Антитела к ферментам пуринового метаболизма при системной склеродермии

© ШИЛОВА Л.Н., ЗБОРОВСКАЯ И.А., ГОНТАРЬ И.П. - 2007

АНТИТЕЛА К ФЕРМЕНТАМ ПУРИНОВОГО МЕТАБОЛИЗМА ПРИ СИСТЕМНОЙ СКЛЕРОДЕРМИИ.

Л.Н. Шилова, И.А. Зборовская, И.П. Гонтарь (Волгоградский государственный медицинский университет. ректор - акад. РАМН. д.м.н.. проф. В.И. Петров. кафедра госпитальной терапии. зав. - д.м.н.. проф. И.А.Зборовская. ГУ НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН. г. Волгоград. директор - акад. РАМН д.м.н.. проф. А.Б.Зборовский).

Резюме. В работе, выполненной на 35 больных системной склеродермией (ССД) установлено, что при ССД выявляются антитела к аденозиндезаминазе (АДА), гуаниндезаминазе (ГДА). Продукция антител увеличивается с возрастанием активности процесса, наличием более тяжелых форм течения заболевания, сопровождается снижением активности АДА и увеличением активности ГДА.

Ключевые слова: системная склеродермия, ферменты, активность, антитела, аденозиндезаминаза, гуа-ниндезаминаза.

Системная склеродермия (ССД) - полисиндромное прогрессирующее заболевание с характерными изменениями кожи, поражением опорно-двигательного аппарата, внутренних органов (легких, сердца, желудочно-кишечного тракта и почек) и распространенными вазоспастическими нарушениями по типу синдрома Рейно, в основе которых лежит поражение соединительной ткани с преобладанием фиброза, аутоиммунные нарушения и патология сосудов по типу облитерирующего эндартериолита [2,3].

Существуют различные теории патогенеза ССД, основывающиеся на дисрегуляции иммунных реакций организма, наличии энзимных дефектов, метаболических нарушениях, но все они не дают полного представления о развитии данной патологии. В настоящее время известно, что пуриновый обмен, играющий важную роль в поддержании многих функций организма (участие в метаболизме нуклеиновых кислот, регуляции сосудистого тонуса, свертываемости крови и т.д.), также влияющий на состояние антиоксидантной системы, участвует в развитии и поддержании хронического ревматического воспаления, поэтому важно определить возможные причины нарушения функционирования пуринового метаболизма у больных с склеродермическим процессом.

В развитии клинических проявлений ССД большая роль принадлежит нарушениям микроциркуляции, приводящим к ишемии и гипоксии органов и тканей. Неизбежным последствием длительной тканевой гипоксии является перестройка метаболиизма пуринов по катаболическому пути, а концентрация пуриновых метаболитов коррелирует со степенью тяжести ишемии [4]. Учитывая, что ССД - аутоиммунное заболевание, другой причиной нарушения пуринового обмена могут быть аутоантитела к ферментам этой системы. Известно, что влияние антител на энзимы - неоднозначно: с одной стороны возможно усиление их функции, с другой - полное или частичное угнетение. Одним из ведущих ферментов адениловой ветви пуринового метаболизма является аденозиндезаминаза (АДА, ЕС З.5.4.4.), гуаниловой- гуаниндезаминаза (ГДА, ЕС 3.5.4.3). Изменение активности данных ферментов играет важную роль в организме, отражая нарушения иммунной системы, а также поражение некоторых органов и систем, например, увеличение активности ГДА при поражении печени [5].

Цель работы - выявление антител к АДА, ГДА в крови больных ССД в зависимости от разных клинических форм патологии.

Материалы и методы

Под наблюдением находилось 35 больных с достоверным диагнозом ССД, поставленном на основании критериев АРА и отечественной классификации болезни (Н.Гусева, 1975) и 30 практически здоровых лиц - доноров станции переливания крови, в возрасте от 25 до 47 лет, среди которых 17 женщин и 13 мужчин.

Среди обследованных больных ССД было 33 (94,3%) женщин и 2 (5,7%) - мужчин. Средний возраст больных

- 38±3.3 г.. продолжительность болезни - 14±2.6 г. 24 (68.6%) из наблюдавшихся больных имели лимитированную форму болезни. 11 (31.4%) - диффузную. I степень активности установлена у 13 (37.1%). II - у 21 (60%). III

- у 1 (2.9%) больных ССД.

