в смеси метанол:тетрагидрофуран (8:8 мл), и содержимое было охлаждено до 0°С. Затем был добавлен едкий натр (0.12 г в 4 мл воды), и содержимое перемешивали на протяжении около 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была выпарена при пониженном давлении, остаток был помещен в воду и экстрагирован дихлорметаном. Органический слой был высушен при помощи NaSO и.сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.34 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19H); 1.18-1.21 (m, 8H); 1.25-1.41 (m, 12H); 1.49-1.62 (m, 8H); 1.65-1.82 (m, 10H); 1.85-1.98 (m, 4H); 2.56-2.69 (m, 2H); 2.88-3.06 (m, 3Н); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.25-4.70 (m, 4H); 5.78 (s, 1H); Масс.: 650 (100%).
Пример 36: получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-3-((4-этилпиперазин-1-ил)метил)циклопентил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 35, 0.24 ммоль) в пиридине (5 мл) были добавлены диметил амино пиридин (0.32 г, 0.48 ммоль) и 3,3-диметилдигидрофуран-2,5-дион (1.3 мл), и содержимое нагревают с обратным холодильником на протяжении около 16 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была разбавлена этил ацетатом (30 мл). Органический слой был промыт 5% водным раствором HCl, водой, а затем концентрированным рассолом, высушен при помощи NaSO и сконцентрирован при пониженном давлении. Остаток был очищен хроматографической колонкой с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве подвижной фазы для получения твердого целевого соединения (0.1 г) белого цвета. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.80-0.95 (m, 16H) 1.23-1.90 (m, 41H); 2.03-3.08 (m, 16H), 4.13-4.18 (m, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.72 (s, 1H); 5.61-5.63 (m, 1H); ES Масс.: [M+1] 778 (100%); ВЭЖХ: 78.4%.
Пример 37: получение метил 3-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)пропаноата:
Стадия 1: синтез метил 3-((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)пропаноата:
3
3
3
1
+
-1
К перемешиваемому раствору (1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты (0.3 г, 1.234 ммоль) в дихлорметане (5 мл) были добавлены 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид) (0.284 г, 1.48 ммоль) и гидроксибензотриазол (0.2 г, 1.48 ммоль) при температуре около 0°С. 10 минут спустя были покапельно добавлены метил 3-аминопропаноат гидрохлорид (0.254 г, 2.47 ммоль) и EtN (0.9 мл, 6.17 ммоль) в дихлорметане (5 мл), и реакционную массу перемешивали при комнатной температуре на протяжении около 16 часов. После завершения реакции, проходившей под контролем ТСХ, реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой и насыщенным раствором NaHCO, а затем водным раствором 1N HCl, водой и концентрированным рассолом. Органический слой концентрировали при пониженном давлении, полученный сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 70% этил ацетата в гексане) для получения твердого титульного соединения. Вес: 0.336 г; Выход по веществу: 88.9%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.89 (brs, 1H), 4.79 (d, 1H, J=8.1 Гц), 3.88-3.73 (m, 1H), 3.70 (s, 3Н), 3.59-3.42 (m, 2H), 2.54-2.51 (m, 2H), 2.39-2.20 (m, 2H), 2.11-1.99 (m, 1H), 1.43 (s, 9H), 1.26 (s, 3H), 0.87 (s, 3Н); Масс.: [М+Nа]351 (100%); ИК (KBr, см): 3359, 3319, 2973, 1737, 1696, 1667, 1539, 1454, 1366, 1271, 1254, 1176, 1051, 1024, 782, 683; Интервал плавления: 98.6°С-100.2°С.
Стадия 2: синтез метил 3-((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)пропаноата:
3
Раствор метил 3-((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламино)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)пропаноата (Стадия 1, 0.336 г, 1.024 ммоль) в смеси трифторуксусная кислота:дихлорметан (1:4) (4 мл) перемешивали при 0°С-комнатной температуре на протяжении около 1 часа. По окончании реакции растворитель выпаривали, и сырой продукт растворяли в дихлорметане и подщелачивали с помощью EtN (0.87 мл, 6.29 ммоль). После этого полученный раствор был использован для следующей реакции как есть. Вес: 0.233 г (на основании 100% выхода по веществу, просчитанному и использованному для следующей реакции).
Стадия 3: получение метил 3-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)пропаноата:
2
4
3
1
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (0.25 г, 0.502 ммоль) (приготовлен согласно описанию в J.Med.Chem. 2009. 52, 3248-3258) в дихлорметане (1 мл) был добавлен оксалилхлорид (2 M) в дихлорметане (2.5 мл, 5.02 ммоль). Перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении около 3 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. После этого растворитель выпаривали в атмосфере азота, смесь растворяли в дихлорметане (4 мл), который добавляли к раствору метил 3-((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидр) пропаноата (Стадия 2) в дихлорметане (5 мл) при температуре около 0°С. После этого перемешивание происходило при комнатной температуре на протяжении 16 часов. По завершении реакции, проходившей под контролем ТСХ, реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, 1N HCl, водой, рассолом и высушена при помощи NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 25% этил ацетата в гексане) для получения твердого соединения грязно-белого цвета. Вес: 0.150 г: Выход по веществу: 35.2%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.99 (d, 1H. J=8.1 Гц), 5.90 (t, 1H, J=6.0 Гц), 4.73 (s, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.50-4.41 (m, 1H), 4.14-4.04 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.59-3.43 (m, 3H), 3.17-3.08 (m, 1H), 2.59-2.22 (m, 6H), 2.19-2.06 (m, 1H), 2.04 (s, 3H), 1.99-1.87 (m, 2H), 1.80-1.12 (m, 25H), 0.96-0.73 (s, 18H); Mass: [M+Na]731 (100%); ИК (KBr, см): 3375, 2952, 1736, 1656, 1516, 1439, 1369, 1247, 1178, 1074, 1027, 980, 885; Интервал плавления: 87.9°С-90.7°С.
Пример 38: получение 3-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)пропановой кислоты:
1
+
+
-1
6
К перемешиваемому раствору метил 3-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)пропаноата (Пример 37, 0,150 г., 0,211 ммоль) в смеси метанол:тетрагидрофуран (2:1) (7,5 мл), добавляли 2N NaOH (2,5 мл) при температуре примерно 0°С. Перемешивалась смесь при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) было произведено выпаривание летучих компонентов. Реакционная смесь была подкислена 1N HCl, отфильтрована, промыта водой и высушена в вакууме для получения целевого соединения в виде беловатого сухого вещества. Вес: 0,030 г.: Выход: 21,7%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, ДМСО-d): δ 7,61 (brm, 1H), 7,54 (d, 1H, J=7,2 Гц), 4,63 (s, 1H), 4,52 (s, 1H), 2,90-2,80 (m, 1H), 3,20-3,08 (m, 3H), 3,00-2,89 (m, 3H), 2,68-2,54 (m, 2H), 2,40-2,18 (m, 5H), 1,90-1,74 (m, 2H), 1,70-1,00 (m, 28H), 0,90, 0,86, 0,84, 0,75, 0,72, 0,64 (s, 15H); Масс.: [М+1]653 (2%), [M+Na]675 (100%); ИК (KBr, см): 3408, 2947, 2868, 1724, 1652, 1636, 1523, 1376, 1250, 1194, 1108, 1074, 1033, 983, 881, 730; Интервал плавления: 188,6°С-200,1°С; ВЭЖХ: 99,35%.
Пример 39: Получение (S)-метил 2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-3-метилбутаноата:
Стадия 1: Синтез (S)-метил 2-((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламин)-2,2-диметилцикпобутанкарбоксамидо)-3-метилбутаноата:
3
3
3
1
-1
К перемешиваемому раствору (1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламин)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты (0,350 г., 1,44 ммоль) в дихлорметане (5 мл) были добавлены 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (0,331 г., 1,73 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,234 г, 1,73 ммоль) при температуре около 0°С. Через 10 минут (S)-метил 2-амино-3-метилбутаноата гидрохлорид (0,720, 8,64 ммоль) и EtN (1,2 мл., 6,17 ммоль) в дихлорметане (5 мл) были по капле добавлены, и реакционная масса перемешивалась при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном, промыта водой и насыщенным раствором NaHCO, водным раствором 1N HCl, водой и насыщенным рассолом, органический слой был сконцентрирован под пониженным давлением. Полученный сырой продукт был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем (100-200 меш, элюент 70% EtOAC в гексане) для получения целевого соединения в виде сухого вещества. Вес: 0,440 г; Выход: 85,9%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 5,62 (d, 1H, J=8,4 Гц), 4,77 (d, 1H, J=8,4 Гц), 4,70-4,60 (m, 1H), 4,89-4,71 (m, 1H), 3,72 (s, 3Н), 2,46-2,21 (m, 2H), 2,18-1,99 (m, 1H), 1,70-1,50 (m, 1H), 1,42 (s, 9H), 1,31 (s, 3Н), 0,94-0,90 (s, 9H); Масс.: Сопутствующего массового пика не наблюдалось; ИК (KBr, см): 3345, 3314, 2960, 1753, 1690, 1664, 1529, 1456, 1366, 1271, 1172, 1049, 1028, 986, 873,
Стадия 2: Синтез (S)-метил 2-((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-3-метилбутаноата:
3
Перемешиваемый раствор (S)-метил 2-((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламин)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-3-метилбутаноата (этап 1, 0,430 г., 1,21 ммоль) в смеси трифторуксусная кислота: дихлорметан (1:4) (4 мл) при 0°С-комнатной температуре в течение часа. После завершения реакции растворитель выпаривали, а сырой продукт растворяли в дихлорметане, подщелачивали EtN (1,0 мл, 7,25 ммоль), затем полученный раствор был как таковой незамедлительно использован для другой реакции. Вес: 0,309 г (Основано на выходе 100%, рассчитанном и использованном в следующей реакции).
Стадия 3: получение (S)-метил 2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-3-метилбутаноата:
2
4
3
1
+
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (0,350 г, 0,702 ммоль) (Полученной так, как описано в J.Med.Chem. 2009, 52, 3248-3258) в дихлорметане (1 мл) был добавлен оксалилхлорид (2 М) в дихлорметане (3,51 мл, 0,702 ммоль) при температуре 0°С, и компоненты перемешивались при комнатной температуре в течение примерно 3 часов. Окончание реакции контролировали методом ТСХ. Затем растворитель выпаривали в атмосфере азота, и смесь растворяли в дихлорметане (4 мл), который добавляли к раствору (S)-метил 2-((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-3-метилбутаноата (Стадия 2, 0,27 г) в дихлорметане (5 мл) при температуре 0°С при перемешивании при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водным раствором 1N HCl, водой и рассолом, затем высушена над NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с силикагелем (100-200 меш, элюент 30% EtOAc в гексане) для получения целевого соединения в виде беловатого сухого вещества. Вес: 0,300 г: Выход: 35,2%; H ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 5,87 (d, 1H, J=8,1 Гц), 5,56 (d, 1H, J=8,1 Гц), 4,72 (s, 1H), 4,61 (s, 1H), 4,50-4,40 (m, 1H), 4,18-4,08 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,17-3,07 (m, 1H), 2,53-2,40 (m, 2H), 2,38-2,24 (m, 1H), 2,19-2,04 (m, 1H), 2,03 (s, 3H), 1,99-1,84 (m, 2H), 1,79-1,11 (m, 21H), 1,09-0,74 (m, 32H); Масс.: [М+Na]759 (100%).
Пример 40: Получение (S)-2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-3-метилбутановой кислоты:
1
+
-1
6
К перемешиваемому раствору (S)-метил 2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-3-метилбутаноата (Пример 39, 0,300 г, 0,407 ммоль) в смеси метанол: тетрагидрофуран (2:1) (7,5 мл) добавляли 2N NaOH (2,5 мл) при температуре 0°С с перемешиванием при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) летучий компонент выпаривали, а реакционную смесь подкисляли с помощью 1N HCl, фильтровали, промыли водой и сушили в вакууме для получения целевого соединения в виде беловатого сухого вещества. Вес: 0,180 г: Выход: 64,9%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, ДМСО-d): δ 7,55 (d, 2H, J=6,6 Гц), 4,62 (s, 1H), 4,51 (s, 1H), 4,20-4,11 (m, 1H), 3,91-3,82 (m, 1H), 3,00-2,98 (m, 2H), 2,71-2,56 (m, 1H), 2,48-2,39 (m, 1H), 2,37-2,18 (m, 2H), 1,92-1,76 (m, 2H), 1,69-1,15 (m, 32H), 0,93-0,76 (m, 15H), 0,85 (s, 3H), 0,84 (s, 3Н); Масс.: [M+Na]703 (100); ИК (KBr, см): 3321, 2951, 1713, 1631, 1532, 1460, 1386, 1252, 1169, 1108, 1044, 983, 882; Интервал плавления: 203,9°С-205,0°С; ВЭЖХ: 97,3%.
Пример 41: Получение (S)-метил 2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-4-метилпентаноата:
Стадия 1: Синтез (S)-метил 2-((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламин)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-4-метилпентаноата:
3
3
3
1
+
-1
К перемешиваемому раствору (1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламин)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты (0,350 г, 1,44 ммоль) в дихлорметане (5 мл) были добавлены 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (0,331 г, 1,73 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,234 г, 1,73 ммоль) при температуре 0°С.Через 10 минут (S)-метил 2-амино-4-метилпентаноата гидрохлорид (0,780, 4,32 ммоль) и EtN (1,2 мл, 8,64 ммоль) в дихлорметане (5 мл) были добавлены по капле и реакционная масса была оставлена перемешиваться при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, насыщенным раствором NaHCO, водой, 1N HCl, водой и насыщенным рассолом, и органический слой был сконцентрирован при пониженном давлении. Полученный сырой продукт был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем (100-200 меш, элюент 65% EtOAC в гексане) для получения целевого соединения в виде сухого вещества. Вес: 0,210 г; Выход: 39,4%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 5,56 (d, 1H), 4,75 (d, 1H, J=9 Гц), 4,70-4,60 (m, 1H), 3,88-3,79 (m, 1H), 3,73 (s, 3Н), 2,48-2,25 (m, 2H), 2,14-1,99 (m, 1H), 1,70-1,48 (m, 3Н), 1,43 (s, 9H), 1,32 (s, 3H), 0,95-0,91 (m, 9H); Масс.: [M+Na]393 (100%); ИК (KBr, см): 3344, 2960, 2873, 1743, 1689, 1664, 1531, 1458, 1366, 1271, 1174, 1050, 1028, 873, 827, 744; Интервал плавления: 100,5°С-103,9°С.
