ТРИЦИКЛИЧЕСКОЕ ПРОИЗВОДНОЕ СОЕДИНЕНИЕ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ТАКОЕ СОЕДИНЕНИЕ
TRICYCLIC DERIVATIVE COMPOUND, METHOD FOR PRODUCTION THEREOF AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING SUCH A COMPOUND

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к трициклическим производным соединениям, обладающим превосходной ингибиторной активностью против поли(АДФ-рибоза)полимеразы, и, более конкретно, к трициклическим производным соединениям, обладающим превосходной ингибиторной активностью против PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, способам их получения и фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения.
Предпосылки создания изобретения
Семейство поли(АДФ-рибоза)полимераз (PARP) состоит из примерно 17 белков, включая PARP-1, PARP-2, PARP-3, PARP-4 (vPARP), PARP-5 (танкираза-1, танкираза-2), PARP-7, PARP-10 и т.п. [Curr Pharm Des., 13(9), 933-962, 2007]. Эти белки демонстрируют определенный уровень гомологии в их каталитическом домене, но отличаются по своим клеточным функциям [BioEssays., 26(8), 882-893, 2004].
Среди многих функций, которые связывают с PARP-1 и PARP-2, их основная роль заключается в том, чтобы облегчить репарацию ДНК АДФ-рибозилированием и, следовательно, координировать ряд белков репарации ДНК. Активация PARP индуцируется одноцепочечными разрывами ДНК в результате воздействия излучения, свободных кислородных радикалов или оксида азота (NO) и т.д. Повреждение ДНК приводит к активации PARP, которая восстанавливает одноцепочечные разрывы ДНК, и, таким образом, PARP может способствовать резистентности, которая может возникать в различных типах при терапии рака. В частности, сообщалось, что ингибиторы PARP являются полезными для специфического уничтожения опухолей с дефицитом факторов репарации двухцепочечной ДНК, таких как BRCA-1 и BRCA-2, и таким образом, были разработаны в качестве пациент-специфичных противораковых средств против различных типов раковых заболеваний, включая рак молочной железы, рак яичников, рак предстательной железы и т.п., которые имели аномалии в факторах репарации двухцепочечного повреждения ДНК [Nature, 434, 913-916, 2005; Cancer Biology & Therapy, 4, 934-936, 2005]. Кроме того, известно, что ингибиторы PARP, при введении в комбинации, повышают эффективность противораковых лекарственных средств, которые используют в обычных противораковых терапиях [Pharmacological Research, 52, 25-33, 2005; Mol Cancer Ther, 2, 371-382, 2003; Clin Cancer Res, 6, 2860-2867, 2000]. Противораковые лекарственные средства, которые повышают эффективность ингибиторов PARP, включают платиновые соединения (цисплатин и карбоплатин), ингибиторы топоизомеразы (иринотекан и топотекан) и темозоломид и т.д.
+
Кроме того, известно, что ингибирование PARP повышает устойчивость к поражению головного мозга. Когда происходит церебральный инфаркт и мозговые кровеносные сосуды забиваются, кислорода в кровеносных сосудах головного мозга становится недостаточно, и в это время высвобождается большое количество глутамата, и чрезмерно активируется глутаматный рецептор для продуцирования избыточного количества активных форм кислорода, которые повреждают ДНК. Считается, что PARP активация, вызванная повреждением ДНК при церебральном инфаркте, быстро расходует чрезмерное количество NADс истощением энергии в клетках головного мозга, вызывая ишемическую поражение головного мозга [Cereb Blood Flow Metab., 17(11), 1143-1151, 1997]. Ингибиторы PARP можно использовать для лечения не только ишемического поражения головного мозга, но также для различных неврологических заболеваний и сердечно-сосудистых заболеваний, включая эпилепсию, инсульт, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, боковой (латеральный) амиотрофический склероз (ALS), болезнь Гантингтона, шизофрению, хроническую или острую боль, ишемическое поражение головного мозга, потерю нейронов после гипоксии, травму и повреждение нерва.
Кроме того, ингибиторы PARP ингибируют продукцию индуцируемой синтазы оксида азота (iNOS) в макрофагах, P-селектина и молекул межклеточной адгезии-1 (ICAM-1) в эндотелиальных клетках. Эта активность становится основой мощного противовоспалительного эффекта, проявляемого ингибиторами PARP. Кроме того, ингибирование PARP может уменьшить некроз, предотвращая транслокацию и проникновение нейтрофилов в поврежденную ткань. Поэтому ингибиторы PARP также полезны при воспалительных симптомах. В последние годы был предложен терапевтический потенциал ингибиторов PARP для лечения диабетической невропатии [Diabetes. 54(12), 3435-3441, 2005].
Между тем, танкираза-1 и танкираза-2, также известные как PARP-5, как известно, вовлечены в сигнальные пути Wnt/β-катенина, процессы репарации ДНК и митоз, который тесно связан с клеточным циклом [Biochimica et Biophysica Acta, 1846, 201-205, 2014]. Кроме того, танкираза-1 и танкираза-2 действуют как положительный регулятор длины теломер, который ADP-рибозилирует TRF-1, делая возможным теломераза-опосредованное удлинение теломер. Следовательно, ингибирование танкиразы-1 и танкиразы-2 может ингибировать сигнальные пути Wnt/β-катенина, процессы репарации ДНК и удлинение теломер, тем самым проявляя противораковые эффекты с помощью механизмов, отличных от механизмов PARP-1 [Nature Reviews Drug Discovery, 11, 923-936, 2012].
Соответственно, авторы настоящего изобретения синтезировали трициклические производные соединения в качестве ингибиторов поли(АДФ-рибоза)полимеразы (PARP)-1 или ингибиторов танкиразы, которые можно использовать для лечения различных заболеваний, вызванных активностью поли(АДФ-рибоза)полимеразы (PARP), и обнаружили, что соединения проявляют превосходную активность против PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, тем самым завершая настоящее изобретение.
[Раскрытие]
[Техническая проблема]
Целью настоящего изобретения является обеспечение трициклических производных соединений, обладающих превосходной ингибиторной активностью против PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, и способов их получения.
Другой целью настоящего изобретения является обеспечение фармацевтической композиции для профилактики или лечения различных заболеваний, вызванных активностью PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, которая содержит трициклическое производное соединение в качестве активного ингредиента.
Еще одной целью настоящего изобретения является обеспечение применения трициклического производного соединения для получения лекарственного средства для профилактики или лечения различных заболеваний, вызванных активностью PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2.
Еще одной целью настоящего изобретения является обеспечение способа для профилактики или лечения заболеваний, вызванных активностью PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, который включает введение трициклического производного соединения.
[Техническое решение]
in vivo
В настоящем изобретении трициклические производные соединения были синтезированы, и было обнаружено, что производные соединения ингибируют активность PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2 и, таким образом, обладают существенным эффектом на лечение различных заболеваний, вызванных активностью PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, и стабильны .
Трициклические производные соединения
Настоящее изобретение обеспечивает трициклические производные соединения, представленные следующей формулой 1, их оптические изомеры, их рацематы или их фармацевтически приемлемые соли:
[Формула 1]
где
2
L представляет собой -CH- или -C(=O)-;
1
1
3
Rпредставляет собой Н, атом галогена или C-C алкокси;
2
3
2
3
1
3
RиRкаждый независимо представляют собой H или C-C алкил, или RиRмогут быть связаны друг с другом с образованием кольца;
3
1
3
1
3
2
2
2
4
4
4
4
4
4
5
6
7
кольцо A представляет собой арил или гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, где арил и гетероарил, каждый, может быть независимо незамещенным, или один или несколько из его Н атомов могут быть замещены заместителем, выбранным из атома галогена, -CN, -CF, -C-Cалкила, -C-C алкокси, -CH-OR, -C(=O)-R, -C(=O)-OR, -S(=O)-R, -NH-C(=O)-R, -NO, -NRR и -C(=O)-NRR;
4
5
6
1
3
R, R и R каждый независимо представляют собой H или C-C алкил; и
7
1
3
3
7
R представляет собой C-C алкил или C-C циклоалкил.
В настоящем изобретении, атом галогена предпочтительно выбран из F, Cl и Br, но не ограничивается этим.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения
2
L может представлять собой -CH- или -C(=O)-;
1
1
3
Rможет представлять собой Н, атом галогена или C-C алкокси;
2
3
2
3
1
3
RиRкаждый независимо может представлять собой H или C-C алкил, или RиRмогут быть связаны друг с другом с образованием кольца;
3
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
2
4
4
6
7
4
4
4
6
7
кольцо A может представлять собой арил или гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, где один или несколько H атомов арила могут быть замещены заместителем, выбранным из группы, включающей атом галогена, -CN, -CF, -C-Cалкил, -C-C алкокси, -C(=O)-R, -NH-C(=O)-R, -NO и -C(=O)-NRR, и гетероарил может быть незамещенным, или один или несколько H атомов гетероарила могут быть замещены заместителем, выбранным из группы, включающей атом галогена, -CN, -C-Cалкил, -C-C алкокси, -CH-OR, -C(=O)-OR, -S(=O)-R и -C(=O)-NRR;
4
1
3
R может представлять собой C-C алкил;
6
R может представлять собой Н; и
7
1
3
3
7
R может представлять собой C-C алкил или C-C циклоалкил.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения
2
L может представлять собой -CH- или -C(=O)-;
1
Rможет представлять собой Н или атом галогена;
2
3
2
3
1
3
RиRкаждый независимо может представлять собой H или C-C алкил, или RиRмогут быть связаны друг с другом с образованием кольца;
1
3
1
3
2
1
3
1
3
2
4
6
7
4
4
6
7
кольцо A может представлять собой арил или гетероарил, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, где один или несколько H атомов арила могут быть замещены заместителем, выбранным из группы, включающей атом галогена, -CN, -C-Cалкил, -C-C алкокси, -C(=O)-R, -NO и -C(=O)-NRR, и гетероарил может быть незамещенным, или один или несколько H атомов гетероарила могут быть замещены заместителем, выбранным из группы, включающей атом галогена, -CN, -C-Cалкил, -C-C алкокси, -C(=O)-OR, -S(=O)-R и -C(=O)-NRR;
4
1
3
R может представлять собой C-C алкил;
6
R может представлять собой Н; и
7
1
3
3
7
R может представлять собой C-C алкил или C-C циклоалкил.
2
3
1
3
В одном варианте осуществления настоящего изобретения RиR,каждый независимо, могут представлять собой H или C-C алкил. В этом случае кольцо A предпочтительно является замещенным по меньшей мере одним заместителем.
2
3
В другом варианте осуществления настоящего изобретения RиRмогут быть связаны друг с другом с образованием кольца.
В настоящем изобретении арил может представлять собой бензольное кольцо, и гетероарил может представлять собой моноциклическое кольцо или бициклическое кольцо. Моноциклическое кольцо предпочтительно представляет собой кольцо, выбранное из пиридина, пиразина, пиримидина, пиридазина, тиофена, тиазола, тиадиазола, оксазола и оксадиазола, и бициклическое кольцо предпочтительно представляет собой кольцо, выбранное из группы, включающей индол, индазол, циклопентапиридин, дигидроциклопентапиридин, фуропиридин, дигидрофуропиридин, оксазолопиридин, бензоксазол и бензоизоксазол.