Хроническое течение выявлено у 14 (40%) пациентов. подострое - у 20 (57.1%). острое - у 1 (2.9%). Больные с подострым и острым течением заболевания. II и III степенями активности в дальнейшем будут рассматриваться в одной группе. вследствие малого количества больных с острым течением и III ст. активности.

I стадия заболевания (начальная) диагностирована у 9 (25.7%) больных. II (генерализованная) - у 23 (65.7%). III (терминальная) - у 3 (8.6%).

В качестве антигена использовались коммерческие препараты АДА (Cat. №5043) и ГДА (Cat. №5752) производства «Sigma». США. Антитела к ГДА. АДА определяли в сыворотке крови больных по разработанной нами методике непрямого иммуноферментного анализа с использованием иммобилизированных антигенных форм энзимов (И.П. Гонтарь. 2001). Иммобилизацию проводили методом эмульсионной полимеризации в потоке газообразного азота с включением магнитного материала в структуру полиакриламидного геля. Положительными считались результаты. превышающие 2 стандартных отклонения показателей. полученных при обследовании здоровых лиц. Для определения активности АДА в сыворотке крови использовалась методика R.G. Martinek (1963). ГДА - методика W.T. Caraway (1966). Все исследования проводились при поступлении и при выписке из стационара после завершения лечения.

Статистическая обработка результатов проводилась с использованием программных пакетов «STATISTICA 6.0». «Excel 5.0». «STAtGrAPHICS 3.0». Значимыми считались различия при р<0.05.

Результаты и обсуждение

Здоровые лица. При исследовании сывороток здоровых лиц уровень антител к АДА составил 0.05±0.004. к ГДА - 0.04±0.002. Показатели. превышающие эти значения на величину 2 стандартных отклонений. были приняты за верхнюю границу нормы: для АТ к АДА - 0.094. к ГДА - 0.062. Общая активность АДА в группе здоровых лиц составила 8.5±0.2 МЕ. ГДА - 1.16±0.2 нмоль/мин/мл. Существенных различий уровня антител к энзимам в зависимости от пола. возраста - не выявлено.

Больные ССД при поступлении на стационарное лечение у больных ССД (группа в целом) наблюдалось незначительное снижение активности АДА (8.3±0.4. р>0.2). причем отмечалась тенденция к более выраженному снижению активности по мере нарастания активности процесса (см. табл. 1). У больных ССД (группа в целом) антитела к АДА выявлены у 13 больных (37.14%). Активность ГДА в крови больных ССД (группа в целом) значимо отличалась от здоровых лиц и составила 1.83±0.02 нмоль/мин/

мл, причем при минимальной активности практически не отличалась от здоровых и значимо увеличивалась по мере возрастания активности патологического процесса (табл.1). Антитела к ГДА обнаружены у 12 больных ССД (34,3%).

При анализе группы больных ССД, в крови которых обнаружены высокие уровни антител к АДА (13 человек-37,14%), получено значимое снижение активности ферментов (р<0,005), в то время как в крови больных с низким содержанием антител - значимого снижения активности энзимов не было.

В группе больных ССД с высоким уровнем антител к ГДА (12 чел. - 34,3%), получено значимо более высокие значения активности фермента (р<0,004).

В группе больных ССД с разным характером течения болезни нами выявлены значимо более высокие уровни антител к ферментам по сравнению со здоровыми (р<0,05), при подостром и остром течении процесса (р<0,005), по сравнению с хроническим. Активность АДА значимо снижалась, а ГДА повышалась при подостром течении процесса (р<0,002). Высокие уровни антител к АДА обнаружены у 3 (21,4%), к ГДА у 2 (14,3%) больных с хроническим течением и у 10 (47,6%) - с подострым.

Итак. можно предположить. что антитела к АДА вызывают. вероятно. угнетение фермента. может быть за счет блокирования активного центра. а антитела к ГДА. наоборот. увеличение активности энзима. Усиление активности может быть обусловлено конформационными изменениями структуры энзима. затрагивающими его активный центр. а также наличием ферментативной активности у вновь появившихся циркулирующих иммунных комплексов (АГ+АТ). о чем свидетельствуют и данные литературы (1). Первоначальное усиление активности АДА при I ст. активности может быть связано. также с активизацией метаболических процессов в начале болезни и менее выраженными иммунными сдвигами при минимальной активности процесса.

Таким образом. в крови больных с системной склеродермией выявляются антитела к АДА. ГДА. продукция которых увеличивается с возрастанием активности процесса. наличием более тяжелых форм течения заболевания и сопровождается со снижением активности АДА и увеличением ГДА. Следовательно. одной из причин изменения функционирования пуринового обмена. вероятно. могут явиться аутоантитела к энзимам.