Стадия 2: Синтез (S)-метил 2-((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-4-метилпентаноата:
3
Раствор (S)-метил 2-((1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламин)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-4-метилпентаноата (Стадия 1, 0,200 г, 0,54 ммоль) в смеси трифторуксусная кислота: дихлорметан (1:4) (4 мл) перемешивали при температуре 0°С-комнатная температура в течение примерно 1 часа. После завершения реакции растворитель выпаривали, а сырой продукт растворяли в дихлорметане и подщелачивали с помощью EtN (0,5 мл, 3,24 ммоль), затем полученный раствор как таковой был незамедлительно использован в следующей реакции. Вес: 0,145 г (На основе 100% выхода, рассчитанного и использованного в следующей реакции).
Стадия 3: Получение (S)-метил 2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-4-метилпентаноата:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (0,200 г, 0,401 ммоль) (Полученной так, как описано в J.Med.Chem. 2009, 52, 3248-3258) в дихлорметане (1 мл) при температуре 0°С был добавлен оксалилхлорид (2 M) в дихлорметане (2,0 мл, 4,016 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 3 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, затем растворитель выпаривали в атмосфере азота, и смесь растворяли в дихлорметане (4 мл), который добавляли к раствору вышеупомянутого (S)-метил 2-((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутан карбоксамидо)-4-метилпентаноата (Стадия 2, 0,16 г) в дихлорметане (5 мл) при температуре 0°С. Компоненты оставили перемешиваться при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, 1N HCl, водой, рассолом и высушена над NaSO, растворитель выпаривали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с силикагелем (100-200 меш, элюент 25% EtOAc в гексане) для получения целевого соединения в виде беловатого сухого вещества. Вес: 0,195 г: Выход: 64,7%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 5,88 (d, 1Н, J=8,1 Гц), 5,68 (d, 1H, J=8,7 Гц) 4,72 (s, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,50-4.42 (m, 1H), 4,18-4,09 (m, 1H), 3,75 (s, 3Н), 3,17-3,05 (m, 1H), 2,57-2,43 (m, 2H), 2,38-2,29 (m, 1H), 2,20-2,08 (m, 2H), 2,04 (s, 3Н), 1,99-1,88 (m, 2H), 1,79-1,09 (m, 30Н), 0,98-0,78 (m, 24H).
Пример 42: Получение (S)-2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-4-метилпентановой кислоты:
2
4
6
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (S)-метил 2-((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксамидо)-4-метилпентаноата (Пример 41, 0,190 г, 0,253 ммоль) в смеси метанол: тетрагидрофуран (2:1) (7,5 мл) добавляли 2N NaOH (2,5 мл) при температуре 0°С. Смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) летучие компоненты были выпарены, реакционная смесь подкислена с помощью 1N HCl, экстрагирована EtOAc, высушена над NaSO, затем органический слой был сконцентрирован и высушен в вакууме для получения целевого соединения в виде беловатого сухого вещества. Вес: 0,100 г: Выход: 56,7%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, ДМСО-d): δ 7,69 (d, 1H, J=8,1 Гц), 7,54 (d, 1H, J=6,6 Гц), 4,62 (s, 1H), 4,51 (s, 1H), 4,29-4,18 (m, 2H), 3,95-3,84 (m, 1H), 3,01-2,88 (m, 2H), 2,34-2,18 (m, 3Н), 1,91-1,72 (m, 3Н), 1,69-1,10 (m, 31H), 0,96-0,58 (m, 23H); Масс.: [М+1]694 (10%), [M+Na]717 (100%); ИК (KBr, см): 3454, 2950, 1726, 1634, 1523, 1466, 1369, 1266, 1207, 1195, 1157, 1044, 1009, 922, 882, 722; Интервал плавления: 192,4°С-213,8°С; ВЭЖХ: 95,97%.
Пример 43: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
Стадия 1: Синтез трет-бутил (1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамата:
3
3
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламин)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты (0,700 г, 2,88 ммоль) в дихлорметане (20 мл) при температуре около 0°С добавляли 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид(0,660 г, 3,456 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,529 г, 3,456 ммоль), а через 10 минут добавляли по капле пирролидин (0,47 мл, 5,761 ммоль) и EtN (1,42 мл, 14,403 ммоль), и затем реакционную массу оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение примерно 12 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой и насыщенным раствором NaHCO, затем промыта водным раствором 1N HCl, затем водой и насыщенным рассолом. Органический слой концентрировали при пониженном давлении, а полученный остаток сырья перемешивали в гексане. В итоге было получено сухое вещество, которое было отфильтровано и высушено в вакууме. Вес: 0,400 г; Выход: 46,9%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 5,00 (d, 1H, J=7,5 Гц), 3,89-3,77 (m, 1H), 3,57-3,29 (m, 4H), 2,78-2,68 (m, 1H), 2,31-2,22 (m, 2H), 1,98-1,78 (m, 4H), 1,43 (s, 9H), 1,35 (s, 3H), 0,89 (s, 3Н); Масс.:: [M+1] 297 (40%), [M+Na]319 (100%); ИК (KBr, см): 3312, 2977, 2956, 1709, 1621, 1606, 1526, 1442, 1365, 1348, 1283, 1267, 1176, 1106, 1046, 1009, 912, 877; Интервал плавления: 164,8°С-165,5°С.
Стадия 2: Синтез ((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пирролидин-1-ил)метанона:
3
Раствор трет-бутил (1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамата (Стадия 1, 0,400 г, 1,351 ммоль) в смеси трифторуксусная кислота: дихлорметан (1:2) (3 мл) перемешивался при температуре 0°С-комнатная температура в течение примерно 1 часа. После завершения реакции растворитель выпаривали, а сырой продукт растворяли в дихлорметане и подщелачивали с помощью EtN (1,124 мл, 8,108 ммоль). Полученный раствор как таковой был незамедлительно использован в следующей реакции. Вес: 0,264 g (На основе 100% выхода, рассчитанного и использованного в следующей реакции).
Стадия 3: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
4
3
1
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (0,336 г, 0,674 ммоль) (полученному так, как описано в J.Med.Chem. 2009, 52, 3248-3258) в дихлорметане (1 мл) был добавлен оксалилхлорид (0,58 мл, 6,746 ммоль) в дихлорметане (3,15 мл) при температуре 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 3 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, затем растворитель выпаривали в атмосфере азота, и смесь растворяли в дихлорметане (4 мл), который добавляли к упоминавшемуся перемешиваемому раствору ((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пирролидин-1-ил)метанона (Стадия 2, 0,264 г, 1,349 ммоль) при температуре 0°С и оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водным раствором 1N HCl, затем промыта водой и рассолом, и высушена над NaSO, растворитель выпаривали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с силикагелем (100-200 меш, элюент 15% EtOAc в гексане) для получения целевого соединения в виде беловатого сухого вещества. Вес: 0,350 г: Выход: 76,7%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 6,28 (d, 1Н), 4,72 (s, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,51-4,06 (m, 2H), 3,56-3,27 (m, 8H), 3,18-3,08 (m, 1H), 2,91-2,74 (m, 2H), 2,60-2,46 (m, 2H), 2,37-2,20 (m, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,99-1,11 (m, 26H), 1,00-0,75 (s, 18H); Масс.: [M+Na]699 (100%); ИК (KBr, см): 3268, 3077, 2955, 2873, 1734, 1716, 1618, 1549, 1455, 1452, 1371, 1344, 1242, 1180, 1150, 1033, 980, 869; Интервал плавления: 94,9°С-101,2°С.
Пример 44: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (Пример 43,0,350 г, 0,517 ммоль) в Метанол: тетрагидрофуран (2:1) (30 мл) добавляли 2N NaOH (10 мл) при температуре 0°C, и смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) летучий компонент выпаривали, и водный слой экстрагировали с помощью этилацетата, а органический слой промывали водой, рассолом и сушили над NaSO. Затем растворитель выпаривали, и полученный сырой продукт перемешивали в гексане. В итоге таким образом было получено результирующее сухое вещество, которое было отфильтровано и высушено в вакууме для получения титульного соединения. Вес: 0,220 г: Выход: 67%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 6,27 (d, 1H, J=8,1 Гц), 4,72 (s, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,17-4,07 (m, 1H), 3,56-3,11 (m, 4H), 3,19-3,09 (m, 2H), 2,82-2,76 (m, 1H), 2,57-2,43 (m, 1H), 2,39-2,18 (m, 2H), 2,01-1,72 (m, 7H), 1,67 (s, 3H), 1,61-1,11 (m, 22H), 0,96, 0,93, 0,87, 0,81, 0,74 (s, 18H); Масс.: [М+1]635 (5%), [M+Na]657 (100%); ИК (KBr, см): 3390, 3071, 2947,2869, 1617, 1455, 1369, 1341, 1250, 1194, 1168, 1108, 1034, 921, 880; Интервал плавления: 176,3°С-180,9°С; ВЭЖХ: 98,9%.
Пример 45: Получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
+
+
-1
2,2-диметилянтарный ангидрид (0,303 г, 2,365 ммоль) был добавлен к перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пирролидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 44, 0,150 г, 0,236 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (0,057 г, 0,473 ммоль) в пиридине (10 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение примерно 24 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена EtOAc, промыта водным раствором 1N HCl, затем промыта водой и рассолом, и высушена над NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с силикагелем (100-200 меш, элюент 20% EtOAc в гексане) для получения целевого соединения в виде беловатого сухого вещества. Вес: 0,045 г: Выход: 24,4%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 6,33 (d, 1H, J=7,8 Гц), 4,73 (s, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,53-4,46 (m, 1H), 4,16-4,07 (m, 1H), 3,54-3,30 (m, 4H), 3,18-3,08 (m, 1H), 2,82-2,42 (m, 6H), 2,34-2,27 (m, 2H), 2,08-1,78 (m, 8H), 1,78-1,10 (m, 30Н), 098-0,1 (s, 18H); Масс.: [М+1]763 (30%), [M+Na]785 (100%); ИК (KBr, см): 3407, 2951, 2346, 2273, 1726, 1619, 1453, 1192, 1019, 879; ВЭЖХ: 96,0%; Интервал плавления: 134,8°С-145,0°С.
Пример 46: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
Стадия 1: Синтез трет-бутил (1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамата:
3
3
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (1S,3R)-3-(трет-бутоксикарбониламин)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты (0,500 г, 2,057 ммоль) в дихлорметане (20 мл) при температуре 0°С добавляли 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид(0,472 г, 2,469 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (0,378 г, 2,469 ммоль), а через 10 минут добавляли по каплям пиперидин (0,4 мл, 4,115 ммоль) и EtN (1,42 мл, 10,288 ммоль). Реакционная масса была оставлена перемешиваться при комнатной температуре в течение примерно 12 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водой, насыщенным раствором NaHCO, водой, 1N HCl, водой, насыщенным рассолом; и органический слой был сконцентрирован при пониженном давлении. Полученный остаток продукта был перемешан в гексане и в итоге было получено результирующее сухое вещество, которое было отфильтровано и высушено в вакууме с получением титульного соединения. Вес: 0,400 г; Выход: 62,79%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 4,77 (d, 1H, J=8,4 Гц), 3,89-3,78 (m, 1H), 3,77-3,67 (m, 1H), 3,49-3,28 (m, 3H), 2,87-2,76 (m, 1H), 2,40-2,18 (m, 2H), 1,70-1,46 (m, 6H), 1,43 (s, 9H), 1,33 (s, 3H), 0,87 (s, 3H); Масс.:: [M+1]311 (35%), [М+Na]333 (100%); ИК (KBr, см): 3337, 2939, 1712, 1628, 1522, 1456, 1445, 1388, 1353, 1366, 1288, 1264, 1254, 1217, 1172, 1047, 1026, 1013, 976; Интервал плавления: 176,0°С-178,0°С.
Стадия 2: Синтез ((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пиперидин-1-ил)метанона:
3
Раствор трет-бутил (1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамата (Стадия 1, 0,500 г, 1,612 ммоль) в смеси трифторуксусная кислота:дихлорметан (1:2) (3 мл) перемешивали при температуре 0°С-комнатная температура в течение примерно 1 часа. После завершения реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали, и сырой продукт растворяли в дихлорметане и подщелачивали с помощью EtN (1,34 мл, 9,677 ммоль). Затем полученный раствор как таковой был использован в следующей реакции. Вес: 0,338 g (На основе 100% выхода, рассчитанного и использованного в следующей реакции).
Стадия 3: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
4
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (0,410 г, 0,823 ммоль) (Полученному так, как описано в J.Mecd.Chem. 2009, 52, 3248-3258) в дихлорметане (1 мл) было добавлен оксалилхлорид (0,71 мл, 8,232 ммоль) в дихлорметане (3,42 мл) при температуре 0°С. Компоненты перемешивались при комнатной температуре в течение примерно 3 часов, завершение реакции контролировали методом ТСХ. Затем растворитель выпаривали в атмосфере азота, а смесь растворяли в дихлорметане (4 мл), который добавляли к перемешиваемому раствору ((1S,3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил)(пиперидин-1-ил)метанона (Стадия 2, 0,328 г, 1,56 ммоль) при температуре 0°С. Компоненты оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном и промыта водным раствором 1N HCl, затем промыта водой и рассолом и высушена над NaSO. затем растворитель выпаривали, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с силикагелем (сетка 100-200 меш, элюент 15% EtOAc в гексане) для получения целевого соединения в виде беловатого сухого вещества. Вес: 0,400 г; Выход: 71,9%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 5,85 (d, 1H), 4,72 (s, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,50-4,41 (m, 1H), 4,18-4,07 (m, 1H), 3,78-3,67 (m, 1H), 2,50-2,30 (m, 3H), 3,19-3,07 (m, 1H), 2,88 (t, 1H, J=8,1 Гц), 2,54-2,13 (m, 3H), 2,04 (s, 3H), 2,00-1,86 (m, 2H), 1,80-1,11 (m, 33H), 0,95, 0,93, 0,87, 0,83, 0,81 (s, 18H); Масс.: [М+Н]691 (100%), [M+Na]713 (25%); ИК (KBr, см): 3395, 2943, 2864, 1736, 1734, 1624, 1444, 1370, 1248, 1192, 1154, 1024, 979, 884; Интервал плавления: 140,2°С-145,8°С.