Из трициклических производных соединений формулы 1 в соответствии с настоящим изобретением предпочтительные соединения представляют собой следующие:
1) 8-{[4-(4-метоксифенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
2) 8-{[4-(4-фторфенил)пиперазин-1-ил]метил}-10-метокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
3) 10-этокси-8-{[4-(4-фторфенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
4) 10-этокси-8-{[4-(пиримидин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
5) 10-этокси-8-{[4-(пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
6) 10-этокси-8-{[4-(5-фторпиримидин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
7) 10-этокси-8-{[4-(5-фторпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
8) 10-этокси-8-{[4-(6-фторпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
9) 10-этокси-8-{[4-(3-фторпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
10) 8-{[4-(5-хлор-3-фторпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-10-этокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
11) 10-этокси-8-{[4-(6-(трифторметил)пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
12) 8-({4-[3-хлор-5-(трифторметил)пиридин-2-ил]пиперазин-1-ил}метил)-10-этокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
13) 8-{[4-(5-хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-10-этокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
14) 8-{[4-(6-хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-10-этокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
15) 8-{[4-(3-хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-10-этокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
16) 8-{[4-(5-бромпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-10-этокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
17) 10-этокси-8-{[4-(3-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
18) 6-{4-{(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-N-метилникотинамид;
19) 6-{4-{(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-N-этилникотинамид;
20) N-циклопропил-6-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинамид;
21) 8-{[4-(4-хлорфенил)пиперазин-1-ил]метил}-10-этокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
22) 8-{[4-(4-бромфенил)пиперазин-1-ил]метил}-10-этокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
23) 4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
24) 3-фтор-4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
25) 3-хлор-4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
26) 4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-3-метилбензонитрил;
27) 10-этокси-8-{[4-(4-фтор-2-метилфенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
28) 4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-3,5-дифторбензонитрил;
29) 4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-2-фторбензонитрил;
30) 4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-N-этилбензамид;
31) 4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-2-фтор-N-метилбензамид;
32) 4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-N-этил-2-фторбензамид;
33) 3-хлор-4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-N-этилбензамид;
34) 3-хлор-N-циклопропил-4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
35) 3-хлор-4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-N-метилбензамид;
36) 4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-N,3-диметилбензамид;
37) 4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-N-этил-3-метилбензамид;
38) N-циклопропил-4-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-3-метилбензамид;
39) 10-метокси-8-{[4-(пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
40) 10-метокси-8-{[4-(3-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
41) 8-{[4-(5-фторпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-10-метокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
42) 4-{4-[(10-метокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
43) 8-{[4-(4-фтор-2-метилфенил)пиперазин-1-ил]метил}-10-метокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
44) 4-{4-[(10-метокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-3-метилбензонитрил;
45) 3-фтор-4-{4-[(10-метокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
46) 3,5-дифтор-4-{4-[(10-метокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
47) 2-фтор-4-{4-[(10-метокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
48) 8-{[4-(4-фторфенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
49) 8-{[4-(4-фтор-2-метилфенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
50) 3-фтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
51) 3-хлор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
52) 3-бром-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
53) 3-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
54) 3-метокси-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
55) 8-({4-[4-(диэтиламино)-2-фторфенил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5-(6H)-он;
56) 3-ацетил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
57) 4-фтор-2-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
58) 3,5-дифтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
59) 8-{[4-(2-фтор-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
60) 2-фтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
61) 2-хлор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
62) 4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-2-(трифторметил)бензонитрил;
63) 2-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
64) N-этил-3-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
65) N-циклопропил-3-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
66) 3-фтор-N-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
67) N-этил-3-фтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
68) N-(3-фтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}фенил)пропионамид;
69) N-циклопропил-3-фтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
70) 3-хлор-N-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
71) 3-хлор-N-этил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
72) 3-хлор-N-циклопропил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
73) 3-бром-N-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
74) 3-бром-N-этил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
75) 3-бром-N-циклопропил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
76) 2-фтор-N-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
77) N-этил-2-фтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
78) N-циклопропил-2-фтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
79) N-этил-2-фтор-N-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
80) 2-хлор-N-метил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
81) 2-хлор-N-этил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
82) 2-хлор-N-циклопропил-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
83) этил 2-хлор-5-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензоат;
84) N-этил-3,5-дифтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
85) N-циклопропил-3,5-дифтор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензамид;
86) 8-{[4-(пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
87) 8-({4-[4-(трифторметил)пиридин-2-ил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
88) 8-({4-[3-(трифторметил)пиридин-2-ил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
89) 6-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинонитрил;
90) 8-{[4-(3-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
91) 8-{[4-(5-фтор-3-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
92) 8-{[4-(пиразин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
93) 8-{[4-(6-хлорпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
94) 8-{[4-(3,5-дихлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
95) N-метил-6-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинамид;
96) N-этил-6-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинамид;
97) N-циклопропил-6-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинамид;
98) 8-{[4-(тиазол-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
99) этил 2-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}тиазол-4-карбоксилат;
100) N-этил 2-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}тиазол-4-карбоксамид;
101) 2-фтор-4-{8-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]-3,8-диазабицикло[3,2,1]октан-3-ил}бензонитрил;
102) 6-{8-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]-3,8-диазабицикло[3,2,1]октан-3-ил}никотинонитрил;
103) 2-фтор-4-{(1S,4S)-5-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил}бензонитрил;
104) 6-{(1S,4S)-5-[(оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил}никотинонитрил;
105) 10-этокси-8-{[4-(5-фторпиримидин-2-ил)-2-метилпиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
106) 10-этокси-8-{[4-(5-фторпиридин-2-ил)-2-метилпиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
107) 3-фтор-4-{3-метил-4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
108) (R)-3-фтор-4-{3-метил-4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
109) (S)-3-фтор-4-{3-метил-4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
110) (R)-3-фтор-4-{2-метил-4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
111) 2-фтор-4-{3-метил-4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
112) (R)-2-фтор-4-{3-метил-4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
113) (S)-2-фтор-4-{3-метил-4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
114) (R)-2-фтор-4-{2-метил-4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
115) 8-({4-[4-(трифторметил)фенил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,2]нафтиридин-5(6H)-он;
116) 6-{4-[(10-этокси-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинонитрил;
117) 8-({4-[2-хлор-4-(трифторметил)фенил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
118) 8-({4-[3-хлор-4-(трифторметил)фенил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
119) 8-{[4-(3-фтор-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
120) 8-{[4-(5-хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
121) 8-({4-[5-(трифторметил)пиридин-2-ил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
122) 8-({4-[5-(метилсульфонил)пиридин-2-ил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
123) 5-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}пиколинонитрил;
124) 2-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}изоникотинонитрил;
125) 2-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинонитрил;
126) 6-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}пиколинонитрил;
127) 8-{[4-(4-метоксипиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
128) 8-({4-[5-(метоксиметил)-пиридин-2-ил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
129) 5-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}пиразин-2-карбонитрил;
130) 8-{[4-(6-метилпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
131) 8-{[4-(6-метоксипиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
132) 6-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}пиридазин-3-карбонитрил;
133) 5-хлор-6-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинонитрил;
134) 6-хлор-4-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинонитрил;
135) 4-хлор-6-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинонитрил;
136) 5-хлор-2-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}изоникотинонитрил;
137) 4-метокси-6-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}никотинонитрил;
138) 8-{[4-(5-бром-4-метоксипиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
139) 2-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}тиазол-4-карбонитрил;
140) 5-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}тиофен-2-карбонитрил;
141) этил 2-{4-[((5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}тиазол-5-карбоксилат;
142) 2-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}тиазол-5-карбонитрил;
143) 5-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-1,3,4-тиадиазол-2-карбонитрил;
144) 2-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}оксазол-4-карбонитрил;
145) 5-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-1,2,4-тиадиазол-3-карбонитрил;
146) 5-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-1,3,4-оксадиазол-2-карбонитрил;
147) 8-{[4-(5-хлорбензо[d]оксазол-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
148) 8-{[4-(2-метилбензо[d]оксазол-6-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
149) 8-{[4-(3-метилбензо[d]изоксазол-5-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
150) 8-{[4-(1H-индол-6-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
151) 8-{[4-(1H-индазол-5-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
152) 8-{[4-(1H-индазол-6-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
153) 8-{[4-(бензо[d]изоксазол-5-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
154) 8-{[4-(оксазоло[4,5-b]пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
155) 8-{[4-(оксазоло[5,4-b]пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
156) 8-{[4-(2,3-дигидрофуро[2,3-b]пиридин-6-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
157) 1-{4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-6,7-дигидро-5H-циклопента[c]пиридин-4-карбонитрил;
158) 8-{[3-(пиразин-2-ил)-3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-8-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
159) 6-{3-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]-3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-8-ил)никотинонитрил;
160) 8-{[3-(6-хлорпиридазин-3-ил)-3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-8-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
161) 3-фтор-4-{(1S,4S)-5-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил}бензонитрил;
162) 8-{[(1S,4S)-5-(2-фтор-4-нитрофенил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
163) 8-{[(1S,4S)-5-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил]метил}-10-фтор-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
164) 10-фтор-8-{[(1S,4S)-5-(пиридазин-2-ил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
165) (S)-2-фтор-4-{2-метил-4-[(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}бензонитрил;
166) 10-фтор-8-{[4-(2-фтор-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
167) 10-фтор-8-{[4-(пиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
168) 10-фтор-8-{[4-(3-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
169) 10-фтор-8-{[4-(5-фторпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
170) 6-{4-[(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил]метил}пиперазин-1-ил)никотинонитрил;
171) 2-{4-[(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил]метил}пиперазин-1-ил)тиазол-5-карбонитрил;
172) 10-фтор-8-{[4-(4-фторфенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
173) 2-фтор-4-{[4-(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил]метил}пиперазин-1-ил)бензонитрил;
174) 4-{[4-(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил]метил}пиперазин-1-ил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
175) 10-фтор-8-{[4-(4-фтор-2-метилфенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
176) 3-фтор-4-{4-[(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил]метил}пиперазин-1-ил)бензонитрил;
177) 6-{(1S,4S)-5-[(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил}никотинонитрил;
178) 10-фтор-8-{[4-(пиразин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
179) 8-{[4-(5-хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-10-фтор-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
180) 5-{4-[(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}пиколинонитрил;
181) 8-{[4-(6-хлорпиридазин-3-ил)пиперазин-1-ил]метил}-10-фтор-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он;
182) 6-{4-[(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}пиридазин-3-карбонитрил;
183) 5-{4-[(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}тиофен-2-карбонитрил;
184) 6-{8-[(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]-3,8-диазабицикло[3,2,1]октан-3-ил}никотинонитрил;
185) 4-{4-[(10-фтор-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-ил)метил]пиперазин-1-ил}-3-метоксибензонитрил;
186) 5-[4-(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбонил)пиперазин-1-ил]тиофен-2-карбонитрил;
187) 6-[4-(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбонил)пиперазин-1-ил]никотинонитрил;
188) 2-[4-(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбонил)пиперазин-1-ил]тиазол-4-карбонитрил; и
189) 2-[4-(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбонил)пиперазин-1-ил]тиазол-5-карбонитрил.
В настоящем изобретении, фармацевтически приемлемая соль предпочтительно может представлять собой кислотно-аддитивную соль, образованную фармацевтически приемлемой свободной кислотой. Кислотно-аддитивную соль можно получить с использованием стандартного способа. Например, кислотно-аддитивную соль можно получить путем растворения соединения в избыточном количестве водного раствора кислоты и осаждением соли с использованием водорастворимого органического растворителя, такого как метанол, этанол, ацетон или ацетонитрил. Альтернативно, кислотно-аддитивную соль можно получить путем нагревания эквимолярного количества соединения и кислоты или спирта (например, монометиловый эфир гликоля) в воде и затем сушки смеси путем упаривания или вакуум-фильтрации осажденной соли.
Свободные кислоты, которые можно использовать в настоящем изобретении, могут включать органические кислоты и неорганические кислоты. Примеры неорганических кислот могут включать, но не ограничиваются этим, хлористоводородную кислоту, фосфорную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту и т.п., и примеры органических кислот могут включать, но не ограничиваются этим, метансульфоновую кислоту, пара-толуолсульфоновую кислоту, уксусную кислоту, трифторуксусную кислоту, малеиновую кислоту, янтарную кислоту, щавелевую кислоту, бензойную кислоту, винную кислоту, фумаровую кислоту, миндальную кислоту, пропионовую кислоту, лимонную кислоту, молочную кислоту, гликолевую кислоту, глюконовую кислоту, галактуроновую кислоту, глутаминовую кислоту, глутаровую кислоту, глюкуроновую кислоту, аспарагиновую кислоту, аскорбиновую кислоту, карбоновую кислоту, ванильную кислоту, йодистовдородную кислоту и т.п.
Кроме того, фармацевтически приемлемую соль металла можно получить с использованием основания. Соль щелочного металла или соль щелочноземельного металла можно получить, например, путем растворения соединения в избыточном количестве раствора гидроксида щелочного металла или гидроксида щелочноземельного металла, фильтрованием нерастворенной соли соединения и упаривания и сушки фильтрата. Для использования в фармацевтике особенно предпочтительно получить соль натрия, калия или кальция, но объем настоящего изобретения не ограничивается этим. Кроме того, соответствующую таким солям соль серебра можно получить путем взаимодействия соли щелочного металла или щелочноземельного металла с подходящей солью серебра (например, нитратом серебра).
Если не указано иное, фармацевтически приемлемые соли соединений формулы 1 включают соли кислотных или щелочных групп, которые могут присутствовать в соединениях формулы 1. Например, фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваются этим, натриевые, кальциевые и калиевые соли и т.п. гидроксильной группы, и другие фармацевтически приемлемые соли амино группы включают, но не ограничиваются этим, гидробромид, сульфат, гидросульфат, фосфат, гидрофосфат, дигидрофосфат, ацетат, сукцинат, цитрат, тартрат, лактат, манделат, метансульфонат (мезилат) и пара-толуолсульфонат (тозилат) и т.п. Для специалистов в данной области очевидно, что любые соли, подходящие для целей настоящего изобретения, также можно использовать, и такие соли можно получить обычным способом получения солей, известным в данной области.
Кроме того, соединения формулы 1 могут иметь асимметричные центры и, таким образом, существовать в разных энантиомерных формах. Все оптические изомеры и (R) и (S) стереоизомеры соединений формулы 1 и их смеси также входят в объем настоящего изобретения. Настоящее изобретение охватывает использование рацематов одной или нескольких энантиомерных форм, одной или нескольких диастереомерных форм или их смесей, а также охватывает способ разделения изомеров или способ получения.
Способы получения трициклических производных соединений
Настоящее изобретение также обеспечивает способы получения трициклических производных соединений, представленных формулой 1, их оптических изомеров, их рацематов или их фармацевтически приемлемых солей.
Предпочтительно, соединения формулы 1 можно получить способами, показанными на схеме реакций ниже, но объем настоящего изобретения не ограничивается такими способами получения. В частности, любой специалист в данной области легко поймет, что соединения формулы 1 можно получить различными способами с использованием обычных методов, хорошо известных в данной области.
Схемы реакций, представленные ниже, иллюстрируют каждую стадию способов для получения типичных соединений в соответствии с настоящим изобретением, и ряд соединений настоящего изобретения можно получить путем изменений или модификаций, включая изменение реагентов, растворителей и последовательности реакций, которые используют в способах получения, представленных на схемах реакций 1-3.
