СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЪЮГАТОВ FC-ФРАГМЕНТА АНТИТЕЛА, ВКЛЮЧАЮЩИХ ПО МЕНЬШЕЙ МЕРЕ ОДНУ СВЯЗЫВАЮЩУЮ ГРУППИРОВКУ, КОТОРАЯ СПЕЦИФИЧЕСКИ СВЯЗЫВАЕТСЯ С МИШЕНЬЮ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Способ получения конъюгата Fc-фрагмента антитела, содержащего в качестве первого компонента рекомбинантный Fc-фрагмент антитела и в качестве второго компонента по меньшей мере одну рекомбинантную связывающую группировку, которая специфически связывается с мишенью, с применением сортазы A для ферментативной конъюгации Fc-фрагмента антитела по меньшей мере с одной связывающей группировкой, включающий следующий этап:
n
m
- инкубацию i) связывающей группировки, которая специфически связывается с мишенью, содержащей аминокислотную последовательность GSLPX1TG (SEQ ID NO: 02, n=1, 2 или 3, где X1 может представлять собой любой аминокислотный остаток) в составе своих 20 C-концевых аминокислотных остатков, и ii) Fc-фрагмента антитела, содержащего по меньшей мере на одном N-конце олигоглицин G (m=2, 3, 4 или 5), с ферментом Сортазой A
с получением таким образом конъюгата Fc-фрагмента антитела.
n
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что связывающая группировка, которая специфически связывается с мишенью, содержит аминокислотную последовательность GSLPX1TGGSGS (SEQ ID NO: 03, n=1, 2 или 3, где X1 может представлять собой любой аминокислотный остаток) в составе своих 20 C-концевых аминокислотных остатков.
3. Способ по любому из пп. 1 и 2, отличающийся тем, что связывающая группировка, которая специфически связывается с мишенью, содержит аминокислотную последовательность X2GSLPX1TGGSGS (SEQ ID NO: 04, где X1 может представлять собой любой аминокислотный остаток) в составе своих 20 C-концевых аминокислотных остатков, где X2 может представлять собой любой аминокислотный остаток, кроме глицина.
n
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что связывающая группировка, которая специфически связывается с мишенью, содержит аминокислотную последовательность GSLPX1TGGSGSX3 (SEQ ID NO: 05, n=1, 2 или 3, где X1 может представлять собой любой аминокислотный остаток) в составе своих 20 C-концевых аминокислотных остатков, где X3 представляет собой аминокислотную последовательность tag.
2
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что связывающая группировка, которая специфически связывается с мишенью, выбрана из группы, состоящей из Fv, Fab, Fab′, Fab′-SH, F(ab′), диатела, линейного антитела, scFv, scFab и dsFv.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что Fc-фрагмент антитела содержит по меньшей мере на одном из своих N-концов два остатка глицина.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что Fc-фрагмент антитела содержит по меньшей мере на одном из своих N-концов аминокислотную последовательность GGCPX4C (SEQ ID NO: 07), где X4 представляет собой S или P.
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что Fc-фрагмент антитела содержит на обоих своих N-концах аминокислотную последовательность GGCPX4C (SEQ ID NO: 07), где X4 представляет собой S или P.
9. Конъюгат Fc-фрагмента антитела, полученный способом по любому из пп. 1-8.
n
10. Конъюгат Fc-фрагмента антитела, содержащий аминокислотную последовательность GSLPX1TGG (SEQ ID NO: 09, n=1, 2 или 3, где X1 может представлять собой любой аминокислотный остаток).
11. Фармацевтическая композиция, содержащая конъюгат Fc-фрагмента антитела по пп. 9 или 10 и возможно фармацевтически приемлемый носитель.
12. Конъюгат Fc-фрагмента антитела по п. 9 или 10 для применения в качестве лекарственного средства.
13. Применение конъюгата Fc-фрагмента антитела по пп. 9 или 10 при изготовлении лекарственного средства.