Фенотипические проявления генотипа HFE у больных хроническим гепатитом с с синдромом перегрузки железом

УДК 616.36-002.2-056.7-06

Е.А Кулагина

ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ГЕНОТИПА HFE У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С С СИНДРОМОМ ПЕРЕГРУЗКИ ЖЕЛЕЗОМ

ГУ НИИ терапии СО РАМН, Новосибирск

Целью данного исследования явилось выявление связи клинических признаков гемохрома-тоза с полиморфизмом гена HFE у больных хроническим гепатитом С. Материалы и методы: у 70 пациентов с доказанным хроническим гепатитом С определялись содержание железа сыворотки, общей железосвязывающей способности, коэффициента насыщения трансфер-рина железом, ферритина сыворотки, глюкозы и генотипы HFE. Результаты: Мутантные аллели гена HFE (C282Y и H63D) достоверно чаще ассоциируются с перегрузкой железом (в 71% случаев против 32% без перегрузки) и с клиническими признаками гемохроматоза (р<0,05) при хроническом гепатите С. Присутствие аллеля C282Y при хроническом гепатите С в большей степени связано с возникновением клинических признаков гемохроматоза, чем присутствие других аллелей гена HFE. У смешанных гетерозиготных носителей C282Y/ H63D при хроническом гепатите С выявлена наибольшая частота фенотипических проявлений генотипа HFE (синдром перегрузки железом, клинические признаки гемохроматоза). Заключение: Фенотипические проявления генотипа HFE у больных хроническим гепатитом С связаны с наличием мутаций гена HFE, в большей степени C282Y.

Ключевые слова: хронический гепатит С, синдром перегрузки железом, полиморфизм гена HFE

Актуальность

С открытием в 1989 г. вируса гепатита С началось интенсивное изучение HCV инфекции. Неудовлетворенность результатами лечения хронического гепатита С (ВГС) объясняет поиск новых подходов для выбора эффективной терапии. В частности, особый интерес вызывает синдром перегрузки железом (СПЖ), поскольку отмечено его неблагоприятное влияние на течение ВГС [1, 2]. Избыточное накопление железа в печени может способствовать воспалительно-деструктивному повреждению, ускоряя прогрессирование до стадии цирроза и рака печени [3, 4]. Механизмы возникновения перегрузки железом при ВГС остаются до конца не изученными. Предполагается влияние на развитие этого синдрома наследственных нарушений обмена железа, в частности связанных с полиморфизмом гена, ответственного за развитие первичного гемохроматоза (HFE). Имеющиеся в настоящее время данные о распространенности мутантных аллелей гена HFE (С282Х Н63Э, S65С) у больных ВГС достаточно разноречивыми [5]. Рядом авторов [6, 7, 8] отмечена их связь с возникновением синдрома перегрузки железом при данном заболевании и его проРабота выполнена под руководством и при содействии чле-на-корр. РАМН, проф. М.И. Воеводы и д-ра мед. наук, проф., С.А. Курилович.

гнозом (прогрессирование до стадии фиброза). В других исследованиях эти утверждения отвергаются. Некоторые авторы признают частичное влияние полиморфизма гена HFE и предполагают необходимость воздействия дополнительных экзогенных факторов и, возможно, наличие других генов для развития синдрома перегрузки железом у больных хроническим вирусным гепатитом С [9]. В связи с этим дальнейшее накопление информации по данной проблеме представляется крайне актуальным как для понимания фундаментальных аспектов патогенеза ВГС, так и для совершенствования методов его диагностики и лечения.

Цель исследования. Выявление связи между синдромом перегрузки железом и фенотипическими проявлениями генотипа HFE у больных хроническим гепатитом С.

Материалы и методы

Для решения поставленных задач было обследовано 70 больных хроническим гепатитом С.

Критериями включения при формировании группы исследования были наличие ВГС на 1-3 стадиях гепатита, подтвержденного иммунологическими, вирусологическими, биохимическими, морфологическими методами. Критериями исключения были регулярные гемотрансфузии, коинфекция вирусными гепатитами В и Д, нали-

чие цирроза печени, отказ больного от участия в исследовании.

Никто из обследуемых больных не получал препаратов железа и биологически активных добавок, содержащих железо.