Способ получения 1
Более конкретно, как показано на схеме реакций 1 ниже, трициклические производные настоящего изобретения, их оптические изомеры, их рацематы или их фармацевтически приемлемые соли, можно получить способом, включающим следующие стадии:
(1) получение хлорангидрида кислоты с использованием реагента, который преобразует соединение никотиновой кислоты формулы 2 в хлорангидрид кислоты, и подвергая хлорангидрид кислоты реакции амидирования с анилином формулы 3, или подвергая никотиновую кислоту формулы 2 реакции сочетания с анилином формулы 3, получая таким образом соединение формулы 4;
(2) введение защитной группы в соединение формулы 4, полученное на стадии (1), получая таким образом N-защищенное соединение формулы 5;
(3) циклизацию соединения формулы 5, полученного на стадии (2), в присутствии металлического катализатора, получая таким образом соединение формулы 6;
(4) соединение формулы 6, полученное на стадии (3), подвергают реакции восстановления кольца с водородом в присутствии палладиевого (Pd) катализатора, получая таким образом соединение формулы 7;
(5) восстановление соединения формулы 7, полученного на стадии (4), восстанавливающим агентом, таким как литийалюминийгидрид (LAH), получая таким образом соединение формулы 8;
(6) соединение формулы 8, полученное на стадии (5), подвергают галогенированию и реакции аминирования с амином, получая таким образом соединение формулы 9; и
(7) удаление защитной группы у соединения формулы 9, полученного на стадии (6), при помощи реакции снятия защиты, получая таким образом соединение формулы 1a.
[Схема реакций 1]
где
X представляет собой атом галогена;
1
3
Y представляет собой Н, C-Cалкокси или атом галогена;
1
10
Alk представляет собой C-C алкил с прямой или разветвленной цепью;
pro представляет собой защитную группу, выбранную из группы, включающей арильную группу, бензильную группу, бензилоксиметильную группу, пара-метоксибензильную (PMB) группу и метоксиметильную (MOM) группу; и
B представляет собой ,
2
3
где кольцо A, R и Rтакие, как определены выше.
Далее каждая стадия будет описана подробно.
На стадии (1), хлорангидрид кислоты получают с использованием реагента (реагент, такой как тионилхлорид или оксалилхлорид, может преобразовать карбоновую кислоту в хлорангидрид кислоты), который преобразует коммерчески доступную никотиновую кислоту формулы 2 в хлорангидрид кислоты. Эту реакцию осуществляют без использования какого-либо растворителя или осуществляют с использованием растворителя, такого как дихлорметан, хлороформ, толуол или т.п., который не оказывает отрицательного влияния на реакцию. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно находится в диапазоне от комнатной температуры до горячей температуры, предпочтительной является горячая температура. Полученный хлорангидрид кислоты подвергают общей реакции амидирования с соединением формулы 3, которое представляет собой анилин, с получением соединения формулы 4. Хотя эту реакцию можно осуществить без использования какого-либо основания, ее обычно осуществляют с использованием дихлорметана, хлороформа, тетрагидрофурана, диэтилового эфира, толуола, N,N-диметилформамида или т.п., который не оказывает отрицательного влияния на реакцию, в присутствии органического амина, такого как пиридин, триэтиламин или диэтилизопропиламин и т.п., который представляет собой основание, которое можно использовать в реакциях амидирования. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно находится в диапазоне от холодной температуры до комнатной температуры, предпочтительно соответствует комнатной температуре. Альтернативно, 2-галогенникотиновую кислоту (формула 2) подвергают общей реакции амидирования с замещенным анилином (формула 3) с использованием связывающего реагента, получая таким образом соединение формулы 4. Как правило, используемый связывающий реагент представляет собой (1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид (EDCI), 1,3-дициклогексилкарбодиимид (DCC), 1,1-карбонилдиимидазол или т.п., который является коммерчески доступным. Хотя эту реакцию можно осуществить без использования какого-либо основания, ее обычно осуществляют с использованием растворителя ацетонитрила, диметилформамида, дихлорметана или т.п., который не оказывает отрицательного влияния на реакцию, в присутствии 4-диметиламинопиридина, пиридина, триэтиламина, диэтилизопропиламина, N-метилморфолина или диметилфениламина и т.п., который представляет собой основание, которое можно использовать в реакциях амидирования. Температура реакции конкретно не ограничена, но может быть от холодной температуры до горячей температуры, предпочтительной является холодная температура или комнатная температура.
На стадии (2), защитную группу вводят в соединение формулы 4, полученное на стадии (1), синтезируя таким образом соединение формулы 5, которое представляет собой N-защищенный амидный промежуточный продукт. Вводимая защитная группа может представлять собой алкоксиметил, такой как метоксиметил (MOM) или бензилоксиметил (BOM) и т.п., бензил (Bn) или пара-метоксибензил (PMB) и т.п. Основание, которое используют в этой реакции, представляет собой гидрид натрия, трет-бутоксид калия, карбонат калия, гидроксид натрия или т.п., и растворитель, используемый в этой реакции, представляет собой тетрагидрофуран, N,N-диметилформамид, ацетонитрил, толуол, дихлорметан, воду и т.п. или их смесь, которая не оказывает отрицательного влияния на реакцию. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно находится в диапазоне от холодной температуры до горячей температуры, предпочтительной является комнатная температура.
3
4
2
2
3
2
3
2
3
3
На стадии (3), соединение формулы 5, которое представляет собой N-защищенный амидный промежуточный продукт, полученный на стадии (2), подвергают реакции циклизации в присутствии металлического катализатора, получая таким образом соединение формулы 6. Металлический катализатор, который используют в этой реакции, обычно представляет собой палладий(0) или палладий(II). Кроме того, в качестве металлического катализатора можно использовать тетракистрифенилфосфин палладий(0) ((PPh)Pd), ацетат палладия(II) (Pd(OAc)), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (Pddba) или хлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (PdCl(PPh)) и т.п. Хотя эту реакцию можно осуществить без использования какого-либо лиганда, ее обычно осуществляют с использованием трифенилфосфина (PPh)4, трибутилфосфина (BuP), 1,2-бис(дифенилфосфино)пропана (DPPP) или (R)-2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтила ((R)-BiNAP) и т.п., который представляет собой лиганд, который обычно используют в реакции циклизации в присутствии металлического катализатора. Основания, которые можно использовать в этой реакции, включают карбонат калия, карбонат натрия, карбонат серебра, диэтилизопропиламин и т.п., и реакцию осуществляют с использованием растворителя, такого как N,N-диметилформамид, бензол, ксилол или ацетонитрил и т.п., который не оказывает отрицательного влияния на реакцию. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно находится в диапазоне от комнатной температуры до горячей температуры, предпочтительно горячая температура.
На стадии (4), соединение формулы 6, полученное на стадии (3), подвергают реакции восстановления кольца с водородом в присутствии палладиевого (Pd) катализатора, получая таким образом соединение формулы 7. Эту реакцию осуществляли с использованием органического растворителя, такого как спирт, хлороформ, дихлорметан, этилацетат и т.п. или их смесь, который не оказывает отрицательного влияния на реакцию. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно представляет собой комнатную температуру.
4
4
На стадии (5), соединение формулы (7), полученное на стадии (4), восстанавливают восстанавливающим агентом, таким как литийалюминийгидрид (LAH) или боргидрид натрия (NaBH), получая таким образом соединение формулы (8). Используемый восстанавливающий агент обычно представляет собой литийалюминийгидрид (LAH), боргидрид натрия (NaBH), диизобутилалюмогидрид (DIBAL-H) или т.п., который является коммерчески доступным. Кроме того, эту реакцию предпочтительно осуществляют в растворителе, который не оказывает отрицательного влияния на реакцию, и примеры растворителей, которые можно использовать для этой цели, включают тетрагидрофуран, диэтиловый эфир, спирт и т.п. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно находится в диапазоне от холодной температуры до горячей температуры, предпочтительной является холодная температура или комнатная температура.
На стадии (6), соединение формулы 8, полученное на стадии (5), галогенируют и аминируют при помощи аминового соединения с получением соединения формулы 9. На этой стадии преобразование в галогенированное соединение обычно осуществляют с использованием трибромфосфина, тетрабромметана, тионилхлорида или т.п., который преобразует гидроксильную группу в галоген, в растворителе, таком как хлороформ, ацетонитрил, дихлорметан или т.п., который не оказывает отрицательного влияния на реакцию. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно находится в диапазоне от холодной температуры до комнатной температуры. Кроме того,, галогенированное соединение можно подвергнуть общей реакции аминирования с получением соединения формулы 9. Эту реакцию обычно осуществляют с использованием спирта, такого как метанол или этанол, дихлорметана, хлороформа, тетрагидрофурана, диэтилового эфира, толуола, N,N-диметилформамида или т.п., который не оказывает отрицательного влияния на реакцию, в присутствии органического амина, такого как пиридин, триэтиламин или диэтилизопропиламин и т.п., или карбоната калия и т.п., который можно использовать в качестве основания в реакциях аминирования. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно находится в диапазоне от холодной температуры до горячей температуры, предпочтительно от комнатной температуры до горячей температуры.
На стадии 7 соединение формулы 9, полученное на стадии (6), подвергают реакции снятия защиты в соответствии со способом, известным в области органического синтеза, получая таким образом трициклическое производное соединение формулы 1a.
Способ получения 2
Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением, как показано ниже на схеме реакций 2, трициклические производные соединения настоящего изобретения, их оптические изомеры, их рацематы или их фармацевтически приемлемые соли, можно получить способом, включающим следующие стадии:
(1) удаление защитной группы соединения формулы 8, полученного на стадии (5) схемы реакций 1, при помощи реакции снятия защиты, получая таким образом соединение формулы 10; и
(2) соединение формулы 10, полученное на стадии (1), подвергают реакции галогенирования и аминирования с аминовым соединением, получая таким образом соединение формулы 1a.
[Схема реакций 2]
где Y, B и pro такие, как определены выше.
Далее каждая стадия будет описана подробно.
На стадии (1) соединение формулы 8, полученное на стадии (5) схемы реакций 1, подвергают реакции снятия защиты способом, известным в области органического синтеза, получая таким образом соединение формулы 10.
На стадии (2) соединение формулы 10, полученное на стадии (1), галогенируют и аминируют при помощи аминового соединения, получая таким образом соединение формулы 1a. На этой стадии преобразование в галогенированное соединение обычно осуществляют с использованием трибромфосфина, тетрабромметана, тионилхлорида или т.п., который преобразует гидроксильную группу в галоген, в растворителе, таком как хлороформ, ацетонитрил, дихлорметан или т.п., который не оказывает отрицательного влияния на реакцию. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно находится в диапазоне от холодной температуры до комнатной температуры. Кроме того, галогенированное соединение можно подвергнуть общей реакции аминирования с получением соединения формулы 9. Эту реакцию обычно осуществляют с использованием спирта, такого как метанол или этанол, дихлорметана, хлороформа, тетрагидрофурана, диэтилового эфира, толуола, N,N-диметилформамида или т.п., который не оказывает отрицательного влияния на реакцию, в присутствии органического амина, такого как пиридин, триэтиламин или диэтилизопропиламин и т.п., или карбоната калия и т.п., который можно использовать в качестве основания в реакциях аминирования. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно находится в диапазоне от холодной температуры до горячей температуры, предпочтительно от комнатной температуры до горячей температуры.
Способ получения 3
Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением, как показано ниже на схеме реакций 3, трициклические производные соединения настоящего изобретения, их оптические изомеры, их рацематы или их фармацевтически приемлемые соли, можно получить способом, включающим следующие стадии:
(1) удаление защитной группы соединения формулы 7, полученного на стадии (4) схемы реакций 1, при помощи реакции снятия защиты, получая таким образом соединение формулы 11;
(2) добавление водного раствора гидроксида калия или гидроксида натрия медленно по каплям к соединению формулы 11, полученному на стадии (1), получая таким образом соединение формулы 12, которое представляет собой гидролизованную карбоновую кислоту; и
(3) соединение формулы 12, полученное на стадии (2), подвергают реакции сочетания амином, получая таким образом соединение формулы 1b.
[Схема реакций 3]
1
10
на схеме реакций 3 Y и B такие, как определены выше в формуле 1, Alk представляет собой C-Cалкил с прямой или разветвленной цепью, и pro представляет собой защитную группу, такую как арильная группа, бензильная группа, бензилоксиметильная группа, пара-метоксибензильная группа (PMB), метоксиметильная группа(MOM) или т.п., предпочтительно пара-метоксибензильная группа(PMB) или метоксиметильная группа(MOM).
Далее каждая стадия будет описана подробно.
На стадии (1) соединение формулы 7, полученное на стадии (4) схемы реакций 1, подвергают реакции снятия защиты способом, известным в области органического синтеза, получая таким образом соединение формулы 11.
На стадии (2) водный раствор гидроксида калия или гидроксида натрия медленно по каплям добавляют к соединению формулы 11, полученному на стадии (1), получая таким образом соединение формулы (12), которое представляет собой гидролизованную карбоновую кислоту. Эту реакцию осуществляли в спиртовом растворителе, таком как метанол или этанол, который не оказывает отрицательного влияния на реакцию. Температура реакции конкретно не ограничена, но обычно реакцию осуществляют при температуре от холодной температуры до горячей температуры, предпочтительно при комнатной температуре. Эту реакцию можно осуществить в общих условиях сложноэфирного гидролиза.