Пример 47: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (Пример 46, 0,400 г, 0,579 ммоль) в смеси метанол: тетрагидрофуран (2:1) (30 мл) добавляли 2N NaOH (10 мл) при температуре 0°С. Смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) летучий компонент выпаривали, и водный слой экстрагировали с помощью этилацетата. Органический слой промывали водой, рассолом и сушили над NaSO, затем растворитель выпаривали, а полученный сырой продукт перемешивали в гексане. В итоге было получено сухое вещество, которое было отфильтровано и высушено в вакууме с получением титульного соединения. Вес: 0,280 г; Выход: 74,6%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 5,86 (d, 1Н, J=8,1 Гц), 4,72 (s, 1H), 4,57 (s, 1H), 4,18-4,06 (m, 1H), 3,78-3,68 (m, 1H), 3,52-3,30 (m, 3H), 3,23-3,08 (m, 2H), 2,92-2,86 (m, 1H), 2,52-2,20 (m, 3H), 2,01-1,88 (m, 2H), 1,80-1,12 (m, 33H), 0,96, 0,93, 0,87, 0,81, 0,74 (s, 18H); Масс.: [М+1]649 (5%), [M+Na]671 (100%); ИК (KBr, см): 3353, 2937, 2858, 1635, 1618, 1533, 1459, 1390, 1262, 1250, 1148, 1048, 1033, 1020, 983, 883; Интервал плавления: 177°С-188,7°С; ВЭЖХ: 95,72%.
Пример 48: Получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
+
+
-1
К перемешиваемому, раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 47, 0,190 г, 0,293 ммоль) при комнатной температуре были добавлены 2,2-диметилянтарный ангидрид (0,375 г, 2,932 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (0,071 г, 0,586 ммоль) в пиридине (10 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение примерно 24 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена EtOAc, промыта водным раствором 1N HCl, затем водой и рассолом, высушена над NaSO, затем растворитель выпаривали, а остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с силикагелем (100-200 меш, элюент 20% EtOAc в гексане) для получения целевого соединения в виде беловатого сухого вещества. Вес: 0,090 г; Выход: 39,6%; Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): δ 5,96 (d, 1H, J=8,1 Гц), 4,72 (s, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,52-4,44 (m, 1H), 4,16-4,07 (m, 1H), 3,79-3,58 (m, 1H), 3,50-3,31 (m, 3H), 3,18-3,07 (m, 1H), 2,91-2,87 (m, 1H), 2,71-2,56 (m, 2H), 2,56-2,37 (m, 2H), 2,30-2,19 (m, 1H), 2.01-1,81 (m, 3H), 1.80-1,10 (m, 35H), 0,95, 0,93, 0,88, 0,87 (s, 21H); Масс.: [М+1]777 (30%). [M+Na]799 (100%); ИК (KBr, см): 3400, 2947, 2868, 1733, 1622, 1456, 1390, 1369, 1320, 1252, 1231, 1192, 1150, 1021, 978, 881; ВЭЖХ: 97,37%; Интервал плавления: 168,5°С-176,9°С.
Пример 49: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (0,5 г, 1,04 ммоль) (Полученному так, как описано в J.Med.Chem. 2009, 52, 3248-3258) в 50 мл дихлорметана был добавлен оксалилхлорид (2 мл, 15,87 ммоль), и компоненты перемешивались при комнатной температуре в течение примерно 6 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционную смесь концентрировали под пониженным давлением. Осадок поместили в дихлорметан (15 мл), а затем поместили в атмосферу N2. Затем добавляли (1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентанамин (интермедиат 10, 0,21 г) в дихлорметане и триэтиламин (0,3 мл, 3,12 ммоль) при температуре 0°С и перемешивали смесь приблизительно в течение 15 минут. Затем был добавлен ранее полученный хлорангидрид, и компоненты перемешивались при комнатной температуре в течение примерно 8 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована с помощью насыщенного NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен над NaSO и сконцентрирован под пониженным давлением. Осадок был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем с использованием 50% этилацетата в гексане в качестве элюента для получения целевого соединения в виде белого сухого вещества. Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 0,57-0,97 (m, 19H); 1,18-1,21 (m, 8H); 1,25-1,41 (m, 12H); 1,49-1,62 (m, 8H); 1,65-1,82 (m, 10H); 1,85-1,98 (m, 4H); 2,56-2,69 (m, 2H); 2,88-3,06 (m, 3H); 3,29-3,38 (m, 1H); 3,89-3,90 (m, 1H); 4,25-4,70 (m, 4H); 5,78 (s, 1H); 6,12-6,15 (m, 1H); Масс.: 763 (100%).
Пример 50: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-N-((1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат (Пример 49, 0,5 г) в смеси метанол:тетрагидрофуран (8:8 мл) охлаждали до 0°С, затем был добавлен гидроксид натрия (0,12 г в 4 мл воды), и компоненты перемешивались в течение примерно 6 часов при комнатной температуре. По окончании реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была выпарена под пониженным давлением, а осадок поместили в воду и экстрагировали с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен над NaSO и сконцентрирован под пониженным давлением. Осадок был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,31 g) в виде белого сухого вещества. Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 0,57-0,97 (m, 19H); 1,18-1,21 (m, 8H); 1,25-1,41 (m, 12H); 1,49-1,62 (m, 8H); 1,65-1,82 (m, 10H); 1,85-1,98 (m, 4H); 2,56-2,69 (m, 2H); 3,29-3,38 (m, 1H); 3,89-3,90 (m, 1H); 4,25-4,70 (m, 4H); 5,78 (s, 1H); Масс.: 635 (100%).
Пример 51: Получение 2,2-диметил-4-оксо-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)бутановой кислоты:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-N-((1R,3S)-3-((3-метилпиперидин-1-ил)метил)циклопентил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример - 50, 0,24 ммоль) в пиридине (5 мл) были добавлены диметиламино пиридин (0,32 г, 0,48 ммоль) и 3,3-диметилдигидрофуран-2,5-дион (1,3 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение примерно 16 часов, завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была разбавлена этилацетатом (30 мл). Органический слой промывали 5% водного HCl, водой и затем концентрированным рассолом, сушили над NaSO и концентрировали под пониженным давлением. Осадок был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,1 г) в виде белого сухого вещества. Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 0,80-0,95 (m, 16Н) 1,23-1,90 (m, 41H); 2,03-3,08 (m, 16H), 4,13-4,18 (m, 1H), 4,46 (s, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,72 (s, 1H); 5,61-5,63 (m, 1H); ES Масс.: [M+1] 778 (100%); ВЭЖХ: 78,4%.
Пример 52: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
3
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (0,5 г, 1,04 ммоль) (Полученному так, как описано в J.Med.Chem. 2009, 52, 3248-3258) в 50 мл дихлорметана был добавлен оксалилхлорид (2 мл, 15,87 ммоль). Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение примерно 6 часов, завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционную смесь концентрировали под пониженным давлением и осадок помещали в дихлорметан (15 мл), а затем в атмосферу N. Затем при температуре 0°С добавляли 1-этилпиперазин (0,23 г, 1,24 ммоль) в дихлорметане (50 мл) и триэтиламин (0,3 мл, 3,12 ммоль), смесь перемешивали в течение примерно 15 минут, после чего добавляли приготовленный ранее хлорангидрид, и компоненты перемешивались при комнатной температуре в течение примерно 8 часов. По окончании реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была нейтрализована с помощью насыщенного NaHCO и экстрагирована с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен над NaSO и сконцентрирован под пониженным давлением. Осадок был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем с использованием 50% этилацетата в гексане в качестве элюента для получения титульного соединения. Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 0,57-0,97 (m, 11H); 1,18-1,21 (m, 8H); 1,25-1,41 (m, 10H); 1,49-1,62 (m, 8H); 1,65-1,82 (m, 10H); 1,85-1,98 (m, 4H); 2,56-2,69 (m, 2H); 2,88-3,06 (m, 3H); 3,89-3,90 (m, 1H); 4,25-4,70 (m, 4H); 5,78 (s, 1H); 6,12-6,15 (m, 1H); ES Масс.: 595 (100%) [M+1].
Пример 53: Получение 4-этилпиперазин-1-ил)((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-ил)метанона:
2
4
3
1
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (Пример 52, 0,5 г) в смеси метанол: тетрагидрофуран (8:8 мл) охлаждали до 0°С. Затем добавляли гидроксид натрия (0,16 г в 4 мл воды), и смесь перемешивали в течение примерно 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционную смесь упаривали под пониженным давлением, а осадок помещали в воду и экстрагировали с помощью дихлорметана. Органический слой был высушен над NaSO и сконцентрирован под пониженным давлением. Осадок был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,31 г) в виде белого сухого вещества. Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 0,57-0,97 (m, 12H); 1,18-1,21 (m, 8H); 1,25-1,41 (m, 10Н); 1,49-1,62 (m, 8H); 1,65-1,82 (m, 10Н); 1,85-1,98 (m, 4H); 2,56-2,69 (m, 2H); 3,29-3,38 (m, 1H); 3,89-3,90 (m, 1H); 4,25-4,70 (m, 4H); 5,78 (s, 1H); Масс.: 552 (100%).
Пример 54: Получение 3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты:
2
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору 3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты (0,5 г, 0,24 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл) был добавлен диизопропилэтиламин (0,32g 0,48, ммоль). Смесь охладили до 0°С, а затем добавляли 2,4,6-трихлорбензоилхлорид (1,3 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 4 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была сконцентрирована под пониженным давлением. Осадок в атмосфере N помещали в пиридин (15 мл), который затем добавляли в 4-этилпиперазин-1-ил)((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-ил)метанон (Пример 47, 0,25 г. 15 ммоль) и диметиламино пиридин (0,02 г, 22 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение примерно 16 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционную смесь разбавляли 30 мл этилацетата. Органический слой промывали 5% водного HCl, водой и затем рассолом, сушили над NaSO и концентрировали под пониженным давлением. Осадок был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения в виде белого сухого вещества (0,12 г). Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 0,95-1,16 (m, 17H); 1,21-1,86 (m, 19H); 2,25-2,48 (m, 11H); 2,77-3,58 (m, 16H); 4,33-4,70 (m, 4H); 5,58-5,60 (s, 1H); 5,78-5,80 (s, 1H); 7,44-7,47 (s, 1H); ES Масс.: 707 (100%).
Пример 55: Получение этил 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-1-бензилциклогексанкарбоксилата:
Стадия 1: Синтез 1-трет-бутил 4-этил пиперидин-1,4-дикарбоксилата:
2
4
3
1
К перемешиваемому раствору этилпиперидин-4-карбоксилата (10,0 г, 63,69 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) был при комнатной температуре добавлен бикарбонат натрия (8,0 г, 95,5 ммоль). Смесь охладили до 0°С. Через десять минут добавляли ди-трет-бутил бикарбонат (15,27 г, 70,05 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 14 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена водой и экстрагирована с помощью дихлорметана, а органический слой был высушен над NaSO и затем сконцентрирован под пониженным давлением для получения целевого соединения (11,4 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 1,23-1,28 (t, 3Н); 1,45 (s, 9Н); 1,60-1,68 (m, 3H); 1,85-1,90 (d, J=15 Htz, 2H); 2,41-2,46 (m, 1H); 2,83-2,87 (m, 2H); 4,04-4,17 (m, 3H); ES Масс.: 258 (100%) [М+1].
Стадия 2: Синтез 1-трет-бутил 4-этил 4-бензилпиперидин-1,4-дикарбоксилата:
3
2
4
3
1
Диизопропил этиламин (6,5 мл) в сухом тетрагидрофуране (25 мл) был охлажден приблизительно до -10°С, и затем к нему был по каплям добавлен N-бутиллитий (1,6 M, 23 мл) в атмосфере азота. Температура поддерживалась на том же уровне в течение 45 минут, после чего была снижена до -75°С приблизительно на 15 минут, а затем был добавлен 1-трет-бутил 4-этилпиперидин-1,4-дикарбоксилата (Стадия 1, 5 г) в тетрагидрофуране (30 мл), и компоненты перемешивались в течение примерно 30 минут. Затем температура реакции была повышена до -35°С, перемешивание продолжалось около 45 минут, затем температуру вновь опустили до -75°С, и затем по каплям был добавлен бромистый бензил (3,5 г в 20 мл тетрагидрофурана), и температура реакции была медленно доведена до комнатной. Перемешивание продолжалось около 12 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакция в смеси была остановлена насыщенным хлористым аммонием, и смесь была экстрагирована с помощью этилацетата. Органический слой был промыт насыщенным NaHCO, а затем рассолом, высушен над NaSO и сконцентрирован под пониженным давлением. Осадок был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем с использованием 3% этилацетата в гексане в качестве элюента для получения целевого соединения в виде светлой жидкости желтого цвета. H ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 1,16-1,18 (t, 3Н); 1,44 (s, 9H); 2,07-2,11 (m, 2H); 2,28 (s, 1H); 2,82 (s, 2H); 2,92-2,95 (m, 1H); 3,46-3,52 (m, 3Н); 4,09-4,11 (m, 2H); 7,03-7,06 (m, 2H); 7,23-7,24 (m, 3Н); ES Масс.: 370 (100%) [M+Na].
Стадия 3: Синтез этил 4-бензилпиперидин-4-карбоксилата:
3
2
4
3
1
Раствор 1-трет-бутил 4-этил 4-бензилпиперидин-1,4-дикарбоксилата (Стадия 2, 4,5 г, 12,96 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был охлажден до 0°С. Через десять минут была добавлена трифторуксусная кислота (6,0 г), и проводилось перемешивание при комнатной температуре в течение примерно 6 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была нейтрализована с помощью насыщенного NaHCO, экстрагирована с помощью дихлорметана, высушена над NaSO и сконцентрирована под пониженным давлением для получения целевого соединения (2,3 г) в виде светло-желтой жидкости. Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 1,19-1,24 (t, 3Н); 1,48-1,58 (m, 2H); 2,14-2,18 (m, 2H); 2,64-2,73 (m, 2H); 2,86 (s, 2H); 3,01-3,07 (m, 4H); 4,10-4,17 (m, 2H); 7,07-7,10 (m, 2H); 7,24-7,30 (m, 3Н); ES Масс.: 248 (100%) [М+1].