Обследуемый не принимал пищу минимум 12 часов до забора крови. Кровь брали в положении сидя из локтевой вены в вакуумированные пробирки, отстаивали при температуре 20 °С в течение 1-3 часов, после этого охлаждали до 4 °С и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 30 минут.

У всех больных выявлены суммарные антитела к рекомбинантному антигену вируса гепатита С в течение по крайней мере 6 месяцев (тест-система «РекомбиБест анти-ВГС-стрип»). Для обнаружения РНК HCV в сыворотке использовали качественную RT-PCR пробу (набор фирмы «Литех», Москва).

Активность печеночных ферментов и уровень глюкозы, как и тест нарушения толерантности к углеводам, определяли традиционными аналитическими методами.

Для выявления нарушений углеводного обмена выполняли модифицированную пероральную пробу на толерантность к глюкозе по методике, рекомендуемой ВОЗ (1999). Анализ капиллярной крови проводили натощак и спустя 120 минут после нагрузки (75 граммов глюкозы) глюкометром фирмы «Эймз» с использованием полосок «Глюкофилм». У больных с сахарным диабетом в анамнезе и с уровнем глюкозы натощак более 6,1 ммоль/л тест не проводили. Результаты теста интерпретировали по критериям ВОЗ (1999).

Кроме стандартной оценки функции печени, исследования включали определение батофенант-ролиновым методом (наборами фирмы «Лахема», Чехия) уровня сывороточного железа и общей железосвязывающей способности, затем рассчитывали коэффициент насыщения трансферрина железом (КНТ). Ферритин определялся имму-нохемилюминесцентным методом на анализаторе Амерлайт производства фирмы «Amersham» (Великобритания).

Определение генотипов HFE по полиморфным сайтам C282Y, Ш30, S65C было проведено с помощью рестрикционного анализа соответствующих ПЦР-продуктов.

Статистическую обработку данных проводили с помощью пакета прикладных статистических программ SPSS 10.0. Применяли стандартные статистические методы, включающие вычисление средних арифметических, стандартных отклонений (М±SD) и доверительных интервалов (95% И). Достоверность различий для непараметрических показателей определялась с помощью тес-

та Манн-Уитни. Достоверность различий частот оценивалась с помощью критерия х2 или точного критерия Фишера (при п<40). Достоверными считали различия при уровне значимости р<0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Обследовано 70 больных хроническим гепатитом С, из них мужчин — 40 человек (57%), средний возраст 46±13 лет.

Все больные имели персистирующую HCV инфекцию, доказанную в течение по крайней мере 6 месяцев (ИФА и ПЦР диагностика).

Средний уровень сывороточного железа в общей группе обследованных хроническим гепатитом С составил 26,2±13,2 мкмоль/л с большим разбросом значений (10,0-89,5 мкмоль/л), КНТ 40,7±17,4% (13,5-100%). Концентрация ферри-тина находилась в пределах 174,6±158,5 нг/мл (6,8-987 нг/мл), в том числе у мужчин — 204,1±132,2 нг/мл (15-593 нг/мл), у женщин — 135,4±182,9 нг/мл (6,8-987 нг/мл) при ВГС.

При корреляционной оценке выявлена прямая связь сывороточной концентрации железа с содержанием ферритина (г=+0,336, р=0,004) и глюкозы (г=+0,236, р=0,049) у больных ВГС.

Для сравнения клинических признаков ге-мохроматоза в общей группе больных хроническим гепатитом С были выбраны такие характеристики, как меланоз, гепатомегалия и фиброз печени, оценке также подлежали такие фенотипические проявления генотипа HFE, как нарушения углеводного обмена (НОУ), биохимический синдром перегрузки железом (Таблица 1).

Таблица 1

Фенотипические проявления генотипа HFE у больных хроническим гепатитом С

Пол ГМ Фиброз Меланоз НОУ СПЖ

Мужчины 27,5 22,5 35 12,5 25

Женщины 23 27 30 20 23

Примечание: ГМ — гепатомегалия, СПЖ — синдром перегрузки железом, НОУ — нарушение углеводного обмена

Достоверных различий по полу характерных для гемохроматоза признаков в общей группе больных хроническим гепатитом С получено не было.

Известно, что СПЖ чаще встречается при хроническом гепатите ^ чем при других хронических заболеваниях печени, за исключением идио-патического гемохроматоза [10]. Предполагается, что вирус гепатита С использует железо в целях репликации. Однако причина избыточного накопления железа в организме при HCV-инфекции остается до конца не выясненной.