ЛИТЕРАТУРА

1. АзаренокК.С., Генералов И.И.//Тер. архив. - 1990. - № 5. - с. 149 - 153.

2. Гусева Н.Г. // Системная склеродермия и склеродермическая группа болезней. // РМЖ. -2000.-Том 8.-№9.

3. Малахов А.Б., Давтян В.Г., Геппе Н.А., Осминина М.К.. // Системная склеродермия: современные аспекты проблемы // Consilium medicum. - 2006. - Том 8. - №2. - С.

4. Рябов Г. А., Ладыгин С.С., Азизов Ю.М., Пасечник И.Н. // Оценка гипоксии по метаболизму пуриновых соединений. Вестник Академии мед. Наук СССР. - №7. - С. 3-7

5. Matsunaga.-H; Honda.-H; Kubo.-K. etal. // Clinical value of the determination of serum guanase activity in patients with chronic hepatitis type C // J-Med-Invest. - 2003. - Vol. 50(1-2). -P. 64-71.

Таблица 1. Показатели активности АДА, ГДА и содержание антител к ферментам в сыворотке крови здоровых лиц и больных ССД в зависимости от активности процесса.

Контингент N Огатист. Активность Антитела Активность Антитела

показатели АДА к АДА ГДА к ГДА

Здоровые ЗО М 8.5 0.05 1.16 0.04

а 1.1 0.022 1.1 0.011

m 0.2 0.004 0.2 0.002

Больные ССД, 1З М 10.9 0.08 1.2 0.06

I степень а 1.9 0.0З2 0.58 0.018

активности m 0.54 0.009 0.16 0.005

Больные ССД, 22 М 5.64 0.1l4 1.8 0.19

11-111 степень а 1.08 0.056 0.З8 0.094

активности m 0.2З 0.012 0.08 0.02

ANTIBODIES ТО ENZYMES OF THE PURIN METABOLISM IN SYSTEMIC SCLEROSIS

L.N. Shilova, I.A. Zborovskaya, I.P. Gontar

In the work executed on 35 patients with systemic sclerosis (SS) it is established, that at SS antibodies to adenozindesaminase (ADA), guanindesaminase (GDA) are revealed. Production of antibodies increases with increase of activity of process, presence of severe forms of course of disease, is accompanied by decrease in activity of the ADA and increase in activity of GDA.

© ПОДДУБНЫЙ Д.А., РЕБРОВ А.П. - 2OO7

ГИПЕРТРОФИЯ И РЕМОДЕЛИРОВАНИЕ ЛЕВОГО ЖЕЛУДОЧКА У БОЛЬНЫХ АНКИЛОЗИРУЮЩИМ СПОНДИЛИТОМ: РОЛЬ ДИСФУНКЦИИ ЭНДОТЕЛИЯ

Д.А. Поддубный, А.П. Ребров

Резюме. С целью оценить роль дисфункции эндотелия как негемодинамического фактора развития ремоделирования и гипертрофии левого желудочка (ЛЖ) у больных анкилозирующим спондилитом (АС) в исследование были включены 102 пациента с достоверным диагнозом АС. У всех пациентов осуществлялось выявление артериальной гипертензии (АГ), скрининг основных классических факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний. С целью выявления признаков гипертрофии и ремоделирования ЛЖ всем пациентам выполнялась стандартная трансторакальная эхокардиография. Функциональное состояние эндотелия оценивалось при проведении допплерографии плечевой артерии в пробах с реактивной гиперемией (эндотелийзависимая вазодилатация - ЭЗВД) и нитроглицерином (эндотелийнезависимая вазодилатация - ЭНВД). В качестве маркера повреждения эндотелия исследовался уровень циркулирующих эндотелиальных клеток (ЦЭК). АГ выявлена у 30 пациентов (29,4%). Дисфункция эндотелия является одним из основных негемодинамических факторов развития гипертрофии/ремоделирования левого желудочка у больных АС. Наиболее ярко эта роль проявляется у пациентов без АГ и приводит преимущественно к развитию эксцентрического типа гипертрофии ЛЖ, тогда как у пациентов с АГ вследствие влияния гемодинамических развиваются преимущественно концентрические изменения геометрии ЛЖ. Ключевые слова: анкилозирующий спондилит, дисфункция эндотелии, гипертрофия левого желудочка, ремоделирование