Особенности распределения и частота встречаемости генотипов вирусов папилломы человека в г. Астане у женщин с нормальной цитологией

НАЦИОНАЛЬНЫЕ ПРИОРИТЕТЫ РОССИИ. 2011. № 2 (5). СПЕЦИАЛЬНЫЙ ВЫПУСК

мены этих фильтров, обеспечения ежедневного контроля герметичности.

Вопросы использования средств контроля эффективности стерилизации паровым методом изделий медицинского назначения регламентированы соответствующими нормативными документами и состоят из нескольких важных составных частей. К ним относятся оперативные методы: физический - по показаниям регистрирующих приборов; химический - с применением современных термо-временных химических индикаторов для внутреннего контроля и в качестве свидетелей процесса. Использование нестандартных индикаторов может вводить в заблуждение персонал относительно выхода стерильных изделий.

Методы периодического контроля паровых стерилизаторов включают:

- периодический термометрический контроль для проверки правильности показаний контрольного мано-вакууметра, полноты удаления воздуха из материалов;

- бактериологические индикаторы (биотесты), использующиеся в комбинации со средствами физического и химического контроля, с частотой не менее двух раз в год, но при высокой оперативной активности учреждения частота такого контроля может быть выше;

- исследование материалов на стерильность из структурных подразделений ЛПУ с частотой, определенной нормативными документами;

- использование ТЕСТ - ИХ для определения полноты удаления воздуха из пористого материала в труднодоступной дл я стерилизации зоне и ТЕСТ -ИБ для подтверждения достоверного выхода стерильного материала на каждом аппарате для паровой стерилизации.

Перспективно внедрение новых технологий в виде использования стерилизаторов инфракрасного излучения для стерилизации инструментов в стоматологии, приобретение и использование газовых стерилизаторов для стерилизации эндоскопов и изделий из термолабильных материалов, микроинструментов с микроэлектронной заточкой, низкотемпературного плазменного стерилизатора на пероксиде водорода или другой основе.

Многолетняя совместная работа Госсанэпиднадзора с органами и учреждениями здравоохранения разных уровней позволила добиться снижения неудовлетворительных результатов (по результатам биологических тестов) в 4-5 раз ниже среднефедеральных показателей.

ОСОБЕННОСТИ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ И ЧАСТОТА ВСТРЕЧАЕМОСТИ ГЕНОТИПОВ ВИРУСОВ ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА В г. АСТАНЕ У ЖЕНЩИН С НОРМАЛЬНОЙ ЦИТОЛОГИЕЙ

А.Б. Абжалелов, А.Б. Шевцов, Г.Д. Садыкова, А.О. Байгабулова,

А.Б. Сейдалина, Д.А. Мухамедьяров, Е.М. Раманкулов

РГП «Национальный центр биотехнологии РК», Астана, РК

ГККП «Центр дерматологии и профилактики болезней, передающихся

половым путем, г. Астаны», Астана, РК

Вирусы папилломы человека (ВПЧ) являются основным этиологическим фактором развития рака шейки матки (РШМ), который в структуре злокачественных опухолей у женщин Казахстана и в мире занимает второе место, уступая раку молочной железы. В настоящее время насчитывается более 100 различных генотипов вирусов папилломы человека, высокоонкоген-ными рисками признаны 15 генотипов (ВПЧ генотипов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73, 82), три генотипа характеризуются как с вероятно вы-сокоонкогенным риском (26, 53, и 66), а 12 классифицированы как типы низкоонкогенного риска (6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81, и СР6108).

Последние исследования выявили отличия в распределении генотипов ВПЧ в определенных географических областях. Поэтому целью нашего исследования являлось изучение распределения генотипов ВПЧ среди женщин с неизмененной цитологией в г. Астане.

В исследование были включены 338 образцов ДНК, выделенных из соскобов цервикального канала. Генотипирование проводили методом амплификации и определения нуклеотидной последовательно-

сти фрагмента генома ВПЧ. Амплификация фрагмента вирусов папилломы человека была выполнена с использованием универсальных праймеров: MY09HPV-5'-CGTCCMARRGGAWACTGATC-3' и MY11HPV-5' -GCMCAGGGWCATAAYAATGG-3'. Учет результатов продуктов ПЦР проводили электрофоретическим методом детекции в 2 %-ном агарозном геле с визуализацией этидтиумом бромидом. Для очистки реакционной смеси от праймеров димеров был использован протокол с осаждением полиэтиленгликолем (PEG 6000). Очищенные ПЦР продукты были использованы для определения нуклеотидной последовательности. Реакцию секвенирования проводили с применением BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit (Applide Biosystems), согласно инструкции производителя, с последующим разделением фрагментов на автоматическом генетическом анализаторе 3730xl DNA Analyzer (Applide Biosystems). Нуклеотидные последовательности, полученные с применением прямого и обратного праймеров, были проанализированы и объединены в общую последовательность при помощи программного обеспечения SeqScape 2.6.0 (Applied Biosystems). Выверенные