Стадия 4: Получение этил 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-1-бензилциклогексанкарбоксилата:
2
К перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (1,0 г, 2,08 ммоль) (полученному так, как описано в J.Med.Chem. 2009, 52, 3248-3258) в 50 мл дихлорметана был добавлен оксалилхлорид (2 мл, 15,87 ммоль), и проводилось перемешивание при комнатной температуре в течение примерно 6 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была сконцентрирована под пониженным давлением, осадок был помещен в дихлорметан (15 мл) и затем помещен в атмосферу N,
3
2
4
3
1
К этил 4-бензилпиперидин-4-карбоксилату (Стадия 3, 0,49 г, 2,08 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при температуре 0°С добавляли триэтил амин (0,3 мл, 3,12 ммоль), и смесь перемешивали приблизительно 15 минут. Затем был добавлен ранее полученный хлорангидрид. Реакция продолжалась при комнатной температуре в течение примерно 8 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была нейтрализована с помощью насыщенного NaHCO, смесь была экстрагирована с помощью дихлорметана, высушена над NaSO и сконцентрирована под пониженным давлением. Осадок был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем с использованием 50% этилацетата в гексане в качестве элюента для получения целевого соединения в виде белого сухого вещества (0,9 г). Н ЯМР-спектр (300 МГц, CDCl): 0,57-0,97 (m, 19H); 1,18-1,21 (m, 8H); 1,25-1,41 (m, 12H); 1,49-1,62 (m, 8H); 1,65-1,82 (m, 10Н); 1,85-1,98 (m, 4H); 2,56-2,69 (m, 2H); 2,88-3,06 (m, 3H); 3,29-3,38 (m, 1H); 3,89-3,90 (m, 1H); 4,12-4,23 (m, 2H); 4,44-4,47 (m, 1H); 4,56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); 7,03-7,05 (m, 2H); 7,23-7,25 (m, 3H); ES Масс.: 728 (100%) [М+1].
Пример 56: Получение этил 1-бензил-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а хризен-3а-карбонил)циклогексанкарбоксилата:
2
4
Этил 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-1-бензилциклогексанкарбоксилат (Пример 55, 0,9 г) был помещен в смесь метанол: тетрагидрофуран (8: 8 мл), и смесь была охлаждена до 0°С. Затем был добавлен гидроксид натрия (0,28 г в 4 мл воды), и компоненты перемешивались в течение примерно 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции контролировали методом ТСХ. Реакционная смесь была упарена под пониженным давлением, а осадок был помещен в воду, экстрагирован с помощью дихлорметана, высушен над NaSO и сконцентрирован под пониженным давлением. Осадок был очищен с помощью колоночной хроматографии с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,45 г) в виде белого сухого вещества.
Пример 57: Получение 4-((1R,3AS,5AR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-бензил-4-(этоксикарбонил)пиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
К раствору этила 1-бензил-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)циклогексанкарбоксилата (Пример 56, 0,25 г, 0,36 ммоль) при комнатной температуре добавили 2,2-диметилянтарный ангидрид (0,375 г, 2,932 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (0,071 г, 0,586 ммоль) в пиридине (10 мл), и кипятили смесь в течение 24 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь разбавили этилацетатом, промыли водой, 1N HC1, водой, рассолом и высушили над NaSO, а затем растворитель выпарили, и остаток очищали на силикагельной колонке с (100-200 меш, элюент 20% этилацетата в гексане) с получением целевого соединения в виде белого твердого вещества. Вес: 0,26 г; H ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 16 Н); 1,18-1.21 (m, 14H), 1.25-1.41 (m, 12H), 1.49-1.62 (m, 8H); 1,65 1,82 (m, 10Н), 1,85-1.98 (m, 4H), 2.56-2.69 (m, 4H), 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.12-4.23 (m, 2H), 4,56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); 7.03-7.05 (m, 2H), 7.23-7.25 (m, 3H); ES Масс.: 814 (100%) [М+1].
Пример 58: Получение (1S,3R)-1-трет-бутил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата:
1
+
3
К раствору (1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонового 2,4,6-трихлоробензойного ангидрида (1,117 г) в пиридине (20 мл) добавили (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пипердин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Пример 47, 1,0 г) в пиридине, далее добавили 4-диметиламинопиридин (376 мг). Полученную таким образом реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение приблизительно 12 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) добавили воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промыли 1N HCl, рассолом и водой, высушили над сульфатом натрия, сконцентрировали при пониженном давлении, и получили сырой продукт. Полученный сырой продукт очистили на хроматографической колонке и получили целевое соединение в виде белого твердого вещества. Вес: 800 мг: Выход: 61%. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,94 (d, 1H, J=8,1 Гц), 4,729 (s, 1H), 4,580 (s, 1H), 4,434 (m, 1H), 4,154 (m, 1H), 3,70 (m, 3Н), 3,44 (m, 4H), 3,1 (m, 1H), 2.93-2.2 (m, 11H), 2,00 (m, 4H), 1.80-1.10 (m, 38 H), 0,95 (s, 6H), 0,93 (3Н), 0,89 (s, 9H), 0,82 (m, 1H); Масс.: [M+H+]860,45 (100%).
Пример 59: Получение (1S,3R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пипедрин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
1
+
+
3
К охлажденному (0°С) HCl в 1,4-диоксане (10 мл) добавили (1S,3R)-1-трет-бутил-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1R,3S)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ин-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил) 2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилат (Пример 58, 800 мг), и смесь нагрели до комнатной температуры. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 12 часов и проверили методом ТСХ. После завершения реакции (по данным ТСХ) добавили воду и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия, упарили при пониженном давлении, очистили на силикагельной хроматографической колонке, и получили целевое соединение в виде белого твердого вещества. Вес: 0,200 г: Выход: 30%. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,98 (d, 1H, J=8,1 Гц), 4,725 (s, 1H), 4,582 (s, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.70-3.00 (m, 6H), 2.902-2.76 (m, 4H), 2.60-1.85 (m, 10Н), 1.81-1.10 (m, 34H), 0,96 (s, 3Н), 0,93 (s, 6H), 0,87 (s, 9H), 0,82 (m, 1H); Масс.: [М+Н+]803,25 (20%), 825,5 (100%) [M+Na+]; ИК (KBr, см-1): 3400, 2949, 2866, 1734, 1638, 1625, 1500, 1463, 1369, 1251, 1233, 1191, 1107, 1088, 977, 882, 542; Интервал плавления: 186.2-238.1°С; ВЭЖХ: 95,25%.
Пример 60: Получение (1S,3R)-1-трет-бутил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата:
1
+
+
3
К раствору (1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонового 2,4,6-трихлоробензойного ангидрида (1,115 г) в пиридине (Пример 8, 1,0 г) добавляли (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Пример 8, 1.0 г) в пиридине, а затем добавляли 4-диметиламинопиридин (375 мг). Полученную таким образом реакционную смесь перемешивали при температуре кипения в течение приблизительно 12 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) добавляли воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промыли водным раствором 1N HCl, рассолом воды, затем высушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении и получили сырое соединение. Полученный сырой продукт очистили с помощью хроматографической колонки и получили целевое соединение в виде белого твердого вещества. Вес: 0,800 г: Выход: 61%. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,9 (d, 1Н, J=8,1 Гц), 4,7356 (s, 1H), 4,590 (s, 1H), 4,43 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 3.80-3.44 (m, 9H), 3,11 (m, 1H), 2,87 (m, 1H), 2.8-2.3 (m, 6H), 2.0-1.80 (m, 3H), 1.80-1.10 (m, 34 Н), 0,98 (s, 3H), 0,95 (s, 6H), 0,8 (s, 9H), 0,78 (m, 2H); Масс.: [М+Н+]861,45 (100%), [M+Na]884,6 (30%).
Пример 61: Получение (1S,3R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
1
+
3
К охлажденному (0°С) HCl в 1,4-диоксане добавляли (1S,3R)-1-трет-бутил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(морфолин-4-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилат (пример 60, 900 мг), и смеси дали нагреться до комнатной температуры. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 12 часов, контролируя методом ТСХ. После завершения реакции (по данным ТСХ) добавили воду и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия, упарили при пониженном давлении, очистили на силикагельной хроматографической колонке и получили целевое соединение в виде белого твердого вещества. Вес: 0,220 г: Выход: 30%. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,988 (d, 1Н, J=7,8 Гц), 4,736 (s, 1H), 4,586 (s, 1H), 4,43 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 3.80-3.44 (m, 8H), 3,12 (m, 1H), 2.902-2.76 (m, 4H), 2.650-2.3 (m, 8H), 2.1-1.80 (m, 3H), 1.80-1.10 (m, 28H), 0,98 (s, 3H), 0,95 (s, 6H), 0,8 (s, 9H), 0,78 (m, 1H); Масс.: [M+H+]806,5 (100%), ИК (KBr, см-1): 3447, 2953, 2869, 1736, 1723, 1645, 1626, 1500, 1463, 1369, 1271, 1239, 1191, 1117, 1038, 975, 882, 722, 573; Интервал плавления: 255,5-266,5°С; ВЭЖХ: 92,86%.
Пример 62: Получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбомоил)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
+
+
К раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 11, 500 мг) в сухом пиридине (10 мл) добавили янтарный ангидрид (771,6 мг) с последующим добавлением 4-диметиламинопиридина (188,53 мг). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 20 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) смесь разбавили этилацетатом и промывали водой и рассолом. Объединенные органические слои сушили над NaSO, концентрировали при пониженном давлении, чтобы получить целевое соединение в виде липкого твердого вещества. Сырое соединение очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 100-200 меш, смесей гексана и этилацетата в качестве подвижной фазы с получением 250 мг (выход 43,5%) титульного соединения с чистотой 5,95% по данным ВЭЖХ. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,027 (1Н, d, J=8,1 Гц), 4,738 (1Н, s), 4,585 (1H, s), 4,52 (1H, m), 4,13 (1H, m), 3.66 (1H, m), 3,512 (1H, m), 3,38 (2H, m), 3,12 (1H, m), 2,95 (2H, m). 2.55-2.7 (7H, m), 2.25-2.54 (5H, m), 1,9 (3H, m), 1,2-1,8 (28H, m), 0,953 (3H, s), 0,924 (3H, s), 0,827 (9H, m), 0,754 (2H, m), ИК (KBr, см-1): 3403, 2946, 2867, 1802, 1733, 1619, 1449, 1370, 1293, 1253. 1228, 1162, 1110, 991, 934, 880, 826; Масс.: [М+Н+]749,55 (40%), 771,55 [M+Na](100%).
Пример 63: Получение (1S,3R)-1-трет-бутил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пипередин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата:
1
+
3
К раствору (1R,3S)-3-(трет-бутоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонового 2,4,6-трихлоробензоидного ангидрида (1,34 г)) в пиридине (20 мл) добавили (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид (Пример 11, 1 г) в пиридине, и затем добавили 4-диметиламинопиридин (375 мг). Полученную таким образом реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 12 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) добавили воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водным раствором 1N HCl, затем рассолом, и водой, а затем сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении, и получили сырое соединение. Полученный сырой продукт очистили с помощью хроматографической колонки и получили целевое соединение в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,02 (1H, d, J=8,1 Гц), 4,74 (1H, s), 4,59 (1H, s), 4,42 (1H, m), 4,11 (1H, m), 3,66 (1H, m), 3,5 (1H, m), 3,4 (2H, m), 3,1 (1H, m), 2.95-2.75 (4H, m), 2.6-2.3 (5H, m), 1,9 (2H, m), 1,8 (1H, m), 1,68 (3H, s), 1.64-1.12 (28H, m), 1.11 (12H, s), 1,05 (6H, s), 0,83 (12H, s), 0,75 (1H, m); Масс.: [М+Н+]787.2 (100%).
Пример 64: Получение (1S,3R)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбомил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоновой кислоты:
1
+
+
3
К охлажденному HCl в 1,4-диоксане (15 мл) добавили (1S,3R)-1-трет-бутил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил) 2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилат (пример 63, 800 мг) и дали нагреться до комнатной температуры. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов и проверили методом ТСХ. После завершения реакции (по данным ТСХ) добавили воду и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, упаривали при пониженном давлении, очистили на силикагельной хроматографической колонке и получили целевое соединение (350 мг) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,02 (1Н, д, J=8,1 Гц), 4,734 (1Н, s), 4,587 (1Н, s), 4,44 (1Н, m), 4,14 (1Н, m), 3,66 (1Н, m), 3,5 (1Н, m), 3,4 (2H, m), 3,1 (1Н, m), 2.95-2.75 (3H, m), 2.6-2.3 (5H, m), 1,9 (2H, m), 1,8 (1Н, m), 1,68 (3H, s), 1.64-1.12 (35h, m), 1,05 (6H, s), 0,83 (12H, s), 0,75 (1Н, m); Масс.: [M+Н]803,7 (100%), 825,7 (50) [M+Na], ИК (KBr, см-1): 3426, 2947, 2866, 2346, 1734, 1625, 1466, 1369, 1252, 1232, 1190, 1107, 1022, 983, 883 и 651 см-1. Интервал плавления 257.7-269°С.
Пример 65: Получение 5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-5-оксопентановой кислоты:
2
4
3
1
+
+
К раствору 5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-2,2-диметил-3-(пиперидин-1-карбонил)циклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-5-оксопентановой кислоты (пример 11, 500 мг) в сухом пиридине (10 мл) добавили глутаровый ангидрид (880,14 мг), а затем добавили 4-диметиламинопиридин (188,53 мг). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 20 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой и рассолом. Объединенные органические слои высушили над NaSO, концентрировали при пониженном давлении, чтобы получить сырое целевое соединение виде вязкого вещества. Сырой продукт очистили с помощью силикагельной хроматографической колонки с использованием 100-200 меш, смесей гексана и этилацетата в качестве подвижной фазы, чтобы получить 350 мг (выход 59,5%) титульного соединения с 91,4% чистоты по данным ВЭЖХ. H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 6,07 (1Н, d, J=8,1 Гц), 4,729 (1Н, s), 4,58 (1H, s), 4,50 (1H, m), 4,132 (1Н, m), 3,71 (2H, m), 3,5 (1Н, m), 3,4 (2H, m), 3,147 (1Н, m), 2,90 (1Н, m), 2.3-2.55 (10Н, m), 2,0 (6H, m), 1,2-1,8 (29H, m), 0,94 (3H, s), 0,92 (3H, s), 0,85 (10Н, m), 0,75- (1H, m), ИК (KBr, см-1): 3395, 2950, 2868, 1712, 1603, 1509, 1517, 1445, 1412, 1390, 1375, 1304, 1253, 1206, 1065, 977, 920, 784; Масс.: [M+H+]763,55 (50%), 785,6 [M+Na](100%).
