Способ определения имплантации зародыша человека в слизистую оболочку матки в зависимости от содержания в хорионе активных рецепторов к эстрогенам при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации
METHOD FOR DETERMINATION OF HUMAN EMBRYO IMPLANTATION INTO UTERINE MUCOUS MEMBRANE, DEPENDING ON CONTENT OF ACTIVE RECEPTORS TO ESTROGENES IN CHORION AT CYTOMEGALOVIRUS INFECTION EXACERBATION AT FIRST TRIMESTER OF GESTATION

1. Цель изобретения - показать отрицательное влияние обострения цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации на имплантацию зародыша человека на 7-8 неделе беременности в связи со снижением содержания в клетках хориона рецепторов к эстрогенам (ERα).
2. Изобретение относится к медицине, а именно к оценке влияния обострения цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации на снижение содержания в хорионе рецепторов к эстрогенам, приводящее к нарушению процесса имплантации зародыша в слизистую оболочку матки.
3. Раскрытие изобретения
Количество и функционирование рецепторов к стероидным гормонам - эстрогенам является показателем благополучия имплантации зародыша в слизистую оболочку матки на первых неделях беременности [1, 2]. Рецепторы к эстрогенам относятся к внутриклеточным рецепторам гормонов. Для благополучной имплантации зародыша в слизистую матки необходимо согласование по времени готовности к этому процессу эндометрия матки. Для имплантации необходима эндокринная регуляция гормонами [3, 4]. Эстрогены усиливают синтез собственных рецепторов и рецепторов прогестерона и андрогенов. Рецепторы эстрогенов влияют на процесс формирования ворсинок плаценты и образования в слизистой матки кровеносных сосудов [5]. Недостаточное содержание эстрогеновых рецепторов или их функциональное подавление приводит к нарушению имплантации зародыша и дальнейшему развитию эмбриона, что создает угрозу самопроизвольного выкидыша.
4. Новая техническая задача
Разработать способ оценки неблагоприятного влияния обострения цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации, подавляюще действующей на содержание эстрогеновых рецепторов в хорионе, создавая угрозу самопроизвольного выкидыша.
5. В доступной литературе имеется много сведений о роли эстрогеновых рецепторов на ранних этапах гестации [1], однако практически нет литературы, освещающей подавление активности эстрогеновых рецепторов при вирусных процессах, сопровождающих первые недели гестации. В настоящем исследовании содержание активных эстрогеновых рецепторов проводилось в гомогенате хориона на 7-8 неделях гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции, снижающей содержание активных эстрогеновых рецепторов.
6. Осуществление изобретения
6.1. Обследовано 20 беременных в возрасте 18-26 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ХЦМВИ) в стадии обострения на 7-8 неделях в первом триместре гестации. 15 беременных было обследовано без заболевания на всем периоде беременности. Диагноз обострение ХЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM к ЦМВ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней до 1:1600, индекса авидности более 65%, а также наличия ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекс авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).
6.2. Рецепторы к эстрогенам определялись в гомогенате хориона, полученного после медицинского аборта, выполненного вследствие обострения ХЦМВИ, то есть по медицинским показаниям.
6.3. Рецепторы к эстрогенам (ERα) определялись методом иммуноферментного анализа на спектрофотометре «Stat Fax 2100» (США) с использованием наборов, полученных в ЗАО «БиоХим МАК» (Москва).
1
2
6.4. Статистический анализ и обработка данных проводилась с использованием пакета прикладных программ «Statistica 6.0». Характеристика вариационных рядов: средняя арифметическая (М), стандартная ошибка (m), коэффициент вариации 95%, доверительный интервал для средних значений M±m, где t определялось по таблице граничных значений критерия Стьюдента при доверительном уровне 95% и числе степеней свободы F=n+n-2. Для определения достоверности различий использовался непарный параметрический критерий Стьюдента. Принимались во внимание р<0,05; 0,01; 0,001. Для определения достоверности различий в случае негауссовых распределений, непараметрические критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни.
7. Полученные данные
Выполненные исследования показали, что обострение ХЦМВИ на 7-8 неделях гестации при наличии антител IgG к ЦМВ 1:1600 в гомогенате хориона снижает содержание рецепторов к эстрогенам (ERα) до 3,62±0,91 нмоль/л (контроль - 10,4±0,95 нмоль/л), что создает угрозу нормально протекающей имплантации зародыша на 7-8 неделях гестации.
Пример. Беременная К. Возраст 25 лет, забеременела впервые. На 7 неделе гестации появились признаки воспаления верхних дыхательных путей. Лабораторный анализ установил обострение ЦМВИ с титром 1:1600 IgG к ЦМВ. На 8 неделе у беременной произошел выкидыш.
Литература
1. Розен В.Б., Смирнов А.Н. Рецепторы и стероидные гормоны. М.: Изд. МГУ. 1981. 210 с.
2. Crum С.Р., Lee K.L. Diagnostic gynecologic and obstetric pathology // Elsevier Saunders. 2006.
3. Farhi J., Weissman A., Steinfeld Z. Estradiol supplementation during the luteal phase may improve the pregnancy rate in patients undergoing in vitro fertilization - embryptransfer cycles // Fertil. Steril. 2000. Vol. 73, №4. P. 761-766.
4. Gregory L. Ovarian markers of implantation potential in assisted reproduction // Hum. Reprod. 1998. Vol. 13. Suppl. 4. P. 117-132.
5. Lessey B.A. Two pathways of progesterone action in the human endometrium; implication for implication and contraception // Steroids. 2003. Vol. 68. P. 809-815.