На стадии (3) соединение формулы 12, полученное на стадии (2), подвергают общей реакции амидирования с аминовым соединением в присутствии связывающего реагента, получая таким образом соединение формулы 1b. Как правило, используемый связывающий реагент представляет собой 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимид (EDCI), 1,3-дициклогексилкарбодиимид (DCC), 1,1-карбонилдиимидазол или т.п., который является коммерчески доступным. Хотя эту реакцию можно осуществить без использования какого-либо основания, ее обычно осуществляют с использованием растворителя, такого как ацетонитрил, диметилформамид, дихлорметан или т.п., который не оказывает отрицательного влияния на реакцию, в присутствии 4-диметиламинопиридина, пиридина, триэтиламина, диэтилизопропиламина, N-метилморфолина или диметилфениламина, который представляет собой общее основание, которое можно использовать в реакциях амидирования. Температура реакции конкретно не ограничена, но может находиться в диапазоне от холодной температуры до горячей температуры, предпочтительной является холодная температура или комнатная температура.
Требуемые продукты, полученные в соответствии со схемами реакций, описанными выше, можно выделить и очистить с использованием обычных способов, таких как колоночная хроматография, перекристаллизация или т.п.
Соединения формулы 1 в соответствии с настоящим изобретением можно получить в виде фармацевтически приемлемых солей и сольватов в соответствии с обычными способами, известными в данной области.
Фармацевтическая композиция, содержащая трициклическое производное соединение, ее применение и способ лечения с использованием этой композиции
Настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию для профилактики или лечения заболеваний, вызванных активностью PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, при этом композиция содержит, в качестве активного ингредиента, трициклическое производное соединение, представленное следующей формулой 1, его оптический изомер, его рацемат или его фармацевтически приемлемую соль:
[Формула 1]
1
2
3
где L, кольцо A, R, R и Rтакие, как определены выше.
Заболевания, вызванные активностью PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2 включают невропатическую боль, эпилепсию, инсульт, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, боковой (латеральный) амиотрофический склероз (ALS), болезнь Гантингтона, шизофрению, хроническую или острую боль, ишемическое поражение головного мозга, потерю нейронов после гипоксии, травму и повреждение нерва, нейродегенеративные заболевания, сердечно-сосудистые заболевания, такие как атеросклероз, гиперлипидемия, повреждение ткани сердечно-сосудистой системы, ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда, стенокардия, кардиогенный шок и т.п., диабетическую невропатию, остеоартрит, остеопороз и рак и т.п.
Трициклические производные соединения настоящего изобретения или их соли могут ингибировать активность поли(АДФ-рибоза)полимеразы и, таким образом, могут эффективно применяться для профилактики или лечения заболеваний, вызванных активностью PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, в частности, невропатической боли, нейродегенеративных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний, диабетической невропатии, воспалительных заболеваний, остеопороза или рака.
Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно вводить различными путями млекопитающим, включая крыс, мышей, домашний скот и людей и т.п. В настоящем изобретении пути введения фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением включают, но не ограничиваются этим, пероральный, внутривенный, внутримышечный, внутриартериальный, интрамедуллярный, интрадуральный, внутрисердечный, чрескожный, подкожный, внутрибрюшинный, интраназальный, энтеральный, местный, сублингвальный или ректальный путь.
Кроме того, фармацевтическую композицию предпочтительно вводят перорально или парентерально. Как используется в настоящей заявке, термин ʺпарентеральныйʺ включает подкожную, внутрикожную, внутривенную, внутримышечную, внутрисуставную, внутрисиновиальную, интрастернальную, интрадуральную, внутриочаговую и интракраниальную инъекцию или инфузию.
Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением также может содержать один или несколько фармацевтически приемлем носителей, один или несколько эксципиентов и/или разбавителей.
Неограничивающие примеры фармацевтически подходящих носителей включают твердые вещества и/или жидкости, такие как этанол, глицерин, вода и т.п. Количество носителя в композиции для лечения находится в диапазоне от около 5 до около 99 масс.% в расчете на общую массу композиции для лечения или терапевтической комбинации. Неограничивающие примеры подходящих фармацевтически приемлемых эксципиентов и разбавителей включают нетоксичные совместимые наполнители, связующие, разрыхлители, буферы, консерванты, смачивающие агенты, экстендеры, антиоксиданты, смазывающие вещества, ароматизаторы, загустители, красители, поверхностно-активные вещества, эмульгаторы, суспендирующие агенты и т.п. Такие эксципиенты и разбавители включают, но не ограничиваются этим, лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, ксилит, эритрит, мальтит, крахмал, гуммиарабик, альгинат, желатин, фосфат кальция, силикат кальция, целлюлозу, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, воду, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеарат магния и минеральное масло, и для специалистов в данной области очевидно, что можно использовать все другие фармацевтически приемлемые носители, эксципиенты и разбавители.
Для использования композиция, содержащая соединение по настоящему изобретению или его соль, может быть сформулирована в виде пероральных лекарственных форм, таких как таблетки, порошки, гранулы, пилюли, капсулы, суспензии, эмульсии, растворы для внутреннего применения, сиропы или тому подобное, составы для наружного применения, суппозитории или стерильные инъекционные растворы, в соответствии с общепринятыми способами.
Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть в виде стерильного инъекционного препарата, например, в виде стерильной инъекционной водной или масляной суспензии. Эту суспензию можно формулировать в соответствии с методами, известными в данной области, с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов (например, Tween 80) и суспендирующих агентов. Стерильная инъекционная композиция может также быть в форме стерильного инъекционного раствора или суспензии в нетоксичном парентерально-приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Приемлемые носители и растворители, которые можно использовать, представляют собой маннит, воду, раствор Рингера или изотонический раствор хлорида натрия и т.п. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используют в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для этой цели можно использовать любое мягкое нелетучее масло, которое имеет низкое раздражение, включая синтетические моно- или диглицериды. Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные полезны в получении инъекционных композиций, а также фармацевтически приемлемые натуральные масла (например, оливковое масло или касторовое масло), особенно их полиоксиэтилированные типы.
Фармацевтическую композицию в соответствии с настоящим изобретением можно вводить перорально в любой перорально приемлемой дозе, включая, но не ограничиваясь этим, капсулы, таблетки, водные суспензии и растворы.
Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению также можно вводить в форме суппозиториев для ректального введения. Эти композиции можно получить путем смешивания соединения по настоящему изобретению с подходящим нераздражающим эксципиентом, который является твердым при комнатной температуре, но становится жидким при ректальной температуре. Такие вещества включают, но не ограничиваются этим, масло какао, пчелиный воск и полиэтиленгликоли.
Местное введение фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением полезно, когда желаемое лечение включает области или органы, легко доступные посредством местного применения. Для нанесения местно на кожу, фармацевтическая композиция должна быть сформулирована с подходящей мазью, содержащей активный компонент, суспендированный или растворенный в носителе. Носители для местного введения соединения по настоящему изобретению включают, но не ограничиваются этим, минеральное масло, жидкий парафин, белый вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтилен, полиоксипропиленовое соединение, эмульгирующий воск и воду. Альтернативно, фармацевтическая композиция может быть сформулирована с подходящим лосьоном или кремом, содержащим активное соединение, суспендированное или растворенное в носителе. Подходящие носители включают, но не ограничиваются этим, минеральное масло, сорбитанмоностеарат, полисорбат 60, воск на основе цетиловых эфиров, цетеариловый спирт, 2-октилдодеканол, бензиловый спирт и воду. Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно также местно применять для нижнего отдело кишечника при помощи ректального суппозитория или в подходящей композиции для клизмы. Трансдермальные пластыри для местного нанесения также включены в настоящее изобретение.
Такие композиции получают в соответствии со способами, хорошо известными в области формулирования фармацевтических композиций, и могут быть получены в виде растворов в физиологическом растворе с использованием бензилового спирта или других подходящих консервантов, промоторов абсорбции для повышения биодоступности, фторуглеродов и/или других солюбилизирующих или диспергирующих агентов, известных в данной области техники.
Новое соединение, описанное выше, содержится в фармацевтической композиции по настоящему изобретению в терапевтически эффективном количестве или профилактически эффективном количестве. Хотя предпочтительная доза соединения в соответствии с настоящим изобретением варьируется в зависимости от состояния и массы тела пациента, тяжести заболевания, типа лекарственного средства и пути и периода введения, ее может быть подходящим образом выбрать специалист в данной области. Однако для желаемых эффектов соединение формулы 1 в соответствии с настоящим изобретением можно вводить один или несколько раз в день при дозе от 0,0001 до 1000 мг/кг, предпочтительно от 0,01 до 500 мг/кг. Композиция по настоящему изобретению может содержать соединение формулы 1 в количестве от 0,0001 до 50 масс.% от общей массы композиции.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может дополнительно содержать один или несколько активных ингредиентов, которые обладают такой же или схожей эффективностью, в дополнение к соединению, представленному формулой 1, его оптическому изомеру, его рацемату или его фармацевтически приемлемой соли.
Кроме того, настоящее изобретение также обеспечивает применение трициклического производного соединения для получения лекарственного средства для профилактики или лечения различных заболеваний, индуцированных активностью PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2. Для получения лекарственного средства соединение, представленное формулой 1, можно смешать с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем, носителем или т.п., и также можно объединить с одним или несколькими другими активными ингредиентами с получением комбинированного препарата, имеющего синергические эффекты.
Настоящее изобретение также обеспечивает способ для профилактики или лечения различных заболеваний, индуцированных активностью PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, включающий введение эффективного количества трициклического производного соединения млекопитающим, включая людей. Способ для профилактики или лечения в соответствии с настоящим изобретением включает ингибирование или предотвращение симптомов заболевания, а также устранение самого заболевания до появления симптомов путем введения соединения, представленного формулой 1. При лечении заболеваний профилактическая или терапевтическая доза конкретного активного ингредиента будет варьироваться в зависимости от характера и тяжести заболевания или состояния и может также варьироваться в зависимости от пути, которым вводят активный ингредиент. Доза и частота введения также будут варьироваться в зависимости от возраста, массы тела и реакции конкретного пациента. Подходящие схемы введения легко сможет выбрать специалист в данной области с учетом таких факторов. Кроме того, способ профилактики или лечения в соответствии с настоящим изобретением может дополнительно включать введение терапевтически эффективного количества дополнительного активного средства, полезного для лечения заболевания, вместе с соединением, представленным формулой 1, в котором дополнительное активное средство может проявлять синергетический эффект с соединением формулы 1 или вспомогательный эффект.
Характерные особенности, указанные для фармацевтической композиции, способа применения и лечения по настоящему изобретению, могут быть соответствующим образом применены друг к другу, если они друг другу не противоречат.
[Полезные эффекты]
Трициклические производные соединения в соответствии с настоящим изобретением могут ингибировать активность PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2 и, таким образом, могут эффективно применяться для профилактики или лечения невропатической боли, нейродегенеративных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний, диабетической невропатии, воспалительных заболеваний, остеопороза или рака.
[Способ осуществления изобретения]
Далее настоящее изобретение будет описано более подробно со ссылкой на примеры. Однако специалистам в данной области будет очевидно, что эти примеры приведены только для иллюстративных целей и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.
Пример 1: Синтез дигидрохлорида 8-{[4-(4-метоксифенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-она
Стадия 1: Синтез этил 3-(2-хлорникотинамидо)бензоата
2-хлорникотиновую кислоту (1,049 кг, 6,66 моль) растворяли в дихлорметане (6 л) и затем к этой смеси по каплям добавляли этил-3-аминобензоат (1,000 кг, 6,05 моль). Смесь охлаждали до 0°C и к этой смеси добавляли 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимид гидрохлорид (EDC, 1,600 кг, 9,08 моль) и 1-гидрокси-бензотриазол гидрат (HOBt, 245 g, 1,82 моль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакцию останавливали путем добавления воды, и затем слой органического растворителя отделяли от водного слоя и промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия. Его сушили безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя и полученное твердое вещество промывали этилацетатом и гексаном и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,584 кг, 86%, желтое твердое вещество).
1
3
H ЯМР (400МГц, CDCl); δ 8,53 (дд, J=1,6Гц, 4,4Гц, 1H), 8,41(с, 1H), 8,21(дд, J=2,0Гц, 8,0Гц, 1H), 8,14(с, 1H), 8,08-8,05(м, 1H), 7,89-7,87(м, 1H), 7,49(т, J=8,0Гц, 1H), 7,42(дд, J=4,8Гц, 7,2Гц, 1H), 4,37(кв., J=6,8Гц, 2H), 1,38(т, J=6,8Гц, 3H).
Стадия 2: Синтез этил 3-[2-хлор-N-(метоксиметил)никотинамидо]бензоата
Соединение (527 г, 1,73 моль), полученное на стадии 1, растворяли в дихлорметане (5,27 л) и охлаждали до 0°C, затем к этой смеси добавляли метоксиметилхлорид (278 г, 3,46 моль). В реакционный раствор добавляли по каплям йодид натрия (39 г, 0,15 моль) и тетрабутиламмонийбромид (223 г, 0,69 моль). Раствор гидроксида натрия, растворенный в воде (100 мл), добавляли в течение 30 минут, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 10 часов. Реакцию останавливали добавлением воды, затем слой органического растворителя отделяли и концентрировали при пониженном давлении. К концентрированному остатку добавляли этилацетат и воду и слой органического растворителя отделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, затем концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Указанное в заголовке соединение (517 г, 86%, желтое твердое вещество) получали без дополнительной очистки (517 г, 86%, желтое твердое вещество).