Пример 66: Получение 1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетат:
3
2
4
3
1
+
Оксалил хлорид был добавлен к охлажденному раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (835 мг) в дихлорметане (20 мл) при 0°С, и реакционную массу перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 6 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали в атмосфере азота, и смесь растворяли в дихлорметане, который добавляли к раствору ((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутил) (4-этилпиперазин-1-ил) метанон (500 мг) в дихлорметане и EtN (6 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 12 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь разбавили дихлорметаном и промыли водой, 1N HCl, рассолом, и высушили с NaSO. Растворитель выпарили, и остаток очистили на силикагельной колонке (100-200 меш, элюент 10% этилацетата в гексане) с получением целевого соединения в виде не совсем белого твердого вещества. Вес: 760 мг: Выход: 67,3%. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5.88 (d, J=8,1 Гц, 1H), 4,737 (d, J=1,5 Гц, 1H), 4,58 (d, J=1,5 Гц, 1H), 4.49-4.438 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.80-3.41 (m, 4H), 3.17-3.08 (m, 1H), 2,9 (m, 1H), 2.60-2.295 (m, 9H), 2,04 (s, 3H), 1,90 (m, 2H), 1.80-1.02 (m, 30 Н), 0,95.0,92 (s, 6H), 0,83 (s, 12H); Масс.: [М+Н+]720 (100%).
Пример 67: Получение 1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1H-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
+
В раствор (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (пример 66, 0,760 г) в смеси метанол: тетрагидрофуран (2:1) (45 мл) при 0°С добавили 2N NaOH (15 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) летучие вещества выпаривали, а водный слой экстрагировали этилацетатом и сушили с NaSO. Растворитель выпарили, и остаток очистили на силикагельной колонке (100-200 меш, элюент 15% этилацетата в гексане) для получения целевого соединения в виде белого твердого вещества. Вес: 0,500 г: Выход: 69,9%; Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,90 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 4,728 (s, 1H), 4,57 (s, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.80-3.41 (m, 4H), 3.20-3.10 (m, 2H), 2,9 (m, 1H), 2.60-2.295 (m, 9H), 2,1 (m, 2H), 1,90 (m, 1H), 1.80-1.02 (m, 22H), 0,95, 0,92 (s, 6H), 0,83 (s, 3H), 0,80 (s, 3H). Масс.: [М+Н+]679 (100%), ИК (KBr, см-1): 3445, 2946, 2867, 1634, 1459, 1463, 1376, 1270, 1242, 1126, 1043, 983, 883, 768, 656; Интервал плавления: 122,0-155,1°С; ВЭЖХ: 94,8%.
Пример 68: Получение-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
+
2,2-диметилянтарный ангидрид (238 мг) добавили к раствору(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1S,3R)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 67, 125 мг) и 4-диметиламинопиридина (45 мг) в сухом пиридине (10 мл) при комнатной температуре. Затем реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 14 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) смесь разбавляли этилацетатом, органический слой промывали водным раствором 1H HCl, затем промывали водой и рассолом и сушили с NaSO. Растворитель выпарили, и остаток очистили на силикагельной колонке (100-200 меш, элюент 35% этилацетата в гексане), для получения 90 мг целевого соединения (выход 60,8%) в виде не совсем белого твердого вещества с 81,67% чистоты HPLC. 1Н-ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,92 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 4,73 (s, 1H), 4,58 (s, 1H), 4.52-4.44 (m, 1H), 4.19-4.09 (m, 1H), 3,90 (m, 2H), 3,7 (m, 2H), 3.15-3.04 (m, 1H), 2.87-2.82 (m, 6H), 2,60 (s, 3Н), 2.5-2.3 (s, 3H), 2.00-1.91 (m, 3H), 1.75-1.10 (m, 36H), 0,947, 0,914, 0,900 (s, 18H); Масс.: [М+1]806 (100%), ИК (KBr, см-1): 3394, 2957, 2873, 1724, 1623, 1455, 1374, 1367, 1244, 1188, 1146, 980, 883, 765; Интервал плавления: 63,80 С-122,5 С.
Пример 69: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
2
4
3
1
Раствор (COCl) в дихлорметане был добавлен к раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (651 мг) в дихлорметане (10 мл) при 0°С, и реакционную массу перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 3 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) растворитель испарялся в атмосфере азота, и смесь растворяли в дихлорметане, который добавляли к раствору соли ((1S, 3R)-3-амино-2,2-диметилциклобутил) (4-этилпиперазин-1-ил)метанона и трифторуксусной кислоты (900 мг) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали водным 1N HCl, затем промывали водой и рассолом, а затем сушили NaSO. Растворитель выпарили, и остаток очистили на силикагельной колонке (100-200 меш, элюент 15% этилацетата в гексане) с получением целевого соединения в виде не совсем белого твердого вещества. Вес: 550 мг. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,80 (d, J=6,5 Гц, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,58 (s, 1H), 4.50-4.41 (m, 1H), 4.2-4.10 (m, 1H), 3.78-3.67 (m, 3Н), 3.6-3.50 (m, 4H), 3.5-3.4 (m, 7H), 3,1 (m, 1H), 3,0 (m, 2H), 2,9 (m, 1H), 2.60-2.40 (m, 6H), 2,0 (3Н, s), 1.9-1.86 (m, 2H), 1.80-1.2 (m, 18H), 0,95, 0,93, 0,87, 0,83, 0,81, (s, 24H).
Пример 70: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-en-2-у1)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида:
2
4
3
1
+
+
К раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата (Пример 69, 550 мг) в смеси метанол: тетрагидрофуран (2:1) при температуре 0°С добавили 2N NaOH (4 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) летучие вещества выпарили, водный слой экстрагировали этилацетатом, а органический слой промыли водой, рассолом и высушили с NaSO. Растворитель выпаривали, и полученное сырое соединение перемешивали в гексане, чтобы получить сырое твердое вещество. Твердое сырое вещество очистили на силикагельной хроматографической колонке, чтобы получить целевое соединение. Вес: 200 мг. Выход: 93,3%. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,86 (d, 1H, J=8,1 Гц), 4,72 (s, 1H), 4,57 (s, 1H), 4.18-4.06 (m, 1H), 3.78-3.68 (m, 1H), 3.52-3.30 (m, 3Н), 3.23-3.08 (m, 2H), 2.92-2.86 (m, 1H), 2.52-2.20 (m, 3Н), 2.01-1.88 (m, 2H), 1,80-1,12 (m, 33H), 0,96, 0,93, 0,87, 0,81, 0,74 (s, 18H); Масс.: [M+1]649 (5%), [М+Na]671 (100%), ИК (KBr, см-1): 3353, 2937, 2858, 1635, 1618, 1533, 1459, 1390, 1262, 1250, 1148, 1048, 1033, 1020, 983, 883; Интервал плавления: 177°С-188,7°С; ВЭЖХ: 95,72%.
Пример 71: Получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(4-этилпиперазин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты (готовится, вышеописанным способом):
3
+
1Н-ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 5,91 (d, J=7,8 Гц, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,58 (s, 1H), 4.53-4.44 (m, 1H), 4.19-4.10 (m, 1H), 3,90 (m, 2H), 3.7 (m, 2H), 3.15-3.04 (m, 1H), 2.87-2.82 (m, 6H), 2,60 (m, 3Н), 2.5-2.3 (m, 3Н), 2.00-1.91 (m, 3Н), 1.75-1.10 (m, 36H), 0,947, 0,914, 0,900 (s, 18H); Масс.: [M+1]806 (100%), ИК (KBr, см-1): 3390, 2956, 2873, 1724, 1623, 1458, 1374, 1367, 1244, 1188, 1146, 980, 883, 765.
Пример 72: Получение этила 1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоксилата:
2
К раствору (1R,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (2,0 г, 4,01 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавили оксалилхлорид (4 мл, 15,87 ммоль) при комнатной температуре. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток помещали в дихлорметан (15 мл) и затем держали в атмосфере N.
3
2
4
3
1
Этиловый 4-бензилпиперидин-4-карбоксилат (0,74 г, 4.01 mmol) добавили в дихлорметан (50 мл) и триэтиламин (1 мл) при 0°С, и смесь перемешивали в течение примерно 15 минут, затем добавили ранее подготовленный хлорангидрид, и реакция продолжалась при комнатной температуре в течение примерно 8 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь нейтрализовали насыщенным NaHCO и экстрагировали дихлорметаном. Органический слой сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 50% этилацетата в гексане в качестве элюента для получения целевого соединения в виде белого твердого вещества (1,8 г). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19H), 1,18-1.21 (m, 8H), 1.25-1.41 (m, 12H), 1.49-1.62 (m, 8H), 1,65 1,82 (m, 10Н), 1,85-1.98 (m, 4H), 2.56-2.69 (m, 2H), 2.88-3.06 (m, 3H); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4,12-4,23 (m, 2H), 4.44-4.47 (m, 1H); 4.56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); 7.03-7.05 (m, 2H), 7.23-7.25 (m, 3H); ES Масс.: 666 (100%), [М+1].
Пример 73: Получение этила 4-этил-1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5a,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)пиперидин-4-карбоксилата:
2
4
3
1
Этил 1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоксилат (Пример 72, 2,0 г) помещали в смесь метанол:тетрагидрофуран (8:8 мл), и охлаждали до 0°С. Затем был добавлен гидроксид натрия (1,5 г в 4 мл воды), и смесь перемешивалась в течение примерно 6 часов при комнатной температуре. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении. Остаток помещали воду и экстрагировали дихлорметаном. Органический слой сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (1,45 г) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19H), 1,18-1.21 (m, 8H), 1.25-1.41 (m, 12H), 1.49-1.62 (m, 10Н); 1.65-1.82 (m, 10Н), 1,85-1.98 (m, 4H), 2.56-2.69 (m, 2H), 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.15-4.18 (m, 2H), 4,56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); Масс.: 624 (100%).
Пример 74: Получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-(этоксикарбонил)-4-этилпиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
К раствору этила 4-этил-1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)пиперидин-4-карбоксилата (Пример 73, 0,5 г, 0,80 ммоль) в пиридине (5 мл) добавили 4-диметиламинопиридин (0,2 г, 1,6 ммоль), а затем добавили 3,3-диметилдигидрофуран-2,5-дион (0,82 мл), и смесь кипятили в течение приблизительно 16 часов. Завершение реакции контролировалось с помощью ТСХ. Реакционную смесь разбавили этилацетатом (30 мл), и органический слой промыли 5% HCl, промыли водой, а затем рассолом, высушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 5% МеОН в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,25 г) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.95-1.16 (m, 19 Н); 1.23-1.78 (m, 23H), 2,15 2,59 (m, 11H), 2.77-3.58 (m, 16H), 4.33-4.70 (m, 4H), 5.58-5.60 (s, 1H); 5,78-5,80 (s, 1H); 7.44-7.47 (s, 1H); Е.С. Масс.: 753; (100%), [М+1].
Пример 75: Получение (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-циано-4-фенилпиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил ацетата:
2
К раствору (1R,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (1,0 г, 2,08 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавили оксалилхлорид (4 мл, 15,87 ммоль) при комнатной температуре. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток помещали в дихлорметан (15 мл) и затем держали в атмосфере N.
3
2
4
3
1
К 4-фенилпиперидин-4-карбонитрилу (0,49 г, 2,08 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавили триэтиламин (0,3 мл, 3,12 ммоль) при 0°С, и смесь перемешивали в течение примерно 15 минут, после чего был добавлен ранее подготовленный хлорангидрид, и реакция продолжалась при комнатной температуре в течение примерно 8 часов. По окончании реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь нейтрализовали насыщенным NaHCO и экстрагировали дихлорметаном. Органический слой высушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 50% этилацетата в гексане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,9 г). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19Н); 1,18-1.21 (m, 8H), 1,25 1,41 (m, 12H), 1.49-1.62 (m, 8H), 1,65-1.82 (m, 10Н), 1.85-1.98 (m, 4H), 2.56-2.69 (m, 2H), 2.88-3.06 (m, 3Н); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.12-4.23 (m, 2H) 4.44-4.47 (m, 1H); 4.56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); 7.03-7.05 (m, 2H), 7.23-7.25 (m, 3Н); ES Масс.: 667 (100%), [M+1].
Пример 76: Получение 1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-фенилпиперидин-4-карбонитрила:
2
4
3
1
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-(4-циано-4-фенилпиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-у1 ацетат (пример 75, 2,0 г) помещали в смесь метанол: тетрагидрофуран (8:8 мл) и охлаждали до 0°С, а затем добавляли гидроксид натрия (1,5 г в 4 мл воды), и смесь перемешивали в течение примерно 6 часов при комнатной температуре. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь выпарили при пониженном давлении, и остаток растворили в воде, а затем экстрагировали дихлорметаном. Органический слой сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (1.45 г) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19Н); 1.18-1.21 (m, 8H), 1.25-1.41 (m, 12H), 1.49-1.62 (m, 10Н), 1.65-1.82 (m, 10Н), 1.85-1.98 (m, 4H), 2.56-2.69 (m, 2H), 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.15-4.18 (m, 2H); 4.56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); Масс.: 624 (100%).
Пример 77: Получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(4-циано-4-фенилпиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
К раствору ((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-фенилпиперидин-4-карбонитрила (Пример 76, 0.5 г, 0,80 ммоль) в пиридине (5 мл) добавили 4-диметиламинопиридин (0,2 г, 1,6 ммоль), а затем добавили 3,3-диметилдигидрофуран-2,5-дион (0,82 мл), и содержимое кипятили в течение приблизительно 16 часов. По окончании реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь разбавили этилацетатом (30 мл). Органический слой промыли 5% HCl, промыли водой, а затем рассолом, высушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,25 г) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.95-1.16 (m, 19 Н); 1.23-1.78 (m, 23H), 2,15 2,59 (m, 11H), 2.77-3.58 (m, 16H), 4.33-4.70 (m, 4H), 5.58-5.60 (s, 1H); 5,78-5,80 (s, 1H); 7.44-7.47 (s, 1H); Е.С. Масс.: 753 (100%), [М+1].
Пример 78: Получение трет-бутил 2-(6-(2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)этил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-ил)ацетата:
2
К раствору (1R,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоновой кислоты (1,0 г, 2,08 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавили оксалилхлорид (4 мл, 15,87 ммоль) при комнатной температуре. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток добавили в дихлорметан (15 мл) и затем держали в атмосфере N.