При изучении основных показателей обмена железа у больных хроническим гепатитом С ги-перферремия выявлена у 33% больных (40,6±13,4

Рис. 1. Частота синдрома перегрузки железом при хроническом гепатите С в Новосибирске

мкмоль/л (М±SD), из них 65% мужчин), КНТ выше нормативных значений — у 36% (М±SD 59,6±14,5%), а гиперферритинемия — у 47% (М±SD 273,9±175,4 нг/мл, в частности у мужчин (61%)- 294,6±128,6 нг/мл и 241,9±232,5 нг/мл у женщин). Поскольку при хроническом гепатите С концентрация ферритина может быть изменена в результате деструктивно-воспалительного процесса, для повышения достоверности результатов исследования за синдром перегрузки железом принимали сочетание гиперферремии и гипер-ферритинемии (Рис. 1).

Синдром перегрузки железом обнаружен у 24% больных вирусным гепатитом С, что свидетельствует о высокой частоте данного синдрома среди обследованных больных и совпадает с результатами других исследователей (25-50%). Средний уровень железа сыворотки составил 39,2±9,0 мкмоль/л, ферритина — 300,0±210,1 нг/мл, КНТ — 57,5±15,9%. Средний возраст больных с синдромом перегрузки железом составил 49±9 лет. Доля имеющих перегрузку железом мужчин

— 59%. В возрасте 40-49 лет синдром перегрузки железом выявлен чаще всего (42%). Обнаружена достоверная связь между уровнем ферритина в сыворотке и гликемией (г=+0,643, р=0,005) при хроническом гепатите С.

Для доказательства предположения, что полиморфизм гена HFE может быть связан с повышенным накоплением железа у больных хроническим гепатитом С, всем больным проведено генотипи-рование для выявления мутантных аллелей гена ОТЕ.

Генотипы с мутантными аллелями гена HFE выявлены у 29 больных ВГС (41%) при среднем возрасте 48±13 лет и преобладании мужчин (62%). В частности, аллель C282Y обнаружен в гетерозиготном состоянии у 7 больных из 70 обследованных (10%), у 20 больных (28,6%) выявлен в гетерозиготном состоянии аллель H63D, у 5 человек

— аллель S65C (17,2%). Гомозигот по мутантным аллелям гена HFE не выявлено (Таблица 2).

3 больных хроническим гепатитом С оказались смешанными гетерозиготными носителями C282Y+H63D гена ОТЕ.

Средний уровень железа, КНТ и ферритина при ВГС среди носителей мутантных аллелей гена HFE оказался не только выше (в 1,5 раза) при сравнении с группой с нормальными аллелями гена HFE, но и превысил нормальные значения. В частности, у 52% больных хроническим гепатитом С, имеющих мутантные аллели гена HFE, выявлена гиперферремия против 19,5% больных с нормальным генотипом и у 52% — гиперферри-тинемия против 44% соответственно.

При дополнительном анализе каждого из мутантных аллелей гена HFE в отдельности была получена высокая степень достоверности различий показателей обмена железа в сравнении с группой с нормальным генотипом при хроническом гепатите С. В присутствии аллелей C282Y и/или H63D показатели обмена железа у больных хроническим гепатитом С превышали нормативные значения, а при сравнении с больными с нормальным генотипом выявлены статистически значимые различия по всем показателям при наличии аллеля H63D. В присутствии аллеля S65C при ВГС уровень ферритина был достоверно выше, но полученные значения не превысили нормативов.

Анализируя показатели обмена железа у компа-унд-гетерозиготных носителей C282Y+H63D при

Таблица 2.

Общая характеристика больных хроническим гепатитом С в зависимости от выявления мутаций гена HFE

Показатели Ми^ п С282^ п H63D, п 865С, п

— + — + — + — +

Мужчины 22 18 36 4 27 13 38 2

Женщины 19 11 27 3 23 7 27 3

Фиброз 8 9 13 4 11 6 17 -

ГМ 9 9 15 3 13 5 15 3

НОУ 4 7 7 4 6 5 11 -

Примечание: ГМ — гепатомегалия, НОУ — нарушение углеводного обмена

хроническом гепатите С, обнаружили повышение уровней железа, КНТ и ферритина в 2 раза при сравнении с соответствующими гетерозиготными носителями. Показатели обмена железа у компа-унд-гетерозиготных носителей C282Y + H63D гена HFE при хроническом гепатите С достигали диагностических критериев для развития гемохро-матоза [11] и имели статистически достоверные различия, несмотря на малочисленность группы. Полученные результаты позволяют утверждать, что компаунд-гетерозиготные носители C282Y + H63D гена HFE при хроническом гепатите С имеют наибольшую перегрузку железом, что не противоречит зарубежным исследованиям [12].