1
3
H ЯМР (400МГц, CDCl); δ 8,24(д, J=4,8Гц 1H), 7,87-7,85(м, 2H), 7,53-7,41(м, 2H), 7,31(т, J=8,0Гц, 1H), 7,12-7,09(м, 1H), 5,30(с, 2H), 4,34(кв., J=6,8Гц, 2H), 3,55(с, 3H), 1,38(т, J=6,8Гц, 3H).
Стадия 3: Синтез этил 6-(метоксиметил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбоксилата
Соединение (774 г, 2,22 моль), полученное на стадии 2, растворяли в N,N-диметилформамиде (4,5 л), затем к этой смеси добавляли трибутилфосфин (247 г, 1,23 моль), ацетат палладия(II) (137 г, 0,61 моль) и карбонат калия (676 г, 4,89 моль), с последующей реакцией при 120°C в течение 1 часа. Температуру понижали до 60°C, и затем реакцию останавливали ледяной водой, с последующей фильтрацией, с получением твердого вещества. К полученному твердому веществу добавляли по каплям метанол, с последующим перемешиванием в течение 1,5 часа, и затем фильтрацией с получением указанного в заголовке соединения (308 г, 44%, белое твердое вещество).
1
3
H ЯМР (400МГц, CDCl); δ 9,05(дд, J=2,0Гц, 4,4Гц, 1H), 8,93-8,91(м, 1H), 8,78-8,74(м, 1H), 8,30(с, 1H), 8,05-8,03(м, 1H), 7,59(дд, J=4,4Гц, 8,0Гц, 1H), 5,88(с, 2H), 4,46(кв., J=6,8Гц, 2H), 3,50(с, 3H), 1,46(т, J=6,8Гц, 1H).
Стадия 4: Синтез этил 6-(метоксиметил)-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбоксилата
К соединению (257 г, 0,82 моль), полученному на стадии 3, добавляли тетрагидрофуран (3 л) и воду (3 л) и затем добавляли 10%-палладий (51 г, 20 масс.%). Смесь перемешивали в атмосфере водорода (4 бар) в течение 3 часов. Смесь фильтровали через фильтр из целита для удаления палладия, затем экстрагировали дихлорметаном. Экстракт концентрировали при пониженном давлении, и, когда оставшееся количество дихлорметана составляло 2 л, к этой смеси добавляли гексан (3 л), с последующим перемешиванием в течение 1,5 часа. Полученное твердое вещество фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (325 г, 52%, белое твердое вещество).
1
3
H ЯМР (400МГц, CDCl); δ 8,22(д, J=1,2Гц, 1H), 7,86(дд, J=1,2Гц, 8,4Гц, 1H), 7,49(д, J=8,4Гц, 1H), 5,78(с, 2H), 4,42(кв., J=7,2Гц, 2H), 3,49-3,46(м, 1H), 3,43(с, 3H), 2,72(т, J=6,4Гц, 1H), 2,00-1,98(м, 1H), 1,43(т, J=7,2Гц, 3H).
Стадия 5: Синтез 8-(гидроксиметил)-6-(метоксиметил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5-(6H)-она
К соединению (50 г, 160 ммоль), полученному на стадии 4, добавляли тетрагидрофуран (1 л) и метанол (0,3 л), с последующим охлаждением до 0°C. Боргидрид натрия (36 г, 96 ммоль) медленно добавляли к раствору, который затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, с последующей реакцией при 60°C в течение 12 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, затем реакцию останавливали водой, после чего реакционный раствор нейтрализовали 2N раствором хлористоводородной кислоты. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, твердое вещество фильтровали и промывали водой и ацетоном, получая таким образом указанное в заголовке соединение (44 г, 99%, желтое твердое вещество).
1
6
H ЯМР (400МГц, DMSO-d); δ 7,82(д, J=8,0Гц, 1H), 7,41(с, 1H), 7,14(д, J=8,0Гц, 1H), 7,07(с, 1H), 5,58(с, 2H), 5,34(с, 1H), 4,59(с, 2H), 3,40-3,30(м, 2H), 3,25(с, 3H), 2,50-2,46(м, 2H), 1,83-1,80(м, 2H).
Стадия 6: Синтез 8-(хлорметил)-6-(метоксиметил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-она
К соединению (54 мг, 0,19 ммоль), полученному на стадии 5, добавляли дихлорметан (5 мл), затем добавляли медленно по каплям тионилхлорид (0,028 мл, 0,39 ммоль) при 0°C. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После завершения реакции добавляли при 0°C дихлорметан и воду в реакционный раствор, который затем сушили безводным сульфатом магния. Полученное вещество концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (37 мг, выход: 44%, желтое твердое вещество). Полученное соединение использовали без дополнительной очистки на следующей стадии.
1
3
H ЯМР (400МГц, CDOD); δ 7,72(д, J=8.Гц, 1H), 7,30(с, 1H), 7,21(дд, J=8,8Гц, 1,6Гц, 1H), 4,68(с, 2H), 3,41(т, J=5,4Гц, 2H), 2,59(т, J=6,2Гц, 2H), 1,92-1,88(м, 2H).
Стадия 7: Синтез 6-(метоксиметил)-8-{[4-(4-метоксифенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-она
К соединению (100 мг, 0,34 ммоль), полученному на стадии 6, добавляли метанол (5,0 мл), затем добавляли 1-(4-метоксифенил)пиперазин (108 мг, 0,41 ммоль) и триметиламин. Смесь перемешивали при 80°C в течение 24 часов. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали, затем экстрагировали дихлорметаном и слой органического растворителя сушили безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (гексан: этилацетат =1:9) с получением указанного в заголовке соединения (115 мг, выход: 75%).
1
3
H ЯМР(400МГц, CDCl); δ 7,52(с, 1H), 7,41-7,39(м, 1H), 7,26-7,22(м, 1H), 6,91-6,89(м, 2H), 6,85-6,82(м, 2H), 5,75(с, 2H), 3,77(с, 3H), 3,67(с, 2H), 3,49-3,43(м, 5H), 3,12-3,10(м, 4H), 2,70-2,63(м, 6H),2,10-1,95(м, 2H).
Стадия 8: Синтез 8-{[4-(4-метоксифенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-она
Соединение (115 мг, 0,26 ммоль), полученное на стадии 7, растворяли в дихлорметане (10 мл), затем добавляли к трифторуксусной кислоте (2 мл) и нагревали с обратным холодильником в течение 24 часов. После завершения реакции реакционный раствор экстрагировали дихлорметаном и экстрагировали еще раз дихлорметаном в насыщенном водном растворе гидрокарбоната натрия. Экстракт сушили безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (дихлорметан: метанол=1:9) с получением указанного в заголовке соединения (68 мг, выход: 65%).
1
3
H ЯМР (400МГц, CDCl); δ 7,40(д, J=8,0Гц, 1H), 7,312(шир., 1H), 7,25-7,20(м, 1H), 6,90(д, J=8,8Гц, 2H), 6,83(д, J=8,8Гц, 2H), 4,99(с, 1H), 3,77(с, 1H), 3,70(с, 2H), 3,49-3,46(м, 2H), 3,14-3,09(м, 6H), 2,73-2,71(м, 4H), 1,98-1,97(м, 2H).
Стадия 9: Синтез 8-{[4-(4-метоксифенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он дигидрохлорида
Соединение (68 мг, 0,17 ммоль), полученное на стадии 8, растворяли в метаноле (2 мл), затем к этой смеси добавляли 1,25 M раствор хлористоводородной кислоты в метаноле (2 мл), с последующим перемешиванием в течение 12 часов. После завершения реакции реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Затем получали твердое вещество с этилацетатом и фильтровали с получением указанного в заголовке соединения (83 мг, выход: 100%, твердое вещество).
1
6
H ЯМР (400МГц, DMSO-d); δ 11,05(с, 1H), 11,1-10,9(шир., 1H), 8,34(д, J=8,4Гц, 1H), 7,84-7,78(м, 1H), 7,75(с, 1H), 7,35(д, J=9,2Гц, 1H), 7,27(д, J=9,6Гц, 1H), 5,00-4,60(м, 2H), 4,10(с, 3H), 4,04(д, J=13,2Гц, 2H), 3,80-3,74(м, 4H), 3,63-3,58(м, 2H), 3,44-3,41(м, 2H), 2,92-2,88(м, 2H), 2,34-2,32(м, 2H)
Пример 2: Синтез 8-{[4-(4-фторфенил)пиперазин-1-ил]метил}-10-метокси-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он дигидрохлорида
Используя 8-хлорметил-10-метокси-6-метоксиметил-2,3,4,6-тетрагидро-1H-бензо[h][1,6]нафтиридин-5-он и 1-(4-фторфенил)пиперазин, указанное в заголовке соединение (17 мг, выход: 64%, белое твердое вещество) получали способом, аналогичным описанному в Примере 1.
1
6
H ЯМР(400МГц, DMSO-d); δ 11,91(шир., 1H), 11,66(шир., 1H), 7,45(с, 1H), 7,15-6,95(м, 5H), 4,40(шир., 2H), 4,01(с, 3H), 3,80-3,65(м, 2H), 3,45-3,30(м, 2H), 3,30-3,15(м, 4H), 2,70-2,30(м, 4H), 1,90-1,70(м, 2H).
Пример 3: Синтез 10-этокси-8-{[4-(4-фторфенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он тригидрохлорида
Используя 8-хлорметил-10-этокси-6-метоксиметил-2,3,4,6-тетрагидро-1H-бензо[h][1,6]нафтиридин-5-он и 1-(4-фторфенил)пиперазин, соединение (36 мг, 0,07 ммоль, 87%) получали способом, аналогичным описанному в Примере 1.
1
6
H ЯМР(400МГц, DMSO-d); δ 11,03(с, 1H), 10,60-10,45(шир., 1H), 7,42(с, 1H), 7,12-7,08(м, 2H), 7,04-6,98(м, 2H), 6,88(с, 1H), 4,35(д, J=4,8Гц, 2H), 4,26(кв., J=7,0Гц, 2H), 3,73(д, J=12,8Гц, 2H), 3,21-3,17(м, 4H), 3,17-3,06(м, 4H), 1,80-1,70(м, 2H), 1,45(т, J=7,0Гц, 3H).
Соединения Примеров 4-114 получали способом, аналогичным описанному в Примерах 1-3, за исключением того, что заместители изменяли, как показано в Таблице 1 ниже.
В таблицах в графе, относящейся к спектрам ЯМР, использованы следующие сокращения:
NMR: ЯМР
s: синглет
brs: широкий синглет
d: дублет
dd: двойной дублет
t: триплет
q: квартет
quint: квинтет
m: мультиплет
6
DMSO-D: дейтерированный диметилсульфоксид
MHz: МГц
Hz: Гц
Таблица 1
Пример 115: Синтез 8-({4-[4-(трифторметил)фенил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,2]нафтиридин-5(6H)-он дигидрохлорида
Стадия 1: Синтез 8-(гидроксиметил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5-(6H)-она
К соединению (34 г, 123 ммоль), полученному на стадии (5) Примера 1, добавляли этанол (0,38 л) и затем медленно по каплям добавляли 12N раствор хлористоводородной кислоты (0,34 л, 419 ммоль). Смеси давали прореагировать при 90°C в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до 0°C, и затем нейтрализовали 4N раствором гидроксида натрия. После перемешивания в течение 1 часа, полученное твердое вещество фильтровали и промывали водой и этанолом с получением указанного в заголовке соединения (26 г, 92%, желтое твердое вещество).
1
6
H ЯМР (400МГц, DMSO-d); δ 10,75(с, 1H), 7,71(д, J=8,4Гц, 1H), 7,17(с, 1H), 6,99(д, J=8,4Гц, 1H), 6,86(с, 1H), 5,26(шир., 1H), 4,52(с, 2H), 3,35-3,25(м, 2H), 2,44(д, J=6,4Гц, 2H), 1,84-1,74(м, 2H).
Стадия 2: Синтез 8-(хлорметил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5-(6H)-она
К соединению (25 г, 110 ммоль), полученному на стадии (1), добавляли дихлорметан (0,66 л), и затем медленно по каплям добавляли тионилхлорид (14,5 мл, 199 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов, и затем концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. Добавляли воду (200 мл) при 0°C, с последующей нейтрализацией 4N раствором гидроксида натрия. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа, и полученное твердое вещество промывали этанолом, получая таким образом указанное в заголовке соединение (27 г, 99%, желтое твердое вещество).
1
6
H ЯМР(400МГц, DMSO-d); δ 10,98(с, 1H), 7,80(д, J=8,4Гц, 1H), 7,26(с, 1H), 7,14(д, J=8,4Гц, 1H), 7,00(шир., 1H), 4,79(с, 2H), 3,32-3,29(м, 2H), 2,46(д, J=6,0Гц, 2H), 1,83-1,75(м, 2H).
Стадия 3: Синтез 8-({4-[4-(трифторметил)фенил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,2]нафтиридин-5(6H)-она
Используя 8-(хлорметил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5-(6H)-он (50 мг, 0,20 ммоль), полученный на стадии 2, получали указанное в заголовке соединение (41 мг, выход: 46%, желтое твердое вещество) таким же образом, как на стадии 7 Примера 1.