3
2
4
3
1
К трет-бутил-2-(6-(2-аминоэтил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-ил)ацетату (0,49 г, 2,08 ммоль) в дихлорметане (50 мл) добавили триэтиламин (0,3 мл, 3,12 ммоль) при 0°С, и смесь перемешивали в течение примерно 15 минут. Затем добавили ранее подготовленный хлорангидрид, и реакция продолжалась при комнатной температуре в течение примерно 8 часов. Завершение реакции контролировали с помощью ТСХ, и реакционную смесь нейтрализовали насыщенным NaHCO и экстрагировали дихлорметаном, а органический слой сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 50% этилацетата в гексане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,9 г). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19Н); 1,18-1.21 (m, 8H), 1,25 1,41 (m, 12H), 1.49-1.62 (m, 8H), 1,65-1.82 (m, 10Н), 1,85-1.98 (m, 4H), 2.56-2.69 (m, 2H), 2.88-3.06 (m, 3H); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4.12-4.23 (m, 4H), 4.44-4.47 (m, 1H); 4.56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); Е.С. Масс.: 754; (100%), [М+1].
Пример 79: Получение трет-бутил 2-(6-(2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)этил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-у1)ацетата:
2
4
3
1
Трет-бутил 2-(6-(2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)этил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-ил) ацетат (Пример 78, 2,0 г) помещали в смесь метанол:тетрагидрофуран (8:8 мл) и охлаждали до 0°С, после чего добавляли гидроксид натрия (1,5 г в 4 мл воды), и смесь перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции контролировалось с помощью ТСХ, реакционную смесь выпарили при пониженном давлении, а остаток растворили в воде и экстрагировали дихлорметаном. Органический слой сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (1,45 г) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19Н); 1.18-1.21 (m, 8H), 1.25-1.41 (m, 12H), 1.49-1.62 (m, 10Н), 1.65-1.82 (m, 10Н), 1.85-1.98 (m, 4H), 2.56-2.69 (m, 2H), 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m1H); 4.15-4.18 (m, 2H); 4.56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); Масс.: 712 (100%).
Пример 80: Получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(6-(2-трет-бутокси-2-оксоэтил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-ил)этилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
К раствору трет-бутил 2-(6-(2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)этил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-ил) ацетата (Пример 79, 0.5 г, 0,80 ммоль) в пиридине (5 мл) добавили диметил амино-пиридин (0,2 г, 1,6 ммоль) и 3,3-диметилдигидрофуран-2,5-дион (0,82 мл). Содержимое кипятили в течение приблизительно 16 часов. После завершения реакции реакционную смесь разбавили этилацетатом (30 мл). Органический слой промыли 5% HCl, водой, а затем рассолом, высушили над NaSO и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 5% МеОН в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,25 г) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.95-1.16 (m, 19Н); 1.23-1.78 (m, 23Н); 2,15 2,59 (m, 11H); 2.77-3.58 (m, 16H); 4.33-4.70 (m, 4H), 5.58-5.60 (s, 1H); 5,78-5,80 (s, 1H); 7.44-7.47 (s, 1H); Е.С. Масс.: 806 [M+Na].
Пример 81: Получение 7-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-3,5-дигидроксигептановой кислоты:
2
4
3
1
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(6-(карбоксиметил)-2,2-диметил-1,3-диоксан-4-ил)этилкарбомил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановую кислоту (пример 80, 0,3 г) помещали в метанол (3 мл) и охлаждали до 0°С, а затем добавляли водный HCl (0,5 мл), и смесь перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь выпарили при пониженном давлении. Остаток помещали в воду и экстрагировали дихлорметаном. Органический слой сушили над NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,08 г) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.57-0.97 (m, 19H), 1.18-1.21 (m, 8H), 1.25-1.41 (m, 12H), 1.49-1.62 (m, 8H), 1,65 1,82 (m, 10Н), 1,85-1.98 (m, 4H), 2.56-2.69 (m, 2H), 2.88-3.06 (m, 3H); 3.29-3.38 (m, 1H); 3.89-3.90 (m, 1H); 4,44-4,47 (m, 1H); 4.56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); Масс.: 744 [М+1].
Пример 82: Получение 5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-3,3-диметил-5-оксопентановой кислоты:
2
4
3
1
К раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамида (Пример 32, 0 5 г, 0,80 ммоль) в пиридине (5 мл) добавили диметил амино-пиридин (0,2 г, 1,6 ммоль), а затем 4,4-диметилдигидро-2Н-пиран-2,6(3Н)-дион (0,82 мл). Смесь кипятили в течение 16 часов. После завершения реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь разбавили этилацетатом (30 мл). Органический слой промыли 5% HCl, водой, а затем рассолом, высушили над NaSO и сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили на силикагельной хроматографической колонке с использованием 5% МеОН в дихлорметане в качестве элюента для получения целевого соединения (0,25 г) в виде белого твердого вещества. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0.80-0.95 (m, 17H), 1.14-1.67 (m, 23H), 1.82-2.02 (m, 15H), 2.23-3.50 (m, 15H), 4.21-4.45 (m, 2H), 4,57 (s, 1H); 4.72 (s, 1H); 6.28-6.30 (m, 1H); 7.11-7.13 (m, 2H), 7.14-7.22 (m, 1H); 7.24-7.29 (m, 2H), E.С. Масс.: 841 (100%), [M+1].
Пример 83: Получение ((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоксильной кислоты:
2
В перемешиваемый раствор (1R,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (2,0 г, 4,01 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при комнатной температуре был добавлен оксалилхлорид (4 мл, 15,87 ммоль). По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была сконцентрирована под пониженным давлением. Осадок помещали в дихлорметан (15 мл) и затем держали атмосфере N.
3
2
4
3
1
К 4-этилпиперидин-4-карбоксильной кислоте (0,74 г, 4,01 ммоль) в дихлорметане (50 мл) был добавлен триэтил амин (1 мл) при 0°С, смесь перемешивали в течение 15 мин, а затем добавляли раннее приготовленный хлорангидрид, и реакция продолжалась при комнатной температуре приблизительно в течение 8 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была нейтрализована насыщенным NaHCO и экстрагирована дихлорметаном. Органический слой был высушен над NaSO и сконцентрирован под пониженным давлением. Осадок был очищен на хроматографической колонке с силикагелем с использованием 50% этилацетата в гексане в качестве элюента для выделения титульного вещества (1,8 г). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): 0,57-0,97 (m, 19H); 1,18-1,21 (m, 8H); 1,25-1,41 (m, 12H); 1,49-1,62 (m, 8H); 1,65-1,82 (m, 10Н); 1,85-1,98 (m, 4H); 2,56-2,69 (m, 2H); 2,88-3,06 (m, 3Н); 3,29-3,38 (m, 1H); 3,89-3,90 (m, 1H); 4,12-4,23 (m, 2H); 4,44-4,47 (m, 1H); 4,56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); 7,03-7,05 (m, 2H); 7,23-7,25 (m, 3Н); ES Масс.: 660 (100%), [M+Na].
Пример 84: Получение 4-этил-1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)пиперидин-4-карбоксильной кислоты:
2
4
3
1
1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-ацетокси-5a,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоксильная кислоту (Пример 83, 2,0 г) помещали в смесь метанол: тетрагидрофолевая кислота (8: 8 мл) и охлаждали до 0°С, после чего добавляли гидроксид натрия (1,5 г в 4 мл воды), и смесь перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре. Завершение реакции отслеживалось методом ТСХ. Реакционная смесь была выпарена под пониженным давлением, а осадок помещен в воду и экстрагирован дихлорметаном. Органический слой был высушен над NaSO и сконцентрирован под пониженным давлением. Осадок был очищен на хроматографической колонке с силикагелем с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для выделения титульного вещества (1,45 г) в виде белого сухого вещества. Н ЯМР (300 MHz, CDCl): 0,57-0,97 (m, 19H); 1,18-1,21 (m, 8H); 1,25-1,41 (m, 12H); 1,49-1,62 (m, 10Н); 1,65-1,82 (m, 10H); 1,85-1,98 (m, 4H); 2,56-2,69 (m, 2H); 3,29-3,38 (m, 1H); 3,89-3,90 (m, 1H); 4,15-4,18 (m, 2H); 4,56 (s, 1H); 4,71 (s, 1H); Масс.: 595 (100%).
Пример 85: Получение 1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-(3-карбокси-3-метилбутанойлокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1H-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)-4-этилпиперидин-4-карбоксильнойкислоты:
2
4
3
1
В перемешиваемый раствор 4-этил-1-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)пиперидин-4-карбоксильной кислоты (Пример 84, 0,5 г, 0,80 ммоль) в пиридине (5 мл) были добавлены 4-диметиламинопиридин (0,2 г, 1,6 ммоль) и 3,3-диметилдигидрофуран-2,5-дион (0,82 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь разбавляли этилацетатом (30 мл). Органический слой промывали 5% водным HCl, водой, затем рассолом, а затем сушили над NaSO и концентрировали под пониженным давлением. Осадок был очищен на хроматографической колонке с силикагелем, с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для выделения титульного вещества (0,25 г) в виде белого сухого вещества. Н ЯМР (300 MHz, CDCl): 0,95-1,16 (m, 19H); 1,23-1,78 (m, 23 H); 2,15-2,59 (m, 11H); 2,77-3,58 (m, 16H); 4,33-4,70 (m, 4H); 5,58-5,60 (s, 1H); 5,78-5,80 (s, 1H); 7,44-7,47 (s, 1H); ES Масс.: 725 (100%), [М+1].
Пример 86: Получение 1-(((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)циклопентил)метил)пиперидин-4-карбоксильной кислоты:
2
4
3
1
В перемешиваемый раствор 1-(((1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбонил)циклопентил)метил)пиперидин-4-карбоксильной кислоты (0,5 г, 0,80 ммоль) в пиридине (5 мл) были добавлены 4-диметиламинопиридин (0,2 г, 1,6 ммоль) и 3,3-диметилдигидрофуран-2,5-дион (0,82 мл), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционную смесь разбавляли этилацетатом (30 мл), органический слой промывали 5% водным HCl, водой и рассолом, а затем сушили над NaSO и концентрировали под пониженным давлением. Осадок был очищен на хроматографической колонке с силикагелем, с использованием 5% метанола в дихлорметане в качестве элюента для выделения титульного вещества (0,25 г) в виде белого сухого вещества. Н ЯМР (300 MHz, CDCl): 0,95-1,16 (m, 19H); 1,23-1,78 (m, 23H); 2,15-2,59 (m, 11H); 2,77-3,58 (m, 16H); 4,33-4,70 (m, 4H); 5,58-5,60 (s, 1H); 5,78-5,80 (s, 1H); 7,44-7,47 (s, 1H); ES Масс.: 778 (100%), [М+1].
Пример 87: Получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
Стадия 1: синтез (1S,3R)-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбокссшидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоскилата:
2
3
2
4
1
В перемешиваемый раствор (1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты (Пример 5, 2,0 г, 3,844 ммоль) в диметилформамиде (15 мл) были при 0°С медленно порционно добавлены CsCO (1,45 г, 4,473 ммоль) и бензилбромид (0,51 мл, 3,843 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена этилацетатом (100 мл), промыта водой (50 мл), рассолом (50 мл) и высушена над NaSO. Затем растворитель выпаривали, и остаток очищали на хроматографической колонке с силикагелем (60-120, элюент 4% этилацетат в гексане) для получения титульного вещества в виде сухого белого вещества. Н ЯМР и масс-спектр соответствует структуре продукта, перешли к следующей стадии.
Стадия 2: Получение 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты:
2
4
3
1
-1
+
+
В перемешиваемый раствор (1S,3R)-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксилата (предыдущая стадия 1, 500 мг) в сухом пиридине (10 мл) был добавлен диметил янтарный ангидрид (953 мг), за которым последовал 4-диметиламинопиридин (181 мг). Затем реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 20 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) смесь разбавляли этилацетатом и промывали водой и рассолом. Объединенные органические слои были высушены над NaSO, сконцентрированы под пониженным давлением для получения сырого вещества в виде гуммозного твердого вещества. Сырое вещество было очищено на хроматографической колонке с силикагелем с использованием сетки на 100-200 меш и смесей гексана и этилацетата в качестве подвижной фазы для получения титульного вещества. Вес: 400 мг. Выход: 67.1%. Н NMR (300 MHZ, CDCl): δ 7,36 (5H, s), 5,70 (1H, d, J=7,8 Hz), 5,136 (2H, d, J=5,7 Hz), 4,723 (1H, s), 4,58 (1H, s), 4,57-4,47 (1H, m), 4,14-4,11 (1H, m), 3,10-3,09 (1H, m), 2,71-2,60 (4H, m), 2,52-2,31 (2H, m), 2,15-2,00 (1H, m), 1,93-1,89 (2H, m), 1,80-1,17 (31H, m), 0,95 (6H, m), 0,91 (3H, s), 0,882 (3H, s), 0,856 (3Н, s), 0,820 (3H, s), 0,786 (1H, m); ИК (KBr, см): 3406, 3069, 2951, 1734, 1664, 1642, 1509, 1499, 1474, 1456, 1391, 1234, 1184, 1150, 977, 881, 697; Масс.: [М+Н]800,6 (10%), 822,65 [M+Na]; Интервал плавления: 64,7-100,4°С
Пример 88: Получение (1S,3R)-3-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-(3-карбокси-3-метилбутаноилокси)-1-изопропил-5а,5b,8,8,11а-пентаметиликосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамидо)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты:
3
-1
В перемешиваемый раствор 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклореntа[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты (Пример 87, 200 мг) в этилацетате (20 мл) при комнатной температуре были добавлены 10% палладия на угле (каталитическое количество), и реакционная смесь перемешивалась в атмосфере газообразного Н2 при комнатной температуре в течение 12 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была отфильтрована через целитовый пласт, а полученный фильтрат сконцентрирован под пониженным давлением для получения дебензилированного титульного вещества в виде белого сухого вещества. Вес: 0,100 g: Выход: 56,2%, 1Н NMR (300 MHz, CDCl): δ 5,77 (d, J=7,8 Hz, 1H), 4,54-4,507 (m, 1H), 4,157-4,13 (m, 1H), 2,9-2,80 (m, 1H), 2,7-2,61 (m, 3Н), 2,60-2,20 (m, 5H), 2,00-1,93 (m, 1H), 1,80-1,10 (m, 30Н), 0,95 (s, 6H), 0,941 (s, 3Н), 0,88 (s, 6H), 0,84 (d, J=7,6 Hz, 6H), 0,832 (s, 3Н), 0,823 (s, 3Н); ИК (KBr, см): 3403, 2956, 2620, 1710, 1652, 1648, 1509, 1474, 1367, 1245, 1194, 1148, 1000, 978, 877, 620, 509; M,R: 150,1°С-282,9°С.