Анализ носителей мутантных аллелей C282Y и H63D также выявил наибольшую частоту фенотипических проявлений генотипа HFE при хроническом гепатите С у компаунд-гетерозиготных носителей C282Y+H63D и минимальную — у носителей аллеля H63D (Таблица 3).

Выявлена корреляционная связь между присутствием мутантного аллеля C282Y и наличием фиброза печени (г=+0,255, р=0,033) и НОУ (г=+0,379, р=0,001) у больных хроническим гепатитом С.

Анализ степени выраженности нарушений углеводного обмена при хроническом гепатите С у носителей мутантных аллелей гена HFE выявил высокую частоту нарушений углеводного обмена, в частности наличие сахарного диабета, в присутствии аллелей С282Х H63D и C282Y+H63D (Таблица 4). Исключение составили носители аллеля S65C, не имевшие нарушений углеводного обмена при хроническом гепатите С.

В литературе имеются противоречивые данные о взаимосвязи мутантных аллелей гена HFE

Таблица 3

Частота фенотипических проявлений при разных генотипах HFE у больных хроническим гепатитом С

Аллель СПЖ Меланоз Гепатомегалия НОУ

C282Y+H63D * 7 6 67 67 * 7 6

C282Y * G 5 5G 25 5G*

H63D 41 47 18 18

Примечание: *- р<0,05 между присутствием и отсутствием мутантных аллелей, гена ШЕ, СПЖ — синдром перегрузки железом, НОУ — нарушение углеводного обмена

Таблица 4

Частота нарушения углеводного обмена при разных генотипах HFE у больных хроническим гепатитом С

НОУ C282Y,% H63D,% C282Y+H63D, % S65C,%

НТУ 5G 33 5G -

СД 5G 67 5G -

Примечание: НОУ — нарушения углеводного обмена, НТУ — нарушение толерантности к углеводам, СД — сахарный диабет

Рис. 2. Частота генотипов HFEу больных хроническим гепатитом С с перегрузкой железом в Новосибирске

с синдромом перегрузки железом при хроническом гепатите С. Начиная исследование, мы предполагали, что мутантные аллели гена HFE могли бы объяснить накопление железа у больных хроническим гепатитом С. Действительно, в данном исследовании у преобладающего числа больных хроническим гепатитом С с синдромом перегрузки железом обнаружены мутантные аллели гена HFE (71%): у 17% -C282Y, у 66% -H63D, у 17%

— C282Y+H63D (Рис. 2).

С другой стороны, при выделении группы больных хроническим гепатитом С, имеющих мутантные аллели гена HFE, синдром перегрузки железом выявлен у 41% (то есть почти в 2 раза чаще, чем в общей группе больных ВГС (24%) и в 3,5 раза чаще, чем у больных с нормальным генотипом (12%)). Вероятность обнаружения мутантных аллелей при синдроме перегрузки железом у больных ВГС значительно возрастает (likelihood ratio = 8).

Среди мутантных аллелей гена HFE у больных хроническим гепатитом С с синдром перегрузки железом отсутствовал аллель S65C, возможно это связано с небольшим числом наблюдений в нашем исследовании.

Распределение частот мутантных аллелей гена HFE у больных хроническим гепатитом С представлено на рисунках 3 и 4.

Полученные данные позволяют предполагать участие мутантных аллелей C282Y и H63D гена HFE в возникновении синдрома перегрузки железом у больных ВГС. Соответственно, мутантные аллели гена HFE (C282Y и H63D) необходимо рассматривать как фактор, способный ухудшить течение и прогноз хронического гепатита С.