1
3
H ЯМР (400МГц, CDOD); δ 7,73(д, J=8,4Гц, 1H), 7,46(д, J=8,8Гц, 2H), 7,30(с, 1H), 7,23(д, J=8,4Гц, 1H), 7,03(д, J=8,8Гц, 2H), 3,65(с, 2H), 3,45-3,41(м, 2H), 3,33-3,30(м, 4H), 2,66-2,60(м, 6H), 1,95-1,89(м, 2H)
Стадия 4: Синтез 8-({4-[4-(трифторметил)фенил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,2]нафтиридин-5(6H)-он дигидрохлорида
Используя 8-({4-[4-(трифторметил)фенил]пиперазин-1-ил}метил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,2]нафтиридин-5(6H)-он (40 мг, 0,09 ммоль), полученный на стадии 3, получали указанное в заголовке соединение (20 мг, выход: 43%, желтое твердое вещество) таким же образом, как на стадии 9 Примера 1.
1
H ЯМР(400МГц, DMSO-d6); δ 11,81(с, 1H), 11,70-11,50(шир., 1H), 8,05(д, J=8,8Гц, 1H), 7,58(д, J=8,0Гц, 1H), 7,52(д, J=8,8Гц, 2H), 7,47(с, 1H), 7,08(д, J=8,4Гц, 2H), 4,41(sS, 2H), 3,94(шир., 4H), 3,33-3,30(м, 6H), 2,52-2,46(м, 2H), 1,80-1,78(м, 2H).
Соединения Примеров 116-165 получали способом, аналогичным описанному в Примере 115, за исключением того, что заместители изменяли, как показано в Таблице 2 ниже.
Таблица 2
Пример 166: Синтез 10-фтор-8-{[4-(2-фтор-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он дигидрохлорида
Стадия 1: Синтез этил 3-амино-5-фторбензоата
Этил 3-амино-2,4-дихлор-5-фторбензоат (5,0 г, 17,73 ммоль) растворяли в метаноле (70 мл), затем к этой смеси добавляли 10%-палладий (500 мг) в атмосфере водорода, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 дня. После завершения реакции раствор фильтровали через целит и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (дихлорметан:метанол=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (2266,6 мг, выход: 70%, белое твердое вещество).
1
3
H ЯМР(400МГц, CDCl); δ 7,13(с, 1H), 7,09(д, J=8,8Гц, 1H), 6,56-6,53(м, 1H), 4,35(кв., J=6,8Гц, 2H), 1,38(т, J=6,8Гц, 3H).
Стадия 2: Синтез этил 3-(2-хлорникотинамидо)-5-фторбензоата
2-хлорникотиновую кислоту (3 г, 18,68 ммоль) растворяли в дихлорметане и охлаждали до 0°C и к этой смеси добавляли по каплям оксалилхлорид. Затем добавляли каталитическое количество N,N-диметилформамида и смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. После завершения реакции раствор концентрировали при пониженном давлении. Полученный 2-хлорпиридин-3-карбонилхлорид растворяли в дихлорметане и охлаждали до 0°C, к этой смеси добавляли соединение (2,63 г, 14,37 ммоль), полученное на стадии 1, и триметиламин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 12 часов. Затем реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении и добавляли этилацетат к остатку, полученному путем концентрирования при пониженном давлении, с последующей фильтрацией при пониженном давлении для удаления твердого вещества. После фильтрации полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении, затем очищали колоночной хроматографией (гексан:этилацетат=2:1) с получением указанного в заголовке соединения (4,20 г, выход: 91%, белое твердое вещество).
1
3
H ЯМР (400МГц, CDCl); δ 8,36-8,35(м, 1H), 7,84-7,82(м, 2H), 7,73-7,71(м, 1H), 7,34-7,32(м, 1H), 7,24-7,22(м, 1H), 4,37(кв., J=7,2Гц, 2H), 1,40-1,36(м, 3H).
Стадия 3: Синтез этил 3-{2-хлор-N-(метоксиметил)никотинамидо}-5-фторбензоата
Соединение (4,2 г, 13,01 ммоль), полученное на стадии 2, растворяли в тетрагидрофуране и охлаждали до 0°C, затем к этой смеси добавляли трет-бутоксид калия (1844,3 мг, 15,61 ммоль), с последующим перемешиванием в течение 30 минут. В реакционный раствор медленно по каплям добавляли метоксиметилхлорид, с последующим перемешиванием в течение 1 часа. Затем медленно добавляли воду для прекращения реакции. Затем реакционный раствор экстрагировали дихлорметаном и слой органического растворителя сушили безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (гексан:этилацетат=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (2,05 г, выход: 46%, желтое твердое вещество).
1
3
H ЯМР(400МГц, CDCl); δ 8,28(с, 1H), 7,62-7,56(м, 3H), 7,19-7,15(м, 2H), 5,28(с, 2H), 4,35(с, 2H), 3,59(с, 3H), 1,37(шир., 3H).
Стадия 4: Синтез этил 10-фтор-6-(метоксиметил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбоксилата
Соединение (2,05 г, 5,93 ммоль), полученное на стадии 3, растворяли в N,N-диметилформамиде, затем к раствору последовательно добавляли ацетат палладия(II) (399,4 мг, 1,78 ммоль), бис-дифенилфосфинопропан (733,8 мг, 1,78 ммоль), трибутилфосфин (1,46 мл, 5,93 ммоль) и карбонат калия (1639,2 мг, 11,86 ммоль), затем раствор перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 5 часов. В реакционный раствор добавляли воду для прекращения реакции и реакционный раствор экстрагировали дихлорметаном. Слой органического растворителя сушили безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. К остатку, полученному путем концентрирования при пониженном давлении, добавляли метанол, с последующей фильтрацией при пониженном давлении. К фильтрату добавляли дихлорметан, с последующей фильтрацией при пониженном давлении, с получением указанного в заголовке соединения (1145,3 мг, выход: 58%, желтое твердое вещество).
1
3
H ЯМР(400МГц, CDCl); δ 9,17(с, 1H), 8,83(д, J=7,6Гц, 1H), 8,16(с, 1H), 7,77(д, J=12,4Гц, 1H), 7,63-7,60(м, 1H), 5,87(с, 2H), 4,46(кв., J=6,8Гц, 2H), 3,50(с, 3H), 1,45(т, J=7,2Гц, 3H).
Стадия 5: Синтез этил 10-фтор-6-(метоксиметил)-5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбоксилата
Соединение (945,3 мг, 2,86 ммоль), полученное на стадии 4, растворяли в смеси дихлорметан/метанол (15 мл), затем к этой смеси добавляли 10%-палладий (4 мг) в атмосфере водорода, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1 дня. После завершения реакции раствор фильтровали через целит и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (гексан:этилацетат=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (841,2 мг, выход: 90%, белое твердое вещество).
1
3
H ЯМР(400МГц, CDCl); δ 8,01(с, 1H), 7,49(д, J=14,8Гц, 1H), 6,08(д, J=19,6Гц, 1H), 5,73(с, 2H), 4,42(кв., J=6,8Гц, 2H), 3,42(с, 5H), 2,70(т, J=6,0Гц, 2H), 1,98-1,92(м, 2H), 1,42(т, J=6,8Гц, 3H).
Стадия 6: Синтез 10-фтор-8-(гидроксиметил)-6-(метоксиметил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-она
Соединение (200 мг, 0,60 ммоль), полученное на стадии 5, растворяли в безводном тетрагидрофуране (10 мл), затем к этой смеси медленно по каплям добавляли литийалюминийгидрид (34,1 мг, 0,90 ммоль) при 0°C, с последующим перемешиванием при 0°C в течение 2 часов. После завершения реакции последовательно добавляли 0°C воду (0,034 мл), 1,0N раствор гидроксида натрия (0,034 мл) и 0°C воду (0,068 мл), с последующим перемешиванием в течение 1 часа. Затем реакционный раствор фильтровали через целит и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией (дихлорметан:метанол=30:1) с получением указанного в заголовке соединения (130,2 мг, выход: 74%, не совсем белое твердое вещество).
1
3
H ЯМР(400МГц, CDCl); δ 7,28(с, 1H), 6,91(д, J=14,4Гц, 1H), 6,06(д, J=20,0Гц, 1H), 5,68(с, 2H), 4,76(д, J=5,2Гц, 2H), 3,41(с, 5H), 2,68(т, J=6,0Гц, 2H), 1,94(т, J=6,0Гц, 2H).
Стадия 7: 8-(хлорметил)-10-фтор-6-(метоксиметил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он
Соединение (44,4 мг, 0,15 ммоль), полученное на стадии 6, добавляли к безводному дихлорметану (7 мл), затем медленно по каплям к этой смеси добавляли тионилхлорид (0,044 мл, 0,61 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После завершения реакции добавляли дихлорметан и 0°C воду, органический слой сушили безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (33,4 мг, выход: 72%, белое твердое вещество). Полученное соединение использовали без дополнительной очистки на следующей стадии.
Стадия 8: Синтез 10-фтор-8-{[4-(2-фтор-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил]метил}-6-(метоксиметил)-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-она
Используя соединение (43 мг, 0,14 ммоль), полученное на стадии 7, указанное в заголовке соединение (46 мг, выход: 66%, белое твердое вещество) получали таким же образом, как на стадии 7 Примера 1.
1
3
H ЯМР (400МГц, CDCl); δ 7,99(дд, J=2,0, 0,8Гц, 1H), 7,97(дд, J=2,8, 0,8Гц, 1H), 7,30(с, 1H), 6,97-6,88(м, 2H), 6,07(д, J=19,6Гц, 1H), 5,70(с, 2H), 3,63(с, 2H), 3,48-3,40(м, 5H), 3,40-3,30(м, 4H), 2,72-2,63(м, 6H), 2,00-1,90(м, 2H).
Стадия 9: Синтез 10-фтор-8-{[4-(2-фтор-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-она
Используя соединение (46 мг, 0,9 ммоль), полученное на стадии 8, указанное в заголовке соединение (34 мг, 74%, желтое твердое вещество) получали таким же образом, как на стадии 8 Примера 1.
1
3
H ЯМР (400МГц, CDCl); δ 11,71(шир., 1H), 7,98(дд, J=8,0, 2,4Гц, 1H), 7,90(дд, J=13,2, 2,8Гц, 1H), 7,13(с, 1H), 6,94-6,81(м, 2H), 6,03(д, J=17,6Гц, 1H), 3,60(с, 1H), 3,48-3,40(м, 2H), 3,38-3,32(м, 4H), 2,78-2,70(м, 2H), 2,70-2,62(м, 4H), 2,00-1,90(м, 2H).
Стадия 10: Синтез 10-фтор-8-{[4-(2-фтор-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он дигидрохлорид
Используя соединение (34 мг, 0,07 ммоль), полученное на стадии 9, указанное в заголовке соединение (40 мг, 99%, белое твердое вещество) получали таким же образом, как на стадии 9 Примера 1.
1
6
H ЯМР(400МГц, DMSO-d); δ 11,32(шир., 1H), 11,20(шир., 1H), 8,10-8,04(м, 2H), 7,33-7,25(м, 2H), 7,13(с, 1H), 4,40(шир., 2H), 3,83-3,67(м, 2H), 3,50-3,20(м, 8H), 2,50-2,40(м, 2H), 1,80-1,70(м, 2H).
Соединения Примеров 167-177 получали способом, аналогичным описанному в Примере 166, за исключением того, что заместители изменяли, как показано в Таблице 3 ниже.
Таблица 3
Пример 178: Синтез 10-фтор-8-{[4-(пиразин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он дигидрохлорида
Стадия 1: Синтез 8-(хлорметил)-10-фтор-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-она
К соединению (163 мг, 0,52 ммоль), полученному на стадии 7 Примера 166, добавляли дихлорметан (8,0 мл) и затем добавляли трифторуксусную кислоту (1,5 мл). Реакцию осуществляли путем перемешивания смеси при 50°C в течение 24 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, затем нейтрализовали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой сушили безводным сульфатом магния, затем концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (124 мг, 89%, желтое твердое вещество).
1
6
H ЯМР (400МГц, DMSO-d); δ 11,11(шир., 1H), 7,08(с, 1H), 6,94(д, J=14,8Гц, 1H), 6,56(д, J=14,0Гц, 1H), 4,75(с, 2H), 3,30-3,20(м, 2H), 2,50-2,40(м, 2H), 1,80-1,70(м, 2H).
Стадия 2: Синтез 10-фтор-8-{[4-(пиразин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-она
Используя соединение (33 мг, 0,12 ммоль), полученное на стадии 1, указанное в заголовке соединение (16 мг, выход: 33%, белое твердое вещество) получали таким же образом, как на стадии 7 Примера 1.
1
6
H ЯМР(400МГц, DMSO-d); δ 10,95(шир., 1H), 8,29(с, 1H), 8,06(с, 1H), 7,82(д, J=2,8Гц, 1H), 7,03(с, 1H), 6,84(д, J=14,4Гц, 1H), 6,57(д, J=14,0Гц, 1H), 4,00-3,20(м, 12H), 2,50-2,40(м, 2H), 1,80-1,70(м, 2H).
Стадия 3: Синтез 10-фтор-8-{[4-(пиразин-2-ил)пиперазин-1-ил]метил}-1,2,3,4-тетрагидробензо[h][1,6]нафтиридин-5(6H)-он дигидрохлорида
Используя соединение (11 мг, 0,03 ммоль), полученное на стадии 2, указанное в заголовке соединение (5 мг, выход: 38%, белое твердое вещество) получали таким же образом, как на стадии 9 Примера 1.