Пример 89: Получение (1R,3S)-1-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-3-(4-(этоксикарбонил)пиперидин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопенти[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата:
2
4
3
1
+
-1
В охлажденный раствор (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1S,3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (Пример 18, 1,0 г) в сухом дихлорметане (15 мл) был по каплям в атмосфере азота добавлен оксалилхлорид (1,24 мл), и смесь перемешивали в течение 2 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали при пониженном давлении для получения сырого вещества в виде белого сухого вещества. Этот сырой хлорангидрид был растворен в сухом дихлорметане и добавлен к смеси этил 1-((1R,3S)-3-амино-2,2-диметилциклобутанкарбонил)пиперидин-4-карбоксилата (678 мг) и триэтиламина (0,5 мл). Реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение ночи. По завершении реакции смесь была разбавлена дихлорметаном, промыта водой, рассолом, высушена над NaSO, сконцентрирована под пониженным давлением и очищена на хроматографической колонке с силикагелем для получения титульного вещества (700 мг). Выход: 51%. Н ЯМР (300 MHZ, CDCl): δ 7,353 (5H, m), 5,958-5,80 (1H, m), 5,12 (2H, d, J=3,90 Hz), 4,73 (1H, m), 4,586 (1H, s), 4,5-4,35 (2H, m), 4,20-4,11 (2H, m), 3,80 (1H, m), 3,20-3,02 (2H, m), 2,898-2,75 (4H, m), 2,70-2,6 (1H, m), 2,59-2,40 (2H, m), 2,38-2,28 (2H, m), 1,96-1,80 (5H, m), 1,79-1,10 (32H, m), 0,961 (6Н, s), 0,952 (6Н, s), 0,926 (6Н, s), 0,840 (3H, s), 0,829 (3Н, s), 0,728 (1H, m); FAB масса: 988 [M+Na]; ИК (KBr, см): 3403, 2952, 1733, 1656, 1652, 1639, 1509, 1497, 1463, 1455, 1375, 1263, 1235, 1184, 1108, 1021, 983, 882, 750 и 697; M,R: 138,1°C-154,2°C; ВЭЖХ: 91,21%.
Пример 90: Получение (1R,3S)-3-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1S,3R)-3-(4-(этоксикарбонил)пиперидин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)карбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты:
3
2
3
1
-1
В перемешиваемый раствор (1R,3S)-1-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1S,3R)-3-(4-(этоксикарбонил)пиперидин-1-карбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-у1)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата (Пример 89, 200 мг) в сухом дихлорметане (10 мл) были добавлены триэтиламин (0,1 мл) и EtSiH (48,1 мг) при 0°С, а затем в азотной среде был добавлен Pd(OAc) (5 мг). Реакционная смесь перемешивалась при нагревании с обратным холодильником в течение ночи. По завершении реакции (по данным ТСХ) смесь разбавляли дихлорметаном и концентрировали при пониженном давлении, а затем очищали на хроматографической колонке для получения титульного вещества (150 мг, выход 83,3%). Н ЯМР (300 MHz, CDCl): δ 6,152-6,09 (1H, m), 4,736 (1H, s), 4,58 (1H, s), 4,52-4,35 (2H, m), 4,19-4,12 (3H, m), 3,85-3,80 (1H, m), 3,18-3,08 (2H, m) 2,95-2,86 (4H, m), 2,66-2,20 (7H, m), 2,10 (1H, m), 2,05-1,89 (7H, m), 1,80-1.14 (31H, m), 1,059 (3H, s), 0,955 (3H, s), 0,930 (3H, s), 0,918-0,884 (11H, m), 0,846 (1H, m). Macc. (ESI): 897,70 [M+Na] (50%); ИК (KBr, см): 3403, 2954, 2869, 1733, 1603, 1456, 1459, 1376, 1236, 1185, 1041, 983, 943 и 883; Интервал плавления: 78°С-125,2°С; ВЭЖХ: 93,94%.
Пример 91: Получение (1R,3S)-1-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3а-((1R,3S)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата:
2
4
3
1
+
-1
В перемешиваемый раствор (1S,3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты (525 мг, 2,003 ммоль) и диизопропилэтиламина (1,027 мл, 6,0 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) при 0°С добавляли 2,4,6-трихлорбензоилхлорид (0.313 мл, 2.00 ммоль). Реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 6 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали, а сырой ангидрид растворяли в сухом пиридине (10 мл). Затем был добавлен (1S,3R)-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид)-2,2-диметилциклобутанкарбокилат (Пример 87-Стадия 1, 0,7 г, 1,641 ммоль) в пиридине (10 мл), а затем 4-диметиламинопиридин (каталитическое количество), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 12 часов. Растворитель выпаривали, реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали водой. Органический слой сушили NaSO и концентрировали при пониженном давлении. Полученное сырое вещество было очищено на хроматографической колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент: 5% этилацетат в гексане) для получения титульного вещества в виде белого сухого вещества. Н ЯМР (300 MHZ, CDOD): δ 7,35 (10Н, s), 5,65 (1H, d, 7=8,1 Hz), 5,13 (4H, d, J=3,6 Hz), 4,72 (1H, s), 4,57 (1H, s), 4,47-4,43 (1H, m), 4,2-4,09 (1H, m), 3,2-3,0 (1H, m), 2,81-2,61 (5H, m), 2,46-2,317 (3H, m), 1,877 (3H, s), 1,713-1,14 (25H, m), 0,954 (6H, s), 0,95 (3H, s), 0,914 (3H, s), 0,892 (3H, s), 0,880 (3H, s), 0,851 (3H, s), 0,782 (1H, m); FAB Масс.: [M+Na]940 (100%); ИК (KBr, см): 3410, 2954, 2869, 1733, 1664, 1498, 1459, 1456, 1234, 1184, 1020, 883, 697; M, предел: 71,9-111,3°С.
Пример 92: Получение (1S,3R)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1S,3R)-3-карбокси-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид)-2,2-диметилциклобутанкарбоксильной кислоты:
3
2
3
1
+
-1
В перемешиваемый раствор (1R,3S)-1-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата (Пример 91, 350 мг) в сухом дихлорметане (10 мл) при 0°С добавляли триэтиламин (0,1 мл) и EtSiH (88,5 мг), а затем в атмосфере азота добавляли Pd(OAc) (5 мг), и реакционную смесь перемешивали при нагреве с обратным холодильником в течение ночи. По завершении реакции (по данным ТСХ) смесь разбавляли дихлорметаном и концентрировали при пониженном давлении. Затем остаток очищали на хроматографической колонке для получения титульного вещества в виде белого сухого вещества. Н ЯМР (300 MHZ, CDOD): δ 5,86 (1H, d, J=8,1 Hz), 4,732 (1H, s), 4,585 (1H, s), 4,54-4,43 (1H, m), 4,2-4,09 (1H, m), 3,2-3,0 (2H, m), 2,80-2,71 (2H, m), 2,46-2,3 (5H, m), 2,00-1,87 (3H, m), 1,83-1,134 (30Н, m), 0,978 (6H, s), 0,948 (3H, s), 0,914 (3H, s), 0,884 (3H, s), 0,880 (3H, s), 0,851 (3H, s), 0,782 (1H, m); FAB Масс.: [M+Na]759 (100%); ИК (KBr, см): 3405, 2955, 2870, 1726, 1658, 1652, 1638, 1463, 1390, 1234, 1192, 1019, 879, 727, 621; Интервал плавления: 102,3-158,2°С.
Пример 93: Получение (1R,3S)-1-бензил 3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR.11bR,13aR,13bR)-3а-(4-(этоксикарбонил)пиперидин-1-карбонил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-у1)2,2-диметилциклобутан-1,3-дикарбоксилата:
2
2
4
3
1
-1
Раствор (COCl) (0,493 мл, 5,71 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли к перемешиваемому раствору (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-((1S,3R)-3-(бензилоксикарбонил)-2,2-диметилциклобутанкарбонилокси)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксильной кислоты (Пример 18, 0,400 г, 0,571 ммоль) в дихлорметане (10 мл) при 0°С. Реакционная смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 3 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) растворитель выпаривали в азотной среде, и смесь растворяли в дихлорметане (10 мл), который добавляют в перемешиваемый раствор 4-этилпиперидинкарбоксилата (0,179 г, 1,142 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 16 часов. По завершении реакции (по данным ТСХ) реакционная смесь была разбавлена дихлорметаном, промыта водой, 1H HCl, водой, рассолом, и высушена NaSO. Растворитель выпаривали, и остаток очищали на хроматографической колонке с силикагелем (100-200 меш, элюент 15% этилацетат в гексане) для получения титульного вещества в виде грязно-белого сухого вещества. Вес: 0,400 г: Выход: 83,5%. Н ЯМР (300 MHz, CDCl): δ 7,363-7,34 (5H, m), 5,12 (2H, d, J=3,9 Hz), 4,72 (1H, d, J=1,5 Hz), 4,51 (1H, d, J=1,5 Hz), 4.44 (1H, m), 4,25 (1H, m), 4,2 (2H, m), 2,98-2,73 (5H, m), 2,63 (1H, m), 2,51 (1H, m) 2,1-2,0 (2H, m), 2,09-1,8 (6H, m), 1,65-1,10 (30Н, m), 0,959 (6H, s), 0,949 (3H, s), 0,928 (9H, s), 0,838 (1H, m); Mass (ESI): 862,70 [M+Na] (20%); ИК (KBr, см): 3434, 2950, 2867, 2366, 1734, 1631, 1456, 1411, 1390, 1376, 1319, 1264, 1234, 1182, 1168, 1039, 916, 881, 748, 697 см-1; Интервал плавления: 57,9°С-92,9°С; ВЭЖХ: 94,30%.
3
Последующие компоненты были приготовлены выше указанным способом, а начальные С-ОН составляющие были взяты из выше перечисленных веществ.
Пример 94: 5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-3,3-диметил-5-оксопентановой кислоты:
1
-1
3
Н ЯМР (300 MHz, CDCl): δ 7,24-7,29 (2H, m), 7,14-7,22 (1H, m), 7,11-7,13 (2H, m), 6,28-6,30 (1Н, m), 4,72 (1H, s), 4,57 (1H, s), 4,21-4,45 (2H, m), 2,23-2,50 (15H, m), 1,82-2,02 (15H, m), 1,14-1,67 (23H, m), 0,80-095 (17H, m); масса (ESI): 854 [M+1] (100%); ИК (KBr, см): 3423, 3066, 2947, 1724, 1656, 1639, 1509, 1375, 1232, 1151, Интервал плавления: 112-160°С; ВЭЖХ: 97,36%.
Пример 95: 2,2-диметил-4-оксо-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-3а-((1S,4R)-4-(морфолинометил)циклопент-2-энилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)бутановая кислота:
1
3
Н ЯМР (300 MHz, CDCl): δ 0,95-1,16 (m, 19H), 1,23-1,78 (m, 23H), 2,15-2,59 (m, 11H), 2,77-3,58 (m, 11H), 4,33-4,70 (m, 4H), 5,58-5,60 (s, 1H), 5,78-5,80 (s, 1H), 7,44-7,47 (s, 1H); ES Масс.: 749 (100%); ВЭЖХ: 99,6%.
Пример 96: 4-оксо-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-пентаметил-3а-(3-(пиперидин-1-илметил)циклопентилкарбамоил)-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)бутановая кислота:
1
-1
3
Н ЯМР (300 MHz, CDCl): 0,95-1,16 (m, 19H), 1,23-1,78 (m, 23H), 2,15-2,59 (m, 11Н), 2,77-3,58 (m, 16H), 4,33-4,70 (m, 4H), 5,58-5,60 (s, 1H), 5,78-5,80 (s, 1H); ИК см: 3391, 2951, 2866, 2731, 2556, 1726, 1630, 1356, 1244, 1185, 1137, 1004; Масс.: 749 [М+1] (100%); ВЭЖХ: 90%.
Пример 97: (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-(2,2-диметил-3-(3-морфолино-3-оксопропилкарбамоил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид:
1
-1
3
Н ЯМР (300 MHz, CDCl): 0.87-0.96 (m, 20H), 1.22-1.89 (m, 23H), 1.89-2.08 (m, 8H), 2.34-2.52 (m, 4H), 3.12-3.16 (m, 2H), 3.40-3.43 (m, 2H), 3.55-3.66 (m, 8H), 4.09 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 6.072-6.10 (d, 1H, J=8.4 Hz), 6.21-6.24 (m, 1H); ИК см: 3372, 2945, 2865, 1656, 1652, 1646, 1509, 1375, 1271, 1235, 1161, 1034, 754; Масс.: 744 [M+Na] (100%); ВЭЖХ: 89%
Пример 98: (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-N-(2,2-диметил-3-(3-оксо-3-(пирролидин-1-ил)пропилкарбамоил)циклобутил)-9-гидрокси-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-3а-карбоксамид:
1
-1
3
Н ЯМР (300 MHz, CDCl): 0,74-0,95 (m, 23H), 1,22-1,38 (m, 12H), 1,49-1,67 (m, 13H), 1,84-2,37 (m, 7H), 2,37-2,47 (m, 5H), 3,12-3,60 (m, 6H), 4,05-4,08 (m, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 6,13-6,15 (d, 1H, J=8,4Hz), 6,44-6,48 (m, 1H); ИК см: 3355, 2948, 2869. 1638, 1513, 1452, 1376, 1250, 1046, 881, 752; Масс.: 728 [M+Na] (100%); ВЭЖХ: 84%.
Пример 99: 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((1R,3S)-3-((4-бензилпиперидин-1-ил)метил)циклопентилкарбамоил)-5а,5b,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосаэдро-1Н-циклопента[а]хризен-9-илокси)-2,2-диметил-4-оксобутановая кислота:
1
-1
3
Н ЯМР (300 MHz, CDCl): 0,80-0,95 (m, 17H), 1,14-1,67 (m, 23H), 1,82-2,02 (m, 15H), 2,23-3,50 (m, 15H), 4,21-4,45 (m, 2H), 4,57 (s, 1H), 4,72 (s, 1H), 6,28-6,30 (m, 1H), 7,11-7,13 (m, 2H), 7,14-7,22 (m, 1H), 7,24-7,29 (m, 2H); ИК см: 3416, 2944, 2869, 2179, 1733, 1729, 1640, 1466, 1365, 1033, 1055, 977; Масс.: 840 [М+1] (100%); ВЭЖХ: 83,13%.
