ТЕХНОЛОГИЯ ПРОИЗВОДСТВА И ОЧИСТКИ УСОВЕРШЕНСТВОВАННЫХ WNT-ЛИГАНДОВ

Способ создания модифицированных вариантов Wnt-лигандов, предусматривающий направленную белковую эволюцию in vivo при помощи соматического гипермутирования в культуре куриных В-лимфоцитов DT40, отличающийся интеграцией и экспрессией кодирующих последовательностей Wnt-лигандов в локусе легкой цепи иммуноглобулинов и их гипермутированием на фоне параллельной пролиферации экспрессирующих Wnt-лиганды клеток, приводящими к созданию популяций клеток DT40 с улучшенными вариантами Wnt-лигандов, отбором таковых популяций по интенсивности флуоресценции зеленого флуоресцентного белка, ген которого экспрессируют куриные В-лимфоциты DT40 под контролем Wnt-зависимого TCF-промотора, при помощи метода проточной цитометрии и последующей очисткой модифицированных Wnt-лигандов методами хроматографии на сефарозе, гель-фильтрации и гепариновой хроматографии.