1
6
H ЯМР(400МГц, DMSO-d); δ 11,47(шир., 1H), 11,37(шир., 1H), 8,42(с, 1H), 8,16(с, 1H), 7,95(д, J=2,4Гц, 1H), 7,37(д, J=14,0Гц, 1H), 7,12(с, 1H), 4,50-4,30(м, 4H), 3,50-3,25(м, 6H), 3,20-3,05(м, 2H), 2,50-2,42(м, 2H), 1,80-1,70(м, 2H).
Соединения Примеров 179-185 получали способом, аналогичным описанному в Примере 178, за исключением того, что заместители изменяли, как показано в Таблице 4 ниже.
Таблица 4
Пример 186: Синтез 5-[4-(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбонил)пиперазин-1-ил]тиофен-2-карбонитрил дигидрохлорида
Стадия 1: Синтез этил 5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбоксилата
К соединению (500 мг, 1,56 ммоль), полученному на стадии 4 Примера 1, добавляли этанол (50 мл) и затем медленно по каплям добавляли 12N раствор хлористоводородной кислоты (5,0 мл, 15,60 ммоль), с последующей реакцией при комнатной температуре в течение 24 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении для удаления этанола, затем охлаждали до 0°C путем добавления воды (5,0 мл), после чего ее нейтрализовали 4N раствором гидроксида натрия. После перемешивания в течение 1 часа полученное твердое вещество фильтровали и промывали водой с получением указанного в заголовке соединения (423 мг, 99%, желтое твердое вещество).
1
3
H ЯМР(400МГц, CDOD); δ 7,91(с, 1H), 7,79(д, J=8,4Гц, 1H), 7,72(д, J=8,4Гц, 1H), 4,63(шир., 2H), 3,45-3,00(м, 2H), 2,62-2,52(м, 2H), 1,95-1,80(м, 2H), 1,35(т, J=7,2Гц, 3H).
Стадия 2: Синтез 5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбоновой кислоты
Соединение (150 мг, 0,55 ммоль), полученное на стадии 1, растворяли в метаноле (6 мл), затем к этой смеси добавляли водный раствор гидроксида натрия (200 мг гидроксида натрия в 3 мл воды). Реакционный раствор охлаждали при кипячении с обратным холодильником в течение 24 часов, затем концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя. К концентрированному остатку добавляли этилацетат, с последующей нейтрализацией 2N раствором хлористоводородной кислоты. Полученное твердое вещество фильтровали и промывали этилацетатом.
1
6
H ЯМР (400МГц, DMSO-d); δ 11,04(шир., 1H), 7,88(д, J=8,0Гц, 1H), 7,28(с, 1H), 7,59(д, J=8,0Гц, 1H),7,06(шир., 1H), 3,30-3,20(м,2H), 2,50-2,40(м, 2H), 1,90-1,80(м, 2H).
Стадия 3: Синтез 5-[4-(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбонил)пиперазин-1-ил]тиофен-2-карбонитрила
Соединение (30 мг, 0,12 ммоль), полученное на стадии 2, растворяли в диметилформамиде (3 мл), затем к этой смеси добавляли 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (35 мг, 0,18 ммоль), гидроксибензотриазол (25 мг, 0,18 ммоль), 4-метилморфолин (70 мл, 0,64 ммоль), 5-(пиперазин-1-ил)-тиофен-карбонитрил гидрохлорид (38 мг, 0,17 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. После завершения реакции добавляли воду, с последующей экстракцией три раза этилацетатом. Слой органического растворителя сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Остаток, полученный путем концентрирования при пониженном давлении, очищали колоночной хроматографией (дихлорметан:метанол=20:1) с получением указанного в заголовке соединения (37 мг, выход:71%, белое твердое вещество).
1
3
H ЯМР (400МГц, CDOD); δ 7,88(д, J=8,0Гц, 1H), 7,48(д, J=4,4Гц, 1H), 7,38(д, J=0,8Гц, 1H), 7,28(д, J=8,4Гц, 1,6Гц, 1H), 6,26(д, J=4,0Гц, 1H), 3,96(шир., 2H), 3,65(шир., 2H), 3,50-3,20(м, 6H), 2,60-2,50(м, 2H), 2,00-1,90(м, 2H).
Стадия 4: Синтез 5-[4-(5-оксо-1,2,3,4,5,6-гексагидробензо[h][1,6]нафтиридин-8-карбонил)пиперазин-1-ил]тиофен-2-карбонитрил дигидрохлорида
Используя соединение (25 мг, 0,06 ммоль), полученное на стадии 3, указанное в заголовке соединение (27 мг, выход: 91%, белое твердое вещество) получали таким же образом, как на стадии 9 Примера 1.
1
6
H ЯМР(400МГц, DMSO-d); δ 11,13(шир., 1H), 7,90(д, J=8,4Гц, 1H), 7,64(д, J=4,4Гц, 1H), 7,28(с, 1H), 7,17(д, J=7,6Гц, 1H), 6,30(д, J=4,4Гц, 1H), 3,80-3,50(м, 4H), 3,45-3,20(м, 6H), 2,60-2,40(м, 2H), 1,80-1,70(м, 2H).
Соединения Примеров 187-189 получали способом, аналогичным описанному в Примере 186, за исключением того, что заместители изменяли, как показано в Таблице 5 ниже.
Таблица 5
Экспериментальный Пример 1: Эксперимент по ингибированию фермента поли(АДФ-рибоза)полимеразы [PARP-1]
Ингибиторные активности соединений настоящего изобретения в отношении PARP-1 фермента анализировали следующим образом с использованием набора (кат.№ 80551), приобретенного у BPS Bioscience.
2
4
2
4
50
96-Луночный планшет, поставляемый в наборе BPS Bioscience, покрывали гистоном и инкубировали при 4°C в течение 16 часов. Затем планшет промывали четыре раза при помощи PBST (7,5 мM NaHPO, 2,5 мM NaHPO, 145 мM NaCl, 0,05% Tween 20, pH 7,4) и добавляли блокирующий буфер (предоставленный в наборе BPS Bioscience) для блокирования неспецифической реакции, и затем инкубировали при 25°C в течение 1 часа. После инкубирования в течение 1 часа планшет промывали четыре раза при помощи PBST и к реакционному раствору, содержащему фермент PARP-1 (50 нг/лунка), смесь для анализа и активированную ДНК, добавляли различные концентрации каждого из соединений Примеров, и оставляли взаимодействовать при 25°C в течение 1 часа. Через 1 час каждую лунку промывали четыре раза при помощи PBST и для измерения уровня рибозилирования PARP ферментом добавляли стрептавидин-связанную пероксидазу (Strep-HRP, разведение 1:50) и оставляли взаимодействовать при 25°C в течение 30 минут. Планшет промывали четыре раза при помощи PBST, и затем в конце добавляли хемилюминесцентный субстрат HRP и оставляли для взаимодействия. Уровень рибозилирования гистонов, образованный каждым ферментом, определяли количественно с использованием считывающего устройства для микропланшетов Synergy™ H4 Hybrid Multi-Mode Microplate Reader (BioTek Instruments, Inc., USA). Результаты, полученные для различных концентраций соединений, представляют собой средние значения, полученные из двух лунок, и результаты анализировали путем вычисления значений IC соединений с использованием SigmaPlot 10 (Systat Software Inc., USA) (см. Таблицу 6).
Таблица 6
Пример
Фермент PARP-1 (нМ)
Пример
Фермент PARP-1 (нМ)
Пример
Фермент PARP-1 (нМ)
<b>1</b>
4,99
<b>66</b>
5,51
<b>128</b>
4,50
<b>2</b>
13,70
<b>67</b>
6,59
<b>129</b>
6,28
<b>3</b>
29,57
<b>68</b>
4,74
<b>130</b>
17,35
<b>5</b>
17,97
<b>70</b>
7,90
<b>132</b>
3,60
<b>6</b>
27,98
<b>71</b>
6,87
<b>133</b>
8,29
<b>7</b>
20,15
<b>72</b>
10,54
<b>134</b>
12,23
<b>9</b>
24,63
<b>73</b>
9,73
<b>135</b>
3,66
<b>10</b>
115,13
<b>74</b>
7,11
<b>136</b>
10,31
<b>12</b>
128,56
<b>75</b>
7,27
<b>137</b>
7,43
<b>13</b>
33,75
<b>76</b>
10,87
<b>138</b>
17,61
<b>15</b>
16,04
<b>77</b>
7,11
<b>139</b>
85,82
<b>16</b>
42,99
<b>78</b>
6,64
<b>140</b>
3,06
<b>17</b>
15,36
<b>79</b>
14,40
<b>141</b>
8,83
<b>18</b>
18,31
<b>80</b>
22,34
<b>142</b>
4,60
<b>19</b>
17,98
<b>81</b>
9,58
<b>143</b>
39,79
<b>20</b>
22,78
<b>82</b>
22,11
<b>144</b>
107,73
<b>21</b>
53,20
<b>83</b>
26,44
<b>145</b>
25,41
<b>22</b>
89,96
<b>84</b>
11,91
<b>146</b>
302,93
<b>23</b>
38,55
<b>85</b>
9,87
<b>147</b>
15,88
<b>24</b>
33,53
<b>86</b>
14,08
<b>148</b>
24,51
<b>25</b>
57,07
<b>87</b>
28,63
<b>149</b>
7,61
<b>26</b>
100,61
<b>88</b>
13,48
<b>150</b>
2,49
<b>27</b>
59,63
<b>89</b>
2,35
<b>151</b>
5,65
<b>28</b>
92,00
<b>90</b>
5,49
<b>152</b>
4,86
<b>29</b>
24,71
<b>91</b>
6,61
<b>153</b>
44,84
<b>30</b>
23,45
<b>92</b>
4,92
<b>154</b>
77,37
<b>31</b>
27,75
<b>93</b>
3,25
<b>155</b>
29,26
<b>32</b>
43,98
<b>94</b>
12,93
<b>156</b>
20,36
<b>33</b>
28,87
<b>95</b>
8,59
<b>157</b>
17,88
<b>34</b>
31,60
<b>96</b>
6,01
<b>158</b>
8,23
<b>35</b>
25,84
<b>97</b>
7,38
<b>159</b>
139,8
<b>36</b>
52,37
<b>98</b>
5,04
<b>160</b>
4,82
<b>37</b>
52,27
<b>99</b>
57,63
<b>161</b>
9,41
<b>38</b>
58,94
<b>100</b>
32,33
<b>162</b>
10,22
<b>39</b>
9,13
<b>101</b>
3,87
<b>163</b>
43,45
<b>40</b>
14,65
<b>102</b>
6,67
<b>164</b>
81,74
<b>41</b>
11,52
<b>103</b>
7,00
<b>165</b>
37,01
<b>42</b>
13,72
<b>104</b>
8,16
<b>166</b>
7,46
<b>43</b>
21,74
<b>105</b>
56,85
<b>167</b>
7,24
<b>44</b>
11,57
<b>106</b>
32,01
<b>168</b>
19,63
<b>45</b>
63,13
<b>107</b>
24,38
<b>169</b>
8,47
<b>46</b>
32,51
<b>108</b>
12,35
<b>170</b>
3,30
<b>47</b>
17,33
<b>109</b>
19,83
<b>171</b>
4,99
<b>48</b>
6,49
<b>110</b>
14,25
<b>172</b>
7,94
<b>49</b>
11,08
<b>111</b>
9,01
<b>173</b>
23,98
<b>50</b>
6,65
<b>112</b>
5,61
<b>174</b>
109,76
<b>51</b>
7,69
<b>113</b>
10,31
<b>175</b>
18,57
<b>52</b>
15,93
<b>114</b>
52,90
<b>176</b>
11,47
<b>53</b>
6,44
<b>115</b>
17,42
<b>177</b>
7,28
<b>54</b>
7,47
<b>116</b>
21,22
<b>178</b>
7,33
<b>55</b>
30,09
<b>117</b>
111,98
<b>179</b>
159,00
<b>56</b>
6,67
<b>118</b>
179,64
<b>180</b>
5,27
<b>57</b>
5,98
<b>119</b>
4,82
<b>181</b>
4,65
<b>58</b>
11,57
<b>120</b>
4,81
<b>182</b>
4,02
<b>59</b>
1,95
<b>121</b>
13,97
<b>183</b>
5,04
<b>60</b>
4,80
<b>122</b>
19,42
<b>184</b>
5,79
<b>61</b>
11,12
<b>123</b>
3,49
<b>185</b>
11,78
<b>62</b>
27,82
<b>124</b>
7,09
<b>186</b>
13,28
<b>63</b>
4,46
<b>125</b>
7,08
<b>187</b>
5,92
<b>64</b>
7,55
<b>126</b>
77,15
<b>188</b>
47,98
<b>65</b>
7,85
<b>127</b>
10,38
<b>189</b>
7,43
<b>50</b>
6,65
<b>112</b>
5,61
<b>174</b>
109,76
<b>51</b>
7,69
<b>113</b>
10,31
<b>175</b>
18,57
Экспериментальный Пример 2: Эксперимент по ингибированию ферментов Танкираза-1 и 2
Ингибиторные активности соединений настоящего изобретения в отношении ферментов танкираза-1 или танкираза-2 анализировали следующим образом с использованием набора (кат.№ 80573 или 80578), приобретенного у BPS Bioscience.