Фармакологическая активность
Описанные вещества можно протестировать на антивирусную активность с помощью процедур, известных любому среднему специалисту. Например, следующие протоколы могут использоваться для тестирования веществ. Эти протоколы приводятся с иллюстративными целями и не ограничивают объем изобретения.
Пример 100: Оценка цитотоксичности веществ на клетках Sup-Tl:
1
6
2
2
Восстановление 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолин бромида (МТТ, сигма) выбрано как оптимальная конечная точка при измерении жизнеспособности клетки (Mosmann, 1983; Cole, 1986; Alley et al., 1988). Клетки Т (0,2×10 клеток на чашку) высеваются в планшеты с 96 лунками. К клеткам добавляется вещество в нарастающей концентрации, планшеты помещаются в инкубатор при 37°С на приблизительно 14 часов в среде CO. В инкубаторе содержание СО составляет 5%. Питательная среда заменяется на свежую с добавлением 20 µL 5 мг/мл 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолин бромида (МТТ, сигма). По прошествии 4 часов инкубации в увлажненной среде питательная среда удаляется, а в чашки добавляется 200 µl 0,1 N кислого изопропилового спирта, чтобы растворить МТТ-формазановые кристаллы. Оптическая плотность регистрируется на 570 нм, сразу же после появления пурпурного цвета. Каждый эксперимент проводится трижды, а данные фиксируются как средние значения со стандартной погрешностью. Процент жизнеспособности клеток высчитывается с учетом оптической плотности восстановленного МТТ в экспериментах, проведенных в отсутствие какого-либо вещества.
Линия клеток: Sup-Tl
Результаты:
Концентрация
Процент жизнеспособности
Пример 4
Пример 6
1 mM
26,18
23,15
100 µМ
38,99
88,79
1 µМ
85,16
88,63
100 nM
86,84
82,71
1 nM
85,81
86,88
Пример 101: Оценка цитотоксичности веществ на клетках Molt-4:
Было изготовлено 10 мМ маточного раствора тестового вещества в DMSO, который поместили на хранение при -20°С для дальнейшего использования. В день проведения опыта рабочие растворы изготовлялись путем последовательного разведения с DMSO. Окончательная концентрация DMSO в тестовом материале равна 1%.
Оценка МТТ проводилась в формате 96 лунок с использованием линии клеток Molt-4 (острая Т-лимфобластная лейкемия человека) - суспензионная культура сохранялась в RPMI с 10% FBS-пересевом.
Было высеяно приблизительно 0,03 млн клеток/лунку, и планшет поместили на инкубацию на 16 часов. По завершении инкубации клетки обработали исследуемым веществом в указанной концентрации в трех идентичных опытах, после чего инкубацию продолжили на еще 24 часа. По окончании инкубационного периода, на планшет был добавлен реагент МТТ (10 µ1, 5 мг/мл раствор), и инкубацию продолжали еще 4 часа. Реакция была остановлена добавлением 200 µl 0, 1N кислого пропанола. Проявившийся цвет был оценен планшет-ридером с использованием 590 нм фильтров. Процент жизнеспособности рассчитывался путем сравнения среднего показателя оптической плотности с контрольным (только среда).
Линия клеток: Molt-4
Результаты:
Концентрация
Процент жизнеспособности
Пример 4
Пример 6
0,1 µМ
101,26
102,89
1 µМ
98,74
98,99
10 µМ
102,26
82,79
100 µМ
7,03
7,27
Пример 102: Оценка Р24 на анти-ВИЧ активность:
2
Вирусная р24 измеряется спустя 72 часа после инфицирования в присутствии медикаментов с использованием набора ABL р24 ELISA. На 24-луночные планшеты были помещены по 0,5 млн клеток/лунку и добавлены нарастающие концентрации медикаментов. В каждую чашку было добавлено по 1 нг/мл вируса HIV-1 (ВИЧ-1), и планшеты были помещены на инкубацию на ночь при 37°С (37°С и 5% CO). Спустя 16 часов инкубации среда менялась на новую, в которой культуры выращиваются в течение 72 часов. Количественная оценка Р24 проводилась на 4й день после инфицирования с использованием набора ABL в соответствии с инструкцией производителя.
Результаты:
Процент ингибирования репликации HIV-193IN 101 в клетках Sup-Tl
Концентрация
Процент жизнеспособности
Пример 4
Пример б
100 µМ
87,54
34,87
1 µМ
42,44
32,08
100 nM
23,54
21,15
1 nM
17,66
15,16
100 рМ
13,03
17,47
Пример 103: Определение анти-HIV-1(IC50) и цитотоксичности против заразного штамма HIV-1 (92-НТ 599):
2
Клетки МТ2 были инфицированы штаммом HIV-1 92-HT599 (10TCID5 0/3 0000 клеток). Инфицированные клетки помещены на планшеты в концентрации по 30000 клеток на лунку (на оценочном микропланшете с 96 лунками). Исследуемое вещество добавляется на микропланшет в указанном формате с окончательной концентрацией DMSO (среды), не превышающей 1%. Инкубация происходила в среде СО в течение 96 часов для вирусного инфицирования. В конце инкубационного периода из каждой лунки была взята аликвотная проба для оценки р24. Количественный анализ р24 является показателем противовирусной активности вещества. Процент ингибирования рассчитан с учетом контрольных значений (среды).
Оценка Р24 производилось с использованием набора Advance Biosciences no методикам, описанным поставщиком.
Подготовка соединений:
Исходный раствор 10 мМ был приготовлен путем разведения тестируемого соединения в ДМСО. Последующие разведения с ДМСО производились до получения необходимых рабочих растворов (100Х).
Результаты:
Пример
IC50 (µМ)
96
0,0001
51
0,001
59
0,006
61
0,007
AZT
3,1
Пример
Концентрация
Процент ингибирования
23
1 µМ
37
0,1 µМ
11
14
1 µМ
32
0,1 µМ
71
40
1 µМ
42
0,1 µМ
13
44
1 µМ
43
0,1 µМ
15
25
1 µМ
25
0,1 µМ
33
15
1 µМ
98
0,1 µМ
86
97
1 µМ
67
0,1 µМ
37
98
1 µМ
50
0,1 µМ
1
26
1 µМ
53
0,1 µМ
52
99
1 µМ
97
0,1 µМ
89
50
50
Пример 104: Оценка веществ на их анти-HIV-l ICs активность и цитотоксичность (CC) с использованием трех заразных штаммов HIV-1 (NL4-3. IIIB and CNHN24) на клетках МТ2:
Описание процедуры:
Подготовка соединения:
Соединение было растворено в DMSO с получением раствора 30 мМ. Затем раствор 30 мМ был снова разведен DMSO до 4 мМ. Раствор 4 мМ использовался как максимальная концентрация для осуществления 11-ступенчатой схемы 3-кратных разведений с использованием DMSO на 96-луночном планшете для получения планшета с дозированным веществом. Вещества с планшета были перенесены на новый планшет с 96 лунками (рабочий планшет), содержащий забуференный фосфатом физиологический раствор с 0,05% плурониевой кислоты. С рабочего планшета раствор вещества был перенесен на оценочные планшеты на 384 лунок.
Контрольные вещества для контрольных лунок были приготовлены и добавлены на оценочные планшеты отдельно.
Алгоритм оценки:
2
Клетки МТ2 были смешаны со штаммом HIV-1 NL4-3 (или IIIB, или CNHN24), и смесь клеток и вируса была добавлена на вышеупомянутые планшеты для оценки противовирусной активности. После инкубации при 37°С, в среде 5% СО, надосадочная жидкость с оценочного планшета была перенесена на новый планшет с 384 чашками, содержащий индикаторные клетки с геном люциферазы светляков под LTR-контролем HIV-1. Уровень экспрессии люциферазы сопоставляли с инфицирующей способностью HIV-1 и измеряли набором Bright-Glo (Promega).
Для оценки цитотоксичности аналогичное количество клеток МТ2 (как для оценивания противовирусной активности, только без вируса HIV-1) было добавлено на планшеты для определения цитотоксичности. Цитотоксичность измерялась методом анализа жизнеспособности клеток Cell Titer-Glo (Promega).
50
Терапевтический индекс (ТИ) определялся отношением СС/IC50
Результаты:
Пример 9
Пример 12
Пример 48
Вирусный штамм
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
TI
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
NL4-3
0,005
>20
3579
0,021
>20
316
0,009
>20
2072
II В
0,007 (0,034)
>20
2658
0,029
>20
227
0,018
>20
1061
CNHN24
0,008 (0,051)
>20
2429
0,017
>20
383
0,011
>20
1691
Пример 57
Пример 54
Пример 94
Вирусный штамм
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
TI
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
NL4-3
0,857
>20
23
0,013
>20
1538
0,023
4
173
IIB
0.590
>20
33
0,005
>20
4000
0,019
4
210
CNHN24
1,068
>20
20
0,024
>20
833
0,026
4
153
Пример 74
Пример 54
Пример 4
Вирусный штамм
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
TI
IC50 (µМ)
СС50 (µM)
Коэффициент безопасности
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
NL4-3
0,165
7,76
47
0,013
>20
1538
0,201
20
91
II В
0,086
7,76
90
0.005
>20
4000
0,364
20
54
CNHN24
0,163
7,76
47
0,024
>20
833
0,218
20
91
Пример 8
Пример 11
Пример 48
Вирусный штамм
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
TI
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
NL4-3
2,197
20
9
4,250
>20
4,7
0,017
20
1176
IIB
3,136
20
6
5,666
>20
3,5
0,025
20
800
CNHN24
2,828
20
7
5,880
>20
3,4
0,021
20
800
Пример 19
Пример 95
Пример 33
Вирусный штамм
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
TI
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
NL4-3
0,072
20
277
0,004
>20
5000
6,700
20
2,98
II В
0,021
20
952
0,001
>20.
20000
6,700
20
2,98
CNHN24
0,026
20
769
0,003
>20
6666
6,700
20
2,98
Пример 45
Пример 36
Вирусный штамм
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
TI
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
NL4-3
0,017
20
1177
0,005
>20
4000
II В
0,025
20
800
0,004
>20
5000
CNHN24
0,022
20
800
0,005
>20
4000
50
50
Пример 105: Оценка веществ на их анти-HIV-1 ICs активность и цитотоксичность (CC) с использованием трех заразных штаммов HIV-1 (NL4-3. IIIB и CNHN24) в клетках РВМС (мононуклеарах периферической крови):
Подготовка соединения:
Действующее вещество было растворено в DMSO до получения 30 мМ раствора. Затем 30 мМ раствор с использованием DMSO был разведен до 4 ммоль. 4 мМ раствор использовался как максимальная концентрация для осуществления 11-ступенчатой схемы 3-кратных разведений с использованием DMSO на 96-луночном планшете для получения планшета с дозированным веществом. Вещества с планшета были перенесены на новый планшет с 96 лунками (рабочий планшет), содержащий забуференный фосфатом физиологический раствор с 0,05% плурониевой кислоты. С рабочего планшета раствор вещества был перенесен на оценочные планшеты на 384 лунок.
Контрольные вещества контрольных лунок были приготовлены и добавлены на оценочные планшеты отдельно.
Алгоритм оценки:
2
Мононуклеары периферической крови были выделены из цельной крови человека при помощи Histopaque-1077 (Sigma, #10771), заморожены и помещены на хранение в емкость с жидким азотом. За два дня до проведения оценки мононуклеары были извлечены и помещены для проращивания в культурную среду, содержащую РНА-Р (Sigma,#L1668). В день оценки мононуклеары осаждались центрифугованием и ресуспендировались в среде, содержащей IL-2 (Sigma, #17908), затем эти клетки были смешаны с HIV-1 штаммом NL4-3, MOI=0,01 (или IIIB, или CNHN24), и смесь клеток и вируса была добавлена на вышеупомянутые планшеты для оценки противовирусной активности. После инкубации при 37°С, в среде 5% CO, надосадочная жидкость с оценочного планшета была перенесена на новый 384-луночный планшет, содержащий индикаторные клетки с геном люциферазы светляков под LTR-контролем HIV-1. Уровень экспрессии люциферазы был сопоставлен с инфицирующей способностью HIV-1 и измерен набором Bright-Glo (Promega).
Для оценки цитотоксичности на планшет оценки цитотоксичности было добавлено столько же мононуклеаров периферической крови, сколько при определении антивируса, но без вируса HIV-1. Цитотоксичность измерялась анализатором жизнеспособности клеток CellTiter-Glo (Promega).
Результаты:
Пример 45
Вирусный штамм
IC50 (µМ)
СС50 (µМ)
Коэффициент безопасности
NL4-3
0,017
>20
1146
II В
0,025
>20
793
CNHN24
0,022
>20
921
Список литературы:
1. Mosmann Т, December 1983, Journal of immunological methods, 65 (1-2), 55-63.
2. SPC Cole, cancer chemotherapy and Pharmacology, 1986, 17, 259-263.
3. Antiviral methods and protocols (Eds: D.Kinchington and RFSchinazi), Humana press Inc. 2000]
4. HIV protocols (Eds: NL Michael and JHKin), Humana press Inc, 1999]
5. DAIDS virology manual for HIV laboratories, publication NIH-97-38-38, 1997
6. HIV-1 p24 antigen capture assay, enzyme immuno assay for deduction of HIV-1 p24 in tissue culture media-Advance bioscience laboratories Inc., kit procedure.
Несмотря на то, что описываемое здесь изобретение описано со ссылками на конкретные варианты осуществления, необходимо понимать, что эти формы служат исключительно иллюстрациями принципов и способов применения настоящего изобретения. Следовательно, необходимо понимать, что в эти иллюстративные воплощения могут быть внесены многочисленные модификации и что возможны и иные решения, которые, тем не менее, не выходят за рамки сущности и объема вышеописанного изобретения.
Все публикации и патентные заявки, процитированные в данной заявке на изобретение, включены в настоящую заявку путем посредством ссылки в той же степени, как если бы каждая публикация или патентная заявка были каждая отдельно и особо включены в настоящую заявку посредством ссылки.