Нарушения углеводного обмена при синдроме перегрузки железом выявлены у 41%, мелано-дермия — у 65%, гепатомегалия — у 29% больных хроническим гепатитом С. При этом такие клини-

Рис. 3. Распределение частот мутантных аллелей гена HFE у больных хроническим гепатитом C

вббС

0%

Рис. 4. Распределение частот мутантных аллелей гена HFE при перегрузке железом у больных ВГС

ческие признаки гемохроматоза, как нарушения углеводного обмена и меланоз у больных ВГС с синдромом перегрузки железом, встречались достоверно чаще, чем без СПЖ (Рис. 5).

Мы получили результаты, доказывающие, что синдром перегрузки железом при хроническом гепатите С часто сочетается с нарушениями углеводного обмена. Однако, репликация вируса не была связаны с частотой данных нарушений при ВГС. Эти результаты дают основание предполагать, что частое развитие сахарного диабета при ВГС в большей степени определяется нарушением обмена железа, чем хронической HCV инфекцией.

В целом, мы не получили достоверных зависимостей между клиническими признаками гемохроматоза при хроническом гепатите С и наличием мутантных аллелей гена HFE. Однако при оценке каждого из мутантных аллелей в отдельности было найдено достоверное увеличение частоты нарушений углеводного обмена при наличии аллеля C282Y (Рис. 6).

Меланодермия и гепатомегалия при наличии мутантного аллеля C282Y выявлялись почти в 2 раза чаще, чем у больных с нормальным генотипом при ВГС, хотя различия не достигали степени достоверности (р=0,15 и р=0,27 соответственно), возможно, из-за небольшого числа наблюдений.

Ряд последних зарубежных исследований [13, 14] показывают, что мутантный аллель C282Y гена HFE ответственен за развитие сахарного диабета (обнаружена высокая частота данного мутантного аллеля у больных сахарным диабетом 2-го типа). В данном исследовании также достоверно подтверждена связь аллеля C282Y с нарушениями углеводного обмена. Следовательно, при выявлении нарушений углеводного обмена необходимо исключить у больного в первую очередь такое заболевание, как гемохроматоз, что чрезвычайно важно в практической деятельности врача любой специальности (ввиду системного поражения).

Выводы

1. При хроническом вирусном гепатите С отмечено повышение показателей обмена железа (в среднем в 1,5 раза) у носителей мутантных аллелей гена HFE в отличие от больных, имеющих нормальный генотип. Мутантные аллели C282Y и H63D имеют преобладающее значение в повышении уровня железа и ферритина сыворотки при хроническом гепатите С.

2. Мутантные аллели гена HFE (C282Y и H63D) достоверно чаще ассоциируются с синд-

Меланоз Гепатомегалия НОУ

Рис. 5. Частота выявления клинических признаков гемохроматоза при перегрузке железом у больных ВГС

%

60

50

40

30

20

10

*- р=0,001

Меланоз

Гепатомегалия

НОУ

Рис. 6. Частота клинических признаков гемохроматоза в присутствии аллеля C282Y

%

0

ромом перегрузки железом (в 71% случаев против 32% без перегрузки) у больных хроническим гепатитом С. Полученные результаты подтверждают, что компаунд-гетерозиготные носители C282Y+H63D гена HFE при хроническом гепатите С имеют наибольшую перегрузку железом.

3. Мутантные аллели гена HFE (C282Y и H63D) достоверно чаще ассоциируются с клиническими признаками гемохроматоза (р<0,05) у больных хроническим вирусным гепатитом С. Присутствие аллеля C282Y в большей степени связано с возникновением клинических признаков гемохроматоза, чем присутствие других аллелей гена HFE при ВГС. В частности, частота нарушений углеводного обмена у больных хроническим гепатитом С в присутствии мутантного аллеля C282Y повышена (57% больных с C282Y против 11% без данного мутантного аллеля). У носителей мутантного аллеля C282Y при ВГС достоверно чаще выявлен фиброз печени.

4. У компаунд-гетерозиготных носителей C282Y+H63D при ВГС выявлена наибольшая частота фенотипических проявлений генотипа HFE (синдром перегрузки железом, клинические признаки гемохроматоза).

Заключение

По результатам данной работы мутантным аллелям C282Y и H63D гена HFE отводится определяющее значение в развитии синдрома перегрузки железом и возникновении нарушений углеводного обмена у больных хроническим гепатитом С. Однако необходимо помнить, что мутантные аллели гена HFE полностью не объясняют механизма развития синдрома перегрузки железом у больных хроническим гепатитом C (29% больных ВГС с синдромом перегрузки железом имеют нормальный генотип HFE), что требует дальнейшего накопления информации по представленному вопросу и работы в данном направлении.