ВОПРОСЫ ПРЕПОДАВАНИЯ МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ, ИММУНОЛОГИИ

Таблица 1

Результаты скринингового исследования 338 образцов на вирус папилломы человека

Наименование генотипов Кол-во % Наименование генотипов Кол-во %

ВПЧ 16 типа 9 2,7 ВПЧ 84 типа 2 0,6

ВПЧ 58 типа 5 1,5 ВПЧ 6 типа 1 0,3

ВПЧ 53 типа 4 1,2 ВПЧ 18 типа 1 0,3

ВПЧ 31 типа 2 0,6 ВПЧ 35 типа 1 0,3

ВПЧ 33 типа 2 0,6 ВПЧ 45 типа 1 0,3

ВПЧ 54 типа 2 0,6 ВПЧ 52 типа 1 0,3

ВПЧ 61 типа 2 0,6 ВПЧ 66 типа 1 0,3

ВПЧ 62 типа 2 0,6 ВПЧ 83 типа 1 0,3

ВПЧ 68 типа 2 0,6 ВПЧ 118 типа 1 0,3

ВПЧ 81 типа 2 0,6

нуклеотидные последовательности были идентифицированы в международной базе данных GenBank (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) с применением функции BLAST. Генотип определяли по максимальному проценту идентичности анализированной последовательности к референным образцам в GenBank. Процент идентичности варьировался от 98 до 100 %, тогда как по L1 гену генотипы различаются между собой более чем на 10 %.

В результате проведенных исследований в 42 (12,4 %) образцах выявлен генетический материал вируса папилломы человека 19 различных генотипов (табл. 1).

В исследуемой выборке у женщин с неизмененной цитологией из вирусов высокоонкогенного риска были выявлены следующие генотипы: ВПЧ-16 - в 2,7 % (n-338), ВПЧ-58 - 1,5 %, ВПЧ-31 и 33 типов - в 0,6 %, а генотипы 18, 35, 45, 66 и 52 - в 0,3 % случаев. Также были выявлены вирусы низкого онкогенного риска: ВПЧ-53 - 1,5 %; ВПЧ-61 - 0,6 %; ВПЧ-6 - 0,3 % случаев. Из не онкогенных вирусов были выявлены ВПЧ-54, 62, 81 и 84 типов в 0,6 %, а ВПЧ-83 и 118 генотипов -в 0,3 % случаев.

Самыми распространенными генотипами ВПЧ во всем мире являются 16, 18, 31, 58, 52 и 53 генотипы, на

долю которых приходится 50 % всех ВПЧ инфекций. Распределение генотипов отличается в различных географических областях. Так, в Японии, на Тайване и в Восточной Африке доминирует ВПЧ-52 генотипа, а ВПЧ-16 генотипа находится на втором месте. В Центральной Америке и Восточной Европе ВПЧ-31 типа находится на втором месте, уступая ВПЧ-16 генотипа. Исследования, проведенные Л^ Ye с соавторами (2010), свидетельствуют о превалировании на территории Китая ВПЧ-52 генотипа (3,1 %), далее на убывание ВПЧ-16 (2,5 %), ВПЧ-58 (2,1 %), ВПЧ-68 (1,0 %) и ВПЧ-81 (0,9 %) генотипов.

В нашем исследовании среди вирусов высокоон-когенного риска доминировал ВПЧ-16 генотипа 2,7 % (п-338), далее на убывание ВПЧ-58 - 1,5 %, ВПЧ-31 и 33 типов в 0,6 %, а генотипы 18, 35, 45, 66 и 52 выявлены в 0,3 % случаев. Низкий процент ВПЧ-18 генотипа в нашем исследовании можно объяснить наименьшей частотой встречаемости данного генотипа в Азиатском регионе.

Таким образом, распределение генотипов ВПЧ является важным эпидемиологическим показателем и может быть использовано при планировании государственных программ скрининга и вакцинации.

ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНОМА ШТАММОВ ВИРУСА ГРИППА А (НШ1) КАЛИФ0РНИЯ/04/2009, ИЗОЛИРОВАННЫХ В РАЗЛИЧНЫХ СТРАНАХ

В.Л. Стасенко, И.В. Червенчук, И.О. Кожевников, А.О. Вайс, А.П. Ускова Омская государственная медицинская академия, Омский государственный технический университет

В апреле 2009 года Всемирная организация здравоохранения проинформировала мир о случаях инфицирования людей новым вирусом гриппа А (НШ1).

Появление нового вируса гриппа сопровождалось беспрецедентно высокой скоростью его распространения - 120 стран и территорий почти за 8 недель. ВОЗ