РАСТЕНИЯ С УЛУЧШЕННЫМИ СВЯЗАННЫМИ С УРОЖАЙНОСТЬЮ СВОЙСТВАМИ И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ

1. Способ улучшения связанных с урожайностью свойств растений, включающий повышенную экспрессию в растение: (i) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид регулирующего рост фактора (GRF); и (ii) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид транслокации синовиальной саркомы (SYT), причем указанные связанные с урожайностью свойства являются улучшенными по сравнению с растениями с повышенной экспрессией одной из: либо (i) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF; либо (ii) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT.
2. Способ по п.1, где указанный полипептид GRF содержит: (i) домен, имеющий, по меньшей мере, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или более идентичности аминокислотной последовательности с QLQ доменом, представленным в виде SEQ ID NO: 115; и (ii) домен, имеющий, по меньшей мере, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или более идентичности аминокислотной последовательности с WRC доменом, представленным в виде SEQ ID NO: 116.
9
10
2
3. Способ по п.1, где указанный полипептид GRF содержит: (i) QLQ домен с InterPro номером IPR014978 (PFAM номер PF08880); (ii) WRC домен с InterPro номером IPR014977 (PFAM номер PF08879); и (iii) домен эффектора транскрипции (ЕТ), содержащий три Cys и один His остаток в консервативной области (СХСХСХН).
4. Способ по п.1, где указанный полипептид GRF имеет в порядке увеличения предпочтения, по меньшей мере, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или более идентичности аминокислотной последовательности с полипептидом GRF, представленным в виде SEQ ID NO: 2, или с любой из последовательностей полипептида, приведенных в таблице А.1.
5. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид GRF, представляет собой любую из последовательностей нуклеиновых кислот, приведенных в таблице A.1, или их часть, или последовательность, способную к гибридизации с любой из последовательностей нуклеиновых кислот, приведенных в таблице А.1.
6. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты кодирует ортолог или паралог любой из последовательностей полипептида GRF, приведенных в таблице А.1.
7. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид GRF, операбельно связана с конститутивным промотором, более предпочтительно с GOS2 промотором, наиболее предпочтительно с GOS2 промотором из риса, представленным в виде SEQ ID NO: 117.
8. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид GRF, получена из растительного источника, предпочтительно из двудольного растения, более предпочтительно из семейства Brassicaceae, наиболее предпочтительно из Arabidopsis thaliana.
9. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты кодирует полипептид SYT, где указанный полипептид SYT содержит от N-конца к С-концу: (i) SNH домен, имеющий в порядке увеличения предпочтения, по меньшей мере, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% идентичности последовательности с SNH доменом SEQ ID NO: 262; и (ii) Met-rich домен; и (iii) QG-rich домен.
10. Способ по п.9, где указанный полипептид SYT далее содержит наиболее консервативные остатки SNH домена, представленные в виде SEQ ID NO: 263 и показанные черным на Фиг.5.
11. Способ по п.9 или 10, где указанный полипептид SYT содержит домен, имеющий в порядке увеличения предпочтения, по меньшей мере, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% идентичности последовательности с SSXT доменом с InterPro номером IPR007726 последовательности SEQ ID NO: 264.
12. Способ по п.9 или 10, где указанный полипептид SYT имеет в порядке увеличения предпочтения, по меньшей мере, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или более идентичности аминокислотной последовательности с полипептидом SYT, представленным в виде SEQ ID NO: 121, или с любой из полной длины последовательностей полипептида, приведенных в таблице А.2.
13. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид SYT, представляет собой любую из последовательностей нуклеиновых кислот, приведенных в таблице А.2, или их часть, или последовательность, способную к гибридизации с любой из последовательностей нуклеиновых кислот, приведенных в таблице А.2.
14. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты кодирует ортолог или паралог любой из последовательностей полипептида SYT, приведенных в таблице А.2.
15. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид SYT, операбельно связана с конститутивным промотором, более предпочтительно с GOS2 промотором, наиболее предпочтительно с GOS2 промотором из риса, представленным в виде SEQ ID NO: 117.
16. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид SYT, получена из растительного источника, предпочтительно из двудольного растения, более предпочтительно из семейства Brassicaceae, наиболее предпочтительно из Arabidopsis thaliana.
17. Способ по п.1, где указанная повышенная экспрессия достигается путем введения и экспрессии в растение: (i) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF; и (ii) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT.
18. Способ по п.17, где указанные последовательности нуклеиновых кислот (i) и (ii) последовательно вводят и экспрессируют в растение предпочтительно путем скрещивания, более предпочтительно путем ре-трансформации.
19. Способ по п.18, где указанное скрещивание осуществляют между женским родительским растением, содержащим вводимую и экспрессируемую выделенную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид GRF, и мужским родительским растением, содержащим вводимую и экспрессируемую выделенную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид SYT, или взаимообратно, и селекцией потомства по наличию и экспрессии обоих трансгенов, где указанное растение имеет улучшенные относящиеся к урожайности свойства по сравнению с каждым родительским растением.
20. Способ по п.18, где указанную ре-трансформацию осуществляют путем введения и экспрессии последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF, в растение, часть растения или растительную клетку, содержащую вводимую и экспрессируемую последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую полипептид SYT, или взаимообратно.
21. Способ по п.17, где указанные последовательности нуклеиновых кислот (i) и (ii) последовательно вводят и экспрессируют в растение.
22. Способ по п.21, где указанные последовательности нуклеиновых кислот (i) и (ii) содержатся в одной или более молекул нуклеиновых кислот.