PHENOTYPIC SIGNS OF HFE GENOTYPE IN PARENTS WITH CHRONIC HEPATITIS WITH IRON EXCESS SYNDROM.

Kulagina E.A.

Objective: The aim of the study was to investigate the frequencies of HFE gene mutant alleles and its association with Fe-overload syndrome (FOS) in HCV — patients. Materials and methods: 70 patients with HCV were examined including measurement of serum Fe, ferritin, liver enzymes, glucose intolerance test and HFE polymorphism. Results: In 24% of HCV-patients FOS was found, in this group mutant alleles of HFE gene were detected in 71%. Frequency of carbohydrate metabolism disturbances (CMD) in HCV-patients with FOS was higher, then in pa-

tients without FOS (41% vs 8%). C282Y allele was associated with highest frequency of CMD (57% vs 11%). Conclusion: In studied sample polymorphism of HFE gene (C282Y or H63D) associated with Fe-overload and carbohydrate metabolism disturbances in HCV-patients.

Литература

1. Elevated serum iron predicts poor response to interferon treatment in patients with chronic HCV infection / N. Arber, M. Moshkowitz, T. F. Konikol et al. // Dig. Dis. Sci. — 2001. — № 40. — Р. 2431-2433.

2. Retreatment of hepatitis C interferon non-responders with larger doses of interferon with and without phlebotomy / D.H. Van Thiel, L. Friedlander, P.J. Mol-loy et al. // Hepatogastroenterology. — 2000. — № 43. — Р. 1557-1561.

3. Bacon B.R. The pathology of hepatic iron overload: a free radical-mediated process? / B.R. Bacon, R.S. Briton // Hepatology. — 2001. — № 11. — Р. 127.

4. Bonkowsky H.L. Iron and chronic viral hepatitis / H.L. Bonkowsky, B.F. Banner, A.L. Rothman // Hepatology. — 1997. — № 25. — Р. 759-768.

5. Lawrie W. Hemochromatosis: the paradigm for Population Screening for Genetic Diseases / W. Lawrie, M.D. Powell // World Gastroenterology news. — 2001. — Vd. 6. — Р. 2-3.

6. Adams P.C. Clinical presentation of hemochromatosis: a changing scene / P.C. Adam, A.E. Kertesz, L.S. Val-berg // Am. J. Med. — 2001.— № 90. — Р. 445.

7. Hepatic iron overload in patients with chronic viral hepatitis: role of HPE gene mutations / A. Piperno, A. Vergani, I. Malosio et al. // Hepatology. — 1998. — № 28.

— Р. 1105-1109.

8. SteindlP.E. The relation of iron status and hemochromatosis gene mutations in patients with chronic hepatitis C / P.E. Steindl, E. Penner, P. Ferenci // Gastroenterology. — 1999. — № 116. — Р. 127-134.

9. Are hemochromatosis mutations related to the severity of liver disease in hepatitis C virus infection? / A.L. Martinelli, R.F. Franco, M. Villanova et al. // Acta Haematol. — 2000. — № 102. — Р. 152-156.

10. Burt MJ. The influence of iron on chronic hepatitis C / M.J. Burt, W.G. Cooksley // J. Gastroenterol. Hepatol. — 1998. — № 13. — Р. 330-332.

11. Павлов Ч.С. Гемохроматоз: диагностика и лечение / Ч.С. Павлов // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. — 2001. — № 5. — С. 2-7.

12. Compound heterozygotes for hemochromatosis gene mutations: may they help to understand the pathophysiology of the disease? / P. Aguilar Martinez, C. Biron, C. Blanc et al. // Blood Cells Mol. Dis. — 1997. — Vol. 23.

— № 2. — Р. 269-276

13. Hemochromatosis Cys282Tyr mutation and liver iron overload in patients with chronic active hepatitis C / C. Hezode, C. Cazeneuve, O. Coue et al. // Hepatology.

— 1998. — № 27. — Р. 306.

14. Patients with type 2 diabetes have a high frequency of the C282Y mutation of the hemochromatosis gene / T. Kwan, B. Leber, S. Ahuja et al. // Clin. Invest. Med.

— 1998. — Vol. 21. — № 6. — Р. 251-257.