2
4
2
4
50
96-луночный планшет, поставляемый в наборе BPS Bioscience, покрывали гистоном и инкубировали при 4°C в течение 16 часов. Затем планшет промывали четыре раза при помощи PBST (7,5 мM NaHPO, 2,5 мM NaHPO, 145 мM NaCl, 0,05% Tween 20, pH 7,4), добавляли блокирующий буфер (предоставленный в наборе BPS Bioscience) для блокирования неспецифической реакции и затем инкубировали при 25°C в течение 1 часа. После инкубирования в течение 1 часа планшет промывали четыре раза при помощи PBST и добавляли различные концентрации каждого из соединений Примеров к реакционному раствору, содержащему фермент танкираза-1 (40 нг/лунку) или фермент танкираза-2 (15 нг/лунку) и смесь для анализа, и оставляли взаимодействовать при 25°C в течение 1 часа. Через 1 час каждую лунку промывали четыре раза при помощи PBST, добавляли стрептавидин-связанную пероксидазу (Strep-HRP, разведение 1:50) для измерения уровня рибозилирования PARP ферментом и оставляли взаимодействовать при 25°C в течение 30 минут. Планшет промывали четыре раза при помощи PBST и затем, в конце, добавляли хемилюминесцентный субстрат HRP и оставляли взаимодействовать. Уровень рибозилирования гистонов, образованный каждым ферментом, определяли количественно с использованием считывающего устройства для микропланшетов Synergy™ H4 Hybrid Multi-Mode Microplate Reader (BioTek Instruments, Inc., USA). Результаты, полученные для различных концентраций соединений, представляют собой средние значения, полученные из двух лунок, и результаты анализировали путем вычисления значений IC соединений с использованием SigmaPlot 10 (Systat Software Inc., США) (см. Таблицы 7 и 8).
Таблица 7
<b>Пример</b>
<b>Фермент TNK-1</b><b>(нM)</b>
<b>Пример</b>
<b>Фермент TNK-1</b><b>(нM)</b>
<b>Пример</b>
<b>Фермент TNK-1</b><b>(нM)</b>
<b>1</b>
59,58
<b>64</b>
8,46
<b>134</b>
4,1 5
<b>7</b>
34,03
<b>89</b>
5,07
<b>137</b>
3,36
<b>39</b>
35,18
<b>90</b>
30,98
<b>139</b>
10,57
<b>48</b>
89,07
<b>91</b>
35,20
<b>140</b>
18,53
<b>50</b>
34,95
<b>92</b>
12,87
<b>141</b>
5,82
<b>51</b>
31,35
<b>93</b>
3,59
<b>142</b>
4,42
<b>52</b>
56,42
<b>94</b>
42,44
<b>143</b>
21,45
<b>53</b>
20,10
<b>95</b>
11,45
<b>145</b>
6,29
<b>54</b>
16,75
<b>96</b>
6,77
<b>149</b>
14,26
<b>56</b>
4,96
<b>97</b>
8,81
<b>150</b>
18,05
<b>57</b>
26,52
<b>98</b>
36,72
<b>151</b>
56,67
<b>59</b>
1,37
<b>99</b>
5,59
<b>152</b>
16,97
<b>60</b>
12,11
<b>100</b>
18,92
<b>158</b>
17,33
<b>61</b>
13,68
<b>101</b>
25,16
<b>160</b>
10,65
<b>62</b>
26,18
<b>102</b>
28,81
<b>161</b>
32,04
<b>63</b>
15,02
<b>103</b>
12,46
<b>166</b>
36,28
<b>64</b>
16,17
<b>104</b>
50,71
<b>167</b>
97,20
<b>65</b>
13,87
<b>107</b>
11,40
<b>169</b>
32,39
<b>66</b>
13,21
<b>108</b>
25,12
<b>170</b>
9,65
<b>67</b>
14,03
<b>110</b>
38,47
<b>171</b>
16,65
<b>68</b>
49,19
<b>111</b>
18,77
<b>172</b>
162,00
<b>69</b>
5,77
<b>112</b>
12,55
<b>174</b>
90,32
<b>70</b>
12,37
<b>113</b>
10,66
<b>176</b>
116,40
<b>71</b>
14,19
<b>119</b>
5,00
<b>177</b>
14,78
<b>72</b>
16,34
<b>120</b>
10,20
<b>178</b>
27,33
<b>73</b>
15,55
<b>122</b>
7,28
<b>180</b>
8,05
<b>74</b>
17,26
<b>123</b>
3,92
<b>181</b>
11,57
<b>75</b>
11,38
<b>124</b>
10,43
<b>182</b>
3,33
<b>76</b>
11,28
<b>125</b>
10,40
<b>183</b>
46,16
<b>77</b>
16,28
<b>128</b>
25,76
<b>184</b>
37,08
<b>78</b>
10,96
<b>129</b>
5,56
<b>185</b>
35,79
<b>80</b>
39,86
<b>131</b>
9,89
<b>186</b>
47,13
<b>81</b>
45,93
<b>132</b>
2,77
<b>187</b>
22,92
<b>82</b>
35,07
<b>133</b>
14,19
<b>189</b>
16,05
Таблица 8
<b>Пример</b>
<b>Фермент TNK-2</b><b>(нM)</b>
<b>Пример</b>
<b>Фермент TNK-2</b><b>(нM)</b>
<b>Пример</b>
<b>Фермент TNK-2</b><b>(нM)</b>
<b>48</b>
49,94
<b>91</b>
11,40
<b>135</b>
1,75нМ
<b>50</b>
14,52
<b>93</b>
1,97
<b>137</b>
0,95нМ
<b>51</b>
14,81
<b>96</b>
1,75
<b>141</b>
2,62нМ
<b>53</b>
10,23
<b>97</b>
3,70
<b>142</b>
2,45нМ
<b>54</b>
12,79
<b>99</b>
1,99
<b>143</b>
12,01нМ
<b>56</b>
3,78
<b>101</b>
15,84
<b>145</b>
3,24нМ
<b>59</b>
0,92
<b>103</b>
2,10
<b>149</b>
6,99нМ
<b>60</b>
6,47
<b>107</b>
6,21
<b>150</b>
6,06нМ
<b>61</b>
3,80
<b>113</b>
3,49
<b>152</b>
10,56нМ
<b>63</b>
4,96
<b>119</b>
1,38
<b>158</b>
6,59нМ
<b>64</b>
3,38
<b>120</b>
4,82
<b>160</b>
4,63нМ
<b>65</b>
4,20
<b>122</b>
2,37
<b>161</b>
8,60нМ
<b>67</b>
4,36
<b>123</b>
2,38
<b>169</b>
34,67нМ
<b>69</b>
1,32
<b>124</b>
4,71
<b>170</b>
1,96нМ
<b>76</b>
2,86
<b>125</b>
3,18
<b>172</b>
67,41нМ
<b>78</b>
1,87
<b>129</b>
1,65
<b>177</b>
10,65нМ
<b>85</b>
10,35
<b>131</b>
2,81
<b>180</b>
2,12нМ
<b>89</b>
1,48
<b>132</b>
1,31
<b>182</b>
1,26нМ
<b>90</b>
13,22
<b>134</b>
2,70
<b>189</b>
14,07нМ
Экспериментальный Пример 3: Эксперимент по ингибированию фермента PARP-1 с использованием клеток
Для исследования ингибиторной способности соединений настоящего изобретения в отношении фермента PARP-1 измеряли количество PAR, продуцированного в клетках.
4
2
2
2
50
HCT-15 колоректальные раковые клетки культивировали в RPMI среде, содержащей 10% фетальную бычью сыворотку (ФБС). Культивированные HCT-15 клетки высевали в 96-луночный планшет при плотности 2×10 клеток/лунка и затем культивировали при условиях 37°C и 5% CO в течение 16 часов. После культивирования клетки обрабатывали различными концентрациями каждого из соединений Примеров, и затем культивировали при 37°C в течение 30 минут. Затем клетки обрабатывали 50 мM повреждающего ДНК вещества HO, и затем подвергали взаимодействию при 25°C в течение 5 минут и фиксировали смесью метанол/ацетон (7/3) при -20°C в течение 10 минут. Через 10 минут планшет промывали три раза при помощи TBST, и затем добавляли 5% обезжиренное сухое молоко для предотвращения неспецифических реакций, с последующим инкубированием при 25°C в течение 1 часа. Через 1 час добавляли анти-PAR антитело (разведение 1:1000) и оставляли взаимодействовать при 25°C в течение 1 часа, затем планшет промывали три раза при помощи TBST. Далее добавляли HRP-конъюгированное анти-мышиное антитело (разведение 1:1000) и оставляли взаимодействовать при 25°C в течение 1 часа. Планшет промывали три раза при помощи TBST, затем, в конце, добавляли хемилюминесцентный субстрат HRP и оставляли взаимодействовать. Подсчитывали количество PAR, продуцированного в клетках, с использованием считывающего устройства для микропланшетов Synergy™ H4 Hybrid Multi-Mode Microplate Reader (BioTek Instruments, Inc., USA). Результаты, полученные для различных концентраций соединений настоящего изобретения, представляют собой средние значения, полученные из трех лунок, и результаты анализировали путем вычисления значений IC соединений с использованием SigmaPlot 10 (Systat Software Inc., США) (см. Таблицу 9).
Таблица 9
<b>Пример</b>
<b>Клетки PARP-1 (нM)</b>
<b>Пример</b>
<b>Клетки PARP-1 (нM)</b>
<b>Пример</b>
<b>Клетки PARP-1 (нM)</b>
<b>1</b>
3,56
<b>80</b>
58,77
<b>132</b>
20,05
<b>7</b>
10,65
<b>82</b>
38,42
<b>134</b>
14,12
<b>20</b>
31,12
<b>84</b>
12,49
<b>135</b>
9,15
<b>39</b>
8,17
<b>85</b>
13,35
<b>137</b>
42,59
<b>48</b>
2,01
<b>86</b>
2,03
<b>140</b>
2,25
<b>50</b>
4,06
<b>89</b>
0,84
<b>141</b>
16,38
<b>51</b>
3,97
<b>90</b>
2,06
<b>142</b>
1,11
<b>52</b>
9,48
<b>91</b>
3,08
<b>149</b>
9,74
<b>53</b>
2,56
<b>92</b>
9,72
<b>150</b>
10,06
<b>54</b>
5,96
<b>93</b>
6,60
<b>151</b>
10,99
<b>56</b>
8,48
<b>94</b>
14,38
<b>152</b>
20,61
<b>57</b>
2,30
<b>95</b>
148,15
<b>158</b>
30,12
<b>59</b>
0,43
<b>96</b>
31,00
<b>160</b>
45,66
<b>60</b>
1,95
<b>97</b>
105,25
<b>161</b>
8,39
<b>61</b>
3,32
<b>98</b>
4,80
<b>166</b>
4,85
<b>62</b>
19,50
<b>101</b>
1,89
<b>167</b>
7,29
<b>63</b>
5,17
<b>102</b>
8,52
<b>168</b>
4,84
<b>64</b>
17,65
<b>103</b>
4,71
<b>169</b>
12,23
<b>65</b>
20,33
<b>104</b>
13,45
<b>170</b>
1,69
<b>66</b>
39,73
<b>107</b>
1,30
<b>171</b>
2,31
<b>67</b>
10,24
<b>108</b>
7,93
<b>172</b>
7,61
<b>68</b>
5,21
<b>110</b>
11,52
<b>174</b>
16,57
<b>69</b>
10,09
<b>111</b>
8,20
<b>176</b>
2,99
<b>70</b>
26,18
<b>112</b>
3,45
<b>177</b>
5,09
<b>71</b>
19,16
<b>113</b>
9,98
<b>178</b>
4,95
<b>72</b>
53,99
<b>119</b>
5,53
<b>180</b>
2,96
<b>73</b>
33,46
<b>120</b>
3,38
<b>181</b>
7,49
<b>74</b>
39,11
<b>123</b>
3,16
<b>182</b>
5,90
<b>75</b>
31,32
<b>124</b>
10,55
<b>183</b>
10,93
<b>76</b>
12,31
<b>125</b>
11,74
<b>184</b>
9,35
<b>77</b>
11,04
<b>128</b>
6,76
<b>187</b>
8,71
<b>78</b>
12,78
<b>129</b>
8,79
<b>189</b>
161,11
<b>79</b>
38,26
<b>131</b>
33,79
Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут ингибировать активность PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2 и, таким образом, могут эффективно использоваться для профилактики или лечения невропатической боли, нейродегенеративных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний, диабетической невропатии, воспалительных заболеваний, остеопороза или рака.
Хотя настоящее изобретение было подробно описано со ссылкой на конкретные характерные признаки, специалистам в данной области будет очевидно, что данное описание представляет собой только предпочтительные варианты осуществления изобретения и не ограничивает объем настоящего изобретения. Таким образом, объем изобретения по существу будет определяться прилагаемой формулой изобретения и ее эквивалентами.
[Промышленная применимость]
Как описано выше, трициклические производные соединения в соответствии с настоящим изобретением могут ингибировать активность PARP-1, танкиразы-1 или танкиразы-2, и, таким образом, их можно эффективно использовать для профилактики или лечения невропатической боли, нейродегенеративных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний, диабетической невропатии, воспалительных заболеваний, остеопороза или рака.