23. Способ по п.1, где указанные улучшенные связанные с урожайностью свойства включают одно или более свойство: (i) увеличенная ранняя мощь, (ii) увеличенная наземная биомасса, (iii) увеличенный общий выход семян на растение, (iv) увеличенная скорость наполнения семян, (v) увеличенное число (наполненных) семян, (vi) увеличенный показатель урожайности или (vii) увеличенная масса тысячи зерен (TKW).
24. Способ по п.1, где указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид GRF, и указанная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид SYT, операбельно или последовательно связаны с конститутивным промотором, предпочтительно с растительным конститутивным промотором, более предпочтительно с GOS2 промотором, наиболее предпочтительно с GOS2 промотором из риса, представленным в виде SEQ ID NO: 117.
25. Растения, их части (включая семена) или растительные клетки, полученные с помощью способа по любому из пп.1-24, где указанные растения, их части или их клетки содержат (i) выделенный трансген нуклеиновой кислоты, кодирующий полипептид GRF; и (и) выделенный трансген нуклеиновой кислоты, кодирующий полипептид SYT.
26. Конструкция, содержащая:
(a) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF, как определено по любому из пп.2-6;
(b) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, как определено по любому из пп.9-13;
(c) одну или более управляющих последовательностей, способных к стимулированию экспрессии последовательности нуклеиновой кислоты (а) и (b); и необязательно
(d) последовательность терминации транскрипции.
27. Конструкция по п.26, где указанная управляющая последовательность представляет собой конститутивный промотор, предпочтительно GOS2 промотор, более предпочтительно GOS2 промотор, представленный в виде SEQ ID NO: 117.
28. Смесь конструкций, где, по меньшей мере, одна конструкция содержит:
(a) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF, как определено по любому из пп.2-6;
(b) одну или более управляющих последовательностей, способных к повышению экспрессии последовательности нуклеиновой кислоты (а); и необязательно
(c) последовательность терминации транскрипции, и где, по меньшей мере, одна другая конструкция содержит:
(d) последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, как определено по любому из пп.9-13;
(e) одну или более управляющих последовательностей, способных к стимулированию экспрессии последовательности нуклеиновой кислоты (d); и необязательно
(f) последовательность терминации транскрипции.
29. Смесь по п.28, где указанная управляющая последовательность (b) и/или (е) представляет собой, по меньшей мере, один конститутивный промотор, предпочтительно GOS2 промотор, более предпочтительно GOS2 промотор, представленный в виде SEQ ID NO: 117.
30. Применение конструкции по п.26 или 27 или смеси конструкций по п.28 или 29 в способе получения растений, имеющих улучшенные относящиеся к урожайности свойства по сравнению с растениями с повышенной экспрессией одной из: либо (а) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF; либо (b) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, причем улучшенные связанные с урожайностью свойства включают одно или более свойство: (i) увеличенная ранняя мощь, (ii) увеличенная наземная биомасса, (iii) увеличенный общий выход семян на растение, (iv) увеличенная скорость наполнения семян, (v) увеличенное число (наполненных) семян, (vi) увеличенный показатель урожайности или (vii) увеличенная масса тысячи зерен (TKW).
31. Растение, часть растения или растительная клетка, трансформированные с конструкцией по п.26 или 27 или смесью конструкций по п.28 или 29.
32. Способ производства трансгенных растений с улучшенными относящимися к урожайности свойствами по сравнению с растениями с повышенной экспрессией одной из: либо (i) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF, либо (ii) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, включающий:
a. введение и экспрессию в растение, часть растения или растительную клетку последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF, как определено по любому из пп.2-6, под контролем конститутивного промотора; и
b. введение и экспрессию в растение, часть растения или растительную клетку последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, как определено по любому из пп.9-13, под контролем конститутивного промотора; и
с. культивирование растительных клеток, части растения или растения в условиях, промотирующих рост растения и развитие.
33. Трансгенное растение с улучшенными относящимися к урожайности свойствами по сравнению с растениями с повышенной экспрессией одной из: либо (i) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF, либо (ii) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, полученное в результате повышенной экспрессии: (i) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF, как определено в любом из пунктов 2-6, и (ii) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, как определено по любому из пп.9 -13, или трансгенная растительная клетка или трансгенная часть растения, произведенные из указанного трансгенного растения.
34. Трансгенное растение по п.25, 31 или 33, где указанное растение является сельскохозяйственным растением или однодольным растением или зерновой культурой, такой как рис, кукуруза, пшеница, ячмень, просо, рожь, тритикале, сорго и овес, или трансгенная растительная клетка, произведенная из указанного трансгенного растения.
35. Урожайные части растений по п.34, содержащие (i) выделенную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF; и (ii) выделенную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, где указанные урожайные части предпочтительно являются семенами.
36. Продукты, произведенные из растения по п.34 и/или из урожайных частей растения по п.35.
37. Применение (i) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF, как определено по любому из пп.2-6, и (ii) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, как определено по любому из пп.9-13, для улучшения в растениях относящихся к урожайности свойств по сравнению с растениями с повышенной экспрессией одной из: либо (а) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GRF; либо (b) последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид SYT, причем улучшенные связанные с урожайностью свойства включают одно или более свойство: (i) увеличенная ранняя мощь, (ii) увеличенная наземная биомасса, (iii) увеличенный общий выход семян на растение, (iv) увеличенная скорость наполнения семян, (v) увеличенное число (наполненных) семян, (vi) увеличенный показатель урожайности или (vii) увеличенная масса тысячи зерен (TKW).