ИНТРАТЕКАЛЬНАЯ ДОСТАВКА ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ, КОДИРУЮЩИХ ABCD1, ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АДРЕНОМИЕЛОНЕВРОПАТИИ

1. Способ увеличения титров вектора на основе аденоассоциированного вируса 9 (AAV9) в трансфицированных клетках-продуцентах, выращенных в культуре, при этом указанный способ предусматривает стадии:
i) инкубирования последовательности нуклеиновой кислоты, которая комплементарна mRNA, кодирующей представителя 1 надсемейства D АТФ-связывающей кассеты (ABCD1), с клетками и
ii) трансфицирования клеток вектором на основе AAV9, содержащим нуклеотидную последовательность, кодирующую ABCD1 (вектор AAV9-ABCD1), где обеспечивают снижение количества mRNA ABCD1, экспрессируемой из вектора на основе AAV9, вследствие чего достигается увеличение выхода вектора AAV9-ABCD1 в клеточном лизате и/или среде, составляющее от приблизительно 1 раза до приблизительно 50 раз, по сравнению с эталонным стандартом.
2. Способ по п. 1, где последовательность нуклеиновой кислоты, которая комплементарна mRNA, кодирующей ABCD1, представляет собой интерферирующую РНК.
3. Способ по п. 2, где интерферирующая РНК представляет собой shRNA или siRNA.
4. Способ по п. 3, где siRNA содержит SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 или их комбинацию.
5. Способ по п. 1, где эталонный стандарт предусматривает выход вектора AAV9-ABCD1 в клеточном лизате и/или среде клеток-продуцентов, которые не инкубировали с последовательностью нуклеиновой кислоты, которая комплементарна mRNA, кодирующей ABCD1.
6. Способ лечения X-сцепленной адренолейкодистрофии (X-ALD) у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающий введение субъекту композиции, содержащей очищенный вектор AAV9-ABCD1, полученный из клеток-продуцентов по в п. 1.
7. Способ по п. 6, где композицию, содержащую очищенный вектор AAV9-ABCD1, вводят субъекту посредством интратекального введения.
8. Способ лечения X-сцепленной адренолейкодистрофии (X-ALD) у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающий введение субъекту вектора на основе аденоассоциированного вируса (AAV), кодирующего представителя 1 надсемейства D АТФ-связывающей кассеты (ABCD1), где указанный вектор вводят субъекту посредством интратекального введения.
9. Способ по п. 8, где интратекальное введение опосредовано осмотическим насосом.
13
13
10. Способ по п. 8, где доза вектора составляет от приблизительно 1×10 к. г. до приблизительно 10×10 к. г.
11. Способ по п. 8, где AAV представляет собой AAV9.
12. Способ доставки представителя 1 надсемейства D АТФ-связывающей кассеты (ABCD1) субъекту с X-сцепленной адренолейкодистрофией (X-ALD), предусматривающий введение субъекту вектора, кодирующего ABCD1, где указанный вектор вводят субъекту посредством интратекального введения, и где экспрессия ABCD1 из указанного вектора в центральной нервной системе является меньшей, чем экспрессия ABCD1 из указанного вектора в периферических органах.
13. Способ по п. 12, где экспрессия ABCD1 из указанного вектора в центральной нервной системе превышает в приблизительно 3 раза экспрессию ABCD1 в центральной нервной системе необработанного субъекта, у которого X-ALD отсутствует.
14. Способ по п. 13, где экспрессия ABCD1 из указанного вектора в периферических органах является на приблизительно 90% меньшей, чем экспрессия ABCD1 в периферических органах необработанного субъекта, у которого X-ALD отсутствует.